(57)【要約】  本発明はＣ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤の共投与に関する。組合せはＣ型肝炎ウイルスのライフサイクルを妨げるように作用し、したがって抗ウイル治療として有用である。組合せそれ自体、患者におけるＣ型肝炎感染の処置または予防に使用することができる。本発明はまた、阻害剤の組合せを含む組成物に関する。本発明はまた、Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤を含むキットおよび医薬パックに関する。本発明はまた、これらの組成物、組合せ、キットおよびパックの製造方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩、シトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含んでなる、医薬組成物。
【請求項２】
前記Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤がＷＯ  ９８／１７６７９、ＷＯ  ０２／１８３６９またはＷＯ  ０３／０８７０９２の化合物から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤がＶＸ−９５０またはその立体異性体である、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤がＶＸ−９５０である、請求項２に記載の組成物。
【請求項５】
前記シトクロームＰ４５０阻害剤がアイソザイム３Ａ４（“ＣＹＰ３Ａ４”）、アイソザイム２Ｃ１９（“ＣＹＰ２Ｃ１９”）、アイソザイム２Ｄ６（“ＣＹＰ２Ｄ６”）、アイソザイム１Ａ２（“ＣＹＰ１Ａ２”）、アイソザイム２Ｃ９（“ＣＹＰ２Ｃ９”）またはアイソザイム２Ｅ１（“ＣＹＰ２Ｅ１”）の阻害剤である、請求項１〜４のいずれかに記載の組成物。
【請求項６】
前記シトクロームＰ４５０阻害剤がリトナビル、ケトコナゾール、トロレアンドマイシン、４−メチルピラゾール、シクロスポリンまたはクロメチアゾールである、請求項１〜４のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
前記シトクロームＰ４５０阻害剤がＣＹＰ３Ａ４の阻害剤である、請求項１〜４のいずれかに記載の組成物。
【請求項８】
前記シトクロームＰ４５０阻害剤がリトナビルである、請求項１〜４のいずれかに記載の組成物。
【請求項９】
患者におけるＣ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤のバイオアベイラビリティーを上昇させる方法であって、当該患者に請求項１〜８のいずれかに記載の組成物を投与することを含んでなる方法。
【請求項１０】
患者のＣ型肝炎ウイルス感染を処置または予防する方法であって、当該患者にＣ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩、およびシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩を投与することを含んでなる方法。
【請求項１１】
患者におけるＣ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤のバイオアベイラビリティーを上昇させる方法であって、当該患者にＣ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩、およびシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩を投与することを含んでなる方法。
【請求項１２】
患者におけるＣ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤の肝臓濃度を上昇させる方法であって、当該患者にＣ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩、およびシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩を投与することを含んでなる方法。
【請求項１３】
患者におけるＣ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤のレベルを上昇させる方法であって、当該患者にＣ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩、およびシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩を投与することを含んでなる方法。
【請求項１４】
前記Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤と前記シトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤が別々の投与形態である、請求項１０〜１３のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
前記別々の投与形態がほぼ同時に投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記化合物と前記シトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤が単剤形態である、請求項１０〜１４のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】
前記方法が免疫調節剤；抗ウイルス剤；ＨＣＶＮＳ３／４Ａプロテアーゼプロテアーゼの阻害剤；ＨＣＶライフサイクルにおけるＮＳ３／４Ａプロテアーゼ以外の標的の阻害剤内部リボソーム侵入の阻害剤、広いスペクトルのウイルス阻害剤；およびシトクロームＰ−４５０阻害剤；またはそれらの組合せから選択されるさらなる薬剤の投与を含む、請求項９〜１３のいずれかに記載の方法。
【請求項１８】
前記免疫調節剤がα−、β−、またはγ−インターフェロンまたはチモシンであるか；前記抗ウイルス剤がリバビリン、アマンタジン、またはテルビブジンであるか；または前記ＨＣＶライフサイクルにおける他の標的の阻害剤がＨＣＶヘリカーゼ、ポリメラーゼ、またはメタロプロテアーゼの阻害剤である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤を含む組成物を製造する方法であって、前記Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤と前記シトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤を組み合わせる工程を含んでなる方法。
【請求項２０】
Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤を含む治療組合せ。
【請求項２１】
Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤、シトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤、および前記阻害剤の使用に対する指示が含まれた添付文書を含む、医薬パック。
【請求項２２】
Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はＣ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤の組合せ剤に関する。当該組合せ剤はＣ型肝炎ウイルスのライフサイクルを妨げ、したがって抗ウイルス治療として有用である。当該組合せ剤それ自体、患者におけるＣ型肝炎感染の処置または予防に使用することができる。本発明はまた、当該組合せ剤を含む組成物、キットおよび医薬パックに関する。本発明はまた、これらの組合せ、組成物、キットおよびパックの製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｃ型肝炎ウイルス（“ＨＣＶ”）による感染は、切実なヒト医療の問題である。ＨＣＶは非Ａ型、非Ｂ型肝炎のほとんどの症例の原因となる要因であると認識されており、世界中で３％のヒト血清有病率であると見積もられている[A. Alberti et al., “Natural History of Hepatitis C, ” J. Hepatology, 31., (Suppl. 1), pp. 17-24 (1999)]。米国だけでおそらく４００万人近くの個体が感染しているであろう[M.J. Alter et al., “The Epidemiology of Viral Hepatitis in the United States, Gastroenterol. Clin. North Am., 23, pp. 437-455 (1994); M. J. Alter “Hepatitis C Virus Infection in the United States, ” J. Hepatology, 31., (Suppl. 1), pp. 88-91 (1999)]。
【０００３】
ＨＣＶへの最初の暴露では、感染個体の約２０％のみが急性臨床肝炎を発現し、一方でその他は自然に感染が緩解するようである。ほぼ７０％の症例において、しかしながら、該ウイルスは長期間持続する慢性感染を確立する[S. Iwarson, “The Natural Course of Chronic Hepatitis, ” FEMS Microbiology Reviews, 14, pp. 201-204 (1994); D. Lavanchy, “Global Surveillance and Control of Hepatitis C, ” J. Viral Hepatitis, 6, pp. 35-47 (1999)]。これは通常、再発性の、そして徐々に悪化する肝臓の炎症をもたらし、これはしばしばより重篤な疾患、例えば肝硬変や肝細胞癌腫へと至る[M.C. Kew, “Hepatitis C and Hepatocellular Carcinoma”, FEMS Microbiology Reviews, 14, pp. 211-220 (1994); I. Saito et. al., “Hepatitis C Virus Infection is Associated with the Development of Hepatocellular Carcinoma, ” Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, pp. 6547-6549 (1990)]。不運なことに、慢性ＨＣＶの消耗性の進行のための広く有効な処置は存在しない。
【０００４】
ＨＣＶゲノムは３０１０−３０３３アミノ酸のポリタンパク質をコード化する[Q.L. Choo, et. al., “Genetic Organization and Diversity of the Hepatitis C Virus.” Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, pp. 2451-2455 (1991); N. Kato et al., “Molecular Cloning of the Human Hepatitis C Virus Genome From Japanese Patients with Non-A, Non-B Hepatitis, ” Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, pp. 9524-9528 (1990); A. Takamizawa et. al., “Structure and Organization of the Hepatitis C Virus Genome Isolated From Human Carriers, ” J. Virol., 65, pp. 1105-1113 (1991)]。ＨＣＶ非構造（ＮＳ）タンパク質は、ウイルスの複製の本質的な触媒機構を提供すると推測されている。ＮＳタンパク質はポリタンパク質のタンパク質分解的切断によって得られる[R. Bartenschlager et. al., “Nonstructural Protein 3 of the Hepatitis C Virus Encodes a Serine-Type Proteinase Required for Cleavage at the NS3/4 and NS4/5 Junctions, ” J. Virol., 67, pp. 3835-3844 (1993); A. Grakoui et. al., “Characterization of the Hepatitis C Virus-Encoded Serine Proteinase:  Determination of Proteinase-Dependent Polyprotein Cleavage Sites, ” J. Virol., 67, pp. 2832-2843 (1993); A. Grakoui et. al., “Expression and Identification of Hepatitis C Virus Polyprotein Cleavage Products, ” J. Virol., 67, pp. 1385-1395 (1993); L. Tomei et. al., “NS3 is a serine protease required for processing of Hepatitis C Virus polyprotein”, J. Virol., 67, pp. 4017-4026 (1993)]。
【０００５】
ＨＣＶ ＮＳタンパク質３（ＮＳ３）はウイルス性酵素の大多数をプロセッシングするのを助けるセリンプロテアーゼ活性を含み、したがってウイルスの複製および感染に必須であると見なされている。黄熱ウイルスＮＳ３プロテアーゼの変異がウイルスの感染性を減少させることは既知である[Chambers, T.J. et. al., “Evidence that the N-terminal Domain of Nonstructural Protein NS3 From Yellow Fever Virus is a Serine Protease Responsible for Site-Specific Cleavages in the Viral Polyprotein”, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, pp. 8898-8902 (1990)]。ＮＳ３の最初の１８１アミノ酸（ウイルス性ポリタンパク質の１０２７−１２０７残基）は、ＨＣＶポリタンパク質の下流の４部位の全てをプロセッシングするＮＳ３のセリンプロテアーゼドメインを含むことが見出された[C. Lin et al., “Hepatitis C Virus NS3 Serine Proteinase: Trans-Cleavage Requirements and Processing Kinetics”, J. Virol., 68, pp. 8147-8157 (1994)]。
【０００６】
現在のところ、満足な抗ＨＣＶ薬剤または処置は全く存在しない。最近まで、ＨＣＶ感染への確立された治療はインターフェロン処置のみであった。しかしながら、インターフェロンは重大な副作用を有し[M. A. Wlaker et al., “Hepatitis C Virus: An Overview of Current Approaches and Progress, ” DDT, 4, pp. 518-29 (1999); D. Moradpour et al., “Current and Evolving Therapies for Hepatitis C, ” Eur. J. Gastroenterol. Hepatol., 11, pp. 1199-1202 (1999); H. L. A. Janssen et al. “Suicide Associated with Alfa-Interferon Therapy for Cronic Viral Hepatitis, ” J. Hepatol., 21, pp. 241-243 (1994); P.F. Renault et al., “Side Effects of Alpha Interferon, ” Seminars in Liver Disease, 9, pp. 273-277. (1989)]、そして症例の一部（〜２５％）においてのみ長期の改善が生じる[O. Weiland, “Interferon Therapy in Chronic Hepatitis C Virus Infection”, FEMS Microbiol. Rev., 14, pp. 279-288 (1994)]。インターフェロンのペグ化された形態（ＰＥＧ−Ｉｎｔｒｏｎ（登録商標）およびＰｅｇａｓｙｓ（登録商標））およびリバビリンとペグ化インターフェロンの組合せ治療（Ｒｅｂｅｔｒｏｌ（登録商標））の近年の導入は、緩解率においてわずかな改善のみに、そして副作用の部分的軽減のみに終わっている。さらに、有効な抗ＨＣＶワクチンの見込みは不明のままである。
【０００７】
ＨＣＶ ＮＳ３セリンプロテアーゼおよびその関連コファクターであるＮＳ４Ａは、全てのウイルス酵素のプロセッシングを助け、したがってウイルスの複製に必須であると見なされている。このプロセッシングは、ヒト免疫不全ウイルスのアスパルチルプロテアーゼによって引き起こされるものと類似するようであり、これもウイルスの酵素のプロセッシングに含まれる。ウイルスタンパク質のプロセッシングを阻害するＨＩＶプロテアーゼ阻害剤は、ヒトにおいて強力な抗ウイルス剤であり、ウイルスのライフサイクルのこの段階を阻害することで治療的に活性な薬剤となることを示す。結果として、これはまた、薬剤の発見に魅力的な標的である。
【０００８】
いくつかの薬剤がシトクロームｐ４５０酵素によって代謝されることは既知である。当該代謝は、典型的には、好ましくない薬物動力学的特徴（例えば、血中レベルの減少、半減期の減少）を有する薬剤をもたらす。対照的に、薬剤代謝の阻害はその薬剤の薬物動力学プロファイルの改善へと導くことができる。このアプローチはある薬剤の薬物動力学を改善する方法の報告に至っている［例えば、米国特許６，０３７，１５７； D.E. Kempf et al. Antimicrob. Agents Chemother., 41, pp. 654-660 (1997)参照］。しかしながら、Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤の薬物動力学を改善する方法の報告は存在しない。
【０００９】
したがって、Ｃ型肝炎ＮＳ３／４Ａウイルスプロテアーゼ阻害剤の薬物動力学を改善するための組成物および治療的組合せ剤に対する必要性が存在する。かかる組成物、組合せ、および方法は、抗ＨＣＶ治療に有用であろう。
【発明の開示】
【００１０】
本発明はＣ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤の組合せに関する。
【００１１】
本発明はまた、患者におけるＨＣＶ感染を本発明の組合せを投与することによって処置する方法に関する。
【００１２】
本発明はＣ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤を含む、組成物、キットおよび医薬パックを提供する。本発明はまた、これらの組合せ、キット、およびパックを製造する方法を提供する。
【発明の詳細な記載】
【００１３】
本発明は、Ｃ型肝炎ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤の薬物動力学を改善する方法を提供する。薬剤の薬物動力学を改善することの利点は、当該技術分野において認識されている（US 2004/0091527; US 2004/0152625; US 2004/0091527）。かかる改善は薬剤の上昇した血液レベルを導き得る。ＨＣＶ治療についてより重要なことに、当該改善が肝臓におけるプロテアーゼ阻害剤の上昇した濃度を導き得る。
【００１４】
一つの態様において、本発明はＣ型肝炎ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤の薬物動力学を、プロテアーゼ阻害剤とシトクロームＰ４５０阻害剤（“ＣＹＰ”）の組合せの共投与によって改善する方法を提供する。本発明者らはＣ型肝炎ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤がシトクロームＰ４５０酵素、とりわけ３Ａ４アイソザイムによって代謝されることを示した。本発明者らはまた、この代謝がシトクロームＰ４５０阻害剤の存在下において減少することを示した。ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とＣＹＰ阻害剤を組み合わせることによって、本発明はプロテアーゼ阻害剤の減少した代謝を提供する。プロテアーゼ阻害剤の薬物動力学は、したがって、改善される。
【００１５】
したがって、本発明はシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤（“ＣＹＰ阻害剤”）とＣ型肝炎ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤の治療的組合せ剤を提供する。他の局面において、本発明はＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とＣＹＰ阻害剤の共投与を含む。
【００１６】
本発明の一つの態様は、患者におけるＣ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤のバイオアベイラビリティーを上昇させるための方法であって、当該患者にＣ型肝炎ＮＳ３／４Ａウイルスプロテアーゼ阻害剤とシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００１７】
本発明の他の態様は、患者におけるＣ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤の血液レベルを上昇させる、または肝臓濃度を上昇させるための方法であって、当該患者にＣ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００１８】
本発明の他の態様は、Ｃ型肝炎ウイルスに感染した患者を処置するための方法であって、当該患者にａ）Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤；およびｂ）シトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００１９】
本発明において使用されるシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤は、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤化合物の代謝を阻害することが予期される。したがって、当該シトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤はプロテアーゼ阻害剤の代謝を阻害するために有効な量で存在するであろう。したがって、前記ＣＹＰ阻害剤は、プロテアーゼ阻害剤のバイオアベイラビリティーが、ＣＹＰ阻害剤なしでのバイオアベイラビリティーと比較して、上昇しているような量で投与される。
【００２０】
これらの態様において、当該阻害剤は好ましくは治療的に有効な量で投与される。本発明において使用される化合物は、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼを阻害することによってＨＣＶを阻害すると予期される。ＣＹＰ阻害剤とプロテアーゼ阻害剤の組合せそれ自体、好ましくは抗ウイルス活性を有するのに有効な量で共投与される。
【００２１】
本発明が化合物の組合せ剤を含むため、各化合物の具体的な量は、前記組合せ剤における互いの化合物の具体的な量に依存し得るということは、理解されるべきである。例えば、本発明の方法において、ＣＹＰ阻害剤とプロテアーゼ阻害剤の投与は、ＣＹＰ阻害剤なしで投与される前記プロテアーゼ阻害剤の薬物動力学と比較して、プロテアーゼ阻害剤の改善された薬物動力学を導く。したがって、ＣＹＰ阻害剤なしよりも、ＣＹＰ阻害剤の存在下において、より少ない量のプロテアーゼ阻害剤でインビボで等しい効果を得るであろう。
【００２２】
本発明の方法において、投与されるＣＹＰ阻害剤の量は、ＣＹＰ阻害剤なしでのプロテアーゼ阻害剤の薬物動力学と比較して、プロテアーゼ阻害剤の薬物動力学を改善するために十分である。ある態様において、投与されるＣＹＰ阻害剤の量は、プロテアーゼ阻害剤の血液レベルを上昇させるために、または肝臓濃度を上昇させるために十分である。有利には、本発明の方法において、（プロテアーゼ阻害剤単独での投与と比較して）より低い用量のプロテアーゼ阻害剤が、したがって、使用される。
【００２３】
Ｃ型肝炎に感染した患者の処置に加えて、本発明の方法は、Ｃ型肝炎への感染から患者を予防するために使用され得る。したがって、本発明の一つの態様は、患者におけるＣ型肝炎ウイルス感染を予防するための方法であって、当該患者に、ａ）Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤；およびｂ）シトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００２４】
当業者に認識されるとおり、本発明の方法が患者を予防的に処置するために使用されており、そして当該患者がＣ型肝炎ウイルスに感染したとき、該方法はその後感染を処置することができる。したがって、本発明の一つの態様は、阻害剤の組合せが患者におけるＣ型肝炎感染を処置または予防するために治療的に有効な量である、Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤を提供する。
【００２５】
本発明の方法は、任意のＣ型肝炎ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤を使用することができる。化合物は、Ｃ型肝炎プロテアーゼを阻害する能力について、当業者に既知の方法によって、および／または本明細書中で提供される方法によってアッセイすることができる。かかる阻害剤の例には、限定されないが、前記アッセイにおいて阻害剤として同定された化合物ならびにWO 03/087092、WO 03/006490、WO 03/064456、WO 03/064416、WO 03/035060、WO 02/060926、WO 02/079234、WO 02/48116、WO 02/48157、WO 00/31129、WO 02/18369、WO 02/08256、WO 02/08244、WO 02/08198、WO 02/08187、WO 01/81325、WO 01/77113、WO 01/74768、WO 01/64678、WO 01/07407、WO 00/59929、WO 00/09588、WO 00/09543、WO 99/64442、WO 99/50230、WO 99/38888、WO 99/07734、WO 99/07733、WO 98/46630、WO 98/46630、WO 98/22496、WO 98/17679、WO 97/43310、US6,018,020、US5,990,276、US5,866,684、US20030008828、US20020177725、US20020016442、US20020016294、M. Llinas-Brunet et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 8, pp. 1713-18 (1998); W. Han et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 10, 711-13 (2000); R. Dunsdon et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 10, pp. 1571-79 (2000); M. Llinas-Brunet et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 10, pp. 2267-70 (2000);およびS. LaPlante et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 10, pp. 2271-74 (2000)］（下記の通り、これらを出典明示により本明細書の一部とする）の阻害剤が含まれる。ある態様において、前記阻害剤はＷＯ  ０３／０８７０９２、ＷＯ  ０２／１８３６９、またはＷＯ  ９８／１７６７９の化合物から選択される。具体的な態様において、前記阻害剤はＶＸ−９５０である。
【００２６】
ＶＸ−９５０は、３ｎＭの定常状態結合定数（ｋｉ＊）を有する、競合的、可逆的ペプチド模倣薬ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤である［ＷＯ  ０２／０１８３６９］。
【化１】
2007509950.tif 000002
【００２７】
したがって、上記ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤に加えて、本発明の方法、プロセス、組合せ、組成物、パック、およびキットにおいて使用されるＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤はＶＸ−９５０である。
【００２８】
本発明と組み合わせて使用するために好ましい化合物は、当該化合物が当業者に既知の方法によって製造し、そして哺乳類に投与するのに十分に安定であるものである。典型的には、かかる化合物は４０℃またはそれ以下で、湿気の存在下で、または他の化学的に反応性の条件で、少なくとも１週間安定である。
【００２９】
ＶＸ−９５０（および本発明において使用される他の化合物）は、１個以上の不斉炭素原子を有し得、したがってラセミ体およびラセミ体混合物、単一の光学異性体、ジアステレオマー混合物、ならびに個々のジアステレオマーを生じ得る。これらの化合物の全てのかかる異性体は、明確に本発明に含まれる。各立体炭素はＲまたはＳ立体配置であり得る。ＶＸ−９５０のＮ−プロピル側鎖でのＤ−およびＬ−異性体は、明確に本発明に含まれる。
【００３０】
関連するＮＳ３／４Ａプロテアーゼの薬物動力学を改善するあらゆるＣＹＰ阻害剤は、本発明の方法において使用され得る。これらのＣＹＰ阻害剤には、限定されないが、リトナビル（ＷＯ  ９４／１４４３６）、ケトコナゾール、トロレアンドマイシン、４−メチルピラゾール、シクロスポリン、クロメチアゾール、シメチジン、イトラコナゾール、フルコナゾール、ミコナゾール、フルボキサミン、フルオキセチン、ネファゾドン、セルトラリン、インディナビル、ネルフィナビル、アンプレナビル、フォサンプレナビル、サキナビル、ロピナビル、デラビルジン、エリスロマイシン、ＶＸ−９４４、およびＶＸ−４９７が含まれる。好ましいＣＹＰ阻害剤には、リトナビル、ケトコナゾール、トロレアンドマイシン、４−メチルピラゾール、シクロスポリン、およびクロムチアゾールが含まれる。好ましいＣＹＰ阻害剤には、リトナビル、ケトコナゾール、トロレアンドマイシン、４−メチルピラゾール、シクロスポリンおよびクロムチアゾールが含まれる。
【００３１】
シトクロームＰ５０モノオキシゲナーゼ活性を阻害する化合物の能力を測定するための方法は、既知である（ＵＳ  ６，０３７，１５７およびYun, et al. Drug Metabolism & Disposition, vol. 21, pp. 403-407 (1993)参照）。例えば、評価すべき化合物を、０．１、０．５、および１．０ｍｇタンパク質／ｍｌ、または他の好ましい濃度のヒト肝臓ミクロソーム（例えば、商業的に入手可能、貯蔵された、特徴のある肝臓ミクロソーム）と、０、５、１０、２０、および３０分、または他の好適な時間、ＮＡＤＰＨ−生産システムの存在下において、インキュベーションすることができる。対照インキュベーションを肝臓ミクロソームなしで、０、および３０分、行うことができる（３連）。サンプルを前記化合物の存在について分析することができる。化合物代謝の直線速度を生み出すインキュベーション条件は、さらなる研究についての指針を使用する。
【００３２】
典型的な実験は、前記化合物の代謝の動態を測定する（ＫｍおよびＶｍａｘ）。化合物の消失速度を測定することができ、そしてそのデータをＬｉｎｅｗｅａｖｅｒ−Ｂｕｒｋ、Ｅａｄｉｅ−Ｈｏｆｓｔｅｅ、または非線形回帰分析を使用して、Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ−Ｍｅｎｔｅｎ反応速度論にしたがって分析する。
【００３３】
代謝実験の阻害を、次いで行うことができる。例えば、化合物（ある濃度、＜Ｋｍ）を、貯蔵されたヒト肝臓ミクロソームと、ＣＹＰ阻害剤（例えばリトナビル）の存在下または非存在下で、上記測定された条件下で、インキュベーションすることができる。理解されるとおり、対照インキュベーションは同じ濃度の有機溶媒を、ＣＹＰ阻害剤とのインキュベーションとして含むべきである。サンプル中の前記化合物の濃度を定量することができ、そして、対照活性のパーセンテージとして表現される比率と共に、親化合物の消失速度を測定することができる。
【００３４】
対象におけるＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とＣＹＰ阻害剤の共投与の影響を評価するための方法も既知である（ＵＳ２００４／００２８７５５）。あらゆるかかる方法を本発明と組み合わせて、組合せ剤の薬物動力学的影響を測定するために使用することができる。次いで本発明の処置から利益を受けるであろう対象が選択され得る。具体的には、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤を代謝する対象が、本発明の処置のために選択され得る。ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤を大量に代謝する、または少なくとも他の対象よりも多い量で代謝する対象は、本発明の処置について好ましい対象であろう。
【００３５】
本発明において使用されるＣＹＰ阻害剤は、一つのアイソザイムのみの、または一つ以上のアイソザイムの阻害剤であり得る。当該ＣＹＰ阻害剤が多くのアイソザイムを阻害するとき、当該阻害剤は、それでもなお、他のアイソザイムよりも一つのアイソザイムをより選択的に阻害し得る。
【００３６】
したがって、本発明の一つの態様は、ＣＹＰ３Ａ４の阻害剤およびＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤を投与するための方法を提供する。本発明の他の態様は、アイソザイム３Ａ４（“ＣＹＰ３Ａ４”）、アイソザイム２Ｃ１９（“ＣＹＰ２Ｃ１９”）、アイソザイム２Ｄ６（“ＣＹＰ２Ｄ６”）、アイソザイム１Ａ２（“ＣＹＰ１Ａ２”）、アイソザイム２Ｃ９（“ＣＹＰ２Ｃ９”）、またはアイソザイム２Ｅ１（“ＣＹＰ２Ｅ１”）の阻害剤を投与する方法を提供する。プロテアーゼ阻害剤がＶＸ−９５０（またはその立体異性体）である態様において、前記ＣＹＰ阻害剤は、好ましくは、ＣＹＰ３Ａ４を阻害する。
【００３７】
理解されるとおり、ＣＹＰ３Ａ４活性はヒトにおいて広く観察される。したがって、アイソザイム３Ａ４の阻害を含む本発明の態様は、広範囲の患者に適用できることが予期されるであろう。
【００３８】
本発明における方法は、Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤の組合せの投与を含む。当該投与は共投与を意味し得る。共投与には各阻害剤の、同じ投与形態での、または異なる投与形態での投与が含まれる。異なる投与形態で投与されるとき、前記阻害剤は異なる時点でかつ任意の順番で投与され得る。
【００３９】
したがって、本発明は、前記ＣＹＰ阻害剤がＣ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤と共に、同じ投与形態で、または別々の投与形態で投与される方法を提供する。
【００４０】
ＣＹＰ阻害剤およびプロテアーゼ阻害剤が別々の投与形態で投与されるとき、各阻害剤はほぼ同時に投与され得る。あるいは、ＣＹＰ阻害剤を、プロテアーゼ阻害剤の投与の前後の任意の時点で投与することができる。すなわち、ＣＹＰ阻害剤をＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤の前に、一緒に、または後で投与することができる。投与の時点は、ＣＹＰ阻害剤がプロテアーゼ阻害剤の代謝に影響を及ぼすものであるべきでる。例えば、プロテアーゼ阻害剤が最初に投与されるとき、ＣＹＰ阻害剤は、プロテアーゼ阻害剤が代謝されおよび／または排出される前に（例えば、プロテアーゼ阻害剤の半減期以内に）投与されるべきである。
【００４１】
本発明の方法はまた、免疫調節剤；抗ウイルス剤；ＨＣＶプロテアーゼの阻害剤；ＨＣＶライフサイクルにおける他の標的の阻害剤；およびシトクロームＰ−４５０阻害剤；またはそれらの組合せから選択されるさらなる薬剤を含む、他の成分の投与を含み得る。
【００４２】
したがって、他の態様において、本発明はＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤、ＣＹＰ阻害剤、および他の抗ウイルス剤、好ましくは抗ＨＣＶ剤を投与することを含む方法を提供する。前記抗ウイルス剤には、限定されないが、免疫調節剤、例えばα−、β−、およびγ−インターフェロン、ペグ化誘導体化インターフェロン−α化合物およびチモシン；他の抗ウイルス剤、例えばリバビリン、アマンタジン、およびテルビブジン；他のＣ型肝炎プロテアーゼの阻害剤（ＮＳ２−ＮＳ３阻害剤およびＮＳ３−ＮＳ４Ａ阻害剤）；ヘリカーゼ、ポリメラーゼおよびメタプロテアーゼ阻害剤を含むＨＣＶライフサイクルにおける他の標的の阻害剤；内部リボソーム侵入の阻害剤；広いスペクトルのウイルス阻害剤、例えばＩＭＰＤＨ阻害剤（例えば、米国特許５，８０７，８７６、６，４９８，１７８、６，３４４，４６５、６，０５４，４７２、ＷＯ  ９７／４００２８、ＷＯ  ９８／４０３８１、ＷＯ  ００／５６３３１の化合物、およびミコフェノール酸およびその誘導体、ならびに限定されないが、ＶＸ−４９７、ＶＸ−１４８、および／またはＶＸ−９４４を含む）；または上記いずれかの組合せが含まれる。
【００４３】
他の薬剤（例えば、非免疫調節または免疫調節化合物）は、本発明の化合物との組合せにおいて使用され得、限定されないが、ＷＯ  ０２／１８３６９（例えば、２７３頁９〜２２行目および２７４頁４行目から２７６頁１１行目参照）に記載のものを含む（出典明示により本明細書の一部とする）。
【００４４】
さらに他の化合物には、限定されないが、ＰＥＧ−ＩＮＴＲＯＮ（登録商標）（ペグインターフェロンα−２ｂ、Schering Corporation, Kenilworth, NJから入手可能）；ＩＮＴＲＯＮ−Ａ（登録商標）（インターフェロンα−２ｂ、Schering Corporation, Kenilworth, NJから入手可能）；リバビリン（１−β−Ｄ−リボフラノシル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−カルボキサミド、ICN Pharmaceuticals, Inc., Costa Mesa, CAから入手可能である；Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ、８３６５番、第１２版に記載）；ＲＥＢＥＴＲＯＬ（登録商標）（Schering Corporation, Kenilworth, NJ）、ＣＯＰＥＧＡＳＵＳ（登録商標）（Hoffmann-La Roche, Nutley, NJ）；ＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標）（ペグインターフェロンα−２ａ、Hoffmann-La Roche, Nutley, NJから入手可能）；ＲＯＦＥＲＯＮ（登録商標）（組み換えインターフェロンα−２ａ、Hoffmann-La Roche, Nutley, NJから入手可能）；ＢＥＲＥＦＯＲ（登録商標）（インターフェロンα２を意味し、Boehringer Ingelheim Pharmaceutical, Inc., Ridgefield, CTから入手可能）；ＳＵＭＩＦＥＲＯＮ（登録商標）（スミフェロンのような天然αインターフェロンの精製混合物、日本の住友から入手可能）；ＷＥＬＬＦＥＲＯＮ（登録商標）（インターフェロンα  ｎ１、Glaxo_Wellcome LTd., Great Britainから入手可能）；ＡＬＦＥＲＯＮ（登録商標）（インターフェロン Sciencesによって製造された天然αインターフェロンの混合物、そしてPurdue Frederick Co., CTから入手可能）；α−インターフェロン；天然α−インターフェロン２ａ；天然α−インターフェロン２ｂ；ペグ化α−インターフェロン２ａまたは２ｂ；コンセンサスα−インターフェロン（Amgen, Inc., Newbury Park, CA）；ＶＩＲＡＦＥＲＯＮ（登録商標）；ＩＮＦＥＲＧＥＮ（登録商標）；ＲＥＢＥＴＲＯＮ（登録商標）（Schering Plough、インターフェロン−α−２Ｂ＋リバビリン）；ペグ化インターフェロン−α（Reddy, K.R. et al. “Efficacy and Safety of Pegylated (40-kd) Interferon alpha-2a Compared with Interferon alpha-2a in Noncirrhotic Patients with Chronic Hepatitis (Hepatology, 33, pp. 433-438 (2001)；コンセンサスインターフェロン（Kao, J.H., et al., “Efficacy of Consensus Interferon in the Treatment of Chronic Hepatitis” J. Gastroenterol. Hepatol. 15, pp. 1418-1423 (2000)；リンパ芽または“天然”インターフェロン；インターフェロンタウ（Clayette, P. et al., “IFN-tau, A New Interferon Type I with Antiretroviral activity” Pathol. Biol. (Paris) 47, pp. 553-559 (1999)；インターロイキン２（Davis, G.L. et al., “Future Options for the Management of Hepatitis C.” Seminars in Liver Disease, 19, pp. 103-112 (1999)；インターロイキン６（Davis, G.L. et al., “Future Options for the Management of Hepatitis C.” Seminars in Liver Disease, 19, pp. 103-112 (1999)；インターロイキン１２（Davis, G.L. et al., “Future Options for the Management of Hepatitis C.” Seminars in Liver Disease, 19, pp. 103-112 (1999)；リバビリン；および１型ヘルパーＴ細胞応答の進行を上昇させる化合物（Davis, G.L. et al., “Future Options for the Management of Hepatitis C.” Seminars in Liver Disease, 19, pp. 103-112 (1999)）が含まれる。また、細胞中のインターフェロン合成を刺激する化合物（Tazulakhova, E.B. et al., “Russian Experience in Screening, analysis, and Clinical Application of Novel Interferon Inducers” J. Interferon Cytokine Res., 21 pp. 65-73）が含まれ、これは、限定されないが、２本鎖ＲＮＡ、トブラマイシン単独または組合せ、ならびにＩｍｉｑｕｉｍｏｄ（3M Pharmaceuticals; Sauder, D.N. “Immunomodulatory and Pharmacologic Properties of Imiquimod” J. Am. Acad. Dermatol., 43 pp. S6-11 (2000)）が含まれる。
【００４５】
当業者に理解されるとおり、プロテアーゼ阻害剤およびＣＹＰ阻害剤は好ましくは経口的に投与されるであろう。インターフェロンは典型的には経口的に投与されない。それにもかかわらず、本発明の方法または組合せは、本発明において何らかの特定の投与形態またはレジメンに限定されるものではない。したがって、本発明の組合せの各成分は、別々に、一緒に、またはその任意の組合せで、投与され得る。当業者に理解されるとおり、インターフェロンの投与量は、典型的には、典型的にはＩＵで測定される（例えば、約４００万ＩＵから約１２００万ＩＵ）。
【００４６】
さらなる薬剤が他のＣＹＰ阻害剤から選択されるとき、前記方法は、したがって、２またはそれ以上のＣＹＰ阻害剤を使用するであろう。各成分は、１つ以上の投与形態で投与され得る。各投与形態を、患者に任意の順序で投与することができる。
【００４７】
ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤、ＣＹＰ阻害剤、および任意のさらなる薬剤を、別々の投与形態に製剤することができる。あるいは、患者に投与される投与形態の数を減ずるために、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤、ＣＹＰ阻害剤、および任意のさらなる薬剤を、任意の組合せで一緒に製剤することができる。例えば、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤を一つの投与形態に製剤し、そしてＣＹＰ阻害剤とさらなる薬剤を一緒に他の投与形態に製剤することができる。任意の別々の投与形態を、同時に、または異なる時点で投与することができる。ＣＹＰ阻害剤を、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤（またはさらなる薬剤（複数も可））の代謝を減少させるような時間内で、投与するであろうとこは、理解されるべきである。
【００４８】
したがって、本発明の他の態様は、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩、およびＣＹＰ阻害剤またはその薬学的に許容される塩を含む組成物を提供する。好ましい態様において、前記ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤は、サンプルまたは患者におけるウイルス負荷（当該ウイルスはウイルスのライフサイクルに必要なＮＳ３／４Ａセリンプロテアーゼをコード化する）を減少させるのに有効な量で、そして薬学的に許容される担体と共に、存在する。あるいは、本発明の組成物は本明細書に記載のさらなる薬剤を含む。各成分は個々の組成物として、組合せ組成物として、または一つの組成物として存在し得る。
【００４９】
化合物の薬学的に許容される塩がこれらの組成物において利用されるとき、当該塩はこれらの塩は好ましくは無機または有機酸および塩基に由来する。かかる酸性の塩には、下記のものが含まれる：アセテート、アジペート、アルギネート、アスパルテート、ベンゾエート、ベンゼンスルホネート、ビスルフェート、ブチレート、サイトレート、カンフォレート、カンファースルホネート、シクロペンタン−プロピオネート、ジグルコネート、ドデシルスルフェート、エタンスルホネート、フマレート、グルコヘプタノエート、グリセロホスフェート、ヘミスルフェート、ヘプタノエート、ヘキサノエート、ヒドロクロリド、ヒドロブロミド、ヒドロアイオダイド、２−ヒドロキシエタンスルホネート、ラクテート、マレエート、メタンスルホネート、２−ナフタレンスルホネート、ニコチネート、オキサレート、パモエート、ペクチネート、ペルスルフェート、３−フェニルプロピオネート、ピクレート、ピバレート、プロピオネート、スクシネート、タートレート、チオシアネート、トシレートおよびウンデカノエート。塩基の塩には、アンモニウム塩、アルカリ金属塩、例えばナトリウムおよびカリウム塩、アルカリ土類金属塩、例えばカルシウムおよびマグネシウム塩、有機塩基との塩、例えばジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、およびアルギニン、リジンなどのようなアミノ酸との塩が含まれる。
【００５０】
また、塩基性窒素含有基は、低級アルキルハライド、例えばメチル、エチル、プロピルおよびブチルの塩化物、臭化物およびヨウ化物；ジメチル、ジエチル、ジブチルおよびジアミルの硫酸エステルのようなジアルキルスルフェート、デシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリルの塩化物、臭化物およびヨウ化物のような長鎖ハライド、ベンジルおよびフェネチルの臭化物のようなアラルキルハライド等のような試薬で、四級化することができる。水または油に可溶性または不溶性の産物をこれによって得る。
【００５１】
本発明の組成物および方法において利用される化合物はまた、選択的な生物学的特性を高めるための適当な官能基を付加することによって改変することができる。当該改変は当業者に既知であり、そして所与の生物学的系（例えば、血液、リンパ系、中枢神経系）へと生物学的浸透性を上昇させる、経口利用能を上昇させる、注射による投与を可能とするために可溶性を上昇させる、代謝を変化させる、そして排出速度を変化させるものが含まれる。
【００５２】
それらの組成物において使用され得る薬学的に許容される担体には、限定されないが、イオン交換体、アルミナ、アルミニウムステアリン酸、レシチン、血清タンパク質、例えばヒト血清アルブミン、緩衝物質、例えばリン酸、グリシン、ソルビン酸、カリウムソルビン酸、飽和植物脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質、例えばアミンスルフェート、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛の塩、コロイド状シリカ、トリシリカマグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの物質、ポリエチレングリコール、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレンポリオキシプロピレンブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂が含まれる。
【００５３】
好ましい態様において、本発明の組成物は哺乳類、とりわけヒトへの医薬的投与のために製剤される。
【００５４】
本発明の前記医薬組成物（ならびに本発明の方法、組合せ、キット、およびパックにおいて使用するための組成物）は経口的に、非経腸的に、舌下で、吸入スプレーによって、局所的に、直腸的に、経鼻的に、頬側的に、経膣的に、またはうめ込まれたリザーバーを介して、投与することができる。“非経腸”との用語は、本明細書において使用するとき、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑膜内、胸骨内、肝内、病巣内および頭蓋内注射または輸液技術を含む。好ましくは、前記組成物は経口的または静脈内投与される。より好ましくは、前記組成物は経口的に投与される。
【００５５】
本発明の組成物の滅菌注射可能形態は、水性または油性懸濁液であり得る。これらの懸濁液は、当業者に既知の技術にしたがって、好適な分散剤または湿潤剤、および懸濁化剤を使用して、製剤することができる。前記滅菌注射製剤はまた、例えば１，３−ブタンジオール中の溶液のような、毒性のない非経腸的に許容される希釈剤または溶媒中の滅菌注射溶液または懸濁液であり得る。使用することができる許容されるビークルおよび溶媒は、水、リンガー溶液、および等張塩化ナトリウム溶液である。さらに、滅菌、固定油は通常、溶媒または懸濁媒体として使用される。この目的のため、合成モノまたはジグリセリドを含む任意の無菌固定油を使用することができる。脂肪酸、例えばオレイン酸およびそのグリセリド誘導体は注射液の製造において有用であり、例えば天然の薬学的に許容される油、例えばオリーブ油またはヒマシ油、とりわけそれらのポリオキシエチル化されたものである。これらの油溶液または懸濁液はまた、長鎖アルコール希釈剤または分散剤、例えばカルボキシメチルセルロースまたはエマルジョンおよび懸濁液を含む薬学的に許容される投与形態の製剤において一般的に使用される同様の分散剤を含み得る。他の一般的に使用される界面活性剤、例えばツイーン、スパン、および薬学的に許容される固体、液体、または他の投与形態の製造において一般的に使用される他の乳化剤またはバイオアベイラビリティー向上物質はまた、製剤の目的のために使用され得る。
【００５６】
本発明の組成物（すなわち、本発明の方法、キット、組合せ、またはパックにおいて使用される組成物）において、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤、ＣＹＰ阻害剤および任意のさらなる薬剤の両方が、単独治療レジメンにおいて通常投与される投与量の約１０〜１００％、より好ましくは約１０〜８０％の投与レベルであるべきである。
【００５７】
本発明の医薬組成物は、限定されないが、カプセル剤、錠剤、粉末、顆粒、水性懸濁液または溶液を含む任意の経口的に許容され得る投与形態で経口的に投与され得る。経口的使用のための錠剤の場合において、一般的に使用される担体にはラクトースおよびコーンスターチが含まれる。滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウムはまた、典型的には加えられる。カプセル剤形態での経口投与のために、有用な希釈剤にはラクトースおよび乾燥コーンデンプンが含まれる。水性懸濁液が経口的使用のために必要であるとき、有効成分は乳化剤および懸濁化剤と組み合わされる。所望により、特定の甘味剤、矯味矯臭剤または着色剤も加えることができる。許容される液体投与形態には、乳液、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシルが含まれる。
【００５８】
あるいは、本発明の医薬組成物を直腸投与のための座薬の形態で投与することができる。これらは室温では固体であるが直腸温度では液体であり、したがって直腸で溶融して薬剤を放出する、好適な刺激のない賦形剤と前記薬剤を混合して製造することができる。このような物質にはカカオバター、蜜ろうおよびポリエチレングリコールが含まれる。
【００５９】
本発明の医薬組成物はまた、典型的には、とりわけ処置の標的が、眼、皮膚または腸管下部の疾患を含む、局所適用によって容易に到達可能な領域または臓器を含むとき、局所的に投与され得る。好適な局所製剤はこれらの領域または臓器の各々について、容易に製造される。
【００６０】
腸管下部への局所適用は、直腸座薬製剤（上記参照）または好適なかん腸製剤が有効であり得る。局所的な経皮パッチも使用することができる。
【００６１】
局所適用のために、前記医薬組成物を、１またはそれ以上の担体に懸濁または溶解させた有効成分を含む好適な軟膏に製剤することができる。本発明の化合物の局所投与のための担体には、限定されないが、鉱油、流動パラフィン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ワックスおよび水が含まれる。あるいは、前記医薬組成物は１またはそれ以上の薬学的に許容される担体に懸濁または溶解させた有効成分を含む好適なローションまたはクリームに製剤することができる。好適な担体には、限定されないが、鉱油、ソルビタンモノステアレート、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水が含まれる。
【００６２】
眼への使用のために、前記医薬組成物を、等張、ｐＨ調節滅菌食塩水中の微小懸濁液として、または好ましくは、塩化ベンザルコニウムのような保存剤添加または無添加の、等張、ｐＨ調節滅菌食塩水中の水溶液として、製剤することができる。あるいは、眼への使用のために、前記医薬組成物をワセリンのような軟膏に製剤することができる。
【００６３】
本発明の医薬組成物はまた、経鼻エアロゾルまたは吸入によって投与され得る。当該組成物は医薬製剤の分野において既知の技術にしたがって製造され、そしてベンジルアルコールまたは他の好適な保存剤、バイオアベイラビリティーを上昇させるための吸収促進剤、フルオロ炭素、および／または他の常套の溶解剤または分散剤を使用して、食塩水中の水溶液として製造することができる。
【００６４】
当業者に理解されるとおり、医薬組成物はまたリポソームの形態で投与され得る。
【００６５】
経口投与用に製剤された本発明の医薬組成物が好ましい。
【００６６】
１つの態様において、１日あたり約０．０１〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の投与レベルのＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤が、抗ＨＣＶ介在疾患の予防および処置のために有用である。ＣＹＰ阻害剤については、１日あたり約０．０１〜約２００ｍｇ／ｋｇ体重の投与レベルが典型である。より典型的には、１日あたり約０．１〜約５０ｍｇ／ｋｇまたは約１．１〜約２５ｍｇ／ｋｇの投与レベルであろう。典型的には、本発明の医薬組成物は１日あたり約１〜５回、あるいはその他で、連続輸液として投与されるであろう。当該投与は慢性または急性治療として使用することができる。単剤形態を生産するための担体物質と組み合わされ得る有効成分の量は、処置される宿主および特定の投与形態に依存して変化するであろう。典型的な製剤は、約５％〜約９５％（ｗ／ｗ）の有効成分を含むであろう。好ましくは、かかる製剤は約２０％〜約８０％の有効成分を含む。
【００６７】
患者の状態の改善によって、本発明の化合物、組成物または組合せの維持用量を、所望により、投与することができる。その後、投与の量もしくは頻度、またはその両方を、症状の関数として、改善された状態が維持されるレベルへと減らすことができ、症状が望ましいレベルへと緩和されたとき、処置を中止すべきである。患者には、しかしながら、疾患の症状の何らかの再発によって、長期の断続的な処置が必要であり得る。
【００６８】
いずれかの特定の患者に対する具体的な投与量および投与レジメンは、使用される具体的な化合物の活性、年齢、体重、一般的な健康、性別、食事、投与の時間、排出速度、薬剤の組合せ、そして処置している医師の判断と処置される具体的な疾患の重症度を含む様々な要因に依存するであろう。有効成分の量はまた、組成物における特記された化合物およびさらなる抗ウイルス剤の存在または性質に依存するであろう。
【００６９】
リトナビルの好ましい投与形態について、米国特許６，０３７，１５７、およびその引用文献：米国特許５，４８４，８０１、米国特許出願０８／４０２，６９０、ならびに国際特許出願ＷＯ  ９５／０７６９６およびＷＯ  ９５／０９６１４参照。
【００７０】
他の態様において本発明は、本発明の薬学的に許容される医薬組成物を患者に投与することによる、ウイルスのライフサイクルに必須であるウイルスコード化ＮＳ３／４Ａセリンプロテアーゼを特徴とするウイルスに感染した患者を処置する方法を提供する。好ましくは、本発明の方法は、ＨＣＶ感染を有する患者を処置するために使用される。当該処置は、完全にウイルス感染をなくし、またはその重症度を減少させることができる。より好ましくは、前記患者はヒトである。
【００７１】
さらに別の態様において本発明は、患者に投与するために生物学的物質を前処置する方法であって、当該生物学的物質を本発明の化合物を含む薬学的に許容される組成物と接触させることを含む方法を提供する。前記生物学的物質には、限定されないが、血液およびその内容物、例えば血漿、血小板、血液細胞の亜集団等；組織、例えば腎臓、肝臓、心臓、肺等；精子および卵子；骨髄およびその内容物、ならびに患者に注入する他の液体、例えば食塩水、デキストロース等が含まれる。
【００７２】
本発明はまた、Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤を含む組成物を製造するための方法であって、Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤を組み合わせる工程を含んでなる方法を提供する。本発明の他の態様は、組成物が本明細書に記載の１以上のさらなる薬剤を含む方法を提供する。
【００７３】
本発明はまた、Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤とシトクロームＰ４５０モノオキシゲナーゼ阻害剤を含む治療的組合せ剤を提供する。本発明の他の態様において、前記治療的組合せ剤はさらに、本明細書に記載の１以上のさらなる薬剤を含む。
【００７４】
医薬組成物を、一つのパッケージ、通常ブリスターパック中に処置の全コースを含む、“患者用パック”で患者に処方することもできる。患者用パックは、薬剤師が大量の供給品から患者への供給品を分割する伝統的な処方よりも、患者パック中に含まれる、通常伝統的な処方にはない添付文書を患者が常に利用できる点で、有利である。添付文書の同封によって、医師の指示に従う患者のコンプライアンスを改善することが示されている。
【００７５】
本発明の組合せの、患者に本発明の正しい使用を説明する添付文書を含む、一つの患者パック、または各製剤の複数の患者パックによる投与は、本発明の望ましい、さらなる特徴であることは理解される。
【００７６】
本発明のさらなる局面は、少なくとも本発明のＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤およびＣＹＰ阻害剤、ならびに本発明の組合せ剤の使用についての指示を含む添付文書を含んでなるパックである。本発明の他の態様において、医薬パックはさらに、本明細書に記載の１以上のさらなる薬剤を含む。当該さらなる薬剤（複数も可）は、同じパックまたは別のパックで提供され得る。
【００７７】
本発明の他の局面は、ＨＣＶ感染の処置またはＨＣＶ感染の予防において使用するための患者用の包装されたキットであって：一つまたは複数の各医薬組成物の医薬製剤；貯蔵中および投与前に前記医薬製剤を格納する容器；およびＨＣＶ感染を処置または予防するために有効な方法で薬剤の投与を実行するための指示書を含むものが含まれる。
【００７８】
したがって、本発明は、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤およびＣＹＰ阻害剤（ならびに所望によりさらなる薬剤）または常套の方法で製造されるその誘導体の、同時または逐次投与のためのキットを提供する。典型的には、当該キットは、例えば、各阻害剤および所望によりさらなる薬剤（複数も可）（そして１または複数の医薬製剤で）の組成物、ならびに同時または逐次投与のための指示書を含む。
【００７９】
他の態様において、包装されたキットは、自己投与のための１以上の投与形態；貯蔵中および投与前に投与形態を格納するための、好ましくは密封された容器；ならびに薬剤の投与を実行するための患者に対する指示書を含む。当該指示書は、典型的には、パッケージの添付文書、ラベルおよび／またはキットの他の要素、ならびに本明細書に記載の投与形態（複数も可）に記載される。各投与形態は、各投与形態が個々のセルまたはバブル中に互いに離れている金属フォイル−プラスチックラミネートのシートにおけるように、個々に格納され得、または前記投与形態は一つの容器中に、例えばプラスチック瓶におけるように格納され得る。当該キットはまた、典型的には、個々のキット要素、すなわち投与形態、容器および使用のための指示書を包装するための手段を含む。このような包装手段は、段ボールまたは紙の箱、プラスチックまたはフォイルのポーチなどの形態を取り得る。
【００８０】
ある例示的な態様を下記に示すが、本発明の化合物は上記一般的な方法によって、当業者に入手可能な一般的な出発物質を使用して、製造することができることは理解される。
【００８１】
本発明がより十分に理解されるために、下記製造例および試験例を記す。これらの実施例は説明を目的としており、いかなる方法においても本発明の技術的範囲を限定するものとして解釈すべきではない。
【実施例】
【００８２】
実施例１
ＨＣＶレプリコン細胞アッセイプロトコル：
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）レプリコンを含む細胞を１０％胎児ウシ血清（ＦＢＳ）、１ｍｌあたり０．２５ｍｇのＧ４１８を含むＤＭＥＭ（培地Ａ）中で、適当な補助物質と共に維持した。
【００８３】
１日目に、レプリコン細胞の単層を、トリプシン：ＥＤＴＡ混合物で処理し、除去し、次いで培地Ａを１ｍＬあたり１００，０００細胞の最終濃度へと希釈し、１００μｌ中の１０，０００細胞を９６ウェル組織培養プレートの各ウェルへと播種し、そして一晩組織培養インキュベーター中で３７℃にて培養した。
【００８４】
２日目に、化合物（１００％ＤＭＳＯ中の）を、２％ＦＢＳ、０．５％ＤＭＳＯを含むＤＭＥＭ（培地Ｂ）中で、適当な補助物質と共に連続希釈した。ＤＭＳＯの最終濃度を希釈系列を通して０．５％で維持した。
【００８５】
レプリコン細胞単層上の培地を除去し、次いで様々な濃度の化合物を含む培地Ｂを加えた。全く化合物を含まない培地Ｂを、化合物なしの対照として他のウェルに加えた。
【００８６】
細胞を培地Ｂ中の化合物または０．５％ＤＭＳＯと共に４８時間、組織培養インキュベーター中で３７℃にてインキュベーションした。４８時間のインキュベーションが終わると、培地を除去し、そしてレプリコン細胞単層をＰＢＳで一度洗浄し、そしてＲＮＡ抽出まで−８０℃にて貯蔵した。
【００８７】
処理されたレプリコン細胞単層を有する培養プレートを溶解させ、そして固定量の他のＲＮＡウイルス、例えばウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）を各ウェルの細胞に加えた。ＲＮＡ抽出試薬（例えばＲＮｅａｓｙキットからの試薬）をＲＮＡの分解を避けるために即座に細胞へと加えた。全ＲＮＡを製造業者の指示書にしたがって抽出効果と一貫性を改善するための改変を加えて抽出した。最終的に、ＨＣＶレプリコンＲＮＡを含む全細胞性ＲＮＡを溶出し、そしてさらなる処理まで−８０℃にて貯蔵した。
【００８８】
Ｔａｑｍａｎ実時間ＲＴ−ＰＣＲ定量アッセイを２セットの特定のプライマーおよびプローブで行った。１つはＨＣＶのためであり、そして他方はＢＶＤＶのためである。処理されたＨＣＶレプリコン細胞に由来する全ＲＮＡ抽出物を、ＨＣＶとＢＶＤＶの両方のＲＮＡの定量のため、同じＰＣＲウェルにおいて、ＰＣＲ反応へ加えた。実験の失敗は各ウェルにおけるＢＶＤＶのＲＮＡレベルに基づいて判断し、そして排除した。各ウェルにおけるＨＣＶのＲＮＡレベルを、同じＰＣＲプレートにおいて標準曲線ランにしたがって計算した。化合物処理によるＨＣＶのＲＮＡレベルの阻害または減少のパーセンテージを、ＤＭＳＯまたは化合物なしの対照を０％阻害として使用して、計算した。ＩＣ５０（ＨＣＶのＲＮＡレベルの５０％阻害が観察される濃度）を、任意の所与の化合物の力価測定曲線から計算した。
【００８９】
実施例２
ＨＣＶ  Ｋｉアッセイプロトコル
５ＡＢ基質と産物の分離のためのＨＰＬＣ  Ｍｉｃｒｏｂｏｒｅ法
基質：
ＮＨ２−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−（α）Ａｂｕ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ＣＯＯＨ
【００９０】
２０ｍＭの５ＡＢ原液（または選択した濃度）をＤＭＳＯ  ｗ／０．２Ｍ  ＤＴＴ中で作成した。これを等分して−２０℃にて貯蔵した。
【００９１】
バッファー：５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．８；２０％グリセロール；１００ｍＭのＮａＣｌ
【００９２】
全アッセイ体積は１００μｌであった。
【表１】
2007509950.tif 000003
【００９３】
バッファー、ＫＫ４Ａ、ＤＴＴ、およびｔＮＳ３を組合せ；各々７８μＬに９６ウェルプレートのウェルへと分配した。これを３０℃にて５〜１０分インキュベーションした。
【００９４】
２．５μＬの適当な濃度の試験化合物をＤＭＳＯ中に溶解させ（ＤＭＳＯのみを対照とする）、そして各ウェルに加えた。これを室温にて１５分、インキュベーションした。
【００９５】
２０μＬの２５０μＭの５ＡＢ基質の添加によって反応を開始させた（２５μＭの濃度は５ＡＢについてのＫｍと同じかわずかに低い）。
２０分、３０℃にてインキュベーションした。
２５μＬの１０％ＴＦＡの添加によって反応を終わらせた。
１２０μＬのアリコートをＨＰＬＣバイアルへと移した。
【００９６】
ＳＭＳＹ産物を基質とＫＫ４Ａから、下記の方法によって分離した：
Ｍｉｃｒｏｂｏｒｅ分離法：
器具類：  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００
脱気器  Ｇ１３２２Ａ
バイナリーポンプ  Ｇ１３１２Ａ
自動サンプラー  Ｇ１３１３Ａ
カラムサーモスタットチャンバー  Ｇ１３１６Ａ
ダイオードアレイ検出器  Ｇ１３１５Ａ
カラム：
Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｊｕｐｉｔｅｒ；５ミクロンＣ１８；３００オングストローム；１５０×２ｍｍ；Ｐ／Ｏ  ００Ｆ−４０５３−Ｂ０
カラムサーモスタット：４０℃
注入体積：１００μＬ
溶媒Ａ＝ＨＰＬＣグレード水＋０．１％ＴＦＡ
溶媒Ｂ＝ＨＰＬＣグレードアセトニトリル＋０．１％ＴＦＡ
【表２】
2007509950.tif 000004
停止時間：１７分
実行後時間：１０分。
【００９７】
実施例３
ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤の代謝安定性
ＶＸ−９５０の代謝におけるリトナビルの相互作用
ＶＸ−９５０の代謝およびリトナビルとの相互作用を、ヒト肝臓ミクロソームを使用して調査した。初期インキュベーションを１ｍＭのＥＤＴＡ、ＮＡＤＰＨ、１μＭのＶＸ−９５０、および０．１、０．５、または１．０ｍｇのミクロソームタンパク質／ｍＬを含む０．１Ｍリン酸バッファー、ｐＨ７．４中で、様々な時点で行った。代謝の非直線速度のため、さらなるインキュベーションを、０．２５または０．５ｍｇミクロソームタンパク質／ｍＬをふくむ、２つの濃度のＶＸ−９５０（０．５および１μＭ）で、３０分までで行った。
【００９８】
ヒト肝臓ミクロソームにおけるＶＸ−９５０の明白な、迅速な代謝のために、ＶＸ−９５０代謝の動態（ＶｍａｘおよびＫｍ）を、０．２５ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度を使用して、そして２分のインキュベーション時間で、測定した。リトナビルのＶＸ−９５０の代謝に対する相互作用を、一つの濃度のＶＸ−９５０（０．２５μＭ）およびヒト肝臓ミクロソーム（０．２５ｍｇのミクロソームタンパク質／ｍＬ）で、様々な濃度のリトナビル（０〜１００μＭ）と共に、２分間インキュベーションすることで測定した。３μＭまでの濃度でのリトナビルの添加は、ＶＸ−９５０代謝の阻害を生み出した。より高い濃度のリトナビル（１０〜１００μＭ）では、ＶＸ−９５０代謝の増加が観察された。
【００９９】
要約すると、この研究で使用した濃度のＶＸ−９５０は、急速にヒト肝臓ミクロソームにおいて代謝される（例えば、２μＭ、６０分で７３％、２０μＭで７％；または２μＭ、１２０分で８６％、２０μＭで２１％）。他のＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤は同様の結果を示した。
【０１００】
リトナビルはＶＸ−９５０の代謝を阻害することが示された。しかし、高濃度のリトナビルとの相互作用によって、ＶＸ−９５０代謝の活性化が起こる。リトナビルの存在下におけるＶＸ−９５０代謝のこの上昇の機構は、不明である。理論に縛られないが、この上昇は、同じ活性部位に両化合物の同時結合の結果であり得、あるいはリトナビルによるＣＹＰ３Ａ４活性の停止が他の阻害されていないＣＹＰ４５０酵素によって代謝されるＶＸ−９５０をもたらし得る。
【０１０１】
本明細書に記載のあらゆる文献を、引用により本明細書の一部とする。
【０１０２】
本発明者らは多くの本発明の態様を記載したが、我々の基本的な例は本発明の化合物および方法を利用する他の態様を提供するために変更し得ることは明らかである。したがって、本発明の技術的範囲が上記実施例の方法によって示された具体的な態様によるよりも、特許請求の範囲に記載の請求項により定義されることは理解される。
【国際調査報告】
2007509950.tif 000005
2007509950.tif 000006