(57)【要約】  C型肝炎ウイルスなどのフラビウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染症を治療するための化合物、組成物および方法が開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Iの化合物：
2007509943.tif 000089
（式中
Yは結合、-CH2-または-O-からなる群より選択され；
W、W1およびW2はそれぞれ水素および薬学的に許容されるプロドラッグからなる群より独立に選択され；かつ
Tは下記からなる群より選択される
a）-C≡C-R（Rは下記からなる群より選択される
i）トリ(C1〜C4)アルキルシリル、-C(O)NR1R2、アルコキシアルキル、ヘテロアリール、および置換ヘテロアリール、ならびにアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノアシル、アミジノ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、シアノ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、グアニジノ、ハロ、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドラジノ、ヒドロキシル、ニトロ、チオール、および-S(O)mR3からなる群より選択される1から3個の置換基で置換されたフェニル；
ただしR1およびR2は、R1およびR2の一つだけがアミノまたは置換アミノであるとの条件で、水素、アルキル、置換アルキル、アミノ、置換アミノ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環および置換複素環からなる群より独立に選択され、さらにR1およびR2はそれらに結合している窒素原子と一緒に複素環または置換複素環を形成し；
R3はアルキル、置換アルキル、アミノ、置換アミノ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環および置換複素環からなる群より選択され；かつ
mは0、1または2の整数である；
ii）-C(O)OR14（R14は水素、アルキルまたは置換アルキルである））；
b）-CH=CH-Q2（Q2は水素またはcis-メトキシから選択される）；
c）-C(O)H；
d）-CH=NNHR15（R15はHまたはアルキルである）；
e）-CH=N(OR15)（R15は前述の定義のとおりである）；
f）-CH(OR16)2（R16は(C3〜C6)アルキルである）および
g）-B(OR15)2（R15は前述のとおりである））；
およびその薬学的に許容される塩または部分塩。
【請求項２】
W、W1およびW2はそれぞれ独立に水素またはアシル、オキシアシル、ホスホン酸塩、リン酸エステル、リン酸塩、ホスホンアミデート、ホスホロジアミデート、ホスホラミデートモノエステル、環状ホスホラミデート、環状ホスホロジアミデート、ホスホラミデートジエステル、および-C(O)CHR30NH2（R30は水素、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、およびアミノ酸の側鎖からなる群より選択される）からなる群より選択される薬学的に許容されるプロドラッグである、請求項1記載の化合物。
【請求項３】
WはHである、請求項2記載の化合物。
【請求項４】
W1はHである、請求項2記載の化合物。
【請求項５】
W2はHである、請求項2記載の化合物。
【請求項６】
WおよびW1はHである、請求項2記載の化合物。
【請求項７】
WおよびW2はHである、請求項2記載の化合物。
【請求項８】
W1およびW2はHである、請求項2記載の化合物。
【請求項９】
W、W1およびW2はHである、請求項2記載の化合物。
【請求項１０】
W1およびW2は水素であり、かつWは下記の式：
2007509943.tif 000090
（式中、R30は前述の定義のとおりであり、R8は水素またはアルキルであり、かつR10はアルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環および置換複素環からなる群より選択される）で表される、請求項2記載の化合物。
【請求項１１】
WおよびW2は水素であり、かつW1は下記の式：
2007509943.tif 000091
（式中、R30は前述の定義のとおりである）で表される、請求項2記載の化合物。
【請求項１２】
Tは-C≡C-Rであり、かつRはトリ(C1〜C4)アルキルシリル、-C(O)NR1R2、アルコキシアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、フェニル、ならびにアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノアシル、アミジノ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、シアノ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、グアニジノ、ハロ、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドラジノ、ヒドロキシル、ニトロ、チオール、および-S(O)mR3からなる群より選択される1から3個の置換基で置換されたフェニルからなる群より選択され；
ただしR1およびR2は、R1およびR2の一つだけがアミノまたは置換アミノであるとの条件で、水素、アルキル、置換アルキル、アミノ、置換アミノ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環および置換複素環からなる群より独立に選択され、さらにR1およびR2はそれらに結合している窒素原子と一緒に複素環または置換複素環を形成し；
R3はアルキル、置換アルキル、アミノ、置換アミノ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環および置換複素環からなる群より選択され；かつ
mは0、1または2の整数である、請求項1から11のいずれか一項記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
Rは-C(O)NH2、-Si(CH3)3、ピリド-2-イル、4-メトキシフェニル、および-CH(OCH2CH3)2からなる群より選択される、請求項12記載の化合物。
【請求項１４】
Tは-C≡C-Rであり、かつRは-C(O)OHである、請求項1から11のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１５】
Tは-C≡C-Rであり、Rは-C(O)OR14であり、かつR14はアルキルである、請求項1から11のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１６】
R14はメチルまたはエチルである、請求項15記載の化合物。
【請求項１７】
Tは-CH=CH-Q2（Q2は水素またはcis-メトキシから選択される）である、請求項1から11のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１８】
Tは-C(=O)Hである、請求項1から11のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１９】
Tは-CH=NNHR15（R15は水素およびアルキルからなる群より独立に選択される）である、請求項1から11のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２０】
Tは-CH=N(OR15)（R15は水素およびアルキルからなる群より独立に選択される）である、請求項1から11のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２１】
Tは-CH(OR16)2（R16は独立に(C3〜C6)アルキルである）である、請求項1から11のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２２】
Tは-B(OR15)2（R15は水素およびアルキルからなる群より独立に選択される）である、請求項1から11のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２３】
下記からなる群より選択される化合物：
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2'-トリメチルシリルエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[2-(ピリド-2-イル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[2-(ピリド-4-イル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-(4-メトキシフェニル)-エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-カルボキサミドエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(3,3-ジエトキシ)プロパルグ-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(N,N-ジメチル-2-カルボキサミド)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(N-アミノ-2-カルボキサミド)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2'-トリメチルシリルエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[2-(ピリド-2-イル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[2-(ピリド-4-イル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-(4-メトキシフェニル)エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-カルボキサミドエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(3,3-ジエトキシ)プロパルグ-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[2-(N,N-ジメチルカルボキサミド)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[2-(N-アミノカルボキサミド)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2'-トリメチルシリルエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[2-(ピリド-2-イル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[2-(ピリド-4-イル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-(4-メトキシフェニル)エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-カルボキサミドエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(3,3-ジエトキシ)プロパルグ-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(N,N-ジメチル-2-カルボキサミド)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(N-アミノ-2-カルボキサミド)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2'-トリメチルシリルエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[2-(ピリド-2-イル)エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[2-(ピリド-4-イル)エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-(4-メトキシフェニル)エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-カルボキサミドエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(3,3-ジエトキシ)プロパルグ-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(N,N-ジメチルカルボキシルアミド)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；および
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(N-アミノカルボキシルアミド)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-カルボキシエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-カルボキシエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-カルボキシエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；および
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-カルボキシエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(エチル2-カルボキシル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(メチル2-カルボキシル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(エチル2-カルボキシル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(メチル2-カルボキシル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(エチル2-カルボキシル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(メチル2-カルボキシル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(エチル2-カルボキシル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(メチル2-カルボキシル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-フェニルエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-(4-フルオロフェニル)エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-(4-メチルフェニル)エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-フェニルエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-(4-フルオロフェニル)エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-(4-メチルフェニル)エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-フェニルエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-(4-フルオロフェニル)エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-(4-メチルフェニル)エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-(4-フルオロフェニル)エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；および
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-(4-メチルフェニル)エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(エテン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-cis-メトキシ-エテン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-モノホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(エテン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-モノホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-cis-メトキシ-エテン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(エテン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-cis-メトキシ-エテン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(エテン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-cis-メトキシ-エテン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ホルミル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ホルミル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ホルミル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ホルミル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ヒドラゾノ)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ヒドラゾノ)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ヒドラゾノ)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ヒドラゾノ)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(カルバルデヒドオキシム)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(カルバルデヒドオキシム)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(カルバルデヒドオキシム)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(カルバルデヒドオキシム)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ジイソプロポキシメチル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ジイソプロポキシメチル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ジイソプロポキシメチル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ジイソプロポキシメチル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ボロン酸)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ボロン酸)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-ジホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ボロン酸)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
7-(2'-C-メチル-5'-トリホスホ-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ボロン酸)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン；
ならびにその薬学的に許容される塩または部分塩。
【請求項２４】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[2-(トリメチルシリル)-エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項２５】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(2-ピリド-2-イル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項２６】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[2-(ピリド-4-イル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項２７】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[2-(4-メトキシフェニル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項２８】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-カルボキサミドエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項２９】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[3,3-ジエトキシプロパルギル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項３０】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(N,N-ジメチル-2-カルボキシルアミド)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項３１】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(N-アミノ-2-カルボキシルアミド)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項３２】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-カルボキシエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項３３】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(エチル2-カルボキシル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項３４】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[(メチル2-カルボキシル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項３５】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-フェニルエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項３６】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-(4-フルオロフェニル)エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項３７】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-(4-メチルフェニル)エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項３８】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(エテン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項３９】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-cis-メトキシ-エテン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項４０】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ホルミル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項４１】
7-(2'-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ヒドラゾノ)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項４２】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(カルバルデヒドオキシム)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項４３】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ジイソプロポキシメチル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項４４】
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ボロン酸)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンまたはその薬学的に許容される塩もしくは部分塩。
【請求項４５】
薬学的に許容される希釈剤と、請求項1から11もしくは23から44のいずれか一項記載の化合物または複数のそのような化合物の混合物の治療上有効な量とを含む、薬学的組成物。
【請求項４６】
哺乳動物において、少なくとも部分的には、フラビウイルス科のウイルスによって媒介されるウイルス感染症の治療法であって、ウイルス感染症と診断されている、またはウイルス感染症を発症するリスクが高い哺乳動物に、請求項47記載の薬学的組成物を投与する段階を含む方法。
【請求項４７】
ウイルスがC型肝炎ウイルスである、請求項46記載の方法。
【請求項４８】
HCVに対して活性な一つまたは複数の薬剤の治療上有効な量の投与と組み合わせての、請求項47記載の方法。
【請求項４９】
活性薬剤がリバビリン、レボビリン、ビラミジン、サイモシンα-1、NS3セリンプロテアーゼの阻害剤、およびイノシン一リン酸デヒドロゲナーゼの阻害剤、インターフェロン-α、単独またはリバビリンもしくはレボビリンとの組み合わせでのペグ化インターフェロン-αである、請求項48記載の方法。
【請求項５０】
HCVに対して活性な薬剤がインターフェロン-α、あるいは単独またはリバビリンもしくはレボビリンとの組み合わせでのペグ化インターフェロン-αである、請求項49記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、少なくとも部分的には、フラビウイルス科のウイルスによって媒介される、哺乳動物のウイルス感染症を治療するための特定の化合物調製法に関する。本発明は、これらの方法において用いられる新規中間体も目的とする。
【０００２】
関連出願に対する相互参照
本出願は、すべて2004年6月4日提出の米国特許出願第10/861,090号、第10/861,311号、および第10/861,219号の一部継続出願であり、これらはそれぞれ2003年10月27日提出の米国特許仮出願第60/515,153号の35 U.S.C. § 119(e)の下での恩典を主張する。本出願は2004年8月18日提出の米国特許仮出願60/602,815号の35 U.S.C. § 119(e)の下での恩典も主張する。前述の出願はすべてその全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【背景技術】
【０００３】
引用文献
下記の出版物は本出願において上付き数字で引用される。
1. Giangaspero, et al., Arch. Virol. Suppl., 7: 53-62 (1993)
2. Giangaspero, et al., Int. J. STD. AIDS, 4(5): 300-302 (1993)
3. Yolken, et al., Lancet, 1(8637): 517-20 (1989)
4. Wilks, et al., Lancet, 1(8629): 107 (1989)
5. Giangaspero, et al., Lancet, 2: 110 (1988)
6. Potts, et al., Lancet, 1(8539): 972-973 (1987)
7. Cornberg, et al., "Hepatitis C: therapeutic perspectives." Forum (Genova), 11(2):154-62 (2001)
8. Dymock, et al., Antivir. Chem. Chemother. 11(2):79-96 (2000)
9. 2002年3月7日公開のDevos, et al., 国際出願番号第02/18404 A2号
10. Sommadossi, et al., 国際出願番号第01/90121号, published 23 May, 2001
11. Carroll, S.S., et al., 2002年7月25日公開の国際出願番号第02057287号
12. Carroll, S.S., et al., 2002年7月25日公開の国際出願番号第02057425号
13. Roberts, et al., 2004年6月4日出願の米国特許出願第10/861,090号
14. Roberts, et al., 2004年6月4日出願の米国特許出願第10/861,311号
【０００４】
前述の出版物および出願はすべて、それぞれ個別の出版物または出願がその全体が参照により本明細書に組み入れられると具体的かつ個別に示されているかのごとく、その全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【０００５】
最先端技術
フラビウイルス科のウイルスは次の3つの属からなる：ペスチウイルス、フラビウイルスおよびヘパシウイルス（C型肝炎ウイルス）。これらの属のうち、フラビウイルスおよびヘパシウイルスはヒトの重要な病原体の代表であり、世界中に広く行きわたっている。デング熱ウイルス、黄熱病ウイルスおよび日本脳炎ウイルスを含む、ヒト疾患に関連する38のフラビウイルスがある。フラビウイルスは一連の急性熱性病ならびに脳炎性および出血性疾患を引き起こす。ヘパシウイルスは現在、世界の人口の約2から3％に感染し、慢性肝疾患、肝硬変、肝細胞癌、および肝機能不全につながる持続性の感染症を引き起こす。ヒトペスチウイルスは動物ペスチウイルスほど詳しく特徴付けられていない。しかし、血清学的調査により、ヒトにおけるかなりのペスチウイルス曝露が示されている。ヒトのペスチウイルス感染症は、先天性脳損傷、乳児胃腸炎、およびヒト免疫不全ウイルス（HIV）陽性患者における慢性下痢を含むが、それらに限定されるわけではない、いくつかの疾患に関係するとされている1〜6。
【０００６】
現在のところ、ペスチウイルスまたはフラビウイルス感染症を予防または治療するための抗ウイルス薬はない。ヘパシウイルス、すなわちC型肝炎ウイルス（HCV）感染症については、インターフェロンα（IFN）が現在米国で承認されている唯一の薬物である。HCVは輸血後および散発性非A非B型肝炎の主な病原体である。HCVによる感染症は慢性的に感染した（および感染性の）保菌者の高い割合において潜行性で、長年にわたって臨床症状を経験しないこともある。
【０００７】
目下、慢性HCVに対する唯一の許容される治療はインターフェロン（IFN-α）で、これは少なくとも6ヶ月の治療および/またはリバビリンを必要とし、感染細胞におけるウイルス複製を阻害し、同時に一部の患者では肝機能を改善することもできる。
【０００８】
IFN-αは、いくつかの疾患、特にウイルス感染症に応答してほとんどの動物有核細胞により産生および分泌される、抗ウイルス、免疫調節、および抗腫瘍活性などの特徴的な生物作用を有する天然小タンパク質ファミリーに属する。IFN-αは、細胞の連絡および免疫制御に影響をおよぼす、成長および分化の重要な調節因子である。しかし、HCVのインターフェロンによる治療は反応率約25％の限られた長期効果を有する。加えて、HCVのインターフェロンによる治療は、疲労、発熱、悪寒、頭痛、筋肉痛、関節痛、軽度脱毛、精神作用および関連する障害、自己免疫現象および関連する障害、ならびに甲状腺機能障害などの有害副作用を伴うことが多かった。
【０００９】
イノシン-5'-一リン酸デヒドロゲナーゼ（IMPDH）の阻害剤であるリバビリン（1-β-D-リボフラノシル-1H-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキサミド）は、HCVの治療においてIFN-αの効力を増強する。リバビリンの導入にもかかわらず、50％よりも多くの患者でインターフェロン-α（IFN）およびリバビリンの現行の標準的治療法によりウイルスは除去されない。これまでに、慢性C型肝炎の標準的治療法はPEG-IFNとリバビリンとの組み合わせに変更されてきた。しかし、一部の患者はまだ、主にリバビリンに関連する著しい副作用を有している。リバビリンは現行の推奨用量で治療を受けた患者の10〜20％で著しい溶血を引き起こし、催奇性および胎児毒性の両方を示す。
【００１０】
ウイルスと戦うために他のアプローチが取られている。それには、例えば、HCV複製を阻害するためのアンチセンスオリゴヌクレオチドまたはリボザイムの適用が含まれる。さらに、HCVタンパク質を直接阻害し、ウイルス複製を妨害する低分子量化合物は、HCV感染症を制御するための魅力的な戦略であると考えられる。NS3/4Aセリンプロテアーゼ、リボ核酸（RNA）ヘリカーゼ、RNA依存性RNAポリメラーゼは新しい薬物のための標的となる可能性があると考えられる7,8。
【００１１】
Devosら9は、プリンおよびピリミジンヌクレオシド誘導体ならびにHCV RNA複製の阻害剤としてのそれらの使用を記載している。Sommadossiら10は、1'、2'または3'-修飾ヌクレオシドおよびHCV感染宿主を治療するためのそれらの使用を記載している。Carrollら11,12は、RNA依存性RNAウイルスポリメラーゼの阻害剤としてのヌクレオシドを記載している。
【００１２】
最近、Robertsら13,14は、特定の7-(2'-置換-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(置換されていてもよいエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン化合物がHCVに対する強力な活性を有することを開示した。これらの引用文献はその全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【発明の開示】
【００１３】
発明の概要
本発明は、少なくとも部分的には、フラビウイルス科のウイルスによって媒介される、哺乳動物のウイルス感染症の治療において有用な新規化合物を目的とする。特に、本発明は、式Iの化合物
2007509943.tif 000002
（式中
Yは結合、-CH2-または-O-からなる群より選択され；
W、W1およびW2はそれぞれ水素および薬学的に許容されるプロドラッグからなる群より独立に選択され；かつ
Tは下記からなる群より選択される
a）-C≡C-R（Rは下記からなる群より選択される
i）トリ(C1〜C4)アルキルシリル、-C(O)NR1R2、アルコキシアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、フェニル、ならびにアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノアシル、アミジノ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、シアノ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、グアニジノ、ハロ、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドラジノ、ヒドロキシル、ニトロ、チオール、および-S(O)mR3からなる群より選択される1から3個の置換基で置換されたフェニル；
ただしR1およびR2は、R1およびR2の一つだけがアミノまたは置換アミノであるとの条件で、水素、アルキル、置換アルキル、アミノ、置換アミノ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環および置換複素環からなる群より独立に選択され、さらにR1およびR2はそれらに結合している窒素原子と一緒に複素環または置換複素環を形成し；
R3はアルキル、置換アルキル、アミノ、置換アミノ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環および置換複素環からなる群より選択され；かつ
mは0、1または2の整数である；
ii）-C(O)OR14（R14は水素、アルキルまたは置換アルキルである））；
b）-CH=CH-Q2（Q2は水素またはcis-アルコキシから選択される）；
c）-C(O)H；
d）-CH=NNHR15（R15はHまたはアルキルである）；
e）-CH=N(OR15)（R15は前述の定義のとおりである）；
f）-CH(OR16)2（R16は(C3〜C6)アルキルである）；および
g）-B(OR15)2（R15は前述のとおりである））；
およびその薬学的に許容される塩または部分塩を目的とする。
【００１４】
一つの好ましい態様において、Tは-C≡C-Rであり、かつRはトリ(C1〜C4)アルキルシリル、-C(O)NR1R2、アルコキシアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、フェニル、ならびにアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノアシル、アミジノ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、シアノ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、グアニジノ、ハロ、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドラジノ、ヒドロキシル、ニトロ、チオール、および-S(O)mR3からなる群より選択される1から3個の置換基で置換されたフェニルからなる群より選択され；
ただしR1およびR2は、R1およびR2の一つだけがアミノまたは置換アミノであるとの条件で、水素、アルキル、置換アルキル、アミノ、置換アミノ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環および置換複素環からなる群より独立に選択され、さらにR1およびR2はそれらに結合している窒素原子と一緒に複素環または置換複素環を形成し；
R3はアルキル、置換アルキル、アミノ、置換アミノ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環および置換複素環からなる群より選択され；かつ
mは0、1または2の整数である；
またはその薬学的に許容される塩。
より好ましくは、Rはフェニル、-C(O)NH2、-Si(CH3)3、ピリド-2-イル、4-メトキシフェニル、および-CH(OCH2CH3)2からなる群より選択される。
【００１５】
もう一つの好ましい態様において、Tは-C≡C-Rであり、かつRは-C(O)OHである。
【００１６】
もう一つの好ましい態様において、Tは-C≡C-Rであり、Rは-C(O)OR14であり、かつR14はアルキルである。
【００１７】
もう一つの好ましい態様において、Tは-CH=CH-Q2（Q2は水素またはcis-メトキシから選択される）である。
【００１８】
もう一つの好ましい態様において、Tは-C(=O)Hである。
【００１９】
もう一つの好ましい態様において、Tは-CH=NNHR15（R15は水素およびアルキルからなる群より独立に選択される）である。
【００２０】
もう一つの好ましい態様において、Tは-CH=N(OR15)（R15は水素およびアルキルからなる群より独立に選択される）である。
【００２１】
もう一つの好ましい態様において、Tは-CH(OR16)2（R16は独立に(C3〜C6)アルキルである）である。
【００２２】
もう一つの好ましい態様において、Tは-B(OR15)2（R15は水素およびアルキルからなる群より独立に選択される）である。
【００２３】
もう一つの好ましい態様において、W、W1およびW2はそれぞれ独立に水素またはアシル、オキシアシル、ホスホン酸塩、リン酸エステル、リン酸塩、ホスホンアミデート、ホスホロジアミデート、ホスホラミデートモノエステル、環状ホスホラミデート、環状ホスホロジアミデート、ホスホラミデートジエステル、および-C(O)CHR30NH2（R30は水素、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群より選択される）からなる群より選択される薬学的に許容されるプロドラッグである。好ましくは、R30はアミノ酸の側鎖、より好ましくは、L-アミノ酸由来である。
【００２４】
好ましくは、WはHであるか、またはW1はHであるか、またはW2はHである。より好ましくは、WおよびW1はHであるか、またはWおよびW2はHであるか、またはW1およびW2はHである。さらにより好ましくは、W、W1およびW2はHである。
【００２５】
さらにもう一つの好ましい態様において、W1およびW2は水素であり、かつWは水素またはアシル、オキシアシル、ホスホン酸塩、リン酸エステル、リン酸塩、ホスホンアミデート、ホスホロジアミデート、ホスホラミデートモノエステル、環状ホスホラミデート、環状ホスホロジアミデート、ホスホラミデートジエステル、および-C(O)CHR30NH2からなる群より選択される薬学的に許容されるプロドラッグである。
【００２６】
一つの特に好ましい態様において、W1およびW2は水素であり、かつWは下記の式：
2007509943.tif 000003
（式中、R30は前述の定義のとおりであり、R8は水素またはアルキルであり、かつR10はアルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環および置換複素環からなる群より選択される）で表される。好ましい態様において、R30はL-アミノ酸由来である。
【００２７】
もう一つの特に好ましい態様において、WおよびW2は水素であり、かつW1は下記の式：
2007509943.tif 000004
（式中、R30は前述の定義のとおりである）で表される。前述と同じく、R30は好ましくはL-アミノ酸由来である。
【００２８】
【表１】
2007509943.tif 000005
2007509943.tif 000006
2007509943.tif 000007
2007509943.tif 000008
2007509943.tif 000009
2007509943.tif 000010
2007509943.tif 000011
2007509943.tif 000012
2007509943.tif 000013
2007509943.tif 000014
2007509943.tif 000015
2007509943.tif 000016
2007509943.tif 000017
2007509943.tif 000018
2007509943.tif 000019
2007509943.tif 000020
2007509943.tif 000021
2007509943.tif 000022
2007509943.tif 000023
2007509943.tif 000024
【００２９】
本発明の化合物は、抗ウイルス剤として活性であるか、または本明細書に記載のウイルス剤調製における中間体として有用であるかのいずれかである。
【００３０】
本発明は、薬学的に許容される希釈剤と、本明細書に記載の化合物または一つもしくは複数のそのような化合物の混合物の治療上有効な量とを含む薬学的組成物も目的とする。
【００３１】
本発明はさらに、哺乳動物において、少なくとも部分的には、HCVなどのフラビウイルス科のウイルスによって媒介されるウイルス感染症の治療法であって、ウイルス感染症と診断されている、またはウイルス感染症を発症するリスクが高い哺乳動物に、薬学的に許容される希釈剤と、本明細書に記載の化合物または一つもしくは複数のそのような化合物の混合物の治療上有効な量とを含む薬学的組成物を投与する段階を含む方法も目的とする。
【００３２】
本発明のさらにもう一つの態様において、哺乳動物のウイルス感染症の治療または予防法であって、本発明の化合物をHCVに対して活性な一つまたは複数の薬剤の治療上有効な量の投与と組み合わせて投与する方法が提供される。HCVに対する活性薬剤には、リバビリン、レボビリン、ビラミジン、サイモシンα-1、NS3セリンプロテアーゼの阻害剤、およびイノシン一リン酸デヒドロゲナーゼの阻害剤、インターフェロン-α、単独またはリバビリンもしくはレボビリンとの組み合わせでのペグ化インターフェロン-αが含まれる。好ましくは、HCVに対して活性な追加薬剤はインターフェロン-α、あるいは単独またはリバビリンもしくはレボビリンとの組み合わせでのペグ化インターフェロン-αである。
【００３３】
発明の詳細な説明
本発明は、C型肝炎ウイルス感染症などのフラビウイルス科のウイルスを治療するための化合物、組成物および方法を目的とする。しかし、本発明を詳細に説明する前に、まず下記の用語を定義づける。
【００３４】
定義
本明細書において用いられる「アルキル」という用語は、1から6個の炭素原子、好ましくは1から3個、より好ましくは1から2個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。この用語は、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、t-ブチル、n-ペンチルなどの基によって例示される。
【００３５】
「置換アルキル」とは、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、オキシアシル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、カルボキシル、カルボキシルエステル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、および置換複素環からなる群より選択される、1から3個、好ましくは1から2個の置換基を有するアルキル基を意味する。
【００３６】
「アルコキシ」とは、例として、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、イソプロポキシ、n-ブトキシ、t-ブトキシ、sec-ブトキシ、n-ペントキシなどを含む「アルキル-O-」という基を意味する。
【００３７】
「置換アルコキシ」とは、「置換アルキル-O-」という基を意味する。
【００３８】
「アルコキシアルキル」とは、-アルキレン(アルコキシ)n -アルキレン(置換アルコキシ)n（アルキレンは炭素原子1から3個の二価直鎖または分枝鎖アルキレン基であり、アルコキシおよび置換アルコキシは本明細書の定義のとおりであり、かつnは1から2の整数である）という基を意味する。
【００３９】
「アシル」とは、アルキル-C(O)-、置換アルキル-C(O)-、アルケニル-C(O)-、置換アルケニル-C(O)-、アルキニル-C(O)-、置換アルキニル-C(O)-、シクロアルキル-C(O)-、置換シクロアルキル-C(O)-、アリール-C(O)-、置換アリール-C(O)-、ヘテロアリール-C(O)-、置換ヘテロアリール-C(O)、複素環-C(O)-、および置換複素環-C(O)-という基を意味する。
【００４０】
「アシルアミノ」とは、-C(O)NR4R4（R4はそれぞれ水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環からなる群より独立に選択され、かつR4はそれぞれ窒素原子と共に連結されて複素環または置換複素環を形成する）を意味する。
【００４１】
「アシルオキシ」とは、アルキル-C(O)O-、置換アルキル-C(O)O-、アルケニル-C(O)O-、置換アルケニル-C(O)O-、アルキニル-C(O)O-、置換アルキニル-C(O)O-、アリール-C(O)O-、置換アリール-C(O)O-、シクロアルキル-C(O)O-、置換シクロアルキル-C(O)O-、ヘテロアリール-C(O)O-、置換ヘテロアリール-C(O)O-、複素環-C(O)O-、および置換複素環-C(O)O-という基を意味する。
【００４２】
「オキシアシル」とは、アルキル-OC(O)-、置換アルキル-OC(O)-、アルケニル-OC(O)-、置換アルケニル-OC(O)-、アルキニル-OC(O)-、置換アルキニル-OC(O)-、アリール-OC(O)-、置換アリール-OC(O)-、シクロアルキル-OC(O)-、置換シクロアルキル-OC(O)-、ヘテロアリール-OC(O)-、置換ヘテロアリール-OC(O)-、複素環-OC(O)-、および置換複素環-OC(O)-という基を意味する。
【００４３】
「アルケニル」とは、好ましくは2から6個の炭素原子、より好ましくは2から4個の炭素原子を有し、少なくとも1部位、好ましくは1〜2部位のアルケニル不飽和を有するアルケニル基を意味する。そのような基はビニル(エテン-1-イル)、アリル、ブタ-3-エン-1-イルなどによって例示される。
【００４４】
「置換アルケニル」とは、いかなるヒドロキシル置換もビニル（不飽和）炭素原子に結合していないとの条件で、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、カルボキシル、カルボキシルエステル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、および置換複素環からなる群より選択される、1から3個の置換基、好ましくは1から2個の置換基を有するアルケニル基を意味する。好ましい置換アルケニル基は、2,2-ジフルオロエテン-1-イル、2-メトキシエテン-1-イルなどから選択されるが、それらに限定されるわけではない。
【００４５】
「置換アルケニル」という用語は、適宜E（シス）およびZ（トランス）異性体の両方を含むことが理解される。異性体は純粋な異性体化合物であってもよく、またはEおよびZ成分の混合物であってもよい。
【００４６】
「アルキニル」とは、少なくとも1部位のアルキニル不飽和を有し、2から6個の炭素原子、より好ましくは2から4個の炭素原子を有する不飽和炭化水素を意味する。好ましいアルキニル基はエチン-1-イル、プロピン-1-イル、プロピン-2-イル、1-メチルプロパ-2-イン-1-イル、ブチン-1-イル、ブチン-2-イル、ブチン-3-イルなどから選択されるが、それらに限定されるわけではない。
【００４７】
「置換アルキニル」とは、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、カルボキシル、カルボキシルエステル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、および置換複素環からなる群より選択される、1から3個の置換基、好ましくは1から2個の置換基を有するアルキニル基を意味する。好ましい置換アルキニル基は、2-フルオロエチン-1-イル、3,3,3-トリフルオロプロピン-1-イル、3-アミノプロピン-1-イル、3-ヒドロキシプロピン-1-イルなどから選択されるが、それらに限定されるわけではない。
【００４８】
「アミノ」とは-NH2という基を意味する。
【００４９】
「置換アミノ」とは、-NR'R"（R'およびR"が両方とも水素であることはないとの条件で、R'およびR"は水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環からなる群より独立に選択され、かつR'およびR"はそれらに結合されている窒素と共に連結されて複素環または置換複素環基を形成する）という基を意味する。R'が水素であり、R"がアルキルである場合、置換アミノ基は本明細書においてアルキルアミノと呼ぶこともある。R'およびR"がアルキルである場合、置換アミノ基は本明細書においてジアルキルアミノと呼ぶこともある。
【００５０】
「アミジノ」とは、-C(=NR11)NR11R11（R11は水素またはアルキルから独立に選択される）という基を意味する。
【００５１】
「アミノアシル」とは、-NR5C(O)アルキル、-NR5C(O)置換アルキル、-NR5C(O)シクロアルキル、-NR5C(O)置換シクロアルキル、-NR5C(O)アルケニル、-NR5C(O)置換アルケニル、-NR5C(O)アルキニル、-NR5C(O)置換アルキニル、-NR5C(O)アリール、-NR5C(O)置換アリール、-NR5C(O)ヘテロアリール、-NR5C(O)置換ヘテロアリール、-NR5C(O)複素環、および-NR5C(O)置換複素環（R5は水素またはアルキルである）という基を意味する。
【００５２】
「アリール」または「Ar」とは、単環（例えばフェニル）または縮合多環（例えばナフチルまたはアントリル）を有し、この縮合されている環は結合点が芳香族炭素であるとの条件で芳香族であってもなくてもよい（例えば2-ベンゾキサゾリノン、2H-1,4-ベンゾキサジン-3(4H)-オン-7-イルなど）、炭素原子6から14個の一価芳香族炭素環基を意味する。好ましいアリールにはフェニルおよびナフチルが含まれる。
【００５３】
「置換フェニル」を含む「置換アリール」とは、ヒドロキシル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、カルボキシル、カルボキシルエステル、シアノ、チオール、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオ複素環、置換チオ複素環、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ハロ、ニトロ、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、および置換ヘテロシクリルオキシからなる群より選択される、1から3個の置換基、好ましくは1から2個の置換基で置換されたアリール基またはフェニル基を意味する。
【００５４】
「アリールオキシ」とは、例としてフェノキシ、ナフトキシなどを含む、アリール-O-という基を意味する。
【００５５】
「置換アリールオキシ」とは、置換アリール-O-基を意味する。
【００５６】
「カルボキシル」とは、-COOHまたはその塩を意味する。
【００５７】
「カルボキシルエステル」とは、-C(O)O-アルキル、-C(O)O-置換アルキル、-C(O)Oアリール、および-C(O)O-置換アリール（アルキル、置換アルキル、アリールおよび置換アリールは本明細書の定義のとおりである）という基を意味する。
【００５８】
「シクロアルキル」とは、例としてアダマンチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチルなどを含む、単環または多環を有する炭素原子3から10個の環状アルキル基を意味する。
【００５９】
「置換シクロアルキル」とは、オキソ（=O）、チオキソ（=S）、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、カルボキシル、カルボキシルエステル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、および置換複素環からなる群より選択される、1から5個の置換基を有するシクロアルキルを意味する。
【００６０】
「シクロアルコキシ」とは、-O-シクロアルキル基を意味する。
【００６１】
「置換シクロアルコキシ」とは、-O-置換シクロアルキル基を意味する。
【００６２】
「ホルミル」とは、-C(O)Hという基を意味する。
【００６３】
「グアニジノ」とは、-NR12C(=NR12)NR12R12（R12はそれぞれ独立に水素またはアルキルである）という基を意味する。
【００６４】
「ハロ」または「ハロゲン」とは、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを意味し、好ましくはフルオロまたはクロロである。
【００６５】
「ヘテロアリール」とは、環内に1から10個の炭素原子と、酸素、窒素、および硫黄からなる群より選択される1から4個のヘテロ原子とを有し、ただし窒素および/または硫黄は任意に酸化されている［(N→O）、-S(O)-、または-SO2-］、芳香族基を意味する。そのようなヘテロアリール基は単環（例えばピリジルまたはフリル）または縮合多環（例えばインドリジニルまたはベンゾチエニル）を有することができ、ただし縮合されている環は結合点が芳香環原子を通じてであるとの条件で芳香族であってもなくてもよく、かつ/またはヘテロ原子を含んでいてもいなくてもよい。好ましいヘテロアリールには、ピリジル、ピロリル、インドリル、チオフェニル、およびフリルが含まれる。
【００６６】
「置換ヘテロアリール」とは、置換アリールについて定義されたのと同じ置換基群から選択される1から3個の置換基で置換されたヘテロアリール基を意味する。
【００６７】
「ヘテロアリールオキシ」とは、-O-ヘテロアリールという基を意味し、「置換ヘテロアリールオキシ」とは、-O-置換ヘテロアリールという基を意味する。
【００６８】
「複素環」または「複素環式」または「ヘテロシクロアルキル」とは、環内に1から10個の炭素原子と、窒素、酸素、および硫黄からなる群より選択される1から4個のヘテロ原子とを有し、ただし窒素および/または硫黄は任意に酸化されていてもよく［(N→O）、-S(O)-、または-SO2-］、さらに縮合環系において結合点が複素環を通じてであるとの条件で一つまたは複数の環はシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールでありうる、単環または縮合多環を有する飽和または不飽和基（ヘテロアリールではない）を意味する。
【００６９】
「置換複素環」または「置換ヘテロシクロアルキル」とは、置換シクロアルキルについて定義されたのと同じ1から3個の置換基で置換された複素環基を意味する。
【００７０】
複素環およびヘテロアリールの例には、アゼチジン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、ジヒドロインドール、インダゾール、プリン、キノリジン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチルピリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナントロリン、イソチアゾール、フェナジン、イソキサゾール、フェノキサジン、フェノチアジン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドリン、フタルイミド、1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン、4,5,6,7-テトラヒドロベンゾ[b]チオフェン、チアゾール、チアゾリジン、チオフェン、ベンゾ[b]チオフェン、モルホリニル、チオモルホリニル（チアモルホリニルとも呼ばれる）、ピペリジニル、ピロリジン、テトラヒドロフラニルなどが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００７１】
「ヘテロシクリルオキシ」とは、-O-複素環という基を意味し、「置換ヘテロシクリルオキシ」とは、-O-置換複素環という基を意味する。
【００７２】
「ヒドラジノ」とは、-NR13NR13R13（R13はそれぞれ水素またはアルキルからなる群より独立に選択される）という基を意味する。
【００７３】
「リン酸（塩）」とは、-OP(O)(OH)2（一リン酸（塩）またはホスホ）、-OP(O)(OH)OP(O)(OH)2（二リン酸（塩）またはジホスホ）および-OP(O)(OH)OP(O)(OH)OP(O)(OH)2（三リン酸（塩）またはトリホスホ）という基またはその部分塩を含む塩を意味する。当然のことながら、一、二および三リン酸（塩）（ホスホ、ジホスホおよびトリホスホ）の最初の酸素はリボース糖の5位の酸素原子を含むことが理解される。
【００７４】
「リン酸エステル」とは、一つまたは複数のヒドロキシル基がアルコキシ基で置換されている、前述の一、二および三リン酸基を意味する。
【００７５】
「ホスホン酸（塩）」とは、-OP(O)(R6)(OH)もしくは-OP(O)(R6)(OR6)またはその部分塩を含む塩（R6はそれぞれ水素、アルキル、置換アルキル、カルボン酸、およびカルボキシルエステルから独立に選択される）という基を意味する。当然のことながら、ホスホン酸（塩）の最初の酸素はリボース糖の5位の酸素原子を含むことが理解される。
【００７６】
「ホスホロジアミデート」とは、下記の基を意味する：
2007509943.tif 000025
（式中、R7はそれぞれ同じでも異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、または置換シクロアルキルである）。特に好ましいホスホロジアミデートは下記の基である。
2007509943.tif 000026
【００７７】
「ホスホラミデートモノエステル」とは、R30が前述の定義のとおりであり、R8が水素またはアルキルである、下記の基を意味する。好ましい態様において、R30はL-アミノ酸由来である。
2007509943.tif 000027
【００７８】
「ホスホラミデートジエステル」とは、R30が前述の定義のとおりであり、R8が水素またはアルキルであり、かつR10がアルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環および置換複素環からなる群より選択される、下記の基を意味する。好ましい態様において、R30はL-アミノ酸由来である。
2007509943.tif 000028
【００７９】
「環状ホスホラミデート」とは、nが1から3、より好ましくはnが1から2である、下記の基を意味する。
2007509943.tif 000029
【００８０】
「環状ホスホロジアミデート」とは、nが1から3、より好ましくはnが1から2である、下記の基を意味する。
2007509943.tif 000030
【００８１】
「ホスホンアミデート」とは、R14が水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、または置換シクロアルキルである、下記の基を意味する。
2007509943.tif 000031
【００８２】
「チオール」とは、-SHという基を意味する。
【００８３】
「チオアルキル」または「アルキルチオエーテル」または「チオアルコキシ」とは、-S-アルキルという基を意味する。
【００８４】
「置換チオアルキル」または「置換アルキルチオエーテル」または「置換チオアルコキシ」とは、-S-置換アルキルという基を意味する。
【００８５】
「チオシクロアルキル」とは、-S-シクロアルキルという基を意味し、「置換チオシクロアルキル」とは、-S-置換シクロアルキルという基を意味する。
【００８６】
「チオアリール」とは、-S-アリールという基を意味し、「置換チオアリール」とは、-S-置換アリールという基を意味する。
【００８７】
「チオヘテロアリール」とは、-S-ヘテロアリールという基を意味し、「置換チオヘテロアリール」とは、-S-置換ヘテロアリールという基を意味する。
【００８８】
「チオ複素環」とは、-S-複素環という基を意味し、「置換チオ複素環」とは、-S-置換複素環という基を意味する。
【００８９】
「アミノ酸側鎖］という用語は、式NH2CH(R30)COOHのα-アミノ酸のR30置換基を意味し、ただしR30は水素、アルキル、置換アルキル、アリールおよび置換アリールからなる群より選択される。好ましくは、α-アミノ酸側鎖は20の天然Lアミノ酸の一つの側鎖である。
【００９０】
「薬学的に許容されるプロドラッグ」という用語は、一つまたは複数の官能基への当技術分野において認められている修飾を意味し、この官能基はインビボで代謝されて本発明の化合物またはその活性代謝物を提供する。そのような官能基は当技術分野において周知で、ヒドロキシルおよび/またはアミノ置換のアシル基、一つまたは複数の側鎖ヒドロキシル基がアルコキシ、置換アルコキシ、アリールオキシまたは置換アリールオキシ基に変換されている一、二および三リン酸のエステルなどを含む。
【００９１】
「薬学的に許容される塩」という用語は、化合物の薬学的に許容される塩を意味し、この塩は当技術分野において周知で、例にすぎないが、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウムなどを含む、様々な有機および無機対イオン由来であり；分子が塩基性官能基を含む場合、塩酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、メシレート、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩などの有機または無機酸の塩である。
【００９２】
「薬学的に許容される部分塩」という用語は、複数の基に塩を形成させることが可能であるが、そのような基の最大量未満が実際に塩を形成している置換基を有する化合物を意味する。例えば、ジホスホ基は複数の塩を形成することができ、部分的にのみイオン化された場合、得られる基は本明細書において部分塩と呼ばれることがある。
【００９３】
前述の定義のすべての置換された基において、置換基をそれら自体へのさらなる置換基で規定することにより生じるポリマー（例えば、それ自体が置換アリール基で置換された置換基としての置換アリール基を有する置換アリールなど）を本明細書に含むことは意図されないことが理解される。そのような場合、そのような置換基の最大数は3個である。すなわち、前述の定義はそれぞれ、例えば、置換アリール基は-置換アリール-(置換アリール)-置換アリールに限定されるとの限定によって制約される。
【００９４】
同様に、前述の定義は許されない置換パターン（例えば、5つのフルオロ基で置換されたメチルまたはエテニルもしくはアセチレン不飽和に対してαのヒドロキシル基）を含むことは意図されないことが理解される。そのような許されない置換パターンは当業者には周知である。
【００９５】
一般合成法
本発明の化合物は、容易に入手可能な出発原料から、下記の一般法および手順を用いて調製することができる。典型的または好ましい工程条件（すなわち、反応温度、時間、反応物のモル比、溶媒、圧など）が示されている場合、特に明記されない限り、他の工程条件も用いうることが理解されると思われる。最適な反応条件は、用いる特定の反応物または溶媒に応じて変動することもあるが、そのような条件は当業者であれば日常的な最適化手順によって決定することができる。
【００９６】
加えて、当業者には明らかなとおり、特定の官能基が望ましくない反応を起こすことを防ぐために、通常の保護基が必要となることもある。様々な官能基に適した保護基ならびに特定の官能基を保護および脱保護するのに適した条件は当技術分野において周知である。例えば、多くの保護基がT. W. Greene and G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, Third Edition, Wiley, New York, 1999、およびその中で引用される文献中に記載されている。
【００９７】
さらに、本発明の化合物は一つまたは複数のキラル中心を含む。したがって、望まれる場合には、そのような化合物を純粋な立体異性体、すなわち個々の鏡像異性体もしくはジアステレオマーとして、または一つの立体異性体を多く含む混合物として、調製または単離することができる。そのような立体異性体（またはそれを多く含む混合物）はすべて、そうではないことが示されていない限り、本発明の範囲内に含まれる。純粋な立体異性体（またはそれを多く含む混合物）は、例えば、当技術分野において周知の光学活性な出発原料または立体選択的試薬を用いて調製してもよい。または、そのような化合物のラセミ混合物を、例えば、キラルカラムクロマトグラフィ、キラル分割試薬などを用いて分離することもできる。
【００９８】
下記の反応のための出発原料は一般に公知の化合物であるか、または公知の方法もしくはその明白な変法により調製することができる。例えば、出発原料の多くはAldrich Chemical Co.（米国ウィスコンシン州ミルウォーキー）、Bachem（米国カリフォルニア州トランス）、Emka-ChemceまたはSigma（米国ミズーリ州セントルイス）などの商業的供給元から入手可能である。その他はFieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, Volumes 1-15 (John Wiley and Sons,1991)、Rodd's Chemistry of Carbon Compounds, Volumes 1-5 and Supplementals (Elsevier Science Publishers, 1989)、Organic Reactions, Volumes 1-40 (John Wiley and Sons, 1991)、March's Advanced Organic Chemistry, (John Wiley and Sons, 4th Edition)、およびLarock's Comprehensive Organic Transformations (VCH Publishers Inc., 1989)などの標準的参考テキストに記載の方法、またはその明白な変法によって調製してもよい。特に、本発明の化合物は、一般には有機化学、特にヌクレオシドおよびヌクレオチド類縁体合成の分野において公知の様々な方法によって調製することができる。ヌクレオシドおよびヌクレオチド類縁体調製の一般的総説には下記が含まれる：1）Michelson A. M. "The Chemistry of Nucleosides and Nucleotides," Academic Press, New York, 1963；2）Goodman L. "Basic Principles in Nucleic Acid Chemistry," Academic Press, New York, 1974, vol. 1, Ch. 2；および3）"Synthetic Procedures in Nucleic Acid Chemistry," Eds. Zorbach W. & Tipson R., Wiley, New York, 1973, vol. 1 & 2。
【００９９】
本発明の化合物の合成は一般に、以下に記載の収束的または直線的いずれかの合成経路に従う。
【０１００】
本発明の化合物合成のために利用可能な戦略には、例えば下記が含まれる：
【０１０１】
2'-C-分枝ヌクレオシドの一般合成
式Iの2'-C-分枝リボヌクレオシド：
2007509943.tif 000032
（式中、T、Y、W、W1、およびW2は前述の定義のとおりである）は、下記の一般法の一つによって調製することができる。
【０１０２】
収束的アプローチ：適当に修飾した糖による核酸塩基のグリコシル化
この方法の鍵となる出発原料は、2'-OHおよび2'-Hを有し、1位に適当な脱離基、例えば、アシル基またはクロロ、ブロモ、フルオロ、もしくはヨード基を有する、適当に置換された糖である。糖は購入することもでき、または標準のエピマー化、置換、酸化および/または還元技術を含む任意の公知の手段によって調製することもできる。例えば、市販の1,3,5-トリ-O-ベンゾイル-α-D-リボフラノース（Pfanstiel Laboratories, Inc.）を用いることができる。次いで、置換糖を適合性溶媒中、適当な温度で、適当な酸化剤により酸化して、2'-修飾糖を得ることができる。可能な酸化剤は、例えば、デス・マーチン・ペルヨージン試薬、DMSO中Ac2O＋DCC、スワーン酸化（DMSO、塩化オキサリル、トリエチルアミン）、ジョーンズ試薬（クロム酸と硫酸との混合物）、コリンズ試薬（ジピリジン酸化Cr(VI)、コーリー試薬（クロロクロム酸ピリジニウム）、二クロム酸ピリジニウム、二クロム酸、過マンガン酸カリウム、MnO2、四酸化ルテニウム、ポリマー上に固定されたクロム酸または過マンガン酸塩などの相転移触媒、Cl2-ピリジン、H2O2-モリブデン酸アンモニウム、NaBrO2-CAN、HOAc中のNaOCl、亜クロム酸銅、酸化銅、ラネーニッケル、酢酸パラジウム、メールワイン‐ポンドルフ‐バーレー試薬（アルミニウムt-ブトキシドおよび別のケトン）およびN-ブロモスクシンイミドである。
【０１０３】
グリニャール試薬、有機リチウム、リチウムジアルキル銅またはTBAF中のSiMe4などの有機金属炭素求核試薬と、ケトンとのカップリングを、適当な非プロトン性溶媒中、適当な温度で行い、2'-メチル糖を得る。例えば、CH3MgBr/TiCl4またはCH3MgBr/CeCl3をWolfe et al. 1997. J. Org. Chem. 62: 1754-1759に記載のとおりに用いることができる。メチル化糖は、Greene et al. Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, Second Edition, 1991によって教示されているとおり、当業者には周知の方法により、適当な保護基、好ましくはアシル、置換アシルまたはシリル基で任意に保護することができる。
【０１０４】
次いで、任意に保護した糖を、Townsend Chemistry of Nucleosides and Nucleotides, Plenum Press, 1994によって教示されているとおり、当業者には周知の方法でプリン塩基にカップリングさせることができる。例えば、アシル化糖を適当な溶媒中、適当な温度で、四塩化スズ、四塩化チタンまたはトリメチルシリルトリフレートなどのルイス酸によりシリル化塩基にカップリングさせることができる。または、ハロ糖をトリメチルシリルトリフレート存在下、シリル化塩基にカップリングさせることができる。
【０１０５】
前述に加えて、本明細書に記載の合成法において用いる2'-C-置換糖は当技術分野において周知で、例えば、Sommadossi, et al.10およびCarrol, et al.11,12によって記載されており、これらはすべてその全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【０１０６】
下記のスキーム1は、本明細書に記載の塩基へのカップリングにとって有用な保護糖の別の合成を記載する。
スキーム1
2007509943.tif 000033
式中、Phはフェニルであり、Xはハロなどの適当な脱離基である。
【０１０７】
上のスキーム1における糖aの形成は、市販のD-リボースから出発してMandal, S.B., et al., Synth. Commun., 1993, 9, page 1239によって記載されたとおりに達成される。糖bを形成するためのヒドロキシル基の保護は、Witty, D.R., et al., Tet. Lett., 1990, 31, page 4787に記載されている。糖cおよびdはNing, J. et al., Carbohydr. Res., 2001, 330, page 165の方法、および本明細書に記載の方法を用いて調製する。糖eはCH3MgBrまたは本明細書に記載の適当な有機金属（チタン/セリウムは必要ない）によるグリニャール反応の変法を用いて調製する。最後に、次のカップリング反応において用いるハロゲン化糖（X＝ハロ）を、前述の糖bの調製において用いたのと同じ保護法を用いて調製する。ハロゲン化はSeela、米国特許第6,211,158号に記載されている。
【０１０８】
続いて、前述のヌクレオシドはいずれも、Greene et al. Protective Groups in Organic Synthesis, Jon Wiley and Sons, Second Edition, 1991によって教示されているとおり、当業者には周知の方法により脱保護することができる。
【０１０９】
複素環塩基へのカップリングにとって有用な保護糖を調製するための別のアプローチの詳細を下記のスキーム2に示す。
スキーム2
2007509943.tif 000034
【０１１０】
スキーム2において、化合物1のヒドロキシル基のメチル化を通常の方法により進めて、化合物2を得る。化合物2の2、3および5ヒドロキシル基をそれぞれ2,4-ジクロロベンジル基で保護して化合物3とする。化合物3の2-(2',4'-ジクロロベンジル)基の選択的脱保護を、塩化メチレン、クロロホルムなどの適当な溶媒中、低温、例えば約0から5℃で、塩化第一スズと接触させることにより反応完了まで、例えば24〜72時間行う。2-ヒドロキシル基の酸化を本明細書に記載のとおりに進め、化合物7を得る。メチル化も本明細書に記載のとおりに行い、化合物8を得る。
【０１１１】
直線的アプローチ：あらかじめ生成したヌクレオシドの修飾
この方法の鍵となる出発原料は、2'-OHおよび2'-Hを有する、適当に置換されたヌクレオシドである。ヌクレオシドは購入することもでき、または標準のカップリング法を含む任意の公知の手段によって調製することもできる。ヌクレオシドは、Greene et al. Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, Second Edition, 1991によって教示されているとおり、当業者には周知の方法により、適当な保護基、好ましくはアシル、置換アルキルまたはシリル基で任意に保護することもできる。
【０１１２】
次いで、適当に保護したヌクレオシドを、適合性溶媒中、適当な温度で、適当な酸化剤により酸化して、2'-修飾糖を得ることができる。可能な酸化剤は、例えば、デス・マーチン・ペルヨージン試薬、DMSO中Ac2O＋DCC、スワーン酸化（DMSO、塩化オキサリル、トリエチルアミン）、ジョーンズ試薬（クロム酸と硫酸との混合物）、コリンズ試薬（ジピリジン酸化Cr(VI)、コーリー試薬（クロロクロム酸ピリジニウム）、二クロム酸ピリジニウム、二クロム酸、過マンガン酸カリウム、MnO2、四酸化ルテニウム、ポリマー上に固定されたクロム酸または過マンガン酸塩などの相転移触媒、Cl2-ピリジン、H2O2-モリブデン酸アンモニウム、NaBrO2-CAN、HOAc中のNaOCl、亜クロム酸銅、酸化銅、ラネーニッケル、酢酸パラジウム、メールワイン‐ポンドルフ‐バーレー試薬（アルミニウムt-ブトキシドおよび別のケトン）およびN-ブロモスクシンイミドである。
【０１１３】
グリニャール試薬、有機リチウム、リチウムジアルキル銅またはTBAF中のCH3SiMe3などの有機金属炭素求核試薬と、ケトンとのカップリングを、適当な非プロトン性溶媒中、適当な温度で行い、アルキル置換ヌクレオシドを得る。必要に応じて適当な同位体の単離を行う。
【０１１４】
続いて、ヌクレオシドを、Greene et al. Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, Second Edition, 1991によって教示されているとおり、当業者には周知の方法により脱保護することができる。
【０１１５】
本発明の一つの態様において、D-鏡像異性体が好ましい。しかし、L-鏡像異性体も本明細書において有用であることが企図される。本発明の化合物に対応するL-鏡像異性体は、出発原料として対応するL-糖またはヌクレオシドから始め、同じ前述の一般法に従って調製することができる。特定の態様において、2'-C-分枝リボヌクレオシドが望ましい。
【０１１６】
本発明の化合物は、一般には有機化学、特にヌクレオシドおよびヌクレオチド類縁体合成の分野において公知の様々な方法によって調製することができる。合成のための出発原料は商業的供給元から容易に入手可能であるか、または公知であるか、または当技術分野において公知の技術によって調製することができる。ヌクレオシドおよびヌクレオチド類縁体調製の一般的総説には下記が含まれる：
Michelson A.M. "The Chemistry of Nucleosides and Nucleotides," Academic Press, New York, 1963.
Goodman L. "Basic Principles in Nucleic Acid Chemistry," Academic Press, New York, 1974, vol. 1, Ch. 2.
"Synthetic Procedures in Nucleic Acid Chemistry," Eds. Zorbach W. & Tipson R., Wiley, New York, 1973, vol. 1 & 2.
【０１１７】
本発明の5-置換アセチレニル-ピロロ[2,3-d]ピリミジニルヌクレオシド誘導体を下記のスキーム3に示す方法を用いて合成することができる。
【０１１８】
ピロロ[2,3-d]ピリミジニルヌクレオシドを調製するための収束的アプローチを下記のスキーム3に示す。まず、市販の4-クロロピロロ[2,3-d]ピリミジン11を周知の方法、例えばA. Gangjee et al., J. Med. Chem. (2003) 46, 591に記載のハロゲン化法を用いて、5位でハロゲン化する（化合物12）。中間化合物12を単離し、クロマトグラフィ、沈殿、結晶化、ろ過などの標準的方法を用いて精製してもよい。または、化合物12を単離し、それ以上精製せずに次の段階で用いてもよい。
【０１１９】
5-(置換アルキニル)-4-クロロピロロ[2,3-d]ピリミジン13を、A. Gangjee et al., (J. Med. Chem. (2003) 46, 591)に記載のSonigashira条件を用いて調製し、化合物13を得る。中間化合物13を単離し、クロマトグラフィ、沈殿、結晶化、ろ過などの標準的方法を用いて精製してもよい。または、化合物13を単離し、それ以上精製せずに次の段階で用いてもよい。
【０１２０】
化合物13を保護2-メチル置換糖8（その合成は前述およびCarroll, et al.,11,12により記載）に、当技術分野において周知の条件を用いてカップリングさせる。例えば、1-O-メチル-3,5-ビス-O-(2,4-ジクロロフェニルメチル)-2'-C-メチル-β-D-リボフラノシド8を、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素などの無水不活性溶媒に溶解し、次いで溶液を約0℃まで冷却する。その後、酢酸中の過剰のHBrまたは他の適当な試薬を滴加する。この反応は典型的には約0℃で約1時間もしくは周囲温度で約2.5時間またはtlcなどの通常の技術により調べて実質的に完了するまで行う。得られたブロム化糖混合物を単離し、クロマトグラフィ、沈殿、結晶化、ろ過などの標準的方法を用いて精製する。または、この中間体を単離し、それ以上精製せずに次の段階で用いてもよい。得られたブロム化糖混合物を、好ましくは無水トルエンと共蒸発させ、無水アセトニトリルなどの適当な不活性希釈剤に溶解し、化合物13のナトリウム塩と共に一晩撹拌する。化合物13のナトリウム塩は、不活性雰囲気中、アセトニトリルなどの無水不活性溶媒中の化合物13を油中に分散したNaHと共に懸濁することにより調製する。反応は、約0℃から約40℃の温度で約2から約24時間行う。最後に、化合物15を単離し、クロマトグラフィ、沈殿、結晶化、ろ過などの標準的方法を用いて精製する。または、この中間体を単離し、それ以上精製せずに次の段階で用いてもよい。
【０１２１】
標準法を用いての化合物15の脱保護により化合物16を得、これをいくつかの場合には当技術分野において周知の方法を用いて4-アミノ誘導体（化合物17）に変換する。例えば、化合物16を液体アンモニアに約-80℃で加え、約80℃で約24から約48時間加温する。化合物17を単離し、クロマトグラフィ、沈殿、結晶化、ろ過などの標準的方法を用いて精製する。
スキーム3
2007509943.tif 000035
式中、Rは本明細書の定義のとおりであり、DCBは2,4-ジクロロベンジルである。
【０１２２】
別のアプローチにおいて、1-[5-(置換アルキニル)-4-アミノピロロ[2,3-d]ピリミジン]-2'-C-メチル-β-D-リボフラノシド化合物を、下記のスキーム4に示す方法を用いて調製することができる。
【０１２３】
前述のとおりに調製した化合物12を保護糖8に、前述のスキーム3で化合物15の調製のために記載した方法を用いてカップリングさせ、化合物19を得る。化合物19を標準法を用いて脱保護し、化合物20を得る。
【０１２４】
化合物20から、1-[5-(置換アルキニル)-4-アミノ-ピロロ[2,3-d]ピリミジン]-2'-C-メチル-β-D-リボフラノシド化合物を、まず前述のスキーム3で化合物16から化合物17を調製するために記載した方法を用いて4-クロロ基をアミノ基に変換して化合物21を得、続いてA. Gangjee et al., (J. Med. Chem. (2003) 46, 591)に記載のSonigashira条件を用いてカップリングを行い、置換アルキニル誘導体、化合物17を生成することにより、調製することができる。
【０１２５】
いくつかの場合に、1-[5-(置換アルキニル)-4-アミノ-ピロロ[2,3-d]ピリミジン]-2'-C-メチル-β-D-リボフラノシド化合物を、化合物20から、まず5-ヨード基を5-置換アルキニル誘導体（化合物16）に変換し、続いて4-クロロ基をアミン（化合物17）に変換することにより、調製することができる。これらの各変換法の詳細は前述のとおりである。
スキーム4
2007509943.tif 000036
式中、RおよびDCBは前述のとおりである。
【０１２６】
出発原料として前述のスキーム3および4で調製した化合物を用いての、W、W1またはW2が水素以外である化合物の調製は、プロドラッグ調製に関する下記の総説に記載の方法を用いて行うことができる：
1）Cooperwood, J. S. et al., "Nucleoside and Nucleotide prodrugs," in Ed(s) Chu, C. K. Recent Advances in Nucleosides (2002), 92-147.
2）Zemlicka, J. et al., Biochimica et Biophysica Acta (2002), 158(2-3), 276-286.
3）Wagner, C. et al., Medicinal Research Reviews (2002), 20(6), 417-451.
4）Meier, C. et al., Synlett (1998), (3), 233-242.
【０１２７】
例えば、1-[5-(置換アルキニル)-4-アミノ-ピロロ[2,3-d]ピリミジン]-2'-C-メチル-β-D-リボフラノシド化合物の5'-ヒドロキシル基のホスホ、ジホスホまたはトリホスホ-類縁体への変換は、D. W. Hutchinson, (Ed. Leroy b. Townsend) "The Synthesis, reaction and Properties of Nucleoside Mono-, Di-, Tri-, and tertaphosphate and Nucleosides with Changes in the Phosphoryl Residue," Chemistry of Nucleosides and Nucleotides, Plenum Press, (1991) 2に記載の方法を用いて調製することができる。
【０１２８】
リボフラノシド上のアミノ酸の調製は下記のスキーム5に示すとおりに達成することができる。
スキーム5
2007509943.tif 000037
【０１２９】
所望のBoc保護アミノ酸およびN,N'-カルボニルジイミダゾールをTHFなどの不活性溶媒に溶解する。反応混合物を約20から約40℃の間で約0.5から24時間維持する。DMFなどの不活性溶媒中にわずかに過剰の所望のヌクレオシドを含む溶液を、Boc保護アミノ酸混合物に加え、約40から約80℃で約2から約24時間加熱する。構造異性体の混合物を単離し、蒸発、沈殿、ろ過、結晶化、クロマトグラフィなどの通常の方法を用いて分離する。
【０１３０】
次いで、所望のエステルを、例えば、1：1 v/v TFA/DCM溶液を用い、約20から約40℃で約0.1から約1時間酸性化し、蒸発させる。残渣を水に溶解し、約0から約30℃で約2から約24時間維持する。標準の方法および条件を用いて、混合物を分離し、所望の生成物をRP-HPLCにより単離することができる。
【０１３１】
前述のスキームはデアザプリンプロドラッグの生成を示しているが、この方法はいかなる所望のヌクレオシド化合物にも用いることができる。同様に、アミノ酸を反応条件に適した任意の保護基で保護してもよい。これらの保護基は当技術分野において周知である。
スキーム6
2007509943.tif 000038
式中、Tは前述の定義のとおりである。
【０１３２】
化合物1をピリジンなどの無水溶媒に溶解し、tert-ブチルクロロジフェニルシランなどのハロゲン化シリルを加えて、糖の5'位に保護基を生成する。5'位に向けることができ、直交的に除去して最終の所望の3'-エステルとすることができる、いかなる保護基も用いることができる。この反応は約10から約40℃の温度で約4から約24時間行う。所望の塩化アシルを保護ヌクレオシド、化合物30に加え、約4から約24時間撹拌して、化合物31を生成する。これは単離し、単離、結晶化、抽出、ろ過、クロマトグラフィなどの標準的方法を用いて精製することができる。5'位の保護基を除去することにより、化合物32を調製する。これは、化合物30をTHF中フッ化テトラブチルアンモニウムの1M溶液と反応させることにより達成することができる。最終生成物を単離し、単離、結晶化、抽出、ろ過、クロマトグラフィなどの標準的方法を用いて精製する。
【０１３３】
前述のスキームはデアザプリンプロドラッグの生成を示しているが、この方法はいかなる所望のヌクレオシド化合物にも用いることができる。
【０１３４】
有用性、試験、および投与
有用性
本発明は、C型肝炎ウイルスを含む抗ウイルス活性を有する新規化合物を提供する。本発明の化合物は、RNA依存性RNAポリメラーゼを含む、複製に関与する酵素を阻害することによりウイルス複製を阻害する。本発明の化合物は、HCVなどのフラビウイルス科のウイルスの活性または増殖において用いられる他の酵素も阻害することがある。
【０１３５】
本発明の化合物は、プロドラッグヌクレオシドとしても用いることができる。したがって、これらは細胞に取り込まれ、細胞内でキナーゼによりリン酸化されて三リン酸塩となり、次いでポリメラーゼ（NS5b）の阻害剤となり、かつ/または連鎖停止物質として作用することができる。
【０１３６】
本発明の化合物は、単独でも、またはウイルスを治療するための他の化合物との組み合わせで用いてもよい。
【０１３７】
投与および薬学的組成物
一般に、本発明の化合物は、同様の有用性を提供する薬剤に対して許容される任意の投与様式により、治療上有効な量で投与することになる。本発明の化合物、すなわち活性成分の実際の量は、治療する疾患の重症度、被検者の年齢および相対的な健康、用いる化合物の効力、投与の経路および形態、ならびに他の因子などの多くの因子に依存することになる。薬物は1日に複数回、好ましくは1日に1または2回投与することができる。
【０１３８】
式Iの化合物の治療上有効な量は、1日に受容者の体重1kgあたり約0.05から50mg、好ましくは約0.01〜25mg/kg/日、より好ましくは約0.5から10mg/kg/日の範囲でありうる。したがって、70kgの人に投与するためには、用量範囲は最も好ましくは1日に約35〜70mgである。
【０１３９】
一般に、本発明の化合物は、下記の経路の任意の一つにより薬学的組成物として投与することになる：経口、全身（例えば、経皮、鼻内、または坐剤による）、または非経口（例えば、筋肉内、静脈内または皮下）投与。好ましい投与様式は、苦痛の程度に応じて調節することができる、通常の1日投与法を用いての経口である。組成物は錠剤、丸剤、カプセル剤、半固形剤、散剤、徐放性製剤、液剤、懸濁剤、エリキシル剤、エアロゾル、または任意の他の適当な組成物の形態を取りうる。本発明の化合物を投与するためのもう一つの好ましい様式は吸入である。これは、治療薬を気道に直接送達するための有効な方法である（米国特許第5,607,915号参照）。
【０１４０】
製剤の選択は、薬物投与様式および薬物のバイオアベイラビリティなどの様々な因子に依存する。吸入による送達のために、化合物を溶液、懸濁液、エアロゾル噴射剤、または乾燥粉末として製剤し、適当な投与用ディスペンサーに充填することができる。薬学的吸入器具にはいくつかの型がある−ネブライザー吸入器、定量吸入器（MDI）および乾燥粉末吸入器（DPI）。ネブライザー器具は、治療薬（液体剤形に製剤されている）を患者の気道に運ばれるミストとして噴霧させる高速の気流を発生する。MDIは典型的には加圧ガスと共に包装された製剤である。作動後、器具は計量した治療薬を加圧ガスによって放出し、信頼性のある一定量の薬剤投与法を提供する。DPIは、その器具による呼吸中に患者の吸息気流中に分散させることができる流動性粉末の形で治療薬を放出する。流動性粉末を得るために、治療薬をラクトースなどの賦形剤と共に製剤する。計量した治療薬をカプセルの形で保存し、作動ごとに供給する。
【０１４１】
最近、バイオアベイラビリティは表面積を増やす、すなわち、粒径を小さくすることにより高めることができるとの原理に基づき、特にバイオアベイラビリィが低い薬物のための薬学的製剤が開発されている。例えば、米国特許第4,107,288号は、活性物質が高分子の架橋基質上に支持されている、サイズが10から1,000nmの範囲の粒子を有する薬学的製剤を記載している。米国特許第5,145,684号は薬学的製剤の製造を記載しており、ここでは表面改変物質存在下、薬物をナノ粒子（平均粒径400nm）に微粉化し、次いで液体媒質中に分散させて、著しく高いバイオアベイラビリティを示す薬学的製剤を得ている。
【０１４２】
組成物は一般に、式Iの化合物と少なくとも一つの薬学的に許容される賦形剤の組み合わせからなる。許容される賦形剤は非毒性で、投与を助け、式Iの化合物の治療上の利益に有害な影響をおよぼさない。そのような賦形剤は、当業者であれば一般に入手可能な、任意の固体、液体、半固体、またはエアロゾル組成物の場合には気体の賦形剤でありうる。
【０１４３】
固体の薬学的賦形剤には、デンプン、セルロース、タルク、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、コメ、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、グリセロールモノステアリン酸、塩化ナトリウム、脱脂粉乳などが含まれる。液体および半液体の賦形剤は、グリセロール、プロピレングリコール、水、エタノールおよび石油、動物油、植物油、または合成油、例えば、落花生油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油などを含む様々な油から選択してもよい。特に注射用液剤のための好ましい液体担体には、水、食塩水、水性デキストロース、およびグリコールが含まれる。
【０１４４】
本発明の化合物をエアロゾル剤形に分散させるために、加圧ガスを用いてもよい。この目的に適した不活性ガスは窒素、二酸化炭素などである。他の適当な薬学的賦形剤およびそれらの製剤は、E. W. Martin編、Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company, 18th ed., 1990)に 記載されている。
【０１４５】
製剤中の化合物の量は、当業者が用いる全範囲内で変動しうる。典型的には、製剤は重量パーセント（重量％）を基本に、全製剤中、式Iの化合物約0.01〜99.99重量％を含み、残りは一つまたは複数の適当な薬学的賦形剤である。好ましくは、化合物は約1〜80重量％のレベルで存在する。式Iの化合物を含む代表的な薬学的製剤を以下に記載する。
【０１４６】
加えて、本発明は、本発明の化合物の治療上有効な量をRNA依存性RNAウイルス、特にHCVに対するもう一つの活性物質の治療上有効な量との組み合わせで含む薬学的組成物を目的とする。HCVに対して活性な物質には、リバビリン、レボビリン、ビラミジン、サイモシンα-1、HCV NS3セリンプロテアーゼの阻害剤、インターフェロン-α、ペグ化インターフェロン-α（ペグインターフェロン-α）、インターフェロン-αとリバビリンとの組み合わせ、ペグインターフェロン-αとリバビリンとの組み合わせ、インターフェロン-αとレボビリンとの組み合わせ、およびペグインターフェロン-αとレボビリンとの組み合わせが含まれるが、それらに限定されるわけではない。インターフェロン-αには、組換えインターフェロン-α2a（Hoffman-LaRoche、ニュージャージー州ナトリーから入手可能なインターフェロンであるRoferonなど）、インターフェロン-α2b（Schering Corp.、米国ニュージャージー州ケニルワースから入手可能なインターフェロンであるIntron-A）、コンセンサスインターフェロン、および精製インターフェロン-α製品が含まれるが、それらに限定されるわけではない。リバビリンおよびそのHCVに対する活性についての議論は、J.O. Saunders and S.A. Raybuck, "Inosine Monophosphate Dehydrogenase: Consideration of Structure, Kinetics and Therapeutic Potential," Ann. Rep. Med. Chem., 35:201-210 (2000)を参照されたい。
【０１４７】
実施例
以下の実施例ならびに本出願の全体を通して、下記の略語は下記の意味を有する。定義されていない場合、用語はその一般に認められている意味を有する。
AcOHまたはHOAc＝酢酸
Ac2O＝無水酢酸
Ar＝アリール水素
atm＝気圧
Boc＝t-ブトキシカルボニル
bs＝広幅一重線
CAN＝硝酸セリウム(IV)アンモニウム
cm＝センチメートル
d＝二重線
con＝濃縮
DCM＝ジクロロメタン
dd＝二重線の二重線
DMF＝ジメチルホルムアミド
dt＝三重線の二重線
DBU＝1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデカ-7-エン
DCB＝2,4-ジクロロベンジル
DCC＝ジシクロヘキシルカルボジイミド
DMEM＝ダルベッコ最小イーグル培地
DMSO＝ジメチルスルホキシド
DTT＝ジチオスレイトール
EDTA＝エチレンジアミン四酢酸
eq.またはeq＝当量
g＝グラム
hまたはhr＝時間
HCV＝C型肝炎ウイルス
HPLC＝高性能液体クロマトグラフィ
IPTG＝イソプロピルβ-D-1-チオガラクトピラノシド
IU＝国際単位
kb＝キロベース
kg＝キログラム
KOAc＝酢酸カリウム
L＝リットル
M＝多重線
M＝モル濃度
Me＝メチル
MeOH＝メタノール
min＝分
mg＝ミリグラム
mL＝ミリリットル
mm＝ミリメートル
mM＝ミリモル濃度
mmol＝ミリモル
MS＝質量スペクトル
ng＝ナノグラム
N＝規定
nm＝ナノメートル
nM＝ナノモル濃度
NMR＝核磁気共鳴
NTA＝ニトリロ三酢酸
NTP＝ヌクレオチド三リン酸
RP HPLC＝逆相高性能液体クロマトグラフィ
q＝四重線
s＝一重線
t＝三重線
TBAF＝フッ化テトラブチルアンモニウム
TEA＝トリエチルアミン
TFA＝トリフルオロ酢酸
THF＝テトラヒドロフラン
tlcまたはTLC＝薄層クロマトグラフィ
Tm＝融解温度
UTP＝ウリジン三リン酸
μL＝マイクロリットル
μg＝マイクログラム
μM＝マイクロモル濃度
v/v＝体積比
w/w＝重量比
Wt％＝重量パーセント
【０１４８】
加えて、すべての反応および融解温度は、別に記載がない限り、摂氏度である。
【０１４９】
以下の実施例ならびに本出願の全体を通して、特許請求される化合物は下記の番号系を用いる。
2007509943.tif 000039
【０１５０】
実施例1
中間体1-O-メチル-2-メチル-3,5-ビス-O-(2,4-ジクロロベンジル)-β-D-リボフラノースの調製
2007509943.tif 000040
段階1：1-O-メチル-2,3,5-トリス-O-(2,4-ジクロロベンジル)-β-D-リボフラノースの調製
標題化合物を、Marin, P.; Helv. Chim. Acta, 1995, 78, 486に記載の方法を用い、市販のD-リボースから出発して合成した。
【０１５１】
段階2：1-O-メチル-3,5-ビス-O-(2,4-ジクロロベンジル)-β-D-リボフラノースの調製
0℃に冷却した塩化メチレン（1.8L）中の段階1の生成物（171.60g、0.2676mol）の溶液に、塩化メチレン（134mL）中の塩化スズ（31.522mL、0.2676mol）の溶液を撹拌しながら滴加した。溶液を約3℃で約27時間維持した後、塩化スズ（SnCl4）（5.031mL、0.04282mol）を追加し、溶液を約3℃で一晩維持した。全反応時間約43時間の後、飽和NaHCO3溶液（1.9L）を注意深く加えることにより反応を停止した。スズ塩をセライトを通してろ過することにより除去し、その後、有機相を単離し、MgSO4で乾燥し、減圧下で蒸発させた。未処理の暗黄色油状物の収量は173.6gであった。粗製油状物をそれ以上精製せずに次の段階で直接用いた。
【０１５２】
段階3：1-O-メチル-2-オキソ-3,5-ビス-O-(2,4-ジクロロベンジル)-β-D-リボフラノースの調製
無水塩化メチレン（740mL）中のデス・マーチン・ペルヨージナン（106.75g、0.2517mol）の溶液をアルゴン雰囲気下で氷冷し、これに無水塩化メチレン（662mL）中の前述の段階2の生成物の溶液を0.5時間かけて加えた。反応混合物を0℃で0.5時間と、次いで室温で6日間撹拌した。混合物を無水ジエチルエーテル（1.26L）で希釈し、次いで飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（4.7L）中のNa2S3O3・5H2O（241.2g、1.5258mol）の氷冷溶液に注いだ。層を分離し、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（1.3L）、水（1.7L）および食塩水（1.3L）で洗浄し、MgSO4で乾燥し、ろ過し、蒸発させて、標的化合物を得た。化合物（72.38g、0.1507mol）をそれ以上精製せずに次の段階で用いた。
【０１５３】
段階4：標題化合物の調製
-55℃に維持した無水ジエチルエーテル（500mL）中のMeMgBrの溶液を、同様に無水ジエチルエーテル（502mL）中の前述の段階3の生成物（72.38g、0.1507mol）の溶液に滴加した。反応混合物を-30℃まで昇温させ、約-30℃から-15℃まで4時間機械的に撹拌し、次いで氷冷水（2L）に注いだ。周囲温度で0.5時間激しく撹拌した後、混合物をセライトパッド（14×5cm）を通してろ過し、セライトをジエチルエーテルで完全に洗浄した。有機層をMgSO4で乾燥し、ろ過し、減圧濃縮した。残渣をヘキサン（粗生成物1gあたり約1mL）に溶解し、シリカゲルカラム（ヘキサン中1.5Lシリカゲル）に吸着させ、ヘキサンおよびヘキサン：酢酸エチル4：1（v/v）で溶出して、最終精製生成物53.58g（0.1080mol）を得た。標題化合物の形態は色の悪い黄色の粘稠油状物であった；
MS: m/z 514.06 (M+ NH4+).
【０１５４】
実施例2
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[2-(トリメチルシリル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの調製
2007509943.tif 000041
段階1.  4-クロロ-5-ヨード-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン：
4-クロロ-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン（10.75g、70mmol）およびN-ヨードスクシンイミド（16.8g、75mmol）を無水DMF（400mL）に溶解し、周囲温度で暗所に一晩放置した。溶媒を蒸発させた。黄色残渣をNa2SO3の10％熱溶液に懸濁し、ろ過し、熱水で二回洗浄し、エタノールから結晶化して、標題化合物（14.6g、74.6％）をオフホワイト結晶で得た。母液を1/3量まで蒸発させ、エタノールから再度結晶化して、標題生成物（2.47g、12.3％）を得た。合計収率は100％に近かった。
2007509943.tif 000042
【０１５５】
段階2.  7-(2'-メチル-3',5'-ビス-O-(2,4-ジクロロベンジル-β-D-リボフラノシル)-4-クロロ-5-ヨード-ピロロ[2,3-d]ピリミジン：
前述のとおりに得た塩基（11.2g、40mmol）をCH3CN（500mL）に懸濁し、NaH（1.6g、40mmol、油中60％）を加え、反応混合物を室温でNaHが溶解するまで（約2時間）撹拌した。1-O-メチル-2-メチル-3,5-ビス-O-(2,4-ジクロロベンジル)-β-D-リボフラノース（10g、20mmol）をDCM（500mL）に溶解し、氷/水浴中で4℃まで冷却した。HBr(g)を約30分間溶液に通気した。反応をTLCでモニターし、出発原料の糖が消失するまで行った（エーテル/ヘキサン1：9  v/v）。反応完了後、溶媒を20℃以下の温度で蒸発させ、高減圧下で20分間維持して、痕跡量のHBrを除去した。塩基のNa塩の溶液を急速ろ過し、ろ液を糖成分に加えた。反応を周囲温度で一晩続け、0.1N H2SO4で中和し、蒸発させた。残渣を酢酸エチル（700mL）および水（700mL）に分配した。有機画分を水（150mL）、食塩水（150mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、蒸発させて、半結晶混合物を得た。トルエン（500mL）を加えて、未反応複素環塩基の淡黄褐色沈殿（2.5g、25％）を得た。ろ液を50mLの量まで濃縮し、シリカゲル（10×10cm）を充填したガラスフィルターに加えた。フィルターをトルエン中10％酢酸エチルで洗浄し、500mL画分を分取した。画分2〜4は標題化合物を含んでおり、画分6〜7は複素環塩基を含んでいた。
【０１５６】
画分2〜4を蒸発させ、無色油状物にエーテルを加え、混合物を5分間超音波処理した。オフホワイト沈殿が生じ（収量7.4g、50％）、母液を蒸発させ、前述の手順を繰り返して、標題ヌクレオシドをさらに0.7g得た。合計収量は8.1g（54.4％）である。
2007509943.tif 000043
【０１５７】
段階3.  7-(2'-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-クロロ-5-ヨード-ピロロ[2,3-d]ピリミジン：
DCM（200mL）中の前段階からの化合物（8g、10.7mmol）の溶液を-78℃に冷却し、これに三塩化ホウ素（DCM中1M、88mL、88mmol）を滴加した。混合物を-78℃で2.5時間と、-20℃でさらに一晩撹拌した。MeOH/DCM（90mL、1：1）を加えて反応を停止し、得られた混合物を-20℃で30分間撹拌し、次いで同じ温度でアンモニア水により中和した。固体をろ過し、メタノール/DCM（250mL、1：1）で洗浄した。ろ液をシリカゲル（50mL）と混合し、蒸発乾固した。乾燥シリカをシリカゲル（10×10cm）を充填したガラスフィルターに加えた。フィルターを酢酸エチルで洗浄し、500mL画分を分取した。画分2〜4は標題化合物を含んでいた。溶媒を蒸発させ、残渣をアセトン/ヘキサンから結晶化して、標題ヌクレオシド（3.3g、72％）を得た。
2007509943.tif 000044
【０１５８】
段階4.  7-(2'-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-ヨード-ピロロ[2,3-d]ピリミジン：
上で調製したヌクレオシド（1.5g、3.5mmol）を、金属耐圧反応器中、液体アンモニアにより85℃で24時間処理した。アンモニア蒸発後、残渣をメタノールに溶解し、シリカゲル（約20mL）と共蒸発させた。生成物を担持したシリカゲルを、アセトン中のシリカゲルを充填したカラム（5×10cm）に載せ、50mL画分を分取した。画分2〜8は標題化合物を含んでいた。アセトンを蒸発させ、残渣をメタノール/アセトニトリルから結晶化して、標題ヌクレオシド（1.2g、84％）を得た。
2007509943.tif 000045
【０１５９】
段階5.  7-(2'-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(トリメチルシラニルエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン：
前段階で合成したアミノヌクレオシド（1.7g、4.2mmol）を無水DMF（12mL）および無水THF（28mL）の混合物に溶解した。トリエチルアミン（3.6mmol、0.5mL）、CuI（1mmol、80mg）を加え、フラスコにアルゴンを充填した。テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)（0.04mmol、46mg）と、続いて(トリメチルシリル)アセチレンを加え、混合物をアルゴン雰囲気下で20時間撹拌した。
【０１６０】
溶媒を蒸発させ、アセトン中の残渣をシリカゲル（5×10cm）を通してろ過した。アセトンを蒸発させ、残渣をアセトニトリルに溶解し、次いで同じサイズのシリカゲルカラムを通して再度ろ過した。溶出を純粋なアセトニトリルで行った。アセトニトリルを少量まで濃縮し、約10倍量のエーテルを加え、溶液を5分間超音波処理した。標題化合物の白色結晶が生じた（収率0.8g、71％）。
2007509943.tif 000046
【０１６１】
実施例3
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[2-(ピリド-2-イル)エチン-1イル]-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの調製
2007509943.tif 000047
実施例2、段階4からの化合物のDMF溶液（0.05M）に1.0当量のTEA、0.4eqのCuI、6.0当量の2-エチニル-ピリジンを加える。この混合物をアルゴンで脱気し、10モル％のP(Ph3)4Pdを加え、反応混合物を25〜80℃の間で24時間撹拌する。次いで、反応混合物を減圧濃縮し、DMFに溶解し、PHenominexカラム（250×20mm）によるRP HPLCで、30分間に水中アセトニトリルの0から80％勾配を用い、流速10mL/分で精製する。
【０１６２】
実施例4
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-カルボキサミドエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの調製
2007509943.tif 000048
実施例8からの生成物（20mg、0.053mmol）の溶液に、濃アンモニア溶液（30％水溶液、1.0mL）を加え、室温で1時間撹拌した。得られた沈殿をろ過し、エタノールとの共蒸発により乾燥して、標題化合物（15mg、80％）を得た。
2007509943.tif 000049
【０１６３】
実施例5
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[3,3-ジエトキシプロパルグ-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの調製
2007509943.tif 000050
実施例2、段階4からの化合物（100mg、0.246mmol）のTHF-DMF（3：1 v/v、6.5mL）溶液にCuI（18.2mg、0.096mmol）、TEA（32μL、0.23mmol）、プロピオールアルデヒドジエチルアセタール（0.05mL、0.36mmol）を加えた。混合物をアルゴンで脱気し、P(Ph3)4Pd（28mg、0.024mmol）を加え、反応混合物を室温で3.5時間撹拌した。プロピオールアルデヒドジエチルアセタールの第二投入量（0.05mL）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、反応混合物を減圧濃縮し、シリカゲル（100％CH2Cl2でゲル上にプレーティングし、15％MeOH-CH2Cl2で溶出）で精製して、標題化合物（60mg、60％）を得た。
2007509943.tif 000051
【０１６４】
実施例6
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-[2-(4-メトキシフェニル)エチン-1-イル]-ピロロ[2,3-d]ジピリミジンの調製
2007509943.tif 000052
実施例2、段階4からの化合物のDMF溶液に1.0当量のTEA、0.4eqのCuI、6.0当量の1-エチニル-4-メトキシ-ベンゼンを加える。この混合物をアルゴンで脱気し、10モル％のP(Ph3)4Pdを加え、反応混合物を25〜80℃の間で24時間撹拌する。次いで、反応混合物を減圧濃縮し、DMFに溶解し、PHenominexカラム（250×20mm）によるRP HPLCで、30分間に水中アセトニトリルの0から80％勾配を用い、流速10mL/分で精製する。
【０１６５】
実施例7
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-フェニルエチン-1イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの調製
2007509943.tif 000053
実施例2、段階4からの生成物（50.0mg、0.1231mmol）のジメチルホルムアミド（5mL）溶液を調製した。溶液を超音波処理しながらアルゴンを通気することにより5分間脱気した。この溶液に、トリエチルアミン（16.0μL、0.1145mmol）、ヨウ化銅（9.4mg、0.0492mmol）、およびテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)（14.2mg、0.0123mmol）を加えた。次に、フェニルアセチレン（81.1μL、0.7386mmol）を加えた。混合物をアルゴン雰囲気下で4時間撹拌した。完了後、混合物を減圧濃縮した。粗反応物をジメチルホルムアミド（1mL）に溶解し、脱イオン水で50mLに希釈し、次いでセライトパッドを通して洗浄した。溶液を再度濃縮乾固し、次いでジメチルホルムアミド（1.0mL）および水（3.5mL）に再度溶解した。標題化合物をHPLCで精製した。
2007509943.tif 000054
【０１６６】
実施例8
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(エチル2-カルボキシルエチン-1イル-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの調製
2007509943.tif 000055
実施例2、段階4からの生成物（450.0mg、1.108mmol）のTHF-DMF（2：1 v/v、28.8mL）溶液にCuI（0.082g、0.432mmol）、TEA（144μL、1.035mmol）、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)（0.126g、0.108mmol）を加え、溶液をアルゴンで脱気した。プロピオール酸エチル（100μL、1.011mmol）を加え、反応混合物を55℃に加熱した。プロピオール酸エチル（100μL）を1時間ごとに6時間、TLCにより実施例2、段階4の出発原料がなくなるまで追加した。反応混合物を減圧濃縮し、DMFに溶解し、PHenominexカラム（250×20mm）によるRP HPLCで、30分間に水中アセトニトリルの0から60％勾配を用い、流速10mL/分で精製して、標題化合物（115mg、28％）を得た。
2007509943.tif 000056
【０１６７】
実施例9
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-カルボキシルエチン-1イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの調製
2007509943.tif 000057
実施例8からの生成物（20.0mg、0.053mmol）に、1N NaOH（500μL）を加え、室温で30分間撹拌した。次いで、反応混合物を水で希釈し、Phenominexカラム（250×20mm）によるRP HPLCで、30分間に水中アセトニトリルの0から60％勾配を用い、流速10mL/分で精製して、標題化合物（7.0mg、38％）を得た。
2007509943.tif 000058
【０１６８】
実施例10
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-cis-メトキシエテン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの調製
2007509943.tif 000059
段階1.  7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ホルミル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの調製：
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ホルミル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンをShin-ichi Watanabe and Tohru Ueda in Nucleosides and Nucleotides (1983) 2(2), 113-125に記載の方法に従って合成した。しかし、標題化合物の合成において、7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-ピロロ[2,3-d]ピリミジン（Carroll, et al.,11,12参照）をツベルシジンの代わりに用いた。
2007509943.tif 000060
【０１６９】
段階2.  標題化合物の調製：
前述の段階1からの生成物（0.050g、0.162mmol）をDMSO（2mL）に溶解し、あらかじめ生成した塩化(メトキシメチル)-トリフェニルホスホニウムのイリドに滴加し、室温で撹拌した。イリドは塩化(メトキシメチル)-トリフェニルホスホニウム（0.555g、1.62mmol）をDMSO（10mL）に溶解し、2Mメチルスルフィニルカルバニオン溶液（0.81mL、1.62mmol）を加えることにより生成し、室温で15分間撹拌した。室温で4時間撹拌した後、塩化(メトキシメチル)-トリフェニルホスホニウムのイリドの第二投入量（1.62mmol）を反応混合物に加え、室温で一晩撹拌した。反応を水で停止し、塩化メチレンで希釈した。層を分離し、有機層を水で二回抽出した。水層を合わせて減圧濃縮し、Phenominexカラム（250×20mm）によるRP HPLCで、30分間に水中アセトニトリルの0から30％勾配を用い、流速10mL/分で精製して、トランスエノールエーテル（20mg）およびシス異性体（10mg）を得た（収率56％）。
2007509943.tif 000061
【０１７０】
実施例11
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(エテン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの調製
2007509943.tif 000062
実施例2からの標題化合物（0.040g、0.0132mmol）をメタノールに溶解し、NH40Hを加え、混合物を周囲温度で1時間放置した。溶媒を蒸発させ、残渣をメタノールに溶解し、シリカゲルと共蒸発させた。乾燥シリカゲルをシリカゲルを充填したガラスフィルターに加え、脱シリル化化合物をアセトンで溶出した。溶媒を蒸発させ、残渣をメタノール/アセトニトリルから結晶化して、7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(エチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを得た。
2007509943.tif 000063
【０１７１】
上で調製したアセチレン生成物をTHF（3mL）に溶解し、リンドラー触媒（22mg）を加えた。溶液を1atmの水素雰囲気下（風船）周囲温度で7日間撹拌した。各日の始めに風船に水素を再充填した。7日後、反応混合物をセライトを通してろ過して触媒を除去し、減圧濃縮し、Phenominexカラム（250×20mm）による逆相HPLCで、30分間に水中アセトニトリルの0から30％勾配を用い、流速10mL/分で精製して、標題化合物（30mg、収率75％）を得た。
2007509943.tif 000064
【０１７２】
実施例12
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ホルミル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの調製
2007509943.tif 000065
段階1.  4-クロロ-5-ヨード-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン：
4-クロロ-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン（10.75g、70mmol）およびN-ヨードスクシンイミド（16.8g、75mmol）を無水DMF（400mL）に溶解し、周囲温度で暗所に一晩放置した。溶媒を蒸発させた。黄色残渣をNa2SO3の10％熱溶液に懸濁し、ろ過し、熱水で二回洗浄し、エタノールから結晶化して、標題化合物（14.6g、74.6％）をオフホワイト結晶で得た。母液を1/3量まで蒸発させ、エタノールから再度結晶化して、標題生成物（2.47g、12.3％）を得た。
2007509943.tif 000066
【０１７３】
段階2.  7-(2'-メチル-3',5'-ビス-O-(2,4-ジクロロベンジル-β-D-リボフラノシル)-4-クロロ-5-ヨード-ピロロ[2,3-d]ピリミジン：
前述のとおりに得た塩基（11.2g、40mmol）をCH3CN（500mL）に懸濁し、NaH（1.6g、40mmol、油中60％）を加え、反応混合物を室温でNaHが溶解するまで（約2時間）撹拌した。1-O-メチル-2-メチル-3,5-ビス-O-(2,4-ジクロロベンジル)-β-D-リボフラノース（10g、20mmol）をDCM（500mL）に溶解し、氷/水浴中で4℃まで冷却した。HBr-ガスを約30分間DCM溶液に通気した。反応をTLCにより、出発原料の糖の消失によって制御した（エーテル/ヘキサン1：9 v/v）。反応完了後、溶媒を20℃以下の温度で蒸発させ、高減圧下で20分間維持して、痕跡量のHBrを除去した。塩基のNa塩の溶液を急速ろ過し、ろ液を糖成分に加えた。反応を周囲温度で一晩続け、0.1N H2SO4で中和し、蒸発させた。残渣を酢酸エチル（700mL）および水（700mL）に分配した。有機画分を水（150mL）、食塩水（150mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、蒸発させて、半結晶混合物を得た。トルエン（500mL）を加えて、未反応複素環塩基の淡黄褐色沈殿（2.5g、25％）を得た。ろ液を50mLの量まで濃縮し、シリカゲル（10×10cm）を充填したガラスフィルターに加えた。フィルターをトルエン中10％酢酸エチルで洗浄し、500mL画分を分取した。画分2〜4は標題化合物を含んでおり、画分6〜7は複素環塩基を含んでいた。
【０１７４】
画分2〜4を蒸発させ、無色油状物にエーテルを加え、混合物を5分間超音波処理した。オフホワイト沈殿が生じた（収量7.4g、50％）。母液を蒸発させ、前述の手順を繰り返して、標題ヌクレオシドをさらに0.7g得た。合計収量は8.1g（54.4％）である。
2007509943.tif 000067
【０１７５】
段階3.  7-(2'-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-クロロ-5-ヨード-ピロロ[2,3-d]ピリミジン：
DCM（200mL）中の前段階からの化合物（8g、10.7mmol）の溶液を-78℃に冷却し、これに三塩化ホウ素（DCM中1M、88mL、88mmol）を滴加した。混合物を-78℃で2.5時間と、-20℃でさらに一晩撹拌した。メタノール/DCM（90mL、1：1）を加えて反応を停止し、得られた混合物を-20℃で30分間撹拌し、次いで同じ温度でアンモニア水により中和した。固体をろ過し、メタノール/DCM（250mL、1：1）で洗浄した。ろ液をシリカゲル（50mL）と混合し、蒸発乾固した。乾燥シリカをシリカゲル（10×10cm）を充填したガラスフィルターに加えた。フィルターを酢酸エチルで洗浄し、500mL画分を分取した。画分2〜4は標題化合物を含んでいた。溶媒を蒸発させ、残渣をアセトン/ヘキサンから結晶化して、標題ヌクレオシド（3.3g、72％）を得た。
2007509943.tif 000068
【０１７６】
段階4.  7-(2'-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-ヨード-ピロロ[2,3-d]ピリミジン：
上で調製したヌクレオシド（1.5g、3.5mmol）を、金属耐圧反応器中、液体アンモニアにより85℃で24時間処理した。アンモニア蒸発後、残渣をメタノールに溶解し、シリカゲル（約20mL）と共蒸発させた。生成物を担持したシリカゲルを、アセトン中のシリカゲルを充填したカラム（5×10cm）に載せ、50mL画分を分取した。画分2〜8は標題化合物を含んでいた。アセトンを蒸発させ、残渣をメタノール/アセトニトリルから結晶化して、標題ヌクレオシド（1.2g、84％）を得た。
2007509943.tif 000069
【０１７７】
段階5.  標題化合物の調製：
上の段階4で調製した化合物（50.0mg、0.1231mmol）の無水テトラヒドロフラン（5mL）溶液を調製し、次いでこれに一酸化炭素をゆっくり通気することにより空気を除去した。この溶液にテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)（2.8mg、0.0025mmol）を加えた。反応混合物を10分間撹拌し、次いで50℃に加熱した。次に、THF中の水素化トリブチルスズ（35.9μL、0.1354mmol）を2.5時間かけてゆっくり加え、この間COガスを引き続き通気した。完了後、混合物を減圧濃縮した。粗反応物をジメチルホルムアミド（1mL）に溶解し、脱イオン水で50mLに希釈し、次いでセライトパッドを通して洗浄した。溶液を再度濃縮乾固し、次いでジメチルホルムアミド（1.0mL）および水（3.5mL）に再度溶解した。標題化合物をHPLCで精製した。
2007509943.tif 000070
【０１７８】
実施例13
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(カルバルデヒドオキシム)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの調製
2007509943.tif 000071
50％エタノール（10mL）中の実施例12からの標題化合物（0.1g、0.325mmol）の溶液に、塩酸ヒドロキシルアミン（0.073g、1.05mmol）およびKOAc（0.103g、1.05mmol）を加え、60℃で2.5時間加熱した。粗製混合物を濃縮し、水で希釈し、Phenominexカラム（250×20mm）による逆相HPLCで、30分間に水中アセトニトリルの0から30％勾配を用い、流速10mL/分で精製して、標題化合物（10mg）を得た。
2007509943.tif 000072
【０１７９】
実施例14
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ボロン酸)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの調製
2007509943.tif 000073
DMSO（1mL）中の実施例2、段階4からの化合物（60mg、0.148mmol）の溶液に、KOAc（44mg、0.449mmol）、ビス(ネオペンチルグリコロト)ジボロン（40mg、0.177mmol）を加えた。混合物をアルゴンで脱気し、P(Ph3)2PdCl2（3.1mg、0.004mmol）を加え、反応混合物を80℃で4時間加熱した。混合物を水で希釈し、Phenominexカラム（250×20mm）によるRP HPLCで、30分間に水中アセトニトリルの0から50％勾配を用い、流速10mL/分で精製して、標題化合物（16mg、33％）を得た。
2007509943.tif 000074
【０１８０】
実施例15
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ジイソプロポキシメチル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの調製
2007509943.tif 000075
無水イソプロパノール中の実施例13、段階5からの化合物の溶液に、活性化モレキュラーシーブスを加え、溶液をHClで酸性化する。溶液を50〜80℃の間で出発原料が消費されてしまうまで加熱する。得られたジアセタールをPhenominexカラム（250×20mm）によるRP HPLCで、30分間に水中アセトニトリルの0から50％勾配を用い、流速10mL/分で精製する。
【０１８１】
実施例16
7-(2'-C-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(ヒドラゾノ)-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの調製
2007509943.tif 000076
DMF中の実施例12、段階5からの化合物（20mg、0.05mmol）の溶液に、ヒドラジン（2μL、0.060mmol）を加え、50℃で2.5時間撹拌した。粗反応物をPhenominexカラム（250×20mm）によるRP HPLCで、30分間に水中アセトニトリルの0から50％勾配を用い、流速10mL/分で直接精製して、標題化合物（12mg、75％）を得た。
2007509943.tif 000077
【０１８２】
実施例17
7-(2'-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-フェニルエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン5'-三リン酸の合成
7-(2'-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-フェニルエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン5'-三リン酸（0.1mmol）を無水DMFと三回共蒸発させ、PO(OMe)3（2mL）に溶解し、5℃に冷却し、POCl3（35μL）およびプロトンスポンジ（64mg）を加える。混合物を5℃で3時間撹拌し、テトラブチルアンモニウムピロリン酸（2mmol、0.5M DMF溶液4mL）を加え、混合物を同じ温度でさらに2時間維持する。(Et3N)HCO3緩衝液（pH7.5）と続いて水により反応停止する。溶媒を蒸発させ、残渣をメタノール（3mL）に溶解し、エーテル（30mL）で沈殿させる。固体残渣をVydacカラム（250×10mm）によるイオン交換HPLC、0から100％Bで精製する。緩衝液Aは25mM NaH2PO4/Na2HPO4、pH3で、緩衝液Bは310mM NaH2PO4/Na2HPO4、pH3である。最後のピークを分取し、5mLの量まで濃縮し、Phenominexカラム（250×20mm）によるRP HPLCで、緩衝液A中の緩衝液Bの0から100％勾配で再度精製する。緩衝液Aは0.5M酢酸トリエチルアンモニウム水溶液で、緩衝液Bは0.5M酢酸トリエチルアンモニウムのアセトニトリル溶液である。標題化合物を含む画分を合わせ、蒸発させ、水と三回共蒸発させ、水から凍結乾燥する。
【０１８３】
実施例18
7-(2'-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-フェニルエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン5'-リン酸の合成
7-(2'-メチル-β-D-リボフラノシル)-4-アミノ-5-(2-フェニルエチン-1-イル)-ピロロ[2,3-d]ピリミジン（0.1mmol）を無水DMFと三回共蒸発させ、PO(OMe)3（2mL）に溶解し、5℃に冷却し、POCl3（35μL）およびプロトンスポンジ（64mg）を加える。混合物を5℃で3時間撹拌する。(Et3N)HCO3緩衝液（pH7.5）と続いて水により反応停止する。溶媒を蒸発させ、残渣をメタノール（3mL）に溶解し、エーテル（30mL）で沈殿させる。固体残渣をVydacカラム（250×10mm）によるイオン交換HPLC、0から100％Bで精製する。緩衝液Aは25mM NaH2PO4/Na2HPO4、pH3で、緩衝液Bは310mM NaH2PO4/Na2HPO4、pH3である。最後のピークを分取し、5mLの量まで濃縮し、Phenominexカラム（250×20mm）によるRP HPLCで、緩衝液A中の緩衝液Bの0から100％勾配で再度精製する。緩衝液Aは0.5M酢酸トリエチルアンモニウム水溶液で、緩衝液Bは0.5M酢酸トリエチルアンモニウムのアセトニトリル溶液である。標題化合物を含む画分を合わせ、蒸発させ、水と三回共蒸発させ、水から凍結乾燥する。
2007509943.tif 000078
【０１８４】
生物学的実施例
実施例1.  抗C型肝炎ウイルス活性
化合物はHCVポリメラーゼを阻害する、複製周期に必要な他の酵素を阻害する、または他の経路により抗C型肝炎ウイルス活性を示すことができる。これらの活性を評価するためのいくつかのアッセイが報告されている。培養中のHCVウイルスの全増加を評価する一般的方法がMiles et al.の米国特許第5,738,985号に開示されている。インビトロアッセイはFerrari et al. Jnl. of Vir., 73:1649-1654, 1999; Ishii et al., Hepatology, 29:1227-1235, 1999; Lohmann et al., Jnl of Bio. Chem., 274:10807-10815, 1999; およびYamashita et al., Jnl. of Bio. Chem., 273:15479-15486, 1998に報告されている。
【０１８５】
C. HagedornおよびA. Reinoldusを発明者として挙げている、Emory Universityによる1996年9月27日提出の国際公開公報第97/12033号は、1995年9月提出の米国特許仮出願第60/004,383号に対する優先権を主張してるが、本明細書に記載の化合物の活性を評価するために用いることができるHCVポリメラーゼアッセイを記載している。別のHCVポリメラーゼアッセイはBartholomeusz, et al., Hepatitis C Virus (HCV) RNA polymerase assay using cloned HCV non-structural proteins; Antiviral Therapy 1996:1(Supp 4) 18-24によって報告されている。
【０１８６】
HCV薬物からのキナーゼ活性の低下を測定する選別法が、Katze et al.の米国特許第6,030,785号、Delvecchio、米国特許第6,228,576号、およびJubin et al.の米国特許第5,759,795号に開示されている。推奨HCV薬物のプロテアーゼ阻害活性を測定する選別法は、Su et al.の米国特許第5,861,267号、De Francesco et al.の米国特許第5,739,002号、およびHoughton et al.の米国特許第5,597,691号に開示されている。
【０１８７】
実施例2.  レプリコンアッセイ
HCV RNA依存性RNAポリメラーゼについて本発明の化合物をスクリーニングするために、細胞株ET（Huh-lucubineo-ET）を用いる。ET細胞株は、I389luc-ubi-neo/NS3-3'/ET；ホタルルシフェラーゼ-ユビキチン-ネオマイシンホスホトランスフェラーゼ融合タンパク質および細胞培養適応突然変異（E1202G；T1280I；K1846T）を含むEMCV-IRES駆動性NS3-5Bポリタンパク質を有するRNA転写物を安定に形質移入されている（Krieger at al, 2001および未発表）。ET細胞を、10％ウシ胎仔血清、2mMグルタミン、ペニシリン（100IU/mL）/ストレプトマイシン（100μg/mL）、1×非必須アミノ酸、および250μg/mL G418（ゲネチシン）を補充したDMEM中で培養する。これらはすべてLife Technologies（メリーランド州ベゼスダ）から入手可能である。細胞を96穴プレートに0.5〜1.0×104細胞/ウェルで播種し、24時間インキュベートした後、ヌクレオシド類縁体を加える。次いで、化合物細胞に加えて、最終濃度50もしくは100μM、または所望のその他の濃度とした。これらの評価のために、各化合物の6回の希釈を用いる。化合物は典型的には3倍希釈して、250倍の濃度範囲に拡げる。ルシフェラーゼ活性は、溶解緩衝液および基質（カタログ番号Glo-溶解緩衝液E2661およびBright-Gloルシフェラーゼ系E2620 Promega、ウィスコンシン州マディソン）を加えることにより、48〜72時間後に測定する。細胞はアッセイ中コンフルエントになりすぎてはならない。複製の阻害パーセントを、化合物なしの対照に対してプロットする。同じ条件下で、化合物の細胞毒性を、細胞増殖試薬WST-1（Roche、ドイツ）を用いて評価する。IC50およびTC50値を、各濃度の阻害％を下記の式（bはヒル係数である）に代入して計算する。
阻害％＝100％/[(IC50/[I])b+1]
【０１８８】
実施例3.  組換えHCV-NS5bのクローニングと発現
NS5bタンパク質のコード配列を、Lohmann, V., et al. (1999) Science 285, 110-113に記載のとおり、下記のプライマーを用いてpFKI389luc/NS3-3'/ETからPCRによりクローニングする：
2007509943.tif 000079
【０１８９】
クローニングした断片はC末端21アミノ酸残基を欠損している。クローニングした断片を、タンパク質のカルボキシ末端にエピトープタグ(His)6を提供するIPTG誘導性発現プラスミドに挿入する。
【０１９０】
組換え酵素をXL-1細胞において発現させ、発現誘導後、タンパク質をニッケル-NTAカラムでのアフィニティクロマトグラフィを用いて精製する。保存条件は-20℃で10mMトリス-HCl pH7.5、50mM NaCl、0.1mM EDTA、1mM DTT、20％グリセロールである。
【０１９１】
実施例4.  HCV-NS5b酵素アッセイ
放射性同位体標識したUTPのRNA生成物への取り込みを、HCVゲノムの一部を含むビオチン化ヘテロポリマーテンプレートを用いて測定することにより、ポリメラーゼ活性を評価する。典型的には、アッセイ混合物（50μL）は10mMトリス-HCl（pH7.5）、5mM MgCl2、0.2mM EDTA、10mM KCl、1単位/μL RNAsin、1mM DTT、それぞれ10μMの[3H]-UTPを含むNTP、および10ng/μLヘテロポリマーテンプレートを含む。試験化合物をまず100％DMSOに溶解し、5％DMSOを含む水性緩衝液でさらに希釈する。典型的には、化合物を1nMから100μMの濃度で試験する。酵素の添加により反応を開始し、37℃で2時間続ける。100mM EDTA 8μLで反応停止し、反応混合物（30μL）をストレプトアビジンでコーティングしたシンチレーション近接マイクロタイタープレート（FlashPlate）に移し、4℃で一晩インキュベートする。放射能の取り込みをシンチレーション計数により評価する。
【０１９２】
以下の表IIに本発明の化合物を試験するために用いたレプリコンアッセイまたは酵素アッセイの結果を示す。
【０１９３】
【表２】
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【０１９４】
製剤実施例
下記は本発明の化合物を含む代表的な薬学的製剤である。
【０１９５】
実施例1：錠剤製剤
下記の成分を緊密に混合し、圧縮して溝一本の錠剤とする。
2007509943.tif 000084
【０１９６】
実施例2：カプセル製剤
下記の成分を緊密に混合し、ゼラチン硬カプセルに充填する。
2007509943.tif 000085
【０１９７】
実施例3：懸濁製剤
下記の成分を混合して、経口投与用の懸濁剤を調製する。
2007509943.tif 000086
【０１９８】
実施例4：注射用製剤
下記の成分を混合して、注射用製剤を調製する。
2007509943.tif 000087
【０１９９】
実施例5：坐剤製剤
全重量2.5gの坐剤を、本発明の化合物をWitepsol（登録商標） H-15（飽和植物性脂肪酸のトリグリセリド；Riches-Nelson, Inc., ニューヨーク）と混合することにより調製し、下記の組成を有する。
2007509943.tif 000088
【国際調査報告】
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