(57)【要約】  本発明は、高い生物学的利用能および経口投与性を有するウロキナーゼ−プラスミノゲン−アクチベーター（ｕＰＡ）を抑制するための新規の化合物ならびにウロキナーゼおよび／またはウロキナーゼ受容体に関連する疾患、たとえば腫瘍および転移を治療するための治療作用物質としての該化合物の使用に関する。本発明は特にヒドロキシアミジン基またはヒドロキシグアニジン基を有する化合物に関する。式（Ｉ）または式（ＩＩ）において、Ｅは式（ＩＩＩ）、式（ＩＶ）からの基を表す。【特許請求の範囲】
【請求項１】
作用物質として、一般式Ｉおよび／またはＩＩ
【化１】
2007513062.tif 000006
［式中、
Ｅは、
【化２】
2007513062.tif 000007
からの基を表し、
Ｂは、−ＳＯ２−または−ＣＯ−を表し、
Ｘは、−ＮＲ１または−ＣＨＲ１を表し、
Ｚは、−Ｒ４、−ＯＲ４または−ＮＨ−Ｒ４を表し、
Ｙは、−ＯＲ２または−ＮＨＲ２を表し、
Ｒ１は、そのつど無関係に−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６−アルケニルまたは−Ｃ２〜Ｃ６−アルキニル（置換されていないか、または置換された）を表し、
Ｒ２は、−Ｈ、−ＯＲ１、−ＣＯＲ１、−ＣＯＮ（Ｒ１）２または−ＣＯＯＲ１を表し、
Ｒ３は、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６−アルケニルまたは−Ｃ２〜Ｃ６−アルキニル（置換されていないか、または置換された）を表すか、あるいは−ＣＯＲ６または−ＣＯＯＲ６を表すか、あるいはオリゴアルキレンオキシ基またはポリアルキレンオキシ基を表し、
Ｒ４は、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６−アルケニルまたは−Ｃ２〜Ｃ６−アルキル（置換されていないか、または置換された）を表すか、または環式基を表し、
Ｒ５は、−ＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）２，−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６−アルケニルまたは−Ｃ２〜Ｃ６−アルキニル（置換されていないか、または置換された）を表し、かつ
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６−アルケニルまたは−Ｃ２〜Ｃ６−アルキニル（置換されていないか、または置換されている）を表すか、または環式基を表し、その際、それぞれの環式基は−Ｃ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｃ１〜Ｃ３−アルコキシ、ハロゲン、−ＯＲ６、＝Ｏ、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＣＯＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）２、−ＮＲ６ＣＯＲ６、−ＮＲ６ＣＯＮ（Ｒ６）２および−ＯＣＯＲ６から選択される１または複数の置換基を有していてもよく、
かつその際、それぞれのアルキル、アルケニルおよびアルキニルは直鎖状もしくは分枝鎖状であってもよく、かつハロゲン、−ＯＲ６、−ＯＣＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）２、−ＮＲ６ＣＯＲ６、−ＮＲ６ＣＯＮ（Ｒ６）２、ＣＯＯＲ６または環式基から選択される１または複数の置換基を有していてもよい］の化合物または該化合物の塩を１または複数ならびに場合により製薬学的に通例の担体、希釈剤および／または助剤を含有する医薬。
【請求項２】
一般式ＩＩＩ
【化３】
2007513062.tif 000008
［式中、
Ｘ、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４およびＲ６は請求項１に定義したものである］の化合物または該化合物の塩を１または複数含有することを特徴とする、請求項１記載の医薬。
【請求項３】
式中でＲ４が
【化４】
2007513062.tif 000009
を表す、請求項１または２記載の医薬。
【請求項４】
Ｒ４が置換された、または置換されていないＣ１〜Ｃ３−アルキル−アリール−基を表し、特に場合によりメタ位またはパラ位でハロゲンおよび／または−ＮＯ２により置換されていてもよいベンジル基を表し、その際、ハロゲンはＦ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択される、請求項１または２記載の医薬。
【請求項５】
化合物が、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド（ＷＸ−６７１）、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｄ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｄ，Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド（ＷＸ−６８３）、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ，Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エチルアミノカルボニルピペラジド（ＷＸ−６８５）、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ）−フェニルアラニン−４−エチルアミノカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ，Ｌ）−フェニルアラニン−４−エチルアミノカルボニルピペラジド、
ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド（ＷＸ−６７８）、
４−クロロ−ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド、
４−クロロ−ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド、
ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ｇｌｙ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド、
４−クロロ−ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ａｌａ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド
またはこれらの生理学的に認容性の塩
から選択されている、請求項１から４までのいずれか１項記載の医薬。
【請求項６】
経口投与可能な薬剤であることを特徴とする、請求項１から５までのいずれか１項記載の医薬。
【請求項７】
化合物が硫酸水素塩の形で存在することを特徴とする、請求項１から６までのいずれか１項記載の医薬。
【請求項８】
化合物が、Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｌ）−フェニル−アラニン−４−エトキシカルボニルピペラジニウム−硫酸水素塩（ＷＸ−６７１・ＨＳＯ４）である、請求項７記載の医薬。
【請求項９】
ウロキナーゼおよび／またはウロキナーゼ受容体の病的な過剰発現と関連している病気を治療するための医薬組成物を製造するための請求項１から８までのいずれか１項記載の医薬の使用。
【請求項１０】
腫瘍の治療または予防のための請求項９記載の使用。
【請求項１１】
転移形成の治療または予防のための請求項１０記載の使用。
【請求項１２】
原発腫瘍を治療するための請求項１１記載の使用。
【請求項１３】
経口投与可能な組成物を製造する、請求項９から１２までのいずれか１項記載の使用。
【請求項１４】
組成物を錠剤、糖衣錠、カプセル、ペレット、液剤、乳剤および／または懸濁剤の形で製造する、請求項９から１３までのいずれか１項記載の使用。
【請求項１５】
式ＩおよびＩＩ
【化５】
2007513062.tif 000010
［式中、Ｅ、Ｂ、Ｘ、Ｚ、Ｙ、Ｒ５およびＲ６は請求項１に定義されているとおりである］の化合物。
【請求項１６】
式ＩＩＩ
【化６】
2007513062.tif 000011
［式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４およびＲ６は請求項１に定義されているとおりである］の化合物。
【請求項１７】
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド（ＷＸ−６７１）、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｄ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｄ，Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド（ＷＸ−６８３）、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ，Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エチルアミノカルボニルピペラジド（ＷＸ−６８５）、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ）−フェニルアラニン−４−エチルアミノカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ，Ｌ）−フェニルアラニン−４−エチルアミノカルボニルピペラジド、
ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド（ＷＸ−６７８）、
４−クロロ−ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド、
４−クロロ−ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド、
ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ｇｌｙ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド、
４−クロロ−ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ａｌａ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド
またはこれらの塩から選択される、請求項１５または１６記載の化合物。
【請求項１８】
硫酸水素塩の形の請求項１５から１７までのいずれか１項記載の化合物。
【請求項１９】
化合物が、Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｌ）−フェニル−アラニン−４−エトキシカルボニルピペラジニウム−硫酸水素塩（ＷＸ−６７１・ＨＳＯ４）である、請求項１５から１８までのいずれか１項記載の化合物。
【請求項２０】
請求項１５から１９までのいずれか１項記載の少なくとも１の化合物の有効量を投与することにより生物においてウロキナーゼを抑制する方法。
【請求項２１】
請求項１５から１９までのいずれか１項記載の少なくとも１の化合物の有効量を投与することにより人間においてウロキナーゼを抑制する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、高い生物学的利用能および経口投与性を有するウロキナーゼ−プラスミノゲン−アクチベーター（ｕＰＡ）を抑制するための新規の化合物ならびにウロキナーゼおよび／またはウロキナーゼ受容体に関連する疾患、たとえば腫瘍および転移を治療するための治療作用物質としての該化合物の使用に関する。本発明は特にヒドロキシアミジン基またはヒドロキシグアニジン基を有する化合物に関する。
【０００２】
ウロキナーゼ型のプラスミノゲン−アクチベーター（ｕＰＡ）は腫瘍の浸潤および転移形成において鍵となる役割を果たす（Ｓｃｈｍｉｔｔ等、Ｊ．Ｏｂｓｔ．Ｇｙｎ．２１（１９９５）、第１５１〜１６５頁）。ｕＰＡは様々な種類の腫瘍細胞中で発現し（Ｋｗａａｎ、Ｃａｎｃｅｒ  Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  Ｒｅｖ．１１（１９９２）、第２９１〜３１１頁）、かつ腫瘍に関連するｕＰＡ−受容体（ｕＰＡＲ）に結合し、ここでプラスミノゲンからプラスミンへの活性化が行われる。プラスミンは細胞外マトリックス（ＥＣＭ）、たとえばフィブロネクチン、ラミニンおよびコラーゲンＩＶ型の種々の成分を分解することができる。これはまたいくつかのその他のＥＣＭ−分解酵素、特にマトリックス−金属プロテアーゼも活性化する。腫瘍に関連するｕＰＡの高い量は癌患者にとって比較的高い転移の危険と相関する（Ｈａｒｂｅｃｋ等、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ６２（２００２）、第４６１７〜４６２２頁）。従ってｕＰＡのタンパク質分解活性の抑制は抗転移治療のための良好なスタート地点である。
【０００３】
いくつかの活性な、および選択的なウロキナーゼ−阻害剤はすでに記載されている。たとえばベンズアミジンタイプのｕＰＡ阻害剤はＥＰ１０９８６５１に、アリールグアニジンタイプのｕＰＡ−阻害剤はＷＯ０１／９６２８６およびＷＯ０２／１４３４９に開示されている。これらの合成による阻害剤の共通の特徴は、アミジノ基および／またはグアニジノ基からなる塩基性の基である。
【０００４】
しかし公知のウロキナーゼ阻害剤は、経口投与の際に吸収性が劣り、従ってこの適用方法の場合、体内でごくわずかな薬理作用が発揮されうるにすぎないという欠点を有する。従って医薬調剤は少なくとも週に１回、しかし２回まで、数時間の時間にわたって患者に静脈投与される。これは患者の高い負担に結びついている。というのも、このことは著しい時間的なコストおよび頻繁な通院と結びついており、かつ高度な患者の協力を前提としているからである。
【０００５】
さらに、静脈内投与の場合、感染の危険が生じ、かつ特に脈管外に流れ出る輸液剤は著しい局所的な刺激から組織の壊死にまでつながる可能性があり、このことは時間のかかるその後の治療および観察を必要とする。
【０００６】
筋肉内および皮下の適用経路もまた利点をもたらすことはない。というのもここではしばしば注射箇所における強い痛みならびに刺激から組織の壊死が現れる場合があり、これらも同様に時間のかかるその後の治療を必要とする。
【０００７】
すでに記載したように、アミジンおよびグアニジンを含有するウロキナーゼ阻害剤は経口投与の際にごくわずかな薬理作用を示すにすぎない。作用物質の治療効果のための前提はその生物学的利用能である。従って経口投与の後には胃腸管からの吸収が行われなくてはならない。この場合、このような膜透過のための重要なメカニズムは受動拡散である（Ｇａｎｇｖａｒ  Ｓ．等、ＤＤＴ（１９９７）、第１４８〜１５５頁）。該文献では部分的に作用物質の親油性が胃腸管の膜障壁を通過する受動拡散のために重要な役割を果たすことが仮定されている。たとえばＥＰ０７０８６４０には、抗ぜん虫作用のあるペンタミジンに関して、アミジン官能基をアミドオキシム、アミドオキシムエステルおよびオキサジアゾールへと修飾することが記載されており、この場合、アミドオキシムエステルおよびオキサジアゾールが有利に適切な変性剤として使用されている。
【０００８】
しかし他方では、親油性の程度単独では十分ではなく（Ｈａｎｓｃｈ等、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８６（１９６４）、第１６１６〜１６２６頁）、かつ化合物の親油性の向上は膜透過に関する予測のための適切なパラメータではないことが示された。従って親油性と膜透過との直接的な関係は確認することができなかった（Ｃｏｎｒａｄｉ等、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．９（１９９２）、第４３５〜４３９頁）。
【０００９】
従って親油性の向上は個別的な事例では膜透過を高めることができるが、しかしこれは必ずしも経口による生物学的利用能の向上につながるとは限らない。たとえばアルガトロバン(Argatroban)に関して、塩基性の基をプロドラッグとしてのアミドオキシムへと変換することは改善された透過性につながるが、しかし付加的に活性の損失につながる（Ｒｅｗｉｎｋｅｌ、Ａｄａｎｇ  Ｃｕｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓｉｇｎ  ５（１９９９）、第１０４３〜１０７５頁）。従って、変性が作用物質における胃腸管中での膜透過を改善することができるのか、およびどのような変性が膜透過を改善するのかということは容易に予測することはできない。さらに、このような変性が作用物質の医薬特性にどのような影響を与えうるのかは一層予測することができない。
【００１０】
本発明の課題は、経口投与の際に、生体内で明らかにより高い生物学的利用能および活性を有する、ウロキナーゼを阻害するための新規の薬剤を提供することである。
【００１１】
前記課題は本発明により、作用物質として一般式Ｉおよび／またはＩＩ
【００１２】
【化１】
2007513062.tif 000002
［式中、
Ｅは、
【００１３】
【化２】
2007513062.tif 000003
からの基を表し、
Ｂは、−ＳＯ２−または−ＣＯ−を表し、
Ｘは、−ＮＲ１または−ＣＨＲ１を表し、
Ｚは、−Ｒ４、−ＯＲ４または−ＮＨ−Ｒ４を表し、
Ｙは、−ＯＲ２または−ＮＨＲ２を表し、
Ｒ１は、そのつど無関係に−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６−アルケニルまたは−Ｃ２〜Ｃ６−アルキニル（置換されていないか、または置換された）を表し、
Ｒ２は、−Ｈ、−ＯＲ１、−ＣＯＲ１、−ＣＯＯＲ１または−ＣＯＮ（Ｒ１）２を表し、
Ｒ３は、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６−アルケニルまたは−Ｃ２〜Ｃ６−アルキニル（置換されていないか、または置換された）を表すか、あるいは−ＣＯＲ６または−ＣＯＯＲ６を表すか、あるいはたとえば−Ｃ２〜Ｃ４−アルキレンオキシ基を有するオリゴアルキレンオキシ基またはポリアルキレンオキシ基、たとえばエチレンオキシ基を表し、
Ｒ４は、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６−アルケニルまたは−Ｃ２〜Ｃ６−アルキニル（置換されていないか、または置換された）を表すか、または環式基を表し、かつ
Ｒ５は、−ＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）２、−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６−アルケニルまたは−Ｃ２〜Ｃ６−アルキニル（置換されていないか、または置換された）を表し、かつ
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６−アルケニルまたは−Ｃ２〜Ｃ６−アルキニル（置換されているか、または置換されていない）を表すか、または環式基を表し、その際、それぞれの環式基はたとえば−Ｃ１〜Ｃ３−アルキル、−ＯＲ６（たとえば−ＯＨまたは−Ｃ１〜Ｃ３−アルコキシ）、ハロゲン、＝Ｏ、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＣＯＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）２、−ＮＲ６ＣＯＲ６、−ＮＲ６ＣＯＮ（Ｒ６）２および−ＯＣＯＲ６から選択される１または複数の置換基を有していてもよく、
かつその際、それぞれのアルキル、アルケニルおよびアルキニルは直鎖状もしくは分枝鎖状であってもよく、かつハロゲン、−ＯＲ６、−ＯＣＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）２、−ＮＲ６ＣＯＲ６、ＣＯＯＲ６、−ＮＲ６ＣＯＲ６または環式基から選択される１または複数の置換基を有していてもよい］の化合物または該化合物の塩を１または複数ならびに場合により薬学的に通例の担体、希釈剤および／または助剤を含有する医薬により解決される。
【００１４】
有利には該医薬は経口投与可能な薬剤である。特に有利には該医薬はウロキナーゼ−プラスミノゲンアクチベーターの抑制のために使用される。
【００１５】
有利であるのは、一般式ＩＩＩ
【００１６】
【化３】
2007513062.tif 000004
［式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４およびＲ６は上記で定義したとおりである］の化合物またはこれらの塩である。
【００１７】
基Ｅは、有利には化合物ＩおよびＩＩの場合、フェニル環のパラ位に存在する。特に有利であるのは、ＥがＡｍである一般式Ｉの化合物である。
【００１８】
本発明による化合物は変性されたアミジノ官能基またはグアニジン官能基Ｅ、有利にはヒドロキシグアニジノ官能基またはヒドロキシアミジノ官能基を有する。これらの変性は単に、グアニジノ型またはアミジノ型のウロキナーゼ−阻害剤を製造する際の合成中間生成物として公知であるにすぎない。医薬効果はこれまで推定されていなかった。
【００１９】
該化合物は塩として、有利には生理学的に認容性の酸塩として、たとえば鉱酸の塩、特に有利には塩酸塩または硫酸水素塩として、または適切な有機酸、たとえば有機カルボン酸またはスルホン酸の塩、たとえば酒石酸塩、メシラートまたはベシラートとして存在していてもよい。特に有利であるのは硫酸水素塩である。該化合物は光学的に純粋な化合物として、またはエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーの混合物として存在してよい。
【００２０】
環式基は１または複数の飽和、不飽和または芳香族の環を有していてもよい。環式基のための有利な例はシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基および二環式基である。特に有利であるのは単環式または二環式の基である。環式基は有利に４〜３０、特に５〜１０の炭素原子およびヘテロ原子を環原子として、ならびに場合により前記のような１または複数の置換基を有する。複素環式構造は有利には１または複数のＯ原子、Ｓ原子および／またはＮ原子を有する。有利な二環式環構造は−ＣＯ−基を有するものである。
【００２１】
アルキル基、アルケニル基およびアルキニル基は有利には４までの炭素原子を有する。Ｒ１は有利にはＨであるか、または場合により置換されたＣ１〜Ｃ４−アルキル基、たとえば−ＣＨ３またはＣ１〜Ｃ６−アルキル−アリール基であり、従って−ＣＯ−Ｘ−ＮＲ１はたとえばグリシル基、アラニル基、フェニルアラニル基またはホモフェニルアラニル基であってよい。Ｒ２は特に有利にはＨであるか、またはＣ１〜Ｃ３−アルキル基であり、従ってＹはたとえばＯＨ−またはＯ−Ｃ１〜Ｃ３−アルキル基であってよい。Ｒ３は特に有利にはＨである。化合物Ｉ中で、Ｒ５は有利には−ＮＨＲ６、特に有利には−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ５）−アルキル（置換されていないか、または置換されている）、たとえば−ＮＨＣ２Ｈ５または−ＯＲ６、特に有利には−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル（置換されていないか、または置換されている）、たとえばエチルオキシまたはベンジルオキシ、または−Ｏ−アリール、たとえばフェニルオキシを表す。化合物ＩＩおよびＩＩＩ中でＲ６は有利には−ＨまたはＣ１〜Ｃ３−アルキルである。
【００２２】
有利であるのは、構造要素ＺがＲ４を表し、Ｒ４が環式の置換基を有するアルキル基、たとえば場合により置換されたフェニル基または二環式の基、たとえば
【００２３】
【化４】
2007513062.tif 000005
を表す。
【００２４】
特に有利な化合物は、Ｒ４が置換された、または置換されていないＣ１〜Ｃ３−アルキル−アリール−基を表すものであり、たとえば場合によりメタ位またはパラ位でハロゲンおよび／または−ＮＯ２で置換されていてもよいベンジル基であり、この場合、ハロゲンはＦ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩ、特に有利にはＣｌおよびＢｒから選択される。
【００２５】
最も有利であるのは、化合物
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド（ＷＸ−６７１）、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｄ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｄ，Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド（ＷＸ−６８３）、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ，Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エチルアミノカルボニルピペラジド（ＷＸ−６８５）、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ）−フェニルアラニン−４−エチルアミノカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ，Ｌ）−フェニルアラニン−４−エチルアミノカルボニルピペラジド、
ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド（ＷＸ−６７８）、
４−クロロベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド、
４−クロロ−ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド、
ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ｇｌｙ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド、
４−クロロ−ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ａｌａ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド
ならびにこれら塩、たとえば硫酸水素塩、たとえばＷＸ−６７１・ＨＳＯ４である。
【００２６】
本発明による化合物は場合により適切な医薬品助剤または担体と一緒に医薬の製造のために使用することができる。その際、その他の作用物質、たとえばその他のウロキナーゼ阻害剤、たとえば抗体および／またはペプチドと、あるいはまた化学療法剤および細胞増殖抑制剤および／または細胞増殖抑制作用物質と組み合わせて投与することが可能である。
【００２７】
医薬は人間および動物において、局所、直腸または非経口、たとえば静脈内、皮下、筋肉内、腹腔内、舌下、経鼻および／または吸入により、たとえば錠剤、糖衣錠、カプセル、ペレット、坐剤、液剤、乳剤、懸濁剤、リポソーム、吸入スプレーまたは経皮システム、たとえば硬膏剤の形で、および特に有利には経口で、たとえば徐放性／遅延製剤として投与することができる。
【００２８】
本発明による化合物は、ｕＰＡおよび／またはウロキナーゼ−プラスミノゲン−アクチベーター受容体（ｕＰＡＲ）の病的な過剰発現と関連している疾患の治療のために適切である。これらはたとえば悪性腫瘍の成長および／または拡散ならびに腫瘍の転移を高い効率で抑制することができる。このための例は腫瘍疾患、たとえば乳ガン、肺ガン、膀胱癌、胃ガン、子宮頚ガン、子宮癌、腎臓癌、前立腺癌および軟部組織肉腫、特に高い転移率と関連する腫瘍である。この場合、該化合物を場合によりその他の腫瘍治療剤またはその他の治療方法、たとえば放射線および／または外科的な介入と一緒に使用することができる。
【００２９】
さらに本発明による化合物はその他のｕＰＡに関連する、および／またはｕＰＡＲに関連する疾患にとっても効果的である。このような疾患のための例はたとえば肺高血圧症および／または心臓疾患（たとえばＷＯ０２／００２４８）、胃および腸の疾患、たとえば炎症性腸疾患、前悪性結腸アデノーマ、炎症性疾患、たとえば敗血症性関節炎、変形性関節炎、リウマチ性関節炎、またはその他の疾患、たとえば骨粗鬆症、真珠種、皮膚および目の疾患ならびにウイルス性または細菌性の感染症であり、この場合、ＥＰ−Ａ−０６９１３５０、ＥＰ−Ａ−１１８２２０７およびＵＳ特許５，７１２，２９１に挙げられている疾患を明文をもって引用する。
【００３０】
一般式Ｉの化合物はたとえば図１、２および３の合成図式におけるように製造することができる。
【００３１】
一般式ＩＩおよびＩＩＩの化合物はたとえば図４および６の合成図式におけるように製造することができる。
【００３２】
本発明によるｕＰＡ阻害剤は有利には、経口投与後に、変性されていないアミジノ官能基またはグアニジノ官能基を有するこのクラスの相応するウロキナーゼ阻害剤よりも５倍、有利には１０倍、および特に有利には１００倍高い生物学的利用能を有することを特徴とする。
【００３３】
意外なことに、本発明によるｕＰＡ阻害剤は改善された生物学的利用能を有するのみではなく、原発腫瘍に対して明らかに改善された活性を有することが確認された。
【００３４】
式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩの本発明による物質は単独で、またはその他の生理学的に活性な物質と、たとえば放射線治療薬または細胞毒性および／または細胞増殖抑制性の薬剤、たとえば化学療法剤、たとえばシスプラチン、ドキソルビシン、５−フルオロウラシル、タキソール誘導体および／またはその他の化学療法剤、たとえばアルキル化剤、代謝拮抗物質、抗生物質、エピドフィロトキシン(Epidophyllotoxine)およびビンカアルカロイドと組み合わせて使用することができる。同様に、放射線治療および／または外科的な介入との組み合わせも可能である。
【００３５】
本発明により、一般式Ｉ、ＩＩおよび／またはＩＩＩの少なくとも１の化合物の有効量を投与することにより、生物、特に人間においてウロキナーゼを抑制する方法が提供される。投与すべき用量は治療すべき疾患の種類および重症度次第である。たとえば日用量は０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ作用物質の範囲である。
【００３６】
最後に本発明は一般式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩのウロキナーゼ−プラスミノゲン−アクチベーターの新規の阻害剤に関する。
【００３７】
本発明を以下の図面および実施例により詳細に説明する。
【００３８】
図１〜４および６は、化合物ＷＸ−６７１（図１および２）、ＷＸ−６８３（図３）およびＷＸ−６７８（図４および６）の製造の略図を示す。
【００３９】
図５は、本発明による物質ＷＸ−６７１を用いたラットの乳ガンモデルにおける結果を対照と比較して示している。
【００４０】
実施例
例１：ＷＸ−６７１の製造
１．１  Ｎ−アセチル−３−シアノ−（Ｄ／Ｌ）−フェニルアラニン
３−シアノベンジルブロミド（９３５ｇ；４．７７モル）、アセトアミドマロン酸ジエチルエステル（１０３６ｇ；４．７７モル）およびヨウ化カリウム（２０ｇ）を、アルゴン下に９８℃で５ｌのジオキサン中に溶解し、かつ５時間攪拌した。引き続き、２ｌのエタノール中のナトリウムメタノラート（３４０ｇ；5ミリモル）の溶液を３時間で滴加した。その後、４．４ｌの３ＭのＮａＯＨを添加し、かつ９８℃でさらに２時間および次いで室温（ＲＴ）で一夜攪拌した。該溶液を真空下で２ｌまで濃縮し、３ｌの蒸留水を添加し、かつＲＴに冷却した。ｐＨ値を＞９に調節した後、１ｌの酢酸エチルで３回抽出した。水相を４ＭのＨＣｌでｐＨ１にし（約４ｌの４ＭのＨＣｌ）、かつ１．２ｌの酢酸エチルで４回抽出した。合した有機相を飽和ＮａＣｌで洗浄し、溶剤を留去し、かつ酢酸エチルから再結晶した。収率８１５ｇ（３．５モル）７３％。
【００４１】
１．２  ３−シアノ−（Ｌ）−フェニルアラニン（ラセミ体分割）
Ｎ−アセチル−３−シアノ−（Ｄ／Ｌ）−フェニルアラニン（６９６ｇ；３モル）を２ｌの水および３ｌの１ＭのＮａＯＨ中に溶解し、ｐＨ値を約１０ｍｌの４ＭのＨＣｌで７．２に調節し、かつ３７℃で温度処理した。２８ｇのアシラーゼＩ（アスペルギルス・メレウス）を添加した後、３７℃で６０時間攪拌した。生じた沈殿物（生成物）を濾過した後、該溶液を約１．５ｌの体積に濃縮し、かつ沈殿物を濾別した。合したフィルターケーキを０．５ｌの水に懸濁させ、攪拌し、改めて濾過し、かつ真空中で乾燥させた。収率１９０ｇ（３３％）、純度９９％（ＨＰＬＣ）。
【００４２】
１．３  トリイソプロピルフェニルスルホニル（ＴＩＰＰＳ）−３−シアノ−（Ｌ）−フェニルアラニン
３−シアノ−（Ｌ）−フェニルアラニン（１３３ｇ、７００ミリモル）を１．２ｌのジオキサンおよび１５４０ｍｌの１ＭのＮａＯＨ中に溶解し、かつ５℃に冷却した。トリイソプロピルフェニルスルホニルクロリド（ＴＩＰＰＳ−Ｃｌ）（２１２ｇ；７００ミリモル）を１ｌのジオキサン中に溶解し、かつ１時間にわたって滴加した。引き続き、さらにＴＩＰＰＳ−ＣｌおよびＮａＯＨを添加し、かつ原料がもはや検出されなくなるまで攪拌した。オレンジ色の溶液を４ＭのＨＣｌでｐＨ５の酸性にし、かつＭＴＢＥで２回抽出した。合した有機溶液をＮａＣｌ溶液で２回抽出し、かつ溶剤を引き続き真空中で留去し、かつトルエンと共に後回転した。純度９３％（ＨＰＬＣ）で収率３０２ｇ（８８％）。
【００４３】
１．４  ＴＩＰＰＳ−３−シアノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド
ＴＩＰＰＳ−３−シアノ−（Ｌ）−フェニルアラニン（２１５ｇ；０．４３５ミリモル；純度９３％）、エチルオキシカルボニルピペラジン（６８．８ｇ；０．４３５ミリモル）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１３．３ｇ；０．０８７ミリモル）を６５０ｍｌのＤＭＦ中に溶解し、かつ１０℃に冷却した。２時間で２１６ｍｌのＤＭＦ中のジシクロヘキシルカルボジイミド（９８．７ｇ；０．４７８ミリモル）の溶液を滴加し、かつ反応溶液をＲＴで一夜攪拌した。溶剤を留去した後、残留物を４３６ｍｌのＭＴＢＥ中に溶解し、沈殿物を濾別し、かつ有機溶液を５％のＫＨＳＯ４、５％のＮａＨＣＯ３および蒸留水でそのつど２回抽出した。溶剤を真空中で留去し、トルエンと共に後回転し、かつ生成物を真空中で乾燥させた。純度９０％（ＨＰＬＣ）で明るい黄色の固体２６１ｇの収率（９０％）。
【００４４】
１．５  ＴＩＰＰＳ−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド（ＷＸ−６７１）
ＴＩＰＰＳ−３−シアノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド（１３０ｇ；１９６ミリモル；純度９０％）、ヒドロキシアミン塩酸塩（２２ｇ；３１３ミリモル）およびトリエチルアミン（６３ｇ；６２６ミリモル）を４７０ｍｌのエタノール中に溶解し、かつＲＴで一日攪拌した。溶剤を留去した後、残留物を３００ｍｌの酢酸エチル中にとり、かつ５％のＫＨＳＯ４、５％のＮａＨＣＯ３および蒸留水でそのつど２回抽出した。溶剤を留去した後、粗生成物を真空中で乾燥させ、かつ引き続き酢酸エチル／エーテル中で再結晶させた。純度９７％（ＨＰＬＣ）で白色の粉末６３ｇの収率（５０％）。
【００４５】
例２：ＷＸ−６７８の製造
２．１  Ｈ−Ｇｌｙ−４−ニトロベンジルアミド塩酸塩
４−ニトロベンジルアミン塩酸塩（１ｇ；５．３ミリモル）およびジイソプロピルエチルアミン（１．８ｍｌ；１０．６ミリモル）をＲＴで７０ｍｌのジクロロメタン中に溶解した。ＢＯＣ−Ｇｌｙ−ＯＳｕ（１．４４ｇ；５．３ミリモル）を添加し、かつ該溶液をＲＴで一夜攪拌した。回転蒸発器で溶剤を留去した後、残留物を５０ｍｌの酢酸エチルにとり、かつ５％のＫＨＳＯ４、５％のＮａＨＣＯ３および蒸留水でそのつど２回抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４により乾燥させ、溶剤を留去し、かつトルエンと共に後回転した。生じた油状物をそれ以上後処理しないで直接、１５ｍｌの４ＭのＨＣｌ／ジオキサン中に溶解し、かつＲＴで攪拌した。短時間の後に、生成物が沈殿し始めた。１時間後に溶剤を留去し、固体を１００ｍｌの酢酸エチル中に懸濁させ、濾別し、かつ石油エーテルで洗浄した。白色の固体を真空中で乾燥させた。収率１．１７ｇ（９０％）。
【００４６】
２．２  Ｆｍｏｃ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−４−ニトロベンジルアミド
Ｈ−Ｇｌｙ−４−ニトロベンジルアミド塩酸塩（１．１７ｇ；４．７７ミリモル）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ（１．８３ｇ；４．７７ミリモル）およびジイソプロピルエチルアミン（２．５ｍｌ；１４．３ミリモル）を４０ｍｌのＤＭＦ：ジクロロメタン１：１中に溶解した。ＰｙＢＯＰ（２．７３ｇ；５．２５ミリモル）の添加後に、該溶液をＲＴで攪拌した。２．５時間後に溶剤を高真空中で完全に留去し、かつ残留物を３００ｍｌのジクロロメタン中に溶解し、かつＴＩＰＰＳ−３−アミノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジドで２回、および濃ＮａＣｌで１回抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４により乾燥させ、溶剤を留去し、かつトルエンと共に後回転した。生成物を高真空中で乾燥させた。
【００４７】
２．３  Ｈ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−４−ニトロベンジルアミド塩酸塩
Ｆｍｏｃ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−４−ニトロベンジルアミド（３．１ｇ）を１００ｍｌのジクロロメタン中に懸濁させ、かつ５ｇのピペラジノメチル−ポリスチレン樹脂（＝ピペラジン５．５ミリモル）を添加した。１時間後にまだ反応は開始されず、かつ５ミリモルのジイソプロピルエチルアミン（８５６μｌ）を添加した。１日後にもなお反応は開始されず、かつ改めてジイソプロピルエチルアミン（５ミリモル；８５６μｌ）を添加し、かつ懸濁液を回転蒸発器で当初の体積の約２０％に濃縮した。５日後に生成物約５０％が生じ、これを改めてジイソプロピルエチルアミン（５ミリモル；８５６μｌ）に添加し、かつ該溶液に２０ｍｌのＤＭＦを添加して溶解度を向上した。さらに６日後に樹脂を濾別し、かつ溶剤を留去した。残留した油状物を超音波浴中で石油エーテルにより処理し、かつデカンテーション分離した。この工程をジエチルエーテルを用いて繰り返して副生成物であるジベンゾフルベンを分離した。引き続き該油状物を３０ｍｌのジクロロメタン中に溶解し、かつ生成物を２０ｍｌのジクロロメタン中の４ＭのＨＣｌ／ジオキサン２ｍｌからなる溶液で塩酸塩として沈殿させた。沈殿は５０ｍｌの石油エーテルで完了し、上澄み液をデカンテーション分離し、かつ沈殿物を真空中で乾燥させた。明るい黄色の粉末１．６８ｇの収率（両方の最後の合成工程に関して９０％）。
【００４８】
２．４  ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−ニトロベンジルアミド
１．６８ｇのＨ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−４−ニトロベンジルアミド塩酸塩（４．３２ミリモル）およびジイソプロピルエチルアミン（２．２２ｍｌ；１２．９６ミリモル）を８０ｍｌのジクロロメタン中に溶解した。ベンジルスルホニルクロリド（８２４ｍｇ；４．３２ミリモル）の添加後に、ＲＴで攪拌した。３．５時間後にあらためてベンジルスルホニルクロリド（１００ｍｇ）およびジイソプロピルエチルアミン（５００μｌ）を添加して反応を完了した。さらに２時間後に、溶剤を留去し、残留物を１３０ｍｌの酢酸エチル中にとり、該溶液を５％のＮａＨＣＯ３および５％のＫＨＳＯ４でそのつど２回および濃ＮａＣｌで１回抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４により乾燥させ、溶剤を留去し、かつトルエンと共に後回転した。生成物を高真空中で乾燥させた。明るい黄色の粉末１．８５ｇの収率（８４％）。
【００４９】
２．５  ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−４−アミノベンジルアミド
１．８５ｇのベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−４−ニトロベンジルアミド（３．６５ミリモル）を５０ｍｌのメタノール中に溶解し、かつＰｄ／Ｃにより水素化した。８時間後に触媒を濾別し、溶剤を留去し、トルエンと共に後回転させ、かつ粗生成物を少量のジクロロメタン中に溶解した。溶剤を回転蒸発器で留去する際に生成物は起泡し、かつ真空中で固化した。明るい黄色の粉末１．６ｇの収率（９２％）。
【００５０】
２．６  ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−４−アミノベンジルアミド塩酸塩
ｔ−ブチル−保護基を分離するために、ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−４−アミノベンジルアミド（１ｇ）を４ＭのＨＣｌ／ジオキサン２０ｍｌ中に懸濁させ、かつＲＴで攪拌した。７時間後に溶剤を真空中で留去し、トルエンで後回転させ、かつ生成物を真空中で乾燥させた。高純度の生成物１．０７ｇの収率（定量的）。
【００５１】
２．７  ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−４−シアノアミノベンジルアミド
ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−４−アミノベンジルアミド塩酸塩（５００ｍｇ；１．０９ミリモル）、酢酸ナトリウム（２２４ｍｇ；２．７２５ミリモル）およびブロモシアン（１２７ｍｇ；１．２ミリモル）を、分子ふるいにより乾燥させた無水のエタノール中に溶解し、かつＲＴで３時間攪拌した。該溶液を氷浴中で冷却し、かつ沈殿した塩を濾別した。該溶液を直接、次の反応工程で使用した。
【００５２】
２．８  ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−４−ヒドロキシグアニジノベンジルアミド
ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−４−シアノアミノベンジルアミドのエタノール性粗生成物溶液に、塩酸ヒドロキシルアミン（８３．４ｍｇ；１．２ミリモル）およびジイソプロピルエチルアミン（１９５μｌ；１．２ミリモル）を添加し、かつ反応混合物を０℃で一夜攪拌した。沈殿した塩を濾別し、かつ溶剤を留去した。生成物を分離用逆相ＨＰＬＣにより精製した。収率１２０ｍｇ（０．２５ミリモル；２１％）；純度（ＨＰＬＣ）：９５％；ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４７９．０（Ｍ＋Ｈ＋）；Ｃ２０Ｈ２６Ｎ６Ｏ６Ｓ１：４７８に関して計算。
【００５３】
例３：ＷＸ−６８３の製造
３．１  Ｎ−アセチル−３−ニトロ−（Ｄ／Ｌ）−フェニルアラニン
３−ニトロベンジルブロミド（１０００ｇ；４．６３モル）、アセトアミドマロン酸ジエチルエステル（１００５ｇ；４．６３モル）およびヨウ化カリウム（２０ｇ）を９８℃でアルゴン下に４ｌのジオキサン中に溶解し、かつ５時間攪拌した。引き続き２ｌのエタノール中のナトリウムエタノラート（３４０ｇ；５ミリモル）を３時間で滴加した。その後、５５０ｇのＮａＯＨ（１３．７５モル）を添加し、かつさらに９８℃で２時間およびＲＴで一夜攪拌した。該溶液を真空中で２ｌまで濃縮し、３ｌの蒸留水を添加し、かつＲＴに冷却した。ｐＨ値を＞９に調節した後に、１ｌの酢酸エチルで３回抽出した。水相を４ＭのＨＣｌでｐＨ１にし（約４ｌの４ＭのＨＣｌ）、かつ１．２ｌの酢酸エチルで４回抽出した。合した有機相を飽和ＮａＣｌで洗浄し、溶剤を留去し、かつ酢酸エチルで再結晶した。収率１０１１ｇ（３．２モル）６９％。
【００５４】
３．２  ３−ニトロ−（Ｌ）−フェニルアラニン（ラセミ体分割）
Ｎ−アセチル−３−ニトロ−（Ｄ／Ｌ）−フェニルアラニン（１０００ｇ；３．１７モル）を２ｌの水および３ｌの１ＭのＮａＯＨ中に溶解し、約１０ｍｌの４ＭのＨＣｌでｐＨ値を７．２に調節し、かつ３７℃で温度処理した。２８ｇのアシラーゼＩ（アスペルギルス・メレウス）を添加した後、３７℃で６０時間攪拌した。生じる沈殿物（生成物）を濾過した後、該溶液を約１．５ｌの体積まで濃縮し、かつ沈殿物を濾別した。合したフィルターケーキを０．５ｌの水中に懸濁させ、攪拌し、改めて濾過し、かつ真空中で乾燥させた。収率２４５ｇ（３７％）、純度９９％（ＨＰＬＣ）。
【００５５】
３．３  ＴＩＰＰＳ−３−ニトロ−（Ｌ）−フェニルアラニン
３−ニトロ−（Ｌ）−フェニルアラニン（２１０ｇ、１モル）を１．２ｌのジオキサンおよび５００ｍｌの４ＭのＮａＯＨ中に溶解し、かつ５℃に冷却した。ＴＩＰＰＳ−Ｃｌ（３６３ｇ；１．２モル）を１ｌのジオキサン中に溶解し、かつ１時間で滴加した。引き続きさらにＴＩＰＰＳ−ＣｌおよびＮａＯＨを添加し、かつ原料がもはや検出されなくなるまで攪拌した。オレンジ色の溶液を４ＭのＨＣｌでｐＨ５の酸性にし、かつＭＴＢＥで２回抽出した。合した有機溶液をＮａＣｌ溶液で２回抽出し、かつ溶剤を引き続き真空中で留去し、かつトルエンと共に後回転した。７６％の純度（ＨＰＬＣ）で４２７ｇの収率（６８％）。
【００５６】
３．４  ＴＩＰＰＳ−３−ニトロ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド
ＴＩＰＰＳ−３−ニトロ−（Ｌ）−フェニルアラニン（２１０ｇ；０．４４ミリモル；純度７６％）、エチルオキシカルボニルピペラジン（６９．７ｇ；０．４４ミリモル）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１０１ｇ；６６０ミリモル）を６５０ｍｌのＤＭＦ中に溶解し、かつ１０℃に冷却した。２時間で２１６ｍｌのＤＭＦ中のジシクロヘキシルカルボジイミド（１００ｇ；０．４８４ミリモル）の溶液を滴加し、かつ反応溶液をＲＴで一夜攪拌した。溶剤を留去した後、残留物を４３６ｍｌのＭＴＢＥ中に溶解し、沈殿物を濾別し、かつ有機溶液を５％のＫＨＳＯ４、５％のＮａＨＣＯ３および蒸留水でそのつど２回抽出した。溶剤を真空中で留去し、トルエンと共に後回転させ、かつ生成物を真空中で乾燥させた。６９％の純度（ＨＰＬＣ）で褐色の樹脂２７８ｇの収率（７０％）。
【００５７】
３．５  ＴＩＰＰＳ−３−アミノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド
ＴＩＰＰＳ−３−ニトロ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド（１５７ｇ；１７６ミリモル）を８００ｍｌのエタノール中に溶解し、活性炭上のパラジウム１０％の触媒１９．７ｇを添加し、かつ３日間、水素をゆっくり導通させながら水素化した。触媒を濾別した後、溶剤を真空中で留去し、かつ粗生成物をシリカゲルを用いてクロマトグラフィーにより精製した。９５％の純度（ＨＰＬＣ）で２１ｇの収率（３８％）。
【００５８】
３．６  ＴＩＰＰＳ−３−シアノアミド−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド
ＴＩＰＰＳ−３−アミノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド（１４．６ｇ；２４．９ミリモル）、酢酸ナトリウム（無水）（５．１１ｇ、６２．２ミリモル）およびブロモシアン（２．９ｇ；２７．４ミリモル）をエタノール中に溶解し、かつ該溶液をＲＴで１０時間攪拌した。溶剤を留去した後、残留物を酢酸エチル中にとり、かつ該溶液を５％のＫＨＳＯ４、５％のＮａＨＣＯ３および蒸留水で抽出した。溶剤を留去した後、粗生成物をシリカゲルを用いてクロマトグラフィーにより精製した。９２％の純度で１０ｇの収率（６０％）。
【００５９】
３．７  ＴＩＰＰＳ−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニル−ピペラジド（ＷＸ−６８３）
ＴＩＰＰＳ−３−シアナミド−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド（９．３ｇ；１５ミリモル）、塩酸ヒドロキシルアミン（１．１５ｇ；１６．５ミリモル）およびジイソプロピルエチルアミン（３．８７ｇ；３０ミリモル）をエタノール中に溶解し、かつ該溶液をＲＴで一夜攪拌した。溶剤を留去した後、生成物をシリカゲルを用いてクロマトグラフィーにより精製した。９８％の純度（ＨＰＬＣ）で３．８７ｇの収率（３９％）。
【００６０】
例４：ラットにおける腫瘍の拡散、腫瘍の成長および転移に対するｕＰＡ−阻害剤−プロドラッグＷＸ−６７１のインビトロ試験
乳ガンモデル
ドナー動物からのＢＮ４７２乳ガン（Ｋｏｒｔ等、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ  ７２、第７０９〜７１３頁、１９８４）の１０〜２５ｍｍ３の大きさの断片を、ブラウン・ノルウェージアン・ラット(Brown Norwegian Ratten)の生後７〜８週のメスの群（群あたりｎ＝５）の乳腺の脂肪組織の下に移植した。腫瘍の移植の７２時間後に処理を開始し、かつ３０日後に動物を殺すまで毎日繰り返した。対照群（Ａ）は、水中のエタノール５％、Ｄ−マンニトール５％およびＴｗｅｅｎ  ２０  ５％からなる物質不含の物質担体溶液０．７５ｍｌを食道ゾンデを介して経口投与した。処理群（ＢおよびＣ）は、物質担体溶液中のＷＸ−６７１の１ｍｇ／ｋｇ（群Ｂ）または５ｍｇ／ｋｇ（群Ｃ）を食道ゾンデにより経口投与した。比較群Ｄは、５％のＤ−マンニトール中に溶解したＷＸ−ＵＫ１  １ｍｇ／ｋｇを腹腔内注射により投与した。
【００６１】
接種した腫瘍の成長を、長さおよび幅の寸法においてキャリパーにより週に２回測定した。動物を殺した後、治療終点、腫瘍質量、腋窩および腹腔内のリンパ節の質量ならびに肉眼による肺転移の数を測定した。
【００６２】
結果の総括
すべての試験においてＷＸ−６７１を用いた処理により、対照群と比較して、腫瘍の大きさもしくは腫瘍の質量および娘腫瘍の数もしくは質量の著しい減少が達成された。乳ガンモデルにおいてＷＸ−６７１により処理した群では平均的な腫瘍質量は処理の終わりに、対照群と比較して６６％以上（ｐ．ｏ．）低減し、その一方で、阻害剤−比較物質ＷＸ−ＵＫ１のｉ．ｐ．処理によれば約５％の低減が達成されたにすぎなかった。阻害剤−プロドラッグ処理した群における肺病巣の数は４２％以上（ｐ．ｏ．）および腋窩のリンパ節の平均質量は６３％以上（ｐ．ｏ．）低減した（図５）。
【００６３】
阻害剤および付形剤で処理した群の間の体重増加の発達および有機体質量の比較により、記載した条件下での阻害剤の場合によっては生じうる著しい毒性に関する示唆は認められなかった。
【００６４】
例５：ＷＸ−６７１硫酸水素塩の製造および特性決定
製造
遊離塩基ＷＸ−６７１  ６．０ｇをアセトン５０ｍｌ中に溶解した。１．２５モル当量のＨ２ＳＯ４を希釈しないで添加した。混合物を室温で２時間攪拌した。硫酸水素塩が該溶液から結晶化した。溶剤を除去した後に残留した白色の固体を真空下で乾燥させた。
【００６５】
特性決定
２５℃での硫酸水素塩の水溶性は１１７２．５ｍｇ／ｌであった（塩基として計算）。純度は９８％以上であった（ＨＰＬＣによる面積％）。
【００６６】
水／アセトン（８０／２０）２５ｍｌ中で硫酸水素塩５ｇを７日間攪拌し、濾過し、かつ室温で６０時間乾燥させた。測定される化学量論比は、該塩が解離に対して安定していたことを示した。
【００６７】
攪拌後に有機不純物の含有率の増加はみられなかった（ＨＰＬＣにより測定）。
【００６８】
９０℃で１週間貯蔵した後に固体物質として有機不純物＜１．５％が判明した（ＨＰＬＣにより測定）。
【００６９】
上記の結果に基づいて硫酸水素塩は医薬調剤を製造するために好適である。
【図面の簡単な説明】
【００７０】
【図１】本発明による化合物の合成を示す図
【図２】本発明による化合物の合成を示す図
【図３】本発明による化合物の合成を示す図
【図４】本発明による化合物の合成を示す図
【図５】阻害剤−プロドラッグ処理群と対照群との腫瘍質量、肺病巣および腋窩リンパ節質量を示すグラフの図
【図６】本発明による化合物の合成を示す図
【図１】
2007513062.tif 000012
【図２】
2007513062.tif 000013
【図３】
2007513062.tif 000014
【図４】
2007513062.tif 000015
【図５】
2007513062.tif 000016
【図６】
2007513062.tif 000017
【手続補正書】
【提出日】平成19年3月13日(2007.3.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式Ｉおよび／またはＩＩ
【化１】
2007513062.tif 000018
［式中、
Ｅは、
【化２】
2007513062.tif 000019
からの基を表し、
Ｂは、−ＳＯ２−または−ＣＯ−を表し、
Ｘは、−ＮＲ１または−ＣＨＲ１を表し、
Ｚは、−Ｒ４、−ＯＲ４または−ＮＨ−Ｒ４を表し、
Ｙは、−ＯＲ２または−ＮＨＲ２を表し、
Ｒ１は、そのつど無関係に−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６−アルケニルまたは−Ｃ２〜Ｃ６−アルキニル（置換されていないか、または置換された）を表し、
Ｒ２は、−Ｈ、−ＯＲ１、−ＣＯＲ１、−ＣＯＮ（Ｒ１）２または−ＣＯＯＲ１を表し、
Ｒ３は、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６−アルケニルまたは−Ｃ２〜Ｃ６−アルキニル（置換されていないか、または置換された）を表すか、あるいは−ＣＯＲ６または−ＣＯＯＲ６を表すか、あるいはオリゴアルキレンオキシ基またはポリアルキレンオキシ基を表し、
Ｒ４は、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６−アルケニルまたは−Ｃ２〜Ｃ６−アルキル（置換されていないか、または置換された）を表すか、または環式基を表し、
Ｒ５は、−ＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）２，−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６−アルケニルまたは−Ｃ２〜Ｃ６−アルキニル（置換されていないか、または置換された）を表し、かつ
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６−アルケニルまたは−Ｃ２〜Ｃ６−アルキニル（置換されていないか、または置換されている）を表すか、または環式基を表し、その際、それぞれの環式基は−Ｃ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｃ１〜Ｃ３−アルコキシ、ハロゲン、−ＯＲ６、＝Ｏ、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＣＯＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）２、−ＮＲ６ＣＯＲ６、−ＮＲ６ＣＯＮ（Ｒ６）２および−ＯＣＯＲ６から選択される１または複数の置換基を有していてもよく、
かつその際、それぞれのアルキル、アルケニルおよびアルキニルは直鎖状もしくは分枝鎖状であってもよく、かつハロゲン、−ＯＲ６、−ＯＣＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）２、−ＮＲ６ＣＯＲ６、−ＮＲ６ＣＯＮ（Ｒ６）２、ＣＯＯＲ６または環式基から選択される１または複数の置換基を有していてもよい］の化合物または該化合物の塩を１または複数ならびに場合により製薬学的に通例の担体、希釈剤および／または助剤を含有する、ウロキナーゼおよび／またはウロキナーゼ受容体の病的な過剰発現と関連している病気を治療するための医薬組成物。
【請求項２】
式中でＲ４が
【化３】
2007513062.tif 000020
を表す、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項３】
Ｒ４が置換された、または置換されていないＣ１〜Ｃ３−アルキル−アリール−基を表し、特に場合によりメタ位またはパラ位でハロゲンおよび／または−ＮＯ２により置換されていてもよいベンジル基を表し、その際、ハロゲンはＦ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択される、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項４】
化合物が、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド（ＷＸ−６７１）、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｄ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｄ，Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド（ＷＸ−６８３）、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ，Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エチルアミノカルボニルピペラジド（ＷＸ−６８５）、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ）−フェニルアラニン−４−エチルアミノカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ，Ｌ）−フェニルアラニン−４−エチルアミノカルボニルピペラジド、
ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド（ＷＸ−６７８）、
４−クロロ−ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド、
４−クロロ−ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド、
ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ｇｌｙ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド、
４−クロロ−ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ａｌａ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド
またはこれらの生理学的に認容性の塩
から選択されている、請求項１から３までのいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項５】
経口投与可能な薬剤であることを特徴とする、請求項１から４までのいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項６】
化合物が、Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｌ）−フェニル−アラニン−４−エトキシカルボニルピペラジニウム−硫酸水素塩（ＷＸ−６７１・ＨＳＯ４）である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項７】
腫瘍の治療または予防のための請求項１から６までのいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項８】
転移形成の治療または予防あるいは原発腫瘍の治療のための請求項７記載の医薬組成物。
【請求項９】
式ＩおよびＩＩ
【化４】
2007513062.tif 000021
［式中、Ｅ、Ｂ、Ｘ、Ｚ、Ｙ、Ｒ５およびＲ６は請求項１に定義されているとおりである］の化合物。
【請求項１０】
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド（ＷＸ−６７１）、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｄ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｄ，Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド（ＷＸ−６８３）、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ，Ｌ）−フェニルアラニン−４−エトキシカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｌ）−フェニルアラニン−４−エチルアミノカルボニルピペラジド（ＷＸ−６８５）、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ）−フェニルアラニン−４−エチルアミノカルボニルピペラジド、
Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシグアニジノ−（Ｄ，Ｌ）−フェニルアラニン−４−エチルアミノカルボニルピペラジド、
ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド（ＷＸ−６７８）、
４−クロロ−ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド、
４−クロロ−ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド、
ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ｇｌｙ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド、
４−クロロ−ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ａｌａ−（４−ヒドロキシグアニジノベンジル）アミド
またはこれらの塩から選択される、請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
化合物が、Ｎ−α−（２，４，６−トリイソプロピルフェニルスルホニル）−３−ヒドロキシアミジノ−（Ｌ）−フェニル−アラニン−４−エトキシカルボニルピペラジニウム−硫酸水素塩（ＷＸ−６７１・ＨＳＯ４）である、請求項９または１０記載の化合物。
【国際調査報告】
2007513062.tif 000022
2007513062.tif 000023
2007513062.tif 000024
2007513062.tif 000025
2007513062.tif 000026
2007513062.tif 000027
2007513062.tif 000028
2007513062.tif 000029
2007513062.tif 000030
2007513062.tif 000031
2007513062.tif 000032