(57)【要約】  本出願は、ＰＮＡ（ペプチド核酸）オリゴマー製造用の一般式（Ｉ）のモノマーに関し、また、あらかじめ規定された配列のＰＮＡオリゴマーおよびランダムな配列のＰＮＡオリゴマーの両者についての合成方法を提供する。【選択図】  なし
2007500184.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式Ｉを有する化合物：
【化１】
2007500184.tif 000038
式中
Ｅは硫黄または酸素であり；Ｊは窒素またはＣ−Ｒ’であり；
Ｒ１、Ｒ’は独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシまたは以下の一般式の１つを有する官能基であり：
【化２】
2007500184.tif 000039
式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５は、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシ、フェニル、およびハロゲン化フェニルから独立して選択され；
Ｒ２は、Ｈ、または天然または非天然α−アミノ酸の保護または非保護の側鎖であり；ならびに
Ｂは天然または非天然の核酸塩基であり、この場合、該核酸塩基が環外のアミノ官能基を有するならば、酸に不安定であるが、チオールの存在下で弱〜中塩基に安定な保護基によって該官能基を保護する。
【請求項２】
Ｅが硫黄であり、Ｊが窒素である、請求項１の化合物。
【請求項３】
Ｅが硫黄であり、Ｊが窒素であり；Ｒ１がアルキルまたは以下の一般式を有するアリールである、請求項１の化合物：
【化３】
2007500184.tif 000040
式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５は、Ｈ、ハロゲン、およびニトロから独立して選択される。
【請求項４】
Ｅが硫黄であり、ＪがＣＲ’であり；ならびに
Ｒ１、Ｒ’が独立して、Ｈ、アルキル、フェニルまたはベンゾイルである、
請求項１の化合物。
【請求項５】
Ｅが酸素であり、ＪがＣＨである、請求項１の化合物。
【請求項６】
Ｒ２が、Ｈ、または天然α−アミノ酸の保護または非保護の側鎖である、請求項１の化合物。
【請求項７】
Ｂが、チミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）、アデニン（Ａ）、またはグアニン（Ｇ）である、請求項１の化合物。
【請求項８】
Ｂの環外のアミノ官能基に関する保護基が以下の一般式を有する、請求項１の化合物：
【化４】
2007500184.tif 000041
式中、Ｒ４は以下の一般式を有し：
【化５】
2007500184.tif 000042
式中、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、Ｙ６、Ｙ７、Ｙ８、Ｙ９、Ｙ１０は、水素、ハロゲン、アルキル、およびアルコキシから独立して選択される。
【請求項９】
Ｂの環外のアミノ官能基に関する保護基が以下の一般式を有する、請求項１の化合物：
【化６】
2007500184.tif 000043
式中、Ｒ４は以下の一般式を有し：
【化７】
2007500184.tif 000044
式中、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５は、水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、および隣接する２残基のメチレンジオキシから独立して選択される。
【請求項１０】
Ｂの環外のアミノ官能基に関する保護基が、ベンジルオキシカルボニル、ベンズヒドリルオキシカルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニルまたはピペロニルオキシカルボニルである、請求項１の化合物。
【請求項１１】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５において、該ハロゲンがＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり；該アルキルがＣ１−Ｃ４アルキルであり、該アルコキシがＣ１−Ｃ４アルコキシであり；該ハロゲン化アルキルがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−アルキルであり；該ハロゲン化アルキルがハロゲン化Ｃ１−Ｃ４アルキルであり；該ハロゲン化アルコキシがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−アルコキシであり；該ハロゲン化アルコキシがＣ１−Ｃ４アルコキシであり；ならびに、該ハロゲン化フェニルがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−フェニルである、請求項１の化合物。
【請求項１２】
請求項１の化合物の製造方法であって、ペプチド合成において通常使用されるカップリング試薬または混合無水物の存在下で式ＶＩの化合物を環化する段階を含み、この場合、式ＶＩは以下に表される通りである、製造方法：
【化８】
2007500184.tif 000045
式中
Ｅは硫黄または酸素であり；Ｊは窒素またはＣ−Ｒ’であり；
Ｒ１、Ｒ’は独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシ、フェニル、ハロゲン化フェニル、ベンゾイル、アルキルベンゾイル、アルコキシベンゾイルまたはハロゲン化ベンゾイルであり：
Ｒ２は、Ｈ、または天然または非天然α−アミノ酸の保護または非保護の側鎖であり；ならびに
Ｂは天然または非天然の核酸塩基であり、この場合、該核酸塩基が環外のアミノ官能基を有するならば、酸に不安定であるが、チオールの存在下で弱〜中塩基に安定な保護基によって該官能基を保護する。
【請求項１３】
請求項１の化合物の製造方法であって、非求核性有機塩基およびペプチド合成において通常使用されるカップリング試薬の存在下で式ＩＶの化合物を核酸塩基酢酸部分とカップリングさせる反応段階を含み、この場合、該式ＩＶは以下に表される通りである、製造方法：
【化９】
2007500184.tif 000046
式中
Ｅは硫黄または酸素であり；Ｊは窒素またはＣ−Ｒ’であり；
Ｒ１、Ｒ’は独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシまたは以下の一般式の１つを有する官能基であり：
【化１０】
2007500184.tif 000047
式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５は、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシ、フェニル、およびハロゲン化フェニルから独立して選択され；ならびに、Ｒ２は、Ｈ、または天然または非天然α−アミノ酸の保護または非保護の側鎖であり、
この場合、該核酸塩基酢酸部分は以下に表される通りであり：
【化１１】
2007500184.tif 000048
式中、Ｂは天然または非天然の核酸塩基であり、この場合、該核酸塩基が環外のアミノ官能基を有するならば、酸に不安定であるが、チオールの存在下で弱〜中塩基に安定な保護基によって該官能基を保護する。
【請求項１４】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５において、該ハロゲンがＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり；該アルキルがＣ１−Ｃ４アルキルであり、該アルコキシがＣ１−Ｃ４アルコキシであり；該ハロゲン化アルキルがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−アルキルであり；該ハロゲン化アルキルがハロゲン化Ｃ１−Ｃ４アルキルであり；該ハロゲン化アルコキシがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−アルコキシであり；該ハロゲン化アルコキシがＣ１−Ｃ４アルコキシであり；ならびに、該ハロゲン化フェニルがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−フェニルである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
以下の式Ｖを有する化合物：
【化１２】
2007500184.tif 000049
式中
Ｅは硫黄または酸素であり；Ｊは窒素またはＣ−Ｒ’であり；
Ｒ１、Ｒ’は独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシまたは以下の一般式の１つを有する官能基であり：
【化１３】
2007500184.tif 000050
式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５は、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシ、フェニル、およびハロゲン化フェニルから独立して選択され；
Ｒ２は、Ｈ、または天然または非天然α−アミノ酸の保護または非保護の側鎖であり；
Ｒ３は、Ｈ、アルキル、またはアリールであり；ならびに
Ｂは天然または非天然の核酸塩基であり、この場合、該核酸塩基が環外のアミノ官能基を有するならば、酸に不安定であるが、チオールの存在下で弱〜中塩基に安定な保護基によって該官能基を保護する。
【請求項１６】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５において、該ハロゲンがＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり；該アルキルがＣ１−Ｃ４アルキルであり、該アルコキシがＣ１−Ｃ４アルコキシであり；該ハロゲン化アルキルがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−アルキルであり；該ハロゲン化アルキルがハロゲン化Ｃ１−Ｃ４アルキルであり；該ハロゲン化アルコキシがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−アルコキシであり；該ハロゲン化アルコキシがＣ１−Ｃ４アルコキシであり；ならびに、該ハロゲン化フェニルがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−フェニルである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ３がメチルまたはエチルである、請求項１５の化合物。
【請求項１８】
Ｂの環外のアミノ官能基に関する保護基が、ベンジルオキシカルボニル、ベンズヒドリルオキシカルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、またはピペロニルオキシカルボニルである、請求項１５の化合物。
【請求項１９】
請求項１５の化合物の製造方法であって、非求核性有機塩基およびペプチド合成において通常使用されるカップリング試薬の存在下で式ＩＩの化合物を核酸塩基酢酸部分とカップリングさせる反応段階を含み、この場合、式ＩＩは以下に表される通りである、製造方法：
【化１４】
2007500184.tif 000051
式中
Ｅは硫黄または酸素であり；Ｊは窒素またはＣ−Ｒ’であり；
Ｒ１、Ｒ’は独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシまたは以下の一般式の１つを有する官能基であり：
【化１５】
2007500184.tif 000052
式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５は、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシ、フェニル、およびハロゲン化フェニルから独立して選択され；
Ｒ２は、Ｈ、または天然または非天然α−アミノ酸の保護または非保護の側鎖であり；ならびに
Ｒ３は、Ｈ、アルキル、またはアリールであり、
この場合、該核酸塩基酢酸部分は以下に表される通りであり：
【化１６】
2007500184.tif 000053
式中、Ｂは天然または非天然の核酸塩基であり、この場合、該核酸塩基が環外のアミノ官能基を有するならば、酸に不安定であるが、チオールの存在下で弱〜中塩基に安定な保護基によって該官能基を保護する。
【請求項２０】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５において、該ハロゲンがＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり；該アルキルがＣ１−Ｃ４アルキルであり、該アルコキシがＣ１−Ｃ４アルコキシであり；該ハロゲン化アルキルがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−アルキルであり；該ハロゲン化アルキルがハロゲン化Ｃ１−Ｃ４アルキルであり；該ハロゲン化アルコキシがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−アルコキシであり；該ハロゲン化アルコキシがＣ１−Ｃ４アルコキシであり；ならびに、該ハロゲン化フェニルがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−フェニルである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
以下の式ＩＩを有する化合物：
【化１７】
2007500184.tif 000054
式中
Ｅは硫黄または酸素であり；Ｊは窒素またはＣ−Ｒ’であり；
Ｒ１、Ｒ’は独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシまたは以下の一般式の１つを有する官能基であり：
【化１８】
2007500184.tif 000055
式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５は、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシ、フェニル、およびハロゲン化フェニルから独立して選択され；
Ｒ２は、Ｈ、または天然または非天然α−アミノ酸の保護または非保護の側鎖であり；ならびに
Ｒ３は、Ｈ、アルキル、またはアリールである。
【請求項２２】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５において、該ハロゲンがＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり；該アルキルがＣ１−Ｃ４アルキルであり、該アルコキシがＣ１−Ｃ４アルコキシであり；該ハロゲン化アルキルがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−アルキルであり；該ハロゲン化アルキルがハロゲン化Ｃ１−Ｃ４アルキルであり；該ハロゲン化アルコキシがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−アルコキシであり；該ハロゲン化アルコキシがＣ１−Ｃ４アルコキシであり；ならびに、該ハロゲン化フェニルがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−フェニルである、請求項２１に記載の化合物。
【請求項２３】
請求項２１の化合物の製造方法であって、非求核性有機塩基の存在下でＮ−（２−アミノエチル）−グリシン誘導体をスルホニルクロライド誘導体とカップリングさせる反応段階を含み、この場合、Ｎ−（２−アミノエチル）−グリシン誘導体は以下に表される通りである、製造方法：
【化１９】
2007500184.tif 000056
式中
Ｒ２は、Ｈ、または天然または非天然α−アミノ酸の保護または非保護の側鎖であり；ならびに
Ｒ３は、Ｈ、アルキル、またはアリールであり、
この場合、スルホニルクロライド誘導体は以下に表される通りであり：
【化２０】
2007500184.tif 000057
式中
Ｅは硫黄または酸素であり；Ｊは窒素またはＣ−Ｒ’であり；ならびに
Ｒ１、Ｒ’は独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシまたは以下の一般式の１つを有する官能基であり：
【化２１】
2007500184.tif 000058
式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５は、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシ、フェニル、およびハロゲン化フェニルから独立して選択される。
【請求項２４】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５において、該ハロゲンがＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり；該アルキルがＣ１−Ｃ４アルキルであり、該アルコキシがＣ１−Ｃ４アルコキシであり；該ハロゲン化アルキルがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−アルキルであり；該ハロゲン化アルキルがハロゲン化Ｃ１−Ｃ４アルキルであり；該ハロゲン化アルコキシがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−アルコキシであり；該ハロゲン化アルコキシがＣ１−Ｃ４アルコキシであり；ならびに、該ハロゲン化フェニルがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−フェニルである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
以下の式ＩＶを有する化合物およびその遊離酸型：
【化２２】
2007500184.tif 000059
式中
Ｅは硫黄または酸素であり；Ｊは窒素またはＣ−Ｒ’であり；
Ｒ１、Ｒ’は独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシまたは以下の一般式の１つを有する官能基であり：
【化２３】
2007500184.tif 000060
式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５は、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシ、フェニル、およびハロゲン化フェニルから独立して選択され；ならびに
Ｒ２は、Ｈ、または天然または非天然α−アミノ酸の保護または非保護の側鎖であり；ならびにＨＸは有機または無機の酸である。
【請求項２６】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５において、該ハロゲンがＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり；該アルキルがＣ１−Ｃ４アルキルであり、該アルコキシがＣ１−Ｃ４アルコキシであり；該ハロゲン化アルキルがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−アルキルであり；該ハロゲン化アルキルがハロゲン化Ｃ１−Ｃ４アルキルであり；該ハロゲン化アルコキシがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−アルコキシであり；該ハロゲン化アルコキシがＣ１−Ｃ４アルコキシであり；ならびに、該ハロゲン化フェニルがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−フェニルである、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２７】
ＨＸがＨＣｌまたはＴＦＡである、請求項２５の化合物。
【請求項２８】
請求項２５の化合物の製造方法であって、ペプチド合成において通常使用されるカップリング試薬または混合無水物の存在下で式ＩＩＩの化合物を環化する段階、次いで酸中でｔ−Ｂｏｃを脱保護する段階を含み、この場合、該式ＩＩＩは以下に表される通りである、製造方法：
【化２４】
2007500184.tif 000061
式中
Ｅは硫黄または酸素であり；Ｊは窒素またはＣ−Ｒ’であり；
Ｒ１、Ｒ’は独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシまたは以下の一般式の１つを有する官能基であり：
【化２５】
2007500184.tif 000062
式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５は、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルコキシ、フェニル、およびハロゲン化フェニルから独立して選択され；ならびに、Ｒ２は、Ｈ、または天然または非天然α−アミノ酸の保護または非保護の側鎖である。
【請求項２９】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５において、該ハロゲンがＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり；該アルキルがＣ１−Ｃ４アルキルであり、該アルコキシがＣ１−Ｃ４アルコキシであり；該ハロゲン化アルキルがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−アルキルであり；該ハロゲン化アルキルがハロゲン化Ｃ１−Ｃ４アルキルであり；該ハロゲン化アルコキシがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−アルコキシであり；該ハロゲン化アルコキシがＣ１−Ｃ４アルコキシであり；ならびに、該ハロゲン化フェニルがＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−またはＩ−フェニルである、請求項２８の方法。
【請求項３０】
ＰＮＡオリゴマーの製造方法であって、請求項１の化合物を互いに連結する段階を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の背景
１．発明の属する分野：
本発明はＰＮＡオリゴマーの製造に適したモノマーに関する。また本発明は該モノマーの前駆物質に関し、ならびに該前駆物質からＰＮＡモノマーを作成する方法に関する。さらに、本発明はＰＮＡモノマーを使用してＰＮＡオリゴマーを作成する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
２．当技術の一般的背景および水準：
この２０年間、リン酸基、リボース環、または核酸塩基の修飾によってオリゴヌクレオチドの特性を最適化する試みの結果、ＤＮＡ診断学、アンチセンスおよびアンチジーン（antigene）形式での薬物療法学（治療学）、ならびに分子生物学およびバイオテクノロジーの基礎研究の分野で適用するための新規オリゴヌクレオチド誘導体が多数発見されている（U. Englisch and D. H. Gauss, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1991, 30, 613-629; A. D. Mesmaeker et al. Curr. Opinion Struct. Biol. 1995, 5, 343-355; P. E. Nielsen, Curr. Opin. Biotech., 2001, 12, 16-20.）。最も注目すべき発見は、デンマークのグループNielsen、Egholm、Buchardt、およびBergによって報告されたペプチド核酸の発見である（P. E. Nielsen et al., Science, 1991, 254, 1497-1500）。ＰＮＡは、Ｎ−（２−アミノエチル）グリシンポリアミドがリン酸基−リボース環主鎖に取って代わり、ならびにメチレン−カルボニルリンカーが天然ならびに非天然の核酸塩基をＮ−（２−アミノエチル）グリシンの中心のアミンに連結しているＤＮＡアナログである。天然構造に対する抜本的な変化にもかかわらず、ＰＮＡはワトソン−クリック塩基対合則にしたがってＤＮＡならびにＲＮＡに配列特異的に結合可能である。ＰＮＡは、その対応する天然の核酸より高い親和性で相補的核酸に結合する。これは主鎖上の負電荷を欠き、結果的に電荷−電荷反発が低下していること、および好都合な幾何学的要因に部分的に起因する（S. K. Kim et al., J. Am. Chem. Soc., 1993, 115, 6477-6481; B. Hyrup et al., J. Am. Chem. Soc., 1994, 116, 7964-7970; M. Egholm et al., Nature, 1993, 365, 566-568; K. L. Dueholm et al., New J. Chem., 1997, 21, 19-31; P. Wittung et al., J. Am. Chem. Soc., 1996, 118, 7049-7054; M. Leijon et al., Biochemistry, 1994, 9820-9825.）。また、結果として生じるＰＮＡ／ＤＮＡ二重鎖の熱安定性はハイブリダイゼーション溶液の塩濃度とは無関係であることが実証された（H. Orum et al., BioTechniques, 1995, 19, 472-480; S. Tomac et al., J. Am. Chem. Soc., 1996, 118, 5544-5552.）。ならびに、ＰＮＡは平行または逆平行様式で結合することができ、逆平行様式が好ましい（E. Uhlman et al., Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1996, 35, 2632-2635.）。
【０００３】
ＰＮＡ／ＤＮＡ二重鎖中のミスマッチはＤＮＡ／ＤＮＡ二重鎖中のミスマッチよりずっと不安定である。一塩基のミスマッチの結果、ＰＮＡ／ＤＮＡおよびＤＮＡ／ＤＮＡのＴｍはそれぞれ１５℃および１１℃低下する。ホモピリミジンＰＮＡオリゴマーおよび高ピリミジン／プリン比を有するＰＮＡオリゴマーは相補ＤＮＡに結合して、異常に安定なＰＮＡ２／ＤＮＡ三重らせん体を形成することができる（P. E. Nielsen et al., Science, 1991, 254, 1497-1500; L. Betts et al., Science, 1995, 270, 1838-1841; H. Knudsen et al., Nucleic Acids Res., 1996, 24, 494-500.）。ＰＮＡはアミド結合および核酸塩基を有するが、ＰＮＡはヌクレアーゼおよびプロテアーゼの両者に高い耐性を示す。強酸で処理し、アルカリ性水酸化物中で加水分解すると脱プリンするＤＮＡとは対照的に、ＰＮＡは完全に酸安定性であり、弱塩基に対して十分に安定である。
【０００４】
一般に、ＰＮＡオリゴマーは、確立された固相ペプチド合成プロトコルを使用して合成される。モノマーに関する新規ストラテジーが複数のグループによって独立して開発され、ＰＮＡオリゴマー合成が最適化されている。ＰＮＡモノマーの製造は、適切に保護されたＮ−（２−アミノエチル）グリシンおよび適切に保護された核酸塩基酢酸誘導体の合成、その後の両者のカップリングに分けることができる。
【０００５】
ＰＮＡオリゴマー合成に関して報告された第一の合成ストラテジーは、ｔ−Ｂｏｃ／ベンジルオキシカルボニル保護基ストラテジーを使用するメリフィールド固相合成であった。このストラテジーでは、ｔ−Ｂｏｃで保護された主鎖アミノ基および核酸塩基の環外のアミノ基をベンジルオキシカルボニルで保護する（P. E. Nielsen et al., Science, 1991, 254, 1497-1500; M. Egholm et al., J. Am. Chem. Soc., 1992, 114, 9677-9678; M. Egholm et al., J. Am. Chem. Soc., 1992, 114, 1895-1897; M. Egholm et al., J. Chem. Soc. Chem. Commun., 1993, 800-801; K.L. Dueholm et al., J. Org. Chem., 1994, 59, 5767-5773；ＷＯ ９２／２０７０２）。ｔ−Ｂｏｃ／ベンジルオキシカルボニルで保護されたＰＮＡモノマーは現在市販されているが、使用するのに不都合である。その理由は、ｔ−Ｂｏｃを脱保護するためにＴＦＡで反復処理することが必要であり、また樹脂から切断し、核酸塩基の環外のアミンからベンジルオキシカルボニル基を脱保護するのに過酷なＨＦまたはトリフルオロメタンスルホン酸処理が必要であるからである。ゆえに、該ストラテジーは多数のタイプの修飾型ＰＮＡオリゴマー、例えばＰＮＡ−ＤＮＡキメラの合成に適合しない。さらにまた、危険な酸、例えばＨＦまたはトリフルオロメタンスルホン酸の使用は、作業者に関する安全上の懸念および自動化設備およびラインに対する腐食作用を考慮して商業的に容認されない。さらに、ｔ−Ｂｏｃ／ベンジルオキシカルボニル保護ストラテジーは差異に基づくストラテジーであり、これは保護基の系として規定され、この場合、該保護基は、同一タイプの試薬または条件によって除去されるが、他の基とは異なる相対的割合の反応に依存して、ある基が除去される。例えば、ｔ−Ｂｏｃ／ベンジルオキシカルボニル保護ストラテジーでは、両保護基は酸不安定性であるが、ベンジルオキシカルボニル基の効率的除去に関して、より強い酸が必要とされる。酸を使用して、より酸不安定性のｔ−Ｂｏｃ基を完全に除去する場合、一定の割合のベンジルオキシカルボニル基も同時に除去される可能性がある。都合の悪いことに、オリゴマー合成の各合成サイクル中には主鎖のアミノ基からｔ−Ｂｏｃ基を除去しなければならない。そしてＴＦＡは一定の割合の側鎖ベンジルオキシカルボニル基を時期尚早に脱保護するほど十分に強く、それによりオリゴマーが分岐し、所望の生成物の総収率が減少する可能性が導入される。
【０００６】
ＤＮＡオリゴマー合成と両立するであろうＰＮＡオリゴマー合成用のより穏やかな脱保護法を見出す別の取組みでは、複数の研究グループがＭｍｔ／アシルで保護されたＰＮＡモノマーを開発している。この場合、Ｍｍｔで保護された主鎖アミノ基および核酸塩基の環外のアミノ基をアシル基、例えばシトシンおよびアデニン用のベンゾイル、アニソイル、およびｔ−ブチルベンゾイル、またはグアニン用のイソブチリル、アセチルで保護する（D. W. Will et al., Tetrahedron, 1995, 51, 12069-12082; P. J. Finn et al., Nucleic Acid Research, 1996, 24, 3357-3363; D. A. Stetsenko et al., Tetrahedron Lett. 1996, 3571-3574; G.. Breipohl et al., Tetrahedron, 1997, 14671-14686.）。
【０００７】
また、Ｆｍｏｃ／ベンズヒドリルオキシカルボニルで保護された別のＰＮＡモノマーが市販されている。このモノマーでは、Ｆｍｏｃで保護された主鎖アミノ基および核酸塩基の環外のアミノ基がベンズヒドリルオキシカルボニルで保護されている（J. M. Coull, et al., US 6,133,444）。しかし、Ｆｍｏｃ／ベンズヒドリルオキシカルボニルストラテジーはいくつかの欠点を有する。例えばＦｍｏｃ脱保護工程中の副反応および溶液中のモノマーの不安定性である。最も重大な副反応は、Ｆｍｏｃ脱保護条件下で核酸塩基アセチル基がアミノエチルグリシン主鎖の第２級（secondary）アミノ官能基から遊離Ｎ末端アミノ官能基に転位する反応である（L.Christensen et al., J. Pept. Sci. 1995, 1, 175-183）。オリゴマー合成中の各サイクルにおけるＮ−アセチル転移反応により、副産物の蓄積が生じる。この副産物は類似の極性および同一の分子量のせいで分離が困難である。またＦｍｏｃ保護基は微量アミンの存在下で非常に不安定である。ゆえに、該ＰＮＡモノマー用の溶媒の選択は慎重にすべきであろう。一般に、高品質のＮ−メチルピロリドンが推奨される。これにより、ＰＮＡオリゴマーの合成には非常に高いコストが必要とされる。
【０００８】
また、Ｆｍｏｃ／ベンジルオキシカルボニル（S. A. Thomson et al., Tetrahedron, 1995, 6179-6194.）およびＦｍｏｃ／Ｍｍｔ（G.. Breipohl et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1996, 6, 665-670.）で保護されたモノマーを使用するＰＮＡオリゴマーの合成が報告されている。しかし、これらのすべての方法は、モノマーの溶解度および製造、過酷な反応条件、およびモノマー合成および／またはＰＮＡオリゴマー合成中の副反応に関して重大な欠点を有する。
【０００９】
新規モノマーを見出す別の取組みにおいて、ISISおよびBioceptによって環状モノマーが報告された。ISISによって開発された第一のストラテジーでは、保護された主鎖をモルホリノンで置換する（米国特許第５，５３９，０８３号）が、オリゴマー合成中の伸長段階ごとに、カップリング反応によって生じるヒドロキシ官能基をアミン官能基に変換すべきであろう点において該ストラテジーは重大な欠点を有する。代替法では、保護アミノエチルグリシン部分がＮ−ｔ−Ｂｏｃ−ピペラジノンによって置換される（ＷＯ ００／０２８９９）。しかし、該ストラテジーもオリゴマー形成におけるモノマー反応性および上記直線状ｔ−Ｂｏｃストラテジーにおいて認められる同じ問題に関していくつかの欠点を有する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
最近の進歩にもかかわらず、収率を増加させ、合成コストを低下させ、自動および並行した合成に適している新規モノマーの必要性が依然として存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
発明の要旨
本発明は、ＰＮＡオリゴマー合成中の効率増加、高収率、および利便性のための新規モノマーを提供する。別の目的は、装置、例えばＰＮＡオリゴマー合成用の自動シンセサイザーに好都合に適用することができるＰＮＡモノマーを提供することである。本発明の新規モノマーは以下の一般式Ｉを有する化合物である：
【化２６】
2007500184.tif 000003
式中
Ｅは硫黄または酸素であってよく、
Ｊは窒素またはＣ−Ｒ’であってよく
Ｒ１、Ｒ’は独立して、Ｈ、ハロゲン、例えばＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ、ＣＦ３、アルキル、好ましくはＣ１−Ｃ４アルキル、または以下の一般式を有するアリールであってよく：
【化２７】
2007500184.tif 000004
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５は独立して、Ｈ、ハロゲン、例えばＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ、ＣＦ３、アルキル、好ましくはＣ１−Ｃ４アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、好ましくはＣ１−Ｃ４アルコキシ、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩ）化アルキル、好ましくはハロゲン化Ｃ１−Ｃ４アルキル、またはハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩ）化アルコキシ、好ましくはハロゲン化Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、フェニル、またはハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩ）化フェニルであってよい。
【００１２】
別の実施態様では、Ｒ１、Ｒ’は以下の一般式で示される基であってよい：
【化２８】
2007500184.tif 000005
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、およびＡ５は上に規定される通りである。
【００１３】
Ｒ２はＨまたは、天然または非天然α−アミノ酸の保護または非保護の側鎖であってよく、ならびにＢは天然または非天然の核酸塩基であってよく、この場合、該核酸塩基が環外のアミノ官能基を有すれば、該官能基は、酸に対して不安定であるがチオールの存在下で弱〜中塩基に対して安定な保護基によって保護される。別の実施態様では、Ｂはチミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）、アデニン（Ａ）、またはグアニン（Ｇ）であってよい。
【００１４】
さらに特に、Ｂの環外のアミノ官能基に関する保護基は以下の一般式を有する：
【化２９】
2007500184.tif 000006
【００１５】
Ｒ４によって表される基は以下の一般式を有してよい：
【化３０】
2007500184.tif 000007
【００１６】
Ｙ１−Ｙ１０によって表される残基は、水素、ハロゲン、例えばＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、アルキル、好ましくはメチル、エチル、ｔ−ブチル、およびアルコキシ、例えばメトキシ、エトキシ、およびｔ−ブチルオキシから独立して選択される。
【００１７】
別の実施態様では、Ｒ４は以下の一般式を有してよい：
【化３１】
2007500184.tif 000008
【００１８】
Ｚ１−Ｚ５によって表される残基は、水素、ハロゲン、例えばＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、アルキル、好ましくはメチル、エチル、ｔ−ブチル、およびアルコキシ、例えばメトキシ、エトキシ、およびｔ−ブチルオキシ、および隣接する２残基のメチレンジオキシから独立して選択される。
【００１９】
さらに本発明は一般式Ｖの化合物から一般式Ｉの化合物を製造する方法を提供する：
【化３２】
2007500184.tif 000009
式中
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２およびＢは上に規定される通りである。
【００２０】
Ｂの該核酸塩基が環外のアミノ官能基を有する場合、Ｂの保護基もまた上記の通りであり、ならびに
Ｒ３は、Ｈ、アルキル、好ましくは（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（例えばメチル、エチル、およびｔ−ブチル）、またはアリールであってよい。
【００２１】
別の実施態様では、本発明は一般式Ｖの化合物およびその一般式ＩＩの化合物からの製造方法を提供する：
【化３３】
2007500184.tif 000010
式中
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は上に規定される通りである。
【００２２】
また、本発明は式ＩＩの化合物およびその製造方法を提供する。
【００２３】
別の実施態様では、本発明は、式Ｖの化合物を作成する方法であって、非求核性有機塩基およびカップリング試薬の存在下で式ＩＩの化合物を核酸塩基酢酸部分とカップリングさせる反応を含む方法を対象とする。該カップリング試薬はペプチド合成において通常使用されるものである。
【００２４】
さらに本発明は一般式ＩＶの化合物から式Ｉの化合物を製造する方法を提供する：
【化３４】
2007500184.tif 000011
式中
Ｅ、Ｊ、Ｒ１およびＲ２は上に規定される通りであり、ならびに
ＨＸは有機または無機の酸である。
【００２５】
また本発明は一般式ＩＶの化合物およびその遊離酸型、およびその製造方法を提供する。
【００２６】
さらに本発明は一般式ＩＩの化合物から一般式ＩＶの化合物を製造する方法を提供する。
【００２７】
また本発明は、式Ｉの化合物を作成する方法であって、非求核性有機塩基およびカップリング試薬の存在下で式ＩＶの化合物を核酸塩基酢酸部分とカップリングさせる反応を含む方法を対象とする。該カップリング試薬はペプチド合成において通常使用されるものである。
【００２８】
また本発明は、式Ｉの化合物を作成する方法であって、ペプチド合成において通常使用されるカップリング試薬または混合無水物の存在下で式ＶＩの化合物を環化する段階を含む方法を対象とする。
【化３５】
2007500184.tif 000012
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２、およびＢによって表される要素は上に規定される通りである。Ｂの該核酸塩基が環外のアミノ官能基を有する場合、Ｂの保護基もまた上記の通りである。
【００２９】
本発明は式ＩＩの化合物を対象とする。この化合物の残基は上に規定される。特に、Ｒ２残基は、Ｈまたは、天然α−アミノ酸の保護または非保護の側鎖であってよい。他の実施態様では、式ＩＩの化合物は以下の構成を有してよい：Ｅは硫黄であり、ならびにＲ１は以下の一般式で示される基であってよく：
【化３６】
2007500184.tif 000013
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５は独立して、Ｈ、ハロゲン、例えばＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ、ＣＦ３、アルキル、好ましくはＣ１−Ｃ４アルキル、ニトロ、ニトリル、アルコキシ、好ましくはＣ１−Ｃ４アルコキシ、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩ）化アルキル、好ましくはハロゲン化Ｃ１−Ｃ４アルキル、またはハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩ）化アルコキシ、好ましくはハロゲン化Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、フェニル、またはハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩ）化フェニルであってよい。
【００３０】
また本発明は、式ＩＩの化合物を作成する方法であって、非求核性有機塩基の存在下でチアジアゾール−２−スルホニルクロライド、オキサジアゾール−２−スルホニルクロライド、チアゾール−２−スルホニルクロライド、またはオキサゾール−２−スルホニルクロライド誘導体をＮ−（２−アミノエチル）グリシンエステルと反応させる段階を含む方法を対象とする。
【００３１】
さらに本発明は式ＩＶを有する化合物およびその遊離酸型を対象とする。式ＩＶに関する残基は上に規定される通りである。特に、Ｒ２残基は、Ｈまたは、天然α−アミノ酸の保護または非保護の側鎖であってよい。他の実施態様では、式ＩＶの化合物は以下の構成を有してよい：Ｒ１は、メチル、フェニル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、２−クロロ−４−ニトロフェニル、４−クロロ−２−ニトロフェニル、２，５−ジクロロフェニル、または２，４−ジクロロフェニルであってよく；Ｅは硫黄であり；Ｊは窒素である。他の実施態様では、Ｒ１は、Ｈ、メチル、またはベンゾイルであってよく；Ｅは硫黄であり；ＪはＣ−ＣＨ３またはＣ−Ｐｈである。
【００３２】
さらに本発明は、式ＩＶの化合物を作成する方法であって、ペプチド合成において通常使用されるカップリング試薬または混合無水物の存在下で式ＩＩＩの化合物を環化する段階、次いで酸中で保護基、例えばｔ−Ｂｏｃを脱保護する段階を含む方法を対象とする。
【化３７】
2007500184.tif 000014
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、およびＲ２によって表される要素は上に規定される通りである。
【００３３】
また本発明は、ＰＮＡオリゴマーを作成する方法であって、式Ｉの化合物を互いに連結する段階を含む方法を対象とする。
【００３４】
上に引用される「Ｒ」基、およびＥおよびＪの指定は式Ｉ−ＶＩのすべての化合物に適用されることが理解されよう。また、該指定は本発明の処理を受ける化合物にも適用されることが理解されよう。
【００３５】
本発明のこれらの目的および他の目的は、以下の発明の説明、本明細書に添付される参照図面および本明細書に添付される特許請求の範囲から、さらに完全に理解される。さらに、図面においてラベルされている化学式は代表的な実施態様としての役目を果たすことが理解されよう。本発明の化学式は本明細書のあらゆる箇所で考察されているものである。図面で説明される化学式は、いかなる意味においても説明対象の化合物の範囲を限定するためのものではない。
【００３６】
本発明は、本明細書中以下に挙げる詳細な説明、および添付の図面から、さらに完全に理解される。該図面は例証のみを目的として提供されるものであり、ゆえに本発明を限定するものではない。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３７】
好ましい実施態様の詳細な説明
図面に記載されている式は単に例示用のバージョンであり、特許請求の範囲に特定の式が引用される場合、本明細書の本文において考察されるバージョンを意味することが理解されよう。
【００３８】
本発明では、一般式Ｉを有する化合物の１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル、１，３，４−オキサジアゾール−２−スルホニル、チアゾール−２−スルホニルまたはオキサゾール−２−スルホニル基は、主鎖アミンの保護基としてだけでなく、カップリング反応の活性化基としても重要な役割を果たす。記載される特性を有するモノマーは、手動または自動シンセサイザーによるＰＮＡオリゴマーの合成およびコンビナトリアル・ケミストリーによるＰＮＡオリゴマーライブラリの製造に有用である。一般式Ｉ中の核酸塩基Ｂは、天然に認められる位置、すなわちチミンまたはシトシンに関する第１位、およびアデニンまたはグアニンに関する第９位、ならびに非天然起源の核酸塩基（核酸塩基アナログ）、または核酸塩基結合部分に関して認められる位置で、天然状態で結合している。いくつかの核酸塩基および例示的な合成核酸塩基を図１および図２に示す。
【００３９】
保護された主鎖の製造
一般式Ｉを有する新規モノマーの製造に関する第一段階は、式ＩＩを有するＮ−［２−（１，３，４−チアジアゾール、１，３，４−オキサジアゾール、チアゾールまたはオキサゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシン誘導体の合成である：
【化３８】
2007500184.tif 000015
式中、Ｎ−［２−（１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシン誘導体に関してＥは硫黄であり、ならびにＪは窒素であり；Ｎ−［２−（１，３，４−オキサジアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシン誘導体に関してＥは酸素であり、ならびにＪは窒素であり；Ｎ−［２−（チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシン誘導体（N-[2-(thiazole-2-sulfonylamnio)-ethyl]-glycine derivatives）に関してＥは硫黄であり、ならびにＪはＣ−Ｒ’であり；Ｎ−［２−（オキサゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシン誘導体に関してＥは酸素であり、ならびにＪはＣ−Ｒ’であり；ならびにＲ’、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は上に規定される通りである。
【００４０】
式ＩＩを有する誘導体は、Ｎ−（２−アミノエチル）グリシン誘導体の第１級アミンを以下の一般式を有するスルホニルクロライド化合物と選択的に反応させることによって一般に合成する：
【化３９】
2007500184.tif 000016
式中、１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルクロライド誘導体に関してＥは硫黄であり、ならびにＪは窒素であり；１，３，４−オキサジアゾール−２−スルホニルクロライド誘導体に関してＥは酸素であり、ならびにＪは窒素であり；チアゾール−２−スルホニルクロライド誘導体に関してＪはＣ−Ｒ’であり、ならびにＥは硫黄であり；オキサゾール−２−スルホニルクロライド誘導体に関してＪはＣ−Ｒ’であり、ならびにＥは酸素であり；ならびにＲ’、およびＲ１は上に規定される通りである。
【００４１】
式ＩＩを有する誘導体を製造する一例では、Ｎ−［２−（１，３，４−チアジアゾールまたはチアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシン誘導体は、既知の方法（例えば、Ｒ２がＨである場合、S. A. Thomson et al., Tetrahedron, 1995, 6179-6194を参照のこと；Ｒ２が保護または非保護の天然または非天然アミノ酸の側鎖である場合、A. Puschl et al., Tetrahedron Lett., 1998, 39, 4707-4710を参照のこと）によって製造されたＮ−（２−アミノエチル）グリシン誘導体の第１級アミンを選択的に反応させることによって合成する。１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルクロライドまたはチアゾール−２−スルホニルクロライド誘導体は、ベンゾチアゾール−２−スルホニルクロライドの合成（E. Vedejs, et al., J. Am. Chem. Soc., 1996, 118, 9796-9797.）の同一手順によって、対応する２−メルカプト−１，３，４−チアジアゾールまたは２−メルカプト−チアゾール誘導体から製造する。
【００４２】
Ｎ−［２−（１，３，４−チアジアゾール、１，３，４−オキサジアゾール、チアゾール、またはオキサゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシン誘導体の製造に関するカップリング反応は、非求核性有機塩基の存在下で室温で、１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルクロライド、１，３，４−オキサジアゾール−２−スルホニルクロライド、チアゾール−２−スルホニルクロライド、またはオキサゾール−２−スルホニルクロライドをＮ−（２−アミノエチル）−グリシン誘導体の溶液にゆっくり加えることによって実施する。上記反応の溶媒の例には、非限定的に、水、トルエン、ベンゼン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、ジイソプロピルエーテル、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、およびアセトニトリルが含まれる。好ましい溶媒はジクロロメタンである。非求核性有機塩基の例には、非限定的に、トリエチルアミン、トリプロピルアミン Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、およびＮ−エチルモルホリンが含まれる。好ましい非求核性有機塩基はトリエチルアミンである。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）でのモニタリングによる反応完了後、反応混合物を水で洗浄し、乾燥し、減圧中で蒸発させて、所望の生成物を得る。
【００４３】
１−（１，３，４−チアジアゾール、１，３，４−オキサジアゾール、チアゾール、またはオキサゾール−２−スルホニル）−ピペラジン−２−オンの製造
一般式Ｉを有するモノマーの合成に関する、式ＩＶを有する第一の前駆物質シントンは、式ＩＩを有するＮ−［２−（１，３，４−チアジアゾール、１，３，４−オキサジアゾール、チアゾール、またはオキサゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシン誘導体から、加水分解、第２級アミンの保護、環化、および第２級アミンの保護基の脱保護によって製造する（図４）。
【化４０】
2007500184.tif 000017
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２、およびＨＸによって表される要素は上に規定される通りであってよい。
【００４４】
第一に、過剰の水酸化物イオン供給源を加えることによって、式ＩＩを有するＮ−［２−（１，３，４−チアジアゾール、１，３，４−オキサジアゾール、チアゾール、またはオキサゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシン誘導体を、対応する酸に変換する。式ＩＩ中の好ましいＲ３はメチルまたはエチルである。水酸化物イオン供給源の例には、非限定的に、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、および水酸化カリウムが含まれる。好ましい水酸化物イオン供給源は水酸化リチウムである。次いで加工（work-up）せずに反応混合物を保護基、例えばジ−ｔ−ブチルジカーボナートで処理して、第２級アミンを保護し、一般式ＩＩＩを有する化合物を得る：
【化４１】
2007500184.tif 000018
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、およびＲ２によって表される要素は上に規定される通りである。
【００４５】
好ましい加水分解反応は、水酸化リチウム（２当量）の水性溶液をＮ−［２−（１，３，４−チアジアゾール、１，３，４−オキサジアゾール、チアゾール、またはオキサゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシンエステル誘導体の溶液に室温で加えることによって行う。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）でのモニタリングによる反応完了後、ジ−ｔ−ブチルジカーボナート（１．５当量）および水酸化リチウム（追加の１当量）の水性溶液を反応混合物に加える。この反応混合物を十分な時間撹拌する。次いで酢酸エチルで抽出することによって過剰のジ−ｔ−ブチルジカーボナートを除去する。次いでこの水性溶液を酸性化し、ジクロロメタンで抽出し、乾燥し、減圧中で蒸発させ、固形物を得る。上記反応の溶媒の例は、水性テトラヒドロフラン、水性ジオキサン、および水性１，２−ジメトキシエタンである。好ましい溶媒は水性テトラヒドロフランである。
【００４６】
第二に、一般式ＩＩＩを有するカルボン酸の環化反応および次いでｔ−Ｂｏｃの脱保護により、一般式ＩＶを有するピペラジノン誘導体を得る。この環化反応はカルボン酸の活性化中に同時に生じる。カルボン酸の活性化は、ペプチド合成用の一般的カップリング試薬によって室温で行うことができる。カップリング試薬の例には、以下に挙げる試薬が含まれるが、これらに限定されない：ＨＡＴＵ、ＨＯＡｔ、ＨＯＤｈｂｔ（L. A. Carpino et al., J. Am. Chem. Soc., 1993, 115, 4397-4398）、ＨＡＰｙＵ、ＴＡＰｉｐＵ（A. Ehrlich et al., Tetrahedron Lett., 1993, 4781-4784）、ＨＢＴＵ（V. Dourtoglou et al., Synthesis, 1984, 572-574）、ＴＢＴＵ、ＴＰＴＵ、ＴＳＴＵ、ＴＮＴＵ（R. Knorr et al., Tetrahedron Lett., 1989, 1927-1930）、ＴＯＴＵ、ＢＯＰ（B. Castro et al., Tetrahedron Lett., 1975, 1219-1222）、ＰｙＢＯＰ（J. Coste et al., Tetrahedron Lett., 1990, 205-208）、ＢｒｏＰ（J. Coste et al., Tetrahedron Lett., 1990, 669-672）、ＰｙＢｒｏＰ（J. Coste et al., Tetrahedron Lett., 1991, 1967-1970）、ＢＯＩ（K.Akaji et al., Tetrahedron Lett., 1992, 3177-3180）、ＭＳＮＴ（B. Blankemeyer-Menge et al., Tetrahedron Lett., 1990, 1701-1704）、ＴＤＯ（R. Kirstgen et al., J. Chem. Soc., Chem. Commun., 1987, 1870-1871）、ＤＣＣ、ＥＤＣＩ、ＣＤＩ（H. A. Staab, Justus Liebigs Ann. Chem., 1957, 609, 75.）、ＨＯＢｔ（W Koenig et al., Chem. Ber., 1970, 103, 788, 2024, 2034）、ＨＯＳｕ（E. Wuensch et al., Chem. Ber., 1966, 99, 110）、ＮＥＰＩＳ（R. B. Woodward et al.,. J. Am. Chem. Soc., 1961, 83, 1010）、ＢＢＣ（S. Chen et al., Tetrahedron Lett. 1992, 33, 647）、ＢＤＭＰ（P, Li et al., Chem. Lett., 1999, 1163）、ＢＯＭＩ（P, Li et al., Tetrahedron Lett., 1999, 40, 3605）、ＡＯＰ（L. A Carpino et al., Tetrahedron Lett., 1994, 35, 2279）、ＢＤＰ（S. Kim et al., Tetrahedron Lett., 1985, 26, 1341）、ＰｙＡＯＰ（F. Albericio et al., Tetrahedron Lett. 1997, 38, 4853）、ＴＤＢＴＵ（R. Knorr et al., Tetrahedron Lett. 1989, 30, 1927）、ＢＥＭＴ（P. Li et al., Tetrahedron Lett. 1999, 40, 8301）、ＢＯＰ−Ｃｌ（J. Diago-Meseguer et al., Synthesis 1980, 547）、ＢＴＦＦＨ、ＴＦＦＨ（A. El-Faham et al.. Chem. Lett., 1998, 671）、ＣＩＰ（K. Akaji, et al., Tetrahedron Lett., 1994, 35, 3315）、ＤＥＰＢＴ（H. Li et al. Organic Lett. 1999, 1, 91）、Ｄｐｐ−Ｃｌ（R. Ramage et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans I, 1985, 461）、ＥＥＤＱ（B. Belleau et al., J. Am. Chem. Soc., 1968, 90, 1651）、ＦＤＰＰ（S. Chen et al., Tetrahedron Lett., 1991, 32, 6711）、ＨＯＴＴ、ＴＯＴＴ（M. A. Bailen et al., J. Org. Chem. 1999, 64, 8936）、ＰｙＣｌｏＰ（J. Coste et al., Tetrahedron Lett., 1991, 32, 1967およびJ. Coste et al., J. Org. Chem., 1994, 59, 2437）。溶媒は、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン、クロロホルム、ＤＭＦ、およびＮ−メチルピロリドンから選択してよい。好ましい溶媒はＤＭＦである。
【００４７】
あるいは、カルボン酸の活性化は、クロロギ酸アルキルまたはアルカノイルクロライドを非求核性有機塩基とともに使用して混合無水物を形成させることによって行うことができる。無水の適切な溶媒の例には、非限定的に、アセトニトリル、クロロホルム、ジクロロメタン、１，２−ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル（diisoproyl ether）、およびテトラヒドロフランが含まれる。好ましい溶媒はジクロロメタンおよびテトラヒドロフランである。最も好ましい反応温度は、−２０℃でのクロロギ酸イソブチルの添加完了後に反応混合物が０℃にゆっくり加温されることを許容する温度である。
【００４８】
図４では、酸の存在下でｔ−Ｂｏｃ基を脱保護する。酸の例には、非限定的に、ＨＣｌ、ＨＢｒ、ＨＦ、ＨＩ、硝酸、硫酸、メタンスルホン酸、ＴＦＡ、およびトリフルオロメタンスルホン酸が含まれる。好ましい酸はＴＦＡである。脱保護反応において使用される溶媒には、非限定的に、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、酢酸エチル、トルエン、およびベンゼンが含まれるであろう。好ましい溶媒はジクロロメタンである。
【００４９】
ＰＮＡモノマーの合成
本発明の方法にしたがい、少なくとも２つの方法によって一般式Ｉを有するＰＮＡモノマーを合成してよい。図５では、ＰＮＡモノマー合成の第一のアプローチは、環化反応前に、保護または非保護の核酸塩基酢酸部分を、保護された直線状の主鎖に導入する方法である。あるいは、保護された直線状の主鎖の環化から出発し、次いで環化された主鎖を脱保護し、保護または非保護の核酸塩基酢酸部分をカップリングさせて、所望の生成物を作成することにより、ＰＮＡモノマーを合成してよい。
【００５０】
方法１
一般式Ｖを有する直線状部分は、一般式ＩＩを有する保護された直線状の主鎖から、カップリング試薬を使用して核酸塩基酢酸部分をアシル化することによって製造する。これは図５に示される通りである。
【００５１】
図５では、無水の適切な溶媒中の一般式ＩＩを有する保護された直線状の主鎖、核酸塩基酢酸部分、および非求核性有機塩基の混合物にカップリング試薬を加えることによってカップリング反応を行った。カップリング試薬の例には、非限定的に、ＨＡＴＵ、ＨＯＡｔ、ＨＯＤｈｂｔ、ＨＡＰｙＵ、ＴＡＰｉｐＵ、ＨＢＴＵ、ＴＢＴＵ、ＴＰＴＵ、ＴＳＴＵ、ＴＮＴＵ、ＴＯＴＵ、ＢＯＰ、ＰｙＢＯＰ、ＢｒｏＰ、ＰｙＢｒｏＰ、ＢＯＩ、ＭＳＮＴ、ＴＤＯ、ＤＣＣ、ＥＤＣＩ、ＣＤＩ、ＨＯＢｔ、ＨＯＳｕ、ＮＥＰＩＳ、ＢＢＣ、ＢＤＭＰ、ＢＯＭＩ、ＡＯＰ、ＢＤＰ、ＰｙＡＯＰ、ＴＤＢＴＵ、ＢＯＰ−Ｃｌ、ＣＩＰ、ＤＥＰＢＴ、Ｄｐｐ−Ｃｌ、ＥＥＤＱ、ＦＤＰＰ、ＨＯＴＴ、ＴＯＴＴ、ＰｙＣｌｏＰが含まれる。好ましいカップリング試薬はＰｙＢＯＰまたはＥＤＣＩである。非求核性有機塩基の例には、非限定的に、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、およびＮ−エチルモルホリンが含まれる。好ましい非求核性有機塩基はＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンである。無水の適切な溶媒の例には、非限定的に、クロロホルム、ジクロロメタン、１，２−ジメトキシエタン、テトラヒドロフラン、ＤＭＦ、およびＮ−メチルピロリドンが含まれる。好ましい溶媒はＤＭＦである。
【化４２】
2007500184.tif 000019
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＢによって表される要素は上に規定される通りである。
【００５２】
過剰の水酸化物イオン供給源を加えることによって、一般式Ｖを有する化合物を対応する酸、例えば式ＶＩに変換する。好ましくは、Ｒ３はメチルまたはエチルであってよい。水酸化物イオン供給源の例には、非限定的に、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、および水酸化カリウムが含まれる。好ましい水酸化物イオン供給源は水酸化リチウムである。
【化４３】
2007500184.tif 000020
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２、およびＢによって表される要素は上に規定される通りである。
【００５３】
さらに、図５では、カルボン酸を環化反応させ、カルボン酸の活性化中の同時反応によって一般式Ｉを有するＰＮＡモノマーを得る。カルボン酸の活性化は、ペプチド合成用の一般的カップリング試薬によって室温で行ってよい。カップリング試薬の例には、非限定的に、ＨＡＴＵ、ＨＯＡｔ、ＨＯＤｈｂｔ、ＨＡＰｙＵ、ＴＡＰｉｐＵ、ＨＢＴＵ、ＴＢＴＵ、ＴＰＴＵ、ＴＳＴＵ、ＴＮＴＵ、ＴＯＴＵ、ＢＯＰ、ＰｙＢＯＰ、ＢｒｏＰ、ＰｙＢｒｏＰ、ＢＯＩ、ＭＳＮＴ、ＴＤＯ、ＤＣＣ、ＥＤＣＩ、ＣＤＩ、ＨＯＢｔ、ＨＯＳｕ、ＮＥＰＩＳ、ＢＢＣ、ＢＤＭＰ、ＢＯＭＩ、ＡＯＰ、ＢＤＰ、ＰｙＡＯＰ、ＴＤＢＴＵ、ＢＯＰ−Ｃｌ、ＣＩＰ、ＤＥＰＢＴ、Ｄｐｐ−Ｃｌ、ＥＥＤＱ、ＦＤＰＰ、ＨＯＴＴ、ＴＯＴＴ、ＰｙＣｌｏＰが含まれる。好ましいカップリング試薬はＥＤＣＩまたはＰｙＢＯＰである。非求核性有機塩基の例には、非限定的に、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、およびＮ−エチルモルホリンが含まれる。好ましい非求核性有機塩基はＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンである。溶媒は、非限定的に、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン、クロロホルム、ＤＭＦ、またはＮ−メチルピロリドンから選択してよい。好ましい溶媒はＤＭＦである。
あるいは、カルボン酸の活性化は、クロロギ酸アルキルまたはアルカノイルクロライドを非求核性有機塩基とともに使用して混合無水物を形成させることによって行うことができる。ハロギ酸アルキルまたはアルカノイルクロライドの例には、非限定的に、クロロギ酸メチル、クロロギ酸エチル、クロロギ酸プロピル、クロロギ酸ブチル、クロロギ酸イソブチル、ピバロイルクロライド、およびアダマンタン（adamantine）カルボキシルクロライドが含まれる。最も好ましい酸クロライドはクロロギ酸イソブチルである。クロロギ酸イソブチルを使用する環化反応は、−３０℃〜１０℃の範囲の温度で、無水の適切な溶媒中のカルボン酸および非求核性有機塩基の反応溶液にクロロギ酸イソブチルをゆっくり加えることによって行う。非求核性有機塩基の例には、非限定的に、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、およびＮ−エチルモルホリンが含まれる。好ましい非求核性有機塩基はＮ−メチルモルホリンである。無水の適切な溶媒の例には、非限定的に、アセトニトリル、クロロホルム、ジクロロメタン、１，２−ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル（diisoproyl ether）、およびテトラヒドロフランが含まれる。好ましい溶媒はジクロロメタンおよびテトラヒドロフランである。好ましい反応温度は、−２０℃でのクロロギ酸イソブチルの添加完了後に反応混合物が約０℃にゆっくり加温されることを許容する温度である。
【００５４】
方法２
代替法として、保護または非保護の核酸塩基酢酸部分を以下の一般式ＩＶを有する環状前駆物質にカップリングさせることによって本発明のＰＮＡモノマーを製造してよい：
【化４４】
2007500184.tif 000021
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２、およびＨＸによって表される要素は上に規定される通りであってよい。
【００５５】
図６では、ペプチド合成用の一般的カップリング試薬および非求核性有機塩基を室温で使用することによって、環状前駆物質と保護または非保護の核酸塩基酢酸部分のカップリング反応を行う。カップリング試薬の例には、非限定的に、ＨＡＴＵ、ＨＯＡｔ、ＨＯＤｈｂｔ、ＨＡＰｙＵ、ＴＡＰｉｐＵ、ＨＢＴＵ、ＴＢＴＵ、ＴＰＴＵ、ＴＳＴＵ、ＴＮＴＵ、ＴＯＴＵ、ＢＯＰ、ＰｙＢＯＰ、ＢｒｏＰ、ＰｙＢｒｏＰ、ＢＯＩ、ＭＳＮＴ、ＴＤＯ、ＤＣＣ、ＥＤＣＩ、ＣＤＩ、ＨＯＢｔ、ＨＯＳｕ、ＮＥＰＩＳ、ＢＢＣ、ＢＤＭＰ、ＢＯＭＩ、ＡＯＰ、ＢＤＰ、ＰｙＡＯＰ、ＴＤＢＴＵ、ＢＯＰ−Ｃｌ、ＣＩＰ、ＤＥＰＢＴ、Ｄｐｐ−Ｃｌ、ＥＥＤＱ、ＦＤＰＰ、ＨＯＴＴ、ＴＯＴＴ、ＰｙＣｌｏＰが含まれる。好ましいカップリング試薬はＰｙＢＯＰである。非求核性有機塩基の例には、非限定的に、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、およびＮ−エチルモルホリンが含まれる。好ましい非求核性有機塩基はＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンである。溶媒は、非限定的に、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン、クロロホルム、ＤＭＦ、またはＮ−メチルピロリドンであってよい。好ましい溶媒はＤＭＦである。
【００５６】
核酸塩基および保護基
本発明の核酸塩基の例には、非限定的に、アデニン、シトシン、グアニン、チミン、ウリジン、２，６−ジアミノプリン、および天然または非天然起源の核酸塩基、これらは図１および図２に記載される、が含まれる。好ましい核酸塩基は、アデニン、シトシン、グアニン、およびチミンである。ＰＮＡオリゴマーの合成に関して、保護基によって核酸塩基を保護してよい。保護基は以下に挙げる基であってよいが、これらに限定されない：Ｂｏｃ、アダマンチルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル（P. E. Nielsen et al., Science, 1991, 254, 1497-1500; M. Egholm et al., J. Am. Chem. Soc., 1992, 114, 9677-9679; M. Egholm et al., J. Am. Chem. Soc., 1992, 114, 1895-1897; M. Egholm et al., J. Chem. Soc. Chem. Commun., 1993, 800-801; K. L. Dueholm et al., J. Org. Chem., 1994, 59, 5767-5773；ＷＯ ９２／２０７０２）、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、３，４−ジメトキシベンジルオキシカルボニル（3,4-dimethoyxbenzyloxycarbonyl）、ベンズヒドリルオキシカルボニル（米国特許第６，１３３，４４４号）、ピペロニルオキシカルボニル誘導体、２−メチルチオエトキシカルボニル（米国特許第６，０６３，５６９号）、Ｍｍｔ（G. Breipohl et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1996, 6, 665-670）、または酸不安定性保護基（T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Group in Organic Synthesis, 3rd Edition, pp 494~653）。
【００５７】
Ｔ−モノマーの合成
Ｔ−モノマーは以下の一般式Ｉ−ｔを有する化合物である：
【化４５】
2007500184.tif 000022
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、およびＲ２によって表される要素は上に規定される通りである。
【００５８】
Ｔ−モノマーの前駆物質である、（チミン−１−イル）−酢酸（下記）を既知の方法によって製造する（K. L. Dueholm et. al., J. Org. Chem., 1994, 59, 5767-5773；ＷＯ ９２／２０７０２）。
【化４６】
2007500184.tif 000023
【００５９】
図７では、（チミン−１−イル）−酢酸を、カップリング試薬の存在下で一般式ＩＩを有する１，３，４−チアジアゾールまたはチアゾール−２−スルホニル基で保護された主鎖エステルとカップリングさせる反応によって一般式Ｖ−ｔの化合物を製造し、以下の一般式を有する化合物を得る：
【化４７】
2007500184.tif 000024
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３によって表される要素は上に規定される通りである。
好ましいＲ３はメチルまたはエチルである。
【００６０】
過剰の水酸化物イオン供給源を加えることによって一般式Ｖ−ｔを有する化合物を対応する酸に変換し、一般式ＶＩ−ｔを有する化合物を得る。
【化４８】
2007500184.tif 000025
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、およびＲ２によって表される要素は上に規定される通りである。
【００６１】
図７では、カルボン酸を環化反応させ、カルボン酸の活性化中の同時反応によって一般式Ｉ−ｔを有するＰＮＡ Ｔ−モノマーを得る。カルボン酸の活性化は、ペプチド合成用の一般的カップリング試薬または混合無水物によって行ってよい。反応条件および試薬は上記と同一である。
【００６２】
あるいは、図８から理解されるように、（チミン−１−イル）−酢酸を、一般式ＩＶを有するピペラジノン誘導体にカップリングさせることによってＰＮＡ Ｔ−モノマーを製造することができる。反応条件および試薬は上記と同一である。
【００６３】
Ｃ−モノマーの合成
Ｃ−モノマーは以下の一般式Ｉ−ｃを有する化合物である：
【化４９】
2007500184.tif 000026
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４によって表される要素は上に規定される通りである。
【００６４】
既知の方法またはその変法によって、ＰＮＡ Ｃ−モノマーの前駆物質である、適切に保護された（シトシン−１−イル）−酢酸（下記）を製造する。該既知の方法は、例えば米国特許第６，１３３，４４４号；米国特許第６，０６３，５６９号；Dueholm, et al., J. Org. Chem., 1994, 59, 5767-5773；およびＷＯ ９２／２０７０２に記載されている方法である。これらの刊行物は引用によりその開示内容全体が本明細書中に包含される。
【化５０】
2007500184.tif 000027
Ｒ４は、ベンジル、ベンズヒドリル、４−メトキシベンジル、またはピペロニル誘導体であってよい。
【００６５】
図９では、適切に保護された（シトシン−１−イル）−酢酸を、カップリング試薬の存在下で一般式ＩＩを有する１，３，４−チアジアゾールまたはチアゾール−２−スルホニル基で保護された主鎖エステルとカップリングさせて、以下の一般式を有する化合物を得る反応によって、ＰＮＡ Ｃ−モノマーを製造する：
【化５１】
2007500184.tif 000028
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４によって表される要素は上に規定される通りである。
【００６６】
過剰の水酸化物イオン供給源を加えることによって一般式Ｖ−ｃを有する化合物を対応する酸に変換し、一般式ＶＩ−ｃを有する化合物を得る：
【化５２】
2007500184.tif 000029
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ４によって表される要素は上に規定される通りである。
【００６７】
図９では、カルボン酸を環化反応させ、カルボン酸の活性化中の同時反応によって一般式Ｉ−ｃを有するＰＮＡモノマーを得る。カルボン酸の活性化は、ペプチド合成用の一般的カップリング試薬または混合無水物によって行ってよい。反応条件および試薬は上記と同一である。
【００６８】
あるいは、適切に保護された（シトシン−１−イル）−酢酸を、一般式ＩＶを有するピペラジノン誘導体にカップリングさせることによってＰＮＡ Ｃ−モノマーを製造することができる。反応条件および試薬は上記と同一である。
【００６９】
Ａ−モノマーの合成
Ａ−モノマーは以下の一般式Ｉ−ａを有する化合物である：
【化５３】
2007500184.tif 000030
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ４によって表される要素は上に規定される通りである。
【００７０】
既知の方法またはその変法によって、ＰＮＡ Ａ−モノマーの前駆物質である、適切に保護された（アデニン−９−イル）−酢酸（下記）を製造する。該既知の方法は、例えば米国特許第６，１３３，４４４号；およびS. A. Thomson et al., Tetrahedron, 1995, 6179-6194に記載されている方法である。これらの刊行物は引用によりその開示内容全体が本明細書中に包含される。
【化５４】
2007500184.tif 000031
Ｒ４は、ベンジル、ベンズヒドリル、４−メトキシベンジル、およびピペロニル誘導体から選択される。
【００７１】
図１０では、適切に保護された（アデニン−９−イル）−酢酸を、カップリング試薬の存在下で一般式ＩＩを有する１，３，４−チアジアゾールまたはチアゾール−２−スルホニル基で保護された主鎖エステルとカップリングさせて、以下の一般式Ｖ−ａを有する化合物を得る反応によって、ＰＮＡ Ａ−モノマーを製造する：
【化５５】
2007500184.tif 000032
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４によって表される要素は上に規定される通りである。
【００７２】
過剰の水酸化物イオン供給源を加えることによって一般式Ｖ−ａを有する化合物を対応する酸に変換し、一般式ＶＩ−ａを有する化合物を得る：
【化５６】
2007500184.tif 000033
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ４によって表される要素は上に規定される通りである。
【００７３】
図１２では、カルボン酸を環化反応させ、カルボン酸の活性化中の同時反応によって一般式Ｉ−ａを有するＰＮＡモノマーを得る。カルボン酸の活性化は、ペプチド合成用の一般的カップリング試薬または混合無水物によって行うことができる。反応条件および試薬は上記と同一である。
【００７４】
あるいは、適切に保護された（アデニン−９−イル）−酢酸を、一般式ＩＶを有するピペラジノン誘導体にカップリングさせることによってＰＮＡ Ａ−モノマーを製造することができる。反応条件および試薬は上記と同一である。
【００７５】
Ｇ−モノマーの合成
Ｇ−モノマーは以下の一般式Ｉ−ｇを有する化合物である：
【化５７】
2007500184.tif 000034
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ４によって表される要素は上に規定される通りである。
【００７６】
既知の方法またはその変法によって、ＰＮＡ Ｇ−モノマーの前駆物質である、適切に保護された（グアニン−９−イル）−酢酸（下記）を製造する。該既知の方法は、例えば米国特許第６，１７２，２２６号に記載の方法である。
【化５８】
2007500184.tif 000035
Ｒ４は、ベンジル、ベンズヒドリル、４−メトキシベンジル、またはピペロニル誘導体であってよい。
【００７７】
図１１では、適切に保護された（グアニン−９−イル）−酢酸を、カップリング試薬の存在下で一般式ＩＩを有する１，３，４−チアジアゾールまたはチアゾール−２−スルホニル基で保護された主鎖エステルとカップリングさせて、以下の一般式Ｖ−ｇを有する化合物を得る反応によって、ＰＮＡ Ｇ−モノマーを製造する：
【化５９】
2007500184.tif 000036
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４によって表される要素は上に規定される通りである。
【００７８】
過剰の水酸化物イオン供給源を加えることによって一般式Ｖ−ｇを有する化合物を対応する酸に変換し、一般式ＶＩ−ｇを有する化合物を得る：
【化６０】
2007500184.tif 000037
Ｅ、Ｊ、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ４によって表される要素は上に規定される通りである。
【００７９】
図１１では、カルボン酸を環化反応させ、カルボン酸の活性化中の同時反応によって一般式Ｉ−ｇを有するＰＮＡモノマーを得る。カルボン酸の活性化は、ペプチド合成用の一般的カップリング試薬または混合無水物によって行うことができる。反応条件および試薬は上記と同一である。
【００８０】
あるいは、適切に保護された（グアニン−９−イル）−酢酸を、一般式ＩＶを有するピペラジノン誘導体にカップリングさせることによってＰＮＡ Ｇ−モノマーを製造することができる。反応条件および試薬は上記と同一である。
【００８１】
ＰＮＡオリゴマーの合成
本発明のモノマーを使用するＰＮＡオリゴマー合成には、化学文献に既に報告されている種々の組み合わせの合成方法を一般に適用可能である。これらの方法には、非限定的に、固相合成および液相（solution phase）合成が含まれる。上記様式でＰＮＡモノマーを合成した後、適切な支持体材料上の固相合成によってＰＮＡオリゴマーを構築する。該適切な支持体材料は、例えば、非限定的に、ポリスチレン、ポリオキシエチレン修飾型ポリスチレン、例えばCLEAR（登録商標）、Tentagel（登録商標）またはControlled Pore Glass、これは分解性アミン官能基を潜在的に含有するアンカー基を備えている、である。固相合成では、本発明の第一のＰＮＡモノマーをカップリング反応によって固形支持体に包含させる。次の段階は所望のＰＮＡオリゴマー配列の体系的生成である。この生成には、脱保護／カップリング／キャッピングの反復サイクルが含まれる。最後にカップリングされたモノマー上の主鎖保護基、１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルまたはチアゾール−２−スルホニル基を、有機塩基の存在下で適切なチオールで処理することによって量的に除去し、末端の遊離アミンを遊離させる。ＰＮＡオリゴマーの合成が完了した後、該オリゴマーを固形支持体から切断し、カチオンスカベンジャーであるクレゾールを含有するＴＦＡ中でほぼ室温で１〜２時間インキュベートすることによって核酸塩基保護基を同時に除去する。
【００８２】
ＰＮＡオリゴマーの合成に使用してよい一般的反応サイクルの例を以下に挙げるが、該例は、例えば段階の順序に関して等の、いかなる意味においても本発明を限定するためのものではない。その根拠は、本発明のＰＮＡモノマーが使用される限り、任意のオリゴマー合成方法を一般に使用してよいからである。
【００８３】
１．  保護基を樹脂から除去し、アミン官能基を活性化する段階。
２．  末端の保護アミン基を有するアミノ酸、リンカー、またはＰＮＡモノマーを樹脂に包含させる段階。
３．  洗浄する段階。
４．  有機塩基の存在下で無水酢酸を用いてキャッピングする段階。
５．  洗浄する段階。
６．  スルホンアミド中の反応型アセチル基上で切断する段階。
７．  洗浄する段階。
８．  スルホニル基を脱保護する段階。
９．  洗浄する段階。
１０．  モノマーを加える段階。
１１．  第３段階に戻り、第４〜第１１段階を反復する段階。
【００８４】
オリゴマー合成反応に関するモノマーのカップリング反応の過程において、触媒を使用することによってアシル化反応を促進することができる。該触媒は、例えば、非限定的に、酢酸水銀、テトラメチルアンモニウムフルオライド、テトラエチルアンモニウムフルオライド、テトラブチルアンモニウムフルオライド、ベンジルトリメチルアンモニウムフルオライド、フッ化セシウム、トリブチルホスフィン、トリフェニルホスフィンである。好ましい触媒はテトラブチルアンモニウムフルオライドである。また、反応速度は、使用される溶媒および反応温度に依存する。溶媒の例には、非限定的に、ＤＭＦ、Ｎ−メチルピロリドン、ジメトキシエタン、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、ＤＭＳＯ、テトラヒドロフラン、ヘキサメチルホスホルアミド（hexamethylphophoramide）、テトラメチレンスルホン、イソプロピルアルコール、エチルアルコール、および選択溶媒の混合物が含まれる。好ましい溶媒はＤＭＦである。溶媒中でチオールを有機塩基とともに使用してＮ末端アミノ保護基を切断する。チオールの例には、非限定的に、Ｃ２〜Ｃ２０アルカンチオール、４−メトキシトルエンチオール、４−メチルベンゼンチオール、３，６−ジオキサ−１，８−オクタンチオール、４−クロロトルエンチオール、ベンジルメルカプタン、Ｎ−アセチルシステイン、Ｎ−（ｔ−Ｂｏｃ）システインメチルエステル、メチル３−メルカプトプロピオナート、４−メトキシベンゼンチオールが含まれる。有機塩基の例には、非限定的に、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（N,N-diisopropyethylamine）、ピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン、および１，８−ジアザビシクロ［５，４，０］ウンデカ−７−オンが含まれる。好ましい有機塩基はＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンである。
【００８５】
略語リスト。
ｔ−Ｂｏｃ  ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ＡＯＰ  Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム
ＢＢＣ  １−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−ビス（ピロリジノ）ウロニウムヘキサフルオロホスファート
ＢＤＭＰ  ５−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）−３，４−ジヒドロ−１−メチル ２Ｈ−ピロリウムヘキサクロロアンチモナート
ＢＤＰ  ベンゾトリアゾール−１−イルジエチルホスファート
ＢＥＭＴ  ２−ブロモ−３−エチル−４−メチルチアゾリウムテトラフルオロボラート
ＢＴＦＦＨ  ビス（テトラメチレンフルオロホルムアミジニウム）ヘキサフルオロホスファート
ＢＯＭＩ  ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチルメタンイミニウムヘキサクロロアンチモナート
ＢＯＩ  ２−（ベンゾトリアゾール−１−イル）オキシ−１，３−ジメチル−イミダゾリニウムヘキサフルオロホスファート
ＢＯＰ  ベンゾトリアゾリル−１−オキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスファート（benzotriazolyl-1-oxy-tris(dimethylamino)phophonium hexafluorophosphate）
ＢＯＰ−Ｃｌ  ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロライド
ＢｒｏＰ  ブロモトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスファート（bromotris(dimethylamino)phophonium hexafluorophosphate）
ＣＤＩ  カルボニルジイミダゾール
ＣＩＰ  ２−クロロ−１，３−ジメチルイミダゾリジニウムヘキサフルオロホスファート
ＤＭＦ  ジメチルホルムアミド
ＤＣＣ  １，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＥＰＢＴ  ３−（ジエトキシホスホリルオキシ）−１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オン
Ｄｐｐ−Ｃｌ  ジフェニルホスフィン酸クロライド
ＥＤＣＩ  １−エチル−３−（３’−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩
ＥＥＤＱ  ２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１，２−ジヒドロキノリン
Ｆｍｏｃ  ９−フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＦＤＰＰ  ペンタフルオロフェニルジフェニルホスフィナート
ＨＡＰｙＵ  Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−ビス（テトラメチレン）ウランヘキサフルオロホスファート
ＨＡＴＵ  Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウランヘキサフルオロホスファート
ＨＢＴＵ  Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウランヘキサフルオロホスファート
ＨＯＢｔ  ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＯＡｔ  １−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＯＤｈｂｔ  ３−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロ−４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン
ＨＯＳｕ  ヒドロキシスクシンイミド
ＨＯＴＴ  Ｓ−（１−オキシド−２−ピリジニル）−１，１，３，３−テトラメチルチオウロニウムヘキサフルオロホスファート
ＭＳＮＴ  ２，４，６−メシチレンスルホニル−３−ニトロ−１，２，４−トリアゾリド
Ｍｍｔ  ４−メトキシフェニルジフェニルメチル
ＮＥＰＩＳ  Ｎ−エチル−５−フェニルイソキサゾリウム−３’−スルホナート
ＰｙＡＯＰ  ７−アゾベンゾトリアゾリルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスファート（7-azobenzotriazolyoxytris(pyrrolidino)phosphonium hexafluorophosphate）
ＰｙＢＯＰ  ベンゾトリアゾリル−１−オキシ−トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート
ＰｙＢｒｏＰ  ブロモトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート
ＰｙＣｌｏＰ  クロロトリス（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスファート（chlorotris(pyrrolydino)phophonium hexafluorophosphate）
ＴＡＰｉｐＵ  Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−ビス（ペンタメチレン）ウランテトラフルオロボラート
ＴＢＴＵ  Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウランテトラフルオロボラート
ＴＤＯ  ２，５−ジフェニル−２，３−ジヒドロ−３−オキソ−４−ヒドロキシチオフェンジオキシド
ＴＦＡ  トリフルオロ酢酸
ＴＦＦＨ  テトラメチルフルオロホルムアミジニウムヘキサフルオロホスファート
ＴＯＴＴ  Ｓ−（１−オキシド−２−ピリジニル）−１，１，３，３−テトラメチルチオウロニウムテトラフルオロボラート
ＴＤＢＴＵ  ２−（３，４−ジヒドロ−４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム
テトラフルオロボラート
ＴＮＴＵ  Ｏ−［（５−ノルボネン−２，３−ジカルボキシイミド）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート（O-[(5-norbonene-2,3-dicarboximido)-1,1,3,3-tetramethyluronium tetrafluoroborate]
ＴＯＴＵ  Ｏ−［（シアノ（エトキシカルボニル）メチレン）アミノ］−１，１，３．３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート
ＴＰＴＵ  Ｏ−（１，２−ジヒドロ−２−オキソ−１−ピリジル−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート
ＴＳＴＵ  Ｏ−（Ｎ−スクシンイミジル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート
【００８６】
以下に実施例を挙げ、本発明をさらに具体的に説明するが、特に断らない限り、この実施例は本発明を限定するためのものではない。
【００８７】
実施例
【実施例１】
【００８８】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステル
ジクロロメタン（５０ｍＬ）中の、Will（D. W. Will et al., Tetrahedron, 1995, 51, 12069.）によって記載されるように製造されたＮ−（２−アミノエチル）−グリシンエチルエステル２ＨＣｌ（１．４ｇ、６．４ｍｍｏｌ）の溶液に、５−（４−クロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルクロライド（１．５ｇ、５．１ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。次いでトリエチルアミン（２．７ｍＬ）をゆっくり加えた。得られた反応混合物を室温でさらに２時間撹拌し、水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過した。ろ液を濃縮し、次いでカラムクロマトグラフィーに付して、固形物として標題化合物（１．１ｇ、２．７ｍｍｏｌ、５３％）を得た。1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6)δ8.08 (d, 2H), 7.66 (d, 2H), 4.03 (q, 2H), 3.26 (s, 2H), 3.15 (t, 2H), 2.64 (t, 2H), 1.14 (t, 3H)。
【実施例２】
【００８９】
Ｎ−［２−（５−フェニル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシンエチルエステル
実施例１の手順の通り、Ｎ−（２−アミノエチル）−グリシンエチルエステル２ＨＣｌを５−フェニル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルクロライドと反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6)δ8.05 (d, 2H), 7.60-7.56 (m, 3H), 4.02 (q, 2H), 3.26 (s, 2H), 3.16 (t, 2H), 2.64 (t, 2H), 1.14 (t, 3H)。
【実施例３】
【００９０】
Ｎ−｛２−［５−（２，５−ジクロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステル
実施例１の手順の通り、Ｎ−（２−アミノエチル）−グリシンエチルエステル２ＨＣｌを５−（２，５−ジクロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルクロライドと反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6)δ8.27 (s, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.75 (d, 1H), 4.03 (q, 2H), 3.35 (s, 2H), 3.21 (t, 2H), 2.71 (t, 2H), 1.15 (t, 3H)。
【実施例４】
【００９１】
Ｎ−｛２−［５−（４−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステル
実施例１の手順の通り、Ｎ−（２−アミノエチル）−グリシンエチルエステル２ＨＣｌを５−（４−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルクロライドと反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6)δ8.42 (d, 2H), 8.27 (d, 2H), 6.40 (brs, 2H), 4.05 (q, 2H), 3.35 (s, 2H), 3.21 (t, 2H), 2.71 (t, 2H), 1.15 (t, 3H)。
【実施例５】
【００９２】
Ｎ−｛２−［５−（２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステル
実施例１の手順の通り、Ｎ−（２−アミノエチル）−グリシンエチルエステル２ＨＣｌを５−（２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルクロライドと反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (MHz ; DMSO-d6)δ8.16 (d, 1H), 7.81-7.78 (m, 3H), 4.02 (q, 2H), 3.34 (s, 2H), 3.21 (t, 2H), 2.70 (t, 2H), 1.15 (t, 3H)。
【実施例６】
【００９３】
Ｎ−｛２−［５−（２−クロロ−４−ニトロ−フェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステル
実施例１の手順の通り、Ｎ−（２−アミノエチル）−グリシンエチルエステル２ＨＣｌを５−（２−クロロ−４−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルクロライドと反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6)δ8.60 (d, 1H), 8.54 (d, 1H), 8.40 (dd, 1H) 4.05 (q, 2H), 3.27 (s, 2H), 3.19 (t, 2H), 2.67 (t, 2H), 1.16 (t, 3H)。
【実施例７】
【００９４】
Ｎ−｛２−［５−（２，４−ジクロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステル
実施例１の手順の通り、Ｎ−（２−アミノエチル）−グリシンエチルエステル２ＨＣｌを５−（２，４−ジクロロ−フェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルクロライドと反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6)δ8.29 (d, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.70 (dd, 1H), 5.65 (brs, 1H), 4.05 (q, 2H), 3.28 (s, 2H), 3.19 (t, 2H), 2.67 (t, 2H), 1.17 (t, 3H)。
【実施例８】
【００９５】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステル
実施例１の手順の通り、Ｎ−（２−アミノエチル）−グリシンエチルエステル２ＨＣｌを５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルクロライドと反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6)δ8.40 (d, 1H), 8.05 (dd, 1H), 8.02 (d, 1H) 4.07 (q, 2H), 3.30 (s, 2H), 3.19 (t, 2H), 2.67 (t, 2H), 1.18 (t, 3H)。
【実施例９】
【００９６】
Ｎ−［２−（５−メチル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシンエチルエステル
実施例１の手順の通り、Ｎ−（２−アミノエチル）−グリシンエチルエステル２ＨＣｌを５−メチル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルクロライドと反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6)δ4.07 (q, 2H), 3.27 (s, 2H), 3.09 (t, 2H), 2.82 (s, 3H), 2.62 (t, 2H), 1.18 (t, 3H)。
【実施例１０】
【００９７】
Ｎ−［２−（４−メチル−チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシンエチルエステル
実施例１の手順の通り、Ｎ−（２−アミノエチル）−グリシンエチルエステル２ＨＣｌを４−メチル−チアゾール−２−スルホニルクロライドと反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6)δ7.68 (s, 1H), 4.07 (q, 2H), 3.26 (s, 2H), 3.02 (t, 2H), 2.58 (t, 2H), 2.43 (s, 3H), 1.18 (t, 3H)。
【実施例１１】
【００９８】
Ｎ−［２−（５−ベンゾイル−４−フェニル−チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシンエチルエステル
実施例１の手順の通り、Ｎ−（２−アミノエチル）−グリシンエチルエステル２ＨＣｌを５−ベンゾイル−４−フェニル−チアゾール−２−スルホニルクロライドと反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ7.46 (d, 2H), 7.36-7.24 (m, 4H), 7.19-7.11 (m, 4H), 4.05 (q, 2H), 3.28 (s, 2H), 3.19 (t, 2H), 2.66 (t, 2H), 1.16 (t, 3H)。
【実施例１２】
【００９９】
Ｎ−［２−（５−メチル−４−フェニル−チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシンエチルエステル
実施例１の手順の通り、Ｎ−（２−アミノエチル）−グリシンエチルエステル２ＨＣｌを５−メチル−４−フェニル−チアゾール−２−スルホニルクロライドと反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ7.68 (d, 2H), 7.51 (t, 2H), 7.44 (t, 1H), 4.05 (q, 2H), 3.26 (s, 2H), 3.10 (t, 2H), 2.64 (s, 3H), 2.63 (t, 2H), 1.16 (t, 3H)。
【実施例１３】
【０１００】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンエチルエステル
ＤＭＦ３０ｍＬ中のＮ−｛２−［５−（４−クロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステル（４．０５ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液に、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物１．６８ｇ（１１ｍｍｏｌ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド２．２７ｇ（１１ｍｍｏｌ）および（チミン−１−イル）−酢酸１．８４ｇ（１０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌した。沈殿したジシクロヘキシル尿素をろ別し、ろ液を真空中で濃縮し、次いでシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーに付して、標題化合物（４．８５ｇ、８．５ｍｍｏｌ、８５％）を得た。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.28 (s, 0.6H), 11.26 (s, 0.4H), 9.15 (brs, 0.6H), 9.00 (brs, 0.4H), 8.07 (d, 2H), 7.67 (d, 2H), 7.31 (s, 0.6H), 7.24 (s, 0.4H), 4.65 (s, 1.2H), 4.47 (s, 0.8H), 4.31 (s, 0.8H), 4.16 (q, 0.8H), 4.06 (q, 1.2H), 4.03 (s, 1.2H), 3.55 (t, 1.2H), 3.45-3.38 (m, 2H), 3.23 (t, 0.8H), 1.73 (s, 3H), 1.21 (t, 1.2H), 1.16 (t, 1.8H)。
【実施例１４】
【０１０１】
Ｎ−［２−（５−フェニル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−［２−（５−フェニル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシンエチルエステルを（チミン−１−イル）−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.28 (s, 0.6H), 11.26 (s, 0.4H), 9.08 (brs, 1H), 8.05 (d, 2H), 7.66-7.57 (m, 3H), 7.32 (s, 0.6H), 7.24 (s, 0.4H), 4.65 (s, 1.2H), 4.47 (s, 0.8H), 4.32 (s, 0.8H), 4.16 (q, 0.8H), 4.06 (q, 1.2H), 4.04 (s, 1.2H), 3.56 (t, 1.2H), 3.43-3.38 (m, 2H), 3.24 (t, 0.8H), 1.73 (s, 3H), 1.21 (t, 1.2H), 1.16 (t, 1.8H)。
【実施例１５】
【０１０２】
Ｎ−｛２−［５−（２，５−ジクロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（２，５−ジクロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステルを（チミン−１−イル）−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.27 (s, 0.6H), 11.25 (s, 0.4H), 9.13 (brs, 1H), 8.26 (d, 0.4H), 8.25 (d, 0.6H), 7.81-7.74 (m, 2H), 7.32 (s, 0.6H), 7.23 (s, 0.4H), 4.63 (s, 1.2H), 4.47 (s, 0.8H), 4.32 (s, 0.8H), 4.16 (q, 0.8H), 4.06 (q, 1.2H), 4.04 (s, 1.2H), 3.55 (t, 1.2H), 3.45-3.38 (m, 2H), 3.25 (t, 0.8H), 1.73 (s, 3H), 1.22 (t, 1.2H), 1.16 (t, 1.8H)。
【実施例１６】
【０１０３】
Ｎ−｛２−［５−（４−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステルを（チミン−１−イル）−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。
1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.20 (s, 1H), 8.37 (d, 2H), 8.24 (d, 2H), 7.49 (s, 1H), 4.82 (s, 1.7H), 4.45 (s, 0.3H), 4.42 (s, 0.3H), 4.13 (q, 0.3H), 4.04 (q, 1.7H), 4.01 (s, 1.7H), 3.39 (t, 1.7H), 3.28 (t, 0.3H), 3.16 (t, 1.7H), 3.03 (t, 0.3H), 1.74 (s, 3H), 1.21 (t, 0.6H), 1.16 (t, 2.4H)。
【実施例１７】
【０１０４】
Ｎ−｛２−［５−（２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステルを（チミン−１−イル）−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ11.29 (s, 0.6H), 11.28 (s, 0.4H), 9.21 (brs, 0.6H), 9.10 (brs, 0.4H), 8.26-8.21 (m, 1H), 7.97-7.89 (m, 3H), 7.33 (d, 0.6H), 7.26 (d, 0.4H), 4.68 (s, 1.2H), 4.45 (s, 0.4H), 4.33 (s, 0.8H), 4.18 (q, 0.8H), 4.08 (q, 1.2H), 4.07 (s, 1.2H), 3.59 (t, 1.2H), 3.47-3.40 (m, 2H), 3.28 (t, 0.8H), 1.74 (s, 3H), 1.24 (t, 1.2H), 1.18 (t, 1.8H)。
【実施例１８】
【０１０５】
Ｎ−｛２−［５−（２−クロロ−４−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（２−クロロ−４−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステルを（チミン−１−イル）−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.28 (s, 0.6H), 11.25 (s, 0.4H), 9.16 (brs, 1H), 8.62-8.57 (m, 1H), 8.54-8.48 (m, 1H), 8.42-8.36 (m, 1H), 7.33 (s, 0.6H), 7.24 (s, 0.4H), 4.66 (s, 1.2H), 4.47 (s, 0.8H), 4.33 (s, 0.8H), 4.18 (q, 0.8H), 4.08 (q, 1.2H), 4.06 (s, 1.2H), 3.57 (t, 1.2H), 3.45-3.40 (m, 2H), 3.28 (t, 0.8H), 1.75 (s, 1.8H), 1.74 (s, 1.2H), 1.24 (t, 1.2H), 1.18 (t, 1.8H)。
【実施例１９】
【０１０６】
Ｎ−｛２−［５−（２，４−ジクロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（２，４−ジクロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステルを（チミン−１−イル）−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ11.28 (s, 0.6H), 11.27 (s, 0.4H), 9.11 (brs, 1H), 8.28 (d, 0.6H), 8.27 (d, 0.4H), 8.00 (d, 0.6H), 7.98 (d, 0.4H), 7.72-7.68 (m, 1H), 7.33 (s, 0.6H), 7.25 (s, 0.4H), 4.66 (s, 1.2H), 4.48 (s, 0.8H), 4.33 (s, 0.8H), 4.18 (q, 0.8H), 4.08 (q, 1.2H), 4.06 (s, 1.2H), 3.57 (t, 1.2H), 3.45-3.39 (m, 2H), 3.26 (t, 0.8H), 1.75 (s, 3H), 1.25 (t, 1.2H), 1.17 (t, 1.8H)。
【実施例２０】
【０１０７】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステルを（チミン−１−イル）−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.29 (s, 0.6H), 11.28 (s, 0.4H), 9.20 (brs, 1H), 8.41-8.40 (m, 1H), 8.07-7.97 (m, 2H), 7.33 (s, 0.6H), 7.26 (s, 0.4H), 4.67 (s, 1.2H), 4.48 (s, 0.8H), 4.33 (s, 0.8H), 4.18 (q, 0.8H), 4.08 (q, 1.2H), 4.06 (s, 1.2H), 3.58 (t, 1.2H), 3.46-3.40 (m, 2H), 3.28 (t, 0.8H), 1.75 (s, 3H), 1.24 (t, 1.2H), 1.18 (t, 1.8H)。
【実施例２１】
【０１０８】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［４−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステルを［４−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ10.97 (s, 1H), 9.16 (brs, 1H), 8.40 (d, 0.6H), 8.38 (d, 0.4H), 8.06-7.94 (m, 2H), 7.91 (d, 0.6H), 7.85 (d, 0.4H), 7.45 (d, 4H), 7.37 (t, 4H), 7.29 (t, 2H), 6.96-6.93 (m, 1H), 6.80 (s, 1H), 4.81 (s, 1.2H), 4.63 (s, 0.8H), 4.36 (s, 0.8H), 4.18 (q, 0.8H), 4.07 (s, 1.2H), 4.06 (q, 1.2H), 3.61 (t, 1.2H), 3.48-3.40 (m, 2H), 3.27 (t, 0.8H), 1.25 (t, 1.2H), 1.17 (t, 1.8H)。
【実施例２２】
【０１０９】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［６−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステルを［６−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ10.90 (s, 0.45H), 10.89 (s, 0.55H), 9.30 (brs, 0.55H), 9.12 (brs, 0.45H), 8.59 (s, 0.45H), 8.58 (s, 0.55H), 8.39 (d, 0.55H), 8.38 (d, 0.45H), 8.34 (s, 0.55H), 8.33 (s, 0.45H), 8.02-7.97 (m, 1H), 7.92 (d, 0.55H), 7.89 (d, 0.45H), 7.53 (d, 4H), 7.38 (t, 4H), 7.29 (t, 2H), 6.83 (s, 1H), 5.39 (s, 1.1H), 5.18 (s, 0.9H), 4.48 (s, 0.9H), 4.23 (q, 0.9H), 4.09 (s, 1.1H), 4.03 (q, 1.1H), 3.73 (t, 1.1H), 3.54 (t, 1.1H), 3.45 (t, 0.9H), 3.29 (t, 0.9H), 1.27 (t, 1.35H), 1.15 (t, 1.65H)。
【実施例２３】
【０１１０】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［２−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステルを［２−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ11.65 (brs, 1H), 11.25 (s, 0.45H), 11.23 (s, 0.55H), 9.20 (brs, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.03-7.91 (m, 2H), 7.82 (s, 0.55H), 7.80 (s, 0.45H), 7.46 (d, 4H), 7.38 (t, 4H), 7.30 (dt, 2H), 6.87 (s, 1H), 5.15 (s, 1.1H), 4.96 (s, 0.9H), 4.47 (s, 0.9H), 4.22 (q, 0.9H), 4.10 (s, 1.1H), 4.09 (q, 1.1H), 3.69 (t, 1.1H), 3.52 (t, 0.9H), 3.45 (t, 1.1H), 3.29 (t, 0.9H), 1.26 (t, 1.35H), 1.16 (t, 1.65H)。
【実施例２４】
【０１１１】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［４−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステルを［４−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ10.69 (s, 1H), 9.21 (brs, 0.6H), 9.09 (brs, 0.4H), 8.40 (s, 1H), 8.07-7.96 (m, 2H), 7.92 (d, 0.6H), 7.86 (d, 0.4H), 7.36 (d, 2H), 7.02 (d, 0.6H), 7.01 (d, 1H), 6.94 (d, 2H), 5.12 (s, 2H), 4.81 (s, 1.2H), 4.64 (s, 0.8H), 4.37 (s, 0.8H), 4.18 (q, 0.8H), 4.08 (s, 1.2H), 4.08 (q, 1.2H), 3.76 (s, 3H), 3.62 (t, 1.2H), 3.47 (t, 1.2H), 3.43 (t, 0.8H), 3.28 (t, 0.8H), 1.24 (t, 1.2H), 1.17 (t, 1.8H)。
【実施例２５】
【０１１２】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［６−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステルを［６−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ10.56 (s, 1H), 10.59 (s, 0.55H), 9.31 (brs, 0.55H), 9.11 (brs, 0.45H), 8.57 (s, 0.45H), 8.56 (s, 0.55H), 8.40 (d, 0.55H), 8.39 (d, 0.45H), 8.31 (s, 0.55H), 8.30 (s, 0.45H), 8.03-7.99 (m, 1H), 7.93 (d, 0.55H), 7.91 (d, 0.45H), 7.39 (d, 1H), 6.95 (d, 2H), 5.38 (s, 1.1H), 5.17 (s, 0.9H), 5.14 (s, 2H), 4.48 (s, 0.9H), 4.23 (q, 0.9H), 4.08 (s, 1.1H), 4.07 (q, 1.1H), 3.76 (s, 3H), 3.72 (t, 1.1H), 3.54 (t, 1.1H), 3.45 (t, 0.9H), 3.29 (t, 0.9H), 1.27 (t, 1.35H), 1.15 (t, 1.65H)。
【実施例２６】
【０１１３】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［２−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステルを［２−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.39 (brs, 0.45H), 11.36 (brs, 0.55H), 9.20 (brs, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.95 (d, 0.55H), 7.92 (d, 0.45H), 7.82 (s, 0.55H), 7.79 (s, 0.45H), 7.37 (d, 2H), 6.95 (d, 2H), 5.17 (s, 2H), 5.13 (s, 1.1H), 4.93 (s, 0.9H), 4.45 (s, 0.9H), 4.21 (q, 0.9H), 4.08 (s, 1.1H), 4.07 (q, 1.1H), 3.76 (s, 3H), 3.66 (t, 1.1H), 3.49 (t, 1.1H), 3.43 (t, 0.9H), 3.28 (t, 0.9H), 1.25 (t, 1.35H), 1.16 (t, 1.65H)。
【実施例２７】
【０１１４】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［４−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステルを［４−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ10.71 (s, 1H), 9.22 (brs, 0.6H), 9.08 (brs, 0.4H), 8.40 (s, 1H), 8.07-7.96 (m, 2H), 7.92 (d, 0.6H), 7.86 (d, 0.4H), 7.02 (d, 0.6H), 7.00 (d, 0.4H), 6.99 (s, 1H), 6.91 (s, 2H), 6.02 (s, 2H), 5.08 (s, 2H), 4.81 (s, 1.2H), 4.64 (s, 0.8H), 4.37 (s, 0.8H), 4.18 (q, 0.8H), 4.08 (s, 1.2H), 4.08 (q, 1.2H), 3.62 (t, 1.2H), 3.47 (t, 1.2H), 3.43 (t, 0.8H), 3.28 (t, 0.8H), 1.24 (t, 1.2H), 1.17 (t, 1.8H)。
【実施例２８】
【０１１５】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［６−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステルを［６−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ10.60 (s, 0.45H), 10.59 (s, 0.55H), 9.31 (brs, 0.55H), 9.11 (brs, 0.45H), 8.58 (s, 0.45H), 8.57 (s, 0.55H), 8.40 (d, 0.55H), 8.39 (d, 0.45H), 8.32 (s, 0.55H), 8.31 (s, 0.45H), 8.03-7.98 (m, 1H), 7.93 (d, 0.55H), 7.90 (d, 0.45H), 7.05 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.91 (d, 1H), 6.02 (s, 2H), 5.38 (s, 1.1H), 5.17 (s, 0.9H), 5.11 (s, 2H), 4.48 (s, 0.9H), 4.23 (q, 0.9H), 4.08 (s, 1.1H), 4.07 (q, 1.1H), 3.73 (t, 1.1H), 3.54 (t, 1.1H), 3.45 (t, 0.9H), 3.30 (t, 0.9H), 1.27 (t, 1.35H), 1.15 (t, 1.65H)。
【実施例２９】
【０１１６】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［２−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステルをＮ−｛［２−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ11.37 (brs, 0.4H), 11.35 (brs, 0.6H), 9.20 (brs, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.03-7.99 (m, 1H), 7.95 (d, 0.6H), 7.92 (d, 0.4H), 7.82 (s, 0.6H), 7.79 (s, 0.4H), 7.01 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 6.91 (d, 1H), 6.02 (s, 2H), 5.14 (s, 3.2H), 4.93 (s, 0.8H), 4.45 (s, 0.8H), 4.21 (q, 0.8H), 4.08 (s, 1.2H), 4.07 (q, 1.2H), 3.65 (t, 1.2H), 3.48 (t, 1.2H), 3.43 (t, 0.8H), 3.27 (t, 0.8H), 1.25 (t, 1.2H), 1.16 (t, 1.8H)。
【実施例３０】
【０１１７】
Ｎ−［２−（５−ベンゾイル−４−フェニル−チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−（チミン−１−イル−アセチル）−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−［２−（５−ベンゾイル−４−フェニル−チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシンエチルエステルをＮ−（チミン−１−イル）−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.26 (s, 0.6H), 11.24 (s, 0.4H), 8.90 (brs, 0.6H), 8.78 (brs, 0.4H), 7.72 (d, 2H), 7.58-7.53 (m, 1H), 7.47-7.43 (m, 2H), 7.38-7.32 (m, 2H), 7.31-7.22 (m, 4H), 4.61 (s, 1.2H), 4.48 (s, 0.8H), 4.32 (s, 0.8H), 4.15 (q, 0.8H), 4.06 (s, 1.2H), 4.05 (q, 0.8H), 3.56 (t, 1.2H), 3.44 (t, 2H), 3.30 (t, 0.8H), 1.72 (s, 1.8H), 1.71 (s, 1.2H), 1.21 (t, 1.2H), 1.15 (t, 1.8H)。
【実施例３１】
【０１１８】
Ｎ−［２−（５−メチル−４−フェニル−チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−（チミン−１−イル−アセチル）−グリシンエチルエステル
実施例１３の手順の通り、Ｎ−［２−（５−メチル−４−フェニル−チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシンエチルエステルをＮ−（チミン−１−イル）−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.26 (s, 1H), 8.58 (brs, 0.6H), 8.50 (brs, 0.4H), 7.68 (d, 2H), 7.53-7.47 (m, 3H), 7.46-7.40 (m, 2H), 7.27 (s, 0.6H), 7.25 (s, 4H), 4.60 (s, 1.2H), 4.47 (s, 0.8H), 4.29 (s, 0.8H), 4.13 (q, 0.8H), 4.05 (q, 0.8H), 4.04 (s, 1.2H), 3.52 (t, 1.2H), 3.40 (t, 0.8H), 3.34 (t, 1.2H), 3.17 (t, 0.8H), 2.64 (s, 3H), 1.72 (s, 3H), 1.20 (t, 1.2H), 1.15 (t, 1.8H)。
【実施例３２】
【０１１９】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシン
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステル（２．８５ｇ、５．０ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン１０ｍＬおよび水２０ｍＬの混合溶媒中に懸濁した。水酸化リチウム一水和物（０．８４ｇ、２０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１０分間撹拌した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）でのモニタリングによる反応完了後、水２０ｍＬを加え、次いで反応混合物を１Ｎ ＨＣｌ溶液で酸性化し、ｐＨを３．０〜３．５の範囲に調節した。沈殿した固形物をろ過し、水で洗浄し、窒素ガスを送り込んで乾燥し、標題化合物（２．４４ｇ、４．５ｍｍｏｌ、９０％）を得た。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.28 (s, 0.5H), 11.24 (s, 0.5H), 8.09-8.05 (m, 2H), 7.68-7.65 (m, 2H), 7.31 (s, 0.5H), 7.24 (s, 0.5H), 4.64 (s, 1H), 4.44 (s, 1H), 4.13 (s, 1H), 3.95 (s, 1H), 3.54 (t, 1H), 3.45-3.38 (m, 2H), 3.25 (t, 1H), 1.73 (s, 1.5H), 1.71 (s, 1.5H)
【実施例３３】
【０１２０】
Ｎ−［２−（５−フェニル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−［２−（５−フェニル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.28 (s, 0.55H), 11.25 (s, 0.45H), 9.05 (brs, 1H), 8.05 (d, 2H), 7.68-7.57 (m, 3H), 7.32 (s, 0.55H), 7.24 (s, 0.45H), 4.64 (s, 1.1H), 4.46 (s, 0.9H), 4.20 (s, 0.9H), 3.97 (s, 1.1H), 3.54 (t, 1.1H), 3.45-3.37 (m, 2H), 3.24 (t, 0.9H), 1.74 (s, 1.1H), 1.73 (s, 0.9H)
【実施例３４】
【０１２１】
Ｎ−｛２−［５−（２，５−ジクロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（２，５−ジクロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.27 (s, 0.6H), 11.24 (s, 0.4H), 9.13 (brs, 1H), 8.26 (d, 0.4H), 8.25 (d, 0.6H), 7.82-7.25 (m, 2H), 7.32 (s, 0.6H), 7.24 (s, 0.4H), 4.62 (s, 1.2H), 4.45 (s, 0.8H), 4.20 (s, 0.8H), 3.97 (s, 1.2H), 3.54 (t, 1.2H), 3.43-3.37 (m, 2H), 3.26 (t, 0.8H), 1.73 (s, 3H)。
【実施例３５】
【０１２２】
Ｎ−｛２−［５−（４−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ12.85 (brs, 1H), 11.29 (s, 0.5H), 11.25 (s, 0.5H), 8.43-8.39 (m, 2H), 8.36-8.32 (m, 2H), 7.33 (s, 0.5H), 7.25 (s, 0.5H), 4.65 (s, 1H), 4.47 (s, 1H), 4.22 (s, 1H), 3.98 (s, 1H), 3.56 (t, 1H), 3.42 (t, 2H), 3.27 (t, 1H), 3.03 (t, 0.3H), 1.75 (s, 1.5H), 1.74 (s, 1.5H)。
【実施例３６】
【０１２３】
Ｎ−｛２−［５−（２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ12.95 (brs, 1H), 11.30 (s, 0.55H), 11.28 (s, 0.45H), 9.22 (brs, 0.55H), 9.08 (brs, 0.45H), 8.27-8.23 (m, 1H), 7.99-7.89 (m, 3H), 7.34 (s, 0.55H), 7.27 (s, 0.45H), 4.67 (s, 1.1H), 4.48 (s, 0.9H), 4.24 (s, 0.9H), 4.00 (s, 1.1H), 3.57 (t, 1H), 3.47- 3.41 (m, 2H), 3.33 (t, 0.9H), 1.75 (s, 3H),
【実施例３７】
【０１２４】
Ｎ−｛２−［５−（２−クロロ−４−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（２−クロロ−４−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.28 (s, 0.55H), 11.24 (s, 0.45H), 9.26 (brs, 1H), 8.62-8.57 (m, 1H), 8.55-8.48 (m, 1H), 8.43-8.36 (m, 1H), 7.34 (s, 0.55H), 7.24 (s, 0.45H), 4.65 (s, 1.1H), 4.46 (s, 0.9H), 4.20 (s, 0.9H), 3.99 (s, 1.1H), 3.56 (t, 1.1H), 3.46-3.39 (m, 2H), 3.29 (t, 0.9H), 1.75 (s, 1.1H), 1.73 (s, 0.9H)
【実施例３８】
【０１２５】
Ｎ−｛２−［５−（２，４−ジクロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（２，４−ジクロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.28 (s, 0.5H), 11.25 (s, 0.5H), 9.23 (brs, 1H), 8.29 (d, 0.5H), 8.27 (d, 0.5H), 7.99 (d, 0.5H), 7.97 (d, 0.5H), 7.72-7.67 (m, 1H), 7.34 (s, 0.5H), 7.25 (s, 0.5H), 4.65 (s, 1H), 4.46 (s, 1H), 4.17 (s, 1H), 3.99 (s, 1H), 3.56 (t, 1H), 3.45-3.38 (m, 2H), 3.28 (t, 1H), 1.73 (s, 3H)。
【実施例３９】
【０１２６】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.29 (s, 0.5H), 11.27 (s, 0.5H), 9.28 (brs, 1H), 8.41-8.39 (m, 1H), 8.06-7.97 (m, 2H), 7.33 (s, 0.5H), 7.26 (s, 0.5H), 4.66 (s, 1H), 4.47 (s, 1H), 4.19 (s, 1H), 3.99 (s, 1H), 3.57 (t, 1H), 3.46-3.39 (m, 2H), 3.29 (t, 1H), 1.75 (s, 1H), 1.74 (s, 1H)
【実施例４０】
【０１２７】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［４−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−アセチル｝−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［４−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ10.95 (brs, 1H), 9.16 (brs, 1H), 8.39 (d, 0.45H), 8.37 (d, 0.55H), 8.06-7.94 (m, 2H), 7.91 (d, 0.45H), 7.84 (d, 0.55H), 7.45 (d, 4H), 7.37 (t, 4H), 7.29 (t, 2H), 6.94 (d, 0.45H), 6.90 (d, 0.55H), 6.80 (s, 1H), 4.79 (s, 0.9H), 4.58 (s, 1.1H), 4.07 (s, 0.9H), 3.98 (s, 1.1H), 3.56 (t, 1.1H), 3.46 (t. 0.9H), 3.41 (t, 1.1H), 3.30 (t, 0.9H)
【実施例４１】
【０１２８】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［６−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−アセチル｝−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［６−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ10.89 (s, 1H), 8.57 (s, 0.4H), 8.56 (s, 0.6H), 8.38 (d, 0.4H), 8.35 (d, 0.6H), 8.34 (s, 0.4H), 8.32 (s, 0.6H), 8.01-7.91 (m, 1.4H), 7.82 (d, 0.6H), 7.54 (d, 4H), 7.38 (t, 4H), 7.29 (t, 2H), 6.83 (s, 1H), 5.37 (s, 0.8H), 5.11 (s, 1.2H), 4.12 (s, 1.2H), 3.97 (s, 0.8H), 3.78 (t, 0.8H), 3.54 (t, 0.8H), 3.44 (t, 1.2H), 3.33 (t, 1.2H)。
【実施例４２】
【０１２９】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［２−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−アセチル｝−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［２−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ11.20 (brs, 1H), 8.38 (d, 0.3H), 8.35 (d, 0.7H), 8.04-7.79 (m, 3H), 7.81 (d, 1H), 7.46 (d, 4H), 7.37 (t, 4H), 7.28 (dt, 2H), 6.86 (s, 0.3H), 6.85 (s, 0.7H), 5.13 (s, 0.6H), 4.89 (s, 1.4H), 4.02 (s, 1.4H), 3.96 (s, 0.6H), 3.66 (t, 0.6H), 3.51 (t, 0.6H), 3.44 (t, 1.4H), 3.34 (t, 1.4H)
【実施例４３】
【０１３０】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［４−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−アセチル｝−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［４−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ10.71 (brs, 1H), 8.40 (s, 0.5H), 8.38 (s, 0.5H), 8.07-7.96 (m, 2H), 7.92 (d, 0.5H), 7.85 (d, 0.5H), 7.36 (d, 2H), 7.02 (d, 0.5H), 6.98 (d, 0.5H), 6.94 (d, 2H), 5.11 (s, 2H), 4.80 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.09 (s, 1H), 3.98 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.59 (t, 1H), 3.47 (t, 1H), 3.42 (t, 1H), 3.30 (t, 1H)。
【実施例４４】
【０１３１】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［６−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−アセチル｝−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［６−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ10.56 (s, 1H), 8.57 (s, 0.45H), 8.56 (s, 0.55H), 8.39 (d, 0.45H), 8.38 (d, 0.55H), 8.31 (s, 0.45H), 8.30 (s, 0.55H), 8.02-7.96 (m, 1H), 7.93 (d, 0.45H), 7.87 (d, 0.55H), 7.39 (d, 2H), 6.95 (d, 2H), 5.37 (s, 0.9H), 5.14 (s, 2H), 5.13 (s, 1.1H), 4.27 (s, 1.1H), 4.00 (s, 0.9H), 3.76 (s, 3H), 3.71 (t, 0.9H), 3.54 (t, 0.9H), 3.44 (t, 1.1H), 3.31 (t, 1.1H)。
【実施例４５】
【０１３２】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［２−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−アセチル｝−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［２−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.38 (s, 1H), 11.35 (brs, 1H), 9.30 (brs, 0.5H), 9.12 (brs, 0.5H), 8.39 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.95 (d, 0.5H), 7.92 (d, 0.5H), 7.82 (s, 0.5H), 7.79 (s, 0.5H), 7.37 (d, 2H), 6.95 (d, 2H), 5.17 (s, 2H), 5.11 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.01 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.65 (t, 1H), 3.50 (t, 1H), 3.42 (t, 1H), 3.30 (t, 1H)。
【実施例４６】
【０１３３】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［４−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−アセチル｝−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［４−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ10.71 (brs, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.07-7.95 (m, 2H), 7.92 (d, 0.5H), 7.85 (d, 0.5H), 7.00 (d, 0.5H), 6.99 (s, 1H), 6.98 (d, 0.5H), 6.91 (s, 2H), 6.02 (s, 2H), 5.08 (s, 2H), 4.80 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.15 (s, 1H), 3.99 (s, 1H), 3.60 (t, 1H), 3.46 (t, 1H), 3.42 (t, 1H), 3.29 (t, 1H)。
【実施例４７】
【０１３４】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［６−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−アセチル｝−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［６−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ10.59 (s, 1H), 8.57 (s, 0.45H), 8.56 (s, 0.55H), 8.39 (d, 0.45H), 8.37 (d, 0.55H), 8.32 (s, 0.45H), 8.30 (s, 0.55H), 8.02-7.96 (m, 1H), 7.93 (d, 0.45H), 7.86 (d, 0.55H), 7.05 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 6.91 (d, 1H), 6.02 (s, 2H), 5.37 (s, 0.9H), 5.13 (s, 1.1H), 5.12 (s, 2H), 4.21 (s, 1.1H), 3.99 (s, 0.9H), 3.71 (t, 0.9H), 3.54 (t, 0.9H), 3.44 (t, 1.1H), 3.32 (t, 1.1H)。
【実施例４８】
【０１３５】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［２−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−アセチル｝−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［２−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ11.50 (brs, 1H), 11.35 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.03-7.94 (m, 2.5H), 7.90 (d, 0.5H), 7.82 (s, 0.5H), 7.79 (s, 0.5H), 7.01 (s, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.91 (d, 1H), 6.02 (s, 2H), 5.14 (s, 2H), 5.11 (s, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.24 (s, 1H), 4.00 (s, 1H), 3.65 (t, 1H), 3.50 (t, 1H), 3.42 (t, 1H), 3.30 (t, 1H)。
【実施例４９】
【０１３６】
Ｎ−［２−（５−ベンゾイル−４−フェニル−チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−（チミン−１−イル−アセチル）−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−［２−（５−ベンゾイル−４−フェニル−チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−（チミン−１−イル−アセチル）−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.25(s, 0.55H), 11.21 (s, 0.45H), 8.96 (brs, 1H), 7.72 (d, 2H), 7.58-7.53 (m, 1H), 7.47-7.43 (m, 2H), 7.38-7.32 (m, 2H), 7.31-7.22 (m, 4H), 4.60 (s, 1.1H), 4.46 (s, 0.9H), 4.17 (s, 0.9H), 3.99 (s, 1.1H), 3.54 (t, 1.1H), 3.44 (t, 2H), 3.31 (t, 0.9H), 1.73 (s, 1.65H), 1.71 (s, 1.35H)。
【実施例５０】
【０１３７】
Ｎ−［２−（５−メチル−４−フェニル−チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−（チミン−１−イル−アセチル）−グリシン
実施例３２の手順の通り、Ｎ−［２−（５−メチル−４−フェニル−チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−（チミン−１−イル−アセチル）−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.26 (s, 1H), 8.61 (brs, 0.55H), 8.56 (brs, 0.45H), 7.68 (d, 2H), 7.53-7.47 (m, 2H), 7.46-7.40 (m, 1H), 7.27 (s, 0.55H), 7.24 (s, 45H), 4.58 (s, 1.1H), 4.45 (s, 0.9H), 4.17 (s, 0.9H), 3.97 (s, 1.1H), 3.49 (t, 1.1H), 3.38 (t, 0.9H), 3.33 (t, 1.1H), 3.17 (t, 0.9H), 2.63 (s, 3H), 1.73 (s, 3H)。
【実施例５１】
【０１３８】
Ｎ−［２−（５−メチル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グリシン
テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）中のＮ−［２−（５−メチル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシンエチルエステル（６１６ｍｇ、２ｍｍｏｌ）の溶液に、水（３ｍＬ）に溶解されたＬｉＯＨ一水和物（２５２ｍｇ、６ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。室温で１時間撹拌した後、ジ−ｔ−ブチルジカーボナート（６５５ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を反応混合物に加えた。得られた反応混合物を３０分間撹拌した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）でのモニタリングによる反応完了後、真空中でテトラヒドロフランを除去した。残留溶液をエチルエーテル（１００ｍＬ）で洗浄した。２Ｎ ＨＣｌを加えることによって水層をｐＨ３に酸性化し、ジクロロメタン（５０ｍＬ）で抽出した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過した。真空中でろ液を濃縮し、所望の生成物（６９０ｍｇ、９１％）を得た。1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6)δ8.82 (brs, 1H), 3.84 (s, 1H), 3.81 (s, 1H), 3.28 (t, 2H), 3.21~3.16 (m, 2H), 2.82 (s, 3H), 1.38 (s, 4.5H), 1.33 (s, 4.5H)。
【実施例５２】
【０１３９】
Ｎ−［２−（４−メチル−チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グリシン
実施例５１の手順の通り、Ｎ−［２−（４−メチル−チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6)δ12.50 (brs, 1H), 8.29 (s, 0.5H), 8.27 (s, 0.5H), 7.59 (s, 1H), 3.72 (s, 1H), 3.69 (s, 1H), 3.14 (t, 2H), 3.06~2.98 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 1.27 (s, 4.5H), 1.23 (s, 4.5H)。
【実施例５３】
【０１４０】
Ｎ−｛２−［５−（４−クロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グリシン
実施例５１の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシンエチルエステルを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6)δ9.01 (brs, 1H), 8.11-8.08 (m, 2H), 7.68 (d, 2H), 3.84 (s, 1H), 3.80 (s, 1H), 3.30-3.23 (m, 4H), 1.38 (s, 4.5H), 1.30 (4.5H)。
【実施例５４】
【０１４１】
１−（５−メチル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル）−ピペラジン−２−オン、トリフルオロ酢酸塩
ジクロロメタン（１０ｍＬ）中のＮ−［２−（５−メチル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グリシン（７６０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）の溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（５１６ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を加えた。室温で２時間撹拌した後、ろ過によって沈殿を除去した。ろ液を約３ｍＬに濃縮し、０℃に冷却した。冷却溶液にトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加えた。混合物を同温度で２時間撹拌し、エチルエーテル（１０ｍＬ）をゆっくり加えた。沈殿した生成物をろ過し、エチルエーテルで洗浄し、真空中で乾燥して、白色固形物（６０２ｍｇ、８０％）を得た。1H-NMR (500 MHz ; DMSO-d6)δ10.13 (brs, 2H), 4.16 (t, 2H), 3.95 (s, 2H), 3.54 (t, 2H), 2.87 (s, 3H)。
【実施例５５】
【０１４２】
１−（４−メチル−チアゾール−２−スルホニル）−ピペラジン−２−オン、トリフルオロ酢酸塩
実施例５４の手順の通り、Ｎ−［２−（４−メチル−チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6)δ9.20 (brs, 2H), 7.94 (s, 1H), 4.08 (t, 2H), 3.94 (s, 2H), 3.52 (t, 2H), 2.46 (s, 3H)。
【実施例５６】
【０１４３】
１−［５−（４−クロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−ピペラジン−２−オン、トリフルオロ酢酸塩
実施例５４の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6)δ9.37 (brs, 2H), 8.15 (d, 2H), 7.70 (d, 2H), 4.14 (t, 2H), 3.98 (s, 2H), 3.56 (t, 2H), 1.41 (s, 9H)。
【実施例５７】
【０１４４】
１−［５−（４−クロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−４−［（チミン−１−イル）−アセチル］−ピペラジン−２−オン
１−エチル−３−（３’−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（０．２１ｇ、１．１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ５ｍＬ中のＮ−｛２−［５−（４−クロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−グリシン（０．５４ｇ，１．０ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌した。水（５０ｍＬ）を反応混合物に加えた。次いで沈殿した固形物をろ過し、水で洗浄し、窒素ガスを送り込んで乾燥し、標題化合物（０．４５ｇ、０．８６ｍｍｏｌ、８６％）を得た。
1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.29 (s, 0.6H), 11.28 (s, 0.4H), 8.13 (d, 2H), 7.68 (d, 2H), 7.33 (s, 0.6H), 7.27 (s, 0.4H), 4.66 (s, 1.2H), 4.57 (s, 0.8H), 4.43 (s, 0.8H), 4.29 (s, 1.2H), 4.16 (t, 1.2H), 4.02 (t, 0.8H), 3.94 (t, 1.2H), 3.84 (t, 0.8H), 1.74(s, 3H)。
【実施例５８】
【０１４５】
１−（５−フェニル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル）−４−［（チミン−１−イル）−アセチル］−ピペラジン−２−オン
テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）中のＮ−［２−（５−フェニル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシン（１．０２ｇ、２ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−メチルモルホリン（３．３ｍＬ、３ｍｍｏｌ）を加え、次いで混合物を−２０℃に冷却した。同温度で５分間撹拌した後、クロロギ酸イソブチル（３．４ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）を反応混合物に加えた。得られた混合物を１時間かけて０℃にゆっくり温めた。次いで反応混合物を真空中で蒸発させ、酢酸エチルおよびアセトニトリルの混合物に溶解した。溶液をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を真空中で蒸発させ、テトラヒドロフラン−エチルエーテル（１／１、ｖ／ｖ）でトリチュレートし、固形物を沈殿させた。固形物をろ別し、エチルエーテルで洗浄し、真空中で乾燥して、標題化合物（８８３ｍｇ、９０％）を得た。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.30 (s, 0.6H), 11.29 (s, 0.4H), 8.10 (d, 2H), 7.68-7.57 (m, 3H), 7.33 (s, 0.6H), 7.27 (s, 0.4H), 4.66 (s, 1.2H), 4.58 (s, 0.8H), 4.43 (s, 0.8H), 4.30 (s, 1.2H), 4.17 (t, 1.2H), 4.02 (t, 0.8H), 3.95 (t, 1.2H), 3.85 (t, 0.8H), 1.73(s, 3H)。
【実施例５９】
【０１４６】
１−［５−（２，５−ジクロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−４−［（チミン−１−イル）−アセチル］−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−［２−（５−フェニル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.30 (s, 0.6H), 11.28 (s, 0.4H), 8.31 (s, 1H), 7.85-7.75 (m, 2H), 7.33 (s, 0.6H), 7.27 (s, 0.4H), 4.66 (s, 1.2H), 4.58 (s, 0.8H), 4.43 (s, 0.8H), 4.30 (s, 1.2H), 4.18 (t, 1.2H), 4.04 (t, 0.8H), 3.95 (t, 1.2H), 3.85 (t, 0.8H), 1.74 (s, 3H)。
【実施例６０】
【０１４７】
１−［５−（４−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−４−［（チミン−１−イル）−アセチル］−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ11.30(s, 0.6H), 11.29 (s, 0.4H), 8.44-8.39(m, 4H), 7,34(s, 0.6H), 7.25(s, 0.4H), 4.69(s, 1.2H), 4.59(s, 0.8H), 4.45(s, 0.8H), 4.31 (s, 1.2H), 4.18(t, 1.2H), 4.05(t, 0.8H), 3.97(t, 1.2H), 3.86(t, 0.8H), 1.75(s, 3H)。
【実施例６１】
【０１４８】
１−［５−（２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−４−［（チミン−１−イル）−アセチル］−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.31(s, 1H), 8.27-8.24(m, 1H), 7.99-7.90 (m, 3H), 7,35(s, 0.6H), 7.30(s, 0.4H), 4.69(s, 1.2H), 4.61 (s, 0.8H), 4.49 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.21(t, 1.2H), 4.07(t, 0.8H), 3.98 (t, 1.2H), 3.88 (t, 0.8H), 1.75(s, 3H)。
【実施例６２】
【０１４９】
１−［５−（２−クロロ−４−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−４−［（チミン−１−イル）−アセチル］−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（２−クロロ−４−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.31 (s, 0.6H), 11.29 (s, 0.4H), 8.65-8.55 (m, 2H), 8.44-8.37 (m, 1H), 7.34 (s, 0.6H), 7.28 (s, 0.4H), 4.68 (s, 1.2H), 4.59 (s, 0.8H), 4.45 (s, 0.8H), 4.32 (s, 1.2H), 4.20 (t, 1.2H), 4.06 (t, 0.8H), 3.97 (t, 1.2H), 3.87 (t, 0.8H), 1.75(s, 3H)。
【実施例６３】
【０１５０】
１−［５−（２，４−ジクロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−４−［（チミン−１−イル）−アセチル］−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（２，４−ジクロロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ11.30 (s, 0.6H), 11.29 (s, 0.4H), 8.35 (d, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.72 (d, 1H), 7.34 (s, 0.6H), 7.28 (s, 0.4H), 4.68 (s, 1.2H), 4.59 (s, 0.8H), 4.45 (s, 0.8H), 4.31 (s, 1.2H), 4.19 (t, 1.2H), 4.05 (t, 0.8H), 3.96 (t, 1.2H), 3.87 (t, 0.8H), 1.75 (s, 3H)。
【実施例６４】
【０１５１】
１−（４−メチル−チアゾール−２−スルホニル）−４−［（チミン−１−イル）−アセチル］−ピペラジン−２−オン
ＤＭＦ３ｍＬに、４−（４−メチル−チアゾール−２−スルホニル）−ピペラジン−２−オントリフルオロ酢酸塩０．３０ｇ（０．８ｍｍｏｌ）、（チミン−１−イル）−酢酸０．１４７ｇ（０．８ｍｍｏｌ）およびＰｙＢＯＰ０．４５８ｇを加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌した。真空中でほとんどの溶媒を除去し、残留物を塩化メチレンに溶解した。溶液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水、１Ｎ ＨＣｌ、水およびブラインで順に洗浄した。有機層を濃縮し、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィーに付して、標題化合物０．１９ｇ（５６％）を得た。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.33 (s, 0.6H), 11.31 (s, 0.4H), 7.90 (d, 1H), 7.35 (s, 0.6H), 7.28 (s, 0.4H), 4.66 (s, 1.2H), 4.58 (s, 0.8H), 4.39 (s, 0.8H), 4.25 (s, 1.2H), 4.13 (t, 1.2H), 3.98 (t, 0.8H), 3.90 (t, 1.2H), 3.79 (t, 0.8H), 2.45 (s, 3H), 1.74 (s, 3H)。
【実施例６５】
【０１５２】
１−（５−メチル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル）−４−［（チミン−１−イル）−アセチル］−ピペラジン−２−オン
実施例６４に記載の方法Ｂの手順の通り、４−（５−メチル−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル）−ピペラジン−２−オントリフルオロ酢酸塩を（チミン−１−イル）−酢酸と反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.31 (s, 1H), 7.34 (s, 0.6H), 7.28 (s, 0.4H), 4.66 (s, 1.2H), 4.58 (s, 0.8H), 4.41 (s, 0.8H), 4.28 (s, 1.2H), 4.14 (t, 1.2H), 3.99 (t, 0.8H), 3.92 (t, 1.2H), 3.82 (t, 0.8H), 2.86 (s, 3H), 1.74 (s, 3H)。
【実施例６６】
【０１５３】
１−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−４−［（チミン−１−イル）−アセチル］−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−［（チミン−１−イル）−アセチル］−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ11.31 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.05 (d, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.35 (s, 0.6H), 7.29 (s, 0.4H), 4.69 (s, 1.2H), 4.61 (s, 0.8H), 4.48 (s, 0.8H), 4.37 (s, 1.2H), 4.21 (t, 1.2H), 4.07 (t, 0.8H), 3.98 (t, 1.2H), 3.88 (t, 0.8H), 1.76(s, 3H)。
【実施例６７】
【０１５４】
１−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−４−｛［４−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−アセチル｝］−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［４−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−アセチル｝−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ8.42 (s, 1H), 8.06-7.95 (m, 2H), 7.90 (d, 0.6H), 7.86 (d, 0.4H), 7.46 (d, 4H), 7.37 (t, 4H), 7.29 (t, 2H), 6.96 (d, 1H), 6.80 (s, 1H), 4.83 (s, 1.2H), 4.76 (s, 0.8H), 4.52 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.21 (t, 1.2H), 4.06 (t, 0.8H), 4.01 (t, 1.2H), 3.87 (t, 0.8H)。
【実施例６８】
【０１５５】
１−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−４−｛［６−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−アセチル｝］−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［６−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ10.89 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.43 (s, dH), 8.33 (d, 0.6H), 8.31 (d, 0.4H), 8.07-7.98 (m, 2H), 7.53 (d, 4H), 7.38 (t, 4H), 7.29 (t, 2H), 6.83 (s, 1H), 5.41 (s, 1.2H), 5.31 (s, 0.8H), 4.63 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.27 (t, 1.2H), 4.12-4.07 (m, 2H), 3.90 (t, 0.8H)。
【実施例６９】
【０１５６】
１−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−４−｛［２−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−アセチル｝］−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［２−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ11.26 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.06-7.93 (m, 2H), 7.81 (d, 1H), 7.46 (d, 4H), 7.38 (t, 4H), 7.30 (t, 2H), 6.86 (s, 1H), 5.17 (s, 1.2H), 5.09 (s, 0.8H), 4.60 (s, 0.8H), 4.36 (s, 1.2H), 4.25 (t, 1.2H), 4.10-4.05 (m, 2H), 3.89 (t, 0.8H)。
【実施例７０】
【０１５７】
１−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−４−｛［４−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−アセチル｝］−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［４−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−アセチル｝−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ10.69 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.07-7.96 (m, 2H), 7.90 (d, 0.6H), 7.87 (d, 0.4H), 7.36 (d, 2H), 7.03 (d, 1H), 6.94 (d, 2H), 5.11 (s, 2H), 4.83 (s, 1.2H), 4.75 (s, 0.8H), 4.52 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.21 (t, 1.2H), 4.06 (t, 0.8H), 4.01 (t, 1.2H), 3.88 (t, 0.8H), 3.76 (s, 3H)。
【実施例７１】
【０１５８】
１−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−４−｛［６−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−アセチル｝］−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［６−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ10.57 (s, 1H), 8.59 (s, 0.6H), 8.58 (s, 0.4H), 8.43 (s, 0.4H), 8.42 (s, 0.6H), 8.31 (s, 0.6H), 8.29 (s, 0.4H), 8.04-8.00 (m, 2H), 7.39 (d, 2H), 6.95 (d, 2H), 5.40 (s, 1.2H), 5.31 (s, 0.8H), 5.14 (s, 2H), 4.63 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.28 (t, 1.2H), 4.11 (t, 1.2H), 4.08 (t, 0.8H), 3.90 (t, 0.8H), 3.76 (s, 3H)。
【実施例７２】
【０１５９】
１−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−４−｛［２−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−アセチル｝］−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［６−Ｎ−（４−メトキシベンジルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.38 (brs, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.08-7.99 (m, 2H), 7.82 (s, 0.6H), 7.80 (s, 0.4H), 7.38 (d, 2H), 6.95 (d, 2H), 5.18 (s, 2H), 5.15 (s, 1.2H), 5.07 (s, 0.8H), 4.60 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.25 (t, 1.2H), 4.12-4.05 (m, 2H), 3.89 (t, 0.8H), 3.76 (s, 3H)。
【実施例７３】
【０１６０】
１−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−４−｛［４−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−アセチル｝］−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［４−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−シトシン−１−イル］−アセチル｝−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (400 MHz; DMSO-d6)δ10.71 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.07-7.95 (m, 2H), 7.91 (d, 0.6H), 7.87 (d, 0.4H), 7.02 (d, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.91 (s, 2H), 6.02 (s, 2H), 5.08 (s, 2H), 4.84 (s, 1.2H), 4.76 (s, 0.8H), 4.52 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.21 (t, 1.2H), 4.06 (t, 0.8H), 4.02 (t, 1.2H), 3.88 (t, 0.8H)。
【実施例７４】
【０１６１】
１−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−４−｛［６−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−アセチル｝］−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［６−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−アデニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ10.60 (s, 1H), 8.59 (s, 0.6H), 8.58 (s, 0.4H), 8.43 (s, 0.4H), 8.42 (s, 0.6H), 8.31 (s, 0.6H), 8.30 (d, 0.4H), 8.08-7.99 (m, 2H), 7.05 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.92 (d, 1H), 6.02 (s, 2H), 5.40 (s, 1.2H), 5.31 (s, 0.8H), 5.11 (s, 2H), 4.63 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.28 (t, 1.2H), 4.12 (t, 0.8H), 4.08 (t, 1.2H), 3.90 (t, 0.8H)。
【実施例７５】
【０１６２】
１−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニル］−４−｛［２−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−アセチル｝］−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−｛２−［５−（４−クロロ−２−ニトロフェニル）−１，３，４−チアジアゾール−２−スルホニルアミノ］−エチル｝−Ｎ−｛［２−Ｎ−（ピペロニルオキシカルボニル）−グアニン−９−イル］−アセチル｝−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.38 (brs, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.09-7.99 (m, 2H), 7.82 (s, 0.6H), 7.80 (s, 0.4H), 7.01 (s, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.91 (d, 1H), 6.03 (s, 2H), 5.14 (s, 3.2H), 5.07 (s, 0.8H), 4.59 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.24 (t, 1.2H), 4.10-4.05 (m, 2H), 3.88 (t, 0.8H)。
【実施例７６】
【０１６３】
１−（５−ベンゾイル−４−フェニル−チアゾール−２−スルホニル）−４−（チミン−１−イル−アセチル）−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−［２−（５−ベンゾイル−４−フェニル−チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−（チミン−１−イル−アセチル）−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.30(s, 0.6H), 11.29 (s, 0.4H), 7.76-7.72 (m, 2H), 7.59 (t, 1H), 7.47 (d, 2H), 7.40 (t, 2H), 7.34-7.26 (m, 4H),  4.66 (s, 1.2H), 4.60 (s, 0.8H), 4.47 (s, 0.8H), 4.33 (s, 1.2H), 4.20 (t, 1.2H), 4.06 (t, 0.8H), 3.95 (t, 1.2H), 3.84 (t, 0.8H), 1.73 (s, 1.65H), 1.74 (s, 3H)。
【実施例７７】
【０１６４】
１−（５−メチル−４−フェニル−チアゾール−２−スルホニル）−４−（チミン−１−イル−アセチル）−ピペラジン−２−オン
実施例５７の手順の通り、Ｎ−［２−（５−メチル−４−フェニル−チアゾール−２−スルホニルアミノ）−エチル］−Ｎ−（チミン−１−イル−アセチル）−グリシンを反応させることによって、標題化合物を合成した。1H NMR (500 MHz; DMSO-d6)δ11.30 (s, 0.6H), 11.29 (s, 0.4H), 7.69 (d, 2H), 7.52 (t, 2H), 7.45 (t, 1H), 7.32 (s, 0.6H), 7.27 (s, 0.4H), 4.66 (s, 1.2H), 4.58 (s, 0.8H), 4.42 (s, 0.8H), 4.28 (s, 1.2H), 4.17 (t, 1.2H), 4.03 (t, 0.8H), 3.92 (t, 1.2H), 3.81 (t, 0.8H), 2.68 (s, 3H), 1.74 (s, 3H)。
【０１６５】
ＰＮＡオリゴマーの固相合成
一般的手順
ＰＮＡオリゴマー合成をCLEAR-Base樹脂（Peptide international）上で手動で行った。この樹脂はアミン官能性を有する架橋型エチラートアクリラート樹脂である。この樹脂を、カップリング試薬としてＤＭＦ中のＨＢＴＵを使用して、ＰＡＬリンカー（５−［４−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ−３，５−ジメトキシフェノキシ］ペンタン酸（Advanced ChemTech）とカップリングさせた。得られた樹脂をＤＭＦ中の２０％ピペリジンで処理し、ＰＮＡオリゴマー合成のためにＰＡＬリンカーのアミン官能基を活性化した。ＰＮＡオリゴマーを以下の合成サイクルにしたがって合成した。樹脂についてのすべての反応および洗浄はフリットシリンジ反応器中で行った。
【０１６６】
ＰＮＡオリゴマーの固相合成に関する非限定的な一般的手順を以下に挙げる：
１．１０当量の適切なモノマー（ＤＭＦ中の０．５Ｍ酢酸中０．４Ｍ）と２時間カップリングさせる。
２．ＤＭＦで３回洗浄する。
３．無水酢酸（ＤＭＦ中の５％無水酢酸および６％ルチジン）で５分間キャッピングする。
４．ＤＭＦで２回洗浄する。
５．ピペリジン（ＤＭＦ中１．０Ｍ）を用いて、５分間、スルホンアミド中の反応型アセチル基上で切断する。
６．ＤＭＦで３回洗浄する。
７．４−メトキシベンゼンチオールを用いて、１５分間、チアゾールまたはチアジアゾール−２−スルホニル基を脱保護する。
８．ＤＭＦで３回洗浄する。
【０１６７】
最終的にチアゾールまたはチアジアゾール−２−スルホニル基を除去した後、樹脂をＤＭＦで３回、そしてジクロロメタンで２回洗浄し、乾燥する。環外のアミンの保護基の除去および樹脂からの切断は、ＴＦＡ中の２５％ｍ−クレゾールで１．５時間処理することによって、一段階で行った。樹脂をろ別し、ＴＦＡで洗浄する。一定の窒素流を送り込むことによって、集めたろ液のほとんどのＴＦＡを除去する。次いで残留物をエチルエーテルで懸濁し、遠心分離した。上清を慎重にデカントして除く。粗製のＰＮＡオリゴマーからなる残留物を、エチルエーテルで懸濁し、遠心分離し、上清を除去することによって、もう一度洗浄する。粗製のＰＮＡオリゴマーをＨＰＬＣで分析し、マトリクス支援レーザー脱離−飛行時間（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）によって確認した。
【実施例７８】
【０１６８】
ＰＮＡオリゴマー配列Ｈ２Ｎ−ＣＧＣＴＡ−Ｈの合成
上記一般的手順によって標題配列を手動で合成した。この合成では、一般式Ｉのモノマーであって、式中、Ｅが硫黄であり；Ｊが窒素であり；Ｒ１が４−クロロ−２−ニトロ−フェニルであり；Ｒ２がＨであり；ならびに核酸塩基（Ａ、Ｃ、およびＧ）の環外のアミンの保護基がベンズヒドリルオキシカルボニルであるモノマーを使用した。図１３はＨＰＬＣプロファイルを示す。ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ ＭＳ：１３５２．５（Ｍ＋Ｈ）。
【０１６９】
当業者は、本明細書中に具体的に記載されている本発明の特定の実施態様に等価な多数の発明を認識し、あるいは単に日常的実験法を使用して該等価な発明に至ることができる。このような等価な発明は特許請求の範囲内に包含されるものとする。
【図面の簡単な説明】
【０１７０】
【図１】図１は、ＤＮＡ認識に有用な、天然および非天然起源の核酸塩基の化学構造図を示す。
【図２】図２は、ＤＮＡ認識に有用な、天然および非天然起源の核酸塩基の別の化学構造図を示す。
【図３】図３は、保護された主鎖の合成についての概略図を示す。
【図４】図４は、モノマーの前駆物質である保護ピペラジノンの合成についての概略図を示す。
【図５】図５は、ＰＮＡモノマーの合成についての概略図を示す。
【図６】図６は、ＰＮＡモノマーの代替の合成についての概略図を示す。
【図７】図７は、ＰＮＡチミンモノマーの合成についての概略図を示す。
【図８】図８は、ＰＮＡチミンモノマーの代替の合成についての概略図を示す。
【図９】図９は、ＰＮＡシトシンモノマーの合成についての概略図を示す。
【図１０】図１０は、ＰＮＡアデニンモノマーの合成についての概略図を示す。
【図１１】図１１は、ＰＮＡグアニンモノマーの合成についての概略図を示す。
【図１２】図１２は、ＰＮＡモノマーからのＰＮＡオリゴマー合成についての概略図を示す。
【図１３】図１３は、合成オリゴマー（Ｈ２Ｎ−ＣＧＣＴＡ−Ｈ）に関するＨＰＬＣの結果を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
2007500184.tif 000072
【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【国際調査報告】
2007500184.tif 000076
2007500184.tif 000077