(57)【要約】  本発明は、式(Ｉ)：【化１】2007530672.tif 000017[式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｌ、Ｇ１、およびｍは、本明細書中で定義した意味を有する]の化合物；その製造方法；それらを含む医薬組成物；医薬組成物の製造方法；および治療におけるその使用を提供する。本化合物は、メタロプロテイナーゼ(ＭＭＰ)の阻害剤として有用である。
2007530672.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(Ｉ)：
【化１】
2007530672.tif 000014
[式中、
Ｒ１およびＲ２は、独立して、ＨまたはＣ１−６アルキルを表し；該アルキルは、所望により、アリール環もしくは芳香族性複素環式環(Ｏ、ＳおよびＮから独立して選択される１から３個のヘテロ原子を含む)によってさらに置換されており；該芳香環は、所望によりハロゲン、ＣＦ３、Ｃ１−４アルキルもしくはＣ１−４アルコキシによってさらに置換されており；
それぞれのＲ３およびそれぞれのＲ４は、独立して、ＨまたはＣ１−６アルキルを表し；該アルキルは、所望により、ＯＨ、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、アミノ、Ｎ−アルキルアミノもしくはＮ,Ｎ−ジアルキルアミノによってさらに置換されているか、
またはＲ３およびＲ４は、結合して一体となって３員環から７員環を形成し；該環は、所望により、Ｏ、Ｓ(Ｏ)ｑおよびＮから選択される１個のヘテロ原子を含み；
ｍは、整数１、２もしくは３を表し；
Ｘは、Ｓ(Ｏ)、Ｓ(Ｏ)２、またはＣ(＝Ｏ)を表し；
Ｒ５は、ＨまたはＣ１−６アルキルを表し；該アルキルは、所望により、ハロゲン、ＯＨもしくはＣ１−６アルコキシによってさらに置換されており；
Ｙは直接結合を表すか、
またはＹおよびＲ５は、結合して一体となり、基：−ＮＲ５Ｙ−は、全体で４員から７員の飽和もしくは部分的に不飽和のアザ環式環を表し；該アザ環式環は、所望によりＯ、Ｓ(Ｏ)ｎおよびＮから選択される１個のヘテロ原子をさらに含み；該アザ環式環は、所望によりベンゾ縮合しており；該アザ環式環は、所望によりＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシもしくはＯＨによって置換されており；
Ｌは直接結合を表すか、
またはＬは、Ｏ、Ｓ(Ｏ)ｐ、Ｃ(Ｏ)、ＮＲ６、Ｃ(Ｏ)ＮＲ６、ＮＲ６Ｃ(Ｏ)、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヘテロアルキルまたはＣ３−６ヘテロアルキニルを表し；該アルキル、アルケニルもしくはアルキニルは、所望によりハロゲン、ＯＨもしくはＣ１−６アルコキシによってさらに置換されており；
ｎ、ｐおよびｑは、独立して、整数０、１もしくは２を表し；
Ｇ１は、１個、２個、３個もしくは４個の環構造(それぞれ７個までの環原子を含む)を含む単環式、二環式、三環式もしくは四環式の基を表し；それぞれの環構造は、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、不飽和ヘテロシクロアルキル、アリール、または芳香族性複素環式環(Ｏ、ＳおよびＮから独立して選択される１から３個のヘテロ原子を含む)から独立して選択され；それぞれの環構造は、独立して、所望により、ハロゲン、ヒドロキシ、ＣＨＯ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−Ｃ１−６アルコキシ、アミノ、Ｎ−アルキルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジアルキルアミノ、アルキルスルホンアミノ、Ｃ２−６アルカノイルアミノ、シアノ、ニトロ、チオール、アルキルチオ、アルキルスルホニル、アルキルアミノスルホニル、Ｃ２−６アルカノイル、アミノカルボニル、Ｎ−アルキルアミノ−カルボニル、Ｎ,Ｎ−アミノ−カルボニルから独立して選択される１個以上の置換基によって置換されており；
ここで、いずれの置換基中のいずれのアルキルも、それ自体、所望により、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−Ｃ１−６アルコキシ、アミノ、Ｎ−アルキルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジアルキルアミノ、Ｎ−アルキルスルホンアミノ、Ｎ−Ｃ２−６アルカノイルアミノ、シアノ、ニトロ、チオール、アルキルチオ、アルキルスルホニル、Ｎ−アルキルアミノスルホニル、ＣＨＯ、Ｃ２−６アルカノイル、アミノカルボニル、Ｎ−アルキルアミノカルボニル、Ｎ,Ｎ−ジアルキルアミノカルボニルおよびカルバメートから選択される１個以上の基で置換されていてもよく；そして
ここで、いずれのアルキル基も、Ｃ１−６アルキル基であり；そして
Ｇ１が、二環式、三環式もしくは四環式の基である場合、それぞれの環構造は、独立して、直接結合によって、−Ｏ−によって、Ｃ１−６アルキルによって、Ｃ１−６ハロアルキルによって、Ｃ１−６ヘテロアルキルによって、Ｃ２−６アルケニルによって、Ｃ２−６アルキニルによって、スルホンによって、ＣＯによって、ＮＲ７ＣＯによって、ＣＯＮＲ７によって、ＮＲ７によって、Ｓによって、またはＣ(ＯＨ)によって、隣の環構造に結合しているか、またはそれぞれの環構造は隣の環構造に縮合しており；
Ｒ６およびＲ７は、独立して、ＨまたはＣ１−６アルキルを表し；そして
−ＮＲ５Ｙ−がアザ環式環を表し、かつＬが直接結合を表す場合、Ｇ１はまた、アザ環式環にスピロ縮合していてもよい]の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物。
【請求項２】
ＸがＳ(Ｏ)２を表す、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１およびＲ２がそれぞれ水素を表す、請求項１もしくは２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ３およびＲ４がそれぞれ水素を表す、請求項１から３の何れか１項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ５が水素またはＣ１−６アルキルを表し、そしてＹが直接結合を表す、請求項１から４の何れか１項に記載の化合物。
【請求項６】
−ＮＲ５Ｙ−が、全体で、５員もしくは６員の飽和もしくは部分的に不飽和のアザ環式環を表し、該アザ環式環が、所望によりＯ、Ｓ(Ｏ)ｎおよびＮから選択される１個のヘテロ原子をさらに含む、請求項１から４の何れか１項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｌが、直接結合、Ｏ、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヘテロアルキルまたはＣ３−６ヘテロアルキニルを表す、請求項１から６の何れか１項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｇ１が、所望により置換されている単環式もしくは二環式環構造を表す、請求項１から７の何れか１項に記載の化合物。
【請求項９】
５−[({４−[(５−クロロピリジン−２−イル)オキシ]ピペリジン−１−イル}スルホニル)メチル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−[２−({４−[(５−クロロピリジン−２−イル)オキシ]ピペリジン−１−イル}スルホニル)エチル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−[３−({４−[(５−クロロピリジン−２−イル)オキシ]ピペリジン−１−イル}スルホニル)プロピル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−({[４−(４−クロロフェニル)ピペラジン−１−イル]スルホニル}メチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−({[４−[(２−メトキシピリミジン−５−イル)エチニル]−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−イル]スルホニル}メチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−({[４−{[２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−５−イル]エチニル}−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−イル]スルホニル}メチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−({[４−[(２−シクロプロピルピリミジン−５−イル)エチニル]−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−イル]スルホニル}メチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−({[４−(４−クロロフェニル)ピペリジン−１−イル]スルホニル}メチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
Ｎ−ベンジル−１−(５−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−イル)メタンスルホンアミド；
１−(５−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−イル)−Ｎ−(２−フェニルエチル)メタンスルホンアミド；
５−(２−{[４−(４−クロロフェニル)ピペリジン−１−イル]スルホニル}エチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−(２−{[４−(４−クロロフェニル)ピペラジン−１−イル]スルホニル}エチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−(３−{[４−(４−クロロフェニル)ピペリジン−１−イル]スルホニル}プロピル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−(３−{[４−(４−クロロフェニル)ピペラジン−１−イル]スルホニル}プロピル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
およびその薬学的に許容される塩ならびにそれらの溶媒和物
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物の製造方法であって、
式(II)：
【化２】
2007530672.tif 000015
[式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｘおよびｍは、請求項１に定義した通りであり、そしてＬ１は脱離基を表す]の化合物を、式(III)：
【化３】
2007530672.tif 000016
[式中、Ｇ１、Ｌ、ＹおよびＲ５は、請求項１で定義した通りである]の化合物と反応させること；および
所望により、その後、薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を形成すること；
を含む方法。
【請求項１１】
薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤もしくは担体と組み合わせた、請求項１から９の何れか１項に記載の式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物を含む医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１１に記載の医薬組成物の製造方法であって、請求項１から９の何れか１項に記載の式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物を、薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤もしくは担体と混合することを含む方法。
【請求項１３】
治療に使用するための、請求項１から９の何れか１項に記載の式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物。
【請求項１４】
閉塞性気道疾患の処置に使用する医薬の製造における、請求項１から９の何れか１項に記載の式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物の使用。
【請求項１５】
閉塞性気道疾患が、喘息もしくは慢性閉塞性肺疾患である、請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
ＭＭＰ１２および／またはＭＭＰ９が介在する疾患もしくは状態を処置する方法であって、患者に、請求項１から９の何れか１項に記載の式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物を治療有効量で投与することを含む方法。
【請求項１７】
閉塞性気道疾患を処置する方法であって、患者に、請求項１から９の何れか１項に記載の式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物を、治療有効量で投与することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規トリアゾロン誘導体、その製造方法、それらを含む医薬組成物、および治療におけるその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
メタロプロテイナーゼは、近年急激にその数が増加しているプロテイナーゼ(酵素)のスーパーファミリーである。構造的および機能的な考察に基づいて、これらの酵素は、N.M. Hooper (1994) FEBS Letters 354:1-6 に記載されたように、ファミリーとサブファミリーに分類される。メタロプロテイナーゼの例は、コラゲナーゼ(ＭＭＰ１、ＭＭＰ８、ＭＭＰ１３)、ゼラチナーゼ(ＭＭＰ２、ＭＭＰ９)、ストロメライシン(ＭＭＰ３、ＭＭＰ１０、ＭＭＰ１１)、マトリライシン(ＭＭＰ７)、メタロエラスターゼ(ＭＭＰ１２)、エナメライシン(ＭＭＰ１９)、ＭＴ−ＭＭＰ(ＭＭＰ１４、ＭＭＰ１５、ＭＭＰ１６、ＭＭＰ１７)のような、マトリックスメタロプロテイナーゼ(ＭＭＰ)；ＴＮＦ変換酵素(ＡＤＡＭ１０、ＴＡＣＥ)のような、セクレターゼおよびシェダーゼを含むレプロリシン、アダマライシン、またはＭＤＣファミリー；プロコラーゲン・プロセッシング・プロテイナーゼ(ＰＣＰ)のような酵素を含むアスタシン・ファミリー；およびアグリカナーゼのような他のメタロプロテイナーゼ、エンドセリンコンバターゼファミリー、およびアンジオテンシンコンバターゼファミリーを含む。
【０００３】
メタロプロテイナーゼは、胎児の発育、骨形成、月経周期間の子宮の再構成のような、組織の再構成を含む、多血性の生理学的疾病過程に重要であると信じられている。これは、メタロプロテイナーゼが、コラーゲン、プロテオグリカン、フィブロネクチンのような広範囲のマトリックス基質の開裂を行い得ることに基づく。メタロプロテイナーゼはまた、腫瘍壊死因子(ＴＮＦ)のような生物学的に重要な細胞のメディエーターの加工・処理または分泌；および親和性の低いＩｇＥ受容体ＣＤ２３のような、生物学的に重要な膜タンパク質(より完全なリストは N. M. Hooper et al., (1997) Biochem J. 321:265-279 参照のこと)の翻訳後のタンパク質分解過程または切断において、重要であると信じられている。
【０００４】
メタロプロテイナーゼは、多くの疾患もしくは状態と関連している。１もしくはそれ以上のメタロプロテイナーゼの活性の阻害は、これらの疾患もしくは状態、例えば：関節の炎症(特にリウマチ性関節炎、骨関節炎、痛風)、胃腸管の炎症(特に炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、胃炎)、皮膚の炎症(特に乾癬、湿疹、皮膚炎)のような様々な炎症性およびアレルギー性疾患；腫瘍の転移または浸潤；骨関節炎のような細胞外マトリックスの無制御の分解；骨の再吸収性疾患(骨粗鬆症、ページェット病)；異常血管新生と関連した疾患；糖尿病、歯周病(歯肉炎など)と関連した、コラーゲンの再構築の亢進；角膜の潰瘍、皮膚の潰瘍、手術後の状態(結腸の吻口など)、皮膚の創傷治癒；中枢および末梢神経系の脱髄性疾患(多発性硬化症など)；アルツハイマー病；再狭窄、アテローム性動脈硬化症などの心血管疾患において観察される、細胞外マトリックスの再構成；喘息；鼻炎；および慢性閉塞性肺疾患(ＣＯＰＤ)において、十分有益であり得る。
【０００５】
ＭＭＰ１２はまた、マクロファージ・エラスターゼまたはメタロエラスターゼとして知られており、これは初めに、マウスにおいて、Shapiroらによってクローニングされ [1992, Journal of Biological Chemistry 267: 4664]、そしてヒトにおいて、同じグループによって 1995年にクローニングされた。ＭＭＰ−１２は、活性化されたマクロファージにおいて優先的に発現され、喫煙者由来の肺胞マクロファージから [Shapiro et al, 1993, Journal of Biological Chemistry, 268: 23824]、そしてアテローム性動脈硬化症の病変部における泡沫細胞中で [Matsumoto et al, 1998, Am J Pathol 153: 109]、分泌されることが示されている。ＣＯＰＤのマウスのモデルは、６月間、１日当たり２本、週６日 タバコの煙で負荷をかけたマウスをベースとしている。野生型のマウスは、該処置の後肺気腫にかかった。ＭＭＰ１２ノックアウトマウスが該モデルで試験した場合、肺気腫にほとんどかからなかった。このことは、ＭＭＰ−１２がＣＯＰＤの病理変化におけるキーエンザイムであることを強く示している。ＣＯＰＤ(肺気腫および気管支炎)におけるＭＭＰ１２のようなＭＭＰの役割は、Anderson and Shinagawa, 1999, Current Opinion in Anti-inflammatory and Immunomodulatory Investigational Drugs 1(1): 29-38 において論じられている。近年では、ヒトの頚動脈プラーク Kangavari において、喫煙がマクロファージの浸潤およびマクロファージに誘導されるＭＭＰ−１２の発現を増大させることが見出されている [Matetzky S, Fishbein MC et al., Circulation 102:(18), 36-39 Suppl. S, Oct 31, 2000]。
【０００６】
ＭＭＰ９(ゼラチナーゼ Ｂ；９２ｋＤａ タイプ IV コラゲナーゼ；９２ｋＤａ ゼラチナーゼ)は、初めて精製され、クローン化され、１９８９年に配列決定された、分泌性タンパク質である [S.M. Wilhelm  et al (1989) J. Biol Chem. 264 (29): 17213-17221; 訂正の発表：J. Biol Chem. (1990) 265 (36): 22570]。ＭＭＰ９の近年のレビューは、このプロテアーゼについての詳細な情報と参考文献の、優れた情報源である：T.H. Vu & Z. Werb (1998) (In :  Matrix Metalloproteinases. 1998.  Edited by W.C. Parks & R.P. Mecham.  pp115 - 148.  Academic Press.  ISBN 0-12-545090-7) 。下記の事項は、T.H. Vu & Z. Werb (1998). によるレビューから引用する。
【０００７】
ＭＭＰ９の発現は、一般的に、トロホブラスト、破骨細胞、好中球、マクロファージを含む幾つかの細胞のタイプに制限される。しかし、それらの発現は、同じおよび他の細胞タイプにおいて、成長因子またはサイトカイニンに細胞が曝されることを含めて、幾つかのメディエータによって誘発される。これらは、しばしば炎症応答の発生に関するものと同じメディエータである。他の分泌されたＭＭＰと同様に、ＭＭＰ９は、不活性な酵素前駆体として放出され、続いて切断され、酵素的に活性な酵素を形成する。この in vivo での活性化に要するプロテアーゼは、知られていない。活性なＭＭＰ９と不活性な酵素のバランスは、さらに天然に生じたタンパク質である、ＴＩＭＰ−１(メタロプロテイナーゼ−１の組織阻害剤)との相互作用によって調節される。ＴＩＭＰ−１は、ＭＭＰ９のＣ末端領域に結合し、ＭＭＰ９の触媒ドメインの阻害を引き起こす。ＭＭＰ９前駆体の誘発発現のバランス、前駆体の活性なＭＭＰ９への切断、およびＴＩＭＰ−１の存在が組み合わさって、局所に存在する触媒的に活性なＭＭＰ９の量を決定する。タンパク質分解的に活性なＭＭＰ９は、ゼラチン、エラスチン、および野生型のタイプ IV コラーゲンおよびタイプＶコラーゲンを含む基質を攻撃し；野生型のタイプＩコラーゲン、プロテオグリカン、またはラミニンに対して活性を持たない。
【０００８】
様々な生理学的な、および病理学的なプロセスにおいて、ＭＭＰ９の役割に関わるデータは増大している。生理学的な役割は、胚の着床の初期段階における、子宮の上皮を通じての胚のトロホブラストの浸潤；骨の成長と発達における幾つかの役割；および炎症性の細胞の、血管から組織への移動を含む。
【０００９】
ＭＭＰ−９の放出は、酵素免疫アッセイを用いて測定され、別の集団からのものと比べて、処置していない喘息由来の体液およびＡＭ上清において、有意に増加している [Am. J. Resp. Cell & Mol. Biol., Nov 1997, 17 (5):583-591]。また、増大したＭＭＰ９発現は、特定の別の病状においても観測されている。そのことによって、ＭＭＰ９は、例えば、関節炎、腫瘍の転移、アルツハイマー病、多発性硬化症、急性の環状動脈症状、例えば心筋梗塞などを引き起こすアテローム性硬化症におけるプラーク破裂、のような疾病過程において、ＭＭＰ９が関係している。
【００１０】
幾つかのメタロプロテイナーゼ阻害剤が既知である(例えば Beckett R.P. and Whittaker M., 1998, Exp. Opin. Ther. Patents, 8(3):259-282, および Whittaker M. et al, 1999, Chemical Reviews 99(9):2735-2776 のＭＭＰ阻害剤のレビューを参照のこと)。
【００１１】
我々は、今、メタロプロテイナーゼの阻害剤である新規のクラスの化合物、すなわちトリアゾロン誘導体を見出し、ＭＭＰの、例えばＭＭＰ１２およびＭＭＰ９の阻害に特に関心がある。本発明の化合物は、有益な効果、選択性、および／または薬物動態学的性質を有する。本発明のある種の化合物はまた、ＴＡＣＥおよび／またはアグリカナーゼの阻害剤としても有用であり得る。
【発明の開示】
【００１２】
本発明に従って、式(Ｉ)：
【化１】
2007530672.tif 000003
[式中、
Ｒ１およびＲ２は、独立して、ＨまたはＣ１−６アルキルを表し；該アルキルは、所望により、アリール環もしくは芳香族性複素環式環(Ｏ、ＳおよびＮから独立して選択される１から３個のヘテロ原子を含む) によってさらに置換されており；該芳香環は、所望によりハロゲン、ＣＦ３、Ｃ１−４アルキルもしくはＣ１−４アルコキシによってさらに置換されており；
それぞれのＲ３およびそれぞれのＲ４は、独立して、ＨまたはＣ１−６アルキルを表し；該アルキルは、所望により、ＯＨ、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、アミノ、Ｎ−アルキルアミノもしくはＮ,Ｎ−ジアルキルアミノによってさらに置換されているか、
またはＲ３およびＲ４は、結合して一体となって３員環から７員環を形成し；該環は、所望により、Ｏ、Ｓ(Ｏ)ｑおよびＮから選択される１個のヘテロ原子を含み；
【００１３】
ｍは、整数１、２もしくは３を表し；
Ｘは、Ｓ(Ｏ)、Ｓ(Ｏ)２、またはＣ(＝Ｏ)を表し；
Ｒ５は、ＨまたはＣ１−６アルキルを表し；該アルキルは、所望により、ハロゲン、ＯＨもしくはＣ１−６アルコキシによってさらに置換されており；
Ｙは直接結合を表すか、
またはＹおよびＲ５は、結合して一体となり、基：−ＮＲ５Ｙ−は、全体で、４員から７員の飽和もしくは部分的に不飽和のアザ環式環を表し；該アザ環式環は、所望によりＯ、Ｓ(Ｏ)ｎおよびＮから選択される１個のヘテロ原子をさらに含み；該アザ環式環は、所望によりベンゾ縮合しており；該アザ環式環は、所望によりＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシもしくはＯＨによって置換されており；
Ｌは直接結合を表すか、
またはＬは、Ｏ、Ｓ(Ｏ)ｐ、Ｃ(Ｏ)、ＮＲ６、Ｃ(Ｏ)ＮＲ６、ＮＲ６Ｃ(Ｏ)、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヘテロアルキルまたはＣ３−６ヘテロアルキニルを表し；該アルキル、アルケニルもしくはアルキニルは、所望によりハロゲン、ＯＨもしくはＣ１−６アルコキシによってさらに置換されており；
【００１４】
ｎ、ｐおよびｑは、独立して、整数０、１もしくは２を表し；
Ｇ１は、１個、２個、３個もしくは４個の環構造(それぞれ７個までの環原子を含む)を含む単環式、二環式、三環式もしくは四環式の基を表し；それぞれの環構造は、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、不飽和ヘテロシクロアルキル、アリール、または芳香族性複素環式環(Ｏ、ＳおよびＮから独立して選択される１から３個のヘテロ原子を含む)から独立して選択され；それぞれの環構造は、独立して、所望により、ハロゲン、ヒドロキシ、ＣＨＯ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−Ｃ１−６アルコキシ、アミノ、Ｎ−アルキルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジアルキルアミノ、アルキルスルホンアミノ、Ｃ２−６アルカノイルアミノ、シアノ、ニトロ、チオール、アルキルチオ、アルキルスルホニル、アルキルアミノスルホニル、Ｃ２−６アルカノイル、アミノカルボニル、Ｎ−アルキルアミノ−カルボニル、Ｎ,Ｎ−アミノ−カルボニルから独立して選択される１個以上の置換基によって置換されており；
ここで、いずれの置換基中のいずれのアルキルも、それ自体、所望により、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−Ｃ１−６アルコキシ、アミノ、Ｎ−アルキルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジアルキルアミノ、Ｎ−アルキルスルホンアミノ、Ｎ−Ｃ２−６アルカノイルアミノ、シアノ、ニトロ、チオール、アルキルチオ、アルキルスルホニル、Ｎ−アルキルアミノスルホニル、ＣＨＯ、Ｃ２−６アルカノイル、アミノカルボニル、Ｎ−アルキルアミノカルボニル、Ｎ,Ｎ−ジアルキルアミノカルボニルおよびカルバメートから選択される１個以上の基で置換されていてもよく；そして
ここで、いずれのアルキル基も、Ｃ１−６アルキル基であり；そして
Ｇ１が、二環式、三環式もしくは四環式の基である場合、それぞれの環構造は、独立して、直接結合によって、−Ｏ−によって、Ｃ１−６アルキルによって、Ｃ１−６ハロアルキルによって、Ｃ１−６ヘテロアルキルによって、Ｃ２−６アルケニルによって、Ｃ２−６アルキニルによって、スルホンによって、ＣＯによって、ＮＲ７ＣＯによって、ＣＯＮＲ７によって、ＮＲ７によって、Ｓによって、またはＣ(ＯＨ)によって、隣の環構造に結合しているか、またはそれぞれの環構造は隣の環構造に縮合しており；
Ｒ６およびＲ７は、独立して、ＨまたはＣ１−６アルキルを表し；そして
−ＮＲ５Ｙ−がアザ環式環を表し、かつＬが直接結合を表す場合、Ｇ１はまた、アザ環式環にスピロ縮合していてもよい]の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物を提供する。
【００１５】
式(Ｉ)の化合物は、エナンチオマーの形態で存在していてもよい。全てのエナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ体、およびその混合物は、本発明の範囲に含まれると理解されるべきである。
【００１６】
式(Ｉ)の化合物はまた、種々の互変異性体の形態で存在していてもよい。従って、例えば、化合物のトリアゾロン環(ここで、Ｒ１およびＲ２は、それぞれＨを表す)は、下記：
【化２】
2007530672.tif 000004
の互変異性体の形態で存在し得る。
全ての可能な互変異性体の形態およびその混合物は、本発明の範囲に含まれる。
【００１７】
１つの態様において、Ｘは、Ｓ(Ｏ)２を表す。別の態様において、Ｘは、Ｃ(＝Ｏ)を表す。
１つの態様において、Ｒ１はＨを表す。１つの態様において、Ｒ２はＨを表す。別の態様において、Ｒ１およびＲ２は、それぞれＨを表す。
【００１８】
１つの態様において、Ｒ３およびＲ４は、独立して、ＨまたはＣ１−６アルキルを表す。別の態様において、Ｒ３およびＲ４は、それぞれＨを表す。
１つの態様において、ｍは整数１を表す。別の態様において、ｍは整数２を表す。
【００１９】
１つの態様において、Ｒ５はＨまたはＣ１−６アルキルを表す。別の態様において、Ｒ５はＨを表す。
１つの態様において、Ｙは直接結合を表す。
【００２０】
別の態様において、ＹおよびＲ５は、結合して一体となり、基：−ＮＲ５Ｙ−は、全体で４員から７員の飽和もしくは部分的に不飽和のアザ環式環を表し；該アザ環式環は、所望によりＯ、Ｓ(Ｏ)ｎおよびＮから選択される１個のヘテロ原子をさらに含み；該アザ環式環は、所望によりベンゾ縮合している。
【００２１】
別の態様において、ＹおよびＲ５は、結合して一体となり、−ＮＲ５Ｙ−は、全体で４員から７員の飽和もしくは部分的に不飽和のアザ環式環を表し；該アザ環式環は、所望によりＯ、Ｓ(Ｏ)ｎおよびＮから選択される１個のヘテロ原子をさらに含む。
【００２２】
別の態様において、ＹおよびＲ５は、結合して一体となり、−ＮＲ５Ｙ−は、全体で、ピペリジニル、３,４−デヒドロピペリジニル、またはピペラジニルを表す。
【００２３】
１つの態様において、Ｌは直接結合を表す。別の態様において、Ｌは、Ｏ、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヘテロアルキル、またはＣ３−６ヘテロアルキニルを表す。
【００２４】
１つの態様において、Ｇ１は、所望により置換されている単環式もしくは二環式環構造を表す。別の態様において、Ｇ１は、所望により置換されている単環式環構造を表す。別の態様において、Ｇ１は、所望により置換されているフェニルもしくはヘテロアリール環を表す。別の態様において、Ｇ１は、所望により置換されている二環式環構造を表す。別の態様において、Ｇ１は、所望により置換されている二環式環構造を表し、ここで、それぞれの環は、独立して、フェニルまたはヘテロアリールである。別の態様において、Ｇ１は、所望により置換されている二環式環構造を表し、ここで、２つの環は、互いに直接結合しているか、またはＯ原子によって隔てられている。別の態様において、Ｇ１は、所望により置換されている二環式環構造を表し、それぞれの環は、独立して、フェニルまたはヘテロアリールであり、そして２つの環は、互いに直接結合しているか、またはＯ原子によって隔てられている。
【００２５】
１つの態様において、ＸはＳ(Ｏ)２を表し；Ｒ１およびＲ２は、それぞれＨを表し；Ｒ３およびＲ４は、独立して、ＨまたはＣ１−６アルキルを表し；ｍは整数１または２を表し；Ｒ５はＨを表し、そしてＹは直接結合を表すか；またはＹおよびＲ５は、結合して一体となり、基：−ＮＲ５Ｙ−は、全体で、ピペリジニル、３,４−デヒドロピペリジニル、またはピペラジニルを表し；Ｌは、直接結合、Ｏ、Ｃ２−６アルキニル、またはＣ１−６アルキルを表し；そしてＧ１は、所望により置換されている単環式もしくは二環式環構造を表す。
【００２６】
１つの態様において、ＸはＳ(Ｏ)２を表し；Ｒ１およびＲ２は、それぞれＨを表し；Ｒ３およびＲ４は、それぞれＨを表し；ｍは整数１を表し；Ｒ５はＨを表し、そしてＹは直接結合を表すか；またはＹおよびＲ５は結合して一体となり、基：−ＮＲ５Ｙ−は、全体で、ピペリジニル、３,４−デヒドロピペリジニル、またはピペラジニルを表し；Ｌは、直接結合、Ｏ、Ｃ２アルキニル、またはＣ１−４アルキルを表し；そしてＧ１は、所望により置換されている単環式もしくは二環式環構造を表し、それぞれの環は、独立して、フェニルまたはヘテロアリールであり；そしてＧ１が二環式環構造を表す場合、２つの環は、互いに直接結合しているか、またはＯ原子によって隔てられている。
【００２７】
異なる指定をしない限り、本明細書中で記載される“Ｃ１−６アルキル”という用語は、１から６個の炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖のアルキル基を表す。このような基の例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、およびｔ−ブチルを含む。“Ｃ１−４アルキル”という用語は、同様に解釈されるべきである。
【００２８】
ジアルキルアミノ基中の２つのアルキル部分は、同一であっても異なっていてもよい。
異なる指定をしない限り、本明細書中で記載される“Ｃ２−６アルケニル”という用語は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含む、２から６個の炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖のアルキルを表す。このような基の例は、エテニル、プロペニル、およびブテニルを含む。
【００２９】
異なる指定をしない限り、本明細書中で記載される“Ｃ２−６アルキニル”という用語は、少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を含む２から６個の炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖のアルキルを表す。このような基の例は、エチニル、プロピニル、およびブチニルを含む。
【００３０】
異なる指定をしない限り、本明細書中で記載される“Ｃ１−６アルコキシ”という用語は、酸素原子を介して分子と結合している、１から６個の炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖のアルキルを表す。このような基の例は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｉ−プロポキシ、およびｔ−ブトキシを含む。“Ｃ１−６アルキルチオ”という用語は、硫黄原子を介して結合する以外は、同様に解釈されるべきである。“Ｃ１−４アルコキシ”および“Ｃ１−４アルキルチオ”という用語も、同様に解釈されるべきである。
【００３１】
異なる指定をしない限り、本明細書で記載される“ハロゲン”という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを表す。
異なる指定をしない限り、本明細書で記載される“Ｃ１−６ヘテロアルキル”という用語は、Ｏ、Ｓ(Ｏ)ｎ、およびＮから独立して選択される１個以上のヘテロ原子を含む、１から６個の炭素原子を有する、直鎖もしくは分枝鎖のアルキルを表す。このような基の例は、−Ｏ−(ＣＨ２)３−、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２−を含む。“Ｃ３−６ヘテロアルキニル”という用語は、同様に解釈されるべきであり、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−Ｏ−といった基を含む。
【００３２】
“Ｃ１−６ハロアルキルもしくはハロ−Ｃ１−６アルコキシ”の例は、ＣＨ２Ｆ、ＣＨＦ２、ＣＦ３、ＣＦ３ＣＦ２、ＣＦ３ＣＨ２、ＣＨ２ＦＣＨ２、ＣＨ３ＣＦ２、ＣＦ３ＣＨ２ＣＨ２、ＯＣＦ３、およびＯＣＨ２ＣＦ３を含む。
【００３３】
異なる指定をしない限り、本明細書中で記載される“Ｃ２−６アルカノイル”という用語は、カルボニル(Ｃ＝Ｏ)を介して分子に結合している、１から５個の炭素原子を有する直鎖もしくば分枝鎖のアルキルを表す。このような基の例は、アセチル、プロピオニル、およびピバロイルを含む。
【００３４】
４員から７員の飽和もしくは部分的に不飽和のアザ環式環(所望によりＯ、Ｓ(Ｏ)ｎもしくはＮから選択される１個のヘテロ原子をさらに含み；かつ所望によりベンゾ縮合している)の例は、ピロリジン、ピペリジン、３,４−デヒドロピペリジン、テトラヒドロキノリン、テトラヒドロイソキノリン、ピペラジン、モルホリン、およびペルヒドロアゼピンを含む。
【００３５】
７個までの環原子(Ｏ、ＳおよびＮから独立して選択される１から３個のヘテロ原子を含む)を有する芳香族性複素環式環の例は、フラン、チオフェン、ピロール、ピリジン、チアゾール、イミダゾール、オキサゾール、イソキサゾール、ピラゾール、トリアゾール、オキサジアゾール、チアジアゾール、ピラジン、ピリダジン、およびピリミジンを含む。
【００３６】
７個までの環原子を含むシクロアルキルもしくはシクロアルケニル環の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、およびシクロヘキセニルを含む。
【００３７】
７個までの環原子を含むヘテロシクロアルキルもしくは不飽和ヘテロシクロアルキル環の例は、ピロリジン、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジオキソラン、チアン、ピペリジン、３,４−デヒドロピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、およびペルヒドロアゼピンを含む。
アリール基の例は、フェニルおよびナフチルを含む。
【００３８】
−ＮＲ５Ｙ−がアザ環式環を表し、かつＬが直接結合を表し、かつＧ１がアザ環式環にスピロ縮合している化合物の例は、例えば
【化３】
2007530672.tif 000005
といった構造を含む。
【００３９】
分子のフラグメントの特定の例：
【化４】
2007530672.tif 000006
は、
【化５】
2007530672.tif 000007
および種々の環が所望により置換されている対応する構造を含む。
【００４０】
縮合二環式環系の具体例は、キノリニル、イソキノリニル、インドリル、テトラヒドロイソキノリニル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、キナゾリニル、フタラジニル、ジヒドロベンゾフラニル、ナフチル、およびジヒドロインドリルを含む。望ましい二環式環系は、キノリニル、イソキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、ナフチル、ベンゾフラニル、およびベンゾチエニルを含む。
【００４１】
本発明の化合物における特定の置換基および置換基の数は、立体的に望ましくない組み合わせを避けるように選択されると認識されるであろう。
【００４２】
本発明の化合物の例は、
５−[({４−[(５−クロロピリジン−２−イル)オキシ]ピペリジン−１−イル}スルホニル)メチル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−[２−({４−[(５−クロロピリジン−２−イル)オキシ]ピペリジン−１−イル}スルホニル)エチル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−[３−({４−[(５−クロロピリジン−２−イル)オキシ]ピペリジン−１−イル}スルホニル)プロピル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−({[４−(４−クロロフェニル)ピペラジン−１−イル]スルホニル}メチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−({[４−[(２−メトキシピリミジン−５−イル)エチニル]−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−イル]スルホニル}メチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−({[４−{[２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−５−イル]エチニル}−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−イル]スルホニル}メチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−({[４−[(２−シクロプロピルピリミジン−５−イル)エチニル]−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−イル]スルホニル}メチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−({[４−(４−クロロフェニル)ピペリジン−１−イル]スルホニル}メチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
Ｎ−ベンジル−１−(５−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−イル)メタンスルホンアミド；
１−(５−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−イル)−Ｎ−(２−フェニルエチル)メタンスルホンアミド；
５−(２−{[４−(４−クロロフェニル)ピペリジン−１−イル]スルホニル}エチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−(２−{[４−(４−クロロフェニル)ピペラジン−１−イル]スルホニル}エチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−(３−{[４−(４−クロロフェニル)ピペリジン−１−イル]スルホニル}プロピル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
５−(３−{[４−(４−クロロフェニル)ピペラジン−１−イル]スルホニル}プロピル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン；
およびその薬学的に許容される塩ならびにそれらの溶媒和物を含む。
例示した化合物はそれぞれ、本発明の特定の、かつ独立の態様を表す。
【００４３】
式(Ｉ)の化合物は、エナンチオマーの形態で存在してもよい。従って、全てのエナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ体、およびその混合物は、本発明の範囲に含まれる。種々の光学異性体は、慣用の方法、例えば分別結晶もしくはＨＰＬＣを用いて、本化合物のラセミ混合物の分割によって単離され得る。あるいは、光学異性体は、非対称合成によって、または光学活性な出発物質からの合成によっても得られる。
【００４４】
本発明の化合物において光学異性体が存在する場合、我々は、全ての個々の光学活性な形態、これらの組み合わせを、個々の特定の態様として開示しており、またその対応するラセミ化合物も同様である。
【００４５】
本発明の化合物において互変異性体が存在する場合、我々は、全ての個々の互変異性体の形態、およびこれらの組み合わせを、本発明の個々の特定の態様として開示している。
【００４６】
本発明は、塩の形態の式(Ｉ)の化合物を含む。適当な塩は、有機酸もしくは無機酸、または有機塩基もしくは無機塩基と形成される塩を含む。このような塩は、通常薬学的に許容される塩であるが、薬学的に許容されない塩は、特定の化合物の製造および精製に有用であり得る。このような塩は、酸付加塩、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、クエン酸塩、トシレート、およびマレイン酸塩、ならびにリン酸と、もしくは硫酸と形成される塩を含む。別の態様において、適当な塩は、塩基付加塩、例えばアルカリ金属塩(例えばナトリウム塩もしくはカリウム塩)、アルカリ土類金属塩(例えばカルシウム塩もしくはマグネシウム塩)、または有機アミン塩(例えばトリエチルアミン塩)を含む。
溶媒和物の例は、水和物を含む。
【００４７】
式(Ｉ)の化合物の塩は、遊離塩基もしくは別の塩を、１当量以上の適当な酸もしくは塩基と反応させることによって形成され得る。
【００４８】
式(Ｉ)の化合物は、それらが動物において薬理活性を有するために、有用であり、従って、医薬として有用である可能性がある。特に、本発明の化合物は、メタロプロテイナーゼ阻害剤であり、従って、ＭＭＰ１２および／またはＭＭＰ９が介在する疾患もしくは状態、例えば喘息、鼻炎、慢性閉塞性肺疾患(ＣＯＰＤ)、関節炎(例えばリウマチ性関節炎および骨関節炎)、アテローム性動脈硬化症、および再狭窄、癌、浸潤および転移、組織破壊を伴う疾患、人工股関節の緩み、歯周病、線維性疾患、梗塞および心臓疾患、肝線維症および腎線維症、子宮内膜症、細胞外マトリックスの脆弱化に関連する疾患、心不全、大動脈瘤、ＣＮＳ関連疾患、例えばアルツハイマー病、および多発性硬化症(ＭＳ)、および血液疾患の処置に使用され得る。
【００４９】
従って、本発明は、治療に使用するための、上記で定義した式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物を提供する。
別の態様において、本発明は、治療に使用する医薬の製造における、上記で定義した式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物の使用を提供する。
【００５０】
別の態様において、本発明は、ＭＭＰ１２および／またはＭＭＰ９の阻害が有益である疾患もしくは状態の処置に使用する医薬の製造における、上記で定義した式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物の使用を提供する。
【００５１】
別の態様において、本発明は、炎症性疾患の処置に使用する医薬の製造における、上記で定義した式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物の使用を提供する。
【００５２】
別の態様において、本発明は、閉塞性気道疾患、例えば喘息もしくはＣＯＰＤの処置に使用する医薬の製造における、上記で定義した式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物の使用を提供する。
【００５３】
本明細書の内容において、“治療”という用語はまた、異なる指定をしない限り、“予防”を含む。“治療の”および“治療上”という用語は、同様に解釈されるべきである。
【００５４】
予防は、特に対象の疾患もしくは状態の病歴があるか、もしくはそのリスクが増大していると考えられるヒトの処置に関連すると予測される。特定の疾患もしくは状態にかかるリスクがあるヒトは、一般的に、該疾患もしくは状態の家族病歴があるヒト、または該疾患もしくは状態に特にかかりやすいと遺伝子試験もしくはスクリーニングによって同定されたヒトを含む。
【００５５】
本発明は、さらに、ＭＭＰ１２および／またはＭＭＰ９の阻害が有益である疾患もしくは状態を処置する方法であって、患者に、上記で定義した式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物を、治療有効量で投与することを含む方法を提供する。
【００５６】
本発明はまた、閉塞性気道疾患、例えば喘息もしくはＣＯＰＤを処置する方法であって、患者に、上記で定義した式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物を、治療有効量で投与することを含む方法を提供する。
【００５７】
上記の治療的使用のために、投与される用量は、用いられる化合物、投与方法、望ましい処置、および処置される疾患に伴って、当然に変化する。式(Ｉ)の化合物／塩／溶媒和物(活性成分)の１日用量は、０.００１mg/kgから７５mg/kgの範囲、特に０.５mg/kgから３０mg/kgの範囲であり得る。この１日用量は、必要ならば分割用量で与えられてもよい。典型的には、単位投与形は、約１mgから５００mgの本発明の化合物を含む。
【００５８】
式(Ｉ)の化合物およびその薬学的に許容される塩ならびにそれらの溶媒和物は、それ自身で用いられてもよいが、一般的に、式(Ｉ)の化合物／塩／溶媒和物(活性成分)が薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤もしくは担体と組み合わされている医薬組成物の形態で投与される。投与方法に依存して、医薬組成物は、好ましくは０.０５から９９％ｗ(重量パーセント)、より好ましくは０.１０から７０％ｗの活性成分、および１から９９.９５％ｗ、より好ましくは３０から９９.９０％ｗの薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤もしくは担体を含む。全ての重量パーセントは、組成物の総量に基づく。適当な医薬製剤の選択および製造の慣用の手順は、例えば“Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Designs”, M. E. Aulton, Churchill Livingstone, 1988 に記載されている。
【００５９】
従って、本発明はまた、薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤もしくは担体と組み合わされた上記で定義した式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物を含む医薬組成物を提供する。
【００６０】
本発明は、さらに、本発明の医薬組成物の製造方法であって、上記で定義した式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物を、薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤もしくは担体と混合することを含む方法を提供する。
【００６１】
本発明の医薬組成物は、処置が望ましい疾患もしくは状態に標準的な方法で、例えば経口投与、局所投与、非経腸投与、頬側投与、鼻腔投与、膣投与、もしくは直腸投与によって、または吸入によって投与されてもよい。これらの目的のために、本発明の化合物は、当業界で既知の方法によって、例えば錠剤、カプセル剤、水性もしくは油性溶液、懸濁液、エマルジョン、クリーム、軟膏、ゲル、鼻腔スプレー、坐剤、微細化粉末、もしくは吸入用エアゾール、および非経腸の使用(静脈内、筋肉内、もしくは点滴を含む)のための、滅菌処理された水性もしくは油性の溶液もしくは懸濁液、または滅菌処理されたエマルジョンの形態で、製剤化され得る。
【００６２】
本発明の化合物に加えて、本発明の医薬組成物はまた、上記の１個以上の疾患もしくは状態を処置するのに有益である１個以上の薬理学的薬剤、例えば“Symbicort”(商標)製品を含んでもよく、またはそれと共に投与(同時にもしくは連続して)されてもよい。
【００６３】
本発明は、さらに、上記で定義した式(Ｉ)の化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの溶媒和物の製造方法であって、
式(II)：
【化６】
2007530672.tif 000008
[式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｘおよびｍは、式(Ｉ)で定義した通りであり、そしてＬ１は、脱離基を表す]の化合物を、式(III)：
【化７】
2007530672.tif 000009
[式中、Ｇ１、Ｌ、ＹおよびＲ５は、式(Ｉ)で定義した通りである]の化合物と反応させること；および
所望によりその後、薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を形成すること；
を含む方法を提供する。
【００６４】
上記の方法において、適当な脱離基Ｌ１は、ハロ、特にクロロを含む。反応は、好ましくは適当な溶媒中で、所望により添加した塩基の存在下で、適当な時間、典型的には１から２４時間、環境温度から還流温度で行われる。好ましくは、溶媒、例えばピリジン、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、もしくはジクロロメタンが用いられる。用いられた場合、さらなる塩基は、有機塩基、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、もしくはピリジン、または無機塩基、例えば炭酸アルカリ金属であり得る。反応は、典型的には、環境温度で、２から１６時間、または反応の完了に至る(クロマトグラフィーもしくは分光学的方法によって決定される)まで行われる。ハロゲン化スルホニルおよびハロゲン化アシルの、種々の１級および２級アミンとの反応は、文献で周知であり、条件のバリエーションは、当業者に明らかである。
【００６５】
式(II)の化合物[式中、ＸはＳ(Ｏ)２を表し、そしてＬ１はクロロを表す]は、式(IV)：
【化８】
2007530672.tif 000010
[式中、Ｒは、Ｃ１−６アルキルもしくはベンジル基を表し、典型的にはＲは非置換ベンジル(Ｐｈ−ＣＨ２)もしくはｔｅｒｔ−ブチルを表す]のアルキル−もしくはベンジル−チオエーテルの酸化的塩素化によって、簡便に製造される(Griffith, O.: J. Biol. Chem., 1983, 258, 3, 1591)。
【００６６】
式(IV)の化合物は、式(Ｖ)：
【化９】
2007530672.tif 000011
[式中、Ｌ２は、脱離基、例えばハロもしくはスルホネートエステルである]の化合物を、アルキル−もしくはベンジル−チオール：Ｒ−ＳＨと反応させることによって製造され得る。反応は、好ましくは塩基(例えばジエチルイソプロピルアミンもしくは炭酸セシウム)の存在下で、そして適当な溶媒(例えばＤＭＦ)の存在下で行われる。
【００６７】
式(Ｖ)の化合物は、例えば、対応するカルボン酸およびその誘導体から、例えば当業者に容易に明らかな方法を用いて製造され得る。例えば B. George et al, J. Org. Chem. 1976, 41(20), 3233; H-C Huang et al, J. Med. Chem. 1993, 36(15), 2172; C.J. Crowden et al, Tetrahedron Letters, 2000, 41, 8661; Y. Xu et al, J. Med. Chem. 2003, 46(24), 5121)を参照のこと。
【００６８】
本発明の製造において、出発試薬もしくは中間体化合物における、ある種の潜在的に反応性の官能基、例えばヒドロキシル基もしくはアミノ基が、適当な保護基によって保護される必要があることが、当業者に認識されるであろう。従って、本発明の化合物の製造は、種々の段階で、１個以上の保護基の付加および除去を含む。
【００６９】
適当な保護基および該基の付加および除去の方法の詳細は、'Protective Groups in Organic Chemistry', edited by J.W.F. McOmie, Plenum Press (1973) および 'Protective Groups in Organic Synthesis', 3rd edition, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience (1999) に記載されている。
【００７０】
本発明の化合物およびその中間体は、その反応混合物から単離されてもよく、必要であれば、標準的な方法を用いることによって、さらに精製されてもよい。
【００７１】
本発明は、下記の実施例の記載によってさらに説明される。
実施例において、１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、Varian Unity Inova 400MHz もしくは Varian Mercury-VX 300MHz instrument の何れかで測定した。ジメチルスルホキシド−ｄ６(δH 2.50ppm)、テトラヒドロフラン−ｄ８(δH 3.58, 1.73ppm)、クロロホルム−ｄ(δH 7.27ppm)、またはメタノール−ｄ４(δH 3.31ppm) の溶媒ピーク中心を内部対照として用いた。
【００７２】
下記の方法は、ＬＣ／ＭＳ分析のために用いられた：
装置  Agilent 1100;
カラム  Waters Symmetry 2.1×30mm;
マス  ＡＰＣＩ;
流速  ０.７mL/分;
波長  ２５４もしくは２２０nm;
溶媒Ａ＝水＋０.１％ ＴＦＡ;
溶媒Ｂ＝アセトニトリル＋０.１％ ＴＦＡ;
濃度勾配  １５〜９５％／Ｂ (２.７分), ９５％ Ｂ (０.３分)。
カラムクロマトグラフィーは、シリカゲル(0.040〜0.063mm, Merck)を用いて行った。
全ての溶媒および市販の試薬は、研究室等級であり、購入品をそのまま用いた。市販されていない試薬は、既知の文献の手順を用いて合成した。
【００７３】
用いられる略号は、以下を含む：
【表１】
2007530672.tif 000012
【実施例】
【００７４】
実施例１
５−[({４−[(５−クロロピリジン−２−イル)オキシ]ピペリジン−１−イル}スルホニル)メチル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
ａ) ５−[(ベンジルチオ)メチル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
ベンジルメルカプタン(１.７５ml；１４.９mmol)をＤＭＦ(２０ml)に溶解し、固体Ｋ２ＣＯ３(２.３５ｇ；１７mmol)を加えた。得られたスラリーに、ＤＭＦ(１２ml)中の５−(クロロメチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン(２.０ｇ；１５mmol)[文献の手順(C. J. Cowden et. al., Tetrahedron Letters 41 (2000) 8661-8664)によって製造]の溶液を加えた。反応混合物を室温で２０.５時間撹拌した。水(８０ml)を加え、粘稠なスラリーを形成させた。固体生成物を濾過によって集め、水で洗浄した。まだ生成物を含む、残りのろ液と洗浄液をＥｔＯＡｃで４回抽出し、有機相を水(２回)で、塩水(２回)で洗浄し、乾燥させた(Ｎａ２ＳＯ４)。溶媒を蒸発させ、粗生成物の第２取得物を得た。合わせた固体物質をトルエンに懸濁し、残りの水を蒸発させて除去した。次に粗生成物をＥｔＯＡｃ／ヘプタン(１：４)の沸騰混合物中に懸濁し、放冷した後、固体生成物を濾過によって集めた。副題化合物を無色の固体として得た(２.０３ｇ；収率６１％)。
APCI-MS m/z: 222.1 [MH+]. 
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.35 (1H, vbrs), 11.26 (1H, brs), 7.37-7.21 (5H, m), 3.72 (2H, s), 3.36 (2H, s) ppm.
13C-NMR (DMSO-D6): δ 156.09, 144.75, 137.66, 128.83, 128.23, 126.79, 34.75, 25.80 ppm.
【００７５】
ｂ) 塩化 (５−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−イル)メタンスルホニル
５−[(ベンジルチオ)メチル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン(０.５ｇ；２.２６mmol)を、ＡｃＯＨ(１８ml)および水(２ml)に溶解した。溶液を氷浴で冷却し、Ｃｌ２ガスをゆっくりと溶液に５分間通気した。緑黄色の溶液を１０分間撹拌し、その間に室温に至らしめ、アルゴンガスを溶液に通気して過剰のＣｌ２を除去した。澄明な溶液を蒸発させ、油状物を得た。それをトルエンに再度懸濁し、蒸発させた。このプロセスを１回以上繰り返した。粗製の生成物：塩化 (５−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−イル)メタンスルホニルは、酢酸ベンジルおよび溶媒残渣を不純物として含む粘着性油状物として得られた。この物質をＴＨＦに溶解し、そしてこれを精製することなく直接用いた。
分析目的のためのサンプルは、粗製の物質を、イソヘキサン、ＣＨＣｌ３、およびＥｔ２Ｏで、順次トリチュレートすることによって得られた。減圧下で乾燥後、僅かに黄色の固体として副題化合物を得た。
1H-NMR (THF-D8): δ 10.93 (1.4H, vbrs, NH), 5.21 (2H, s, CH2), 4.80-3.65 (0.9H, vbrs, H2O + NH) ppm.
【００７６】
該塩化スルホニルの反応性は、Ｅｔ２ＮＨと反応させることによって、予測されたＮ,Ｎ−ジエチル−１−(５−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−イル)メタンスルホンアミドを得られることで、確認された。
APCI-MS m/z: 235.1 [MH+].
【００７７】
ｃ) ５−[({４−[(５−クロロピリジン−２−イル)オキシ]ピペリジン−１−イル}スルホニル)メチル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
５−クロロ−２−(ピペリジン−４−イルオキシ)ピリジン(１８０mg；０.８５mmol)およびＤＩＥＡ(１４５μｌ；０.８５mmol)を、ＴＨＦ(３ml)に溶解し、粗製の塩化 (５−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−イル)メタンスルホニル(約０.５６mmol)のＴＨＦ溶液を加えた。反応物を室温で１.５時間撹拌した。溶媒を蒸発によって除去し、残渣を、ＥｔＯＡｃおよび５％ ＮａＨＳＯ４水溶液の層間に分配し、分離した。水相をＥｔＯＡｃで１回以上抽出し、合わせた有機相を塩水で洗浄し、蒸発させた。粗生成物を、分取ＨＰＬＣ系で、KROMASIL KR-100-7-C18, 250×50.8mm カラムを用いて精製した。２０〜９０％ ＭｅＣＮ／水＋０.１％ ＴＦＡの濃度勾配を用いて、ＵＶ  ２２０nmで検出した。ＬＣ／ＭＳによる生成物を含むフラクションを、スラリーが形成するまで蒸発させ、残った水を凍結乾燥によって除去し、粗生成物を得た(４０mg)。この物質を、さらに、セミ分取ＨＰＬＣ系：KROMASIL 100-5-C18, 250×20mm カラムを用いて、ＵＶ  ２２０nmで、８０分の２５〜２７％ ＭｅＣＮ／水＋５０ｍＭ ＮＨ４ＯＡｃの濃度勾配で精製した。凍結乾燥し、表題化合物を無色の固体として得た(１６mg；収率７.６％)。
APCI-MS m/z: 374.2 [MH+].
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.61 (1H, brs), 11.57 (1H, vbrs), 8.20 (1H, d), 7.81 (1H, dd), 6.87 (1H, d), 5.08 (1H, m), 4.32 (2H, s), 3.49-3.39 (2H, m), 3.23-3.13 (2H, m), 2.06-1.94 (2H, m), 1.77-1.64 (2H, m) ppm.
13C-NMR (DMSO-D6): δ 160.79, 155.69, 144.73, 139.14, 137.74, 123.22, 112.74, 69.57, 47.47, 42.80, 30.08 ppm.
【００７８】
実施例２
５−[２−({４−[(５−クロロピリジン−２−イル)オキシ]ピペリジン−１−イル}スルホニル)エチル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
ａ) ５−[２−(ベンジルチオ)エチル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
３−(ベンジルチオ)プロパン酸(１.０ｇ；５.１mmol)を、ＴＨＦ(１０ml)に溶解した。ＤＭＦ(１００μＬ)を加え、次に(ＣＯＣｌ)２(０.４５ml；５.２mmol)を滴下した。１時間後、ＬＣのためのサンプルをＥｔ２ＮＨでクエンチしたところ、これは約４０％の出発物質が残っていることを示した。さらに(ＣＯＣｌ)２(０.１２ml；１.４mmol)を加え、反応混合物を室温で２.５時間撹拌した。ＬＣのためのサンプルを上記同様にＥｔ２ＮＨでクエンチしたところ、これは出発物質が全て消費されたことを示した。塩化 ３−(ベンジルチオ)プロパノイルの僅かに黄色の溶液を、ＴＨＦ(１０ml)および水(２ml)中のセミカルバジド塩酸塩(０.９５ｇ；８.５mmol)およびＮａＯＨ(０.８３ｇ；２０.８mmol)の前もって冷却した溶液に加えた。僅かに酸性の溶液(ｐＨ ５)を、数滴の水性ＮａＯＨで、ｐＨ ７まで中和した。反応物を室温に至らしめ、終夜放置した。ＬＣ／ＭＳ分析およびＡＰＣＩ−ＭＳ m/z: 254.0 [MH+]のためにサンプルを採取したところ、中間体：２−[３−(ベンジルチオ)プロパノイル]ヒドラジンカルボキサミドが、主要な生成物であった。この溶液に、２Ｍ 水性ＮａＯＨ(３０ml)を加え、混合物を２３時間還流した。反応混合物を室温に至らしめ、濃ＨＣｌを用いて酸性にし、ＥｔＯＡｃで２回抽出し、有機相を乾燥し(Ｎａ２ＳＯ４)、濾過し、蒸発させ、粗生成物を得た(１.０８ｇ)。この物質を、フラッシュクロマトグラフィーを用いて、Si-60 ゲル および０〜１０％ ＩＰＡ／ＤＣＭの溶媒濃度勾配を用いて精製した。生成物を含むフラクションを蒸発させ、副題化合物を無色の固体として得た(０.３４ｇ；２８％)。
TLC (Si-60, DCM + 10% IPA): Rf 0.4.
APCI-MS m/z: 236.1 [MH+]. 
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.18 (1H, s), 11.13 (1H, s), 7.36-7.19 (5H, m), 3.75 (2H, s), 2.70-2.57 (4H, m) ppm.
【００７９】
ｂ) 塩化 ２−(５−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−イル)エタンスルホニル
５−[２−(ベンジルチオ)エチル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン(０.３ｇ；１.２７mmol)を、ＡｃＯＨ(１８ml)および水(２ml)に溶解した。溶液を、氷／水浴で冷却し、Ｃｌ２(ｇ)を、撹拌しながら、溶液にゆっくりと通気した。溶液が緑がかった黄色に変わった時、塩素の導入を停止した。冷却浴を除き、混合物を１０分間撹拌した。無色になるまで溶液にアルゴン(ｇ)を通気した。澄明な溶液を凍結乾燥し、副題化合物を無色の固体として得た(０.２６ｇ；９７％)。
1H-NMR (THF-D8): δ 10.69 (1H, vbrs), 10.57 (1H, brs), 4.29 (2H, m), 3.15 (2H, m) ppm. 
【００８０】
ｃ) ５−[２−({４−[(５−クロロピリジン−２−イル)オキシ]ピペリジン−１−イル}スルホニル)エチル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
５−クロロ−２−(ピペリジン−４−イルオキシ)ピリジン(１００mg；０.４７mmol)およびＤＩＥＡ(８０μＬ；０.４７mmol)を、ＴＨＦ(３ml)に溶解した。ＴＨＦ(４ml)中の塩化 ２−(５−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−イル)エタンスルホニル(６５mg；０.３１mmol)の溶液を、室温で滴下した。反応物を１時間撹拌した後、溶媒を蒸発によって除去した。残渣を分取ＨＰＬＣ系：カラム Kromasil, KR-100-7-C18, 250×50.8mmを用いて精製した。４０分の２０〜９０％ ＭｅＣＮ／水＋０.１％ ＴＦＡの濃度勾配、そして検出にＵＶ  ２２０nmを用いた。望ましい生成物を含むフラクションを集めた。溶媒を蒸発させ、スラリーを得た。その残った水を凍結乾燥によって除去し、表題化合物を無色の固体として得た(９０mg；７４％)。
APCI-MS m/z: 388.1 [MH+]. 
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.25 (1H, s), 11.24 (1H, s), 8.20 (1H, d), 7.81 (1H, dd), 6.88 (1H, d), 5.11 (1H, m), 3.47-3.39 (2H, m), 3.39 (2H, t), 3.23-3.14 (2H, m), 2.81 (2H, t), 2.06-1.96 (2H, m), 1.77-1.66 (2H, m) ppm.
13C-NMR (DMSO-D6): δ 160.80, 155.86, 144.68, 144.20, 139.11, 123.19, 112.75, 69.58, 45.20, 42.49, 30.15, 20.87 ppm.
【００８１】
実施例３
５−[３−({４−[(５−クロロピリジン−２−イル)オキシ]ピペリジン−１−イル}スルホニル)プロピル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
ａ) ５−(３−ブロモプロピル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
これを、５−(クロロメチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オンについて記載された方法と同様の方法で製造した(C. J. Cowden et. al., Tetrahedron Letters 41 (2000) 8661-8664)。
４−ブロモ−オルト酪酸トリメチル(５ｇ；２２mmol)およびセミカルバジド塩酸塩(１.１２ｇ；１０mmol)を、ＭｅＯＨ中で２０時間室温で撹拌した。溶媒を蒸発させ、油性残渣を得た。それをトルエンで処理し、蒸発させ、残ったＭｅＯＨを除去した。その時点でトルエン溶液中で沈殿が形成し始めた。スラリーをドライアイスで冷却し、固体の物質を濾過によって除去し、トルエンで洗浄した。固体物質(１.７９ｇ)を水に懸濁し、５％水性ＮａＨＣＯ３で中和した。次に生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させ、副題化合物を無色の固体として得た(１.７ｇ；８２％)。
APCI-MS m/z: 206.0 および 208.0 [MH+].
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.19 (1H, s), 11.11 (1H, s), 3.56 (2H, t), 2.51 (2H, t), 2.09 (2H, quintet) ppm.
【００８２】
ｂ) ５−[３−(ベンジルチオ)プロピル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
ベンジルメルカプタン(０.９ml；７.７mmol)を、ＤＭＦ(１０ml)に溶解し、Ｋ２ＣＯ３(１.１５ｇ；８.３mmol)を加えた。ＤＭＦ(６ml)に溶解した５−(３−ブロモプロピル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン(１.６ｇ；７.８mmol)を加え、スラリーを２１時間室温で撹拌した。水(４０ml)を加え、不透明な溶液を形成した。それをＥｔＯＡｃで４回抽出した。有機相を水(２回)で、そして塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を蒸発によって除去した。残った無色の固体を熱ＥｔＯＡｃ(５０ml)に再度溶解し、撹拌しながら、ヘプタン(１５０から２００ml)を加え、望ましい生成物を沈殿させた。スラリーを室温に至らしめた後、固体を濾過によって集め、ヘプタンで洗浄し、減圧下で＋５０℃で１３時間乾燥して一定重量とし、副題化合物を無色の固体として得た(０.７ｇ；３６％)。
APCI-MS m/z: 250.1 [MH+]. 
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.16 (1H, s), 11.07 (1H, s), 7.34-7.20 (5H, m), 3.72 (2H, s), 2.43 (2H, t), 2.39 (2H, t), 1.81 (2H, quintet) ppm.
13C-NMR (DMSO-D6): δ 156.01, 146.46, 138.40, 128.64, 128.16, 126.58, 34.69, 29.61, 25.60, 25.19 ppm. 
【００８３】
ｃ) 塩化 ３−(５−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−イル)プロパン−１−スルホニル
５−[３−(ベンジルチオ)プロピル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン(０.５ｇ；２.０mmol)を、ＡｃＯＨ(１８ml)と水(２ml)に溶解した。溶液を氷／水浴で冷却し、緑黄色の溶液が得られるまでＣｌ２(ｇ)を溶液に通気した。反応混合物を１０分間撹拌し、次に冷却浴を除いた。澄明な無色の溶液が得られるまでアルゴン(ｇ)を溶液に通気した。凍結乾燥し、油状物として副題化合物を得た(０.６３ｇ)(酢酸ベンジルおよび残った溶媒を主要な不純物として含む)。この物質をＴＨＦに溶解し、それをさらに精製することなく直接用いた。
1H-NMR (THF-D8): δ 12.00-9.20 (2H, ベースラインがブロード), 4.05 (2H, t), 2.71 (2H, t), 2.36 (2H, quintet) ppm.
【００８４】
反応性塩化スルホニルの存在は、得られた油状物の少量のサンプルを５−クロロ−２−(ピペリジン−４−イルオキシ)ピリジンと反応させ、予期された５−[３−({４−[(５−クロロピリジン−２−イル)オキシ]ピペリジン−１−イル}スルホニル)プロピル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オンを得ることによって確認された。
APCI-MS m/z: 402.1 [MH+].
【００８５】
ｄ) ５−[３−({４−[(５−クロロピリジン−２−イル)オキシ]ピペリジン−１−イル}スルホニル)プロピル]−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
５−クロロ−２−(ピペリジン−４−イルオキシ)ピリジン(０.１６ｇ；０.７５mmol)およびＤＩＥＡ(１３０μＬ；０.７６mmol)を、ＴＨＦ(３ml)に溶解した。粗製の塩化 ３−(５−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−イル)プロパン−１−スルホニル(最大０.５mmol)を含むＴＨＦ溶液(４ml)をゆっくりと加えた。反応物を室温で終夜撹拌し、次に黄色のスラリーを蒸発させた。残った物質をＭｅＣＮ／水中に懸濁し、数滴のＴＦＡを用いて酸性とした。不溶性生成物を濾過して取り、減圧下で乾燥した。表題化合物を無色の固体として得た(１３７mg；６８％)。これはＨＰＬＣによる純度９５％を示した。
APCI-MS m/z: 402.2 [MH+].
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.22 (1H, s), 11.30 (1H, s), 8.20 (1H, d), 7.81 (1H, dd), 6.87 (1H, d), 5.11 (1H, m), 3.43 (2H, m), 3.21-3.08 (4H, m), 2.53 (2H, t), 2.08-1.92 (4H, m), 1.72 (2H, m) ppm.
13C-NMR (DMSO-D6): δ 160.81, 155.97, 146.04, 144.68, 139.10, 123.71, 112.72, 69.71, 47.42, 42.62, 30.17, 24.65, 19.86 ppm.
【００８６】
適当なアミン中間体を選択し、かつアミン塩を用いる場合は１当量過剰の塩基ＤＩＥＡを用い、実施例１の一般的方法に従って、実施例４から１０の化合物を製造した。
【００８７】
実施例４
５−({[４−(４−クロロフェニル)ピペラジン−１−イル]スルホニル}メチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
APCI-MS m/z: 358.1 [MH+]. 
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.61 (1H, s), 11.59 (1H, s), 7.26 (2H, d), 6.98 (2H, d), 4.36 (2H, s), 3.34-3.28 (4H, m), 3.22-3.16 (4H, m) ppm.
【００８８】
実施例５
５−({[４−[(２−メトキシピリミジン−５−イル)エチニル]−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−イル]スルホニル}メチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
APCI-MS m/z: 377.1 [MH+].
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.56 (2H, s), 8.72 (2H, s), 6.24 (1H, m), 4.37 (2H, s), 3.95 (3H, s), 3.90 (2H, m), 3.35 (2H, t), 2.35 (2H, m) ppm.
13C-NMR (DMSO-D6): δ 163.40, 161.15, 155.63, 137.62, 130.98, 117.81, 111.89, 93.41, 82.08, 54.98, 47.47, 44.54, 41.86, 28.86 ppm.
１５Ｎ−１Ｈ−相関ＮＭＲは、11.56 ppmの同一の１Ｈシグナルに対して、169.9 および 145.7 ppm に２つの異なる１５Ｎのクロス・ピークを示す。
【００８９】
実施例６
５−({[４−{[２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−５−イル]エチニル}−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−イル]スルホニル}メチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
APCI-MS m/z: 415.0 [MH+]. 
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.60 (2H, s), 9.16 (2H, s), 6.40 (1H, m), 4.38 (2H, s), 3.94 (2H, m), 3.37 (2H, t), 2.40 (2H, m) ppm.
【００９０】
実施例７
５−({[４−[(２−シクロプロピルピリミジン−５−イル)エチニル]−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−イル]スルホニル}メチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
APCI-MS m/z: 387.1 [MH+].
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.59 (2H, s), 8.72 (2H, s), 6.27 (1H, m), 4.37 (2H, s), 3.90 (2H, brm), 3.35 (2H, brt), 2.35 (2H, brm), 2.21 (1H, m), 1,10 (2H, m), 1.02 (2H, m) ppm.
13C-NMR (DMSO-D6): δ 169.69, 158.27, 155.62, 137.61, 131.45, 117.72, 114.93, 94.42, 82.47, 47.48, 44.56, 41.84, 28.80, 18.18, 11.15 ppm.
【００９１】
実施例８
５−({[４−(４−クロロフェニル)ピペリジン−１−イル]スルホニル}メチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
APCI-MS m/z: 357.1 [MH+]. 
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.60 (1H, s), 11.58 (1H, s), 7.36 (2H, d), 7.29 (2H, d), 4.32 (2H, s), 3.70 (2H, m), 2.93 (2H, m), 2.64 (1H, m), 1.81 (2H, m), 1.59 (2H, m) ppm.
【００９２】
実施例９
Ｎ−ベンジル−１−(５−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−イル)メタンスルホンアミド
APCI-MS m/z: 269.2 [MH+].
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.54 (1H, s), 11.50 (1H, s), 8.00 (1H, t), 7.38-7.22 (5H, m), 4.21 (2H, s), 4.17 (2H, d) ppm.
【００９３】
実施例１０
１−(５−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−イル)−Ｎ−(２−フェニルエチル)メタンスルホンアミド
APCI-MS m/z: 283.2 [MH+]. 
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.52 (1H, s), 11.46 (1H, s), 7.57 (1H, t), 7.33-7.26 (2H, m), 7.25-7.18 (3H, m), 4.16 (2H, s), 3.17 (2H, q), 2.75 (2H, t) ppm.
【００９４】
適当なアミン中間体を選択し、かつアミン塩を用いる場合は１当量過剰の塩基ＤＩＥＡを用いて、実施例２の一般的な方法に従って、実施例１１および１２の化合物を製造した。
【００９５】
実施例１１
５−(２−{[４−(４−クロロフェニル)ピペリジン−１−イル]スルホニル}エチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
APCI-MS m/z: 371.2 [MH+]. 
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.26 (1H, s), 11.24 (1H, s), 7.36 (2H, d), 7.29 (2H, d), 3.70 (2H, m), 3.39 (2H, t), 2.90 (2H, m), 2.82 (2H, t), 2.66 (1H, m), 1.83 (2H, m), 1.59 (2H, m) ppm.
【００９６】
実施例１２
５−(２−{[４−(４−クロロフェニル)ピペラジン−１−イル]スルホニル}エチル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
APCI-MS m/z: 372.2 [MH+].
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.24 (1H, s), 11.22 (1H, s), 7.26 (2H, d), 6.98 (2H, d), 3.42 (2H, t), 3.30 (4H, m), 3.20 (4H, m), 2.82 (2H, t) ppm.
【００９７】
適当なアミン中間体を選択し、かつアミン塩を用いる場合は１当量過剰の塩基ＤＩＥＡを用いて、実施例３の一般的な方法に従って、実施例１３および１４の化合物を製造した。
【００９８】
実施例１３
５−(３−{[４−(４−クロロフェニル)ピペリジン−１−イル]スルホニル}プロピル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
APCI-MS m/z: 385.3 [MH+].
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.23 (1H, s), 11.14 (1H, s), 7.36 (2H, d), 7.29 (2H, d), 3.70 (2H, m), 3.13 (2H, t), 2.89 (2H, m), 2.67 (1H, m), 2.54 (2H, t), 1.99 (2H, quintet), 1.83 (2H, m), 1.61 (2H, m) ppm.
【００９９】
実施例１４
５−(３−{[４−(４−クロロフェニル)ピペラジン−１−イル]スルホニル}プロピル)−２,４−ジヒドロ−３Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−オン
APCI-MS m/z: 386.2 [MH+].
1H-NMR (DMSO-D6): δ 11.22 (1H, s), 11.12 (1H, s), 7.26 (2H, d), 6.98 (2H, d), 3.29 (4H, m), 3.22 (4H, m), 3.16 (2H, t), 2.53 (2H, t), 1.99 (2H, quintet) ppm. 
【０１００】
実施例で用いられる市販されていないアミン中間体の製造：
５−クロロ−２−(ピペリジン−４−イルオキシ)ピリジン
カリウム ｔｅｒｔ−ブトキシド(２０２.０ｇ, １.８mol)を、ＴＨＦ(１.４Ｌ)に、室温で溶解した。粉末状４−ヒドロキシピペリジン(１８２.０ｇ, １.８mol)を、一度に加えた。澄明な橙色の溶液を２５分間撹拌した。２,５−ジクロロピリジン(２２６.４ｇ, １.５３mol)を、ＴＨＦ(０.７Ｌ)に溶解し、それを、１.５時間にわたって、溶液に、激しく撹拌しながら滴下した。約１０分後、塩化カリウムが沈殿し始め、温度を約＋４０℃まで上げた。室温で終夜撹拌を続けた。反応混合物を濾過し、ろ液を蒸発させ、橙色の油状物を得た(３４６ｇ)。橙色の油状物をジクロロメタン(３.０Ｌ)に溶解し、水(３×０.５Ｌ)で洗浄した。有機相を乾燥し(Ｎａ２ＳＯ４)、濾過し、一定の重量になるまで蒸発させた。表題化合物を黄色の油状物として得た。それを結晶化させ、明黄色の固体を得た(２８７ｇ, １.３５mol, ８８％)。
APCI-MS m/z: 213.0 [MH+].
1H-NMR (CDCl3) δ: 8.05 (1H, d), 7.50 (1H, dd), 6.66 (1H, d), 5.07 (1H, m), 3.12 (2H, m), 2.77 (2H, m), 2.03 (2H, m), 1.81 (1H, s), 1.63 (2H, m) ppm.   
13C-NMR (CDCl3) δ: 161.38, 144.90, 138.40, 123.57, 112.55, 71.60, 44.15, 32.32 ppm.
【０１０１】
２−メトキシ−５−(１,２,３,６−テトラヒドロピリジン−４−イルエチニル)ピリミジン塩酸塩
ａ) ｔｅｒｔ−ブチル ４−[(トリメチルシリル)エチニル]−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−カルボキシレート
表題化合物を、WO 96/05200 に記載された通りに、Ｎ−Ｂｏｃ−ピペリジン−４−オンから製造した。
1H NMR (CDCl3) δ  6.05 (1H, s), 3.94 (2H, dd), 3.47 (2H, t), 2.23 (2H, dq), 1.45 (10H, s), 0.15 (8H, s).
GCMS-MS m/z: 223 [M-56].
【０１０２】
ｂ) ｔｅｒｔ−ブチル ４−エチニル−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−カルボキシレート
ｔｅｒｔ−ブチル ４−[(トリメチルシリル)エチニル]−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−カルボキシレート(２.８５ｇ, １０.２mmol)、およびＫＦ(１.８０ｇ, ３０.６mmol)を、ＭｅＯＨ(１００ml)に溶解し、室温で終夜撹拌した。水を加え、混合物をＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機相を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、次に濾過し、蒸発させ、粗生成物を油状物として得た(２.０５ｇ, 収率９７％)。さらに、この物質を、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーによって、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ(４：１)を溶出液として精製した。必要な生成物を含むフラクションを蒸発させ、黄色の油状物を得た。それをフリーザーに保存し、固化させた(１.３９ｇ)。
GCMS-MS m/z: 151 [M-56].
1H NMR (CDCl3) δ 6.11 (1H, brs), 3.97 (2H, m), 3.50 (2H, t), 2.89 (1H, s), 2.26 (2H, m), 1.47 (9H, s) ppm.
【０１０３】
ｃ) ｔｅｒｔ−ブチル ４−[(２−メトキシピリミジン−５−イル)エチニル]−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−カルボキシレート
５−ブロモ−２−メトキシピリミジン(２３８mg, １.２６mmol)、ｔｅｒｔ−ブチル ４−エチニル−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−カルボキシレート(２６１mg, １.２６mmol)、ジイソプロピルアミン(０.５３６ml, ３.７８mmol)、およびＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２(４４mg, ０.０６mmol)を混合し、油浴で、＋７０℃まで１０分間加熱した。反応混合物を水で処理し、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。粗生成物を、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーによって、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン(３：１６)を溶出液として精製した。必要な生成物を含むフラクションを蒸発させ、副題化合物を得た(１７９mg, ４５％)。
APCI-MS m/z: 316.1 [MH+].
1H-NMR (CDCl3) δ: 8.56 (2H, s), 6.16 (1H, m), 4.04 (3H+2H, s+m), 3.58 (2H, t), 2.35 (2H, m), 1.49 (9H, s) ppm.
【０１０４】
ｄ) ２−メトキシ−５−(１,２,３,６−テトラヒドロピリジン−４−イルエチニル)ピリミジン塩酸塩
ｔｅｒｔ−ブチル ４−[(２−メトキシピリミジン−５−イル)エチニル]−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−カルボキシレート(１７９mg, ０.５７mmol)を、ＭｅＯＨ(１０ml)に溶解した。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル(５ml)中の１.８Ｍ 塩化水素を加え、溶液を１.５時間還流した。溶媒を蒸発によって除去し、残った物質を沸騰させた無水ＥｔＯＨに溶解した。エーテルを加え、溶液を氷上で冷却した。沈殿物を濾過によって取り、ＥｔＯＨで、そしてエーテルで洗浄し、表題化合物を僅かに黄色の固体として得た(８２mg, ５７％)。ろ液を蒸発乾固し、さらなる物質を得た(４９mg, ３４％)。それは僅かに濃い黄色であったが、その後の使用に十分な純度であった。
APCI-MS m/z: 216.1 [MH+].
1H-NMR (CD3OD) δ: 8.34 (2H, s), 6.23 (1H, m), 4.03 (3H, s), 3.83 (2H, m), 3.40 (2H, t), 2.61 (2H, m) ppm.
【０１０５】
５−(１,２,３,６−テトラヒドロピリジン−４−イルエチニル)−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン塩酸塩
ａ) ２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−５−イル トリフルオロメタンスルホネート
トリフルオロメタンスルホン酸無水物(１.０１ml, ６.０mmol)を、撹拌しながら、２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−５−オール(米国特許第４,５５８,０３９号に従って製造)(０.８２ｇ, ５.０mmol)、トルエン(１０ml)、および水性リン酸三カリウム(３０重量％, １０ml)の混合物に、氷浴温度で滴下した(Frantz et al., Organic Letters 2002, 4(26), 4717-4718)。添加が完了した際に氷浴を取り、溶液を環境温度で３０分間撹拌した。澄明な相を分離し、有機層を、水で、次に塩水で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、室温でロータリーエバポレーターにかけて濃縮し、１.３８ｇ(９３％)の２−(トリフルオロメチル)−ピリミジン−５−イル トリフルオロメタンスルホネートを、無色の油状物として得た。
沸点：７５〜７７℃(１０mbar)。
1H NMR (CDCl3) δ 8.90 (2H, s).
【０１０６】
ｂ) ｔｅｒｔ−ブチル ４−{[２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−５−イル]エチニル}−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−カルボキシレート
２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−５−イル トリフルオロメタンスルホネートと、ｔｅｒｔ−ブチル ４−エチニル−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−カルボキシレートを、ジイソプロピルアミン中で、ＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２を触媒として、２−メトキシ−５−(１,２,３,６−テトラヒドロピリジン−４−イルエチニル)ピリミジン塩酸塩の合成において上記で記載された通りに、カップリングさせた。
APCI-MS m/z: 354.1 [MH+].
1H NMR (CDCl3) δ 8.88 (2H, s), 6.30 (1H, m), 4.08 (2H, dd), 3.58 (2H, t), 2.37 (2H, m), 1.49 (9H, s) ppm.
【０１０７】
ｃ) ５−(１,２,３,６−テトラヒドロピリジン−４−イルエチニル)−２−(トリフルオロメチル)ピリミジン塩酸塩
塩化アセチル(０.２１ml, ３mmol)を、乾燥ＭｅＯＨ(１０ml)の冷溶液に、アルゴン下で加え、ＨＣｌ／ＭｅＯＨ溶液を形成した。この溶液に、ｔｅｒｔ−ブチル ４−{[２−(トリフルオロメチル)ピリミジン−５−イル]エチニル}−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−カルボキシレート(０.３５３ｇ, １mmol)を、少しずつ加え、脱保護が完了するまで、得られた溶液を５０℃で２７０分間加熱した。溶媒を蒸発させ、副題化合物を定量的な収率で得た。それはさらなる使用に十分なほど純粋であった。分析目的のために、該塩(０.２ｇ)を、ＭｅＯＨ／ｔｅｒｔ−ブチル メチル エーテルから再結晶し、ベージュ色の固体を得た(０.１ｇ)。
APCI-MS m/z: 254.1 [MH+].
1H NMR (CD3OD) δ 9.02 (2H, s), 6.38 (1H, m), 3.86 (2H, dd), 3.41 (2H, t), 2.65 (2H, m) ppm.
【０１０８】
２−シクロプロピル−５−(１,２,３,６−テトラヒドロピリジン−４−イルエチニル)ピリミジン トリフルオロ酢酸塩
ａ) ５−(ベンジルオキシ)−２−シクロプロピルピリミジン
表題化合物を、米国特許第４,５５８,０３９号に記載された手順に従って、テトラフルオロホウ酸のArnold塩：[Ｎ−(２−ベンジルオキシ−３−(ジメチルアミノ)−２−プロペニリジン)−Ｎ−メチルメタンアンモニウム テトラフルオロボレート− Holy, A., Arnold, Z, Collect. Czech. Chem. Commun., EN; 38; 1973; 1371-1380]を用いて製造した。シクロプロパンカルボキサミジン塩酸塩(２.０ｇ, １６.６mmol)を、ＭｅＯＨ(１０ml)に溶解した。この溶液に、Arnold塩(５.８５ｇ, １８.３mmol)を加えた。ＭｅＯＨ(２０ml)中のＮａＯＭｅ(２.１５ｇ, ３９.８mmol)の溶液を、少量ずつ加え、反応混合物を、アルゴン下で、還流温度まで加熱した。３.５時間後、反応混合物を室温で冷却し、溶媒を蒸発によって除去した。固体物質を水で洗浄し、濾過して取り、減圧下で乾燥し、副題化合物を得た(２.４ｇ, ６４％)。
APCI-MS m/z: 227.1 [MH+].
1H-NMR (DMSO-D6): δ 8.44 (2H, s), 7.49-7.29 (5H, m), 5.21 (2H, s), 2.14 (1H, m), 0.95 (2H, m), 0.89 (2H, m) ppm.
【０１０９】
ｂ) ２−シクロプロピルピリミジン−５−オール
１０％ Ｐｄ／炭素(０.１５ｇ)を含むＭｅＯＨ(４０ml)中の、５−(ベンジルオキシ)−２−シクロプロピルピリミジン(３.４ｇ, １４.９mmol)を、室温で、１気圧のＨ２(ｇ)で、１.５時間水素化した。混合物をセライトで濾過し、蒸発させ、副題化合物を僅かに黄色の固体として得た。それはさらなる使用に十分なほど純粋であった(２.０ｇ, １００％)。
APCI-MS m/z: 137.1 [MH+].
1H-NMR (DMSO-D6): δ 10.03 (1H, brs), 8.18 (2H, s), 2.09 (1H, m), 0.91 (2H, m), 0.85 (2H, m) ppm.
【０１１０】
ｃ) ２−シクロプロピルピリミジン−５−イル トリフルオロメタンスルホネート
２−シクロプロピルピリミジン−５−オール(１.７ｇ, １２.５mmol)を、ＤＣＭ(５０ml)およびＴＨＦ(８ml)の混合物に、一部溶解させた。トリエチルアミン(３.８ｇ, ３７.５mmol)を加え、濁った溶液を−１５℃まで冷却した。ＤＣＭ(１０ml)に溶解したトリフルオロメタンスルホン酸無水物(５.３ｇ, １８.７mmol)をゆっくりと加えた。２０分後、反応混合物をさらなるＤＣＭ(１５ml)を用いて分液ろうとに移し、５％ ＫＨＣＯ３溶液(３５ml)で、そして塩水(３５ml)で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させ、粗生成物を黒色の油状物として得た。この物質を、さらに、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーによって、４０％ ＥｔＯＡｃ／ヘプタンを溶出液として精製し、副題化合物を得た(２.０ｇ, ６２％)。
APCI-MS m/z: 269.1 [MH+].
1H-NMR (CDCl3): δ 8.53 (2H, s), 2.34 (1H, m), 1.20-1.15 (4H, m) ppm.
【０１１１】
ｄ) ２−シクロプロピル−５−(１,２,３,６−テトラヒドロピリジン−４−イルエチニル)ピリミジン トリフルオロ酢酸塩
２−シクロプロピルピリミジン−５−イル トリフルオロメタンスルホネート(０.４ｇ, １.４９mmol)、ｔｅｒｔ−ブチル ４−エチニル−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−カルボキシレート(０.３１ｇ, １.４９mmol)、ジエチルアミン(０.３３ｇ, ４.４７mmol)、およびＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２(０.０４ｇ, ０.０６mmol)を、アルゴン下で封管中に入れ、８０℃まで１.５時間加熱した。揮発性のジエチルアミンを蒸発によって除去し、残った物質をＤＣＭ(１０ml)に溶解し、ＴＦＡ(３ml)で、室温で１５分間処理した。溶媒を蒸発によって除去し、残渣を、以下のセミ分取ＨＰＬＣ系：KROMASIL 100-5-C18, 250×20mm カラム, ＵＶ＝２２０nmで、３０分の１０〜９０％ ＭｅＣＮ／０.１％ ＴＦＡを含む水の濃度勾配を用いて精製した。必要な生成物を含むフラクションを集め、蒸発させ、ＭｅＣＮを除去した。凍結乾燥によって残った水を除去し、表題のトリフルオロ酢酸塩を得た(５０mg, １０％)。
APCI-MS m/z: 226.1 [MH+].
1H-NMR (DMSO-D6): δ 8.85 (2H, brs), 8.74 (2H, s), 6.25 (1H, m), 3.74 (2H, m), 3.26 (2H, t), 2.46 (2H, m), 2.22 (1H, m), 1.11 (2H, m), 1.02 (2H, m) ppm.
【０１１２】
薬理学的実施例
単離した酵素のアッセイ
リコンビナントのヒトＭＭＰ１２触媒ドメインを、Parkar A.A. et al, (2000), Protein Expression and Purification, 20:152 に記載された通りに発現し、精製し得る。精製した酵素は、下記のように活性の阻害剤をモニターするのに用い得る：
ＭＭＰ１２(５０ng/ml 最終濃度)を、アッセイ緩衝液(０.１Ｍ ＮａＣｌ、２０ｍＭ ＣａＣｌ２、０.０２０ｍＭ ＺｎＣｌ、および０.０５％(w/v) “Brij 35”(商標)界面活性剤を含む０.１Ｍ “Tris-HCl”(商標)緩衝液(ｐＨ ７.３))中の合成基質：Mac−Pro−Cha−Gly−Nva−His−Ala−Dpa−NH2と共に、阻害剤の存在下(５種の濃度)もしくは非存在下で、室温で６０分間インキュベートする。活性は、λex ３２０nm、およびλem ４０５nmでの蛍光を測定することによって決定する。パーセント阻害は下記のように計算する：
％阻害は、[蛍光阻害剤添加−蛍光バックグラウンド] を、[蛍光阻害剤非添加−蛍光バックグラウンド] で割ったものと等しい。
【０１１３】
発現させ精製したｐｒｏＭＭＰを用いた、ＭＭＰ９を含む他のマトリックス・メタロプロテイナーゼについて試験するためのプロトコルは、例えば C. Graham Knight et al., (1992) FEBS Lett. 296(3):263-266 に記載されている。
【０１１４】
下記の表は、種々のＭＭＰについて試験した場合の実施例の化合物の代表例のＩＣ５０値(ｎＭ)を示している。
【表２】
2007530672.tif 000013
【国際調査報告】
2007530672.tif 000018
2007530672.tif 000019
2007530672.tif 000020
2007530672.tif 000021
2007530672.tif 000022