(57)【要約】  本発明は、以下の式（Ｉ）の化合物並びに血管新生に関連する受容体に結合するターゲティングベクターとしての使用に関する。そこで、かかる化合物は、例えば悪性疾患、心疾患、子宮内膜症、炎症関連疾患、関節リウマチ及びカポジ肉腫の診断又は治療に使用し得る。【化１】2007523880.tif 000037【選択図】  なし
2007523880.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式（Ｉ）の化合物。
【化１】
2007523880.tif 000027
式中、
Ｒ２は次式の基であり、
【化２】
2007523880.tif 000028
（但し、ｂは０〜１０の整数である。）
Ｒ３はＣ１〜４アルキレン又はＣ２〜４アルケニレン橋かけ基であり、
Ｗ１は存在しないか、或いは適宜酸素、窒素及び硫黄から選択される１〜１０個のヘテロ原子を含んでいてもよいＣ１〜３０ヒドロカルビル基であって、優先的にグルタル酸及び／又はコハク酸及び／又はポリエチレングリコール単位及び／又は次式の単位から誘導されたスペーサー基を表し、
【化３】
2007523880.tif 000029
Ｚ１は抗悪性腫瘍薬、キレート剤又はレポーター部分である。
【請求項２】
Ｚ１が放射性核種を含むレポーター部分である、請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項３】
次の式（Ｉａ）の化合物。
【化４】
2007523880.tif 000030
式中、
Ｒ１は単結合又は次式の基であり、
【化５】
2007523880.tif 000031
（但し、ａは、１〜３０の整数である。）
Ｒ２は次式の基であり、
【化６】
2007523880.tif 000032
（但し、ｂは、０〜１０の整数である。）
Ｒ３はＣ１〜４アルキレン又はＣ２〜４アルケニレン橋かけ基であり、
リンカーは適宜１〜１０個のヘテロ原子を含んでいてもよいＣ１〜３０ヒドロカルビル基である。
【請求項４】
Ｒ３がＣ１〜４アルキレンであり、ａが１〜１０の整数であり、ｂが１である、請求項３記載の式（Ｉａ）の化合物。
【請求項５】
Ｒ３が−ＣＨ２−であり、ａが５である、請求項３又は請求項４記載の式（Ｉａ）の化合物。
【請求項６】
リンカーが以下の（ＩＩ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）から選択される、請求項３乃至請求項５のいずれか１項記載の式（Ｉａ）の化合物。
【化７】
2007523880.tif 000033
式中、ｎは１〜２０の整数であり、ｍは１〜１０の整数であり、ｐは１〜２０の整数であり、ｑは０〜４の整数であり、ｒは１〜１０の整数である。
【請求項７】
次式で表される、請求項３乃至請求項６のいずれか１項記載の式（Ｉａ）の化合物。
【化８】
2007523880.tif 000034
【請求項８】
医療、特に血管新生に関連した疾患又は病態の、例えばＰＥＴによるインビボ診断又はイメージングに使用するための請求項１乃至請求項７のいずれか１項記載の式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物。
【請求項９】
血管新生に関連した疾患又は病態のインビボ診断又はイメージングの方法であって、請求項１乃至請求項７のいずれか１項記載の式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物をヒト又は動物の身体に投与し、次いで身体の一部分又は全体の画像、好適にはＰＥＴ画像を生成する段階を含む方法。
【請求項１０】
請求項１乃至請求項７のいずれか１項記載の式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物、及び薬学的に許容される１種以上の賦形剤を含む放射性医薬組成物。
【請求項１１】
請求項３乃至請求項７のいずれか１項記載の式（Ｉａ）の化合物の製造方法であって、式（Ｖ）の化合物と適当な式（ＶＩ）の化合物との反応を含んでなる方法。
【化９】
2007523880.tif 000035
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、式（Ｉａ）の化合物について定義した通りであり、Ｘはクロロ、ブロモ及びヨードから選択される脱離基、好ましくはクロロである。）
１８Ｆ−（リンカー）−ＳＨ      （ＶＩ）
（式中、リンカーは式（Ｉａ）の化合物について定義した通りである。）
【請求項１２】
請求項１１記載の式（Ｖ）の化合物。
【請求項１３】
請求項３乃至請求項７のいずれか１項記載の式（Ｉａ）の放射性フッ素化ペプチド製造用キットであって、
（ｉ）次の式（ＶＩａ）の化合物
Ｌ−（リンカー）−ＳＲ      （ＶＩａ）
（式中、Ｌはｐ−トルエンスルホネート、トリフルオロメタンスルホネート又はメタンスルホネートのような脱離基であり、リンカーは適宜１〜１０個のヘテロ原子を含んでいてもよいＣ１〜３０ヒドロカルビル基であり、Ｒは水素又はチオール保護基である。）、及び
（ｉｉ）請求項１１記載の式（Ｖ）の活性化ペプチド
を含むキット。
【請求項１４】
（ｉ）以下の式（ＶＩｂ）、（ＶＩｃ）又は（ＶＩｄ）の化合物
【化１０】
2007523880.tif 000036
（式中、ｎは１〜２０の整数であり、ｍは１〜１０の整数であり、ｐは１〜２０の整数であり、ｑは０〜４の整数であり、ｒは１〜１０の整数であり、Ｌはｐ−トルエンスルホネート、トリフルオロメタンスルホネート又はメタンスルホネートのような脱離基であり、Ｌ′はヨード、ｐ−トルエンスルホネート、トリフルオロメタンスルホネート又はメタンスルホネートのような脱離基であり、ｑが０のときは、Ｌ′はニトロ、又はヨードニウム若しくはアンモニウム塩であってもよく、Ｒは水素又はチオール保護基である。）、及び
（ｉｉ）請求項１１記載の式（Ｖ）の活性化ペプチド
を含む請求項１３記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規ペプチド系化合物、並びに単一光子放射型コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）や陽電子放射型断層撮影（ＰＥＴ）のような画像診断法における使用に関する。さらに具体的には、本発明は、血管新生に関連する受容体、特にインテグリン受容体（例えばαｖβ３インテグリン受容体など）に結合するターゲティングベクターとしての上記ペプチド系化合物の使用に関する。そこで、かかる化合物は、例えば悪性疾患、心疾患、子宮内膜症、炎症関連疾患、関節リウマチ及びカポジ肉腫の診断及び治療に使用し得る。
【背景技術】
【０００２】
新しい血管は脈管形成と血管新生という２つの異なる機序で形成される。血管新生は既存の血管からの枝分れによる新しい血管の形成である。このプロセスに対する主な刺激として、組織内の細胞への栄養及び酸素の不十分な供給（低酸素）がある。細胞は血管新生因子の分泌によって応答することがある。血管新生因子は多数存在するが、しばしば言及されるその一例は血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）である。これらの因子は、基底膜のタンパク質を分解するタンパク分解酵素の分泌だけでなく、かかる潜在的に有害な酵素の作用を制限する阻害剤の分泌も惹起する。血管新生因子のもう一つの顕著な作用は内皮細胞を遊走させ分裂させることである。血管の反管腔側に連続層をなす基底膜に付着した内皮細胞は有糸分裂を起こさない。付着の喪失と血管新生因子受容体からのシグナルとの複合作用によって、内皮細胞の移動、増殖及び再配列が起こり、最終的には新血管周囲に基底膜が合成される。
【０００３】
血管新生は創傷治癒及び炎症過程を始めとする組織の増殖及びリモデリングに重要である。腫瘍は、ミリメートル大に達すると、その増殖速度を保つため血管新生を惹起しなければならない。血管新生は内皮細胞とそれらの周囲の環境に特徴的な変化を伴う。これらの細胞の表面は遊走に備えてリモデリングされ、基底膜が分解されて、タンパク分解の誘発と制御に関与する各種タンパク質に加えて、隠れた構造が露出される。腫瘍の場合、形成される血管ネットワークは通常はまとまりがなく、鋭いねじれや動静脈シャントの形成を伴う。血管新生の阻害も抗腫瘍療法の有望な方策であると考えられる。血管新生に伴う形質転換も診断に極めて有望であり、その一例は悪性疾患であるが、この方策は、炎症及びアテローム性動脈硬化症を始めとする様々な炎症関連疾患にも極めて有望である。初期アテローム性動脈硬化病変のマクロファージは血管新生因子の潜在的発生源である。
【０００４】
細胞接着に関与するリガンドの多くはアルギニン−グリシン−アスパラギン酸のトリペプチド配列（ＲＧＤ）を含んでいる。ＲＧＤ配列は、この配列を提示するリガンドと細胞表面の受容体との間の一次認識部位として作用すると考えられている。リガンドと受容体の二次的相互作用は上記相互作用の特異性を高めると一般に考えられている。こうした二次的相互作用は、リガンドと受容体のＲＧＤ配列に直接隣接した部分又はＲＧＤ配列から離れた部位で起こり得る。
【０００５】
血管新生に関連するインテグリン受容体のインビボでの効率的ターゲティング及びイメージングには、化学的に頑強かつ安定で選択性及び親和性の高いＲＧＤ系ベクターが要求される。さらに、造影剤の設計に際しては、バックグラウンドノイズに付随する問題を軽減するため排泄経路が重要な要因である。
【０００６】
国際公開第０３／００６４９１号には、インテグリン血管新生に関連した受容体をターゲットとするペプチド系化合物が記載されている。しかし、かかるペプチド系化合物でＳＰＥＣＴやＰＥＴなどの画像診断法並びに治療に有用な化合物はさらに必要とされている。特に、放射性核種のようなレポーター部分の導入に用いられる反応条件に対する安定性の向上したペプチド系化合物が必要とされている。
【特許文献１】国際公開第０３／００６４９１号パンフレット
【特許文献２】国際公開第０１／７７１４５号パンフレット
【特許文献３】国際公開第０２／０６２８１９号パンフレット
【特許文献４】米国特許第５８８８４７４号明細書
【特許文献５】国際公開第０２／２０６１０号パンフレット
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
そこで、本発明の第一の態様では、式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０００８】
【化１】
2007523880.tif 000003
式中、
Ｒ２は次式の基であり、
【０００９】
【化２】
2007523880.tif 000004
（但し、ｂは０〜１０の整数である。）
Ｒ３はＣ１〜４アルキレン又はＣ２〜４アルケニレン橋かけ基であり、
Ｗ１は存在しないか、或いは適宜酸素、窒素及び硫黄から選択される１〜１０個のヘテロ原子を含んでいてもよいＣ１〜３０ヒドロカルビル基であって、優先的にグルタル酸及び／又はコハク酸及び／又はポリエチレングリコール単位及び／又は次式の単位から誘導されたスペーサー基を表し、
【００１０】
【化３】
2007523880.tif 000005
Ｚ１は抗悪性腫瘍薬、キレート剤又はレポーター部分である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
好適なキレート剤Ｚ１としては、次の式Ａのものが挙げられる。
【００１２】
【化４】
2007523880.tif 000006
式中、
Ｒ１Ａ、Ｒ２Ａ、Ｒ３Ａ及びＲ４Ａは各々独立にＲＡ基であり、
各ＲＡ基は独立にＨ又はＣ１〜１０アルキル、Ｃ３〜１０アルキルアリール、Ｃ２〜１０アルコキシアルキル、Ｃ１〜１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜１０アルキルアミン、Ｃ１〜１０フルオロアルキルであるか、或いは２以上のＲＡ基がそれらに結合した原子と共に炭素環、複素環、飽和又は不飽和環を形成するものである。
或いは、Ｚは以下の式（Ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）又は（ｉｖ）のキレート剤であってもよい。
【００１３】
【化５】
2007523880.tif 000007
キレート剤の好ましい例は次の式（ｖ）で表される。
【００１４】
【化６】
2007523880.tif 000008
式（Ａ）のキレート剤を含む式（Ｉ）の化合物を放射性標識すると、中性ｐＨ付近の水性条件下室温で良好な放射化学的純度（「ＲＣＰ」）が得られる。
【００１５】
スペーサー基Ｗ１の役割はペプチド成分の活性部位からＺ１を離隔させることである。例えば、スペーサー基Ｗ１はペプチドの活性部位から嵩高い抗悪性腫瘍薬を離隔させるのことができる。
【００１６】
適当なキレート剤Ｚ１のその他の例は、米国特許第４６４７４４７号、国際公開第８９／００５５７号、米国特許第５３６７０８０号、米国特許第５３６４６１３号に開示されており、さらに以下の表１に挙げるものがある。
【００１７】
【表１】
2007523880.tif 000009
【００１８】
【表２】
2007523880.tif 000010
本発明の一態様では、Ｚ１は抗悪性腫瘍薬である。この態様では、式（Ｉ）の化合物は癌に関連した血管新生部位をターゲティングし、抗悪性腫瘍薬を疾患領域に運搬する。抗悪性腫瘍薬の例として、シクロホスファミド、クロラムブシル、ブスルファン、メトトレキセート、シタラビン、フルオロウラシル、ビンブラスチン、パクリタキセル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エトポシド、テニポシド、シスプラチン、アムサクリン、ドセタキセルが挙げられるが、その他幅広い種類の抗悪性腫瘍薬も使用し得る。
【００１９】
式（Ｉ）の化合物のレポーター部分（Ｚ１）はインビボ画像診断法で直接又は間接的に検出できる部分であればよい。検出可能な放射線を直接又は間接的に放出するレポーター部分（例えば、陽電子放射性核種のような放射性核種）が好ましい。
【００２０】
磁気共鳴（ＭＲ）イメージング用には、レポーター部分は核スピンが０でない同位体（例えば１９Ｆ）であるか、或いは不対電子スピンを有していて常磁性、超常磁性、フェリ磁性又は強磁性特性を備える物質である。光学イメージング用には、レポーター部分は光散乱体（例えば着色又は非着色粒子）、光吸収体又は発光体である。磁気イメージング用には、レポーターは検出可能な磁性特性を有する。電気インピーダンス式イメージング用には、レポーターは電気インピーダンスに影響を与えるものである。シンチグラフィー、ＳＰＥＣＴ、ＰＥＴなどの用途には、レポーターは放射性核種である。
【００２１】
概して、レポーター部分は、（１）原子番号の高い（例えば原子番号が３７を超える）金属又は多原子金属含有イオン（ＴｃＯなど）、常磁性種（例えば遷移金属又はランタニド）又は放射性同位体にキレートした上述のキレート剤、（２）共有結合した非金属種で、不対電子部位（例えば持続性フリーラジカルの酸素又は炭素）、原子番号の高い非金属又は放射性同位体であるもの、（３）原子番号の高い原子を含む多原子クラスター又は結晶で、協同的磁性挙動（例えば超常磁性、フェリ磁性又は強磁性）を示すか或いは放射性核種を含むもの、のいずれでもよい。
【００２２】
キレート金属レポーター部分は、好ましくは９０Ｙ、９９ｍＴｃ、１１１Ｉｎ、４７Ｓｃ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、５１Ｃｒ、１７７ｍＳｎ、６２Ｃｕ、１８７Ｔｍ、９７Ｒｕ、１８８Ｒｅ、１７７Ｌｕ、１９９Ａｕ、２０３Ｐｂ及び１４１Ｃｅからなる群から選択され、上述のキレート基でキレートされる。
【００２３】
存在するキレート剤を金属化する方法は当業者の技術レベルである。金属は、直接導入法、鋳型合成及び／又はトランスメタレーションの３通りの常法のいずれかでキレート剤に導入し得る。直接導入法が好ましい。
【００２４】
そこで、例えば単にキレート剤含有部分の水溶液を好ましくはｐＨ約４〜約１１の水溶液中の金属塩に曝露又は混合することによって、金属イオンをキレート剤と容易に錯化できるのが望ましい。塩はどんな塩でもよいが、好ましくはハロゲン塩のような水溶性の金属塩であり、さらに好ましくは、かかる塩は金属イオンとキレート剤との結合を妨害しないものを選択する。キレート剤含有部分は、好ましくはｐＨ約５〜約９、さらに好ましくはｐＨ約６〜約８の水溶液中に存在する。キレート剤含有部分は、至適ｐＨが得られるようにクエン酸塩、炭酸塩、酢酸塩、リン酸塩及びホウ酸塩のような緩衝塩と混合してもよい。好ましくは、緩衝塩は後段の金属とキレート剤との結合を妨害しないものを選択する。
【００２５】
以下の同位体及び同位体対：４７Ｓｃ２１、１４１Ｃｅ５８、１８８Ｒｅ７５、１７７Ｌｕ７１、１９９Ａｕ７９、４７Ｓｃ２１、１３１Ｉ５３、６７Ｃｕ２９、１３１Ｉ５３と１２８Ｉ５３、１８８Ｒｅ７６と９９ｍＴｃ４３、９０Ｙ３９と８７Ｙ３９、４７Ｓｃ２１と４４Ｓｃ２１、９０Ｙ３９と１２３Ｉ５３、１４６Ｓｍ６２と１５３Ｓｍ６２及び９０Ｙ３９と１１１Ｉｎ４９は、放射性標識法又はキレーターを変更しなくても、イメージングと治療の両方に使用できる。
【００２６】
好ましい非金属原子レポーターとしては、１２３Ｉ、１３１Ｉ及び１８Ｆのような放射性同位体、並びに１９Ｆのような核スピンが０でない原子及びＩのような重原子が挙げられる。
【００２７】
本発明の好ましい態様では、式（Ｉ）の化合物のＺ１は、補欠分子族として、又は置換若しくは付加反応又はキレート化によって導入された陽電子放出型放射性核種を含む。この目的に適した陽電子放出型放射性核種としては、１１Ｃ、１８Ｆ、１５Ｏ、１３Ｎ、７５Ｂｒ、１２２Ｉ、１２４Ｉ、８２Ｒｂ、６８Ｇａ及び６２Ｃｕが挙げられるが、１１Ｃ及び１８Ｆが好ましい。得られた式（Ｉ）の化合物は、陽電子放射型断層撮影（ＰＥＴ）イメージングに使用し得る。
【００２８】
したがって、本発明の好ましい態様では、次の式（Ｉａ）の化合物を提供する。
【００２９】
【化７】
2007523880.tif 000011
式中、
Ｒ１は単結合又は次式の基であり、
【００３０】
【化８】
2007523880.tif 000012
（但し、ａは、１〜３０の整数である。）
Ｒ２は次式の基であり、
【００３１】
【化９】
2007523880.tif 000013
（但し、ｂは、０〜１０の整数である。）
Ｒ３はＣ１〜４アルキレン又はＣ２〜４アルケニレン橋かけ基であり、
リンカーは適宜１〜１０個のヘテロ原子を含んでいてもよいＣ１〜３０ヒドロカルビル基である。
【００３２】
式（Ｉａ）の化合物において、Ｒ３は好ましくはＣ１〜４アルキレン、さらに好ましくは−ＣＨ２−であり、ａは好ましくは１〜１０の整数、最も好ましくは５であり、ｂは好ましくは１である。
【００３３】
式（Ｉａ）において、リンカーは、適宜酸素や窒素のような１〜１０個のヘテロ原子を含んでいてもよいＣ１〜６０ヒドロカルビル基であり、好ましい排出特性など、良好なインビボ薬物動態が得られるように選択し得る。
好適なリンカー基としては、アルキル、アルケニル、アルキニル鎖、芳香族、ポリ芳香族及びヘテロ芳香族環、さらにエチレングリコール、アミノ酸又は炭水化物サブユニットを含むポリマーが挙げられる。リンカーは好ましくは以下の（ＩＩ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）から選択される。
【００３４】
【化１０】
2007523880.tif 000014
式中、ｎは１〜２０の整数であり、ｍは１〜１０の整数であり、ｐは１〜２０の整数であり、ｑは０〜４の整数であり、ｒは１〜１０の整数である。
【００３５】
式（ＩＩ）において、ｎは通例２〜６、好適には３であり、ｍは通例１〜４、好適には２である。
【００３６】
式（ＩＩＩ）において、ｐは通例１〜６、好適には３である。
【００３７】
式（ＩＶ）において、−（ＣＨ２）ｑ−基は好適にはアミド基に対してパラ位に結合しており、ｑは通例０〜４、好適には１であり、ｒは通例１〜４、好適には２である。
【００３８】
後述のインビトロ競合結合試験に示す通り、式（Ｉ）及び（Ｉａ）の化合物は、血管新生に関連する受容体に結合する。そこで、これらの化合物は、血管新生に関連した疾患及び病態の治療、インビボ診断及びイメージングに有用であると考えられる。
【００３９】
「血管新生に関連した疾患及び病態」という用語には、以下に挙げる疾患及び病態が包含される。これに関しては国際公開第９８／４７５４１号も参照できる。
【００４０】
血管新生に関連した疾患及び病態としては、例えば様々な形態の癌及び転移、例えば乳癌、皮膚癌、結腸直腸癌、膵臓癌、前立腺癌、肺癌又は卵巣癌が挙げられる。
【００４１】
血管新生に関連したその他の疾患及び病態は、炎症（例えば慢性）、アテローム性動脈硬化症、関節リウマチ及び歯肉炎である。
【００４２】
血管新生に関連したさらに別の疾患及び病態は、動静脈奇形、星細胞腫、絨毛癌、グリア芽細胞種、神経膠腫、血管腫（小児性、毛細血管性）、肝細胞腫、過形成性子宮内膜症、虚血性心筋症、子宮内膜症、カポジ肉腫、黄斑変性症、黒色腫、神経芽細胞腫、閉塞性末梢動脈疾患、骨関節炎、乾癬、網膜症（糖尿病性、増殖性）、強皮症、精上皮腫及び潰瘍性大腸炎である。
【００４３】
したがって、本発明の別の態様では、医療、特に血管新生に関連した疾患又は病態の例えばＰＥＴによるインビボ診断又はイメージングに使用するための式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物を提供する。
【００４４】
別の態様では、血管新生に関連した疾患又は病態のインビボ診断又はイメージングの方法であって、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物をヒト又は動物の身体に投与し、次いで身体の一部分又は全体の画像、好適にはＰＥＴ画像を生成する段階を含む方法を提供する。
さらに、治療に有効な量の式（Ｉ）の化合物をヒト又は動物の身体に投与する段階を含む血管新生に関連した疾患又は病態の治療方法も提供する。
【００４５】
式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物は、好ましくは放射性医薬組成物として投与される。「放射性医薬組成物」とは、本発明では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物をヒトなどの哺乳類への投与に適した形態で含む組成物と定義される。投与は、好ましくは放射性医薬組成物を水溶液として注射することによって実施される。かかる放射性医薬組成物は、緩衝剤、薬学的に許容される可溶化剤（例えば、シクロデキストリン、又はＰｌｕｒｏｎｉｃ、Ｔｗｅｅｎ、リン脂質などの界面活性剤）、薬学的に許容される安定剤又は酸化防止剤（アスコルビン酸、ゲンチシン酸、パラアミノ安息香酸など）、又は凍結乾燥用構造形成剤（塩化ナトリウムやマンニトール）などの追加成分を適宜含んでいてもよい。放射性医薬組成物は、検査すべき疾患の種類又は病態、患者の体重その他当業者に自明の要因を考慮して、信頼性のある画像が得られる量で投与される。レポーター部分が金属を含んでいる場合、信頼性のある画像を得るには、一般に患者の体重１ｋｇ当たりイメージング用キレート化金属イオン０．００１〜５．０ｍｍｏｌの用量が有効である。ＰＥＴについて、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物の適量は０．１〜１００ｍＣｉ、好ましくは１〜２０ｍＣｉである。
【００４６】
したがって、本発明の別の態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物と薬学的に許容される１種以上の賦形剤を含む放射性医薬組成物を提供する。本発明は、さらに、治療に有効な量の式（Ｉ）の化合物又はその塩を、薬学的に許容される１種以上の補助剤、賦形剤又は希釈剤と共に含んでなる組成物も提供する。
【００４７】
式（Ｉ）の化合物の有効治療線量は、治療すべき病態及び患者によって異なるが、一般に１ｐｍｏｌ／ｋｇ〜１ｍｍｏｌ／１ｋｇ体重の範囲内である。
【００４８】
式（Ｉ）の化合物は、自動ペプチド合成装置を用いたＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄの固相法（Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．，  ８５：  ２１４９  （１９６４））及び国際公開第０３／００６４９１号に記載のものと同様の方法を始めとする有機合成法で製造し得る。式（Ｉ）の化合物は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いて精製し得る。
【００４９】
式（Ｉａ）の化合物は、以下の式（Ｖ）の化合物から、以下の適当な式（ＶＩ）の化合物との反応によって製造し得る。
【００５０】
【化１１】
2007523880.tif 000015
式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、式（Ｉ）の化合物について定義した通りであり、Ｘはクロロ、ブロモ及びヨードから選択される脱離基、好ましくはクロロである。
【００５１】
１８Ｆ−（リンカー）−ＳＨ      （ＶＩ）
式中、リンカーは式（Ｉａ）の化合物について定義した通りである。
【００５２】
式（Ｖ）の化合物は新規であり、本発明のさらに別の態様をなす。
【００５３】
式（Ｖ）と（ＶＩ）の化合物との反応は、国際公開第０３／０８０５４４号に記載の方法を用いて実施できる。一般に、この反応は、適当な溶媒（例えばｐＨ５〜１１の水性緩衝液）中、５〜７０℃の穏和な温度、好ましくは室温で実施し得る。
【００５４】
式（Ｖ）の化合物は、ペプチド合成の常法、例えば固相ペプチド合成、例えばＡｔｈｅｒｔｏｎ，Ｅ．  ａｎｄ  Ｓｈｅｐｐａｒｄ，Ｒ．Ｃ．；“Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”；ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ：Ｏｘｆｏｒｄ，  １９８９に記載にしたがって、製造し得る。国際公開第０３／００６４９１号にも同様のペプチドの合成法が記載されており、その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。橋かけ基Ｒ３の導入は、２つの遊離チオール基を含む対応ペプチドとジクロロアルカン又はジクロロアルケン（Ｒ３をメチレンとするときはジクロロメタン）との反応で実施し得る。式（Ｖ）の化合物の「Ｘ−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−」基の導入は、ペプチド結合形成の通常の条件下での、ペプチドのＮ末端又はアミン含有アミノ酸、好ましくはリジンと次の式（ＶＩＩ）の試薬との反応で実施できる。
【００５５】
Ｘ−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｚ      （ＶＩＩ）
（式中、Ｘは式（Ｖ）の化合物について定義した通りであり、Ｚは−ＯＨ、又はクロロ、ブロモ、フルオロ、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ２−Ｘ（Ｘは式（Ｖ）の化合物について定義した通りである。）のような適当な活性化基である。）。或いは、Ｚが−ＯＨの場合、その酸を、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）やＮ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルメチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスファートＮ−オキシド（ＨＡＴＵ）のようなインサイツ活性化剤を用いて活性化してもよい。
【００５６】
式（ＶＩ）の化合物は、国際公開第０３／０８０５４４号に記載されているような常法によって、対応する以下の式（ＶＩａ）の化合物を、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド又はジメチルスルホキシドのような適当な溶媒中、通常は昇温下（例えば６０〜１２０℃）で、サイクロトロン生成水性［１８Ｆ］フッ化物（好適には、塩基（例えば、テトラブチルアンモニウム又はＫ２ＣＯ３／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ−２２２）からの蒸発によって予め活性化しておいたもの）と反応させた後、常法でチオール保護基を除去することによって製造し得る。
【００５７】
Ｌ−（リンカー）−ＳＲ      （ＶＩａ）
式中、Ｌはｐ−トルエンスルホネート、トリフルオロメタンスルホネート又はメタンスルホネートのような脱離基であり、リンカーは式（ＶＩ）の化合物について定義した通りであり、Ｒは水素又はチオール保護基である。
【００５８】
リンカーが式（ＩＩ）のものである式（ＶＩ）の化合物は、対応する以下の式（ＶＩｂ）の化合物を、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド又はジメチルスルホキシドのような適当な溶媒中、通常は昇温下（例えば６０〜１２０℃）で、サイクロトロン生成水性［１８Ｆ］フッ化物（好適には、塩基（例えば、テトラブチルアンモニウム又はＫ２ＣＯ３／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ−２２２）からの蒸発によって予め活性化しておいたもの）と反応させた後、常法でチオール保護基を除去することによって製造し得る。
【００５９】
Ｌ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−（ＣＨ２）ｍ−ＳＲ      （ＶＩｂ）
式中、Ｌはｐ−トルエンスルホネート、トリフルオロメタンスルホネート又はメタンスルホネートのような脱離基であり、ｎ及びｍは式（ＩＩ）で定義した通りであり、Ｒは水素又はチオール保護基である。
【００６０】
リンカーが式（ＩＩＩ）のものである式（ＶＩ）の化合物は、対応する以下の式（ＶＩｃ）の化合物を、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド又はジメチルスルホキシドのような適当な溶媒中、通常は昇温下（例えば６０〜１２０℃）で、サイクロトロン生成水性［１８Ｆ］フッ化物（好適には、塩基（例えば、テトラブチルアンモニウム又はＫ２ＣＯ３／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ−２２２）からの蒸発によって予め活性化しておいたもの）と反応させた後、常法でチオール保護基を除去することによって製造し得る。
【００６１】
Ｌ−（ＣＨ２）ｐ−ＳＲ      （ＶＩｃ）
式中、Ｌはｐ−トルエンスルホネート、トリフルオロメタンスルホネート又はメタンスルホネートのような脱離基であり、ｐは式（ＩＩＩ）で定義した通りであり、Ｒは水素又はチオール保護基である。
【００６２】
リンカーが式（ＩＶ）のものである式（ＶＩ）の化合物は、対応する以下の式（ＶＩｄ）の化合物を、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド又はジメチルスルホキシドのような適当な溶媒中、通常は昇温下（例えば６０〜１２０℃）で、サイクロトロン生成水性［１８Ｆ］フッ化物（好適には、塩基（例えば、テトラブチルアンモニウム又はＫ２ＣＯ３／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ−２２２）からの蒸発によって予め活性化しておいたもの）と反応させた後、常法でチオール保護基を除去することによって製造し得る。
【００６３】
【化１２】
2007523880.tif 000016
式中、Ｌ′はヨード、ｐ−トルエンスルホネート、トリフルオロメタンスルホネート又はメタンスルホネートのような脱離基であり、ｑが０のときは、Ｌ′はニトロ、又はヨードニウム若しくはアンモニウム塩であってもよく、ｑ及びｒは式（ＩＶ）で定義した通りであり、Ｒは水素又はチオール保護基である。
【００６４】
式（ＶＩａ）、（ＶＩｂ）、（ＶＩｃ）及び（ＶＩｄ）において、適当なチオール保護基としては、（フェニル）３Ｃ−（すなわちトリチル）その他、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｔｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．  Ｍ．  Ｗｕｔｓ，  ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ  ｂｙ  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ  Ｉｎｃ．に記載のものが挙げられる。かかるチオール保護基の除去は、上記Ｇｒｅｅｎｅの成書に記載されているような常法で実施すればよい。例えば、Ｒがトリチルの場合、ジクロロメタンのような塩素化溶媒中の希酸（例えばトリフルオロ酢酸）での処理によって、遊離チオールを形成し得る。
【００６５】
好ましい態様では、式（ＶＩａ）、（ＶＩｂ）、（ＶＩｃ）及び（ＶＩｄ）の化合物を、ポリマービーズ又はコーティング（例えばトリチル又はクロロトリチル樹脂など）のような固体担体に結合させてもよい。この態様では、ポリマー結合生成物から過剰の試薬及び放射性フッ素化反応の副生物を洗浄によって分離し得る。上述の脱保護法を用いれば、固体担体から式（ＶＩ）の化合物が開裂する。この方法は特に式（ＶＩ）の化合物の自動合成に適していると思われる。別法として、チオール脱保護の副生成物が反応混合物に不溶であれば、濾過によって除去できる。
【００６６】
本発明の別の態様では、式（Ｉ）の放射性フッ素化ペプチド製造用キットであって、式（ＶＩａ）、（ＶＩｂ）、（ＶＩｃ）又は（ＶＩｄ）の補欠分子族と式（Ｖ）の活性化ペプチドとを含むキットを提供する。
【００６７】
キットの使用に際して、式（ＶＩａ）、（ＶＩｂ）、（ＶＩｃ）又は（ＶＩｄ）の化合物を上述の方法を用いて対応する式（ＶＩ）の化合物に変換する。好ましくは、式（ＶＩ）の化合物又はそのチオール保護前駆体は、反応混合物を固相抽出（ＳＰＥ）カートリッジに流して、不要な反応体から分離し得る。ＳＰＥカートリッジには、グラファイトパッド又はＣ１８固相を含むものがある。チオール保護基は、例えばトリフルオロ酢酸のような酸の添加によって除去できる。式（ＶＩ）の化合物のチオール基がトリチル基のような疎水性基で保護されている場合、脱保護はＳＰＥカートリッジで簡便に実施でき、疎水性チオール保護基（トリチルなど）を固相に結合したまま、式（ＶＩ）の標識補欠分子族が高い純度及び収率で溶出される。次いで式（ＶＩ）の化合物を式（Ｖ）の化合物に添加するが、これは水性緩衝液（ｐＨ７〜１１）に好適に溶解し得る。穏和な温度で１〜６０分間反応させた後、標識ペプチドを例えばＳＰＥで精製し、回収すればよい。
【００６８】
以下の実施例によって本発明を例証するが、実施例では以下の略語を用いる。
【００６９】
ＤＣＭ：ジクロロメタン、
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸、
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン、
ＨＢＴＵ：２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート、
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニル、
Ｆｍｏｃ：９−フルオレニルメトキシカルボニル、
ＴＩＳ：トリイソプロピルシラン。
【実施例】
【００７０】
実施例１：  ３−フルオロ−プロピルスルファニル標識ＲＧＤ含有ペプチドの製造
標記化合物
【００７１】
【化１３】
2007523880.tif 000017
１ａ）  ３−トリチルスルファニル−プロパン−１−オールの合成
【００７２】
【化１４】
2007523880.tif 000018
塩化トリチル（２７．９ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（４９μｌ、０．５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２ｍＬ）に溶解してから、３−メルカプト−１−プロパノール（９μｌ、０．１ｍｍｏｌ）を添加した。６時間後、ＤＣＭを減圧下で蒸発させ、粗生成物を調製用逆相クロマトグラフィー（Ｖｙｄａｃ  ２１８ＴＰ１０２２カラム；溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：４０分間で３０〜７０％Ｂ；流速１０ｍＬ／分；２５４ｎｍで検出）で精製した。収量６ｍｇの精製標品を得た（分析用ＨＰＬＣ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８，００Ｂ−４２５１−Ｅ０カラム；溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：１０分間で３０〜７０％Ｂ；流速１．０ｍＬ／分；保持時間７．７３分、２１４及び２５４ｎｍで検出）。構造はＮＭＲで確認した。
【００７３】
１ｂ）  メタンスルホン酸３−トリチルスルファニル−プロピルエステルの合成
【００７４】
【化１５】
2007523880.tif 000019
ＴＨＦ（１ｍＬ）中の３−トリチルスルファニル−プロパン−１−オール（５ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（３２μｌ、０．２３ｍｍｏｌ）の溶液に、塩化メシル（６μｌ、０．０７５ｍｍｏｌ）を添加した。３０分後、ＴＨＦを減圧下で蒸発させ、粗生成物をＤＣＭに溶解し、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液、塩化ナトリウムの飽和溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。減圧下で蒸発させた後、１０ｍｇの収量を得た（分析用ＨＰＬＣ：Ｌｕｎａ  Ｃ１８，００Ｂ−４２５１−Ｅ０カラム；溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：１０分間で４０〜８０％Ｂ；流速１．０ｍＬ／分；保持時間７．１２分、２１４及び２５４ｎｍで検出）。構造はＮＭＲで確認した。
【００７５】
１ｃ）  （３−フルオロ−プロピルスルファニル）トリフェニルメタンの合成
【００７６】
【化１６】
2007523880.tif 000020
フッ化カリウム（１．４ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）及びＫｒｙｐｔｏｆｉｘ  ２２２（９．０ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（０．２ｍＬ）に（加熱しながら）溶解した。アセトニトリル（０．２ｍＬ）中のメタンスルホン酸３−トリチルスルファニル−プロピルエステル（５ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を８０℃に９０分間加熱した。粗生成物を調製用逆相クロマトグラフィー（Ｖｙｄａｃ  ２１８ＴＰ１０２２カラム；溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：４０分間で４０〜９０％Ｂ；流速１０ｍＬ／分；２５４ｎｍで検出）で精製した。収量２ｍｇの精製標品を得た（分析用ＨＰＬＣ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８，００Ｂ−４２５１−Ｅ０カラム；溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：１０分間で４０〜８０％Ｂ；流速１．０ｍＬ／分；保持時間８．２分、２１４及び２５４ｎｍで検出）。構造はＮＭＲで確認した。
【００７７】
１ｄ）  Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｃｙｓ（ＳｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−Ｃｙｓ（ＳｔＢｕ）−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＡＭ樹脂の合成
標記のペプチド配列は、自動ペプチド合成装置ＡＢＩ  ４３３Ａで１ｍｍｏｌアミノ酸カートリッジを用いてＲｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＡＭ樹脂から０．１ｍｍｏｌスケールで合成した。アミノ酸は、カップリング前に、ＨＢＴＵを用いて予め活性化しておいた。
【００７８】
１ｅ）  Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−シクロ［Ｃｙｓ（ＣＨ２）−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−Ｃｙｓ］−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＡＭ樹脂の合成
１ｄ）に記載の通り合成したペプチジル樹脂０．０５ｍｍｏｌを、トリブチルホスフィン３４６μＬ、水１００μＬ及びジメチルホルムアミド２ｍＬの溶液で処理した。９０分後、試薬を除去し、樹脂をジメチルホルムアミド及びジクロロメタンで洗浄した。次いで、樹脂をフッ化テトラブチルアンモニウム６３ｍｇ及びジクロロメタン２ｍＬの溶液で処理した。２時間後に試薬を濾過で除去し、樹脂をジクロロメタンで数回洗浄した。
【００７９】
１ｆ）  Ｃｌ−ＣＨ２ＣＯ−Ｌｙｓ−シクロ［Ｃｙｓ（ＣＨ２）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ］−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−ＮＨ２の合成
【００８０】
【化１７】
2007523880.tif 000021
１ｅ）のペプチジル樹脂から９−フルオレニルメトキシカルボニル基を除去し、無水クロロ酢酸を用いてＮ−末端クロロアセチル化した。次いで、樹脂からのペプチドと側鎖保護基の同時除去を、２．５％のトリイソプロピルシランと２．５％の水を含有するトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）５ｍＬ中で１時間４０分実施した。後処理後、粗ペプチド２７ｍｇを得た（分析用ＨＰＬＣ；勾配：１０分間で０〜４０％Ｂ、ただし、溶媒Ａ＝Ｈ２Ｏ／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；１ｍＬ／分；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）カラム５０×４．６ｍｍ；検出ＵＶ波長２１４ｎｍ；生成物保持時間７．７９分）。エレクトロスプレー質量分析法でさらに生成物の特性決定を行った。Ｍ＋Ｈの予測値１０１８．３、実測値１０１８．３）。
【００８１】
１ｇ）  シクロ［ＣＨ２ＣＯ−Ｌｙｓ−シクロ［Ｃｙｓ（ＣＨ２）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ］−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−ＮＨ２の合成
【００８２】
【化１８】
2007523880.tif 000022
１ｆ）に記載の通り合成したペプチド生成物２７ｍｇを、水／アセトニトリルに溶解した。混合物をアンモニア溶液でｐＨ８に調整し、２時間撹拌した。凍結乾燥後、所望の生成物２６ｍｇを得た。調製用ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  Ｃ１８（２）カラム２５０×２１．２０ｍｍ）での粗製物の精製を４０分間で０〜３０％Ｂ（ただし、溶媒Ａ＝Ｈ２Ｏ／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ）、流速１０ｍＬ／分で実施した。凍結乾燥後、９ｍｇの純物質を得た（分析用ＨＰＬＣ；勾配：１０分間で０〜３０％Ｂ、ただし、溶媒Ａ＝Ｈ２Ｏ／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；流速１ｍＬ／分；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）カラム５０×４．６ｍｍ；検出ＵＶ波長２１４ｎｍ；生成物保持時間７．００分）。エレクトロスプレー質量分析法でさらに生成物の特性決定を行った。Ｍ＋Ｈの予測値９８２．４、実測値９８２．３）。
【００８３】
１ｈ）  シクロ［−ＣＨ２ＣＯ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−ＣＨ２ＣＯ−アミノ−ＰＥＧ）−シクロ［Ｃｙｓ（ＣＨ２）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ］−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−ＮＨ２の合成
【００８４】
【化１９】
2007523880.tif 000023
１ｇ）に記載の通り合成したペプチド９ｍｇ、無水Ｂｏｃ−アミノ−ＰＥＧ３４ｍｇ及びＮ−メチルモルホリン７μＬを、ジメチルホルムアミド１ｍＬに溶解し、混合物を３０分間撹拌した。Ｎ−メチルモルホリン２５μＬと水２ｍＬの溶液（ｐＨ約９）を添加して、反応を奪活した。混合物を２時間撹拌し、次いで蒸発乾固した。残渣を２．５％のトリイソプロピルシランと２．５％の水を含有するＴＦＡ溶液５ｍＬで１時間処理した。ＴＦＡを減圧下で蒸発させ、残渣にジエチルエーテルを添加し、得られた沈殿をジエチルエーテルで洗浄し、風乾した。沈殿を、無水クロロ酢酸８ｍｇ及びＮ−メチルモルホリン９μＬと共にジメチルホルムアミド３ｍＬ中に溶解し、混合物をさらに６０分間撹拌した。反応混合物を蒸発乾固した。
【００８５】
調製用ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  Ｃ１８（２）カラム２５０×２１．２０ｍｍ）での粗製物の精製を、４０分間で５〜５０％Ｂ（ただし、溶媒Ａ＝Ｈ２Ｏ／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ）、流速１０ｍＬ／分で実施した。凍結乾燥後、５ｍｇの純物質を得た（分析用ＨＰＬＣ；勾配：１０分間で５〜５０％Ｂ、ただし、溶媒Ａ＝Ｈ２Ｏ／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；流速１ｍＬ／分；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）カラム５０×４．６ｍｍ；検出ＵＶ波長２１４ｎｍ；生成物保持時間７．０８分）。エレクトロスプレー質量分析法でさらに生成物の特性決定を行った。Ｍ＋Ｈの予測値１４３６．５、実測値１４３６．０）。
【００８６】
１ｉ）  クロロアセチル修飾（ｍｏｄｉｆｉｅｄ）ペプチドへの部位特異的結合
【００８７】
【化２０】
2007523880.tif 000024
１ｃ）に記載の（３−フルオロ−プロピルスルファニル）トリフェニルメタン（２．０ｍｇ、０．００６ｍｍｏｌ）のトリチル基を、ＴＩＳ（１０μｌ）及び水（１０μｌ）の存在下、ＴＦＡ（１００μｌ）で開裂した（５分間）。混合物を水２５０μｌ及びアセトニトリル２５０μｌで希釈してから、１ｈ）で得たｃ［ＣＨ２ＣＯ−Ｌｙｓ（ＣｌＣＨ２ＣＯ−アミノ−ＰＥＧ）−ｃ［Ｃｙｓ（ＣＨ２）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ］−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ２（４．０ｍｇ、０．００３ｍｍｏｌ）の水５００μｌ及びアセトニトリル５００μｌ中の溶液を添加し、炭酸カリウム緩衝液（約４００μｌ）でｐＨを１０に調整した。反応混合物を６０℃に５０分間加熱した。反応混合物をＴＦＡで奪活し、調製用逆相クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ社製Ｃ１８，００Ｇ−４２５３−Ｎ０カラム；溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：３０分間で１０〜５０％Ｂ；流速５ｍＬ／分；２５４ｎｍで検出）を用いて精製した。収量１．１ｍｇの精製標品を得た（分析用ＨＰＬＣ：Ｖｙｄａｃ  ２１８ＴＰ５４カラム；溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ；勾配：１０分間で１０〜５０％Ｂ；流速１．０ｍＬ／分；保持時間１３．２０分、２１４及び２５４ｎｍで検出）。質量分析法でさらに特性決定を行ったところ、ｍ／ｚ値は１４９４．１であった。［Ｍ−Ｈ＋］は所望生成物に対する予測値通りであった。
【００８８】
実施例２：  ３−［１８Ｆ］−フルオロ−プロピルスルファニル標識ＲＧＤ含有ペプチドの製造
標記化合物
【００８９】
【化２１】
2007523880.tif 000025
２ａ）  １８Ｆシントン：（３−［１８Ｆ］フルオロ−プロピルスルファニル）トリフェニルメタンの製造
【００９０】
【化２２】
2007523880.tif 000026
Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標）２２２（１０ｍｇ）、炭酸カリウム（１ｍｇを水５０μｌに溶解したもの）及びアセトニトリル（０．８ｍＬ）を仕込んだＷｈｅａｔｏｎバイアル（２ｍＬ）に、フッ素−１８を含有する水（１０ｍＣｉ、１ｍＬ）を添加した。窒素気流中、１１０℃で１時間加熱して溶媒を除去した。無水アセトニトリル（０．５ｍＬ）を添加し、上述の通り再度蒸発させた。この段階を２回繰り返した。バイアルを室温に冷却し、次いで実施例２ｂ）に記載の通り合成したメシル酸エステル（１ｍｇ）の無水ＤＭＳＯ（０．２ｍＬ）中の溶液を注入した。反応混合物を８０℃で５分間撹拌し、ＨＰＬＣで分析した（勾配１、放射化学収率９０％）。
【００９１】
反応混合物をＤＭＳＯ／水（１：１ｖ／ｖ、０．１５ｍＬ）で希釈し、予めコンディショニング（アセトニトリル１０ｍＬ、水２０ｍＬ）しておいたＳｅｐＰａｋ−Ｐｌｕｓカートリッジ（ｔＣ１８、Ｗａｔｅｒｓ社製）に添加した。カートリッジを水（１０ｍＬ）で洗浄し、生成物はアセトニトリルで溶出した。放射化学的純度は、９９％であった。
【００９２】
２ｂ）  クロロアセチル修飾ペプチドへの部位特異的結合
２ａ）に記載の通り合成した（３−［１８Ｆ］フルオロ−プロピルスルファニル）トリフェニルメタンの脱保護と、その後の１ｈ）に記載の通り合成したクロロアセチル修飾ペプチドとの反応は、実施例１ｉ）に記載のものと同様の方法を用いて行う。
【００９３】
生物学的データ
αｖβ３インテグリン受容体を発現することが知られている細胞膜標品を用いて、１２５Ｉ−エキスタチン及びＦ−標識ペプチドを競合リガンドとして用いた競合結合試験を実施した。結合曲線を得てＫｉをＰｒｉｓｍ（商標）ソフトウェアで算出した。実施例１の化合物のＫｉは７ｎｍｏｌであった。
【国際調査報告】
2007523880.tif 000038
2007523880.tif 000039
2007523880.tif 000040
2007523880.tif 000041
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