(57)【要約】  本発明は、対象が磁場内にあるようにした状態で、細胞と磁性材料を含む製剤を対象及び対象の一部に投与する方法、及び当該方法に用いられるキットを提供する。また、前記方法に用いられる医療装置を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞と磁性材料とを含む製剤を対象に投与する工程と、前記対象の体の一部を磁界におく工程と、を有する方法。
【請求項２】
細胞と磁性材料とを含む製剤を対象に投与する工程と、前記対象の体の一部を磁界にさらす工程とを有する細胞治療に用いられる薬剤を製造するための、細胞と磁性材料とを含む製剤の使用。
【請求項３】
前記細胞治療の対象となる症状が、ガン、炎症及び感染症から選択される、請求項２に記載の使用。
【請求項４】
前記細胞治療が、火傷部位、負傷部位、又は自己免疫疾患による変性部位のような再生、修復を要する部位を対象とする、請求項２に記載の使用。
【請求項５】
前記細胞が前記磁性材料を内包する、請求項１に記載の方法、請求項２乃至４に記載の使用のいずれか。
【請求項６】
前記磁界を形成する磁石は、前記対象と物理的に接触する又は接触しない、請求項１、５に記載の方法、請求項２乃至５に記載の使用のいずれか。
【請求項７】
前記細胞は、幹細胞である、請求項１、５、６に記載の方法、請求項２乃至６に記載の使用のいずれか。
【請求項８】
前記磁界にさらされる前記対象の体の一部は、体全体の３０％未満であり、好ましくは１０％未満である、請求項１及び５乃至７に記載の方法、請求項２乃至７に記載の使用のいずれか。
【請求項９】
前記磁界は、直径が２０ｃｍ未満である、請求項１及び５乃至７に記載の方法、請求項２乃至７に記載の使用のいずれか。
【請求項１０】
前記磁性材料は、超常磁性の酸化鉄粒子である、請求項１及び５乃至９に記載の方法、請求項２乃至９に記載の使用のいずれか。
【請求項１１】
前記対象はヒトである、請求項１及び５乃至１０に記載の方法、請求項２乃至１０に記載の使用のいずれか。
【請求項１２】
細胞と磁性材料とを含む製剤を対象に投与する工程と、前記対象の体の一部を磁界にさらす工程と、を有する美容方法。
【請求項１３】
細胞と磁性材料を含む製剤を対象の部位にターゲティングするための医療装置であって、磁石を備える医療装置。
【請求項１４】
請求項１又は１２に記載の方法に用いられる、請求項１３に記載の医療装置。
【請求項１５】
磁気ポリマーを含む、磁気ポリマーが被覆されている、又は磁気ポリマーで縞模様が施されている、ステント、カテーテル、又は針状プローブ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体内で、動物の体の種々の領域を標的とする治療製剤又は美容製剤であって、特に細胞のように核酸を含む製剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
例えば、経口的に、又は末梢血管への注射により全身的に製剤が投与されたとしても、製剤が投与される位置は、製剤が作用するように所望されている生体内の領域からは離れている。このような場合、製剤が生体内の必要とされる部位、すなわち標的部位に導かれることが所望される。
【０００３】
他の例では、例えば皮下注射又はカテーテルにより、標的部位又はその周囲に投与がなされる。この場合、製剤が標的部位から分散しないよう、製剤が実質的に投与部位またはその近傍にとどまることが望ましい。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
望ましくない副作用、毒作用の可能性を低減させる方法で、さらに低用量で製剤を標的部位にターゲティングできれば有利であることは明らかである。ターゲティングは受動的にも達成され、例えば、標的細胞の表面上にある結合相手（レセプター）に対する蛋白性の親和性を持つリガンドを取り込んだリポソームなどによる。ここで用いられる「ターゲティング」は、製剤を標的領域から離れた位置に投与し、体内を通って標的領域に達する場合と、投与位置から離れて製剤が分散することが阻止する場合とをいう。
【０００５】
特定のコントロールされた治療又は美容施用への期待は、代替の又は改良された薬物送達方法に、そしてさらに典型的には、製剤の送達に、特に治療、美容又は他の目的のために用いられる細胞を含む製剤の送達に対する継続した要求があることを意味する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、このような要求に対処するものであり、一側面において、核酸と磁性材料とを含む治療用又は美容用製剤を対象に投与し、対象（製剤による治療を必要とする）の体の一部を磁界にさらすという方法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明の好ましい実施形態は、細胞及び磁性材料を含む製剤が対象に投与される工程と、対象の体の一部が磁界に晒される工程とを含む方法を提供する。
【０００８】
磁界は、標的領域から、例えば約１０ｃｍ以下、好ましくは５ｃｍ以下、さらに好ましくは２ｃｍ以下であり、好ましくは少なくとも部分的に標的領域と重なる。磁界の全て又は少なくとも大部分が標的領域と重なることがより好ましい。
【０００９】
「標的領域」とは、本発明にかかる製剤を必要とする対象の体の一部を意味する。医学的治療においては、標的領域は、病状によって冒される全て又は一部の領域である。ほぼ全ての場合において、冒されている領域の一部に本発明にかかる製剤を送達すれば十分である。例えば、腫瘍の場合、標的部位は腫瘍の一部の小さい領域である。理論に制限されることなく考えると、腫瘍部位に例えばＴリンパ球を到達させることによって、対象の体で免疫反応が惹起され、腫瘍全体が除去されるであろう。
【００１０】
磁界形成には磁石が用いられるであろう。かかる磁石の種類は限定されない。オンオフの切り換え、磁界を制御する点で実用的であることから、電磁石が好ましく用いられる。
【００１１】
磁界形成時に、磁石を実質上、直接的又は間接的に対象の身体に接触させることが好ましい。磁石は、保護層による被覆、及び／又は外枠や型のようなものによるカバーがなされていてもよく、これらの被覆やカバーが直接的又は間接的に対象の身体に接触することが好ましい。このように、磁石の位置は、対象から５０ｃｍ以内とし、好ましくは２０ｃｍ以内、１０ｃｍ以内又は５ｃｍ以内、さらに好ましくは２ｃｍ以内、さらに好ましくは１ｃｍ以内とする。最も好ましくは、磁石と対象との距離が数ミリメートル未満である。磁石が対象と接触することなく、さらに対象からの距離が５０ｃｍを超える場合、本件発明の範囲に入らない。
【００１２】
対象の内部又は外部に磁石を配置する。外部の場合、磁石は、直接的に、又は例えばパッドや衣類などを介して間接的に皮膚上に配置される。磁石と対象の間に、例えば衣類等の層が存在するのは通常問題とはならない。外部への配置は、標的領域が対象の表面またはその近傍である場合、及び／又は広範囲にわたる磁界の形成が所望される場合に好ましい。
【００１３】
磁石が内部に配置される場合は、例えばカテーテル、ステント、針等の一部として磁石を対象の体内に挿入する。内部に配置される磁石は全て、たとえそれが何らかしらの方法で被覆されていたり、カバーされていたりするものであっても、対象に直接接触されているものとみなすことができる。例えば内臓のように、標的領域が対象の身体の表面に無い場合は、磁石を内部に配置することが好ましい。
【００１４】
磁界形成の開始は、対象への製剤の投与前、投与中、投与後いずれであってもよい。このように、本発明の方法は二つの工程を有する：
（ａ）細胞と磁性材料とを含む製剤を対象に投与する工程；及び
（ｂ）磁界に対象の身体の一部をおく工程；
これらの二つの工程は同時に又は順次実行される。通常、製剤投与前に磁界形成が開始された場合、磁界形成は、投与中又は投与後にも、継続又は再開される。このように、対象が磁界におかれるタイミングと製剤が投与されるタイミングとの間に間隔がない場合、すなわち二つの工程が完全に連続して実行される場合、この場合磁界形成工程を二番目の工程とする。磁界の印加は、製剤投与後１時間未満に実行されることが好ましい。さらに好ましくは２０分以内、さらに好ましくは１０分以内である。最も好ましくは、実質上製剤投与直後に磁界が印加される。
【００１５】
磁界印加のモード及び磁石の位置によるが、磁界が印加される前に投与工程が実行されることが必然であろう。例えば、カテーテル又はステントのような投与手段内に又はその表面に磁石が配置されている場合、投与中に磁界を印加すると、例えば、投与手段内に又はその表面に、組成物が凝集したり、滞留したりするなど、投与に干渉してしまう。熟練者であれば二段階を同時に行うべきか、又は段階的に行うべきかを常識に基づいて行うことができるであろう。
【００１６】
組成物の投与の後、治療目的や細胞の種類に応じて適切な時間、磁界の印加を継続すべきであろう。理論的裏付けはないかもしれないが、細胞−細胞間の相互作用が細胞をある場所に保持するのに寄与すると想定している。したがって、もしある細胞を含むような組成物がある部位を標的とし、磁界によってその場所に保持され、ある適切な時間後十分な細胞−細胞間相互作用が形成されると、たとえ磁界が無くなったとしても導入した細胞が標的部位に残ることになる。適切な時間は様々であろうが、典型的には少なくとも２０分、好ましくは少なくとも３０分、例えば３０〜４５分である。
【００１７】
磁界は、好ましくは少なくとも２０分間、さらに好ましくは少なくとも３０分、そしてさらに好ましくは少なくとも１時間である。特に、患者を不快にさせないような好適な磁石を用いたときには、より長い時間印加することも可能である。例えば、２、３、４又は５時間以上、例えば２４時間まで、又は数日間印加することも可能である。
【００１８】
投与場所が標的部位から離れているような場合には、細胞を標的部位に引き付ける必要があり、そしてその後標的部位に保持する必要がある。熟練者であれば、必要に応じて核磁気共鳴（ＮＭＲ）スキャンなどにより、細胞が標的部位に到達したときを決定することができる。細胞を標的部位に導くための磁界の印加は、如何なる有害な効果をも生じさせるものであってはならず、そして磁界印加時間は問題を生じさせるものであってはならない。
【００１９】
必要な磁界の強さは、とりわけ、組成物で用いられた磁性材料の大きさと磁力による。一般的には、小さな磁性粒子は、大きな磁性粒子より、強い磁界を必要とする。熟練者は、操作可能な安全領域を知っているであろう。すなわち、使うべきでない危険な強い磁界を知っているであろう。熟練者であれば、本発明の方法において用いる磁界の強さを容易に決定することができるであろう。
【００２０】
外部永久磁石によって形成される適切な磁界は、当業者によって知られている。例えば、「磁気治療」（種々の症状を処置する磁石を用いものであるものの、磁性材料を含む組成物は用いていない）において用いられる市販の磁石が種々ある。適切な永久磁石は磁束範囲がＮ２５〜Ｎ４８であるものを含んでいる。電磁石の場合、約１ｍＡ〜１３ｍＡの範囲の電流が適切であり、好ましくは１０ｍＡ〜１３ｍＡの範囲である。
【００２１】
適切な磁界は、実験的に決定される。例えば、磁性材料を含む細胞群を実験動物またはそれらの組織試料に注入し、標的部位に磁界を印加し、適切な時間（例えば３０分）経過後、標的部位の周辺領域を切り取り、細胞が標的部位に向かっているか、どの程度移動しているか、又は標的部位に保持されているか（必要に応じて）を顕微鏡で調べることが可能である。注入した細胞群は、磁性粒子を含んでいるため容易に認識される。どの程度の距離において磁石が有効であるかを決めるために、磁石からの距離が異なる位置に細胞群を注入することができる。電磁石は、異なる磁界の強さを作るために用いることができ、熟練者がどの強さが適当であるかを試すことを可能とする。
【００２２】
使用可能なフェライト充填剤を含むゼラチン混合物の上に磁石を配置することにより、磁石の強さを試験することもできるであろう。
【００２３】
例えばベクター又は細胞内の核酸を含む、生体内への投与に適した製剤は当業者に良く知られている。製剤は、典型的には、細胞、ベクター又は核酸と、生理学的に許容可能な液状担体とを含む液状製剤である。
【００２４】
治療用製剤は、典型的には、細胞からなる。これらの細胞は、上述の核酸を含み、さらに磁性材料を内包し又は磁性材料と接合されている。好ましくは、細胞に磁性材料が内包されている。細胞としては、対象に対する治療上有効などのような細胞をも意味する。有効性は、例えば、細胞がリンパ球、Ｔリンパ球の場合、細胞の通常の特性及び機能によってもたらされる。細胞の具体例としては、樹状細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球又は他の免疫活性細胞を含むＴリンパ球が挙げられる。幹細胞は特に好ましい。
【００２５】
細胞は、その場で、治療上有効なタンパク質産生手段として機能するかもしれない。産生されたタンパク質は、細胞の天然核酸の産生物、又は細胞に含まれるように修飾された異種核酸の産生物である。本発明の背景からは、異種核酸を含むように遺伝操作された細胞が特に好ましい。このように、細胞は、治療薬剤、特に治療薬剤をコードする核酸の便利な担体として機能する。
【００２６】
細胞治療が有効な部位に製剤を導くであろう。具体的には、損傷又は火傷部位、がん性部位、感染又は炎症によって冒された体の一部のように再生が必要などのような部位をも含む。
【００２７】
細胞治療が有効であり、かつ本発明の方法によって治療されうる症状として、白血病（急性又は慢性）を含む全てのがん、筋ジストロフィー、関節炎、骨粗鬆症、脊髄損傷、糖尿病、アミロイド症のような骨髄異形成症候群、真性赤血球増加症のような骨髄増殖症候群、ホジキン病のようなリンパ球増殖性疾患、網状発育不全のような貧食細胞機能不全、ムコ多糖症のような遺伝的代謝異常、血球貪食のような組織球性症、循環器疾患、嚢胞性線維症、パーキンソン病のような神経疾患、ルー・ゲーリック病及びアルツハイマー病、てんかん及び多発性硬化症が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２８】
幹細胞及び他の前駆細胞が好ましく用いられ、これらは本発明にかかる方法において特に好ましく用いられ、例えば、これらは修復及び再生のために、若しくは炎症又はがんの治療のために、損傷又は変性部位に導かれる。本発明は、加齢の又は損傷した組織（骨、軟骨及び腱が含まれる）を治療対象としている。自己免疫疾患に冒された部位又は炎症部位に、鎮静力のあるＴ細胞を導く。細胞傷害性Ｔ細胞はがん治療に有用であり、ＣＤ２５及びＣＤ４要請細胞は特に炎症の治療の有効である。樹状細胞は、感染症、炎症、関節炎及び細胞再生治療の治療に用いられ、さらにがん患者のリンパ組織のターゲティングに用いられる。
【００２９】
細胞は、好ましくは対象と同一種の由来であり、自家性である。
【００３０】
ここで記述される製剤及び方法は、標的部位において細胞そのものの及び／又は細胞の産生物（典型的には産生タンパク質である。もちろん、核酸又は糖のような他の分泌分子も有用であろう。）の存在が有用である広範囲の症状の治療に用いられる。治療上有効な細胞を患者に導入する処置はここでは「細胞治療」と称す。したがって、本発明は、以下の実施形態において、製剤を対象に投与する工程と、対象の体の一部を磁界にさらす工程とを有する細胞治療に用いられる薬剤の製造方法における、細胞と磁性材料とを含む製剤の使用を提供する。好ましくは、製剤を対象に投与し、対象の一部を磁界にさらす治療であって、がん、炎症及び感染症から選択される症状の治療に用いられる薬剤の製造における、細胞と磁性材料とを含む製剤の使用を提供する。
【００３１】
さらに好ましくは、製剤を対象に投与し、対象の一部を磁界にさらす治療であって、火傷部位、傷部位又は自己免疫疾患によって冒された変性部位のような再生又は修復が必要な部位の治療に用いられる薬剤の製造における、細胞と磁性材料とを含む製剤の使用を提供する。
【００３２】
他の例として、標的部位に印加された磁界を介して製剤が標的部位に指向される細胞治療に用いられる薬剤の製造における、細胞と磁性材料とを含む治療製剤の使用を提供する。
【００３３】
製剤は、細胞の種類に応じた生理学的に許容可能な担体及び希釈剤、例えば、生理食塩水、又は生理的ｐＨ（例えば７．２〜７．５）近傍に調節するリン酸緩衝液のような緩衝液を含む。さらに、ラクトース又はグルコースのような糖、及び／又は、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム等のような生理学的に許容可能な塩を含んでもよい。５％デキストローズ又は生理食塩水のような液体で細胞を希釈してもよい。細胞製剤に適切な担体及び希釈剤は、当技術分野において知られている。
【００３４】
細胞の代わりに、アデノウィルスのようなウィルス性ベクター、又はプラスミドのように、遺伝物質を宿主細胞に届けることが可能で磁性材料と結合可能な非ウィルス性ベクターのような核酸が製剤に含まれていてもよい。
【００３５】
「ターゲティング」という用語は、離れた位置から標的部位に細胞を引き寄せることと、標的部位に細胞を保持することの両者の意味を含む。このように、本発明の一実施形態では、細胞が実質的に標的部位に投与され、細胞が対象の体に分散することを防ぐために細胞を特定部位に保持するのに磁界が寄与する。他の実施形態では、細胞は標的部位から離れた領域に投与され、磁界により、細胞が標的部位に引きよせられ、好ましくはその後細胞が標的部位に保持される。
【００３６】
細胞の標識に用いられる磁性材料は、常磁性、超常磁性又は強磁性であってもよい。最も好ましくは、超常磁性である。典型的には、鉄、ニッケル、コバルト、ガドリニウム、又はジスプロシウム、又はこれらの元素を一以上含む酸化物又は合金のような化合物である。鉄、及び酸化鉄のような鉄化合物が特に好ましい。化合物に含まれるさらに好ましい鉄は、超常磁性酸化鉄粒子である。好ましくは、これらの粒子は被覆されている。被覆により、水溶液中での粒子の凝集及び沈殿を防ぐことができ、高い生理的耐性が得られ、さらに毒性の副作用を防ぐことができる。これらの化合物は、不定比の微晶性磁鉄鉱核からなり、これらは例えばデキストラン（フェルモキサイド（ferumoxides）の場合）又はシロキサン（フェルモキシル（ferumoxsils）の場合）により被覆されている。
【００３７】
超常磁性酸化鉄粒子の好ましい具体例として、カルボキシデキストランによって被覆された粒子（フェリキサン（Ferrixan））（シェーリング  エージー（Schering AG）社製、商品名：Resovist（登録商標））、シリコンによって被覆された粒子（フェルモキシル（ferumoxsil）（商品名：GastroMARK（登録商標）又はLumirem（登録商標））、デキストランで被覆された粒子（フェルモキサイド（ferumoxide））（商品名：Feridex（登録商標）又はEndorem（登録商標））、及びフェルモキシトラン（Ferumoxtran）（商品名：Combidex（登録商標）又はSinerem（登録商標））が挙げられる。
【００３８】
例えば、磁気共鳴造影法における造影剤としてのこのような粒子の使用は当技術分野においてよく知られており、これらの粒子は安全であることがわかっており、市販品として入手可能である。
【００３９】
上述の磁性材料を細胞に導入する方法は当技術分野においてよく知られている。典型的には、細胞を磁性材料とともに培養することによる。例えば、室温程度から体温程度の範囲内の温度で、２０分から４時間培養することが好ましい。磁気共鳴造影法によって実施されているように、例えば、ＣＤ３４＋細胞（１０６及び５×１０５）を０．２ｍｍｏｌのResovist（登録商標）とともに、３７°で２時間培養することにより磁性材料を取りこむことが知られている。
【００４０】
局部的な磁界を形成する種々の方法を、本明細書において記述し、また図８〜２０に示す。磁界によって影響を受ける体の領域は直径３ｃｍ程度が最も好ましいが、この大きさは投与形態に依存して変化する。磁界の直径は、典型的には３０ｃｍを超えず、好ましくは２０ｃｍ未満であり、さらに好ましくは１０ｃｍ未満である。磁界にさらされる体の領域は、全体ではなく、通常は全体の３０％より大きくなく、大抵はさらに少ない。体積又は表面積に基づいて測定した場合に、例えば、全体の２０％より小さく、好ましくは１０％より小さく、さらに好ましくは５％より小さい。このように、本発明では対象の体全体を磁界にさらすことを予定していない。本発明では、磁界を絞って又は局在化して用いる。
【００４１】
本発明で用いる磁石は永久磁石又は電磁石いずれであってもよい。本発明では、電流を流したワイヤ、ループワイヤ、ソレノイド及び棒磁石の４種の主たる磁界源いずれをも用いることができる。図２０にその原理を示す。永久磁石は、シール容器内に封入された磁性流体であってもよい。永久又は非永久磁石は、患者の体内に導かれ、又は患者の体の上に載置され、標的領域内又はその周囲に局在化した磁界を形成する。
【００４２】
好ましい方法においては、体の標的部位に挿入可能で、磁石（永久磁石が好ましい）を有する針（中心部が中空でない針又は中空である針いずれであってもよい）、プローブ、ステント又はカテーテルを備える装置を用いる。これらは、体外にある希土類磁石とともにフェライト磁心を備える。電磁石装置は、直流（ＤＣ）コイルを巻いたフェライト磁心を備える。ＤＣの印加によりコイルを活性化し、磁界が形成される。電流を介して、磁界の有無及びその強さを調節する。磁心は、製剤及び／又はその他の液体を注入するための複数の注入口を有する。例えば前立腺がんのような前立腺疾患の治療用の前立腺ステント、又は膵臓や胃腸管が冒された疾患を治療するためのステントのような、磁石を備えたステントを用いてもよい。かかるステントは、細胞再生と同様に、炎症、感染症、再狭窄、組織拒絶反応、心臓血管疾患の治療に用いてもよい。
【００４３】
本発明においては、電磁石コイルを備えた針状プローブが特に好ましい。かかるプローブは、小さい径を有する中空のシャフトを備え、かかるシャフトは柔軟性を有さなくても有してもよい。磁界を集中させるよう、シャフトそのものは絶縁性である。このような装置により、本発明の製剤を標的部位に導くことができる。その後、針状プローブは標的部位にまたはその周辺に保持され、電流が印加され磁界が形成される。代わりに、中空シャフトを有する装置を用いて対象に製剤を投与してもよく、シャフトの管腔に永久磁石を挿入する（図２１）。
【００４４】
好ましい実施形態において、磁気装置は、対象の組織を撮影するための超音波アレイを備える。かかる装置は、製剤のモニターも可能である。
【００４５】
本発明で用いる磁気装置は、安定性と生体親和性とを付与する外側胴枠を備える。かかる磁気装置は、バルーン、圧力センサー等の他の機構が一部として組み込まれているものであっても、又はかかる機構が接続されているものであってもよい。
【００４６】
さらなる特徴として、本発明は、磁石を備え、細胞と磁性材料を含む製剤を対象の一部にターゲティングする医療装置を提供する。かかる装置の好ましい機構は、図を参照して上述した通り又は後述する通りである。針状プローブ、ステント、カテーテル等を備える装置が好ましい。かかる装置は、通常、管腔を備える（リボンステントは管腔を有するものとみなすことができる）。本発明の方法の実施に適している装置が、最も好ましい。
【００４７】
他の方法として、磁石が患者の体の外部に、指輪、ブレスレット、ネックレス、カラー、ストラップ、腕輪又は他のバンドとして、又はその一部として存在し、例えば装着部位に磁界を形成するものであってもよい。または、磁石は、リボン、シース、パッド、包帯、靴下、手袋、帽子等として、装着され、又は患者の皮膚に貼り付けられるものであってもよい。低周波電磁石は、より深部へ浸透するであろう。この場合、筋肉疾患、通常の整形外科疾患及び脊髄疾患と同様に、関節炎又は悪性黒色腫に対しても、簡単に処置されるであろう。一つの好ましい実施形態においては、表面磁石が提供される。これは、製剤に含まれる細胞を通常注入により対象に投与するための穴部（すなわち管腔）を有する装置の一部として提供される。磁石の中空部の中心を通過可能な針を備えたシャフトとともに、例えば実質的に円形磁石である、パッド状の磁石が提供される。
【００４８】
好ましい実施形態の一つは、磁気層で被覆されている装置、又は磁気材料で縞模様が形成されている装置である。かかる磁石は永久磁石であろう。装置の特定の領域に被覆又は描線する技術が用いられる。本方法においては、別体の小さい磁石が組み込まれている構成とは異なり、装置全体の重要な部分が磁化されていることになる。このような被覆された装置を提供する方法の一つは以下の通りである。
【００４９】
噴霧ポリマーや担体の流れの中にNdFeBにより被覆されたニッケルナノ粒子を強噴出により注入する。ポリマー内に生じる静電気により、流動性ポリマーによるナノ粒子の被覆が促進される。その後、被覆された粒子が所望の基材にスプレーされる。かかる工程は、プラズマ処理又はコロナ放電処理により進行しうる。磁場を印加することにより、ナノ粒子がポリマー中を移動し、基材表面へ付着することを促進する。蒸気、加熱、UV又は他の適切な方法によりポリマーを硬化する。ナノ粒子は、ポリマー担体により被覆され、柔軟性のある表面被覆を有することになる。担体としてシリコンやヒドロゲルを用いることにより、非接着性の被覆を形成し、標識細胞が表面被覆に接着することが防止される。
【００５０】
他の側面において、本発明は、例えばステント、カテーテル、又は針状プローブのような医療装置であって、被覆又はその一部に形成されている縞模様により磁化ポリマーを含む医療装置を提供する。「磁化ポリマー」とは、磁性粒子と結合するポリマーである。上述の医療装置は、全体又はその一部が磁化ポリマーによって構成されていてもよい。
【００５１】
治療製剤の標的送達が好ましい体の種々の部位は上述の通りである。その部位は、通常は、例えば肝臓、膵臓、腎臓等の臓器、またはその一部である。または関節、または疾患、炎症、火傷等による負傷で冒されたさらに典型的な領域である。
【００５２】
本発明の方法は、治療用途を有するのと同じように、美容用途として用いることもできる。このように、本発明はさらなる側面において、細胞と磁性材料を含む製剤を対象に投与する工程と、対象の体の一部を磁界にさらす工程とを有する方法を提供する。
【００５３】
美容用途において、標的領域として、例えば、色素沈着、発毛又は育毛、シワ等の改善が望まれる皮膚の領域を含むであろう（幹細胞の皮膚への導入により毛を産生する）。美容上の効果は、細胞又は細胞産生物の特性によるであろう。例えば、濾胞細胞を発毛の促進が所望される領域に導入してもよい。コラーゲン及び／又はヒアルロナン産生細胞はふくらませたい、又はシワ等をのばしたい領域に投与されるであろう。
【００５４】
本発明の方法は、如何なる動物対象にも実行しうる。哺乳類対象が好ましく、ヒトが特に好ましい。
【００５５】
さらなる側面において、本発明は細胞を標的送達するためのキットであって、
（ａ）磁性材料により標識された細胞
（ｂ）磁性源
を含む、キットを提供する。
【００５６】
本発明のさらに好ましい実施形態を以下の実施例及び図面に示す。
【実施例】
【００５７】
実施例１：インビトロアッセイ
ＣＤ３４＋細胞（１０６）を超常磁性酸化鉄（ＳＰＩＯ）によって標識した。０．２５ｍｍｏｌの市販品Ｒｅｓｏｖｉｓｔ（有効成分はＳＰＩＯである）とともに、２時間３７℃で細胞を培養した。標識細胞を、荷電磁石又は偽磁石を有するプラスチックのペトリ皿に載置し、顕微鏡によりそれらの動向を観測した。荷電磁石は標識細胞を強く引きつけ、その表面はわずか５分で標識細胞に覆われた。偽磁石を用いた場合このような現象は観測されなかった。
【００５８】
Ｒｅｓｏｖｉｓｔのインビトロ毒性はトリパンブルー排除アッセイによって試験され、大きくないことが確認されている（＜４％）。このことは図１〜３にも示されている。
【００５９】
実施例２：インビボアッセイ
コントロールマウスと実験用マウスの脇腹の皮下に、実施例１に記載のように標識された細胞を投与した。ＡＮ３２ネオジム−鉄−ホウ素の固体ディスク磁石を実験用マウスの投与部位近くに配置した；コントロールマウスには磁石を適用しなかった。１時間後に、両マウスの投与部位近傍の皮膚を切除した。実験用マウス（すなわち磁界が印加されたマウス）において、標識細胞は投与部位に保持されていた（図４〜図７に示す）。しかしながら、コントロールマウスにおいて細胞は投与部位から分散していた。このことにより、磁石により標識細胞が所望の領域に保持されることが示された。
【図面の簡単な説明】
【００６０】
【図１】成熟した樹状細胞において、トリパンブルー排除アッセイを用いて酸化第I鉄ナノ粒子の毒性を試験した。
【００６１】
０．２ｍｍｏｌの超常磁性酸化第I鉄粒子とともに細胞を培養した。標識細胞と標識されていない細胞（コントロール）の成長を測定した。成長は酸化第I鉄粒子によって影響されることはなく、深刻な毒性は観察されなかった。酸化第I鉄の存在下または非存在下で樹状細胞を培養した時の細胞数をトリパンブルーカウントに対してプロットした。
【図２】図１と対比するために、未成熟な樹状細胞を用いて酸化第I鉄ナノ粒子の毒性を測定した。
【図３】図１と図２とに示す結果を合わせて示す図である。
【図４】酸化第I鉄ナノ粒子で標識された細胞を投与したマウスの断面写真である（実施例２）。明るい部分がマウスの組織で、暗い部分が投与された細胞である。
【図５】酸化第I鉄ナノ粒子で標識された細胞を投与したマウスの断面写真である（実施例２）。明るい部分がマウスの組織で、暗い部分が投与された細胞である。
【図６】酸化第I鉄ナノ粒子で標識された細胞を投与したマウスの断面写真である（実施例２）。明るい部分がマウスの組織で、暗い部分が投与された細胞である。
【図７】酸化第I鉄ナノ粒子で標識された細胞を投与したマウスの断面写真である（実施例２）。明るい部分がマウスの組織で、暗い部分が投与された細胞である。
【図８】本発明の方法で用いられる磁針プローブの例を示す図である。これらのプローブは、可撓性またはそうでない小さい径のシャフト（１）を有する。これらは、チップ部位（２）に電磁石又は永久磁石を含む。電流供給用のルアー及びケーブル（３）を有してもよい。
【図９】電磁針プローブの例を示す。フェライト磁針（４）にＤＣコイルが巻かれ、外枠を有する。
【図１０】ＤＣコイル（１０５）が巻かれたフェライト磁針（１０４）を有する電磁針プローブの例を示す。組織撮影用の超音波アレイ（７）及び外枠（１０６）を備える。
【図１１】液体注入用の孔を有し、ＤＣコイル（２０５）が巻かれたフェライト磁針（２０４）を有する電磁針プローブの例を示す。組織撮影用の超音波アレイ（７）及び外枠（１０６）を備える。
【図１２】対照材料のような液体注入口（８）を有する電磁針プローブの例を示す。電流供給用のルアーとケーブル（１０３）を備える。
【図１３】外枠（９）にフェライト磁針を有し、フェライト磁針を介して先端部に磁界を形成させる希土類磁石（１０）を有する永久磁針プローブの例を示す。
【図１４】希土類磁石又は磁性流体セルである永久磁石（１２）、シャフト（１０１）、及びチップ（１１１）を有する永久磁針プローブの例を示す。磁性流体はカプセル又はチューブによって封入された状態で用いられる。
【図１５】ＤＣコイル（３０５）及び（４０５）を有する磁気カテーテルの例を示す。これらは、全ての用途に適用しうるが、典型的には導尿カテーテル又は静脈カテーテルを意図している。さらには、バルーン（１３）及び／又は圧力センサーを有しうる。
【図１６】ＤＣコイル（６０５）、又はカテーテルシャフト（１４）に搭載されている希土類磁石を有する導尿カテーテル又は静脈カテーテルの例を示す。磁石は外枠で覆われているか、又は外型がはめられているものであってもよい。
【図１７】本図は、ステントのような装置が磁気層によってどのように被覆されるかを示す。磁気ナノ球体により、例えば心臓学及び周辺システムに用いられる、ニチノール又はステンレススチールからなるステント（１６）の被覆が可能となる。磁気ポリマーはステント内又は縞模様内に混合され、全面的な磁気構造体１７が形成される。ナノ球体層（１９）と、被覆層（２０）とが形成されたステントストラット（１８）の例を示す。
【図１８】リボンステントを構成するために磁気ポリマーが用いられる。図中の上方部は、リボンステント、及びこれを広げた状態で保持しているデリバリーシャフトを示す；シャフトが除かれると、図中の下方部に示すように、血管又はこれに同等のルーメンを開いて保持するように広がる。
【図１９】対象の皮膚上に配置しうる外部磁石の例を示す。希土類磁石（１１０）又はコイル（７０５）が、再使用可能なパッド（２０）又は（２１）にはめ込まれる。磁石は、ベルト、指輪、カラー等の中に構成されてもよい。本図は、磁気指輪（２２）の例を示す。
【図２０】本図は、４つの主たる磁界源を示す。左から右に説明すると、電流を流したワイヤ、ループ状ワイヤ、ソレノイド及び棒磁石である。
【図２１】本図は、本発明の実施例を示す図である。製剤を対象に投与するために、中空を有する装置が用いられる（左図）。装置のルーメンに永久磁石が挿入される（中図）。磁石によって形成された磁界により、製剤が引きつけられ、装置周辺に保持される（右図）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【手続補正書】
【提出日】平成18年12月29日(2006.12.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトを除く対象に細胞と磁性材料とを含む製剤を投与する工程と、前記対象の体の一部を磁界におく工程と、を有する方法。
【請求項２】
前記細胞が、前記磁性材料を内包する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記磁界を形成する磁石は、前記対象と物理的に接触又は非接触である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記細胞は、幹細胞である、請求項１乃至３いずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記体の一部は、体全体の３０％未満である、請求項１乃至４いずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記体の一部は、体全体の１０％未満である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記磁界は、直径が２０ｃｍ未満である、請求項１乃至６いずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記磁性材料は、超常磁性の酸化鉄粒子である、請求項１乃至７いずれかに記載の方法。
【請求項９】
対象に細胞と磁性材料とを含む製剤を投与する工程と、前記対象の体の一部を磁界にさらす工程とを有する細胞治療用の薬剤を製造するための、細胞と磁性材料とを含む製剤の使用。
【請求項１０】
前記薬剤が、ガン、炎症及び感染症から選択される疾患の治療薬である、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
前記薬剤が、火傷部位、負傷部位、又は自己免疫疾患による変性部位のような再生、修復を要する部位に対して適用される、請求項９又は１０に記載の使用。
【請求項１２】
前記細胞が、前記磁性材料を内包する、請求項９乃至１１いずれかに記載の使用。
【請求項１３】
前記磁界を形成する磁石は、前記対象と物理的に接触又は非接触である、請求項９乃至１２いずれかに記載の使用。
【請求項１４】
前記細胞は、幹細胞である、請求項９乃至１３いずれかに記載の使用。
【請求項１５】
前記体の一部は、体全体の３０％未満である、請求項９乃至１４いずれかに記載の使用。
【請求項１６】
前記体の一部は、体全体の１０％未満である、請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
前記磁界は、直径が２０ｃｍ未満である、請求項９乃至１６いずれかに記載の使用。
【請求項１８】
前記磁性材料は、超常磁性の酸化鉄粒子である、請求項９乃至１７いずれかに記載の使用。
【請求項１９】
前記対象はヒトである、請求項９乃至１８いずれかに記載の使用。
【請求項２０】
対象に細胞と磁性材料とを含む製剤を投与する工程と、前記対象の体の一部を磁界にさらす工程と、を有する美容方法。
【請求項２１】
細胞と磁性材料を含む製剤を対象の部位にターゲティングするための医療装置であって、磁石を備える医療装置。
【請求項２２】
請求項１乃至８いずれかに記載の方法に用いられる、請求項２１に記載の医療装置。
【請求項２３】
磁気ポリマーを含む、磁気ポリマーが被覆されている、又は磁気ポリマーで縞模様が施されている、ステント。
【請求項２４】
磁気ポリマーを含む、磁気ポリマーが被覆されている、又は磁気ポリマーで縞模様が施されている、カテーテル。
【請求項２５】
磁気ポリマーを含む、磁気ポリマーが被覆されている、又は磁気ポリマーで縞模様が施されている、針状プローブ。
【国際調査報告】
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