(57)【要約】  本発明は、化学式（ＩＡ）の純ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−３Ｅ−オキシム異性体、2007534617.tif 000010  化学式（ＩＢ）の純ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−３Ｚ−オキシム異性体に関し、2007534617.tif 000011  これらは黄体ホルモン活性を備え、並びに上記異性体の混合物及び純異性体の合成方法に関する。本発明は、化学式（ＩＡ）の純異性体あるいは化学式（ＩＢ）の純異性体のみを有効成分として含み、あるいは別の有効成分（例えばエストロゲン剤）と組合わせて通常実際に使用される薬剤副原料と共に含まれる、医薬合成物及びそれらの合成方法に関する。
2007534617.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の化学式（ＩＡ）のｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−オキシム。
【化１】
2007534617.tif 000008
【請求項２】
以下の化学式（ＩＢ）のｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｚ）−オキシム。
【化２】
2007534617.tif 000009
【請求項３】
黄体ホルモン活性成分として化学式（ＩＡ）の純ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−オキシム異性体あるいは化学式（ＩＢ）の純ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｚ）−オキシム異性体のいずれかのみ、あるいは通常の担体、賦形剤、希釈剤、安定剤、調味料あるいは、芳香剤、並びに製剤促進補助剤、あるいは製剤供与補助剤と共にエストロゲン物質と組合わせて含有される医薬合成物。
【請求項４】
黄体ホルモン活性成分として化学式（ＩＡ）の純ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−オキシムを含有することを特徴とする請求項３記載の膏薬型医薬合成物。
【請求項５】
黄体ホルモン活性成分として化学式（ＩＢ）の純ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｚ）−オキシムを含有することを特徴とする請求項３記載の経口投与用医薬合成物。
【請求項６】
ノルエルゲストロミンのＥ／Ｚ−異性体混合物、並びに化学式（ＩＡ）の純ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−オキシム及び化学式（ＩＢ）の純ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｚ）−オキシムの合成方法において、
ａ）１モルのｄ−ノルゲストレルを１．２〜５モル当量の酢酸ヒドロキシルアンモニウム、あるいはヒドロキシルアンモニウム塩と及びそれと同当量未満であるアルカリ金属アセテートとを、５０質量％以内の水を含有する酢酸において、１５〜５０℃で１５〜４５分間反応し、得られたノルエルゲストロミンの異性体混合物を含有する反応混合物は、
α）およそ１０倍量の水で希釈され更に沈降異性体混合物は分離され、５６：４４〜６４：３６の比率でＥ／Ｚ異性体混合物を得て、あるいは場合により、
β）およそ１０−２５容量％の水を添加した後、１０〜３０℃で２４〜７２時間攪拌され、場合により水を反応混合物に添加し更に沈降生成物を分離することにより、化学式（ＩＡ）の（３Ｅ）−オキシム異性体を得て、あるいは場合により
γ）およそ１０倍量の水を添加した後沈降異性体混合物を分離し更にジクロロメタン中にて攪拌し、化学式（ＩＡ）の不溶性の（３Ｅ）−オキシム異性体を濾過により除去し、この濾液を吸着剤としてシリカゲル、溶離剤として非極性−極性溶媒混合液を使用するカラムクロマトグラフィーにより精製し化学式（ＩＢ）の（３Ｚ）−オキシムを得るか、あるいは
ｂ）いずれかの比率のノルエルゲストロミンのＥ／Ｚ異性体混合物は
α）酢酸ヒドロキシルアンモニウム、あるいはヒドロキシルアンモニウム塩及びそれと同当量未満であるアルカリ金属アセテートと、５０質量％以内の水を含有する酢酸において、１５〜３０℃で２４〜７２時間攪拌し、更に場合により水を更に添加した後に、生成物を分離し化学式（ＩＡ）の（３Ｅ）−オキシム異性体を得るか、あるいは
β）ジクロロメタンにおいて攪拌し、化学式（ＩＡ）の不溶性（３Ｅ）−オキシム異性体を濾過除去し、濾液を吸着剤としてシリカゲル、溶離剤として非極性−極性溶媒混合物を使用するカラムクロマトグラフィーにより精製し化学式（ＩＢ）の（３Ｚ）−オキシムを得るか、あるいは
ｃ）ノルゲスティメイトの３Ｅ−あるいは３Ｚ−異性体の１７の位置における酢酸基を同当量のアルカリ金属水酸化物により、アルコール溶液中にて５〜３０℃で加水分解し、更に出発材料と同じ構造を有する得られた生成物を分離し化学式（ＩＡ）の（３Ｅ）−オキシム異性体あるいは化学式（ＩＢ）の（３Ｚ）−オキシム異性体を得て、
更に、上記ａ）〜ｃ）工程で得られた化学式（ＩＡ）及び（ＩＢ）の異性体を結晶化により精製することを特徴とする合成方法。
【請求項７】
加水分解をメタノール中において水酸化リチウムで実施することを特徴とする請求項６記載のｃ）の合成方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、化学式（ＩＡ）の純ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−３Ｅ−オキシム異性体、
【０００２】
【化１】
2007534617.tif 000003
【０００３】
化学式（ＩＢ）の純ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−３Ｚ−オキシム異性体であって、
【０００４】
【化２】
2007534617.tif 000004
【０００５】
これらは黄体ホルモン活性を備え、並びに上記異性体の混合物及び純異性体の合成方法に関する。本発明はさらに医薬合成物及びそれらの合成方法に関し、これは化学式（ＩＡ）の純異性体及び化学式（ＩＢ）の純異性体のみを有効成分として含み、あるいは別の有効成分（例えばエストロゲン物質）と組合わせて通常実際に使用される薬剤副原料と共に含まれる。
【０００６】
これら異性体は本明細書においては「純」異性体とし、実施例で得られた異性体と同じ純度を有する。
【０００７】
本発明の医薬合成物は好適にはタブレット、糖衣錠、経皮性膏薬となる。このタブレットは有効成分に加えて、通常の担体、賦形剤、希釈剤、安定剤、調味料及び、芳香剤、並びに製剤促進補助剤、あるいは製剤供与補助剤が含まれる。タブレットの形成は従来から実際に使用される方法で実施可能である。糖衣錠の生成は通常の方法に従って、タブレットと同様に生成される、種をコーティングすることにより実施される。
【０００８】
膏薬は好適には３層からなるマトリックス型の経皮性膏薬である。これらの外側層は膜であり、これは有効成分及びマトリックスの別の成分に対して不透過性であり、ＰＶＣ、ポリエチレン、ポリプロピレンあるいはポリウレタン薄膜からなる。ホルモンを含有するマトリックスはこの外側層上に配置される。このマトリックスは感圧接着剤成分を含み、これはポリアクリレート、ポリジメチルシロキサン、あるいはポリイソブチレンである。これらの接着剤のうちの一つは、有効成分及び結晶化を阻害するポリビニルピロリドン副原料と混合する。皮膚を介してステロイドの吸着を促進する助剤（促進剤）は好適にはマトリックス内に分散された方がよい。これらの成分は例えば乳酸ラウリル、オレイン酸等の脂肪族アルコールエステル類である。このように得られた分散されたものは膏薬の外側層上に配置され更に乾燥される。
【０００９】
塗布されるまで、このマトリックスは膏薬の第３層により被覆され、この保護層は例えばポリエチレンテレフタレート膜である。この保護層は膏薬の塗布（皮膚上に粘着する）前に取り除かれる。
【００１０】
ステラン骨格を含む３−オキシミノ−アンドロステン−及びゴネン誘導体の合成及び生物学的研究は１９６０年代に開始された。性交後避妊薬として、ｄｌ−（１７α）−１３−エチル−１７−アシルオキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−オキシム誘導体は米国特許第３，７８０，０７３号明細書において示唆される。
【００１１】
治療で使用される各有効成分ごとに有効成分の塗布用量を減少させることは非常に重要であり、このことは特に高い生物活性を有するステロイド誘導体に対しては重要であり、この研究の目的としてステロイド誘導体の純光学対掌体の生物学的作用を合成及び研究することであり、これはラセミ混合物として以前から文献に記載されてきた。ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−アセトキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−オキシム（ノルゲスティメイト）は米国特許第４，０２７，０１９号明細書に記載される。
【００１２】
ノルゲスティメイトの生物学的及び臨床研究は受胎能力に対してより有効に阻害することを証明した。エチニル−エストラジオールと組合わせた化合物はＯＲＴＨＯ−ＣＹＣＬＥＮ及びＣＩＬＥＳＴとして治療用塗布を得た。この光学活性異性体の利用はラセミ混合物の場合よりもより少ない用量で有効成分の塗布を可能にした。
【００１３】
この研究のさらなる進展として、１７−デアセチル−ノルゲスティメイト（ノルエルゲストロミン）の合成及びそれらの薬理学的並びに臨床的研究であった。以下の文献の著者、Ａｍ．Ｊ．Ｏｂｓｔｅｔ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．，１６６．１９６９〜７７（１９９２）およびＡｍ．Ｊ．Ｏｂｓｔｅｔ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．，１６３．２１２７〜３１（１９９０）は、経口投与されたノルゲスティメイトの代謝産物は１７−デアセチル−ノルゲスティメイト及び３−ケト−ノルゲスティメイト（レボノルゲストレルアセテート）、並びにｄ−ノルゲストレル（レボノルゲストレル）であり、これらは主に生物活性に関与することを発見した。
【００１４】
米国特許第４，９０６，１６９号明細書は経皮膏薬においてエストロゲン成分と組合わせたｄ−ノルゲストレルおよびノルゲスティメイトの利用について記載される。
【００１５】
ＰＣＴの公報番号国際公開第９６／４０３５５号パンフレットにおいては、デアセチル−ノルゲスティメイト、これはノルゲスティメイトの代謝産物の一つであり、経皮膏薬において単独かあるいはエストロゲン成分と組合わせて利用されることが記載される。
【００１６】
ｄｌ−及びｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−オキシムの合成はハンガリー国特許第１６５，３５６号明細書に記載される。この化合物は、ラセミ型の光学活性ノルゲストレルの合成における中間体として記載されるが、これらの生物活性は記載されていない。
【００１７】
上記特許は本質的にはオキシム誘導体の合成方法と同じ方法が記載される。これらは、試薬として塩酸ヒドロキシルアンモニウム、溶剤としてピリジン、及び塩基を使用し、このステロイドは水槽中で加熱により溶解し、更にこの反応が完了するまで加熱する。この生成物は水を加えて分離し再結晶化させる。このようにして得られたオキシム誘導体のＥ／Ｚ異性体比率はおよそ６０：４０〜６４：３６である。
【００１８】
高圧クロマトグラフィーによる、いくつかの公知のステロイドの分離の中でも、ノルエルゲストロミンの分離について以下の文献、Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，３９２，４６４〜９（１９８７）に記載されるが、クロマトグラフィーのパラメータのみが記載され、分離されたオキシム異性体の構造を立証する物理化学的特性については記載されていない。
【００１９】
高速液体クロマトグラフィー及びガス液体クロマトグラフィーによるノルゲストレル合成のいくつかの中間体における実験について、以下の文献、Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，１９１（１），１４５〜５４（１９８０）に記載される。上記化合物の中には、ラセミ混合体及び光学的純オキシム誘導体が同じく存在し、これらはハンガリー国特許第１６５，３５６号明細書に記載される。しかしながら、この記載からは光学的純粋なあるいはラセミ混合ステロイドオキシム誘導体のいずれを実験したかは明確ではない。上記公報からはオキシム異性体が順相分析ＨＰＬＣにより分離され、その構造が解明された。この構造解明に対して、ハラ及びその共同研究者の公報（Ｃｈｅｍ．Ｉｎｄ．（Ｌｏｎｄｏｎ），８３２（１９６７））において、テストステロンの共及び抗オキシム異性体が分離され、これらの構造がＮＭＲ及びＵＶ分光法により実験され；この２つのオキシム異性体は２４２ｎｍ波長でのモル吸光度の測定において有意な差が際立った。
【００２０】
薬理学的産業における通常の試みとして、構造上均質で、且つ立体化学的に純粋な有効成分の合成であり、且つ治療におけるそれらの利用であり、このことはより明瞭な生物活性プロファイルを有する有効成分をより低用量で塗布し従って副作用を減少させることを意味する。
【００２１】
この試みによりｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−オキシムにおける化学式（ＩＡ）のＥ−異性体オキシム及び化学式（ＩＢ）のＺ−異性体オキシムを合成することとなり、これをＥ／Ｚオキシムの異性体立体化学的混合物として治療に使用される。純異性体の使用は生物活性プロファイルの均一性を増加させることを可能にし、更に治療においてより適切な塗布方法を実現するために、個別の異性体における異なる物理的特性（例えば、溶解性、吸収性、運搬性）をうまく利用できるようになる。
【００２２】
上述のように、第３の位置にオキシム基を含むステロイド化合物、すなわちノルゲスティメイト及び１７−デアセチル−ノルゲスティメイトなど、の公知の合成方法において、オキシムの異性体混合物を生じ、この異性体の比率はおよそ６０：４０〜６４：３６のＥ／Ｚ−オキシムである。
【００２３】
驚くべきことに、オキシム化反応及び得られたオキシム混合物の精密検査方法に関する本発明の方法を使用すると、ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−あるいは−（３Ｚ）−オキシム、並びに−（３Ｅ及び３Ｚ）−オキシムの混合物のいずれかが必要に応じて合成されることを発見した。本発明に関する方法は以下の：
ａ）１モルのｄ−ノルゲストレルを１．２〜５モル当量の酢酸ヒドロキシルアンモニウム、あるいはヒドロキシルアンモニウム塩と及びそれと同当量未満であるアルカリ金属アセテートとを、５０質量％以内の水を含有する酢酸中にて、１５〜５０℃で１５〜４５分間反応し、得られたノルエルゲストロミンの異性体混合物を含有する反応混合物は、
α）およそ１０倍量の水で希釈され更に沈降異性体混合物は分離され、５６：４４〜６４：３６の比率でＥ／Ｚ異性体混合物を得て、あるいは場合により、
β）およそ１０−２５容量％の水を添加した後、１０〜３０℃で２４〜７２時間攪拌され、場合により水をその反応混合物に添加し更に沈降生成物を分離することにより、化学式（ＩＡ）の（３Ｅ）−オキシム異性体を得て、あるいは場合により
γ）１０倍量の水を添加した後沈降した異性体混合物を分離しジクロロメタン中にて攪拌し、化学式（ＩＡ）の不溶性の（３Ｅ）−オキシム異性体を濾過により除去し、この濾液が吸着剤としてシリカゲル、溶離剤として非極性−極性溶媒混合液を使用するカラムクロマトグラフィーにより精製して化学式（ＩＢ）の（３Ｚ）−オキシムを得るか、あるいは
ｂ）いずれかの比率のノルエルゲストロミンのＥ／Ｚ異性体混合物は
α）酢酸ヒドロキシルアンモニウムと、あるいはヒドロキシルアンモニウム塩及びそれと同当量未満であるアルカリ金属アセテートと、５０質量％以内の水を含有する酢酸において１５〜３０℃で２４〜７２時間攪拌し、更に場合により水を更に添加した後に生成物を分離し化学式（ＩＡ）の（３Ｅ）−オキシム異性体を得るか、あるいは
β）ジクロロメタンにおいて攪拌し、化学式（ＩＡ）の不溶性（３Ｅ）−オキシム異性体を濾過除去し、濾液を吸着剤としてシリカゲル、溶離剤として非極性−極性溶媒混合物を使用するカラムクロマトグラフィーにより精製し化学式（ＩＢ）の（３Ｚ）−オキシムを得るか、あるいは
ｃ）ノルゲスティメイトの３Ｅ−あるいは３Ｚ−異性体の１７の位置における酢酸基を同当量のアルカリ金属水酸化物によりアルコール溶液中にて５〜３０℃で加水分解し、更に出発材料と同じ構造を有する得られた生成物を分離し化学式（ＩＡ）の（３Ｅ）−オキシム異性体あるいは化学式（ＩＢ）の（３Ｚ）−オキシム異性体を得て、
更に、上記ａ）〜ｃ）工程で得られた化学式（ＩＡ）及び（ＩＢ）の異性体を結晶化により精製する。
【００２４】
工程ｃ）において水酸化リチウム一水和物を好適にはアルカリ金属水酸化物として使用し更にこの反応はメタノールで実施される。
【００２５】
本発明に関し、オキシムの形成は予め調整された、酢酸ヒドロキシルアンモニウムあるいはヒドロキシルアンモニウム塩酸塩及び酢酸ナトリウムにより氷酢酸中あるいは酢酸水溶液中で実施され、得られた粗異性体混合物におけるＥ／Ｚ異性体の比率は混合物の更なる処理に従って５６：４４〜９４：６の間で変化可能である。このことは例えば、反応混合物から直接Ｅ−オキシム異性体を分離することを可能にするが、カラムクロマトグラフィーによりＺ−オキシム異性体を、例えば５６：４４の混合物から分離可能であり、これはこの比率がジクロロメタン中で攪拌後６５．５：３４．５まで変化可能なためである。このＺ異性体は例えばカラムクロマトグラフィーによりこの混合物から容易に分離可能である。
【００２６】
本発明の工程ｂ）を使用することにより、純Ｅ−異性体はＥ／Ｚ異性体混合物あるいは異性化により純Ｚ−異性体からさえ生成可能である。この詳細な説明は実施例に示す。
【００２７】
本発明の工程ｃ）に関して、純Ｅ−あるいはＺ−オキシム異性体は公知のｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−アセトキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−あるいは−（３Ｚ）−オキシム（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，６３５，３４２−３４５（１９９３））から１７の位置におけるアセトキシ基を加水分解して得られる。本発明に関してこの立体化学純度は加水分解における穏やかな反応条件下では変化しない。
【００２８】
本発明に関する以下の方法で好適に実施可能であり：
１．２〜５モル当量（ｄ−ノルゲストレルの１モルによって算出した）の塩酸ヒドロキシルアンモニウムおよびそれと同当量未満の酢酸ナトリウムは氷酢酸で懸濁され、更に得られた懸濁液（塩化ナトリウム沈降物）は３０分間攪拌され、次にこの塩化ナトリウムは濾過除去される。ｄ−ノルゲストレルは濾液に加えられ更にこの反応混合物は反応が完了するまで攪拌された後に、水で洗浄され、乾燥され再結晶化される。
【００２９】
本発明のもう一つ別の実施態様に関し、水を添加した後に溶解され且つ生成物の収率及び質に影響しないため、塩化ナトリウムは濾過除去されない。
【００３０】
このようにして得られたオキシム異性体混合物のＥ／Ｚ比率はおよそ６０：４０である。
【００３１】
予め調整された酢酸ヒドロキシルアンモニウムは試薬としても利用可能である。
【００３２】
この反応混合物に対し、形成されたオキシムを分離することなく、出発材料を消費した後更に２４〜７２時間、好適には４８時間攪拌し、さらに溶媒としての８５％酢酸水溶液あるいは氷酢酸を使用する、上記反応条件下で反応を実施し、さらに形成された生成物は水を添加した後に濾過除去あるいは分離される場合、得られた異性体混合物はおよそ９４：６の比率でＥ／Ｚ異性体を含有する。
【００３３】
本発明の別の実施例に関して、例えば６０：４０のＥ／Ｚ異性体混合物あるいは純Ｚ−異性体は塩酸ヒドロキシルアンモニウムとそれと同当量未満の酢酸ナトリウムとを含む酢酸中に懸濁され更に上述の反応条件が適用される。この場合に異性体混合物は９０：１０〜９６：４の比率のＥ／Ｚ異性体を得る。
【００３４】
工程ａ）の第一部分において、オキシム化反応が反応混合物を均一にすることにより実施され、更に出発材料の消費後すぐに反応混合物は水で希釈され、更に沈降した固形生成物は分離される場合に、得られた混合物の異性体の比率は５６：４４のＥ／Ｚオキシムである。この異性体混合物は工程ａ）のγ）工程においてジクロロメタンで攪拌される。この場合に、不溶性Ｅ−異性体は濾過除去され、更に濾液中の異性体の比率はＺ−異性体に関して変更可能であり（およそＥ／Ｚ＝３３：７７）、このことはカラムクロマトグラフィーによりＺ−異性体を分離し易くする。
【００３５】
Ｅ−異性体とＺ−異性体の分離は好適には吸着剤としてシリカゲルを使用するカラムクロマトグラフィーにより実施され更に大部分が非極性の混合溶媒で溶出を開始し、更により極性のある溶媒の濃度を徐々に増加させる。同じ異性体からなるフラクションは濃縮され更に残留物は再結晶化される。
【００３６】
純Ｅ−あるいはＺ−異性体の合成の更なる可能性は工程ｃ）に記載される。本工程において、ノルゲスティメイトのＥ／Ｚ異性体混合物は公知のクロマトグラフィー法［Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，６３５，３４２−３４５（１９９３）］により分離され、さらに純Ｅ−あるいはＺ−異性体オキシムの１７の位置における酢酸基は同当量のアルカリ金属水酸化物、好適には水酸化リチウムあるいは水酸化ナトリウムによりアルコール溶液中において穏やかな条件下、好適には５〜２０℃で加水分解される。加水分解がこれらの条件で実施されれば、３の位置にあるオキシム基のヒドロキシル基の立体化学性は変化しない。
【００３７】
本発明の新規な方法において、純Ｅ−オキシム異性体は工業規模で製造可能である。Ｅ／Ｚ異性体の比率はＺ−異性体オキシムに対して変更可能であり、更にＺ−異性体はカラムクロマトグラフィーによりこの混合物から分離可能であるため、Ｚ−オキシム異性体の分離は経済的である。
【００３８】
新規な方法である上に、化学式（ＩＡ）及び（ＩＢ）の純異性体も同様に新規であり、それらの構造を明確に立証する固有性が本発明において示される。
【００３９】
ノルエルゲストロミンのオキシム基のヒドロキシル基の相対配置に関して、この化合物に２つの幾何異性体が存在する。これらの異性体は通常のカラムクロマトグラフィーで分離可能であり、且つＺ−異性体はＥ−異性体よりも極性が高い。経皮膏薬にノルエルゲストロミンの異性体混合物を適用する際に生じる疑問として、異なる極性を有する異性体を皮膚を介して吸収させることが困難ではないかということである。次にこの憶測について研究した。本研究には純異性体の物理化学的特性並びにそれらの生体外の薬物動力学の研究が含まれる。
【００４０】
物理化学的研究において、水に対する異性体の溶解性及び旧来の世界共通のＨＰＬＣによりそれらの親油性を決定した。生体外の薬物動力学研究には化合物の代謝安定性、代謝クリアランス及びＣａｃｏ−２浸透性を含んだ。
【００４１】
溶解度測定の手順
ノルエルゲストロミンのＥ−異性体及びＺ−異性体の平衡溶解度は蒸留水中で決定された。２０ｍｇのノルエルゲストロミンは室温で２０ｍｌの蒸留水を添加した。この懸濁液は連続して攪拌されると共に試料を時々搾取した。これら試料は濾過されこの濾液におけるノルエルゲストロミン含有量は分光光度法で決定された。分光光度の測定は室温でＶＡＲＩＡＮ  Ｃａｒｙ  ３Ｅ分光光度計により実施された。
【００４２】
親油性測定の手順
親油性はＨＰＬＣ法により決定された。ＨＰＬＣの測定はＴｈｅｒｍｏ  Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｄｕｃｔ（ＳｐｅｃｔｒａＳｙｓｔｅｍ  Ｐ４０００  及び  ＳｐｅｃｔｒａＦＯＣＵＳ  Ｆｏｒｗａｒｄ  Ｏｐｔｉｃａｌ  Ｓｃａｎｎｉｎｇ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ）ＨＰＬＣ機器で実施された。データはＣｈｒｏｍＱｕｅｓｔ（ｖｅｒ．２．５１）ソフトウェアで分析された。
【００４３】
逆層ＨＰＬＣ測定に対して、Ｎｏｖａ−Ｐａｋ  Ｃ１８カラム（４μｍ×４．６ｍｍ×２５０ｍｍ：Ｗａｔｅｒｓ，Ｉｒｅｌａｎｄ）を使用しλ＝２８０
ｎｍで２５℃で検出を行った。移動層の流速は１．０ｍｌ／ｍｉｎであった。ＨＰＬＣ勾配度アセトニトリルは有機成分（Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ．，Ｄａｒｍｓｔａｄｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ）として利用した。２つの異性体の保持値は異なる量のアセトニトリルを含む移動層の定組成分析により得られた。空隙時間（ｔ０）はメタノール注入により決定された。
【００４４】
試料はアセトニトリル：水の１：１混合物中で１ｍｇ／４ｍｌの濃度で溶解した。このｌｏｇＫ’値は２つ連続した１０μｌ容量を注入した後測定された平均保持時間から計測された（ｌｏｇｋ’＝ｌｏｇ（（ｔＲ−ｔ０）／ｔ０））。このｌｏｇｋ’値は１フラクション当りのアセトニトリル濃度で示された。この空隙時間（ｔ０）はこの実験装置では１．４９分となることが分かった。
【００４５】
クロマトグラフィーの疎水性指標（ψ０）は逆層ＨＰＬＣ測定における化合物の親油性度を示す。ψ０パラメータは移動層のアセトニトリル濃度と定義するとｌｏｇｋ’＝０である。
【００４６】
代謝的安定性及びクリアランスの査定手順
ノルエルゲストロミンＥ及びＺ異性体の代謝安定性はヒト肝ミクロソームで実験した。２．５ｍｌの培養混合物は６ｍＭのＮａ−ピロリン酸塩、５ｍＭのＭｇＣｌ２、５ｍＭのグルコース−６−リン酸、１Ｕ／ｍｌのグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ、ヒト肝ミクロソーム（１ｍｇ／ｍｌ）及び５μＭのノルエルゲストロミンＥあるいはＺ異性体を含有した。このｐＨは１００ｍＭのトリス−ＨＣｌバッファーによりｐＨ７．４まで調整された。この反応は５ｍＭのＮＡＤＰＨを添加して開始された。０．５ｍｌの試料は０、５及び２０分において０．５ｍｌの冷メタノールによる即時沈殿で採取された。１ｍｌの沈殿した試料は３０分間１２００ｇで遠心分離され１０μｌの上清はＨＰＬＣ内に注入された。
【００４７】
分析測定はＭｅｒｃｋ−Ｈｉｔａｃｈｉ  ＨＰＬＣシステムを利用して２４４ｎｍのＵＶモニタリングにより実施された。不変材料が測定され内因性クリアランス（Ｃｌｉｎｔ）及び代謝生物学的利用能（Ｆ％）は以下の方程式で計算された：
ｄｃ／ｄｔ／ｃ０＝Ｃｌｉｎｔ1（ｍｌ／ｍｉｎ×ｇプロテイン）、
ここでｄｃ／ｄｔは一定期間における濃度変化を示し且つｃ０はノルエルゲストロミン異性体の初期濃度（０分の試料で測定された）である。同様に、
Ｃｌｉｎｔ1×４５＝Ｃｌｉｎｔ２（ｍｌ／ｍｉｎ×ｇ肝）及び
ＥＨ＝Ｃｌｉｎｔ２／Ｃｌｉｎｔ２＋ＨＢＦ、
ここで、ＥＨは肝抽出であり、ＨＢＦは肝血流量である。最終的に代謝安定性は：
Ｆ％＝（１００−ＥＨ）×１００
【００４８】
統計的分析に対してスチューデントｔ−検定が使用された（マイクロソフトエクセル）。表１にまとめた結果は３つの並行測定の平均値として計算される。
【００４９】
Ｃａｃｏ−２浸透率測定の手順
生体外モデルとしてＣａｃｏ−２ヒト腺癌（上皮）細胞系単層を使用して薬物吸収研究を実施した。Ｃａｃｏ−２単層を通過する薬物の受動フラックス特性はヒトの経口バイオアベイラビリティと相関することが示された。
【００５０】
アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション、ロックビル、ＭＤ、（ＡＴＣＣ）から得られたＣａｃｏ−２細胞は、５％ＣＯ２雰囲気下で３７℃で１０％の熱不活性化ウシ胎仔血清（ＧＩＢＣＯＢＲＬ  １１３６０−０３９）及び抗生物質：ペニシリン１００Ｕ／ｍＬ及びストレプトマイシン１００μｇ／ｍＬ（ＧＩＢＣＯＢＲＬ  １５１４０−０３１）で補足されたダルべコの改質イーグル培地中で成長させた。
【００５１】
培養器（３７℃、５％ＣＯ２／９５％Ｏ２及び９５％湿度）で成長した融合性細胞単層は、７日おきに１ｍＭのＥＤＴＡを含有する０．２５％トリプシンで処理することにより継代培養された。
【００５２】
完全に分化されたＣａｃｏ−２細胞の１９〜２３日目の融合性単層が６〜１０継代後における搬送研究に使用された。
【００５３】
ＥＨＳ細胞付着マトリックス（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｇ５９７１）、アール塩を含む最小必須イーグル培地（ＭＥＭ）、Ｌ−グルタミン（ＧＩＢＣＯＢＲＬ  ４１５００−０９１）及びトランスウェルポリカーボネート膜（Ｃｏｓｔａｒ  ３４０１）が使用された。
【００５４】
ＥＨＳ細胞付着マトリックス（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｇ５９７１）を有する被覆トランスウェル及び２０００００〜５０００００  Ｃａｃｏ−２細胞が塗布／挿入される。Ｃａｃｏ−２単層がトランスウェルの区画の腔側／先端部上で成長させた。
【００５５】
ノルエルゲストロミン（ｎｏｒｅｌｇｅｓｔｒｏｍｉｎ）のＥ−あるいはＺ−異性体は５０μＭの濃度でアッセイされた。[１４Ｃ]マンニトールは傍細胞マーカー（３，７×１０４Ｂｑ／試験室）として使用された。
【００５６】
細胞培養液を除去した後、３つの並行Ｃａｃｏ−２細胞単層は、各試験化合物に対して、予め温められた（３７℃）ＨＢＢＳ−ＴＲＩＳ（腔側／区画に対して４００μＬ、側底部／区画に対して１．５ｍＬ）により３７℃、２０分間前培養された。
【００５７】
培地の変更は挿入物の腔側／先端区画に対して、５０〜１００μＭの作用濃度の調査される分子及び対照分子を０．４ｍＬ添加して実行した。
【００５８】
吸収測定（腔側から側底部へ）は、ゼロ時点における腔側／先端（「供与者」）の区画からと、１５分ごと（３×）の側底部（「受容者」側）からのサンプルを得ることにより実施された。
【００５９】
異性体の濃度は紫外線による液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ／ＵＶ）分析により決定された。方法：３５℃での勾配溶離。溶離液Ａ：メタノール−０．０５Ｍ、酢酸アンモニウム＝３００−２００＋５００μＬの１０％酢酸。溶離液Ｂ：メタノール。流速：０．５０ｍＬ／ｍｉｎ。検出：２４０ｎｍ。カラムタイプ：Ｍｅｒｃｋ  Ｐｕｒｏｓｐｈｅｒ  Ｃ−１８。
【００６０】
Ｄｉｍ．：１２５〜３ｍｍ．＋ｇｕａｒｄ。Ｃｈｒｏｍ  Ｔｙｐｅ：ＨＰＬＣチャンネル：２。ピーク定量法：高さ；計算法：ＥＸＴ−ＳＴＤ。
【００６１】
透過された異性体の腔外の濃度は表１に示される。
【００６２】
【表１】
2007534617.tif 000005
【００６３】
上記データは、ノルエルゲストロミンのＺ−異性体は、Ｅ−異性体よりも水中における安定性が高いことを示す。Ｚ−異性体の場合、Ｅ−異性体と比較して、上皮細胞層への浸透がより早く、代謝安定性がより高く、且つ代謝クリアランスがより小さい。これらの特徴は、経口投与後のＺ−異性体の吸収がＥ−異性体のものよりも良く、従って経口的投与される製剤（例えばタブレット）への適用がより有利であることを示す。
【００６４】
Ｓｉｄｄｉｑｕｉ及び共同研究者により[Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｐｈａｒｍ．，１７．４０５（１９８９）]、単離されたヒトの皮膚標本により実験を実施し、脂溶性ステロイドは極性ステロイドよりもより早くヒトの上皮に浸透されるが、除去速度は両方ともだいたい同じであることが示された。溶解度及び極性に関する本実験において、ノルエルゲストロミンのＥ−異性体はＺ−異性体よりも、より脂溶性が高い。Ｓｉｄｄｉｑｕｉ及び共同研究者の実験に基づき、Ｚ−異性体と比較して、より脂溶性の低いＥ−異性体は表皮への浸透がＺ−異性体のものよりもより早く、従って、経皮膏薬に対してＥ−異性体を適用することはより有利である。
【００６５】
経皮吸収に対して、脂溶性の増加が有利である効果に関し、６つの異なるステロイドで構造吸収実験を実施することにより証明した。以下の文献：Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．２００１，２１７，１，及びＪ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，４９，６３１（１９９３）において、同一条件下で測定されたクロマトグラフ疎水性指標（ＣＨＩ）は非常に良好な脂溶性記述子であることが示された。本願においてこれらの実験に基づき目的のステロイドのＣＨＩ値を決定すると共に、測定された角質層／水分の分配係数と相関させた。得られた良好な相関関係（ｒ２＝０．８８）から、より高いＣＨＩ指数を有するステロイドがより良好に角質層に浸透されることが示される。本発明の測定値から、Ｅ−異性体のＣＨＩ指数はＺ−異性体のものよりも高く、従ってこの分析結果もＥ−異性体の経皮への適性を証明する。角質層／水分の透過係数（ｌｏｇｋｐ）とＣＨＩ指数との関係は図１に示される。
【００６６】
本発明の実施例を以下に説明するが、これに限定されない。
【００６７】
実施例１
ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（Ｅ／Ｚ）−オキシム
塩酸ヒドロキシルアンモニウム３４．７ｇ（０．５モル）及び酢酸ナトリウム３４ｇ（０．４１モル）が氷酢酸５００ｍｌに懸濁され、更に１時間攪拌した後ｄ−ノルゲストレル３１．２ｇ（０．１モル）が窒素下で添加される。異種反応混合物は反応が完了するまで攪拌され、その後に水３０００ｍｌに注がれる。沈降物は濾過され、水、５％水酸化アンモニウム水溶液、水で連続的に洗浄され、真空下にて６０℃未満で乾燥される。
【００６８】
得られた粗生成物はエタノール３２０ｍｌで溶解され、活性炭で浄化され、活性体を濾過した後の溶液は原液の１０％容量まで濃縮される。その残留物は０℃まで冷却され更に５時間後に濾過される。この固形物質はエタノール洗浄され且つ乾燥されて表題化合物２９．４ｇ（９０％）を生じる。
【００６９】
融点：１１０〜１３０℃（幾何異性体の混合物）
オキシム異性体の割合：Ｅ−異性体＝５８％；Ｚ−異性体＝４２％
【００７０】
実施例２
ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−オキシム
窒素下において、塩酸ヒドロキシルアンモニウム２．５ｇ（０．０３５モル）、酢酸ナトリウム２ｇ（０．０２４モル）及び７０％酢酸水溶液５５ｍｌで激しく攪拌された懸濁液に対し、ｄ−ノルゲストレル５ｇ（０．０１６モル）が加えられ、更に５０時間攪拌を続ける。次に反応混合物を５００ｍｌの水に注がれ、沈降生成物は濾過除去され、水、５％水酸化アンモニウム水溶液、水で連続的に洗浄され、６０℃未満で乾燥される。得られた粗生成物（オキシム異性体の割合：Ｅ−オキシム＝９４．５％；Ｚ−オキシム＝５．５％）はジクロロメタンで再結晶され、表題化合物の純粋Ｅ−異性体を４．６５ｇ（８８．７％）得る。
【００７１】
融点：１９８〜２００℃
【００７２】
実施例３
ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−オキシム
塩酸ヒドロキシルアンモニウム５ｇ（０．０７モル）、酢酸ナトリウム５．８ｇ（０．０７モル）は氷酢酸１００ｍｌ中に懸濁され、懸濁液は１時間攪拌され更に形成された塩化ナトリウムは濾過除去される。窒素下において、ｄ−ノルゲストレル１０ｇ（０．０３２モル）が攪拌されたろ液に添加され更に反応が完了するまで攪拌が続けられる。次に水３０ｍｌが反応混合物に添加され更に５０時間攪拌が続けられる。反応混合物は水１０００ｍｌに注がれ、沈殿生成物は濾過除去され、実施例２に記載される方法に基づき洗浄され更に乾燥される。粗生成物はアセトニトリルにより再結晶され、表題化合物、純粋Ｅ−異性体を９．１ｇ（８６．８％）得る。融点：１９８〜２００℃
【００７３】
実施例４
ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−オキシム
窒素下において、ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−３（Ｅ／Ｚ）−オキシム［異性体の割合：Ｅ−オキシム＝５８％；Ｚ−オキシム＝４２％］１０ｇ（０．０２７モル）及び氷酢酸１００ｍｌを激しく攪拌した懸濁液に対して、塩酸ヒドロキシルアンモニウム２．５ｇ（０．０３５モル）及び水２０ｍｌ中の酢酸ナトリウム２．９ｇ（０．０３５モル）が添加される。反応混合物は５０時間攪拌され、次に水１０００ｍｌに注がれる。実施例２に記載される方法に基づき更に実施され粗生成物９．６ｇ（９６％）が得られる。この得られた粗生成物［異性体の割合：Ｅ−オキシム９４％；Ｚ−オキシム６％］は実施例２に記載される方法に基づき酢酸エチルにより再結晶され表題化合物、純粋Ｅ−異性体９．１ｇ（９１％）を得る。融点：１９７〜１９９℃。
【００７４】
実施例５
ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｚ）−オキシム
酢酸ナトリウム４３．８ｇ（０．５３モル）、塩酸ヒドロキシルアンモニウム５０ｇ（０．７２モル）、及び９０％酢酸水溶液１００ｍｌの懸濁液は室温で１時間激しく攪拌される。沈降塩酸ナトリウムは濾過除去され、ｄ−ノルゲストレル１００ｇ（０．３２モル）が窒素下においてろ液に添加され、その結果生じた混合物は１．５時間攪拌される。この期間に反応温度は４５℃まで上昇する。この反応混合物が均一になると反応の完了を示す。反応混合物は水４０００ｍｌに注がれ、沈殿物は濾過除去され、水、５％水酸化アンモニウム水溶液、水で連続的に洗浄され、乾燥される。得られたオキシムの異性体混合物１０４ｇ［異性体の割合：Ｅ−オキシム５７．４％，Ｚ−オキシム４２．６％］は２０倍容量のジクロロメタンで３０分間激しく攪拌され、不溶性物質は濾過除去され、６０℃未満で乾燥され生成物４５．６ｇ[異性体の割合：Ｅ−オキシム９４．４％、Ｚ−オキシム４．６％]を得る。
【００７５】
上記生成物を分離後得られた母液は濃縮され生成物５８ｇを得る[異性体の割合：Ｚ−オキシム６５．５％、Ｅ−オキシム３３．２％］。これはジクロロメタン２３００ｍｌ（４０倍容量）で溶解され、５時間０〜５℃で保持される。沈降した結晶生成物は濾過除去され、ジクロロメタンで洗浄され、乾燥され生成物１７．６ｇを得る[異性体の割合：Ｅ−オキシム９％、Ｚ−オキシム９１％］。
【００７６】
こうして得られる母液は再び濃縮され、更に残留物３９ｇは吸着剤としてシリカゲル７００ｇ及び溶離液としてトルエン、そのカラムクロマトグラフィーにより精製される後より極性の高いトルエン−アセトン混合液を利用する。同じ異性体を含有する画分は濃縮されＥ−オキシム（異性体純度：９４％）３．７ｇ及びＺ−オキシム（異性体純度：９５％）２５．２ｇを得る。
【００７７】
結晶化及びカラムクロマトグラフィーにより得られる対応する結晶は混合され、更に最初に２０倍容量のアセトニトリル、次に２３倍容量の酢酸エチルにより再結晶化され、Ｚ−オキシム（純度：９９．３％）２９ｇ及びＥ−オキシム（純度：９９．７％）３８．４ｇを得る。融点：Ｚ−オキシム：２０６〜２０７℃。融点：Ｅ−オキシム：１９９〜２００℃。
【００７８】
ＮＭＲデータ：
Ｚ−オキシム：
【００７９】
【化３】
2007534617.tif 000006
【００８０】
Ｅ−オキシム：
【００８１】
【化４】
2007534617.tif 000007
【００８２】
実施例６
ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−オキシム
窒素下において、ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｚ）−オキシム１０ｇ（０．０２７モル）及び８０％酢酸水溶液１００ｍｌを激しく攪拌した懸濁液に対して、塩酸ヒドロキシルアンモニウム２．５ｇ（０．０３５モル）及び酢酸ナトリウム２．９ｇ（０．０３５モル）が添加される。反応混合物は５０時間攪拌され、次に実施例４に記載される方法に従って処理され、表題化合物、純粋Ｅ−異性体８．５ｇ（８５％）を得る。融点：１９６〜１９８℃。
【００８３】
実施例７
ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−オキシム
窒素下において、ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−アセトキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｚ）−オキシム５ｇ（０．０１モル）及びメタノール５０ｍｌを激しく攪拌させた溶液に対して、水酸化リチウム一水和物１．７ｇ（０．０４モル）を０〜５℃において添加し、更に２時間攪拌を続ける。薄層クロマトグラフィーにより検査することにより、反応終了後、反応混合物は水５００ｍｌに注がれ、更に得られた懸濁液のｐＨは酢酸によって、７．５〜９に調整される。沈降生成物は濾過除去され、水で洗浄され真空にて６０℃未満に乾燥される。得られた粗生成物（４．５ｇ）はアセトニトリルで再結晶され、ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｚ）−オキシム４ｇ（９０．２％）を得る。
【００８４】
融点：２０３〜２０４℃
【００８５】
ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−オキシムは、上述の方法に従って、ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−アセトキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−オキシム５ｇから生成される。収率：４．１ｇ（９２．４５％）。
【００８６】
融点：１９８〜２００℃。
【００８７】
実施例８
ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−オキシム
窒素下において、塩酸ヒドロキシルアンモニウム１．２５ｇ（０．０１７モル）、酢酸ナトリウム１．４５ｇ（０．０１７モル）および５０％酢酸水溶液６０ｍｌを激しく攪拌させた懸濁液に対して、ｄ−ノルゲストレル２．５ｇ（０．００８モル）を添加する。薄層クロマトグラフィーにより検査することにより、反応終了後、反応混合物は水５００ｍｌに注がれる。沈降生成物は濾過除去され、水、５％水酸化アンモニウム水溶液、水で連続的に洗浄され、６０℃未満で乾燥される。粗生成物はジクロロメタンで再結晶化され表題化合物２．２７ｇ（８６．７％）を得る。
【００８８】
融点：１９８〜２００℃
【００８９】
実施例９
ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−オキシム（異性体混合物）
酢酸ナトリウム５．８ｇ（０．０７モル）および氷酢酸８０ｍｌを激しく攪拌させた懸濁液に対して、水２２ｍｌ中の塩酸ヒドロキシルアンモニウム５ｇ（０．０７モル）を添加する。次にｄ−ノルゲストレル１０ｇ（０．０３２モル）は窒素下において反応混合物に添加され反応が完了するまで攪拌を続ける。薄層クロマトグラフィーにより検査することにより、反応終了後、反応混合物は水８００ｍｌに注がれる。沈降生成物は濾過除去され、水、５％水酸化アンモニウム水溶液、水で連続的に洗浄され、６０℃未満で乾燥され、Ｅ／Ｚ−異性体の混合割合が５５．８８：４４．０５である表題化合物８．９ｇ（８４．９２％）を得る。
【００９０】
融点：１１０〜１３０℃
【００９１】
実施例１０
ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｚ）−オキシム及び錠剤の活性成分としてのエチニル−エストラジオールを含有する医薬合成物
ノルエルゲストロミンのＺ−異性体２５０ｍｇ及びエチニル−エストラジオール３５ｍｇはラクトース７５．７１５ｇ、微結晶性セルロース２２．５ｇ、コロイド状二酸化ケイ素（エアロシル）１ｇ及びステアリン酸マグネシウム５００ｍｇと均一に混合される。こうして得られた粉末混合物は造粒なしで１００ｍｇのタブレットに圧縮される。約１０００ピースの錠剤が得られる。
【００９２】
実施例１１
ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｚ）−オキシム及び錠剤の活性成分としてのエチニル−エストラジオールを含有する医薬合成物
ノルエルゲストロミンのＺ−異性体２５０ｍｇ及びエチニル−エストラジオール３５ｍｇはエタノール１０ｍｌに溶解され、更に得られた混合物はラクトース７５．７１５ｇ及びコーンスターチ２０．５ｇからなる均一な混合物上に噴霧される。エタノールは流動化乾燥により混合物から除去される。活性成分を含有する得られた粉末混合物は流動装置におけるポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）２ｇの水溶液で粒状化され、次に乾燥される。コロイド状二酸化ケイ素１ｇ及びステアリン酸マグネシウム０．５ｇは粒状材料物に均質化され、更に錠剤１００ｍｇまで圧縮される。約１０００ピースの錠剤が得られる。
【００９３】
実施例１２
ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｚ）−オキシム及び錠剤の活性成分としてのエチニル−エストラジオールを含有する医薬合成物
ノルエルゲストロミンのＺ−異性体２５０ｍｇ、エチニル−エストラジオール３５ｍｇ及びポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）２ｇはエタノール１０ｍｌに溶解され、更に得られた混合物は高剪断混合機内のラクトース７５．７１５ｇ、コーンスターチ２０．５ｇの均一な混合物上に噴霧される。混合物は粒状にされ、更にエタノールはマイクロ波真空乾燥機において除去される。コロイド状二酸化ケイ素１ｇ及びステアリン酸マグネシウム０．５ｇは粒状材料物に均質化され、更に錠剤１００ｍｇまで圧縮される。約１０００ピースの錠剤が得られる。
【００９４】
実施例１３
ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−オキシム及び経皮製剤の活性成分としてのエチニル−エストラジオールを含有する医薬合成物
膏薬型
３層からなるマトリックスタイプの経皮膏薬の１ピースはノルエルゲストロミンのＥ−異性体６．０ｍｇ及びエチニル−エストラジオール０．７５ｍｇを含有する。
【００９５】
各膏薬単位ごとに、ノルエルゲストロミンのＥ−異性体６．０ｍｇ、エチニル−エストラジオール０．７５ｍｇ、ポリビニルピロリドン２５ｍｇ、乳酸ラウリル（吸着促進剤）２０ｍｇ及びポリイソブチレン２４８ｍｇはヘキサン／酢酸エチル／エタノールが８：１：１の割合の混合液中に室温で約４５分間分散される。こうして得られた分散液は膏薬の外膜に注がれ、約４５分間７０℃で乾燥される。保護膜は乾燥されたマトリックスの表面上に覆われる。
【００９６】
実施例１４
ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−オキシム及び経皮製剤の活性成分としてのエチニル−エストラジオールを含有する医薬合成物
膏薬型
３層からなるマトリックスタイプの経皮膏薬の１ピースはノルエルゲストロミンのＥ−異性体６．０ｍｇ及びエチニル−エストラジオール０．７５ｍｇを含有する。
【００９７】
各膏薬単位ごとに、ポリジメチルシロキサン２６１ｍｇとポリビニルピロリドン１７ｍｇは室温で均質化される。メチルラウリエート１５ｍｇ、ノルエルゲストロミンのＥ−異性体６．０ｍｇ、エチニル−エストラジオール０．７５ｍｇがこの混合液に添加され、エタノール３５０ｍｌにより４５分間室温で分散される。得られた分散液は膏薬の外膜に注がれ更に約４５分間７０℃で乾燥される。保護膜は乾燥されたマトリックスの表面上に覆われる。
【手続補正書】
【提出日】平成17年7月23日(2005.7.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
黄体ホルモン活性成分として以下の化学式（ＩＡ）の純ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−オキシムを含有することを特徴とする膏薬型医薬合成物。
【化１】
2007534617.tif 000012
【請求項２】
黄体ホルモン活性成分として以下の化学式（ＩＢ）の純ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｚ）−オキシムを含有することを特徴とする経口投与用医薬合成物。
【化２】
2007534617.tif 000013
【請求項３】
ノレルゲストロミンのＥ／Ｚ−異性体混合物、並びに化学式（ＩＡ）の純ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｅ）−オキシム及び化学式（ＩＢ）の純ｄ−（１７α）−１３−エチル−１７−ヒドロキシ−１８，１９−ジノルプレグ−４−エン−２０−イン−３−オン−（３Ｚ）−オキシムの合成方法において、
ａ）１モルのｄ−ノルゲストレルを１．２〜５モル当量の酢酸ヒドロキシルアンモニウム、あるいはヒドロキシルアンモニウム塩と及びそれと同当量未満であるアルカリ金属アセテートとを、５０質量％以内の水を含有する酢酸において、１５〜５０℃で１５〜４５分間反応し、得られたノレルゲストロミンの異性体混合物を含有する反応混合物は、
α）およそ１０倍量の水で希釈し更に沈降異性体混合物を分離し、５６：４４〜６４：３６の比率でＥ／Ｚ異性体混合物を得て、あるいは場合により、
β）およそ１０〜２５容量％の水を添加した後、１０〜３０℃で２４〜７２時間攪拌し、場合により水を反応混合物に添加し更に沈降生成物を分離することにより、化学式（ＩＡ）の（３Ｅ）−オキシム異性体を得て、あるいは場合により
γ）およそ１０倍量の水を添加した後沈降異性体混合物を分離し更にジクロロメタン中で攪拌し、化学式（ＩＡ）の不溶性の（３Ｅ）−オキシム異性体を濾過により除去し、この濾液を吸着剤としてシリカゲル、溶離剤として非極性−極性溶媒混合液を使用するカラムクロマトグラフィーにより精製し化学式（ＩＢ）の（３Ｚ）−オキシムを得るか、あるいは
ｂ）いずれかの比率のノレルゲストロミンのＥ／Ｚ異性体混合物は
α）酢酸ヒドロキシルアンモニウム、あるいはヒドロキシルアンモニウム塩及びそれと同当量未満であるアルカリ金属アセテートと、５０質量％以内の水を含有する酢酸において、１５〜３０℃で２４〜７２時間攪拌し、更に場合により水を更に添加した後に、生成物を分離し化学式（ＩＡ）の（３Ｅ）−オキシム異性体を得るか、あるいは
β）ジクロロメタンにおいて攪拌し、化学式（ＩＡ）の不溶性（３Ｅ）−オキシム異性体を濾過除去し、濾液を吸着剤としてシリカゲル、溶離剤として非極性−極性溶媒混合物を使用するカラムクロマトグラフィーにより精製し化学式（ＩＢ）の（３Ｚ）−オキシムを得るか、あるいは
ｃ）ノルゲスティメイトの３Ｅ−あるいは３Ｚ−異性体の１７の位置における酢酸基を同当量のアルカリ金属水酸化物によりアルコール溶液中にて５〜３０℃で加水分解し、更に出発材料と同じ構造を有する得られた生成物を分離し化学式（ＩＡ）の（３Ｅ）−オキシム異性体あるいは化学式（ＩＢ）の（３Ｚ）−オキシム異性体を得て、
更に、上記ａ）〜ｃ）工程で得られた化学式（ＩＡ）及び（ＩＢ）の異性体を結晶化により精製することを特徴とする合成方法。
【請求項４】
加水分解はメタノール中で水酸化リチウムにおいて実施することを特徴とする請求項３記載のｃ）の合成方法。
【国際調査報告】
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