(57)【要約】  ククルビツリルを含む高分子が提供される。ククルビツリルを含む高分子は、大気汚染物質、水質汚染物質、生体物質、有機または無機物質、アルカリ金属、重金属、イオン性または水溶性の生体物質を除去、分離あるいは精製するために用いられうる。さらに、前記高分子を利用したカラムクロマトグラフィ用固定相が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
反応性末端置換基を有する粒子型高分子が下記化学式１のククルビツリルに共有結合によって連結された高分子：
【化１】
2007500763.tif 000009
式中、ｎは４ないし２０の整数であり、Ｒ１は、それぞれ独立して、末端が不飽和結合であるＣ２〜Ｃ２０の置換もしくは非置換のアルケニルオキシ基、Ｃ２〜Ｃ２０の置換もしくは非置換のアルキル部分を有するカルボキシアルキルスルファニルオキシ基、Ｃ２〜Ｃ８の置換もしくは非置換のアルキル部分を有するカルボキシアルキルオキシ基、Ｃ１〜Ｃ８の置換もしくは非置換のアルキル部分を有するアミノアルキルオキシ基、Ｃ１〜Ｃ８の置換もしくは非置換のアルキル部分を有するヒドロキシアルキルオキシ基、またはＣ２〜Ｃ８の置換もしくは非置換のアルキル部分を有するエポキシアルキルオキシ基である。
【請求項２】
前記反応性末端置換基がハロゲン原子、置換もしくは非置換のアミノ基、エポキシ基、カルボキシル基、チオール基、イソシアネート基、またはチオイソシアネート基である、請求項１に記載の高分子。
【請求項３】
前記反応性末端置換基を有する粒子型高分子がＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ  ｐｏｌｙｍｅｒまたはＸＡＤ  ｐｏｌｙｍｅｒである、請求項１に記載の高分子。
【請求項４】
前記粒子型高分子の平均粒径が５ないし３００μｍである、請求項１に記載の高分子。
【請求項５】
前記共有結合がエーテル結合、スルファニル結合、アミノ結合、エステル結合、アミド結合、チオアミド結合、またはウレア結合である、請求項１に記載の高分子。
【請求項６】
下記化学式２の構造を有する化合物である、請求項１に記載の高分子：
【化２】
2007500763.tif 000010
式中、Ｐは高分子残基である。
【請求項７】
下記化学式３の構造を有する化合物である、請求項１に記載の高分子：
【化３】
2007500763.tif 000011
式中、Ｐは高分子残基である。
【請求項８】
下記化学式４の構造を有する化合物である、請求項１に記載の高分子：
【化４】
2007500763.tif 000012
式中、Ｐは高分子残基である。
【請求項９】
請求項１に記載の化学式１のククルビツリル誘導体がＣ３〜Ｃ２０の置換または非置換のアルケニル基を有する単量体と共重合された高分子。
【請求項１０】
下記化学式５の構造を有する化合物である、請求項９に記載の高分子：
【化５】
2007500763.tif 000013
式中、ｎは１００ないし１０，０００の整数であり、ｍは１０ないし５，０００の整数であり、Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立してＣ６〜Ｃ３０の置換もしくは非置換のアリール基、カルボキシル基、Ｃ４〜Ｃ３０の置換もしくは非置換のヘテロ環基、Ｃ１〜Ｃ２０の置換もしくは非置換のアルキル基、ハロゲン原子、シアノ基、アミノ基、Ｃ１〜Ｃ１０の置換もしくは非置換のアミノアルキル基、ヒドロキシル基、Ｃ１〜Ｃ１０の置換もしくは非置換のヒドロキシアルキル基、Ｃ３〜Ｃ１０の置換もしくは非置換のアルケニル基、または水素である。
【請求項１１】
Ｒ１がアリルオキシ基である請求項１に記載の化学式１のククルビツリル誘導体がＣ３〜Ｃ２０の置換または非置換のアルケニル基を有する単量体と共重合された請求項１０に記載の高分子。
【請求項１２】
下記化学式６の構造を有する化合物である、請求項９に記載の高分子：
【化６】
2007500763.tif 000014
式中、ＡはＮＨまたはＯであり、ｎは１ないし８の整数であり、ａは１０ないし２，０００の整数であり、ｂおよびｃはそれぞれ独立して１００ないし１０，０００の整数である。
【請求項１３】
Ｒ１が、Ｃ２〜Ｃ９のアルキル部分を有するアミノアルキルオキシ基またはヒドロキシアルキルオキシ基である請求項１に記載の化学式１のククルビツリル誘導体が、エピクロロヒドリンまたはエピブロモヒドリンと塩基の存在下で共重合された請求項１２に記載の高分子。
【請求項１４】
下記化学式７の高分子：
【化７】
2007500763.tif 000015
式中、ｎは１００ないし１０，０００の整数であり、ｍは１０ないし５，０００の整数であり、Ｚは、アミド結合、エステル結合、ウレア結合、チオウレア結合、アミン結合、またはエーテル結合であり、Ｒ２はＣ１〜Ｃ１０の置換もしくは非置換のアルキル基、Ｃ６〜Ｃ３０の置換もしくは非置換のアリール基、カルボキシル基、Ｃ４〜Ｃ３０の置換もしくは非置換のヘテロ環基、または水素であり、Ｘは、Ｓｉ、Ａｌ、またはＴｉである。
【請求項１５】
請求項１４に記載の化学式７の高分子がガラスウール、フィルタまたはセルロースに共有結合されたフィルタ材料。
【請求項１６】
Ｃ３〜Ｃ２０の置換または非置換のアルケニル部分を有する単量体と、請求項１に記載の化学式１で、Ｒ１がアリルオキシ基であるアリルオキシククルビツリルとを溶媒に溶かして溶液を得て、
前記溶液にポロゲンを、次いで反応物質の全重量に対して０．２ないし５重量％のラジカル開始剤を入れ、
一端を密閉したカラム管に反応溶液を入れ、カラム管の他端を密閉し、
６０ないし８０℃で１５ないし３０時間撹拌し、そして
前記カラム管を洗浄する、
を含む工程によって得られたモノリシックカラム。
【請求項１７】
前記単量体がアクリルアミド、アクリル酸、メタクリル酸、メタクリルアミド、ビニルピロリジノン、スチレン、メチレンビスアクリルアミドおよびメタクリルブチルエステルからなる群から選択される一つ以上である、請求項１６に記載のモノリシックカラム。
【請求項１８】
前記ポロゲンがＣ２〜Ｃ１８の１級アルコール、塩化メチレン、またはクロロホルムである、請求項１６に記載のモノリシックカラム。
【請求項１９】
前記ラジカル開始剤がＡＩＢＮ（２，２’−アゾビスイソブチロニトリル）、Ｋ２Ｓ２Ｏ８、過硫酸アンモニウム、または過酸化ベンゾイルである、請求項１６に記載のモノリシックカラム。
【請求項２０】
Ｃ３〜Ｃ２０の置換または非置換のアルケニル基を有するシランのアセトン溶液を毛細管の内部に１０ないし３０分間流し、
前記毛細管の両端を密閉して前記毛細管を１０ないし３０時間放置し、
前記毛細管の内部をアセトンと水とで洗浄し、
ラジカル開始剤、Ｃ３〜Ｃ２０の置換もしくは非置換のアルケニル基を有する単量体、および請求項１に記載の化学式１の化合物でＲ１がアリルオキシ基であるアリルオキシククルビツリルを、水または水とアセトンとの混合溶媒に溶解させ、反応溶液を前記毛細管に加え、
前記毛細管の両端を密閉して前記毛細管を常温で１０ないし３０時間放置して共重合させ、そして
前記毛細管を洗浄する、
を含む工程によって得られたモノリシックカラム。
【請求項２１】
前記単量体がアクリルアミド、アクリル酸、メタクリル酸、メタクリルアミド、ビニルピロリジノン、スチレン、メチレンビスアクリルアミドおよびメタアクリルブチルエステルからなる群から選択される一つ以上である、請求項２０に記載のモノリシックカラム。
【請求項２２】
前記ラジカル開始剤がＡＩＢＮ、Ｋ２Ｓ２Ｏ８、過硫酸アンモニウム、または過酸化ベンゾイルである、請求項２０に記載のモノリシックカラム。
【請求項２３】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載の高分子を用いたカラムクロマトグラフィ用固定相。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本発明は、ククルビツリルを含む高分子、これを利用した固定相およびカラムに係り、さらに具体的には、ククルビツリルが結合した高分子、ククルビツリル誘導体を含む共重合体、前記高分子または高分子を用いた、物質の分離および除去に使用できる固定相ならびにカラムに関する。
【背景技術】
【０００２】
背景技術
一般的に、カラム充填剤は、多種の試験試料の分離および精製において固定相として利用される物質をいう。多種の化合物をシリカゲルに結合させた、さまざまなカラム充填剤が固定相として開発されてきた。シリカゲルに結合した代表的な物質としては、クラウンエーテル（韓国特許第０２６３８７２号明細書）およびシクロデキストリン（米国特許第４，５３９，３９９号明細書）が公知である。クラウンエーテルまたはシクロデキストリンに結合したシリカゲルは、さまざまな有機化合物またはイオン性化合物との選択的な非共有相互作用によって、固定相として多様な試験試料の分離に利用されている。
【０００３】
シクロデキストリンと同様に、ククルビツリルは、親水性および疎水性のキャビティの存在によって、多様な化合物に対して捕集能力を有していることが知られている。しかし、シクロデキストリンとは異なって、ククルビツリルはキャビティ入口にカルボニル基があるため、電荷−極性相互作用、極性−極性相互作用または水素結合によって、多様なイオン性化合物および極性の大きい化合物を捕集できる。従って、ククルビツリルは、例えば、気体化合物、脂肪族化合物、および芳香族化合物のような有機化合物、殺虫剤、除草剤、アミノ酸、核酸、イオン性化合物、金属イオン、または有機金属イオンのような多種の化合物に対して捕集能力を有する（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２００１，１２３，１１３１６、欧州特許第１０９４０６５号明細書、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９８６，５１，１４４０）。しかし、ククルビツリルを溶解させる溶媒がほとんどなく、ククルビツリルに置換基がないために、シリカゲルまたは高分子のような固体への共有結合など、その用途がきわめて制限的であった。
【０００４】
シクロデキストリンを含む高分子を固定相として使用した例が報告されている（米国特許第５，４０３，８９８号明細書）。かかるシクロデキストリンを含む高分子を利用した固定相は、多種の水溶性の化合物を逆相カラムクロマトグラフィによる分離に用いられうる（米国特許第５，５１６，７６６号明細書）。しかし、前述のように、シクロデキストリンは、ククルビツリルに比べて多種の生化学的物質またはイオンに対する非共有結合能力が弱いので、その用途が制限的である。
【０００５】
最近、より効率的な高速の分離性能によって、モノリシックカラムが注目を集めている（米国特許第６，３９８，９６２号明細書）。しかし、最近まで、ククルビツリル誘導体が報告されておらず、したがってククルビツリルを利用したモノリシックカラムの調製についての研究はなかった。
【発明の開示】
【０００６】
発明の開示
技術的課題
国際特許出願ＰＣＴ／ＤＥ０２／０１９８０号には、ククルビツリルとシリカゲルとを溶媒に加えてその後熱処理をすることによって調製された、物理的にククルビツリルをコーティングさせたシリカゲルを開示する。しかし、物理的なコーティングは共有結合ではないので、再現性ならびに物理的および化学的安定性に限界がある。国際特許出願ＰＣＴ／ＫＲ０２／０２２１３号には、ヒドロキシククルビツリルの調製方法が開示されており、その方法によって前述のククルビツリルの短所の克服が可能である。しかし、現在まで、ククルビツリル誘導体と共有結合した高分子を含む逆相カラムでの多種の水溶性物質の分離に関する報告はない。
【０００７】
技術的解決
本発明は、ククルビツリルと共有結合した高分子を提供する。
【０００８】
本発明はまた、ククルビツリルと有機単量体との共重合体を提供する。
【０００９】
本発明はまた、ククルビツリルを含む高分子でそれぞれコーティングされた、シリカゲル、アルミナおよび酸化チタンを提供する。
【００１０】
本発明はまた、毛細管またはカラム管の中でククルビツリル誘導体と単量体との共重合によって調製されたモノリシックカラムを提供する。
【００１１】
本発明はまた、ククルビツリルと共有結合した高分子、ククルビツリルを含む共重合体、ククルビツリルと有機単量体との共重合体、ならびに前記高分子または前記共重合体とそれぞれ結合したシリカゲル、アルミナ、および酸化チタンから選択される１つを用いる、物質の分離のためのカラム用固定相を提供する。
【００１２】
本発明の一実施形態によれば、下記化学式１のククルビツリル誘導体が末端置換基を有する粒子型高分子に共有結合した高分子が提供される：
【００１３】
【化１】
2007500763.tif 000002
【００１４】
式中、ｎは４ないし２０の整数であり、Ｒ１は、それぞれ独立して末端が不飽和結合であるＣ２〜Ｃ２０の置換もしくは非置換のアルケニルオキシ基、Ｃ２〜Ｃ２０の置換もしくは非置換のアルキル部分を有するカルボキシアルキルスルファニルオキシ基、Ｃ２〜Ｃ８の置換もしくは非置換のアルキル部分を有するカルボキシアルキルオキシ基、Ｃ１〜Ｃ８の置換もしくは非置換のアルキル部分を有するアミノアルキルオキシ基、Ｃ１〜Ｃ８の置換もしくは非置換のアルキル基を有するヒドロキシアルキルオキシ基、またはＣ２〜Ｃ８の置換もしくは非置換のアルキル部分を有するエポキシアルキルオキシ基である。
【００１５】
本発明で、前記粒子型高分子は、前記化学式１のククルビツリル誘導体を含む高分子の調製に使われた高分子であり、多様な置換基を末端に有しうる。前記粒子型高分子は、カラム充填剤として使われる高分子であり、特に、末端にハロゲン原子、置換または非置換のアミノ基、エポキシ基、カルボキシル基、チオール、イソシアネート、およびチオイソシアネートのような官能基を有する。前記粒子型高分子の例としては、塩素を含むＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ  ｐｏｌｙｍｅｒ、またはクロロ基を有するＸＡＤ  ｐｏｌｙｍｅｒがある。
【００１６】
カラム充填剤として使用するときに、均質な結果を得るために、粒子型高分子は、好ましくは、５ないし３００μｍの平均粒径を有する。かような粒子型高分子は、前記化学式１のククルビツリル誘導体と、多様な有機反応を介して共有結合で連結される。かような共有結合としては、エーテル結合、スルファニル結合、アミノ結合、エステル結合、アミド結合、チオアミド結合、またはウレア結合などを例として挙げることができ、かような結合形成については、以下でさらに詳細に説明する。
【００１７】
化学式１のククルビツリル誘導体が末端に官能基を有する粒子型高分子に共有結合した、ククルビツリルが結合した高分子は、下記化学式２の化合物でありうる：
【００１８】
【化２】
2007500763.tif 000003
【００１９】
式中、Ｐは、高分子残基であって表面にハロゲン基を有している高分子粒子から得られる。前記化学式２の化合物は、前記化学式１のククルビツリルと高分子粒子との間のエーテル結合の形成によって得られうる。
【００２０】
具体的には、前記化学式２の化合物は、前記化学式１で、Ｒ１が２−ヒドロキシエチルオキシ基であるククルビツリル誘導体を、反応溶媒中で一日放置した高分子粒子と、塩基存在下で６０℃以上で２０時間以上撹拌した後、水とアセトンとで洗浄することによって調製されうる。ここで、前記高分子粒子は、塩素、ヨウ素、および臭素などのようなハロゲン原子を表面に有している高分子であり、例えば、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ  ｐｏｌｙｍｅｒでありうる。前記塩基は、炭酸カリウム、塩化カリウム、塩化ナトリウム、炭酸ナトリウム、およびピリジンのような多種の塩基から選択されうる。前記反応溶媒は、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミドまたは水でありうる。
【００２１】
前記化学式１のククルビツリル誘導体が粒子型高分子と共有結合した、ククルビツリルが結合した高分子はまた、下記化学式３の化合物でありうる。
【００２２】
【化３】
2007500763.tif 000004
【００２３】
前記化学式３の化合物は、前記化学式１のククルビツリル誘導体と、末端置換基を有する粒子型高分子Ｐとの間のスルファニル結合の形成によって得られ、具体的には、チオール基を有する高分子Ｐと、化学式１で、Ｒ１がアリルオキシ基であるククルビツリル誘導体と間のラジカル反応によって得られる。このとき、ラジカル反応は紫外線を照射するか、またはＡＩＢＮ（２，２’−アゾビスイソブチロニトリル）のようなラジカル開始剤によって行われる。前記ラジカル反応に用いられうる溶媒は、メタノール、クロロホルムまたはアセトニトリルのような有機溶媒である。
【００２４】
前記化学式１のククルビツリル誘導体が粒子型高分子と共有結合した、ククルビツリルが結合した高分子はまた、下記化学式４の化合物でありうる：
【００２５】
【化４】
2007500763.tif 000005
【００２６】
前記化学式４の化合物は、前記化学式１のククルビツリル誘導体と高分子との間のアミノ結合の形成によって得られ、具体的には、置換もしくは非置換のアミノ基を末端に有する高分子Ｐと、化学式１でＲ１がＣ２〜Ｃ８のエポキシ基であるククルビツリル誘導体との間の反応によって得られうる。ここで、前記反応は、トリエチルアミンまたはピリジンなどの塩基の存在下で、または塩基を使用せずに、５０℃以上の高温で行われうる。
【００２７】
前記アミノ結合の形成に用いられうる溶媒は、ジメチルホルムアミドまたはジメチルスルホキシドなどの有機溶媒である。反応が完了した後、前記化学式４の化合物を１Ｍ塩酸水溶液で処理して、前記化学式４の化合物の残ったエポキシ基を加水分解させ、他の粒子型高分子と前記化学式４の化合物のククルビツリル誘導体とのアミノ結合が形成される。
【００２８】
本発明の他の実施形態によれば、化学式１のククルビツリル誘導体と単量体との間の共重合によって得られる、下記化学式５または下記化学式６の高分子が提供される。
【００２９】
【化５】
2007500763.tif 000006
【００３０】
式中、ｎおよびｍはそれぞれ単量体単位であり、ｎは１００ないし１０，０００の整数であり、ｍは１０ないし５，０００の整数であり、Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立してＣ６〜Ｃ３０の置換もしくは非置換のアリール基、カルボキシル基、Ｃ４〜Ｃ３０の置換もしくは非置換のヘテロ環基、Ｃ１〜Ｃ２０の置換もしくは非置換のアルキル基、ハロゲン原子、シアノ基、アミノ基、Ｃ１〜Ｃ１０の置換もしくは非置換のアミノアルキル基、ヒドロキシル基、Ｃ１〜Ｃ１０の置換もしくは非置換のヒドロキシアルキル基、Ｃ３〜Ｃ１０の置換もしくは非置換のアルケニル基、または水素である。
【００３１】
前記化学式５の化合物で用いられる前記化学式１のククルビツリル誘導体は、ｍが４ないし２０である。前記化学式５の化合物で、Ｒ１が水素であり、Ｒ２がフェニル、カルボキシル、アミド、メチルエステル、またはピロリジノンである、および、Ｒ１がメチルであり、Ｒ２はカルボキシルまたはアミドであることが望ましい。
【００３２】
前記化学式５の化合物は、前記化学式１で、Ｒ１がアリルオキシ基であるククルビツリル誘導体と、前記化学式５の単量体（Ｒ１Ｒ２Ｃ＝ＣＨ２；Ｒ１およびＲ２は、前記定義したところと同一）との共重合によって調製されうる。ここで、前記単量体は、前述のような置換基を有するアルケニドであり、例えば、スチレン、アクリル酸、メタクリル酸、ビニルピロリジノン、アクリル酸メチルエステル、ジビニルベンゼン、またはアクリルアミドである。前記化学式５の化合物は、アリルオキシククルビツリル１モルと前記単量体を５ないし５０モルとを、適切な溶媒中でラジカル開始剤の存在下で、１０ないし５０時間撹拌して調製されうる。
【００３３】
前記溶媒は水または有機溶媒でありうる。有機溶媒を使用する場合、アセトニトリルとトルエンとの１００：０ないし１，０００の混合物を使用でき、有機溶媒の組成は、用途によって粒径を考慮して決定されうる。
【００３４】
前記化学式５の化合物を調製するために用いられるラジカル開始剤は、多種のラジカル開始剤から選択でき、望ましくは、ＡＩＢＮ、Ｋ２Ｓ２Ｏ８、（ＮＨ４）２Ｓ２Ｏ８、または過酸化ベンゾイルを使用できる。前記共重合は、６０ないし８０℃の高温で、窒素またはアルゴン雰囲気下で行われうる。
【００３５】
前記化学式５の化合物を調製するための共重合には、例えば、ラジカル反応、グラッブス触媒反応、またはメタロセン反応などの一般的な二重結合の共重合を制限なく使用できる。
【００３６】
【化６】
2007500763.tif 000007
【００３７】
式中、ＡはＮＨまたはＯであり、ｎは１ないし８の整数であり、ａは１０ないし２，０００の整数であり、ｂおよびｃは単量体単位の数を表し、それぞれ独立して１００ないし１０，０００の整数である。
【００３８】
前記化学式６の高分子は、前記化学式１で、Ｒ１がＣ２〜Ｃ９のアルキル部分を有するアミノアルキルオキシ基またはＣ２〜Ｃ９のアルキル部分を有するヒドロキシアルキルオキシ基であるククルビツリル誘導体と、エピクロロヒドリンまたはエピブロモヒドリンとの間の共重合によって調製されうる。前記共重合は、ジメチルホルムアミド、ジメチルホルムスルホキシド、エタノール、および水のような溶媒中で行われうる。塩基は、ピリジン、トリエチルアミンまたは炭酸カリウムでありうる。塩基が存在しない場合、共重合は３０ないし６０℃で行われうる。
【００３９】
前記化学式５および化学式６の化合物に加えて、多様なククルビツリルを含む高分子が、多様なククルビツリル誘導体と多様な単量体との公知の共重合によって調製されうるということは、当業者ならば理解できるであろう。
【００４０】
本発明のさらに他の実施形態によれば、前記化学式５または化学式６の高分子でコーティングされたアルミナ、シリカゲルまたは酸化チタンが提供される。
【００４１】
用途によって選択された前記化学式５もしくは前記化学式６の高分子を溶媒に溶解し、シリカゲル、酸化チタンまたはアルミナを反応溶液に入れ、２０ないし４０時間密閉された状態で撹拌する。得られた溶液を遠心分離または濾過することによって高分子溶液を除去し、残っているシリカゲル、アルミナまたは酸化チタンを先に使用した溶媒で数回洗浄する。溶媒は、アセトニトリル、アセトン、水、およびジメチルスルホキシドから選択されうる。
【００４２】
本発明のさらに他の実施形態によれば、前記化学式５の高分子が酸化チタン、アルミナまたはシリカゲルに共有結合した、下記化学式７の化合物が提供される：
【００４３】
【化７】
2007500763.tif 000008
【００４４】
式中、ｎおよびｍは、それぞれ単量体単位の数であり、ｎは１００ないし１０，０００の整数であり、ｍは１０ないし５，０００の整数である。前記化学式１で、ｎが４ないし２０の整数であるククルビツリル誘導体が用いられた。前記化学式７で、Ｒ２は、それぞれ独立してＣ６〜Ｃ３０の置換もしくは非置換のアリール基、カルボキシル基、Ｃ４〜Ｃ３０の置換もしくは非置換のヘテロ環基、Ｃ１〜Ｃ２０の置換もしくは非置換のアルキル基、ハロゲン原子、シアノ基、アミノ基、Ｃ１〜Ｃ１０のアミノアルキル基、または水素であり、Ｘは、Ｓｉ、Ａｌ、またはＴｉであり、Ｚは、アミド、エステル、エーテル、ウレア、チオウレア、アミン、またはエーテルである。
【００４５】
前記化学式７で、ＸがＳｉであるシリカゲルの調製のためには、末端にアミン、イソシアネート、イソチオシアネート、チオール、ヒドロキシ、またはカルボン酸などの炭素数３ないし１０の官能基を有するシリカゲルと、前記化学式５で、Ｒ２がそれぞれカルボキシル基、炭素数２ないし１０のアミン、ヒドロキシル基、またはアルケニル基である高分子とが使用されうる。高分子およびシリカゲルは通常の共有結合によって適切に連結されうる。
【００４６】
例えば、ＸがＳｉである化学式７のシリカゲルは、アミノプロピル基を有するシリカゲルと、Ｒ１がカルボキシル基である化学式５のククルビツリルを含む高分子との間のアミド結合の形成によって調製されうる。
【００４７】
前記アミド結合の形成は、ジシクロヘキシルカルボジイミドまたは１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミドの存在下で、塩化メチレン、クロロホルム、ジメチルスルホキシドまたは水などの溶媒中で、２ないし２０時間撹拌して行われうる。前記化学式７のシリカゲルの上述の調製方法は、アルミナの調製に適用されうる。すなわち、前記化学式７でＸがＡｌであるアルミナは、アミノプロピル基を有するアルミナと前記化学式５のククルビツリルを含む高分子との間のアミド結合の形成によって調製されうる。かような方法で、前記化学式７でＸがＴｉである酸化チタンも調製可能である。また、上述の方法は、ククルビツリルの誘導体またはククルビツリルを含む高分子と共有結合したガラスウール、ろ紙、またはセルロースのような多様なフィルタ材料の調製に応用できる。
【００４８】
本発明のさらに他の実施形態によれば、前記化学式５または前記化学式６の高分子を含むモノリシックカラムとその製造方法とが提供される。
【００４９】
本発明によれば、高分子のみを含むモノリシックカラムは、以下のように調製されうる：はじめに、Ｃ３〜Ｃ２０の置換または非置換のアルケニル基を有する単量体と、前記化学式１でＲ１がアリルオキシ基であるアリルオキシククルビツリルとを溶媒に溶解させる。次いで、この溶液に、高分子の孔径を決定するポロゲンを入れる。続いて、反応物質の全重量に対して０．２〜５重量％のラジカル開始剤を加える。一端を密閉した直径４ないし１２ｍｍ、長さ３０ないし１００ｍｍのステンレス鋼のカラム管に反応溶液を入れ、ステンレス鋼のカラム管の他端を密閉し、その後反応溶液を６０ないし８０℃で１５ないし３０時間撹拌する。反応終了後、ステンレス鋼のカラム管をイソプロパノール、メタノール、または水のような溶媒で、０．１〜１０ｍＬ／分の速度で流して洗浄し、本発明のモノリシックカラムが完成する。ここで用いられる単量体は、Ｃ３〜Ｃ２０の置換または非置換のアルケニル基を有する化合物であり、望ましくは、アクリルアミド、アクリル酸、メタクリル酸、メタクリルアミド、ビニルピロリジノン、スチレン、メチレンビスアクリルアミド、およびメタクリルブチルエステルから選択される１以上である。溶媒は、ジメチルスルホキシドまたはジメチルホルムアミドでありうる。ポロゲンは、Ｃ２〜Ｃ１８の１級アルコール、塩化メチレン、またはクロロホルムであり、ラジカル開始剤は、ＡＩＢＮ、Ｋ２Ｓ２Ｏ８、過硫酸アンモニウム、または過酸化ベンゾイルでありうる。
【００５０】
本発明によるモノリシックカラムは、以下のようにも調製されうる：Ｃ３〜Ｃ２０のアルケニル基を有するシランのアセトン溶液を毛細管の内部に１０ないし３０分間流し、前記毛細管の両端を密閉する。１０ないし３０時間放置した後、前記毛細管の内部をアセトンと水とで洗浄する。ラジカル開始剤、アルケニル基を有する単量体、および前記化学式１でＲ１がアリルオキシ基であるアリルオキシククルビツリルを、水または水とアセトンとの混合溶媒に溶解させ、前記毛細管に加える。前記毛細管の両端を密閉して常温で１０ないし３０時間で重合させる。次に、水、メタノール、またはアセトニトリルなどの溶媒で前記毛細管を洗浄し、モノリシックカラムを完成させる。
【００５１】
本発明のさらに他の実施形態によれば、前記化学式２ないし６の高分子から選択される高分子を用いたカラムクロマトグラフィ用固定相が提供される。
【００５２】
前記化学式２ないし６で示したように、ククルビツリルを含む高分子は、ククルビツリル誘導体の、多様な置換基を有する高分子粒子との共有結合によって、またはククルビツリル誘導体と多種の単量体との間の共重合によって調製されうる。このように調製されたククルビツリルを含む高分子を、シリカゲル、アルミナ、もしくは酸化チタンにコーティングするか、または共有結合させることができる。
【００５３】
前記化学式２ないし６から選択されるククルビツリルを含む高分子、前記ククルビツリルを含む高分子が連結したシリカゲル、アルミナ、または酸化チタンをカラムクロマトグラフィ用カラム管に充填してカラムの固定相が調製される。前記ククルビツリルを含む高分子は、直接カラムクロマトグラフィ用固定相として用いられうる。前記ククルビツリルを含む高分子をコーティングさせるか、もしくは共有結合させたシリカゲル、アルミナ、または酸化チタンもまた、カラムクロマトグラフィ用固定相として用いられうる。このように調製されたカラムクロマトグラフィ用固定相は、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ：Ｈｉｇｈ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）、ガスクロマトグラフィ（ＧＣ：Ｇａｓ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）、キャピラリー電気泳動（ＣＥ：Ｃａｐｉｌｌａｒｙ  Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ）、またはキャピラリー電気クロマトグラフィ（ＣＥＣ）のようなカラムクロマトグラフィのカラム充填剤として直接利用できる。したがって、かかるカラムクロマトグラフィは、アルカリ金属とその同位元素との分離；重金属の除去および分離；水質汚染物質および大気汚染物質の除去；蛋白質およびポリペプチドなどの生体物質の分離ならびに精製などに有用に使用可能である。
【００５４】
本明細書中で用いられる置換基は以下のように定義される。アルキル基は、直鎖または分岐のＣ１〜Ｃ２０のラジカルを意味し、望ましくは、Ｃ１〜Ｃ１２の直鎖または分岐のラジカルである。さらに望ましくは、アルキル基は、Ｃ１〜Ｃ６の低級アルキルである。かようなアルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ｉｓｏ−アミル、およびヘキシルが挙げられる。Ｃ１〜Ｃ３の低級アルキルラジカルがさらに望ましい。アルキル基上の１以上の水素原子、望ましくは、１ないし５個の水素原子は、ハロゲン原子、アミノ基、Ｃ１〜Ｃ１０のアルキルアミノ基、ニトロ基、ヒドロキシル基、カルボキシル基、シアノ基、Ｃ１〜Ｃ１０のアルコキシ基、Ｃ２〜Ｃ１０のアルケニル基、Ｃ４〜Ｃ３６のヘテロ環基、Ｃ６〜Ｃ３０のアリール基またはＣ４〜Ｃ３０のヘテロアリール基で置換されうる。
【００５５】
本明細書中で用いられるアリール基は、単独または組み合わせて用いられ、一つ以上の環を含むＣ６〜Ｃ３０の炭素環式芳香族系を意味する。前記環は、ペンダント基として互いに接するか、または縮合されうる。「アリール」という用語は、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダンおよびビフェニルのような芳香族ラジカルを含む。望ましくは、フェニルである。アリール基上の一つ以上の水素原子、望ましくは、１ないし５個の水素原子は、ハロゲン原子、アミノ基、ニトロ基、ヒドロキシル基、カルボキシル基、シアノ基、Ｃ１〜Ｃ１０のアルキルアミノ基、Ｃ１〜Ｃ１０のアルキル基、Ｃ１〜Ｃ１０のハロアルキル基、Ｃ１〜Ｃ１０のアルコキシ基、またはＣ２〜Ｃ１０のアルケニル基で置換されうる。
【００５６】
本明細書中で用いられるヘテロ環基は、飽和、部分的飽和または不飽和の、窒素、硫黄、ケイ素、リンおよび酸素から選択されるヘテロ原子を含むＣ４〜Ｃ３０の環状ラジカルを意味する。飽和ヘテロ環ラジカルの例としては、１ないし４の窒素原子を含む飽和の３員環ないし６員環のヘテロ単環基（例えば、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピペラジノ、ピペラジニル）、１または２の酸素原子および１ないし３の窒素原子を含む飽和の３員環ないし６員環のヘテロ単環基（例えば、モルフォリニル）、ならびに１または２の硫黄原子および１ないし３の窒素原子を含む飽和の３員環ないし６員環のヘテロ単環基（例えば、チアゾリニリル）が挙げられる。部分飽和ヘテロ環ラジカルの例としては、ジヒドロチオフェン、ジヒドロピラン、ジヒドロフラン、およびジヒドロチアゾールが挙げられる。ヘテロアリール基としても称される不飽和ヘテロ環基の例としては、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、およびトリアゾリルのような１ないし４の窒素原子を含む不飽和の５員環または６員環のヘテロ単環基（例えば、４Ｈ−１，２，４−トリアゾリル、１Ｈ−１，２，３−トリアゾリル、２Ｈ−１，２，３−トリアゾリル）；インドリル、イソインドリル、インドリルジニル、ベンズイミダゾリル、キノリル、イソキノリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、およびテトラゾロピリダジニルのような１ないし５の窒素原子を含む不飽和の縮合ヘテロ環基（例えば、テトラゾロ［１，５−ｂ］ピリダジニル）；ピラニル、２−フリル、および３−フリルのような酸素を含む不飽和の３員環ないし６員環のヘテロ単環基；２−チエニル、３−チエニルのような硫黄原子を含む不飽和の５員環または６員環のヘテロ単環基；オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリルのような１または２の酸素原子および１ないし３の窒素原子を含む不飽和の５員環または６員環のヘテロ単環基（例えば、１，２，４−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、１，２，５−オキサジアゾリル）；１または２の酸素原子および１ないし３の窒素原子を含む不飽和縮合ヘテロ環基（例えば、ベンゾキサゾリル、ベンゾキサジアゾリル）；チアゾリル、およびチアジアゾリルのような１ないし２の硫黄原子および１ないし３の窒素原子を含む不飽和の５員環または６員環のヘテロ単環基（例えば、１，２，４−チアジアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、１，２，５−チアジアゾリル）；ならびに１または２の硫黄原子および１ないし３の窒素原子を含む不飽和縮合ヘテロ環基（例えば、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル）などを挙げることができる。前記へテロ環基は、アリールラジカルと縮合したヘテロ環ラジカルを含む。かような縮合した二環式ラジカルの例としては、ベンゾフラン、およびベンゾチオフェンなどを挙げることができる。前記ヘテロ環基は、低級アルキル、ハロゲン原子、ヒドロキシ、オキソ、アミノおよび低級アルキルアミノから選択される１ないし３の置換基を有することができる。望ましいヘテロ環ラジカルは、５員環ないし１０員環の縮合または非縮合ラジカルを含む。さらに望ましいヘテロアリール基の例としては、ベンゾフリル、２，３−ジヒドロベンゾフリル、ベンゾチエニル、インドリル、ジヒドロインドリル、クロマニル、ベンゾピラン、チオクロマニル、ベンゾチオピラン、ベンゾジオキソリル、ベンゾジオキサニル、ピリジル、チエニル、チアゾリル、オキサゾリル、フリル、およびピラジニルが挙げられる。さらに望ましいヘテロアリールラジカルは、硫黄、窒素および酸素から選択された一つ以上のヘテロ原子を含み、チエニル、フラニル、ピロリル、チアゾリル、オキサゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、ピリジル、ピペリジニルおよびピラジニルから選択された５員環または６員環のヘテロアリールである。
【００５７】
本明細書中で用いられるアルケニル基は、炭素−炭素二重結合を含有するＣ３〜Ｃ２０の直鎖または分岐の脂肪族炭化水素を意味する。望ましいアルケニル基は、２ないし１２個の炭素原子を有し、さらに望ましくは、２ないし６個の炭素原子を有する。分岐のアルケニル基は、一つ以上の低級アルキルまたは低級アルケニル基が付いた直鎖アルケニル基を意味する。かかるアルケニル基は、非置換であるか、または１以上のハロ、カルボキシ、ヒドロキシ、ホルミル、スルホ、スルフィノ、カルバモイル、アミノおよびイミノで置換されうるが、それらに制限されない。アルケニル基の例としては、エテニル、プロフェニル、カルボキシエテニル、カルボキシプロフェニル、スルフィノエテニルおよびスルフォノエテニルが挙げられる。
【００５８】
本発明に従って、当業者は、ククルビツリルを含む高分子の調製方法、前記高分子を利用したカラム充填剤の合成方法と、およびカラムクロマトグラフィ用固定相の調製方法とについて、多様な変化がなされうることを理解することができるであろう。
【００５９】
本発明による多様な高分子の合成方法とモノリシックカラムの製造法とを、さらに具体的に説明するために、本発明は以下に実施例を提供する。
【実施例】
【００６０】
実施例
実施例１：ククルビツリルがエーテル結合で連結された粒子型高分子の調製
Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ  ｐｏｌｙｍｅｒ粒子（１００ないし２００メッシュ、１ｍｍｏｌ／ｇ  Ｃｌ）１ｇ（１ｍｍｏｌ）を１２０ｍＬのジメチルスルホキシドに加え、２０時間撹拌した。前記化学式１でｎ＝６であり、Ｒ１が２−ヒドロキシエチルオキシ基である２−ヒドロキシエチルオキシククルビト［６］ウリル１７ｇ（１０ｍｍｏｌ）を入れた後、炭酸カリウム２７６ｍｇ（２ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で２０時間撹拌した。反応終了後、得られた溶液をジメチルスルホキシド、水、メタノール、アセトン、およびジエチルエーテルでそれぞれ二回ずつ洗浄し、１０５ｍｍｏｌ／ｇの前記化学式２で表されるククルビツリルがエーテル結合で連結された粒子型高分子を得た。
【００６１】
１３Ｃ−ＣＰ  ＭＡＳ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ）：δ  １５４．２、１４３．２、１３９．５、１３３．２、１２８．４、１２０．５、１１９．３、１１８．７、９８．５、６９．５、４３．２、４２．２，３９．６、２９．５．
元素分析：Ｃ  ８３．０３％、Ｎ  ３．３８％、Ｈ  ７．０１％。
【００６２】
実施例２：ククルビツリルとスチレンとが共重合された高分子の調製
前記化学式１でｎ＝６でありＲ１がアリルオキシ基であるアリルオキシククルビト［６］ウリル１７０ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）とスチレン１２０μｍとをアセトン５ｍＬと水５ｍＬとの混合溶媒に溶解させ、反応溶液にＫ２Ｓ２Ｏ８  ３ｍｇを加え、窒素雰囲気下で７５℃で２４時間撹拌した。反応が終了した後、得られた溶液を水、アセトン、メタノール、およびジエチルエーテルでそれぞれ三回ずつ洗浄し、前記化学式５でＲ１が水素であり、Ｒ２がフェニル基であるククルビツリルとスチレンとの共重合体２００ｍｍｏｌ／ｇを得た。
【００６３】
１３Ｃ−ＣＰ  ＭＡＳ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ）：δ  １５６．１、１４６．２、１４３．３、１４０．５、１３８．５、１３１．９、１２８．４、１２２．５、１１９．３、１１７．３、９７．４、７１．２、６８．５、４８．２、４２．２，３９．６、２９．５．
元素分析：Ｃ  ８２．０３％、Ｎ  ６．７１％、Ｈ  ８．７１％。
【００６４】
実施例３：ククルビツリルを含む高分子でコーティングされたシリカゲルの調製
前記実施例２で調製した、前記化学式５でＲ１が水素であり、Ｒ２はフェニル基であるククルビツリルとスチレンとの共重合体２００ｍｇを５ｍＬのジメチルスルホキシドに溶解し、シリカゲル１００ｍｇを反応混合物に加えた。反応混合物を入れた反応容器に窒素を充填させて密閉し、２４時間撹拌した。反応が終結した後、遠心分離によって溶媒および溶媒に溶解した高分子を除去した。シリカゲルをジメチルスルホキシド、水、メタノール、アセトン、およびエーテルでそれぞれ二回ずつ遠心分離器中で洗浄し、ククルビツリルを含む高分子でコーティングされたシリカゲルを得た。
【００６５】
実施例４：ククルビツリルを含む高分子が共有結合したシリカゲルの調製
前記化学式５でＲ１が水素であり、Ｒ２はカルボキシル基である、ククルビツリルとアクリル酸との共重合体１００ｍｇ（３．１５ｍｍｏｌ／ｇのカルボン酸、３１５ｍｍｏｌ）を、ジメチルスルホキシド１０ｍＬに溶解させた。アミノプロピル基を有するシリカゲル１００ｍｇ（１．３５ｍｍｏｌ／ｇのアミン基、１３５ｍｍｏｌ）、次いで１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド３９ｍｇ（２００ｍｍｏｌ）を反応混合物に加え、常温で２０時間撹拌した。反応が終わった後、得られた溶液をジメチルスルホキシド、水、メタノール、アセトン、およびジエチルエーテルでそれぞれ三回ずつ洗浄し、化学式７でＸがＳｉであるククルビツリルを含む高分子が共有結合したシリカゲル４５８ｍｍｏｌ／ｇを得た。
【００６６】
１３Ｃ−ＣＰ  ＭＡＳ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ）：δ  １８４．５、１５６．１、１３８．５、１２２．５、１１９．３、９７．４、７１．２、４２．２、２９．５．
元素分析：Ｃ  ３１．８３％、Ｎ  １６．４３％、Ｈ  ６．７１％。
【００６７】
実施例５：ククルビツリルを含む共重合体を有する毛細管モノリシックカラムの調製
直径が１００μｍであり、長さが５０ｃｍである毛細管の内部を０．２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液、０．２Ｍの塩酸水溶液、および蒸溜水をそれぞれ３０分間順次に流して洗浄した。次いで、３−（トリメトキシシリル）プロピルメタクリレートの３０体積％のアセトン溶液を毛細管に１５分間流した。前記毛細管の両端を密閉して、前記毛細管を常温で１５時間放置した。毛細管の内部をメタノールと水とで洗浄した。ピペラジンジアクリルアミド０．２ｍｇ（０．００１ｍｍｏｌ）、アクリルアミド７．１ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）、前記化学式１でｎ＝６であり、Ｒ１がアリルオキシ基であるアリルオキシククルビト［６］ウリル１７ｍｇ（０．０１ｍｍｏｌ）をｐＨ７の５０ｍＭのリン酸緩衝液３ｍＬに溶解させた後、窒素ガスで空気を除去し、１０μｍの１０％過硫酸アンモニウムと１０μｍの１０％テトラメチルエチレンジアミドとを加えた。反応溶液を毛細管の内部に充填して毛細管の両端を密閉し、常温で２０時間放置した。共重合が終結した後、蒸溜水を３０分間１５０ｂａｒの圧力で毛細管に流して洗浄し、ククルビツリルを含む共重合体を有する毛細管モノリシックカラムを得た。
【００６８】
実施例６：ククルビツリルを含む高分子を有するカラムの調製
シリカゲルがククルビツリルを含む高分子に共有結合した、前記化学式２のククルビツリルを含む高分子が結合したシリカゲル４００ｍｇをメタノール１０ｍＬに加えた。直径８ｍｍ、長さが４．５ｃｍのカラム管を１０分間高周波で処理し、カラム管の一端をガラスウールで封じた。上記で調製した反応溶液をカラム管に流して、ククルビツリルを含む高分子が連結したシリカゲルから選択される固定相で充填されたカラム管を形成した。固定相が充填されたカラム管をメタノール、アセトン、およびジエチルエーテルで数回洗浄して乾燥し、カラムクロマトグラフィ用カラムを得た。
【００６９】
産業上の利用可能性
ククルビツリルはホスト分子として、水溶液中で多種のゲスト分子と優秀な非共有結合能力を示す。したがって、かかるククルビツリルを含む高分子は、逆相カラムクロマトグラフィの固定相、またはその適用の幅が急速に広がっているモノリシックカラムとして用いられうる。本発明に従って調製された固定相は、現在入手できるククルビツリルが結合したシリカゲルに比べて、汚染物質、イオン性物質、生体物質、有機および無機物質、ならびに金属イオンのようなさまざまな水溶性物質の除去または分離により効果的に用いられうる。
【国際調査報告】
2007500763.tif 000016
2007500763.tif 000017