(57)【要約】  電離放射線被曝による損傷を処置または防止するための方法は、こうした処置を必要とする対象に、１）アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴを含む放射線損傷阻害ポリペプチド（チモシンβ４など）、ＬＫＫＴＥＴの保存的変異体、アクチン封鎖剤、抗炎症剤を含む化合物、２）対象における化合物の生成を刺激する薬剤、３）対象における化合物を調整する薬剤、または４）化合物のアンタゴニストを含む組成物の有効量を投与することによって、対象における放射線損傷を阻害するステップを含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
放射線被曝による損傷を処置または防止する方法であって、こうした処置を必要とする対象に、１）アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴを含む放射線損傷阻害ポリペプチド、ＬＫＫＴＥＴの保存的変異体、アクチン封鎖剤、抗炎症剤を含む化合物、２）前記対象における前記化合物の生成を刺激する薬剤、３）前記対象における前記化合物を調整する薬剤、または４）前記化合物のアンタゴニストを含む組成物の有効量を投与することによって、前記対象における放射線損傷を阻害するステップを含む、方法。
【請求項２】
前記化合物はアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴを含むポリペプチドまたはその保存的変異体を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ポリペプチドはアミノ酸配列ＫＬＫＫＴＥＴまたはＬＫＫＴＥＴＱ、チモシンβ４（Ｔβ４）、Ｔβ４のＮ末端変異体、Ｔβ４のＣ末端変異体、Ｔβ４のアイソフォーム、Ｔβ４のスプライシング変異体、酸化Ｔβ４、Ｔβ４スルホキシド、リンパ系Ｔβ４、またはペグ化Ｔβ４を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記化合物はチモシンベータ４（Ｔβ４）である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記化合物はゲル、クリーム、ペースト、ローション剤、スプレー、軟膏剤、懸濁液、分散体、ヒドロゲル、または軟膏中に存在する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記化合物は注射、注入、肺送達によって、もしくは経口的に、直腸から、鼻から、経皮的に、またはその組合せによって前記対象に全身的に送達される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記薬剤は抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記アンタゴニストは前記化合物のアンチセンス形である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記対象に前記化合物を投与することによって前記対象における放射線感受性幹細胞を保護するステップを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記幹細胞は前記対象の血液、骨髄または胃腸管組織の中にある、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記組成物は全身的に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記組成物は局所的に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記組成物は腸から投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記放射線は電離放射線である、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記対象の目標領域に放射線を投与することによって前記目標領域における癌または組織異常を処置するステップをさらに含み、前記組成物は前記目標領域への前記放射線の投与の前、間もしくは後に、またはその組合せで前記対象に投与されることによって、前記目標領域の外側の前記対象における放射線損傷を阻害する、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記組成物は、前記目標領域の外側の前記対象の細胞のアポトーシスの誘導を防止する
、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記組成物は、前記対象への投与のために約０．００１−１０重量％の範囲内の濃度で配合物に含まれる、請求項３に記載の方法。
【請求項１８】
電離放射線被曝による損傷を処置または防止するための薬の製造において用いるための物質であって、１）放射線損傷阻害アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴ、ＬＫＫＴＥＴの保存的変異体、アクチン封鎖剤、抗炎症剤を含む化合物、２）前記対象における前記化合物の生成を刺激する薬剤、３）前記対象における前記化合物を調整する薬剤、または４）前記化合物のアンタゴニストを含み、前記対象における放射線損傷を阻害する、物質。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の背景
関連出願に対する相互参照
この出願は、２００３年７月１８日に提出された米国仮出願連続番号第６０／４８８，０９７号の利益を主張する。
【０００２】
１．発明の分野
この発明は、放射線による損傷の処置または防止の分野に関する。
【背景技術】
【０００３】
２．背景技術の説明
何十年もの間、多くの種類の癌および組織異常の処置のための理学療法としてしばしば電離放射線が用いられてきた。こうした放射線の送達の制御は改善されてきたが、それは体の多くの領域において正確に制御できないことから特定の望ましくない生物的副作用が与えられ、その副作用には健康な組織の破壊、放射線火傷および疾病、ならびに組織および細胞構成の崩壊、細胞骨格組織中の構造変化およびアクチンの構造組織の崩壊などのその他の類似の損傷、ならびに血液、血管、微小血管系、放射線治療に従属的な健康な組織および器官に対するさまざまな変性的、免疫学的およびその他の傷害が含まれる。特に、放射線処置を受ける癌患者およびその他の患者における治療の効力は現在、周囲の健康な組織に対する顕著な損傷によって制限されており、その損傷には炎症反応の増加、ならびに炎症性サイトカイン、ケモカイン、エイコサノイドおよび患者における電離放射線の有効用量を制限するような代謝産物を含む有害な中間生成物の放出が含まれる。
【０００４】
日光、ガンマ線、Ｘ線、核装置、核設備、核兵器、「汚い」爆弾、高電圧電流などを含むその他の供給源からの放射線は、被曝者の組織にときに深刻な損傷をもたらし得る。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
当該技術分野においては、放射線被曝によってもたらされる損傷を処置または防止するための改善された方法および組成物がなおも要求される。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
発明の概要
この発明に従うと、放射線被曝による損傷を処置または防止する方法は、こうした処置を必要とする対象に、１）アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴを含む放射線損傷阻害ポリペプチド、ＬＫＫＴＥＴの保存的変異体、アクチン封鎖剤、抗炎症剤を含む化合物、２）対象におけるその化合物の生成を刺激する薬剤、３）対象におけるその化合物を調整する薬剤、または４）その化合物のアンタゴニストを含む組成物を有効量投与することによって、対象における放射線損傷を阻害するステップを含む。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
発明の詳細な説明
実施の形態の１つに従うと、この発明は一般的に、ペプチドのチモシンベータ４（チモシンβ４もしくはＴβ４）、またはＬＫＫＴＥＴなどのＴβ４のフラグメント、またはその保存的変異体の使用による、電離放射線の被曝によってもたらされる物理的、認知的および生物的傷害の処置、防止または反転に関する。これらのペプチドはしばしばＬＫＫＴＥＴペプチドまたはポリペプチドと呼ばれる。ＫＬＫＫＴＥＴおよびＬＫＫＴＥＴＱなど
のＮまたはＣ末端変異体が含まれる。
【０００８】
すべての癌患者の５０％より多くが腫瘍の大きさを減少させるために放射線治療を受ける。放射線療法の効力は、放射線の有害な副作用および通常の組織構成の崩壊、ならびに周囲組織に対する炎症、変性および免疫効果のために用量制限的であり、これはｘ線もしくはガンマ線の直接的な効果、または腫瘍からの有害量の組織および細胞破片の放出によってもたらされる副作用によるものである。腫瘍の全タンパク質の最高１０％がアクチンであり、腫瘍組織の破壊に続いてＧアクチンが血中に放出されるときにこのタンパク質の５０％が単量体の形で封鎖されるため、血液の物理化学的性質によって、Ｇアクチンのこの分子の原繊維形であるＦアクチンへの重合が誘導される。このＦアクチンの氾濫が血液のアクチンを封鎖する性質を圧倒し、深刻な病状をもたらし得る。Ｆアクチンのみを実験動物に投与してもかなりの毒性を有し、多臓器不全ＡＲＤＳおよび敗血症性ショックに関連する他の症候群における役割を有すると考えられる。骨髄の幹細胞、脾臓およびリンパ節などのリンパ組織、ならびに腸の内皮細胞などのいくつかの組織は、電離放射線の悪影響に高度に感受性であることが長く知られている。これらの組織に対する悪影響は、副腎皮質ステロイドの放出またはさまざまなその他の付加的なホルモンおよび成長因子による直接的または間接的な影響によるものとされてきた。加えて、放射線の直接的または間接的な影響によるアクチンの構造解体が、観察される毒性に顕著に寄与していると考えられる。炎症性サイトカインおよびケモカインを含む成長因子のいくつか、ならびにエイコサノイドなどのその他の薬剤が、副作用および現在の放射線療法の制限に顕著に寄与しているかもしれない。Ｔβ４、類似体およびアイソフォームおよびその他の誘導体は、全身的、局部的または局所的に投与されるときには、それらの特異な性質によって、放射線療法の有毒な副作用を減少させる効果を有する。さらに、Ｔβ４の特異な性質は放射線保護効果を含み、よって放射線治療の有効用量を増加させることができる。この発明はまた、日光、ｘ線、ガンマ線、核装置、核設備、核兵器、「汚い」爆弾、高電圧電流およびその他の放射線源を含む他の供給源からの放射線による損傷の処置または防止にも適用可能である。
【０００９】
いかなる特定の理論にも束縛されることなく、この発明は、抗炎症性ペプチドおよびＴβ４などのアクチン封鎖ペプチド、ならびにアクチン結合モチーフおよびアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴを含むいくつかのその他のアクチン封鎖ペプチドが、電離放射線に対する被曝によって起こる特定の生物的プロセスの処置または防止に有用であり、電離放射線被曝による損傷の処置または防止を促進するという発見に基づいていると考えられる。これらのペプチドが修復および治癒を促進する能力を有するのは、末端デオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼ（鋳型によらない（ｎｏｎ−ｔｅｍｐｌａｔｅ  ｄｉｒｅｃｔｅｄ）ＤＮＡポリメラーゼ）を誘導できることにより、１つまたはそれ以上の炎症性サイトカインおよびケモカインのレベルを減少させ、また内皮細胞に対する走化性および脈管形成因子として作用して、特定のｘ線、ガンマ線またはその他の形の電離放射線に対する被曝、および（ｉ）癌患者、（ii）皮膚疾患に対する放射線または光線治療を受けている患者、または（iii）急性線量または致死量の電離放射線に被曝した個体の放射線療法を含むいくつかの因子によって起こる影響を防止および／または治癒および反転するためである。Ｔβ４は「救助分子」として作用し、アクチンの永続的な重合を防ぎ、放射線に被曝した細胞におけるアクチンの機能を保存し、通常細胞が分裂する能力を保護し得る。Ｔβ４はアポトーシスを誘導する酵素の誘導を阻害することによって、放射線によってもたらされ得る通常細胞のアポトーシスの誘導を阻害し得る。Ｔβ４はまた、組織の生存の改善にかかわる転写因子の調節によって組織に対する損傷を防ぎ得る。Ｔβ４は、細胞の生存に必須であるＬＩＭドメインタンパク質ＰＩＮＣＨおよびインテグリン結合キナーゼ（ＩＬＫ）と機能性の三元複合体を形成する。Ｔβ４にさらされることにより、ＩＬＫの誘導、局在性の変化および活性化がもたらされる。細胞中でのＴβ４−ＰＩＮＣＨ−ＩＬＫ複合体の形成は、アクチン重合とは独立にＴβ４の保護および／または修復効果を媒介し得る。加
えて、Ｔβ４は組織を保護するかまたはその修復を促進し得る細胞中のラミニン−５の生産を刺激する。
【００１０】
Ｔβ４は初め、インビトロにおける内皮細胞の移動および分化の際にアップレギュレートされるタンパク質として確認された。Ｔβ４は元々胸腺から単離された、さまざまな組織において確認される４３アミノ酸、４．９ｋＤａの遍在するポリペプチドである。内皮細胞の分化および移動、Ｔ細胞の分化、アクチン封鎖ならびに血管新生における役割を含むいくつかの役割がこのタンパク質に帰されている。
【００１１】
実施の形態の１つに従うと、この発明は電離放射線被曝による損傷を処置または防止する方法であって、こうした処置を必要とする対象に、ＬＫＫＴＥＴを含む放射線損傷阻害ポリペプチド、または放射線損傷阻害活性を有するその保存的変異体、好ましくはＴβ４、Ｔβ４のアイソフォーム、酸化Ｔβ４、Ｔβ４スルホキシド、またはＴβ４のアンタゴニストを含む組成物の有効量を投与するステップを含む。投与は対象の放射線被曝の前、間または後であることにより、組織を保護して損傷を防ぎ、および／または組織を救いかつ修復できる。
【００１２】
この発明に従って用いられてもよい好ましい組成物は、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴ、アミノ酸配列ＫＬＫＫＴＥＴまたはＬＫＫＴＥＴＱ、Ｔβ４、Ｔβ４のＮ末端変異体、Ｔβ４のＣ末端変異体、Ｔβ４のアイソフォーム、Ｔβ４のスプライシング変異体、酸化Ｔβ４、Ｔβ４スルホキシド、リンパ系Ｔβ４、ペグ化（ｐｅｇｙｌａｔｅｄ）Ｔβ４、またはアクチン結合ドメインを有するあらゆるその他のアクチンを封鎖もしくは束ねるたんぱく質、または放射線損傷阻害活性を有する、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴもしくはその保存的変異体を含むかもしくは本質的にそれからなるペプチドフラグメントを含む。ここに引用により援用される国際出願連続番号第ＰＣＴ／ＵＳ９９／１７２８２号は、この発明に従って有用であり得るＴβ４のアイソフォームならびにアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴおよびその保存的変異体を開示しており、これらはこの発明とともに利用されてもよい。ここに引用により援用される国際出願連続番号第ＰＣＴ／ＧＢ９９／００８３３（ＷＯ９９／４９８８３）号は、この発明に従って利用され得る酸化Ｔβ４を開示する。この発明は以後主にＴβ４およびＴβ４アイソフォームに関して記載されるが、以下の記載は放射線損傷阻害活性を有するアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴ、ＫＬＫＫＴＥＴ、ＬＫＫＴＥＴＱ、およびＬＫＫＴＥＴ、ＫＬＫＫＴＥＴまたはＬＫＫＴＥＴＱを含むかもしくは本質的にそれからなるペプチドおよびフラグメント、その保存的変異体、ならびに酸化Ｔβ４およびＴβ４スルホキシドにも同等に適用可能であることが意図されることが理解される。
【００１３】
実施の形態の１つにおいて、この発明は、処置すべき領域をＴβ４またはＴβ４アイソフォームを含む放射線損傷阻害組成物の有効量と接触させることによって、対象における放射線損傷を治癒する方法を提供する。接触は局所的に、全身的に、腸から、肺送達などによって行なわれてもよい。局所的投与の例はたとえば、Ｔβ４を単独で、またはＴβ４の浸透を促進するかもしくは処置される領域へのＴβ４ペプチドの放出を遅延もしくは遅らせる少なくとも１つの薬剤と組合せて含む、ローション剤、軟膏剤、ゲル、クリーム、ペースト、スプレー、懸濁液、分散体、ヒドロゲル、軟膏または油を皮膚に接触させることを含む。全身的投与はたとえば、Ｔβ４またはＴβ４アイソフォームなどを含む組成物の静脈内、腹腔内、筋肉内もしくは皮下への注射、または吸入、経皮もしくは経口投与を含む。腸からの投与は経口または直腸投与を含んでもよい。対象は哺乳動物、好ましくはヒトであってもよい。
【００１４】
Ｔβ４またはその類似体、アイソフォームもしくは誘導体はあらゆる有効量で投与されてもよい。たとえば、Ｔβ４は約０．１−５０マイクログラムのＴβ４の範囲内の用量、より好ましくは約１−２５マイクログラムの量で投与されてもよい。
【００１５】
この発明に従う組成物は、毎日、１日おきなどに、投与日当り単一の投与または複数回の投与で、たとえば投与日当り２回、３回、４回またはより多くの回数の適用などで投与され得る。
【００１６】
Ｔβ４アイソフォームは確認されており、Ｔβ４の公知のアミノ酸配列に対して約７０％、または約７５％、または約８０％またはそれより高い相同性を有する。こうしたアイソフォームは、たとえばＴβ４ala、Ｔβ９、Ｔβ１０、Ｔβ１１、Ｔβ１２、Ｔβ１３、Ｔβ１４およびＴβ１５を含む。Ｔβ１０およびＴβ１５アイソフォームは、Ｔβ４と同様にアクチンを封鎖することが示されている。Ｔβ４、Ｔβ１０およびＴβ１５、ならびにこれらその他のアイソフォームは、アクチン封鎖または結合の媒介に関わると考えられるアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴを共有する。いかなる特定の理論に束縛されることも望むものではないが、Ｔβ４アイソフォームの活性は部分的には、アクチンの重合を調整する能力によるものと思われる。たとえば、Ｔβ４は皮膚におけるアクチン重合を調節できる（たとえばβチモシンは遊離Ｇアクチンを封鎖することによってＦアクチンを解重合させるようである）。したがってＴβ４がアクチン重合を調節する能力は、全面的または部分的に、ＬＫＫＴＥＴ配列を介してアクチンを結合または封鎖する能力に起因し得る。よって、Ｔβ４と同様に、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴを有するＴβ４アイソフォームを含む、アクチンを結合もしくは封鎖するかまたはアクチン重合を調節する他のタンパク質も、ここに示すように単独またはＴβ４との組合せで、放射線損傷を防止または低減すると考えられる。
【００１７】
よって、Ｔβ４ala、Ｔβ９、Ｔβ１０、Ｔβ１１、Ｔβ１２、Ｔβ１３、Ｔβ１４およびＴβ１５などの公知のＴβ４アイソフォーム、ならびにまだ確認されていないＴβ４アイソフォームがこの発明の方法において有用となることが特定的に予期される。このようにＴβ４アイソフォームは、対象において実行される方法を含むこの発明の方法において有用である。したがってこの発明はさらに、Ｔβ４、ならびにＴβ４アイソフォームのＴβ４ala、Ｔβ９、Ｔβ１０、Ｔβ１１、Ｔβ１２、Ｔβ１３、Ｔβ１４およびＴβ１５、ならびに医薬上許容可能な担体を含む医薬組成物を提供する。
【００１８】
加えて、適切な封鎖、結合、可動化もしくは重合アッセイによって示されるか、またはたとえばＬＫＫＴＥＴなどのアクチン結合を媒介するアミノ酸配列の存在によって確認されるような、アクチン封鎖もしくは結合能力を有するか、またはアクチンを可動化できるかもしくはアクチン重合を調節できる他のタンパク質も、この発明の方法において同様に用いられ得る。こうしたタンパク質はたとえばゲルゾリン、ビタミンＤ結合タンパク質（ＤＢＰ）、プロフィリン、コフィリン、アドセベルチン（ａｄｓｅｖｅｒｔｉｎ）、プロポミオシン、フィンシリン、デパクチン、ＤＮアーゼＩ、ビリン、フラグミン、セベリン、キャッピングタンパク質、βアクチニンおよびアクメンチンを含む。こうした方法は対象において実行されるものを含むため、この発明はさらに、ここに示されるようなゲルゾリン、ビタミンＤ結合タンパク質（ＤＢＰ）、プロフィリン、コフィリン、デパクチン、ＤＮアーゼＩ、ビリン、フラグミン、セベリン、キャッピングタンパク質、βアクチニンおよびアクメンチンを含む医薬組成物を提供する。よってこの発明は、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴ（主要アミノ酸配列内にあってもよい）およびその保存的変異体を含む放射線損傷阻害ポリペプチドの使用を含む。
【００１９】
ここで用いられる「保存的変異体」という用語またはその文法上の変形は、別の生物学上類似の残基によるアミノ酸残基の置換を示す。保存的変異体の例は、イソロイシン、バリン、ロイシンもしくはメチオニンなどの疎水性残基による別の残基の置換、極性残基による別の残基の置換、たとえばアルギニンによるリジンの置換、グルタミン酸によるアスパラギン酸の置換、またはグルタミンによるアスパラギンの置換などを含む。
【００２０】
Ｔβ４はいくつかの組織および細胞型に局在化されているため、Ｔβ４の生成を刺激する薬剤を加えるかまたは組成物に含ませることによって、組織および／または細胞からのＴβ４生成をもたらすことができる。こうした薬剤は、インシュリン様成長因子（ＩＧＦ−１）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）、ベータ型トランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ−β）、塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）、チモシンα１（Ｔα１）および血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）など、成長因子のファミリーのメンバーを含む。より好ましくは、その薬剤はベータ型トランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ−β）、またはＴＧＦ−βスーパーファミリーの他のメンバーである。この発明のＴβ４組成物は、細胞外基質堆積、細胞移動および血管新生を通じた結合組織の成長をもたらすことによって放射線の特定の影響を減少させ得る。
【００２１】
加えて、組成物にＴβ４またはＴβ４アイソフォームとともに他の薬剤が加えられてもよい。こうした薬剤は、脈管形成剤、成長因子、細胞の分化を指示する薬剤、細胞の移動を起こす薬剤、および組織中の細胞外基質材料の供給を刺激する薬剤を含む。たとえば、制限的でなく、Ｔβ４またはＴβ４アイソフォームが単独または組合されて、次の薬剤のいずれか１つまたはそれ以上と組合されて加えられてもよい。すなわち、有効量のＶＥＧＦ、ＫＧＦ、ＦＧＦ、ＰＤＧＦ、ＴＧＦβ、ＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２、ＩＬ−１、プロチモシンα、およびチモシンα１。
【００２２】
放射線損傷に関連する損傷を治癒する試薬、配合物または組成物実際の用量は、対象の大きさおよび健康状態を含む多くの要素に依存し得る。しかし、通常の当業者は、前述のＰＣＴ／ＵＳ９９／１７２８２およびそこに引用される参考文献に開示されるような、臨床的な用量を定めるための方法および技術を記載する教示を用いて、使用する適切な用量を定めることができる。
【００２３】
好適な配合物は、この発明の組成物を約０．００１−１０重量％の範囲内、より好ましくは約０．００５−０．１重量％の範囲内、最も好ましくは約０．０１−０．０５重量％の範囲内の濃度で含む。
【００２４】
ここに記載される治療上のアプローチは、Ｔβ４またはこの発明のその他の化合物を含む試薬または組成物の投与または送達のさまざまな経路を含み、それは対象に対するあらゆる従来の投与技術（たとえば、制限的ではないが、局所的投与、局部注射、吸入、全身的または腸からの投与など）を含む。Ｔβ４またはこの発明のその他の化合物を用いるかまたは含む方法および組成物は、医薬上許容可能な無毒の賦形剤またはキャリアとの混合によって医薬組成物に配合されてもよい。
【００２５】
この発明は、Ｔβ４ペプチドまたはその機能性フラグメントと相互作用する抗体の使用を含む。異なるエピトープ特性を有するプールされたモノクローナル抗体を含む抗体、および別個のモノクローナル抗体調製物が提供される。モノクローナル抗体は、前述のＰＣＴ／ＵＳ９９／１７２８２に開示されるような当業者に周知の方法によって、タンパク質のフラグメントを含む抗原から作られる。この発明において用いられる抗体という用語は、モノクローナルおよびポリクローナル抗体を含むことが意図される。
【００２６】
実施の形態の１つにおいて、この発明は電離放射線被曝による損傷を処置または防止する方法を提供し、この方法は、こうした処置を必要とする対象に、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴを含む放射線損傷阻害ポリペプチドまたは放射線損傷阻害活性を有するその保存的変異体を含む組成物の有効量を投与するステップを含む。
【００２７】
実施の形態の１つにおいて、この発明は、Ｔβ４またはＴβ４アイソフォームを含む組
成物の放射線損傷阻害量を組織に接触させることによって、対象における電離放射線被曝による損傷を処置または防止する方法を提供する。この接触は局所的に、腸から、または全身的に行なわれてもよい。局所的投与の例はたとえば、Ｔβ４を単独で、またはＴβ４浸透を促進するかもしくは処置される領域へのＴβ４ペプチドの放出を遅延もしくは遅らせる少なくとも１つの薬剤と組合せて含む、ローション剤、軟膏剤、ゲル、クリーム、ペースト、スプレー、懸濁液、分散体、ヒドロゲル、軟膏または油を、皮膚またはその他の組織に接触させることを含む。全身的投与はたとえば、Ｔβ４またはＴβ４アイソフォームなどを含む組成物の静脈内、腹腔内、筋肉内もしくは皮下への注射、または吸入（口もしくは鼻から）、経皮投与、座薬、浣腸、または経口投与を含む。対象は哺乳動物、好ましくはヒトであってもよい。
【００２８】
この発明は、Ｔβ４、Ｔβ４類似体、アイソフォーム、またはアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴを有するペプチドフラグメントおよびその保存的変異体を含む組成物の治療上有効な量の適用によって、Ｘ線、ガンマ線またはその他の形の電離放射線、および（ｉ）癌患者、（ii）皮膚またはその他の疾患に対する放射線または光線療法を受けている患者、または（iii）急性線量または致死量の電離放射線に被曝した個体の放射線療法によってもたらされる、体、体組織および器官ならびに／またはそれに関連する症状を防止および／または治癒および反転する方法を提供する。
【００２９】
この発明の方法は、治療のコースの間治療上有効な量の組成物を継続的または周期的にある部位に、または全身的に適用することによって電離放射線への被曝の影響を減少させるステップを含む。投与の継続時間は、単一の投与から対象の生涯にわたる投与にまで及び得る。投与の好ましいコースは約１−６ヶ月の範囲である。投与は周期的または継続的であり得る。投与のコースの間、この発明に従う組成物は１日当り１回、２回または３回またはより多くの回数投与されてもよく、また毎日、１日おき、３日ごとなどに投与され得る。
【００３０】
実施の形態の１つに従うと、対象の目標領域に放射線が投与され、目標領域への放射線投与の前、間および／または後にこの発明に従う組成物が投与されることによって、目標領域の外側の対象の領域における放射線損傷を阻害する。
【００３１】
この発明の方法は、ＬＫＫＴＥＴまたはＴβ４またはその変異体またはいくつかのその他のアクチン封鎖もしくは抗炎症化合物の生成を刺激する薬剤を含む組成物の利用を含む。
【００３２】
この方法の１つの局面において、治癒ポリペプチドは、ゲル、クリーム、ペースト、ローション剤、スプレー、懸濁液、分散体、軟膏剤、ヒドロゲル、または軟膏配合物中のＴβ４またはＴβ４のアイソフォームもしくは酸化形、またはＴβ４のスプライシング変異体である。
【００３３】
この発明の別の局面において、組成物は注射によって全身的に、経口的に、経鼻的に、経皮的に、またはあらゆるその他の手段で送達されてもよい。
【００３４】
組成物は天然由来であっても、または組換方法論、もしくは固相および液相合成などであるがこれに制限されないその他の合成手段を用いて生産されてもよい。
【００３５】
方法の１つは、対象における電離放射線または他の種類の放射線に対する被曝を処置することを含み、対象にアクチン封鎖ペプチドＬＫＫＴＥＴまたはＴβ４活性を調整する薬剤を含む組成物を投与するステップを含む。薬剤は抗体であってもよい。抗体はポリクローナルまたはモノクローナルであってもよい。
【００３６】
方法の１つは、放射線療法の毒性を改善することを含み、こうした放射線療法に被曝した対象をＴβ４活性を調整する薬剤で処置するステップを含む。
【００３７】
いくつかの実施の形態において、Ｔβ４調整薬剤はＴβ４ペプチドのアンチセンス形もしくは他の種類のアンタゴニスト、またはその他の好適な組成物である。
【００３８】
この発明は、炎症および／またはアクチン毒性を低減し、および／または脈管形成を刺激して、血液、骨髄、胃腸管および／または体の他の部分における放射能感受性幹細胞を保護する、Ｔβ４、またはＴβ４類似体、アイソフォーム、またはアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴおよびその他の保存的変異体を含むここに記載されるその他の分子の有効量を投与することによって、癌患者が受けることのできる放射線療法の量をかなり増加させ得る。
【手続補正書】
【提出日】平成18年3月23日(2006.3.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３８】
この発明は、炎症および／またはアクチン毒性を低減し、および／または脈管形成を刺激して、血液、骨髄、胃腸管および／または体の他の部分における放射能感受性幹細胞を保護する、Ｔβ４、またはＴβ４類似体、アイソフォーム、またはアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴおよびその他の保存的変異体を含むここに記載されるその他の分子の有効量を投与することによって、癌患者が受けることのできる放射線療法の量をかなり増加させ得る。
【実施例１】
実施例１
７００Ｒ全身照射に対する被曝後のＣＢＡマウスの生存およびリンパ系組織の保護に対するＴβ４含有調製物の影響。
リンパ系組織は体の最も放射線感受性の高い組織の１つである。この実験において、１６から２４匹のマウスのグループの各々は予め致死量の７００Ｒ全身放射に１０日間被曝し、ｘ線の被曝の２時間以内に皮下的にＴβ４含有調製物（１日当り４０−４００ｕｇ）または食塩水いずれかの処置を受けた。食塩水管理の場合では脾臓、リンパ節および胸腺における核破片および核濃縮を伴う顕著な細胞破壊があったのに対し、Ｔβ４を受けたグループではリンパ節および脾臓における細胞調製物のかなり良好な保存が見られた。加えて、特に興味深いことに、通常は致死量である放射線に被曝したＣＢＡマウスの寿命がかなり延び、唯一の明らかな副作用は体毛の白色化であることが観察された。この組織の保護に対する分子機構は、ＬＩＭドメインタンパク質ＰＩＮＣＨおよびインテグリン結合キナーゼ（ＩＮＫ）との機能性の三元複合体のアップレギュレーションおよびＡＫＴ生存キナーゼのアップレギュレーションを含み、これによってアポトーシスを誘導する酵素を阻害する。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
電離放射線被曝による損傷を処置または防止するための薬の製造において用いるための物質であって、１）放射線損傷阻害アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴ、ＬＫＫＴＥＴの保存的変異体、アクチン封鎖剤、抗炎症剤を含む化合物、２）前記対象における前記化合物の生成を刺激する薬剤、３）前記対象における前記化合物を調整する薬剤、または４）前記化合物のアンタゴニストを含み、前記対象における放射線損傷を阻害する、物質。
【請求項２】
前記化合物はアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴを含むポリペプチドまたはその保存的変異体を含む、請求項１に記載の物質。
【請求項３】
前記ポリペプチドはアミノ酸配列ＫＬＫＫＴＥＴまたはＬＫＫＴＥＴＱ、チモシンβ４（Ｔβ４）、Ｔβ４のＮ末端変異体、Ｔβ４のＣ末端変異体、Ｔβ４のアイソフォーム、Ｔβ４のスプライシング変異体、酸化Ｔβ４、Ｔβ４スルホキシド、リンパ系Ｔβ４、またはペグ化Ｔβ４を含む、請求項１に記載の物質。
【請求項４】
前記化合物はチモシンベータ４（Ｔβ４）である、請求項１に記載の物質。
【請求項５】
前記化合物はゲル、クリーム、ペースト、ローション剤、スプレー、軟膏剤、懸濁液、分散体、ヒドロゲル、または軟膏中に存在する、請求項１に記載の物質。
【請求項６】
前記化合物は注射、注入、肺送達によって、もしくは経口的に、直腸から、鼻から、経皮的に、またはその組合せによって前記対象に全身的に送達される、請求項１に記載の物質。
【請求項７】
前記薬剤は抗体である、請求項１に記載の物質。
【請求項８】
前記アンタゴニストは前記化合物のアンチセンス形である、請求項１に記載の物質。
【請求項９】
前記対象に前記化合物を投与することによって前記対象における放射線感受性幹細胞を保護することを含む、請求項１に記載の物質。
【請求項１０】
前記幹細胞は前記対象の血液、骨髄または胃腸管組織の中にある、請求項１に記載の物質。
【請求項１１】
前記組成物は全身的に投与される、請求項１に記載の物質。
【請求項１２】
前記組成物は局所的に投与される、請求項１に記載の物質。
【請求項１３】
前記組成物は腸から投与される、請求項１に記載の物質。
【請求項１４】
前記放射線は電離放射線である、請求項１に記載の物質。
【請求項１５】
前記対象の目標領域に放射線を投与することによって前記目標領域における癌または組織異常を処置することをさらに含み、前記組成物は前記目標領域への前記放射線の投与の前、間もしくは後に、またはその組合せで前記対象に投与されることによって、前記目標領域の外側の前記対象における放射線損傷を阻害する、請求項１に記載の物質。
【請求項１６】
前記組成物は、前記目標領域の外側の前記対象の細胞のアポトーシスの誘導を防止する、請求項１５に記載の物質。
【請求項１７】
前記組成物は、前記対象への投与のために約０．００１−１０重量％の範囲内の濃度で
配合物に含まれる、請求項３に記載の物質。
【国際調査報告】
2007523878.tif 000002
2007523878.tif 000003