(57)【要約】本発明は、新生物を治療するための組成物、方法、およびキットを特徴とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗不整脈剤、式（I）の化合物またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物：
2007500231.tif 000013
式中、XはCH2またはNであり；ZはCH2またはOであり；Arはフェニル、チエニル、ハロチエニル、ならびにそれぞれが独立して、ハロ、C1-C6直鎖または分岐アルキル、直鎖または分岐C1-C6アルコキシ、およびトリフルオロメチルからなる群より選択される置換基1〜3個を有する置換フェニルからなる群より選択され；かつYは以下の式を有する基である：
2007500231.tif 000014
式中、R1はヒドロキシル置換基0または1個を有するC1-C6直鎖または分岐アルキル、およびC1-C6直鎖または分岐アルカリールからなる群より選択され、R2は、H、直鎖または分岐C1-C6アルキル、およびC1-C6アルカリールからなる群より選択され、ここで該アリール基は、そのそれぞれが独立してハロ、C1-C6直鎖または分岐アルキル、直鎖または分岐C1-C6アルコキシ、およびトリフルオロメチルからなる群より選択される置換基0〜3個を有するフェニル環である。
【請求項２】
抗不整脈剤がアミオダロン、ジ-N-デスエチルアミオダロン、デスエチルアミオダロン、ベプリジル（bepridil）、またはニカルジピンである、請求項1記載の組成物。
【請求項３】
式（I）の化合物が、イトラコナゾール、ヒドロキシイトラコナゾール、ポサコナゾール（posaconazole）、またはサペルコナゾール（saperconazole）である、請求項1または2記載の組成物。
【請求項４】
請求項1〜3のいずれか一項に記載の薬学的組成物を患者に投与することを含む、該患者における新生物を治療する方法。
【請求項５】
新生物が、結腸癌、肺癌、非小細胞癌、卵巣癌、前立腺癌、および白血病からなる群より選択される、請求項4記載の方法。
【請求項６】
抗不整脈剤および式（I）の化合物またはその薬学的に許容される塩を患者に投与することを含む、該患者における新生物を治療する方法であって、該抗不整脈剤および該式（I）の化合物が、共に該新生物を治療するために有効である量で投与される方法：
2007500231.tif 000015
式中、XはCH2またはNであり；ZはCH2またはOであり；Arはフェニル、チエニル、ハロチエニル、ならびにそれぞれが独立して、ハロ、C1-C6直鎖または分岐アルキル、直鎖または分岐C1-C6アルコキシ、およびトリフルオロメチルからなる群より選択される置換基1〜3個を有する置換フェニルからなる群より選択され；かつYは以下の式を有する基である：
2007500231.tif 000016
式中、R1はヒドロキシル置換基0または1個を有するC1-C6直鎖または分岐アルキル、およびC1-C6直鎖または分岐アルカリールからなる群より選択され、R2は、H、直鎖または分岐C1-C6アルキル、およびC1-C6アルカリールからなる群より選択され、ここで該アリール基は、そのそれぞれが独立してハロ、C1-C6直鎖または分岐アルキル、直鎖または分岐C1-C6アルコキシ、およびトリフルオロメチルからなる群より選択される置換基0〜3個を有するフェニル環である。
【請求項７】
抗不整脈剤が、アミオダロン、ジ-N-デスエチルアミオダロン、デスエチルアミオダロン、ベプリジル、またはニカルジピンである、請求項6記載の方法。
【請求項８】
式（I）の化合物が、イトラコナゾール、ヒドロキシイトラコナゾール、ポサコナゾール、またはサペルコナゾールである、請求項6または7記載の方法。
【請求項９】
新生物が、結腸癌、肺癌、非小細胞癌、卵巣癌、前立腺癌、または白血病からなる群より選択される、請求項6〜8のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
抗不整脈剤および式（I）の化合物が互いに14日以内に投与される、請求項6〜9のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
抗不整脈剤および式（I）の化合物が互いに7日以内に投与される、請求項10記載の方法。
【請求項１２】
抗不整脈剤および式（I）の化合物が互いに5日以内に投与される、請求項11記載の方法。
【請求項１３】
抗不整脈剤および式（I）の化合物が互いに24時間以内に投与される、請求項12記載の方法。
【請求項１４】
抗不整脈剤および式（I）の化合物が互いに1時間以内に投与される、請求項13記載の方法。
【請求項１５】
抗不整脈剤および式（I）の化合物が同時投与される、請求項14記載の方法。
【請求項１６】
抗不整脈剤が0.1 mg〜10,000 mg/日の量で投与される、請求項6〜15のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
抗不整脈剤が0.1 mg〜1000 mg/日の量で投与される、請求項16記載の方法。
【請求項１８】
抗不整脈剤が0.1 mg〜100 mg/日の量で投与される、請求項17記載の方法。
【請求項１９】
式（I）の化合物が0.1 mg〜1000 mg/日の量で投与される、請求項6〜18のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
式（I）の化合物が0.1 mg〜100 mg/日の量で投与される、請求項19記載の方法。
【請求項２１】
式（I）の化合物が0.1 mg〜10 mg/日の量で投与される、請求項20記載の方法。
【請求項２２】
患者に、手術、放射線照射、化学療法、免疫療法、抗血管新生療法、および遺伝子治療からなる群より選択される一つまたはそれ以上のさらなる癌治療を投与する段階をさらに含む、請求項6〜21のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
以下を含むキット：
（i）抗不整脈剤および式（I）の化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む組成物；ならびに
（ii）新生物を有すると診断されたまたは新生物を発症するリスクを有する患者に該組成物を投与するための説明書。
【請求項２４】
以下を含むキット：
（i）抗不整脈剤；
（ii）式（I）の化合物、またはその薬学的に許容される塩；および
（iii）新生物を有すると診断されたまたは新生物を発症するリスクを有する患者に該抗不整脈剤および該式（I）の化合物を投与するための説明書。
【請求項２５】
以下を含むキット：
（i）抗不整脈剤；および
（ii）新生物を有すると診断されたまたは新生物を発症するリスクを有する患者に該抗不整脈剤および式（I）の化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与するための説明書。
【請求項２６】
以下を含むキット：
（i）式（I）の化合物またはその薬学的に許容される塩；および
（ii）新生物を有すると診断されたまたは新生物を発症するリスクを有する患者に該式（I）の化合物および抗不整脈剤を投与するための説明書。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
発明の背景
本発明は、癌のような新生物の治療に関する。
【０００２】
癌は、異常な細胞の制御されない増殖を特徴とする疾患である。癌細胞は、有限の寿命を有する正常細胞に対して課せられた障害を克服して、無限に増殖する。癌細胞の増殖が持続すると、癌様細胞がより攻撃的な増殖表現型を追求するように明白になるまで遺伝的変化が持続する可能性がある。無処置のまま放置すると、転移、すなわちリンパ系または血流によって体内の離れた領域への癌細胞の散布がその後に起こり、健康な組織を破壊する可能性がある。
【０００３】
最近の米国癌学会の研究により、2001年だけでも米国において新規癌症例約1,268,000例が診断されると予想された。肺癌は、男性および女性における最も一般的な癌関連死因であり、全ての癌関連死の28％より多くを占める。これは男性および女性における最も一般的に起こる癌の第二位であり；2001年では、米国において肺癌の新規症例は169,000例より多いと推定され、これは全ての新規癌診断の13％を占める。肺癌症例の発生率は、米国の男性では減少しつつあるが、女性では増加し続けている。米国癌学会によれば、2001年に推定でアメリカ人157,400人が肺癌のために死亡すると予想された。
【０００４】
肺において始まる癌は、顕微鏡下で細胞がどのように見えるかに応じて二つの主要なタイプ、すなわち肺の非小細胞癌および肺の小細胞癌に分けられる。肺の非小細胞癌（扁平上皮癌、腺癌、および大細胞癌）は一般的に、他の臓器への転移が肺の小細胞癌より遅い。肺の小細胞癌はあまり一般的でないタイプであり、全ての肺癌に占める割合は約20％である。
【０００５】
他の癌には、脳の癌、乳癌、子宮頚癌、結腸癌、胃癌、腎臓癌、白血病、肝臓癌、リンパ腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、直腸癌、肉腫、皮膚癌、精巣癌、および子宮癌が含まれる。これらの癌は、肺癌と同様に、時に化学療法によって治療される。
【０００６】
多数の化学療法剤を利用できるにもかかわらず、特定の癌に対する治療レジメが必要であるのみならず、より安全でより有効な化学療法レジメに対する全般的な要求がある。
【発明の開示】
【０００７】
発明の概要
本発明者らは、イトラコナゾールのような特定のトリアゾールが、アミオダロン、ニカルジピン、またはベプリジル（bepridil）のような抗不整脈剤の抗増殖活性を増強することを発見した。トリアゾールによる抗不整脈剤の抗増殖活性のこの増強は、細胞生存率アッセイにおいて、HCT116結腸腺癌細胞株、SKMEL-28ヒト黒色腫細胞、DU145ヒト前立腺細胞株、およびA549ヒト肺の非小細胞癌を用いて測定した。抗不整脈剤の構造的および機能的類似体は公知であり、本発明の方法において特定のトリアゾールと併用して用いることができる。
【０００８】
したがって、本発明は、以下の式（I）を有するトリアゾール、またはその薬学的に許容される塩と併用して抗不整脈剤を患者に投与することによって、新生物を有する、または新生物を発症するリスクを有する患者を治療する方法を特徴とする：
2007500231.tif 000002
式中、XはCH2またはNであり；ZはCH2またはOであり；Arはフェニル、チエニル、ハロチエニル、ならびにそれぞれ独立して、ハロ、C1-C6直鎖または分岐アルキル、直鎖または分岐C1-C6アルコキシ、およびトリフルオロメチルからなる群より選択される置換基1〜3個を有する置換フェニルからなる群より選択され；かつYは以下の式を有する基である：
2007500231.tif 000003
式中、R1はヒドロキシル置換基0または1個を有するC1-C6直鎖または分岐アルキル、およびC1-C6直鎖または分岐アルカリールからなる群より選択され、かつR2は、H、直鎖または分岐C1-C6アルキル、およびC1-C6アルカリールからなる群より選択され、ここで該アリール基は、そのそれぞれが独立してハロ、C1-C6直鎖または分岐アルキル、直鎖または分岐C1-C6アルコキシ、およびトリフルオロメチルからなる群より選択される置換基0〜3個を有するフェニル環である。式（I）の適したトリアゾールには、イトラコナゾール、ヒドロキシイトラコナゾール、ポサコナゾール（posaconazole）、およびサペルコナゾール（saperconazole）が含まれる。
【０００９】
式（I）の化合物および抗不整脈剤は、新生物の増殖を阻害するために十分な量で同時に、または互いに28日以内に投与される。
【００１０】
上記の方法の特定の態様において、投与される化合物の一つまたは双方は、ヒトに投与するために米国食品医薬品局（USFDA）のような国の製薬規制局によって承認されている。望ましくは、化合物は、互いに14日以内、互いに5日以内、互いに24時間以内、互いに1時間以内、または同時に投与される。最も望ましくは、化合物は同じ薬剤において投与されるが、化合物は異なる経路によって投与することができる。投与経路には、静脈内、筋肉内、皮下、直腸内、経口、局所、膣内、点眼、または吸入投与が含まれる。
【００１１】
新生物の治療のために式（I）の化合物の抗不整脈剤との併用によって、それぞれの化合物のより低用量を投与することができ、いずれかの化合物単独の投与と比較して類似の有効性または増加した有効性を提供する。方法によってまた、各化合物の標準用量を投与することができ、いずれかの化合物単独の投与と比較して改善された有効性を提供する。
【００１２】
式（I）の化合物および抗不整脈剤は、それぞれ、新生物を治療するために物質の有効性を測定可能に増強する量、回数、および期間で投与される。式（I）の化合物および抗不整脈剤のそれぞれは、0.1〜10,000 mg/日の量で、より好ましくは0.1〜1000 mg/日の量で、および最も好ましくは0.1〜100 mg/日の量で投与される。または、式（I）の化合物および／または抗不整脈剤は、0.5％〜25％w/v局所製剤として投与することができる。そのような局所製剤は、皮膚ならびに真皮および表皮の腺（すなわち、汗腺および皮脂腺）の癌を治療するために特に有用である。
【００１３】
化合物は、薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物と共に提供することができる。当然のこととして、単一の用量に再度調製するために適しているバルク調製物はより高用量を含んでもよい。本発明の方法において用いられる化合物は、医薬品パックの成分として提供することができる。そのようなパックには典型的に、本発明の方法において化合物を使用する説明書が含まれてもよい。これらのパックにおいて、化合物は、共にまたは個別に、個々の投与量で調製することができる。
【００１４】
本発明はまた、前述の方法が手術、放射線療法、化学療法、免疫療法、抗血管新生療法、または遺伝子治療のような癌のさらなる治療と併用して用いられる、癌のような新生物を有する患者を治療する方法を特徴とする。二つの処置は典型的に、互いに6ヶ月以内に行われ、同時に行ってもよい。好ましくは、さらなる治療は化学療法である。最も好ましくは、さらなる治療には、患者にシスプラチン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エトポシド、メソトレキセート、メルカプトプリン、5-フルオロウラシル、ヒドロキシウレア、ビンブラスチン、ビンクリスチン、パクリタキセル、ビカルタミド、ブレオマイシン、カルボプラチン、カルムスチン、シクロホスファミド、ドセタキセル、エピルビシン、塩酸ゲンシタビン、酢酸ゴセレリン、イマチニブ、インターフェロンα、イリノテカン、ロムスチン、酢酸リュープロリド、マイトマイシン、リツキシマブ、タモキシフェン、トラスツズマブ、またはその任意の併用を患者に投与することが含まれる。
【００１５】
本発明の方法に従って治療することができる癌には、白血病（例えば、急性白血病、急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、急性骨髄芽球性白血病、急性前骨髄球性白血病、急性骨髄単球性白血病、急性単球性白血病、急性赤白血病、慢性白血病、慢性骨髄球性白血病、慢性リンパ球性白血病）、真性赤血球増加症、リンパ腫（ホジキン病、非ホジキン病）、ワルデンストレームマクログロブリン血症、重鎖病、ならびに肉腫および癌腫のような固形腫瘍（例えば、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮細胞肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、肝腫、胆管癌、絨毛上皮腫、精上皮腫、胎児性癌、ウィルムス腫瘍、子宮頚癌、子宮癌、精巣癌、肺癌、肺の小細胞癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽細胞腫、頭蓋咽頭腫、脳室上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、神経鞘腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽腫、および網膜芽腫）が含まれる。好ましくは、治療される癌は、肺癌、特に扁平上皮癌、腺癌、台細胞癌、結腸直腸癌、卵巣癌、特に卵巣腺癌、または前立腺癌である。
【００１６】
本発明の特定の態様において、式（I）の化合物は、抗不整脈剤および新生物の増殖を阻害するために十分な量および回数の一つ、二つ、三つ、またはそれ以上の抗増殖剤と併用して投与される。典型的に、それぞれの物質は28日間のあいだに少なくとも1回投与され、新生物の増殖を阻害するために必要であるように2回、3回、4回、またはその期間毎日個々に投与してもよい。
【００１７】
本発明はまた、そのような治療を必要とする患者における新生物を治療または予防するために有用である化合物の組み合わせを同定する方法を特徴とする。方法には、（a）細胞をインビトロで（i）トリアゾールまたは抗不整脈剤、および（ii）候補化合物に接触させること、ならびにトリアゾールまたは抗不整脈剤と候補化合物の併用が、トリアゾールもしくは抗不整脈剤に接触させたが、候補化合物には接触していない細胞、または候補化合物に接触させたがトリアゾールもしくは抗不整脈剤に接触していない細胞と比較して、細胞増殖を減少させるか否かを決定することが含まれる。細胞増殖が減少すれば、その組み合わせはそのような治療を必要とする患者を治療するために有用であると同定される。
【００１８】
「癌」、「新生物」、または「新生物細胞」とは、異常なように増幅する細胞の集団を意味する。癌の増殖は制御されずに進行性であり、正常な細胞であれば複製を誘発しない、または中止を引き起こすであろう条件で起こる。
【００１９】
「抗不整脈剤」とは、心不整脈を減少させる薬剤を意味する。抗不整脈剤の例は、電圧感受性ナトリウムチャンネルを遮断する薬剤、アドレナリンβ受容体拮抗剤、心臓の活動電位を持続させる薬剤、およびCa2+チャンネル拮抗剤である。
【００２０】
「トリアゾール」とは、炭素原子2個と窒素原子3個の五員環を有する化合物を意味する。本発明の方法において用いることができるトリアゾールは、以下の式（I）を有する。
【００２１】
「抗増殖剤」とは、新生物の増殖を個々に阻害する化合物を意味する。抗増殖剤には、微小管阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、プラチン類、アルキル化剤、および抗代謝剤が含まれるがこれらに限定されない。特定の抗増殖剤には、パクリタキセル、ゲンシタビン、ドキソルビシン、ビンブラスチン、エトポシド、5-フルオロウラシル、カルボプラチン、アルトレタミン、アミノグルテチミド、アムサクリン、アナストロゾール、アザシチジン、ブレオマイシン、ブスルファン、カルムスチン、クロラムブシル、2-クロロデオキシアデノシン、シスプラチン、コルヒチン、シクロホスファミド、シタラビン、シトキサン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドセタキセル、燐酸セストラムスチン、フロクスウリジン、フルダラビン、ゲンツズマブ、ヘキサメチルメラミン、ヒドロキシウレア、イフォスファミド、イマチニブ、インターフェロン、イリノテカン、ロムスチン、メクロレタミン、メルファラン、6-メルカプトプリン、メソトレキセート、マイトマイシン、ミトタン、ミトキサントロン、ペントスタチン、プロカルバジン、リツキシマブ、ストレプトゾシン、タモキシフェン、テモゾロミド、テニポシド、6-チオグアニン、トポテカン、トラスツズマブ、ビンクリスチン、ビンデシン、およびビノレルビンが含まれる。
【００２２】
「新生物の増殖を阻害する」とは、インビトロまたはインビボで新生物または新生物細胞の増殖速度を測定可能に遅らせる、停止させる、または逆転させることを意味する。望ましくは、増殖速度を遅らせることは、細胞増殖速度を決定するための適したアッセイ（例えば、本明細書に記述の細胞増殖アッセイ）を用いて決定した場合に、少なくとも20％、30％、50％、または70％遅らせることである。典型的に、増殖速度の逆転は、新生物細胞において細胞死に関する壊死またはアポトーシスメカニズムを開始または加速して、それによって新生物の退縮を引き起こすことによって得られる。
【００２３】
「有効量」とは、インビボで新生物の増殖を阻害するために必要な、本発明に従う単独または併用した化合物の量を意味する。新生物（例えば、癌）の治療的治療のために本発明を実践するために用いられる活性化合物の有効量は、投与方法、被験者の年齢、体重、および全身健康に応じて変化する。最終的に、主治医または獣医師は、適当な量および投与レジメを決定するであろう。そのような量は、「有効」量であると呼ばれる。
【００２４】
「低用量」とは、抗不整脈剤またはトリアゾールの最低の標準推奨用量より少なくとも10％少ないことを意味する。「高用量」とは、抗不整脈剤またはトリアゾールの最高標準用量より少なくとも5％多いことを意味する。「中等度の用量」は、低用量と高用量のあいだの用量を意味する。
【００２５】
本明細書において用いられるように、「アルキル」および接頭辞「アルク-」という用語は、直鎖および分岐鎖の双方、ならびに環状基、例えばシクロアルキル基を含む。環状基は、単環式または多環式となりえて、好ましくは、環状炭素原子3〜20個を有する。例としての環状基は、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、およびアダマンチル基である。
【００２６】
「芳香族残基」とは、結合π電子を有する環系を有する芳香族基（例えばフェニルまたはイミダゾール）を意味する。アリール基の環は、好ましくは原子5〜10個である。芳香環は、炭素原子のみからなってもよく、または炭素原子およびヘテロ原子の混合物からなってもよい。好ましいヘテロ原子には、窒素、酸素、硫黄、および燐が含まれる。アリール基には選択的に、それぞれの環が好ましくは五員環または六員環を有する単環、二環、または三環が含まれる。アリール基は、置換または非置換であってもよい。例としての置換には、アルキル、ヒドロキシル、アルコキシ、アリールオキシ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、ハロゲン、フルオロアルキル、カルボキシル、カルボキシルアルキル、アミノ、アミノアルキル、モノ置換アミノ、二置換アミノ、および四級アミノ基が含まれる。
【００２７】
「アリール」基という用語は、炭素環芳香環または環系を意味する。アリール基の例には、フェニル、ナフチル、ビフェニル、フルオレニル、およびインデニル基が含まれる。「ヘテロアリール」という用語は、少なくとも一つの環ヘテロ原子（例えば、O、S、N）を含む芳香環または環系を意味する。アリール基は置換しなくてもよく、またはC1-10アルキル、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、C1-10アルコキシ、C1-10アルキルチオ、トリハロメチル、C1-10アシル、アリールカルボニル、ニトリル、C1-10アルコキシカルボニル、オキソ、およびアリールアルキル（アルキル基は炭素原子1〜10個を有する）からなる群より選択される一つまたはそれ以上の置換基によって置換されてもよい。
【００２８】
「治療する」とは、炎症疾患を治療または予防するための薬学的組成物を投与または処方することを意味する。
【００２９】
「患者」は任意の動物（例えば、ヒト）を意味する。
【００３０】
本発明において有用である化合物には、そのジアステレオマーおよびエナンチオマーのような異性体、塩、溶媒和化合物、多形と共に、本明細書に記述の化合物のラセミ混合物および純粋な異性体を含む、その薬学的に許容される任意の剤形の本明細書に記述の化合物が含まれる。
【００３１】
本発明の他の特徴および長所は以下の詳細な説明および請求の範囲から明らかとなるであろう。
【００３２】
詳細な説明
本発明者らは、特定のトリアゾール抗真菌剤が、心不整脈を治療するために用いられる化合物の癌細胞に対する抗増殖活性を増強することを発見した。このように、抗不整脈剤とトリアゾールとの併用は、癌および他の新生物の治療にとって有用である。
【００３３】
抗不整脈剤
一般的に、抗不整脈作用に関して抗不整脈剤のあいだに構造活性相関はほとんどない。Vaugham Williamsの分類によって、抗不整脈剤は一般的に四つのクラスに分類される。
【００３４】
クラスI薬剤は電圧感受性ナトリウムチャンネルを遮断する。クラスIの薬剤はさらに、クラスIA、IBおよびICに分類される。クラスIAの薬剤は心筋の活動電位の持続時間を延長させるが、最大脱分極速度を減少させる。クラスIA薬剤には、ヒドロキシルキニジン、キニジン、ジソピラミド、およびプロカインアミドが含まれる。クラスIB抗不整脈剤は、最大脱分極速度を減少させるのみならず、心筋の活動電位の持続時間を減少させる。クラスIB物質の例は、リドカイン、トカイニド、メキシレチン、およびフェニトインである。クラスIC抗不整脈剤は、最大脱分極速度を減少させるが、心筋の活動電位の持続時間に対しては全く作用を有しない。例には、フレカイニドおよびエンカイニドが含まれる。
【００３５】
クラスII薬剤はアドレナリンβ拮抗剤であり、その例はプロプラノロール、アセブトロール、エスモロール、およびソタロールである。
【００３６】
クラスIII薬剤は、アミオダロン、ソタロール、およびブレチリウムトシレートのように、心臓の活動電位を持続させ、それによって不応期間を増加させて異所およびリエントラント活性を抑制する。
【００３７】
クラスIV薬剤はCa2+チャンネル拮抗剤であり、これは、心筋の活動電位の際にカルシウムイオンによって運ばれる遅い内向き電流を遮断する。クラスIV薬剤の例は、ニフェジピン、アムロジピン、フェロジピン、フルナリジン、イスラジピン、ニカルジピン、ジルチアゼム、ベラパミールおよびベプリジルである。
【００３８】
上記の分類の一つに入らないが抗不整脈剤として見なされるその他の抗不整脈剤には、ジゴキシンおよびアデノシンが含まれる。
【００３９】
アミオダロン
アミオダロン（2-ブチル-3-ベンゾフラニル(4-(2-ジエチルアミノ)エトキシ)-3,5-ジイドフェニル)メタノン；Cordaron（商標））は、以下の構造を有する：
2007500231.tif 000004
【００４０】
典型的に、不整脈の治療にあたって、アミオダロンは、患者の病態に応じた量で投与されるが、標準推奨用量は経口投与の場合400〜1600 mg/日、または注射用量の場合150〜720 mg/日である。
【００４１】
アミオダロンの関連化合物には、ジ-N-デスエチルアミオダロン、デスエチルアミオダロン、デスオキソアミオダロン、エタベンザロン、および2-ブチルベンゾフラン-3-イル、4-ヒドロキシ-3,5-ジヨードフェニルケトンが含まれる。
【００４２】
ベプリジル
ベプリジル（β-((2-メチルプロポキシ)メチル-N-フェニル-N-(フェニルメチル)-1-ピロリジンエタナミン）は、以下の構造を有する：
2007500231.tif 000005
【００４３】
典型的に、不整脈の治療の場合、ベプリジルは患者の病態に応じた量で投与されるが、標準推奨用量は200〜300 mg/kgのあいだである。
【００４４】
ニカルジピン
ニカルジピン（2-(ベンジル-メチルアミノ)エチルメチル1,4-ジヒドロ-2,6-ジメチル-4-(m-ニトロフェニル)-3,5-ピリジンジカルボキシレート一塩酸）は、以下の構造を有するクラスIV抗不整脈剤である：
2007500231.tif 000006
【００４５】
典型的に、不整脈の治療の場合、ニカルジピンは、患者の病態に応じた量で投与されるが、標準推奨用量は20 mgを1日3回投与である。
【００４６】
他の抗不整脈剤の標準推奨用量は以下の通りである：アムロジピン−5〜10 mg/日；ニフェジピン−10 mgを1日3回；ジルチアゼム−90〜240 mg/日（1回または3回に分けて）；フェロジピン−5〜10 mg/日；フルナリジン−10 mg/日；イスラジピン−2.5 mgを1日2回；ニモジピン−60 mgを4時間毎；ベラパミール−40〜120 mgを1日3回。
【００４７】
トリアゾール
式（I）の化合物は、炭素原子2個および窒素原子3個の五員環を有するクラスの化合物であるトリアゾールである。式（I）の化合物の例は、イトラコナゾール、ヒドロキシイトラコナゾール、ポサコナゾール、およびサペルコナゾールである。
【００４８】
典型的に、真菌感染症の治療の場合、トリアゾールは患者の病態に応じた量で投与されるが、イトラコナゾールの標準推奨用量は、100〜400 mg/日の範囲である。
【００４９】
薬学的組成物の調製
適した投与様式には、経口、直腸内、静脈内、筋肉内、皮下、吸入、局所、または経皮、膣内、腹腔内（IP）、関節内、および点眼が含まれる。
【００５０】
併用した各化合物の投与は、他の成分と併用した場合に、標的領域に達すると抗新生物作用を有する化合物の濃度が得られる任意の適した手段であってもよい。化合物は、適した担体物質と混合して、一般的に、組成物の総重量の重量で約1〜95％で存在する。組成物は、経口、非経口（例えば、静脈内、筋肉内、皮下）、直腸内、経皮、鼻腔内、膣内、吸入、または点眼投与に適した投与剤形で提供してもよい。このように、組成物は、例えば錠剤、カプセル剤、丸剤、粉剤、顆粒剤、懸濁剤、乳剤、溶液、ハイドロゲルを含むゲル、パスタ剤、軟膏、クリーム、硬膏、飲薬、輸送装置、坐剤、浣腸、注射剤、インプラント、スプレー、またはエアロゾルの剤形であってもよい。薬学的組成物は、通常の薬学の実践に従って調製してもよい（例えば、Rmington：「The Science and Practice of Pharmacy」、（第20版）、A.R. Gennaro編、2000、Lippincott Williams & Wilkins、フィラデルフィア、ペンシルバニア州および「Encyclopedia of Pharmaceutical Technology」、J. Swarbrick and J.C. Boylan編、1988〜2002、Marcel Dekker、ニューヨークを参照されたい）。
【００５１】
治療
本発明の化合物の併用は、新生物の治療にとって有用である。併用治療は単独で行ってもよく、またはもう一つの治療（例えば、手術、放射線療法、化学療法、生物療法）と併用して行ってもよい。さらに、新生物を発症するリスクがより大きい人（例えば、遺伝的に素因を有する人または新生物をこれまでに有したことがある人）は、新生物の形成を阻害または遅らせるために予防治療を受けてもよい。併用治療の期間は、治療される疾患または障害のタイプ、患者の年齢および状態、患者の疾患の進行期およびタイプ、ならびに患者が治療に対してどのように反応するかに依存する。
【００５２】
併用療法は化学療法が行われる場所ではどこでも提供してもよい：自宅、医師の診察室、診療所、病院の外来診療部門、または病院。治療は一般的に、医師が治療効果を厳密に観察して必要な如何なる調整も行うことができるように、病院で開始される。併用治療の期間は、治療される癌の種類、患者の年齢および状態、患者の疾患の進行期およびタイプ、ならびに患者の体が治療に対してどのように反応するかに依存する。薬物投与は、異なる間隔（例えば、毎日、毎週、または毎月）で行ってもよく、各物質の投与は個別に決定してもよい。併用治療は、患者の体が健康な新しい細胞を構築して、その強さを回復する機会を有するように、休止期を含むオン＆オフサイクルで行ってもよい。
【００５３】
癌のタイプおよびその進行期に応じて、癌を治療するために、癌の散布を遅らせるために、癌の増殖を遅らせるために、原発腫瘍から体の他の部分へと広がる可能性がある癌細胞を殺すまたは停止させるために、癌によって引き起こされる症状を軽減するために、または癌を最初の場所で予防するために、併用治療を用いることができる。併用治療はまた、疼痛または不快感を引き起こす癌細胞を消失させることによって、人々がより快適に生活できるように助けることができる。
【００５４】
併用する各成分の投与量、投与回数、および投与様式は、独立して制御することができる。例えば、一つの化合物を1日3回局所投与してもよく、第二の化合物を1日1回経口投与してもよい。併用治療は患者の体がなお予測できない副作用から回復する機会が得られるように、休止期を含むオン＆オフサイクルで行ってもよい。化合物はまた、一回の投与によって双方の化合物が輸送されるように、共に調製してもよい。
【００５５】
癌および他の新生物の例には、白血病（例えば急性白血病、急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、急性骨髄芽球性白血病、急性前骨髄性白血病、急性骨髄単球性白血病、急性単球性白血病、急性赤白血病、慢性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病）、真性赤血球増加症、リンパ腫（ホジキン病、非ホジキン病）、ワルデンストレームマクログロブリン血症、重鎖病、ならびに肉腫および癌腫のような固形腫瘍（例えば、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮細胞肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、肝腫、胆管癌、絨毛上皮腫、精上皮腫、胎児性癌、ウィルムス腫瘍、子宮頚癌、子宮癌、精巣癌、肺癌、肺の小細胞癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽細胞腫、頭蓋咽頭腫、脳室上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、神経鞘腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽腫、および網膜芽腫）が含まれるがこれらに限定されない。
【００５６】
用量
請求の併用治療に関するそれぞれの化合物の用量は、以下を含むいくつかの要因に依存する：投与法、治療される新生物、新生物の重症度、新生物が治療または予防されるか否か、ならびに治療される患者の年齢、体重、および健康。
【００５７】
併用される化合物は、錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、もしくはシロップ剤の剤形で経口投与、または坐剤の形で直腸内投与してもよい。化合物の非経口投与は、例えば生理食塩液溶液の剤形で、または化合物をリポソームに組み入れて適切に行われる。化合物そのものが溶解するために十分に溶解性でない場合、エタノールのような溶解剤を加えることができる。当業者は、もう一つの化合物をトリアゾール、抗不整脈剤、またはいずれか一つの抗増殖剤のいずれかの代わりに用いる場合、細胞増殖アッセイにおける化合物の有効性を調べることによって、正確な用量を決定することができることを認識するであろう。本発明の方法に従う併用治療において用いる場合、抗不整脈剤は、その化合物を用いる有効な抗癌単剤療法が得られる場合と同等のまたはそれより低い量および回数で投与される。
【００５８】
以下の実施例は本発明を説明するためであって、如何なるようにも制限することを意図していない。
【００５９】
実施例1：ヒト結腸直腸癌HCT116に対するイトラコナゾールおよびアミオダロンの抗増殖活性
HCT116細胞増殖に及ぼすアミオダロンおよびイトラコナゾールの併用の連続2倍希釈液の結果を表1に示す。本アッセイにおいて、アミオダロンは、29 μMで94.7％の最大阻害を示すが、7.3 μMアミオダロンは7.4％の阻害を示すに過ぎない。7μMイトラコナゾールの存在下では、アミオダロンの有効性は増強され、アミオダロンの4倍少ない濃度で90.5％の阻害を示す。
【００６０】
（表１）HCT116細胞におけるアラマー・ブルー代謝の阻害（％）
2007500231.tif 000007
【００６１】
実施例2：肺の非小細胞癌A549に対するイトラコナゾールおよびアミオダロンの抗増殖活性
A549細胞増殖に及ぼすアミオダロンおよびイトラコナゾール併用の連続2倍希釈液の結果を表2に示す。本アッセイにおいて、アミオダロンは、7.3μMで実質的に全く阻害を示さない。7μMイトラコナゾールの存在下では、アミオダロンの有効性は77.3％である。
【００６２】
（表２）A549細胞におけるアラマー・ブルー代謝の阻害（％）
2007500231.tif 000008
【００６３】
実施例3：SKMEL-28黒色腫細胞に対するイトラコナゾールおよびアミオダロンの抗増殖活性
SKMEL-28細胞増殖に及ぼすアミオダロンおよびイトラコナゾール併用の連続2倍希釈液の結果を表3に示す。アミオダロンは7.3μMにおいて1.4％の阻害を示すに過ぎないが、7μMイトラコナゾールおよび7.3μMアミオダロンの併用は80.8％の阻害を示す。
【００６４】
（表３）SKMEL-28細胞におけるアラマー・ブルー代謝の阻害（％）
2007500231.tif 000009
【００６５】
実施例4：ヒトDU145ヒト前立腺癌細胞に対するアミオダロンおよびイトラコナゾールの抗増殖活性
DU145細胞増殖に及ぼすアミオダロンおよびイトラコナゾール併用の連続2倍希釈液の結果を表4に示す。本アッセイにおいて、アミオダロンは29μMで60.5％の最大阻害を示すのに対し、15μMアミオダロンは実質的に阻害を示さない。14μMイトラコナゾールおよび15μMアミオダロンの併用は44.1％の阻害を示す。
【００６６】
（表４）DU145細胞におけるアラマー・ブルー代謝の阻害（％）
2007500231.tif 000010
【００６７】
実施例5：ヒト結腸直腸癌HCT116に対するベプリジルおよびイトラコナゾールの抗増殖活性
HCT116細胞増殖に及ぼすベプリジルおよびイトラコナゾール併用の連続2倍希釈液の結果を表5に示す。本アッセイにおいて、ベプリジルは、48μMで96.4％の最大阻害を示すのに対し、12μMベプリジルは33.2％の阻害を示すに過ぎない。7μMイトラコナゾールおよび12μMベプリジルの併用は87.3％の阻害を示す。
【００６８】
（表５）HCT116細胞におけるアラマー・ブルー代謝の阻害（％）
2007500231.tif 000011
【００６９】
実施例6：ヒト結腸直腸癌HCT116に対するイトラコナゾールおよびニカルジピンの抗増殖活性
HCT116細胞増殖に及ぼすアミオダロンおよびイトラコナゾールの併用の連続2倍希釈液からの結果を表6に示す。本アッセイにおいて、ニカルジピンは、39μMで81.7％の最大阻害を示すのに対し、19μMニカルジピンは25.2％の阻害を示すに過ぎない。7μMイトラコナゾールおよび19μMニカルジピンの併用は73.3％の阻害を示す。
【００７０】
（表６）HCT116細胞におけるアラマー・ブルー代謝の阻害（％）
2007500231.tif 000012
【００７１】
材料および方法
前述の結果は以下の材料および方法によって得られた。
【００７２】
腫瘍細胞の培養
ヒト結腸直腸癌HCT116（ATCC #CCL-247）細胞、肺の非小細胞癌A549（ATCC #CCL-185）細胞、ヒト前立腺癌DU145（ATCC #HTB-81）細胞、およびヒト黒色腫SKMEL-28（ATCC #HTB-72）細胞を37±0.5℃および5％CO2において、10％FBS、2 mMグルタミン、1％ペニシリン、および1％ストレプトマイシンを添加したRPMI1640培地において増殖させた。
【００７３】
試験化合物
アミオダロン、ニカルジピン、およびベプリジルはSigma Chemical Co.（セントルイス、ミズーリ州）から得た。イトラコナゾールは、Intrachem（パラムス、ニュージャージー州）から得た。各化合物の保存液（1000×）をDMSOにおいて調製して、-20℃で保存した。個々の化合物の2倍連続希釈液のマスターストックプレートを384ウェルプレートにおいて調製した。上記の増殖培地に希釈することによって、これらのマスターストックプレートから試験化合物の併用に関する行列を作製した。併用行列における試験化合物の最終濃度はアッセイにおいて用いられる濃度より10倍より大きい。併用行列は、直ちに用いて廃棄した。
【００７４】
抗増殖アッセイ
抗増殖アッセイは、384ウェルプレートにおいて行った。0.25％トリプシン溶液を用いて培養フラスコから腫瘍細胞を剥がした。SKMEL細胞3,000個、または他の全ての細胞株に関して1,500個が、各アッセイウェルにおいて培地35μl中に加えられるように、細胞を培養培地において希釈した。アッセイプレートを、37℃±0.5℃、5％CO2で16〜24時間インキュベートした。次に、併用行列から10×保存溶液4.5μlを培養培地40μlに加えた。アッセイプレートを37℃±0.5℃で5％CO2でさらに72時間インキュベートした。インキュベーション期間の後に、37℃±0.5℃に加温した10.5％アラマーブルー40μlをアッセイウェルに加えた。アラマーブルーの代謝は、添加後3.5〜5.0時間の蛍光強度の量によって定量した。LJLアナリストADリーダー（LJL Biosystems）を用いた定量は、ウェルの中心において高い減衰、読み取り時間100 msec、励起フィルター530 nm、および放射フィルター575 nmで行った。いくつかの実験に関して、定量は、Wallac Victor2リーダーを用いて行った。測定は、安定化したエネルギーランプ対照によってウェルの上段で行った；読み取り時間100 m秒、励起フィルター530 nm、および放射フィルター590 nm。プレートリーダー間に有意差は測定されなかった。
【００７５】
以下の式を用いて各ウェルの阻害の割合（％I）を計算した：
％I＝[（無処置ウェルの平均値−処置ウェル）／（無処置ウェルの平均値）]×100
無処置ウェルの平均値（avg.無処置ウェル）は、溶媒対照によって処置した同じアッセイプレートからのウェル40個の相加平均である。負の阻害値は、無処置ウェルと比較して処置ウェルにおける局所変動に起因する。表1に示すデータは、9×9行列10個の平均値である。表2に示すデータは、9×9行列8個の平均値である。表4に示すデータは9×9行列6個の平均値である。表3、5および6に示すデータは、9×9行列4個の平均値である。
【００７６】
他の態様
本明細書において用いられる腫瘍細胞株について証明された抗増殖作用は、NSC肺癌、MCF7乳腺腺癌、PA-1卵巣奇形癌、HT29結腸直腸腺癌、H1299大細胞癌、U-2 OS骨原性肉腫、U-373 MG神経膠芽腫、Hep-3B肝細胞癌、BT-549乳癌、T-24膀胱癌、C-33A子宮頚癌、HT-3転移性子宮頚癌、SiHa扁平上皮癌、CaSki類表皮子宮頚癌、NCI-H292粘膜表皮肺癌、NCI-2030、肺の非小細胞癌、HeLa、上皮性頚部腺癌、KB上皮性口腔癌、HT1080上皮線維肉腫、Saos-2上皮骨原性肉腫、PC3上皮前立腺腺癌、SW480結腸直腸癌、CCL-228、MS-751類上皮子宮頚癌、LOX IMVI黒色腫、MALME-3M黒色腫、M14黒色腫、SK-MEL-2黒色腫、SK-MEL-28黒色腫、SK-MEL-5黒色腫、UACC-257黒色腫、およびUACC-62黒色腫細胞株のような他の癌細胞株を用いて同様に証明することができる。特異性は、対照細胞として、NHLF肺線維芽細胞、NHDF皮膚線維芽細胞、HMEC乳腺上皮細胞、PrEC前立腺上皮細胞、HRE腎上皮細胞、NHBE気管支上皮細胞、CoSmC結腸平滑筋細胞、CoEC結腸内皮細胞、NHEK上皮ケラチノサイト、および骨髄細胞のような細胞を用いて試験することができる。
【００７７】
上記の明細書において言及した全ての出版物および特許は、参照として本明細書に組み入れられる。本発明の記述の方法および系の様々な改変および変更が当業者に明らかであり、それらも本発明の範囲および趣旨に含まれる。本発明は、特定の好ましい態様に関連して記述してきたが、請求の本発明は、そのような特定の態様に不当に限定されてはならないと理解すべきである。実際に、腫瘍学または関連分野の当業者に明白な、本発明を行うために記述された様式の様々な改変が本発明の範囲に含まれると意図される。
【国際調査報告】
2007500231.tif 000017
2007500231.tif 000018