(57)【要約】例えば、気道および肺の炎症を処置する目的のために、サイトカイン活性を調節する方法が提供される。ＩＬ−１９もしくはＩＬ−２４のアゴニストまたはアンタゴニストをスクリーニングする際に使用するための試薬もまた、提供される。本発明は、細胞の活性を調節する方法を提供し、上記方法は、上記細胞を、ＩＬ−１９（配列番号１または配列番号２）もしくはＩＬ−２４（配列番号３または配列番号４）のアゴニストまたはアンタゴニストと接触させる工程を包含し；上記細胞は、気道反応性亢進または気道炎症を調節する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞の活性を調節する方法であって、該方法は、該細胞を、以下：
ａ）ＩＬ−１９（配列番号１または配列番号２）；もしくは
ｂ）ＩＬ−２４（配列番号３または配列番号４）
のアゴニストまたはアンタゴニストと接触させる工程を包含し、該細胞は、気道反応性亢進または気道炎症を調節する、方法。
【請求項２】
前記細胞が、以下：
ａ）単球もしくはマクロファージ；
ｂ）Ｔ細胞もしくはＢ細胞；
ｃ）樹状細胞；または
ｄ）上皮細胞もしくは内皮細胞
である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記マクロファージが、肺胞マクロファージである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記アゴニストまたはアンタゴニストが、抗体の抗原結合部位に由来する結合組成物である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記アゴニストまたはアンタゴニストが、以下：
ａ）ＩＬ−１９（配列番号１または配列番号２）；
ｂ）ＩＬ−２４（配列番号３または配列番号４）；
ｃ）ＩＬ２０Ｒ１；
ｄ）ＩＬ−２０Ｒ２；もしくは
ｅ）ＩＬ−２２Ｒ
のポリペプチドまたは核酸に特異的に結合する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記アゴニストまたはアンタゴニストが、以下：
ａ）ポリクローナル抗体；
ｂ）モノクローナル抗体；
ｃ）ヒト化抗体；
ｄ）Ｆａｂフラグメント、Ｆｖフラグメント、もしくはＦ（ａｂ’）２フラグメント；
ｅ）抗体のペプチド模倣体；
ｆ）核酸；または
ｇ）検出可能な標識
を含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
気道反応性亢進障害または気道炎症障害を罹患している被験体を処置する方法であって、該方法は、有効量の以下：
ａ）ＩＬ−１９（配列番号１または配列番号２）；もしくは
ｂ）ＩＬ−２４（配列番号３または配列番号４）
のアゴニストまたはアンタゴニストを投与する工程を包含する、方法。
【請求項８】
前記障害が、以下：
ａ）単球もしくはマクロファージ；
ｂ）Ｔ細胞もしくはＢ細胞；
ｃ）樹状細胞；または
ｄ）上皮細胞もしくは内皮細胞
によって仲介される、請求項７に記載方法。
【請求項９】
前記マクロファージが、肺胞マクロファージである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記障害が、以下：
ａ）ぜん息；
ｂ）アレルギー性鼻炎；
ｃ）気管支炎；
ｄ）細気管支炎；または
ｅ）慢性閉塞性肺障害（ＣＯＰＤ）
を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
前記アンタゴニストが、気道反応性亢進を軽減または阻害する、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
前記アゴニストまたはアントゴニストが、抗体の抗原結合部位に由来する結合組成物である、請求項７に記載の方法。
【請求項１３】
前記アゴニストまたはアンタゴニストが、以下：
ａ）ＩＬ−１９（配列番号１または配列番号２）；
ｂ）ＩＬ−２４（配列番号３または配列番号４）；
ｃ）ＩＬ−２０Ｒ１；
ｄ）ＩＬ−２０Ｒ２；もしくは
ｅ）ＩＬ−２２Ｒ
を含むポリペプチドまたは核酸に特異的に結合する、請求項７に記載の方法。
【請求項１４】
前記アゴニストまたはアンタゴニストが、以下：
ａ）ポリクローナル抗体；
ｂ）モノクローナル抗体；
ｃ）ヒト化抗体；
ｄ）Ｆａｂフラグメント、Ｆｖフラグメント、もしくはＦ（ａｂ’）２フラグメント；
ｅ）抗体のペプチド模倣体；
ｆ）核酸；または
ｇ）検出可能な標識
を含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
気道反応性亢進障害または気道炎症障害を診断する方法であって、該方法は、試験被験体由来のサンプルを、以下：
ａ）ＩＬ−１９（配列番号１または配列番号２）；
ｂ）ＩＬ−２４（配列番号３または配列番号４）；
ｃ）ＩＬ−２０Ｒ１；
ｄ）ＩＬ−２０Ｒ２；もしくは
ｅ）ＩＬ−２２Ｒ
のポリペプチドまたは核酸に特異的に結合する結合組成物と接触させる工程を包含する、方法。
【請求項１６】
以下の工程：
ａ）前記結合組成物を、コントロール被験体に由来するサンプルまたはコントロールサンプルと接触させる工程；および
ｂ）前記試験被験体で見出された結合を、該コントロール被験体またはコントロールサンプルで見出された結合と比較する工程
をさらに包含する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
生理学的活性を調節する化合物をスクリーニングする方法であって、該方法は、以下：
ａ）候補化合物をＩＬ−１９ノックアウト（ＩＬ−１９ＫＯ）マウスに接触させて、接触されたＩＬ−１９ＫＯマウスを提供し、そして該接触されたＩＬ−１９ＫＯマウスにおいて生理学的活性を決定する工程；
ｂ）該候補化合物と接触していないＩＬ−１９ＫＯマウスにおいて生理学的活性を決定する工程；および
ｃ）該接触されたＩＬ−１９ＫＯマウスの生理学的活性と該接触されていないＩＬ−１９ＫＯマウスの生理学的活性とを比較する工程
を包含する、方法。
【請求項１８】
前記生理学的活性が、以下：
ａ）免疫活性；
ｂ）気道の炎症；
ｃ）気道反応性亢進；または
ｄ）増殖活性
を含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
生理学的活性を調節する化合物をスクリーニングする方法であって、該方法は、以下：
ａ）候補化合物をＩＬ−２４ノックアウト（ＩＬ−２４ＫＯ）マウスに接触させて、接触されたＩＬ−２４ＫＯマウスを提供し、そして該接触されたＩＬ−２４ＫＯマウスにおいて生理学的活性を決定する工程；
ｂ）該候補化合物と接触していないＩＬ−２４ＫＯマウスにおいて生理学的活性を決定する工程；および
ｃ）該接触されたＩＬ−２４ＫＯマウスの生理学的活性と該接触されていないＩＬ−２４ＫＯマウスの生理学的活性とを比較する工程
を包含する、方法。
【請求項２０】
前記生理学的活性が、以下：
ａ）免疫活性；
ｂ）気道の炎症；
ｃ）気道反応性亢進；または
ｄ）増殖活性
を含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
肥満もしくは糖尿病を処置または診断するための方法であって、該方法は、有効量の以下：
ａ）ＩＬ−１９；もしくは
ｂ）ＩＬ−２４
のアゴニストまたはアンタゴニストを投与する工程を包含する、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、一般的に、哺乳動物のサイトカインの使用に関する。より具体的には、本発明は、気道反応性亢進におけるサイトカインの機能を開示する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
免疫系は、感染性因子（例えば、細菌、多細胞生物およびウイルス）および癌から個体を防御するために機能する。この系は、１または数個の型のリンパ系細胞および骨髄性細胞（例えば、単球、マクロファージ、樹状細胞（ＤＣ）、好酸球、Ｔ細胞、Ｂ細胞、および好中球）を包含する。これらのリンパ系細胞および骨髄性細胞は、多くの場合、サイトカインとして公知のシグナル伝達タンパク質を産生する。免疫応答は、炎症（すなわち、身体の全身的か、または特に局所における免疫細胞の蓄積）を包含する。感染性因子または外来物質に応答して、免疫細胞は、サイトカインを分泌し、次いでサイトカインは、免疫細胞の増殖、発生、分化、または移動を調節する。サイトカインは、気道反応性亢進および肺胞マクロファージ（すなわち、肺胞マクロファージによる浸潤または肺胞マクロファージの活性化）に関連する多くの障害の病理学に関連している（例えば、非特許文献１；非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４；非特許文献５；非特許文献６；非特許文献７；非特許文献８を参照のこと）。
【０００３】
気道反応性亢進は、気道応答性亢進（ｈｙｐｅｒｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ）としても公知であり、刺激に応答した不適切な気道の狭小化に関連する。気道反応性亢進は、気道の種々の障害（例えば、ぜん息、アレルギー性鼻炎、気管支炎、細気管支炎、およびおそらく慢性閉塞性肺障害（ＣＯＰＤ））の特徴である。反応性亢進は、例えば、呼吸器感染、喫煙、および呼吸器アレルゲンによって誘発され得る。ぜん息は、致死的であり得る慢性障害であって、合衆国の約７人に１人の子供を冒し、小児科救急の１５％以上の原因である。この症状は、息切れおよび粘液の過分泌に関連する（例えば、非特許文献９；非特許文献１０；非特許文献１１；非特許文献１２；非特許文献１３；非特許文献１４を参照のこと）。
【０００４】
別の気道反応性亢進障害は、全ての慢性状態の最も一般的なもののうちの１つである、アレルギー性鼻炎（上部気道の炎症を含む）であり、合衆国において毎年約２００万の出勤日を無駄にする原因となっている（例えば、非特許文献１５；非特許文献１６；非特許文献１７；非特許文献１８；非特許文献１９；非特許文献２０；非特許文献２１；非特許文献２２；非特許文献２３を参照のこと）。
【０００５】
気道反応性亢進は、気道におけるＴ細胞、好酸球、肥満細胞、好中球、および抗原提示細胞（ＡＰＣ）による浸潤によって特徴付けられる。肺のＡＰＣとしては、ＤＣ、Ｂ細胞および肺胞マクロファージが挙げられ、これらの各々は、サイトカインを発現して気道反応性亢進の一因となり得る（例えば、非特許文献２４；非特許文献２５；非特許文献２６；非特許文献２７；非特許文献２８；非特許文献２９；非特許文献３０；非特許文献３１；非特許文献３２を参照のこと）。気道のマクロファージ（肺胞マクロファージ、樹状細胞、ならびに胸膜マクロファージ、間質性マクロファージ、および脈管内マクロファージが挙げられる）は、Ｔ細胞との直接の相互作用によって、そして（例えば、病原体およびアレルゲンに応答して（そして、ぜん息およびアレルギーのような障害において））サイトカインを産生することによって、免疫応答を仲介する。肺胞マクロファージは、細菌、胞子、真菌（例えば、Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｒｉｎｉｉ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）、ウイルス（例えば、ＲＳウイルス（ＲＳＶ））、腫瘍、およびタバコの煙に対して、食作用性である。さらに、これらの免疫細胞は、サイトカインを分泌することによって後天性免疫応答を調節する（例えば、非特許文献３３；非特許文献３４；非特許文献３５；非特許文献３６；非特許文献３７；非特許文献３８；非特許文献３９；非特許文献４０；非特許文献４１；非特許文献４２；非特許文献４３；非特許文献４４；非特許文献４５を参照のこと）。
【０００６】
肺胞マクロファージはまた、マクロファージ、好中球、およびＴ細胞（例えば、ＣＤ８＋Ｔ細胞）による細気管支の浸潤に関連する障害である、慢性閉塞性肺障害（ＣＯＰＤ）の病理学にも関連している。ＣＯＰＤは、北アメリカにおいて４番目の主要な死亡原因であり、気道の平滑筋の肥厚と気道の炎症とによって特徴付けられる。この反応は、単球、マクロファージ、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、および好中球の肺に対する浸潤に起因しているようである。肺胞マクロファージは、ＣＯＰＤにおいて上昇し、次いで、炎症を促進して免疫細胞の活性を増加させるサイトカインを発現する。ＣＯＰＤは、慢性気管支炎および気腫に関連する。気腫は、実質、末端細気管支の先端領域の永久的な破壊によって特徴付けられる。例えば、非特許文献４６；非特許文献４７；非特許文献４８；非特許文献４９；非特許文献５０を参照のこと。
【非特許文献１】Ａｂｂａｓら（編）「Ｃｅｌｌｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ」，Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ  Ｃｏ．，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ，２０００年
【非特許文献２】ＯｐｐｅｎｈｅｉｍおよびＦｅｌｄｍａｎｎ（編）「Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ」，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，２００１年
【非特許文献３】ｖｏｎ  ＡｎｄｒｉａｎおよびＭａｃｋａｙ「Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．」２０００年，第３４３巻：ｐ．１０２０−１０３４
【非特許文献４】ＤａｖｉｄｓｏｎおよびＤｉａｍｏｎｄ「Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．」２００１年，第３４５巻：ｐ．３４０−３５０
【非特許文献５】Ｒｉｆｆｏ−ＶａｓｑｕｅｚおよびＳｐｉｎａ「Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」２００２年，第９４巻：ｐｐ．１８５−１２１
【非特許文献６】Ｅｖａｎｓら「Ｉｎｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」２００３年，第２２巻：ｐ．１７３−１９４
【非特許文献７】Ｌｙｓａｇｈｔら「Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ」２００３年，第４巻：ｐ．７１６−７２１
【非特許文献８】Ｅｎｇｌｅｍａｎ「Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．」２００３年，第３０巻（３補遺８）：ｐ．２３−２９
【非特許文献９】Ｃｒａｉｎら「Ａｒｃｈ．Ｐｅｄｉａｔｒ．Ａｄｏｌｅｓｃ．Ｍｅｄ．」１９９５年，第１４９巻：ｐ．８９３−９０１
【非特許文献１０】Ｇｒｕｎｉｇら「Ｓｃｉｅｎｃｅ」１９９８年，第２８２巻：ｐ．２２６１−２２６３
【非特許文献１１】Ｃｒｙｓｔａｌら（編）「Ｔｈｅ  Ｌｕｎｇ」，第１−２巻，第２版，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ−Ｒａｖｅｎ，Ｐｈｉｌａ，ＰＡ，１９９７年
【非特許文献１２】Ｈｏｌｇａｔｅら「Ａｌｌｅｒｇｙ」，第２版，Ｍｏｓｂｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，２００１年
【非特許文献１３】Ｍａｒｏｎｅ「Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ」１９９８年，第１９巻：ｐ．５−９
【非特許文献１４】ＢａｒｎｅｓおよびＬｅｍａｎｓｋｅ「Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．」２００１年，第３４４巻：ｐ．３５０−３６２
【非特許文献１５】Ｍａｒｏｎｅ「Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ」１９９８年，第１９巻：ｐ．５−９
【非特許文献１６】Ｋｕｍａｒ「Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」２００１年，第９１巻：ｐ．９３−１０４
【非特許文献１７】Ｈｏｍｅｒ「Ｎｅｗ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．」１９９７年，第３３７巻：１４６１−１４６３
【非特許文献１８】Ｐｌａｔｔｓ−ＭｉｌｌｓおよびＣａｒｔｅｒ「Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ  Ｍｅｄ．」１９９７年，第３３６巻：ｐ．１３８２−１３８４
【非特許文献１９】Ｊａｍｅｓ「Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ」２００３年，第１１１巻：ｐ．１６２５−１６３０
【非特許文献２０】Ｒｏｂｉｎｓｏｎら「Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｐｕｌｍｏｎｏｌ．」１９９６年，第２２巻：ｐ．２４８−２５４
【非特許文献２１】Ｂｅｃｋｅｔｔ「Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．」２０００年，第３４２巻：ｐ．４０６−４１３
【非特許文献２２】Ｓｉｒｏｕｘら「Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ａｌｌｅｒｇｙ」２００３年，第３３巻：ｐ．７４６−７５１
【非特許文献２３】Ｋｅｓｓｌｅｒら「Ａｎｎａｌｓ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ａｓｔｈｍａ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．」２００１年，第８７巻：ｐ．２８９−２９５
【非特許文献２４】Ｌａｗｒｅｎｃｅら「Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａ．」１９９８年，第２８４巻：ｐ．２２２−２２７
【非特許文献２５】Ａｌｅｘｉｓら「Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｐｈｙｓｉｏ．」２００１年，第２８０巻：ｐ．Ｌ３６９−Ｌ３７５
【非特許文献２６】Ａｋａｂａｒｉら「Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ」２００２年，第８巻：ｐ．１０２４−１０３２
【非特許文献２７】ＭａｃＬｅａｎら「Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．」１９９９年，第２０巻：ｐ．３７９−３８７
【非特許文献２８】Ｈａｍｅｌｍａｎｎら「Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．」１９９９年，第２１巻：ｐ．４８０−４８９
【非特許文献２９】Ｇｏｎｚａｌｅｓら「Ａｎｎａｌｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ」２０００年，第１３３巻：ｐ．９８１−９９１
【非特許文献３０】Ｌｉら「Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」２００２年，第１５巻：ｐ．４０９−４１６
【非特許文献３１】Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎら「Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」２００３年，第１１１巻：ｐ．２２７−２４２
【非特許文献３２】Ｒｉｆｆｏ−ＶａｓｑｕｅｚおよびＳｐｉｎａ「Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」２００２年，第９４巻：ｐ．１８５−２１１
【非特許文献３３】ＭｃＮａｍａｒａら「Ｂｒｉｔ．Ｍｅｄ．Ｂｕｌｌ．」２００２年，第６１巻：ｐ．１３−２８
【非特許文献３４】Ｏｐｅｎｓｈａｗ「Ｒｅｓｐｉｒ．Ｒｅｓ．」２００２年，第３巻（補遺ｌ）ｐ．Ｓ１５−Ｓ２０
【非特許文献３５】ＧｏｒｄｏｎおよびＲｅａｄ「Ｂｒｉｔ．Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ」２００２年，第６１巻：ｐ．４５−６１
【非特許文献３６】Ｇｕｉｄｉ−Ｒｏｎｔａｎｉ「Ｔｒｅｎｄｓ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．」２００２年，第１０巻：ｐ．４０５−４０９
【非特許文献３７】Ｅｉｆｕｋｕら「Ｊｐｎ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．」２０００年，第３０巻：ｐ．２９５−３００
【非特許文献３８】Ｆａｔｈｉら「Ｅｘｐ．Ｍｏｌ．Ｐａｔｈｏｌ．」２００１年，第７０巻：ｐ．７７−８２
【非特許文献３９】Ｉｅｏｎｇら「Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．」２０００年，第１６２巻：ｐ．９６６−９７０
【非特許文献４０】Ｙｉ「Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｃｌｉｎ．Ｌａｂ  Ｓｃｉ．」２００２年，第３９巻：ｐ．５８１−６２９
【非特許文献４１】Ｆｒｉｅｄｍａｎら「Ｓｅｍｉｓ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｉｎｆｅｃｔ．」１９９８年，第１３巻：ｐ．１００−１０８
【非特許文献４２】Ｂｒｕｍｍｅｒ「Ｍｙｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉａ」１９９８年−１９９９年，第１４３巻：ｐ．１２１−１２５
【非特許文献４３】Ｖａｓｓａｌｌｏら「Ｓａｒｃｏｉｄｏｓｉｓ  Ｖａｓｃ．Ｄｉｆｆｕｓｅ  Ｌｕｎｇ  Ｄｉｓ．」２０００年，第１７巻：ｐ．１３０−１３９
【非特許文献４４】Ｂｅｎｔｅｎら「Ｊ．Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｖｉｒｏｌ．」２００３年，第７１巻：ｐ．２９０−２９７
【非特許文献４５】Ｒｉｇｄｅｎら「Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ」２００２年，第１０６巻：ｐ．５３７−５４８
【非特許文献４６】Ｈａｕｔａｍａｋｉら「Ｓｃｉｅｎｃｅ」１９９７年，第２７７巻：ｐ．２００２−２００４
【非特許文献４７】Ｂａｒｎｅｓ「Ｃｈｅｓｔ」２０００年，第１１７巻：ｐ．１０Ｓ−１４Ｓ
【非特許文献４８】Ｂａｒｎｅｓ「Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．」２００３年，第５４巻：ｐ．１１３−１２９
【非特許文献４９】Ｊｅｆｆｅｒｙ「Ｔｈｏｒａｘ」１９９８年，第５３巻：ｐ．１２９−１３６
【非特許文献５０】Ｂａｒｎｅｓ「Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．」２０００年，第３４３巻：ｐ．２６９−２８０
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
ぜん息およびＣＯＰＤ、ならびに感染に対する肺胞マクロファージ仲介性防御および癌は、十分に理解されないままであり、新規の治療が必要とされる。本発明は、炎症、気道反応性亢進、およびマクロファージ活性に関連する２種のサイトカインを同定し、これらの呼吸器障害を処置および診断するための試薬ならびに方法を提供することによって、この必要性を満たす。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
（発明の要旨）
本発明は、部分的に、ＩＬ−１９またはＩＬ−２４を欠損している動物が、気道反応性亢進の軽減を示すという発見に基づいている。
【０００９】
本発明は、細胞の活性を調節する方法を提供し、上記方法は、上記細胞を、ＩＬ−１９（配列番号１または配列番号２）もしくはＩＬ−２４（配列番号３または配列番号４）のアゴニストまたはアンタゴニストと接触させる工程を包含し；上記細胞は、気道反応性亢進または気道炎症を調節する。
【００１０】
上記細胞が、単球もしくはマクロファージ、Ｔ細胞もしくはＢ細胞、樹状細胞、または上皮細胞もしくは内皮細胞である上記方法、上記マクロファージが、肺胞マクロファージである上記方法、上記アゴニストまたはアンタゴニストが、抗体の抗原結合部位に由来する結合組成物である上記方法、および上記アゴニストまたはアンタゴニストが、ＩＬ−１９（配列番号１または配列番号２）；ＩＬ−２４（配列番号３または配列番号４）；ＩＬ２０Ｒ１；ＩＬ−２０Ｒ２；もしくはＩＬ−２２Ｒのポリペプチドまたは核酸に特異的に結合する上記方法もまた、提供される。
【００１１】
別の実施形態において、本発明は、上記アゴニストまたはアンタゴニストが、ポリクローナル抗体；モノクローナル抗体；ヒト化抗体；Ｆａｂフラグメント、Ｆｖフラグメント、もしくはＦ（ａｂ’）２フラグメント；抗体のペプチド模倣体；核酸；または検出可能な標識を含む、活性を調節する上記方法を提供する。
【００１２】
別の局面において、本発明は、気道反応性亢進障害または気道炎症障害を罹患している被験体を処置する方法であって、有効量の、ＩＬ−１９（配列番号１または配列番号２）もしくはＩＬ−２４（配列番号３または配列番号４）のアゴニストまたはアンタゴニストを投与する工程を包含する、方法；上記障害が、単球もしくはマクロファージ、Ｔ細胞もしくはＢ細胞、樹状細胞、または上皮細胞もしくは内皮細胞によって仲介される上記方法；および上記マクロファージが、肺胞マクロファージである上記方法；ならびに上記障害が、ぜん息、アレルギー性鼻炎、気管支炎；細気管支炎；または慢性閉塞性肺障害（ＣＯＰＤ）を含む上記方法を提供する。
【００１３】
本発明のさらに別の実施形態は、被験体を処置する上記方法であって、ここで上記アンタゴニストは、気道反応性亢進を軽減または阻害し；上記アゴニストまたはアントゴニストは、抗体の抗原結合部位に由来する結合組成物であり；上記アゴニストまたはアンタゴニストは、ＩＬ−１９（配列番号１または配列番号２）；ＩＬ−２４（配列番号３または配列番号４）；ＩＬ−２０Ｒ１；ＩＬ−２０Ｒ２；もしくはＩＬ−２２Ｒを含むポリペプチドまたは核酸に特異的に結合する方法であるか、あるいは上記アゴニストまたはアンタゴニストが、ポリクローナル抗体；モノクローナル抗体；ヒト化抗体；Ｆａｂフラグメント、Ｆｖフラグメント、もしくはＦ（ａｂ’）２フラグメント；抗体のペプチド模倣体；核酸；または検出可能な標識を含む上記方法を提供する。
【００１４】
本発明はまた、気道反応性亢進障害または気道炎症障害を診断する方法を提供し、上記方法は、試験被験体由来のサンプルを、ＩＬ−１９（配列番号１または配列番号２）；ＩＬ−２４（配列番号３または配列番号４）；ＩＬ−２０Ｒ１；ＩＬ−２０Ｒ２；もしくはＩＬ−２２Ｒのポリペプチドまたは核酸に特異的に結合する結合組成物と接触させる工程を包含する方法；ならびに上記結合組成物を、コントロール被験体に由来するサンプルまたはコントロールサンプルと接触させる工程；および上記試験被験体で見出された結合と、上記コントロール被験体またはコントロールサンプルで見出された結合とを比較する工程をさらに包含する方法を提供する。
【００１５】
本発明の別の実施形態は、生理学的活性を調節する化合物をスクリーニングする方法であって、候補化合物をＩＬ−１９ノックアウト（ＩＬ−１９ＫＯ）マウスに接触させて、接触されたＩＬ−１９ＫＯマウスを提供し、上記接触されたＩＬ−１９ＫＯマウスにおいて生理学的活性を決定する工程；上記候補化合物と接触していないＩＬ−１９ＫＯマウスにおいて生理学的活性を決定する工程；および上記接触されたＩＬ−１９ＫＯマウスの生理学的活性と上記接触されていないＩＬ−１９ＫＯマウスの生理学的活性とを比較する工程を包含する、方法；ならびに上記生理学的活性が、免疫活性；気道の炎症；気道反応性亢進；または増殖活性を含む上記方法を提供する。
【００１６】
本発明のさらに別の実施形態は、生理学的活性を調節する化合物をスクリーニングする方法を提供し、上記方法は、候補化合物をＩＬ−２４ノックアウト（ＩＬ−２４ＫＯ）マウスに接触させて、接触されたＩＬ−２４ＫＯマウスを提供し、上記接触されたＩＬ−２４ＫＯマウスにおいて生理学的活性を決定する工程；上記候補化合物と接触していないＩＬ−２４ＫＯマウスにおいて生理学的活性を決定する工程；および上記接触されたＩＬ−２４ＫＯマウスの生理学的活性と上記接触されていないＩＬ−２４ＫＯマウスの生理学的活性とを比較する工程を包含する、方法；ならびに上記生理学的活性が、免疫活性；気道の炎症；気道反応性亢進；または増殖活性を含む上記方法を提供する。
【００１７】
本発明のさらなる局面は、肥満もしくは糖尿病を処置または診断するための方法であって、上記方法は、有効量の、ＩＬ−１９；もしくはＩＬ−２４のアゴニストまたはアンタゴニストを投与する工程を包含する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
（好ましい実施形態の詳細な説明）
添付された特許請求の範囲を含む本明細書において使用される場合、「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」のような単語の単数形態は、状況が明らかにそうでないことを示さない限り、それらの対応する複数形の言及を包含する。
【００１９】
本明細書において引用される全ての参考文献は、あたかも各個々の刊行物または特許出願が、具体的かつ独立して参考として援用されることが示されるのと同じ程度に、本明細書において参考として援用される。
【００２０】
（Ｉ．定義）
「活性化」、「刺激」および「処置」は、細胞またはレセプターに対して適用される場合、状況によって明らかにそうでないことが示されないか、または明示的にそうでないことが示されない限り、同じ意味を有し得る（例えば、リガンドを用いた細胞またはレセプターの活性化、刺激、または処置）。「リガンド」は、天然リガンドおよび合成リガンド（例えば、サイトカイン、サイトカインの改変体、アナログ、ムテイン、および抗体由来の結合組成物）を包含する。「リガンド」はまた、低分子（例えば、サイトカインのペプチド模倣体、および抗体のペプチド模倣体）も包含する。「活性化」は、内部機構および外部機構、または環境因子によって調節される場合の細胞の活性化について言及し得る。例えば、細胞、組織、器官、または生物の「応答」は、生化学的挙動または生理学的挙動（例えば、生物学的画分内の濃度、密度、接着、もしくは移動、遺伝子発現の速度、または分化の状態）の変化を包含する。この変化は、活性化、刺激、または処置、あるいは遺伝的プログラミングのような内部機構と相関する。
【００２１】
分子の「活性」は、リガンドもしくはレセプターに対する分子の結合、触媒活性；遺伝子発現もしくは細胞シグナル伝達、分化、または成熟を刺激する能力；抗原性活性、他の分子の活性の調節などを説明し得るか、あるいはこれらについて言及し得る。分子の「活性」はまた、細胞−細胞相互作用（例えば、接着）を調節もしくは維持する活性、または細胞の構造（例えば、細胞膜または細胞骨格）を維持する活性について言及し得る。「活性」はまた、比活性（例えば、［触媒活性］／［ｍｇタンパク質］、または［免疫学的活性］／［ｍｇタンパク質］、生物学的画分における濃度など）を意味し得る。「増殖活性」は、例えば、正常な細胞分裂、ならびに癌、腫瘍、形成異常、細胞形質転換、転移、および新脈管形成を促進する活性（すなわち、これらに必要とされるか、またはこれらに特異的に関連する活性）を包含する。
【００２２】
「投与」および「処置」は、ヒト被験体、研究被験体、獣医学的被験体、動物、または細胞の処置に適用される場合、薬学的薬剤、治療的薬剤、診断的薬剤もしくは薬学的組成物、治療的組成物、診断的組成物、またはプラシーボの、ヒト被験体、動物、または細胞への接触について言及する。細胞の処置は、試薬の細胞への接触、および試薬の流体への接触（ここで、上記流体は、細胞と接触している）を包含する。「投与」および「処置」はまた、上記薬剤または組成物が、エキソビボ処置の間もしくは後に、代謝、変更、分解、または除去される場合であっても、細胞、組織、または器官の、上記被験体または動物への接触が後に続くエキソビボ処置（例えば、細胞、組織、または器官へのエキソビボ処置）を包含する。
【００２３】
「候補化合物」は、例えば、その候補化合物が、治療剤もしくは診断剤の開発または同定に使用される、分子、分子の複合体、あるいは分子の混合物について言及する。候補化合物の試験またはスクリーニングは、上記化合物が治療薬または診断薬として有用であるか否かを決定するために使用される。「候補化合物」は、例えば、第２の治療剤もしくは診断剤、またはキャリア、希釈剤、安定剤、もしくは賦形剤と一緒の、ポリペプチド、抗体、天然生成物、合成化学物質、有機化合物、無機化合物、およびこれらの組み合わせを包含する。
【００２４】
「障害」は、病理学的状態、または病理学的状態に相関しているか、もしくは病理学的状態になりやすい状態について言及する。「感染性障害」は、例えば、微生物、細菌、寄生生物、ウイルスなどから生じる障害、および上記障害に対する不適切な免疫応答、効果のない免疫応答、または病理学的な免疫応答について言及する。「腫瘍形成障害」は、癌、形質転換された細胞、腫瘍、形成異常（ｄｉｓｐｌａｓｉａ）、新脈管形成、転移など、および上記障害に対する不適切な免疫応答、効果のない免疫応答、または病理学的な免疫応答を包含する。
【００２５】
「遺伝子」は、ポリペプチドおよび任意の調節配列（例えば、プロモーター、オペレーター、エンハンサー、ならびに転写開始シグナルおよび転写終止シグナル）のコード領域を包含する。上記コード領域は、１つの連続的なオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を含み得るか、または上記コード領域は、１を超えるＯＲＦを含み得る（すなわち、１以上のイントロンによって中断され得る）。
【００２６】
「有効量」は、例えば、障害、状態、または病理学的状態の症状または徴候を改善するのに十分な、ＩＬ−１９アゴニスト、ＩＬ−１９アンタゴニスト、またはＩＬ−１９結合化合物もしくはＩＬ−１９結合組成物、あるいはＩＬ−２４アゴニスト、ＩＬ−２４アンタゴニスト、またはＩＬ−２４結合化合物もしくはＩＬ−２４結合組成物の量を意味する。「有効量」はまた、障害、状態、または病理学的状態の症状または徴候を診断するのに十分な、ＩＬ−１９アゴニスト、ＩＬ−１９アンタゴニスト、またはＩＬ−１９結合化合物もしくはＩＬ−１９結合組成物、あるいはＩＬ−２４アゴニスト、ＩＬ−２４アンタゴニスト、またはＩＬ−２４結合化合物もしくはＩＬ−２４結合組成物の量にも関する。
【００２７】
「発現」は、特異的遺伝子によってコードされるｍＲＮＡまたはポリペプチドの測定について言及する。発現の単位は、例えば、細胞もしくは組織、または細胞抽出物もしくは組織抽出物におけるタンパク質１ｍｇあたりの、ｍＲＮＡの分子の数あるいはポリペプチドの数の測定であり得る。発現の単位は、相対的であり得、例えば、コントロール哺乳動物および実験哺乳動物からのシグナルの比較、またはｍＲＮＡまたはポリペプチドに非特異的である試薬に対する、ｍＲＮＡまたはポリペプチドに特異的である試薬を用いたシグナルの比較である。
【００２８】
「炎症障害」は、上記病理学が、全体的または部分的に、免疫系の細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、単球もしくはマクロファージ、肺胞マクロファージ、樹状細胞、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、好中球、好酸球、または肥満細胞）の数の増加および／または活性の増加から生じる、障害あるいは病理学的状態を意味する。
【００２９】
「ノックアウト」（ＫＯ）は、遺伝子（例えば、ＩＬ−１９またはＩＬ−２４）によってコードされるポリペプチドの少なくとも一部分の発現の、部分的な減少または完全な減少について言及し、上記遺伝子は、単一細胞、選択された細胞、または哺乳動物の全ての細胞に対して内因性である。ＫＯはまた、生物学的機能は低下しているが、発現は必ずしも減少していない実施形態（例えば、挿入された不活性化ペプチド、オリゴペプチド、またはポリペプチドを含む発現ＩＬ−１９ポリペプチドを含有するＩＬ−１９ＫＯポリペプチド）を包含する。コード配列または調節配列の破壊は、ノックアウト技術によって包含される。上記細胞または哺乳動物は、内因性遺伝子の一方の対立遺伝子が破壊されている「ヘテロ接合性ノックアウト」であり得る。あるいは、上記細胞または哺乳動物は、内因性遺伝子の両方の対立遺伝子が破壊されている「ホモ接合性ノックアウト」であり得る。「ホモ接合性ノックアウト」は、両方の対立遺伝子の破壊をそのゲノムにおける同一の技術または同一の結果に限定することは意図されない。本発明の範囲内には、一方もしくは両方のＩＬ−１９対立遺伝子および／または一方もしくは両方のＩＬ−２４対立遺伝子がノックアウトされている哺乳動物が含まれる。「トランスジェニック」は、遺伝子工学の技術によって作製され、安定して遺伝される遺伝的変化について言及する。トランスジェニックの方法、細胞、および動物は、ノックアウト技術の使用から生じる遺伝的変化を含む。
【００３０】
「マーカー」は、細胞、組織、器官、動物の表現型（例えば、ＩＬ−１９ＫＯマウスもしくはＩＬ−２４ＫＯマウス、またはヒト被験体の表現型）に関する。マーカーは、例えば、細胞の精製、定量、移動、活性化、成熟、または発生の間に細胞を検出するために使用され、そしてインビトロ研究とインビボ研究との両方について使用され得る。活性化マーカーは、細胞の活性化に関連するマーカーである。
【００３１】
「感受性」、例えば、リガンドに対するレセプターの感受性は、レセプターへのリガンドの結合が、上記レセプターまたは上記レセプターに特異的に関連した現象もしくは分子の検出可能な変化（例えば、上記レセプターに関連したタンパク質のコンホメーション変化、リン酸化、性質もしくは量）、あるいは上記レセプターによって仲介されるか、または上記レセプターに関連する遺伝的発現の変化を生じることを意味する。
【００３２】
「可溶性レセプター」は、水溶性であり、そして例えば、細胞外流体、細胞内流体において生じるか、または膜に弱く結合されたレセプターについて言及する。可溶性レセプターは、水溶性となるように操作されているレセプターをさらに言及する。
【００３３】
「結合の特異性」、「結合の選択性」などは、所定のリガンドと他のリガンドとの間または所定のレセプターと他のレセプターとの間を区別し得る、所定のリガンドと所定のレセプターとの間の結合相互作用について言及する。「特異的に」または「選択的に」結合するとは、リガンド／レセプター、抗体／抗原、または他の結合対について言及する場合、タンパク質および他の生物学的物質の不均一な集団においてタンパク質の存在の決定因となる結合反応を示す。従って、指定された条件下において、特定化されたリガンドは、特定のレセプターに結合し、かつサンプル中に存在するかなりの量の他のタンパク質には結合しない。抗体、または抗体の抗原結合部位に由来する結合組成物は、任意の他の抗原に対する親和性よりも、少なくとも２倍超、好ましくは少なくとも１０倍超、より好ましくは少なくとも約２０倍超、そして最も好ましくは少なくとも１００倍超の親和性でその抗原に結合する。好ましい実施形態において、上記抗体は、約１０９リットル／ｍｏｌを超える親和性を有する。例えば、Ｍｕｎｓｅｎら（１９８０）Ａｎａｌｙｔ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１０７：２２０−２３９を参照のこと。
【００３４】
（ＩＩ．概要）
ＩＬ−１９およびＩＬ−２４（ｍｄａ−７としてもまた公知）は、サイトカインのＩＬ−１０ファミリーのメンバーであり、ＩＬ−１０と２１〜２２％のアミノ酸配列同一性を共有する。ＩＬ−１０、ＩＬ−１９、およびＩＬ−２４は、ヒト染色体１ｑ３２上に存在し、例えば、Ｔ細胞によって発現される。ＩＬ−２４のげっ歯類オーソロガスは、例えば、ラットのｃ４９ａ（ｍｏｂ−５としてもまた公知）およびマウスのＦＩＳＰが同定されており、これらのオーソロガスは、ヒトＩＬ−２４と幾分異なって機能する。ＩＬ−１９およびＩＬ−２４のレセプターもまた、同定されている。上記ＩＬ−１９レセプターの複合体は、ＩＬ−２０Ｒ１（ｃｒｆ２−８としてもまた公知）およびＩＬ−２０Ｒ２（ＤＩＲＳ１；ｃｒｆ２−１１としてもまた公知）のヘテロダイマーである。ＩＬ−２４は、２種の異なるレセプター複合体（すなわち、ＩＬ−２２Ｒ１とＩＬ−２０Ｒ２とのヘテロダイマーおよびＩＬ−２０Ｒ１（ＩＬ−２０ＲＡとしてもまた公知）とＩＬ−２０Ｒ２（ＩＬ−２０ＲＢとしてもまた公知）とのヘテロダイマー）に結合する（例えば、Ｇａｌｌａｇｈｅｒら，（２０００）Ｇｅｎｅｓ  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １：４４２−４５０；Ｄｕｍｏｕｔｉｅｒら，（２００１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６７：３５４５−３５４９；Ｆｉｃｋｅｎｓｃｈｅｒら，（２００２）Ｔｒｅｎｄｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２３：８９−９６；Ｐａｒｒｉｓｈ−Ｎｏｖａｋら，（２００２）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７：４７５１７−４７５２３；Ｗａｎｇら，（２００２）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７：７３４１−７３４７；米国特許公開番号ＵＳ２００３／００７８３８１を参照のこと）。
【００３５】
多くの因子が、ＩＬ−１９またはＩＬ−２４の発現を刺激し得、それらは次いで、アポトーシスまたは他のサイトカインの発現のような現象を誘発し得る。刺激因子としては、リポ多糖類（ＬＰＳ）、ＩＬ−４、顆粒球単球コロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、および植物性赤血球凝集素（ｐｈｙｔｏｈｅｍａｇｌｕｔｔｉｎｉｎ）（ＰＨＡ）が挙げられる。
【００３６】
ＩＬ−１９およびＩＬ−２４ならびに／またはそれらのレセプターの複合体は、多くの生理学的活性を用いて同定されている。ＩＬ−１９レセプターの発現は、乾癬に関連している。ＩＬ−２４は、新脈管形成、ならびに内皮細胞の分化および移動を阻害する。さらに、ＩＬ−２４は、サイトカイン（例えば、インターロイキン−６（ＩＬ−６）および腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα））の発現を誘発する。Ｃ４９ａは、ＩＬ−２４のラットオーソロガスであり、細胞増殖の増加（例えば、創傷治癒およびｒａｓ癌遺伝子形質転換）に関連する（例えば、Ｒａｍｅｓｈら，（２００３）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６３：５１０５−５１１３；Ｓａｕａｎｅら，（２００３）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｖｓ．１４：３５−５１；Ｐａｒｒｉｓｈ−Ｎｏｖａｋら（前出）；Ｗｏｌｋら，（２００２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６８：５３９７−５４０２；Ｌｉａｏら，（２００２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９：４２８８−４２９７；Ｇｈｏｒｅｓｃｈｉら，（２００３）Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ９：４０−４６；Ｃａｕｄｅｌｌら，（２００２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６８：６０４１−６０４６；Ｄｕｍｏｕｔｉｅｒら（前出）；Ｓａｒｋａｒら，（２００２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９９：１００５４−１００５９；Ｊｉａｎｇら，（１９９６）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．９３：９１６０−９１６５；Ｃｈａｎｇら，（２００３）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７８：３３０８−３３１３；Ｆｉｃｋｅｎｓｃｈｅｒら，（２００２）Ｔｒｅｎｄｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２３：８９−９６；Ｇａｌｌａｇｈｅｒら，（２０００）Ｇｅｎｅｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：４４２−４５０；Ｖａｎｄｅｎｂｒｏｅｃｋら，（２００２）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７：２５６６８−２５６７６；Ｓａｕａｎｅら，（２００３）Ｊ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９６：３３４−３４５を参照のこと）。
【００３７】
ＩＬ−１９およびＩＬ−２４、ならびにそれらに対するアゴニストおよびアンタゴニストの生物学的効果は、細胞に関連する特定の表現型の「マーカー」を使用して決定され得る。ＣＤ１１ｃ＋ＭＨＣ  ｌｏｗ細胞は、気管支肺胞洗浄流体ＢＡＬ中の細胞の分析によって決定された場合、野生型コントロールマウスと比較してＩＬ−２４ＫＯマウスにおいて増加することが見出された。ＣＤ１１ｃは、免疫細胞の発生および細胞活性化のマーカーであり、α−インテグリンタンパク質のＣＤ−１１ファミリーのメンバーである。ＣＤ１１は、細胞の接着および移動（免疫細胞の上皮細胞を通過する気道腔への移動を含む）を仲介する。ＣＤ１１は、例えば、ＤＣ、マクロファージ、Ｔ細胞、およびＢ細胞の活性化についてのマーカーである（例えば、Ｋａｄｏｗａｋｉら，（２００１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６６：２２９１−２２９５；Ｋａｄｏｗａｋｉら，（２００１）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９４：８６３−８６９；Ｌｉｕ（２００２）Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ６３：１０６７−１０７１；Ｓｈｅｌｌｅｙら，（２００２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６８：３８８７−３８９３；ＫｉｄｎｅｙおよびＰｒｏｕｄ（２０００）Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２３：３８９−３９５；ＴａｂｏｒｄａおよびＣａｓａｄｅｖａｌｌ（２００２）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １６：７９１−８０２を参照のこと）。
【００３８】
ＭＨＣクラスＩＩ発現は、ＢＡＬ中の細胞の測定で決定されたように、野生型コントロールマウスと比較してＩＬ−２４ＫＯマウスにおいて増加している。ＭＨＣクラスＩＩは、細胞の活性化または成熟（例えば、ＤＣ、単球、マクロファージ、Ｂ細胞、Ｔ細胞、および内細胞の活性化または成熟）についてのマーカーである。ＤＣまたはＢ細胞のような抗原提示細胞（ＡＰＣ）が一旦ＭＨＣクラスＩＩを発現すると、そのＡＰＣは、他の型の細胞（すなわち、T細胞）を活性化し得る。例えば、Ｗａｌｄｂｕｒｇｅｒら，（２００１）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９４：３９３−４０６；Ｐａｉら，（２００２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９：１３２６−１３３３；Ｖｉｌｌａｄａｎｇｏｓら，（２００１）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １４：７３９−７４９；Ｘａｕｓら，（２０００）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６５：６３６４−６３７１；Ｋｗａｋら，（２０００）Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ６：１３９９−１４０２；Ｍａｃｈら，（１９９６）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４：３０１−３３１を参照のこと。
【００３９】
Ｂ２２０を発現する樹状細胞の比率は、チャレンジされていない（ｎｏｉｎ−ｃｈａｌｌｅｎｇｅｄ）野生型コントロールマウスよりもチャレンジされていない（ｎｏｎ−ｃｈａｌｌｅｎｇｅｄ）ＩＬ−１９ＫＯマウスにおいて、より高かった。Ｂ２２０は、例えば、ＤＣ上で見出されるタンパク質である。このタンパク質は、状況に依存して、多かれ少なかれＤＣ活性に関連している。ＣＤ１１ｃ＋Ｂ２２０＋ＤＣは、ＣＤ１１ｃ＋Ｂ２２０−ＤＣよりも多くの型のケモカインに引き付けられるが、しかし明らかに対照的に、ＣＤ１１ｃ＋Ｂ２２０＋ＤＣは、ＣＤ１１ｃ＋Ｂ２２０−ＤＣよりもＴ細胞増殖を刺激する能力に劣る（Ｂｒａｗａｎｄら，（２００２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９：６７１１−６７１９）。
【００４０】
（ＩＩＩ．核酸、細胞、および器官の遺伝的変更）
核酸、細胞、および器官は、例えば、既存の核酸配列を変更もしくは欠失させることによってか、または新規の染色体配列もしくは染色体外の配列を導入することによって、遺伝的に改変され得る。遺伝的変更は、新規の遺伝子を導入すること、既存の遺伝子を変異もしくはノックアウトすること、および遺伝子の調節特性を変更することを包含する。これらの変更は、染色体エレメントまたは染色体外のエレメントの共有結合的改変、および非共有結合的改変を含む。
【００４１】
サイトカインノックアウト（ＫＯ）構築物（例えば、ＩＬ−１９ＫＯ構築物またはＩＬ−２４ＫＯ構築物）は、代表的に、ゲノムＤＮＡまたはｃＤＮＡのサイトカインヌクレオチド配列の一部分を単離し、そして上記サイトカイン配列にマーカー配列を挿入することによって調製される。上記サイトカインＤＮＡ分子は、上記ＫＯ構築物が胚性幹（ＥＳ）細胞のゲノムＤＮＡに導入される場合、染色体ＤＮＡによる認識のために、十分な相補性配列が提供されるように十分長い（すなわち、相同的組換え）。
【００４２】
ＫＯ構築物を調製する際に使用されるべき天然に存在するゲノムのサイトカインフラグメントまたはｃＤＮＡ分子（すなわち、ＩＬ−１９またはＩＬ−２４をコードしている）は、当該分野で周知の方法を使用して得られ得る。これらの方法は、例えば、特定のＤＮＡ配列のポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）増幅、またはサイトカイン遺伝子を含む細胞もしくは組織から調製されたゲノムライブラリーのスクリーニングであり、そのスクリーニングには、サイトカインゲノム遺伝子配列の少なくとも一部分を得るために、同じサイトカイン遺伝子または相同性の高いサイトカイン遺伝子の少なくとも一部分をコードするｃＤＮＡプローブを使用する。あるいは、ｃＤＮＡ配列がＫＯ構築物において使用される場合、上記ｃＤＮＡは、ｃＤＮＡライブラリーをスクリーニングすることによって得られ得る。
【００４３】
マーカー遺伝子挿入のための適切な位置は、全長の内因性サイトカイン遺伝子の転写もしくは翻訳を減少または妨げるように機能する位置、あるいは翻訳は可能であるが、そのサイトカインタンパク質が生物学的に不活性である位置である。この挿入手順は、サイトカイン遺伝子由来の配列の欠失を伴ってか、またはそれを伴わずに（すなわち、イントロンおよび／もしくはエキソンの欠失を伴ってか、または伴わずに）達成され得る。
【００４４】
マーカー遺伝子は、通常、それ自身のプロモーターまたは別の強力なプロモーター（例えば、チミジンキナーゼ（ＴＫ）プロモーターまたはホスホグリセロールキナーゼ（ＰＧＫ））に作動可能に連結される。上記マーカー遺伝子は、ノックアウトされる遺伝子のプロモーターを使用して転写され得る場合、それ自身のプロモーターに結合されることを必要としない。好ましいマーカー遺伝子は、ネオマイシン耐性遺伝子をコードするｎｅｏのような任意の抗生物質耐性遺伝子、またはβ−ガラクトシダーゼをコードするβ−ｇａｌである。いくつかの場合において、上記サイトカイン核酸配列に関して逆配向またはアンチセンス配向に、マーカー配列を挿入することが好ましい。逆挿入は、マーカー遺伝子が特に強力なプロモーターに作動可能に連結している場合に好ましい。連結されたＤＮＡ  ＫＯ構築物は、ＥＳ細胞に直接的にトランスフェクトされ得るか、または連結されたＤＮＡ  ＫＯ構築物は、挿入の前に増幅するために、まず適切なベクターに配置され得る。
【００４５】
上記ＩＬ−１９−ＫＯ構築物またはＩＬ−２４ＫＯ構築物は、代表的にＥＳにトランスフェクトされ、使用されるＥＳ細胞株は、ＫＯ構築物の生殖細胞系伝達（ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ）を作製するために、発生する胚の生殖細胞株に組み込み、その一部になる能力について選択される。ＫＯマウスを作製するためのＥＳ細胞株としては、例えば、マウス細胞株Ｄ３およびＥ１４（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ，カタログ番号ＣＲＬ  １９３４およびＣＲＬ  １８２１）およびＲＷ４（Ｇｅｎｏｍｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，カタログ番号ＥＳＶＪ−１１８２）が挙げられる。ＫＯ構築物のトランスフェクションは、例えば、エレクトロポレーション、マイクロインジェクション、またはリン酸カルシウム処理によって達成され得る。
【００４６】
上記ＩＬ−１９ＫＯ構築物またはＩＬ−２４ＫＯ構築物に対して陽性である子孫は、代表的にヘテロ接合性であるが、いくつかのホモ接合性ノックアウトが存在してもよい。ホモ接合性ノックアウト哺乳動物が所望される場合、それらは、互いの生殖細胞系に上記ノックアウト構築物を保有していると考えられるヘテロ接合性子孫を交配することによって調製され得る。
【００４７】
サイトカインＫＯ構築物を作製するための分子生物学の方法が、記載される。例えば、Ｐｏｗｅｒ（２００３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２７３：７３−８２；Ｓａｕｅｒ（１９９８）Ｍｅｔｈｏｄｓ  １４：３８１−３９２；Ｃｏｐｅｌａｎｄら，（２００１）Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｓ．２：７６９−７７９；ＶｏｏｒｈｏｅｖｅおよびＡｇａｍｉ（２００３）Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２１：２−４；Ｗａｌｋｅら，（２００１）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１２：６２６−６３１；Ｇａｌｌｉ−Ｔａｌｉａｄｏｒｏｓら，（１９９５）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  １８１：１−１５；Ｌｏｖｉｋ（１９９７）Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ  １１９：６５−７６；Ｃｈａｒｒｅａｕら，（１９９６）Ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  Ｒｅｓ．５：２２３−２３４；ｔｅ  Ｒｉｅｌｅら，（２００１）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５８：２５１−２６２；ＯｓａｄａおよびＭａｅｄａ（１９９８）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１１０：７９−９２；ＲａｖｉｒａｊａｎおよびＩｓｅｎｂｅｒｇ（２００２）Ｌｕｐｕｓ  １１：８４３−８４９；ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｗｅｙｄｅｎら，（２００２）Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  １１：１３３−１６４を参照のこと。
【００４８】
幹細胞を使用してサイトカインＫＯマウスを作製するための方法が、記載される。例えば、Ｄｕｎｓｔａｎらに対して発行された米国特許第６，０８７，５５５号；Ｐｏｔｔｅｎ（編）（１９９７）Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ；Ｓｅｌｌ（編）（２００３）Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ；Ｍａｒｓｈａｋら，（編）（２００２）Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ；Ｔｕｒｋｓｅｎ（編）（２００１）Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ；Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ；Ｄｕｒｕｍら，（編）（１９９８）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｋｎｏｃｋｏｕｔｓ，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ；Ｊａｃｏｂ（編）（１９９４）Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ｋｎｏｃｋｏｕｔ  ｏｆ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ  ｉｎ  Ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  Ｍｉｃｅ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ；ＴｙｍｍｓおよびＫｏｌａ（編）（２００１）Ｇｅｎｅ  Ｋｎｏｃｋｏｕｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪを参照のこと。
【００４９】
ＩＬ−１９ＫＯマウスによるＩＬ−１９の発現およびＩＬ−２４ＫＯマウスによるＩＬ−２４の発現は、代表的に、適切な野生型マウスに由来する発現の６０％未満であり、より代表的には３０％未満であり、一般的には１５％未満であり、好ましくは５％以下であり、より好ましくは２％以下であり、そして最も好ましくは１％以下である。
【００５０】
ＫＯマウスの適切な野生型マウスとの比較において、ＫＯマウスと野生型マウスとは、可能なかぎり近縁種であることが好ましい。例えば、上記野生型マウスは、ＫＯマウスの調製の際の幹細胞の供給源として使用されたマウスと同じ系統のマウスであるべきである。
【００５１】
本発明は、診断剤、医薬品、および治療剤をスクリーニングならびに試験するために、ＩＬ−１９ＫＯマウスまたはＩＬ−２４ＫＯマウスを使用する方法を企図する。スクリーニングの目的で、どのアナログが投与されたＩＬ−１９もしくはＩＬ−２４と最も同様に機能するか、またはどのアナログが投与されたＩＬ−１９もしくはＩＬ−２４より優れているかを決定するために、ＩＬ−１９ＫＯ動物またはＩＬ−２４ＫＯ動物は、種々のＩＬ−１９またはＩＬ−２４のアナログで処置され得る。スクリーニングアッセイの指標は、所定のレベル（例えば、野生型マウスまたは適切なコントロールマウスで見出されるレベル）に対するマクロファージ活性または濃度の変化、所定のレベルに対する樹状細胞活性または濃度の変化、所定のレベルに対する気道反応性亢進の増強であり得る。
【００５２】
（ＩＶ．アゴニスト、アンタゴニスト、および結合組成物）
抗体、および抗体の抗原結合部位に由来する結合組成物が、提供される。これらとしては、ヒト化抗体、ヒト抗体、モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体、結合フラグメント（例えば、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ）２フラグメント、およびＦｖフラグメント）、およびこれらの遺伝子操作されたバージョンが挙げられる。「由来する（ｄｅｒｉｖｅｄ）」は、抗体の化学的改変、抗体の組換え改変によって生じるもの、ならびに抗体を構造的に特徴付けた後の結合組成物のコンピューターモデリングによって生じるものを含む。上記抗体または結合組成物は、アゴニスト性であってもアンタゴニスト性であってもよい。リガンドおよびレセプター、二量体リガンドの両方のサブユニット、または二量体レセプターの両方のサブユニットに同時に結合する抗体が、企図される。ＩＬ−１９、ＩＬ−２４、抗ＩＬ−１９抗体、および抗ＩＬ−２４抗体の低分子のペプチド模倣体（ｍｉｍｅｔｉｃ）もまた、包含される。
【００５３】
抗体は、通常、少なくとも約１０−３Ｍ、より通常は少なくとも約１０−６Ｍ、代表的には少なくとも約１０−７Ｍ、より代表的には少なくとも約１０−８Ｍ、好ましくは少なくとも約１０−９Ｍ、そしてより好ましくは少なくとも約１０−１０Ｍ、そして最も好ましくは少なくとも約１０−１１ＭのＫＤで結合する（例えば、Ｐｒｅｓｔａら，（２００１）Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．８５：３７９−３８９；Ｙａｎｇら，（２００１）Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｏｎｃｏｌ．Ｈｅｍａｔｏｌ．３８：１７−２３；Ｃａｒｎａｈａｎら，（２００３）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．（補遺）９：３９８２ｓ−３９９０ｓを参照のこと）。
【００５４】
本発明は、ＩＬ−１９のアゴニストおよびアントゴニストを提供する。これらは、例えば、ＩＬ−１９のムテインおよび天然に存在する変異体、結合組成物（例えば、抗ＩＬ−１９抗体）、ＩＬ−１９レセプターポリペプチド可溶性バージョン、ならびにＩＬ−１９レセプターポリペプチドに対する結合組成物および抗体である。ＩＬ−２４のアゴニストおよびアンタゴニストもまた提供される。これらは、例えば、ＩＬ−２４のムテインおよび天然に存在する変異体、結合組成物（例えば、抗ＩＬ−２４抗体）、ＩＬ−２４レセプターポリペプチド可溶性バージョン、ならびにＩＬ−２４レセプターポリペプチドに対する結合組成物および抗体である。
【００５５】
ヒトＩＬ−１９（配列番号２）に対する抗体が調製され得る。ヒトＩＬ−１９において抗原性を増加させた領域は、ＫＲＡＩＱＡＫＤ（配列番号２のアミノ酸４５−５２）；ＴＫＮＬＬＡ（配列番号２の７８−８３）；ＫＤＨＱ（配列番号２の９１−９４）；およびＫＴＬＲ（配列番号２の１１６−１１９）を含む。ｈＩＬ−１９の変異体に対する抗体もまた企図される。例えば、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿７５８８４６；ＮＰ＿４４３１０４；およびＡＡＨ０９６８１を参照のこと。
【００５６】
ヒトＩＬ−２４（配列番号４）に対する抗体が調製され得る。ヒトＩＬ−２４において抗原性を増加させた領域は、ＡＶＫＤ（配列番号４のアミノ酸４８−５１）；ＳＡＲＬＬＱ（配列番号４の６１−６６）；ＬＶＨＴＬＬ（配列番号４の８１−８６）；ＬＫＴＶＦＫＮＹＨＮ（配列番号４の９０−９９）；ＤＳＡＨＲＲ（配列番号４の１３７−１４２）；およびＲＲＡＦＫＱＬＤＶＥＡＡＬＴＫＡＬ（配列番号４の１４７−１６３）を含む。ｈＩＬ−２４の変異体に対する抗体もまた、企図される。例えば、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿７１５６３９およびＮＰ＿０３７５０３を参照のこと。
【００５７】
ＩＬ−１９レセプターポリペプチドおよびＩＬ−２４レセプターポリペプチドに対する抗体（すなわち、ＩＬ−２０Ｒ１（ｃｒｆ２−８；ｚｃｙｔｏｒ７としてもまた公知）；ＩＬ−２０Ｒ２（ｃｒｆ２−１１；ＤＩＲＳ１としてもまた公知）；およびＩＬ−２２Ｒ）が、調製され得る。抗ＩＬ−２２Ｒ抗体は、入手可能である（Ｄｕｍｏｕｔｉｅｒら，（２００１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６７：３５４５−３５４９）。ヒトＩＬ−２０ＲＡの抗原性を増加させた領域は、ＧｅｎＢａｎｋ登録番号ＮＭ＿０１４４３２のアミノ酸７９−８５；１０３−１１４；１５５−１６３；２００−２０５；２３４−２４３；および２７８−２８７を含む。ヒトＩＬ−２０ＲＢの抗原性を増加させた領域は、ＧｅｎＢａｎｋ登録番号ＡＡＱ４７００３のアミノ酸４９−５１；７７−８１；１１１−１１６；１２７−１３０；１４７−１５２；および２３３−２３７を含む。抗原性は、Ｗｅｌｌｉｎｇ  ｐｌｏｔ  ｏｆ  Ｖｅｃｔｏｒ  ＮＴＩ（登録商標）Ｓｕｉｔｅ（Ｉｎｆｏｒｍａｘ，Ｉｎｃ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）によって決定された。
【００５８】
モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、およびヒト化抗体が、調製され得る。例えば、ＳｈｅｐｅｒｄおよびＤｅａｎ（編）（２０００）Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖ．Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ；ＫｏｎｔｅｒｍａｎｎおよびＤｕｂｅｌ（編）（２００１）Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ，ｐｐ．１３９−２４３；Ｃａｒｐｅｎｔｅｒら，（２０００）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６５：６２０５−６２１３；Ｈｅら，（１９９８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６０：１０２９−１０３５；Ｔａｎｇら，（１９９９）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：２７３７１−２７３７８；Ｌｉら，（２００２）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖｓ．１９０：５３−６８；Ｓａｔｏら，（１９９４）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３１：３７１−３８１；Ｍｏｒｅａら，（２０００）Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２０：２６７−２７９を参照のこと。
【００５９】
ヒト化抗体は、親マウス抗体の６個の相補性決定領域（ＣＤＲ）に由来するアミノ酸配列を含み、ヒト抗体フレームワークにグラフトされている。ヒト化に代わるものとしては、完全ヒト抗体、およびファージ上に示されたヒト抗体ライブラリーまたはトランスジェニックマウスに含まれるヒト抗体ライブラリーの使用が挙げられる。例えば、Ｖａｕｇｈａｎら，（１９９６）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：３０９−３１４；Ｂａｒｂａｓ（１９９５）Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．１：８３７−８３９；ｄｅ  Ｈａａｒｄら，（１９９９）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：１８２１８−１８２３０；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４；Ｃｌａｃｋｓｏｎら（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４−６２８；Ｍａｒｋｓら（１９９１）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７；Ｍｅｎｄｅｚら，（１９９７）Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔ．１５：１４６−１５６；ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＣｈａｍｅｓ（２０００）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ  ２１：３７１−３７７；Ｂａｒｂａｓら，（２００１）Ｐｈａｇｅ  Ｄｉｓｐｌａｙ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；Ｋａｙら，（１９９６）Ｐｈａｇｅ  Ｄｉｓｐｌａｙ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ；ｄｅ  Ｂｒｕｉｎら，（１９９９）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１７：３９７−３９９を参照のこと。
【００６０】
ヒト化抗体、キメラ抗体、一本鎖抗体、単一ドメイン抗体、二重特異性抗体、および抗体のペプチド模倣体が、記載される（例えば、ＭａｙｎａｒｄおよびＧｅｏｒｇｉｏｕ（２０００）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｅｎｇ．２：３３９−３７６；Ｍａｌｅｃｋｉら，（２００２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９９：２１３−２１８；Ｃｏｎｒａｔｈら，（２００１）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：７３４６−７３５０；Ｄｅｓｍｙｔｅｒら，（２００１）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：２６２８５−２６２９０，Ｋｏｓｔｅｌｎｅｙら，（１９９２）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．１４８：１５４７−１５５３；Ｃａｓｓｅｔら，（２００２）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．３０７：１９８−２０５；米国特許第５，９３２，４４８号；同第５，５３２，２１０号；同第６，１２９，９１４号；同第６，１３３，４２６号；同第４，９４６，７７８号を参照のこと）。
【００６１】
抗原の精製は、抗体の作製に必ずしも必要なわけではない。免疫化は、ＤＮＡベクター免疫化によって行われ得る。例えば、Ｗａｎｇら，（１９９７）Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ２２８：２７８−２８４を参照のこと。あるいは、動物は、目的の抗原を保有する細胞によって免疫化され得、続いてハイブリドーマ作製を行う。例えば、Ｍｅｙａａｒｄら，（１９９７）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ７：２８３−２９０；Ｗｒｉｇｈｔら，（２０００）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １３：２３３−２４２；Ｐｒｅｓｔｏｎら，（１９９７）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２７：  １９１１−１９１８；Ｋａｉｔｈａｍａｎａら，（１９９９）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．１６３：５１５７−５１６４を参照のこと。
【００６２】
抗体／抗原結合特性は、例えば、表面プラズモン共鳴または酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）によって測定され得る（Ｎｅｒｉら，（１９９７）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１５：１２７１−１２７５；Ｊｏｎｓｓｏｎら，（１９９１）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  １１：６２０−６２７；Ｈｕｂｂｌｅ（１９９７）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ  １８：３０５−３０６）。本発明の抗体は、抗体の標的抗原および関連する結合タンパク質を単離する際に親和性クロマトグラフィーのために使用され得る（Ｗｉｌｃｈｅｋら，（１９８４）Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．１０４：３−５５）。
【００６３】
ＩＬ−１９レセプターポリペプチドまたはＩＬ−２４レセプターポリペプチドの細胞外ドメインを含む可溶性レセプターが、提供される。ＩＬ−２０Ｒ１（ｃｒｆ２−８としてもまた公知）、ＩＬ−２０Ｒ２（ｃｒｆ２−１１としてもまた公知）、およびＩＬ−２２Ｒ（ｃｒｆ２−９；ｚｃｙｔｏｒ  １１としてもまた公知）の細胞外ドメインが、開示される。例えば、Ｋｏｔｅｎｋｏ（２００２）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｖｓ．１３：２２３−２４０；Ｋｏｔｅｎｋｏら，（２００１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６６：７０９６−７１０３；Ｄｕｍｏｕｔｉｅｒら，（２００１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６６：７０９０−７０９５を参照のこと。可溶性レセプターが調製され、標準的な方法に従って使用され得る。例えば、Ｊｏｎｅｓら，（２００２）Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ  １５９２：２５１−２６３；Ｐｒｕｄｈｏｍｍｅら，（２００１）Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．１：３５９−３７３；Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ−Ｂｏｔｒａｎ（１９９９）Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｃｌｉｎ．Ｌａｂ  Ｓｃｉ．３６：１６５−２２４を参照のこと。
【００６４】
核酸結合化合物が、診断的使用またはキット使用のために提供される。これらは、例えば、ＰＣＲプライマー、ハイブリダイゼーションプライマー、および分子ビーコンとして使用するための、例えば、配列番号２または配列番号４をコードする核酸、またはそれらの抗原性フラグメントである。
【００６５】
（ＩＶ．治療用組成物、方法）
本発明は、例えば、炎症および自己免疫障害の処置に使用するためのＩＬ−１９、抗ＩＬ−１９抗体、ＩＬ−２４、ならびに抗ＩＬ−２４抗体を提供する。これら治療的使用のための核酸もまた、提供される。これらの核酸は、例えば、配列番号２または配列番号４をコードする核酸、それらの抗原フラグメント、対応するアンチセンス核酸、およびそれらのハイブリダイゼーション生成物である。本発明はまた、ＲＮＡ干渉のための組成物を提供する。例えば、ＡｒｅｎｚおよびＳｃｈｅｐｅｒｓ（２００３）Ｎａｔｕｒｗｉｓｓｅｎｓｃｈａｆｔｅｎ  ９０：３４５−３５９；ＳａｚａｎｉおよびＫｏｌｅ（２００３）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１２：４８１−４８６；Ｐｉｒｏｌｌｏら，（２００３）Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ９９：５５−７７；Ｗａｎｇら，（２００３）Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌ．１３：１６９−１８９を参照のこと。
【００６６】
ＩＬ−１９のアゴニストもしくはアンタゴニスト、ＩＬ−２４のアゴニストもしくはアンタゴニストを含有する薬学的組成物または滅菌組成物を調製するために、例えば、サイトカイン、サイトカインアナログもしくはムテイン、またはそれらに対する抗体が、好ましくは不活性な薬学的に受容可能なキャリアまたは賦形剤と混合される。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ａｎｄ  Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ：Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ（１９８４）を参照のこと。治療剤および診断剤の処方物は、例えば、凍結乾燥粉末、スラリー、水溶液または懸濁液の形態の生理学的に受容可能なキャリア、賦形剤、または安定剤と混合することによって、調製され得る。例えば、Ｈａｒｄｍａｎら，（２００１）Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ；Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００）Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ；Ａｖｉｓら（編）（１９９３）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（編）（１９９０）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（編）（１９９０）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｄｉｓｐｅｒｓｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ；ＷｅｉｎｅｒおよびＫｏｔｋｏｓｋｉｅ（２０００）Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ  Ｔｏｘｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  Ｓａｆｅｔｙ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹを参照のこと。
【００６７】
治療薬に対する投与レジメンを選択することは、１または数個の因子（実体（ｅｎｔｉｔｙ）の血清または組織のターンオーバー速度、症状のレベル、実体の免疫原性、および生物学的マトリックス中の標的細胞の接近のしやすさが挙げられる）に依存する。好ましくは、投与レジメンは、受容可能なレベルの副作用と整合性をとって、患者に送達される治療薬の量を最大にする。したがって、送達される生物製剤の量は、部分的に、処置される状態の特定の実体および重症度に依存する。抗体、サイトカイン、および低分子の適切な用量を選択する際の指標が、利用可能である。例えば、Ｗａｗｒｚｙｎｃｚａｋ（１９９６）Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｂｉｏｓ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｕｂ．Ｌｔｄ，Ｏｘｆｏｒｄｓｈｉｒｅ，ＵＫ；Ｋｒｅｓｉｎａ（編）（１９９１）Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ  ａｎｄ  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ；Ｂａｃｈ（編）（１９９３）Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ；Ｂａｅｒｔら，（２００３）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４８：６０１−６０８；Ｍｉｌｇｒｏｍら，（１９９９）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４１：１９６６−１９７３；Ｓｌａｍｏｎら，（２００１）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４４：７８３−７９２；Ｂｅｎｉａｍｉｎｏｖｉｔｚら，（２０００）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４２：６１３−６１９；Ｇｈｏｓｈら，（２００３）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４８：２４−３２；Ｌｉｐｓｋｙら，（２０００）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４３：１５９４−１６０２を参照のこと。
【００６８】
抗体、抗体フラグメント、およびサイトカインは、例えば、１日、１週間もしくは１週間に１〜７回の間隔での持続注入によってか、または投薬によって提供され得る。投薬は、静脈内、皮下、局所、経口、経鼻、経直腸、筋肉内、脳室内に、または吸入によって提供され得る。好ましい用量プロトコルは、重大な望まれない副作用を避ける最大用量または投薬頻度を含むものである。全体の週用量は、一般的に少なくとも０．０５μｇ／ｋｇ体重、より一般的には少なくとも０．２μｇ／ｋｇ体重、最も一般的には少なくとも０．５μｇ／ｋｇ体重、代表的には少なくとも１μｇ／ｋｇ体重、より代表的には少なくとも１０μｇ／ｋｇ体重、最も代表的には少なくとも１００μｇ／ｋｇ体重、好ましくは少なくとも０．２ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは少なくとも１．０ｍｇ／ｋｇ体重、最も好ましくは少なくとも２．０ｍｇ／ｋｇ体重、最適には少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ体重、より最適には少なくとも２５ｍｇ／ｋｇ体重、そして最も最適には少なくとも５０ｍｇ／ｋｇ体重である。例えば、Ｙａｎｇら，（２００３）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４９：４２７−４３４；Ｈｅｒｏｌｄら，（２００２）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４６：１６９２−１６９８；Ｌｉｕら，（１９９９）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．Ｐｓｙｃｈ．６７：４５１−４５６；Ｐｏｒｔｉｅｌｊｉら，（２０００３）Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．５２：１３３−１４４を参照のこと。低分子治療薬（例えば、ペプチド模倣体、天然生成物、または有機化学物質）の所望の用量は、モル／ｋｇベースで抗体またはポリペプチドについての用量とほぼ同じである。
【００６９】
特定の患者に対する有効量は、処置される状態、患者の全体的な健康状態、投与の方法、経路および用量、ならびに副作用の重症度のような因子に依存して変化し得る。例えば、Ｍａｙｎａｒｄら（１９９６）Ａ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  ＳＯＰｓ  ｆｏｒ  Ｇｏｏｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｉｎｔｅｒｐｈａｒｍ  Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，ＦＬ；Ｄｅｎｔ（２００１）Ｇｏｏｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ａｎｄ  Ｇｏｏｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｕｒｃｈ  Ｐｕｂｌ．，Ｌｏｎｄｏｎ，ＵＫを参照のこと。
【００７０】
代表的な獣医学的被験体、実験被験体、または研究被験体としては、サル、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ウサギ、モルモット、ウマ、およびヒトが挙げられる。
【００７１】
適切な用量の決定は、例えば、当該分野において処置に影響することが公知もしくはそれが疑われるか、または処置に影響することが予想されるパラメータあるいは因子を使用して、医師によってなされる。一般的に、上記用量は、最適用量よりもいくらか少ない量で開始され、その後、あらゆるネガティブな副作用に対して所望の効果または最適な効果が達成されるまで、少量ずつ増加される。重要な診断測定としては、例えば、炎症の症状または産生された炎症性サイトカインのレベルの測定が挙げられる。好ましくは、使用される生物製剤は、処置の標的にされる動物と同じ種に由来し、これによってその試薬の液性反応を最小にする。
【００７２】
第２の治療因子（例えば、サイトカイン、ステロイド、化学療法剤、抗生物質、または放射線）の同時投与またはこれらでの処置のための方法は、当該分野で周知である。例えば、Ｈａｒｄｍａｎら，（編）（２００１）Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄＧｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，第１０版，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ；ＰｏｏｌｅおよびＰｅｔｅｒｓｏｎ（編）（２００１）Ｐｌａａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ｆｏｒ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａ．，ＰＡ；ＣｈａｂｎｅｒおよびＬｏｎｇｏ（編）（２００１）Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａ．，ＰＡを参照のこと。治療薬の有効量は、代表的に少なくとも１０％まで；通常少なくとも２０％まで；好ましくは少なくとも約３０％まで；より好ましくは少なくとも４０％まで；そして最も好ましくは少なくとも５０％まで症状を軽減する。
【００７３】
（Ｘ．キットおよび診断試薬）
本発明は、例えば、ぜん息、気道反応性亢進、樹状細胞仲介性障害、およびマクロファージ仲介性障害を診断するために、診断キットにおいて、ＩＬ−１９およびＩＬ−２４のポリペプチド、それらのフラグメント、ＩＬ−１９およびＩＬ−２４の核酸、ならびにそれらのフラグメントを提供する。ＩＬ−１９、ＩＬ−２４を検出するための抗体または抗体フラグメント、ならびにそれらの代謝産物および分解生成物を含む結合化合物もまた、提供される。代表的には、上記キットは、ＩＬ−１９またはＩＬ−２４のポリペプチド、あるいはそれらの抗原性フラグメント、それらに対する結合組成物、または核酸（例えば、核酸プローブ、プライマー、または分子ビーコン）のいずれかを含む画分を有する。例えば、Ｒａｊｅｎｄｒａｎら，（２００３）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．３１：５７００−５７１３；Ｃｏｃｋｅｒｉｌｌ（２００３）Ａｒｃｈ．Ｐａｔｈｏｌ．Ｌａｂ．Ｍｅｄ．１２７：１１１２−１１２０；Ｚａｍｍａｔｔｅｏら，（２００２）Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ａｎｎｅ．Ｒｅｖ．８：８５−１０１；Ｋｌｅｉｎ（２００２）Ｔｒｅｎｄｓ  Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．８：２５７−２６０を参照のこと。
【００７４】
診断の方法は、被験体（例えば、試験被験体）由来のサンプルを、ＩＬ−１９（配列番号１または配列番号２）；ＩＬ−２４（配列番号３または配列番号４）；ＩＬ−２０Ｒ１；ＩＬ−２０Ｒ２；またはＩＬ−２２Ｒのポリペプチドまたは核酸に特異的に結合する結合組成物と接触させる工程を包含し得る。上記方法は、コントロール被験体、正常被験体、または試験被験体由来の正常組織もしくは正常流体に由来するサンプルを、上記結合組成物と接触させる工程をさらに包含し得る。さらに、上記方法は、試験被験体への組成物の特異的結合を、正常被験体、コントロール被験体、または上記試験被験体由来の正常組織または正常流体への組成物の特異的結合と比較する工程をさらに包含し得る。試験サンプルもしくは試験被験体の発現または活性は、コントロールサンプルもしくはコントロール被験体からの発現または活性と比較され得る。コントロールサンプルとしては、例えば、免疫障害に罹患している患者の冒されていない組織または非炎症組織のサンプルが挙げられ得る。コントロール被験体もしくはコントロールサンプルからの発現または活性は、例えば、統計学的に適切な群のコントロール被験体から得られた所定値として提供され得る。
【００７５】
上記キットは、例えば、試薬および画分、使用のための試薬および説明書、または使用のための画分を含む試薬および説明書を備え得る。上記試薬は、ＩＬ−１９もしくはＩＬ−２４のアゴニストまたはアンタゴニスト、それらの抗原性フラグメント、結合組成物、あるいはセンスおよび／またはアンチセンス配向の核酸を含み得る。例えば、生物学的サンプルまたは化学的ライブラリーから得られた試験化合物の結合を決定するためのキットは、コントロール化合物、標識化合物、および結合された標識化合物からの遊離した標識化合物を分離するための方法を備え得る。上記コントロール化合物は、配列番号２もしくは配列番号４のセグメント、または配列番号２もしくは配列番号４のセグメントをコードする配列番号１もしくは配列番号３の核酸を含み得る。このセグメントは、０個、１個、２個、またはそれ以上の抗原性フラグメントを含み得る。
【００７６】
「標識されている」組成物は、分光学的方法、光化学的方法、生化学的方法、免疫化学的方法、同位体的方法、または化学的方法によって、直接的または間接的に検出可能である。例えば、有用な標識としては、３２Ｐ、３３Ｐ、３５Ｓ、１４Ｃ、３Ｈ、１２５Ｉ、安定な同位体、蛍光色素、高電子密度試薬、基質、エピトープタグ、または酵素（例えば、酵素結合免疫アッセイにおいて使用される）またはフルオレット（ｆｌｕｏｒｅｔｔｅ）が挙げられる（ＲｏｚｉｎｏｖおよびＮｏｌａｎ（１９９８）Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．５：７１３−７２８）。
【００７７】
診断アッセイは、生物学的マトリックス（例えば、生細胞、細胞抽出物、細胞溶解物、固定された細胞、細胞培養物、体液、または法医学的サンプル）を用いて使用され得る。診断またはキットの目的に有用な結合体化抗体としては、色素、同位体、酵素、および金属に結合された抗体が挙げられる。例えば、Ｌｅ  Ｄｏｕｓｓａｌら，（１９９１）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．１４６：１６９−１７５；Ｇｉｂｅｌｌｉｎｉら，（１９９８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６０：３８９１−３８９８；ＨｓｉｎｇおよびＢｉｓｈｏｐ（１９９９）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．１６２：２８０４−２８１１；Ｅｖｅｒｔｓら，（２００２）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．１６８：８８３−８８９を参照のこと。ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、ＥＬＩＳＡ、およびラボオンアチップ（ｌａｂ  ｏｎ  ａ  ｃｈｉｐ）（米国特許番号第６，１７６，９６２号および同第６，５１７，２３４号）のような種々のアッセイ形式が存在する。
【００７８】
（ＸＩ．使用）
本発明は、気道の免疫障害、気道反応性亢進、および肺線維症を含む多くの障害を処置および診断するための方法を提供する。肺実質、立方上皮、Ｉ型肺胞上皮、ＩＩ型肺胞上皮、肺胞腔、または間隙を含む肺状態の処置および診断のための方法が、提供される。ＢＡＬ、痰、および生検のサンプルに関連する処置および診断の方法もまた、提供される（例えば、Ｄｏｅｒｓｃｈｕｋ（２０００）Ｒｅｓｐｉｒ．Ｒｅｓ．１：１３６−１４０；Ｃｏｓｉｏら，（１９９９）Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．１６０：Ｓ２１−Ｓ２５；Ｃｏｓｉｏら，（２００２）Ｃｈｅｓｔ  １２１：１６０Ｓ−１６５Ｓを参照のこと）。
【００７９】
本発明は、単球もしくはマクロファージ、樹状細胞、好中球、好酸球、脂肪細胞、Ｔ細胞（ＴＨ１型細胞およびＴＨ２型細胞を含む）、Ｂ細胞、上皮細胞；または内皮細胞によって調節される障害を処置および診断するための方法を提供する。これらの障害としては、例えば、気道、実質、または肺胞の障害（ぜん息、気管支炎、細気管支炎、ぜん息発作重積状態、およびＣＯＰＤが挙げられる）が挙げられる。気道再構築を仲介する細胞（例えば、上皮細胞、平滑筋細胞、および他の間質細胞）を調節するための方法が、提供される（Ｋｕｍａｒ（２００１）Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ９１：９３−１０４）。線維症および肉芽腫の処置および／または診断の方法が、提供される。線維症および肉芽腫は、間質性肺障害（例えば、特発性肺線維症、好酸球性肉芽腫、および過敏性肺炎）の特徴である。これらの障害は、活性化肺胞上皮細胞、活性化マクロファージ、および／またはリンパ球に関連する（Ｋａｍｐ（２００３）Ｃｈｅｓｔ  １２４：１１８７−１１８９；Ｐａｔｅｌら，（２００１）Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０８：６６１−６７０）。
【００８０】
本発明によって処置および／または診断される障害は、気道の障害に限定されないが、例えば、炎症性腸障害（ＩＢＤ）、慢性関節性リウマチまたは滑膜炎、乾癬、グラフトおよび移植片の拒絶反応、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、中枢神経系の炎症（例えば、多発性硬化症）、敗血症、アテローム性動脈硬化症、真性糖尿病、ならびに病原体（例えば、細菌、寄生生物、およびウイルス）に対する先天免疫および後天免疫が挙げられる。
【００８１】
単球またはマクロファージに依存する障害および状態を調節するためのＩＬ−１９もしくはＩＬ−２４のアゴニストまたはアンタゴニストが、提供される。例えば、Ｃｈｅｄｅｖｅｒｇｎｅら，（２０００）Ａｒｃｈ．Ｄｉｓ．Ｃｈｉｌｄ．８２（補遺２）ＩＩ６−９；Ｊｅｆｆｅｒｙ（１９９９）Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ａｌｌｅｒｇｙ  ２９（補遺２）：１４−２６；Ｅｓｓａｄｋｉら，（１９９８）Ｅｕｒ．Ｒａｄｉｏｌ．８：１６７４−１６７６；Ｊｅｆｆｅｒｙ（２０００）Ｃｈｅｓｔ  １１７（補遺１）：２５１Ｓ−２６０Ｓ；Ｂｅｒｒｅｂｉら，（２００３）Ｇｕｔ  ５２：８４０−８４６；Ｈｉｂｉら，（２００３）Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．３８（補遺１５）：３６−４２；Ｗａｔａｎａｂｅら，（２００３）Ｄｉｇ．Ｄｉｓ．４８：４０８−４１４；Ｓｈｉｍｉｚｕら，（２００２）Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．ＣｅｌｌＢｉｏｌ．１１８：２５１−２５７；Ｚａｎｄｅｒら，（１９９９）Ｊ  Ｈｅａｒｔ  Ｌｕｎｇ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．１８：６４６−６５３；Ｓｌｅｇｅｒｓら，（２００３）Ｃｕｒｒ．Ｅｙｅ  Ｒｅｓ．２６：７３−７９；Ｍｉｌｎｅら，（１９９８）Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  １５：６７１−６７３；Ｓｔｅｉｎｂａｃｈら，（２０００）Ａｎｎ．Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ．５９：２８３−２８８；Ｓｃｈｗａｒｔｚ  （２００３）Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏｗ  Ｍｅｔａｂ．２３：３８５−３９４；Ｕｎｄｅｒｈｉｌｌ（２００３）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３３：１７６７−１７７５；Ｏｐｅｎｓｈａｗ（２００２）Ｒｅｓｐｉｒ．Ｒｅｓ．３（補遺１）：Ｓ１５−Ｓ２０；Ｑｉａｎら，（１９９９）Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１５５：１２９３−１３０２；Ｂｒｅｔｔｓｃｈｎｅｉｄｅｒら，（２００２）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ．１３３：１９３−１９７；Ｋｌｅｂｌら，（２００１）Ｊ．Ｐａｔｒｏｌ．１９５：６０９−６１９；Ｓｚｅｋａｎｅｃｚら，（２００１）Ｃｕｒｒ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．Ｒｅｐ．３：５３−６３；Ｂｏｅｈｎｃｋｅら，（１９９５）Ａｍ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｐａｔｈｏｌ．１７：１３９−１４４；Ｓｉｃａら，（２００２）Ｉｎｔ．Ｉｍｎｔｕｎｏｐｈａｒｒｎａｃｏｌ．２：１０４５−１０５４を参照のこと。
【００８２】
本発明は、抗体の抗原結合部位に由来する結合組成物を含むアゴニストまたはアンタゴニストを提供する。ここで、上記アゴニストまたはアンタゴニストは、ＩＬ−ｌ９（配列番号２）；ＩＬ−２４（配列番号４）；ＩＬ−２０Ｒ１；ＩＬ−２０Ｒ２；またはＩＬ−２２Ｒのポリペプチドに特異的に結合する。ＩＬ−ｌ９（配列番号１）；ＩＬ−２４（配列番号３）；ＩＬ−２０Ｒ１；ＩＬ−２０Ｒ２；もしくはＩＬ−２２Ｒの核酸に特異的に結合する核酸を含むアゴニストまたはアントゴニストもまた、提供される。
【００８３】
ＩＬ−１９は、脂肪組織の厚さを調節することが見出されている。すなわち、ＩＬ−１９ＫＯマウスは、組織学的測定によって決定された場合、脂肪組織の厚さの増加を示す。サイトカインおよびサイトカイン様化合物（例えば、レプチンおよびレプチンレセプター）は、脂肪組織代謝、肥満、糖尿病、およびおそらく創傷治癒または皮膚修復の確立された調節因子である。脂肪組織の厚さおよび肥満は、組織学の方法および人体計測法によって評価され得る（例えば、ＶｅｎｉａｎｔおよびＬｅＢｅｌ（２００３）Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．９：８１１−８１８；ＳａｎｄｏｖａｌおよびＤａｖｉｓ（２００３）Ｊ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃｏｍｐｌｉｃ．１７：１０８−１１３；Ｃｏｐｐａｃｋ（２００１）Ｐｒｏｃ．Ｎｕｔｒ．Ｓｏｃ．６０：３４９−３５６；ＦａｎｔｕｚｚｉおよびＦａｇｇｉｏｎｉ（２０００）Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  ＢｉｏＬ  ６８：４３７−４４６；Ｇｏｒｅｎら，（２００３）Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ５２：２８２１−２８３２；Ｐｉｅｍｏｎｔｉら，（２００３）Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ  ２６：２８８３−２９９９；Ｔａｇｇａｒｔら，（１９６７）Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｎｕｔｒ．２１：４３９−４５１；ＬｅｅおよびＮｉｅｍａｎ（１９９６）ＮｕｔｒｉｔｉｏｎａｌＡｓｓｅｓｓｍｅｎｔ，第２版，Ｍｏｓｂｙ  Ｙｅａｒ  Ｂｏｏｋ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ；Ｒｏｌｌａｎｄ−Ｃａｃｈｅｒａら，（１９９７）Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒ．６５：１７０９−１７１３；Ｊｅｎら，（１９８５）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｏｂｅｓ．９：２１３−２２４を参照のこと）。
【００８４】
本発明の広範な範囲は、以下の実施例の参照によって最もよく理解されるが、以下の実施例が、本発明を特定の実施形態に限定することは意図されない。
【実施例】
【００８５】
（Ｉ．一般的方法）
標準的方法の一部が、以下において記載または参照される：例えば、Ｍａｎｉａｔｉｓら，（１９８２）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ；Ｓａｍｂｒｏｏｋら，（１９８９）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，（第２版），第１−３巻，ＣＳＨ  Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ；Ａｕｓｕｂｅｌら，Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｂｒｏｏｋｌｙｎ，ＮＹ；またはＡｕｓｕｂｅｌら，（１９８７）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ，Ｇｒｅｅｎｅ／Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ。タンパク質精製のための方法としては、例えば、カラムクロマトグラフィー、電気泳動、遠心分離、免疫沈降、ならびにベクターおよび細胞によるクローニングおよび発現が挙げられる。例えば、Ａｍｅｒｓｈａｍ  ＰｈａｒｍａｃｉａＢｉｏｔｅｃｈ（２００３）Ｃａｔａｌｏｇｕｅ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（２００３）Ｃａｔａｌｏｇｕｅ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ；Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（２００３）Ｃａｔａｌｏｇｕｅ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯを参照のこと。
【００８６】
蛍光細胞分析分離（ＦＡＣＳ）を含むフローサイトメトリーのための方法が、利用可能である。例えば、Ｏｗｅｎｓら，（１９９４）Ｆｌｏｗ  Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｈｏｂｏｋｅｎ，ＮＪ；Ｇｉｖａｎ（２００１）ＦｌｏｗＣｙｔｏｍｅｔｒｙ，第２版；Ｗｉｌｅｙ−Ｌｉｓｓ，Ｈｏｂｏｋｅｎ，ＮＪ；Ｓｈａｐｉｒｏ（２００３）Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｆｌｏｗ  Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｈｏｂｏｋｅｎ，ＮＪを参照のこと。ビーズまたはミクロスフェア（例えば、Ｃａｌｔａｇ（登録商標）計数ビーズ（Ｃａｌｔａｇ  Ｌａｂｓ，Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ，ＣＡ）およびＰｅｒｆｅｃｔｃｏｕｎｔ（登録商標）（Ｅｘａｌｐｈａ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，Ｗａｔｅｒｔｏｗｎ，ＭＡ））を使用した細胞計数が、達成され得る。核酸（核酸プライマーおよびプローブ、ポリペプチドが挙げられる）を改変するために適切な蛍光試薬、および例えば、診断試薬として使用するための抗体が、利用可能である（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ（２００３）カタログ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ；Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（２００３）カタログ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）。
【００８７】
免疫系の組織学の標準的な方法が、記載される。例えば、Ｍｕｌｌｅｒ−Ｈａｒｍｅｌｉｎｋ（編）（１９８６）Ｈｕｍａｎ  Ｔｈｙｍｕｓ：Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ；Ｈｉａｔｔら，（２０００）Ｃｏｌｏｒ  Ａｔｌａｓ  ｏｆ  Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａ，ＰＡ；Ｌｏｕｉｓら，（２００２）Ｂａｓｉｃ  Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ：Ｔｅｘｔ  ａｎｄ  Ａｔｌａｓ，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹを参照のこと。気管支肺胞洗浄および肺チャレンジ試験（例えば、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ、ヒスタミン、およびメタコリンが挙げられる）に関する方法が、利用可能である。マクロファージ、好中球、および好酸球は、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓに対する宿主防御に関与する。例えば、ＫｕｒｕｐおよびＧｒｕｎｉｇ（２００２）Ｍｙｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉａ  １５３：１６５−１７７；Ｓｃｈｕｈら，（２００２）ＥＭＢＯ  Ｊ．１６：１３１３−１３１５；Ｗａｒｋら，（２０００）Ｅｕｒ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｊ．１６：１０９５−１１０１；Ｐｈｉｌｉｐｐｅら，（２００３）Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ．７１：３０３４−３０４２，Ｆｅｌｌｅｒ−ＫｏｐｍａｎおよびＥｒｎｓｔ（２００３）Ｓｅｍｉｎ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｉｎｆｅｃｔ．１８：８７−９４；Ｍａｒｒら，（２００２）Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．Ｃｌｉｎ．Ｎｏｒｔｈ  Ａｍ．１６：８７５−８９４；ＫｕｒｕｐおよびＧｒｕｎｉｇ（２００２）Ｍｙｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉａ  １５３：１６５−１７７；Ｊｏｏｓ（２００３）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｎａｃｏｌ．３：２３３−２３８；Ｃｏｃｋｃｒｏｆｔら，（２００１）Ｃｈｅｓｔ  １２０：１８５７−１８６０；ＢｒｕｓａｓｃｏおよびＣｒｉｍｉ（２００１）Ａｌｌｅｒｇｙ  ５６：１１１４−１１２０；Ｏ’ＢｙｒｎｅおよびＩｎｍａｎ（２０００）Ｊ．Ａｓｔｈｍａ  ３７：２９３−３０２；ＢｕｃｋｉｎｇｈａｍおよびＨａｎｓｅｌｌ（２００３）Ｅｕｒ．Ｒａｄｉｏｌ．１３：１７８６−１７８００；Ｋｕｒｕｐら（２００２）Ｉｎｔ．Ａｒｃｈ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２９：１８１−１８８；Ｗｈｅａｔら，（２００２）Ｓｅｍｉｎ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｉｎｆｅｃｔ．１７：１５８−１８１を参照のこと。
【００８８】
動物モデル（例えば、ノックアウトマウス）を使用するための方法、ならびに診断剤、治療剤、および医薬品の試験、評価、およびスクリーニングするための細胞ベースのアッセイが、利用可能である。例えば、ＣａｒおよびＥｎｇ（２００１）Ｖｅｔ．Ｐａｔｈｏｌ．３８：２０−３０；Ｋｅｎｙｏｎら，（２００３）Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ａｐｐｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１８６：９０−１００；Ｄｅｕｒｌｏｏら，（２００１）Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２５：７５１−７６０；Ｚｕｂｅｒｉら，（２０００）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：２６６７−２６７３；Ｔｅｍｅｌｋｏｖｓｋｉら，（１９９８）Ｔｈｏｒａｘ  ５３：８４９−８５６；Ｈｏｒｒｏｃｋｓら，（２００３）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．Ｄｅｖｅｌ．６：５７０−５７５；Ｊｏｈｎｓｔｏｎら，（２００２）Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．Ｔｏｄａｙ  ７：３５３−３６３を参照のこと。
【００８９】
例えば、抗原性フラグメント、シグナル配列およびリーダー配列、タンパク質の折り畳み、ならびに機能的ドメインを決定するためのソフトウェアパッケージが、利用可能である。例えば、Ｖｅｃｔｏｒ  ＮＴＩ（登録商標）Ｓｕｉｔｅ（Ｉｎｆｏｒｍａｘ，Ｉｎｃ．，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）；ＧＣＧウィスコンシンパッケージ（Ａｃｃｅｌｒｙｓ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）、およびＤｅＣｙｐｈｅｒ（登録商標）（ＴｉｍｅＬｏｇｉｃ  Ｃｏｒｐ．，Ｃｒｙｓｔａｌ  Ｂａｙ，Ｎｅｖａｄａ）；Ｍｅｎｎｅら，（２０００）Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  １６：７４１−７４２を参照のこと。例えば、ＧｅｎＢａｎｋなどの公的な配列データベースもまた使用した。
【００９０】
（ＩＩ．ノックアウトマウス）
Ｃｈｅｎｓｕｅら（２００１）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９３：５７３−５８４によって記載された一般的な方法を使用して、ＩＬ−１９ノックアウト（ＩＬ−１９ＫＯ）マウスを作製した。親マウス系統は、１２９  ＳｖＥｖであった。端的に言えば、ネオマイシンカセットをＩＬ−１９遺伝子のエキソンに挿入し、ネオマイシン遺伝子を有する遺伝子産物を生じた。マウスＩＬ−１９に対するｃＤＮＡプローブを利用して、完全なＩＬ−１９座を含むＢＡＣクローンを同定した。エキソン１〜５を含む１２キロベース（ｋｂ）のＥｃｏＲＩフラグメントをサブクローニングした。このプラスミドを利用して、１，７５２塩基対（ｂｐ）のＢａｍＨＩフラグメント（５’領域のホモロジー（ｈｏｍｏｌｏｇｙ））および４，０４４ｂｐのＸｍｎＩフラグメント（３’領域のホモロジー）を含むターゲティングベクターを構築した。標的化した座は、ＩＬ−１９の反対方向のＨＳＶ  ＴＫプロモーターによって駆動されるフロックスされた（ｆｌｏｘｅｄ）Ｎｅｏカセットによって反復されたエキソン３およびエキソン４を有した。Ｎｅｏ耐性ＥＳ細胞クローン由来のゲノムＤＮＡをＮｃｏＩで消化し、プライマー１：ＡＡＧＴＧＡＴＴＴＣＧＴＴＴＧＧＣＴＧ（配列番号５）およびプライマー２：ＴＧＴＣＴＧＧＴＡＡＧＡＴＣＣＴＡＴＣ（配列番号６）を用いた１２ｋｂのＥｃｏＲＩフラグメント上でのＰＣＲを使用して作製された、３７２ｂｐプローブとハイブリダイズすることによって、適切に標的化した座を同定した。Ｎｅｏ耐性胚性幹（ＥＳ）細胞クローンに由来するゲノムＤＮＡをＥｃｏＲＩで消化し、プライマー番号１：ＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＣＴＴＧＧＴＣ（配列番号７）およびプライマー番号２：ＴＡＡＴＣＣＴＣＡＴＧＣＡＧＣＴＣＴＧ（配列番号８）を用いた１２ｋｂのＥｃｏＲＩフラグメント上でのＰＣＲを使用して作製された、３２２ｂｐプローブとハイブリダイズすることによって、３’アームの組み込みを確認した。
【００９１】
ＩＬ−１９標的化ＥＳ細胞クローンを作製した。記載されるように、ＥＳ細胞を直鎖状のターゲティングベクターを用いてエレクトロポレーションした（Ｊｏｙｎｅｒ（１９９３）Ｇｅｎｅ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ，ＵＫ）。５’外側プローブ（ｅｘｔｅｒｎａｌ  ｐｒｏｂｅ）および３’外側プローブを用いたサザン分析によって、１３６７個のＧ４１８耐性クローンから６個を、相同的組換え体として検出した。ターゲティング構築物の単一コピーの置換を、ｎｅｏプローブを使用したサザン分析によって確認した。
【００９２】
キメラマウス、ヘテロ接合性マウスおよびホモ接合性マウスを作製した。２個の標的化ＥＳクローンを３．５ｄｐｃのＣ５７ＢＬ／６（ＣＲＬ）胚盤胞に注入し、次いで妊娠期間の２．５ｄｐｃ日において、ＣＤ１偽妊娠雌マウスに移した。キメラの雄子孫を、Ｃ５７ＢＬ／６（ＣＲＬ）雌と交配させ、子のアグーチコート色（ａｇｏｕｔｉ  ｃｏａｔ  ｃｏｌｏｒ）によって生殖細胞系伝達を認識した。父親からの変異した対立遺伝子を遺伝したヘテロ接合性マウスを、ＰＣＲまたはＤＮＡのサザン分析によって検出した。雑種のヘテロ接合体由来の子孫は、ＰＣＲまたはＤＮＡのサザン分析によって遺伝子型を特定した。
【００９３】
Ｌｅｍｃｋｅｒｔら（１９９７）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：９１７−９１８によって記載された一般的な方法を使用して、ＩＬ−２４ＫＯマウスを調製した。親マウス系統は、Ｃ５７ＢＬ／６であった。端的に言えば、ネオマイシンカセットをＩＬ−２４のエキソンに挿入し、次いで位置を変え（ｆｌｉｐｐｅｄ  ｏｕｔ）、エキソンおよびネオマイシン遺伝子の欠失を生じた。ＩＬ−２４ＫＯを調製する際に使用したＣｒｅ−Ｌｏｘ方法に関するさらなる詳細が、記載される（Ｒｕｕｌｓら，（２００１）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １５：５３３−５４３）。マウスＩＬ−２４に対するｃＤＮＡプローブを利用して、完全なＩＬ−２４座を含むＢＡＣクローンを同定した。１２，７６３ｂｐのＩＬ−２４座のサブクローンを配列決定し、５つのＩＬ−２４エキソンを含むことを見出した。１．６ｋｂのＳｔｕＩおよびＨｐａＩフラグメント（５’領域のホモロジー）ならびに５．３４ｋｂのＸｂａＩおよびＰａｃＩフラグメント（３’領域のホモロジー）を含むターゲティングベクターを構築した。この標的化した座は、ＩＬ−２４の反対方向のＨＳＶ  ＴＫプロモーターによって駆動されるフロックスされたＮｅｏカセットによって反復されたエキソン１およびエキソン２を有する。Ｎｅｏ耐性ＥＳ細胞クローン由来のゲノムＤＮＡをＨｉｎｄＩＩＩで消化し、ＩＬ−２４座のサブクローン由来の領域１２２０〜１６００ｂｐに由来するプローブとハイブリダイズすることによって、適切に標的化した座を同定した。Ｎｅｏ耐性ＥＳ細胞クローンに由来するゲノムＤＮＡをＨｐａＩで消化し、ＩＬ−２４座のサブクローン由来の領域１１０５０〜１１３９１ｂｐに由来するプローブとハイブリダイズすることによって、３’アームの組み込みを確認した。
【００９４】
（ＩＩＩ．気管支肺胞洗浄流体（ＢＡＬ）の細胞分析）
Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｕｍｉｇａｔｕｓ（Ａｓｐ；Ａｓｐ処置；Ａｓｐチャレンジ）は、多くのぜん息の徴候および肺の他の免疫障害（例えば、気道反応性亢進、杯細胞過形成、粘液過剰産生、および好酸性気道炎症）の徴候を誘導する。Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ抗原またはリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で、４日の間隔（ｔ＝１日、５日、９日、１２日、および１６日）でマウスを鼻腔内処置した（表１）。野生型マウス、ＩＬ−１９ＫＯマウス、およびＩＬ−２４ＫＯマウス由来のＢＡＬにおいて、細胞を同定した。細胞計数の全ては、ビーズ１個あたりの細胞数を表す。ＢＡＬサンプルを３２，０００個の蛍光ビーズと共に提供して、計数を容易にした（表１）。
【００９５】
Ａｓｐ処置は、ＢＡＬ細胞の総数を調節し、この処置は、３種全ての遺伝子型のマウス（野生型マウス、ＩＬ−１９ＫＯマウスおよびＩＬ−２４ＫＯマウス）において、ＢＡＬ細胞を増加させた。表１に示すように、Ａｓｐ処置を用いると、ＩＬ−１９ＫＯ  ＢＡＬおよびＩＬ−２４ＫＯ  ＢＡＬにおける細胞の数は、野生型のＢＡＬよりもいくらか少なかった（表１）。Ａｓｐ処置はまた、３種全ての遺伝子型のマウスにおいてＣＤ１１ｃ＋ＭＨＣ  ｌｏｗ細胞を増加させ、Ａｓｐ処置したＩＬ−１９ＫＯマウスのＢＡＬにおけるＣＤ１１ｃ＋ＭＨＣ  ｌｏｗ細胞の数は、Ａｓｐ処置された野生型のＢＡＬよりも少なかった（表１）。上記ＣＤ１１ｃ＋ＭＨＣ  ｌｏｗ細胞は、主にＤＣ、単球、およびマクロファージであった。
【００９６】
Ｂ細胞数およびＭＨＣクラスＩＩのＢ細胞の発現の反応は、野生型マウスに対して、ＩＬ−１９ＫＯおよびＩＬ−２４ＫＯで異なった。Ａｓｐ処置を用いると、Ｂ細胞数は、野生型マウスにおけるＢ細胞計数に対して、ＩＬ−１９ＫＯマウスで低く、ＩＬ−２４ＫＯマウスで高かった（表１）。Ａｓｐ処置を用いると、ＭＣＨクラスＩＩ発現は、ＩＬ−１９ＫＯ由来のＢ細胞で増加し、ＩＬ−２４ＫＯ由来のＢ細胞で減少した（表１）。
【００９７】
マクロファージおよびＤＣの計数は、野生型マウスにおける計数に対して、ＩＬ−１９ＫＯマウスで減少した（表１）。
【００９８】
野生型マウスに関して、ＣＤ１１ｃおよびＭＨＣクラスＩＩを発現する細胞の割合について、２種の型の野生型マウスを試験した。これら２種の型は、雌１２９  ＳｖＥｖ（１２週齢）マウスおよび雌Ｃ５７  ＢＬ／６（７週齢）マウスであった。上記の２種の型の野生型マウスの両方と比較した場合、ＩＬ−１９ＫＯマウスにおけるＣＤ１１ｃ発現は減少した。
【００９９】
【表１】
2007513163.tif 000002
組織学的分析は、Ａｓｐ処置したＩＬ−１９  ＫＯマウス肺が、２種のＡｓｐ処置した野生型との比較において、より炎症（特に、実質炎症）が少ないことを示した。Ａｓｐ処置した野生型マウスとＡｓｐ処置したＩＬ−１９ＫＯマウスの両方が、杯細胞過形成を示した。ＩＬ−２４ＫＯマウスは、野生型と比較した場合、より構造化された（ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ）炎症を有した。すなわち、ＩＬ−２４ＫＯマウスは、肺の中にリンパ小胞型の構造を有し、Ａｓｐ処置したＩＬ−２４ＫＯマウスのＢＡＬにおいてＢ細胞が増加することを示すＦＡＣＳデータと一致する知見であった。Ａｓｐ処置した野生型およびＡｓｐ処置したＩＬ−２４ＫＯの肺は、組織学的分析によると、同様の炎症と杯細胞過形成とを示した。組織学はまた、Ｃ５７  ＢＬ／６野生型マウスは、１２９  ＳｖＥｖ野生型マウスよりもＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓに対していくらか感受性が低いことを示した。すなわち、この１２９  ＳｖＥｖ野生型マウスは、Ａｓｐ誘導の炎症の程度がより高いことを示した。
【０１００】
皮膚における脂肪組織のアッセイによって決定された場合、上記ＩＬ−１９ＫＯマウスは、脂肪組織の沈着物の増加を有することを見出した。
【０１０１】
（ＩＶ．チャレンジ後の気道反応性亢進）
気道反応性亢進を以下の後に測定した：ＰＢＳでのコントロール処置；Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓのみでのチャレンジ；メタコリンのみでの処置；またはメタコリンおよびＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ両方での処置（表２）。ヒト患者および実験動物における気道反応性亢進を評価するために、メタコリンを使用する（Ｇｒｏｎｋｅら，（２００２）Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ａｌｌ．３２：５７−６３；Ｏｂａｓｅら，（２００３）Ａｌｌｅｒｇｙ  ５８：２１３−２２０）。気道反応性亢進を、Ｐｅｎｈ方法によって試験した（例えば、Ｋｅｎｙｏｎら，（２００３）Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９１：２−１１；Ｈａｎｔｏｓら，（２００２）Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．９３：１１９６−１１９７；Ｈａｍｅｌｍａｎｎら，（１９９７）Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．１５６：７６６−７７５を参照のこと）。
【０１０２】
上記チャレンジプロトコルは、４．１７ｍｇ／ｍｌまたは１０．０ｍｇ／ｍｌのメタコリン用量を包含した。この投薬プロトコルは、３サイクルから構成され、各サイクルは、３つの工程（すなわち、エアロゾル期（３．０分）、乾燥期（０．５分）、および記録期（５分））を包含する。３工程の各サイクルは、８．５分にわたった。３つの連続するサイクル（ＭＣｈ１；ＭＣｈ２；およびＭＣｈ３）において、同一量のメタコリンの３種の別個の用量を、各マウスに投与した。この試験を０ｍｇ／ｍｌ、４．１７ｍｇ／ｍｌまたは１０ｍｇ／ｍｌのメタコリンで行い、次いで気道反応性亢進の評価をした。ＰＢＳとの反応性を、１００％に設定した（表２）。Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ処置プロトコルは、４日の間隔（すなわち、ｔ＝１日、５日、９日、１２日、および１６日）における、鼻腔内Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｕｍｉｇａｔｕｓ抗原を包含した。
【０１０３】
Ａｓｐ処置したＩＬ−１９ＫＯマウスは、Ａｓｐ処置した野生型マウスよりも低い反応性亢進を示した。同様に、Ａｓｐ処置したＫＯマウスは、Ａｓｐ処置した野生型マウスよりも低い反応性亢進を示した。
【０１０４】
ＩＬ−１９ＫＯは、メタコリン単独およびＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓを加えたメタコリンに応答して反応性亢進の減少を示した（表２）。同様に、このＩＬ−２４ＫＯはまた、メタコリン単独およびＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓを加えたメタコリンに応答して反応性亢進を減少させた（表２）。メタコリン処置の後に３００％以上の反応性亢進の値を有するマウスは、呼吸困難を示した。
【０１０５】
Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓチャレンジを行わないと、気道反応性亢進は、野生型マウスおよびＩＬ−２４ＫＯマウスにおいて同じであるようであった。しかし、チャレンジを行うと、反応性亢進は、野生型マウスよりもＩＬ−２４ＫＯマウスにおいて低かった。気道反応性亢進におけるＢ細胞のＴ細胞相互作用に対する確立した役割に起因して、ＩＬ−２４ＫＯマウスにおけるＢ細胞上のＭＨＣクラスＩＩの発現の低下は、これらの動物での反応性亢進の低下を説明し得る（Ｗａｌｄｂｕｒｇｅｒら，（２００１）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９４：３９３−４０６；Ｐａｉら，（２００２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９：１３２６−１３３３）。
【０１０６】
【表２】
2007513163.tif 000003
（Ｖ．リンパ節における細胞の分析）
４日の間隔（すなわち、ｔ＝１日、５日、９日、１２日、および１６日）において、マウスをＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｕｍｉｇａｔｕｓ抗原で鼻腔内処置した。野生型マウス、ＩＬ−１９ＫＯマウス、ＩＬ−２４ＫＯマウス由来のリンパ節からの細胞を同定した。示したとおりに、マウスをＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ（Ａｓｐ）で処置した（表３）。リンパ節サンプルを６４，０００個のビーズと共に提供して、細胞計数を容易にした。リンパ節のＢ細胞数は、野生型に対してＩＬ−２４ＫＯマウスで増加し（データは示さず）、そしてＡｓｐ処置した野生型に対してＡｓｐ処置したＩＬ−２４ＫＯマウスで増加した（表３）。ＭＨＣクラスＩＩ発現を蛍光によって測定し、恣意的な単位の蛍光で開示する。この蛍光強度は、細胞によって発現される分子の数に比例する。
【０１０７】
【表３】
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表３に開示された変化に加えて、野生型マウスと比較した場合、ＩＬ−１９ＫＯマウスのリンパ節においてＤＣの数は減少する傾向が存在した。Ａｓｐ処置した野生型マウスと比較した場合、Ａｓｐ処置したＩＬ−１９ＫＯマウスのリンパ節におけるＤＣの数もまた減少した。リンパ節のマクロファージはまた、Ａｓｐ処置した野生型マウスと比較した場合、Ａｓｐ処置したＩＬ−１９ＫＯマウスにおいて減少した。
【０１０８】
（ＶＩ．ＩＬ−１９、ＩＬ−２４分布のＰＣＲ分析）
ヒトの細胞および組織ならびにマウスの細胞および組織において、ＩＬ−１９およびＩＬ−２４の発現と分布とを、Ｔａｑｍａｎ（登録商標）リアルタイムＰＣＲ（ＰＥ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ）によって決定した。この結果は、ユビキチン発現と相補的なものである（表４および表５）。ユビキチン発現を１（１．０）に設定する。特に、ＩＬ−１９およびＩＬ−２４の発現は、単球／マクロファージもしくは樹状細胞の活性化、または肺に対する抗原チャレンジに応答して増加した（表４および表５）。
【０１０９】
【表４】
2007513163.tif 000005
【０１１０】
【表５】
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（ＶＩＩ．ＩＬ−１９は脂肪組織の厚さを調節する）
ＩＬ−１９ノックアウトは、ＩＬ−１９ＫＯマウスにおいて脂肪組織の厚さの増加を引き起こす。真皮と肉様層との間の脂肪組織の層の厚さは、組織学的方法によって決定された場合、２〜３倍増加した。本発明は、ＩＬ−１９もしくはＩＬ−２４のアゴニストまたはアンタゴニストによって、脂肪組織の厚さ、肥満症（ａｄｉｐｏｓｉｔｙ）、肥満（ｏｂｅｓｉｔｙ）、および糖尿病を調節する方法を提供する。本発明は、肥満、肥満症、もしくは糖尿病を処置するためのＩＬ−１９またはＩＬ−２４のアゴニスト（例えば、ＩＬ−１９ポリペプチドまたはＩＬ−１９をコードする核酸）を提供する。肥満、肥満症、または糖尿病を診断するための方法もまた、提供される。
【０１１１】
本明細書中の全ての引用は、各個々の刊行物、特許出願、または特許が、あたかも具体的かつ個別に、全ての図面（ｆｉｇｕｒｅ）および図面（ｄｒａｗｉｎｇ）を含んで参考として援用されることが示されるのと同じ程度に、本明細書において参考として援用される。
【０１１２】
本発明の多くの改変および変化物が、当業者には明らかなように、本発明の目的、趣旨および範囲を保存するために、特定の状況、材料、組成物、プロセス、処理工程に適合するようになされ得る。全てのこのような改変物は、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、本明細書に添付される特許請求の範囲の範囲内であることが意図される。本明細書において記載される特定の実施形態は、実施例のみによって提供され、そして本発明は、権利を与えられるこのような特許請求の範囲と等価の全体の範囲に加えて、添付された特許請求の範囲の用語によって限定されるべきである。そして、本発明は、実施例によって本明細書中に提示されている特定の実施形態によって限定されるべきではない。
【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】平成18年9月29日(2006.9.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
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【国際調査報告】
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