(57)【要約】
2007530424.tif 000016  本発明は、ｎが０モル又は１モルを表し溶媒和物が水、Ｃ１−Ｃ４アルコール、Ｃ１−Ｃ３カルボン酸のＣ１−Ｃ４アルキルエステル、又はジオクサンを表す上記式（Ｉ）の新規Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの溶媒和物、及び溶媒和体（ｎ＝１）と脱溶媒和体（ｎ＝０）との混合物に関する。更に、本発明は、これらの溶媒和物及び混合物を作製するプロセス、及び抗炎症性と鎮痛性に関する薬理モデル実験に基づく変形性関節症、関節リウマチ、外科手術、原発性月経困難症による疼痛を治療するためのこれらの溶媒和物及び混合物の使用に関する。
2007530424.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｎが０モル又は１モルを表し溶媒和物が水、Ｃ１−Ｃ４アルコール、Ｃ１−Ｃ３カルボン酸のＣ１−Ｃ４アルキルエステル、又はジオクサンを表す下記式（Ｉ）
【化１】
2007530424.tif 000011
のＮ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの溶媒和物。
【請求項２】
ｎ＝１であり溶媒和物が水を表す請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項３】
ｎ＝１であり溶媒和物が酢酸エチルを表す請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項４】
ｎ＝１であり溶媒和物が２−プロパノールを表す請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項５】
ｎ＝１であり溶媒和物がジオクサンを表す請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項６】
ｎ＝０である請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項７】
ｎ＝１である請求項１記載の式（Ｉ）の化合物と、ｎ＝０である請求項１記載の式（Ｉ）の化合物との混合物。
【請求項８】
ｎ＝１であり溶媒和物がＣ１−Ｃ３カルボン酸のＣ１−Ｃ４アルキルエステル又はジオクサンである式（Ｉ）のＮ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの溶媒化合物を作製するプロセスにおいて、
下記式（ＩＩＩ）の３，４−ジフェニル−５−メチル−イソオキサゾールがクロロスルホン酸と反応し、
【化２】
2007530424.tif 000012
その生成物である下記式（ＩＩ）の３−フェニル−４−（４−クロロスルホニル−フェニル）−５−メチル−イソオキサゾールが
ａ）水と水混和性溶媒との混合物において、又は
ｂ）相転換触媒が存在する非水混和性溶媒と水との混合物においてヒドロキシルアミンと反応し、
【化３】
2007530424.tif 000013
その生成物がＣ１−Ｃ３カルボン酸のＣ１−Ｃ４アルキルエステル又はジオクサンから選択される溶媒から結晶化することを特徴とするプロセス。
【請求項９】
相転換触媒がテトラブチルアンモニウム硫酸水素塩であることを特徴とする請求項８記載のプロセス。
【請求項１０】
再結晶が酢酸エチルから行われたことを特徴とする請求項８記載のプロセス。
【請求項１１】
ｎ＝１であり溶媒和物が水である式（Ｉ）のＮ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの溶媒化合物を作製するプロセスにおいて、
下記式（ＩＩＩ）の３，４−ジフェニル−５−メチル−イソオキサゾールがクロロスルホン酸と反応し、
【化４】
2007530424.tif 000014
その生成物である下記式（ＩＩ）の３−フェニル−４−（４−クロロスルホニル−フェニル）−５−メチル−イソオキサゾールが
ａ）水と水混和性溶媒との混合物において、又は
ｂ）相転換触媒が存在する非水混和性溶媒と水との混合物においてヒドロキシルアミンと反応し、
【化５】
2007530424.tif 000015
その生成物が水とエタノールと必要に応じてアスコルビン酸とを含む混合物から結晶化することを特徴とするプロセス。
【請求項１２】
ｎ＝０である式（Ｉ）の化合物を調製するプロセスにおいて、溶媒和物が加熱によりｎ＝１である式（Ｉ）の化合物から脱離することを特徴とするプロセス。
【請求項１３】
ｎ＝１である式（Ｉ）の化合物とｎ＝０である式（Ｉ）の化合物との任意の比率での混合物を作製するプロセスにおいて、溶媒和物が、加熱及び減圧によりｎ＝１である式（Ｉ）の化合物から必要量分だけ脱離することが可能であることを特徴とするプロセス。
【請求項１４】
抗炎症性と鎮痛性に関する薬理モデル実験に基づく変形性関節症、関節リウマチ、外科手術、原発性月経困難症による疼痛の治療用の医薬用組成物を作製するための請求項１〜６のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項１５】
抗炎症性と鎮痛性に関する薬理モデル実験に基づく変形性関節症、関節リウマチ、外科手術、原発性月経困難症による疼痛の治療用の医薬用組成物を作製するための請求項７記載の混合物の使用。
【請求項１６】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物と、１つ以上の治療上許容可能な医薬用基材とを含む医薬用組成物。
【請求項１７】
請求項７記載の混合物と、１つ以上の治療上許容可能な医薬用基材とを含む医薬用組成物。
【請求項１８】
基材のうちの１つがアスコルビン酸であることを特徴とする請求項１６記載の医薬用組成物。
【請求項１９】
抗炎症性と鎮痛性に関する薬理モデル実験に基づく変形性関節症、関節リウマチ、外科手術、原発性月経困難症による疼痛の治療方法において、請求項１〜６のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物を治療上有効な投与量にて必要とする患者を治療することを備えた治療方法。
【請求項２０】
抗炎症性と鎮痛性に関する薬理モデル実験に基づく変形性関節症、関節リウマチ、外科手術、原発性月経困難症による疼痛の治療方法において、請求項７に記載の混合物を治療上有効な投与量にて必要とする患者を治療することを備えた治療方法。
【請求項２１】
抗炎症性と鎮痛性に関する薬理モデル実験に基づく変形性関節症、関節リウマチ、外科手術、原発性月経困難症による疼痛の治療方法において、請求項１６〜１８のいずれか１項に記載の医薬用組成物を治療上有効な投与量にて必要とする患者を治療することを備えた治療方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、ｎが０モル又は１モルを表し溶媒和物（solvate）が水、Ｃ１−Ｃ４アルコール、Ｃ１−Ｃ３カルボン酸のＣ１−Ｃ４アルキルエステル、又はジオクサンを表す下記式（Ｉ）の新規Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの溶媒和物、及び溶媒和体（ｎ＝１）と脱溶媒和体（ｎ＝０）との混合物に関する。更に、本発明は、これらの溶媒和物及び混合物を作製するプロセス、及び抗炎症性と鎮痛性に関する薬理モデル実験に基づく変形性関節症、関節リウマチ、外科手術、原発性月経困難症による疼痛を治療するためのこれらの溶媒和物及び混合物の使用に関する。
【０００２】
【化１】
2007530424.tif 000003
【０００３】
選択的シクロオキシゲナーゼ−２−阻害剤の副作用プロフィールは、非ステロイド系抗炎症薬の副作用プロフィールよりもはるかに良好であることが知られている。これは、第１に、胃腸への副作用に関して良好であるとされている。
【０００４】
現在、２つの世代の選択的シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤が知られている。最初に市販されたシクロオキシゲナーゼ−２阻害剤の１つは、セレコキシブであった。セレコキシブは、選択性が高く、胃腸への副作用を大きく減少させるものの、かかる副作用が完全になくなるわけではない。
【０００５】
ＣＯＸ−２酵素阻害剤の第２世代の１つであるバルデコキシブは、２００２年に、変形性関節症、関節リウマチ、月経困難症による疼痛の治療用として発売された。調査報告書によればバルデコキシブの投与においても胃腸への副作用がみられることが知られている。
【０００６】
選択的シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤が心血管への副作用を有することも考慮すべきである。
【０００７】
これらの事実は、別の第１世代ＣＯＸ−２阻害剤であるロフェコキシブに関する調査でもみられる（Vigor-study, Bombardier C, Laine L, Reicin A et al for the VIGOR Study Group.  Comparison of upper gastrointestinal toxicity of rofecoxib and naproxen in patients with rheumatoid arthritis.  N Engl J Med 343(21):1520-1528, Nov. 2000）。
【０００８】
可能性のある原因については、D. Mukherjeeの調査で詳細に考察された（Mukherjee D, Nissen SE, Topol EJ. Risk of cardiovascur events associated with selective COX-2 inhibitors.  JAMA 2001; 286: 954-959）。
【０００９】
上記の問題を解決するため、より有効な選択的シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤について研究を行った。
【００１０】
驚くべきことに、我々は、式（Ｉ）のＮ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの溶媒和物（ｎ＝１）と脱溶媒和体（ｎ＝０）、又はそれらの混合物が、バルデコキシブよりも更に有利な効果プロフィールを有することを発見した。
【００１１】
ある論文（Josh J. Yuan, Dai-Chang Yang, Ji Y. Zjang, Roy Bible Jr., Aziz Karim es John W.A. Findlay: Drug Metabolism and Disposition Vol. 30 (No. 9), 1013-1021 (2002))には、脱溶媒和Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドが、バルデコキシブの代謝産物として尿中に排出されることが記載されている。この化合物は、質量分析によってバルデコキシブの下位代謝産物として識別されたが、かかる化合物の調製、生物学的特性、及び化学的特性については報告されていない。
【００１２】
一般式（Ｉ）の化合物は、選択的シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤の群に含めるべきである。理由は、これらの化合物は、表１に示したように、シクロオキシゲナーゼ−２酵素に対して大きな選択性を有するからである。一般式（Ｉ）の化合物の主効果（抗炎症性と鎮痛性）については、バルデコキシブよりも更に良好な特性がみられる。理由は、これらの化合物は、バルデコキシブよりも生体内テストにおいてはるかに良好な結果をあげるからである。
【００１３】
一般式（Ｉ）の化合物の副作用は、バルデコキシブの副作用よりも更に有利なプロフィールを有する。これらの化合物は、血流の速度を増大させた。この効果は、臨床治療を実践する上で有利である。疼痛を伴う関節炎、変性関節、骨の変形は、老齢者によく発現するが、これら老齢者にはこれと同時に、心臓の血管基盤の異常を引き起こしうる脈管系の疾病もよくみられる。この場合、関節や骨の問題に使用される治療が、心臓の血管基盤も大きく向上させるならば、かかる治療は非常に有利となり得る。
【００１４】
Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの調製中、我々は、溶媒和体は結晶化しており容易に取扱い可能なので、溶媒和体の特性の方がアモルファス化合物の特性より良好であることを発見した。式（Ｉ）の溶媒和物は、包接化合物として、１モルの溶媒和物を含む（ｎ＝１）。溶媒和物は、１モルの水、１モルのＣ１−Ｃ４アルコール、１モルのＣ１−Ｃ３カルボン酸のＣ１−Ｃ４アルキルエステル、又は１モルのジオクサンであってよい。一般式（Ｉ）の化合物の溶媒和物（ｎ＝１）は、調製又は分離の際に、かかる溶媒和物のうちの一部を脱離させることができる。一般式（Ｉ）の化合物の脱溶媒和体は、真空中で加熱することにより形成することができる。溶媒和体と脱溶媒和体との比率は、加熱時間を変化させることにより調整可能である。
【００１５】
一般式（Ｉ）の化合物の出発原料は、３−フェニル−４−（４−クロロスルホニル−フェニル）−５−メチル−イソオキサゾール（ＩＩ）であった。かかる出発原料は、クロロスルホン酸の反応によって３，４−ジフェニル−５−メチル−イソオキサゾール（ＩＩＩ）から調製した。式（ＩＩＩ）の化合物の調製は、以下の論文を参照して行うことができる：P. Bravo, G. Gaudiano, C. Ticozzi: Gazz. Chim. Ital. 102,395 (1972)
【００１６】
スルホン化は、不活性有機溶媒中において、好ましくは非水ジコロメタン中において行った。すなわち、３，４−ジフェニル−５−メチル−イソオキサゾールは、その数倍量のクロロスルホン酸と、好ましくはその５倍量のクロロスルホン酸と、好ましくは反応混合物の沸点まで加熱して反応させた。
【００１７】
式（ＩＩ）の化合物は、２つの異なるプロセスにて、ヒドロキシスルホンアミドと結合させることができる。
【００１８】
方法ａの場合、クロロスルホニル誘導体を、水溶性溶媒と水との混合物において、ヒドロキシルアミンと反応させた。反応時間は１５〜４５分、好ましくは３０分であった。反応温度は摂氏１５〜２５度であった。反応混合物を水に加えて、生成物を濾過して、水で洗浄した。粗生成物は、水とエタノールとの混合物から結晶化させた。最終生成物は一水和物（Ｉ、ｎ：１、溶媒和物：Ｈ２Ｏ）で、収率は７０％、純度は９９．８％（ＨＰＬＣ）であった。
【００１９】
方法ｂの場合、クロロスルホニル誘導体を、非水溶性溶媒の混合物中において、好ましくは相転換触媒であるテトラブチルアンモニウム硫酸水素塩が存在するエチルアセテートと水との中において反応させた。反応は室温で行い、反応時間は５〜２０時間であった。調製後に得た粗生成物は結晶化させてから、水とアルコールとの混合物、好ましくは水とエタノールとの混合物から再結晶させた。収率は６０％であった。得た生成物の溶媒和物は水であった。
【００２０】
脱溶媒和Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの調製は、一般式（Ｉ）の溶媒化合物を加熱することによって、好ましくはＮ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの一水和物を加熱することによって行った。加熱時間は、２０〜４０分、好ましくは２５分であった。
【００２１】
生体外調査
ヒトの組換えＣＯＸ−２とシープのＣＯＸ−１との活性度を分光学的ＴＭＰＤ分析によって測定した（K. Gierse, S.D. Hauser, D.P. Creely, C.M. Koboldt, S.H. Rangwala, P.C. Isakson and K. Seibert: Expression and selective inhibition of the constitutive and inducible forms of human cyclo-oxygenase Biochem. J. 305: 479-484 (1995)）。
【００２２】
測定の原理
ヒトの組換えＣＯＸ−２とシープのＣＯＸ−１との活性度を、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’，−テトラメチル−ｐ−フェニレンジアミン（ＴＭＰＤ）の酸化に基づく分光学的分析によって測定した。プロスタグランジンＧ２（ＰＧＧ２）がプロスタグランジンエンドピロキシドＨ２（ＰＧＨ２）に還元される間に、ＴＭＰＤは６１０ｎｍにおいて分光光度計で測定可能な着色生成物に酸化された。
【００２３】
方法
異なる濃度の阻害剤の溶液４μｌを、反応混合物１５６μｌ（リン酸ナトリウム緩衝液１００ｍＭ、ｐＨ：６．５、ヘマチン１μＭ、ゼラチン１ｍｇ／ｍｌ）に加えた。その後、５０単位のヒトの組換えＣＯＸ−２酵素の溶液２０μｌ、又は５０単位のシープのＣＯＸ−１酵素の溶液２０μｌ（米国アナーバーに在するCayman Chemical社製の品番６０１２２／ＣＯＸ−２／と品番６０１００／ＣＯＸ−１／）を加えた。インキュベーション混合物は、分光学的９６ウェルプレートリーダ（Labsystem社製のiEMS Reader MF）において摂氏２５度で１５分、前保温した。次に、アラキドン酸１ｍＭとＴＭＰＤ溶液１ｍＭとの混合物２０μｌを加えて１０秒振動させ、吸光度を６１０ｎｍにおいて測定した。結果を表１にまとめた。
【００２４】
【表１】
2007530424.tif 000004
【００２５】
生体内調査
１．カラゲナンに誘発されたラットの足の浮腫の分析
オスのウィスターラット（１４０〜１５０ｇ）の右後足にカラゲナン（１％懸濁液５０μｌ）を皮下注射して浮腫を誘発した。形成された炎症を体積記録器（Ugo Basile社製、型式：７１５０）で測定した。処置した足を（０．５％生理食塩水中に添加物を０．３％含有する溶液で充填された）体積記録器内に入れ、炎症のレベルを排出溶液の体積から割り出した。この体積を、最初の注射前の足の体積と比較した。
【００２６】
炎症のレベル（ｍｌ）＝ＣＡ処置後の体積（ｍｌ）−ＣＡ処置前の体積（ｍｌ）
【００２７】
被処置群において誘発された炎症を、（基材のみ注射された）対照群と比較した。
【００２８】
サンプル材と溶媒とを、ＣＡ処置の１時間前に胃腸用体内検査用消息子を介して経口にて投与した。処置された足の体積を、ＣＡ処置から３時間後と５時間後に測定した。炎症レベルの変化は、以下のように計算した。
【００２９】
炎症阻害率（％）＝対照群（ｍｌ）−被処置群（ｍｌ）／対照群（ｍｌ）
【００３０】
広い投与範囲のバルデコキシブ（０．１ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ）と、実施例１の化合物とを調べた（ｎ＝６〜１２匹／群）。化合物の炎症阻害効果のレベルは、処置から４時間後と６時間後に百分率として測定し、炎症阻害の有効量ＥＤ３０を計算した。
【００３１】
結果：
バルデコキシブの浮腫阻害効果
処置から４時間後：ＥＤ３０＝０．２ｍｇ／ｋｇ
処置から６時間後：ＥＤ３０＝０．３ｍｇ／ｋｇ
【００３２】
実施例１の化合物の浮腫阻害効果
処置から４時間後：ＥＤ３０＝１．８ｍｇ／ｋｇ
処置から６時間後：ＥＤ３０＝０．８ｍｇ／ｋｇ
【００３３】
結果からわかるように、両化合物の浮腫阻害効果は有意であった。バルデコキシブの阻害効果は、処置から４時間後においては、実施例１の化合物より大きい。しかしながら、実施例１の化合物は処置から４時間後よりも６時間後においてより有効であるので、実施例１の化合物の効果プロフィールは良好であった。
【００３４】
結果を表２にまとめた。
【００３５】
【表２】
2007530424.tif 000005
【００３６】
動物の疼痛の閾値は、フォンフライ装置（ＩＩＴＣ社製、型式：１６０１Ｃ）で測定した。刺激閾値は、足裏表面の中央部位に加える力を連続的に増大させて測定した。これらの値は、ピーク時に記録した。各測定中に、閾値を少なくとも３回測定し、ピーク値から平均値を計算した。
【００３７】
オスのスプレーグドーリーラット（体重：２５０〜３００ｇ）を使用した（ｎ＝５〜６匹／群）。カラゲナン（ＣＡ）の生理食塩水溶液１００μｌを足の中央に注射した。その後、刺激閾値を測定し、胃腸用体内検査用消息子を用いて経口にて処置を完了した。処置から３０分後、６０分後、９０分後、１２０分後において、マテリアルの効果を測定した。その効果を、基材（２％トウィーン８０溶液）で処置した対照群と比較した。
【００３８】
効果は以下のように計算した。
【００３９】
鎮痛効果（％）＝被処置群の閾値（ｔｘ）−対照群の閾値（ｔｘ）／ＣＡ注射後の被処置群の閾値（ｔ０）−対照群の閾値（ｔｘ）
ｔｘ＝３０分、６０分、９０分、１２０分
【００４０】
急性疼痛モデルにおいて、バルデコキシブと実施例１の化合物の鎮痛効果については、１回当たり経口投与量３０ｍｇ／ｋｇを適量とした。
【００４１】
バルデコキシブの阻害効果は、実施例１の化合物の阻害効果より若干高かった（５〜１０％）が、この差異は統計的には有意ではなかった。結果を表３に示す。
【００４２】
【表３】
2007530424.tif 000006
【００４３】
３．ラットにおけるカラゲナンとカオリンに誘発された単関節炎モデル（活動不能化テスト）
活動不能化テスターは、疼痛から生じる機能パラメータの変化を測定するための装置である。この装置は、後足の挙動、移動量、及び重力中心の変化を記録することができる。
【００４４】
後足の膝関節に対して、カラゲナン及びカオリンを２％含有する溶液１００μｌを処置した。処置後３〜４時間の間に、処置した足の関節包靭帯に関節炎が発現した。この炎症は、処置から２４時間を経てもなお存在する。疼痛のため、動物は処置された足をかばってその足にあまり体重をかけない。重量負荷の変化は、活動不能化テスター装置でグラム単位で測定することができる。
【００４５】
活動不能化は、以下のように計算した。
【００４６】
活動不能化（ＩＣ％）＝｛左足（ｇ）−右足（ｇ）／左足（ｇ）＋右足（ｇ）｝×１００
【００４７】
鎮痛抗炎症化合物は、膝関節の刺激閾値を増大することができたので、ひいては足の機能パラメータが向上した。この測定は、左脚の負荷の減少レベルによって、すなわち、リバーサル百分率として計算することができる。
【００４８】
リバーサル率（％）＝１００×｛処置後の左足の活動不能化率（％）／処置前の左足の活動不能化率（％）｝×１００
【００４９】
左足への刺激剤投与によって誘発された活動不能化を、注射から４時間後に測定した。その後、動物（ｎ＝２４〜３２匹／群）に、バルデコキシブとテスト化合物とを投与量１０ｍｇ／ｋｇにて経口処置した。測定は、処置から１時間後と２時間後に行った。両化合物の鎮痛効果は、１時間後に有意であり、次の１時間後に増大した。実施例１の化合物の効果は、バルデコキシブの効果よりも両測定点において２０％高かった。
【００５０】
結果を表４にまとめた。
【００５１】
【表４】
2007530424.tif 000007
【００５２】
４．ラットにおけるカラゲナンに誘発された炎症性痛覚過敏モデル（ランダル・セリット法）
右後足の足裏表面にカラゲナン（ＣＡ）を注射して浮腫を誘発した。オスのＳＰＲＤラット（体重１４０〜１９０ｇ）を使用した（ｎ＝６〜８匹／群）。次に、炎症を有する後足の物理的疼痛閾値を無痛覚計（Ugo Basile社製、型式：３７２１５）で測定した。
【００５３】
この分析では、疼痛閾値の減少と、物理的疼痛刺激による疼痛の時間依存性の変化を監視する。鎮痛剤によって、炎症後足の疼痛閾値は増大し、この効果はリバーサル百分率として表される。
【００５４】
未処置の右後足を、徐々に圧力を増大させて圧迫した。動物が最初に発声したとき又は足を大きく動かそうとしたときの圧力を記録した（単位：グラム）。未処置の足の基準閾値を測定した（平均：８０〜１１０ｇ）。その後、動物にカラゲナンを処置した。処置後、任意の時間において、浮腫と閾値をチェックした。ＣＡに誘発された閾値の減少は、注射から３時間後に観察された（炎症に誘発された疼痛の閾値の平均は、２０〜２５ｇであった。これは、基準閾値に対して６５〜８０％減少したことを意味する）。
【００５５】
急性モデル：
ＣＡ注射（２％溶液１００μｌ）から１時間後に、動物に対してテスト化合物とバルデコキシブ（各１０ｍｇ／ｋｇ経口投与）を処置した。閾値の変化を投与から２時間後に測定した。
【００５６】
慢性モデル：
炎症の慢性相と閾値の減少を、更に多くの量のＣＡを投与することによって誘発した。炎症によって生じた閾値の減少は、ＣＡ注射（２％溶液１５０μｌ）から２４時間後に測定された。その後、動物に対してテスト化合物とバルデコキシブ（各３０ｍｇ／ｋｇ経口投与）を処置した。閾値の変化を薬剤投与から１時間後、２時間後、３時間後にチェックした。両モデルにおいて使用した対照群に対しては、処置時間に溶媒のみを経口処置した。両プロトコルにおいて、テスト化合物の効果を物理的過剰痛覚のリバーサル百分率として計算した。
【００５７】
リバーサル率（％）＝｛処置群の平均Ｔｘｈ（ｇ）−対照群の平均Ｔ３ｈ／Ｔ２４ｈ（ｇ）／対照群の基準Ｔ０ｈ（ｇ）−対照群の平均Ｔ３ｈ／Ｔ２４ｈ（ｇ）｝×１００
Ｔ３ｈ：急性モデルにおける、ＣＡ注射から３時間後における対照群の閾値（単位：グラム）
Ｔ２４ｈ：慢性モデルにおける、ＣＡ注射から２４時間後における対照群の閾値（単位：グラム）
Ｔ０ｈ：ＣＡ注射前の閾値（単位：グラム）
Ｔｘｈ：急性モデルにおいては、ＣＡ注射から３時間後
Ｔｘｈ：慢性モデルにおいては、ＣＡ注射から２５時間後、２６時間後、２７時間後
【００５８】
バルデコキシブとテスト化合物は、急性モデルと慢性モデルにおいて有意な抗過剰痛覚性を示した。慢性モデルにおいては、３回の測定時間すべてにおいて、実施例１の化合物はバルデコキシブよりも効果が高かった。急性モデルと慢性モデルとの結果を、それぞれ表５、６にまとめた。
【００５９】
【表５】
2007530424.tif 000008
【００６０】
【表６】
2007530424.tif 000009
【００６１】
５．分離したラビットの心臓に及ぼす心臓への影響
体重１．５〜２ｋｇのニュージーランドホワイトラビットを使用した。動物は放血を行い、開胸術後に心臓を摘出してランゲンドルフ型灌流装置に設置した。心臓は、大動脈を介して、酸素処理し恒温（摂氏３７度）に維持したクレブス溶液で灌流した。一定の灌流圧力の８０ｃｍＨ２Ｏを適用した。テスト化合物を灌流溶液に溶解して、要求される濃度にした。
【００６２】
冠状動脈の流量の基準値を測定した。その後、少量の化合物を灌流液に加え、灌流を１０分毎に３０分間測定した。その後３０分間、化合物なしで灌流を行い、溶剤と高量の化合物とを加えた状態で測定を繰り返した。
【００６３】
同じ濃度のバルデコキシブと実施例１のテスト化合物の効果を、各４つの心臓において調査した（濃度は１、３、１０μＭ）。バルデコキシブは、いずれの濃度においても効果を示さなかった。実施例１の化合物は、効能を示した。その結果は表７にまとめた。明らかに、冠状動脈流量が投与量に依存して増大していることがわかる。この効果は臨床治療において有利である。疼痛を伴う関節炎、変性関節、骨の変形は、老齢者によく発現するが、これらの高齢者においてはこれと同時に、心臓の血管基盤の異常を引き起こしうる脈管系の疾病もよくみられるからである。この場合、関節や骨の問題に使用される治療が、心臓の血管基盤も大きく向上させるならば、かかる治療は非常に有利となり得る。
【００６４】
【表７】
2007530424.tif 000010
【００６５】
生物学的調査の結果から以下のことがわかった：
・生体外調査に基づくと、一般式（Ｉ）の化合物は、有意なＣＯＸ−２酵素に対する選択性を有する。
・生体内テスト結果からわかるように、一般式（Ｉ）の化合物の効果は、バルデコキシブの効果よりも高い。
・一般式（Ｉ）の化合物は、冠状動脈の流量を増大させる。
【００６６】
本発明の実装を以下の実施例により説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００６７】
ＮＭＲ調査は、バリアン分光形（３００ＭＨｚ）によって実施した。ＨＰＬＣ調査は、メルク・ヒタチ・ラクロム装置によって行った。
【００６８】
実施例１
Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの一水和物
Ａ．
ヒドロキシルアミン塩酸塩６．８８ｇ（０．０９９モル）をジオクサン５０ｍｌ内で懸濁し、摂氏＋１０度まで冷却し、水２５ｍｌ中に酢酸ナトリウム８．１ｇ（０．０９９モル）を溶解した溶液を加えた。ジオクサン５０ｍｌ中に３−フェニル−４−（４−クロロスルホニル−フェニル）−５−メチル−イソオキサゾール１１ｇ（０．０３３モル）を溶解した溶液を３０分間加えた。混合物を３０分間攪拌して水５００ｍｌに加え、懸濁液を２時間振動させた。粗生成物を酢酸エチル（２００ｍｌ）に溶解して、溶液を、まずエチレンジアミン４酢酸ジナトリウム塩（４０ｍｌ）の５％水溶液で、次に水（４０ｍｌ）で、最後に塩水（２０ｍｌ）で抽出した。溶液を真空中で蒸散した。残留物をエタノール（９０ｍｌ）に溶解し、活性炭（１ｇ）で脱色し、濾過し、アスコルビン酸（３ｇ）を含む水（２７０ｍｌ）を摂氏６０度にて溶液に加えた。溶液を冷却し（摂氏＋５度）、沈降物を濾過して、水で洗浄し、乾燥させて、上記標題の化合物を得た（７．８ｇ、６８％、ｍｐ：摂氏９５〜１１０度）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳｄ６、摂氏３０度、δＴＭＳ：０．００ｐｐｍ）：２．４９ｓ（３Ｈ）、７．３３〜７．５２ｍ（７Ｈ）、８．８２〜７．８８ｍ（２Ｈ）、９．６７ｓ（２Ｈ）。純度はＨＰＬＣにより９９．９％であった。
【００６９】
Ｂ．
３−フェニル−４−（４−クロロスルホニル−フェニル）−５−メチル−イソオキサゾール５．４ｇ（０．０１６モル）を酢酸エチル６５ｍｌに溶解した。ヒドロキシルアミンの５０％水溶液２．３ｍｌ（０．０３５モル）と、テトラブチルアンモニウム硫酸水素塩０．３ｇを水（６５ｍｌ）内で混合した。反応混合物を８〜２０時間、室温で攪拌した。酢酸エチル（１５０ｍｌ）と水（１５０ｍｌ）とを反応混合物に加えた。有機相を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させてから、溶液を減圧下で蒸散させた。残留物（４．９ｇ）をエタノール７０ｍｌに溶解し、活性炭で脱色した後、溶液を濾過した。水（２１０ｍｌ）を溶液に加え、結晶物を濾過して、水で洗浄して乾燥させた。収率は３．０ｇ（５４％）であった。
【００７０】
実施例２
Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドのモノ酢酸エチル溶媒和物
ヒドロキシルアミン塩酸塩６．８８ｇ（０．０９９モル）をジオクサン５０ｍｌ内で懸濁し、摂氏＋１０度まで冷却し、水２５ｍｌ中に酢酸ナトリウム８．１ｇ（０．０９９モル）を溶解した溶液を加えた。ジオクサン５０ｍｌ中に３−フェニル−４−（４−クロロスルホニル−フェニル）−５−メチル−イソオキサゾール１１ｇ（０．０３３モル）を溶解した溶液を３０分間加えた。混合物を３０分間攪拌して水６００ｍｌに加え、懸濁液を２時間攪拌した。懸濁液を濾過して水１００ｍｌで２回洗浄した。沈降物を、酢酸エチル３００ｍｌに溶解して、水５０ｍｌで３回抽出した。有機溶液を無水硫酸マグネシウム５ｇで乾燥させた。硫酸マグネシウムを濾過した後、溶液を減圧下（４０ｍｂａｒ）で８０ｍｌになるまで蒸散し、生成物を結晶化させた。この懸濁液を摂氏−５度で２時間攪拌し、冷却した（摂氏−１０度）酢酸エチル１０ｍｌで洗浄した。乾燥後、上記標題の化合物８．５ｇ（６０％）を得た（ｍｐ：摂氏９６〜１００度、摂氏１０８度で分解）。純度はＨＰＬＣにより９９．９％であった。
【００７１】
実施例３
Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドのモノ−２−プロパノール溶媒和物
Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドのモノ酢酸エチル溶媒和物４ｇを摂氏４５度にて２−プロパノール２０ｍｌに溶解した。加熱を停止し、上記標題の化合物を沈降させた。懸濁液を摂氏０度で２時間攪拌し、濾過して、上記標題の化合物を得た（３．６ｇ、９６％、ｍｐ：摂氏１００〜１１８度、摂氏１２３度で分解）。
【００７２】
実施例４
Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドのモノ−ジオクサン溶媒和物
実施例３の標題の化合物１００ｍｇをジオクサン１０ｍｌに溶解し、摂氏４０度まで加熱し、水１０ｍｌを滴下して加えた。生成物を、摂氏２０度で結晶形に沈降させた。懸濁液を２時間攪拌し、濾過してから、生成物を摂氏２５度で乾燥させた。収率は１００ｍｇ（８３％）であった（ｍｐ：摂氏１４８〜１５３度）。
【００７３】
実施例５
３−フェニル−４−（４−クロロスルホニル−フェニル）−５−メチル−イソオキサゾール（ＩＩ）の調製
クロロスルホン酸６．６５ｇ（０．１モル）を無水ジクロロメタン５０ｍｌに溶解した。溶液を摂氏０度まで冷却し、無水ジクロロメタン２０ｍｌに３，４，ジフェニル−５−メチル−イソオキサゾール４．７ｇ（０．０２モル）を溶解した溶液を加えた。反応混合物を室温で２時間攪拌し、更に１０時間沸点にて攪拌した。溶媒を蒸散し、残留物を氷５０ｇ上に注いだ。この懸濁液を酢酸エチル４０ｍｌで２回抽出した。合成有機相を水５０ｍｌで抽出し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。濾過と蒸散を行った後、残留物を高温のシクロヘキサンに溶解し、摂氏＋１５度まで冷却して結晶化させた。沈降生成物（４ｇ）を濾過して、シクロヘキサン５０ｍｌから再結晶させ、上記標題の化合物（ＩＩ）を得た（３．７ｇ、ｍｐ：摂氏１０６〜１０７度）。
【００７４】
実施例６
脱溶媒和物Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの調製
実施例１で調製したＮ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの一水和物２１．６ｍｇを真空中（２０ｍｂａｒ）で摂氏９５度まで加熱して融解した。摂氏２５度まで冷却した際に、ガラス状生成物が形成された。融解範囲は摂氏８３〜９５度、摂氏１５０度で分解、純度は９９．８％（ＨＰＬＣ）であった。
【００７５】
実施例７
Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの一水和物を含む錠剤
Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの一水和物１０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム２ｍｇ
クロスポビドン４ｍｇ
微結晶性セルロース１８４ｍｇ
合計：２００ｍｇ
Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの一水和物と各成分とを混合し圧縮して錠剤を作製した。
【００７６】
実施例８
Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの一水和物を含むカプセル
Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホニル−アミドの一水和物１０ｍｇ
アスコルビン酸１０ｍｇ
化合物は均質化して、カプセルに充填した。
【００７７】
Ｘ線回折調査
Ｘ線回折調査をエンラフノニアスＣＡＤ４回折計を用いて実施した。
【００７８】
化学理論上の固相を形成することができるＮ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの能力は、様々な溶媒と関係している。この特性を最も良く示すのは、結晶データである。更に重要な特性は、すべての場合において、Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドは、ホスト分子として、溶媒のより小さい（ゲスト）分子を水素結合にて結合させる点である。例えば、これらの結合は、水素結合が破線グラフで表される水複合体の結晶構造であることを特徴とする。
【００７９】
Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの水和包接（図１）では、無色で柱状で単斜晶形の結晶が形成される（空間群：Ｐ２１／ｃ、絶対温度２９５（２）度のときのセル定数：ａ＝７，６５９（１）Å、ｂ＝２３．５１０（１）Å、ｃ＝９，１４８（１）Å、β＝９５．６５（１）°、Ｖ＝１６３９．２（３）Å３。計算密度はＤｘ＝１．４１２Ｍｇ／ｍ３。硫黄原子は、オリゴ依存相対原子座標（０．２３１１７（９），０．２７７００（２），０．５２７５９（６））（ｘ，ｙ，ｚ）の特徴を有する。誤差σは統計的有意性３σの範囲内（ブラケット間）。
【００８０】
比率２：２のイソプロパノールとともに形成された複合体（図２）は、以下のデータの特徴を有する。無色で柱状で単斜晶形の結晶。空間群：Ｐ１、絶対温度２９５（２）度のときのセル定数：ａ＝８．７５３（１）Å、ｂ＝１０．８５８（１）Å、ｃ＝１１．４５７（１）Å、α＝７０．４７（１）°、β＝７９．８３（１）°、γ＝８３．０７（１）°、Ｖ＝１００７．９（２）Å３。計算密度はＤｘ＝１．２８７Ｍｇ／ｍ３。硫黄原子は、オリゴ依存相対原子座標（０．２７９５０（４），０．３８１１２（３），０．９０８３３（３））（ｘ，ｙ，ｚ）の特徴を有する。誤差σは統計的有意性３σの範囲内（ブラケット間）。
【００８１】
ジオクサン包接（図３）は、以下のデータの特徴を有する。無色で柱状で単斜晶形の結晶。空間群：Ｐ２１／ｃ、絶対温度２９５（２）度のときのセル定数：ａ＝１１，７３２（４）Å、ｂ＝１０．１７１（７）Å、ｃ＝１５．３８３（１３）Å、β＝９５．９８（５）°、Ｖ＝１８２６（２）Å３。計算密度はＤｘ＝１．３６２Ｍｇ／ｍ３。硫黄原子は、オリゴ依存相対原子座標（０．６０２９３（４），０．３１２３０（５），０．７８８４８（３））（ｘ，ｙ，ｚ）の特徴を有する。誤差σは統計的有意性３σの範囲内（ブラケット間）。
【００８２】
上記の固体結晶複合体のセル定数と相対原子座標から計算された粉末の回折曲線は、測定値と一致する。これは、結晶と巨視的サンプルとが一致していることを意味する。
【図面の簡単な説明】
【００８３】
【図１】
【図２】
【図３】
【図１】
2007530424.tif 000017
【図２】
2007530424.tif 000018
【図３】
2007530424.tif 000019
【手続補正書】
【提出日】平成17年5月11日(2005.5.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
溶媒和物が水、Ｃ１−Ｃ４アルコール、Ｃ１−Ｃ３カルボン酸のＣ１−Ｃ４アルキルエステル、又はジオクサンを表す下記式（Ｉ）
【化１】
2007530424.tif 000020
のＮ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの溶媒和物。
【請求項２】
溶媒和物が水を表す請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項３】
溶媒和物が酢酸エチルを表す請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項４】
溶媒和物が２−プロパノールを表す請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項５】
溶媒和物がジオクサンを表す請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項６】
溶媒和物がＣ１−Ｃ３カルボン酸のＣ１−Ｃ４アルキルエステル又はジオクサンである式（Ｉ）のＮ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの溶媒化合物を作製するプロセスにおいて、
下記式（ＩＩＩ）の３，４−ジフェニル−５−メチル−イソオキサゾールがクロロスルホン酸と反応し、
【化２】
2007530424.tif 000021
その生成物である下記式（ＩＩ）の３−フェニル−４−（４−クロロスルホニル−フェニル）−５−メチル−イソオキサゾールが
ａ）水と水混和性溶媒との混合物において、又は
ｂ）相転換触媒が存在する非水混和性溶媒と水との混合物においてヒドロキシルアミンと反応し、
【化３】
2007530424.tif 000022
その生成物がＣ１−Ｃ３カルボン酸のＣ１−Ｃ４アルキルエステル又はジオクサンから選択される溶媒から結晶化することを特徴とするプロセス。
【請求項７】
相転換触媒がテトラブチルアンモニウム硫酸水素塩であることを特徴とする請求項６記載のプロセス。
【請求項８】
再結晶が酢酸エチルから行われたことを特徴とする請求項６記載のプロセス。
【請求項９】
溶媒和物が水である式（Ｉ）のＮ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの溶媒化合物を作製するプロセスにおいて、
下記式（ＩＩＩ）の３，４−ジフェニル−５−メチル−イソオキサゾールがクロロスルホン酸と反応し、
【化４】
2007530424.tif 000023
その生成物である下記式（ＩＩ）の３−フェニル−４−（４−クロロスルホニル−フェニル）−５−メチル−イソオキサゾールが
ａ）水と水混和性溶媒との混合物において、又は
ｂ）相転換触媒が存在する非水混和性溶媒と水との混合物においてヒドロキシルアミンと反応し、
【化５】
2007530424.tif 000024
その生成物が水とエタノールと必要に応じてアスコルビン酸とを含む混合物から結晶化することを特徴とするプロセス。
【請求項１０】
変形性関節症、関節リウマチ、外科手術、原発性月経困難症による疼痛の治療用の医薬用組成物を作製するための請求項１〜５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項１１】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物と、１つ以上の治療上許容可能な医薬用基材とを含む医薬用組成物。
【請求項１２】
基材のうちの１つがアスコルビン酸であることを特徴とする請求項１１記載の医薬用組成物。
【請求項１３】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物を治療上有効な投与量にて必要とする患者を治療することを備えた変形性関節症、関節リウマチ、外科手術、原発性月経困難症による疼痛の治療方法。
【請求項１４】
請求項１１〜１２のいずれか１項に記載の医薬用組成物を治療上有効な投与量にて必要とする患者を治療することを備えた変形性関節症、関節リウマチ、外科手術、原発性月経困難症による疼痛の治療方法。
【手続補正書】
【提出日】平成18年3月20日(2006.3.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８３】
【図１】Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−５−メチル−イソオキサゾール−４−ｙｌ）−ベンゼンスルホンアミドの水和包接を示す説明図である。
【図２】比率２：２のイソプロパノールとともに形成された複合体を示す説明図である。
【図３】ジオクサン包接を示す説明図である。
【国際調査報告】
2007530424.tif 000025
2007530424.tif 000026