(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）【化１】2007509117.tif 000056[式中、Ｒ１及びＲ５は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ（ＯＲＪ’）又は１以上のＲ６基により置換されていてもよいヒドロカルビル基であり；Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、アルキル又はアルケニルであり、そのそれぞれが、１以上のＲ７基により置換されていてもよく；Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、ハロゲン、ＮＯ２、ＣＮ、（ＣＨ２）ｍＯＲａ、Ｏ（ＣＨ２）ｎＯＲｂ、（ＣＨ２）ｐＮＲｃＲｄ、ＣＦ３、ＣＯＯＲｅ、ＣＯＮＲｆＲｇ、ＣＯＲｈ、ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２Ｒｉ、ＳＯ２ＮＲｊＲｋ、（ＣＨ２）ｑＮＲａ’ＣＯＲｇ’、Ｒｆ’、（ＣＨ２）ｒＮＲｂ’ＳＯ２Ｒｈ’、ＳＯ２ＮＲｄ’Ｒｉ’、ＳＯ２ＮＲｅ’（ＣＨ２）ｓＯＲｃ’、ヘテロシクロアルキル又はヘテロアリールであり、ここで、前記ヘテロシクロアルキル及びヘテロアリールは、アラルキル、スルホニル、Ｒｍ及びＣＯＲｎから選択される１以上の置換基により置換されていてもよく；Ｒｇ’、Ｒｈ’、Ｒｉ’及びＲｊ’は、それぞれ独立して、アルキル、アリール、アラルキル及びヘテロアリールから選択され、そのそれぞれが、ハロゲン、ＯＨ、ＮＯ２、ＮＨ２ＣＦ３及びＣＯＯＨから選択される１以上の置換基により置換されていてもよく；ｍ、ｐ、ｑ及びｒは、それぞれ独立して、０、１、２又は３であり；ｎ及びｓは、それぞれ独立して、１、２又は３であり；Ｒａ〜ｎ及びＲａ’〜ｆ’は、それぞれ独立して、Ｈ又はアルキルである。]の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。本発明のさらなる態様は、かかる化合物を含む医薬組成物、並びに、増殖性障害、ウィルス性障害、ＣＮＳ障害、卒中、脱毛症及び糖尿病のうちの１以上を治療する薬剤の調製におけるその使用に関する。
2007509117.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
2007509117.tif 000050
[式中、
Ｒ１及びＲ５は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ（ＯＲＪ’）又は１以上のＲ６基により置換されていてもよいヒドロカルビル基であり；
Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、アルキル又はアルケニルであり、そのそれぞれが、１以上のＲ７基により置換されていてもよく；
Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、ハロゲン、ＮＯ２、ＣＮ、（ＣＨ２）ｍＯＲａ、Ｏ（ＣＨ２）ｎＯＲｂ、（ＣＨ２）ｐＮＲｃＲｄ、ＣＦ３、ＣＯＯＲｅ、ＣＯＮＲｆＲｇ、ＣＯＲｈ、ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２Ｒｉ、ＳＯ２ＮＲｊＲｋ、（ＣＨ２）ｑＮＲａ’ＣＯＲｇ’、Ｒｆ’、（ＣＨ２）ｒＮＲｂ’ＳＯ２Ｒｈ’、ＳＯ２ＮＲｄ’Ｒｉ’、ＳＯ２ＮＲｅ’（ＣＨ２）ｓＯＲｃ’、ヘテロシクロアルキル又はヘテロアリールであり、ここで、前記ヘテロシクロアルキル及びヘテロアリールは、アラルキル、スルホニル、Ｒｍ及びＣＯＲｎから選択される１以上の置換基により置換されていてもよく；
Ｒｇ’、Ｒｈ’、Ｒｉ’及びＲｊ’は、それぞれ独立して、アルキル、アリール、アラルキル及びヘテロアリールから選択され、そのそれぞれが、ハロゲン、ＯＨ、ＮＯ２、ＮＨ２ＣＦ３及びＣＯＯＨから選択される１以上の置換基により置換されていてもよく；
ｍ、ｐ、ｑ及びｒは、それぞれ独立して、０、１、２又は３であり；
ｎ及びｓは、それぞれ独立して、１、２又は３であり；及び
Ｒａ〜ｎ及びＲａ’〜ｆ’は、それぞれ独立して、Ｈ又はアルキルである。]の化合物であって、式Ｉ〜XVIIの化合物以外の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項２】
Ｒ１及びＲ５が、それぞれ独立して、Ｈ、又は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択されるヘテロ原子を最大６個まで含んでいてもよく、１、２又は３個のＲ６基により置換されていてもよいＣ１〜２０ヒドロカルビル基であることを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ５が、それぞれ１以上のＲ６基により置換されていてもよいアリール又はヘテロアリールであることを特徴とする請求項１又は２記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ５が、それぞれ１以上のＲ６基により置換されていてもよいフェニル又はピリジニルであることを特徴とする請求項３記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１が、Ｈ又はアルキルであることを特徴とする請求項１〜４のいずれか記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル又はＣ２〜Ｃ６アルケニルであり、そのそれぞれが、１、２又は３個のＲ７基により置換されていてもよいことを特徴とする請求項１〜５のいずれか記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ６及びＲ７が、それぞれ独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ２、ＣＮ、ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＣＨ２ＯＨ、Ｏ（ＣＨ２）２ＯＭｅ、ＮＨ２、ＮＨＭｅ、ＮＭｅ２、ＣＦ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＭｅ、ＣＯＮＭｅ２、ＣＯＭｅ、ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２Ｍｅ、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＭｅ、ＳＯ２ＮＭｅ２、モルホリン、ピペリジン、ピペラジン、Ｎ−アセチルピペラジン、Ｎ−メチルピペラジン、トリアゾール、又はテトラゾールであることを特徴とする請求項１〜６のいずれか記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ３及びＲ４が共にＨであり、Ｒ２がＭｅであることを特徴とする請求項１〜７のいずれか記載の化合物。
【請求項９】
化合物が、式II
【化２】
2007509117.tif 000051
［式中、
Ｒ１は、上記請求項１又は２にて定義したとおりであり；
ＸはＣであり；又はＸはＮであってＲ８は存在せず；
Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ独立して、Ｈ又はＲ６及びＲ７について定義したとおりである。］の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩であることを特徴とする請求項１〜８のいずれか記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１が、Ｈ又はアルキルであり；
Ｒ８が、Ｈ、ＮＯ２、ＯＲｐ、ハロゲン、ＣＦ３、ＣＮ、ＣＯＲｑ、アルキル、ＮＲｒＲｓ、Ｏ（ＣＨ２）ｎＯＲｔであり；
Ｒ９が、Ｈ、ＯＲｕ、ハロゲン、アルキル、ＮＲｖＲｗ、又はＲｍ及びＣＯＲｎから選択される１以上の置換基により置換されていてもよいヘテロシクロアルキルであり；
ｔが、０、１、２又は３であり；
Ｒ１０が、Ｈ、アルキル又はＮＲｘＲｙであり；及び
Ｒｐ〜ｙが、それぞれ独立して、Ｈ又はアルキルであることを特徴とする請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ１が、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ又は３−メチルブチルであることを特徴とする請求項１〜１０のいずれか記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ８が、Ｈ、ＮＯ２、ＯＨ、Ｍｅ、Ｉ、ＣＦ３、ＣＮ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｍｅ又はＮＨ２であり；
Ｒ９が、Ｈ、Ｆ、ＯＨ、Ｉ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＭｅ、ＮＭｅ２、モルホリン、Ｍｅ、Ｎ−メチルピペラジン、Ｎ−アセチルピペラジン又はピペラジンであり；及び
Ｒ１０が、Ｈ、Ｍｅ又はＮＭｅ２であることを特徴とする請求項１０又は１１記載の化合物。
【請求項１３】
ＸがＮであり、Ｒ８が存在しないことを特徴とする請求項９記載の化合物。
【請求項１４】
ＸがＣであることを特徴とする請求項９記載の化合物。
【請求項１５】
３，４−ジメチル−５−［２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−クロロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−ブロモ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−メトキシ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（３−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−ジメチルアミノ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−［２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−フルオロ−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−［２−（４−メチル−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−フルオロ−３−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−｛２−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（３−ヨード−４−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−クロロ−３−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゾニトリル；
５−｛２−［４−（４−アセチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−クロロ−３−ヒドロキシメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−［２−（３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−［２−（２−メチル−５−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−［２−（４−メチル−３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−ジメチルアミノ−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−４−メチル−５−［２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
２−クロロ−５−［４−（３−エチル−４−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−安息香酸；
２−クロロ−５−［４−（３−エチル−４−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−安息香酸メチルエステル；
５−［２−（４−ジメチルアミノ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−４−メチル−５−［２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−４−メチル−５−［２−（４−メチル−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−ジメチルアミノ−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
４−メチル−３−（３−メチル−ブチル）−５−［２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−クロロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３−（３−メチル−ブチル）−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（６−クロロ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−５−［２−（６−メトキシ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（６−クロロ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３−（３−メチル−ブチル）−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（６−メトキシ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３−（３−メチル−ブチル）−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−ヨード−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（２−ジメチルアミノ−５−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−［２−（４−ピペラジン−１−イル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（３−アミノ−４−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
４−メチル−５−［２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
４−メチル−５−［２−（４−メチル−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−アセトアミド；
３−エチル−５−［２−（３−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−５−［２−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−クロロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−５−［２−（３−ヒドロキシ−４−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−｛２−［３−（４−アセチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−５−［２−（３−メトキシ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−クロロ−３−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−４−メチル−５−［２−（４−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
４−［４−（３−エチル−４−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホン酸；
３−［４−（３−エチル−４−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホン酸；
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−メタン−スルホンアミド；
５−［２−（５−メトキシ−２−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−ベンズアミド；
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−Ｃ，Ｃ，Ｃ−トリフルオロ−メタンスルホンアミド；
Ｎ−｛４−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−アセトアミド；
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド；
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−イソプロピル−４−メチル−ベンズアミド；
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−エチル−ベンゼンスルホンアミド；
５−［２−（５−ヒドロキシメチル−２−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−５−トリフルオロメチル−フェニル｝−アセトアミド；
４−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−（２−メトキシ−エチル）−ベンゼンスルホンアミド；
５−［２−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−（２−メトキシ−エチル）−ベンゼンスルホンアミド；
５−［２−（３−ブロモ−５−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−｛２−［４−（４−ベンジル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
４−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−２−トリフルオロメチル−ベンゾニトリル；
５−［２−（３−アミノ−５−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
４−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−ベンゼンスルホンアミド；
Ｎ−ベンジル−４−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド；
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−イソプロピル−ベンゼンスルホンアミド；
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−ベンゼンスルホンアミド；
３，４−ジメチル−５−［２−（３−メチルアミノ−５−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
Ｎ−ベンジル−３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド；
３，４−ジメチル−５−｛２−［４−メチル−３−（モルホリン−４−スルホニル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−｛２−［３−（モルホリン−４−スルホニル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−アミノメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（６−クロロ−５−メチル−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
ピリジン−２−カルボン酸４−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジルアミド；
３，４−ジメチル−５−｛２−［（ピリジン−３−イルメチル）−アミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−（２−アミノ−ピリミジン−４−イル）−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
Ｎ−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イル］−アセトアミド；
から選択されることを特徴とする請求項１〜１４のいずれか記載の化合物。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれか記載の化合物と薬学的に許容可能な希釈剤、賦形剤又は担体とを混合してなる医薬組成物。
【請求項１７】
増殖性障害を治療する薬剤の調製における、請求項１〜１５のいずれか記載の化合物の使用。
【請求項１８】
増殖性障害が、癌又は白血病であることを特徴とする請求項１７記載の使用。
【請求項１９】
増殖性障害が、糸球体腎炎、関節リウマチ、乾癬又は慢性閉塞性肺疾患であることを特徴とする請求項１７記載の使用。
【請求項２０】
ウィルス性障害を治療する薬剤の調製における、請求項１〜１５のいずれか記載の化合物の使用。
【請求項２１】
ウィルス性障害が、ヒトサイトメガロウィルス（ＨＣＭＶ）、単純ヘルペスウィルスＩ型（ＨＳＶ−１）、ヒト免疫不全ウィルスＩ型（ＨＩＶ−１）及び水痘帯状ヘルペスウィルス（ＶＺＶ）から選択されることを特徴とする請求項２０記載の使用。
【請求項２２】
ＣＮＳ障害を治療する薬剤の調製における、請求項１〜１５のいずれか記載の化合物の使用。
【請求項２３】
ＣＮＳ障害が、アルツハイマー病又は双極性障害であることを特徴とする請求項２０記載の使用。
【請求項２４】
脱毛症を治療する薬剤の調製における、請求項１〜１５のいずれか記載の化合物の使用。
【請求項２５】
卒中を治療する薬剤の調製における、請求項１〜１５のいずれか記載の化合物の使用。
【請求項２６】
化合物が、少なくとも１つのＰＬＫ酵素を阻害するのに充分な量で投与されることを特徴とする請求項１７〜２５のいずれか記載の使用。
【請求項２７】
ＰＬＫ酵素が、ＰＬＫ１であることを特徴とする請求項２６記載の使用。
【請求項２８】
化合物が、少なくとも１つのＣＤＫ酵素を阻害するのに充分な量で投与されることを特徴とする請求項１７〜２５のいずれか記載の使用。
【請求項２９】
ＣＤＫ酵素が、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ３、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、及び／又はＣＤＫ９であることを特徴とする請求項２８記載の使用。
【請求項３０】
化合物が、オーロラキナーゼを阻害するのに充分な量で投与されることを特徴とする請求項１７〜２５のいずれか記載の使用。
【請求項３１】
糖尿病を治療する薬剤の調製における、請求項１〜１５のいずれか記載の化合物の使用。
【請求項３２】
糖尿病が、II型糖尿病であることを特徴とする請求項３１記載の使用。
【請求項３３】
化合物が、ＧＳＫを阻害するのに充分な量で投与されることを特徴とする請求項３１又は３２記載の使用。
【請求項３４】
化合物が、ＧＳＫ３βを阻害するのに充分な量で投与されることを特徴とする請求項３３記載の使用。
【請求項３５】
サイクリン依存性キナーゼ、ＧＳＫ及びＰＬＫ酵素のうち、１つ以上を阻害することが可能なさらなる候補化合物を同定するアッセイにおける、請求項１〜１５のいずれか記載の化合物の使用。
【請求項３６】
アッセイが結合タンパク質競合アッセイであることを特徴とする請求項３５記載の使用。
【請求項３７】
請求項１で定義された式Ｉの化合物を調製するプロセスであって、式Ｘの化合物と式XIの化合物とを反応させて、式Ｉの化合物を形成するプロセス。
【化３】
2007509117.tif 000052
【請求項３８】
式Ｘの化合物が、以下のステップにより調製されることを特徴とする請求項３７記載のプロセス：
（Ａ）  （ｉ）式IIIの化合物を式VIIの化合物と反応させて、式VIIIの化合物を形成するステップ；
（ii）前記式VIIIの化合物を式Ｘの化合物に変換するステップ；
【化４】
2007509117.tif 000053
又は、
（Ｂ）  （ｉ）式IIIの化合物を式IVの化合物と反応させて、式VIの化合物を形成するステップ；
（ii）前記式VIの化合物を式VIIIの化合物に変換するステップ；及び
（iii）前記式VIIIの化合物を式Ｘの化合物に変換するステップ；
【化５】
2007509117.tif 000054
又は、
（Ｃ）  （ｉ）式IIIの化合物を式IVの化合物と反応させて、式VIの化合物を形成するステップ；
（ii）前記式VIの化合物を式Ｘの化合物に変換するステップ；
【化６】
2007509117.tif 000055
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規２−置換−４−ヘテロアリール−ピリミジン誘導体及び治療におけるその使用に関する。より詳細には、本発明は、１以上のプロテインキナーゼを阻害することが可能な化合物に関するが、それに限定されるものではない。
【背景技術】
【０００２】
真核生物において、ＤＮＡ複製、細胞周期の進行、エネルギー代謝、及び細胞増殖と細胞分化を含むあらゆる生物学的機能は、タンパク質の可逆的なリン酸化を通じて制御されている。タンパク質の機能、細胞内分布及び安定性だけではなく、他のどのようなタンパク質又は細胞成分と会合するかということも、タンパク質のリン酸化状態によって決まる。したがって、全体としてのプロテオームにおける特異的リン酸化のバランスも、生化学経路における個々のメンバーのバランスと同様に、刻々と変化する環境に反応してホメオスタシスを維持するための戦略として、生体により利用されている。こうしたリン酸化ステップ及び脱リン酸化ステップを実行する酵素が、それぞれプロテインキナーゼとホスファターゼである。
【０００３】
真核生物のプロテインキナーゼファミリーは、ヒトゲノムの中でも最大のものの１つであり、約５００の遺伝子を擁している（Manning, G.; Whyte, D. B.; Martinez, R.; Hunter, T.; Sudarsanam, S. The protein kinase complement of the human genome. Science 2002, 298, 1912-1934; Kostich, M.; English, J.; Madison, V.; Gheyas, F.; Wang, L. et al. Human members of the eukaryotic protein kinase family. Genome Biology 2002, 3, research0043.0041-0043.0012.）。キナーゼの大多数は、保存されたコア構造を有する２５０〜３００のアミノ酸残基触媒ドメインを含んでいる。このドメインはＡＴＰ（それほど多くはないがＧＴＰ）用の結合ポケットを含んでおり、その末端リン酸基を、キナーゼが共有結合によってその高分子基質まで輸送している。リン酸供与体は、常に二価のイオン（通常はＭｇ２＋又はＭｎ２＋）を有する複合体として結合する。触媒ドメインの他の重要な機能は、高分子基質のリン酸転移のための結合及び配向である。大半のキナーゼに存在する触媒ドメインは、程度の差はあるものの相同性を有している。
【０００４】
ＡＴＰ結合に拮抗することでプロテインキナーゼ機能を阻害することが可能な多種多様な分子は、当該技術分野で周知である（Dancey, J.; Sausville, E. A. Issues and progress with protein kinase inhibitors for cancer treatment. Nat. Rev. Drug Disc. 2003, 2, 296-313; Cockerill, G. S.; Lackey, K. E. Small molecule inhibitors of the class 1 receptor tyrosine kinase family. Current Topics in Medicinal Chemistry 2002, 2, 1001-1010; Fabbro, D.; Ruetz, S.; Buchdunger, E.; Cowan-Jacob, S. W.; Fendrich, G. et al. Protein kinases as targets for anticancer agents: from inhibitors to useful drugs. Pharmacol.Ther. 2002, 93, 79-98; Cohen, P. Protein kinases - the major drug targets of the twenty-first century? Nat. Rev. Drug Disc. 2002, 1, 309-315; Bridges, A. J. Chemical inhibitors of protein kinases. Chem.Rev. 2001, 101(8), 2541-2571.）。例えば、本出願人は、特にサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）に対するキナーゼ阻害性を有する、２−アリニノ−４−ヘテロアリール−ピリミジン化合物を以前に開示している（Wang, S.; Meades, C.; Wood, G.; Osnowski, A.; Fischer, P. M. N-(4-(4-methylthiazol-5-yl) pyrimidin-2-yl)-N-phenylamines as antiproliferative compounds. PCT Intl. Patent Appl. Publ. WO 2003029248; Cyclacel Limited, UK; Wu, S. Y.; McNae, I.; Kontopidis, G.; McClue, S. J.; McInnes, C. et al. Discovery of a Novel Family of CDK Inhibitors with the Program LIDAEUS: Structural Basis for Ligand-Induced Disordering of the Activation Loop. Structure 2003, 11, 399-410; Fischer, P. M.; Wang, S.; Wood, G. Inhibitors of cyclin dependent kinases as anti-cancer agent. PCT Intl. Patent Appl. Publ. WO 02/079193; Cyclacel Limited, UK; Wang, S.; Fischer, P. M. Anti-cancer compounds. US Patent Appl. Publ. 2002/0019404; Fischer, P. M.; Wang, S. 2-substituted 4-heteroaryl-pyrimidines and their use in the treatmetn of proliferative disorders. PCT Intl. Patent Appl. Publ. WO 2001072745; Cyclacel Limited, UK.）。ＣＤＫは、各種サイクリンサブユニットと会合するセリン／スレオニンプロテインキナーゼである。これらの複合体は、真核細胞周期の進行の制御だけではなく、転写の制御にも重要である（Knockaert, M.; Greengard, P.; Meijer, L. Pharmacological inhibitors of cyclin-dependent kinases. Trends Pharmacol. Sci. 2002, 23, 417-425; Fischer, P. M.; Endicott, J.; Meijer, L. Cyclin-dependent kinase inhibitors. Progress in Cell Cycle Research; Editions de la Station Biologique de Roscoff: Roscoff, France, 2003; pp 235-248）。
【０００５】
本発明は、さらなる２−置換−４−ヘテロアリール−ピリミジンの提供を目的とするものである。より詳しくは、本発明は、多種多様な疾患の治療において幅広い治療用途を有する化合物、及び／又は、１以上のプロテインキナーゼを阻害することが可能な化合物に関する。
【０００６】
【非特許文献１】Manning, G.; Whyte, D. B.; Martinez, R.; Hunter, T.; Sudarsanam, S. The protein kinase complement of the human genome. Science 2002, 298, 1912-1934.
【非特許文献２】Kostich, M.; English, J.; Madison, V.; Gheyas, F.; Wang, L. et al. Human members of the eukaryotic protein kinase family. Genome Biology 2002, 3, research0043.0041-0043.0012.
【非特許文献３】Dancey, J.; Sausville, E. A. Issues and progress with protein kinase inhibitors for cancer treatment. Nat. Rev. Drug Disc. 2003, 2, 296-313.
【非特許文献４】Cockerill, G. S.; Lackey, K. E. Small molecule inhibitors of the class 1 receptor tyrosine kinase family. Current Topics in Medicinal Chemistry 2002, 2, 1001-1010.
【非特許文献５】Fabbro, D.; Ruetz, S.; Buchdunger, E.; Cowan-Jacob, S. W.; Fendrich, G. et al. Protein kinases as targets for anticancer agents: from inhibitors to useful drugs. Pharmacol.Ther. 2002, 93, 79-98.
【非特許文献６】Cohen, P. Protein kinases - the major drug targets of the twenty-first century? Nat. Rev. Drug Disc. 2002, 1, 309-315.
【非特許文献７】Bridges, A. J. Chemical inhibitors of protein kinases. Chem.Rev. 2001, 101(8), 2541-2571.
【非特許文献８】Wang, S.; Meades, C.; Wood, G.; Osnowski, A.; Fischer, P. M. N-(4-(4-methylthiazol-5-yl) pyrimidin-2-yl)-N-phenylamines as antiproliferative compounds. PCT Intl. Patent Appl. Publ. WO 2003029248; Cyclacel Limited, UK.
【非特許文献９】Wu, S. Y.; McNae, I.; Kontopidis, G.; McClue, S. J.; McInnes, C. et al. Discovery of a Novel Family of CDK Inhibitors with the Program LIDAEUS: Structural Basis for Ligand-Induced Disordering of the Activation Loop. Structure 2003, 11, 399-410.
【非特許文献１０】Fischer, P. M.; Wang, S.; Wood, G. Inhibitors of cyclin dependent kinases as anti-cancer agent. PCT Intl. Patent Appl. Publ. WO 02/079193; Cyclacel Limited, UK,.
【非特許文献１１】Wang, S.; Fischer, P. M. Anti-cancer compounds. US Patent Appl. Publ. 2002/0019404.
【非特許文献１２】Fischer, P. M.; Wang, S. 2-substituted 4-heteroaryl-pyrimidines and their use in the treatmetn of proliferative disorders. PCT Intl. Patent Appl. Publ. WO 2001072745; Cyclacel Limited, UK.
【非特許文献１３】Knockaert, M.; Greengard, P.; Meijer, L. Pharmacological inhibitors of cyclin-dependent kinases. Trends Pharmacol. Sci. 2002, 23, 417 -425.
【非特許文献１４】Fischer, P. M.; Endicott, J.; Meijer, L. Cyclin-dependent kinase inhibitors. Progress in Cell Cycle Research; Editions de la Station Biologique de Roscoff: Roscoff, France, 2003; pp 235-248.
【発明の開示】
【０００７】
本発明の第１の態様は、  式Ｉ
【０００８】
【化１】
2007509117.tif 000003
[式中、
Ｒ１及びＲ５は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ（ＯＲＪ’）又は１以上のＲ６基により置換されていてもよいヒドロカルビル基であり；
Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、アルキル又はアルケニルであり、そのそれぞれが、１以上のＲ７基により置換されていてもよく；
Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、ハロゲン、ＮＯ２、ＣＮ、（ＣＨ２）ｍＯＲａ、Ｏ（ＣＨ２）ｎＯＲｂ、（ＣＨ２）ｐＮＲｃＲｄ、ＣＦ３、ＣＯＯＲｅ、ＣＯＮＲｆＲｇ、ＣＯＲｈ、ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２Ｒｉ、ＳＯ２ＮＲｊＲｋ、（ＣＨ２）ｑＮＲａ’ＣＯＲｇ’、Ｒｆ’、（ＣＨ２）ｒＮＲｂ’ＳＯ２Ｒｈ’、ＳＯ２ＮＲｄ’Ｒｉ’、ＳＯ２ＮＲｅ’（ＣＨ２）ｓＯＲｃ’、ヘテロシクロアルキル又はヘテロアリールであり、ここで、前記ヘテロシクロアルキル及びヘテロアリールは、アラルキル、スルホニル、Ｒｍ及びＣＯＲｎから選択される１以上の置換基により置換されていてもよく；
Ｒｇ’、Ｒｈ’、Ｒｉ’及びＲｊ’は、それぞれ独立して、アルキル、アリール、アラルキル及びヘテロアリールから選択され、そのそれぞれが、ハロゲン、ＯＨ、ＮＯ２、ＮＨ２ＣＦ３及びＣＯＯＨから選択される１以上の置換基により置換されていてもよく；
ｍ、ｐ、ｑ及びｒは、それぞれ独立して、０、１、２又は３であり；
ｎ及びｓは、それぞれ独立して、１、２又は３であり；及び
Ｒａ〜ｎ及びＲａ’〜ｆ’は、それぞれ独立して、Ｈ又はアルキルである。]の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【０００９】
本発明の第２の態様は、上記定義の式Ｉの化合物と、薬学的に許容可能な、適切な担体、賦形剤又は希釈剤とを混合してなる医薬組成物に関する。
【００１０】
本発明の第３の態様は、増殖性障害、ウィルス性障害、ＣＮＳ障害、卒中、脱毛症及び糖尿病から選択される１以上の障害を治療する薬剤の調製における、上記定義の式Ｉの化合物の使用に関する。
【００１１】
本発明の第４の態様は、サイクリン依存性キナーゼ、ＧＳＫ、オーロラキナーゼ及びＰＬＫ酵素のうち、１つ以上を阻害することが可能なさらなる化合物を同定するアッセイにおける、上記定義の式Ｉの化合物の使用に関する。
【００１２】
本出願人の以前の研究では、各種プロテインキナーゼのＡＴＰ競合性阻害剤として、新規２−アニリノ−４−（チアゾール−５−イル）−ピリミジン化合物が開示されている（S.Y. Wu et al., 2003, Structure, 11, 399; ＷＯ２００１／０７２７４５、ＷＯ２００２／０７９１９３、及びＷＯ２００３／０２９２４８）。現在は、３Ｈ−チアゾール−２−オン−５−イル基を含む対応化合物もキナーゼ阻害剤としての生物活性を示すことが、最近の研究で明らかになっている。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明のある態様は、  式Ｉａ
【００１４】
【化２】
2007509117.tif 000004
[式中、
Ｒ１及びＲ５は、それぞれ独立して、Ｈ又は１以上のＲ６基により置換されていてもよいヒドロカルビル基であり；
Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、アルキル又はアルケニルであり、そのそれぞれが、１以上のＲ７基により置換されていてもよく；
Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、ハロゲン、ＮＯ２、ＣＮ、ｍが０、１、２又は３である（ＣＨ２）ｍＯＲａ、ｎが１、２又は３であるＯ（ＣＨ２）ｎＯＲｂ、ＮＲｃＲｄ、ＣＦ３、ＣＯＯＲｅ、ＣＯＮＲｆＲｇ、ＣＯＲｈ、ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２Ｒｉ、ＳＯ２ＮＲｊＲｋ、ヘテロシクロアルキル又はヘテロアリールであり、ここで、前記ヘテロシクロアルキル及びヘテロアリールは、アラルキル、スルホニル、Ｒｍ及びＣＯＲｎから選択される１以上の置換基により置換されていてもよく；及び
Ｒａ〜ｎは、それぞれ独立して、Ｈ又はアルキルである。]の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関する。
【００１５】
本発明のある態様は、上記定義の式Ｉ又はＩａの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関するが、前記化合物は、Ｉ〜XVIIの化合物以外のものとする。
【００１６】
本発明のある態様は、上記定義の式Ｉ又はＩａの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関するが、前記化合物は、Ｉ〜XIIIの化合物以外のものとする。
【００１７】
本発明のある態様は、上記定義の式Ｉ又はＩａの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関するが、前記化合物は、XIV又はXVの化合物以外のものとする。
【００１８】
本発明のある態様は、上記定義の式Ｉ又はＩａの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関するが、前記化合物は、XVI又はXVIIの化合物以外のものとする。
【００１９】
本明細書においては、化合物Ｉとは、ＷＯ０３／０２９２４８の実施例９にしたがって調製された化合物を指す。
【００２０】
本明細書においては、化合物II〜XIIIとは、ＷＯ０３／０２９２４８（ＰＣＴ／ＧＢ２００２／００４３８３）の実施例１０にしたがって調製された化合物を指す。
【００２１】
本明細書においては、化合物XIV及びXVとは、それぞれ、ＷＯ２００４／０４３９５３（ＰＣＴ／ＧＢ２００３／００４９７３）の化合物９２及び９３の調製について記された方法にしたがって調製された化合物を指す。
【００２２】
本明細書においては、化合物XVI及びXVIIとは、それぞれ、ＰＣＴ／ＧＢ２００４／００３２８２の化合物４及び１１の調製について記された方法にしたがって調製された化合物を指す。
【００２３】
本発明の別の態様は、上記定義の式Ｉ又はＩａの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩に関するが、前記化合物は、以下の化合物以外のものとする：
３，４−ジメチル−５−［２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−クロロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−メトキシ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（３−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−ジメチルアミノ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−［２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−フルオロ−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−［２−（４−メチル−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−フルオロ−３−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−｛２−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（３−ヨード−４−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−クロロ−３−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（６−クロロ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−５−［２−（６−メトキシ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−ヨード−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン。
【００２４】
本明細書において、「ヒドロカルビル」との語は、少なくともＣとＨとを含む基を指す。ヒドロカルビル基が２以上のＣを含む場合、そうした炭素は、必ずしもお互いに結合している必要はない。例えば、炭素のうちの少なくとも２つが、適切な元素又は基を介して結合していてもよい。したがって、ヒドロカルビル基は、ヘテロ原子を含んでいてもよい。適切なヘテロ原子に関しては、当業者であれば自明のことと思われ、例えば、硫黄、窒素、酸素、リン及びシリコンが例示できる。かかるヒドロカルビル基は、アリール基、ヘテロアリール基、アルキル基、シクロアルキル基、アラルキル基、又はアルケニル基であることが好ましい。
【００２５】
本明細書において、「アルキル」との語は、置換（一置換又は多置換）されていても置換されていなくてもよい、飽和直鎖及び分岐アルキル基の両方を指す。好ましくは、かかるアルキル基はＣ１〜２０アルキル基であり、さらに好ましくはＣ１〜１５アルキル基であり、さらにまた好ましくはＣ１〜１２アルキル基であり、さらにまた好ましくはＣ１〜６アルキル基であり、さらに好ましくはＣ１〜３アルキル基である。特に好ましいアルキル基としては、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル及びヘキシルが例示できる。適切な置換基としては、例えば、１以上のＲ６基が挙げられる。
【００２６】
本明細書において、「シクロアルキル」との語は、置換（一置換又は多置換）されていても置換されていなくてもよい、環状アルキル基を指す。かかる環状アルキル基は、Ｃ３〜１２シクロアルキル基であることが好ましい。適切な置換基としては、例えば、１以上のＲ６基が挙げられる。
【００２７】
「ヘテロシクロアルキル」との語は、Ｏ、Ｎ及びＳから選択される１以上のヘテロ原子を含むシクロアルキル基を指す。ヘテロシクロアルキルの例として、１−（１，２，５，６−テトラヒドロピリジル）、１−ピペリジニル、２−ピペリジニル、３−ピペリジニル、４−モルホリニル、３−モルホリニル、テトラヒドロフラン−２−イル、テトラヒドロフラン−３−イル、テトラヒドロチエン−２−イル、テトラヒドロチエン−３−イル、１−ピペラジニル、２−ピペラジニル、ピロリジニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ピラニル、チオピラニル、アジリジニル、オキシラニル、メチレンジオキシル、クロメニル、イソキサゾリジニル、１，３−オキサゾリジン−３−イル、イソチアゾリジニル、１，３−チアゾリジン−３−イル、１，２−ピラゾリジン−２−イル、１，３−ピラゾリジン−１−イル、チオモルホリニル、１，２−テトラヒドロチアジン−２−イル、１，３−テトラヒドロチアジン−３−イル、テトラヒドロチアジアジニル、１，２−テトラヒドロジアジン−２−イル、１，３−テトラヒドロジアジン−１−イル、テトラヒドロアゼピニル、ピペラジニル、クロマニル等が挙げられる。また、ヘテロシクロアルキルについては、ヘテロ環が分子の残りの部分に付着している位置を、ヘテロ原子が占めることができる。このように、当業者であれば、前記ヘテロシクロアルキル環の結合が炭素又はｓｐ３混成窒素のヘテロ原子を介したものであることを理解するであろう。好ましいヘテロシクロアルキル基として、ピペラジン、モルホリン、ピペリジン及びピロリジンが挙げられる。
【００２８】
本明細書において、「アルケニル」との語は、分枝状であっても分枝状でなくてもよく、置換（一置換又は多置換）されていても置換されていなくてもよい、１以上の炭素−炭素の二重結合を含む基を指す。好ましくは、かかるアルケニル基はＣ２〜２０アルケニル基であり、さらに好ましくはＣ２〜１５アルケニル基であり、さらにまた好ましくはＣ２〜１２アルケニル基であり、さらにまた好ましくはＣ２〜６アルケニル基であり、さらに好ましくはＣ２〜３アルケニル基である。適切な置換基としては、例えば、上記定義の１以上のＲ６基が挙げられる。
【００２９】
本明細書において、「アリール」との語は、置換（一置換又は多置換）されていても置換されていなくてもよい、Ｃ６〜１２芳香基を指す。典型的な例として、フェニル及びナフチル等が挙げられる。適切な置換基としては、例えば、１以上のＲ６基が挙げられる。
【００３０】
本明細書において、「ヘテロアリール」との語は、置換（一置換又は多置換）されていても置換されていなくてもよい、Ｃ４〜１２芳香族であって、１以上のヘテロ原子を含むものを指す。好ましいヘテロアリール基として、ピロール、ピラゾール、ピリミジン、ピラジン、ピリジン、キノリン、トリアゾール、テトラゾール、チオフェン及びフランが例示できる。ここでもまた、適切な置換基としては、例えば、１以上のＲ６基が挙げられる。
【００３１】
好ましくは、Ｒｇ’、Ｒｈ’、Ｒｉ’及びＲｊ’は、それぞれ独立して、アルキル、フェニル、ベンジル及びピリジルから選択され、そのそれぞれが、ハロゲン、ＯＨ、ＮＯ２、ＮＨ２ＣＦ３及びＣＯＯＨから選択される１以上の置換基により置換されていてもよい。
【００３２】
Ｒａ−ｎ及びＲａ’−ｆ’は、それぞれ独立して、Ｈ、メチル、エチル又はイソプロピルであることが好ましい。
【００３３】
本発明のある好ましい実施態様においては、Ｒ１及びＲ５は、それぞれ独立して、Ｈであるか、又は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択されるヘテロ原子を最大６個まで含んでいてもよく、１、２若しくは３個のＲ６基により置換されていてもよいＣ１〜２０ヒドロカルビル基である。
【００３４】
別の好ましい実施態様においては、Ｒ５は、それぞれ１以上のＲ６基により置換されていてもよいアリール又はヘテロアリールである。
【００３５】
別の好ましい実施態様においては、Ｒ５は、Ｈ、Ｃ（ＯＲＪ’）、アリール又はヘテロアリールであり、前記アリール基又はヘテロアリール基は、１以上のＲ６基により置換されていてもよい。
【００３６】
より好ましくは、Ｒ５は、Ｈ、ＣＯＭｅ、フェニル又はピリジルであり、前期フェニル基又はピリジル基は、１以上のＲ６基により置換されていてもよい。
【００３７】
Ｒ５は、それぞれ１以上のＲ６基により置換されていてもよいフェニル又はピリジルであることが、さらに好ましい。
【００３８】
好ましい実施態様においては、Ｒ１は、Ｈ又はアルキルである。より好ましくは、Ｒ１は、Ｈ、メチル、エチル又は３−メチルブチルである。
【００３９】
好ましくは、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル又はＣ２〜６アルケニルであり、そのそれぞれが、１、２若しくは３個のＲ７基により置換されていてもよい。
【００４０】
より好ましくは、Ｒ２はＣ１〜６アルキルである。さらに好ましくは、Ｒ２はメチルである。
【００４１】
Ｒ３及びＲ４は、共にＨであることが好ましい。
【００４２】
好ましくは、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ２、ＣＮ、ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＣＨ２ＯＨ、Ｏ（ＣＨ２）２ＯＭｅ、ＮＨ２、ＮＨＭｅ、ＮＭｅ２、ＣＦ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＭｅ、ＣＯＮＭｅ２、ＣＯＭｅ、ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２Ｍｅ、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＭｅ、ＳＯ２ＮＭｅ２、モルホリン、ピペリジン、ピペラジン、Ｎ−アセチルピペラジン、Ｎ−メチルピペラジン、トリアゾール又はテトラゾールである。
【００４３】
ある好ましい実施態様においては、Ｒ３及びＲ４は共にＨであり、Ｒ２はＭｅである。
【００４４】
ある特に好ましい実施態様においては、本発明の化合物は、式II
【００４５】
【化３】
2007509117.tif 000005
［式中、
Ｒ１は上記定義のとおりであり；
ＸはＣであり；又はＸはＮであってＲ８は存在せず；
Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ独立して、Ｈ又はＲ６及びＲ７に関する上記定義のとおりである。］の化合物、又は薬学的に許容可能なその塩である。
【００４６】
より好ましくは、前記式IIの化合物について、
Ｒ１は、Ｈ又はアルキルであり；
Ｒ８は、Ｈ、ＮＯ２、ＯＲｐ、ハロゲン、ＣＦ３、ＣＮ、ＣＯＲｑ、アルキル、ＮＲｒＲｓ、Ｏ（ＣＨ２）ｔＯＲｔであり；
Ｒ９は、Ｈ、ＯＲｕ、ハロゲン、アルキル、ＮＲｖＲｗ、又はＲｍ及びＣＯＲｎから選択される１以上の置換基により置換されていてもよいヘテロシクロアルキルであり；
ｔは、０、１、２又は３であり；
Ｒ１０は、Ｈ、アルキル又はＮＲｘＲｙであり；及び
Ｒｐ〜ｙは、それぞれ独立して、Ｈ又はアルキルである。
【００４７】
ある特に好ましい実施態様においては、Ｒ１は、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ又は３−メチルブチルである。
【００４８】
より一層好ましくは、前記式IIの化合物について、
Ｒ８は、Ｈ、ＮＯ２、ＯＨ、Ｍｅ、Ｉ、ＣＦ３、ＣＮ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｍｅ又はＮＨ２であり；
Ｒ９は、Ｈ、Ｆ、ＯＨ、Ｉ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＭｅ、ＮＭｅ２、モルホリン、Ｍｅ、Ｎ−メチルピペラジン、Ｎ−アセチルピペラジン又はピペラジンであり；及び
Ｒ１０は、Ｈ、Ｍｅ又はＮＭｅ２である。
【００４９】
ある好ましい実施態様においては、前記式IIの化合物について、Ｒ８は、Ｈ、ＮＯ２、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ３、ＳＯ３Ｈ、（ＣＨ２）ｍＯＲａ、ＣＯＯＲｅ、（ＣＨ２）ｐＮＲｃＲｄ、（ＣＨ２）ｒＮＲｂ’ＳＯ２Ｒｈ’、（ＣＨ２）ｑＮＲａ’ＣＯＲｇ’、ＳＯ２ＮＲｊＲｋ、ＣＯＮＲｆＲｇ、ＳＯ２ＮＲｅ’（ＣＨ２）ｓＯＲｃ’、ＳＯ２ＮＲｄ’Ｒｉ’、及び１以上のＣＯＲｎ又はスルホニル基により置換されていてもよいヘテロシクロアルキルから選択される。
【００５０】
より好ましくは、Ｒ８は、Ｈ、ＮＯ２、ＯＨ、Ｍｅ、Ｉ、ＣＮ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＦ３、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｍｅ、ＮＨ２、Ｃｌ、４−アセチルピペラジン−１−イル、ＯＭｅ、ＳＯ３Ｈ、ＣＨ２ＮＨＳＯ２Ｍｅ、ＣＨ２ＮＨＣＯＰｈ、ＣＨ２ＮＨＳＯ２ＣＦ３、ＳＯ２ＮＨ２、ＣＯＮＨｉＰｒ、ＳＯ２ＮＨＥｔ、ＳＯ２ＮＨ（ＣＨ２）２ＯＭｅ、ＳＯ２ＮＨｉＰｒ、ＳＯ２ＮＨ（ＣＨ２）２ＯＨ、ＮＨＭｅ、ＳＯ２ＮＨ−ベンジル及びモルホリン−４−スルホニルから選択される。
【００５１】
ある好ましい実施態様においては、前記式IIの化合物について、Ｒ９は、Ｈ、ＮＯ２、ＳＯ３Ｈ、ハロゲン、（ＣＨ２）ｍＯＲａ、（ＣＨ２）ｐＮＲｃＲｄ、（ＣＨ２）ｑＮＲａ’ＣＯＲｇ’、ＳＯ２ＮＲｅ’（ＣＨ２）ｓＯＲｃ’、ＳＯ２ＮＲｄ’Ｒｉ’及び１以上のＣＯＲｎ、Ｒｍ又はアラルキル基により置換されていてもよいヘテロシクロアルキルから選択される。
【００５２】
より好ましくは、Ｒ９は、Ｈ、Ｆ、ＯＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＭｅ、ＮＭｅ２、モルホリン−４−イル、４−メチルピペラジン−１−イル、Ｍｅ、４−アセチル−ピペラジン−１−イル、Ｉ、ＣＨ２ＮＨＣＯＭｅ、ＮＯ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２ＮＨ（ＣＨ２）２ＯＭｅ、４−ベンジルピペラジン−１−イル、ＳＯ２ＮＨ（ＣＨ２）２ＯＨ、ＳＯ２ＮＨ−ベンジル、ＣＨ２ＮＨ２、ＣＨ２ＮＨＣＯ−（ピリド−２−イル）及びピペラジン−１−イルから選択される。
【００５３】
ある好ましい実施態様においては、前記式IIの化合物について、Ｒ１０は、Ｈ、Ｒｆ’及び（ＣＨ２）ｐＮＲｃＲｄから選択される。
【００５４】
より好ましくは、Ｒ１０は、Ｈ、Ｍｅ及びＮＭｅ２から選択される。
【００５５】
ある好ましい実施態様においては、前記式IIの化合物について、Ｒ１１は、Ｈ、Ｒｆ’、ＣＦ３、ハロゲン及び（ＣＨ２）ｑＮＲａ’ＣＯＲｇ’から選択される。
【００５６】
より好ましくは、Ｒ１１は、Ｈ、ＮＨＣＯＭｅ、ＣＦ３、Ｂｒ及びＭｅから選択される。
【００５７】
ある好ましい実施態様においては、ＸはＮであってＲ８は存在しない。
【００５８】
ある好ましい実施態様においては、ＸはＣである。
【００５９】
本発明のある好ましい実施態様においては、化合物は以下から選択される：
３，４−ジメチル−５−［２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−クロロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−ブロモ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−メトキシ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（３−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−ジメチルアミノ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−［２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−フルオロ−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−［２−（４−メチル−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−フルオロ−３−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−｛２−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（３−ヨード−４−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−クロロ−３−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゾニトリル；
５−｛２−［４−（４−アセチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−クロロ−３−ヒドロキシメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−［２−（３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−［２−（２−メチル−５−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−［２−（４−メチル−３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−ジメチルアミノ−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−４−メチル−５−［２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
２−クロロ−５−［４−（３−エチル−４−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−安息香酸；
２−クロロ−５−［４−（３−エチル−４−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−安息香酸メチルエステル；
５−［２−（４−ジメチルアミノ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−４−メチル−５−［２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−４−メチル−５−［２−（４−メチル−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−ジメチルアミノ−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
４−メチル−３−（３−メチル−ブチル）−５−［２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−クロロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３−（３−メチル−ブチル）−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（６−クロロ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−５−［２−（６−メトキシ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（６−クロロ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３−（３−メチル−ブチル）−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（６−メトキシ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３−（３−メチル−ブチル）−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−ヨード−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（２−ジメチルアミノ−５−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−［２−（４−ピペラジン−１−イル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（３−アミノ−４−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
４−メチル−５−［２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
４−メチル−５−［２−（４−メチル−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−アセトアミド；
３−エチル−５−［２−（３−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−５−［２−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−クロロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−５−［２−（３−ヒドロキシ−４−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−｛２−［３−（４−アセチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−５−［２−（３−メトキシ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−クロロ−３−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−エチル−４−メチル−５−［２−（４−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
４−［４−（３−エチル−４−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホン酸；
３−［４−（３−エチル−４−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホン酸；
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−メタン−スルホンアミド；
５−［２−（５−メトキシ−２−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−ベンズアミド；
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−Ｃ，Ｃ，Ｃ−トリフルオロ−メタンスルホンアミド；
Ｎ−｛４−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−アセトアミド；
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド；
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−イソプロピル−４−メチル−ベンズアミド；
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−エチル−ベンゼンスルホンアミド；
５−［２−（５−ヒドロキシメチル−２−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−５−トリフルオロメチル−フェニル｝−アセトアミド；
４−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−（２−メトキシ−エチル）−ベンゼンスルホンアミド；
５−［２−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−（２−メトキシ−エチル）−ベンゼンスルホンアミド；
５−［２−（３−ブロモ−５−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−｛２−［４−（４−ベンジル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
４−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−２−トリフルオロメチル−ベンゾニトリル；
５−［２−（３−アミノ−５−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
４−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−ベンゼンスルホンアミド；
Ｎ−ベンジル−４−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド；
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−イソプロピル−ベンゼンスルホンアミド；
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−ベンゼンスルホンアミド；
３，４−ジメチル−５−［２−（３−メチルアミノ−５−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
Ｎ−ベンジル−３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド；
３，４−ジメチル−５−｛２−［４−メチル−３−（モルホリン−４−スルホニル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
３，４−ジメチル−５−｛２−［３−（モルホリン−４−スルホニル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（４−アミノメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−［２−（６−クロロ−５−メチル−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
ピリジン−２−カルボン酸４−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジルアミド；
３，４−ジメチル−５−｛２−［（ピリジン−３−イルメチル）−アミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
５−（２−アミノ−ピリミジン−４−イル）−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン；
Ｎ−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イル］−アセトアミド。
【００６０】
ある特に好ましい実施態様においては、本発明の化合物は以下から選択される：
３，４−ジメチル−５−［２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン［１］；
５−［２−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［２］；
５−［２−（４−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［３］；
５−［２−（４−クロロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［４］；
５−［２−（４−ブロモ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［５］；
５−［２−（４−メトキシ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［６］；
５−［２−（３−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［７］；
５−［２−（４−ジメチルアミノ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［８］；
３，４−ジメチル−５−［２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン［９］；
５−［２−（４−フルオロ−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［１０］；
３，４−ジメチル−５−［２−（４−メチル−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン［１１］；
５−［２−（４−フルオロ−３−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［１２］；
３，４−ジメチル−５−｛２−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３Ｈ−チアゾール−２−オン［１３］；
５−［２−（３−ヨード−４−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［１４］；
５−［２−（４−クロロ−３−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［１５］；
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゾニトリル［１６］；
５−｛２−［４−（４−アセチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［１７］；
５−［２−（４−クロロ−３−ヒドロキシメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［１８］；
３，４−ジメチル−５−［２−（３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン［１９］；
３，４−ジメチル−５−［２−（２−メチル−５−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン［２０］；
３，４−ジメチル−５−［２−（４−メチル−３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン［２１］；
５−［２−（４−ジメチルアミノ−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［２２］；
３−エチル−４−メチル−５−［２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン［２３］；
２−クロロ−５−［４−（３−エチル−４−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−安息香酸［２４］；
２−クロロ−５−［４−（３−エチル−４−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−安息香酸メチルエステル［２５］；
５−［２−（４−ジメチルアミノ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［２６］；
３−エチル−４−メチル−５−［２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン［２７］；
３−エチル−４−メチル−５−［２−（４−メチル−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン［２８］；
５−［２−（４−ジメチルアミノ−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［２９］；
４−メチル−３−（３−メチル−ブチル）−５−［２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン［３０］；
５−［２−（４−クロロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３−（３−メチル−ブチル）−３Ｈ−チアゾール−２−オン［３１］；
５−［２−（６−クロロ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［３２］；
３−エチル−５−［２−（６−メトキシ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［３３］；
５−［２−（６−クロロ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３−（３−メチル−ブチル）−３Ｈ−チアゾール−２−オン［３４］；
５−［２−（６−メトキシ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３−（３−メチル−ブチル）−３Ｈ−チアゾール−２−オン［３５］；
５−［２−（４−ヨード−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［３６］；
５−［２−（２−ジメチルアミノ−５−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［３７］；
３，４−ジメチル−５−［２−（４−ピペラジン−１−イル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン［３８］；
５−［２−（３−アミノ−４−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン［３９］；
４−メチル−５−［２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン［４０］；及び
４−メチル−５−［２−（４−メチル−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン［４１］。
【００６１】
ある特に好ましい実施態様においては、本発明の化合物は、適切なアッセイによる測定で、１以上のプロテインキナーゼを阻害することができる。かかるプロテインキナーゼは、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＤＫ２／サイクリンＥ、ＣＤＫ２／サイクリンＡ、ＣＤＫ４／サイクリンＤ１、ＣＤＫ７／サイクリンＨ、ＣＤＫ９／サイクリンＴ１、ＧＳＫ−３β、ＧＳＫ−３α、ＤＹＲＫ１Ａ及びオーロラキナーゼから選択されることが好ましい。
【００６２】
より好ましくは、かかる化合物が示すＩＣ５０値（前記キナーゼのうち、１以上のキナーゼの阻害に対するもの）は１μＭ未満であり、好ましくは０．１μＭ未満、より好ましくは０．０１μＭ未満、さらに好ましくは０．００２μＭ未満、より一層好ましくは０．００１μＭ未満である。
【００６３】
本発明の選択した化合物に対するキナーゼ活性（ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＤＫ２／サイクリンＥ、ＣＤＫ２／サイクリンＡ、ＣＤＫ４／サイクリンＤ１、ＣＤＫ７／サイクリンＨ、ＣＤＫ９／サイクリンＴ１及びオーロラＡ）を、表８に示す。
【００６４】
本発明の選択した化合物に対する、インビトロでのＧＳＫ３α、ＧＳＫ３β及びＤＹＲＫ１Ａの阻害活性を表９に示す。ＧＳＫ３及びＤＹＲＫの阻害活性に関して、本発明の好ましい化合物として表９に列挙されているものが例示できる。
【００６５】
ＨＥＫ２９３細胞、マウス脂肪細胞及びラット筋管におけるグリコーゲンシンターゼの活性化を、表１０に示す。この点における好ましい化合物として、化合物［６２］、［６４］、［６７］、［６８］、［７５］及び［７６］が例示できる。
【００６６】
ある好ましい実施態様において、かかる化合物は以下より選択される：［１］、［２］、［３］、［１０］、［１１］、［１６］、［１８］、［２２］、［２３］、［２８］、［３８］及び［４１］。
【００６７】
より好ましくは、かかる化合物は以下より選択される：［１１］、［１６］、［２３］、及び［２８］。
【００６８】
別の好ましい実施態様において、本発明の化合物は、［７６］、［６４］、［６７］、［６２］、［６６］、［６８］及び［７５］より選択される。
【００６９】
別の好ましい実施態様において、本発明の化合物は、［７６］、［６４］、［６７］、［６２］、［６８］及び［７５］より選択される。
【００７０】
別の好ましい実施態様において、本発明の化合物は、［６４］、［６７］、［６８］及び［７５］より選択される。
【００７１】
治療での使用
式Ｉの化合物は、抗増殖作用を有することがわかっており、そのため、癌、白血病などの増殖性障害、及び乾癬や再狭窄などの制御不可能な細胞増殖に付随するその他の障害の治療に有用であると考えられている。本明細書においては、本発明の範囲内の抗増殖作用を、例えば、Ａ５４９、ＨＴ２９又はＳａｏｓ−２のいずれかの細胞株を用いたインビトロでの全細胞アッセイにおける細胞増殖阻害能力によって示す場合がある。ある化合物が本発明との関連において抗増殖作用を有するかどうかを、そうしたアッセイを用いて決定する場合がある。
【００７２】
したがって、本発明のある好ましい実施態様は、増殖性障害を治療する薬剤の調製における、１以上の、式Ｉの化合物の使用に関する。
【００７３】
本明細書において、「薬剤の調製」との語は、式Ｉａの化合物を、他の治療薬のスクリーニングプログラムに使用すること、又はそのような薬剤のいずれかの製造工程において使用することに加え、薬剤として直接使用することを含む。
【００７４】
かかる増殖性障害は、癌又は白血病であることが好ましい。ここで使用する増殖性障害との語は広義のものであり、細胞周期の制御を必要とするあらゆる障害、例えば、再狭窄、心筋症及び心筋梗塞などの心血管障害、糸球体腎炎及び関節リウマチなどの自己免疫障害、乾癬などの皮膚障害、マラリアなどの抗炎症性、抗真菌性、抗寄生虫性障害、肺気腫、脱毛症、及び慢性閉塞性肺障害を含んでいる。これらの障害において、本発明の化合物は、必要に応じて目的とする細胞内部でのアポトーシスの誘導又は恒常性の維持を行う場合がある。
【００７５】
本発明の化合物は、細胞周期におけるいずれかのステップ又は段階、例えば、核膜の形成、細胞周期の鎮静期（Ｇ０）からの脱却、Ｇ１の進行、染色体の脱凝集、核膜の崩壊、ＳＴＡＲＴ、ＤＮＡ複製の開始、ＤＮＡ複製の進行、ＤＮＡ複製の終了、中心体の複製、Ｇ２の進行、分裂又は減数分裂機能の活性化、染色体の凝集、中心体の分離、微小管の核形成、紡錘糸の形成及び機能、微小管運動タンパク質との相互作用、染色分体の分離、分裂機能の不活性化、収縮環の形成、及び細胞質分離機能などを阻害する場合がある。特に、本発明の化合物は、クロマチンの結合、複製複合体の形成、複製ライセンシング、リン酸化又はその他の二次修飾活性、タンパク質分解、微小管の結合、アクチンの結合、セプチンの結合、中心核形成活性を整えて細胞周期シグナル伝達経路の構成成分に結合する微小管などの、ある種の遺伝子機能に影響を及ぼす場合がある。
【００７６】
本発明のある実施態様においては、式Ｉの化合物は、少なくとも１つのＣＤＫ酵素を阻害するのに充分な量で投与される。
【００７７】
式Ｉの化合物は、ＣＤＫ２及び／又はＣＤＫ４のうちの少なくとも１つを阻害するのに充分な量で投与されることが好ましい。
【００７８】
本発明の別の態様は、ヒトサイトメガロウィルス（ＨＣＭＶ）、単純ヘルペスウィルスＩ型（ＨＳＶ−１）、ヒト免疫不全ウィルスＩ型（ＨＩＶ−１）及び水痘帯状ヘルペスウィルス（ＶＺＶ）などのウィルス性障害を治療する薬剤の調製における、式Ｉの化合物の使用に関する。
【００７９】
本発明のより好ましい実施態様においては、式Ｉの化合物は、ウィルスの複製に関与する１以上の宿主細胞ＣＤＫ、すなわち、ＣＤＫ２、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、及びＣＤＫ９を阻害するのに充分な量で投与される［Wang D, De la Fuente C, Deng L, Wang L, Zilberman I, Eadie C, Healey M, Stein D, Denny T, Harrison LE, Meijer L, Kashanchi F. Inhibition of human immunodeficiency virus type 1 transcription by chemical cyclin-dependent kinase inhibitors. J. Virol. 2001; 75: 7266-7279］。
【００８０】
本明細書で定義したように、本発明の範囲内の抗ウィルス作用は、ＣＤＫ２、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、又はＣＤＫ９を阻害する能力によって示されるものであってもよい。
【００８１】
特に好ましい実施態様においては、本発明は、ＣＤＫ依存性又は感受性のウィルス性障害の治療における、１以上の式Ｉａの化合物の使用に関する。ＣＤＫ依存性障害は、１以上のＣＤＫ酵素の活性が通常レベル以上の場合に付随する。かかる障害は、ＣＤＫ２、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、及び／又はＣＤＫ９の活性が異常なレベルの場合に付随することが好ましい。ＣＤＫ感受性障害とは、ＣＤＫレベルの異常が根本原因として存在するのではなく一次代謝異常の下流に存在する障害である。そのような事態においては、ＣＤＫ２、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、及び／又はＣＤＫ９は感受性代謝経路であると言うことが可能であり、したがって、ＣＤＫ阻害剤はそうした障害の治療に有効であると思われる。
【００８２】
本発明の選択化合物は、添付する実施例で記載したアッセイによる測定で、抗ＨＩＶ活性を有していることが判明した。
【００８３】
抗ＨＩＶ活性との関連において、非常に好ましい化合物として以下のものが挙げられる：
５−［２−（３−ヨード−４−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（１４）、
３，４−ジメチル−５−［２−（３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン（１９）、
５−［２−（４−ジメチルアミノ−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（２２）、
５−［２−（４−ジメチルアミノ−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（２９）、
５−［２−（６−クロロ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（３２）、
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−メタン−スルホンアミド（５５）、
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−Ｃ，Ｃ，Ｃ−トリフルオロ−メタンスルホンアミド（５８）、
５−［２−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（２）、
３，４−ジメチル−５−［２−（４−メチル−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン（１１）、
５−［２−（４−クロロ−３−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（１５）、
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゾニトリル（１６）、
３，４−ジメチル−５−［２−（４−メチル−３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン（２１）、
３−エチル−４−メチル−５−［２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン（２３）、
３−エチル−５−［２−（６−メトキシ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（３３）、
３，４−ジメチル−５−［２−（４−ピペラジン−１−イル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン（３８）、
Ｎ−｛４−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−アセトアミド（５９）、
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド（６０）、
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−５−トリフルオロメチル−フェニル｝−アセトアミド（６４）、及び
４−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−（２−メトキシ−エチル）−ベンゼンスルホンアミド（６５）。
【００８４】
抗ＨＩＶ活性との関連において、非常に好ましい化合物として以下のものが挙げられる：
５−［２−（３−ヨード−４−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（１４）、
３，４−ジメチル−５−［２−（３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン（１９）、
５−［２−（４−ジメチルアミノ−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（２２）、
５−［２−（４−ジメチルアミノ−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（２９）、５−［２−（６−クロロ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（３２）、
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−メタン−スルホンアミド（５５）、
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−Ｃ，Ｃ，Ｃ−トリフルオロ−メタンスルホンアミド（５８）、及び
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−５−トリフルオロメチル−フェニル｝−アセトアミド（６４）。
【００８５】
本発明の別の態様は、糖尿病を治療する薬剤の調製における、式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩の使用に関する。
【００８６】
特に好ましい実施態様においては、かかる糖尿病はII型糖尿病である。
【００８７】
ＧＳＫ３は、グリコーゲンシンターゼ（ＧＳ）をリン酸化する数種類のプロテインキナーゼの１つである。骨格筋における、インシュリンによるグリコーゲン合成促進は、ＧＳの脱リン酸化及び活性化に起因する。このように、ＧＳＫ３がＧＳに及ぼす作用は、結果的に後者の脱活性化を起こし、それにより、筋肉内でのグルコースからグリコーゲンへの変換を抑制する。
【００８８】
II型糖尿病（インシュリン非依存型糖尿病）は、多因子疾患である。肝臓、筋肉及びその他の組織におけるインシュリンへの耐性と、インシュリンの分泌不全が重なって、高血糖が生じる。インシュリン刺激性グルコース取り込みの主な部位が骨格筋であり、グルコースはそこで循環から外されるか、グリコーゲンへと変換される。筋肉におけるグリコーゲン沈着はグルコースホメオスタシスの主な決定基であり、II型糖尿病では、筋肉におけるグリコーゲンの貯蔵に欠陥が生じる。II型糖尿病においてはＧＳＫ３活性の上昇が重要であるとの証拠がある［Chen, Y.H.; Hansen, L.; Chen, M.X.; Bjorbaek, C.; Vestergaard, H.; Hansen, T.; Cohen, P.T.; Pedersen, O. Diabetes, 1994, 43, 1234］。また、II型糖尿病の筋肉細胞内でＧＳＫ３が過剰発現していること、及び骨格筋のＧＳＫ３活性とインシュリンの作用との間に逆相関が存在することが示されている［Nikoulina, S.E.; Ciaraldi, T.P.; Mudaliar, S.; Mohideen, P.; Carter, L.; Henry, R.R. Diabetes, 2000, 49, 263］。
【００８９】
したがって、ＧＳＫ３の阻害は、糖尿病、特にII型糖尿病と、糖尿病性ニューロパシーの治療において治療上の意義がある。
【００９０】
特筆すべきは、ＧＳＫ３はＧＳ以外の多くの基質をリン酸化することが知られていること、よって、多数の生化学的経路の調節に関与していることである。例えば、ＧＳＫは、中枢及び末梢神経系で高発現する。
【００９１】
したがって、本発明の別の態様は、例えば神経変性障害などのＣＮＳ障害を治療する薬剤の調製における、式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩の使用に関する。
【００９２】
かかるＣＮＳ障害は、アルツハイマー病であることが好ましい。
【００９３】
タウは、アルツハイマー病の病因に関係があるとされてきたＧＳＫ−３基質である。健常神経細胞では、タウはチューブリンと結合して微小管となる。しかし、アルツハイマー病では、タウは大型の神経線維塊を形成し、それが神経細胞中で微小管の構造を破壊する。それにより、ニューロンメッセージの伝達だけではなく、栄養素の輸送も低下させる。
【００９４】
理論に縛られるものではないが、ＧＳＫ阻害剤は、アルツハイマー病及び、進行性核上まひ、大脳皮質基底核変性症、ピック病といった、その他の多くの神経変性疾患の不変特徴である、微小管会合タンパク質タウの異常な過剰リン酸化を防止及び／又は逆行させられるかもしれないと考えられている。タウ遺伝子内の突然変異は、遺伝性の前頭側頭型痴呆を引き起こす。このことは、タウタンパク質機能不全と神経変性プロセスとの関連性をさらに強めるものである［Goedert, M. Curr. Opin. Gen. Dev., 2001, 11, 343］。
【００９５】
本発明の別の態様は、双極性障害を治療する薬剤の調製における、式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩の使用に関する。
【００９６】
本発明のさらに別の態様は、卒中を治療する薬剤の調製における、式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩の使用に関する。
【００９７】
頭部外傷、卒中、てんかん、及び運動性ニューロン障害との関連において、ニューロンのアポトーシスを減少させることは、重要な治療目標である［Mattson, M.P. Nat. Rev. Mol. Cell. Biol., 2000, 1, 120］。したがって、ＧＳＫ３がニューロン細胞におけるアポトーシス性因子として存在することから、このプロテインキナーゼは、これらの疾患を治療する阻害剤を設計するための魅力的な治療標的となっている。
【００９８】
本発明のさらに別の態様は、脱毛症を治療する薬剤の調製における、式Ｉａの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩の使用に関する。
【００９９】
毛髪の成長は、Ｗｎｔシグナル伝達経路、特にＷｎｔ−３によって制御されている。皮膚の組織培養モデル系では、β−カテニンの非分解性変異体の発現は、より増殖能の高い推定幹細胞群の劇的な増加につながる［Zhu, A.J.; Watt, F.M. Development, 1999, 126, 2285］。この幹細胞群は、非カドヘリン会合β−カテニン［DasGupta, R.; Fuchs, E. Development, 1999, 126, 4557］をより高いレベルで発現しており、非カドヘリン会合β−カテニンは、幹細胞群の増殖能の高さに寄与していると思われる。また、皮膚中の平滑化β−カテニンを過剰発現するトランスジェニックマウスには、通常は胚形成期にのみ確立される新規毛包の形態形成が生じる。したがって、ＧＳＫ３阻害剤の局所的塗布は、禿頭の治療の際に、及び化学療法により誘発された脱毛症の後で毛髪の成長を回復させる際に、治療上有用であると思われる。
【０１００】
本発明のさらなる態様は、ＧＳＫ３依存性障害の治療方法であって、治療を必要とする対象に、上記定義の式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩を、ＧＳＫ３を阻害するのに充分な量で投与するステップを含む方法に関する。
【０１０１】
式Ｉの化合物、又は薬学的に許容可能なその塩は、ＧＳＫ３βを阻害するのに充分な量で投与されることが好ましい。
【０１０２】
本発明のある実施態様においては、式Ｉの化合物は、少なくとも１つのＰＬＫ酵素を阻害するのに充分な量で投与される。
【０１０３】
ポロ様キナーゼ（ＰＬＫ）は、セリン／スレオニンプロテインキナーゼファミリーを構成している。ポロ遺伝子座の分裂期Drosophila melanogaster変異体は紡錘糸の異常を示し［Sunkel et al., J. Cell Sci., 1988, 89, 25］、ポロは有糸分裂キナーゼをコードすることが判明した［Llamazares et al., Genes Dev., 1991, 5, 2153］。ヒトにおいては、密接に関連する３つのＰＬＫが存在する［Glover et al., Genes Dev., 1998, 12, 3777］。それらは相同性の高いアミノ末端触媒キナーゼドメインを含み、そのカルボキシル末端は２又は３つの保存領域、すなわちポロボックスを含んでいる。ポロボックスの機能に対してはいまだに不完全な理解しか得られてはいないが、細胞内コンパートメントに対するＰＬＫのターゲティング［Lee et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1998, 95, 9301; Leung et al., Nat. Struct. Biol., 2002, 9, 719］、他のタンパク質との相互作用の仲介［Kauselmann et al., EMBO J., 1999, 18, 5528］に関係しているか、又は自己調節ドメインの一部を構成している場合もある［Nigg, Curr. Opin. Cell Biol., 1998, 10, 776］。また、ポロボックス依存性ＰＬＫ１活性は、正しい中期／後期の移行及び細胞質分裂に必要である［Yuan et al., Cancer Res., 2002, 62, 4186; Seong et al., J. Biol. Chem., 2002, 277, 32282］。
【０１０４】
これまでの研究により、ヒトＰＬＫが有糸分裂のいくつかの基本的な様相を制御することが示されている［Lane et al., J. Cell. Biol., 1996, 135, 1701; Cogswell et al., Cell Growth Differ., 2000, 11, 615］。特に、ＰＬＫ１活性は、Ｇ２期後半／前期前半での中心体の機能的成熟及びその後の二極性紡錘体の確立に必要であると考えられている。低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）法による細胞ＰＬＫ１の枯渇によっても、このタンパク質が複数の有糸分裂プロセス及び細胞質分裂の完了に必要であることが確認されている［Liu et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2002, 99, 8672］。
【０１０５】
本発明のより好ましい実施態様においては、式Ｉの化合物は、ＰＬＫ１を阻害するのに充分な量で投与される。
【０１０６】
３つのヒトＰＬＫのうち、もっともよく特徴づけられているのはＰＬＫ１である；ＰＬＫ１は、有糸分裂の開始［Toyoshima-Morimoto et al., Nature, 2001, 410, 215; Roshak et al., Cell. Signalling, 2000, 12, 405］、ＤＮＡ損傷チェックポイント活性化［Smits et al., Nat. Cell Biol., 2000, 2, 672; van Vugt et al., J. Biol. Chem., 2001, 276, 41656］、後期促進複合体の制御［Sumara et al., Mol. Cell, 2002, 9, 515; Golan et al., J. Biol. Chem., 2002, 277, 15552; Kotani et al., Mol. Cell, 1998, 1, 371］、プロテアソームのリン酸化［Feng et al., Cell Growth Differ., 2001, 12, 29］、並びに中心体の複製及び成熟［Dai et al., Oncogene, 2002, 21, 6195］を含む、多数の細胞分裂周期作用を制御する。
【０１０７】
具体的には、有糸分裂の開始には、サイクリン依存性キナーゼＣＤＫ１とＢ型サイクリンとの複合体であるＭ期促進因子（ＭＰＦ）の活性化が必要である［Nurse, Nature, 1990, 344, 503］。後者は、細胞周期のＳ期及びＧ２期に蓄積され、ＷＥＥ１キナーゼ、ＭＩＫ１キナーゼ、及びＭＹＴ１キナーゼによるＭＰＦ複合体の阻害的リン酸化を促進する。Ｇ２期の終りに、これに対応する、二重特異性ホスファターゼＣＤＣ２５Ｃによる脱リン酸化がきっかけとなって、ＭＰＦの活性化が生じる［Nigg, Nat. Rev. Mol. Cell Biol., 2001, 2, 21］。間期には、サイクリンＢが細胞質に局部集中し［Hagting et al., EMBO J., 1998, 17, 4127］、その後、前期にリン酸化し、このリン酸化が核転座を引き起こす［Hagting et al., Curr. Biol., 1999, 9, 680; Yang et al., J. Biol. Chem., 2001, 276, 3604］。前期での活性化ＭＰＦの核蓄積は、Ｍ期の事象を開始するためには重要であると考えられている［Takizawa et al., Curr. Opin. Cell Biol., 2000, 12, 658］。しかし、核ＭＰＦは、ＣＤＣ２５Ｃによる反対作用がない限り、ＷＥＥ１によって不活性状態に維持されたままである。ホスファターゼＣＤＣ２５Ｃそれ自体は、間期に細胞質に局部集中し、前期に核内に蓄積する［Seki et al., Mol. Biol. Cell, 1992, 3, 1373; Heald et al., Cell, 1993, 74, 463; Dalal et al., Mol. Cell. Biol., 1999, 19, 4465］。サイクリンＢ［Toyoshima-Morimoto et al., Nature, 2001, 410, 215］及びＣＤＣ２５Ｃ［Toyoshima-Morimoto et al., EMBO Rep., 2002, 3, 341］の核移行はともにＰＬＫ１のリン酸化により促進される［Roshak et al., Cell. Signalling, 2000, 12, 405］。このキナーゼは、Ｍ期開始の重要な制御因子である。
【０１０８】
本発明のある特に好ましい実施態様においては、式Ｉの化合物は、ＰＬＫに対するＡＴＰ拮抗性阻害剤である。
【０１０９】
本件との関連では、ＡＴＰ拮抗作用とは、ＡＴＰ結合を損なう又は撤廃するように、酵素の活性部位に可逆的又は不可逆的に結合することにより、ＰＬＫ触媒活性、すなわち、ＡＴＰから高分子のＰＬＫ基質へのリン酸転移を減少させる又は防止する、阻害剤化合物の能力を指す。
【０１１０】
別の好ましい実施態様においては、式Ｉの化合物は、ＰＬＫ２及び／又はＰＬＫ３を阻害するのに充分な量で投与される。
【０１１１】
哺乳類のＰＬＫ２（ＳＮＫとしても知られる）及びＰＬＫ３（ＰＲＫ及びＦＮＫとしても知られる）は、もともと、前初期遺伝子産物であることが判明していた。ＰＬＫ３キナーゼ活性は、後期Ｓ期及びＧ２期にピークを迎えるようであり、ＤＮＡ損傷チェックポイント活性化及び重度の酸化的ストレスの期間中にも活性化される。ＰＬＫ３はまた、細胞中の微小管動力学及び中心体機能の制御において重要な役割を果たし、無秩序なＰＬＫ３の発現は、結果として細胞周期の停止とアポトーシスを発生させる［Wang et al., Mol. Cell. Biol., 2002, 22, 3450］。ＰＬＫ２は、３つのＰＬＫのうちでもっともよく理解されていないホモログである。ＰＬＫ２とＰＬＫ３は共に、他にも重要な有糸分裂後機能を有していると思われる［Kauselmann et al., EMBO J., 1999, 18, 5528］。
【０１１２】
医薬組成物
本発明の別の態様は、上記定義の式Ｉの化合物と、１以上の薬学的に許容可能な希釈剤、賦形剤又は担体とを混合してなる医薬組成物に関する。本発明の化合物（薬学的に許容可能なその塩、エステル、及び薬学的に許容可能な溶媒和物を含む）は、単独投与が可能であっても、特にヒトの治療においては、通常は医薬用担体、賦形剤又は希釈剤と混合して投与される。かかる医薬組成物を、医学的及び獣医学的にヒト用又は動物用として用いてもよい。
【０１１３】
本明細書に記載した各種異なる形態の医薬組成物に適切な賦形剤の例は、”Handbook of Pharmaceutical Excipients, 2ndEdition, (1994), Edited by A Wade and PJ Weller”に収録されている。
【０１１４】
治療用の許容可能な担体又は希釈剤は、医薬品の分野では周知であり、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A. R. Gennaro edit. 1985) に掲載されている。
【０１１５】
適切な担体としては、ラクトース、澱粉、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、マンニトール、ソルビトールなどが例示できる。適切な希釈剤としては、エタノール、グリセロール及び水が例示できる。
【０１１６】
医薬用の担体、賦形剤、又は希釈剤の選択は、目的の投与経路及び薬学の標準的技法を参照しながら行うことができる。医薬組成物には、担体、賦形剤又は希釈剤が含まれていてもよく、あるいはそれらに加えて、適切な結合剤、滑沢剤、懸濁剤、コーティング剤、可溶化剤が含まれていてもよい。
【０１１７】
適切な結合剤の例としては、澱粉、ゼラチン、並びにグルコース、無水ラクトース、フリーフローラクトース、ベータラクトース、コーンシロップなどの天然糖、並びにアカシア、トラガカント又はアルギン酸ナトリウムなどの天然及び合成ゴム、カルボキシメチルセルロース及びポリエチレングリコールが挙げられる。
【０１１８】
適切な滑沢剤の例としては、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。
【０１１９】
防腐剤、安定剤、着色剤、さらには香料をも医薬組成物に添加してもよい。防腐剤の例として、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、及びｐ−ヒドロキシ安息香酸エステルが挙げられる。抗酸化剤及び懸濁剤も用いてもよい。
【０１２０】
塩／エステル
式Ｉの化合物は、塩又はエステルとして、特に薬学的に許容可能な塩又はエステルとして存在することも可能である。
【０１２１】
本発明の化合物の薬学的に許容可能な塩には、その適切な酸付加塩及び塩基性塩が含まれる。Berge et al, J Pharm Sci, 66, 1-19 (1977)には、適切な医薬用塩に関する論評が掲載されている。塩は、例えば以下のものにより形成される：鉱酸のような強い無機酸、例えば、硫酸、リン酸又はハロゲン化水素酸；置換されていない又は（例えばハロゲンにより）置換されている炭素数１〜４のアルカンカルボン酸や、酢酸などの強い有機カルボン酸；飽和又は不飽和ジカルボン酸、例えば、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、フタル酸又はテトラフタル酸；ヒドロキシカルボン酸、例えば、アスコルビン酸、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸又はクエン酸；アミノ酸、例えば、アスパラギン酸又はグルタミン酸；安息香酸；置換されていない又は（例えばハロゲンにより）置換されている、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキル−スルホン酸又はアリール−スルホン酸や、メタンスルホン酸又はｐ−トルエンスルホン酸などの有機スルホン酸。
【０１２２】
エステルは、エステル化される官能基に応じて、有機酸又はアルコール／水酸化物のいずれかを用いて形成される。有機酸として、以下のものが例示される：置換されていない又は（例えばハロゲンにより）置換されている炭素数１〜１２のアルカンカルボン酸や、酢酸などのカルボン酸；飽和又は不飽和ジカルボン酸、例えば、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、フタル酸又はテトラフタル酸；ヒドロキシカルボン酸、例えば、アスコルビン酸、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸又はクエン酸；アミノ酸、例えば、アスパラギン酸又はグルタミン酸；安息香酸；置換されていない又は（例えばハロゲンにより）置換されている、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキル−スルホン酸又はアリール−スルホン酸や、メタンスルホン酸又はｐ−トルエンスルホン酸などの有機スルホン酸。適切な水酸化物としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化アルミニウムなどの無機水酸化物が挙げられる。アルコールとしては、置換されていない又は（例えばハロゲンにより）置換されている炭素数１〜１２のアルカンアルコールが挙げられる。
【０１２３】
鏡像異性体／互変異性体
これまでに説明した本発明のすべての態様において、本発明は、適切な場合には、式Ｉの化合物のあらゆる鏡像異性体及び互変異性体を含むものである。当業者であれば、光学的性質（１以上の不斉炭素原子）又は互変的特質を保有する化合物を認識するであろう。対応する鏡像異性体及び／又は互変異性体を、当該技術において周知の方法により単離／調製してもよい。
【０１２４】
立体異性体及び幾何異性体
本発明の化合物のなかには、立体異性体及び／又は幾何異性体として存在するものがあってもよい。例えば、１以上の不斉中心及び／又は幾何中心を保有していてもよく、２以上の立体異性体及び／又は幾何異性体中に存在していてもよい。本発明は、これらの薬剤の立体異性体／幾何異性体の１つ１つすべての使用、及びその混合物の使用を企図するものである。特許請求の範囲で使用されている用語は、こうした形態が適切な機能活性を（同程度である必要はないが）保持しているかぎり、かかる形態を包含する。
【０１２５】
本発明は、かかる薬剤又は薬学的に許容可能なその塩のあらゆる適切な同位体変化をも含んでいる。本発明の薬剤又は薬学的に許容可能なその塩の同位体変化は、少なくとも１つの原子が、同じ原子番号を有してはいるものの原子量が自然界に通常に見られる原子量とは異なる原子によって置換されているもの、として定義される。薬剤又は薬学的に許容可能なその塩に組み込むことが可能な同位体としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素及び塩素のそれぞれの同位体、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ及び３６Ｃｌなどが挙げられる。かかる薬剤又は薬学的に許容可能なその塩のある同位体変化、例えば、３Ｈ又は１４Ｃなどの放射性同位体が組み込まれたものは、薬物及び／又は基質の組織分布研究に有用である。トリチウム化されたもの、すなわち３Ｈ、及び、炭素１４、すなわち１４Ｃは、その調製の容易さ及び検出能から、特に好ましい同位体である。また、重水素、すなわち２Ｈなどの同位体によって置換されたものは、例えば、インビボでの半減期の増大又は必要な用量の減少といった代謝安定性の向上の結果として生じる、ある種の治療上の利点を提供することができ、そのため、状況によっては好まれる場合がある。本発明の薬剤又は本発明の薬学的に許容可能なその塩の同位体変化は、一般に、ふさわしい試薬の適切な同位体変化を用いた従来の手順により、調製することができる。
【０１２６】
溶媒和物
本発明は、本発明の化合物の溶媒和物形態での使用をも包含する。特許請求の範囲で使用されている用語は、こうした形態を含むものである。
【０１２７】
多形体
さらに本発明は、多様な結晶形態、多形性形態及び（無）水形態の本発明の化合物に関する。化合物の合成による調製に用いた溶媒からの精製及び又は単離方法をわずかに変更することにより、化合物がそうした形態のいずれかに単離されることは、医薬品業界では充分に確立されている。
【０１２８】
プロドラッグ
本発明はさらにプロドラッグ形態の本発明の化合物をも包含する。一般に、そうしたプロドラッグとは、１以上の適切な基が修飾されており、その修飾が、ヒト又は哺乳動物である対象への投与に際して逆行するようになっている式Ｉの化合物である。通常、そのような逆行は、そうした対象に天然に存在する酵素によって行われるが、そのような逆行をインビボで行うために、かかるプロドラッグと共に第二の薬剤を投与することも可能である。そうした修飾の例としては、エステル（例えば、上述のいずれかのエステル）であって、エステラーゼなどにより逆行が行われるものが挙げられる。他の同様のシステムは、当業者には周知であろう。
【０１２９】
投与
本発明の医薬組成物は、経口、経直腸、経膣、非経口、筋肉内、腹腔内、動脈内、髄腔内、気管支内、皮下、皮内、静脈内、鼻腔内、口腔内又は舌下などの投与経路に適している。
【０１３０】
経口投与用としては、特に、圧縮錠、丸剤、錠剤、ゲル剤（gellules）、滴剤、及びカプセル剤が利用される。これらの組成物は、好ましくは１投与量当り１〜２５０ｍｇ、より好ましくは１０〜１００ｍｇの有効成分を含む。
【０１３１】
他の投与形態としては、静脈内、動脈内、髄腔内、皮下、皮内、腹腔内又は筋肉内に注射可能で、無菌又は殺菌可能な溶液から調製した液剤又は乳剤が含まれる。本発明の医薬組成物はまた、坐剤、膣坐剤、懸濁剤、乳剤、ローション剤、軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤、スプレー剤、液剤又は粉剤の形態であってもよい。
【０１３２】
経皮投与の代替手段としては、皮膚用パッチ剤の使用によるものがある。例えば、ポリエチレングリコール又は流動パラフィンの水性乳剤からなるクリーム剤に、有効成分を組み込むことができる。必要に応じてかかる安定剤及び防腐剤と共に、白蝋又は白色ワセリン基剤からなる軟膏剤に、有効成分を１〜１０重量％の濃度で組み込むこともできる。
【０１３３】
注射剤の形態では、１投与量当り１０〜１０００ｍｇ、好ましくは１０〜２５０ｍｇの有効成分を含んでいてもよい。
【０１３４】
組成物は、単位用量の形態、すなわち、単位用量、又は単位用量の複数回分若しくは単位用量以下の量が入った個別ポーションの形態で製剤することができる。
【０１３５】
投与量
当業者は、本組成物の１つについて、対象に投与するための適切な投与量を、過度の実験なしに容易に決定することができる。通常は、医師が個々の患者に最適と思われる実際の投与量を判断し、そうした投与量は、使用する特定化合物の活性、その化合物の代謝安定性及び作用の長さ、年齢、体重、全身の健康、性別、食事、投与モード及び時間、排泄速度、薬物併用、特定症状の重症度、並びに治療を受けている個人を含む多様な要因によって異なる。本明細書に開示している投与量は、標準的な症例を例示したものである。もちろん、個々の事例によっては、高め又は低めの用量域が適切な場合もありうる。それらもまた、本発明の範囲内である。
【０１３６】
必要に応じて、薬剤を０．０１〜３０ｍｇ／ｋｇ体重の投与量、例えば、０．１〜１０ｍｇ／ｋｇで、より好ましくは０．１〜１ｍｇ／ｋｇ体重の投与量で投与してもよい。
【０１３７】
代表的な実施態様では、１０〜１５０ｍｇ／日の投与量を、１回又は複数回に分けて患者に投与する。
【０１３８】
組み合わせ
特に好ましい実施態様においては、本発明の１以上の化合物を、１以上の他の治療上有効な成分、例えば、市販されている既存の薬品と組み合わせて投与する。そのような場合では、本発明の化合物は、１以上の他の有効成分と連続して、同時に、又は順次に投与される。
【０１３９】
例を挙げると、一般に抗癌剤を組み合わせて使用すると効果が高くなることが知られている。特に、組み合わせ療法は、主要な毒性、作用機序及び耐性機構の重複を回避するために好ましい。さらに、大半の薬剤をその最大耐量で、最短投与間隔で投与するのにも好ましい。化学療法剤を組み合わせる最大の利点に、それが付加的な効果又は考えられる相乗効果を、生化学的な相互作用を介して促進するかもしれないこと、また、このような処置を講じなければ単一の薬剤を用いた最初の化学療法で反応したと思われる、初期の腫瘍細胞における耐性の出現を減少させるかもしれないことがある。薬剤の組み合わせを選択する際の生化学的相互作用の利用例を以下に示す：ロイコボリンを投与して、５−フルオロウラシルの細胞内活性代謝産物の、その標的であるチミジル酸生成酵素への結合を増大させ、それによりその細胞傷害性作用を増大させる。
【０１４０】
現在、癌及び白血病の治療において、多数の組み合わせが用いられている。医療行為に関するさらに広範な評論が、"Oncologic Therapies" edited by E. E. Vokes and H. M. Golomb, published by Springerに収録されている。
【０１４１】
ある癌の病初での治療における有用性が判明している薬剤若しくは推測されている薬剤、又はその癌に由来する細胞株を用いて、被験化合物の成長阻害活性を研究することにより、有益な組み合わせを示唆してもよい。この手順は、薬剤の投与順序、すなわち、送達前か、同時か、又は送達後かを判断する際にも用いることができる。そうしたスケジューリングは、本明細書で同定した周期作用性薬剤すべての特徴であるとも言える。
【０１４２】
アッセイ
本発明の別の態様は、１以上のプロテインキナーゼを阻害することが可能なさらなる候補化合物を同定するためのアッセイにおける本発明の化合物の使用に関する。
【０１４３】
このアッセイは、競合結合アッセイであることが好ましい。
【０１４４】
さらに好ましくは、競合結合アッセイには、本発明の化合物をプロテインキナーゼ及び候補化合物と接触させるステップ、及び本発明の化合物とプロテインキナーゼとの相互作用におけるあらゆる変化を検出するステップを含む。
本発明のある態様は、
（ａ）先に記載したアッセイ法を行うステップ；
（ｂ）リガンド結合ドメインと結合可能な１以上のリガンドを同定するステップ；及び
（ｃ）ある量の前記１以上のリガンドを調製するステップ
を含むプロセスに関する。
【０１４５】
本発明の別の態様は、
（ａ）先に記載したアッセイ法を行うステップ；
（ｂ）リガンド結合ドメインと結合可能な１以上のリガンドを同定するステップ；及び
（ｃ）前記１以上のリガンドを含む医薬組成物を調製するステップ
を含むプロセスを提供する。
【０１４６】
本発明の別の態様は、
（ａ）先に記載したアッセイ法を行うステップ；
（ｂ）リガンド結合ドメインと結合可能な１以上のリガンドを同定するステップ；
（ｃ）リガンド結合ドメインと結合可能な前記１以上のリガンドを修飾するステップ；
（ｄ）先に記載したアッセイ法を行うステップ；
（ｅ）前記１以上のリガンドを含む医薬組成物を任意に調製するステップ
を含むプロセスを提供する。
【０１４７】
本発明はまた、先に記載した方法により同定されたリガンドに関する。
【０１４８】
本発明のさらに別の態様は、先に記載した方法により同定されたリガンドを含む医薬組成物に関する。
【０１４９】
本発明の別の態様は、増殖性障害、ウィルス性障害、ＣＮＳ障害、卒中、脱毛症及び糖尿病の治療において使用する医薬組成物の調製における、先に記載した方法により同定されたリガンドの使用に関する。
【０１５０】
前期候補化合物は、本発明の化合物に対する従来のＳＡＲ修飾により生成されることが好ましい。
【０１５１】
本明細書において、「従来のＳＡＲ修飾」との語は、化学誘導体化により所定の化合物を変化させる、当該技術において周知の標準的な方法を指す。
【０１５２】
上記の方法を用いて、１以上のプロテインキナーゼの阻害剤として有用なリガンドのスクリーニングを行ってもよい。
【０１５３】
合成
チアゾールアミン、アルコール、及びチオール（スキーム１、IIa、それぞれ、Ｘ＝ＮＨ、Ｏ、及びＳ）は、異なる互変異性体形態で存在することができる（D. Kikelj et al., 2002, Science of Synthesis, 11, 630）。３つの事例すべてにおいて、メソイオン形態のIIcは一般に重要ではない。溶液中のチアゾール−２−アミン（Ｘ＝ＮＨ）は、イミノ形態のIIbよりもほぼ例外なくアミノ形態のIIaで存在している。一方、チアゾール−２−オール（Ｘ＝Ｏ）（S.P. Cornwell et al., 1981, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 2340）及びチアゾール−２−チオール（Ｘ＝Ｓ）は、２−オキソ及び２−チオン形態のIIbに似ている。
【０１５４】
【化４】
2007509117.tif 000006
【０１５５】
本発明の５−（２−アミノ−ピリミジン−４−イル）−３Ｈ−チアゾール−２−オンＩの調製は、当該技術で周知のあらゆる方法によって行うことができる。いくつかの適切な方法をスキーム２に示す。
【０１５６】
【化５】
2007509117.tif 000007
【０１５７】
ハロ−ジケトンIIIの、Ｎ−非置換５−アシル−チアゾロンVIへの変換は、チオシアネートIVを用いて間接的に（R.G. Guy, 1977, In Chem. Cyanates Their Thio Deriv., Vol. 2, S. Patai, ed., pp. 819-886, Wiley, Chichester, Engl.）、又はチオカルバミン酸Ｖを用いて直接的に（J.J. D’Amico et al., 1986, J. Heterocycl. Chem. 23, 641）、行うことができる。３Ｈ−チアゾール−２−オンVIのアルキル化により、反応条件に応じて、Ｎ−アルキル化産物VIII又はＯ−アルキル化チアゾールIXのいずれかを生じさせることができる。したがって、例えばジアゾメタンを用いた３Ｈ−チアゾール−２−オンのメチル化により、Ｎ−メチル化（すなわち、３−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン）及びＯ−メチル化（すなわち、２−メトキシ−チアゾール）産物との混合物がもたらされる（G. Klein et al., 1954, Helv. Chim. Acta, 37, 2057）。一方、トリメチルオキソニウムテトラフルオロホウ酸を用いた３Ｈ−チアゾール−２−オンのメチル化では、Ｏ−メチル化チアゾール産物が排他的に供給される（E.F. Atkins et al., 1994, Tetrahedron, 50, 7253）。しかし、Ｎ−非置換３Ｈ−チアゾール−２−オンのＯ−アルキル化は、通例ではなくむしろ例外であり（T. Nishiwaki et al., 1981, Heterocycles, 16, 595）、基本的な条件下でのハロゲン化アルキルによる３Ｈ−チアゾール−２−オンの処理では、通常、Ｎ−アルキル化産物のみがもたらされる（R. Dahlbom, 1960,. Acta Chem. Scand., 14, 211）。Ｎ−アルキル化産物VIIIの調製は、Ｎ−置換−チオカルバミン酸VIIとの反応により、ハロ−ジケトンIIIから疑問の余地なく、直接的に行うことができる（S.P. Cornwell et al., 1981, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 2340）。後者の調製は、例えば、硫化カルボニルによるアミンのチオカルバモイル化によって行うことができる（Y. Gelernt et al., 1974, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 2610）。
【０１５８】
ケトンVIIIのエナミノンへの変換、例えば、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミドジメチルアセタールを用いたＸへの変換により、グアニジンXIを用いた下記ピリミジン環縮合反応に好適な中間産物がもたらされる（J. Zimmermann et al., 1996, Arch. Pharm. Pharm. Med. Chem., 329, 371）。Ｎ−メチル化にも作用する試薬であるＮ，Ｎ’−ジメチルホルムアミドジメチルアセタールによるVIの直接処理によっても、エナミノンＸ（Ｒ１＝Ｍｅ）を得ることができる。あるいは、VIをｔｅｒｔ−ブトキシ−ビス（ジメチルアミノ）メタンで処理した場合には、Ｎ−非置換エナミノンＸ（Ｒ１＝Ｈ）を得ることができる（H. Bredereck et al., 1964, Chem. Ber., 97, 3397）。グアニジンXIの調製は、シアナミド又はシアナミドのある誘導体との反応により、行うことができる（A.R. Katritzky et al., 1995, Synth. Commun., 25, 1173）。
【０１５９】
表１に示す化合物は、先に記載し、添付の実施例において詳述する手順を用いて調製された。
【０１６０】
本発明のさらなる態様は、請求項１で定義した式Ｉの化合物の調製プロセスであって、式Ｘの化合物を式XIの化合物と反応させて式Ｉの化合物を形成するプロセスに関する。
【０１６１】
【化６】
2007509117.tif 000008
【０１６２】
前記式Ｘの化合物を、以下のステップにより調製することが好ましい：
（Ａ）  （ｉ）式IIIの化合物を式VIIの化合物と反応させて、式VIIIの化合物を形成するステップ；
（ii）前記式VIIIの化合物を式Ｘの化合物に変換するステップ；
【０１６３】
【化７】
2007509117.tif 000009
又は、
（Ｂ）  （ｉ）式IIIの化合物を式IVの化合物と反応させて、式VIの化合物を形成するステップ；
（ii）前記式VIの化合物を式VIIIの化合物に変換するステップ；及び
（iii）前記式VIIIの化合物を式Ｘの化合物に変換するステップ；
【０１６４】
【化８】
2007509117.tif 000010
又は、
（Ｃ）  （ｉ）式IIIの化合物を式IVの化合物と反応させて、式VIの化合物を形成するステップ；
（ii）前記式VIの化合物を式Ｘの化合物に変換するステップ。
【０１６５】
【化９】
2007509117.tif 000011
【０１６６】
本発明を、実施例により、及び後述の図面を参照して、さらに詳細に説明する。
【０１６７】
概論
Varian INOVA-500装置を用いて、ＮＭＲスペクトルを得た。内部標準物質のテトラメチルシランに対し、１００万分の１単位での化学シフトが報告されている。Waters ZQ2000一連四重極質量分析計とエレクトロスプレーイオン化法（ＥＳＩ）を用いて、質量スペクトルを得た。Vydac 218TP54（２５０×４．６ｍｍ）カラム及び218TP1022（２５０×２２ｍｍ）カラムをそれぞれ用いて、分析用及び分取用ＲＰ−ＨＰＬＣを行った。Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮシステム（０．１％のＣＦ３ＣＯＯＨを含む）を用いた線状勾配溶出法を、流速１ｍＬ／分（分析用）及び９ｍＬ／分（分取用）で行った。クロマトグラムの結合により純度を査定した（λ＝２５４ｎｍ）。フラッシュクロマトグラフィーには、シリカゲル（EM Kieselgel 60、０．０４０−０．０６３ｍｍ、Merck社製）及びＩＳＯＬＵＴＥプレパックカラム（Jones Chromatography Ltd.社製、英国）を使用した。
【実施例１】
【０１６８】
５−アセチル−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン
Ｎ−メチルチオ−カルバミン酸メチルアンモニウム（１３．１ｇ、０．１０５ｍｏｌ；Y. Gelernt et al. 1974, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 2610に記載のとおりにメチルアミンおよび硫化カルボニルより調製）を部分的にＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）に溶解させた。３−クロロ−ペンタン−２，４−ジオン（１４．９ｍＬ、０．１２５ｍｏｌ）を室温にて滴下して添加し、４０℃まで徐々に発熱させた。室温で１時間攪拌した後、溶媒を減圧除去した。残渣をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で処理し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×５０ｍＬ）で抽出した。結合した有機画分を洗浄し（塩水）、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で蒸発させて琥珀色の油状物質とした。これをクロマトグラフィーで精製した（３００ｇのＳｉＯ２、１：１のヘプタン／Ｅｔ２Ｏで溶出して非環化付加化合物を得て、その後Ｅｔ２Ｏで溶出してＥｔＯＨから再結晶化した無色の針状物質である表題の化合物を得た（１４．２ｇ））。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ２．３４（ｓ，３Ｈ），２．５９（ｓ，３Ｈ），３．３３（ｓ，３Ｈ）。ＩＲ（ＡＴＲ）：１６５５及び１６２１ｃｍ−１（ＣＯｓｔｒ）。
【０１６９】
５−（３−ジメチルアミノ−アクリロイル）−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン
乾いたアルゴン流入フラスコ内で、５−アセチル−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（４．６４ｇ、２７．１０ｍｍｏｌ）とジメチルホルムアミドジメチルアセタール（８．４ｍＬ、５９．６２ｍｍｏｌ）とを混合し、１００℃で３時間加熱した。かかる混合物を冷却し、沈殿させた。その際、等量のＥｔ２Ｏを添加して沈殿を増大させた。結果として生じたオレンジ色の固体を濾過し、Ｅｔ２Ｏで洗浄して２．７３ｇの表題産物を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：δ２．５２（ｓ，３Ｈ），２．８２（ｂｓ，３Ｈ），３．１１（ｂｓ，３Ｈ），３．２２（ｓ，３Ｈ），５．１０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ），７．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ）。ＩＲ（ＡＴＲ）：１６６９及び１６３０ｃｍ−１（ＣＯｓｔｒ）。
【実施例２】
【０１７０】
５−アセチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン
チオシアン酸カリウム溶液（５．６７ｇ，５８ｍｍｏｌ）を含むＭｅ２ＣＯ（４５ｍＬ）をアイスバスで冷却し、３−クロロ−ペンタン−２，４−ジオン（６．９５ｍＬ，５８ｍｍｏｌ）を滴下により添加した。かかる混合物を室温まで温めて、６時間攪拌した。蒸発乾固させた後、残渣をＥｔＯＨ（３０ｍＬ）に溶解させ、濃塩酸水溶液（１５ｍＬ）を添加した。この混合物を１４時間加熱環流した。冷却後、これを濃縮し、結果として生じた沈殿物を濾過し、冷却したＭｅＯＨ及びＥｔ２Ｏでの連続洗浄を行って、黄褐色固体の表題化合物を得た（９．１ｇ，１００％）：ｍｐ２０８−２１１℃。Ａｎａｌ．ＲＰ−ＨＰＬＣ：ｔＲ６．５分（１０〜７０％のＭｅＣＮで２０分間，純度１００％）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ２．３３（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３），２．３８（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３），１１．９（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１５．０６，２９．９４，１１５．５３，１４２．９９，１７０．９２，１８９．９１。ＦＴＩＲ：３０９４，２８５０，１６６９，１６２２，１５７９ｃｍ−１。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ１５５．７７（Ｍ＋Ｈ）＋。Ａｎａｌ．（Ｃ６Ｈ７ＮＯ２Ｓ）Ｃ，Ｈ，Ｎ。
【０１７１】
５−アセチル−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン
５−アセチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（４．１３４ｇ，２６．３１ｍｍｏｌ）を含むＤＭＳＯ（１０ｍＬ）の溶液に、ＫＯＨ（１．４７６ｇ，２６．３１ｍｍｏｌ）を添加して、室温で３０分間攪拌した。ヨードエタン（２．５２５ｍＬ，３１．５７ｍｍｏｌ）を添加し、結果として生じた混合物を７２時間攪拌した。Ｈ２Ｏ（３０ｍＬ）からＣＨ２Ｃｌ２（５×３０ｍＬ）へと反応混合物を抽出し、短いＳｉＯ２ゲルカラムを通過させる前に、結合有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させた。目的とする画分の貯留により、表題化合物が得られた（３．１０４ｇ，６４％）。
【０１７２】
５−（３−ジメチルアミノ−アクリロイル）−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン
５−アセチル−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（３．１０ｇ，１６．７５ｍｍｏｌ）とジメチルホルムアミドジメチルアセタール（２．２２６ｍＬ）とを組み合わせ、８５℃に８時間加熱した。真空下で過剰なアセタールを除去したところ、濃色の残渣が残った。１％のＭｅＯＨを含むＥｔ２Ｏでこの残渣を処理すると、黄色の結晶状固体として表題化合物が得られた（１．１３１ｇ，３０％）。
【実施例３】
【０１７３】
５−（３−ジメチルアミノ−アクリロイル）−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン
５−アセチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（０．５ｇ，３．１８ｍｍｏｌ）とｔｅｒｔ−ブトキシ−ビス（ジメチルアミノ）メタン（Bredereck’s試薬；２．２２６ｍＬ，０．４７７ｍｍｏｌ）とを組み合わせ、８０℃に４時間加熱した。減圧下で過剰な溶媒を除去したところ、濃色の残渣が得られた。この残渣をＥｔＯＡｃで処理すると、固体状の表題化合物が得られ、この化合物を濾過により回収した（０．０７４ｇ，１１％）。Ａｎａｌ．ＲＰ−ＨＰＬＣ：ｔＲ１０．５分（０〜６０％のＭｅＣＮで２０分間）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．３３（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３），２．７０（３Ｈ，ｓ，ＮＣＨ３），３．０９（３Ｈ，ｓ，ＮＣＨ３），５．０７（１Ｈ，ｄ，ＣＨ，Ｊ＝１２．０），７．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０，ＣＨ），１１．２３（１Ｈ，ｓ，ＮＨ）。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ２１３．４４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【実施例４】
【０１７４】
３−エチル−５−［２−（６−メトキシ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（３３）。５−（３−ジメチルアミノ−アクリロイル）−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（８０ｍｇ，０．３３３ｍｍｏｌ）、Ｎ−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−硝酸グアニジン（７６ｍｇ，０．３３３ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（１８５ｍｇ，１．３３２ｍｍｏｌ）を、２−メトキシエタノール（４ｍＬ）中で組み合わせ、かかる混合物を、１２０℃に２２時間加熱した。冷却後、無機物を濾過で除去し、濾過物を乾燥させて濃縮した。粗産物をＳｉＯ２ゲルクロマトグラフィーで精製した。目的とする画分の貯留により、表題化合物が得られた（４５ｍｇ，３９％）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）δ：１４．５，１４．７，３７．３，５３．７，１０９．０，１１０．３，１２８．４，１３１．８２，１３２．４，１３７．８，１３８．４，１５２．７，１５９．５，１６０．３，１６４．７，１７０．１。残りの分析データは表２に示されている。
【０１７５】
対応する芳香族アミンを通常の方法でグアニル化して調製した適切な芳香族グアニジン塩を用いて、実施例１〜４に記載のように調製したエナミノンを縮合することにより、表１の残りの化合物を同様に調製した。調製した例示化合物の分析データを表２にまとめておく。
【実施例５】
【０１７６】
表１の化合物の酸付加塩を形成する典型的な手順は以下のとおりである：
【０１７７】
ピリミジン塩基（３ｍｍｏｌ）を含むｎ−ブタノール懸濁液（１００ｍＬ）を１２０℃に加熱し、酸を添加した。溶液が透明となり、ついで、１０分以内に沈殿が発生した。その後、反応混合物を室温まで冷ました。ジエチルエーテル（１００ｍＬ）を添加して、沈殿物を濾過した。温メタノールからの再結晶により、目的の塩を得た。
【０１７８】
３，４−ジメチル−５−［２−（４−ピペラジン−１−イル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン（３８）のビス（メタンスルホン酸）塩
黄色固体。Ａｎａｌ．ＲＰ−ＨＰＬＣ：ｔＲ＝１１．４分（０〜６０％のＭｅＣＮ，純度１００％）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：２．０９（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３），２．６９（ｓ，６Ｈ，ＣＨ３），２．８７（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３），３．２８〜３．３２（ｍ，８Ｈ，ＣＨ２），６．５８（ｍ，１Ｈ，ピリミジニル−Ｈ），６．８５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，Ｐｈ−Ｈ），７．１４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，Ｐｈ−Ｈ），７．７４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，ピリミジニル−Ｈ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：１５．２８，３０．４６，４３．４４，４６．８３，１０８．０６，１１０．１７，１１７．３９，１２２．５１，１３２．３０，１４１．９９，１４６．５３，１５４．５１，１５７．０２，１６０．７９及び１７０．４０。元素分析により、Ｃ４３．５５，Ｈ５．２６，Ｎ１４．５０（Ｃ１９Ｈ２２Ｎ６ＯＳ．２ＣＨ４Ｏ３ＳはＣ４３．８９，Ｈ５．２６，Ｎ１４．６２を必要とする）であることが判明した。
【０１７９】
３，４−ジメチル−５−［２−（４−ピペラジン−１−イル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン（３８）のビス（シュウ酸）塩
黄色固体。Ａｎａｌ．ＲＰ−ＨＰＬＣ：ｔＲ＝１１．６分（０〜６０％のＭｅＣＮ，純度１００％）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ：２．５４（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３），３．１６（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３），３．２７〜３．２９（ｍ，８Ｈ，ＣＨ２），６．８８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，ピリミジニル−Ｈ），６．９５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｐｈ−Ｈ），７．６４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｐｈ−Ｈ），８．３８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，ピリミジニル−Ｈ），９．４２（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：１４．９１，３０．２５，４３．６８，４７．３７，１０８．４０，１１０．７１，１１７．１８，１２１．０２，１３３．９９，１３８．３１，１４５．９６，１５８．３８，１５９．２０，１６０．２８，１６５．３７，１７０．４８。Ｃ１９Ｈ２２Ｎ６ＯＳ．２Ｃ２Ｈ４Ｏ８はＣ１９．１１，Ｈ４．６６，Ｎ１４．９４を必要とする；Ｃ４９．９１，Ｈ５．１４，Ｎ１５．４９であることが判明した。
【実施例６】
【０１８０】
結晶化
化合物２（表１）を、最小量の煮沸２−メトキシエタノールに溶解させた。温溶液を濾過し、濾過物を冷まし、室温で３日間放置した。針状の結晶が形成され、その結晶のＸ線構造決定を行った。
【０１８１】
Ｘ線構造決定
不活性パーフルオロポリエーテル油下、結晶化母液中の塊の１つから結晶を切除し、絶対温度１５０度で操作するOxford Cryosystems社製の低温装置を装備したBruker社製のSmart Apex回折計に載置した。そのＸ線回折パターンから、かかる試料は単結晶ではないが、パターン中のあらゆるスポットには、２つの方向変換マトリックスを用いて三斜晶系単位格子（表３）上で指数付けを行えると思われることが明らかになった（R.A. Sparks, 2000. GEMINI, Bruker AXS社製、米国、ウィスコンシン州、マディソン）。これは、かかる試料が実際に２つのドメインからなる非欠面双晶であったことを暗示するものである；双晶則は、約［１００］の１８０°回転であり、以下のマトリックスにより表される：
【数１】
2007509117.tif 000012
【０１８２】
データの範囲を、刻み幅０．３°及び３０ｓ／画像で採取した。その後、構造解析のために、全データを平均化した。マルチスキャンの手順であるＳＡＤＡＢＳ（G.M. Sheldrick, 2002. SADABS Version 2.04、ゲッチンゲン大学、ドイツ）を用いて、吸収補正を行った。
【０１８３】
硫黄原子は、パターソン合成に位置し(G.M. Sheldrick, 2001, SHELXTL Version 6、ゲッチンゲン大学、ドイツ)、残りの原子は、最小二乗精密化と差フーリエマップとの反復サイクル中に位置していた（D.J. Watkin et al. 2003, CRYSTALS Issue 12, Chemical Crystallography Laboratory、オックスフォード大学、英国）。この段階での不適合データの分析により、回折パターンに由来していた双晶則を確認した（ROTAX, R.I. Cooper et al. 2002, J. Appl. Cryst. 35, 168-174）。その後、Pratt, Coyle and Ibersの手順を用いて、双晶のモデル化を行った（C.S. Pratt et al. 1971, J. Chem. Soc. 2146-2151）。水素原子は、Ｃ３１に基づくメチル基の配向を定義する差マップに位置し、Ｃ４１に基づくメチル基が、約Ｃ４１〜Ｃ４の１８０°回転を介してつながっている２つの配向に対して乱れていることを示していた。その後、Ｈ原子を理想的な位置に置き、Ｃ４１に付着させたＨ原子の重量は０．５に固定した。すべての非Ｈ原子を、異方性転位パラメータでモデル化した。最終的な従来Ｒ因子は、０．０４８であった；他の結晶、データ採取、及び精密化パラメータを表３に挙げておく。分率原子座標、結合距離及び結合角、異方性転位パラメータ、並びにＨ原子位置を、表４、表５、表６、及び表７にそれぞれ挙げておく。
【０１８４】
化合物２は、疑問の余地なく、図１に示されている構造をもつことができる。一次結合距離及び一次結合角は、通常の値を採用した。Ｃ３ＮＳ環のＣ２−Ｎ３−Ｃ４−Ｃ５部分は、すべて１．４０Å未満であり、このことは、これらの原子に対してπ結合が非局在化していることを暗示している。ケンブリッジデータベースにおけるＣ（ｓｐ２）−Ｓ−Ｃ（ｓｐ２）部分の平均幾何学的パラメータ（F.H. Allen, 2002, Acta Cryst. B58, 380-388）は、Ｄ（Ｃ−Ｓ）＝１．７５（２）Å及び＜（ＣＳＣ）＝９５（５）°である；ＣＹＣ４２８１で観察された数値も同様である。Ｎ１２でのアミン機能付近でπ結合の非局在化もいくつか観察されているが、その結合距離であるＣ１０−Ｎ１２［１．３７０（３）Å］とＮ１２−Ｃ１３［１．４１４（３）Å］には顕著な非対称性があり、Ｃ１０に対するπ結合のほうが、より意義のあるものと推測される。結晶構造中のパッキングは、ＮＨ−Ｏ  Ｈ結合を介して、結晶学的対称心付近にある化合物２の二量体の形成に支配される（図１）。Ｈ結合パラメータは、Ｈ１２−Ｏ２：２．００Å、Ｎ１２−Ｏ２：２．９４７（３）Å、及びＮ１２−Ｈ１２−Ｏ２：１５４．３（１５）°である。
【実施例７】
【０１８５】
キナーゼアッセイ
上記実施例の化合物について、各種プロテインキナーゼの触媒活性に対する阻害能を調べてみた。ＡＴＰから適切なポリペプチド基質への放射性リン酸の取り込みを測定することにより、この調査を行った。組換えプロテインキナーゼ及びキナーゼ複合体については、作製するか、又は市販品を入手した。９６ウェルプレート、及び適切な基質と共に２〜４μｇの活性酵素を添加した適切なアッセイ用緩衝液（一般的には、２５ｍＭのβ−グリセロリン酸、２０ｍＭのＭＯＰＳ、５ｍＭのＥＧＴＡ、１ｍＭのＤＴＴ、１ｍＭのＮａ３ＶＯ３、ｐＨ７．４）を用いて、アッセイを行った。Ｍｇ／ＡＴＰ混合物（１５ｍＭのＭｇＣｌ２＋１ウェル当たり３０〜５０ｋＢｑの［γ−３２Ｐ］−ＡＴＰを添加した１００μＭのＡＴＰ）の添加により反応を開始させ、混合物を必要に応じて３０℃でインキュベートした。氷上で反応を停止させ、ついでｐ８１フィルタープレート又はＧＦ／Ｃフィルタープレート（Whatman Polyfiltronics社製、英国、ケント州）で濾過した。７５ｍＭのオルトリン酸水溶液で３回洗浄した後、プレートを乾燥させ、シンチレーション物質を添加し、放射活性の取り込みをシンチレーションカウンター（TopCount, Packard Instruments社製、英国、バークシャー州、パングボーン）で測定した。キナーゼアッセイ用の化合物を、１０ｍＭの原液を含むＤＭＳＯとして作製し、アッセイ用緩衝液で希釈して、１０％のＤＭＳＯとした。曲線適合ソフトウェア（GraphPad Prism version 3.00 for Windows, GraphPad Software社製、米国、カリフォルニア州、サンディエゴ）でデータを分析し、ＩＣ５０値（キナーゼ活性を５０％阻害する被検化合物の濃度）を測定した。結果を表８にまとめておく。
【実施例８】
【０１８６】
新鮮ヒトＰＢＭＣにおける抗ＨＩＶ有効性評価
臨床小児ＨＩＶ株Rojo又はWejoを用いて、本発明の代表的な化合物の、ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）におけるＨＩＶ−１に対する抗ウィルス活性をテストした。細胞生存及びＨＩＶ複製を促進する条件下で、ＰＢＭＣを培養した。１００μＭの化合物原液を含むＤＭＳＯの、６〜９ｌｏｇ１０連続希釈液から、抗ウィルス活性をテストした。以下のパラメータを抽出した：ＩＣ５０及びＩＣ９０（ウィルスの複製をそれぞれ５０％及び９０％阻害する濃度）、ＴＣ５０値（細胞生存率を５０％低下させる濃度）、及びＴＩ（治療指数：ＴＣ５０／ＩＣ５０）。
【０１８７】
スクリーニングを受診したドナーから、ＨＩＶ及びＨＢＶに対して血清反応陰性の新鮮ＰＢＭＣを単離した（Interstate Blood Bank, Inc.社製、テネシー州、メンフィス）。ＰＢＳ中での低速遠心分離及び再懸濁により、細胞のペレット化／洗浄を２〜３回行って、汚染した血小板を除去した。その後、Dulbecco’sリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）でかかる白血球減少血を希釈し、５０ｍＬの遠心分離管内のリンパ球分離培地（ＬＳＭ；Mediatech, Inc.社製のCellgro（登録商標）；密度１．０７８±０．００２ｇ／ｍＬ；Ｃａｔ．＃８５−０７２−ＣＬ）上に重ねてから、遠心分離を行った。結果として生じた界面から、バンド化したＰＢＭＣをそっと吸引し、ＰＢＳを用いて低速遠心分離により洗浄した。最終的な洗浄の後、トリパンブルー色素排除法で細胞を計数し、ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、Ｌ−グルタミン酸、フィトヘマグルチニン（ＰＨＡ−Ｐ、Sigma社製）を補充したＲＰＭＩ１６４０に再懸濁した。かかる細胞を３７℃でインキュベートした。インキュベーション後、ＰＢＭＣを遠心分離し、ＦＢＳ、Ｌ−グルタミン酸、ペニシリン、ストレプトマイシン、ゲンタマイシン、及び組換えヒトＩＬ−２（R&D Systems, Inc社製）を含むＲＰＭＩ１６４０に再懸濁した。ＰＨＡ分裂刺激により開始された細胞分裂を維持するために、ＩＬ−２を培養培地中に入れておいた。この中でＰＢＭＣを維持し、アッセイプロトコルに使用するまで二週間毎に培地交換を行った。細胞は、古すぎてアッセイに使用できないと判断されて処分されるまで、最長二週間にわたって培養状態に置かれていた。組織培養フラスコへ付着した結果、培養物中の単球は激減した。
【０１８８】
標準的ＰＢＭＣアッセイのため、少なくとも２人の健常ドナーのＰＨＡ−Ｐ刺激細胞を貯蔵し、希釈して、９６ウェル丸底マイクロプレートの内部ウェルに載置した。２人以上のドナーの貯蔵単核球を利用して、ＨＩＶ感染における質的量的な差異、及び一次リンパ球群のＰＨＡ及びＩＬ−２に対する全体的な応答の結果によって生じる、個々のドナー間に観察されるばらつきを最小限に抑えた。各プレートには、ウィルス／細胞コントロールウェル（細胞プラスウィルス）、実験ウェル（薬剤プラス細胞プラスウィルス）及び化合物コントロールウェル（薬剤プラス無細胞培地、細胞傷害性のＭＴＳモニタリングに必要）が含まれていた。ＨＩＶ−１にはＰＢＭＣに対する細胞変性作用がないため、同じアッセイプレートを抗ウィルス活性と細胞傷害性の両方の測定に使用することができる。被検薬剤希釈液をマイクロタイターチューブ内で調製し、標準フォーマットを使用して各濃度のものを適切なウェルに置いた。ウィルス原液に所定の希釈を行って、各テストウェルに載置した（最終ＭＯＩ０．１）。ＰＢＭＣ培養物を、感染後７日間にわたって３７℃、５％ＣＯ２で維持した。この期間の後は、逆転写酵素活性及び／又はＨＩＶｐ２４含有量の分析のため、無細胞上清液の試料を回収した。上清液試料の除去に続いて、細胞生存を確認するためにプレートにＭＴＳを添加して、化合物の細胞傷害性を測定した。顕微鏡でもウェルの検査を行い、異常があれば記録した。
【０１８９】
逆転写酵素活性アッセイ
マイクロタイタープレートによる逆転写酵素（ＲＴ）反応を利用した（Buckheit et al., AIDS Research and Human Retroviruses 7:295-302, 1991）。１ｍＣｉ／ｍＬで、１：１のｄＨ２Ｏ：エタノール中でトリチウム化チミジン三リン酸（３Ｈ−ＴＴＰ，８０Ｃｉ／ｍｍｏｌ，ＮＥＮ）を得た。ポリｒＡ：オリゴｄＴテンプレート：プライマー（Pharmacia社製）を原液として調製し、ついで等分し、−２０℃で保存した。ＲＴ反応緩衝液は、毎日新鮮なものを調製した。３Ｈ−ＴＴＰ、ｄＨ２Ｏ、ポリｒＡ：オリゴｄＴ原液及び反応緩衝液を組み合わせて、最終反応混合物を調製した。この反応混合物を、丸底マイクロタイタープレートに載置し、ウィルス含有上清液を添加し、混ぜ合わせた。３７℃で６０分間、プレートをインキュベートした。インキュベーション後、リン酸ナトリウム緩衝液又は２×ＳＳＣ（Life Technologies社製）中で、ＤＥ８１フィルターマット（Wallac社製）上に反応体積をスポットした。次に、それらを蒸留水で、及び７０％のエタノールで洗浄し、乾燥させた。標準的な液体シンチレーション法を用いて、取り込まれた放射活性（１分当たりのカウント数、ＣＰＭ）を定量した。
【０１９０】
結果
先に定義したＴＩ値に基づき、以下の本発明の化合物に抗ＨＩＶ活性があることが判明した。
【０１９１】
高い活性を有する（ＴＩ＞５０）化合物：
５−［２−（３−ヨード−４−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（１４）、
３，４−ジメチル−５−［２−（３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン（１９）、
５−［２−（４−ジメチルアミノ−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（２２）、
５−［２−（４−ジメチルアミノ−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３−エチル−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（２９）、
５−［２−（６−クロロ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（３２）、
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−メタンスルホンアミド（５５）、
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−Ｃ，Ｃ，Ｃ−トリフルオロ−メタンスルホンアミド（５８）、及び
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−５−トリフルオロメチル−フェニル｝−アセトアミド（６４）。
【０１９２】
活性を有する（５＜ＴＩ＜５０）化合物：
５−［２−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（２）、
３，４−ジメチル−５−［２−（４−メチル−３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン（１１）、
５−［２−（４−クロロ−３−メチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３，４−ジメチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（１５）、
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゾニトリル（１６）、
３，４−ジメチル−５−［２−（４−メチル−３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン（２１）、
３−エチル−４−メチル−５−［２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン（２３）、
３−エチル−５−［２−（６−メトキシ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−４−メチル−３Ｈ−チアゾール−２−オン（３３）、
３，４−ジメチル−５−［２−（４−ピペラジン−１−イル−フェニルアミノ）−ピリミジン−４−イル］−３Ｈ−チアゾール−２−オン（３８）、
Ｎ−｛４−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンジル｝−アセトアミド（５９）、
３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド（６０）、
Ｎ−｛３−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−５−トリフルオロメチル−フェニル｝−アセトアミド（６４）、及び
４−［４−（３，４−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−チアゾール−５−イル）−ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−（２−メトキシ−エチル）−ベンゼンスルホンアミド（６５）。
【実施例９】
【０１９３】
ＧＳＫ３β及びＧＳＫ３αアッセイ
ＧＳＫの同位体（α及びβ）は共に、グリコーゲン代謝の重要な酵素であるグリコーゲンシンターゼ活性の制御に関与している。組換えヒトＧＳＫ３−α及びＧＳＫ３−βを用いたインビトロキナーゼアッセイを利用して、例示化合物の阻害能力を測定した；測定したＩＣ５０値を、表９に示す。
【０１９４】
選択した例示化合物の、ＧＳＫ３βに対するＩＣ５０値を測定するため、１０ポイント滴定の準備を行った。９６ウェルのマイクロタイタープレートを使用し、１ウェル当たりの最終容積を２５μＬとして、アッセイを行った。各アッセイには、１．５ユニットのＧＳＫ３β（New England Biolabs社製）、２００μＭのＣＲＥＢホスホペプチド（KRREILSRRPpSYR, Alta Biosciences社製）、２０ｍＭのＴｒｉｓＨＣｌ、ｐＨ７．５、５ｍＭのＤＴＴ、１００μＭのＡＴＰを補充した１５ｍＭのＭｇＣｌ２、及び０．５μＣｉの［γ−３２Ｐ］ＡＴＰに加えて阻害剤を含む又は含まない２％のＤＭＳＯが含まれていた。３０℃で３０分間アッセイを行ってから、等容積の７５ｍＭのリン酸水溶液を添加して反応を停止させた。その後、試料をｐ８１フィルタープレート（Whatman社製）上にスポットし、空気を抜いた。２００μＬの希釈リン酸水溶液でウェルを３回洗浄した後、１ウェル当たり５０μＬのMicroscint 40を添加した。トップカウントマイクロプレートシンチレーションカウンター（Packard社製）で、放射活性の取り込みを測定した。
【０１９５】
各アッセイポイントにつき１ｎｇの酵素を添加したこと以外は全く上記と同じように、ＧＳＫ３α（Upstate社製）のアッセイを行った。
【実施例１０】
【０１９６】
ＤＹＲＫ１Ａアッセイ
二重特異性チロシンリン酸化制御キナーゼ１Ａ（ＤＹＲＫ１Ａ）は、他の機能の中でも、ＧＳＫ３に類似した形でグリコーゲン代謝制御の一翼を担っていることがこれまでに提案されている。本発明の例示化合物のいくつかについては、組換えヒトＤＹＲＫ１Ａに対するインビトロでのスクリーニングを行っており、測定したＩＣ５０値を表９に示す。現時点での本発明者らの知識によると、ＤＹＲＫ１Ａの阻害は、グリコーゲンシンターゼの刺激に付加的な効能を及ぼすものと思われる。
【０１９７】
選択した例示化合物の、ＤＹＲＫ１Ａに対するＩＣ５０値を測定するため、１０ポイント滴定の準備を行った。９６ウェルのマイクロタイタープレートを使用し、最終容積を２５μＬ／ウェルとして、アッセイを行った。各アッセイには、２．３ミリユニットのＤＹＲＫ１Ａ（Upstate社製）、５０μＭのWoodtideペプチド（KKISGRLSPIMTEQ, Upstate社製）、２０ｍＭのＴｒｉｓＨＣｌ、ｐＨ８．０、１０ｍＭのＤＴＴ、５ｍＭのＥＧＴＡ、１ｍＭのＮａＶＯ３、３１ｍＭのベータ−グリセロリン酸、１００μＭのＡＴＰを補充した１５ｍＭのＭｇＣｌ２、及び０．５μＣｉの［γ−３２Ｐ］ＡＴＰに加えて阻害剤を含む又は含まない２％のＤＭＳＯが含まれていた。３０℃で６０分間アッセイを行ってから、等容積の７５ｍＭのリン酸水溶液を添加して反応を停止させた。その後、試料をｐ８１フィルタープレート（Whatman社製）上にスポットし、空気を抜いた。２００μＬの希釈リン酸水溶液でウェルを３回洗浄した後、１ウェル当たり５０μＬのMicroscint 40を添加した。トップカウントマイクロプレートシンチレーションカウンター（Packard社製）で、放射活性の取り込みを測定した。
【実施例１１】
【０１９８】
脂肪細胞と筋管の分化
３Ｔ３−Ｌ１マウス前脂肪細胞を、１０％のウシ胎仔血清（ＦＣＳ）とペニシリン／ストレプトマイシンを補充したＤＭＥＭ培地で、充分にコンフルエントに達するまで成長させた。０．５ｍＭのＩＢＭＸ（２−イソブチル−１−メチルキサンチン）、０．２５μＭのデキサメタゾン及び１μｇ／ｍＬのインシュリンを成長培地に添加して、細胞分化を開始させた。４日後及び７日後に、分化培地を交換した。分化開始後、ＤＭＥＭ、１０％のＦＣＳ、及び抗生物質中で、細胞をさらに３日間成長させた。
【０１９９】
ラットの筋管は、ＤＭＥＭ、１０％のＦＣＳ、及び抗生物質中でコンフルエントに達するまで成長させた、Ｌ６．Ｇ８．Ｃ５筋芽細胞から分化した。その後、培地を除去し、ＰＢＳ、並びに２％のＦＣＳ及び抗生物質を補充したイーグルの最小必須培地（アルファ改変）を含む分化培地で、細胞を洗浄した。＞９０％の細胞が多核筋管を形成するまで、３〜４日間、細胞を培養した。その後、分化した細胞を、ＧＳＫ３阻害剤である例示化合物で処理した後に、グリコーゲンシンターゼ活性化の測定に使用した。
【実施例１２】
【０２００】
培養細胞におけるグリコーゲンシンターゼ活性化
１０ｃｍのペトリ皿の中で、ＨＥＫ２９３細胞、マウス脂肪細胞又はラット筋管を、異なる濃度のＧＳＫ３阻害剤例示化合物で９０分間処理した。処理時間の最後に、２０ｍＭのＮａＦを補充した氷冷ＰＢＳ緩衝液中で細胞を洗浄し、こすり落とした。細胞を遠心分離によりペレット化し、３００μＬの緩衝液（５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、１０ｍＭのＥＤＴＡ、１００ｍＭのＮａＦ、５ｍＭのＤＴＴ、プロテアーゼインヒビターカクテル（Sigma社製））に溶解させた。氷上での３０分間のインキュベーション後、試料を遠心分離で清澄化した。２つの異なるグルコース−６−ホスファターゼ濃度――低濃度（０．１ｍＭ）及び高濃度（１０ｍＭ）――の可溶性画分中で、グリコーゲンシンターゼ活性を測定した。かかる反応は、３０分間行われた（緩衝液：５０ｍＭのＴｒｉｓ、ｐＨ７．８、２０ｍＭのＥＤＴＡ、２５ｍＭのＮａＦ、５ｍＭのＤＴＴ）。反応混合物（総容積９０μＬ）には、１％のグリコーゲン、０．３ｍＭのＵＤＰ−グルコース及び０．０６μＣｉの１４Ｃ−ＵＤＰ−グルコースが含まれていた。１４０μＬの１００％のエタノールを含むＧＦＣ９６ウェルフィルタープレートに、７０μＬを移すことで反応を停止させ、４℃で１時間グリコーゲンを沈殿させた。２００μＬの６６％のエタノールでウェルを２回洗浄した後、乾燥させた。ついで、１００μＬのシンチレーション液を添加して、プレートを密封し、Packard Topcounterで計数した。ＵＤＰ−グルコースが低濃度の場合と高濃度の場合とを比較した、グリコーゲンにおける標識１４Ｃ−ＵＤＰ−グルコースの取り込み量の比率として、グリコーゲンシンターゼ活性化を計算した（分別速度（fractional velocity））。
【０２０１】
ＧＳＫ３阻害剤がグリコーゲンシンターゼを活性化する能力を、ＨＥＫ２９３細胞、マウス脂肪細胞及びラット筋管で確認した。確認したＥＣ５０値、及び４０ｍＭのＬｉＣｌ（％）の作用に対して標準化を行った最大発光量比（maximum fold induction）を表１０に提示する。テストした化合物は、３つの細胞系すべてにおいて、ミクロモル以下、又は低値のミクロモルという濃度範囲のＥＣ５０値で、グリコーゲンシンターゼを活性化した。その多くは、４０ｍＭのＬｉＣｌにより誘導された刺激を超えていた（このアッセイで使用した化合物の最高濃度は、２０μＭであった）。
【実施例１３】
【０２０２】
ＰＥＰＣＫ遺伝子発現アッセイ――ｑＰＣＲ
６ウェルプレートに１ウェル当たり１×１０７個で播種したＨＥＰＧ２（肝細胞癌）細胞における、ＰＥＰＣＫ遺伝子発現を調べてみた。細胞を２０時間血清飢餓状態にしておいた後、インシュリン又はＧＳＫ３阻害剤例示化合物の存在下又は不在下で、デキサメタゾン／ｃＡＭＰ（ＰＥＰＣＫ遺伝子発現刺激剤）での処理を行った。処理の３時間後に細胞を回収し、溶解させ、RNeasyミニスピンカラム（Quiagen社製）を用いてＲＮＡを抽出した。ＰＥＰＣＫ遺伝子のプライマーセットには、ＣＯＤ２０６３／ＣＯＤ２０６４（３５０ｂｐ）を使用した。Lightcycler-RNA Master SYBR Green 1 Kitを用いて、ワンステップＲＴ−ＰＣＲを行った。ＰＣＲ産物の増幅が対数期に達するのに必要なＰＣＲサイクル数を、ｑＰＣＲ分析にて計算した。ハウスキーピング遺伝子――２８Ｓ――のｑＰＣＲを標準化に使用した。
【０２０３】
ＰＥＰＣＫは、肝臓でのグルコース新生の重要な酵素であり、ＧＳＫ３阻害を介してインシュリンによる負の制御を受けることが知られている。インシュリン又はＧＳＫ３阻害剤の存在下又は不在下で、デキサメタゾン／ｃＡＭＰ（ＰＥＰＣＫ遺伝子発現の正の制御因子）で処理したＨＥＰＧ２細胞において、例示化合物がＰＥＰＣＫ遺伝子発現に及ぼす作用を調べてみた。ＰＥＰＣＫ遺伝子転写レベルをデキサメタゾン誘導性刺激のパーセンテージで表し、表１１に示す。ＧＳＫ３阻害剤例示化合物は、ＨＥＰＧ２細胞におけるＰＥＰＣＫ遺伝子発現のデキサメタゾン／ｃＡＭＰ誘導性刺激を、効率よく停止させた。テストした化合物の中には、インシュリンよりも有意に強力なものもあった。これらの結果は、不具合が生じて糖尿病患者における高血糖の一因となっている肝臓でのグルコース新生を調節する際の、ＧＳＫ３阻害剤の利用可能性を示唆するものである。
【実施例１４】
【０２０４】
雄ＺＤＦラットの経口グルコース耐性に及ぼすＧＳＫ３阻害剤例示化合物の作用
本発明の例示化合物の、グルコース代謝改善能力を、週齢１２〜１３の雄ＺＤＦｆａ／ｆａラットでテストした。実験動物（空腹時血糖値１０〜１５ｍｍｏｌ／Ｌ）に、３０ｍｇ／ｋｇで２回の投与を行い、グルコースチャレンジテストを時間０で行った。−２７０〜１８０分、及び０〜１８０分でＡＵＣを測定し、血中の被検化合物濃度をグルコース負荷後３０分及び６０分で測定した。結果を表１２に挙げておく。血糖値の低下傾向が観察された（化合物６６及び６８についてのみ、統計学的に有意である）。４つの化合物にある程度の経口バイオアベラビリティが認められ（６４、６６、６７及び６８）、グルコースＡＵＣの適度な減少と相関していた。これらの血中濃度はその大半が、細胞アッセイで測定したＥＣ５０値を下回っていた。
【０２０５】
週齢１２〜１３の雄ＺＤＦｆａ／ｆａラットを用いて、ＧＳＫ３阻害剤例示化合物が経口グルコース耐性に及ぼす作用を調べた。温度を制御し（２２±２℃）、明暗サイクルを１２／１２時間としたセミバリア状態で、動物を、個別に収容した；２３％のタンパク質、６％の脂肪、６１．７％の炭水化物、３．３％の繊維質、及び６％の灰分を含むエネルギー強化ペレット状食餌（m Z Ereich; Act. No. V1185-000; ssniffO Spezialitaeten GmbH社製、ドイツ、Ｄ−５９４９４  ゾースト）、並びにＨＣｌで酸性化した水道水を自由に摂取させた。週に３回、体重を記録した。１０％のＤＭＳＯ、５％のTween、５％のSpan 20、３０％のＰＥＧ４００及び５０％の水（ｖ／ｖ）からなる製剤に被検化合物を溶解させ、濃度が５ｍｇ／ｍＬの最終溶液を作製した。各実験群で７匹の動物を用いた。夜を徹しての１６時間の断食後、３０ｍｇ／ｋｇの被検化合物を経口で２回投与（−２７０分及び−３０分）してから、経口グルコース耐性テストを開始した（２ｇのグルコース／ｋｇを、栄養チューブ経由で導入される４０％溶液として経口投与）。コントロール群には、ビヒクルのみを同様の方式で投与した。血糖値測定のための採血（血液２０μＬ）を、−２７０分、０分、１５分、３０分、６０分、９０分、１２０分及び１８０分に行った。溶血用の１ｍＬの溶液を充填した標準管内に入れておいた容量２０μＬのガラス毛管に、尾静脈から混合静脈血を採取した。グルコースオキシダーゼ法でグルコースの濃度を測定した（Super G Glukosemessgeraet; Dr Mueller Geraetebau、ドイツ、フライタール）。また、グルコース投与から３０分及び６０分後に、５０μＬの採血を行い、ヘパリン処理管に入れた後、液体窒素で直ちに凍結させた。使用した生物学的分析法は、定組成溶離による液体クロマトグラフィー――エレクトロスプレー陽イオン多重反応モニタリングモードでのタンデム質量分析法――を用いたものである。
【０２０６】
本発明の範囲及び精神から逸脱することのない、ここに記載した本発明の態様の様々な修正及び変更は、当該分野の熟練者には自明なことであろう。本発明を特定の好ましい実施形態に関して記載したが、請求項に記載の本発明が、そのような特定の実施形態に不当に限定されるべきではないことは、理解されてしかるべきであろう。特に、関連分野の熟練者にとっては自明なことである、ここに記載した本発明の実施形態の様々な修正は、添付した請求の範囲の範囲内であると解釈される。
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【０２０７】
【表１】
2007509117.tif 000013
2007509117.tif 000014
2007509117.tif 000015
2007509117.tif 000016
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2007509117.tif 000025
2007509117.tif 000026
2007509117.tif 000027
2007509117.tif 000028
【０２０８】
【表２】
2007509117.tif 000029
2007509117.tif 000030
2007509117.tif 000031
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2007509117.tif 000037
【０２０９】
【表３】
2007509117.tif 000038
【０２１０】
【表４】
2007509117.tif 000039
【０２１１】
【表５】
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【０２１２】
【表６】
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【０２１３】
【表７】
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【０２１４】
【表８】
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【０２１５】
【表９】
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【０２１６】
【表１０】
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【０２１７】
【表１１】
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【０２１８】
【表１２】
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【図面の簡単な説明】
【０２１９】
【図１】図１は、結晶中の化合物２の分子構造を示す。楕円体は５０％の確立で表面を囲んでおり、Ｈ原子は任意の半径の円として描かれている。ＳＨＥＬＸＴＬで図面を作成した。
【図２】図１は、化合物２の結晶構造におけるＨ結合の形成を示す。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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