(57)【要約】  空気媒介病原体からの感染に対する個体及び／又は集団の保護のための予防的処置法を提供する。詳細には、自然発生源による又は環境への病原体の故意的放出により、１種又は複数の空気媒介病原体に対する曝露の危険にある又は既に曝露されてしまった集団の１又は複数のメンバーに、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミル又は薬学上許容されるそれらの塩を投与することを含む予防的処置法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
１種若しくは複数の空気媒介病原体からの感染又は疾病に対する予防的処置を必要とする個体に対して、予防有効量のアミロライド、ベンザミル、フェナミル又は薬学上許容されるそれらの塩を投与することを含む予防的処置法。
【請求項２】
前記病原体が炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）である、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項３】
前記病原体が大痘瘡（Ｖａｒｉｏｌａ  Ｍａｊｏｒ）である、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項４】
前記病原体がペスト菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ）である、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項５】
前記病原体が野兎病菌（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ）である、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項６】
前記病原体がグラム陰性細菌である、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項７】
前記グラム陰性細菌が、ブルセラ（Ｂｒｕｃｅｌｌａ）属、類鼻疽菌（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ）、バークホルデリア・マレイ（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｍａｌｌｅｉ）、コクシエラ・バーネッティ（Ｃｏｘｉｅｌｌａ  ｂｕｒｎｅｔｔｉ）及びリケッチア（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ）からなる群から選択される、請求項６に記載の予防的処置法。
【請求項８】
前記病原体が、アルファウイルス、フラビウイルス又はブニヤウイルスである、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項９】
前記病原体が、ヒマ（Ｒｉｃｉｎｕｓ  ｃｏｍｍｕｎｉｓ）からのリシン毒素、ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）のイプシロン毒素又はブドウ球菌エンテロトキシンＢである、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項１０】
前記病原体が結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）細菌である、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項１１】
前記病原体が、インフルエンザウイルス、ライノウイルス、アデノウイルス又は呼吸器合胞体ウイルスである、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項１２】
前記病原体がコロナウイルスである、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項１３】
前記のアミロライド、ベンザミル、フェナミル又は薬学上許容されるそれらの塩が、個体が吸入する、呼吸に適した粒子のエアロゾル懸濁液で投与される、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項１４】
ヒトの疾病を惹起できる空気媒介病原体からの感染の危険を低減するための予防的処置法であって、空気媒介病原体からの感染の危険の可能性はあるがその疾病に関して無症候であるヒトの肺に対して、有効量のアミロライド、ベンザミル及びフェナミル又は薬学上許容されるそれらの塩を投与することを含み、アミロライド、ベンザミル及びフェナミル又は薬学上許容されるそれらの塩の有効量が、ヒトにおける感染の危険を低減するのに十分である予防的処置法。
【請求項１５】
前記空気媒介病原体が炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）であり、疾病は炭疽病である、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項１６】
前記空気媒介病原体が大痘瘡（Ｖａｒｉｏｌａ  Ｍａｊｏｒ）であり、疾病が天然痘である、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項１７】
前記空気媒介病原体がペスト菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ）であり、疾病がペストである、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項１８】
前記空気媒介病原体がグラム陰性細菌である、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項１９】
前記グラム陰性細菌が、ブルセラ（Ｂｒｕｃｅｌｌａ）属、類鼻疽菌（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ）、バークホルデリア・マレイ（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｍａｌｌｅｉ）、及びコクシエラ・バーネッティ（Ｃｏｘｉｅｌｌａ  ｂｕｒｎｅｔｔｉ）からなる群から選択される、請求項１８に記載の予防的処置法。
【請求項２０】
前記空気媒介病原体が、アルファウイルス、フラビウイルス又はブニヤウイルスである、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項２１】
前記空気媒介病原体が、ヒマ（Ｒｉｃｉｎｕｓ  ｃｏｍｍｕｎｉｓ）からのリシン毒素、ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）のイプシロン毒素又はブドウ球菌エンテロトキシンＢである、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項２２】
前記空気媒介病原体が結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）細菌である、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項２３】
前記空気媒介病原体が、インフルエンザウイルス、ライノウイルス、アデノウイルス又は呼吸器合胞体ウイルスである、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項２４】
前記空気媒介病原体がコロナウイルスであり、疾病が重症急性呼吸器症候群である、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項２５】
前記のアミロライド、ベンザミル、フェナミル又は薬学上許容されるそれらの塩が、ヒトが吸入する、呼吸に適した粒子のエアロゾル懸濁液で投与される、請求項１４に記載の予防的処置法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００３年８月２０日出願の米国特許仮出願第６０／４９６，５１７号の特典を要求するものであり、そのそれぞれをそのすべてにおいて参照により本明細書に組み込む。
【０００２】
本発明は、病原体、特に生物テロで使用される可能性のある病原体によって引き起こされる疾病又は状態に対する予防（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）的、曝露後予防的、若しくは防止的（ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ）処置のためのアミロライド、ベンザミル又はフェナミルなどのピラジノイルグアニジン類の使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
近年、テロリズム行為における生物剤の使用に関する懸念に対処するために、種々の研究計画及び生体防御手段が検討されている。これらの手段は、バイオテロリズムに関する懸念、又は人を殺害し、恐怖を広げ、社会を混乱させるための微生物又は生物毒素の使用に備えることを目的としている。例えば、米国立アレルギー感染症研究所（ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ａｌｌｅｒｇｙ  ａｎｄ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ）（ＮＩＡＩＤ）は、バイオテロリズム並びに新興及び再興感染疾患の広範な領域における研究の必要性に取り組むための計画を概説した「生体防御研究のための戦略計画（Ｓｔｒａｔｅｇｉｃ  Ｐｌａｎ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｄｅｆｅｎｃｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）」を明らかにしている。この計画書によれば、合衆国の民間住民が炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）の胞子に意図的に曝露されたことによって、バイオテロリズムに対する国家の総合的な備えの欠陥が明らかになった。さらに、報告書は、これらの攻撃が、迅速に診断するための試験、予防するためのワクチン及び免疫療法、並びにバイオテロリズムの作用物質で惹起される疾病を治療するための薬剤及び生物製剤の不足を明らかにしたと詳述している。
【０００４】
各種研究活動の焦点の多くは、バイオテロリズムの作用物質と同様に潜在的に危険であることが確認されている病原体の生物学の研究、このような作用物質に対する宿主応答の研究、感染症に対するワクチン開発、このような作用物質に対する現在利用可能な及び研究中の治療剤の評価、並びに脅威を与える作用物質の兆候及び症状を同定するための診断方法の開発を対象としてきた。このような努力は賞賛に値するが、バイオテロリズムに潜在的に利用可能であることが確認されている多数の病原体を考えると、これらの努力は、未だ、すべての起こりうるバイオテロリズムの脅威に対して満足できる対応を提供できるものではない。さらに、バイオテロリズムの作用物質として潜在的に危険であることが確認されている病原体の多くは、産業が治療的又は予防的手段を開発するための適切な経済的動機を提供しない。さらに、バイオテロリズムで使用される可能性のあるそれぞれの病原体に対してワクチンなどの予防手段を利用できるとしても、このようなすべてのワクチンを集団全体に投与する費用は莫大である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
便利で効果的な処置法が、あらゆるバイオテロリズムの脅威に対して利用可能になるまで、病原性作用物質からの感染の危険を防止又は低減することのできる防止的又は予防的処置法が強く求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、このような予防的処置法を提供する。本発明の一態様において、１種若しくは複数の空気媒介病原体からの感染に対する予防的処置を必要とする個体に対して、予防有効量のアミロライド、ベンザミル、フェナミル又は薬学上許容されるそれらの塩を投与することを含む予防的処置法を提供する。
【０００７】
もう１つの態様において、ヒトに疾病を惹起させることのできる空気媒介病原体からの感染の危険を低減するための予防的処置法が提供され、該方法は、空気媒介病原体からの感染の危険の可能性はあるがその疾病について無症状であるヒトの肺に、有効量のアミロライド、ベンザミル、フェナミル又は薬学上許容されるそれらの塩を投与することを含み、その有効量のアミロライド、ベンザミル、フェナミル又は薬学上許容できる塩は、ヒトにおける感染の危険を軽減するに十分である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明の予防的処置法は、集団のある部分が、１種又は複数の空気感染性病原体に曝されてしまったか、又はそのように思われる状況において使用できる。この予防的処置法は、さらに、空気感染性病原体への曝露又は空気感染性病原体からの感染の危険が継続している状況においても使用できる。このような状況は、天然の病原体によって起こる可能性もあるし、或いは集団のある部分が１種又は複数の病原体に故意に曝露されるバイオテロリズム事件によって起こる可能性もある。本明細書に開示する方法により、感染の危険性のあると思われる集団の個体又は部分を処置することができる。このような処置は、好ましくは、病原体への切迫した曝露が予想されるか起こり得る場合には曝露に先立って、或いは実際の若しくはその疑いのある曝露の後に、できるだけ最も早期に開始する。典型的には、この予防的処置法は、ヒトがその危険性のあると思われる疾病に関して無症状のヒトに使用できる。用語「無症状の」は、本明細書中で使用する場合、医学的に認識されるその疾病の症状を示さないこと、空気媒介病原体への曝露による感染若しくは疾病にまだ罹患していないこと、又は疾患に対して陽性の結果が出ていないことを意味する。
【０００９】
ＮＩＡＩＤが確認している病原性作用物質の多くは、それらの物質が口又は鼻を通って身体に入り、身体気道及び肺内に移動できるように、エアロゾル化されることが可能であったか、可能性がある。身体のこれら領域は、身体に入って来る外来作用物質を防御するのにある程度自然的に役立つ粘膜表面を有する。環境と身体の界面にある粘膜表面は、幾つかの「自然防御」すなわち保護機構を進化させてきた。このような自然防御の主な形態は、これらの表面を液体で清潔にすることである。一般に、粘膜表面上の液体層の量は、水（及びカチオン性対イオン）と結合したアニオン（Ｃｌ−及び／又はＨＣＯ３−）の分泌を反映することの多い、上皮の液体分泌と、水及び対アニオン（Ｃｌ−及び／又はＨＣＯ３−）と結合したＮａ＋吸収を反映することの多い上皮の液体吸収との間のバランスを反映する。
【００１０】
Ｒ．Ｃ．Ｂｏｕｃｈｅｒは、米国特許第６，２６４，９７５号に、ナトリウムチャネル遮断薬ピラジノイルグアニジンを投与することによって粘膜表面、特に鼻の気道表面を水和する方法を記載している。アミロライド、ベンザミル及びフェナミルで代表されるこれらの化合物は、粘膜表面を水和するのに有効である。米国特許第５，６５６，２５６号は、例えば嚢胞性線維症及び慢性気管支炎などの疾病を治療するために、ベンザミル又はフェナミルの投与によって肺の粘液分泌物を水和する方法を記載している。米国特許第５，７２５，８４２号は、アミロライドの投与によって肺から滞留粘液分泌物を除去する方法を対象にしている。
【００１１】
アミロライド、ベンザミル、及びフェナミルは、居住地域の環境、典型的には空気中に故意に持ち込むことが可能な、又は可能でない病原体からの感染の危険からヒトを全部又は部分的に保護するための予防的処置法において使用できることが今回わかった。このような処置は、曝露された可能性がある者を、ワクチンが利用できないか、或いは曝露された集団に準備されていない場合、及び／又は集団が遭遇した病原体から起こる感染に対する処置が不十分であるかまったく利用できない状況において有効に使用できる。
【００１２】
ある理論に拘束されるものではないが、アミロライド、ベンザミル及び／又はフェナミルは、驚くべきことに、実質的に正常又は健康な肺組織に対して使用して、空気媒介病原体の取込みを防止又は低減し、且つ／又はこのような病原体の全部又は少なくとも一部を肺から取り除くことができると考えられる。好ましくは、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルは、空気媒介病原体のウイルス又は細菌の取り込みを防止又は低減する。アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルが粘膜表面を水和する能力は、ヒトが遭遇した空気媒介病原体を含有する粘液を含む肺粘液分泌物を急速に水和し、次いで、身体からの肺粘液分泌物の除去を容易にするように機能すると考えられる。身体から肺粘液分泌物を除去するように機能することによって、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルは、身体の気道を通って体内に吸入又は運ばれた病原体からの感染の危険を防止、又は少なくとも低減する。
【００１３】
本発明は、第一に、ヒト対象の予防的、曝露後、救済的及び治療的処置に関するが、イヌ及びネコなどのその他哺乳動物対象の獣医学的目的のため、且つ哺乳動物が空気感染性病原体からの感染又は疾患の危険性のある範囲での処置に対して使用することもできる。
【００１４】
用語「気道」は、本明細書で使用する場合、喉頭より下流及び肺の中を含む口又は鼻から接近可能な気道など、呼吸器系のすべての気道、並びに喉頭の上部領域の洞を含む頭部内の空気通路を指す。
【００１５】
用語「病原体」及び「病原性作用物質」は、相互交換可能であり、本明細書で使用する場合、疾病を引き起こすことのできる任意の作用物質、又は疾病を引き起こす病原体によって産生される毒性物質を意味する。典型的には、病原性作用物質は、疾病を引き起こすことのできる生きた微生物である。例を挙げれば、病原体は、疾病を引き起こすことのできる、細菌、原生動物又はウイルスなどの任意の微生物でよい。
【００１６】
用語「空気媒介病原体」は、空気中を伝播できる能力のある任意の病原体を意味し、担体物質を利用して空気中を伝わる病原体、及び人工的にエアロゾル化された或いは空気中に自然に現われる病原体が含まれる。
【００１７】
用語「予防」は、本明細書で使用する場合、感染の防止、感染の遅延、感染の抑制、及び／又は病原体に対する曝露前及び曝露後を含む病原体からの感染リスクの低減を意味する。予防効果には、とりわけ、病原体が体内に侵入する能力を低下させることを含めることができ、又は病原体が感染又は疾病を開始又は引き起こすに先立って、体内の気道及び気道表面に到達する病原体の全部又は一部を身体から除去することを含めることができる。病原体を全部又は部分的に除去できる気道には、肺の気道表面を含む粘膜表面を有するすべての体内気道及び気道表面が含まれる。
【００１８】
本発明において有用である化合物としては、参照によりそのすべてを本明細書に組み込む、Ｅ．Ｃｒａｇｏｅに対する米国特許第３，３１３，８１３号に記載されているようなピラジノイルグアニジン類、特にアミロライド、ベンザミル及びフェナミルを挙げることができる。アミノライドとは、３，５−ジアミノ−Ｎ−（アミノイミノメチル）−６−クロロピラジンカルボキサミドである。ベンザミルとは、３，５−ジアミノ−６−クロロ−Ｎ−（ベンジルアミノアミノメチレン）ピラジンカルボキサミドであり、フェナミルは３，５−ジアミノ−６−クロロ−Ｎ−（フェニルアミノアミノメチレン）ピラジンカルボキサミドである。これら各化合物は、米国特許第３，３１３，８１３号に開示されている。アミロライド、ベンザミル及びフェナミルは、当業者に周知の方法と組み合わせて、米国特許第３，３１３，８１３号に記載の方法によって調製できる。
【００１９】
用語、「アミロライド」、「ベンザミル」、及び「フェナミル」には、本明細書で使用する場合、薬学上許容されるその塩が含まれる。薬学上許容される塩は、所望される親化合物の生物学的活性を保持し、望ましくない毒性効果を与えない塩である。このような塩の例は、（ａ）無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸などを用いて形成される酸付加塩、及び例えば、酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、グルコン酸、クエン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パルミチン酸、アルギン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンスルホン酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、ポリガラクツロン酸、などの有機酸を用いて形成される塩、並びに（ｂ）元素、例えば、塩素、臭素、及びヨウ素のアニオンから形成される塩である。
【００２０】
本発明の組成物を調製するのに使用するアミロライド、ベンザミル又はフェナミルは、代わりに、アミロライド、ベンザミル又はフェナミルの薬学上許容される遊離塩基の形態であってもよい。該化合物の遊離塩基はその塩よりも溶解性が低いので、遊離塩基組成物は、肺に対してより徐放性である化合物を提供するために使用される。溶液に移行しない粒子状形態で肺中に存在するアミノライド、ベンザミル又はフェナミルは、生理学的応答を誘導するのには利用できないが、徐々に溶液に移行する生物学的に利用可能な薬剤のデポー剤として役立つ。
【００２１】
本明細書に開示する活性化合物は、任意の適切な手段によって患者の肺に投与できるが、好ましくは、対象が吸収する活性化合物を含む、呼吸に適した粒子のエアロゾル懸濁液を投与することによって投与される。化合物は、口又は鼻を通って吸入できる。活性化合物は、限定はしないが、乾燥粉末吸入剤、定量投与吸入剤又は液／液懸濁液など、各種の形態でエアロゾル化できる。吸入に適した粒子は、液体でも固体でもよい。アミロライド、ベンザミル又はフェナミルの含有量は、対象の気道表面におけるアミロライド、ベンザミル又はフェナミルの溶存濃度として約１０−７〜約１０−３モル／リットル、より好ましくは約１０−６〜約１０−４モル／リットルを達成するに十分な量であればよい。
【００２２】
本発明の１つの態様において、粒子状のアミロライド、ベンザミル又はフェナミル組成物には、肺粘液分泌物に溶解するために、アミロライド、ベンザミル又はフェナミルの早期放出及び持続放出の双方を提供するために、アミロライド、フェナミル又はベンザミルの遊離塩基、及びアミロライド塩酸塩、ベンザミル塩酸塩又はフェナミル塩酸塩などの薬学上許容される塩の双方を含めることができる。このような組成物は、患者に対して、早期の緩解及び長期に渡る持続的緩解の双方を提供するのに役立つ。持続的緩解は、必要な毎日の投与回数を減らすことによって、アミノライド、ベンザミル又はフェナミル治療の方針に対する患者のコンプライアンスを高めると期待される。
【００２３】
本発明実施のために調製される固体又は液体の粒子状アミロライド、ベンザミル、又はフェナミルは、吸入に適した大きさの粒子、すなわち、吸入に際し、口及び喉頭から気管支及び肺胞に通り抜けるように大きさが十分に小さな粒子を含むべきである。一般に、大きさが約１〜５ミクロンの範囲（特に、約４．７ミクロン未満の大きさ）の粒子が吸入に適している。エアロゾル中に含まれる吸入に適さない粒子は、喉に沈着し嚥下される傾向があり、エアロゾル中の吸入に適さない粒子の量を最小にするのが好ましい。経鼻投与の場合、鼻腔での滞留を確実にするため、１０〜５００μｍの範囲の粒子径が好ましい。経鼻投与は、病原体が、一般に鼻を通って進入する場合に有用である可能性がある。しかし、病原体が肺に達することが予想される場合には、効果的な予防的処置を確実にするために、少なくとも一部のアミロライド、ベンザミル、又はフェナミルを、肺に到達する剤形で投与するのが好ましい。
【００２４】
活性化合物の投与量は、所望される予防効果及び対象の状態に応じて変動するが、一般に、約１０−７〜約１０−３モル／リットル、より好ましくは約１０−６〜約１０−４モル／リットルの、対象の気道表面における活性化合物の溶存濃度を達成するに十分な量でよい。投与される活性化合物の特定の製剤の溶解度に応じて、１日の投与量を１つ又は幾つかの単位投与量の投与に分割できる。呼吸に適したアミロライド、ベンザミル又はフェナミル粒子の１日当たり投与量は、ヒト対象に対して約１〜約２０ｍｇであり、対象の年齢及び状態に応じて、好ましくは約１〜約１０ｍｇである。呼吸に適したアミロライド、ベンザミル又はフェナミル粒子の一般に好ましい単位投与量は、１日当たり４回投与の計画とすれば、約２ｍｇである。投与量は、任意の適切な手段（例えば、ゼラチンカプセル中にカプセル化）によって前以て包装された単位として提供できる。
【００２５】
気道投与に適した医薬製剤には、液剤、乳剤、懸濁剤及びエキスの製剤が含まれる。概括的には、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ編、「Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ」８６章（第１９版、１９９５年）中のＪ．Ｎａｉｍによる「Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ，Ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｅｘｔｒａｃｔｓ」を参照のこと。経鼻投与に適した医薬製剤は、Ｓｃｈｏｒに対する米国特許第４，３８９，３９３号、Ｉｌｌｕｍに対する同第５，７０７，６４４号、Ｓｕｚｕｋｉに対する同第４，２９４，８２９号、及びＳｕｚｕｋｉに対する同第４，８３５，１４２号に記載されていると同様に調製できる。
【００２６】
本発明による製剤の製造において、有効薬剤、又は生理学的に許容されるそれらの塩若しくは遊離塩基は、一般に、特に、許容される担体と混合される。もちろん、担体は、製剤中の任意のその他成分と化学反応を起こさないと言う意味で許容されなければならず、且つ、患者に対して有害であってはならない。担体は、固体又は液体、或いは両方でよく、好ましくは、化合物と共に単位投与製剤、例えば、０．５重量％〜９９重量％の活性化合物を含むことのできるカプセルとして製剤される。本発明の製剤には、１種又は複数の活性化合物を組み込むことが可能であり、その製剤は、本質的には化合物を混合することからなる任意の周知製薬技術によって調製できる。
【００２７】
活性化合物を含む液体粒子のエアロゾル又はミストは、任意の適切な手段によって、例えば、経鼻投与の場合には、滅菌生理食塩水又は滅菌水などの薬学上許容される水性担体中の活性化合物を用いる簡単な鼻内噴霧によって作ることができる。その他の手段としては、圧力駆動ネブライザー又は超音波ネブライザーを用いてエアロゾルを作ることが挙げられる。例えば、米国特許第４，５０１，７２９号を参照されたい。ネブライザーは商業的に入手できる装置であって、狭いベンチュリーオリフィスを通る圧縮ガス、典型的には空気又は酸素の加速によって、或いは超音波撹拌によって、有効成分の溶液又は懸濁液を治療用エアロゾルミストに変換する。ネブライザーで使用するのに適した製剤は、液体担体中に有効成分を含み、有効成分は、製剤の４０％ｗ／ｗまで、好ましくは２０％ｗ／ｗまで含まれる。担体は、典型的には、たとえば塩化ナトリウムを添加して好ましくは体液と等張性にした、水（最も好ましくは、滅菌された、パイロジェンを含まない水）又は希薄アルコール水である。
【００２８】
活性化合物を含む固体粒子のエアロゾル又はミストは、任意の固体粒子状薬剤エアロゾル発生器を用いて同様に生成させることができる。対象に対して固体粒子状薬剤を投与するためのエアロゾル発生器は、上で説明したような吸入に適した粒子を生成し、事前に決めた定量投与量の薬剤を含むある容積のエアロゾルを、ヒトへの投与に適した速度で発生する。このようなエアロゾル発生器は、当技術分野で周知である。例については、米国特許第５，７２５，８４２号を参照されたい。
【００２９】
固体粒子状エアロゾル発生器の１つの実例となる型は、インサフレーター（ｉｎｓｕｆｆｌａｔｏｒ）である。吹込みによって投与するのに適した製剤としては、インサフレーターを用いて送達できる、又は鼻から息を吸う方法で鼻腔内に取り入れることのできる微粉砕した粉末が挙げられる。インサフレーターでは、粉末（例えば、本明細書に記載の処置を実施するのに十分なその定量投与量）を、典型的にはゼラチン又はプラスチック製のカプセル又はカートリッジに入れ、その場でそれらに穴をあけるか、開口し、吸入の際に装置を通って吸い出される空気によって、又は手動ポンプを使用して粉末を送達する。インサフレーターで採用される粉末は、有効成分の単独から、又は、有効成分、乳糖などの適切な粉末希釈剤、及び任意選択の界面活性剤を含む粉末ブレンドから構成される。有効成分は、典型的には、その製剤の０．１〜１００ｗ／ｗを構成する。
【００３０】
例示するエアロゾル発生器の第二の型は、定量投与吸入器を含む。定量投与吸入器は、典型的には、有効成分を液化噴射剤に懸濁又は溶解した製剤を含む、加圧エアロゾル分注器である。使用中、これらの装置は、定容積、典型的には１０〜１５０μｌを送達するように構成されたバルブを通して製剤を放出し、有効成分を含む微細粒子の霧を生成する。本発明を実施するに際しては、クロロフルオロカーボン含有噴射剤及びクロロフルオロカーボン非含有噴射剤の両方を含む、任意の噴射剤を使用できる。適切な噴射剤としては、ある種のクロロフルオロカーボン、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン及びそれらの混合物が挙げられる。
【００３１】
製剤には、さらに、例えばエタノールなどの１種又は複数の共溶媒、オレイン酸又はトリオレイン酸ソルビタンなどの界面活性剤、酸化防止剤、ヒドロキシ安息香酸メチルなどの防腐剤、揮発性オイル、緩衝剤及び適切な着香剤を含めることができる。
【００３２】
ミクロ化したアミロライド、ベンザミル又はフェナミルの呼吸に適した乾燥粒子を含む組成物は、乾燥アミロライド、フェナミル又はベンザミルを乳鉢及び乳棒で粉砕し、次いで、そのミクロ化された組成物を４００メッシュの網を通して大きな集塊物を壊し、又は分離することによって調製できる。活性化合物は、単独で（すなわち、固体粒子状組成物は本質的に活性化合物からなってよい）、或いは糖類（すなわち、乳糖、蔗糖、トレハロース、マニトール）などの分散剤、希釈剤若しくは担体、又は、任意の適切な比率（例えば重量で１対１）で活性化合物と混合できる肺若しくは気道送達のためのその他許容される補助剤と組み合わせて製剤できる。乾燥粉末の固体粒子状化合物は、噴霧乾燥、粉砕、凍結乾燥などの当技術分野で周知の方法によって得ることができる。
【００３３】
エアロゾル又はミストは、固体又は液体粒子のいずれから形成されるにせよ、エアロゾル発生器によって毎分約１０〜約１５０リットル、より好ましくは毎分約３０〜約１５０リットル、最も好ましくは毎分約６０リットルの速度で作られる。より大量の薬剤を含むエアロゾルは、より迅速に投与できる。
【００３４】
その他の薬剤は、該薬剤が製剤中の活性化合物及びその他の成分と反応せず、本明細書に記載するように投与できる場合、開示された活性化合物と共に投与できる。
【００３５】
本発明の曝露後予防、救出及び治療的処置法によって防止できる病原体には、口、鼻又は鼻気道を通って身体に入り、それによって肺に進入できる任意の病原体が含まれる。典型的には、病原体は、自然に現われる又はエアロゾル化による空気媒介病原体である。病原体は、自然に現われる可能性もあり、或いは、病原体を環境中に持ち込むエアロゾル化又はその他の方法の後に、環境中に故意に持ち込まれる可能性もある。空気中で自然には伝播しない多くの病原体は、バイオテロリズムで使用するためにエアロゾル化され、或いはされる可能性がある。
【００３６】
本発明の処置が有用である可能性のある病原体には、それに限定されないが、ＮＩＡＩＤが示したカテゴリーＡ、Ｂ及びＣの重要病原体が含まれる。これらのカテゴリーは、一般に、米国疾病管理予防センター（ＣＤＣ）が編集したリストに対応している。ＣＤＣが設定したように、カテゴリーＡの作用物質は、容易に散布可能であるか、或いはヒトからヒトに容易に伝播可能であり、多くの公衆の健康に対して潜在的影響を有する高い死亡率を引き起こすものである。カテゴリーＢの作用物質は、すぐ次の重要度であり、中程度の容易さで散布され、罹患率が中程度であり、死亡率の低いものが含まれる。カテゴリーＣは、それらの有用性、製造及び散布の容易さ及び高い罹患率及び死亡率が得られる可能性のために、将来、大量散布用に遺伝子工学で作られる可能性のある新興病原体からなる。
カテゴリーＡ：
炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）（炭疽病）、
ボツリヌス菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）（ボツリヌス中毒）、
ペスト菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ）（ペスト）、
大痘瘡（Ｖａｒｉｏｌａ  ｍａｊｏｒ）（天然痘）及びその他の痘瘡ウイルス、
野兎病菌（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ）（野兎病）、
ウイルス性出血熱、
アレナウイルス、
ＬＣＭ（リンパ球性脈絡髄膜炎）、フニンウイルス、ジウニンウイルス、
マチュポウイルス、グアナライトウイルス（Ｇｕａｎａｒｉｔｅ  ｖｉｒｕｓ）、
ラッサ熱、
ブニヤウイルス、
ハンタウイルス、
リフトヴァレー熱、
フラビウイルス、
デング、
フィロウイルス、
エボラ、
マールブルグ、
カテゴリーＢ：
類鼻疽菌（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ）（類鼻疽）、
コクシエラ・バーネッティ（Ｃｏｘｉｅｌｌａ  ｂｕｒｎｅｔｔｉ）（Ｑ熱）、
ブルセラ属（Ｂｒｕｃｅｌｌａ  ｓｐｅｃｉｅｓ）（ブルセラ病）
バークホルデリア・マレイ（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｍａｌｌｅｉ）（鼻疽）、
ヒマ（Ｒｉｃｉｎｕｓ  ｃｏｍｍｕｎｉｓ）からのリシン毒素、
ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）のイプシロン毒素、
ブドウ球菌エンテロトキシンＢ、
発疹チフス（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ  ｐｒｏｗａｚｅｋｉｉ）、
食物及び水系媒介病原体、
細菌：
下痢性大腸菌
病原性ビブリオ菌
シゲラ属
サルモネラ属
リステリア・モノシトゲネス
ウイルス：
カリシウイルス、
Ａ型肝炎
原生動物：
クリプトスポリジウム・パルバム（Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ  ｐａｒｖｕｍ）、
シクロスポラ・カヤテネンシス（Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒａ  ｃａｙａｔｅｎｅｎｓｉｓ）、
ジアルジア・ラムブリア（Ｇｏａｒｄｉａ  ｌａｍｂｌｉａ）、
赤痢アメーバ（Ｅｎｔａｍｏｅｂａ  ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ）、
トキソプラスマ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ）、
ミクロスポリディア（Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｉｄｉａ）、及び
さらなるウイルス性脳炎：
西ナイル熱、
ラクロス、
カリフォルニア脳炎、
ベネズエラウマ脳炎、
東部ウマ脳炎、
西部ウマ脳炎、
日本脳炎ウイルス、及び
キャサヌール森林ウイルス、
【００３７】
カテゴリーＣ：
ニパウイルス及びさらなるハンタウイルスなどの新興感染性疾病の脅威、クリミア−コンゴ出血熱ウイルスなどのダニ媒介出血熱ウイルス、ダニ媒介脳炎ウイルス、黄熱病、多剤耐性結核、インフルエンザ、その他リケッチア及び狂犬病。
【００３８】
防護できる、又はそれからの感染リスクが低減されるさらなる病原体には、インフルエンザウイルス、ライノウイルス、アデノウイルス及び呼吸器合胞体ウイルスなどが含まれる。防護できるさらなる病原体は、重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）を引き起こすと考えられるコロナウイルスである。
【００３９】
上に挙げた病原体の幾つかは、空気によって体内に取り込まれた場合に特に有害であることが知られている。例えば、炭疽病を引き起こす作用物質である炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）は、３つの主要臨床形態、皮膚、吸入及び胃腸の形態を有する。３つの形態のすべてが、死に至る可能性を有するが、皮膚及び胃腸炭疽病の早期抗生物質治療により通常これらの形態の炭疽病は治癒する。一方、吸入炭疽病は、抗生物質治療を用いてさえ潜在的に致命的な疾病である。初期症状は通常の風邪に似ている。数日後、症状は、重度の呼吸問題及びショックにまで進行する。自然に現われる又は偶発的感染の場合、適切な抗生物質及びその他すべての利用可能な支持ケアを用いてさえ、歴史上の死亡率は、ＮＩＡＩＤによれば約７５％であると考えられる。吸入炭疽病は、胞子が肺胞空間内に沈着し続いて肺胞マクロファージによって摂取された後に発現する。生き残った胞子は、次いで、縦隔リンパ節に輸送され、そこで６０日又はそれ以上発芽できる。発芽後、複製細菌は、疾病を引き起こす毒素を放出する。胞子は、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルの作用で水和された肺粘液分泌物を除去することによって身体から完全に又は部分的に排除されるので、これらの過程は、予防有効量のアミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルの投与によって妨害される。
【００４０】
ヒトからヒトへ容易に伝播し、効果的な治療法が存在せず、ほとんどの人々がそのウイルスに対する完全な免疫を持たないが故に、もっとも危険な潜在的生物兵器の１つとして懸念される主なもう１つの病原体は、天然痘ウイルス、大痘瘡（Ｖａｒｉｏｌａ  ｍａｊａｒ）である。天然痘は、主として、感染者から排出されるエアロゾル化された唾液飛沫によってヒトからヒトへ直接的に拡がる。初期症状としては、高熱、疲労、頭痛及び腰痛が挙げられ、２、３日間特徴的な発疹が続く。
【００４１】
本発明の１つの実施形態は、予防有効量のアミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することを含む、天然痘又はその他の痘瘡ウイルスに曝露された又は曝露された可能性のある１又は複数の個体を予防的に処置する方法を提供する。有効量のアミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することは、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルの作用で水和された水和化肺粘液分泌物を除去することによって、個体が曝露されたエアロゾル化唾液飛沫中に存在する大痘瘡ウイルス又はその他の痘瘡ウイルスが身体から完全に又は部分的に排除されることを可能にするように機能する。
【００４２】
細菌ペスト菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ）は、ペストを引き起こし、世界中で広く入手できる。ＮＩＡＩＤは、有毒なエアロゾル化ペスト細菌の少量の吸入による感染でさえ肺ペストに至る可能性があり、その死亡率は、未処置で放置すればほぼ１００％であることを報告している。肺ペストは、他の呼吸器病と類似した熱及び咳の初期症状を有する。抗生物質は、ペストに対して有効であるが、抗生物質での成功は、薬物療法開始の迅速性、吸入した細菌の吸入量、及び患者に対する支持ケアの程度によって左右され、有効なワクチンは、広範には利用できない。
【００４３】
本発明の１つの実施形態は、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することを含む、エアロゾル化されたペスト細菌に曝露された又は曝露された可能性のある１又は複数の個体を予防的に処置する方法を提供する。有効量のアミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与すると、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルの作用で水和された水和化肺粘液分泌物を除去することによって、エアロゾル化されたペスト細菌が身体から完全に又は部分的に排除されることを可能にするように機能する。
【００４４】
ボツリヌス毒素は、環境に放出するのが容易なので、重大なバイオテロリズムの脅威を与えると考えられるもう１つの物質である。抗生物質は、ボツリヌス毒素に対して有効ではなく、認められたワクチンは存在しない。毒素は、食物を介して伝播されるが、ボツリヌス毒素は、粘膜表面を通過して吸収され、従って、本発明の１つの実施形態は、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することを含む、ボツリヌス毒素に曝露された又は曝露された可能性のある１又は複数の個体を予防的に処置する方法を提供する。
【００４５】
ＮＩＡＩＤは、野兎病菌（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ）が１０程度の少ない器官で感染を起こす能力があり、且つそのエアロゾル化される性質ゆえに、野兎病を引き起こす細菌を潜在的なバイオテロリズム作用物質として確認している。自然感染は、空気媒介粒子の吸入後に発生する。野兎病は、抗生物質で処置可能であり、実験的なワクチンは存在するが、この疾病に関して研究している研究者は極めて少数なので野兎病に対する最適治療方法に関する知識は限られている。本発明の一実施形態は、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することを含む、エアロゾル化された野兎病菌に曝露された又は曝露された可能性のある１又は複数の個体を予防的に処置する方法を提供する。有効量のアミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することは、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルの作用で水和された水和化肺粘液分泌物を除去することによって、エアロゾル化された野兎病菌が身体から完全に又は部分的に排除されることを可能にするように機能する。
【００４６】
最も広範にはエアロゾル経路で感染する可能性を有すると考えられるカテゴリーＢ及びＣの細菌には、ブルセラ（Ｂｒｕｃｅｌｌａ）属、類鼻疽菌（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ）、バークホルデリア・マレイ（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｍａｌｌｅｉ）、コクシエラ・バーネッティ（Ｃｏｘｉｅｌｌａ  ｂｕｒｎｅｔｉｉ）などのグラム陰性細菌、及び一部のリッケチア（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ）属が含まれる。これらの作用物質のそれぞれは、少数の微生物の吸入に続き、感染を引き起こす能力があると考えられる。ブルセラ（Ｂｒｕｃｅｌｌａ）属は、ブルセラ病を引き起こすことができる。６つのブルセラ属中の４つ、ブタ流産菌（Ｂ．ｓｕｉｓ）、ヤギ流産菌（Ｂ．ｍｅｌｉｔｅｎｓｉｓ）、ウシ流産菌（Ｂ．ａｂｏｒｔｕｓ）及びイヌ流産菌（Ｂ．ｃａｎｉｓ）は、ヒトにブルセラ病を引き起こすことが知られている。類鼻疽菌（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ）は、ヒト及びその他の哺乳動物並びに鳥類に類鼻疽を引き起こす可能性があり、バークホルデリア・マレイ（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｍａｌｌｅｉ）は、通常はウマ、ラバ及びロバの疾病である鼻疽を引き起こす微生物であるが、ＮＩＡＩＤによればエアロゾル曝露に続く感染が報告されている。コクシエラ・バーネッティ（Ｃｏｘｉｅｌｌａ  ｂｕｒｎｅｔｔｉ）は、Ｑ熱を引き起こすことができ、高度に感染性である。エアロゾル化された細菌による感染が報告されており、ほんの少数だけの微生物の吸収で感染が起こり得る。発疹チフスリケッチア（Ｒ．ｐｒｏｗａｚｅｋｉｉ）、ロッキー山紅斑熱リケッチア（Ｒ．ｒｉｃｋｅｔｔｓｉｉ）、地中海紅斑熱リケッチア（Ｒ．ｃｏｎｏｒｒｉｉ）及び発疹熱リケッチア（Ｒ．ｔｙｐｈｉ）は、エアロゾル経路での低投与量伝染性を有することが見出されている。
【００４７】
本発明の１つの実施形態は、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することを含む、エアロゾル化された、ブルセラ（Ｂｒｕｃｅｌｌａ）属、類鼻疽菌（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ）、バークホルデリア・マレイ（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｍａｌｌｅｉ）、コクシエラ・バーネッティ（Ｃｏｘｉｅｌｌａ  ｂｕｒｎｅｔｉｉ）、及び一部のリケッチア（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ）属などのグラム陰性細菌に曝露された又は曝露された可能性のある１又は複数の個体を予防的に処置する方法を提供する。有効量のアミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することは、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルの作用で水和された水和化肺粘液分泌物を除去することによって、エアロゾル化されたグラム陰性細菌が身体から完全に又は部分的に排除されることを可能にするように機能する。
【００４８】
典型的には節足動物で媒介される幾つかのウイルスは、エアロゾル化された曝露に続くそれらの激しい伝染力ゆえに、潜在的なバイオテロリズムの兵器としてかなりの脅威を与えると考えられる。これらのウイルスには、ウイルス性脳炎及び出血熱の重要な作用物質であるアルボウイルスが含まれる。このようなウイルスとしては、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス及び西部ウマ脳炎ウイルスなどのアルファウイルスを挙げることができる。その他のこのようなウイルスとしては、西ナイル熱ウイルス、日本脳炎ウイルス、キャサヌール森林病ウイルス、ダニ媒介脳炎ウイルス複合体及び黄熱ウイルスを挙げることができる。脅威を与えることのできるウイルスのその他の群には、カリフォルニア脳炎ウイルス、又はラクロスウイルス、クリミア−コンゴ出血熱ウイルスなどのブニヤウイルスが含まれる。ＮＩＡＩＤによれば、ワクチン又は有効で具体的な治療法は、これらのウイルスの極めて少量に対してのみ利用できる。ヒトにおいて、アルボウイルスへの感染は、通常、初めは無症状であるか、或いは熱、痛み、疲労など、非特異的なインフルエンザ様症候を引き起こす。
【００４９】
本発明の１つの実施形態は、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することを含む、エアロゾル化されたアルボウイルスに曝露された又は曝露された可能性のある１又は複数の個体を予防的に処置する方法を提供する。有効量のアミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することは、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルの作用で水和された水和化肺粘液分泌物を除去することによって、アルボウイルスが身体から完全に又は部分的に排除されることを可能にするように機能する。
【００５０】
ヒマ（Ｒｉｃｉｎｕｓ  Ｃｏｍｍｕｎｉｓ）由来のリシン毒素、ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）のイプシロン毒素及びブドウ球菌エンテロトキシンＢなど、特定のカテゴリーＢの毒素も、潜在的なバイオテロリズムの手段と見なされる。これら毒素のそれぞれは、エアロゾルに対する吸入曝露によって環境又は集団に送達できる。リシン毒素の少量吸入により、鼻及び喉の鬱血及び気管支喘息が起こる可能性があり、多量吸入に曝露されると、重症肺炎、急性炎症が起こり、非ヒト霊長動物での気道壊死が広がる。ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）は、ヒト及び動物に感染できる嫌気性細菌である。５種の細菌が存在し、ガス壊疽に関連したアルファトキシン、壊死性腸炎の原因であるベータトキシン、ヤギ及びヒツジの出血性腸炎に至る神経毒イプシロントキシンを含む、４つの主要致死性毒素及び７つの少量毒素を産生する。黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）の吸入は、激しい高熱、呼吸困難、胸痛及び頭痛を引き起こす。
【００５１】
本発明の１つの実施形態は、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することを含む、エアロゾル化された毒素に曝露された又は曝露された可能性のある１又は複数の個体を予防的に処置する方法を提供する。有効量のアミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することは、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルの作用で水和された水和化肺粘液分泌物を除去することによって、エアロゾル化された毒素が身体から完全に又は部分的に排除されることを可能にするように機能する。
【００５２】
結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）は、結核の原因となり、結核に罹ったヒトが咳、くしゃみ又は話をしたときに肺から排出され、空気で運ばれる飛沫によって拡がる。本発明の１つの実施形態は、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することを含む、結核菌に曝露された又は曝露された可能性のある１又は複数の個体を予防的に処置する方法を提供する。有効量のアミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することは、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルの作用で水和された水和化肺粘液分泌物を除去することによって、結核菌が身体から完全に又は部分的に排除されることを可能にするように機能する。
【００５３】
本発明の方法は、インフルエンザウイルス、ライノウイルス、アデノウイルス及び呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）などのより一般的な病原体に対しても使用できる。本発明の１つの実施形態は、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することを含む、これらのウイルスの１つに曝露された又は曝露された可能性のある１又は複数の個体を予防的に処置する方法を提供する。有効量のアミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することは、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルの作用で水和された水和化肺粘液分泌物を除去することによって、ウイルスが身体から完全に又は部分的に排除されることを可能にするように機能する。
【００５４】
本発明の方法は、さらに、ＳＡＲＳの原因であると考えられるウイルス、コロナウイルスに対して使用できる。重症急性呼吸器症候群は、ある人が咳又はくしゃみをして他人又は近くの表面にウイルスを含む飛沫を吐き出した場合を含む、人と人との接触によって拡がると考えられる呼吸器の病気である。最近、ＣＤＣは、ＳＡＲＳは、空気を介して又は現在知られていないその他の経路によってより急速に広がることができると考えている。典型的には、ＳＡＲＳは、３８℃（１００．４°Ｆ）を超える発熱で始まる。その他の症状としては、頭痛及び身体痛がある。２〜７日後に、ＳＡＲＳ患者は乾性咳を発し、呼吸困難を示す。
【００５５】
空気媒介病原体で起こる広範なＳＡＲＳに対して、本発明の１つの実施形態は、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することを含む、ＳＡＲＳウイルスに曝露された又は曝露された可能性のある１又は複数の個体を予防的に処置する方法を提供する。有効量のアミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルを投与することは、アミロライド、ベンザミル、及び／又はフェナミルの作用で水和された水和化肺粘液分泌物を除去することによって、ウイルスが身体から完全に又は部分的に排除されることを可能にするように機能する。
【００５６】
次の実施例で、化合物の粘膜繊毛クリアランスに対する効果を測定するための１つの方法を例示する。アミロライド、ベンザミル及びフェナミルは、説明するアッセイにおいて明確な効果を示す。
【００５７】
動物における薬物の薬理効果及び作用機序
粘膜繊毛クリアランス（ＭＣＣ）の向上に対する化合物の効果は、ＳａｂａｔｅｒらがＪｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ、１９９９年、２１９１〜２１９６頁に発表しているｉｎ  ｖｉｖｏモデルを用いて測定可能であり、該文献を参照により本明細書に組み込む。アミロライドを用いる典型的な実験を以下で説明する。
方法
動物の準備：成熟雌性ヒツジ（体重２５〜３５ｋｇ）を、改造ショッピングカートに適合させた特殊身体ハーネスに直立姿勢で拘束した。動物の頭部を固定し、２％リドカインで鼻通路の局部麻酔を誘導した。次いで、動物に内径７．５ｍｍの気管内チューブ（ＥＴＴ）を経鼻挿管した。ＥＴＴのカフを声帯の直下に置き、その位置を軟性気管支鏡で確認した。挿管後、粘膜繊毛クリアランスの測定を開始するのに先立って、約２０分間平衡させた。
放射性エアロゾルの投与：３．６μｍの空気力学的直径中央値を有する液滴を作り出すレインドロップネブライザー（Ｒａｉｎｄｒｏｐ  Ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ）を使用して、９９ｍＴｃ−ヒト血清アルブミン（３．１ｍｇ／ｍｌ、約２０ｍＣｉを含む）のエアロゾルを発生させた。ネブライザーを、ソレノイドバルブ及び圧縮空気源（０．１４ＭＰａ（２０ｐｓｉ））からなる線量測定装置に連結した。ネブライザーの出力をプラスチック製Ｔ型コネクターに向け、コネクターの一端を気管内チューブに連結し、他端をピストン式人工呼吸器に連結した。人工呼吸器の吸気サイクルの開始１秒で装置を作動させた。人工呼吸器は、中央気道沈着を最大化するために、５００ｍｌの換気容積、１：１の吸気呼気比、毎分２０回の呼吸速度に設定した。ヒツジに放射化標識エアロゾルを５分間呼吸させた。ガンマカメラを使用して気道からの９９ｍＴｃ−ヒト血清アルブミンのクリアランスを測定した。画像視野が動物の脊髄に対して垂直になるように、カートに支持された自然な直立姿勢のヒツジに対して動物の背中の上方にカメラを配置した。放射化標識外部マーカーをヒツジに配置し、ガンマカメラの下での妥当な位置調整を確保した。全ての画像をガンマカメラと統合されたコンピューターに保存した。重要な領域をヒツジの右肺に該当する画像上で追跡し、計数値を記録した。計数値は、崩壊に対する補正を行い、初めの基準画像に存在する放射能に関する比率として表した。左肺は、その外形線が胃と重なり合い、計数値は嚥下され放射化標識された粘液として胃に入るので、解析から除外した。
処置プロトコール（ｔ−ゼロでの活性評価）：放射性エアロゾル投与の直後に基準沈着画像を得た。基準画像を補足した後、時刻ゼロで、ビヒクル対照（蒸留水）、アミロライド、又はその他の供試化合物を、Ｐａｒｉ  ＬＣ  ＪｅｔＰｌｕｓネブライザーを使用して自由呼吸動物に対して容積４ｍｌからエアロゾル化した。ネブライザーは、流速毎分８リットルの圧縮空気で駆動した。溶液を送達するための時間は１０〜１２分であった。ＥＴＴからの過剰な放射性トレーサーの吸引によって起こる計数値の偽上昇を防止するために、全投与量の送達に続いて、直ちに動物から抜管した。投与後の最初の２時間は１５分間隔で、投与後の次の６時間は１時間ごとに肺の連続画像を収得し、全部で８時間観察した。異なる供試薬剤を用いる投与実験期は、少なくとも７日間の洗浄期間を置いて隔離した。
処置プロトコール（ｔ−４時間での活性評価）：標準実験計画を以下のように変更して、ビヒクル対照（蒸留水）、アミロライド若しくはベンザミル、又はその他の治験薬剤に対する１回だけの曝露に続く応答の持続性を評価した。時刻ゼロで、ビヒクル対照（蒸留水）、陽性対照（アミロライド）、又は治験薬剤を、Ｐａｒｉ  ＬＣ  ＪｅｔＰｌｕｓネブライザーを使用して自由呼吸動物に対して容積４ｍｌからエアロゾル化した。ネブライザーは、流速毎分８リットルの圧縮空気で駆動した。溶液を送達するための時間は１０〜１２分であった。動物は、特殊身体ハーネスに直立姿勢で４時間拘束した。４時間の期間の終末で、レインドロップネブライザー（Ｒａｉｎｄｒｏｐ  Ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ）からエアロゾル化した９９ｍＴｃ−ヒト血清アルブミン（３．１ｍｇ／ｍｌ、約２０ｍＣｉを含む）を、動物に１回だけ投与した。放射性トレーサーの全投与量の送達に続いて、直ちに動物から抜管した。放射性エアロゾルの投与後、直ちに基準沈着画像を採取した。放射性トレーサー投与後の最初の２時間は１５分間隔で、投与後の次の２時間（投与後４〜６時間を表す）は１時間ごとに肺の連続画像を採取し、全部で４時間観察した。異なる供試薬剤を用いる投与実験期は、少なくとも７日間の洗浄期間を置いて隔離した。
統計：データは、ＳＹＳＴＡＴ  ｆｏｒ  Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）、バージョン５を使用して解析した。二元配置反復ＡＮＯＶＡを使用して（総合効果の評価用）、続いて特定ペアー間の階差を確認するためにペアードｔ検定によってデータを解析した。Ｐが０．０５以下である場合に有意と認めた。平均ＭＣＣ曲線に対する勾配値（ｔ−ゼロの評価における投与後の最初の４５分間に集められたデータから計算される）を、線形最小二乗回帰を用いて計算し、急速クリアランス期における初期速度の差を評価した。
【００５８】
本発明は好ましい態様に関して記載してきたように、変換及び修飾として当業者に明らかな手段を取ることができることは理解されるべきである。かかる変換及び修飾は、本明細書に添付した特許請求の範囲の権限及び範囲内と考えられるべきである。
【手続補正書】
【提出日】平成17年8月16日(2005.8.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１種又は複数の空気媒介病原体からの感染又は疾病に対する予防的処置を必要とする個体に対して、肺粘液分泌物を水和するために、予防有効量のアミロライド、ベンザミル、フェナミル又は薬学上許容されるそれらの塩を投与すること、
並びに、アミロライド、ベンザミル、フェナミル又は薬学上許容されるそれらの塩の投与で水和された水和肺粘液分泌物を除去して、個体から１種又は複数の空気媒介病原体を全面的又は部分的に除去すること
を含む予防的処置法。
【請求項２】
前記病原体が炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）である、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項３】
前記病原体が大痘瘡（Ｖａｒｉｏｌａ  Ｍａｊｏｒ）である、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項４】
前記病原体がペスト菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ）である、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項５】
前記病原体が野兎病菌（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ）である、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項６】
前記病原体がグラム陰性細菌である、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項７】
前記グラム陰性細菌が、ブルセラ（Ｂｒｕｃｅｌｌａ）属、類鼻疽菌（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ）、バークホルデリア・マレイ（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｍａｌｌｅｉ）、コクシエラ・バーネッティ（Ｃｏｘｉｅｌｌａ  ｂｕｒｎｅｔｔｉ）及びリケッチア（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ）からなる群から選択される、請求項６に記載の予防的処置法。
【請求項８】
前記病原体が、アルファウイルス、フラビウイルス又はブニヤウイルスである、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項９】
前記病原体が、ヒマ（Ｒｉｃｉｎｕｓ  ｃｏｍｍｕｎｉｓ）からのリシン毒素、ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）のイプシロン毒素又はブドウ球菌エンテロトキシンＢである、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項１０】
前記病原体が結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）細菌である、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項１１】
前記病原体が、インフルエンザウイルス、ライノウイルス、アデノウイルス又は呼吸器合胞体ウイルスである、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項１２】
前記病原体がコロナウイルスである、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項１３】
前記のアミロライド、ベンザミル、フェナミル又は薬学上許容されるそれらの塩が、個体が吸入する、呼吸に適した粒子のエアロゾル懸濁液で投与される、請求項１に記載の予防的処置法。
【請求項１４】
ヒトの疾病を惹起できる空気媒介病原体からの感染の危険を低減するための予防的処置法であって、空気媒介病原体からの感染の危険の可能性はあるがその疾病に関して無症候であるヒトの肺に対して、有効量のアミロライド、ベンザミル及びフェナミル又は薬学上許容されるそれらの塩を投与することを含み、アミロライド、ベンザミル及びフェナミル又は薬学上許容されるそれらの塩の有効量が、ヒトにおける感染の危険を低減するのに十分である予防的処置法。
【請求項１５】
前記空気媒介病原体が炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）であり、疾病は炭疽病である、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項１６】
前記空気媒介病原体が大痘瘡（Ｖａｒｉｏｌａ  Ｍａｊｏｒ）であり、疾病が天然痘である、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項１７】
前記空気媒介病原体がペスト菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ）であり、疾病がペストである、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項１８】
前記空気媒介病原体がグラム陰性細菌である、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項１９】
前記グラム陰性細菌が、ブルセラ（Ｂｒｕｃｅｌｌａ）属、類鼻疽菌（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ）、バークホルデリア・マレイ（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｍａｌｌｅｉ）、及びコクシエラ・バーネッティ（Ｃｏｘｉｅｌｌａ  ｂｕｒｎｅｔｔｉ）からなる群から選択される、請求項１８に記載の予防的処置法。
【請求項２０】
前記空気媒介病原体が、アルファウイルス、フラビウイルス又はブニヤウイルスである、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項２１】
前記空気媒介病原体が、ヒマ（Ｒｉｃｉｎｕｓ  ｃｏｍｍｕｎｉｓ）からのリシン毒素、ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）のイプシロン毒素又はブドウ球菌エンテロトキシンＢである、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項２２】
前記空気媒介病原体が結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）細菌である、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項２３】
前記空気媒介病原体が、インフルエンザウイルス、ライノウイルス、アデノウイルス又は呼吸器合胞体ウイルスである、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項２４】
前記空気媒介病原体がコロナウイルスであり、疾病が重症急性呼吸器症候群である、請求項１４に記載の予防的処置法。
【請求項２５】
前記のアミロライド、ベンザミル、フェナミル又は薬学上許容されるそれらの塩が、ヒトが吸入する、呼吸に適した粒子のエアロゾル懸濁液で投与される、請求項１４に記載の予防的処置法。
【国際調査報告】
2007507423.tif 000002