(57)【要約】  次式Ｉの造影剤。Ｖ−Ｌ−Ｒ          （Ｉ）式中、ＶはアンジオテンシンＩＩレセプター部位に対する結合親和性を有する有機基であり、Ｌは線状又は枝分かれアミノ酸を含むバイオモディファイヤー又はリンカー部分であり、Ｒはヒト又は動物の身体のインビボ画像化で検出可能なレポーター部分である。【選択図】    なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式Ｉの造影剤。
Ｖ−Ｌ−Ｒ          （Ｉ）
式中、ＶはアンジオテンシンＩＩレセプター部位に対して結合親和性を有する有機基であり、Ｌは線状又は枝分かれアミノ酸を含むバイオモディファイヤー又はリンカー部分であり、Ｒはヒト又は動物の身体のインビボ画像形成で検出可能なレポーター部分である。
【請求項２】
Ｖがロサルタン、バルサルタン、カンデサルタン又はエプロサルタンである、請求項１又は２記載の造影剤。
【請求項３】
Ｌが１〜４０のアミノ酸残基を含んでいる、請求項１又は請求項２記載の造影剤。
【請求項４】
Ｌがさらに１以上のジカルボン酸単位、エチレングリコール単位若しくはＰＥＧ様成分又は以上のものの組合せを含んでおり、好ましくは１以上のジグリコリル、グリコリル、グルタリル若しくはスクシニル単位又はこれらの組合せを含んでいる、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の造影剤。
【請求項５】
Ｌが枝分かれである、請求項１乃至請求項４のいずれか１項記載の造影剤。
【請求項６】
キレート剤が次式ＩＩのものである、請求項１乃至請求項５のいずれか１項記載の造影剤。
【化１】
2007512321.tif 000019
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は各々独立にＲ基であって、各Ｒ基は独立にＨ又はＣ１−１０アルキル、Ｃ３−１０アルキルアリール、Ｃ２−１０アルコキシアルキル、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１−１０アルキルアミン、Ｃ１−１０フルオロアルキルであるか、或いは２以上のＲ基がそれらに結合した原子と共に炭素環、複素環、飽和又は不飽和環を形成するものである。
【請求項７】
キレート剤が次式（ｅ）のものである、請求項１乃至請求項６のいずれか１項記載の造影剤。
【化２】
2007512321.tif 000020
【請求項８】
９９ｍＴｃ（ロサルタン−Ｌｅｕ−ジグリコリル−ｃＰｎ２１６）、９９ｍＴｃ（ロサルタン−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ジグリコリル−ｃＰｎ２１６）、９９ｍＴｃ（ロサルタン−Ｌｅｕ−β−Ａｌａ−ジグリコリル−ｃＰｎ２１６）、又は９９ｍＴｃ（ロサルタン−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ（プロピオニル−ＰＥＧ（１２）−Ａｃ）−ジグリコロイル−ｃＰｎ２１６）であることを特徴とする、請求項１乃至請求項７のいずれか１項記載の造影剤。
【請求項９】
有効量の一般式Ｉの化合物又はその塩を、１種以上の薬学的に許容されるアジュバント、賦形剤又は希釈剤と共に含んでなる、インビボ画像形成における画像のコントラストを増強するために使用される薬剤組成物。
【請求項１０】
式Ｉで定義される化合物を含む造影剤組成物を前もって投与されたヒト又は動物の身体の増強された画像を生成する方法であって、前記身体の少なくとも一部の画像を生成することを含んでなる、前記方法。
【請求項１１】
リガンド−キレートコンジュゲート及び還元剤を含んでなる、式Ｉの放射性薬剤組成物を製造するためのキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、疾患状態を画像化することができる画像診断技術に使用するのに適した標的化造影剤に関する。より具体的には、本発明は、アンジオテンシンＩＩ型レセプターＡＴ１のアップレギュレーションに関連した疾患の画像形成用造影剤に関する。本発明は、現存の医薬品と比較して増大した効力並びに最適化された排泄及び生体内分布プロフィールを有するように設計されたリガンドについて記載する。
【０００２】
ＡＴ１レセプターを標的とする造影剤を使用して検出することができる疾患は、鬱血性心不全（ＣＨＦ）、アテローム性動脈硬化、並びに心臓、肺及び肝臓のような臓器の線維症である。
【背景技術】
【０００３】
オクタペプチド（Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ）であるアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）は２つの異なるレセプター、すなわちＡｎｇＩＩの１型（ＡＴ１）及び２型（ＡＴ２）レセプターに結合する多面的な血管作用性ペプチドである。レニン−アンジオテンシン−アルドステロン系（ＲＡＡＳ）の活性化の結果、血管肥大、血管収縮、塩及び水の貯留、並びに高血圧が起こる。これらの結果は主としてＡＴ１レセプターによって媒介される。逆に、他のＡｎｇＩＩに媒介される結果、例えば細胞死、血管拡張、及びナトリウム排泄増加はＡＴ２レセプターの活性化によって媒介される。ＡｎｇＩＩシグナリングメカニズムの理解は不完全なままである。ＡＴ１レセプター活性化は、チロシンキナーゼ誘発タンパク質リン酸化、アラキドン酸代謝産物の産生、反応性酸化剤化学種活性の変更、及び細胞内Ｃａ２＋濃度の流れを始めとする細胞内の様々な系の引き金となる。ＡＴ２レセプター活性化により、ブラジキニン、一酸化窒素産生、及びプロスタグランジン代謝が刺激されるが、これらは大部分がＡＴ１レセプターの効果と反対である（Ｂｅｒｒｙ  Ｃ，Ｔｏｕｙｚ  Ｒ，Ｄｏｍｉｎｉｃｚａｋ  ＡＦ，Ｗｅｂｂ  ＲＣ，Ｊｏｈｎｓ  ＤＧ．：Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｈｅａｒｔ  Ｃｉｒｃ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２００１  Ｄｅｃ；２８１（６）：Ｈ２３３７−６５．Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：ｓｉｇｎａｌｉｎｇ，ｖａｓｃｕｌａｒ  ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，ａｎｄ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｗｉｔｈ  ｃｅｒａｍｉｄｅ参照）。
【０００４】
ＡｎｇＩＩは、レニン−アンジオテンシン−アルドステロン系（ＲＡＡＳ）の活性成分であり、血圧、血漿量、交感神経活性、及び渇き反応(thirst response)の調節において重要な生理学的役割を果たす。また、ＡｎｇＩＩは、心臓肥大、心筋梗塞、高血圧、慢性閉塞性肺疾患、肝臓線維症 及びアテローム性動脈硬化において病態生理学的役割をもっている。ＡｎｇＩＩは、古典的ＲＡＡＳを介して全身で、また組織ＲＡＡＳを介して局所で産生される。古典的ＲＡＡＳにおいては、循環性の腎臓由来レニンが肝臓由来アンギオテンシノゲンを開裂してデカペプチドのアンジオテンシンＩ（ＡｎｇＩ）を形成し、これが肺でアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）により活性なＡｎｇＩＩに変換される。また、ＡｎｇＩは組織エンドペプチダーゼによるプロセッシングを受けてヘプタペプチドのＡｎｇ−（１−７）になることもできる。このＲＡＡＳ系を概略的に図１に示す。図は、Ｆｏｏｔｅらの論文Ａｎｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．２７：１４９５−１５０３（１９９３）の図１に基づいている。
【０００５】
正常な心血管ホメオスタシスにおいて重要な役割を果たすＲＡＡＳに加えて、ＲＡＡＳの過度の活性は高血圧、鬱血性心不全、冠動脈虚血及び腎不全のような様々な心血管疾患の進行に関与していることが示唆されている。心筋梗塞（ＭＩ）後、ＲＡＡＳが活性化される。特に、ＭＩ後及び左心室機能障害でＡＴ１レセプターの発現が増大することから、ＡＴ１レセプターはＭＩ後リモデリング(remodelling)で突出した役割を果たすように思われる。それ故、ＡＣＥ阻害剤及びＡＴ１レセプターアンタゴニストのようにＲＡＡＳに干渉する薬剤が、かかる心血管障害の処置において治療上非常に有益であることが示されてきている。
【０００６】
心臓、腎臓、肺及び肝臓では一様に、線維症がそれらの不全に至る共通の経路である。従って、臓器線維症に関与する病態生理学的メカニズムの理解は、特に防御薬理的方策の可能性を考えると、大いに興味深い。組織修復には、修復過程の開始に不可欠な単球／マクロファージ系統のメンバーを含む炎症細胞、並びにコラーゲンターンオーバー及び繊維組織の形成を担う表現型が形質転換された間質線維芽細胞である筋線維芽細胞が関与する。修復の微小環境におけるこれらの細胞事象は各々が、アンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）の新たな(de novo)生成につながる分子事象に関連している。このペプチドは、自己分泌／パラクリン様式(autocrine/paracrine manner)で、アンジオテンシン（ＡＴ１）レセプター−リガンド結合を介してＴＧＦ−β１の発現を調節する。このサイトカインが、線維芽細胞の筋線維芽細胞（ｍｙｏＦｂ）への表現型変換に寄与しており、コラーゲンの筋線維芽細胞ターンオーバーを調節するのである。アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害又はＡＴ１レセプターアンタゴニズムは各々、線維症に帰結するこれらの分子及び細胞応答の多くを防止し、従って防護的介入であることが判明している（Ｗｅｂｅｒ  ＫＴ．Ｆｉｂｒｏｓｉｓ，ａ  ｃｏｍｍｏｎ  ｐａｔｈｗａｙ  ｔｏ  ｏｒｇａｎ  ｆａｉｌｕｒｅ：ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  ａｎｄ  ｔｉｓｓｕｅ  ｒｅｐａｉｒ．Ｓｅｍｉｎ  Ｎｅｐｈｒｏｌ．１９９７  Ｓｅｐ；１７（５）：４６７−９１及びそこに引用されている文献を参照されたい）。
【０００７】
ＡｎｇＩＩは間葉細胞の活性化を介して組織線維症を調節することができる。例えば、ＡｎｇＩＩはＡＴ１の活性化を介してインビトロで心臓線維芽細胞の増殖を刺激する。ＡＴ１レセプターの存在はインビトロで心臓線維芽細胞でも立証されている。ＡｎｇＩＩの前線維症(profibrotic)効果の殆どはこのレセプターを介して媒介されるようである。しかし、心臓線維芽細胞における増大したＡＴ２発現が肥大したヒト心臓で検出されており、これら２つの亜型の発現のバランスはＡｎｇＩＩに対する応答を決定する上で重大であり得る（Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．，Ｖｏｌｕｍｅ  １６１，Ｎｕｍｂｅｒ  ６，Ｊｕｎｅ  ２０００，１９９９〜２００４：Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  Ｉｓ  Ｍｉｔｏｇｅｎｉｃ  ｆｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ｌｕｎｇ  Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ  ｖｉａ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｔｙｐｅ  １  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｒｉｃｈａｒｄ  Ｐ．Ｍａｒｓｈａｌｌ，Ｒｏｂｉｎ  Ｊ．ＭｃＡｎｕｌｔｙ，ａｎｄ  Ｇｅｏｆｆｒｅｙ  Ｊ．Ｌａｕｒｅｎｔ及びそこに引用されている文献を参照されたい）。
【０００８】
ＡｎｇＩＩレセプターは特定のアンタゴニストによる阻害に従って識別することができる。ＡＴ１レセプターはロサルタンのようなビフェニルイミダゾールによって選択的に拮抗され、一方テトラヒドロイミダゾピリジンはＡＴ２レセプターを特異的に阻害する。また、ＡＴ２レセプターはＣＧＰ−４２１１２Ａにより選択的に活性化され得る。これはＡｎｇＩＩのヘキサペプチドアナログであり、濃度に応じてＡＴ２レセプターを阻害し得る。他の２つのアンジオテンシンレセプター、すなわちＡＴ３亜型とＡＴ４亜型が既に記載されている。
【０００９】
齧歯類の場合、ＡＴ１レセプターは機能的に異なる２つの亜型、ＡＴ１ＡとＡＴ１Ｂを有し、これらは＞９５％のアミノ酸配列相同性をもっている。
【００１０】
第２の主要なアンジオテンシンレセプターアイソフォームはＡＴ２レセプターである。これはＡＴ１Ａ又はＡＴ１Ｂレセプターとのアミノ酸配列相同性が低い（約３４％）。ＡＴ２レセプターの正確なシグナル経路と機能的役割ははっきりしないが、これらのレセプターは、生理的条件下で、細胞増殖を阻害し、かつアポトーシスと血管拡張を誘導することによりＡＴ１媒介作用と拮抗し得る。心血管疾患におけるＡＴ２レセプターの正確な役割はまだ明確になっていない。
【００１１】
ＡＴ１及びＡＴ２に加えてＡｎｇＩＩに対するその他のレセプターが公知であり、一般にＡＴａｔｙｐｉｃａｌといわれている（Ｋａｎｇら，Ａｍ．Ｈｅａｒｔ  Ｊ．１２７：１３８８−１４０１（１９９４）参照）。ＡｎｇＩＩの効果の抑制は治療上、例えば高血圧及び心不全の管理に使用されている。これを達成するには幾つかの方法があり、例えば、アンギオテンシノゲンからアンジオテンシンＩ（ＡｎｇＩＩの前駆体）への変換をブロックするレニン阻害剤の使用、アンジオテンシンＩからＡｎｇＩＩへの変換をブロックする（そしてブラジキニンとプロスタグランジンの生物変換もブロックする）アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤の使用、抗−ＡｎｇＩＩ−抗体の使用、並びにＡｎｇＩＩ−レセプターアンタゴニストの使用である。
【００１２】
β−ブロッカーは不整脈の治療で最も普遍的に使用されている。抗−不整脈剤は限られた全体的成功を収めており、カルシウムチャンネルブロッカーは時に不整脈を誘発することがある。単一の作用物質が優位性を示すことはなく、可能な例外はアミオダロンのみである。短期的な抗−不整脈効果が、個々の薬剤に依存するが、死亡率に対する中立的又はマイナスの効果によって相殺されることが分かっている（Ｓａｎｇｕｉｎｅｔｔｉ  ＭＣ及びＢｅｎｎｅｔｔ，ＰＢ：Ａｎｔｉ−ａｒｒｈｙｔｈｍｉｃ  ｄｒｕｇ  ｔａｒｇｅｔ  ｃｈｏｉｃｅｓ  ａｎｄ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ２００３，９３（６）：４９１−９２５７−２６３）。明らかに、より良好な抗−不整脈剤が必要である。
【００１３】
刊行物Ｌａｎｃｅｔ（Ｌｉｎｄｈｏｌｍ，ＬＨら  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｌｏｓａｒｔａｎ  ｏｎ  ｓｕｄｄｅｎ  ｃａｒｄｉａｃ  ｄｅａｔｈ  ｉｎ  ｐｅｏｐｌｅ  ｗｉｔｈ  ｄｉａｂｅｔｅｓ：ｄａｔａ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ＬＩＦＥ  ｓｔｕｄｙ．Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ，２００３，３６２：６１９−６２０）により、ＡＴ１レセプターアンタゴニストが、一般的にＣＨＦの患者に好まれることに加えて、突然心臓死の発生も低下させることが明らかにされた。ＡＴ１アンタゴニストが心筋梗塞により誘発された不整脈に対して、又はＬＡＤの結紮後の再潅流において抗−不整脈効果を有することを示す二、三の研究がある（Ｈａｒａｄａ  Ｋら  Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  Ｔｙｐｅ  １ａ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｉｓ  ｉｎｖｏｌｖｅｄ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ  ｏｆ  ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ａｒｒｈｙｔｈｍｉａｓｓ．  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ．１９９８，９７：３１５−３１７，Ｏｚｅｒ  ＭＫら  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｃａｐｔｏｐｒｉｌ  ａｎｄ  Ｌｏｓａｒｔａｎ  ｏｎ  ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｉｓｃｈｅｍｉａ−ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ａｒｒｈｙｔｈｍｉａｓ  ａｎｄ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｉｎ  ｒａｔｓ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００２，４５（４），２５７−２６３，Ｌｙｎｃｈ  ＪＪら  ＥＸＰ３１７４，ｔｈｅ  ＡＩＩ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ  ｈｕｍａｎ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ  ｏｆ  Ｌｏｓａｒｔａｎ，ｂｕｔ  ｎｏｔ  Ｌｏｓａｒｔａｎ  ｎｏｒ  ｔｈｅ  Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ−ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｃａｐｔｏｐｒｉｌ，ｐｒｅｖｅｎｔｓ  ｔｈｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｌｅｔｈａｌ  ｉｓｃｈｅｍｉｃ  ａｒｒｈｙｔｈｍｉａｓ  ｉｎ  ａ  ｃａｎｉｎｅ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｒｅｃｅｎｔ  ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ．ＪＡＣＣ，１９９９，３４  ８７６−８８４）。
【００１４】
この度、標的性結合性リガンドがＡｎｇＩＩ−レセプター部位に対する親和性を有する標的化造影剤を用いてインビボでＡｎｇＩＩレセプター部位を画像化することが可能であるということが判明した。ＡｎｇＩＩレセプターは、一般に、かかる造影剤が血流中に投与されたときその造影剤にアクセス可能である。従って、かかる標的化造影剤を用いて、心不全、アテローム性動脈硬化及び制限された血流、並びにその他の血管疾患及び障害のような疾患及び障害を検出し、またかかる疾患及び障害の治療の経過をモニターすることが可能である。
【００１５】
国際公開第９８／１８４９６号（Ｎｙｃｏｍｅｄ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ＡＳ）には、インビボ画像形成用に標識されたＡｎｇＩＩ−レセプターアンタゴニストを含む造影剤が開示されている。
【００１６】
米国特許第５１３８０６９号には、ＡｎｇＩＩレセプターブロッカーとして使用される置換イミダゾールが開示されている。さらに、米国特許第５２６４５８１号（Ｃａｒｉａｎｉ）には、放射性ヨウ素化されたイミダゾールＡｎｇＩＩアンタゴニストが開示されている。
【特許文献１】国際公開第９８／１８４９６号
【特許文献２】米国特許第５１３８０６９号
【特許文献３】米国特許第５２６４５８１号
【非特許文献１】Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｈｅａｒｔ  Ｃｉｒｃ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２００１  Ｄｅｃ；２８１（６）：Ｈ２３３７−６５
【非特許文献２】Ａｎｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．２７：１４９５−１５０３（１９９３）
【非特許文献３】Ｓｅｍｉｎ  Ｎｅｐｈｒｏｌ．１９９７  Ｓｅｐ；１７（５）：４６７−９１
【非特許文献４】Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．，Ｖｏｌｕｍｅ  １６１，Ｎｕｍｂｅｒ  ６，Ｊｕｎｅ  ２０００，１９９９〜２００４
【非特許文献５】Ａｍ．Ｈｅａｒｔ  Ｊ．１２７：１３８８−１４０１（１９９４）
【非特許文献６】Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ２００３，９３（６）：４９１−９２５７−２６３
【非特許文献７】Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ，２００３，３６２：６１９−６２０
【非特許文献８】Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ．１９９８，９７：３１５−３１７
【非特許文献９】Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００２，４５（４），２５７−２６３
【非特許文献１０】ＪＡＣＣ，１９９９，３４  ８７６−８８４
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
嵩高いキレートのような比較的大きいレポーターを有するコンジュゲート中に結合性リガンドとしてイミダゾール類、例えロサルタンを使用すると、その選択された結合部位に対するそのリガンドの親和性にマイナスの影響が生じ得る。
【００１８】
薬剤及びキレートコンジュゲートのいずれでもあるロサルタンのような作用物質のもつ問題は、それらが主に（８０％より多く）が肝臓を経由して排泄され、天然のホルモンＡｎｇＩＩより弱い親和性（Ｋｉ）を有することである。これは、かかる組成物を標的化造影剤として使用する際に２つの問題を構成する。まず第一に、肝臓で吸収される前に投与された組成物のうちの小量がＡｎｇＩＩレセプター部位に結合し得ることであり、第二に、肝臓摂取の結果バックグラウンド活性が増大し、例えば肝臓からのバックグラウンドは心臓の疾患のある領域の画像化の妨害となることがある。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
この度、アミノ酸を含むバイオモディファイヤー／リンカーを標的化リガンドとキレート又はレポーター部分との間に導入すると、肝臓摂取を低下させることができ、またＡｎｇＩＩレセプター部位に対する結合親和性を増大することもできるということが判明した。
このバイオモディファイヤー／リンカーは線状でも枝分かれでもよい。従って、本発明の組成物は哺乳類の身体をインビボ画像化するために有用な診断用造影剤である。また、画像化処置を受ける患者は「サータン(sartan)」薬物療法も受けていることがある。「サータン」、例えばロサルタンは高血圧の処置に用いられているＡｎｇＩＩレセプターアンタゴニストである。ＡｎｇＩＩレセプターを標的とする造影剤は同じレセプター部位に対する結合に関して治療用薬剤と競合する。従って、ほど遠い薬剤、すなわち規定されている検出可能でない「サータン」薬剤の有害な競合作用を回避するために、その規定されている薬剤より高いＡＴ１レセプターに対する親和性を有する造影剤を開発することが望ましいと考えられている。
【００２０】
インビボで検出可能な部分（レポーター）は、インビボ画像診断処置、例えばＭＲＩ、光学的画像化、シンチグラフィー、ＳＰＥＣＴ、ＰＥＴ 、Ｘ−線、超音波、電気インピーダンス又は磁気的処置により、直接又は間接的に検出することができる部分であることができる。
【００２１】
本発明の物質は、ＡｎｇＩＩレセプター部位のアップレギュレーションが関与することが知られているある範囲の疾患状態（鬱血性心不全（ＣＨＦ）、アテローム性動脈硬化、心臓、肺及び肝臓のような臓器の線維症）のインビボ画像診断に有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
第１の態様において、本発明は次式Ｉの物質を提供する。
Ｖ−Ｌ−Ｒ            （Ｉ）
式中、ＶはアンジオテンシンＩＩレセプター部位に対する結合親和性を有する有機基であり、Ｌはアミノ酸を含むバイオモディファイヤー又はリンカー部分であり、Ｒはヒト又は動物の身体のインビボ画像形成法で検出可能な部分である。
【００２３】
リガンドＶはＡｎｇＩＩレセプターに対する親和性を有するいかなる有機化合物でもよい。ＡＴ１又はＡＴ２のような特定の型のＡｎｇＩＩレセプターに対して際立った親和性を有する化合物が一般に好ましい。イミダゾールＡｎｇＩＩアンタゴニストリガンドが好ましく、最も好ましいのはロサルタン、バルサルタン、カンデサルタン及びエプロサルタンのようなリガンドである。
【００２４】
診断、特にインビボ診断に有用な造影剤の場合、部分ＲはＭで表される画像形成可能な１以上の部分を担持することができなければならない。担持するとは、化学結合、例えば共有結合若しくは電気原子価すなわちイオン結合又は吸着その他の型の結合のような、部分ＲとＭとの間のあらゆる形態の結合を意味する。Ｒは任意の画像形成可能な部分であることができる。Ｍが金属である場合、Ｙ１はキレート剤を表す。Ｒ及び／又はＹ１Ｍの種類は診断に利用する画像化様式に依存する。Ｒ及び／又はＹ１Ｍは、インビボ画像診断法で直接又は間接的に検出することができなければならず、例えば、検出可能な放射線を（例えば、放射性壊変、蛍光励起、スピン共鳴励起、などにより）放出するか又は放出させることができる部分、局部的電磁場に影響を及ぼす部分（例えば、常磁性、超常磁性、フェリ磁性又はフェロ磁性化学種）、放射線エネルギーを吸収又は散乱する部分（例えば、発色団、粒子（例えば、気体又は液体含有する小胞）、重元素及びその化合物、など）、並びに検出可能な物質を生成する部分（例えば、気体超微粒気泡発生器）を含んでいなければならない。
【００２５】
好ましい実施形態において、１つの部分ＲはＬに直接共有結合してＮ−アルキルグリシン単位を形成する。
【００２６】
後述する式（ＩＩ）及び（ｅ）のキレート剤も特に好ましい。
【００２７】
広範囲の適切な画像形成可能な部分が、例えば国際公開第９８／１８４９６号（援用によりその内容は本明細書の内容の一部をなす）により公知である。
【００２８】
画像化様式並びに画像形成可能な部分Ｒ及びＭについて以下さらに詳細に説明する。
【００２９】
第１の実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、Ｒａｄｉｏ及びＳＰＥＣＴ画像化様式で有用な１以上の画像形成可能な部分Ｍを担持する部分Ｙ１を含んでいる。好ましくは、Ｍは、α−及びβ−放出が少ないか若しくは全くなくて半減期が１時間より長いγエミッターである。好ましい基Ｍは放射性核種６７Ｇａ、１１１Ｉｎ、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、８１ｍＫｒ、９９Ｍｏ、９９ｍＴｃ、２０１Ｔｌ及び１３３Ｘｅである。最も好ましいのは９９ｍＴｃである。
【００３０】
Ｍはさらに、放射性標識方法又はキレート剤を変更することなく画像化と治療の両方に使用する以下の同位体又は同位体対であることができる。４７Ｓｃ２１、１４１Ｃｅ５８、１８８Ｒｅ７５、１７７Ｌｕ７１、１９９Ａｕ７９、４７Ｓｃ２１、１３１Ｉ５３、６７Ｃｕ２９、１３１Ｉ５３及び１２３Ｉ５３、１８８Ｒｅ７５及び９９ｍＴｃ４３、９０Ｙ３９及び８７Ｙ３９、４７Ｓｃ２１及び４４Ｓｃ２１、９０Ｙ３９及び１２３Ｉ５３、１４６Ｓｍ６２及び１５３Ｓｍ６２、並びに９０Ｙ３９及び１１１Ｉｎ４９。
【００３１】
Ｍが金属性放射性核種を表す場合、Ｙ１はＭとの安定なキレートを形成するのに適したキレート剤を表す。かかるキレート剤は当該分野の技術水準から周知であり、かかるキレート剤の典型的な例は国際公開第０１／７７１４５号の表Ｉに記載されている。
【００３２】
特に好ましいのは次式（ＩＩ）のキレート剤である。
【００３３】
【化１】
2007512321.tif 000002
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は各々独立にＨ又はＣ１−１０アルキル、Ｃ３−１０アルキルアリール、Ｃ２−１０アルコキシアルキル、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１−１０アルキルアミン、Ｃ１−１０フルオロアルキルであるか、或いは２以上のＲ基がそれらに結合した原子と共に炭素環、複素環、飽和又は不飽和環を形成するものである。
【００３４】
特に好ましいのは、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が水素又はメチル基であり、Ｒ４がアルキルアミン基である式（ＩＩ）のキレート剤であり、特に次の式（ｅ）の化合物（本明細書ではｃＰＮ２１６という。）である。以下の構造で、星印は可能な結合部位を表す。次式（ｅ）の場合、星印はアミン基を表す。
【００３５】
【化２】
2007512321.tif 000003
Ｙ１として最も好ましいのは、キレートがｃＰＮ２１６であるとき、及び画像化部分Ｍが９９ｍＴｃであるときである。
【００３６】
その他の好ましいキレート剤は次式ａ、ｂ、ｃ及びｄで表すことができる。
【００３７】
【化３】
2007512321.tif 000004
式（ＩＩ）及び（ｅ）のキレート剤の合成は国際公開第０３／００６０７０号に記載されている。
【００３８】
その他の関連するキレート剤は次式（ＩＩI）のものである。
【００３９】
【化４】
2007512321.tif 000005
式中、Ｑ１〜Ｑ６は独立にＱ基であり、ＱはＨ、アルキル、アリール又はアミン保護基であり、Ｗ１は−ＮＲ−、−ＣＯ２−、−ＣＯ−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｓ）−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｏ）−、−ＣＯＮＲ−又はＱ基であり、各Ｙは独立にＤ−若しくはＬ−アミノ酸、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＯＣＨ２−若しくは−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−又はＷ１基であり、ｐは値１〜８の整数であり、ｑは値０〜３０の整数であり、ＲはＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルコキシアルキル、Ｃ１−４ヒドロキシアルキル、又はＣ１−４フルオロアルキルである。
【００４０】
式（ＩＩI）のテトラアミンキレート剤の合成は英国特許出願第０４１６０６２．８号に見ることができる。
【００４１】
１２３Ｉ、１２５Ｉ及び１３１Ｉのような非金属放射性核種は当技術水準で周知の置換又は付加反応により部分Ｌに共有結合させることができる。
【００４２】
第２の実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、ＰＥＴ画像化様式で有用な部分Ｒを含んでいる。その場合Ｒは陽電子放出特性をもつ放射性エミッターを表す。好ましい基Ｒは放射性核種１１Ｃ、１８Ｆ、６８Ｇａ、１３Ｎ、１５Ｏ及び８２Ｒｂである。１８Ｆは取り分け好ましい。キレート剤Ｙ１とキレート化された金属性放射性エミッター８２Ｒｂ及び６８Ｇａも好ましい。
【００４３】
チオール結合化学、１８Ｆ−シントン及びチオール結合化学を用いて製造された標識されたペプチドは国際公開第０３／０８０５４４号（その内容は援用により本明細書の内容の一部をなす）に記載されている。
【００４４】
チオール結合化学を用いて標識されたペプチドの記載は英国特許出願第０３１７８１５．９号（その内容は援用により本明細書の内容の一部をなす）に見ることができる。
【００４５】
Ｍが金属性放射性核種を表す場合、Ｙ１はＭと共に安定なキレートを形成するのに適したキレート剤を表す。かかるキレート剤は当分野の技術水準から周知であり、かかるキレート剤の典型的な例は国際公開第０１／７７１４５号の表Ｉ及びその前のＲａｄｉｏ及びＳＰＥＣＴ画像化に関する欄に記載されている。
【００４６】
別の好ましい実施形態において、Ｙ１はＤＯＴＡキレート剤であり、Ｍはマイクロ波化学を用いてキレート中に容易に導入することができる６８Ｇａである。
【００４７】
１８Ｆのような非金属放射性核種を、当分野の技術水準から周知の置換又は付加反応によって部分Ｌに共有結合させてもよく、例えば国際公開第０３／０８０５４４号（援用により本明細書の内容の一部をなす）にも記載されている。
【００４８】
第３の実施形態において、式（Ｉ）の化合物のＲはＭＲ画像化様式に有用な１以上の画像形成可能な部分Ｍを担持する部分Ｙ１を含む。ここで、Ｍは米国特許第４６４７４４７号に述べられているもののような常磁性金属を表し、Ｇｄ３＋、Ｄｙ３＋、Ｆｅ３＋及びＭｎ２＋が特に好ましく、Ｙ１はキレート剤、特に例えば米国特許第４６４７４４７号及び国際公開第８６／０２８４１号に記載されている非環式又は環式ポリアミノカルボキシレート（例えば、ＤＴＰＡ、ＤＴＰＡ−ＢＭＡ、ＤＯＴＡ及びＤＯ３Ａ）のようなキレート剤である。Ｍはまた、超常磁性、フェリ磁性又はフェロ磁性化学種のような金属酸化物を表してもよく、これらは例えばＲが金属酸化物に対するコーティングとして機能するようにＲによって吸収される。ＭＲ造影剤として使用される金属酸化物は、例えば米国特許第６２３０７７７号（援用により本明細書の内容の一部をなす）に記載されている。
【００４９】
第４の実施形態において、式（Ｉ）の化合物のＲは、Ｘ線画像化様式に有用な１以上の画像形成可能な部分Ｍを担持する部分Ｙ１を含んでいる。ここで、Ｍは、好ましくはＲにより吸収され得る酸化物の形態にあるＷ、Ａｕ及びＢｉのような重金属を表す。また、Ｒは、特にＸ線造影剤、例えばＩｏｐａｍｉｒｏｎ（商標）及びＯｍｎｉｐａｑｕｅ（商標）として周知のヨウ素化されたアリール誘導体を表すこともできる。これらの作用物質は、
例えば式（Ｉ）のＶにアミド又はアミン基を介して結合することができる。
【００５０】
さらに別の実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、気体を充填した微小胞の形態にあるＲを含んでいる。かかる超音波造影剤は、例えば、当分野の技術水準、例えば国際公開第９８／１８５００号に記載されているように、レセプターがペプチドと結合するように官能化されたときそれらレセプターの画像化に利用することができる。
【００５１】
本発明の第６の実施形態において、式（Ｉ）の部分Ｒは、光学的画像化法で直接又は間接的に検出することができるいかなる部分であってもよい。この検出可能な部分は光散乱剤（例えば、着色又は無着色粒子）、光吸収剤又は発光体であることができる。より好ましくは、Ｒは発色団又は蛍光化合物のような染料で代表される。部分Ｒは、電磁スペクトル中で紫外光〜近赤外の波長を有する光と相互作用する任意の染料であることができる。好ましい形態ではＲが蛍光特性を有する。
【００５２】
好ましい有機染料部分としては、広範囲に非局在化した電子系を有するもの、例えばシアニン類、メロシアニン類、インドシアニン類、フタロシアニン類、ナフタロシアニン類、トリフェニルメチン類、ポルフィリン類、ピリリウム染料、チアピリリウム染料、スクアリリウム染料、クロコニウム染料、アズレニウム染料、インドアニリン類、ベンゾフェノキサジニウム染料、ベンゾチアフェノチアジニウム染料、アントラキノン類、ナフトキノン類、インダスレン類、フタロイルアクリドン類、トリスフェノキノン類、アゾ染料、分子内及び分子間電荷移動染料及び染料複合体、トロポン類、テトラジン類、ビス（ジチオレン）複合体、ビス（ベンゼン−ジチオラート）複合体、ヨードアニリン染料、ビス（Ｓ，Ｏ−ジチオレン）複合体がある。緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）及び異なる吸収／発光特性を有するＧＦＰの修飾体のような蛍光タンパク質も有用である。場合により、蛍光性ナノ結晶（量子ドット）と同様に、ある種の希土類金属（例えば、ユーロピウム、サマリウム、テルビウム又はジスプロシウム）の錯体が使用される。
【００５３】
光学的画像化法に適した部分のさらなる説明は、ノルウェー特許出願第２００３０３１１５号（その内容は、援用により本明細書の内容の一部をなす）に見られる。
【００５４】
本発明は、ロサルタン誘導体により例示することができ、バイオモディファイヤー／リンカー及びレポーター部分のイミダゾール５−位への結合に基づく。この原理はまた、構造類似性を有する他の化合物、例えば分子のロサルタンイミダゾール環に相当する部分に適切な固着(anchoring)部位を有するバルサルタン、カンデサルタン及びエプロサルタンにも当て嵌まる。
【００５５】
【化５】
2007512321.tif 000006
バイオモディファイヤー／リンカー部分Ｌの１つの役割は、金属錯体のような比較的嵩高いレポーターを結合性リガンドＶの活性部位から遠ざけることであろう。バイオモディファイヤー／リンカー部分は、レセプターに対する組成物の結合親和性を増大するように選択することができる。バイオモディファイヤー／リンカー部分は１〜４０のアミノ酸を含んでおり、１〜２０のアミノ酸が好ましく、１〜１０のアミノ酸がより好ましく、１〜５のアミノ酸が最も好ましい。さらに、バイオモディファイヤー／リンカー部分は、１以上のジカルボン酸単位（例えば、ジグリコロイル単位、グリコリル単位、スクシニル、グルタリル単位）、エチレングリコール単位、ジアミン、ＰＥＧ若しくはＰＥＧ様単位又は以上のものの組合せを含んでいてもよい。
【００５６】
また、リンカー基の種類を利用して、得られるコンジュゲートの金属錯体の生体内分布を変えることもでき、例えば、異なる特性を有するアミノ酸を導入して肝臓による摂取を低減することができる。
【００５７】
本発明の化合物の幾つかはＡＴ１レセプターに対して高い親和性を有する。「高い親和性」とは、ＡＴ１に対する競合結合アッセイから計算してＫｉ＝５ｎＭ、好ましくは＜０．１ｎＭを有する化合物をいい、最も好ましいＫｉはｐＭ以下の範囲を有する。ここで、Ｋｉ値は、公知の高い親和性ベクター１２５Ｉ−Ｓａｒ１Ｉｌｅ８−アンジオテンシンＩＩとの競合によって決定されたものである。このアッセイ系におけるＡｎｇＩＩに対するＫｉはおよそ５ｎＭである。
【００５８】
画像化用部分で標識された、バルサルタン、カンデサルタン及びエプロサルタンのようないわゆる「サータン」類の薬剤、好ましくはロサルタンに由来するＡｎｇＩＩ−レセプターアンタゴニストは、ヒト又は動物の身体のインビボ画像化に有用な診断用造影剤である。
【００５９】
本発明の１つの好ましい実施形態は、９９ｍＴｃ標識造影剤の９９ｍＴｃ（ロサルタン−Ｌｅｕ−ジグリコリル−ｃＰｎ２１６）、９９ｍＴｃ（ロサルタン−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ジグリコリル−ｃＰｎ２１６）、９９ｍＴｃ（ロサルタン−Ｌｅｕ−β−Ａｌａ−ジグリコリル−ｃＰｎ２１６）及び９９ｍＴｃ（ロサルタン−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ（プロピオニル−ＰＥＧ（１２）−Ａｃ）−ジグリコロイル−ｃＰｎ２１６）である。
【００６０】
式（Ｉ）の造影剤は、ヒトのような哺乳動物に投与するのに適した形態で式（Ｉ）の化合物を含む医薬製剤として投与するのが好ましい。投与は水溶液のような製剤の注射又は注入により行うのが適切である。製剤は１種以上の製薬上許容できる添加剤及び／又は賦形剤、例えば緩衝剤、シクロデキストリン類のような可溶化剤、又はＰｌｕｒｏｎｉｃ、Ｔｗｅｅｎ若しくはリン脂質のような界面活性剤を含有していてもよい。さらに、アスコルビン酸、ゲンチシン酸又はパラ−アミノ安息香酸のような安定剤又は抗酸化剤及び塩化ナトリウム又はマンニトールのような凍結乾燥用充填剤(bulking agent)を添加してもよい。
【００６１】
本発明はまた、有効量（例えば、インビボ画像形成法において画像コントラストを増強するのに有効な量）の一般式Ｉの組成物又はその塩を、１種以上の薬学的に許容されるアジュバント、賦形剤又は希釈剤と共に含む薬剤組成物を提供する。
【００６２】
さらに別の態様から見ると、本発明は、造影剤をヒト又は動物の身体に投与し、前記身体の少なくとも一部の画像を生成することを含む診断法に使用する造影剤の製造のための、式Ｉの組成物の使用を提供する。
【００６３】
さらに別の態様から見ると、本発明は、式Ｉで定義される物質を含む造影剤組成物を前もって投与されたヒト又は動物の身体の増強された画像を生成する方法であって、前記身体の少なくとも一部の画像を生成することを含んでなる、前記方法を提供する。
【００６４】
本発明はさらに、心不全及びＡＴ１レセプターのアップレギュレーションに関連する他の疾患の治療の効果をモニターする方法を提供する。
【００６５】
さらにもう１つ別の態様において、本発明は、リガンド−キレートコンジュゲート及び還元剤を含む、式（Ｉ）の放射性薬剤組成物の調製用キットを提供する。好ましくは、還元剤は第一スズ塩である。キットはさらに、１種以上の安定剤、抗酸化剤、凍結乾燥用充填剤及び可溶化剤を含んでいてもよい。
【００６６】
本明細書でアミノ酸に対して使用する３文字略語は以下の意味を有する。
Ａｌａ  −  アラニン
Ａｓｐ  −  アスパラギン酸
Ａｒｇ  −  アルギニン
Ｇｌｕ  −  グルタミン酸
Ｇｌｙ  −  グリシン
Ｌｙｓ  −  リジン
Ｌｅｕ  −  ロイシン
Ｓａｒ  −  サルコシン
Ｖａｌ  −  バリン
Ｔｙｒ  −  チロシン
Ｉｌｅ  −  イソロイシン
Ｈｉｓ  −  ヒスチジン
Ｐｒｏ  −  プロリン
Ｐｈｅ  −  フェニルアラニン
Ｎａｌ  −  ２−アミノ−３−ナフチルプロピオン酸
Ｃｈａ  −  ２−アミノ−３−シクロヘキシルプロピオン酸。
【００６７】
本明細書で使用するその他の略語の意味は次の通りである。
ＤＯＴＡ  −  １，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸
ＰＥＧ  −  ポリエチレングリコール
ＤＩＥＡ  −  ジイソプロピルエチルアミン
ＤＰＰＡ  −  ジフェニルホスホリルアジド
ＤＢＵ  −  １，８−ジアザ−ビシクロ（５，４，０）ウンデス−７−エン
ＤＭＦ  −  ジメチルホルムアミド
ＭＤＰ  −  メチレンジホスホネート
ＴＦＡ  −  トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ  −  テトラヒドロフラン
ＨＡＴＵ  −  Ｎ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジノ−１−イルメチレン］−Ｎ−メチルメタナミニウムヘキサフルオロホスホネートＮ−オキシド
ＰｙＡＯＰ  −  ７−アザベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウム−ヘキサフルオロホスフェート
Ｆｍｏｃ  −  ９−フルオレニルメトキシカルボニル。
【００６８】
一般手順
反応式１に、ロサルタンリンカーキレート剤コンジュゲートの固相合成を示す。円は固体支持体粒子を表す。
【００６９】
【化６】
2007512321.tif 000007
Ｋｉの決定
化合物の親和性は、解離定数（Ｋｄ）として決定し、既知の親和性の放射性標識されたリガンドの置換によって測定した。
【００７０】
化合物のＡＴ１レセプターに対する親和性は、そのレセプターを発現するＣＨＯ細胞由来の膜を用いた競合アッセイで決定されている。ＡＴ１レセプターと非常に効率的に結合することが知られているリガンドである１２５Ｉ−Ｓａｒ１−Ｉｌｅ８−アンジオテンシンＩＩの結合を、様々な濃度の試験物質と競合させた。Ｋｉは、競合アッセイにおいて、放射性リガンドが存在しなければレセプターの５０％を占めることになる競合するリガンドの濃度である。Ｋｉは次のＣｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｓｏｆｆ式を用いて計算される。
Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋（Ｌ）／Ｋｄ）
式中、（Ｌ）は使用する放射性標識されたリガンドの濃度であり、Ｋｄは放射性標識されたリガンドのレセプターに対する解離定数である。ＩＣ５０は放射性リガンドの特異的結合の５０％を置換する競合性リガンドの濃度である。ある化合物に対するＩＣ５０値は放射性リガンドの濃度に応じて実験間で変わり得るが、Ｋｉは絶対値である。
【００７１】
９９ｍＴｃ−標識化手順
０．１ｍｇの凍結乾燥したｃＰｎ２１６由来化合物を０．２ｍｌの（蒸留、酸素不含）水に溶解することによって調製物を作成する。この溶液を１０ｍｌの窒素を充填したバイアル中に移す。０．５ｍｌの炭酸塩緩衝液、０．５ｍｌのＮａ９９ｍＴｃＯ４溶液及び０．１ｍｌのＳｎ−ＭＤＰ溶液を加える。この調製物を室温で２０分放置する。
【００７２】
炭酸塩緩衝液：炭酸塩緩衝液はｐＨが９．２であり、水１ｍｌ当たり８．４ｍｇのＮａＨＣＯ３及び１０．６ｍｇのＮａ２ＣＯ３を含有する。使用する前に窒素ガスで１５分以上パージする。
【００７３】
Ｎａ９９ｍＴｃＯ４溶液：テクネチウム発生器（例えば、Ｉｆｅｔｅｃ発生器）溶出液、２ＧＢｑ／ｍｌの放射活性濃度に希釈、酸素不含。
【００７４】
Ｓｎ−ＭＤＰ溶液：この溶液は水１ｍｌ当たり０．１３１ｍｇのＳｎＣｌ２＊２Ｈ２Ｏ及び０．９２５ｍｇのＭＤＰ（メチレンジホスホネート）を含有する。この溶液は使用前に連続的に窒素ガスをパージしながら新たに作成する。
【実施例】
【００７５】
実施例１  短いＰＥＧ−リンカーを介してｃＰｎ２１６で誘導体化されたロサルタン−Ｌｅｕ（固相合成）
【００７６】
【化７】
2007512321.tif 000008
反応は全て、手動窒素バブラー装置で行った。
【００７７】
ａ）ロサルタンとトリチル誘導体化固体支持体との結合
【００７８】
【化８】
2007512321.tif 000009
ロサルタン（ＭＳＤ、０．２３６ｇ、０．５５８ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（Ｆｌｕｋａ、０．２３３ｍｌ、１．６７ｍｍｏｌ）を、塩化トリチル樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ、置換度１．２４ｍｍｏｌ／ｇ、０．３００ｇ）のＤＭＦ（５ｍｌ）懸濁液に加えた。４日後、樹脂を排液し、洗浄した。樹脂の一部試料を開裂した（ジクロロメタン／ＴＦＡ／トリイソプロピルシラン、９２．５：５．０：２．５、１５ｍｉｎ）。ＨＰＬＣ分析（カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ  ４．６×５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配１０〜４０％Ｂ、１０ｍｉｎ、流量２．０ｍｌ／ｍｉｎ、ＵＶ検出２１４及び２５４ｎｍ）により、ロサルタンに相当するｔＲ６．７分のピークが得られた。この樹脂をジクロロメタン／メタノール／ジイソプロピルエチルアミン溶液（１７：２：１、２０ｍｌ、１ｈ）で処理し、ジクロロメタンで洗浄し、乾燥した。
【００７９】
ｂ）アジドによるヒドロキシル基の置換
【００８０】
【化９】
2007512321.tif 000010
ジフェニルホスホリルアジド（Ａｌｄｒｉｃｈ、０．４８１ｍｌ、２．２３ｍｍｏｌ）及びＤＢＵ（０．６１１ｍｌ、４．０９ｍｍｏｌ）を、ａ）で得られた樹脂結合ロサルタン（０．３７２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍｌ）懸濁液に加えた。反応を一晩継続させた。樹脂の一部試料をａ）に記載したようにして開裂した。ＬＣ−ＭＳ（カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ  ５０×４．６０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配２０〜８０％Ｂ、１０ｍｉｎ、流量１ｍｌ／ｍｉｎ、ＵＶ検出２１４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）による分析により、上記構造に相当するｔＲ７．３分、ｍ／ｚ４４８．１（ＭＨ＋）のピークが得られた。
【００８１】
ｃ）アジド基のアミンへの還元
【００８２】
【化１０】
2007512321.tif 000011
ｂ）で得られた樹脂のＴＨＦ（４ｍｌ）懸濁液に、塩化スズ(ＩＩ)（Ａｃｒｏｓ、０．１４１ｇ、０．７４４ｍｍｏｌ）、チオフェノール（Ｆｌｕｋａ、０．３０４ｍｌ、２．９７６ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（Ｆｌｕｋａ、０．３１１ｍｌ、２．２３ｍｍｏｌ）を加えた。１．５時間後、樹脂の一部試料をａ）に記載したようにして開裂した。ＬＣ−ＭＳ分析（カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ  ５０×４．６０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配２０〜８０％Ｂ、１０ｍｉｎ、流量１ｍｌ／ｍｉｎ、ＵＶ検出２１４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）により、アミンに期待される通りｍ／ｚ４２２．２（ＭＨ＋）のピークが１．９分で得られた。
【００８３】
ｄ）ロサルタン−Ｌｅｕ−ジグリコロイル−ＰＥＧ（４）−ジグリコロイル−ｃＰｎ２１６
標準カップリング用試薬（ＨＡＴＵ及びＤＩＥＡ）及び標準Ｆｍｏｃ−開裂手順（ＤＭＦ中２０％ピペリジン）を用いて、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ、０．０３０ｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）及びＦｍｏｃ−アミノＰＥＧジグリコール酸（Ｐｏｌｙｐｕｒｅ、０．０４５ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）を、ｃ）で得られた樹脂結合アミノ−ロサルタン（０．０４２ｍｍｏｌ）の一部試料にＤＭＦ中で順次カップリングさせた。カップリングの完了は標準Ｋａｉｓｅｒ試験でチェックした。ジグリコール酸無水物（Ａｌｄｒｉｃｈ、０．０１０ｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（０．０１４ｍｌ、０．０８４ｍｍｏｌ）を用いて、第２のジグリコロイル単位を導入した。この樹脂（末端カルボキシル官能基を含有する）に、キレートｃＰｎ２１６（０．０２９ｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）、ＰｙＡＯＰ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、０．０２２ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（０．０１４ｍｌ、０．０８４ｍｍｏｌ）を加えた。２時間後、化合物を樹脂から開裂した（ジクロロメタン／ＴＦＡ／トリイソプロピルシラン、９２．５：５．０：２．５溶液、３０分）。この溶液を濾過し、濃縮し、分取用ＨＰＬＣ（カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ５μｍ  １０．０×２５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配２５〜３０％Ｂ、６０ｍｉｎ、流量５．０ｍｌ／ｍｉｎ、ＵＶ検出２１４ｎｍ）で精製し、凍結乾燥後３ｍｇの生成物を得た。ＬＣ−ＭＳ分析（カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ  ５０×４．６０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配１０〜８０％Ｂ、１０ｍｉｎ、流量０．３ｍｌ／ｍｉｎ、ＵＶ検出２１４及び２５４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）のｔＲ５．９分、ｍ／ｚ１２６６．５（ＭＨ＋））で上記構造を確認した。
【００８４】
この化合物のアンジオテンシン−ＩＩレセプターＡＴ１（Ｋｉ０．５ｎＭ）に対する結合性をインビトロで試験した。
【００８５】
実施例２〜１８  アミノ酸で置換されたロサルタン誘導体
表１に示す一般式（IV）のアミノ誘導体を、実施例１に記載のようにして固体支持体上で合成した。適切な勾配のアセトニトリル／０．１％ＴＦＡ含有水を用いて逆相クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム）で生成物を精製し、電気スプレーイオン化を用いたＬＣ−ＭＳで分析した。
【００８６】
【化１１】
2007512321.tif 000012
【００８７】
【表１】
2007512321.tif 000013
実施例１９〜４６  レポーター部分を含むロサルタン−Ｌｅｕ誘導体
表２に挙げる一般式（Ｖ）の化合物を、実施例１に記載のようにして固体支持体上で合成した。ビオチン及びフルオレセイン−ＮＨＳエステルはそれぞれＦｌｕｋａ及びＰｉｅｒｃｅから購入した。ＴｃキレートｃＰｎ２１６をグルタリルリンカーを介して結合する場合、３つの異なる合成方法を使用した。殆どの場合は、式（VI）の活性エステルを使用した。これに代わる場合として、ＰｙＡＯＰ又はＨＡＴＵのような試薬を用いて相当する遊離酸をカップリングさせたが、この場合にはカップリングを数回繰り返す必要があった。また、グルタリル−ｃＰｎ２１６部分を、実施例１で相当するジグリコロイル誘導体に関して記載したようにして二段階反応で結合した。すなわち、第１に、樹脂をグルタル酸無水物と反応させ、次の段階で樹脂に結合したカルボン酸を活性化し、式（VＩＩ）の遊離のアミンとしてのｃＰｎ２１６をカップリングさせる。テトラアミンキレートを含有する化合物の合成の場合、完全にＢｏｃで保護された構築ブロック（VＩＩI）（英国特許第０４１６０６２．８号）を使用した。適切な勾配のアセトニトリル／０．１％ＴＦＡ含有水又はギ酸を用いた逆相クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム）により生成物を精製し、電気スプレーイオン化を用いたＬＣ−ＭＳによって分析した。
【００８８】
【化１２】
2007512321.tif 000014
【００８９】
【表２】
2007512321.tif 000015
【表３】
2007512321.tif 000016
【表４】
2007512321.tif 000017
【表５】
2007512321.tif 000018
【図面の簡単な説明】
【００９０】
【図１】図は、ＲＡＡＳ系を概略的に示す。
【図１】
2007512321.tif 000021
【国際調査報告】
2007512321.tif 000022
2007512321.tif 000023
2007512321.tif 000024
2007512321.tif 000025