(57)【要約】【課題】  タンパク質−オリゴマープロドラッグを消化管を介して血流中に送達し、オリゴマー部分が放出されて活性が充分なタンパク質を生ずるプロドラッグ方法に関するさらなる発展を提供する。【解決手段】式：（Ｉ）（式中、Ｒ1は、アルキル、−ＣＨ2（ＯＣ2Ｈ4）ＯＣＨ3および−（ＯＣ2Ｈ4）ＯＣＨ3からなる群から選択され；ｎは０〜４であり；Ｏｌｉｇは式（Ｉ）（式中、Ｌは、ＣＨ2Ｏ、ＣＨ2ＯＸ、ＯＸ、Ｃ（Ｏ），Ｃ（Ｏ）Ｘ、ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）、ＸＮＨＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）Ｘ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、Ｃ（ＯＮＨＸおよび（Ｉ）（式中、Ｘはアルキル1〜6であるかまたは存在せず、ＹはＮもしくはＯまたは存在せず、およびＲ3はアルキル1〜6である）からなる群から選択される必要に応じたリンカーである）を有するオリゴマーであり；ＰＡＧは鎖状または分岐鎖状ポリアルキレングリコール部分であり；Ｒ2は、Ｘが存在する場合はアルキル1〜22キャッピング部分であるかまたはＸが存在しない場合はアルキル2〜22であり；ｑは１〜分岐の最大数までの数であり；ｍは１〜５である）を含む化合物である。
2007508244.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2007508244.tif 000034
（式１）
（式中、
Ｒ1は、アルキル、−ＣＨ2（ＯＣ2Ｈ4）ＯＣＨ3、および−（ＯＣ2Ｈ4）ＯＣＨ3からなる群から選択され；
ｎは０〜４であり；
ｍは１〜５であり；
Ｏｌｉｇは、式：
−Ｌ−Ｏ−ＰＡＧ−［−Ｒ2］ｑ
を有するオリゴマーである
（式中、Ｌは、−ＣＨ2Ｏ−、−ＣＨ2ＯＸ−、−ＯＸ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｘ、−ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＸＮＨＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｘ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＸ−、および、
【化２】
2007508244.tif 000035
（式中、
Ｘはアルキル1-6であるかまたは存在せず、
ＹはＮもしくはＯであるかまたは存在せず、ならびに、
Ｒ3はアルキル1-6である）からなる群から選択される任意のリンカー部分であり；
ＰＡＧは直鎖状または分岐鎖状ポリアルキレングリコール部分であり；
Ｒ2は、Ｘが存在する場合にはアルキル1-22キャッピング部分であるか、または、Ｘが存在しない場合にはアルキル2-22であり；および
ｑは１〜ＰＡＧの分岐の最大数までの数字である）化合物。
【請求項２】
フェノール部分の炭素４にカップリングしているＯｌｉｇを含む請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
フェノール部分の炭素３にカップリングしているＯｌｉｇおよびフェノール部分の炭素５にカップリングしているＯｌｉｇを含む請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
ｍが１であり、Ｏｌｉｇがフェノール部分の炭素４にカップリングしている請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
ｍが１であり、Ｏｌｉｇがフェノール部分の炭素３または炭素５にカップリングしている請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
（ａ）ｍが２であり、
（ｂ）第１のＯｌｉｇがフェノール部分の炭素３にカップリングしており、
（ｃ）第２のＯｌｉｇがフェノール部分の炭素５にカップリングしている
請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｌが存在し、Ｘが存在しない請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
ＬおよびＸが共に存在する請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
ＰＡＧが直鎖状ポリアルキレングリコール部分である請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
ＰＡＧが直鎖状ポリエチレングリコール部分である請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
ＰＡＧが分岐鎖状ポリアルキレングリコール部分である請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
ＰＡＧが分岐鎖状ポリエチレングリコール部分である請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
ｑが１〜５である請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
ｑが２である請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ2がアルキル5-12である請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ2がアルキル1-4である請求項１に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｘが存在し、Ｒ2がメチルである請求項１に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ1がアルキル1-22である請求項１に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ1がアルキル1-12である請求項１に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ1がアルキル1-6である請求項１に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｒ1がメチルであり、ＬがアミドでもＯでもない請求項１に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｒ1がメチルである請求項１に記載の化合物。
【請求項２３】
請求項１に記載の化合物の活性化型。
【請求項２４】
クロロホルメート、ＮＨＳカルボネートおよびパラニトロフェニルカルボネートからなる群から選択される活性部分を含む請求項２３に記載の活性化型。
【請求項２５】
カルバメート結合によって共有結合によりカップリングされ、生物学的に活性な薬剤の生物学的活性を保持するまたは保持しないプロドラッグを形成する請求項１に記載の化合物を含む生物学的に活性な薬剤。
【請求項２６】
請求項１に記載の１つ以上の化合物に共有結合によりカップリングしているペプチドまたはタンパク質。
【請求項２７】
式：
【化３】
2007508244.tif 000036
（式２）
（式中
Ｘはアルキルであるかまたは存在せず；
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
ｎは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数である）を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項２８】
式：
【化４】
2007508244.tif 000037
（式３）
（式中
Ｘはアルキルであるかまたは存在せず；
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
ｎは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数である）を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項２９】
式：
【化５】
2007508244.tif 000038
（式４）
（式中
Ｘはアルキルであるかまたは存在せず；
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
Ｒ’はアルキルであり；
ｎは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数である）を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項３０】
式：
【化６】
2007508244.tif 000039
（式５）
（式中
Ｘはアルキルであるかまたは存在せず；
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
ｎは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数である）を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項３１】
式：
【化７】
2007508244.tif 000040
（式６）
（式中
Ｘはアルキルであるかまたは存在せず；
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
ｎは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数である）を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項３２】
式：
【化８】
2007508244.tif 000041
（式７）
（式中
Ｘはアルキルであるかまたは存在せず；
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
ｎは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数である）を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項３３】
式：
【化９】
2007508244.tif 000042
（式８）
（式中
Ｘはアルキルであるかまたは存在せず；
ｎは１〜２２であり；
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
ｍは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数である）を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項３４】
式：
【化１０】
2007508244.tif 000043
（式９）
（式中
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ２−５０であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
ｎは１または２であり；
ｍは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数である）を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項３５】
ｎが２であり；
【化１１】
2007508244.tif 000044
がフェノール部分の３位および４位に結合している
請求項３４に記載の化合物。
【請求項３６】
式：
【化１２】
2007508244.tif 000045
（式中
Ｘはアルキルであるかまたは存在せず；
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
ｎは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数であり；
Ｒ1はアルキルである）を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項３７】
式：
【化１３】
2007508244.tif 000046
（化合物１）
を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項３８】
式：
【化１４】
2007508244.tif 000047
（化合物２）
を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項３９】
式：
【化１５】
2007508244.tif 000048
（化合物３）
を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項４０】
式：
【化１６】
2007508244.tif 000049
（化合物４）
を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項４１】
式：
【化１７】
2007508244.tif 000050
（化合物５）
を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項４２】
式：
【化１８】
2007508244.tif 000051
（化合物６）
を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項４３】
式：
【化１９】
2007508244.tif 000052
（化合物７）
を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項４４】
純プロドラッグまたは部分プロドラッグである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４５】
請求項１に記載の化合物を製薬学的に許容されうる担体中に含む製薬学的組成物。
【請求項４６】
本明細書に記載するステップにより請求項１に記載の化合物を合成する方法。
【請求項４７】
請求項１に記載の化合物の有効量を被験者に投与するステップを含む、このような治療を必要としている被験者を治療する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、加水分解可能なプロドラッグを製造するためのアリールカルバメートオリゴマー、このようなオリゴマーを含むオリゴマー形成したプロドラッグ、アリールカルバメートオリゴマーおよびオリゴマー形成したプロドラッグを合成する方法ならびにこのようなポリマープロドラッグを使用して治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
多数のペプチドおよびタンパク質（本明細書において集合的に「ポリペプチド」と呼ぶ）は、治療薬として有用となる可能性があるが、適当な投与手段がない。治療薬としてのポリペプチドの有用性は、ポリペプチドが特定のインビボ標的に到達することが可能になる前に、生物学的障壁を通過しなければならいことによって制限されている。非経口的に投与されるポリペプチドは血漿プロテアーゼによって容易に代謝される。おそらく最も興味深い投与経路である経口投与はさらに問題がある。胃では、酸がタンパク質を分解し、酵素が解体する。分解されないで無傷で胃に流入するポリペプチドは、胃の酵素および膵臓の酵素、エキソ−およびエンドペプチダーゼならびに刷子縁ペプチダーゼを含む種々の酵素で連続的に集中攻撃されるので、さらにタンパク質分解を受ける。結果として、腸内腔から血流へのポリペプチドの通過はかなり制限される。従って、治療用ポリペプチドの非経口および経口投与を可能にする手段の必要性が当技術分野において存在する。
【０００３】
ポリペプチドの経口および非経口送達を改善する試みにおいて種々の方法が使用されている。使用される方法には、消化管におけるタンパク質およびペプチドの分解速度を遅くする酵素阻害物質の使用；局所的な消化酵素を不活性化するためのｐＨの操作；傍細胞および経細胞輸送を増加することによってタンパク質およびペプチドの吸収を改善するための浸透増強物質の使用；腸上皮、特にパイエル板による無傷の吸収を促進し、酵素分解に対する抵抗性を増加するための粒状担体としてのナノ粒子の使用；腸内腔における化学的および酵素的分解から薬物を保護する乳濁液；ならびに水溶性が悪い薬物のためのミセル形成が挙げられるが、それに限定されるわけではない。
【０００４】
ポリペプチドの投与を改善するための重要な方法のいくつかは、ポリマー部分などの種々の部分にポリペプチドを結合して、ポリペプチド薬物の物理化学的特性を改良し、酸および酵素分解に対する抵抗性を増加し、粘膜を通過するこのような薬物の透過性を増大することであった。例えば、ＡｂｕｃｈｏｗｓｋｉおよびＤａｖｉｓは、酵素を誘導体化して、水溶性で、非−免疫原性で、インビボにおいて安定な産物を提供する種々の方法を記載している（「溶解性ポリマー−酵素付加物」、薬物としての酵素（「Ｓｏｌｕｂｌｅ  ｐｏｌｙｍｅｒｓ−  Ｅｎｚｙｍｅ  ａｄｄｕｃｔｓ」，  Ｅｎｚｙｍｅｓ  ａｓ  Ｄｒｕｇｓ）、ＨｏｌｃｅｎｂｅｒｇおよびＲｏｂｅｒｔｓ編、Ｊ．  ＷｉｌｅｙおよびＳｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、Ｎ．  Ｙ．、１９８１））。ＡｂｕｃｈｏｗｓｋｉおよびＤａｖｉｓは、酵素に、デキストラン、ポリビニルピロリドン、グリコペプチド、ポリエチレングリコールおよびポリアミノ酸などのポリマー物質を結合する種々の方法を論じている。得られた結合ポリペプチドは、生物学的活性および非経口適用のための水溶性を保持することが報告されている。さらに、米国特許第４，１７９，３３７号において、Ｄａｖｉｓらは、酵素およびインスリンなどのポリペプチドを、分子量５００〜２０，０００ダルトンのポリエチレングリコールまたはポリプロプロピレングリコールに結合して、生理学的に活性で、非−免疫原性で水溶性のポリペプチド組成物を提供することができることを報告している。ポリエチレングリコールまたはポリプロピレングリコールはポリペプチドを活性の損失から保護することが報告されており、この組成物は、免疫原性応答を実質的に生じないで哺乳類の循環系に注射することができる。しかし、この方法はポリペプチドの非経口投与を改善する方向のもので、経口送達に対するものではない。
【０００５】
タンパク質に結合したポリエチレングリコールは変性および酵素消化に対する
安定性を改善することを他の研究者は示している。（Ｂｏｃｃｕ  ｅｔ  ａｌ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ  １４，１１−１２０（１９８２））。しかし、これらのポリマーは、膜相互作用を増大する成分を含有していない。従って、得られた結合物には上記と同じ問題があり、経口投与に好適でない。
【０００６】
ポリペプチドを両親媒性オリゴマー、すなわち親水性および親油性を有するオリゴマーに結合することに関係する本発明者らの以前の研究は、ポリペプチドの経口送達分野の大きな進歩であった。例えば、Ｅｋｗｕｒｉｂｅらに付与された米国特許第５，６８１，８１１号ならびに関連の米国特許第５，４３８，０４０号および同第５，３５９，０３０号は、治療薬を含む安定化された結合ポリペプチド複合体であって、親油性部分および親水性部分を含むオリゴマーに結合したものを記載している。’８１１号特許に記載されている好ましい一群のポリペプチド−オリゴマー結合物には、直鎖状ポリアルキレングリコール部分および直鎖状アルキル部分を有するポリマーが挙げられる。
【０００７】
Ｅｋｗｕｒｉｂｅらに付与された米国特許第６，３０９，６３３号は、親水性成分および親油性成分を有するオリゴマーにポリペプチドを結合し、親油性成分が生理学的条件下において加水分解可能である「部分プロドラッグ」方法を記載している。オリゴマーを使用してポリペプチドを結合することにより、完全なオリゴマーの存在が、経口投与された結合物を消化管を介して血流中に送達する助けとなり、親油性成分は加水分解されて親水性成分（例えば、ポリエチレングリコールポリマー）を放出する「部分プロドラッグ」が得られる。血流中での親油性成分の加水分解は結合物を生物活性にする（または生物活性を改善する）および／または循環半減期を改善することができる。しかし、親ポリペプチドの有用な生物活性をなくさない方法で経口投与のためにポリペプチドを両親媒的に結合する手段の大きな必要性が当技術分野において存在する。
【０００８】
プロドラッグ方法は、通常、小型分子治療薬に使用される。例えば、特許を取得している６−ＭＮＡおよびパクリタキセルプロドラッグはカルボキシレートおよびアルコールのエステルプロドラッグを使用することが知られているが、ＡＰＡＺＡ（商標）化合物（Ｎｏｂｅｘ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｔｒｉａｎｇｌｅ  Ｐａｒｋ，  ＮＣ）は、独立に活性のある２つの小型分子薬物が、インビボにおいて還元的に切断されるアゾ結合によって互いに結合されているプロドラッグである（米国特許第６，５５２，０７８号、同第６，５４１，５０８号、同第６，５２５，０９８号、同第６，４３６，９９０号および  同第６，３８０，４０５号参照）。
【０００９】
Ｇａｒｍｅｎらはタンパク質−ＰＥＧプロドラッグを記載している（Ｇａｒｍａｎ，  Ａ．  Ｊ．およびＫａｌｉｎｄｊｉａｎ，  Ｓ．  Ｂ．，  ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．，  １９８７，２２３，  ３６１−３６５）。この著者らは、多分散ＭＰＥＧ５０００から無水マレイン酸試薬を調製し、組織プラスミノーゲンアクチベーターおよびウロキナーゼに結合することを報告している。アミノ酸と無水マレイン酸の反応は、通常、ペプチドシークエンシング化学に使用される。マレイル−アミド結合を加水分解して、アミン含有薬剤を再形成することは、隣接遊離カルボキシル基の存在および二重結合によって作られる攻撃の幾何学によって助けられている。無水マレイン酸結合物の未変性のタンパク質が生理学的条件下において放出され、プロドラッグを介する投与はタンパク質の除去速度を５〜１０倍延長したことをＧａｒｍａｎは記載している。
【００１０】
さらに最近では、ペグ化インターフェロンの開発において、Ｒｏｂｅｒｔらは、多分散ＰＥＧとインターフェロンα−２ｂの間に分解可能な結合を使用することを記載している（Ｒｏｂｅｒｔｓ，  Ｍ．  Ｊ．  ｅｔ  ａｌ．  ，  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  ＤｅｌｉｖｅｒｙＲｅｖ．，  ２００２，  ５４，  ４５９−４７６）。低ｐＨ（〜５）においてインターフェロンにＰＥＧを結合すると、ヒスチジンのイミダゾール環の窒素の１つにカルバメートを介して結合している結合物が得られたことをこの著者らは報告した。ＰＥＧは経時的にタンパク質から放出された。これらのＰＥＧ−インターフェロンα−２ｂ結合物はＰＥＧ−Ｉｎｔｒｏｎ（登録商標）の商品名で知られている（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）。インビトロにおけるＰＥＧ−Ｉｎｔｒｏｎ（登録商標）はＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標）（非−加水分解性分岐鎖状ＰＥＧを有するペグ化インターフェロン、Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ  Ｒｏｃｈｅ）より活性が強いことが報告されているが、ＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標）はインビボにおいて有効であることが報告されている。
【００１１】
放出可能なＰＥＧ化学分野における他の努力は、１，６または１，４ベンジル脱離（ＢＥ）方法の使用（Ｌｅｅ，  Ｓ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．，  ２００１，１２，１６３−１６９；Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ，  Ｒ．  Ｂ．  ｅｔ  ａｌ．，  米国特許第６，１８０，０９５号，２００１；Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ，  Ｒ．  Ｂ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９９９，４２，３６５７−３６６７．）；トリメチルロックラクトン化（ＴＭＬ）の使用（Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ，  Ｒ．  Ｂ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，２０００，４３，４７５−４８７）；ＰＥＧカルボン酸のヒドロキシ−末端カルボン酸リンカーへのカップリング（Ｒｏｂｅｒｔｓ，  Ｍ．  Ｊ．，Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．，１９９８，８７（１１），１４４０−１４４５）ならびにカルバメートとＰＥＧアミドまたはカルバメートとエーテルの間のメタ関係に関係するプロドラッグ構造（Ｂｅｎｔｌｙらに付与された米国特許第６，４１３，５０７号）を含む、アリールカルバメートを介してアミン−含有薬物に結合しているＭＰＥＧフェニルエーテルおよびＭＰＥＧベンザミドのファミリーに関係するＰＥＧプロドラッグ（Ｒｏｂｅｒｔｓ，  Ｍ．  Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．，２００２，５４，４５９−４７６）；ならびに加水分解機序と対照的にジスルフィド還元機序に関係するプロドラッグ（Ｚａｌｉｐｓｋｙ，  Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．，  １９９９，１０（５），７０３−７０７）に焦点が絞られている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、タンパク質−オリゴマープロドラッグを消化管を介して血流中に送達し、オリゴマー部分が放出されて活性が充分なタンパク質を生ずるプロドラッグ方法に関するさらなる発展を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明の実施態様によると、式：
【化１】
2007508244.tif 000003
（式１）
（式中、
Ｒ1は、アルキル、−ＣＨ2（ＯＣ2Ｈ4）ＯＣＨ3、および−（ＯＣ2Ｈ4）ＯＣＨ3から選択され；
ｎは０〜４であり；
ｍは１〜５であり；
Ｏｌｉｇは、式：
−Ｌ−Ｏ−ＰＡＧ−［−Ｒ2］ｑ
を有するオリゴマーであり；
（式中、Ｌは、−ＣＨ2Ｏ−、−ＣＨ2ＯＸ−、−ＯＸ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｘ、−ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＸＮＨＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｘ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＸ−、および、
【化２】
2007508244.tif 000004
（式中、
Ｘはアルキル1-6であるかまたは存在せず、
ＹはＮもしくはＯであるかまたは存在せず、および
Ｒ3はアルキル1-6である）からなる群から選択される任意のリンカー部分であり；
ＰＡＧは直鎖状または分岐鎖状ポリアルキレングリコール部分であり；
Ｒ2は、Ｘが存在する場合にはアルキル1-22キャッピング部分であるか、またはＸが存在しない場合にはアルキル2-22であり；
ｑは１〜ＰＡＧの分岐の最大数までの数字である）
）を有する化合物が提供される。
【００１４】
他の実施態様において、本発明は、式Ｉの化合物を含む純プロドラッグおよび部分プロドラッグ、本発明の化合物を含む医薬組成物、このような化合物を合成する方法、このような化合物を使用する治療を必要としている被験者を治療する方法ならびに医薬品を製造するための本発明の化合物の使用を提供する。
【００１５】
本発明は、経口投与されたプロドラッグの少なくとも一部が、（ｉ）消化管を通過するポリペプチドを保護するプロドラッグ形態で存在する（すなわち、オリゴマーが結合したままである）；（ｉｉ）消化管壁を通過して血流に流入する；および／または（ｉｉｉ）系（例えば、血流および／または肝臓）において変換されて、治療的に有効な量の生物活性が充分な親ポリペプチドを生ずる「純プロドラッグ」ポリペプチド結合方法を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
本発明の説明に使用する用語は特定の実施態様を説明する目的のためだけであって、本発明を限定する意図のものではない。本発明および特許請求の範囲の説明に使用する単数形「ある１つのもの」および「その１つもの」は、内容が明らかにそうでないことを示さない限り、複数形も含むことが意図されている。
【００１７】
本明細書において使用する以下の用語は以下に示す意味を有する：
【００１８】
「プロドラッグ」または「純プロドラッグ」は、（ｉ）親薬物化合物の生物活性の一部、全てを保持するまたは全く保持せず、（ｉｉ）被験者において代謝されて親薬物化合物を生ずるように化学的に誘導体化されている生物学的に活性な薬剤を意味する。オリゴマー形成されたポリペプチドプロドラッグまたは純プロドラッグに関連して、全てのオリゴマーがインビボにおいて脱離されて、生物学的に活性な非結合ポリペプチドを生じてもよい。
【００１９】
「部分プロドラッグ」は、（ｉ）親薬物化合物の生物活性の一部、全てを保持するまたは全く保持せず、（ｉｉ）被験者において代謝されて、生物学的に活性な薬剤の生物学的に活性な誘導体を生ずるように化学的に誘導体化されている生物学的に活性な薬剤を意味する。オリゴマー形成されたポリペプチド部分プロドラッグに関連して、１つ以上のオリゴマーの一部を切断することによっておよび／または１つ以上の完全なオリゴマーを切断することによって生物学的に活性なペプチド誘導体（例えば、ポリマー−結合および／またはオリゴマー−結合ポリペプチド）をインビボにおいて産生することができる。
【００２０】
「生物学的に活性な薬剤」は、本発明の方法で結合されうる治療剤または薬剤を意味する。生物学的に活性な薬剤は小型分子、ペプチドまたはタンパク質であってもよい。生物学的に活性な薬剤の例には、以下の治療カテゴリーに入るものが挙げられるが、それに限定されるわけではない：ＡＣＥ阻害剤；抗狭心症薬；抗不整脈薬；抗喘息薬；抗コレステロール血症薬；抗痙攣薬；抗うつ薬；抗下痢製剤；抗ヒスタミン剤；抗高血圧薬；抗感染症薬；抗炎症薬；抗脂肪薬；抗躁剤；抗嘔吐剤；抗卒中剤；抗甲状腺製剤；抗腫瘍薬；鎮咳剤；抗尿酸血症薬；抗ウイルス薬；座瘡薬；アルカロイド；アミノ酸製剤；同化剤；鎮痛剤；麻酔薬；血管形成阻害剤；制酸剤；抗関節炎剤；抗生物質；抗凝固剤；制吐剤；抗肥満薬；抗寄生虫薬；抗精神病薬；解熱剤；鎮痙薬；抗血栓薬；抗不安薬；食欲刺激剤；食欲抑制剤；β遮断剤；気管支拡張剤；心血管作動薬；脳血管拡張薬（ｃｅｒｅｂｒａｌ  ｄｉｌａｔｏｒ）；キレート剤；コレシストキニンアンタゴニスト；化学療法剤；認知活性化剤；避妊薬；冠動脈拡張薬；鎮咳剤；充血除去剤；消臭剤；外皮用剤；糖尿病剤；利尿剤；皮膚軟化剤；酵素；赤血球生成剤；去痰剤；排卵促進剤；防かび剤；消化管剤；成長調節剤；ホルモン補充療法剤；血糖上昇剤；催眠剤；血糖降下剤；下剤；片頭痛治療剤；ミネラル補給剤；粘液溶解剤；麻薬；神経遮断薬；神経筋作用薬；ＮＳＡＩＤ；栄養補給剤（ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  ａｄｄｉｔｉｖｅｓ）；抹消血管拡張剤；プロスタグランジン；向精神薬；レニン阻害剤；呼吸刺激剤；ステロイド；覚醒剤；交感神経遮断薬；甲状腺製剤；トランキライザー；子宮弛緩薬；膣製剤；血管収縮薬；血管拡張薬；眩暈薬；ビタミン；および創傷治癒剤。生物剤の限定するものではない他の例には、クマリン、インスリン、カルシトニン、ロイ−エンケファリンおよびｍｅｔ−エンケファリンが挙げられる。
【００２１】
「加水分解可能な」は、生理学的条件下において加水分解されうる結合を意味する。
「溶解性」は、ある物質が別の物質と均一に混合する傾向を意味する。
【００２２】
「親水性」は水に溶解する能力を意味し、「親水性部分」または「親水性基」は、親水性であるおよび／または別の化学物質に結合されると、このような化学物質の親水性を増加する部分をいう。
【００２３】
「親油性」は脂質に溶解する能力および／または生体膜を透過する、相互作用するおよび／または通過する能力を意味し、「親油性部分」または「親油性基」は親油性である部分、および／または、別の化学物質に結合されると、このような化学物質の親油性を増加する部分を意味する。
【００２４】
「両親媒性」は、水溶性および脂溶性の両方を示す特性を意味する。
【００２５】
「ポリアルキレングリコール」は、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールおよびポリブチレングリコールを含むが、それに限定されるわけではない直鎖状または分岐鎖状ポリアルキレングリコールポリマーを意味し、ポリアルキレングリコールのモノアルキルエーテルを含む。一実施態様において、ポリアルキレングリコールはポリエチレングリコールまたは「ＰＥＧ」である。「ＰＥＧサブユニット」という用語は、１つのポリエチレングリコール単位、すなわち、−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）−をいう。さらに、「オリゴマー」という用語はポリマーをいうために使用することができる。
【００２６】
「単分散の」は、混合物中の化合物の約１００パーセントが同じ分子量を有する化合物の混合物を記載するために使用される。
【００２７】
「実質的に単分散の」は、混合物中の化合物の少なくとも約９５パーセントが同じ分子量を有する化合物の混合物を記載するために使用される。
【００２８】
「純粋に単分散の」は、混合物中の化合物の約１００パーセントが同じ分子量を有し、同じ分子構造を有する化合物の混合物を記載するために使用される。従って、純粋に単分散の混合物は単分散の混合物であるが、単分散の混合物は必ずしも純粋に単分散の混合物ではない。
【００２９】
「実質的に純粋に単分散の」は、混合物中の化合物の少なくとも約９５パーセントが同じ分子量を有し、同じ分子構造を有する化合物の混合物を記載するために使用される。従って、実質的に純粋に単分散の混合物は実質的に単分散の混合物であるが、実質的に単分散の混合物は必ずしも実質的に純粋に単分散の混合物ではない。
【００３０】
「重量平均分子量」は、混合物中の所定の分子の重量分率×混合物中の各分子の分子質量の積の合計と規定される。「重量平均分子量」は記号ＭWによって表される。
【００３１】
「数平均分子量」は、混合物の総重量を混合物中の分子の数で割ったものと規定され、記号Ｍnによって表される。
【００３２】
「分散係数」（ＤＣ）は、式：
【００３３】
【数１】
2007508244.tif 000005
【００３４】
式中：
ｎは試料中の異なる分子の数であり；
Ｎiは試料中のｉ番目の分子の数であり；
Ｍはｉ番目の分子の質量である）によって規定される。
【００３５】
「化学的安定性」は生理的環境または疑似−生理的環境における所定の化合物の安定性をいう。例えば、化学的安定性は、血漿の存在、プロテアーゼの存在、肝ホモジネートの存在、酸性条件の存在および塩基性条件の存在などであるが、それに限定されるわけではない条件によって特徴づけられる環境における生物学的に活性な薬剤またはプロドラッグの安定性をいう。
【００３６】
「有効量」は、治療効果となりうる望ましい効果を生ずるのに充分な化合物または組成物の量をいう。有効量は、年齢、被験者の全身状態、治療対象の状態の重症度、投与される特定の生物学的に活性のある薬剤、治療期間、任意の併用治療の性質、使用する製薬学的に許容されうる担体ならびに当業者の知識および専門知識内の同様の要因によって変わってもよい。任意の個々の症例の「有効量」は、関連のあるテキストおよび文献を参照することによっておよび／または通常の経験を使用することによって当業者が決定することができる。（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（第２０版、２０００年）参照）。
【００３７】
本発明による組成物の塩、担体、賦形剤または希釈剤などの「製薬学的に許容されうる」成分は、（ｉ）プロドラッグを意図された目的に不適当にすることなく、本発明のプロドラッグと併用することができるという点において組成物の他の成分と適合性であるおよび／または（ｉｉ）（毒性、刺激およびアレルギー反応などの）不当な有害な副作用を生じないで本明細書に提供する被験者に使用するのに好適である成分である。副作用は、それらのリスクが本発明の製薬学的組成物によって提供される利益を超える場合には「不当」である。製薬学的に許容されうる成分の限定するものではない例には、リン酸緩衝生理食塩液、水、油／水エマルジョンなどのエマルジョン、マイクロエマルジョンおよび種々の種類の湿潤剤などの標準的な製薬学的担体のいずれかが挙げられるが、それに限定されるわけではない。
【００３８】
「治療する」または「治療」は、被験者の状態（例えば、１つ以上の症状）の改善、状態の進行の遅延および／または疾患の発症の予防または遅延、臨床パラメーター、疾病または病気の変化等を含む、例えば、疾患、疾病または病気に罹患している被験者に対する有用な影響となりうる調節効果を与える任意の種類の治療をいう。
【００３９】
６．  本発明の詳細な説明
本発明は、薬物部分、特にタンパク質薬物部分などの生物学的に活性な薬剤に結合するためのアリールカルバメートクラスのオリゴマーを提供する。オリゴマーは、結合すると、インビボにおいて加水分解して生物学的に活性な親化合物を生ずる経口投与により生物的に利用できる純プロドラッグを生ずる。
【００４０】
６．１  本発明のオリゴマー
一般に、本発明のオリゴマーは、以下の式：
【００４１】
【化３】
2007508244.tif 000006
（式１）
【００４２】
（式中、
Ｒ1は、アルキル、−ＣＨ2（ＯＣ2Ｈ4）ＯＣＨ3、および−（ＯＣ2Ｈ4）ＯＣＨ3から選択され；
ｎは０〜４であり；
ｍは１〜５であり；
Ｏｌｉｇは、式：
−Ｌ−Ｏ−ＰＡＧ−［−Ｒ2］ｑ
（式中、
Ｌは、−ＣＨ2Ｏ−、−ＣＨ2ＯＸ−、−ＯＸ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｘ、−ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＸＮＨＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｘ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＸ−、および、
【００４３】
【化４】
2007508244.tif 000007
【００４４】
（式中、
Ｘはアルキル1-6であるかまたは存在せず、
ＹはＮもしくはＯであるかまたは存在せず、ならびに、
Ｒ3はアルキル1-6である）からなる群から選択される任意のリンカー部分であり；
ＰＡＧは直鎖状または分岐鎖状ポリアルキレングリコール部分であり；
Ｒ2は、Ｘが存在する場合にはアルキル1-22キャッピング部分であるか、またはＸが存在しない場合にはアルキル2-22であり；および
ｑは１〜ＰＡＧの分岐の最大数までの数字である。）を有するオリゴマー
である。）を有する。
【００４５】
式１において、１つ以上のＯｌｉｇが存在してもよい。各Ｏｌｉｇは、式１のフェノール部分の炭素２〜５のいずれかにカップリングする。例えば、一実施態様において、Ｏｌｉｇはフェノール部分の炭素４にカップリングする。別の実施態様において、Ｏｌｉｇはフェノール部分の炭素４にカップリングし、１つ以上のＯｌｉｇは、炭素４以下の他の炭素にカップリングする。いくつかの実施態様において、１つのＯｌｉｇ（すなわち、ｍ＝１）がフェノール部分の炭素４にカップリングする。他の例示的な実施態様において、Ｏｌｉｇはフェノール部分の炭素３にカップリングするおよび／またはＯｌｉｇはフェノール部分の炭素５にカップリングする。さらに別の実施態様において、２つのＯｌｉｇ（すなわち、ｍ＝２）がフェノール部分の炭素３および５にカップリングする。
【００４６】
いくつかの実施態様において、Ｌは存在し、Ｘは存在しない。他の実施態様において、ＬおよびＸは共に存在する。
【００４７】
ＰＡＧは直鎖状または分岐鎖状ポリアルキレングリコール部分であってもよい。好ましいポリアルキレングリコール部分には、直鎖状または分岐鎖状ポリエチレングリコールおよび直鎖状または分岐鎖状ポリプロピレングリコールが挙げられる。いくつかの実施態様において、ポリエチレングリコールまたはポリプロピレングリコールは非−多分散型、単分散型、実質的に単分散型、純粋に単分散型または実質的に純粋に単分散型であり、これらの用語は、開示内容全体が参照により本明細書に組み入れられる、２００１年６月４日提出の米国特許出願第０９／８７３，７９７号に記載されている。
【００４８】
一実施態様において、Ｒ2は、Ｘが存在する場合には、アルキル1-22キャッピング部分であり、Ｘが存在しない場合には、アルキル1-22である。Ｒ2は、好適にはアルキル1-22であり、好ましくは、アルキル1-12であり、さらに好ましくは、アルキル1-6である。Ｒ2は、好適には、下限は上限より小さい（下限＜上限）という条件を満足する範囲の任意の組み合わせにおいて、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０または２１の下限から２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１または２２の上限までの範囲の炭素原子数を有するアルキル部分である。具体的な実施態様において、Ｘが存在するとき、Ｒ2はメチルである。
【００４９】
ＰＡＧが分岐鎖である場合には、オリゴマーに存在するＲ2部分の数ｑは、分岐鎖状ＰＡＧの分岐の数に制限される。例えば、ｑは、好適には、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０であってもよい。いくつかの実施態様において、ＰＡＧは２、３、４または５つの分岐を有し、ｑは、それぞれ、２、３、４または５である。別の実施態様において、ＰＡＧは２つの分岐を有し、ｑは２である。ｑが１より大きい場合には、Ｒ2は各々同じであってもまたは異なってもよい。例えば、ｑが３である場合には、Ｒ2の２つはＣ2であってもよく、１つはＣ7であってもよい。
【００５０】
一実施態様において、Ｒ1はメチルである。別の実施態様において、Ｒ1はメチルであり、ＬはアミドまたはＯではない。
【００５１】
本発明はまた、上記オリゴマーのいずれかの活性化型、例えば、クロロホルメート、ＮＨＳカルボネートまたは上記オリゴマーのいずれかのパラニトロフェニルカルボネートも提供する。一般に、当業者に理解されるように、反応性部分を有する化合物は、好適な溶媒中で、好適な時間にわたって、好適な温度において活性化剤に接触される。例えば、オリゴマーをＤＳＣパラ−ニトロクロロホルメートまたはホスゲンと反応させて活性化することができる。
【００５２】
本発明はまた、カルバメート結合によって上記オリゴマーの１つ以上に共有結合している親化合物を含むプロドラッグも提供する。一実施態様において、親化合物はポリペプチド薬物である。
【００５３】
本発明の他のオリゴマーには、以下に示す式２〜１０のオリゴマーが挙げられる。これらのオリゴマーでは、Ｘは、示すように、アルキルであってもよい。アルキルは直鎖状または分岐鎖状であってもよく、例えば、炭素原子数２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１または２２であってもよい。式２〜１０のいずれかのＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ポリエチレングリコール部分であってもよく、例えば、１〜５０のＰＥＧ単位、２〜２５のＰＥＧ単位、２〜１２のＰＥＧ単位を含んでもよい。ＰＥＧは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９または５０のＰＥＧ単位を有してもよい。式２〜１０のいずれかのＲは好適にはアルキル1-22であり、好ましくは、アルキル1-12であり、さらに好ましくは、アルキル1-6である。Ｒは、好適には、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１または２２の炭素単位を有するアルキル部分である。式２〜１０のＰＥＧはＰＰＧなどのＰＡＧと容易に交換することができることが理解される。
【００５４】
式２のオリゴマーはヒドロキノンに基づいており、以下の式：
【００５５】
【化５】
2007508244.tif 000008
（式２）
【００５６】
（式中
Ｘはアルキルであり；
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
ｎは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数である）
を有する。
【００５７】
式３のオリゴマーはｐ−ヒドロキシベンジルアルコール：
【００５８】
【化６】
2007508244.tif 000009
（式３）
【００５９】
（式中
Ｘはアルキルであるかまたは存在せず；
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
ｎは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数字である）
に基づいている。
【００６０】
式１および２の化合物の広大な数の市販の好適な出発物質（例えば、ヒドロキノンおよびｐ−ヒドロキシベンジルアルコール）を考えると、これらの方法は、芳香環に存在する多種多様の他の置換基から利益を得ることができる。電子供与基（例えば、エーテル、アミノまたはアルキル基）もしくは電子吸引基（例えば、ニトロまたはカルボキシル基）の付加またはヒドロキシル部分の酸素のオルト位への立体障害部分（例えば、アルキル基）の付加（最終的なカルバメート部分）は薬物放出を微調整する際の助けとなりうる。
【００６１】
式４のカルバメートオリゴマーは、ベンジルエーテルが、プロドラッグのカルバメートでは酸素になるフェノールのオルト基に付加された方法を例示する：
【００６２】
【化７】
2007508244.tif 000010
（式４）
【００６３】
（式中、
Ｘはアルキルであるかまたは存在せず；
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
Ｒ’はアルキルであり；
ｎは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数字である）。
【００６４】
Ｒ’置換基に使用されるメチル基は、エステラーゼ活性を部分的に遮断し、プロドラッグ加水分解を遅くするために使用することができる。ｔ−ブチル基などのかさ高い基は加水分解をさらに遅くするために使用することができる。
【００６５】
式５および６のカルバメートオリゴマーは、式２および３に使用する方法が分岐鎖状の加水分解可能なオリゴマーを提供するためにどのように変更することができるかを例示する。従って、本発明は：
【００６６】
【化８】
2007508244.tif 000011
（式５）
【００６７】
（式中
Ｘはアルキルであるかまたは存在せず；
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
ｎは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数字である）を提供する。
【００６８】
本発明はまた、式：
【００６９】
【化９】
2007508244.tif 000012
（式６）
【００７０】
（式中
Ｘはアルキルであるかまたは存在せず；
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
ｎは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数字である）を有するオリゴマーも提供する。
【００７１】
式７、８および９は、アリール環へのＰＥＧの結合が電子吸引アミド（式７および８）またはケトン（式９）基の使用に関係する方法を例示する。従って、本発明は：
【００７２】
【化１０】
2007508244.tif 000013
（式７）
【００７３】
（式中
Ｘはアルキルであるかまたは存在せず；
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
ｎは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数字である）を提供する。
【００７４】
本発明はまた、
【００７５】
【化１１】
2007508244.tif 000014
（式８）
【００７６】
（式中
Ｘはアルキルであるかまたは存在せず；
ｎは１〜２２であり；
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
ｍは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数字である）も提供する。
【００７７】
本発明はまた、式：
【００７８】
【化１２】
2007508244.tif 000015
（式９）
【００７９】
（式中、
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルであり；
ｎは１または２または３であり；
ｍは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数字である）を有するオリゴマーも提供する。
【００８０】
式９のオリゴマーの実施態様において、ｎは２であり、
【００８１】
【化１３】
2007508244.tif 000016
【００８２】
はフェノール部分の３位および４位に結合している。
【００８３】
本発明はまた、式：
【００８４】
【化１４】
2007508244.tif 000017
（式１０）
【００８５】
（式中
Ｘはアルキルであるかまたは存在せず；
ＰＥＧは直鎖状または分岐鎖状ＰＥＧ2-50であり；
ＲはＨまたはアルキルである；
ｎは１〜ＰＥＧ分岐の最大数までの数字であり；
Ｒ1はアルキルである）を有するオリゴマーを提供する。
【００８６】
式１０のカルバメートオリゴマーは、数多くの部分保護型で容易に入手可能な分子である、アミノ酸チロシンの構造に基づいている。式１０のオリゴマーは、インビボにおいて加水分解可能であると思われる３つの結合を有し、アミノ酸を再生すると思われる。
【００８７】
任意の置換基が特定の化合物から排除されることがあることもさらに注目されるべきである。
【００８８】
６．２  オリゴマー合成
本発明の種々の合成経路は本明細書に記載する実施例に例示されている。当業者はこれらの実施例から推定して、本発明による多種多様のオリゴマーを容易に製造することができることが理解される。
【００８９】
６．３  本発明のプロドラッグ
生物学的に活性な薬剤と本発明の加水分解可能なオリゴマー部分の結合により、親の生物学的に活性な部分より化学的安定性が改善された、例えば、親の生物学的に活性な部分と比較してプロテアーゼまたは他の酵素の存在下における安定性が改善された純プロドラッグを得ることができる。化学的安定性の種々の寄与は、血漿の存在、プロテアーゼの存在、肝ホモジネートの存在、酸性条件の存在および塩基性条件の存在などの種々のアッセイ条件にプロドラッグを接触させることによって評価することができる。これらのアッセイ条件の任意の１つ以上におけるプロドラッグの安定性が同じ条件における親化合物の安定性より大きい場合には、安定性は親化合物と比較して改善されている。酸性環境において化学的安定性を判定するアッセイは、ｐＨ２の溶液に少なくとも２時間プロドラッグおよび親薬物化合物を接触させることに関係し、親薬物化合物と比較してプロドラッグの分解の少ないことが化学的安定性の改善を示す。
【００９０】
インビボにおけるアッセイも化学的安定性を試験するために使用することができる。例えば、生物学的に活性な薬剤またはプロドラッグの化学的安定性は、被験者の消化管に接触させることによって試験することができる。
【００９１】
生物学的に活性な薬剤と本発明のオリゴマーの結合は、生物学的に活性な薬剤の溶解度を改善して、親薬剤と比較して水溶性が改善されたプロドラッグを生じる場合もある。他の場合では、生物学的に活性な薬剤と本発明のオリゴマーの結合は、親薬剤と比較して薬剤を親油性にし、生体膜をより通過しやすくする。
【００９２】
６．４  プロドラッグ合成
本発明の実施態様によると、加水分解可能な部分を有するプロドラッグを合成する方法は、生物学的に活性な薬剤と本発明のオリゴマー部分を有する化合物を接触させるステップを含む。生物学的に活性な薬剤がポリマー部分を含む化合物と反応して加水分解可能な結合を形成し、加水分解可能な部分を有するプロドラッグを提供するように、当技術分野において公知の種々の反応を使用して生物学的に活性な薬剤またはポリマー部分を含む化合物のどちらかを活性することができる。プロドラッグが、非結合の生物学的に活性な薬剤の化学的安定性より大きいまたはそれに等しいレベルの化学的安定性、例えば、親化合物の生物学的に活性な部分と比較してプロテアーゼまたは他の酵素の存在下において改善された安定性を示すように、ポリマー部分は生物学的に活性な薬剤の化学的安定性に影響を与えることができる。上記に考察するように、化合物の特定の必要性に応じて、得られる結合物の溶解性を大きくまたは小さくすることによって、ポリマー部分は溶解性および吸収性に積極的に影響することもできる。
【００９３】
当業者は、活性化された化合物を提供するのに充分な条件を容易に理解する。一般に、当業者に理解されているように、反応性部分を有する化合物を好適な溶媒中で、好適な時間にわたって、好適な温度において活性化剤と接触させる。例えば、化合物をＤＳＣまたはパラ−ニトロクロロホルメートまたはホスゲンと反応させて活性化することができる。
【００９４】
当業者は、生物学的に活性な薬剤にポリマー部分を含む活性化された化合物をカップリングして、加水分解可能な部分を有するプロドラッグを提供するのに充分な条件を理解している。一般に、好適な溶媒の存在下において生物学的に活性な薬剤をポリマー部分を含む活性化された化合物と接触させる。好適な溶媒は、化合物を互いに反応させることができる程度に生物学的に活性な薬剤およびポリマー部分を含む化合物を溶解することができるものである。好適な溶媒には、緩衝水溶液および有機溶媒が挙げられるが、それに限定されるわけではない。このような有機溶媒の限定するものではない例には、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノールおよびブタノールなどのＣ1〜Ｃ4アルコールならびにアセトン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミドおよびジメチルスルホキシドなどの溶媒が挙げられる。
【００９５】
生物学的に活性な薬剤およびポリマー部分を含む活性化された化合物は、好ましくは、望ましい収率のプロドラッグを提供するのに充分な時間および条件下において接触させられる。
【００９６】
開示されている一般的な合成方法の変形は当業者に容易に明らかになり、本発明の範囲内であると思われる。
【００９７】
本発明のいくつかの実施態様において、プロドラッグは製薬学的に許容されうる塩として提供される。製薬学的に許容されうる塩は、親化合物の望ましい生物学的活性を保持することができ、一般に望ましくない毒性作用を示さない塩である。このような塩の例は、無機塩、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸等で形成された酸添加塩；および、例えば、酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、グルコン酸、クエン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パルミチン酸、アルギン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンスルホン酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、ポリガラクツロン酸等などの有機酸で形成された塩である。いくつかの実施態様において、製薬学的に許容されうる塩は塩酸（または酢酸）で形成される。
【００９８】
６．５．  製薬学的組成物
本発明のさらに他の実施態様によると、上記のプロドラッグを含む製薬学的組成物が提供される。本発明の実施態様による製薬学的組成物を製造する際には、プロドラッグは、典型的には、特に製薬学的に許容されうる担体と混合される。担体は、当然のことながら、製薬学的組成物の任意の他の成分と適合性であるという意味において許容可能であるべきであり、患者に有害であってはならない。担体は、固体もしくは液体またはその両方であってもよく、単位−用量製剤、例えば、約０．０１または０．５重量％〜約９５重量％または９９重量％のプロドラッグを含有してもよい錠剤としてプロドラッグと共に製剤化することができる。製薬学的組成物は、必要に応じて１種以上の補助成分を含む成分を混合するステップを含むが、それに限定されるわけではない周知の薬学技法のいずれかによって製剤化することができる。
【００９９】
本発明による製薬学的組成物は、経口、直腸、局所、吸入（例えば、エアゾールによる）、口腔内（例えば、舌下）、膣、非経口（例えば、皮下、筋肉内、皮内、関節内、胸膜内、腹腔内、脳内、動脈内または静脈内）、局所（すなわち、皮膚表面、および、気道表面を含む粘膜表面）および経皮投与に好適なものを含むが、任意の所定の場合における最も好適な経路は治療対象の状態の性質および重症度ならびに使用される特定のプロドラッグの性質に依存する。
【０１００】
経口投与に好適な製薬学的組成物は、各々所定量のプロドラッグを含有するカプセル、カシェ剤、トローチもしくは錠剤などの別個の単位で；粉末もしくは顆粒として；水性もしくは非水性の液体中の溶液もしくは懸濁液として；または水中油型もしくは油中水型エマルジョンとして提供されてもよい。このような製剤は、プロドラッグと（上記のように１種以上の補助成分を含有してもよい）好適な担体を関連させるステップを含む任意の好適な薬学方法によって製剤化することができる。一般に、本発明の実施態様による製薬学的組成物は、プロドラッグを液体または微粉化した固体担体を均一によく混合し、次いで適宜得られた混合物を形づくることによって製剤化することができる。例えば、錠剤は、プロドラッグを含有する粉末または顆粒と、必要に応じて１種以上の補助成分を圧縮または成型することによって製剤化することができる。圧縮錠は、必要に応じて結合剤、潤滑剤、不活性な希釈剤および／または界面活性／分散剤と混合した粉末または顆粒などの自由−流動形態の混合物を好適な機械で圧縮することによって製剤化することができる。成型錠は、不活性な液体結合剤で湿潤化した粉末状化合物を好適な機械で成型することによって製造することができる。
【０１０１】
口腔（舌下）投与に好適な製薬学的組成物には、矯味矯臭剤を添加した基剤、通常スクロースおよびアカシアまたはトラガカントにプロドラッグを含むトローチ；ならびにゼラチンおよびグリセリンまたはスクロースおよびアカシアなどの不活性な基剤中にプロドラッグを含む芳香錠が挙げられる。
【０１０２】
非経口投与に好適な本発明の実施態様による製薬学的組成物は、プロドラッグの滅菌水性および非水性注射液を含み、その製剤は、好ましくは、目的のレシピエントの血液と等張である。これらの製剤は、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤および組成物を目的のレシピエントの血液と等張にする溶質を含有してもよい。水性および非水性滅菌懸濁剤は懸濁剤および増粘剤を含んでもよい。組成物は、単位用量または多数回投与の容器、例えば、密封アンプルおよびバイアルで提供されてもよく、使用時に滅菌液体担体、例えば、生理食塩液または注射用水を添加するだけでよいフリーズ−ドライ（凍結乾燥）状態で保存することができる。即時注射液および懸濁液は、上記の種類の滅菌粉末、顆粒および錠剤から製剤化することができる。例えば、密封容器に単位用量形態のプロドラッグを含む注射用の安定した滅菌組成物を提供することができる。プロドラッグは、好適な製薬学的に許容されうる担体で再構成して、被験者への注射に好適な液体組成物を形成することができる凍結乾燥物の形態で提供される。単位用量形態は、典型的には、約１０ｍｇ〜約１０グラムのプロドラッグを含む。プロドラッグが実質的に水−不溶性である場合には、水性担体にプロドラッグを乳化するのに充分な量の製薬学的に許容されうる乳化剤を使用することができる。このような有用な乳化剤のひとつはホスファチジルコリンである。
【０１０３】
直腸投与に好適な製薬学的組成物は、好ましくは、単位用量坐剤として提供される。これらは、プロドラッグを１種以上の従来の固体担体、例えば、カカオ脂と混合し、次いで得られた混合物を形づくることによって製剤化することができる。
【０１０４】
皮膚への局所適用に好適な製薬学的組成物は、好ましくは、軟膏、クリーム、ローション、ペースト、ゲル、スプレー、エアゾールまたはオイルの形態を取る。使用することができる担体には、ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール、アルコール、経皮増強剤およびこれらの２種以上の組み合わせが挙げられる。
【０１０５】
経皮投与に好適な製薬学的組成物は、長期間にわたってレシピエントの表皮にしっかりと接触し続けるように適合された別個のパッチとして提供することができる。経皮投与に好適な組成物はイオン泳動によって送達することもでき（例えば、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ３（６）：３１８（１９８６）参照）、典型的には必要に応じて緩衝液を添加したプロドラッグの水溶液の形態ととってもよい。好適な製剤はクエン酸塩またはＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ６）またはエタノール／水を含み、０．１〜０．２Ｍの作用成分を含有する。
【０１０６】
６．６  治療方法
本発明の他の実施態様によると、このような治療を必要としている被験者を治療する方法は、被験者に本発明の組成物の有効量を投与するステップを含む。有効量は、組成物および被験者によって幾分異なってもよく、被験者の年齢、種、性別および／または状態ならびに送達経路および様式に依存する。このような用量は当業者に公知の通常の薬理学的手法により設定することができる。一般的な提案として、約１００μｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの用量が有効性を有し、全ての重量は組成物および／または作用成分（例えば、プロドラッグ）の重量に基づいて算出されている。約１０ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇの用量を経口投与に使用することができる。典型的には、約０．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇの用量を筋肉内注射に使用することができる。投与頻度は、状態を治療するために１日／１週間／１ヶ月／１年あたり１、２もしくは３回または適宜であってもよい。治療期間は治療対象の状態の種類に依存し、患者の寿命ほど長くてもよい。
【０１０７】
本発明による治療対象として好適な被験体には、トリおよび哺乳類被験体が挙げられるが、それに限定されるわけではなく、好ましくは、哺乳類である。本発明の哺乳類には、イヌ、ネコ、ウシ、ヤギ、ウマ、ヒツジ、ブタ、げっ歯類（例えば、ラットおよびマウス）、ウサギ、霊長類、ヒト等ならびに子宮内の哺乳類が挙げられるが、それに限定されるわけではない。本発明による治療を必要としている任意の哺乳類被験体が好適である。ヒト被験者が好ましい。性別を問わず、任意の発育段階（すなわち、新生児、乳幼児、年少者、青年、成人）のヒト被験者を本発明により治療することができる。
【０１０８】
本発明による例示的なトリには、ニワトリ、アヒル、七面鳥、ガン、ウズラ、キジ、走鳥類（例えば、ダチョウ）およびコンパニオン（またはペット）鳥（例えば、オウムおよびカナリア）ならびに卵内のトリが挙げられる。
【０１０９】
本発明は、主に、ヒト被験者の治療に関するが、本発明はまた、獣医学的な目的のためならびに薬物スクリーニングおよび薬物開発目的のために動物被験者、特にマウス、ラット、イヌ、ネコ、家畜およびウマなどの特に哺乳類被験者にも実施することができる。
【０１１０】
本発明の化合物および組成物は、親化合物によって治療可能な疾病、疾患または状態を治療するために使用することができる。限定するものではない例として、本発明の化合物および組成物は、糖尿病、癌、感染症、循環器系疾病、呼吸疾患、睡眠障害、神経障害、神経変性性疾病、消化管疾患、脱毛症、筋骨格疾患、泌尿生殖器疾患、アレルギー、炎症および疼痛を治療するために使用することができる。
【０１１１】
本発明の特定の態様は、ここで、以下の実施例を参照して記載される。これらの実施例は本発明の態様を例示する目的のためであり、本発明の範囲を限定するものではないことが理解されるべきである。
【０１１２】
７．実施例
以下の限定するものではない実施例は本発明を例示する：
【０１１３】
７．１．  ４−（２−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−フェノール（オリゴマーＩＩ）の合成
【０１１４】
【化１５】
2007508244.tif 000018
【０１１５】
褐色フラスコ中で、４−ベンジルオキシフェノール（２．０  ｇ，１０．０  ｍｍｏｌ）を１５  ｍＬの乾燥ＴＨＦに溶解した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（０．４４６  ｇ，４．０  ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温において撹拌した。１時間後、ＭＰＥＧ4メシレート（０．９４５  ｇ，３．  ３３  ｍｍｏｌ）の８  ｍｌ乾燥ＴＨＦ溶液を添加した。混合物全体を終夜撹拌した。１０  ｍＬ  ＭｅＯＨで反応を停止し、Ｃｅｌｉｔｅの小さいパッドでろ過した。ろ過後の反応液を粘稠な褐色のオイル状になるまで濃縮した。粗生成物を、溶離液としてＥｔＯＡｃを使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、０．８９７  ｍｇ（２３  ％）のＭＰＥＧ4エーテルＩを得た。
【０１１６】
次いで、化合物Ｉ（０．７９７  ｇ，２．０４  ｍｍｏｌ）を５０  ｍＬ  ＥｔＯＡｃに溶解した。０．０８１  ｇの１０％Ｐｄ／Ｃを含有するＥｔＯＡｃスラリーを添加し、混合物全体をＨ2雰囲気下におき、室温および１気圧において終夜撹拌させた。反応が終了したことをＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ）が示すまで追加の触媒を添加した。次いで、混合物をＣｅｌｉｔｅの（ｏｒ）小さいパッドでろ過し、ろ液を濃縮して、０．４８３  ｇ（７９  ％）の脱保護したペグ化フェノール、ＩＩを得た。  ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｅ  ３２３．２（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１１７】
７．２．  ４−［２−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−ドデシルオキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−フェノール（オリゴマーＶ）の合成
【０１１８】
【化１６】
2007508244.tif 000019
【０１１９】
１０．０  ｇ（１８．６  ｍｍｏｌ）Ｃl2ＰＥＧ8ＯＨを６０  ｍＬ乾燥ジクロロメタンに溶解し、得られた溶液をＮ2雰囲気下で０℃に冷却することによってＣl2ＰＥＧ8ＯＨのメシレートを調製した。冷却した溶液に３．１  ｍＬ（２２．３  ｍｍｏｌ）ＴＥＡおよび１．７２  ｍＬ（２２．３  ｍｍｏｌ）塩化メタンスルホニルを添加した。反応を０℃において３０分進行させ、次いで室温に加温させて、終夜撹拌した。次いで、反応混合物をさらに５０  ｍＬのジクロロメタンで希釈し、次いで飽和ＮａＨＣＯ3（２  ｘ  ２０  ｍＬ）および水（３  ｘ  ２０  ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、ろ過して、蒸発乾固してメシレート、ＩＩＩを得た。ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｅ６１７．５（Ｍ＋Ｈ）+，６３９．４（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１２０】
Ｃ12ＰＥＧ8メシレート，ＩＩＩ，８．９７  ｇ（１６．６５  ｍｍｏｌ）の  ６０  ｍＬの乾燥ＤＭＦを、８０  ｍＬの乾燥ＤＭＦ中で１時間撹拌しておいた１０．０  ｇの（４９．９  ｍｍｏｌ）の４−ベンジルオキシフェノールおよび２．２４  ｇ（２０．０  ｍｍｏｌ）のカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドの混合物に添加した。反応を室温において３日間撹拌し、次いで５０  ｍＬ  ＭｅＯＨで停止した。反応を停止した反応液をＣｅｌｉｔｅの小さいパッドでろ過し、ろ液を真空下濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（濃度勾配溶出：５／１  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン〜ＥｔＯＡｃ）で精製して、４．５９  ｇ（３８％）のＩＶをオレンジ色の油状物質として得た。ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｅ７２１．６（Ｍ＋Ｈ）+，７４３．６（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１２１】
ベンジルエーテルＩＶ（１．００  ｇ，１．３９  ｍｍｏｌ）を３０  ｍＬのＥｔＯＡｃに溶解し、１００  ｍｇの１０％Ｐｄ／ＣのＥｔＯＡｃスラリーを添加した。混合物全体をＨ2雰囲気下におき、室温において撹拌させた。全てのベンジルエーテルがフェノールに変換したことをＴＬＣが示すまで、追加の触媒を添加した；次いで、反応混合物をＣｅｌｉｔｅでろ過し、ろ液を蒸発乾固して、０．８５４  ｇ（９８  ％）のＶを提供した。ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｅ６５３．５（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１２２】
７．３．  ４−（２−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシメチル）−フェノール（オリゴマーＸ）の合成
【０１２３】
【化１７】
2007508244.tif 000020
【０１２４】
５００  ｍＬの丸底フラスコに、５．００  ｇ（４０．９ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシベンズ−アルデヒド、２００  ｍＬの乾燥ＣＨ2Ｃ１2、５．５７  ｍＬ（６１．４  ｍｍｏｌ）のジヒドロピランおよび１．０３  ｇ（４．０９  ｍｍｏｌ）のＰＰＴＳを入れた。混合物を室温において１６時間撹拌し、次いで１００  ｍＬ以上のＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、水（２  ｘ  １００  ｍＬ）および食塩水（１  ｘ  １００  ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、ろ過し、濃縮した。粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（溶離液：ＣＨＣ１3／５％ＭｅＯＨ）によって精製して７．７８  ｇ（９２  ％）のＴＨＰ保護したフェノール，ＶＩを得た。
【０１２５】
フェノールＶＩ（７．５  ｇ，３６．４  ｍｍｏｌ）を８５  ｍＬの乾燥ＴＨＦに溶解し、０℃に冷却した。水素化ホウ素ナトリウム（１．３７  ｇ，３６．４  ｍｍｏｌ）を添加した。０℃において２時間撹拌後、反応を室温まで加温し、終夜撹拌させた。ＴＨＦを除去し、残渣を９５  ｍＬのＥｔＯＡｃに取り、水（２  ｘ  ４５  ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、ろ過し、蒸発乾固した。フラッシュクロマトグラフィー（溶離液（ｅｌｕｔａｎｔ）：ＣＨＣ１3／４％ＭｅＯＨ）によって精製して、６．４  ｇ（８５％）のベンジルアルコール，ＶＩＩを透明な油状物質として得た。
【０１２６】
６．００  ｇ（２８．８ｍｍｏｌ）のベンジルアルコールを３６  ｍＬの乾燥ＣＨ2Ｃｌ2に溶解することによって対応するメシレート，ＶＩＩＩを調製した。溶液を氷浴で冷却し、次いで４．８２  ｍＬ（３４．６  ｍｍｏｌ）のＴＥＡおよび２．６８  ｍＬ（３４．６  ｍｍｏｌ）の塩化メタンスルホニルを添加した。反応を０℃において３０分撹拌し、次いで室温においてさらに４時間撹拌した。反応混合物を２０  ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ3（２  ｘ  ２０  ｍＬ）および水（３  ｘ  ２０  ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、ろ過して、真空下濃縮して、５．７７  ｇ（７０  ％）のＶＩＩＩをオレンジ色の油状物質として生じた。
【０１２７】
ＭＰＥＧ4ＯＨ（１．７８  ｍＬ，９．１４  ｍｍｏｌ）を５０  ｍＬの乾燥ＴＨＦに溶解し、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２．１６  ｇ，１９．２１  ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温において１時間撹拌し、次いでＶＩＩＩ（５．３８  ｇ，１９．２  ｍｍｏｌ）の２０  ｍＬ  ＴＨＦ溶液を添加し、混合物全体を室温において終夜撹拌した。反応を５０  ｍＬのＭｅＯＨで停止し、Ｃｅｌｉｔｅの小さいパッドでろ過した。ろ液を真空下濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ）によって精製して、１．２８  ｇ（１７  ％）のペグ化ベンジルアルコール，ＩＸを得た。ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｅ  ４２１．１（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１２８】
２０  ｍＬ酢酸を含有する溶液に、１０  ｍＬのＴＨＦおよび５  ｍＬの水、１．０  ｇ（２．５１  ｍｍｏｌ）のＩＸを溶解した。混合物を４５℃に加温し、終夜撹拌した。反応を３０  ｍＬの水、２０  ｍＬの飽和ＮａＨＣＯ3および２０  ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈した。有機層を回収し、水層を２０  ｍＬのＥｔＯＡｃで再度抽出した。有機層を合わせてＭｇＳＯ4で乾燥し、ろ過し、蒸発乾固して、６１１  ｍｇ（７７  ％）のオリゴマーＸを淡黄色の油状物質として得た。ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｅ  ３３７．０（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１２９】
７．４．  ３，４−ビス−（２−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−フェノール（オリゴマーＸＩＩ）の合成
【０１３０】
【化１８】
2007508244.tif 000021
【０１３１】
３，４−ジヒドロキシベンズアルデヒド（２．５  ｇ，１８．１  ｍｍｏｌ）およびＫ2ＣＯ3（５．２５  ｇ，３８．０  ｍｍｏｌ）の混合物を４０  ｍＬのアセトンに懸濁させた。混合物を５６℃に加熱し、ＭＰＥＧ4メシレート（１０．６  ｇ，３７．１  ｍｍｏｌ）を添加した。次の３時間の経過中に大量の沈殿が形成し、さらに２０  ｍＬのアセトンを添加した。５６℃において３時間後、反応を３７℃に冷却して１５時間おいた。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／１０  ％ＭｅＯＨ）はこの時、実質的に未反応で、モノ−ＰＥＧエーテル物質が残存していることを示した。さらに５．０  ｇ（１８．０  ｍｍｏｌ）のメシレートの２０  ｍＬアセトン溶液を添加した。反応混合物を５６℃に加熱してさらに２日おいた。次いで、アセトンを除去し、固体残渣をＣＨ2Ｃｌ2と水の混合物に取った。有機層を有機層より多い量の水および食塩水で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、ろ過し、真空下濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（濃度勾配溶出：ＥｔＯＡｃ−−−ＥｔＯＡｃ／１０  ％ＭｅＯＨ）によって精製して、２．７８ｇ（３０  ％）のジ−ＰＥＧエーテルベンズアルデヒド，ＸＩを得た。
【０１３２】
ベンズアルデヒドＸＩ（１．４１  ｇ，２．７２  ｍｍｏｌ）を、室温においてｍＣＰＢＡ（０．７３  ｇ，３．３  ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３０  ｍＬ）溶液中で終夜酸化した。反応混合物をさらに８０  ｍＬのジクロロメタンで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ3、水および食塩水で逐次的に洗浄した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、ろ過し、真空下濃縮して、黄色の油状物質とし、８  ｍＬのＭｅＯＨと１．０  ｍＬの６Ｎ  ＮａＯＨの混合物に取った。混合物は即座に紫になった。５分後、混合物を５０  ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌで１回洗浄し、次いで水および食塩水で洗浄した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、ろ過し、真空下濃縮した。得られた粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（濃度勾配溶出：ＣＨＣ１3／２  ％ＭｅＯＨ−−−−ＣＨＣｌ3／５％  ＭｅＯＨ）によって精製して、０．６２４  ｇの（４５  ％）のＸＩＩを暗い紫色の油状物質として得た。ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｅ  ５０７（Ｍ  ＋  Ｈ）+、５２９（Ｍ  ＋  Ｎａ）+、５４５（Ｍ  ＋  Ｋ）+。
【０１３３】
７．５．  ４−ヒドロキシ−Ｎ−（２−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エチル）−  ベンザミド（オリゴマー  ＸＶ）の合成
【０１３４】
【化１９】
2007508244.tif 000022
【０１３５】
３．０  ｇ（１３．１  ｍｍｏｌ）の４−ベンジルオキシ安息香酸と５０  ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2を混合することによって化合物ＸＩＩＩを調製した。この混合物に、１．８１  ｇ（１５．７  ｍｍｏｌ）のＮＨＳおよび３．０１  ｇ（１５．７  ｍｍｏｌ）のＥＤＣを添加した。反応を室温において終夜撹拌し、次いでさらに１００  ｍｌのＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、水および食塩水で洗浄した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、ろ過し、真空下濃縮した。粗生成物を、溶離液としてＣＨ2Ｃｌ2を使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１．９１  ｇ（６４  ％）の安息香酸のＮＨＳエステルを得た。
【０１３６】
このＮＨＳエステル，ＸＩＩＩ（０．７８  ｇ，２．４  ｍｍｏｌ）を２０  ｍＬのＣＨ2Ｃ１2に溶解した。ＴＥＡ（０．３５４  ｍＬ，０．２５７  ｇ，２．５４  ｍｍｏｌ）およびＭＰＥＧ4アミン（０．４０３  ｇ，１．９５  ｍｍｏｌ）を添加した。反応を室温において終夜撹拌した。次いで、粗反応混合物をさらに２０  ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、０．５  Ｎ  ＨＣｌ（２  ｘ  １５０  ｍＬ）、水（２  ｘ  １５０  ｍＬ）および食塩水（２  ｘ  １５０  ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、ろ過し、真空下濃縮してオフホワイトの固体を得、フラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3／５％ＭｅＯＨ）によって精製して、０．５２４  ｇ（６４  ％）の目的とするアミド，ＸＩＶを得た。
【０１３７】
アミド（０．５２４  ｇ，１．２６  ｍｍｏｌ）を４０  ｍＬのＭｅＯＨに溶解し、６０  ｍＬのＥｔＯＡｃに懸濁させておいた０．１８  ｇの５  ％  Ｐｄ／Ｃに添加した。混合物をＨ2雰囲気下におき、室温および１  ａｔｍにおいて終夜撹拌した。ＴＬＣ（ＣＨＣ１3／１５  ％ＭｅＯＨ）は、全ての出発物質が消費されたことを示した。反応をＣｅｌｉｔｅでろ過し、触媒を除去した。Ｃｅｌｉｔｅをさらに１５０  ｍＬのＥｔＯＡｃで洗浄した。ろ液を合わせて真空下濃縮して、０．３８６  ｇ（９４  ％）のＸＶを褐色の油状物質として得た。ＦＡＢ  ＭＳ：ｍ／ｅ  ３２８（Ｍ＋Ｈ）+、３５０（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１３８】
７．６．  ５−ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ’−ビス−（２−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エチル）−イソフタルアミド（オリゴマーＸＸ）の合成
塩化ベンジル（５．２０  ｍｌ，４５．０  ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（６．２１  ｇ，４５．０  ｍｍｏｌ）を、ジメチル−５−ヒドロキシイソフタレート  （７．０  ｇ，３３  ｍｍｏｌ）の１００  ｍＬアセトン溶液に添加した。反応を加熱還流し、終夜撹拌させた。ＴＬＣで確認後、反応を室温に冷却し、真空下濃縮して、オフホワイトの固体生成物を得た。沸騰シクロヘキサンで再結晶して、６．８  ｇ（６８％）の白色結晶ＸＶＩを得た。ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｅ  ３０１．  １  （Ｍ＋Ｈ）+。
【０１３９】
４０  ｇのＫＯＨを４００  ｍＬのメタノールに含む攪拌溶液中に、化合物ＸＶＩ（６．７  ｇ，２２  ｍｍｏｌ）を分割して添加した。反応を２時間還流した。室温に冷却後、混合物を２Ｎ  ＨＣｌでｐＨ  ２〜３に酸性化して、生成物を沈殿させた。ろ過後、ＸＶＩＩの白色固体を８６％の収率（５．１５  ｇ）で得た。ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｅ  ２７１．０  （Ｍ−Ｈ）-。
【０１４０】
化合物ＸＶＩＩ（２．００  ｇ，７．３５  ｍｍｏｌ）を８０  ｍＬの乾燥ＣＨ2Ｃｌ2に溶解させ、これにＮＨＳ（１．８６  ｇ，１６．２  ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（３．１０  ｇ，１６．２  ｍｍｏｌ）を添加した。終夜撹拌後、反応混合物を４０  ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、水（２  ｘ  ７０  ｍＬ）および食塩水（２  ｘ  ７０  ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濃縮して、３．０５  ｇ（９０  ％）の白色の固体ＸＶＩＩＩを得た。
【０１４１】
ＭＰＥＧ4アミン（９１０  ｍｇ，４．３９  ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．６１１  ｍＬ，４．３９  ｍｍｏｌ）を３０  ｍＬのＣＨ2Ｃ１2に溶解し、撹拌させた。化合物ＸＶＩＩＩ（６８２  ｍｇ，１．４６  ｍｍｏｌ）を１０  ｍＬのＣＨ2Ｃ１2に溶解し、反応に添加した。終夜撹拌後、反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ、水および食塩水（各々２  ｘ  ５０  ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濃縮して黄色のスラリーを得た。フラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ  １０／１）によって精製して、４８８  ｍｇ（５１  ％）のＸＩＸを粘稠な黄色の油状物質として得た。ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｅ  ６５１．３（Ｍ＋Ｈ）+。
【０１４２】
化合物ＸＩＸ（９３０  ｍｇ，１．４３  ｍｍｏｌ）を８０  ｍＬのＥｔＯＡｃに溶解した。次いで、パラジウム−活性炭（１０％）を添加し（約１００  ｍｇ）、溶液をＨ2雰囲気下で終夜撹拌した。Ｃｅｌｉｔｅでろ過して触媒を除去し、ろ液を留去して６３０  ｍｇ（８０％）の白色固体ＸＸを得た。ＥＳＩ  ＭＳ：  ｍ／ｅ  ５６１．３（Ｍ＋Ｈ）+。
【０１４３】
７．７．  ３−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−（２−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシカルボニルアミノ）−プロピオン酸メチルエステル（オリゴマーＸＸＩＩ）の合成
【０１４４】
【化２０】
2007508244.tif 000023
【０１４５】
テトラエチレングリコールモノメチルエーテル（ＭＰＥＧ4ＯＨ  ４．００  ｇ，１９．２  ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（４０  ｍＬ）に溶解し、ジスクシンイミジルカルボネート（ＤＳＣ，５．４４  ｇ，２１．２  ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、トリエチルアミン（４．００  ｍＬ，２８．８  ｍｍｏｌ）を滴下し、１０分後、反応混合物は透明になった。反応を室温において終夜撹拌した。〜１６時間撹拌後、粗反応を蒸発乾固し、飽和ＮａＨＣＯ3（１５０  ｍＬ）に溶解し、酢酸エチル（２  ｘ  １５０  ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、蒸発乾固した。カラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ，１０：  １）により油状のＸＸＩ（４．０４  ｇ，収率６０％）を得た。ＥＳＩ  ＭＳ  ：ｍ／ｅ  ３７２．１（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１４６】
チロシンメチルエステル（２．２６  ｇ，１２．５  ｍｍｏｌ）およびＸＸＩをＣＨ2Ｃ１2（４０  ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミンを添加した（３．８  ｍＬ，２７  ｍｍｏｌ）。反応を室温において終夜撹拌した。１８時間撹拌後、粗反応液をＣＨ2Ｃｌ2で１５０  ｍＬに希釈し、Ｈ2Ｏ（１５０  ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（１５０  ｍＬ）、１  ＮＨＣｌ（１５０  ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、蒸発乾固した。カラムクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ，２５：１）により、油状物質ＸＸＩＩ（３．５１  ｇ，７２％）を得た。ＥＳＩ  ＭＳ：  ｍ／ｅ  ４３０．１（Ｍ＋Ｈ）+、４５２．２（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１４７】
【化２１】
2007508244.tif 000024
【０１４８】
７．８．  ２−［２−（２−ドデシルオキシ−エトキシ）−エトキシカルボニルアミノ］−３−（４−ヒドロキシ−フェニル）−プロピオン酸メチルエステル（オリゴマーＸＸＩＶ）の合成
【０１４９】
【化２２】
2007508244.tif 000025
【０１５０】
オリゴマーＸＸＩＶは、オリゴマーＸＸＩＩについて上記した方法と同様の方法で製造した。ジエチレングリコールモノドデシルエーテル（２．７１２  ｇ，９．８８  ｍｍｏｌ）を１００  ｍＬの乾燥アセトニトリルに溶解した。トリエチルアミン（２．０６  ｍＬ，１４．８  ｍｍｏｌ）およびＤＳＣ（３．８０  ｇ，１４．８  ｍｍｏｌ）を添加した。不活性雰囲気下で室温において１８時間撹拌後、反応混合物を真空下で濃縮した。残渣の油状物質を濃炭酸水素ナトリウムに取り、ＥｔＯＡｃ（２  ｘ  ２００  ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ層を合わせて水（２  ｘ  １００  ｍＬ）および食塩水（２  ｘ  １００  ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、ろ過して、蒸発乾固して３．５８  ｇ（８７  ％）のＸＸＩＩＩを得た。
【０１５１】
チロシンメチルエステル（１．２３  ｇ，５．３０  ｍｍｏｌ）を６０  ｍＬの乾燥ＣＨ2Ｃｌ2に溶解した。この溶液に０．７３８  ｍＬ（５．３０  ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを添加した。化合物ＸＸＩＩＩ（２．００  ｇ，４．８０ｍｍｏｌ）を３５  ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2に溶解し、チロシンメチルエステル溶液に添加した。
【０１５２】
室温において１７時間後、反応混合物を、上記の化合物ＸＸＩＩについて記載するようにワークアップした。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ，ＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：  １）によって精製して、１．５２９  ｇ（６５  ％）のオリゴマーＸＸＩＶを透明な油状物質として得た。ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｅ  ４９５．４  （Ｍ＋Ｈ）+、５１８．３（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１５３】
７．９．  ４−（ヒドロキシ−フェニル）−カルバミン酸２−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エチルエステル（オリゴマーＸＸＶ）の合成
４−アミノフェノール（２５０  ｍｇ，２．２９  ｍｍｏｌ）を２０  ｍＬのＴＨＦに溶解した。ＴＥＡ（０．４７９  ｍＬ，３．４３  ｍｍｏｌ）を添加し、次に  ＸＸＩ（９６０  ｍｇ，２．７５  ｍｍｏｌ）の５  ｍＬ  ＴＨＦ溶液を添加した。反応を室温において終夜撹拌させた。反応混合物を粘稠な黄色の粗油状物質になるまで真空下濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ，ＥｔＯＡｃ）による精製後、６９２  ｍｇ（８８％）のＸＸＶを黄色の油状物質として得た。ＥＳＩ  ＭＳ：  ｍ／ｅ  ３４４．２（Ｍ＋Ｈ）+。
【０１５４】
【化２３】
2007508244.tif 000026
【０１５５】
７．１０．  ４−｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−ヘキシルオキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−フェノール（オリゴマーＸＸＸ）
１−ヘキサノールのメシレート、ＸＸＶＩは、８０  ｍＬの乾燥ジクロロメタンに溶解した２４．５７  ｍＬ（１９５．８  ｍｍｏｌ）アルコールから製造した。この溶液を０℃に冷却し、Ｎ2雰囲気下においた。この溶液に３２．７４  ｍＬ（２３４．９  ｍｍｏｌ）ＴＥＡを添加した。塩化メタンスルホニル（１８．１８  ｍＬ，２３４．９  ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃において３０分後、溶液を室温に加温し、３日間撹拌させた。混合物を４０  ｍＬのジクロロメタンで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ3（２  ｘ  ３０  ｍＬ）および水（２  ｘ  ３０  ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、ろ過し、真空下濃縮して３４．０  ｇ（９６  ％）ＸＸＶＩを得た。
【０１５６】
１８０  ｍＬの乾燥ＴＨＦに、３１．３２  ｇ（１１０．９  ｍｍｏｌ）のＰＥＧ6ジオールを溶解した。溶液を０℃に冷却した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１２．４５  ｇ，１１０．９  ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加し、混合物全体を１時間撹拌した。ＸＸＶＩ（１０．０  ｇ，５５．５  ｍｍｏｌ）を３０  ｍＬのＴＨＦに溶解し、ＰＥＧ溶液に添加した。メシレートの添加後、反応を０℃において３０分維持し、次いで室温に加温し、終夜撹拌した。反応をＭｅＯＨで停止し、Ｃｅｌｉｔｅでろ過した。Ｃｅｌｉｔｅをジクロロメタンで洗浄し、ろ液を合わせて真空下濃縮した。濃縮した残渣をジクロロメタンに取り、水で数回洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、ろ過して、留去した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ，ＥｔＯＡｃ）によって精製し、４．６６  ｇ（２３  ％）のモノ−ヘキシルＰＥＧ6、ＸＸＶＩＩを得た。ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｅ  ３６７．１４（Ｍ＋Ｈ）+，３８９．０８（Ｍ＋Ｎａ）+，４０５．０６（Ｍ＋Ｋ）+。
【０１５７】
【化２４】
2007508244.tif 000027
【０１５８】
ヘキシルＰＥＧアルコールのメシレートを製造するためには、１７．００  ｇ（４６．５  ｍｍｏｌ）のＸＸＶＩＩを７０  ｍＬの乾燥ＣＨ2Ｃｌ2に溶解し、０℃に溶解し、Ｎ2雰囲気下においた。トリエチルアミン（７．７８  ｍＬ，５５．８  ｍｍｏｌ）を添加し、次いで塩化メタンスルホニル（４．３２  ｍＬ，５５．８  ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃において３０分後、混合物を室温にし、次いで終夜撹拌した。反応混合物を多量のＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ3および水で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、ろ過し、真空下濃縮して１８．７  ｇ（９０  ％）のＸＸＶＩＩＩを得た。ＥＳＩ  ＭＳ：  ｍ／ｅ  ４６７．０（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１５９】
５０  ｍＬのＴＨＦに５．００  ｇ（２５．０  ｍｍｏｌ）の４−ベンジルオキシフェノールをＮ2雰囲気下で溶解した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１．１２  ｇ，９．９８  ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温において１時間撹拌した。１．１２  ｇ（９．９８  ｍｍｏｌ）のＸＸＶＩＩＩの２０  ｍＬ  ＴＨＦ溶液をベンジルオキシフェノール混合物に添加し、溶液全体を室温において終夜撹拌した。反応をメタノールで停止し、Ｃｅｌｉｔｅでろ過した。ろ液を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ，ＥｔＯＡｃ／ヘキサン５：２）によって精製して、３．３７  ｇ（２５  ％）のＸＸＩＸを得た。ＥＳＩ  ＭＳ：  ｍ／ｅ  ５７１．０５（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１６０】
ＸＸＩＸ（３．３７  ｇ，６．１４  ｍｍｏｌ）を９０  ｍＬのＭｅＯＨに溶解した。０．３４  ｇの１０  ％Ｐｄ／ＣのＭｅＯＨスラリーを添加し、反応をＨ2雰囲気下においた。室温において終夜撹拌後、ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ）は全ての出発物質が消費されたことを示した。反応混合物をＣｅｌｉｔｅでろ過し、ろ液を真空下濃縮して、２．５４  ｇ（９０  ％）のオリゴマーＸＸＸを得た。ＥＳＩ  ＭＳ：  ｍ／ｅ  ４５９．１９（Ｍ＋Ｈ）+，４８０．９８（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１６１】
７．１１．  ４−（６−｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−ヘキシルオキシ）−フェノール（オリゴマー  ＸＸＸＶ）の合成
【０１６２】
【化２５】
2007508244.tif 000028
【０１６３】
ＭＰＥＧ6アルコール（１０．０  ｇ，３３．７  ｍｍｏｌ）を４０  ｍＬの乾燥ＣＨ2Ｃ１2に溶解し、得られた溶液を氷浴で０℃に冷却した。ＴＥＡ（５．６４  ｍＬ，４０．５  ｍｍｏｌ）を添加し、次いで３．１３  ｍＬ（４０．５  ｍｍｏｌ）の塩化メタンスルホニルを滴下した。反応を０℃において３０分撹拌し、次いで氷浴をはずし、室温にし、終夜撹拌した。反応混合物を大量のＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ3および水で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、ろ過し、真空下濃縮して、１２．４  ｇ（９８  ％）のＭＰＥＧ6メシレート，ＸＸＸＩを得た。
【０１６４】
６．３１１  ｇのジオール（５３．４１  ｍｍｏｌ）および１８０  ｍＬの乾燥ＴＨＦから１，６−ヘキサンジオール溶液を製造した。溶液を０℃に冷却し、Ｎ2雰囲気下においた。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（５．９９６  ｇ，５３．４１  ｍｍｏｌ）を溶液に添加し、得られた混合物を１時間撹拌した。ＸＸＸＩ（１０．０  ｇ，２６．７  ｍｍｏｌ）の３０  ｍＬ  ＴＨＦ溶液を混合物に添加した。全てを０℃においてさらに３０分撹拌し、次いで室温に加温させ、終夜撹拌した。反応混合物をＣｅｌｉｔｅでろ過した。ＣｅｌｉｔｅをＣＨ2Ｃｌ2ですすぎ、ろ液を合わせて真空下濃縮した。残渣をＣＨ2Ｃｌ2に再度溶解し、水で洗浄した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、ろ過し、蒸発乾固した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカ，ＣＨＣ１3／１０％ＭｅＯＨ）による精製。一部の物質は分取ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／１０  ％ＭｅＯＨ）でさらに精製した。合わせた収率は３．９２３  ｇ（３７  ％）のＸＸＸＩＩであった。
【０１６５】
ＸＸＸＩＩ（３．９２３  ｇ，９．８９  ｍｍｏｌ）を１６  ｍＬの乾燥ＣＨ2Ｃ１2に溶解し、得られた溶液を０℃においてＮ2雰囲気下においた。トリエチルアミン（１．６５  ｍＬ，１１．９  ｍｍｏｌ）を添加し、次いで０．９２  ｍＬ（１１．９  ｍｍｏｌ）の塩化メタンスルホニルを滴下した。反応を０℃においてさらに３０分撹拌し、次いで室温にさせ、終夜撹拌した。反応混合物を大量のＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ3および水で洗浄した。有機層をＭｇ2ＳＯ4で乾燥し、ろ過し、真空下濃縮して、４．２５  ｇ（９１  ％）のメシレートＸＸＸＩＩＩを提供した。
【０１６６】
５０  ｍＬの乾燥ＴＨＦを含有するフラスコに、５．００１ｇ（２４．９７  ｍｍｏｌ）の４−ベンジルオキシフェノールを溶解した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１．２０２  ｇ，９．９８９  ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で、不活性雰囲気下において１時間撹拌した。３．９５０  ｇ（８．３２４  ｍｍｏｌ）のＸＸＸＩＩＩの２０  ｍＬ  ＴＨＦ溶液を添加した。さらに１８時間後、混合物全体を１０  ｍＬのＭｅＯＨで停止し、Ｃｅｌｉｔｅの小さいパッドでろ過した。ろ液を真空下濃縮し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ，ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ  ２０：  １）によって精製して、１．５８４  ｇ  （３３  ％）の化合物ＸＸＸＩＶを提供した。ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｅ  ５７９．１６  （Ｍ＋Ｈ）+，６０１．１４（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１６７】
化合物ＸＸＸＩＶ（０．６８３  ｇ，１．１８  ｍｍｏｌ）を２０  ｍＬのＭｅＯＨに溶解した。この溶液に、１３６  ｍｇの５  ％  Ｐｄ／ＣのＭｅＯＨスラリーを添加した。混合物全体をＨ2雰囲気下におき、全ての出発物質が消費されたことをＴＬＣが確認するまで撹拌した。次いで、混合物をＣｅｌｉｔｅでろ過し、ろ液を蒸発乾固して４１２  ｍｇ（７１  ％）のＸＸＸＶを得た。ＥＳＩ  ＭＳ：  ｍ／ｅ  ５１１．０９  （Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１６８】
７．１２．  １−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（２−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エタノン（オリゴマーＸＸＸＩＸ）の合成
【０１６９】
【化２６】
2007508244.tif 000029
【０１７０】
化合物ＸＸＸＩＸは、４−ヒドロキシアセトフェノンのフェノール部分をｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルエーテル（ＴＢＤＰＳ）などの求核的に安定な保護基で保護することによって合成することができた。次いで、保護した化合物，ＸＸＸＶＩを、２，２−ジブロモ−２−シアノ−Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドまたはＮＢＳなどのブロム化試薬を使用してモノ−ブロム化して、化合物ＸＸＸＶＩＩを製造することができる。次いで、臭化物を、ＭＰＥＧ4ＯＨなどのＰＥＧ化合物のオキシアニオンと置換することができる。次いで、フェノール基の脱保護（この場合には、テトラ−ブチルアンモニウムフルオリドがＴＢＤＰＳエーテルを脱離すると思われる）により望ましいオリゴマー，ＸＸＸＩＸを生じる。
【０１７１】
７．１３．  ｌ−（４−ヒドロキシフェニル）−４−（２−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ブタン−１−オン（オリゴマーＸＸＸＸＩＶ）の合成
【０１７２】
【化２７】
2007508244.tif 000030
【０１７３】
（４−ヒドロキシフェニル）−４’−クロロブタン−１−オンのフェノール基は、ＰＰＴＳおよびジヒドロピランでＴＨＰエーテルとして保護することができる。次いで、炭酸水素ナトリウムを使用し、水とアセトニトリルの混合物中で加熱して塩化物をアルコールに変換することができる。アルコールをメシル化し、次いでメシレートを、ＭＰＥＧ4ＯＨなどのＰＥＧオリゴマーのオキシアニオンで置換することができる。ＴＨＰ基の最後の脱保護により表題の化合物ＸＸＸＸＩＶが得られる。
【０１７４】
７．１４．  オリゴマーＸＶの活性化
オリゴマーＸＶ（０．１５８  ｇ，０．４８２  ｍｍｏｌ）を１０  ｍＬの乾燥ＣＨ2Ｃ１2に溶解した。ＴＥＡ（１０１  μＬ，０．７２４  ｍｍｏｌ）およびｐ−ニトロクロロホルメート（０．１４６  ｇ，０．７２４  ｍｍｏｌ）を添加した。４時間後、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ3／１５  ％ＭｅＯＨ）は、全ての出発物質が消費されたことを示した。反応混合物をさらに１５  ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、冷水および冷却した食塩水で洗浄した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、ろ過し、真空下濃縮した。粗生成物を、溶離液としてＥｔＯＡｃを用いた分取ＴＬＣで精製して、８５  ｍｇ（３６％）の活性化オリゴマーを得た。ＥＳＩ  ＭＳ  ：  ｍ／ｅ  ４９３．２（Ｍ＋Ｈ）+，５１５．２（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１７５】
７．１５．  オリゴマーＸＸＸの活性化
オリゴマーＸＸＸ（０．５０３  ｇ，１．０９  ｍｍｏｌ）を１５  ｍＬの乾燥ＣＨ2Ｃ１2に溶解した。この溶液に０．２３  ｍＬ（１．６４  ｍｍｏｌ）のＴＥＡおよび０．３２９  ｇ（１．６４  ｍｍｏｌ）のｐ−ニトロ−フェニルクロロホルメートを添加した。反応を室温において終夜撹拌した。次いで、混合物をさらに１５  ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、１５  ｍＬの１Ｎ  ＨＣｌ、次に１５  ｍＬの水で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、ろ過し、濃縮して乾燥した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ，濃度勾配溶出：３／１  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）で精製して、５１０  ｍｇ（７５  ％）の活性化オリゴマーを得た。ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｅ  ６２４．１３（Ｍ＋Ｈ）+，  ６４６．９３（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１７６】
７．１６．  プロドラッグ
Ｌｅｕ−Ｅｎｋ（Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ）を結合のモデルペプチドとして選択した。Ｌｅｕ  Ｅｎｋは、結合に利用可能な唯一の１級アミンを有する。インスリンが生物学的に活性な薬剤であるプロドラッグを製造した。使用した他の例はヒトインスリンが挙げられる。インスリンプロドラッグは、インスリンが２つ以上の１級アミンを持つので、２つ以上のオリゴマーを有すると思われる。
【０１７７】
７．１７．  Ｌｅｕ−Ｅｎｋプロドラッグの結合
上記のオリゴマーのポリペプチド結合物を以下のように合成した。ＬｅｕＥｎｋ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｃｏｍｐａｎｙ）を、２当量のＴＥＡを添加した乾燥ＤＭＳＯに溶解した。活性化オリゴマーの溶液を乾燥ＴＨＦで調製した。オリゴマー溶液をペプチド溶液に添加し、混合物を室温においてゆっくり撹拌した。少量を取り出し、反応を逆相ＨＰＬＣでモニターした。結合物を、分取ＨＰＬＣ（例えば、Ａ  Ｃ１８  Ｖｙｄａｃカラム、水（０．１％  ＴＦＡ）／アセトニトリル（０．１％  ＴＦＡ）濃度勾配を使用する、２８０  ｎｍのＵＶでモニターする）によって精製した。有機溶媒を真空下除去し、残存する水溶液を凍結乾燥した。インスリンプロドラッグ結合物は同様の手法によって合成した。
【０１７８】
７．１８．  カルボキシルエステラーゼ加水分解
加水分解検討は、市販の精製カルボキシルエステラーゼ（この場合には、ＳＮ−３８の小型分子プロドラッグであり、芳香族ヒドロキシル基を含有する抗−癌剤である、イリノテカンのアリールカルバメートの加水分解を検討するために使用されたエステラーゼであるウサギ肝臓カルボキシルエステラーゼ）を用いてＰＢＳ緩衝液中で３７℃において実施した。表１参照。
【０１７９】
【表１】
2007508244.tif 000031
【０１８０】
７．１９．  エステラーゼ加水分解
最初に、ＤＭＳＯで〜２  ｍｇ／ｍＬの加水分解可能な結合物のストックまたは基準溶液を調製した。次いで、加水分解可能な結合物のワーキング溶液をトリプリケートで調製した（ワーキング溶液Ａ）。５０マイクロリッターのストック結合物を５．０  ｍＬの５０  ｍＭ  ＰＢＳ緩衝液に添加した。
【０１８１】
〜２  ｍｇのエステラーゼを２．０  ｍＬの５０  ｍＭ  ＰＢＳ緩衝液に添加することによって、カルボキシルエステラーゼのストック溶液を調製した。５０  ｕＬのストック溶液を５．０  ｍＬの５０  ｍＭ  ＰＢＳ緩衝液で希釈することによってカルボキシルエステラーゼのワーキング溶液を調製した（ワーキング溶液Ｂ）。
【０１８２】
次いで、５００マイクロリッターのワーキング溶液Ｂを各ワーキング溶液Ａに添加した（０．５単位の酵素および１０〜２０μＭの結合物）。反応混合物を速やかにボルテックスし、経過時間＝０分析のサンプリングした。反応溶液を往復水浴振とう機で３７℃においてインキュベーションした。インキュベーション中の適当な時間間隔において、７５μＬの量を取り、ＨＰＬＣに直接注入して加水分解速度データを得た。各実験を用いて、特定の結合物の新たな検量線を作製した。
【０１８３】
結合物１〜７のデータを図１Ａ〜１Ｇに示す。擬一次速度定数または「ｋ」を、結合物の濃度の自然対数対時間曲線の傾斜から得る。次いで、半減期をｋから算出する。
【０１８４】
７．２０．  血漿による加水分解
ラット血漿を使用する実験を、エステラーゼ加水分解実験と同様の方法で実施した。〜１５  ｍｇ／ｍＬのＤＭＳＯ溶液である各結合物のストックまたは基準溶液を作製した。２００マイクロリッターのストックを８００  μＬの５０  ｍＭ  ＰＢＳ緩衝液に添加した。この後者の溶液の５０マイクロリッターを９５０  μＬのラット血漿に添加し、３７℃の往復水浴振とう機に入れた。適当な時間間隔において、５０  μＬの量を取り、１００  μＬのＡＣＮに添加し、１分激しくボルテックした。試料を１０，０００  ｒｐｍで５分遠心分離し、次いで５０  μＬの上清をＨＰＬＣ分析に注入した。各結合物の濃度を測定するための検量線を作製した。結合物１の検量線を図２Ａに示す。３７℃におけるラット血漿における結合物１の加水分解曲線を図２Ｂに示す。
【０１８５】
【表２】
2007508244.tif 000032
【０１８６】
【表３】
2007508244.tif 000033
【０１８７】
８．  結論
本発明は、本明細書に記載する種々の実施態様に関して記載されている。本発明は異なる形態で実現することができ、本明細書に記載する特定の実施態様に限定されると解釈されるべきではない。むしろ、これらの実施態様は、本発明の開示が完全で完璧であり、本発明の範囲が当業者に充分に伝達するように提供されている。特に規定しない限り、本明細書において使用する全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する当分野の当業者に普通に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書において本発明を記載する際に使用する用語は特定の実施態様を記載する目的のためだけであり、本発明を限定する意図のものではない。
【０１８８】
本明細書に引用する全ての刊行物、特許出願、特許および他の参照文献は、言及されている文章および／またはパラグラフに関連する教示内容について全体として参照により本明細書に組み入れられる。
【０１８９】
関連出願のデータ
本願は、米国特許法１１９条（ｅ）に準じ、開示内容が全体として参照により本明細書に組み入れられる、２００３年８月１日提出の米国特許仮出願第６０／４９１，７５１号の利益を主張する。
【図面の簡単な説明】
【０１９０】
【図１Ａ−Ｇ】本発明のＬｅｕ−Ｅｎｋ結合プロドラッグのエステラーゼ加水分解を図示するグラフを例示する。各結合物のｌｎ結合物濃度（μＭ）対時間（分）曲線の傾斜から擬一次速度定数が得られた。結合物の半減期も得られた。
【図２Ａ−Ｂ】生体外におけるラット血漿検討の結合物１濃度（μＭ）を求める標準曲線を図示するグラフ（図２Ａ）および３７℃においてラット血漿におけるｌｎ結合物１濃度（μＭ）対時間（分）を示すグラフ（図２Ｂ）を例示する。
【図１Ａ】
2007508244.tif 000053
【図１Ｂ】
2007508244.tif 000054
【図１Ｃ】
2007508244.tif 000055
【図１Ｄ】
2007508244.tif 000056
【図１Ｅ】
2007508244.tif 000057
【図１Ｆ】
2007508244.tif 000058
【図１Ｇ】
2007508244.tif 000059
【図２Ａ】
2007508244.tif 000060
【図２Ｂ】
2007508244.tif 000061
【国際調査報告】
2007508244.tif 000062
2007508244.tif 000063