(57)【要約】  モノクローナル抗体の重鎖及び軽鎖をコードするヌクレオチド配列及びモノクローナル抗体の重鎖及び軽鎖を含有するアミノ酸配列。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される、少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、及び抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、単離ポリペプチド
（ＣＤＲ１ａは、アミノ酸配列  ａ  ｂ  ｃ  ｄ  ｅ（アミノ酸配列ａは、アスパラギン、スレオニン、フェニルアラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｂは、アラニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｃは、トリプトファン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄは、メチオニン又はトリプトファンから選択され；及びアミノ酸ｅは、セリン、アスパラギン又はヒスチジンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ（アミノ酸ｆは、アルギニン又はバリンから選択され；アミノ酸ｇは、イソロイシンであり；アミノ酸ｈは、リシン、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｉは、セリン、イソロイシン、チロシン、スレオニン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｊは、リシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋは、スレオニン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｌは、アスパラギン酸、セリン又はグルタミン酸から選択され；アミノ酸ｍは、グリシン、スレオニン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｎは、グリシン、アスパラギン、リシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｏは、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｐは、スレオニン、イソロイシン、アスパラギン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｑは、アスパラギン酸、プロリン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｒは、チロシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｓは、グリシン、アラニン、ロイシン又はセリンから選択され；及びアミノ酸ｔは、アラニン、リシン又はバリンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列  ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’（アミノ酸ｕは、アスパラギン酸、グリシン、メチオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｖは、アルギニン、グリシン、アスパラギン酸、チロシン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｗは、チロシン、バリン、グリシン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｘは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｙは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はイソロイシンから選択され；アミノ酸ｚは、グリシン、チロシン、プロリン、バリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ’は、グルタミン酸、セリン、チロシン、トリプトファン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｂ’は、フェニルアラニン、グリシン、チロシン、スレオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ’は、プロリン、チロシン、セリン、リシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄ’は、フェニルアラニン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｅ’は、アスパラギン酸、チロシン、アルギニン又はヒスチジンから選択され；及びアミノ酸ｆ’は、チロシン、バリン、グリシン、アルギニン又はスレオニンから選択される。）を含む。）。
【請求項２】
ポリペプチドが、抗体重鎖可変領域を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３】
抗体重鎖定常領域をさらに含む、請求項２に記載の単離ポリペプチド。
【請求項４】
抗体重鎖可変領域及び重鎖定常領域が、配列番号２；配列番号６；配列番号１０；配列番号１４；配列番号１８；又は配列番号２２で規定されるアミノ酸配列を含む、請求項３に記載の単離ポリペプチド。
【請求項５】
ＣＤＲ２ａ（ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’を含み、及びアミノ酸ｇ’は、プロリン、リシン又はセリンから選択される。）を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項６】
ＣＤＲ２ａ（ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’  ｈ’を含み、及びアミノ酸ｈ’は、バリン又はグリシンから選択される。）を含む、請求項５に記載の単離ポリペプチド。
【請求項７】
ＣＤＲ２ａ（ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’  ｈ’  ｉ’を含み、及びアミノ酸ｉ’は、リシンである。）を含有する、請求項６に記載の単離ポリペプチド。
【請求項８】
ＣＤＲ２ａ（ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’  ｈ’  ｉ’  ｊ’を含み、及びアミノ酸ｊ’はグリシンである。）を含む、請求項７に記載の単離ポリペプチド。
【請求項９】
ＣＤＲ３ａ（ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’を含み、及びアミノ酸ｋ’は、アスパラギン酸、メチオニン、アスパラギン、チロシン又はバリンから選択される。）を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１０】
ＣＤＲ３ａ（ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’を含み、及びアミノ酸ｌ'は、ヒスチジン、アスパラギン酸、セリン、チロシン又はフェニルアラニンから選択される。）を含む、請求項９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１１】
ＣＤＲ３ａ（ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’を含み、及びアミノ酸ｍ’は、バリン、アスパラギン酸又はグリシンから選択される。）を含む、請求項１０に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１２】
ＣＤＲ３ａ（ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’  ｎ’を含み、及びアミノ酸ｎ’は、フェニルアラニン、メチオニン又はチロシンから選択される。）を含む、請求項１１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１３】
ＣＤＲ３ａ（ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’  ｎ’  ｏ’を含み、及びアミノ酸ｏ’は、アスパラギン酸である。）を含む、請求項１２に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１４】
ＣＤＲ３ａ（ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’  ｎ’  ｏ’  ｐ’を含み、及びアミノ酸ｐ’は、バリン又はチロシンから選択される。）を含む、請求項１３に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１５】
請求項１に記載の、ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される少なくとも２個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１６】
請求項１に記載の、ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ及びＣＤＲ３ａを含み、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１７】
請求項１に記載の単離ポリペプチドを含み、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆａｃｂ及び一本鎖抗体から選択される、抗体断片。
【請求項１８】
配列番号２のアミノ酸５０から５４；
配列番号２のアミノ酸６９から８７；
配列番号２のアミノ酸１２０から１３５；
配列番号６のアミノ酸５０から５４；
配列番号６のアミノ酸６９から８４；
配列番号６のアミノ酸１１７から１３４；
配列番号１０のアミノ酸５０から５４；
配列番号１０のアミノ酸６９から８５；
配列番号１０のアミノ酸１１８から１３５；
配列番号１４のアミノ酸５０から５４；
配列番号１４のアミノ酸６９から８４；
配列番号１４のアミノ酸１１７から１３１；
配列番号１８のアミノ酸５０から５４；
配列番号１８のアミノ酸６９から８７；
配列番号１８のアミノ酸１２０から１３３；
配列番号２２のアミノ酸５０から５４；
配列番号２２のアミノ酸６９から８７；又は
配列番号２２のアミノ酸１２０から１３１
の少なくとも１個から選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、単離ポリペプチド。
【請求項１９】
請求項１８に記載の相補性決定領域（ＣＤＲ）の少なくとも２個を含み、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、単離ポリペプチド。
【請求項２０】
請求項１８に記載の相補性決定領域（ＣＤＲ）の少なくとも３個を含み、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、単離ポリペプチド。
【請求項２１】
単離ポリペプチドが配列番号２のアミノ酸５０から５４、配列番号２のアミノ酸６９から８７及び配列番号２のアミノ酸１２０から１３５を含む、請求項１８に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２２】
単離ポリペプチドが配列番号６のアミノ酸５０から５４、配列番号６のアミノ酸６９から８４及び配列番号６のアミノ酸１１７から１３４を含む、請求項１８に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２３】
単離ポリペプチドが配列番号１０のアミノ酸５０から５４、配列番号１０のアミノ酸６９から８５及び配列番号１０のアミノ酸１１８から１３５を含む、請求項１８に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２４】
単離ポリペプチドが配列番号１４のアミノ酸５０から５４、配列番号１４のアミノ酸６９から８４及び配列番号１４のアミノ酸１１７から１３１を含む、請求項１８に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２５】
単離ポリペプチドが配列番号１８のアミノ酸５０から５４、配列番号１８のアミノ酸６９から８７及び配列番号１８のアミノ酸１２０から１３３を含む、請求項１８に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２６】
単離ポリペプチドが配列番号２２のアミノ酸５０から５４、配列番号２２のアミノ酸６９から８７及び配列番号２２のアミノ酸１２０から１３１を含む、請求項１８に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２７】
ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される、少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、及び抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合可能である、単離ポリペプチド
（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１（アミノ酸ａ１は、アルギニンであり；アミノ酸ｂ１は、アラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ１は、セリンであり；アミノ酸ｄ１は、グルタミンであり；アミノ酸ｅ１は、グリシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｆ１は、イソロイシン、バリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｇ１は、セリン又はバリンから選択され；アミノ酸ｈ１は、アスパラギン、セリン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｉ１は、ヒスチジン、アスパラギン、セリン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｊ１は、ロイシン、チロシン又はアスパラギン酸から選択され；及びアミノ酸ｋ１は、バリン、ロイシン、グリシン又はアスパラギンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ２ｂは、アミノ酸配列ｌ１  ｍ１  ｎ１  ｏ１  ｐ１  ｑ１  ｒ１（アミノ酸ｌ１は、アラニン、グリシン又はリシンから選択され；アミノ酸ｍ１は、アラニン又はリシンから選択され；アミノ酸ｎ１は、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｏ１は、スレオニン、セリン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｐ１は、ロイシン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｑ１は、グルタミン、アラニン又はフェニルアラニンから選択され；及びアミノ酸ｒ１は、セリン又はスレオニンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ３ｂは、アミノ酸配列ｓ１  ｔ１  ｕ１  ｖ１  ｗ１  ｘ１  ｙ１  ｚ１  ａ１’（アミノ酸ｓ１は、グルタミン又はメチオニンから選択され；及びアミノ酸ｔ１は、リシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｕ１は、チロシン、アラニン、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｖ１は、アスパラギン、グリシン、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｗ１は、セリン、グリシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｘ１は、アラニン、セリン、イソロイシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｙ１は、プロリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｚ１は、ロイシン、トリプトファン又はフェニルアラニンから選択され；及びアミノ酸ａ１’は、スレオニンである。）を含む。）。
【請求項２８】
ポリペプチドが、抗体軽鎖可変領域を含む、請求項２７に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２９】
抗体軽鎖定常領域をさらに含む、請求項２８に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３０】
抗体軽鎖可変領域及び軽鎖定常領域が、配列番号４；配列番号８；配列番号１２；配列番号１６；又は配列番号２０で規定されるアミノ酸配列を含む、請求項２９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３１】
ＣＤＲ１ｂ（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’を含み、及びアミノ酸ｂ１’は、アスパラギン又はアラニンから選択される。）を含む、請求項２７に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３２】
ＣＤＲ１ｂ（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’を含み、及びアミノ酸ｃ１’は、スレオニンである。）を含む、請求項３１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３３】
ＣＤＲ１ｂ（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’を含み、及びアミノ酸ｄ１’は、チロシンである。）を含む、請求項３２に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３４】
ＣＤＲ１ｂ（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’  ｅ１’を含み、及びアミノ酸ｅ１’は、ロイシンである。）を含む、請求項３３に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３５】
ＣＤＲ１ｂ（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’  ｅ１’  ｆ１’を含み、及びアミノ酸ｆ１’は、セリンである。）を含む、請求項３４に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３６】
請求項２７に記載の、ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される、少なくとも２個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、請求項２７に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３７】
請求項２７に記載の、ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ及びＣＤＲ３ｂを含み、抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、請求項２７に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３８】
請求項２７に記載の単離ポリペプチドを含み、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆａｃｂ及び一本鎖抗体から選択される、抗体断片。
【請求項３９】
配列番号４のアミノ酸４６から５６；
配列番号４のアミノ酸７２から７８；
配列番号４のアミノ酸１１１から１１９；
配列番号８のアミノ酸４６から５６；
配列番号８のアミノ酸７２から７８；
配列番号８のアミノ酸１１１から１１９；
配列番号１２のアミノ酸４４から５９；
配列番号１２のアミノ酸７５から８１；
配列番号１２のアミノ酸１１４から１２２；
配列番号１６のアミノ酸４４から５５；
配列番号１６のアミノ酸７１から７７；
配列番号１６のアミノ酸１１０から１１８；
配列番号２０のアミノ酸４６から５６；
配列番号２０のアミノ酸７２から７８；
又は配列番号２０のアミノ酸１１１から１１９
の少なくとも１個から選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合可能である、単離ポリペプチド。
【請求項４０】
請求項３９に記載の相補性決定領域（ＣＤＲ）の少なくとも２個を含み、抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、単離ポリペプチド。
【請求項４１】
請求項３９に記載の相補性決定領域（ＣＤＲ）の少なくとも３個を含み、抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、単離ポリペプチド。
【請求項４２】
単離ポリペプチドが配列番号４のアミノ酸４６から５６、配列番号４のアミノ酸７２から７８及び配列番号４のアミノ酸１１１から１１９を含む、請求項３９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項４３】
単離ポリペプチドが配列番号８のアミノ酸４６から５６、配列番号８のアミノ酸７２から７８及び配列番号８のアミノ酸１１１から１１９を含む、請求項３９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項４４】
単離ポリペプチドが配列番号１２のアミノ酸４４から５９、配列番号１２のアミノ酸７５から８１及び配列番号１２のアミノ酸１１４から１２２を含む、請求項３９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項４５】
単離ポリペプチドが配列番号１６のアミノ酸４４から５５、配列番号１６のアミノ酸７１から７７及び配列番号１６のアミノ酸１１０から１１８を含む、請求項３９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項４６】
単離ポリペプチドが配列番号２０のアミノ酸４６から５６、配列番号２０のアミノ酸７２から７８及び配列番号２０のアミノ酸１１１から１１９を含む、請求項３９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項４７】
ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、及び抗体軽鎖と共同してＯＸ４０Ｌを結合することが可能であるポリペプチドをコードする配列を含む、単離ポリヌクレオチド
（ＣＤＲ１ａは、アミノ酸配列  ａ  ｂ  ｃ  ｄ  ｅ（アミノ酸配列ａは、アスパラギン、スレオニン、フェニルアラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｂは、アラニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｃは、トリプトファン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄは、メチオニン又はトリプトファンから選択され；及びアミノ酸ｅは、セリン、アスパラギン又はヒスチジンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ（アミノ酸ｆは、アルギニン又はバリンから選択され；アミノ酸ｇは、イソロイシンであり；アミノ酸ｈは、リシン、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｉは、セリン、イソロイシン、チロシン、スレオニン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｊは、リシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋは、スレオニン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｌは、アスパラギン酸、セリン又はグルタミン酸から選択され；アミノ酸ｍは、グリシン、スレオニン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｎは、グリシン、アスパラギン、リシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｏは、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｐは、スレオニン、イソロイシン、アスパラギン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｑは、アスパラギン酸、プロリン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｒは、チロシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｓは、グリシン、アラニン、ロイシン又はセリンから選択され；及びアミノ酸ｔは、アラニン、リシン又はバリンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列  ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’（アミノ酸ｕは、アスパラギン酸、グリシン、メチオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｖは、アルギニン、グリシン、アスパラギン酸、チロシン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｗは、チロシン、バリン、グリシン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｘは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｙは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はイソロイシンから選択され；アミノ酸ｚは、グリシン、チロシン、プロリン、バリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ’は、グルタミン酸、セリン、チロシン、トリプトファン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｂ’は、フェニルアラニン、グリシン、チロシン、スレオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ’は、プロリン、チロシン、セリン、リシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄ’は、フェニルアラニン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｅ’は、アスパラギン酸、チロシン、アルギニン又はヒスチジンから選択され；及びアミノ酸ｆ’は、チロシン、バリン、グリシン、アルギニン又はスレオニンから選択される。）を含む。）。
【請求項４８】
ポリペプチドをコードする配列が、抗体重鎖可変領域をコードする配列である、請求項４７に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項４９】
単離ポリヌクレオチドが、一本鎖抗体をコードする、請求項４７に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５０】
抗体重鎖定常領域をコードするポリヌクレオチド配列をさらに含む、請求項４８に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５１】
単離ポリヌクレオチドが配列番号２；配列番号６；配列番号１０；配列番号１４；配列番号１８；又は配列番号２２で規定されるアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする配列を含む、請求項５０に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５２】
単離ポリヌクレオチドが配列番号１；配列番号５；配列番号９；配列番号１３；配列番号１７；又は配列番号２１で規定されるヌクレオチド配列を含む、請求項５０に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５３】
ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、及び抗体重鎖と共同してＯＸ４０Ｌを結合することが可能であるポリペプチドをコードする配列を含む、単離ポリヌクレオチド
（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１（アミノ酸ａ１は、アルギニンであり；アミノ酸ｂ１は、アラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ１は、セリンであり；アミノ酸ｄ１は、グルタミンであり；アミノ酸ｅ１は、グリシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｆ１は、イソロイシン、バリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｇ１は、セリン又はバリンから選択され；アミノ酸ｈ１は、アスパラギン、セリン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｉ１は、ヒスチジン、アスパラギン、セリン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｊ１は、ロイシン、チロシン又はアスパラギン酸から選択され；及びアミノ酸ｋ１は、バリン、ロイシン、グリシン又はアスパラギンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ２ｂは、アミノ酸配列ｌ１  ｍ１  ｎ１  ｏ１  ｐ１  ｑ１  ｒ１（アミノ酸ｌ１は、アラニン、グリシン又はリシンから選択され；アミノ酸ｍ１は、アラニン又はリシンから選択され；アミノ酸ｎ１は、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｏ１は、スレオニン、セリン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｐ１は、ロイシン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｑ１は、グルタミン、アラニン又はフェニルアラニンから選択され；及びアミノ酸ｒ１は、セリン又はスレオニンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ３ｂは、アミノ酸配列ｓ１  ｔ１  ｕ１  ｖ１  ｗ１  ｘ１  ｙ１  ｚ１  ａ１’（アミノ酸ｓ１は、グルタミン又はメチオニンから選択され；及びアミノ酸ｔ１は、リシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｕ１は、チロシン、アラニン、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｖ１は、アスパラギン、グリシン、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｗ１は、セリン、グリシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｘ１は、アラニン、セリン、イソロイシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｙ１は、プロリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｚ１は、ロイシン、トリプトファン又はフェニルアラニンから選択され；及びアミノ酸ａ１’は、スレオニンである。）を含む。）。
【請求項５４】
ポリペプチドをコードする配列が、抗体軽鎖可変領域をコードする配列である、請求項５３に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５５】
単離ポリヌクレオチドが、一本鎖抗体をコードする、請求項５３に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５６】
抗体軽鎖定常領域をコードするポリヌクレオチド配列をさらに含む、請求項５４に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５７】
単離ポリヌクレオチドが配列番号４；配列番号８；配列番号１２；配列番号１６；又は配列番号２０で規定されるアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする配列を含む、請求項５６に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５８】
単離ポリヌクレオチドが配列番号３；配列番号７；配列番号１１；配列番号１５；又は配列番号１９で規定されるヌクレオチド配列を含む、請求項５６に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５９】
可変領域及び定常領域を含む単離抗ＯＸ４０Ｌ抗体であって、
（ｉ）ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、及び抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、第一のポリペプチド
（ＣＤＲ１ａは、アミノ酸配列  ａ  ｂ  ｃ  ｄ  ｅ（アミノ酸ａは、アスパラギン、スレオニン、フェニルアラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｂは、アラニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｃは、トリプトファン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄは、メチオニン又はトリプトファンから選択され；及びアミノ酸ｅは、セリン、アスパラギン又はヒスチジンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ（アミノ酸ｆは、アルギニン又はバリンから選択され；アミノ酸ｇは、イソロイシンであり；アミノ酸ｈは、リシン、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｉは、セリン、イソロイシン、チロシン、スレオニン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｊは、リシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋは、スレオニン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｌは、アスパラギン酸、セリン又はグルタミン酸から選択され；アミノ酸ｍは、グリシン、スレオニン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｎは、グリシン、アスパラギン、リシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｏは、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｐは、スレオニン、イソロイシン、アスパラギン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｑは、アスパラギン酸、プロリン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｒは、チロシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｓは、グリシン、アラニン、ロイシン又はセリンから選択され；及びアミノ酸ｔは、アラニン、リシン又はバリンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列  ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’（アミノ酸ｕは、アスパラギン酸、グリシン、メチオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｖは、アルギニン、グリシン、アスパラギン酸、チロシン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｗは、チロシン、バリン、グリシン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｘは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｙは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はイソロイシンから選択され；アミノ酸ｚは、グリシン、チロシン、プロリン、バリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ’は、グルタミン酸、セリン、チロシン、トリプトファン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｂ’は、フェニルアラニン、グリシン、チロシン、スレオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ’は、プロリン、チロシン、セリン、リシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄ’は、フェニルアラニン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｅ’は、アスパラギン酸、チロシン、アルギニン又はヒスチジンから選択され；及びアミノ酸ｆ’は、チロシン、バリン、グリシン、アルギニン又はスレオニンから選択される。）を含む。）、及び
（ｉｉ）ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み；及び抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、第二のポリペプチド
（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１（アミノ酸ａ１は、アルギニンであり；アミノ酸ｂ１は、アラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ１は、セリンであり；アミノ酸ｄ１は、グルタミンであり；アミノ酸ｅ１は、グリシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｆ１は、イソロイシン、バリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｇ１は、セリン又はバリンから選択され；アミノ酸ｈ１は、アスパラギン、セリン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｉ１は、ヒスチジン、アスパラギン、セリン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｊ１は、ロイシン、チロシン又はアスパラギン酸から選択され；及びアミノ酸ｋ１は、バリン、ロイシン、グリシン又はアスパラギンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ２ｂは、アミノ酸配列ｌ１  ｍ１  ｎ１  ｏ１  ｐ１  ｑ１  ｒ１（アミノ酸ｌ１は、アラニン、グリシン又はリシンから選択され；アミノ酸ｍ１は、アラニン又はリシンから選択され；アミノ酸ｎ１は、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｏ１は、スレオニン、セリン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｐ１は、ロイシン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｑ１は、グルタミン、アラニン又はフェニルアラニンから選択され；及びアミノ酸ｒ１は、セリン又はスレオニンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ３ｂは、アミノ酸配列ｓ１  ｔ１  ｕ１  ｖ１  ｗ１  ｘ１  ｙ１  ｚ１  ａ１’（アミノ酸ｓ１は、グルタミン又はメチオニンから選択され；及びアミノ酸ｔ１は、リシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｕ１は、チロシン、アラニン、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｖ１は、アスパラギン、グリシン、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｗ１は、セリン、グリシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｘ１は、アラニン、セリン、イソロイシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｙ１は、プロリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｚ１は、ロイシン、トリプトファン又はフェニルアラニンから選択され；及びアミノ酸ａ１’は、スレオニンである。）を含む。）
を含む、前記抗体。
【請求項６０】
抗体が、ヒト抗体である、請求項５９に記載の単離抗体。
【請求項６１】
抗体が、キメラ抗体である、請求項５９に記載の単離抗体。
【請求項６２】
可変領域及び定常領域を含む単離抗ＯＸ４０Ｌ抗体であって、
配列番号２で規定される相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む第一のポリペプチド及び配列番号４で規定されるＣＤＲを含む第二のポリペプチド；
配列番号６で規定されるＣＤＲを含む第一のポリペプチド及び配列番号８で規定されるＣＤＲを含む第二のポリペプチド；
配列番号１０で規定されるＣＤＲを含む第一のポリペプチド及び配列番号１２で規定されるＣＤＲを含む第二のポリペプチド；
配列番号１４で規定されるＣＤＲを含む第一のポリペプチド及び配列番号１６で規定されるＣＤＲを含む第二のポリペプチド；又は、
配列番号１８で規定されるＣＤＲを含む第一のポリペプチド及び配列番号２０で規定されるＣＤＲを含む第二のポリペプチド；
を含む、前記抗体。
【請求項６３】
ａ）請求項５９に記載の抗体と試料とを混合すること；
ｂ）抗原に結合した抗体を、非結合抗体から分離すること；及び
ｃ）抗原に結合した抗体の有無を検出すること、
を含む、試料中のＯＸ４０Ｌの有無を検出するための方法。
【請求項６４】
方法が、酵素免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）を使用する、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
請求項５９に記載の抗体の治療的有効量を患者に投与することを含む、患者において炎症性疾患を治療するための方法。
【請求項６６】
炎症性疾患が、関節リウマチ、骨関節症、移植片対宿主拒絶反応、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、多発性硬化症、乾癬又は増殖性ループス腎炎の少なくとも１つから選択される、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
請求項４７に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
【請求項６８】
請求項５３に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
【請求項６９】
請求項６７又は請求項６８に記載の発現ベクターのうち少なくとも１個を含む細胞。
【請求項７０】
ポリペプチドを産生させるために、その中に含有されるポリヌクレオチドを発現するのに適切な条件において、請求項６７に記載の発現ベクターを含む細胞においてポリペプチドを産生させることを含む、ポリペプチドを作製する方法。
【請求項７１】
ポリペプチドを産生させるために、その中に含有されるポリヌクレオチドを発現するのに適切な条件において、請求項６８に記載の発現ベクターを含む細胞においてポリペプチドを産生させることを含む、ポリペプチドを作製する方法。
【請求項７２】
抗体を産生させるために、その中に含有されるポリヌクレオチドを発現するのに適切な条件において、請求項６７に記載の発現ベクターを含み、さらに請求項６８に記載の発現ベクターを含む細胞において抗体を産生させることを含む、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を作製する方法。
【請求項７３】
請求項５９に記載の抗体と、医薬的に許容される担体と、を含む医薬組成物。
【請求項７４】
Ａｂ  Ａ、Ａｂ  Ｂ、Ａｂ  Ｃ、Ａｂ  Ｄ、Ａｂ  Ｅ、Ａｂ  Ｆ、Ａｂ  Ｇ、Ａｂ  Ｈ、Ａｂ  Ｉ又はＡｂ  Ｊのうち少なくとも１個によって特異的に結合されるエピトープに特異的に結合する、単離抗体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、本明細書中に参照により組み込む、２００４年３月２３日出願の、米国特許仮出願第６０／５５５，３９６号の優先権を主張する。
【０００２】
分野
本発明は、ＯＸ４０リガンド（ＯＸ４０Ｌ）と反応性のある抗体、ＯＸ４０Ｌと反応性のある抗体を産生する細胞、ＯＸ４０Ｌと反応性のある抗体を含有する医薬組成物、ＯＸ４０Ｌと反応性のある抗体を用いた方法及びＯＸ４０Ｌと反応性のある抗体を含有するキットに関する。
【背景技術】
【０００３】
ＯＸ４０とそのリガンド、ＯＸ４０Ｌとの間の相互作用は、免疫反応時に、抗原活性化ＣＤ４  Ｔ細胞の活性化及び増殖に関与する。最初に、ＭＨＣ−ＩＩ及びＴ細胞受容体（ＴＣＲ）と結合する抗原の提示を介して、ＣＤ４  Ｔ細胞が活性化される。抗原提示後、ＯＸ４０及びＯＸ４０Ｌ細胞表面発現が、ＣＤ４  Ｔ細胞表面で発現されるＯＸ４０及び抗原提示細胞（ＡＰＣ）表面で発現されるＯＸ４０Ｌとともに上方制御される。抗原ＴＣＲ及びＯＸ４０Ｌ−ＯＸ４０相互作用のシグナルが合わせられ、ＣＤ４  Ｔ細胞活性化、増殖、移動及びサイトカイン産生が促進される。一般的には、例えば、Ｌａｎｅ，Ｐ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９１：２０１−０５（２０００）を参照のこと。
【０００４】
ＯＸ４０Ｌは、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）ファミリータンパク質のメンバーである。ＯＸ４０Ｌは、一般に、樹状細胞（ＤＣ）、マクロファージ、ミクログリア及びＢ細胞などのＡＰＣ上で発現される。ＯＸ４０は、一般に、リンパ組織、例えば活性化ＣＤ４  Ｔ細胞などにおいて発現される。これらのＯＸ４０＋Ｔ細胞は、選択的に、身体の炎症部位において見出される。同様に、炎症症状のある患者において、ＯＸ４０Ｌは、一般に、炎症部位の組織で発現され、健康な組織では発現されない。研究者らは、ＯＸ４０Ｌ−ＯＸ４０相互作用を阻害する物質がＴ細胞介在性の実験的炎症疾患を緩和するために使用し得ることを示した。例えば、全般的に、Ｗｅｉｎｂｅｒｇ，Ａ．，Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２３：１０２−０９（２００２）を参照のこと。
【発明の開示】
【０００５】
ある実施形態において、ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される、少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ａは、アミノ酸配列  ａ  ｂ  ｃ  ｄ  ｅ（アミノ酸配列ａは、アスパラギン、スレオニン、フェニルアラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｂは、アラニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｃは、トリプトファン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄは、メチオニン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｅは、セリン、アスパラギン又はヒスチジンから選択される。）を含有し；
ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ（アミノ酸ｆは、アルギニン又はバリンから選択され；アミノ酸ｇは、イソロイシンであり；アミノ酸ｈは、リシン、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｉは、セリン、イソロイシン、チロシン、スレオニン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｊは、リシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋは、スレオニン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｌは、アスパラギン酸、セリン又はグルタミン酸から選択され；アミノ酸ｍは、グリシン、スレオニン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｎは、グリシン、アスパラギン、リシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｏは、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｐは、スレオニン、イソロイシン、アスパラギン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｑは、アスパラギン酸、プロリン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｒは、チロシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｓは、グリシン、アラニン、ロイシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｔは、アラニン、リシン又はバリンから選択される。）を含有し；
ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列  ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’（アミノ酸ｕは、アスパラギン酸、グリシン、メチオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｖは、アルギニン、グリシン、アスパラギン酸、チロシン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｗは、チロシン、バリン、グリシン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｘは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｙは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はイソロイシンから選択され；アミノ酸ｚは、グリシン、チロシン、プロリン、バリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ’は、グルタミン酸、セリン、チロシン、トリプトファン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｂ’は、フェニルアラニン、グリシン、チロシン、スレオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ’は、プロリン、チロシン、セリン、リシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄ’は、フェニルアラニン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｅ’は、アスパラギン酸、チロシン、アルギニン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｆ’は、チロシン、バリン、グリシン、アルギニン又はスレオニンから選択される。）を含有する。）を含有し；抗体軽鎖と共同してＯＸ４０Ｌへの結合が可能である、単離ポリペプチドを提供する。
【０００６】
ある実施形態において、配列番号２のアミノ酸５０から５４；配列番号２のアミノ酸６９から８７；配列番号２のアミノ酸１２０から１３５；配列番号６のアミノ酸５０から５４；配列番号６のアミノ酸６９から８４；配列番号６のアミノ酸１１７から１３４；配列番号１０のアミノ酸５０から５４；配列番号１０のアミノ酸６９から８５；配列番号１０のアミノ酸１１８から１３５；配列番号１４のアミノ酸５０から５４；配列番号１４のアミノ酸６９から８４；配列番号１４のアミノ酸１１７から１３１；配列番号１８のアミノ酸５０から５４；配列番号１８のアミノ酸６９から８７；配列番号１８のアミノ酸１２０から１３３；配列番号２２のアミノ酸５０から５４；配列番号２２のアミノ酸６９から８７；又は配列番号２２のアミノ酸１２０から１３１の少なくとも１個から選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有しており、抗体軽鎖と共同してＯＸ４０Ｌに結合可能である、単離ポリペプチドを提供する。
【０００７】
ある実施形態において、ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される、少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１（アミノ酸ａ１は、アルギニンであり；アミノ酸ｂ１は、アラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ１は、セリンであり；アミノ酸ｄ１は、グルタミンであり；アミノ酸ｅ１は、グリシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｆ１は、イソロイシン、バリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｇ１は、セリン又はバリンから選択され；アミノ酸ｈ１は、アスパラギン、セリン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｉ１は、ヒスチジン、アスパラギン、セリン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｊ１は、ロイシン、チロシン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋ１は、バリン、ロイシン、グリシン又はアスパラギンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ２ｂは、アミノ酸配列ｌ１  ｍ１  ｎ１  ｏ１  ｐ１  ｑ１  ｒ１（アミノ酸ｌ１は、アラニン、グリシン又はリシンから選択され；アミノ酸ｍ１は、アラニン又はリシンから選択され；アミノ酸ｎ１は、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｏ１は、スレオニン、セリン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｐ１は、ロイシン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｑ１は、グルタミン、アラニン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｒ１は、セリン又はスレオニンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ３ｂは、アミノ酸配列ｓ１  ｔ１  ｕ１  ｖ１  ｗ１  ｘ１  ｙ１  ｚ１  ａ１’（アミノ酸ｓ１は、グルタミン又はメチオニンから選択され；アミノ酸ｔ１は、リシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｕ１は、チロシン、アラニン、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｖ１は、アスパラギン、グリシン、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｗ１は、セリン、グリシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｘ１は、アラニン、セリン、イソロイシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｙ１は、プロリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｚ１は、ロイシン、トリプトファン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ１’は、スレオニンである。）を含有する。）を含有し、抗体重鎖と共同してＯＸ４０Ｌに結合可能である、単離ポリペプチドを提供する。
【０００８】
ある実施形態において、配列番号４のアミノ酸４６から５６；配列番号４のアミノ酸７２から７８；配列番号４のアミノ酸１１１から１１９；配列番号８のアミノ酸４６から５６；配列番号８のアミノ酸７２から７８；配列番号８のアミノ酸１１１から１１９；配列番号１２のアミノ酸４４から５９；配列番号１２のアミノ酸７５から８１；配列番号１２のアミノ酸１１４から１２２；配列番号１６のアミノ酸４４から５５；配列番号１６のアミノ酸７１から７７；配列番号１６のアミノ酸１１０から１１８；配列番号２０のアミノ酸４６から５６；配列番号２０のアミノ酸７２から７８；又は配列番号２０のアミノ酸１１１から１１９の少なくとも１個から選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有し、抗体重鎖と共同してＯＸ４０Ｌに結合することが可能である単離ポリペプチドを提供する。
【０００９】
ある実施形態において、ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ａは、アミノ酸配列  ａ  ｂ  ｃ  ｄ  ｅ（アミノ酸配列ａは、アスパラギン、スレオニン、フェニルアラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｂは、アラニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｃは、トリプトファン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄは、メチオニン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｅは、セリン、アスパラギン又はヒスチジンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ（アミノ酸ｆは、アルギニン又はバリンから選択され；アミノ酸ｇは、イソロイシンであり；アミノ酸ｈは、リシン、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｉは、セリン、イソロイシン、チロシン、スレオニン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｊは、リシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋは、スレオニン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｌは、アスパラギン酸、セリン又はグルタミン酸から選択され；アミノ酸ｍは、グリシン、スレオニン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｎは、グリシン、アスパラギン、リシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｏは、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｐは、スレオニン、イソロイシン、アスパラギン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｑは、アスパラギン酸、プロリン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｒは、チロシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｓは、グリシン、アラニン、ロイシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｔは、アラニン、リシン又はバリンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列  ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’（アミノ酸ｕは、アスパラギン酸、グリシン、メチオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｖは、アルギニン、グリシン、アスパラギン酸、チロシン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｗは、チロシン、バリン、グリシン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｘは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｙは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はイソロイシンから選択され；アミノ酸ｚは、グリシン、チロシン、プロリン、バリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ’は、グルタミン酸、セリン、チロシン、トリプトファン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｂ’は、フェニルアラニン、グリシン、チロシン、スレオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ’は、プロリン、チロシン、セリン、リシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄ’は、フェニルアラニン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｅ’は、アスパラギン酸、チロシン、アルギニン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｆ’は、チロシン、バリン、グリシン、アルギニン又はスレオニンから選択される。）を含有する。）を含有しており抗体軽鎖と共同してＯＸ４０Ｌに結合可能であるポリペプチドをコードする配列を含有する、単離ポリヌクレオチドを提供する。
【００１０】
ある実施形態において、ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１（アミノ酸ａ１は、アルギニンであり；アミノ酸ｂ１は、アラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ１は、セリンであり；アミノ酸ｄ１は、グルタミンであり；アミノ酸ｅ１は、グリシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｆ１は、イソロイシン、バリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｇ１は、セリン又はバリンから選択され；アミノ酸ｈ１は、アスパラギン、セリン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｉ１は、ヒスチジン、アスパラギン、セリン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｊ１は、ロイシン、チロシン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋ１は、バリン、ロイシン、グリシン又はアスパラギンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ２ｂは、アミノ酸配列ｌ１  ｍ１  ｎ１  ｏ１  ｐ１  ｑ１  ｒ１（アミノ酸ｌ１は、アラニン、グリシン又はリシンから選択され；アミノ酸ｍ１は、アラニン又はリシンから選択され；アミノ酸ｎ１は、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｏ１は、スレオニン、セリン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｐ１は、ロイシン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｑ１は、グルタミン、アラニン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｒ１は、セリン又はスレオニンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ３ｂは、アミノ酸配列ｓ１  ｔ１  ｕ１  ｖ１  ｗ１  ｘ１  ｙ１  ｚ１  ａ１’（アミノ酸ｓ１は、グルタミン又はメチオニンから選択され；アミノ酸ｔ１は、リシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｕ１は、チロシン、アラニン、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｖ１は、アスパラギン、グリシン、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｗ１は、セリン、グリシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｘ１は、アラニン、セリン、イソロイシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｙ１は、プロリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｚ１は、ロイシン、トリプトファン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ１’は、スレオニンである。）を含有する。）を含有しており抗体重鎖と共同してＯＸ４０Ｌに結合可能であるポリペプチドをコードする配列を含む、単離ポリヌクレオチドを提供する。
【００１１】
ある実施形態において、
（ｉ）ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ａは、アミノ酸配列  ａ  ｂ  ｃ  ｄ  ｅ（アミノ酸配列ａは、アスパラギン、スレオニン、フェニルアラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｂは、アラニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｃは、トリプトファン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄは、メチオニン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｅは、セリン、アスパラギン又はヒスチジンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ（アミノ酸ｆは、アルギニン又はバリンから選択され；アミノ酸ｇは、イソロイシンであり；アミノ酸ｈは、リシン、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｉは、セリン、イソロイシン、チロシン、スレオニン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｊは、リシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋは、スレオニン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｌは、アスパラギン酸、セリン又はグルタミン酸から選択され；アミノ酸ｍは、グリシン、スレオニン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｎは、グリシン、アスパラギン、リシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｏは、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｐは、スレオニン、イソロイシン、アスパラギン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｑは、アスパラギン酸、プロリン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｒは、チロシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｓは、グリシン、アラニン、ロイシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｔは、アラニン、リシン又はバリンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列  ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’（アミノ酸ｕは、アスパラギン酸、グリシン、メチオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｖは、アルギニン、グリシン、アスパラギン酸、チロシン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｗは、チロシン、バリン、グリシン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｘは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｙは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はイソロイシンから選択され；アミノ酸ｚは、グリシン、チロシン、プロリン、バリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ’は、グルタミン酸、セリン、チロシン、トリプトファン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｂ’は、フェニルアラニン、グリシン、チロシン、スレオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ’は、プロリン、チロシン、セリン、リシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄ’は、フェニルアラニン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｅ’は、アスパラギン酸、チロシン、アルギニン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｆ’は、チロシン、バリン、グリシン、アルギニン又はスレオニンから選択される。）を含有する。）を含有し、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌに結合することが可能である第一のポリペプチドと、
（ｉｉ）ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１（アミノ酸ａ１は、アルギニンであり；アミノ酸ｂ１は、アラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ１は、セリンであり；アミノ酸ｄ１は、グルタミンであり；アミノ酸ｅ１は、グリシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｆ１は、イソロイシン、バリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｇ１は、セリン又はバリンから選択され；アミノ酸ｈ１は、アスパラギン、セリン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｉ１は、ヒスチジン、アスパラギン、セリン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｊ１は、ロイシン、チロシン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋ１は、バリン、ロイシン、グリシン又はアスパラギンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ２ｂは、アミノ酸配列ｌ１  ｍ１  ｎ１  ｏ１  ｐ１  ｑ１  ｒ１（アミノ酸ｌ１は、アラニン、グリシン又はリシンから選択され；アミノ酸ｍ１は、アラニン又はリシンから選択され；アミノ酸ｎ１は、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｏ１は、スレオニン、セリン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｐ１は、ロイシン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｑ１は、グルタミン、アラニン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｒ１は、セリン又はスレオニンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ３ｂは、アミノ酸配列ｓ１  ｔ１  ｕ１  ｖ１  ｗ１  ｘ１  ｙ１  ｚ１  ａ１’（アミノ酸ｓ１は、グルタミン又はメチオニンから選択され；アミノ酸ｔ１は、リシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｕ１は、チロシン、アラニン、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｖ１は、アスパラギン、グリシン、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｗ１は、セリン、グリシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｘ１は、アラニン、セリン、イソロイシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｙ１は、プロリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｚ１は、ロイシン、トリプトファン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ１’は、スレオニンである。）を含有する。）を含有し；抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌに結合することが可能である第二のポリペプチドと、
を含有する、単離抗ＯＸ４０Ｌ抗体を提供する。
【００１２】
ある実施形態において、
配列番号２で規定される相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有する第一のポリペプチド及び配列番号４で規定されるＣＤＲを含有する第二のポリペプチド；
配列番号６で規定されるＣＤＲを含有する第一のポリペプチド及び配列番号８で規定されるＣＤＲを含有する第二のポリペプチド；
配列番号１０で規定されるＣＤＲを含有する第一のポリペプチド及び配列番号１２で規定されるＣＤＲを含有する第二のポリペプチド；
配列番号１４で規定されるＣＤＲを含有する第一のポリペプチド及び配列番号１６で規定されるＣＤＲを含有する第二のポリペプチド；又は、
配列番号１８で規定されるＣＤＲを含有する第一のポリペプチド及び配列番号２０で規定されるＣＤＲを含有する第二のポリペプチド、を含有する、単離抗ＯＸ４０Ｌ抗体を提供する。
【００１３】
ある実施形態において、試料中のＯＸ４０Ｌの有無を検出するための方法を提供する。ある実施形態において、このような方法は、（ａ）抗ＯＸ４０Ｌ抗体と試料とを混合することと；（ｂ）抗原に結合した抗体を非結合抗体から分離することと；ｃ）抗原に結合した抗体の有無を検出することと、を含む。
【００１４】
ある実施形態において、ＯＸ４０Ｌを単離するための方法を提供する。ある実施形態において、このような方法は、（ａ）抗ＯＸ４０Ｌ抗体を基質に付着させることと；（ｂ）ＯＸ４０Ｌを含有する試料をパート（ａ）の抗体に曝露することと；（ｃ）ＯＸ４０Ｌを単離することと、を含む。
【００１５】
ある実施形態において、患者において炎症性疾患を治療するための方法を提供する。ある実施形態において、このような方法は、抗ＯＸ４０Ｌ抗体の治療的有効量を患者に投与することを含む。
【００１６】
ある実施形態において、ポリペプチドを作製する方法を提供する。ある実施形態において、このような方法は、ポリペプチドを産生させるために、そこに含有されるポリヌクレオチドを発現するのに適切な条件において、配列番号２；配列番号６；配列番号１０；配列番号１４；配列番号１８；又は配列番号２２で規定される相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲは、抗ＯＸ４０Ｌ抗体重鎖可変領域を含有する。）を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターを含有する細胞において、ポリペプチドを産生させることを含む。ある実施形態において、このような方法は、ポリペプチドを産生させるために、そこに含有されるポリヌクレオチドを発現するのに適切な条件において、配列番号４；配列番号８；配列番号１２；配列番号１６；又は配列番号２０で規定される相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲは、抗ＯＸ４０Ｌ抗体軽鎖可変領域を含有する。）を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターを含有する細胞において、ポリペプチドを産生させることを含む。
【００１７】
ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を作製する方法を提供する。ある実施形態において、このような方法は、抗体を産生させるために、そこに含有されるポリヌクレオチドを発現するのに適切な条件において、配列番号２；配列番号６；配列番号１０；配列番号１４；配列番号１８；又は配列番号２２で規定される相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲは、抗ＯＸ４０Ｌ抗体重鎖可変領域を含有する。）を含有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターを含有し；配列番号４；配列番号８；配列番号１２；配列番号１６；又は配列番号２０で規定される相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲは、抗ＯＸ４０Ｌ抗体軽鎖可変領域を含有する。）を含有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターをさらに含有する細胞において抗体を産生させることを含む。
【００１８】
ある実施形態において、試料中のＯＸ４０Ｌの有無を検出するためのキットを提供する。ある実施形態において、このようなキットは、抗ＯＸ４０Ｌ抗体及び該抗体を検出するための試薬を含有する。
【００１９】
ある実施形態において、ＯＸ４０Ｌを単離するためのキットを提供する。ある実施形態において、このようなキットは、基質に付着させられた抗ＯＸ４０Ｌ抗体及びＯＸ４０Ｌを単離するための試薬を含有する。
【００２０】
ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体及び医薬的に許容される担体を含有する医薬組成物を提供する。
【００２１】
ある実施形態において、Ａｂ  Ａ、Ａｂ  Ｂ、Ａｂ  Ｃ、Ａｂ  Ｄ、Ａｂ  Ｅ、Ａｂ  Ｆ、Ａｂ  Ｇ、Ａｂ  Ｈ、Ａｂ  Ｉ又はＡｂ  Ｊのうち少なくとも１個と特異的に結合するエピトープに特異的に結合する単離抗体を提供する。
【００２２】
図１は、Ａｂ  Ａの重鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号１）及びＡｂ  Ａの重鎖のアミノ酸配列（配列番号２）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【００２３】
図２は、Ａｂ  Ａの軽鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号３）及びＡｂ  Ａの軽鎖のアミノ酸配列（配列番号４）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【００２４】
図３は、Ａｂ  Ｂの重鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号５）及びＡｂ  Ｂの重鎖のアミノ酸配列（配列番号６）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【００２５】
図４は、Ａｂ  Ｂの軽鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号７）及びＡｂ  Ｂの軽鎖のアミノ酸配列（配列番号８）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【００２６】
図５は、Ａｂ  Ｃの重鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号９）及びＡｂ  Ｃの重鎖のアミノ酸配列（配列番号１０）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【００２７】
図６は、Ａｂ  Ｃの軽鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号１１）及びＡｂ  Ｃの軽鎖のアミノ酸配列（配列番号１２）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【００２８】
図７は、Ａｂ  Ｄの重鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号１３）及びＡｂ  Ｄの重鎖のアミノ酸配列（配列番号１４）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【００２９】
図８は、Ａｂ  Ｄの軽鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列及（配列番号１５）びＡｂ  Ｄの軽鎖のアミノ酸配列（配列番号１６）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【００３０】
図９は、Ａｂ  Ｅ及びＦの重鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号１７）及びＡｂ  Ｅ及びＦの重鎖のアミノ酸配列（配列番号１８）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【００３１】
図１０は、Ａｂ  Ｅ及びＦの軽鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号１９）及びＡｂ  Ｅ及びＦの軽鎖のアミノ酸配列（配列番号２０）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【００３２】
図１１は、Ａｂ  Ｇの重鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号２１）及びＡｂ  Ｇの重鎖のアミノ酸配列（配列番号２２）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【００３３】
図１２は、ある一定の様々な抗ＯＸ−４０ヒトモノクローナル抗体において、Ｖｅｃｔｏｒ  ＮＴＩソフトウェアによりアミノ酸配列を調べた場合の関連性を示す。右側の数字は、各Ｖ領域における体細胞変異の数（最も近い生殖細胞系列配列とのアミノ酸の相違）である。
【００３４】
図１３は、実施例２で述べる実験による、ヒトＯＸ４０Ｌ（普通の三角）、カニクイザルＯＸ４０Ｌ（逆三角）、ヒトＩＬ−１受容体（四角）及びマウスＯＸ４０Ｌ（菱型）に対する、、Ａｂ  Ｃ、Ａｂ  Ｄ及びＡｂ  Ｆの結合を比較する、３つの代表的な図を示す。ＭＦＩは、平均蛍光強度を指す。
【００３５】
図１４は、平衡結合分析からのデータの代表的な図を示す。０．２ｎＭの固定濃度で、ＭＡｂを使用した。実施例３で述べる実験に従い、Ａｂ  Ｆ（丸）、Ａｂ  Ｅ（三角）、Ａｂ  Ｃ（逆三角形）及びＡｂ  Ｄ（菱型）に対する結果を示す。
【００３６】
図１５は、ＯＸ４０ＬがＨＵＶＥＣで発現される、競合結合測定法からのデータの代表的な図を示す。実施例３で述べる実験に従い、ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｒタンパク質との結合に対する競合に使用した試験抗体は、Ａｂ  Ａ（黒四角）、Ａｂ  Ｅ（黒逆三角形）、Ａｂ  Ｉ（黒丸）、Ａｂ  Ｂ（白四角）、Ａｂ  Ｈ（白三角）、Ａｂ  Ｃ（白逆三角形）、Ａｂ  Ｄ（白菱型）、Ａｂ  Ｇ（白丸）及びＡｂ  Ｆ（Ｘ印）であった。
【００３７】
図１６は、ＩＬ−２産生の阻害を測定する全血アッセイからのデータの代表的図を示す。実施例４で述べる実験に従い、ブロッキング試薬は、ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｒ（Ｘ印）、Ａｂ  Ｅ（逆三角形）、Ａｂ  Ｄ（普通の三角）及びＡｂ  Ｃ（丸）であった。
【００３８】
図１７は、実施例４で述べる実験に従う、ヒトＴ細胞によるＩＬ−２産生をブロックするＡｂ  Ｃの能力を測定する、共刺激アッセイからのデータの代表的グラフを示す。
【００３９】
図１８は、実施例５で述べる実験に従う、カニクイザルＴ細胞によるＩＬ−２産生をブロックするＡｂ  Ｃの能力を測定する、共刺激アッセイからのデータの代表的な図を示す。４匹のカニクイザルドナーからのＴ細胞を試験した。２．５μｇ／ｍｌの最終濃度で、共刺激因子  ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌを使用した。グラフでの解析のために、得られたＥＬＩＳＡ  ＯＤ値を、対照値のパーセンテージ（ＰＯＣ）に変換した。
【００４０】
図１９は、実施例５で述べる実験に従う、カニクイザルＴ細胞によるＩＬ−２産生をブロックするＡｂ  Ｃの能力を測定する、共刺激アッセイからのデータの代表的な図を示す。図１８の４匹のカニクイザルドナーからのＴ細胞を試験した。１．２５μｇ／ｍｌの最終濃度で、共刺激因子  ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌを使用した。グラフでの解析のために、得られたＥＬＩＳＡ  ＯＤ値を、対照値のパーセンテージ（ＰＯＣ）に変換した。
【００４１】
図２０は、Ｔ細胞増殖の阻害を測定するＰＢＭＣアッセイからのデータの代表的な図を示す。ブロッキング試薬は、実施例６で述べる実験に従い、Ａｂ  Ｅ（黒逆三角形）、Ａｂ  Ｄ（白三角）、Ａｂ  Ｃ（灰色丸）、ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｒ（Ｘ印）及びＩｇＧ（黒丸）であった。Ｙ軸は、３Ｈ取り込みの％阻害である（阻害抗体の様々な濃度の存在下、誘導因子のみによる３Ｈ取り込みに関して（ＩｇＧなし）。）。ＩｇＧ対照もまた、様々な濃度で個別に試験した。
【００４２】
図２１Ａは、Ａｂ  Ｃ又はｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒの、ＣＨＯ細胞で発現されたＯＸ４０Ｌへの結合を検出する、直接結合アッセイからのデータの代表的な図を示す。染色試薬は、実施例７で述べる実験に従い、Ａｂ  Ｃ（三角）、ヒトＩｇＧ（黒丸）及びｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒ（灰色丸）である。図２１Ｂは、染色試薬  ５μｇ／ｍｌを用いて３群の染色群を比較する、代表的なＦＡＣＳ分析を示す。
【００４３】
図２２Ａは、様々なソースから得られたＡｂ  Ｃが有する、ＣＨＯ細胞で発現されたＯＸ４０Ｌに対するｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒ結合中和能を検出する中和アッセイからのデータの代表的な図を示す。使用する中和試薬は、実施例７で述べる実験に従い、ＣＨＯ細胞で発現された様々なロットのＡｂ  Ｃ（菱型、四角及び三角）及びハイブリドーマ細胞から発現されたＡｂ  Ｃ（Ｘ印）である。図２２Ｂは、実施例７で述べる実験に従い、ｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒ結合のパーセント阻害率を示す。両図の実験では、５μｇ／ｍｌで、ｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒを使用する。
【００４４】
図２３は、実施例７で述べる実験による、Ａｂ  Ｃの様々な濃度での、ｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒに対するＡｂ  Ｃの中和活性のＦＡＣＳ分析を示す。
【００４５】
好ましい実施形態の詳細な説明
本明細書中で使用するセクション見出しは、単に整理することを目的とするものであり、説明する主題を限定するものとして解釈されるべきものではない。本願で引用する参考文献及び参考文献の一部は全て、あらゆる目的のために、その全体を参照により本明細書中に明確に組み込む。
【００４６】
定義
組み換えＤＮＡ、オリゴヌクレオチド合成及び組織培養及びトランスフェクション（例えば、エレクトロポレーション、リポフェクション）に対して標準的技術を用い得る。酵素反応及び精製技術は、製造者の使用説明書に従い、又は当技術分野で一般的に行われているようにして、又は本明細書中で説明するようにして、行うことができる。先行技術及び手法は、一般に、当技術分野で周知の従来法に従い、及び、本願をとおして引用し考察する、様々な一般的及びより具体的な参考文献において述べられるようにして、行うことができる。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（第二版、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（１９８９））を参照のこと。別段の定義がない限り、本明細書中に記載の、分析化学、合成有機化学及び医薬品化学ならびに薬化学に関わり利用される命名法、ならびにその実験手法及び技術は、周知のものであり、当技術分野において一般に使用されるものである。化学合成、化学分析、薬品調製、処方及び送達ならびに患者の治療に対して、標準的技術を使用することができる。
【００４７】
本開示に従い利用する場合、別段の指示がない限り、以下に挙げる用語は、次の意味を有すると理解されたい。
【００４８】
「単離ポリヌクレオチド」という用語は、本明細書中で使用する場合、ゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡもしくは合成物又はそれらの組み合わせのポリヌクレオチドを意味し、その起源により、この「単離ポリヌクレオチド」は、（１）この「単離ポリヌクレオチド」が天然に見られるポリヌクレオチドの全体又は一部を伴わないか、（２）天然には連結していないポリヌクレオチドに連結しているか、又は（３）より大きな配列の一部として天然に存在しない。
【００４９】
「ポリヌクレオチド」という用語は、本明細書中で述べる場合、少なくとも１０塩基長のヌクレオチドの多量体型を意味する。ある実施形態において、この塩基とは、リボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド及び何れかのタイプのヌクレオチドの修飾型のうち少なくとも１つを含有し得る。この用語には、１本鎖及び２本鎖型のＤＮＡが含まれる。「ポリヌクレオチド」という用語はまた、配列番号１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９及び２１を含有する配列も包含する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、図１から図１１で示すヌクレオチド配列に対して、約９０％もしくは約９５％もしくは約９６％もしくは約９７％もしくは約９８％もしくは約９９％同一のヌクレオチド配列である。ある実施形態において、本明細書中に記載の、ある一定のポリペプチドをコードする具体的なポリヌクレオチドに対して相補的なポリヌクレオチドを提供する。
【００５０】
ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される、少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ａは、アミノ酸配列  ａ  ｂ  ｃ  ｄ  ｅ（アミノ酸配列ａは、アスパラギン、スレオニン、フェニルアラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｂは、アラニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｃは、トリプトファン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄは、メチオニン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｅは、セリン、アスパラギン又はヒスチジンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ（アミノ酸ｆは、アルギニン又はバリンから選択され；アミノ酸ｇは、イソロイシンであり；アミノ酸ｈは、リシン、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｉは、セリン、イソロイシン、チロシン、スレオニン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｊは、リシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋは、スレオニン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｌは、アスパラギン酸、セリン又はグルタミン酸から選択され；アミノ酸ｍは、グリシン、スレオニン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｎは、グリシン、アスパラギン、リシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｏは、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｐは、スレオニン、イソロイシン、アスパラギン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｑは、アスパラギン酸、プロリン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｒは、チロシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｓは、グリシン、アラニン、ロイシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｔは、アラニン、リシン又はバリンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列  ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’（アミノ酸ｕは、アスパラギン酸、グリシン、メチオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｖは、アルギニン、グリシン、アスパラギン酸、チロシン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｗは、チロシン、バリン、グリシン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｘは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｙは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はイソロイシンから選択され；アミノ酸ｚは、グリシン、チロシン、プロリン、バリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ’は、グルタミン酸、セリン、チロシン、トリプトファン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｂ’は、フェニルアラニン、グリシン、チロシン、スレオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ’は、プロリン、チロシン、セリン、リシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄ’は、フェニルアラニン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｅ’は、アスパラギン酸、チロシン、アルギニン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｆ’は、チロシン、バリン、グリシン、アルギニン又はスレオニンから選択される。）を含有する。）を含有し、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌに結合可能であるポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ���配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’（ｆからｔは、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｇ’は、プロリン、リシン又はセリンから選択される。）を含有するＣＤＲ２ａをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’  ｈ’（ｆからｇ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｈ’は、バリン又はグリシンから選択される。）を含有するＣＤＲ２ａをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’  ｈ’  ｉ’（ｆからｈ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｉ’は、リシンである。）を含有するＣＤＲ２ａをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’  ｈ’  ｉ’  ｊ’（ｆからｉ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｊ’はグリシンである。）を含有するＣＤＲ２ａをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’（ｕからｆ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｋ’は、アスパラギン酸、メチオニン、アスパラギン、チロシン又はバリンから選択される。）を含有するＣＤＲ３ａをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’（ｕからｋ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｌ'は、ヒスチジン、アスパラギン酸、セリン、チロシン又はフェニルアラニンから選択される。）を含有するＣＤＲ３ａをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’（ｕからｌ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｍ’は、バリン、アスパラギン酸又はグリシンから選択される。）を含有するＣＤＲ３ａをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’  ｎ’（ｕからｍ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｎ’は、フェニルアラニン、メチオニン又はチロシンから選択される。）を含有するＣＤＲ３ａをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’  ｎ’  ｏ’（ｕからｎ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｏ’は、アスパラギン酸である。）を含有するＣＤＲ３ａをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’  ｎ’  ｏ’  ｐ’（ｕからｏ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｐ’は、バリン又はチロシンから選択される。）を含有するＣＤＲ３ａをコードする配列を含有する。
【００５１】
ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される少なくとも２個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有し、抗体軽鎖と共同してＯＸ４０Ｌに結合可能であるポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ及びＣＤＲ３ａを含有し、抗体軽鎖と共同してＯＸ４０Ｌに結合可能であるポリペプチドをコードする配列を含有する。
【００５２】
ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、抗体重鎖可変領域を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、ヒト抗体重鎖可変領域を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、重鎖定常領域を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、ヒト重鎖定常領域を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号２；配列番号６；配列番号１０；配列番号１４；配列番号１８；又は配列番号２２で規定されるアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、非ヒト重鎖定常領域を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、ヒト以外の種の重鎖定常領域を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。
【００５３】
ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号２のアミノ酸５０から５４；配列番号２のアミノ酸６９から８７；配列番号２のアミノ酸１２０から１３５；配列番号６のアミノ酸５０から５４；配列番号６のアミノ酸６９から８４；配列番号６のアミノ酸１１７から１３４；配列番号１０のアミノ酸５０から５４；配列番号１０のアミノ酸６９から８５；配列番号１０のアミノ酸１１８から１３５；配列番号１４のアミノ酸５０から５４；配列番号１４のアミノ酸６９から８４；配列番号１４のアミノ酸１１７から１３１；配列番号１８のアミノ酸５０から５４；配列番号１８のアミノ酸６９から８７；配列番号１８のアミノ酸１２０から１３３；配列番号２２のアミノ酸５０から５４；配列番号２２のアミノ酸６９から８７；又は配列番号２２のアミノ酸１２０から１３１の少なくとも１つから選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有し、抗体軽鎖と共同してＯＸ４０Ｌに結合可能なポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号２、６、１０、１４、１８又は２２のＣＤＲのうち少なくとも２個を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号２、６、１０、１４、１８又は２２のＣＤＲのうち３個を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。
【００５４】
ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号２のアミノ酸５０から５４、配列番号２のアミノ酸６９から８７及び配列番号２のアミノ酸１２０から１３５を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号６のアミノ酸５０から５４、配列番号６のアミノ酸６９から８４及び配列番号６のアミノ酸１１７から１３４を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号１０のアミノ酸５０から５４、配列番号１０のアミノ酸６９から８５及び配列番号１０のアミノ酸１１８から１３５を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号１４のアミノ酸５０から５４、配列番号１４のアミノ酸６９から８４及び配列番号１４のアミノ酸１１７から１３１を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号１８のアミノ酸５０から５４、配列番号１８のアミノ酸６９から８７及び配列番号１８のアミノ酸１２０から１３３を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号２２のアミノ酸５０から５４、配列番号２２のアミノ酸６９から８７及び配列番号２２のアミノ酸１２０から１３１を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。
【００５５】
ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される、少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１（アミノ酸ａ１は、アルギニンであり；アミノ酸ｂ１は、アラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ１は、セリンであり；アミノ酸ｄ１は、グルタミンであり；アミノ酸ｅ１は、グリシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｆ１は、イソロイシン、バリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｇ１は、セリン又はバリンから選択され；アミノ酸ｈ１は、アスパラギン、セリン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｉ１は、ヒスチジン、アスパラギン、セリン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｊ１は、ロイシン、チロシン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋ１は、バリン、ロイシン、グリシン又はアスパラギンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ２ｂは、アミノ酸配列ｌ１  ｍ１  ｎ１  ｏ１  ｐ１  ｑ１  ｒ１（アミノ酸ｌ１は、アラニン、グリシン又はリシンから選択され；アミノ酸ｍ１は、アラニン又はリシンから選択され；アミノ酸ｎ１は、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｏ１は、スレオニン、セリン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｐ１は、ロイシン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｑ１は、グルタミン、アラニン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｒ１は、セリン又はスレオニンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ３ｂは、アミノ酸配列ｓ１  ｔ１  ｕ１  ｖ１  ｗ１  ｘ１  ｙ１  ｚ１  ａ１’（アミノ酸ｓ１は、グルタミン又はメチオニンから選択され；アミノ酸ｔ１は、リシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｕ１は、チロシン、アラニン、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｖ１は、アスパラギン、グリシン、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｗ１は、セリン、グリシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｘ１は、アラニン、セリン、イソロイシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｙ１は、プロリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｚ１は、ロイシン、トリプトファン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ１’は、スレオニンである。）を含有する。）を含有し、抗体重鎖と共同してＯＸ４０Ｌに結合可能であるポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’（ａ１からｋ１は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｂ１’は、アスパラギン又はアラニンから選択される。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’（ａ１からｂ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｃ１’は、スレオニンである。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’（ａ１からｃ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｄ１’は、チロシンである。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’  ｅ１’（ａ１からｄ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｅ１’は、ロイシンである。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’  ｅ１’  ｆ１’（ａ１からｅ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｆ１’は、セリンである。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含有する。
【００５６】
ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される少なくとも２個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有し、抗体重鎖と共同してＯＸ４０Ｌに結合可能であるポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ及びＣＤＲ３ｂを含有し、抗体重鎖と共同してＯＸ４０Ｌに結合可能であるポリペプチドをコードする配列を含有する。
【００５７】
ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、抗体軽鎖可変領域を含有するポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、ヒト抗体軽鎖可変領域を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、軽鎖定常領域を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、ヒト軽鎖定常領域を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号４；配列番号８；配列番号１２；配列番号１６；又は配列番号２０で規定されるアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、非ヒト軽鎖定常領域を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、ヒト以外の種の軽鎖定常領域を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。
【００５８】
ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号４のアミノ酸４６から５６；配列番号４のアミノ酸７２から７８；配列番号４のアミノ酸１１１から１１９；配列番号８のアミノ酸４６から５６；配列番号８のアミノ酸７２から７８；配列番号８のアミノ酸１１１から１１９；配列番号１２のアミノ酸４４から５９；配列番号１２のアミノ酸７５から８１；配列番号１２のアミノ酸１１４から１２２；配列番号１６のアミノ酸４４から５５；配列番号１６のアミノ酸７１から７７；配列番号１６のアミノ酸１１０から１１８；配列番号２０のアミノ酸４６から５６；配列番号２０のアミノ酸７２から７８；又は配列番号２０のアミノ酸１１１から１１９の少なくとも１個から選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有し、抗体重鎖と共同してＯＸ４０Ｌに結合可能であるポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号４、８、１２、１６又は２０のＣＤＲのうち少なくとも２個を含有するポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号４、８、１２、１６又は２０のＣＤＲのうち３個を含有するポリペプチドをコードする配列を含有する。
【００５９】
ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号４のアミノ酸４６から５６、配列番号４のアミノ酸７２から７８及び配列番号４のアミノ酸１１１から１１９を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号８のアミノ酸４６から５６、配列番号８のアミノ酸７２から７８及び配列番号８のアミノ酸１１１から１１９を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号１２のアミノ酸４４から５９、配列番号１２のアミノ酸７５から８１及び配列番号１２のアミノ酸１１４から１２２を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号１６のアミノ酸４４から５５、配列番号１６のアミノ酸７１から７７及び配列番号１６のアミノ酸１１０から１１８を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号２０のアミノ酸４６から５６、配列番号２０のアミノ酸７２から７８及び配列番号２０のアミノ酸１１１から１１９を含むポリペプチドをコードする配列を含有する。
【００６０】
ある実施形態において、本願は、抗体重鎖及び軽鎖をコードするある一定のポリヌクレオチドについて考察する。ある実施形態において、本願は、抗体重鎖可変領域をコードするある一定のポリヌクレオチドについて考察する。ある実施形態において、本願は、ヒト抗体重鎖可変領域をコードするある一定のポリヌクレオチドについて考察する。ある実施形態において、本願は、抗体軽鎖可変領域をコードするある一定のポリヌクレオチドについて考察する。ある実施形態において、本願は、ヒト抗体軽鎖可変領域をコードするある一定のポリヌクレオチドについて考察する。ある実施形態において、本願は、抗体重鎖定常領域をコードするある一定のポリヌクレオチドについて考察する。ある実施形態において、本願は、ヒト抗体重鎖定常領域をコードするある一定のポリヌクレオチドについて考察する。ある実施形態において、本願は、ヒト以外の種の抗体重鎖定常領域をコードするある一定のポリヌクレオチドについて考察する。ある実施形態において、本願は、抗体軽鎖定常領域をコードするある一定のポリヌクレオチドについて考察する。ある実施形態において、本願は、ヒト抗体軽鎖定常領域をコードするある一定のポリヌクレオチドについて考察する。ある実施形態において、本願は、ヒト以外の種の抗体軽鎖定常領域をコードするある一定のポリヌクレオチドについて考察する。ある実施形態において、本願は、一本鎖抗体をコードするある一定のポリヌクレオチドについて考察する。
【００６１】
ある実施形態において、これらの抗体重鎖及び軽鎖ポリヌクレオチド及びポリペプチドは、ヒト抗体重鎖及び軽鎖ポリヌクレオチド及びポリペプチドである。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９又は２１で規定されるヌクレオチド配列及び、それらの配列の１又は複数のヌクレオチドの、欠失、付加及び／又は置換のある配列を含む。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、配列番号２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０又は２２で規定されるアミノ酸配列を含有するアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含む。ある実施形態において、相補性決定領域（ＣＤＲ）、例えばＣＤＲ１からＣＤＲ３、を含む可変領域配列を提供する。ある実施形態において、可変領域ポリヌクレオチド及びポリペプチドは、ヒト可変領域ポリヌクレオチド及びポリペプチドである。
【００６２】
本明細書中で述べる「オリゴヌクレオチド」という用語には、天然に生じる及び／又は天然に生じないオリゴヌクレオチド結合により一緒に結合されている、天然に生じるヌクレオチド及び／又は修飾ヌクレオチドが含まれる。オリゴヌクレオチドは、一般に２００塩基長以下を含有するポリヌクレオチドのサブセットである。ある実施形態において、オリゴヌクレオチドは、１０から６０塩基長である。ある実施形態において、オリゴヌクレオチドは、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０から４０塩基長である。オリゴヌクレオチドは、例えば、遺伝子突然変異の構築において使用するための、１本鎖又は２本鎖であり得る。本発明のオリゴヌクレオチドは、センス又はアンチセンスオリゴヌクレオチドであり得る。
【００６３】
「天然に生じるヌクレオチド」という用語には、デオキシリボヌクレオチド及びリボヌクレオチドが含まれる。デオキシリボヌクレオチドには、これらに限定されないが、アデノシン、グアニン、シトシン及びチミジンが含まれる。リボヌクレオチドには、これらに限定されないが、アデノシン、シトシン、チミジン及びウリシル（ｕｒｉｃｉｌ）が含まれる。「修飾ヌクレオチド」という用語には、修飾又は置換された糖類などを有するヌクレオチドが含まれる。「オリゴヌクレオチド結合」という用語には、ホスホロチオアート、ホスホロジチオアート、ホスホロセレノアート、ホスホロジセレノアート、ホスホロアニロチオアート（ｐｈｏｓｐｈｏｒｏａｎｉｌｏｔｈｉｏａｔｅ）、ホスホールアニラダート（ｐｈｏｓｈｏｒａｎｉｌａｄａｔｅ）、ホスホロアミダートなどのオリゴヌクレオチド結合が含まれる。例えば、ＬａＰｌａｎｃｈｅら、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ．Ｒｅｓ．１４：９０８１（１９８６）；Ｓｔｅｃら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１０６：６０７７（１９８４）；Ｓｔｅｉｎら、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．１６：３２０９（１９８８）；Ｚｏｎら、Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ６：５３９（１９９１）；Ｚｏｎら、Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ｐｐ．８７−１０８（Ｆ．Ｅｃｋｓｔｅｉｎ，編、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｅｎｇｌａｎｄ（１９９１））；Ｓｔｅｃら、米国特許第５，１５１，５１０号；Ｕｈｌｍａｎｎ  ａｎｄ  Ｐｅｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ９０：５４３（１９９０）を参照のこと。ある例において、オリゴヌクレオチドには、検出用の標識が含有され得る。
【００６４】
本明細書中で述べる「単離ポリペプチド」という用語は、ｃＤＮＡ、組み換えＲＮＡもしくはそれらの合成起源のもの又はこれらの組合せによりコードされ、（１）通常は見いだされる少なくとも一部のタンパク質が含まれないか、（２）基本的に、同じソース、例えば同じ種由来の他のタンパク質が含まれないか、（３）異なる種由来の細胞により発現されるか、又は（４）天然に生じない、ポリペプチドを意味する。
【００６５】
「ポリペプチド」という用語は、本明細書中で、互いにペプチド結合又は修飾されたペプチド結合（つまりペプチド等量式）により連結された２以上のアミノ酸を含有するあらゆるポリペプチドを指す一般名として使用する。「ポリペプチド」は、通常ペプチド、オリゴペプチド又はオリゴマーと呼ばれる短鎖と、通常タンパク質と呼ばれる長鎖の両方を指す。ポリペプチドは、コドンにより通常コードされるものの他にアミノ酸を含有し得る。
【００６６】
ポリペプチドは、翻訳後プロセシングなどの天然のプロセス、又は当技術分野で周知の化学的修飾技術のいずれかにより修飾されたアミノ酸配列を含む。このような修飾は、基本的な教科書及びさらに詳細な研究論文ならびに膨大な研究文献に詳しく記載されている。修飾は、ペプチド骨格、アミノ酸側鎖及びアミノ又はカルボキシル末端を含むポリペプチドの何れの場所でも起こり得る。このような修飾は、あるポリペプチドにおいて数ヶ所で同じ又は様々な程度に存在し得る。また、ある実施形態において、あるポリペプチドは、ネイティブ配列の１又は複数のアミノ酸の、欠失、付加及び／又は置換などの、多くのタイプの修飾を含有し得る。ある実施形態において、ポリペプチドは、ユビキチン化の結果として分枝型であり得、ある実施形態において、それらは、分枝あり又は無しの、環状型であり得る。環状型、分枝型及び分枝環状型ポリペプチドは、翻訳後の天然プロセスの結果生じ得るか、又は合成法により作製され得る。修飾には、これらに限定されないが、アセチル化、アシル化、ＡＤＰ−リボシル化、アミド化、ビオチン化、フラビンの共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチド又はヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質又は脂質誘導体の共有結合、ホスホチジルイノシトールの共有結合、架橋、環状化、ジスルフィド結合形成、脱メチル化、共有架橋形成、シスチン形成、ピログルタミン酸形成、ホルミル化、γ−カルボキシル化、グリコシル化、ＧＰＩアンカー形成、ヒドロキシル化、ヨード化、メチル化、ミリストイル化、酸化、タンパク質分解プロセシング、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレノイル化（ｓｅｌｅｎｏｙｌａｔｉｏｎ）、硫酸化、タンパク質に対するアミノ酸のトランスファーＲＮＡ介在付加（アルギニン化など）及びユビキチン化が含まれる。「ポリペプチド」という用語はまた、下記で述べる（ある一定のこのような配列に対する、配列番号２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０及び２２を参照のこと。）Ａｂ  Ａ、Ａｂ  Ｂ、Ａｂ  Ｃ、Ａｂ  Ｄ、Ａｂ  Ｅ、Ａｂ  Ｆ、Ａｂ  Ｇ、Ａｂ  Ｈ、Ａｂ  Ｉ又はＡｂ  Ｊの、重鎖及び／又は軽鎖のアミノ酸配列を含む配列及び、それらの配列の１又は複数のアミノ酸の、欠失、付加及び／又は置換を有する配列を包含する。ある実施形態において、あるポリペプチド配列は、少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有する。
【００６７】
ある実施形態において、ポリペプチドは、ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される、少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ａは、アミノ酸配列  ａ  ｂ  ｃ  ｄ  ｅ（アミノ酸配列ａは、アスパラギン、スレオニン、フェニルアラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｂは、アラニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｃは、トリプトファン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄは、メチオニン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｅは、セリン、アスパラギン又はヒスチジンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ（アミノ酸ｆは、アルギニン又はバリンから選択され；アミノ酸ｇは、イソロイシンであり；アミノ酸ｈは、リシン、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｉは、セリン、イソロイシン、チロシン、スレオニン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｊは、リシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋは、スレオニン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｌは、アスパラギン酸、セリン又はグルタミン酸から選択され；アミノ酸ｍは、グリシン、スレオニン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｎは、グリシン、アスパラギン、リシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｏは、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｐは、スレオニン、イソロイシン、アスパラギン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｑは、アスパラギン酸、プロリン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｒは、チロシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｓは、グリシン、アラニン、ロイシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｔは、アラニン、リシン又はバリンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列  ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’（アミノ酸ｕは、アスパラギン酸、グリシン、メチオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｖは、アルギニン、グリシン、アスパラギン酸、チロシン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｗは、チロシン、バリン、グリシン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｘは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｙは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はイソロイシンから選択され；アミノ酸ｚは、グリシン、チロシン、プロリン、バリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ’は、グルタミン酸、セリン、チロシン、トリプトファン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｂ’は、フェニルアラニン、グリシン、チロシン、スレオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ’は、プロリン、チロシン、セリン、リシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄ’は、フェニルアラニン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｅ’は、アスパラギン酸、チロシン、アルギニン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｆ’は、チロシン、バリン、グリシン、アルギニン又はスレオニンから選択される。）を含有する。）を含有し、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌに結合可能である。ある実施形態において、ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’を含有し、ｆからｔは、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｇ’は、プロリン、リシン又はセリンから選択される。ある実施形態において、ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’  ｈ’を含有し、ｆからｇ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｈ’は、バリン又はグリシンから選択される。ある実施形態において、ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’  ｈ’  ｉ’を含有し、ｆからｈ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｉ’は、リシンである。ある実施形態において、ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’  ｈ’  ｉ’  ｊ’を含有し、ｆからｉ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｊ’はグリシンである。ある実施形態において、ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’を含有し、ｕからｆ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｋ’は、アスパラギン酸、メチオニン、アスパラギン、チロシン又はバリンから選択される。ある実施形態において、ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’を含有し、ｕからｋ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｌ'は、ヒスチジン、アスパラギン酸、セリン、チロシン又はフェニルアラニンから選択される。ある実施形態において、ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’を含有し、ｕからｌ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｍ’は、バリン、アスパラギン酸又はグリシンから選択される。ある実施形態において、ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’  ｎ’を含有し、ｕからｍ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｎ’は、フェニルアラニン、メチオニン又はチロシンから選択される。ある実施形態において、ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’  ｎ’  ｏ’を含有し、ｕからｎ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｏ’は、アスパラギン酸である。ある実施形態において、ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’  ｎ’  ｏ’  ｐ’を含有し、ｕからｏ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｐ’は、バリン又はチロシンから選択される。
【００６８】
ある実施形態において、ポリペプチドは、ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される少なくとも２個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有し、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌに結合可能である。ある実施形態において、ポリペプチドは、ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ及びＣＤＲ３ａを含有し、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌに結合可能である。
【００６９】
ある実施形態において、ポリペプチドは、抗体重鎖可変領域を含む。ある実施形態において、ポリペプチドは、ヒト抗体重鎖可変領域を含む。ある実施形態において、ポリペプチドは、重鎖定常領域を含む。ある実施形態において、ポリペプチドは、ヒト重鎖定常領域を含む。ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号２；配列番号６；配列番号１０；配列番号１４；配列番号１８；又は配列番号２２で規定されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態において、ポリペプチドは、非ヒト重鎖定常領域を含む。ある実施形態において、ポリペプチドは、ヒト以外の種の重鎖定常領域を含む。
【００７０】
ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸５０から５４；配列番号２のアミノ酸６９から８７；配列番号２のアミノ酸１２０から１３５；配列番号６のアミノ酸５０から５４；配列番号６のアミノ酸６９から８４；配列番号６のアミノ酸１１７から１３４；配列番号１０のアミノ酸５０から５４；配列番号１０のアミノ酸６９から８５；配列番号１０のアミノ酸１１８から１３５；配列番号１４のアミノ酸５０から５４；配列番号１４のアミノ酸６９から８４；配列番号１４のアミノ酸１１７から１３１；配列番号１８のアミノ酸５０から５４；配列番号１８のアミノ酸６９から８７；配列番号１８のアミノ酸１２０から１３３；配列番号２２のアミノ酸５０から５４；配列番号２２のアミノ酸６９から８７；又は配列番号２２のアミノ酸１２０から１３１の少なくとも１つから選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有し、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌに結合可能である。ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号２、６、１０、１４、１８又は２２のＣＤＲのうち少なくとも２個を含む。ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号２、６、１０、１４、１８又は２２のＣＤＲのうち少なくとも３個を含む。
【００７１】
ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸５０から５４、配列番号２のアミノ酸６９から８７及び配列番号２のアミノ酸１２０から１３５を含む。ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号６のアミノ酸５０から５４、配列番号６のアミノ酸６９から８４及び配列番号６のアミノ酸１１７から１３４を含む。ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号１０のアミノ酸５０から５４、配列番号１０のアミノ酸６９から８５及び配列番号１０のアミノ酸１１８から１３５を含む。ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号１４のアミノ酸５０から５４、配列番号１４のアミノ酸６９から８４及び配列番号１４のアミノ酸１１７から１３１を含む。ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号１８のアミノ酸５０から５４、配列番号１８のアミノ酸６９から８７及び配列番号１８のアミノ酸１２０から１３３を含む。ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号２２のアミノ酸５０から５４、配列番号２２のアミノ酸６９から８７及び配列番号２２のアミノ酸１２０から１３１を含む。
【００７２】
ある実施形態において、ポリペプチドは、ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される、少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１（アミノ酸ａ１は、アルギニンであり；アミノ酸ｂ１は、アラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ１は、セリンであり；アミノ酸ｄ１は、グルタミンであり；アミノ酸ｅ１は、グリシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｆ１は、イソロイシン、バリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｇ１は、セリン又はバリンから選択され；アミノ酸ｈ１は、アスパラギン、セリン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｉ１は、ヒスチジン、アスパラギン、セリン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｊ１は、ロイシン、チロシン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋ１は、バリン、ロイシン、グリシン又はアスパラギンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ２ｂは、アミノ酸配列ｌ１  ｍ１  ｎ１  ｏ１  ｐ１  ｑ１  ｒ１（アミノ酸ｌ１は、アラニン、グリシン又はリシンから選択され；アミノ酸ｍ１は、アラニン又はリシンから選択され；アミノ酸ｎ１は、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｏ１は、スレオニン、セリン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｐ１は、ロイシン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｑ１は、グルタミン、アラニン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｒ１は、セリン又はスレオニンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ３ｂは、アミノ酸配列ｓ１  ｔ１  ｕ１  ｖ１  ｗ１  ｘ１  ｙ１  ｚ１  ａ１’（アミノ酸ｓ１は、グルタミン又はメチオニンから選択され；アミノ酸ｔ１は、リシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｕ１は、チロシン、アラニン、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｖ１は、アスパラギン、グリシン、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｗ１は、セリン、グリシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｘ１は、アラニン、セリン、イソロイシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｙ１は、プロリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｚ１は、ロイシン、トリプトファン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ１’は、スレオニンである。）を含有する。）を含有し、抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌに結合可能である。ある実施形態において、ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’を含有し、ａ１からｋ１は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｂ１’は、アスパラギン又はアラニンから選択される。ある実施形態において、ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’を含有し、ａ１からｂ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｃ１’は、スレオニンである。ある実施形態において、ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’を含有し、ａ１からｃ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｄ１’は、チロシンである。ある実施形態において、ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’  ｅ１’を含有し、ａ１からｄ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｅ１’は、ロイシンである。ある実施形態において、ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’  ｅ１’  ｆ１’を含有し、ａ１からｅ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｆ１’は、セリンである。
【００７３】
ある実施形態において、ポリペプチドは、ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される少なくとも２個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有しており、抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌに結合可能である。ある実施形態において、ポリペプチドは、ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ及びＣＤＲ３ｂを含有しており、このポリペプチドは、抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌに結合可能である。
【００７４】
ある実施形態において、ポリペプチドは、抗体軽鎖可変領域を含有する。ある実施形態において、ポリペプチドは、ヒト抗体軽鎖可変領域を含有する。ある実施形態において、ポリペプチドは、軽鎖定常領域を含有する。ある実施形態において、ポリペプチドは、ヒト軽鎖定常領域を含有する。ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号４；配列番号８；配列番号１２；配列番号１６；又は配列番号２０で規定されるアミノ酸配列を含有する。ある実施形態において、ポリペプチドは、非ヒト軽鎖定常領域を含有する。ある実施形態において、ポリペプチドは、ヒト以外の種の軽鎖定常領域を含有する。
【００７５】
ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号４のアミノ酸４６から５６；配列番号４のアミノ酸７２から７８；配列番号４のアミノ酸１１１から１１９；配列番号８のアミノ酸４６から５６；配列番号８のアミノ酸７２から７８；配列番号８のアミノ酸１１１から１１９；配列番号１２のアミノ酸４４から５９；配列番号１２のアミノ酸７５から８１；配列番号１２のアミノ酸１１４から１２２；配列番号１６のアミノ酸４４から５５；配列番号１６のアミノ酸７１から７７；配列番号１６のアミノ酸１１０から１１８；配列番号２０のアミノ酸４６から５６；配列番号２０のアミノ酸７２から７８；又は配列番号２０のアミノ酸１１１から１１９の少なくとも１個から選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有し、抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌに結合可能である。ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号４、８、１２、１６又は２０のＣＤＲのうち少なくとも２個を含有する。ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号４、８、１２、１６又は２０のＣＤＲのうち少なくとも３個を含有する。
【００７６】
ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号４のアミノ酸４６から５６、配列番号４のアミノ酸７２から７８及び配列番号４のアミノ酸１１１から１１９を含む。ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号８のアミノ酸４６から５６、配列番号８のアミノ酸７２から７８及び配列番号８のアミノ酸１１１から１１９を含む。ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号１２のアミノ酸４４から５９、配列番号１２のアミノ酸７５から８１及び配列番号１２のアミノ酸１１４から１２２を含む。ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号１６のアミノ酸４４から５５、配列番号１６のアミノ酸７１から７７及び配列番号１６のアミノ酸１１０から１１８を含む。ある実施形態において、ポリペプチドは、配列番号２０のアミノ酸４６から５６、配列番号２０のアミノ酸７２から７８及び配列番号２０のアミノ酸１１１から１１９を含む。
【００７７】
本明細書中で使用する場合、対象に対して本明細書中で適用される「天然に生じる」という用語は、対象を天然に見つけることができるという事実を意味する。例えば、自然のソースから単離し得る生物（ウイルスを含む）中に存在し、実験室などにおいて人為的に修飾されていないポリペプチド又はポリヌクレオチド配列は、天然に生じるものである。
【００７８】
本明細書中で使用する場合、「操作可能に連結」という用語は、意図する方式で機能する関係にある成分を指す。例えば、コード配列に「操作可能に連結」する制御配列は、制御配列に適合する条件下でコード配列の発現が達成されるように結合される。
【００７９】
本明細書中で使用する場合、「制御配列」という用語は、それらが結合するコード配列の発現及びプロセシングを達成し得るポリヌクレオチド配列を指す。このような制御配列の性質は、宿主生物により異なる。ある実施形態によると、原核生物用の制御配列は、プロモーター、リボソーム結合部位及び転写終結配列を含み得る。ある実施形態によると、真核生物用の制御配列は、プロモーター、エンハンサー及び転写終結配列を含み得る。ある実施形態において、「制御配列」はリーダー配列及び／又は融合パートナー配列を含み得る。
【００８０】
関連ポリペプチドの同一性及び類似性は、公知の方法により容易に算出できる。そのような方法には、これらに限定されないが、Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｌｅｓｋ，Ａ．Ｍ．，編、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８８）；Ｂｉｏｃｏｍｐｕｔｉｎｇ：Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｐｒｏｊｅｃｔｓ，Ｓｍｉｔｈ，Ｄ．Ｗ．ら、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９３）；Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｄａｔａ，Ｐａｒｔ１，Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ａ．Ｍ．及びＧｒｉｆｆｉｎ，Ｈ．Ｇ．，編、Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ（１９９４）；Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｎ  Ｈｅｉｎｊｅ，Ｇ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ（１９８７）；Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｐｒｉｍｅｒ，Ｇｒｉｂｓｋｏｖ，Ｍ．及びＤｅｖｅｒｅｕｘ，Ｊ．，編、Ｍ．Ｓｔｏｃｋｔｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９１）；及びＣａｒｉｌｌｏら、ＳＩＡＭ  Ｊ．Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｍａｔｈ．，４８：１０７３（１９８８）に記載のものが含まれる。ある実施形態において、ポリペプチドは、図１から図１１で示されるアミノ酸配列に対して、約９０％、もしくは約９５％、もしくは約９６％、もしくは約９７％もしくは約９８％もしくは約９９％の同一性を有するアミノ酸配列を有する。
【００８１】
同一性を調べるある方法は、試験対象の配列間のマッチが最大になるように設計されている。同一性を調べるある方法は、公に利用可能なコンピュータプログラムで述べられている。２つの配列間の同一性を決定するためのあるコンピュータプログラム法には、これらに限定されないが、ＧＡＰを含むＧＣＧプログラムパッケージ（Ｄｅｖｅｒｅｕｘら、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ．Ｒｅｓ．，１２：３８７（１９８４）；Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ，ＢＬＡＳＴＰ，ＢＬＡＳＴＮ及びＦＡＳＴＡ（Ａｌｔｓｃｈｕｌら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２１５：４０３−４１０（１９９０））が含まれる。ＢＬＡＳＴＸプログラムは、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＢＩ）及び他のソース（ＢＬＡＳＴ  Ｍａｎｕａｌ，Ａｌｔｓｃｈｕｌら、ＮＣＢ／ＮＬＭ／ＮＩＨ  Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ  ２０８９４；Ａｌｔｓｃｈｕｌら、上述（１９９０））から公に利用可能である。周知のＳｍｉｔｈ  Ｗａｔｅｒｍａｎアルゴリズムも、同一性を調べるために使用し得る。
【００８２】
２つのアミノ酸配列を整合させるためのあるアラインメントスキームを実行することにより、２つの配列の短い領域のみがマッチし得るが、この２つの全長配列間では顕著な関連がない場合でも、この小さな整合領域は、非常に高い配列同一性を有し得る。従って、ある実施形態において、選択した整合方法（ＧＡＰプログラム）により、標的ポリペプチドの少なくとも５０個の連続するアミノ酸にわたり整合が得られるであろう。
【００８３】
例えば、コンピュータアルゴリズムＧＡＰ（Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を用いて、配列同一性のパーセンテージを調べたい２つのポリペプチドを、それらの個々のアミノ酸が最大にマッチするように整合させる（アルゴリズムにより決定される「マッチした長さ」）。ある実施形態において、ギャップオープニングペナルティー（平均対角線の３ｘとして計算される。「平均対角線」は、使用している比較マトリックスの対角線の平均であり；「対角線」とは、特定の比較マトリックスにより各完全アミノ酸マッチに割り当てられたスコア又は数字である。）及びギャップ伸長ペナルティー（通常、ギャップオープニングペナルティーの１／１０である。）、並びにＰＡＭ２５０又はＢＬＯＳＵＭ６２などの比較マトリックスが、本アルゴリズムと併せて使用される。ある実施形態において、標準比較マトリックス（ＰＡＭ２５０比較マトリックスに対して、Ｄａｙｈｏｆｆら、Ａｔｌａｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，５（３）（１９７８）；ＢＬＯＳＵＭ６２比較マトリックスに対して、Ｈｅｎｉｋｏｆｆら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  ＵＳＡ，８９：１０９１５−１０９１９（１９９２）を参照のこと。）も、本アルゴリズムにより使用される。
【００８４】
ある実施形態において、ポリペプチド配列比較に対するパラメーターには、次のものが含まれる。
アルゴリズム：Ｎｅｅｄｌｅｍａｎら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，４８：４４３−４５３（１９７０）；
比較マトリックス：Ｈｅｎｉｋｏｆｆら、上述（１９９２）からのＢＬＯＳＵＭ６２；
ギャップペナルティー：１２
ギャップ長ペナルティー：４
類似性の閾値（Ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ  ｏｆ  Ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ）：０
【００８５】
ＧＡＰプログラムは、上記パラメーターを用いて有用であり得る。ある実施形態において、上述のパラメーターは、ＧＡＰアルゴリズムを用いるポリペプチド比較（末端ギャップ用のペナルティ無しで）のための初期設定パラメーターである。
【００８６】
本明細書中で使用する場合、２０個の従来のアミノ酸及びそれらの略語は、従来使用されているものに従う。Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ――Ａ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（第２版、Ｅ．Ｓ．Ｇｏｌｕｂ及びＤ．Ｒ．Ｇｒｅｎ，編，Ｓｉｎａｕｅｒ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｓｕｎｄｅｒｌａｎｄ，Ｍａｓｓ．（１９９１））を参照のこと。２０個の従来のアミノ酸、α−、α−二重置換アミノ酸などの非天然アミノ酸、Ｎ−アルキルアミノ酸、乳酸及び他の従来のものではないアミノ酸の立体異性体（例えば、Ｄ−アミノ酸）もまた、本発明のポリペプチドの適切な成分であり得る。従来のものではないアミノ酸の例には、これらに限定されないが、４−ヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタメート、ε−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルリシン、ε−Ｎ−アセチルリシン、Ｏ−ホスホセリン、Ｎ−アセチルセリン、Ｎ−ホルミルメチオニン、３−メチルヒスチジン、５−ヒドロキシリシン、σ−Ｎ−メチルアルギニン及び他の同様のアミノ酸及びイミノ酸（例えば４−ヒドロキシプロリン）が含まれる。本明細書中で使用するポリペプチド表記法において、標準的使用法及び従来のものに従い、左方向がアミノ末端方向であり、右方向がカルボキシ末端方向である。
【００８７】
同様に、特記しない限り、一本鎖ポリヌクレオチド配列の左側末端は５’末端であり；二本鎖ポリヌクレオチド配列の左側末端は５’方向と呼ばれる。発生時期のＲＮＡ転写体の５’から３’への付加の方向は転写方向と呼ばれ、ＲＮＡと同じ配列を有しＲＮＡ転写体の５’から５’末端であるＤＮＡ鎖上の配列領域は、「上流配列」と呼び、ＲＮＡと同じ配列を有しＲＮＡ転写体の３’から３’末端であるＤＮＡ鎖上の配列領域は、「下流配列」と呼ぶ。
【００８８】
保存的アミノ酸置換は、生物学的システムにおける合成ではなく、化学的ペプチド合成により一般に組み込まれる非天然アミノ酸残基を包含し得る。これらには、ペプチド模倣体及び、アミノ酸部分の他の逆型（ｒｅｖｅｒｓｅｄ  ｆｏｒｍｓ）又は転位型（ｉｎｖｅｒｔｅｄ  ｆｏｒｍｓ）が含まれる。
【００８９】
天然に生じる残基を、共通の側鎖の性質に基づいたクラスに分類し得る。
１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
５）鎖の配向性に影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；及び
６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【００９０】
例えば、非保存的置換には、これらのあるクラスのメンバーが別のクラスのメンバーへと変換されることが含まれ得る。
【００９１】
このような改変を行う場合、ある実施形態によると、アミノ酸のハイドロパシー指標（ｈｙｄｒｏｐａｔｈｉｃ  ｉｎｄｅｘ）を考慮し得る。各アミノ酸に対して、その疎水性及び電荷の特徴に基づいてハイドロパシー指標が割り当てられている。イソロイシン（＋４．５）；バリン（＋４．２）；ロイシン（＋３．８）；フェニルアラニン（＋２．８）；システイン／シスチン（＋２．５）；メチオニン（＋１．９）；アラニン（＋１．８）；グリシン（−０．４）；スレオニン（−０．７）；セリン（−０．８）；トリプトファン（−０．９）；チロシン（−１．３）；プロリン（−１．６）；ヒスチジン（−３．２）；グルタミン酸（−３．５）；グルタミン（−３．５）；アスパラギン酸（−３．５）；アスパラギン（−３．５）；リシン（−３．９）；及びアルギニン（−４．５）；である。
【００９２】
タンパク質に対する相互作用的な生体機能付与におけるハイドロパシーアミノ酸指標の重要性は、本分野で理解されている。Ｋｙｔｅら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１５７：１０５−１３１（１９８２）。あるアミノ酸を同様なハイドロパシー指標又はスコアを有する他のアミノ酸で置換することができ、このような置換を行っても同様な生体活性を保持することが知られている。ハイドロパシー指標に基づいた改変を行う場合、ある実施形態において、ハイドロパシー指標が±２以内であるアミノ酸の置換が含まれる。ある実施形態において、±１以内の置換が含まれ、ある実施形態において、±０．５以内の置換が含まれる。
【００９３】
特にそれによって作られる生物学的に機能的なタンパク質又はペプチドを、本ケースにおいてのように、免疫学的実施形態で使用することを意図する場合、親水性に基づいて、類似のアミノ酸の置換を効果的に行うことができることも本分野で理解されている。ある実施形態において、その隣接アミノ酸の親水性によって支配される場合、タンパク質の最大の局所的平均親水性は、その免疫原性及び抗原性、つまり、そのタンパク質の生物学的特性に相関する。
【００９４】
以下の親水性値がこれらのアミノ酸残基に割り当てられている。アルギニン（＋３．０）；リシン（＋３．０）；アスパラギン酸（＋３．０±１）；グルタミン酸（＋３．０±１）；セリン（＋０．３）；アスパラギン（＋０．２）；グルタミン（＋０．２）；グリシン（０）；スレオニン（−０．４）；プロリン（−０．５±１）；アラニン（−０．５）；ヒスチジン（−０．５）；システイン（−１．０）；メチオニン（−１．３）；バリン（−１．５）；ロイシン（−１．８）；イソロイシン（−１．８）；チロシン（−２．３）；フェニルアラニン（−２．５）及びトリプトファン（−３．４）。同等の親水性の値に基づいた改変を行う場合、ある実施形態において、親水性の値が±２以内であるアミノ酸の置換が含まれ、ある実施形態において、±１以内の置換が含まれ、ある実施形態において、±０．５以内の置換が含まれる。親水性に基づいて一次アミノ酸配列からもまたエピトープを同定し得る。これらの領域は、「エピトープコア領域」とも呼ばれる。
アミノ酸置換の例を表１に示す。
【００９５】
【表１】
2007530045.tif 000002
【００９６】
当業者は、周知の技術を用いて、本明細書中に記載のポリペプチドの適切な変異体を決定することができる。ある実施形態において、当業者は、活性に重要と考えられない領域を標的とすることにより、活性を破壊することなく変化させることができる分子の適切な領域を特定することができる。ある実施形態において、同様のポリペプチド中で保存されている分子の残基及び部分を特定することができる。ある実施形態において、これらに限定されないが抗体のＣＤＲを含む、生物学的活性に重要であり得る領域又は構造に重要であり得る領域さえ、生物学的活性を損なうことなく、又はポリペプチド構造に悪影響を及ぼすことなく、ポリペプチド構造に保存的アミノ酸置換を行い得る。
【００９７】
さらに、当業者は、活性又は構造に重要な、類似のポリペプチド中の残基を特定する構造−機能研究を行うことができる。このような比較を考慮して、類似タンパク質中の活性又は構造に重要なアミノ酸残基に対応するタンパク質中のアミノ酸残基の重要性を予想することができる。当業者は、このような重要と予想されるアミノ酸残基と化学的に類似のアミノ酸置換基を選び得る。
【００９８】
当業者はまた、類似のポリペプチドにおけるその構造に関して、立体構造及びアミノ酸配列を解析することもできる。このような情報を考慮して、当業者は、その立体構造について、抗体のアミノ酸残基の配列を予想し得る。ある実施形態において、タンパク質表面にあると予想される残基は他の分子との重要な相互作用に関与し得るので、当業者は、そのタンパク質の表面にあると予想されるアミノ酸残基に対する根本的な改変を行わないように選択し得る。さらに、当業者は、所望する各アミノ酸残基において、１つのアミノ酸置換を含有する試験変異体を作製し得る。次に、当業者にとって公知の活性アッセイを用いて、その変異体をスクリーニングすることができる。例えば、当業者は、ＯＸ４０Ｌに対するその結合能について試験変異体をスクリーニングし得る。適切な変異体に関する情報を集めるために、このような変異体を使用することができるであろう。例えば、特定のアミノ酸残基に対する変化により破壊、望ましくない還元又は不適切な活性が生じることが判った場合、このような変化のある変異体を回避し得る。言い換えれば、このような所定の実験から集めた情報に基づいて、当業者は、さらなる単独の置換、又は他の突然変異と組み合わせた置換を避けるべきアミノ酸を容易に決定し得る。
【００９９】
二次構造の予想についての多数の科学出版物がある。Ｍｏｕｌｔ  Ｊ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，７（４）：４２２−４２７（１９９６）、Ｃｈｏｕら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１３（２）：２２２−２４５（１９７４）；Ｃｈｏｕら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１１３（２）：２１１−２２２（１９７４）；Ｃｈｏｕら、Ａｄｖ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．Ｒｅｌａｔ．Ａｒｅａｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，４７：４５−１４８（１９７８）；Ｃｈｏｕら、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，４７：２５１−２７６及びＣｈｏｕら、Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｊ．，２６：３６７−３８４（１９７９）。さらに、現在、二次構造の予想を促進するために、コンピュータプログラムを利用することができる。ある二次構造予想方法は、ホモロジーモデリングに基づくものである。例えば、３０％を超える配列同一性又は４０％を超える類似性を有する２つのポリペプチド又はタンパク質は、同様の構造トポロジーを持つことが多い。最近のタンパク質構造データベース（ＰＤＢ）の進歩により、ポリペプチド又はタンパク質の構造内で起こり得る折り畳み数を含む、二次構造の予測性が向上した。Ｈｏｌｍら、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ．Ｒｅｓ．，２７（１）：２４４−２４７（１９９９）を参照のこと。ある一定のポリペプチド又はタンパク質における折り畳み数は決まっており、必要最低限の構造が分かれば、構造予測が劇的に正確になるであろうことが示唆されている（Ｂｒｅｎｎｅｒら、Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，７（３）：３６９−３７６（１９９７））。
【０１００】
二次構造を予想するさらなる方法には、「スレッディング」（Ｊｏｎｅｓ，Ｄ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，７（３）：３７７−８７（１９９７）；Ｓｉｐｐｌら、Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，４（１）：１５−１９（１９９６））、「プロファイル解析」（Ｂｏｗｉｅら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１６４−１７０（１９９１）；Ｇｒｉｂｓｋｏｖら、Ｍｅｔｈ．Ｅｎｔｙｍ．，１８３：１４６−１５９（１９９０）；Ｇｒｉｂｓｋｏｖら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，８４（１３）：４３５５−４３５８（１９８７））及び「進化的連鎖（ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ  ｌｉｎｋａｇｅ）」（Ｈｏｌｍ、上述（１９９９）及びＢｒｅｎｎｅｒ、上述（１９９７）参照）が含まれる。
【０１０１】
ある実施形態において、抗体変異体には、親ポリペプチドのアミノ酸配列と比較して、グリコシル化部位の数及び／又はタイプが変化しているグリコシル化変異体が含まれる。ある実施形態において、タンパク質変異体では、Ｎ−結合グリコシル化部位の数が天然のタンパク質よりも多く又は少なくなっている。Ｎ−結合グリコシル化部位の特徴は、配列：Ａｓｎ−Ｘ−Ｓｅｒ又はＡｓｎ−Ｘ−Ｔｈｒであり、この式中、Ｘで表されるアミノ酸残基は、プロリン以外のあらゆるアミノ酸であり得る。この配列を作るためのアミノ酸残基の置換により、Ｎ−結合炭水化物鎖が付加する可能性がある新しい部位が得られる。あるいは、この配列を排除する置換により、存在するＮ−結合炭水化物鎖が除去される。また、１つ又は複数のＮ−結合グリコシル化部位（一般に、天然に生じるもの）が除去され、１又は複数の新しいＮ−結合部位が生成するといった、Ｎ−結合炭水化物鎖の再編成も起こる。
【０１０２】
ある実施形態において、抗体変異体には、システイン変異体が含まれる。ある実施形態において、システイン変異体は、削除されるか、又は親アミノ酸配列とは異なる別のアミノ酸（例えば、セリン）に置換されている、１又は複数のシステイン残基を有する。ある実施形態において、システイン変異体は、付加されるか、又は親アミノ酸配列とは異なる別のアミノ酸（例えば、セリン）が置換されている、１又は複数のシステイン残基を有する。ある実施形態において、システイン変異体は、不溶性封入体の単離後など、抗体を再び折り畳んで生物学的活性立体配座にすべき場合に有用となり得る。ある実施形態において、システイン変異体は通常、天然のタンパク質よりもシステイン残基の数が少ない。ある実施形態において、システイン変異体は、天然タンパク質よりもシステイン残基の数が多い。ある実施形態において、システイン変異体において、対にならないシステインによる相互作用を最低限に抑えるよう、システイン残基の数は偶数である。
【０１０３】
ある実施形態によると、アミノ酸置換は、（１）タンパク質分解に対する感受性を低下させる、（２）酸化に対する感受性を低下させる、（３）タンパク質複合体形成に対する結合親和性を変化させる、（４）結合親和性を変化させる、及び／又は（４）このようなポリペプチドに他の物理化学的又は機能的特徴を与えるか変化させるものである。ある実施形態によると、天然に生じる配列において（ある実施形態において、分子間接触を形成するドメイン外部のポリペプチド部分において）、１個又は複数のアミノ酸置換（ある実施形態において、保存的アミノ酸置換）を行い得る。ある実施形態において、保存的アミノ酸置換は通常、親配列の構造特性を実質的に変化させ得ない（例えば、アミノ酸の置換により、親配列にあるへリックスを破壊する傾向がない、又は親配列の特徴となる他のタイプの二次構造を破壊する傾向がないものであるべきである。）。この分野で認識されているポリペプチドの二次及び三次構造の例は、Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ（Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ  編、Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８４））；Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ（Ｃ．Ｂｒａｎｄｅｎ及びＪ．Ｔｏｏｚｅ編、Ｇａｒｌａｎｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（１９９１））；及びＴｈｏｒｎｔｏｎら、Ｎａｔｕｒｅ  ３５４：１０５（１９９１）に記載されている。
【０１０４】
本明細書中で使用する場合、「ポリペプチド断片」という用語は、アミノ末端及び／又はカルボキシ末端欠失があるポリペプチドを指す。ある実施形態において、断片は長さが少なくとも５から４６７アミノ酸長である。ある実施形態において、断片は少なくとも５、６、８、１０、１４、２０、５０、７０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００又は４５０アミノ酸長であると認められる。
【０１０５】
ペプチド類似体は、医薬業界において、鋳型ペプチドの特性と類似する特性を有する非ペプチド薬として、一般に使用される。これらのタイプの非ペプチド化合物は、「ペプチド模倣物（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｍｉｍｅｔｉｃｓ）」又は「ペプチド模倣物（ｐｅｐｔｉｄｅｏｍｉｍｅｔｉｃｓ）」と呼ばれる。Ｆａｕｃｈｅｒｅ，Ｊ．Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ．Ｒｅｓ．１５：２９（１９８６）；Ｖｅｂｅｒ及びＦｒｅｉｄｉｎｇｅｒ  ＴＩＮＳ  ３９２頁（１９８５）；及びＥｖａｎｓら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３０：１２２９（１９８７）を参照のこと。このような化合物は、コンピュータ化された分子モデリングの支援により開発されているものが多い。治療上有効なペプチドと構造的に類似するペプチド模倣物を使用して同様の治療効果又は予防効果を与えることができる。一般に、ペプチド模倣物は、ヒト抗体などの典型的ポリペプチド（つまり、生化学的特性又は薬理学的活性を有するポリペプチド）と構造的に類似しているが、場合によっては、当技術分野で周知の方法により、――ＣＨ２ＮＨ――、――ＣＨ２Ｓ――、――ＣＨ２−ＣＨ２――、――ＣＨ＝ＣＨ−（シス及びトランス）、――ＣＯＣＨ２――、――ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２――及び――ＣＨ２ＳＯ――から選択される結合により置換されている、１又は複数のペプチド結合がある。ある実施形態において、より安定なペプチドを得るために、同じタイプのＤ−アミノ酸によるコンセンサス配列の１又は複数のアミノ酸の組織的な置換（例えば、Ｌ−リジンの代わりにＤ−リジン）を用い得る。さらに、当技術分野で公知の方法（Ｒｉｚｏ及びＧｉｅｒａｓｃｈ  Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６１：３８７（１９９２））により、例えば、ペプチドを環状化する分子内ジスルフィド架橋を形成させることができる内部システイン残基の付加により、コンセンサス配列又は実質的に同一のコンセンサス配列変異を含有する自然にはないようなペプチドを生成させ得る。
【０１０６】
「単離抗体」という用語は、本明細書中で使用する場合、（１）通常は見いだされる少なくとも一部のタンパク質が含まれないか、（２）基本的に、同じソース、例えば同じ種由来の他のタンパク質が含まれないか、（３）様々な種由来の細胞により発現されるか、又は（４）天然に生じない、抗体を意味する。
【０１０７】
「抗体」又は「抗体ペプチド」は両方とも、そのままの抗体又はその断片を指す。ある実施形態において、この抗体断片は、特異的な結合に対して、そのままの抗体と競合する結合断片であり得る。「抗体」という用語はまた、ポリクローナル抗体及びモノクローナル抗体を包含する。ある実施形態において、結合断片は、組み換えＤＮＡ技術により産生される。ある実施形態において、結合断片は、そのままの抗体の、酵素的又は化学的切断により作製される。ある実施形態において、結合断片は、組み換えＤＮＡ技術により作製される。結合断片には、これらに限定されないが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆａｃｂ及び一本鎖抗体が含まれる。非抗原結合断片には、これらに限定されないが、Ｆｃ断片が含まれる。ある実施形態において、抗体は、Ａｂ  Ａ、Ａｂ  Ｂ、Ａｂ  Ｃ、Ａｂ  Ｄ、Ａｂ  Ｅ、Ａｂ  Ｆ、Ａｂ  Ｇ、Ａｂ  Ｈ、Ａｂ  Ｉ又はＡｂ  Jの少なくとも１個により特異的に結合されるエピトープに特異的に結合する。「抗体」という用語はまた、別の抗体の可変領域に特異的に結合する抗イディオタイプ抗体も包含する。ある実施形態において、抗イディオタイプ抗体は、抗ＯＸ４０Ｌ抗体の可変領域に特異的に結合する。ある実施形態において、抗イディオタイプ抗体は、試料において特定の抗ＯＸ４０Ｌ抗体の有無を検出するために、又は抗ＯＸ４０Ｌ抗体の活性をブロックするために、使用し得る。
【０１０８】
「抗ＯＸ４０Ｌ抗体」という用語は、本明細書中で使用する場合、ＯＸ４０Ｌに特異的に結合する抗体を意味する。ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体は、Ａｂ  ＡからＪの少なくとも１個が結合するＯＸ４０Ｌエピトープに結合する。様々な実施形態において、ＯＸ４０Ｌは、これらに限定されないが、ヒト、カニクイザル、マウス及びウサギを含む、あらゆる種のＯＸ４０Ｌであり得る。抗体の特異性を調べるためのある一定のアッセイは、当業者にとって周知であり、これには、これらに限定されないが、ＥＬＩＳＡ、ＥＬＩＳＰＯＴ、ウエスタンブロット、ＢＩＡｃｏｒｅアッセイ、溶液アフィニティー結合アッセイ、Ｔ細胞共刺激アッセイ及びＴ細胞移動アッセイが含まれる。
【０１０９】
ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体は、
（ｉ）ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ａは、アミノ酸配列  ａ  ｂ  ｃ  ｄ  ｅ（アミノ酸配列ａは、アスパラギン、スレオニン、フェニルアラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｂは、アラニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｃは、トリプトファン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄは、メチオニン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｅは、セリン、アスパラギン又はヒスチジンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ（アミノ酸ｆは、アルギニン又はバリンから選択され；アミノ酸ｇは、イソロイシンであり；アミノ酸ｈは、リシン、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｉは、セリン、イソロイシン、チロシン、スレオニン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｊは、リシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋは、スレオニン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｌは、アスパラギン酸、セリン又はグルタミン酸から選択され；アミノ酸ｍは、グリシン、スレオニン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｎは、グリシン、アスパラギン、リシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｏは、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｐは、スレオニン、イソロイシン、アスパラギン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｑは、アスパラギン酸、プロリン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｒは、チロシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｓは、グリシン、アラニン、ロイシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｔは、アラニン、リシン又はバリンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列  ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’（アミノ酸ｕは、アスパラギン酸、グリシン、メチオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｖは、アルギニン、グリシン、アスパラギン酸、チロシン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｗは、チロシン、バリン、グリシン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｘは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｙは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はイソロイシンから選択され；アミノ酸ｚは、グリシン、チロシン、プロリン、バリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ’は、グルタミン酸、セリン、チロシン、トリプトファン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｂ’は、フェニルアラニン、グリシン、チロシン、スレオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ’は、プロリン、チロシン、セリン、リシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄ’は、フェニルアラニン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｅ’は、アスパラギン酸、チロシン、アルギニン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｆ’は、チロシン、バリン、グリシン、アルギニン又はスレオニンから選択される。）を含有する。）を含有し、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌに結合することが可能である、第一のポリペプチドと、
（ｉｉ）ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１（アミノ酸ａ１は、アルギニンであり；アミノ酸ｂ１は、アラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ１は、セリンであり；アミノ酸ｄ１は、グルタミンであり；アミノ酸ｅ１は、グリシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｆ１は、イソロイシン、バリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｇ１は、セリン又はバリンから選択され；アミノ酸ｈ１は、アスパラギン、セリン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｉ１は、ヒスチジン、アスパラギン、セリン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｊ１は、ロイシン、チロシン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋ１は、バリン、ロイシン、グリシン又はアスパラギンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ２ｂは、アミノ酸配列ｌ１  ｍ１  ｎ１  ｏ１  ｐ１  ｑ１  ｒ１（アミノ酸ｌ１は、アラニン、グリシン又はリシンから選択され；アミノ酸ｍ１は、アラニン又はリシンから選択され；アミノ酸ｎ１は、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｏ１は、スレオニン、セリン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｐ１は、ロイシン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｑ１は、グルタミン、アラニン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｒ１は、セリン又はスレオニンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ３ｂは、アミノ酸配列ｓ１  ｔ１  ｕ１  ｖ１  ｗ１  ｘ１  ｙ１  ｚ１  ａ１’（アミノ酸ｓ１は、グルタミン又はメチオニンから選択され；アミノ酸ｔ１は、リシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｕ１は、チロシン、アラニン、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｖ１は、アスパラギン、グリシン、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｗ１は、セリン、グリシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｘ１は、アラニン、セリン、イソロイシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｙ１は、プロリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｚ１は、ロイシン、トリプトファン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ１’は、スレオニンである。）を含有する。）を含有し、抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌに結合することが可能である、第二のポリペプチドと、を含有する。
【０１１０】
ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体は、
配列番号２で規定される相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有する第一のポリペプチド及び配列番号４で規定されるＣＤＲを含有する第二のポリペプチド；
配列番号６で規定されるＣＤＲを含有する第一のポリペプチド及び配列番号８で規定されるＣＤＲを含有する第二のポリペプチド；
配列番号１０で規定されるＣＤＲを含有する第一のポリペプチド及び配列番号１２で規定されるＣＤＲを含有する第二のポリペプチド；
配列番号１４で規定されるＣＤＲを含有する第一のポリペプチド及び配列番号１６で規定されるＣＤＲを含有する第二のポリペプチド；又は、
配列番号１８で規定されるＣＤＲを含有する第一のポリペプチド及び配列番号２０で規定されるＣＤＲを含有する第二のポリペプチド、を含有する。ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体は、上記段落［００７０］で規定される第一のポリペプチドと上記段落［００７５］で規定される第二のポリペプチドと、を含有する。ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体は、上記段落［００７１］で規定される第一のポリペプチドと上記段落［００７６］で規定される第二のポリペプチドと、を含有する。ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体は、ヒト抗体である。ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体は、検出可能な標識を含有する。ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体は、キメラ抗体である。
【０１１１】
「キメラ抗体」は、別の分子（例えば別の第二の種の抗体定常領域）と融合させられた第一の種の抗体可変領域を有する抗体を指す。ある実施形態において、この第一の種は、第二の種と異なり得る。ある実施形態において、この第一の種は、第二の種と同じであり得る。ある実施形態において、キメラ抗体は、抗ＯＸ４０Ｌ抗体可変領域の既知の配列の一部を適合させるために、突然変異誘発又はＣＤＲ移植を介して作製し得る。ＣＤＲ移植は、通常、所望する特異性を有する抗体由来のＣＤＲを別の抗体のフレームワーク領域（ＦＲ）上に移植することを含む。
【０１１２】
ある実施形態において、「多特異性の」又は「多機能性の」抗体以外の２価の抗体は通常、その結合部位のそれぞれが同一であると理解されたい。
【０１１３】
過剰な抗体が、リガンドへ結合する受容体量を、少なくとも約２０％、４０％、６０％、８０％、８５％以上低下させる（インビトロ競合結合測定法アッセイにおいて測定したもの）場合、抗体は、実質的に、受容体に対するリガンドの接着を阻害する。
【０１１４】
「エピトープ」という用語には、免疫グロブリン又はＴ細胞受容体への特異的な結合を可能にするあらゆるポリペプチド決定因子が含まれる。ある実施形態において、エピトープ決定因子は、アミノ酸、糖側鎖、ホスホリル又はスルホニルなどの分子の化学的に活性のある表面基を含み、ある実施形態においては、特異的な立体構造特性及び／又は特異的な電荷特性を有し得る。エピトープは、抗体が結合する抗原の領域である。抗体は、タンパク質及び／又は巨大分子の複雑な混合物中でその標的抗原を選択的に認識すると、抗原に特異的に結合する。ある実施形態において、抗体は、その解離定数が≦１μＭである場合、ある実施形態において、その解離定数が≦１００ｎＭである場合、及びある実施形態において、その解離定数が≦１０ｎＭである場合、抗原に特異的に結合する。ある実施形態において、抗体はＯＸ４０Ｌに特異的に結合する。
【０１１５】
「試薬」という用語は、本明細書において、化合物、化合物の混合物、生体高分子又は生体物質から調製した抽出物を表すために使用する。
【０１１６】
本明細書中で使用する場合、「標識」という用語は、検出できるあらゆる分子を指す。ある実施形態において、放射性標識アミノ酸を組み込むことにより、抗体を標識し得る。ある実施形態において、マークされたアビジン（例えば、光学的又は比色法により検出できる、蛍光マーカー又は酵素活性を含有するストレプトアビジン）により検出できるビオチン部分を抗体に連結し得る。ある実施形態において、関心のある抗体に順に結合する別の試薬に、標識を取り込ませるか、又は連結させ得る。例えば、関心のある抗体に順に特異的に結合する抗体に、標識を取り込ませるか、又は連結させ得る。ある実施形態において、標識又はマーカーは治療的でもあり得る。ポリペプチド及び糖タンパク質を標識する種々の方法が当技術分野で公知であり、用いることができる。標識のある一般的クラスには、これらに限定されないが、酵素的、蛍光、化学発光及び放射活性標識が含まれる。ポリペプチド用の標識の例には、これらに限定されないが、放射性同位体又は放射性核種（例えば、３Ｈ、１４Ｃ、１５Ｎ、３５Ｓ、９０Ｙ、９９Ｔｃ、１１１Ｉｎ、１２５Ｉ、１３１Ｉ）、蛍光標識（例えば、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、ローダミン、ランタニド蛍光体、フィコエリスリン（ＰＥ））、酵素標識（例えば、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ、グルコースオキシダーゼ、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ、アルコールデヒドロゲナーゼ、リンゴ酸デヒドロゲナーゼ、ペニシリナーゼ、ルシフェラーゼ）、化学発光、ビオチニル基、二次レポーターにより認識される予め決められたポリペプチドエピトープ（例えば、ロイシンジッパー対配列、二次抗体用の結合部位、金属結合ドメイン、エピトープタグ）が含まれる。ある実施形態において、様々な長さのスペーサーアームにより標識を連結させ、起こり得る立体障害を低下させる。
【０１１７】
本明細書中で使用する場合、「試料」という用語は、これらに限定されないが、生きている物体又は以前は生きていた物体からの物質のあらゆる量を含む。このような生きている物体には、これらに限定されないが、ヒト、マウス、サル、ラット、ウサギ及び他の動物が含まれる。このような物質には、これらに限定されないが、血液、血清、尿、細胞、臓器、組織、骨、骨髄、リンパ節及び皮膚が含まれる。ある実施形態において、試料は、これらに限定されないが、タンパク質合成反応を含む、化学反応由来であり得る。
【０１１８】
「医薬品（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ａｇｅｎｔ）又は医薬的薬物（ｄｒｕｇ）」という用語は、本明細書中で使用する場合、患者に対して適切に投与した場合、所望する治療効果を誘導することが可能な化合物又は組成物を指す。
【０１１９】
本明細書中で使用する場合、「モジュレータ」という用語は、分子の活性又は機能を変化させる又は変更する化合物である。例えば、モジュレータは、モジュレータが存在しない場合に見られる活性又は機能の程度と比較して、分子のある活性又は機能の程度を向上又は低下させ得る。ある実施形態において、モジュレータは阻害剤であり、少なくとも１つの、分子の活性又は機能を低下させる。分子のある典型的な活性及び機能には、これらに限定されないが、結合親和性、酵素活性及びシグナル伝達が含まれる。ある典型的な阻害剤には、これらに限定されないが、タンパク質、ペプチド、抗体、ぺプチボディ、炭水化物又は小さな有機分子が含まれる。ぺプチボディについては、例えば国際特許ＷＯ第０１／８３５２５号に記載されている。
【０１２０】
本明細書中で使用する場合、「実質的に純粋」とは、対象の種が、主要な種として存在する（つまり、モルベースで、その組成物中の他のいかなる個々の種よりも量が多い。）ことを意味する。ある実施形態において、実質的に精製された断片は、対象となる種が、存在する全ての高分子種のうち少なくとも約５０％（モルベース）を構成する組成物である。ある実施形態において、実質的に純粋な組成物は、その組成物中に存在する全ての高分子種のうち、約８０％、８５％、９０％、９５％又は９９％を超える割合を占める。ある実施形態において、対象となる種は、本質的に均一になるまで精製され（従来の検出法により、混入した種を組成物中で検出することができない。）、その組成物は、本質的に１種類の高分子種から成る。
【０１２１】
「患者」という用語は、ヒト及び動物対象を含む。
【０１２２】
本願において、単数形を使用する場合、別段の定めのある場合を除き、複数形を含む。本願において、「又は」の使用は、別段の定めのある場合を除き、「及び／又は」を意味する。さらに、「含んでいる（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」という用語、ならびに他の形、例えば「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」及び「含まれる（ｉｎｃｌｕｄｅｄ）」などの使用は限定的ではない。また、「要素」又は「成分」などの用語は、別段の定めのある場合を除き、１つのユニットを含有する要素及び成分、及び、複数のサブユニットを含有する要素及び成分、の両方を包含する。
【０１２３】
ある実施形態に従い、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を発現する細胞株を提供する。
【０１２４】
ある実施形態において、ヒト配列及び別の種の配列の少なくとも一部を含有するキメラ抗体を提供する。ある実施形態において、このようなキメラ抗体は、その結果として、宿主の抗体配列のない抗体よりも宿主における免疫反応を低下させ得る。例えば、ある例において、特定のヒト疾患に対するモデルとして関心のある動物を使用し得る。動物宿主におけるその疾患に対する抗体の効果を調べるために、異なる種由来の抗体を使用し得る。しかし、ある例において、別種由来のこのような抗体は、宿主動物において抗体それ自身に対する免疫反応を誘発し得、したがって、これらの抗体の評価を妨げる。ある実施形態において、宿主動物由来の抗体アミノ酸配列で抗ＯＸ４０Ｌ抗体のアミノ酸配列の一部を置換することにより、宿主動物の抗−抗体反応の程度を低下させ得る。
【０１２５】
ある実施形態において、キメラ抗体は、重鎖及び軽鎖を含み、ここで、軽鎖及び重鎖の可変領域は、第一の種由来であり、軽鎖及び重鎖の定常領域は、第二の種由来である。ある実施形態において、この抗体重鎖定常領域は、ヒト以外の種の抗体重鎖定常領域である。ある実施形態において、この抗体軽鎖定常領域は、ヒト以外の種の抗体軽鎖定常領域である。代表的な抗体定常領域には、これらに限定されないが、カニクイザル抗体定常領域、マウス抗体定常領域及びウサギ抗体定常領域が含まれる。代表的な抗体可変領域には、これらに限定されないが、ヒト抗体可変領域、マウス抗体可変領域、ブタ抗体可変領域、モルモット抗体可変領域、カニクイザル抗体可変領域、及びウサギ抗体可変領域が含まれる。ある実施形態において、重鎖及び軽鎖における可変領域のフレームワーク領域は、他の抗体配列由来のフレームワーク領域で置換し得る。
【０１２６】
キメラ抗体は、当業者にとって周知の方法により作製し得る。ある実施形態において、重鎖可変領域をコードする第一の種のポリヌクレオチドと、重鎖定常領域をコードする第二の種のポリヌクレオチドとを融合させることができる。ある実施形態において、軽鎖可変領域をコードする第一の種のポリヌクレオチドと、軽鎖定常領域をコードする第二の種のポリヌクレオチドとを融合させることができる。ある実施形態において、１個の発現ベクター（例えばプラスミド）又は複数の発現ベクターにおいて、これらの融合ヌクレオチド配列を細胞に導入することができる。ある実施形態において、ポリペプチドを作製するために、少なくとも１個の発現ベクターを含有する細胞を使用し得る。ある実施形態において、個別の発現ベクターにおいて、又は１個の発現ベクターにおいてのいずれかで、これらの融合ヌクレオチド配列を細胞に導入することができる。ある実施形態において、宿主細胞は、重鎖及び軽鎖両方を発現し、抗体を作製するために合わせる。ある実施形態において、抗体を作製するために、少なくとも１個の発現ベクターを含有する細胞を使用し得る。抗体を産生及び発現させるための代表的な方法を下記で考察する。
【０１２７】
ある実施形態において、様々な抗体定常領域を作るために、機能的ドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３及び介在配列を入れ替えることができる。例えば、ある実施形態において、このようなハイブリッド定常領域は、血清中の半減期のために、抗体四量体のアセンブリー及び折り畳みのために、及びエフェクター機能を向上させるために、最適化することができる。ある実施形態において、定常領域のアミノ酸配列に単一点突然変異を導入し、例えば上記で挙げたものなどの性質が向上したことについて得られた抗体を試験することにより、改変抗体定常領域を生成させることもできる。
【０１２８】
ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体の重鎖及び軽鎖に対する保存的修飾（及びコードヌクレオチドに対する対応する改変）により、オリジナルの抗体と同じ機能的及び化学的性質を有する抗体が得られる。一方、（ａ）例えば、シート又はへリックス構造などの、置換の部位における分子骨格の構造、（ｂ）標的部位における分子の電荷又は疎水性又は（ｃ）側鎖の大きさを維持して、それらの効果を顕著に変化させる、重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列における置換を選択することにより、抗ＯＸ４０Ｌ抗体の機能的及び／又は化学的性質を実質的に修飾し得る。
【０１２９】
例えば、「保存的アミノ酸置換」には、その位置でのアミノ酸残基の極性又は電荷にほとんど影響がない、又は全く影響がないような、非ネイティブ残基によるネイティブアミノ酸残基の置換が含まれ得る。さらに、「アラニンスキャニング突然変異」に関して既に述べたように、ポリペプチドにおけるあらゆるネイティブ残基もまた、アラニンで置換し得る。
【０１３０】
所望するアミノ酸置換（保存的であれ非保存的であれ）は、そのような置換が必要である場合に、当業者によって決定され得る。ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体の重要な残基を同定するために、ＯＸ４０Ｌに対する抗体の親和性又は抗体のエフェクター機能を増減させるように、アミノ酸置換を使用することができる。
【０１３１】
ある実施形態において、疾患の症候の程度の低下を測定することにより、抗ＯＸ４０Ｌ抗体の有効性を評価し得る。ある実施形態において、関心のある疾患を病原体により引き起こし得る。ある実施形態において、物質の導入（発癌物質など）及び遺伝子操作を含む他の方法により、動物宿主において疾患を確立することができる。ある実施形態において、動物宿主において、１又は複数の有害事象を検出することにより、有効性を評価し得る。「有害事象」には、これに限定されないが、抗体を投与していない動物宿主において存在しない、抗体を投与された動物宿主における有害反応が含まれる。ある実施形態において、有害事象には、これらに限定されないが、発熱、抗体に対する免疫反応、炎症又は動物宿主の死亡が含まれる。
【０１３２】
多くの方法で、抗原に特異的な抗体を生成させることができる。ある実施形態において、関心のあるエピトープを含有する抗原を、動物宿主（例えばマウス）に導入することができ、したがって、そのエピトープに対して特異的な抗体を産生させることができる。ある例において、天然にそのエピトープに曝露された宿主から採取した生物試料から、関心のあるエピトープに特異的な抗体を得ることができる。ある例において、ヒト免疫グロブリン（Ｉｇ）遺伝子座を、内因性Ｉｇ遺伝子が不活性化されているマウスへ導入することにより、完全ヒトモノクローナル抗体（ＭＡｂ）を得ることができる。
【０１３３】
天然抗体の構造
天然抗体の構造単位は、通常、四量体を含有する。このような各四量体は通常、ポリペプチド鎖の２つの相同対から構成されているが、その各対は、１つの全長「軽」鎖（ある実施形態において約２５ｋＤ）及び１つの全長「重」鎖（ある実施形態において、約５０から７０ｋＤ）を有する。「重鎖」という用語は、特定の抗原に対して特異性を有するのに十分な可変領域配列を有するあらゆるポリペプチドを含む。全長重鎖は、可変領域ドメイン、ＶＨ及び３個の定常領域ドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３を含む。ＶＨドメインは、ポリペプチドのアミノ末端にあり、ＣＨ３ドメインは、カルボキシ末端にある。「重鎖」という用語は、本明細書中で使用する場合、全長抗体重鎖及びその断片を包含する。
【０１３４】
「軽鎖」という用語は、特定のエピトープに対して特異性を有するのに十分な可変領域配列を有するあらゆるポリペプチドを含む。全長軽鎖には、可変領域ドメイン、ＶＬ及び定常領域ドメインＣＬが含まれる。重鎖のように、軽鎖の可変領域ドメインは、ポリペプチドのアミノ末端にある。「軽鎖」という用語は、本明細書中で使用する場合、全長軽鎖及びその断片を包含する。
【０１３５】
各鎖のアミノ末端部分には通常、一般に抗原認識に関与する約１００から１１０以上のアミノ酸の可変領域（重鎖のＶＨ及び軽鎖のＶＬ）が含まれる。各鎖のカルボキシ末端部分は、エフェクター機能に関与し得る定常領域（重鎖のＣＨドメイン及び軽鎖のＣＬドメイン）を規定する。抗体エフェクター機能には、補体の活性化及びオプソニン食作用（ｏｐｓｏｎｏｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ）の刺激が含まれる。ヒト軽鎖は通常、カッパ及びラムダ軽鎖として分類される。重鎖は、通常、ミュー、デルタ、ガンマ、アルファ又はイプシロンとして分類され、それぞれＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＡ及びＩｇＥといった抗体のアイソタイプを定義する。ＩｇＧには、これらに限定されないが、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４を含むいくつかのサブクラスがある。ＩｇＭには、これらに限定されないが、ＩｇＭ１及びＩｇＭ２を含むサブクラスがある。ＩｇＡは、同様に、これらに限定されないが、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２を含むサブクラスにさらに分類される。全長軽鎖及び重鎖中では、通常、約１２以上のアミノ酸の「Ｊ」領域により可変領域及び定常領域が連結されており、重鎖にはまた、約１０以上のアミノ酸の「Ｄ」領域も含まれる。例えば、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｃｈ．７（Ｐａｕｌ，Ｗ．，編、第２版、Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．（１９８９）））を参照のこと。各軽／重鎖ペアの可変領域は通常、抗原結合部位を形成する。
【０１３６】
可変領域は、通常、相補性決定領域又はＣＤＲとも呼ばれる３個の超可変領域により連結された比較的保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）の、同じ一般構造を示す。各ペアの重鎖及び軽鎖からのＣＤＲは通常、フレームワーク領域のそばに配置されており、特定のエピトープに結合可能であり得る。Ｎ末端からＣ末端まで、軽鎖及び重鎖両方の可変領域は通常、ドメインＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３及びＦＲ４を含有する。各ドメインに対するアミノ酸の配置は通常、Ｋａｂａｔ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９８７及び１９９１））、又はＣｈｏｔｈｉａ＆Ｌｅｓｋ  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７）；Ｃｈｏｔｈｉａら、Ｎａｔｕｒｅ  ３４２：８７８−８８３（１９８９）の定義に従う。
【０１３７】
上記で考察したように、いくつかのタイプの抗体断片がある。Ｆａｂ断片は、１個の軽鎖及びＣＨ１及び１個の重鎖の可変領域からなる。Ｆａｂ分子の重鎖は、他の重鎖分子とジスルフィド結合を形成できない。鎖間ジスルフィド結合を２個の重鎖間で形成し、Ｆ（ａｂ’）２  分子を形成するように、Ｆａｂ’断片には、そのＣＨ１とＣＨ２ドメインとの間により多くの定常領域を含有する、１個の軽鎖及び１個の重鎖が含まれる。Ｆａｃｂ断片は、分子の重鎖の定常領域がＣＨ２ドメインの末端に広がっていることを除き、Ｆ（ａｂ’）２  分子と類似している。Ｆｖ領域には、重鎖及び軽鎖両方からの可変領域が含まれるが、定常領域がない。１本鎖抗体は、重鎖及び軽鎖可変領域がフレキシブルなリンカーで連結され、抗原結合部位を形成する１本のポリペプチド鎖を形成するＦｖ分子である。１本鎖抗体については、ＷＯ８８／０１６４９及び米国特許第４，９４６，７７８号及び同第５，２６０，２０３号で詳しく考察している。Ｆｃ断片は、鎖間ジスルフィド結合が２個の鎖の間で形成され得るように、重鎖のＣＨ２及びＣＨ３ドメインを含有し、ＣＨ１とＣＨ２ドメインとの間にさらなる定常領域を含有する。
【０１３８】
二重特異性又は二重機能性抗体
二重特異性又は二重機能性抗体は、通常、２種類の異なる重／軽鎖対及び２種類の異なる結合部位を有する人工ハイブリッド抗体である。二重特異性抗体は、これらに限定されないが、ハイブリドーマの融合又はＦａｂ’断片の連結を含む様々な方法により作製することができる。例えば、Ｓｏｎｇｓｉｖｉｌａｉ＆Ｌａｃｈｍａｎｎ  Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７９：３１５−３２１（１９９０），Ｋｏｓｔｅｌｎｙら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１５４７−１５５３（１９９２）を参照のこと。
【０１３９】
ある一定の抗体調製
ある実施形態において、抗体は、ハイブリドーマ細胞株以外の細胞株において発現させることができる。ある実施形態において、適切な哺乳動物宿主細胞の形質転換のために、キメラ抗体を含む、特定の抗体をコードする配列を使用することができる。ある実施形態に従い、形質転換は、例えばウイルスにおいて（又はウイルスベクターに）ポリヌクレオチドをパッケージングすること及びウイルスを宿主細胞に形質導入することを含む、ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための何らかの公知の方法によるもの、又は、米国特許第４，３９９，２１６号；同４，９１２，０４０号；同４，７４０，４６１号及び同４，９５９，４５５号により例示されるものなど、当技術分野で公知の手法を用いてベクターをトランスフェクションすることによるものであり得る。
【０１４０】
ある実施形態において、発現ベクターは、本明細書中で考察するポリヌクレオチド配列のいずれかを含有する。ある実施形態において、ポリペプチドを産生させるために、そこに含有されるポリヌクレオチドを発現するのに適切な条件において、上記発現ベクターのいずれかを含有する細胞でポリペプチドを産生させることを含む、ポリペプチドを作製する方法を提供する。
【０１４１】
ある実施形態において、発現ベクターは、ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される、少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ａは、アミノ酸配列  ａ  ｂ  ｃ  ｄ  ｅ（アミノ酸配列ａは、アスパラギン、スレオニン、フェニルアラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｂは、アラニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｃは、トリプトファン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄは、メチオニン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｅは、セリン、アスパラギン又はヒスチジンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ（アミノ酸ｆは、アルギニン又はバリンから選択され；アミノ酸ｇは、イソロイシンであり；アミノ酸ｈは、リシン、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｉは、セリン、イソロイシン、チロシン、スレオニン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｊは、リシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋは、スレオニン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｌは、アスパラギン酸、セリン又はグルタミン酸から選択され；アミノ酸ｍは、グリシン、スレオニン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｎは、グリシン、アスパラギン、リシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｏは、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｐは、スレオニン、イソロイシン、アスパラギン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｑは、アスパラギン酸、プロリン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｒは、チロシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｓは、グリシン、アラニン、ロイシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｔは、アラニン、リシン又はバリンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列  ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’（アミノ酸ｕは、アスパラギン酸、グリシン、メチオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｖは、アルギニン、グリシン、アスパラギン酸、チロシン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｗは、チロシン、バリン、グリシン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｘは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｙは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はイソロイシンから選択され；アミノ酸ｚは、グリシン、チロシン、プロリン、バリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ’は、グルタミン酸、セリン、チロシン、トリプトファン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｂ’は、フェニルアラニン、グリシン、チロシン、スレオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ’は、プロリン、チロシン、セリン、リシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄ’は、フェニルアラニン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｅ’は、アスパラギン酸、チロシン、アルギニン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｆ’は、チロシン、バリン、グリシン、アルギニン又はスレオニンから選択される。）を含有する。）を含有し；抗体軽鎖と共同してＯＸ４０Ｌへの結合が可能であるポリペプチドをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベ���ターは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’（ｆからｔは、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｇ’は、プロリン、リシン又はセリンから選択される。）を含有するＣＤＲ２ａをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’  ｈ’（ｆからｇ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｈ’は、バリン又はグリシンから選択される。）を含有するＣＤＲ２ａをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’  ｈ’  ｉ’（ｆからｈ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｉ’は、リシンである。）を含有するＣＤＲ２ａをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’  ｈ’  ｉ’  ｊ’（ｆからｉ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｊ’はグリシンである。）を含有するＣＤＲ２ａをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’（ｕからｆ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｋ’は、アスパラギン酸、メチオニン、アスパラギン、チロシン又はバリンから選択される。）を含有するＣＤＲ３ａをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’（ｕからｋ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｌ'は、ヒスチジン、アスパラギン酸、セリン、チロシン又はフェニルアラニンから選択される。）を含有するＣＤＲ３ａをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’（ｕからｌ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｍ’は、バリン、アスパラギン酸又はグリシンから選択される。）を含有するＣＤＲ３ａをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’  ｎ’（ｕからｍ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｎ’は、フェニルアラニン、メチオニン又はチロシンから選択される。）を含有するＣＤＲ３ａをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’  ｎ’  ｏ’（ｕからｎ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｏ’は、アスパラギン酸である。）を含有するＣＤＲ３ａをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’  ｎ’  ｏ’  ｐ’（ｕからｏ’は、上記で定義するアミノ酸配列であり、アミノ酸ｐ’は、バリン又はチロシンから選択される。）を含有するＣＤＲ３ａをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、ポリペプチドを産生させるために、そこに含有されるポリヌクレオチドを発現するのに適切な条件において、上記の発現ベクターを含有する細胞においてポリペプチドを産生させることを含むポリペプチドを作製する方法を提供する。
【０１４２】
ある実施形態において、発現ベクターは、ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される、少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１（アミノ酸ａ１は、アルギニンであり；アミノ酸ｂ１は、アラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ１は、セリンであり；アミノ酸ｄ１は、グルタミンであり；アミノ酸ｅ１は、グリシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｆ１は、イソロイシン、バリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｇ１は、セリン又はバリンから選択され；アミノ酸ｈ１は、アスパラギン、セリン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｉ１は、ヒスチジン、アスパラギン、セリン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｊ１は、ロイシン、チロシン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋ１は、バリン、ロイシン、グリシン又はアスパラギンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ２ｂは、アミノ酸配列ｌ１  ｍ１  ｎ１  ｏ１  ｐ１  ｑ１  ｒ１（アミノ酸ｌ１は、アラニン、グリシン又はリシンから選択され；アミノ酸ｍ１は、アラニン又はリシンから選択され；アミノ酸ｎ１は、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｏ１は、スレオニン、セリン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｐ１は、ロイシン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｑ１は、グルタミン、アラニン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｒ１は、セリン又はスレオニンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ３ｂは、アミノ酸配列ｓ１  ｔ１  ｕ１  ｖ１  ｗ１  ｘ１  ｙ１  ｚ１  ａ１’（アミノ酸ｓ１は、グルタミン又はメチオニンから選択され；アミノ酸ｔ１は、リシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｕ１は、チロシン、アラニン、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｖ１は、アスパラギン、グリシン、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｗ１は、セリン、グリシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｘ１は、アラニン、セリン、イソロイシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｙ１は、プロリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｚ１は、ロイシン、トリプトファン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ１’は、スレオニンである。）を含有する。）を含有し、抗体重鎖と共同してＯＸ４０Ｌに結合可能であるポリペプチドをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’（ａ１からｋ１は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｂ１’は、アスパラギン又はアラニンから選択される。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’（ａ１からｂ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｃ１’は、スレオニンである。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’（ａ１からｃ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｄ１’は、チロシンである。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’  ｅ１’（ａ１からｄ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｅ１’は、ロイシンである。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’  ｅ１’  ｆ１’（ａ１からｅ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｆ１’は、セリンである。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、ポリペプチドを産生させるために、そこに含有されるポリヌクレオチドを発現するのに適切な条件において、上記の発現ベクターを含有する細胞においてポリペプチドを産生させることを含む、ポリペプチドを作製する方法を提供する。ある実施形態において、上記発現ベクターのうち少なくとも１個を含有する細胞を提供する。ある実施形態において、ポリペプチドを産生させるために、そこに含有されるポリヌクレオチドを発現するのに適切な条件において、上記の発現ベクターを含有する細胞においてポリペプチドを産生させることを含む、ポリペプチドを作製する方法を提供する。
【０１４３】
ある実施形態において、発現ベクターは、抗ＯＸ４０Ｌ抗体重鎖を発現する。ある実施形態において、発現ベクターは、抗ＯＸ４０Ｌ抗体軽鎖を発現する。ある実施形態において、発現ベクターは、抗ＯＸ４０Ｌ抗体重鎖と抗ＯＸ４０Ｌ抗体軽鎖の両方を発現する。ある実施形態において、抗体を産生させるために、そこに含有されるポリヌクレオチドを発現するのに適切な条件において、本明細書中に記載の発現ベクターのうち少なくとも１個を含有する細胞において抗体を産生させることを含む、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を作製する方法を提供する。
【０１４４】
ある実施形態において、使用するトランスフェクション手段は、形質転換を行う宿主に依存し得る。異種ポリヌクレオチドの哺乳動物細胞への導入のためのある一定の方法が当技術分野で公知であり、それには、これらに限定されないが、デキストランを介したトランスフェクション、リン酸カルシウム沈殿法、ポリブレンを介したトランスフェクション、原形質融合、エレクトロポレーション、リポソームにおけるポリヌクレオチドの封入及び核へのＤＮＡの直接マイクロインジェクションが含まれる。
【０１４５】
発現のための宿主として利用可能なある一定の哺乳動物細胞は、当技術分野で公知であり、それには、これらに限定されないが、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  （ＡＴＣＣ）から入手可能である多くの不死化細胞株（これらに限定されないが、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、Ｅ５細胞、ＨｅＬａ細胞、新生仔ハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞、サル腎臓細胞（ＣＯＳ）、ヒト肝細胞癌細胞（例えばＨｅｐＧ２）、ＮＳ０細胞、ＳＰ２０細胞、ＰｅｒＣ６細胞、２９３細胞及び多くのその他の細胞株が含まれる。）が含まれる。ある実施形態において、どの細胞株が高発現レベルを有し、構成的抗原結合特性のある抗体を産生するか、を調べることにより、細胞株を選択することができる。
【０１４６】
ある実施形態において、宿主細胞にトランスフェクションし得るベクターは、抗ＯＸ４０Ｌ抗体をコードするポリヌクレオチドに操作可能に連結された制御配列を含有する。ある実施形態において、制御配列は、連結されたポリヌクレオチドの発現を促進し、したがって、その結果、連結されたポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドが産生される。ある実施形態において、本ベクターはまた、宿主細胞において染色体非依存性複製を可能にするポリヌクレオチド配列も含有する。代表的なベクターには、これらに限定されないが、プラスミド（例えば、ＢｌｕｅＳｃｒｉｐｔ、ｐｕｃなど）、コスミド及びＹＡＣＳが含まれる。
【０１４７】
ある一定の抗体の使用
ある実施形態によると、試料中で特定の抗原を検出するために、抗体は有用である。ある実施形態において、これにより、本タンパク質を産生する細胞又は組織の同定が可能となる。例えば、ある実施形態において、試料中のＯＸ４０Ｌの有無を検出するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、試料中のＯＸ４０Ｌの有無を検出するための方法は、（ａ）抗ＯＸ４０Ｌ抗体と試料とを混合することと；（ｂ）抗原に結合した抗体を非結合抗体から分離することと；（ｃ）抗原に結合した抗体の有無を検出することと、を含む。
【０１４８】
抗原の有無を検出するために抗体を使用し得るアッセイには、これらに限定されないが、ＥＬＩＳＡ及びウエスタンブロットが含まれる。ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を標識し得る。ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体に結合する標識された抗体により、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を検出し得る。ある実施形態において、試料中のＯＸ４０Ｌの有無を検出するためのキットを提供する。ある実施形態において、本キットは、抗ＯＸ４０Ｌ抗体及び該抗体を検出するための試薬を含む。ある実施形態において、本キットは、上記段落［０１０９］に記載のような抗ＯＸ４０Ｌ抗体及び該抗体を検出するための試薬を含む。ある実施形態において、本キットは、上記段落［０１１０］に記載のような抗ＯＸ４０Ｌ抗体及び該抗体を検出するための試薬を含む。
【０１４９】
ある実施形態において、これらに限定されないがタンパク質などの化学部分を実質的に単離するために、抗体を使用し得る。ある実施形態において、抗体を固定化するために使用される支持材である「基質」に本抗体を付着させる。基質には、これらに限定されないが、チューブ、プレート（つまり、マルチウェルプレート）、マイクロビーズなどのビーズ、フィルター、ボール及びメンブレンが含まれる。ある実施形態において、基質は、これらに限定されないがポリカーボネート樹脂、シリコーン樹脂又はナイロン樹脂などの、非水溶性材料で作製され得る。アフィニティークロマトグラフィーで使用するための代表的な基質には、これらに限定されないが、セルロース、アガロース、ポリアクリルアミド、デキストラン、ポリスチレン、ポリビニルアルコール及び多孔性シリカが含まれる。多くの市販のクロマトグラフィー基質があり、これらに限定されないが、セファロース２Ｂ、セファロース４Ｂ、セファロース６Ｂ及びその他の形態のセファロース（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）；Ｂｉｏ−Ｇｅｌ（及び、Ｂｉｏｇｅｌ  Ａ、Ｐ又はＣＭなどの様々な形態のＢｉｏ−Ｇｅｌ）、Ｃｅｌｌｅｘ（及び、Ｃｅｌｌｅｘ  ＡＥ又はＣｅｌｌｅｘ−ＣＭなどの様々な形態のＣｅｌｌｅｘ）、Ｃｈｒｏｍａｇｅｌ  Ａ、Ｃｈｒｏｍａｇｅｌ  Ｐ及びＥｎｚａｆｉｘ（Ｗａｋｏ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓ．）が含まれる。抗体アフィニティーカラムの使用は、当業者にとって公知である。ある実施形態において、ＯＸ４０Ｌを単離するための方法は、（ａ）ＯＸ４０Ｌ抗体を基質に接触させることと；（ｂ）パート（ａ）の抗体にＯＸ４０Ｌを含有する試料を曝露することと；（ｃ）ＯＸ４０Ｌを単離することと、を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０Ｌを単離するための方法は、（ａ）上記段落［０１０９］に記載のようなＯＸ４０Ｌ抗体を基質に接触させることと；（ｂ）パート（ａ）の抗体にＯＸ４０Ｌを含有する試料を曝露すること；（ｃ）ＯＸ４０Ｌを単離することと、を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０Ｌを単離するための方法は、（ａ）上記段落［０１１０］に記載のようなＯＸ４０Ｌ抗体を基質に接触させることと；（ｂ）パート（ａ）の抗体にＯＸ４０Ｌを含有する試料を曝露することと；（ｃ）ＯＸ４０Ｌを単離することと、を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０Ｌを単離するためのキットを提供する。ある実施形態において、本キットは、基質に付着させられた抗ＯＸ４０Ｌ抗体と、ＯＸ４０Ｌを単離するための試薬と、を含む。ある実施形態において、本キットは、基質に付着させられた、上記段落［０１０９］に記載のような抗ＯＸ４０Ｌ抗体と、ＯＸ４０Ｌを単離するための試薬と、を含む。ある実施形態において、本キットは、基質に付着させられた、上記段落［０１１０］に記載のような抗ＯＸ４０Ｌ抗体と、ＯＸ４０Ｌを単離するための試薬と、を含む。
【０１５０】
「アフィニティークロマトグラフィー」という用語は、本明細書中で使用する場合、抗原及び抗体、酵素及び基質、又は受容体及びリガンドなどの、物質のペア間の相互作用（例えば親和性）を利用することにより、試料中の関心のある物質を分離又は精製する方法を意味する。
【０１５１】
ある実施形態において、特定のタンパク質に結合し、他の結合化合物との相互作用を妨げる抗体は、治療的用途があり得る。本願において、疾患又は状態を治療するための抗ＯＸ４０Ｌ抗体の使用を考察する際、このような使用には、抗ＯＸ４０Ｌ抗体そのものの使用、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を含有する組成物；及び／又は抗ＯＸ４０Ｌ抗体及び１又は複数のさらなる活性成分を含有する併用治療が含まれ得る。疾患又は状態を「治療」するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用する場合、このような治療には、その疾患又は状態の予防が含まれても含まれなくても良い。例えば、下記の例で示すように、抗ＯＸ４０Ｌ抗体は、ＯＸ４０Ｌの、その受容体、ＯＸ４０Ｒとの相互作用を妨害する。ＯＸ４０Ｌは炎症性免疫反応と関与するので、ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体は、これらに限定されないが炎症を伴う疾患を含む様々な疾患の治療において、治療的用途があり得る。このような疾患には、これらに限定されないが、関節リウマチ、骨関節炎、移植片対宿主拒絶反応、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、多発性硬化症、乾癬及び増殖性ループス腎炎が含まれる。
【０１５２】
ある実施形態において、細菌性、ウイルス性又は原生動物性感染及びそれらの結果として起こる合併症を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。細菌性疾患には、これらに限定されないが、マイコプラズマ肺炎が含まれる。ある実施形態において、ＨＩＶ感染ならびにその関連疾患、ＡＩＤＳ及びＡＩＤＳに付随する状態及び／又はＡＩＤＳに関連する状態（ＡＩＤＳによる認知症、ＡＩＤＳに伴う消耗、抗レトロウイルス治療によるリピジストロフィー（ｌｉｐｉｄｉｓｔｒｏｐｈｙ）；ＣＭＶ（サイトメガロウイルス）及びカポジ肉腫など）を治療するために、例えばＥＮＢＲＥＬＴＭと組み合わせて、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、これらに限定されないが、マラリア及び住血吸虫症を含む、原生動物性疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、癩性結節性紅斑；細菌性又はウイルス性髄膜炎；結核（肺結核を含む。）；及び細菌又はウイルス感染に対する二次性肺炎を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、ボレリア・レキュレンチス（Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｒｅｃｕｒｒｅｎｔｉｓ）により起こるものなど、シラミ媒介性回帰熱を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、ヘルペス角膜炎、角膜病変；及びウイルス誘発性角膜疾患など、ヘルペスウイルスにより引き起こされる状態を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、ヒトパピローマウイルス感染を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、インフルエンザ感染及び感染性単核球症を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１５３】
ある実施形態において、これらに限定されないが慢性骨盤痛（慢性前立腺炎／骨盤痛症候群を含む。）を含む、慢性疼痛状態を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、ヘルペス後疼痛を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１５４】
ある実施形態において、内分泌系の様々な疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、若年発症糖尿病（自己免疫性糖尿病及びインスリン依存性糖尿病を含む。）及び／又は成人発症糖尿病（インスリン非依存性糖尿病及び肥満介在糖尿病を含む。）を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、若年発症糖尿病（自己免疫性糖尿病及びインスリン依存性糖尿病を含む。）及び／又は成人発症糖尿病（インスリン非依存性糖尿病及び肥満介在糖尿病を含む。）を治療するために、ＥＮＢＲＥＬＴＭ又は本明細書中に記載のその他の活性剤などのＴＮＦ阻害剤とともに抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、糖尿病に伴う二次症状（糖尿病性網膜症、糖尿病患者における腎臓移植拒絶、肥満介在性インスリン抵抗性及び腎不全（それ自身が蛋白尿及び高血圧を付随し得る。）など）を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、これらに限定されないが、多嚢胞卵巣、Ｘ染色体性副腎白質ジストロフィー、甲状腺機能低下症及び、橋本病を含む甲状腺炎（つまり自己免疫性甲状腺炎）を含む、その他の内分泌疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、これらに限定されないが、甲状腺機能正常な病的症候群（ｅｕｔｈｙｒｏｉｄ  ｓｉｃｋ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）を含む、甲状腺細胞機能低下に関与する医学的症状を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１５５】
ある実施形態において、これらに限定されないがセリアック病を含む消化器系の状態を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、ＥＮＢＲＥＬＴＭ又はセリアック病を治療するのに適切な本明細書中に記載のその他の活性剤などのＴＮＦ阻害剤とともに抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、これらに限定されないが、クローン病；潰瘍性大腸炎；特発性胃不全麻痺；膵炎（慢性膵炎を含む。）；急性膵炎、炎症性腸疾患及び潰瘍（胃潰瘍及び十二指腸潰瘍を含む。）を含む消化器疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１５６】
ある実施形態において、尿生殖器系の疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、糸球体腎炎（自己免疫性糸球体腎炎、毒物への曝露による糸球体腎炎又は溶血性レンサ球菌もしくはその他の感染物による感染に対する二次的糸球体腎炎を含む。）を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、これらに限定されないが、尿毒症性症候群及びその医学的合併症（例えば、腎不全、貧血及び肥大型心筋症）を含む（環境毒素、薬物又はその他の原因への曝露と関与する尿毒症性症候群を含む。）、尿生殖器疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、吸収機能の変化を引き起こす胆嚢壁の炎症により生じる合併症を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。このよう合併症には、これらに限定されないが、胆石症（胆石）及びコリドコリチアシス（ｃｈｏｌｉｅｄｏｃｈｏｌｉｔｈｉａｓｉｓ）（胆管結石）及び胆石症及びコリドコリチアシスの再発が含まれる。ある実施形態において、血液透析の合併症；良性前立腺肥大、非細菌性前立腺炎及び慢性前立腺炎を含む、前立腺状態；及び血液透析の合併症を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１５７】
ある実施形態において、様々な血液疾患及び癌性疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、これらに限定されないが、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、エプスタインバーウイルス陽性上咽頭癌、神経膠腫、結腸癌、胃癌、前立腺癌、腎細胞癌、子宮頸癌及び卵巣癌、肺癌（ＳＣＬＣ及びＮＳＣＬＣ）（これらに限定されないが、癌関連悪液質、疲労、衰弱、悪液質及び高カルシウム血症の腫瘍随伴症候群を含む。）を含む様々な形態の癌を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、肉腫、骨肉種及び、腺癌（例えば乳癌）及び扁平上皮癌などの癌腫を含む固形癌を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、食道癌、胃癌、胆嚢癌、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄性白血病、慢性もしくは急性リンパ芽球性白血病及びヘアリー細胞白血病を含む白血病を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、これらに限定されないが、多発性骨髄腫を含む、侵襲的転移の可能性のあるその他の悪性腫瘍を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、これらに限定されないが、慢性特発性好中球減少症、慢性疾患の貧血、ファンコニ再生不良性貧血を含む再生不良性貧血；特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）；血栓性血小板減少性紫斑病、骨髄異形成症候群（不応性貧血、環状鉄芽球を伴う不応性貧血、過剰の芽球を伴う不応性貧血、形質転換における過剰の芽球を伴う不応性貧血を含む。）；骨髄繊維症／骨髄様化生；及び鎌状細胞血管閉塞クリーゼを含む、貧血及び血液疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１５８】
ある実施形態において、様々なリンパ増殖性疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、自己免疫性リンパ球増殖性症候群（ＡＬＰＳ）、慢性リンパ芽球白血病、ヘアリー細胞白血病、慢性リンパ性白血病、末梢Ｔ細胞リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、バーキットリンパ腫、エプスタインバーウイルス陽性Ｔ細胞リンパ腫、組織球性リンパ腫、ホジキン病、びまん性侵攻性リンパ腫、急性リンパ性白血病、Ｔガンマリンパ球増殖性疾患、皮膚Ｂ細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫（つまり、菌状息肉腫）及びセザリー症候群を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１５９】
ある実施形態において、遺伝性疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、これらに限定されないが、ゴーシェ病、ハンチントン病、線状ＩｇＡ病及び筋ジストロフィーを含む疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１６０】
ある実施形態において、これらに限定されないが、頭部への外傷による硬膜下血腫を含む、頭部又は脊髄に対する損傷を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、頭部損傷及び脊髄損傷を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、頭蓋の神経障害及び／又は頸椎性頭痛を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、脳照射に伴う神経学的副作用を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１６１】
ある実施形態において、肝臓の状態を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、急性アルコール肝炎、急性薬剤誘発性肝炎又はウイルス性肝炎、Ａ型、Ｂ型及びＣ型肝炎、硬化性胆管炎及び原因不明の肝臓の炎症を含む肝炎を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、肝臓類洞上皮を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、これらに限定されないが、自己免疫プロセスの結果によるものと考えられる蝸牛神経が関与する聴覚損失（つまり自己免疫性聴覚損失）を含む、聴覚損失に関与する様々な疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。この状態は、現在、ステロイド、メトトレキセート及び／又はシクロホスファミドを用いて治療が行われている。ある実施形態において、メニエール症候群及びコレステリン腫、聴覚損失を伴うことが多い中耳疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１６２】
ある実施形態において、これらに限定されないが、骨損失を導く破骨細胞疾患（これらに限定されないが、閉経後骨粗しょう症などの骨粗しょう症、骨関節炎、結果として歯のゆるみ又は損失を導く歯周炎及び関節置換術後のプロテーゼのゆるみ（通常、磨耗くずに対する炎症性反応を伴う。）を含む。）を含む、骨及び関節の非関節炎性の医学的状態を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。この後者の状態はまた、「整形外科インプラント骨溶解」と呼ばれる。ある実施形態において、顎関節症（ＴＭＪ）を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１６３】
ある実施形態において、これらに限定されないが、成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、急性呼吸窮迫症候群及び、毒性化学物質、膵炎、外傷もしくは炎症のその他の原因への曝露を含む、様々な状態により生じる急性肺損傷を含む、肺疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、気管支肺異形成（ＢＰＤ）；慢性閉塞性肺疾患（例えば、肺気腫及び慢性気管支炎）及び早産児の慢性繊維性肺疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、石綿肺、炭鉱労働者の塵肺、珪肺もしくは微細粒子に長期間曝露されることに付随する同様の状態を含む職業性肺疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、器質化肺炎（ｂｒｏｎｃｈｉｏｌｉｔｅｒａｎｓ  ｏｒｇａｎｉｚｉｎｇ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）、これらに限定されないが、特発性肺繊維症及び照射誘発性肺繊維症を含む肺繊維症；肺サルコイドーシス；及びアレルギー性鼻炎、接触性皮膚炎、アトピー性皮膚炎及び喘息を含むアレルギーを治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１６４】
ある実施形態において、これらに限定されないが、成人及び若年性関節リウマチを含む様々なリウマチ疾患；強皮症；全身性エリテマトーデス；痛風；骨関節炎；リウマチ性多発筋痛；強直性脊椎炎及びライテル病を含む血清陰性脊椎関節炎を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１６５】
ある実施形態において、乾癬性関節炎及び慢性ライム関節炎を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、スティル病及び関節リウマチに付随するブドウ膜炎を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、皮膚筋炎、封入体筋炎、多発性筋炎及びリンパ脈管筋腫症を含む、随意筋及びその他の筋肉の炎症の結果起こる疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１６６】
ある実施形態において、原発性アミロイドーシスを治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、様々な状態を特徴とする二次性アミロイドーシスを治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。このような状態には、これらに限定されないが、アルツハイマー病、二次性反応性アミロイドーシス；ダウン症候群；及び透析に伴うアミロイドーシスが含まれる。ある実施形態において、家族性地中海熱、高免疫グロブリンＤ及び周期熱症候群ならびにＴＮＦ受容体関連周期性症候群（ＴＲＡＰＳ）を含む、遺伝性周期熱症候群を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１６７】
ある実施形態において、皮膚又は粘膜に関与する疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。このような疾患には、これらに限定されないが、ダリエ病、毛包性角化症及び尋常性天疱瘡などの棘融解性疾患が含まれる。ある実施形態において、座瘡；酒さ；円形脱毛症；アフタ性口内炎；水疱性類天疱瘡；バムス（ｂｕｍｓ）；湿疹；多形性紅斑症及び多形性紅斑水疱症（Ｓｔｅｖｅｎｓ−Ｊｏｈｎｓｏｎ症候群）を含む紅斑；炎症性皮膚疾患；扁平苔癬；線状ＩｇＡ水疱性疾患（小児期の慢性水疱性皮膚疾患）；皮膚の弾力性の喪失；胃潰瘍を含む粘膜表面潰瘍；好中球性皮膚炎（スウィーツ症候群）；皮膚筋炎、毛孔性紅色粃糠疹；乾癬；壊疽性膿皮症；多中心性細網組織球症；及び中毒性表皮剥離症を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、疱疹状皮膚炎を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、移植に関連する疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。このような疾患には、これらに限定されないが、移植片対宿主拒絶反応及び心臓、肝臓、皮膚、腎臓、肺（肺移植気道閉塞）などの固形臓器移植又は骨髄を含むその他の移植による合併症が含まれる。
【０１６８】
ある実施形態において、これらに限定されないが、裂孔原性網膜剥離及び、喫煙及び黄斑変性に関連する炎症性眼疾患などの炎症性眼疾患を含む、眼疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１６９】
ある実施形態において、女性生殖器に影響する疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。例としては、これらに限定されないが、複数の移植不全／不妊症；胎児消失症候群又はＩＶ胚消失（自然流産）；妊娠中毒症もしくは子癇；子宮内膜症、慢性子宮頸管炎及び早期陣痛が挙げられる。
【０１７０】
ある実施形態において、レプチン形成低下を引き起こすことを含む肥満を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、坐骨神経痛、老化現象、重度の薬物反応（例えば、１１−２毒性又はブレオマイシン誘発性肺障害及び繊維症）を治療するために、又は、心臓手術又は他の手術における同種異系の赤血球細胞の輸血前、輸血中、輸血後の炎症反応を抑制するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、外傷性膝損傷などの手足又は関節に対する外傷を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、これらに限定されないが、多発性硬化症；ベーチェット症候群；シェーグレン症候群；自己免疫性溶血性貧血；βサラセミア；筋萎縮性側索硬化症（ルー・ゲーリック病）；パーキンソン病；及び原因不明の腱滑膜炎ならびに、ｘ染色体精神遅滞を含む遺伝的欠陥に付随する様々な自己免疫疾患及び障害を含む疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１７１】
ある実施形態において、これらに限定されないが中枢神経系の炎症が起こった際に放出される神経毒性神経伝達物質の影響を含む中枢神経系（ＣＮＳ）損傷を治療するために、及び、中枢神経系損傷の部位におけるグリア性瘢痕の広がりを抑制又は防ぐために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、側頭葉てんかんを治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。てんかんとの関連及び発作の治療において、再発発作の重症度及び回数を低下させ、発作の悪影響の重篤度を抑える。ある実施形態において、ニューロンの欠損、神経変性及び発作に伴うグリオーシスを治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１７２】
ある実施形態において、重症多発性神経障害及びミオパシー（ＣＩＰＮＭ）急性多発性神経障害；拒食症；ベル麻痺；慢性疲労性症候群；クロイツフェルトヤコブ病を含む伝染性認知症；脱髄性神経障害；ギランバレー症候群；椎間板障害；湾岸戦争症候群；慢性炎症性脱髄性多発神経障害、重症筋無力症；無症候性脳虚血；ナルコレプシー及び睡眠時無呼吸を含む睡眠障害；慢性神経変性；及び脳虚血障害を含む発作を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、拒食症及び／又は拒食状態、腹膜炎、内毒素症及び敗血症、肉芽腫形成、熱射病、チャーグ・ストラウス症候群、結核及びハンセン病などの急性感染後の慢性炎症、全身性硬化及び肥大性瘢痕化を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１７３】
ある実施形態において、抗体療法、化学療法、放射線療法に伴う毒性及び、ＴＲＡＥＬ及びＴＲＡＤＥなどのその他のアポプトーシス誘導剤及びＩＬ−１産生細胞、ＯＸ４０Ｌ産生細胞を標的とする治療の影響を治療するために、又は炎症反応を制する（ｉｌｌｉｃｉｔ）ために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ＯＸ４０Ｌ細胞を標的とする、モノクローナル抗体療法、化学療法及びその他のアポプトーシス誘導療法は、ＯＸ４０Ｌの産生及び／又は放出を誘導する。ある実施形態において、その受容体及び／又は受容体付属物との相互作用を妨害することによってＯＸ４０Ｌの影響を抑える治療剤を投与することにより、ＯＸ４０Ｌに関与する、炎症反応促進効果及び医学的状態を緩和するか、又は取り除き得る。
【０１７４】
ある実施形態において、ペット（イヌ、ネコ、トリ、霊長類など）、家畜（ウマ、ウシ、ヒツジ、ブタ、トリなど）又はＯＸ４０／ＯＸ４０Ｌ炎症性もしくは関節炎状態に罹患している何らかの動物などの非ヒト動物を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。あるこのような例において、動物の体重に従い適切な用量を決定し得る。例えば、ある実施形態において、０．２から１ｍｇ／ｋｇの用量を使用し得る。ある実施形態において、用量は、動物の表面積に従い決定し得、典型的な用量範囲は、０．１から２０ｍｇ／ｉｎ２又は５から１２ｍｇ／ｍ２である。イヌ又はネコなどの小動物の場合、ある実施形態において、適切な用量は、０．４ｍｇ／ｋｇである。ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体は、注入又はその他の適切な経路により、週に１又は複数回、動物の状態が改善するまで投与し得るか、又は無期限に投与し得る。
【０１７５】
ある実施形態において、乾癬病巣を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、尋常性乾癬又は乾癬性関節炎の患者において生じた乾癬病巣を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１７６】
ある実施形態において、乾癬性関節炎のより重篤な症候（例えば、遠位指節間関節ＤＩＰの侵襲、腱付着部症、脊椎炎及び指炎）がないが、次のうち１つを示す場合、通常乾癬（ｏｒｄｉｎａｒｙ  ｐｓｏｒｉａｓｉｓ）を有するものとして、患者を定義する：１）銀白色の鱗屑に覆われ、炎症を起こし腫れた皮膚病変（プラーク乾癬又は尋常性乾癬；２）胴部、腕部又は脚部に現れた小さな赤い斑点（滴状類乾癬）；３）皮膚の屈曲面の、鱗屑のない、滑らかで炎症のある病変（逆型乾癬（ｉｎｖｅｒｓｅ  ｐｓｏｒｉａｓｉｓ））；４）かゆみ及び腫れを伴う、又は伴わない、発赤の広がり及び細かい鱗屑の剥離（乾癬性紅皮症）；５）水疱様病変（膿疱性乾癬）；６）銀白色の鱗屑に覆われ、隆起した炎症性の頭皮病変（頭皮乾癬）；７）帯黄変色がある、又はない、陥凹指爪、爪の崩壊又は炎症及び爪床からの爪の剥離（爪乾癬）。
【０１７７】
通常乾癬の治療では、ある実施形態において、患者の乾癬病変の重症度を反映する何らかの目安に従い測定した場合に患者の症状改善を誘導する量及び期間にわたり、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与し得る。ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体の量及び治療期間が十分であるか否かを調べるために、１又は複数のこのような目安を評価し得る。ある実施形態において、乾癬部位及び重症度指標（ＰＡＳＩ）又はＴａｒｇｅｔ  Ｌｅｓｉｏｎ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  Ｓｃｏｒｅのいずれかにおけるベースラインを超える改善を誘導するのに十分な量及び期間にわたり、本抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与する。ある実施形態において、両指標を使用する。ある実施形態において、ＰＡＳＩスコアを指標として使用する際は、患者のＰＡＳＩスコアにおいて少なくとも５０％の改善が示される場合、あるいは、ＰＡＳＩスコアが少なくとも７５％の改善を示す場合、治療が十分であるとみなす。ある実施形態において、治療の充足性を測定するために、乾癬のＴａｒｇｅｔ  Ｌｅｓｉｏｎ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  Ｓｃｏｒｅを用いることには、１又は複数の次のもの（それぞれ個々にスコアを付ける。）：すなわち、プラーク隆起、鱗屑の量及び程度又は紅斑の程度；及び治療に対する標的病変反応、において改善が起こるか否かについて個々の乾癬病変を調べることが含まれる。ある実施形態において、前述の４個の指標全てに対する個々のスコアを加算し、治療薬を投与した後のスコアとベースラインスコアを比較することによって改善の程度を調べることにより、乾癬のＴａｒｇｅｔ  Ｌｅｓｉｏｎ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  Ｓｃｏｒｅを決定する。
【０１７８】
ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を週に１回又は複数回投与することにより、乾癬患者における改善の充足度を得る。ある実施形態において、週に１回、２回又は３回以上、本抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与し得る。ある実施形態において、少なくとも１週間、２週間、３週間、４週間以上の期間にわたり、治療を継続し得る。ある実施形態において、患者が改善した後に治療を中断し得、症候が再発したら再開するか、又は、あるいは、無期限で連続的に治療薬を投与し得る。ある実施形態において、投与経路は、皮下注射である。ある実施形態において、５から１２ｍｇ／ｍ２の用量又は２５ｍｇもしくは５０ｍｇのいずれかの一定用量で注入することにより、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与する。ある実施形態において、２５ｍｇの用量を週に２回注入し、ある実施形態において、５０ｍｇの用量を週に１回注入する。ある実施形態において、６ヶ月に１回、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与する。ある実施形態において、３ヶ月に１回、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与する。ある実施形態において、１ヶ月に１回、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与する。小児乾癬患者の治療のある実施形態において、注入による投与用量は、０．１ｍｇ／ｋｇから２５ｍｇの最大用量までである。
【０１７９】
ある実施形態において、乾癬に対して有効な、１、２、３以上のその他の医薬品と組み合わせて、通常乾癬を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。抗ＯＸ４０Ｌ抗体の投与前、抗ＯＸ４０Ｌ抗体と同時に、又は抗ＯＸ４０Ｌ抗体と連続して、これらのさらなる医薬品を投与し得る。乾癬の併用療法に適切な典型的薬物には、これらに限定されないが、鎮痛剤（鎮痛薬）（これらに限定されないが、アセトアミノフェン、コデイン、プロポキシフェンナプシレート、オキシコドン塩酸塩、ヒドロコドン２４酒石酸塩及びトラマドールを含む。）が含まれる。ある実施形態において、メトトレキセート、スルファサラジン、金塩、アザチオプリン、シクロスポリン、抗マラリア薬、経口ステロイド（例えばプレドニゾン）又はコルヒチンと組み合わせて、ＥＮＢＲＥＬＴＭあり又は無しで、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与し得る。これらに限定されないが、サリチル酸（アスピリン）；イブプロフェン；インドメタシン；セレコキシブ；ロフェコキシブ；ケトロラク；ナンブメトン；ピロキシカム；ナプロキセン；オキサプロジン；スリンダック；ケトプロフェン；ジクロフェナク；及びその他のＣＯＸ−１及びＣＯＸ−２阻害剤、サリチル酸誘導体、プロピオン酸誘導体、酢酸誘導体、フマル酸誘導体、カルボン酸誘導体、酪酸誘導体、オキシカーン（ｏｘｉｃａｒｎｓ）、ピラゾール及びピラゾロン（新しく開発された抗炎症剤を含む。）を含む、非ステロイド抗炎症剤もまた、抗ＯＸ４０Ｌ抗体及びＴＮＦＲ模倣物と共投与し得る。
【０１８０】
ある実施形態において、１又は複数の次のものと組み合わせて、乾癬を治療するために抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る：局所ステロイド、全身ステロイド、炎症性サイトカインのアンタゴニスト、Ｔ細胞表面タンパク質に対する抗体、アントラリン、コールタール、ビタミンＤ３及びその類似体（１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３及びカルシポトリエンを含む。）、局所レチノイド、経口レチノイド（これらに限定されないが、エトレチナート、アシトレチン及びイソトレチノインを含む。）、局所サリチル酸、メトトレキセート、シクロスポリン、ヒドロキシ尿素及び／又はスルファサラジン。ある実施形態において、１又は複数の次の化合物と組み合わせて抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与し得る：ミノサイクリン；ミソプロストル；経口コラーゲン；ペニシルアミン；６−メルカプトプリン；窒素マスタード；ガバペンチン；ブロモクリプチン；ソマトスタチン；ペプチドＴ；抗ＣＤ４モノクローナル抗体；フルナル酸（ｆｕｒｎａｒｉｃ  ａｃｉｄ）；ポリ不飽和エチルエステル脂質；亜鉛；及び／又は乾癬を治療するのに使用し得るその他の薬物。
【０１８１】
ある実施形態において、１又は複数の次の局所適用化合物と組み合わせて抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与することにより乾癬を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る：魚油；堅果油及び植物油を含む油；アロエベラ；ホホバ；死海塩；カプサイシン；オオアザミ；マンサク；保湿剤；及び／又はエプソム塩。
【０１８２】
ある実施形態において、１又は複数の次の典型的な療法と組み合わせて抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与することにより乾癬を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る：血漿交換法；紫外線Ｂによる光線療法；紫外線Ａと組み合わせたソラレン（ＰＵＶＡ）；及び／又は日光浴。
【０１８３】
ある実施形態において、これらに限定されないが、喘息、慢性閉塞性肺疾患、肺胞タンパク症、ブレオマイシン誘発性肺障害及び繊維症、放射線誘発性肺繊維症、嚢胞性線維症、肺におけるコラーゲン蓄積及びＡＲＤＳを含む肺疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体及びＩＬ−４阻害剤と組み合わせて、このような疾患を治療し得る。ある実施形態において、これらに限定されないが、疱疹状皮膚炎（ジューリング病）、アトピー性皮膚炎、接触皮膚炎、蕁麻疹（慢性特発性蕁麻疹を含む。）及び自己免疫性水疱性疾患（尋常性天疱瘡及び水疱性類天疱瘡を含む。）を含む様々な皮膚疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、重症筋無力症、肺サルコイドーシスを含むサルコイドーシス、強皮症、反応性関節炎、高ＩｇＥ症候群、多発性硬化症及び特発性好酸球増多症を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、薬品に対するアレルギー反応を治療するために、及びアレルギー免疫療法に対するアジュバントとして、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。
【０１８４】
ある実施形態において、これらに限定されないが、腹部大動脈瘤を含む大動脈瘤；急性冠症候群、動脈炎；大脳動脈閉塞を含む血管閉塞；冠状動脈バイパス手術の合併症；虚血再灌流傷害；アテローム性動脈硬化心疾患を含む心疾患；慢性自己免疫性心筋炎及びウイルス性心筋炎を含む心筋炎；慢性心不全、うっ血性心不全、心不全の悪液質を含む心不全；心筋梗塞；心臓手術後又は頸動脈バルーン血管形成術後の再狭窄及び／又はアテローム性動脈硬化症；無症候性心筋虚血；左心室ポンプ機能不全、左心室支援装置の移植後合併症；レイノー現象；静脈血栓症；川崎病脈管炎を含む脈管炎；静脈閉塞症、巨細胞性動脈炎、ヴェーゲナー肉芽腫症；心肺バイパス術後の精神錯乱及びシェーンライン・ヘノッホ紫斑病を含む、心臓疾患又は損傷を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を使用し得る。ある実施形態において、大動脈瘤及び腫瘍などの、ある一定の心血管系疾患を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体、ＴＮＦ阻害剤及び血管形成阻害剤（例えば抗ＶＥＧＦ）の組合せを使用し得る。
【０１８５】
前述の薬剤又は併用療法に対する個々の患者による反応は変動し得、各患者に対する薬物の適切な効果的組合せは、その患者の担当医により決定され得る。
【０１８６】
カニクイザルは、ある種の疾患に対する有用なモデルである。典型的な疾患には、これらに限定されないが、移植拒絶症候群及び炎症性腸疾患様疾患が含まれる。カニクイザルのヒト疾患モデルにおいてヒトＭＡｂの効果を試験する場合、ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ  ＭＡｂがヒト及びカニクイザルにおけるＯＸ４０Ｌに同程度で結合するか否かを調べることは有用である。
【０１８７】
ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体は、抗ＯＸ４０Ｌ抗体全体又は一部及び細胞毒性薬を含有する共役分子の一部であり得る。「細胞毒性薬」という用語は、細胞の機能を阻害する又は防ぐ、及び／又は細胞死もしくは細胞破壊を引き起こす物質を指す。この用語には、これに限定されないが、放射性同位体（例えば、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０及びＲｅ１８６）、化学療法剤及び、細菌、真菌、植物及び動物由来の酵素活性毒素又はそれらの断片などの毒素が含まれる。細胞毒性薬には、これらに限定されないが、アドリアマイシン、ドキソルビシン、５−フルオロウラシル、シトシンアラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）、シクロホスファミド、チオテパ、タキソテール（ドセタキセル）、ブスルファン、サイトキシン、タキソール、メトトレキセート、シスプラチン、メルファラン、ビンブラスチン、ブレオマイシン、エトポシド、イホスファミド、マイトマイシンＣ、ミトキサントロン、ビンクレスチン（ｖｉｎｃｒｅｉｓｔｉｎｅ）、ビノレルビン、カルボプラチン、テニポシド、ダウノマイシン、カルミノマイシン、アミノプテリン、ダクチノマイシン、マイトマイシン、エスペラマイシン、メルファラン及びその他の関連窒素マスタードが含まれる。
【０１８８】
ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体は、抗ＯＸ４０Ｌ抗体全体又は一部及びプロドラッグを含有する共役分子の一部であり得る。ある実施形態において、「プロドラッグ」という用語は、医薬的活性物質の前駆体又は誘導体形態を指す。ある実施形態において、プロドラッグは、親薬物と比較して、細胞に対して細胞毒性が低く、より活性の高い細胞毒性のある親形態へと酵素的に活性化又は変換することができる。本発明の典型的なプロドラッグには、これらに限定されないが、より活性の高い細胞毒性不含薬物に変換することができる、リン酸含有プロドラッグ、チオリン酸含有プロドラッグ、硫酸含有プロドラッグ、ペプチド含有プロドラッグ、Ｄ−アミノ酸修飾プロドラッグ、グリコシル化プロドラッグ、β−ラクタム含有プロドラッグ、場合によっては置換されたフェノキシアセトアミド含有プロドラッグ及び場合によっては置換されたフェニルアセトアミド含有プロドラッグ、５−フルオロシトシン及びその他の５−フルオロウリジンプロドラッグが含まれる。プロドラッグ形態に誘導体化することができる細胞毒性薬物の例には、これらに限定されないが、上述の細胞毒性薬が含まれる。例えば、米国特許第６，７０２，７０５号を参照のこと。
【０１８９】
ある実施形態において、分子の抗体部分を有することによる抗体共役機能により、その分子の細胞毒性部分又はプロドラッグ部分が、患者における細胞の特異的集団に向けられる。抗ＯＸ４０Ｌ抗体の場合、例えば、ある実施形態において、異常又は有害な炎症性反応の部位においてＯＸ４０Ｌを発現するＡＰＣを破壊するために、このような共役分子を使用し得る。
【０１９０】
ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体の治療的有効量を投与することを含む、患者を治療する方法を提供する。ある実施形態において、抗体共役物の治療的有効量を投与することを含む、患者を治療する方法を提供する。ある実施形態において、少なくとも１個のさらなる治療薬の治療的有効量と併せて抗体を使用する。典型的な治療薬には、これらに限定されないが、ＢＭＰ−１からＢＭＰ−１２と呼ばれる骨形成因子；形質転換増殖因子−β（ＴＧＦ−β）及びＴＧＦ−βファミリーメンバー；これらに限定されないが、ＩＬ−１ｒａ及びその誘導体及びＫｉｎｅｒｅｔＴＭを含む、インターロイキン−１（ＩＬ−１）阻害剤；これらに限定されないが、可溶性ＴＮＦα受容体、ＥＮＢＲＥＬＴＭ、抗ＴＮＦα抗体、ＲｅｍｉｃａｄｅＴＭ及びＤ２Ｅ７抗体を含むＴＮＦα阻害剤；副甲状腺ホルモン及びその類似体；副甲状腺関連タンパク質及びその類似体；Ｅシリーズのプロスタグランジン；ビホスホネート（アレンドロネートなど）；フッ化物及びカルシウムなどの骨促進ミネラル；これらに限定されないが、ＣＯＸ−２阻害剤（ＣｅｌｅｂｒｅｘＴＭ及びＶｉｏｘｘＴＭなど）を含む、非ステロイド抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）；メトトレキセート又はレフルノミドなどの免疫抑制剤；これらに限定されないが、分泌性白血球プロテアーゼ阻害剤（ＳＬＰＩ）を含むセリンプロテアーゼ阻害剤；ＩＬ−６阻害剤（これらに限定されないが、ＩＬ−６に対する抗体を含む。）；ＩＬ−８阻害剤（これらに限定されないが、ＩＬ−８に対する抗体を含む。）；ＩＬ−１８阻害剤（これらに限定されないが、ＩＬ−１８結合タンパク質及びＩＬ−１８抗体を含む。）；インターロイキン−１変換酵素（ＩＣＥ）モジュレータ；繊維芽細胞細胞増殖因子  ＦＧＦ−１からＦＧＦ−１０及びＦＧＦモジュレータ；ＰＡＦアンタゴニスト；ケラチノサイト増殖因子（ＫＧＦ）、ＫＧＦ−関連分子及びＫＧＦモジュレータ；マトリクスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）モジュレータ；これらに限定されないが、誘発型ＮＯＳのモジュレータを含む、一酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）モジュレータ；グルココルチコイド受容体のモジュレータ；グルタミン酸受容体のモジュレータ；リポ多糖類（ＬＰＳ）レベルのモジュレータ；及びノルアドレナリン及びモジュレータ及びその模倣物が含まれる。典型的なさらなる治療薬における例となる詳細については、例えば、公開ＰＣＴ出願ＷＯ０３／０００２７１３を参照のこと。
【０１９１】
上記で考察したように、ある実施形態において、同じ患者に投与される１又は複数の他の薬物と同時に、各薬物をその薬品に対して適切な投与計画に従い投与して、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与し得る。このような治療は、前治療、同時治療、連続治療及び交互処方計画を包含する。このような薬物のさらなる例には、これらに限定されないが、抗ウイルス剤、抗菌剤、鎮痛剤、コルチコステロイド、炎症性サイトカインのアンタゴニスト、ＤＭＡＲＤ及び非ステロイド抗炎症剤が含まれる。さらに、ある実施形態において、ペントキシフィリン又はサリドマイドと併用して、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与する。
【０１９２】
ある実施形態において、別のサイトカイン又はサイトカイン阻害剤と併用して、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を用いて様々な内科的疾患を治療する。例えば、ある実施形態において、他の炎症性サイトカインとその受容体との相互作用を阻害する化合物も含有する組成物において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与し得る。ある実施形態において、本抗ＯＸ４０Ｌ抗体及びサイトカイン阻害剤を、個別の組成物として投与することができ、同じ又は異なる経路でこれらを投与することができる。抗ＯＸ４０Ｌ抗体と組み合わせて使用するサイトカイン阻害剤の例には、これらに限定されないが、例えば、ＴＧＦβ、ＩＦＮγ、ＩＩ型ＩＬ−１受容体、ＩＬ−６又はＩＬ−８及びＴＮＦに拮抗するものが含まれる。ある実施形態において、発作の再発（ＧＡＢＡＡ受容体拮抗により誘発される発作、ＥＥＧ発作出現と関連する発作及びてんかん重積状態中に生じる運動辺縁系発作を含む。）を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体とＩＬ−１阻害剤、例えばＩＩ型ＩＬ−１受容体又はＩＬ−６との組合せを使用し得る。ある実施形態において、特発性肺繊維症及び嚢胞性線維症を治療するために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体とＩＦＮγ−１ｂとの組合せを使用し得る。本明細書中に記載のものなどの疾患を治療するためのその他の典型的な組合せはには、ＲＡＮＫ及びＲＡＮＫリガンドの結合を妨げる化合物（ＲＡＮＫリガンド阻害剤、ＲＡＮＫ：Ｆｃを含む、８もしくは可溶型ＲＮＡＫなど）との抗ＯＸ４０Ｌ抗体の使用が含まれる。ある実施形態において、これらに限定されないが、様々なリウマチ疾患、骨粗しょう症、多発性骨髄腫もしくは、骨変性を引き起こすその他の悪性腫瘍又は骨への転移を阻害もしくは防御する目的の抗腫瘍治療又はプロテーゼ摩耗くずもしくは歯周炎に伴う骨破壊を含む、様々な設定において骨破壊を阻害する又は妨げるために、抗ＯＸ４０Ｌ抗体とＲＡＮＫ：Ｆｃとの組合せを使用し得る。ある実施形態において、抗レトロウイルス治療を受けているＭＶ感染患者におけるＴ細胞増殖を促進するために、次のもののうち１又は複数と組み合わせて抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与し得る：Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−２及び／又は１型タンパク質キナーゼＡの阻害剤。ある実施形態において、次のもののうち１又は複数と組み合わせて抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与し得る：ＩＬ−１７受容体の可溶型（ＩＬ−１７Ｒ：Ｆｃなど。）、ＩＬ−１８結合タンパク質、ＩＬ−１８受容体の可溶型及びＩＬ−１８抗体、ＩＬ−１８受容体に対する抗体又はＣＤ−３０リガンドに対する及び／又はＣＤ−４リガンドに対する抗体。
【０１９３】
ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体、ＴＮＦ阻害剤、例えばＴＮＦＲ：Ｆｃ（Ｉｍｍｕｎｅｘ  Ｃｏｒｐにより臨床用途に対して市販されているＥＮＢＲＥＬＴＭ）及び併用療法において活性薬剤である、上述のサイトカイン又はサイトカイン阻害剤の何らかの組合せの併用により、内科的疾患を治療し得る。ある実施形態において、関節リウマチ、発作及びうっ血性心不全を治療するための併用療法は、抗ＯＸ４０Ｌ抗体及びＥＮＢＲＥＬＴＭを投与することを含む。ある実施形態において、医薬品を使用するための併用療法において、特に、本明細書中に記載のものなどの内科的疾患に対する治療的処置及び予防的処置において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体及びＴＮＦ阻害剤を使用し得る。ある実施形態において、医薬における使用は、抗ＯＸ４０Ｌ抗体とＥＮＢＲＥＬＴＭとの組合せを投与することを含む併用療法により、本明細書中に記載の内科的疾患のいずれかの治療を含み得る。ある実施形態において、本抗ＯＸ４０Ｌ抗体及びＴＮＦ阻害剤（ＥＮＢＲＥＬＴＭ）は、化合物、組成物又は併用療法の形態であり得る。１又は複数のその他の成分と組み合わせて化合物を使用する場合、同時に、個別に又は連続的に（例えば、薬剤形式で）化合物及び１又は複数のその他の成分を投与し得る。
【０１９４】
抗ＯＸ４０Ｌ抗体と使用し得る典型的ＴＮＦアンタゴニストには、これらに限定されないが、ＴＮＦアンチセンスオリゴヌクレオチドのペプチド断片又はＴＮＦαを阻害するリボザイム、産生、ＴＮＦαに向けられる抗体（つまり、ＲＥＭＩＣＡＤＥ）及び、ＴＮＦαに対する受容体の全てもしくは一部を含有する組み換えタンパク質又はそれらの改変変異体（これらに限定されないが、遺伝的改変タンパク質、多量体形態及び徐放製剤が含まれる。）が含まれる。典型的なＴＮＦα阻害剤は、米国特許第５，６４１，７５１号及び同第５，５１９，０００号で開示されており、Ｄ−アミノ酸含有ペプチドが、米国特許第５，７５３，６２８号に記載されている。
【０１９５】
併用療法において使用し得るＴＮＦ阻害剤である典型的な化合物には、これらに限定されないが、サリドマイドもしくはサリドマイド類似体、ペントキシフィリン又はマトリクスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）阻害剤及びその他の小分子など、小分子が含まれる。典型的なＭＭＰ阻害剤には、例えば、米国特許第５，８８３，１３１号；同第５，８６３，９４９号；及び同第５，８６１，５１０号に記載のもの、ならびに、米国特許第５，８７２，１４６号に記載のメルカプトアルキルペプチジル化合物が含まれる。ＴＮＦα産生を低下させることができるその他の小分子には、例えば、米国特許第５，５０８，３００号；同第５，５９６，０１３号；及び同第５，５６３，１４３号に記載の分子が含まれ、いずれも、可溶性ＴＮＦＲ又は、ＴＮＦαに対する抗体などのＴＮＦα阻害剤と組み合わせて投与することができる。本明細書中に記載のＴＮＦα介在疾患を治療するために有用なさらなる典型的な小分子には、米国特許第５，７４７，５１４号及び同第５，６９１，３８２号に記載のＭＭＰ阻害剤ならびに、米国特許第５，８２１，２６２号に記載のヒドロキサミン酸誘導体が含まれる。本明細書中に記載の疾患はまた、置換オキシム誘導体（ＷＯ９６／００２１５）、キノリンスルホンアミド（米国特許第５，８３４，４８５号）、アリールフラン誘導体（ＷＯ９９／１８０９５）及びヘテロ二環式誘導体（ＷＯ９６／０１８２５；ＧＢ２２９１４２２Ａ）などの、ホスホジエステラーゼＩＶ及びＴＮＦα産生を阻害する小分子を用いても治療し得る。ある実施形態において、ＴＮＦα及びＩＦＮγを抑制するチアゾール誘導体（ＷＯ９９／１５５２４）ならびにＴＮＦα及びその他の炎症性サイトカインを抑制するキサンチン誘導体（例えば、米国特許第５，１１８，５００号；同第５，０９６，９０６号；及び同第５，１９６，４３０号を参照のこと。）もまた、本明細書中に記載の疾患の治療に有用であり得る。本明細書中に記載の状態を治療するためのさらなる典型的な小分子には、米国特許第５，５４７，９７９号で開示されるものが含まれる。
【０１９６】
ある実施形態において、併用療法で疾患を治療するのに適切なアンチセンスオリゴヌクレオチドには、例えば、糖尿病、関節リウマチ、接触過敏症、クローン病、多発性硬化症、膵炎、肝炎及び心臓移植の動物モデルにおいて試験するための候補としてこのようなオリゴヌクレオチドの使用を提案している、米国特許第６，０８０，５８０号に記載の抗ＴＮＦαオリゴヌクレオチドが含まれる。
【０１９７】
ある実施形態において、併用療法において、ＴＮＦαアンタゴニストとして可溶性ＴＮＦＲを利用する。ＴＮＦＲの可溶型には、単量体、融合タンパク質（「キメラタンパク質」とも呼ばれる。）、二量体、三量体又はさらに高度の多量体が含まれ得る。ある実施形態において、可溶型ＴＮＦＲ誘導体は、７５ｋＤａ  ＴＮＦＲ又は５５ｋＤａ  ＴＮＦＲを模倣し、患者の体内でＴＮＦαに結合する。ある実施形態において、これらの可溶型ＴＮＦＲ模倣体は、ＴＮＦＲ  ｐ５５もしくはｐ７５又はそれらの断片由来であり得る。
【０１９８】
ある実施形態において、本明細書中に記載の様々な内科的疾患を治療するための可溶型化合物を得るために、例えば、ＷＯ９９／０４００１に記載のＴＮＦＲなど、ｐ５５及びｐ７５以外のＴＮＦＲを使用し得る。ＴＮＦＲ模倣物を構築するために使用する典型的な可溶型ＴＮＦＲ分子には、これらに限定されないが、少なくとも２０アミノ酸を有し、ネイティブＴＮＦＲの膜貫通領域を欠き、ＴＮＦαに結合できる、ネイティブＴＮＦＲの、類似体又は断片が含まれる。
【０１９９】
ある実施形態において、ＴＮＦＲ由来のアンタゴニストは、細胞表面の受容体とともにＴＮＦに対して競合し、したがって、ＴＮＦαの細胞との結合を阻害し、それによって、その生物学的活性の発現を妨げる。ＥＬＩＳＡ又は何らかの他の従来のアッセイを用いて、可溶型ＴＮＦＲのＴＮＦα又はＬＴαへの結合をアッセイすることができる。ある実施形態において、多くの疾患の治療に対する医薬品の製造において、可溶型ＴＮＦα受容体を使用する。
【０２００】
ある実施形態において、ＩＬ−４阻害剤の治療的有効量とともに、及び場合によっては、ＴＮＦα阻害剤、例えばＥＮＢＲＥＬＴＭとともに、上述の併用療法のいずれかにおいて、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を治療的有効量で患者に投与し得る。
【０２０１】
ある実施形態に従い用い得るＩＬ−４アンタゴニストには、これらに限定されないが、ＩＬ−４受容体（ＩＬ−４Ｒ）及びその他のＩＬ−４−結合分子、ＩＬ−４突然変異タンパク質及び、ＩＬ−４又はＩＬ−４受容体に特異的に結合し、それによってシグナル伝達をブロックする抗体ならびにアンチセンスオリゴヌクレオチド及びＩＬ−４もしくはＩＬ−４Ｒを標的とするリボザイムが含まれる。標準的手法を用いて、ＩＬ−４又はＩＬ−４受容体に特異的な抗体を調製し得る。ある実施形態において、本明細書中に記載のような用途に適切なＩＬ−４受容体は、ＩＬ−４結合能を保持するヒトＩＬ−４Ｒの可溶型断片である。ある実施形態において、このような断片は、ＩＬ−４結合可能であり、ＩＬ−４Ｒ細胞外領域の全て又は一部を保持する。
【０２０２】
併用療法において有用であり得る典型的なＩＬ−４アンタゴニストには、内因性ＩＬ−４又はＩＬ−４Ｒの合成を選択的にブロックする分子が含まれる。典型的なＩＬ−４受容体は、米国特許第５，５９９，９０５号；Ｉｄｚｅｒｄａら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７１：８６１−８７３、１９９０年３月（ヒトＩＬ−４Ｒ）；及びＭｏｓｌｅｙら、Ｃｅｌｌ  ５９：３３５−３４８，１９８９（マウスＩＬ−４Ｒ）で述べられている。これらの３つの参考文献に記載のタンパク質は、時に、科学文献においてＩＬ−４Ｒαと呼ばれることがある。
【０２０３】
ある実施形態において、治療すべき疾患及び所望する治療レベルの観点において、２、３以上の薬剤を投与し得る。ある実施形態において、同じ処方物に含めることにより、このような薬剤を一緒に提供し得る。ある実施形態において、同じ処方物に含めることにより、このような薬剤及び抗体を一緒に提供し得る。ある実施形態において、治療キットに含めることにより、このような薬剤を一緒に提供し得る。ある実施形態において、このような薬剤を個別に提供し得る。ある実施形態において、遺伝子治療により投与する場合、タンパク物質及び／又は抗体をコードする遺伝子を同じベクターに含有させ得る。ある実施形態において、タンパク質剤及び／又は抗体をコードする遺伝子を同じプロモーター領域の制御下に置き得る。ある実施形態において、タンパク物質及び／又は抗体をコードする遺伝子を個別のベクターに置き得る。
【０２０４】
ある実施形態において、本発明は、医薬的に許容される、希釈剤、担体、可溶化剤、乳化剤、保存料及び／又はアジュバントと一緒に、抗体の治療的有効量を含有する医薬組成物を提供する。
【０２０５】
ある実施形態において、本発明は、医薬的に許容される、希釈剤、担体、可溶化剤、乳化剤、保存料及び／又はアジュバントと一緒に、抗体の治療的有効量及び少なくとも１個のさらなる治療薬の治療的有効量を含有する医薬組成物を提供する。
【０２０６】
ある実施形態において、許容可能な処方物質は、用いる投与量及び濃度の点で、服用者に対して非毒性であることが好ましい。
【０２０７】
ある実施形態において、医薬組成物は、例えば、ｐＨ、浸透圧、粘性、透明度、色、等張性、臭気、無菌性、安定性、溶解速度又は放出速度、組成物の吸収又は浸透性を変更、維持又は保存するための処方物質を含有し得る。ある実施形態において、適切な処方物質には、これらに限定されないが、アミノ酸（グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン又はリシンなど）；抗菌剤；抗酸化剤（アスコルビン酸、亜硫酸ナトリウム又は亜硫酸水素ナトリウムなど）；緩衝剤（ホウ酸、重炭酸、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、クエン酸、リン酸又は他の有機酸など）；容積補充剤（マンニトール又はグリシンなど）；キレート剤（エチレンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ）など）；錯化剤（カフェイン、ポリビニルピロリドン、β−シクロデキストリン又はヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンなど）；充填剤；単糖類；二糖類；及びその他の炭水化物（グルコース、マンノース又はデキストリンなど）；タンパク質（血清アルブミン、ゼラチン又は免疫グロブリンなど）；着色剤、香味剤及び希釈剤；乳化剤；親水性ポリマー（ポリビニルピロリドン）；低分子量ポリペプチド；塩形成対イオン（ナトリウムなど）；保存料（塩化ベンズアルコニウム、安息香酸、サリチル酸、チメロサール、フェンチルアルコール、メチルパラベン、プロピルパラベン、クロルヘキシジン、ソルビン酸又は過酸化水素など）；溶剤（グリセリン、プロピレングリコール又はポリエチレングリコールなど）；糖アルコール（マンニトール又はソルビトールなど）；懸濁化剤；界面活性剤又は湿潤剤（プルロニック、ＰＥＧ、ソルビタンエステル、ポリソルベート（ポリソルベート２０、ポリソルベート８０など）、トライトン、トロメタミン、レシチン、コレステロール、チロキサポールなど）；安定促進剤（スクロース又はソルビトールなど）；等張化促進剤（ハロゲン化アルキル金属等、好ましくは、塩化ナトリウム又は塩化カリウム、マンニトールソルビトール）；送達ビヒクル；希釈剤；賦形剤及び／又は医薬アジュバント（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８版，Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，編、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ（１９９０））が含まれる。
【０２０８】
ある実施形態において、抗体及び／又はさらなる治療用分子を、当技術分野で公知の半減期延長ビヒクルと連結させる。このようなビヒクルには、これらに限定されないが、Ｆｃドメイン、ポリエチレングリコール及びデキストランが含まれる。このようなビヒクルは、例えば、米国出願番号第０９／４２８，０８２号及びＰＣＴ出願ＷＯ９９／２５０４４に記載されている。
【０２０９】
ある実施形態において、例えば、意図する投与経路、送達形式及び所望する用量に依存して、最適の医薬組成物が当業者により決定されるであろう。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，上述、を参照のこと。ある実施形態において、このような組成物は、本抗体の、物理的状態、安定性、インビボ放出速度及びインビボのクリアランス速度に影響を与え得る。
【０２１０】
ある実施形態において、医薬組成物中の主要なビヒクル又は担体は、事実上、水性又は非水性の何れかであり得る。例えば、ある実施形態において、適切なビヒクル又は担体は、注射用の水、生理食塩水溶液又は人工脳脊髄液であり得、非経口投与用組成物に一般に使用される他の物質が追加されることもある。ある実施形態において、さらなる典型的なビヒクルとして、中性の緩衝食塩水又は血清アルブミンを混合した食塩水が挙げられる。ある実施形態において、医薬組成物には、ｐＨが約７．０から８．５のトリス緩衝液又はｐＨが約４．０から５．５の酢酸緩衝液が含有されるが、これらには、さらにソルビトール又は適切なその代替物が含まれ得る。ある実施形態において、医薬組成物は、ｐＨが約４．０から５．５の酢酸緩衝液、ポリオール（ポリアルコール）及び場合によっては界面活性剤を含有する、水性又は液体処方物であり、本組成物は、例えば塩化ナトリウムなどの塩を含有せず、本組成物は患者に対して等張である。典型的なポリオールには、これらに限定されないが、スクロース、グルコース、ソルビトール及びマンニトールが含まれる。典型的な界面活性剤には、これに限定されないが、ポリソルベートが含まれる。ある実施形態において、医薬組成物は、約ｐＨ５．０の酢酸緩衝液、ソルビトール及びポリソルベートを含有する、水性又は液体処方物であり、本組成物は、例えば塩化ナトリウムなどの塩を含有せず、本組成物は患者に対して等張である。ある典型的な組成物は、例えば、米国特許第６，１７１，５８６号で見出すことができる。さらなる医薬担体には、これらに限定されないが、油（石油、動物油、植物油、ピーナツ油、大豆油、鉱物油、ゴマ油などを含む。）が含まれる。水性デキストロース及びグリセロール溶液もまた、液体担体として、特に注射用溶液のために用いることができる。ある実施形態において、凍結乾燥ケーキ又は水溶液の形態で、所望する精製度の選択した組成物を任意の処方剤（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，上述）と混合することにより、少なくとも１個のさらなる治療薬あり又は無しで抗体を含有する組成物を保存用に調製し得る。さらに、ある実施形態において、希釈剤として適切な賦形剤溶液（例えばスクロース）を用いて凍結乾燥物として、少なくとも１個のさらなる治療薬あり又は無しで抗体を含有する組成物を処方し得る。
【０２１１】
ある実施形態において、生理学的に許容可能な担体、賦形剤又は希釈剤と組み合わせて、精製組み換えタンパク質を含有する生理学的に許容可能な組成物の形態で、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与する。ある実施形態において、このような担体は、用いる投与量及び濃度において、受容者に対して非毒性である。ある実施形態において、このような組成物の調製には、緩衝剤、アスコルビン酸などの抗酸化剤、低分子量ポリペプチド（１０アミノ酸より少ないものなど）、タンパク質、アミノ酸、グルコース、スクロースもしくはデキストランなどの糖質、ＥＤＴＡなどのキレート剤、グルタチオン及び／又はその他の安定化剤及び賦形剤と抗ＯＸ４０Ｌ抗体を混合することが含まれ得る。ある実施形態において、標準的な投薬試験において適切な投与量を決定するが、この投与量は、選択した投与経路により変動し得る。ある実施形態において、適切な工業規格に従い、これらに限定されないがベンジルアルコールなどの保存料も添加し得る。ある実施形態において、治療を行う疾患の性質及び重症度、所望する反応、患者の年齢及び状態などの要因に基づいて、投与量及び投与頻度を決定し得る。
【０２１２】
ある実施形態において、非経口送達のために、医薬組成物を選択することができる。このような医薬的に許容される組成物の調製は、当技術分野の技術の範囲内である。
【０２１３】
ある実施形態において、処方成分は、投与部位に対して許容できる濃度で存在する。ある実施形態において、組成物を生理的ｐＨ、又はそれよりわずかに低いｐＨに維持するために緩衝液を使用するが、その一般的なｐＨ範囲は、約５から約８である。
【０２１４】
ある実施形態において、非経口投与を考慮する場合、治療用組成物は、発熱性物質不含で、医薬的に許容されるビヒクル中に、さらなる治療薬あり又は無しで、所望する抗体を含有する非経口的に許容可能な水溶液の形態であり得る。ある実施形態において、非経口注射用のビヒクルは、適切に保存された滅菌、等張溶液として、少なくとも１個のさらなる治療薬あり又は無しで抗体が処方される、滅菌蒸留水である。ある実施形態において、本製剤には、蓄積注射を介して送達され得る生成物の制御放出又は持続放出を可能にし得る、注射用ミクロスフィア、生物浸食可能な（ｂｉｏ−ｅｒｏｄｉｂｌｅ）粒子、高分子化合物（ポリ乳酸又はポリグリコール酸など）、ビーズ又はリポソームなどの物質を用いた、所望する分子の処方が含まれ得る。ある実施形態において、ヒアルロン酸も使用し得るが、これは、循環系における持続時間を向上させる効果を持ち得る。ある実施形態において、所望する分子を導入するために、埋め込み可能な薬物送達装置を使用し得る。
【０２１５】
ある実施形態において、吸入用に医薬組成物を処方し得る。ある実施形態において、吸入用のドライパウダーとして、少なくとも１個のさらなる治療薬あり又は無しで抗体を処方し得る。ある実施形態において、エアロゾル送達用に、噴射剤とともに、少なくとも１個のさらなる治療薬あり又は無しで抗体を含有する吸入溶液を処方し得る。ある実施形態において、溶液を霧状にし得る。肺への投与については、ＰＣＴ出願ＰＣＴ／ＵＳ９４／００１８７５（化学的修飾を行ったタンパク質の肺への送達について述べている。）でさらに述べられている。
【０２１６】
ある実施形態において、処方物を経口投与し得ると考えられる。ある実施形態において、錠剤及びカプセルなどの固体製剤の調製に通例使用される担体あり又は無しで、この様式で投与する抗体を、少なくとも１個のさらなる治療薬あり又は無しで処方し得る。ある実施形態において、カプセルは、生体内利用を最大にし、全身循環前の分解（ｐｒｅ−ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ）を最低限に抑える場合、胃腸管で処方物の有効成分を放出するように設計され得る。ある実施形態において、抗体及び／又は何らかのさらなる治療薬の吸収を促進するために、少なくとも１つのさらなる薬剤を含有させることができる。ある実施形態において、希釈剤、香味剤、低融点ワックス、植物油、潤滑剤、懸濁化剤、錠剤崩壊剤及び結合剤も用い得る。
【０２１７】
ある実施形態において、医薬組成物は、少なくとも１個のさらなる治療薬あり又は無しで、錠剤の製造に適した非毒性賦形剤と混合して、抗体の有効量を含み得る。ある実施形態において、錠剤を滅菌水又は別の適切なビヒクルに溶解させることにより、最小投薬単位型で溶液を調製し得る。ある実施形態において、適切な賦形剤には、これらに限定されないが、不活性希釈剤（炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム又は重炭酸ナトリウム、ラクトース又はリン酸カルシウムなど）；又は結合剤（デンプン、ゼラチン又はアカシアなど）；又は潤滑剤（ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルクなど）が含まれる。
【０２１８】
持続又は調節送達処方にて、少なくとも１個のさらなる治療薬あり又は無しで抗体を含有する処方物を含む、さらなる医薬組成物が当業者にとって明らかであろう。ある実施形態において、リポソーム担体、生体浸食可能な（ｂｉｏ−ｅｒｏｄｉｂｌｅ）微小粒子又は多孔性ビーズ及び蓄積注射など、様々な他の持続又は調節送達手段を処方するための技術も当業者にとって公知である。例えば、ＰＣＴ出願ＰＣＴ／ＵＳ９３／００８２９（医薬組成物送達のための、多孔性高分子微小粒子の制御放出が述べられている。）を参照のこと。ある実施形態において、徐放製剤には、例えばフィルム又はマイクロカプセルなどの、成型品の形の半透性ポリマーマトリクスが含まれ得る。徐放マトリクスには、ポリエステル、ヒドロゲル、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号及び欧州特許ＥＰ第０５８，４８１号）、Ｌ−グルタミン酸とγエチル−Ｌ−グルタミン酸との共重合体（Ｓｉｄｍａｎら、Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ，２２：５４７−５５６（１９８３））、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）（Ｌａｎｇｅｒら、Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．，１５：１６７−２７７（１９８１）及びＬａｎｇｅｒ，Ｃｈｅｍ．Ｔｅｃｈ．，１２：９８−１０５（１９８２））、エチレン酢酸ビニル（Ｌａｎｇｅｒら、前出）又はポリ−Ｄ−３−ヒドロキシ酪酸（ＥＰ１３３，９８８）が含まれ得る。ある実施形態において、徐放組成物には、リポソームも含まれ得るが、これは、当技術分野で公知のいくつかの方法のうちの何れかで調製することができる。例えば、Ｅｐｐｓｔｅｉｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８２：３６８８−３６９２（１９８５）；ＥＰ０３６，６７６；ＥＰ０８８，０４６及びＥＰ１４３，９４９を参照のこと。
【０２１９】
ある実施形態において、インビボ投与用に使用する医薬組成物は、滅菌状態である。ある実施形態において、濾過滅菌膜を介して滅菌を行い得る。ある実施形態において、組成物が凍結乾燥されている場合、凍結乾燥及び再構成の前又は後の何れかでこの方法を用いた滅菌を行い得る。ある実施形態において、凍結乾燥形態又は溶液状態で非経口投与用組成物を保存し得る。ある実施形態において、非経口組成物は一般に、滅菌アクセスポートを備える容器、例えば静脈注射用溶液バッグ又は皮下注射針を通すことができるストッパーを備えるバイアルに入れられている。
【０２２０】
ある実施形態において、医薬組成物を処方した後、溶液、懸濁液、ジェル、エマルジョン、固体又は乾燥もしくは凍結乾燥粉末として滅菌バイアルにそれを保存し得る。ある実施形態において、すぐに使用できる形又は投与前に再構成する形（例えば凍結乾燥）の何れかで、このような処方物を保存し得る。
【０２２１】
ある実施形態において、本発明は、単回投与の投与単位を調製するためのキットに関する。ある実施形態において、本キットは、それぞれ、乾燥タンパク質が入った第一の容器と水性系が入った第二の容器との両方を含有する。本発明のある実施形態において、１又は複数の区画がある、プレフィルドシリンジ（例えば、液体シリンジ及び溶解シリンジ（ｌｙｏｓｙｒｉｎｇｅ））を含有するキットが含まれる。
【０２２２】
ある実施形態において、治療のために用いられる、少なくとも１個のさらなる治療薬あり又は無しで抗体を含有する医薬組成物の有効量は、例えば、治療状況及び目的に依存する。従って、当業者は、ある実施形態に従い、用量を決定する要因の一部として、送達させる分子、少なくとも１個のさらなる治療薬あり又は無しで抗体を使用している徴候、投与経路及び患者の体格（体重、体表面又は器官サイズ）及び／又は状態（年齢及び全般的な健康状態）に一部依存して、治療に対する適切な用量レベルが変化することを理解するであろう。ある実施形態において、臨床家は、最大の治療効果を得るために、適切になるように用量を決定し、投与経路を変更し得る。ある実施形態において、一般的な用量は、約０．１μｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇ以上の範囲であり得るが、これは、上述の要因に依存する。ある実施形態において、用量は、０．１μｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇ；又は１μｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇ；又は５μｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇの範囲であり得る。
【０２２３】
ある実施形態において、投与頻度は、使用する処方における、抗体及び／又は何らかのさらなる治療薬の薬物動態パラメーターを考慮に入れる。ある実施形態において、臨床家は、投与量が所望する効果を達成する量になるまで、組成物を投与するであろう。従って、ある実施形態において、単回投与として、又は、長期にわたる２回以上の投与（所望する分子を同量含有していてもよいし、同量含有しなくてもよい。）として、又は、埋め込み装置もしくカテーテルを介した持続注入として、本組成物を投与し得る。当業者により、通常どおりに、適切な用量がさらに改善されるが、これは当業者により通常行われる職務の範囲内である。ある実施形態において、適切な用量反応データを使用することにより、適切な用量を確定し得る。
【０２２４】
ある実施形態において、医薬組成物の投与経路は、例えば、経口、静脈内注射、腹腔内注射、脳内投与（実質内投与）、脳室内注入、筋肉内注射、眼内注射、動脈内投与、門脈内投与又は病巣内投与により；又は徐放システムによる投与又は埋め込み装置による投与など、公知の方法に従う。ある実施形態において、蓄積注射による投与又は輸液による連続投与により、又は埋め込み装置により、組成物を投与し得る。
【０２２５】
上記で考察したように、様々な実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与するために、あらゆる効果的な投与経路を使用し得る。注射の場合、ある実施形態において、例えば、関節内、静脈内、筋肉内、病巣内、腹腔内、頭蓋内、吸入もしくはボーラス注入による皮下経路又は連続注入により、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与し得る。ある実施形態において、肺疾患は、鼻腔内及び吸入の送達方法を含み得る。典型的な投与方法には、これらに限定されないが、埋め込み物からの持続放出、エアロゾル吸入、点眼薬、ピル、シロップ、トローチ剤又はチューイングガムなどの経口用製剤及び、ローション、ジェル、スプレー、軟膏又はその他の適切な技術などの局所用製剤が含まれる。
【０２２６】
ある実施形態において、吸入による投与は、肺疾患に関与する疾病を治療する場合に有利である。ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を発現する培養細胞を移植することにより、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与し得る。ある実施形態において、抗ＯＸ４０Ｌ抗体をコードする、１又は複数のベクターをインビボ又はエクスビボでトランスフェクションすることにより、患者自身の細胞が産生するように誘導する。ある実施形態において、例えば、抗ＯＸ４０Ｌ抗体をコードする裸のＤＮＡ又は抗ＯＸ４０Ｌ抗体をコードする、リポソームに封じ込めたＤＮＡを注入することにより、又は、トランスフェクションのその他の方法により、患者の細胞へこのベクターを導入することができる。１又は複数のその他の生物学的活性化合物と組み合わせて抗ＯＸ４０Ｌ抗体を投与する場合、ある実施形態において、同じ経路又は異なる経路によりこれらを投与することができ、また、同時に、個別に、又は連続的に投与することができる。
【０２２７】
ある実施形態において、所望する分子を吸収又は封入した膜、スポンジ又は他の適切な物質の埋め込みを介して、局所的に本組成物を投与し得る。ある実施形態において、埋め込み装置を使用する場合、何れかの適切な組織又は器官にその装置を埋め込むことができ、拡散、徐放ボーラス又は連続投与を介して、その所望する分子の送達を行い得る。
【０２２８】
ある実施形態において、エクスビボ様式で、少なくとも１個のさらなる治療薬あり又は無しで抗体を含有する医薬組成物を使用することが好ましいものであり得る。このような例において、患者から取り出した、細胞、組織及び／又は器官を、少なくとも１個のさらなる治療薬あり又は無しで抗体を含有する医薬組成物に曝露し、その後、その細胞、組織及び／又は器官を患者の体に移植し返す。
【０２２９】
ある実施形態において、本ポリペプチドを発現させ分泌させるために、本明細書中に記載したような方法を用いて遺伝子工学的に操作したある細胞を移植することにより、抗体及び／又は何らかのさらなる治療薬を送達することができる。ある実施形態において、このような細胞は、動物又はヒト細胞であり得、自系、異種（ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓ又はｘｅｎｏｇｅｎｅｉｃ）であり得る。ある実施形態において、その細胞は不死化したものであり得る。ある実施形態において、免疫反応が起こる可能性を減少させるために、周囲の組織への浸潤を防ぐように細胞を封入し得る。ある実施形態において、封入物質は、通常、タンパク質産物は放出できるが、患者の免疫系による、又は周囲組織からの他の有害因子による崩壊を防ぐ、生体適合性の半透性高分子封入物又は膜である。
実施例
【実施例１】
【０２３０】
ある一定のヒトモノクローナル抗体の作製
ある一定のヒト抗ＯＸ４０Ｌモノクローナル抗体を、ヒト免疫グロブリン遺伝子を発現するトランスジェニックマウスにおいて作製する。マウスに総計８回の注射を行う。０日目に、ヒトＯＸ４０Ｌを発現する１０７個のＣＨＯ細胞を前記トランスジェニックマウスの足蹠へと注入する。３、７、１０及び１４日目に、このマウスに免疫促進注射を行ったが、各注射には、ヒトＯＸ４０Ｌを発現する１０７個のＣＨＯ細胞とＣｐＧポリヌクレオチド  １０μｇとが含有されていた。１７、２１及び２７日目に、このマウスにＯＸ４０Ｌ−フラッグ融合タンパク質を含有するさらなる免疫促進注射を行う。この免疫付与トランスジェニックマウスから全血を３１日目に採取し、標準的な技術を介してハイブリドーマを調製する。ＯＸ４０Ｌに結合する抗体に対するＦＭＡＴ及びＥＬＩＳＡにより、得られたハイブリドーマ上清をスクリーニングする。このＦＭＡＴアッセイにおいて、ＯＸ４０Ｌを発現する細胞でプレートをコーティングし、ハイブリドーマ上清を添加し、次いで、標準的ＥＬＩＳＡ技術を介した検出のために、二次抗ヒトＩｇ抗体を添加する。ネガティブコントロールは、ＯＸ４０Ｌを発現しない、トランスフェクションを行っていない対応する細胞である。プレートをＯＸ４０Ｌで直接コーティングすること以外は同様の方法でＥＬＩＳＡアッセイを実施する。
【０２３１】
得られた抗体をスクリーニングするために、Ｆｃ融合タンパク質をＢＩＡＣｏｒｅ法において使用する。ヒトＦｃ−ＯＸ４０Ｌは、ヒトＯＸ４０Ｌに融合させられたヒトＩｇＧのＦｃドメインからなる融合タンパク質であり、ｈＯＸ４０Ｒ−Ｆｃは、ヒトＯＸ４０受容体に融合させられたヒトＩｇＧＦｃドメインからなる。５％ＦＢＳ＋１ｘ非必須アミノ酸＋１ｘＰｅｎ  Ｓｔｒｅｐ  Ｇｌｕｔ＋１ｘピルビン酸ナトリウムを補充したＤＭＥＭ中で増殖させ、維持した、一過性トランスフェクションを行った、２９３Ｔ又はＣＯＳ  ＰＫＢ接着細胞ににより、これらの融合タンパク質が産生される。
【０２３２】
約４から５ｘ１０７個の２９３Ｔ細胞（つまり、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１１２６８）を８５０ｃｍ２のローラーボトル中に一晩播種する。次いで、ＦｕＧｅｎｅ６トランスフェクション試薬を使用して、翌日、既に播種した細胞に対してトランスフェクションを行う。最初に６７５μｌのＦｕＧｅｎｅ６トランスフェクション試薬を無血清ＤＭＥＭへ添加した後、Ｆｃ融合タンパク質をコードするプラスミドＤＮＡ  １１２．５μｇを添加することによって、ＤＮＡ−ＦｕＧｅｎｅ６混合物を約６．７５ｍｌの無血清ＤＭＥＭ中で調製する。この混合物を室温で３０分間インキュベーションする。次いで、混合物全てをローラーボトルに添加する。このローラーボトルに対して５％ＣＯ２気体混合物を供給し、堅く蓋をして、０．３５ｒｐｍで回転する回転ラック上にある３７℃のインキュベーター中に置く。このトランスフェクションを２４時間実施した後、１００ｍｌのＤＭＥＭ＋１ｘインスリン−トランスフェリン−セレニウム補充剤＋１ｘＰｅｎ  Ｓｔｒｅｐ  Ｇｌｕ＋１ｘ非必須アミノ酸＋１ｘピルビン酸ナトリウムで培地交換し、その結果、Ｆｃ融合タンパク質を構成的に発現する細胞を得る。５日目に１００ｍｌ回収物を２回、各ローラーボトルから得る。回収した無血清調整培地を一緒にして、４０００ｒｐｍで３０分間４℃において遠心分離した後、Ｆｃ融合タンパク質を精製する。
【０２３３】
約２ｘ１０７個のＣＯＳ細胞（つまり、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１６５０）を８５０ｃｍ２のローラーボトルの中に一晩播種する。次いで、ＦｕＧｅｎｅ６トランスフェクション剤を使用して、翌日、既に播種した細胞に対してトランスフェクションを行う。最初に、２４１．５μｌのＦｕＧｅｎｅ６トランスフェクション試薬を無血清ＤＭＥＭに添加した後、Ｆｃ融合タンパク質をコードするプラスミドＤＮＡ  １２０．７５μｇを添加することによって、ＤＮＡ−ＦｕＧｅｎｅ６混合物を約７．２５ｍｌの無血清ＤＭＥＭ中で調製する。この混合物を室温で３０分間インキュベーションする。次いで、混合物全てをローラーボトルに添加する。このローラーボトルに対して５％ＣＯ２気体混合物を供給し、堅く蓋を閉め、０．３５ｒｐｍで回転する回転ラック上にある３７℃のインキュベーター中に置く。このトランスフェクションを２４時間実施した後、１００ｍｌのＤＭＥＭ＋１ｘインスリン−トランスフェリン−セレニウム補充剤＋１ｘＰｅｎ  Ｓｔｒｅｐ  Ｇｌｕ＋１ｘ非必須アミノ酸＋１ｘピルビン酸ナトリウムで培地交換する。５日目に２５０ｍｌ回収物を２回、各ローラーボトルから得る。回収した無血清調整培地を一緒にして、４０００ｒｐｍで３０分間４℃において遠心分離した後、Ｆｃ融合タンパク質を精製する。
【０２３４】
ＢＩＡＣｏｒｅミクロチップ分析を用いて、抗体のヒトＯＸ４０Ｌ結合能について、前述の抗体をスクリーニングする。具体的には、ＣＭ５センサーチップ（ＢＩＡＣｏｒｅ；Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，  ＮＪ）と合わせてＢＩＡＣｏｒｅ２０００分析装置を使用する。ＨＢＳ−ＥＰ緩衝液（１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、０．１５Ｍ  ＮａＣｌ、３．４ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．００５％  Ｐ−２０、ｐＨ７．４）の連続流を使用し、製造者の説明書に従って、ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌ融合タンパク質をこのセンサーチップ表面に固定化する。０．２Ｍ  Ｎ−エチル−Ｎ’−（ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）及び０．０５Ｍ  Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）を含有する混合物  ６０μｌを注入することにより、このセンサーチップ表面上のカルボキシル基を活性化する。２，０００共鳴単位（ＲＵ）の中程度の表面密度を得るため、１０μｇ／ｍｌの濃度で１０ｍＭ酢酸塩、ｐＨ４．５（ＢＩＡＣｏｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，  ＮＪ）に希釈した組み換えｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌを注入することにより、特異的表面を得る。ある実施形態において、２５μｇ／ｍｌなどのｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌの他の濃度も使用できる。
【０２３５】
１Ｍエタノールアミン  ６０μｌを注入することにより、チップ表面上の過剰の反応基を不活性化する。ブランクの模擬連結基準表面も各センサーチップ上で調製する。模擬連結の場合は、活性化及び不活性化段階をタンパク質なしで実施する。
【０２３６】
モノクローナル抗体候補を試料緩衝液（ろ過して脱気した１ｘＰＢＳ＋０．００５％Ｐ−２０＋０．１ｍｇ／ｍｌ  ＢＳＡ（フラクションＶ、ＩｇＧ不含、Ｓｉｇｍａ））を２５ｎＭの濃度に希釈し、８０μｌ／分の流速で２分間、ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌ表面上に注入する。（ろ過して脱気した）試料緩衝液に対して、個別のｈＦｃ−ＯＸ４０Ｒ対照を５０ｎＭの濃度まで希釈し、８０μｌ／分の流速で２分間、ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌ表面上に注入する。全分析に対して、機器作動緩衝液は、１ｘＰＢＳ（塩化カルシウム不含、塩化マグネシウム不含、Ｇｉｂｃｏ，Ｉｎｃ．）＋（ろ過して脱気した）０．００５％Ｐ−２０であり、温度を２５℃に設定する。５分間の解離時間後、８ｍＭグリシン、ｐＨ３．０（ＢＩＡＣｏｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）、１Ｍ  ＮａＣｌを３０秒間注入することによって表面を再生する。結合シグナル強度並びに解離速度について定量的に結合曲線を比較する。陽性の結合シグナルを示す抗体をさらなる研究用に選択する。
前述のスクリーニング方法に従って何百もの陽性クローンを同定する。１０個の典型的なヒトモノクローナル抗体をさらなる研究用に選択する（Ａｂ  ＡからＡｂ  Ｊ）。表２は、これらの抗体のうちの８個についてのＥＣ５０値を与える。
【０２３７】
【表２】
2007530045.tif 000003
【０２３８】
これらの抗体のいくつかの重鎖可変領域におけるアミノ酸配列を、配列類似性について比較する。図１２に示されるように、これらの配列は、第一群においてＡｂ  Ａ及びＡｂ  Ｇを、第二群においてＡｂ  Ｅ及びＡｂ  Ｆを、第三群においてＡｂ  Ｂ、Ａｂ  Ｄ、Ａｂ  Ｈ及びＡｂ  Ｃを有する、３つの主要な群に収まる。Ａｂ  Ｅ及びＡｂ  Ｆに対するアミノ酸配列は同一である。同様に、これらの抗体のいくつかにおける軽鎖可変領域のアミノ酸配列も比較する。これらの配列も、第一群においてＡｂ  Ａ、Ａｂ  Ｅ及びＦ及びＡｂ  Ｉを、第二群においてＡｂ  Ｈ、Ａｂ  Ｂ、Ａｂ  Ｊ及びＡｂ  Ｄを、及び第三群においてＡｂ  Ｇを有する３つの群に分けられる。
【０２３９】
Ａｂ  ＡからＦの、重鎖及び軽鎖のｃＤＮＡヌクレオチド配列及びアミノ酸配列を図１から図１０で与えるが、各配列は、これらの図において示される配列番号１から２０として同定される。図１１は、配列番号２１及び２２にそれぞれ対応する、ＡｂＧにおける重鎖のｃＤＮＡヌクレオチド配列及びアミノ酸配列を提供する。以下の実施例で詳述するように、これらのモノクローナル抗体のうちある一部を、ＯＸ４０Ｌ結合活性、ＩＬ−２産生遮断能及びＴ細胞のＯＸ４０Ｌ刺激遮断能を検討する様々なアッセイにおいて試験する。
【実施例２】
【０２４０】
ヒトＯＸ４０Ｌ及びカニクイザルＯＸ４０Ｌに対する、ある一定の抗ＯＸ４０Ｌヒトモノクローナル抗体の相対的な結合親和性。
ある一定の抗ＯＸ４０Ｌ  ＭＡｂの相対的な結合親和性を、ヒトＯＸ４０Ｌ及びカニクイザルＯＸ４０Ｌへの結合について比較した。ビーズ  ２７０μｌ（Ｂｅａｄｌｙｔｅ  Ｍｕｌｔｉ−Ｂｉｏｔｉｎ  Ｂｅａｄ  Ｋｉｔ（１０ｐｌｅｘ））、２０Ｘ（２０００個のビーズ／μｌ）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｃａｔ＃４１−０１２）を、アビジン−ｈｕＩＬ−１ＲＦＬＡＧの２０ｎｇ（対照）、アビジン−ｈＯＸ４０Ｌ融合体  ２０ｎｇ又はアビジン−ｃＯＸ４０Ｌ融合体  ２０ｎｇと、１５ｍｌ遠心チューブ（Ｃｏｒｎｉｎｇ、Ｃａｔ＃４３００５２）の中で混合することにより、３種類の個々のビーズセットを負荷した。タンパク質濃度を標準化するため、ＰＢＳＴ／１％ＢＳＡ（０．１％  Ｔｗｅｅｎ−２０／１％ＢＳＡを含有するＰＢＳ）を用いて容積を７．２ｍｌになるように調整した。暗所で少なくとも１時間室温にて混合しながら負荷反応液をインキュベーションした。
【０２４１】
このインキュベーションの間、各抗ＯＸ４０Ｌ抗体の２００ｎｍストックを調製した。８個の各抗体ストックの５倍希釈液を２つずつ調製し、結果として２００ｎｍから０．０００５１２ｎｍの範囲の抗体調製物を得た。希釈は全てＰＢＳＴ／１％ＢＳＡ中で行った。
【０２４２】
各ビーズ負荷反応液を個別の５０ｍｌフィルタートップチューブ（０．４５μＭ、Ｃｏｒｎｉｎｇ、カタログ番号４３０３２０）へ移し、チューブの膜をＰＢＳＴ／１％ＢＳＡで予め湿らせ、試料を穏やかに吸引した。ビーズを１５ｍｌのＰＢＳＴ（ＰＢＳ中の０．１％  Ｔｗｅｅｎ−２０）で３回洗浄した。最後の洗浄後、チューブフィルターを完全に洗浄することによって、ＰＢＳＴ  ９ｍｌ（１８０ウェルｘ５０μｌ／ウェル）に各ビーズセットを再懸濁した。各ビーズセットを個別に混合し、２個のフィルターボトムプレート（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、カタログ番号ＭＡＢＶＮ１２１０）においてウェルを分けるために、各混合ビーズセット  ２００μｌ（各ビーズセット／ウェル  ５０μｌｘ４ビーズセット）を分注した。Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ真空システムを使用してプレートを真空にした後、５０μｌＰＢＳＴ／ウェルでビーズを再懸濁した。
【０２４３】
各抗体に対して各希釈シリーズを用いて各ビーズを試験できるように、各２ｘ抗体希釈  ５０μｌを適切なウェルへ添加した。得られた抗ＯＸ４０Ｌ抗体の最高終濃度は１００ｎＭであり、一方、最低終濃度は０．０００２５６ｎｍであった。プレートを光から保護し混合しながら１．５時間インキュベーションした。２５０μｌのＰＢＳＴ／ウェルでビーズを３回洗浄するために、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ真空システムを使用した。ＰＢＳＴ／１％ＢＳＡ中で希釈した２μｇ／ｍｌ  抗ｈｕＩｇＧ−ＰＥ（Ｒｏｃｋｌａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ）又は抗ヤギＰＥ（Ｒｏｃｋｌａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｃａｔ＃７０５−７０８−１２５）  １００μｌを各ウェルに添加した。抗ヤギＰＥをネガティブコントロール二次抗体として使用した。プレートを光から保護しながら混合し１時間インキュベートした後、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ真空システムを用い、２５０μｌ  ＰＢＳＴ／ウェルで３回洗浄した。ウェルあたりＰＢＳＴ  １００μｌでビーズを再懸濁した後、Ｌｕｍｉｎｅｘ装置で分析した。
【０２４４】
各試料について１００μｌのうち７５μｌを吸引するために、Ｌｕｍｉｎｅｘ装置を設定することにより試料を読み取った。ゲートを７１０９及び１８６２８に設定した。ビーズに付着したヒトＩＬ−１受容体（ＩＬ−１Ｒ）への結合及びビーズに付着したマウスＯＸ４０Ｌへの結合を、本アッセイに対するネガティブコントロール抗原として含めた。次に、得られたデータからＥＣ５０値を算出した。表２は、抗体のＥＣ５０値を列挙する。図１３は、抗体のうちの３個（ＡｂＣ、ＡｂＤ、及びＡｂＦ）についての結合の生データを与える。
【０２４５】
【表３】
2007530045.tif 000004
表３及び図１３で示されるように、これらの抗体はヒトＯＸ４０Ｌ（ｈＯＸ４０Ｌ）及びカニクイザルＯＸ４０Ｌ（ｃＯＸ４０Ｌ）に同程度のレベルで結合した。
【実施例３】
【０２４６】
ある抗ＯＸ４０Ｌ  ＭＡｂの結合平衡及びある抗ＯＸ４０Ｌ  ＭＡｂとＯＸ４０Ｒとの間の結合に対する競合。
以下の変更を施した、実施例１において前述したＢＩＡＣｏｒｅチップ上で、前記抗体のうち４個の結合平衡を評価した。ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌを８，０００ＲＵの高密度でセンサーチップに固定化した。一度抗ＯＸ４０Ｌ抗体と混合したｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌの終濃度が２０ｎＭから０．００５ｎＭの範囲となるように、ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌの２．５倍連続希釈物を試料緩衝液中で調製した。モノクローナル抗体の終濃度が０．２ｎＭとなるように、４００μｌ  総量で、モノクローナル抗ＯＸ４０Ｌ抗体の候補を各ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌ希釈物と混合した。試料を平衡に到達させるために、試料を室温で少なくとも５時間インキュベーションした。次に、固定したｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌ表面上に、３０分間、１０μｌ／分で試料を注入した。試料注入後、この試料を３分間解離させた後、８ｍＭグリシン、ｐＨ３．０、１Ｍ  ＮａＣｌを３０秒間注入することにより表面を再生した。得られた結合シグナルは、リガンドのある濃度に対して平衡である溶液中での遊離抗体と比例した。結合シグナル対リガンド濃度をプロットし、科学グラフ作製ソフトウェアプログラムであるＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｚｍを使用して、ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌの様々な濃度の存在下において、ある濃度で各抗体についてのＥＣ５０値を算出した。
図１４は、結合シグナルデータを示す代表的なグラフを与え、以下の表４は、得られたＥＣ５０値を与える。
【０２４７】
【表４】
2007530045.tif 000005
【０２４８】
ＢＩＡＣｏｒｅチップ上に固定化するか又はＨＵＶＥＣ細胞で発現させたＯＸ４０Ｌに対する結合親和性について、抗ＯＸ４０Ｌ抗体のいくつかをＯＸ４０Ｒと比較した。特に、以下の修正を行って実施例１で上述するようにして、ＢＩＡＣｏｒｅチップを調製した。ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌを８，０００ＲＵの高密度でセンサーチップに固定化した。２種類の異なる終濃度、０．２ｎＭ及び０．６ｎＭのモノクローナル抗体候補物、又は０．２ｎＭ及び０．６ｎＭの終濃度のｈＯＸ４０Ｒを、上述のように、ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌの２０ｎＭから０．００５ｎＭの様々な終濃度とともにインキュベーションした。試料を平衡に到達させるために、室温で少なくとも５時間試料をインキュベーションした。次に、固定したｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌ表面上に、３０分間、１０μｌ／分で試料を注入した。試料注入後、試料を３分間解離させた後、８ｍＭグリシン、ｐＨ３．０、１Ｍ  ＮａＣｌを３０秒間注入することにより表面を再生させた。ＲＵにおいて測定して得た結合シグナルは、リガンドのある濃度に対して平衡である溶液中での遊離抗体と比例した。二重曲線片側均一結合モデル（ＫｉｎＥｘＡソフトウェア  ｖ．２．３、Ｓａｐｉｄｙｎｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｉｎｃ．，Ｂｏｉｓｅ  ＩＤ）を使用して、競合曲線の非直線回帰分析から、解離平衡定数（ＫＤ）を得た。
【０２４９】
【表５】
2007530045.tif 000006
表５に示されるように、抗ＯＸ４０Ｌ抗体は前記ＯＸ４０Ｒと比較して優れた結合親和性を有した。
【０２５０】
ヒト胚性静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ；Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ  ＣＣ−２５７１、ロット番号０Ｆ０６１１）を用いて実験を行った。ＯＸ４０Ｌを天然に発現するＨＵＶＥＣ細胞をコンフルエントになるまで増殖させ、使用前に４回から６回継代を行った。トリプシンを用いて組織培養フラスコから細胞を回収し、４００から５００ｘｇで細胞を遠心分離し、最初に培地を廃棄し、２回目にＰＢＳを廃棄することにより、細胞をＰＢＳで２回洗浄した。ＦＡＣＳ緩衝液（０．１％ＢＳＡ、ＰＢＳ中０．０１％アジ化ナトリウム）  １００μｌ中で３００，０００個の細胞を懸濁することにより試料を調製した。次に、２０μｇ／ｍｌ（終濃度）のヒトＩｇを用いて、室温において５分間細胞を前処理した。次に、抗ＯＸ４０Ｌ抗体検査試薬を１５、３、０．６、０．１２、０．０２４又は０．００４８μｇ／ｍｌの終濃度で細胞へ添加した。これらの抗体とともに１０分間氷上で細胞をインキュベーションした。次に、３μｇ／ｍｌの終濃度でビオチン化ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｒを全試料に添加した。ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｒ単独をポジティブコントロールとして使用し、一方、ｈＦｃ単独、ＨＵＶＥＣ単独及びＰＥ−ＳＡ（ＰＥ−ストレプトアビジン）単独をネガティブコントロールとして使用した。これらの試料をさらに２０分間インキュベーションし、細胞を洗浄し、（１：１００の）ＰＥ−ＳＡを含有するＦＡＣＳ緩衝液中で２０分間氷上にて再懸濁した。氷冷ＰＢＳ中で細胞を再び洗浄し、氷冷ＰＢＳ中  １％ホルムアルデヒド  ０．５ｍｌ中で再懸濁し、フローサイトメーターによりすぐに読み取った。
【０２５１】
図１５は、ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｒタンパク質と比較した、各試験抗ＯＸ４０Ｌ抗体からの結果を示す。
【実施例４】
【０２５２】
ヒトＴ細胞によるＩＬ−２産生阻害の評価。
ヒトＴ細胞によるＩＬ−２産生を遮断する能力について、全血アッセイを使用して、ある抗ＯＸ４０Ｌ  ＭＡｂを評価した。特に、ＯＸ４０Ｌ共刺激がＴ細胞によるＩＬ−２産生上昇を導くという知識に基づいてヒト全血アッセイを展開した。Ｉｓｃｏｖｅｓ培地（Ｇｉｂｃｏ）の等量を添加することによってヒト全血を５０％に希釈した。ＰＢＳ中で希釈した抗ＣＤ３（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍ）の１０μｇ／ｍｌ溶液を用いて、この抗ＣＤ３溶液  １００μｌを各ウェルへ添加し、４℃で一晩インキュベートすることによってプレート（９６ウェル；Ｆａｌｃｏｎ）をコーティングした。コーティングしたプレートを、ＰＢＳ  ２００μｌを用いて洗浄した。希釈した全血を各ウェルへ添加し、Ｉｓｃｏｖｅｓ培地（Ｇｉｂｃｏ）中で希釈したｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌ（可溶性）を１．５ｎＭの終濃度になるよう添加した。この血液を３７℃で４８時間培養し、細胞を４００ｘｇで遠心分離することによってペレット化した。上清を回収し、製造者の説明書に従ってＲ＆ＤシステムＩＬ−２ＥＬＩＳＡキットを使用してＩＬ−２タンパク質についてＥＬＩＳＡによりアッセイした。
【０２５３】
共刺激反応物に濃度を上昇させながら抗体を添加することにより抗体を試験し、ＩＬ−２産生に及ぼす効果を調べた（ＩＣ５０）。ＩＬ−２量を５０％低下させる抗体の濃度として、ＩＣ５０を算出した。使用したｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌレベルが強く再現可能なシグナル−ノイズ比を与えることが分かった。しかし、使用したｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌの量の理由から、抗体の有効性を１ｎＭ未満の有効性と区別することに本アッセイが制限されたが、それは、この量のリガンドを中和するための抗体の化学量論的量が必要だからである。本アッセイにより、あまり有力でない抗体が容易に識別された。Ｆｃ−ＯＸ４０Ｒをポジティブコントロールとして使用し、その一方、本アッセイのためにヒトＩｇＧをネガティブコントロールとして使用した。
表６に示されるように、抗ＯＸ４０Ｌ抗体は、全血におけるＩＬ−２産生を、ＯＸ４０Ｒよりも大きく阻害した。図１６は、ＩＬ−２産生阻害アッセイからのデータの代表的なグラフを与える。
【０２５４】
【表６】
2007530045.tif 000007
【０２５５】
ＩＬ−２産生を遮断するＡｂＣの能力を測定するために同様のアッセイを実施した。可溶性ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌの替わりにｈＯＸ４０Ｌを発現するＣＨＯ細胞を使用したこと以外は前述のようにして、この全血アッセイを実施した。親株ＣＨＯ細胞株をネガティブコントロールとして使用した。この改変アッセイの結果を図１７に示す。
【実施例５】
【０２５６】
カニクイザルＴ細胞によるＩＬ−２産生阻害の評価。
カニクイザルＴ細胞によるＩＬ−２の産生を遮断する能力についてＡｂＣを評価した。ＰＢＳ中で希釈した抗ＣＤ３（Ｒ＆Ｄシステム）の１μｇ／ｍｌ溶液を用いて、抗ＣＤ３溶液  １００μｌを各ウェルへ添加し、４℃で一晩インキュベーションすることによりプレート（９６ウェル；Ｆａｌｃｏｎ  Ｉｎｃ．）をコーティングした。ＰＢＳ  ２００μｌを使用して、コーティング済みプレートを洗浄した。次に、ＰＢＳ中で希釈したｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌ（可溶性）の２．５μｇ／ｍｌ（図１８）又は１．２５μｇ／ｍｌ（図１９）のいずれかの溶液を用いて、ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌ溶液  １００μｌを各ウェルへ添加し、３７℃で４時間インキュベーションすることによりこのプレートをコーティングした。Ｔ細胞を添加する前に、ＰＢＳ  ２００μｌを使用してプレートを再度洗浄した。
【０２５７】
４匹のカニクイザル血液ドナー由来のＴ細胞を、以下を除き製造者の説明書に従い、ネガティブ選別を使用してヒトＴ細胞を精製するためのＭｉｌｔｙｎｌ  Ｂｉｏｔｅｃキット（カタログ番号１３０−０９１−１５６）を使用することによって精製した。この試料を前記キットにおいて提供されるビオチン化抗体とともにインキュベーションした後、ストレプトアビジンでコーティングした（ビオチン化抗体に結合する）磁気ビーズ及び抗サルＣＤ２０磁気ビーズ（Ｍｙｌｔｙｎｌ  Ｂｉｏｔｅｃカタログ番号１３０−０９１−１０５）を試料に添加し、Ｔ細胞キットの説明書に従ってインキュベーションし、その後、最終的なＴ細胞精製のための磁気カラムに前記試料を載せた。Ｂ細胞を完全に除去するために、抗サルＣＤ２０磁気ビーズを使用した。
【０２５８】
カニクイザルＴ細胞をアッセイ培地（ＲＰＭＩ  １６４０、１０％ＦＢＳ、ＰＳＧ（ペニシリン、ストレプトマイシン及びグルチニン）、ＮＥＡＡ（非必須アミノ酸）、及びβ−メルカプトエタノール）中で再懸濁し、１００μｌ中の１００，０００個のＴ細胞を各ウェルに添加した。２．５μｇ／ｍｌから０．０１μｇ／ｍｌの範囲の終濃度にするために、ウェルあたり抗体溶液  １００μｌを添加することにより、Ａｂ  Ｃ又は対照ＩｇＧの様々な濃度について試験した。Ｔ細胞を３７℃、５％ＣＯ２で４８時間培養し、細胞を４００ｘｇで遠心分離することによってペレット化した。この上清  １００μｌ体積を回収し、製造者の説明書に従ってＢＤ  Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ  ＩＬ−２  ＥＬＩＳＡキット（Ｃａｔ＃５５１４９４）を使用してＩＬ−２タンパク質についてＥＬＩＳＡによりアッセイした。グラフ分析のために、ＥＬＩＳＡ  ＯＤ値をＰＯＣ（コントロールの％）値に変換した。
【０２５９】
図１８及び１９で示されるように、Ａｂ  Ｃは、共刺激カニクイザルＴ細胞によるＩＬ−２産生を阻害した。
【実施例６】
【０２６０】
ＯＸ４０Ｌ介在Ｔ細胞増殖の阻害の評価。
ＯＸ４０Ｌ及びＣＤ３が介在するＴ細胞共刺激を遮断する抗体の能力について、ある抗ＯＸ４０Ｌ抗体を試験した。抗ＣＤ３（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ＃５５５３３６）を用いて４℃で一晩、丸底９６ウェルプレートをコーティングした。個々のドナーからＴ細胞を新たに回収したので、各Ｔ細胞増殖に対して、最適な刺激を生じるために必要な抗ＣＤ３の至適濃度を実験的に決定することが必要であった。したがって、特定のＴ細胞調製物とともに使用する適切な濃度を決定するために、０．２５μｇ／ｍｌから４．０μｇ／ｍｌの範囲の抗ＣＤ３溶液を使用した。ＰＢＳ  ２００μｌを用いてプレートを洗浄した。次に、抗ＣＤ３コーティングプレートを３７℃で４時間、ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌの１１ｎｍ溶液でコーティングした。次に、前述のようにＰＢＳ  ２００μｌでプレートを洗浄した。
【０２６１】
Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ密度勾配（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）を用いて、白血球搬出法のパックから末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を単離した。製造者の説明書を用い、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ（ｃａｔ＃１３０−０５３−００１）のＰａｎＴ細胞分離キットを使用して、ＰＢＭＣからＴ細胞を単離した。単離したＴ細胞をＲＰＭＩプラス１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）中で１ｘ１０６個／ｍｌになるように希釈し、これらの希釈細胞  １００μｌを、前記抗ＣＤ３／ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌでコーティングしたプレートに添加した。試験した抗ＯＸ４０Ｌ抗体を６μｇ／ｍｌに個々に希釈し、次いで、１９ｎＭから０．０７８ｎＭの終濃度にわたる３倍連続希釈を行い、さらに希釈した。各抗体の希釈液  １００μｌを、個別のウェルに入ったＴ細胞  １００μｌに添加した。このアッセイでは、ネガティブコントロールとして抗ＯＸ４０Ｌ抗体の代わりにヒトＩｇＧを使用した（つまり、ブロッキングなし）。前記抗体の代わりに、ＯＸ４０Ｒ−Ｆｃをポジティブコントロールとして使用した（つまり、ブロッキングあり）。プレートを３７℃、５％ＣＯ２で４８時間インキュベーションした。次に、３Ｈ−チミジン（ＩＣＮ、カタログ番号２４０４２０５）  １μＣｉ／ウェルを添加した。プレートを３７℃、５％ＣＯ２で１６時間インキュベーションした。Ｔｏｍｔｅｃ回収装置を使用して細胞を回収した。Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ  Ｔｒｉｌｕｘ液体シンチレーションカウンタ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して、３Ｈ−チミジン取り込みを測定した。
【０２６２】
前述のように、ＩＣ５０の決定について、抗体を１９ｎＭから０．０７８ｎＭで、３倍希釈物中でトリプリケートで検査した。Ｔ細胞ドナーに依って、Ｔ細胞を刺激するために抗ＣＤ３の様々な量及びｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌ  １１ｎＭを使用した。（トリプリケートの）平均３Ｈ−チミジン取り込みを対照の％として表した。阻害曲線をプロットし（３Ｈ−チミジン取り込み（ＰＯＣ）対ｌｏｇ抗体濃度）、ＧｒａｐｈＰａｄ（ＰＲＩＳＭＴＭ）ソフトウェアを使用して非直線回帰（可変式の傾斜を有するシグモイド投与量反応）によりＩＣ５０値を決定した。全ての結果を平均±標準誤差バー平均（ＳＥＭ）として表した。
表７及び図２０は、前記Ｔ細胞増殖阻害アッセイの結果を示す。
【０２６３】
【表７】
2007530045.tif 000008
2007530045.tif 000009
【実施例７】
【０２６４】
ＣＨＯ細胞ＯＸ４０Ｌに対するある抗ＯＸ４０Ｌ抗体の結合の評価及びＣＨＯ細胞ＯＸ４０Ｌに対するあるＯＸ４０Ｒの結合の中和の評価。
ＯＸ４０Ｌの細胞表面発現ができるように、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）（つまり、ＡＴＣＣのＣＣＬ−６１）細胞をトランスフェクションする。ＰｖｕＩで線状化したＦｃ−ｃＯＸ４０Ｌプラスミドを用いてＣＨＯ細胞を安定的にトランスフェクションすることにより、これらの細胞を調製する。トランスフェクションを行う際に細胞が８０から９０％コンフルエントとなるように、ＣＨＯ細胞を１．５ｘ１０６個で播種する。トランスフェクション試薬、ＦｕＧｅｎｅＴＭ６（Ｒｏｃｈｅ、Ｃａｔ．Ｎｏ．１８１４４４３）を安定的トランスフェクションのために使用する。ＦｕＧｅｎｅＴＭ６  ２４μｌをＭＥＭ無血清培地  ８００μｌ中に希釈し、線状化したプラスミド  ８μｇを添加した後、室温で２０分間インキュベーションする。ＦｕＧｅｎｅＴＭ６／ＤＮＡ混合物を１００ｍｍプレート中のＣＨＯ細胞に添加した後、５％ＣＯ２、３７℃インキュベーターの中で４８時間インキュベーションする。ＣＨＯ細胞をＤＭＥＭ高濃度グルコース（Ｇｉｂｃｏ）、５％ＦＢＳ、１ｘｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ、グルタミン、１ｘ非必須アミノ酸、１ｘピルビン酸Ｎａ、及び１ｘＨＴ補助物質中で増殖させる。
【０２６５】
４８時間のインキュベーション後、ＨＴマイナス選別培地（ＤＭＥＭ高濃度グルコース（Ｇｉｂｃｏ）、５％透析済みＦＢＳ、１ｘｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ、グルタミン、１ｘ非必須アミノ酸、１ｘピルビン酸Ｎａ）で、１：１０に細胞を分割する。次に、５％ＣＯ２、３７℃のインキュベーター中で細胞を増殖させ、選別培地を１週間に２回交換する。選別２週間後にコロニーが出現し、それをクローニングディスクにより６穴プレートへと単離し、５％ＣＯ２中で３７℃で増殖させる。６ウェルプレート中で細胞がコンフルエントになった際に、ＦＡＣＳにより、ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｒを用いてｈｕＯＸ４０Ｌ発現を検出する。
【０２６６】
膜結合性ｃＯＸ４０Ｌへの結合について、抗ＯＸ４０Ｌ抗体をｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒ（ヒトＦｃ領域及びカニクイザルＯＸ４０Ｒ）と比較するために、ＣＨＯ細胞を発現するＣＯＸ４０Ｌを使用する。具体的には、ＲＰＭＩ培地中でコンフルエントになるよう、トランスフェクションしたＣＨＯ細胞を増殖させ、Ｖｅｒｓｅｎｅを使用して回収する。４００ｘｇで回転させて、ＦＡＣＳ緩衝液（ＰＢＳ緩衝液中の２％ウシ胎児血清（熱非働化）、０．１％アジ化ナトリウム）中で細胞を洗浄する。次に、ＣＨＯ細胞をＦＡＣＳ緩衝液中で再懸濁し、５ｘ１０５個の細胞を各試料チューブへ導入する。
【０２６７】
各染色試薬について４５、１５、５、１．７、０．６及び０．２μｇ／ｍｌの最終染色濃度にするために、試験する抗ＯＸ４０Ｌ抗体、ｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒ及びヒトＩｇＧ（ネガティブコントロール）染色試薬を、氷冷ＦＡＣＳ緩衝液中で個別に希釈する。染色試薬  １００μｌ中の、抗ＯＸ４０Ｌ抗体、ｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒ又はｈＩｇＧのうちの１つで細胞を染色する。次に、氷上で１時間細胞をインキュベーションした後、ＦＡＣＳ緩衝液中で３回洗浄する。ヤギ抗ヒトＩｇＧ  Ｆｃ−ＦＩＴＣを氷冷ＦＡＣＳ緩衝液中で１：１０００に希釈し、１００μｌを各試料中の洗浄済み細胞に添加する。細胞を氷上で３０分間インキュベートした後、３回洗浄する。最終洗浄後、染色した細胞を５００μｌの氷冷ＦＡＣＳ緩衝液中で再懸濁し、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）で分析するまで氷上で維持する。
【０２６８】
図２１ＡはＦＡＣＳ分析の結果を提供する。
【０２６９】
抗ＯＸ４０Ｌ抗体の同定したグループ由来の代表的な抗体であるＡｂ  Ｃに対しても、ＣＨＯ細胞で発現させたＯＸ４０Ｌに対するｃＯＸ４０Ｒ−Ｆｃの結合を中和する能力について試験を行う。トランスフェクションしたＣＨＯ細胞を前述のとおり調製し、上記で列挙した最終染色濃度でＡｂＣ又はｈＩｇＧ  １００μｌとともに前述の条件下でインキュベーションする。この細胞を３回洗浄した後、ビオチン化した（Ｐｉｅｒｃｅのビオチン化キット）（冷ＦＡＣＳ緩衝液中で希釈した５μｇ／ｍｌで）ｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒ  １００μｌとともに氷上で１時間、これらをインキュベートする。細胞を前述のように３回洗浄する。ストレプトアビジン−ＰＥを、冷（４℃）ＦＡＣＳ緩衝液中で１：５００に希釈し、１００μｌを洗浄済み細胞に添加し、次に３０分間氷上でこれをインキュベーションする。細胞を３回洗浄し、上述のような分析のために、冷ＦＡＣＳ緩衝液  ５００μｌ中に再懸濁する。
【０２７０】
図２２に示されるように、Ａｂ  Ｃは、ＣＨＯ細胞において膜結合性ＯＸ４０Ｌへ結合するｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒの能力を低下させる。さらに、様々な源から得たＡｂ  Ｃは、活性があまり多様ではなく、このことから、いくつかの発現系を介してＡｂＣを産生させることができることが示される。図２３は、様々な濃度でのＡｂ  Ｃの活性を比較する典型的なＦＡＣＳ分析を提供する。
【０２７１】
本発明の他の実施形態は、本明細書に開示される本発明の明細書及び実施の検討から当業者に明白となろう。本明細書及び実施例は、典型例としてのみみなされるべきものであり、本発明の真の範囲及び精神は、次の請求項により示されている本発明の正確な範囲及び精神により指示される。
【図面の簡単な説明】
【０２７２】
【図１】図１は、Ａｂ  Ａの重鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号１）及びＡｂ  Ａの重鎖のアミノ酸配列（配列番号２）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【図２】図２は、Ａｂ  Ａの軽鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号３）及びＡｂ  Ａの軽鎖のアミノ酸配列（配列番号４）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【図３】図３は、Ａｂ  Ｂの重鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号５）及びＡｂ  Ｂの重鎖のアミノ酸配列（配列番号６）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【図４】図４は、Ａｂ  Ｂの軽鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号７）及びＡｂ  Ｂの軽鎖のアミノ酸配列（配列番号８）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【図５】図５は、Ａｂ  Ｃの重鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号９）及びＡｂ  Ｃの重鎖のアミノ酸配列（配列番号１０）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【図６】図６は、Ａｂ  Ｃの軽鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号１１）及びＡｂ  Ｃの軽鎖のアミノ酸配列（配列番号１２）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【図７】図７は、Ａｂ  Ｄの重鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号１３）及びＡｂ  Ｄの重鎖のアミノ酸配列（配列番号１４）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【図８】図８は、Ａｂ  Ｄの軽鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列及（配列番号１５）びＡｂ  Ｄの軽鎖のアミノ酸配列（配列番号１６）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【図９】図９は、Ａｂ  Ｅ及びＦの重鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号１７）及びＡｂ  Ｅ及びＦの重鎖のアミノ酸配列（配列番号１８）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【図１０】図１０は、Ａｂ  Ｅ及びＦの軽鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号１９）及びＡｂ  Ｅ及びＦの軽鎖のアミノ酸配列（配列番号２０）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【図１１】図１１は、Ａｂ  Ｇの重鎖をコードするｃＤＮＡヌクレオチド配列（配列番号２１）及びＡｂ  Ｇの重鎖のアミノ酸配列（配列番号２２）を示す。シグナルペプチド中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドを斜字体で示す。可変領域のフレームワーク領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、通常テキストで示す。可変領域のＣＤＲのアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドは、太字で示す。定常領域中のアミノ酸及びそれらの対応するコードヌクレオチドには、下線を付す。
【図１２】図１２は、ある一定の様々な抗ＯＸ−４０ヒトモノクローナル抗体において、Ｖｅｃｔｏｒ  ＮＴＩソフトウェアによりアミノ酸配列を調べた場合の関連性を示す。右側の数字は、各Ｖ領域における体細胞変異の数（最も近い生殖細胞系列配列とのアミノ酸の相違）である。
【図１３−１】図１３は、実施例２で述べる実験による、ヒトＯＸ４０Ｌ（普通の三角）、カニクイザルＯＸ４０Ｌ（逆三角）、ヒトＩＬ−１受容体（四角）及びマウスＯＸ４０Ｌ（菱型）に対する、、Ａｂ  Ｃ、Ａｂ  Ｄ及びＡｂ  Ｆの結合を比較する、３つの代表的な図を示す。ＭＦＩは、平均蛍光強度を指す。
【図１３−２】図１３は、実施例２で述べる実験による、ヒトＯＸ４０Ｌ（普通の三角）、カニクイザルＯＸ４０Ｌ（逆三角）、ヒトＩＬ−１受容体（四角）及びマウスＯＸ４０Ｌ（菱型）に対する、、Ａｂ  Ｃ、Ａｂ  Ｄ及びＡｂ  Ｆの結合を比較する、３つの代表的な図を示す。ＭＦＩは、平均蛍光強度を指す。
【図１４】図１４は、平衡結合分析からのデータの代表的な図を示す。０．２ｎＭの固定濃度で、ＭＡｂを使用した。実施例３で述べる実験に従い、Ａｂ  Ｆ（丸）、Ａｂ  Ｅ（三角）、Ａｂ  Ｃ（逆三角形）及びＡｂ  Ｄ（菱型）に対する結果を示す。
【図１５】図１５は、ＯＸ４０ＬがＨＵＶＥＣで発現される、競合結合測定法からのデータの代表的な図を示す。実施例３で述べる実験に従い、ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｒタンパク質との結合に対する競合に使用した試験抗体は、Ａｂ  Ａ（黒四角）、Ａｂ  Ｅ（黒逆三角形）、Ａｂ  Ｉ（黒丸）、Ａｂ  Ｂ（白四角）、Ａｂ  Ｈ（白三角）、Ａｂ  Ｃ（白逆三角形）、Ａｂ  Ｄ（白菱型）、Ａｂ  Ｇ（白丸）及びＡｂ  Ｆ（Ｘ印）であった。
【図１６】図１６は、ＩＬ−２産生の阻害を測定する全血アッセイからのデータの代表的図を示す。実施例４で述べる実験に従い、ブロッキング試薬は、ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｒ（Ｘ印）、Ａｂ  Ｅ（逆三角形）、Ａｂ  Ｄ（普通の三角）及びＡｂ  Ｃ（丸）であった。
【図１７】図１７は、実施例４で述べる実験に従う、ヒトＴ細胞によるＩＬ−２産生をブロックするＡｂ  Ｃの能力を測定する、共刺激アッセイからのデータの代表的グラフを示す。
【図１８】図１８は、実施例５で述べる実験に従う、カニクイザルＴ細胞によるＩＬ−２産生をブロックするＡｂ  Ｃの能力を測定する、共刺激アッセイからのデータの代表的な図を示す。４匹のカニクイザルドナーからのＴ細胞を試験した。２．５μｇ／ｍｌの最終濃度で、共刺激因子  ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌを使用した。グラフでの解析のために、得られたＥＬＩＳＡ  ＯＤ値を、対照値のパーセンテージ（ＰＯＣ）に変換した。
【図１９】図１９は、実施例５で述べる実験に従う、カニクイザルＴ細胞によるＩＬ−２産生をブロックするＡｂ  Ｃの能力を測定する、共刺激アッセイからのデータの代表的な図を示す。図１８の４匹のカニクイザルドナーからのＴ細胞を試験した。１．２５μｇ／ｍｌの最終濃度で、共刺激因子  ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｌを使用した。グラフでの解析のために、得られたＥＬＩＳＡ  ＯＤ値を、対照値のパーセンテージ（ＰＯＣ）に変換した。
【図２０】図２０は、Ｔ細胞増殖の阻害を測定するＰＢＭＣアッセイからのデータの代表的な図を示す。ブロッキング試薬は、実施例６で述べる実験に従い、Ａｂ  Ｅ（黒逆三角形）、Ａｂ  Ｄ（白三角）、Ａｂ  Ｃ（灰色丸）、ｈＦｃ−ＯＸ４０Ｒ（Ｘ印）及びＩｇＧ（黒丸）であった。Ｙ軸は、３Ｈ取り込みの％阻害である（阻害抗体の様々な濃度の存在下、誘導因子のみによる３Ｈ取り込みに関して（ＩｇＧなし）。）。ＩｇＧ対照もまた、様々な濃度で個別に試験した。
【図２１】図２１Ａは、Ａｂ  Ｃ又はｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒの、ＣＨＯ細胞で発現されたＯＸ４０Ｌへの結合を検出する、直接結合アッセイからのデータの代表的な図を示す。染色試薬は、実施例７で述べる実験に従い、Ａｂ  Ｃ（三角）、ヒトＩｇＧ（黒丸）及びｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒ（灰色丸）である。図２１Ｂは、染色試薬  ５μｇ／ｍｌを用いて３群の染色群を比較する、代表的なＦＡＣＳ分析を示す。
【図２２】図２２Ａは、様々なソースから得られたＡｂ  Ｃが有する、ＣＨＯ細胞で発現されたＯＸ４０Ｌに対するｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒ結合中和能を検出する中和アッセイからのデータの代表的な図を示す。使用する中和試薬は、実施例７で述べる実験に従い、ＣＨＯ細胞で発現された様々なロットのＡｂ  Ｃ（菱型、四角及び三角）及びハイブリドーマ細胞から発現されたＡｂ  Ｃ（Ｘ印）である。図２２Ｂは、実施例７で述べる実験に従い、ｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒ結合のパーセント阻害率を示す。両図の実験では、５μｇ／ｍｌで、ｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒを使用する。
【図２３】図２３は、実施例７で述べる実験による、Ａｂ  Ｃの様々な濃度での、ｃＦｃ−ＯＸ４０Ｒに対するＡｂ  Ｃの中和活性のＦＡＣＳ分析を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３−１】
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【図１３−２】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【手続補正書】
【提出日】平成18年11月24日(2006.11.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される、少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、及び抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、単離ポリペプチド
（ＣＤＲ１ａは、アミノ酸配列  ａ  ｂ  ｃ  ｄ  ｅ（アミノ酸配列ａは、アスパラギン、スレオニン、フェニルアラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｂは、アラニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｃは、トリプトファン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄは、メチオニン又はトリプトファンから選択され；及びアミノ酸ｅは、セリン、アスパラギン又はヒスチジンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ（アミノ酸ｆは、アルギニン又はバリンから選択され；アミノ酸ｇは、イソロイシンであり；アミノ酸ｈは、リシン、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｉは、セリン、イソロイシン、チロシン、スレオニン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｊは、リシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋは、スレオニン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｌは、アスパラギン酸、セリン又はグルタミン酸から選択され；アミノ酸ｍは、グリシン、スレオニン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｎは、グリシン、アスパラギン、リシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｏは、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｐは、スレオニン、イソロイシン、アスパラギン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｑは、アスパラギン酸、プロリン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｒは、チロシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｓは、グリシン、アラニン、ロイシン又はセリンから選択され；及びアミノ酸ｔは、アラニン、リシン又はバリンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列  ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’（アミノ酸ｕは、アスパラギン酸、グリシン、メチオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｖは、アルギニン、グリシン、アスパラギン酸、チロシン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｗは、チロシン、バリン、グリシン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｘは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｙは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はイソロイシンから選択され；アミノ酸ｚは、グリシン、チロシン、プロリン、バリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ’は、グルタミン酸、セリン、チロシン、トリプトファン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｂ’は、フェニルアラニン、グリシン、チロシン、スレオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ’は、プロリン、チロシン、セリン、リシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄ’は、フェニルアラニン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｅ’は、アスパラギン酸、チロシン、アルギニン又はヒスチジンから選択され；及びアミノ酸ｆ’は、チロシン、バリン、グリシン、アルギニン又はスレオニンから選択される。）を含む。）。
【請求項２】
ポリペプチドが、抗体重鎖可変領域を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３】
抗体重鎖定常領域をさらに含む、請求項２に記載の単離ポリペプチド。
【請求項４】
抗体重鎖可変領域及び重鎖定常領域が、配列番号２；配列番号６；配列番号１０；配列番号１４；配列番号１８；又は配列番号２２で規定されるアミノ酸配列を含む、請求項３に記載の単離ポリペプチド。
【請求項５】
ＣＤＲ２ａ（ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’を含み、及びアミノ酸ｇ’は、プロリン、リシン又はセリンから選択される。）を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項６】
ＣＤＲ２ａ（ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’  ｈ’を含み、及びアミノ酸ｈ’は、バリン又はグリシンから選択される。）を含む、請求項５に記載の単離ポリペプチド。
【請求項７】
ＣＤＲ２ａ（ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’  ｈ’  ｉ’を含み、及びアミノ酸ｉ’は、リシンである。）を含有する、請求項６に記載の単離ポリペプチド。
【請求項８】
ＣＤＲ２ａ（ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ  ｇ’  ｈ’  ｉ’  ｊ’を含み、及びアミノ酸ｊ’はグリシンである。）を含む、請求項７に記載の単離ポリペプチド。
【請求項９】
ＣＤＲ３ａ（ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’を含み、及びアミノ酸ｋ’は、アスパラギン酸、メチオニン、アスパラギン、チロシン又はバリンから選択される。）を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１０】
ＣＤＲ３ａ（ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’を含み、及びアミノ酸ｌ'は、ヒスチジン、アスパラギン酸、セリン、チロシン又はフェニルアラニンから選択される。）を含む、請求項９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１１】
ＣＤＲ３ａ（ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’を含み、及びアミノ酸ｍ’は、バリン、アスパラギン酸又はグリシンから選択される。）を含む、請求項１０に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１２】
ＣＤＲ３ａ（ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’  ｎ’を含み、及びアミノ酸ｎ’は、フェニルアラニン、メチオニン又はチロシンから選択される。）を含む、請求項１１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１３】
ＣＤＲ３ａ（ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’  ｎ’  ｏ’を含み、及びアミノ酸ｏ’は、アスパラギン酸である。）を含む、請求項１２に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１４】
ＣＤＲ３ａ（ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’  ｋ’  ｌ’  ｍ’  ｎ’  ｏ’  ｐ’を含み、及びアミノ酸ｐ’は、バリン又はチロシンから選択される。）を含む、請求項１３に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１５】
請求項１に記載の、ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される少なくとも２個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１６】
請求項１に記載の、ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ及びＣＤＲ３ａを含み、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１７】
請求項１に記載の単離ポリペプチドを含み、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆａｃｂ及び一本鎖抗体から選択される、抗体断片。
【請求項１８】
配列番号２のアミノ酸５０から５４；
配列番号２のアミノ酸６９から８７；
配列番号２のアミノ酸１２０から１３５；
配列番号６のアミノ酸５０から５４；
配列番号６のアミノ酸６９から８４；
配列番号６のアミノ酸１１７から１３４；
配列番号１０のアミノ酸５０から５４；
配列番号１０のアミノ酸６９から８５；
配列番号１０のアミノ酸１１８から１３５；
配列番号１４のアミノ酸５０から５４；
配列番号１４のアミノ酸６９から８４；
配列番号１４のアミノ酸１１７から１３１；
配列番号１８のアミノ酸５０から５４；
配列番号１８のアミノ酸６９から８７；
配列番号１８のアミノ酸１２０から１３３；
配列番号２２のアミノ酸５０から５４；
配列番号２２のアミノ酸６９から８７；又は
配列番号２２のアミノ酸１２０から１３１
の少なくとも１個から選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、単離ポリペプチド。
【請求項１９】
請求項１８に記載の相補性決定領域（ＣＤＲ）の少なくとも２個を含み、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、単離ポリペプチド。
【請求項２０】
請求項１８に記載の相補性決定領域（ＣＤＲ）の少なくとも３個を含み、抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、単離ポリペプチド。
【請求項２１】
単離ポリペプチドが配列番号２のアミノ酸５０から５４、配列番号２のアミノ酸６９から８７及び配列番号２のアミノ酸１２０から１３５を含む、請求項１８に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２２】
単離ポリペプチドが配列番号６のアミノ酸５０から５４、配列番号６のアミノ酸６９から８４及び配列番号６のアミノ酸１１７から１３４を含む、請求項１８に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２３】
単離ポリペプチドが配列番号１０のアミノ酸５０から５４、配列番号１０のアミノ酸６９から８５及び配列番号１０のアミノ酸１１８から１３５を含む、請求項１８に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２４】
単離ポリペプチドが配列番号１４のアミノ酸５０から５４、配列番号１４のアミノ酸６９から８４及び配列番号１４のアミノ酸１１７から１３１を含む、請求項１８に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２５】
単離ポリペプチドが配列番号１８のアミノ酸５０から５４、配列番号１８のアミノ酸６９から８７及び配列番号１８のアミノ酸１２０から１３３を含む、請求項１８に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２６】
単離ポリペプチドが配列番号２２のアミノ酸５０から５４、配列番号２２のアミノ酸６９から８７及び配列番号２２のアミノ酸１２０から１３１を含む、請求項１８に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２７】
ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される、少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、及び抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合可能である、単離ポリペプチド
（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１（アミノ酸ａ１は、アルギニンであり；アミノ酸ｂ１は、アラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ１は、セリンであり；アミノ酸ｄ１は、グルタミンであり；アミノ酸ｅ１は、グリシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｆ１は、イソロイシン、バリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｇ１は、セリン又はバリンから選択され；アミノ酸ｈ１は、アスパラギン、セリン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｉ１は、ヒスチジン、アスパラギン、セリン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｊ１は、ロイシン、チロシン又はアスパラギン酸から選択され；及びアミノ酸ｋ１は、バリン、ロイシン、グリシン又はアスパラギンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ２ｂは、アミノ酸配列ｌ１  ｍ１  ｎ１  ｏ１  ｐ１  ｑ１  ｒ１（アミノ酸ｌ１は、アラニン、グリシン又はリシンから選択され；アミノ酸ｍ１は、アラニン又はリシンから選択され；アミノ酸ｎ１は、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｏ１は、スレオニン、セリン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｐ１は、ロイシン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｑ１は、グルタミン、アラニン又はフェニルアラニンから選択され；及びアミノ酸ｒ１は、セリン又はスレオニンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ３ｂは、アミノ酸配列ｓ１  ｔ１  ｕ１  ｖ１  ｗ１  ｘ１  ｙ１  ｚ１  ａ１’（アミノ酸ｓ１は、グルタミン又はメチオニンから選択され；及びアミノ酸ｔ１は、リシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｕ１は、チロシン、アラニン、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｖ１は、アスパラギン、グリシン、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｗ１は、セリン、グリシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｘ１は、アラニン、セリン、イソロイシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｙ１は、プロリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｚ１は、ロイシン、トリプトファン又はフェニルアラニンから選択され；及びアミノ酸ａ１’は、スレオニンである。）を含む。）。
【請求項２８】
ポリペプチドが、抗体軽鎖可変領域を含む、請求項２７に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２９】
抗体軽鎖定常領域をさらに含む、請求項２８に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３０】
抗体軽鎖可変領域及び軽鎖定常領域が、配列番号４；配列番号８；配列番号１２；配列番号１６；又は配列番号２０で規定されるアミノ酸配列を含む、請求項２９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３１】
ＣＤＲ１ｂ（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’を含み、及びアミノ酸ｂ１’は、アスパラギン又はアラニンから選択される。）を含む、請求項２７に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３２】
ＣＤＲ１ｂ（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’（配列番号２３）を含み、及びアミノ酸ｃ１’は、スレオニンである。）を含む、請求項３１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３３】
ＣＤＲ１ｂ（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’（配列番号２４）を含み、及びアミノ酸ｄ１’は、チロシンである。）を含む、請求項３２に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３４】
ＣＤＲ１ｂ（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’  ｅ１’（配列番号２５）を含み、及びアミノ酸ｅ１’は、ロイシンである。）を含む、請求項３３に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３５】
ＣＤＲ１ｂ（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’  ｅ１’  ｆ１’（配列番号２６）を含み、及びアミノ酸ｆ１’は、セリンである。）を含む、請求項３４に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３６】
請求項２７に記載の、ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される、少なくとも２個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、請求項２７に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３７】
請求項２７に記載の、ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ及びＣＤＲ３ｂを含み、抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、請求項２７に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３８】
請求項２７に記載の単離ポリペプチドを含み、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆａｃｂ及び一本鎖抗体から選択される、抗体断片。
【請求項３９】
配列番号４のアミノ酸４６から５６；
配列番号４のアミノ酸７２から７８；
配列番号４のアミノ酸１１１から１１９；
配列番号８のアミノ酸４６から５６；
配列番号８のアミノ酸７２から７８；
配列番号８のアミノ酸１１１から１１９；
配列番号１２のアミノ酸４４から５９；
配列番号１２のアミノ酸７５から８１；
配列番号１２のアミノ酸１１４から１２２；
配列番号１６のアミノ酸４４から５５；
配列番号１６のアミノ酸７１から７７；
配列番号１６のアミノ酸１１０から１１８；
配列番号２０のアミノ酸４６から５６；
配列番号２０のアミノ酸７２から７８；
又は配列番号２０のアミノ酸１１１から１１９
の少なくとも１個から選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合可能である、単離ポリペプチド。
【請求項４０】
請求項３９に記載の相補性決定領域（ＣＤＲ）の少なくとも２個を含み、抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、単離ポリペプチド。
【請求項４１】
請求項３９に記載の相補性決定領域（ＣＤＲ）の少なくとも３個を含み、抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、単離ポリペプチド。
【請求項４２】
単離ポリペプチドが配列番号４のアミノ酸４６から５６、配列番号４のアミノ酸７２から７８及び配列番号４のアミノ酸１１１から１１９を含む、請求項３９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項４３】
単離ポリペプチドが配列番号８のアミノ酸４６から５６、配列番号８のアミノ酸７２から７８及び配列番号８のアミノ酸１１１から１１９を含む、請求項３９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項４４】
単離ポリペプチドが配列番号１２のアミノ酸４４から５９、配列番号１２のアミノ酸７５から８１及び配列番号１２のアミノ酸１１４から１２２を含む、請求項３９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項４５】
単離ポリペプチドが配列番号１６のアミノ酸４４から５５、配列番号１６のアミノ酸７１から７７及び配列番号１６のアミノ酸１１０から１１８を含む、請求項３９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項４６】
単離ポリペプチドが配列番号２０のアミノ酸４６から５６、配列番号２０のアミノ酸７２から７８及び配列番号２０のアミノ酸１１１から１１９を含む、請求項３９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項４７】
ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、及び抗体軽鎖と共同してＯＸ４０Ｌを結合することが可能であるポリペプチドをコードする配列を含む、単離ポリヌクレオチド
（ＣＤＲ１ａは、アミノ酸配列  ａ  ｂ  ｃ  ｄ  ｅ（アミノ酸配列ａは、アスパラギン、スレオニン、フェニルアラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｂは、アラニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｃは、トリプトファン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄは、メチオニン又はトリプトファンから選択され；及びアミノ酸ｅは、セリン、アスパラギン又はヒスチジンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ（アミノ酸ｆは、アルギニン又はバリンから選択され；アミノ酸ｇは、イソロイシンであり；アミノ酸ｈは、リシン、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｉは、セリン、イソロイシン、チロシン、スレオニン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｊは、リシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋは、スレオニン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｌは、アスパラギン酸、セリン又はグルタミン酸から選択され；アミノ酸ｍは、グリシン、スレオニン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｎは、グリシン、アスパラギン、リシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｏは、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｐは、スレオニン、イソロイシン、アスパラギン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｑは、アスパラギン酸、プロリン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｒは、チロシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｓは、グリシン、アラニン、ロイシン又はセリンから選択され；及びアミノ酸ｔは、アラニン、リシン又はバリンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列  ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’（アミノ酸ｕは、アスパラギン酸、グリシン、メチオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｖは、アルギニン、グリシン、アスパラギン酸、チロシン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｗは、チロシン、バリン、グリシン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｘは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｙは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はイソロイシンから選択され；アミノ酸ｚは、グリシン、チロシン、プロリン、バリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ’は、グルタミン酸、セリン、チロシン、トリプトファン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｂ’は、フェニルアラニン、グリシン、チロシン、スレオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ’は、プロリン、チロシン、セリン、リシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄ’は、フェニルアラニン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｅ’は、アスパラギン酸、チロシン、アルギニン又はヒスチジンから選択され；及びアミノ酸ｆ’は、チロシン、バリン、グリシン、アルギニン又はスレオニンから選択される。）を含む。）。
【請求項４８】
ポリペプチドをコードする配列が、抗体重鎖可変領域をコードする配列である、請求項４７に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項４９】
単離ポリヌクレオチドが、一本鎖抗体をコードする、請求項４７に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５０】
抗体重鎖定常領域をコードするポリヌクレオチド配列をさらに含む、請求項４８に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５１】
単離ポリヌクレオチドが配列番号２；配列番号６；配列番号１０；配列番号１４；配列番号１８；又は配列番号２２で規定されるアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする配列を含む、請求項５０に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５２】
単離ポリヌクレオチドが配列番号１；配列番号５；配列番号９；配列番号１３；配列番号１７；又は配列番号２１で規定されるヌクレオチド配列を含む、請求項５０に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５３】
ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、及び抗体重鎖と共同してＯＸ４０Ｌを結合することが可能であるポリペプチドをコードする配列を含む、単離ポリヌクレオチド
（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１（アミノ酸ａ１は、アルギニンであり；アミノ酸ｂ１は、アラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ１は、セリンであり；アミノ酸ｄ１は、グルタミンであり；アミノ酸ｅ１は、グリシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｆ１は、イソロイシン、バリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｇ１は、セリン又はバリンから選択され；アミノ酸ｈ１は、アスパラギン、セリン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｉ１は、ヒスチジン、アスパラギン、セリン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｊ１は、ロイシン、チロシン又はアスパラギン酸から選択され；及びアミノ酸ｋ１は、バリン、ロイシン、グリシン又はアスパラギンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ２ｂは、アミノ酸配列ｌ１  ｍ１  ｎ１  ｏ１  ｐ１  ｑ１  ｒ１（アミノ酸ｌ１は、アラニン、グリシン又はリシンから選択され；アミノ酸ｍ１は、アラニン又はリシンから選択され；アミノ酸ｎ１は、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｏ１は、スレオニン、セリン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｐ１は、ロイシン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｑ１は、グルタミン、アラニン又はフェニルアラニンから選択され；及びアミノ酸ｒ１は、セリン又はスレオニンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ３ｂは、アミノ酸配列ｓ１  ｔ１  ｕ１  ｖ１  ｗ１  ｘ１  ｙ１  ｚ１  ａ１’（アミノ酸ｓ１は、グルタミン又はメチオニンから選択され；及びアミノ酸ｔ１は、リシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｕ１は、チロシン、アラニン、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｖ１は、アスパラギン、グリシン、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｗ１は、セリン、グリシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｘ１は、アラニン、セリン、イソロイシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｙ１は、プロリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｚ１は、ロイシン、トリプトファン又はフェニルアラニンから選択され；及びアミノ酸ａ１’は、スレオニンである。）を含む。）。
【請求項５４】
ポリペプチドをコードする配列が、抗体軽鎖可変領域をコードする配列である、請求項５３に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５５】
単離ポリヌクレオチドが、一本鎖抗体をコードする、請求項５３に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５６】
抗体軽鎖定常領域をコードするポリヌクレオチド配列をさらに含む、請求項５４に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５７】
単離ポリヌクレオチドが配列番号４；配列番号８；配列番号１２；配列番号１６；又は配列番号２０で規定されるアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする配列を含む、請求項５６に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５８】
単離ポリヌクレオチドが配列番号３；配列番号７；配列番号１１；配列番号１５；又は配列番号１９で規定されるヌクレオチド配列を含む、請求項５６に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５９】
可変領域及び定常領域を含む単離抗ＯＸ４０Ｌ抗体であって、
（ｉ）ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ又はＣＤＲ３ａから選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、及び抗体軽鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、第一のポリペプチド
（ＣＤＲ１ａは、アミノ酸配列  ａ  ｂ  ｃ  ｄ  ｅ（アミノ酸ａは、アスパラギン、スレオニン、フェニルアラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｂは、アラニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｃは、トリプトファン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄは、メチオニン又はトリプトファンから選択され；及びアミノ酸ｅは、セリン、アスパラギン又はヒスチジンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ２ａは、アミノ酸配列ｆ  ｇ  ｈ  ｉ  ｊ  ｋ  ｌ  ｍ  ｎ  ｏ  ｐ  ｑ  ｒ  ｓ  ｔ（アミノ酸ｆは、アルギニン又はバリンから選択され；アミノ酸ｇは、イソロイシンであり；アミノ酸ｈは、リシン、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｉは、セリン、イソロイシン、チロシン、スレオニン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｊは、リシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋは、スレオニン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｌは、アスパラギン酸、セリン又はグルタミン酸から選択され；アミノ酸ｍは、グリシン、スレオニン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｎは、グリシン、アスパラギン、リシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｏは、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｐは、スレオニン、イソロイシン、アスパラギン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｑは、アスパラギン酸、プロリン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｒは、チロシン、セリン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｓは、グリシン、アラニン、ロイシン又はセリンから選択され；及びアミノ酸ｔは、アラニン、リシン又はバリンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ３ａは、アミノ酸配列  ｕ  ｖ  ｗ  ｘ  ｙ  ｚ  ａ’  ｂ’  ｃ’  ｄ’  ｅ’  ｆ’（アミノ酸ｕは、アスパラギン酸、グリシン、メチオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｖは、アルギニン、グリシン、アスパラギン酸、チロシン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｗは、チロシン、バリン、グリシン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｘは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はトリプトファンから選択され；アミノ酸ｙは、フェニルアラニン、アスパラギン酸、チロシン又はイソロイシンから選択され；アミノ酸ｚは、グリシン、チロシン、プロリン、バリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ’は、グルタミン酸、セリン、チロシン、トリプトファン又はアラニンから選択され；アミノ酸ｂ’は、フェニルアラニン、グリシン、チロシン、スレオニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ’は、プロリン、チロシン、セリン、リシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｄ’は、フェニルアラニン、チロシン又はグリシンから選択され；アミノ酸ｅ’は、アスパラギン酸、チロシン、アルギニン又はヒスチジンから選択され；及びアミノ酸ｆ’は、チロシン、バリン、グリシン、アルギニン又はスレオニンから選択される。）を含む。）、及び
（ｉｉ）ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み；及び抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌを結合することが可能である、第二のポリペプチド
（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１（アミノ酸ａ１は、アルギニンであり；アミノ酸ｂ１は、アラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ１は、セリンであり；アミノ酸ｄ１は、グルタミンであり；アミノ酸ｅ１は、グリシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｆ１は、イソロイシン、バリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｇ１は、セリン又はバリンから選択され；アミノ酸ｈ１は、アスパラギン、セリン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｉ１は、ヒスチジン、アスパラギン、セリン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｊ１は、ロイシン、チロシン又はアスパラギン酸から選択され；及びアミノ酸ｋ１は、バリン、ロイシン、グリシン又はアスパラギンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ２ｂは、アミノ酸配列ｌ１  ｍ１  ｎ１  ｏ１  ｐ１  ｑ１  ｒ１（アミノ酸ｌ１は、アラニン、グリシン又はリシンから選択され；アミノ酸ｍ１は、アラニン又はリシンから選択され；アミノ酸ｎ１は、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｏ１は、スレオニン、セリン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｐ１は、ロイシン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｑ１は、グルタミン、アラニン又はフェニルアラニンから選択され；及びアミノ酸ｒ１は、セリン又はスレオニンから選択される。）を含み；
ＣＤＲ３ｂは、アミノ酸配列ｓ１  ｔ１  ｕ１  ｖ１  ｗ１  ｘ１  ｙ１  ｚ１  ａ１’（アミノ酸ｓ１は、グルタミン又はメチオニンから選択され；及びアミノ酸ｔ１は、リシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｕ１は、チロシン、アラニン、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｖ１は、アスパラギン、グリシン、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｗ１は、セリン、グリシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｘ１は、アラニン、セリン、イソロイシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｙ１は、プロリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｚ１は、ロイシン、トリプトファン又はフェニルアラニンから選択され；及びアミノ酸ａ１’は、スレオニンである。）を含む。）
を含む、前記抗体。
【請求項６０】
抗体が、ヒト抗体である、請求項５９に記載の単離抗体。
【請求項６１】
抗体が、キメラ抗体である、請求項５９に記載の単離抗体。
【請求項６２】
可変領域及び定常領域を含む単離抗ＯＸ４０Ｌ抗体であって、
配列番号２で規定される相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む第一のポリペプチド及び配列番号４で規定されるＣＤＲを含む第二のポリペプチド；
配列番号６で規定されるＣＤＲを含む第一のポリペプチド及び配列番号８で規定されるＣＤＲを含む第二のポリペプチド；
配列番号１０で規定されるＣＤＲを含む第一のポリペプチド及び配列番号１２で規定されるＣＤＲを含む第二のポリペプチド；
配列番号１４で規定されるＣＤＲを含む第一のポリペプチド及び配列番号１６で規定されるＣＤＲを含む第二のポリペプチド；又は、
配列番号１８で規定されるＣＤＲを含む第一のポリペプチド及び配列番号２０で規定されるＣＤＲを含む第二のポリペプチド；
を含む、前記抗体。
【請求項６３】
ａ）請求項５９に記載の抗体と試料とを混合すること；
ｂ）抗原に結合した抗体を、非結合抗体から分離すること；及び
ｃ）抗原に結合した抗体の有無を検出すること、
を含む、試料中のＯＸ４０Ｌの有無を検出するための方法。
【請求項６４】
方法が、酵素免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）を使用する、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
請求項５９に記載の抗体の治療的有効量を患者に投与することを含む、患者において炎症性疾患を治療するための方法。
【請求項６６】
炎症性疾患が、関節リウマチ、骨関節症、移植片対宿主拒絶反応、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、多発性硬化症、乾癬又は増殖性ループス腎炎の少なくとも１つから選択される、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
請求項４７に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
【請求項６８】
請求項５３に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
【請求項６９】
請求項６７又は請求項６８に記載の発現ベクターのうち少なくとも１個を含む細胞。
【請求項７０】
ポリペプチドを産生させるために、その中に含有されるポリヌクレオチドを発現するのに適切な条件において、請求項６７に記載の発現ベクターを含む細胞においてポリペプチドを産生させることを含む、ポリペプチドを作製する方法。
【請求項７１】
ポリペプチドを産生させるために、その中に含有されるポリヌクレオチドを発現するのに適切な条件において、請求項６８に記載の発現ベクターを含む細胞においてポリペプチドを産生させることを含む、ポリペプチドを作製する方法。
【請求項７２】
抗体を産生させるために、その中に含有されるポリヌクレオチドを発現するのに適切な条件において、請求項６７に記載の発現ベクターを含み、さらに請求項６８に記載の発現ベクターを含む細胞において抗体を産生させることを含む、抗ＯＸ４０Ｌ抗体を作製する方法。
【請求項７３】
請求項５９に記載の抗体と、医薬的に許容される担体と、を含む医薬組成物。
【請求項７４】
Ａｂ  Ａ、Ａｂ  Ｂ、Ａｂ  Ｃ、Ａｂ  Ｄ、Ａｂ  Ｅ、Ａｂ  Ｆ、Ａｂ  Ｇ、Ａｂ  Ｈ、Ａｂ  Ｉ又はＡｂ  Ｊのうち少なくとも１個によって特異的に結合されるエピトープに特異的に結合する、単離抗体。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５５】
ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される、少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１（アミノ酸ａ１は、アルギニンであり；アミノ酸ｂ１は、アラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ１は、セリンであり；アミノ酸ｄ１は、グルタミンであり；アミノ酸ｅ１は、グリシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｆ１は、イソロイシン、バリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｇ１は、セリン又はバリンから選択され；アミノ酸ｈ１は、アスパラギン、セリン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｉ１は、ヒスチジン、アスパラギン、セリン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｊ１は、ロイシン、チロシン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋ１は、バリン、ロイシン、グリシン又はアスパラギンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ２ｂは、アミノ酸配列ｌ１  ｍ１  ｎ１  ｏ１  ｐ１  ｑ１  ｒ１（アミノ酸ｌ１は、アラニン、グリシン又はリシンから選択され；アミノ酸ｍ１は、アラニン又はリシンから選択され；アミノ酸ｎ１は、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｏ１は、スレオニン、セリン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｐ１は、ロイシン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｑ１は、グルタミン、アラニン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｒ１は、セリン又はスレオニンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ３ｂは、アミノ酸配列ｓ１  ｔ１  ｕ１  ｖ１  ｗ１  ｘ１  ｙ１  ｚ１  ａ１’（アミノ酸ｓ１は、グルタミン又はメチオニンから選択され；アミノ酸ｔ１は、リシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｕ１は、チロシン、アラニン、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｖ１は、アスパラギン、グリシン、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｗ１は、セリン、グリシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｘ１は、アラニン、セリン、イソロイシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｙ１は、プロリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｚ１は、ロイシン、トリプトファン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ１’は、スレオニンである。）を含有する。）を含有し、抗体重鎖と共同してＯＸ４０Ｌに結合可能であるポリペプチドをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’（ａ１からｋ１は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｂ１’は、アスパラギン又はアラニンから選択される。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’（配列番号２３）（ａ１からｂ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｃ１’は、スレオニンである。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’（配列番号２４）（ａ１からｃ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｄ１’は、チロシンである。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’  ｅ１’（配列番号２５）（ａ１からｄ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｅ１’は、ロイシンである。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含有する。ある実施形態において、ポリヌクレオチドは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’  ｅ１’  ｆ１’（配列番号２６）（ａ１からｅ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｆ１’は、セリンである。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含有する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７２】
ある実施形態において、ポリペプチドは、ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される、少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１（アミノ酸ａ１は、アルギニンであり；アミノ酸ｂ１は、アラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ１は、セリンであり；アミノ酸ｄ１は、グルタミンであり；アミノ酸ｅ１は、グリシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｆ１は、イソロイシン、バリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｇ１は、セリン又はバリンから選択され；アミノ酸ｈ１は、アスパラギン、セリン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｉ１は、ヒスチジン、アスパラギン、セリン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｊ１は、ロイシン、チロシン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋ１は、バリン、ロイシン、グリシン又はアスパラギンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ２ｂは、アミノ酸配列ｌ１  ｍ１  ｎ１  ｏ１  ｐ１  ｑ１  ｒ１（アミノ酸ｌ１は、アラニン、グリシン又はリシンから選択され；アミノ酸ｍ１は、アラニン又はリシンから選択され；アミノ酸ｎ１は、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｏ１は、スレオニン、セリン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｐ１は、ロイシン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｑ１は、グルタミン、アラニン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｒ１は、セリン又はスレオニンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ３ｂは、アミノ酸配列ｓ１  ｔ１  ｕ１  ｖ１  ｗ１  ｘ１  ｙ１  ｚ１  ａ１’（アミノ酸ｓ１は、グルタミン又はメチオニンから選択され；アミノ酸ｔ１は、リシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｕ１は、チロシン、アラニン、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｖ１は、アスパラギン、グリシン、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｗ１は、セリン、グリシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｘ１は、アラニン、セリン、イソロイシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｙ１は、プロリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｚ１は、ロイシン、トリプトファン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ１’は、スレオニンである。）を含有する。）を含有し、抗体重鎖と共同して、ＯＸ４０Ｌに結合可能である。ある実施形態において、ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’を含有し、ａ１からｋ１は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｂ１’は、アスパラギン又はアラニンから選択される。ある実施形態において、ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’（配列番号２３）を含有し、ａ１からｂ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｃ１’は、スレオニンである。ある実施形態において、ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’（配列番号２４）を含有し、ａ１からｃ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｄ１’は、チロシンである。ある実施形態において、ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’  ｅ１’（配列番号２５）を含有し、ａ１からｄ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｅ１’は、ロイシンである。ある実施形態において、ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’  ｅ１’  ｆ１’（配列番号２６）を含有し、ａ１からｅ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｆ１’は、セリンである。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４２】
ある実施形態において、発現ベクターは、ＣＤＲ１ｂ、ＣＤＲ２ｂ又はＣＤＲ３ｂから選択される、少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＣＤＲ１ｂは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１（アミノ酸ａ１は、アルギニンであり；アミノ酸ｂ１は、アラニン又はセリンから選択され；アミノ酸ｃ１は、セリンであり；アミノ酸ｄ１は、グルタミンであり；アミノ酸ｅ１は、グリシン又はセリンから選択され；アミノ酸ｆ１は、イソロイシン、バリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｇ１は、セリン又はバリンから選択され；アミノ酸ｈ１は、アスパラギン、セリン又はヒスチジンから選択され；アミノ酸ｉ１は、ヒスチジン、アスパラギン、セリン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｊ１は、ロイシン、チロシン又はアスパラギン酸から選択され；アミノ酸ｋ１は、バリン、ロイシン、グリシン又はアスパラギンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ２ｂは、アミノ酸配列ｌ１  ｍ１  ｎ１  ｏ１  ｐ１  ｑ１  ｒ１（アミノ酸ｌ１は、アラニン、グリシン又はリシンから選択され；アミノ酸ｍ１は、アラニン又はリシンから選択され；アミノ酸ｎ１は、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｏ１は、スレオニン、セリン又はアスパラギンから選択され；アミノ酸ｐ１は、ロイシン又はアルギニンから選択され；アミノ酸ｑ１は、グルタミン、アラニン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｒ１は、セリン又はスレオニンから選択される。）を含有し；ＣＤＲ３ｂは、アミノ酸配列ｓ１  ｔ１  ｕ１  ｖ１  ｗ１  ｘ１  ｙ１  ｚ１  ａ１’（アミノ酸ｓ１は、グルタミン又はメチオニンから選択され；アミノ酸ｔ１は、リシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｕ１は、チロシン、アラニン、セリン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ｖ１は、アスパラギン、グリシン、スレオニン又はチロシンから選択され；アミノ酸ｗ１は、セリン、グリシン又はグルタミンから選択され；アミノ酸ｘ１は、アラニン、セリン、イソロイシン又はスレオニンから選択され；アミノ酸ｙ１は、プロリン又はロイシンから選択され；アミノ酸ｚ１は、ロイシン、トリプトファン又はフェニルアラニンから選択され；アミノ酸ａ１’は、スレオニンである。）を含有する。）を含有し、抗体重鎖と共同してＯＸ４０Ｌに結合可能であるポリペプチドをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’（ａ１からｋ１は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｂ１’は、アスパラギン又はアラニンから選択される。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’（配列番号２３）（ａ１からｂ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｃ１’は、スレオニンである。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’（配列番号２４）（ａ１からｃ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｄ１’は、チロシンである。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’  ｅ１’（配列番号２５）（ａ１からｄ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｅ１’は、ロイシンである。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、発現ベクターは、アミノ酸配列ａ１  ｂ１  ｃ１  ｄ１  ｅ１  ｆ１  ｇ１  ｈ１  ｉ１  ｊ１  ｋ１  ｂ１’  ｃ１’  ｄ１’  ｅ１’  ｆ１’（配列番号２６）（ａ１からｅ１’は、上述のように定義されるアミノ酸配列であり、アミノ酸ｆ１’は、セリンである。）を含有するＣＤＲ１ｂをコードする配列を含むポリヌクレオチドを含有する。ある実施形態において、ポリペプチドを産生させるために、そこに含有されるポリヌクレオチドを発現するのに適切な条件において、上記の発現ベクターを含有する細胞においてポリペプチドを産生させることを含む、ポリペプチドを作製する方法を提供する。ある実施形態において、上記発現ベクターのうち少なくとも１個を含有する細胞を提供する。ある実施形態において、ポリペプチドを産生させるために、そこに含有されるポリヌクレオチドを発現するのに適切な条件において、上記の発現ベクターを含有する細胞においてポリペプチドを産生させることを含む、ポリペプチドを作製する方法を提供する。
【国際調査報告】
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