(57)【要約】本発明は、式（Ｉ）の置換アリールアミド誘導体、その製剤ならびに疾患、特に腫瘍および／または血管新生によって引き起こされ、媒介されかつ／または伝播される疾患を治療するための薬物を調製するためのその使用に関する。式（Ｉ）の化合物は、チロシンキナーゼ、特にＴＩＥ−２およびＶＥＧＦＲ、ならびにＲａｆキナーゼの効果的な阻害剤である。
2007523921.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物
【化１】
2007523921.tif 000016
［式中、
Ａｒ1、Ａｒ2、Ａｒ3は、それぞれ互いに独立して、芳香族ラジカルまたはＨｅｔを意味し、そのそれぞれは、非置換であるかＲ1により一置換、二置換または多置換されており、
Ｈｅｔは、１、２、３または４個のＮ、Ｏおよび／またはＳ原子を有する単環式または二環式芳香族複素環を意味し、
Ｒ1は、いずれの場合も独立に、Ｈ、Ａ、アリール、ＯＲ4、ＳＲ4、Ｏアリール、Ｓアリール、Ｎ(Ｒ4)2、ＮＨアリール、Ｈａｌ、ＮＯ2、ＣＮ、(ＣＨ2)mＣＯＯＲ4、(ＣＨ2)mＣＯＯアリール、(ＣＨ2)mＣＯＮ(Ｒ4)2、(ＣＨ2)mＣＯＮＨアリール、ＣＯＲ4、ＣＯアリール、Ｓ(Ｏ)mＡ、Ｓ(Ｏ)mアリール、ＮＨＣＯＡ、ＮＨＣＯアリール、ＮＨＳＯ2Ａ、ＮＨＳＯ2アリールまたはＳＯ2Ｎ(Ｒ4)2、Ｏ(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4）2、Ｏ(ＣＨ2)nＮＨＲ3、Ｏ(ＣＨ2)nＮＨ2、Ｏ(ＣＨ2)n−モルホリン、Ｏ(ＣＨ2)n−ピペラジン、Ｏ(ＣＨ2)n−ピロリジン、Ｏ(ＣＨ2)n−ピペリジン、Ｏ−ピペリジン、Ｏ(ＣＨ2)n−オキソピペラジン、Ｏ(ＣＨ2)n−オキソモルホリン、Ｏ(ＣＨ2)n−オキソピロリジン、Ｏ(ＣＨ2)nＣ(ＣＨ3)2(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)2、Ｎ(ＣＨ2)nＣ(ＣＨ3)2(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)2、Ｏ(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4）ＳＯmＡ、Ｏ(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmＮ(Ｒ4)Ａ、Ｏ(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmアリール、(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmＡ、(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmＮ(Ｒ4)Ａ、(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmアリール、Ｏ(ＣＨ2)nＳＯmＡ、Ｏ(ＣＨ2)nＳＯmＮ(Ｒ4)Ａ、Ｏ(ＣＨ2)nＳＯmアリール、(ＣＨ2)nＳＯmＡ、(ＣＨ2)nＳＯmＮ(Ｒ4)Ａおよび／または(ＣＨ2)nＳＯmアリールを意味し、
Ｙは、Ｏ、Ｓ、Ｃ−ＮＯ2、Ｃ(ＣＮ)2またはＮ−Ｒ3を意味し、
Ｚは、Ｇ1n、Ｇ1nＥＧ2m、ＥＧ1nＧ2mまたはＧ1nＧ2mЕを意味し、
Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、Ａまたは−アルキレン−アリールを意味し、
Ａは、１〜１０個のＣ原子を有する非分枝または分枝のアルキルであり、そのうち、１個または２個のＣＨ2基が、ＯもしくはＳ原子および／または−ＣＨ＝ＣＨ−基により置換されていてもよく、かつ／あるいはさらに１〜７個のＨ原子が、Ｈａｌにより置換されていてもよく、
アリールは、非置換であるか、Ａ、フェニル、ＯＡ、ＳＡ、Ｏフェニル、ＮＨ2、ＮＡ2、Ｈａｌ、ＮＯ2、ＣＮ、(ＣＨ2)mＣＯＯＲ4、(ＣＨ2)mＣＯＮ(Ｒ4)2、ＣＯＲ4、ＣＯアリール、Ｓ(Ｏ)mＡ、ＮＨＣＯＡまたはＮＨＳＯ２Ａにより、一置換、二置換または多置換されているフェニルを意味し、
Ｅは、Ｏ、ＳＯm、ＮＲ1、ＣＯ、Ｃ＝Ｎまたはアルケンを意味し、
Ｇ1、Ｇ2は、それぞれ互いに独立して、ＣＲ1Ｒ1またはＥを意味し、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを意味し、
ｎは、０、１、２、３、４または５を意味し、
ｍは、０、１または２を意味する］
ならびに医薬品として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）。
【請求項２】
Ａｒ1が、Ｒ1により一置換または二置換されているフェニルを意味する請求項１に記載の化合物、ならびに医薬品として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）。
【請求項３】
Ａｒ2が、非置換フェニルを意味する請求項１または２に記載の化合物、ならびに医薬品として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）。
【請求項４】
Ａｒ3が、Ｒ1により一置換されているピリジニルを意味する請求項１から３の一項または複数項に記載の化合物、ならびに医薬品として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）。
【請求項５】
Ｙが、ＯまたはＳを意味する請求項１から４の一項または複数項に記載の化合物、ならびに医薬品として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）。
【請求項６】
Ｚが、ＯまたはＣＲ1Ｒ1を意味する請求項１から５の一項または複数項に記載の化合物、ならびに医薬品として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）。
【請求項７】
Ｒ2が、Ｈを意味する請求項１から６の一項または複数項に記載の化合物、ならびに医薬品として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）。
【請求項８】
Ｒ1が、各場合において独立に、Ｈ、Ａ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＯＡ、ＣＦ3、および／またはＣＯＮＨＡを意味する請求項１から７の一項または複数項に記載の化合物、ならびに医薬品として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）。
【請求項９】
Ａｒ1が、Ｒ1により一置換または二置換されているフェニルを意味し、
Ａｒ2が、非置換のフェニルを意味し、
Ａｒ3が、Ｒ1により一置換されているピリジニルを意味し、
Ｙが、ＯまたはＳを意味し、
Ｚが、ＯまたはＣＲ1Ｒ1を意味し、
Ｒ2が、Ｈを意味し、
Ｒ1が、各場合において独立に、Ｈ、Ａ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＯＡ、ＣＦ3、および／またはＣＯＮＨＡを意味する
請求項１に記載の化合物、ならびに医薬品として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）。
【請求項１０】
群
ａ）Ｎ−メチル−４−［３−（２−ヒドロキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｂ）Ｎ−メチル−４−［４−（２−ヒドロキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｃ）Ｎ−メチル−４−［３−（２−ヒドロキシ−５−メチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｄ）Ｎ−メチル−４−［４−（２−ヒドロキシ−５−メチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｅ）Ｎ−メチル−４−［４−（２−ヒドロキシ−４−メチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｆ）Ｎ−メチル−４−［３−（４−フルオロ−２−ヒドロキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｇ）Ｎ−メチル−４−［３−（５−クロロ−２−ヒドロキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｈ）Ｎ−メチル−４−［３−（４−クロロ−２−ヒドロキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｉ）Ｎ−メチル−４−［３−（２，５−ジメトキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｊ）Ｎ−メチル−４−［３−（５−クロロ−２−メトキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｋ）Ｎ−メチル−４−［３−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ヒドロキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｌ）Ｎ−メチル−４−［３−（ヒドロキシトリフルオロメチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｍ）Ｎ−メチル−４−［３−（２−メトキシ−５−トリフルオロメチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｎ）Ｎ−メチル−４−［３−（５−エタンスルホニル−２−ヒドロキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｏ）Ｎ−メチル−４−｛３−［２−（２−ジメチルアミノエトキシ）−５−トリフルオロメチルフェニルカルバモイル］フェノキシ｝ピリジン−２−カルボキサミド
ｐ）Ｎ−メチル−４−［３−（２−メトキシ−５−トリフルオロメチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｑ）Ｎ−メチル−４−［３−（３−トリフルオロメタンスルホニルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｒ）Ｎ−メチル−４−［３−（１Ｈ−インダゾール−７−イルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｓ）Ｎ−メチル−４−［３−（１Ｈ−インドール−７−イルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｔ）Ｎ−メチル−４−［３−（５−ブロモ−１Ｈ−インドール−７−イルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｕ）Ｎ−メチル−４−［３−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−メトキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｖ）Ｎ−メチル−４−［３−（３−トリフルオロメチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｗ）Ｎ−メチル−４−［３−（４−トリフルオロメチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｘ）Ｎ−メチル−４−［３−（２−メトキシ−５−メチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｙ）Ｎ−メチル−４−［３−（３−クロロ−４−フルオロフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｚ）Ｎ−メチル−４−［３−（３−クロロフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ａａ）Ｎ−メチル−４−［３−（４−フルオロ−３−トリフルオロメチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｂｂ）Ｎ−メチル−４−［３−（３−フルオロ−４−トリフルオロメチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
から選択される請求項１に記載の化合物、ならびに医薬品として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）。
【請求項１１】
式Ｉの化合物、ならびに生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体を調製する方法であって、式ＩＩの化合物
Ａｒ1−ＮＨＲ2      ＩＩ
（式中、Ａｒ1およびＲ2は、請求項１で示した意味を有する）を、式ＩＩＩの化合物
【化２】
2007523921.tif 000017
（式中、Ｙ、Ａｒ2、ＺおよびＡｒ3は、請求項１で示した意味を有し、
Ｌは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉまたは遊離のもしくは反応するように官能的に修飾されているＯＨ基を意味する）と反応させ、
かつ／あるいは式Ｉの塩基または酸をその塩の１つに変換することを特徴とする方法。
【請求項１２】
請求項１から１０の一項または複数項に記載の少なくとも１種の化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）、ならびに適宜賦形剤および／または補助剤を含む薬物。
【請求項１３】
請求項１から１０の一項または複数項に記載の少なくとも１種の化合物および／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）、ならびに少なくとも１種のさらなる薬物活性成分を含む薬物。
【請求項１４】
ａ）請求項１から１０の一項または複数項に記載の化合物ならびに／または生理的に許容されるその誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の有効量、ならびに
ｂ）さらなる薬物活性成分の有効量
の別々のパックからなるセット（キット）。
【請求項１５】
キナーゼの活性化剤または阻害剤としての、請求項１から１０の一項または複数項に記載の化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）。
【請求項１６】
チロシンキナーゼおよび／またはＲａｆキナーゼの阻害剤としての、請求項１から１０の一項または複数項に記載の化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）。
【請求項１７】
疾患の治療および／または予防のための薬物の調製のための、請求項１から１０の一項または複数項に記載の化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の使用。
【請求項１８】
キナーゼおよび／またはキナーゼ媒介シグナル伝達によって引き起こされ、媒介されかつ／または伝播される疾患の治療および／または予防のための薬物の調製のための、請求項１から１０の一項または複数項に記載の化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の使用。
【請求項１９】
前記キナーゼがチロシンキナーゼの群から選択される請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
前記チロシンキナーゼが、ＴＩＥ−２またはＶＥＧＦＲである請求項１９に記載の使用。
【請求項２１】
前記キナーゼがＲａｆキナーゼの群から選択される請求項１８に記載の使用。
【請求項２２】
前記Ｒａｆキナーゼが、Ａ−Ｒａｆ、Ｂ−ＲａｆまたはＲａｆ−１である請求項２１に記載の使用。
【請求項２３】
固形腫瘍の治療および／または予防のための薬物の調製のための、請求項１から１０の一項または複数項に記載の化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の使用。
【請求項２４】
前記固形腫瘍が、脳腫瘍、尿生殖路の腫瘍、リンパ系の腫瘍、胃腫瘍、喉頭腫瘍および肺腫瘍からなる群から選択される請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
前記固形腫瘍が、単球性白血病、肺腺癌、小細胞肺癌、膵癌、神経膠芽腫および乳癌からなる群から選択される請求項２３に記載の使用。
【請求項２６】
血管新生によって引き起こされ、媒介されかつ／または伝播される疾患の治療および／または予防のための薬物の調製のための、請求項１から１０の一項または複数項に記載の化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の使用。
【請求項２７】
網膜血管新生、糖尿病性網膜症、加齢誘発性黄斑変性症および／または炎症性疾患からなる群から選択される疾患の治療および／または予防のための薬物の調製のための、請求項１から１０の一項または複数項に記載の化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の使用。
【請求項２８】
骨肉腫、変形性関節炎およびクル病からなる群から選択される骨病態の治療および／または予防のための薬物の調製のための、請求項１から１０の一項または複数項に記載の化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の使用。
【請求項２９】
乾癬、関節リウマチ、接触性皮膚炎、遅延型過敏反応、炎症、子宮内膜症、瘢痕、良性前立腺過形成、免疫疾患、自己免疫疾患および免疫不全症からなる群から選択される疾患の治療および／または予防のための薬物の調製のための、請求項１から１０の一項または複数項に記載の化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の使用。
【請求項３０】
脳腫瘍、肺癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵癌、肝癌、腎癌、結腸直腸癌、乳癌、頭部癌、頚部癌、食道癌、婦人科癌、甲状腺癌、リンパ腫、慢性白血病および急性白血病からなる群から選択される疾患の治療および／または予防のための薬物の調製のための、請求項１から１０の一項または複数項に記載の化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の使用。
【請求項３１】
疾患の治療および／または予防のための薬物の調製のための、請求項１から１０の一項または複数項に記載の化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩および溶媒和物の使用であって、請求項１から１０の一項または複数項に記載の化合物の治療有効量が、１）エストロゲン受容体調節物質、２）アンドロゲン受容体調節物質、３）レチノイド受容体調節物質、４）細胞傷害性作用物質、５）抗増殖性作用物質、６）プレニルタンパクトランスフェラーゼ阻害剤、７）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、８）ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、９）逆転写酵素阻害剤、１０）成長因子受容体阻害剤および１１）血管新生阻害剤の群からの化合物との組合せで投与される使用。
【請求項３２】
疾患の治療および／または予防のための薬物の調製のための、請求項１から１０の一項または複数項に記載の化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩および溶媒和物の使用であって、請求項１から１０の一項または複数項に記載の化合物の治療有効量が、放射線治療ならびに１）エストロゲン受容体調節物質、２）アンドロゲン受容体調節物質、３）レチノイド受容体調節物質、４）細胞傷害性作用物質、５）抗増殖性作用物質、６）プレニルタンパクトランスフェラーゼ阻害剤、７）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、８）ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、９）逆転写酵素阻害剤、１０）成長因子受容体阻害剤および１１）血管新生阻害剤の群からの化合物との組合せで投与される使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の背景）
本発明は、式Ｉの置換アリールアミド誘導体、
式Ｉの化合物
【０００２】
【化１】
2007523921.tif 000003
【０００３】
［式中、
Ａｒ1、Ａｒ2、Ａｒ3は、それぞれ互いに独立して、芳香族ラジカルまたはＨｅｔを意味し、それぞれ、非置換であるかＲ1により一置換、二置換または多置換されており、
Ｈｅｔは、１、２、３または４個のＮ、Ｏおよび／またはＳ原子を有する単環式または二環式芳香族複素環を意味し、
Ｒ1は、いずれの場合も独立に、Ｈ、Ａ、アリール、ＯＲ4、ＳＲ4、Ｏアリール、Ｓアリール、Ｎ(Ｒ4)2、ＮＨアリール、Ｈａｌ、ＮＯ2、ＣＮ、(ＣＨ2)mＣＯＯＲ4、(ＣＨ2)mＣＯＯアリール、(ＣＨ2)mＣＯＮ(Ｒ4)2、(ＣＨ2)mＣＯＮＨアリール、ＣＯＲ4、ＣＯアリール、Ｓ(Ｏ)mＡ、Ｓ(Ｏ)mアリール、ＮＨＣＯＡ、ＮＨＣＯアリール、ＮＨＳＯ2Ａ、ＮＨＳＯ2アリールまたはＳＯ2Ｎ(Ｒ4)2、Ｏ(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)2、Ｏ(ＣＨ2)nＮＨＲ3、Ｏ(ＣＨ2)nＮＨ2、Ｏ(ＣＨ2)n−モルホリン、Ｏ(ＣＨ2)n−ピペラジン、Ｏ(ＣＨ2)n−ピロリジン、Ｏ(ＣＨ2)n−ピペリジン、Ｏ−ピペリジン、Ｏ(ＣＨ2)n−オキソピペラジン、Ｏ(ＣＨ2)n−オキソモルホリン、Ｏ(ＣＨ2)n−オキソピロリジン、Ｏ(ＣＨ2)nＣ(ＣＨ3)2(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)2、Ｎ(ＣＨ2)nＣ(ＣＨ3)2(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)2、Ｏ(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmＡ、Ｏ(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmＮ(Ｒ4)Ａ、Ｏ(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmアリール、(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmＡ、(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmＮ(Ｒ4)Ａ、(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmアリール、Ｏ(ＣＨ2)nＳＯmＡ、Ｏ(ＣＨ2)nＳＯmＮ(Ｒ4)Ａ、Ｏ(ＣＨ2)nＳＯmアリール、(ＣＨ2)nＳＯmＡ、(ＣＨ2)nＳＯmＮ(Ｒ4)Ａ、および／または(ＣＨ2)nＳＯmアリールを意味し、
Ｙは、Ｏ、Ｓ、Ｃ−ＮＯ2、Ｃ(ＣＮ)2またはＮ−Ｒ3を意味し、
Ｚは、Ｇ1n、Ｇ1nＥＧ2m、ＥＧ1nＧ2mまたはＧ1nＧ2mЕを意味し、
Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、Ａまたは−アルキレン−アリールを意味し、
Ａは、１〜１０個のＣ原子を有する非分枝または分枝のアルキルであり、そのうち、１個または２個のＣＨ2基が、ＯもしくはＳ原子および／または−ＣＨ＝ＣＨ−基により置換されていてもよく、かつ／あるいはさらに１〜７個のＨ原子が、Ｈａｌにより置換されていてもよく、
アリールは、非置換であるか、Ａ、フェニル、ＯＡ、ＳＡ、Ｏフェニル、ＮＨ2、ＮＡ2、Ｈａｌ、ＮＯ2、ＣＮ、(ＣＨ2)mＣＯＯＲ4、(ＣＨ2)mＣＯＮ(Ｒ4)2、ＣＯＲ4、ＣＯアリール、Ｓ(Ｏ)mＡ、ＮＨＣＯＡまたはＮＨＳＯ２Ａにより、一置換、二置換または多置換されているフェニルを意味し、
Ｅは、Ｏ、ＳＯm、ＮＲ1、ＣＯ、Ｃ＝Ｎまたはアルケンを意味し、
Ｇ1、Ｇ2は、それぞれ互いに独立して、ＣＲ1Ｒ1またはＥを意味し、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを意味し、
ｎは、０、１、２、３、４または５を意味し、
ｍは、０、１または２を意味する］
ならびに医薬品として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）に関する。
【０００４】
本発明は、さらに、本発明による置換アリールアミド誘導体の製剤、および疾患、特に腫瘍および／または血管新生により引き起こされ、媒介されかつ／または伝播される疾患を治療するための薬物を調製するためのその使用に関する。式Ｉの化合物は、チロシンキナーゼ、特にＴＩＥ−２およびＶＥＧＦＲ、並びにＲａｆキナーゼの効果的な阻害剤である。
【０００５】
式Ｉの化合物は、キナーゼ、特にチロシンキナーゼおよび／またはＲａｆキナーゼにより媒介されるシグナル伝達を阻害し、制御しかつ／または調節することができることが見出されている。特に、本発明による化合物は、チロシンキナーゼおよび／またはＲａｆキナーゼの阻害剤として適する。かくして、本発明による薬物および医薬品組成物は、キナーゼにより、かつ／またはキナーゼに媒介されるシグナル伝達により、または血管新生により、引き起こされ、媒介されかつ／または伝播される疾患の治療に使用すると効果的であり得る。したがって、本発明による化合物は、哺乳動物における癌、腫瘍成長、動脈硬化、加齢黄斑変性、糖尿病性網膜症、炎症性疾患などの治療および予防に適している。
【０００６】
チロシンキナーゼは、アデノシン三リン酸の末端リン酸をタンパク質基質内のチロシン残基へ移動させる触媒作用をする酵素の一種である。チロシンキナーゼは、基質のリン酸化反応を介して多数の細胞機能に対するシグナル伝達において重要な役割を果たしていることが考えられる。シグナル伝達の正確な機構は依然として不明確であるが、チロシンキナーゼは、細胞増殖、発癌および細胞分化における重要な因子であることが示されている。
【０００７】
チロシンキナーゼは、受容体型チロシンキナーゼまたは非受容体型チロシンキナーゼに分類することができる。受容体型チロシンキナーゼは、細胞外部分、膜貫通部分および細胞内部分を有しており、一方非受容体型チロシンキナーゼは、もっぱら細胞内だけである。
【０００８】
受容体型チロシンキナーゼは、異なる生物活性を有する様々な膜貫通受容体からなる。かくして、受容体型チロシンキナーゼの約２０の異なるサブファミリーが確認されている。ＥＧＦＲまたはＨＥＲサブファミリーとして知られる１つのチロシンキナーゼサブファミリーは、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３およびＨＥＲ４からなる。受容体のこのサブファミリーに由来するリガンドとしては、上皮成長因子（ＥＧＦ）、組織成長因子（ＴＧＦ−α）、アンフィレグリン、ＨＢ−ＥＧＦ、ベータセルリンおよびヘレグリンが含まれる。これら受容体型チロシンキナーゼの別のサブファミリーは、ＩＳＮ−Ｒ、ＩＧＦ−ＩＲおよびＩＲ−Ｒが含まれるインスリンサブファミリーである。ＰＤＧＦサブファミリーとしては、ＰＤＧＦ−αおよびＰＤＧＦ−β受容体、ＣＳＦＩＲ、ｃ−キットならびにＦＬＫ−ＩＩが含まれる。さらに、キナーゼ挿入ドメイン受容体（ＫＤＲ）またはＶＥＧＦＲ−２、胎児肝臓キナーゼ−１（ＦＬＫ−１）、胎児肝臓キナーゼ−４（ＦＬＫ−４）およびｆｍｓチロシンキナーゼ−１（ｆｌｔ−１）またはＶＥＧＦＲ−１からなるＦＬＫファミリーがある。ＰＤＧＦとＦＬＫファミリーは、その２つのグループの類似点のために通常スプリットキナーゼドメイン受容体チロシンキナーゼのグループに組み込まれる（Ｌａｉｒｄ，Ａ．Ｄ．ａｎｄ Ｊ．Ｍ．Ｃｈｅｒｒｉｎｇｔｏｎ、Ｅｘｐｅｒｔ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ １２（１）：５１−６４、２００３）。受容体型チロシンキナーゼの詳細な論議については、参照により本明細書に組み込まれているＰｌｏｗｍａｎ ｅｔ ａｌ.、ＤＮ ＆ Ｐ ７（６）：３３４−３３９、１９９４を参照されたい。
【０００９】
非受容体型チロシンキナーゼも同様に、Ｓｒｃ、Ｆｒｋ、Ｂｔｋ、Ｃｓｋ、Ａｂｌ、Ｚａｐ７０、Ｆｅｓ／Ｆｐｓ、Ｆａｋ、Ｊａｋ、ＡｃｋおよびＬＩＭＫを含む様々なサブファミリーからなる。これらサブファミリーのそれぞれは、さらに異なるサブグループに細分化される。例えば、Ｓｒｃサブファミリーは最も大きいサブファミリーの１つである。それは、Ｓｒｃ、Ｙｅｓ、Ｆｙｎ、Ｌｙｎ、Ｌｃｋ、Ｂｌｋ、Ｈｃｋ、ＦｇｒおよびＹｒｋを含む。酵素のＳｒｃサブファミリーは発癌と関連している。非受容体型チロシンキナーゼの詳細な論議については、参照により本明細書に組み込まれているＢｏｌｅｎによる論文、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、８：２０２５−２０３１（１９９３）を参照されたい。
【００１０】
受容体型チロシンキナーゼおよび非受容体型チロシンキナーゼの両方は、癌、乾癬および過免疫応答などの状態に導く細胞シグナル伝達経路に関与する。
【００１１】
癌は、原因が障害のあるシグナル伝達に見られる疾患である。特に、チロシンキナーゼを介する調節解除されたシグナル伝達は、癌の成長および伝播において重要な役割を演じる（Ｂｌｕｍｅ−Ｊｅｎｓｅｎ，Ｐ．ａｎｄ Ｔ．Ｈｕｎｔｅｒ、Ｎａｔｕｒｅ ４１１：３５５−３６５、２００１；Ｈａｎａｈａｎ Ｄ．ａｎｄ Ｒ.Ａ.Ｗｅｉｎｂｅｒｇ、Ｃｅｌｌ １００：５７−７０、２０００）。チロシンキナーゼ、特に受容体型チロシンキナーゼおよびそれらに結合している成長因子は、このようにして、調節解除されたアポトーシス、組織への侵入、転移に関与し、癌を引き起こすシグナル伝達機構に一般に関与することができる。
【００１２】
特に、受容体型チロシンキナーゼは、癌の成長および伝播におけるさらに重要な機構である血管新生において役割を果たす（Ｍｕｓｔｏｎｅｎ ａｎｄ Ａｌｉｔａｌｏ、Ｊ.Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１２９：８９５−８９８、１９９５）。この受容体型チロシンキナーゼの１つは、ＦＬＫ−１とも呼ばれる胎児肝臓キナーゼ１である。ＦＬＫ−１のヒト類似体は、それが高い親和力でＶＥＧＦを結び付けるために血管内皮細胞成長因子受容体２またはＶＥＧＦＲ−２としても知られる、キナーゼ挿入受容体型チロシンキナーゼである。この受容体のマウス版はＮＹＫと呼ばれている（Ｏｅｌｒｉｃｈｓ ｅｔ ａｌ.、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ８（１）：１１−１５、１９９３）。ＶＥＧＦおよびＫＤＲは、血管内皮細胞の増殖ならびに血管の形成および出芽においてそれぞれ血管形成および血管新生と呼ばれる極めて重要な役割を果たすリガンド受容体の一組である。
【００１３】
血管新生は、血管内皮細胞成長因子（ＶＥＧＦ）の過剰活性を特徴とする。ＶＥＧＦは、実はリガンドのファミリーからなる（Ｋｌａｇｓｂｕｒｎ ａｎｄ Ｄ’Ａｍｏｒｅ、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ＆ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｖｉｅｗｓ ７：２５９−２７０、１９９６）。ＶＥＧＦは、高い親和力の膜貫通のチロシンキナーゼ受容体ＫＤＲと、Ｆｌｔ−１または血管内皮細胞成長因子受容体１（ＶＥＧＦＲ−１）としても知られる同類のｆｍｓチロシンキナーゼ−１とを結び付ける。細胞培養および遺伝子ノックアウト実験により、各受容体は、血管新生の異なる態様の一因となっていることが示されている。ＫＤＲは、ＶＥＧＦの分裂促進機能を媒介し、一方Ｆｌｔ−１は、例えば細胞癒着と関連するもののような非分裂促進機能を調節するようである。ＫＤＲ阻害はしたがって分裂を促進するＶＥＧＦの活動のレベルを調節する。実際に、腫瘍増殖は、ＶＥＧＦ受容体拮抗薬の抗血管新生効果により影響されることが示されている（Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ.、Ｎａｔｕｒｅ ３６２、ｐｐ.８４１−８４４、１９９３）。
【００１４】
ＶＥＧＦの発現量は、また、壊死部位に隣接する動物およびヒトの腫瘍の低酸素領域において著しく増加する。その上、ＶＥＧＦは、腫瘍遺伝子ｒａｓ、ｒａｆ、ｓｒｃおよびｐ５３の変異体（そのすべてが、癌の治療において重要のものである）の発現によって上方制御される。抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体は、ヌードマウスにおけるヒト腫瘍の成長を阻害する。同じ腫瘍細胞が、培養液中でＶＥＧＦを発現し続けるが、ここではその抗体は、分裂速度を減退しない、すなわち、腫瘍由来のＶＥＧＦは、自己分泌分裂促進因子としては機能しない。代わりに、ＶＥＧＦは、そのパラ分泌血管内皮細胞の走化活性および分裂促進活性を通じた血管新生を促進することによる生体内腫瘍成長に寄与する。これらのモノクローナル抗ＶＥＧＦ抗体は、また、胸腺欠損マウスにおける一般的にはあまり血管新生化していないヒト結腸癌の成長を阻害し、播種された細胞から生ずる腫瘍の数を減少させる。
【００１５】
固形腫瘍は、これらの腫瘍がその成長を支えるために必要な血管を形成するための血管新生に依存するため、チロシンキナーゼ阻害剤により治療することができる。これらの固形腫瘍としては、単球性白血病、脳、尿生殖路、リンパ系、胃、喉頭および肺の癌腫（肺腺癌および小細胞肺癌を含む）が挙げられる。
【００１６】
固形腫瘍のさらなる例としては、Ｒａｆ活性化腫瘍遺伝子（例えば、Ｋ−ｒａｓ、ｅｒｂ−Ｂ）の過剰発現または活性化が見られる癌腫が挙げられる。これらの癌腫としては膵癌および乳癌が挙げられる。これらのチロシンキナーゼおよび／またはＲａｆキナーゼの阻害剤は、したがって、これらの酵素によって引き起こされる増殖性疾患の予防および治療に適している。
【００１７】
ＶＥＧＦの血管新生作用は腫瘍に限定されない。ＶＥＧＦは、また、糖尿病性網膜症における網膜内またはその付近に生ずる血管新生作用にも関与する。網膜内のこの血管成長は、視覚退化を引き起こし、最終的には失明させる。眼のＶＥＧＦのｍＲＮＡおよび新血管新生をもたらすタンパク質のレベルは、霊長類における網膜静脈閉鎖症およびマウスにおける減少したｐＯ2レベル等の条件によりさらに上昇する。抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体またはＶＥＧＦ受容体免疫融合体の眼球内注射は、霊長類およびげっ歯類モデルの両方における眼の新血管新生を阻害する。ヒトの糖尿病性網膜症におけるＶＥＧＦの誘発の原因とは関係なく、眼のＶＥＧＦＦを阻害することは、この疾患の治療に対して適切である。
【００１８】
細胞質チロシンキナーゼドメインを取り除くために切断されているが膜アンカーを保持しているマウスＫＤＲ受容体のホモログである、Ｆｌｋ−１、Ｆｌｔ−１のＶＥＧＦ結合コンストラクトのウイルス中の発現は、おそらく膜貫通内皮細胞ＶＥＧＦ受容体との異種二量体形成の優勢な負のメカニズムによって、マウスにおける移植可能な神経膠芽腫の成長を事実上停止する。ヌードマウスにおける固形腫瘍として通常は成長する胚性幹細胞は、両方のＶＥＧＦ対立遺伝子がノックアウトされている場合は検知される腫瘍を形成しない。総合すれば、これらのデータは、固形腫瘍の成長におけるＶＥＧＦの役割を示している。ＫＤＲまたはＦｌｔ−１の阻害は、病的血管新生に関与し、これらの受容体の阻害剤は、血管新生が全体的な病変の一部である疾患、例えば、炎症、糖尿病網膜血管新生、ならびに腫瘍の成長は血管新生に依存することが知られているため（Ｗｅｉｄｎｅｒ ｅｔ ａｌ.、Ｎ.Ｅｎｇｌ.Ｊ.Ｍｅｄ.、３２４、ｐｐ.１−８、１９９１）、様々な形態の癌の治療に適している。
【００１９】
本発明は、また、ＶＥＧＦＲを制御、調節または阻害することができる化合物および制御されていないか障害のあるＶＥＧＦＲ活性と関連する疾患の阻止および／または治療のためのその使用を対象とする。特に、本発明による化合物は、したがって、いくつかの形態の癌の治療および病的な血管新生によって引き起こされる疾患、例えば糖尿病性網膜症または炎症などの場合に使用することができる。
【００２０】
さらに、本発明による化合物は、ＶＥＧＦＲの単離、および活性または発現の調査のために使用することができる。加えて、それらは、制御されていないか障害のあるＶＥＧＦＲ活性と関連する疾患の診断法に使用するのに特に適している。
【００２１】
内皮特異性受容体型のチロシンキナーゼＴＩＥ−２のリガンド、アンジオポエチン１（Ａｎｇ１）は、新規な血管新生因子である（Ｄａｖｉｓ ｅｔ ａｌ．Ｃｅｌｌ、１９９６、８７：１１６１−１１６９；Ｐａｒｔａｎｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ.Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ.、１２：１６９８−１７０７（１９９２）；米国特許第５５２１０７３号；同第５８７９６７２号；同第５８７７０２０号；および同第６０３０８３１号）。その頭文字のＴＩＥは、「ＩｇおよびＥＧＦホモロジードメインを有するチロシンキナーゼ」を表す。ＴＩＥは、もっぱら血管内皮細胞および初期の造血細胞中に発現する受容体型のチロシンキナーゼの種類を識別するために使用される。ＴＩＥ受容体キナーゼは、鎖間のジスルフィド架橋結合により安定化された細胞外の折り畳み単位からなるＥＧＦ様のドメインおよび免疫グロブリン（ＩＧ）様のドメインが存在することを特徴とする（Ｐａｒｔａｎｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｃｕｒｒ.Ｔｏｐｉｃｓ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ.Ｉｍｍｕｎｏｌ.、１９９９、２３７：１５９−１７２）。血管発達の初期段階にその機能を発揮するＶＥＧＦとは対照的に、Ａｎｇ１およびその受容体ＴＩＥ−２は、血管発達の後期中すなわち血管変換（血管内腔の形成に関係する変換）および成熟の途中に作用する（Ｙａｎｃｏｐｏｕｌｏｓ ｅｔ ａｌ．Ｃｅｌｌ、１９９８、９３：６６１−６６４；Ｐｅｔｅｒｓ，Ｋ．Ｇ.、Ｃｉｒｃ.Ｒｅｓ.、１９９８、８３（３）：３４２−３；Ｓｕｒｉ ｅｔ ａｌ．Ｃｅｌｌ ８７、１１７１−１１８０（１９９６））。
【００２２】
したがって、ＴＩＥ−２の阻害は、血管新生による新たな血管系の変換および成熟を妨げ、したがって血管新生の過程を妨げるはずであるものと期待される。その上、ＶＥＧＦＲ−２のキナーゼドメイン結合部位の阻害は、チロシン残基のリン酸化反応を妨害し、血管新生の開始を妨げることに寄与するであろう。したがって、ＴＩＥ−２および／またはＶＥＧＦＲ−２の阻害は、腫瘍の血管新生を妨げ、腫瘍の成長を遅くするかまたは完全になくすことに寄与することが想定されるはずである。
【００２３】
したがって、不適切な血管新生が伴う癌およびその他の疾患の治療は、ＴＩＥ−２および／またはＶＥＧＦＲ−２の阻害剤によって提供することができよう。
【００２４】
本発明は、ＴＩＥ−２を阻害、制御および／または調節することができる化合物ならびに制御されていないか支障のあるＴＩＥ−２活性に関連する疾患の阻止および／または治療のためのその使用を対象とする。特に本発明による化合物は、したがって、いくつかの形態の癌の治療および病的な血管新生によって引き起こされる疾患、例えば糖尿病性網膜症または炎症などの場合に使用することができる。
【００２５】
さらに、本発明による化合物は、ＴＩＥ−２の活性または発現の単離および調査のために使用することができる。加えて、それらは、制御されていないか支障のあるＴＩＥ−２活性に関連する疾患の診断法において使用するのに特に適している。
【００２６】
本発明による化合物は、さらに、いくつかの既存の癌化学療法および放射線治療における相加作用または相乗効果を提供することができかつ／またはいくつかの既存の癌化学療法および放射線治療の有効性を修復するために使用することができる。
【００２７】
本発明は、さらに、Ｒａｆキナーゼの阻害剤としての化合物に関する。タンパク質リン酸化は、細胞機能を制御する基本的過程である。タンパク質キナーゼとホスファターゼ両者の協調的作用がリン酸化の程度を制御し、それにより、特定の標的タンパク質の活性度を調整する。タンパク質リン酸化の主な役割の１つはシグナル伝達であり、そこで細胞外シグナルが、例えばｐ２１ras／ｒａｆ経路において次々と起こるタンパク質リン酸化および脱リン酸化現象により増幅され、広められる。
【００２８】
そのｐ２１ras遺伝子は、ハーベイ(Harvey)（Ｈ−Ｒａｓ）およびキルステン(Kirsten)（Ｋ−Ｒａｓ）ラット肉腫ウイルスの腫瘍遺伝子として発見された。ヒトにおいては、細胞Ｒａｓ遺伝子（ｃ−Ｒａｓ）の独特の変異が多くの様々なタイプの癌と関係している。Ｒａｓ遺伝子を常時活性型にするこれらの変異誘発遺伝子は、培養液中で例えばマウスの株化細胞ＮＩＨ３Ｔ３のような細胞を形質転換することが示されている。
【００２９】
ｐ２１ras腫瘍遺伝子は、ヒト固形癌の発生と進行に対する重要な因子であり、すべてのヒトの癌の３０％で変異する（Ｂｏｌｔｏｎ ｅｔ ａｌ.（１９９４）Ａｎｎ.Ｒｅｐ.Ｍｅｄ.Ｃｈｅｍ.、２９、１６５−７４；Ｂｏｓ.（１９８９）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ.、４９、４６８２−９）。その正常で変異のない形態においては、Ｒａｓタンパク質は、殆どすべての組織中の成長因子受容体により支配されるシグナル伝達カスケードの重要な要素である（Ａｖｒｕｃｈ ｅｔ ａｌ.（１９９４）Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ.Ｓｃｉ.、１９、２７９−８３）。
【００３０】
生物化学的には、Ｒａｓは、グアニンヌクレオチド結合タンパク質であり、ＧＴＰ結合活性型とＧＤＰ結合不活性型との間の循環は、Ｒａｓ遺伝子内在性ＧＴＰ加水分解酵素活性およびその他の調節タンパク質によって完全に制御される。Ｒａｓ遺伝子産物は、グアニン三リン酸（ＧＴＰ）およびグアニン二リン酸（ＧＤＰ）に結合し、ＧＴＰを加水分解してＧＤＰにする。ＲａｓはＧＴＰ結合状態で活性である。癌細胞のＲａｓ遺伝子変異体においては、内在性ＧＴＰ加水分解酵素の活性度は軽減され、そのタンパク質はその結果、例えば酵素Ｒａｆキナーゼ等の下流のエフェクターに構成的な成長シグナルを発信する。これによりこれらの変異体を運ぶ細胞の癌性の成長がもたらされる（Ｍａｇｎｕｓｏｎ ｅｔ ａｌ.（１９９４）Ｓｅｍｉｎ.Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｌ.、５，２４７−５３）。Ｒａｓプロト癌遺伝子は、より高等な真核生物中の受容体型および非受容体型チロシンキナーゼにより惹起される成長および分化シグナルを伝達するために機能的に損なわれていないＣ−Ｒａｆ−１プロト癌遺伝子を必要とする。
【００３１】
活性化したＲａｓはｃ−ｒａｆ１癌原遺伝子の活性化のために必要であるが、ＲａｓがＲａｆ−１タンパク質(Ｓｅｒ／Ｔｈｒ)キナーゼを活性化する生化学的ステップは、現在では十分に解明されている。非活性化させる抗体のＲａｆキナーゼへの投与によるか、Ｒａｆキナーゼの基質であるドミナントネガティブなＲａｆキナーゼもしくはドミナントネガティブなＭＥＫ(Ｒａｆキナーゼの基質である）の同時発現によりＲａｆキナーゼのシグナル伝達経路を阻害することによる活性なｒａｓの効力を阻害することにより、形質転換した細胞の正常な発育のフェノタイプへの復帰がもたらされることが示されている(Ｄａｕｍら、(１９９４)Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ.Ｓｃｉ.,１９,４７４〜８０；Ｆｒｉｄｍａｎら、(１９９４)Ｊ Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ.、 ２６９, ３０１０５〜８；Ｋｏｌｃｈら(１９９１)Ｎａｔｕｒｅ,３４９,４２６〜２８)およびＷｅｉｎｓｔｅｉｎ−Ｏｐｐｅｎｈｅｉｍｅｒらの概説、Ｐｈａｒｍ.＆Ｔｈｅｒａｐ.(２０００), ８８, ２２９〜２７９を参照されたい）。
【００３２】
同様に、Ｒａｆキナーゼの阻害(アンチセンスオリゴデオキシヌクレオチドによる)は、インビトロおよびインビボにおいてさまざまなヒト腫瘍タイプの成長の阻害と関連付けられている(Ｍｏｎｉａら、Ｎａｔ.Ｍｅｄ.１９９６, ２, ６６８〜７５)。
【００３３】
Ｒａｆセリンおよびスレオニン特異性タンパク質キナーゼは、さまざまな細胞系における細胞増殖を刺激する細胞質内酵素である(Ｒａｐｐ,Ｕ.Ｒ.ら、(１９８８)Ｔｈｅ ｏｎｃｏｇｅｎｅ ｈａｎｄｂｏｏｋ中；Ｔ.Ｃｕｒｒａｎ, Ｅ.Ｐ.ＲｅｄｄｙおよびＡ.Ｓｋａｌｋａ(編集者）， Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ；Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ, ｐｐ.２１３〜２５３；Ｒａｐｐ,Ｕ.Ｒ.ら、(１９８８) Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｓｙｍ.Ｑｕａｎｔ.Ｂｉｏｌ. ５３：１７３〜１８４；Ｒａｐｐ,Ｕ.Ｒ.ら、(１９９０)Ｉｎｖ Ｃｕｒｒ.Ｔｏｐ.Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ.Ａｍｕｎｏｌ.ＰｏｔｔｅｒおよびＭｅｌｃｈｅｒｓ(編集者), Ｂｅｒｌｉｎ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ １６６：１２９〜１３９）。
【００３４】
３個のアイソザイムが解明されている：
Ｃ−Ｒａｆ（Ｒａｆ−１）（Ｂｏｎｎｅｒ,Ｔ.ｌ．ｅｔ ａｌ.（１９８６）Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１４：１００９−１０１５）、Ａ−Ｒａｆ（Ｂｅｃｋ,Ｔ.Ｗ．ｅｔ ａｌ.（１９８７）Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１５：５９５−６０９）、およびＢ−Ｒａｆ（Ｑｋａｗａ，Ｓ．ｅｔ ａｌ.（１９９８）Ｍｏｌ.Ｃｅｌｌ.Ｂｉｏｌ.８：２６５１−２６５４；Ｓｉｔｈａｎａｎｄａｍ,Ｇ．ｅｔ ａｌ.（１９９０）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ：１７７５）。これらの酵素は、様々な組織においてそれらの発現を異にする。Ｒａｆ−１は、試験したすべての臓器およびすべての株化細胞で発現し、Ａ−ＲａｆおよびＢ−Ｒａｆは、泌尿生殖器および脳組織においてそれぞれ発現する（Ｓｔｏｒｍ,Ｓ.Ｍ．（１９９０）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ５：３４５−３５１）。
【００３５】
Ｒａｆ遺伝子は、プロト癌遺伝子であり、それらは特に別の形態で発現した場合に細胞の悪性転換を起こし得る。発癌活性を引き起こす遺伝子の変化は、タンパク質のＮ末端の負の調節ドメインを除去または妨害することによって常時活性型のタンパク質キナーゼを生ずる（Ｈｅｉｄｅｃｋｅｒ,Ｇ．ｅｔ ａｌ.（１９９０）Ｍｏｌ.Ｃｅｌｌ.Ｂｉｏｌ.１０：２５０３−２５１２；Ｒａｐｐ,Ｕ.Ｒ．ｅｔ ａｌ.（１９８７）ｉｎ Ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ；Ｓ．Ａ．Ａａｒｏｎｓｏｎ、Ｊ．Ｂｉｓｈｏｐ、Ｔ．Ｓｕｇｉｍｕｒａ、Ｍ．Ｔｅｒａｄａ、Ｋ．Ｔｏｙｏｓｈｉｍａ ａｎｄ Ｐ．Ｋ．Ｖｏｇｔ(ｅｄｓ.)Ｊａｐａｎ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｋｙｏ）。大腸菌発現ベクターと共に調製される発癌活性化型であるが野生型ではない種類のＲａｆタンパク質のＮＩＨ３Ｔ３細胞中への微量注入は、形態変換をもたらし、ＤＮＡの合成を促進する（Ｒａｐｐ,Ｕ.Ｒ．ｅｔ ａｌ.（１９８７）ｉｎ Ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ；Ｓ.Ａ.Ａａｒｏｎｓｏｎ、Ｊ.Ｂｉｓｈｏｐ、Ｔ.Ｓｕｇｉｍｕｒａ、Ｍ.Ｔｅｒａｄａ、Ｋ.Ｔｏｙｏｓｈｉｍａ、ａｎｄ Ｐ.Ｋ.Ｖｏｇｔ(ｅｄｓ.) Ｊａｐａｎ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｋｙｏ；Ｓｍｉｔｈ,Ｍ.Ｒ．ｅｔ ａｌ.（１９９０）Ｍｏｌ.Ｃｅｌｌ.Ｂｉｏｌ.１０：３８２８−３８３３）。
【００３６】
したがって、活性化Ｒａｆ−１は細胞増殖の細胞内活性化因子である。Ｒａｆ−１タンパク質セリンキナーゼは、Ｒａｆ発癌遺伝子が、細胞突然変異（Ｒａｓ遺伝子復帰変異体細胞）または抗Ｒａｓ抗体の微量注入のいずれかによる細胞のＲａｓ遺伝子活性の遮断に由来するアポトーシスに打ち勝つので、マイトジェンシグナル伝達の下流エフェクター候補である（Ｒａｐｐ,Ｕ.Ｒ．ｅｔ ａｌ.（１９８８）ｉｎ Ｔｈｅ Ｏｎｃｏｇｅｎｅ Ｈａｎｄｂｏｏｋ、Ｔ.Ｃｕｒｒａｎ、Ｅ.Ｐ.Ｒｅｄｄｙ ａｎｄ Ａ.Ｓｋａｌｋａ(ｅｄｓ.)、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ；Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ、ｐｐ.２１３−２５３；Ｓｍｉｔｈ,Ｍ.Ｒ．ｅｔ ａｌ.（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ（Ｌｏｎｄｏｎ）３２０：５４０−５４３）。
【００３７】
Ｃ−Ｒａｆの機能は、様々な膜結合型の発癌遺伝子による形質転換および血清中に含まれるマイトジェンによる増殖促進に対して必要である（Ｓｍｉｔｈ,Ｍ.Ｒ．ｅｔ ａｌ.（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ（Ｌｏｎｄｏｎ）３２０：５４０−５４３）。Ｒａｆ−１タンパク質セリンキナーゼ活性は、マイトジェンによりリン酸化を介して調節され（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ,Ｄ.Ｋ．ｅｔ ａｌ.（１９８９）Ｃｅｌｌ ５８：６４８−６５７）、それはまた細胞内分布に影響を及ぼす（Ｏｌａｈ，Ｚ.、（１９９１）Ｅｘｐ.Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ.８４：４０３；Ｒａｐｐ,Ｕ.Ｒ．ｅｔ ａｌ.（１９８８）Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｓｙｍ.Ｑｕａｎｔ.Ｂｉｏｌ.５３：１７３−１８４）。Ｒａｆ−１を活性化する成長因子としては、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ,Ｄ.Ｋ．ｅｔ ａｌ.（１９８８）Ｐｒｏｃ.Ｎａｔｌ.Ａｃａｄ.Ｓｃｉ.ＵＳＡ ８５：８８５５−８８５９）、コロニー刺激因子（Ｂａｃｃａｒｉｎｉ，Ｍ.、（１９９０）ＥＭＢＯ Ｊ．９：３６４９−３６５７）、インスリン（Ｂｌａｃｋｓｈｅａｒ,Ｐ.Ｊ. ｅｔ ａｌ.、（１９９０）Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ．２６５：１２１１５−１２１１８）、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ,Ｒ.Ｋ．ｅｔ ａｌ.（１９８８）Ｐｒｏｃ.Ｎａｔｌ.Ａｃａｄ.Ｓｃｉ.ＵＳＡ ８５：８８５５−８８５９）、インターロイキン２（Ｔｕｒｎｅｒ,Ｂ.Ｃ．ｅｔ ａｌ.（１９９１）Ｐｒｏｃ.Ｎａｔｌ.Ａｃａｄ.Ｓｃｉ.ＵＳＡ ８８：１２２７）、ならびにインターロイキン３および顆粒状マクロファージコロニー刺激因子（Ｃａｒｒｏｌｌ,Ｍ.Ｐ．ｅｔ ａｌ.（１９９０）Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ.２６５：１９８１２−１９８１７）が挙げられる。
【００３８】
細胞のマイトジェン処理の後、一過性に活性化されたＲａｆ−１タンパク質セリンキナーゼは、核周囲領域および核に転位する（Ｏｌａｈ，Ｚ．ｅｔ ａｌ.（１９９１）Ｅｘｐ.Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．８４：４０３；Ｒａｐｐ,Ｕ.Ｒ．ｅｔ ａｌ.（１９８８）Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｂｏｒ Ｓｙｍ.Ｑｕａｎｔ.Ｂｉｏｌ．５３：１７３−１８４）。活性化Ｒａｆを含む細胞は、それらの遺伝子発現のパターンが改変され（Ｈｅｉｄｅｃｋｅｒ，Ｇ．ｅｔ ａｌ.（１９８９）「Ｇｅｎｅｓ ａｎｄ ｓｉｇｎａｌ ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ｍｕｌｔｉｓｔａｇｅ ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ」、Ｎ．Ｃｏｌｂｕｒｎ(ｅｄ.)、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ｐｐ.３３９−３７４）、Ｒａｆ発癌遺伝子は、一過性トランスフェクションアッセイにおいて、Ａｐ−Ｉ／ＰＥＡ３依存性のプロモーターからの転写を活性化する（Ｊａｍａｌ，Ｓ．ｅｔ ａｌ.（１９９０）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３４４：４６３−４６６；Ｋａｉｂｕｃｈｉ，Ｋ．ｅｔ ａｌ.（１９８９）Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ.２６４：２０８５５−２０８５８；Ｗａｓｙｌｙｋ，Ｃ．ｅｔ ａｌ.（１９８９）Ｍｏｌ.Ｃｅｌｌ.Ｂｉｏｌ．９：２２４７−２２５０）。
【００３９】
細胞外マイトジェンによるＲａｆ−１活性化に対しては少なくとも２つの独立した経路が存在し、１つはタンパク質キナーゼＣ（ＫＣ）を必要とし、２番目はタンパク質チロシンキナーゼにより起こされる（Ｂｌａｃｋｓｈｅａｒ,Ｐ.Ｊ．ｅｔ ａｌ.（１９９０）Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ.２６５：１２１３１−１２１３４；Ｋｏｖａｃｉｎａ,Ｋ.Ｓ．ｅｔ ａｌ.（１９９０）Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ．２６５：１２１１５−１２１１８；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ,Ｄ.Ｋ．ｅｔ ａｌ.（１９８８）Ｐｒｏｃ.Ｎａｔｌ.Ａｃａｄ.Ｓｃｉ.ＵＳＡ ８５：８８５５−８８５９；Ｓｉｅｇｅｌ,Ｊ.Ｎ．ｅｔ ａｌ.（１９９０）Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ．２６５：１８４７２−１８４８０；Ｔｕｒｎｅｒ,Ｂ.Ｃ．ｅｔ ａｌ.（１９９１）Ｐｒｏｃ.Ｎａｔｌ.Ａｃａｄ.Ｓｃｉ.ＵＳＡ ８８：１２２７）。いずれの場合も、活性化はＲａｆ−１タンパク質のリン酸化を伴う。Ｒａｆ−１のリン酸化は、自己リン酸化により増幅されたキナーゼカスケードの結果であるかまたはジアシルグリセロールによるＰＫＣ活性化と類似した潜在的な活性化リガンドのＲａｆ−１調節ドメインへの結合により開始される自己リン酸化によりもっぱら引き起こされ得る（Ｎｉｓｈｉｚｕｋａ，Ｙ.（１９８６）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３３：３０５−３１２）。
【００４０】
本発明は、Ｒａｆキナーゼを阻害、制御、および／または調節することができる化合物および制御されていないか障害のあるＲａｆキナーゼ活性と関連する疾患の阻止および／または治療のためのその使用を対象とする。特に、本発明による化合物は、したがって、いくつかの形態の癌の治療に使用することができる。既に上で述べたように、本発明による化合物は、さらに、いくつかの既存の癌化学療法および放射線治療における相加作用または相乗効果を提供することができかつ／またはいくつかの既存の癌化学療法および放射線治療の有効性を修復するために使用することができる。
【００４１】
さらに、本発明による化合物は、Ｒａｆキナーゼの活性または発現の単離および調査のために使用することができる。加えて、それらは、制御されていないか支障のあるＲａｆキナーゼ活性に関連する疾患の診断法において使用するのに特に適している。
【００４２】
細胞制御を達成する主要な機構の１つは、細胞内の生化学的経路を順次調節する膜を越える細胞外シグナルの伝達である。タンパク質リン酸化反応は、細胞内シグナルが分子から分子に伝播し、最後に細胞の応答をもたらす１つの過程である。これらのシグナル伝達カスケードは、多くのタンパク質キナーゼならびにホスファターゼの存在から明らかなように、高度に制御され、しばしば重複する。タンパク質のリン酸化反応は、大部分はセリン、トレオニンまたはチロシン残基において発生し、タンパク質キナーゼは、したがって、それらのリン酸化反応部位の特異性により、すなわち、セリン／トレオニンキナーゼおよびチロシンキナーゼに分類されている。リン酸化反応は、そのような細胞内の遍在性の過程であるためと、細胞の表現型が、これらの経路の活性度に大きく影響されるために、多数の病状および／または疾患が、キナーゼカスケードの分子成分における異常な活性化または機能の変異のいずれかに起因するものと現在では考えられている。このため、多くの注目がそれらの活性を調節することができるこれらタンパク質および化合物の特徴付けに向けられた（総説参照：Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ−Ｏｐｐｅｎｈｅｉｍｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｐｈａｒｍａ.＆.Ｔｈｅｒａｐ.、２０００、８８、２２９−２７９）。キナーゼの阻害、制御および調節に対する様々な可能性としては、例えば、抗体、アンチセンスリボザイムおよび阻害剤の提供が含まれる。腫瘍学の研究において、チロシンキナーゼは特に高度に有望な標的である。したがって、多数の合成小分子が、癌の治療のためのチロシンキナーゼ阻害剤として、例えばイレッサ(Iressa)（登録商標）またはグリーベック(Gleevec)（登録商標）など、臨床的な開発がなされている。しかしながら、副作用、投薬量、腫瘍の抵抗、腫瘍特異性および患者選択など多数の問題を今なお解決しなければならない。
【００４３】
ＷＯ０２／４４１５６は、ＴＩＥ−２および／またはＶＥＧＦＲ２阻害剤としてのベンズイミダゾール誘導体について記載している。ＷＯ９９／３２４３６、ＷＯ０２／０６２７６３、ＷＯ９９／３２４５５、ＷＯ００／４２０１２およびＷＯ０２／０８５８５７は、Ｒａｆキナーゼ阻害剤としての尿素誘導体を開示している。ＷＯ９８／２２１０３Ａ１は、Ｒａｆキナーゼ阻害剤としてのアリールアミド誘導体を開示している。
【００４４】
本発明は、価値ある特性を有する新規な化合物、特に薬物の調製のために使用することができるものを見出すことを基本的に目的とした。
【００４５】
チロシンキナーゼおよび／またはＲａｆキナーゼのシグナル伝達を特異的に阻害、制御および／または調節する小化合物の同定および提供が、したがって望ましく、本発明の狙いである。
【００４６】
本発明による化合物およびその塩は、非常に価値のある薬理学的特性を有しており、一方で良好な耐用性を示すことが見出されている。
【００４７】
特に、本発明による化合物は、意外にも効果的なキナーゼ阻害剤であることが見出された。
【００４８】
したがって、それらは、チロシンキナーゼ阻害作用、特にＴＩＥ−２および／またはＶＥＧＦＲ阻害作用を示す。さらに、本発明によれば、Ｒａｆキナーゼの効果的な阻害剤である。
【００４９】
(発明の概要)
本発明は上記の式Ｉの化合物に関する。
【００５０】
本発明を通して、１回を超えて出現するすべての基は、同一であるかまたは異なることができ、すなわち互いに独立している。上文および下文で、基およびパラメータは、別に明白に記述されていない限り、式Ｉに対して示された意味を有する。したがって、本発明は、特に、前記基の少なくとも１個が以下に示す好ましい意味の１つを有する式Ｉの化合物に関する。
【００５１】
Ｈｅｔは、１、２、３または４個のＮ、Ｏおよび／またはＳ原子を有する芳香族複素環、例えば、フラニル、ピロリル、チオフェニル、ピラゾリル、イミダゾリル、イソアゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラニル、ピラジニル、ピロリル、ピラジジニル、プリニル、プテリジニル、アゼピニル、ジアゼピニル、インドリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、キノリニル、イソキノリニル、フェナジニルなどを意味する。Ｈｅｔは、特に好ましくはピリジニルを意味する。
【００５２】
芳香族基は、例えば、フェニルまたはナフチルまたはビフェニルなど芳香族Ｃ6〜Ｃ10炭素環を意味する。芳香族基は、特に好ましくはフェニルを意味する。
【００５３】
Ａは、アルキルを意味し、非分枝（線状）であるかまたは分枝しており、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個のＣ原子を有する。１個または２個のＣＨ2基が、ＯもしくはＳ原子および／または−ＣＨ＝ＣＨ−基により置換されていてもよく、かつ／あるいはさらに１〜７個のＨ原子が、Ｈａｌにより置換されていてもよい。Ａは、好ましくはメチルを意味し、さらにエチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓ−ブチルまたはｔ−ブチル、さらにまた、ペンチル、１−、２−もしくは３−メチルブチル、１,１−、１,２−もしくは２,２−ジメチルプロピル、１−エチルプロピル、ヘキシル、１−、２−、３−もしくは４−メチルペンチル、１,１−、１,２−、１,３−、２,２−、２,３−もしくは３,３−ジメチルブチル、１−もしくは２−エチルブチル、１−エチル−１−メチルプロピル、１−エチル−２−メチルプロピル、１,１,２−もしくは１,２,２−トリメチルプロピルを、さらに好ましくは、例えばトリフルオロメチルを意味する。
【００５４】
Ａは、特に好ましくは、１、２、３、４、５または６個のＣ原子を有するアルキル、好ましくは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルまたは１,１,１−トリフルオロエチルを意味する。
【００５５】
アリールは、非置換であるか、Ａ、フェニル、ＯＡ、ＳＡ、Ｏフェニル、ＮＨ2、ＮＡ2、Ｈａｌ、ＮＯ2、ＣＮ、(ＣＨ2)mＣＯＯＲ4、(ＣＨ2)mＣＯＮ(Ｒ4)2、ＣＯＲ4、ＣＨＯ、ＣＯアリール、Ｓ(Ｏ)mＡ、ＮＨＣＯＡまたはＮＨＳＯ2Ａにより、一置換、二置換または多置換されているフェニルを好ましくは意味する。
【００５６】
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを意味する。
【００５７】
用語「基(group)」「残基(residue)」「ラジカル(radical)」または「基類(groups)」、「残基類(residues)」、「ラジカル類(radicals)」は、当技術分野では通例であるように、ここでは同意語として使用される。
【００５８】
用語「置換された」は、別に特定しない限り、複数個の程度の異なる置換が可能である上記の置換基による置換を好ましくは指す。
【００５９】
これらの化合物のすべての生理的に許容される塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）は、同様に本発明によるものである。
【００６０】
式Ｉの化合物は、１個または複数のキラル中心を有することができる。したがって、それらは、様々な鏡像異性の形態で発生し、ラセミ形態または光学的に活性な形態で存在することができる。本発明は、したがって、これらの化合物の光学的に活性な形態（立体異性体）、鏡像異性体、ラセミ体、ジアステレオマーおよび溶媒和物にも関する。
【００６１】
本発明による化合物のラセミ体または立体異性体の医薬品有効性は異なる可能性があるため、鏡像異性体を使用することが望ましいことがある。これらの場合においては、最終製品が、または別法では中間体が、既に当業者には周知の化学的または物理的手段によって鏡像異性体化合物に分離されるか、実に合成においてさえそのようなものとして使用される。
【００６２】
ラセミ体アミンの場合、ジアステレオマーが、光学的に活性な分割剤との反応により形成される。適当な分割剤は、例えば、Ｒ型またはＳ型の、酒石酸、ジアセチル酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸、乳酸、適切にはＮ−保護されたアミノ酸（例えば、Ｎ−ベンゾイルプロリンまたはＮ−ベンゼンスルホニルプロリン）などの光学的に活性な酸または光学的に活性な様々なカンファースルホン酸である。光学的に活性な分割剤（例えば、シリカゲルに固定化したジニトロベンゾイルフェニルグリシン、セルローストリアセテートまたは炭水化物のその他の誘導体またはキラルに誘導体化されたメタクリルポリマー）を用いる鏡像異性体のクロマトグラフ分割もまた有利である。この目的のための適当な溶離液は、例えば、ヘキサン／イソプロパノール／アセトニトリルの割合が例えば８２：１５：３であるような水性またはアルコール性溶媒混合物である。
【００６３】
Ｒ1は、いずれの場合も独立に、Ｈ、Ａ、アリール、ＯＲ4、ＳＲ4、Ｏアリール、Ｓアリール、Ｎ(Ｒ4)2、ＮＨアリール、Ｈａｌ、ＮＯ2、ＣＮ、(ＣＨ2)mＣＯＯＲ4、(ＣＨ2)mＣＯＯアリール、(ＣＨ2)mＣＯＮ(Ｒ4)2、(ＣＨ2)mＣＯＮＨアリール、ＣＯＲ4、ＣＯアリール、Ｓ(Ｏ)mＡ、Ｓ(Ｏ)mアリール、ＮＨＣＯＡ、ＮＨＣＯアリール、ＮＨＳＯ2Ａ、ＮＨＳＯ2アリールまたはＳＯ2Ｎ(Ｒ4)2、Ｏ(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)2、Ｏ(ＣＨ2)nＮＨＲ3、Ｏ(ＣＨ2)nＮＨ2、Ｏ(ＣＨ2)n−モルホリン、Ｏ(ＣＨ2)n−ピペラジン、Ｏ(ＣＨ2)n−ピロリジン、Ｏ(ＣＨ2)n−ピペリジン、Ｏ−ピペリジン、Ｏ(ＣＨ2)n−オキソピペラジン、Ｏ(ＣＨ2)n−オキソモルホリン、Ｏ(ＣＨ2)n−オキソピロリジン、Ｏ(ＣＨ2)nＣ(ＣＨ3)2(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)2、Ｎ(ＣＨ2)nＣ(ＣＨ3)2(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)2、Ｏ(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmＡ、Ｏ(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmＮ(Ｒ4)Ａ、Ｏ(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmアリール、(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmＡ、(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmＮ(Ｒ4)Ａ、(ＣＨ2)nＮ(Ｒ4)ＳＯmアリール、Ｏ(ＣＨ2)nＳＯmＡ、Ｏ(ＣＨ2)nＳＯmＮ(Ｒ4)Ａ、Ｏ(ＣＨ2)nＳＯmアリール、(ＣＨ2)nＳＯmＡ、(ＣＨ2)nＳＯmＮ(Ｒ4)Ａおよび／または(ＣＨ2)nＳＯmアリールを意味する。Ｒ1は、特に好ましくは、それぞれの個々の場合に、独立に、Ｈ、Ａ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＯＡ、ＣＦ3および／またはＣＯＮＨＡを意味する。
【００６４】
Ａｒ1は、芳香族基を好ましくは意味し、Ａｒ1は、特に好ましくはＲ1により一置換または二置換されているフェニルを意味する。ここでは、Ｒ1は、ＯＨまたはＯＡ、Ｈａｌ、ＣＦ3、Ａ、例えばメチルまたはイソプロピルを好ましくは意味する。
【００６５】
Ａｒ2は、芳香族基を、特に好ましくは、非置換のフェニルを意味する。
【００６６】
Ａｒ3は、芳香族複素環を好ましくは意味し、Ａｒ3は、特に好ましくは、Ｒ1により一置換されているピリジニルを意味する。Ｒ1は、ここで好ましくはＣＯＮＨＡまたはＣＯＮＨ2、特に好ましくはＣＯＮＨＣＨ3を意味する。
【００６７】
Ｙは、好ましくはＯまたはＳ、特に好ましくはＯを意味する。
【００６８】
Ｚは、好ましくはＯまたはＣＲ1Ｒ1を意味し、特に好ましくはＯを意味する。
【００６９】
Ｒ2は、好ましくはＨまたはＡ、特に好ましくはＨを意味する。
【００７０】
特定の選択は、
Ａｒ1が、Ｒ1により一置換または二置換されているフェニルを意味し、
Ａｒ2が、非置換のフェニルを意味し、
Ａｒ3が、Ｒ1により一置換されているピリジニルを意味し、
Ｙが、ＯまたはＳを意味し、
Ｚが、ＯまたはＣＲ1Ｒ1を意味し、
Ｒ2が、Ｈを意味し、
Ｒ1が、各場合において独立に、Ｈ、Ａ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＯＡ、ＣＦ3、および／またはＣＯＮＨＡを意味する
式Ｉの化合物、ならびに医薬品として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）に与えられる。
【００７１】
特定の選択は、したがって、式ＩＶの化合物
【００７２】
【化２】
2007523921.tif 000004
【００７３】
（式中、
Ｙは、ＯまたはＳを意味し、
Ｒaは、各場合に独立に、Ａ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＯＡまたはＣＦ3を意味し、
Ｒbは、ＣＯＮＨＡを意味し、
ｏは、１または２を意味し、
ｐは、１を意味する）
ならびに医薬品として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）に与えられる。
【００７４】
極めて特定的な選択は、本発明による以下の化合物ならびに医薬品として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）に与えられる。
【００７５】
ａ）Ｎ−メチル−４−［３−（２−ヒドロキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｂ）Ｎ−メチル−４−［４−（２−ヒドロキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｃ）Ｎ−メチル−４−［３−（２−ヒドロキシ−５−メチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｄ）Ｎ−メチル−４−［４−（２−ヒドロキシ−５−メチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｅ）Ｎ−メチル−４−［４−（２−ヒドロキシ−４−メチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｆ）Ｎ−メチル−４−［３−（４−フルオロ−２−ヒドロキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｇ）Ｎ−メチル−４−［３−（５−クロロ−２−ヒドロキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｈ）Ｎ−メチル−４−［３−（４−クロロ−２−ヒドロキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｉ）Ｎ−メチル−４−［３−（２，５−ジメトキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｊ）Ｎ−メチル−４−［３−（５−クロロ−２−メトキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｋ）Ｎ−メチル−４−［３−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ヒドロキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
Ｉ）Ｎ−メチル−４−［３−（ヒドロキシトリフルオロメチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｍ）Ｎ−メチル−４−［３−（２−メトキシ−５−トリフルオロメチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｎ）Ｎ−メチル−４−［３−（５−エタンスルホニル−２−ヒドロキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｏ）Ｎ−メチル−４−｛３−［２−（２−ジメチルアミノエトキシ）−５−トリフルオロメチルフェニルカルバモイル］フェノキシ｝ピリジン−２−カルボキサミド
ｐ）Ｎ−メチル−４−［３−（２−メトキシ−５−トリフルオロメチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｑ）Ｎ−メチル−４−［３−（３−トリフルオロメタンスルホニルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｒ）Ｎ−メチル−４−［３−（１Ｈ−インダゾール−７−イルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｓ）Ｎ−メチル−４−［３−（１Ｈ−インドール−７−イルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｔ）Ｎ−メチル−４−［３−（５−ブロモ−１Ｈ−インドール−７−イルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｕ）Ｎ−メチル−４−［３−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−メトキシフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｖ）Ｎ−メチル−４−［３−（３−トリフルオロメチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｗ）Ｎ−メチル−４−［３−（４−トリフルオロメチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｘ）Ｎ−メチル−４−［３−（２−メトキシ−５−メチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｙ）Ｎ−メチル−４−［３−（３−クロロ−４−フルオロフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｚ）Ｎ−メチル−４−［３−（３−クロロフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ａａ）Ｎ−メチル−４−［３−（４−フルオロ−３−トリフルオロメチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド
ｂｂ）Ｎ−メチル−４−［３−（３−フルオロ−４−トリフルオロメチルフェニルカルバモイル）フェノキシ］ピリジン−２−カルボキサミド。
【００７６】
医薬品としてまたは生理的に許容される誘導体とは、例えば、本発明による化合物の塩および同じくいわゆるプロドラッグ化合物も意味するものと解釈される。かかる誘導体は当業者には周知である。生理的に許容されるということについての概要は、Ｂｕｒｇｅｒ’ｓ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、５ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｖｏｌ.１：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅに示されている。プロドラッグ化合物とは、生命体中で急速に開裂または遊離されて本発明による効果的な化合物を生じる、例えば、アルキルもしくはアシル基、糖またはオリゴペプチドにより修飾されている式Ｉの化合物を意味するものと解釈される。これらには、例えばＩｎｔ.Ｊ.Ｐｈａｒｍ．１１５（１９９５）、６１−６７に記載されているような本発明による化合物の生分解性ポリマー誘導体も含まれる。
【００７７】
適当な酸付加塩は、すべての生理的にまたは薬理学的に許容される酸の無機塩または有機塩、例えば、ハロゲン化物特に塩酸塩または臭化水素酸塩、乳酸塩、硫酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、シュウ酸塩、酢酸塩、リン酸塩、メチルスルホン酸塩またはｐ−トルエンスルホン酸塩である。
【００７８】
式Ｉの化合物の溶媒和物とは、不活性溶媒分子が式Ｉの化合物上にそれら相互の引力によって生じる付加物を意味するものと解釈される。溶媒和物は、例えば一水和物または二水和物等の水和物、あるいはアルコラート、すなわちアルコール例えばメタノールまたはエタノールとの付加化合物である。
【００７９】
「有効量」という表現は、組織、系、動物またはヒトにおいて、例えば研究者または医師により探究または所望される生物学的または医学的反応を引き起こす薬物または医薬活性成分の量を意味する。
【００８０】
加えて、「治療的有効量」という表現は、この量を受けなかった対象と比較して、以下の、疾患、症候群、疾患状態、健康状態、障害または副作用の改善された治療、治癒、予防または除去、または同様に疾患、病状または障害の進行の減少の結果をもたらす量を意味する。「治療的有効量」という表現は、また、通常の生理的機能を増すために有効である量も包含する。
【００８１】
本発明は、また、本発明による式Ｉの化合物の混合物、例えば２つのジアステレオマーの、例えば１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：１０、１：１００または１：１０００の混合物に関する。これらは、特に、立体異性を示す化合物の混合物であることが好ましい。
【００８２】
本発明は、また、式Ｉの化合物、ならびに生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体を調製する方法であって、式ＩＩの化合物
Ａｒ1−ＮＨＲ2      ＩＩ
（式中、Ａｒ1およびＲ2は、請求項１で示した意味を有する）を、式ＩＩＩの化合物
【００８３】
【化３】
2007523921.tif 000005
【００８４】
（式中、Ｙ、Ａｒ2、ＺおよびＡｒ3は、請求項１で示した意味を有しており、
Ｌは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉまたは遊離もしくは反応するように官能的に修飾されているＯＨ基を意味する）と反応させ、
かつ／あるいは式Ｉの塩基または酸をその塩の１つに変換することを特徴とする方法にも関する。
【００８５】
各反応を段階的に行うこともまた可能である。
【００８６】
出発化合物は、一般に知られている。それらが新規である場合は、それらはそれ自体知られている方法によって調製することができる。
【００８７】
出発材料は、必要に応じて、また、それらが反応混合物から分離せず、それよりむしろ直ちに式Ｉの化合物にさらに変換するように、原位置で形成させることもできる。
【００８８】
出発材料は、密閉容器またはオートクレーブ中無溶媒下で組み合わせる（融解する）ことができる。しかしながら、出発材料を不活性溶媒の存在下で反応させることもまた可能である。
【００８９】
式ＩＩおよびＩＩＩの化合物の反応は当業者には周知の方法によって行われる。その反応は、初めに、適当な溶媒中、特に不活性溶媒中で行う。
【００９０】
適当な不活性溶媒は、例えば、ヘプタン、ヘキサン、石油エーテル、ベンゼン、トルエン、キシレン、トリクロロエチレン、１，２−ジクロロエタンテトラクロロメタン、クロロホルムまたはジクロロメタン；メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノールまたはｔ−ブタノール等のアルコール類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル（インドールの窒素上の置換に好ましい）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）またはジオキサン等のエーテル類；エチレングリコールモノメチルまたはモノエチルエーテル（メチルグリコールまたはエチルグリコール）、エチレングリコールジメチルエーテル（ジグライム）等のグリコールエーテル類；アセトンまたはブタノン等のケトン類；アセトアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）またはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）等のアミド類；アセトニトリル等のニトリル類；酢酸エチル等のエステル類；例えば酢酸または無水酢酸などのカルボン酸類または酸無水物類；ニトロメタンまたはニトロベンゼン等のニトロ化合物類、また、必要な場合は、前記溶媒の相互の混合物または水との混合物である。特に好ましいのは、ジメチルホルムアミドである。
【００９１】
反応はまた、好ましくは水相およびベンゼンまたはトルエン相を用いた不均一相で行うことができる。この場合、相間移動触媒、例えばヨウ化テトラブチルアンモニウムなど、および場合によってアシル化触媒、例えばジメチルアミノピリジンなどが使用される。
【００９２】
溶媒の量は重要ではなく、反応すべき式Ｉの化合物の１ｇ当たり、好ましくは１０ｇから５００ｇの溶媒を加えることができる。
【００９３】
適当な反応温度は、１０から１８０℃、好ましくは１５から１５０℃、まさしく特に好ましくは２０から１２０℃の温度である。
【００９４】
反応は、好ましくは１から２００バールの圧力、特に好ましくは大気圧で行う。
【００９５】
反応は、４から１０のｐＨで好ましくは行う。
【００９６】
反応の持続時間は選択された反応条件に依存する。一般に、反応の持続時間は、１０分から１０日間、好ましくは２０分から２４時間である。
【００９７】
式ＩＩおよび式ＩＩＩの化合物、ならびにまた、それらを調製するための出発材料は、さらに、文献（例えば、Ｈｏｕｂｅｎ−ＷｅｙｌのＭｅｔｈｏｄｅｎ ｄｅｒ ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ Ｃｈｅｍｉｅ［有機化学の方法］、Ｇｅｏｒｇ−Ｔｈｉｅｍｅ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ等の標準的な著作物）に記載されている既知の方法により、例えば既知であって前記反応に適した条件下で調製される。それ自体知られている別形を使用することもできるがここでさらに詳しく記述することはしない。
【００９８】
溶媒の除去後、式Ｉの化合物は、通常の後処理ステップ、例えば、反応混合物への水の添加および抽出などによって得ることができる。生成物のさらなる精製のために、続いて蒸留または結晶化を行うのが有利であり得る。
【００９９】
式ＩＩおよびＩＩＩの化合物の式Ｉの化合物への変換は、上で示した方法により行われる。
【０１００】
式Ｉの酸は、例えば、同一当量の酸および塩基を、エタノール等の不活性溶媒中で反応させる（蒸発を含む）ことにより、塩基を用いて関連する付加塩に変換することができる。この反応のために特に適した塩基は生理的に許容される塩を生じるものである。したがって、式Ｉの酸は、塩基（例えば、水酸化ナトリウムまたは炭酸ナトリウムあるいは水酸化カリウムまたは炭酸カリウム）を用いて、対応する金属塩、特にアルカリまたはアルカリ土類金属塩、または対応するアンモニウム塩に変換することができる。生理的に許容される塩を生じる有機塩基、例えばエタノールアミンもまたこの反応に適している。
【０１０１】
他方、式Ｉの塩基は、例えば、同一当量の塩基および酸を、エタノール等の不活性溶媒中で反応させる（蒸発を含む）ことにより、酸を用いて関連する酸付加塩に変換することができる。この反応のために特に適した酸は、生理的に許容される塩を生じるものである。したがって、無機酸、例えば、硫酸、硝酸、塩化水素酸または臭化水素酸等のハロゲン化水素酸類、オルトリン酸等のリン酸類、スルファミン酸、さらに有機酸、特に、脂肪族、脂環族、芳香脂肪族、芳香族または複素環式一塩基性または多塩基性カルボン酸、スルホン酸または硫酸、例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、ピバリン酸、ジエチル酢酸、マロン酸、コハク酸、ピメリン酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、グルコン酸、アスコルビン酸、ニコチン酸、イソニコチン酸、メタンまたはエタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンモノおよびジスルホン酸またはラウリル硫酸を使用することが可能である。生理的非許容性の酸との塩、例えばピクリン酸塩は、式Ｉの化合物の単離および／または精製のために使用することができる。
【０１０２】
本発明は、さらに、本発明による少なくとも１つの化合物ならびに／または生理的に許容されるそれらの塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比率のそれらの混合物を含む）を含む薬物に関する。
【０１０３】
本発明による医薬品組成物は、さらなる賦形剤および／または補助剤および場合により１種または複数のさらなる薬物活性成分をさらに含むことができる。
【０１０４】
本発明は、さらに、薬物を調製するための方法であって、本発明による化合物および／またはその生理的に許容される塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の１つを、固体、液体または半固体の賦形剤または補助剤と共に適当な剤形にすることを特徴とする方法に関する。
【０１０５】
本発明は、また、
ａ）本発明による化合物、ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の有効量、ならびに
ｂ）さらなる薬物活性成分の有効量
の別々のパックからなるセット（キット）にも関する。
【０１０６】
そのセットは、箱、個々のビン、バッグまたはアンプル等の適当な容器を含む。そのセットは、それぞれが有効量の本発明による化合物および／またはその医薬品として使用できる誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）、ならびに有効量のさらなる薬物有効成分を溶解または凍結乾燥された形態で含有する別々のアンプルを含むことができる。
【０１０７】
薬物は、用量単位当たり活性成分の所定量を含む用量単位の形態で投与することができる。かかる単位は、治療される状況、投与の方法ならびに患者の年齢、体重および状態により、例えば、０．５ｍｇから１ｇ、好ましくは１ｍｇから７００ｍｇ、特に好ましくは５ｍｇから１００ｍｇの本発明による化合物を含むことができる。好ましい用量単位製剤は、活性成分の上で示した１日量または部分量を含むもの、またはその対応する画分である。さらに、この種類の薬物は、医薬品技術分野で一般に知られている方法を用いて調製することができる。
【０１０８】
薬物は、任意の望ましい適当な方法による投与、例えば経口（頬側または舌下を含む）、直腸、経鼻、局所（頬側、舌下または経皮を含む）、膣または非経口（皮下、筋肉内、静脈内または皮内を含む）法を適用することができる。かかる薬物は、医薬品技術分野で知られているすべての方法を用いて、例えば、活性成分を賦形剤（単数または複数）または補助剤（単数または複数）と組み合わせることによって調製することができる。
【０１０９】
経口投与用に適用される薬物は、独立単位、例えば、カプセルもしくは錠剤、粉末もしくは顆粒、水性もしくは非水性液体中の溶液もしくは懸濁液、食用発泡体もしくは含泡食品、または水中油滴型液状エマルションもしくは油中水滴型液状エマルションなどとして投与することができる。
【０１１０】
したがって、例えば、錠剤またはカプセルの形態の経口投与の場合は、活性成分要素は、経口、無毒性および医薬品として許容される不活性賦形剤、例えば、エタノール、グリセロール、水などなどと組み合わせることができる。粉剤は、化合物を適当な細かさに粉砕し、それを類似の方法で粉砕した医薬品賦形剤、例えば、食用炭水化物、例えばデンプンまたはマンニトールと混合することによって調製する。香味料、保存料、分散剤および染料を同様に存在させることができる。
【０１１１】
カプセルは、上記の粉末混合物を調製し、それを成型したゼラチンの殻に充填することによって製造する。流動促進剤および潤滑剤、例えば、高分散のケイ酸、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたは固形のポリエチレングリコールなどを充填作業の前に粉末混合物に添加することができる。錠剤分解物質または可溶化剤、例えば、寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムなどを、カプセルが摂取された後の薬物の有効性を改良するために同様に加えることができる。
【０１１２】
さらに、望ましい場合または必要な場合は、適当な結合剤、潤滑剤および錠剤分解物質ならびに染料をその混合物に同様に込みこむことができる。適当な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、天然の糖類、例えばグルコースまたはβ−ラクトース、トウモロコシから造られた甘味料、天然および合成ゴム、例えば、アカシア、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックス類などが挙げられる。これらの投薬形態に使用される潤滑剤としては、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。錠剤分解物質としては、それらに限定はされないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが挙げられる。錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、その混合物を粒状にするかドライプレス加工し、潤滑剤および錠剤分解物質を添加し、混合物全体をプレス加工して錠剤を生じさせることにより製剤化する。粉末混合物は、希釈剤または上記の塩基と共に、および場合によっては結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチンまたはポリビニルピロリドンなど、溶解遅延剤、例えばパラフィンなど、吸収促進剤、例えば第四級塩など、および／または吸収剤、例えばベントナイト、カオリンまたは第二リン酸カルシウムなどと共に混合することにより調製する。その粉末混合物は、結合剤、例えばシロップ、デンプン糊、アカディア粘液またはセルロースもしくはポリマー材料の溶液でそれを湿潤させ、それを、篩を通して圧縮することによって顆粒化することができる。顆粒化の別法として、粉末混合物を錠剤成形機にかけ、不均一な形状の塊を生じさせ、それを壊して顆粒を形成させることができる。その顆粒は、錠剤の鋳型へのくいつきを防止するために、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱物油を添加することによって潤滑性を与えることができる。潤滑性を与えたその混合物は次に圧縮して錠剤とする。本発明による化合物は、また、自由に流動する不活性賦形剤と混合し、次いで、顆粒化またはドライプレスのステップなしで直接圧縮して錠剤を生じさせることもできる。セラック密封層、糖またはポリマー材料の層および光沢のあるワックスの層からなる透明または不透明な保護層があってもよい。これらのコーティングには異なる用量単位を区別することができるように染料を添加することができる。
【０１１３】
経口液剤、例えば、溶液、シロップ剤、エリキシル剤は、一定量が化合物の所定量を含むような用量単位の形態で調製することができる。シロップ剤は、適当な香味料を含む水溶液中に化合物を溶解することにより、一方、エリキシル剤は、毒性のないアルコール系媒体を使用して調製することができる。懸濁剤は、毒性のない媒体に化合物を分散させることによって製剤化することができる。可溶化剤および乳化剤、例えばエトキシ化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなど、保存料、香味添加剤、例えばペパーミント油、あるいは天然甘味料またはサッカリンもしくはその他の人工甘味料などを同様に添加することができる。
【０１１４】
経口投与用の用量単位製剤は、所望によりマイクロカプセル中に封入することができる。その製剤は、また、その放出を、例えば、粒子状物質をコーティングするかポリマー、ワックスなどの中に埋め込むことによって、引き延ばしたりまたは遅延させるように調製したりすることもできる。
【０１１５】
本発明による化合物およびその塩、溶媒和物および生理機能性誘導体は、また、リポソーム運搬システム、例えば、小さな一枚膜の小胞、大きい一枚膜の小胞および多重膜の小胞などの形で投与することもできる。リポソームは、様々なリン脂質、例えばコレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンなどから作成することができる。
【０１１６】
本発明による化合物およびその塩、溶媒和物および生理機能性誘導体は、また、化合物分子が結合している個々の担体であるモノクローナル抗体を用いて送達することもできる。該化合物は、また、目標とされる薬物担体である可溶性ポリマーと結合させることもできる。かかるポリマーとしては、ポリビニルピロリドン、ピラン共重合体、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノールまたはパルミトイル基により置換されているポリエチレンオキシドポリリシンを含む。該化合物は、さらに、薬物の制御放出を達成するために適するある種の生分解性ポリマー、例えばポリ乳酸、ポリ−ε−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロキシピラン、ポリシアノアクリレートおよび橋かけしたまたは両親媒性のブロック共重合体のヒドロゲルに結合させることができる。
【０１１７】
経皮投与に適用される薬物は、レシピエントの表皮と幅広く密に接触するための独立したプラスターとして投与することができる。したがって、例えば、活性成分は、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、３（６）、３１８（１９８６）に一般用語で記載されているように、イオン泳動によりプラスターから送達させることができる。
【０１１８】
局所投与に適用される薬物は、軟膏、クリーム、懸濁剤、ローション、粉剤、液剤、ペースト剤、ゲル、スプレー、エアロゾルまたは油剤として製剤化することができる。
【０１１９】
眼またはその他の外部組織、例えば口および皮膚の治療に対して、製剤は、局所軟膏またはクリームとして好ましくは適用する。軟膏を与える製剤の場合、活性成分は、パラフィン系または水混和性クリームベースのいずれかと共に使用することができる。別法では、活性成分は、水中油滴型クリームベースまたは油中水滴型ベースを用いて製剤化し、クリームを生じさせることができる。
【０１２０】
眼への局所使用に適応する薬物としては、活性成分を適当な担体、特に水性溶媒に溶解または懸濁させた点眼液が挙げられる。
【０１２１】
口への局所使用に適応する薬物としては、薬用キャンディー、トローチ剤およびうがい薬を含む。
【０１２２】
直腸投与に適応する薬物は、座薬または浣腸剤の形で投与することができる。
【０１２３】
担体物質が、固体である経鼻投与に適応する薬物は、例えば２０〜５００ミクロンの範囲の粒径を有する粗い粉末を含み、鼻から吸い込む方式、すなわち、鼻の近くに保持したその粉末を含有する容器からの鼻腔を経る急速な吸入により投与される。担体物質として液体を用いる鼻腔用スプレーまたは点鼻薬として投与するための適当な製剤は、水または油中の活性成分の溶液を含む。
【０１２４】
吸入による投与に適応する薬物は、様々なタイプのエアロゾルの加圧型ディスペンサー、噴霧器または吹き付け器により発生させることができる微粒子状粉塵または霧を含む。
【０１２５】
経膣投与に適応する薬物は、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、泡沫またはスプレー製剤として投与することができる。
【０１２６】
非経口的投与に適応する薬物としては、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤および溶質（それを用いることによって製剤を治療すべきレシピエントの血液と等張にする）を含む水性および非水性の滅菌した注射液、ならびに懸濁媒体および増粘剤を含むことができる水性および非水性の滅菌した懸濁液が含まれる。製剤は、無菌の担体液例えば注射目的の水の添加のみを使用直前に必要とするように、単回投与または複数回投与容器、例えば密閉アンプルおよびバイアル中でフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存したものを投与することができる。処方に従って調製される注射液および懸濁液は、無菌の粉剤、顆粒剤および錠剤から調製することができる。
【０１２７】
言うまでもなく、上で特定的に述べた構成物質に加えて、本発明による薬物は、また、独特のタイプの医薬品製剤に関して当分野では普通であるその他の作用物質を含むことができ、したがって、例えば経口投与に適した薬物は香味料を含むことができる。
【０１２８】
本発明の化合物の治療的有効量は、例えば、そのヒトまたは動物の年齢と体重、治療を必要とする正確な状態、およびその重傷度、製剤の性質および投与の方法を含む多数の要因に依存し、最終的には治療をする医師または獣医により決定される。しかしながら、腫瘍性成長、例えば結腸癌または乳癌の治療のための本発明による化合物の有効量は、一般に、１日にレシピエント（哺乳類）の体重１ｋｇ当たりの０．１から１００ｍｇの範囲、特に、典型的には、１日に体重１ｋｇ当たり１から１０ｍｇの範囲である。したがって、体重７０ｋｇの成熟した哺乳類に対する１日当たりの実際量は、通常、７０と７００ｍｇの間であり、この量は、１日当たりの個人の投与量として、または通常は、全体の１日の投与量が同じになるように１日当たりの連続した分割投与量（例えば、２回、３回、４回、５回または６回等）として投与することができる。塩または溶媒和物あるいはそれらの生理的に機能する誘導体の有効量は、本発明による化合物それ自体の有効量の一部分として決定することができる。同様の投与量が上記のその他の状態の治療に対しても適しているものと見なすことができる。
【０１２９】
本発明による化合物は、実施例に記載されている酵素アッセイにより容易に検出することができる有利な生物活性を好ましくは示す。かかる酵素に基づくアッセイにおいて、本発明による化合物は、適当な範囲、好ましくはミクロモル範囲、より好ましくはナノモル範囲のＩＣ50値によって通常記録される阻害効果を示しかつ引き起こす。
【０１３０】
本発明は、本明細書に記載のシグナル経路の活性剤または阻害剤、好ましくは阻害剤としての本発明による化合物に関する。本発明は、したがって、特に好ましくは、キナーゼの活性剤または阻害剤として、特に好ましくはチロシンキナーゼ、特にＴＩＥ−２および／またはＶＥＧＦＲ、ならびに／またはＲａｆキナーゼ、特にＡ−Ｒａｆ、Ｂ−ＲａｆおよびＲａｆ−１（Ｃ−Ｒａｆ）の阻害剤としての本発明による化合物に関する。
【０１３１】
上記のように、本発明による化合物により影響されるシグナル経路は、様々な疾患と関係する。したがって、本発明による化合物は、１個または複数の前記シグナル経路との相互作用を経る前記シグナル経路によって決まる疾患の予防および／または治療において有用である。
【０１３２】
本発明は、したがってさらに、本発明による化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の、疾患、特にキナーゼおよび／またはキナーゼ媒介シグナル伝達によって引き起こされ、媒介されかつ／または伝播される疾患の治療および／または予防のための薬物の調製のための使用に関する。チロシンキナーゼの群から選択されるキナーゼがここでは好ましい。そのチロシンキナーゼは、特に好ましくはＴＩＥ−２またはＶＥＧＦＲである。Ｒａｆキナーゼの群から選択されるキナーゼもまた好ましい。そのＲａｆキナーゼは、特に好ましくはＡ−Ｒａｆ、Ｂ−ＲａｆまたはＲａｆ−１である。
【０１３３】
本発明による化合物は、酵素Ｒａｆキナーゼの阻害剤であることが見出されている。その酵素は、ｐ２１rasの下流エフェクターであるため、Ｒａｆキナーゼ経路の阻害が、例えばＲａｆキナーゼにより媒介される腫瘍および／または癌細胞の成長の治療において示されて、その阻害剤が、ヒトまたは動物の医薬で使用するための医薬品組成物に適することが判明する。特に、該化合物は、ヒトおよび動物の固形癌、例えばマウス癌の治療に適しており、それはこれらのタイプの腫瘍の進行が、Ｒａｓタンパク質のシグナル伝達カスケードに依存し、したがって、そのカスケードの妨害による、すなわち、Ｒａｆキナーゼを阻害することによる治療に反応するためである。したがって、本発明による化合物または医薬品として許容されるその塩は、Ｒａｆキナーゼ経路によって媒介される疾患、特に、固形癌を含む癌、例えば、癌腫（例えば、肺、膵臓、甲状腺、膀胱または大腸の）、骨髄疾患（例えば、骨髄性白血病）または腺腫（例えば、大腸絨毛腺腫）、病的血管新生および転移細胞遊走などの治療のために投与される。該化合物は、さらに、補体活性化依存性慢性炎症（Ｎｉｃｕ−ｌｅｓｃｕ ｅｔ ａｌ.（２００２）Ｉｍｍｕｎｏｌ.Ｒｅｓ.、２４：１９１−１９９）およびＨＩＶ−１（ヒト免疫不全ウイルスタイプ−１）に誘発される免疫不全症（Ｐｏｐｉｋ ｅｔ ａｌ.（１９９８）Ｊ Ｖｉｒｏｌ、７２：６４０６−６４１３）の治療にも適する。
【０１３４】
加えて、本化合物は、チロシンキナーゼにより誘発される疾患の治療における、哺乳類、特にヒトに対する医薬品活性成分として適している。「チロシンキナーゼにより誘発される疾患」という表現は、１種または複数のチロシンキナーゼの活性によって決まる病的状態を指す。チロシンキナーゼは、増殖、癒着ならびに遊走および分化を含む様々な細胞活動のシグナル伝達経路と直接的または間接的のいずれかで関係する。チロシンキナーゼ活性と関係がある疾患としては、腫瘍細胞の増殖、固形腫瘍の成長を促進する病的な新血管形成、眼球の新血管形成（糖尿病性網膜症、加齢黄斑変性症など）および炎症（乾癬、関節リウマチなど）が挙げられる。
【０１３５】
本明細書で論じられている疾患は、高増殖性および非高増殖性疾患の２つのグループに通常は分けられる。これに関して、乾癬、関節炎、炎症、子宮内膜症、瘢痕、良性前立腺肥大、免疫疾患、自己免疫疾患および免疫不全症は、非癌性疾患として見なされ、そのうち、関節炎、炎症、免疫疾患、自己免疫疾患および免疫不全症は非高増殖性疾患として通常は見なされる。
【０１３６】
これに関して、脳腫瘍、肺癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵癌、肝癌、腎癌、結腸直腸癌、乳癌、頭部癌、頚部癌、食道癌、婦人科癌、甲状腺癌、リンパ腫、慢性白血病および急性白血病は、癌性疾患と見なされるべきであり、そのすべてが高増殖性疾患のグループに通常は加えられる。特に、癌細胞の成長、ならびに特に直接的または間接的にＴＩＥ−２、ＶＥＧＦＲおよびＲａｆキナーゼにより媒介される癌細胞の成長は、本発明が標的とする疾患である。
【０１３７】
本発明は、したがって、前記疾患の治療および／または予防のための薬物の調製のための本発明による化合物の使用と、また、１種または複数の本発明による化合物の投与を必要としている患者にその投与をすることを含む前記疾患を治療のための方法にも関する。
【０１３８】
本発明による化合物は、異種移植腫瘍モデルにおいてインビボで増殖作用を有することを示すことができる。本発明による化合物は、高増殖性疾患を有する患者に、例えば、腫瘍の成長を阻害するため、リンパ増殖性疾患に伴う炎症を減少させるため、移植片拒絶反応または組織修復による神経障害を阻止するなどのために投与される。本化合物は、予防または治療の目的のために適する。本明細書で使用されている用語「治療する」とは、疾患の防止および既存の状態の治療の両方を指して使用される。増殖の防止は、明白な疾患の進行の前に本発明による化合物を投与することによって達成され、例えば腫瘍の成長が防止され、転移性成長が防止され、心臓血管手術に伴う再狭窄が軽減されたりする。別法では、該化合物は、進行中の疾患を治療するために使用され、患者の臨床症状を安定化させまたは改善する。
【０１３９】
ホストまたは患者は、任意の哺乳類の種、例えば、霊長類の種、特にヒト；マウス、ラットおよびハムスターを含むげっ歯類；ウサギ；ウマ、ウシ、イヌ、ネコなどに属することができる。動物モデルは、ヒトの疾患の治療のためのモデルを提供する実験的研究に対して重要である。
【０１４０】
本発明による化合物による治療に対する特定の細胞の反応は、インビトロ試験により測定することができる。一般的には、細胞の培養液を様々な濃度の本発明による化合物と、活性薬が細胞死を引き起こすかまたは遊走を阻止することを可能にするのに十分な、通常は約１時間と１週間の間混ぜ合わせる。インビトロ試験は、生検試料からの培養細胞株を使用して実施することができる。処理後残っている生存細胞を次に数える。
【０１４１】
投薬量は、使用する特定の化合物、特定の疾患、患者の状態などにより変動する。薬用量は、一般的には、患者の生存率を維持しながら標的組織中の望ましくない細胞の個体群を大幅に減少させるのに十分なものである。その治療は、かなりの数、例えば特定細胞数の少なくとも約５０％の減少が起こるまで一般に継続し、基本的にそれ以上望ましくない細胞が体内に検出されなくなるまで継続することができる。
【０１４２】
キナーゼ阻害剤を識別するために、様々なアッセイ系を利用することができる。シンチレーション近接アッセイ（Ｓｏｒｇ ｅｔ ａｌ.、Ｊ.ｏｆ.Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ、２００２、７、１１−１９）およびフラッシュプレートアッセイにおいては、γＡＴＰを含む基質としてのタンパク質またはペプチドの放射性リン酸化反応を測定する。阻害性化合物の存在下では、探知できる放射性シグナルは減少しているかまたはまったくない。さらに、均一時間分解蛍光共鳴エネルギー転移（ＨＴＲ−ＦＲＥＴ）および蛍光偏光（ＦＰ）技術が、アッセイ方法として適している（Ｓｉｌｌｓ ｅｔ ａｌ.、Ｊ.ｏｆ Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ、２００２、１９１−２１４）。
【０１４３】
他の非放射性のＥＬＩＳＡアッセイ方法は、特異的リン酸化抗体（ホスホＡＢｓ）を使用する。そのホスホ−ＡＢはリン酸化した基質のみに結合する。この結合は、第２のペルオキシダーゼ複合抗ヒツジ抗体を使用する化学発光により検知することができる（Ｒｏｓｓ ｅｔ ａｌ.、２００２、Ｂｉｏｃｈｅｍ.Ｊ.、ちょうど発行される、原稿ＢＪ２００２０７８６）。
【０１４４】
細胞増殖の調節解除および細胞死（アポトーシス）と関連する多くの疾患および状態が存在する。しかしながら、本発明による化合物により治療、防止または改良することができる疾患および状態として挙げられるのは、非限定で、以下に掲げる疾患および状態である。本発明による化合物は、平滑筋細胞および／または炎症細胞の血管の内膜層中への増殖および／または遊走があり、例えば新生内膜閉塞性障害の場合におけるような、その血管を通る限定された血流を引き起こす多数の異なる疾患および状態の治療および／または予防に適している。重要な閉塞性移植血管疾患としては、アテローム性動脈硬化、移植後の冠状動脈血管性疾患、静脈移植狭窄、吻合部周囲人工器官再狭窄、血管形成またはステント留置後の再狭窄などが挙げられる。
【０１４５】
本発明は癌の治療または予防のための本発明による化合物の使用を含む。特に、本発明は、固形腫瘍が、特に好ましくは、脳腫瘍、尿生殖路の腫瘍、リンパ系の腫瘍、胃腫瘍、喉頭腫瘍、肺腫瘍からなる群から選択される固形腫瘍の治療および／または予防のための薬物を調製するための本発明による化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の使用に関する。単球性白血病、肺腺癌、小細胞肺癌、膵癌、神経膠芽腫および乳癌からなる群から選択される固形腫瘍は、好ましくは同じく、本発明による化合物を含む薬物により治療することができる。
【０１４６】
本発明による化合物は癌の治療のために患者に投与することができる。本化合物は、腫瘍の血管新生を阻害し、それにより腫瘍の増殖に影響を及ぼす（Ｊ.Ｒａｋ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、５５：４５７５−４５８０、１９９５）。本発明による化合物の血管新生阻害特性は、また、網膜新生血管と関係するある一定の形の失明の治療にも適している。
【０１４７】
本発明は、したがって、また、本発明による化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の、血管新生によって引き起こされ、媒介されかつ／または伝播される疾患の治療および／または予防のための薬物の調製のための使用にも関する。
【０１４８】
血管新生が関与する上記疾患は、網膜血管新生、糖尿病性網膜症、加齢黄斑変性などの眼疾患である。
【０１４９】
炎症性疾患。本発明は、したがって、また、上記疾患の治療および／または予防のための薬物を調製するための本発明による化合物の使用に関する。
【０１５０】
本発明による化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩および溶媒和物の炎症性疾患の治療および／または予防のための薬物を調製するための使用は、また、本発明の範囲に入る。上記の炎症性疾患の例としては、関節リウマチ、乾癬、接触性皮膚炎、遅延型過敏反応などが挙げられる。
【０１５１】
本発明による化合物は、また、癌化骨軟化症としても知られる骨肉腫、骨関節炎およびクル病（Ｈａｓｅｇａｗａ ｅｔ ａｌ.、Ｓｋｅｌｅｔａｌ Ｒａｄｉｏｌ.２８、ｐｐ.４１−４５、１９９９；Ｇｅｒｂｅｒ ｅｔ ａｌ.、Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、Ｖｏｌ.５、Ｎｏ.６、ｐｐ．６２３−６２８、Ｊｕｎｅ １９９９）等のある骨の病態の治療にも適している。ＶＥＧＦは、成熟した破骨細胞中に発現するＫＤＲ／Ｆｌｋ−１を介して破骨細胞の骨吸収を直接促進するため（ＦＥＢＳ Ｌｅｔ.４７３：１６１−１６４（２０００）；Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、１４１：１６６７（２０００））、本化合物は、また、骨粗鬆症およびパジェット病等の骨吸収と関係する状態の治療および予防にも適する。
【０１５２】
本発明は、したがって、さらに本発明による化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の、骨肉腫、変形性関節炎およびクル病からなる群から選択される骨病態の治療のための薬物の調製のための使用に関する。
【０１５３】
該化合物は、また、脳水腫、組織障害および虚血によって引き起こされる再灌流傷害を減少することにより、脳卒中等の脳の虚血の発症の後に起こる組織障害を減少または予防するために使用することができる（Ｄｒｕｇ Ｎｅｗｓ Ｐｅｒｓｐｅｃｔ １１：２６５−２７０（１９９８）；Ｊ.Ｃｌｉｎ.Ｉｎｖｅｓｔ.１０４：１６１３−１６２０（１９９９））。
【０１５４】
本発明による化合物は、また、Ｒａｆキナーゼによって引き起こされ、媒介されかつ／または伝播され、そのＲａｆキナーゼが、Ａ−Ｒａｆ、Ｂ−ＲａｆおよびＲａｆ−１からなる群から選択される疾患の治療および予防のための薬物の調製にも適する。
【０１５５】
好ましくは高増殖性および非高増殖性疾患の群からの疾患の治療への使用が選択される。これらは癌性疾患または非癌性疾患である。
【０１５６】
本発明は、また、本発明による化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の、乾癬、関節炎、炎症、子宮内膜症、瘢痕、良性前立腺過形成、免疫疾患、自己免疫疾患および免疫不全症からなる非癌性疾患の群から選択される疾患の治療のための薬物の調製のための使用にも関する。
【０１５７】
本発明は、さらに、本発明による化合物ならびに／または生理的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての割合のそれらの混合物を含む）の、脳腫瘍、肺癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵癌、肝癌、腎癌、結腸直腸癌、乳癌、頭部癌、頚部癌、食道癌、婦人科癌、甲状腺癌、リンパ腫、慢性白血病および急性白血病からなる癌性疾患の群から選択される疾患の治療のための薬物の調製のための使用に関する。
【０１５８】
本発明による化合物は、また、治療中の状態に対してそれらが特に有用であるために選択される他のよく知られた治療薬と同時に投与することもできる。例えば、骨の状態の場合、有利であろう組合せとしては、アレンドロネートおよびリセドロネート等の再吸収抑制性ビスフォスフォネート、αｖβ３拮抗薬等のインテグリン遮断薬（以下でさらに明らかにする）、プレムプロ(Prempro)（登録商標）、プレマリン(Premarin)（登録商標）およびＥｎｄｏｍｅｔｒｉｏｎ（登録商標）等のホルモン補充療法で使用される共役エストロゲン；ラロキシフェン、ドロロキシフェン、ＣＰ−３３６，１５６(Pfizer)およびラソフォキシフェン(lasofoxifene)等の選択的エストロゲン受容体調節物質類（ＳＥＲＭｓ）、カテプシンＫ阻害剤、およびＡＴＰプロトンポンプ阻害剤とのものが挙げられる。
【０１５９】
本化合物は、また、既知の抗癌剤との組合せにも適している。これらの既知の抗癌剤としては、次の、エストロゲン受容体調節物質、アンドロゲン受容体調節物質、レチノイド受容体調節物質、細胞障害性作用物質、抗増殖性作用物質、プレニル化タンパクトランスフェラーゼ阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、逆転写酵素阻害剤、成長因子阻害剤および血管新生阻害剤が挙げられる。本化合物は、放射線治療と同時に投与するのに特に適している。放射線治療との組合せにおけるＶＥＧＦ阻害の相乗効果が技術的に記載されている（ＷＯ００／６１１８６参照）。
【０１６０】
「エストロゲン受容体調節物質」とは、その機構は無視して、エストロゲンの受容体への結合を干渉するかまたは阻害する化合物を指す。エストロゲン受容体調節物質の例としては、非限定で、タモキシフェン、ラロキシフェン、イドキシフェン、ＬＹ３５３３８１、ＬＹ１１７０８１、トレミフェン、フルベストラント、４−［７−（２,２−ジメチル−１−オキソプロポキシ−４−メチル−２−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３−イル］フェニル２,２−ジメチルプロパノアート、４,４'−ジヒドロキシベンゾフェノン−２,４−ジニトロフェニルヒドラゾンおよびＳＨ６４６が挙げられる。
【０１６１】
「アンドロゲン受容体調節物質」とは、機構は無視して、アンドロゲンの受容体への結合を干渉するかまたは阻害する化合物を指す。アンドロゲン受容体調節物質の例としては、フィナステリドおよび他の５α−レダクターゼ阻害剤、ニルタミド、フルタミド、ビカルタミド、リアロゾールおよび酢酸アビラテロンが挙げられる。
【０１６２】
「レチノイド受容体調節物質」とは、機構は無視して、レチノイドの受容体への結合を干渉するかまたは阻害する化合物を指す。上記レチノイド受容体調節物質の例としては、ベキサロテン、トレチノイン、１３−シス−トレチノイン酸、９−シス−トレチノイン酸、α−ジフルオロメチルオルニチン、ＩＬＸ２３−７５５３、トランス−Ｎ−（４'−ヒドロキシフェニル）レチナミドおよびＮ−４−カルボキシフェニルレチナミドが挙げられる。
【０１６３】
「細胞傷害性作用物質」とは、主として細胞機能に対する直接作用による細胞死をもたらす、または細胞減数分裂を阻害もしくは干渉する化合物を指し、アルキル化剤、腫瘍壊死因子、インターカレーター、マイクロチューブリン阻害剤およびトポイソメラーゼ阻害剤が含まれる。
【０１６４】
細胞傷害性作用物質の例としては、非限定で、チラパザミン、セルテネフ、カケクチン、イフォスアミド、タソネルミン、ロニダミン、カルボプラチン、アルトレタミン、プレドニムスチン、ジブロモズルシトール、ラニムスチン、フォテムスチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、テモロゾマイド、ヘプタプラチン(heptaplatin)、エストラムスチン、トシル酸インプロスルファン、トロフォスファミド、ニムスチン、塩化ジブロスピジウム(dibrospidium chloride)、プミテパ、ロバプラチン、サトラプラチン、プロフィロマイシン、シスプラチン、イロフルベン、デキシフォスファミド、シス−アミンジクロロ（２−メチルピリジン）白金、ベンジルグアニン、グルフォスファミド、ＧＰＸ１００、（トランス,トランス,トランス）ビス−μ−（ヘキサン−１,６−ジアミン）μ−［ジアミン白金(II)］ビス−［ジアミン（クロロ）白金(II)］テトラクロリド、ジアリジジニルスペルミン(diarisidinylspermine)、三酸化ヒ素、１−（１１−ドデシルアミノ−ｌ０−ヒドロキシウンデシル）−３,７−ジメチルキサンチン、ゾルビシン、イダルビシン、ダウノルビシン、ビサントレン、ミトザントロン、ピラルビシン、ピナフィド、バルルビシン、アムルビシン、アンチネオプラストン、３'−デアミノ−３'−モルホリノ−１３−デオキソ−１０−ヒドロキシカルミノマイシン、アナマイシン、ガラルビシン(galarubicin)、エリナフィド、ＭＥＮ１０７５５および４−デメトキシ−３−デアミノ−３−アジリジニル−４−メチルスルホニルダウノルビシンが挙げられる（ＷＯ００／５００３２参照）。
【０１６５】
マイクロチューブリン阻害剤の例としては、パクリタキセル、硫酸ビンデシン、３',４'−ジデヒドロ−４'−デオキシ−８'−ノルビンカロイコブラスチン、ドセタキソール、リゾキシン、ドラスタチン、イセチオン酸ミボブリン、オウリスターチン(auristatin)、セマドチン、ＲＰＲ１０９８８１、ＢＭＳ１８４４７６、ビンフルニン、クリプトフィシン、２,３,４,５,６−ペンタフルオロ−Ｎ−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）ベンゼンスルホンアミド、無水ビンブラスチン、Ｎ,Ｎ−ジメチル−Ｌ−バリル−Ｌ−バリル−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリル−Ｌ−プロリン−ｔ−ブチルアミド、ＴＤＸ２５８およびＢＭＳ１８８７９７が挙げられる。
【０１６６】
トポイソメラーゼ阻害剤のいくつかの例は、トポテカン、ヒカプタミン(hycaptamine)、イリノテカン、ルビテカン、６−エトキシプロピオニル−３',４'−Ｏ−エキソベンジリデンシャルトルーシン(chartreusin)、９−メトキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−５−ニトロピラゾロ［３,４,５−ｋｌ］アクリジン−２−（６Ｈ）プロパンアミン、１−アミノ−９−エチル−５−フルオロ−２,３−ジヒドロ−９−ヒドロキシ−４−メチル−１Ｈ,１２Ｈ−ベンゾ［ｄｅ］ピラノ［３',４'：ｂ,７］インドリジノ［１,２ｂ］キノリン−１０,１３（９Ｈ,１５Ｈ）ジオン、ルルトテカン(lurtotecan)、７−［２−（Ｎ−イソプロピルアミノ）エチル］−（２０Ｓ）カンプトテシン、ＢＮＰ１３５０、ＢＮＰＩ１１００、ＢＮ８０９１５、ＢＮ８０９４２、リン酸エトポシド、テニポシド、ソブゾキサン、２'−ジメチルアミノ−２'−デオキシエトポシド、ＧＬ３３１、Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）−エチル］９−ヒドロキシ−５,６−ジメチル−６Ｈ−ピリド［４,３−ｂ］カルバゾール−１−カルボキサミド、アスラクライン(asulacrine)、（５ａ,５ａＢ,８ａａ,９ｂ）−９−［２−［Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−Ｎ−メチルアミノ］エチル］−５−［４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル］−５,５ａ,６,８,８ａ,９−ヘキソヒドロフロ（３',４'：６,７）ナフト（２,３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６−オン、２，３−（メチレンジオキシ）−５−メチル−７−ヒドロキシ−８−メトキシベンゾ［ｃ］フェナントリジニウム、６,９−ビス［（２−アミノエチル）アミノ］ベンゾ［ｇ］イソキノリン−５,１０−ジオン、５−（３−アミノプロピルアミノ）−７,１０−ジヒドロキシ−２−（２−ヒドロキシエチルアミノメチル）−６Ｈ−ピラゾロ［４,５,１−ｄｅ］アクリジン−６−オン、Ｎ−［１−［２（ジエチルアミノ）エチルアミノ］−７−メトキシ−９−オキソ−９Ｈ−チオキサンテン−４−イルメチル］ホルムアミド、Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）アクリジン−４−カルボキサミド、６−［［２−（ジメチルアミノ）エチル］アミノ］−３−ヒドロキシ−７Ｈ−インデノ［２,１−ｃ］キノリン−７−オンおよびジメスナである。
【０１６７】
「抗増殖性作用物質」としては、アンチセンスＲＮＡおよびアンチセンスＤＮＡのオリゴヌクレオチド、例えば、Ｇ３１３９、ＯＤＮ６９８、ＲＶＡＳＫＲＡＳ、ＧＥＭ２３１およびＩＮＸ３００１など、ならびに、代謝拮抗物質、例えば、エノシタビン、カルモフール、テガフル、ペントスタチン、ドキシフルリジン、トリメトレキサート、フルダラビン、カペシタビン、ガロシタビン、シタラビンオクフォスファート、フォステアビン水酸化ナトリウム(fosteabine sodium hydrate)、ラルチトレキセド、パルチトレキシド(paltitrexid)、エミテフール、チアゾフリン、デシタビン、ノラトレキセド、ペメトレキセド、ネルザラビン、２'−デオキシ−２'−メチリデンシチジン、２'−フルオロメチレン−２'−デオキシシチジン、Ｎ−［５−（２,３−ジヒドロベンゾフリル）スルホニル］−Ｎ'−（３,４−ジクロロフェニル）尿素、Ｎ６−［４−デオキシ−４−［Ｎ２−［２（Ｅ）,４（Ｅ）−テトラデカジエノイル］グリシルアミノ］−Ｌ−グリセロ−Ｂ−Ｌ−マンノヘプトピラノシル］アデニン、アピリジン、エクチナサイジン、トロキサシタビン(troxacitabine)、４−［２−アミノ−４−オキソ−４,６,７,８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピリミジノ［５,４−ｂ］−１,４−チアジン−６−イル−（Ｓ）−エチル］−２,５−チエノイル−Ｌ−グルタミン酸、アミノプテリン、５−フルオロウラシル、アラノシン、１１−アセチル−８−（カルバモイルオキシメチル）−４−フォルミル−６−メトキシ−１４−オキサ−１,１１−ジアザテトラシクロ（７.４.１.０.０）テトラデカ−２,４,６−トリエン−９−イル酢酸エステル、スワンソニン、ロメトレキソール、デクスラゾキサン、メチオニナーゼ、２'−シアノ−２'−デオキシ−Ｎ４−パルミトイル−１−Ｂ−Ｄ−アラビノフラノシルシトシンおよび３−アミノピリジン−２−カルボキサルデヒドチオセミカルバゾンなどが挙げられる。「抗増殖性作用物質」としては、また、「血管新生阻害剤」のもとで上で掲げたもの以外のトラスツズマブ等の成長因子に対するモノクローナル抗体、および組み換えウイルスが介在する遺伝子により送達することができるｐ５３等の腫瘍抑制遺伝子導入も含まれる（例えば、米国特許第６０６９１３４号参照）。
【０１６８】
上文および下文において、温度はすべて℃で示している。以下の実施例において、「従来の後処理」とは、必要ならば水を加え、必要ならｐＨを、最終生成物の構成により２と１０の間の値に調整し、混合物を酢酸エチルまたはジクロロメタンで抽出し、相分離し、有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、蒸発させ、生成物をシリカゲルに基づくクロマトグラフィーにより、かつ／または結晶化により精製することを意味する。シリカゲルに基づくＲｆ値；溶離剤：酢酸エチル／メタノール９：１。
【０１６９】
質量分析法（ＭＳ）：ＥＩ（電子衝撃イオン化）Ｍ+
ＦＡＢ（高速原子衝撃）（Ｍ＋Ｈ）+
ＥＳＩ（電気スプレーイオン化）（Ｍ＋Ｈ）+（他に記述がない限り）。
【実施例】
【０１７０】
実施例１：準備プロセス
Ｉ）活性エステルの合成
【０１７１】
【化４】
2007523921.tif 000006
【０１７２】
ａ）７５０ｍｌの塩化チオニルを、Ｎ2雰囲気下で４５℃に加熱し、２３ｍｌのＤＭＦを滴下して加える。２５０ｇ（２．０３１モル）のピリジン−２−カルボン酸をその後分割して加え、その反応混合物を４５℃で１５分間および８０℃で２４時間攪拌する。黄色の懸濁液を蒸発させ、残留物をトルエンにより何回か噴流させる。油状の残留物を１８０ｍｌのトルエンに溶解し、０℃まで冷却して１１０ｍｌのメタノールを滴下して加える。その懸濁液をさらに１時間攪拌し、沈殿した固体を吸引して濾別し、トルエンですすぐ。この方法で得られた粗生成物をアセトンから何回か結晶化させ、真空乾燥キャビネット中で乾燥する。
【０１７３】
収量：式１の化合物の１４０ｇ（３３％）、淡色結晶
ｂ）１４０ｇ（０．６７３モル）の式１の化合物を、３２ｇ（０．３３６モル）の塩化マグネシウムおよび２ｌのＴＨＦと共に室温で攪拌する。５分後、１．３６ｌ（２．３６９モル）のメチルアミンを２０分間にわたって滴下して加える。その懸濁液を室温でさらに１６時間攪拌する。１．３ｌの水と６８０ｍｌの１ＮのＨＣｌ溶液をその反応混合物中に加え、それを酢酸エチル（３×１ｌ）で抽出する。一緒にした有機相を飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムを用いて乾燥し、濾過して蒸発させる。その粗生成物を、３００ｍｌの酢酸エチルにとり、２００ｍｌの１ＮのＨＣｌ溶液で抽出する。その水相を２５％のＮＨ4ＯＨ溶液を用いてｐＨ９にし、酢酸エチル（２×４００ｍｌ）で抽出する。その有機相を、硫酸ナトリウムを用いて乾燥し、濾過して蒸発させる。
【０１７４】
収量：９３ｇ（８１％）の式２の化合物、褐色油状物
ｃ）式１の化合物（１当量）および４−ヒドロキシ安息香酸メチルまたは３−ヒドロキシ安息香酸メチル（２当量）を共に１６０℃に一晩加熱する。冷却後、固体を酢酸エチルおよび１ＮのＮａＯＨにとり、水酸化ナトリウム溶液を分離し、有機相を１Ｎの水酸化ナトリウム溶液および水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過して蒸発させる。その残留物は、続くステップでさらに直接使用するか、カラムクロマトグラフィーにより精製するかのいずれかとする。
【０１７５】
化合物３ａ：３−（２−メチルカルバモイルピリジン−４−イルオキシ）安息香酸メチル、収量：７．３ｇ（４２％）の式３の化合物、褐色油状物
化合物３ｂ：４−（２−メチルカルバモイルピリジン−４−イルオキシ）安息香酸エチル、６ｇ（６４％）の無色固体
ｄ）化合物３ａおよび３ｂを水酸化ナトリウム溶液（１Ｎ）およびエタノール（１：１）中で、室温で一晩攪拌する。そのエタノールを、減圧下で除去する。その水相を１ＮのＨＣｌを用いてｐＨ５に調節し、次いで無色の結晶が析出するまで蒸発させ、後者を次に吸引して濾別する。その沈殿物を１００ミリバール、７５℃で一晩乾燥する。
【０１７６】
化合物４ａ：３−（２−メチルカルバモイルピリジン−４−イルオキシ）安息香酸、１．４ｇ（８０％）、無色固体
化合物４ｂ：４−（２−メチルカルバモイルピリジン−４−イルオキシ）安息香酸、５．７ｇ（１００％）、ＮａＣｌで汚染されており、化合物は、さらにこの状態で次の反応に使用する。
【０１７７】
ｅ）化合物４ａおよび４ｂ（１当量）を、１,４−ジオキサンに溶解し、ペンタフルオロフェノール（１．１当量）およびＮ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（１当量）を加え、その混合物を、室温で一晩攪拌する。溶媒をその後減圧下で除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製する。
【０１７８】
化合物５ａ：ペンタフルオロフェニル３−（２−メチルカルバモイルピリジン−４−イルオキシ）安息香酸塩、１．３４ｇ（５８％）、無色固体
化合物５ｂ：ペンタフルオロフェニル４−（２−メチルカルバモイルピリジン−４−イルオキシ）安息香酸塩、５．２ｇ（５８％）、無色固体。
【０１７９】
ＩＩ）アニリンの合成
【０１８０】
【化５】
2007523921.tif 000007
【０１８１】
５−フルオロ−２−ニトロフェノールを、ＴＨＦ中、Ｈ2およびラネーＮｉを用いて室温で１時間水素化する。触媒を濾別し、濾液を乾燥するまで蒸発させる。
【０１８２】
収量：１４０ｇ（８６％）の式６の化合物、褐色固体
【０１８３】
【化６】
2007523921.tif 000008
【０１８４】
４−ヒドロキシ−３−ニトロベンゾトリフルオリドを、メタノール中で水素およびパラジウム炭素（１０％）を用いて３時間水素化する。触媒をその後濾別し、濾液の溶媒を減圧下で除去する。
【０１８５】
収量：３８７ｍｇ（８６％）の式７の化合物、褐色固体
ＩＩＩ）アミドの合成
【０１８６】
【化７】
2007523921.tif 000009
【０１８７】
式６の化合物または式７の化合物または市販のアニリン（１当量）および式５ａまたは５ｂの化合物を１ｍｌのＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、６０℃で一晩攪拌する。その反応混合物を乾燥するまで蒸発させ、酢酸エチルに溶解し、水で抽出する。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過して蒸発させる。その化合物を、必要に応じて再結晶させるかまたはカラムクロマトグラフィーにより精製する。
【０１８８】
置換パターン、収量および分析法は、表参照（実施例２）
【０１８９】
実施例２：本発明による化合物
【０１９０】
【表１】
2007523921.tif 000010
【０１９１】
【表２】
2007523921.tif 000011
【０１９２】
【表３】
2007523921.tif 000012
【０１９３】
【表４】
2007523921.tif 000013
【０１９４】
【表５】
2007523921.tif 000014
【０１９５】
【表６】
2007523921.tif 000015
【０１９６】
＃６  *ＨＰＬＣ方法１：９９％Ａ／１％Ｂで１分間、１００％Ｂまで２．５分、１００％Ｂで１分間；Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）、Ｂ：アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）；２５４ｎｍで検出
＃７  *ＨＰＬＣ方法２：９９％Ａ／１％Ｂで０．５分間、１００％Ｂまで２．５分、１００％Ｂで１分間；Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）、Ｂ：アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）；２５４ｎｍで検出。
【０１９７】
実施例３：医薬品有効性の判定
実施例に記載した本発明による化合物は、下記のアッセイ法により試験し、キナーゼ阻害活性を有することが見出される。他のアッセイ法は、文献から知られており当業者によって容易に実施することができよう（例えば、Ｄｈａｎａｂａｌ ｅｔ ａｌ.、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５９：１８９−１９７；Ｘｉｎ ｅｔ ａｌ.、Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ.２７４：９１１６−９１２１；Ｓｈｅｕ ｅｔ ａｌ.、Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ.１８：４４３５−４４４１；Ａｕｓｐｒｕｎｋ ｅｔ ａｌ.、Ｄｅｖ.Ｂｉｏｌ.３８：２３７−２４８；Ｇｉｍｂｒｏｎｅ ｅｔ ａｌ.、Ｊ.Ｎａｔｌ.Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．５２：４１３−４２７；Ｎｉｃｏｓｉａ ｅｔ ａｌ.、Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ １８：５３８−５４９を参照）。
【０１９８】
ＶＥＧＦ受容体キナーゼアッセイ法
ＶＥＧＦ受容体活性は、放射標識されたリン酸塩を４：１のポリグルタミン酸／チロシン基質（ｐＥＹ）に組み込むことによって測定する。リン酸化したｐＥＹ生成物は、フィルター膜に捕捉され、放射標識されたリン酸塩の組み込みが、シンチレーション計数により数量化される。
【０１９９】
ＶＥＧＦ受容体キナーゼ
ヒトＫＤＲの細胞間チロシンキナーゼドメイン（Ｔｅｒｍａｎ,Ｂ.Ｉ．ｅｔ ａｌ.、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ（１９９１）Ｖｏｌ.６、ｐｐ.１６７７−１６８３.）およびＦｌｔ−１（Ｓｈｉｂｕｙａ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ（１９９０）Ｖｏｌ.５、ｐｐ.５１９−５２４）は、グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）遺伝子融合タンパク質としてクローン化する。これは、ＧＳＴ遺伝子のカルボキシル末端におけるインフレーム融合物としてのＫＤＲキナーゼの細胞質ドメインをクローン化することによって達成される。可溶性組み換え型ＧＳＴキナーゼドメイン融合タンパク質は、バキュロウイルス発現ベクター（ｐＡｃＧ２Ｔ、Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ社）を使用してヨトウガ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（Ｓｆ２１））由来昆虫細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）中に発現させる。
【０２００】
溶解緩衝液：５０ｍＭのトリス（ｐＨ７．４）、０．５ＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＤＴＴ、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５％のトライトンＸ−１００、１０％のグリセロール、ロイペプチン、ペプスタチン、アプロチニンの各１０ｍｇ／ｍｌ、および１ｍＭのフェニルメチルスルホニルフッ化物（すべてＳｉｇｍａ社）。
【０２０１】
洗浄緩衝液：５０ｍＭのトリス（ｐＨ７．４）、０．５ＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＤＴＴ、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．０５％のトライトンＸ−１００、１０％のグリセロール、ロイペプチン、ペプスタチン、アプロチニンの各１０ｍｇ／ｍｌ、および１ｍＭのフェニルメチルスルホニルフッ化物。
【０２０２】
透析用緩衝液：５０ｍＭのトリス（ｐＨ７．４）、０．５ＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＤＴＴ、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５％のトライトンＸ−１００、５０％のグリセロール、ロイペプチン、ペプスタチン、アプロチニンの各１０ｍｇ／ｍｌ、および１ｍＭのフェニルメチルスルホニルフッ化物。
【０２０３】
１０倍反応緩衝液：２００ｍＭのトリス（ｐＨ７．４）、１．０ＭのＮａＣｌ、５０ｍＭのＭｎＣｌ2、１０ｍＭのＤＴＴおよび５ｍｇ／ｍｌのウシ血清アルブミン［ＢＳＡ］（Ｓｉｇｍａ社）。
【０２０４】
酵素希釈緩衝液：５０ｍＭのトリス（ｐＨ７．４）、０．１ＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＤＴＴ、１０％のグリセロール、１００ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ。
【０２０５】
１０倍基質：７５０μｇ／ｍｌのポリ（グルタミン酸／チロシン；４：１）（Ｓｉｇｍａ社）。
【０２０６】
停止溶液：３０％のトリクロロ酢酸、０．２Ｍのピロリン酸ナトリウム（いずれもＦｉｓｈｅｒ社）。
【０２０７】
洗浄溶液：１５％のトリクロロ酢酸、０．２Ｍのピロリン酸ナトリウム。
【０２０８】
フィルタープレート：ミリポア＃ＭＡＦＣ  ＮＯＢ、ＧＦ／Ｃグラスファイバー  ９６−ウェルプレート。
【０２０９】
方法Ａ−タンパク質精製
１．Ｓｆ２１細胞に、５ウイルス粒子／細胞の感染多重度の組換えウイルスにより感染させ、２７℃で４８時間培養する。
【０２１０】
２．すべてのステップを４℃で実施する。感染した細胞は、1000×ｇで遠心分離することにより収集し、１/１０容の溶解緩衝液により４℃で３０分間溶解させ、続いて100.000×ｇで１時間の遠心分離する。その上清を次に溶解緩衝液で平衡化させたグルタチオンセファローズカラム(Pharmacia社)に通し、５容の同じ緩衝液、続いて５容の洗浄緩衝液で洗浄する。組換え型ＧＳＴ−ＫＤＲタンパク質を洗浄緩衝液／１０ｍＭの還元グルタチオン(Sigma社)により溶出し、透析用緩衝液に向かって透析する。
【０２１１】
方法Ｂ−ＶＥＧＦ受容体キナーゼアッセイ
１．５０％ＤＭＳＯ中のアッセイに５μｌの阻害薬または対照を加える
２．５μｌの１０×反応緩衝液、５μｌの２５ｍＭ  ＡＴＰ／１０μＣｉ[33Ｐ]ＡＴＰ（Amersham社）および５μｌの１０×基質を含有する３５μｌの反応混合物を加える
３．酵素希釈緩衝液中の１０μｌのＫＤＲ(２５ｎＭ)を添加することにより反応を開始させる
４．混合し、室温で１５分間培養する
５．５０μｌの停止溶液を加えて反応を停止させる
６．４℃で１５分間培養する
７．９０μｌのアリコートをフィルタープレートに移す
８．吸引し、洗浄溶液により３回洗浄する
９．３０μｌのシンチレーションカクテルを加え、プレートをシールし、Ｗａｌｌａｃｅ  Ｍｉｃｒｏｂｅｔａシンチレーションカウンターで数える。
【０２１２】
ヒト臍静脈内皮細胞有糸分裂誘発アッセイ
増殖因子に対して細胞分裂応答を仲介するＶＥＧＦ受容体の発現は、血管内皮細胞に大部分は限定される。培養液中のヒト臍静脈内皮細胞(ＨＵＶＥＣ)は、ＶＥＧＦの処置により増殖し、ＶＥＧＦ刺激に対するＫＤＲキナーゼ阻害薬の影響を数量化するアッセイ系として使用することができる。記載されているアッセイにおいて、静止状態のＨＵＶＥＣの単層は、ＶＥＧＦまたは塩基性線維芽細胞増殖因子(ｂＦＧＦ)の添加２時間前に、媒体または試験化合物で処理する。ＶＥＧＦまたはｂＦＧＦに対する細胞分裂の応答は、[3Ｈ]チミジンの細胞ＤＮＡへの取り込みを計量することによって測定する。
【０２１３】
ＨＵＶＥＣ
初代培養単離品としての凍結ＨＵＶＥＣを、クロネティクス社(Clonetics Corp.)から購入する。その細胞は、内皮増殖培地(ＥＧＭ；クロネティクス社)で得られ、継代３〜７における分裂促進アッセイに使用する。
【０２１４】
培養皿：ＮＵＮＣＬＯＮ  ９６ウェルポリスチレン組織培養皿(ＮＵＮＣ ＃１６７００８）
アッセイ培地：１ｇ／ｍｌのグルコース(低グルコースＤＭＥＭ；Mediatech社)と１０％(Ｖ/Ｖ)のウシ胎仔血清(Clonetics社)を含有するダルベッコ変法イーグル培地
試験化合物：試験化合物の作業原液は、１００％ジメチルスルホキシド(ＤＭＳＯ)中に、それらの望ましい最終濃度の４００倍の大きさに希釈する。１倍濃度への最終の希釈は、細胞に加える直前にアッセイ培地中で行った。
【０２１５】
１０×増殖因子：ヒトＶＥＧＦ１６５(５００ｎｇ／ｍｌ；Ｒ＆Ｄ  Systems社)およびｂＦＧＦ(１０ｎｇ／ｍｌ；Ｒ＆Ｄ Systems社)の溶液をアッセイ培地中で調製する。
１０×［3Ｈ］チミジン：［メチル−3Ｈ］チミジン(２０Ｃｉ／ｍｍｏｌ；Dupont-NEN社)を低グルコースＤＭＥＭ培地中８０μＣｉ／ｍｌに希釈する。
【０２１６】
細胞洗浄培地：１ｍｇ／ｍｌのウシ血清アルブミン(Boehringer-Mannheim社)を含有するハンクの平衡塩類溶液(Hank's balanced salt solution）
細胞溶解液：１Ｎ  ＮａＯＨ、２％(ｗ/ｖ）のＮａ2ＣＯ3。
【０２１７】
方法１
ＥＧＭ中に保存したＨＵＶＥＣ単層を、トリプシン化によって収集し、９６ウェルプレートに１ウェル当たり１００μｌのアッセイ培地につき４０００個の細胞密度で蒔く。５％のＣＯ2を含有する湿った雰囲気中、３７℃で２４時間にわたり細胞増殖を阻止する。
【０２１８】
方法２
増殖阻止培地を、媒体(０.２５％[ｖ/ｖ]のＤＭＳＯ)または望ましい最終濃度の試験化合物のいずれかを含有する１００μｌのアッセイ培地により置換する。測定はすべて３回繰り返して行う。細胞を次に、試験化合物が細胞に入るようにするため、３７℃／５％ＣＯ2で２時間培養する。
【０２１９】
方法３
２時間にわたる前処理の後、細胞を、アッセイ培地、１０×ＶＥＧＨ溶液または１０×ｂＦＧＦ溶液のいずれかの１０μｌ／ウェルを添加して刺激する。細胞を次に３７℃／５％ＣＯ2で培養する。
【０２２０】
方法４
２４時間後、増殖因子の存在下、１０×[3Ｈ]チミジン(１０μｌ／ウェル)を加える。
【０２２１】
方法５
［3Ｈ］チミジンの添加３日後、培地を吸引により除去し、細胞を細胞洗浄培地で２度洗浄する(４００μｌ/ウェルに続いて２００μｌ/ウェル）。洗浄した接着細胞を、次に、細胞溶解液(１００μｌ/ウェル)を加え、３７℃に３０分加温して可溶化する。細胞溶解物を、１５０μｌの水を含有する７ｍｌのシンチレーションガラス瓶に移す。シンチレーションカクテル(５ｍｌ/ガラス瓶)を加え、細胞関連放射能を液体シンチレーション分光法により測定する。
【０２２２】
これらのアッセイによれば、式Ｉの化合物はＶＥＧＦの阻害薬であり、したがって、眼疾患、例えば糖尿病性網膜症の治療、および癌腫、例えば固形腫瘍の治療等における血管新生の阻害に適している。本化合物は、培養液中のヒト血管内皮細胞のＶＥＧＦ刺激の有糸分裂誘発を０.０１〜５.０μＭのＩＣ５０値で阻害する。これらの化合物はまた、関係するチロシンキナーゼについての選択性を示す(例えば、ＦＧＦＲ１およびＳｒｃファミリー；ＳｒｃキナーゼとＶＥＧＦＲキナーゼの間の関係、Ｅｌｉｃｅｉｒｉら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ, Ｖｏｌ.４, ｐｐ.９１５〜９２４, Ｄｅｃｅｍｂｅｒ １９９９参照）。
【０２２３】
ＴＩＥ−２試験は、例えば、ＷＯ０２／４４１５６に示されている方法と同様に行うことができる。
該アッセイ法は、放射性33Ｐ−ＡＴＰの存在下のＴｉｅ−２キナーゼによる基質ポリ(Ｇｌｕ、Ｔｙｒ)のリン酸化反応において試験される物質の阻害活性を測定する。そのリン酸化された基質は、培養時間中に「フラッシュプレート」マイクロタイタープレートの表面に結合する。反応混合物を除去した後、マイクロタイタープレートを何回も洗浄し、その表面の放射能をその後測定する。測定される物質の阻害効果により、影響を受けていない酵素反応と比較して低い放射能の結果となる。
【０２２４】
続く実施例は、医薬品組成物に関する：
【０２２５】
実施例４：注射バイアル
本発明による１００ｇの有効成分および５ｇのリン酸一水素二ナトリウムの３ｌの２回蒸留水の溶液を、２Ｎの塩酸、を用いてｐＨ６．５に調整し、無菌ろ過し、注射バイアルに移し、無菌状態で凍結乾燥し、無菌条件下で密封する。各注射バイアルは５ｍｇの有効成分を含有する。
【０２２６】
実施例５：座薬
本発明による２０ｇの有効成分と、１００ｇのダイズレシチンおよび１４００ｇのカカオバターとの混合物を溶融し、型に注ぎ冷却させる。各坐薬は２０ｍｇの有効成分を含有する。
【０２２７】
実施例６：溶液
９４０ｍｌの２回蒸留水中の、本発明による１ｇの有効成分、９．３８ｇのＮａＨ2ＰＯ4・２Ｈ2Ｏ、２８．４８ｇのＮａ2ＨＰＯ4・１２Ｈ2Ｏおよび０．１ｇの塩化ベンザルコニウムから、溶液を調製する。そのｐＨを６．８に調整し、その溶液を１ｌとし、放射殺菌により無菌化する。この溶液は点眼液の形で使用することができる。
【０２２８】
実施例７：軟膏
５００ｍｇの本発明による有効成分を、９９．５ｇのワセリンと無菌状態のもとで混合する。
【０２２９】
実施例８：錠剤
１ｋｇの有効成分、４ｋｇのラクトース、１．２ｋｇのジャガイモデンプン、０．２ｋｇのタルクおよび０．１ｋｇのステアリン酸マグネシウムを、圧縮成型して、各錠剤が１０ｍｇの有効成分を含有するように従来どおりに錠剤を生じさせる。
【０２３０】
実施例９：コーティング錠
錠剤を実施例Ｅと同様に圧縮成型し、その後、スクロース、ジャガイモデンプン、タルク、トラガカントおよび染料のコーティングで従来どおり被覆する。
【０２３１】
実施例１０：カプセル
２ｋｇの活性成分を、各カプセルが２０ｍｇの活性成分を含有するように、従来どおり硬質のゼラチンカプセルに導入する。
【０２３２】
実施例１１：アンプル
６０ｌの２回蒸留水中の１ｋｇの本発明による有効成分の溶液を、無菌ろ過し、アンプル中に移し、無菌条件下で凍結乾燥させ、無菌条件下で密封する。各アンプルは１０ｍｇの活性成分を含有する。
【国際調査報告】
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