(57)【要約】本発明は、コラーゲン及びエラスチンのレベルはアマドリ経路を経由するフラックスを変化することにより調整できること、及び銅含有化合物及び複合体は酵素フルクトサミン−３−キナーゼを抑制することの発見に関する。
2007523908.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳類のデスモシンレベルを必要に応じて低下させる方法であって、アマドラーゼ経路阻害剤を含む組成物を哺乳類に投与することを含む、前記方法。
【請求項２】
前記組成物がフルクトサミンキナーゼ阻害剤を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記組成物が３ＤＧ（３−デオキシグルコソン）阻害剤を更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記哺乳類がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記ヒトが糖尿病及び肺線維症の群から選ばれる少なくとも１の疾患を有する、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
哺乳類のデスモシンレベルを必要に応じて安定化させる方法であって、アマドラーゼ経路阻害剤を含む組成物を哺乳類に投与することを含む、前記方法。
【請求項７】
前記組成物がフルクトサミンキナーゼ阻害剤を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記組成物が３ＤＧ阻害剤を更に含む、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記哺乳類がヒトである、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
前記ヒトが糖尿病及び肺線維症の群から選ばれる少なくとも１の疾患を有する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記デスモシンレベルが細胞外マトリックス、肺、腎臓、皮膚、心臓、動脈、靱帯及び弾性軟骨の群から選ばれる少なくとも１の場所におけるものである、請求項１又は６に記載の方法。
【請求項１２】
前記フルクトサミンキナーゼ阻害剤が局所、口腔、直腸、膣、筋肉内、皮下及び静脈内の群から選ばれる経路で前記哺乳類に投与される、請求項２又は７に記載の方法。
【請求項１３】
前記フルクトサミンキナーゼ阻害剤が抗体である、請求項２又は７に記載の方法。
【請求項１４】
前記フルクトサミンキナーゼがSEQ ID NO:2に記載されるアミノ酸配列をエンコードする核酸を含む核酸によってエンコードされる、請求項２又は７に記載の方法。
【請求項１５】
哺乳類のデスモシンレベルを必要に応じて低下させる方法であって、アマドラーゼ経路阻害剤を含む組成物を哺乳類に投与することを含み、該阻害剤が式XIX：
【化１】
2007523908.tif 000059
［ここで、
（ａ）Ｘは−ＮＲ'−、−Ｓ(Ｏ)−、−Ｓ(Ｏ)2−又は−Ｏ−
｛ここで、Ｒ'はＨ、直鎖状又は分岐鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ4)、ＣＨ2(ＣＨＯＲ2)nＣＨ2ＯＲ2（ここで、ｎは１〜５であり、Ｒ2はＨ、アルキル(Ｃ1〜Ｃ4)又は置換若しくは非置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)若しくはアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)である）或はＣＨ(ＣＨ2ＯＲ2)(ＣＨＯＲ2)nＣＨ2ＯＲ2（ここで、ｎは１〜４であり、Ｒ2はＨ、アルキル(Ｃ1〜Ｃ4)又は置換若しくは非置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)若しくはアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)である）、置換又は非置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)及び置換又は非置換アラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)の群から選ばれる｝
であり；
（ｂ）ＲはＨ、アミノ酸残基、ポリアミノ酸残基、ペプチド鎖、非置換の又は少なくとも１の窒素若しくは酸素含有置換基で置換された直鎖状又は分岐鎖状脂肪族基(Ｃ1〜Ｃ8)及び少なくとも１の−Ｏ−、−ＮＨ−又は−ＮＲ''−成分（ここで、Ｒ''は直鎖状若しくは分岐鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)又は非置換若しくは置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)若しくはアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)である）で中断された非置換の又は少なくとも１の窒素若しくは酸素含有置換基で置換された直鎖状又は分岐鎖状脂肪族基(Ｃ1〜Ｃ8)の群から選ばれる置換基であり；
（ｃ）Ｘが−ＮＲ'−を表わす場合にはＲ及びＲ'はそれらが結合している窒素原子と一緒になって５〜７個の環原子を有する置換又は非置換ヘテロ環を表わすこともでき、この環中のヘテロ原子は少なくとも１の窒素及び酸素だけであり、
前記アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)又はアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)及び前記ヘテロ環の置換基は、Ｈ、アルキル(Ｃ1〜Ｃ6)、ハロゲン、ＣＦ3、ＣＮ、ＮＯ2及び−Ｏ−アルキル(Ｃ1〜Ｃ6)の群から選ばれ；
Ｒ1は１〜４個の直鎖状炭素原子を有するポリオール成分であり；
Ｙはヒドロキシメチレン成分−ＣＨＯＨ−であり；
Ｚは−Ｈ、−Ｏ−アルキル(Ｃ1〜Ｃ6)、−ハロゲン、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ及び−ＳＯ3Ｈ2、並びに随意としての−ＯＨの群から選ばれる］；
の化合物、又は
（ｄ）該化合物の異性体若しくは医薬的に許容できる塩
（但し、上記式においてＸ−Ｒがヒドロキシル又はチオールを表わすものは除く）
である、前記方法。
【請求項１６】
前記組成物が前記阻害剤を約０．０００１〜約１５重量％含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
更に前記組成物が医薬組成物である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記の式XIXの化合物がガラクチトールリシン、３−デオキシソルビトールリシン、３−デオキシ−３−フルオロ−キシリトールリシン、３−デオキシ−３−シアノソルビトールリシン、３−Ｏ−メチルソルビトールリシン、メグルミン、ソルビトールリシン及びマンニトールリシンの群から選ばれる、請求項１５に記載の方法。
【請求項１９】
前記化合物が３−Ｏ−メチルソルビトールリシンである、請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】
哺乳類においてアマドリ経路のフラックスを増加させることによって哺乳類におけるコラーゲンについてのｍＲＮＡのレベルを低下させる方法であって、次式XIX(b)：
【化２】
2007523908.tif 000060
［ここで、
（ａ）Ｘは−ＮＲ'−、−Ｓ(Ｏ)−、−Ｓ(Ｏ)2−又は−Ｏ−
｛ここで、Ｒ'はＨ、グアニジン基、直鎖状又は分岐鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ4)、ＣＨ2(ＣＨＯＲ2)nＣＨ2ＯＲ2（ここで、ｎは１〜５であり、Ｒ2はＨ、アルキル(Ｃ1〜Ｃ4)又は置換若しくは非置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)若しくはアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)である）或はＣＨ(ＣＨ2ＯＲ2)(ＣＨＯＲ2)nＣＨ2ＯＲ2（ここで、ｎは１〜４であり、Ｒ2はＨ、アルキル(Ｃ1〜Ｃ4)又は非置換若しくは置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)若しくはアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)である）、非置換又は置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)及び非置換又は置換アラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)の群から選ばれる｝
であり、；
（ｂ）ＲはＨ、アミノ酸残基、ポリアミノ酸残基、ペプチド鎖、非置換の又は少なくとも１の窒素若しくは酸素含有置換基で置換された直鎖状又は分岐鎖状脂肪族基(Ｃ1〜Ｃ8)及び少なくとも１の−Ｏ−、−ＮＨ−又は−ＮＲ''−（ここで、Ｒ''は直鎖状若しくは分岐鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)又は置換若しくは非置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)若しくはアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)である）成分で中断された非置換の又は少なくとも１の窒素若しくは酸素含有置換基で置換された直鎖状又は分岐鎖状脂肪族基(Ｃ1〜Ｃ8)の群から選ばれる置換基であり；
（ｃ）Ｘが−ＮＲ'−を表わす場合にはＲ及びＲ'はそれらが結合している窒素原子と一緒になって５〜７個の環原子を有する置換又は非置換ヘテロ環を表わすこともでき、この環中のヘテロ原子は少なくとも１の窒素及び酸素だけであり、
前記アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)又はアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)及び前記ヘテロ環の置換基は、Ｈ、アルキル(Ｃ1〜Ｃ6)、ハロゲン、ＣＦ3、ＣＮ、ＮＯ2及び−Ｏ−アルキル(Ｃ1〜Ｃ6)の群から選ばれ；
Ｒ1は１〜４個の直鎖状炭素原子を有するポリオール成分であり；
Ｚは−Ｈ、−Ｏ−アルキル(Ｃ1〜Ｃ6)、−ハロゲン、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ及び−ＳＯ3Ｈ2、並びに随意としての−ＯＨの群から選ばれる］
の化合物、又は
（ｄ）該化合物の異性体若しくは医薬的に許容できる塩
（但し、上記式においてＸ−Ｒがヒドロキシル又はチオールを表わすものは除く）
を哺乳類に投与することを含む、前記方法。
【請求項２１】
前記コラーゲンがI型コラーゲンである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記化合物がフルクトサミンキナーゼの基質である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記化合物がフルクトースリシンである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
哺乳類においてアマドラーゼ経路のフラックスを増加させる化合物を含む組成物を哺乳類に投与し、それによってコラーゲンI型についてのｍＲＮＡのレベルを低下させることを含む、哺乳類の強皮症を治療する方法。
【請求項２５】
哺乳類においてアマドラーゼ経路のフラックスを増加させる化合物を含む組成物を哺乳類に投与し、それによって哺乳類におけるコラーゲンI型についてのｍＲＮＡのレベルを低下させることを含む、哺乳類のケロイドを治療する方法。
【請求項２６】
前記化合物がフルクトサミンキナーゼを刺激する、請求項２４又は２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記化合物がフルクトースリシン−３−ホスフェート及びフルクトースリシン−３−ホスフェートの類似体の群から選ばれる、請求項２４又は２５に記載の方法。
【請求項２８】
哺乳類の強皮症を治療する方法であって、
（ａ）アマドラーゼ経路のフラックスを刺激する第１の化合物；及び
（ｂ）３ＤＧを不活性化する第２の化合物
を含む組成物を哺乳類に投与することを含む、前記方法。
【請求項２９】
前記の第２の化合物が構造式Ｉ：
【化３】
2007523908.tif 000061
（ここで、Ｒ1及びＲ2は、独立して水素、低級アルキル、低級アルコキシ及びアリール基の群から選ばれるか、又はＲ1及びＲ2が窒素と一緒になって１〜２個のヘテロ原子及び２〜６個の炭素原子を含有するヘテロ環を形成するかのいずれかであり、前記へテロ原子の第２のものは窒素、酸素若しくは硫黄を含み；更に、
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記アリール基は置換及び非置換のフェニル及びピリジル基を含む）
のものである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
少なくとも１のジカルボニル化合物と哺乳類のトロポエラスチンとの反応を阻害する方法であって、有効量のα−ジカルボニル糖機能阻害剤を哺乳類に投与することを含む、前記方法。
【請求項３１】
前記ジカルボニル化合物が３ＤＧである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記阻害剤が３ＤＧをキレート化する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
前記阻害剤が３ＤＧを解毒する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３４】
前記阻害剤が構造式Ｉ〜XVII及びXVIIIの群から選ばれる、請求項３１に記載の方法。
【請求項３５】
前記阻害剤が構造式Ｉ：
【化４】
2007523908.tif 000062
（ここで、Ｒ1及びＲ2は、独立して水素、低級アルキル、低級アルコキシ及びアリール基の群から選ばれるか、又はＲ1及びＲ2が窒素と一緒になって１〜２個のヘテロ原子及び２〜６個の炭素原子を含有するヘテロ環を形成するかのいずれかであり、前記へテロ原子の第２のものは窒素、酸素若しくは硫黄を含み；更に、
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記アリール基は置換及び非置換のフェニル及びピリジル基を含む）
のものである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３６】
前記化合物がＮ，Ｎ−ジメチルイミドジカルボンイミド酸ジアミド、イミドジカルボンイミド酸ジアミド、Ｎ−フェニルイミドジカルボンイミド酸ジアミド、Ｎ−（アミノイミノメチル）−４−モルホリンカルボキシイミドアミド、Ｎ−（アミノイミノメチル）−４−チオモルホリンカルボキシイミドアミド、Ｎ−（アミノイミノメチル）−４−メチル−１−ピペラジンカルボキシイミドアミド、Ｎ−（アミノイミノメチル）−１−ピペリジンカルボキシイミドアミド、Ｎ−（アミノイミノメチル）−１−ピロリジンカルボキシイミドアミド、Ｎ−（アミノイミノメチル）−Ｉ−ヘキサヒドロアゼピンカルボキシイミドアミド、（アミノイミノメチル）−Ｉ−ヘキサヒドロアゼピンカルボキシイミドアミド、Ｎ−４−ピリジルイミドジカルボンイミド酸ジアミド、Ｎ，Ｎ−ジ−ｎ−ヘキシルイミドジカルボンイミド酸ジアミド、Ｎ，Ｎ−ジ−ｎ−ペンチルイミドジカルボンイミド酸ジアミド、Ｎ，Ｎ−ジ−ｎ−ブチルイミドジカルボンイミド酸ジアミド、Ｎ，Ｎ−ジプロピルイミドジカルボンイミド酸ジアミド及びＮ，Ｎ−ジエチルイミドジカルボンイミド酸ジアミドの群から選ばれる、請求項３０に記載の方法。
【請求項３７】
前記構造式が構造式II：
【化５】
2007523908.tif 000063
（ここで、ＺはＮ又はＣＨであり；
Ｘ、Ｙ及びＱはそれぞれ独立して水素、アミノ、ヘテロ環、アミノ低級アルキル、低級アルキル及びヒドロキシ基の群から選ばれ；
Ｒ3は水素又はアミノ基又はそれらの対応する３−オキシドを含み；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記ヘテロ環基は３〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
Ｘ、Ｙ及びＱはそれぞれ窒素原子上のヒドロキシ変異体として存在することができる）
である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３８】
前記化合物が４，５−ジアミノピリミジン、４−アミノ−５−アミノメチル−２−メチルピリミジン、６−（ピペリジノ）−２，４−ジアミノピリミジン−３−オキシド、４，６−ジアミノピリミジン、４，５，６−トリアミノピリミジン、４，５−ジアミノ−６−ヒドロキシピリミジン、２，４，５−トリアミノ−６−ヒドロキシピリミジン、２，４，６−トリアミノピリミジン、４，５−ジアミノ−２−メチルピリミジン、４，５−ジアミノ−２，６−ジメチルピリミジン、４，５−ジアミノ−２−ヒドロキシ−ピリミジン及び４，５−ジアミノ−２−ヒドロキシ−６−メチルピリミジンの群から選ばれる、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記構造式が構造式III：
【化６】
2007523908.tif 000064
｛ここで、Ｒ4は水素又はアシルであり、
Ｒ5は水素又は低級アルキルであり、
Ｘaは低級アルキル、カルボキシ、カルボキシメチル随意に置換されたフェニル及び随意に置換されたピリジル基の群から選ばれる置換基であり、ここで、随意としての置換基はハロゲン、低級アルキル、ヒドロキシ低級アルキル、ヒドロキシ及びアセチルアミノ基の群から選ばれ；
更にＸが随意に置換されたフェニル又はピリジルである場合には、Ｒ5は水素であり、
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれる｝
である、請求項３０に記載の方法。
【請求項４０】
前記化合物がＮ−アセチル−２−（フェニルメチレン）ヒドラジンカルボキシイミドアミド、２−（フェニルメチレン）ヒドラジンカルボキシイミドアミド、２−（２，６−ジクロロフェニルメチレン）ヒドラジンカルボキシイミドアミドピリドキサールグアニルヒドラゾン、ピリドキサールホスフェートグアニルヒドラゾン、２−（１−メチルエチリデン）ヒドラジンカルボキシイミドアミド、ピルビン酸グアニルヒドラゾン、４−アセトアミドベンズアルデヒドグアニルヒドラゾン、４−アセトアミドベンズアルデヒド−Ｎ−アセチルグアニルヒドラゾン及びアセト酢酸グアニルヒドラゾンの群から選ばれる、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記構造式が構造式IV：
【化７】
2007523908.tif 000065
（ここで、Ｒ6は水素、低級アルキル基及びフェニル基の群から選ばれ、更に該フェニル基は１〜３個のハロ、アミノ、ヒドロキシ及び低級アルキル基の群から選ばれる構造によって随意に置換され、該フェニル基が置換されている場合のその置換点は、前記構造式IVの直鎖への該フェニル環の結合点に対してオルト位、メタ位及びパラ位の群から選ばれ；
Ｒ7は水素、低級アルキル基及びアミノ基の群から選ばれ；
Ｒ8は水素又は低級アルキル基であり；
更に、前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子から成る低級アルキル基から選ばれる）
である、請求項３０に記載の方法。
【請求項４２】
前記化合物が等価のｎ−ブタンヒドラゾン酸ヒドラジド、４−メチルベンズアミドラゾン、Ｎ−メチルベンゼンカルボキシイミド酸ヒドラジド、ベンゼンカルボキシイミド酸１−メチルヒドラジド、３−クロロベンズアミドラゾン、４−クロロベンズアミドラゾン、２−フルオロベンズアミドラゾン、３−フルオロベンズアミドラゾン、４−フルオロベンズアミドラゾン、２−ヒドロキシベンズアミドラゾン、３−ヒドロキシベンズアミドラゾン、４−ヒドロキシベンズアミドラゾン、２−アミノベンズアミドラゾン、ベンゼンカルボヒドラゾン酸ヒドラジド及びベンゼンカルボヒドラゾン酸１−メチルヒドラジドの群から選ばれる、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記構造式が構造式Ｖ：
【化８】
2007523908.tif 000066
（ここで、Ｒ9及びＲ10は独立して水素、ヒドロキシ、低級アルキル及び低級アルコキシの群から選ばれ、
自由なアミノ基は固定アミノ基に隣接し；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子から成る低級アルキル基から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子から成る低級アルコキシ基から選ばれる）
である、請求項３０に記載の方法。
【請求項４４】
前記化合物が３，４−ジアミノピリジン、２，３−ジアミノピリジン、５−メチル−２，３−ジアミノピリジン、４−メチル−２，３−ジアミノピリジン、６−メチル−２，３−ピリジンジアミン、４，６−ジメチル−２，３−ピリジンジアミン、６−ヒドロキシ−２，３−ジアミノピリジン、６−エトキシ−２，３−ジアミノピリジン、６−ジメチルアミノ−２，３−ジアミノピリジン、２−（２，３−ジアミノ−６−ピリジル）マロン酸ジエチル、６−（４−メチル−１−ピペラジニル）−２，３−ピリジンジアミン、６−（メチルチオ）−５−（トリフルオロメチル）−２，３−ピリジンジアミン、５−（トリフルオロメチル）−２，３−ピリジンジアミン、６−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−５−（トリフルオロメチル）−２，３−ピリジンジアミン、６−クロロ−５−（トリフルオロメチル）−２，３−ピリジンジアミン、５−メトキシ−６−（メチルチオ）−２，３−ピリジンジアミン、５−ブロモ−４−メチル−２，３−ピリジンジアミン、５−（トリフルオロメチル−２，３−ピリジンジアミン、６−ブロモ−４−メチル−２，３−ピリジンジアミン、５−ブロモ−６−メチル−２，３−ピリジンジアミン、６−メトキシ−３，４−ピリジンジアミン、２−メトキシ−３，４−ピリジンジアミン、５−メチル−３，４−ピリジンジアミン、５−メトキシ−３，４−ピリジンジアミン、５−ブロモ−３，４−ピリジンジアミン、２，３，４−ピリジントリアミン、２，３，５−ピリジントリアミン、４−メチル−２，３，６−ピリジントリアミン、４−（メチルチオ）−２，３，６−ピリジントリアミン、４−エトキシ−２，３，６−ピリジントリアミン、２，３，６−ピリジントリアミン、３，４，５−ピリジントリアミン、４−メトキシ−２，３−ピリジンジアミン、５−メトキシ−２，３−ピリジンジアミン及び６−メトキシ−２，３−ピリジンジアミンの群から選ばれる、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記構造式が構造式VI：
【化９】
2007523908.tif 000067
（ここで、ｎは１又は２であり、
Ｒ11はアミノ基又はヒドロキシエチル基であり、
Ｒ12はアミノ基、ヒドロキシアルキルアミノ基、低級アルキル基及び式ａｌｋ−Ｙａの基の群から選ばれ、
ここで、ａｌｋは低級アルキレン基であり、
Ｙａはヒドロキシ、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、低級アルキルアミノ基及びヘテロ環式基の群から選ばれ、
ここで、前記ヘテロ環式基は４〜７個の環員及び１〜３個のヘテロ原子を含有し；
前記Ｒ11がヒドロキシエチル基である場合には前記Ｒ12はアミノ基であり；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ、
前記低級アルキレン基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ、
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれる）
である、請求項３０に記載の方法。
【請求項４６】
前記化合物が１−アミノ−２−［２−（２−ヒドロキシエチル）ヒドラジノ］−２−イミダゾリン、１−アミノ−［２−（２−ヒドロキシエチル）ヒドラジノ］−２−イミダゾリン、１−アミノ−２−（２−ヒドロキシエチルアミノ）−２−イミダゾリン、１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−１，４，５，６−テトラヒドロピリミジン、１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン、１−アミノ−２−（［２−（４−モルホリノ）エチル］アミノ）イミダゾリン、（［２−（４−モルホリノ）エチル］アミノ）イミダゾリン、１−アミノ−２−（［３−（４−モルホリノ）プロピル］アミノ）イミダゾリン、１−アミノ−２−（［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）プロピル］−アミノ）イミダゾリン；１−アミノ−２−（［３−（ジメチルアミノ）プロピル］アミノ）イミダゾリン、１−アミノ−２−［（３−エトキシプロピル）アミノ］イミダゾリン、１−アミノ−２−（［３−（１−イミダゾリル）プロピル］アミノ）イミダゾリン、１−アミノ−２−（２−メトキシエチルアミノ）−２−イミダゾリン、（２−メトキシエチルアミノ）−２−イミダゾリン、１−アミノ−２−（３−イソプロポキシプロピルアミノ）−２−イミダゾリン、１−アミノ−２−（３−メチルチオプロピルアミノ）−２−イミダゾリン、１−アミノ−２−［３−（１−ピペリジノ）プロピルアミノ）イミダゾリン、１−アミノ−２−［２，２−ジメチル−３−（ジメチルアミノ）プロピルアミノ］−２−イミダゾリン及び１−アミノ−２−（ネオペンチルアミノ）−２−イミダゾリンの群から選ばれる、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記構造式が構造式VII：
【化１０】
2007523908.tif 000068
（ここで、Ｒ13は水素及びアミノ基の群から選ばれ、
Ｒ14及びＲ15は独立してアミノ基、ヒドラジノ基、低級アルキル基及びアリール基の群から選ばれ、
Ｒ13、Ｒ14及びＲ15の内の１つはアミノ基又はヒドラジノ基でなければならず；
前記アリール基は６〜１０個の炭素原子を有するものの群から選ばれ、
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれる）
である、請求項３０に記載の方法。
【請求項４８】
前記化合物が３，４−ジアミノ−５−メチル−１，２，４−トリアゾール、３，５−ジメチル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−４−アミン、４−トリアゾール−４−アミン、４−トリアゾール−４−アミン、４−トリアゾール−４−アミン、１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン、５−（１−エチルプロピル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン、５−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン、５−シクロヘキシル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン、５−メチル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン、５−フェニル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン、５−プロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン及び５−シクロヘキシル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミンの群から選ばれる、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記構造式が構造式VIII：
【化１１】
2007523908.tif 000069
（ここで、Ｒ16は水素及びアミノ基の群から選ばれ；
Ｒ17はアミノ基及びグアニジノ基の群から選ばれ、
ここで、Ｒ16が水素である場合にはＲ17はグアニジノ基又はアミノ基であり、Ｒ16がアミノ基である場合にはＲ17はアミノ基であり；
Ｒ18及びＲ19は独立して水素、ヒドロキシ、低級アルキル基、低級アルコキシ基及びアリール基の群から選ばれ；
ここで、前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ、
前記アリール基は６〜１０個の炭素原子を有するものの群から選ばれる）
である、請求項３０に記載の方法。
【請求項５０】
前記化合物が２−グアニジノベンゾイミダゾール、１，２−ジアミノベンゾイミダゾール、１，２−ジアミノベンゾイミダゾール塩酸塩、５−ブロモ−２−グアニジノベンゾイミダゾール、５−メトキシ−２−グアニジノベンゾイミダゾール、５−メチルベンゾイミダゾール−１，２−ジアミン、５−クロロベンゾイミダゾール−１，２−ジアミン及び２，５−ジアミノベンゾイミダゾールの群から選ばれる、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記構造式が構造式IX：
【化１２】
2007523908.tif 000070
（ここで、Ｒ20は水素、低級アルキル基、低級アルキルチオール基、カルボキシ基、アミノカルボキシ基及びアミノ基の群から選ばれ；
Ｒ21は水素及びアシル基の群から選ばれ；
ここで、前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ、
前記アシル基は２〜１０個の炭素原子を有するものの群から選ばれる）
である、請求項３０に記載の方法。
【請求項５２】
前記化合物がリシン、２，３−ジアミノコハク酸及びシステインの群から選ばれる、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記化合物が前記構造式Ｘ：
【化１３】
2007523908.tif 000071
（ここで、Ｒ22は水素、アミノ基、モノアミノ低級アルキル基及びジアミノ低級アルキル基の群から選ばれ；
Ｒ23は水素、アミノ基、モノアミノ低級アルキル基及びジアミノ低級アルキル基の群から選ばれ；
Ｒ24は水素、低級アルキル基、アリール基及びアシル基の群から選ばれ；
Ｒ25は水素、低級アルキル基、アリール基及びアシル基の群から選ばれ；
Ｒ22又はＲ23の一方はアミノ基、モノアミノ低級アルキル基又はジアミノ低級アルキル基でなければならず；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有する低級アルキル基から選ばれ；
前記モノアミノ低級アルキル基又はジアミノ低級アルキル基は１又は２個のアミノ基で置換された低級アルキル基であり；
前記アリール基は６〜１０個の炭素原子を有するアリール基から選ばれ；
前記アシル基は２〜１０個の炭素原子を有する低級アルキル−、アリール−及びヘテロアリール−カルボン酸の群から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれる）の化合物である、請求項３０に記載の方法。
【請求項５４】
前記化合物が１，２−ジアミノ−４−フェニル［ｌＨ］イミダゾール、１，２−ジアミノイミダゾール、１−（２，３−ジアミノプロピル）イミダゾール三塩酸塩、４−（４−ブロモフェニル）イミダゾール−１，２−ジアミン、４−（４−クロロフェニル）イミダゾール−１，２−ジアミン、４−（４−ヘキシルフェニル）イミダゾール−１，２−ジアミン、４−（４−メトキシフェニル）イミダゾール−１，２−ジアミン、４−フェニル−５−プロピルイミダゾール−１，２−ジアミン、１，２−ジアミノ−４−メチルイミダゾール、１，２−ジアミノ−４，５−ジメチルイミダゾール及び１，２−ジアミノ−４−メチル−５−アセチルイミダゾールの群から選ばれる、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記構造式が構造式XI：
【化１４】
2007523908.tif 000072
（ここで、Ｒ26はヒドロキシ、低級アルコキシ基、アミノ基、アミノ低級アルコキシ基、モノ低級アルキルアミノ低級アルコキシ基、ジ低級アルキルアミノ低級アルコキシ基、ヒドラジノ基及び式ＮＲ29Ｒ30の群から選ばれ；
Ｒ29は水素及び低級アルキル基の群から選ばれ；
Ｒ30は１〜２０個の炭素原子を有するアルキル基、アリール基、ヒドロキシ低級アルキル基、カルボキシ低級アルキル基、低級シクロアルキル基並びに４〜７個の環員及び１〜３個のヘテロ原子を含有するヘテロ環式基の群から選ばれ；
前記Ｒ29、Ｒ30及び窒素はモルホリノ、ピペリジニル及びピペラジニルの群から選ばれる構造を形成することもでき；
Ｒ27は０〜３個のアミノ基、０〜３個のニトロ基、０〜１個のヒドラジノ基、ヒドラジノスルホニル基、ヒドロキシエチルアミノ基及びアミジノ基の群から選ばれ；
Ｒ28は水素、１個のフルオロ、２個のフルオロ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、カルボキシ、低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ及びヒドロキシ低級アルキルアミノ基の群から選ばれ；
Ｒ26がヒドロキシ又は低級アルコキシである場合には前記Ｒ27は非水素置換基であり；
Ｒ26がヒドラジノである場合には該式XIのフェニル環上に少なくとも２個の非水素置換基が存在しなければならず；
Ｒ28が水素である場合には前記Ｒ30は１〜２０個の炭素原子を有するアルキル基、アリール基、ヒドロキシ低級アルキル基、カルボキシ低級アルキル基、低級シクロアルキル基、４〜７個の環員及び１〜３個のヘテロ原子を含有するヘテロ環式基、アミノイミノ基、グアニジノ基、アミノグアニジノ基及びジアミノグアニジノ基の群から選ばれ；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記シクロアルキル基は４〜７個の炭素原子を有するものの群から選ばれる）
である、請求項３０に記載の方法。
【請求項５６】
前記化合物が４−（シクロヘキシルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン塩酸塩、３，４−ジアミノベンゾヒドラジド、４−（ｎ−ブチルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン二塩酸塩、４−（エチルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン二塩酸塩、４−カルバモイル−ｏ−フェニレンジアミン塩酸塩、４−（モルホリノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン塩酸塩、４−［（４−モルホリノ）ヒドラジノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−（１−ピペリジニルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン二塩酸塩、２，４−ジアミノ−３−ヒドロキシ安息香酸、４，５−ジアミノ−２−ヒドロキシ安息香酸、３，４−ジアミノベンズアミド、３，４−ジアミノベンゾヒドラジド、３，４−ジアミノ−Ｎ，Ｎ−ビス（１−メチルエチル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ，Ｎ−ジプロピルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（２−フラニルメチル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（２−メチルプロピル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（５−メチル−２−チアゾリル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（６−メトキシ−２−ベンゾチアゾリル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（６−メトキシ−８−キノリニル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（６−メチル−２−ピリジニル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（２−ピリジニル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（２−チアゾリル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（４−ピリジニル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−［９Ｈ−ピリド（３，４−ｂ）インドール−６−イル］ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−ブチルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−シクロヘキシルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−シクロペンチルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−デシルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−ドデシルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−メチルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−オクチルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−ペンチルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−フェニルベンズアミド、４−（ジエチルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ｔ−ブチルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−イソブチルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ネオペンチルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ジプロピルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ｎ−ヘキシルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ｎ−デシルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ｎ−ドデシルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（１−ヘキサデシルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（オクタデシルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ヒドロキシルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（２−ヒドロキシエチルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレン、４−［（２−ヒドロキシエチルアミノ）エチルアミノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−［（２−ヒドロキシエチルオキシ）エチルアミノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−（６−ヒドロキシヘキシルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（３−エトキシプロピルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（３−イソプロポキシプロピルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（３−ジメチルアミノプロピルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−［４−（２−アミノエチル）モルホリノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−［４−（３−アミノプロピル）モルホリノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−Ｎ−（３−アミノプロピル）ピロリジノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−［３−（Ｎ−ピペリジノ）プロピルアミノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−［３−（４−メチルピペラジニル）プロピルアミノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−（３−イミダゾリルプロピルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（３−フェニルプロピルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−［２−（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）エチルアミノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−（イミダゾリルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ピロリジニルカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ピペリジノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（１−メチルピペラジニルカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（２，６−ジメチルモルホリノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ピロリジン−１−イルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ホモピペリジン−１−イルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（４−メチルピペラジン−１−イルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（１，２，４−トリアゾール−１−イルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（グアニジノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（グアニジノアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−アミノグアニジノアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ジアミノグアニジノアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、３，４−アミノサリチル酸、４−グアニジノ安息香酸、３，４−ジアミノベンゾヒドロキサム酸、３，４，５−トリアミノ安息香酸、２，３−ジアミノ−５−フルオロ安息香酸及び３，４−ジアミノ安息香酸の群から選ばれる、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記構造式が構造式XII：
【化１５】
2007523908.tif 000073
（ここで、Ｒ31は水素、低級アルキル基及びヒドロキシ基の群から選ばれ；
Ｒ32は水素、ヒドロキシ低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキル基及びアリール基の群から選ばれ；
Ｒ33は水素及びアミノ基の群から選ばれ；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記ヒドロキシ低級アルキル基は第１、第２及び第３アルコール置換基パターンの群から選ばれ；
前記アリール基は６〜１０個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
ハロ原子、ここで、該ハロ原子はフルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードの群から選ばれる）
である、請求項３０に記載の方法。
【請求項５８】
前記化合物が３，４−ジアミノピラゾール、３，４−ジアミノ−５−ヒドロキシピラゾール、３，４−ジアミノ−５−メチルピラゾール、３，４−ジアミノ−５−メトキシピラゾール、３，４−ジアミノ−５−フェニルピラゾール、１−メチル−３−ヒドロキシ−４，５−ジアミノピラゾール、１−（２−ヒドロキシエチル）−３−ヒドロキシ−４，５−ジアミノピラゾール、１−（２−ヒドロキシエチル）−３−フェニル−４，５−ジアミノピラゾール、１−（２−ヒドロキシエチル）−３−メチル−４，５−ジアミノピラゾール、１−（２−ヒドロキシエチル）−４，５−ジアミノピラゾール、１−（２−ヒドロキシプロピル）−３−ヒドロキシ−４，５−ジアミノピラゾール、３−アミノ−５−ヒドロキシピラゾール及び１−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）−３−ヒドロキシ−４，５−ジアミノピラゾールの群から選ばれる、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記構造式が構造式XIII:
【化１６】
2007523908.tif 000074
（ここで、ｎは１〜６であり；
Ｘは−ＮＲ1−、−Ｓ(Ｏ)−、−Ｓ(Ｏ)2−及び−Ｏ−の群から選ばれ、
ここで、Ｒ1はＨ、直鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)及び分岐鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)の群から選ばれ；
Ｙは−Ｎ−、−ＮＨ−及び−Ｏ−の群から選ばれ；
ＺはＨ、直鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)及び分岐鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)の群から選ばれる）
である、請求項３０に記載の方法。
【請求項６０】
前記構造式が構造式XIV：
【化１７】
2007523908.tif 000075
（ここで、Ｒ37は低級アルキル基及び式ＮＲ41ＮＲ42の基の群から選ばれ；
ここで、Ｒ41及びＲ42は、Ｒ41が水素であり且つＲ42が低級アルキル基であるか、Ｒ41が水素であり且つＲ42がヒドロキシ（低級）アルキル基であるか、又はＲ41及びＲ42と窒素原子とが一緒になってヘテロ環式基を形成するかのいずれかであり、ここで、このヘテロ環式基は４〜６個の炭素原子を有し且つ酸素、窒素及び硫黄の群から選ばれる０〜１個の追加の原子を含有し；
Ｒ38は水素及びアミノ基の群から選ばれ；
Ｒ39は水素及びアミノ基の群から選ばれ；
Ｒ40は水素及び低級アルキル基の群から選ばれ；
Ｒ38、Ｒ39及びＲ40の内の少なくとも１つは水素以外であり、
Ｒ37及びＲ38の一方はアミノ基であることができず；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
ＮＲ41Ｒ42が形成する前記ヘテロ環式基は０〜１個の追加のヘテロ原子を含有する４〜７員環である）
である、請求項３０に記載の方法。
【請求項６１】
前記化合物が２−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）ヒドラジンカルボキシイミド酸ヒドラジド、Ｎ−（４−モルホリノ）ヒドラジンカルボキシイミドアミド、１−メチル−Ｎ−（４−モルホリノ）ヒドラジンカルボキシイミドアミド、１−メチル−Ｎ−（４−ピペリジノ）ヒドラジンカルボキシイミドアミド、１−（Ｎ−ヘキサヒドロアゼピノ）ヒドラジンカルボキシイミドアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルカルボンイミド酸ジヒドラジド、１−メチルカルボンイミド酸ジヒドラジド、２−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）カルボヒドラゾン酸ジヒドラジド及びＮ−エチルカルボンイミド酸ジヒドラジドの群から選ばれる、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記構造式が構造式XV：
【化１８】
2007523908.tif 000076
（ここで、Ｒ43はピリジル、フェニル及びカルボン酸置換フェニル基の群から選ばれ；
Ｒ46は水素、低級アルキル基及び水可溶化成分の群から選ばれ；
Ｗは炭素−炭素結合及び１〜３個の炭素原子を有するアルキレン基の群から選ばれ；
Ｒ44は低級アルキル基、アリール基及びヘテロアリール基の群から選ばれ；
Ｒ45は水素、低級アルキル基、アリール基及びヘテロアリール基の群から選ばれ；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記アルキレン基は直鎖及び分岐鎖の群から選ばれ；
前記アリール基は６〜１０個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
ハロ原子はフルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードの群から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記ヘテロアリール基はヘテロ原子１個のもの及びヘテロ原子２個のものの群から選ばれる）
である、請求項３０に記載の方法。
【請求項６３】
前記化合物がメチルグリオキサールビス−（２−ヒドラジノ安息香酸）ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−（ジメチル−２−ヒドラジノベンゾエート）ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−（フェニルヒドラジン）ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−（ジメチル−２−ヒドラジノベンゾエート）ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−（４−ヒドラジノ安息香酸）ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−（ジメチル−４−ヒドラジノベンゾエート）ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−（２−ピリジル）ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−（ジエチレングリコールメチルエーテル−２−ヒドラジノベンゾエート）ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−［１−（２，３−ジヒドロキシプロパン）−２−ヒドラジンベンゾエートヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−［１−（２−ヒドロキシエタン）−２−ヒドラジノベンゾエート］ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−［（１−ヒドロキシメチル−１−アセトキシ））−２−ヒドラジノ−２−ベンゾエート］ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−［（４−ニトロフェニル）−２−ヒドラジノベンゾエート］ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−［（４−メチルピリジル）−２−ヒドラジノベンゾエート］ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−（トリエチレングリコール−２−ヒドラジノベンゾエート）ヒドラゾン及びメチルグリオキサールビス−（２−ヒドロキシエチルホスフェート−２−ヒドラジンベンゾエート）ヒドラゾンの群から選ばれる、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記構造式が構造式XVI：
【化１９】
2007523908.tif 000077
｛ここで、Ｒ47は水素を表わすか、又はＲ48と一緒になって２〜３個の炭素原子を有するアルキレン基を表わすかのいずれかであり；
Ｒ48は水素及びａｌｋ−Ｎ−Ｒ50Ｒ51（前記Ｒ47が水素である場合）の群から選ばれ；
ここで、前記ａｌｋは１〜８個の炭素原子を有する直鎖状又は分岐鎖状アルキレン基であり、
Ｒ50及びＲ51は、それぞれが独立して１〜６個の炭素原子を有する低級アルキル基を表わすか、又はＲ50及びＲ51と窒素原子とが一緒になってモルホリノ、ピペリジニル及びメチルピペラジニルの群から選ばれる基を形成するかのいずれかであり；
Ｒ49は水素であるか、又はＲ47とＲ48とが一緒になって２〜３個の炭素原子を有するアルキレン基を形成する場合にはヒドロキシエチルを表わすかのいずれかであり；
Ｗは炭素−炭素結合、１〜３個の炭素原子を有するアルキレン基、１，２−、１，３−又は１，４−フェニレン基、２，３−ナフチレン基、２，５−チオフェニレン基、２，６−ピリジレン基、エチレン基、エテニレン基及びメチレン基の群から選ばれ；
Ｒ52は低級アルキル基、アリール基及びヘテロアリール基の群から選ばれ；
Ｒ53は水素、低級アルキル基、アリール基及びヘテロアリール基の群から選ばれ；
Ｗが炭素−炭素結合である場合にはＲ52及びＲ53が一緒になって１，４−ブチレン基を形成することもでき、又、Ｗが１又は２個の低級アルキル又はアミノ基で随意に置換された１，２−、１，３−又は１，４−フェニレン基である場合にはＲ52及びＲ53は共に水素又は低級アルキル基であり；
Ｗがエチレン基である場合にはＲ52及びＲ53は一緒になってエチレン基であり：
Ｗがメチレン基である場合には、Ｒ52及びＲ53が一緒になって式＝Ｃ(−ＣＨ3)−Ｎ−(Ｈ3Ｃ−)Ｃ＝の基であるか又は−Ｃ−Ｗ−Ｃ−とＲ52及びＲ53とが一緒になってビシクロ−（３，３，１）−ノナン若しくはビシクロ−［３，３，１］−オクタン基を形成するかのいずれかであり且つＲ47及びＲ48が一緒になって２〜３個の炭素原子を有するアルキレン基となり且つＲ49が水素であり；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ，この基はハロ、ヒドロキシ、アミノ基又は低級アルキルアミノ基で随意に置換されていてもよく；
前記アルキレン基は直鎖及び分岐鎖の群から選ばれ；
前記アリール基は６〜１０個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
ハロ原子はフルオロ、クロロ、ブロモ及びヨード基の群から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ、
前記ヘテロアリール基は１又は２個のヘテロ原子を有するものの群から選ばれる｝
である、請求項３０に記載の方法。
【請求項６５】
前記化合物がメチルグリオキサールビス（グアニルヒドラゾン）、メチルグリオキサールビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン−ヒドラゾン）、テレフタルジカルボキサルデヒドビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）、テレフタルジカルボキサルデヒドビス（グアニルヒドラゾン）、フェニルグリオキサールビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）、フリルグリオキサールビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）、メチルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）、メチルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−１，４，５，６−テトラヒドロピリミジンヒドラゾン）、フェニルグリオキサールビス（グアニルヒドラゾン）、フェニルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）、フリルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）、フェニルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−１，４，５，６−テトラヒドロピリミジンヒドラゾン）、フリルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−１，４，５，６−テトラヒドロピリミジンヒドラゾン）、２，３−ブタンジオンビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）、１，４−シクロヘキサンジオンビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）、ｏ−フタル酸ジカルボキサルデヒドビス（２−ｈｙｄカルボキシイミドアミドヒドラゾン）、フリルグリオキサールビス（グアニルヒドラゾン）二塩酸塩二水和物、２，３−ペンタンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、１，２−シクロヘキサンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、２，３−ヘキサンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、１，３−ジアセチルビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、２，３−ブタンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、２，６−ジアセチルピリジン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）二臭化水素酸塩；２，６−ジアセチルピリジン−ビス−（グアニルヒドラゾン）二塩酸塩、２，６−ピリジンジカルボキサルデヒド−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）二臭化水素酸塩三水和物、２，６−ピリジンジカルボキサルデヒド−ビス（グアニルヒドラゾン）二塩酸塩、１，４−ジアセチルベンゼン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）二臭化水素酸塩二水和物、１，３−ジアセチルベンゼン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、１，３−ジアセチルベンゼン−ビス（グアニル）−ヒドラゾン二塩酸塩、イソフタルアルデヒド−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、イソフタルアルデヒド−ビス−（グアニル）ヒドラゾン二塩酸塩、２，６−ジアセチルアニリンビス−（グアニル）ヒドラゾン二塩酸塩、２，６−ジアセチルアニリンビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、２，５−ジアセチルチオフェンビス（グアニル）ヒドラゾン二塩酸塩、２，５−ジアセチルチオフェンビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、１，４−シクロヘキサンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、３，４−ヘキサンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩、メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−５−メチル−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩、２，３−ペンタンジオン−ビス−（２−ヒドラジノ−３−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、２，３−ヘキサンジオン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、３−エチル−２，４−ペンタンジオン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−５−エチル−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩、メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−５−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩、メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−５−シクロプロピル−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩、メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−５−シクロブチル−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩、１，３−シクロヘキサンジオン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、６−ジメチルピリジンビス（グアニル）ヒドラゾン二塩酸塩、３，５−ジアセチル−１，４−ジヒドロ−２，６−ジメチルピリジンビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、ビシクロ−（３，３，１）ノナン−３，７−ジオンビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩及びｃｉｓ−ビシクロ−（３，３，１）オクタン−３，７−ジオンビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩の群から選ばれる、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
前記構造式が構造式XVII：
【化２０】
2007523908.tif 000078
（ここで、Ｒ54は水素、ヒドロキシ（低級）アルキル基、低級アシルオキシ（低級）アルキル基及び低級アルキル基の群から選ばれ；
Ｒ55は水素、ヒドロキシ（低級）アルキル基、低級アシルオキシ（低級）アルキル基及び低級アルキル基の群から選ばれ；
Ｒ54及びＲ55は水素は環炭素と一緒になって芳香族縮合環となることもでき；
Ｚaは水素又はアミノ基であり；
Ｙaは水素、式−ＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)−Ｒ56の基及び式−ＣＨＲ'の基の群から選ばれ、
ここで、Ｙaが式−ＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)−Ｒ56の基である場合、該Ｒ56は低級アルキル基、アルコキシ基、ヒドロキシ、アミノ基及びアリール基の群から選ばれ；
Ｙaが式−ＣＨＲ'の基である場合、該Ｒ'は水素、低級アルキル基、低級アルキニル基及びアリール基の群から選ばれ；
Ａはハライド、トシレート、メタンスルホネート及びメシチレンスルホネートイオンの群から選ばれ；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記低級アルキニル基は２〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記低級アシルオキシ（低級）アルキル基はアシルオキシ部分及び低級アルキル部分を含有し、
ここで、このアシルオキシ部分は２〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ、低級アルキル部分は１〜６炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記アリール基は６〜１０個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
式XVIIのハロ原子はフルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードの群から選ばれる）
である、請求項３０に記載の方法。
【請求項６７】
前記化合物が３−アミノチアゾリウムメシチレンスルホネート、３−アミノ−４，５−ジメチルアミノチアゾリウムメシチレンスルホネート、２，３−ジアミノチアゾリニウムメシチレンスルホネート、３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−チアゾリウムブロミド、３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４，５−ジメチルチアゾリウムブロミド、３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルチアゾリウムブロミド、３−（２−フェニル−２−オキソエチル）−４−メチルチアゾリウムブロミド、３−（２−フェニル−２−オキソエチル）−４，５−ジメチルチアゾリウムブロミド、３−アミノ−４−メチルチアゾリウムメシチレンスルホネート、３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−５−メチルチアゾリウムブロミド、３−（３−（２−フェニル−２−オキソエチル）−５−メチルチアゾリウムブロミド、３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］チアゾリウムブロミド、３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］−４−メチルチアゾリウムブロミド、３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］−５−メチルチアゾリウムブロミド、３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］−４，５−ジメチルチアゾリウムブロミド、３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチル−５−（２−ヒドロキシエチル）チアゾリウムブロミド、３−（２−フェニル−２−オキソエチル）−４−メチル−５−（２−ヒドロキシエチル）チアゾリウムブロミド、３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］−４−メチル−５−（２−ヒドロキシエチル）チアゾリウムブロミド、３，４−ジメチル−５−（２−ヒドロキシエチル）チアゾリウムヨージド、３−エチル−５−（２−ヒドロキシエチル）−４−メチルチアゾリウムブロミド、３−ベンジル−５−（２−ヒドロキシエチル）−４−メチルチアゾリウムクロリド、３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）ベンゾチアゾリウムブロミド、３−（２−フェニル−２−オキソエチル）ベンゾチアゾリウムブロミド、３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］ベンゾチアゾリウムブロミド、３−（カルボキシメチル）ベンゾチアゾリウムブロミド、２，３−（ジアミノ）ベンゾチアゾリウムメシチレンスルホネート、３−（２−アミノ−２−オキソエチル）チアゾリウムブロミド、３−（２−アミノ−２−オキソエチル）−４−メチルチアゾリウムブロミド、３−（２−アミノ−２−オキソエチル）−５−メチルチアゾリウムブロミド、３−（２−アミノ−２−オキソエチル）−４，５−ジメチルチアゾリウムブロミド、３−（２−アミノ−２−オキソエチル）ベンゾチアゾリウムブロミド、３−（２−アミノ−２−オキソエチル）−４−メチル−５−（２−ヒドロキシエチル）チアゾリウムブロミド、３−アミノ−５−（２−ヒドロキシエチル）−４−メチルチアゾリウムメシチレンスルホネート、３−（２−メチル−２−オキソエチル）チアゾリウムクロリド、３−アミノ−４−メチル−５−（２−アセトキシエチル）チアゾリウムメシチレンスルホネート、３−（２−フェニル−２−オキソエチル）チアゾリウムブロミド、３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチル−５−（２−アセトキシエチル）チアゾリウムブロミド、３−（２−アミノ−２−オキソエチル）−４−メチル−５−（２−アセトキシエチル）チアゾリウムブロミド、２−アミノ−３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）チアゾリウムブロミド、２−アミノ−３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）ベンゾチアゾリウムブロミド、２−アミノ−３−（２−アミノ−２−オキソエチル）チアゾリウムブロミド、２−アミノ−３−（２−アミノ−２−オキソエチル）ベンゾチアゾリウムブロミド、３−［２−（４'−メトキシフェニル）−２−オキソエチル］−チアゾリニウムブロミド、３−［２−（２'，４'−ジメトキシフェニル）−２−オキソエチル］−チアゾリニウムブロミド、３−［２−（４'−フルオロフェニル）−２−オキソエチル］−チアゾリニウムブロミド、３−［２−（２'，４'−ジフルオロフェニル）−２−オキソエチル］−チアゾリニウムブロミド、３−［２−（４'−ジエチルアミノフェニル）−２−オキソエチル］−チアゾリニウムブロミド、３−プロパルギル−チアゾリニウムブロミド、３−プロパルギル−４−メチルチアゾリニウムブロミド、３−プロパルギル−５−メチルチアゾリニウムブロミド、３−プロパルギル−４，５−ジメチルチアゾリニウムブロミド及び３−プロパルギル−４−メチル−５−（２−ヒドロキシエチル）−チアゾリニウムブロミドの群から選ばれる、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
前記構造式が構造式XVIII：
【化２１】
2007523908.tif 000079
（ここで、Ｒ57はヒドロキシ、ＮＨＣＯＮＣＲ61Ｒ62及びＮ＝Ｃ(ＮＲ61Ｒ62)2の群から選ばれ；
ここで、Ｒ61及びＲ62はそれぞれ独立して水素、Ｃ1〜Ｃ10直鎖状アルキル、Ｃ1〜Ｃ10分岐鎖状アルキル、アリール−Ｃ1〜Ｃ4アルキル、一置換アリール−Ｃ1〜Ｃ4アルキル及び二置換アリール−Ｃ1〜Ｃ4アルキルの群から選ばれ、
ここで、前記置換基はフルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、Ｃ1〜Ｃ10アルキル直鎖及びＣ1〜Ｃ10アルキル分岐鎖の群から選ばれ；
Ｒ58は水素、アミノ、一置換アミノ及び二置換アミノの群から選ばれ、
Ｒ59は水素、アミノ、一置換アミノ及び二置換アミノの群から選ばれ；
Ｒ58及びＲ59の両方共がアミノ又は置換アミノではない場合、この置換基はＣ1〜Ｃ10直鎖状アルキル、Ｃ1〜Ｃ10分岐鎖状アルキル及びＣ3〜Ｃ8シクロアルキルの群から選ばれ；
Ｒ60は水素、トリフルオロメチル、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードの群から選ばれる）
である、請求項３０に記載の方法。
【請求項６９】
強皮症、ケロイド及び瘢痕の群から選ばれる疾患を有していて治療を必要としている哺乳類の治療方法であって、架橋した蛋白質の間の架橋を崩壊させることができる少なくとも１の化合物を含む有効量の組成物を前記哺乳類に投与することを含む、前記方法。
【請求項７０】
前記化合物が式XXV：
【化２２】
2007523908.tif 000080
｛ここで、Ｒ1及びＲ2は独立して水素及びアルキル基（これはヒドロキシ基で置換されていてもよい）の群から選ばれ；
Ｙは式−ＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)Ｒの基（ここで、Ｒは４〜１０個の環員並びに酸素、窒素及び硫黄の群から選ばれる１〜３個のヘテロ原子を含有するアルキレンジオキシアリール以外のヘテロ環式基であり、このヘテロ環式基はアルキル、オキソ、アルコキシカルボニルアルキル、アリール及びアラルキル基の群から選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよく；前記の１以上の置換基は、１以上のアルキル又はアルコキシ基で置換されていてもよい）；又は式−ＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)−ＮＨＲ'の基（ここで、Ｒ'は４〜１０個の環員並びに酸素、窒素及び硫黄の群から選ばれる１〜３個のヘテロ原子を含有するアルキレンジオキシアリール以外のヘテロ環式基であり、このヘテロ環式基は１以上のアルコキシカルボニルアルキル基で置換されていてもよい）であり；
Ｘは医薬的に許容できるイオン；及びその担体である｝
の化合物の群から選ばれる、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
強皮症、ケロイド及び瘢痕の群から選ばれる疾患を有していて治療を必要としている哺乳類の治療方法であって、蛋白質架橋を防止することができる少なくとも１の化合物を含む有効量の組成物を前記哺乳類に投与することを含む、前記方法。
【請求項７２】
強皮症、ケロイド及び瘢痕の群から選ばれる疾患を有していて治療を必要としている哺乳類の治療方法であって、
（ａ）蛋白質架橋を防止することができる少なくとも１の化合物；及び
（ｂ）架橋した蛋白質の間の架橋を崩壊させることができる少なくとも１の化合物：
を含む有効量の組成物を前記哺乳類に投与することを含む、前記方法。
【請求項７３】
コラーゲンを必要としている患者におけるコラーゲンの架橋を防止する方法であって、３ＤＧを不活性化する化合物を含む組成物を前記患者に投与することを含む、前記方法。
【請求項７４】
前記化合物が３ＤＧの形成を阻害するものである、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
前記化合物が構造式Ｉ：
【化２３】
2007523908.tif 000081
（ここで、Ｒ1及びＲ2は、独立して水素、低級アルキル、低級アルコキシ及びアリール基の群から選ばれるか、又はＲ1及びＲ2が窒素と一緒になって１〜２個のヘテロ原子及び２〜６個の炭素原子を含有するヘテロ環を形成するかのいずれかであり、前記へテロ原子の第２のものは窒素、酸素若しくは硫黄を含み；更に、
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記アリール基は置換及び非置換のフェニル及びピリジル基を含む）
を有する化合物の群から選ばれる、請求項７３に記載の方法。
【請求項７６】
前記化合物がメグルミン、ソルビトールリシン、マンニトールリシン及びガラクチトールリシンの群から選ばれる、請求項７４に記載の方法。
【請求項７７】
前記患者が強皮症、ケロイド及び瘢痕の群から選ばれる少なくとも１の疾患を有する、請求項７３に記載の方法。
【請求項７８】
哺乳類におけるフルクトサミンキナーゼを阻害する方法であって、銅含有化合物を含む組成物を前記哺乳類に投与することを含む、前記方法。
【請求項７９】
前記銅含有化合物が銅−サリチル酸共役、銅−ペプチド共役、銅−アミノ酸共役及び銅塩の群から選ばれる、請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
前記銅含有化合物が銅−リシン共役及び銅−アルギニン共役の群から選ばれる、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
前記哺乳類が少なくとも１の糖尿病性合併症に関連する疾患を有する、請求項７８に記載の方法。
【請求項８２】
前記糖尿病性合併症が網膜症、ニューロパシー、心臓血管疾患、痴呆及び腎症の群から選ばれる、請求項８１に記載の方法。
【請求項８３】
アマドラーゼ経路を阻害する組成物を哺乳類に投与することによって哺乳類におけるコラーゲンの製造を増加させる方法であって、前記組成物が銅含有化合物を含み、それによって哺乳類におけるコラーゲンの製造を増加させる、前記方法。
【請求項８４】
前記銅含有化合物がフルクトサミンキナーゼを阻害するものである、請求項８３に記載の方法。
【請求項８５】
前記コラーゲンがI型コラーゲンである、請求項８３に記載の方法。
【請求項８６】
前記コラーゲンがII型Iコラーゲンである、請求項８３に記載の方法。
【請求項８７】
前記コラーゲンがI型及びII型Iコラーゲンを含む、請求項６７に記載の方法。
【請求項８８】
アマドラーゼ経路を阻害する組成物を哺乳類に投与することによって哺乳類におけるコラーゲンについてのｍＲＮＡのレベルを増大させる方法であって、前記組成物が銅含有化合物を含み、それによって哺乳類におけるｍＲＮＡコラーゲンのレベルを増大させる、前記方法。
【請求項８９】
哺乳類のデスモシンレベルを低下させる方法であって、アマドラーゼ経路阻害剤を含む組成物を哺乳類に投与することを含み、前記阻害剤が銅含有化合物である、前記方法。
【請求項９０】
哺乳類のデスモシンレベルを安定化させる方法であって、アマドラーゼ経路阻害剤を含む組成物を哺乳類に投与することを含み、前記阻害剤が銅含有化合物である、前記方法。
【請求項９１】
哺乳類においてアマドリ経路のフラックスを増加させることによって哺乳類におけるコラーゲンについてのｍＲＮＡのレベルを低下させる方法であって、少なくとも１の銅キレート化剤を含む組成物を哺乳類に投与することを含む、前記方法。
【請求項９２】
前記化合物がトリエチレンテトラミン二塩酸塩（トリエン）、ペニシラミン、ｓａｒ、ｄｉａｍｓａｒ、エチレンジアミン四酢酸、ｏ−フェナントロリン及びヒスチジンの群から選ばれる、請求項９１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、哺乳類、特にヒトにおけるコラーゲン又はエラスチンの調節のための有用で確実な介入方法に関する。詳細には、本発明は、糖尿病等の疾患症状を治療及び／又は緩和する方法、並びに皺又は老化した皮膚及び病気の皮膚の新規な治療方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明の背景：
組織柔軟性及び伸長性は、多細胞性有機体の進化において必須の要求である。コラーゲン及び弾性線維は、不溶性細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の主要な構成成分であり、それは結合組織へ引張強度及び弾性を与え、長期変形能及びエネルギー入力無しの受動的収縮を可能とする。これら性質は、拡張及び収縮の繰り返しサイクルを受ける動脈、肺、皮膚及び他の全ての動的結合組織の機能に重要である。
【０００３】
コラーゲンは、全ての動物中で発見される不溶性、細胞外糖蛋白質であり、ヒト体内で最も豊富な蛋白質である。それらは、軟骨、骨、腱、靱帯、筋膜及び皮膚等の全ての結合組織に必須の構造的構成成分である。コラーゲンは、細胞外マトリックス、基底膜及び細胞外マトリックスの他の構造の細線維性及び微小線維性ネットワークの形成に中心的に含まれる（非特許文献１）。
【０００４】
コラーゲンは、脊椎動物及び他の多くの多細胞性有機体を構造的に完全体とするのに基礎となる主要な蛋白質である。皮膚、腱、骨及び軟骨等の組織中で、コラーゲン細線維は引張応力への抵抗力を提供する。組織に応じて、細線維は異なる超細線維性構造に配置され、５００ｎｍまでの直径を有する。小径細線維は軟骨や角膜中に見られ、後者中での垂直なラメラ中の細線維の高度に規則正しい配置は、光透過性には必須である。全ての細線維性コラーゲンは、プロコラーゲンと呼ばれる可溶性前駆体の形で細胞外マトリックス空間中に産生され分泌される。細線維形成コラーゲン（I型、II、III、V及びXI）は、ヒトコラーゲンの２０個以上の異なる遺伝子型のたった５個に由来する。全てのコラーゲンは三重らせんの少なくとも１個が引き延ばされた３個のポリペプチド鎖からなるモジュラー蛋白質である。
【０００５】
ヒト中に見られるコラーゲンでは、I−IV型が最も豊富である。I型は、腱、靱帯、及び骨の主な構成成分である。II型コラーゲンは、軟骨中の５０％を超える蛋白質である。それは又、脊椎動物胚の脊索を形成するために使用される。III型は、動脈、腸及び子宮等の中空構造の壁を強化する。IV型はしばしば基底膜と呼ばれる上皮の基底膜を形成する。IV型コラーゲンの網は、毛細血管及び腎臓糸球体のフィルターを提供する。他の１５種の型は、多分同様に重要ではあるがその存在はよりわずかである。
【０００６】
基本的コラーゲンユニットは、繰り返し配列（グリシン（Ｇｌｙ）−Ｘ−Ｙ）nから構成されるポリペプチドであり、そのＸはしばしばプロリン（Ｐｒｏ）でありＹはしばしばヒドロキシプロリン（ポリペプチドの産生後に−ＯＨ基が付加されるプロリン）である。二次的及び三次的構造を形成するために、分子はねじれて引き延ばされた左巻きらせんとなる。産生される時に、ポリペプチドのＮ−及びＣ−末端は、分子可溶性を保持する球状ドメインを有する。小胞体（ＥＲ）及びゴルジ装置を通過する間に、分子はグリコシル化され、ヒドロキシル基が付加されて「Ｙ」アミノ酸を産生する。鎖間ジスルフィド結合は共有結合的に３個の鎖へ結合し、３個の分子は一緒にねじれて三重らせんを形成する。三重らせんが、通常は線維芽細胞により細胞から分泌されると、２個の球状末端は切り取られる。残った直鎖状の不溶性分子は、組み合ってコラーゲン線維となる。それらは互い違いパターンで組み合わされて電子顕微鏡写真で線条を示す。IV型コラーゲンは例外であり、その理由はそれらが線条線維よりもむしろ網を形成するためである。
【０００７】
幾つかのコラーゲン（例えば、II型）中で、３個の分子は同一である（単一遺伝子の生成物）。別のコラーゲン（例えば、Ｉ型）では、１種類の２個のポリペプチド（遺伝子生成物）が第二の非常に類似のポリペプチド、即ち第二の遺伝子生成物と組み合わされている。
【０００８】
皮膚では、真皮層は大部分が水平に走るコラーゲンの束で構成され、それは基質と呼ばれるゼリー状材料中に埋まっている。コラーゲンは、真皮の主な構成成分であり、７５％乾燥重量を占める。７０％を超える部分がＩ型コラーゲンであり１５％がIII型コラーゲンである。コラーゲン線維のサイズと配置により、大人皮膚中の２つの皮膚領域が区別される。乳頭状真皮は表皮と互いにからみあっており、レチクリンとして知られているIII型コラーゲンから主に構成された血管がよく発達した部分である。そのコラーゲン線維は狭くて短く、ゆるく織り合わされてランダムに配向されて基質中に埋め込まれている。網状真皮は主にＩ型コラーゲンで構成されており、そのコラーゲン線維はより幅広で緊密に、大きく幅広でウェーブのかかった束中に充填されている。これらの束は、ゆるく織り合わされ、皮膚表面と平行に配置され、同様に基質中に埋め込まれている（非特許文献２）。
【０００９】
自然な老化プロセスは、コラーゲン産生を減少させ、マトリックスメタロプロテイナーゼの発現を増加させ、光老化はコラーゲン産生及び対応するより多量のマトリックスの増加を生じる（非特許文献３）。まぶた皮膚のＩ型コラーゲン産生は加齢と共に減少することが報告されている（非特許文献４）。
【００１０】
結果的に、老化プロセスは、内因性又は外因性のいずれでも、皮膚中のコラーゲン及び弾性線維に対する量的及び質的な両方の効果を有する（非特許文献５）。自然老化、太陽光を保護した皮膚及び光老化した皮膚は、結合組織損傷、マトリックスメタロプロテイナーゼレベル上昇、及びコラーゲン産生減少等の重要な分子的特徴を共有する（非特許文献６）。
【００１１】
IV型コラーゲンは基底膜構成成分であり、老化で減少するが、その膜合計厚みは増加する。これは組織の代謝回転の減少を示す（非特許文献７）。表面の皮膚擦傷法は、光老化した皮膚を治療的に改善する。この改良は、コラーゲンＩ遺伝子発現の増加と非常に相関する（非特許文献８）。
【００１２】
老化には、弾性への損傷、その結果コラーゲン線維が厚くなり、絡み合い、劣化した非機能性線維となる等の真皮の変化が含まれる。コラーゲンの架橋は、多くの因子により影響され、従って架橋パターンは、コラーゲン細線維の構造的状態を反映する。コラーゲン分子間架橋は安定であり、安定性及び引張強度に必須である。加齢と共に、コラーゲン架橋の増加と共に皮膚剛直性が増加する。二価の架橋はヒスチジノヒドロキシリジノノルロイシンの等の完成した三価の架橋へ転換される。これには、酵素制御された完成までのプロセス及び非酵素的グリコシル化（マイラード反応）の２個の機構が含まれ、これによりコラーゲン中のアルギニン及びリシン間の蛋白質内架橋が生じる。これらは加齢と共に及び真性糖尿病において観察される。しかし、自己蛍光研究は、ＵＶＲがコラーゲン架橋を減少させることを明らかにした。
【００１３】
慢性ＵＶＲ曝露に関する変化は、コラーゲン喪失によるものであると考えられ、それは密集して均一である弾性材料によるか水及び基質の混合物によって補填される（非特許文献９）。コラーゲン組成物の変化は又、ある役割を果たし、それによって、コラーゲンIII型の割合が光損傷された皮膚中で増加することが示された（非特許文献１０）。
【００１４】
コラーゲンの異常な産生及びコラーゲン遺伝子中の突然変異は様々な疾患を生じる。コラーゲンVI型は、加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）として知られる非常に一般的眼障害に関係することが知られた。ＡＭＤは、斑紋の原因となり、読書、裁縫、及び運転等の活動に必要な鮮明な中心視力をかすませる疾患である。この症状の発症についてはあまりわかっていないが、この疾患に伴いブルーフ膜中及び網膜色素上皮の直下で沈着がしばしば見られる。下記２種のアセンブリが存在する：その１種は３０ｎｍ離れて軸方向に約１００ｎｍごとに繰り返す蛋白質密度の横軸二重帯を示し；他方は３０ｎｍ離れて軸方向に約５０ｎｍごとに繰り返す蛋白質密度の横軸二重帯を示す（非特許文献１１）。ＡＭＤは、ソーズビー眼底ジストロフィー（ＳＦＤ）と多くの臨床的及び病理学上の特徴を共有する。ＳＦＤは常染色体優性疾患であり、メタロプロテイナーゼ−３（ＴＩＭＰ−３）遺伝子の組織阻害剤中の突然変異と関連する。
【００１５】
骨関節炎は、関節の軟骨及び肋軟下骨及び滑液反応の進行性損傷を特徴とする慢性疾患である。骨関節炎及び椎間板疾患は、最も一般的な筋骨格性障害である。それらは多くの危険因子と関連するが、最近の研究では遺伝子の因子がそれらの発病に主要な役割を果たすことが示唆された。ヒアリン軟骨及び椎間板の両方共、比較的少ない細胞と豊富な細胞外マトリックスを含有する。骨関節炎及び椎間板疾患はヒアリン軟骨及び椎間板の変性で特徴付けられるので、これら遺伝子の因子は、コラーゲン等の結合組織蛋白質をコードする遺伝子を含む。
【００１６】
軟骨コラーゲン（コラーゲンII、IX及びXI）はヒアリン軟骨及び椎間板に見られる。コラーゲンIIはヒアリン軟骨中最も豊富な蛋白質であり、椎間板、髄核の内部構造はコラーゲンIIを２０％乾燥重量含有する。コラーゲンIX及びXIはヒアリン軟骨及び椎間板中では量的により少量の構成成分である。髄核に加えて、コラーゲンIXは又椎間板の外側層である線維輪中にも存在する。コラーゲンIIはコラーゲンIX及びXIと共に、強力な線維構造を形成し、その引張強度はスチールのそれに相当する。コラーゲンII及びXIは細線維形成コラーゲングループに含まれる。コラーゲンIIの突然変異は、比較的劇的な重篤な表現型を示し、軟骨異形成症から骨関節炎まで様々な範囲の疾患を生じる。この知見は、発達及び組織の物理的サポートにおけるコラーゲンIIの重要性を反映するようである（非特許文献１２、非特許文献１３）。
【００１７】
心筋性コラーゲンマトリックスは、筋細胞に密接に結合している細線維性コラーゲンのネットワークから構成される。細線維性コラーゲンＩ及びIII型は、心筋性コラーゲンマトリックスの主要な構成成分である。それらは筋細胞と平行に存在し、ウェーブ状、緊張した又はコイル状の外観を有する。コラーゲンＩ型は合計コラーゲン蛋白質のほとんど８０％を占める一方、III型コラーゲンはより低い割合（約１１％）で存在することが明らかになった。心臓線維芽細胞は細線維性コラーゲンの細胞源であり、心筋細胞はIV型コラーゲンのｍＲＮＡのみを発現する。コラーゲンＩ及びIII型は、心臓周期中の心室挙動で重要な役割を果たす高度な引張強度を示す。コラーゲンレベル及びコラーゲンの分子間架橋は、加齢と共に増加する。心筋性組織中のコラーゲン含量の測定結果は、加齢で数量及び厚みが増加するのはＩ型コラーゲン線維であることを示した。同時に、電子顕微鏡観察は、老化した心臓中では大径のコラーゲン細線維数が増加することを示した。老化した心筋層での心筋性線維症の病因となる機構は明らかではない。心筋層中のコラーゲン沈着は、前翻訳的レベルでのコラーゲン生合成の調節に起因するらしい。このプロセス中に含まれる調節エレメントは、ＴＧＦ−β１及びホルモン等の成長因子及び神経伝達物質らしい。老化中に働く調節機構の詳細は、更なる研究により明らかになるであろう。
【００１８】
心筋層中のコラーゲンの蓄積は筋肉剛直性を増加させる。心筋性機能は、このプロセスに影響される；これは通常早期拡張期充満中の不充分な弛緩により反映され、早期左心室拡張追従性（コンプライアンス）の減少の原因となるらしい（非特許文献１４）。線維状組織の蓄積は、高血圧性心疾患で見られる心臓組織の有害な構造的再造形を伴う特徴を有する（非特許文献１５）。
【００１９】
老化及び真性糖尿病（ＤＭ）は、両方とも心筋層の構造及び機能に影響して心臓中のコラーゲンを増加させて心臓機能を低減する。このプロセスの一部として、高血糖症は後期糖化産生物（ＡＧＥ）の産生を刺激し、ＡＧＥは共有結合的に蛋白質を変性（修飾）し細胞機能を損なう（非特許文献１６）。
【００２０】
コラーゲンレベルは、炎症進行により変化する。慢性的に炎症を起こした組織中のコラーゲンの性質を研究するために、慢性接触皮膚炎を起こしたマウスの耳皮膚から得られたコラーゲンを単離し、その生物化学的特性を試験した。その特性は、マトリックスメタロプロテイナーゼ２及び内皮細胞及び線維芽細胞から得られる他のコラーゲン−分解性酵素の分泌を調節するものである。慢性接触皮膚炎のある皮膚のコラーゲンは、６０％Ｉ型コラーゲン及び４０％III型コラーゲンから構成され、後者のそれは対照（健康）皮膚の含量よりも高いものである。線維芽細胞から分泌されたコラーゲン分解活性は又、細胞が慢性的に炎症を起こした皮膚のコラーゲンと接触するときにアップレギュレートされた。これらの結果は、慢性的に炎症を起こした組織中のコラーゲンは、生物化学的特性及び機能が変化し、それは慢性皮膚疾患の発病に影響する可能性のあることを示す（非特許文献１７）。
【００２１】
コラーゲンＩ型及びIV型のＵＶ照射による架橋も又観察された。アミノ酸分析により、両方のコラーゲン型中のＴｙｒ残基が照射によって減少し、Ｈｉｓ及びＭｅｔ残基の減少も又コラーゲンIV型中で観察されることが明らかになった。コラーゲンIV型のこれら損失もＴｒｐ分解の原因であり、ＴｒｐはコラーゲンIV型中に存在するがＵＶ照射中に劇的に減少する（非特許文献１８）。
【００２２】
別のコラーゲン異常性疾患として、心内膜心筋線維症が挙げられる。これは心臓疾患独特の病例であり、拘束的な心室拡張及び心不全へ至る。この疾患は、心内膜の著しい肥大で特徴付けられ、それはコラーゲンのウェーブ状の束からなる密集した線維状組織の沈着を原因とする（非特許文献１９）。
【００２３】
肺線維症は、高度な死亡率を生じる障害であり、そのために治療の選択は限られている。従って、ブレオマイシン誘起された肺線維症に対する、コラーゲンＩ型産生の新規な阻害剤であるハロフジノンの効果がラットで研究された。ハロフジノンは、ブレオマイシン誘起された肺線維症の有効なインビボ阻害剤であり、この機能不全の治療用の新規で有効な治療医薬として使用できる（非特許文献２０）。別の疾患である成人型呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）は、肺の炎症であり、肺は剛直で線維状となり酸素交換ができなくなる（非特許文献２１）。
【００２４】
高度な近視の進行は、ヒト及び動物モデルの両方で、強膜コラーゲン蓄積の減少、強膜薄化、及び強膜組織の損失と関連する。コラーゲン細線維直径の減少も又、高度な近視眼の強膜中で観察された。調査したコラーゲンの大部分が、特定された１１種のサブタイプと共に強膜中で現れていることが確認された、コラーゲンＩ型ｍＲＮＡ発現は近視眼の強膜中で減少したが、コラーゲンIII型及びV型の発現はコントロールと比較して変化しないため、コラーゲンIII型／I型及びコラーゲンV型／I型の発現割合は実質的な増加となる。これらの結果は、近視眼での強膜コラーゲン蓄積の減少はコラーゲン産生減少及びコラーゲン分解の加速の両方の結果であることを示す。更に又、コラーゲン産生の変化はＩ型コラーゲン産生の減少に起因する。新たに産生したコラーゲンIII型／I型及びコラーゲンV型／I型の割合の短期間内での増加は、高度な近視で観察された小径強膜コラーゲン細線維の発生頻度増加に重要であり、病理学上の近視であるヒトの後部ぶどう腫の進行にも重要であるらしい（非特許文献２２、非特許文献２３）。
【００２５】
コラーゲンの過度の沈着は、心肥大及び心不全における異常な剛直性及び心臓機能変容の病因であると考えられる。研究結果のデータは、高血圧自然発症ラット（ＳＨＲ）の慢性肥大状態では、Ｉ型のIII型に対する割合が徐々に減少することを示し、それは主に慢性肥大状態においてIII型コラーゲンが増加しないためである。これはコラーゲンの質は、心臓の剛直性の程度を決定するための重要な因子であることを示唆する（非特許文献２４）。
【００２６】
骨形成不全症（ＯＩ）は通常「ブリットル骨疾患」として知られ、骨脆弱性及び結合組織の異常性として特徴付けられる優性常染色体障害である。生物化学的及び分子の遺伝子の研究は、患者のほとんど大部分が、ＣＯＬ１Ａ１又はＣＯＬ１Ａ２遺伝子のいずれかに突然変異を有することを示し、それら遺伝子はＩ型プロコラーゲンの鎖をコードする。ＯＩは、軽症から重篤で致命的症状までの広い範囲の表現型を伴う。軽症の態様は通常、ＣＯＬ１Ａ１遺伝子の１個の対立遺伝子を不活化する突然変異により引き起こされ、正常なＩ型コラーゲン量の減少を生じる。一方、重篤な及び致命的症状は、ＣＯＬ１Ａ１又はＣＯＬ１Ａ２内のドミナントネガティブ突然変異から生じ、それはコラーゲン分子の構造的欠陥を生じる。最も一般的な突然変異はグリシン残基がより大きなアミノ酸により置換されるものであり、それはコラーゲン三重らせんの形成及び機能に重要である。Ｉ型コラーゲンは骨及び皮膚の主要な構造的蛋白質であるが、Ｉ型コラーゲン遺伝子中の突然変異は骨疾患の病因となる。幾つかの報告により、突然変異体コラーゲンは骨中及び皮膚中で様々に発現できることが示された。多くのＯＩ突然変異は、ドミナントネガティブであるために、その遺伝子治療法には劣性遺伝子障害に使用されるものとは基本的に異なる方法が必要である。アンチセンス治療法は、突然変異遺伝子の発現を減少させることにより、構造的突然変異を突然変異の無い状態に変化でき、その結果疾患の重篤な症状を軽症のＯII型へ転換する（非特許文献２５、非特許文献２６、非特許文献２７）。
【００２７】
更に別のコラーゲン中の欠陥により生じる疾患は、異所性骨化（ＨＯ）である。それは幾つかの疾患及び様々な態様の外傷性障害の結果発症する。ＨＯでは、軟骨形成性細胞が中心的役割を果たし、コラーゲン中の変質及びＴＧＦ−β１  ｍＲＮＡ発現によりＨＯ表現型を示す（非特許文献２８）。
【００２８】
強皮症又は全身性硬化症（ＳＳｃ）は結合組織の慢性自己免疫性疾患であり、一般的にリューマチ性疾患の一種として区分される。その疾患では、皮膚が罹患する場合には症状が可視的であり、内部器官のみが罹患する場合には視認できない。それは皮膚、血管及び内部器官の肥大、硬化、又は締め付け(tightening)を生じる。強皮症は高度に個別の疾患であり、軽症から致命的な程度まで発症する。この疾患は、線維芽細胞による過度のコラーゲン産生により、血管過敏性及び閉塞現象により特徴付けられる。過度のコラーゲン製造は、内皮細胞、線維芽細胞及び単核細胞間の異常な相互作用の結果である。免疫学的異常性は、ＳＳｃの進行の非常に初期に存在する。単核細胞、好ましくはマクロファージ及びＴリンパ球、からのサイトカインは、線維芽細胞活性化及びコラーゲン産生に主要な役割を果たす。皮膚中及び肺中のリンパ球性浸潤は、優先的にインターロイキン４（ＩＬ−４）を産生するＣＤ８＋Ｔリンパ球から構成される。トランスフォーミング成長因子Ｂ（ＴＧＦ−Ｂ）及び結合組織成長因子（ＣＴＧＦ）と組み合わせたＩＬ−４の効果は、線維芽細胞によるコラーゲン産生を刺激する。Ｔリンパ球は又γンターフェロン（ＩＮＦ−γ）を産生し、それは線維芽細胞によるコラーゲン産生の有効な阻害剤である。しかし、コラーゲン産生に対するＩＮＦ−γの阻害性効果は、ＳＳｃ患者では消滅している。数多くの自己抗体は又、ＳＳｃ患者の血清中に存在する（非特許文献２９）。
【００２９】
ＳＳｃ線維芽細胞中のコラーゲン遺伝子発現のアップレギュレーションは、組織線維症の進行で重大なイベントであることが明らかになった。多くの細胞外マトリックス遺伝子の協調的転写活性化は、ＳＳｃ線維芽細胞中の遺伝子発現の調節コントロールの基本的な変化を示す（非特許文献３０）。
【００３０】
強皮症は、皮膚及び様々な内部器官の線維症として特徴付けられる。Ｉ型コラーゲン（ＣｏｌＩ）は最も豊富な細胞外マトリックス蛋白質であり、この病気では皮膚中に沈着される（非特許文献３１）。Ｉ型コラーゲンを含有するα１及びα２コラーゲンポリペプチドの産生は、サイトカインにより高度に転写的に調節される。真皮領域中のコラーゲンの過度の産生及び沈着は、厚く及び硬い皮膚を生じ、強皮症の臨床的発病が起こる（非特許文献３２）。強皮症には又、斑状強皮症又は限局性強皮症が含まれる。
【００３１】
慢性移植片対宿主病（ｃＧｖＨＤ）及び強皮症は、皮膚及び内部器官線維症を含む臨床的特性を共有する。線維症は、病因に関係なく細胞外マトリックス沈着に特徴付けられ、そのコラーゲンＩ型は主要な構成成分である。結合組織の進行的蓄積は、正常な組織構造の損傷及び内部器官不全を生じる。ＳＳｃ及びｃＧｖＨＤの両方で、皮膚及び内部器官線維症の重篤性は疾患の臨床経過と相関関係がある（非特許文献３３）。
【００３２】
ＳＳｃ線維芽細胞は、ＴＧＦ（β）ＲＩ及びＴＧＦ（β）ＲＩＩ蛋白質並びにｍＲＮＡレベルを増加させ、Ｉ型コラーゲン蛋白質及びα２（Ｉ）コラーゲンｍＲＮＡ量も増加させる。ＳＳｃ線維芽細胞中のＴＧＦ（β）ＲＩ及びＴＧＦ（β）ＲＩＩ ｍＲＮＡの半減期は、コントロール真皮の線維芽細胞中のそれと比較して違いは無かったが、両方の遺伝子のプロモーター活性は両方ともＳＳｃ線維芽細胞中で非常に増加した。これらの結果は、ＳＳｃ線維芽細胞中のＴＧＦ（β）ＲＩ及びＲＩＩ量の増加は過度のコラーゲン製造の原因となること、及びＴＧＦ（β）R発現のアップレギュレーションが転写レベルで発生することを示す。蛋白質キナーゼＣ及び／又はＰＩ３キナーゼは、ＳＳｃ線維芽細胞中のＴＧＦ（β）Ｒ発現のアップレギュレーションを導く（非特許文献３４）。
【００３３】
早期の進行における弾性線維の発生には、フィブリリンリッチ微少線維の予備形成された鋳型上へのトロポエラスチン（成熟したエラスチンの可溶性前駆体）の沈着が含まれる。従って成熟した弾性線維は、外側微小線維性被膜及び無定形に架橋されたエラスチンの内部コア等の複合バイオマテリアルである。フィブリリン及びフィブリリンリッチ微少線維は、脊椎動物及び脊椎動物間では保存されている（非特許文献３５）。トロポエラスチンはより最近進化したものであり、高級脊椎動物の高圧閉鎖循環器系を強化する機能を果たす。血管、肺、靱帯及び皮膚等の動的弾性組織内の微少線維の分布は、中心的な生体力学的役割を示す。微少線維は又、幾つかの弾性組織内で豊富であり、その組織は、例えば動的懸濁液中でレンズ対を保持する毛様体小帯のようにエラスチンを発現せず（非特許文献３６）、それはそれらの独立した進化的機能を示す。
【００３４】
弾性線維の生物学は、それらの多数の構成成分、緊密にレギュレートされた沈着の発生パターン、マルチステップ階層的アセンブリ、独特のエラストマー性及び細胞表現型に対する影響のために複雑化している。
【００３５】
弾性線維は、結合組織の細胞外マトリックス内に観察され、繰り返し可逆的に変形される組織へ弾性及び復元力を与えている。線維は異なる組織中の下記独特の形態へ組織化される：肺、皮膚及び靱帯中の小さなロープ状ネットワーク；血管中の薄い同心性シート；及び弾性軟骨中の大きな三次元ハニカム構造（非特許文献３７）。エラスチンは、極めて不溶性の蛋白質であり、その理由はＬｙｓ残基における多数の架橋にある。その架橋は、酵素リシルオキシダーゼによる選択的リシン酸化によって進み、α−アミノアジピン酸５−セミアルデヒドを生成する。エラスチンは、原始的円口類を除く全ての脊椎動物中で観察されるが、無脊椎動物中では見つからない。
【００３６】
様々な後発性及び遺伝性疾患が構造、分布及び豊富な弾性線維に影響することは公知である。最も顕著に影響される器官は、エラスチンが豊富な器官である。弾性線維の複合性並びに線維の形成及び構造中の分子集団の相互作用のために、これら疾患のほとんどは、原発性欠陥としてエラスチンを含まず、更に、弾性線維の完全性に大きく影響する。
【００３７】
弾性線維は、弾性機能を一生維持するように設計されている。しかし、様々な酵素（マトリックスメタロプロテイナーゼ及びセリンプロテアーゼ）は、弾性線維分子を切断することができる（非特許文献３８）。実際、変性的変化による弾性の損失は、結合組織の老化、大動脈瘤及び気腫の発達、及び太陽光で損傷した皮膚の変性的変化の主要な貢献因子である（非特許文献３９）。弾性線維の重要性は、弾性線維の構成成分中の突然変異により生じる重篤な遺伝的結合組織疾患により更に強調される（非特許文献４０、非特許文献４１）。フィブリリン−１突然変異はマルファン症候群を生じ、それは心臓血管性、眼性及び骨格性欠陥に関係する。フィブリリン−２突然変異は骨格性及び眼性症状を伴う先天的拘縮性蜘蛛指症（ＣＣＡ）を生じ、エラスチン突然変異はウィリアムス症候群、弁上部狭搾症（ＳＶＡＳ）及び皮膚弛緩症を生じる（非特許文献４２、非特許文献４３）。弾性線維仮性黄色腫（ＰＸＥ）は弾性線維カルシウム沈着に関係する遺伝的疾患であり、イオンチャネル蛋白質中の突然変異に起因する（非特許文献４４、非特許文献４３、非特許文献４５）。
【００３８】
エラスチン線維の異常な蓄積は、弾性線維仮性黄色腫及びブシュケ−オレンドルフ症候群で観察され、一方、線維の切断及び損失の増加は皮膚弛緩症、マルファン症候群及びメンケス疾患で観察される。後発性疾患には、弾性線維の分解の増加が肺で観察される気腫、並びにカルシウム及び脂質沈着と共に主要な血管中の弾性が損失するアテローム性動脈硬化症が挙げられる。エラスチン分解は、マトリックスメタロプロテイナーゼ及び他のエラスターゼ等のプロテアーゼにより調節される。これら疾患の幾つかは銅代謝のエラー、即ちリシルオキシダーゼに関係し、又は微小線維性蛋白質のエラーに関係する。従って、弾性線維産生に関係する多くの重要分子の一つの変質は、重篤な損傷を生じ、全部の線維及び器官系が影響される。弾性線維生合成及び機能のより完全な理解は、上記疾患の解明に役立ち、その有効な治療法を提供できる可能性がある。エラスチンの溶解度の限界のために、弾性線維形成プロセスの研究は、銅遺伝子欠陥のある動物から最初に単離された可溶性前駆体である、トロポエラスチンの発見まで困難であった。
【００３９】
トロポエラスチンｍＲＮＡの発現及び弾性線維産生は、早期発達において最も多く行われ、ニワトリ大動脈、ヒト皮膚線維芽細胞、及びヒツジ項靱帯及びラット肺中に示されるように、発達中の限定された期間に主に起きる。エラスチン産生の変化は、エラスチンｍＲＮＡの割合及び量の両方の変化並びにｍＲＮＡレベル及びトロポエラスチン産生間に存在する強い相関関係の結果に示される。これは、トロポエラスチン発現が主に前翻訳的制御下にあることを示し、前及び転写後両方の制御機構が示された。
【００４０】
ヒトエラスチンプロモーターからの年齢依存発現が、マウス中インビボで示された。ニワトリ大動脈細胞中で、加齢と共に起きるエラスチン産生の減少は、一部ｍＲＮＡの不安定化から生じる。トランスフォーミング成長因子、インスリン様成長因子Ｉ、ビタミンＤ及びインターロイキン−ｌ等の成長因子及びホルモンは全て、トロポエラスチンｍＲＮＡの安定性に影響することにより、プロモーターレベル又は転写後のいずれかでトロポエラスチン産生に影響する。更に、トロポエラスチンは負のフィードバック自己調節を受け、その結果細胞外マトリックススペース中のトロポエラスチンの蓄積は、トロポエラスチンｍＲＮＡの更なる産生を阻止することが示された。
【００４１】
トロポエラスチンは翻訳後一次変異をほとんど受けず、糖化（グリコシル化）の証拠はない。Ｐｒｏ残基のヒドロキシル化は、酵素プロピルヒドロキシラーゼによるヒドロキシル化Ｐｒｏ合計量の０−２０％の範囲で発生する。ヒドロキシル化Ｐｒｏは弾性線維産生には必要ではなく、過度のヒドロキシル化は有害らしいことが明らかになった。プロピルヒドロキシラーゼの抑制はトロポエラスチン分泌に影響しない。しかし、過度のヒドロキシル化は、プロピルヒドロキシラーゼの共因子であるアスコルベートの細胞培養への添加により生じ、エラスチン産生の減少をもたらす。アスコルベートの効果はエラスチンｍＲＮＡレベルの転写調節に起因すると考えられるが、その機構は不明である。過度のヒドロキシル化はトロポエラスチンの二次構造の不安定化を生じ、その結果コアセルベーションが阻止され、トロポエラスチンが生理学的温度で線維を形成する能力は減少する。架橋及び不溶性エラスチンの形成も又減少する。ヒドロキシル化はコラーゲンヒドロキシル化の副生として生じ、同じ細胞区分中で起こる。一方、ヒドロキシプロリンの存在は、単なるトロポエラスチン生成物の少量のコラーゲン汚染の結果である。
【００４２】
トロポエラスチンの細胞外空間への沈着は、細胞表面上の特定の領域で発生し、トロポエラスチンは更なる蛋白分解無しに、急速に形成される弾性線維内へ組み込まれる。エラスチンが沈着される前に、微少線維は細胞表面近くの細胞外空間中へ分泌され、弾性線維形成の最初のステップを特徴付ける。反応性エラスチン含有量は、エラスチンが小さな凝集塊となるに従い増加し、その塊は徐々に融合してアモルファス線維を形成する。
【００４３】
近年、他の細胞内トロポエラスチン結合蛋白質の存在が示された。小胞体シャペロン、ＢｉＰ、及びＦＫＢＰ６５は、ペプチジルプロピルシス−トランス異性体化能力を有するイムノフィリンファミリーの一員であり、トロポエラスチンと共免疫沈降し、トロポエラスチンの適切な折りたたみに重要である。これらの役割は未だ解明されていないが、ＥＢＰの役割とは異なるらしい。
【００４４】
トロポエラスチンは２０℃未満の冷水溶液に可溶である。しかし生理学的範囲まで温度を上げると、コアセルベーションと呼ばれるプロセス中で、トロポエラスチン分子がオリゴペプチド反復配列ＧＶＧＶＰ、ＧＧＶＰ及びＧＶＧＶＡＰ等の疎水性ドメイン間の相互作用により凝集して、溶液は濁ってしまう。
【００４５】
トロポエラスチンのコアセルベーションは、原線維発生で重要なステップであると考えられ、それは架橋前にトロポエラスチン分子を凝集し、かつ配列すると考えられる。円偏向二色性（ＣＤ）検査からは、トロポエラスチン及びα−エラスチン（エラスチンのシュウ酸可溶化誘導体）のコアセルベート形成は配列プロセスであり、ポリペプチド分子は秩序が非常に少ない状態から実際のレベルの構造の典型的な配置へ転換されることを示す結果が得られた。不適当なトロポエラスチンコアセルベーションは、線維形成に有害であり、多くの異なる分子がこのプロセスへ影響を及ぼすことが明らかになった。
【００４６】
細胞外空間への分泌後、トロポエラスチンは急速な架橋形成により不溶性となり、更なる変性（修飾）又は蛋白質分解性プロセシングは生じない。最初の反応は、Ｌｙｓ残基の酵素リシルオキシダーゼによる酸化的脱アミノ化であり、α−アミノアジピン酸（５−セミアルデヒド）として知られるアリシンが生成する。それに続く全て反応は自発的であり、近くに位置するＬｙｓとアリシン残基との縮合を含み、アリシンアルドール、リシノノルロイシン、メロデスモシン等の架橋、及びデスモシン及びイソデスモシン等のエラスチン独特の４官能性架橋を生成する。４官能性デスモシン及びイソデスモシンは、２種の異なる経路からの生成物であると考えられる。リシルオキシダーゼは銅依存性の、広いｐＨ最適条件を有する高度に熱安定な酵素である。それはコラーゲン及びエラスチンの両方で架橋形成を開始する。リシルオキシダーゼが阻害される場合、架橋は非常に減少し、トロポエラスチンは組織中に蓄積し、この酵素の弾性線維形成における非常な重要性を示す。ヒト及び動物における必須栄養としての銅の欠如は、消化管欠陥及び大動脈瘤へ至る。これは、トロポエラスチン精製プロトコルのほとんどの基礎であり；動物は銅欠乏食を与えられるてリシルオキシダーゼ活性を減少するか、それともリシルオキシダーゼがアミノプロピオニトリル等のラチロゲンにより不可逆的に阻害される。リシルオキシダーゼの親和性は、溶液中のモノマーに対するよりもトロポエラスチン及びコラーゲンの不溶性形に対する方が高く、次に続く生合成的事象のためのトロポエラスチンコアセルベート化の重要性が強調される。リシルオキシダーゼは成熟した弾性線維に局在し、成長する線維中に組み込まれている場合もある。トロポエラスチン中のＬｙｓ残基の多くは組み合わされて架橋する。
【００４７】
デスモシン及びイソデスモシンは４個のＬｙｓ残基から形成されるが、２個のトロポエラスチン鎖とのみ結合する。３個のアリシン及び１個のＬｙｓ残基が、デスモシン及びイソデスモシンそれぞれに寄与する。ＬｙｓのＣ−末端側上の芳香族残基（Ｔｙｒ又はＰｈｅ）の存在は、リシルオキシダーゼによる酸化を防止すると考えられる。これはリシノノルロイシン形成に好ましく、従ってデスモシン及びイソデスモシン形成へ結びつく。Ａｌａリッチ領域中のＬｙｓ残基は、常にそれぞれ２又は３個のＡｌａ残基により分断されて２又は３個の集団となっている。これら領域はα−らせん形状であると考えられ、２又は３個のＡｌａ残基によるＬｙｓの分離はＬｙｓ残基をらせんの同一側上に互いに近く配置し、その結果デスモシン及びイソデスモシン形成に適した構成となる。たった２個のエクソン１９及び２５は、２個ではなく３個のＬｙｓ残基を含む。これらエクソンは、３個の分離されたトロポエラスチン鎖がこれらドメインを介して結合することに特徴を有する。２個のアンチパラレル鎖のエクソン１９及び２５はデスモシンにより結合され、第３のトロポエラスチン鎖からのエクソン１０は、残っている２個のＬｙｓ残基を使用して２個のリシノノルロイシン架橋を介して、それらを橋渡しする。Ｐｒｏ含有ドメイン中のＬｙｓ残基は、トロポエラスチンのＮ−末端半分に主要成分として存在し、α−らせんにはなりにくく、従ってデスモシン又はイソデスモシンを形成しにくい。しかし、それらの特定の構造及び相互作用は解明されていない。
【００４８】
不溶性エラスチンは正常な組織中に非常に遅い代謝回転を有する。大人ラット肺中で、代謝回転は、この有機体の一生に近い数年であると考えられる；これは又ヒトの例でも同様である。この理由の１つは、エラスチンのプロテアーゼ性分解に対する強い抵抗力にある。不溶性エラスチンを分解できるプロテアーゼの主なグループは、一括してエラスターゼとして知られ、それらは一般的に、エラスチンの他にも非常に多量の基質に対し活性である。最も豊富な哺乳類のセリンエラスターゼとして、すい臓エラスターゼ、多形核白血球エラスターゼ（好中球エラスターゼとしても知られている）及びカテプシンＧが挙げられる。血中単球は又、弾性線維溶解性マトリックスメタロプロテイナーゼを産生し、それは９２ｋＤａ及び７２ｋＤａゼラチナーゼ、マトリリシン及びマクロファージエラスターゼを含む。血中単球はセリンエラスターゼを産生するが、マクロファージへの分化後はマトリックスメタロプロテイナーゼを産生する代わりにこの能力を失う。好ましくは肺のセリンエラスターゼ機能の重要な調節遺伝子はアルプロテイナーゼ(alproteinase)阻害剤である。
【００４９】
エラスチン分解は、発達、創傷治癒、妊娠及び組織改造等の多くの生理学的プロセスで重要である。しかし、不適当で非制御の弾性線維溶解（エラストリシス）は有害であり、肺気腫及び動脈におけるアテローム性動脈硬化症等の障害の原因となる。動脈中の弾性線維溶解は、脂質及びコレステロールにより増強される。弾性線維溶解活性の増加は、皮膚弛緩症等の皮膚障害でも観察された。増加した弾性線維溶解及びエラスチンの分解は又正常な老化の態様である。
【００５０】
プロテアーゼ損傷したエラスチンの補修が起こり得るが、成長中に元から発生したのと同質のエラスチンを産生することは示されていない。例えば気腫を実験的に誘起してその後肺組織の補修が起きると、エラスチンレベルは正常に戻るが、新しい弾性線維は非常に無秩序であり完全な機能性を保持しない。エラスチンペプチドのある程度の再利用が、補修中に起こることが示された。この補修機構は、損傷したエラスチンの完全分解及び新しい線維の再合成よりもむしろ、線維中のペプチドの重複及び再利用を含むことが明らかになった。
【００５１】
トロポエラスチンは蛋白分解に対して、エラスチンよりかなり傷つきやすい。トロポエラスチンの組織からの精製は、通常多量の分解を生じ、それはプロテアーゼ阻害剤、好ましくはセリンプロテアーゼの使用により実質的に減少できる。メタロプロテイナーゼによる特定の分解は又、平滑筋細胞の細胞培養でも見られる。高度に精製されたトロポエラスチンでさえ、長期貯蔵で約５個の別々の集団へ分解することが報告され、それは内因性プロテアーゼと共に共精製されており、内因性プロテアーゼは徐々にトロポエラスチンを分解するという仮説が導かれる。組み換え型トロポエラスチンの精製中、組織からの精製後に見られるのと同様に、特定の分解生成物が時々観察された。哺乳類の血清はプロテアーゼを含有し、それはトロポエラスチンを分解する。この血清は又、平滑筋細胞中でエラスターゼ活性を誘起することを示し、エラスチン分解が生じる。セリンプロテアーゼ阻害剤は、血清により生じるトロポエラスチンの分解を減少できる。
【００５２】
様々な仮説がトロポエラスチン分解の予測できる役割及びその結果について立てられた。可溶性トロポエラスチン蓄積は転写のための負のフィードバック調節機構として働くという仮定によると、セリンプロテアーゼ、特にプラスミンは、トロポエラスチンｍＲＮＡレベルを調節する。エラスターゼによるエラスチン分解により生成した可溶性ペプチドは、未消化のエラスチン産生培養物へ添加された場合にｍＲＮＡレベルをダウンレギュレートする。一方、上記可溶性ペプチドは、損傷した培養物ではｍＲＮＡレベルを増加し、従って損傷した組織への補修を局在化する働きをすることを示した。可溶性エラスチンペプチドは血管拡張を生じ、単球及び線維芽細胞のための化学走性誘因物質である。これは、架橋した材料由来のプロテアーゼ分解生成物は、細胞移動及び炎症においてある役割を演じることを示す。従って、トロポエラスチン及びエラスチンの蛋白質分解性分解は、正常な弾性線維形成及び補修プロセスのための重要な効果を有する。
【００５３】
アミノ酸リシンは、哺乳類では必須アミノ酸であり、それを再使用するためのリシン回収用生物化学的経路が存在する。Brownらの米国特許6,006,958明細書（特許文献１）の全てをここで資料として使用し、そこではリシンはアマドリ経路中の３−デオキシグルコソン（３ＤＧ）の随伴的生成により酵素的にフルクトースリシンから回収されることが示される。３ＤＧ及びその酵素は又、国際公開WO 03/089601パンフレット（特許文献２）（国際特許出願番号PCT/US03/12003）に記載されているように皮膚中に観察され、その全てをここで資料として使用する。リシンは、グルコースとリシン含有蛋白質のε−ＮＨ2基との間の可逆的反応の結果として体内で糖化される。このプロセスは、シッフ塩基中間体を介して進行し、それは転位して更に安定なフルクトースリシン（ＦＬ）、即ち「アマドリ生成物」となる。食物により導入される調理した動物性産物は又、糖化蛋白質を供給する。糖化蛋白質は、最後には分解されてフルクトースリシン（ＦＬ）となる。フルクトサミン−３−キナーゼ（Ｆ３Ｋ）はＦＬをその３’−ＯＨでホスホリル化し、フルクトースリシン−３−ホスフェート（ＦＬ３Ｐ）を生成し、それは次に自発的に分解してリシンＰｉ及び３ＤＧとなる。従ってＦ３Ｋは、体がリシンを回収することを可能とする。
【００５４】
Brownらの米国特許6,004,958明細書（特許文献３）及び特許文献２は、フルクトース−リシンのＦＬ３Ｐへの酵素的転換を阻害し、フルクトースリシン（ＦＬ）の脱糖によるリシン形成を阻害し、３ＤＧの形成を阻害し、同時に３ＤＧの不活化及び３ＤＧの解毒を提供するする化合物を示す。このクラスの代表的な特定の化合物も記載されている（Brownら、国際公開番号WO98／33492パンフレット（特許文献４））。例えば尿又は血漿３ＤＧは、メグルミン、ソルビトールリシン、マンニトールリシン及びガラクチトールリシンにより減少できることが見いだされた（同上）。糖化蛋白質が高い食物は、腎臓に有害であり、出生率の減少を引き起こすことが見いだされた（同上）。フルクトース−リシン経路は、腎臓の発癌に関与することも開示された（同上）。更に以前の研究で、食物及び３ＤＧがこの経路に関する発癌に対してある役割を果たしていることが証明されている（国際公開番号ＷＯ００／２４４０５パンフレット（特許文献５）；ＷＯ００／６２６２６パンフレット（特許文献６）；特許文献４参照）。
【００５５】
３ＤＧは少なくとも２つの経路により体内で解毒することができる高度に活性な分子である。１つの経路では、３ＤＧをアルデヒドレダクターゼにより３−デオキシフルクトース（３ＤＦ）に還元し、次いで３ＤＦは尿中に排出される（非特許文献４６）。別の解毒反応は、３ＤＧをオキソアルデヒドデヒドロゲナーゼにより３−デオキシ−２−ケトグルコン酸（ＤＧＡ）に酸化する（非特許文献４７）。
【００５６】
現在までの研究の結果は、これら酵素であるアルデヒドレダクターゼの１個が糖尿病において悪影響を受けていることを示す。糖尿病ラットの肝臓から単離した時、この酵素は６７、８４及び１４０位のリシン上で糖化され、正常な非修飾化酵素と比べた時、低い触媒的効率を有する（非特許文献４６）。糖尿病患者は正常血糖値の個体よりも高い割合の糖化蛋白質を有するので、患者はより高レベルの３ＤＧ、及び３ＤＦへの還元によりこの反応性分子を解毒する低下した能力の両方を有するらしい。アルデヒドレダクターゼの過剰発現が、メチルグリオキサール又は３ＤＧの細胞傷害性効果からＰＣ１２細胞を保護することも見いだされた（非特許文献４８）。
【００５７】
アルデヒドレダクターゼが作用する機構が研究された。これらの研究は、この重要な解毒酵素がアルドースレダクターゼ阻害剤（ＡＲＩ）により阻害されることを示した（非特許文献４９）。ＡＲＩは現在、それらの糖尿病性合併症を減らす能力について臨床検査されている。これらの化合物は１つの種類として、短期の糖尿病性合併症にある程度効果があることが示された。しかしそれらは、慢性糖尿病性合併症に対して臨床効果が無く、高蛋白質食を与えられたラットでは腎臓機能を悪化させる。この知見は、新たに発見されたリシン回収代謝経路と矛盾しない。
【００５８】
アミノグアニジン（ＡＧ）は、迅速に排出される共有誘導体の形成を通して薬理学的に３ＤＧを解毒する薬剤であり（非特許文献５０）、動物モデルにおいてＡＧＥが関連する網膜、神経、動脈及び腎臓の病状を減らすことが示された（非特許文献５１、非特許文献５２、非特許文献５３、非特許文献５４、非特許文献５５）。
【００５９】
過去の研究は、糖尿病における３ＤＧの役割に集中していた。糖尿病のヒトは、非糖尿病個体と比べて血漿中（非特許文献５６、非特許文献５７）、及び尿中（非特許文献５７）で検出可能に上昇したレベルの３ＤＧ及び３−デオキシフルクトース（３ＤＦ）、３ＤＧの解毒産物を有することが示された。更に腎症がある糖尿病は、非糖尿病と比べて上昇した３ＤＧの血漿レベルを有することが分かった（非特許文献５６）。
【００６０】
インスリン依存的真性糖尿病（ＩＤＤＭ）と非インスリン依存的真性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者とを比較した最近の研究は、３ＤＧ及び３ＤＦレベルが両種の患者群からの血液及び尿中で上昇していたことを確認した。従って３ＤＧの還元的解毒（３ＤＦへの転換）の正常な経路は、糖尿病性ヒトでは損なわれているらしい（非特許文献５８）。更にグルコース及び蛋白質をインビトロで、生理学的条件下でインキュベーションすると、３ＤＧが生成されることが示された。
【００６１】
次いで、３ＤＧは蛋白質を糖化し、架橋して検出可能なＡＧＥ生成物を生成することが示された（非特許文献５９、非特許文献６０）。
【００６２】
更に対照のラット腎臓と比べて、糖尿病ラットの腎臓では３ＤＧ修飾化蛋白質のレベルが上昇することが見いだされた（非特許文献６１）。３ＤＧは、中心的な抗酸化酵素であるグルタチオンレダクターゼ等の酵素を不活性化する能力を有することが示された。又ヘモグロビン−ＡＧＥレベルが糖尿病個体で上昇し（非特許文献６２）、そして他のＡＧＥ蛋白質が実験モデルにおいて、糖尿病ラットの網膜、レンズ及び腎皮質で５〜２０週の期間にわたり経時的に蓄積し、５〜５０倍増加することも示された（非特許文献５１）。更に３ＤＧは糖尿病胚障害における催奇性因子であることも示された（非特許文献６３）。
【００６３】
非酵素的糖化は、還元糖が遊離アミノ基に共有結合して最終的にＡＧＥを形成するものであり、正常な加齢で起こり、そして真性糖尿病では加速されて発生することが見いだされた（非特許文献６４）。蛋白質の架橋、それに続くＡＧＥ形成は、蛋白質、脂質成分及び核酸の構造及び機能的特性を改変する不可逆的なプロセスである（非特許文献６４）。これらのプロセスは、腎症、網膜症及び神経障害を含む一連の糖尿病性合併症の発症に寄与するものと考えられてきた（非特許文献６５）。
【００６４】
ＡＧＥ形成の阻害が糖尿病ラットの腎症の程度を下げることが示された（非特許文献６６）。従って、ＡＧＥ形成及び／又は酸化的ストレスを阻害する物質は、糖尿病性合併症の進行を制限し、そして糖尿病の治療における治療的介入のための新規道具を提供することができると思われる（非特許文献６７、非特許文献６４）。
【００６５】
最後に、糖尿病患者の３ＤＧの血清レベルと糖尿病性合併症の発病の危険性の直接的つながりが示された（非特許文献６８）。その結果は、絶食した血清３ＤＧレベルは糖尿病性患者で上昇し、比較的高い３ＤＧレベルを示した患者はより重篤な合併症に罹患しやすいことを示し、従って、３ＤＧと糖尿病性細小血管症とで関係があるらしいことを示す。
【００６６】
まとめると、３ＤＧは細胞に対して数多くの毒性効果を有し、そして幾つかの疾患状態では上昇したレベルで存在する。３ＤＧの有害効果には、限定するわけではないが以下が含まれる。
【００６７】
３ＤＧはヒトの臍静脈内皮細胞に活性酸素種を誘導し、これは酸化的ＤＮＡ傷害をもたらすことが知られている（非特許文献６９）。以前の研究では、３ＤＧはアルデヒドレダクターゼを不活化することが示された（非特許文献４６）。これはアルデヒドレダクターゼが３ＤＧから身体を保護する細胞性酵素であるので重要である。糖尿病性ヒトでは、尿及び血漿中の３ＤＧ対３ＤＦの比率が非糖尿病個体とは有意に異なるので、３ＤＧから３−デオキシフルクトース（３ＤＦ）へのこの解毒が糖尿病のヒトでは損なわれていることを示す証拠がある（非特許文献７０）。
【００６８】
更に、３ＤＧは糖尿病性合併症の発症に寄与する活性酸素種を誘導することも示された（非特許文献７１）。具体的には３ＤＧはヘパリン結合上皮増殖因子、アテローム硬化症斑中で豊富な平滑筋マイトジェンを誘導する。これは３ＤＧの増加が糖尿病におけるアテローム発病を誘起できることを示唆している（非特許文献７２、非特許文献７３）。
【００６９】
更に３ＤＧは糖尿病胚障害における公知の催奇性因子であり、胚性奇形を導く（非特許文献６３）。これは３ＤＧの蓄積から起こり、スーパーオキシドが媒介する胚障害を導くと思われる。
【００７０】
更に最近では、３ＤＧはマクロファージ由来の細胞株でのアポトーシスを誘導し（非特許文献７４）、そして培養した皮質ニューロン（非特許文献７５）、及びＰＣ１２細胞（非特許文献４８）に対して毒性であることが証明された。運動ニューロン疾患の形態である筋萎縮性側索硬化症の原因に関する最近の研究は、３ＤＧの蓄積がＲＯＳ生成の結果として神経毒性を導く可能性を示唆した（非特許文献７６）。
【００７１】
以前の実験では、３ＤＧが蛋白質を糖化し、架橋して後期糖化産生物（ＡＧＥ）と呼ばれる化合物の複雑な混合物を導くことが示された（非特許文献５９、非特許文献６０）。ＡＧＥは、糖尿病、アテローム性動脈硬化症及び痴呆等のほとんどの炎症疾患に関与してきた。それらは通常、コラーゲン等の長寿命の構造蛋白質上に形成される。
【００７２】
ヘモグロビン−ＡＧＥレベルは糖尿病個体で上昇し（非特許文献６２）、そして他のＡＧＥ蛋白質が実験モデルにおいて、糖尿病ラットの網膜、レンズ及び腎皮質で５〜２０週の期間にわたり経時的に蓄積し、５〜５０倍増加することも示された（非特許文献５１）。
【００７３】
ＡＧＥは、細胞上のＲＡＧＥと呼ばれる特異的レセプターを有する。内皮細胞、単核食細胞及びリンパ球上の細胞性ＲＡＧＥの活性化は、フリーラジカルの生成及び炎症性遺伝子メディエーターの発現を誘起する（非特許文献７７）。この増加した酸化的ストレスは、転写因子ＮＦ−ｋＢの活性化を導き、そしてアテローム性動脈硬化症に関連したＮＦ−ｋＢ遺伝子の発現を促進する（非特許文献６４）。
【００７４】
癌との関連では、ＲＡＧＥ活性化の遮断が腫瘍の増殖及び腫瘍細胞の内皮通過移動に関連する幾つかの機構を阻害する。これは又、自発的腫瘍及び移植した腫瘍の両方の増殖及び転移も下げる（非特許文献７８）。
【００７５】
糖尿病のヒトは非糖尿病個体と比べて血漿中（非特許文献５６、非特許文献５７）、及び尿中（非特許文献５６、非特許文献５７）に上昇したレベルの３ＤＧ及び３ＤＦを有する。
【００７６】
腎症を有する糖尿病は、他の非糖尿病と比べて３ＤＧの上昇した血漿レベルを有することが分かった（非特許文献５６）。３ＤＧ修飾化蛋白質の上昇したレベルは、対照のラット腎臓に対して糖尿病で見いだされる（非特許文献６１）。更に、絶食した血清３ＤＧレベルは糖尿病性患者で上昇し、比較的高い３ＤＧレベルを示した患者はより重篤な合併症に罹患しやすいことが示され、３ＤＧと糖尿病性細小血管症とに関係があるらしいことが示された (非特許文献７９)。
【００７７】
【特許文献１】米国特許6,006,958明細書
【特許文献２】国際公開番号WO03/089601パンフレット
【特許文献３】米国特許6,004,958明細書
【特許文献４】国際公開番号WO98/33492パンフレット
【特許文献５】国際公開番号WO00/24405パンフレット
【特許文献６】国際公開番号WO00/62626パンフレット
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【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００７８】
現在まで、哺乳類、特にヒトにおけるコラーゲン又はエラスチンの調節のための有用で確実な介入方法は特定されていない。従って、結合組織関連疾患、障害又は症状でのコラーゲン及びエラスチンレベルの調節の役割は、解明されていない。そして、糖尿病等の疾患症状を治療及び／又は緩和する方法を特定する長い間の要求があった。更に、皮膚老化、皺等は多くの研究の対象であり、皺又は老化した皮膚及び病気の皮膚の新規な治療方法の開発が、当分野で長い間求められていた。本発明はこれらの要求を満たすものである。
【課題を解決するための手段】
【００７９】
発明の簡単な要約
本発明は、哺乳類のデスモシンレベルを必要に応じて低下させる方法であって、アマドラーゼ経路阻害剤を含む組成物を哺乳類に投与することを含む、前記方法を包含する。１つの具体例において、前記阻害剤はフルクトサミンキナーゼを阻害するものである。別の具体例において、前記組成物はさらに３ＤＧの阻害剤を含む。１つの局面において、前記哺乳類はヒトである。別の局面において、ヒトは糖尿病及び肺線維症の群から選ばれる少なくとも１の疾患を有する。
【００８０】
本発明は又、哺乳類のデスモシンレベルを必要に応じて安定化させる方法であって、アマドラーゼ経路阻害剤を含む組成物を哺乳類に投与することを含む、前記方法をも包含する。１つの具体例において、前記組成物はフルクトサミンキナーゼ阻害剤を含む。別の具体例において、前記組成物はさらに３ＤＧの阻害剤を含む。１つの局面において、前記哺乳類はヒトである。別の局面において、ヒトは糖尿病及び肺線維症の群から選ばれる少なくとも１の疾患を有する。
【００８１】
本発明の方法の１つの具体例において、デスモシンレベルは細胞外マトリックス、肺、腎臓、皮膚、心臓、動脈、靱帯及び弾性軟骨の群から選ばれる少なくとも１の場所におけるものである。
【００８２】
本発明の方法の別の具体例において、フルクトサミンキナーゼ阻害剤は、口腔、直腸、膣、筋肉内、皮下及び静脈内の群から選ばれる経路で哺乳類に投与される。
【００８３】
本発明の方法のさらに別の具体例において、フルクトサミンキナーゼ阻害剤は抗体である。
【００８４】
本発明の方法のさらに別の具体例において、フルクトサミンキナーゼは、SEQ ID NO:2に記載されるアミノ酸配列をエンコードする核酸を含む核酸によってエンコードされる。
【００８５】
本発明の１つの具体例において、哺乳類のデスモシンレベルを必要に応じて低下させる方法は、アマドラーゼ経路阻害剤を含む組成物を哺乳類に投与することを含み、前記阻害剤は、式XIX：
【化１】
2007523908.tif 000003
［ここで、
（ａ）Ｘは−ＮＲ'−、−Ｓ(Ｏ)−、−Ｓ(Ｏ)2−又は−Ｏ−
｛ここで、Ｒ'はＨ、直鎖状又は分岐鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ4)、ＣＨ2(ＣＨＯＲ2)nＣＨ2ＯＲ2（ここで、ｎは１〜５であり、Ｒ2はＨ、アルキル(Ｃ1〜Ｃ4)又は置換若しくは非置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)若しくはアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)である）或はＣＨ(ＣＨ2ＯＲ2)(ＣＨＯＲ2)nＣＨ2ＯＲ2（ここで、ｎは１〜４であり、Ｒ2はＨ、アルキル(Ｃ1〜Ｃ4)又は置換若しくは非置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)若しくはアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)である）、置換又は非置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)及び置換又は非置換アラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)の群から選ばれる｝
であり；
（ｂ）ＲはＨ、アミノ酸残基、ポリアミノ酸残基、ペプチド鎖、非置換の又は少なくとも１の窒素若しくは酸素含有置換基で置換された直鎖状又は分岐鎖状脂肪族基(Ｃ1〜Ｃ8)及び少なくとも１の−Ｏ−、−ＮＨ−又は−ＮＲ''−｛ここで、Ｒ''は直鎖状若しくは分岐鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)又は置換若しくは非置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)若しくはアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)である｝成分で中断された非置換の又は少なくとも１の窒素若しくは酸素含有置換基で置換された直鎖状又は分岐鎖状脂肪族基(Ｃ1〜Ｃ8)の群から選ばれる置換基であり；
（ｃ）Ｘが−ＮＲ'−を表わす場合にはＲ及びＲ'はそれらが結合している窒素原子と一緒になって５〜７個の環原子を有する置換又は非置換ヘテロ環を表わすこともでき、この環中のヘテロ原子は少なくとも１の窒素及び酸素だけであり、
前記アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)又はアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)及び前記ヘテロ環の置換基は、Ｈ、アルキル(Ｃ1〜Ｃ6)、ハロゲン、ＣＦ3、ＣＮ、ＮＯ2及び−Ｏ−アルキル(Ｃ1〜Ｃ6)の群から選ばれ；
Ｒ1は１〜４個の直鎖状炭素原子を有するポリオール成分であり；
Ｙはヒドロキシメチレン成分−ＣＨＯＨ−であり；
Ｚは−Ｈ、−Ｏ−アルキル(Ｃ1〜Ｃ6)、−ハロゲン、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ及び−ＳＯ3Ｈ2、並びに随意としての−ＯＨの群から選ばれる］；
の化合物又は
（ｄ）該化合物の異性体若しくは医薬上許容できる塩
（但し、上記式においてＸ−Ｒがヒドロキシル又はチオールを表わすものは除く）
である。
【００８６】
本発明の１つの局面において、前記組成物は前記阻害剤を約０．０００１％〜約１５重量％含む。別の局面において、前記組成物は医薬組成物である。
【００８７】
本発明の別の局面において、式XIXの化合物は、ガラクチトールリシン、３−デオキシソルビトールリシン、３−デオキシ−３−フルオロ−キシリトールリシン、３−デオキシ−３−シアノソルビトールリシン、３−Ｏ−メチルソルビトールリシン、メグルミン、ソルビトールリシン及びマンニトールリシンの群から選ばれる。さらに別の局面において、前記化合物は３−Ｏ−メチルソルビトールリシンである。
【００８８】
１つの具体例において、本発明は、哺乳類においてアマドリ経路のフラックスを増加させることによって哺乳類におけるコラーゲンについてのｍＲＮＡのレベルを低下させる方法であって、次式XIX(b)：
【化２】
2007523908.tif 000004
［ここで、
（ａ）Ｘは−ＮＲ'−、−Ｓ(Ｏ)−、−Ｓ(Ｏ)2−又は−Ｏ−
｛ここで、Ｒ'はＨ、グアニジン基、直鎖状又は分岐鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ4)、ＣＨ2(ＣＨＯＲ2)nＣＨ2ＯＲ2（ここで、ｎは１〜５であり、Ｒ2はＨ、アルキル(Ｃ1〜Ｃ4)又は置換若しくは非置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)若しくはアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)である）或はＣＨ(ＣＨ2ＯＲ2)(ＣＨＯＲ2)nＣＨ2ＯＲ2（ここで、ｎは１〜４であり、Ｒ2はＨ、アルキル(Ｃ1〜Ｃ4)又は非置換若しくは置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)若しくはアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)である）、非置換又は置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)及び非置換又は置換アラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)の群から選ばれる｝
であり；
（ｂ）ＲはＨ、アミノ酸残基、ポリアミノ酸残基、ペプチド鎖、非置換の又は少なくとも１の窒素若しくは酸素含有置換基で置換された直鎖状又は分岐鎖状脂肪族基(Ｃ1〜Ｃ8)及び少なくとも１の−Ｏ−、−ＮＨ−又は−ＮＲ''−（ここで、Ｒ''は直鎖状若しくは分岐鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)又は置換若しくは非置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)若しくはアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)である）成分で中断された非置換の又は少なくとも１の窒素若しくは酸素含有置換基で置換された直鎖状又は分岐鎖状脂肪族基(Ｃ1〜Ｃ8)の群から選ばれる置換基であり；
（ｃ）Ｘが−ＮＲ'−を表わす場合にはＲ及びＲ'はそれらが結合している窒素原子と一緒になって５〜７個の環原子を有する置換又は非置換ヘテロ環を表わすこともでき、この環中のヘテロ原子は少なくとも１の窒素及び酸素だけであり、
前記アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)又はアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)及び前記ヘテロ環の置換基は、Ｈ、アルキル(Ｃ1〜Ｃ6)、ハロゲン、ＣＦ3、ＣＮ、ＮＯ2及び−Ｏ−アルキル(Ｃ1〜Ｃ6)の群から選ばれ；
Ｒ1は１〜４個の直鎖状炭素原子を有するポリオール成分であり；
Ｚは−Ｈ、−Ｏ−アルキル(Ｃ1〜Ｃ6)、−ハロゲン、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ及び−ＳＯ3Ｈ2、並びに随意としての−ＯＨの群から選ばれる］
の化合物、又は
（ｄ）該化合物の異性体若しくは医薬上許容できる塩
（但し、上記式においてＸ−Ｒがヒドロキシル又はチオールを表わすものは除く）
を哺乳類に投与することを含む、前記方法を特徴とする。
【００８９】
本発明の１つの局面において、前記コラーゲンはタイプＩコラーゲンである。別の局面において、前記化合物はフルクトサミンキナーゼの基質である。１つの局面において、前記化合物はフルクトースリシンである。
【００９０】
１つの具体例において、本発明は、哺乳類においてアマドラーゼ経路のフラックスを増加させる化合物を含む組成物を哺乳類に投与し、それによってコラーゲンタイプＩについてのｍＲＮＡのレベルを低下させることを含む、哺乳類の強皮症を治療する方法を特徴とする。
【００９１】
別の具体例において、本発明は、哺乳類においてアマドラーゼ経路のフラックスを増加させる化合物を含む組成物を哺乳類に投与し、それによってコラーゲンタイプＩについてのｍＲＮＡのレベルを低下させることを含む、哺乳類のケロイドを治療する方法を特徴とする。１つの局面において、前記化合物はフルクトサミンキナーゼを刺激する。別の局面において、前記化合物は、フルクトースリシン−３−ホスフェート及びフルクトースリシン−３−ホスフェートの類似体の群から選ばれる。
【００９２】
１つの具体例において、本発明は、アマドラーゼ経路のフラックスを刺激する第１の化合物、及び３ＤＧを不活性化する第２の化合物、を含む組成物を哺乳類に投与することを含む、哺乳類の強皮症を治療する方法を特徴とする。１つの局面において、前記の第２の化合物は、次の構造式Ｉのものである。
【化３】
2007523908.tif 000005
（ここで、Ｒ1及びＲ2は、独立して水素、低級アルキル、低級アルコキシ及びアリール基の群から選ばれるか、又はＲ1及びＲ2が窒素と一緒になって１〜２個のヘテロ原子及び２〜６個の炭素原子を含有するヘテロ環を形成するかのいずれかであり、前記へテロ原子の第２のものは窒素、酸素若しくは硫黄を含み；さらに、
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記アリール基は置換及び非置換のフェニル及びピリジル基を含む。）
【００９３】
本発明は又、少なくとも１のジカルボニル化合物と哺乳類のトロポエラスチンとの反応を阻害する方法であって、有効量のα−ジカルボニル糖機能阻害剤を哺乳類に投与することを含む、前記方法をも特徴とする。１つの局面において、前記ジカルボニル化合物は３ＤＧである。別の局面において、前記阻害剤は３ＤＧをキレート化するものである。さらに別の局面において、前記阻害剤は３ＤＧを解毒するものである。本発明の１つの局面において、前記阻害剤は、構造式Ｉ〜XVII及びXVIIIの群から選ばれる。本発明の別の局面において、前記阻害剤は、次の構造式Ｉのものである。
【化４】
2007523908.tif 000006
（ここで、Ｒ1及びＲ2は、独立して水素、低級アルキル、低級アルコキシ及びアリール基の群から選ばれるか、又はＲ1及びＲ2が窒素と一緒になって１〜２個のヘテロ原子及び２〜６個の炭素原子を含有するヘテロ環を形成するかのいずれかであり、前記へテロ原子の第２のものは窒素、酸素若しくは硫黄を含み；さらに、
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記アリール基は置換及び非置換のフェニル及びピリジル基を含む。）
【００９４】
本発明の別の局面において、前記化合物は、Ｎ，Ｎ−ジメチルイミドジカルボンイミド酸ジアミド、イミドジカルボンイミド酸ジアミド、Ｎ−フェニルイミドジカルボンイミド酸ジアミド、Ｎ−（アミノイミノメチル）−４−モルホリンカルボキシイミドアミド、Ｎ−（アミノイミノメチル）−４−チオモルホリンカルボキシイミドアミド、Ｎ−（アミノイミノメチル）−４−メチル−１−ピペラジンカルボキシイミドアミド、Ｎ−（アミノイミノメチル）−１−ピペリジンカルボキシイミドアミド、Ｎ−（アミノイミノメチル）−１−ピロリジンカルボキシイミドアミド、Ｎ−（アミノイミノメチル）−Ｉ−ヘキサヒドロアゼピンカルボキシイミドアミド、（アミノイミノメチル）−Ｉ−ヘキサヒドロアゼピンカルボキシイミドアミド、Ｎ−４−ピリジルイミドジカルボンイミド酸ジアミド、Ｎ，Ｎ−ジ−ｎ−ヘキシルイミドジカルボンイミド酸ジアミド、Ｎ，Ｎ−ジ−ｎ−ペンチルイミドジカルボンイミド酸ジアミド、Ｎ，Ｎ−ジ−ｎ−ブチルイミドジカルボンイミド酸ジアミド、Ｎ，Ｎ−ジプロピルイミドジカルボンイミド酸ジアミド及びＮ，Ｎ−ジエチルイミドジカルボンイミド酸ジアミドの群から選ばれる。
【００９５】
本発明の別の局面において、前記構造式は、次の構造式IIである。
【化５】
2007523908.tif 000007
（ここで、ＺはＮ又はＣＨであり；
Ｘ、Ｙ及びＱはそれぞれ独立して水素、アミノ、ヘテロ環、アミノ低級アルキル、低級アルキル及びヒドロキシ基の群から選ばれ；
Ｒ3は水素又はアミノ基又はそれらの対応する３−オキシドを含み；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記ヘテロ環基は３〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
Ｘ、Ｙ及びＱはそれぞれ窒素原子上のヒドロキシ変形体として存在することができる。）
【００９６】
本発明の別の局面において、前記化合物は、４，５−ジアミノピリミジン、４−アミノ−５−アミノメチル−２−メチルピリミジン、６−（ピペリジノ）−２，４−ジアミノピリミジン−３−オキシド、４，６−ジアミノピリミジン、４，５，６−トリアミノピリミジン、４，５−ジアミノ−６−ヒドロキシピリミジン、２，４，５−トリアミノ−６−ヒドロキシピリミジン、２，４，６−トリアミノピリミジン、４，５−ジアミノ−２−メチルピリミジン、４，５−ジアミノ−２，６−ジメチルピリミジン、４，５−ジアミノ−２−ヒドロキシ−ピリミジン及び４，５−ジアミノ−２−ヒドロキシ−６−メチルピリミジンの群から選ばれる。
【００９７】
本発明の別の局面において、前記構造式は、次の構造式IIIである。
【化６】
2007523908.tif 000008
｛ここで、Ｒ4は水素又はアシルであり、
Ｒ5は水素又は低級アルキルであり、
Ｘaは低級アルキル、カルボキシ、カルボキシメチル随意に置換されたフェニル及び随意に置換されたピリジル基の群から選ばれる置換基であり、ここで、随意としての置換基はハロゲン、低級アルキル、ヒドロキシ低級アルキル、ヒドロキシ及びアセチルアミノ基の群から選ばれ；
さらにＸが随意に置換されたフェニル又はピリジルである場合には、Ｒ5は水素であり；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれる。｝
【００９８】
本発明の別の局面において、前記化合物は、Ｎ−アセチル−２−（フェニルメチレン）ヒドラジンカルボキシイミドアミド、２−（フェニルメチレン）ヒドラジンカルボキシイミドアミド、２−（２，６−ジクロロフェニルメチレン）ヒドラジンカルボキシイミドアミドピリドキサールグアニルヒドラゾン、ピリドキサールホスフェートグアニルヒドラゾン、２−（１−メチルエチリデン）ヒドラジンカルボキシイミドアミド、ピルビン酸グアニルヒドラゾン、４−アセトアミドベンズアルデヒドグアニルヒドラゾン、４−アセトアミドベンズアルデヒドＮ−アセチルグアニルヒドラゾン及びアセト酢酸グアニルヒドラゾンの群から選ばれる。
【００９９】
本発明の別の局面において、前記構造式は、次の構造式IVである。
【化７】
2007523908.tif 000009
（ここで、Ｒ6は水素、低級アルキル基及びフェニル基の群から選ばれ、さらに該フェニル基は１〜３個のハロ、アミノ、ヒドロキシ及び低級アルキル基の群から選ばれる構造によって随意に置換され、該フェニル基が置換されている場合のその置換点は、前記構造式IVの直鎖への該フェニル環の結合点に対してオルト位、メタ位及びパラ位の群から選ばれ；
Ｒ7は水素、低級アルキル基及びアミノ基の群から選ばれ；
Ｒ8は水素又は低級アルキル基であり；
さらに、前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子から成る低級アルキル基から選ばれる。）
【０１００】
本発明の別の局面において、前記化合物は、等価のｎ−ブタンヒドラゾン酸ヒドラジド、４−メチルベンズアミドラゾン、Ｎ−メチルベンゼンカルボキシイミド酸ヒドラジド、ベンゼンカルボキシイミド酸１−メチルヒドラジド、３−クロロベンズアミドラゾン、４−クロロベンズアミドラゾン、２−フルオロベンズアミドラゾン、３−フルオロベンズアミドラゾン、４−フルオロベンズアミドラゾン、２−ヒドロキシベンズアミドラゾン、３−ヒドロキシベンズアミドラゾン、４−ヒドロキシベンズアミドラゾン、２−アミノベンズアミドラゾン、ベンゼンカルボヒドラゾン酸ヒドラジド及びベンゼンカルボヒドラゾン酸１−メチルヒドラジドの群から選ばれる。
【０１０１】
本発明の別の局面において、前記構造式は、次の構造式Ｖである。
【化８】
2007523908.tif 000010
（ここで、Ｒ9及びＲ10は独立して水素、ヒドロキシ、低級アルキル及び低級アルコキシの群から選ばれ、
自由なアミノ基は固定アミノ基に隣接し；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子から成る低級アルキル基から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子から成る低級アルコキシ基から選ばれる。）
【０１０２】
本発明の別の局面において、前記化合物は、３，４−ジアミノピリジン、２，３−ジアミノピリジン、５−メチル−２，３−ジアミノピリジン、４−メチル−２，３−ジアミノピリジン、６−メチル−２，３−ピリジンジアミン、４，６−ジメチル−２，３−ピリジンジアミン、６−ヒドロキシ−２，３−ジアミノピリジン、６−エトキシ−２，３−ジアミノピリジン、６−ジメチルアミノ−２，３−ジアミノピリジン、２−（２，３−ジアミノ−６−ピリジル）マロン酸ジエチル、６−（４−メチル−１−ピペラジニル）−２，３−ピリジンジアミン、６−（メチルチオ）−５−（トリフルオロメチル）−２，３−ピリジンジアミン、５−（トリフルオロメチル）−２，３−ピリジンジアミン、６−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−５−（トリフルオロメチル）−２，３−ピリジンジアミン、６−クロロ−５−（トリフルオロメチル）−２，３−ピリジンジアミン、５−メトキシ−６−（メチルチオ）−２，３−ピリジンジアミン、５−ブロモ−４−メチル−２，３−ピリジンジアミン、５−（トリフルオロメチル−２，３−ピリジンジアミン、６−ブロモ−４−メチル−２，３−ピリジンジアミン、５−ブロモ−６−メチル−２，３−ピリジンジアミン、６−メトキシ−３，４−ピリジンジアミン、２−メトキシ−３，４−ピリジンジアミン、５−メチル−３，４−ピリジンジアミン、５−メトキシ−３，４−ピリジンジアミン、５−ブロモ−３，４−ピリジンジアミン、２，３，４−ピリジントリアミン、２，３，５−ピリジントリアミン、４−メチル−２，３，６−ピリジントリアミン、４−（メチルチオ）−２，３，６−ピリジントリアミン、４−エトキシ−２，３，６−ピリジントリアミン、２，３，６−ピリジントリアミン、３，４，５−ピリジントリアミン、４−メトキシ−２，３−ピリジンジアミン、５−メトキシ−２，３−ピリジンジアミン及び６−メトキシ−２，３−ピリジンジアミンの群から選ばれる。
【０１０３】
本発明の別の局面において、前記構造式は、次の構造式VIである。
【化９】
2007523908.tif 000011
（ここで、ｎは１又は２であり、
Ｒ11はアミノ基又はヒドロキシエチル基であり、
Ｒ12はアミノ基、ヒドロキシアルキルアミノ基、低級アルキル基及び式ａｌｋ−Ｙａの基の群から選ばれ、
ここで、ａｌｋは低級アルキレン基であり、
Ｙａはヒドロキシ、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、低級アルキルアミノ基及びヘテロ環式基の群から選ばれ、
ここで、前記ヘテロ環式基は４〜７個の環員及び１〜３個のヘテロ原子を含有し；
前記Ｒ11がヒドロキシエチル基である場合には前記Ｒ12はアミノ基であり；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ、前記低級アルキレン基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ、前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれる。）
【０１０４】
本発明の別の局面において、前記化合物は、１−アミノ−２−［２−（２−ヒドロキシエチル）ヒドラジノ］−２−イミダゾリン、１−アミノ−［２−（２−ヒドロキシエチル）ヒドラジノ］−２−イミダゾリン、１−アミノ−２−（２−ヒドロキシエチルアミノ）−２−イミダゾリン、１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−１，４，５，６−テトラヒドロピリミジン、１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン、１−アミノ−２−（［２−（４−モルホリノ）エチル］アミノ）イミダゾリン、（［２−（４−モルホリノ）エチル］アミノ）イミダゾリン、１−アミノ−２−（［３−（４−モルホリノ）プロピル］アミノ）イミダゾリン、１−アミノ−２−（［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）プロピル］−アミノ）イミダゾリン；１−アミノ−２−（［３−（ジメチルアミノ）プロピル］アミノ）イミダゾリン、１−アミノ−２−［（３−エトキシプロピル）アミノ］イミダゾリン、１−アミノ−２−（［３−（１−イミダゾリル）プロピル］アミノ）イミダゾリン、１−アミノ−２−（２−メトキシエチルアミノ）−２−イミダゾリン、（２−メトキシエチルアミノ）−２−イミダゾリン、１−アミノ−２−（３−イソプロポキシプロピルアミノ）−２−イミダゾリン、１−アミノ−２−（３−メチルチオプロピルアミノ）−２−イミダゾリン、１−アミノ−２−［３−（１−ピペリジノ）プロピルアミノ）イミダゾリン、１−アミノ−２−［２，２−ジメチル−３−（ジメチルアミノ）プロピルアミノ］−２−イミダゾリン及び１−アミノ−２−（ネオペンチルアミノ）−２−イミダゾリンの群から選ばれる。
【０１０５】
本発明の別の局面において、前記構造式は、次の構造式VIIである。
【化１０】
2007523908.tif 000012
（ここで、Ｒ13は水素及びアミノ基の群から選ばれ、
Ｒ14及びＲ15は独立してアミノ基、ヒドラジノ基、低級アルキル基及びアリール基の群から選ばれ、
Ｒ13、Ｒ14及びＲ15の内の１つはアミノ基又はヒドラジノ基でなければならず；
前記アリール基は６〜１０個の炭素原子を有するものの群から選ばれ、
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれる。）
【０１０６】
本発明の別の局面において、前記化合物は、３，４−ジアミノ−５−メチル−１，２，４−トリアゾール、３，５−ジメチル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−４−アミン、４−トリアゾール−４−アミン、４−トリアゾール−４−アミン、４−トリアゾール−４−アミン、１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン、５−（１−エチルプロピル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン、５−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン、５−シクロヘキシル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン、５−メチル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン、５−フェニル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン、５−プロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン及び５−シクロヘキシル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミンの群から選ばれる。
【０１０７】
本発明の別の局面において、前記構造式は、次の構造式VIIIである。
【化１１】
2007523908.tif 000013
（ここで、Ｒ16は水素及びアミノ基の群から選ばれ；
Ｒ17はアミノ基及びグアニジノ基の群から選ばれ、
ここで、Ｒ16が水素である場合にはＲ17はグアニジノ基又はアミノ基であり、Ｒ16がアミノ基である場合にはＲ17はアミノ基であり；
Ｒ18及びＲ19は独立して水素、ヒドロキシ、低級アルキル基、低級アルコキシ基及びアリール基の群から選ばれ；
ここで、前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ、
前記アリール基は６〜１０個の炭素原子を有するものの群から選ばれる。）
【０１０８】
本発明の別の局面において、前記化合物は、２−グアニジノベンゾイミダゾール、１，２−ジアミノベンゾイミダゾール、１，２−ジアミノベンゾイミダゾール塩酸塩、５−ブロモ−２−グアニジノベンゾイミダゾール、５−メトキシ−２−グアニジノベンゾイミダゾール、５−メチルベンゾイミダゾール−１，２−ジアミン、５−クロロベンゾイミダゾール−１，２−ジアミン及び２，５−ジアミノベンゾイミダゾールの群から選ばれる。
【０１０９】
本発明の別の局面において、前記構造式は、次の構造式IXである。
【化１２】
2007523908.tif 000014
（ここで、Ｒ20は水素、低級アルキル基、低級アルキルチオール基、カルボキシ基、アミノカルボキシ基及びアミノ基の群から選ばれ；
Ｒ21は水素及びアシル基の群から選ばれ；
ここで、前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ、
前記アシル基は２〜１０個の炭素原子を有するものの群から選ばれる。）
【０１１０】
本発明の別の局面において、前記化合物は、リシン、２，３−ジアミノコハク酸及びシステインの群から選ばれる。
【０１１１】
本発明の別の局面において、前記化合物は、次の構造式Ｘの化合物である。
【化１３】
2007523908.tif 000015
（ここで、Ｒ22は水素、アミノ基、モノアミノ低級アルキル基及びジアミノ低級アルキル基の群から選ばれ；
Ｒ23は水素、アミノ基、モノアミノ低級アルキル基及びジアミノ低級アルキル基の群から選ばれ；
Ｒ24は水素、低級アルキル基、アリール基及びアシル基の群から選ばれ；
Ｒ25は水素、低級アルキル基、アリール基及びアシル基の群から選ばれ；
Ｒ22又はＲ23の一方はアミノ基、モノアミノ低級アルキル基又はジアミノ低級アルキル基でなければならず；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有する低級アルキル基から選ばれ；
前記モノアミノ低級アルキル基又はジアミノ低級アルキル基は１又は２個のアミノ基で置換された低級アルキル基であり；
前記アリール基は６〜１０個の炭素原子を有するアリール基から選ばれ；
前記アシル基は２〜１０個の炭素原子を有する低級アルキル−、アリール−及びヘテロアリール−カルボン酸の群から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれる。）
【０１１２】
本発明の別の局面において、前記化合物は、１，２−ジアミノ−４−フェニル［ｌＨ］イミダゾール、１，２−ジアミノイミダゾール、１−（２，３−ジアミノプロピル）イミダゾール三塩酸塩、４−（４−ブロモフェニル）イミダゾール−１，２−ジアミン、４−（４−クロロフェニル）イミダゾール−１，２−ジアミン、４−（４−ヘキシルフェニル）イミダゾール−１，２−ジアミン、４−（４−メトキシフェニル）イミダゾール−１，２−ジアミン、４−フェニル−５−プロピルイミダゾール−１，２−ジアミン、１，２−ジアミノ−４−メチルイミダゾール、１，２−ジアミノ−４，５−ジメチルイミダゾール及び１，２−ジアミノ−４−メチル−５−アセチルイミダゾールの群から選ばれる。
【０１１３】
本発明の別の局面において、前記構造式は、次の構造式XIである。
【化１４】
2007523908.tif 000016
（ここで、Ｒ26はヒドロキシ、低級アルコキシ基、アミノ基、アミノ低級アルコキシ基、モノ低級アルキルアミノ低級アルコキシ基、ジ低級アルキルアミノ低級アルコキシ基、ヒドラジノ基及び式ＮＲ29Ｒ30の群から選ばれ；
Ｒ29は水素及び低級アルキル基の群から選ばれ；
Ｒ30は１〜２０個の炭素原子を有するアルキル基、アリール基、ヒドロキシ低級アルキル基、カルボキシ低級アルキル基、低級シクロアルキル基並びに４〜７個の環員及び１〜３個のヘテロ原子を含有するヘテロ環式基の群から選ばれ；
前記Ｒ29、Ｒ30及び窒素はモルホリノ、ピペリジニル及びピペラジニルの群から選ばれる構造を形成することもでき；
Ｒ27は０〜３個のアミノ基、０〜３個のニトロ基、０〜１個のヒドラジノ基、ヒドラジノスルホニル基、ヒドロキシエチルアミノ基及びアミジノ基の群から選ばれ；
Ｒ28は水素、１個のフルオロ、２個のフルオロ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、カルボキシ、低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ及びヒドロキシ低級アルキルアミノ基の群から選ばれ；
Ｒ26がヒドロキシ又は低級アルコキシである場合には前記Ｒ27は非水素置換基であり；
Ｒ26がヒドラジノである場合には該式XIのフェニル環上に少なくとも２個の非水素置換基が存在しなければならず；
Ｒ28が水素である場合には前記Ｒ30は１〜２０個の炭素原子を有するアルキル基、アリール基、ヒドロキシ低級アルキル基、カルボキシ低級アルキル基、低級シクロアルキル基、４〜７個の環員及び１〜３個のヘテロ原子を含有するヘテロ環式基、アミノイミノ基、グアニジノ基、アミノグアニジノ基及びジアミノグアニジノ基の群から選ばれ；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記シクロアルキル基は４〜７個の炭素原子を有するものの群から選ばれる。）
【０１１４】
本発明の別の局面において、前記化合物は、４−（シクロヘキシルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン塩酸塩、３，４−ジアミノベンゾヒドラジド、４−（ｎ−ブチルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン二塩酸塩、４−（エチルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン二塩酸塩、４−カルバモイル−ｏ−フェニレンジアミン塩酸塩、４−（モルホリノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン塩酸塩、４−［（４−モルホリノ）ヒドラジノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−（１−ピペリジニルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン二塩酸塩、２，４−ジアミノ−３−ヒドロキシ安息香酸、４，５−ジアミノ−２−ヒドロキシ安息香酸、３，４−ジアミノベンズアミド、３，４−ジアミノベンゾヒドラジド、３，４−ジアミノ−Ｎ，Ｎ−ビス（１−メチルエチル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ，Ｎ−ジプロピルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（２−フラニルメチル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（２−メチルプロピル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（５−メチル−２−チアゾリル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（６−メトキシ−２−ベンゾチアゾリル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（６−メトキシ−８−キノリニル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（６−メチル−２−ピリジニル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（２−ピリジニル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（２−チアゾリル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−（４−ピリジニル）ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−［９Ｈ−ピリド（３，４−ｂ）インドール−６−イル］ベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−ブチルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−シクロヘキシルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−シクロペンチルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−デシルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−ドデシルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−メチルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−オクチルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−ペンチルベンズアミド、３，４−ジアミノ−Ｎ−フェニルベンズアミド、４−（ジエチルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ｔ−ブチルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−イソブチルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ネオペンチルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ジプロピルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ｎ−ヘキシルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ｎ−デシルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ｎ−ドデシルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（１−ヘキサデシルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（オクタデシルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン,４−（ヒドロキシルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（２−ヒドロキシエチルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレン、４−［（２−ヒドロキシエチルアミノ）エチル��ミノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−［（２−ヒドロキシエチルオキシ）エチルアミノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−（６−ヒドロキシヘキシルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（３−エトキシプロピルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（３−イソプロポキシプロピルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（３−ジメチルアミノプロピルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−［４−（２−アミノエチル）モルホリノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−［４−（３−アミノプロピル）モルホリノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−Ｎ−（３−アミノプロピル）ピロリジノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−［３−（Ｎ−ピペリジノ）プロピルアミノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−［３−（４−メチルピペラジニル）プロピルアミノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−（３−イミダゾリルプロピルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（３−フェニルプロピルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−［２−（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）エチルアミノカルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン、４−（イミダゾリルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ピロリジニルカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ピペリジノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（１−メチルピペラジニルカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（２，６−ジメチルモルホリノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ピロリジン−１−イルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ホモピペリジン−１−イルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（４−メチルピペラジン−１−イルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（１，２，４−トリアゾール−１−イルアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（グアニジノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（グアニジノアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−アミノグアニジノアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、４−（ジアミノグアニジノアミノカルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン、３，４−アミノサリチル酸、４−グアニジノ安息香酸、３，４−ジアミノベンゾヒドロキサム酸、３，４，５−トリアミノ安息香酸、２，３−ジアミノ−５−フルオロ安息香酸及び３，４−ジアミノ安息香酸の群から選ばれる。
【０１１５】
本発明の別の局面において、前記構造式は、次の構造式XIIである。
【化１５】
2007523908.tif 000017
（ここで、Ｒ31は水素、低級アルキル基及びヒドロキシ基の群から選ばれ；
Ｒ32は水素、ヒドロキシ低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキル基及びアリール基の群から選ばれ；
Ｒ33は水素及びアミノ基の群から選ばれ；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記ヒドロキシ低級アルキル基は第１、第２及び第３アルコール置換基パターンの群から選ばれ；
前記アリール基は６〜１０個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
ハロ原子、ここで、該ハロ原子はフルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードの群から選ばれる。）
【０１１６】
本発明の別の局面において、前記化合物は、３，４−ジアミノピラゾール、３，４−ジアミノ−５−ヒドロキシピラゾール、３，４−ジアミノ−５−メチルピラゾール、３，４−ジアミノ−５−メトキシピラゾール、３，４−ジアミノ−５−フェニルピラゾール、１−メチル−３−ヒドロキシ−４，５−ジアミノピラゾール、１−（２−ヒドロキシエチル）−３−ヒドロキシ−４，５−ジアミノピラゾール、１−（２−ヒドロキシエチル）−３−フェニル−４，５−ジアミノピラゾール、１−（２−ヒドロキシエチル）−３−メチル−４，５−ジアミノピラゾール、１−（２−ヒドロキシエチル）−４，５−ジアミノピラゾール、１−（２−ヒドロキシプロピル）−３−ヒドロキシ−４，５−ジアミノピラゾール、３−アミノ−５−ヒドロキシピラゾール及び１−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）−３−ヒドロキシ−４，５−ジアミノピラゾールの群から選ばれる。
【０１１７】
本発明の別の局面において、前記構造式は、次の構造式XIIIである。
【化１６】
2007523908.tif 000018
（ここで、ｎは１〜６であり；
Ｘは−ＮＲ1−、−Ｓ(Ｏ)−、−Ｓ(Ｏ)2−及び−Ｏ−の群から選ばれ、
ここで、Ｒ1はＨ、直鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)及び分岐鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)の群から選ばれ；
Ｙは−Ｎ−、−ＮＨ−及び−Ｏ−の群から選ばれ；
ＺはＨ、直鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)及び分岐鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)の群から選ばれる。）
【０１１８】
本発明の別の局面において、前記構造式は、次の構造式XIVである。
【化１７】
2007523908.tif 000019
（ここで、Ｒ37は低級アルキル基及び式ＮＲ41ＮＲ42の基の群から選ばれ；
ここで、Ｒ41及びＲ42は、Ｒ41が水素であり且つＲ42が低級アルキル基であるか、Ｒ41が水素であり且つＲ42がヒドロキシ（低級）アルキル基であるか、又はＲ41及びＲ42と窒素原子とが一緒になってヘテロ環式基を形成するかのいずれかであり、ここで、このヘテロ環式基は４〜６個の炭素原子を有し且つ酸素、窒素及び硫黄の群から選ばれる０〜１個の追加の原子を含有し；
Ｒ38は水素及びアミノ基の群から選ばれ；
Ｒ39は水素及びアミノ基の群から選ばれ；
Ｒ40は水素及び低級アルキル基の群から選ばれ；
Ｒ38、Ｒ39及びＲ40の内の少なくとも１つは水素以外であり、
Ｒ37及びＲ38の一方はアミノ基であることができず；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
ＮＲ41Ｒ42が形成する前記ヘテロ環式基は０〜１個の追加のヘテロ原子を含有する４〜７員環である。）
【０１１９】
本発明の別の局面において、前記化合物は、２−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）ヒドラジンカルボキシイミドヒドラジド、Ｎ−（４−モルホリノ）ヒドラジンカルボキシイミドアミド、１−メチル−Ｎ−（４−モルホリノ）ヒドラジンカルボキシイミドアミド、１−メチル−Ｎ−（４−ピペリジノ）ヒドラジンカルボキシイミドアミド、１−（Ｎ−ヘキサヒドロアゼピノ）ヒドラジンカルボキシイミドアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルカルボンイミド酸ジヒドラジド、１−メチルカルボンイミド酸ジヒドラジド、２−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）カルボヒドラゾン酸ジヒドラジド及びＮ−エチルカルボンイミド酸ジヒドラジドの群から選ばれる。
【０１２０】
本発明の別の局面において、前記構造式は、次の構造式XVである。
【化１８】
2007523908.tif 000020
（ここで、Ｒ43はピリジル、フェニル及びカルボン酸置換フェニル基の群から選ばれ；
Ｒ46は水素、低級アルキル基及び水可溶化成分の群から選ばれ；
Ｗは炭素−炭素結合及び１〜３個の炭素原子を有するアルキレン基の群から選ばれ；
Ｒ44は低級アルキル基、アリール基及びヘテロアリール基の群から選ばれ；
Ｒ45は水素、低級アルキル基、アリール基及びヘテロアリール基の群から選ばれ；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記アルキレン基は直鎖及び分岐鎖の群から選ばれ；
前記アリール基は６〜１０個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
ハロ原子はフルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードの群から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記ヘテロアリール基はヘテロ原子１個のもの及びヘテロ原子２個のものの群から選ばれる。）
【０１２１】
本発明の別の局面において、前記化合物は、メチルグリオキサールビス−（２−ヒドラジノ安息香酸）ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−（ジメチル−２−ヒドラジノベンゾエート）ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−（フェニルヒドラジン）ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−（ジメチル−２−ヒドラジノベンゾエート）ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−（４−ヒドラジノ安息香酸）ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−（ジメチル−４−ヒドラジノベンゾエート）ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−（２−ピリジル）ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−（ジエチレングリコールメチルエーテル−２−ヒドラジノベンゾエート）ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−［１−（２，３−ジヒドロキシプロパン）−２−ヒドラジンベンゾエートヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−［１−（２−ヒドロキシエタン）−２−ヒドラジノベンゾエート］ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−［（１−ヒドロキシメチル−１−アセトキシ））−２−ヒドラジノ−２−ベンゾエート］ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−［（４−ニトロフェニル）−２−ヒドラジノベンゾエート］ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−［（４−メチルピリジル）−２−ヒドラジノベンゾエート］ヒドラゾン、メチルグリオキサールビス−（トリエチレングリコール−２−ヒドラジノベンゾエート）ヒドラゾン、及びメチルグリオキサールビス−（２−ヒドロキシエチルホスフェート−２−ヒドラジンベンゾエート）ヒドラゾンの群から選ばれる。
【０１２２】
本発明の別の局面において、前記構造式は、次の構造式XVIである。
【化１９】
2007523908.tif 000021
｛ここで、Ｒ47は水素を表わすか、又はＲ48と一緒になって２〜３個の炭素原子を有するアルキレン基を表わすかのいずれかであり；
Ｒ48は水素及びａｌｋ−Ｎ−Ｒ50Ｒ51（前記Ｒ47が水素である場合）の群から選ばれ；
ここで、前記ａｌｋは１〜８個の炭素原子を有する直鎖状又は分岐鎖状アルキレン基であり、
Ｒ50及びＲ51は、それぞれが独立して１〜６個の炭素原子を有する低級アルキル基を表わすか、又はＲ50及びＲ51と窒素原子とが一緒になってモルホリノ、ピペリジニル及びメチルピペラジニルの群から選ばれる基を形成するかのいずれかであり；
Ｒ49は水素であるか、又はＲ47とＲ48とが一緒になって２〜３個の炭素原子を有するアルキレン基を形成する場合にはヒドロキシエチルを表わすかのいずれかであり；
Ｗは炭素−炭素結合、１〜３個の炭素原子を有するアルキレン基、１，２−、１，３−又は１，４−フェニレン基、２，３−ナフチレン基、２，５−チオフェニレン基、２，６−ピリジレン基、エチレン基、エテニレン基及びメチレン基の群から選ばれ；
Ｒ52は低級アルキル基、アリール基及びヘテロアリール基の群から選ばれ；
Ｒ53は水素、低級アルキル基、アリール基及びヘテロアリール基の群から選ばれ；
Ｗが炭素−炭素結合である場合にはＲ52及びＲ53が一緒になって１，４−ブチレン基を形成することもでき、又、Ｗが１又は２個の低級アルキル又はアミノ基で随意に置換された１，２−、１，３−又は１，４−フェニレン基である場合にはＲ52及びＲ53は共に水素又は低級アルキル基であり；
Ｗがエチレン基である場合にはＲ52及びＲ53は一緒になってエチレン基であり：
Ｗがメチレン基である場合には、Ｒ52及びＲ53が一緒になって式＝Ｃ(−ＣＨ3)−Ｎ−(Ｈ3Ｃ−)Ｃ＝の基であるか又は−Ｃ−Ｗ−Ｃ−とＲ52及びＲ53とが一緒になってビシクロ−（３，３，１）−ノナン若しくはビシクロ−［３，３，１］−オクタン基を形成するかのいずれかであり且つＲ47及びＲ48が一緒になって２〜３個の炭素原子を有するアルキレン基となり且つＲ49が水素であり；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ，この基はハロ、ヒドロキシ、アミノ基又は低級アルキルアミノ基で随意に置換されていてもよく；
前記アルキレン基は直鎖及ぶ分岐鎖の群から選ばれ；
前記アリール基は６〜１０個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；ハロ原子はフルオロ、クロロ、ブロモ及びヨード基の群から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ、
前記ヘテロアリール基は１又は２個のヘテロ原子を有するものの群から選ばれる。｝
【０１２３】
本発明の別の局面において、前記化合物は、メチルグリオキサールビス（グアニルヒドラゾン）,メチルグリオキサールビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン−ヒドラゾン）、テレフタル酸ジカルボキサルデヒドビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）、テレフタル酸ジカルボキサルデヒドビス（グアニルヒドラゾン）、フェニルグリオキサールビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）、フリルグリオキサールビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）,メチルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）,メチルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−１，４，５，６−テトラヒドロピリミジンヒドラゾン）、フェニルグリオキサールビス（グアニルヒドラゾン）、フェニルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）、フリルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）、フェニルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−１，４，５，６−テトラヒドロピリミジンヒドラゾン）、フリルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−１，４，５，６−テトラヒドロピリミジンヒドラゾン）、２，３−ブタンジオンビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）、１，４−シクロヘキサンジオンビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）,ｏ−フタル酸ジカルボキサルデヒドビス（２−ｈｙｄカルボキシイミドアミドヒドラゾン）、フリルグリオキサールビス（グアニルヒドラゾン）二塩酸塩二水和物、２，３−ペンタンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、１，２−シクロヘキサンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、２，３−ヘキサンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、１，３−ジアセチルビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、２，３−ブタンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、２，６−ジアセチルピリジン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）二臭化水素酸塩；２，６−ジアセチルピリジン−ビス−（グアニルヒドラゾン）二塩酸塩、２，６−ピリジンジカルボキサルデヒド−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）二臭化水素酸塩三水和物、２，６−ピリジンジカルボキサルデヒド−ビス（グアニルヒドラゾン）二塩酸塩、１，４−ジアセチルベンゼン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）二臭化水素酸塩二水和物、１，３−ジアセチルベンゼン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、１，３−ジアセチルベンゼン−ビス（グアニル）−ヒドラゾン二塩酸塩、イソフタルアルデヒド−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、イソフタルアルデヒド−ビス−（グアニル）ヒドラゾン二塩酸塩、２，６−ジアセチルアニリンビス−（グアニル）ヒドラゾン二塩酸塩、２，６−ジ��セチルアニリンビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、２，５−ジアセチルチオフェンビス（グアニル）ヒドラゾン二塩酸塩、２，５−ジアセチルチオフェンビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、１，４−シクロヘキサンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、３，４−ヘキサンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩,メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩、メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−５−メチル−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩、２，３−ペンタンジオン−ビス−（２−ヒドラジノ−３−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、２，３−ヘキサンジオン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩,３−エチル−２，４−ペンタンジオン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩,メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−５−エチル−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩、メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−５−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩、メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−５−シクロプロピル−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩、メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−５−シクロブチル−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩、１，３−シクロヘキサンジオン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、６−ジメチルピリジンビス（グアニル）ヒドラゾン二塩酸塩、３，５−ジアセチル−１，４−ジヒドロ−２，６−ジメチルピリジンビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩、ビシクロ−（３，３，１）ノナン−３，７−ジオンビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩及びｃｉｓ−ビシクロ−（３，３，１）オクタン−３，７−ジオンビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩の群から選ばれる。
【０１２４】
本発明の別の局面において、前記構造式は、次の構造式XVIIである。
【化２０】
2007523908.tif 000022
（ここで、Ｒ54は水素、ヒドロキシ（低級）アルキル基、低級アシルオキシ（低級）アルキル基及び低級アルキル基の群から選ばれ；
Ｒ55は水素、ヒドロキシ（低級）アルキル基、低級アシルオキシ（低級）アルキル基及び低級アルキル基の群から選ばれ；
Ｒ54及びＲ55は環炭素と一緒になって芳香族縮合環となることもでき；
Ｚaは水素又はアミノ基であり；
Ｙaは水素、式−ＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)−Ｒ56の基及び式−ＣＨＲ'の基の群から選ばれ、
ここで、Ｙaが式−ＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)−Ｒ56の基である場合、該Ｒ56は低級アルキル基、アルコキシ基、ヒドロキシ、アミノ基及びアリール基の群から選ばれ；
Ｙaが式−ＣＨＲ'の基である場合、該Ｒ'は水素、低級アルキル基、低級アルキニル基及びアリール基の群から選ばれ；
Ａはハライド、トシレート、メタンスルホネート及びメシチレンスルホネートイオンの群から選ばれ；
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記低級アルキニル基は２〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記低級アシルオキシ（低級）アルキル基はアシルオキシ部分及び低級アルキル部分を含有し、
ここで、このアシルオキシ部分は２〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ、低級アルキル部分は１〜６炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記アリール基は６〜１０個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
式XVIIのハロ原子はフルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードの群から選ばれる。）
【０１２５】
本発明の別の局面において、前記化合物は、３−アミノチアゾリウムメシチレンスルホネート、３−アミノ−４，５−ジメチルアミノチアゾリウムメシチレンスルホネート、２，３−ジアミノチアゾリニウムメシチレンスルホネート、３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−チアゾリウムブロミド、３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４，５−ジメチルチアゾリウムブロミド、３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルチアゾリウムブロミド、３−（２−フェニル−２−オキソエチル）−４−メチルチアゾリウムブロミド、３−（２−フェニル−２−オキソエチル）−４，５−ジメチルチアゾリウムブロミド、３−アミノ−４−メチルチアゾリウムメシチレンスルホネート、３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−５−メチルチアゾリウムブロミド、３−（３−（２−フェニル−２−オキソエチル）−５−メチルチアゾリウムブロミド、３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］チアゾリウムブロミド、３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］−４−メチルチアゾリウムブロミド、３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］−５−メチルチアゾリウムブロミド、３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］−４，５−ジメチルチアゾリウムブロミド、３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチル−５−（２−ヒドロキシエチル）チアゾリウムブロミド、３−（２−フェニル−２−オキソエチル）−４−メチル−５−（２−ヒドロキシエチル）チアゾリウムブロミド、３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］−４−メチル−５−（２−ヒドロキシエチル）チアゾリウムブロミド、３，４−ジメチル−５−（２−ヒドロキシエチル）チアゾリウムヨージド、３−エチル−５−（２−ヒドロキシエチル）−４−メチルチアゾリウムブロミド、３−ベンジル−５−（２−ヒドロキシエチル）−４−メチルチアゾリウムクロリド、３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）ベンゾチアゾリウムブロミド、３−（２−フェニル−２−オキソエチル）ベンゾチアゾリウムブロミド、３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］ベンゾチアゾリウムブロミド、３−（カルボキシメチル）ベンゾチアゾリウムブロミド、２，３−（ジアミノ）ベンゾチアゾリウムメシチレンスルホネート、３−（２−アミノ−２−オキソエチル）チアゾリウムブロミド、３−（２−アミノ−２−オキソエチル）−４−メチルチアゾリウムブロミド、３−（２−アミノ−２−オキソエチル）−５−メチルチアゾリウムブロミド、３−（２−アミノ−２−オキソエチル）４，５−ジメチルチアゾリウムブロミド、３−（２−アミノ−２−オキソエチル）ベンゾチアゾリウムブロミド、３−（２−アミノ−２−オキソエチル）−４−メチル−５−（２−ヒドロキシエチル）チアゾリウムブロミド、３−アミノ−５−（２−ヒドロキシエチル）−４−メチルチアゾリウムメシチレンスルホネート、３−（２−メチル−２−オキソエチル）チアゾリウムクロリド、３−アミノ−４−メチル−５−（２−アセトキシエチル）チアゾリウムメシチレンスルホネート、３−（２−フェニル−２−オキソエチル）チアゾリウムブロミド、３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチル−５−（２−アセトキシエチル）チアゾリウムブロミド、３−（２−アミノ−２−オキソエチル）−４−メチル−５−（２−アセトキシエチル）チアゾリウムブロミド、２−アミノ−３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）チアゾリウムブロミド、２−アミノ−３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）ベンゾチアゾリウムブロミド、２−アミノ−３−（２−アミノ−２−オキソエチル）チアゾリウムブロミド、２−アミノ−３−（２−アミノ−２−オキソエチル）ベンゾチアゾリウムブロミド、３−［２−（４'−メトキシフェニル）−２−オキソエチル］−チアゾリニウムブロミド、３−［２−（２'，４'−ジメトキシフェニル）−２−オキソエチル］−チアゾリニウムブロミド、３−［２−（４'−フルオロフェニル）−２−オキソエチル］−チアゾリニウムブロミド、３−［２−（２'，４'−ジフルオロフェニル）−２−オキソエチル］−チアゾリニウムブロミド、３−［２−（４'−ジエチルアミノフェニル）−２−オキソエチル］−チアゾリニウムブロミド、３−プロパルギル−チアゾリニウムブロミド、３−プロパルギル−４−メチルチアゾリニウムブロミド、３−プロパルギル−５−メチルチアゾリニウムブロミド、３−プロパルギル−４，５−ジメチルチアゾリニウムブロミド及び３−プロパルギル−４−メチル−５−（２−ヒドロキシエチル）−チアゾリニウムブロミドの群から選ばれる。
【０１２６】
本発明の別の局面において、前記構造式は、次の構造式XVIIIである。
【化２１】
2007523908.tif 000023
（ここで、Ｒ57はヒドロキシ、ＮＨＣＯＮＣＲ61Ｒ62及びＮ＝Ｃ(ＮＲ61Ｒ62)2の群から選ばれ；
ここで、Ｒ61及びＲ62はそれぞれ独立して水素、Ｃ1〜Ｃ10直鎖状アルキル、Ｃ1〜Ｃ10分岐鎖状アルキル、アリール−Ｃ1〜Ｃ4アルキル、一置換アリール−Ｃ1〜Ｃ4アルキル及び二置換アリール−Ｃ1〜Ｃ4アルキルの群から選ばれ、
ここで、前記置換基はフルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、Ｃ1〜Ｃ10アルキル直鎖及びＣ1〜Ｃ10アルキル分岐鎖の群から選ばれ；
Ｒ58は水素、アミノ、一置換アミノ及び二置換アミノの群から選ばれ、
Ｒ59は水素、アミノ、一置換アミノ及び二置換アミノの群から選ばれ；
Ｒ58及びＲ59の両方共がアミノ又は置換アミノではない場合、この置換基はＣ1〜Ｃ10直鎖状アルキル、Ｃ1〜Ｃ10分岐鎖状アルキル及びＣ3〜Ｃ8シクロアルキルの群から選ばれ；
Ｒ60は水素、トリフルオロメチル、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードの群から選ばれる。）
【０１２７】
本発明は又、強皮症、ケロイド及び瘢痕の群から選ばれる疾患を有していて治療を必要としている哺乳類の治療方法であって、架橋した蛋白質の間の架橋を崩壊させることができる少なくとも１の化合物を含む有効量の組成物を前記哺乳類に投与することを含む、前記方法を特徴とする。
【０１２８】
１つの局面において、前記化合物は、式XXV：
【化２２】
2007523908.tif 000024
｛ここで、Ｒ1及びＲ2は独立して水素及びアルキル基（これはヒドロキシ基で置換されていてもよい）の群から選ばれ；
Ｙは式−ＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)Ｒの基（ここで、Ｒは４〜１０個の環員並びに酸素、窒素及び硫黄の群から選ばれる１〜３個のヘテロ原子を含有するアルキレンジオキシアリール以外のヘテロ環式基であり、このヘテロ環式基はアルキル、オキソ、アルコキシカルボニルアルキル、アリール及びアラルキル基の群から選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよく；前記の１以上の置換基は、１以上のアルキル又はアルコキシ基で置換されていてもよい）；又は式−ＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)−ＮＨＲ'の基（ここで、Ｒ'は４〜１０個の環員並びに酸素、窒素及び硫黄の群から選ばれる１〜３個のヘテロ原子を含有するアルキレンジオキシアリール以外のヘテロ環式基であり、このヘテロ環式基は１以上のアルコキシカルボニルアルキル基で置換されていてもよい）であり、
Ｘは医薬上許容できるイオン；及びその担体である｝
の群から選ばれる。
【０１２９】
本発明は又、強皮症、ケロイド及び瘢痕の群から選ばれる疾患を有していて治療を必要としている哺乳類の治療方法であって、蛋白質架橋を防止することができる少なくとも１の化合物を含む有効量の組成物を前記哺乳類に投与することを含む、前記方法をも特徴とする。別の具体例において、本発明は、蛋白質架橋を防止することができる少なくとも１の化合物及び架橋した蛋白質の間の架橋を崩壊させることができる少なくとも１の化合物を含む有効量の組成物を哺乳類に投与することを含む、哺乳類の方法を特徴とする。
【０１３０】
１つの具体例において、本発明は、コラーゲンを必要としている患者におけるコラーゲンの架橋を防止する方法であって、３ＤＧを不活性化する化合物を含む組成物を前記患者に投与することを含む、前記方法を特徴とする。
【０１３１】
１つの局面において、前記化合物３ＤＧの形成を阻害するものである。
【０１３２】
別の局面において、前記化合物は、構造式Ｉを有する化合物の群から選ばれる。
【化２３】
2007523908.tif 000025
（ここで、Ｒ1及びＲ2は、独立して水素、低級アルキル、低級アルコキシ及びアリール基の群から選ばれるか、又はＲ1及びＲ2が窒素と一緒になって１〜２個のヘテロ原子及び２〜６個の炭素原子を含有するヘテロ環を形成するかのいずれかであり、前記へテロ原子の第２のものは窒素、酸素若しくは硫黄を含み；さらに、
前記低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有するものの群から選ばれ；
前記アリール基は置換及び非置換のフェニル及びピリジル基を含む。）
【０１３３】
本発明の別の局面において、前記化合物は、メグルミン、ソルビトールリシン、マンニトールリシン及びガラクチトールリシンの群から選ばれる。本発明の別の局面において、患者は、強皮症、ケロイド及び瘢痕の群から選ばれる少なくとも１の疾患を有する。
【０１３４】
本発明は又、哺乳類におけるフルクトサミンキナーゼを阻害する方法であって、銅含有化合物を含む組成物を前記哺乳類に投与することを含む、前記方法をも特徴とする。１つの局面において、前記銅含有化合物は、銅−サリチル酸共役、銅−ペプチド共役、銅−アミノ酸共役及び銅塩の群から選ばれる。別の局面において、前記銅含有化合物は、銅−リシン共役及び銅−アルギニン共役の群から選ばれる。本発明の１つの具体例において、前記哺乳類は、少なくとも１の糖尿病性合併症に関連する疾患を有する。１つの局面において、前記糖尿病性合併症は、網膜症、ニューロパシー、心臓血管疾患、痴呆及び腎症の群から選ばれる。
【０１３５】
１つの具体例において、本発明は、アマドラーゼ経路を阻害する組成物を哺乳類に投与することによって哺乳類におけるコラーゲンの製造を増加させる方法であって、前記組成物が銅含有化合物を含み、それによって哺乳類におけるコラーゲンの製造を増加させる、前記方法を特徴とする。１つの局面において、前記銅含有化合物はフルクトサミンキナーゼを阻害するものである。フルクトサミン３キナーゼ並びにコラーゲン及びエラスチンの形成別の局面において、前記コラーゲンはタイプＩコラーゲンである。さらに別の局面において、前記コラーゲンがタイプIIIコラーゲンである。さらに別の局面において、前記コラーゲンはタイプＩ及びタイプIIIコラーゲンを含む。
【０１３６】
１つの具体例において、本発明は、アマドラーゼ経路を阻害する組成物を哺乳類に投与することによって哺乳類におけるコラーゲンについてのｍＲＮＡのレベルを増大させる方法であって、前記組成物が銅含有化合物を含み、それによって哺乳類におけるｍＲＮＡコラーゲンのレベルを増大させることを含む、前記方法を特徴とする。別の具体例において、本発明は、哺乳類のデスモシンレベルを低下させる方法であって、アマドラーゼ経路阻害剤を含む組成物を哺乳類に投与することを含み、前記阻害剤が銅含有化合物である、前記方法を特徴とする。さらに別の具体例において、本発明は、哺乳類のデスモシンレベルを安定化させる方法であって、アマドラーゼ経路阻害剤を含む組成物を哺乳類に投与することを含み、前記阻害剤が銅含有化合物である、前記方法を特徴とする。
【０１３７】
本発明は又、哺乳類においてアマドリ経路のフラックスを増加させることによって哺乳類におけるコラーゲンについてのｍＲＮＡのレベルを低下させる方法であって、少なくとも１の銅キレート化剤を含む組成物を哺乳類に投与することを含む、前記方法をも特徴とする。１つの局面において、前記化合物は、トリエチレンテトラミン二塩酸塩（トリエン）、ペニシラミン、ｓａｒ（３，６，１０，１３，１６，１９−ヘキサアザビシクロ［６．６．６］エイコサン）、ｄｉａｍｓａｒ（１，８−ジアミノ−３，６，１０，１３，１６，１９−ヘキサアザビシクロ［６．６．６］エイコサン）、エチレンジアミン四酢酸、ｏ−フェナントロリン及びヒスチジンの群から選ばれる。
【０１３８】
図面の簡単な説明：
上記の要約、並びに本発明の好ましい実施例の詳細な説明は、添付された図面と一緒に読む場合に、より良く理解されるであろう。本発明を具体的に説明する目的で、現在の好適な実施例を図面で示す。しかし本発明は、示された厳密な装置及び手段に限定されないと理解されるべきである。
図１は、蛋白質の架橋を導く多段階反応に関与する初期段階を表す概略図である。
図２は、リシン回収経路に関与する反応を具体的に説明する概略図である。フルクトース−リシン（ＦＬ）は、アマドラーゼなどのフルクトサミンキナーゼによりリン酸化されて、フルクトースリシン−３−ホスフェート（ＦＬ３Ｐ）を作る。ＦＬ３Ｐは、自然発生的にリシン、Ｐｉ及び３ＤＧに分解する（米国特許6,004,958号明細書、特許文献３）。
図３は、２グラムのＦＬを与えた１個体の３ＤＦ、３ＤＧ及びＦＬの２４時間経時変化を示す尿のプロファイルを表すグラフである。
図４は、２グラムのフルクトースリシンを与えた７名のボランティアの尿中への３ＤＦの経時的な排出を表すグラフである。
図５は、コントロール動物及び０．３％糖化蛋白質を与え続けた実験グループにおける３ＤＦ及びＮ−アセチル−β−グルコサミニダーゼ（ＮＡＧ）レベルをグラフによって比較するものである（Brown他、米国特許6,004,958号、特許文献３）。
図６は、コントロール食又は糖化蛋白質を強化した食物のいずれかを与えたラットの尿中の３ＤＦレベルと３ＤＧレベルとの間の直線関係を示すグラフである（Brown他、米国特許6,004,958号、特許文献３）。
図７は、健常者及び糖尿病患者における空腹時の尿中３ＤＧレベルを、空腹時の３ＤＦレベルに対してプロットしたグラフで表す。
図８は、高レベルの糖化蛋白質を含む食物が腎臓に及ぼす影響を具体的に説明する顕微鏡写真の画像を表す。緩やかに糖化した蛋白質強化食を与えたラット（図８Ａ）、及び標準食を与えたラット（図８Ｂ）から採取した腎臓切片を過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色法で染色した。この実験では、非糖尿病ラットに３％糖化蛋白質を含む食物を８カ月間与えた。この食物はＦＬ及びその代謝産物レベルを顕著に上昇させた（＞腎臓の３倍）。図８Ａは糖化食物を８カ月間与えたラットからの糸球体の顕微鏡写真の画像である。糸球体は、ボーマン嚢に癒着した糸球体係蹄の分節状硬化症を示す（左下）。又、９時から３時辺りには細管壁の上皮化生がある。糸球体は、ボーマン嚢に癒着した糸球体係蹄の分節状硬化症、細管壁の上皮化生及び間隙線維症であった。これらの硬化及び化生病変は、糖尿病の腎臓疾患で観察される病状を連想させる。図８Ｂは、８カ月間のコントロール食ラットからの組織学的に正常な糸球体を含む画像である。
図９は、ＦＬを与えた後のラット腎臓からの糸球体及び細管画分中の３ＤＧ及び３ＤＦレベルのグラフ的比較である。
図１０は、ヒトアマドラーゼ（フルクトサミン−３−キナーゼ）の核酸配列（配列番号１）、ＮＣＢＩ寄託番号ＮＭ ０２２１５８を表す画像である。染色体１７上のヒト遺伝子の寄託番号は、ＮＴ ０１０６６３である。
図１１は、ヒトアマドラーゼ（フルクトサミン−３−キナーゼ）のアミノ酸配列（配列番号２）、ＮＣＢＩ寄託番号ＮP ０７１４４１を表す像である。
図１２は、コラーゲンの架橋に及ぼす３ＤＧの効果、及び３ＤＧが誘導する架橋をアルギニンが阻害することを実証するポリアクリルアミドゲルの画像である。Ｉ型コラーゲンを、アルギニンの存在又は不存在下で３ＤＧにより処理した。サンプルを臭化シアン（ＣＮＢｒ）分解し、１６．５％ＳＤＳ Ｔｒｉｓ−トリシンゲルで電気泳動を行い、次いでゲルを銀染色技術により処理し、蛋白質を視覚化した。レーン１は分子量マーカーの標準を含む。レーン２及び５はＣＮＢｒ分解後の１０及び２０μｌのコラーゲン混合物を含む。レーン３及び６は、３ＤＧで処理し、ＣＮＢｒで分解したコラーゲン混合物を含み、それぞれ１０及び２０μｌがかけられた。レーン４及び７は、それぞれ５ｍＭ ３ＤＧ及び１０ｍＭアルギニンとインキュベートし、ＣＮＢｒで分解したコラーゲン混合物を含み、それぞれ１０及び２０μｌがかけられた。
図１３は、アマドラーゼ／フルクトサミンキナーゼのｍＲＮＡがヒトの皮膚に存在することを実証するアガロースゲルの画像である。ＲＴ−ＰＣＲを利用し、ＰＣＲ用鋳型を調製するための基として公開されたアマドラーゼ配列を使用した。ＰＣＲ反応に用いたプライマー（実施例参照）に基づくと、ゲル中の５１９塩基対（ｂｐ）断片の存在はアマドラーゼｍＲＮＡの存在を示唆する。５１９塩基対（ｂｐ）断片により示唆されるアマドラーゼｍＲＮＡの存在に基づくアマドラーゼの発現が、腎臓（レーン１）及び皮膚（レーン３）で見られた。５１９塩基対（ｂｐ）断片は、プライマーを含むが鋳型は含まないコントロールレーン（レーン２及び４）では見られなかった。レーン５はＤＮＡ分子量マーカーを含んだ。
図１４は、ＤＹＮ１２（３−Ｏ−メチルソルビトールリシン）処置が、皮膚の弾力に及ぼす効果のグラフによる具体的説明である。
糖尿病又は正常ラットをＤＹＮ１２（５０ｍｇ／ｋｇ毎日）又は生理食塩水で８週間処置し、次に皮膚の弾力試験にかけた。使用した４グループは、糖尿病コントロール（生理食塩水注射；黒色バー）、ＤＹＮ１２処置糖尿病（白抜きバー）、正常動物コントロール（生理食塩水注射；点描バー）及びＤＹＮ１２で処置した正常動物（斜線バー）を含んだ。データはキロパスカル（ｋＰＡ）で表す。
図１５は、ＤＹＮ１２（３−Ｏ−メチルソルビトールリシン）処置が皮膚の弾力に及ぼす効果のグラフによる具体的説明である。糖尿病又は正常ラットをＤＹＮ１２（５０ｍｇ／ｋｇ毎日）又は生理食塩水で８週間処置し、次に皮膚の弾力試験にかけた。使用した４グループには、（生理食塩水注射；黒色バー）、ＤＹＮ１２処置糖尿病（白抜きバー）、正常動物コントロール（生理食塩水注射；点描バー）及びＤＹＮ１２で処置した正常動物（斜線バー）を含んだ。データはキロパスカル（ｋＰＡ）で表し、各特定グループの被検体で得られた結果の平均として表す。測定は被検体の後脚で行い、又技師により拘束され警戒している動物で行った。
図１６は、腎臓での新規な代謝経路の略図である。腎臓中の３ＤＧの生成は内因性の糖化蛋白質又は食物由来の糖化蛋白質のいずれかを使用して起こる。内因的経路を介してのグルコース及びリシンの化学結合が、糖化蛋白質を生成する。又一方、糖化蛋白質は食物源から得ることもできる。糖化蛋白質の異化は、結果的にフルクトースリシンを生成し、次にアマドラーゼがこれに作用する。フルクトサミン−３−キナーゼであるアマドラーゼは、両経路の一部である。アマドラーゼはフルクースリシンをリン酸化し、フルクトースリシン−３−ホスフェートを生成し、次にこれは３−デオキシグルコソン（３ＤＧ）に転換され、リシン及び無機ホスフェートの副産物を生成する（非常に少量のフルクトースリシン（全フルクトースリシン＜５％）が非酵素的経路により３ＤＧに転換され得る）。次いで３ＤＧは３−デオキシフルクトース（３ＤＦ）への転換により解毒されるか、あるいは活性酸素種（ＲＯＳ）及び後期糖化産生物（ＡＧＥ）の生成に進む。図１６に示すように、ＤＹＮ１２（３−Ｏ−メチルソルビトールリシン）は、フルクトースリシンに対するアマドラーゼの作用を阻害し、ＤＹＮ１００（アルギニン）は３ＤＧが介在するＲＯＳ及びＡＧＥの生成を阻害する。
図１７は、活性酸素種（ＲＯＳ）により影響を受ける疾患の略図である。３ＤＧはＲＯＳを直接生成することができ、又はＲＯＳを生成することができる糖化の進んだ最終生成物を生成することができる。ＲＯＳは、次いで図に示す種々の疾患を進行させる原因となる。
図１８は、本発明の実施例による付加物形成及び付加物形成阻害の両方の略図である。３ＤＧは蛋白質上に１級アミノ基と付加物を形成することができる。蛋白質−３ＤＧ付加物形成はシッフ塩基を生成し、この平衡は図１８に示される。蛋白質−３ＤＧシッフ塩基付加物は、上記の第１蛋白質−３ＤＧシッフ塩基付加物に関与した３ＤＧ分子による第２の蛋白質−３ＤＧ付加物の生成により架橋蛋白質を生成することができ、これにより「３ＤＧブリッジ」が１つの蛋白質の２つの１級アミノ基間に形成する（経路「Ａ」）。あるいはその架橋は離れた蛋白質の２つの１級アミノ基の間で起こり、２つの離れた蛋白質の２つの１級アミノ基の間に「３ＤＧブリッジ」を形成し、蛋白質分子の架橋対を生じさせる。第１の蛋白質−３ＤＧシッフ塩基付加物が、経路「Ａ」で示される架橋蛋白質を形成することを防ぐことができる。例えば、その蛋白質の架橋は、図１８の経路「Ｂ」で具体的に説明するように、グルタチオン又はペニシラミンなどの求核剤により阻害することができる。その求核剤は、第２シッフ塩基を生成する原因となる３ＤＧ炭素原子と反応し、その炭素原子がシッフ塩基蛋白質−３ＤＧ付加物を形成することを防止し、そしてこれにより蛋白質の架橋化を防止する。
図１９は、Col 1A1及びGAPDHリボ核酸をプローブとするサンプルを用いたノーザンブロットである。
図２０は、アマドラーゼ活性への銅の効果のグラフによる具体的説明である。データは硫酸銅濃度条件(X軸)のときのアマドラーゼ活性パーセント活性(Y軸)としてプロットされた。銅を加えない場合は、活性が１００％であった。銅の濃度の増加に従って、アマドラーゼ活性は阻害された。
図２１は、ヒトの皮膚の線維芽細胞におけるコラーゲン生成へのフルクトースリシンが及ぼす影響のプロットである。線維芽細胞をフルクトースリシン又はマグネシウムアスコルビン酸(As-PM)を用いて７２時間処理した。各々のバーは、Ｉ型コラーゲンレベルの平均値±SDを表し、線グラフは細胞数の平均を表す(n=3)。コントロールに対し、*：P<0.05,***：P<0.001（ダネット多重比較試験）。
図２２は、ヒトの皮膚の線維芽細胞におけるコラーゲン生成へのDYN-12のプロットである。線維芽細胞をDYN-12又はマグネシウムアスコルビン酸(As-PM)を用いて７２時間処理した。各々のバーは、Ｉ型コラーゲンレベルの平均値±SDを表し、線グラフは細胞数の平均を表す(n=3)。コントロールに対し、*：P<0.05,***：P<0.001（ダネット多重比較試験）。
【発明を実施するための最良の形態】
【０１３９】
本発明の詳細な説明：
本発明は下記開示により初めて記載されるものであり、驚くべきことにアマドラーゼ経路を経由するフラックス（流れ）を変化させるとコラーゲンのｍＲＮＡの変化を生じ、エラスチンの必須の構成成分であるデスモシンの形成が起きることが発見された。
【０１４０】
本発明は従って、アマドラーゼ経路を経由するフラックスを増加することによりコラーゲンのためのｍＲＮＡのレベルを減少させる組成物及び方法を含み、その組成物及び方法では、ＦＬ３Ｋへ基質として働き、ＦＬ３Ｋをアップレギュレートし、リシンを遊離する化合物を哺乳類へ導入する。
【０１４１】
本発明は更に、化合物の導入によるコラーゲンのためのｍＲＮＡの過度の産生に関する疾患の治療を含み、その治療はアマドラーゼ経路を経由するフラックスを増加し、その結果コラーゲンのためのｍＲＮＡのレベルを減少させる。コラーゲンＩ型の過剰レベルに関する疾患として、強皮症、心内膜心筋線維症、ＡＲＤＳ及び肺線維症が挙げられる。本発明は又、増加したアマドラーゼ経路を経由するフラックスにより生成された３ＤＧを除去し、３ＤＧの毒性効果を阻止することも含む。
【０１４２】
本発明は更に、コラーゲンのためのｍＲＮＡのレベルの減少又は低下に関する疾患の治療に関する。これら疾患は、特にＩ型コラーゲンでは皮膚及び動脈での老化並びに近視、II型コラーゲンでは骨関節炎及び椎間板疾患を含む。本発明は従って、コラーゲンのためのｍＲＮＡのレベルを増加させる組成物及び方法を含み、それはアマドラーゼ経路を経由するフラックスの減少により行われ、その組成物及び方法では、ＦＬ３Ｋへ基質として働き、３ＤＧの生成及び／又は遊離リシンを生じない化合物を哺乳類へ導入する。その化合物はＦＬ３Ｋを抑制する一方、アマドラーゼ経路を経由するフラックスを減少させる。
【０１４３】
本発明はコラーゲン移植片の成功を強化する組成物及び方法に関し、それはアマドラーゼ経路を経由するフラックスを減少させてコラーゲンのためのｍＲＮＡのレベルを増加させる化合物の添加を含み、その組成物及び方法ではコラーゲン移植片を受ける哺乳類への上記化合物を導入するか、哺乳類への移植前の移植片へ上記化合物を組み合わせる。本発明の化合物は、３ＤＧの生成及び／又は遊離リシンを生じないＦＬ３Ｋのための基質を含み、それはＦＬ３Ｋを抑制する化合物及びアマドラーゼ経路を経由するフラックスを減少させる化合物である。
【０１４４】
本発明は更に、糖尿病ではデスモシンレベルが上昇しており、これらレベルはアマドラーゼ経路に影響する方法及び化合物により減少できることの発見に基づく。本発明は従って、酵素フルクトサミン３キナーゼを経由するフラックスを阻止する組成物及び方法を含み、酵素フルクトサミン３キナーゼを抑制し、３ＤＧの形成を阻止し、３ＤＧを不活化する。酵素を抑制する化合物及び３ＤＧを不活化する化合物はここで詳細に記載され、かつ国際特許出願番号PCT/US03/12003(国際公開WO03/089601パンフレット、特許文献２）及び米国特許6,006,958明細書（特許文献１）にも記載され、ここで資料として使用する。
【０１４５】
本発明は更に、３ＤＧ形成を抑制してエラスチン含有器官から３ＤＧを除去する組成物及び方法、並びにエラスチン含有器官からの３ＤＧの解毒及び除去速度を増加する組成物及び方法に関する。
【０１４６】
本発明は更に、弾性のない老化した皮膚及び弾性のないエラスチン含有器官の発達は、酵素フルクトサミン３キナーゼを経由するフラックスを抑制し、酵素フルクトサミン３キナーゼを抑制し、３ＤＧの形成を阻止し、かつ３ＤＧを不活化することによりデスモシンの形成を阻止する組成物及び方法により防止され減少させることができるという考えに基づく。エラスチン含有器官には、体の内部構造及びその器官、特に皮膚、肺、靱帯、血管、及び弾性軟骨を形成する細胞外マトリックスが含まれる。
【０１４７】
本発明は又、所定のエラスチン関連疾患を予防し治療する方法及び組成物に関する。エラスチン関連疾患として、アテローム性動脈硬化症、ブシュケ‐オレンドルフ症候群、皮膚弛緩症、気腫、マルファン症候群、メンケス症候群、弾性線維仮性黄色腫、大動脈弁上狭窄症及びウィリアムス症候群が挙げられる。
従って本発明は、エラスチン含有器官中のデスモシン産生の増加を抑制する方法及び組成物、並びに上記エラスチン含有器官から３ＤＧを除去する方法及び組成物に関する。本発明は又、酵素フルクトサミン３ホスフェートキナーゼを抑制する銅の組成物及び銅含有化合物に関する。
【０１４８】
特記しない限り、ここで使用される全ての技術的及び科学的用語は、本発明の属する当分野で通常理解されるものと同一の意味を有する。ここで記載されたものと等価のいずれの方法及び材料が本発明の実施又は試験で使用できるが、ここでは好ましい方法及び材料を記載する。
【０１４９】
ここで使用する以下の各用語は、本明細書で下記意味を有する。
ここで使用する冠詞「ａ」及び「ａｎ」は、１以上（即ち少なくとも１つ）の物体の文法的対象を指す。例えば「ａｎ エレメント」は、１つのエレメント又は１を超えるエレメントを意味する。
ここで使用する用語「３ＤＧの蓄積」又は「α−ジカルボニル糖の蓄積」とは、経時的な３ＤＧ及び／又はα−ジカルボニル糖のレベルの検出可能な増加を指す。
【０１５０】
ここで使用する「α−ジカルボニル糖」とは３−デオキシグルコソン、グリオキサール、メチルグリオキサール及びグルコソンを含む化合物のファミリーを指す。
「α−ジカルボニル糖が関連する皮膚の皺、老化、疾患又は障害のパラメーター」とは、３ＤＧレベル、３ＤＦレベル、フルクトサミンキナーゼレベル、蛋白質の架橋化及びα−ジカルボニル糖が関連する皮膚の皺、老化、疾患又は障害の他のマーカー又はパラメーターを含む本発明に記載する生物学的マーカーを指す。
【０１５１】
ここで使用する「３−デオキシグルコソン」又は「３ＤＧ」は、１，２−ジカルボニル−３−デオキシ糖（３−デオキシヘキュロソン(deoxyhexulosone)としても知られている）を指し、これは酵素的経路を介して形成することができ、又は非酵素的経路を介して形成することができる。本記載では、用語３−デオキシグルコソンは、図１に記載する非酵素的経路、及び図２に記載するＦＬ３Ｐの分解を生じる酵素的経路を含む経路を介して形成することができるα−ジカルボニル糖である。３ＤＧの別の供給源は食物である。３ＤＧはα−ジカルボニル糖ファミリーの一員であり、２−オキソアルデヒドとしても知られている。
【０１５２】
ここで使用する「３ＤＧに関連する」又は「３ＤＧに関連する」疾患又は障害とは、３ＤＧにより発病する、発症する、又は関連する疾患、症状又は障害を指し、強化された３ＤＧの産生、生産、形成及び蓄積に関する欠陥、並びに３ＤＧの分解、解毒、結合及びクリアランスのレベルの減少により引き起こされ、介され、又は関連する疾患等を含む。
化合物の「３ＤＧ阻害（抑制）量」又は「α−ジカルボニル阻害（抑制）量」とは、３ＤＧ又は別のα−ジカルボニル糖の産生、形成、蓄積及び／又は機能等の目的の機能又はプロセスを阻害するために充分な化合物の量を指す。
【０１５３】
用語「３ＤＧ蛋白質/ペプチド付加物」は、３ＤＧと蛋白質又はペプチド上のアミノ酸残基との間に形成された共有結合を指す。
「３−Ｏ−メチルソルビトールリシン（３−Ｏ−Ｍｅ−ソルビトールリシン）」は、ここで記載するフルクトサミンキナーゼの阻害剤である。これは用語「ＤＹＮ１２と互換的に使用する。
【０１５４】
ここで使用する「疾患又は障害の症状を緩和する」とは、症状の重篤度を下げることを意味する。
ここで使用する用語「ＡＧＥ−蛋白質」（後期糖化産生物で修飾された蛋白質）は、糖と蛋白質との間の反応の生成物を指す[Brownlee, M. 「糖尿病性合併症の糖化産物及び発病」1992. Diabetes Care 15(12): p.1835-43; Niwa, T. et al.「尿毒症の患者におけるマイラード反応の有効な蛋白質架橋中間体 ある３−デオキシグルコソンの血清レベル上昇」1995. Nephron 69(4): p.438-43]。例えば蛋白質のリシン残基とグルコースとの間の反応は、フルクトース−リシン（ＦＬ）の形成では止まらない。ＦＬは多数の脱水を受け、そして転位反応により非酵素的な３ＤＧを生成し、これは遊離アミノ基と再び反応して関与する蛋白質の架橋化及び褐変を導く。ＡＧＥは限定するわけではないが図１６に示すような３ＤＧと他の化合物との反応から形成される生成物も含む。
【０１５５】
ここで使用する「アマドラーゼ」は、３−ＤＧ生産の原因である蛋白質であるフルクトサミンキナーゼを指す。特に、これは、高エネルギーホスフェート源が更に供給された時、上で定義したＦＬをＦＬ３Ｐに酵素的に転換することができる蛋白質を言う。
更に、この酵素は高度なエネルギーホスフェート源を供給された場合にフルクトースをフルクトース−３−ホスフェートへ転換できる。
ここで使用する用語「アマドリ生成物」は、限定するわけではないがフルクトースリシン等のケトアミンを指し、グルコースとリシン含有蛋白質のε−ＮＨ2基との相互作用後の転位生成物である。
【０１５６】
ここで使用する「アミノ酸」は以下の表に示すように、それらの完全名により、それらに対する３文字コードにより、又はそれらに対する１文字コードにより表される：
【０１５７】
【表１】
2007523908.tif 000026
【０１５８】
用語「結合」は、限定するわけではないが酵素の基質への、リガンドのレセプターへの、抗体の抗原への、蛋白質のＤＮＡ結合ドメインのＤＮＡへの、及びＤＮＡ又はＲＮＡ鎖の相補鎖への付着等の分子の互いの付着を指す。
ここで使用する「結合パートナー」とは、別の分子へ結合することができる分子を指す。
【０１５９】
ここで使用する用語「生物学的サンプル」は、皮膚、毛髪、組織、血液、血漿、細胞、汗及び尿を含む生きている有機体から得られるサンプルを指す。
ここで使用する用語「クリアランス」は、拡散、剥離、血流による除去、及び尿中への排出により、又は他の汗若しくは他の流体を介するような化合物又は分子の除去の生理学的プロセスを指す。
【０１６０】
遺伝子の「コード領域」は、遺伝子の転写により生成されるｍＲＮＡ分子のコード領域にそれぞれ相同的若しくは相補的な遺伝子の、コード鎖のヌクレオチド残基及び非コード鎖のヌクレオチドからなる。
ここで使用する「相補的」とは、２つの核酸間、例えば２つのＤＮＡ分子の間のサブユニット配列の相補性の広い概念を指す。両分子中のヌクレオチド位が、通常は互いに塩基対合できるヌクレオチドにより占められている場合、核酸はその位置で互いに相補的であると考えられる。即ち、２つの核酸は、各分子において対応する位置の実質的数（少なくとも５０％）が、通常、互いに塩基対合できるヌクレオチド（例えばＡ：Ｔ及びＧ：Ｃヌクレオチド対）により占有されている時、互いに相補的である。このように、第１核酸領域のアデニン残基は、第１領域にアンチパラレルである第２核酸領域の残基と、この残基がチミン又はウラシルならば特異的な水素結合（「塩基対」）を形成することができることが知られている。同様に第１核酸鎖のシトシン残基は、第１鎖にアンチパラレルである第２核酸鎖の残基と、この残基がグアニンならば塩基対を形成することができることが知られている。２つの領域がアンチパラレルの様式で配置された時、第１領域の少なくとも１つのヌクレオチド塩基が第２領域の残基と塩基対合できる場合、核酸の第１領域は、同じか又は異なる核酸の第２領域に相補的である。好ましくは第１領域は第１部分を含み、第２領域は第２部分を含み、かつ第１及び第２部分がアンチパラレルの様式で配置された時、少なくとも約５０％、好ましくは少なくとも約７５％、更に好ましくは少なくとも約９０％、特に好ましくは少なくとも約９５％の第１部分のヌクレオチド残基が、第２部分のヌクレオチド残基と塩基対合することができる。最も好ましくは第１部分のすべてのヌクレオチド残基が、第２部分のヌクレオチドと塩基対合することができる。
【０１６１】
ここで使用する「化合物」は、通常は薬剤又は薬剤として使用できる候補物質と考えられる任意の種類の物質又は薬剤(agent)、並びに上記の組み合わせ及び混合物、化合物の改質された変更体又は誘導体を指す。
ここで使用する用語「保存的変異」又は「保存的置換」とは、別の生物学的に類似する残基によるアミノ酸残基の置換を指す。保存的変異又は置換は、ペプチド鎖の形状を有意に変え難い。保存的変異又は置換の例には、イソロイシン、バリン、ロイシン若しくはアラニン等の疎水性残基の別の残基への置換、又はアルギニンからリシンへの、グルタミン酸からアスパラギン酸への、又はグルタミンからアスパラギンへ等の１つの荷電したアミノ酸の別のアミノ酸への置換を含む。
【０１６２】
ここで使用される用語「デスモシン」は、エラスチンに特有のテトラ機能性架橋体を言う。デスモシン及びイソデスモシンは４個のLys残基から形成されるが、２個のトロポエラスチン鎖とのみ結合する。３個のアリシン及び１個のLys残基が、デスモシン及びイソデスモシンそれぞれに寄与する。LysのＣ−末端側上の芳香族残基(Tyr又はPhe)の存在は、リシルオキシダーゼによる酸化を防止すると考えられる。これはリシノノルロイシン形成に好ましく、従ってデスモシン及びイソデスモシン形成へ結びつく。
３ＤＧの「解毒」とは、３ＤＧのその正常な機能を行うことができない形態への分解又は転換を指す。解毒は「薬理学的解毒」、又は３ＤＧの解毒を引き起こすことができる代謝経路を含む任意の組成物又は方法によりもたらされるか、又は刺激することができる。
【０１６３】
３ＤＧ又は他のα−ジカルボニル糖の「薬理学的解毒」とは、化合物が３ＤＧに結合又は修飾し、次いでこれを不活性となるようにするか、又は限定するわけではないが排出等の代謝的経路により除去されるプロセスを指す。
【０１６４】
ここで使用される用語「糖尿病」は、インスリン分泌、インスリン機能又はその両方の欠陥から生じる炭化水素、脂肪及び蛋白質代謝障害を伴う慢性高血糖症に特徴付けられる多数の病因の代謝的障害を意味する。「糖尿病性合併症」は、網膜症、腎症、神経障害痴呆及びアテローム性動脈硬化症を意味する。
【０１６５】
「疾患」は、動物が恒常性を維持することができず、そして疾患が緩和されなければ、動物の健康が悪化し続ける、動物の健康状態を指す。ここで使用される正常な加齢は、疾患に含まれる。
動物の「障害」は、動物が恒常性を維持することができるが、動物の健康状態は障害が無い場合よりも順調ではない、動物の健康状態を指す。未治療のままでも、障害は必ずしも動物の健康状態に更に低下を引き起こさない。
【０１６６】
ここで使用する用語「ドメイン」は、限定するわけではないが疎水性、極性、球状及びらせん状ドメイン等の共通する物理化学的特徴、又はリガンド結合、シグナル伝達、細胞透過等等の特性を共有する分子又は構造の部分を指す。結合ドメインの具体例として、限定するわけではないが、ＤＮＡ結合ドメイン及びＡＴＰ結合ドメインが挙げられる。
【０１６７】
ここで使用する用語「エラスチン」は、結合組織(軟骨、骨、脂肪及び神経及び血管を体中で支持する組織等)の細胞外マトリックスで観察され、繰り返し及び可逆的に変形できる能力を求められる組織へ弾性及び弾性を与える不溶性蛋白質を意味する。
ここで使用する用語「エラスチン含有器官」は、例えば、肺、心臓、腸、血管、皮膚及び蛋白質エラスチンを含む体内の全ての他の器官の結合組織の細胞外マトリックスを意味する。
【０１６８】
化合物の「有効量」又は「治療的有効量」は、化合物が投与される個体に有益な効果を提供するか、又は化粧料として治療的効果を提供する外観を与えるために充分な化合物の量である。
ここで使用する用語「エフェクタードメイン」は、生物学的経路を調節することができる細胞質中のエフェクター分子、化学物質又は構造と直接相互作用することができるドメインを指す。
【０１６９】
「コードする」とは、特定のヌクレオチド配列（即ちｒＲＮＡ、ｔＲＮＡ及びｍＲＮＡ）又は特定のアミノ酸配列のいずれか、及びそれらから生じる生物学的特性を有する、生物学的プロセスにおける他のポリマー又は高分子の産生に鋳型として働くための、遺伝子、ｃＤＮＡ又はｍＲＮＡ等のポリヌクレオチド中のヌクレオチドの特別な配列の固有な特性を指す。即ち遺伝子は、その遺伝子に対応するｍＲＮＡの転写及び翻訳が、細胞又は他の生物学的系で蛋白質を生産する場合、その蛋白質をコードする。コード鎖（そのヌクレオチド配列はｍＲＮＡ配列と同一であり、通常は配列表に提供されている）、及び非コード鎖（遺伝子又はｃＤＮＡの転写用鋳型として使用される）の両方が、その遺伝子又はｃＤＮＡの蛋白質又は他の産物をコードすると言うことができる。特記しない限り、「アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列」は、互いの変性変異体であり、そして同じアミノ酸配列をコードするすべてのヌクレオチド配列を含む。蛋白質及びＲＮＡをコードするヌクレオチド配列はイントロンを含むことができる。
【０１７０】
ここで使用する用語「線維症」は、炎症の主要な症状、即ち機能損失の一つの原因ともなる瘢痕を言う。この損失は、実質型組織(例えば、収縮性心筋線維)の転位又は瘢痕組織により生じる物理的問題のいずれかを原因とする。例えば、瘢痕組織は成熟するにつれて、収縮する。従って瘢痕組織は、それが取り囲む器官を締め付けるか(いわゆるナプキンリング瘢痕又は腸の線維症)動きを妨げる(例えば、それが関節を横切る場合)。
ここで使用する用語「自由な(floating)」とは、置換基が環構造上に任意の可能な炭素結合点で結合することができるような環構造への置換基の結合を指す。「固定化された」結合とは、置換基が特定の部位で結合することを意味する。
【０１７１】
用語「３ＤＧの形成」は、産生経路を介して必ずしも形成される必要はないが、前駆体の自発的な、又は誘導された分解等の経路を介して形成することができる３ＤＧを指す。
ここで使用する蛋白質又はペプチドに適用する用語「断片」は、通常少なくとも約３〜１５アミノ酸長、好ましくは少なくとも約１５〜２５アミノ酸、更に好ましくは少なくとも約２５〜５０アミノ酸長、更に好ましくは少なくとも約５０〜７５アミノ酸長、特に好ましくは少なくとも約７５〜１００アミノ酸長、最も好ましくは１００アミノ酸長を超えてもよい。
【０１７２】
核酸に適用するここで使用する用語「断片」は、通常、少なくとも約２０ヌクレオチド長、典型的には少なくとも約５０ヌクレオチド長、更に典型的には約５０ヌクレオチド〜約１００ヌクレオチド、好ましくは少なくとも約１００〜約２００ヌクレオチド、更に好ましくは少なくとも約２００〜約３００ヌクレオチド、更に好ましくは少なくとも約３００〜約３５０ヌクレオチド、更に少なくとも約３５０〜約５００ヌクレオチド、更に好ましくは少なくとも約５００〜約６００ヌクレオチド、更に好ましくは少なくとも約６００ヌクレオチド〜約６２０ヌクレオチド、更に好ましくは少なくとも約６２０〜約６５０、最も好ましくは核酸断片は約６５０ヌクレオチド長を超えてもよい。
【０１７３】
ここで使用する用語「フルクトース−リシン（ＦＬ）」は、蛋白質／ペプチドに包含されていても、又は蛋白質／ペプチドから蛋白質分解的消化により放出されていてもよい任意の糖化リシンを示すために使用する。この用語は、フルクトース−リシンと一般に呼ばれる化学構造に特に限定されず、フルクトース−リシンは蛋白質リシン残基とグルコースとの反応から形成されると報告されている。上記のように、リシンのアミノ基は広い種々の糖と反応することができる。実際にある報告では、グルコースが試験した１６種の異なる糖の群中で最も反応性の低い糖であることが示された[Bunn, H.F. and Higgins, P.J. 「単糖の蛋白質との反応：可能な進化的顕著性」 1981. Science 213(4504): p.222-4]。従って、用語フルクトースリシンが、天然であってもなくてもこの記載ですべての他の糖の縮合生成物であるとして挙げられていたとしても、グルコースと同様にガラクトースとリシンとから形成されるタガトース−リシンも含まれる。ここでの記載から、蛋白質−リシン残基と糖との間の反応には多くの反応段階が関与していると理解できるだろう。この反応順序の最終段階には蛋白質の架橋化及びＡＧＥ−蛋白質として知られている多量体種（その幾つかは蛍光性である）の生成が含まれる。いったんＡＧＥ蛋白質が形成されれば、そのようなＡＧＥ−蛋白質の蛋白質分解的消化は糖分子に共有結合したリシンを生じない。従って、これらの種はここで使用するような「フルクトース−リシン」の概念中には含まれない。
【０１７４】
ここで使用する用語「フルクトース−リシン−３−ホスフェート」は、高エネルギーリン酸基をＡＴＰからＦＬに酵素的に転移することにより形成される化合物を指す。ここで使用する用語、フルクトース−リシン−３−ホスフェート（ＦＬ３Ｐ）は、遊離体でも蛋白質に結合していても、酵素的に形成され得るすべてのリン酸化されたフルクトース−リシン成分を含むことを意味する。
【０１７５】
ここで使用する「フルクトース−リシン−３−ホスフェートキナーゼ」（ＦＬ３Ｋ）は、アマドラーゼ等の１以上の蛋白質を指し、これは高エネルギーホスフェート源を供給した時、ここで記載するようにＦＬをＦＬ３Ｐに酵素的に転換することができる。この用語は「フルクトース−リシンキナーゼ（ＦＬＫ）」、「フルクトサミン−３−キナーゼ（Ｆ３Ｋ）」及び「アマドラーゼ」と互換的に使用する。
【０１７６】
ここで使用する用語「アマドリ経路」又は「アマドラーゼ経路」とは、ヒト皮膚、腎臓、肺及び他のコラーゲン含有器官中に存在し、他の組織でも存在する可能性のあるリシン回復経路を言い、それは非修飾（変性）リシンを遊離のアミノ酸としてポリペプチド鎖又は蛋白質中に組み込まれた形で再生するものであり、基質及び産物を含む。従って上記経路は、リシン及び３ＤＧの産生、製造又は形成へ導く経路又は事象を開始又は刺激する方法又は手段を含む。この経路は、フルクトース−３−ホスフェートを形成するために結合されたアミノ酸を必要としないフルクトースのホスホリル化を含み(フルクトース−３−キナーゼ活性)、それは次に分解して３ＤＧを生成することが理解される。
【０１７７】
ここで使用する用語「糖化された食物」とは、標準的な蛋白質の割合が糖化蛋白質に置き換わっているいずれの所定食物を指す。表現「糖化された食物」及び「糖化蛋白質食」は本明細書で互換的に使用する。
ここで使用する「糖化されたリシン残基」とは、還元糖とリシン含有蛋白質との反応により生成される安定な付加産物の変性されたリシン残基を指す。
【０１７８】
蛋白質のリシン残基の大部分は、正に荷電したアミノ酸について予想されるように蛋白質の表面上に位置する。即ち血清又は他の生物学的流体と接触する蛋白質上のリシン残基は、溶液中の糖分子と自由に反応することができる。この反応は多段階で起こる。最初の段階は、リシンの遊離アミノ基と糖のケト基との間のシッフ塩基の形成を含む。この初期生成物は、次にアマドリ転位を受けて安定なケトアミン化合物を生成する。
【０１７９】
この一連の反応は、種々の糖で生じることができる。関与する糖がグルコースである時、最初のシッフ塩基生成物は、グルコースのＣ−１上のアルデヒド部分とリシンのアミノ基との間のイミン形成を含む。アマドリ転位は、フルクトースのＣ−１炭素上へ結合したリシンの形成を生じ、それはここでフルクトース−リシン又はＦＬと呼ぶ１−デオキシ−１−（アミノリシン）−フルクトースである。同様の反応が他のアルドース糖、例えばガラクトース及びリボースとの間にも起こる[Dills, W.L., Jr. 「蛋白質フルクトース化：フルクトース及びマイラード反応」1993. Am J Clin Nutr 58(5 Suppl): p.779S-787S]。本発明の目的には、任意の還元糖と蛋白質リシンのγアミノ残基との反応の初期生成物は、修飾された糖分子の実際の構造にかかわらず、糖化されたリシン残基の概念に含まれる。
ここで使用される「グアニジノ」は、Ｎ（Ｒ”）−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ2であり、Ｒ”はＨ、又は直鎖状若しくは分岐状鎖アルキル基（Ｃ1−Ｃ4）を表す。
【０１８０】
ここで使用する「相同的」とは、２つのポリマー性分子の間、例えば２つの核酸分子、例えば２つのＤＮＡ分子若しくは２つのＲＮＡ分子、又は２つのポリペプチド分子間のサブユニット配列の類似性を指す。２つの両方の分子中のサブユニット位が同じモノマー性サブユニットにより占められている場合、例えば２つの各ＤＮＡ分子の位置がアデニンにより占められている場合、それらはその位置で相同的である。２つの配列の相同性は、対合又は相同的位置の数の直接関数であり、例えば２つの化合物の配列位置の半分（例えば１０個のサブユニット長のポリマーの５個の位置）が相同的ならば、２つの配列は５０％相同的であり、もし位置の９０％、例えば１０のうちの９が対合又は相同的ならば、２つの配列は９０％の相同性を共有する。例として、DNA 配列３’ＡＴＴＧＣＣ５’及び３’ＴＡＴＧＧＣは５０％の相同性を共有する。
【０１８１】
ここで使用する「相同的」又は「相同性」は、「同一性」と同義的に使用する。２つのヌクレオチド若しくはアミノ酸配列間の同一性又は相同性の割合の決定は、数学的アルゴリズムを使用して計算することができる。例えば２つの配列を比較するために有用な数学的アルゴリズムは、Karlin及びAltschul(Altschul ら, 1990, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 87:5509-13)を、Karlin及びAltschul (Karlin ら, 1993, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90:5873-7)により改良したものである。このアルゴリズムはAltschulらのＮＢＬＡＳＴ及びＸＢＬＡＳＴプログラムに組み込まれ(Altschul ら, 1990, J. Mol. Biol. 215:403-10)、例えばアメリカ国立バイオテクノロジー情報センター（ＮＣＢＩ）のウェッブサイトからアクセス可能である。ＢＬＡＳＴヌクレオチド検索は、ＮＢＬＡＳＴプログラム（ＮＣＢＩのウェブサイトでは「ｂｌａｓｔｎ」と命名されている）を用いて、以下のパラメーターを使用して行える：ギャップペナルティー＝５；ギャップエクステンションペナルティー＝２；ミスマッチペナルティー＝３；マッチリワード＝１：期待値１０．０；及びワードサイズ＝１１：その結果、ここで記載する核酸に対して相同的なヌクレオチド配列を得ることができる。ＢＬＡＳＴ蛋白質検索は、ＸＢＬＡＳＴプログラム（ＮＣＢＩのウェブサイトでは「ｂｌａｓｔｎ」と命名されている）又はＮＣＢＩ「ｂｌａｓｔｐ」プログラムを用いて、以下のパラメーターを使用して行える：期待値１０．０、ＢＬＯＳＵＭ６２スコアリングマトリックス：その結果、ここで記載する蛋白質分子に対して相同的なアミノ酸配列を得ることができる。比較の目的でギャプ化アライメントを得るために、ギャップ化ＢＬＡＳＴを、Altschulら(Altschulら、1997,Nucleic Acids Res.25:3389-3402)に記載されているように利用することができる。一方、ＰＳＩ−Ｂｌａｓｔ又はＰＨＩ−Ｂｌａｓｔは使用して、分子間(Id.)の顕著な関係及び、共通パターンを共有する分子間の関係を検出する反復調査を行うことができる。ＢＬＡＳＴ、ギャップ化ＢＬＡＳＴ、ＰＳＩ−Ｂｌａｓｔ及びＰＨＩ−Ｂｌａｓｔプログラムを利用する時、各プログラムのデフォルトパラメーター（例えばＸＢＬＡＳＴ及びＮＢＬＡＳＴ）を使用することができる。
【０１８２】
ここで使用する「３ＤＧを阻害する」とは、３ＤＧ産生、生産、形成、蓄積、又は機能を阻害する任意の方法又は技術、並びに３ＤＧの産生、形成、蓄積又は機能の誘導又は刺激を阻害する方法を指す。又この用語は３ＤＧ機能又は誘導を調節できる任意の代謝経路も指す。又この用語は３ＤＧを解毒することにより、又は３ＤＧのクリアランスを引き起こすことにより、３ＤＧ機能を阻害するための組成物又は方法も指す。阻害は直接的でも間接的でもよい。誘導とは３ＤＧの産生の誘導又は機能の誘導を指す。同様に文言「α−ジカルボニル糖を阻害する」とは、３ＤＧ、グリオキサール、メチルグリオキサール及びグルコソンを含むα−ジカルボニル糖ファミリーメンバーを阻害することを指す。
【０１８３】
ここで使用する用語「３ＤＧの蓄積を阻害する」とは、その結果がその組成物又は方法で処置しなかった組織中のレベルと比較して、調査又は処置した組織中で３ＤＧ若しくは機能性基修飾３ＤＧが低いレベルとなるように、３ＤＧの産生を減少させ、分解を増加し、又はクリアランスを増加する任意の組成物又は方法の使用を指す。同様に、文言「α−ジカルボニル糖の蓄積を阻害する」とは、３ＤＧ、グリオキサール、メチルグリオキサール及びグルコソン並びにそれらの中間体を含むα−ジカルボニル糖ファミリーメンバーの蓄積を阻害することを指す。
【０１８４】
ここで使用する「使用説明書」には、ここに述べる種々の疾患又は障害の緩和を行うキットの中の本発明のペプチドの有用性を伝えるために使用することができる刊行物、記録、図及び任意の表現媒体を含む。任意で又は交替で、使用説明書は哺乳類の細胞又は組織における疾患又は障害を緩和する１以上の方法を記載することができる。本発明のキットの使用説明書は例えば、特定の化合物発明を収めた容器に張り付けられ、又は特定の化合物を収めた容器と一緒に輸送されてもよい。あるいは使用説明書は、使用説明書及び本発明の化合物が受容者により一緒に使用されることを意図して、容器と別個に輸送することもできる。
【０１８５】
「単離された核酸」は、天然由来の状態でそれを挟む配列から分離された核酸セグメント又は断片、例えば通常は断片に隣接する複数の配列、例えば天然由来のゲノム中で断片に隣接する複数の配列から取り出されたＤＮＡ断片を指す。この用語は、核酸に自然に付随する他の構成成分、例えば細胞中で自然に付随するＲＮＡ若しくはＤＮＡ又は蛋白質から実質的に精製された核酸にも適用される。従ってこの用語は、例えばベクター中に、自律的に複製するプラスミド若しくはウイルス中に、又は原核若しくは真核生物のゲノムＤＮＡに組み込まれた組換えＤＮＡ、あるいは他の配列から独立して別個の分子として存在する（例えばｃＤＮＡ又はＰＣＲ若しくは制限酵素消化により生成されたゲノム若しくはｃＤＮＡ断片）組換えＤＮＡを含む。これは又更にポリペプチド配列をコードするハイブリッド遺伝子の一部である組換えＤＮＡも含む。
【０１８６】
ここで使用する用語「狼瘡」は、慢性でしばしば長期の、軽症から重篤症状まで特に女性が罹患する自己免疫性疾患を言う。全身性紅斑性狼瘡(SLE)は、広い範囲で発症するが、皮膚、関節、血液、及び腎臓中で最もしばしば発症する。
ここで使用する「修飾（変性）された」化合物は、化合物の機能性又は活性を増すか、又は変えるために、化学的に化合物を改変する等の化学的修飾（改質）でもよい、化合物の修飾（変性）又は誘導化を指す。
【０１８７】
用語「突然変異性」とは、化合物が突然変異を誘導するか、又はその頻度を上げる能力を指す。用語「核酸」は、通常大きなポリヌクレオチドを指す。
【０１８８】
用語「オリゴヌクレオチド」は典型的には、一般に約５０ヌクレオチドを超えない短いポリヌクレオチドを指す。ヌクレオチド配列がＤＮＡ配列（即ちＡ、Ｔ、Ｇ、Ｃ）により表される場合には、その表記は“Ｔ”が“Ｕ”により置換されたＲＮＡ配列（即ちＡ、Ｕ、Ｇ、Ｃ）も含むと理解されるべきである。
用語「ペプチド」は典型的には短いポリペプチドを指す。
【０１８９】
ここで使用する「透過(permeation)強化」及び「透過強化剤」とは、即ち薬剤が皮膚を通過して血流に入る速度が増すように、皮膚透過性の低い薬理活性のある薬剤に対して、皮膚の透過性を上昇させるプロセス及び添加材料に関する。「透過強化剤」は、「浸透(penetration)強化剤」と互換的に使用する。
【０１９０】
ここで使用する用語「医薬的に許容され得る担体」は、それと適切な化合物又は誘導体とを組み合わせることができ、そして組み合わせた後、適切な化合物を個体に投与するために使用することができる化学的組成物を意味する。
ここで使用する用語「生理学的に許容され得る」エステル又は塩は、医薬的組成物の他の成分と適合性があり、その組成物が投与される個体に対して有害ではない活性成分のエステル又は塩形態を意味する。
【０１９１】
「ポリペプチド」は少なくとも２個のアミノ酸残基からなるポリマー、関連する天然由来の構造的変異体、及びペプチド結合を介して結合された合成非天然類似体、関連する天然由来の構造的変異体、及びその合成非天然類似体を指す。
「ポリヌクレオチド」は核酸の１本鎖又は平行及びアンチパラレル鎖を意味する。従って１のポリヌクレオチドは、１本鎖又は２本鎖核酸のいずれかでよい。
【０１９２】
「プライマー」は、目的のポリヌクレオチド鋳型に特異的にハイブリダイズし、そして相補的ポリヌクレオチドの産生のための開始点を提供することができるポリヌクレオチドを指す。そのような産生は、ポリヌクレオチドプライマーが、産生が誘導される条件下、即ちヌクレオチド、相補的ポリヌクレオチド鋳型及びＤＮＡポリメラーゼのような重合用薬剤の存在下に置かれた時に起こる。プライマーは典型的には１本鎖であるが、２本鎖でもよい。プライマーは典型的にはデオキシリボ核酸であるが、広い種々の産生及び天然由来のプライマーが多くの用途に有用である。プライマーは、それにハイブリダイズして産生の開始部位として役立つように設計された鋳型に相補的であるが、鋳型の正確な配列を反映する必要はない。そのような場合、プライマーの鋳型に対する特異的ハイブリダイゼーションは、ハイブリダイゼーション条件のストリンジェンシーに依存する。プライマーは例えば発色性、放射性又は蛍光性部分で標識し、そして検出可能な部分として使用できる。
【０１９３】
ここで使用する用語「プロモーター／調節配列」は、プロモーター／調節遺伝子配列に操作可能に結合された遺伝子産物の発現に必要な核酸配列を意味する。場合により、この配列はコアプロモーター配列でもよく、他の例ではこの配列はエンハンサー配列及び遺伝子産物の発現に必要な他の調節エレメントを含んでもよい。プロモーター／調節配列は例えば、組織特異的様式で遺伝子産物を発現するものでよい。
「構成的プロモーター」は、操作可能に結合された遺伝子の発現を細胞中で一定の様式で行わせるプロモーターである。例えば、細胞のハウスキーピング遺伝子の発現を行わせるプロモーターは構成的プロモーターであると考えられる。
【０１９４】
「誘導性」プロモーターは、遺伝子産物をコード又は特定するポリヌクレオチドに操作可能に結合された時、プロモーターに対応するインデューサーが細胞に存在する時にのみ実質的に遺伝子産物を生細胞内で産生させるヌクレオチド配列である。
「組織特異的」プロモーターは、遺伝子産物をコード又は特定するポリヌクレオチドに操作可能に結合された時、細胞がプロモーターに対応する組織型の細胞である場合にのみ実質的に遺伝子産物を生細胞内で生産させるヌクレオチド配列である。
【０１９５】
「予防的」処置は、疾患に関連する病状が発症する危険性を下げる目的で、疾患の兆候を表していないか、又は疾患の初期症状を表しているだけの個体へ投与される処置である。
【０１９６】
「蛋白質」は典型的には大きなポリペプチドを指す。
用語「活性酸素種」は、体内で生成される酸素の種々の有害な形態を含む。例えば、１重項酸素、スーパーオキシドラジカル、過酸化水素及びヒドロキシルラジカルはすべて組織損傷を引き起こす。用語「活性酸素種（ＲＯＳ）」は、これら及び類似の酸素関連種全てに関して適用できる。この用語は又、細胞へのＡＧＥのインターナリゼーションにより形成されたＲＯＳ、及びそれらから形成されるＲＯＳも含む。
【０１９７】
ここで使用する「３−デオキシグルコソンを除去する」は、その組成物の不存在下で３ＤＧのレベル又は機能性基修飾３ＤＧのレベルと比べた場合に、それを使用することによりより低いレベルの３−デオキシグルコソン（３ＤＧ）又はより低いレベルの機能性基修飾３ＤＧをもたらす任意の組成物及び方法を指す。より低レベルの３ＤＧは、その産生又は形成の減少、上昇した分解、上昇したクリアランス又はそれらの任意の組み合わせにより達成できる。より低レベルの機能性基修飾３ＤＧは、３ＤＧ分子が糖化プロセスでより非効率的に機能するように３ＤＧを修飾して生じるし、３ＤＧが機能するための能力を遮断阻害する別の分子と３ＤＧとを結合させることからも生じる。より低レベルな３ＤＧは又、３ＤＧのクリアランス増加及び尿中排出でも達成できる。この用語は又、「３ＤＧの蓄積を阻害する」とも互換的に使用する。同様に、文言「α−ジカルボニル糖を除去する」とは、３ＤＧ、グリオキサール、メチルグリオキサール及びグルコソンを含むα−ジカルボニル糖ファミリーのメンバーの除去を指す。
【０１９８】
又ここで互換的に使用する用語、糖化されたリシン残基、糖化蛋白質及びグリコシル化蛋白質若しくはリシン残基は、これら用語が技術的に認識されて互換的に使用される当分野での現在の使用と一致している。
用語「蛋白質架橋」は、蛋白質若しくはペプチドと、自分自身又は１以上の他の蛋白質若しくはペプチドとの共有結合を言う。これら蛋白質架橋された結合は、蛋白質又は蛋白質の自然な生理学的状態又は機能とは異常なものであり、その蛋白質の不活化及び／又は沈着を生じる。これら架橋は、「架橋分解剤」と呼ばれる組成物又は化合物の使用により分解される。これら架橋分解剤の例は、Alteon's ALT-711である(Vasanら、 2003, Arch. Biochem. Biophys. 419:89-96)。
【０１９９】
ここで使用する用語「強皮症」は、皮膚及び結合組織(体中の神経及び血管を支持する軟骨、骨、脂肪及び組織を含む)を冒す進行的疾患を言う。強皮症は、身体の免疫系が自分自身に対し反応する自己免疫性疾患である。強皮症では、異常なコラーゲン(結合組織中に存在する蛋白質線維の一種)の過剰産生がある。このコラーゲンは体中に蓄積して、硬化症(sclerosis)、瘢痕(線維症)、及び他の障害を生じる。この障害は、皮膚の外見を変える場合もあり、内部器官のみに症状が出る場合もある。強皮症の症状及び重篤性は、個人個人で異なる。
【０２００】
ここで使用する用語「皮膚」は、一般的に使用されている皮膚の定義、例えば表皮及び真皮、並びに皮膚を構成する細胞、腺、粘膜及び結合組織を指す。
【０２０１】
ここで使用する用語「標準」は、比較として使用されるものを指す。例えば試験化合物を投与した時に結果を比較するために投与及び使用される既知の標準的な薬剤又は化合物でもよく、パラメーター又は機能について薬剤又は化合物の効果を測定する時、対照値を得るために測定される標準的パラメーター又は機能でもよい。「標準」は又「内部標準」も指し、それは、目的のマーカーを測定する前に、既知の量でサンプルに加えられ、そしてサンプルが精製若しくは抽出手順で処理されるかそれら手順にかけられた場合に、精製若しくは回収率等の事柄を決定するために有用な薬剤又は化合物等をも言う。内部標準は、しばしば、しかし限定するわけではないが、放射性同位体等で標識された目的の精製されたマーカーであり、サンプル中の内因性物質から区別できる。
ここで使用する「感受性の試験動物」は、例えば特定の遺伝子突然変異の存在により、糖尿病、癌等の（試験用に）選択した疾患障害又は症状に対して高い指向性を有する実験動物の血統種を指す。
【０２０２】
ここで使用する「３ＤＧの産生」は、３ＤＧの形成又は生産を指す。３ＤＧは酵素依存的経路又は酵素非依存的経路に基づき形成される。同様に、文言「α−ジカルボニル糖の産生」は、３ＤＧ、グリオキサール、メチルグリオキサール及びグルコソン及びここで開示する付加物を含むα−ジカルボニル糖のファミリーのメンバーの産生又は自発的な形成を指す。
「合成ペプチド又はポリペプチド」は、非天然のペプチド又はポリペプチドを指す。合成ペプチド又はポリペプチドは、例えば自動化ポリペプチド合成機を使用して合成できる。当業者は種々のペプチド合成法について知っている。
【０２０３】
「治療的」処置は、病気の症状を消失又は排除する目的で、病気の症状を表す個体に投与される処置である。
「経皮的(transdarmal)」デリバリーは、経皮的（又はpercutaneous）及び経粘膜投与、即ち薬剤の皮膚又は粘膜組織を通した血流へのデリバリー、の両方を意図する。経皮的とは又、皮膚に薬剤又は化合物を局所適用することにより、薬剤又は化合物の投与のための入り口(portal)としての皮膚を指す。
ここで使用する用語「局所適用」は、皮膚等の表面への投与を指す。この用語は「皮膚適用」と互換的に使用する。
ここで使用する用語「処置する」は、患者又は個体が体験する症状の頻度を減じること、又は体験する症状の頻度を減少するための薬剤又は化合物を投与すること意味する。
ここで使用する「疾患又は障害を処置する」とは、患者が体験する疾患又は障害の症状の頻度を減じることを意味する。疾患及び障害は、ここで互換的に使用する。
【０２０４】
ここで使用する用語「トロポエラスチン」は、エラスチンの可溶性前駆体を言う。トロポエラスチンは、高級脊椎動物の高圧閉鎖循環器系を強化する。
ここで使用する用語「野生型」とは、天然由来種のほとんどのメンバーに特徴的な遺伝子型及び表現型を指し、そして変異体の遺伝子型及び表現型とは対照的である。
【０２０５】
ここで使用する「モジュレート」とは、プロセス又は活性を１の状態又は段階から別へ変質させることを言う。例えば、３ＤＧ活性のモジュレーションは、３ＤＧの濃度増加による３ＤＧの活性増加を含む。同時に、３ＤＧ活性のモジュレーションは又、３ＤＧ産生の抑制による３ＤＧの活性減少も含む。更に、組成物、化合物、ポリペプチド等の活性、レベル、濃度又は効果は、その組成物、化合物、ポリペプチド等の活性、レベル、濃度又は効果が、組成物、化合物、ポリペプチド等の活性、レベル、濃度又は効果の比較用参考値よりもより大きく反応した場合には、ここで使用される用語「強化（増強）」されたことになる。
【０２０６】
ここで使用する用語である、化合物の「類似体」は、第一化合物の性質の幾つか又は全てを有する第二化合物を言う。類似体は、機能的類似体、構造的類似体又はその両方の類似体でもよい。類似体の性質は、それが類似体である化合物の対応する性質より劣る、同等、又はそれを超えるものでもよい。
【０２０７】
ここで使用する用語である、３ＤＧの「解毒」は、３ＤＧの変質、不活化又は哺乳類からの除去を言う。例えば、１以上の原子又は分子を３ＤＧへ結合し、又は３ＤＧから除去することにより、３ＤＧを新規な化学的物質へ化学的転換して、３ＤＧは解毒される。
「安定化」は、状態又は症状をその現在の状態と同じ又はその近傍に保つことを言う。
【０２０８】
本発明は一般的に、アマドラーゼ経路をモジュレートすると、コラーゲンのためのｍＲＮＡのレベルが変化し、エラスチンの必須エレメントであるデスモシンが形成されるという新規な発見に関する。本発明は更に、ある種の疾患においてコラーゲンＩ型のためのｍＲＮＡのレベルが上昇するが、これらレベルはアマドラーゼ経路に影響する方法及び化合物により減少できるという知識を基礎とする。単に例示のためとして、これら疾患には強皮症、心内膜心筋線維症、肺線維症、ＡＲＤＳ、及びｃＧｖＨが含まれる。本発明は従って、アマドラーゼ経路を経由するフラックスを増加してコラーゲンＩ型のためのｍＲＮＡを減少し、コラーゲンＩ型産生レベルを減少し関連する疾患の症状を軽減する方法及び化合物に関する。これは強皮症及びケロイドの治療に特に重要であり、この２種の疾患は過剰量のコラーゲン産生に特徴付けられる。化合物を使用してアマドラーゼ経路を経由するフラックスを増加する処置の後、形成されるどんな３ＤＧも排除することが重要である。これは、効率的な解毒手段及び／又は３ＤＧの解毒強化により又は３ＤＧの不活化により達成できる。アマドラーゼ経路を経由するフラックスを増加するために好ましく使用される方法は、３ＤＧの形成を生じないものである。アマドラーゼ経路を経由するフラックスを増加する化合物として、フルクトースリシン、タガトースリシン、及びモルホリノフルクトース及び糖フルクトース等の糖化蛋白質及びアマドリ化合物が挙げられる。
【０２０９】
ここで詳細に記載されるように、増加したコラーゲンレベルは多くの疾患を特徴付ける。コラーゲンの増加したレベルが、フルクトサミン３キナーゼ経路を経由するフラックスを増加させることにより低下できることは今まで知られていなかった。より多くのコラーゲンを産生する身体では、それに対応してフルクトサミン３キナーゼ経路が活性化され、コラーゲンＩ型ｍＲＮＡのレベルが非常に減少し、コラーゲンがより少なくなるとする仮説が提唱された。残念ながら、この経路を経由するフラックスの連続的増加は、毒性のある化合物３デオキシグルコソンを蓄積し、それは酸化的ストレス、コラーゲン架橋の形成及び後期糖化産生物の形成を生じる。フルクトースリシン３ホスフェート及びフルクトースリシン３ホスフェート様化合物の形成を生じる化合物は、コラーゲンｍＲＮＡ及び酵素の基質レベルの減少を生じる。しかし、酵素の基質又は産生物が３ＤＧの生成を生じる場合、３ＤＧを不活化する別の化合物又は２機能性である別の化合物の投与が必要である。一方、酵素が３ＤＧの形成を減少させることを抑制し、コラーゲンＩ型ｍＲＮＡの減少の利益を得ないようにすることもできる。
【０２１０】
本発明はここで初めて開示されたものであり以前には、アマドリ経路のモジュレートはコラーゲンのためのｍＲＮＡ形成に影響すること及び、コラーゲンのためのｍＲＮＡのレベルはアマドリ経路を経由するフラックスを変えることによりモジュレートできること、その結果フラックス増加はＩ型コラーゲン産生減少を生じ、フラックス減少はＩ型コラーゲン産生増加を生じることは知られていなかった。同様に、コラーゲンのためのｍＲＮＡのレベルは、酵素フルクトサミン−３−キナーゼであるＦＬ、及び３ＤＧの形成を阻害する方法及び化合物により制御できることは公知ではなかった。又、この経路はコラーゲンの産生を抑制して強皮症及び関連する炎症性疾患を予防し及び／又は治療するためにレギュレートできることも公知ではなかった。
【０２１１】
ここで最初に開示された内容により、当業者は、過剰のコラーゲンを生じる疾患の患者は、アマドラーゼ経路の活性化剤の投与の効能を受けることが理解できる。本発明の例として、アマドラーゼ経路の活性化剤は、次にコラーゲンのためのｍＲＮＡを減少させ、その結果患者中のコラーゲン産生を減少させる。一方、コラーゲン欠失に至る疾患の患者は、アマドラーゼ経路阻害剤の投与の効能を受ける。本発明の別の例では、アマドラーゼ経路阻害剤は、次にコラーゲンのためのｍＲＮＡを増加し、患者のコラーゲン産生を増加させる。
【０２１２】
更に又、アマドリ経路のモジュレートは糖尿病患者でのデスモシン形成に影響すること、及びデスモシンレベルはアマドリ経路の抑制により減少できることは本発明で初めて開示された。
【０２１３】
従って、本発明は更に、３ＤＧ形成の抑制又は細胞外マトリックス及びコラーゲン含有器官からの３ＤＧ除去のための組成物及び方法、並びに細胞外マトリックス及びコラーゲン含有器官からの３ＤＧの解毒及び除去速度を増加する組成物及び方法に関する。更に又、本発明は、架橋されたコラーゲン、エラスチン及び他の蛋白質中に存在する３ＤＧ蛋白質／ペプチド付加物を分解する組成物及び方法に関する。
【０２１４】
これら化合物は、アマドラーゼ経路を経由するフラックスを増加する化合物と組み合わせて使用して、形成される可能性のある３ＤＧの望ましくない副作用を減少させることができる。
【０２１５】
本発明は従って、コラーゲンＩ型のためのｍＲＮＡのレベル増加に関連するある種の炎症性疾患の合併症を予防及び治療する方法及び組成物に関し、その疾患には強皮症及びケロイドが含まれる。本発明は又、ある種のコラーゲン関連疾患を予防及び治療する方法及び組成物に関する。上記コラーゲン関連疾患として、上記記載のものが挙げられる。
【０２１６】
本発明までは、Ｉ型のｍＲＮＡのレギュレーションは、アマドラーゼ経路と関連づけられていなかった。ここで初めて開示されたデータは、コラーゲンｍＲＮＡがアマドラーゼ経路を経由するフラックスを変化させることによりレギュレートされることを示す。アマドラーゼ経路を経由するフラックスの増加は、皮膚中のＩ型コラーゲンのｍＲＮＡ産生の減少を生じる。アマドラーゼ経路を経由するフラックスの抑制は、Ｉ型コラーゲンのｍＲＮＡの減少及び皮膚中のコラーゲン減少を生じる。
【０２１７】
皮膚及び動脈の老化等のＩ型コラーゲンレベルが減少する症状及び疾患も又存在する。これら症状において、アマドラーゼ経路を経由するフラックスを抑制し、Ｉ型コラーゲンのためのｍＲＮＡのレベルを増加することは、Ｉ型コラーゲンの減少の予防に効果的であり、例えば、加齢に伴う皮膚の薄化及び皺並びに加齢に伴う静脈及び動脈の薄化の予防にも効果的である。本発明は従って、酵素フルクトサミン３キナーゼを経由するフラックスを阻止する組成物及び方法に関し、それらは酵素フルクトサミン３キナーゼを抑制し、３ＤＧの形成を阻止し、更に３ＤＧを不活化する。酵素を抑制する化合物及び３ＤＧを不活化する化合物はここで詳細に記載され、かつ国際特許出願番号PCT/US03/12003(国際公開WO03/089601パンフレット、特許文献２）及び米国特許6,006,958明細書（特許文献１）にも記載され、ここで資料として使用する。
【０２１８】
エラスチン
本発明は更に、糖尿病ではデスモシンのレベルが上昇すること及びこのレベルはアマドラーゼ経路に影響する方法及び化合物により減少できることを発見したことを基礎とする。本発明は従って、酵素フルクトサミン３キナーゼを経由するフラックスを阻止する組成物及び方法に関し、それらは酵素フルクトサミン３キナーゼを抑制し、３ＤＧの形成を阻止し、更に３ＤＧを不活化する。酵素を抑制する化合物及び３ＤＧを不活化する化合物はここで詳細に記載され、かつ国際特許出願番号PCT/US03/12003(国際公開WO03/089601パンフレット、特許文献２）及び米国特許6,006,958明細書（特許文献１）にも記載され、ここで資料として使用する。
【０２１９】
本発明は更に、３ＤＧ形成を抑制するかエラスチン含有器官から３ＤＧを除去する組成物及び方法、並びにエラスチン含有器官からの３ＤＧの解毒及び除去速度を増加する組成物及び方法に関する。
【０２２０】
本発明は更に、弾性のない老化した皮膚及び弾性のないエラスチン含有器官の発達は、酵素フルクトサミン３キナーゼを経由するフラックスを抑制し、酵素フルクトサミン３キナーゼを抑制し、３ＤＧの形成を阻止し、かつ不活化することによりデスモシンの形成を抑制する組成物及び方法により予防され減少させることができるという考えに基づく。弾性のない含有器官として、体の内部構造及びその器官を形成する細胞外マトリックス、特に皮膚、肺、靱帯、血管及び弾性軟骨が挙げられる。
【０２２１】
本発明は又、所定のエラスチン関連疾患を予防し治療する方法及び組成物に関する。エラスチン関連疾患として、アテローム性動脈硬化症、ブシュケ−オレンドルフ症候群、皮膚弛緩症、気腫、マルファン症候群、メンケス症候群、弾性線維仮性黄色腫、大動脈弁上狭窄症及びウィリアムス症候群が挙げられる。
【０２２２】
アマドラーゼ経路阻害方法
当業者は、アマドラーゼ経路をモジュレートする多くの方法を知ることができる。これらには抗体が含まれる。この抗体は、公知の抗体、公知の技術及びフルクトサミンキナーゼ／アマドラーゼ（寄託番号ＮＰ  ０７１４４１）の公開配列を使用して調製できる抗体でもよい。例えば、抗体はポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体及び合成抗体の群から選ばれる。
【０２２３】
本発明の別の例では、フルクトサミンキナーゼの機能は、アンチセンス又はｓｉＲＮＡ遺伝子サイレンシング技術を使用して抑制できる。例えば、フルクトサミンキナーゼｍＲＮＡに相補的なアンチセンス核酸は、対応するｍＲＮＡ（SEQ ID No:1参照）の発現又は翻訳をブロックするのに使用できる（実施例２０及び２２参照）。
【０２２４】
別の例では、フルクトサミンキナーゼｍＲＮＡに対するｓｉＲＮＡは、２重鎖ＲＮＡ(dsRNA)の導入により引き起こされる蛋白質の発現をノックダウンするために使用でき、配列特異的に遺伝子サイレンシングを導く。
本発明は、アンチセンス又はｓｉＲＮＡ技術を使用したフルクトサミンキナーゼ抑制のみを含むと見なされるべきではなく、他の遺伝子及びアマドリ経路中に含まれるその蛋白質の抑制又はアップレギュレーションも含むものである。
【０２２５】
コラーゲンＩ型のためのｍＲＮＡのレベルを減少させる化合物の使用として、例えば本発明は、コラーゲンＩ型のためのｍＲＮＡのレベルの増加方法を含み、その方法はＦＬ３Ｋ産生阻害剤又はその誘導体若しくはその変性体の有効量を哺乳類へ投与してコラーゲンＩ型のためのｍＲＮＡのレベルを低下させることを含む。
【０２２６】
例えば、本発明は、デスモシンレベルを阻害する方法であって、その方法は、デスモシン産生阻害剤又は誘導体若しくはその変性体の有効量を哺乳類へ投与することを含み、この結果デスモシン産生を抑制する。
【０２２７】
ここで詳細に記載されるように、デスモシン阻害剤は医薬的組成物を約０．０００１％〜約１５重量％含む。１つの観点では、阻害剤は徐放性配合物として投与される。別の観点では、医薬的組成物はローション、クリーム、ゲル、塗布剤、軟膏、ペースト、歯磨きペースト、マウスウォッシュ、口腔内リンス、コーティング、溶液、粉末又は懸濁液を含んでもよい。更に別の観点では、組成物は更に保湿剤、湿潤剤、粘滑剤、油、水、乳化剤、増粘剤、希釈剤、界面活性剤、香料、保存剤、抗酸化剤、ハイドロトロピー剤、錯化剤、ビタミン、ミネラル、浸透強化剤、化粧用補助剤、漂白剤、脱色素剤、発泡剤、コンディショナー、粘度調整剤、緩衝剤又はサンスクリーンを含んでもよい。
同様にここで詳細に記載されるように、本発明は局所、経口、筋肉内及び静脈内を含む種々の投与法を含むと解釈すべきである。
【０２２８】
本発明の１つの観点では、ＦＬ３Ｋの阻害剤は、下式（XIX）の化合物：
【化２４】
2007523908.tif 000027
【０２２９】
ここで、
Ｘは−ＮＲ’−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）2−又は−Ｏ−の群から選ばれる二価の成分｛ここで、Ｒ’はＨ、直鎖状又は分岐鎖状アルキル基（Ｃ1〜Ｃ4）、又は置換若しくは非置換アリール基（Ｃ6〜Ｃ10）若しくはアラルキル基（Ｃ7〜Ｃ10）又はＣＨ2（ＣＨＯＲ2）nＣＨ2ＯＲ2（ここで、ｎは１〜５である）或はＣＨ（ＣＨ2ＯＲ2）（ＣＨＯＲ2）nＣＨ2ＯＲ2（ここで、ｎは１〜４であり、Ｒ2はＨ、アルキル（Ｃ1〜Ｃ4）又は置換若しくは非置換アリール基（Ｃ6〜Ｃ10）若しくはアラルキル基（Ｃ7〜Ｃ10）である）；
ＲはＨ、アミノ酸残基（このアミノ酸は上記ＮＲ’成分を含む）、ポリアミノ酸残基（このポリアミノ酸は上記ＮＲ’成分を含む）、ペプチド鎖、直鎖状又は分岐鎖状脂肪族基（Ｃ1〜Ｃ8）（非置換又は少なくとも１の窒素若しくは酸素含有置換基で置換されている）並びに直鎖状又は分岐鎖状脂肪族基(Ｃ1〜Ｃ8)（非置換又は少なくとも１の窒素若しくは酸素含有置換基で置換されるか、少なくとも１の−Ｏ−、−ＮＨ−又は−ＮＲ3−成分で中断されている：ここで、Ｒ3は直鎖状若しくは分岐鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)又は非置換若しくは置換アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)若しくはアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)である）
の群から選ばれる置換基であり； 
Ｘが−ＮＲ1−を表わす場合にはＲ及びＲ1はそれらが結合している窒素原子と一緒になって５〜７個の環原子を有する置換又は非置換ヘテロ環を表わすこともでき、この環中のヘテロ原子は少なくとも１の窒素及び酸素だけであり、
前記アリール基(Ｃ6〜Ｃ10)又はアラルキル基(Ｃ7〜Ｃ10)及び前記ヘテロ環の置換基は、Ｈ、アルキル(Ｃ1〜Ｃ6)、ハロゲン、ＣＦ3、ＣＮ、ＮＯ2及び−Ｏ−アルキル(Ｃ1〜Ｃ6)の群から選ばれ；
Ｒ1は１〜４個の直鎖状炭素原子を有するポリオール成分であり；
Ｙはカルボニル成分又はヒドロキシメチレン成分であり；
Ｚは−Ｈ、−Ｏ−アルキル(Ｃ1〜Ｃ6)、−ハロゲン、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ及び−ＳＯ3Ｈ2の群から選ばれる］；並びに
該化合物の異性体若しくは医薬的に許容できる塩である。
【０２３０】
他の適切な反応物として、限定されるものではないが、非置換若しくは置換アリール（Ｃ6〜Ｃ10）化合物（ここで置換基はアルキル（Ｃ1〜Ｃ3）、アルコキシ、カルボキシ、ニトロ又はハロゲン基）、非置換若しくは置換アルカン（ここで置換基は少なくとも１つのアルコキシ基）；又は非置換若しくは置換の窒素含有ヘテロ環式化合物（ここで置換基はアルキル（Ｃ1〜Ｃ3）、アリール（Ｃ6〜Ｃ10）、アルコキシ、カルボキシ、ニトロ又はハロゲン基）が挙げられる。反応物の最後に挙げたグループの具体例には、ｍ−メチル−、ｐ−メチル−、ｍ−メトキシ−、ｏ−メトキシ−及びｍ−ニトロ−アミノベンゼン、ｏ−及びｐ−アミノ安息香酸；ｎ−プロピルアミン、ｎ−ブチルアミン、３−メトキシプロピルアミン；モルホリン及びピペルジン(piperdine)が含まれる。
【０２３１】
本発明の１つの観点では、上式の代表的な阻害剤化合物には、ガラクチトールリシン、３−デオキシソルビトールリシン、３−デオキシ−３−フルオロ−キシリトールリシン及び３−デオキシ−３−シアノソルビトールリシン及び３−Ｏ−メチルソルビトールリシンが含まれる。本発明の実施において阻害剤として使用できる既知の化合物の例には、限定されるものではないがメグルミン、ソルビトールリシン、ガラクチトールリシン及びマンニトールリシンが挙げられる。好適な阻害剤は、３−Ｏ−メチルソルビトールリシンである。
【０２３２】
本発明の化合物は、例えば細胞、組織又は個体に、ここに記載する数種の方法又は当業者に既知な他の方法により投与することができる。
【０２３３】
本発明は式XIX及びここに記載する代表的化合物の修飾（変性）体、誘導体又は置換体のみを含むと解釈すべきではない。本発明は、式XIXで表される、ここに記載しない他の変性体及びここに記載しない化合物も同様に含むと解釈すべきである。
【０２３４】
本発明の別の例では、フルクトサミン３キナーゼ活性の阻害剤は、銅又は他の金属含有化合物又は錯体であり、他の金属として限定されるものではないが、亜鉛、アルミニウム、インジウム、マンガン、チタン、白金、金又はスズが挙げられる。酵素フルクトサミン３キナーゼ阻害剤として適切な銅含有化合物又は複合体は、［Sorenson, JR 「銅錯体は慢性疾患治療の生理学的方法を提供する。」1989 Prog Med Chem 26:437; Pickart LR米国特許第5,554,375号明細書; Konishi米国特許第4,461,724号明細書; Fairlie DP and Whitehouse MW 1991 Drug Des Discov 8:83-102］に記載されており、ここで資料として使用する。非限定的例示として、本発明に有用な銅化合物及び錯体には銅塩、及びアミノ酸、ペプチド(Cu(II):Gly-Ser-His-Lys)及び有機的分子(Cu(II)：３，５−ジイソプロピルサリチラート）との複合体が挙げられる。
【０２３５】
本発明の別の例では、アマドラーゼ経路を経由するフラックスは、銅又は銅含有化合物をキレートすることにより増加し、そのため銅がアマドラーゼ経路阻害剤として利用できなくなる。例えば、本発明は、銅をアマドラーゼ経路阻害剤として利用できないように銅をキレートする組成物及び方法に関し、その結果アマドラーゼ経路を経由するフラックスが増加する。
【０２３６】
例えば、本発明は、アマドラーゼ経路の活性化を必要とする患者へ、銅キレート団を含有する組成物を投与する方法を示す。本発明で使用できる銅キレート剤として、下記に限定されないが、トリエチレンテトラミン二塩酸塩（トリエン）、ペニシラミン、ｓａｒ（３，６，１０，１３，１６，１９−ヘキサアザビシクロ［６．６．６］エイコサン）、ｄｉａｍｓａｒ（１，８−ジアミノ−３，６，１０，１３，１６，１９−ヘキサアザビシクロ［６．６．６］エイコサン）、エチレンジアミン四酢酸、ｏ−フェナントロリン及びヒスチジンが挙げられる。他の本発明で使用できる銅キレート剤として、ここで資料として使用する米国特許6,610,693号明細書に記載されたものが挙げられる。
【０２３７】
本発明の一例では、コラーゲンＩ型のためのメッセンジャーＲＮＡのレベルを低下させる本発明の阻害剤は、公知技術を使用してインビトロで産生できる（例えば、実施例２７及び２８参照）。
【０２３８】
３ＤＧ抑制用並びに３ＤＧ製造用化合物及び方法
本発明は、３ＤＧ抑制用並びに３ＤＧ製造用の化合物及び方法を示す。これら化合物及び方法は、アマドラーゼ経路を経由するフラックスを増加する化合物と組み合わせて使用できる。
【０２３９】
上記のように、３ＤＧ機能の抑制は直接的でも間接的でもよい。従って３ＤＧ機能は、ここで詳細に記載する多くの手段を使用して抑制し又は低下させることができる。３ＤＧ機能の抑制は、ここに記載する技術並びに当業者に知られている他の技術を使用して分析又はモニタリングすることができる。機能は直接測定することができ、又は３ＤＧ機能と相関することが公知のパラメーターを測定する技術を使用して評価することができる。例えば蛋白質の架橋化及び蛋白質生産は、電気泳動分析（図１２並びに実施例７及び１８参照）及び他の技術（実施例２１〜２４参照）等の技術を使用して直接測定することができる。本発明は、３ＤＧが誘導するプロコラーゲン及びコラーゲン等の分子の架橋化を防止するために有用な化合物だけを含むと解釈すべきではなく、他の分子の架橋化を抑制する化合物も含むと解釈すべきである。
【０２４０】
１つの態様では、阻害剤は医薬的組成物の約０．０００１％〜約１５重量％を構成する。１つの観点では、阻害剤は徐放性配合物として投与される。別の観点では、医薬的組成物はローション、クリーム、ゲル、塗布剤、軟膏、ペースト、歯磨きペースト、マウスウォッシュ、口腔内リンス、コーティング、溶液、粉末又は懸濁液を含んでもよい。更に別の観点では、組成物は更に保湿剤、湿潤剤、粘滑剤、油、水、乳化剤、増粘剤、希釈剤、界面活性剤、香料、保存剤、抗酸化剤、ハイドロトロピー剤、錯化剤、ビタミン、ミネラル、浸透強化剤、化粧用補助剤、漂白剤、脱色素剤、発泡剤、コンディショナー、粘度調整剤、緩衝剤又はサンスクリーンを含んでもよい。
本発明は、局所、経口、筋肉内、皮下及び静脈内を含む種々の投与法を含むと解釈すべきである。
【０２４１】
非限定的例示として、３ＤＧ機能阻害剤は、フルクトサミンキナーゼｍＲＮＡに相補的でありアンチセンス方向である核酸をコードする単離された核酸でもよい。他の阻害剤として、アンチセンスオリゴヌクレオチド、抗体若しくは低分子等の他の化合物又は薬剤が挙げられる。
本発明の方法は又、ブロック３ＤＧ機能を抑制又はブロックするための下記にその構造式を示す化合物の使用を含む。本発明の実施に使用できる化合物として、（例えば、組み合わせ等の）１以上の下記のものが挙げられる：
【０２４２】
式Ｉは、Ｒ1及びＲ2が独立して水素、低級アルキル、低級アルコキシ若しくはアリール基であるか、又はＲ1及びＲ2が窒素と一緒になって１〜２個のヘテロ原子及び２〜６個の炭素原子を含有するヘテロ環を形成する（前記へテロ原子の第２のものは窒素、酸素及び硫黄の群から選ばれる）かのいずれかである構造を含み、そしてそれらの生体適合性の酸付加塩及び医薬上許容できる酸付加塩を包含する。
【０２４３】
式Ｉの化合物中の低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有し、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を有し、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ及びそれらの分岐鎖状異性体を包含する。アリール基は置換及び非置換の両方のフェニル及びピリジル基を包含する。典型的なアリール基の置換基は低級アルキル基、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨード原子のようなものである。
【化２５】
2007523908.tif 000028
【０２４４】
式Ｉに含まれる化合物の中では、ある種の置換基の組合せが好ましい。例えば、Ｒ1が水素原子である場合には、Ｒ2は水素又はアリール基であるのが好ましい。
【０２４５】
Ｒ1及びＲ2が共にアルキル基である場合には、同一のＲ1及びＲ2アルキル基を有する化合物が好ましい。
【０２４６】
Ｒ1及びＲ2と窒素原子とが一緒になって１〜２個のヘテロ原子を含有するヘテロ環を形成する場合、このヘテロ原子は窒素、酸素及び硫黄の群から選ばれ、好ましいヘテロ環はモルホリノ、ピペラジニル、ピペリジニル及びチオモルホリノであり、モルホリノが特に好ましい。
【０２４７】
式Ｉの化合物の代表的なものは、次のものである：
Ｎ，Ｎ−ジメチルイミドジカルボンイミド酸ジアミド；
イミドジカルボンイミド酸ジアミド；
Ｎ−フェニルイミドジカルボンイミド酸ジアミド；
Ｎ−（アミノイミノメチル）−４−モルホリンカルボキシイミドアミド；
Ｎ−（アミノイミノメチル）−４−チオモルホリンカルボキシイミドアミド；
Ｎ−（アミノイミノメチル）−４−メチル−１−ピペラジンカルボキシイミドアミド；
Ｎ−（アミノイミノメチル）−１−ピペリジンカルボキシイミドアミド；
Ｎ−（アミノイミノメチル）−１−ピロリジンカルボキシイミドアミド；
Ｎ−（アミノイミノメチル）−１−ヘキサヒドロアゼピンカルボキシイミドアミド；
（アミノイミノメチル）−１−ヘキサヒドロアゼピンカルボキシイミドアミド；
Ｎ−４−ピリジルイミドジカルボンイミド酸ジアミド；
Ｎ，Ｎ−ジ−ｎ−ヘキシルイミドジカルボンイミド酸ジアミド；
Ｎ，Ｎ−ジ−ｎ−ペンチルイミドジカルボンイミド酸ジアミド；
Ｎ，Ｎ−ジ−ｎ−ブチルイミドジカルボンイミド酸ジアミド；
Ｎ，Ｎ−ジプロピルイミドジカルボンイミド酸ジアミド；
Ｎ，Ｎ−ジエチルイミドジカルボンイミド酸ジアミド；並びに
それらの医薬上許容できる酸付加塩。
【０２４８】
式IIは、ＺがＮ又はＣＨであり；Ｘ、Ｙ及びＱがそれぞれ独立して水素、アミノ、ヘテロ環、アミノ低級アルキル、低級アルキル又はヒドロキシ基であり且つＲ3が水素又はアミノ基である構造、それらの対応する３−オキシドを含み、それらの生体適合性の塩及び医薬上許容できる塩を包含する。
【０２４９】
式IIにおいてＸ、Ｙ又はＱ置換基が環の窒素上にある化合物は、互変異性体として存在し、即ち２−ヒドロキシピリミジンは２（１Ｈ）−ピリミジンとして存在することもできる。両方の形を本発明の実施において用いることができる。
【化２６】
2007523908.tif 000029
【０２５０】
式IIの化合物の低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を含有し、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。式IIの化合物のヘテロ環式基は３〜６個の炭素原子を有し、例えばピロリジニル、−メチルピロリジニル、ピペリジニル、２−メチルピペリジノ、モルホリノ及びヘキサメチレンアミノのような基である。
【０２５１】
式II中の自由なＸ、Ｙ、Ｑ及びＮＨＲ3結合は、これらの変形体が任意の利用可能な炭素結合部において環構造に結合することができることを示す。Ｘ、Ｙ及びＱのヒドロキシ変形体は、窒素原子上に存在することもできる。
【０２５２】
式IIに含まれる化合物の中では、ある種の置換基の組合せが好ましい。例えば、Ｒ3が水素であり、ＺがＣＨ基であり且つＸ、Ｙ又はＱの内の少なくとも１つが別のアミノ基である化合物が好ましい。又、Ｒ3が水素であり、ＺがＣＨ基であり且つＸ又はＹの１つがアミノ低級アルキル基である化合物群も好ましい。別の好ましい化合物群は、Ｒ3が水素であり且つＺがＮ（窒素）であるものである。ある種の置換パターンが好ましく、即ち６位（ＩＵＰＡＣ番号付け、Ｚ＝ＣＨ）が置換されているのが好ましく、アミノ又はニトロ含有基で置換されているのが特に好ましい。又、Ｘ、Ｙ及びＱの２つ以上が水素以外のものである化合物も好ましい。式IIの化合物の代表的なものは、次のものである：
４，５−ジアミノピリミジン；４−アミノ−５−アミノメチル−２−メチルピリミジン；６−（ピペリジノ）−２，４−ジアミノピリミジン−３−オキシド；４，６−ジアミノピリミジン；４，５，６−トリアミノピリミジン；４，５−ジアミノ−６−ヒドロキシピリミジン；２，４，５−トリアミノ−６−ヒドロキシピリミジン；２，４，６−トリアミノピリミジン；４，５−ジアミノ−２−メチルピリミジン；４，５−ジアミノ−２，６−ジメチルピリミジン；４，５−ジアミノ−２−ヒドロキシ−ピリミジン；及び４，５−ジアミノ−２−ヒドロキシ−６−メチルピリミジン。
【０２５３】
式IIIは、Ｒ4が水素又はアシルであり、Ｒ5が水素又は低級アルキルであり、Ｘaが低級アルキル、カルボキシ、カルボキシメチル、又は随意にハロゲン、低級アルキル、ヒドロキシ低級アルキル、ヒドロキシ若しくはアセチルアミノで置換されたフェニル若しくはピリジル基の群から選ばれる置換基であり、但し、Ｘが随意に置換されたフェニル又はピリジル基である場合にはＲ5は水素である構造を含み、そしてそれらの生体適合性の酸付加塩及び医薬上許容できる酸付加塩を包含する。
【０２５４】
式IIIの化合物中の低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有し、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。ハロ変形体は、フルオロ、クロロ、ブロモ又はヨード置換基であることができる。
【化２７】
2007523908.tif 000030
【０２５５】
本発明の目的のための式IIIの化合物の等価物は、それらの生体適合性の塩及び医薬上許容できる塩である。
【０２５６】
かかる塩は、様々な有機及び無機酸から誘導されるものであることができ、これらの酸にはメタンスルホン酸、塩酸、トルエンスルホン酸、硫酸、マレイン酸、酢酸及びリン酸が包含されるが、これらに限定されるものではない。
【０２５７】
式IIIに含まれる化合物の中では、ある種の置換基が好ましい。例えば、Ｒ4はメチル基であるのが好ましく、Ｘaはフェニル又は置換フェニル基であるのが好ましい。
【０２５８】
式IIIの化合物の代表的なものは、次のものである：
Ｎ−アセチル−２−（フェニルメチレン）ヒドラジンカルボキシイミドアミド；２−（フェニルメチレン）ヒドラジンカルボキシイミドアミド；２−（２，６−ジクロロフェニルメチレン）ヒドラジンカルボキシイミドアミドピリドキサールグアニルヒドラゾン；ピリドキサールホスフェートグアニルヒドラゾン；２−（１−メチルエチリデン）ヒドラジンカルボキシイミドアミド；ピルビン酸グアニルヒドラゾン；４−アセトアミドベンズアルデヒドグアニルヒドラゾン；４−アセトアミドベンズアルデヒドＮ−アセチルグアニルヒドラゾン；アセト酢酸グアニルヒドラゾン；並びにそれらの生体適合性の塩及び医薬上許容できる塩。
【０２５９】
式IVは、Ｒ6が水素又は低級アルキル基、又は随意に１〜３個のハロ、アミノ、ヒドロキシ若しくは低級アルキル基で置換されたフェニル基であり、Ｒ7が水素、低級アルキル基又はアミノ基であり、Ｒ8が水素又は低級アルキル基である構造を含み、そしてそれらの生体適合性の塩及び医薬上許容できる酸付加塩を包含する。
【０２６０】
式IVの化合物中の低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を有し、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。ハロ変形体は、フルオロ、クロロ、ブロモ又はヨード置換基であることができる。フェニル環が置換されている場合、その置換点は、該分子の直鎖への該フェニル環の結合点に対してオルト位、メタ位又はパラ位であることができる。
【化２８】
2007523908.tif 000031
【０２６１】
式IVの化合物の代表的なものは、次のものである：
等価のｎ−ブタンヒドラゾン酸ヒドラジド；４−メチルベンゾアミドラゾン；Ｎ−メチルベンゼンカルボキシイミド酸ヒドラジド；ベンゼンカルボキシイミド酸１−メチルヒドラジド；３−クロロベンゾアミドラゾン；４−クロロベンゾアミドラゾン；２−フルオロベンゾアミドラゾン；３−フルオロベンゾアミドラゾン；４−フルオロベンゾアミドラゾン；２−ヒドロキシベンゾアミドラゾン；３−ヒドロキシベンゾアミドラゾン、４−ヒドロキシベンゾアミドラゾン：２−アミノベンゾアミドラゾン；ベンゼンカルボヒドラゾン酸ヒドラジド；ベンゼンカルボヒドラゾン酸１−メチルヒドラジド；並びにそれらの生体適合性の塩及び医薬上許容できる塩。
【０２６２】
式Ｖは、Ｒ9及びＲ10が独立して水素、ヒドロキシ、低級アルキル又は低級アルコキシであり、但し自由なアミノ基が固定アミノ基に隣接する構造を含み、そしてそれらの生体適合性の酸付加塩及び医薬上許容できる酸付加塩を包含する。
【０２６３】
式Ｖの化合物の低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を含有し、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。同様に、式Ｖの化合物の低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を含有し、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペントキシ及びヘキソキシ並びにそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。
【化２９】
2007523908.tif 000032
【０２６４】
本発明の目的のための式Ｖの化合物の等価物は、それらの生体適合性の塩及び医薬上許容できる塩である。
【０２６５】
かかる塩は、様々な有機及び無機酸から誘導されるものであることができ、これらの酸にはメタンスルホン酸、塩酸、トルエンスルホン酸、硫酸、マレイン酸、酢酸及びリン酸が包含されるが、これらに限定されるものではない。
【０２６６】
式Ｖに含まれる化合物の中では、ある種の置換基が好ましい。例えばＲ9が水素である場合にはＲ10も水素であるのが好ましい。
【０２６７】
式Ｖの化合物の代表的なものは、次のものである：
３，４−ジアミノピリジン；２，３−ジアミノピリジン；５−メチル−２，３−ジアミノピリジン；４−メチル−２，３−ジアミノピリジン；６−メチル−２，３−ピリジンジアミン；４，６−ジメチル−２，３−ピリジンジアミン；６−ヒドロキシ−２，３−ジアミノピリジン；６−エトキシ−２，３−ジアミノピリジン；６−ジメチルアミノ−２，３−ジアミノピリジン；２−（２，３−ジアミノ−６−ピリジル）マロン酸ジエチル；６−（４−メチル−１−ピペラジニル）−２，３−ピリジンジアミン；６−（メチルチオ）−５−（トリフルオロメチル）−２，３−ピリジンジアミン；５−（トリフルオロメチル）−２，３−ピリジンジアミン；６−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−５−（トリフルオロメチル）−２，３−ピリジンジアミン；６−クロロ−５−（トリフルオロメチル）−２，３−ピリジンジアミン；５−メトキシ−６−（メチルチオ）−２，３−ピリジンジアミン；５−ブロモ−４−メチル−２，３−ピリジンジアミン；５−（トリフルオロメチル−２，３−ピリジンジアミン；６−ブロモ−４−メチル−２，３−ピリジンジアミン；５−ブロモ−６−メチル−２，３−ピリジンジアミン；６−メトキシ−３，４−ピリジンジアミン；２−メトキシ−３，４−ピリジンジアミン；５−メチル−３，４−ピリジンジアミン；５−メトキシ−３，４−ピリジンジアミン；５−ブロモ−３，４−ピリジンジアミン；２，３，４−ピリジントリアミン；２，３，５−ピリジントリアミン；４−メチル−２，３，６−ピリジントリアミン；４−（メチルチオ）−２，３，６−ピリジントリアミン；４−エトキシ−２，３，６−ピリジントリアミン；２，３，６−ピリジントリアミン；３，４，５−ピリジントリアミン；４−メトキシ−２，３−ピリジンジアミン；５−メトキシ−２，３−ピリジンジアミン；６−メトキシ−２，３−ピリジンジアミン；並びにそれらの生体適合性の塩及び医薬上許容できる塩。
【０２６８】
式VIは、ｎが１又は２であり、Ｒ11がアミノ基又はヒドロキシエチル基であり且つＲ12がアミノ、ヒドロキシアルキルアミノ、低級アルキル基又は式ａｌｋ−Ｙａの基であり、ここで、ａｌｋは低級アルキレン基であり且つＹａはヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、低級アルキルアミノ並びに４〜７個の環員及び１〜３個のヘテロ原子を含有するヘテロ環式基の群から選ばれ、但し、Ｒ11がヒドロキシエチル基である場合にはＲ12がアミノ基である構造；並びにそれらの生体適合性の酸付加塩及び医薬上許容できる酸付加塩を含む。
【化３０】
2007523908.tif 000033
【０２６９】
ここで言う低級アルキル、低級アルキレン及び低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を含有し、メチル、メチレン、メトキシ、エチル、エチレン、エトキシ、プロピル、プロピレン、プロポキシ、ブチル、ブチレン、ブトキシ、ペンチル、ペンチレン、ペンチルオキシ、ヘキシル、ヘキシレン、ヘキシルオキシ及びそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。ここで言うヘテロ環式基は、環中に少なくとも１個で３個までのヘテロ原子を有する４〜７員環を包含する。
【０２７０】
代表的なヘテロ環式基は、モルホリノ、ピペリジノ、ピペラジノ、メチルピペラジノ及びヘキサメチレンイミノのようなものである。
【０２７１】
本発明の目的のための式VIの化合物の等価物は、それらの生体適合性の塩及び医薬上許容できる塩である。
【０２７２】
かかる塩は、様々な有機及び無機酸から誘導されるものであることができ、これらの酸にはメタンスルホン酸、塩酸、トルエンスルホン酸、硫酸、マレイン酸、酢酸及びリン酸が包含されるが、これらに限定されるものではない。
【０２７３】
式VIに含まれる化合物の中では、ある種の置換基の組合せが好ましい。例えば、Ｒ11がヒドロキシエチル基である場合にはＲ12がアミノ基である。Ｒ11がアミノ基である場合には、Ｒ12はヒドロキシ低級アルキルアミノ、低級アルキル基又はａｌｋ−Ｙ（ここで、ａｌｋは低級アルキレン基であり且つＹａはヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、低級アルキルアミノ並びに４〜７個の環員及び１〜３個のヘテロ原子を含有するヘテロ環式基の群から選ばれる）の基であるのが好ましい．
【０２７４】
式VIの化合物の代表的なものは、次のものである：
１−アミノ−２−［２−（２−ヒドロキシエチル）ヒドラジノ］−２−イミダゾリン；１−アミノ−［２−（２−ヒドロキシエチル）ヒドラジノ］−２−イミダゾリン；１−アミノ−２−（２−ヒドロキシエチルアミノ）−２−イミダゾリン；１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−１，４，５，６−テトラヒドロピリミジン；１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン；１−アミノ−２−（［２−（４−モルホリノ）エチル］アミノ）イミダゾリン；（［２−（４−モルホリノ）エチル］アミノ）イミダゾリン；１−アミノ−２−（［３−（４−モルホリノ）プロピル］アミノ）イミダゾリン；１−アミノ−２−（［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）プロピル］−アミノ）イミダゾリン；１−アミノ−２−（［３−（ジメチルアミノ）プロピル］アミノ）イミダゾリン；１−アミノ−２−［（３−エトキシプロピル）アミノ］イミダゾリン；１−アミノ−２−（［３−（１−イミダゾリル）プロピル］アミノ）イミダゾリン；１−アミノ−２−（２−メトキシエチルアミノ）−２−イミダゾリン；（２−メトキシエチルアミノ）−２−イミダゾリン；１−アミノ−２−（３−イソプロポキシプロピルアミノ）−２−イミダゾリン；１−アミノ−２−（３−メチルチオプロピルアミノ）−２−イミダゾリン；１−アミノ−２−［３−（１−ピペリジノ）プロピルアミノ）イミダゾリン；１−アミノ−２−［２，２−ジメチル−３−（ジメチルアミノ）プロピルアミノ］−２−イミダゾリン；１−アミノ−２−（ネオペンチルアミノ）−２−イミダゾリン；並びにそれらの生体適合性の塩及び医薬上許容できる塩。
【０２７５】
式VIIは、Ｒ13が水素又はアミノ基であり、Ｒ14及びＲ15が独立してアミノ基、ヒドラジノ基、低級アルキル基又はアリール基であり、但しＲ13、Ｒ14及びＲ15の内の１つはアミノ又はヒドラジノ基でなければならない構造を含み、そしてそれらの生物学上又は医薬上許容できる酸又はアルカリ付加塩を包含する。
【０２７６】
上記の低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を含有するのが好ましく、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。
【０２７７】
式VIIに含まれるアリール基は６〜１０個の炭素原子を含有するもの、例えばフェニル及び低級アルキル置換フェニル（例えばトリル及びキシリル）、並びに１〜２個のハロ、ヒドロキシ又は低級アルコキシ基で置換されたフェニルである。
【化３１】
2007523908.tif 000034
【０２７８】
式VII中のハロ原子はフルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードであることができる。低級アルコキシ基は１〜６個、好ましくは１〜３個の炭素原子を含有し、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ等である。
【０２７９】
本発明の目的のための式VIIの化合物の等価物は、それらの生物学上又は医薬上許容できる酸付加塩である。かかる酸付加塩は、硫酸、リン酸、塩酸、臭化水素酸、スルファミン酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、桂皮酸、酢酸、安息香酸、グルコン酸、アスコルビン酸及び同族の酸のような様々な有機及び無機酸から誘導されるものであることができる。
【０２８０】
式VIIに含まれる化合物の中では、ある種の置換基の組合せが好ましい。例えば、Ｒ13が水素である場合にはＲ14がアミノ基であるのが好ましい。Ｒ14がヒドラジノ基である場合にはＲ13がアミノ基であるのが好ましい。
【０２８１】
式VIIの化合物の代表的なものは、次のものである：
３，４−ジアミノ−５−メチル−１，２，４−トリアゾール；３，５−ジメチル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−４−アミン；４−トリアゾール−４−アミン；４−トリアゾール−４−アミン；４−トリアゾール−４−アミン；１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン；５−（１−エチルプロピル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン；５−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン；５−シクロヘキシル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン；５−メチル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン；５−フェニル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン；５−プロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン；５−シクロヘキシル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，４−ジアミン。
【０２８２】
式VIIIは、Ｒ16が水素又はアミノ基であり、Ｒ16が水素である場合にはＲ17がアミノ基又はグアニジノ基であり、Ｒ16がアミノ基である場合にはＲ17がアミノ基であり、Ｒ18及びＲ19が独立して水素、ヒドロキシ、低級アルキル基、低級アルコキシ基又はアリール基である構造を含み、そしてそれらの生物学上又は医薬上許容できる酸又はアルカリ付加塩を包含する。
【０２８３】
式VIIIの化合物中の低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を含有するのが好ましく、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。同様に低級アルコキシ基は１〜６個、好ましくは１〜３個の炭素原子を含有し、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ等である。
【化３２】
2007523908.tif 000035
【０２８４】
上記の式中に含まれるアリール基は、６〜１０個の炭素原子を含有するもの、例えばフェニル及び低級アルキル置換フェニル（例えばトリル及びキシリル）、並びに１〜２個のハロ、ヒドロキシ又は低級アルコキシ基で置換されたフェニルである。上記の式VIII中のハロ原子は、フルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードであることができる。
【０２８５】
式VIIIの化合物の生物学上又は医薬上許容できる塩は、哺乳類の体が耐えられるものであり、硫酸、リン酸、塩酸、スルファミン酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、桂皮酸、酢酸、安息香酸、グルコン酸、アスコルビン酸及び同族の酸のような様々な有機及び無機酸から誘導される酸付加塩を包含する。式VIIIに含まれる化合物の中では、ある種の置換基が好ましい。例えば、Ｒ16又はＲ17がアミノ基である化合物が好ましいグループである。
【０２８６】
式VIIIの化合物の代表的なものは、次のものである：
２−グアニジノベンゾイミダゾール；１，２−ジアミノベンゾイミダゾール；１，２−ジアミノベンゾイミダゾール塩酸塩；５−ブロモ−２−グアニジノベンゾイミダゾール；５−メトキシ−２−グアニジノベンゾイミダゾール；５−メチルベンゾイミダゾール−１，２−ジアミン；５−クロロベンゾイミダゾール−１，２−ジアミン；及び２，５−ジアミノベンゾイミダゾール。
【０２８７】
式IXは、Ｒ20−ＣＨ−(ＮＨＲ21)−ＣＯＯＨ（IX）から成り、Ｒ20が水素；随意に１又は２個のヒドロキシル、チオール、フェニル若しくはヒドロキシフェニルで置換された低級アルキル、低級アルキルチオール、カルボキシ、アミノカルボキシ又はアミノ基の群から選ばれ且つＲ21が水素及びアシル基の群から選ばれる構造式並びにそれらの生体適合性の酸付加塩及び医薬上許容できる酸付加塩である。
【化３３】
2007523908.tif 000036
【０２８８】
式IXの化合物の低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を含有し、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。
【０２８９】
ここで言うアシル基は、２〜１０個の炭素原子を有する低級アルキル−、アリール−及びヘテロアリール−カルボン酸の残基である。これらはアセチル、プロピオニル、ブタノイル、バレリル、ヘキサノイル並びにそれらの対応する長鎖及び分岐鎖状類似体によって代表される。アシル基は又、１以上の二重結合及び／又は追加の酸官能基、例えばグルタリル及びスクシニルを含有することもできる。
【０２９０】
ここで用いられるアミノ酸は、Ｌ及びＤのいずれかの立体化学配置を有することもでき、それらの混合物として用いることもできる。しかしながら、Ｌ配置が好ましい。
【０２９１】
本発明の目的のための式IXの化合物の等価物は、それらの生体適合性の塩及び医薬上許容できる塩である。かかる塩は、メタンスルホン酸、塩酸、トルエンスルホン酸、硫酸、マレイン酸、酢酸、リン酸及び同族の酸のような様々な無機及び有機酸から誘導されるものであることができる。
【０２９２】
式IXの化合物の代表的な化合物は、次のものである：
リシン；２，３−ジアミノコハク酸；システイン並びにそれらの生体適合性の塩及び医薬上許容できる塩。
【０２９３】
式Ｘは、Ｒ22及びＲ23が独立して水素、アミノ基又はモノ−若しくはジアミノ低級アルキル基であり、Ｒ24及びＲ25が独立して水素、低級アルキル基、アリール基又はアシル基であり、但しＲ22及びＲ23の内の一方がアミノ基又はモノ−若しくはジアミノ低級アルキル基である構造を含み、そしてそれらの生物学上又は医薬上許容できる酸又はアルカリ付加塩を包含する。
【０２９４】
式Ｘの化合物の低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を含有し、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。モノ−又はジアミノアルキル基とは、鎖中において１又は２個のアミノ基で置換された低級アルキル基である。
【化３４】
2007523908.tif 000037
【０２９５】
ここで言うアリール基は、６〜１０個の炭素原子を含有するもの、例えばフェニル及び低級アルキル置換フェニル（例えばトリル及びキシリル）、並びに１〜２個のハロ、ヒドロキシ又は低級アルコキシ基で置換されたフェニルを含む。ここで言うアシル基は、２〜１０個の炭素原子を含有する低級アルキル−、アリール−及びヘテロアリール−カルボン酸の残基である。これらは、アセチル、プロピオニル、ブタノイル、バレリル、ヘキサノイル並びにそれらの対応する長鎖及び分岐鎖状類似体によって代表される。又、アシル基は１以上の二重結合及び／又は追加の酸官能基、例えばグルタリル又はスクシニルを含有することもできる。
【０２９６】
上記のヘテロアリール基は、３〜６個の炭素原子及び１個以上の酸素、窒素又は硫黄のようなヘテロ原子を含有する芳香族ヘテロ環式基を包含する。
【０２９７】
上記式Ｘ中のハロ原子は、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードであることができる。低級アルコキシ基は１〜６個、好ましくは１〜３個の炭素原子を含有し、例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ等である。
【０２９８】
用語生物学上又は医薬上許容できる塩とは、哺乳類の体が耐えられる塩を意味し、例えば硫酸、リン酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、スルファミン酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、桂皮酸、酢酸、安息香酸、グルコン酸、アスコルビン酸及び同族の酸のような様々な有機及び無機酸から誘導される酸付加塩である。
【０２９９】
式Ｘに含まれる化合物の中では、ある種の置換基の組合せが好ましい。例えば、Ｒ22及びＲ23が共にアミノ基である場合には、Ｒ24及びＲ25が共に水素原子であるのが好ましい。Ｒ22又はＲ23がアミノ基である場合には、Ｒ24又はＲ25の一方がアリール基であり且つＲ24及びＲ25のもう一方が水素であるのが好ましい。
【０３００】
式Ｘの代表的な化合物は、次のものである：
１，２−ジアミノ−４−フェニル［ｌＨ］イミダゾール；１，２−ジアミノイミダゾール；１−（２，３−ジアミノプロピル）イミダゾール三塩酸塩；４−（４−ブロモフェニル）イミダゾール−１，２−ジアミン；４−（４−クロロフェニル）イミダゾール−１，２−ジアミン；４−（４−ヘキシルフェニル）イミダゾール−１，２−ジアミン；４−（４−メトキシフェニル）イミダゾール−１，２−ジアミン；４−フェニル−５−プロピルイミダゾール−１，２−ジアミン；１，２−ジアミノ−４−メチルイミダゾール；１，２−ジアミノ−４，５−ジメチルイミダゾール；及び１，２−ジアミノ−４−メチル−５−アセチルイミダゾール。
【０３０１】
式XIは、Ｒ26がヒドロキシ、低級アルコキシ、アミノ、アミノ低級アルコキシ、モノ低級アルキルアミノ低級アルコキシ、ジ低級アルキルアミノ低級アルコキシ若しくはヒドラジノ基、又は式−ＮＲ29Ｒ30の基であり、Ｒ29が水素又は低級アルキルであり、Ｒ30が１〜２０個の炭素原子を有するアルキル基、アリール基、ヒドロキシ低級アルキル基、カルボキシ低級アルキル基、低級シクロアルキル基又は４〜７個の環員及び１〜３個のヘテロ原子を含有するヘテロ環式基であり；或はＲ29及びＲ30が窒素と一緒になってモルホリノ、ピペリジニル又はピペラジニル基を形成し；Ｒ29が水素である場合にはＲ30がヒドロキシ基であることもでき；Ｒ27が０〜３個のアミノ若しくはニトロ基及び／又はヒドラジノ基、ヒドラジノスルホニル基、ヒドロキシエチルアミノ若しくはアミジノ基であり；Ｒ28が水素又は１若しくは２個のフルオロ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、カルボキシ、低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ又はヒドロキシ低級アルキルアミノ基であり；但し、Ｒ26がヒドロキシ又は低級アルコキシである場合にはＲ27が非水素置換基であり；さらに、Ｒ26がヒドラジノである場合にはフェニル環上に少なくとも２個の非水素置換基が存在しなければならず；さらに、Ｒ28が水素である場合にはＲ30はアミノイミノ、グアニジノ、アミノグアニジノ又はジアミノグアニジノであることもできる構造を含み、そしてそれらの医薬上許容できる塩及び水和物を包含する。
【０３０２】
式XIの化合物の低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を含有し、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。シクロアルキル基は４〜７個の炭素原子を有し、例えばシクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、４−メチルシクロヘキシル及びシクロヘプチル基のような基である。
【化３５】
2007523908.tif 000038
【０３０３】
式XIの化合物のヘテロ環式基は、環中に少なくとも１個で３個までのヘテロ原子、例えば酸素、窒素又は硫黄を有する４〜７員環を包含し、様々な不飽和度のものを包含する。
【０３０４】
かかるヘテロ環式基の代表的なものは、モルホリノ、ピペリジノ、ホモピペリジノ、ピペラジノ、メチルピペラジノ、ヘキサメチレンイミノ、ピリジル、メチルピリジル、イミダゾリル、ピロリジニル、２，６−ジメチルモルホリノ、フルフラール、１，２，４−チアゾリル、チアゾリル、チアゾリニル、メチルチアゾリル等のようなものである。
【０３０５】
本発明の目的のための式XIの化合物の等価物は、それらの生体適合性の塩及び水和物並びに医薬上許容できる塩及び水和物である。かかる塩は、様々な有機及び無機酸から誘導されるものであることができ、これらの酸にはメタンスルホン酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、トルエンスルホン酸、硫酸、マレイン酸、酢酸及びリン酸が包含されるが、これらに限定されるものではない。
【０３０６】
式XIの化合物が１個以上の不斉炭素原子を含有する場合、エナンチオマーの混合物、並びに純粋な（Ｒ）又は（Ｓ）エナンチオマー形を本発明の実施に当たって用いることができる。
【０３０７】
さらに、フェニル環上に３，４−ジアミノ−又は２，３−ジアミノ−５−フルオロ置換基パターンを有する化合物が特に好ましい。
【０３０８】
本発明の式XIの代表的な化合物は、次のものである：
４−（シクロヘキシルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン塩酸塩；３，４−ジアミノベンゾヒドラジド；４−（ｎ−ブチルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン二塩酸塩；４−（エチルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン二塩酸塩；４−カルバモイル−ｏ−フェニレンジアミン塩酸塩；４−（モルホリノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン塩酸塩；４−［（４−モルホリノ）ヒドラジノ−カルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン；４−（１−ピペリジニルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン二塩酸塩；２，４−ジアミノ−３−ヒドロキシ安息香酸；４，５−ジアミノ−２−ヒドロキシ安息香酸；３，４−ジアミノベンズアミド；３，４−ジアミノベンゾヒドラジド；３，４−ジアミノ−Ｎ，Ｎ−ビス（１−メチルエチル）ベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ，Ｎ−ジエチルベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ，Ｎ−ジプロピルベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−（２−フラニルメチル）ベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−（２−メチルプロピル）ベンズアミド；ベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−（５−メチル−２−チアゾリル）ベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−（６−メトキシ−２−ベンゾチアゾリル）ベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−（６−メトキシ−８−キノリニル）ベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−（６−メチル−２−ピリジニル）ベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）ベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−（２−ピリジニル）ベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−（２−チアゾリル）ベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−（４−ピリジニル）ベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−［９Ｈ−ピリド（３，４−ｂ）インドール−６−イル］ベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−ブチルベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−シクロヘキシルベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−シクロペンチルベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−デシルベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−ドデシルベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−メチルベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−オクチルベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−ペンチルベンズアミド；３，４−ジアミノ−Ｎ−フェニルベンズアミド；４−（ジエチルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（ｔ−ブチルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−イソブチルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（ネオペンチルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（ジプロピルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（ｎ−ヘキシルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（ｎ−デシルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（ｎ−ドデシルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（１−ヘキサデシルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（オクタデシルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（ヒドロキシルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（２−ヒドロキシエチルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレン；４−［（２−ヒドロキシエチルアミノ）エチルアミノ−カルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン；４−［（２−ヒドロキシエチルオキシ）エチルアミノ−カルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン；４−（６−ヒドロキシヘキシルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（３−エトキシプロピルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（３−イソプロポキシプロピルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（３−ジメチルアミノプロピルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−［４−（２−アミノエチル）モルホリノ−カルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン；４−［４−（３−アミノプロピル）モルホリノ−カルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン；４−Ｎ−（３−アミノプロピル）ピロリジノ−カルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン；４−［３−（Ｎ−ピペリジノ）プロピルアミノ−カルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン；４−［３−（４−メチルピペラジニル）プロピルアミノ−カルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン；４−（３−イミダゾリルプロピルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（３−フェニルプロピルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−［２−（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）エチルアミノ−カルボニル］−ｏ−フェニレンジアミン；４−（イミダゾリルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（ピロリジニル−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（ピペリジノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（１−メチルピペラジニル−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（２，６−ジメチルモルホリノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（ピロリジン−１−イルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（ホモピペリジン−１−イルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（４−メチルピペラジン−１−イルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（１，２，４−トリアゾール−１−イルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（グアニジニル−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（グアニジニルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−アミノグアニジニルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；４−（ジアミノグアニジニルアミノ−カルボニル）−ｏ−フェニレンジアミン；３，４−アミノサリチル酸；４−グアニジノ安息香酸；３，４−ジアミノベンゾヒドロキサム酸；３，４，５−トリアミノ安息香酸；２，３−ジアミノ−５−フルオロ−安息香酸；及び３，４−ジアミノ安息香酸；並びにそれらの医薬上許容できる塩及び水和物。
【０３０９】
式XIIは、Ｒ31が水素、低級アルキル又はヒドロキシ基であり；Ｒ32が水素、ヒドロキシ低級アルキル、低級アルコキシ基、低級アルキル基又はアリール基であり；Ｒ33が水素又はアミノ基である構造；及びそれらの生物学上又は医薬上許容できる酸付加塩を含む。
【０３１０】
式XIIの化合物の低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を含有し、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。同様に、低級アルコキシ基は１〜６個、好ましくは１〜３個の炭素原子を含有し、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシ、プロポキシ等を包含する。ヒドロキシ低級アルキル基は第１、第２及び第３アルコール置換基パターンを包含する。
【化３６】
2007523908.tif 000039
【０３１１】
式XIIの化合物のアリール基には、６〜１０個の炭素原子を含有するもの、例えばフェニル及び低級アルキル置換フェニル（例えばトリル及びキシリル）、並びに１〜２個のハロ、ヒドロキシ又は低級アルコキシ基で置換されたフェニルが包含される。上記式XII中のハロ原子は、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードであることができる。
【０３１２】
用語「生物学上又は医薬上許容できる塩」とは、哺乳類の体が耐えられる塩を意味し、例えば硫酸、リン酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、スルファミン酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、桂皮酸、酢酸、安息香酸、グルコン酸、アスコルビン酸及び同族の酸のような様々な有機及び無機酸から誘導される酸付加塩である。
【０３１３】
式XIIに含まれる化合物の中では、ある種の置換基が好ましい。例えば、Ｒ32がヒドロキシであり且つＲ33がアミノ基である化合物が好ましい。
【０３１４】
式XIIの化合物の代表的なものには、次のものが包含される（しかしこれらに限定されるものではない）：
３，４−ジアミノピラゾール；３，４−ジアミノ−５−ヒドロキシピラゾール；３，４−ジアミノ−５−メチルピラゾール；３，４−ジアミノ−５−メトキシピラゾール；３，４−ジアミノ−５−フェニルピラゾール；１−メチル−３−ヒドロキシ−４，５−ジアミノピラゾール；１−（２−ヒドロキシエチル）−３−ヒドロキシ−４，５−ジアミノピラゾール；１−（２−ヒドロキシエチル）−３−フェニル−４，５−ジアミノピラゾール；１−（２−ヒドロキシエチル）−３−メチル−４，５−ジアミノピラゾール；１−（２−ヒドロキシエチル）−４，５−ジアミノピラゾール；１−（２−ヒドロキシプロピル）−３−ヒドロキシ−４，５−ジアミノピラゾール；３−アミノ−５−ヒドロキシピラゾール；及び１−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）−３−ヒドロキシ−４，５−ジアミノピラゾール；並びにそれらの生物学上及び医薬上許容できる酸付加塩。
【０３１５】
式XIIIは、ｎが１〜６であり、Ｘが−ＮＲ1−、−Ｓ(Ｏ)−、−Ｓ(Ｏ)2−又は−Ｏ−であり、Ｒ1がＨ、直鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)及び分岐鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)の群から選ばれ、Ｙが−Ｎ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり且つＺがＨ、直鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)及び分岐鎖状アルキル基(Ｃ1〜Ｃ6)の群から選ばれる構造を含む。
【化３７】
2007523908.tif 000040
【０３１６】
式XIVは、Ｒ37は低級アルキル基又は式ＮＲ41ＮＲ42であり、ここで、Ｒ41及びＲ42は、Ｒ41が水素であり且つＲ42が低級アルキル基若しくはヒドロキシ（低級）アルキル基であるか、又はＲ41及びＲ42と窒素原子とが一緒になってヘテロ環式基を形成するかのいずれかであり、ここで、このヘテロ環式基は４〜６個の炭素原子を有し且つ窒素原子に加えて０〜１個の酸素、窒素又は硫黄原子を含有し；Ｒ38が水素又はアミノ基であり；Ｒ39が水素又はアミノ基であり；Ｒ40が水素又は低級アルキル基であり；但し、Ｒ38、Ｒ39及びＲ40の内の少なくとも１つは水素以外であり；さらに、Ｒ37及びＲ38の両方共がアミノ基であることはできない構造；並びにそれらの医薬上許容できる酸付加塩を含む。
【０３１７】
式XIVの化合物の低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を含有し、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。
【化３８】
2007523908.tif 000041
【０３１８】
ＮＲ41ＮＲ42基が形成するヘテロ環式基は、環中に０〜１個の追加のヘテロ原子、例えば酸素、窒素又は硫黄を有し、様々な不飽和度を有する４〜７員環である。かかるヘテロ環式基の代表的なものは、モルホリノ、ピペリジノ、ヘキサヒドロアゼピノ、ピペラジノ、メチルピペラジノ、ヘキサメチレンイミノ、ピリジル、メチルピリジル、イミダゾリル、ピロリジニル、２，６−ジメチルモルホリノ、１，２，４−チアゾリル、チアゾリル、チアゾリニル等のようなものである。
【０３１９】
本発明の目的のための式XIVの化合物の等価物は、それらの生体適合性の塩及び医薬上許容できる塩である。かかる塩は、様々な有機及び無機酸から誘導されるものであることができ、メタンスルホン酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、トルエンスルホン酸、硫酸、マレイン酸、酢酸及びリン酸を包含するが、これらに限定されるものではない。
【０３２０】
式XIVの化合物が１個以上の不斉炭素原子を含有する場合、エナンチオマーの混合物、並びに純粋な（Ｒ）又は（Ｓ）エナンチオマー形を本発明の実施に当たって用いることができる。
【０３２１】
式XIVに含まれる化合物の中では、ある種の置換基の組合せが好ましい。例えば、Ｒ37がヘテロ環式基、好ましくはモルホリノ又はヘキサヒドロアゼピノ基である化合物が特に好ましい。
【０３２２】
式XIVの化合物の代表的なものは、次のものである：
２−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）ヒドラジンカルボキシイミド酸ヒドラジド；Ｎ−（４−モルホリノ）ヒドラジンカルボキシイミドアミド；１−メチル−Ｎ−（４−モルホリノ）ヒドラジンカルボキシイミドアミド；１−メチル−Ｎ−（４−ピペリジノ）ヒドラジンカルボキシイミドアミド；１−（Ｎ−ヘキサヒドロアゼピノ）ヒドラジンカルボキシイミドアミド；Ｎ，Ｎ−ジメチルカルボンイミド酸ジヒドラジド；１−メチルカルボンイミド酸ジヒドラジド；２−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）カルボヒドラゾン酸ジヒドラジド；及びＮ−エチルカルボンイミド酸ジヒドラジド。
【０３２３】
式XVは、(Ｒ43ＨＮ＝)ＣＲ44−Ｗ−ＣＲ45(＝ＮＨＲ43)（XV）から成り；Ｒ43がピリジル、フェニル又は式のカルボン酸置換フェニル基（ここで、Ｒ46は水素、低級アルキル基又は水可溶化エステル成分である）であり；Ｗが炭素−炭素結合又は１〜３個の炭素原子を有するアルキレン基であり、Ｒ44が低級アルキル、アリール又はヘテロアリール基であり且つＲ45が水素、低級アルキル、アリール又はヘテロアリール基である構造であり；それらの生物学上又は医薬上許容できる酸付加塩を包含する。
【０３２４】
式XVの化合物の低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を含有するのが好ましく、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。これらの基は、１個以上のハロ、ヒドロキシ、アミノ又は低級アルキルアミノ基で随意に置換されていてよい。
【０３２５】
同様に、式XVの化合物のアルキレン基は直鎖状又は分岐鎖状であってよく、かくして例えばエチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン、ヘキシレン及びそれらの対応する分岐鎖状異性体である。
【化３９】
2007523908.tif 000042
【０３２６】
カルボン酸置換フェニル基の式中のＲ44は水素、低級アルキル基又は水可溶化エステル成分であり、この水可溶化エステル成分は、当技術分野において公知の様々なかかるエステルから選択することができる。典型的には、これらのエステルは、ジアルキレン若しくはトリアルキレングリコール又はそれらのエーテル、ジヒドロキシアルキル基、アリールアルキル基（例えばニトロフェニルアルキル及びピリジルアルキル基）、並びにヒドロキシ及びカルボキシ置換アルキル基のカルボン酸エステル及びリン酸エステルから誘導される。特に好ましい水可溶化エステル成分は、２，３−ジヒドロキシプロパン及び２−ヒドロキシエチルホスフェートから誘導されるものである。
【０３２７】
上記式XVに含まれるアリール基は、６〜１０個の炭素原子を含有するもの、例えばフェニル及び低級アルキル置換フェニル（例えばトリル及びキシリル）であり、１〜２個のハロ、ニトロ、ヒドロキシ又は低級アルコキシ基で随意に置換されていてよい。
【０３２８】
フェニル又はアリール環の置換可能性がある場合、置換基の位置は、ヒドラジン基の窒素へのフェニル又はアリール環の結合点に対してオルト位、メタ位又はパラ位であることができる。
【０３２９】
上記の式XV中のハロ原子は、フルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードであることができる。低級アルコキシ基は１〜６個、好ましくは１〜３個の炭素原子を含有し、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ等である。
【０３３０】
上記の式XV中のヘテロアリール基は１〜２個のヘテロ原子、即ち窒素、酸素又は硫黄を含有し、例えばフリル、ピロリニル、ピリジル、ピリミジニル、チエニル、キノリル及び対応するアルキル置換化合物である。
【０３３１】
本発明の目的のための式XVの化合物の等価物は、それらの生物学上又は医薬上許容できる酸付加塩である。かかる酸付加塩は、硫酸、リン酸、塩酸、臭化水素酸、スルファミン酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、桂皮酸、酢酸、安息香酸、グルコン酸、アスコルビン酸、メタンスルホン酸及び同族の酸のような様々な有機及び無機酸から誘導されるものであることができる。
【０３３２】
式XVに含まれる化合物の中では、ある種の置換基が好ましい。例えば、Ｗが炭素−炭素結合であり、Ｒ44がメチル基であり且つＲ45が水素である化合物が好ましい。
【０３３３】
式XVの化合物の代表的なものは、次のものである：
メチルグリオキサールビス−（２−ヒドラジノ−安息香酸）ヒドラゾン；メチルグリオキサールビス−（ジメチル−２−ヒドラジノベンゾエート）ヒドラゾン；メチルグリオキサールビス−（フェニルヒドラジン）ヒドラゾン；メチルグリオキサールビス−（ジメチル−２−ヒドラジノベンゾエート）ヒドラゾン；メチルグリオキサールビス−（４−ヒドラジノ安息香酸）ヒドラゾン；メチルグリオキサールビス−（ジメチル−４−ヒドラジノベンゾエート）ヒドラゾン；メチルグリオキサールビス−（２−ピリジル）ヒドラゾン；メチルグリオキサールビス−（ジエチレングリコールメチルエーテル−２−ヒドラジノベンゾエート）ヒドラゾン；メチルグリオキサールビス−［１−（２，３−ジヒドロキシプロパン）−２−ヒドラジンベンゾエートヒドラゾン；メチルグリオキサールビス−［１−（２−ヒドロキシエタン）−２−ヒドラジノベンゾエート］ヒドラゾン；メチルグリオキサールビス−［（１−ヒドロキシメチル−１−アセトキシ））−２−ヒドラジノ−２−ベンゾエート］ヒドラゾン；メチルグリオキサールビス−［（４−ニトロフェニル）−２−ヒドラジノベンゾエート］ヒドラゾン；メチルグリオキサールビス−［（４−メチルピリジル）−２−ヒドラジノベンゾエート］ヒドラゾン；メチルグリオキサールビス−（トリエチレングリコール−２−ヒドラジノベンゾエート）ヒドラゾン；及びメチルグリオキサールビス−（２−ヒドロキシエチルホスフェート−２−ヒドラジンベンゾエート）ヒドラゾン。
【０３３４】
式XVIは、Ｒ47及びＲ48がそれぞれ水素を表わすか又は一緒になって２〜３個の炭素原子を有するアルキレン基を表わすかのいずれかであり、又、Ｒ47が水素である場合にはＲ48が式ａｌｋ−Ｎ−Ｒ50Ｒ51（ここで、ａｌｋは１〜８個の炭素原子を有する直鎖状又は分岐鎖状アルキレン基であり、Ｒ50及びＲ51はそれぞれが独立して１〜６個の炭素原子を有する低級アルキル基を表わすか又は窒素原子と一緒になってモルホリノ、ピペリジニル又はメチルピペラジニル基を形成するかのいずれかである）の基であることができ；Ｒ49が水素であるか又はＲ47とＲ48とが一緒になって２〜３個の炭素原子を有するアルキレン基を形成する場合にはヒドロキシエチル基を表わすかのいずれかであり；Ｗ並びにＲ52及びＲ53が、Ｗが炭素−炭素結合又は１〜３個の炭素原子を有するアルキレン基であり、且つＲ52が低級アルキル、アリール又はヘテロアリール基であり且つＲ53が水素、低級アルキル、アリール又はヘテロアリール基である（但し、Ｗが炭素−炭素結合である場合にはＲ52及びＲ53が一緒になって１，４−ブチレン基を形成することもできる）か；或は、Ｗが１若しくは２個の低級アルキル若しくはアミノ基で随意に置換された１，２−、１，３−若しくは１，４−フェニレン基、２，３−ナフチレン基、２，５−チオフェニレン基、又は２，６−ピリジレン基であり；且つＲ52及びＲ53が共に水素又は低級アルキル基であるか；或は、Ｗがエチレン基であり且つＲ52及びＲ53は一緒になってエチレン基であるか：或は、Ｗがエテニレン基であり且つＲ52及びＲ53が一緒になってエテニレン基であり：或は、Ｗがメチレン基であり且つＲ52及びＲ53が一緒になって式＝Ｃ(−ＣＨ3)−Ｎ−(Ｈ3Ｃ−)Ｃ＝の基であるか又は−Ｃ−Ｗ−Ｃ−とＲ52及びＲ53とが一緒になってビシクロ−（３，３，１）−ノナン若しくはビシクロ−［３，３，１］−オクタン基を形成するかであり且つＲ47及びＲ48が一緒になって２〜３個の炭素原子を有するアルキレン基となり且つＲ49が水素である：構造、並びにそれらの生物学上又は医薬上許容できる酸付加塩を含む。
【化４０】
2007523908.tif 000043
【０３３５】
式XVIの化合物の低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を含有するのが好ましく、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。これらの基は、１個以上のハロ、ヒドロキシ、アミノ又は低級アルキルアミノ基で随意に置換されていてよい。
【０３３６】
同様に、式XVIの化合物のアルキレン基は直鎖状又は分岐鎖状であってよく、かくして例えばエチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン、ヘキシレン及びそれらの対応する分岐鎖状異性体である。
【０３３７】
上記の式XVIに含まれるアリール基は、６〜１０個の炭素原子を含有するもの、例えばフェニル及び低級アルキル置換フェニル（例えばトリル及びキシリル）であり、そして１〜２個のハロ、ヒドロキシ又は低級アルコキシ基で随意に置換されていてよい。
【０３３８】
上記の式XVI中のハロ原子は、フルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードであることができる。低級アルコキシ基は１〜６個、好ましくは１〜３個の炭素原子を含有し、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ等である。
【０３３９】
上記の式XVI中のヘテロアリール基は１〜２個のヘテロ原子、即ち窒素、酸素又は硫黄を含有し、例えばフリル、ピロリニル、ピリジル、ピリミジニル、チエニル、キノリル及び対応するアルキル置換化合物である。
【０３４０】
本発明の目的のための式XVIの化合物の等価物は、それらの生物学上許容できる酸付加塩及び医薬上許容できる酸付加塩である。かかる酸付加塩は、硫酸、リン酸、塩酸、臭化水素酸、スルファミン酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、桂皮酸、酢酸、安息香酸、グルコン酸、アスコルビン酸、メタンスルホン酸及び同族の酸のような様々な有機又は無機酸から誘導されるものであることができる。
【０３４１】
式XVIに含まれる化合物の中では、ある種の置換基が好ましい。例えば、Ｒ48及びＲ49が一緒になって２〜３個の炭素原子を含有するアルキレン基である化合物が好ましい。又、Ｒ52及びＲ53が一緒になってブチレン、エチレン又はエテニレン基である化合物、並びにＲ52及びＲ53が共にメチル又はフリル基である化合物も特に好ましい。
【０３４２】
式XVIの化合物の代表的なものは、次のものである：
メチルグリオキサールビス（グアニルヒドラゾン）；メチルグリオキサールビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン−ヒドラゾン）；テレフタルジカルボキサルデヒドビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）；テレフタルジカルボキサルデヒドビス（グアニルヒドラゾン）；フェニルグリオキサールビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）；フリルグリオキサールビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）；メチルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）；メチルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−１，４，５，６−テトラヒドロピリミジンヒドラゾン）；フェニルグリオキサールビス（グアニルヒドラゾン）；フェニルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）；フリルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）；フェニルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−１，４，５，６−テトラヒドロピリミジンヒドラゾン）；フリルグリオキサールビス（１−（２−ヒドロキシエチル）−２−ヒドラジノ−１，４，５，６−テトラヒドロピリミジンヒドラゾン）；２，３−ブタンジオンビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）；１，４−シクロヘキサンジオンビス（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）；ｏ−フタル酸ジカルボキサルデヒドビス（２−ｈｙｄカルボキシイミドアミドヒドラゾン）；フリルグリオキサールビス（グアニルヒドラゾン）二塩酸塩二水和物；２，３−ペンタンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；１，２−シクロヘキサンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；２，３−ヘキサンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；１，３−ジアセチルビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；２，３−ブタンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；２，６−ジアセチルピリジン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）二臭化水素酸塩；２，６−ジアセチルピリジン−ビス−（グアニルヒドラゾン）二塩酸塩；２，６−ピリジンジカルボキサルデヒド−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）二臭化水素酸塩三水和物；２，６−ピリジンジカルボキサルデヒド−ビス（グアニルヒドラゾン）二塩酸塩；１，４−ジアセチルベンゼン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリンヒドラゾン）二臭化水素酸塩二水和物；１，３−ジアセチルベンゼン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；１，３−ジアセチルベンゼン−ビス（グアニル）−ヒドラゾン二塩酸塩；イソフタルアルデヒド−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；イソフタルアルデヒド−ビス−（グアニル）ヒドラゾン二塩酸塩；２，６−ジアセチルアニリンビス−（グアニル）ヒドラゾン二塩酸塩；２，６−ジアセチルアニリンビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；２，５−ジアセチルチオフェンビス（グアニル）ヒドラゾン二塩酸塩；２，５−ジアセチルチオフェンビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；１，４−シクロヘキサンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；３，４−ヘキサンジオンビス（２−テトラヒドロピリミジン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩；メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−５−メチル−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩；２，３−ペンタンジオン−ビス−（２−ヒドラジノ−３−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；２，３−ヘキサンジオン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；３−エチル−２，４−ペンタンジオン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−５−エチル−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩；メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−５−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩；メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−５−シクロプロピル−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩、メチルグリオキサール−ビス−（４−アミノ−３−ヒドラジノ−５−シクロブチル−１，２，４−トリアゾール）ヒドラゾン二塩酸塩；１，３−シクロヘキサンジオン−ビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；６−ジメチルピリジンビス（グアニル）ヒドラゾン二塩酸塩；３，５−ジアセチル−１，４−ジヒドロ−２，６−ジメチルピリジンビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；ビシクロ−（３，３，１）ノナン−３，７−ジオンビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩；及びｃｉｓ−ビシクロ−（３，３，１）オクタン−３，７−ジオンビス−（２−ヒドラジノ−２−イミダゾリン）ヒドラゾン二臭化水素酸塩。
【０３４３】
式XVIIは、Ｒ54及びＲ55が独立して水素、ヒドロキシ（低級）アルキル、低級アシルオキシ（低級）アルキル及び低級アルキルの群から選ばれ、又はＲ54及びＲ55がそれらの環炭素と一緒になって芳香族縮合環であってもよく；Ｚaが水素又はアミノ基であり；Ｙaが水素又は式−ＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)−Ｒ56の基（ここで、Ｒ56は低級アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、アミノ若しくはアリール基である）又は式−ＣＨＲ'の基（ここで、Ｒ'は水素又は低級アルキル、低級アルキニル若しくはアリール基である）であり；且つＡがハライド、トシレート、メタンスルホネート又はメシチレンスルホネートイオンである構造を含む。
【０３４４】
式XVIIの化合物の低級アルキル基は１〜６個の炭素原子を含有し、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。低級アルキニル基は２〜６個の炭素原子を含有する。同様に、低級アルコキシ基は１〜６個の炭素原子を含有し、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペントキシ及びヘキソキシ並びにそれらの対応する分岐鎖状異性体を包含する。これらの基は、１個以上のハロ、ヒドロキシ、アミノ又は低級アルキルアミノ基で随意に置換されていてよい。
【化４１】
2007523908.tif 000044
【０３４５】
上記の式XVIIに含まれる低級アシルオキシ（低級）アルキル基は、アシルオキシ部分が２〜６個の炭素原子を含有し且つ低級アルキル部分が１〜６個の炭素原子を含有するものを包含する。
【０３４６】
代表的なアシルオキシ部分は、アセトキシ又はエタノイルオキシ、プロパノイルオキシ、ブタノイルオキシ、ペンタノイルオキシ、ヘキサノイルオキシ及びそれらの対応する分岐鎖状異性体のようなものである。代表的な低級アルキル部分は、上に記載したものである。上記の式に含まれるアリール基は、６〜１０個の炭素原子を含有するもの、例えばフェニル及び低級アルキル置換フェニル（例えばトリル及びキシリル）であり、これらは１〜２個のハロ、ヒドロキシ、低級アルコキシ又はジ（低級）アルキルアミノ基で随意に置換されていてよい。好ましいアリール基は、フェニル、メトキシフェニル及び４−ブロモフェニル基である。上記の式XVII中のハロ原子は、フルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードであることができる。
【０３４７】
本発明の目的のためには、式XVIIの化合物は、生物学上又は医薬上許容できる塩として形成される。有用な塩の形は、ハライド、好ましくはブロミド及びクロリド、トシレート、メタンスルホネート及びメシチレンスルホネート塩である。その他の同族の塩は同様に無毒性で生物学上又は医薬上許容できるアニオンを用いて形成されることができる。
【０３４８】
式XVIIに含まれる化合物の中では、ある種の置換基が好ましい。例えば、Ｒ54又はＲ55が低級アルキル基である化合物が好ましい。又、Ｙaが２−フェニル−２−オキソエチル又は２−［４'−ブロモフェニル］−２−オキソエチル基である化合物も特に好ましい。
【０３４９】
式XVIIの化合物の代表的なものは、次のものである：
３−アミノチアゾリウムメシチレンスルホネート；３−アミノ−４，５−ジメチルアミノチアゾリウムメシチレンスルホネート；２，３−ジアミノチアゾリニウムメシチレンスルホネート；３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−チアゾリウムブロミド；３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４，５−ジメチルチアゾリウムブロミド；３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルチアゾリウムブロミド；３−（２−フェニル−２−オキソエチル）−４−メチルチアゾリウムブロミド；３−（２−フェニル−２−オキソエチル）−４，５−ジメチルチアゾリウムブロミド；３−アミノ−４−メチルチアゾリウムメシチレンスルホネート；３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−５−メチルチアゾリウムブロミド；３−（３−（２−フェニル−２−オキソエチル）−５−メチルチアゾリウムブロミド；３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］チアゾリウムブロミド；３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］−４−メチルチアゾリウムブロミド；３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］−５−メチルチアゾリウムブロミド；３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］−４，５−ジメチルチアゾリウムブロミド；３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチル−５−（２−ヒドロキシエチル）チアゾリウムブロミド；３−（２−フェニル−２−オキソエチル）−４−メチル−５−（２−ヒドロキシエチル）チアゾリウムブロミド；３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］−４−メチル−５−（２−ヒドロキシエチル）チアゾリウムブロミド；３，４−ジメチル−５−（２−ヒドロキシエチル）チアゾリウムヨージド；３−エチル−５−（２−ヒドロキシエチル）−４−メチルチアゾリウムブロミド；３−ベンジル−５−（２−ヒドロキシエチル）−４−メチルチアゾリウムクロリド；３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）ベンゾチアゾリウムブロミド；３−（２−フェニル−２−オキソエチル）ベンゾチアゾリウムブロミド；３−［２−（４'−ブロモフェニル）−２−オキソエチル］ベンゾチアゾリウムブロミド；３−（カルボキシメチル）ベンゾチアゾリウムブロミド；２，３−（ジアミノ）ベンゾチアゾリウムメシチレンスルホネート；３−（２−アミノ−２−オキソエチル）チアゾリウムブロミド；３−（２−アミノ−２−オキソエチル）−４−メチルチアゾリウムブロミド；３−（２−アミノ−２−オキソエチル）−５−メチルチアゾリウムブロミド；３−（２−アミノ−２−オキソエチル）−４，５−ジメチルチアゾリウムブロミド；３−（２−アミノ−２−オキソエチル）ベンゾチアゾリウムブロミド；３−（２−アミノ−２−オキソエチル）−４−メチル−５−（２−ヒドロキシエチル）チアゾリウムブロミド；３−アミノ−５−（２−ヒドロキシエチル）−４−メチルチアゾリウムメシチレンスルホネート；３−（２−メチル−２−オキソエチル）チアゾリウムクロリド；３−アミノ−４−メチル−５−（２−アセトキシエチル）チアゾリウムメシチレンスルホネート；３−（２−フェニル−２−オキソエチル）チアゾリウムブロミド；３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチル−５−（２−アセトキシエチル）チアゾリウムブロミド；３−（２−アミノ−２−オキソエチル）−４−メチル−５−（２−アセトキシエチル）チアゾリウムブロミド；２−アミノ−３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）チアゾリウムブロミド；２−アミノ−３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）ベンゾチアゾリウムブロミド；２−アミノ−３−（２−アミノ−２−オキソエチル）チアゾリウムブロミド；２−アミノ−３−（２−アミノ−２−オキソエチル）ベンゾチアゾリウムブロミド；３−［２−（４'−メトキシフェニル）−２−オキソエチル］−チアゾリニウムブロミド；３−［２−（２'，４'−ジメトキシフェニル）−２−オキソエチル］−チアゾリニウムブロミド；３−［２−（４'−フルオロフェニル）−２−オキソエチル］−チアゾリニウムブロミド；３−［２−（２'，４'−ジフルオロフェニル）−２−オキソエチル］−チアゾリニウムブロミド；３−［２−（４'−ジエチルアミノフェニル）−２−オキソエチル］−チアゾリニウムブロミド；３−プロパルギル−チアゾリニウムブロミド；３−プロパルギル−４−メチルチアゾリニウムブロミド；３−プロパルギル−５−メチルチアゾリニウムブロミド；３−プロパルギル−４，５−ジメチルチアゾリニウムブロミド；及び３−プロパルギル−４−メチル−５−（２−ヒドロキシエチル）−チアゾリニウムブロミド。
【０３５０】
式XVIIIは、Ｒ57がＯＨ、ＮＨＣＯＮＣＲ61Ｒ62又はＮ＝Ｃ(ＮＲ61Ｒ62)2であり；ここで、Ｒ61及びＲ62はそれぞれ独立して水素；Ｃ1〜Ｃ10直鎖状又は分岐鎖状アルキル；アリール−Ｃ1〜Ｃ4アルキル及び一置換又は二置換アリール−Ｃ1〜Ｃ4アルキルであり、ここで、置換基はフルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード又はＣ1〜Ｃ10直鎖状若しくは分岐鎖状アルキルであり；Ｒ58及びＲ59がそれぞれ独立して水素、アミノ及び一置換又は二置換アミノの群から選ばれ；ここで、置換基がＣ1〜Ｃ10直鎖状若しくは分岐鎖状アルキル又はＣ3〜Ｃ8シクロアルキルであり；但し、Ｒ58及びＲ59両方共がアミノ又は置換アミノではなくてもよく；且つＲ60が水素、トリフルオロメチル；フルオロ；クロロ；ブロモ；又はヨードである構造；或はそれらの医薬上許容できる塩を含む。
【化４２】
2007523908.tif 000045
【０３５１】
本発明の別の観点では、３ＤＧ機能の阻害剤は、３ＤＧと不可逆的に反応してイミダゾロンと呼ばれる５員環を形成するアミノ酸であるアルギニン等の化合物でもよい。いったん反応が起こると、活性な架橋剤が除去されているので３ＤＧは架橋化を引き起こすことができない。従って、アルギニンと３ＤＧとの結合は、蛋白質の架橋化を防止する（実施例１８及び図１２参照）。ここに記載するように、コラーゲンを３ＤＧで処理すると、コラーゲンがより高分子量を有するかのように電気泳動的移動し、架橋化が行われたことを示す。しかしコラーゲンサンプルをアルギニンの存在下で３ＤＧで処理すると、よりゆっくりと移動する（高分子量）蛋白質の出現が阻止された（実施例１８及び図１２参照）。アルギニンは他のα−ジカルボニル糖も同様に阻害すると考えられる。本発明は、アルギニンのみを含むと解釈すべきではなく、その誘導体及び修飾（変性）体も含むと解釈すべきである。本発明の１つの観点では、アルギニンは誘導化又は修飾化されて、皮膚又は他の組織をより高い効率で透過若しくは通過させ、又はより有効な結果をもたらす。
【０３５２】
アミノ酸アルギニンは下記構造を有する：
【化４３】
2007523908.tif 000046
【０３５３】
本発明の別の観点では、３ＤＧ又は他のα−ジカルボニル糖機能の阻害剤は、Ｌ−システイン又はα−アミノ−β，β−メルカプト−β，β−ジメチル−エタン等の誘導体、又はその誘導体もしく修飾（変性）体でもよい。α−アミノ−β，β−メルカプト−β，β−ジメチル−エタンファミリーのメンバーとして、限定されるものではないが、Ｄ−ペニシラミン、Ｌ−ペニシラミン及びＤ，Ｌ−ペニシラミン等の化合物（Jacobsonら、国際公開第01/78718号パンフレット参照）が挙げられる。阻害される機能には、限定されるものではないが、蛋白質及び他の分子の架橋化の阻害、並びに蛋白質、脂質及びＤＮＡ等の分子に損傷を引き起こす他の機能等、ここに記載される種々の機能を含む。例えば脂質に対する損傷には、脂質の過酸化が挙げられ、ＤＮＡに対する損傷には突然変異誘発等の損傷が挙げられる。
【０３５４】
本発明の１つの観点では、α−アミノ−β，β−メルカプト−β，β−ジメチル−エタンは、誘導化又は修飾化されて、皮膚又は他の組織をより高い効率で透過若しくは通過させ、又はより高い効率で３ＤＧ及び他のα−ジカルボニル糖の目的の機能の阻害をもたらす。
【０３５５】
例えばα−アミノ−β，β−メルカプト−β，β−ジメチル−エタン誘導体、Ｄ−ペニシラミンは、下記構造を有する：
【化４４】
2007523908.tif 000047
【０３５６】
ここに記載された化合物は、デスモシン産生を阻害できる化合物だけではないと理解すべきである。当業者は、デスモシン機能の阻害に関連してここに記載する本発明の様々な態様は、デスモシン機能を阻害するために有用な他の方法及び化合物も包含すると理解できる。又当業者は本発明を実施するために他の化合物及び技術を使用することができることも認識する。
【０３５７】
本発明の別の例では、ここで記載されるように、ここに記載されたいずれの化合物又は方法も、皮膚老化、皺及び弾性の損失の予防又は治療のために使用できる。
【０３５８】
例えば本発明は、皮膚中の様々な変化を、フルクトサミン３キナーゼ及び３ＤＧを阻害することによりデスモシン生成を抑制する化合物を使用した処置に続いて測定できる。
皮膚微細構造は、（ａ）皺の数；（ｂ）皺の合計面積；（ｃ）皺の合計長さ；（ｄ）皺の平均長さ；及び（ｅ）皺の平均深さ等のパラメーターにより定義できる。皺のタイプは、深さ、長さ、及び面積を根拠に決定できる。これら性質は、皮膚の疾患若しくは障害又は治療の効果による皮膚の変化を評価するときに使用できる。様々な皮膚品質に対するエラスチン変化の効果及び作用は、公知技術により測定できる。皮膚品質の測定方法として、限定されるものではないが、皮膚弾力計等の機器による粘弾性測定、キュトメーター等の機器による皮膚の物理的／垂直方向変形性測定、又は湿度変化から生じる皮膚電気容量の変化のcorneometer（商標）を使用した測定等が挙げられる。
【０３５９】
本発明は又、哺乳類における蛋白質架橋の崩壊（reversal）に関する。例えば、本発明は、グリコシル化(糖化)最終生成物が形成される結果として形成された、単一の蛋白質内又は２以上の蛋白質間に形成された架橋の崩壊又は切断に関する。例えば、本発明は、コラーゲン及びエラスチンの反転（reversal）に有用な化合物及び方法を示す。別の例として、本発明は、ここで詳細に記載されている合併症等の糖尿病性合併症から生じる蛋白質架橋の崩壊に有用な組成物及び方法を示す。
【０３６０】
従って、本発明の一例は、強皮症、ケロイド、及び瘢痕の群から選ばれる疾患を有する哺乳類であり、その治療を必要とする哺乳類の治療方法を示す。この方法は、架橋された蛋白質間の架橋を崩壊できる少なくとも１の化合物を含有する組成物の有効量の哺乳類への投与を含む。本発明で使用できる化合物及び方法の例として、例えばここで資料として使用する米国特許6,319,934号明細書に記載されたものが挙げられる。本出願の初めての開示を参考に、当業者は米国特許6,319,934号明細書の化合物及び方法を本発明へ適用する方法を理解できる。
【０３６１】
１つの局面において、本発明で使用できる化合物は、式XXV：
【化４５】
2007523908.tif 000048
【０３６２】
｛ここで、Ｒ1及びＲ2は独立して水素及びアルキル基（これはヒドロキシ基で置換されていてもよい）の群から選ばれ；
Ｙは式−ＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)Ｒの基（ここで、Ｒは４〜１０個の環員並びに酸素、窒素及び硫黄の群から選ばれる１〜３個のヘテロ原子を含有するアルキレンジオキシアリール以外のヘテロ環式基であり、このヘテロ環式基はアルキル、オキソ、アルコキシカルボニルアルキル、アリール及びアラルキル基の群から選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよく；前記の１以上の置換基は、１以上のアルキル又はアルコキシ基で置換されていてもよい）；又は式−ＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)−ＮＨＲ'の基（ここで、Ｒ'は４〜１０個の環員並びに酸素、窒素及び硫黄の群から選ばれる１〜３個のヘテロ原子を含有するアルキレンジオキシアリール以外のヘテロ環式基であり、このヘテロ環式基は１以上のアルコキシカルボニルアルキル基で置換されていてもよい）であり、
Ｘは医薬上許容できるイオン；及びその担体である｝
の群から選ばれる。
【０３６３】
本発明は、本発明の方法を実行するための、特定の化合物の医薬的又は化粧用組成物としての投与に関し、この組成物は化合物は更に、化合物の適切な誘導体又は断片及び医薬的に許容できる担体を含むことができる。本発明は、リシン(lysine)形成の１つ又は２以上の同時使用を含むと解釈すべきである。１を超える刺激物又は阻害剤が使用される場合、それらは一緒に投与されても、別個に投与されてもよい。
【０３６４】
１つの態様では、本発明の実施に有用な医薬的組成物は、１ｎｇ／ｋｇ／日から１００ｍｇ／ｋｇ／日の間の用量でデリバリーするために投与することができる。別の態様では本発明の実施に有用な医薬的組成物は、１ｎｇ／ｋｇ／日から１００ｇ／ｋｇ／日の用量をデリバリーするために投与することができる。
【０３６５】
有用な医薬的に許容できる担体として、限定されるものではないが、グリセロール、水、（生理）食塩水、エタノール、並びにリン酸塩及び有機酸の塩のような他の医薬的に許容できる塩溶液が挙げられる。これら及び他の医薬的に許容できる担体の例は、Remington's Pharmaceutical Sciences (1991, Mack Publication Co., New Jersey)に記載されている。
【０３６６】
医薬的組成物は、滅菌された注射用の水性又は油性の懸濁液又は溶液の状態で調製、包装又は販売されている。この懸濁液又は溶液は、既知の技術に従い配合され、活性成分に加えて、ここで記載する分散剤、加湿剤又は沈殿防止剤等の追加的成分を含んでもよい。これら滅菌された注射用の配合物は、例えば水又は１，３−ブタンジオール等の非毒性の非経口的に許容できる希釈剤又は溶媒を使用して調製できる。他の許容できる希釈剤及び溶媒には限定されるものではないが、リンゲル溶液、等張性塩化ナトリウム溶液、及び合成モノ−又はジ−グリセリド等の固定油が挙げられる。
【０３６７】
本発明の方法に有用な医薬的組成物は、経口、直腸、膣、非経口（経腸性）、局所、肺、鼻内、バッカル、眼内又は他の投与経路に適する配合物として、投与され、調製され、包装され、及び／又は販売できる。他の本発明の製剤として、計画的放出される（projected）ナノ粒子、リポソーム調製物、活性成分を含む再封入赤血球、及び免疫学的製剤が挙げられる。
【０３６８】
本発明の組成物は、限定されるものではないが経口、直腸、膣、非経口（経腸性）、局所、肺、鼻内、バッカル又は眼内投与経路を含む多数の経路を介して投与することができる。これら１以上の投与経路は、当業者とって明白であり、治療する疾患の種類及び重篤度、治療される動物又はヒト患者の種類及び年齢等を含む任意の数の因子に依存する。
【０３６９】
本発明の方法に有用な医薬的組成物は、経口の固体製剤、眼薬、座薬、エアロゾル、局所又は他の類似製剤で全身的に投与することができる。ヘパリン硫酸又はその生物学的均等物等の化合物に加えて、これら製薬的組成物は、医薬的に許容できる担体、及び薬剤の投与を強化、促進することが知られている他の成分を含むことができる。ナノ粒子、リポソーム、再封入赤血球及び免疫系等の、他に考えられる製剤も、本発明の方法による化合物を投与するために使用できる。
【０３７０】
ここに記載する任意の方法を使用して特定された化合物は、皮膚の老化、皮膚の皺、及び皮膚の弾力性の損失を治療するために、配合し投与できる。
【０３７１】
これら医薬的組成物は、個体に投与するために適当な形態の活性成分のみからなるものでもよく、又医薬的組成物は少なくとも１つの活性成分及び１以上の医薬的に許容できる担体、１以上の追加的成分、又はこれらの幾つかの組み合わせを含んでもよい。活性成分は、医薬的組成物中に、当分野で公知の生理学的に許容できるカチオン若しくはアニオンとの組み合わせ等の、生理学的に許容できるエステル又は塩の形態で存在することもできる。
【０３７２】
薬品の局所的投与の障害物は、表皮の角質層である。角質層は、蛋白質、コレステロール、スフィンゴ脂質、遊離脂肪酸及び様々な他の脂質を含んでなる高度に耐久性のある層であり、角化細胞及び生細胞を含む。角質層を通過する化合物の浸透速度（フラックス）を限定する因子の１つは、皮膚表面上に担持されるか、又は適用され得る活性物質の量である。皮膚の単位面積あたりに適用される活性物質の量が多いほど、皮膚表面と皮膚のより下層との間の濃度勾配が大きく、その結果皮膚を通過する活性物質の拡散力(diffusion force)も大きい。従って他の全ての条件が同じでより低い濃度を要する製剤よりは、より高濃度の活性物質を含む製剤は、活性物質が皮膚をより浸透し易くなり、そして浸透が多くなり、そしてより一定速度となる。
【０３７３】
ここに記載する医薬的組成物の製剤は、薬理学の分野で既知の、又は今後開発される方法により調製できる。一般にそのような調製法は、活性成分を担体又は１以上の他の補助的成分と組み合わせ、次いで必要又は所望する場合、目的の単回若しくは複数回投与単位に製品を成形又は包装する工程を含む。
【０３７４】
ここに示される医薬的組成物の記載は、ヒトへの医療用投与に適する医薬的組成物を対象としているが、当業者にはこれら組成物が一般にすべての種の動物へ投与するためにも適すると理解できる。
組成物を種々の動物への投与に適するようにするために、ヒトへの投与に適する医薬的組成物の修飾（変性）は充分に理解されており、そして獣医薬理学の当業者は、必要ならば実験により、単なる標準体の修飾（変性）を計画し、実行できる。本発明の医薬的組成物が投与される個体は、限定されるものではないがヒト及び他の霊長類、牛、ブタ、ウマ、ヒツジ、ネコ及びイヌのような市販の哺乳類等の哺乳類を含む。
【０３７５】
本発明の方法に有用な医薬的組成物は、経口、直腸、膣、非経口（経腸性）、局所、肺、鼻内、バッカル、眼内、髄腔内又は他の投与経路に適する製剤内に調製され、包装され、又は販売できる。目的とする他の製剤には、計画的放出されるナノ粒子、リポソーム調製物、活性成分を含む再封入赤血球及び免疫性製剤が挙げられる。
【０３７６】
本発明の医薬的組成物は、バルクで、単回単位用量として又は複数回単位用量として調製され、包装され、又は販売することができる。ここで使用する「単位用量」とは、予め定めた量の活性成分を含む医薬的組成物の別々の量である。活性成分の量は一般に、個体に投与される活性成分の投薬用量に等しいか、又はそのような投薬用量の例えば１／２又は１／３のような便利な投薬用量の画分である。
【０３７７】
本発明の医薬的組成物中の活性成分、医薬的に許容できる担体及び任意の追加的成分の相対的な量は、処置する個体の特徴、サイズ及び症状に依存して、更に組成物が投与される経路に依存して変動する。例として組成物は０．１％から１００（重量／重量）％の活性成分を含んでもよい。
【０３７８】
活性成分に加えて、本発明の医薬的組成物は更に１以上の追加的な医薬的活性薬剤を含んでもよい。特に好ましい追加的薬剤には、制吐剤並びにシアニド及びシアネートスカベンジャーのようなスカベンジャーが挙げられる。
本発明の医薬的組成物の徐放性−又は徐放性配合物は、従来の技術を使用して作成することができる。
【０３７９】
局所的投与に適する配合物として、限定されるものではないが塗布剤、ローション、クリーム、軟膏若しくはペースト等の水中油型又は油中水型エマルジョン等の液体又は半液体調製物、並びに溶液又は懸濁液が挙げられる。局所投与可能な配合物は、例えば約１％〜約１０（重量／重量）％の活性成分を含んでもよいが、活性成分の濃度は溶媒中の活性成分の溶解限界まで高くてもよい。局所投与用の配合物は、更にここに記載する１以上の追加的成分を含んでもよい。
【０３８０】
浸透強化剤も使用できる。これらの物質は皮膚を横断する薬剤の透過速度を増加する。当分野で典型的な強化剤として、エタノール、グリセロールモノラウレート、ＰＧＭＬ（ポリエチレングリコールモノラウレート）、ジメチルスルホキシド等が挙げられる。他の強化剤として、オレイン酸、オレイルアルコール、エトキシジグリコール、ラウロカプラム、アルカンカルボン酸、ジメチルスルホキシド、極性脂質又はＮ−メチル−２−ピロリドンが挙げられる。
【０３８１】
本発明の組成物の幾つかを局所デリバリーするための許容できる賦形剤として、リポソームが挙げられる。リポソームの組成及びそれらの使用は、公知である（例えば、Constanza、米国特許6,323,219号明細書参照）。
【０３８２】
配合される活性化合物の供給源は、一般に化合物の特定の形態に依存する。低分子量の有機分子及びペプチジル断片又はオリゴ断片を化学的に合成し、医薬的／化粧料用途に適する精製状態で提供することができる。天然抽出物製品は、当分野で既知の技術に従い精製することができる。化合物の組み換え型起源も当業者により利用可能である。
【０３８３】
別の態様では局所的に活性な医薬的又は化粧料組成物は、保湿剤、化粧用補助剤、抗酸化剤、錯化剤、漂白剤、チロシナーゼ阻害剤及び他の既知の脱色素剤、界面活性剤、発泡剤、コンディショナー、浸潤剤、加湿剤、乳化剤、香料、粘度調整剤、緩衝剤、保存剤、サンスクリーン等の他の成分と任意で組み合わせることができる。別の態様では、浸透強化性を欠く組成物に対して、浸透及び透過強化剤を組成物に含ませると、活性成分の角質層中及びそれを通過する経皮的透過の改善に効果的である。オレイン酸、オレイルアルコール、エトキシジグリコール、ラウロカプラム、アルカンカルボン酸、ジメチルスルホキシド、極性脂質又はＮ−メチル−２−ピロリドン等の種々の浸透強化剤は、当業者に公知である。別の観点では、本発明の組成物は更に、角質層の構造的無秩序性を増加するように機能するハイドロトロピー剤を含んでもよく、これにより角質層を通過する移動が増加する。イソプロピルアルコール、プロピレングリコール、又はキシレンスルホン酸ナトリウム等の種々のハイドロトロピー剤が当業者には知られている。本発明の組成物は又、例えばトレチノイン、レチノール、トレチノイン及び／又はレチノールのエステル等を含む有効量のレチノイド（即ちレチノイドレセプターファミリーの任意のメンバーに結合する化合物）を含んでもよい。
【０３８４】
局所的に活性な医薬的又は化粧料組成物は、所望の変化を及ぼすための有効量で適用すべきである。ここで使用する「有効量」は、変化を望む皮膚表面の領域を覆うために充分な量を意味する。活性化合物は、組成物の約０．０００１％〜約１５重量容量％の量で存在すべきである。好ましくは組成物の約０．０００５％〜約５％の量で存在すべきであり；最も好ましくは組成物の約０．００１％〜約１％の量で存在すべきである。これら化合物は合成されても天然由来でもよい。
【０３８５】
生物起源から直接作成された液体誘導体及び天然抽出物は、約１〜約９９（重量／容量）％の濃度で本発明の組成物に使用することができる。天然抽出物の画分及びプロテアーゼ阻害剤は、好ましくは組成物の約０．０１％〜約２０％、より好ましくは約１％〜約１０％の異なる好適な範囲を有する。もちろん本発明の活性剤の混合物を組み合わせてもよく、同じ製剤中で使用しても、異なる配合物剤を順次適用で使用してもよい。
【０３８６】
本発明の組成物は、その組成物の総重量の約０．００５％〜２．０％の保存剤を含んでもよい。保存剤は、水性ゲルの場合には組成物が空気又は患者の皮膚に対する暴露等、周囲の不純物に暴露された時の患者の繰り返し使用から腐敗を防ぐために使用し、上記曝露には治療用ゲル又はクリーム等の本発明の組成物を適用するために使用する指との接触も含まれる。本発明に有用な保存剤の例として、限定されるものではないがベンジルアルコール、ソルビン酸、パラベン、イミドウレア及びそれらの組み合わせを含む群から選ばれるものが挙げられる。特に好適な保存剤は、約０．５％〜２．０％のベンジルアルコールと０．０５％〜０．５％ソルビン酸との組み合わせである。
【０３８７】
本発明の組成物は好ましくは、水性ゲル配合物中での本発明の使用のため、化合物の分解を阻害する抗酸化剤及び錯化剤を含む。幾つかの化合物に好適な抗酸化剤はＢＨＴ、ＢＨＡ、α−トコフェロール及びアスコルビン酸であり、好適な範囲は約０．０１％〜０．３％であり、更に好ましくは組成物の総重量の０．０３％〜０．１重量％の範囲のＢＨＴである。好ましくは錯化剤は組成物の総重量の０．０１％〜０．５重量％の量で存在する。更に好適な錯化剤は、エデト酸塩（例えばエデト酸二ナトリウム）及びクエン酸であり、好ましくは組成物の総重量の約０．０１〜０．２０％の重量範囲、更に好ましくは０．０２〜０．１０重量％の範囲である。錯化剤は製剤の寿命に有害となり得る組成物中の金属イオンをキレートするために使用される。ＢＨＴ及びエデト酸二ナトリウム塩はそれぞれ、幾つかの化合物に特に好適な抗酸化剤及び錯化剤であるが、当業者に知られているように他の適当かつ均等な抗酸化剤及び錯化剤で、それらを置き換えることもできる。
【０３８８】
徐放性製剤も使用でき、そしてそのような製剤の使用方法は、当業者に知られている。
ある場合には、使用する剤形は目的の放出プロファイルを割合を変化させて提供するために、例えばヒドロプロピルメチルセルロース、他のポリマー性マトリックス、ゲル、浸透膜、浸透系、多層コーティング、微粒子、リポソーム、又は微小球又はそれらの組み合わせを使用して、その中の１以上の活性成分を緩効的に又は制御的に放出することができる。当業者に公知の適当な徐放性配合物は、ここに記載するものを含め本発明の医薬的組成物に使用するために容易に選択することができる。徐放性に適合するものとされる、錠剤、カプセル、ゲルキャップ及びキャプレットのような経口投与用の単回の単位剤形も本発明に包含される。
【０３８９】
すべての徐放性医薬的製品は、非制御型の製品により達成される薬剤治療を改善する共通目標を有する。理想的には、薬剤治療において最適に設計された徐放性配合物の使用は、最少量の薬剤物質が最短時間で症状を治癒又は制御するために使用されることを特徴とする。徐放性配合物の利点には、薬剤の活性長期化、投薬頻度の低減及び患者のコンプライアンス上昇が含まれる。更に徐放性配合物は、作用開始時期又は薬剤の血中レベル等の他の特性に影響を与えるために使用することもでき、その結果副作用の発生にも影響を与えることができる。
【０３９０】
最も放出が制御された製剤は、目的の治療効果を即座に達成する薬剤量を最初に放出し、この治療効果のレベルを長期にわたり維持するために、薬剤を別の量で徐々に、しかも持続的に放出するように設計されている。この一定の体内薬剤レベルを維持するために、薬剤は体内で代謝されて排出される薬剤の量を置換する速度で剤形から放出されなければならない。
【０３９１】
活性成分の徐放性は、種々のインデューサー、例えばｐＨ、温度、酵素、水又は他の生理学的状態又は化合物により刺激される。本発明の内容において用語「徐放性成分」とは、ここでは活性成分の徐放性を促進する１以上の化合物であり、限定されるものではないがポリマー、ポリマー性マトリックス、ゲル、浸透膜、リポソーム、又は微小球又はそれらの組み合わせを含む。
【０３９２】
液体懸濁液は、水性又は油性賦形剤に活性成分の懸濁を達成する常法を使用して調製できる。水性賦形剤には例えば、水及び等張性食塩水が含まれる。油性賦形剤には例えば、アーモンド油、油性エステル、エチルアルコール；落花生、オリーブ、ゴマ又はヤシ油等の植物油、分別植物油、及び液体パラフィン等の鉱物油が含まれる。液体懸濁液は限定されるものではないが更に、沈殿防止剤、分散剤又は加湿剤、乳化剤、粘滑剤、保存剤、バッファー、塩、風味剤、着色剤及び甘味料等の１以上の追加的成分を更に含んでもよい。油性懸濁液は更に増粘剤を含むことができる。既知の沈殿防止剤には限定されるものではないが、ソルビトールシロップ、水素化食用脂肪、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガム、アカシアガム、及びカルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等のセルロース誘導体が含まれる。既知の分散剤又は加湿剤には限定されるものではないが、レシチン等の天然由来のホスファチド、アルキレンオキシドと；脂肪酸；長鎖脂肪族アルコール；脂肪酸又はヘキシトールに由来する部分エステル；又は脂肪酸又はヘキシトール無水物に由来する部分エステル（それぞれ例えばポリオキシエチレンステアレート、ヘプタデカエチレンオキシセタノール、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレート、及びポリオキシエチレンソルビタンモノオレート）；との間の縮合生成物が含まれる。既知の乳化剤には限定されるものではないが、レシチン及びアカシアが含まれる。既知の保存剤には限定されるものではないが、メチル−、エチル−又はｎ−プロピル−パラ−ヒドロキシベンゾエート、アスコルビン酸及びソルビン酸が含まれる。既知の甘味料には、例えばグリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール、スクロース及びサッカリンが含まれる。油性懸濁液用の既知の増粘剤には、例えば蜜蝋、硬質パラフィン及びセチルアルコールが含まれる。
【０３９３】
活性成分の水性又は油性溶媒液体溶液は、液体懸濁液と実質的に同じ様式で調製することができ、主要な変更は活性成分が溶媒に懸濁されるのではなく溶解される点である。本発明の医薬的組成物の液体溶液は、液体懸濁液に関して記載した各成分を含んでもよいが、沈殿防止剤は活性成分を溶媒に溶解することを促進する必要は必ずしもないと考えられる。水性溶媒には例えば水及び等張性食塩水が含まれる。油性溶媒には例えば、アーモンド油、油性エステル、エチルアルコール、落花生、オリーブ、ゴマ又はヤシ油等の植物油、分別植物油、及び液体パラフィン等の鉱物油を含む。
【０３９４】
本発明の医薬的調製物の粉末及び顆粒状製剤は、既知の方法を使用して調製できる。これら製剤は例えば錠剤を形成するために、カプセルに充填するために、又はそれらに水性若しくは油性賦形剤を加えることにより水性若しくは油性懸濁液若しくは溶液を形成するために使用して、個体に直接投与することができる。これらの各製剤は、更に１以上の分散剤又は加湿剤、沈殿防止剤及び保存剤を含んでもよい。充填剤及び甘味料、風味剤、着色剤等の補形剤も更にこれらの製剤に含めることができる。
【０３９５】
本発明の医薬的組成物は又、水中油型エマルジョン又は油中水型エマルジョンの形態で調製、包装又は販売することができる。油性相はオリーブ又は落花生油等の植物油、液体パラフィン等の鉱物油、又はこれらの組み合わせでもよい。でよい。これら組成物は更に、アカシアガム又はトラガカントガム等の天然由来のガム、ダイズ又はレシチンホスファチド等の天然由来のホスファチド、ソルビタンモノオレート等の脂肪酸及びヘキシトール無水物との組み合わせに由来するエステル又は部分エステル、並びにポリオキシエチレンソルビタンモノオレート等のこれら部分エステルとエチレンオキシドとの縮合物等の１以上の乳化剤を含んでもよい。これらのエマルジョンは、例えば甘味料又は風味剤を含む追加的成分も含むことができる。
ここで使用する「油性」液体は、炭素含有液体分子を含み、水より低い極性を表すものである。
【０３９６】
経口投与に適する本発明の医薬的組成物の製剤は、別個の固体投与単位の形状で調製、包装又は販売することができ、限定されるものではないが、各々予め定めた量の活性成分を含有する、錠剤、硬質若しくは軟質カプセル、カシェ剤、トローチ又はロゼンジが挙げられる。経口投与に適する他の製剤には限定されるものではないが、粉末化又は顆粒状製剤、水性若しくは油性懸濁液、水性若しくは油性溶液、ペースト、ゲル、歯磨きペースト、マウスウォッシュ、コーティング、口腔内リンス、又は乳液が挙げられる。用語「口腔内リンス」及び「マウスウォッシュ」は、本明細書では互換的に使用する。
【０３９７】
本発明の医薬的組成物は、経口若しくはバッカル投与に適する製剤で調製、包装又は販売できる。これら製剤には限定されるものではないが、ゲル、液体、懸濁液、ペースト、歯磨きペースト、マウスウォッシュ若しくは口腔内リンス及びコーティングが挙げられる。例えば本発明の口腔内リンスは、約１．４％の本発明の化合物、クロルヘキシジングルコネート（０．１２％）、エタノール（１１．２％）、サッカリンナトリウム（０．１５％）、ＦＤ＆Ｃ Ｂｌｕｅ Ｎｏ．１（商標、０．００１％）、ペパーミント油（０．５％）、グリセリン（１０．０％）、Ｔｗｅｅｎ６０（商標、０．３％）及び残余水を加えて１００％とすることができる。別の態様では本発明の歯磨きペーストは、約５．５％の本発明の化合物、ソルビトール７０％水溶液（２５．０％）、サッカリンナトリウム（０．１５％）、ラウリル硫酸ナトリウム（１．７５％）、カルボポール９３４，６％分散体（商標、１５％）、スペアミント油（１．０％）、水酸化ナトリウム５０％水溶液（０．７６％）、二塩基性リン酸カルシウム二水和物（４５％）及び残余水を加えて１００％とすることができる。本明細書に記載する製剤の例は網羅的ではなく、そして本発明はここで記載されないこれら及び他の製剤の更に変形を含むが、それらは当業者には公知であると考えられる。
【０３９８】
活性成分を含む錠剤は、例えば活性成分を任意で１以上の追加的成分と共に圧縮又は成形して製造できる。圧縮錠剤は、適当な装置中で粉末又は顆粒状調製物等の自由に流動する状態の活性成分を、任意で１以上の結合剤、潤滑剤、賦形剤、界面活性剤及び分散剤と混合して圧縮することにより調製できる。成形された錠剤は、適当な装置中で活性成分、医薬的に許容できる担体及び少なくとも混合物を湿らせるために充分な液体の混合物を成形することにより調製できる。錠剤の製造に使用される医薬的に許容できる賦形剤には、限定されるものではないが不活性な希釈剤、造粒剤及び崩壊剤、結合剤及び潤滑剤が含まれる。既知の分散剤には限定されるものではないが、ジャガイモ澱粉及びグリコール酸ナトリウム澱粉が挙げられる。既知の界面活性剤には限定されるものではないが、ラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。既知の希釈剤には限定されるものではないが、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、微結晶セルロース、リン酸カルシウム、リン酸水素カルシウム及びリン酸ナトリウムが挙げられる。既知の造粒剤及び崩壊剤には限定されるものではないがトウモロコシ澱粉及びアルギン酸が挙げられる。既知の結合剤には限定されるものではないが、ゼラチン、アカシア、アルファ化トウモロコシ澱粉、ポリビニルピロリドン及びヒドロキシプロピルメチルセルロースが挙げられる。既知の潤滑剤には限定されるものではないが、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、シリカ及びタルクが挙げられる。
【０３９９】
錠剤は非コートか、又は既知の方法を使用してコートして、個体の胃腸管で遅延した崩壊を達成し、これにより徐放及び活性成分の引き延ばされた吸収を提供することができる。例えば、モノステアリン酸グリセリル又はジステアリン酸グリセリル等の材料を錠剤コートに使用できる。更に例として、錠剤は米国特許4,256,108、4,160,452及び4,265,874号明細書に記載の方法を使用して被覆して、浸透圧的に徐放される錠剤を形成することができる。錠剤は更に医薬的に洗練され、飲みやすい調製物を提供するために、甘味料、風味剤、着色剤、保存剤又はこれらの幾つかの組み合わせを含むことができる。
【０４００】
活性成分を含む硬質カプセルは、ゼラチン等の生理学的に分解可能な組成物を使用して作成できる。これらの硬質カプセルは活性成分を含み、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はカオリン等の不活性な固体希釈剤を含む追加的成分を更に含むことができる。
【０４０１】
活性成分を含む軟質ゼラチンカプセルは、ゼラチン等の生理学的に分解可能な組成物を使用して作成できる。これらの軟質カプセルは、水又はピーナッツ油、液体パラフィン又はオリーブ油等の油性媒体と混合できる活性成分を含む。
【０４０２】
経口投与に適する本発明の医薬的組成物の液体製剤は、液体状態、又は水若しくは別の適当な賦形剤で使用前に再構成することを意図する乾燥生成物の形態で調製、包装及び販売することができる。
【０４０３】
本発明の医薬的組成物は、直腸投与に適する製剤として調製、包装又は販売することができる。そのような組成物は例えば座薬、滞留浣腸製剤及び直腸若しくは結腸潅注用の溶液形態でもよい。
【０４０４】
座薬製剤は活性成分を、通常の室温（即ち約２０℃）では固体であり、そして個体の直腸温度（即ち健康なヒトでは約３７℃）では液体である非炎症性の医薬的に許容できる賦形剤と組み合わせることにより作成できる。適当な医薬的に許容できる賦形剤には限定されるものではないが、ココアバター、ポリエチレングリコール及び種々のグリセリドが挙げられる。座薬製剤は限定されるものではないが、抗酸化剤及び保存剤等の様々な追加的成分を更に含むことができる。
【０４０５】
直腸若しくは結腸潅注用の滞留浣腸調製物又は溶液は、活性成分を医薬的に許容できる液体担体と組み合わせることにより作成できる。当分野で公知のように、浣腸調製物は個体の直腸の解剖学的構造に適合したデリバリー装置を使用して投与することができ、又その中に包装することもできる。浣腸調製物は限定されるものではないが、抗酸化剤及び保存剤等の様々な追加的成分を更に含むことができる。
【０４０６】
本発明の医薬的組成物は、膣投与に適当な製剤で調製、包装又は販売することができる。そのような組成物は例えば座薬、タンポン等の含浸又はコートした膣に挿入可能な材料、潅注用調製物、又は膣洗浄用のゲル若しくはクリーム若しくは溶液の形態であることができる。
【０４０７】
材料を化学的組成物で含浸又はコートする方法は当分野では公知であり、限定されるものではないが、表面に化学的組成物を沈着又は結合する方法、化学的組成物を材料合成中に材料の構造に組み入れる方法（即ち、生理学的に分解可能な材料を使用して）、及び後の乾燥を含むか又は含まない、水性若しくは油性溶液又は懸濁液の吸収材料への吸収法が挙げられる。
【０４０８】
膣潅注用の潅注用調製物又は溶液は、活性成分を医薬的に許容できる液体担体と組み合わせることにより作成できる。当分野で公知のように、潅注用調製物は個体の膣の解剖学的構造に適合したデリバリー装置を使用して投与することができ、又その中に包装することもできる。潅注用調製物は限定されるものではないが、抗酸化剤、抗生物質、抗カビ・菌剤及び保存剤等の様々な追加的成分を更に含むことができる。ここで使用する医薬的組成物の「非経口（経腸性）投与」には、個体の組織を物理的にブリーチすることを特徴とする投与、及び組織中の裂傷（ブリーチ）を介する医薬的組成物の投与等の任意の経路を含む。このように非経口投与には限定されるものではないが、組成物の注入による、外科的切開を介する組成物の投与による、組織を通過する非外科的創傷を介する組成物の投与等による医薬的組成物の投与が含まれる。特に非経口投与には限定されるものではないが、皮下、腹腔内、筋肉内、胸骨内注入及び腎臓透析潅流法が含まれる。
【０４０９】
非経口投与に適する医薬的組成物の製剤は、滅菌水又は滅菌等張性食塩水等の医薬的に許容できる担体と組み合わせて活性成分を含有できる。これら製剤は、ボーラス投与又は連続投与に適する形態で調製、包装又は販売することができる。注入用製剤は、アンプル等の単回剤形又は保存剤を含む多回投与容器で調製、包装又は販売することができる。非経口投与用の製剤には限定されるものではないが、懸濁液、溶液、油性若しくは水性賦形剤中のエマルジョン、ペースト及び移植可能な徐放性又は生分解性製剤が含まれる。これら製剤は、限定されるものではないが沈殿防止剤、安定化剤又は分散剤等の１以上の追加的成分を更に含んでもよい。非経口投与用の製剤の１つの態様では、再構成した組成物の非経口投与前に、適当な賦形剤（例えば滅菌性のパイロジェンフリー水）で再構成するために、活性成分が乾燥（即ち粉末又は粒状）状で提供される。
【０４１０】
医薬的組成物は、滅菌された注射用の水性若しくは油性懸濁液又は溶液の形態で調製、包装又は販売されることができる。この懸濁液又は溶液は、既知の技術に従い配合されることができ、活性成分に加えて、ここに記載する分散剤、加湿剤又は沈殿防止剤等の追加的成分を含むことができる。これらの滅菌された注射用の製剤は、例えば水又は１，３−ブタンジオール等の非毒性の非経口的に許容できる希釈剤又は溶媒を使用して調製することができる。他の許容できる希釈剤及び溶媒には、限定されるものではないが、リンゲル溶液、等張性塩化ナトリウム溶液、及び合成モノ−若しくはジ−グリセリド等の固定油が挙げられる。他の有用な非経口的に投与可能な製剤には、活性成分を、微結晶形態で、リポソーム調製物として、又は生分解性ポリマー系の成分として含むものが挙げられる。徐放性又は移植用の組成物は、エマルジョン、イオン交換樹脂、難溶性ポリマー又は難溶性塩等の医薬的に許容できるポリマー性又は疎水性材料を含んでもよい。
【０４１１】
本発明の医薬的組成物は、バッカル投与に適する配合で調製、包装又は販売することができる。そのような製剤は例えば、常法を使用して作成された錠剤又はロゼンジの形態でもよく、例えば０．１〜２０（重量／重量）％の活性成分、経口で溶解可能又は分解可能な組成物を含む残余成分、及び任意でここに記載する１以上の追加的成分からなるものでもよい。一方、バッカル投与に適する製剤は、活性成分を含む粉末又は、エアロゾル化若しくは噴霧化の溶液若しくは懸濁液を含んでもよい。そのような粉末化、エアロゾル化又は噴霧化製剤は、分散した時、好ましくは約０．１〜約２００ナノメーターの範囲の平均粒子径又は小滴径を有し、更にここに記載する１以上の追加的成分を含むことができる。
【０４１２】
ここで使用する「追加的成分」には限定されるものではないが１以上の下記成分が含まれる；賦形剤；界面活性剤；分散剤；不活性希釈剤；造粒剤及び崩壊剤；結合剤；潤滑剤；甘味料；風味剤；着色剤；保存剤；ゼラチン等の生理学的に分解可能な組成物；水性賦形剤及び溶媒；油性賦形剤及び溶媒；沈殿防止剤；分散剤又は加湿剤；乳化剤、粘滑剤；バッファー；塩；増粘剤；充填剤；乳化剤；抗酸化剤；抗生物質；抗カビ・菌剤；安定化剤；及び医薬的に許容できるポリマー性又は疎水性材料。本発明の医薬的組成物に含むことができる他の「追加的成分」は当分野では公知であり、例えばGenaro 編(1985, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA)に記載されており、ここで資料として使用する。
【０４１３】
典型的には動物、好ましくはヒトに投与できる本発明の化合物の投与量は、限定されるものではないが、処置する動物の種類及び症状の種類、動物の年齢及び投与経路を含む任意の数の因子に依存して変動できる。
【０４１４】
化合物は、１日に数回の頻度で動物に投与でき、１日１回、１週間に１回、２週間に１回、１月に１回のようなより少ない頻度で、あるいは数カ月に１回又は更に１年に１回以下等の更に少ない頻度で投与することもできる。投与の頻度は当業者には明白であり、限定されるものではないが、処置する疾患の種類及び重篤度、動物の種類、年齢等等の任意の数の因子に依存する。
【０４１５】
当業者は、３ＤＧを阻害するか、又は３ＤＧ関連疾患又は症状を処置する方法に関する上記本発明の様々な態様が、ここに記載されていない他の疾患及び症状をも含むと認識するだろう。
【実施例】
【０４１６】
ここで、本発明を以下の実施例を参考にして説明する。これらの実施例は具体的説明の目的のみに提供され、そして本発明はこれらの実施例によって限定されると解釈されるべきではなく、むしろここで提供する教示の結果として明らかになる全ての改変を包含すると解釈すべきである。
【０４１７】
実施例１：ＦＬ３Ｐの単離及び同定
以下のアッセイはフルクトースリシン（ＦＬ）がそのリン酸化された状態、例えばＦＬ３Ｐで同定できることを確認するために行った。糖尿病のラット腎臓の過塩素酸抽出物の31Ｐ ＮＭＲ分析を行ったところ、非腎臓組織中には観察されず、非糖尿病の腎臓では著しく減少したレベルで存在する新規な糖のモノホスフェートの共鳴が６．２４ｐｐｍに示された。観察された共鳴に関与する化合物を、溶離液として１−ブタノール−酢酸−水（５：２：３）を用いた微晶質セルロースカラムでの抽出クロマトグラフィーにより単離した。プロトン２Ｄ ＣＯＳＹにより、構造はフルクトースリシン−３−ホスフェートと決定された。これは、以前の記載(Finot and Mauson, 1969, Helv. Chim. Acta, 52:1488)同様に調製したＦＬを動物に注射することにより後に確認され、ＦＬ３Ｐへの直接的リン酸化が示された。
【０４１８】
３位を特異的に重水素化したＦＬを使用して、３位炭素に位置するリン酸を確認した。これはカップリング及びデカップリング両方の31Ｐ ＮＭＲスペクトルを分析することにより行った。通常のＰ−Ｏ−Ｃ−Ｈカップリングは、ＦＬ３Ｐにおいて１０．３ＨｚのＪ値を有するダブレットを生じる；一方、Ｐ−Ｏ−Ｃ−Ｄはカップリングせず、３重水素化ＦＬ３Ｐについて見られるようにカップルされたもの及びデカップルされたもの両方のシングレットを生じる。ＦＬ３Ｐ固有の特性は、水素化ホウ素ナトリウムで処理した時、マンニトール及びソルビトールリシン−３−ホスフェートに対応する５．８５及び５．９５ｐｐｍの２つの新しい共鳴に転換する点である。
【０４１９】
実施例２：ＦＬ３Ｐの合成
１mmolのジベンジル−グルコース−３−ホスフェート及び０．２５mmolのα−カルボベンゾキシ−リシンを、５０ｍｌのＭｅＯＨ中で３時間還流した。
当該溶液を１００ｍｌの水で希釈し、ピリジニウム型Ｄｏｗ−５０カラム（商標、２．５×２０ｃｍ）でクロマトグラフィーを行い、最初に水（２００ｍｌ）、次いで６００ｍｌのバッファー（０．１Ｍピリジン及び０．３Ｍ酢酸）で溶出した。標的化合物は水洗浄の終わり及びバッファー洗浄の始めに溶出した。水素２０ｐｓｉでの５％Ｐｄ／Ｃを用いたｃｂｚ及びベンジル保護基の除去により、６％収率でＦＬ３Ｐが得られることを結果は示した。
【０４２０】
実施例３：ＦＬ及びＡＴＰからのＦＬ３Ｐの酵素的生成、並びに阻害剤・スクリーニングのアッセイ
最初に、腎臓皮質のキナーゼ活性を示すために、31Ｐ ＮＭＲを用いた。新鮮なブタ腎臓皮質サンプル３ｇを、１５０ｍＭ ＫＣｌ、５ｍＭ ＤＴＴ、１５ｍＭ ＭｇＣｌ2を含む５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）９ｍｌの中でホモジナイズした。これを１０，０００×ｇで３０分間遠心分離し、次いで上澄みを１００，０００×ｇで６０分間遠心分離した。硫酸アンモニウムを６０％飽和まで加えた。４℃で１時間置いた後、遠心分離することで沈殿物を回収し、最初のバッファー５ｍｌに溶解した。当該溶液２ｍｌアリコートを１０ｍＭ ＡＴＰ及び１０ｍＭのＦＬ（上記実施例１に従い調製した）と共に、３７℃で２時間インキュベートした。３００μｌの過塩素酸を用いて反応を停止し、蛋白質を除去するために遠心分離し、Sephadex G 10（商標、５×１０ｃｍ）カラムで脱塩した。反応混合物の31Ｐ ＮＭＲ分析によりＦＬ３Ｐの生成が検出された。
【０４２１】
こうして得られたキナーゼ活性試験に基づき、放射性アッセイを開発した。ＦＬ３ＰのＤｏｗ−５０カチオン交換樹脂（商標）への結合を利用して、当該アッセイを設計した。ＦＬ３Ｐのこの特性は、ＦＬ３Ｐを単離する試みの最中に発見された。ほとんどのホスフェートがこの樹脂に結合しないので、余分のＡＴＰだけでなくＡＴＰと反応するすべての化合物の大半は結合しないと考えた。
第１ステップは、当該アッセイからＡＴＰを除去するために必要な樹脂の量を明らかにすることであった。０．９ｍｌＨ2Ｏ中に２００ｍｇＤｏｗ−１（商標）を懸濁した液に該混合物をピペットで入れ、ボルテックスミキサー（商標）で撹拌し、遠心分離で樹脂を圧縮することによりこれを行った。ここからの上澄み０．８ｍｌを、新たな乾燥樹脂２００ｍｇの上にピペットで入れ、ボルテックスミキサーで撹拌し、遠心分離した。０．５ｍｌ量の上澄みを１０ｍｌのEcoscint A（商標）中にピペットで入れ、カウントした。残留カウントは８５ｃｐｍであった。この手順をアッセイに用いた。６０％硫酸アンモニウム沈殿による、未精製の皮質ホモジネートの沈殿物を４℃のホモジネートバッファーに再溶解した。アッセイは、１０ｍＭ γ33Ｐ−ＡＴＰ（４０，０００ｃｐｍ）、１０ｍＭ ＦＬ、１５０ｍＭ ＫＣｌ、１５ｍＭ ＭｇＣｌ2、５ｍＭ ＤＴＴを０．１ｍｌの５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）中に含む。３７℃で３０分間、１、２及び４ｍｇの蛋白質を用いた３連の測定を行いＦＬ３Ｐ生成速度と酵素レベル間の関係を決定した。並行して行ったＦＬ無しのブランク実験を差し引き、データを記録した。観察された活性は、２０nmol／時間／ｍｇ蛋白質のＦＬ３Ｐ合成速度にほぼ相当した。
【０４２２】
実施例４：メグルミンによって測定される遊離リシンの生成阻害、３ＤＧ及び多様なポリオールリシンの生成
ａ．一般的なポリオールリシン合成：
糖（１１mmol）、α−カルボベンゾキシ−リシン（１０mmol）及びＮａＢＨ3ＣＮ（１５mmol）を、５０ｍｌのＭｅＯＨ−Ｈ2Ｏ（３：２）に溶解し、そして２５℃で１８時間撹拌した。溶液を過剰なＤｏｗ−５０（Ｈ）イオン交換樹脂で処理して過剰なＮａＢＨ3ＣＮを分解した。この混合物（液体に樹脂を加えたもの）を、Ｄｏｗ−５０（Ｈ）カラム（２．５×１５ｃｍ）に移し、水で充分に洗浄して、過剰な糖及びホウ酸を除去した。５％ＮＨ4ＯＨを用いてカルボベンゾキシ−ポリオールリシンを溶出した。蒸発により得られた残基を水−メタノール（９：１）に溶解し、１０％活性炭担持パラジウム触媒を使用し、水素ガス（２０ｐｓｉ）を用いて還元した。濾過及び蒸発によりポリオールリシンが得られる。
【０４２３】
ｂ．ソルビトールリシン、マンニトールリシン及びガラクチトールリシンによる尿中及び血漿中３−デオキシグルコソン低減のための実験プロトコル：
６匹のラットから３時間かけて尿を回収した。又血漿サンプルも採取した。次に、動物は１０μmolのソルビトールリシン、マンニトールリシン又はガラクチトールリシンのいずれかを腹腔内注射された。尿は更に３時間かけて回収され、血漿サンプルは３時間の終わりに採取された。サンプル中の３−デオキシグルコソンを以下の実施例５の記載と同様に測定し、変化量をクレアチニンに対して標準化した。尿中３−デオキシグルコソン減少の平均値は、ソルビトールリシンでは５０％、マンニトールリシンでは３５％、そしてガラクチトールリシンでは３５％であった。血漿中３−デオキシグルコソンは、ソルビトールリシンでは４０％、マンニトールリシンでは５８％、そしてガラクチトールリシンでは５０％減少した。
【０４２４】
ｃ．尿中３−デオキシグルコソンを減少させるためのメグルミンの使用：
３匹のラットは、上述のリシン誘導体の代わりにメグルミン（１００μmol）を腹腔内注射することを除き、直前のｂと同様に処置した。注射から３時間後、尿中の平均３−デオキシグルコソンレベルは４２％減少した。
【０４２５】
実施例５：糖化蛋白質摂取後のヒト尿中ＦＬ、３ＤＧ及び３ＤＦの上昇
ａ．糖化蛋白質を含む食品の調製：
２６０ｇのカゼイン、１２０ｇのグルコース及び７２０ｍｌの水を混合して、均一な混合物を得た。該混合物を金属プレートに移し、６５℃で６８時間加熱した。次に作製したケーキを粗い粉末に粉砕した。該粉末はケルダール法の測定によると６０％蛋白質を含んでいた。
【０４２６】
ｂ．糖化リシン含量の測定：
上記ステップａで調製した１グラムの粉末を６Ｎ ＨＣｌで２０時間還流することにより加水分解した。得られた溶液をＮａＯＨ溶液を用いてｐＨ１．８に調整し、１００ｍｌに希釈した。フルクトースリシン含量は、フルクトースリシンの酸加水分解により得られた生成物であるフロシンとしてアミノ酸分析機で測定した。この方法で、該ケーキは５．５％(w/w)のフルクトースリシンを含有すると測定された。
【０４２７】
ｃ．実験プロトコル:
ボランティアは、２日間フルクトースリシンを含まない食物を取り、次いでここで記載したとおりに調製した食品を２２．５ｇ摂取し、こうして実質的に２グラム用量のフルクトースリシンを取った。尿は２時間間隔で１４時間採取され、そして最終の採取は２４時間目に行われた。
【０４２８】
ｄ．尿中のＦＬ、３ＤＧ及び３ＤＦの測定：
ウォーターズ社製Ｃ１８遊離アミノ酸カラムを４６℃で用い、ウォーターズ９９６ダイオードアレイ（商標）を使用したＦＬのＨＰＬＣによって、１ｍｌ／分のアセトニトリル−メチルアルコール−水（４５：１５：４０）からアセトニトリル−酢酸ナトリウム−水（６：２：９２）へのグラジエント溶離システムで測定を行った。定量には、メグルミンの内部標準を使用した。
【０４２９】
３ＤＦはサンプルの脱イオン化後にＨＰＬＣにより測定した。ダイオネックスＤＸ−５００ＨＰＬＣシステムで、ＰＡ１カラム(商標、Dionex社製)を使用し、３２ｍＭ水酸化ナトリウムを用いて１ｍｌ／分で溶離して分析を行った。毎日作成した合成３ＤＦの標準曲線で定量を行った。
【０４３０】
３ＤＧはサンプルの脱イオン化後にＧＣ−ＭＳにより測定した。ＰＢＳ中で、１０倍過剰のジアミノナフタレンを用いて３ＤＧを誘導体化した。酢酸エチル抽出により塩を含まない画分を得、これをＴｒｉ−Ｓｉｌ(商標、Pierce社製)でトリメチルシリルエーテルに転換した。分析はヒューレット−パッカード社製５８９０イオン選択モニタリングＧＣ−ＭＳシステム（商標）で行った。ＧＣはフューズドシリカキャピラリーカラム（ＤＢ−５、２５ｍｘ．２５ｍｍ）を用い、以下の温度プログラムで行った。：注入口２５０℃、初期カラム温度１５０℃を１分間保持し、２９０℃まで１６℃／分で上昇させ、１５分間保持する。３ＤＧの定量にはＵ−１３Ｃ−３ＤＧの内部標準を使用するイオン選択モニタリングを用いた。
【０４３１】
図３に示すグラフは、糖化蛋白質を摂取した後の１名のボランティアの尿中のＦＬ、３ＤＦ及び３ＤＧの生成を表す。３つの全ての代謝産物の迅速な出現が明白である。２４時間後であっても、３ＤＦ及び３ＤＧの両方がわずかな上昇を示す。
【０４３２】
図４に示すグラフは、７名の試験群の各人における３ＤＦの生成を表す。同様のパターンがすべての場合で見られた。図４に示すように、３ＤＦ排出ピークはＦＬボーラスの約４時間後であり、ボーラスの２４時間後であっても、３ＤＦがわずかに上昇することは、注目に値する。
【０４３３】
実施例６：糖化蛋白質が増加した食物摂取の影響
Ｎ−アセチル−β−グルコサミニダーゼ(NAGase)は、尿中に排出される酵素であり、糖尿病では高レベルとなる。これは尿細管傷害の初期マーカーであると考えられるが、尿中で増加するNAGaseの発症機序は充分に理解されていない。糖尿病における尿中でのNAGaseの増加は、糖尿病により誘導され、細胞破壊よりも尿中への排出が増加する尿細管付近のリソソームの活性化の結果であると提示されている。
【０４３４】
ラットに０．３％の糖化蛋白質を含有する飼料又はコントロール飼料を数カ月間にわたり与えた。NAGase及び３ＤＦの尿中排出は図５に示す様々な時点で測定した。尿中に排出された３ＤＧの量も測定した。
【０４３５】
この実験から得られた結果は、すべての比較において３ＤＦ及びNAGaseレベルがコントロールよりも実験群で上昇することを示す。即ち、糖化蛋白質を与えた動物は、糖尿病で得られた結果と同様に過剰なNAGaseを尿中に排出する。NAGase排出はコントロール動物と比較して実験群で約５０％まで増加した。実験動物はコントロールと比較して尿中３ＤＦにも５倍の増加があった。図５及び６に見ることができるように、尿中３ＤＦは３ＤＧと極めて良く相関することが分かった。
【０４３６】
実施例７：腎臓蛋白質の電気泳動分析
２匹のラットに毎日、５μmolのＦＬ又はマンニトール（コントロールとして使用した）のいずれかを５日間注射した。動物を屠殺し、そして腎臓を摘出し、そして皮質及び髄質に分けた。組織は、１５０ｍＭ ＫＣｌ、１５ｍＭ ＭｇＣｌ2及び５ｍＭ ＤＴＴを含む５つの５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）の中でホモジナイズした。細胞破片を１０，０００×ｇで１５分間遠心することにより除去し、次いで上澄みを１５０，０００×ｇで７０分間遠心した。可溶性蛋白質を１２％ポリアクリルアミドゲル並びに４〜１５及び１０〜２０％の濃度勾配ゲルを用いてＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分析した。
【０４３７】
すべての場合において、マンニトールを注射した動物と比較すると、ＦＬを注射した動物の腎臓抽出物は、低分子量のバンドが無いか、又は視覚的に減っていた。
【０４３８】
実施例８：３−Ｏ−メチルソルビトールリシン(構造XIX)の合成
３−ＯＭｅグルコース（２５グラム、１２９mmol）及びα−Ｃｂｚ−リシン（１２グラム、４３mmol）を２００mlの水−メタノール（２：１）に溶解した。水素化ホウ素ナトリウム（１０グラム、１６２mmol）を加え、反応物を室温で１８日間撹拌した。α−Ｃｂｚ−リシンの反応物は、１−ブタノール−酢酸−水（４：１：１）を用いたシリカゲル薄層クロマトグラフィーにおいて、視覚化にニンヒドリンを用いて確認した。
反応はα−Ｃｂｚ−リシンが無くなった時に完了させた。HClを用いて溶液をｐＨ２に調整することで過剰なシアノボロ水素化物を分解し、中和し、次いでＤｏｗｅｘ−５０（商標、Ｈ＋）のカラム（５×５０ｃｍ）にかけ、カラムを水でよく洗浄して過剰な３−Ｏ−ｍｅ−グルコースを除去した。標的化合物は、５％水酸化アンモニウムで溶離した。蒸発後、残基を５０ｍｌの水−メタノール（２：１）に溶解し、１０％ Ｐｄ／Ｃ（０．５グラム）を加えた。混合物を２０ｐｓｉの水素下で１時間振盪した。活性炭を濾去し、濾液を白色粉末まで蒸発させ（１０．７グラム、α−Ｃｂｚ−リシンに基づき７７％収量）、この粉末を逆相ＨＰＬＣにより分析したところ、フェニルイソチオシアネート誘導体として均一であった。元素分析：Ｃ13Ｈ28Ｎ2Ｏ7ＣＨ3ＯＨ2Ｈ2Ｏの理論値Ｃ，４２．８６；Ｈ，９．１８；Ｎ，７．１４、測定値：Ｃ，４２．９４；Ｈ，８．５０；Ｎ，６．９５。
【０４３９】
上記式（ＸＩＸ）の構造を有する他の具体的化合物は、例えば選択した窒素−又は酸素−を含有するアミノ酸、ポリアミノ酸、ペプチド等でもよい出発材料を、化学的に修飾することができるフルクトースなどの糖化剤を用いて糖化することにより、必要に応じて当業者に公知の手順に従って作製し得る。
【０４４０】
実施例９:ＦＬ３Ｐキナーゼ活性の追加アッセイ
ａ．ストックソリューションの作製：
１００ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ８．０、１０ｍＭ ＡＴＰ、２ｍＭ ＭｇＣｌ2、５ｍＭ ＤＴＴ、０．５ｍＭ ＰＭＳＦであるアッセイバッファー溶液を作製した。２ｍＭフルクトシル−スペルミンＨＣｌであるフルクトシル−スペルミン・ストックソリューションを作製した。２ｍＭスペルミンＨＣｌであるコントロール溶液を作製した。
【０４４１】
ｂ．フルクトシル−スペルミンの合成：
フルクトシル−スペルミンの合成は、公知の手順(J. Hodge and B. Fisher, 1963, Methods Carbohydr. Chem., 2:99-107) を適用して行った。スペルミン（５００ｍｇ）、グルコース（５００ｍｇ）及びピロ亜硫酸ナトリウム（８０ｍｇ）の混合物を、８：４：１（スペルミン：グルコース：ピロ亜硫酸塩）のモル比で５０ｍｌのメタノール−水（１：１）中に調製し、１２時間還流した。生成物を水で２００ｍｌまで希釈し、ＤＯＷ−５０カラム（５×９０ｃｍ）にかけた。未反応グルコースは２カラム容量の水で除去し、生成物及び未反応スペルミンは０．１Ｍ ＮＨ4ＯＨを用いて除去した。生成物のプールされたピーク画分を凍結乾燥し、生成物の定量的13Ｃ ＮＭＲスペクトル中のＣ−２フルクトシルピークを積算することによりフルクトシル−スペルミンの濃度を決定した（４５゜パルス、１０秒のリラクゼーションディレイ、ＮＯＥデカップリング無しで、ＮＭＲデータを得た）。
【０４４２】
ｃ．精製の確認ためのキナーゼアッセイ：
１０μｌの酵素液、１０μｌのアッセイバッファー、１．０μＣｉの33Ｐ-ＡＴＰ、１０μｌのフルクトシル−スペルミン・ストックソリューション及び７０μｌの水を含むインキュベーション混合物を、３７℃で１時間インキュベートした。インキュベーションの終わりに、９０μｌ（２×４５μｌ）のサンプルを２枚の直径２．５ｃｍのリン酸セルロースディスク（ワットマンP-81）に滴下し、乾燥させた。このディスクを水で何度も洗浄した。乾燥後、ディスクをシンチレーションバイアル中に置き、カウントした。各酵素画分は、適切なスペルミンコントロールを用いて２連でアッセイした。
【０４４３】
実施例１０：糖化蛋白質食の実験動物で観察された腎臓の病状
３匹のラットを糖化蛋白質食（全蛋白質２０％;糖化３％）で８カ月間飼育し、コントロール食で飼育した同齢の９匹のラットと比較した。糖化蛋白質の食物は、非糖化蛋白質の３％を糖化蛋白質に置換した標準栄養食から成っていた。糖化蛋白質は、カゼイン及びグルコース（２：１）を一緒に混合し、水（材料の乾燥重量の２倍）を加え、混合物を６０℃で７２時間焼くことで作製した。コントロールは、水を使用せず、カゼイン及びグルコースを焼く前に混合しないこと以外は、同様に作製された。
【０４４４】
主な知見は、糖化食の動物では、損傷を受けた糸球体が実質的に増加したことであった。これら動物で観察された典型的な病変は、ボーマン嚢に癒着した糸球体係蹄の分節状硬化症、細管壁の上皮化生及び間隙線維症であった。糖化蛋白質食のすべての動物、及びコントロール食の１匹のみの動物が１３％より高い糸球体の損傷を示した。偶然による発生の確率は２％未満である。糸球体に観察される病理学上の変化に加え、多数のヒアリン円柱が細管の中に観察された。これらのヒアリン化円柱は糖化食の動物でより多く見られたが、これらの定量は行われなかった。NAGaseレベルの上昇も、糖化食の動物で観察された。
【０４４５】
本実験の結果に基づくと、糖化食は、糖尿病の腎臓に見られるものに類似する一連の組織学的病変を実験動物に発症させる原因にみえる。
【０４４６】
実施例１１：Ｉ型糖尿病患者における、３−デオキシフルクトースの尿中への排出は、微量アルブミン尿の進行の指標である
本明細書で説明するように、糖化中間体、３−デオキシグルコソン（３ＤＧ）及びその還元型解毒産物である３−デオキシフルクトース（３ＤＦ）の血中レベルは、糖尿病で上昇する。これら化合物のベースラインレベルとその後のミクロアルブミン尿（ＭＡ）の進行との相関が、ジョスリン糖尿病センターにおいて、インスリン依存性真性糖尿病（ＩＤＤＭ）及び微量アルブミン尿患者の見込み群３９名のグループで調査され（１９９０〜１９９３年の間に開始した２年間のベースラインの多くの測定に基づく）、又ＡＣＥ阻害剤については調査されなかった。
【０４４７】
無作為に尿中の３ＤＦ及び３ＤＧのベースラインレベルを、ＨＰＬＣ及びＧＣ−ＭＳで測定した。続く４年間に、高レベルのＭＡ又は蛋白尿のいずれかに進行した個体（ｎ＝２４）は、未進行者（ｎ＝１５）に比べて、有意に高いベースラインレベルのlog比 ３ＤＦ／尿クレアチニンを有した（ｐ＝０．０２）。
本実験で確認されたベースラインレベルは、進行者ではクレアチニン約０．２４μmole/mgであったのに対し、非進行者ではクレアチニン約０．１８μmole/mgであった。ベースラインの３ＤＧ／尿クレアチニン比はグループ間で変わらなかった。ＨｇＡＩｃ（糖化ヘモグロビンの主要画分）のベースラインレベルの調整は、これらの知見を実質的に変えなかった。これらの結果は、尿中の３ＤＦと糖尿病の腎臓合併症の進行との関連の追加的証拠を提供する。
【０４４８】
ａ．３−デオキシフルクトースの定量:
試験サンプル０．３ｍｌアリコートを、０．１５ｍｌのＡＧ１−Ｘ８及び０．１５ｍｌのＡＧ ５０Ｗ−Ｘ８樹脂を含むイオン交換カラムに通すことによりサンプルを処理した。次いで該カラムを０．３ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、遊離した液体を除去するために吸引し、０．４５ｍｍのミリポア社製フィルターを通して濾過した。
処理したサンプルを注入し（５０μｌ）、ダイオネックスＤＸ５００クロマトグラフィーシステム（商標）を用いて分析した。水酸化ナトリウム（２００ｍＭ）１６％及び脱イオン水８４％からなる溶離液と、carbopac PA1イオン交換カラム（商標）を使用した。
３ＤＦは、パルス式電流検出器を用いて電気化学的に検出した。予想される３ＤＦレベルを測定する標準３ＤＦ溶液は、各未知サンプルの前後で流された。
【０４４９】
ｂ．尿中クレアチニンの測定：
尿中クレアチニンレベルは、プレートリーダー用に変更した終点比色法により測定した（シグマ社製、診断キット５５５−Ａ）。尿中に存在する代謝産物レベルを測定するために、尿量を標準化し、クレアチニンレベルを評価した。
【０４５０】
ｃ．尿中アルブミンの測定：
被検体の尿中のアルブミンレベルを評価するために、ランダムに尿を集め、Ｎ−アルブミンキット（ベーリング社製）を用いてＢＮ１００装置にて免疫比濁法行った。抗アルブミン抗体は市販されている。尿中のアルブミンレベルは、これに限定はされないが、ＥＬＩＳＡアッセイ、ラジオイムノアッセイ、ウエスタン及びドットブロッティングを含む適切なアッセイにより評価することができる。
【０４５１】
ジョスリン糖尿病センターの患者の実験で得られたデータに基づくと、上昇した尿中の３ＤＦレベルは、糖尿病の微量アルブミン尿の進行に関連することが明らかである。この所見により、糖尿病に罹患している患者の重篤な腎臓合併症の進行の可能性を評価するための新規な診断パラメーターが提供される。
【０４５２】
実施例１２：３−Ｏ−メチルソルビトールリシンは、正常及び糖尿病ラットの全身の３ＤＧレベルを下げる
１２匹の糖尿病ラット集団を、６匹の２グループに分割した。第１グループは生理食塩水注射のみを受け、第２グループは生理食塩水中の３−Ｏ−メチルソルビトールリシンの注射を受けた（５０ｍｇ／ｋｇ体重）。１２匹の非糖尿病ラット集団について同じ手順を行った。
【０４５３】
表Ｂに要約するように、各生理食塩水コントロールと比較すると、糖尿病及び非糖尿病の両方のラットにおいて、３−Ｏ−メチルソルビトールリシンの投与により、１週間以内に３ＤＧの血漿レベルが顕著に減少した。
【０４５４】
【表２】
2007523908.tif 000049
【０４５５】
３−Ｏ−メチルソルビトールリシンが全身の３ＤＧレベルを低下させる能力は、腎臓病以外の糖尿病性合併症（例えば網膜症及び大動脈硬化）もアマドラーゼ阻害剤治療によってコントロールできることを示唆している。
【０４５６】
実施例１３：インビボで３−Ｏ−メチルソルビトールリシンを取り込む部位は腎臓である
６匹のラットに１３．５ｎｍｏｌ（４．４ｍｇ）の３−Ｏ−メチルソルビトールリシンを腹腔内注射した。尿を３時間集め、その後ラットを屠殺した。分析する組織を取り出し、液体窒素でフリーズクランプした。組織の過塩素酸抽出物を代謝産物分析に用いた。試験する組織は、脳、心臓、筋肉、座骨神経、脾臓、膵臓、肝臓及び腎臓から得た。血漿も分析した。
【０４５７】
３−Ｏ−メチルソルビトールリシンを含む唯一の組織抽出物は、腎臓組織の抽出物であった。尿も３−Ｏ−メチルソルビトールリシンを含んでいたが、血漿は含まなかった。尿及び腎臓からの注射投与量の回収率は、以下の表Ｃに示すように３９から９６％の間で変動した。
【０４５８】
【表３】
2007523908.tif 000050
【０４５９】
実施例１４：大部分の３ＤＧ生成の要因となるアマドラーゼ／フルクトサミンキナーゼ活性
様々な重要成分（１０ｍＭ Ｍｇ−ＡＴＰ、部分精製アマドラーゼ、２．６ｍＭ ＦＬ）の３ＤＧ生成における重要性を評価するために、それらを反応から除外したインビトロアッセイにより、３ＤＧの酵素的生成が実証された。
【０４６０】
アマドラーゼ及びその基質を含む腎臓抽出物の存在下では、３ＤＧ生成が２０倍高いということを、結果は示す（表Ｄの反応１及び３の比較）。明らかに、３ＤＧ生成のかなり大部分は、アマドラーゼの存在下で酵素的に介在されている。
【０４６１】
【表４】
2007523908.tif 000051
【０４６２】
実施例１５：コラーゲンの架橋における３ＤＧ及び３ＤＧ阻害の効果
コラーゲンは皮膚に高レベルで存在する。そのため、３ＤＧがコラーゲンの架橋にどのような効果を有するかを確認した。
【０４６３】
コラーゲンＩをインビトロで、３ＤＧの存在下又は非存在下においてインキュベートした。ウシ皮膚のＩ型コラーゲン（１．３ｍｇ；シグマ社製）を、ｐＨ７．２５の２０ｍＭリン酸ナトリウムバッファー単独のもの、又は５ｍＭ ３ＤＧを加えたもの、又は５ｍＭ ３ＤＧと１０ｍＭのアルギニンを加えたものの中で、総容量を１ｍｌとして３７℃で２４時間インキュベートし、次いで凍結及び凍結乾燥した。
凍結乾燥物を７０％ギ酸０．５ｍｌに溶解し、臭化シアンを加えた（２０：１，ｗ／ｗ）。該溶液を３０℃で１８時間インキュベートした。分画分子量１０，０００の透析チューブを用いて、２％のＳＤＳ及び２％のグリセロールを含有するｐＨ６．８の０．１２５Ｍ Trisに対して、サンプルは透析された。サンプルはすべて１ｍｌ容量に調整した。コラーゲンの架橋度は、等容量のサンプルを用いてＳＤＳ−ＰＡＧＥ電気泳動（１６．５％Tris-tricineゲル）で分析することで測定され、コラーゲンの泳動に対する３ＤＧの影響が確認された。
【０４６４】
３ＤＧを用いてコラーゲンを処理することにより、架橋の指標であるより高い分子量をコラーゲンが有するかの如く、コラーゲンの泳動が起こることが明かとなった。図１２の銀染色したゲルの画像は、コラーゲンのみを含むグループあるいはコラーゲンに３ＤＧ及びアルギニンを加えたグループでは、高分子のバンドがより少なく存在することを示す。３ＤＧ阻害剤の非存在下において３ＤＧで処理したグループには、より高分子のバンドが存在する。３ＤＧのみで処理したサンプル中では、蛋白質がより多く存在すると思われる。３つの全てのサンプルは同じ蛋白質量から始まったので、いかなる理論にも拘束されることなく、より多くの架橋がされるほど、より高分子量の蛋白質が保持されるので、透析中に３ＤＧ処理サンプルから漏れたペプチドは、より少量であったと結論づけることができる。換言すると、コントロール及びアルギニンを加えた３ＤＧのグループでは、比較的低分子量のペプチドが透析中に拡散したために蛋白質が少なくなったと思われる。
【０４６５】
実施例１６:皮膚における３ＤＧの局在
本開示に記載するように、本発明は皮膚における３ＤＧの存在を初めて確認する。
マウスの皮膚モデルを用いた。１センチメートル（１ｃｍ）四方の皮膚を採取し、過塩素酸を用いて抽出した。３ＤＧは上記と同様に測定した。６匹のマウスを用い、皮膚から検出された３ＤＧの平均量は１．４６＋／−０．３μＭであった。この値は、同じ動物で検出された３ＤＧの血漿レベル（０．１９＋／−０．０５μＭ）よりも実質的に高かった。これらのデータ及び以下の実施例１７に記載するデータは、皮膚における高レベルの３ＤＧは、皮膚での３ＤＧの生成に起因することを示唆している。
【０４６６】
実施例１７:皮膚におけるアマドラーゼｍＲＮＡの局在
高レベルの３ＤＧが皮膚で発見されたが（実施例１６参照）、３ＤＧが局所的に作られるのか、又皮膚は３ＤＧを酵素的に生成する能力を有するのかは不明であった。アマドラーゼｍＲＮＡの存在が分析され、皮膚に存在する３ＤＧを生成する皮膚の能力の１つの尺度として利用された（前述の実施例参照）。
【０４６７】
ヒト腎臓及び皮膚から単離したポリＡ＋メッセンジャーＲＮＡを、ストラタジーンから購入した。ｍＲＮＡをＲＴ−ＰＣＲ法で使用した。アマドラーゼについて公開された遺伝子配列［Delpierre, G. 他．「哺乳類のフルクトサミン−３−キナーゼの同定、クローニング、及び異種発現」2000. Diabetes 49(10): p.1627-34.; Szwergold, B.S. 他.「フルクトサミン−３−キナーゼ(FN3K)の精製、塩基配列決定、及び特徴付け」:「酵素によらないの糖化のコントロールに関与する可能性を有する酵素（要約）」. 2001. Diabetes 50 Suppl. (2): p.A167] の３’末端 (ｂｐ９３０−９１２) に対するリバースプライマーを用いて逆転写(ＲＴ)し、ＰＣＲ用のｃＤＮＡ鋳型を作製した。この同じプライマーと、アマドラーゼ遺伝子の中央（ｂｐ４１２−４３１）からのフォワードプライマーを使用して、ｃＤＮＡ鋳型からアマドラーゼ遺伝子を増幅した。ＰＣＲの産物は５１９塩基対（ｂｐ）断片となるはずである。ヒトの皮膚及び腎臓サンプルに対しＲＴ−ＰＣＲを実施し、アガロースゲル電気泳動により分析した。又ｃＤＮＡ鋳型を含まないコントロールも分析した。
【０４６８】
結果は、皮膚が実際にアマドラーゼｍＲＮＡを発現することを実証する。引き続く蛋白質の発現が皮膚における３ＤＧ生成の原因であり得る。予想どおり、５１９塩基対（ｂｐ）産物が観察された（図１３参照）。５１９塩基対（ｂｐ）の断片は腎臓（レーン１）だけでなく、皮膚（レーン３）でも見られた。この５１９ｂｐ断片はｃＤＮＡ鋳型を含まないグループでは検出されなかった（レーン２及び４）。
【０４６９】
実施例１８：アマドラーゼｍＲＮＡ及び蛋白質を阻害することによる３ＤＧの阻害
３ＤＧ合成は、その合成を導く酵素経路の構成成分を阻害することにより阻害することができる。これは幾つかの方法により行うことができる。例えば本明細書でアマドラーゼと呼ぶ３ＤＧの合成を導く酵素（フルクトサミン−３−キナーゼ）は、上記の化合物を用いて作用を抑制され得るが、上記の化合物を用いる外に、そのｍＲＮＡ又は蛋白質の合成をブロックするか、あるいは蛋白質自体をブロックすることによっても阻害され得る。
アマドラーゼｍＲＮＡ及び蛋白質の合成及び機能は、転写若しくは翻訳阻害剤、抗体、アンチセンスメッセンジャー若しくはオリゴヌクレオチド、又は競合的阻害剤のなどの化合物又は分子を用いて阻害され得る。
【０４７０】
核酸及び蛋白質配列
以下はアマドラーゼ（フルクトサミン−３−キナーゼ）の９８８塩基対（ｂｐ）のｍＲＮＡ由来ＤＮＡ配列を表す。寄託番号NP_022158（配列番号１）（図１０参照）：
【０４７１】
【表５】
2007523908.tif 000052
【０４７２】
以下はヒトのアマドラーゼ（フルクトサミン−３−キナーゼ）の３０９アミノ酸残基配列を表す。寄託番号NP_071441（配列番号２）（図１１参照）：
【０４７３】
【表６】
2007523908.tif 000053
【０４７４】
上記の同定された配列は、Delpierreらにより提示された[Delpierre, G. 他.「哺乳類のフルクトサミン-3-キナーゼの同定、クローニング及び異種発現」2000. Diabetes 49(10): p.1627-34.]。Szwergoldらの配列データ［Szwergold, B.S他「フルクトサミン-3-キナーゼ(FN3K)の精製、塩基配列決定、及び特徴付け」:「非酵素性糖化制御に潜在的に関与する酵素（要約）」 2001. Diabetes 50 Suppl. (2): p.A167］は、３０９のアミノ酸残基のうち３０７のアミノ酸残基がDelpierreらの配列データと一致している。
【０４７５】
実施例１９：汗中のα−ジカルボニル糖の存在
ここで開示するように、α−ジカルボニル糖は皮膚に存在するが、それらの汗中の存在は確認されていなかった。皮膚の機能の１つは排出器官として役割を果たすことであり、従ってα−ジカルボニル糖が汗中に排出されるかを確認した。
【０４７６】
上記と同様に、３ＤＧの存在についてヒトの汗のサンプルを分析した。４被検者からサンプルを得て、３ＤＧがそれぞれ０．１８９、２．８、０．３１２及び０．１１μＭのレベルで存在することが測定された。従ってこの結果は汗中の３ＤＧの存在を実証する。
【０４７７】
実施例２０：ＤＹＮ１２（３−Ｏ−メチルソルビトールリシン）の皮膚の弾力に及ぼす効果
アマドラーゼの低分子阻害剤であるＤＹＮ１２の投与は、糖尿病及び非糖尿病の動物の血漿中３ＤＧレベルを低下させる[Kappler, F., Su, B., Schwartz, ML, Tobia, AM,及びBrown, T.「酵素アマドラーゼの低分子阻害剤であるDYN12は、糖尿病ラットの３−デオキシグルコソンレベルを低下させる」2002. Diabetes Technol. Ther. Winter 3(4): p.609-606]。
【０４７８】
糖尿病に関連する皮膚弾力の低下に及ぼすＤＹＮ１２の効果を確認するために実験は行われた。この目的のために、ＳＴＺ−糖尿病ラットの２グループ及び正常ラットの２グループについて、ＤＹＮ１２又は生理食塩水を用いた処置を行った。ＳＴＺ−糖尿病ラットの１グループ（ｎ＝９）は、５０ｍｇ／ｋｇのＤＹＮ１２の皮下注射を８週間毎日受け、正常ラットの１グループ（ｎ＝６）も同様にされた。コントロールの糖尿病ラットの１グループ（ｎ＝１０）及び正常ラットの１グループ（ｎ＝６）は、ＤＹＮ１２の代わりに生理食塩水を受けた。１匹のラットは、血中グルコースの測定値が他の糖尿病ラットと整合しない（低すぎる）ので、２週間後に糖尿病ＤＹＮ１２グループから除いた。
【０４７９】
サイバーダーム社の技術に基づく、皮膚の弾力測定装置を用いた非侵襲的手法により、ＤＹＮ１２処置が皮膚の弾力に及ぼす効果を試験した。この手法は、皮膚を変位させるために必要な真空吸引量に基づいて皮膚の弾力を測定する非侵襲的方法を提供する。吸引カッププローブは、気密性のあるシールを形成するために皮膚を剃った部分に密着される。次いで皮膚がプローブの内側に配置されたセンサーを越えて変位するまで、吸引カップの内側の皮膚の部分に真空がかけられる。従って皮膚を変位させるために必要な圧力が高いほど、皮膚の弾力は低い。
【０４８０】
データは、８週間の処置後、ＤＹＮ１２で処置した糖尿病ラットの皮膚の弾力が、生理食塩水で処置した糖尿病動物の皮膚の弾力よりも大きかったことを実証する。図１４に見られるように、生理食塩水で処置した糖尿病ラットの皮膚を変位させるために必要な圧力量(7.2 +/- 3.0 kPA)は、ＤＹＮ１２で処置した糖尿病動物の皮膚を変位させるために必要な圧力(3.2 +/- 1.2 kPA)よりも約２〜２．２５倍高かった。又ＤＹＮ１２で処置した糖尿病ラットで観察された弾力値は、生理食塩水で処置した非糖尿病ラットで見られる値と統計的に相違しなかった（ｐ＝０．３９）（表Ｅ）。即ち、３ＤＧの間接的阻害剤であるＤＹＮ１２による糖尿病動物の処置の成果は、生理食塩水のみを受けた糖尿病動物の皮膚よりも大きな弾力を持つ皮膚であった。
【０４８１】
【表７】
2007523908.tif 000054
【０４８２】
上記のデータは、糖尿病ラットへのＤＹＮ１２の投与が、未投与の糖尿病ラットで一般に観察される皮膚弾力の低下（例えば強皮症及び皮膚の基底膜の肥厚化）を防止することを実証し、これは糖尿病で見られる過剰な３ＤＧが弾力の低下の原因であることの証拠である。本明細書に開示するデータは、更に３ＤＧレベルを下げることが、正常な個体の皮膚の弾力を維持するためにも役立ち得ることを示す。
【０４８３】
皮膚の弾力の測定は上記と同様の被検体についても行ったが、測定前に実験動物を沈静させていない。図１５は、技師に拘束され、警戒している被検体の後脚で行った皮膚の弾力測定を具体的に説明する。
【０４８４】
これらの実験では、動物は激しく拘束に抵抗したので、結果が異なった。薬剤投与無しの糖尿病動物は、吸引カップを「引き離す」能力が低いことが示され、従って「引っ張りに対する抵抗」が低いことを示した。一方、薬剤を受けている糖尿病動物及び正常動物の両方が、吸引カップを引き離すよりも大きな能力を有し、そして両グループの動物が剛性及びより大きな筋肉張力を有した。これは、酵素の阻害、多分３ＤＧの不活性化が、糖尿病症状の特徴を表す微少循環の悪化及び神経−悪化を緩和することを示している。
【０４８５】
実施例２１：強皮症の皮膚中の３ＤＧレベル
以前、本明細書の別の場所で開示した方法に従い、正常な皮膚が以下のレベルの３ＤＧを有することを確認した（数被検体からのデータ）：０．９μＭ，０．７μＭ，及び０．６μＭ。数名の強皮症患者に由来する数種の皮膚サンプルを同様にアッセイしたところ、以下の３ＤＧレベルを有した：１５μＭ，１３０μＭ，及び３．５μＭ。従ってこれらのデータは、強皮症患者の皮膚の３ＤＧのレベルが、正常なヒトの皮膚中の３ＤＧレベルに比べて、顕著に上昇していることを示す。
【０４８６】
実施例２２：アマドラーゼの基質であるフルクトースリシンの強皮症細胞への添加後のＩ型コラーゲンのmRNAのダウンレギュレート
これらの実験では、強皮症の患者から得て培養されたヒトの皮膚線維芽細胞に、５ｍＭのＦＬが添加された。７２時間後、細胞は回収され、ｍＲＮＡが単離された。等量のｍＲＮＡ試料はそれぞれ電気泳動で分離され、図１９に示すようにＩ型コラーゲンＡ１ ｍＲＮＡに対する放射性プローブを用いたノーザンブロットにより、Ｉ型コラーゲンＡ１ ｍＲＮＡ量が検出された。Ｉ型コラーゲンＡ１ ｍＲＮＡ量の定量には、ホスフォイメージャー（商標）を用いた。ＧＡＰＤＨ ｍＲＮＡの放射性プローブを、各サンプルのＩ型コラーゲンＡ１ ｍＲＮＡのレベルを標準化するコントロールとして用いた。Ｉ型コラーゲンＡ１ ＲＮＡのレベルは４０％減少した。
これらのデータは、産生されたＩ型コラーゲンｍＲＮＡの量をアマドラーゼ経路がダウンレギュレートできることを実証する。
【０４８７】
実施例２３:アマドラーゼ活性は、銅によって濃度依存的に阻害される
実験は、インビトロで、銅のアマドラーゼ酵素活性への影響を試験するために行われた。別の場所に記載された方法をＣｕＳＯ4の形で銅の量を増加させて用いることで、インビトロアッセイに加えた。図２０で示されたグラフは、銅の濃度の機能として、アマドラーゼ活性のパーセントを表す。硫酸銅は約１μＭの濃度でアマドラーゼを５０％阻害した。
【０４８８】
実施例２４：コラーゲン生成の抑制
Ｉ型コラーゲンの生成は、ヒトの皮膚線維芽細胞にアマドラーゼの基質であるフルクトースリシンを３ｍＭ投与することで、約４０％抑制される。反対に、アマドラーゼの阻害剤であるＤＹＮ１２（３−Ｏ−メチルソルビトールリシン）の３ｍＭの投与は、Ｉ型コラーゲンを５０％増加させた。
【０４８９】
これらの実験では、培養された６６歳の女性から得たヒトの皮膚線維芽細胞に、ＦＬ又はＤＹＮ１２を添加した。７２時間後に、上澄み中のアマドラーゼ経路（プロコラーゲンＩ型−Ｃペプチド）レベルを、ＥＩＡを用いて測定した。なにも加えていないコントロールの培養では、変化割合が比例した。これらのデータ（図２１）は、アマドラーゼ経路がＩ型コラーゲンの生成に影響し得ることを実証する。
ＦＬによる経路の活性増加はＩ型コラーゲンを減少させ、一方、ＤＹＮ１２を用いた経路の阻害は、全く反対の効果を有する。
【０４９０】
実施例２５:デスモシン分析
デスモシン分析のために、組織の生検を、パラフィンを用いて固定した。
該パラフィンを、１０分間、５００μＬのキシレンを用いてインキュベートすることによって、マイクロチューブ中の切片から除去した。５μＬの水を加え、チューブを、穏やかにボルテックスミキサーで攪拌し、その後微量遠心した。キシレンを慎重に除去し、４００μＬの６Ｎ ＨＣｌを蛋白質ペレットに加えたサンプルを、１００℃で２４時間かけて加水分解した。酸をサバント真空遠心分離中で蒸発させ、加水分解物を４００μＬの蒸留水で再溶解した。サンプルをボルテックスミキサーで攪拌し、微量遠心し、ラジオイムノアッセイによるデスモシン分析のために、２０μＬずつ各チューブから取り出した。２μＬの加水分解物中の蛋白質含量を、少し改良したニンヒドリン法によって測定した。ニンヒドリン溶液の原液は、１０ｇのニンヒドリンを３７５ｍＬのエチレングリコール及び１２５ｍＬの４Ｎ酢酸ナトリウムバッファー（ｐＨ５．５）に溶解して作製した。
希釈標準溶液として、２５０μＬの１０％塩化第一錫懸濁液を各１０ｍＬのニンヒドリン溶液の原液に加えた。アミノ酸分析により、５０μＬの加水分解物中のヒドロキシプロリンが測定された。
【０４９１】
実施例２６:アマドラーゼ経路を経由したデスモシンのレギュレーション
エラスチンの前駆体であるデスモシンの生成は、アマドラーゼ経路に作用する化合物によってレギュレートされ得る。正常動物、糖尿病動物、及び１−デオキシ−１−モルホリノフルクトースを投与した糖尿病動物から皮膚を切除し、実施例２９の記載と同様にデスモシン含有量の測定を行った。結果は、糖尿病動物は非糖尿病動物よりも高いレベルのデスモシンを有し（Ｐ＝０．０００３４）、又１−デオキシ−１−モルホリノフルクトースを投与した糖尿病動物は未投与の糖尿病動物に比較して低いレベルのデスモシンを有する（Ｐ＝０．００２４２）ことを示した。
【０４９２】
【表８】
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【０４９３】
【表９】
2007523908.tif 000056
【０４９４】
実施例２７:エラスチンの前駆体であるデスモシンの生成は、アマドラーゼ経路に作用する化合物によってレギュレートされ得る−サンプル採取
ＳＴＺによる糖尿病マウスの肺組織を切除し、デスモシンレベルを分析した。
糖尿病マウスのデスモシンレベルは、非糖尿病のマウスを超えていた。マウスが糖尿病かに関わらず、メグルミンを投与したマウスのデスモシンレベルは、投与をしていないマウスよりも低かった。
【０４９５】
実施例２８:エラスチンの前駆体であるデスモシンの生成は、アマドラーゼ経路に作用する化合物によってレギュレートされ得る
１−デオキシ−１−モルホリノフルクトースを投与した糖尿病ラットの大動脈のサンプルは、未投与のラットに較べ、デスモシンレベルの減少を示した（Ｐ＝０．１０４）。
【０４９６】
【表１０】
2007523908.tif 000057
【０４９７】
実施例２９:ＤＹＮ１２の分布
ラットに、１００ｍＭ ＤＹＮ１２溶液を１ｍｌ（１００μｍｏｌ）腹腔内注射した。１時間後に尿を回収し、ＤＹＮ１２レベルを測定した。１時間後動物を屠殺し、血漿中及び肝臓組織中のＤＹＮ１２レベルを測定した。
【０４９８】
【表１１】
2007523908.tif 000058
【０４９９】
これは、１時間後、ＤＹＮ１２は血漿中で非常に低いレベルで存在し、尿への排出と腎臓中では、フルクトサミンキナーゼ阻害の腎臓（Ki）（２−３ｍＭ）よりも２〜３倍高いレベルで存在することを具体的に示す。
【０５００】
本明細書に引用した各々の、全ての特許、特許出願及び刊行物の開示は、全部、本明細書で資料として使用する。
【０５０１】
本発明は具体的な態様を参照にして開示してきたが、本発明の他の態様及び変更は、当業者により本発明の真の精神及び範囲から逸脱することなく発明できることは明白である。添付する特許請求の範囲は、すべてのそのような態様及び均等な変更を含むと解釈されることを意図する。
【図面の簡単な説明】
【０５０２】
【図１】蛋白質の架橋を導く多段階反応に関与する初期段階を表す概略図である。
【図２】リシン回収経路に関与する反応を具体的に説明する概略図である。
【図３】２グラムのＦＬを与えた１個体の３ＤＦ、３ＤＧ及びＦＬの２４時間追った経時変化を示す尿のプロファイルを表すグラフである。
【図４】２グラムのフルクトースリシンを与えた７名のボランティアの尿中への３ＤＦの経時的な排出を表すグラフである。
【図５】コントロール動物及び０．３％糖化蛋白質を与え続けた実験グループにおける３ＤＦ及びＮ−アセチル−β−グルコサミニダーゼ（ＮＡＧ）レベルを比較するグラフである。
【図６】コントロール食又は糖化蛋白質を強化した食物のいずれかを与えたラットの尿中の３ＤＦレベルと３ＤＧレベルとの間の直線関係を示すグラフである。
【図７】健常者及び糖尿病患者における空腹時の尿中３ＤＧレベルを、空腹時の３ＤＦレベルに対してプロットしたグラフで表す。
【図８】高レベルの糖化蛋白質を含む食物が腎臓に及ぼす影響を具体的に説明する顕微鏡写真の画像を表す。
【図９】ＦＬを与えた後のラット腎臓からの糸球体及び細管画分中の３ＤＧ及び３ＤＦレベルのグラフ的比較である。
【図１０】ヒトアマドラーゼ（フルクトサミン−３−キナーゼ）の核酸配列（配列番号１）、ＮＣＢＩ寄託番号ＮＭ  ０２２１５８を表す画像である。
【図１１】ヒトアマドラーゼ（フルクトサミン−３−キナーゼ）のアミノ酸配列（配列番号２）、ＮＣＢＩ寄託番号ＮＰ  ０７１４４１を表す像である。
【図１２】コラーゲンの架橋に及ぼす３ＤＧの効果、及び３ＤＧが誘導する架橋をアルギニンが阻害することを実証するポリアクリルアミドゲルの画像である。
【図１３】アマドラーゼ／フルクトサミンキナーゼのｍＲＮＡがヒトの皮膚に存在することを実証するアガロースゲルの画像である。
【図１４】ＤＹＮ１２（３−Ｏ−メチルソルビトールリシン）処置が、皮膚の弾力に及ぼす効果のグラフによる具体的説明である。
【図１５】ＤＹＮ１２（３−Ｏ−メチルソルビトールリシン）処置が皮膚の弾力に及ぼす効果のグラフによる具体的説明である。
【図１６】腎臓での新規な代謝経路の略図である。
【図１７】活性酸素種（ＲＯＳ）により影響を受ける疾患の略図である。
【図１８】本発明の実施例による付加物形成及び付加物形成阻害の両方の略図である。
【図１９】Ｃｏｌ １Ａ１及びＧＡＰＤＨリボ核酸をプローブとするサンプルを用いたノーザンブロットである。
【図２０】アマドラーゼ活性への銅の効果のグラフによる具体的説明である。
【図２１】ヒトの皮膚の線維芽細胞におけるコラーゲン生成へのフルクトースリシンが及ぼす影響のプロットである。
【図２２】ヒトの皮膚の線維芽細胞におけるコラーゲン生成へのＤＹＮ−１２のプロットである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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