(57)【要約】  改良型トロンボポエチン模倣物である、２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オンのコリン塩。【特許請求の範囲】
【請求項１】
２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オン・コリン
【請求項２】
２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オン・コリンおよび医薬上許容される担体または希釈剤を含む、医薬組成物。
【請求項３】
その必要のある哺乳類において血小板減少症を処置する方法であって、かかる哺乳類へ治療上有効量の請求項１記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項４】
哺乳類がヒトである、請求項３記載の方法。
【請求項５】
その必要のある哺乳類において血小板産生を増強する方法であって、かかる哺乳類へ治療上有効量の請求項１記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項６】
哺乳類がヒトである、請求項５記載の方法。
【請求項７】
化合物が経口投与される、請求項３記載の方法。
【請求項８】
化合物が非経口投与される、請求項３記載の方法。
【請求項９】
対象においてＴＰＯ受容体をアゴナイズする方法であって、有効量の請求項１記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１０】
医薬上許容される担体または希釈剤および有効量の請求項１記載の化合物を含む医薬組成物の調製方法であって、請求項１記載の化合物を医薬上許容される担体または希釈剤と会合させることを含む、方法。
【請求項１１】
コロニー刺激因子、サイトカイン、ケモカイン、インターロイキンまたはサイトカイン受容体アゴニストまたはアンタゴニスト、可溶性受容体、受容体アゴニストまたはアンタゴニスト抗体からなる群より選択される剤、或いは１またはそれ以上の該剤と同じ機序により作用する小分子またはペプチドを治療上有効量で共投与することをさらに含む、請求項３記載の方法。
【請求項１２】
剤が、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＰＯ、Ｍ−ＣＳＦ、ＥＰＯ、Ｇｒｏ−β、ＩＬ−１１、ＳＣＦ、ＦＬＴ３リガンド、ＬＩＦ、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−１、プロゲニポイエチン、ＮＥＳＰ、ＳＤ−０１、ＩＬ−８またはＩＬ−５からなる群より選択されるか、或いは任意の該剤の生物学的に活性な誘導体である、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
コロニー刺激因子、サイトカイン、ケモカイン、インターロイキンまたはサイトカイン受容体アゴニストからなる群より選択される剤を治療上有効量で共投与することをさらに含む、請求項２記載の医薬組成物。
【請求項１４】
剤が、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＰＯ、Ｍ−ＣＳＦ、ＥＰＯ、Ｇｒｏ−β、ＩＬ−１１、ＳＣＦ、ＦＬＴ３リガンド、ＬＩＦ、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−１またはＩＬ−５からなる群より選択されるか、或いは任意の該剤の生物学的に活性な誘導体である、請求項１３記載の組成物。
【請求項１５】
ドナーから得られる血小板産生を増強するための方法であって、血小板交換療法、献血または血小板供与の前に、かかるドナーへ治療上有効量の請求項１記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１６】
ドナーから得られる末梢血幹細胞の数を増大させるための方法であって、白血球交換療法の前に、かかるドナーへ治療上有効量の請求項１記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１７】
コロニー刺激因子、サイトカイン、ケモカイン、インターロイキンまたはサイトカイン受容体アゴニスト、接着分子アンタゴニストまたは抗体からなる群より選択される造血細胞動員剤を治療上有効量で共投与することをさらに含む、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
動員剤が、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＰＯ、ＥＰＯ、Ｇｒｏ−β、ＩＬ−８、サイトキサン、ＶＬＡ−４阻害剤、ＳＣＦ、ＦＬＴ３リガンドからなる群より選択されるか、或いはＧ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＰＯ、ＥＰＯ、Ｇｒｏ−βまたはＩＬ−８の生物学的に活性な誘導体である、請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
巨核球成熟および／または血小板産生の刺激を増強するためのインビトロまたはエキソビボ方法であって、ＴＰＯ受容体を発現する細胞の培養培地へ有効量の請求項１記載の化合物を添加することを含む、方法。
【請求項２０】
巨核球成熟および／または血小板産生の刺激を増強するためのインビトロまたはエキソビボ方法であって、幹細胞、骨髄細胞、臍帯血細胞または末梢血細胞の培養培地へ有効量の請求項１記載の化合物を添加することを含む、方法。
【請求項２１】
化学療法または放射線療法後に巨核球または血小板が哺乳類に戻される、請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
培養物中で幹細胞、骨髄細胞、臍帯血細胞、末梢血細胞またはＴＰＯ受容体を発現する他の細胞型の生存および／または増殖を増強するためのインビボまたはエキソビボ方法であって、有効量の請求項１記載の化合物を含む培地中で該細胞を培養することを含む、方法。
【請求項２３】
治療上有効量のコロニー刺激因子、サイトカイン、ケモカイン、インターロイキンまたはサイトカイン受容体アゴニストを共投与することをさらに含む、請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
化学療法または放射線療法後に幹細胞が哺乳類へ戻される、請求項２２記載の方法。
【請求項２５】
その必要のあるヒトを含む哺乳類において好中球減少症を処置する方法であって、かかる哺乳類へ治療上有効量の請求項１記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項２６】
好中球産生の刺激を増強するためのインビトロまたはエキソビボ方法であって、有効量の請求項１記載の化合物を幹細胞、骨髄細胞、臍帯血細胞、末梢血細胞またはＴＰＯ受容体を発現する他の細胞型の培養培地へ添加することを含む、方法。
【請求項２７】
化学療法または放射線療法後に好中球が哺乳類へ戻される、請求項２６記載の方法。
【請求項２８】
血小板減少症が化学療法または放射線療法により惹起される骨髄抑制に起因する、請求項３記載の方法。
【請求項２９】
血小板減少症が臓器移植に起因する、請求項３記載の方法。
【請求項３０】
血小板減少症が骨髄、幹細胞または肝臓移植に起因する、請求項３記載の方法。
【請求項３１】
血小板減少症が特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）に起因する、請求項３記載の方法。
【請求項３２】
血小板減少症が骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、再生不良性貧血または白血病に起因する、請求項３記載の方法。
【請求項３３】
血小板減少症がウイルス感染、真菌感染、細菌感染または寄生虫感染に起因する、請求項３記載の方法。
【請求項３４】
血小板減少症が肝機能不全に起因する、請求項３記載の方法。
【請求項３５】
血小板減少症が外科的処置に起因する、請求項３記載の方法。
【請求項３６】
血小板減少症が薬剤に誘導される、請求項３記載の方法。
【請求項３７】
請求項１の化合物の調製方法であって、
ｉ）２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オンを有機溶媒または溶媒中に溶解させて溶液を得ること；
ｉｉ）１またはそれ以上の水酸化コリン等価物を該溶液へ添加すること；次いで
ｉｉｉ）調製された化合物を単離すること：
を含む方法。
【請求項３８】
その必要のある哺乳類において変性疾患を処置する方法であって、かかる哺乳類へ治療上有効量の請求項１記載の化合物をインビボで投与することを含む、方法。
【請求項３９】
哺乳類がヒトである、請求項３８記載の方法。
【請求項４０】
変性疾患が、横断性脊髄炎、多発性硬化症、脳または脊髄への外傷後に生じる脱随、急性脳損傷、頭部外傷、脊髄損傷、末梢神経損傷、虚血性脳傷害、ＣＮＳの遺伝性ミエリン疾患、癲癇、出産時仮死、仮死、無酸素症、癲癇重積、脳卒中、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、心血管障害、心筋梗塞、心血管疾患、肝疾患、胃腸疾患、腎疾患、ＡＩＤＳ、糖尿病および真性糖尿病から選択される、請求項３８記載の方法。
【請求項４１】
変性疾患が神経変性疾患である、請求項３８記載の方法。
【請求項４２】
化合物が経口投与される、請求項４０記載の方法。
【請求項４３】
化合物が非経口投与される、請求項４０記載の方法。
【請求項４４】
コロニー刺激因子、サイトカイン、ケモカイン、インターロイキンまたはサイトカイン受容体アゴニストまたはアンタゴニスト、可溶性受容体、受容体アゴニストまたはアンタゴニスト抗体からなる群より選択される剤、或いは１またはそれ以上の該剤と同じ機序により作用する小分子またはペプチドを治療上有効量で共投与することをさらに含む、請求項４０記載の方法。
【請求項４５】
剤が、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＰＯ、Ｍ−ＣＳＦ、ＥＰＯ、Ｇｒｏ−β、ＩＬ−１１、ＳＣＦ、ＦＬＴ３リガンド、ＬＩＦ、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−１、プロゲニポイエチン、ＮＥＳＰ、ＳＤ−０１、ＩＬ−８またはＩＬ−５からなる群より選択されるか、或いは任意の該剤の生物学的に活性な誘導体である、請求項４４記載の方法。
【請求項４６】
コロニー刺激因子、サイトカイン、ケモカイン、インターロイキンもしくはサイトカイン受容体アゴニスト、接着分子アンタゴニストまたは抗体からなる群より選択される造血細胞動員剤を治療上有効量で共投与することをさらに含む、請求項４０記載の方法。
【請求項４７】
動員剤が、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＰＯ、ＥＰＯ、Ｇｒｏ−β、ＩＬ−８、サイトキサン、ＶＬＡ−４阻害剤、ＳＣＦ、ＦＬＴ３リガンド、或いはＧ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＰＯ、ＥＰＯ、Ｇｒｏ−βまたはＩＬ−８の生物学的に活性な誘導体からなる群より選択される、請求項４６記載の方法。
【請求項４８】
変性疾患がウイルス感染、真菌感染、細菌感染または寄生虫感染に起因する、請求項４０記載の方法。
【請求項４９】
変性疾患が肝機能不全に起因する、請求項４０記載の方法。
【請求項５０】
変性疾患が外科的処置に起因する、請求項４０記載の方法。
【請求項５１】
変性疾患が抗ウイルス剤または抗生剤での処置に起因する、請求項４０記載の方法。
【請求項５２】
変性疾患が脊髄損傷に起因する、請求項４０記載の方法。
【請求項５３】
横断性脊髄炎、多発性硬化症、脳または脊髄への外傷後に生じる脱随、急性脳損傷、頭部外傷、脊髄損傷、末梢神経損傷、虚血性脳傷害、ＣＮＳの遺伝性ミエリン疾患、癲癇、出産時仮死、仮死、無酸素症、癲癇重積、脳卒中、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、心血管障害、心筋梗塞、心血管疾患、肝疾患、胃腸疾患、腎疾患、ＡＩＤＳ、糖尿病および真性糖尿病から選択される疾患状態の処置方法であって、有効量の請求項１記載の化合物をインビボで投与することを含む、方法。
【請求項５４】
神経変性疾患の処置方法であって、有効量の請求項１記載の化合物をインビボで投与することを含む、方法。
【請求項５５】
横断性脊髄炎、多発性硬化症、脳または脊髄への外傷後に生じる脱随、急性脳損傷、頭部外傷、脊髄損傷、末梢神経損傷、虚血性脳傷害、ＣＮＳの遺伝性ミエリン疾患、癲癇、出産時仮死、仮死、無酸素症、癲癇重積、脳卒中、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、心血管障害、心筋梗塞、心血管疾患、肝疾患、胃腸疾患、腎疾患、ＡＩＤＳ、糖尿病および真性糖尿病から選択される疾患状態の処置方法であって、有効量の請求項２記載の化合物をインビボで投与することを含む、方法。
【請求項５６】
神経変性疾患の処置方法であって、有効量の請求項２記載の化合物をインビボで投与することを含む、方法。
【請求項５７】
その必要のある哺乳類において変性疾患を処置する方法であって、かかる哺乳類へ治療上有効量の請求項１記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項５８】
哺乳類がヒトである、請求項５７記載の方法。
【請求項５９】
溶液が酢酸エチルおよびエタノールの混合物を含む、請求項３７記載の方法。
【請求項６０】
溶液がテトラヒドロフランを含む、請求項３７記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、改良型トロンボポエチン（以下、ＴＰＯという）模倣物である、２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オンのコリン塩に関する。この化合物は構造式Ｉ：
【化１】
2007509159.tif 000002
により表される。
【０００２】
本発明の化合物は、特に血小板産生の増強において、ＴＰＯ受容体のアゴニストとして有用である。
【０００３】
（発明の詳細な記載）
２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オンは、国際出願日２００１年５月２４日、国際公報番号ＷＯ  ０１／８９４５７および国際公報日２００１年１１月２９日を有する国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０１／１６８６３において、その医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびエステルと一緒に開示かつ請求されている化合物であり（実施例１２の化合物）、特に血小板産生の増強および血小板減少症の処置において、ＴＰＯ受容体のアゴニストとして有用である。該文献の全ての開示内容は、出典明示により、本明細書の一部となる。国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０１／１６８６３は、そこで開示された任意の化合物についての塩形態を具体的には開示していない。
【０００４】
意外にも、この度、２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オンのコリン塩は、その遊離酸よりも多数の利点を有することが見出された。遊離酸は難水溶性である。この難溶解性は、遊離酸が医薬投与形態へ処方される能力に悪影響を及ぼし、そしてインビボでの化合物の生物学的利用能および経口曝露を減じる。
【０００５】
遊離酸は、特に血小板産生の増強および血小板減少症の処置において、ＴＰＯ受容体のアゴニストとして高度に有用であるが、２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オンのコリン塩は、生物学的利用能および経口曝露の増大というさらなる利点を有する。
【０００６】
本発明の化合物、２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オン・コリン（以下、「活性成分」または「化合物Ａ」という）は、特に血小板産生の増強および血小板減少症の処置において、ＴＰＯ受容体のアゴニストとして有用である。活性成分は、当業者が容易に理解する技法、例えば、国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０１／１６８６３に記載のものに従って、活性成分を慣用的な医薬上許容される担体または希釈剤と組み合わせることにより調製される慣用的な投与形態にて投与され得る。
【０００７】
適当には、本発明はその範囲内に、医薬上許容される担体または希釈剤と組み合わせた２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オン・コリンを活性成分として含有する医薬組成物を包含する。本発明の化合物Ａは、経口、非経口、皮内または局所経路により投与され得る。本明細書中用いられるような非経口なる用語は、静脈内、筋内、皮下、鼻腔内、直腸内、膣内および腹腔内投与を含む。一般的には経口投与が好ましい。化合物Ａは、カプセル剤、錠剤、ピル、散剤および顆粒剤を含む、各投与経路に適した投与形態に処方され得る。かかる固体投与形態において、一般的に、活性化合物は少なくとも１つの不活性希釈剤と混合される。経口投与形態は、通常の慣行であるとして、不活性希釈剤以外のさらなる物質、例えば、滑沢剤、流動促進剤および抗酸化剤を含み得る。カプセル剤、錠剤およびピルの場合には、投与形態は緩衝化剤を含んでもよい。錠剤およびピルは持続性放出のためにさらに調製され得る。
【０００８】
非経口投与のための本発明に記載の調製物は無菌水溶液を含むが、エマルジョンの非水性懸濁液も用いられ得る。かかる投与形態は、アジュバント、例えば、防腐剤、湿潤剤、浸透剤、緩衝化剤、乳化剤および分散剤を含んでもよい。それらは、例えば、細菌保持フィルターを通して濾過するか、組成物中に滅菌剤を組み込むか、組成物に放射線を照射するか、または組成物を加熱することにより滅菌されてもよい。
【０００９】
本明細書中用いるように「コリン」は（２−ヒドロキシエチル）トリメチルアンモニウムを意味する。
【００１０】
上記したような医薬投与単位中の本発明の活性成分の用量は、効果的かつ無毒な量であり得、好ましくは、全体重の１ｋｇあたり０．００１−１００ｍｇの範囲、好ましくは、０．００１−５０ｍｇ／ｋｇの範囲から選択される。ＴＰＯ模倣物を必要とするヒト患者を処置する場合、好ましくは、特定用量が、毎日１−６回、経口または非経口投与される。非経口投与の好ましい形態は、注射および連続注入による局所用、直腸用、経皮用を含む。ヒト投与用の経口投与単位は、好ましくは、０．０５ないし３５００ｍｇの活性成分、最も好ましくは、０．５ないし１，０００ｍｇの活性成分を含む。より少ない用量での経口投与が好ましい。しかしながら、患者にとって安全かつ都合のよい場合には、高用量での非経口投与も用いられ得る。上記投与量は、遊離酸として送達される活性成分の好ましい用量に関連する。
【００１１】
活性成分の個々の投与の最適な用量および間隔は、処置されるべき状態の性質および程度、投与形態、投与経路および投与部位ならびに処置されるべき特定の患者により決定され得、さらにかかる最適条件が慣用的な技法により決定され得るということが、当業者によって理解されるだろう。最適な処置過程、すなわち、所定日数間、１日当たり与えられる活性成分の投与回数は、処置決定試験の慣用的な過程を用いて当業者により確認され得ることも、当業者によって理解されるだろう。
【００１２】
一般的に言えば、本発明の化合物は、遊離酸、２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オンを適切な有機溶媒、例えば、エタノールおよび酢酸エチルの混合物中に溶解し、得られた混合物を濾過し、汚染物質を除き、次いで、この溶液を、例えば、有機溶媒、好ましくは、ＭｅＯＨまたはＴＨＦなどの水混和性溶媒中の１．５当量の水酸化コリン溶液へ添加することにより調製される。本発明の化合物を、一般的には、３ないし２４時間にわたって沈殿させ、次いで、濾過して取り出し、例えば、真空乾燥または高温での風乾により乾燥させる。
【００１３】
メタノール中の５０重量％の水酸化コリン溶液は、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎから購入した。
【００１４】
有機溶媒は、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎから入手可能である。
【００１５】
本発明の医薬的に活性な化合物はＴＰＯ模倣物として活性があるために、それは、血小板減少症および血小板産生の低下を伴う他の状態の処置において治療的な有用性を示す。
【００１６】
本明細書に記載のごとき血小板減少症の処置は、血小板産生の増強により達成される。
【００１７】
本明細書中用いられるような用語「血小板減少症」およびその派生語は、正常と見なされるものまたは健康な個人について所望されるものを下回る、血小板の数における任意の減少として広く解釈されるものとする。血小板減少症は多数の原因因子を有することが知られており、放射線療法、化学療法、免疫療法、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ，Ｂｕｓｓｅｌ  Ｊ．Ｂ．，Ｓｅｍｉｎａｒｓ  ｉｎ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ，２０００，３７，Ｓｕｐｐｌ  １，１−４９）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、再生不良性貧血、ＡＭＬ、ＣＭＬ、ウイルス感染（ＨＩＶ、Ｃ型肝炎、パルボウィルスを含むが、これらに限定されない）、肝疾患、骨髄破壊、骨髄移植、幹細胞移植、末梢血幹細胞移植、前駆細胞欠損、幹細胞および前駆細胞における多型、Ｔｐｏでの欠損、好中球減少症（Ｓａｗａｉ，Ｎ．Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  Ｂｉｏｌ．，２０００，６８，１３７−４３）、樹状細胞動員（Ｋｕｔｅｒ  Ｄ．Ｊ．Ｓｅｍｉｎａｒｓ  ｉｎ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ，２０００，３７，Ｓｕｐｐｌ  ４，４１−４９）、増殖、活性化または分化を含むが、これらに限定されない。本発明の医薬上有効な化合物は、状態を惹起する１または複数の因子に関わらず、血小板減少症の処置において有用である。本発明の医薬上有効な化合物は、状態の１または複数の原因因子が未知または未同定である場合でも、血小板減少症の処置において有用である。
【００１８】
ＴＰＯは、末梢血への幹細胞動員剤として作用することが実証されている（Ｎｅｕｍａｎｎ  Ｔ．Ａ．ら，Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ，Ｃｅｌｌ．＆Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．，２０００，６，４７−５６）。この活性はＧ−ＣＳＦなどの幹細胞動員剤と一緒になって相乗作用を与え得る（Ｓｏｍｏｌｏら．，Ｂｌｏｏｄ，１９９９，９３，２７９８−２８０６）。故に、本発明の化合物は、骨髄破壊的化学療法を受けている患者において造血幹細胞移植のために白血球交換療法を行う前の、ドナーにおける循環幹細胞数の増大において有用である。
【００１９】
同様に、ＴＰＯは、骨髄細胞、特に、顆粒球／マクロファージ系譜の成長を刺激する（Ｈｏｌｌｙら．，ＵＳ−５９８９５３７）。顆粒球／マクロファージ前駆細胞は、好中球、単球、好塩基球および好酸球として成熟する骨髄系譜の細胞である。故に、本発明の化合物は、好中球減少状態を伴う患者での好中球増殖の刺激において治療上の有用性を有する。
【００２０】
血液または血小板における減少が予想される場合には、常に、本発明の化合物の予防的使用が熟慮される。化合物Ａの予防的使用は、血液または血小板の損失が予想される前に、血小板の構築または血小板産生の開始をもたらす。化合物Ａの予防的使用は、移植手術、手術、出産前の麻酔および腸の保護を含むが、これらに限定されない。
【００２１】
ヒト樹状細胞はＴＰＯ受容体を発現することが示されており（Ｋｕｍａｍｏｔｏら．，Ｂｒ．Ｊ．Ｈａｅｍ，１９９９，１０５，１０２５−１０３３）、そしてＴＰＯは樹状細胞の強力な動員剤である。本発明のＴＰＯ模倣化合物は、樹状細胞の活性および動員性を増大するという点で、ワクチンアジュバントとしても有用である。化合物Ａは、経口的、経皮的または皮下的に送達されるワクチンおよび／または免疫調整剤と組み合わされるならば、樹状細胞の活性および動員性を増大することにより、免疫アジュバントとしても有用である。
【００２２】
ＴＰＯは、巨核球、血小板および幹細胞への抗アポトーシス／生存効果ならびに幹細胞および巨核球細胞への増殖効果を含む様々な効果を有することが知られている（Ｋｕｔｅｒ  Ｄ．Ｊ．Ｓｅｍｉｎａｒｓ  ｉｎ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ，２０００，３７，４１−９）。これらのＴＰＯ活性は幹細胞および前駆細胞の数を効果的に増大させ、結果として、分化を誘導する他のサイトカインと一緒にＴＰＯが用いられる場合、相乗効果がある。
【００２３】
本発明のさらなる態様は、処置の必要のあるヒトを含む哺乳類において変性疾患を処置する方法であって、かかる哺乳類へ治療上有効量の本発明の化合物Ａを投与することを含む方法を提供する。
【００２４】
本明細書中用いるような変性疾患なる用語およびその派生語は、横断性脊髄炎、多発性硬化症、脳または脊髄への外傷後に生じる脱随、急性脳損傷、頭部外傷、末梢神経損傷、虚血性脳傷害、脊髄損傷、ＣＮＳの遺伝性ミエリン疾患、癲癇、出産時仮死、仮死、無酸素症、癲癇重積および脳卒中を含む神経系疾患；神経変性疾患、例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病および筋萎縮性側索硬化症；例えば、心血管障害、心筋梗塞および心血管疾患／組織における組織の処置、修復および／または再生におけるもの、ならびに肝疾患／組織、胃腸疾患／組織および腎疾患／組織の処置、修復および／または再生におけるもの；ＡＩＤＳの処置におけるもの；糖尿病／真性糖尿病の処置におけるもの：から選択される疾患状態を意味する。
【００２５】
脳卒中は脳血管事象（ＣＶＩ）を言い、急性血栓塞栓性脳卒中を含む。脳卒中は、局所性および全脳虚血性の両方を含む。一過性脳虚血発作および脳虚血に付随する他の脳血管問題も含まれる。患者は、具体的には頸動脈内膜切除術または一般的には他の脳血管もしくは血管の外科的処置、或いは脳血管撮影などを含む血管の診断的処置を受ける。
【００２６】
他の事象は、頭部外傷、脊髄外傷、または一般的な無酸素症、低酸素症、低血糖症、低血圧に由来する損傷、ならびに塞栓摘出、過剰融合および低酸素症に由来する処置の間に見られる同様の損傷である。
【００２７】
化合物Ａは、一連の事象、例えば、心臓バイパス手術の間、頭蓋内出血事象において、出産時仮死において、心停止および癲癇重積において有用である。
【００２８】
故に、本発明は、横断性脊髄炎、多発性硬化症、脳または脊髄への外傷後に生じる脱随、急性脳損傷、頭部外傷、脊髄損傷、末梢神経損傷、虚血性脳傷害、ＣＮＳの遺伝性ミエリン疾患、癲癇、出産時仮死、仮死、無酸素症、癲癇重積および脳卒中を含む神経系疾患；神経変性疾患、例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病および筋萎縮性側索硬化症；例えば、心血管障害、心筋梗塞および心血管疾患／組織における組織の処置、修復および／または再生におけるもの、ならびに肝疾患／組織、胃腸疾患／組織および腎疾患／組織の処置、修復および／または再生におけるもの；ＡＩＤＳの処置におけるもの；糖尿病／真性糖尿病の処置におけるもの；から選択される疾患状態を処置する方法であって、有効量の化合物Ａを投与することを含む方法を提供する。
【００２９】
本明細書中記載の変性疾患の処置は、化合物Ａの投与により達成され、特定の任意の作用機序に限定されない。本明細書中記載のように変性疾患を処置するための作用機序は、幹細胞の生存および／または産生の刺激および／または幹細胞機能および／または寿命の増大による。
【００３０】
変性疾患は多数の原因因子を有することが知られており、ウイルス感染（ＨＩＶ、Ｃ型肝炎、パルボウィルスを含むが、これらに限定されない）および肝疾患、加齢、自己免疫疾患、神経疾患／傷害、肝疾患／傷害、腎疾患／傷害、胃腸疾患／傷害、心血管疾患／傷害および膵疾患／傷害を含むが、これらに限定されない。本発明は、状態を惹起する１または複数の因子に関わらず、変性疾患の処置に関連する。本発明の化合物、化合物Ａは、状態の１または複数の原因因子が未知または未同定である場合にも、変性疾患の処置において有用である。
【００３１】
熟練の医師は、本発明の方法による投与に適した状況、すなわち、どの対象が変性疾患、例えば、脳卒中に感受的であるか、またはその危険性があるか、ならびに脳卒中にかかっているかを決定することができるだろう。
【００３２】
変性疾患が予想される場合は、常に、本発明の化合物の予防的使用が熟慮される。
【００３３】
変性疾患を処置する化合物Ａの能力は、ＣＤ３４＋前駆細胞増殖アッセイにおける活性により実証される。
【００３４】
ＣＤ３４＋前駆細胞増殖アッセイ
ヒト骨髄由来の初期ＣＤ３４＋前駆細胞の生存および増殖の刺激における能力について、化合物Ａを試験する。このアッセイにおいて、精製ヒトＣＤ３４＋前駆細胞を、化合物Ａと一緒に液体培地中で最高７日間インキュベーションし、次いで、初期幹細胞マーカーＣＤ３４を発現する細胞の数をフローサイトメトリーにより測定し、未処理細胞と比較した（Ｌｉｕら．Ｂｏｎｅ  Ｍａｒｒｏｗ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．２４：２４７−５２，１９９９を参照のこと）。
【００３５】
故に、本発明は、変性疾患の処置方法であって、有効量の化合物Ａをその必要のある対象へ投与することを含む方法を提供する。化合物Ａは、変性疾患を処置する能力のために、上記した疾患状態を処置するための方法を提供する。
【００３６】
化合物Ａのインビボでの投与が、パーキンソン病、ハンチントン病、多発性硬化症および虚血性脳傷害の処置において有用であることは、本知見の一部である。成体骨髄幹細胞を含む幹細胞は、多発性硬化症の処置において効果的であることが示されている；Ｓｔａｎｇｅｌ  Ｍ．ら．，Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，６８（５）：３６１−７６，２００２  Ｄｅｃ。パーキンソン病、ハンチントン病、多発性硬化症および虚血性脳傷害における神経幹細胞ならびにそれらの使用は、Ｏｓｔｅｎｆｉｅｌｄ  Ｔ．ら．，Ａｄｖａｎｃｅｓ＆Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  ｓｔａｎｄａｒｄｓ  ｉｎ  Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，２８：３−８９，２００３に記載されている。
【００３７】
さらに、化合物Ａのインビボでの投与が、幹細胞処理に応答する組織の再生および修復において有用であることは、本知見の一部である。かかる組織は、当業者によって容易に理解されるかまたは容易に確認されるものである。例えば、幹細胞は、心筋梗塞、心血管障害および心血管疾患を伴う患者の処置において有用であることが示されている；Ｓｔａｍｍ  Ｃ．ら．，Ｌａｎｃｅｔ．３６１（９３５１）：４５−６，２００３およびＳｅｍｓａｒｉａｎＣ．，Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ．３２（５−６）：２５９−６５，２００２。幹細胞は、肝疾患／組織、胃腸疾患／組織および腎疾患／組織の処置、修復および／または再生においても示唆されている；Ｃｈｏｉ  Ｄ．ら．，Ｃｅｌｌ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，１１（４）：３５９−６８，２００２，  Ｐｏｕｌｓｏｍ  Ｒ．ら．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，１９７（４）：４４１−５６，２００２  ａｎｄ  Ａｌｉｓｏｎ  Ｍ．ら．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，１９７（４）：４１９−２３，２００２。
【００３８】
さらに、化合物Ａのインビボでの投与が、糖尿病／真性糖尿病の処置において有用であることは、本知見の一部である。幹細胞は、糖尿病の処置においても示唆されている；Ｂｅｒｎａ  Ｇ，ら．，Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ＆Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ，５５（４）：２０６−１２，２００１  ａｎｄ  Ｂｅｉｌｈａｃｋ  ＧＦら，Ｄｉａｂｅｔｅｓ，５２（１）：５９−６８，２００３。
【００３９】
本発明のさらなる態様は、本発明の化合物Ａをさらなる活性成分、例えば、変性疾患および／または化学療法に誘導される血小板減少症を含む血小板減少症ならびに骨髄移植ならびに血小板産生の低下を伴う他の状態を処置することが知られている他の化合物、或いは、ＴＰＯ模倣物と組み合わせて用いられる場合に有用性をもつことが知られている化合物と共投与する方法を提供する。
【００４０】
本明細書中に用いるような用語「共投与」およびその派生語は、変性疾患および／または化学療法に誘導される血小板減少症を含む血小板減少症ならびに骨髄移植ならびに血小板産生の低下を伴う他の状態を処置することが知られている１または複数のさらなる活性成分ならびに化合物Ａを同時に投与するか、または任意の方法で別々かつ連続的に投与するかのいずれかを意味する。本明細書中に用いるような１または複数のさらなる活性成分なる用語は、ＴＰＯまたは一のＴＰＯ模倣物と一緒に投与される場合に、有利な特性を有するまたは示すことが知られている任意の化合物または治療剤を含む。好ましくは、同時投与でないならば、化合物は互いに近接する時間にて投与される。さらに、化合物が同じ投与形態で投与されるか否かは重要ではなく、例えば、一の化合物は局所投与され、および別の化合物は経口投与されてもよい。
【００４１】
本発明のＴＰＯ模倣化合物は、細胞の生存または増殖への作用が知られている他の剤と連動した、細胞の生存または増殖への作用においても有用である。かかる他の剤は、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＰＯ、Ｍ−ＣＳＦ、ＥＰＯ、Ｇｒｏ−β、ＩＬ−１１、ＳＣＦ、ＦＬＴ３リガンド、ＬＩＦ、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−１、プロゲニポイエチン（Ｐｒｏｇｅｎｉｐｏｉｅｔｉｎ）、ＮＥＳＰ、ＳＤ−０１もしくはＩＬ−５または前記した任意の剤の生物学的に活性な誘導体、ＫＴ６３５２（Ｓｈｉｏｔｓｕ  Ｙ．ら．，Ｅｘｐ．Ｈｅｍａｔ．１９９８，２６，１１９５−１２０１）、ウテロフェリン（ｕｔｅｒｏｆｅｒｒｉｎ）（Ｌａｕｒｅｎｚ  ＪＣ．，ら．Ｃｏｍｐ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．＆Ｐｈｙｓ．，Ｐａｒｔ  Ａ．Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ．，１９９７，１１６，３６９−７７）、ＦＫ２３（Ｈａｓｅｇａｗａ  Ｔ．，ら．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍ．，１９９６，１８１０３−１１２）、および幹細胞、前駆細胞またはＴｐｏ受容体を発現する他の細胞について抗アポトーシス性、生存性もしくは増殖性を有するとして同定された他の分子を含むが、これらに限定されない。
【００４２】
本発明の化合物Ａと組み合わせて用いられるための１または複数のさらなる有効成分の例は、化学的予防剤もしくは骨髄保護剤、例えば、Ｇ−ＣＳＦ、ＢＢ１００１０（Ｃｌｅｍｏｎｓら．，Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，１９９９，５７，１２７）、アミフォスチン（Ｅｔｈｙｏｌ）（Ｆｅｔｓｃｈｅｒら．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｈｅｍａｔ．，２０００，７，２５５−６０）、ＳＣＦ、ＩＬ−１１、ＭＣＰ−４、ＩＬ−１−β、ＡｃＳＤＫＰ（Ｇａｕｄｒｏｎら，Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ，１９９９，１７，１００−６）、ＴＮＦ−ａ、ＴＧＦ−ｂ、ＭＩＰ−１ａ（Ｅｇｇｅｒら．，Ｂｏｎｅ  Ｍａｒｒｏｗ  Ｔｒａｎｓｐｌ．，１９９８，２２（Ｓｕｐｐｌ．２），３４−３５）、および抗アポトーシス性、生存性もしくは増殖性を有するとして同定された他の分子を含むが、これらに限定されない。
【００４３】
本発明のＴＰＯ模倣化合物と組み合わせて用いられるための１または複数のさらなる有効成分のさらなる例は、幹細胞、巨核球、好中球動員剤、例えば、化学療法剤（すなわち、サイトキサン、エトポシド、シスプラチン、Ｂａｌｌｅｓｔｒｅｒｏ  Ａ．ら．，Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２０００，５９，７−１３）、ケモカイン、ＩＬ−８、Ｇｒｏ−β（Ｋｉｎｇ，Ａ．Ｇ．ら．Ｊ．Ｉｍｍｕｎ．，２０００，１６４，３７７４−８２）、受容体アゴニストもしくはアンタゴニスト抗体、小分子サイトカインまたは受容体アゴニストもしくはアンタゴニスト、ＳＣＦ、Ｆｌｔ３リガンド、接着分子阻害剤または抗体、例えば、抗−ＶＬＡ−４（Ｋｉｋｕｔａ  Ｔ．ら．，Ｅｘｐ．Ｈｅｍａｔ．，２０００，２８，３１１−７）もしくは抗−ＣＤ４４（Ｖｅｒｍｅｕｌｅｎ  Ｍ．ら．，Ｂｌｏｏｄ，１９９８，９２，８９４−９００）、サイトカイン／ケモカイン／インターロイキンまたは受容体アゴニストもしくはアンタゴニスト抗体、ＭＣＰ−４（Ｂｅｒｋｈｏｕｔ  ＴＡ．，ら．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９９７，２７２，１６４０４−１６４１３；Ｕｇｕｃｃｉｏｎｉ  Ｍ．ら．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１９９６，１８３，２３７９−２３８４）を含むが、これらに限定されない。
【００４４】
本発明の化合物Ａは、哺乳類、特にそれを必要とするヒトにおいて、ＴＰＯ模倣物として有用である。
【００４５】
ヒトを含む哺乳類においてＴＰＯ模倣活性を誘導する本発明の方法は、かかる活性を必要とする対象へ本発明の化合物ＡをＴＰＯ模倣に有効な量で投与することを含む。
【００４６】
本発明は、治療において用いるための医薬の製造における化合物Ａの使用も提供する。
【００４７】
本発明は、ＴＰＯ模倣物として用いるための医薬の製造における化合物Ａの使用も提供する。
【００４８】
本発明は、血小板産生の増強において用いるための医薬の製造における化合物Ａの使用も提供する。
【００４９】
本発明は、血小板減少症の処置において用いるための医薬の製造における化合物Ａの使用も提供する。
【００５０】
本発明は、変性疾患の処置において用いるための医薬の製造における化合物Ａの使用も提供する。
【００５１】
本発明は、変性疾患の処置において用いるための医薬組成物であって、化合物Ａおよび医薬上許容される担体を含有する医薬組成物も提供する。
【００５２】
本発明は、ＴＰＯ模倣物として用いるための医薬組成物であって、化合物Ａおよび医薬上許容される担体を含有する医薬組成物も提供する。
【００５３】
本発明は、血小板減少症の処置において用いるための医薬組成物であって、化合物Ａおよび医薬上許容される担体を含有する医薬組成物も提供する。
【００５４】
本発明は、血小板産生の増強において用いるための医薬組成物であって、化合物Ａおよび医薬上許容される担体を含有する医薬組成物も提供する。
【００５５】
本発明は、変性疾患の処置において用いるための医薬組成物であって、化合物Ａおよび医薬上許容される担体を含有する医薬組成物も提供する。
【００５６】
本明細書中用いるように用語「処理」およびその派生語は、予防的および治療的処置を  意味する。
【００５７】
本明細書中に引用した特許、特許出願を含め、全ての文献は、出典明示により、そのすべてを本明細書の一部となす。
【００５８】
本発明の化合物を本発明に従って投与する場合、許容できない毒性効果は予想されない。
【００５９】
予想される均等物−化合物Ａが互変異性形態であってもよいことは、当業者によって理解されよう。化合物Ａの交互異性形態は、以下の式（ＩＩおよびＩＩＩ）により正しく示される構造式を含んでもよいが、これらに限定されない。
【００６０】
【化２】
2007509159.tif 000003
（ＩＩ）                          （ＩＩＩ）
【００６１】
かかる化合物の全ては本発明の範囲内に含まれ、かつ化合物Ａの定義内に本質的に含まれる。
【００６２】
以下の実施例は本発明をさらに説明する。実施例は、本明細書中の上記記載にて定義されかつ添付の特許請求の範囲にて請求される本発明の範囲を限定するものではない。
【００６３】
（実施例）
実施例１
２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オン・コリン：の調製
【化３】
2007509159.tif 000004
【００６４】
７ｍＬの酢酸エチルおよび１２ｍＬのエタノール（１９０プルーフ）中の２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オン、１．１ｇの橙色粗固体を約４０℃で攪拌した。この懸濁液へ、メタノール中の水酸化コリン（１Ｎ）溶液、２．５ｍｌを加え、暗橙褐色溶液を得る。水（１ｍｌ）をその暗色の溶液へ加え、混合物を約３時間約３５℃で攪拌した。この間、溶液中に沈殿が見られた。懸濁液を約２０℃でさらに７２時間攪拌し、次いで、濾過により固体を単離し、１２時間にわたって約４０℃で乾燥して、１．２ｇ（収率８７％）の標記化合物を淡橙色の結晶性固体として得た。
【００６５】
Ｐｈｉｌｉｐｓ  Ｘ’Ｐｅｒｔ  Ｐｒｏ回折計で得られたＸ線粉末回折により、固体は結晶性であることが証明された。以下のパラメーターを用いて試料をスキャンした：スキャン範囲：２−３５°２θ；発生装置出力：４０ｋＶ，４０ｍＡ；放射線源：Ｃｕ  Ｋα；スキャン型：連続；工程時間：１０．１６秒；工程サイズ：１秒あたり０．０１６７°２θ；試料回転：２５ｒｐｍ。Ｘ線粉末パターンおよびピークリストを以下に示す。
【表１】
2007509159.tif 000005
【表２】
2007509159.tif 000006
【表３】
2007509159.tif 000007
【００６６】
ＤＳＣデータは、固体が、約２３５．３℃での吸熱開始を伴って分解溶融することを示した。
【００６７】
プロトンＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＨ−ｄ４、ＭｅＯＨ−ｄ４  δ３．３２を標準とする）：
δ  ２．２８（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），２．３９（ｓ，３Ｈ），３．２１（ｓ，９Ｈ），３．４７−３．４９（ｔ，２Ｈ），３．９９−４．０１（ｔ，２Ｈ），７．１０−７．１３（ｄｄ，１Ｈ），７．１７−７．１８（ｄ，１Ｈ），７．２０−７．２１（ｄｄ，１Ｈ），７．５５−７．６０（ｍ，３Ｈ），７．６８（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．７６−７．７７（ｄｄ，１Ｈ），８．０６−８．０７（ｄｄ，１Ｈ），８．２１（ｓ，１Ｈ）
【００６８】
ＩＲデータ（ＤＡＴＲ）
３０２３，２９２０，２８５３，１６４８，１６０６，１５４１，１５０３，１４５７，１４１０，１３６７，１３３４，１２６７，１２５７，１２２４，１１９１，１１５５，１１３５，１１１７，１０９７，１０５４，１０２４，１０００，９５８，９２０，９０４，８７４，８５１，８０６，７８４，７７３，７６０，７２６，７０８，６８１ｃｍ−１
【００６９】
実施例２
２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オン・コリン：の調製
２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オン（２．０ｇ，４．２９ミリモル）をエタノール（１７ｍｌ）および水（１．８５ｍｌ）中に懸濁させた。褐色スラリーを周囲温度で水酸化コリン（２．６８ｍｌ，２．２当量）（メタノール中の４５重量％溶液として供給）を用いて処理し、濃い紫色の溶液を得、これを３０分間攪拌した。溶液を濾過し、エタノール（４ｍｌ）でリンスした。水（１．８５ｍｌ）中のトリフルオロ酢酸（０．３６ｍｌ，１当量）を濾液に加え、橙色−赤色スラリーを得、次いで、これを７８℃（還流）に加熱し、３０分間攪拌した。次いで、反応物を６０℃に冷却し、エタノール（２５ｍｌ，１２．５ｖｏｌ）で処理し、６０℃でさらに１時間攪拌した。次いで、懸濁液を周囲温度に冷却し、１７時間攪拌した。濾過した後、ケークをエタノール（８ｍｌ，４ｖｏｌ）で洗浄した。得られた固体を真空中５０℃で乾燥し、２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オン・コリンを橙色固体（２．０２ｇ，８３％）として得た。
【００７０】
プロトンＮＭＲおよびＩＲデータは標記化合物に一致した。
【００７１】
実施例３
錠剤組成物
ラクトース、微結晶セルロース、澱粉グリコール酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウムおよび２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オン・コリンを、下記表１で示す割合で混合した。次いで、混合物を圧縮して錠剤化した。
【００７２】
【表４】
2007509159.tif 000008
【００７３】
実施例４
非経口注射用組成物
５．０ｍｇの化合物を１．０ｍｌの一般的な生理食塩液中で攪拌することにより、２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−｛［２−ヒドロキシ−３’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−３−イル］−ヒドラゾノ｝−５−メチル−２，４−ジヒドロピラゾール−３−オン・コリンを投与するための注射用形態を製造する。
【００７４】
本発明の好ましい実施態様は上記により例示されるが、本発明は、本明細書に開示された厳密な指示に限定されるものではなく、添付の特許請求の範囲内となる全ての変更に対する権利も保有されるものと理解される。
【国際調査報告】
2007509159.tif 000009