(57)【要約】  緑内障を治療し、眼圧を制御し、小柱網を維持し、眼の神経変性に対して保護し、及び／又は緑内障性網膜症に対して保護するための、HMG-CoAレダクターゼ阻害剤の使用が記載される。０．２〜０．７のRI値を有するスタチン（プラバスタチンなど）である好ましいHMG-CoAレダクターゼ阻害剤が、患者の罹患した眼に局所適用を介して投与される。
2007534699.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つのHMG-CoAレダクターゼ阻害剤を含む組成物の医薬としての有効量が患者に投与される、前記患者における緑内障の治療方法。
【請求項２】
前記HMG-CoAレダクターゼ阻害剤が少なくとも１つのスタチンである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記少なくとも１つのスタチンが、コンパクチン、ロバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、メバスタチン、フルバスタチン、ロスバスタチン、アトルバスタチン、ピタバスタチン、セルビスタチン、ベリバスタチン、ダルバスタチン、グレンバスタチン、それらのプロドラッグ、又はそれらの誘導体、或いはそれらの組み合わせである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記少なくとも１つのスタチンが０．２〜０．７のRI値を有し、且つ前記組成物が前記患者の少なくとも１つの眼に局所投与される、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記HMG-CoAレダクターゼ阻害剤が式A-B：
｛式中、
【化１】
2007534699.tif 000016
R1は、CO2R、CONR5R6又はCH2OR7であるか、又はR1及びR3はラクトンを形成し；
Rは、H又はカチオン性塩部分であるか、又はCO2Rは医薬として許容可能なエステル部分を形成し；
R2、R3、R4は、同じ又は異なり、H、C(O)R8又はC(O)NR5R6であり；
R5、R6は、同じ又は異なり、H又はアルキルであり；
R7は、H又はC(O)R8であり；そして
R8は、アルキルである。｝
により表される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記HMG-CoAレダクターゼ阻害剤が、以下の構造B：
【化２】
2007534699.tif 000017
｛式中、
R1は、CO2R、CONR5R6又はCH2OR7であるか、又はR1及びR3は一緒になってラクトンを形成し；
Rは、H又はカチオン性塩部分であるか、又はCO2Rは医薬として許容可能なエステル部分を形成し；
R2、R3は、同じ又は異なり、H、C(O)R8又はC(O)NR5R6であり；
R5、R6は、同じ又は異なり、H又はアルキルであり；
R7は、H又はC(O)R8であり；そして
R8は、アルキルである。｝
のうちの1つを含むHMG-CoAレダクターゼ阻害剤である、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記組成物が前記患者の少なくとも１つの眼に局所投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記HMG-CoAレダクターゼ阻害剤が約０．０５重量％〜約２．０重量％の前記組成物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
少なくとも1つのHMG-CoAレダクターゼ阻害剤を含む組成物の医薬としての有効量を患者に投与することを含む、前記患者における正常な又は上昇した眼圧を制御する方法。
【請求項１０】
前記HMG-CoAレダクターゼ阻害剤が少なくとも１つのスタチンである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記少なくとも１つのスタチンが、コンパクチン、ロバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、メバスタチン、フルバスタチン、ロスバスタチン、アトルバスタチン、ピタバスタチン、セルビスタチン、ベリバスタチン、ダルバスタチン、グレンバスタチン、それらのプロドラッグ、又はそれらの誘導体、或いはそれらの組み合わせを含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記少なくとも１つのスタチンが、０．２〜０．７のRI値を有し、且つ前記組成物が前記患者の少なくとも１つの眼に局所投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記HMG-CoAレダクターゼが式A-B：
｛式中、
【化３】
2007534699.tif 000018
R1は、CO2R、CONR5R6又はCH2OR7であるか、又はR1及びR3はラクトンを形成し；
Rは、H又はカチオン性塩部分であるか、又はCO2Rは医薬として許容可能なエステル部分を形成し；
R2、R3、R4は、同じ又は異なり、H、C(O)R8又はC(O)NR5R6であり；
R5、R6は、同じ又は異なり、H又はアルキルであり；
R7は、H又はC(O)R8であり；そして
R8は、アルキルである。｝
により表される、請求項９に記載の方法。
【請求項１４】
前記組成物が前記患者の少なくとも１つの眼に局所投与される、請求項９に記載の方法。
【請求項１５】
前記HMG-CoAレダクターゼ阻害剤が、約０．０５重量％〜約２重量％の前記組成物を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１６】
少なくとも１つのHMG-CoAレダクターゼ阻害剤を含む組成物の医薬としての有効量を患者に投与することを含む、前記患者の小柱網を維持する方法。
【請求項１７】
前記HMG-CoAレダクターゼ阻害剤が少なくとも１つのスタチンである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
少なくとも１つのHMG-CoAレダクターゼ阻害剤を含む組成物の医薬としての有効量を患者に投与することを含む、眼の神経変性に対する保護の方法。
【請求項１９】
前記HMG-CoAレダクターゼ阻害剤が０．２〜０．７のRI値を有する少なくとも１つのスタチンであり、且つ前記組成物が前記患者の少なくとも１つの眼に局所投与される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
少なくとも１つのHMG-CoAレダクターゼ阻害剤を含む組成物の医薬としての有効量を患者に投与することを含む、前記患者の緑内障性網膜症に対する保護の方法。
【請求項２１】
前記HMG-CoAレダクターゼ阻害剤が０．２〜０．７のRI値を有する少なくとも１つのスタチンであり、且つ前記組成物が前記患者の少なくとも１つの眼に局所投与される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記組成物が前記患者の少なくとも１つの眼に眼内投与される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記組成物の部分として、又は別の投与として、βブロッカー、カルボニックアンハイドラーゼ阻害剤、α１アンタゴニスト、α２アゴニスト、マイトティック、プロスタグランジンアナログ、神経保護剤、又はそれらのいずれかの組み合わせを投与することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
前記組成物の部分として、又は別の投与として、少なくとも１つのカルボニックアンハイドラーゼ阻害剤を投与することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
前記組成物の部分として、又は別の投与として、βブロッカー、カルボニックアンハイドラーゼ阻害剤、α１アンタゴニスト、α２アゴニスト、マイトティック、プロスタグランジンアナログ、神経保護剤、又はそれらのいずれかの組み合わせを投与することをさらに含む、請求項９に記載の方法。
【請求項２６】
前記組成物の部分として、又は別の投与として、少なくとも１つのカルボニックアンハイドラーゼ阻害剤を投与することをさらに含む、請求項９に記載の方法。
【請求項２７】
前記組成物の部分として、又は別の投与として、βブロッカー、カルボニックアンハイドラーゼ阻害剤、α１アンタゴニスト、α２アゴニスト、マイトティック、プロスタグランジンアナログ、神経保護剤、又はそれらのいずれかの組み合わせを投与することをさらに含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２８】
前記組成物の部分として、又は別の投与として、少なくとも１つのカルボニックアンハイドラーゼ阻害剤を投与することをさらに含む、請求項１８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、患者における緑内障の治療及び眼圧の制御又は低下に関する。より特別には、本発明は緑内障の治療及び眼圧の制御又は低下に有用な医薬組成物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
緑内障性の視神経症（緑内障）は、視神経への不可逆的な損傷による視覚機能の永久的喪失を特徴とする病気である。いくつかの形態学的又は機能的に異なるタイプの緑内障は典型的に、該病気の病理学的経過の原因に関連すると考えられている、上昇した眼圧（IOP）によって特徴付けられる。高眼圧症は、IOPが上昇するが、明らかな視覚機能の喪失は起こっていない状態であり；そのような患者は緑内障に関連する視覚喪失が最終的に発生するリスクが高いと考えられる。緑内障による視野の損失を有する何人かの患者は比較的低いIOPを有する。これらの正常圧又は低圧の緑内障患者もまた、IOPを低下させ、そして制御する作用物質からの利益を得ることができる。緑内障又は高眼圧が早期に検出され、そして上昇した眼圧を有効に低下させる医薬によってただちに治療される場合、一般に、視覚機能の喪失又はその進行性の悪化は緩和されることができる。眼圧の低下に有用であることが証明されている薬物療法は、眼房水産生を減少させる剤及び流出能力を増加させる剤の両方の剤を含む。
【０００３】
持続的に上昇したIOPは、網膜の進行性の悪化及び視覚機能の喪失と関連した。したがて、緑内障性網膜症の可能性を低下させるか又はその重篤度を低下させるために、IOPを低下させることは緑内障患者の治療の目的であることができる。残念なことに、現存の緑内障治療で治療された場合、多くの個体はうまく応答しない。
【０００４】
本発明は、主に、HMG-CoAレダクターゼ阻害活性を示す薬物のクラスに関する。「スタチン」という用語は、しばしば「HMG-CoAレダクターゼ阻害剤」を記載するために使用されてきた。スタチンは様々な目的のための様々な医学的研究において使用され又は評価されてきた。これらの研究のいくつかを以下に示す。しかしながら、これらの研究のすべてにおいて、スタチンが緑内障の治療及び／又は眼圧の制御又は低下に有効であることができるという認識はなかった。スタチンは３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリルコエンザイムA(HMG-CoA)レダクターゼ阻害剤のクラスであって、それらの臨床における脂質低下特性に関して知られている。脂質低下特性は、HMG-CoAレダクターゼを阻害し、コレステロール合成における律速ステップである３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−CoAのメバロン酸への変換を妨害するスタチンの能力による。しかしながら、スタチンは、コレステロール生合成の阻害に関連しないかもしれない作用もあらわす。例えば、他の効果の中でも、スタチンは多様なインテグリンの発現を阻害し、スーパーオキシドアニオンの産生を阻害し、Rhoタンパク質のイソプレニル化を妨害し、そしてフリーラジカルスカベンジャーとして作用することが報告されている（Wassmann and Nickenig, Endothelium, 2003,10:23-33;Mason JC, Clin Sci(Lond) 2003,105:251-66）。また、スタチンの抗炎症作用及び心臓保護作用も報告されている（Yoshida M J. Atherosclerosis Thromb 2003, 10(3), 140-4; Luo JD and Chen AF Curr Med Chem 2003, 10(16), 1593-601）。
【０００５】
スタチンが緑内障に関連しない目的のために使用された研究のさらなる例は、HMG-CoAレダクターゼ阻害剤であるスタチンの黄斑変性症の治療又は黄斑変性症の予防のための使用に関する米国特許出願第２００３／００６５０２０号にさらに記載される。また、米国特許第６，５６９，４６１号は、糖尿病性網膜症の治療のための一定のジヒドロキシオープンアシッド（open acid）スタチンの遅延放出性製剤の使用に関する。Schmidtら（Ophthalmic Res. 1994, 26, 352-60）は、少なくとも１年間経口投与されたロバスタチン又はシンバスタチンで治療された患者が、眼圧において臨床的に顕著な変化を起こさなかったことを報告した。
【０００６】
LDLコレステロール及びトリグリセリドの適度な低下を起こす、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（PPAR）アゴニストのフィブレートクラスのメンバーであるクロフィブレートもIOPを低下させることも報告されている。
【０００７】
本発明者らは、重要な研究を通じて、スタチンなどのHMG-CoAレダクターゼ阻害剤の使用によって、緑内障を治療し及び／または眼圧を制御又は低下させる方法を発見した。
【発明の開示】
【０００８】
本発明の特徴は、化学的安定性が増加し、そして正常な又は上昇した眼圧の低下及び制御ならびに／または緑内障の治療に有用な化合物を使用することである。
【０００９】
本発明の他の特徴は、正常又は上昇した眼圧の低下及び制御ならびに／または緑内障の治療における所望のレベルの治療作用を提供する化合物を使用することである。
【００１０】
本発明のさらに他の特徴は、神経保護効果を提供する、緑内障の治療又は予防方法を提供することである。
【００１１】
本発明のさらに他の特徴は、小柱網（TM）細胞による結合組織成長因子（CTGF）の産生の顕著な減少を提供する緑内障の治療又は予防方法を提供することである。
【００１２】
本発明のさらに他の特徴は、TM細胞によるフィブロネクチンの分泌を顕著に低下させる緑内障の治療又は予防方法を提供することである。
【００１３】
本発明のさらなる特徴及び利点は、一部分、以下の記載において示され、そして部分的に該記載から明らかとなるか又は本発明の実施によって学ばれるであろう。本発明の目的及び他の利点は、明細書及び添付された請求項において特に指摘された要素及びその組み合わせの手段によって実現されそして達成されるであろう。
【００１４】
そして本明細書中に具体化され、広く記載された本発明の目的によってすべての利益を達成するために、本発明は、緑内障の治療及び／又は正常な又は上昇したIOP（正常眼圧緑内障及び／または高眼圧症と関連したIOPなど）の低下又は制御のための少なくとも１つのHMG-CoAレダクターゼ阻害剤を含む組成物の使用に関する。該組成物は、好ましくは、例えば眼への局所送達に適した医薬組成物であることができる。
【００１５】
上記の一般的説明及び以下の詳細な説明はどちらも、例示的及び単なる例示であり、権利請求された本発明のさらなる説明を提供することを意図することを理解されるべきである。
【００１６】
本発明の詳細な説明
本発明は部分的に、ヒト患者又は他の哺乳動物における緑内障の治療方法に関する。本発明はまた、ヒト患者又は他の哺乳動物における正常な又は上昇したIOPの低下又は制御方法にも関する。該方法は、少なくとも１つの３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリルコエンザイムA（HMG-CoA）レダクターゼ阻害剤を含む組成物の投与を含む。言い換えれば、本発明は、HMG-CoAレダクターゼ阻害活性を有する少なくとも１つの物質の使用に関する。
【００１７】
本発明における使用に好適なHMG-CoAレダクターゼ阻害剤の１群は、スタチンとして知られる。本発明の目的のためには、本明細書中で使用される「スタチン」は、HMG-CoA阻害剤である。これらの薬物は、HMG-CoAレダクターゼを阻害し、コレステロール合成における律速ステップである、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−CoAのメバロン酸への変換を妨害するそれらの能力によって脂質低下特性を有することができる。
【００１８】
HMG-CoAレダクターゼ阻害剤の例は、コンパクチン、ロバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、メバスタチン、フルバスタチン、ロスバスタチン、アトルバスタチン、ピタバスタチン、セルビスタチン、ベリバスタチン、ダルバスタチン、グレンバスタチン、RP61969、SDZ-265859、BMS-180431、CP-83101、ジヒドロメビノリン、L-669262、又はそれらのいずれかの組み合わせを含むが、これらに限定されない。化学名は以下の：コンパクチン（メバスタチン、（２S）−２−メチルブタノイックアシッド（１S、７S、８S、8aR）−１，２，３，７，８，８a−ヘキサヒドロ−７−メチル−８−［２−［（２R，４R）−テトラヒドロ−４−ヒドロキシ−６−オキソ−２H−ピラン−２−イル］エチル］−１−ナフタレニルエステル）、ロバスタチン（２（S）−２−メチル−ブタノイックアシッド（１S，３R，７S，８S，8aR）−１，２，３，７，８，８a−ヘキサヒドロ−３，７−ジメチル−８−［２−［（２R，４R）−テトラヒドロ−４−ヒドロキシ−６−オキソ−２Ｈ−ピラン−２−イル］エチル］−１−ナフタレニルエステル）、シンバスタチン（２，２−ジメチル−ブタノイックアシッド（１Ｓ，３Ｒ，７Ｓ，８Ｓ，８aR）−１，２，３，７，８，８a−ヘキサヒドロ−３，７−ジメチル−８−［２−［（２R，４R）−テトラヒドロ−４−ヒドロキシ−６−オキソ−２H−ピラン−２−イル］エチル］−１−ナフタレニルエステル）、プラバスタチン（（βR，δR，１S，２S，６S，８S，８aR）−１，２，６，７，８，８a−ヘキサヒドロ−β，δ，６−トリヒドロキシ−２−メチル−８−［（２S）−２−メチル−１−オキソブトキシ］−１−ナフタレンペプタノイックアシッド）、フルバスタチン（（３R，５S，６E)−rel−７−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１H−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプタノイックアシッド）、ロスバスタチン（（３R，５S，６E）−７−［４−（４−フルオロフェニル）−６−（１−メチルエチル）−２−［メチル（メチルスルホニル）アミノ］−５−ピリミジニル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテノイックアシッド）、アトルバスタチン（（βＲ，δＲ）−２−（４−フルオロフェニル）−β，δ−ジヒドロキシ−５−（１−メチルエチル）−３−フェニル−４−［（フェニルアミノ）カルボニル］−１Ｈ−ピロール−１−ヘプタノイックアシッド）、ピタバスタチン（（３Ｒ，５Ｓ，６Ｅ）−７−［２−シクロプロピル−４−（４−フルオロフェニル）−３−キノリニル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテノイックアシッド）、セルビスタチン（（３Ｒ，５Ｓ，６Ｅ）−７−［４−（４−フルオロフェニル）−５−（メトキシメチル）−２，６−ビス（１−メチルエチル）−３−ピリジニル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテノイックアシッド）、ベリバスタチン（（Ｒ*，Ｓ*−（Ｅ）−７−（４−（４−フルオロフェニル）スピロ（２Ｈ−１−ベンゾピラン−２，１’−シクロペンタン）−３−イル）−３，５−ジヒドロキシ−エチルエステル）、ダルバスタチン（（４Ｒ，６Ｓ）−rel−６−［（１E）−２−［２−（４−フルオロ−３−メチルフェニル）−４，４，６，６−テトラメチル−１−シクロヘキセン−１−イル］エテニル］テトラヒドロ−４��ヒドロキシ−，２Ｈ−ピラン−２−オン）、グレンバスタチン（（４Ｒ，６Ｓ）−６−［（１Ｅ）−２−［４−（４−フルオロフェニル）−２−（１−メチルエチル）−６−フェニル−３−ピリジニル］エテニル］テトラヒドロ−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン）、RP61969（［２Ｓ−［２α（Ｅ），４β］］−；４−（４−フルオロフェニル）−２−（１−メチルエチル）−３−［２−（テトラヒドロ−４−ヒドロキシ−６−オキソ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エテニル］−１（２Ｈ）−イソキノリノン）、BMS−180431（（３Ｒ，５Ｓ，６Ｅ）−rel−９，９−ビス（４−フルオロフェニル）−３，５−ジヒドロキシ−８−（１−メチル−１H−テトラゾール−５−イル）−６，８−ノナジエノイックアシッド）、CP−83101（（３R，５S，６E)−rel−３，５−ジヒドロキシ−９，９−ジフェニル−６，８−ノナジエノイックアシッドメチルエステル）、ジヒドロメビノリン（（２S）−２−メチル−ブタノイックアシッド（１S，３S，４aR，７S，８S，８aS）−１，２，３，４，４a，７，８，８a−オクタヒドロ−３，７−ジメチル−８−［２−［（２R，４R）−テトラヒドロ−４−ヒドロキシ−６−オキソ−２H−ピラン−２−イル］エチル］−１−ナフタレニルエステル）、L−669262（２，２−ジメチル−ブタノイックアシッド（１S，７R，８R，８aR）−１，２，６，７，８，８a−ヘキサヒドロ−３，７−ジメチル−６−オキソ−８−［２−［（２R，４R）−テトラヒドロ−４−ヒドロキシ−６−オキソ−２H−ピラン−２−イル］エチル］−１−ナフタレニルエステル）である。
【００１９】
これらの好ましいHMG-CoAレダクターゼ阻害剤のうちのいくつかの具体的構造は以下に示すものである。
【００２０】
【化１】
2007534699.tif 000003
【００２１】
【化２】
2007534699.tif 000004
【００２２】
【化３】
2007534699.tif 000005
【００２３】
【化４】
2007534699.tif 000006
【００２４】
【化５】
2007534699.tif 000007
【００２５】
【化６】
2007534699.tif 000008
【００２６】
【化７】
2007534699.tif 000009
【００２７】
【化８】
2007534699.tif 000010
【００２８】
上記の例に加えて、本発明において使用可能な好適なHMG-CoAレダクターゼ阻害剤の他の例は、構造A-Bを有する化合物を含み、ここで、A及びBは、本発明の目的のために好適なHMG-CoAレダクターゼ阻害剤を形成する化合物の部分を表す。以下の構造中の波線は、共有結合のある場所、すなわち、C−C結合を表し、A及びBの間にも存在するだろう。好ましくは、このA−B結合は、β構造にある。いかなる組み合わせでも結合可能であるA及びBの好適な例を以下に示す。
【００２９】
【化９】
2007534699.tif 000011
【００３０】
構造B部分は、上記の最初の構造によって図解されるオープンジヒドロキシ酸、エステル、アミド又はアルコール、或いは上記の第２の構造によって図解されるラクトンの形態であることができる。本明細書中で「構造A」及び「構造B」部分とそれぞれ称される上記の構造中では、構造中に示される置換基は以下のものであることができる：
R1は、CO2R、CONR5R6又はCH2OR7であるか、又はR1及びR3はラクトンを形成し；
Rは、H又はカチオン性塩部分であるか、又はCO2Rは医薬として許容可能なエステル部分を形成し；
R2、R3、R4は、同じ又は異なり、H、C(O)R8又はC(O)NR5R6であり；
R5、R6は、同じ又は異なり、H又はアルキルであり；
R7は、H又はC(O)R8であり；そして
R8は、アルキルである。
【００３１】
用語「アルキル」は、直鎖、分岐鎖及び環状アルキル又は全部で１〜１０の原子を含む（環状アルキル）アルキル基を含む。アルキル基は、非置換、或いはハロゲン又はヒドロキシルなどの他の基で置換されることができる。上記の化合物が１つ以上のキラル中心を含むことができることは理解される。本発明は、すべてのエナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物を考慮する。
【００３２】
本発明において利用されるHMG-CoAレダクターゼ阻害剤は、上記の構造B部分を上記の構造A部分以外の部分と組み合わせて有するか又は含む化合物も包含する。
【００３３】
上記の化合物の医薬として許容可能な塩及び溶媒和物、並びにプロドラッグ形態もまた、本発明の方法において使用可能である。さらに、上記の化合物の誘導体もまた、本発明の方法において使用可能である。誘導体は、以下の：（カルボン酸塩、エステル、ラクトン、アミド、ヒドロキサミン酸、アルコール、エステル化アルコール及びアルキル化アルコール（アルコキシド）などの）カルボン酸の誘導体並びに（エステル、カーバメート、ラクトン、炭酸塩、アルコキシド、アセタール、ケタール、リン酸塩、及びリン酸エステルなどの）アルコールの誘導体を含む。上記の化合物に関しては、いくつかの化合物は１つ以上の芳香環上にフッ素を含み、したがってフッ素の代わりにいかなる他のハライドも使用可能である。また、上記の化合物中に示された水素又はアルキル基の代わりに異なるアルキル基も使用されることができる。例えば、−OH基の代わりに−O−アルキル基が使用可能である。したがって、本明細書中に示された指導及び知識とともにこの技術分野において当業者が有する知識に基づいて、本発明において多様な誘導体が容易に使用可能である。
【００３４】
上記例は、（Calbiochem-Novabiochem Corporation, SST Corporation, Aceto Corporation, Tocris Cookson Inc., Sigma 及び BIOMOL Research Laboratories, Inc.などから）商業的に入手可能であるか又は当業者に利用可能な文献に基いて合成可能である。
【００３５】
全身循環へ到達する前の肝臓及び小腸粘膜における大きな消失によって、スタチンの経口のバイオアベイラビリティーは低い（すなわち、一般に５〜２０％）。さらに、ほとんどのスタチンは高度に血漿に結合し、急速に除去される（Klotz U Arzneim Forsch (Drug Research)2003, 53, 605-611）。これらの因子は、経口投与後に眼の組織に到達する活性化合物量を顕著に制限する。
【００３６】
局所的な眼内投与の使用はしたがって、本発明において非常に好ましい。しかしながら、本発明者らは、一定のスタチン(プラバスタチンなど)が、局所的眼内投与後に角膜の透過を介して眼内組織に到達することができる一方、他のスタチン（アトルバスタチンなど）は容易に角膜を透過せず、その結果としてこの投与経路を介する本発明の方法において実行可能な剤でないということを発見した。
【００３７】
保持指標（「RI」）などの逆相高速液体クロマトグラフィーの保持パラメーターは、生体膜中へ及びそれを通る分子の分配を予測するのに有用であることが証明された（Brent DA. Sabaltks JJ, Minick DJ, and Henry DW. Journal of Medicinal Chemistry 1983, 26, 1014-1020）。本発明者らは、スタチンが局所的眼内投与後に眼内組織中で治療的濃度に達する能力を予測するのに、RI値が利用可能であることを発見した。具体的には、発明者らは、０．２〜０．７のRI値を有するスタチンが局所的眼内投与を介して患者に投与可能であることを発見した。RI値は以下に記載の手順によって決定される。
【００３８】
保持指標（「RI」）値の決定
被験物を溶媒に溶解して１５〜２０μg/mLの溶液を提供する。この溶液および参照溶液（３mLの希釈溶媒で希釈した、エタノール中１％PGF2αイソプロピルエステル）をMicrosorb-MV ODS逆相高速クロマトグラフィーカラム（４．６mm内径×１５ｃｍ長さ、５μm）に直接注入する。移動相は、pH３．０ リン酸アンモニウム水性緩衝液／アセトニトリルの混合物（１：１）で、流速は約１mL／分である。保持指標（RI）は、以下の式：
RI＝RT1／RT2
｛式中、
RT1＝被験物の保持時間、及び
RT2＝PGF2αイソプロピルエステル標準品の保持時間｝
を用いて計算した。
【００３９】
０．２〜０．７の上記RI値範囲は、本明細書に記載のすべてのスタチンに適用可能である。しかしながら、該範囲は化合物のジヒドロキシオープンアシッド形態に基くものである。結局、構造Bがラクトン構成にあるスタチンは、RI値を決定する前に対応するオープンアシッドに変換されなければならない。
【００４０】
本発明の化合物は、温血動物、特にヒトにおける正常血圧緑内障、高眼圧症及び緑内障に関連するIOPを含むIOPを低下させ、そして制御するために使用されることができる。組成物は、患者の眼などへの局所投与に好適な医薬組成物に製剤されることが好ましい。組成物は慣用技術によるいかなる好適な様式で投与されることもできる。
【００４１】
スタチンは、緑内障とともに見られる小柱網（TM）細胞性の損失の遅延／これへの対抗を助けることができる。正確なメカニズムはわかっていないが、スタチンの抗酸化的及びフリーラジカルスカベンジャー効果は、TMにおける加齢及び／または緑内障に関連した酸化的損傷／ストレスに対抗することができる。細胞性の低下は緑内障患者からのTM組織において以前に注目された（Alvarado et al, Ophthalmology, 1984, 91:564-579）。さらに、全体的な抗酸化能の減少とともに、脂質過酸化物レベルは緑内障患者の眼房水において少なくとも２倍に増加した（Kurysheva et al, Vestn Oftalmol, 1996, 112:3-5）。増加したフリーラジカルのレベルは、広く多様な組織に損傷を与えることができ、したがって、スタチンは緑内障において見られるTM細胞性の損失を遅らせ／これに対抗するのを助けることができる。TMは、眼房水（AH）の主なドレナージ部位であり、TMを介するAH流出低下は、緑内障においてしばしば注目されるIOP増加の原因因子であることができる。スタチンによる治療でTM細胞性を維持することにより、AH流出が改善され、そしてIOPが減少させられることができる。したがって、本発明はさらに、少なくとも１つのHMG-CoAレダクターゼ阻害剤を含む組成物の医薬としての有効量を患者に投与することによって、患者のTMを維持する方法にも関する。
【００４２】
本発明はまた、流出経路を詰まらせるかもしれない過剰な又は不適切な細胞外マトリックスの蓄積を予防することもできる。TM領域中における細胞外マトリックスの過剰蓄積も、多くの形態の緑内障の特徴である。かかる増加は、水の流出に対する抵抗を増加させることができ、それによってIOPを上昇させる。結合組織成長因子（CTGF）は、強皮症、線維増殖性疾患及び瘢痕などの、ECMの過剰蓄積に関連した状態における原因因子に含まれる。CTGFは、コラーゲンI及びフィブロネクチンなどの細胞外マトリックス（ECM）物質の産生を増加させることができる。CTGF遺伝子産物の存在は単離された組織及びヒトから確立された細胞株の両方において検出され、ECM成分のフィブロネクチンは、ヒト培養TM細胞によって活発に分泌される。シンバスタチン、ロバスタチン、及びメバスタチン（コンパクチン)などのスタチン薬物は、培養ヒトTM細胞による結合組織成長因子（CTGF）の発現を顕著に減少させる。スタチンはまた、培養ヒトTM細胞によるフィブロネクチン分泌を顕著に減少させる。したがって、抗酸化及びフリーラジカルスカベンジャー活性、並びにCTGF発現及びフィブロネクチン分泌の抑制を介して、スタチン剤はIOPを低下させるための新規な潜在的手段を代表する。
【００４３】
眼圧低下作用を補足して、スタチンは神経保護作用をあらわすことができる。iNOS、TNFα、マトリックスメタロプロテイナーゼ（MMP）及び活性化星状細胞などの神経変性メディエーターレベルの上昇が、緑内障の網膜において観察された。
【００４４】
神経保護の１つの手段は、神経組織への虚血性の損傷の減少によることができる。スタチンは内皮の一酸化窒素シンターゼを上方制御し、そしてしたがって虚血組織への血流維持を助けることができる。スタチンはまた、虚血−再かん流障害モデルにおいて網膜神経を保護することが示され、その効果は一酸化窒素シンターゼの阻害剤によって遮断された。
【００４５】
さらに、スタチンの抗酸化及びフリーラジカルスカベンジャー効果は緑内障に関連する網膜及び視神経内の酸化的損傷／ストレスに対して保護的であることができる。緑内障は、網膜神経節細胞（RGC）の死を引き起こす。正確な分子メカニズムは不明である。しかしながら、３つの一般的な仮説がある：（１）虚血に導く網膜血管の異常（Flammer et al., Prog Retin Eye Res, 2002, 21:359-393）、（２）グルタミン酸毒性（Dreyer et al, Arch Ophthalmol, 1996, 114:229-305）、及び（３）神経栄養因子の休薬（Quigley et al, Arch Ophthalmol, 1981, 99:635-649; Quigley et al, Arch Ophthalmol, 1982, 100:135-146; Quigley et al, Am J Ophthalmol, 1983, 95:674-691）。これらの提案されたメカニズムのすべてが、緑内障におけるRGCへの酸化的毒性に導き、そしてその死に寄与することができる。例えば、過剰量のフリーラジカル及び反応性酸素種は、虚血によって生成されることができ、これがATP産生を枯渇させ、ミトコンドリアの機能不全を引き起こし、そしてフリーラジカルを増加させる。グルタミン酸の毒性は細胞内カルシウム濃度を増加させ、カルパイン及びNOシンターゼを活性化し、そしてフリーラジカルを産生する。神経栄養因子の休薬もまた、酸化的損傷を引き起こすことが示されている（Greenlund et al, Neuron, 1995, 14:303-315）。この情報に基いて、スタチンなどの抗酸化剤は、緑内障患者における神経保護剤として有用である。本発明はさらに、少なくとも１つのHMG-CoAレダクターゼ阻害剤を含む組成物の医薬としての有効量を患者に投与することによる、患者の緑内障性網膜症に対する保護の方法に関する。
【００４６】
本発明において使用される組成物は、（局所的、嚢内、又はインプラントを介するなどの）眼への送達のための眼科製剤などの、多様なタイプの医薬組成物であることができる。該組成物は眼への送達のための局所的眼科製剤であることが好ましい。該組成物は、水性の滅菌眼科懸濁剤又は溶液を形成するための眼科学的に許容可能な保存剤、増粘剤、透過促進剤、緩衝剤、塩化ナトリウム及び水を含むことができる。眼科の溶液製剤は、活性成分を生理学的に許容可能な等張水性緩衝液に溶解することによって調製されることができる。さらに、眼科の溶液は、該活性成分の溶解を支援するための眼科学的に許容可能な界面活性剤を含むことができる。さらに、眼科学の溶液は、結膜嚢内での製剤の保持を改善するために、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどの粘度を増加させるための剤を含むことができる。ジェラン及びキサンタンガムを含むがこれらに限定されないゲル化剤も使用されることができる。滅菌眼科軟膏製剤を調製するために、活性成分は、鉱油、液体ラノリン又は白色ワセリンなどの適切なビヒクル中で保存剤と併合される。滅菌眼科ゲル製剤は、活性成分を、カルボポール−９７４などの組み合わせから類似の眼科製剤のための刊行物記載された製剤にしたがって調製された親水性基剤に懸濁することによって調製されることができ、保存剤及び等張化剤を含むことができる。
【００４７】
本発明において使用される組成物は、pHが例えば約４〜約８である、局所的眼科懸濁剤又は溶液として製剤されることが好ましい。各個人のための特別な投与計画を確立することは、医師の裁量に任せられる。（スタチンなどの）活性成分は、通常、これらの製剤中に組成物又は製剤の約０．０１重量％〜約１０重量％、例えば、約０．０１重量％〜約５重量％、好ましくは約０．０５重量％〜約２重量％、そしてもっとも好ましくは約０．1重量％〜約１．０重量％の量で含まれる。剤形は溶液又はマイクロエマルジョン懸濁剤であることができる。例えば、局所投与のためには、１〜２滴のこれらの製剤が、熟練した医師の裁量にしたがって、１日約１〜約４回、眼の表面に送達される。本発明の組成物は単一用量又は複数用量で投与されることができる。本発明の組成物は、1日又は複数の日に投与されることができ、そして、毎日連続的に投与されることができ、又はある日には治療があるが翌日にはないというスケジュールによって投与されることもできる。言い換えれば、治療は非連続的な日に行われることができる。治療は少なくとも２日連続で、少なくとも３日連続で、又はさらに長く連続で行われることができる。さらに、連続した日又は非連続的な日にわたって、一日に複数の投与が行われることができる。投与計画のいかなる組み合わせも可能である。
【００４８】
組成物はまた、（チモロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、カルテオロール、レボブノロール、プロプラノロールなどの）βーブロッカー、（ブリンゾラミド及びドルゾラミドなどの）カルボニックアンハイドラーゼ阻害剤、（ニプラドロールなどの）α１アンタゴニスト、（イオピジン及びブリモニジンなどの）α２アゴニスト、（ピロカルピン及びエピネフリンなどの）マイトティック、（ラタノプロスト、トラボプロスト、ビマトプロスト、ウノプロストン、及び米国特許第５，８８９，０５２号；同第５，２９６，５０４号；同第５，４２２，３６８号；同第５，３５２，７０８号；及び同第５，１５１，４４４号に記載の化合物などの）プロスタグランジンアナログ、及び（米国特許第４，６９０，９３１号からの化合物、特に米国特許出願番号６０／２０３，３５０中に記載のエリプロジル及びR-エリプロジルなどの）神経保護剤、及びメマンチンを含む、PCT国際特許出願公開第WO９４／１３２７５号からの好適な化合物などを含むがこれらに限定されない、緑内障の治療のための他の剤と併用して使用されることができる。
【００４９】
以下の実施例は、本発明の異なる側面の実施において発明者らに採用された技術の代表的なものである。これらの技術が本発明の実施のための好ましい実施態様の例である一方、本開示を参照した当業者は、本発明の精神及び意図された範囲から離れることなく多数の改変が行われ得ることを理解するであろう。
【実施例】
【００５０】
実施例１
HMG-CoAレダクターゼ阻害アッセイ
HMG-CoAレダクターゼ活性は、米国特許出願公開第US２００３／００６５０２０号に記載の通りに、Sheferら（J. Lipid Res 1972, 13, 402）の方法にしたがって評価されることができる。完全なアッセイ溶媒は、全体積０．８ｍLであり、以下の：１００mMリン酸緩衝液、pH７．２；３mM、MgCl2；３mM、NADP；３酵素単位のグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ；５０mM、還元グルタチオン；０．２mM（０．１μCi）、HMG-CoA（グルタリル−３−14C）；及び１００μLの部分精製された酵素原液を含んだ。
【００５１】
選択された濃度の酸性塩の形態の化合物、１０μLをアッセイ系に加えた。３７℃での４０分間の振とうしつつ空気に露出しながらのインキュベーション後、０．４mLの８N HClを加えることによって反応を停止させた。メバロン酸からメバロノラクトンへのラクトン化の完了を確実にするためにさらに３０分間３７℃でインキュベートした後、０．２mLの混合物を、Albertsら（Proc Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1980, 77, 3967）の記載の通りに、蒸留水で湿らせた１００〜２００メッシュのBio-Rex 5、塩素型（Bio-Rad）を含む０．５×０．５cmカラムに加えた。未反応の［C14］HMG-CoAを樹脂に吸着させ、［C14］メバロン酸を蒸留水（２×１mL）で直接７mLのシンチレーションバイアル中に溶出した。５ミリリッターのAquasol-２を各バイアルに加え、そしてシンチレーションカウンター中で放射能測定した。被験化合物濃度に対して阻害パーセントをプロットし、最少二乗法によって得られたデータを直線に当てはめることによって、IC50値を決定した。相対阻害能の推定のために、標準物質としてコンパクチンを使用して１００の値を割り当て、試験化合物のIC50値を同時に測定されたコンパクチンの値と比較した。
【００５２】
実施例２
TGFβ２刺激によるCTGF遺伝子発現の阻害
培養ヒト小柱網（TM）細胞におけるCTGF遺伝子発現に対するスタチンの効果を研究した。結果を図１〜３にまとめた。これらの実験において、CTGF／18SのｃDNAレベルを定量的逆転写PCR（QPCR）によって測定し、比較した。図１及び２における要約からわかるように、CTGFレベルの制御に対する効果を決定するために３つの異なるタイプのスタチンを試験した。図からわかるように、ビヒクル中にTGFβ２が存在すると、CTGFレベルはかなり高かった。しかしながら、スタチンの1つを導入すると、これらのレベルはほぼ１００％、顕著に低下した。ロバスタチンはTGFβ２刺激によるCTGF発現を用量依存的に阻害し、IC50値は７５nMであった（図３）。この試験結果は、スタチンが培養ヒト小柱網細胞におけるCTGF遺伝子発現に大きな効果を有することを明白に実証する。
【００５３】
実施例３
H2O2を介するTM細胞死に対する保護
H2O2によって誘発された酸化的ストレスのHTM-３５D細胞（培養ヒトTM細胞株）バイアビリティーに対する効果を、スタチンの存在下又は非存在下で試験した。特に、無血清培地中の被験物質の存在下又は非存在下で３０分間細胞をインキュベートし（３７℃、５％CO2）、続いて２日間、無血清培地で洗浄し交換した。そして、バイアビリティーをニュートラルレッドの取り込みによって評価した。結果を図４に要約し、ここで、各バーはそれぞれ３連でおこなった２つの別の試験の平均及びSEMを表す。図４からわかるように、スタチンの存在下では、HTM-３５D細胞のバイアビリティーに対するH2O2の効果は抑制されるか又はH2O2が存在しないレベルまで本質的に制御された。したがって、これらの試験は、緑内障の治療において有用であり、IOPを制御又は低下させるスタチンの能力を示す。
【００５４】
実施例４
TMによるフィブロネクチン分泌の阻害
基礎的な（ビヒクル）及び刺激された（TGFβ２）GTM-3（形質転換されたヒトTM細胞株）によるフィブロネクチンの分泌の両方に対するロバスタチンの効果を試験した。被験物質の存在下又は非存在下の無血清培地中でGTM-３細胞を２４時間インキュベートし（３７℃、５％CO2）、そして、分泌されたフィブロネクチンレベルの変化を細胞上清のELISAによって測定した。被験物質のGTM-3細胞バイアビリティーに対する効果を決定するために、残った細胞単層についてニュートラルレッドの取り込みアッセイを実施した。結果を図５にまとめる。図５から容易にわかるように、ロバスタチンは、細胞のバイアビリティーには影響せずに、基礎的な分泌の抑制に加えてTGFβ２により刺激されたフィブロネクチン分泌を抑制した。したがって、（フィブロネクチンなどの）細胞外マトリックスの過剰蓄積を減少させる能力によって、スタチンは緑内障の治療及びIOPの制御又は低下において有用である。
【００５５】
実施例５
意識のあるカニクイザルのレーザー照射された（高圧の）眼における急性のIOP応答
眼圧（IOP）を、０．１％プロパラカインによる角膜麻酔後にAlcon Pneumatonometerで測定した。各測定後に眼を生理食塩水で洗浄した。ベースラインのIOP測定の後、３０μLのアリコートの被験化合物を９匹のカニクイザルの右目にだけ滴下した。ビヒクルをさらなる６匹の動物の右目に滴下した。その１、３及び６時間後にIOP測定した。ロバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン及びプラバスタチンは、３００μgの単回の局所眼内適用後にはIOPを顕著に低下させなかった。
【００５６】
実施例６
反復投与後の意識のあるカニクイザルのレーザー照射された（高圧の）眼における応答
さらなる研究において、５回投与、３日の試験計画を用いて、意識のある高眼圧サルにおいてロバスタチンの眼圧低下作用を測定した。試験材料を、８匹の動物のレーザー照射した（一側性レーザー線維柱帯形成術）眼に３０μlのアリコートで投与した。対照として、さらなる６匹の動物のレーザー照射した眼にビヒクルを滴下した。１、３、及び５回目の投与を０９時００分に３日間連続して滴下し；２及び４回目の投与を第１日及び第２日の１６時３０分に行った。１及び５回目の投与の１、３及び６時間後にIOPを測定した。４回目の投与の１６時間後にもIOPを測定した。各動物の各IOP測定値について、０時間のベースラインからの変化のパーセントを決定した。
【００５７】
ロバスタチンは、５回目の３００μgの局所的眼内滴下後、レーザー照射されたサルにおいて、１、３及び６時間でそれぞれ平均して２２．８％（８．３mmHg）、２１．５％（８．１mmHg）及び２５．５％（９．５mmHg）のレーザー照射されたサルの目のIOPを低下させた。対照群においては、平均して１２．５％のIOP減少があった。５日間にわたってロバスタチンが９回投与されたその後の試験においては、IOPは最大７．４％減少した。
【００５８】
本発明の目的のために、以下の製剤を作ることができる。
実施例７
【表１】
2007534699.tif 000012
【００５９】
【表２】
2007534699.tif 000013
【００６０】
【表３】
2007534699.tif 000014
【００６１】
【表４】
2007534699.tif 000015
【００６２】
本発明の組成物及び方法が好ましい実施態様に関して記載された一方、本発明の概念、精神及び範囲から離れることなく、本明細書に記載された組成物及び／又は方法並びに方法のステップ若しくは連続したステップに、変更が加えられる得ることは当業者に明らかであろう。より具体的には、類似の結果を達成するために、化学的及び構造的に関連する一定の剤に、本明細書に記載の剤が置換されうることは明らかであろう。当業者に明らかであるかかる置換及び変更は、添付の請求項によって定義された本発明の精神、範囲及び概念内にあるとみなされる。
【００６３】
本明細書中に見出されるすべての特許、特許出願及び他の文献は、その全体が参考文献として本明細書中に援用され、そして本発明の一部を形成する。
【図面の簡単な説明】
【００６４】
【図１】図１は、培養ヒト小柱網細胞中での基礎的な、及びTGFβ２によって誘発されたCTGF遺伝子発現に対するスタチンの効果を表すグラフである。
【図２】図２は、培養ヒト小柱網細胞中での基礎的な、及びTGFβ２によって誘発されたCTGF遺伝子発現に対するスタチンの効果を表すグラフである。
【図３】図３は、培養ヒト小柱網細胞中での基礎的な、及びTGFβ２によって誘発されたCTGF遺伝子発現に対するスタチンの効果を表すグラフである。
【図４】図４は、HTM-35D細胞のバイアビリティーに対するH2O2により誘発された酸化的ストレスの効果を示す棒グラフである。細胞を被験物質の存在下又は非存在下、無血清培地中で３０分間インキュベートし（３７℃、５％CO2）、続いて２日間、無血清培地で洗浄して置換した。その後、ニュートラルレッドの取り込みによってバイアビリティーを評価した。バーは、それぞれ３連で実施した２つの別の実験の平均及びSEMを表す。
【図５】図５は、GTM-3細胞のフィブロネクチン分泌及びバイアビリティーに対するロバスタチンの効果を表すグラフを示す。形質転換されたヒト小柱網（GTM-3）細胞を、被験物質の存在下又は非存在下、無血清DMEM培地中で２４時間インキュベートした（３７℃、５％CO2）。ELISAによってフィブロネクチン含量について細胞上清をアッセイし、そして細胞単層をニュートラルレッド取り込みによってバイアビリティーについてアッセイした。
【図１】
2007534699.tif 000019
【図２】
2007534699.tif 000020
【図３】
2007534699.tif 000021
【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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2007534699.tif 000025
2007534699.tif 000026
2007534699.tif 000027