(57)【要約】  逆相分取クロマトグラフィーの方法を利用するフェンタニルを含有する純粋でない調製物の精製方法を記載する。クロマトグラフィーのカラムに、典型的には有機リガンドが結合したシリカ粒子である固定相をロードする。ロード比約５０ないし約１５０で、純粋でない調製物を酸性化し、カラムに通す。カラムを典型的にはアセトニトリルの水性溶液で溶出し、精製フェンタニルを特定のカットで得る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
純粋でない調製物を逆相高速分取液体クロマトグラフィーに付し、高度に純粋なフェンタニルを回収することを含む、純粋でない調製物から高度に純粋なフェンタニルを回収するための産業用の方法。
【請求項２】
ロード比（loading ratio）が約５０ないし約１５０の範囲にある、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ロード比が約７０ないし約１３０の範囲にある、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
固定相が、アルキルシラン類、アリールシラン類、ハロアルキルシラン類、アルキルエステル類、アリールエステル類、アルキルアミン類、アルキルシアノ化合物、アルキルジオール類、アルキルエーテル類、アリールエーテル類、ハロアルキルエーテル類、アルキルカルボン酸類、アリールカルボン酸類、アルキルスルホン酸類、アリールスルホン酸類、ポリスチレンジビニルベンゼン、アミノポリカプロラクタムおよびグリシドオキシエチルメトキシシランからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
固定相が、ブチル−、オクチル−およびオクタデシル−部分からなる群から選択される結合相シリカ含有リガンドである、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
リガンドがオクチルシランである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
クロマトグラフィーカラムを、有機溶媒を含有する水性酸性溶液を含む移動相で溶出する、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
溶液を酸性化するのに用いる酸が、酢酸、蟻酸、酒石酸、臭化水素酸、蓚酸および塩酸からなる群から選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
水性移動相のｐＨが約２.５ないし約３.５の範囲にある、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ｐＨが約２.８ないし約３.２の範囲にある、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
有機溶媒がアルコールである、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
アルコールが、メタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノールおよびｔ−ブタノールからなる群から選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
溶媒がアセトニトリルである、請求項７に記載の方法。
【請求項１４】
フェンタニル塩を調製するために、純粋でない調製物を酸性化する、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
フェンタニルの水性溶液を酸性化するために用いる酸が、無機酸である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
酸が、塩酸、臭化水素酸、リン酸、亜リン酸、硫酸および硝酸からなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
フェンタニルの水性溶液を酸性化するために用いる酸が、有機酸である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
有機酸が、酢酸、蟻酸、蓚酸、コハク酸、乳酸および酒石酸からなる群から選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
フェンタニルの水性溶液のｐＨが、約２ないし約５の範囲にある、請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】
フェンタニルの水性溶液のｐＨが、約２.５ないし約３.５の範囲にある、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
酸が塩酸である、請求項１６に記載の方法。
【請求項２２】
アセトニトリルが約２ないし約１００体積パーセントの範囲にある、請求項１３に記載の方法。
【請求項２３】
精製フェンタニルの収集の間に、アセトニトリルが、約５ないし約１０体積パーセントの範囲にある、請求項１３に記載の方法。
【請求項２４】
フェネチルピペルアニリン（phenethylpiperaniline）を含有するフェンタニルの純粋でない調製物を精製するための方法であって、
（ａ）クロマトグラフィーカラムをクロマトグラフィー充填物質で充填すること；
（ｂ）該カラムに、純粋でないフェンタニルの水性酸性溶液を、約５０ないし約１５０のロード比で通すこと、および、
（ｃ）該カラムを有機溶媒の水性溶液で溶出し、フェンタニルを含有し、約０.０１０パーセントより少ないフェネチルピペルアニリンを有する溶出液を産生すること、
の各段階を含む方法。
【請求項２５】
溶離液を４つのカットに分け、
（ｉ.）第１のカットを廃棄し、
（ｉｉ.）第２のカットを第４のカットと一緒にし、その後水および有機溶媒を減らし、次いでカラムを介して再利用し、そして、
（ｉｉｉ.）第３のカットが約０.０１０パーセントより少ないフェネチルピペルアニリンを含有する、
請求項２４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は、逆相分取クロマトグラフィーを利用する産業スケールでのフェンタニルの分離および精製手法に関する。より具体的には、本発明の方法は、高度に純粋なフェンタニルを、便利に、かつ産業的な量で提供する。
【０００２】
発明の背景
フェンタニルは、周知の強力な麻薬的範囲の鎮痛剤であり、獣医学の実務において知られている静穏剤である、Ｎ−フェニル−Ｎ−［１−（２フェニルエチル）−４−ピペリジニル］プロパンアミドの一般名である。典型的には、Ｎ−（フェネチル−４−ピペリジニル）プロピオンアニリドシトレートとしても知られるクエン酸塩の形態で商業的に提供される。
【０００３】
初期のフェンタニル製造法は、Janssen の米国特許第３,１６４,６００号に見出される。この初期の開示によると、典型的には沈殿および再結晶により生成物が精製された。典型的には、医薬的使用に適切な純度をもたらすために、複数回の沈殿が必要とされた。かかる方法における収量の損失に加え、この実務は産生の複雑さおよび費用を大幅に高める。さらに、沈殿方法は冗長であり得、最終的に産生される粒子のサイズのために長い濾過時間を必要とし得る。
【０００４】
フェンタニルなどの医薬の沈殿および再結晶の方法を改良する試みの一例は、Lee の米国特許第６,５９６,２０６号に開示されている。この手法では、集束型音響エネルギー（focused acoustic energy）を使用する、医薬物質の粒子を生成させる装置が開示されている。医薬の溶液は、適する溶媒中で提供され、そこに、溶液の液滴と混合されると液滴中の医薬物質を沈殿させる混和性の「反溶媒」を導入する。集束型音響エネルギーは、その溶液の小さい液滴を反溶媒に注入させ、そうすると医薬が沈殿し、小さい結晶生成物をもたらす。この方法を達成するための装置も開示されている。かかる手法および装置は、沈殿手法の改良をもたらす一方で、依然として溶媒、反溶媒および特殊な設備を要し、その全てが、医薬を分離および生成するための沈殿手法の上記の欠点を持ったままである。
【０００５】
医薬の分離または精製を達成するための他の手段には、炭素の使用などの吸着方法が含まれる。もう１つは、イオン交換剤を介する吸着の使用である。これは、コデインやモルヒネなどのアルカロイド類で行われたが、低い供給液（feed）濃度を必要とするという制限がある。これは、沈殿を起こすことができる高いｐＨのフラッシュ（flush）の使用が必要であるためである。いかなる沈殿も、生成方法全体を汚す可能性がある。この方法のもう１つの欠点は、かなりの塩が必要とされ、それ故にイオン除去のためにもう一段階の透析または逆浸透が必要とされることである。
【０００６】
吸着を達成するためのさらに他のやり方は、極性相互作用または順相吸着を介するものである。この方法は好結果であるが、有機溶媒の大量使用を必要とする。さらに、アルカロイド類を相互に分離できるが、さらなる蒸発が必要とされる。
【０００７】
フェンタニルなどの麻薬への分析クロマトグラフィーのいかなる使用も、当業者を産業スケールの方法への分取クロマトグラフィーの使用から遠ざけるであろう。分取クロマトグラフィーと異なり、分析クロマトグラフィーは、一般的に各ピークの完全な分離を必要とする。分取クロマトグラフィーと異なり、各ピークの完全な分離は、紫外（ＵＶ）吸光度により測定される。これは、無限に少量の供給液をカラムにロード（load）し、固定相に小さい粒子サイズ直径（しばしば５マイクロメーター（１９６.８５マイクロインチ）より小さい）を使用して、達成される。小さい粒子サイズは、分取クロマトグラフィーで見られるものより非常に高い圧力を生じさせる。これらの高い圧力は、非常に大きく、強く、高価なクロマトグラフィー設備の使用を要求し、このことは、この分析方法の商業的実行可能性を打ち消すであろう。無限に少量の供給液が各ランでロードされることを考慮しても、設備は非常に大きい。分取クロマトグラフィーでは、目的は所望の供給液成分を必要な純度で回収することである。所望の成分は、不純物が規格限界（specification limit）内にある限り、不純物と共に回収することもできる。固定相の粒子サイズは、分離を達成するのに十分小さいが、しばしば１０ミクロン（３９３.７０マイクロインチ）より大きい。このことは、生成される圧力の低下を制限する。また、分取クロマトグラフィーでは、所望の生成物純度を獲得するという制約のもと、供給液の最大量がロードされる。このことは、生成物が最高の濃度でカラムを通過することを可能にし、任意の蒸発または濃縮ユニットなどの下流の装置のサイズを最小化する。
【０００８】
様々な特許が、様々な非イオン性化学物質の精製または分離のために、分取クロマトグラフィーに言及している。この分野の初期の特許は、Lin の米国特許第４,３９６,５９８号（Ｘ線造影剤）および Doran らの米国特許第５,２０４,００５号である。'００５号特許では、その方法は、クロマトグラフィーのカラムにクロマトグラフィー充填物質を詰め、そのカラムに水溶性非イオン性造影媒体化合物および不純物としての非イオン性化合物を含有する溶液を約１０対１ないし１.５対１の充填物質重量／非イオン性化合物の総重量のロード比（loading ratio）で通すことを含む。次いで、カラムを溶出し、非イオン性造影媒体化合物を含有する溶出液を産生する。
【０００９】
多数の刊行物が上記の'００５特許に追随し、様々な物質の分離のために、フラッシュ、ＨＰＬＣおよび分取クロマトグラフィーを含む様々なクロマトグラフィー系を示したが、条件を示さず、明らかに産業的方法を教示しなかった。かかる刊行物には、受容体を調節する多量体物質の分離に様々なクロマトグラフィー法を用いる米国公開出願２００３／００８７３０６、Ｌ−スレオ−メチルフェニデートの異性化を示す米国特許第６,３９５,７５２号および第６,１２７,３８５号、組換えデオキシリボ核酸タンパク質（deoxyribonucleic protein）を単離する米国特許第４,９０９,９４１号、１またはそれ以上のベクターと対にした微小泡を有する診断／治療剤の回収に関する米国特許第６,２６１,５３７号、１より多い異なるベクターを有する標的化診断／治療剤に関する米国特許第６,３３１,２８９号および診断治療剤に関する米国公開出願２００２／０１０２２７が含まれる。
【００１０】
ロード比を含む分取、逆相クロマトグラフィーへの言及は米国特許第４,３１７,９０３号であり、リンコマイシン塩酸塩の精製を開示し、結合相のシリカゲルの出発物質に対するロード重量比１８対１を示している。クロマトグラフィー分離とそれに続くナノ濾過と、イオン交換樹脂による最後の変色の組合せは、米国特許第５,８１１,５８１号に記載されている。'５８１号特許で分離される物質は、Ｘ線イメージングの造影剤として有用な非イオン性、水溶性、三および六ヨウ化物の不透明化剤と記載されている。そのクロマトグラフィー法は、固定相の、ロードされた未加工の生成物に対する重量比２０：１ないし０.５：１以下で実施する。
【００１１】
上記の先行技術の概説から分かるとおり、多数の有機物質がクロマトグラフィー法を利用して分離または精製されてきた。しかしながら、殆どの場合、クロマトグラフィー分離を実行した条件は示されなかった。また、クロマトグラフィー法を利用して分離された物質は、本発明の目的、即ち、フェンタニルの産業スケールでの分離および精製、と非常に異なる。フェンタニルへの分析クロマトグラフィー適用に対する言及は多数あるが、何らかの条件下で産業用の方法を用いられるという示唆はない。
【００１２】
現在のフェンタニル精製方法は、２回の塩酸塩の結晶化および１回のアルカロイド沈殿を利用して所望の純度を獲得する。純度の要件は達成されるが、塩酸塩の溶解性のためにフェンタニルの約半分が生成される母液流に失われるので、回収率は低い。これらの液流中のフェンタニルの再利用は、不純物のレベルが高いので困難である。高度に純粋なフェンタニルを単離するためのより効率的かつ直接的な手法への要望がある。
【００１３】
本発明は、上記の問題の１つまたはそれ以上を克服することを対象とする。これらの欠陥および短所には、アルカロイド収量の損失、遠心機やフィルターのロードおよびアンロードなどの退屈な手動による堅実な取り扱い操作、実施者による保護設備への依存、必須の純度要件に達するための広範な加工段階および起こり得る多数回の沈殿が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００１４】
発明の要旨
現在、フェンタニルは、フェネチルピペルアニリン（ＰＰＡ）を使用する反応を介して産生されている。産生されたフェンタニルは、反応液から沈殿する。その固体を水で溶解し、十分な塩酸を添加し、十分に酸性の溶液を製造する。この酸性化溶液を本発明の方法に用いる。
【００１５】
本発明によると、純粋でない酸性のフェンタニル水性溶液から高度に純粋なフェンタニルを回収するための産業用の方法がここに提供される。それは、該純粋でないフェンタニルを、逆相分取液体クロマトグラフィーに付すことを含む。クロマトグラフィーの方法は、付着した結合相を有する媒体を含有する充填カラムを用いる。一連の収集した画分（その一部は再利用されたものである）を介して、高度に精製されたフェンタニルをカラムから溶出し、高収率で回収する。本発明に従い、フェンタニルは、精製された生成物中０.０１０重量パーセントより低いＰＰＡ不純物レベルで、産生される。
【００１６】
図面の簡単な説明
添付図面は、本発明に従う逆相分取ＨＰＬＣ操作の結果を示すグラフである。ここでは、生成物のＵＶ分析が、カラムから出た各溶出画分の内容物の指標を提供する。この図は、時間；四４つの画分の各々の画分カットラインおよびこの方法で用いた移動相のアセトニトリル含有量も示す。
【００１７】
発明の詳細な説明
定義：
面積％：分析クロマトグラフィーから算出される純度の単位。それは、検出された総面積で除した所望の成分の面積である。
ロード比：精製ランでロードするアルカロイドの量で除した固定相の量。
移動相：供給液がロードされた後にカラムに送り込まれる液体。この液体は成分を溶出する。
【００１８】
二次採収物：２回目のクロマトグラフィーカラムの通過を必要とする画分で回収されるアルカロイドの量。その画分を濃縮し、次いで別々に精製する。
固定相：カラムへの供給液の成分を吸着する媒体。
収量：カラムに供給された成分の量で除した、精製画分で回収された所望の成分の量。
パーセント：特記しない限り、本明細書および特許請求の範囲で述べる全ての百分率の量は、重量パーセントである。
【００１９】
本発明に従い、フェネチルピペルアニリンを使用する反応を介してフェンタニルを得る。上記の通り、この反応からの沈殿を使用して移動相を調製する。その沈殿を最初に水に溶解し、その溶液を適切な酸性化剤で酸性化する。典型的には、水性溶液中のフェンタニルの濃度は、約５ｇ／ｌないし約３５ｇ／ｌの範囲にあり、好都合には約２０ｇ／ｌである。フェンタニル溶液を酸性化するのに用いる酸の非限定的な例には、塩酸、臭化水素酸、リン酸、亜リン酸、硝酸および硫酸などの無機酸が含まれるがこれらに限定されるものではない。有機酸を用いてもよく、典型的には酢酸、蟻酸、蓚酸、コハク酸、乳酸および酒石酸であり得る。用いる酸の量は、好ましくは約２ないし約５の範囲にあるｐＨ、そして最も好ましくは約３ないし約４のｐＨまで、フェンタニル溶液のｐＨを下げるのに十分なものである。他の強酸はフェンタニル溶液を分解し得るので、希塩酸などの希釈無機酸が好ましい。添加する酸の量は、確実にフェンタニルを塩に変換させるものである。フェンタニルの最大の保持は、フェンタニルを遊離塩基形態でカラムに供給するときに得られることが明らかになった。従って、妥当なフラッシュ体積で確実にフェンタニルを回収できるためには、供給溶液を適正に酸性化する必要がある。典型的には、約０.５パーセントないし約３.５パーセントのフェンタニルを含有する溶液を準備する。好ましい溶液は約１.５ないし約２.５パーセントのフェンタニルを含有し、最も好ましい溶液は、約２.０パーセントのフェンタニルを含有する。
【００２０】
固定相は、アルキルシラン類、アリールシラン類、ハロアルキルシラン類、アルキルエステル類、アリールエステル類、アルキルアミン類、アルキルシアノ化合物、アルキルジオール類、アルキルエーテル類、アリールエーテル類、ハロアルキルエーテル類、アルキルカルボン酸類、アリールカルボン酸類、アルキルスルホン酸類、アリールスルホン酸類、ポリスチレンジビニルベンゼン、アミノポリカプロラクタムおよびグリシドオキシエチルメトキシシランからなる群からの様々な物質の１つであり得る。利用する固定相媒体は、典型的にはオクチル−（Ｃ８）リガンドを有するシリカであるが、オクタデシル−（Ｃ１８）およびブチル−（Ｃ４）リガンドなどの他のリガンドを用いてよい。リガンドは、ポリマーなどの他の粒子、酸化ジルコニウムまたはチタンに付着させることができる。固定相は、好ましくは、１２０オングストローム（０.４７マイクロインチ）の孔を有する２０ミクロン（７８７.４マイクロインチ）の球状粒子である。
【００２１】
一般的には、高速分取液体クロマトグラフィーのカラムを用いる。分取クロマトグラフィーカラムは、例示的な好ましい系では、短くとも約５センチメートル（１.９７インチ）の直径を有する。分取クロマトグラフィーカラムの長さは、この方法に決定的ではなく、好ましい長さは、約５センチメートル（１.９７インチ）ないし約１００センチメートル（３９.４インチ）の範囲にあり、より好ましい長さは、約２０センチメートル（７.８７インチ）ないし約３０センチメートル（１１.８１インチ）の範囲にある。より一層好ましいのは、長さ約２５センチメートルのカラムである。72 Cherry Hill Drive, Beverly, Massachusetts 01915 に事業所がある Amicon, Inc. を含む、この種の分取クロマトグラフィーカラムを構築できる様々な商業的供給者がいる。Amicon, Inc. は、PROCHROM（登録商標）クロマトグラフィーカラムの製造業者である。他の製造業者には、1801 Maple Avenue, Evanston, Illinois 60201 に事業所がある TechniKrom, Incorporated が含まれる。本発明は、広範な高速液体分取クロマトグラフィーカラムに適用可能であり、本特許出願で詳述する特定の実施態様に限定されない。
【００２２】
フェンタニルおよび不純物は、固定相に吸着され、希塩酸および有機極性溶媒を含有する移動相で脱着または溶出される。水性移動相は、十分な塩酸で水を酸性化してｐＨ２.５ないし３.５に達することにより調製する。より好ましいｐＨの範囲は、２.８ないし３.２である。酢酸、蟻酸、臭化水素酸、硝酸および酒石酸などの他の酸を使用できる。有機極性溶媒は、メタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、ｔ−ブタノールおよび好ましくはアセトニトリルなどの、いくつの水溶性非干渉性溶媒からでも選択される。典型的には、水性有機溶媒溶液中の溶媒の量は、約２パーセントないし約１００パーセントの範囲にある。典型的には、移動相中の有機溶媒の量は、溶出方法の間に増加し、最初の数回の移動相のカラム通過では少量を使用し、次いで、増やした量を用いてカラムの中を一掃する。
【００２３】
本発明の決定的な特徴は、ロード比である。本発明の方法で用いるロード比は、典型的には、移動相を用いる前にカラムにロードするフェンタニル１グラムにつき、媒体約５０ないし約１５０グラムの範囲にあることが明らかになった。最も典型的には、ロード比は、約７０ないし約１３０の範囲にある。周知の通り、ＨＰＬＣの分析的使用では、ロード比は１０,０００を超え、供給液の成分は分離したピークで溶出する。分取クロマトグラフィーでは、かかるロード比は、カラムのラン回数を１００を超える係数で乗じるか、または、カラムの直径を１０倍以上大きくさせる。分析的ロード条件を使用することは、いかなる新しいクロマトグラフィー精製技法をも非実用的にするであろう。実行可能な分取適用には、フェンタニルが所望の純度で収集される溶出前端がある。
【００２４】
本発明の方法で得られる所望の純度は、当然、ある程度、不純物の量およびクロマトグラフィー法の実施条件に依存する。高不純物の場合、上記の範囲のうち高レベルのロード比が要求されよう。また、不純物を尚早に溶出しないように、移動相中の有機溶媒の量を制御しなければならない。下記の実施例に見られるとおり、総溶出量が多いランほど不純物を多く産生した。
【００２５】
実施において、フェンタニル供給溶液を充填カラムにロードした後、約２ないし約１０重量パーセントの有機溶媒を含有する移動相で、最初の成分を溶出する。上記の通り、好ましい溶媒はアセトニトリルである。ＰＰＡおよび他の不純物の殆どを最初の画分で収集し、廃棄する。最初の少量のフェンタニルおよび残っているＰＰＡを含有する第２の画分を収集する。二次採収物は、ロードしたフェンタニルの約１０パーセントを含有するであろう。次いで、精製したフェンタニルを第３画分で収集する。ここで、移動相を約８−１０パーセントの範囲に溶媒量を増加したものに変えるが、第３画分中の有機溶媒の量が１５パーセントまで高い場合もあり得る。第３画分は、カラムにロードしたフェンタニルの約９０パーセントを含有する。この第３画分を蒸発させて溶媒を除去し、標準的操作に準じる沈殿により、溶液から精製アルカロイドを回収する。次いで、第４画分を得て、カラムから残っているロードしたフェンタニルを流し出す。第４画分では、用いる水性移動相は、約５０パーセントの有機溶媒、典型的にはアセトニトリル、を含有する。次いで、この第４画分を、第２画分と一緒にし、蒸発に付し有機溶媒を除去する。一緒にした画分を、上記の通りに分取、逆相分取クロマトグラフィーに付すが、但し、不純物を一掃するために再利用画分は収集しない。次いで、精製した、一緒にした二次採収物を、第３画分について上記した通りのアルカロイド沈殿操作に送る。
【００２６】
本発明の逆相、分取クロマトグラフィー法は、典型的には約２０℃ないし約３０℃の温度で実施するが、結果を有意に変化させずに、より高温または低温を用い得る。
【００２７】
好ましい実施態様の説明
実施にあたり、カラムから溶出された物質のＵＶ分析を用いるのが典型的である。この分析から、大きいピークが観察され、これは、溶出の最初の時間における不純物のＰＰＡを示す。これより小さいピークが観察され、これは、第２画分における不純物ＰＰＡを示す。大きいピークが、この時にカラムを高濃度の有機溶媒で流し出す第４画分で観察される。本発明の方法に従い溶出した物質の典型的ＵＶプロフィールを図に表す。図中のＵＶ曲線をもたらす方法は、ｐＨ３.０のフェンタニル塩酸塩の供給溶液を、付着させたＣ８リガンドを有する１５／３０−ミクロンのシリコン粒子を有する、１ｘ２５−ｃｍの寸法のクロマトグラフィーカラムに用いた。ロード比は１００であり、流速は３ｍｌ／分であった。図中、横座標は溶出時間を分で示し、左の縦座標は２８０ｎｍでのＵＶ吸光度を示す。右の縦座標は、アセトニトリルのパーセントを、供給溶液中の体積パーセントで示す。収集した様々な画分をＩ−ＩＶとしてチャートに示す。
【００２８】
一連のランを実施し、フェンタニルの分取逆相分取クロマトグラフィー精製で達成される回収率および純度を立証した。全てのランは、Ｃ８リガンドを含有し１２０オングストロームの孔をもたらす２０−ミクロンのシリカを充填したカラムを使用した。移動相は、ＨＣｌを添加してｐＨ２.８−３.２を達成した水からなり、アセトニトリルが増加していった。これらのランで得られた結果を、下表Ｉに記載する。
【００２９】
表Ｉ
【表１】
2007509945.tif 000002
【００３０】
実施例１
以下の条件を用いて２回のクロマトグラフィーのランを行った：
目的：０.０１０パーセントより少ないＰＰＡでフェンタニルを回収する
供給液組成：９１.２面積％フェンタニル、８.６面積％（０.９１重量％）ＰＰＡ
供給液ｐＨ：塩酸で３.０３
供給液濃度：１９ｇ／ｌフェンタニル
固定相：Ｃ８リガンドを有するシリカ、１２０オングストロームの孔を有する２０ミクロンの球状粒子
カラム：直径１.０ｃｍ、長さ２５ｃｍ、固定相１０.２ｇ
流速：３ｍｌ／分
流動方向：上から下へ
温度：２５℃
検出：２８０ｎｍ
移動相：ｐＨ３.１２の希塩酸水溶液、段階勾配で２.５ないし１００体積パーセントのアセトニトリル（ＡＣＮ）を添加
【００３１】
２回のランの結果を下表ＩＩに表す。
表ＩＩ
【表２】
2007509945.tif 000003
【００３２】
ラン１では、ＰＰＡは０.０１重量パーセントより少なく減少した。これは、表２のラン２では起こらなかった。ラン１はロード比１０３を使用し、一方表２のラン２は、５０の比で多すぎる供給液をロードした。ラン１では、最初に２.５体積パーセントのアセトニトリルフラッシュを使用することにより、フェンタニルとＰＰＡの分離を助けた。ラン２は、最初に５体積パーセントとより多い量のアセトニトリルフラッシュを使用した。これは、ＰＰＡとフェンタニルの分離をより困難にした。両方のランは、精製画分でほぼ同じフェンタニル回収量であり、残っているフェンタニルがフェンタニル−ＰＰＡおよび後で溶出する画分から回収された。これらの画分を二次採収物と呼び、カラムを通して２回目の精製をするものとした。
【００３３】
実施例２
もう１対のランを行い、本発明の方法において適正なロード比を達成する必要性を立証した。この実施例では、実施例１に関して上記した実施条件を用いた。ランの結果は、下表ＩＩＩに含まれる。
【００３４】
表ＩＩＩ
【表３】
2007509945.tif 000004
【００３５】
表ＩＩＩ中、ラン３は、所望のＰＰＡ不純物の減少を示した。ラン４のＰＰＡレベルは、わずかに所望の０.０１パーセントより高かった。表ＩＩＩのラン４における不純物量が多いのは、大部分、ラン３の８８と比較して６４のロード比を使用しているためである。ラン３は、精製フェンタニルを収集するために、ラン４より少ない溶出体積を使用した。これは、ラン３が１０％アセトニトリルのフラッシュを省略したためであった。高いロード比が供給中の不純物量のために必要であり、他の実施条件を補償することが、表ＩＩＩのデータから明らかである。ラン３における僅かに大きいフェンタニル−ＰＰＡ画分体積の使用も、ＰＰＡの減少を助けた。
【００３６】
フェンタニル製造のための逆相分取クロマトグラフィーを利用する新規方法を本明細書で説明した。本発明の方法を特定の化合物および実施例を参照して説明したが、明示的に記述しない限り、かかる参照により本発明の範囲を限定することは全く意図していない。本発明から逸脱せずに、様々な工程にふさわしいように適合させて、物質および工程の順序並びに方法の組合せに様々な改変を成し得る。前記の説明は、理解の明瞭化のためだけに提供するものであり、改変は当業者に明らかであるので、不必要な限定をそこから理解すべきではない。
【国際調査報告】
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