(57)【要約】ポリマービグアニドまたはビス（ビグアニド）化合物、キレート剤、および緩衝剤を含む局所洗浄組成物、ならびに皮膚または耳組織感染を予防または治療するためにそれらの組成物を使用する方法が提供される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物において皮膚の感染を阻害、治療、または予防する方法であって、
（ｉ）キレート剤、
（ｉｉ）緩衝剤、および
（ｉｉｉ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩
を含む組成物の有効量を、哺乳動物の皮膚に局所投与することを含む方法。
【請求項２】
ビス（ビグアニド）が、式（ＩＩ）の化合物、またはその互変異性体、あるいは薬剤としてまたは獣医用として許容されるその塩である請求項１に記載の方法。
【化１】
2007532490.tif 000020
式中、Ｚは、２価架橋基であり、Ｘ１およびＸ２は独立して、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクリル、または置換されていてもよいヘテロアリールから選択される。
【請求項３】
式（ＩＩ）の化合物において、Ｘ１およびＸ２が共に４−クロロフェニルであり、Ｚが−（ＣＨ２）６−である請求項２に記載の方法。
【請求項４】
式（ＩＩ）の化合物において、Ｘ１およびＸ２が共に３−エチルヘキサンであり、Ｚが−（ＣＨ２）６−である請求項２に記載の方法。
【請求項５】
ポリマービグアニドが、式（ＩＩＩ）の化合物、またはその互変異性体、あるいは薬剤としてまたは獣医用として許容されるその塩である請求項１に記載の方法。
【化２】
2007532490.tif 000021
式中、Ｚは、不在であるか、または２価架橋基であり、各Ｚは、ポリマーを通じて同一でも異なっていてもよく、
ｎは、少なくとも３であり、
Ｘ３およびＸ４は独立して、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ−ＣＮ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロシクリル、および置換されていてもよいヘテロアリールから選択される。
【請求項６】
ポリマービグアニドが、式（ＩＶ）の化合物、またはその互変異性体、あるいは薬剤として許容されるその塩である請求項５に記載の方法。
【化３】
2007532490.tif 000022
式中、ｎは、３から５００の整数であり、Ｘ３およびＸ４は独立して、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ−ＣＮ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロシクリル、および置換されていてもよいヘテロアリールから選択される。
【請求項７】
式（ＩＶ）の化合物において、ｎが３から１５の平均値を有する請求項６に記載の方法。
【請求項８】
キレート剤が、アミノカルボン酸、デフェロキサミン、ジメルカプロール、クエン酸、ペニシラミン、大環状ポリエーテル、およびビホスホネート、ならびにそれらの塩、およびそれらの混合物から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項９】
アミノカルボン酸が、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ニトリロ三酢酸、ニトリロトリプロピオン酸、ジエチレントリアミン五酢酸、２−ヒドロキシエチル−エチレンジアミン−三酢酸、１，６−ジアミノ−ヘキサメチレン−四酢酸、１，２−ジアミノ−シクロヘキサン四酢酸、Ｏ，Ｏ’−ビス（２−アミノエチル）−エチレングリコール−四酢酸、１，３−ジアミノプロパン−四酢酸、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシベンジル）エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ−二酢酸、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−二酢酸、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−ジプロピオン酸、トリエチレンテトラアミン六酢酸、７，１９，３０−トリオキサ−１，４，１０，１３，１６，２２，２７，３３−オクタアザビシクロ［１１，１１，１１］ペンタトリアコンタン（Ｏ−ビス−トレン）、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−ビス（メチレンホスホン酸）、イミノ二酢酸、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）グリシン（ＤＨＥＧ）、１，３−ジアミノ−２−ヒドロキシプロパン−四酢酸、１，２−ジアミノプロパン−四酢酸、エチレンジアミン−テトラキス（メチレンホスホン酸）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸およびトリエチレンテトラミン−六酢酸およびそれらの塩または混合塩から選択される請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
キレート剤が、ＥＤＴＡ二ナトリウム、ＥＤＴＡ三ナトリウム、ＥＤＴＡ四ナトリウム、ＥＤＴＡ二カリウム、ＥＤＴＡ三カリウム、ＥＤＴＡリチウム、ＥＤＴＡ二リチウム、ＥＤＴＡアンモニウム、ＥＤＴＡ二アンモニウム、およびＥＤＴＡカルシウム二ナトリウムである請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
キレート剤が、ＥＤＴＡ二ナトリウムである請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
緩衝剤が、アミン、ピペラジン、モルホリン、ヒスチジン、イミダゾール、アミノアルコール、アミノポリオール、ホウ酸、重炭酸塩、塩化ナトリウム、メグルミン、リン酸緩衝剤、クエン酸緩衝剤、ならびに薬剤としておよび獣医用として許容されるそれらの塩から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
緩衝剤が、トリエチルアミン、トリエチレンテトラミン、テトラエチルエチレンジアミン、テトラメチレンジアミン、Ｎ，Ｎ’−ジエチル−Ｎ，Ｎ’−ビス（スルホプロピル）−エチレンジアミン、Ｎ，Ｎ’−ジエチルピペラジン、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（アルキルスルホン酸）、（Ｎ−モルホリノ）アルキルスルホン酸、２−アミノエタノール、２−アミノ−２−メチル−１−プロパノール、トリエタノールアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、２−アミノ−２−メチル−１，３−プロパンジオール、ビス−（２−ヒドロキシエチル）イミノ−トリス（ヒドロキシメチル）メタン、２−ジメチルアミノ−２−メチル−１−プロパノール、２−アミノ−２−エチル−１，３−プロパンジオールおよび１，３−ビス（トリス［ヒドロキシメチル］メチルアミノ）プロパン、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）−２−アミノエタンスルホン酸、Ｎ−［トリス（ヒドロキシメチル）メチル］−３−アミノプロパンスルホン酸、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）グリシン、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）タウリン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン  Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）メチルグリシンおよびそれらの塩およびそれらの混合物から選択される請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
緩衝剤が、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンおよび／またはその塩である請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
抗生物質を哺乳動物に投与するステップをさらに含む請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
皮膚の感染が、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ．、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐｐ．、Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｓｐｐ．、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｄｓ、または酵母に起因する請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
皮膚の感染が、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、またはＭａｌａｓｓｅｚｉａ  ｐａｃｈｙｄｅｒｍａｔｉｓに起因する請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
皮膚の感染を阻害、治療、または予防する方法が、外耳の感染を阻害、治療、または予防する方法である請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
（ｉ）キレート剤、
（ｉｉ）緩衝剤、および
（ｉｉｉ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩
を含むが、ただし成分（ｉｉｉ）はクロルヘキシジンでない医薬組成物または獣医用組成物。
【請求項２０】
ビス（ビグアニド）が、式（ＩＩ）の化合物、またはその互変異性体、あるいは薬剤としてまたは獣医用として許容されるその塩である請求項１９に記載の組成物。
【化４】
2007532490.tif 000023
式中、Ｚは、２価架橋基であり、Ｘ１およびＸ２は独立して、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクリル、または置換されていてもよいヘテロアリールから選択される。
【請求項２１】
式（ＩＩ）の化合物において、Ｘ１およびＸ２が共に３−エチルヘキサンであり、Ｚが−（ＣＨ２）６−である請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
ポリマービグアニドが、式（ＩＩＩ）の化合物、またはその互変異性体、あるいは薬剤としてまたは獣医用として許容されるその塩である請求項１９に記載の組成物。
【化５】
2007532490.tif 000024
式中、Ｚは、不在であるか、または２価架橋基であり、各Ｚは、ポリマーを通じて同一でも異なっていてもよく、
ｎは、少なくとも３であり、
Ｘ３およびＸ４は独立して、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ−ＣＮ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロシクリル、および置換されていてもよいヘテロアリールから選択される。
【請求項２３】
ポリマービグアニドが、式（ＩＶ）の化合物、またはその互変異性体、あるいは薬剤として許容されるその塩である請求項２２に記載の組成物。
【化６】
2007532490.tif 000025
式中、ｎは、３から５００の整数であり、Ｘ３およびＸ４は独立して、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ−ＣＮ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロシクリル、および置換されていてもよいヘテロアリールから選択される。
【請求項２４】
式（ＩＶ）の化合物において、ｎが３から１５の平均値を有する請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
キレート剤が、アミノカルボン酸、デフェロキサミン、ジメルカプロール、クエン酸、ペニシラミン、大環状ポリエーテル、およびビホスホネート、ならびに薬剤としておよび獣医用として許容されるそれらの塩から選択される請求項１９に記載の組成物。
【請求項２６】
アミノカルボン酸が、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ニトリロ三酢酸、ニトリロトリプロピオン酸、ジエチレントリアミン五酢酸、２−ヒドロキシエチル−エチレンジアミン−三酢酸、１，６−ジアミノ−ヘキサメチレン−四酢酸、１，２−ジアミノ−シクロヘキサン四酢酸、Ｏ，Ｏ’−ビス（２−アミノエチル）−エチレングリコール−四酢酸、１，３−ジアミノプロパン−四酢酸、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシベンジル）エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ−二酢酸、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−二酢酸、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−ジプロピオン酸、トリエチレンテトラアミン六酢酸、７，１９，３０−トリオキサ−１，４，１０，１３，１６，２２，２７，３３−オクタアザビシクロ［１１，１１，１１］ペンタトリアコンタン（Ｏ−ビス−トレン）、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−ビス（メチレンホスホン酸）、イミノ二酢酸、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）グリシン（ＤＨＥＧ）、１，３−ジアミノ−２−ヒドロキシプロパン−四酢酸、１，２−ジアミノプロパン−四酢酸、エチレンジアミン−テトラキス（メチレンホスホン酸）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸およびトリエチレンテトラミン−六酢酸ならびに薬剤としておよび獣医用として許容されるそれらの塩または混合塩から選択される請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
キレート剤が、ＥＤＴＡ二ナトリウム、ＥＤＴＡ三ナトリウム、ＥＤＴＡ四ナトリウム、ＥＤＴＡ二カリウム、ＥＤＴＡ三カリウム、ＥＤＴＡリチウム、ＥＤＴＡ二リチウム、ＥＤＴＡアンモニウム、ＥＤＴＡ二アンモニウム、およびＥＤＴＡカルシウム二ナトリウムである請求項２６に記載の組成物。
【請求項２８】
キレート剤が、ＥＤＴＡ二ナトリウムである請求項２７に記載の組成物。
【請求項２９】
緩衝剤が、アミン、ピペラジン、モルホリン、ヒスチジン、イミダゾール、アミノアルコール、アミノポリオール、ホウ酸、重炭酸塩、塩化ナトリウム、メグルミン、リン酸緩衝剤、クエン酸緩衝剤、ならびに薬剤としておよび獣医用として許容されるそれらの塩から選択される請求項１９に記載の組成物。
【請求項３０】
緩衝剤が、トリエチルアミン、トリエチレンテトラミン、テトラエチルエチレンジアミン、テトラメチレンジアミン、Ｎ，Ｎ’−ジエチル−Ｎ，Ｎ’−ビス（スルホプロピル）−エチレンジアミン、Ｎ，Ｎ’−ジエチルピペラジン、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（アルキルスルホン酸）、（Ｎ−モルホリノ）アルキルスルホン酸、２−アミノエタノール、２−アミノ−２−メチル−１−プロパノール、トリエタノールアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、２−アミノ−２−メチル−１，３−プロパンジオール、ビス−（２−ヒドロキシエチル）イミノ−トリス（ヒドロキシメチル）メタン、２−ジメチルアミノ−２−メチル−１−プロパノール、２−アミノ−２−エチル−１，３−プロパンジオールおよび１，３−ビス（トリス［ヒドロキシメチル］メチルアミノ）プロパン、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）−２−アミノエタンスルホン酸、Ｎ−［トリス（ヒドロキシメチル）メチル］−３−アミノプロパンスルホン酸、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）グリシン、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）タウリン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン  Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）メチルグリシンならびに薬剤としておよび獣医用として許容されるそれらの塩、およびそれらの混合物から選択される請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
緩衝剤が、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンおよび／または薬剤としておよび獣医用として許容されるその塩である請求項３０に記載の組成物。
【請求項３２】
薬剤としてまたは獣医用として許容される担体、希釈剤、および／または賦形剤をさらに含む請求項１９に記載の組成物。
【請求項３３】
抗微生物活性を増強する添加剤、および／または抗炎症剤をさらに含む請求項１９に記載の組成物。
【請求項３４】
抗微生物活性を増強する添加剤が、プロピレングリコール、グリセリン、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、抗生物質、またはそれらの混合物から選択される請求項３３に記載の組成物。
【請求項３５】
抗炎症剤が、コルチコステロイドおよび非ステロイド性抗炎症剤から選択される請求項３３に記載の組成物。
【請求項３６】
哺乳動物の皮膚の感染を治療または予防する薬剤の製造における、
（ｉ）キレート剤、
（ｉｉ）緩衝剤、および
（ｉｉｉ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩
の使用。
【請求項３７】
イヌの外耳の感染を治療または予防する方法であって、
（ｉ）キレート剤、
（ｉｉ）緩衝剤、および
（ｉｉｉ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩
を含む水性組成物の有効量を、イヌの外耳に局所投与することを含む方法。
【請求項３８】
イヌの外耳の感染を治療する薬剤の製造における、
（ｉ）水、
（ｉｉ）キレート剤、
（ｉｉｉ）緩衝剤、および
（ｉｖ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩
の使用。
【請求項３９】
（ｉ）水、
（ｉｉ）キレート剤、
（ｉｉｉ）緩衝剤、および
（ｉｖ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩
を含むが、ただし成分（ｉｖ）はクロルヘキシジンでない獣医用耳洗浄組成物。
【請求項４０】
（ｉ）水、
（ｉｉ）キレート剤、
（ｉｉｉ）緩衝剤、
（ｉｖ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩、および
（ｖ）保存剤
を含み、成分（ｉｖ）は、組成物の０．０２重量％超から０．５重量％の範囲の濃度で存在する獣医用耳洗浄組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ポリマービグアニドまたはビス（ビグアニド）化合物、キレート剤、および緩衝剤を含む洗浄組成物を適用することを含む、哺乳動物における皮膚および耳組織感染の治療または予防に関する。本発明はさらに、そのような治療または予防に有用な組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚および上皮被覆体腔、特に外耳の感染の治療は、ヒトおよび温血動物においてそれらの部位が抗微生物剤耐性微生物を誘引するため、非常に困難なものとなり得る。抗微生物剤耐性は、反復性感染治療中の抗微生物薬への反復暴露、およびそれに続く耐性株の選択の結果として生じる可能性があり、あるいは固有の抗微生物剤耐性を有する微生物の侵入の結果である可能性がある。
【０００３】
哺乳動物の耳に感染する一般に遭遇する微生物には、ブドウ球菌属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ．）、腸内細菌科（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃａｅ）、たとえば大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）など、クレブシエラ属（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐｐ．）、プロテウスミラビリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）、プロテウスブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｖｕｌｇａｒｉｓ）、およびシュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｄｓ）、たとえば緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）などが含まれる。これらの微生物は、耳道などの体腔で繁殖し、ときには場合によって同じ環境を競合する他の感受性微生物の除去によって、抗微生物剤治療から利益を得る場合もあることが知られている。そのような現象の一例は、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）減数後のマラセジア（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）の劇的な過剰増殖である（Ｆｏｓｔｅｒ、ＤｅＢｏｅｒ  １９９８）。
【０００４】
耳感染周囲の膿性滲出物中の炎症細胞、生体タンパク質、酵素、ＤＮＡ、ならびに他の化学物質および生体化合物が、その感染の治療に処方された薬剤の抗微生物作用および殺菌作用を低減または不活性化するため、耳感染はしばしば治療が困難である。感染を治療するために処方される多くの薬剤は、神経毒性であり、したがって聴器毒性である（Ｒｏｈｎ等、１９９３）。
【０００５】
聴器毒性レベル未満の低量で迅速かつ活性である、耳感染の簡易で有効な治療が求められている。また抗微生物薬に対する感染の耐性スペクトルの復帰に広範な作用を有する治療も求められている。
【０００６】
キレート剤、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）と緩衝剤、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（Ｔｒｉｓ）との組み合わせは、これまでイヌの耳洗浄剤として用いられている。この組み合わせは、いくらかの抗微生物活性を有することが知られているが、Ｔｒｉｓ−ＥＤＴＡ併用の主たる利点は、微生物、特に抗微生物剤耐性を有する微生物の抗生物質の作用に対する感受性を向上させることである（ＡｓｈｗｏｒｔｈおよびＮｅｌｓｏｎ、１９９０；Ｇｒｅｅｎ、１９８４；Ｎｅｅｒ、１９８２；ＦｏｓｔｅｒおよびＤｅＢｏｅｒ、１９９８；Ｆａｒｃｉａ、１９９３；Ｆａｒｃｉａ、１９９７；Ｇｏｔｔｈｅｌｆ、２００３）。しかしながら、１０から１５分程度の耳道へのＴｒｉｓ−ＥＤＴＡの暴露が必要とされる可能性がある（Ｐａｔｅｒｓｏｎ、２００３）。Ｆａｒｃｉａ（１９９７）は、一般用Ｔｒｉｓ−ＥＤＴＡ溶液の使用が１０分後に有効であることを見出した。Ｇｏｔｔｈｅｌｆ（２００３）はＴｒｉｓ−ＥＤＴＡのｉｎ  ｖｉｔｒｏでの最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）低下効果は５分および３０分で生じ得ることを見出したが、いくつかのｉｎ  ｖｉｔｒｏモデルではそれらの有益な効果を得るには数時間を要する（Ｗｏｏｌｌｅｙ等、１９８３ａ、１９８３ｂ）。耳洗浄剤を投与すると、耳から液体を除去するために頭を振るイヌやネコなどの家で飼われている動物では、そのような長い時間は困難である可能性がある。
【０００７】
現在用いられているＴｒｉｓ−ＥＤＴＡフラッシュ液は、グラム陽性菌には最小効果を有するが、細胞壁が異なるためカンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）およびマラセジア（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）などの酵母には効果がない（ＦｏｓｔｅｒおよびＤｅＢｏｅｒ、１９９８；Ｓｐａｒｋｅｓ等、１９９４）。Ｐａｔｔｅｒｓｏｎ（２００３）は、「実際、多くの水性（耳）洗浄剤のようにＥＤＴＡ−Ｔｒｉｓを長時間使用するとマラセジア（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）感染に罹患しやすくなる可能性がある」と述べている。
【０００８】
国際公開第０３／０８６３３２号パンフレットは、洗浄液としての保存Ｔｒｉｓ−ＥＤＴＡ製剤の使用を記載している。この場合、選択された保存剤は非イオン性であり、ＵＳＰ保存剤有効性試験に適合するように選択されている。この溶液は、防腐洗浄剤として単独で用いることができ、あるいは抗生物質の担体として用いることもできる。
【０００９】
Ｔｒｉｓが生物活性を有することは知られていないが、しかしながら、ＥＤＴＡが水中のカルシウムおよびマグネシウムイオンをキレートすることは知られている。ＥＤＴＡは、細菌細胞壁でカルシウムおよびマグネシウムイオンと結合し、細胞壁を弱体化して、それによりその後の抗生物質による治療の効果を向上させることができると推測される。
【００１０】
ビグアニド化合物は既知の防腐剤であり、コンタクトレンズ液において局所用防腐剤として、ならびに排水およびその容器の殺菌剤として用いられている。ビグアニドには、クロルヘキシジンおよびアレキシジンなどのビス（ビグアニド）、ポリヘキサメチレンビグアニド（ＰＨＭＢ）などのポリマービグアニド、ならびに文献に記載されている他のビグアニドが含まれる（Ｅａｓｔ等、１９９７；Ｉｋｅｄａ等、１９８４）。
【００１１】
ビス（ビグアニド）クロルヘキシジンは、多くの防腐剤適用例で用いられている。ヒトおよび動物においてクロルヘキシジンが耳および耳の周囲に術前防腐剤として用いられた場合、時折、聴器毒性が報告されている。しかしながら、クロルヘキシジンの聴器毒性に関して相反する報告も存在する（Ｗｉｌｌｏｕｇｈｂｙ  Ｋ．１９８９；Ｍｅｒｃｈａｎｔ  Ｓ．Ｒ．１９９４；Ａｕｒｓｎｅｓ  Ｊ．１９８１ａおよび１９８１ｂ）。いくつかの研究は、特に２％程度の高濃度でクロルヘキシジンを含有する組成物が聴器毒性であることを示しており、これは鼓膜が破裂しているときに特に認められる（Ｈａｒｖｅｙ等、２００１；Ｍｅｒｃｈａｎｔ、１９９４）。他の研究は、０．２％のクロルヘキシジンを鼓膜の破裂したイヌの外耳に用いたとき、聴器毒性作用がないことを示している（Ｍｅｒｃｈａｎｔ等、１９９２）。クロルヘキシジンとエタノールまたはセントリミド（ｃｅｎｔｒｉｍｉｄｅ）などの第四級アンモニウムとの組み合わせは、聴器毒性を増強する（Ｈａｒｖｅｙ等、２００１）。確実に鼓膜が損傷しておらず、濃度が聴器毒性量未満であり、聴器毒性作用を増強する可能性のある添加剤が存在しないように、クロルヘキシジンの耳への投与には細心の注意が払われなければならない。
【００１２】
クロルヘキシジン（０．０１％）はまた、間欠的カテーテル法を必要とする脊髄損傷を有する患者において膀胱内点滴注入として、Ｔｒｉｓ−ＥＤＴＡと組み合わせて用いられている（Ｈａｒｐｅｒ、１９８７；Ｐｅａｒｍａｎ、１９８８）。しかしながら、０．０２％のクロルヘキシジン組成物は、血尿を引き起こす化学性膀胱炎の原因となることが認められている（Ｐｅａｒｍａｎ、１９８８）。
【発明の開示】
【００１３】
有利なことに、本発明者は、ビグアニド化合物と緩衝剤およびキレート剤との組み合わせが、耳感染および皮膚など他の組織感染の迅速かつ有効な治療を提供する可能性があり、抗生物質の作用に対する微生物の感受性を向上させる可能性のあることを見出した。
【００１４】
本発明の一態様によれば、哺乳動物において皮膚の感染を阻害、治療、または予防する方法であって、
（ｉ）キレート剤、
（ｉｉ）緩衝剤、および
（ｉｉｉ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩を含む組成物の有効量を、哺乳動物の皮膚に局所投与することを含む方法が提供される。
【００１５】
本発明の他の態様によれば、
（ｉ）キレート剤、
（ｉｉ）緩衝剤、および
（ｉｉｉ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩を含むが、ただし成分（ｉｉｉ）はクロルヘキシジンでない医薬組成物または獣医用組成物が提供される。
【００１６】
他の態様によれば、哺乳動物の皮膚の感染を治療または予防する薬剤の製造における、
（ｉ）キレート剤、
（ｉｉ）緩衝剤、および
（ｉｉｉ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩の使用が提供される。
【００１７】
本発明は、外耳の感染の阻害、治療、または予防に特に有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
適切な哺乳動物には、耳感染などの皮膚感染を罹患しやすい任意の哺乳動物、たとえばヒト、愛玩動物および農業上有用な動物などの家畜、たとえばヒツジ、ウシ、ブタ、およびウマなどが含まれる。特に好ましい哺乳動物は、ヒトおよび愛玩動物、たとえばネコおよびイヌなどであり、特に好ましい動物は、イヌ、特に長毛、垂耳種のイヌである。
【００１９】
本明細書では、「外耳」という用語は、耳介（ｐｉｎｎａまたはａｕｒｉｃｌｅ）および耳道（ａｕｄｉｔｏｒｙ  ｃａｎａｌまたはｍｅａｔｕｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｅａｒ）を指す。
【００２０】
本発明の方法および組成物は、特に酵母、グラム陽性および／またはグラム陰性菌、特に抗生物質の作用に少なくともいくらかの耐性を有する細菌に起因する感染の阻害または治療に有用である。本発明の方法および組成物は、特にブドウ球菌属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ）、たとえば黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、スタフィロコッカスインターミディウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ）など、腸内細菌科（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃａｅ）、たとえば大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）など、クレブシエラ属（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐｐ）、プロテウス属（Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｓｐｐ）、たとえばプロテウスミラビリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）など、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｄ）、たとえば緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）など、連鎖球菌属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ．）、酵母、たとえばマラセジアパキデルマチス（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ  ｐａｃｈｙｄｅｒｍａｔｉｓ）およびカンジダアルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ）など、ならびに真菌、たとえばアスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｓｐｐ．）などに起因する感染の治療または阻害に有用である。好ましくは、本方法および組成物は、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、スタフィロコッカスインターミディウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ）、およびマラセジアパキデルマチス（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ  ｐａｃｈｙｄｅｒｍａｔｉｓ）に起因する感染を治療または阻害するために用いられる。
【００２１】
ビグアニド化合物は、次式の基、
【化１】
2007532490.tif 000002
あるいはその塩または互変異性体を含む。
【００２２】
ビス（ビグアニド）は、２価架橋基で結合された２つの式（Ｉ）の基またはその塩を含み、ポリマービグアニドは、それぞれが２価架橋基で結合された３個以上の式（Ｉ）の基またはその塩を含む。
【００２３】
好ましいビス（ビグアニド）は、次式、
【化２】
2007532490.tif 000003
またはその互変異性体を有し、式中、Ｚは、２価架橋基であり、Ｘ１およびＸ２は独立して、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクリル、または置換されていてもよいヘテロアリールから選択されるもの、あるいは薬剤としてまたは獣医用として許容されるそれらの塩である。上述のビス（ビグアニド）化合物およびそれらの調製方法は、たとえば米国特許第４６７０５９２号および第４９５２７０４号に記載されている。好ましいビス（ビグアニド）には、Ｘ１およびＸ２が共に４−クロロフェニルであり、Ｚが−（ＣＨ２）６−であるクロルヘキシジン（Ｄｅｇｕｓｓａ  ＡＧ、Ｄｕｓｓｅｌｄｏｒｆ、Ｇｅｒｍａｎｙなどの様々な供給業者から市販され入手可能）、ならびにＸ１およびＸ２が共に３−エチルヘキサンであり、Ｚが−（ＣＨ２）６−であるアレキシジン（Ｒａｖｅｎｓｂｅｒｇ  ＧｍｂＨ  Ｃｈｅｍｉｓｃｈｅ  Ｆａｂｒｉｋ、Ｋｏｎｓｔａｎｚ、Ｇｅｒｍａｎｙから市販され入手可能）が含まれる。
【００２４】
好ましい実施形態において、ビグアニドはポリマービグアニドであり、たとえばビグアニドがポリマー骨格に出現するＥａｓｔ等、１９９７に記載されているものなどである。特に好ましいポリマービグアニドは、以下の式、
【化３】
2007532490.tif 000004
またはその互変異性体を有し、式中、Ｚは、不在であるか、または有機２価架橋基であり、各Ｚは、ポリマーを通じて同一であるか異なっていることができ、ｎは、少なくとも３、好ましくは５から２０であり、Ｘ３およびＸ４は独立して、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ−ＣＮ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロシクリル、および置換されていてもよいヘテロアリールから選択されるもの、あるいは薬剤としてまたは獣医用として許容されるそれらの塩である。好ましくは、このポリマー化合物の分子量は、少なくとも１０００ａｍｕ、より好ましくは１０００ａｍｕから５００００ａｍｕの間である。単一の組成物において、ｎが多様であり、ポリマービグアニドの混合物を提供することもできる。いくつかの実施形態において、ポリマービグアニドは、２９００から１５０００、特に３０００から８０００、特に３２００から５０００、特に３５００から４５００の範囲の平均分子量を有する。
【００２５】
上述のポリマービグアニド化合物およびそれらの調製方法は、たとえば米国特許第３４２８５７６号およびＥａｓｔ等、１９９７に記載されている。
【００２６】
ポリマー骨格にビグアニドが出現する、本発明に用いられる好ましいポリマービグアニドは、ポリマーヘキサメチレンビグアニド、たとえば以下の式のポリヘキサニドまたはＰＨＭＢ（Ｖａｎｔｏｃｉｌ、Ｂａｑｕａｃｉｌ、Ａｒｌａｇａｒｄ、Ｌｏｎｚａｂａｃ  ＢＧ、またはＣｏｓｍｏｃｉｌとして市販され入手可能）、
【化４】
2007532490.tif 000005
またはその互変異性体であって、式中、ｎは、３から５００の整数であり、Ｘ３およびＸ４は独立して、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ−ＣＮ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロシクリル、および置換されていてもよいヘテロアリールから選択されるもの、あるいは薬剤としてまたは獣医用として許容されるそれらの塩である。好ましくは、ｎは３から１５、より好ましくは３から１２の平均値を有する。より好ましくは、たとえば塩酸塩として、Ｃｏｓｍｏｃｉｌ  ＣＱ（商標）の商標でＡｖｅｃｉａ（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、Ｄｅｌａｗａｒｅ、ＵＳＡ）から市販され入手可能なポリマーヘキサメチレンビグアニドである。
【００２７】
本発明の他の実施形態において、ポリマービグアニドは、ポリマーの低分子量部分が除去されている分割ポリマービグアニドである。特に、ｎ≦５の値を有するオリゴマーの分画が、組成物のポリマービグアニドの２重量％未満、好ましくは０．５重量％未満、もっとも好ましくは０．１重量％未満であるポリマービグアニド組成物である。
【００２８】
他の好ましいポリマービグアニドは、次式、
【化５】
2007532490.tif 000006
またはその互変異性体を有し、式中、Ｘ３は、上述の式ＩＩＩに関して定義されたものであり、Ｘ５およびＸ６は独立して、ＨまたはＸ３から選択され、Ｚは、不在であるか、または２価架橋基であり、ｍは、１から１０の整数であり、ｐは、０であるか、または１から１０の整数であり、ｑは、１から１０００の整数であるペンダントビグアニド基を有するもの、あるいは薬剤としてまたは獣医用として許容されるそれらの塩である。
【００２９】
ペンダントビグアニド基を有する好ましいポリマービグアニドは、Ｘ５およびＸ６が水素であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−であり、Ｘ３がフェニルまたは置換されていてもよいフェニル、特に４−クロロフェニルまたは３，４−ジクロロフェニルであり、ｍが１から１０の整数であり、ｐが０であり、ｑが１から５００の整数（ホモポリマー）であるか、またはｍが１から１０であり、ｐが１から１０であり、ｑが１から５００（アクリルアミドとのコポリマー）であるＩｋｅｄａ等、１９８４に記載されているものである。
【００３０】
ペンダントビグアニド基を有するポリマービグアニドおよびそれらの調製方法は、Ｉｋｅｄａ等、１９８４に記載されている。
【００３１】
本明細書では、「アルキル」という用語は、必要に応じて１から１０個の炭素原子を有する、１価の直鎖または分岐鎖炭化水素基を指す。たとえば、適切なアルキル基には、これに限定されるものではないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、２−メチルペンチル、３−メチルペンチル、ｎ−ヘキシル、２−、３−、または４−メチルヘキシル、２−、３−、または４−エチルヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、およびデシルが含まれる。
【００３２】
本明細書では、「シクロアルキル」という用語は、環式炭化水素基を指す。適切なシクロアルキル基には、これに限定されるものではないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルが含まれる。
【００３３】
本明細書では、「アリール」という用語は、フェニルおよびナフチルなどのＣ６〜Ｃ１０芳香族炭化水素基を指す。
【００３４】
本明細書では、「ヘテロシクリル」または「複素環式」という用語は、１つまたは複数の炭素原子（適切な場合には、それに結合している水素原子）が、非芳香族残基を提供するようにヘテロ原子で置換されている、単環式、多環式、縮合または共役環式炭化水素残基、好ましくはＣ３〜６を指す。適切なヘテロ原子には、Ｏ、Ｎ、およびＳが含まれる。２つ以上の炭素原子が置換される場合、２つ以上の同じへテロ原子、または異なるヘテロ原子で置換されることができる。複素環基の適切な例には、これに限定されるものではないが、ピロリジニル、ピロリニル、ピペリジル、ピペラジニル、モルホリノ、インドリニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、チオモルホリノ、ジオキサニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピロリルを含むことができる。
【００３５】
本明細書では、「ヘテロアリール」または「複素芳香族」という用語は、少なくとも１つの環が芳香族であり、Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択された１から４個のヘテロ原子を含有する、各環の原子が６個までの安定な単環式または２環式の環を表す。この定義の範囲内であるヘテロアリール基には、これに限定されるものではないが、アクリジニル、カルバゾリル、シンノリニル、キノキサリニル、ピラゾリル、インドリル、ベンゾトリアゾリル、フラニル、チエニル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、キノリニル、イソキノリニル、オキサゾリル、イソキサゾリル、インドリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリジニル、ピリミジニル、ピロリル、テトラヒドロキノリンが含まれる。
【００３６】
本発明のアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、およびアリール基は、ＯＨ、ＯＣ１〜６アルキル、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｉ、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１〜６アルキル）、Ｎ（Ｃ１〜６アルキル）２、ＳＨ、ＳＣ１〜６アルキル、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｃ１〜６アルキル、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨ（Ｃ１〜６アルキル）、またはＣＯＮ（Ｃ１〜６アルキル）２から選択された１から５個の基で場合によって置換されていてもよい。
【００３７】
本明細書では、「２価架橋基」という用語は、２価を有し、他の２つの基と結合することのできる基を指す。適切な２価架橋基の例には、これに限定されるものではないが、ｔは１から１０の整数である−（ＣＨ２）ｔ−、−Ｏ−、−Ｓ−、２価飽和または芳香族炭素環、あるいは複素環または複素芳香環、あるいはそのような２価および／または環式部分の組み合わせが含まれる。たとえば、飽和Ｃ６環式基には、−Ｃ６Ｈ１０−が含まれ、Ｃ６芳香族基には、−Ｃ６Ｈ４−が含まれ、Ｃ６複素環基には、次式が含まれ、
【化６】
2007532490.tif 000007
Ｃ６複素芳香族には、次式が含まれる。
【化７】
2007532490.tif 000008
【００３８】
他の２価架橋基には、１つまたは複数の炭素原子がＮＨ、Ｓ、Ｏ、
【化８】
2007532490.tif 000009
で置換されているアルキレン基（−ＣＨ２−）ｔが含まれる。好ましい実施形態において、２価架橋基は、−（ＣＨ２）ｔ−であり、ｔは、１から１０の整数、特に１から６、特に６である。
【００３９】
本明細書では、「互変異性体」という用語は、隣接する２重結合の移動を伴う、水素原子の移動を有する化合物の異性体を指す。たとえば、式（Ｉ）は、互変異性化して、以下の等式による種々の異性体を提供することができる。
【化９】
2007532490.tif 000010
【００４０】
本明細書で用いられるとき、防腐剤、抗微生物剤、保存剤、抗生物質、消毒剤、および抗菌剤という用語は、この主題に関して国際的に受け入れられている教科書、Ｂｌｏｃｋ  Ｓ．（２００１）に規定されている意味を有するものとする。
【００４１】
本明細書では、「防腐剤」という用語は、微生物の活性を阻害するか、微生物を死滅させることによって、微生物の増殖または活性を防止または阻止する物質を指す。この用語は特に、生体組織に局所的に適用される調剤に関して用いられる。したがって、「皮膚（耳を含む）防腐剤」は、顕性な皮膚／耳感染を防ぐ安全な非刺激性の液状抗微生物調剤を指す。
【００４２】
本明細書では、「保存」という用語は、それによって化学的または物理的薬剤が物質の生物劣化を防ぐプロセスを指す。本明細書では、「保存剤」という用語は、物質／材料の生物劣化を引き起こすことのできる微生物の増殖を阻害する薬剤を指す。
【００４３】
本明細書では、「抗微生物」とは、微生物の増殖の抑制または死滅を指す。
【００４４】
本明細書では、「抗生物質」という用語は、希釈液が細菌および他の微生物の増殖を死滅または阻害する能力を有する、微生物から産生される有機化学物質を指す。
【００４５】
本明細書では、「抗菌剤（Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ）」という用語は、殺菌剤（ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｄｅ）と同じ意味であり、細菌を死滅させ、生体組織に適用される薬剤を指す。
【００４６】
本明細書では、「消毒剤」という用語は、感染を防ぐ薬剤を指し、通常は化学的薬剤であるが、物理的薬剤であることもある。「消毒剤」という用語は、無生物に適用される物質を指す。
【００４７】
使用条件下、たとえば組成物の調製および使用ｐＨにおいて、ビグアニド化合物はイオン形態である。薬剤としてまたは獣医用として許容される適切なイオンの塩には、これに限定されるものではないが、薬剤として許容される無機酸の塩、たとえば塩酸、硫酸、リン酸、ホスホン酸、ホスファニル酸（ｐｈｏｓｐｈａｎｉｌａｔｅ）、硝酸、炭酸、ホウ酸、スルファミン酸、スルホン酸、および臭化水素酸などの塩、または薬剤として許容される有機酸の塩、たとえば酢酸、プロピオン酸、酪酸、酒石酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、クエン酸、乳酸、粘液酸、グルコン酸、安息香酸、コハク酸、シュウ酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、（４−アミノフェニル）ホスホン酸、フェニルホスホン酸、サリチル酸、スルファニル酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、エデト酸、ステアリン酸、パルミチン酸、オレイン酸、ラウリン酸、パントテン酸、タンニン酸、アスコルビン酸、および吉草酸などの塩が含まれる。好ましい塩には、塩酸、ホウ酸、スルホン酸、酢酸、乳酸、ホスファニル酸、グルコン酸、クエン酸、および酒石酸の塩が含まれる。
【００４８】
好ましくは、キレート剤は、ナトリウム、リチウム、ルビジウム、セシウム、カルシウム、マグネシウム、バリウム、セリウム、コバルト、銅、鉄、マンガン、ニッケル、ストロンチウム、または亜鉛などの１価または多価金属イオンを封鎖することができ、薬剤としてまたは獣医用として許容される任意の化合物から選択される。適切なキレート剤には、これに限定されるものではないが、アミノカルボン酸およびそれらの塩、たとえばエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ニトリロ三酢酸、ニトリロトリプロピオン酸、ジエチレントリアミン五酢酸、２−ヒドロキシエチル−エチレンジアミン三酢酸、１，６−ジアミノ−ヘキサメチレン−四酢酸、１，２−ジアミノ−シクロヘキサン四酢酸、Ｏ，Ｏ’−ビス（２−アミノエチル）−エチレングリコール−四酢酸、１，３−ジアミノプロパン−四酢酸、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシベンジル）エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ−二酢酸、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−二酢酸、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−ジプロピオン酸、トリエチレンテトラアミン六酢酸、７，１９，３０−トリオキサ−１，４，１０，１３，１６，２２，２７，３３−オクタアザビシクロ［１１，１１，１１］ペンタトリアコンタン（Ｏ−ビス−トレン）、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−ビス（メチレンホスホン酸）、イミノ二酢酸、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）グリシン（ＤＨＥＧ）、１，３−ジアミノ−２−ヒドロキシプロパン−四酢酸、１，２−ジアミノプロパン−四酢酸、エチレンジアミン−テトラキス（メチレンホスホン酸）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸およびトリエチレンテトラミン−六酢酸、デフェロキサミン、ジメルカプロール、クエン酸およびその塩、たとえばクエン酸亜鉛、ペニシラミンおよびその塩、ビホスホネート、たとえばエディトロネート（ｅｄｉｔｒｏｎａｔｅ）など、または大環状ポリエーテル、たとえば文献（Ｉｚａｔｔ  Ｒ．Ｍ．等、１９９５）に記載されているものなどが含まれる。特に好ましいキレート剤は、薬剤としてまたは獣医用として許容されるＥＤＴＡの塩および混合塩、たとえば二ナトリウム、三ナトリウム、四ナトリウム、二カリウム、三カリウム、リチウム、二リチウム、アンモニウム、二アンモニウム、カルシウム、およびカルシウム二ナトリウム塩など、もっとも好ましくはＥＤＴＡの二ナトリウムまたは四ナトリウム塩、特にＥＤＴＡ二ナトリウムである。
【００４９】
本発明に用いるのに適した緩衝剤は、薬剤としてまたは獣医用として許容されるものである。好ましい緩衝剤には、これに限定されるものではないが、アミン、たとえばトリエチルアミン、トリエチレンテトラミン、テトラエチルエチレンジアミン、テトラメチレンジアミン、およびＮ，Ｎ’−ジエチル−Ｎ，Ｎ’−ビス（スルホプロピル）エチレンジアミン（ＤＥＳＰＥＮ）など、ピペラジン、たとえばＮ，Ｎ’−ジエチルピペラジン、およびピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（アルキルスルホン酸）など、ヒスタジン（ｈｉｓｔａｄｉｎｅ）、イミダゾール、モルホリン、たとえば（Ｎ−モルホリノ）アルキルスルホン酸、たとえば２−モルホリンエタンスルホン酸および４−モルホリンプロパンスルホン酸など、アミノアルコール、たとえば２−アミノエタノールおよび２−アミノ−２−メチル−１−プロパノール（ＡＭＰ）、およびトリエタノールアミンなど、アミノポリオール、ホウ酸、重炭酸塩、たとえば重炭酸ナトリウムなど、塩化ナトリウム、メグルミン、リン酸緩衝剤、クエン酸緩衝剤、およびそれらの塩が含まれる。特に好ましい緩衝剤は、アミノポリオール、たとえばトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（Ｔｒｉｓ、ＴＨＡＭ、トロメタミン、およびトロメタモールとも称される）、２−アミノ−２−メチル−１，３−プロパンジオール（ＡＭＰＤとも称される）、２，２−ビス（ヒドロキシメチル）−２，２’，２’’−ニトリロトリエタノール（ＢＩＳ−ＴＲＩＳとも称される）、および１，３−ビス（トリス［ヒドロキシメチル］メチルアミノ）プロパン（ＢＩＳ−ＴＲＩＳプロパン、およびＢＴＰとも称される）、トリエタノールアミン、ならびにそれらの塩、およびそれらの混合物である。特に好ましい緩衝剤は、Ｔｒｉｓである。好ましい実施形態において、組成物はｐＨ３から９、もっとも好ましくはｐＨ５から８に緩衝されるべきである。いくつかの実施形態において、ｐＨは約ｐＨ８である。他の実施形態において、ｐＨは６から７である。
【００５０】
好ましい実施形態において、ビスまたはポリマービグアニドは、組成物の０．０００１重量％（１ｐｐｍ）から１０重量％、好ましくは０．００１から５重量％、もっとも好ましくは０．００１から２重量％、特に約０．０２重量％から０．２重量％の濃度で存在する。これに限定されるものではないが、クロルヘキシジンの使用を含むいくつかの実施形態において、ビスまたはポリマービグアニドの濃度は、０．０２重量％超から０．５重量％、特に０．０５から０．２重量％、または０．１から０．２重量％の範囲である。
【００５１】
存在するキレート剤の量は、そのキレート剤の性質、および細菌細胞壁からイオンをキレートする有効性によって決まる。キレート剤は通常、組成物の０．０００１重量％（１ｐｐｍ）から５重量％、好ましくは０．０５から２重量％、もっとも好ましくは０．１から０．２重量％、特に約０．１２重量％の濃度で存在する。
【００５２】
緩衝剤の量は、その緩衝剤の性質、およびその組成物に必要とされるｐＨによって決まる。いくつかの実施形態において、緩衝剤は通常、組成物の０．０００１重量％（１ｐｐｍ）から５重量％、好ましくは０．０１から２重量％、もっとも好ましくは０．１から１重量％、特に約０．６重量％の濃度で存在する。他の実施形態において、緩衝剤は、リットル当たり０．０００１モルから５モル、好ましくはリットル当たり０．００１から２モル、もっとも好ましくはリットル当たり０．０１から０．１モル、特にリットル当たり約０．０５モルの範囲の濃度で存在する。
【００５３】
一実施形態において、組成物はさらに、その組成物の抗微生物活性を増強する添加剤を含むことができる。そのような添加剤には、プロピレングリコール、グリセリン、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、抗生物質、あるいはプロピレングリコール、および／またはポリプロピレングリコール、および／またはポリエチレングリコール、および／またはグリセリン、および／または抗生物質の混合物が含まれる。
【００５４】
他の実施形態において、本発明の方法は、抗生物質を哺乳動物に投与する次のステップをさらに含む。適切な抗生物質には、これに限定されるものではないが、フルオロキノロン類、たとえばシプロフロキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、エノキサシン、ペルフロキサシン（ｐｅｒｆｌｏｘａｃｉｎ）、フレロキサシン、エンロフロキサシン、マルボフロキサシン、サラフロキサシン、オルビフロキサシン、ダノフロキサシンなど、アミノグリコシド類、たとえばストレプトマイシン、ネチルマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、トブラマイシン、アミカシン、シソマイシン、リボスタマイシン、ジベカシン、フラマイセチン、ゲンタマイシンなど、ペニシリンおよびアミノペニシリン類、たとえばペニシリン、アンピシリン、アモキシリン、ナフシリン、オキサシリン、およびチカルシリンなど、セファロスポリン類、たとえばセフトリアキソン、セファレキシン、セファドロキシル、およびセフチオフルなど、β−ラクタム類、たとえばペニシリンまたはアミノペニシリン類と併せて用いることができるクラブラン酸など、マクロライド類、たとえばクラリスロマイシン、およびエリスロマイシンなど、ならびに他の抗生物質、たとえばダクチノマイシン、クリンダマイシン、ナラジキシン酸（ｎａｌａｄｉｘｉｃ  ａｃｉｄ）、クロラムフェニコール、リファモピン（ｒｉｆａｍｏｐｉｎ）、クロファジミン、スペクチノマイシン、ポリミキシンＢ、コリスチン、ミノサイクリン、バンコマイシン、ハイグロマイシンＢまたはＣ、フシジン酸、トリメトプリム、およびセフォタキシムなどが含まれる。
【００５５】
本発明による局所投与は、液体または気化組成物を用いて行うことができる。適切な液体組成物には、ローション剤、軟膏、およびゲルが含まれ、さらに水溶液が含まれる。好ましい組成物は、水性組成物である。適切な気化組成物には、スプレー剤およびエアロゾル剤が含まれる。好ましくは、局所投与は、点耳剤の投与または洗浄によるか、あるいはトリガー式スプレーボトルによる送達などスプレーによる液体組成物の投与である。他の適切な適用手段は当分野で知られており、たとえば湿潤させたガーゼ、綿棒、綿、フォーム、スポンジ、または布である。特に好ましくは、液体組成物は洗浄によって適用される。特に利点となるのは、付着した膿およびロウ状の蓄積物を耳の内層から粉砕除去して、それを破壊し、他の薬剤の浸透を可能にし、耳道から洗い流す物理的なフラッシュ効果である。そのような液体洗浄組成物は、フラッシュアプリケータを用いて適用することができる。局所組成物に用いるのに適した担体には、これに限定されるものではないが、鉱油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン、乳化ロウ、ソルビタンモノステアレート、ポリソルベート２０、ポリソルベート６０、セチルエステル、ロウ、セテアリルアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコール、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン、および水が含まれる。特に好ましい担体は水である。
【００５６】
本明細書では、「有効量」とう用語は、所望の投与計画に従って投与されたとき、所望の治療活性または感染予防を提供する組成物の量に関する。投与は、分、時間、日、週、月、または年間隔で行うことができる。阻害有効量は、所望の投与計画に従って投与されたとき、感染に関与する微生物の増殖を防ぐのに充分な組成物の量である。治療有効量または処置有効量は、所望の投与計画に従って投与されたとき、少なくとも部分的に所望の治療効果を得るか、あるいは感染の発症を遅延、感染の進行を阻害、感染の発症または進行を部分的または完全に停止するか、あるいは最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を低減または相乗的相互作用を誘発することを含む、生物の抗生物質感受性の復帰または部分的復帰を可能にするのに充分な組成物の量である。組成物の予防有効量は、所望の投与計画に従って投与されたとき、少なくとも部分的に感染の発症を予防または遅延するのに充分な量である。
【００５７】
適切な投与量および投与計画は、担当医または獣医によって決定されることができ、感染の重篤度、ならびに治療される対象の一般的な年齢、健康状態、および体重によって決定される可能性がある。
【００５８】
本発明の組成物のもっとも単純な形態は、ポリマービグアニド、キレート剤、および緩衝剤からなる水性組成物であってよいが、この組成物は薬剤としてまたは獣医用として許容される他の添加剤、たとえば担体、希釈剤および賦形剤、抗炎症剤、抗アレルギー剤、および抗生物質なども含むことができる。適切な担体、希釈剤、および賦形剤には、必要に応じて、溶媒、分散剤、保存剤、浸透剤、界面活性剤、粘度調整剤、等張剤、および吸収剤などが含まれる。いくつかの溶媒、たとえば種々のアルコール（たとえばベンジルアルコール）は、敏感な鼓膜および／または保護内層の剥離した耳道への刺激作用があるため、耳道に局所投与されるべきではない。
【００５９】
好ましい実施形態において、組成物は、非イオン性、カチオン性、または両性界面活性剤、あるいはそれらの組み合わせを含む。適切な界面活性剤には、これに限定されるものではないが、ポリソルベート、アルコキシフェノールエトキシレート、ポロキサミン、およびベタインが含まれる。好ましい界面活性剤は、ノンオキシノール、オクトキシノール、リン脂質、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、およびコカミドプロピルベタインである。界面活性剤は通常、組成物の０．０００１重量％（１ｐｐｍ）から５重量％、好ましくは０．００１から２重量％、もっとも好ましくは０．０１から２重量％、特に約０．２重量％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、好ましい界面活性剤の量は、組成物の０．０１から０．０２重量％の範囲、特に組成物の約０．０１５重量％である。
【００６０】
滲出物および耳垢への浸透、または上皮層（表皮および真皮）への貫通を増進する適切な薬剤には、これに限定されるものではないが、ジメチルスルホキシド、ポリビニルピロリドン、およびミリスチン酸イソプロピルなどの軽油が含まれる。軽油はさらに耳で作られる油性の耳垢を溶解するが、これは有益な作用である。
【００６１】
適切な抗炎症剤には、これに限定されるものではないが、コルチコステロイド、たとえばプレドニゾロン、トリアムシノロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、およびモメタゾンなど、非ステロイド性抗炎症剤、たとえば、これに限定されるものではないが、イブプロフェン、ケトプロフェン、スプロフェン、カプロフェン、メロキシカム、トルフェナム酸、ピロキシカム、フィロコキシブ、およびケトロラクなどが含まれる。適切な抗アレルギー剤には、これに限定されるものではないが、クロモリン、エメダスチン、オロパタジン、およびシクロスポリンが含まれる。
【００６２】
適切な増粘剤には、これに限定されるものではないが、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ベントナイト、セルロース、たとえばメチルセルロース、エチルセルロース、およびカルボキシメチルセルロースなど、ならびにトラガカントが含まれる。
【００６３】
適切な抗生物質には、これに限定されるものではないが、フルオロキノロン類、たとえばシプロフロキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、エノキサシン、ペルフロキサシン（ｐｅｒｆｌｏｘａｃｉｎ）、フレロキサシン、エンロフロキサシン、マルボフロキサシン、サラフロキサシン、オルビフロキサシン、ダノフロキサシンなど、アミノグリコシド類、たとえばストレプトマイシン、ネチルマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、トブラマイシン、アミカシン、シソマイシン、リボスタマイシン、ジベカシン、フラマイセチン、ゲンタマイシンなど、ペニシリンおよびアミノペニシリン類、たとえばペニシリン、アンピシリン、アモキシリン、ナフシリン、オキサシリン、およびチカルシリンなど、セファロスポリン類、たとえばセフトリアキソン、セファレキシン、セファドロキシル、およびセフチオフルなど、β−ラクタム類、たとえばペニシリンまたはアミノペニシリン類と併せて用いることができるクラブラン酸など、マクロライド類、たとえばクラリスロマイシン、およびエリスロマイシンなど、ならびに他の抗生物質、たとえばダクチノマイシン、クリンダマイシン、ナラジキシン酸（ｎａｌａｄｉｘｉｃ  ａｃｉｄ）、クロラムフェニコール、リファモピン（ｒｉｆａｍｏｐｉｎ）、クロファジミン、スペクチノマイシン、ポリミキシンＢ、コリスチン、ミノサイクリン、バンコマイシン、ハイグロマイシンＢまたはＣ、フシジン酸、トリメトプリム、およびセフォタキシムなどが含まれる。
【００６４】
この組成物は、場合によって保存剤を含むことができる。多くの保存剤およびそれらの混合物が当業者に知られている。組成物に組み入れることのできる適切な保存剤には、これに限定されるものではないが、安息香酸ナトリウム、アルファトコフェロール、アスコルビン酸、ソルビン酸、安息香酸、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン、または亜硫酸水素ナトリウムが含まれる。いくつかの実施形態において、保存剤は、メチルパラベン、プロピルパラベン、またはそれらの混合物である。
【００６５】
本発明の好ましい実施形態において、イヌの外耳の感染を治療または予防する方法であって、
（ｉ）キレート剤、
（ｉｉ）緩衝剤、および
（ｉｉｉ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩を含む水性組成物の有効量を、イヌの外耳に局所投与することを含む方法が提供される。
【００６６】
さらなる実施形態によれば、イヌの外耳の感染を治療する薬剤の製造における、
（ｉ）水、
（ｉｉ）キレート剤、
（ｉｉｉ）緩衝剤、および
（ｉｖ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩の使用が提供される。
【００６７】
近代のイヌの耳道は長く回旋しており、したがって自己洗浄できない。イヌは感染を防ぐために、耳を充分に清浄に保つことができない。特に耳感染に感受性であるイヌは、長毛および垂耳を有する傾向にある。
【００６８】
イヌの耳感染の治療をさらに困難なものにしているのは、液滴または液体が外耳道に入ると、液体を除去するためにイヌが頭を振る反射である。耳道に投与されると迅速に作用する耳洗浄剤または組成物を有することが重要である。
【００６９】
他の好ましい実施形態において、
（ｉ）水、
（ｉｉ）キレート剤、
（ｉｉｉ）緩衝剤、および
（ｉｖ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩を含むが、ただし成分（ｉｖ）はクロルヘキシジンでない獣医用耳洗浄組成物が提供される。
【００７０】
好ましくは、ポリマービグアニドはＰＨＭＢであり、キレート剤はＥＤＴＡ二ナトリウムまたは四ナトリウムであり、緩衝剤はＴｒｉｓである。
【００７１】
さらに他の好ましい実施形態において、
（ｉ）水、
（ｉｉ）キレート剤、
（ｉｉｉ）緩衝剤、
（ｉｖ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩、および
（ｖ）保存剤を含み、
成分（ｉｖ）は、組成物の０．０２重量％超から０．５重量％の範囲の濃度で存在する獣医用耳洗浄組成物が提供される。
【００７２】
本明細書に記載した本発明には、特に記述した以外の変形および修正を加えられることを、当業者は理解するであろう。本発明はその精神および範囲内であるそのようなすべての変形および修正を含むことが理解される。
【００７３】
本発明を以下の実施例を参照して記載するが、これらの実施例は例示のためにのみ包含されるものであり、上に記載した本発明の一般性を制限するものではない。
【実施例】
【００７４】
組成物１
成分                            ｇ／ｌ
Ｔｒｉｓ                        ６．０５
ＥＤＴＡ二ナトリウム            １．２０
Ｃｏｓｍｏｃｉｌ  ＣＱ（商標）  １．０
プロピレングリコール            ２０．０
ポリソルベート２０              ２．０
リン酸                          ｐＨ８．０まで
精製水                          １ｌまで
約７５０ｇの精製水に、Ｔｒｉｓ、ＥＤＴＡ二ナトリウム、Ｃｏｓｍｏｃｉｌ  ＣＱ（商標）、ポリソルベート２０、およびプロピレングリコールを加え、溶解するまで攪拌する。リン酸でｐＨ８．０に調整する。最終量１ｌとなるように、精製水の残量を加える。
【００７５】
組成物２
成分                            ｇ／ｌ
Ｔｒｉｓ                        ６．０５
ＥＤＴＡ二ナトリウム            １．２０
Ｃｏｓｍｏｃｉｌ  ＣＱ（商標）  １．０
ポリソルベート２０              ２．０
リン酸                          ｐＨ８．０まで
精製水                          １ｌまで
約７５０ｇの精製水に、Ｔｒｉｓ、ＥＤＴＡ二ナトリウム、Ｃｏｓｍｏｃｉｌ  ＣＱ（商標）、ポリソルベート２０を加え、溶解するまで攪拌する。リン酸でｐＨ８．０に調整する。最終量１ｌとなるように、精製水の残量を加える。
【００７６】
組成物３
成分                            ｍｇ
Ｔｒｉｓ                        ３００
ＥＤＴＡ二ナトリウム            １２５
グルコン酸クロルヘキシジン      １３５
（２０％溶液として）
精製水                          ２５０ｇまで
約２００ｇの精製水に、Ｔｒｉｓ、ＥＤＴＡ二ナトリウム、グルコン酸クロルヘキシジンを加え、溶解するまで攪拌する。最終量２５０ｇとなるように、精製水の残量を加える。最終ｐＨ８．７。
【００７７】
2007532490.tif 000011
【００７８】
緩衝剤とエデト酸二ナトリウムを精製水に溶解する。塩酸でｐＨをほぼ中性に調整する。パラベンをプロピレングリコールに溶解し、バルクに添加する。コカミドプロピルベタインを添加する。Ｃｏｓｍｏｃｉｌ  ＣＱを添加する。容量まで水を添加し、ｐＨを確認する。
【００７９】
比較組成物１（Ｄｅｒｍａｐｅｔ  ＴｒｉｚＥＤＴＡとして購入）
成分                            ｍｇ
Ｔｒｉｓ                        ５３３
ＥＤＴＡ二ナトリウム            １４１
トリスＨＣｌ                    １７６
精製水                          １１２ｍｌまで
Ｔｒｉｓ、ＥＤＴＡ二ナトリウム、およびトリスＨＣｌを混合し、摩砕した。摩砕した混合物をボトルに入れ、１１２ｍｌの水を添加した。ボトルを１０秒間振とうして溶解し、その後、２時間静置した。ｐＨは７．９から８．１の間であった。
【００８０】
比較組成物２（ＤＶＭ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｔ８  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（商標）として購入）
成分                            ｇ／ｌ
Ｔｒｉｓ                        ４．７
トリスＨＣｌ                    ４．３
ＥＤＴＡ四ナトリウム            １．３
ノンオキシノール１２            ５．０
ＰＰＧ１２／ＰＥＧ５０          ５．０
ベンジルアルコール              １２．０
精製水                          １ｌまで
ＥＤＴＡ四ナトリウム、Ｔｒｉｓ、トリスＨＣｌ、ベンジルアルコール、ノンオキシノール１２、ならびにポリプロピレングリコール１２（ＰＰＧ１２）およびポリエチレングリコール５０（ＰＥＧ５０）を、攪拌しながら、ビーカーの水に段階的に添加した。ｐＨを８．５に調整し、水で容量を１ｌとした。
【００８１】
実施例１
１２の緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）細菌分離物を、臨床例から試料を得る大学および民間研究所から入手した。実際の臨床で利用可能な通常の抗生物質に対する最大耐性に関して、それらの分離物を選択した。
【００８２】
２種のＴｒｉｓＥＤＴＡ製剤（組成物１および比較組成物１）４ミリリットルを、特定の異なる種々の時間、１ｍｌ当たり（平均）１０８コロニー形成単位（ＣＦＵ）の生物を含有する１ｍｌの接種物に暴露した。その処理時間後、特定量を培地で継代培養し、３７℃のインキュベータで２４時間培養して、生存数（レシチンを含むＰＢＳ緩衝剤に希釈したＣＦＵ）を算出した。
【００８３】
結果はＲ％で表す。Ｒ％＝１００（１−Ｔａ／Ｃａｘ  Ｃｂ／Ｔｂ）であり、式中、Ｒ＝処理による微生物の減数。Ｔａ＝処理後の処理群における平均数。Ｔｂ＝処理前の処理群における平均数。Ｃａ＝処理後のコントロール群における平均数。Ｃｂ＝材料および方法による処理前のコントロール群における平均数。
【００８４】
結果を図１に示す。図１は、Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ製品である比較組成物１による暴露と比較して、Ｔｒｉｓ、ＥＤＴＡ、およびポリヘキサニドを含む組成物１に微生物を暴露したとき、微生物数が著しくかつ急速に減少することを示している。
【００８５】
実施例２
５つのスタフィロコッカスインターミディウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ）細菌分離物を、臨床例から試料を得る大学および民間研究所から入手した。
【００８６】
２種のＴｒｉｓＥＤＴＡ製剤（組成物１および比較組成物１）４ミリリットルを、特定の異なる種々の時間、１ｍｌ当たり（平均）１０８コロニー形成単位（ＣＦＵ）の生物を含有する１ｍｌの接種物に暴露した。その処理時間後、特定量を培地で継代培養し、３７℃のインキュベータで２４時間培養して、生存数（レシチンを含むＰＢＳ緩衝剤に希釈したＣＦＵ）を算出した。
【００８７】
結果は上記の実施例１に概説したとおり、Ｒ％で表す。
【００８８】
結果を図２に示す。
【００８９】
図２は、Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ製品である比較組成物１による暴露と比較して、Ｔｒｉｓ、ＥＤＴＡ、およびポリヘキサニドを含む組成物１に微生物を暴露したとき、微生物数が著しくかつ急速に減少することを示している。
【００９０】
実施例３
マラセジアパキデルマチス（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ  ｐａｃｈｙｄｅｒｍａｔｉｓ）酵母分離物を、臨床例から試料を得る民間研究所から入手した。
【００９１】
２種のＴｒｉｓＥＤＴＡ製剤（組成物１および比較組成物１）４ミリリットルを、特定の異なる種々の時間、１ｍｌ当たり（平均）１０５コロニー形成単位（ＣＦＵ）の生物を含有する１ｍｌの接種物に暴露した。その処理時間後、特定量を培地で継代培養し、３７℃のインキュベータで４８〜７２時間培養して、生存数（レシチンを含むＰＢＳ緩衝剤に希釈したＣＦＵ）を算出した。
【００９２】
結果は上記の実施例１に概説したとおり、Ｒ％で表す。
【００９３】
結果を図３に示す。
【００９４】
図３は、Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ製品である比較組成物１による暴露と比較して、Ｔｒｉｓ、ＥＤＴＡ、およびポリヘキサニドを含む組成物１に微生物を暴露したとき、酵母数が著しくかつ急速に減少することを示している。
【００９５】
実施例４
上記の実施例１で生存した生物を、臨床規格委員会（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄ）（ＮＣＣ  １９９０  ＭＡ−Ａ４）によるキルビー−バウアーディスク拡散法によって、抗微生物剤感受性に関して試験した。抗生物質感受性ディスク：シプロフロキサシン（ＣＩＰ）、アミカシン（ＡＫ）、ネオマイシン（Ｎ）、エンロフロキサシン（ＥＮＲ）、ポリミキシンＢ（ＰＢ）、クロラムフェニコール（Ｃ）、ゲンタマイシン（ＧＮ）、クラブロクス（Ｃｌａｖｕｌｏｘ）（ＡＭＣ）、チカルシリン（ＴＩＣ）、フラマイセチン（ＦＹ）、トリメトプリム（ＳＸＴ）、およびセフォタキシム（ＣＴＸ）。
【００９６】
抗微生物剤感受性試験は、臨床研究所規格委員会（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ）（ＮＣＣＬＳ、１９９０、ＭＡ−Ａ４）によって規格化された方法であるキルビー−バウアーディスク拡散法に従って表す。耐性からより感受性の状態に変化する分離物の％を表した。
【００９７】
結果を図４に示すが、これらの結果は、比較組成物１で処理した微生物の感受性と比較して、組成物１による処理後、抗生物質に対する微生物感受性が著しく増大したことを示している。
【００９８】
実施例５
通常の治療で効果のなかった耐性シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）外耳炎に罹患している１０頭のイヌを、組成物１または比較組成物１で前処置した。いずれかの溶液で耳道を洗い流す前後に、抗生物質感受性試験の培養試料を得た。次いで、実施例４で用いたものと同様の通常の薬剤で耳を再び処置した。
【００９９】
結果を図５に示すが、これらの結果は、比較組成物１で処置したイヌの耳に感染している微生物の感受性と比較して、組成物１で処置したとき、イヌの耳に感染しているシュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）微生物の感受性が著しく増大したことを示している。イヌを組成物１で処置したとき、副作用および聴器毒性は観察されなかった。
【０１００】
実施例６
４つの緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）細菌分離物を、臨床例から試料を得る大学および民間研究所から入手した。実際の臨床で利用可能な通常の抗生物質に対する最大耐性に関して、それらの分離物を選択した。
【０１０１】
３種のＴｒｉｓＥＤＴＡ製剤（組成物４、比較組成物１、および比較組成物２）４ミリリットルを、特定の異なる種々の時間、１ｍｌ当たり（平均）１０８コロニー形成単位（ＣＦＵ）の生物を含有する１ｍｌの接種物に暴露した。その処理時間後、特定量を培地で継代培養し、３７℃のインキュベータで２４時間培養して、生存数（レシチンを含むＰＢＳ緩衝剤に希釈したＣＦＵ）を算出した。
【０１０２】
結果は上記の実施例１に概説したとおり、Ｒ％で表す。
【０１０３】
結果を表１に示す。表１は、Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ製品である比較組成物と比較して、Ｔｒｉｓ、ＥＤＴＡ、およびポリヘキサニドを含む組成物４に微生物を暴露したとき、微生物数が著しくかつ急速に減少することを示している。
【０１０４】
【表１】
2007532490.tif 000012
【０１０５】
実施例７
２つのスタフィロコッカスインターミディウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ）細菌分離物を、臨床例から試料を得る大学および民間研究所から入手した。
【０１０６】
３種のＴｒｉｓＥＤＴＡ製剤（組成物４、比較組成物１、および比較組成物２）４ミリリットルを、特定の異なる種々の時間、１ｍｌ当たり（平均）１０８コロニー形成単位（ＣＦＵ）の生物を含有する１ｍｌの接種物に暴露した。その処理時間後、特定量を培地で継代培養し、３７℃のインキュベータで２４時間培養して、生存数（レシチンを含むＰＢＳ緩衝剤に希釈したＣＦＵ）を算出した。
【０１０７】
結果は上記の実施例１に概説したとおり、Ｒ％で表す。
【０１０８】
結果を表２に示す。表２は、Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ製品である比較組成物１または２による暴露と比較して、Ｔｒｉｓ、ＥＤＴＡ、およびポリヘキサニドを含む組成物４に微生物を暴露したとき、微生物数が著しくかつ急速に減少することを示している。
【０１０９】
【表２】
2007532490.tif 000013
【０１１０】
実施例８
２つの緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）細菌分離物を、臨床例から試料を得る大学および民間研究所から入手した。実際の臨床で利用可能な通常の抗生物質に対する最大耐性に関して、それらの分離物を選択した。
【０１１１】
５種のＴｒｉｓＥＤＴＡ製剤（組成物４、組成物５、組成物６、組成物７、および組成物８）４ミリリットルを、特定の異なる種々の時間、１ｍｌ当たり（平均）１０８コロニー形成単位（ＣＦＵ）の生物を含有する１ｍｌの接種物に暴露した。その処理時間後、特定量を培地で継代培養し、３７℃のインキュベータで２４時間培養して、生存数（レシチンを含むＰＢＳ緩衝剤に希釈したＣＦＵ）を算出した。
【０１１２】
結果は上記の実施例１に概説したとおり、Ｒ％で表す。
【０１１３】
結果を表３に示す。表３は、ＥＤＴＡおよびポリヘキサニドを含み、一連のアミノアルコールまたはアミノポリオール緩衝剤を含む組成物に微生物を暴露したとき、微生物の減数に相違のないことを示している。
【０１１４】
【表３】
2007532490.tif 000014
【０１１５】
実施例９
２つのプロテウス属（Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｓｐｐ．）細菌分離物を、臨床例から試料を得る大学および民間研究所から入手した。
【０１１６】
３種のＴｒｉｓＥＤＴＡ製剤（組成物４、比較組成物１、および比較組成物２）４ミリリットルを、特定の異なる種々の時間、１ｍｌ当たり（平均）１０８コロニー形成単位（ＣＦＵ）の生物を含有する１ｍｌの接種物に暴露した。その処理時間後、特定量を培地で継代培養し、３７℃のインキュベータで２４時間培養して、生存数（レシチンを含むＰＢＳ緩衝剤に希釈したＣＦＵ）を算出した。
【０１１７】
結果は上記の実施例１に概説したとおり、Ｒ％で表す。
【０１１８】
結果を表４に示す。表４は、Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ製品である比較組成物１または２による暴露と比較して、Ｔｒｉｓ、ＥＤＴＡ、およびポリヘキサニドを含む組成物４に微生物を暴露したとき、微生物数が著しくかつ急速に減少することを示している。
【０１１９】
【表４】
2007532490.tif 000015
【０１２０】
実施例１０
２つの大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）細菌分離物を、臨床例から試料を得る大学および民間研究所から入手した。
【０１２１】
３種のＴｒｉｓＥＤＴＡ製剤（組成物４、比較組成物１、および比較組成物２）４ミリリットルを、特定の異なる種々の時間、１ｍｌ当たり（平均）１０８コロニー形成単位（ＣＦＵ）の生物を含有する１ｍｌの接種物に暴露した。その時間の処理後、特定量を培地で継代培養し、３７℃のインキュベータで２４時間培養して、生存数（レシチンを含むＰＢＳ緩衝剤に希釈したＣＦＵ）を算出した。
【０１２２】
結果は上記の実施例１に概説したとおり、Ｒ％で表す。
【０１２３】
結果を表５に示す。表５は、Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ製品である比較組成物１または２による暴露と比較して、Ｔｒｉｓ、ＥＤＴＡ、およびポリヘキサニドを含む組成物４に微生物を暴露したとき、微生物数が著しくかつ急速に減少することを示している。
【０１２４】
【表５】
2007532490.tif 000016
【０１２５】
実施例１１
２つのマラセジアパキデルマチス（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ  ｐａｃｈｙｄｅｒｍａｔｉｓ）酵母分離物を、臨床例から試料を得る民間研究所から入手した。
【０１２６】
３種のＴｒｉｓＥＤＴＡ製剤（組成物４、比較組成物１、および比較組成物２）４ミリリットルを、特定の異なる種々の時間、１ｍｌ当たり（平均）１０５コロニー形成単位（ＣＦＵ）の生物を含有する１ｍｌの接種物に暴露した。その処理時間後、特定量を培地で継代培養し、３７℃のインキュベータで４８〜７２時間培養して、生存数（レシチンを含むＰＢＳ緩衝剤に希釈したＣＦＵ）を算出した。
【０１２７】
結果は上記の実施例１に概説したとおり、Ｒ％で表す。
【０１２８】
結果を表６に示す。表６は、Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ製品である比較組成物１または２による暴露と比較して、Ｔｒｉｓ、ＥＤＴＡ、およびポリヘキサニドを含む組成物４に微生物を暴露したとき、酵母数が著しくかつ急速に減少することを示している。
【０１２９】
【表６】
2007532490.tif 000017
【０１３０】
実施例１２
上記の実施例６で生存した生物を、臨床規格委員会（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄ）（ＮＣＣ  １９９０  ＭＡ−Ａ４）によるキルビー−バウアーディスク拡散法によって、抗微生物剤感受性に関して試験した。抗生物質感受性ディスク：アミカシン（ＡＫ）、ネオマイシン（Ｎ）、エンロフロキサシン（ＥＮＲ）、ポリミキシンＢ（ＰＢ）、ゲンタマイシン（ＧＮ）、チカルシリン（ＴＩＣ）、およびフラマイセチン（ＦＹ）。
【０１３１】
抗微生物剤感受性試験は、臨床研究所規格委員会（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ）（ＮＣＣＬＳ、１９９０、ＭＡ−Ａ４）によって規格化された方法であるキルビー−バウアーディスク拡散法に従って表す。耐性からより感受性の状態に変化する分離物の％を表した。
【０１３２】
結果を表７に示すが、これらの結果は、Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ製品である比較組成物１または２で処理した微生物の感受性と比較して、Ｔｒｉｓ、ＥＤＴＡ、およびポリヘキサニドを含む組成物４による処理後、抗生物質に対する微生物感受性が著しく増大したことを示している。
【０１３３】
【表７】
2007532490.tif 000018
【０１３４】
実施例１３
本明細書に記載のＴｒｉｓＥＤＴＡポリヘキサミド組成物、比較組成物１、および比較組成物２を、ＢＰ２００３  Ａｐｐｅｎｄｉｘ  ＸＶＩＣを用いて、抗微生物保存剤の有効性に関して試験した。比較組成物１および２とは対照的に、組成物４、ＴｒｉｓＥＤＴＡポリヘキサミド組成物は、ＢＰ抗微生物保存剤の要件を満たしている（基準Ａ）。
【０１３５】
【表８】
2007532490.tif 000019
【０１３６】
参考：
Ashworth C.D. and Nelson D.R., 1990, Antimicrobial potentiation of irrigation solutions containing tris-(hydroxymethyl)aminomethane-EDTA, J. Am. Vet. Med. Assoc., 197(11), 1513-1514.
Aursnes J. 1981 a. Vestibular damage from chlorhexidine in guinea pigs. Acta Otolaryngology 92. 89-100.
Aursnes J. 1981 b. Cochlear damage from chlorhexidine in guinea pigs. Acta Otolaryngology 92. 259-271.
Block S.S., 2001 Disinfection, Sterilization and Preservation. Chapter 2 DEFINITION of TERMS in the 5th edition published by LIPINCOTT WILLIAMS & WILKINS page 19 to 31.
East G.C., McIntyre J.E., Shao J., 1997, Polymer, 38(15), 3973-3984
Facia A.M., Marfei G., Re. G., 1997, Potentiating effect of EDTA-Tris on the activity of antibiotics against resistent bacteria associated with otitis, dermatitis and cystitis, J. Small Animal Practice, 38, 243-245.
Facia A.M., Nebbia P., Re G., 1993, Potentiation of the in-vitro activity of some antimicrobial agents against selected Gram-negative bacteria by EDTA-tromethamine, Veterinary Research Communication, 17, 77-84.
Farng R.K., Mrha S., 2003, Antimicrobial wash and carrier solutions and uses thereof, WO 03/086332.
Foster A. and DeBoer D., 1998, The role of pseudomonas in canine ear disease, Compendium on Continuing Education, 20(8), 909-918.
Gotthelf N., 2003, evaluation of the in-vitro effects of tris-EDTA on the minimum inhibitory concentration (M1C) of enrofloxacin against ciprofloxacin resistant Pseudomonas aureglnosa, Proceedings of the 19th Annual Congress of ESUD/ECVD, Tenerfife, 2003, p145.
Green C., 1984, The clinical use of topical buffered EDTA solutions in the treatment of Gram negative bacterial infections of dogs and cats. Antimicrobial chemotherapy in 'Clinical Microbiology of Infectious Diseases of the Cat and Dog, p171, Saunders, Philadelphia.
Harper W.E.S. and Epis J.A., 1987, Effect of Chlorhexidine/EDTA/Tris against bacterial isolates from clinical specimens, Microbios, 51, 107-112.
Harvey R.G., Harari J., Delauche A.J., 2001, Ear Diseases of the Dog and Cat, Manson Publishing, page 216.
Ikeda T., Yamaguchi H, Tazuke S., 1984, Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 26(2), 139-144.
Izatt R.M., Pawlak K., Bradshaw J.S., 1995, Thermodynamic and Kinetic data for Macrocycle Interaction with cations, anions and neutral molecules, Chem. Rev., 95, 1261.
Kirby-Bauer disc diffusion method is the standardised method by the National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS, 1990, MA-A4) in Quinn P.J., Carter, M.E.
Merchant S.R., 1994, Ototoxicity, Veterinary Clinics of North America: Small Animal Practice, 24(5), 976.
Merchant S.R., Neer, T.M., Tedford, B.L., Twedt A.C., Cheramie P.M., Strain G.M., 1993, Ototoxicity Assessment of a chlorhexidine otic preparation in dogs, Progress in Veterinary Neurology, 4(3), 72-75.
Neer T.M., 1982, Otitis media, Compendium of continuing Education, Vo14, p410-417 Facia A.M., Nebbia P., Re G., 1993, Veterinary Research Communication, Vol 17, 77-84.
Paterson S., 2003 New Concepts in Ear Cleaning TrizEDTA (EDTA tris) DermaPet articles of Interest. Found at: http://www.dermapet.com/articles/new_concepts.html
Pearman J.W., Bailey M., Harper W.E.S., 1988, Comparison of the Efficacy of "Trisdine" and Kanamycin-Colistin Bladder Instillations in Reducing Bacteriuria during Intermittent Catheterisation of Patients with Acute Spinal Cord Trauma, British J. of Urology, 62, 140-144.
Quinn P.J., Carter M.E., Antimicrobial Agents in: Clinical Veterinary Microbiology, editors Markey B., Carter G.R., 1994, Mosby-Yearbook Europe Ltd., 95-102.
Rohn G.N., Meyerhoff W.L., Wright C.G., 1993, Ototoxicity of Topical Agents, Otolaryngology Clinics of North America, 26(5), 747-758.
Sparkes T.A., Kemp D.T., Wooley R.E., Gibbs P.S., 1994, Antimicrobial effects of combinations of EDTA-Tris and amikacin or neomycin on the microorganism associated with Otitis externa in dogs, Veterinary Research Communications, 18, 241-249.
Willoughby K., 1989. Chlorhexadine and ototoxicity in cats. Veterinary Record 124 page 547.
Wooley R.E., Jones M.S., Gilbert J.P., Shotts E.B., 1983a, In-vitro effect of combinations of anti-microbial agents and EDTA- tromethamine on certain Gram positive bacteria, American Journal of Veterinary Research, 44(11), 2167-2169.
Wooley R.E., Jones M.S., 1983b, Action of EDTA-TRIS and antimicrobial agent combinations on selected pathogenic bacteria, Veterinary Microbiology, 8,271-280.
【図面の簡単な説明】
【０１３７】
【図１】図１は、暴露時間１５秒および３０秒での、Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ組成物と比較したポリヘキシニド／Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ組成物の緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）の平均減数（Ｒ％）を示すグラフである。
【図２】図２は、暴露時間１５秒および３０秒での、Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ組成物と比較したポリヘキシニド／Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ組成物のスタフィロコッカスインターミディウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ）の平均減数（Ｒ％）を示すグラフである。
【図３】図３は、暴露時間１５秒での、Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ組成物と比較したポリヘキシニド／Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ組成物のマラセジアパキデルマチス（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ  ｐａｃｈｙｄｅｒｍａｔｉｓ）の平均減数（Ｒ％）を示すグラフである。
【図４】図４は、Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ組成物と比較した、ポリヘキシニド／Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ組成物を含有する耳洗浄製剤に暴露した緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）のｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける抗生物質感受性の復帰を示すグラフである。
【図５】図５は、Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ組成物と比較した、ポリヘキシニド／Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ組成物を含有する耳洗浄製剤に暴露した緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）のｉｎ  ｖｉｖｏにおける抗生物質感受性の復帰を示すグラフである。
【図１】
2007532490.tif 000026
【図２】
2007532490.tif 000027
【図３】
2007532490.tif 000028
【図４】
2007532490.tif 000029
【図５】
2007532490.tif 000030
【手続補正書】
【提出日】平成18年12月12日(2006.12.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物（人間を除く）において外耳の感染を阻害、治療、または予防する方法であって、
（ｉ）キレート剤、
（ｉｉ）緩衝剤、および
（ｉｉｉ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩
を含む組成物の有効量を、哺乳動物の外耳に局所投与することを含む方法。
【請求項２】
ビス（ビグアニド）が、式（ＩＩ）の化合物、またはその互変異性体、あるいは薬剤としてまたは獣医用として許容されるその塩である請求項１に記載の方法。
【化１】
2007532490.tif 000031
式中、Ｚは、２価架橋基であり、Ｘ１およびＸ２は独立して、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクリル、または置換されていてもよいヘテロアリールから選択される。
【請求項３】
式（ＩＩ）の化合物において、Ｘ１およびＸ２が共に４−クロロフェニルまたは３−エチルヘキサンであり、Ｚが−（ＣＨ２）６−である請求項２に記載の方法。
【請求項４】
ポリマービグアニドが、式（ＩＩＩ）の化合物、またはその互変異性体、あるいは薬剤としてまたは獣医用として許容されるその塩である請求項１に記載の方法。
【化２】
2007532490.tif 000032
式中、Ｚは、不在であるか、または２価架橋基であり、各Ｚは、ポリマーを通じて同一でも異なっていてもよく、
ｎは、少なくとも３であり、
Ｘ３およびＸ４は独立して、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ−ＣＮ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロシクリル、および置換されていてもよいヘテロアリールから選択される。
【請求項５】
ポリマービグアニドが、式（ＩＶ）の化合物、またはその互変異性体、あるいは薬剤として許容されるその塩である請求項４に記載の方法。
【化３】
2007532490.tif 000033
式中、ｎは、３から５００の整数であり、Ｘ３およびＸ４は独立して、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ−ＣＮ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロシクリル、および置換されていてもよいヘテロアリールから選択される。
【請求項６】
式（ＩＶ）の化合物において、ｎが３から１５の平均値を有する請求項５に記載の方法。
【請求項７】
キレート剤が、アミノカルボン酸、デフェロキサミン、ジメルカプロール、クエン酸、ペニシラミン、大環状ポリエーテル、およびビホスホネート、ならびにそれらの塩、およびそれらの混合物から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項８】
キレート剤が、ＥＤＴＡ二ナトリウム、ＥＤＴＡ三ナトリウム、ＥＤＴＡ四ナトリウム、ＥＤＴＡ二カリウム、ＥＤＴＡ三カリウム、ＥＤＴＡリチウム、ＥＤＴＡ二リチウム、ＥＤＴＡアンモニウム、ＥＤＴＡ二アンモニウム、およびＥＤＴＡカルシウム二ナトリウムである請求項７に記載の方法。
【請求項９】
キレート剤が、ＥＤＴＡ二ナトリウムである請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
緩衝剤が、トリエチルアミン、トリエチレンテトラミン、テトラエチルエチレンジアミン、テトラメチレンジアミン、Ｎ，Ｎ’−ジエチル−Ｎ，Ｎ’−ビス（スルホプロピル）−エチレンジアミン、Ｎ，Ｎ’−ジエチルピペラジン、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（アルキルスルホン酸）、（Ｎ−モルホリノ）アルキルスルホン酸、２−アミノエタノール、２−アミノ−２−メチル−１−プロパノール、トリエタノールアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、２−アミノ−２−メチル−１，３−プロパンジオール、ビス−（２−ヒドロキシエチル）イミノ−トリス（ヒドロキシメチル）メタン、２−ジメチルアミノ−２−メチル−１−プロパノール、２−アミノ−２−エチル−１，３−プロパンジオールおよび１，３−ビス（トリス［ヒドロキシメチル］メチルアミノ）プロパン、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）−２−アミノエタンスルホン酸、Ｎ−［トリス（ヒドロキシメチル）メチル］−３−アミノプロパンスルホン酸、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）グリシン、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）タウリン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン  Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）メチルグリシンおよびそれらの塩およびそれらの混合物から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
緩衝剤が、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンおよび／またはその塩である請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
抗生物質を哺乳動物に投与するステップをさらに含む請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
哺乳動物が犬である請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
（ｉ）キレート剤、
（ｉｉ）緩衝剤、および
（ｉｉｉ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩
を含むが、ただし成分（ｉｉｉ）はクロルヘキシジンでない医薬用または獣医用の耳洗浄組成物。
【請求項１５】
ビス（ビグアニド）が、式（ＩＩ）の化合物、またはその互変異性体、あるいは薬剤としてまたは獣医用として許容されるその塩である請求項１４に記載の耳洗浄組成物。
【化４】
2007532490.tif 000034
式中、Ｚは、２価架橋基であり、Ｘ１およびＸ２は独立して、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクリル、または置換されていてもよいヘテロアリールから選択される。
【請求項１６】
式（ＩＩ）の化合物において、Ｘ１およびＸ２が共に３−エチルヘキサンであり、Ｚが−（ＣＨ２）６−である請求項１５に記載の耳洗浄組成物。
【請求項１７】
ポリマービグアニドが、式（ＩＩＩ）の化合物、またはその互変異性体、あるいは薬剤としてまたは獣医用として許容されるその塩である請求項１４に記載の耳洗浄組成物。
【化５】
2007532490.tif 000035
式中、Ｚは、不在であるか、または２価架橋基であり、各Ｚは、ポリマーを通じて同一でも異なっていてもよく、
ｎは、少なくとも３であり、
Ｘ３およびＸ４は独立して、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ−ＣＮ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロシクリル、および置換されていてもよいヘテロアリールから選択される。
【請求項１８】
ポリマービグアニドが、式（ＩＶ）の化合物、またはその互変異性体、あるいは薬剤として許容されるその塩である請求項１７に記載の耳洗浄組成物。
【化６】
2007532490.tif 000036
式中、ｎは、３から５００の整数であり、Ｘ３およびＸ４は独立して、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ−ＣＮ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロシクリル、および置換されていてもよいヘテロアリールから選択される。
【請求項１９】
式（ＩＶ）の化合物において、ｎが３から１５の平均値を有する請求項１８に記載の耳洗浄組成物。
【請求項２０】
キレート剤が、アミノカルボン酸、デフェロキサミン、ジメルカプロール、クエン酸、ペニシラミン、大環状ポリエーテル、およびビホスホネート、ならびに薬剤としておよび獣医用として許容されるそれらの塩から選択される請求項１４に記載の耳洗浄組成物。
【請求項２１】
キレート剤が、ＥＤＴＡ二ナトリウム、ＥＤＴＡ三ナトリウム、ＥＤＴＡ四ナトリウム、ＥＤＴＡ二カリウム、ＥＤＴＡ三カリウム、ＥＤＴＡリチウム、ＥＤＴＡ二リチウム、ＥＤＴＡアンモニウム、ＥＤＴＡ二アンモニウム、およびＥＤＴＡカルシウム二ナトリウムである請求項２０に記載の耳洗浄組成物。
【請求項２２】
キレート剤が、ＥＤＴＡ二ナトリウムである請求項２１に記載の耳洗浄組成物。
【請求項２３】
緩衝剤が、トリエチルアミン、トリエチレンテトラミン、テトラエチルエチレンジアミン、テトラメチレンジアミン、Ｎ，Ｎ’−ジエチル−Ｎ，Ｎ’−ビス（スルホプロピル）−エチレンジアミン、Ｎ，Ｎ’−ジエチルピペラジン、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（アルキルスルホン酸）、（Ｎ−モルホリノ）アルキルスルホン酸、２−アミノエタノール、２−アミノ−２−メチル−１−プロパノール、トリエタノールアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、２−アミノ−２−メチル−１，３−プロパンジオール、ビス−（２−ヒドロキシエチル）イミノ−トリス（ヒドロキシメチル）メタン、２−ジメチルアミノ−２−メチル−１−プロパノール、２−アミノ−２−エチル−１，３−プロパンジオールおよび１，３−ビス（トリス［ヒドロキシメチル］メチルアミノ）プロパン、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）−２−アミノエタンスルホン酸、Ｎ−［トリス（ヒドロキシメチル）メチル］−３−アミノプロパンスルホン酸、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）グリシン、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）タウリン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン  Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）メチルグリシンならびに薬剤としておよび獣医用として許容されるそれらの塩、およびそれらの混合物から選択される請求項１４に記載の耳洗浄組成物。
【請求項２４】
緩衝剤が、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンおよび／または薬剤としておよび獣医用として許容されるその塩である請求項２３に記載の耳洗浄組成物。
【請求項２５】
プロピレングリコール、グリセリン、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、抗生物質、コルチコステロイドおよび非ステロイド性抗炎症剤またはそれらの混合物から選択される、抗微生物活性を増強する添加剤および／または抗炎症剤をさらに含む請求項１４に記載の耳洗浄組成物。
【請求項２６】
哺乳動物の外耳の感染を治療または予防する薬剤の製造における、
（ｉ）キレート剤、
（ｉｉ）緩衝剤、および
（ｉｉｉ）少なくとも１種のビス（ビグアニド）またはポリマービグアニド、あるいはそれらの混合物、あるいは薬剤として許容されるそれらの塩
の使用。
【請求項２７】
哺乳動物が犬である請求項２６に記載の使用。
【国際調査報告】
2007532490.tif 000037
2007532490.tif 000038