(57)【要約】  トロンビンS2およびS3サブサイトに結合可能な疎水性部分に連結した中性トロンビンP1ドメインを有するボロン酸ならびにかかる酸の塩、プロドラッグおよびプロドラッグの塩から選択される化合物の経口投与形態、ここで該投与形態は該化合物の固相製剤を含み、液体調製物の作成のための該製剤の再構成に適合する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
トロンビンS2およびS3サブサイトに結合可能な疎水性部分に連結した中性トロンビンP1ドメインを有するボロン酸および該酸の塩、プロドラッグおよびプロドラッグの塩から選択される化合物の経口投与形態、ここで該投与形態は該化合物を含み、液体調製物の作成のための該製剤の再構成に適合する固相製剤を含む。
【請求項２】
トロンビンP1ドメインが中性アミノボロン酸残基を含む、請求項１の投与形態。
【請求項３】
ボロン酸が以下の式 (I)である、請求項１の投与形態:
【化１】
2007528381.tif 000065
［式中、
Yは、フラグメント CH(R9)-B(OH)2とともに、トロンビンの基質結合部位への親和性を有する部分を含む; および
R9は、1以上のエーテル結合が介在し、その酸素および炭素原子の総数が3、4、5または6である直鎖アルキル基である、またはR9は、−(CH2)m-W であり、ここでm は2、3、4または5であり、Wは-OHまたはハロゲン (F、Cl、BrまたはI）である］。
【請求項４】
R9がアルコキシアルキル基である、請求項３の投与形態。
【請求項５】
Yが以下を含む、請求項３の投与形態：
構造フラグメント -CH(R9)-B(OH)2に結合したアミノ基、および
該アミノ基に連結し、該構造フラグメントとともに、トロンビンの基質結合部位への親和性を有する疎水性部分。
【請求項６】
YがトロンビンのS2サブサイトに結合するアミノ酸を含み、該アミノ酸がトロンビンのS3サブサイトに結合する部分とN末端で連結している、請求項３−５のいずれかの投与形態。
【請求項７】
YがトロンビンのS3およびS2結合部位に結合するN末端保護されていてもよいジペプチドであり、酸中のペプチド結合が、鎖内または環内に窒素、酸素または硫黄を含有してもよくハロ、ヒドロキシおよびトリフルオロメチルから選択される置換基で置換されていてもよい C1-C13ヒドロカルビル基により独立してN置換されていてもよい、請求項６の投与形態、および所望により、該ジペプチドがN末端保護されており、および／または酸中の全てのペプチド結合が非置換である該投与形態。
【請求項８】
S3結合アミノ酸残基が(R)-配置であり、S2結合残基が(S)-配置であり、かつフラグメント−NHCH(R9)-B(OH) が(R)-配置である、請求項７の投与形態。
【請求項９】
該化合物が該酸の医薬上許容される塩基付加塩である、請求項１−８のいずれかの投与形態。
【請求項１０】
投与前に、経口投与用の液体へと再構成されるか、または口腔内で再構成されるのに適合した経口医薬投与形態であって、以下の式 (III)のボロン酸ならびにその塩、プロドラッグおよびプロドラッグの塩から選択される化合物を含む投与形態：
【化２】
2007528381.tif 000066
［式中、
Xは、H (NH2を形成する) またはアミノ保護基である；
aa1は、20を超えない炭素原子を含有するヒドロカルビル側鎖を有し、かつ13までの炭素原子を有する少なくとも１の環状基を含むアミノ酸である；
aa2は、4〜6員環を有するイミノ酸である；
R1は、式 -(CH2)s-Z の基であり、ここでsは2、3または4であり、Zは-OH、-OMe、-OEtまたはハロゲン (F、Cl、BまたはI)である］。
【請求項１１】
aa1が、Phe、Dpaおよびそれらの全体的または部分的水素化アナログから、所望によりDpa、Phe、DchaおよびChaから選択される、例えば(R)-Pheまたは(R)-Dpaである、請求項１０の投与形態。
【請求項１２】
aa2が以下の式 (IV) のイミノ酸： 
【化３】
2007528381.tif 000067
［式中、R11 は -CH2-、-CH2-CH2-、-CH2=CH2-、-S-CH2-、-S-C(CH3)2-または −CH2-CH2-CH2-であり、環が5または6員のとき、その基は１以上の-CH2- 基において1〜3のC1-C3 アルキル基により置換されていてもよい］の残基である、請求項１０または１１の投与形態、および所望により、aa2が(S)-プロリン残基である、例えばaa1-aa2が(R)-Phe-(S)-Proである、請求項１０または１１の投与形態。
【請求項１３】
aa1が(R)-配置であり、および／またはaa2が(S)-配置であり、および／またはフラグメント -NH-CH(R1)-B(OH)2が(R)-配置である、請求項１０−１２のいずれかの投与形態。
【請求項１４】
R1 が2-ブロモエチル、2-クロロエチル、2-メトキシエチル、3-ブロモプロピル、3-クロロプロピルまたは3-メトキシプロピルである、例えば3-メトキシプロピルである、請求項１０−１３のいずれかの投与形態。
【請求項１５】
X がR6-(CH2)p-C(O)-、R6-(CH2)p-S(O)2-、R6-(CH2)p-NH-C(O)-、またはR6-(CH2)p-O-C(O)-［式中、ｐは0、1、2、3、4、5または6であり、R6はHまたは5〜13員環状基であり、該5〜13員環状基は、1以上（例えば1、2、3、4または5）のハロゲン（例えばF)により、例えば少なくとも4位において、置換されていてもよく、および／またはアミノ、ニトロ、ヒドロキシ、C5-C6環状基、C1-C4アルキル、および鎖内にOを含有する、および／または該環状基に鎖内のOを介して連結するC1-C4アルキルから選択される1、2または3の置換基に置換されていてもよく、前記アルキル基はハロゲン、アミノ、ニトロ、ヒドロキシおよびC5-C6環状基から選択される置換基により置換されていてもよい］である、請求項１０−１４のいずれかの投与形態、および所望により、該5〜13員環状基が芳香族またはヘテロ芳香族である、例えばフェニルまたは６員ヘテロ芳香族基である、例えばXがベンジルオキシカルボニルである、該投与形態。
【請求項１６】
ボロン酸が以下の式 (VIII)である、請求項１０または１５の投与形態:
X-(R)-Phe-(S)-Pro-(R)-Mpg-B(OH)2      (VIII)。
【請求項１７】
塩がボロン酸と金属との塩を含む、請求項９−１６のいずれかの投与形態。
【請求項１８】
金属がアルカリ金属塩、例えばナトリウム、カリウムまたはリチウムを含む、請求項１７の投与形態。
【請求項１９】
ペプチドボロン酸から誘導されるボロネートイオンを含み、かつ一価の負電荷を有するボロネートイオンに一致する化学量を有する、請求項１−１８のいずれかの投与形態。
【請求項２０】
以下を含む、請求項１−１９のいずれかの投与形態：
該化合物を含有し、粉末または顆粒の形態である医薬製剤；および
該製剤を含有し、該製剤がそこから再構成のため調剤される密閉容器。
【請求項２１】
製剤が粉末の形態であり、流動助剤または流動促進剤を含む、請求項２０の投与形態。
【請求項２２】
製剤が顆粒の形態であり、結合剤を含む、請求項２０の投与形態。
【請求項２３】
容器が小袋である、請求項２０−２２のいずれかの投与形態。
【請求項２４】
該化合物および発泡システムを含有する発泡錠の形態の医薬製剤を含む、請求項１−１９のいずれかの投与形態。
【請求項２５】
該化合物を含有する即時融解医薬製剤を含む、請求項１−１９のいずれかの投与形態。
【請求項２６】
ボロン酸を基準として計算して約0.2〜約1.5 mol、例えば約0.35〜約1 molの該化合物を含む、請求項２０−２５のいずれかの投与形態。
【請求項２７】
抗菌性保存剤および香料を含む、請求項１−２６のいずれかの投与形態。
【請求項２８】
容量約50ml〜約150mlの溶液の作成のため再構成されるのに適合している、請求項１−２３、または請求項２６もしくは請求項２６に従属しない請求項２７のいずれかの投与形態。
【請求項２９】
酸 Cbz-(R)-Phe-(S)-Pro-(R)-Mpg-B(OH)2の医薬上許容される塩基付加塩を含む医薬製剤であって、小袋中の粉末または顆粒の形態、または発泡錠の形態である、製剤。
【請求項３０】
以下を含む、血栓症を予防するための経口投与形態を製造する方法：
トロンビンS2およびS3サブサイトに結合可能な疎水性部分に連結した中性トロンビンP1ドメインを有するボロン酸と、塩基性金属化合物、例えば金属水酸化物またはカルボナート、およびpKbが少なくとも7の有機窒素含有化合物からなる群より選択される塩基とを反応させ、反応産物を形成させること；および
該反応産物を固相製剤へと製剤化すること、ここで該製剤は該反応産物を含み、液体調製物の作成のための該製剤の再構成に適合している。
【請求項３１】
飲用調製物、例えば飲用液の作成のため再構成される医薬を製造するための、請求項１−１９のいずれかに定義される化合物の使用。
【請求項３２】
医薬が、人工透析を受けている患者の人工透析回路における血栓症の予防に使用される、請求項３１の使用。
【請求項３３】
医薬が、疑われる血栓事象の緊急処置のためのものである、請求項３１の使用。
【請求項３４】
経口投与のための液体調製物、好ましくは飲用調製物へと固相製剤を再構成することを含む、抗凝固物質調製物を調製する方法であって、該固相製剤が以下を含む方法：
a) (a) 以下の式 (I)のボロン酸、(b) そのボロネートアニオン、および(c) それらのいずれかの平衡形態 (例えば無水物)、ならびにそれらの組み合わせから選択される第１種：
【化４】
2007528381.tif 000068
［式中、
Yは、アミノボロン酸残基 -NHCH(R9)-B(OH)2とともに、トロンビンの基質結合部位への親和性を有する疎水性部分を含む; および
R9は、1以上のエーテル結合が介在し、その酸素および炭素原子の総数が3、4、5または6である直鎖アルキル基である、または R9は、−(CH2)m-W であり、ここでmは2、3、4または5であり、Wは-OHまたはハロゲン (F、Cl、BrまたはI）である］；および
b) 価nを有する医薬上許容される金属イオンおよび強塩基性有機窒素含有化合物からなる群から選択される第２種。
【請求項３５】
疾患の処置においてトロンビンを阻害する方法であって、それを必要とする被験体に経口にて治療上有効量の請求項１−１９のいずれかに定義される化合物を投与することを含み、該化合物が胃に入る前に固相製剤から溶液または懸濁液になる方法。
【請求項３６】
塩が、投与前に液体にて再構成されることにより、または口腔内の唾液中において、溶液または懸濁液になる、請求項３５の方法。
【請求項３７】
以下を含む、患者の人工透析回路における血栓症を予防する方法：
請求項９−１９のいずれかに定義される塩を含む固体製剤を飲用調製物へと再構成すること、および
経口にて該飲用調製物を投与すること。
【請求項３８】
フライトDVTまたは断続的アフェレーシス、例えば体外肝解毒における血栓症を処置するための医薬を製造するための、請求項１−１９のいずれかに定義される化合物の使用。
【請求項３９】
医薬が経口医薬、例えば錠剤、カプセル、小袋、発泡錠もしくは即時融解製剤である、または非経口医薬、例えば静脈内投与用医薬、例えば粉末である、請求項３８の使用。
【請求項４０】
飛行中に深部静脈血栓症を発症する危険性のある被験体において該血栓症を予防する方法であって、治療上有効量の請求項１−１９のいずれかに定義される化合物を被験体に投与することを含む方法。
【請求項４１】
体外肝解毒において血栓症を発症する危険性のある被験体において該血栓症を予防する方法であって、被験体に治療上有効量の請求項１−１９のいずれかに定義される化合物を投与することを含む方法。
【請求項４２】
人工透析を受けている患者の人工透析回路における血栓症を予防するための医薬を製造するための、トロンビンS2およびS3サブサイトに結合可能な疎水性部分に連結した中性トロンビンP1ドメインを有するボロン酸、ならびに該酸の塩、プロドラッグおよびプロドラッグの塩から選択される化合物の使用、ただし該化合物は該ボロン酸の塩基付加塩ではない。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［背景］
本開示は、有機ボロン酸およびそれから得られる医薬上有用なものから選択される物質に関する。本開示はまた、上記クラスの物質のメンバーの使用、その製剤、その投与形態その他の主題に関する。
【０００２】
ボロペプチドセリンプロテアーゼ阻害薬
Shenvi (EP-A-145441およびUS 4499082)は、中性側鎖を有するα-アミノボロン酸を含むペプチドが効果的なエラスターゼ阻害薬であることを開示しており、またそれらに続きセリンプロテアーゼのボロペプチド阻害薬に関する多数の特許文献が発行されている。
【０００３】
プロテアーゼの阻害薬または基質の記述において、P1、P2、P3 などは切断可能ペプチド結合に対してアミノ末端側である基質または阻害薬の残基を意味し、S1、S2、S3 などは同系のプロテアーゼの対応サブサイトを意味する。参照：Schechter, I. and Berger, A. On the Size of the Active site in Proteases, Biochem.Biophys.Res.Comm., 27:157-162, 1967。トロンビンにおいて、S1 結合部位すなわち「特異性ポケット」は酵素中のよく解明されたスリットであり、一方、S2 およびS3結合サブサイト (それぞれ、近位および遠位の疎水性ポケットともいう) は疎水性であり、なかでも Pro および (R)-Phe とそれぞれ強く相互作用する。
【０００４】
セリンプロテアーゼのアミノボロネートまたはペプチドボロネート阻害薬または基質は以下に記載される：
US 4935493
EP 341661
WO 94/25049
WO 95/09859
WO 96/12499
WO 96/20689
Lee S-L et al, Biochemistry 36:13180-13186, 1997
Dominguez C et al, Bioorg. Med. Chem. Lett. 7:79-84, 1997
EP 471651
WO 94/20526
WO 95/20603
WO97/05161
US 4450105
US 5106948
US 5169841
WO 96/25427
US 5288707
WO 96/20698
WO 01/02424。
【０００５】
アミノ酸配列 (R)-Phe-Pro-Argは、フィブリノーゲンのアミノ酸配列を模倣したものであるのだが、かつてはトロンビン阻害薬として最良の配列と考えられていた。この配列は、強固に結合するトロンビンの阻害薬、例えばAc-(R)-Phe-Pro-boroArg (DUP 714)、を形成し、Ki値はピコモル範囲であった (Kettner et al, J. Biol. Chem. 265: 18289-18297, 1990; EP-A-293,881)。
【０００６】
ボロトリペプチドトロンビン阻害薬のP2 Pro残基のN置換グリシンによる置換は、以下に記載されている： Fevig J M et al Bioorg. Med. Chem. 8: 301-306、およびRupin A et al Thromb. Haemost. 78(4):1221-1227, 1997。US 5,585,360 (de Nanteuil et al)も参照。
【０００７】
Matteson D S Chem. Rev. 89: 1535-1551, 1989 が、特にアミノボロン酸およびその誘導体の合成のための中間体としての α-ハロボロン酸エステルの使用について総説している。Matteson は、ピナコールボロン酸エステルの非キラル合成における使用およびピナンジオールボロン酸エステルのキラルコントロールのための使用について述べており、これはアミノおよびアミドボロン酸エステルの合成を含む。
【０００８】
残念なことに、有機ボロン酸は分析的に純粋な形態で得るのが比較的困難である。すなわち、アルキルボロン酸およびそのボロキシンはしばしば空気に敏感である。Korcek et al, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2:242, 1972 は、ブチルボロン酸が空気により容易に酸化されて、1-ブタノールとホウ酸とを生じることを教示する。
【０００９】
ボロン酸の環状エステルとしての誘導体化が酸化に対する抵抗性を提供することが知られている。例えば、Martichonok V et al J. Am. Chem. Soc. 118: 950-958, 1996 によると、ジエタノールアミン誘導体化は可能性あるボロン酸の酸化に対する保護を提供する。米国特許 5,681,978 (Matteson DS et al) は、1,2-ジオールおよび 1,3-ジオール、例えばピナコールが、容易に酸化されない安定な環状ボロン酸エステルを形成することを教示する。
【００１０】
WO 02/059131は、安定と記載されるボロン酸産物を開示する。具体的には、これら産物は、ボロン酸基が糖、例えばマンニトール、で誘導体化され糖エステルを形成しているある種のボロペプチドおよび／またはボロペプチドミメティックである。
【００１１】
中性P1残基ボロペプチドトロンビン阻害薬
Claeson et al (US 5574014 など) および Kakkar et al (WO 92/07869 および US 5648338 を含むファミリーメンバー) は、中性 (非荷電) のＣ末端 (P1) 側鎖、例えば、アルコキシアルキル側鎖を有する親油性トロンビン阻害薬を開示する。
【００１２】
Claeson et al および Kakkar et al の特許ファミリーは、トロンビンの高度に特異的な阻害薬であるアミノ酸配列 D-Phe-Pro-BoroMpg [(R)-Phe-Pro-BoroMpg] を含有するボロン酸エステルを開示する。これらの化合物の中でも、特に Cbz-(R)-Phe-Pro-BoroMpg-Oピナコール (TRI 50b としても知られる) が挙げられる。対応の遊離ボロン酸は、TRI 50c として知られる。TRI 50b および関連化合物についてのさらなる情報のために、下記の文献を参照できる。
・Elgendy S et al., in The Design of Synthetic Inhibitors of Thrombin, Claeson G et al Eds, Advances in Experimental Medicine, 340:173-178, 1993.
・Claeson G et al, Biochem J. 290:309-312, 1993
・Tapparelli C et al, J Biol Chem, 268:4734-4741, 1993
・Claeson G, in The Design of Synthetic Inhibitors of Thrombin, Claeson G et al Eds, Advances in Experimental Medicine, 340:83-91, 1993
・Phillip et al, in The Design of Synthetic Inhibitors of Thrombin, Claeson G et al Eds, Advances in Experimental Medicine, 340:67-77, 1993
・Tapparelli C et al, Trends Pharmacol. Sci. 14:366-376, 1993
・Claeson G, Blood Coagulation and Fibrinolysis 5:411-436, 1994
・Elgendy et al, Tetrahedron 50:3803-3812, 1994
・Deadman J et al, J. Enzyme Inhibition 9:29-41, 1995
・Deadman J et al, J. Medicinal Chemistry 38:1511-1522, 1995。
【００１３】
TRI 50bは、in vivoにおける活性本体であるTRI 50cのためのプロドラッグと考えられている。TRI 50cのトリペプチド配列は、３つのキラル中心をもつ。少なくとも、商業上有用な阻害薬の活性を有する化合物において、Phe 残基は (R)- 配置、Pro 残基は天然の (S)-配置であると考えられる；Mpg 残基 は、商業上有用な阻害薬の活性をもつ異性体において、(R)-配置であると考えられる。すなわち、活性な、または最も活性な TRI 50c 立体異性体は、R,S,R 配置であると考えられ、下記のように表示し得る：
【化１】
2007528381.tif 000002
【００１４】
PCT/GB03/03897、さらにUSSN 10/659,178およびEP-A-1396270は、トロンビン S2およびS3 サブサイトに結合可能な疎水性部分にペプチド結合により結合しているトロンビンS1サブサイトに結合可能な中性アミノボロン酸残基を有するボロン酸の医薬上許容される塩基付加塩を開示する。第１の態様において、ボロン酸の医薬上許容される塩基付加塩、例えば以下の式 (A)が開示されている:
【化２】
2007528381.tif 000003
［式中、
Yは、アミノボロン酸残基 −NHCH(R9)-B(OH)2 とともに、トロンビンの基質結合部位への親和性を有する疎水性部分を含む；および
R9は、1 以上のエーテル結合（例えば1または2）が介在し、その酸素および炭素原子の総数が3、4、5または6（例えば5）である直鎖アルキル基である、または R9は、−(CH2)m-W であり、ここでmは2、3、4または5（例えば4） であり、Wは-OH またはハロゲン (F、Cl、BrまたはI）である］。R9は、あるサブセットの化合物において、アルコキシアルキル基、例えば、4 炭素原子を含有するアルコキシアルキルである。TRI 50cの塩は例示である。
【００１５】
そのような塩の経口製剤もまた開示される。
【００１６】
その塩は、加水分解および脱ホウ素に対して比較的安定であると記載されている。
【００１７】
PCT/GB03/03887、およびさらにUSSN 10/659,179およびEP-A-1396269は、多価（少なくとも二価）金属と有機ボロン酸薬物との医薬上許容される塩を開示する。かかる塩は既知の化学に基づき説明または予測不可能な改善された安定性レベルを有すること、および既知のメカニズムに基づき説明できない予想外に高くかつ一貫した経口バイオアベイラビリティを有すると示唆されることが記載されている。それゆえかかる塩の経口製剤もまた開示される。
【００１８】
ある特定の塩のクラスには、有機ボロン酸がボロペプチドまたはボロペプチドミメティックを含むものが含まれる。塩として調製することが有益でありうるそのような薬物には、限定はされないが、式 X-(aa)n-B(OH)2［式中、XはHまたはアミノ保護基であり、nは2、3または4 (特に2または3) であり、各aaは独立して天然または非天然の疎水性アミノ酸である］を有するものが含まれる。多価金属塩のあるクラスにおいて、有機ボロン酸は前述の式 (A)である。TRI 50cの塩は例示である。
【００１９】
PCT/GB03/03883、さらにUSSN 10/658,971およびEP-A-1400245は、特に、ボロン酸、例えば上記式 (A)のボロン酸の医薬上許容される塩基付加塩を含む非経口医薬製剤を開示し、特許請求する。そのような塩は既知の化学に基づき説明または予測不可能な安定性のレベルの改善が見られると記載されている。TRI 50cの塩は例示である。
【００２０】
経口投与形態
経口投与可能な薬物は、嚥下用の錠剤またはカプセルとして提供されることが多い。しかしながら、他の投与形態も知られている。
【００２１】
したがって、経口投与される薬物は、再構成可能製剤、特に、投与前に液体またはしばしば飲料として再構成するための形態であってよく、例えば発泡錠または微粒子形態（粉末または顆粒として）である。可溶性薬物を口腔内で直接溶解するための粉末または顆粒として包装することも知られている；さらに知られるのは「即時融解（fast melt）」または「即時溶解（fast dissolving）」経口製剤であり、これらは口腔内に入ると迅速に融解または溶解する。先の文に記載の製剤も、再構成された製剤が胃に到達する前に口腔内で再構成される点で、再構成可能製剤とみなすことができる。これらすべての再構成可能製剤は、錠剤/カプセルが崩壊しその内容物が溶解するのに時間を要する結果錠剤またはカプセル中の活性成分が血液に到達するのが遅れることを回避する。再構成可能製剤の別の重要な利点は、必要投与量が単一の錠剤またはカプセルに組み込むには高すぎる活性成分に関する：複数の錠剤またはカプセルの摂取は患者にとって望ましくなく、またバイオアベイラビリティーのばらつきというさらなる危険性をもたらしうるものであり、複数の錠剤またはカプセルを１つの再構成可能製剤と置き換えることによってこれら特有の欠点が回避されよう。
【００２２】
薬物の経口投与ための一般的投与形態は、調剤容器、例えば小袋、特に一回投与用（monodose）の小袋、に含有される微粒子製剤である。調剤容器の内容物は、（常にではないが）通常、例えば患者が飲むための一杯の水または果物ジュースまたは牛乳に注がれる。微粒子製剤にとって、飲料サイズの容量(例えば、限定的な例ではないが、50-150 ml)に再構成されることは好都合であり、なぜならそれにより、患者が失う危険性のある活性成分の量が、5mlの容量と比較して(この場合患者がその液体のほんの少量を摂取しなかっただけでもかなりの割合の活性成分が失われる）最小限となるからである。さらに、香味の問題が存在する場合、液体の容量が大きいほど使用する着香料の割合を高くすることができる。
【００２３】
調剤容器は、原則として、単回投与量または投与量の一部を放出するために開けられるいずれの容器であってもよい。多くの場合、容器は、単回投与または一回投与用容器であり、その容器には製剤の単回投与に適切な量が含まれる。あるいは、製剤は分割投与されてもよく、その場合、一部の患者が必要とする量よりも少ない単位投与量が提供される；後者の場合、患者はその製剤の単回投与において2以上の投与単位を摂取する。調剤容器はあるいは定量噴霧器であってもよく、その場合製剤の一単位は製剤の貯蔵容器から定量噴霧される。小袋のかわりに、容器は例えばプラスチック容器であってもよい。
【００２４】
このように、微粒子製剤にとって、例えば飲料として再構成するために、典型的な単位投与形態は小袋である。小袋は、適した材料の両端をあわせて折るかあるいはシールすることにより形成されるポーチである、適した材料としては、接着剤、典型的には熱シール可能接着剤、でシールすることができるか、あるいは熱および圧力をかけることで互いにシールすることができる薄い一層または多層の軟質シートが挙げられる。熱および圧力によりシールしてあわせることができる典型的材料は、熱可塑性ポリマー、例えばポリエチレンおよび塩化ビニルである。これらポリマーは、透明、無色、または有色であってよく、適した乳白剤、例えば二酸化チタンを添加することにより不透明にすることができる。材料のいくつかの層を結合して一緒にし、特定の性質を有するラミネートを形成することができる。例えば、ラミネートには、紙の外層 (容易に印刷可能）、ポリエチレン (ラミネートに強度を付与する)、アルミホイル (気体、蒸気、および液体を透過しないバリアとして機能する)、および内部熱シール可能ラッカー(ラミネートをそれ自身または他の材料とシールできるようにする)が含まれうる。小袋は、単一のラミネートのシートから、あるいは同じであっても異なってもよい2枚のシート、例えば有色および無色の、または透明および不透明のシートから形成されうる。
【００２５】
小袋は、小袋をシールする前に小袋に封入された固体、粉末、または液体を含みうる。医薬的適用において、小袋は、粉末または顆粒、典型的には水または他の液体で再構成するための粉末または顆粒、を含むように使用される。
【００２６】
小袋に充填するのに適した微粒子製剤は、例えば、希釈剤、流動助剤（flow aid）、潤滑剤、緩衝剤、顆粒化剤、崩壊剤、溶解剤、増粘剤、甘味料、および香料を、活性成分に加えて含むことができる（必ずしも含む必要はない）。
【００２７】
発泡錠は、別の一般的な経口投与形態であり、水の存在下で一緒に反応して二酸化炭素を産生する成分を含む。発泡錠を水に添加した時の二酸化炭素の放出により、錠剤の崩壊、および活性成分または他の要素の溶解または分散が促進される。発泡錠は、通常、水に添加して経口投与用の溶液または分散液を作成することを意図する。発泡錠は通常他の錠剤よりもかなり大きく、なぜならそれが投与量が大きい薬物に使用され、かつ比較的大量の着香料を含むことが多いからである。
【００２８】
水中で一緒に反応して二酸化炭素を産生する成分には、有機酸および炭酸塩が含まれる。例えば、クエン酸および／または酒石酸を、炭酸カルシウムおよび／または重炭酸ナトリウムと、必要な程度および速度の二酸化炭素酸産生が提供される比率および量にて組み合わせることができる。他の成分は非発泡製剤に一般的に使用されるものであってよい。  
【００２９】
発泡錠は、典型的には、少なくとも3つの要素からなる： 活性成分；酸；および炭酸塩または重炭酸塩から構成されるアルカリ化合物 (塩基性成分)。
【００３０】
この場合、酸とアルカリは、錠剤が水と接触した時にその発泡および崩壊を提供するために必須要素である。酸性の要素としては、無水形態のクエン酸がよく用いられるが、他の食用酸、例えば酒石酸、フマル酸、アジピン酸、およびリンゴ酸も使用可能である。炭酸塩は、発泡をもたらす二酸化炭素供給源にあたるが、通常水溶性の炭酸アルカリである。重炭酸ナトリウムは最も使用される炭酸塩の1つであり、なぜなら非常に溶解しやすく、また安価なためである。あるいは、一般的な重炭酸ナトリウムを加熱してその粒子表面を炭酸ナトリウムに変換して安定性を上昇させた、改変された重炭酸ナトリウムを使用することができる。
【００３１】
他の生理学的に許容されるアルカリまたはアルカリ土類金属の炭酸塩を使用してもよく、例えば（重）炭酸カリウムまたはカルシウム、炭酸ナトリウム、またはグリシン炭酸ナトリウムである。
【００３２】
発泡錠組成物はまた、錠剤潤滑剤を含んでも良く、それは透明溶液を形成する水溶性化合物でありうる。この種の潤滑剤の例は、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、4000以上のポリエチレングリコール (PEG)、アラニン、およびグリシンである。
【００３３】
常套的な賦形剤、例えば希釈剤、リガンド、緩衝剤、甘味料、香料、着色料、可溶化剤、崩壊剤、湿潤剤、および一般的に使用される他の賦形剤を製剤に添加してもよい。発泡錠は、便利で、魅力的で、かつ使用が容易な、測定済みの投与形態である。しかしながらこれらの利点は吸湿性とのバランスがとられ、ここで吸湿性とは、通常錠剤が相対湿度の低い条件下で製造され、水蒸気の侵入に対する保護が良好な容器に包装されなければならないことを意味する。
【００３４】
「即時融解」製剤、すなわち迅速に溶解または融解する固体経口投与製剤の現在の製造元には、Cima Labs、Fuisz Technologies Ltd.、Prographarm、R. P. Scherer (現在はCardinal Healthの一部)、およびYamanouchi-Shakleeが含まれる。これら製造元はいずれも、様々なタイプの即時融解性の固体経口投与形態を販売している。
【００３５】
Cima Labsは、経口溶解時間が5〜30秒の直接圧縮発泡錠であるOraSolv（登録商標）、および活性成分が味マスクされており経口溶解時間が15〜45秒の直接圧縮錠であるDuraSolv（登録商標）を販売している。Cimaの米国特許第5607697号「Taste Masking microparticles for Oral Dosage Forms」には、口腔内で崩壊する被覆微粒子からなる固体投与形態が記載されている。その微粒子コアは、医薬物質と、マンニトール、ソルビトール、人工甘味料とメントールの混合物、糖とメタノールの混合物、およびサリチル酸メチルから選択される負の溶解熱を有する1以上の甘味化合物とを含む。微粒子コアは、少なくとも部分的に、口腔内での溶解を遅延させ、医薬物質の味をマスクする材料により被覆される。次いで、微粒子が圧縮され錠剤が形成される。他の賦形剤をその錠剤製剤に添加することもできる。
【００３６】
WO 98/46215「Rapidly Dissolving Robust Dosage Form」（Cima Labsが所有）は、活性成分と、少なくとも間接的圧縮充填剤および潤滑剤を含むマトリクスとを含む硬質圧縮即時融解製剤に関する。間接的圧縮充填剤は、典型的には、直接圧縮 (DC グレード) 充填剤と比較して自由流動性がなく、通常自由流動性顆粒を形成するためにさらなる処理を必要とする。
【００３７】
Cimaはまた、発泡性投与形態(米国特許第5503846号、5223264号、および5178878号)、および即時溶解性の投与形態のための打錠助剤（米国特許第5401513号および5219574号)、および水溶性薬物のための即時融解性の投与形態(WO 98/14179 「Taste-Masked Microcapsule Composition and Methods of Manufacture」)に関する米国特許および国際特許出願を有する。
【００３８】
Fuisz Technologiesは、Shearform（登録商標）と呼ばれる処理済み賦形剤を含む直接圧縮錠である、Flash Dose（登録商標）を販売する。Shearform（登録商標）は、不定形繊維に変換された混合多糖類からなる綿菓子様の物質である。この技術を記載している米国特許には、米国特許第5871781号「Apparatus for Making Rapidly Dissolving Dosage Units」；米国特許第5869098号「Fast-Dissolving Comestible Units Formed Under High-Speed/High-Pressure Conditions」；米国特許第5866163号、5851553号、および5622719号「Process and Apparatus for Making Rapidly Dissolving Dosage Units and Product Therefrom」；米国特許第5567439号「Delivery of Controlled-Release Systems」および米国特許第5587172号「Process for Forming Quickly Dispersing Comestible Unit and Product Therefrom」が含まれる。
【００３９】
Prographarmは、崩壊剤、例えばカルボキシメチルセルロース、膨張剤、例えば加工デンプン、および味マスクされた活性物質を含む即時融解錠である、Flashtab（登録商標）を販売する。この錠剤は、口腔内崩壊時間が1分未満である(米国特許第5464632号)。
【００４０】
R. P. Schererは、経口溶解時間が2〜5秒の凍結乾燥錠である、Zydis（登録商標）を販売する。凍結乾燥錠は、湿気および温度に対する錠剤の感受性のため、製造費用がかかり、また包装するのが難しい。米国特許第4642903号 (R. P. Scherer Corp.)は、凍結乾燥すべき溶液または懸濁液に気体を散布することによって調製される、即時融解投与形態製剤について述べる。米国特許第5188825号 (R. P. Scherer Corp.)は、水溶性活性物質をイオン交換樹脂と結合または複合体化して実質的に水に不溶性の複合体を形成し、それを適当な担体と混合して凍結乾燥することによって調製される、凍結乾燥投与形態について述べる。米国特許第5631023号 (R. P. Scherer Corp.)は、キサンタンガムをゼラチンと活性物質の懸濁液に添加することによって製造される、凍結乾燥薬物投与形態について述べる。米国特許第5827541号 (R. P. Scherer Corp.) は、疎水性物質の固体医薬投与形態を調製するための方法を開示する。この方法は、疎水性活性成分、非水相における界面活性剤、および水相における担体材料を含む分散液を凍結乾燥する工程を含む。
【００４１】
Yamanouchi-Shakleeは、低成形性単糖類と高成形性単糖類の組み合わせを含む錠剤である、Wowtab（登録商標）を販売する。この技術をカバーする米国特許には、米国特許第5576014号「Intrabuccally Dissolving Compressed Moldings and Production Process Thereof」および「米国特許第5446464号「Intrabuccally Disintegrating Preparation and Production Thereof」が含まれる。
【００４２】
即時融解に関する技術を有する他の企業には、Janssen Pharmaceuticaが含まれる。Janssenに付与された米国特許には、2種類のポリペプチド (またはゼラチン) 要素と膨張性薬剤（bulking agent）とを含む即時融解錠が記載されており、ここでこの2種類の要素は同符号の正味荷電を有し、かつ第１の要素が第２の要素よりも水溶液中で溶解しやすい。以下を参照：米国特許第5807576号「Rapidly Dissolving Tablet」；米国特許第5635210号「Method of Making a Rapidly Dissolving Tablet」；米国特許第5595761号「Particulate Support Matrix for Making a Rapidly Dissolving Tablet」；米国特許第5587180号「Process for Making a Particulate Support Matrix for Making a Rapidly Dissolving Tablet」；および米国特許第5776491号「Rapidly Dissolving Dosage Form」。
【００４３】
Eurand America, Inc.は、重炭酸ナトリウム、クエン酸、およびエチルセルロースの混合物を含む即時融解性発泡組成物に関する米国特許を有する (米国特許第5639475号および5709886号)。
【００４４】
L.A.B. Pharmaceutical Researchは、発泡性酸と発泡性塩基との発泡性の組み合わせを含む、発泡に基づく即時融解製剤に関する米国特許を有する (米国特許第5807578号および5807577号)。
【００４５】
Schering Corporationは、活性物質、賦形剤 (界面活性剤でもよい) またはショ糖、乳糖、またはソルビトールの少なくとも1つ、およびステアリン酸マグネシウムまたはドデシル硫酸ナトリウムのいずれかを含むバッカル錠に関する技術を有する(米国特許第5112616号および5073374号)。
【００４６】
Takeda Chemicals Inc., Ltd.は、即時融解錠の製造方法であって、活性物質と湿った可溶性炭水化物を錠剤に圧縮成形し、続いてその錠剤を乾燥する方法に関する技術を有する。
【００４７】
実務上、活性成分の経口用の提供と静注用の提供とは全く異なる。具体的には、静脈内投与用製剤の場合、活性成分に追加される不必要な賦形剤や要素は最小限に抑えられることが望ましい。これに対して、経口投与製剤は、さらなる賦形剤を含む。賦形剤のクラスおよび種類は経口投与製剤のタイプによって様々であるが、以下の1以上のいずれを含有してもよい：
抗菌性保存剤、流動助剤 (流動促進剤)、界面活性剤、香料 (粉末の場合)
抗菌性保存剤、流動助剤 (流動促進剤)、界面活性剤、増粘剤、結合剤、崩壊剤、香料 (顆粒の場合)
抗菌性保存剤、錠剤潤滑剤、界面活性剤、増粘剤、結合剤、崩壊剤、膨張剤 (錠剤の場合)
抗菌性保存剤、錠剤潤滑剤、界面活性剤、結合剤、膨張剤、崩壊剤、香料 (「即時融解」製剤の場合)。
【００４８】
上記賦形剤のクラスのメンバーのより詳細な情報については、US Pharmacopeiaを参照のこと。
【００４９】
経口投与製剤の別の特徴は、等張性である必要がなく、また通常そうでない。これに対して、静脈内投与用製剤は等張性であり、ほとんどの場合pH4〜5である。
【００５０】
速効性抗凝固および短時間抗凝固作用
ある状況下においては、顕著な活性を示す時間が比較的短い（効果消失が速い）抗凝固物質を投与することが望ましい。つまり、いくつかの抗凝固物質は、特定の適応にとって活性ある時間が長すぎる；一例として、ワルファリンは、活性が治療レベルから低下するのに長時間を要し、短時間作用性の抗凝固物質が望ましい人工透析には適さない。
【００５１】
人工透析は、末期の腎不全患者の処置に用いられる。抗凝固物質は、人工透析回路の血栓症を予防するため、透析の開始に先立って患者に投与される。抗凝固は人工透析セッション (典型的には約4時間) の間しか必要でなく、抗凝固物質は患者が病院を出た後はほとんどまたは全く効果を示さないことが望ましい。最も好都合なのは、抗凝固物質が腎排泄されるものでないことであり、なぜなら腎臓が障害されている場合抗凝固がより長く続き、患者特異的に抗凝固物質の投与量を調節し、および／またはセッション中の凝固状態のモニタリングを強化し、および／またはそのセッションよりも長く患者を病院に留めて凝固パラメータを安全なレベルに戻すことが必要となるからである。患者が限られた時間（例えば4時間）の定期的な人工透析セッションをうけるそのような人工透析（「HD」）は、「慢性断続的」人工透析 (CIHD)ともいわれ、非常に状態の良くない患者、例えば急性腎不全または他の重大な傷害を患う患者や生命維持装置につながれた患者において長期間続けられうる急性HDと区別される；明らかに、経口抗凝固物質は急性患者にとって好都合な選択肢ではない。CIHDは、断続的アフェレーシスの例であり、この場合患者は断続的に限られた時間のアフェレーシスを受け、継続的アフェレーシスとは対照的である。アフェレーシスは、被験体 (患者またはドナーでありうる)からの全血の取り出しを含むプロセスであり、その血液の要素が分離され、次いで分離された部分の1つが取り除かれ、そして残りの要素がその被験体に再輸血される; 取り除かれる要素は毒素でありうる。
【００５２】
現在、人工透析における抗凝固は、主にヘパリン(低分子量ヘパリンを含む)の注射および／または注入によりなされている。ヘパリンは応答が一定せず、過剰または過小投与され易く、その結果非常に危険な出血が起こったり、あるいは抗凝固が不十分となってフィルター (「人工腎臓」)において凝固が起こりセッションの効率が低下したりする。それゆえ患者の抗凝固モニタリングが望ましい。出血が起こればそれを処置しなければならず、フィルター凝固の場合は洗浄除去か交換を行わなければならない。家庭での人工透析において、静脈抗凝固の自己管理またはパートナー／介護者による管理の複雑さおよび責任は、この選択肢を考慮している患者が直面する多くの課題に加わるさらなる課題である。経口抗凝固物質が利用可能であれば、この複雑さの点が軽減されるであろう。
【００５３】
短時間の経口抗凝固が望ましい他の状況には、DVT(深部静脈血栓症)の危険性があると考えられる飛行機乗客の場合のフライトDVT、およびアフェレーシスまたは選択的体外解毒法が含まれる。典型的な体外血液解毒法は、肝解毒、すなわち肝疾患の場合の体外血液解毒である。治療的アフェレーシスが行われる他の疾患には、自己免疫疾患 (抗体の除去)が含まれる；この場合、患者はプラスマフェレーシスをうけることがあり、そこでは血漿の除去 (および生理食塩水との置換)が循環抗体および免疫複合体の減少を助ける。アフェレーシスはさらに、心血管疾患を患う患者またはその危険性のある患者における低密度リポタンパクの除去、血小板またはリンパ球の除去に使用されることもある。アフェレーシスによる献血も挙げられる。
【００５４】
フライトDVTはまれな状況である。そうではあるが、普段は経口抗凝固を必要としないが長時間のフライト中にDVTを起こしやすくなりうる人にとって、フライトの最初または離陸直後に摂取するために経口摂取可能な即効性の抗凝固物質を持っておくことが望ましい。より長時間のフライトでは、フライト全体をカバーすること保証するために、１回目の摂取後決まった時間に２回目を摂取してもよい。
【００５５】
患者が前もって自分が血液を体外回路に通すべきことを理解している一部の選択的血液洗浄またはアフェレーシス法では、その方法の期間中をカバーし、かつ通常そのような方法に必要とされる溶液抗凝固の複雑さおよび管理を回避するため、経口で自身の抗凝固物質を受けることが患者にとって好ましく、またより好都合である。
【００５６】
開示の概要
本開示は、ある局面において、比較的短時間の活性を提供できる新規経口投与製剤に関する。本開示はまた、ある種のボロン酸およびその誘導体により処置される新規適応に関する。
【００５７】
本開示はまた、本明細書において「新規ボロン酸」と題して後述するものを含む、新規有機ボロン酸およびその誘導体に関する。
【００５８】
本開示はさらに、有機ボロン酸トロンビン阻害薬、その塩、プロドラッグ、およびプロドラッグの塩から選択される化合物に関し、またある局面においてかかるトロンビン阻害薬の新規経口投与形態に関する。本開示はさらに、かかるトロンビン阻害薬の投与形態であって、比較的即効性および／または短時間の活性が必要とされる場合、例えば人工透析中の抗凝固治療に有用な投与形態に関する。トロンビン阻害薬は、以下で詳述するように、医薬上許容されるボロン酸の塩基付加塩を含んでも良い。ボロン酸には、トロンビンS2およびS3サブサイトに結合可能な疎水性部分に連結した中性トロンビンP1ドメインを有するものが含まれる。特定のトロンビン阻害薬は、そのようなボロン酸、例えばトロンビンS2およびS3サブサイトに結合可能な疎水性部分に連結したトロンビンS1サブサイトに結合可能な中性アミノボロン酸残基を有するもの、例えば以下の式 (I)を有するもの、の医薬上許容される塩基付加塩である。
【００５９】
本開示は、本明細書に記載のボロン酸化合物 (例えば塩) の経口投与形態を固相製剤にて提供し、この投与形態は活性成分が胃に入る前に液体ビヒクル中に入るのに適合している。このように、この固相製剤は、投与前に溶液または分散液（溶液のほうが好ましい）へ再構成するのに適合しうる；あるいは、それは、口腔内で迅速に溶解または融解する「即時融解」製剤でありうる。本開示が関係する製剤タイプの特徴の一般的説明については、本明細書の「経口投与形態」と題する先の節を参照のこと。
【００６０】
本開示の固相製剤の多くは、抗菌性保存剤を含む。通常、本開示の固相製剤は、香料 例えば着香料、香味強化剤（flavour enhancer)、または甘味料)を含む。粉末はしばしば流動助剤または流動促進剤を含む。顆粒はしばしば結合剤を含む。常にではないが一般的に、本開示の固相製剤は、抗菌性保存剤と香料の両方を、通常均一な分布にて含む。；これはもちろん非経口製剤とは異なる。粉末および顆粒は、有機酸を含んでも良い; 実際の発泡錠も同様である。
【００６１】
投与形態は、例えば、微粒子製剤 (粉末または顆粒) を含む小袋その他の密閉調剤容器であってよく、あるいは発泡錠または「即時融解」製剤であってよい。
【００６２】
さらに提供されるのは、適した液体と組み合わせて血栓症の処置に使用する経口摂取用の液体調製物を形成するための固相医薬を製造するための、本明細書に開示されるボロン酸化合物(例えば塩) の使用である。本開示は、液体調製物が飲用調製物である態様を含む。固相医薬と組み合わせるのに適する液体は、毒性がなく、かつ薬物の活性またはバイオアベイラビリティを著しく損なわないものである；実施上、液体の味は過度に不快であってはならない。
【００６３】
本開示の方法のあるクラスに含まれるのは、抗凝固物質調製物の調製方法であって、経口投与用の液体調製物および好ましくは飲用調製物へ、本明細書に開示のボロン酸化合物、例えばトロンビンS2およびS3サブサイトに結合可能な疎水性部分に連結した中性トロンビンP1ドメインを有するボロン酸の医薬上許容される塩基付加塩、を含む固相製剤を再構成することを含む方法である。
【００６４】
本開示に含まれるのは、疾患の処置においてトロンビンを阻害する方法であって、治療上有効量の本明細書に開示のボロン酸化合物、例えばトロンビンS2およびS3サブサイトに結合可能な疎水性部分に連結した中性トロンビンP1ドメインを有するボロン酸の医薬上許容される塩基付加塩を、それを必要とする被験体に経口投与することを含み、その塩が胃に入る前に該化合物が固相製剤から溶液または懸濁液中へと加えられる方法である。あるクラスの方法において、化合物は、投与に先立つ液体による再構成により、溶液または懸濁液中に加えられる; 別のクラスの方法では、化合物は、口腔内において溶液または懸濁中に加えられる。
【００６５】
さらに含まれるのは、以下のいずれかを予防する方法である：
・人工透析を受ける患者の人工透析回路中の血栓症
・フライトDVT
・アフェレーシス、例えば体外肝解毒における血栓症(前述)。
【００６６】
本明細書の実施例は、開示化合物が驚くべきことに活性本体の崩壊レベルを害することなく比較的迅速に胃から吸収されること、および活性本体の血漿濃度が投与後約4時間以内に耐えうる程度に低いレベルまで戻ることを示す。TRI 50cのモノナトリウム塩が関与する実施例において、投与した量の14%しかTRI 50c種として排泄されないことがわかった。明らかなように、このような活性の短時間作用 (迅速な活性消失) は断続的アフェレーシス法における血栓症の予防に非常に適し、また選択的な断続的アフェレーシス法の場合に経口投与は特に有用である。あるクラスの態様において、アフェレーシス法は人工透析 (厳密にはCIHD)である; 別の態様において、ボロン酸は塩基付加塩の形態で投与され、方法は人工透析でない。
【００６７】
化合物は、特に塩基付加塩に関してより詳細に後述される。しかしながら、本発明の方法は開示の塩に限定されず、本明細書に開示されるいずれのボロン酸、その塩（例えば酸付加塩）、プロドラッグ、プロドラッグの塩を使用してもよい。本発明の方法は、治療上有効量の、トロンビンS2およびS3サブサイトに結合可能な疎水性部分に連結した中性トロンビンP1ドメインを有するボロン酸並びにその塩、プロドラッグ、およびプロドラッグの塩から選択される化合物を、それを必要とする被験体に投与することを含む。これら方法において、本開示は、投与経路および製剤の性質に関して限定されない；例えば、これら方法において、化合物は非経口投与、例えば静脈内投与されてもよく、より好ましくは経口投与される；経口投与が選択される場合、活性化合物は例えば錠剤またはカプセルの形態で投与されてもよいが、そうではなくて再構成可能製剤として投与されてもよい。これら方法のあるクラスにおいて、選択される化合物は塩基付加塩ではない；別のクラスにおいて、それは塩基付加塩である。
【００６８】
他の局面において、本開示は、人工透析をうける患者の人工透析回路における血栓症、フライトDVT、または体外肝解毒における血栓症 (前述)を予防するための医薬を製造するための、本明細書に記載のボロン酸化合物の使用を含む。医薬は、経口投与に適合していてよく、例えば錠剤、カプセル、または再構成可能製剤である; あるいは、医薬は、非経口投与に適合していてもよい。
【００６９】
本開示は、本明細書に記載のボロン酸化合物を含む固相製剤を含む製品であって、人工透析中の血栓症を予防するための飲用調製物への前記製剤の再構成に適合した製品を含む。
【００７０】
本開示は、本明細書に記載のボロン酸化合物を含む固相製剤を含む製品であって、実際の血栓症、または血栓症が疑われる場合、例えば患者の正確な診察の前、の緊急処置のための飲用調製物への前記製剤の再構成に適合した製品を含む。
【００７１】
固相製剤は、以下の式 (I)のボロン酸、またはその塩、プロドラッグ、もしくはプロドラッグの塩を含むことができる。プロドラッグとしては、エステル、例えばアルカノールの残基とのエステルが挙げられ、ここでアルカノールは例えばC1-C4 アルカノール、例えばメタノールまたはエタノールである。また挙げられるのは環状誘導体であり、利用可能なボロンの2つの価(遊離酸の2つの-OH基に対する結合に相当する) が原子鎖の各末端と結合し、すなわちボロンが環の一部となる。このような環状誘導体は、式 (I)の酸の場合以下のように示すことができ、これは本明細書に開示の他の式の酸について準用され改変される：
【化３】
2007528381.tif 000004
［式中、VおよびWはヘテロ原子 (例えば、独立にN、O、およびSから選択される) であり、弓状線は直鎖または分岐の原子鎖を表し、ボロン由来の2つの結合の間の鎖の長さは、重要ではないが、ある場合には4、5または6でありうる］。前述のように、ホウ素で両端が終わる鎖 (環形成鎖) は、直鎖であっても分岐していてもよく、例えば1以上の分岐側鎖を有していてもよい；複数の分岐側鎖が存在する場合、その少なくとも一部が一緒になって環を形成してもよく、それは例えばピナンジオールエステルの場合である。
【００７２】
それゆえ、特定の環状誘導体は、ジオールにより形成される環状エステルである。ジオールの種類は重要ではない。好適なジオールとしては、隣接する炭素原子上または別の炭素で置換された炭素原子上で置換されたヒドロキシ基を有する脂肪族および芳香族化合物が挙げられる。つまり、好適なジオールには、鎖または環において少なくとも2つの結合炭素原子が介在する少なくとも2つのヒドロキシ基を有する化合物が含まれる。あるクラスのジオールは、ちょうど2つのヒドロキシ基により置換された炭化水素を含む。このようなジオールの1つはピナコールであり、もう1つはピナンジオールである; また、ネオペンチルグリコール、1,2-エタンジオール、1,2-プロパンジオール、1,3-プロパンジオール、2,3-ブタンジオール、1,2-ジイソプロピルエタンジオール、5,6-デカンジオール、および1,2-ジシクロヘキシルエタンジオールが挙げられる。
【００７３】
プロドラッグは、WO 02/059131および対応のUS 6699835 (前述)に記載されるような糖誘導体であってもよい。したがって、ボロネート基は、糖、例えば単糖または二糖によりエステル化されていてよい。糖は、還元糖、例えばマンニトールまたはソルビトールであってよい: それはWO 02/059131に教示される個々の糖または糖のクラスであってもよい。例えばWO 02/059131に教示されるように、ボロン酸、糖 (または他のジオール)、および水を組み合わせ、続いて凍結乾燥してもよい。
【００７４】
塩は、酸付加塩または塩基付加塩であってよい。
【００７５】
特定のクラスの可溶性化合物には、開示のボロン酸のアルカリ金属塩、糖エステル、およびアミノ糖塩が含まれる。そのような可能性誘導体は、溶液として再構成するための製剤の製造に有用である。別の特定のクラスには、遊離酸が含まれる。さらに挙げられるのは酸付加塩である。
【００７６】
本開示に関係するボロン酸はトロンビン阻害薬であり、例えば式 (I)のボロン酸、並びにその塩、プロドラッグ、およびプロドラッグの塩である。さらに開示されるのは、ボロン酸、例えば式 (I)のボロン酸、またはその塩、プロドラッグ、もしくはプロドラッグの塩を含む、液体経口調製物、好ましくは飲用調製物、の調製に使用するための固相医薬製剤である：
【化４】
2007528381.tif 000005
［式中
Yは、フラグメント -CH(R9)-B(OH)2とともに、トロンビンの基質結合部位への親和性を有する部分を含む；および
R9は、1 以上のエーテル結合（例えば1または2）が介在し、その酸素および炭素原子の総数が3、4、5または6（例えば5）である直鎖アルキル基である、または R9は、-(CH2)m-W であり、ここでmは2、3、4または5（例えば4）であり、Wは-OH またはハロゲン (F、Cl、BrまたはI）である］。R9は、あるサブセットの化合物において、アルコキシアルキル基、例えば4の炭素原子を含有するアルコキシアルキルである。
【００７７】
いくつかの態様において、Yは、
構造フラグメント -CH(R9)-B(OH)2に結合したアミノ基、および
該アミノ基に結合し、かつ該構造フラグメントとともに、トロンビンの基質結合部位への親和性を有する疎水性部分、
を含む。
【００７８】
本開示は、トロンビン阻害薬の疎水性ボロン酸の塩基付加塩である活性成分を含む製品を含む。そのような阻害薬は疎水性アミノ酸を含んでもよく、このクラスのアミノ酸には、その側鎖がヒドロカルビル、鎖内に酸素を含みおよび／または鎖内の酸素により分子の残りの部分と連結するヒドロカルビル、またはヘテロアリールであるアミノ酸、あるいは前記の基のいずれかをヒドロキシ、ハロゲンまたはトリフルオロメチルで置換したアミノ酸が含まれる。代表的な疎水性側鎖には、アルキル、アルコキシアルキル、少なくとも1つのアリールまたはヘテロアリールで置換されたアルキルおよびアルコキシアルキル、アリール、ヘテロアリール、少なくとも1つのアルキルで置換されたアリール、および少なくとも1つのアルキルで置換されたヘテロアリールが含まれる。環置換されていないか、または先の文で挙げた部分の1つにより環置換されたプロリンおよび他のイミノ酸もまた疎水性である。
【００７９】
一部の疎水性側鎖は、1〜20の炭素原子を含み、例えば1、2、3または4炭素原子を有する非環状部分を含む。環状基を含む側鎖は、必ずではないが典型的には、5〜13員環を含み、多くの場合フェニルまたは1または2のフェニルで置換されたアルキルである。
【００８０】
疎水性非ペプチド部分を含む阻害薬が含まれ、その部分は、典型的には前述のような疎水性アミノ酸の側鎖を形成しうる部分に基づく。
【００８１】
疎水性化合物は、例えば、1つのアミノ基および／または1つの酸性基 (例えば、-COOH、-B(OH)2)を含んでも良い。通常、疎水性化合物は、いずれのタイプの極性基も複数は含まない。
【００８２】
本開示は、疎水性ボロン酸トロンビン阻害薬またはその塩もしくはプロドラッグが関与する、または含む、物、方法、および用途を含み、それゆえ、log Pで表される1-n-オクタノールと水との間の分配係数が生理学的pHおよび25℃において1.0より大きいペプチドボロン酸、並びにその塩およびプロドラッグが含まれる。いくつかの有用なペプチドボロン酸は、分配係数が少なくとも1.5である。有用な疎水性ペプチドボロン酸のあるクラスは、分配係数が5以下である。
【００８３】
疎水性有機ボロン酸のいくつかのサブクラスは、以下に「一部の実施例の詳しい説明」との題のもと、式 (II) および (III) で記載されるものである。
【００８４】
文献において、水溶液中のボロネートが「三角形型」B(OH)2 を形成するのか「四面体型」 B(OH)3- ホウ素種を形成するかについての議論があるが、NMRの結果は、ボロン酸の第１のpKaより下のpHでは主なホウ素種は中性 B(OH)2であることを示していると思われる。十二指腸ではpHが6〜7のようであり、それゆえここでは三角形型種が優勢と思われる。いずれの場合においても、表示 B(OH)2 には、四面体型と三角形型のホウ素種が含まれ、本明細書全体を通して三角形型ホウ素種を示すシンボルは四面体型種をも包含する。この表示はさらに、無水形態におけるボロン酸基を含みうる。
【００８５】
化合物、例えば塩は、溶媒和物、特に水和物の形態であってもよい。
【００８６】
塩基付加塩は、ボロン酸が1つ脱プロトン化した酸性塩を含むか、または実質的に前記酸性塩からなっていてもよい。本開示はそれゆえ、化合物中のボロネート基と一致する金属/ボロネート化学量を有する主に(50 mol %以上) 一価の負電荷を有するものを含む。
【００８７】
塩は、例えば実施例 34の方法で測定した場合、少なくとも約90%、例えば約95%以上の純度を有する。医薬製剤の場合、かかる塩形態は、医薬上許容される希釈剤、賦形剤、または担体と組み合わされうる。
【００８８】
本開示のさらなる局面によれば、抗血栓活性が必要とされる症状の処置方法であって、治療上有効量の本明細書に開示のボロン酸化合物、例えば式 (I)のボロン酸の医薬上許容される塩基付加塩を、かかる症状を患う人またはその危険性のある人に、飲用により経口投与することを含む方法が提供される。
【００８９】
TRI 50c 塩基付加塩は、TRI 50c エステルを介して得られる。しかしながら、TRI 50c エステルへの、つまりTRI 50cへの公知の合成経路は、1以上の不純物を生じる。以下に「「高純度」合成」と題して記載する塩の製造方法（本願の優先日の時点で非公知）は1以上の不純物を生じ、非常に高純度な塩は得られない。さらに、この塩は高純度で得るのが非常に難しいことがわかった。つまり、適用した精製技術では高純度の塩を産生することができなかった。HPLCは、公知のTRI 50c エステル合成および「「高純度」合成」と題して記載する塩調製技術を介して製造される塩を精製するのに、工業的規模で使用可能でない。言い換えれば、TRI 50c 塩の治療上の効用をそれを必要とする人に提供するためには、塩は工業的に適度に純粋な形態にて取得可能でなければならず、その純粋な形態は過度に高価な精製技術を使用せずに達成できなければならない。
【００９０】
本開示のさらなる局面および態様は、以下の明細書において記載され、かつ特許請求される。
【００９１】
本明細書に記載の塩には、ボロン酸と強塩基との反応により得られうる(その反応により得られた産物の特性を有する) 産物が含まれ、本明細書中の用語 「塩」 はそのように解されるべきである。したがって、開示産物に関する用語「塩」は、その産物が個別的なカチオンおよびアニオンを含むことを必ずしも意味するのではなく、ボロン酸と塩基との反応により取得しうる産物を包含すると解すべきである。本開示は、多かれ少なかれ配位化合物の形態にある産物を包含する。このように、本開示は、開示のボロン酸と強塩基との反応により得られうる(その反応により得られた産物の特性をもつ) 産物、ならびにかかるその産物の予防を含む治療的使用を提供する。
【００９２】
本開示はその塩の調製方法に関して限定されないが、塩が開示のボロン酸および対イオンに由来するボロネート種を含むことを条件とする。かかるボロネート種は、いかなる平衡形態にあるボロネートアニオンであってもよい。用語「平衡形態」は、平衡反応式で表示され得る同じ化合物の異なる形態を意味する (例えば、ボロン酸無水物と平衡状態にあるボロン酸および様々なボロネートイオンと平衡状態にあるボロン酸)。ボロネートは固相において無水物を形成でき、また開示のボロネート塩は固相においてボロン酸平衡種としてボロネート無水物を含み得る。塩が、対イオンを含む塩基とボロン酸 (I) との反応により調製される必要はない。さらに、本開示は、間接的にかかる酸／塩基反応により調製されたとみなすことができる塩産物、ならびにかかる間接的調製により得られうる(かかる間接的調製により得られた産物の特性をもつ) 塩を含む。可能な間接的調製の例として、塩の最初の回収後、それを精製および／または処理して、その物理化学的性質を改変する、例えば、固体形態または水和物形態、あるいはその両方を改変する方法が挙げられる。
【００９３】
いくつかの態様において、塩のカチオンは一価である。
【００９４】
いくつかの態様において、塩は無水種を含む；あるいは無水種を基本的に含まない。
【００９５】
本開示のさらなる局面および態様は、以下の説明および請求項に示される。そのようなものとしてさらに含まれるのは、本明細書に記載の塩である。
【００９６】
本明細書の記載および請求項を通して、単語「含む」および「含有する」ならびにその変形、例えば、「含んでいる」および「含み」は、「含むが、限定されない」を意味し、他の部分、添加物、要素、整数、または工程を排除する意図ではない（排除しない）。
【００９７】
本願は、有機ボロン酸の安定性 (脱ホウ素化に対する抵抗性) が、塩、例えば金属塩の形態にて提供されることにより増大され得ることを示すデータを含む。一回の実験において、TRI 50c のアンモニウム塩は乾燥に際して分解されてアンモニアを産出したようであり、一方、コリン塩は脱ホウ素化された不純物への迅速な分解を示した。これら１回限りの観察を再現する実験は行っていないが、アンモニウムおよびコリン塩を除外したサブクラスが提供される。塩は、酸塩であってもよい。いずれにせよ、この安定化技術は、本開示の一部を形成し、中でも、「背景」に記載の有機ボロン酸および「背景」に示す公知文献に記載の有機ボロン酸に適用可能である。
【００９８】
一部の実施例の詳しい説明
用語集
下記の用語および略号を本明細書で使用する：
ボロン酸の塩に用いる表現「酸塩」は、三角形で表される酸基 -B(OH)2 の１つの OH 基が脱プロトン化されている塩を意味する。すなわち、ボロネート基が一価の負電荷を有し、-B(OH)(O-) または [-B(OH)3]- で表される塩は、酸塩である。この表現は、ボロン酸とカチオンのモル比が約 n：1 である n 価を有するカチオンの塩を包含する。実際的には、観測される化学量は厳密に n:1 でないが、概念的に n:1 化学量に一致する。例えば、カチオンの観測質量は n:1 化学量について計算された質量と異なりうるが、約10%を超えて異なることはなく、例えば、約7.5%以下である；ある場合において、カチオンの観測質量は、計算質量と約1%未満異なりうる。計算質量は、好適には、三角形型形態のボロネートに基づく。(原子レベルで、化学量的に酸塩と一致する塩は、平均して単一の脱プロトン状態に近いプロトン付加状態の混合物にてボロネートを含む可能性があり、かかる「混合」塩は用語「酸塩」に含まれる)。酸塩の例は、モノナトリウム塩およびヘミカルシウム塩である。
【００９９】
α-アミノボロン酸すなわち Boro(aa) は、CO2 基が BO2 で置換されたアミノ酸を意味する。
【０１００】
用語「アミノ基保護部分」は、ペプチドまたはアミノ酸のアミノ基、特にＮ末端アミノ基を誘導体化するのに使用されるいかなる基をも意味する。かかる基には、限定でないが、アルキル、アシル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびスルホニル部分が含まれる。しかしながら、用語「アミノ基保護部分」を、有機合成において一般的に使用される特定の保護基に限定する意図はなく、また容易に解裂する基に限定する意図でもない。
【０１０１】
「調剤容器」なる表現は、含まれる製剤を投与前に調剤するのに適合している容器を意味する。したがって、摂取後まで活性成分の放出が意図されないカプセルは、調剤容器ではない。本明細書で用いる場合、この表現は特に、液体製剤へ再構成すべき微粒子製剤または活性成分の迅速な放出のため口腔内に直接置かれる微粒子製剤を調剤するのに役立つ容器を意味する。調剤容器は、成形されたプラスチック本体 (製剤の１単位を含んでも良く、定量ディスペンサであってもよい) を含んでも良く、あるいは例えば小袋であってもよい。
【０１０２】
「飲用調製物」は、飲用に適した特性を有する調製物を意味する。したがって、その量は飲用に適しており (これに対して、スプーン一杯5mlは飲み込まれるのであり、飲用されるのではない）、かつ例示として約50〜約150 mlでありうる; 場合によっては、その量は150mlを超える。質もまた飲用に適さなければならず、したがって調製物は毒性がなく、味の点で飲用に耐えうるものでなければならない。
【０１０３】
「一回投与用製剤」なる表現は、投与すべき所望の投与量に相当する量の活性成分を含む製剤を意味する。例えば、いずれかの投与の例において(例えば、人工透析の前に)、活性成分を300mgの量で投与すべきならば、一回投与用製剤は300mgの成分を含む。
【０１０４】
「医薬上許容される」なる句は、正当な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応などの問題または合併症なしにヒトまたは動物の組織と接触させて使用するのに適し、合理的な利益／危険性の比に見合う、化合物、材料、組成物および／または投与形態を意味するものとして、本明細書において使用される。
【０１０５】
「トロンビン阻害薬」なる表現は、正当な薬理学的判断の範囲内で、トロンビンの阻害薬として潜在的または顕在的に医薬上有用なものを意味し、また医薬上活性な種を含み、トロンビン阻害薬として記述され、推奨され、または認められている物質をも意味する。かかるトロンビン阻害薬は選択的であってよく、すなわち、正当な薬理学的判断の範囲内で、他のプロテアーゼに比してトロンビンに選択的と見なされるものであってもよい。用語「選択的トロンビン阻害薬」は、医薬上活性な種を含み、かつトロンビン阻害薬として記述され、推奨され、または認められている物質を意味する。
【０１０６】
用語「ヘテロアリール」は、少なくとも1つ(例えば、1、2または3つ) の環内ヘテロ原子を有し、共役環内二重結合系を有する環系を意味する。用語「ヘテロ原子」には、酸素、硫黄および窒素が含まれるが、硫黄は時にあまり好ましくない。
【０１０７】
「天然アミノ酸」は、以下から選択されるの中性 (疎水性または極性)、正荷電および負荷電アミノ酸から選択されるL-アミノ酸 (またはその残基) を意味する：
疎水性アミノ酸：
A = Ala = アラニン
V = Val = バリン
I = Ile = イソロイシン
L = Leu = ロイシン
M = Met = メチオニン
F = Phe = フェニルアラニン
P = Pro = プロリン
W = Trp = トリプトファン
極性 (中性または非荷電) アミノ酸
N = Asn = アスパラギン
C = Cys = システイン
Q = Gln = グルタミン
G = Gly = グリシン
S = Ser = セリン
T = Thr = トレオニン
Y = Tyr = チロシン
正荷電 (塩基性) アミノ酸
R = Arg = アルギニン
H = His = ヒスチジン
K = Lys = リシン
負荷電 アミノ酸
D = Asp = アスパラギン酸
E = Glu  = グルタミン酸。
【０１０８】
ACN = アセトニトリル
アミノ酸 = α-アミノ酸
酸付加塩 = 遊離塩基(例えば、ペプチドのN末端アミノ基のようなアミノ基)への無機酸または有機酸の付加により調製される塩
塩基付加塩 = 遊離酸(この場合、ボロン酸) への無機塩基または有機塩基の付加により調製される塩
Cbz = ベンジルオキシカルボニル
Cha = シクロヘキシルアラニン (疎水性非天然アミノ酸)
荷電 (薬物または薬物分子のフラグメント、例えばアミノ酸残基に用いられる) = アミノ、アミジノまたはカルボキシ基の場合のように、生理学的pHにおいて電荷を有すること
Dcha = ジシクロヘキシルアラニン (疎水性非天然アミノ酸)
Dpa = ジフェニルアラニン (疎水性非天然アミノ酸)
薬物 = 医薬上有用な物質、インビボ活性本体またはプロドラッグ
Mpg = 3-メトキシプロピルグリシン (疎水性非天然アミノ酸)
多価 = 少なくとも二価、例えば二または三価
中性 (薬物または薬物分子のフラグメント、例えばアミノ酸残基に用いられる) = 非荷電 = 電荷を生理学的pHにおいて有さない
Pinac = ピナコール = 2,3-ジメチル-2,3-ブタンジオール
ピナンジオール = 2,3-ピナンジオール = 2,6,6-トリメチルビシクロ [3.1.1] ヘプタン-2,3-ジオール
Pip = ピペコリン酸
室温 = 25℃±2℃
強塩基 =  ボロン酸と反応するのに十分高いpKbをもつ塩基。好適にはかかる塩基はpKb 7以上、例えば7.5以上、例えば約8以上である
THF = テトラヒドロフラン
Thr = トロンビン
【０１０９】
換算係数
特記なき限り、本明細書においては以下の換算係数をモルとグラム質量の間の変換および他の同様の計算に使用する：
・TRI 50cの分子量は三角形型形態に関して決定する (分子量 525.4)
・TRI 50c モノナトリウム塩の分子量は一水和物に基づき計算する (C27H35BN3O7)Na H2O (分子量 565.39)。
【０１１０】
化合物
本開示は、トロンビンS2およびS3サブサイトに結合可能な疎水性部分に連結したトロンビンS1サブサイトに結合可能な中性アミノボロン酸残基を有するボロン酸に関する。本開示はまた、かかる酸のプロドラッグ (例えば、エステル) および塩、特に塩基付加塩に関する。本開示は、上記式 (I)の酸および以下の式 (II)によって表されるサブクラスの酸を含む：
【化５】
2007528381.tif 000006
［式中、Y’は疎水性部分を含み、Y’CO-は、フラグメント −NHCR(R9)-B(OH)2 とともに、トロンビンの基質結合部位への親和性を有する；および
R9は、1 以上のエーテル結合が介在し、その酸素および炭素原子の総数が3、4、5または6（例えば5）である直鎖アルキル基である、またはR9は、-(CH2)m-W であり、ここでmは 2、3、4または5（例えば4）であり、Wは-OH またはハロゲン (F、Cl、BrまたはI）である］。１以上のエーテル結合 (-O-) が介在する直鎖アルキルの例として、アルコキシアルキル (介在１つ) およびアルコキシアルコキシアルキル (介在２つ) がある。R9は、化合物のあるサブセットにおいてアルコキシアルキル基、例えば、4の炭素原子を含有するアルコキシアルキルである。
【０１１１】
ここで式 (I)に戻ると、典型的には、Y-は、トロンビンのS2サブサイトに結合するアミノ酸残基 (天然または非天然)を含み、このアミノ酸残基はトロンビンのS3サブサイトに結合する部分にＮ末端で結合している。Y-は、式 Z3-Z2-CO-［式中、-Z2-CO-はトロンビンのS2サブサイトに親和性を有するアミノ酸残基であり、Z3はトロンビンのS3サブサイトに親和性を有する部分である］であってよい。
【０１１２】
ボロン酸は、構造フラグメント -CH(R9)-B(OH)2 と部分Yの間に結合を含んでもよく、あるいはY内部に１および／または複数の結合、例えば、Z3-Z2結合を含んでもよく、Z3-Z2 結合は、窒素原子を -NH- または -NR14- ［式中、R14は、鎖内および／または環内に窒素、酸素または硫黄を含んでもよく、かつハロ、例えばF、または官能基、例えばヒドロキシ、から選択される置換基によって置換されていてもよいC1-C13ヒドロカルビル基である］として含む。ヒドロカルビル基は、1〜4の炭素原子を含みうる; それはアルキルであってもよく、あるいは前記窒素原子に結合した-CH2- およびそのハロゲン化変異体、特にフッ素化変異体、例えば -CF2-、から選択される部分を含んでもよい。
【０１１３】
式 (I)の酸のあるクラスにおいて、Y- は、トロンビンのS3およびS2結合部位に結合する、N末端が保護されていてもよいジペプチド残基であって、その酸におけるペプチド結合は独立にR14 基によりN置換されていてもよい。N末端保護基は、存在する場合、上記定義の基 X (水素以外) でありうる。多くの場合、酸はN置換ペプチド結合を含まない。N置換ペプチド結合が存在するとき、置換基はしばしば1C〜6Cヒドロカルビル、例えば飽和ヒドロカルビルである; N置換基はいくつかの態様において環、例えばシクロアルキルを含み、例えばシクロペンチルであってよい。あるクラスの酸は、N末端保護基 (例えば、X 基) および非置換ペプチド結合を有する。
【０１１４】
Y- がジペプチド残基 (N末端が保護されているか否かによらない) の場合、S3結合アミノ酸残基は(R)-配置であり得、および／またはS2結合残基は(S)-配置であり得る。フラグメント−NHCH(R9)-B(OH) は(R)-配置であり得る。しかし、本開示はこれらの配座のキラル中心に限定されない。
【０１１５】
化合物のあるクラスにおいて、P3 (S3結合) アミノ酸および／または P2 (S2結合) アミノ酸の側鎖は、下記式AまたはBの基から選択される水素以外の部分である：
【化６】
2007528381.tif 000007
［式中、
a は 0 または 1 である;
e は 1 である;
b および d は、独立に、0、または (b+d) が 0 〜 4 もしくは場合により (b+e) が 1 〜 4 となるような整数である;
c は 0 または 1 である;
D は O または S である;
Eは、H、C1-C6 アルキル、または通常最大14 員を含む飽和または非飽和環状基、特に5-6員環 (例えば、フェニル) もしくは8-14員の縮合環系 (例えば、ナフチル) であり、このアルキルまたは環状基は、C1-C6 トリアルキルシリル、-CN、-R13、-R12OR13、-R12COR13、-R12CO2R13 および -R12O2CR13から独立に選択される最大3つの基 (例えば、1つの基) により置換されていてもよく、ここでR12 は -(CH2)f- であり、R13は -(CH2)gH であり、あるいは、非水素原子が炭素原子および環内ヘテロ原子からなり、数が 5 〜 14 であり、かつ環系 (例えば、アリール基) ならびに所望によりアルキルおよび／またはアルキレン基を含有する部分により置換されていてもよく、ここでfおよびgはそれぞれ独立に0〜10であり、特にg は少なくとも 1 であり(なお、-OHも置換基として挙げられる)、ただし、(f+g) は10を超えず、より具体的には6を超えず、より一層具体的には 1、2、3または4 であり、また、置換基が前記のような環系を含有する部分である場合、またはEが C1-C6 トリアルキルシリルである場合、置換基は１つしか存在しない）；E1、E2 および E3 は、それぞれ独立に -R15 および -J-R15 から選択され、ここでJ は5-6員環であり、R15 は C1-C6 トリアルキルシリル、-CN、-R13、-R12OR13、-R12COR13、-R12CO2CR13、-R12O2CR13、および１または２のハロゲン(例えば、後者の場合、ジクロロフェニルである-J-R15 部分が形成される) から選択され、R12およびR13はそれぞれ上記で定義したR12部分およびR13部分である (ある種の酸において、E1、E2およびE3はR13基を含有し、gは0または1である) ］；式 (A) または (B) の部分では、いずれの環も炭素環または芳香族環、あるいはその両者であり、炭素原子に結合している１以上のいずれかの水素原子がハロゲン、特にFで置換されていてもよい。
【０１１６】
ある例において、a は 0 である。a が 1 の場合、c は 0 でありうる。特定の例において、(a+b+c+d) および (a+b+c+e) は 4 以下であり、特に 1、2 または 3 である。 (a+b+c+d) は 0 であってもよい。
【０１１７】
E、E1、E2、および E3 のための例示の基には、例えば、フェニル、ナフチル、ピリジル、キノリニルおよびフラニルなどの芳香族環；シクロヘキセニルなどの非芳香族不飽和環；シクロヘキシルなどの飽和環が含まれる。Eは、芳香族環および非芳香族環の両方を含有する縮合環系、例えばフルオレニルでありうる。E、E1、E2 および E3 基のあるクラスは芳香族 (ヘテロ芳香族を含む) 環、特に芳香族6員環である。ある化合物において、E1 は H であり、一方、E2 および E3 は H でない；これらの化合物において、E2 および E3 基の例はフェニル (置換または非置換) および C1-C4 アルキル、例えばメチルである。
【０１１８】
あるクラスの態様において、Eは、C1-C6 アルキル、(C1-C5 アルキル)カルボニル、カルボキシC1-C5アルキル、アリール (ヘテロアリールを含む)、特に5員または好ましくは6員のアリール (例えば、フェニルまたはピリジル) またはアリールアルキル (例えば、アリールメチルまたはアリールエチルであり、アリールはヘテロ環であってもよく、好ましくは6員である) である置換基を含有する。
【０１１９】
別のクラスの態様において、Eは、OR13 ［式中、R13は6員環、例えば芳香族環 (例えば、フェニル) であってよい］であるが、あるいは、かかる6員環で置換されたアルキル (例えば、メチルまたはエチル) である置換基を含有する。
【０１２０】
式AまたはBの部分のあるクラスは、Eが置換されていてもよい、特に 2位または 4位で -R13 または -OR13により置換されていてもよい芳香族6員環であるものである。
【０１２１】
本開示は、P3 および／または P2 側鎖 が、1 または 2 の水素がハロゲン、例えば、FまたはCl、で置換されている環状基を含む塩を含む。
【０１２２】
本開示は、式 (A) または (B) の側鎖が以下の式 (i)、(ii) または (iii) であるか、あるいは (ii)の一方または両方のフェニル環または(iii)のフェニル環がシクロヘキシルまたはシクロヘキセニルにより置換されているその変異体である、塩のクラスを含む。
【化７】
2007528381.tif 000008
［式中、q は 0 〜 5、例えば、0、1、または2であり、各 Tは独立に、水素、1、2、または 3 のハロゲン (例えば、FまたはCl)、-SiMe3、-CN、-R13、-OR13、-COR13、-CO2R13、または -O2CR13 である］。構造 (ii) および (iii) のいくつかの態様において、Tは、フェニル基の4位にあり、-R13、-OR13、-COR13、-CO2R13 または-O2CR13 であり、R13は C1-C10 アルキルであり、特に C1-C6 アルキルである。あるサブクラスにおいて、Tは -R13 または -OR13 であり、例えば、fおよびgは各々独立に 0、1、2、または 3 である；このサブクラスの一部の側鎖基においてTは-R12OR13 であり、R13は H である。
【０１２３】
あるクラスの部分において、側鎖は式 (i) であり、各 Tは独立にR13またはOR13であり、R13はC1-C4アルキルである。これらの化合物の一部においてR13は分枝アルキルであり、他のものにおいて直鎖である。ある部分においては、炭素原子数は 1 〜 4 である。
【０１２４】
ジペプチドフラグメント(ジペプチドはN末端が保護されていてもいなくてもよい)であるY- 基の多くにおいて、P3アミノ酸は上記の式 (A) または (B) の側鎖を有し、P2残基はイミノ酸である。
【０１２５】
したがって、本開示は、中性のP1(S1結合) 部分を有するトロンビン阻害薬、特に選択的トロンビン阻害薬である有機ボロン酸の塩、例えば金属塩を含む医薬を含む。トロンビンのS3、S2およびS1部位に結合する部分についてのさらなる情報は下記を参照：例えば Tapparelli C et al, Trends Pharmacol. Sci. 14: 366-376, 1993; Sanderson P et al, Current Medicinal Chemistry, 5: 289-304, 1998; Rewinkel J et al, Current Pharmaceutical Design, 5:1043-1075, 1999; および Coburn C Exp. Opin. Ther. Patents 11(5): 721-738, 2001。開示のトロンビン阻害性塩は、先の文に挙げた文献に記載されるS3、S2およびS1親和性基を有するものに限定されない。塩として存在するかわりに、有機ボロン酸は遊離酸またはプロドラッグ (例えば、 エステル)として存在してもよい。
【０１２６】
ボロン酸は、トロンビンに対するKiが約100 nM以下、例えば約20 nM以下でありうる。
【０１２７】
式 (I) の酸のあるサブセットは、以下の式 (III) の酸を含む。
【化８】
2007528381.tif 000009
［式中、XはN末端アミノ基に結合している部分であり、HであってNH2 を形成してもよい］。X の種類は重要でなく、前述の特定の X 部分であってよい。一例として、ベンジルオキシカルボニルが挙げられる。
【０１２８】
ある例において、Xは、R6-(CH2)p-C(O)-、R6-(CH2)p-S(O)2-、R6-(CH2)p-NH-C(O)- または R6-(CH2)p-O-C(O)- であり、ここでp は 0、1、2、3、4、5または6であり (なかでも0、1および2が好ましい)、R6は、Hまたは5〜13員環状基であり、該5〜13員環状基は１以上（例えば1、2、3、4または5）のハロゲン（例えばF）により、例えば少なくとも4位で置換されていてもよく、および／またはヒドロキシ、C5-C6 環状基、C1-C4 アルキル、および鎖内にOを含む、および／または該環状基に鎖内のOを介して連結するC1-C4 アルキル、から選択される 1、2 または 3 の置換基により置換されていてもよく、前記アルキル基は、ハロゲン、アミノ、ニトロ, ヒドロキシおよび C5-C6 環状基から選択される置換基により置換されていてもよい。特に、Xは R6-(CH2)p-C(O)- または R6-(CH2)p-O-C(O)- であり、これら部分においてp は 0、1、または 2 であり、R6はフェニルまたはフルオロフェニルでありうる。前記 5 〜 13員環状基は、しばしば芳香族またはヘテロ芳香族、例えば、6員の芳香族またはヘテロ芳香族基である。多くの場合、この基は置換されていない。
【０１２９】
例示的な X 基は、 (2-ピラジン) カルボニル、(2-ピラジン) スルホニル、および特にベンジルオキシカルボニルまたはベンジルメチルカルボニルである。
【０１３０】
aa1は、20以下の炭素原子 (例えば、15まで、所望により13までのC 原子) を含有するヒドロカルビル側鎖を有し、かつ13までの炭素原子を有する少なくとも１の環状基を含むアミノ酸残基である。ある例において、aa1 の環状基は5または6員環である。例えば、aa1 の環状基はアリール、特にフェニルである。典型的には、aa1 側鎖中に１または２の環状基が存在する。ある種の側鎖は、1または2の5-または6-員環で置換されたメチルを含むか、またはかかるメチルからなる。
【０１３１】
より具体的には、aa1は、Phe、Dpaまたは全体的または部分的に水素化されたそのアナログである。全体的水素化アナログは ChaおよびDChaである。
【０１３２】
aa2は、4〜6員環を有するイミノ酸残基である。あるいは、aa2は、C3-C13ヒドロカルビル基、例えばC3-C6ヒドロカルビル環を含むC3-C8ヒドロカルビル基により N置換されたGlyである；ヒドロカルビル基は飽和していてもよく、例えば、例示的 N置換基はシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルである。１以上の不飽和結合を含有するヒドロカルビル基としては、フェニル、およびフェニルで置換されたメチルまたはエチル、例えば、2-フェニルエチルおよび β,β-ジアルキルフェニルエチルが挙げられる。
【０１３３】
別の選択肢としては、aa2は、C3-C13ヒドロカルビル基、例えばC3-C6ヒドロカルビル環を含むC3-C8ヒドロカルビル基によりN置換されたGly(すなわち H2N-CH2-CH2-COOH)のβ-アミノ酸アナログである;ヒドロカルビル基は飽和していてもよく、例えば、例示的 N置換基はシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルである。１以上の不飽和結合を含有するヒドロカルビル基としては、フェニル、およびフェニルで置換されたメチルまたはエチル、例えば、2-フェニルエチルおよび β,β-ジアルキルフェニルエチルが挙げられる。
【０１３４】
本開示は、aa2が、4〜6員の炭素環を有するβ-アミノ酸の残基であって、その炭素環の１つの炭素原子が硫黄で置換されてもよく、かつその環形成炭素原子がカルボキシル基に対してα−またはβ-である炭素原子を含む (すなわち、β-アミノ酸が1位でカルボキシにより置換され、2位でアミノにより置換され、かつもう1つ別の位置でS原子を含みうる4〜6員の炭素環を含む）化合物のクラスを含む。
【０１３５】
例示的クラスの物は、aa2が下記式 (IV) のイミノ酸残基であるものを含む：
【化９】
2007528381.tif 000010
［式中、R11 は -CH2-、-CH2-CH2-、-CH2=CH2-、-S-CH2- または −CH2-CH2-CH2-であり、環が5または6員のとき、その基は１以上の-CH2-基において1〜3のC1-C3 アルキル基により置換されていてもよく、例えばR11基 -S-C(CH3)2- を形成する］。これらのイミノ酸のうち、アゼチジン-2-カルボン酸、特に (s)-アゼチジン-2-カルボン酸、およびより具体的にはプロリンが例示される。
【０１３６】
さらに挙げられるのは、aa2が以下の式 (XXVI)のβ-アミノ酸であるものである:
【化１０】
2007528381.tif 000011
［式中、R11 は先に定義したとおりである］。
【０１３７】
ある態様において、aa2は、N置換イミノ酸またはβ-アミノ酸の残基である。
【０１３８】
上記からわかるように、非常に好ましいもののクラスは、aa1-aa2がPhe-Pro であるものからなる。他の好ましいクラスにおいては、aa1-aa2はDpa-Pro である。他のものにおいては、aa1-aa2がCha-ProまたはDcha-Proである。もちろん、Proが (s)-アゼチジン-2-カルボン酸により置換された対応物のクラスも含まれる。
【０１３９】
R9は上記に定義されたものであり、式 -(CH2)s-Z の部分 R1 であり得る。整数sは 2、3 または 4 であり、Wは、-OH、-OMe、-OEt、またはハロゲン (F、Cl、I、または、好ましくはBr) である。 特に例示的な Z 基は -OMe および-OEt、特に-OMe である。ある例においてsは全Z基について3であり、実際、開示の全化合物について3である。特定の R1 基は、2-ブロモエチル、2-クロロエチル、2-メトキシエチル、4-ブロモブチル、4-クロロブチル、4-メトキシブチルおよび、特に3-ブロモプロピル、3-クロロプロピル、および 3-メトキシプロピルである。最も好ましくは、R1は3-メトキシプロピルである。2-エトキシエチルが別の好ましい R1 基である。
【０１４０】
したがって、ある具体的クラスの酸は、式 X-Phe-Pro-Mpg-B(OH)2、特に Cbz-Phe-Pro-Mpg-B(OH)2を有するものである；また含まれるのは、Mpg が別のR1基を有する残基で置換され、および／または Pheが Dpaまたは別のaa1残基で置換された、これらの化合物のアナログである。さらに含まれるのは、Cbzがベンジルメチルカルボニル (Ph-Et-CO-)で置換された化合物である。
【化１１】
2007528381.tif 000012
【０１４１】
酸の aa1 部分は好ましくはR配置である。aa2部分は好ましくは (S)-配置である。特に好ましい化合物はaa1が (R)-配置で、aa2が (S)-配置である。キラル中心 −NH-CH(R1)-B- は好ましくは (R)-配置である。市販製剤は (R,S,R) 配置のキラル中心を有すると思われ、例えばCbz-Phe-Pro-BoroMpg-OH の塩の場合である。
【０１４２】
好ましい態様において、本開示の様々な局面は、前記の酸の医薬上許容される塩基付加塩に関する。
【０１４３】
本開示は、Cbz-(R)-Phe-(S)-Pro-(R)-boroMpg-OH (および式 X-(R)-Phe-(S)-Pro-(R)-boroMpg-OHの他の化合物) の塩基付加塩を含み、これは少なくとも純度 90% 、例えば、少なくとも純度95% である。
【０１４４】
広い意味において、本明細書に記載の塩基付加塩は、上記の有機ボロン酸と強塩基、例えば、塩基性金属化合物との反応産物に対応すると考えることができる；しかし、塩は、かかる反応の結果である産物に限定されず、別の経路でも得ることができる。
【０１４５】
それゆえ、塩基付加塩は、本明細書に開示のボロン酸と強塩基とを接触させることより取得可能である。すなわち、本開示は式 (I) の酸と強塩基との反応産物の特性を有するもの (合成物) を包含する。塩基は医薬上許容されるものである。
【０１４６】
適当な塩として、金属、例えば一価または二価の金属の塩や、より強い有機塩基が挙げられ、例えば以下である：
１．アルカリ金属；
２．二価、例えばアルカリ土類金属塩；
３．グループIII金属；
４．強塩基性有機窒素含有化合物の塩、この化合物には以下が含まれる：
４Ａ.  グアニジンおよびそのアナログの塩
４Ｂ.  強塩基性アミン（例えば(i) アミノ糖および (ii) 他のアミンが含まれる）の塩。
【０１４７】
上記の塩について、特に例示されるのはアルカリ金属、特に Na および Li である。また例示されるのはアミノ糖である。
【０１４８】
具体的な塩は酸ボロネートの塩であるが、実際のところ、酸塩は非常に少量の二重に脱プロトンされたボロネートを含有することがある。用語「酸ボロネート」は、B-OH 基のひとつが脱プロトン化された三角形型  B(OH)2 基、およびそれと平衡状態にある対応する四面体型基を意味する。酸ボロネートは単一の脱プロトン化に一致する化学量を有する。
【０１４９】
本開示は、それゆえ、下記式 (V) で表すことができる塩を含むもの（合成物）を含む：
【化１２】
2007528381.tif 000013
［式中、Yn+ は強塩基から得られうる医薬上許容されるカチオンであり、aa1、aa2、X およびR1は上記に定義のとおりである］。さらに含まれるのは、R1 が別の R9 基で置換されたものである。
【０１５０】
あるクラスの塩の溶解度は、実施例に記載のように25mg/mlで溶解して測定した場合に約 10 mM 以上、例えば、少なくとも約 20mM である。特にさらに、その溶解度は、実施例に記載のように溶解 50mg/ml で溶解して測定した場合に少なくとも約 50mM である。
【０１５１】
本開示は、式 「(ボロネート-)n カチオンn+」である（これにより表示されうる）塩に一致する観測化学量を有するボロン酸 (I) の塩を含む。かかる塩のあるクラスは下記式により表示される：
[Cbz-(R)-Phe-(S)-Pro-(R)-Mpg-B(OH)(O-)]M+
［式中、 M+ は一価カチオン、特にアルカリ金属カチオンを表す］。明らかなように、上記の表示はものの概念的な表示であって、その観測化学量は文言どおりでなく厳密には 1:1 でない。いずれにせよ、ある特定の塩は Cbz-(R)-Phe-(S)-Pro-(R)-Mpg-B(OH)2 のモノナトリウム塩 (TGN 255) である。上記式において、三角形型に表示されたボロネートは、同じように、三角形型、四面体型または三角形／四面体混合型であるボロネートを表す。
【０１５２】
特に例として下記を含む物がある：
(i) (a) 式 (VIII)：X-(R)-Phe-(S)-Pro-(R)-Mpg-B(OH)2［式中、Xは H またはアミノ保護基、特に Cbz）の酸、(b) そのボロネートアニオン、および(c) 前記のいずれの平衡形態（例えば、無水物）から選択される種；および
(ii) 前記の種と組み合わされる n 価のイオン、ここでこの種およびイオンは、概念的な種：イオンの化学量 n:1 に一致する観測化学量を有する］。あるクラスの塩において、n は 1 である。
【０１５３】
次に対イオンを考察する：
1. 一価金属、特にアルカリ金属の塩
好適なアルカリ金属には、リチウム、ナトリウムおよびカリウムが含まれる。これらはすべてかなり可溶性である。リチウムおよびナトリウムがその高い溶解度からみて例示される。なかでもリチウムおよび特にナトリウムの塩は、カリウムに比して驚くほど高い溶解度を有する。ナトリウムが多くの場合最も使用される。アルカリ金属の混合物を含有する塩は本開示に包含される。
【０１５４】
本開示は、式 (VI) の塩：
【化１３】
2007528381.tif 000014
［式中、M+はアルカリ金属イオンであり、aa1、aa2、XおよびR1は上記の定義のとおりである］、およびボロネート基の両ヒドロキシ基が塩の形態である塩 (好ましくは、もう一つの同じM+基との塩) 、ならびにかかる塩の混合物である。R1が他のR9基で置換されたものも含まれる。
【０１５５】
２．二価、例えばアルカリ土類金属（グループII金属）塩
二価金属の一例はカルシウムである。他の好適な二価金属はマグネシウムである。亜鉛もまた包含される。二価金属は通常、好ましい一価ボロネート部分を得るために、ボロン酸：金属の比が実質的に２：１にて使用される。二価金属の混合物、例えばアルカリ土類金属の混合物を含有する塩も包含される。
【０１５６】
さらなる開示は、式 (VII) で表されうる塩：
【化１４】
2007528381.tif 000015
［式中、M2+は二価金属カチオン、例えばアルカリ土類金属または亜鉛カチオンであり、aa1、aa2'、XおよびR9は上記定義のとおりである］、およびボロネート基の両ヒドロキシ基が脱プロトン化されている塩、ならびにかかる塩の混合物を含むもの（合成物）である。上記のように、ボロネートは四面体型種を含みうる。
【０１５７】
３．グループIII金属
好適なグループIII金属には、アルミニウムまたはガリウムが含まれる。グループIII金属の混合物を含む塩も包含される。
【０１５８】
本開示は、式(VIII) の塩：
【化１５】
2007528381.tif 000016
［式中、うち、M3+はグループIII金属イオンであり、aa1、aa2、XおよびR9は上記定義のとおりである］、およびポロネート基の両ヒドロキシ基は脱プロトン化されている塩、ならびにかかる塩の混合物を含むものを含む。上記のように、ボロネートは四面体種を含みうる。
【０１５９】
４. 強塩基性有機窒素含有化合物
本開示は、上記で定義のペプチドボロン酸と強有機塩基との反応により得られうる（その反応により得られた産物の特性を有する）産物を含む。有機塩基の好ましい２クラスについて下記のセクション4Aおよび4Bで述べる。特に好ましいのは酸塩 (２つのボロン酸の −OH 基のうち１つが脱プロトン化されているもの) である。最も一般的には、塩は単一のタイプの有機対イオンを含有するが (微量の混入物は無視する)、本開示は、有機対イオンの混合物を含有する塩を包含する；あるサブクラスにおいて、異なる対イオンはすべて、下記のセクション 4A ファミリーに入るか、または場合により下記のセクション4Bファミリーに入る。別のサブクラスにおいて、塩は、すべてが同じファミリー (4Aまたは4B) に由来するわけでない有機対イオンの混合物を含む。
【０１６０】
好適な有機塩基には、pKbが7以上、例えば7.5以上、例えば8以上の範囲のものが含まれる。親油性が低い[例えば、少なくとも１つの極性官能基 (例えば、1、2または3のかかる基)、例えばヒドロキシ、を有する] 塩基が好ましい；したがって、アミノ糖がひとつの好ましいクラスの塩基である。
【０１６１】
４Ａ. グアニジンおよびそのアナログ
グアニジノ化合物 (グアニジン) は、原則的にグアニジノもしくは置換グアニジノ基を有する可溶性かつ医薬上許容される化合物、または置換もしくは非置換のグアニジンアナログであり得る。好適な置換基には、アリール (例えば、フェニル)、アルキルまたはエーテルもしくはチオエーテル結合が介在するアルキルがあり、これら置換基は、典型的には1〜6、特にメチルまたはエチルの場合のように 1、2、3または4の炭素原子を含有する。グアニジノ基は、例えば末端窒素上に、1、2、3または4の置換基を有し得るが、通常は1または2 の置換基を有する。あるクラスのグアニジンはモノアルキル化されている；他のクラスはジアルキル化されている。グアニジンアナログの例としてチオグアニジンおよび 2-アミノピリジンがある。非置換グアニジノ基を有する化合物、例えばグアニジンおよびアルギニンは、ある特定のクラスを形成する。
【０１６２】
本開示は、グアニジン類の混合物を含有する塩を包含する。
【０１６３】
具体的なグアニジノ化合物は、L-アルギニンまたは L-アルギニンアナログ、例えば、D-アルギニン、あるいはホモアルギニンまたはアグマチン[(4-アミノブチル)グアニジン]の D- または好ましくは L- 異性体である。次に好ましいアルギニンアナログは、例えばNG-ニトロ-L-アルギニンメチルエステルや、拘束（constrained）グアニジン類似体、特に 2-アミノピリミジン、例えば5,6,7,8-テトラヒドロ-2,6-キナゾリンジアミンなどの2,6-キナゾリンジアミンである。グアニジノ化合物はペプチドであってもよく、例えばアルギニンを含有するジペプチドである。このジペプチドの１つは L-チロシル-L-アルギニンである。
【０１６４】
いくつかの特定のグアニジノ化合物は下記式 (VII) の化合物である：
【化１６】
2007528381.tif 000017
［式中、nは1〜6、例えば少なくとも 2、例えば 3 以上であり、多くの場合 5 を超えない］。特に、nは3、4または5である。R2はHまたはカルボキシラートもしくは誘導体化カルボキシラートであり、例えば、エステル (例えば、C1-C4 アルキルエステル) またはアミドを形成する。R3はH、C1-C4 アルキル、または天然もしくは非天然のアミノ酸 (例えばチロシン) の残基である。式 (IV) の化合物は通常 L-配置である。式 (IV) の化合物はアルギニン (n=3、R2=カルボキシル、R3=H) およびアルギニン誘導体またはアルギニンアナログである。
【０１６５】
本開示は、下記式 (IX) の塩：
【化１７】
2007528381.tif 000018
［式中、aa1、aa2、XおよびR1は上記の定義のとおりであり、G+ はグアニジノ基を含む医薬上許容される有機化合物またはそのアナログのプロトン化形態である］、およびボロネート基の両ヒドロキシ基が(好ましくはもう一つの同一の G+ 基との)塩の形態である塩、ならびにかかる塩の混合物を含むものを包含する。R1が別の R9 基で置換されたものもまた包含される。
【０１６６】
4B. 強塩基性アミン
本開示は、上記に定義されたペプチドボロン酸とアミンである強有機塩基との反応により得られうる産物 (該反応により得られた産物の特性を有する産物) を含む。このアミンは、原則的にいずれの可溶性かつ医薬上許容されるアミンであってもよい。
【０１６７】
予測されるように、望ましいクラスのアミンには単一のアミン基に加えて極性官能基を有するものが含まれ、なぜならかかる化合物は他のものよりも親水性であり、それゆえにより可溶性だからである。ある種の塩において、１または複数のさらなる官能基の各々はヒドロキシである。いくつかのアミンは1、2、3、4、5または6のさらなる官能基、特にヒドロキシ基を有する。ある例示的クラスのアミンにおいて、(アミノ基＋ヒドロキシ基)：炭素原子の比率は1:2 〜1:1であり、後者の比率が特に好ましい。１以上のさらなる極性官能基を有するこれらのアミンは、アミノ基および（１または複数の）さらなる極性基により置換された炭化水素、特にアルカン、であり得る。アミノ基は置換されていても非置換であってもよく、アミノ置換基を除き、極性塩基は、例えば、10までの炭素原子を含有してもよい；通常、かかる炭素原子は３以上、例えば、4、5または6である。アミノ糖はこのカテゴリーの極性塩基に含まれる。
【０１６８】
本開示は、下記式 (X)の塩：
【化１８】
2007528381.tif 000019
［式中、aa1、aa2、X およびR1は上記の定義のとおりであり、A+は医薬上許容されるアミンのプロトン化形態である］、およびボロネート基の両ヒドロキシ基が(好ましくはもう１つの同一の A+ 基との)塩の形態である塩、ならびにかかる塩の混合物を含むものを包含する。かかるもののあるクラスにおいて、A+は下記のセクション4B(i)に記載されるアミンのプロトン化形態である；別のクラスにおいて、A+は下記のサブセクション4B(ii)に記載されるアミンのプロトン化形態である。R1 が別の R9 基で置換されたものもまた包含される。
【０１６９】
アミン塩基の例示的な２つのクラスについて下記のサブセクション4B(i)および4B(ii)で述べる。特に好ましいのは酸塩 (２つのボロン酸 −OH 基の１つが脱プロトン化されている) である。最も一般的には、この塩は単一のタイプのアミン対イオンを含有するが (微量の汚染物は無視する)、本発明はアミン対イオンの混合物を含有する塩を包含する；あるサブクラスにおいて、異なる対イオンがすべて下記のセクション4B(i) ファミリーに入るか、または場合により下記のサブセクション4B(ii)ファミリーに入る。別のサブクラスにおいて、この塩は、すべてが同じファミリー (4B(i)または4B(ii)) に由来するのではない有機対イオンの混合物を含む。
【０１７０】
4B(i) アミノ糖
アミノ糖の種類は本発明において重要でない。好ましいアミノ糖には、開環の糖、特にグルカミンが含まれる。環状アミノ糖も有用である。あるクラスのアミノ糖は N非置換であり、別の好ましいクラスは１または２ (例えば、１)の N置換基によりN置換されている。好適な置換基は、例えば、限定でないが、1〜12の炭素原子を含有するヒドロカルビル基である；この置換基はアルキルもしくはアリール部分またはその両者を含みうる。例示的置換基は、C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7およびC8アルキル基、特にメチルおよびエチルであり、なかでもメチルが好ましい。データによると、アミノ糖、特に N−メチル−D−グルカミンが驚くべき高い溶解性を有する。
【０１７１】
最も好ましいアミノ糖はN−メチル−D−グルカミンである：
【化１９】
2007528381.tif 000020
【０１７２】
4B(ii) 他のアミン類
他の好適なアミンには、側鎖がアミノ基で置換された(天然または非天然の)アミノ酸、特にリシンが含まれる。
【０１７３】
いくつかのアミンは下記式 (XI) の化合物である：
【化２０】
2007528381.tif 000021
［式中、n、R2およびR3は式 (IV) について定義されたものである］。式 (VI) の化合物は通常L-配置である。式 (VI) の化合物はリシン (n=4；R2=カルボキシル；R3=H) およびリシン誘導体またはリシンアナログである。最も好ましいアミンは L-リシンである。
【０１７４】
別の好適なアミンは窒素含有ヘテロ環である。少なくとも通常、かかるヘテロ環状化合物は脂環状である。あるクラスのヘテロ環状化合物は N置換であり、別の好ましいクラスはN非置換である。ヘテロ環は、ピペリジン、ピペラジンおよびモルホリンのように 6つの 環形成原子を含有しうる。あるクラスのアミンには、極性置換基、特にヒドロキシにより、例えば 1、2 または 3 回置換された、N-含有ヘテロ環が含まれる。
【０１７５】
本開示はそれゆえ、１以上 (例えば、1、2、3、4、5 または 6) の極性置換基、特にヒドロキシを１つのアミン基に加えて有する、アミノ糖以外のアミンを含む。かかる化合物は (アミノ基＋ヒドロキシ基)：炭素原子の比率が1:2〜1:1であり、後者の比率が特に好ましい。
【０１７６】
本開示は、混合の塩、すなわちボロペプチド部分および／または対イオンの混合物を含有する塩を含むが、単一の塩が好ましい。
【０１７７】
固体形態の塩は、溶媒、例えば水を含有しうる。塩が実質的に無水であるクラスのものも含まれる。塩が水和物であるクラスもまた含まれる。
【０１７８】
新規ボロン酸
本開示は、血栓症の処置、例えば予防、に有用な、新規ボロン酸およびその誘導体を提供する。この新規な酸には、下記の式 (IA)を有するものが含まれる:
【化２１】
2007528381.tif 000022
［式中、
Yは、フラグメント −CH(R9)-B(OH)2 とともに、トロンビンの基質結合部位への親和性を有し、かつβ-アミノ酸の残基を含むトロンビンP2ドメインを含む；および
R9は、1以上（例えば1または2）のエーテル結合が介在し、その酸素および炭素原子の総数が3、4、5または6（例えば5）である直鎖アルキル基である、またはR9は、-(CH2)m-W であり、ここでmは 2、3、4または5（例えば4）であり、Wは-OH またはハロゲン (F、Cl、BrまたはI）である］。R9は、化合物のあるサブセットにおいて、アルコキシアルキル基、例えば、4 炭素原子を含有するアルコキシアルキルである。
【０１７９】
β-アミノ酸はトロンビンのS2サブサイトに親和性を有し、β-アミノ酸であってもβ-イミノ酸であってもよい。
【０１８０】
β-アミノ酸は、C3-C13ヒドロカルビル基、例えば、C3-C6ヒドロカルビル環を含むC3-C8ヒドロカルビル基によりN置換されたGly(すなわち H2N-CH2-CH2-COOH)のβ-アミノ酸アナログであってよい;ヒドロカルビル基は飽和していてもよく、例えば例示的な N置換基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルである。1以上の不飽和結合を含有するヒドロカルビル基としては、フェニルおよびフェニルにより置換されたメチルまたはエチル、例えば、2-フェニルエチル、並びにβ, β-ジアルキルフェニルエチルが挙げられる。
【０１８１】
本開示は、β-アミノ酸が、4〜6員環の炭素環であって、１つの炭素原子が硫黄で置換されていてもよく、かつその環形成炭素原子がカルボキシル基に対してα-およびβ-である炭素原子を含む炭素環を有するβ-アミノ酸の残基である化合物のクラスを含む(すなわち、このβ-アミノ酸は、1位がカルボキシルにより、2位がアミノにより置換され、かつ他の１つの位置がS原子を含有してもよい4〜6員環の炭素環を含む）。
【０１８２】
β-アミノ酸としては、下記の式 (XXVI)のβ-アミノ酸もまた挙げられる:
【化２２】
2007528381.tif 000023
［式中、R11は上記定義のとおりである］。
【０１８３】
一部の態様において、β-アミノ酸は、N置換イミノ酸またはN置換β-アミノ酸の残基である。
【０１８４】
本開示には、aa2がここに開示するβ-アミノ酸である上記式 (II)の酸が含まれる。
【０１８５】
この新規な酸は、本明細書に製剤に関して開示されるように、酸、塩、プロドラッグ、またはプロドラッグの塩の形態であってよい。それらは例えば、エステル、塩基付加塩、または酸付加塩である。エステルは、前述のジオール、例えば、ピナコール、ピナンジオール、または糖、例えばマンニトールまたはソルビトール、のエステルであってよい。
【０１８６】
この酸およびその誘導体は、単独で、または医薬上許容される希釈剤、賦形剤、または担体と組み合わせて、医薬製剤として提供することができる。本開示は製剤のタイプについて拘束されず、経口投与のための製剤、例えば錠剤、カプセル、顆粒、または粉末であってよい。製剤は、本明細書に記載されるような再構成可能製剤であってもよいが、そうである必要はない。錠剤またはカプセルは、腸溶性コーティングされていても、されていなくてもよい。
【０１８７】
非経口製剤としては、静脈内投与用製剤(例えば、等張溶液) または液体の静脈内投与用製剤として再構成するための粉末/顆粒が挙げられる。非経口製剤は、微細粉末、例えば凍結乾燥粉末、を含んでも良く、所望により適した賦形剤、例えば等張化剤を含んでもよい。
【０１８８】
化合物は、疾患の処置において、例えば本明細書に記載の適応またはトロンビン阻害が有益な他のいずれかの適応について、トロンビンを阻害するために投与することができる。
【０１８９】
新規化合物の態様の他の構造的および機能的特性は、本明細書に開示の製剤、方法、および使用に用いられる化合物に関して本明細書に記載されるとおりである。
【０１９０】
新規化合物は、選択肢を提供する。意図されるように、少なくとも一部の態様において、化合物は、少なくとも広い意味において、効力または特異性あるいはその両方がTRI 50cと比較して維持または改善されている。
【０１９１】
少なくとも一部の態様において、化合物はバイオアベイラビリティが維持または増強されている。新規化合物の医薬的有用性に寄与しうる他の性質には、例えば製剤の保存安定性または簡便性が含まれる。
【０１９２】
2-アミノ-シクロアルキルカルボン酸の合成は、WO 98/03540に記載される。
【０１９３】
合成方法およびその産物
１．ペプチド／ペプチドミメティックの合成
例えばCbz-D-Phe-Pro-BoroMpg-Oピナコールを含むボロペプチドの合成は、当業界で周知であり、Claeson et al (US 5574014 など) および Kakkar et al (WO 92/07869 および US 5648338 を含むファミリーメンバー) を含む前述の先行技術文献に記載されている。また、Elgendy et al Adv. Exp. Med. Biol. (USA) 340:173-178, 1993; Claeson, G. et al Biochem.J. 290:309-312, 1993; Deadman et al J. Enzyme Inhibition 9:29-41, 1995, および Deadman et al J. Med. Chem. 38:1511-1522, 1995 にも記載されている。
【０１９４】
キラルなB-末端炭素での S またはR配置の立体選択的合成は、確立された技術 (Elgendy et al Tetrahedron. Lett. 33:4209-4212, 1992; WO 92/07869 および US 5648338 を含むファミリーメンバー) により、 (+) または (-) ピナンジオールをキラル・ディレクターとして用いて (Matteson et al J. Am. Chem. Soc. 108:810-819, 1986; Matteson et al, Organometallics. 3:1284-1288, 1984)実施できる。他の方法は、必要なアミノボロネート中間体 (例えば、Mpg-BOピナコール) を溶融し、選択的に所望の (R)-異性体を得て、それをその分子の残りの部分を形成するジペプチド部分 (例えば、Cbz-(R)-Phe-(S)-Pro、これはCbz-D-Phe-L-Pro と同じである）と結合させる。
【０１９５】
ボロペプチドは、最初にボロン酸エステルの形態、特にジオールとのエステルの形態にて合成してもよい。かかるジオールエステルは、次に記載のペプチドボロン酸に変換することができる。
【０１９６】
２．エステルの酸への変換
Cbz-(R)-Phe-Pro-BoroMpg-Oピナコールなどのペプチドボロン酸エステルを加水分解して、対応する酸をつくることができる。
【０１９７】
例えば式 (I) のペプチドボロン酸のジオールエステルを酸に変換する新しい技術は、ジオールエステルをエーテル、特にジアルキルエーテルに溶解すること、この溶解したジオールをジオールアミン、例えばジアルカノールアミンと反応させ、産物沈澱物を形成させること、沈殿物を回収すること、それを極性有機溶媒に溶解すること、およびこの溶解した産物を水性媒体、例えば水性酸と反応させ、ペプチドボロン酸を形成させることを含む。このボロン酸は、反応から得られる混合物の有機層から、例えば溶媒を減圧下蒸発または蒸留などにより除去することによって、回収することができる。ジオールエステルとジオールアミンとの反応は、例えば、還流下において実施することができる。
【０１９８】
ジオールの種類は重要でない。好適なジオールとして、隣接炭素原子上または他の炭素により置換された炭素原子上で置換されたヒドロキシ基を有する脂肪族および芳香族化合物が挙げられる。すなわち、好適なジオールには、鎖内または環内に少なくとも２つの結合した炭素原子により隔てられた少なくとも２つのヒドロキシ基を有する化合物が含まれる。あるクラスのジオールには、丁度２つのヒドロキシル基で置換された炭化水素が含まれる。かかるジオールの１つはピナコールであり、他のものはピナンジオールである。また、ネオペンチルグリコール、1,2-エタンジオール、1,2-プロパンジオール、1,3-プロパンジオール、2,3-ブタンジオール、1,2-ジイソプロピルエタンジオール、5,6-デカンジオールおよび 1,2-ジシクロヘキシルエタンジオールが挙げられる。
【０１９９】
ジアルキルエーテルのアルキル基は好ましくは 1、2、3または4 つの炭素原子を有し、それらアルキル基は同一であっても異なっていても良い。エーテルの１例はジエチルエーテルである。
【０２００】
ジアルカノールアミンのアルキル基は、好ましくは 1、2、3または4 つの炭素原子を持ち、それらアルキル基は同一であっても異なっていても良い。ジアルカノールアミンの１例はジエタノールアミンである。ジエタノールアミン／ボロン酸の反応産物は水中にて室温で加水分解し、加水分解の速度は酸または塩基の添加で促進されうる。
【０２０１】
極性有機溶媒は好ましくはCHCl3である。他の例は、一般的にはポリハロゲン化アルカン、および酢酸エチルである。原則として、アルコール以外のいかなる極性有機溶媒も許容される。
【０２０２】
水性酸は、好適にはpH 1程度の強無機酸、例えば、塩酸である。 
【０２０３】
酸との反応後、反応混合物を好適なように、例えば NH4Cl または別の緩和な塩基で洗浄する。
【０２０４】
具体的な操作の例は下記のとおりである。
1. 選択したペプチドボロン酸のピナコールまたはピナンジオールエステルをジエチルエーテルに溶解する。
2. ジエタノールアミンを添加し、混合物を40℃で還流する。
3. 沈殿産物を採取し(ろ過し)、ジエチルエーテルまたはアルコール以外の別の極性有機溶媒で (通常数回) 洗浄し、乾燥する (例えば、減圧下蒸発による)。
4. 乾燥産物をアルコール以外の極性有機溶媒、例えば、CHCl3に溶解する。水性の酸または塩基、例えば塩酸 (pH 1) を添加し、混合物を、例えば 約 1 時間室温で攪拌する。
5. 有機層を採取し、NH4Cl 溶液で洗浄する。
6. 有機溶媒を留去し、残渣の固体産物を乾燥する。
【０２０５】
上記の方法は、ペプチドボロン酸の「ジオールアミン付加体」と便宜的に言うことができるもの、特にジエタノールアミンの付加体、を形成し、かかる付加体はそれ自体本開示に含まれる。
【０２０６】
明らかなように、上記の技術は有機ボロン酸産物を回収する方法の例を含み、その方法は、可溶性形態の有機ボロン酸と２つのヒドロキシ基および１つのアミノ基を有する化合物 (すなわち、ジオールアミン) とを含む溶解混合物を溶媒中に提供すること、有機ボロン酸とジオールアミンとを反応させ、またはそれらの反応を起こさせ、沈殿物を形成させること、およびこの沈殿物を回収することを含む。可溶性形態の有機ボロン酸は、上記のようにジオールエステルであってよい。溶媒は、上記のようにエーテルであってよい。有機ボロン酸は本明細書に挙げた有機ボロン酸の１つであってよく、例えば、式 (I) または (III) のものであってよい。本段落に記載の方法は新規であり開示の１局面を形成する。回収方法はろ過である。
【０２０７】
ジオールアミンと可溶性形態の有機ボロン酸との反応は、高い温度で、例えば還流下において好適に実施できる。
【０２０８】
本開示の別の局面は、以下を含む有機ホウ素種を回収する方法である：
エーテルに可溶性の形態の有機ボロン酸、例えば、式 (III) の化合物のような薬物を提供すること；
エーテル中において可溶性形態の溶液を形成すること；
この溶液をジアルカノールアミンと組み合わせ、ジアルカノールアミンと可溶性形態の有機ボロン酸とを反応させ、またはそれらの反応を起こさせ、不溶性沈殿物を形成させること；
この沈殿物を回収すること。
【０２０９】
先の段落における用語「可溶性」は、反応媒体中において沈殿産物よりも実質的により可溶性である種を意味する。変法においては、エーテルをトルエンまたは別の芳香族溶媒に置き換える。
【０２１０】
上記のジエタノールアミン沈澱技術は別の新規方法の例であり、この方法はエーテル溶液からペプチドボロン酸のピナコールまたはピナンジオールエステルを回収する方法であって、ジエタノールアミンを溶液中に溶解し、沈殿物を形成させること、または沈殿物の形成を起こさせること、およびこの沈殿物を回収することを含む。本開示は、ピナコールまたはピナンジオール以外の別のジオールを用いる変法も包含する。
【０２１１】
沈殿した物質、例えば「付加体」は、例えば酸と接触させることにより、遊離の有機ボロン酸に変換できる。酸は、例えば、上記のような水性無機酸などの水性酸であってよい。沈殿物は、酸との接触の前に、例えば有機溶媒中に溶解してもよい。
【０２１２】
本開示は、それゆえ、有機ボロン酸を製造する方法を提供し、この方法はそのジオールアミン反応産物を有機ボロン酸に変換することを含む。
【０２１３】
上記の２つの段落に記載される方法から得られる酸は、多価金属との酸の塩に変換することができ、その塩は次いで非経口投与形態の医薬組成物に製剤化することができる。
【０２１４】
３．塩の合成
３．１  塩基付加塩
一般的に、塩は、適当なペプチドボロン酸を所望の塩の形成に適する強塩基と接触させることにより調製することができる。金属塩の場合、水酸化金属は好適な塩基であり(あるいは、例えば、金属カルボナートが用いられこともある) （酸を適当な金属アルコキシド (例えば、メトキシド) と接触させる方が好都合な場合もある）、この目的では対応するアルカノールが好適な溶媒である。有機塩基との塩は、ペプチドボロン酸を有機塩基自体と接触させることにより調製することができる。例示的な塩として酸塩 (１つの BOHのプロトン置換) が挙げられ、一価カチオンとの酸塩をつくるために、酸と塩基とを実質的に等モル量で反応させることが好適である。一般的に、したがって、通常の酸：塩基のモル比は実質的にn:1であり、n は塩基のカチオン価である。
【０２１５】
ある操作において、ペプチドボロン酸の水混和性有機溶媒、例えばアセトニトリルやアルコール (例えば、エタノール、メタノール、イソプロパノールなどのプロパノールまたは他のアルカノール) の溶液を、塩基の水溶液と組み合わせる。酸と塩基とを反応させ、塩を回収する。反応は典型的には周囲の温度 (例えば、温度15〜30℃、例えば15〜25℃) で実施するが、より高い温度、例えば最大で反応混合物の沸点までの温度を用いることができ、しかしより一般的にはより低い温度、例えば最大で40℃または50℃までの温度を用いる。反応混合物は放置してもよく、振盪 (通常は攪拌) してもよい。
【０２１６】
酸と塩基とを反応させる時間は重要でないが、反応混合物を少なくとも１時間置くのが望ましいことがわかっている。１〜２時間が通常好適であるが、より長い反応も用いることができる。
【０２１７】
塩は、反応混合物から、いずれかの好適な方法、例えば蒸発や沈澱により回収することができる。沈澱は、塩の溶解度が限られる混和性溶媒を過剰に添加することにより実施できる。ある好ましい技術においては、反応混合物を吸気乾燥することで塩を回収する。塩は、その後精製するのが好ましく、例えば、得られる液体をろ過前に再溶解し、それを吸気乾燥などにより乾燥する。再溶解には、水、例えば蒸留水を用いることができる。塩は次いで、残った水を除去するために好適な溶媒、好都合には酢酸エチルまたはTHF中に再溶解することにより、さらに精製することができる。精製操作は、周囲の温度 (すなわち、15〜30℃、例えば15〜25℃) またはやや高い温度、例えば40℃もしくは50℃を超えない温度にて実施することができる；例えば、塩を水および／または溶媒に、加温ありまたはなしで、例えば37℃で、撹拌することにより溶解することができる。
【０２１８】
また、本開示の塩および他のペプチドボロン酸塩を乾燥する方法もまた含まれ、これは、これらの塩を有機溶媒、例えば酢酸エチルまたはTHFに溶解し、ついで吸引などにより蒸発乾固することを含む。
【０２１９】
一般的に、塩の精製における使用に好ましい溶媒は、酢酸エチルまたはTHF、または他の有機溶媒である。
【０２２０】
Cbz-Phe-Pro-BoroMpg-OH の塩を合成する一般的な操作は下記の通りである：
Cbz-Phe-Pro-BoroMpg-OH (20.00g、38.1mM) をアセトニトリル (200ml) に室温で攪拌して溶解する。この液に必要な塩基（蒸留水溶液 (190ml) ）を添加する；塩基は一価カチオンにつき 0.2M の溶液として添加する。得られる澄明液を、例えば通常の時間、いずれの場合も１−２時間、放置するか攪拌する。反応は、典型的には周囲の温度 (例えば、15〜30 ℃、例えば15〜25℃) で実施するが、あるいは温度を上げることもできる (例えば、30 ℃、40℃または 50℃まで)。ついで反応混合物を37℃を超えない温度で減圧下吸気乾燥すると、典型的には白色のもろい固体または油状/粘着性の液体が得られる。この油状／粘着性の液体を必要最少量の蒸留水 (200 ml〜4 L) に、典型的には加温して (例えば、30-40℃まで)、通常 2 時間までで再溶解する。この溶液を、好適には濾紙により、ろ過し、再び37℃を超えない溶液温度で吸気乾燥し、凍結乾燥する。得られた産物を一晩減圧で乾燥すると、通常白色のもろい固体が得られる。産物が油状または粘着性の固体である場合、それを酢酸エチルに溶解し、吸気乾燥し、白色固体としての産物を生産する。白色固体は、典型的には粗い無定形の粉末である。
【０２２１】
上記の一般的操作の変形においては、アセトニトリルを他の水混和性有機溶媒、とりわけ、上記したようなアルコール、特にエタノール、メタノール、イソプロパノールなどのプロパノールで置換する。
【０２２２】
ボロン酸塩が塩形成のために選択された反応媒体に溶けにくく、対応する酸および塩基からの直接的調製が好都合でない場合、その溶けにくい塩は、反応媒体により溶けやすい塩から調製することができる。
【０２２３】
また、本開示の塩基付加塩を製造するためのボロン酸の使用が提供される。さらに、本開示の産物を調製する方法も含まれ、この方法は、ボロン酸、例えば式 (I)、(II) または (III) のボロン酸を、かかる塩をつくることができる塩基と接触させることを含む。
【０２２４】
３．２  酸付加塩
通常、酸付加塩は、適当なボロペプチド (例えば、ボロン酸またはエステルその他のプロドラッグ)を所望の塩の形成に適する酸と接触させることにより、調製することができる。
【０２２５】
４．立体異性体の分離
ペプチドボロン酸エステルまたは合成中間体アミノボロネートの立体異性体は、例えば、いずれの既知の方法によっても分割することができる。具体的には、ボロン酸エステルの立体異性体はHPLCで分割することができる。
【０２２６】
５．「高純度」合成
既存の刊行物は、有機ボロン酸がC-B結合の酸化により分解されることを教示している。例えば、Wu et al（上記参照）を参照。TRI 50cの塩に関する初期の研究では、これらの塩がC-B結合の切断によって生じたことが明らかな不純物 Iと呼ばれるホウ素を含まない不純物を含み、この塩および／または中間体はその調製の際やや不安定であることが確認されている。あるクラスの塩は、このような分解に対して遊離酸よりも著しく安定である。
【０２２７】
これらの初期のTRI 50c塩は、本明細書の実施例５および９に記載されている一般法により製造されたものである。不純物 Iは以下の構造を有する：
【化２３】
2007528381.tif 000024
【０２２８】
実施例５および９の一般的操作に従って製造される塩の相対的キラル純度は、TRI 50bと呼ばれるTRI 50cのピナコールエステルをHPLCにより分割し、このようにして分割したTRI 50bを塩に変換することにより達成される。このようなHPLC操作は通常の商業的な薬物生産には適さない。
【０２２９】
「アミノボロネート法」と題して要約した先行技術の合成をTRI 50cまたはそのエステルの合成に適用すると、下記の不純物 IVが形成されることがわかった：
【化２４】
2007528381.tif 000025
【０２３０】
TRI 50cから不純物 IVを分離する試みは成功していない。同じことが、TRI 50cの塩およびエステルならびに対応する不純物 IVの塩およびエステルについても言える。このような先行技術の合成を用いる限り、不純物 IVの存在を回避できる精製技術はなかった。
【０２３１】
とりわけ、本明細書の本節に記載される合成方法は、有機ボロン酸化合物におけるC-B結合切断の制御、ならびにTRI 50cおよびその他の有機ボロン酸のキラル的に純粋な塩を商業的規模で得るという課題に対処する。これに関して、C-B結合は、多くの溶媒、とりわけ水や例えば水性の酸および塩基、の存在下で起こる非酸化的メカニズムにより切断されるようであることが分かった。
【０２３２】
キラル選択的沈殿を用いると、有機ボロン酸を高純度で回収することができる。
【０２３３】
このように、C-B結合の切断（したがって、具体的には不純物 Iの生成）は、下記により制御することができる：
・処理に溶媒が必要であり、アセトニトリルが必要な溶媒力を持っている場合には、アセトニトリルを選択すること（特に、アセトニトリルは、極性溶媒が望ましいかまたは必要な方法において選択される）、
・水との過度の接触を避けること。
【０２３４】
それゆえ、TRI 50c塩の産生に関して、本開示は以下の特徴のうち１つ、２つまたは３つを含む方法を含む：
（i）ジエタノールアミンを用い、必ずしも必要ではないが便宜的に、出発物質としてエステル、例えばピナコールエステル、の形態のTRI 50cを用いるキラル選択的沈殿による、TRI 50cの（R,S,S）および（R,S,R）エピマーの分割；
（ii）C-B結合の切断の制御のための、TRI 50cジエタノールアミンエステル、例えばかかる沈殿によって得られるエステル、の加水分解時間および／または条件の制御；
（iii）TRI 50cと塩基とを反応させて塩を形成するための、TRI 50c、例えばかかる加水分解によって得られるTRI 50c、のための溶媒としてのアセトニトリルの使用。別の好ましい溶媒は、テトラヒドロフランでありうる。
【０２３５】
任意的または独立の４つめの特徴としては、TRI 50c塩は、アセトニトリルを用いた共沸乾燥により乾燥することができる。
【０２３６】
C-B結合の切断は求核性のメカニズムにより起こりうると考えられることから、本開示は求核的攻撃の機会が最小限とされた方法を含む。
【０２３７】
上記４つの特徴、またはそのいずれか１つ、２つもしくは３つは、他のボロン化合物、特に、式 (I)の酸およびそれらの誘導体（例えば、エステルおよび塩）の製造および処理に適用することができる。
【０２３８】
よって、本開示は、ある局面において、式 (I)のボロン酸のジアステレオマーを選択的沈殿により分割するためのジエタノールアミンの使用を提供する。出発物質は、ボロン酸のジエタノールアミンエステルを形成することができる酸（Ｉ）またはその誘導体でありうる。この沈殿により、(R)-配置のキラル中心C*を有する酸が沈殿物として選択される。この沈殿物を回収し、対応するボロン酸またはその塩に変換することができる。この塩は医薬製剤とすることができる。
【０２３９】
キラル純度および収率を至適化するためには、ジエタノールアミンを、(R)-配置のキラル中心C*を有するボロン酸の最初の当量を基準として約1.25±0.1当量の量で用いればよい。
【０２４０】
最初のボロン酸または酸誘導体は、例えば、(R)-配置のキラル中心C*を有する分子50%〜60%と、(S)-配置のキラル中心C*を有する分子40%〜50%を含みうる。
【０２４１】
本方法は、医薬としてのボロン酸 (I)およびその誘導体、特に塩、の商業化への道を拓くものである。それゆえ、ボロン酸 (I)およびその誘導体を用いる商業的規模の産物および活性が提供される。
【０２４２】
ある態様において、以下を含む、式 (I)のボロン酸のジアステレオマーを分離する方法が提供される：
ジエチルエーテル溶液中において、（A）ボロン酸 (I)およびそのエステルから選択されるボロン酸種（このボロン酸種には(R)-配置のキラル中心C*を有する分子と(S)-配置のキラル中心C*を有する分子が含まれる）と、（B）ジエタノールアミン（このジエタノールアミンはキラル中心C*が(R)-配置であるボロン酸種を基準として約1.25±0.1当量の量である）とを組み合わせ、混合して混合物を形成させること；
沈殿物が形成されるまで、このボロン酸種とジエタノールアミンを反応させること、またはそれらの反応を起こさせること；および
その沈殿を回収すること。
【０２４３】
出発物質がエステルである場合、それはボロン酸と、その唯一の可能性ある電子供与性ヘテロ原子が酸素（ボロン酸エステルでは、エステル官能基の酸素に相当する）であるアルコール類からなる群から選択されるアルコールとのエステルであってよい。
【０２４４】
いくつかの方法では、このジエタノールアミンは、キラル中心C*が(R)-配置であるボロン酸種を基準として約1.2〜1.3当量の量である。
【０２４５】
ボロネート種がボロン酸とジオールのエステル、特に、立体障害のないジオールである方法が含まれる。例示的ジオールとしては、ピナコール、ネオペンチルグリコール、1, 2-エタンジオール、1, 2-プロパンジオール、1, 3-プロパンジオール、2, 3-ブタンジオール、1, 2-ジイソプロピルエタンジオール、または5, 6-デカンジオールが挙げられる。特定のジオールはピナコールである。
【０２４６】
このボロン酸種とジエタノールアミンの反応は、混合物を加熱して高温とすることにより起こさせることができ、例えば、混合物を、例えば少なくとも１０時間還流させればよい。
【０２４７】
沈殿物は濾過により回収することができる。回収した沈殿はジエチルエーテルで洗浄すればよい。回収した沈殿を、洗浄を行う場合にはその後、CH2Cl2およびCHCl3から選択される溶媒に溶解し、得られた溶液をジエチルエーテルと合わせることにより再沈殿させることができる。特定の溶媒はCH2Cl2である。
【０２４８】
回収した沈殿物は、好適には加水分解により、式 (I)の酸に変換することができ、例えば、この沈殿物をハロ炭化水素類やそれらの組み合わせなどから選択される有機溶媒に溶解すること、得られた溶液をpH 3未満の水性酸などの水性液とともに攪拌し、それにより溶解した沈殿物を式 (I)の酸に変換すること、および蒸発により式 (I)の酸を回収することにより、式 (I)の酸に変換することができる。有機溶媒はCH2Cl2またはCHCl3である。特定の溶媒はCH2Cl2である。一部の方法では、有機溶媒をさらに回収した式 (I)の酸から蒸発させる。
【０２４９】
本開示は、ボロン酸 (I)のエステル、特にジエタノールアミンエステルが、C-B結合の切断を制御する様式により加水分解される方法を含む。特に、これには、選択された温度にて加水分解時間を制限することが含まれる。ジエタノールアミンエステルの加水分解の場合、その加水分解は好適には、室温以下の温度で、約30分を超えない時間、例えば約20分を超えない時間、所望により約20分で行われる。
【０２５０】
このように、２つ前の段落で述べた回収沈殿物は、水性酸、特に２％塩酸または同様のpHの他の無機酸を用い、およそ室温以下で約30分未満にて加水分解すればよい。好適には、この沈殿物を非求核有機溶媒（例えば、ハロ炭化水素またはハロ炭化水素混合物、例えばCH2Cl2）に溶解し、得られた溶液を前述のような時間にて水性酸と接触させる。これにより、この沈殿物が加水分解されて式 (I)の遊離酸が形成され、これは有機溶媒中に留まる。この有機溶媒を水性媒体から分離した後、蒸発させると、固体の式Ｉの酸を得ることができる。
【０２５１】
式 (I)の酸、例えば前段に記載のように得られた酸、を乾燥させる方法が含まれる。あるクラスの方法では、式 (I)の酸が有機溶媒中に存在する場合に、その溶媒を吸湿性の固体と接触させることにより式 (I)の酸を乾燥する。
【０２５２】
式 (I)の酸が有機溶媒中に存在する場合に、式 (I)の酸を水性アンモニウム塩で洗浄する方法も含まれる。
【０２５３】
キラル的に純粋なボロン酸は、医薬上許容されるその塩基付加塩に変換することができ、その変換は、特に、その酸をアセトニトリルに溶解すること、得られた溶液を医薬上許容される塩基の水溶液または懸濁液と組み合わせること、およびその塩基と酸を反応させること、またはそれらの反応を起こさせること、次いで蒸発乾固により蒸発残渣を得ることによる。酸と塩基を反応させる、またはそれらの反応を起こさせる工程は、酸のアセトニトリル溶液と塩基の水溶液または懸濁液との組み合わせを35℃以下、多くの場合30℃以下、例えば25℃以下の温度で撹拌することを含んでも良い；至適温度は室温であり、その反応時間は約２時間が適当である。これらの方法は、さらに以下を含んでも良い：
（ｉ）蒸発残渣をアセトニトリルに溶解し、得られた溶液を蒸発乾固すること、および
（ｉｉ）乾燥蒸発残渣を得るために必要な回数、工程（ｉ）を繰り返すこと。
【０２５４】
一部の方法では、乾燥蒸発残渣をアセトニトリルまたはテトラヒドロフランに溶解して溶液を形成させ、この溶液をジエチルエーテルと脂肪族または環状脂肪族溶媒との3:1〜1:3 v/v混合物と組み合わせ（例えば、塊が形成しないように十分遅い速度でゆっくり添加し）、沈殿を形成させる（この溶液はジエチルエーテル／（環状）脂肪族溶媒混合物に（溶液：混合物）1:5〜1:15 v/vの比率で添加する）。この沈殿物を回収し、一部または実質的に全部の残留溶媒を回収した沈殿物から温度を35℃以下に維持しつつ、例えば減圧下で除去する。乾燥プロセスの最初の温度が約10℃であり、そのプロセス中に35℃まで昇温する方法が含まれる。脂肪族または環状脂肪族溶媒は６、７または８個の炭素原子を有してよい；溶媒はアルカン、例えばｎ−アルカン、例えばn-ヘプタンであってよい。周囲温度で行える反応もあり、例えば15〜30℃、例えば20〜30℃であってもよく、場合によって周囲温度は室温であってもよい。
【０２５５】
本発明により生産された塩は、微量の脂肪族または環状脂肪族溶媒を含むことがあり、それは例えば、0.1％未満、特に0.01％未満、例えば約0.005％の量である。
【０２５６】
塩を製造する方法において、塩基は、ｎ価のカチオンを含み、約n：1の化学量（ボロン酸：塩基）で用られうる。特定の方法では、塩基はアルカリ金属またはアルカリ土類金属塩基、例えば、アルカリ金属水酸化物またはアルカリ土類金属水酸化物である。塩基の一例として、水酸化ナトリウムが挙げられる。別の塩基としては、水酸化カルシウムが挙げられる。本開示は、塩基が水酸化ナトリウムであり、乾燥蒸発残渣をアセトニトリルに溶解する方法を含む。本開示は、塩基が水酸化カルシウムであり、乾燥蒸発残渣をテトラヒドロフランに溶解する工程を含む。
【０２５７】
本開示は、式 (I)のボロン酸が（例えばそのエステルとして）得られる方法に限定されない。しかし、本発明のあるクラスでは、式 (I)の酸は式−(CH2)s-O-R3［式中、R3はメチルまたはエチルであり、sは独立に2、3または4である］のR1基を有し、この式 (I)の酸は式 (XXV)：
(HO)2B-(CH2)s-O-R3          (XXV)
の中間体を経て調製され、この中間体はホウ酸エステルと好適な１−メタロアルコキシアルカンとの間の反応により製造される。
【０２５８】
本開示の新規な局面は、式 (XXV)の中間体を含む。
【０２５９】
式 (XXV)の中間体は、アルコキシアルカンが式-(CH2)s-O-R3である場合、１−メタロアルコキシアルカンとホウ酸エステルとを反応させて式 (XXV)の化合物を形成させることにより、製造することができる。
【０２６０】
理解されるように、上記方法は、式RZ-O-RY-B(OH)2で表されうるアルコキシアルキルボロン酸を製造する一般法を提供する。かかるアルコキシアルキルボロン酸はアミノボロネートに変換することができ、このアミノボロネートをアミノ基において誘導体化して別の部分へ連結するアミド結合を作成することができる。言い換えれば、アミノボロネートをボロペプチドに変換することができる。以下、本方法を、限定されるものではないが、式 (XXV)の化合物を例に挙げて記載する。
【０２６１】
この反応の出発物質はメタロアルコキシアルカン、例えば、式Hal-(CH2)s-O-R3［式中、Halはハロゲンである］の１−ハロアルコキシアルカンとホウ酸エステルとから得られるグリニャール試薬であってよい。金属は、特にはマグネシウムである。別の金属としてリチウムがあり、この場合、この金属試薬は１−ハロアルコキシアルカンとブチルリチウムとを反応させることにより製造することができる。この方法がハロアルコキシアルカンからの金属試薬の調製を含む場合、ハロアルコキシアルカンはクロロアルコキシアルカンであってよい；対応するブロモ化合物も使用できる。グリニャール試薬を製造するには、マグネシウムをハロアルコキシアルカンと反応させてもよい。
【０２６２】
好適なボロン酸エステルは、１-または２-官能性アルコール（例えば、EtOH、MeOH、BuOH、ピナコール、グリコール、ピナンジオールなど）のエステルである。例えば、このエステルは式B(ORa)(ORb)(ORc) ［式中、Ra、RbおよびRcはC1-C4アルキルであり、互いに同じであってもよい］のエステルであってよい。
【０２６３】
アルコキシアルカン種としてメトキシプロパンを例に挙げて示される式 (XXV)の中間体を製造するための例示的方法は次の通りである：
【化２５】
2007528381.tif 000026
【０２６４】
この反応は有機溶媒、例えばTHF中で好適に行われる。上記のアルコキシアルキルボロン酸の製造方法では、不純物 IV（上記参照）、またはそのアナログ（この場合、最終産物はTRI 50cまたはその誘導体（塩、エステルなど）ではない）の生成が回避される。それゆえ、この方法は、不純物 IVの混入がないTRI 50c、そのエステルおよび塩を製造するための、および、ホウ素に対するα−がアルコキシアルキル基によって置換されており、かつ不純物 IVに類似する不純物の混入がない他のアミノボロン酸を製造するための、ユニークな経路を提供する。
【０２６５】
アルコキシアルキルボロン酸、すなわち、式RZ-O-RY-B(OH)2で表すことができる化合物は、当業界で公知の方法などいずれの好適な方法によってもアミノボロン酸化合物、例えばボロペプチド、へと変換することができる。アルコキシアルキルボロン酸からアミノボロネートを製造するため、およびアミノボロネートをペプチドボロネートに変換するための反応式は、本明細書の実施例の冒頭でTRI 50cの合成を例に挙げて説明している。この反応式は、例えば、ジエタノールアミン沈殿とその後の工程を除いてもよい、および／または試薬の置換を行ってもよいなど、所望により改変することができる。例えば、ピナコールを他のジオールに置き換えてもよい。ＬＤＡは非求核性の強塩基であり、別のこのような塩基で置換可能である。他の例としては、限定されるものではないが、リチウムジイソプロピルアミド、リチウム２，２，６，６−テトラメチルピペリジン、１−リチウム４−メチルピペラジド、１，４−ジリチウムピペラジド、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド、ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド、カリウムビス（トリメチルシリル）アミド、塩化イソプロピルマグネシウム、塩化フェニルマグネシウム、リチウムジエチルアミド、およびカリウムtert−ブトキシドが挙げられる。これらの反応はいずれの好適な溶媒中で行ってもよい；実施例においてn-ヘプタンを用いている場合には、それは別の不活性な非極性溶媒、例えば別の脂肪族または環状脂肪族溶媒、例えばアルカン、例えばｎ−アルカンで置き換えてもよい。
【０２６６】
以上から明らかなように、上記の方法は、記載のような有機ボロン酸の製造に用いることができる。連続する工程を一回の操作として、または同じ場所において行う必要はない；この通りに行ってもよいし、あるいは種々のプロセス（合成全体の種々の部分）を時間および／または空間的に分けてもよい。特定の最終産物としての塩は、例えばTRI 50cの、モノナトリウム、モノリチウム、ヘミカルシウムおよびヘミマグネシウム塩である。
【０２６７】
一般に、この反応は、非求核性溶媒を用いて好適に行うことができる。求核性溶媒が存在する場合、例えばジエタノールアミンエステルの加水分解の場合には、最小限の接触が好ましい。
【０２６８】
高純度産物
本開示の「高純度産物」には、とりわけ、開示の方法により得られる（開示の方法により得られる産物の特性を有する）、ボロン酸、ジエタノールアミンエステルおよび塩が含まれる。また、開示の方法により直接的または間接的に得られる産物も含まれる。かかる産物は、経口投与用に製剤化することができ、そのような経口製剤が本開示に含まれる。
【０２６９】
本発明の特定の産物は、式 (I)のボロン酸の塩基付加塩であって、本明細書に記載の方法により調製された場合にキラル的に純粋な塩である。他の産物は、式 (I)のボロン酸の塩基付加塩であって、本明細書に記載の方法により製造された場合にこの塩について純度を有するものである。
【０２７０】
産物の実体は、これまでの説明と以下の例から明らかであろう。さらに、本開示の産物は請求項に記載する。特に注目すべきは実施例３８のデータであり、これは本発明の方法がHPLCにより検出可能な不純物を含まない最終産物の塩を達成できることを明確に示す。他の例では、塩は実質的に不純物を含まず、逆相（RP）HPLC％ピーク面積として、例えば少なくとも98％の純度、より通常には少なくとも99％の純度、例えば少なくとも99.5％の純度である。塩は、逆相（ＲＰ）HPLC％ピーク面積として、少なくとも99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％または99.9％の純度でありうる。好適なRP HPLC操作は、実施例３８の参考文献１および／または参考文献２および／または参考文献３に従う。また、少なくとも実質的に不純物 Iおよびアナログを含まない産物、不純物 IVおよびアナログを含まない産物、ならびに微量の非極性溶媒、例えばn-ヘプタンを含む産物も含まれる。微量の非極性溶媒とは、GC-ヘッドスペースクロマトグラフィーによって測定した場合、0.2％、0.1％、0.05％、0.01％または0.005％未満でありうる。
【０２７１】
また、410ppm未満のアセトニトリルを含む塩も含まれる。
【０２７２】
10,000ppm、5000ppm、1000ppm、または500ppmの不純物を含む塩もある。
【０２７３】
製剤
本開示の製剤には、経口投与のための、および活性本体（ボロン酸および／またはそれに対応するボロネート種）を胃に入れる前に溶液または懸濁液に加えるための、活性成分（ボロン酸の塩基付加塩）に適合した固相物が含まれる。活性成分は、投与前に溶液または懸濁液に加えてもよく、あるいは口腔内に加えてもよい。
【０２７４】
第１のクラスの製剤には、それゆえ、液体調製物、好ましくは飲用調製物へと再構成した後に経口投与される、微粒子製剤、すなわち粉末および顆粒が含まれる。通常、液体調製物は懸濁液より溶液である方が好ましく、ある種の微粒子製剤は溶解して飲用液を形成するためのものである。製剤は、約50ml〜約150mlの容量の懸濁液またはより一般的には溶液に再構成するためのものであってよい。本開示はまた、約50ml未満または約150ml以上、例えば約250mlまで、より頻繁には約200mlまで、の再構成容量も包含する。再構成された溶液の容量が小さい必要があれば、それは少なくとも好ましい態様において達成することができ、例えばTRI 50cのモノナトリウム塩の場合、600mgのTRI 50cに相当する量の塩を容易に10mlの水に溶解し、pH 9.88の溶液の作成することができる。
【０２７５】
本開示には、ボロン酸塩(または遊離ボロン酸、プロドラッグ、またはプロドラッグの塩)の溶液または懸濁液を作成するための、水による再構成に適合した微粒子製剤が含まれ、この溶液は治療上有効量のボロン酸塩を含有し、容量が約50ml〜約150mlである。かかる製剤は、医薬上許容される有機酸を、溶液のpHを下げるために、例えば塩の場合9.5未満の値まで下げるために、十分な量にて含んでも良い。
【０２７６】
驚くほど濃縮されたボロネート塩溶液(TRI 50c モノナトリウム塩の場合約600mg/mlまで)を、pH 約9.5において作成できることがわかった。しかしながら、pH 9.5の溶液は、多くの場合飲用するには望ましくなくまずい。したがって、医薬上許容される有機酸は、溶液の味がより良く、一方で飲用可能な量（例えば約50ml〜約150ml）の溶液を微粒子製剤の再構成により作成できるような値までpHを下げるように選択された量にて、微粒子製剤に含まれうる。有機酸としては、例えばクエン酸、酒石酸、またはリンゴ酸が挙げられる。多くの場合クエン酸が選択される。
【０２７７】
様々なpH値にてTRI 50cモノナトリウム塩の溶解度を試験する実験が行った。実験はすべて、600mgのTRI 50c遊離酸に相当する量の塩を用いて行った。第１の実験のシリーズでは、この量の塩を50mlの水に溶解し、およそpH 9.5の溶液を作成した。希水性HClを添加し、沈殿を生じさせずにどこまでpHを下げられるかを測定した。再構成溶液のpHを9未満まで下げた時に塩が沈殿する傾向があり、それゆえ塩を溶液中に保持するためには、この濃度の塩を有する再構成溶液のpHを9以上、例えば9.2以上、に維持すればよいことがわかった。
【０２７８】
第２の実験のシリーズでは、同じ量の塩を150mlの水に溶解し、クエン酸を添加した。ここでは、沈殿を生じさせずにpHを3.7-3.8の値までクエン酸を用いて下げられることがわかった。言い換えれば、塩の投与量が600mgのTRI 50cに相当する量の場合に患者への指示が少なくとも150mlの水に溶液を調製するものであるならば、有機酸 (例えばクエン酸)は、pHを約4以上の値まで下げる量にて、沈殿の危険なく製剤中に含めることができる。酸溶液の方がアルカリ溶液よりも味が良い傾向があり、またクエン酸は一般的な着香料であることから、この塩の性質は非常に有益である。実際には、200mgまでのクエン酸をTRI 50c モノナトリウム塩 (TRI 50cとして計算して600mg)と組み合わせて、150ml以上の水に再構成されるべき調製物とすることができる。理解されるように、通常ボロネートは、pH 4〜8、例えば4〜7、所望により5〜6の再構成溶液が形成されるよう製剤化される。
【０２７９】
無論、クエン酸その他の酸の絶対量は、(i) 塩の絶対量、および (ii) 所望の再構成容量により、上記結果や必要とされうるかかるルーチンの実験からの指針に沿って変化する。
【０２８０】
TRI 50c ナトリウム塩は本明細書に開示される他の塩、特に他のアルカリ金属塩の代表例であるが、他の可溶性の塩または誘導体、例えばアミノ糖塩または糖エステルも挙げられる。したがって、これらの結果は、所望によりさらなる香料を含める場合には、開示の態様のボロン酸化合物を香料として許容される有機酸により製剤化できることを示す。
【０２８１】
ヒト成人に対する治療上有効なボロン酸化合物（例えば塩）の投与量には、ボロネート約0.2モル〜1.5モルが含まれると予想される。投与量は、少なくとも約0.35モルであってもよい。投与量は、通常はボロネート約1.5モル以下、より通常は約1.35モル以下、例えば約1.25モル以下である：ある場合には、最大で約1モルである。１つの例では、治療上有効な投与量は、ボロネート約0.4モル〜0.85モルである。
【０２８２】
製剤は、一回投与単位、すなわち再構成のための活性化合物の単回投与量を正確に含有する単位にて提供されうる。したがって、ある態様において、TRI 50c (または例えばその塩)をTRI 50cに換算して約100mg〜約750mg、例えば約100mg〜約700 mg、より通常は約200mg〜約600mg、例えば約200mg〜約500mgの量で含有する一回投与単位が提供される。特定のクラスの単位投与形態は、TRI 50cに換算して約200mg〜約450mg、例えば約300mg、のTRI 50cまたはTRI 50c 塩を含有する；塩は、好適にはモノアルカリ金属、例えばナトリウム、の塩である。塩にかえて、別のTRI 50cの可溶性形態、例えば、糖誘導体も用いることができる。
【０２８３】
前述のTRI 50c塩の重量をモルに変換して以下に示す：
2007528381.tif 000027
【０２８４】
顆粒または粉末は典型的には抗菌性保存剤および着香料を含み、両者は通常製剤中に分散している。それほど多くはないが、顆粒または粉末はこれら２つの要素の一方のみを含有する場合がある。さらに、またはそれほど多くはないがそれらにかえて、顆粒または粉末は「経口投与形態」の表題のもと前述したような1以上の他の賦形剤を含んでもよい。ある態様において、粉末または顆粒製剤は、発泡錠に関して前述したような発泡システムを含んでも良い。
【０２８５】
顆粒または粉末は、製造後に容器に充填されるであろう。通常、容器は、水の入っている飲用容器中にてその内容物を調剤するのに好適である(水は、着香されていても、されていなくてもよく、あるいは果物ジュースや別の飲料品と置き換えてもよい）。容器は、大抵の場合、調剤用の製剤の１単位を含有する。容器は一回投与用容器であってよく、あるいは裁量により、製剤を分割投与量にて提供してもよく、その場合容器には想定される投与量の一画分が含まれ、所要の数の容器が選択され個々の患者に対する単回投与量が構成される。
【０２８６】
好適には、単位容器の形態は、小袋またはプラスチック容器、例えば成形されたプラスチック本体を有する容器、である。１単位容器のかわりに挙げられるのは、製剤の貯蔵部および適切な投与量の製剤の調剤を可能とする計測装置を有する定量噴霧器である。
【０２８７】
本開示には、液体と組み合わせて経口投与可能なボロネート塩の溶液または懸濁液を作成するための発泡錠の形態である、記載のボロン酸塩の経口投与製剤が含まれる。いくつかの好適な発泡システムが、「経口投与形態」の表題のもとに前述されている。ある態様において、錠剤は一回投与用形態である；他の態様において、一回投与量は、好適な数の錠剤を組み合わせることで得られ、通常そのすべての錠剤を、飲用調製物と、例えば約50ml〜約150mlの量の水と、または同量の別の飲料品と組み合わせることで得られる。好適なボロン酸塩の投与量は、粉末および顆粒に関して前述している。
【０２８８】
液体のpHを下げてより飲みやすくするために発泡錠に酸を含めることが望ましい場合、これは発泡システムで使用される有機酸を過剰に組み込むことで行うことができ、すなわち、単一の酸、例えばクエン酸が、錠剤を用いて作られる液体調製物のため、発泡システムの要素とpH低下剤との両方として機能しうる。
【０２８９】
発泡錠および「即時融解」製剤は前述のものを含むことができ、例えばほとんどの場合、抗菌性保存剤および／または1以上の香料を含む。あるクラスの錠剤および即時融解製剤には、顆粒および粉末に関して前述したように、一回投与用錠剤または単回投与量のボロン酸塩を含有する製剤単位が含まれる。あるいは、各錠剤または製剤単位は、投与量の一画分を含有してもよく、これも顆粒および粉末について記載のとおりである。
【０２９０】
発泡錠は、無論、前述のように、発泡システムを含む。
【０２９１】
これら製剤は無論、活性本体を遊離ボロン酸として、あるいは塩またはプロドラッグの塩として含有してもよい。例示的な塩として、アルカリ金属、例えばナトリウム、の塩基付加塩のみならず、アルカリ土類金属、例えばカルシウム、の塩基付加塩がある。さらに挙げられるのは、有機塩基、例えば本明細書で前述したもの、との塩基付加塩である。プロドラッグは本明細書において前述している。
【０２９２】
本開示は、上記のような再構成可能製剤に限定されない。したがって、本開示のある局面には、他の経口投与製剤、例えば錠剤およびカプセル、が含まれる、または関与する。本開示のかかる局面には、非経口、特に静脈内投与用製剤が含まれうる、または関与しうる。これら局面のいくつかを以下に挙げる：
・高純度塩
・フライトDVTの処置（予防）
・体外肝解毒における血栓症の処置（予防）
・人工透析中の血栓症を予防するための、塩基付加塩以外の化合物の使用
【０２９３】
CIHD または他の断続的アフェレーシスの場合、考えられることには、TRI 50c モノナトリウム塩が成人患者に約20〜50 mg/時間の速度で静脈内投与され、これは前述の換算係数を用いるとおよそ0.035-0.089  mmole/時間の TRI 50cに等しいことが容易に計算される。TRI 50c 約0.035-0.089  mmole/時間の速度での投与は、それゆえ、CIHDおよび他の断続的アフェレーシス法において、他のTRI 50c塩および同様の効力（TRI 50cのKi = 7-22nM）を有する他のボロン酸に好適と考えられる。無論、投与速度は、医師の臨床判断において、例えば患者の体重や他の因子を考慮して調節されうるものであり、それゆえ投与速度 約0.025-0.125  mmole/時間が挙げられる。効力が異なる場合、例えばKi値が5-25nMの範囲外の場合、投与速度は適宜調節することができる。活性凝固時間 (ACT) は、一般的に抗凝固の程度の評価のためのパラメータとして使用され、CIHDにおける目標ACTは150〜250秒である。本開示はかかる量または投与計画に限定されず、本段落に記載の投与量および投与計画の範囲外を含む。
【０２９４】
CIHDにおいて望ましいことには、抗凝固中に添加される水はできるだけ少ない方がよく、なぜならCIHDの目的の１つが血液から水を除去することだからである。それゆえ考えられるのは、比較的可溶性の抗血栓物質、例えばナトリウム塩またはボロン酸とアミノ糖 (例えば N−メチル−D−グルカミン)との反応産物を、CIHDの場合に使用することである。静脈内抗凝固に関与する他の方法は注射または注入される水の量にそれほど敏感でない場合もあり、因子のバランスにおいて可溶性の低い産物が好ましいこともある。したがって、例えば、そのような場合、二価金属、例えばカルシウムまたは亜鉛、の塩を投与することが安定性の理由から好ましい。マグネシウムは別の医薬上許容される二価金属である。三価金属もまた挙げられる。
【０２９５】
前段に述べた、添加される水の量に敏感でない方法および場合の例には、人工透析以外のアフェレーシス法（腎不全または腎疾患の場合を除く）が含まれる。
【０２９６】
さらなる局面にしたがい、それゆえ、本明細書に記載されるもの、特に高純度方法により得られる、または得られうるものを、医薬上許容されるアジュバント、希釈剤、または担体とともに含む経口または非経口医薬製剤が提供される。
【０２９７】
経口投与のための固体投与形態には、カプセル、錠剤 (丸剤ともいう)、粉末および顆粒が含まれる。かかる固体投与形態において、活性化合物は、典型的には、クエン酸ナトリウムやリン酸ジカルシウムなどの少なくとも１の医薬上許容される賦形剤または担体および／または以下の１以上と混合される：a) 充填剤または伸張剤、例えばデンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよびケイ酸、b) 結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、アルギナート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよびアカシア、c) 保湿剤（humectant）、例えばグリセロール、d) 崩壊剤、例えば寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のケイ酸塩および炭酸ナトリウム、e) 溶解遅延剤、例えばパラフィン、f) 吸収促進剤、例えば４級アンモニウム化合物、g) 湿潤剤、例えばセチルアルコールおよびグリセロールモノステアラート、h) 吸収剤、例えばカオリンおよびベントナイトクレイ、およびi) 滑沢剤、例えばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固形ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよびこれらの混合物。カプセルおよび錠剤の場合、投与形態は緩衝剤も含むことがある。同様のタイプの固体組成物を軟および硬カプセルの充填物として、例えばラクトースやミルク糖などの賦形剤および高分子量ポリエチレングリコールのような賦形剤を使用して、用いることができる。
【０２９８】
好適には、経口製剤は溶解補助剤を含有してもよい。溶解補助剤は、医薬上許容される限りその実体に関して限定されない。例として、非イオン性界面活性剤、例えばスクロース脂肪酸エステル、グリセロール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル (例えば、ソルビタントリオレアート)、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレン水素化カスター油、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、メトキシポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルアミン、ポリオキシエチレンアルキルチオエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンコポリマー、ポリオキシエチレングリセロール脂肪酸エステル、ペンタエリスリトール脂肪酸エステル、プロピレングリコールモノ脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンプロピレングリコールモノ脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステル、脂肪酸アルキルオールアミドおよびアルキルアミンオキシド；胆汁酸およびその塩 (例えば、ケノデオキシコール酸、コール酸、デオキシコール酸、デヒドロコール酸およびそれらの塩、ならびにそのグリシンまたはタウリン結合体)；イオン性界面活性剤、例えばラウリル硫酸ナトリウム、脂肪酸石けん、アルキルスルホナート、アルキルホスファート、エーテルホスファート、塩基性アミノ酸の脂肪酸塩；トリエタノールアミン石けんおよびアルキル４級アンモニウム塩；両性イオン性界面活性剤、例えばベタインおよびアミノカルボン酸塩がある。
【０２９９】
ここに開示するものは、微細な固体の形態、例えば微粉化固体として提示されうる。粉末または微細固体はカプセルに封入することができる。
【０３００】
活性化合物は、単回投与用、複数回投与用、または持続放出製剤であってよい。
【０３０１】
錠剤またはカプセルの場合、化合物、特にアミノボロン酸またはペプチドボロン酸の塩は、塩と酸性の胃液との接触を防ぐ形態、例えば腸溶製剤にて投与してもよく、これにより十二指腸に到達するまで塩の放出が防止される。
【０３０２】
腸溶コーティングは、好適には、炭水化物ポリマーまたはポリビニルポリマーなどから製造される。腸溶コーティング材料の例には、限定でないが、セルロースアセタートフタラート、セルロースアセタートスクシナート、セルロース水素フタラート、セルロースアセタートトリメリタート、エチルセルロース、ヒドロキシプロピル-メチルセルロースフタラート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセタートスクシナート、カルボキシメチルエチルセルロース、スターチアセタートフタラート、アミロースアセタートフタラート、ポリビニルアセタートフタラート、ポリビニルブチラートフタラート、スチレン-マレイン酸コポリマー、メチルアクリラート-メタアクリル酸コポリマー (MPM-05)、メチルアクリラート-メタアクリル酸-メチルメタクリラートコポリマー (MPM-06) およびメチルメタクリラート-メタアクリル酸コポリマー (Eudragit（登録商標） L & S) が含まれる。所望により、腸溶コーティングは可塑剤を含有する。可塑剤の例には、限定でないが、トリエチルシトラート、トリアセチンおよびジエチルフタラートが含まれる。
【０３０３】
併用療法
化合物は、単独で、または医薬上許容される希釈剤、賦形剤または担体と組み合わせて投与することができる。「医薬上許容される」なる用語は、ヒトおよび動物を目的とする許容性を含み、とりわけヒトの医薬として使用のための許容性が好ましい。
【０３０４】
本開示の塩は、いずれかの心臓血管処置薬と組み合わせてもよい、および／または共投与してもよい。多数の心臓血管処置薬が市販、臨床開発、および前臨床開発の段階にあり、これらは併用薬物療法により心臓血管障害を予防するために、本開示のものとともに使用するよう選択できる。かかる物質は、限定でないが、下記のいくつかの主要なカテゴリーから選択される１以上の物質でありうる： 脂質低下薬、例えばIBAT (回腸の Na+／胆汁酸共輸送体) 阻害薬、フィブラート、ナイアシン、スタチン、CETP (コレステリルエステル輸送タンパク質) 阻害薬、および胆汁酸捕捉剤、抗酸化剤、例えばビタミンＥおよびプロブコール、IIb/IIIa アンタゴニスト (例えば、アブシキシマブ、エプチフィバチド、チロフィバン)、アルドステロン阻害薬 (例えば、スピロラクトンおよびエポキシメクスレノン)、アデノシンA2受容体 アンタゴニスト (例えば、ロサルタン)、アデノシンA3受容体アゴニスト、ベータブロッカー、アセチルサリチル酸、ループ利尿剤、ならびに ACE (アンギオテンシン変換酵素) 阻害薬。
【０３０５】
本開示の塩はまた、作用メカニズムが異なる抗血栓物質、例えば抗血小板物質、アセチルサリチル酸、チクロピジン、クロピドグレル、トロンボキサン受容体および／またはシンテターゼ阻害薬、プロスタサイクリンミメティック、およびホスホジエステラーゼ阻害薬、ならびにADP-受容体 (P2 T) アンタゴニスト、と組み合わせてもよい、および／または共投与してもよい。
【０３０６】
本開示のものはさらに、血栓性疾患、特に心筋梗塞において、血栓溶解薬、例えば組織プラスミノーゲンアクチベーター (天然、組換え、または修飾型)、ストレプトキナーゼ、ウロキナーゼ、プロウロキナーゼ、アニソイル化プラスミノーゲン-ストレプトキナーゼアクチベーター複合体 (APSAC)、動物唾液腺プラスミノーゲンアクチベーターなどと組み合わせることができる、および／または共投与することができる。
【０３０７】
本開示の塩は、心臓保護薬、例えばアデノシンA1またはA3受容体アゴニストと組み合わせてもよい、および／または共投与してもよい。
【０３０８】
本開示の医薬組成物中の活性成分の実際の投与量レベルは、特定の患者、組成物、および投与様式について所望の治療的応答が達成されるのに有効な量(本明細書では「治療上有効量」という)の活性化合物が得られるように、変更されうる。選択される投与量レベルは、特定の化合物の活性、処置しようとする病態の重篤度、および処置しようとする患者の病態および医学的前歴に依存する。しかしながら、所望の治療効果を達成するのに必要な量よりも低い化合物の投与量から開始し、所望の効果が達成されるまで徐々に投与量を増加することは、当技術分野の範囲内にある。
【０３０９】
本開示の製剤および投与形態には、塩がアルカリ金属塩、例えば、リチウム、ナトリウム、またはカリウム塩であるものが挙げられ、このうち、特定の塩としてはナトリウム塩が挙げられる。別のクラスの製剤は、開示のボロン酸のアミノ糖塩、例えばN−メチル−D−グルカミン塩を含む。本段落に挙げた塩は水溶液として、典型的には１種以上の添加剤、例えば等張剤および／または抗酸化剤を含有する水溶液として投与することができる。これらの塩の好適な保存方法は、固体形態、例えば乾燥粉末であり、投与前に投与溶液とするものである。
【０３１０】
以上から理解されるように、水性の即時飲用可能製剤へと再構成するのに好適な製品の形態の、式 (I) のボロン酸モノアルカリ金属またはヘミアルカリ土類金属塩を含む医薬品が提供される。再構成に適した製品には粉末または顆粒を含有する小袋が含まれ、あるいは発泡錠が含まれうる。例の１つが、飲用液体製剤、特に溶液として再構成するための乾燥粉末または顆粒形態の、式 (I)のボロン酸、特にTRI 50cのモノナトリウム塩である。別の例は、飲用液体製剤、特に溶液として再構成するための乾燥粉末または顆粒形態の、式 (I)のボロン酸、特にTRI 50cのヘミカルシウム塩である。塩は、凍結乾燥物であってよい。乾燥粉末または顆粒材料は小袋に包装することができる。かかる乾燥粉末または顆粒材料のかわりに、モノナトリウムまたはヘミカルシウム塩は発泡錠の形態であってもよい。
【０３１１】
［実施例］
実施例１−４は前置き的な説明である。
装置
下記の実施例１−４の操作においては、標準的な実験室用ガラス器具と、必要に応じて空気に敏感な試薬を取り扱い移すのに適当な特殊な装置とを用いた。
【０３１２】
すべてのガラス器具を使用前に140-160℃で少なくとも4時間加熱し、ついで乾燥器中にて、または熱を集めて乾燥窒素蒸気を注入することにより、冷却する
【０３１３】
溶媒
実施例１−４の操作において使用する有機溶媒はすべて乾燥している。好適には、使用の前にナトリウムワイヤーで乾燥する。
【０３１４】
乾燥
実施例１−４の操作の乾燥操作において、産物の乾燥度 (有機溶媒についての乾燥度を含む) を乾燥時の重量損失を観察することにより試験する。下記の操作を行って乾燥時の損失を測定した：サンプルを減圧乾燥機に入れ、40℃、100 mbarで 2 時間乾燥した。乾燥時の重量低下が出発物質の全重量の0.5%未満になったときに、産物が乾燥されていると考える。
【０３１５】
実施例１−４は、下記の反応式のパフォーマンス、および得られる TRI 50c のナトリウム塩およびカルシウム塩への変換について述べる。
【化２６】
2007528381.tif 000028
LDA = リチウムジイソプロピルアミド
LiHMDS = リチウムヘキサメチルジシラザン、リチウムビス (トリメチルシリル) アミドともいう
【０３１６】
実施例１  TRI 50B の合成
工程１：Z-DIPIN B
操作 A
17.8 g (732.5 mmole) マグネシウムターニング（turning）、0.1 g (0.4 mmole) ヨウ素および 127 ml 乾燥 テトラヒドロフランを入れ加熱還流する。ついで、66 g (608 mmole) 1-クロロ-3-メトキシプロパンの 185 ml 乾燥テトラヒドロフランの溶液 15 ml を加え、激しい反応が始まるまで還流下撹拌する。最初の発熱が終わった後、1-クロロ-3-メトキシプロパン液を徐々に加え、すべてのマグネシウムが消費されるまで、緩やかな還流を維持する。反応の終了後、反応混合物を周囲温度まで冷まし、徐々に 64.4 g (620 mmole) トリメチルボラートの 95 ml 乾燥テトラヒドロフラン溶液に加える；後者の溶液を 0 ℃以下に冷やし、反応中に熱くなる場合には、反応混合物を十分にゆっくりと加えて、この溶液の温度を -65 ℃以下に保持しなければならない。添加が完了したら、反応混合物を約 0 ℃まで温め、さらに 60 分間攪拌する。22.4 ml 硫酸の 400 ml 水溶液をゆっくりと添加し、温度を 20 ℃以下に保つ。この層を放置し、各フェーズに分ける。水層を３回 200 ml tert.-ブチルメチルエーテルで洗浄する。合わせた有機層を放置し、この液体から分離した水をさらに除く。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、蒸発により乾燥する。蒸発残渣から沈殿固体をろ過し、濾液を 175 ml トルエンに溶解する。34.8 g (292 mmole) ピナコールをこの溶液に入れ、周囲温度で 10 時間以上攪拌する。この溶液を蒸発乾固し、475 ml n-ヘプタンに溶解し、290 ml 炭酸水素ナトリウム飽和水溶液で３回洗浄する。n-ヘプタン溶液を蒸発により乾燥し、蒸発残基を蒸留し、Bp 40-50 ℃、0.1-0.5 mbar でその画分を回収する。
沸点：40-50 ℃/ 0.1-0.5 mbar
収量：40.9 g (70%) Z-DIPIN B (油状)
【０３１７】
操作 B
17.8 g (732.5 mmole) マグネシウムターニング、0.1 g (0.4 mmole) ヨウ素および 127 ml 乾燥 テトラヒドロフランを入れ加熱還流する。ついで、66 g (608 mmole) 1-クロロ-3-メトキシプロパンの 185 ml 乾燥テトラヒドロフラン溶液 15 ml を加え、激しい反応が始まるまで還流下撹拌する。最初の発熱が終わった後、1-クロロ-3-メトキシプロパン溶液を徐々に添加し、緩やかな還流を維持する。反応終了後、反応混合物を周囲温度にまで冷やし、徐々に 64.4 g (620 mmole) トリメチルボラート の 95 ml 乾燥テトラヒドロフラン溶液に添加し、この溶液の温度を-65 ℃以下に保持する。添加が完了したら、反応混合物を約 0 ℃まで暖め、さらに 60 分間攪拌する。22.4 ml 硫酸の 400 ml 水溶液を温度 20 ℃以下に保つように徐々に添加する。有機溶媒を減圧蒸留で除去する。300 ml n-ヘプタンを蒸発残渣の水溶液に入れ、34.8 g (292 mmole) ピナコールを添加する。２層混合物を周囲温度で 2 時間以上攪拌する。層を放置した後、水層を分離する。300 ml n-ヘプタンを水溶液に入れ、２層混合物を周囲温度で 2 時間以上攪拌する。層を放置した後、水層を分離する。有機層を合わせ、200 ml の水で１回洗浄し、200 ml 飽和炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、 さらに200 ml の水で２回洗浄する。ついで n-ヘプタン溶液を蒸発により乾燥し、蒸発残渣を蒸留し、Bp 40-50 ℃、0.1-0.5 mbar で画分を回収する。
沸点：40-50 ℃/ 0.1-0.5 mbar
収量：40.9 g (70-85%) Z-DIPIN B (油状)
【０３１８】
工程２： Z-DIPIN C
16.6 g (164 mmole) ジイソプロピルアミンおよび 220 ml テトラヒドロフランを入れ、-30 〜 -40℃に冷却する。この溶液に 41.8 g (163 mmole) n-ブチルリチウム（n-ヘプタン溶液中25%）を加え、0 〜 -5 ℃で１時間攪拌する。この新しく調製したリチウムジイソプロピルアミド溶液を -30 ℃に冷却し、27.9 g (139 mmole) Z-DIPIN B の120 ml テトラヒドロフランおよび 35.5 g (418 mmole) ジクロロメタン溶液に温度 −60〜−75 ℃で添加する。この溶液を前記温度で30分攪拌し、480 ml (240 mmole) 0.5N 無水塩化亜鉛(II) テトラヒドロフラン溶液または 32.5 g (240 mmole) 無水固体塩化亜鉛(II) を添加する。−65 ℃で１時間攪拌した後、反応混合物を周囲温度にまで温め、さらに 16-18 時間攪拌する。反応混合物を蒸発乾固し (すなわち、溶媒が除去されるまで)、385 ml n-ヘプタンを加える。反応混合物を 150 ml 5% 硫酸、190 ml 飽和炭酸水素ナトリウム溶液、および 180 ml 飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄する。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、蒸発乾固する (すなわち、溶媒が除去されるまで)。油状残渣を次の工程に精製することなしに移す。
収量：19 g (55%) Z-DIPIN C
【０３１９】
工程３：Z-DIPIN D
23.8 g (148 mmole) ヘキサメチルジシラザンの 400 ml テトラヒドロフラン溶液に -15 ℃で 34.7 g (136 mmole) n-ブチルリチウム（n-ヘプタン中25%）を加え、１時間攪拌する。この溶液を -55 ℃まで冷却し、30.6 g (123 mmole) Z-DIPIN C （290 ml テトラヒドロフランおよび35 ml テトラヒドロフランに溶解）をこの新たに調製した LiHMDS 溶液に添加する。この溶液を周囲温度まで温め、12 時間攪拌する。反応混合物を蒸発乾固し、蒸発残渣を 174 ml n-ヘプタンに溶解し、170 ml 水および 75 ml 飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄する。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、完全に蒸発乾固する (すなわち、溶媒が除去されるまで)。油状残渣を 100 g n-ヘプタンに溶解する。この溶液を、さらなる乾燥なしに次の工程に用いる。
収量：32.2 g (70%) Z-DIPIN D
【０３２０】
工程４：Z-DIPIN (TRI50b、粗製)
26.6 g (71 mmole) Z-DIPIN D （82.6 g n-ヘプタン中）を 60 ml n-ヘプタンで希釈し、-60 ℃まで冷却し、10.5 g (285 mmole) 塩酸を入れる。ついで、反応混合物を吸気し、窒素を導入し、その間温度を約20 ℃ずつ上昇させ周囲温度とする。溶媒を油状沈殿物から除き、60 ml の新鮮な n-ヘプタンで数回置き換える。油状残渣を 60 ml テトラヒドロフランに溶解する (溶液 A)。
【０３２１】
別のフラスコに 130 ml テトラヒドロフラン、24.5 g (61.5 mmole) Z-D-Phe-Pro-OH および 6.22 g (61.5 mmole) N-メチルモルホリンを入れ、−20 ℃に冷却する。この溶液に 8.4 g (61.5 mmole) イソブチルクロロホルマートの20 ml テトラヒドロフラン溶液を加え、30 分間攪拌し、ついで溶液 A を−25 ℃で加える。添加が完了したら、16 ml (115 mmole) までトリエチルアミンを加え、pH 試験紙で測定して pH を 9-10 に調節する。反応混合物を周囲温度まで暖め、3 時間、窒素下で攪拌する。溶媒を蒸発乾固し、蒸発残渣を 340 ml tert.-ブチルメチルエーテル (t-BME) に溶解する。Z-DIPIN の t-BME 溶液を175 ml 1.5% 塩酸で２回洗浄する。合わせた酸性洗液を 175 ml t-BME で再洗浄する。あわせた有機層を 175 ml 水、175 ml 飽和炭酸水素ナトリウム溶液、175 ml 25% 塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過する。この溶液をさらなる精製なしに次の工程に用いる。
収量: 29.9 g (80%) Z-DIPIN
【０３２２】
実施例２
TRI 50D (TRI 50C のジエタノールアミン付加体) の合成
本実施例で使用する出発材料は、実施例１で得られた TRI 50b (「Z-DIPIN」) の溶液である。この溶液をさらに精製することなしに TRI 50d の合成に供する。Z-DIPIN の t-BME 溶液 (7.0 g (11.5 mmole) (R,S,R) TRI50b を含有、Z-DIPIN のHPLC結果 に基づき計算) を蒸発乾固し、蒸発残渣を 80 ml ジエチルエーテルに溶解する。1.51 g (14.4 mmole) ジエタノールアミンを添加し、混合物を少なくとも10 時間加熱還流すると、その間に沈殿産物が生じる。この懸濁液を 5-10 ℃まで冷却し、ろ過し、ろ過残渣をジエチルエーテルで洗浄する。
【０３２３】
キラルおよび化学的純度を改善するために、湿ったろ過物 (7 g) を 7 ml ジクロロメタンに溶解し、0-5 ℃に冷却し、42 ml ジエチルエーテルの添加により産物を沈澱せしめ、ろ過する。単離された湿った産物を35℃にて減圧下または少なくとも4時間乾燥する。
収量: 5.5 g (80%) Tri50d
融点: 140-145℃
【０３２４】
実施例３
TRI 50C のナトリウム塩の調製
実施例２の1.5 kg (2.5 mole) TRI50d を 10.5 L ジクロロメタンに溶解する。11 L 2% 塩酸を添加し、混合物を最大 30 分間 (所望により約 20 分間) 室温で攪拌する。沈殿物が有機層に形成される。攪拌後、その層を放置し、分離する。水層を2.2 L ジクロロメタンで２回再洗浄する。合わせた有機層を625 g 塩化アンモニウムの 2.25 L 水溶液で洗浄する。(塩化アンモニウムは水性抽出物のpHを約 pH 1-2 〜約 pH 4-5 の範囲内に緩衝するが、これは強い酸性状態がペプチド結合を切断する可能性があるためである)。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、濾液を蒸発乾固する。遊離ボロン酸のアッセイを(実施例３８の RP HPLC 法により最大 30 分間 (所望により約 20 分間) 室温において)行い、酸から塩への変換のための溶媒および塩基の量を計算する。2.5 mol の遊離酸を得たら、蒸発残渣を 5 L アセトニトリルに溶解し、100 g (2.5 mole) 水酸化ナトリウム溶液を 5% 水溶液 2.2 Lとして加える。この溶液を２時間、周囲温度 (すなわち 15-30 ℃、最適には室温) で攪拌し、ついで 35℃を超えない温度で減圧下(約 10 mmHg) 蒸発せしめる。蒸発残渣を再び 3.5 L の新しいアセトニトリルに溶解し、蒸発により乾燥し、微量の水を除く。蒸発残渣が乾燥したら、それを 3 L アセトニトリル (あるいは 6L THF) に溶解し、徐々に 32 L n-ヘプタンと 32 L ジエチルエーテルの混合物に加える。添加は、産物が塊となったり固着したりするのを避けるよう十分にゆっくりと行い、30 分間以上をかけて実施する。沈殿産物を濾取し、n-ヘプタンで洗浄し、減圧下、最初は温度約 10 ℃、ついで約35℃まで温度を上げて乾燥させる。
収量: 1.0 kg (70%) TRI 50c ナトリウム塩
【０３２５】
実施例４
TRI 50C のカルシウム塩の調製
実施例２の 1.5 kg (2.5 mole) TRI 50d を 10.5 L ジクロロメタンに溶解する。11 L 2% 塩酸を加え、混合物を最大 30 分間 (所望により約 20 分間) 室温で攪拌する。攪拌後、その層を放置し、分離する。水層を2.2 L ジクロロメタンで２回洗浄する。合わせた有機層を 625 g 塩化アンモニウムの 2.25 L 水溶液で洗浄する。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、濾液を蒸発乾固する。遊離ボロン酸のアッセイを行い、酸から塩への変換のための溶媒および塩基の量を計算する。2.5 mol の遊離酸を得たら、蒸発残渣を 5 L アセトニトリルに溶解し、93 g (1.25 mole) 水酸化カルシウム懸濁液（ 1 L 水中）を添加する。溶液を２時間、周囲温度 (すなわち15-30℃、最適には室温) で攪拌し、減圧下(約 10 mmHg)、最初は約10 ℃で、ついで35℃を超えない温度まで上げて蒸発せしめる。蒸発残渣を再び 3.5 L の新しいアセトニトリルに溶解し、蒸発により乾燥し、微量の水を除く。蒸発残渣が乾燥したら、それを 6 L テトロヒドロフランに溶解し、徐々に 32 L n-ヘプタンと 32 L ジエチルエーテルの混合物に添加する。添加は、産物が塊になったり固着したりするのを避けるよう十分にゆっくりと行い、30 分間以上をかけて実施する。沈殿した産物を濾取し、n-ヘプタンで洗浄し、減圧下(約 10 mmHg)で35℃以下の温度で乾燥させる。
収量: 0.98 kg (70%) TRI 50c カルシウム塩
【０３２６】
実施例１−４の操作はスケールアップでき、注意深く操作すると、高純度の塩が産生される。ジエタノールアミン沈澱工程において、(R,S,R) TRI 50b 1当量に対し 1.25 当量のジエタノールアミンを使用することが重要である。ジエタノールアミンエステルの加水分解においては、水性酸との過度に長い接触を避けることが重要である。同様に、TRI 50b はZ-DIPIN A に対するグリニヤール反応を経て合成される。
【０３２７】
実施例５
TRI 50B の TRI 50C への別の変換法
ここで記載の合成操作および続く合成例は、一般的に窒素下でなされ、市販の乾燥溶媒を使用する。
【０３２８】
1. ラセミ TRI 50bの HPLC 精製により得られた約 300 g の TRI 50b を約 2.5 L のジエチルエーテルに溶解した。様々なバッチの TRI 50b は、85%〜95% 以上の範囲の R,S,R 異性体純度を有すると推定される。
2. 約 54 ml のジエタノールアミンを添加し (全TRI 50b 含量に対して1:1の化学量)、混合物を40℃で還流した。
3. 沈殿産物を回収し、数回ジエチルエーテルで洗い、乾燥した。
4. 乾燥産物を CHCl3 に溶解した。塩酸 (pH 1) を添加し、混合物を約１時間室温で攪拌した。
5. 有機層を回収し、NH4Cl 液で洗浄した。
6. 有機溶媒を留去し、残渣固体産物を乾燥した。
典型的収量：約 230 g
【０３２９】
実施例６
TRI 50C リチウム塩の調製
実施例５の方法で得られたCbz-Phe-Pro-BoroMpg-OH (20.00g、38.1mM) を室温で攪拌しながらアセトニトリル (200ml) に溶解する。この溶液に LiOH を 0.2M 水溶液（蒸留水中） (190ml)として加える。得られる澄明の溶液を 2 時間室温で攪拌し、37 ℃を超えない温度で減圧下にて吸気し乾燥する。得られる油状／粘着性の液体を、必要ならば約20 分間緩やかに加熱して、 500ml の蒸留水に再び溶解する。この溶液を濾紙でろ過し、再び37 ℃を超えない溶液温度で吸気乾燥する。得られた産物を一晩減圧下乾燥すると、通常白色のもろい固体が得られる。
ついで、この塩を一定重量までシリカで減圧下乾燥した (72 h)。
収量 17.89g
ミクロ分析
【表１】
2007528381.tif 000029
【０３３０】
実施例７
TRI 50C リチウム塩の UV/可視スペクトル
実施例６の操作から得られた塩のUV/可視スペクトルを蒸留水中で 20 ℃で 190nm 〜 400nm で記録した。塩は λmax が 210 および 258nm であった。乾燥塩の重量を、吸光係数（extinction coefficient）の計算のために測定した。λmax 258nm を使用した。吸光係数は以下の式により計算した：
A = εcl、A は吸光度
C は濃度
l は UV セルの経路長
ε は吸光係数
吸光係数：451
【０３３１】
実施例８
TRI 50C リチウム塩の水溶解度
本実施例に使用した塩は、実施例６に記載の方法の改変法を用いて製造した。この改変法は、出発物質として 100mg の TRI 50c を使用した点、水に再溶解した産物を凍結乾燥により乾燥した点、およびろ過を0.2μmのろ紙により行った点が記載の方法と異なる。塩は約85% の R,S,R 異性体を含有すると考えられる。
【０３３２】
最大水溶解度を調べるために、25mg の乾燥塩を水中で37℃で振盪し、このサンプルをろ過し、UV スペクトルを測定した。塩は不溶性物質の白色残渣を残した。リチウム塩は比較的可溶性であったので、上記と同様にして 50mg/ml で再溶解した。
25mg/mlで溶解したときの溶解度：43mM (23 mg/ml)
50mg/mlで溶解したときの溶解度：81mM (43 mg/ml)
【０３３３】
実施例９
TRI 50C ナトリウム塩の調製
実施例５の方法により得られたCbz-Phe-Pro-BoroMpg-OH (20.00g、38.1mM) を室温で攪拌しながらアセトニトリル (200ml) に溶解する。この溶液に NaOH を 0.2M 溶液（蒸留水中）(190ml)として加える。得られる澄明の溶液を 2 時間室温で攪拌し、37 ℃を超えない温度で減圧下吸気乾燥する。得られる油状／粘着性の液体を、15-20 分間緩やかに加熱して500ml 蒸留水に再び溶解する。この溶液を濾紙でろ過し、再び37 ℃を超えない溶液温度で吸気乾燥する。得られた産物を一夜減圧下乾燥すると、通常、白色のもろい固体が得られる。産物は、残った水のために油状または粘着性の固体として存在しうるので、その場合これを酢酸エチルに溶解し、吸気乾燥すると、産物が白色固体として得られる。
ついで、この塩を一定重量までシリカで減圧下乾燥した (72 h)。
収量：50% 以上
ミクロ分析：
【表２】
2007528381.tif 000030
【０３３４】
実施例１０
TRI 50C ナトリウム塩の UV/可視スペクトル
実施例９の操作から得られたナトリウム塩のUV/可視スペクトルを蒸留水中で 20 ℃で 190nm 〜 400nm で記録した。塩は λmax が 210 および 258nm であった。乾燥塩の重量を、吸光係数の計算のために測定した。λmax 258nm を使用した。吸光係数は以下の式により計算した：
A = εcl、A は吸光度
C は濃度
l は UV セルの経路長
ε は吸光係数
吸光係数：415
【０３３５】
実施例１１
TRI 50C ナトリウム塩の水溶解度
本実施例に使用する塩は、実施例９に記載の方法の改変法を用いて製造した。改変法は出発物質として 100mg の TRI 50c を使用した点、水に再溶解した産物を凍結乾燥により乾燥した点、およびろ過を0.2μm のろ紙により行った点が、記載の方法と相違する。塩は約 85% の R,S,R 異性体を含有すると考えられる。
【０３３６】
最大水溶解度を調べるために、25mgの乾燥塩を水中で37℃で振盪し、このサンプルをろ過し、UV スペクトルを測定した。塩は不溶性物質の白色残渣を残した。ナトリウム塩は比較的可溶性であったので、上記と同様にして50mg/mlで再溶解した。
25mg/mlで溶解したときの溶解度：44mM (25 mg/ml)
50mg/mlで溶解したときの溶解度：90mM (50 mg/ml)
【０３３７】
実施例１２
TRI 50C カリウム塩の調製
実施例５の方法により得られたCbz-Phe-Pro-BoroMpg-OH (20.00g、38.1mM) を室温で攪拌しながらアセトニトリル (200ml) に溶解する。この溶液に KOH を 0.2M 溶液（蒸留水中） (190ml)として加える。得られる澄明の溶液を 2 時間室温で攪拌し、37 ℃を超えない温度で減圧下吸気乾燥する。得られる油状／粘着性の液体を、1L 蒸留水に37℃まで約 2 時間温め再び溶解する。この溶液を濾紙でろ過し、再び37 ℃を超えない溶液温度で吸気乾燥する。得られた産物を一晩減圧下乾燥すると、通常白色のもろい固体が得られる。
収量：14.45 mg
ついで、この塩を一定重量までシリカで減圧下乾燥した (72 h)。
ミクロ分析：
【表３】
2007528381.tif 000031
【０３３８】
実施例１３
TRI 50C カリウム塩の UV/可視スペクトル
実施例１２の操作から得られたカリウム塩のUV/可視スペクトルを蒸留水中で 20 ℃で 190nm 〜 400nm で記録した。TRI 50C および塩は λmax が 210 および 258nm であった。乾燥塩の重量を、吸光係数の計算のために測定した。λmax 258nm を使用した。吸光係数は以下の式を用いて計算した：
A = εcl、A は吸光度
C は濃度
l は UV セルの経路長
ε は吸光係数
吸光係数：438
【０３３９】
実施例１４
TRI 50C カリウム塩の水溶解度
本実施例に使用する塩は、実施例１２に記載の方法の改変法を用いて製造した。改変法は、出発物質として 100mg の TRI 50c を使用した点、水に再溶解した産物を凍結乾燥により乾燥した点、およびろ過を0.2μm ろ紙を用いて行った点が記載の方法と相違する。塩は約 85% の R,S,R 異性体を含有すると考えられる。
【０３４０】
最大水溶解度を調べるために、25mg の乾燥塩を水中で37℃で振盪し、サンプルをろ過し、UV スペクトルを測定した。塩は不溶性物質の白色残渣を残した。
25mg/mlで溶解したときの溶解度：29mM (16 mg/ml)
【０３４１】
実施例１５
TRI 50C 亜鉛塩の調製
水酸化亜鉛の相対的溶解度は、この水酸化物を用いて実施例６の操作により対応の TRI 50c 塩を調製すると均質の塩が形成されないものであった。したがって、新しい方法を開発して、本実施例および次の実施例に記載のように、亜鉛塩を製造した。
【０３４２】
TRI 50c ナトリウム塩 (2.24g、4.10mM) を蒸留水 (100ml) に室温で溶解し、塩化亜鉛のTHF液(4.27ml、0.5M) を攪拌しながら注意深く加えた。すぐに形成する白色沈殿物を濾取し、蒸留水で洗浄した。この固体を酢酸エチルに溶解し、蒸留水 (2 x 50ml) で洗浄した。有機溶液を吸気乾燥し、生じた白色固体を乾燥器中シリカで 3 日間、ミクロ分析の前に乾燥した。収量 1.20g。
【０３４３】
1H NMR 400MHz, δH(CD3OD) 7.23-7.33 (20H, m, ArH), 5.14 (4H, m, PhCH2O), 4.52 (4H, m, αCH), 3.65 (2H, m), 3.31 (12H, m), 3.23 (6H, s, OCH3), 2.96 (4H, d, J 7.8Hz), 2.78 (2H, m), 2.58 (2H, m), 1.86 (6H, m), 1.40 (10H, m).
【０３４４】
13C NMR 75MHz δC(CD3OD) 178.50, 159.00, 138.05, 137.66, 130.54, 129.62, 129.50, 129.07, 128.79, 128.22, 73.90, 67.90, 58.64, 58.18, 56.02, 38.81, 30.06, 28.57, 28.36, 25.29．
FTIR (KBr disc) νmax (cm-1) 3291.1, 3062.7, 3031.1, 2932.9, 2875.7, 2346.0, 1956.2, 1711.8, 1647.6, 1536.0, 1498.2, 1452.1, 1392.4, 1343.1, 1253.8, 1116.8, 1084.3, 1027.7, 916.0, 887.6, 748.6, 699.4, 595.5, 506.5.
【０３４５】
実施例１６
TRI 50C アルギニン塩の調製
実施例５の方法により得られたCbz-Phe-Pro-BoroMpg-OH (20.00g、38.1mM) を室温で攪拌しながらアセトニトリル (200ml) に溶解する。この溶液にアルギニンを 0.2M 溶液（蒸留水中） (190ml)として加える。得られる澄明の溶液を 2 時間室温で攪拌し、37 ℃を超えない温度で減圧下にて吸気乾燥する。得られる油状／粘着性の液体を、2L 蒸留水に37℃まで約 2 時間温め再び溶解する。溶液を濾紙でろ過し、再び37 ℃を超えない溶液温度で吸気乾燥する。得られた産物を一晩減圧下乾燥すると、通常白色のもろい固体が得られる。
ついで、塩を一定重量までシリカで減圧下乾燥した (72 h)。
収量：10.54 g
【０３４６】
ミクロ分析
【表４】
2007528381.tif 000032
【０３４７】
実施例１７
TRI 50C アルギニン塩の UV/可視スペクトル
実施例１５の操作から得られた塩のUV/可視スペクトルを蒸留水中で 20 ℃で 190nm 〜 400nm で記録した。TRI 50C および塩は λmax が 210 および 258nm であった。乾燥塩の重量を、吸光係数の計算のために測定した。λmax 258nm を使用した。吸光係数は以下の式で計算した：
A = εcl、A は吸光度
C は濃度
l は UV セルの経路長
ε は吸光係数
吸光係数：406
【０３４８】
実施例１８
TRI 50C アルギニン塩の水溶解度
本実施例に使用した塩は、実施例１６に記載の方法の改変法を用いて製造した。改変法は、出発物質として 100mg の TRI 50c を使用した点、水に再溶解した産物を凍結乾燥により乾燥した点、ろ過を0.2μm ろ紙により行った点が記載の方法と相違する。塩は約85% の R,S,R 異性体を含有すると考えられる。
【０３４９】
最大水溶解度を調べるために、25mgの乾燥塩を水中で37℃で振盪し、このサンプルをろ過し、UV スペクトルを測定した。塩は不溶性物質の白色残渣を残した。
25mg/mlで溶解したときの溶解度：14mM (10 mg/ml)
【０３５０】
実施例１９
TRI 50C リシン塩の調製
実施例５の方法により得られたCbz-Phe-Pro-BoroMpg-OH (20.00g、38.1mM) を室温で攪拌しながらアセトニトリル (200ml) に溶解する。この溶液にL-リシンを 0.2M 溶液（蒸留水中） (190ml)として加える。得られる澄明の溶液を 2 時間室温で攪拌し、37 ℃を超えない温度で減圧下吸気乾燥する。得られる油状/粘着性の液体を、3L 蒸留水に37℃まで約 2 時間温め再び溶解する。この溶液を濾紙でろ過し、再び37 ℃を超えない溶液温度で吸気乾燥する。得られた産物を一晩減圧下乾燥すると、通常白色のもろい固体が得られる。この産物は油状または粘着性の固体として存在することがあり（残ったの水のため）、その場合、続いてそれを酢酸エチルに溶解し、吸気乾燥し、白色固体として産物を得る。
ついで、塩を一定重量までシリカで減圧下乾燥した (72 h)。
収量：17.89 g
【０３５１】
ミクロ分析
【表５】
2007528381.tif 000033
【０３５２】
実施例２０
TRI 50C リシン塩の UV/可視スペクトル
実施例１９の操作から得られた塩のUV/可視スペクトルを蒸留水中で 20 ℃で 190nm 〜 400nm で記録した。TRI 50C および塩は λmax が 210 および 258nm であった。乾燥塩の重量を、吸光係数の計算のために測定した。λmax 258nm を使用した。吸光係数は以下の式により計算した：
A = εcl、A は吸光度
C は濃度
l は UV セルの経路長
ε は吸光係数
吸光係数：437
【０３５３】
実施例２１
TRI 50C リシン塩の水溶解度
本実施例に使用した塩は、実施例１９に記載の方法の改変法を用いて製造した。改変法は、出発物質として 100mg の TRI 50c を使用した点、水に再溶解した産物を凍結乾燥により乾燥した点、およびろ過を0.2μm ろ紙により行った点が記載の方法と相違する。塩は約 85% の R,S,R 異性体を含有すると考えられる。
【０３５４】
最大水溶解度を調べるために、25mgの乾燥塩を水中で37℃で振盪し、サンプルをろ過し、UVスペクトルを測定した。塩は不溶性物質の白色残渣を残した。
25mg/mlで溶解したときの溶解度：13mM (8.6 mg/ml)
【０３５５】
実施例２２
TRI 50C の N−メチル−D−グルカミン塩の調製
実施例５の方法により得られたCbz-Phe-Pro-BoroMpg-OH (20.00g、38.1mM) を室温で攪拌しながらアセトニトリル (200ml) に溶解する。この溶液にN−メチル−D−グルカミンを 0.2M 溶液（蒸留水中） (190ml)として加える。得られる澄明の溶液を 2 時間室温で攪拌し、37 ℃を超えない温度で減圧下吸気乾燥する。得られる油状/粘着性の液体を、500ml蒸留水に約 20 分間軽く温めながら再び溶解する。この溶液を濾紙でろ過し、再び37 ℃を超えない溶液温度で吸気乾燥するか、あるいは凍結乾燥する。得られた産物を一晩減圧下乾燥すると、通常白色のもろい固体が得られる。
塩を一定重量までシリカで減圧下乾燥した (72 h)。
収量：21.31 g
【０３５６】
ミクロ分析
【表６】
2007528381.tif 000034
【０３５７】
実施例２３
TRI 50C のN−メチル−D−グルカミン塩の UV/可視スペクトル
実施例２２の操作から得られた塩のUV/可視スペクトルを蒸留水中で 20 ℃で 190nm 〜 400nm で記録した。TRI 50C および塩は λmax が 210 および 258nm であった。乾燥塩の重量を、吸光係数の計算のために測定した。λmax 258nm を使用した。吸光係数は以下の式により計算した：
A = εcl、A は吸光度
C は濃度
l は UV セルの経路長
ε は吸光係数
吸光係数：433
【０３５８】
実施例２４
TRI 50C N−メチル−D−グルカミン塩の水溶解度
本実施例に使用した塩は、実施例２２に記載の方法の改変法を用いて製造した。改変法は、出発物質として 100mg の TRI 50c を使用した点、水に再溶解した産物を凍結乾燥により乾燥した点、およびろ過を0.2μm ろ紙により行った点が記載の方法と相違する。塩は約 85% の R,S,R 異性体を含有すると考えられる。
【０３５９】
最大水溶解度を調べるために、25mgの乾燥塩を水中で37℃で振盪し、このサンプルをろ過し、UV スペクトルを測定した。塩は完全に溶解したように見られた。この塩は比較的可溶性であったので、上記と同様にして 50mg/ml で再溶解した。
25mg/mlで溶解したときの溶解性：35mM (25 mg/ml)
50mg/mlで溶解したときの溶解性：70mM (50 mg/ml)
【０３６０】
実施例２５
TRI 50C アルギニン塩の別法による調製
ややモル過剰の L-アルギニンを 0.2-0.3mmol TRI 50c の酢酸エチル溶液（10 ml）に加えると、アルギニン塩が簡単に形成される。溶媒を１時間後に蒸発せしめ、残渣を２回ヘキサンで倍散し、過剰のアルギニンを除去する。
【０３６１】
実施例２６
TRI 50C カルシウム塩の第１調製法
実施例５の方法で得られたCbz-Phe-Pro-BoroMpg-OH (20.00g、38.1mM) を室温で攪拌しながらアセトニトリル (200ml) に溶解する。この溶液に Ca(OH)2 を 0.1M 溶液（蒸留水中） (190ml)として加える。得られる澄明の溶液を 2 時間室温で攪拌し、37 ℃を超えない温度で減圧下にて吸気乾燥する。得られる産物は白色のもろい固体である。
ついで、塩を一定重量までシリカで減圧下乾燥した (72 h)。
収量 17.69g
【０３６２】
実施例２７
TRI 50C カルシウム塩の別法の第２調製法
50.0 TRI 50c (95.2 mmol) を 250ml アセトニトリルに攪拌しながら室温で溶解し、ついで氷浴で冷やした。この氷冷溶液に3.5 g (47.6 mmol) 水酸化カルシウムの水性懸濁液 100 ml を滴下し、2.5 時間室温で攪拌し、ろ過し、得られた混合物を、35 ℃を超えない温度で蒸発により乾燥した。澄明の淡黄色油状残渣を 200 ml アセトンに再溶解し、蒸発により乾燥した。アセトンでの再溶解操作をもう一回繰り返し、無色泡状物を得た。
【０３６３】
この泡状物を 100 ml アセトンに再溶解し、濾過し、1100 ml 石油エーテル 40/60 および 1100 ml ジエチルエーテルの氷冷溶液に滴下した。得られた無色の沈澱を濾取し、石油エーテル 40/60 で２回洗浄し、高い減圧下で乾燥すると、無色固体49.48 g (92%) が得られたが、これはHPLC 測定によると純度 99.4% であった。
【０３６４】
実施例２８
TRI 50C カルシウム塩の UV/可視スペクトル
実施例２６の操作から得られた塩の UV/可視スペクトルを蒸留水中で 20 ℃で 190nm 〜 400nm で記録した。TRI 50C および塩は λmax が 210 および 258nm であった。ついで、乾燥塩の重量を吸光係数の計算のために測定した。λmax 258nm を使用した。吸光係数は以下の式により計算した：
A = εcl、A は吸光度
C は濃度
l は UV セルの経路長
ε は吸光係数
吸光係数：955
【０３６５】
実施例２９
TRI 50C カルシウム塩の水溶解度
本実施例に使用した塩は、実施例２７に記載の方法の改変法を用いて製造した。改変法は、出発物質として100mgのTRI 50cを使用した点、水に再溶解した産物を凍結乾燥により乾燥した点、およびろ過を0.2μm ろ紙によりを行った点が記載の方法と相違する。塩は約 85% の R,S,R 異性体を含有すると考えられる。
【０３６６】
最大水溶解度を調べるために、25mgの乾燥塩を水中で37℃で攪拌し、このサンプルをろ過し、UV スペクトルを測定した。塩は不溶性物質の白色残渣を残した。
25mg/mlで溶解したときの溶解度：5mM (5 mg/ml)
【０３６７】
実施例３０
TRI 50C カルシウム塩のインビトロ活性
TRI 50C カルシウム塩をヒトα-トロンビンの阻害薬として、アミド分解アッセイ（J,Deadman et al, J. Med. Chem. 38: 15111-1522, 1995, TRI 50b について Ki 値 7nM を報告する）により評価した。
【０３６８】
ヒトα-トロンビンの阻害は、それゆえ、３種の異なる濃度の色素原基質 S-2238 の酵素触媒加水分解の阻害により測定した。
【０３６９】
200 μl のサンプルまたは緩衝液および 50 μl の S-2238 を37℃で１分間インキュベートし、50μlのヒトα-トロンビン(0.25 NIHμ/ml) を加えた。阻害および非阻害反応の初速度を 4.5nm で記録した。吸光度の増加を Lineweaver および Burke の方法にしたがいプロットした。Km および見かけ Km を測定し、この関係を用いて Ki を計算した。
2007528381.tif 000035
【０３７０】
使用した緩衝液は、0.1M リン酸ナトリウム、0.2 NaCl、0.5% PEG および 0.02% アジ化ナトリウムを含有し、オルトリン酸で pH 7.5 に調節した。
【０３７１】
サンプルは DMSO に溶解した化合物からなる。
【０３７２】
Ki 測定についてのさらなる記述は、Dixon, M and Webb, E. C., ”Enzymes”, third edition, 1979, Academic Press,（出典明示により本明細書の一部とする）を参照のこと。
【０３７３】
TRI 50c カルシウム塩が Ki 10nM を有することを観測した。
【０３７４】
実施例３１
TRI 50C のマグネシウム塩の調製
TRI 50c (1.00g、1.90mM) をメタノール (10ml) に溶解し、室温で攪拌した。この溶液にマグネシウムメトキシド (Mg(CH3O)2) のメタノール液 (1.05m、l7.84 %) を加えた。この溶液を２時間室温で攪拌し、ろ過し、吸気して5ml とした。ついで水 (25ml) を加え、溶液を吸気乾燥して、白色固体を得た。これをミクロ分析にかける前に 72 時間シリカで乾燥した。収量 760mg。
【０３７５】
1H NMR 300MHz, δH(CD3C(O)CD3) 7.14-7.22 (20H, m),6.90 (2H,m),4.89 (4H, m, PhCH2O), 4.38 (2H,m), 3.40 (2H, br s),2.73-3.17 (20H, 広い非分割多重項), 1.05-2.10 (16H, 広い非分割多重項)
【０３７６】
13C NMR 75MHz δC(CD3C(O)CD3) 206.56, 138.30, 130.76, 129.64, 129.31, 129.19, 129.09, 128.20, 128.04, 74.23, 73.55, 67.78, 58.76, 56.37, 56.03, 48.38, 47.87, 39.00, 25.42, 25.29．
FTIR (KBr disc) νmax (cm-1) 3331.3, 3031.4, 2935.3, 2876.9, 2341.9, 1956.1, 1711.6, 1639.9, 1534.3, 1498.1, 1453.0, 1255.3, 1115.3, 1084.6, 1027.6, 917.3, 748.9, 699.6, 594.9, 504.5, 467.8.
【０３７７】
実施例３２
TRI 50Cの溶解度
実施例５の操作で得られた TRI 50c のUV/可視スペクトルおよび溶解度を、塩について前述したようにして得た。TRI 50c の溶解度は、50mg/ml で溶解したとき、8mM (4mg/ml)であった。
【０３７８】
実施例３３
(R,S,R) TRI 50Cのナトリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩および亜鉛塩についての分析
下記の塩を、ボロネート：金属の化学量 n:1（n は金属の価）を用い、実施例８、１１、１４、１８、２１、２４および２９に記載の塩の調製に用いたものより高いキラル純度の (R,S,R) TRI 50c を使用して調製した。
【０３７９】
【表７】
2007528381.tif 000036
【０３８０】
【表８】
2007528381.tif 000037
【０３８１】
【表９】
2007528381.tif 000038
【０３８２】
【表１０】
2007528381.tif 000039
【０３８３】
注：三角形型の酸ボロネートをミクロ分析の計算に使用する。実施例１１で試験した塩の方がキラル純度が低いので、実施例１１の方がナトリウム塩の溶解度が低く報告されたと思われる。
【０３８４】
結論
亜鉛塩、カルシウム塩およびマグネシウム塩は、それぞれ１の金属イオンに対して２分子の TRI 50c の化学量でもって調製した。カルシウム塩およびマグネシウム塩に見られる値は、この1:2化学量について計算したものと近く、それに一致する。亜鉛塩については、過剰の亜鉛が見られた；しかし、亜鉛塩はかなりの割合で酸ボロネートを含む。ナトリウム塩は、１の金属イオンに対して１分子の TRI 50c の化学量でもって調製した。ナトリウム塩にみられる値は、この 1:1 化学量で計算したものに近く、それに一致する。
【０３８５】
実施例３４
安定性
乾燥の前後における TRI 50c ならびにそのナトリウム塩およびリシン塩についてのアッセイ
１．結果の表
【表１１】
2007528381.tif 000040
【０３８６】
酸の純度は乾燥処理により低下したが、塩の純度はあまり影響を受けなかった；ナトリウム塩の純度は有意に低下しなかった。しかし、応答因子が大きく相違すると、実際の不純物レベルは低下するであろう。
【０３８７】
２．分析操作
２.１. サンプルの調製
TRI 50c およびその Na、Li および Lys 塩を HPLC バイアル中に秤量し、乾燥器中でリン酸ぺントキシドとともに１週間保存した。サンプル分析のために、5 mg の乾燥および非乾燥材料を 5 ml 容量フラスコに秤量し 1 mL アセトニトリルに溶解し、ミネラル不含水で 5 mL とした。
【０３８８】
３．データの評価
定量評価は HPLC-PDA 法により行った。
【０３８９】
４. 分析パラメーター
４.１. 装置およびソフトウエアー
オートサンプラー                Waters Alliance 2795
ポンプ                          Waters Alliance 2795
カラムオーブン                  Waters Alliance 2795
検出                            Waters 2996 diode array, MS-ZQ single quad
ソフトウエアーバージョン        Waters Millennium  Release 4.0
【０３９０】
４.２.  静止相
分析カラム ID                    S71
材料                             X-Terra（商標） MS C18、5μm
サプライアー                     Waters, Eschborn, Germany
大きさ                           150 mm x 2.1 mm (長さ、内直径)
【０３９１】
４.３.  動相
水相：A: H2O + 0.1%
有機相：C: ACN
勾配条件：
【表１２】
2007528381.tif 000041
【０３９２】
本実施例は、開示の塩、特に金属塩、例えばアルカリ金属塩が、酸、特にTRI 50c より安定であることを示す。
【０３９３】
実施例３５
TRI 50c マグネシウム塩のトロンビン阻害薬としてのインビトロアッセイ
トロンビンアミド分解アッセイ
TRI 50c マグネシウム塩（TRI 1405) をトロンビンアミド分解アッセイで試験した。
【０３９４】
試薬：
アッセイ緩衝液：
100mM リン酸ナトリウム
200mM NaCl (11.688g/l)
0.5% PEG 6000 (5g/l)
0.02% アジ化ナトリウム
pH 7.5
【０３９５】
色素原基質 S2238 を 4mM にて水に溶解した (25mg + 10ml)。5μM にてアッセイで使用するために、アッセイ緩衝液で 50μM まで希釈した (S2238 は H-D-Phe-Pip-Arg-pNA)。
【０３９６】
HTI から Cambridge Bioscience 経由でトロンビンを取得し、アッセイ緩衝液で 1mg/ml のアリコートとした。アッセイ緩衝液で 100n/ml に希釈し、ついでアッセイに使用するためにさらに１／３にした。
【０３９７】
アッセイ：
100μl アッセイ緩衝液
50μl 5μg/ml トロンビン
20μl ビヒクルまたは化合物溶液
5 分間、37 ℃
20μl 50μM S2238
405nm、37 ℃で 10 分間読み、Vmax を記録
【０３９８】
結果および考察
本アッセイにおいて、TRI 50c のマグネシウム塩は外部対照としての TRI 50b と同じ活性を示す。
【０３９９】
実施例３６
TRI 50c ナトリウム塩の静脈内投与
TRI 50c ナトリウム塩の薬物動態 (PK) および薬力学 (PD) をビーグル犬に静脈内投与後に調べた。
【０４００】
PD を自動凝固測定器でトロンビン時間および APTT として決定した。血漿濃度は LCMS/MS 法で測定した。
【０４０１】
TRI 50c ナトリウム塩 (108.8g) を 0.9% 塩化ナトリウム (100ml) に溶解し、1.0 mg/kg (1.0 mg/kg、30 秒)を静脈内投与した。血液サンプルを 3.8% クエン酸三ナトリウム (1+8) に投与前および投与後 2、5、10、20、30 分、ついで 1、2、3、4、6、8、12、24 時間で採取した。血漿を遠心で調製し、分析まで-20 ℃で保存した。
【０４０２】
結果
ナトリウム塩はよく耐容され、試験の全期間中有害事象はなかった。
【０４０３】
雄および雌の犬の応答は薬物動態 C max: 2 分で類似していた（トロンビン時間が基準時の 14.3 秒から 154 秒に上昇した)。トロンビン時間は投与１時間で 26 秒であった。
【０４０４】
投与量 1.0 mg/kg i.v. でナトリウム塩投与を受けた犬において、APTT とトロンビン凝血時間との間の治療可能比が特に良好であった。トロンビン凝血時間は投与２分後に基準時の 10.8 倍に（14.3 秒から 154.4 秒に）上昇し、一方 APTT の上昇は 1.3 倍に（投与後 19 秒から 25 秒に)過ぎなかった。
【０４０５】
実施例３７
TRI 50cカルシウム塩の残留n-ヘプタン
実施例１および３の方法にしたがって製造した塩をヘッドスペースガスクロマトグラフィーによって試験した。データを下記に示す：
【表１３】
2007528381.tif 000042
【表１４】
2007528381.tif 000043
【表１５】
2007528381.tif 000044
【０４０６】
実施例３８
HPLCクロマトグラム
実施例１、２および３の方法で製造したTRI 50cモノナトリウム塩および実施例１、２および４の方法で製造したTRI 50cヘミカルシウム塩を、HPLCクロマトグラフィーにより分析した。
【０４０７】
１．方法
１．１  装置およびソフトウエア
オートサンプラー            Waters Alliance 2795
ポンプ                      Waters Alliance 2795
カラムオーブン              Waters Alliance 2795
検出                        Waters 2996 diode array, MS-ZQ single quad
ソフトウエア・バージョン    Waters Millennium 4.0
【０４０８】
１．２  静止相
分析カラム ＩＤ                    S-71
材料                               XTerra（商標） MS C18, 5μm
供給元                             Waters, Eschborn, Germany
寸法                               150 mm x 2.1 mm (長さ,ＩＤ)
プレ-カラムＩＤ                    プレ-カラムは使用しない
【０４０９】
Xterra MS C18, ５μm は、2002/2003年にWaters Corporation, 34 Maple Street, Milford, MA 01757, US および地方の営業所で供給されたカラム充填材である。それは、５μm サイズ、１２５Å孔サイズおよび１５.５％炭素添加の球状粒子からなるハイブリド有機／無機粒子を含む。
【０４１０】
１．３  動相
水相：        A:H2O+0.1% HCOOH
有機相：      C:ACN
H2O= H2O（Ultra Clear water purification systemによる）
ACN= 勾配等級アセトニトリル
勾配条件
【表１６】
2007528381.tif 000045
【０４１１】
１．４  機器のパラメーター
流速                        0.5 mL/分
温度                        40±5℃
HPLCコントロール        Waters Millennium Release 4.0
計算                        Waters Millenium 4.0
【０４１２】
２．  パラメーター
２．１  波長/保持時間/応答因子
表：保持および検出パラメーター（k' F：0.5 mL/分, t0 = 0.9 mL/分)
【表１７】
2007528381.tif 000046
【０４１３】
２．２  直線性
直線範囲4000-10μg/mL (検出UV 258 nm)
【表１８】
2007528381.tif 000047
【０４１４】
直線方程式パラメーター：
Y   = 6.75e+002X - 8.45e+003
r   = 0.99975
r2  = 0.99950
【０４１５】
直線範囲10−0.10μg/mL (検出SIR m/z 508.33)
表：直線データ SIR 508.33
【表１９】
2007528381.tif 000048
【０４１６】
方程式パラメーター
Y  = 2.27e+007X + 1.69e+006
r  = 0.99958
r2 = 0.99916
【０４１７】
２．３  定量限界
定量限界を、シグナル対ノイズ比基準、S/N＞19を用いて決定した。
ＵＶ258 nm：10μg/mL
Ｍ／ｚ 508.3:0.1 μg/mL
【０４１８】
２．４  精度
【表２０】
2007528381.tif 000049
【０４１９】
２．５  ロバスト性
表：ロバスト性データ；標準 250μg/mL水溶液 (＜1％ ACN含有)
【表２１】
2007528381.tif 000050
【０４２０】
引用文献
１．ICH HARMONISED TRIPARTITE GUIDELINE.  TEXT ON VALIDATION OF ANALYTICAL PROCEDURES Recommended for Adoption at Step 4 of the ICH Process on 27 October 1994 by the ICH Steering Committee
２．FDA Reviewer Guidance.  Validation of chromatographic methods.  Center forDrug Evaluation and Research.  Nov. 1994
３．USP 23.  <621> Chromatography
４．L. Huber.  Validation of analytical Methods.  LC-GC International Feb. 1998
５．Handbuch Validierung in der Analytik.  Dr. Stavros Kromidas (Ed.) Wiley-VCH Verlag. 2000.  ISBN 3-527-29811-8
【０４２１】
３．結果
３．１  サンプル名：TRI 50cモノナトリウム塩
注入容量：10μL
名前        保持時間        面積            面積            ピーク高
(分)          ％            [μAU's]            μAU
TRI 50c      12.136      100.0000        604.27228          32.05369
【０４２２】
３．２  サンプル名：TRI 50c ヘミカルシウム塩
注入容量：１０μL
名前            保持時間        面積          面積          ピーク高
(分)            ％        [μAU's]          μAU
TRI 50c          12.126        100.0000    597.11279        32.29640
【０４２３】
開示の方法を、C-B結合分解産物を実質的に含まない塩、特にHPLCにより、具体的には実施例３８の方法により検出しうる量でこのような産物を含有しない塩を得るために使用した。開示の方法を、不純物 Iを実質的に含まない塩、特にHPLCにより、具体的には実施例３８の方法により検出しうる量で不純物 Iを含まない塩を得るために使用した。開示の方法を、実質的に不純物 IVを含まない塩、特にHPLCにより、具体的には実施例３８の方法により検出しうる量の不純物 IVを含有しない塩を得るために使用した。
【０４２４】
実施例３９
ジアステレオマー過剰の決定
TRI 50b粗製物は、３つのキラル中心を含む。そのうち２つは鏡像異性的に純粋なアミノ酸((Ｒ)-Phe および(Ｓ)-Pro)の使用によって固定される。３番目のキラル中心は合成中に形成される。好ましいエピマーは、所望のTRI 50b、異性体Ｉ（R,S,R-TRI 50b）である。TRI 50bの両エピマーは、HPLC方法によって明確にベースライン分離され、TRI 50bのジアステレオマー過剰(de)を決定できる。
【０４２５】
TRI 50dはHPLC純度決定のために用いた条件下では安定でなかったが、サンプル調製時にTRI 50cに迅速に分解するので、TRI 50dとTRI 50cは同じHPLCトレースを示す。
【０４２６】
TRI 50cの２つの異性体は、HPLCにおいてベースライン分離されないが、両異性体は明確に認識できる。これは、TRI 50b粗製物 (両異性体の混合物)をフェニルボロン酸でTRI 50c粗製物に変換した場合に明らかとなる。TRI 50cの両異性体は、前述のTRI 50b粗製物におけるのとほぼ同じ関係でHPLCにおいて観察される。
【０４２７】
TRI 50b粗製物からのTRI 50dの合成の際、一つのジアステレオ異性体のみが沈殿する。この場合、HPLCは、TRI 50cについて１つのピークのみを示し、そこに非常に小さなフロンティングが観察される。ジクロロメタン/ジエチルエーテルから沈殿させると、このフロンティングが効率的に除去される。異性体IIの除去レベルは、このHPLC方法によって定量できない。したがって、再沈殿前のサンプルと１〜２回再沈殿させたサンプルとをピナコールでエステル化し、得られたTRI 50bのサンプルをHPLCにより分析した。こうして、95.4％の de (ジアステレオマー過剰）を、粗製物サンプルについて決定した。再沈殿したサンプルは99.0％の de を生じ、最終的に２回再沈殿したサンプルは99.5％の de を示した。
【０４２８】
これらの結果は明らかに、異性体Iは沈殿しやすく、一方異性体IIは溶液中に残ることを示す。
【０４２９】
前述の記載からわかるように、本開示は、医薬目的に有用であり、また１つ以上の下記属性を特徴とするボロン酸塩を提供する：（１）改善された加水分解安定性、（２）改善された脱ボロン酸に対する安定性、および（３）いずれにせよ先行技術には示唆されていない属性。
【０４３０】
医薬組成物のための活性成分の選択は、生物学的特性(バイオアベイラビリティを含む)だけでなく、加工、製剤および貯蔵のために望ましい物理化学特性についても熟考を必要とされる複雑な仕事である。バイオアベイラビリティ自身は、インビボ安定性、溶媒和特性および吸収特性などの様々な因子に依存しており、その各々もまた複数の物理学的、化学的および／または生物学的挙動に潜在的に依存している。
【０４３１】
実施例４０  短時間胃到達製剤（SHORT DURATION GASTRICALLY ACCESSIBLE FORMULATION）
TRI 50c ヘミカルシウム塩 (TGN 167) の製剤を、円形の白色錠（直径11 mm ）の形態で生産した。各錠剤は、75 mg のTRI 50c （カルシウム塩(TGN 167)として含有）を、以下の要素および組成とともに含有する：
【表２２】
2007528381.tif 000051
【０４３２】
賦形剤および組成の選択は、迅速な崩壊を達成するという主目的にしたがい決定した。
【０４３３】
試験プロトコール
前記のTGN 167 錠を経口経路にて10人の健常男性被験者に単回投与により投与した(無作為二重盲検プラセボ対照試験）。この群は10人の健常男性ボランティアからなり、そのうち9人に活性化合物を投与し、1人にプラセボを投与した。最終パネルに変更を加え、(9人にかえて)15人の被験者に600mgを投与した。TGN 167の各投与間の間隔は、最低１週間である。プラセボは、各ボランティアが試験中１回だけプラセボを投与されるように配分された。
【０４３４】
経口投与量: 75mg (１錠)、150mg (２錠) 、300mg (４錠) 、および600 mg (８錠)
【０４３５】
試験結果
1)  いずれの安全性評価においても、臨床学的に有意な所見は検出されなかった。一般的性質または心臓血管系の性質のいずれについても、24時間の試験時間中いずれの投与量のTGN 167でも臨床学的有害事象は見られなかった。
2)  TGN 167経口投与により、トロンビン 時間 (TT)の投与量依存的な上昇が誘導され、投与後2〜3h以内にピークに達し、最大平均値は投与前よりおよそ2.5〜7倍高かった。投与後4時間以内にTTは基準値の1.5倍まで下落した。TTはすべて、投与後10時間で基準値まで戻った。
【０４３６】
上記の結果は、TRI 50c塩が短時間経口抗血栓薬として好適な薬力学的性質を有することを示し、それはすなわち、投与後のトロンビン時間の迅速な上昇と、その直後に起こる、臨床学的に有意な抗凝固が期待されない基準値のやや上のレベルまでのTTの下落である。
【０４３７】
実施例４１
150MLの水に溶解するためのTGN255 小袋製剤
TGN 255は、TRI 50cのモノナトリウム塩である。以下の表に、TGN 255の量をTRI 50c当量にて示す。
【０４３８】
粉末
【表２３】
2007528381.tif 000052
【０４３９】
【表２４】
2007528381.tif 000053
【０４４０】
顆粒
【表２５】
2007528381.tif 000054
＊顆粒化のため50%w/w の水を使用。最終製剤には含まれない。
【０４４１】
【表２６】
2007528381.tif 000055
＊顆粒化のため20%w/w のエタノールを使用。最終製剤には含まれない。
【０４４２】
粉末および顆粒は小袋に包装される。
【０４４３】
実施例４２  比較安定性
TRI 50c ナトリウム塩およびTRI 50cナトリウム塩カルシウム塩の安定性を、同様の設計および条件の研究により調べた。いずれの研究でも、活性医薬成分は、グリップで密閉される二重バックに入れ、PE/PPスクリューキャップで閉まるシリンダー内部に保存した。この包装は水分の移動が可能であり、本研究は水分および酸素のこれらTRI 50c塩の安定性に対する作用を調べられるよう設計した。
【０４４４】
１２時間保存後に観察された結果を以下の表にまとめる。
【表２７】
2007528381.tif 000056
【０４４５】
考察
本実施例のデータは、ボロン酸のカルシウム塩が対応のナトリウム塩よりも安定であることを示す。同じ利点が亜鉛によって提供されうると考えられる。
＊                ＊                ＊                    
【０４４６】
本開示は、以下の項（連番は付されていない）の主題を含む。
１．以下の式 (I) のボロン酸またはその塩もしくはプロドラッグを含む固相医薬製剤であって、胃に入る前の液相への再構成に適合する製剤：
【化２７】
2007528381.tif 000057
［式中、
Yは、アミノボロン酸残基 −NHCH(R9)-B(OH)2 とともに、トロンビンの基質結合部位への親和性を有する疎水性部分を含む；
R9は、1 以上のエーテル結合が介在し、その酸素および炭素原子の総数が3、4、5または6である直鎖アルキル基である、またはR9は、−(CH2)m-W であり、ここでm は 2、3、4または5であり、Wは-OHまたはハロゲン (F、Cl、BrまたはI）である］。
【０４４７】
２．R9がアルコキシアルキルである、項１の製剤。
【０４４８】
３．YCO-が、トロンビンのS2サブサイトに結合するアミノ酸を含み、該アミノ酸がトロンビンのS3サブサイトに結合する部分にＮ末端で結合している、項１または項２の製剤。
【０４４９】
４．Y-が、トロンビンのS3およびS2結合部位に結合するN末端保護されていてもよいジペプチド残基であり、酸中のペプチド結合が、鎖内および／または環内に窒素、酸素または硫黄を含有してもよく、かつハロ、ヒドロキシおよびトリフルオロメチルから選択される置換基で置換されていてもよい C1-C13ヒドロカルビル基により独立してN置換されていてもよい、項１または項２の製剤。
【０４５０】
５．該ジペプチドがN末端保護されており、酸中のすべてのペプチド結合が非置換である、項４の製剤。
【０４５１】
６．S3結合アミノ酸残基がR-配置であり、S2結合残基がS-配置であり、かつフラグメント−NHCH(R9)-B(OH) がR-配置である、項４または項５の製剤。
【０４５２】
７．ボロン酸のトロンビンに対するＫｉが約100 nM以下である、項１−６のいずれかの製剤。
【０４５３】
８．ボロン酸のトロンビンに対するＫｉが約20 nM以下である、項７の製剤。
【０４５４】
９．以下の式 (II) のボロン酸またはその塩、プロドラッグもしくはプロドラッグ塩の再構成可能経口製剤：
【化２８】
2007528381.tif 000058
［式中、
Xは、H (NH2 を形成する) またはアミノ保護基である；
aa1は、20を超えない炭素原子を含有するヒドロカルビル側鎖を有し、かつ13までの炭素原子を有する少なくとも１の環状基を含むアミノ酸である；
aa2は、4〜6員環を有するイミノ酸である；
R1は、式 -(CH2)s-Z の基であり、ここでsは2、3または4であり、Zは-OH、-OMe、-OEtまたはハロゲン (F、Cl、BまたはI)である）］。
【０４５５】
１０．aa1が Phe、Dpaおよびそれらの全体的または部分的水素化アナログから選択される、項９の製剤。
【０４５６】
１１．aa1が Dpa、Phe、DchaおよびChaから選択される、項９の製剤。
【０４５７】
１２．aa1が R-配置である、項９−１１のいずれかの製剤。
【０４５８】
１３．aa1が (R)-Phe (すなわち、D-Phe) または (R)-Dpa (すなわち、D-Dpa) である、項９の製剤。
【０４５９】
１４．aa1が (R)-Phe である、項９の製剤。
【０４６０】
１５．aa2が以下の式 (IV)のイミノ酸残基である、項９−１４のいずれかの製剤： 
【化２９】
2007528381.tif 000059
［式中、R11は -CH2-、-CH2-CH2-、-CH2=CH2-、-S-CH2-、-S-C(CH3)2-または−CH2-CH2-CH2-であり、環が5または6員のとき、その基は１以上の-CH2-基において1〜3のC1-C3 アルキル基により置換されていてもよい］。
【０４６１】
１６．aa2がS-配置である、項１５の製剤。
【０４６２】
１７．aa2が(S)-プロリン残基である、項１５の製剤。
【０４６３】
１８．aa1-aa2が (R)-Phe-(S)-Pro (すなわち、D-Phe-L-Pro) である、項９の製剤。
【０４６４】
１９．R1が2-ブロモエチル、2-クロロエチル、2-メトキシエチル、3-ブロモプロピル、3-クロロプロピルまたは3-メトキシプロピルである、項９−１８のいずれかの製剤。
【０４６５】
２０．R1が3-メトキシプロピルである、項９−１８のいずれかに記載の製剤。
【０４６６】
２１．XがR6-(CH2)p-C(O)-、R6-(CH2)p-S(O)2-、R6-(CH2)p-NH-C(O)-、またはR6-(CH2)p-O-C(O)- ［式中、ｐは0、1、2、3、4、5または6であり、R6はHまたは5〜13員環状基であり、該5〜13員環状基は、１以上（例えば１、2、3、4または5）のハロゲン（例えばF)により、例えば少なくとも4位において、置換されていてもよく、および／またはアミノ、ニトロ、ヒドロキシ、C5-C6環状基、C1-C4アルキル、および鎖内にOを含有する、および／または該環状基に鎖内のOを介して結合するC1-C4アルキルから選択される１、２または３の置換基に置換されていてもよく、前記アルキル基はハロゲン、アミノ、ニトロ、ヒドロキシおよびC5-C6環状基から選択される置換基により置換されていてもよい］である、項９−２０のいずれかの製剤。
【０４６７】
２２．該5〜13員環状基が芳香族またはヘテロ芳香族である、項２１の製剤。
【０４６８】
２３．該5〜13員環状基がフェニルまたは６員ヘテロ芳香族基である、項２２の製剤。
【０４６９】
２４．XがR6-(CH2)p-C(O)-またはR6-(CH2)p-O-C(O)-であり、ｐが0、1または2である、項９−２０のいずれかの製剤。
【０４７０】
２５．Ｘがベンジルオキシカルボニルである、項９−２０のいずれかの製剤。
【０４７１】
２６．ボロン酸が以下の式 (VIII)である、項９の製剤：
X-(R)-Phe-(S)-Pro-(R)-Mpg-B(OH)2          (VIII)。
【０４７２】
２７．ボロン酸が医薬上許容されるその塩、例えば一価または二価の対イオンとの塩、の形態である、項１−２６のいずれかの製剤。
【０４７３】
２８．ペプチドボロン酸とアルカリ金属または強塩基性有機窒素含有化合物との塩を含む、項２７の製剤。
【０４７４】
２９．強塩基性有機窒素含有化合物がグアニジン、グアニジンアナログ、またはアミンである、項２８の製剤。
【０４７５】
３０．塩がボロン酸と金属との塩である、項２７の製剤。
【０４７６】
３１．ボロン酸とアルカリ金属、アミノ糖、グアニジン、または以下の式 (XI) のアミンとの塩を含む、項２６の製剤：
【化３０】
2007528381.tif 000060
［式中、nは1〜6 であり、R2はHまたはカルボキシラートもしくは誘導体化カルボキシラートであり、R3はH、C1-C4アルキル、または天然もしくは非天然のアミノ酸の残基である］。
【０４７７】
３２．ボロン酸とグアニジンまたは以下の式 (XI) のアミンとの塩を含む、項２６の製剤：
【化３１】
2007528381.tif 000061
［式中、nは1〜6 であり、R2はHまたはカルボキシラートもしくは誘導体化カルボキシラートであり、R3はH、C1-C4アルキルまたは天然もしくは非天然のアミノ酸の残基である］。
【０４７８】
３３．ボロン酸のグアニジン塩を含む、項３２の製剤。
【０４７９】
３４．ボロン酸と L-アルギニンまたは L-アルギニンアナログとの塩を含む、項３３の製剤。
【０４８０】
３５．L-アルギニンアナログが、D-アルギニンまたはホモアルギニンの D-もしくはL- 異性体、アグマチン[(4-アミノブチル)グアニジン]、NG-ニトロ-L-アルギニンメチルエステルまたは2-アミノピリミジンである、項３４の製剤。
【０４８１】
３６．ボロン酸と以下の式 (VII) のグアニジンとの塩を含む、項３３の製剤。
：
【化３２】
2007528381.tif 000062
［式中、nは1〜6であり、R2はHまたはカルボキシラートもしくは誘導体化カルボキシラートであり、R3はH、C1-C4 アルキルまたは天然もしくは非天然のアミノ酸の残基である］。
【０４８２】
３７．nが2、3または4である、項３６の製剤。
【０４８３】
３８．誘導体化カルボキシラートが、C1-C4アルキルエステルまたはアミドを形成する、項３６または項３７の製剤。
【０４８４】
３９．式 (VII) の化合物がL-配置である、項３６−３８ののいずれかの製剤。
【０４８５】
４０．ペプチドボロン酸のL-アルギニン塩を含む、項３３の製剤。
【０４８６】
４１．ボロン酸と式 (IX) のアミンとの塩を含む、項３２の製剤。
【０４８７】
４２．n が 2、3 または 4 である、項４１の製剤。
【０４８８】
４３．誘導体化カルボキシラートがC1-C4アルキルエステルまたはアミドを形成する、項４１または項４２の製剤。
【０４８９】
４４．式 (IX) のアミンが L-配置である、項４１−４３ののいずれかの製剤。
【０４９０】
４５．ボロン酸のL-リシン塩を含む、項４１の製剤。
【０４９１】
４６．ボロン酸のアルカリ金属塩を含む、項１−２６のいずれかの製剤。
【０４９２】
４７．アルカリ金属がカリウムである、項４６の製剤。
【０４９３】
４８．アルカリ金属がナトリウムである、項４６の製剤。
【０４９４】
４９．アルカリ金属がリチウムである、項４６の製剤。
【０４９５】
５０．ボロン酸のアミノ糖塩を含む、項２７の製剤。
【０４９６】
５１．アミノ糖が開環糖である、項５０の製剤。
【０４９７】
５２．アミノ糖がグルカミンである、項５１の製剤。
【０４９８】
５３．アミノ糖が環状アミノ糖である、項５０の製剤。
【０４９９】
５４．アミノ糖がN非置換である、項５０−５３のいずれかの製剤。
【０５００】
５５．アミノ糖が１または２の置換基によりN置換されている、項５０−５３のいずれかの製剤。
【０５０１】
５６．置換基または各置換基がヒドロカルビル基である、項５５の製剤。
【０５０２】
５７．置換基または各置換基がアルキルおよびアリール部分からなる群より選択される、項５５の製剤。
【０５０３】
５８．置換基または各置換基が、C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7およびC8アルキル基からなる群より選択される、項５７の製剤。
【０５０４】
５９．単一の N置換基が存在する、項５５−５８のいずれかの製剤。
【０５０５】
６０．グルカミンが N−メチル−D−グルカミンである、項５０の製剤。
【０５０６】
６１．ペプチドボロン酸から誘導されるボロネートイオンを含み、一価の負電荷を有するボロネートイオンに一致する化学量を有する、項２７−６０のいずれかの製剤。
【０５０７】
６２．塩が酸塩（すなわち、１つのB-OH基がプロトン化されたままの塩）から実質的になる、項２７−６０のいずれかの製剤。
【０５０８】
６３．塩が、ペプチドボロン酸および対イオンから誘導されるボロネートイオンを含み、かつ単一のタイプの対イオンを有する塩から実質的になる、項２７−６２のいずれかの製剤。
【０５０９】
８２．項７６−８１のいずれかに列挙される処置のための経口医薬を製造するための、項１−６３のいずれかに記載の塩の使用。
【０５１０】
８３．（ｉ）項１−６３のいずれかの酸、プロドラッグまたは塩と、(ｉｉ)さらなる医薬活性物質との組合せを含む、再構成可能経口医薬製剤。
【０５１１】
８４．（ｉ）項１−６３のいずれかの酸、プロドラッグまたは塩と、(ｉｉ)他の心血管処置物質との組合せを含む、再構成可能経口医薬製剤。
【０５１２】
８５．他の心臓血管処置薬が、脂質低下薬、フィブレート、ナイアシン、スタチン、CETP阻害薬、胆汁酸捕捉剤、抗酸化剤、IIb/IIIaアンタゴニスト、アルドステロン阻害薬、A2アンタゴニスト、A3アゴニスト、ベータブロッカー、アセチルサリチル酸、ループ利尿剤、ACE阻害薬、異なるメカニズムの抗血栓薬、抗血小板薬、トロンボキサン受容体および／またはシンテターゼ阻害薬、フィブリノーゲン受容体アンタゴニスト、プロスタサイクリンミメティック、ホスホジエステラーゼ阻害薬、ADP受容体 (P2 T) アンタゴニスト、血栓溶解薬、心臓保護薬またはCOX-2阻害薬を含む、項８４に記載の製剤。
【０５１３】
８６．他の心臓血管処置薬との共投与において心臓血管障害を処置、例えば予防するための医薬を製造するための、項１−６３のいずれかの酸、プロドラッグまたは塩の使用。
【０５１４】
８７．選択的トロンビン阻害薬であり、トロンビンS2およびS3サブサイトに結合可能な疎水性部分とペプチド結合を介して連結したトロンビンS1サブサイトに結合可能な中性アミノボロン酸残基を有するボロン酸の塩を含み、該塩がｎ価のカチオンを有し、概念的化学量 (ボロン酸:カチオン) n:1に一致する観測化学量を有する、再構成可能経口医薬。
【０５１５】
８８．ボロン酸のトロンビンに対するKiが約100 nM以下である、項８７の医薬。
【０５１６】
８９．ボロン酸のトロンビンに対するKiが約20 nM以下である、項８７の医薬。
【０５１７】
９０．Cbz-(R)-Phe-(S)-Pro-(R)-Mpg-B(OH)2 のナトリウム塩を含む投与形態であって、、該塩を含有する粉末または顆粒を含む小袋であるか、または発泡錠である投与形態。
【０５１８】
９１．液体経口製剤の作成のため再構成できる状態である微細固体または粉末の形態にて治療上有効量の下記式 (II) のボロン酸またはその塩もくしはプロドラッグを含有する密閉容器を含む医薬品であって、ボロネート塩が下記式 (II) のボロン酸の単一の医薬上許容される塩基付加塩から実質的になる医薬品：
【化３３】
2007528381.tif 000063
［式中、
Xは、H (NH2 を形成する) またはアミノ保護基である；
aa1は、20を超えない炭素原子を含有するヒドロカルビル側鎖を有し、かつ13までの炭素原子を有する少なくとも１の環状基を含むR-配置のアミノ酸であり；
aa2は、4〜6員環を有するS-配置のイミノ酸である；
C*は、R-配置のキラル中心である；
R1は、式 -(CH2)s-Z の基であり、ここでsは2、3または4であり、Zは-OH、-OMe、-OEtまたはハロゲン (F、Cl、BまたはI)である］。
【０５１９】
９２．Xが、R6-(CH2)p-C(O)-、R6-(CH2)p-S(O)2-、R6-(CH2)p-NH-C(O)-またはR6-(CH2)p-O-C(O)- ［式中、pは0、1、2、3、4、5または6であり、R6はHまたは5〜13員環状基であり、該5〜13員環状基は、ハロゲン、アミノ、ニトロ、ヒドロキシ、C5-C6環状基、C1-C4アルキル、および鎖内にOを含有する、および／または該環状基に鎖内のOを介して連結するC1-C4アルキルから選択される1、2または3の置換基に置換されていてもよく、前記アルキル基はハロゲン、アミノ、ニトロ、ヒドロキシおよびC5-C6環状基から選択される置換基により置換されていてもよい］である；
aa1が、D-Phe、D-Dpa、D-chaおよびDChaから選択される；
aa2が、Pro である；
Ｒ1が、２-エトキシエチルまたは3-メトキシプロピルである、
項９１の医薬品。
【０５２０】
９３．液体と組み合わせた後に経口投与に適合する医薬製剤であって、
ａ）(a) 下記式 (I) のボロン酸、(b) そのボロネートアニオン、および (c) それらの平衡形態（例えば、無水物）から選択される第１種：
【化３４】
2007528381.tif 000064
［式中、
Yは、アミノボロン酸残基 −NHCH(R9)-B(OH)2 とともに、トロンビンの基質結合部位への親和性を有する疎水性部分を含む；
R9は、1 以上のエーテル結合が介在し、その酸素および炭素原子の総数が3、4、5または6である直鎖アルキル基である、またはR9は、−(CH2)m-W であり、ここでmは2、3、4または5であり、Wは-OHまたはハロゲン (F、Cl、BrまたはI）である］；
ｂ）医薬上許容される金属イオン（該金属イオンは価nをもつ）、リシン、アルギニンおよびアミノ糖から選択される第２種、
を含み、第１種対第２種の観測化学量が概念的化学量1:1に一致し、第２種が１より大きい価を有する金属イオンである場合には観測化学量が実質的に概念的化学量n:1に一致する、製剤。
【０５２１】
９４．水性担体中にない製剤が水性担体中に置かれた場合にそのトロンビンに対するKiが約20 nM以下となる特性を有する、項９３の製剤。
【０５２２】
９５．R9が 3-メトキシプロピルであり、第２種がナトリウムイオン、リチウムイオンまたはリシンである、項９３または項９４の製剤。
【０５２３】
９６．液体と組み合わせて液体製剤をつくるための微粒子の形態である、項９３−９５のいずれかの製剤。
【０５２４】
９７．飲用液へと再構成するための形態にて式 IIのボロン酸およびその塩から選択される化合物、例えば式 Cbz-(R)-Phe-(S)-Pro-(R)-Mpg-B(OH)2 の酸のモノアルカリ金属塩から実質的になる塩、を含む製品であって、該化合物が有機酸と混合されていてもよい製品。
【０５２５】
９８．塩が単位投与形態で存在する、項９７の製品。
【０５２６】
９９．単位投与形態が約0.2mol〜1.5molの塩を含有する、項９７の製品。
【０５２７】
１００．等張化剤を含まない、項９７−９９の製品。
【０５２８】
１０１．抗菌性保存剤および香料を含む、項９７−１００の製品。
【０５２９】
１０２．発泡錠の形態にて式 Cbz-(R)-Phe-(S)-Pro-(R)-Mpg-B(OH)2 の酸のモノアルカリ金属塩から実質的になる塩を含む製品、ここで該塩は該酸の他のエピマーを少量しか含有せず、該製品はさらに有機酸を含んでもよい。
【０５３０】
１０３．約0.2mol〜1.5molの塩を含有する、項１０２の製品。
【０５３１】
上記から明らかなことには、開示のボロン酸により提供される経口抗凝固活性（塩形態にて投与されたTRI 50cにより示される）は人工透析に非常に適する。抗凝固活性の迅速な開始、その大きさ、および抗凝固の消失は、所望の抗凝固活性を提供し、その大きさおよび抗凝固の消失は、典型的な人工透析セッションの時間中人工透析回路における凝血を防止するのに望ましい所望の抗凝固プロファイルを提供する。固体調製物から再構成された飲用液は、十分満足できる投与計画を提供する。
【国際調査報告】
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