(57)【要約】  本発明は、抗腫瘍物質として有用な、下に記載の式[式中、ＲはＨ又はＯＨであり、ｎは２〜３である](式(Ｉ)及び(ＩＩ))で示される新規ピロロ-[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン及びそれらの製造方法を提供する。
2007528344.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式：
【化１】
2007528344.tif 000028
[式中、
Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、
ｎは、２〜３であり、そして
Ｒ'は、
【化２】
2007528344.tif 000029
である]
で表される、ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項２】
以下の構造：
【化３】
2007528344.tif 000030
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項３】
以下の構造：
【化４】
2007528344.tif 000031
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項４】
以下の構造：
【化５】
2007528344.tif 000032
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項５】
以下の構造：
【化６】
2007528344.tif 000033
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項６】
以下の構造：
【化７】
2007528344.tif 000034
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項７】
以下の構造：
【化８】
2007528344.tif 000035
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項８】
以下の構造：
【化９】
2007528344.tif 000036
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項９】
以下の構造：
【化１０】
2007528344.tif 000037
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項１０】
以下の式：
【化１１】
2007528344.tif 000038
[式中、
Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、
ｎは、２〜３であり、そして
Ｒ'は、
【化１２】
2007528344.tif 000039
である]
で表される化合物の製造方法であって、アクリドン又はアクリジン酸を、有機溶媒中ＥＤＣＩ及びＨＯＢｔの存在下で、以下の式Ｉ：
【化１３】
2007528344.tif 000040
で表される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(ｎ'-アミノアルキルオキシ)-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]-ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタールと２４時間反応させて、以下の：
【化１４】
2007528344.tif 000041
[式中、ｎは２〜３である]
で表される(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)／(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式Ｖ)を得て、当該式ＩＩ／式Ｖの化合物を単離し、次いでこの式ＩＩ／式Ｖの化合物を、還流温度以下にて有機溶媒の存在下においてＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏで還元して、以下の：
【化１５】
2007528344.tif 000042
[式中、ｎは２〜３である]
で表される(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)／(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＶＩ)を単離し、式ＩＩＩ／式ＶＩの化合物を脱保護剤と反応させて、所望のピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドを得る事を含む、前記方法。
【請求項１１】
アクリドン／アクリジン酸と式Ｉの化合物の反応に使用する有機溶媒がジメチルフランを含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
式ＩＩ／式Ｖの化合物を、飽和ＮａＨＣＯ3、塩類溶液により洗浄し、乾燥し、そして溶媒を蒸発することによって単離する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
式ＩＩ／式Ｖの化合物の還元の際に使用する有機溶媒がメタノールを含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
式ＩＩＩ／式Ｖの化合物を、飽和ＮａＨＣＯ3溶液で反応混合物のｐＨを約ｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し、有機相を抽出し、そしてこの有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥することによって単離する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１５】
式ＩＶ／式ＶＩＩの化合物の取得に使用する脱保護剤がＭｅＣＮ-水(４：１)中のＨｇＣｌ2及びＣａＣＯ3を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１６】
以下の式：
【化１６】
2007528344.tif 000043
[式中、
Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、
ｎは、２〜３であり、そして
Ｒ'は、
【化１７】
2007528344.tif 000044
である]
で表される化合物の医薬としての有効量及び医薬として許容し得る添加物を含む、医薬組成物。
【請求項１７】
癌を患う患者における癌の治療方法であって、以下の式：
【化１８】
2007528344.tif 000045
[式中、
Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、
ｎは、２〜３であり、そして
Ｒ'は、
【化１９】
2007528344.tif 000046
である]
で表される化合物の医薬としての有効量を投与することを含む、前記方法。
【請求項１８】
前記患者が哺乳動物である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記哺乳動物が人間である、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記癌が、白血病、非小細胞癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、メラノーマ、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、及び乳癌より成る群から選ばれる、請求項１７に記載の方法。
【請求項２１】
白血病、非小細胞癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、メラノーマ、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、及び乳癌より成る群から選ばれる癌を患う対象において、これらの癌を治療するための、以下の式：
【化２０】
2007528344.tif 000047
[式中、
ｎは、２〜３であり
Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、そして
Ｒ'は、
【化２１】
2007528344.tif 000048
である]
で表される化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、抗腫瘍物質として有用な、新規ピロロ-[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン・ハイブリッドを提供するものである。本発明はさらに、抗腫瘍物質としての、新たなピロロ-[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドの製造方法を提供する。さらに詳細には、本発明は、脂肪族鎖長の異なる７-メトキシ-８-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)アルキル]-オキシ-(１１ａＳ)-１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン及び７-メトキシ-８-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)アルキル]-オキシ-(１１ａＳ)-１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンの製造方法を提供し、本発明はまた、ＤＮＡ結合、抗癌(抗腫瘍)活性を記載している。本発明に係る新規ピロロ[２,１-ｃ]-[１,４]ベンゾジアゼピン類の構造式を下に示す：
【０００２】
【化１】
2007528344.tif 000003
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン抗腫瘍抗生物質は一般にアントラマイシン類の化合物として知られている。この数年間、新たなピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン(ＰＢＤ)類の開発に関心の高まりが示されている。これらの抗生物質は、ＤＮＡと共有結合的反応をしてＮ２-グアニン付加生成物を形成し、それは、Ｎ１０-Ｃ１１位の親電子イミンとの酸不安定性アミノ結合を介してＤＮＡ二本鎖の副溝内に位置する(Kunimoto, S.; Masuda, T.; Kanbayashi, N.; Hamada, M.; Naganawa, H.; Miyamoto, M.; Takeuchi, T.; and Unezawa, H., J. Antibiot., 1980, 33, 665;Kohn, K. W. and Speous, C. L., J. Mol. Biol., 1970, 51, 551;Hurley, L. H.; Gairpla, C. and Zmijewski, M., Biochem. Biophys. Acta., 1977, 475, 521;Kaplan, D. J. and Hurley, L. H., Biochemistry, 1981, 20, 7572)。この分子は右向きの回転を持ち、その事が、３個の塩基対に跨るＢ型二本鎖ＤＮＡの副溝の弯曲に該分子を従わせる。近年の開発は、２個のＰＢＤユニットを、そのＣ-８位を介して結合して、ＤＮＡを架橋できる二官能性のアルキル化剤を与えることであった。(Thurston, D. E.; Bose, D. S.; Thomson, A. S.; Howard, P. W.; Leoni, A.; Croker, S. J.; Jenkins, T. C.; Neidle, S. and Hurley, L. H., J. Org. Chem., 1996, 61, 8141)。
【化２】
2007528344.tif 000004
【０００４】
近年、不活性なプロパンジオキシ・リンカーを介してＣ-８位で結合させた２個のＣ２-エキソ-メチレン置換ＤＣ-８１サブユニットを含むＰＢＤ二量体が開発された(Gregson, S. J.; Howard, P. W.; Hartely, J. A.; Brooks, N. A.; Adams, L. J.; Jenkins, T. C.; Kelland, L. R. and Thurston, D. E., J. Med. Chem., 2001, 44, 737)。近年、顕著なＤＮＡ結合能と強力な抗腫瘍活性を有する非架橋混合イミン-アミドＰＢＤ二量体が合成された(Kamal, A.; Ramesh, G.; Laxman, N.; Ramulu, P.; Srinivas, O.; Neelima, K.; Kondapi, A. K.; Srinu, V. B.; Nagarajaram, H. M. J., Med. Chem., 2002, 45, 4679)。
【０００５】
天然のピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン類はStreptomyces種から誘導される抗腫瘍抗生物質の群に属している。ＰＢＤ系は特定のＤＮＡ配列を認識しそれに結合できることから、近年ＰＢＤ系のための大きな推進力がある。天然に存在するＰＢＤの例には、アントラマイシン、ＤＣ-８１、トマイマイシン、シビロマイシン及びネオトラマイシンがある。
【０００６】
しかしながら、これらの抗生物質の臨床的有効性は、低い水溶性、心臓毒性、薬物耐性の出現及び代謝による不活性化といった幾つかの制限によって障害されている。
【発明の開示】
【０００７】
発明の目的
本発明の主たる目的は、抗腫瘍物質として有用な新たなピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドを提供する事である。
【０００８】
本発明のもう一つの目的は、抗腫瘍物質として有用な新規なピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドの製造方法を提供する事である。
【０００９】
発明の要約
したがって本発明は、式ＩＶ又はＶＩＩ：  
【化３】
2007528344.tif 000005
で示される新規なピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドを提供する。
【００１０】
本発明の或る態様では、本発明化合物は、７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン；７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン；７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン；７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン；７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン；７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン；７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン及び７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンより成る群から選ばれる。
【００１１】
本発明はさらに、以下の式ＩＶ又はＶＩＩ：
【化４】
2007528344.tif 000006
[式中、Ｒ＝Ｈ、ＯＨであり、そしてｎは２〜３である]
で示されるピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドの製造方法であって、
アクリドン又はアクリジン酸を、有機溶媒中ＥＤＣＩ及びＨＯＢｔの存在下で、以下の式Ｉ：
【化５】
2007528344.tif 000007
で示される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(ｎ'-アミノアルキルオキシ)-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]-ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタールと２４時間反応させて、以下の：
【化６】
2007528344.tif 000008
[式中、ｎは２〜３である]
で表される(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)／(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式Ｖ)を得て、当該式ＩＩ／式Ｖの化合物を単離し、次いでこの式ＩＩ／式Ｖの化合物を、還流温度以下で有機溶媒の存在下にＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏで還元し、以下の：
【化７】
2007528344.tif 000009
【化８】
2007528344.tif 000010
[式中、ｎは２〜３である]
で表される(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)／(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＶＩ)を既知の方法で単離し、式ＩＩＩ／式ＶＩの化合物を常法により既知の脱保護剤と反応させて、式ＩＶ／式ＶＩＩで示される新規なピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッド[式中、ｎ及びＲは上記の通りである]を得る事を含む方法を提供する。
【００１２】
本発明の或る態様では、アクリドン／アクリジン酸と式Ｉの化合物の反応に使用する有機溶媒はジメチルフランを含む。
【００１３】
本発明の別の態様では、式ＩＩ／式Ｖの化合物を、飽和ＮａＨＣＯ3、塩類溶液による洗浄、乾燥及び溶媒の蒸発によって単離する。
【００１４】
本発明の別の態様では、式ＩＩ／式Ｖの化合物の還元の際に使用する有機溶媒はメタノールを含む。
【００１５】
本発明のさらなる態様では、式ＩＩＩ／式Ｖの化合物を、飽和ＮａＨＣＯ3で反応混合物のｐＨを約ｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し、そして有機相を抽出しその有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥することにより単離する。
【００１６】
本発明の別の態様では、式ＩＶ／式ＶＩＩの化合物の取得に使用する脱保護剤は、ＭｅＣＮ-水(４：１)中のＨｇＣｌ2及びＣａＣＯ3を含む。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
本発明は、式ＩＶ又はＶＩＩ[式中、Ｒ＝Ｈ、ＯＨであり、ｎは２〜３である]で示される新規なピロロ-[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドを提供し、さらにその製造方法を提供するものである。
【００１８】
本発明に係る方法は、アクリドン又はアクリジン酸を、有機溶媒中ＥＤＣＩ及びＨＯＢｔの存在下で、式Ｉ：
【化９】
2007528344.tif 000011
で示される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(ｎ'-アミノアルキルオキシ)-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]-ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタールと２４時間反応させて、以下の：
【化１０】
2007528344.tif 000012
[式中、ｎは２〜３である]
で表される(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)／(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式Ｖ)を得る事を含む。
【００１９】
式ＩＩ／式Ｖの化合物を単離し、次いでこの式ＩＩ／式Ｖの化合物を、還流温度以下で、メタノールのような有機溶媒の存在下にＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏで還元して、(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)／(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＶＩ)[式中、ｎは２〜３である]を得る。次いで以下の式ＩＩＩ／式ＶＩ：
【化１１】
2007528344.tif 000013
【化１２】
2007528344.tif 000014
で表される化合物を常法で単離する。
【００２０】
式ＩＩＩ／式ＶＩの化合物を常法により既知の脱保護剤と反応させて、式ＩＶ／式ＶＩＩで示される新規なピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッド[式中、ｎ及びＲは上記の通りである]を得る：
【化１３】
2007528344.tif 000015
【００２１】
アクリドン／アクリジン酸と式Ｉの化合物の反応に使用する有機溶媒はジメチルフランを含み、式ＩＩ／式Ｖの化合物は、飽和ＮａＨＣＯ3、塩類溶液による洗浄、乾燥及び溶媒の蒸発によって単離する。式ＩＩ／式Ｖの化合物の還元の際に使用する有機溶媒はメタノールを含み、式ＩＩＩ／式Ｖの化合物は、飽和ＮａＨＣＯ3溶液で反応混合物のｐＨを約ｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し、そして有機相を抽出しその有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥することにより単離する。
【００２２】
式ＩＶ／式ＶＩＩの化合物の取得に使用する脱保護剤は、ＭｅＣＮ-水(４：１)中のＨｇＣｌ2及びＣａＣＯ3を含む。
【００２３】
前駆体であるアクリドン酸(Atwell, G. J.; Cain, B. F.; Baguley, B. C.; Finlay, G. J.; Denny, W. A., J. Med. Chem., 1984, 27, 1481)、アクリジン酸(Atwell, G. J.; Rewcastle, G. W.; Baguley, B. C.; Denny, W. A., J. Med. Chem., 1987, 30, 664)及び式Ｉで示される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(ｎ'-アミノアルキルオキシ)-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(Thurston, D. E.; Morris, S. J.; Hartley, J. A., Chem. Commun., 1996, 563-565)は文献に記載の方法によって製造した。
【００２４】
本発明に係る式ＩＶ／式ＶＩＩで示される幾つかの代表化合物を下に記載する。
【００２５】
１.  ７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン、
２.  ７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン、
３.  ７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン、
４.  ７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン、
５.  ７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン、
６.  ７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン、
７.  ７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン、
８.  ７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン。
【００２６】
Ｃ-８位で結合されたこれら新たなピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドの類似体は、種々の細胞系列において有望なＤＮＡ結合活性及び有効な抗癌活性を示した。合成されたこれらの分子は、潜在的な配列選択的ＤＮＡ結合性と共に計り知れない生物学的重要性を有する。その結果、スキーム１／スキーム２で示される新たな同族体の設計と合成がなされたが、それは、
１.  ＤＣ-８１中間体のＣ-８位における、アクリドン／アクリジン環部分とのエーテル結合、
２.  反応混合物を還流温度以下で１２-４８時間加熱、
３.  Ｃ-８で結合されたＰＢＤ抗腫瘍抗生物質ハイブリッドイミンの合成、
４.  酢酸エチル、ヘキサン、ジクロロメタン及びメタノールといった種々の溶媒を用いたカラムクロマトグラフィーによる精製、
を含む。
【００２７】
反応スキームを下に示すが、これらは本発明に係る方法の代表例である。
【化１４】
2007528344.tif 000016
【００２８】
【化１５】
2007528344.tif 000017
【００２９】
以下の実施例は例示のために記載するものであり、故に本発明の範囲の限定を示すと解釈してはならない。
【実施例】
【００３０】
実施例１
化合物アクリドン酸(０.２３９ｇ、１ｍｍｏｌ)を乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)に溶解し、ＥＤＣＩ(０.２０３ｇ、１.５ｍｍｏｌ)及びＨＯＢｔ(０.２８８ｇ、１.５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を０-５℃に冷却し、３０分間攪拌した。ここに式Ｉで示される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(２'-アミノエチル)-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(０.４４３ｇ、１ｍｍｏｌ)のＤＭＦ溶液を同じ温度で加え、溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ3(５０ｍＬ)、塩類溶液で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。この粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン(８：２)溶媒を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付すと、黄色液体の化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)が得られた。
【００３１】
化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)(０.６６４ｇ、１ｍｍｏｌ)をメタノール(１５ｍＬ)に溶解し、添加したＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ(１.１２８ｇ、５ｍｍｏｌ)を２時間、又はＴＬＣが反応の完結を示すまで還流した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液で注意深くｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し抽出した。合わせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧で蒸発させて、粗製化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)を得た。
【００３２】
ＭｅＣＮ-水(４：１)に入れた、化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)(０.６３４ｇ、１ｍｍｏｌ)、ＨｇＣｌ2(０.８１４５ｇ、３ｍｍｏｌ)及びＣａＣＯ3(０.３ｇ、３ｍｍｏｌ)の溶液を、ＴＬＣが出発物質の完全な喪失を示すまで室温でゆっくりと攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)で希釈し、セライト層で濾過した。この透明な黄色有機上清を飽和５％ＮａＨＣＯ3(２０ｍＬ)、塩類溶液(２０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を乾燥する(Ｎａ2ＳＯ4)。有機相を減圧で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー(９０％ＣＨ2Ｃｌ2-ＭｅＯＨ)で精製して、化合物７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンが得られた。
【００３３】
実施例２
化合物アクリドン酸(０.２３９ｇ、１ｍｍｏｌ)を乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)に溶解し、ＥＤＣＩ(０.２０３ｇ、１.５ｍｍｏｌ)及びＨＯＢｔ(０.２８８ｇ、１.５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を０-５℃に冷却し、３０分間攪拌した。ここに式Ｉで示される(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-[４-(２'-アミノエチル)-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(０.４５９ｇ、１ｍｍｏｌ)のＤＭＦ溶液を同じ温度で加え、溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ3(５０ｍＬ)、塩類溶液で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。この粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン(８：２)溶媒を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付すと、黄色液体の(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)が得られた。
【００３４】
化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)(０.６８０ｇ、１ｍｍｏｌ)をメタノール(１５ｍＬ)に溶解し、添加したＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ(１.１２８ｇ、５ｍｍｏｌ)を２時間、又はＴＬＣが反応の完結を示すまで還流した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液で注意深くｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し抽出した。合わせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧で蒸発させて、粗製化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝-ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)を得た。
【００３５】
ＭｅＣＮ-水(４：１)に入れた、化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)(０.６５０ｇ、１ｍｍｏｌ)、ＨｇＣｌ2(０.８１４５ｇ、３ｍｍｏｌ)及びＣａＣＯ3(０.３ｇ、３ｍｍｏｌ)の溶液を、ＴＬＣが出発物質の完全な喪失を示すまで室温でゆっくりと攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)で希釈し、セライト層で濾過した。この透明な黄色有機上清を飽和５％ＮａＨＣＯ3(２０ｍＬ)、塩類溶液(２０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を乾燥する(Ｎａ2ＳＯ4)。有機相を減圧で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー(９０％ＣＨ2Ｃｌ2-ＭｅＯＨ)で精製して、化合物７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンが得られた。
【００３６】
実施例３
化合物アクリドン酸(０.２３９ｇ、１ｍｍｏｌ)を乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)に溶解し、ＥＤＣＩ(０.２０３ｇ、１.５ｍｍｏｌ)及びＨＯＢｔ(０.２８８ｇ、１.５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を０-５℃に冷却し、３０分間攪拌した。ここに式Ｉで示される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(３'-アミノプロピル)-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(０.４５７ｇ、１ｍｍｏｌ)のＤＭＦ溶液を同じ温度で加え、溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ3(５０ｍＬ)、塩類溶液で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。この粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン(８：２)溶媒を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付すと、黄色液体の化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)が得られた。
【化１６】
2007528344.tif 000018
【００３７】
化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)(０.６７８ｇ、１ｍｍｏｌ)をメタノール(１５ｍＬ)に溶解し、添加したＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ(１.１２８ｇ、５ｍｍｏｌ)を２時間、又はＴＬＣが反応の完結を示すまで還流した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液で注意深くｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し抽出した。合わせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧で蒸発させて、粗製の(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)を得た。
【化１７】
2007528344.tif 000019
【００３８】
ＭｅＣＮ-水(４：１)に入れた、化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)(０.６４８ｇ、１ｍｍｏｌ)、ＨｇＣｌ2(０.８１４５ｇ、３ｍｍｏｌ)及びＣａＣＯ3(０.３ｇ、３ｍｍｏｌ)の溶液を、ＴＬＣが出発物質の完全な喪失を示すまで室温でゆっくりと攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)で希釈し、セライト層で濾過した。この透明な黄色有機上清を飽和５％ＮａＨＣＯ3(２０ｍＬ)、塩類溶液(２０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を乾燥する(Ｎａ2ＳＯ4)。有機相を減圧で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー(９０％ＣＨ2Ｃｌ2-ＭｅＯＨ)で精製して、化合物７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンが得られた。
【化１８】
2007528344.tif 000020
【００３９】
実施例４
化合物アクリドン酸(０.２３９ｇ、１ｍｍｏｌ)を乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)に溶解し、ＥＤＣＩ(０.２０３ｇ、１.５ｍｍｏｌ)及びＨＯＢｔ(０.２８８ｇ、１.５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を０-５℃に冷却し、３０分間攪拌した。ここに式Ｉで示される(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-[４-(３'-アミノプロピル)-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(０.４７３ｇ、５ｍｍｏｌ)のＤＭＦ溶液を同じ温度で加え、溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ3(５０ｍＬ)、塩類溶液で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。この粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン(８：２)溶媒を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付すと、黄色液体の(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)が得られた。
【００４０】
化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)(０.６９４ｇ、１ｍｍｏｌ)をメタノール(１５ｍＬ)に溶解し、添加したＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ(１.１２８ｇ、５ｍｍｏｌ)を２時間、又はＴＬＣが反応の完結を示すまで還流した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液で注意深くｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し抽出した。合わせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧で蒸発させて、粗製化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)を得た。
【００４１】
ＭｅＣＮ-水(４：１)に入れた、化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)(０.６６４ｇ、１ｍｍｏｌ)、ＨｇＣｌ2(０.８１４５ｇ、３ｍｍｏｌ)及びＣａＣＯ3(０.３ｇ、３ｍｍｏｌ)の溶液を、ＴＬＣが出発物質の完全な喪失を示すまで室温でゆっくりと攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)で希釈し、セライト層で濾過した。この透明な黄色有機上清を飽和５％ＮａＨＣＯ3(２０ｍＬ)、塩類溶液(２０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を乾燥する(Ｎａ2ＳＯ4)。有機相を減圧で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー(９０％ＣＨ2Ｃｌ2-ＭｅＯＨ)で精製して、化合物７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンが得られた。
【００４２】
実施例５
化合物アクリジン酸(０.２２３ｇ、１ｍｍｏｌ)を乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)に溶解し、ＥＤＣＩ(０.２０３ｇ、１.５ｍｍｏｌ)及びＨＯＢｔ(０.２８８ｇ、１.５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を０-５℃に冷却し、３０分間攪拌した。ここに式Ｉで示される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(２'-アミノエチル)-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(０.４４３ｇ、１ｍｍｏｌ)のＤＭＦ溶液を同じ温度で加え、溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ3(５０ｍＬ)、塩類溶液で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。この粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン(８：２)溶媒を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付して、黄色液体の化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)が得られた。
【００４３】
化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)(０.６４８ｇ、１ｍｍｏｌ)をメタノール(１５ｍＬ)に溶解し、添加したＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ(１.１２８ｇ、５ｍｍｏｌ)を２時間、又はＴＬＣが反応の完結を示すまで還流した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液で注意深くｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し抽出した。合わせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧で蒸発させて、粗製化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)を得た。
【００４４】
ＭｅＣＮ-水(４：１)に入れた、化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)(０.６１８ｇ、１ｍｍｏｌ)、ＨｇＣｌ2(０.８１４５ｇ、３ｍｍｏｌ)及びＣａＣＯ3(０.３ｇ、３ｍｍｏｌ)の溶液を、ＴＬＣが出発物質の完全な喪失を示すまで室温でゆっくりと攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)で希釈し、セライト層で濾過した。この透明な黄色有機上清を飽和５％ＮａＨＣＯ3(２０ｍＬ)、塩類溶液(２０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を乾燥する(Ｎａ2ＳＯ4)。有機相を減圧で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー(９０％ＣＨ2Ｃｌ2-ＭｅＯＨ)で精製して、化合物７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンが得られた。
【００４５】
実施例６
化合物アクリジン酸(０.２２３ｇ、１ｍｍｏｌ)を乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)に溶解し、ＥＤＣＩ(０.２０３ｇ、１.５ｍｍｏｌ)及びＨＯＢｔ(０.２８８ｇ、１.５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を０-５℃に冷却し、３０分間攪拌した。ここに式Ｉで示される(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-[４-(２'-アミノエチル)-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(０.４５９ｇ、１ｍｍｏｌ)のＤＭＦ溶液を同じ温度で加え、溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ3(５０ｍＬ)、塩類溶液で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。この粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン(８：２)溶媒を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付すと、黄色液体の(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)が得られた。
【００４６】
化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)(０.６６４ｇ、１ｍｍｏｌ)をメタノール(１５ｍＬ)に溶解し、添加したＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ(１.１２８ｇ、５ｍｍｏｌ)を２時間、又はＴＬＣが反応の完結を示すまで還流した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液で注意深くｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し抽出した。合わせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧で蒸発させて、粗製化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)を得た。
【００４７】
ＭｅＣＮ-水(４：１)に入れた、化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)(０.６３４ｇ、１ｍｍｏｌ)、ＨｇＣｌ2(０.８１４５ｇ、３ｍｍｏｌ)及びＣａＣＯ3(０.３ｇ、３ｍｍｏｌ)の溶液を、ＴＬＣが出発物質の完全な喪失を示すまで室温でゆっくりと攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)で希釈し、セライト層で濾過した。この透明な黄色有機上清を飽和５％ＮａＨＣＯ3(２０ｍＬ)、塩類溶液(２０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を乾燥する(Ｎａ2ＳＯ4)。有機相を減圧で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー(９０％ＣＨ2Ｃｌ2-ＭｅＯＨ)で精製して、化合物７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンが得られた。
【００４８】
実施例７
化合物アクリジン酸(０.２２３ｇ、１ｍｍｏｌ)を乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)に溶解し、ＥＤＣＩ(０.２０３ｇ、１.５ｍｍｏｌ)及びＨＯＢｔ(０.２８８ｇ、１.５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を０-５℃に冷却し、３０分間攪拌した。ここに式Ｉで示される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(３'-アミノプロピル)-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(０.４５７ｇ、１ｍｍｏｌ)のＤＭＦ溶液を同じ温度で加え、溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ3(５０ｍＬ)、塩類溶液で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。この粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン(８：２)溶媒を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付して、黄色液体の化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)が得られた。
【化１９】
2007528344.tif 000021
【００４９】
化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)(０.６６２ｇ、１ｍｍｏｌ)をメタノール(１５ｍＬ)に溶解し、添加したＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ(１.１２８ｇ、５ｍｍｏｌ)を２時間、又はＴＬＣが反応の完結を示すまで還流した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液で注意深くｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し抽出した。合わせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧で蒸発させて、粗製化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)を得た。
【化２０】
2007528344.tif 000022
【００５０】
ＭｅＣＮ-水(４：１)に入れた、化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)(０.６３２ｇ、１ｍｍｏｌ)、ＨｇＣｌ2(０.８１４５ｇ、３ｍｍｏｌ)及びＣａＣＯ3(０.３ｇ、３ｍｍｏｌ)の溶液を、ＴＬＣが出発物質の完全な喪失を示すまで室温でゆっくりと攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)で希釈し、セライト層で濾過した。この透明な黄色有機上清を飽和５％ＮａＨＣＯ3(２０ｍＬ)、塩類溶液(２０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を乾燥する(Ｎａ2ＳＯ4)。有機相を減圧で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー(９０％ＣＨ2Ｃｌ2-ＭｅＯＨ)で精製して、化合物７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンが得られた。
【化２１】
2007528344.tif 000023
【００５１】
実施例８
化合物アクリジン酸(０.２２３ｇ、１ｍｍｏｌ)を乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)に溶解し、ＥＤＣＩ(０.２０３ｇ、１.５ｍｍｏｌ)及びＨＯＢｔ(０.２８８ｇ、１.５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を０-５℃に冷却し、３０分間攪拌した。ここに式Ｉで示される(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-[４-(３'-アミノプロピル)-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(０.４７３ｇ、５ｍｍｏｌ)のＤＭＦ溶液を同じ温度で加え、溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ3(５０ｍＬ)、塩類溶液で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。この粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン(８：２)溶媒を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付して、黄色液体の化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)が得られた。
【００５２】
化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)(０.６７８ｇ、１ｍｍｏｌ)をメタノール(１５ｍＬ)に溶解し、添加したＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ(１.１２８ｇ、５ｍｍｏｌ)を２時間、又はＴＬＣが反応の完結を示すまで還流した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液で注意深くｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し抽出した。合わせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧で蒸発させて、粗製化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)を得た。
【００５３】
ＭｅＣＮ-水(４：１)に入れた、化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)(０.６４８ｇ、１ｍｍｏｌ)、ＨｇＣｌ2(０.８１４５ｇ、３ｍｍｏｌ)及びＣａＣＯ3(０.３ｇ、３ｍｍｏｌ)の溶液を、ＴＬＣが出発物質の完全な喪失を示すまで室温でゆっくりと攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)で希釈し、セライト層で濾過した。この透明な黄色有機上清を飽和５％ＮａＨＣＯ3(２０ｍＬ)、塩類溶液(２０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を乾燥する(Ｎａ2ＳＯ4)。有機相を減圧で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー(９０％ＣＨ2Ｃｌ2-ＭｅＯＨ)で精製して、化合物７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンが得られた。
【００５４】
生物活性：National Cancer Institute(USA)でインビトロ生物活性試験を実施した。
【００５５】
細胞毒性：式ＩＶで示される７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンを、原発性抗癌活性(表１)について、及び９種類の癌(白血病、非小細胞癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、メラノーマ、卵巣癌、前立腺癌、及び乳癌)から派生された６０のヒト腫瘍細胞に対してインビトロで評価した。各々の化合物について、１０倍希釈で最低５種類の濃度で、各細胞系列についての用量反応曲線を作製した。４８時間の連続薬物暴露のプロトコルを使用し、スルホローダミンＢ(ＳＲＢ)蛋白検定を使用して細胞の生存性又は増殖を評価した。対照と比較して５０％の細胞増殖阻害(ＧＩ５０)、完全な細胞増殖阻害(total cell growth inhibition)(TGI ０％増殖)及び５０％細胞死(ＬＣ５０、-５０％増殖)を惹起する濃度を算出した。ＩＶについてのｌｏｇ10ＴＧＩ及びｌｏｇ10ＬＣ５０ならびにｌｏｇ10ＧＩ５０の平均グラフ中点値を表２に列挙する。平均グラフ自身を表４に示す。平均グラフパターンで立証されるように、化合物ＩＶは種々の細胞系列について興味深い活性及び選択性のプロファイルを示す。ｌｏｇ10ＴＧＩ及びｌｏｇ10ＬＣ５０の平均グラフ中点はｌｏｇ10ＧＩ５０平均グラフ中点と類似のパターンを示した。
【００５６】
【表１】
2007528344.tif 000024
【００５７】
式ＩＶで示される新規なピロロベンゾジアゼピンハイブリッド  ７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンは、一つのメラノーマ癌(ＵＡＣＣ-６２)に対して１０ナノモル未満の力価(ＬＣ50レベルにおいて)を持ち、結腸癌(ＨＣＣ-２９９８)、ＣＮＳ癌(ＳＮＢ-７５)、乳癌(ＭＤＡ-ＭＢ-４３５)に対して０.１マイクロモル力価を持ち、そしてまた、二つのメラノーマ癌細胞系列(ＬＯＸＩＭＶＩ、Ｍ１４)及び一つの腎臓癌(ＳＮ１２Ｃ)に対して１０マイクロモル未満の力価を持つ事を示した。９種の癌に対する、式ＩＶで示される化合物７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンのＬＣ50値(６〜９個の癌細胞系列の平均)を表３に列挙する。
【００５８】
【表２】
2007528344.tif 000025
【００５９】
【表３】
2007528344.tif 000026
【００６０】
【表４】
2007528344.tif 000027
【手続補正書】
【提出日】平成18年10月3日(2006.10.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式：
【化１】
2007528344.tif 000049
[式中、
Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、
ｎは、２〜３であり、そして
Ｒ'は、
【化２】
2007528344.tif 000050
である]
で表される、ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項２】
以下の構造：
【化３】
2007528344.tif 000051
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項３】
以下の構造：
【化４】
2007528344.tif 000052
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項４】
以下の構造：
【化５】
2007528344.tif 000053
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項５】
以下の構造：
【化６】
2007528344.tif 000054
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項６】
以下の構造：
【化７】
2007528344.tif 000055
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項７】
以下の構造：
【化８】
2007528344.tif 000056
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項８】
以下の構造：
【化９】
2007528344.tif 000057
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項９】
以下の構造：
【化１０】
2007528344.tif 000058
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項１０】
以下の式：
【化１１】
2007528344.tif 000059
[式中、
Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、
ｎは、２〜３であり、そして
Ｒ'は、
【化１２】
2007528344.tif 000060
である]
で表される化合物の製造方法であって、アクリドン又はアクリジン酸を、有機溶媒中ＥＤＣＩ及びＨＯＢｔの存在下で、以下の式Ｉ：
【化１３】
2007528344.tif 000061
で表される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(ｎ'-アミノアルキルオキシ)-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]-ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタールと２４時間反応させて、以下の：
【化１４】
2007528344.tif 000062
[式中、ｎは２〜３である]
で表される(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)／(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式Ｖ)を得て、当該式ＩＩ／式Ｖの化合物を単離し、次いでこの式ＩＩ／式Ｖの化合物を、還流温度以下にて有機溶媒の存在下においてＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏで還元して、以下の：
【化１５】
2007528344.tif 000063
[式中、ｎは２〜３である]
で表される(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)／(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＶＩ)を単離し、式ＩＩＩ／式ＶＩの化合物を脱保護剤と反応させて、所望のピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドを得る事を含む、前記方法。
【請求項１１】
アクリドン／アクリジン酸と式Ｉの化合物の反応に使用する有機溶媒がジメチルフランを含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
式ＩＩ／式Ｖの化合物を、飽和ＮａＨＣＯ3、塩類溶液により洗浄し、乾燥し、そして溶媒を蒸発することによって単離する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
式ＩＩ／式Ｖの化合物の還元の際に使用する有機溶媒がメタノールを含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
式ＩＩＩ／式Ｖの化合物を、飽和ＮａＨＣＯ3溶液で反応混合物のｐＨを約ｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し、有機相を抽出し、そしてこの有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥することによって単離する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１５】
式ＩＶ／式ＶＩＩの化合物の取得に使用する脱保護剤がＭｅＣＮ-水(４：１)中のＨｇＣｌ2及びＣａＣＯ3を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１６】
以下の式：
【化１６】
2007528344.tif 000064
[式中、
Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、
ｎは、２〜３であり、そして
Ｒ'は、
【化１７】
2007528344.tif 000065
である]
で表される化合物の医薬としての有効量及び医薬として許容し得る添加物を含む、医薬組成物。
【請求項１７】
以下の式：
【化１８】
2007528344.tif 000066
[式中、
Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、
ｎは、２〜３であり、そして
Ｒ'は、
【化１９】
2007528344.tif 000067
である]
で表される化合物の医薬としての有効量を含む、癌治療用の医薬組成物。
【請求項１８】
対象が哺乳動物である、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記癌が、白血病、非小細胞癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、メラノーマ、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、及び乳癌より成る群から選ばれる、請求項１７に記載の医薬組成物。
【手続補正書】
【提出日】平成18年10月25日(2006.10.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式：【化１】
2007528344.tif 000068
[式中、    Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、    ｎは、２〜３であり、そして    Ｒ'は、
【化２】
2007528344.tif 000069
である]  で表される、ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項２】
以下の構造：【化３】
2007528344.tif 000070
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項３】
以下の構造：【化４】
2007528344.tif 000071
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項４】
以下の構造：【化５】
2007528344.tif 000072
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項５】
以下の構造：【化６】
2007528344.tif 000073
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項６】
以下の構造：【化７】
2007528344.tif 000074
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項７】
以下の構造：【化８】
2007528344.tif 000075
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項８】
以下の構造：【化９】
2007528344.tif 000076
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項９】
以下の構造：【化１０】
2007528344.tif 000077
で表される、請求項１に記載に記載のピロロベンゾジアゼピン・ハイブリッド。
【請求項１０】
以下の式：【化１１】
2007528344.tif 000078
[式中、    Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、    ｎは、２〜３であり、そして    Ｒ'は、
【化１２】
2007528344.tif 000079
である]  で表される化合物の製造方法であって、アクリドン又はアクリジン酸を、有機溶媒中ＥＤＣＩ及びＨＯＢｔの存在下で、以下の式Ｉ：
【化１３】
2007528344.tif 000080
で表される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(ｎ'-アミノアルキルオキシ)-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]-ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタールと２４時間反応させて、以下の：
【化１４】
2007528344.tif 000081
[式中、ｎは２〜３である]  で表される(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)／(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式Ｖ)を得て、当該式ＩＩ／式Ｖの化合物を単離し、次いでこの式ＩＩ／式Ｖの化合物を、還流温度以下にて有機溶媒の存在下においてＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏで還元して、以下の：
【化１５】
2007528344.tif 000082
[式中、ｎは２〜３である]  で表される(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)／(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＶＩ)を単離し、式ＩＩＩ／式ＶＩの化合物を脱保護剤と反応させて、所望のピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドを得る事を含む、前記方法。
【請求項１１】
アクリドン／アクリジン酸と式Ｉの化合物の反応に使用する有機溶媒がジメチルフランを含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
式ＩＩ／式Ｖの化合物を、飽和ＮａＨＣＯ3、塩類溶液により洗浄し、乾燥し、そして溶媒を蒸発することによって単離する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
式ＩＩ／式Ｖの化合物の還元の際に使用する有機溶媒がメタノールを含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
式ＩＩＩ／式Ｖの化合物を、飽和ＮａＨＣＯ3溶液で反応混合物のｐＨを約ｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し、有機相を抽出し、そしてこの有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥することによって単離する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１５】
式ＩＶ／式ＶＩＩの化合物の取得に使用する脱保護剤がＭｅＣＮ-水(４：１)中のＨｇＣｌ2及びＣａＣＯ3を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１６】
以下の式：【化１６】
2007528344.tif 000083
[式中、    Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、    ｎは、２〜３であり、そして    Ｒ'は、
【化１７】
2007528344.tif 000084
である]  で表される化合物の医薬としての有効量及び医薬として許容し得る添加物を含む、医薬組成物。
【請求項１７】
癌を患う対象における癌の治療方法であって、以下の式：【化１８】
2007528344.tif 000085
[式中、    Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、    ｎは、２〜３であり、そして    Ｒ'は、
【化１９】
2007528344.tif 000086
である]  で表される化合物の医薬としての有効量を投与することを含む、前記方法。
【請求項１８】
前記対象が哺乳動物である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記癌が、白血病、非小細胞癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、メラノーマ、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、及び乳癌より成る群から選ばれる、請求項１７に記載の方法。
【請求項２１】
白血病、非小細胞癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、メラノーマ、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、及び乳癌より成る群から選ばれる癌を患う対象において、これらの癌を治療するための、以下の式：【化２０】
2007528344.tif 000087
[式中、    ｎは、２〜３であり    Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、そして    Ｒ'は、
【化２１】
2007528344.tif 000088
である]  で表される化合物の使用。
【国際調査報告】
2007528344.tif 000089
2007528344.tif 000090
2007528344.tif 000091
2007528344.tif 000092