(57)【要約】  本発明により、アスコマイシンの新規な結晶形態と、その調製方法と、アスコマイシンのこのような結晶形態を含む医薬組成物が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
2θ=約8.7、11.8、14.3±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターン；約3443、1639、1194、1092cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトル；約148〜152℃と約158〜162℃の2つの位置で吸熱を示すDSCサーモグラムの中から選択したデータを特徴とするアスコマイシンA型。
【請求項２】
2θ=約8.7、11.8、14.3±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターンを特徴とする、請求項1に記載のアスコマイシンA型。
【請求項３】
2θ=約10.4、11.4、12.7、13.9、17.1、17.4、19.2、20.0±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターンをさらに特徴とする、請求項2に記載のアスコマイシンA型。
【請求項４】
図1に示した粉末X線回折パターンを特徴とする、請求項3に記載のアスコマイシンA型。
【請求項５】
約3443、1639、1194、1092cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトルを特徴とする、請求項1に記載のアスコマイシンA型。
【請求項６】
約3665、1740、1723、1691、1640、1280、1194、1173、1038、997、926、858、785、771、722、686cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトルをさらに特徴とする、請求項5に記載のアスコマイシンA型。
【請求項７】
図10に示したFTIRスペクトルを特徴とする、請求項6に記載のアスコマイシンA型。
【請求項８】
約148〜152℃と約158〜162℃の2つの位置で吸熱を示すDSCサーモグラムを特徴とする、請求項1に記載のアスコマイシンA型。
【請求項９】
図4に示したDSCサーモグラムを特徴とする、請求項8に記載のアスコマイシンA型。
【請求項１０】
2θ=約7.5、14.7、19.2±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターン；約3442、1639、1196、1093cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトル；約152〜155℃の1つの位置で吸熱を示すDSCサーモグラムの中から選択したデータを特徴とするアスコマイシンB型。
【請求項１１】
2θ=約7.5、14.7、19.2±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターンを特徴とする、請求項10に記載のアスコマイシンB型。
【請求項１２】
2θ=約10.4、11.4、13.9、15.4、16.2、17.4、19.7、21.4、23.8±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターンをさらに特徴とする、請求項11に記載のアスコマイシンB型。
【請求項１３】
図2に示した粉末X線回折パターンを特徴とする、請求項12に記載のアスコマイシンB型。
【請求項１４】
約3442、1639、1196、1093cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトルを特徴とする、請求項10に記載のアスコマイシンB型。
【請求項１５】
約3579、1739、1721、1690、1649、1279、1197、1173、1093、1037、996、928、857、722cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトルをさらに特徴とする、請求項14に記載のアスコマイシンB型。
【請求項１６】
図11に示したFTIRスペクトルを特徴とする、請求項15に記載のアスコマイシンB型。
【請求項１７】
約152〜155℃の1つの位置で吸熱を示すDSCサーモグラムを特徴とする、請求項10に記載のアスコマイシンB型。
【請求項１８】
図5に示したDSCサーモグラムを特徴とする、請求項17に記載のアスコマイシンB型。
【請求項１９】
2θ=約6.6、15.5、19.7±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターン；約3459、1649、1196、1094cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトル；約156〜160℃の1つの位置で吸熱を示すDSCサーモグラムの中から選択したデータを特徴とするアスコマイシンC型。
【請求項２０】
2θ=約6.6、15.5、19.7±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターンを特徴とする、請求項19に記載のアスコマイシンC型。
【請求項２１】
2θ=約10.4、11.4、13.9、15.5、17.4、19.3、23.9、25.1、25.6±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターンをさらに特徴とする、請求項20に記載のアスコマイシンC型。
【請求項２２】
図3に示した粉末X線回折パターンを特徴とする、請求項21に記載のアスコマイシンC型。
【請求項２３】
約3459、1649、1196、1094cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトルを特徴とする、請求項19に記載のアスコマイシンC型。
【請求項２４】
約3579、3457、1739、1720、1690、1279、1036、995、955、928、855、789、774、721、682cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトルをさらに特徴とする、請求項23に記載のアスコマイシンC型。
【請求項２５】
図12に示したFTIRスペクトルを特徴とする、請求項24に記載のアスコマイシンC型。
【請求項２６】
約156〜160℃の1つの位置で吸熱を示すDSCサーモグラムを特徴とする、請求項19に記載のアスコマイシンC型。
【請求項２７】
図6に示したDSCサーモグラムを特徴とする、請求項26に記載のアスコマイシンC型。
【請求項２８】
アスコマイシンの結晶を調製する方法であって、
a）アスコマイシンを第1の極性有機溶媒と混合して溶液を取得し；
b）この溶液を第2の極性有機溶媒および貧溶媒と混合して混合物を形成し；
c）アスコマイシンが結晶化するまでこの混合物を維持し；
d）アスコマイシンの結晶を回収する操作を含む方法。
【請求項２９】
上記アスコマイシンの結晶がA型またはC型である、請求項28に記載の方法。
【請求項３０】
ステップa）の第1の極性有機溶媒の選択を、酢酸エチル、メタノール、エタノール、n-プロパノール、イソ-プロパノール、n-ブタノール、イソ-ブタノール、t-ブタノール、2-ブタノール、アセトン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、酢酸イソブチル、酢酸n-ブチル、ギ酸エチル、酢酸n-プロピル、酢酸イソ-プロピル、メチル-エチルケトン、ならびにこれらの混合物からなるグループの中から行なう、請求項28に記載の方法。
【請求項３１】
上記第1の極性有機溶媒が酢酸エチルである、請求項30に記載の方法。
【請求項３２】
ステップa）における温度を約50℃を超えない温度まで上昇させる、請求項28に記載の方法。
【請求項３３】
ステップa）においてあらゆる粒子を濾過または希釈して除く、請求項28に記載の方法。
【請求項３４】
ステップa）における溶液の濃度が約0.06g/ml〜約0.8g/mlである、請求項28に記載の方法。
【請求項３５】
ステップb）における貧溶媒の選択を、シクロヘキサン、ヘキサン、ヘプタン、n-オクタン、イソオクタン、メチルシクロヘキサンからなるグループの中から行なう、請求項28に記載の方法。
【請求項３６】
ステップb）における貧溶媒がシクロヘキサンである、請求項35に記載の方法。
【請求項３７】
ステップb）における第2の極性有機溶媒の選択を、水、N,N-ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジメチルアセトアミド、N,N-ジエチルホルムアミド、ならびにこれらの混合物からなるグループの中から行なう、請求項28に記載の方法。
【請求項３８】
ステップb）における第2の極性有機溶媒が水またはN,N-ジメチルホルムアミドである、請求項37に記載の方法。
【請求項３９】
上記貧溶媒と上記第2の極性有機溶媒を、溶媒中のアスコマイシン溶液にほぼ同時に添加する、請求項28に記載の方法。
【請求項４０】
ステップc）における反応混合物を約-15℃〜約30℃の温度に維持する、請求項28に記載の方法。
【請求項４１】
ステップc）における反応混合物を約0℃〜約8℃の温度に維持する、請求項40に記載の方法。
【請求項４２】
アスコマイシンの結晶を調製する方法であって、アスコマイシンを酢酸エチルに溶かし；この溶液を約-20℃〜約10℃の温度に維持し；アスコマイシンの結晶を回収する操作を含む方法。
【請求項４３】
上記アスコマイシンの結晶がB型である、請求項42に記載の方法。
【請求項４４】
上記溶液を約0℃〜約8℃の温度に維持する、請求項42に記載の方法。
【請求項４５】
アスコマイシンA型を少なくとも約30分間にわたって約100℃〜約160℃の温度に維持する操作を含む、請求項19に記載のアスコマイシン結晶C型の調製方法。
【請求項４６】
A型を約150℃の温度に維持する、請求項45に記載の方法。
【請求項４７】
A型を約1時間にわたって維持する、請求項45に記載の方法。
【請求項４８】
請求項1のアスコマイシンA型、請求項10のアスコマイシンB型、請求項19のアスコマイシンC型のいずれかを治療に有効な量含む医薬製剤。
【請求項４９】
細菌感染に苦しんでいる患者の治療法であって、その患者に請求項48に記載の医薬製剤を投与するステップを含む方法。
【請求項５０】
アトピー性皮膚炎を患っている患者の治療法であって、その患者に請求項48に記載の医薬製剤を投与するステップを含む方法。
【請求項５１】
免疫抑制療法を必要としている患者の治療法であって、その患者に請求項48に記載の医薬製剤を投与するステップを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連する出願
【０００２】
本出願は、2004年12月1日に出願されたアメリカ合衆国仮特許出願第60/632,372号、2004年12月6日に出願されたアメリカ合衆国仮特許出願第60/633,926号、2005年1月5日に出願されたアメリカ合衆国仮特許出願第60/641,697号、2005年1月5日に出願されたアメリカ合衆国仮特許出願第60/641,868号、2005年1月5日に出願されたアメリカ合衆国仮特許出願第60/641,869号、2005年3月16日に出願されたアメリカ合衆国仮特許出願第60/662,440号、2005年8月3日に出願されたアメリカ合衆国仮特許出願第60/705,681号、2005年8月17日に出願されたアメリカ合衆国仮特許出願第60/709,160号の恩恵を主張するものであり、これらの内容全体が、参考としてこの明細書に組み込まれているものとする。
【０００３】
技術分野
本発明は、マクロライド系アスコマイシンの新規な結晶形態と、その結晶形態を製造する方法に関する。
【背景技術】
【０００４】
マクロライド系抗生物質は、置換基として1つ以上のデオキシ糖を有する多員ラクトン環である。エリスロマイシン、アジスロマイシン、クラリスロマイシンは、静菌活性およびよまたは殺菌活性を有するマクロライド系抗生物質である。アスコマイシン、タクロリムス、ピメクロリムスもマクロライド系抗生物質である。
【０００５】
アスコマイシン（CAS番号11011-38-4）は免疫調節マクロラクタムであり、T細胞の活性化を阻止し、サイトカインの放出を抑制し、マスト細胞の活性化を抑制することが報告されている。“アスコマイシンの作用メカニズムは、シクロスポリンおよびタクロリムスの作用メカニズムと非常に似ているが、これら3つの化合物は異なる化学構造を有する。”C.E. Griffiths、「アスコマイシン：アトピー性皮膚炎の管理における進展」、Br. J. Dermatol.、第144巻(4)、679〜681ページ、2001年4月。アスコマイシンはアメリカ合衆国特許第3,244,592号に開示されており、この特許にはこの化合物が抗真菌剤として記載されていて、以下の化学式を有する。
【０００６】
【化１】
2007523896.tif 000002
【０００７】
免疫抑制剤としてのアスコマイシンの用途は、ヨーロッパ特許出願第323865号に記載されている。
【０００８】
固体化合物の結晶形態（または結晶形態が存在しないこと）は、その化合物の性質のうちで医薬製剤にとって重要な多くの性質に影響を与える。そのような性質として、例えば、粉砕した固体の流動性がある。流動性は、その材料を医薬製品に加工する間の取り扱いやすさに影響を与える。粉末化した化合物の粒子が互いにうまく滑らない場合には、製剤の専門家は、その事実を考慮して錠剤やカプセルを開発せねばならない。すると流動促進剤（例えばコロイド状二酸化ケイ素、タルク、デンプン、三塩基性リン酸カルシウム）を用いる必要性が出てくる可能性がある。
【０００９】
医薬化合物において結晶性に依存する可能性のある別の重要な性質は、水性流体への溶解速度である。患者の胃における活性成分の溶解速度は、治療効果を左右する可能性がある。なぜなら溶解速度が、経口投与した活性成分が患者の血流に到達する速度の上限を決めるからである。ある化合物の固体状態での形態は、圧縮性や保管安定性に関する挙動にも影響を与える可能性がある。
【００１０】
こうした実際的な物理的性質は、ある物質の特定の多形形態を規定する分子の立体配座と方向が、単位セル内でどのようになっているかの影響を受ける。その立体配座や方向という因子によって分子内相互作用が起こるため、異なる結晶形態は異なる分光学的性質を生じさせる可能性がある。そしてその性質は、粉末X線回折法、固体状態の13CのNMR分光法、赤外分光法によって検出することができる。特定の多形形態は、アモルファス材料や別の多形形態とは異なった熱的挙動を生じさせる可能性もある。熱的挙動は、実験室において例えばキャピラリー融点法、熱重量測定分析（TGA）法、示差走査熱量測定（DSC）法などの方法で測定され、その結果を利用すると、ある多形形態を別の多形形態と区別することができる。
【００１１】
薬理学的に有用な化合物の新規な結晶形態が発見されると、医薬製品の性能が向上する新たな機会が提供される。そのような発見により、例えば所望の放出プロファイルやそれ以外の所望の性質を有する薬の投与形態を製剤の研究者が設計する際に利用できる材料のレパートリーが広がる。そのためアスコマイシンのいろいろな結晶形態が現在必要とされている。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明により、2θ=約8.7、11.8、14.3±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターン；約3443、1639、1194、1092cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトル；約148〜152℃と約158〜162℃の2つの位置で吸熱を示すDSCサーモグラムの中から選択したデータを特徴とするアスコマイシンの1つの結晶形態（A型と名づける）とその溶媒和物が提供される。
【００１３】
本発明により、2θ=約7.5、14.7、19.2±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターン；約3442、1639、1196、1093cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトル；約152〜155℃の1つの位置で吸熱を示すDSCサーモグラムの中から選択したデータを特徴とするアスコマイシンの1つの結晶形態（B型と名づける）とその溶媒和物が提供される。
【００１４】
本発明により、2θ=約6.6、15.5、19.7±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターン；約3459、1649、1196、1094cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトル；約156〜160℃の1つの位置で吸熱を示すDSCサーモグラムの中から選択したデータを特徴とするアスコマイシンの1つの結晶形態（C型と名づける）とその溶媒和物が提供される。
【００１５】
好ましい実施態様では、本発明によるアスコマイシンの新規な結晶形態は、アスコマイシンの他の結晶形態と比べて実質的に純粋である。すなわち新規な結晶形態に含まれるアスコマイシンの他の結晶形態は、約10（重量）％未満である。この値は約5％未満であることが好ましく、約1％未満であることがより一層好ましい。いくつかの実施態様では、新規な結晶形態に含まれるアモルファスなアスコマイシンは約10（重量）％未満である。この値は約5％未満であることが好ましく、約1％未満であることがより一層好ましい。
【００１６】
本発明により、アスコマイシンの結晶を調製する新しい方法であって、
a）アスコマイシンを第1の極性有機溶媒と混合して溶液を取得し；
b）この溶液を第2の極性有機溶媒および貧溶媒と混合して混合物を形成し；
c）アスコマイシンが結晶化するまでこの混合物を維持し；
d）アスコマイシンの結晶を回収する操作を含む方法も提供される。
【００１７】
このアスコマイシンの結晶は、A型またはC型であることが好ましい。
【００１８】
本発明により、アスコマイシンの結晶を調製する別の方法であって、アスコマイシンを酢酸エチルに溶かし；この溶液を約-20℃〜約10℃の温度に維持し；アスコマイシンの結晶を回収する操作を含む方法も提供される。
【００１９】
このアスコマイシンの結晶は、B型であることが好ましい。
【００２０】
本発明により、アスコマイシンC型を調製する方法であって、アスコマイシンA型を少なくとも約30分間にわたって約100℃〜約160℃の温度に維持する操作を含む方法がさらに提供される。
【００２１】
本発明により、アスコマイシンA型、B型、C型のいずれか1つを治療に有効な量含むとともに、薬理学的に許容可能な賦形剤を含む医薬製剤が提供される。
【００２２】
本発明により更に、細菌感染に苦しんでいる患者、またはアトピー性皮膚炎を患っている患者、または免疫抑制療法を必要としている患者の治療法であって、その患者に、アスコマイシンA型、B型、C型のいずれか1つを治療に有効な量含む医薬製剤を投与するステップを含む方法が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
この明細書では、“室温”という用語は、約15℃〜約30℃、好ましくは約18℃〜約25℃の温度を意味する。
【００２４】
“少量”の極性溶媒は、極性溶媒（または2種類以上の極性溶媒）に対する溶媒混合物の比が、容積／容積に基づくと約140/1〜約636/1であることを意味する。この比は、約200/1〜約500/1であることが好ましく、約300/1〜約350/1であることがより一層好ましい。適切であることがわかった溶媒混合物／極性溶媒（または極性溶媒混合物）の比は、140/1、212/1、300/1、318/1、325/1、350/1、636/1などである。
【００２５】
あるいは“少量”は、マクロライド系抗生物質に対する極性溶媒（または2種類以上の極性溶媒）のモル当量の比で考えることもできる。マクロライド系抗生物質に対する極性溶媒のモル当量が0.5と小さいと、マクロライド系抗生物質が結晶化することがわかった。したがって本発明の方法において極性溶媒を（マクロライド系抗生物質に対して）約0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8（ときにはそれ以上）モル当量添加してマクロライド系抗生物質を結晶化させることが、本発明の範囲に含まれる。
【００２６】
本発明により、2θ=約8.7、11.8、14.3±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターン；約3443、1639、1194、1092cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトル；約148〜152℃と約158〜162℃の2つの位置で吸熱を示すDSCサーモグラムの中から選択したデータを特徴とするアスコマイシンの1つの結晶形態（A型と名づける）とその溶媒和物が提供される。
【００２７】
アスコマイシンA型は、（実質的に図1に示してあるように）2θ=約8.7、10.4、11.4、11.8、12.7、13.9、14.3、17.1、17.4、19.2、20.0±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターンをさらに特徴とすることができる。A型は、（実質的に図10に示してあるように）約3665、1740、1723、1691、1640、1280、1194、1173、1038、997、926、858、785、771、722、686cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトルも特徴とすることができる。さらに、アスコマイシンA型は、実質的に図4に示したDSCサーモグラムを特徴とすることができる。
【００２８】
アスコマイシンA型結晶の融解までの重量損失をTGAによって測定した値は、（実質的に図7に示してあるように）約1.6〜1.8％である。これは、カール・フィッシャー滴定によって測定した含水量に対応する。
【００２９】
本発明のアスコマイシンA型結晶は棒状粒子を含んでおり、それが凝集体を形成する。好ましい最大粒径は約60μmである。
【００３０】
本発明により、2θ=約7.5、14.7、19.2±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターン；約3442、1639、1196、1093cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトル；約152〜155℃の1つの位置で吸熱を示すDSCサーモグラムの中から選択したデータを特徴とするアスコマイシンの1つの結晶形態（B型と名づける）とその溶媒和物が提供される。
【００３１】
アスコマイシンB型は、（実質的に図2に示してあるように）2θ=約7.5、10.4、11.4、13.9、14.7、15.4、16.2、17.4、19.2、19.7、21.4、23.8±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターンをさらに特徴とすることができる。B型は、（実質的に図11に示してあるように）約3579、3442、1739、1721、1690、1649、1639、1279、1197、1173、1093、1037、996、928、857、722cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトルも特徴とすることができる。さらに、アスコマイシンB型は、実質的に図5に示したDSCサーモグラムを特徴とすることができる。
【００３２】
アスコマイシンB型結晶の融解までの重量損失をTGAによって測定した値は、（実質的に図8に示してあるように）約1.0〜1.2％である。これは、カール・フィッシャー滴定によって測定した含水量に対応する。
【００３３】
本発明のアスコマイシンB型は棒状粒子を含んでおり、それが凝集体を形成する。好ましい最大粒径は約100μmである。
【００３４】
本発明により、2θ=約6.6、15.5、19.7±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターン；約3459、1649、1196、1094cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトル；約156〜160℃の1つの位置で吸熱を示すDSCサーモグラムの中から選択したデータを特徴とするアスコマイシンの1つの結晶形態（C型と名づける）とその溶媒和物が提供される。
【００３５】
アスコマイシンC型は、（実質的に図3に示してあるように）2θ=約6.6、10.4、11.4、13.9、15.4、17.4、19.3、19.7、23.9、25.1、25.6±0.2°の位置にピークがある粉末X線回折パターンさらに特徴とすることができる。C型は、（実質的に図12に示してあるように）約3579、3457、1739、1720、1690、1649、1279、1196、1094、1036、995、955、928、855、789、774、721、682cm-1の位置にピークがあるFTIRスペクトルも特徴とすることができる。さらに、アスコマイシンC型は、実質的に図6に示したDSCサーモグラムを特徴とすることができる。
【００３６】
アスコマイシンC型結晶の融解までの重量損失をTGAによって測定した値は、（実質的に図9に示してあるように）0.3％未満である。これは、カール・フィッシャー滴定によって測定した含水量に対応する。アスコマイシンC型結晶は、無水物である。
【００３７】
本発明のアスコマイシンC型は棒状粒子と板状体を含んでおり、それが凝集体を形成する。好ましい最大粒径は約40〜約50μmである。
【００３８】
本発明によるアスコマイシンの新規な結晶形態は、アスコマイシンの他の結晶形態と比べて実質的に純粋である。すなわち新規な結晶形態に含まれるアスコマイシンの他の結晶形態は、約10（重量）％未満である。この値は約5％未満であることが好ましく、約1％未満であることがより一層好ましい。いくつかの実施態様では、新規な結晶形態に含まれるアモルファスなアスコマイシンは約10（重量）％未満である。この値は約5％未満であることが好ましく、約1％未満であることがより一層好ましい。
【００３９】
本発明により、アスコマイシンの結晶を調製する方法であって、
a）アスコマイシンを第1の極性有機溶媒と混合して溶液を取得し；
b）この溶液を第2の極性有機溶媒および貧溶媒と混合して混合物を形成し；
c）アスコマイシンが結晶化するまでこの混合物を維持し；
d）アスコマイシンの結晶を回収する操作を含む方法も提供される。
【００４０】
このアスコマイシンの結晶は、A型またはC型であることが好ましい。
【００４１】
ステップa）の第1の極性有機溶媒の選択は、酢酸エチル、メタノール、エタノール、n-プロパノール、イソ-プロパノール、n-ブタノール、イソ-ブタノール、t-ブタノール、2-ブタノール、アセトン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、酢酸イソブチル、酢酸n-ブチル、ギ酸エチル、酢酸n-プロピル、酢酸イソ-プロピル、メチル-エチルケトン、ならびにこれらの混合物からなるグループの中から行なうことが好ましい。最も好ましい第1の極性有機溶媒は酢酸エチルである。
【００４２】
透明な溶液を得るには、ステップa）における温度を約50℃を超えない温度まで上昇させる。
【００４３】
あるいは透明な溶液は、あらゆる粒子を濾過または希釈して除くことによっても得られる。濾過は、紙、ガラス繊維、他の膜材料、清澄剤（例えばセライト）のいずれかを通過させることによって実現できる。使用する装置と溶液の濃度および温度に応じ、濾過装置をあらかじめ加熱して結晶化が早く起こり過ぎないようにする必要があろう。
【００４４】
貧溶媒の選択は、シクロヘキサン、ヘキサン、ヘプタン、n-オクタン、イソオクタン、メチルシクロヘキサンからなるグループの中から行なうことが好ましい。最も好ましい貧溶媒はシクロヘキサンである。
【００４５】
場合によっては、ステップb）の貧溶媒なしで本発明の方法を実施することができる。
【００４６】
第2の極性有機溶媒の選択は、水、N,N-ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジメチルアセトアミド、N,N-ジエチルホルムアミド、ならびにこれらの混合物からなるグループの中から行なうことが好ましい。より好ましいのは、この極性有機溶媒の選択を、水、N,N-ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドからなるグループの中から行なうことである。最も好ましい極性有機溶媒は、水またはN,N-ジメチルホルムアミドである。
【００４７】
場合によっては、この極性溶媒を少量添加する。
【００４８】
貧溶媒と第2の極性有機溶媒は、溶媒中のアスコマイシン溶液にほぼ同時に添加することが好ましい。
【００４９】
ステップc）における反応混合物は、結晶化を誘導するために低温に維持することが好ましい。この反応混合物は約-15℃〜約30℃の温度に維持することが好ましい。この反応混合物は約0℃〜約8℃の温度に維持することが好ましい。
【００５０】
結晶化は、最初にアスコマイシンの濃縮溶液を用いることによって容易になる。溶液の濃度は約0.06g/ml〜約0.8g/mlであることが好ましい。濃度を大きくすると、より高収率になる。
【００５１】
本発明により、アスコマイシンの結晶を調製する別の方法であって、アスコマイシンを酢酸エチルに溶かし；この溶液を約-20℃〜約10℃の温度に維持し；アスコマイシンの結晶を回収する操作を含む方法も提供される。この方法で得られるアスコマイシンの結晶はB型であることが好ましい。
【００５２】
溶液は約0℃〜約8℃の温度に維持することが好ましい。
【００５３】
本発明により、アスコマイシンC型を調製する方法であって、アスコマイシンA型を少なくとも約30分間にわたって約100℃〜約160℃の温度に維持する操作を含む方法がさらに提供される。A型を約150℃の温度に維持することが好ましい。A型を約1時間にわたって維持することが好ましい。
【００５４】
本発明により、アスコマイシンA型、B型、C型のいずれか1つを治療に有効な量含むとともに、少なくとも1種類の薬理学的に許容可能な賦形剤をある量含む医薬製剤が提供される。
【００５５】
“治療に有効な量”は、疾患または望ましくない症状を治療するために患者に結晶形態を投与するとき、その疾患または症状に対して好ましい効果をもたらすのに十分な量を意味する。“治療に有効な量”は、どの結晶形態であるかや、治療する患者の疾患または症状とその程度、年齢、体重などに応じて異なるであろう。所定の結晶形態について治療に有効な量を決定することは当業者の能力で可能であり、ルーチン作業以上のことは必要とされない。
【００５６】
本発明により、細菌感染に苦しんでいる患者の治療法であって、その患者に、アスコマイシンの上記結晶形態のすべてからなるグループの中から選択したアスコマイシンを治療に有効な量含む医薬製剤を投与するステップを含む方法も提供される。本発明の別の一実施態様は、アトピー性皮膚炎を患っている患者の治療法であって、その患者に、アスコマイシンの上記結晶形態のすべてからなるグループの中から選択したアスコマイシンを治療に有効な量含む医薬製剤を投与するステップを含む方法である。本発明のさらに別の一実施態様は、免疫抑制療法を必要としている患者の治療法であって、その患者に、アスコマイシンの上記結晶形態のすべてからなるグループの中から選択したアスコマイシンを治療に有効な量含む医薬製剤を投与するステップを含む方法である。
【００５７】
医薬製剤の調製に用いる本発明の結晶形態は、アスコマイシンの他の結晶形態と比べて実質的に純粋である。すなわち新規な結晶形態に含まれるアスコマイシンの他の結晶形態は、約10（重量）％未満である。この値は約5％未満であることが好ましく、約1％未満であることがより一層好ましい。いくつかの実施態様では、新規な結晶形態に含まれるアモルファスなアスコマイシンは約10（重量）％未満である。この値は約5％未満であることが好ましく、約1％未満であることがより一層好ましい。
【００５８】
本発明の医薬製剤は、結晶形態のアスコマイシン（例えばこの明細書に開示した結晶形態の1つ）を、場合によってはアスコマイシンの他の結晶形態との混合物として含んでいる。本発明の医薬製剤は、活性成分に加え、1種類以上の賦形剤を含むことができる。賦形剤は、さまざまな目的で製剤に添加される。
【００５９】
希釈剤を本発明の製剤に添加することができる。希釈剤によって固体医薬組成物の体積が増えるため、その組成物を含む医薬投与形態を患者や看護人が取り扱いやすくなる。固体組成物のための希釈剤としては、例えば、微結晶セルロース（例えばAvicel（登録商標））、マイクロファイン・セルロース、ラクトース、デンプン、あらかじめゼラチン化したデンプン、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム、糖類、デキストレート、デキストリン、デキストロース、二塩基性リン酸カルシウム二水和物、三塩基性リン酸カルシウム、カオリン、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、マルトデキストリン、マンニトール、ポリメタクリレート（例えばEudragit（登録商標））、塩化カリウム、粉末化したセルロース、塩化ナトリウム、ソルビトール、タルクなどがある。
【００６０】
圧縮によって投与形態（例えば錠剤）にされた固体医薬組成物は、賦形剤を含んでいてもよい。賦形剤の機能は、圧縮後に活性成分と他の賦形剤を一体化するのを助けることである。固体医薬組成物の結合剤としては、アラビアゴム、アルギン酸、カルボマー（例えばカルボポール）、カルボキシメチルセルロースナトリウム、デキストリン、エチルセルロース、ゼラチン、グアルゴム、水素化植物油、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース（例えばKlucel（登録商標））、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（例えばMethocel（登録商標））、液体グルコース、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、マルトデキストリン、メチルセルロース、ポリメタクリレート、ポビドン（例えばKollidon（登録商標）、Plasdone（登録商標））、あらかじめゼラチン化したデンプン、アルギン酸ナトリウム、デンプンなどがある。
【００６１】
圧縮した固体医薬組成物が患者の胃の中で溶ける速度は、その組成物に崩壊剤を添加することによって大きくできる。崩壊剤としては、アルギン酸、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム（例えばAc-Di-Sol（登録商標）、Primellose（登録商標））、コロイド状二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン（例えばKollidon（登録商標）、Polyplasdone（登録商標））、グアルゴム、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、メチルセルロース、微結晶セルロース、ポラクリリンカリウム、粉末化したセルロース、あらかじめゼラチン化したデンプン、アルギン酸ナトリウム、グリコール酸ナトリウムデンプン（例えばExplotab（登録商標））、デンプンなどがある。
【００６２】
流動促進剤を添加して圧縮されていない固体組成物の流動性を大きくするとともに、用量をより正確にすることができる。流動促進剤として機能する賦形剤としては、コロイド状二酸化ケイ素、三ケイ酸マグネシウム、粉末化したセルロース、デンプン、タルク、三塩基性リン酸カルシウムなどがある。
【００６３】
粉末化した組成物を圧縮することによって錠剤などの投与形態を製造する場合、その組成物にパンチまたはダイで圧力を加える。賦形剤や活性成分によっては、パンチまたはダイの表面に付着する傾向がある。すると製品の表面に窪みその他の凹凸が生じる可能性がある。潤滑剤を組成物に添加して付着を減らすことにより、製品がダイから離れやすくすることができる。潤滑剤としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、モノステアリン酸グリセリル、パルミトステアリン酸グリセリル、水素化ひまし油、水素化植物油、鉱油、ポリエチレングリコール、安息香酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリルフマル酸ナトリウム、ステアリン酸、タルク、ステアリン酸亜鉛などがある。
【００６４】
着香剤と調味料により、投与形態が患者にとってより好ましい風味になる。本発明の組成物に含まれていてもよい医薬製品用の一般的な着香剤および調味料としては、マルトール、バニリン、エチルバニリン、メントール、クエン酸、フマル酸、エチルマルトール、酒石酸などがある。
【００６５】
固体組成物と液体組成物を薬理学的に許容可能な着色剤を用いて染色し、外観を向上させること、および／または患者にとって製品と単位投与量のレベルをわかりやすくすることもできる。
【００６６】
アスコマイシンを溶液にすると、新規な結晶形態の結晶構造や、本発明によるアスコマイシンの新規な結晶形態を区別する特徴が失われるため、アスコマイシンの真の溶液が本発明に含まれることは想定していない。したがってこの明細書に開示したアスコマイシンの新規な結晶形態を含む本発明の医薬組成物は、主として固体医薬組成物である。しかし（例えばアスコマイシンを液体医薬製剤として供給するために）新規な結晶形態を利用してそのような溶液を調製することも本発明の範囲であると考えられる。
【００６７】
本発明の結晶形態を利用して調製する液体医薬組成物では、アスコマイシンと他の固体賦形剤を液体基剤（例えば水、植物油、アルコール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン）に溶かすか懸濁させる。
【００６８】
液体医薬組成物は、活性成分を、あるいは液体基剤に溶けないそれ以外の賦形剤を組成物全体に均一に分散させるための乳化剤を含んでいてもよい。本発明の液体組成物で有用な乳化剤としては、例えば、ゼラチン、卵黄、カゼイン、コレステロール、アラビアゴム、トラガカント、ツノマタ、ペクチン、メチルセルロース、カルボマー、セトステアリルアルコール、セチルアルコールなどがある。
【００６９】
液体医薬組成物は、製品の口当たりを改善するため、および／または胃腸管の内壁をコーティングするための増粘剤を含むこともできる。そのような増粘剤としては、アラビアゴム、アルギン酸、ベントナイト、カルボマー、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、セトステアリルアルコール、メチルセルロース、エチルセルロース、ゼラチン、グアルゴム、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、マルトデキストリン、ポリビニルアルコール、ポビドン、炭酸プロピレン、アルギン酸プロピレングリコール、アルギン酸ナトリウム、グリコール酸ナトリウムデンプン、デンプン、トラガカント、キサンタンゴムなどがある。
【００７０】
甘味剤（例えばソルビトール、サッカリン、サッカリンナトリウム、スクロース、アスパルテーム、フルクトース、マンニトール、転化糖）を添加して風味を改善することができる。
【００７１】
摂取しても安全なレベルで保存剤やキレート剤（例えばアルコール、安息香酸ナトリウム、ブチル化ヒドロキシトルエン、ブチル化ヒドロキシアニソール、エチレンジアミン四酢酸）を添加し、貯蔵安定性を向上させることができる。
【００７２】
液体組成物は、緩衝液（例えば、グコン酸、乳酸、クエン酸、酢酸、グコン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム）も含んでいてよい。賦形剤を何にするかとその使用量は、製剤の専門家であれば、この分野での標準的な手続きと参考となる研究に関する経験と考察に基づいて容易に決定することができる。
【００７３】
本発明の固体組成物としては、粉末、顆粒、凝集体、圧縮した組成物などがある。投与形態としては、経口投与、口内投与、直腸投与、非経口投与（例えば皮下投与、筋肉内投与、静脈内投与）、吸入投与、目への投与に適した投与形態が挙げられる。どの場合でも、最適な投与経路は治療する疾患の性質と程度によって異なることになろうが、本発明で最も好ましい経路は経口である。投与形態は単位用量の形態で提示するのが便利であり、薬理学でよく知られている任意の方法で投与形態を調製することができる。
【００７４】
投与形態としては、錠剤、粉末、カプセル、座薬、サッシェ、トローチ、ロゼンジなどの固体投与形態と、液体シロップ、懸濁液、エリキシルなどがある。
【００７５】
本発明の投与形態は、用量が約10mg〜約160mgの経口カプセルの形態になっていることが好ましい。約20mg〜約80mgの用量であることがより好ましく、20、40、60、80mgのカプセルになっていることが最も好ましい。1日当たりの用量としては、カプセルを1個、2個、またはそれ以上が可能である。
【００７６】
本発明の投与形態は、組成物（本発明の固体組成物を粉末化または顆粒化したものが好ましい）を硬いシェルまたは柔らかいシェルの中に含むカプセルにすることができる。その組成物は、本発明の固体組成物を粉末または顆粒にしたものであることが好ましい。シェルはゼラチンで作ることができ、場合によっては可塑剤（例えばグリセリンやソルビトール）と、不透明化剤または着色剤とを含んでいてもよい。
【００７７】
錠剤またはカプセルに詰める組成物は、湿式顆粒化によって調製することができる。湿式顆粒化では、粉末の形態になった活性成分と賦形剤の一部または全体を混合した後、液体（一般に水）の存在下でさらに混合して粉末を凝集させ、顆粒にする。顆粒をスクリーニングおよび／または粉砕し、乾燥させ、さらにスクリーニングおよび／または粉砕し、望む粒径にする。その後、顆粒を錠剤にしたり、他の賦形剤（例えば流動促進剤および／または潤滑剤）を添加した後に錠剤化したりすることができる。
【００７８】
錠剤組成物は、通常は乾式混合によって調製することができる。例えば活性成分と賦形剤の混合組成物を圧縮してスラグまたはシートにした後、粉末化して圧縮顆粒にすることができる。その後、圧縮顆粒を圧縮すると錠剤になる。
【００７９】
乾式混合に代わる方法として、混合した組成物を直接圧縮することによって圧縮された投与形態にすることもできる。直接的な圧縮により、顆粒のない、より均一な錠剤が得られる。直接圧縮錠剤化に特に適した賦形剤としては、微結晶セルロース、スプレー乾燥させたラクトース、リン酸二カルシウム二水和物、コロイド・シリカなどがある。直接圧縮錠剤化におけるこれらの賦形剤または他の賦形剤の適切な使用法は、直接圧縮錠剤化という特別な製剤化に挑戦した経験と技術のある当業者には公知である。
【００８０】
本発明のカプセル充填物としては、錠剤化に関して説明した上記の混合物と顆粒のうちの任意のものが可能であるが、それらに対して最終錠剤化ステップは実施しない。
【００８１】
活性成分と賦形剤は、従来技術で知られている方法に従って組成物や投与形態にすることができる。
【００８２】
本発明の製剤がアスコマイシンの1つの結晶形態だけを含んでいる必要はない。本発明の結晶形態は、単独の成分として、あるいはアスコマイシンの他の結晶形態またはアモルファスなアスコマイシンとの混合物として、医薬製剤または医薬組成物の中で使用することができる。しかし本発明の医薬製剤または医薬組成物は、少なくとも1つの新規な形態を、その製剤中または組成物中のアスコマイシンの全量に対して25〜100重量％、特に50〜100重量％含んでいることが好ましい。
【００８３】
アスコマイシンの新規な結晶形態の量は、75〜100重量％、特に90〜100重量％であることが好ましい。非常に好ましいのは、95〜100重量％の量である。
【００８４】
本発明を好ましいいくつかの実施態様を参照して説明してきたが、当業者であれば、この明細書の内容を考慮すれば他の実施態様も明らかであろう。本発明の組成物を調製する方法と本発明の利用法を詳しく説明した以下の実施例を参照し、本発明をさらに明確にする。当業者であれば、本発明の範囲を逸脱することなく、材料と方法の両方に対する多くの変更をなすことができよう。
【実施例】
【００８５】
器具
【００８６】
本発明の方法で得られたアスコマイシンの結晶形態は、粉末X線回折（PXRD）によって分析することができる。粉末X線回折は、粉末X線回折装置、ARL、θ-θゴニオメータ、Cu管、固体検出器を用い、ペルティエ冷却しながら行なった。サンプル・ホルダは、バックグラウンドがゼロの丸い水晶板が付いた丸い標準的なアルミニウム製サンプル・ホルダであった。走査パラメータ：範囲は2θが2〜40°、連続走査、速度は3°/分。
【００８７】
アスコマイシンの結晶形態は、熱分析によって分析することもできる。熱分析は、ディジタル走査熱量走査熱量測定（DSC）と熱重量測定分析（TGA）によって実施することができる。DSCサーモグラムは、DSC822eメトラー・トレド装置（アドバンスト・インスツルメンツ社、サン・フアン、プエルト・リコ国）を用いて得ることができる。サンプルの重量：3〜5mg；加熱速度：10℃/分；るつぼにある穴の数：3。TGAサーモグラムは、TGA/SDTA 851装置（アドバンスト・インスツルメンツ社、サン・フアン、プエルト・リコ国）で標準的なアルミナ製の皿を用いて得ることができる。サンプルの重量：7〜15mg；加熱速度：10℃/分。
【００８８】
粒径は、以下の方法で測定することができる：篩、沈降、エレクトロゾーン検知（コールター・カウンター）、顕微鏡法、低角度レーザー光散乱（LALLS）。
【００８９】
実施例１
アスコマイシンA型の調製方法
【００９０】
アスコマイシンA型結晶（150.1g）を酢酸エチル（1000ml）に溶かし、蒸発により乾燥させた。このプロセスを2回繰り返した。蒸発後の油性材料を酢酸エチル（300ml）に溶かした。シクロヘキサン（1800ml）をこの溶液に添加した。水（3.3ml）を少量ずつ3時間かけて添加した。得られた混合物を室温にて1時間にわたって撹拌した。このようにして形成された結晶性生成物を濾過し、シクロヘキサン（300ml）で洗浄し、真空下で70℃にて1.5時間にわたって乾燥させた。アスコマイシンA型（133.6g）が得られた。
【００９１】
実施例２
アスコマイシンB型の調製方法
【００９２】
アスコマイシン粗生成物（6g）を酢酸エチル（48ml）に溶かし、蒸発により体積を減らした（9ml）。この混合物を室温にて1時間にわたって撹拌した後、0〜8℃にて24時間にわたってインキュベートした。このようにして形成された結晶性生成物を濾過し、シクロヘキサン（18ml）で洗浄し、真空下で70℃にて1.5時間にわたって乾燥させた。アスコマイシンB型（3.51g）が得られた。
【００９３】
実施例３
アスコマイシンC型の調製方法
【００９４】
アスコマイシン粗生成物（6g）を酢酸エチル（60ml）に溶かし、蒸発により乾燥させた。このプロセスを2回繰り返した。蒸発後の油性材料を酢酸エチル（6ml）に溶かした。シクロヘキサン（36ml）とジメチルホルムアミド（0.12ml）をこの溶液に添加し、得られた混合物を室温にて1.5時間にわたって撹拌した。このようにして形成された結晶性生成物を濾過し、シクロヘキサン（18ml）で洗浄し、減圧下で70℃にて1時間にわたって乾燥させた。アスコマイシンC型（2.76g）が得られた。
【００９５】
実施例４
アスコマイシンC型の調製方法
【００９６】
アスコマイシンA型結晶（6g）を酢酸エチル（60ml）に溶かし、蒸発により乾燥させた。このプロセスを2回繰り返した。蒸発後の油性材料を酢酸エチル（6ml）に溶かした。シクロヘキサン（66ml）とジメチルスルホキシド（0.24ml）をこの溶液に添加し、得られた混合物を室温にて1.5時間にわたって撹拌した。このようにして形成された結晶性生成物を濾過し、シクロヘキサン（18ml）で洗浄し、減圧下で70℃にて1時間にわたって乾燥させた。アスコマイシンC型（4.81g）が得られた。
【００９７】
実施例５
アスコマイシンの調製方法
【００９８】
アスコマイシンA型結晶（6g）を酢酸エチル（60ml）に溶かし、蒸発により乾燥させた。このプロセスを2回繰り返した。蒸発後の油性材料を酢酸エチル（6ml）に溶かした。シクロヘキサン（36ml）、ならびにジメチルホルムアミド（0.06ml）と水（0.06ml）の混合物をこの溶液に添加した。得られた混合物を室温にて1.5時間にわたって撹拌した。結晶性生成物を濾過し、シクロヘキサン（18ml）で洗浄し、減圧下で70℃にて1時間にわたって乾燥させた。アスコマイシンA型（5.46g）が得られた。
【００９９】
実施例６
150℃でのアスコマイシンC型の調製方法
【０１００】
表1に示した性質を持つA型から出発し、150℃にて1時間にわたってインキュベーションを行なうとアスコマイシンC型が得られた。
【０１０１】
【表１】
2007523896.tif 000003
【図面の簡単な説明】
【０１０２】
【図１】アスコマイシンA型の粉末X線回折パターンである。
【図２】アスコマイシンB型の粉末X線回折パターンである。
【図３】アスコマイシンC型の粉末X線回折パターンである。
【図４】アスコマイシンA型のDSCサーモグラムである。
【図５】アスコマイシンB型のDSCサーモグラムである。
【図６】アスコマイシンC型のDSCサーモグラムである。
【図７】アスコマイシンA型のTGAサーモグラムである。
【図８】アスコマイシンB型のTGAサーモグラムである。
【図９】アスコマイシンC型のTGAサーモグラムである。
【図１０】アスコマイシンA型のFTIRスペクトルである。
【図１１】アスコマイシンB型のFTIRスペクトルである。
【図１２】アスコマイシンC型のFTIRスペクトルである。
【図１３】実施例5からのアスコマイシン・サンプルの粉末X線回折パターンである。
【図１】
2007523896.tif 000004
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
2007523896.tif 000010
【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【国際調査報告】
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2007523896.tif 000018
2007523896.tif 000019
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