(57)【要約】  本発明は、腫瘍及び腫瘍等のその他の増殖性疾患の治療用のキット、方法及び組成物を提供する。ここで前記組成物は、薬学的許容可能な担体又は賦形剤中に、例えばＮＤＧＡ化合物等を含む、少なくとも１つのカテコールブタンの実質的に純粋な調製物を含む。ＮＤＧＡ又はその誘導体等の前記カテコールブタンは、治療を必要とする単数又は複数の対象体に対して、その疾患組織への直接注射や疾患組織への局所投与以外の経路で投与される。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つのカテコールブタンと、薬用的に許容可能な担体又は賦形剤とを含み、前記薬用組成物が、疾患組織に対する直接注射又は皮膚に対する局所投与以外の経路による投与用に製剤される対象体の疾患を治療するための薬用組成物。
【請求項２】
前記疾患が、炎症性疾患以外である請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３】
前記疾患が、小膠細胞活性化又は刺激に関連する炎症性疾患以外である請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項４】
前記疾患が、増殖性疾患である請求項１、２又は３に記載の薬用組成物。
【請求項５】
前記増殖性疾患が、悪性、前悪性又は良性癌である請求項４に記載の薬用組成物。
【請求項６】
前記疾患が、ＨＩＶ感染から生じる又はそれに関連する請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項７】
前記疾患が、ＨＰＶ感染から生じる又はそれに関連する請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項８】
前記疾患が、ＨＳＶ感染から生じる又はそれに関連する請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項９】
前記組成物が、鼻腔内投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項１０】
前記組成物が、経口投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項１１】
前記組成物が、遅効性及び速効性カプセル剤から成るグループから選択される１つとして製剤されている請求項１０に記載の薬用組成物。
【請求項１２】
前記組成物が、吸入用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項１３】
前記組成物が、皮下投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項１４】
前記組成物が、経皮投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項１５】
前記組成物が、閉塞有り又は無しで、動脈内投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項１６】
前記組成物が、頭蓋内投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項１７】
前記組成物が、脳室内投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項１８】
前記組成物が、静脈内投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項１９】
前記組成物が、口腔投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２０】
前記組成物が、腹腔内投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２１】
前記組成物が、眼内投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２２】
前記組成物が、筋肉内投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２３】
前記組成物が、移植用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２４】
前記組成物が、中心静脈投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２５】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２６】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、リン酸緩衝生理食塩水を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２７】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、生理食塩水を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２８】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、脂質系製剤を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２９】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、リポソーム製剤を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３０】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ナノ粒子製剤を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３１】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ミセル製剤を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３２】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、水溶性製剤を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３３】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、生物分解性重合体を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３４】
前記カテコールブタンが、以下の式を有する、
【化１】
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Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、アルキレン又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈ又は低級アルキルであり、そして、
Ｒ７、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−Ｈ、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又は任意の隣接する二つの基が共にジオキシアルキエンとすることができ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩である、請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３５】
Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、
Ｒ３、Ｒ４が、独立的に、低級アルキルであり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈであり、そして
Ｒ７、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−Ｈ、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩である、請求項３４に記載の薬用組成物。
【請求項３６】
Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、
Ｒ３、Ｒ４が、独立的に、低級アルキルであり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈであり、そして、
Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩である、請求項３５に記載の薬用組成物。
【請求項３７】
Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−ＣＨ３又は−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又はその塩である請求項３６に記載の薬用組成物。
【請求項３８】
Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３又は−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又はその塩である請求項３６に記載の薬用組成物。
【請求項３９】
Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−ＣＨ３、−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又は−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ＋Ｈ（ＣＨ３）２．Ｃｌ−であり、そして、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又は、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ＋Ｈ（ＣＨ３）２．Ｃｌ−である請求項３６に記載の薬用組成物。
【請求項４０】
前記カテコールブタンが、ＮＤＧＡではないことを条件として、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ又は−ＣＨ３であり、そして、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＨ又は−ＯＣＨ３である請求項３６に記載の薬用組成物。
【請求項４１】
Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−ＣＨ３であり、そして、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３である請求項３６に記載の薬用組成物。
【請求項４２】
前記カテコールブタンが、ＮＤＧＡである請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項４３】
前記カテコールブタンが、ＮＤＧＡ以外である請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項４４】
請求項１に記載の薬用組成物を製造する方法であって、以下の工程、
（ａ）請求項３４〜４３のいずれか一項に記載の少なくとも１つのカテコールブタンを提供する工程、
（ｂ）請求項２５〜３３のいずれか一項に記載の少なくとも１つの薬学的許容可能な担体又は賦形剤を提供する工程、
（ｃ）前記カテコールブタンと前記薬学的許容可能な担体又は賦形剤とを組み合わせる工程、を含む薬用組成物を製造する方法。
【請求項４５】
対象体の疾患を治療する方法であって、以下の工程、
（ａ）少なくとも１つのカテコールブタンと薬学的に許容可能な担体とを含む組成物を提供する工程、そして
（ｂ）前記組成物を前記対象体に、疾患組織に対する直接注射又は局所的適用以外の経路で投与する工程、を含む疾患を治療する方法。
【請求項４６】
前記疾患が、炎症性疾患以外である請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記疾患が、小膠細胞活性化又は刺激に関連する炎症性疾患以外である請求項４５に記載の方法。
【請求項４８】
前記疾患が、増殖性疾患である請求項４５に記載の方法。
【請求項４９】
前記増殖性疾患が、悪性、前悪性又は良性癌である請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記疾患が、ＨＩＶ感染から生じる又はそれに関連する請求項４５に記載の方法。
【請求項５１】
前記疾患が、ＨＰＶ感染から生じる又はそれに関連する請求項４５に記載の方法。
【請求項５２】
前記疾患が、ＨＳＶ感染から生じる又はそれに関連する請求項４５に記載の方法。
【請求項５３】
前記方法が、前記組成物を鼻腔内投与することを含む請求項４５〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５４】
前記方法が、前記組成物を経口投与することを含む請求項４５〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５５】
前記方法が、前記組成物を吸入によって投与することを含む請求項４５〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
前記方法が、前記組成物を皮下投与することを含む請求項４５〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
前記方法が、前記組成物を経皮投与することを含む請求項４５〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５８】
前記方法が、前記組成物を閉塞有り又は無しで、動脈内投与する工程を含む請求項４５〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５９】
前記方法が、前記組成物を頭蓋内投与することを含む請求項４５〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６０】
前記方法が、前記組成物を脳室内投与することを含む請求項４５〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６１】
前記方法が、前記組成物を静脈内投与することを含む請求項４５〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６２】
前記方法が、前記組成物を口腔投与することを含む請求項４５〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６３】
前記方法が、前記組成物を腹腔内投与することを含む請求項４５〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６４】
前記方法が、前記組成物を眼内投与することを含む請求項４５〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６５】
前記方法が、前記組成物を筋肉内投与することを含む請求項４５〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６６】
前記方法が、前記組成物を移植によって投与することを含む請求項４５〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６７】
前記方法が、前記組成物を中心静脈経由で投与することを含む請求項４５〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６８】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含む請求項５３〜６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６９】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、リン酸緩衝生理食塩水を含む請求項５３〜６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７０】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、生理食塩水を含む請求項５３〜６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７１】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、脂質系製剤を含む請求項５３〜６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７２】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、リポソーム製剤を含む請求項５３〜６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７３】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ナノ粒子製剤を含む請求項５３〜６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７４】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ミセル製剤を含む請求項５３〜６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７５】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、水溶性製剤を含む請求項５３〜９１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７６】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、生物分解性重合体を含む請求項５３〜９１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７７】
前記カテコールブタンが、請求項３４〜４１のいずれか一項に記載の式を有する請求項４５に記載の方法。
【請求項７８】
前記カテコールブタンが、テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡである請求項４５に記載の方法。
【請求項７９】
前記カテコールブタンが、テトラ−グリシニルＮＤＧＡ又はテトラ−ジメチルグリシニルＮＤＧＡである請求項４５に記載の方法。
【請求項８０】
前記カテコールブタンが、トリ−Ｏ−メチルＮＤＧＡを含む請求項４５に記載の方法。
【請求項８１】
前記カテコールブタンが、ＮＤＧＡである請求項４５に記載の方法。
【請求項８２】
前記カテコールブタンが、ＮＤＧＡ以外である請求項４５に記載の方法。
【請求項８３】
前記方法が、少なくとも二つのカテコールブタンを投与する工程を含む請求項４５に記載の方法。
【請求項８４】
前記二つのカテコールブタンが、実質的に同時に投与される請求項８３に記載の方法。
【請求項８５】
前記二つのカテコールブタンが、異なる時間に投与される請求項８３に記載の方法。
【請求項８６】
前記二つのカテコールブタンが、トリ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡ、テトラ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡ及びテトラ−グリシニルＮＤＧＡ、テトラ−ジメチルグリシニルＮＤＧＡから成るグループから選択される請求項８３に記載の方法。
【請求項８７】
前記ナノ粒子製剤が、ポリ（ＤＬ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリビニルアルコール、ｄ−α−トコフェリル  ポリエチレングリコール１０００コハク酸塩、及びポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）−モノメトキシ−ポリ（ポリエチレングリコール）から成るグループから選択される少なくとも１つを含む請求項７３に記載の方法。
【請求項８８】
前記リポソーム製剤は、ホスファチジルコリン／コレステロール／ＰＥＧ−ＤＰＰＥ、ジステアロイルホスファチジルコリン／コレステロール／ＰＥＧ−ＤＰＰＥ、及び１−２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン／１−２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）ナトリウム塩／コレステロール／トリオレイン／トリカプリリンから成るグループから選択される少なくとも１つを含む請求項７２に記載の方法。
【請求項８９】
前記癌が、固形腫瘍、リンパ腫又は白血病である請求項４９に記載の方法。
【請求項９０】
前記癌が、悪性、前悪性又は良性脳腫瘍、鼻咽頭腫瘍、頭部及び頚部腫瘍、肝臓腫瘍、腎臓腫瘍、前立腺腫瘍、乳部腫瘍、膀胱腫瘍、膵臓腫瘍、胃腫瘍、大腸腫瘍、子宮腫瘍、（子宮）頚部腫瘍、及び皮膚腫瘍及びそれらに対する転移から成るグループから選択される請求項８９に記載の方法。
【請求項９１】
前記方法が、前記組成物を一度以上投与することを含む請求項４５に記載の方法。
【請求項９２】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤は、水性製剤である請求項４５に記載の方法。
【請求項９３】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、疎水性製剤を含む請求項４５に記載の方法。
【請求項９４】
前記疎水性製剤が、脂質系賦形剤を含む請求項９３に記載の方法。
【請求項９５】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ヒマシ油、ピーナッツ油、ジメチルスルホキシド、及びその他の食物脂肪又は油から成るグループから選択される少なくとも１つを含む請求項４５に記載の方法。
【請求項９６】
前記組成物が、錠剤、散剤、ゲルカプセル剤、液剤、及び洗口液から成るグループから選択される１つの形態に製剤される請求項４５に記載の方法。
【請求項９７】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、重合体製剤を含む請求項４５に記載の方法。
【請求項９８】
前記重合体製剤が、生物分解性重合体製剤である請求項９７に記載の方法。
【請求項９９】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、一定時間に渡って、高い局所的薬剤濃度と持続的放出を許容する請求項４５に記載の方法。
【請求項１００】
前記重合体製剤が、１，３−ビス（ｐ−カルボキシフェノキシ）プロパン、セバシン酸、ポリ（エチレン−ｃｏ−酢酸ビニル）、及びポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）から成るグループから選択される少なくとも１つを含む請求項９８に記載の方法。
【請求項１０１】
前記カテコールブタンが、投与前に、生理食塩水、ＤＭＳＯ又はエタノールに溶解される請求項４５に記載の方法。
【請求項１０２】
前記組成物が、散剤、煙霧剤、水性製剤、リポソーム製剤、ナノ粒子製剤、及び疎水性製剤から成るグループから選択される少なくとも１つである請求項４５に記載の方法。
【請求項１０３】
前記組成物が、所定時間にわたって毎日投与される請求項４５に記載の方法。
【請求項１０４】
前記組成物が、間欠的に投与される請求項４５に記載の方法。
【請求項１０５】
前記カテコールブタンが、前記対象体内に注入される請求項４５に記載の方法。
【請求項１０６】
前記カテコールブタンが、水溶性化合物である請求項４５に記載の方法。
【請求項１０７】
前記カテコールブタンが、疎水性化合物である請求項４５に記載の方法。
【請求項１０８】
前記カテコールブタンが、液剤、煙霧剤、洗口液、懸濁液、錠剤、散剤、又はゲルカプセル剤として製剤される請求項４５に記載の方法。
【請求項１０９】
請求項１に記載の組成物を前記対象体に投与する工程を有し、前記ウイルス感染が、ＨＩＶ、ＨＰＶ、又はＨＳＶから生じる、又はそれに関連するものである、対象体のウイルス感染を治療する方法。
【請求項１１０】
前記カテコールブタンが、ヒトに対して、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で３７５ｍｇ／ｋｇ以下の範囲で投与される請求項４５に記載の方法。
【請求項１１１】
前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で２５０ｍｇ／ｋｇ以下である請求項１１０に記載の方法。
【請求項１１２】
前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約２００ｍｇ／ｋｇ以下である請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１３】
前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約１５０ｍｇ／ｋｇ以下である請求項１１２に記載の方法。
【請求項１１４】
前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約１００ｍｇ／ｋｇ以下である請求項１１３に記載の方法。
【請求項１１５】
前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約７５ｍｇ／ｋｇ以下である請求項１１４に記載の方法。
【請求項１１６】
前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約５０ｍｇ／ｋｇ以下である請求項１１５に記載の方法。
【請求項１１７】
前記組成物が、静脈内投与される請求項１１０〜１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１８】
前記カテコールブタンが、トリ−Ｏ−ＮＤＧＡ又はテトラ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡである請求項１１０〜１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１９】
請求項１に記載の組成物と前記組成物の投与のための取扱指示とを含む疾患治療用のキット。
【請求項１２０】
乳部、肝臓、胃、膵臓、結腸直腸、大腸及び前立腺から成るグループから選択される組織又は器官から生ずる、又は、それに関連する対象体の、悪性、前悪性又は良性腫瘍を治療する方法であって、以下の工程、
（ａ）テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡと薬学的に許容可能な担体又は賦形剤を含む組成物を提供する工程、そして
（ｂ）前記組成物を前記対象体に投与する工程、を有し、前記組成物が、前記腫瘍に対する直接注射又は局所投与以外によって投与される悪性、前悪性又は良性腫瘍を治療する方法。
【請求項１２１】
前記組成物が、経口投与される請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２２】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、油である請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２３】
前記油が、ヒマシ油又はコーン油である請求項１２２に記載の方法。
【請求項１２４】
前記組成物が、食用ミックスとして存在する請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２５】
前記組成物が、所定期間、毎日投与される請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２６】
前記組成物が、毎日、５日間以上１週間投与される請求項１２５に記載の方法。
【請求項１２７】
前記組成物が、毎日、５日間以上２週間投与される請求項１２５に記載の方法。
【請求項１２８】
前記組成物が、毎日、５日間以上３週間投与される請求項１２５に記載の方法。
【請求項１２９】
投与される前記テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡの量が、毎投与当たり少なくとも３０ｍｇである請求項１２１に記載の方法。
【請求項１３０】
投与される前記テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡの量が、毎投与当たり少なくとも９０ｍｇである請求項１２１に記載の方法。
【請求項１３１】
前記テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡが、前記組成物中において２０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する請求項１２１に記載の方法。
【請求項１３２】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、Cremaphor EL、エタノール及び生理食塩水を含む請求項１２０に記載の方法。
【請求項１３３】
前記Cremaphor EL濃度が、６％である請求項１３２に記載の方法。
【請求項１３４】
前記エタノール濃度が、６％である請求項１３２に記載の方法。
【請求項１３５】
前記生理食塩水濃度が、８８％である請求項１３２に記載の方法。
【請求項１３６】
前記対象体に投与される前記組成物が、毎投与当たり少なくとも２ｍｇのテトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡを含む請求項１３２に記載の方法。
【請求項１３７】
前記組成物が、静脈内投与される請求項１３２に記載の方法。
【請求項１３８】
前記組成物が、腹腔内投与される請求項１３２に記載の方法。
【請求項１３９】
前記組成物が、所定期間、６日間毎に一回以上の頻度で投与される請求項１３７又は１３８に記載の方法。
【請求項１４０】
前記組成物が、所定期間、２日間毎に一回以上の頻度で投与される請求項１３９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、そのそれらすべての内容をここに参考文献として合体させる、２００３年５月２０日出願の「腫瘍の治療のためのＮＤＧＡ誘導体の投与のための方法と組成物」と称する米国仮出願第６０／４７２，１８８号、２００３年５月２０日出願の「腫瘍の治療のためのＮＤＧＡ誘導体の投与のための方法と組成物」と称する米国仮出願第６０／４７２，２９９号、２００３年５月２０日出願の「神経変性疾患、障害及び状態の治療のための方法と組成物」と称する米国仮出願第６０／４７２，００８号、２００３年５月２０日出願の「神経変性疾患、障害及び状態の治療のためのＮＤＧＡ組成物と方法」と称する米国仮出願第６０／４７２，１４４号、２００３年５月２０日出願の「高血圧症、糖尿病及び肥満治療のためのＮＤＧＡ誘導体」と称する米国仮出願第６０／４７２，２８２号、の優先権を主張する。
【０００２】
発明の分野
本発明は、悪性、前悪性及び良性腫瘍の治療のための対象体に対する投与のためのカテコールブタンを含有する、キット、方法及び組成物に関する。本発明は、更に、前述の組成物の製造方法にも関する。いくつかの治療法において、単数又は複数のカテコールブタンが、疾患組織に対する直接注射以外、及び、疾患組織への局所的投与以外の投与経路で対象体に投与される。本発明は、更に、そのような投与形態及び治療に好適に製剤された単数又は複数のカテコールブタンを含む組成物にも関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
ノルジヒドロゲアヤレチック酸（“ＮＤＧＡ”）を含むカテコールブタン、及びその誘導体は、ある種の実験動物において腫瘍の成長を抑制するために使用されてきた。例えば、米国特許５，００８，２９４でジョーダン（Jordan）他は、胸腺欠損ヌードＮＣｒマウスにおいて乳癌ＭＸ−１異種移植片に対して単回投与のＮＤＧＡを使用することを記載している。１つの実験において、前記マウスの腋窩領域への１４ｍｇフラグメントのヒト乳癌の皮下移植後、１日に、その腫瘍にＮＤＧＡを投与した。ジョーダン（Jordan）他は、更に、胸腺欠損マウスのヒト乳腺癌の移植の２３日後のＮＤＧＡの局所投与について記載している。それらの実験において腫瘍の成長の抑制の証拠が観察されたが、その抗腫瘍作用が望ましいものであったか否かは不明である。
【０００４】
米国特許６，４１７，２３４号及び６，２１４，８７４号においてフアン（Huang）他は、テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡ又はＭ４Ｎと命名されたＮＤＧＡ誘導体と、Ｇ４Ｎと命名された別のＮＤＧＡ誘導体とを別々又はいっしょに、ＨＰＶ−１６形質転換不死化マウス上皮細胞（Ｃ３）を移植されたマウスに腫瘍内注射することについて記載している。フアン（Huang）他は、更に、これらＮＧＤＡ誘導体による腫瘍成長の抑制のいくつかの証拠も見出している。これらのＮＤＧＡ誘導体等のような組成物がヒトなどの他の動物に対して安全に投与可能であるか否かについては知られていない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
ＮＤＧＡ誘導体であるＭ４Ｎ等のある種のカテコールブタンは、ジメチルスルホキシド（“ＤＭＳＯ”）に溶解可能であることが判っている疎水性化合物である。ＤＭＳＯ中のＭ４Ｎの化合物を腫瘍に注入したとき、その組成物は、その腫瘍組織の全部ではないにしても、大半が浸透するようであった。その１つの可能な説明は、その組成物の疎水性によってその浸透が制限されるということである。それらの有効性を改善し、その有用性を押し広げながら、抗腫瘍活性などの、それらの生物活性を維持するようにこれらの疎水性化合物の安全な全身投与のための薬剤が発見されることが望ましい。又、前記ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンが、疾患組織に対する直接注入や局所投与以外の投与経路によって安全に投与可能となることが望ましい。
【０００６】
更に、薬剤の疾患組織への腫瘍内注射又は直接注射は理想的な治療措置ではないかもしれない。患者は、時々、注射部位に不快感をおぼえる。更に、多くの腫瘍は、治療剤の腫瘍内注射に対して適合せず、多くは、治療剤の局所投与に対して応答しないかもしれない。安全で疾患又は症状に適したものでありながら、そのような化合物の生物活性を維持するような、これらのカテコールブタンの異なった投与経路が発見されることが望ましい。
【０００７】
更に、ＮＤＧＡ及びＮＤＧＡ誘導体（集合的に、「ＮＤＧＡ化合物」）を含むカテコールブタン又はそれらを含有する製剤が人において正常組織に悪影響を与えずに腫瘍の成長又は腫瘍の成長の進行を差別的に抑制することが可能であるか否かは知られていない。前記ＮＤＧＡ化合物を含む、カテコールブタンが、正常組織に対する悪影響無く、製剤、及び投与可能となることが望まれる。
【０００８】
更に、ヒトの悪性腫瘍の多くは、原発性の悪性腫瘍が局所的に形成されるのに対して、原発腫瘍から生じるその二次腫瘍は他の組織へと全身的に広がるか、もしくは、原発源と類似の組織から新たに生じるという点において、その性質において局所的であるとともに全身的である。従って、最も適切な治療オプションは、有効な薬剤を、悪性腫瘍の原発源のみならず二次源にも送達するようなものを含む。悪性腫瘍の原発源と二次源との両方にアクセス可能な、有効治療剤が製剤可能となることが望まれている。
【０００９】
また、前記ＮＤＧＡ化合物等のカテコールブタンが、標的組織に対する送達と、その標的組織中においてある範囲の投与レベルの維持とを容易にするように製剤されることも望ましい。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
発明の要旨
従って、本発明の対象の一つは、背景に記載したもののような、従来技術の方法及び組成物の問題点に対応するような、腫瘍の予防又は治療のための方法と組成物とを提供することにある。
【００１１】
本発明の対象のもう一つは、たとえば腫瘍の成長又は腫瘍の発達又は進行を阻害するものなどの、上述した方法と組成物とを提供することにある。
【００１２】
本発明の対象の更にもう一つは、治療されるべき前記標的化組織又は疾患組織が、そのような化合物の直接注射に対して容易にアクセス可能ではないか、もしくは、その局所投与に適応しない場合において、上述したような腫瘍の予防又は治療に有効な、前記ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンを投与する単数又は複数の方法を提供することにある。
【００１３】
本発明の対象の更に一つは、標的組織に対する、前記ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンの分布の促進及び／又は最適化することができる、前記ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンを含有する単数又は複数の製剤を提供することにある。
【００１４】
本発明の対象の更にもう一つは、標的組織に対する治療のための適切な製剤における、前記ＮＤＧＡ化合物を含む、単数又は複数のカテコールブタンを含む組成物を提供することにある。
【００１５】
本発明の前記対象の一つに拠れば、動物等、例えばヒト、のような対象体の疾患を治療するための薬用組成物が提供され、前記組成物が、少なくとも１つのカテコールブタンと、薬用的に許容可能な担体又は賦形剤とを含み、前記組成物は、疾患組織に対して、直接注入又は局所的適用以外の経路によって投与されるように製剤される。
【００１６】
前記対象のもう一つに拠れば、上述した組成物であって、前記疾患、障害、又は症状が、炎症性疾患以外、例えば、小膠細胞活性化又は刺激に関連する炎症性疾患以外である。
【００１７】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した組成物であって、前記疾患は、増殖性疾患である。そのような増殖性疾患は、例えば、悪性腫瘍、前悪性症状又は良性腫瘍とすることができる。
【００１８】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した組成物であって、前記疾患は、例えば、ＨＩＶ感染、ＨＰＶ感染、又はＨＳＶ感染などの、ウイルス感染から生じる、又はそれに関連するものである。
【００１９】
前記対象のもう一つに拠れば、上述した組成物であって、該組成物が、鼻腔内投与、経口投与、遅効性又は速効性カプセル剤を介するものを含む、吸入、皮下投与、経皮投与、動脈内投与、閉塞（occlusion）有り又は無しで、頭蓋内投与、脳室内投与、静脈内投与、口腔投与、腹腔内投与、眼内投与、中心静脈投与、筋肉内投与、又は移植用に製剤された組成物が提供される。
【００２０】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した組成物であって、前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、生理食塩水、油、例えば、ヒマシ油またはコーン油、Cremaphor PL、及びエタノール、又はそのような単数又は複数を含有する混合物を含む。
【００２１】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した組成物であって、前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、脂質系製剤、リポソーム系製剤、ナノ粒子製剤、ミセル製剤、水溶性製剤、Cremaphor EL／エタノール／生理食塩水製剤、又は、上述のいずれかを生体内分解性高分子中に含む。
【００２２】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した組成物であって、前記カテコールブタンが、以下の構造式を有する。
【００２３】
【化２】
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【００２４】
ここで、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、アルキレン又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈ又は低級アルキルであり、そして、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−Ｈ、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又は任意の隣接する二つの基が共にジオキシ  アルキエン（alkyene dioxy）とすることができ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩である。
【００２５】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールアミンであって、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、Ｒ３、Ｒ４が、独立的に、低級アルキルであり、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈであり、Ｒ７，Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−Ｈ、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩とすることができる。
【００２６】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールアミンであって、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、Ｒ３、Ｒ４が、独立的に、低級アルキルであり、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈであり、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩とすることができる。
【００２７】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールブタンであって、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−ＣＨ３又は−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又はその塩である。
【００２８】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールブタンであって、Ｒ８とＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３又は−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又はその塩である。
【００２９】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールブタンであって、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−ＣＨ３又は−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又は、−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ＋Ｈ（ＣＨ３）２．Ｃｌ−であり、そしてＲ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又は、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ＋Ｈ（ＣＨ３）２．Ｃｌ−である。
【００３０】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールブタンであって、該カテコールブタンがＮＤＧＡではないことを条件として、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、又は、−ＣＨ３であり、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＨ、又は、−ＯＣＨ３である。
【００３１】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールブタンであって、Ｒ１とＲ２が、独立的に、−ＣＨ３であり、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３である。
【００３２】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールブタンであって、該カテコールブタンがＮＤＧＡである。
【００３３】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールブタンであって、該カテコールブタンがＮＤＧＡ以外である。
【００３４】
前記対象の更にもう一つに拠れば、カテコールブタンを含有する薬用組成物を製造する方法が提供され、前記方法は、（ａ）上述したカテコールブタンを提供する工程と、（ｂ）上述した薬学的に許容可能な担体又は賦形剤とを提供する工程と、（ｃ）前記カテコールブタンと前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤とを組み合わせる工程とを含む。
【００３５】
前記対象の更にもう一つに拠れば、対象体の疾患を治療する方法が提供され、前記治療法は、上述した薬用組成物を提供する工程と、前記組成物を前記対象体に、腫瘍への直接注射又は腫瘍への局所投与以外の経路で投与する工程とを含む。
【００３６】
前記対象のもう一つに拠れば、上述した治療法であって、前記疾患が、炎症性疾患以外、例えば、小膠細胞活性化又は刺激に関連する炎症性疾患以外である。
【００３７】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療法であって、前記疾患は、悪性腫瘍、前悪性症状又は良性腫瘍等の増殖性疾患である。
【００３８】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療法であって、前記疾患は、例えば、ＨＩＶ感染、ＨＰＶ感染、又はＨＳＶ感染などの、ウイルス感染から生じる、又はそれに関連するものである。
【００３９】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記組成物が、鼻腔内投与、経口投与、遅効性又は速効性カプセル剤を介するものを含む、吸入、皮下投与、経皮投与、動脈内投与、閉塞有り又は無しで、頭蓋内投与、脳室内投与、静脈内投与、口腔投与、腹腔内投与、眼内投与、中心静脈投与、筋肉内投与又は移植用に製剤される。
【００４０】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記薬学的許容可能な担体又は賦形剤が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、生理食塩水、ヒマシ油やコーン油などの油、Cremaphor PL、及びエタノールまたはこれらの任意の組み合わせを含む。
【００４１】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記薬学的許容可能な担体または賦形剤が、脂質系製剤、リポソーム製剤、ナノ粒子製剤、ミセル製剤、水溶性製剤、Cremaphor EL／エタノール／生理食塩水製剤、又は、上述のいずれかを生物分解性重合体中に含む。
【００４２】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが上記式を有する。
【００４３】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡである。
【００４４】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、テトラ−ジメチルグリシニルＮＤＧＡである。
【００４５】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、トリ−Ｏ−メチルＮＤＧＡである。
【００４６】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、ＮＤＧＡである。
【００４７】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、ＮＤＧＡ以外である。
【００４８】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記方法が、少なくとも二つのカテコールブタンを投与する工程を含む。
【００４９】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記二つのカテコールブタンが、実質的に同時に投与される。
【００５０】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記二つのカテコールブタンが、異なる時間に投与される。
【００５１】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記二つのカテコールブタンは、テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡ、トリ−Ｏ−メチルＮＤＧＡ及びテトラ-ジメチルグリシニルＮＤＧＡから成るグループから選択される。
【００５２】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記ナノ粒子製剤が、ポリ（ＤＬ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリビニルアルコール、ｄ−α−トコフェリル  ポリエチレングリコール  １０００  コハク酸塩及びポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）−モノメトキシ−ポリ（ポリエチレングリコール）から成るグループから選択される少なくとも１つを含む。
【００５３】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記リポソーム製剤が、ホスファチジルコリン／コレステロール／ＰＥＧ−ＤＰＰＥ、ジステアロイルホスファチジルコリン／コレステロール／ＰＥＧ−ＤＰＰＥ、及び１−２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン／１−２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−rac−（１−グリセロール）ナトリウム塩／コレステロール／トリオレイン／トリカプリリンから成るグループから選択される少なくとも１つを含む。
【００５４】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記疾患は癌であり、前記癌は、固形腫瘍、リンパ腫又は白血病である。
【００５５】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記疾患は、悪性、前悪性又は良性脳腫瘍、鼻咽頭腫瘍、頭部及び頚部腫瘍、肝臓腫瘍、腎臓腫瘍、前立腺腫瘍、乳部腫瘍、膀胱腫瘍、膵臓腫瘍、胃腫瘍、結腸腫瘍、子宮腫瘍、（子宮）頚部腫瘍、皮膚腫瘍、及びそれらに対する転移、から成るグループから選択される。
【００５６】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記方法が、前記組成物を一度以上投与する工程を含む。
【００５７】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記薬学的許容可能な担体又は賦形剤が、水性製剤である。
【００５８】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記薬学的許容可能な担体又は賦形剤が、疎水性製剤である。
【００５９】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記疎水性製剤が、脂質系賦形剤を含む。
【００６０】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記薬学的許容可能な担体又は賦形剤が、ヒマシ油、ピーナッツ油、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、及びその他の食事性脂肪又は油から成るグループから選択される少なくとも１つを含む。
【００６１】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記組成物が、錠剤、散剤、ゲルカプセル剤、液剤、及び洗口剤から成るグループから選択される１つの形態に製剤される。
【００６２】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記薬学的許容可能な担体又は賦形剤が、重合体製剤を含む。
【００６３】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記重合体製剤が、生物分解性重合体製剤である。
【００６４】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記薬学的許容可能な担体又は賦形剤が、一定時間に渡って、高い局所的薬剤濃度と持続的放出を許容する。
【００６５】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記重合体製剤が、１，３−ビス（ｐ−カルボキシフェノキシ）プロパン、セバシン酸、ポリ（エチレン−ｃｏ−酢酸ビニル）及びポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）から成るグループから選択される少なくとも１つを含む。
【００６６】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、投与前に、食塩水、ＤＭＳＯ又はエタノールに溶解される。
【００６７】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記組成物が、散剤、煙霧剤、水性製剤、リポソーム製剤、ナノ粒子製剤、及び疎水性製剤から成るグループから選択される少なくとも１つである。
【００６８】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記組成物が、所定時間に渡って毎日投与される。
【００６９】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記組成物が、間欠的に投与される。
【００７０】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、前記対象体内に注入される。
【００７１】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、水溶性化合物である。
【００７２】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、疎水性化合物である。
【００７３】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、液剤、煙霧剤、洗口剤、懸濁液、錠剤、散剤、又はゲルカプセル剤として製剤される。
【００７４】
前記対象の更にもう一つに拠れば、対象体のウイルス感染の治療方法が提供され、請求項１に記載の組成物を前記対象体に投与する工程を有し、前記ウイルス感染は、ＨＩＶ、ＨＰＶ又はＨＳＶから生じる、又は、に関連する。
【００７５】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、ヒトに対して、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で３７５ｍｇ／ｋｇ以下の範囲で投与される。
【００７６】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記範囲は、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で２５０ｍｇ／ｋｇ以下の範囲で投与される。
【００７７】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約２００ｍｇ／ｋｇ以下である。
【００７８】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約１５０ｍｇ／ｋｇ以下である。
【００７９】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約１００ｍｇ／ｋｇ以下である。
【００８０】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約７５ｍｇ／ｋｇ以下である。
【００８１】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約５０ｍｇ／ｋｇ以下である。
【００８２】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記組成物が、例えば静脈内投与などで、全身投与される。
【００８３】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、トリ−Ｏ−ＮＤＧＡ又はテトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡである。
【００８４】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述の疾患治療用のキットが提供され、これは、上述した薬用組成物と該組成物の投与の取扱指示とを含む。
【００８５】
前記対象の更にもう一つに拠れば、対象体の腫瘍を治療する方法が提供され、前記腫瘍が、悪性、前悪性又は良性腫瘍であり、そして、前記腫瘍が、乳部、肝臓、胃、膵臓、結腸直腸、大腸、前立腺から成るグループから選択される組織又は器官から生じる又は関連するものであり、前記方法は、（ａ）テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡ （Ｍ４Ｎ）と薬学的に許容可能な担体又は賦形剤を含む組成物を提供する工程と、（ｂ）前記組成物を前記対象体に投与する工程とを有し、前記組成物は、前記腫瘍に対する直接注射又は局所投与以外によって投与される。
【００８６】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した腫瘍治療法であって、前記方法は、前記組成物を経口投与する工程を含み、前記経口組成物は、遅効性又は速効性製剤とすることができる。
【００８７】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述の腫瘍治療用の方法であって、前記薬学的許容可能な担体又は賦形剤が、ヒマシ油、又はコーン油などの油である。
【００８８】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述の腫瘍治療用の方法であって、前記組成物が、食用混合物（mix）として提供される。
【００８９】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述の腫瘍治療用の方法であって、前記カテコールブタン組成物は、例えば、毎日５日以上１週間、毎日５日以上２週間、毎日５日以上３週間等、所定の期間にわたって毎日投与される。
【００９０】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述の腫瘍治療用の方法であって、投与される前記テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡの量が、毎投与当たり少なくとも３０ｍｇ、或いは、選択的に、毎投与当たり少なくとも９０ｍｇである。
【００９１】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述の腫瘍治療用の方法であって、前記組成物中においてテトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡが、２０ｍｇ／ｍＬの濃度で含まれる。
【００９２】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述の腫瘍治療用の方法であって、前記薬学的許容可能な担体又は賦形剤が、Cremaphor EL、エタノール及び生理食塩水を含み、Cremaphor ELは約６％の濃度で含有可能であり、エタノールは約６％の濃度で含有可能であり、そして生理食塩水は約８８％の濃度で含有可能である。
【００９３】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述の腫瘍治療用の方法であって、前記対象体に投与される前記組成物が、毎投与当たり少なくとも２ｍｇのテトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡを含む。
【００９４】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述の腫瘍治療用の方法であって、前記組成物が、静脈内又は腹腔内投与される。
【００９５】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述の腫瘍治療用の方法であって、前記組成物が、所定期間にわたって６日間毎に一回、又は、選択的に、所定期間にわたって２日間毎に一回、以上の頻度で投与される。
【００９６】
本発明のその他の対象、特徴及び利点は、本記載を読むことによって当業者に明らかとなるであろう。そのような他の対象、特徴及び利点も、本発明によって実施されるものと理解される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００９７】
図面の簡単な説明
図１は、静脈内および腹腔内注射の３時間後における種々の器官へのＭ４Ｎの全身分布を示している。マウスに、１００μＣｉの３Ｈ−Ｍ４Ｎと６０ｍＭの未標識Ｍ４Ｎとを注射した。注射の３時間後に器官と血液を収集、及び計量し、Ｍ４Ｎを抽出した。これら器官抽出物のトリチウム含有率を測定し、各器官中のＭ４Ｎの量を、接種物の比活性に基づいて計算した。図１Ａは、比較的高い量のＭ４Ｎを含む各器官に見られた、１グラムの組織当たりのＭ４Ｎのマイクログラム単位の量を示している。図１Ｂは、比較的低い量のＭ４Ｎを含む器官を示している。
【００９８】
図２は、種々の時点におけるＭ４Ｎの全身組織分布プロファイルを図示している。マウスに、１００μＣｉの３Ｈ−Ｍ４Ｎと６０ｍＭの未標識のＭ４Ｎとを注射した。注射の４，６，１８時間後と６日後とに器官と血液を収集、及び計量し、Ｍ４Ｎを抽出した。これら器官抽出物のトリチウム含有率を測定し、各器官中のＭ４Ｎの量を、接種物の比活性に基づいて算出した。
【００９９】
図３は、明白な毒性を示していない、Ｍ４Ｎの長期経口給飼中のマウスの体重を示している。オスとメスのマウスに、９ｇの重さで、２８０ｍｇのＭ４Ｎを含有するフードボールを１４週間、連続給飼した。平均で、マウスは、一日当たり、９３．３ｍｇのＭ４Ｎを消費した。対照マウスには、Ｍ４Ｎを含有しないフードボールを給飼した。体重を周期的に記録した。
【０１００】
図４は、Ｍ４Ｎによる治療がヒト腫瘍異種移植片の生体内成長を阻害することを示している。無胸腺ヌードマウスに、ｓ．ｃ．で、各脇側に、ＭＣＦ−７乳腺癌細胞と、Ｈｅｐ３Ｂ肝細胞癌細胞、ＨＴ−２９結腸直腸癌細胞、及びＬＮＣａＰ前立腺癌細胞、を移植した。腫瘍が７〜８ｍｍの平均直径に達した時、マウスは、１００μＬのCremaphor−エタノール系溶液中に溶解した２ｍｇのＭ４Ｎを含有する注射を一日一回ｉ．ｐ．で、三週間にわたって受けた。対照マウスは溶媒のみを受けた。腫瘍を、７日毎に一度、二方向の垂直寸法（ＬとＷ）において測定し、腫瘍体積を式によって算出した。
【０１０１】
【数１】
2007500229.tif 000004
【０１０２】
図５は、異なる時点において異なる投与量のＭ４Ｎを与えられた犬におけるＭ４Ｎ血清濃度を示している。
【０１０３】
図６は、脳腫瘍の治療のための脳への前記ＮＤＧＡ誘導体の送達の種々の態様の具体例の略図である。Ｍ４Ｎは、親水性ＮＤＧＡを示し、Ｇ４Ｎは親油性ＮＤＧＡを示す。ＯＤは脳血液関門の浸透性崩壊を示す。ＳＣは、皮下投与を示す。ＩＰは腹腔内投与を示す。ＩＭは、筋肉内投与を示す。
【０１０４】
図７は、腫瘍の治療のための、脳以外の組織への前記ＮＤＧＡ誘導体の送達の種々の態様の具体例の略図である。Ｍ４Ｎは、親水性ＮＤＧＡを示し、Ｇ４Ｎは親油性ＮＤＧＡを示す。ＳＣは、皮下投与を示す。ＩＰは腹腔内投与を示す。ＩＭは、筋肉内投与を示す。
【０１０５】
表１．全身組織分布におけるＭ４Ｎの経口投与の結果。（Ａ）Ｍ４Ｎの短期経口給飼。三匹のマウスに、ひまし油に溶解させた３０ｍｇのＭ４Ｎを給飼した。給飼の２、４及び８時間後、組織を取り出し、計量した。次に、組織中に存在するＭ４Ｎの量を、ＨＰＬＣによって定量化した。（Ｂ）Ｍ４Ｎの長期経口給飼。マウスに、９ｇの重さで、２８０ｍｇのＭ４Ｎを含有するフードボールを１４週間、連続給飼した。平均で、マウスは、一日当たり、９３．３ｍｇのＭ４Ｎを消費した。組織中に存在するＭ４Ｎの量を、ＨＰＬＣによって定量化した。
【０１０６】
表２．Ｍ４Ｎによる治療がヒト腫瘍異種移植片の生体内成長を阻害する。無胸腺ヌードマウスに、ｓ．ｃ．で、各脇側に、ＭＣＦ−７乳腺癌細胞と、Ｈｅｐ３Ｂ肝細胞癌細胞、ＨＴ−２９結腸直腸癌細胞、及びＬＮＣａＰ前立腺癌細胞、を移植した。腫瘍が７〜８ｍｍの平均直径に達した時、マウスは、１００μＬのCremaphor−エタノール系溶液中に溶解した２ｍｇのＭ４Ｎを含有する注射を一日一回ｉ．ｐ．で、三週間にわたって受けた。対照マウスは溶媒のみを受けた。腫瘍を、７日毎に一度、二方向の垂直寸法（ＬとＷ）において測定し、腫瘍体積を式によって算出した。
【０１０７】
【数２】
2007500229.tif 000005
【０１０８】
表３．２１日間の治療後のすべての腫瘍の腫瘍寸法変化。無胸腺ヌードマウスに、ｓ．ｃ．で、各脇側に、ＭＣＦ−７乳腺癌細胞と、Ｈｅｐ３Ｂ肝細胞癌細胞、ＨＴ−２９結腸直腸癌細胞、及びＬＮＣａＰ前立腺癌細胞、を移植した。腫瘍が７〜８ｍｍの平均直径に達した時、マウスは、１００μＬのCremaphor−エタノール系溶液中に溶解した２ｍｇのＭ４Ｎを含有する注射を一日一回ｉ．ｐ．で、三週間にわたって受けた。対照マウスは溶媒のみを受けた。腫瘍を、７日毎に一度、二方向の垂直寸法（ＬとＷ）において測定し、腫瘍体積を式によって算出した。
【０１０９】
【数３】
2007500229.tif 000006
【０１１０】
発明の開示
本発明者等は、下記の式のカテコールブタンを発見した。
【０１１１】
【化３】
2007500229.tif 000007
【０１１２】
ここで、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、アルキレン又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈ又は低級アルキルであり、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−Ｈ、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又は任意の隣接する二つの基が共にジオキシアルキエンであってもよく、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩である、が腫瘍へ直接注射又は腫瘍部位へ局所投与された時に、癌などの増殖性疾患の治療に有用である。そのようなカテコールブタンを、薬剤的に許容可能な担体又は賦形剤と組み合わせて、多様な投与経路用に製剤可能な薬用組成物を作り出すことができる。
【０１１３】
本発明の別実施形態において、前記カテコールブタンは、上記式を有し、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、Ｒ３、Ｒ４が、独立的に、低級アルキルであり、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈであり、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立的に、−Ｈ、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩である。
【０１１４】
本発明の更に別の実施形態において、前記薬用組成物は上記式を有し、ここで、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、Ｒ３、Ｒ４が、独立的に、低級アルキルであり、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈであり、Ｒ８及びＲ９は、独立的に、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩である。
【０１１５】
本発明の更に別の実施形態において、前記薬用組成物は上記式を有し、ここで、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−ＣＨ３又は−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又はその塩である。
【０１１６】
本発明の更に別の実施形態において、前記薬用組成物は上記式を有し、ここで、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３又は−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又はその塩である。
【０１１７】
本発明の更に別の実施形態において、前記薬用組成物は上記式を有し、ここで、Ｒ１及びＲ２とは、独立的に、−ＣＨ３又は−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又は、−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ＋Ｈ（ＣＨ３）２．Ｃｌ−であり、そしてＲ８及びＲ９とは、独立的に、−ＯＣＨ３、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又は、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ＋Ｈ（ＣＨ３）２．Ｃｌ−である。
【０１１８】
本発明の更に別の実施形態において、前記薬用組成物は上記式を有し、ここで、該カテコールブタンがＮＤＧＡではないことを条件として、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ又は−ＣＨ３であり、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＨ又は−ＯＣＨ３である。
【０１１９】
本発明の更に別の実施形態において、前記薬用組成物は上記式を有し、ここで、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−ＣＨ３であり、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３である。
【０１２０】
本発明の更に別の実施形態において、前記カテコールブタンはＮＤＧＡである。本発明の更に別の実施形態において、前記カテコールブタンはＮＤＧＡ以外である。
【０１２１】
【化４】
2007500229.tif 000008
【０１２２】
本発明者は、少なくとも１つのＮＤＧＡ誘導体の実質的に純粋な調製物を含む組成物が、この組成物が疾患又は標的部位への直接注射以外、及び疾患組織への局所適用以外の経路で投与された時に、腫瘍等の増殖性疾患の治療に有効であるという驚くべき発見をした。ここでの前記ＮＤＧＡ化合物は、上述の式を有し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、独立的に−ＯＨ、−ＯＨ３のような低級アルコキシ、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ３のような低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であるが、夫々が同時に−ＯＨではなく、Ｒ５、Ｒ６が、独立的に、−Ｈ又はアルキル、例えば、−ＣＨ３又は−ＣＨ２ＣＨ３のような低級アルキル、を表す。一実施形態において、Ｒ５及びＲ６が、共に、−Ｈ, −ＣＨ３又は−ＣＨ２ＣＨ３とすることができる。
【０１２３】
前記ＮＤＧＡを含む適当な製剤形態における本発明のカテコールブタンは、鼻腔内投与によってそのような治療を必要とする単数又は複数の対象体に安全に投与することができる。或いは、選択的に、カテコールブタン又はＮＤＧＡは、吸入によって投与することができる。更に選択的に、そのようなカテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物は、たとえば食物と混合することによって、口腔投与等の経口的又は眼内投与によって投与することができる。更に、前記カテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物は、例えば、濯ぐ−そして−吐く治療（rinse-and-spit）における、洗口剤として、一日に単数又は複数回投与することができる。
【０１２４】
本発明者等は、更に、前記カテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物は、リポソーム系製剤、ナノ粒子製剤、又は、ミセル製剤として、追加的に、安全に全身的に、例えば、中心静脈への注射等による静脈内、又は腹腔内、間質内、皮下、経皮、筋肉内、動脈内、頭蓋内、又は脳室内によって投与することができるということを発見した。
【０１２５】
更に、前記カテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物を、そのような治療を必要とする対象体用に、生体内分解性高分子中に埋め込まれた、リポソーム系製剤、ナノ粒子製剤又は、ミセル製剤、又は任意の製剤に製剤することが可能である。例えば、脳への移植が、脳の腫瘍の治療のために使用することができる。
【０１２６】
本発明の一実施形態において、ここに記載の目的のための投与経路は、非経口（parenteral）投与以外によるものであり、ここで、非経口投与とは、静脈内、静脈内、動脈内、筋肉内、皮下、経皮、及び腹腔内投与を意味する。
【０１２７】
本発明は、腫瘍などの増殖性疾患の治療用の、カテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物を含有する薬用組成物を提供し、ここで、前記組成物は、例えば、錠剤、親水性又は疎水性のいずれかである液剤、凍結乾燥から生じるものなどの散剤、煙霧剤、の形態で、又は、水性水溶性組成物、疎水性組成物、リポソーム組成物、ミセル組成物、例えばＴｗｅｅｎ８０又はジブロック共重合体をベースとするもの、ナノ粒子組成物、重合体組成物、シクロデキストリン錯体組成物、エマルジョン、「リポコア（lipocores）」と称される脂質系ナノ粒子、の形態で、上述の投与経路用に製剤される。
【０１２８】
本発明は、更に、本発明の前記薬用組成物を製造する方法を提供し、前記方法は、前記カテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物を実質的に純粋な形態で提供する工程と、前記組成物を薬学的許容可能な担体又は賦形剤と組み合わせる工程と、前記組成物を、所望の投与形態に適合するように製剤する工程とを含む。
【０１２９】
本発明の更に別の態様において、上述した腫瘍の治療法であって、前記腫瘍が、肺、前立腺、乳部、大腸、肝臓、腎臓、卵巣、（子宮）頚部、皮膚、膵臓、脳、白血病、リンパ腫、胃等の胃腸腫瘍、軟部組織肉腫、等から成るグループから選択される、腫瘍の治療法が提供される。
【０１３０】
本発明は、更に、腫瘍のような増殖性疾患のための治療のための上述の組成物又は製剤、ここで前記組成物は、鼻腔内投与、吸入、経口投与、静脈内投与、腹腔内投与、及びその他の非経口投与、又は、洗口剤として等を含む、上述した送達用に製剤されるものである、と、そのような投与のための取扱指示とを含む、キットを提供する。
【０１３１】
特に別の定義がされない限り、ここに使用される全ての技術及び科学用語は、本発明が属する技術の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本発明は、以下の特定の意味に鑑みてより良く理解されるであろう。
【０１３２】
定義
ここでの使用において「活性剤」、「化合物」及び「薬剤」という用語は、ＮＤＧＡ及びＮＤＧＡ誘導体を含む単数又は複数のカテコールブタンを意味する。
【０１３３】
ここでの使用において「ジオキシ  アルキレン」という用語は、ジオキシ  メチレン（又は置換メチレン）、又はジオキシ  エチレン（又は置換エチレン）を意味する。
【０１３４】
ここで、前記カテコールブタンに関する式中のＲ基の１つに言及して使用される「アミノ酸残基又はその置換物又は塩」という用語は、非限定的に、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリジン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニールアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、３−メチルヒスチジン、ε−Ｎ−メチルリジン、ε−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルリジン、アミノアジピン酸、γ−カロキシグルタミン酸、ホスホセリン、ホスホトレオニン、ホスホチロシン、Ｎ−メチルアルギニン、Ｎ−アセチルリジン、及びＮ，Ｎ−ジメチル置換アミノ酸残基又はその塩を含む、アミノ酸、置換アミノ酸、またはアミノ酸残基又は置換アミノ酸残基の塩、例えば塩化物塩である。
【０１３５】
「低級アルキル」という用語は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味する。
【０１３６】
「低級アシル」という用語は、Ｃ１−Ｃ６アシルを意味する。
【０１３７】
「ＮＤＧＡ化合物」という用語は、ＮＤＧＡおよび／又はその誘導体、を別々又は総称的に意味する。
【０１３８】
「ＮＤＧＡ誘導体」という用語は、それぞれが下記の式を有する単数又は複数の化合物を意味する。
【０１３９】
【化５】
2007500229.tif 000009
【０１４０】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、独立的に−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であるが、夫々が同時に−ＯＨではなく、Ｒ５、Ｒ６が、独立的に、−Ｈ又は低級アルキルのようなアルキルである。前記用語は、例えば、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４が、それぞれ−ＯＣＨ３、又は、それぞれが−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ３であり、Ｒ５、Ｒ６が、それぞれが−Ｈ又は−低級アルキルである。本発明の一実施形態において、Ｒ５、Ｒ６が、それぞれ−ＣＨ３又は−ＣＨ２ＣＨ３である。
【０１４１】
ここで、前記カテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物に言及する「実質的に純粋な」化合物とは、本発明の前記カテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物ではない化合物（以下、「非ＮＤＧＡ物質」）を実質的に含まないものを意味する。実質的に含まないとは、少なくとも５０％、好ましくは少なくとも７０％、更に好ましくは少なくとも８０％、更に好ましくは少なくとも９０％が非ＮＤＧＡ物質を含まないことを意味する。
【０１４２】
ここでの使用に適した「緩衝剤」は、トリス、リン酸、イミダゾール、重炭酸塩、等の当該技術における任意の従来の緩衝剤を含む。
【０１４３】
ここでの使用において、「治療」、「治療する」等の用語は、所望の薬理学および／又は生理学的効果を得ることを意味する。前記効果は、症状、疾患又はその徴候を完全又は部分的に防止する意味において予防的なものであってよく、及び／又は、症状又は疾患及び／又はその病状又は疾患に起因する有害作用の部分的又は完全な治癒の意味において治療的なものであってもよい。従って、「治療」は、哺乳動物、特にはヒト、の症状又は疾患の任意の治療をカバーし、（ａ）そのような症状または疾患を生まれつき有するかもしれないが、まだそれ有するものと診断されたことのない対象体においてそのような症状又は疾患が発生することを防止すること、（ｂ）そのような症状又は疾患の抑制、例えば、その発達の阻止、そして（ｃ）そのような症状又は疾患の緩和、軽減又は改善、例えば、そのような症状又は疾患の緩解、を含む。
【０１４４】
「薬剤的に許容可能な担体」とは、任意の従来タイプの、非毒性固体、半固体、液体充填剤、希釈剤、カプセル剤化剤、又は補助製剤を意味する。「薬剤的に許容可能な担体」は、使用される投与量及び濃度で受容者に対して非毒性であり、前記製剤のその他の成分と互換性のものである。例えば、本発明のカテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物を含有する製剤用の担体は、酸化剤や、そのようなものに対して有害であることが知られているその他の化合物を含まない。適当な担体は、非限定的に、水、ブドウ糖、グリセロール、生理食塩水、エタノール、緩衝剤、ジメチルスルホキシド、Cremaphor EI、及びこれらの組み合わせ、を含む。前記担体は、湿潤剤又は乳化剤又はｐＨ−緩衝剤、等の追加の物質を含むことができる。必要であれば、酸化防止剤、湿潤剤、粘度安定化剤、その他類似の物質を添加することができる。
【０１４５】
ここで、薬剤的に許容可能な塩は、例えば、塩酸塩やリン酸塩などの無機酸塩、又は、酢酸、マンデル酸、シュウ酸、酒石酸等の有機酸によって形成される酸付加塩（ポリペプチドの遊離アミノ基で形成される）を含む。前記遊離カルボキシル基で形成される塩は、例えば、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、又は水酸化鉄などの無機塩、及び、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、２−エチルアミノエタノール及びヒスチジンなどの有機塩から導くこともできる。
【０１４６】
「薬剤的に許容可能な賦形剤」という用語は、容易に大衆にとって入手可能な、当該技術において従来のものなどの、溶媒（vehicle）、アジュバント、又は希釈剤、又はその他の補助物質、を含む。例えば、薬学的に許容可能な補助物質には、ｐＨ調整及び緩衝剤、緊張調整剤、安定化剤、湿潤剤等を含む。
【０１４７】
ここで、互換的に使用される「対象体」、「ホスト」及び「患者」は、本発明の組成物によって治療される動物を称し、非限定的に、猿、ヒト、ネコ、イヌ、ウマ、ウシ、ブタ、羊、ヤギ、哺乳家畜動物、哺乳スポーツ動物、哺乳ペット動物を含む。
【０１４８】
本発明を更に記載する前に、本発明は、ここに記載される実施形態に限定されるものではなく、勿論、改変可能である、と理解される。又、ここで使用される用語は、特定の実施形態を記載する目的のものであって、本発明の範囲は貼付のクレームによってのみ限定されるものであることから、限定を意図するものではないことも理解される。
【０１４９】
ある範囲の値が提供される場合、特に明確に記載されていない限り、その範囲の上限と下限との間の、下限の単位の１／１０までの各中間値、及び、その記載におけるいずれかの他の記載又は介入値が本発明の範囲に含まれると理解される。これらのより小さな範囲の上限及び下限は、その記載の範囲から特に具体的に除外されている限界値を除き、独立的にその小さな範囲に含まれ、従って、本発明の範囲に含まれる。記載の範囲がそれらの限界値の一方又は両方を含む場合、それらの含まれる限界値の一方又は両方を除く範囲も、本発明に含まれる。
【０１５０】
特許、特許出願、及び定期刊行物の記事を含む、ここに記載する全ての刊行物は、それらもここに参考文献として合体させるその中において引用されている文献を含めて、その全体がここに参考文献として合体される。
【０１５１】
ここでの使用において、“a”，“an”，“the”の単数形は、文脈からそうでないことが明らかである場合を除き、複数形も含むものであることが銘記されなければならない。したがって、例えば、“a compound”（「化合物」）は、複数のそのような化合物を含み、“the NDGA Compound” （「ＮＤＧＡ化合物」）は、単数又は複数のＮＤＧＡ化合物と、当業者に知られているそれらの均等物とに対する言及を含む。
【０１５２】
ここに記載の刊行物は、本出願の出願前にそれらを開示することを唯一の目的として提供されるものである。ここに記載のいずれも、本発明が前の発明によってそのような刊行物よりも以前のものである権利を有さないことの自白として解釈されてはならない。更に、提供される刊行物の日付は、独立的に確認を必要するかもしれない実際の公開日とは異なっているかもしれない。
【０１５３】
以下に記載する発明は、例示的にのみ提供されるものであって、いかなる意味においても本発明を限定するものと解釈されるものではない。
【０１５４】
カテコールブタンの調製
本発明のカテコールブタンは、任意の従来方法によって調製することができる。例えば、そのような化合物は、米国特許５，００８，２９４号に記載されているように調製することができる。
【０１５５】
ＮＤＧＡ化合物の調製
前記ＮＤＧＡ化合物及びその製剤は、任意の従来式の方法によって製造することができる。例えば、前記ＮＤＧＡ化合物は、米国特許５，００８，２９４号（ジョーダン（Jordan）他，１９９１年４月１６日発行）、米国特許６，２９１，５２４号（フアン（Huang）他、２００１年９月１８日発行）、フー，ジェイ・アール（Hwu, J.R.）(1998）又はマクドナルド，アール・ダブリュ（McDonald, R.W.）他 (2001）に記載されているように製造することができる。
【０１５６】
本発明の一実施形態において、ＮＤＧＡ化合物、テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡ、メソ−１，４−ビス（３，４−ジメトキシフェニル）−２−３−ジメチルブタン、又はＭ４Ｎとしても知られている、は、以下のように製造される。反応フラスコ内で、メタノール中にＮＤＧＡと水酸化カリウムとを含む溶液を製造する。次に、この反応フラスコに硫酸ジメチルを添加し、反応を進行させる。反応を水によって最終的に終わらせ、生成物を沈殿させる。この沈殿物を、濾過によって分離し、真空炉内で乾燥させる。次に、この化合物を、塩化メチレンとトルエンの溶液に溶解させ、その後、アルミナカラムを通して精製する。溶媒を、回転蒸発によって除去し、固形物をイソプロバノール中で再懸濁させ、濾過によって分離する。濾滓を真空炉内で乾燥させる。得られたテトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡ（Ｍ４Ｎ）を、前記濾滓をイソプロパノール中で還流させることによって結晶化させ、結晶を濾過によって分離する。
【０１５７】
本発明のいくつかの実施形態において、メソ１，４−ビス[３，４−（ジメチルアミノアセトキシ）フェニル]−（２Ｒ，３Ｓ）−ジメチルブタンとしても知られているＧ４Ｎや、時として、テトラグリシナルＮＤＧＡとしても知られているテトラ−ジメチルグリシニルＮＤＧＡ、等の本発明のある種のＮＤＧＡ化合物、又は、その塩酸塩、及びアミノ酸置換物を有する類似の化合物、も、例えば、米国特許６，４１７，２３４に記載されているもののような従来方法によって調製することができる。
【０１５８】
組成物
本発明は、更に、前記ＮＤＧＡ化合物と、薬剤的に許容可能な担体又は賦形剤を含む前記カテコールブタンを有する、薬用組成物も提供する。これらの組成物は、前記カテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物の所望の利用法に応じて選択可能な緩衝剤を含むことができ、更に、その意図される利用法に適したその他の物質も含むことができる。当業者は、意図される利用法に適した、多種多様なものが知られている緩衝剤を、容易に選択することができる。いくつかの場合、前記組成物は、多様なものが知られている薬剤的に許容可能な賦形剤を含むことができる。ここでの利用法に適した薬学的に許容可能な賦形剤は、例えば、エイ・ジェンナーロ（A. Gennaro）(1990）；アンセル，エイチ・シー（Ansel, H.C.）他 (1999）；およびキッベ，エイ・エイチ（Kibbe, A.H.）(2000）を含む、種々の刊行物に記載されている。
【０１５９】
ここでの前記組成物は、想定される投与形態に応じて製剤される。従って、もしも組成物が鼻腔内又は吸入によって投与されることが意図される場合、例えば、前記組成物を、そのような目的のために、従来行われているように、散剤又は煙霧剤に変えることができる。例えば、経口又は非経口投与などのその他の製剤も、従来と同様に使用される。
【０１６０】
ここでの投与用の組成物は、溶液、懸濁液、錠剤、丸剤、カプセル剤、持効性製剤又は散剤の形態とすることができる。
【０１６１】
治療法
本発明の前記ＮＤＧＡ化合物組成物を含む前記カテコールブタンは、悪性、前悪性又は良性腫瘍などの増殖性疾患を有する対象体に対する治療を提供することが望まれる状況、そして、ＨＩＶ、ＨＰＶ又はＨＳＶ等のウイルス性疾患に対して治療を提供することが望まれる状況において治療剤としての使用が見出された。
【０１６２】
本発明の方法によって、ヒト及びヒト以外の動物を含む、多様な動物ホストを治療することが可能である。一般に、それらのホストは、「哺乳類（mammal）」又は「哺乳類のもの（mammalian）」であり、ここで、これらの用語は、食肉目（例えば、犬と猫）、げっ歯目（例えば、モルモット及びラット）、及び、ウシ、ヤギ、馬、羊、ウサギ、ブタ、霊長類（例えば、ヒト、チンパンジー及びサル）を含むその他の動物を含む、哺乳類に含まれる生物である。多くの実施形態において、前記ホストはヒトとされる。動物モデルは、ヒトの疾患の治療用のモデルの提供などの、実験調査のために興味深い。更に、本発明は、獣医的ケアにも適用可能である。
【０１６３】
更に、本発明は、種々の腫瘍及び癌を治療するために使用可能であり、これらは、非限定的に以下を含む。急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、肛門癌、星細胞腫、胆管癌、膀胱癌、骨癌骨肉腫／悪性線維組織球腫、脳幹神経膠腫、脳腫瘍上衣細胞腫、脳腫瘍髄芽細胞腫、乳癌、消化管カルチノイド腫瘍、副腎皮質癌、島細胞癌、（子宮）頸癌、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、腱鞘の明細胞肉腫、大腸癌、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、子宮体癌、卵巣上皮癌、食道癌、エウィングファミリー腫瘍、生殖腺外生殖細胞腫瘍、肝臓外胆管癌、眼癌眼内メラノーマ、眼網膜芽細胞腫、胆嚢癌、胃癌、消化管カルチノイド腫瘍、生殖腺外生殖細胞腫瘍、卵巣生殖細胞腫瘍、妊娠性栄養膜腫瘍、神経膠腫、有毛細胞性白血病、肝細胞性（肝臓）癌、ホジキンリンパ腫、下咽頭癌、眼内メラノーマ、島細胞癌（膵臓内分泌腺）、カポジ肉腫、喉頭癌、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、有毛細胞性白血病、肝臓癌、非小細胞性肺癌、小細胞性肺癌、男性乳癌、悪性中皮腫、髄芽腫、メラノーマ、メルケル細胞癌、多発性内分泌腺腫瘍候群、菌状息肉腫、多発性骨髄腫、鼻腔及び副鼻腔癌、上鼻咽頭癌、神経芽細胞腫、口腔及び口唇癌、口咽頭癌、骨の骨肉腫／悪性線維組織球腫、卵巣上皮癌、卵巣生殖細胞腫瘍、膵臓癌、副鼻腔及び鼻腔癌、副甲状腺癌、陰茎癌、クロム親和性細胞腫、松果体及び天幕上原始神経外胚葉性腫瘍、脳下垂体腫瘍、胸膜肺芽細胞腫、前立腺癌、直腸癌、腎盂及び尿管移行細胞癌、網膜細胞芽腫、横紋筋肉腫、唾液腺癌、エウィングファミリー腫瘍の肉腫、カポジ肉腫、成人軟部組織肉腫、セザール症候群、皮膚癌、小腸癌、胃癌、皮膚Ｔ細胞リンパ腫皮膚、睾丸癌、胸腺腫、甲状腺癌、腎盂及び尿管の移行細胞癌、尿道癌、子宮内膜癌、膣頚部癌、外陰部癌、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、ウィルムス腫瘍。
【０１６４】
製剤、投与量、及び投与経路  
上述したように、有効量の前記有効物質が前記ホストに投与され、ここで、「有効量」とは、所望の結果を作り出すのに十分な投与量を意味する。いくつかの実施形態において、前記所望の結果は、少なくとも対照に対する、腫瘍成長の低減又は抑制である。
【０１６５】
通常、本発明の前記組成物は、前記活性成分、即ち、ここに記載の前記ＮＤＧＡ化合物を含む前記カテコールブタン、を、約１％以上約９９％まで、含むことになり、又は、本発明は、前記活性成分を約１％以上約９０％まで含むことになる。適当な投与量は、投与されるべき適切な投与量は、対象体の一般的健康状態、対象体の年齢、疾患または症状の状態、対象体の体重、腫瘍の大きさ等、治療されるべき対象体に依存する。一般に、約０.１ｍｇ〜約５００ｍｇ以下を子供に投与することができ、そして、より一般的には、約０.１ｍｇ〜約５グラム以下を、成体に対して投与することができる。前記活性剤は、単回の投与、より一般的には、複数回の投与で投与することができる。所与の薬剤の好適投与量は、種々の手段によって当業者によって容易に決定することができる。その他好適な投与量は、用量反応曲線を形成するルーチン的試みを介して当業者によって容易に決定可能である。薬剤の量は、勿論、使用される特定の薬剤に応じて異なるであろう。
【０１６６】
投与量と同様、活性剤の投与の頻度は、年齢、体重、疾患状態、健康状態及び患者の反応性に基づき、介護人によって決定されるであろう。従って、これらの薬剤は、毎日、毎週、毎月、或いは従来式決定によって、単数又は複数回数投与することができる。これら薬剤は、数日間、数週間、数ヶ月間、間欠的に投与し、その後は、３ヶ月間や６ヶ月間などの一定期間が経過するまで、投与されず、更に、その後、再び、数日間、数週間、数ヶ月間、投与することができる。
【０１６７】
本発明の前記カテコールブタン又は活性剤は、種々の治療投与のための製剤に組み込むことができる。より具体的には、本発明のカテコールブタンは、適当な、薬学的に許容可能な担体、又は希釈剤と組み合わせて薬用組成物に製剤することができ、錠剤、カプセル剤、散剤、煙霧剤、リポソーム、ナノ粒子、顆粒剤、軟膏剤、液剤、座薬、注射、吸入剤、煙霧剤等、固体、半固体、液体、又は気体形状で製剤中に製剤することができる。
【０１６８】
そういうものとして、活性剤の投与は、様々な方法で、例えば、経口、口腔内、直腸、鼻腔内、静脈内、動脈内、気管内、脳室内、頭蓋内、間質、経皮のような、又は、吸入又は移植によって達成される。
【０１６９】
具体的には、ナノ粒子、ミセル及びリポソーム製剤を、非経口投与と鼻腔内投与を含む、全身投与によって、更に、薬剤標的化、薬剤の生物学的利用能の増強、薬剤の生理活性及び安定性の保護などのために、経口投与、局所投与、経皮投与で、吸入又は移植を介して、投与することができる。ここでのナノ粒子結合薬剤は、腫瘍内において延長された薬剤保持を達成することが期待される。
【０１７０】
医薬品投与形態において、前記活性剤は、それらの薬学的に許容可能な塩の形態で投与することができ、又は、単体あるいは、その他の適当な薬学的に許容可能な活性化合物との会合、組み合わせ形態でとすることができる。以下の方法及び賦形剤は、単なる例示的なものであり、いかなる意味においても限定的なものではない。
【０１７１】
経口投与のために、前記活性剤は、単体で、又は、適当な添加物、例えば、ラクトース、マンニトール、コーンスターチ、又はポテトスターチなどの従来の添加剤、結晶セルロース、セルロース誘導体、アラビアゴム、コーンスターチ、又はゼラチンなどの結合剤、コーンスターチ、ポテトスターチ、カルボキシルメチルセルロースナトリウム等の崩壊剤、タルクやステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤、そして所望の場合、希釈剤、緩衝剤、湿潤剤、保存剤、及び香料、と組み合わせて、使用して、錠剤、散剤、粒剤、又はカプセル剤を製造することができる。洗口剤用として、その調製物は、例えば、エプスタイン，ジェイ・ビー（Epstein, J.B.）他 (2002)及びピッテン，エフ（Pitten, F.）他 (2003)に記載されているように、従来方法によって作成することができる。
【０１７２】
溶媒、アジュバント、担体又は希釈剤などの薬学的利用可能な賦形剤は、従来のものである。適当な賦形溶媒は、例えば、水、生理食塩水、ブドウ糖、グリセロール、エタノールなど、そしてそれらの組み合わせである。更に、所望の場合、前記溶媒は、ｐＨ調節および緩衝剤、張度調節剤、安定化剤、湿潤剤、又は乳化剤などの補助物質を少量含むことができる。そのような投与形態を調製するための実際の方法は、当業者に知られているか、又は明らかであろう。例えば、Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, イートン、ペンシルベニア、第１７版、１９８５を参照。投与される前記組成物又は製剤は、いずれの場合も、治療される対象体において望ましい状態を達成するのに適切な薬剤を一定量含むことになる。
【０１７３】
前記活性剤は、それらを、水溶液又は、コーン油、ひまし油、合成脂肪酸グリセリド、高級脂肪酸又はプロピレングリコールのエステル、等の植物又はその他類似の油等の非水性溶液中に、所望の場合は、可溶化剤、等張剤、懸濁剤、乳化剤、安定化剤、保存剤などの従来式添加物と共に、溶解、懸濁又は乳化することによって、注射用の製剤に製剤することができる。
【０１７４】
前記活性剤は、吸入によって投与される煙霧剤製剤に利用することができる。本発明の前記化合物は、ジクロロジフロロメタン、プロパン、窒素のような加圧された許容可能な噴霧剤に製剤することができる。
【０１７５】
更に、前記活性剤は、乳化基材や水溶性基材などの種々の基材と混合することによって座薬にすることができる。本発明の前記化合物は、座薬を介して直腸投与することができる。前記座薬は、体温では溶けるが、室温では固体状態の、ココアバター、カーボワックス、ポリエチレングリコール、等の溶媒を含むことができる。
【０１７６】
シロップ、エリキシル、及び懸濁剤等の経口又は直腸投与用の単位投与形態を提供することができ、ここで、例えば、茶さじ一杯、匙一杯、錠剤又は座薬などの各投与単位は、単数又は複数の阻害剤を含有する前記組成物を所定量含有する。同様に、注射又は静脈内投与用の単位投与形態は、前記阻害剤（単数又は複数）を、組成物中に、滅菌水、通常の生理食塩水、又は、別の薬学的に許容可能な担体中の溶液として含むことができる。
【０１７７】
ここでの使用において「単位用量形態」という用語は、ヒト及び動物の対象体用の単位用量として適切な身体的な別個の単位を規定するものであり、各単位が、薬学的に許容可能な希釈剤、担体又は溶媒との組み合わせで、所望の作用を作り出すのに十分であると計算された所定量の本発明の化合物を含有している。本発明の新規な単位用量形態の仕様は、使用される特定の化合物、達成されるべき作用、ホスト内の、各化合物に関連する薬物動態学、に依存する。
【０１７８】
本発明は、前記活性剤を複数又は単位用量含むキットを含む。そのようなキットにおいて、複数又は単位用量の前記ＮＤＧＡ誘導体を含有する組成物を含む容器に加えて、対象病理状態の治療に於ける薬剤の使用法及び付随する有用性を記載した説明書を備えた情報添付文書が含まれる。
【０１７９】
本発明の方法によって治療可能な腫瘍は、以下を含む。癌、例えば、大腸、直腸、前立腺、乳部、メラノーマ、（乳）管、子宮内膜、胃、膵臓、中皮腫、形成異常口腔粘膜、侵襲性口腔腫瘍、非小細胞性肺癌（“ＮＳＣＬ”）、移行及び扁平上皮細胞泌尿器癌等、神経悪性腫瘍、例えば、神経芽細胞腫、神経膠芽細胞腫、星細胞腫、神経膠腫等、血液悪性腫瘍、例えば、小児急性白血病、非ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病、悪性皮膚Ｔ細胞、菌状息肉腫、非皮膚Ｔ細胞リンパ腫、リンパ腫様丘疹症、Ｔ細胞リッチ皮膚リンパ様過形成、類天疱瘡、円板状エリテマトーデス、扁平苔癬等、婦人科腫瘍、例えば、（子宮）頚部及び卵巣、精巣腫瘍、肝細胞癌（“ＨＣＣ”）と胆管の腫瘍を含む肝臓腫瘍、多発性骨髄腫、食道の腫瘍、小細胞及び明細胞を含むその他の肺腫瘍、ホジキンリンパ腫、種々の器官における肉腫、等。
【０１８０】
ナノ粒子（“ＮＰ”）の調製
本発明は、ＮＰ製剤としてＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンの製剤を含む。ここでの使用に適した様々なＮＰ製剤を、投与方法に応じて製造することができる。前記ＮＰ製剤は、分子量、共重合体比率、薬剤添加（drug loading）、マイクロ粒子寸法、多孔度、製造条件、を制御することによって、薬剤放出プロファイルに基づいて、異なるものとすることができる。前記ＮＰ製剤は、又、製造工程に使用される重合体、安定化剤、及び界面活性剤に基づいても、異なるものとすることができる。異なる賦形剤によっても、薬剤吸収、体内での薬剤分布、血漿中での薬剤の残留率、に対して異なる影響を与えることができる。当業者は、所望の性質又は特性を決定することができ、従って、使用される適切なＮＰ製剤を決定することができるであろう。
【０１８１】
前記ＮＰの重合体基質は、生体適合性、生物利用能、物理的強度及び処理の容易性、の要件を満たさなければならない。この目的のために最も良く知られている重合体は、生物分解性ポリ（ラクチド−co−グリコリド）（“ＰＬＧＡ”）である。
【０１８２】
ここでのＮＰは、任意の従来方法によって製造することができる。一実施形態において、ＮＰは、例えばロックマン，ピー・アール（Lockman, P.R.）他（2002）に記載されているようにして製造することができる。製造方法の種類は、例えば、エマルジョン、重合、界面重合、脱溶媒和蒸発、溶剤析出、を含む。
【０１８３】
ここでのＮＰを製造するエマルジョン重合法において、この重合法は、例えば、クロイター，ジェイ（Kreuter, J.）(1994）に記載されているように、単一の単量体単位から重合体の鎖を構築することからなる。重合は、例えば、高エネルギー照射、ＵＶ光またはヒドロキシルイオンを使用することによって、フリーラジカル又はイオン形成のいずれかによる、惹起後に、室温で自発的に起こる。重合が完了すると、溶液を濾過し中和する。重合体は約１００〜１０７の重合体分子からなるミセルと小滴を形成する。この方法において、界面活性剤と安定化剤は一般に不要である。又、この方法は、水相ではなく、有機相中で達成することができる。
【０１８４】
ここでのＮＰは、例えば、クーリ，エイ・エル（Khouri, A.L.）他 (1986）に記載されているような界面重合法によっても製造することができる。この方法において、単量体を使用して重合体を形成し、水及び有機相が、高トルク機械的攪拌下での均質化、乳化、又は微少溶液操作によって互いに混合される時に重合が起こる。例えば、前記ＮＤＧＡ化合物などのカテコールブタンを含有するポリアルキルシアノアクリレートのナノカプセル剤を、親油性ＮＤＧＡ化合物と、前記単量体とを有機相中で組み合わせ、この組み合わせを油中で溶解し、絶え間なく攪拌しながら、この混合物をゆっくりと、小管を通して水相に添加することによって製造することができる。これにより、前記単量体は、陰イオン重合によって２００−３００ｎｍのカプセル剤を自然に形成することができる。この方法の１変形例は、例えば、フェッシ，エイチ（Fessi, H.）他 (1989）に記載されているように、前記単量体と前記薬剤とを含む前記有機相に、安息香酸ベンジルと、アセトンと、リン脂質との溶剤混合物を添加するものである。これによって、薬剤がカプセル剤化され、それが標的組織に到達するまで分解に対して保護された製剤が作り出される。
【０１８５】
アルブミンやゼラチンなどの巨大分子を、ＮＰの製造において油変性及び脱溶媒和工程に使用することができる。油エマルジョン変性工程において、大きな巨大分子は、均質化によって有機相に捕捉される。一旦捕捉されると、前記巨大分子は、絶え間ない攪拌を受けている水相にゆっくりと導入される。次に、二つの非混和性相の導入によって形成されるナノ粒子を、アルデヒド等との架橋化、又は熱変性によって硬化させることができる。
【０１８６】
或いは、巨大分子は、「脱溶媒和」によってもＮＰを形成することができる。この脱溶媒和工程において、巨大分子は、溶媒中に溶解され、その中で巨大分子は、膨潤したコイル状配位内に配置される。次に、膨潤した巨大分子を、ｐＨ、電荷、等の環境を変化させることによって、又は、エタノールなどの脱溶媒和剤を使用することによって、堅いコイルを形成するように誘導する。その後、巨大分子を、アルデヒドへの架橋化によって固定し硬化させる。誘導体が新たに形成された粒子内に捕捉されるように、架橋化の前に前記ＮＤＧＡ化合物は前記巨大分子に対して吸着又は結合することができる。
【０１８７】
固体脂質ＮＰを、高圧均質化によって作り出すことができる。固体脂質ＮＰは、殺菌、オートクレーブ消毒可能であり、制御された放出を提供する固体のマトリクスを有するという利点を有する。
【０１８８】
本発明は、更に、異なる薬剤添加法でのＮＰを含む。ＮＰは、その中に薬剤が均質に分散した固体コロイド状ＮＰとすることができる。ＮＰは、吸着等によって、ＮＰの外側に薬剤が結合された固体ＮＰとすることができる。ＮＰは、その中に薬剤が捕捉されたナノカプセル剤とすることができる。ＮＰは、更に、その内部に、適切な組織への標的投与のための細胞表面リガンドと共に薬剤が均質に分散された固体コロイド状ＮＰとすることができる。
【０１８９】
ＮＰの寸法は、所与の投与態様に対するそれらの有効性に関連しているかもしれない。ＮＰは通常、約１０ｎｍ〜約１０００ｎｍの範囲であり、選択的に、ＮＰは、約３０ｎｍ〜約８００ｎｍの範囲であり、一般的には、約６０ｎｍ〜約２７０ｎｍの範囲であり、更に一般的には、約８０ｎｍ〜約２６０ｎｍの範囲、又は約９０ｎｍ〜約２３０ｎｍ、又は約１００ｎｍ〜約１９５ｎｍである。重合中に使用される溶液のｐＨ、惹起トリガー（熱、放射線、等）の量、前記単量体単位の濃度、等、複数の要因がＮＰの寸法に影響を与え、それらの全ては、当業者によって調節可能である。ＮＰの寸法決定は、光散乱を使用した光子相関分光法によって行うことができる。
【０１９０】
多糖類ＮＰやアルブミンＮＰ等のここでのＮＰは、選択的に、脂質コーティングによってコーティングすることができる。例えば、多糖類ＮＰを、ジパルミトイルホスファチジルコリン及びコレステロールコーティングを含むもの等の、脂質二重層有り又は無しで、リン酸塩（陰イオン性）及び四級アンモニウム（陽イオン性）リガンドと架橋化することができる。その他の重合体／安定化剤は、非限定的に、大豆油、マルトデキストリン、ポリブチルシアノアクリレート、ブチルシアノアクリレート／デキストラン７０ｋＤａ、ポリソルベート８５、ポリブチルシアノアクリレート／デキストラン７０ｋＤａ、ポリソルベート８５、ステアリン酸、ポリメチルメチルアクリレートを含む。
【０１９１】
ＮＰに対する吸着によるものなどの、ＮＤＧＡ化合物などのカテコールブタンを含有する前記ＮＰ調製物は、例えば、脳、心臓、及び細網内皮細胞（“ＲＥＳ”）、含有器官、例えば、肝臓、脾臓及び骨髄含有器官などの、腫瘍の治療のために静脈投与することができる。これらのＮＰ製剤の細網内皮細胞による望ましくない取り込みを回避するために、前記ＮＰを、界面活性剤によってコーティングしたり、あるいは、磁力反応性材と共に製造したりすることができる。
【０１９２】
従って、選択的に、界面活性剤を前記ＮＰと組み合わせて使用することができる。例えば、ポリブチルシアノアクリレートＮＰを、デキストラン−７０，０００安定化剤と、界面活性剤としてのポリソルベート８０と共に使用することができる。その他の界面活性剤は、非限定的に、ポリソルベート２０，４０又は６０、ポロキサマー１８８、脂質コーティング−ジパルミトイルホスファチジルコリン、エピクロン（Epikuron）２００、ポロキサマー３３８、ポラキサミン（polaxamine）９０８、ポロキサマー４０７、を含む。例えば、ＮＰの、肝臓、脾臓、肺、骨髄のＲＥＳ内への取り込みを減少させるための界面活性剤としてポラキサミン（polaxamine）９０８を使用することができる。
【０１９３】
前記磁力反応性材は、前記ＮＰを製造するための前記組成物に組み込むことが可能なマグネタイト（Ｆｅ３Ｏ４）とすることができる。これらの磁力反応性ＮＰは、磁石によって外部から案内することが可能である。
【０１９４】
別実施形態において、ここでのＮＰは、ムー，エル（Mu, L.）及びフェン，エス・エス（Feng, S.S.）(2003）に記載されているように、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（“ＰＬＧＡ”）とｄ−α−トコフェリル  グリコール１０００コハク酸塩（ビタミンＥ  ＴＰＧＳ又はＴＰＧＳ）とのブレンドを使用して製造することができる。後者は、マトリクス剤であることに加えて、乳化剤としても作用することができる。
【０１９５】
ミセル形成担体の調製
本発明は、ミセル形成担体に製剤される、前記ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンを含み、ここで、前記ミセルは、従来の方法によって作られる。そのようなものの具体例は、例えば、リッギンズ，アール・ティ（Liggins, R.T.）及びバート，エイチ・エム（Burt, H.M.）(2002）、ツァン，エックス（Zhang, X.）他 (1996）及びチャーチル，ジェイ・アール（Churchill, J.R.）及びハッチンソン，エウ・ジー（Hutchinson, F.G.）(1988）に記載されている。そのような方法の１つにおいて、親水性（ポリエーテル）セグメントと疎水性（ポリエステル）セグメントとを有する両親媒性重合体であるポリエーテル−ポリエステルブロック共重合体がミセル形成担体として使用される。
【０１９６】
別のタイプのミセルは、例えば、トゥザール，ゼット（Tuzar, Z.）及びクラトクヴィル，ピー（Kratochvil, P）(1976）及びウィルヘルム，エム（Wilhelm, M.）他 (1991）に記載されているように、親水性セグメントと疎水性セグメントとの両方を有するＡＢタイプのブロック共重合体によって形成され、それらの両親媒性により、水系媒体中においてミセル構造を形成することが知られているものである。これらの重合体系ミセルは、そのミセル内部コア内部に取り込まれる疎水性の薬剤の高い含有率にも拘わらず、満足できる水性安定性を維持することができる。約＜２００ｎｍの寸法範囲のこれらのミセルは、非選択的なＲＥＳ捕集を減少させるのに有効であり、固体の部位における腫瘍高い浸透性と保持率を示す。この特性は、前記ＮＤＧＡ誘導体などの、抗癌剤の蓄積が癌部位で蓄積されることを可能にする。
更に、例えば、ポリ（ＤＬ−ラクチド）−ｂ−メトキシポリエチレングリコール（ＭｅＰＥＧ：ＰＤＬＬＡ）ジブロック共重合体を、ＭｅＰＥＧ  １９００と５０００を使用して製造することができる。触媒としてオクチル酸スズ（０．２５％）を使用して、１６０℃で３時間反応を進行させることができる。しかし、もしも、反応を約６時間進行させることが許容されるのであれば１３０℃の低い温度を使用することが可能であり、もしも、反応が約２時間だけ行われる場合は、１９０℃の高い温度を使用することが可能である。
【０１９７】
一実施形態において、Ｎ−イソプロピルアクリルアミド（“ＩＰＡＡｍ”）（興人、東京、日本）とジメチルアクリルアミド（“ＤＭＡＡｍ”）（和光純薬工業、東京、日本）を、コホリ，エフ（Kohori, F.）他 (1998）の方法を使用して、ラジカル重合法でヒドロキシ−末端ポリ（ＩＰＡＡｍ−ｃｏ−ＤＭＡＡｍ）を製造するために使用することができる。得られた共重合体は、冷水に溶解させ、１０，０００及び２０，０００分子量カットオフの二つの限外濾過膜を通して濾過することができる。前記重合体溶液は、先ず、２０，０００分子量カットオフの膜を通して濾過される。次に、この濾液を１０，０００分子量カットオフの膜を通して再度濾過する。その結果、低分子量、中分子量、重合体量の三つの分子量画分を得ることができる。次に、前記中分子量画分のポリ（ＩＰＡＡｍ−ｃｏ−ＤＭＡＡｍ）の末端ヒドロキシル基からのＤ，Ｌ−ラクチドの開環重合によってブロック共重合体を合成することができる。その結果得られるポリ（ＩＰＡＡｍ−ｃｏ−ＤＭＡＡｍ）−ｂ−ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）共重合体を、コホリ，エフ（Kohori, F.）他 (1999）に記載されているようにして精製することができる。
【０１９８】
前記ＮＤＧＡ化合物などのカテコールブタンは、透析法によって、同時に調製されるミセル内部コアとミセル内に添加することができる。例えば、ＮＤＧＡ化合物の塩化物塩を、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセタミド（“ＤＭＡＣ”）中に溶解し、トリエチルアミン（“ＴＥＡ”）を添加することができる。ポリ（ＩＰＡＡｍ−co−ＤＭＡＡｍ）−ｂ−ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）ブロック共重合体をＤＭＡＣに溶解し、蒸留水を添加することができる。ＮＤＧＡ化合物の溶液と前記ブロック共重合体溶液を室温で混合し、その後、１２，０００−１４，０００分子量カットオフの透析膜（Spectra／Por（登録商標）２，spectrum Medical Indus., CA. U.S.A.）を２５℃で使用して、蒸留水に対する透析を行うことができる。ＮＤＧＡ化合物を取り込んだポリ（ＩＰＡＡｍ−ｃｏ−ＤＭＡＡｍ）−ｂ−ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）ミセルを、コホリ，エフ（Kohri, F）他 (1999）に記載されているように、２０ｍｍ孔径の精密濾過膜（ANODISCTM, Whatman International）での濾過によって精製することができる。
【０１９９】
ＮＤＧＡ化合物を含有する多小胞リポソームの調製
多小胞リポソーム（“ＭＶＬ”）を、例えば、マントリプルガダ，エス（Mantripragada, S.）(2002）に記載されている二重乳化法などの、任意の公知の方法によって調製することができる。簡単に説明すると、前記二重乳化法において、先ず「油中水」エマルジョンが、少なくとも１つのトリグリセリド等の中性脂肪を含有するリン脂質を、投与単数又は複数の揮発性有機溶剤中に溶解させ、この脂質成分を、非混合性の第１水性成分と、疎水性ＮＤＧＡ化合物などの親水性カテコールブタンに添加することによって作られる。次に、この混合物を、乳化して油水中エマルジョンを形成し、その後、第２の非混合性水性成分と混合し、その後、機械混合して、前記第２水性成分中に懸濁した状態の溶剤小球を形成し、水中油中水エマルジョンを形成する。前記溶剤小球は、その中に溶解した前記ＮＤＧＡ化合物などの、カテコールブタンを備える複数の水性小滴を含んだものとなる。次に、一般的に、蒸発、減圧、又はその懸濁液上又は中にガス流を通過させることによって、前記有機溶剤を前記小球から除去する。溶剤が完全に除去されると、前記小球は、ＤｅｐｏＦｏａｍ粒子などのＭＬＶとなる。前記中性脂肪がこの工程から省略される場合、前記ＭＬＶの代わりに、従来式の多重層小胞又は単層小胞が形成される。
【０２００】
経口投与用の、ＮＤＧＡ化合物などのカテコールブタンの製剤
Ｇ４Ｎ等のような、ＮＤＧＡ化合物などの一部のカテコールブタンは、水溶性親水性化合物である。本発明は、薬学的許容可能な担体又は賦形剤中の親水性化合物の製剤と、その化合物の水溶液形態などの、経口製剤などの投与を含み、或いは、前記化合物は、凍結乾燥して散剤として投与したり、錠剤にしたり、又は前記化合物はカプセル剤化することも可能である。
【０２０１】
ここでの前記錠剤は、腸内コーティング錠剤とすることができる。ここでの製剤は、持続効性、遅効性又は速効性製剤とすることができる。
前記経口製剤中に含まれるＮＤＧＡ化合物などの前記カテコールブタンの量は、対象体に投与される所望の投与量に応じて調整することができる。そのような調整は、当業者の技量範囲内である。
【０２０２】
Ｍ４Ｎ等のような、ＮＤＧＡ化合物などの一部のカテコールブタンは、疎水性又は親油性化合物である。腸内での親油性化合物の吸収は、前記化合物の水性腸管流体内への溶解の速度又は程度を高めることが可能な薬学的許容可能な担体を使用することによって改善することができる。脂質担体は、例えば、スタッチリック，エム（Stuchlik, M.）及びザック，エス（Zak, S.）(2001）に記載されているように公知である。ここでの製剤は、経口液として投与することができ、或いは、種々のタイプのカプセル剤にカプセル剤化することができる。
【０２０３】
本発明は、一実施形態において、そのような化合物のトリアクリルグリセロール中での溶解による経口投与用に製剤される前記親油性ＮＤＧＡ化合物を含有する製剤を含み、次に、前記製剤は、経口投与用にカプセル剤化される。トリアクリルグリセロールは、グリセロール分子に連結した長鎖および／又は中鎖脂肪酸を有する分子である。前記長鎖脂肪酸は、約Ｃ１４からＣ２４の範囲であり、これらは一般的な脂肪内に見られる。前記中鎖脂肪酸は、約Ｃ６からＣ１２の範囲であり、これらはココナッツ油又はヤシ核油中に見られる。ここでの使用に適したトリアクリルグリセロールは、同じグリセロール分子上にエステル化された、短鎖又は中鎖脂肪酸又はそれらの両方の混合物を含む構造脂質を含む。
【０２０４】
本発明の別実施形態において、単数又は複数の界面活性剤を、ＮＤＧＡ化合物と脂質担体とを含むカテコールブタンの混合物に対して、薬剤が油／界面活性剤の細かい小滴中に存在するように添加することができる。前記界面活性剤は、胃腸流体内での希釈時に前記油性製剤を分散するように作用することができる。
【０２０５】
本発明は、更に、親水性界面活性剤及び油からなるマイクロエマルジョン形態としての、ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンの経口投与用製剤を含む。前記マイクロエマルジョン粒子は、安定化された油と薬剤を含有する界面活性剤ミセルとすることができる。
【０２０６】
ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンの、固体脂質ナノ粒子製剤としての製剤も経口投与用に適している。固体脂質ナノ粒子は、例えば、スタッチリック，エム（Stuchlik, M）及びザック，エス（Zak,S.）(2001）に記載されているような、任意の従来方法で調製することができる。
【０２０７】
一実施形態において、前記固体脂質ナノ粒子は、昇温での溶解された脂質の均質化による高温均質化工程によって調製することができる。この工程において、前記固体脂質は、溶融され、ＮＤＧＡ化合物等のカテコールブタンがその溶融した脂質中に溶解される。次に、予め加熱された分散媒体を、その薬剤添加脂質溶融物と混合させ、この組み合わせを、均質化剤と混合して粗製の前エマルジョンを形成する。次に、脂質の溶融点以上の温度で高圧均一化を行い、油／水ナノエマルジョンを製造する。このナノエマルジョンを室温にまで冷却して固体脂質ナノ粒子を形成する。
【０２０８】
本発明の別実施形態において、前記固体脂質ナノ粒子は、低温均質化工程によって調製することができる。この工程において、脂質を溶融し、ＮＤＧＡ化合物などのカテコールブタンをこの溶融した脂質中で溶解させる。次に、その薬剤添加脂質を、液体窒素又はドライアイス中で固化させる。この固体薬剤−脂質を、粉砕機内で粉砕して５０−１００μｍの粒子を形成する。次に、脂質粒子を低温の水性分散媒体中に分散させ、室温又はそれ以下で均質化して固体脂質ナノ粒子を形成する。
【０２０９】
本発明は、更に、ＮＤＧＡ化合物などの親油性カテコールブタンの、経口投与用のリポソーム又はミセルとしての製剤を含む。これらの製剤は、任意の従来方法によって製造することができる。ミセルは、通常、疎水性薬剤が、単分子層上で疎水性領域と結合している脂質単分子膜小胞である。リポソームは、通常、リン脂質二分子膜小胞である。親油性ＮＤＧＡ化合物などの親油性カテコールブタンは、通常、これらの小胞の中心に位置する。
【０２１０】
動脈内投与
本発明は、脳血液関門崩壊（“ＢＢＢＤ”）を伴う、又は伴わない、例えば、ドゥーリトル，エヌ・ディ（Doolittle, N.D.）他 (2000)及びクラフェシー，ティ・エフ（Cloughesy, T.F.）他 (1997)に記載されているような、そして、ドロウガス，ジェイ・ジー（Drougas, J.G.）他 (1998)及びデサイ，ディ・シー（Desai, D.C.）他 (2001)に記載されているような、肝動脈化学閉塞療法等における、閉塞有り又は無しで、従来の動脈内投与用の、前記ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンの製剤を含む。簡単な説明すると、ＮＤＧＡ化合物が閉塞によって、動脈内投与される場合、標的部位にいたる主動脈にカテーテルが挿入され、ＮＤＧＡ化合物がカテーテルを通して与えられる。ＮＤＧＡ化合物を標的部位により長い時間保持するために、動脈の塞栓形成が、ポリビニルアルコールのみ、又は、そのコイルとの組み合わせ、を使用して行われる。ＮＤＧＡ化合物の動脈内送達は、水溶性組成物に限られる。Ｇ４Ｎ等の水溶性ＮＤＧＡ化合物、Ｍ４Ｎ等の疎水性ＮＤＧＡ化合物のリポソーム製剤、又は、疎水性のＮＤＧＡ化合物のナノ粒子製剤が、このタイプの送達に特に適している。ここでの薬剤又物質は、動脈内注射に先立って、食塩水に溶解させることができ、そのような注射の前に、ヘパリン処理と鎮静処理を行うことができる。脳腫瘍の最も安全な治療にためには、好ましくは、腫瘍負担が過度になる前に、動脈内投与が行われる。
【０２１１】
従来技術のような脳血液関門（“ＢＢＢ”）の浸透性破壊を、例えば、ドゥーリトル，エヌ・ディ（Doolitle, N.D.）他 (2000), サトー，エス（Sato, S.）他, Acta Neuochir (Wien) 140: 1135-1141, disc 1141-1132 (1998)及びバッタチャージェー，エイ・ケイ（Bhattacharjee, A.K.）他  Brain Res Protocol 8: 126-131 (2001)に記載されているように、ここでの薬剤の動脈内送達に併用することができる。そのような処置を使用して、好ましくは動脈内送達の直前に、薬剤の中枢神経系（“ＣＮＳ”）内への移送を増大させることができる。そのような崩壊のために、カテーテルが、脳へといたる、通常は、浅側頭動脈である、動脈内に挿入され、ＢＢＢがマンニトール溶液によって崩壊される。この侵襲性処置は、通常、患者が全身麻酔されている状態で行われる。このような治療は、抗痙攣薬および／又はアトロピンの事前の水和及び投与を必要するかもしれない。
【０２１２】
鼻腔内投与用のＮＤＧＡ化合物の製剤
本発明は、鼻腔内投与用の、ＮＤＧＡ化合物によって例示されるカテコールブタンの製剤と、その鼻腔内投与とを含む。鼻腔内投与は、静脈内投与によって達成可能であるよりも、脳内での活性剤の濃度を有利に高めることができる。又、この投与形態は、その薬剤を受ける対象体の肝臓と腸とにおける初回通過代謝の問題を回避するものである。
【０２１３】
吸収可能な活性剤の量は、部分的には、血清タンパク質、糖タンパク質、脂質及び電解質の約９５％の水溶液から成る粘液中での薬剤の溶解度に依存する。一般に、活性剤の親油性が増加するにつれて、CSFの薬剤濃度も増加する。例えば、ミン，エイ（Minn, A.）他 (2002）を参照。
【０２１４】
前記親水性ＮＤＧＡ化合物は、生理食塩水、リン酸緩衝液、又はリン酸緩衝生理食塩水などの薬学的に許容可能な担体中で溶解可能である。一実施形態において、例えば、カオ，エイチ・ディ（Kao, H.D.）他 (2000）に記載されているように、ｐＨ７．４の０．０５Ｍリン酸緩衝液を、前記担体として使用することができる。
【０２１５】
本薬剤の鼻腔内投与は、それらの薬剤の投与時に、対象体の位置を調節することによって最適化することができる。例えば、患者の頭部を、直立−９０度、仰臥９０度、仰臥４５度、又は仰臥７０度に様々に位置させて最大の効果を得ることができる。
【０２１６】
前記ＮＤＧＡ化合物の組成物の担体は、薬学的に許容可能で、その組成物の活性物質と適合可能な任意の材料とすることができる。担体が液体である場合、それは、鼻流体に対して、低張又は等張のものであって、約４．５〜約７．５のｐＨ内のものとすることができる。担体が粉体形態である場合、それも、許容可能なｐＨ範囲内である。
【０２１７】
鼻腔内投与用の担体組成物は、選択的に、活性物質の鼻膜をわたって、そして嗅覚神経経路を経由した脳内への吸収を高めることが可能な親油性物質を含むことができる。そのような親油性物質の具体例は、非限定的に、ガングリオシド、及びホスファチジルセリンを含む。例えばミセル形態などの、前記組成物中には、単数又は複数の親油性アジュバントを含ませることができる。
【０２１８】
腫瘍およびその他の増殖性疾患、障害、又は症状の治療のための対象体への投与用の鼻腔内投与用の活性物質の前記薬用組成物は、例えば、Ｕ．Ｓ．６，１８０，６０３に記載されているような、従来方法によって製剤することができる。例えば、ここでの前記組成物は、散剤、顆粒、溶液、煙霧剤、点鼻薬、ナノ粒子又はリポソームとして製剤することができる。前記活性物質に加えて、前記組成物は、適当なアジュバント、緩衝剤、保存剤、塩、を含むことができる。点鼻薬等の溶液は、酸化防止剤、緩衝剤、等を含むことができる。
【０２１９】
移植による投与
前記ＮＤＧＡ化合物によって例示されるここでのカテコールブタンは、前記ＮＤＧＡ化合物を含有する生物分解性重合体の移植などの、腫瘍の外科切除有り又は無しの、腫瘍部位への外科的移植によって治療のために対象体に投与することができる。一実施例において、この治療法は、例えば、フレミング，エイ・ビー（Fleming, A.B.）及びソールツマン，ダブリュ・エム（Saltzman, W.M.），Pharmacokinetics of the Carmustine Implant, Clin. Pharmacokinet, 41: 403-419 (2002)に記載されているようにして、行うことができる。この投与方法は、脳腫瘍のみならず、他の腫瘍に対しても適用可能である。この治療は、放射線治療、化学治療又は免疫治療法などの、外科手術以外又はそれに加えて、他の従来の療法と組み合わせることができる。
【０２２０】
したがって、ここで前記生物分解性重合体は、ホスト組織に対する毒性又は有害作用無く間質流体中に溶解する、任意の重合体又は共重合体とすることが出来る。好ましくは、前記重合体又は、この重合体がそれから合成される単量体は、ヒトへの投与がＦＤＡによって認可されているものである。溶解の速度を制御するために、ある単量体の他の単量体に対する比率を増加させる等、解重合の動態を制御するために、互いに異なる溶解特性の単量体を有する共重合体が好ましい。
【０２２１】
一実施形態において、前記重合体は、フレミング，エイ・ビー（Fleming, A.B.）及びソールツマン，ダブリュ・エム（Saltzman, W.M.）， Pharmacokinetics of the Carmustine Implant, Clin. Pharmacokinet, 41：403-419 (2002）及びブレム，エイチ（Brem, H）及びガビキアン，ピー（Gabikian, P.）(2001)に記載されているように、１，３−ビス−（ｐ−カルボキシフェノキシ）プロパン及びセバシン酸[ｐ−（ＣＰＰ：ＳＡ）]の共重合体である。別実施形態において、前記重合体は、フー，ジェイ（Fu, J. ）他 (2002）に記載されているように、ポリエチレングリコール（“ＰＥＧ”）とセバシン酸との共重合体である。
【０２２２】
重合体投与システムは、ここでの疎水性ＮＤＧＡ化合物と親水性ＮＤＧＡ化合物との両方の投与に適用できる。これらＮＤＧＡ化合物は、前記生物分解性重合体と組み合わせられ、腫瘍部位に外科移植される。一部の重合体組成物は、ここでの静脈内又は吸入療法にも使用可能である。
【０２２３】
吸入による投与
前記ＮＤＧＡ化合物によって例示される前記カテコールブタンは、吸入による肺への投与によって、全身的および／又は局所的に投与することが出来る。薬剤の吸入投与は、大きな全身毒性を引き起こすことなく肺組織における高薬剤濃度を達成する方法として、又、薬剤の全身循環を達成する方法として、十分に受け入れられている。そのような製剤を製造するための技術は、従来のものである。肺疾患に対する有効性は、このように投与された疎水性ＮＤＧＡ化合物と親水性ＮＤＧＡ化合物とのいずれかで見ることができる。
【０２２４】
吸入を介した肺投与のために、ここでのＮＤＧＡ化合物は、乾燥散剤、水溶液、リポソーム、ナノ粒子、又は重合体に製剤することができ、例えば、煙霧剤として投与できる。親水性製剤は、肺胞表面を介して、全身投与のために血液流に取り込むことができる。
【０２２５】
一実施形態において、ここでの活性物質を含有する前記重合体は、フー，ジェイ（Fu, J.）他 (2002）に記載されているように作られ、使用される。例えば、ここでの重合体は、セバシン酸とポリエチレングリコール（“ＰＥＧ”）の重合体、又は、ポリ（乳酸−co−グリコール）酸（“ＰＬＧＡ”）、又は、ポリエチレンイミン（“ＰＥＩ”）とポリ−Ｌ−リジン（“ＰＬＬ”）の重合体、とすることができる。
【０２２６】
別実施形態において、吸入投与用のＮＤＧＡ化合物は、チョイ，ダブリュ・エス（Choi, W.S.）他 (2001）に記載されているように、噴霧化の前に生理食塩水又はエタノール中に分解され、投与される。
【０２２７】
更に別の実施形態において、ここでの薬剤は、例えば、パットン，ジェイ・エス（Patton, J.S.）他，Inhaled Insulin, ADv. Drug Deliv. Rev., 35：235-247に記載されているように、任意の従来方法で乾燥散剤として投与される場合も有効である。
【０２２８】
本発明は、前記ＮＤＧＡ化合物を、例えば、ゴンダ，アイ（Gonda, I.）他 (1998）に記載されているように、例えば、SmartMistTMやAEＲxTM等の薬剤投与装置に埋め込まれたマイクロプロセッサの補助で、投与することを含む。
【０２２９】
本開示を読了したあと、当業者は、本発明の製剤の投与によって治療および／又は緩和されるかもしれないその他の病状および／又は症候を認識するであろう。
【実施例】
【０２３０】
以下の例は、当業者に、本発明をいかに調製し使用するかの完全な開示及び説明を提供するものであって、本発明者等が、自らの発明であると見なす範囲を限定するものではなく、下記の実験が全てであるとか、行われた実験はこれらのみであるとかを表すことを意図するものでもない。使用されている数字（例えば、量、温度、等）については正確なものとなるように努力が払われているが、一部との実験上のエラーと誤差については考慮されるべきである。特に銘記されないかぎり、部は重量部であり、分子量は、重量平均分子量であり、温度は、摂氏単位であり、圧力は大気圧又はそれに近いものである。
【０２３１】
例１：テトラ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡの調製用バッチの調製
ここでＭ４Ｎと称されるテトラ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡを、ＮＤＧＡを、例えば、水酸化カリウム等の塩基の存在下で、過剰硫酸ジメチルと反応させることによって合成した。その生成物を、生成物の沈殿を引き起こす水の添加によって分離した。反応生成物を、塩基性アルミナのプラグを通過させて、微量フェノール不純物、主として、種々のジ−Ｏ−メチル及びトリ−Ｏ−メチル−置換ＮＤＧＡ、を取り除いた。反応混合物の溶液を前記アルミナプラグに通過させた後、溶媒を回転蒸発装置で除去し固体生成物を得た。これを、２−プロパノールで粉砕（triturated）し、真空炉で乾燥し、粗製テトラ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡを得た。２−プロパノールからの結晶化によって、９９．６６％以上の純度のテトラ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡを得た。
【０２３２】
工程１：テトラ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡの粗製製剤の合成
機械式攪拌装置、冷却器、不活性雰囲気用の入口を備えた２２Ｌのフラスコを冷却浴として使用されるタブ内にセットした。このフラスコを、アルゴン雰囲気下に置き、これに４８４．３グラムのＮＤＧＡ（Western Engineering & Research Co, El Paso, TX）と４８５０ｍＬのエタノールとを入れ、攪拌した。この攪拌されたスラリに、１２１０ｍＬの脱イオン水中の３８７．５グラムの水酸化カリウムの溶液を添加した。この反応混合物を含むフラスコを、氷浴を使用して冷却し、硫酸ジメチル（１２１０ｍＬ）をゆっくりと（滴下）添加した。添加は、発熱を避けるように制御した。この添加の最後において、温度は約１３℃であった。反応のｐＨをモニタし、５０％ＫＯＨ溶液を、塩基性ｐＨを維持すべくその日の間、一部分、添加した：５０％ＫＯＨ溶液の全１４００ｍＬを添加した。過剰塩基の反応混合物は、ｐＨ指示片の使用による検出で約１２のｐＨを示した。溶液は塩基性ｐＨでは暗色であったが、中性又は酸性ｐＨでは淡色に変化した。
【０２３３】
その日の最後に、追加の６００ｍＬの硫酸ジメチルを添加し、その反応混合物を一晩攪拌させた。翌朝、反応物はまだ塩基性であったが、反応は約９０％進行していた。
【０２３４】
前記反応混合物を、４８５０ｍＬの脱イオン水の添加によって急冷し、生成物を沈殿させた。この生成物を、濾過によって分離し、濾滓を、水で完全に洗浄し、その生成物を真空炉で５０℃にて約６５時間乾燥し、５３９．５gの粗製生成物を得た。この生成物を７５０ｍＬの塩化メチレン中で溶解し、この溶液に３７５ｍＬのトルエンを添加した。この溶液を、２２１５gの塩基性アルミナの短いカラムに通した。前記アルミナを、１２，０００ｍＬの塩化メチレン／トルエン溶液（２：１）で溶出させた。溶媒の回転蒸発装置上での真空での除去によって固体残滓が得られた。これを、１Ｌの２−プロパノールによって粉砕（triturated）した。得られたスラリを濾過して固体生成物を分離した。これを真空炉で５０℃、高真空状態で約２１時間乾燥させ、４２６．７g（７４％収率）の粗製テトラ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡを得た。
【０２３５】
工程２：テトラ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡの結晶化
機械式攪拌装置、冷却器、不活性雰囲気用の入口を備えた３Ｌのフラスコを加熱マントルにセットした。このフラスコに４１５．５gの前記生成物を入れた。このフラスコに１２４５ｍＬの２−プロパノールを入れ、攪拌した混合物を加熱し、穏やかな還流を与え、溶液を得た。熱を止め、混合物を一晩冷却させた。結晶生成物を濾過によって分離し、濾過ケーキを２００ｍＬの低温２−プロパノールで洗浄した。この生成物を真空炉内で、５０℃にて高真空状態で４０４．７g（ＮＤＧＡからの７０．５％総収率）まで乾燥させた。
【０２３６】
例２：ＮＤＧＡ化合物を含有するＰＬＧＡナノ粒子の調製
前記ＮＤＧＡ化合物は、任意の従来方法によってナノ粒子製剤として製剤できる。例えば、前記ナノ粒子は、ランプレヒト，エイ（Lamprecht, A.）他（2001a）及びランプレヒト，エイ（Lamprecht, A.）他（2001b）に記載されているように、下記のようにして調製可能である。
【０２３７】
生物分解性重合体  ポリ［ＤＬ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド］５０／５０（ＰＬＧＡ）（分子量５，０００又は２０，０００）は、和光（大阪、日本）から購入可能である。約４０ｍｇのＮＤＧＡ化合物を、２５０ｍｇの重合体  ポリ[ＤＬ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド]５０／５０（ＰＬＧＡ）（分子量．５，０００又は２０，０００）を含有する４ｍｌの塩化メチレンに溶解することができる。その後、この溶液を、８ｍｌの水性ポリビニルアルコール溶液（１％）に注ぎ、超音波化装置（Ultrasonic DisruptorモデルＵＲ−２００Ｐ；トミー精工、東京、日本）によって氷浴中で３分間均質化した。塩化メチレンは、減圧下で蒸発させることができ、重合体を沈殿させることができる。非カプセル剤化薬剤と遊離の界面活性剤からナノ粒子を遠心分離（１４，０００ｇ、５分間）によって分離することができる。ナノ粒子は、再分散され、そして、凍結乾燥前に蒸留水中で三回、遠心分離することができる。経口投与前に、ナノ粒子は、ｐＨ６．８のリン酸緩衝液中で再分散させることができる。
【０２３８】
前記ナノ粒子の、粒径分布、表面電位を、光レーザ粒径解析装置（photal laser particle analyzer）ＬＰＡ３１００（大塚電子、大阪、日本）とＺｅｔａｓｉｚｅｒ  ＩＩ（Malvern Instruments, ウースターシャー州、英国）とをそれぞれ使用して分析することができる。ナノ粒子の外形態は、ＪＥＯＬ  ＪＳＭ−Ｔ３３０Ａ走査型顕微鏡（東京、日本）によって分析することができる。
【０２３９】
例３：ＮＤＧＡ化合物を有するＰＬＧＡ／ビタミンＥ  ＴＰＧＳナノ粒子の調製
ＰＬＧＡと別のマトリクス剤，ｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコール１０００コハク酸塩（ビタミンＥ  ＴＰＧＳ又はＴＰＧＳ）とを含むＮＰを、ムー，エル（Mu, L.）及びフェン，エス・エス（Feng, S.S.）(2003）に記載されているように、改変の水中油の単一エマルジョン溶媒蒸発／抽出法で製造することができる。この方法において、既知量の重合体質量と、ＮＤＧＡ化合物とを塩化メチレン（ジクロロメタン）に添加する。前記重合体、例えば、ポリ−（ＤＬ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド （ＰＬＧＡ；Ｌ／Ｇ＝５０／５０，ＭＷ４０，０００−７５，０００；Ｌ／Ｇ＝７５／２５，ＭＷ９０，０００−１２０，０００及びＬ／Ｇ＝８５／１５，ＭＷ９０，０００−１２０，０００）を、Sigma（USA）から購入することができる。ビタミンＥ  ＴＰＧＳは、Eastman Chemical, USAから入手可能である。全ての原料が溶解されるように前記混合物を攪拌する。次に、有機相の溶液を、乳剤有り又は無しで、攪拌された水溶液にゆっくり注ぎ、同時に５０Ｗパルスモード（Misonix, USA）で超音波処理する。形成されたｏ／ｗエマルジョンを、一晩、磁気攪拌装置で室温（２２℃）にて、ゆっくりと攪拌して前記有機相を蒸発させることができる。得られたサンプルは、１０，０００ｒｐｍ、１０分間，１６℃（Eppendorfモデル５８１０Ｒ，Eppendorf，ハンブルグ、ドイツ）等での遠心分離によって収集することができ、一部のサンプルについては脱イオン水で１回又は２回洗浄することができる。調製された懸濁液を、凍結乾燥（Alpha-２，Martin Christ Freeze Dryers，ドイツ）し、ナノ粒子の細かい粉体を得て、これを真空乾燥器に入れ、そこに保存することができる。
【０２４０】
例４: ＮＤＧＡ化合物を含有するリポソームの調製
前記親油性薬剤等のＮＤＧＡ化合物は、従来方法によって持効性リポソーム中にカプセル剤化することができる。そのような方法のひとつは、例えば、シャルマ，ユー・エス（Sharma, U.S.）他 (1997）に記載されている。
【０２４１】
持効性リポソームは、延長された血液循環時間を有する。それらは、通常、高位相−転移Ｔｍ脂質、高コレステロール含有率で、ホスファチジルイノシトール、モノシアロガングリオシド（ＧＭ１）や、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ） 頭部基を有する合成リン脂質等の、リポソーム表面への血漿タンパク質の接近に対する立体障害を提供する、成分から構成される。
【０２４２】
一例において、ホスファチジルコリン（“ＰＣ”）：コレステロール（“Ｃｈｏｌ”）：ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミンに結合したポリエチレングリコール（“ＰＥＧ−ＤＰＰＥ”）を、９：５：１のモル比で含むリポソームを調製することができる。前記脂質を最初、クロロホルム中で混合し、脂質の薄膜を、溶媒の蒸発によって製造することができる。次に、これらの脂質を、ＮａＣｌ（１４５ｍＭ），トリス[ヒドロキシメチル]−２−アミノエタン−スルホン酸（ＴＥＳ：１０ｍＭ）及びエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ：０．１ｍＭ）緩衝液、ｐＨ７．２中からなる緩衝液で水和する。次に、リポソームを、０．０８μｍのポリカーボネートフィルタを介して複数回抽出することができる。
【０２４３】
別の例において、ジステアロイルホスファチジルコリン（“ＤＳＰＣ”）：Ｃｈｏｌ：ＰＥＧ−ＤＳＰＥをモル比９：５：１で含むリポソームを、マッデン，ティ・ディ（Madden, T.D.）他（1990）に記載されているような「遠隔添加（remote loading）」法によって調製することができる。この遠隔装填法は、高濃度のＮＤＧＡ化合物をリポソーム水性コア内にカプセル剤化することを可能にする。簡単に説明すると、脂質の薄膜を、硫酸アンモニウム（２５０ｍＭ，ｐＨ５．５）中で水和することができる。脂質懸濁液を、０.０８μｍのポリカーボネートフィルタを通して６０℃で抽出し、等張のスクロースに対して一晩、透析して遊離の硫酸アンモニウムを除去することができる。親水性ＮＤＧＡ化合物を、１０％（ｗ／ｖ）のスクロース中で水和し、予め形成されたリポソームと、６５℃で１時間インキュベートすることができる。製剤を、等張のスクロースに対して透析して、カプセル剤化されていない薬剤の僅かな残り画分を除去することができる。この方法によって、初発のＮＤＧＡ化合物の９０％以上のカプセル剤化収率を得ることができる。
【０２４４】
ベレスティ，エイ（Belesti, A）他（1999）及びアヴゴウスタキス，ケイ（Avgoustakis, K.）他（2002）に記載されているように、触媒としてオクチル酸スズを使用した真空下での溶融重合法によって、モル比の異なる、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）−モノメトキシ−ポリ（ポリエチレングリコール）（ＰＬＧＡ-ｍＰＥＧ）共重合体を調製することができる。
【０２４５】
例５：ＮＤＧＡ化合物の鼻腔内製剤の調製
前記ＮＤＧＡ化合物は、例えば、マーティン，イー（Marttin, E.）他（1997）に記載されるもののような任意の従来方法によって鼻腔内投与用の乾燥散剤又は煙霧剤として製剤することができる。
【０２４６】
一実施例において、前記ＮＤＧＡ化合物は、ＭＱ水、即ち、Millipore （Etten-Leur，オランダ）のＭｉｌｉ−Ｑ  ＵＦプラス超純粋水システムによって濾過された水に、無作為化メチル化β−シクロデキストリン（“ＲＡＭＥＢ”）（置換度１．８）（Wacker, Burghausen,ドイツ）、マンニトール、又はグルコース、を含む溶液として製剤される。この製剤は、スプレー又は点鼻薬として投与することができる。前記液体製剤中のＮＤＧＡ化合物の投与量は、約１ｍｇ／ｍｌ〜約１５００ｍｇ／ｍｌ、又は、選択的に約１０ｍｇ／ｍｌ〜約１２００ｍｇ／ｍｌ、更には選択的に、約１００ｍｇ／ｍｌ〜約１０００ｍｇ／ｍｌ、更には選択的に、約２００ｍｇ／ｍｌ〜約８００ｍｇ／ｍｌ、又は、これの範囲内に属する任意の値、とすることができる。これらの液体製剤は、鼻孔内に噴霧したり、点鼻薬として投与したりすることができる。
【０２４７】
別実施例において、本発明は、前記ＮＤＧＡ化合物と、種々の量の、ＲＡＭＥＢ、ラクトース、又はマンニトールをＭＱ水中に溶解させ、その混合物を、例えば、一晩、凍結乾燥させることによって調製される、ＮＤＧＡ化合物の凍結乾燥散剤製剤を含む。
【０２４８】
例６：生物分解性重合体移植片の調製
ここでのＮＤＧＡ化合物は、手術不可能な腫瘍への移植のために生物分解性重合体に組み入れることができる。そのような生物分解性重合体は、例えば、フレミング，エイ・ビー（Fleming, A.B.）及びソールツマン，ダブリュ・エム（Saltzman, W.M.）（2002）に記載されているもののような、任意の従来方法によって製造することができる。通常、前記ポリマー移植片は、腫瘍の大半を除去した後に挿入される。この生物分解性重合体の単数又は複数のウエハを、所望の化合物の投与量に応じて、一度に移植することができる。前記重合体の生物分解性マトリクスは、ポリフェプロサン（polifeprosan）２０、１，３−ビス−（ｐ−カルボキシフェノキシ）プロパンとセバシン酸[ｐ（ＣＣＰ：ＳＡ）]の共重合体を２０：８０のモル比で含むものとすることができる。前記重合体を移植用に形成するために、ｐ（ＣＰＰ：ＳＡ）とここでの化合物を、ジクロロメタン中で同時に溶解し、噴霧乾燥させて、約１μｍ〜約２０μｍの寸法範囲の球状粒子を形成することが出来る。その結果得られる「微小球体（microsphere）」を圧縮成形して、任意の寸法、例えば、直径が約１４ｍｍで厚みが約１ｍｍのウエハを形成することができる。これらのウエハ、小さな空隙に取り囲まれた密につめられた微小球体から成る均質構造を有する。ＮＤＧＡ化合物の濃度は、例えば、３．８％活性化合物など、治療される対象体に適切な任意の量にすることができる。
【０２４９】
例７：ＰＬＧＡ−ｍＰＥＧナノ粒子の調製
前記ＮＤＧＡ化合物を含有するＰＬＧＡ−ｍＰＥＧナノ粒子を、ソン，シー・エックス（Song, C.X.）他（1997）によって記載されている二重エマルジョン法を少し改変した方法を使用して調製することができる。ここで、ＮＤＧＡ化合物の水溶液を、プローブ超音波処理（Bioblock Scientific，モデル７５０３８）を使用して、前記共重合体が溶解されたジクロロメタン中で乳化することができる。この水／油エマルジョンを、コール酸ナトリウムの水溶液に移し、その混合物をプローブ超音波処理することができる。結果形成された水／油／水エマルジョンを、有機相の蒸発が完了するまで、室温でゆっくりと攪拌することができる。このようにして作られたナノ粒子は、遠心分離によって精製し、脱イオン化され蒸留された水で再構成することができる。次に、これらのナノ粒子を、例えば、１.２μｍのフィルタ（Millex AP, Millipore）等を通して濾過することができる。
【０２５０】
例８： ＮＤＧＡ化合物を含有するプルロニックミセルの調製
プルロニックは、トリブロックＰＥＯ−ＰＰＯ−ＰＥＯ共重合体であり、ＰＥＯはポリ（エチレン酸化物）を表しＰＰＯはポリ（プロピレン酸化物）を表す。疎水性の中央のＰＰＯブロックはミセルコアを形成し、側方のＰＥＯブロックは、ミセルを細網内皮系（“ＲＥＳ”）による認識から保護する、シェル又はコロナを形成する。プルロニック共重合体は、BASF Corp,及びICIから市販されている。前記ＮＤＧＡ化合物を、例えば、ラポポート，エヌ・ワイ（Rapoport, N.Y.）他（1999）に記載されているもののような任意の従来方法でプルロニックミセルに導入することができる。
【０２５１】
簡単に説明すると、例えば、前記ＮＤＧＡ化合物は、ＰＢＳやＲＰＭＩ培地に溶解させ、その後、６７ｋＨｚで作動する超音波処理浴中での短い、例えば１５秒間、の超音波処理を行うことができる。この溶液は、約２時間３７℃で保存し、これにより、溶解されていない薬剤を、１０００Ｄカットオフ膜を通して、３７℃で約１２時間、ＰＢＳ又はＲＰＭＩ培地に対する透析によって除去することができる（透析は、１０ｗｔ％と２０ｗｔ％のプルロニック溶液に対してのみ行われる）。
【０２５２】
例９：移植によるＮＤＧＡ化合物の投与
前記ＮＤＧＡ化合物の移植は、従来方法によって行うことができる。一実施例において、移植は、ブレム，エイチ（Brem, H.）及びガビキアン，ピー（Gabikian, P.）(2001)に記載されているように行われる。前記重合体移植片の挿入に先立って、腫瘍の大半が外科的に除去される（debulked）ことが好ましい。更に、脳脊髄液の漏出を無くし、感染のリスクを低減するために、硬膜を水密に閉じるべきである。又、神経学的妥協（neurological compromise）のために必要であれば、術前抗痙攣薬と高投与量ステロイドを使用することも望ましい。更に、ステロイド療法を、術後少なくとも２週間続けることが望ましい。
【０２５３】
例１０：吸入を介したエタノール中のＮＤＧＡ化合物の投与
ここでのＮＤＧＡ化合物は、乾燥散剤や水溶液を含む、任意の従来の製剤を使用して吸入を介して投与することができる。前者は、安定性、微生物の成長に対する低い感受性、及び、ひと吹き当たりの高い質量、の利点を有する。水溶液は、より良好な再現性を提供し、疑集塊の問題を回避する。
【０２５４】
一実施例において、ある種の前記ＮＤＧＡ化合物が、チョイ，ダブリュ・エス（Choi, W.S.）他（2001）に記載の方法によって投与される。特定の化合物及びその溶解性に応じて、前記化合物を、例えば、約１ｍｇ／ｍｌ〜約１０００ｍｇ／ｍｌ、又は、その任意の中間値、例えば、約２ｍｇ／ｍｌ〜約８００ｍｇ／ｍｌ、約４ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌ、又は、約５ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、等のエタノール中の適当な濃度で製剤することができる。最大の深い肺投与のために、１−３μｍの粒径の煙霧剤粒子を作り出すことができる。前記化合物のエタノール中のより良好な溶解性のためには、ここでの化合物をまず凍結乾燥し、その後、必要であれば、又は望ましいのであれば、Ｈ３ＰＯ４等で酸性化することができる。その結果得られる組成物のｐＨを、望ましいのであれば、ＮａＯＨによってｐＨ７．４等に調節することができる。その後、得られる組成物を凍結乾燥させ、エタノール中に懸濁させ、超音波処理し、攪拌し、適当なサブミクロン粒径の粒子を製造することができる。次に、煙霧化された化合物を、コンプレッサ（空気噴流）、超音波式又は計量投与量吸入器などの標準的な市販の噴霧器を使用して投与することができる。一例は、ＰＡＲI  ＰＲＯＮＥＢコンプレッサとの組み合わせの、ＰＡＲＩ  ＬＣ  Ｊｅｔ＋噴霧器（PARI Respiratory Equipment,モントレー、カルフォルニア州）である。約９ｍｌの量を前記噴霧器の貯蔵器に投入し、約１０分間まで、噴霧することができる。
【０２５５】
別実施例において、吸入用の製剤は、ワン，ディ・エル（Wang, D.L.）他（2000）に記載されているように調製することができる。例えば、粉末化されたＮＤＧＡ化合物を、１０：９０（ｖ／ｖ）ポリエチレングリコール３００：０．５％（ｗ／ｖ）のアスコルビン酸と０．５％（ｗ／ｖ）のホスファチジルコリンとを含有する、１００％エタノールに溶解させることができる。次に、この薬剤を、ＰａｒｉＬＣ−ｐｌｕｓ噴霧器（Pari, Richmond, VA）を使用して噴霧化し、このようにして発生された煙霧剤に治療対象体を、その薬剤の投与量、達成されることが望まれる濃度、に応じて、異なる時間、晒すことができる。そのような時間は、約５分間、１０分間、１５分間以上とすることができる。
【０２５６】
例１１：特定設計された吸入装置を使用したＮＤＧＡ化合物の投与
前記ＮＤＧＡ化合物は、吸入の目的ためのその他多数の薬学的に許容可能な担体に製剤することができる。この例において、ここでの化合物のいくつかを、エンク，エイ・エイチ（Enk, A.H.）他（2000）に記載の方法によって投与することができる。そのような化合物は、約５％のグルコースと２％のヒトアルブミンとを含有する溶液に溶解することができる。次に、特別に設計された吸入装置を使用して吸入を行うことができる（Jetair, Fa,ホイヤー，ドイツ）。
【０２５７】
例１２：口部損傷の治療のための洗口剤としてのＮＤＧＡ誘導体の投与
口腔に対するＮＤＧＡ誘導体の投与は、例えば、アームストロング，ダブリュ・ビー（Armstrong, W.B.）他 (2000)に記載されているもののような、従来技術である賦形剤を使用した洗口剤としての使用に関する。ＮＤＧＡ誘導体を、使用の直前に、例えば、Roxane Saliva Substitute（Roxane Laboratories, コロンバス、オハイオ）等の適当な投与流体中に再構成された散剤として分散させる。次に、患者は、薬剤混合物を吐き出すか、飲み込む前に、ＮＤＧＡ誘導体懸濁液を約１分間口の中に保持する。この手順が、口腔へのＮＤＧＡ誘導体の局所投与のために、少なくとも一日に一回、行われる。
【０２５８】
或いは、口腔へのＮＤＧＡ誘導体の投与は、エプスタイン，ジェイ・ビー（Epstein, J.B.）他 (2001)に記載されているもののような洗口剤を利用するものとすることができる。簡単に説明すると、前記ＮＤＧＡ誘導体を、約０．１％のアルコールとソルビトールとを含有する洗口剤に調製する。患者は、例えば、一回の濯ぎにつき約５ｍｌ等の、適当な量を与えられ、これで口の中を約１分間濯ぎ、その後、吐き出す。この手順が、口腔へのＮＤＧＡ誘導体の局所投与のために、少なくとも一日に一回、行われる。
【０２５９】
例１３：Ｍ４Ｎの全身又は経口投与後におけるマウスの腫瘍成長の阻止
この例において、本発明者等は、Ｍ４Ｎの癌治療潜在能力を、複数のヒト癌異種移植片モデルに対する生体内でのその抗癌有効性と、薬学的に関連するレベルでの種々の投与経路を通じて全身投与される能力との両方を調べることによって、大幅に拡張した。この例は以下を示す。（１）腹腔内（ＩＰ）注射、静脈内（ＩＶ）注射、及び経口給飼を含む全身投与の種々の経路を介して生体内で投与された時、Ｍ４Ｎは、マウスに対する明白な毒性がほとんど、又はまったく無しで、種々の器官と腫瘍とに対して一貫して分布する。（２）Ｍ４Ｎの全身ＩＰ投与は、４種類のヒト癌タイプ、即ち、ＭＣＦ−７乳癌、Ｈｅｐ３Ｂ肝細胞癌、ＨＴ−２９結腸直腸癌、及びＬＮＣａＰ前立腺癌、からの異種移植片の生体内成長を効果的に遅延させ、Ｍ４Ｎの全身経口投与は、ＬＮＣａＰ異種移植片腫瘍の成長を効果的に抑制する−今のところＬＮＣａＰ腫瘍のみが経口投与有効性の研究において評価されている。
【０２６０】
細胞ラインと培養条件  ヒト腫瘍細胞ラインは、ATCC（Mannassas,VA）から購入した。ヒト肝細胞癌細胞ライン、Ｈｅｐ  ３Ｂ、とヒト乳上皮腺癌細胞ライン、ＭＦＣ−７は、イーグル最少必須培地＋１０％ＦＢＳ＋ペニシリン＋ストレプトマイシン中で成長させた。ヒト結腸直腸腺癌細胞ラインＨＴ−２９は、マッコイ５ａ培地＋１０％ＦＢＳ＋ペニシリン＋ストレプトマイシン中で成長させた。ヒト前立腺癌細胞ラインＬＮＣａＰは、ＲＰＭＩ  １６４０＋１０％ＦＢＳ＋ペニシリン＋ストレプトマイシン中で成長させた。
【０２６１】
マウス
６−８週齢のメスのＩＣＲマウスを、Harlan Sprague Dawley （Indianapolis, IN）から購入した。Ｃ５７ｂｌ／６マウスを、Charles River Laboratories （Wilmington, MA）から購入した。胸腺欠損（ｔｈｙ−／ｔｈｙ−）ヌードマウス、５−６週齢のオスとメス、をCharles River Laboratoriesから購入し、国際動物保護及び使用ガイドラインに基づき、制御された温度と湿度の無病原室に収納した。
Ｃ３−細胞誘発腫瘍を有するＣ５７ｂｌ／６マウスを、キム，イー・エイチ（Kim, E.H.）他（2004）に記載されているように準備した。
【０２６２】
ヒト腫瘍の異種移植片アッセイ  無胸腺ヌードマウスに、２．５ｘ１０６Ｈｅｐ  ３Ｂ細胞、２ｘ１０６  ＬＮＣａＰ細胞、１x１０７  ＨＴ−２９細胞、又は２ｘ１０６  ＭＣＦ−７細胞を、それらの脇側に皮下移植した。腫瘍が７〜８ｍｍの平均直径を示した後、マウスを二つのグループ、溶媒のみを受ける対照グループと、Cremaphor EL−エタノール系溶液システムに溶解させたＭ４Ｎを受けるグループのいずれか、に割り当てた。割当は、対照グループと実験グループとの両方が同程度の寸法の腫瘍を有するマウスを含むように行われた。
【０２６３】
Ｍ４Ｎを、ロガンツォ（Loganzo）他（2003）に記載されているように、６％  Cremaphor EL，６％エタノール、８８％生理食塩水中に溶解させた。マウスに、２ｍｇのＭ４Ｎを含有する一日当たり１００μＬ．ｉ．ｐ．の注射を３週間与えた。対照マウスには、同量の賦形剤を与えた。腫瘍を、７日間毎に、二つの垂直寸法（ＬとＷ）で測定し、腫瘍の体積を、下記の式：Ｖ＝（ＬｘＷ／２）３ｘπ／６、によって算出した。それぞれのマウスからの結果を、時間対の平均腫瘍体積としてプロットした。腫瘍体積の平均差の統計上の有意性を、スチューデントＴ検定によって評価した。実験の最後に、ｃｄｃ２とサバイビン（survivin）発現の免疫組織学的な解析のために、腫瘍生検を収集した。
【０２６４】
３Ｈ−Ｍ４−Ｎを使用したＭ４Ｎ組織分布の研究
Ｈａｒｌａｎ  ＩＣＲマウス又はＣ３細胞誘発腫瘍Ｃ５７ｂｌ／６マウスに、尾静脈を介して、１００μＣｉのトリチウム標識Ｍ４Ｎと６０ｍＭの非放射性のＭ４Ｎとを含有する１００μＬのCremaphor−エタノール系溶剤を腹腔内注射した。特定の注射後時に、これらのマウスを犠牲にし、その器官と血液を収集し、計量し、４Ｍグアニジンイソチオシネート（ＧＩＴＣ）中に一晩溶解させた。その後、不溶性ペレットを更にＥｔＯＨで抽出した。ＧＩＴＣ抽出物とＥｔＯＨ抽出物との両方のトリチウム含有率を、パッカード  シンチレーション  カウンターで測定し、各器官のＭ４Ｎの量を、接種原の特異的活性に基づいて算出した。
【０２６５】
短期及び長期経口給飼後の組織分布及び毒性分析
短期給飼実験のために、３００μＬのひまし油中に溶解させた３０ｍｇのＭ４Ｎを、６匹のマウスのそれぞれに経口投与した。投与の２時間後、４時間後、及び８時間後に、２匹のマウスを犠牲にし、器官と血液を収集し、下記のように、Ｍ４Ｎを抽出し、定量化した。長期給飼実験では、マウスに、コーン油に溶解させたＭ４ＮとBasal Mixとから成るフードボール（Harlan Teklad；Madison, WI；Cat.#TD02273）を１４週間与えた。フードボールの重さは９gで、それぞれが２４２ｍｇのＭ４Ｎを含有していた。２匹のマウス、一匹のオスと一匹のメス、を長期薬剤保持研究のために確保し、１４匹のマウス、オスとメスの双方、の長期薬剤毒性研究のために使用した。給飼の終わりに、マウスを犠牲にし、器官と血液を収集し、下記のようにしてＭ４Ｎを抽出し、定量化した。
【０２６６】
経口給飼後のＭ４Ｎ抽出とＨＰＬＣ解析
Ｍ４Ｎ給飼マウスから収集した器官と血液を、一晩−８０℃で凍結させた。凍結の前に、胃腸器官（胃と、小腸と結腸）を長手方向に切開し、全ての含有物を除去するためにＰＢＳで徹底的に洗浄した。次の日、器官を剃刀でドライアイス上にて小片に切断し、スピード−バック（Speed-vac）中で乾燥させ、その後、乳鉢と乳棒とを使用して粗い粉体に粉砕した。サンプルを、振とうしながら、１００％エタノール中で一晩、抽出した。サンプルを遠心分離し、上清を収集した。ペレットを、振とうしながら、更に２回、１００％エタノール中に抽出した。貯蔵されたエタノール抽出物を、ベンチトップ上で数日間蒸発させ、その後、酢酸エチルで再度抽出し、スピード−バック内で完全に乾燥させた。これらの乾燥サンプルを、次に、ＨＰＬＣによって定量化分析し、Ｍ４Ｎを、標準として純粋Ｍ４Ｎを使用した質量分析法によって同定した。
【０２６７】
短期給飼マウスからのサンプルでは、組織抽出物からＭ４Ｎを更に精製するために、透析を行った。乾燥したエタノール抽出物を、１．５ｍＬの１００％ＥｔＯＨ中で再度溶解させ、５分間遠心分離した。上清を収集し、ペレットを、０．４ｍＬのエタノール中で再懸濁し、再び遠心分離した。上清を、前の上清と共に貯蔵し、その後、一晩１５０ｍＬの１００％ＥｔＯＨに対して透析した。これらの透析物を、ベンチトップ上、及びスピード−バック内で乾燥させ、その後、ＨＰＬＣによって分析した。
【０２６８】
Ｍ４ＮのＨＰＬＣ定量化
各時点における一匹のマウスからのサンプルを、ＨＰＬＣ分析のために、KP Pharmaeuticals（Bloomington, IN）に送った。ＨＰＬＣ条件は以下の通りであった。３５％：０．１％  ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ、６５％＝“ＣＡＮ”。Ｎ４Ｎ標品を、１００ｍＬのＣＡＮに１０．０１ｍｇのＭ４Ｎを希釈することによって調製し、その後、５分間超音波処理した（２００２ｎｇ／注射）。サンプルを、４００μＬ  ＥｔＯＨを添加し、２分間、又は、完全な溶解が達成されるまで、超音波処理することによって調製した。これらのサンプルの注射量は１００μＬであった。
【０２６９】
腹腔内、静脈内及び経口投与後、Ｍ４Ｎは、種々の組織に対して全身的に、かつ、検出可能な毒性無く、分散する。
−単数の腹腔内又は静脈内投与後のＭ４Ｎの全身分布
ＵＳ６，６０８，１０８に記載されているように、前の研究によって、Ｍ４ＮのマウスのＣ３−誘発腫瘍への局所腫瘍内注射後の大きな殺腫瘍活性が示された。しかし、僅かな例外を除き、非全身腫瘍内化学療法の臨床使用は、十分定義されている原発損傷、即ち、乳部、結腸直腸、肺及び前立腺、によって特徴付けられる高死亡率癌においてさえ稀である。むしろ、臨床腫瘍学における医療の従来の学識及び標準は、外科処置後に、臨床状態において適切と考えられる場合には、全身化学療法および／又は放射線療法を、行うということのままである。多くの原発腫瘍、更に、転移性疾患の効果的な治療には、全身投与が必要であるので、Ｍ４Ｎが生体内で全身に分布する能力が評価された。
【０２７０】
トリチウム標識Ｍ４Ｎと非放射性Ｍ４Ｎの混合物を、６％ Cremaphor EL，６％エタノール、８８％生理食塩水溶媒に溶解し、マウスに、腹腔内（ｉ．ｐ．）及び尾静脈を介した静脈内（ｉ．ｖ．）で注射した。注射の３時間後、器官と血液を採取し、計量し、Ｍ４Ｎを抽出した。各器官からの抽出物のトリチウム含有量をパッカード  シンチレーション  カウンターで測定し、各器官のＭ４Ｎの量を、接種原の特異的活性に基づいて算出した。図１Ａ及び１Ｂに図示されているように、Ｍ４Ｎは、ｉ．ｐ．とｉ．ｖ．の投与経路の両方による注射の３時間後において、種々の器官に有効に分布していた。興味深いことに、投与経路の違いにも拘わらず、非常によく似た組織分布プロファイルが得られ、このことは、薬剤分散のランダムでは無く、恐らくは規制された機序を示すものである。これについて詳述すると、下記の経口投与を使用して、非常によく似た分布プロファイルが観察された。回収された放射性活性の大半は、組織１ｇ当たり３μｇ〜２０μｇＭ４Ｎの範囲で、胃腸管器官、胃、小腸、盲腸、大腸、に局在していた（図１Ａ）。有意な量のＭ４Ｎは肝臓と脂肪にも存在しており、組織１ｇ当たり１５０ｎｇ〜４００ｎｇの範囲での、より低い濃度（図１Ｂ）が、脳、腎臓、及び脾臓に検出された。但し、注射後３時間で、心臓や血液中にはＭ４Ｎは全く、又はほとんど検出されなかった。結論として、Ｍ４Ｎは、ｉ．ｐ．又はｉ．ｖ．注射を介して種々の特定の組織に全身的に投与することができる。
【０２７１】
以前の実験は、Ｍ４Ｎは、ある単一時点において種々の組織に対して全身的かつ比較的迅速に送達することが可能であることを示した。単回の投与後の組織におけるＭ４Ｎの時間分布を測定するために、又、遠位の腫瘍へＭ４Ｎを送達する能力を評価するために、６匹のＣ３細胞誘発腫瘍マウス（Ａ〜Ｆ）を、上述したようにｉ．ｐ．によって３Ｈ−Ｍ４Ｎで治療した。注射の４時間後、６時間後、１８時間後及び６日後、種々の組織と腫瘍における３Ｈ−Ｍ４Ｎの量を測定した。図２に示す結果、Ｍ４Ｎの全身分布させる能力が確認され、ここでも、Ｍ４Ｎの大半は、消化管器官、脂肪及び肝臓に局在し、より少量が脳と腎臓とに検出された。興味深いことに、そして、前の３時間注射からは明らかでなかったことであるが、脂肪と脾臓とは、４時間と６時間の間にＭ４Ｎの迅速な増加を示した。比較的少ない量、湿潤腫瘍１グラム当たり２９４ｎｇのＭ４Ｎ、ではあるが有意の量のＭ４Ｎが、注射の６時間後の腫瘍中に測定された。最初の投与後のＭ４Ｎの組織分布の変化は、これらの組織における０時間〜６時間でのＭ４Ｎのレベルの増加を示し、そのピークは約６時間であった。１８時間の時、Ｍ４Ｎのレベルは大幅に減少したが、注射の６日後では、大半の組織において有意のＭ４Ｎのレベルがまだ検出可能ではあったが、Ｍ４Ｎレベルは、６時間後に見られたものの５〜１０％まで減少していた。
【０２７２】
−短期及び長期経口給飼後の全身組織分布と生体外での毒性評価
前の実験によって、Ｍ４Ｎは、明らかな毒性無く、ＩＰ注射とＩＶ注射との両方によって生体内で全身的に分布させることが可能であることが示された。但し、経口投与の便利性及び容易性、特に、長期の外科手術後のアジュバント治療の場合は、患者に対する薬剤投与を容易にし、かつ、患者の生活質を改善するであろう。従って、ＩＰ及びＩＶ投与に加えて、Ｍ４Ｎを経口投与によって全身分布させる能力も調べた。短期（８時間未満）給飼実験と長期（１４週間）給飼実験との両方において、種々の組織中のＭ４Ｎレベルとそれらの生体内毒性とを評価した。短期実験では、マウスに、ひまし油中に溶解された３０ｍｇのＭ４Ｎ（１００ｍｇ  Ｍ４Ｎ／ｍＬ，ひまし油）を給飼し、給飼の２時間後、４時間後及び８時間後に、種々の組織中に存在するＭ４Ｎの量をＨＰＬＣによって測定した。表１に示す通り、給飼の２時間後では、各組織において比較的少量のＭ４Ｎ（組織１グラム当たり<２ｎｇ）が見られた。給飼の２時間後から４時間後では、肝臓、すい臓、腎臓、精嚢、小腸、胃、大腸、盲腸及び血液を含む大半の器官が、Ｍ４Ｎの大きな増加を示した。４時間では、ＩＰ投与とＩＶ投与とで見られたように、Ｍ４Ｎの大半は、組織１グラム当たり４ｎｇ〜４５ｎｇの範囲で、胃腸管器官に局在していた。有意の量のＭ４Ｎがすい臓にも存在しており、組織１グラム当たり０．１ｎｇ〜２ｎｇの範囲のより低い濃度が、心臓、肝臓、精嚢、血液及び膀胱に検出された。給飼の８時間後では、Ｍ４Ｎレベルは、ほとんど全ての器官において減少し、大半の器官からはＭ４Ｎは無くなっていた。結論として、Ｍ４Ｎは、３０ｍｇのＭ４Ｎの一回の経口投与後に、種々の器官に一過的に分布された。Ｍ４Ｎレベルは、給飼の約４時間後にピークに達し、Ｍ４Ｎ濃度は、ＩＰ及びＩＶ単回投与において見られるものよりも大幅に低かった。
【０２７３】
【表１】
2007500229.tif 000010
【０２７４】
長期給飼実験の目的は、１４週間の連続経口投与後における種々のマウス器官中のＭ４Ｎの安定状態レベルを測定することにあった。重さ約９ｇで、約２８０ｍｇのＭ４Ｎを含有するフードボールを、野生型のマウスに１４週間連続投与した。１つの９ｇのフードボールが、一匹のマウスによって約３日間で消費され、これは、一日当たり９３．３ｍｇのＭ４Ｎ消費又は投与量に相当する。ＨＰＬＣ定量化は、経口投与が、Ｍ４Ｎを、分析されたすべての器官に全身的に分布させていたこと、そして、驚くべきことに、ＩＰ， ＩＶ及び経口での一回の投与において見られたものを遥かに上回る濃度でＭ４Ｎを全ての器官において蓄積されたことを示した。組織１グラム当たり３５０μｇ及び９０μｇのＭ４Ｎが、消化管器官と脾臓とにおいて測定され、１５μｇ／ｇ〜３０μｇ／ｇのＭ４Ｎが、肺、すい臓、精嚢、血液及び脂肪中に測定され、５μｇ／ｇ〜１３μｇ／ｇのＭ４Ｎが心臓、肝臓、腎臓及び膀胱に測定された。
【０２７５】
全身長期経口投与後に高レベルのＭ４Ｎが種々の器官に存在したにも拘わらず、活動と全体的な体重変化の日々の評価において、毒性の徴候は認められなかった（図３）。
【０２７６】
Ｍ４Ｎの全身治療は、ヒト腫瘍異種移植片の生体内での成長を抑制する
（１）Ｍ４Ｎは、種々のヒト腫瘍細胞の成長を効果的に防止することを示したわれわれの細胞培養分析と、（２）Ｍ４Ｎは、無毒性投与量で全身に分布することができることを示した我々の生体内での観察、とに基づき、と我々は、Ｍ４Ｎの全身投与がヒト腫瘍の生体内での成長を抑制するか否かを調べた。無胸腺ヌードマウスに、ｓ．ｃ．で、各脇側に、ＭＣＦ−７胸部腺癌細胞と、Ｈｅｐ３Ｂ肝細胞癌細胞、ＨＴ−２９結腸直腸癌細胞、及びＬＮＣａＰ前立腺癌細胞、を移植した。ほとんどのマウスは、両脇腹に癌が成長したが、何匹かは単一の癌のみが成長した。腫瘍が７〜８ｍｍの平均直径に達した時、マウスは、１００μＬのCremaphor−エタノール系溶媒中に溶解した２ｍｇのＭ４Ｎを含有するｉ．ｐ．注射を一日一回三週間に渡って受けた。対照マウスは賦形剤のみを受けた。腫瘍を、７日毎に一回二つの垂直方向（ＬとＷ）において測定し、腫瘍体積を式によって算出した。
【０２７７】
【数４】
2007500229.tif 000011
【０２７８】
図４に図示されているように、２１日間に渡るＭ４Ｎの全身投与によって、４種類のすべての腫瘍での平均腫瘍成長において統計的に有意（p ＜ ０．０５）な減少があった。２１日間の全身Ｍ４Ｎ投与後、ＭＣＦ−７腫瘍は、平均腫瘍体積において、対照腫瘍の平均体積の僅か２５．５％にまで７４％減少し（表２）、ＨＴ−２９腫瘍は平均体積において７０％減少し、Ｈｅｐ３Ｂ肝臓主要は８０％減少し、ＬＮＣａＰ前立腺腫瘍は５３％減少した。
【０２７９】
表３は、各投与群の腫瘍の総数を示し、それぞれを、前記２１日間の投与において寸法が全体として増加したか、減少したかに基づいてに分類している。４種類すべての腫瘍において、対照腫瘍の１００％が、それぞれ腫瘍寸法の増加を占めた。しかし、Ｍ４Ｎ投与マウスでは、２１日間の全身Ｍ４Ｎ投与後、１０個のＭＣＦ−７腫瘍のうちの７個の寸法が減少し、７個のＨｅｐ３Ｂ腫瘍のうちの２個の寸法が減少し、１１個のＨＴ−２９腫瘍のうちの３個の寸法が減少し、１１個のＬＮＣａＰ腫瘍のうちの９個の寸法が減少した。纏めると、４７個の対照群の腫瘍でその１００％で寸法が増大したのに対して、３９個のうち２１個、つまり５３％のＭ４Ｎ投与腫瘍が、２１日間の全身投与後に寸法が減少し、３９個のＭ４Ｎ投与腫瘍のうちの残りの１８個が、それらの開始時の腫瘍寸法からは増加したものの、大半が２１日間の投与中に成長の阻害を示した。各タイプの腫瘍に認められた有意な殺腫瘍作用にもかかわらず、前記マウスの体重と一般的健康状態が２１日間の投与に渡ってモニターされたが、いずれのマウスにおいても毒性は示されなかった。
【０２８０】
【表２】
2007500229.tif 000012
【０２８１】
【表３】
2007500229.tif 000013
【０２８２】
例１４：ヒトにおける安全性の研究
この例において、本発明者等は、ヒトにおけるＮＤＧＡ誘導体投与の、頭部及び頸部癌の治療としての安全性及び有効性を明白に示した。この例は、患者年齢範囲、疾患発達段階、及び二つの異なる治療法にわたる二つの別々の臨床試験の結果を記載するものである。この例によって以下が示された（１）Ｍ４Ｎは、毎週約４９５ｍｇまでの投与量を三週間、又は、一日につき２０ｍｇで、５日間まで、で、薬剤関連毒性無く、投与可能である。この毎日のＭ４Ｎの投与は、Ｍ４Ｎを一日当たり２０ｍｇの投与量で５日間までの、併用療法有り又は無しで行うことができ、その後、病巣の外科的切除が行われる。（２）これらの治療法の両方が、これらの治療を完了した患者における壊死の誘発の点において８０％以上の有効性を提供した。（３）ＵＳ以外での試験（ex-US study）の長期経過追跡において、患者の６４％が、疾患がない状態に維持され、又、ＮＤＧＡ誘導体暴露に対する長期作用も無かった。
【０２８３】
ＵＳ第Ｉ相腫瘍内頭部及び頸部癌試験
第Ｉ相臨床試験が、ＵＳ  ＩＮＤのもとで完了された。平均対象体年齢は、６６歳（５３〜８２歳）であった。８名の男性対象体と１名の女性対象体が参加した。平均体重は１３９ポンド（１０２〜２１９ポンド）であって。すべての患者は、難治の頭部及び頸部癌と診断されていた。
【０２８４】
９名の患者に、Ｍ４Ｎの腫瘍内投与で、毎週、三週間、５ｍｇ／ｃｍ３腫瘍体積（２名の対象体）、１０ｍｇ／ｃｍ３腫瘍体積（２名の対象体）、１５ｍｇ／ｃｍ３腫瘍体積（３名の対象体）、及び２０ｍｇ／ｃｍ３腫瘍体積（２名の対象体）、を投与した。週に４９５ｍｇまで三週間の投与量を投与した。
【０２８５】
３名の対象体はプロトコルによって研究を完了した。２名の対象体は、試験中に、試験投薬と関連する可能性が低いと考えられる原因で死亡した。１名の対象体は、プロトコルの要件を満たすために移動することが出来なかったために、Ｍ４Ｎの３回の投与後に、同意を撤回した。１名は、偶発的な神経周囲投与に関連する注射時の重篤な放散痛を経験した後、同意を撤回した。１名が、その腫瘍が安全な２回目の投与を可能とするには頚動脈に余りにも近いと見なされたために、１回の投与後に撤退された。１名は、腫瘍の進行の結果、撤回された。その他の点では投与に関連する有害事象は僅かなものであり、注射時における軽い又は中程度の痛みを含むものであった（４名の対象体）。Ｍ４Ｎ投与が原因とされるその他の有害事象は無かった。散発性で、そして非再現性の軽いＬＦＴの上昇が２名の対象体で見られ、これらは、まだ治療中に解消した。血液パラメータには、薬剤を原因とする変化は見られなかった。
【０２８６】
６件の重篤な有害事象（ＳＡＥ）が４名の対象体で報告された。これら重篤な有害事象は、上室性頻脈（１名の対象体における２つの別々の場合での２つの発症）、肺炎、脱水、および腫瘍の進行からの死亡（１名の対象体）、及び研究の１９日後の死亡（原因不明）を含むものであった。全症例において、ＳＡＥは、そのような投薬との関係が低い、又は無関係であると見なされた。
【０２８７】
三回の投与を受けた６名の対象体の内の５名において、注射後に薬剤に関連する腫瘍の壊死が起こった。腫瘍の回りの健全な組織には損傷はなかった。瘻孔の形成が、腫瘍が完全な厚さであったところで発生した。腫瘍は、又、やわらかくなった、又は、「平らに延びた」ことも銘記されたが、縁部における残りの腫瘍が成長し続け、このことは全身投与がより適切であるかもしれないということを示唆した。３回の投与を完了した前記６名の対象体のうちの３名において、腫瘍の体積減少が放射線によって確認された。投与量は、一般的に良好に許容された。
【０２８８】
例１５．Ｍ４Ｎの１４日間の静脈内投与後のビーグル犬での安全性の研究
この実験において、オス及びメスのビーグル犬に対するＭ４Ｎの二種類の製剤[Cremaphor−エタノール（ＣＥＴ）又はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）]の製剤の最大耐容量（ＭＴＤ）を測定した。この例は、Ｍ４Ｎが、犬に対して、四時間にわたる静脈内注入で、ＣＥＴ賦形剤の場合は１０ｍｇ／ｋｇまで、ＤＭＳＯ賦形剤の場合は１００ｍｇ／ｋｇまで、安全に投与されたことを示している。これらの製剤で、最小の毒性で、１４，０００ｎｇ／ｍｌ  Ｍ４Ｎ以下の血中レベルが達成された。
【０２８９】
Ｍ４Ｎ−ＣＥＴ  グループの血管アクセスポート（Vascular Access Port：ＶＡＰ）移植外科手術
ＶＡＰをビーグル犬に対して、注入カテコールの先端が、上大静脈の準位に位置するように移植した。犬は、外科手術の日に、鎮痛剤と抗生物質とによって、又、手術後は、抗生物質および／又は鎮痛剤によって予防的に処理された（適切な場合には、Gene Logic Inc. SOP Nos. 324.0.2、325.0.1及び326.0.2によって）。その他の処置が、スタッフの獣医による推奨により、提供された。カテーテルラインを、研究指導者によって適切であると見なされた頻度で、術後の回復時期中に、生理食塩水によって洗浄した。
【０２９０】
ＶＡＰが、Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯの注入を受けるように指定された犬に移植されたが、ＤＭＳＯは、動物内のＶＡＰに付着した注入カテーテルに適合しないことがわかった。従って、Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯグループ動物には、４時間の時間にわたり３０分間毎に、非−ＶＡＰ頚静脈を介して、８回の静脈内注射によってＭ４Ｎ−ＤＭＳＯが投与された。この送達頻度は、注入ポンプを使用した試験物の送達を模したものであった。
【０２９１】
【表５】
2007500229.tif 000014
【０２９２】
前記ＣＥＴグループからの動物を、注入期間全体と、注入後の少なくとも一時間後とに観察した。ＤＭＳＯグループの犬は、頚静脈注入期間全体と、最後（８回目）の注入後の少なくとも１時間とに観察した。
【０２９３】
毒物動態学（ＴＫ）解析のための血液サンプルの収集
前記ＣＥＴグループ動物からの血液サンプルを、下記の時点、即ち、投与前、約４時間の注入の完了後の、０．２５，０．５．１，２，４，８及び１６時間後、研究日（ＳＤ）１，ＳＤ３，ＳＤ６及びＳＤ８に頚静脈を介して収集した。
【０２９４】
前記ＤＭＳＯグループ動物からの血液サンプルを、下記の時点、即ち、投与前、Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯの最終注入後の、投与前、０．２５，０．５，１，２，４，８及び１６時間後、ＳＤ１，ＳＤ３，ＳＤ６及びＳＤ８に頭部静脈を介して収集した。
【０２９５】
両動物グループから収集された血液サンプルを、血漿及び血清のＴＫ解析のために処理した。
【０２９６】
ＴＫ分析
前記血漿及び血清サンプルを、ＴＫ分析のために本提供者が指定した研究所である、MedTox Laboratoriesに送った。Ｍ４Ｎ血漿及び血清濃度−時間データのＴＫ分析を、MedTox Laboratoriesによる確証方法（Ｍ２００４０６）を使用して行い、非コンパートメント法によって分析し、毒物動態学的パラメータ（データによって可能である場合）、但し、Ｃｍａｘ，Ｔｍａｘ及びＡＵＣに必ずしも限定されるものではない、の推定値を得た。
【０２９７】
研究日１（ＳＤ１）：
ａ）Ｍ４Ｎ−ＣＥＴグループ
オス犬：ＣＥＴ注入に対して、最初の一時間半で、紅斑、蕁麻疹、そう痒、嘔吐、下痢、及び一般的な傾眠で反応した。そのあと、回復を始め、歩き回り始め、水を飲み始めた。注入終了後直ぐに正常に挙動した。
メス犬：嘔吐と下痢が無かったこと以外はオス犬と類似の反応であった。そのアレルギー反応も、オス犬よりも軽かった。注入終了後直ぐに正常に挙動した。
【０２９８】
ｂ）Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯグループ
オス犬：ＤＭＳＯ注入に対して、軽度の紅斑、軽いそう痒、で反応した以外は、正常であった。最後の注入終了後直ぐに正常に挙動した。メス犬：オス犬と類似の反応。最後の注入終了後直ぐに振る舞いは正常になった。４匹の犬全部がそのそれぞれの賦形剤処理の注入に生き残った。それらはすべて治療後、健康で正常に挙動した。
【０２９９】
研究日３（ＳＤ３）：
ａ）Ｍ４Ｎ−ＣＥＴグループ
オス犬：Ｍ４Ｎ− ＣＥＴ（１ｍｇ／ｋｇ）注入に対して、軽い紅斑、蕁麻疹、そう痒、で反応した。この日のこれらの反応は、ＳＤ１のものよりも軽度であった。具体的には、動物には、嘔吐、下痢及び傾眠は無く、ＳＤ１においてよりもより機敏であった。注入終了後直ぐに正常に挙動した。メス犬：Ｍ４Ｎ−ＣＥＴ（１ｍｇ／ｋｇ）当日の注入に対するその反応は、ＳＤ１に観察されたものよりも更に軽度であった。そのアレルギー反応は、軽い紅斑とそう痒を含んでいたが、その４時間の注入期間全体を通じて一般的に極めて機敏であった。注入終了後直ぐに正常に挙動した。
【０３００】
ｂ）Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯグループ
オス犬：この犬によるなんら有害な臨床反応はなかった。予想されたように、頚静脈の沿った注射部位にいくらかの炎症があった。
メス犬：この犬によるなんら有害な臨床反応はなかった。予想されたように、頚静脈の沿った注射部位にいくらかの炎症があった。
４匹の犬全部がそのそれぞれの試験物治療に生き残った。それらはすべて治療後、健康で正常に挙動した。
【０３０１】
研究日６（ＳＤ６）：
ａ）Ｍ４Ｎ−ＣＥＴグループ
オス犬：以前の二つの投与日に類似し、この動物は、注入に対して軽い紅斑、蕁麻疹及び、そう痒で反応した。これらの反応の強度は、ＳＤ３での反応よりも確実に小さかった。動物は、嘔吐や下痢をせず、注入期間全体を通して一般的に機敏であった。注入終了後直ぐに正常に挙動した。
メス犬：以前の投与への反応と一致して、オス犬よりも当日の注入によく耐容性を示した。動物は軽度の紅斑、及び、そう痒を示したが、ほとんど機敏であった。注入終了後直ぐに正常に挙動した。
【０３０２】
ｂ）Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯグループ
オス犬：この犬は、最初の３回の投与間隔（投与の間に１／２時間）において非−ＶＡＰ頚静脈を介してＭ４Ｎ−ＤＭＳＯをうまく静脈内注射された。前の投与日と同様、この犬も各注射後において、なんら有害な臨床的徴候又は症候群を示さなかった。４回目の注射に先立って、技術者は、注射部位の周りに「卵の寸法」の腫れに気づいた。皮下投与ミスの可能性は、それは、３回目の注射中に容易に検出されたであろうため、除外することができた。それは、注射部位を通して血液がゆっくりと血管外放出した結果の血腫である可能性が最も高かった。この動物は、三回目の注射後、それ以上の投与を受けなかったが、但し、血液サンプルは収集され、三回目の注射投与後の血液収集の正確な時点は明確に記録された。血腫は、２時間以内に無くなり、注射部位領域をゆっくりマッサージしても動物に炎症を起こさせることはなかった。
メス犬：この犬は、４時間にわたる８回反復投与全体においてＭ４Ｎ−ＤＭＳＯをうまく注射された。前の投与日と同様、この犬もなんら有害な臨床的徴候又は症候群を示さなかった。
【０３０３】
研究日８（ＳＤ８）：
ａ）Ｍ４Ｎ−ＣＥＴグループ
オスとメスの両方の犬が全投与を受けた。この高投与量に対するそれらの反応は、紅斑、蕁麻疹、及び、そう痒を含む、以前の投与日に示されたものに類似していた。嘔吐や下痢は無かった。動物は、注入終了後直ぐに正常に挙動した。
【０３０４】
ｂ）Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯグループ
オスとメスの両方の犬が全投与を受けた。この高投与量に対するそれらの反応は、前の投与日に示されたものに類似していた。両方の犬が嘔吐の無い、いくらかの悪心反応を示し、それは通常よりも傾眠であったことからより多くの消化管炎症があったと思われた。しかし、両方の犬が、全高投与量の投与療法に生き残り、投与の完了後には回復したようであった。
【０３０５】
Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯグループのための追加投与（２００ｍｇ／ｋｇ）
Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯを１００ｍｇ／Ｋｇ投与された動物はなんら有害な臨床的徴候又は症候群を示さなかったので、二匹の予備の犬（オス１匹とメス１匹）に、Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯを２００ｍｇ／Ｋｇ投与した。２００ｍｇ／Ｋｇでは、メス犬は、８回の投与の最初のあとに既に呼吸困難（鼻からの泡立ち）を経験し、直ぐに虚脱したが、二回目の投与時では回復することができ。二回目の投与後、その反応は、類似していたが、更に深刻であった。従って、スタッフ獣医はこのメス犬を安楽死させることを提案した。オス犬は、それよりも僅かに耐性を示したが、類似の呼吸困難と虚脱症候群を示した。この動物は全部で三回の投与を受けたが、スタッフ獣医はそれ以上の投与を停止することを提案した。
この追加投与のためには投与後のＴＫ分析は行われず、当日に収集された全ての投与前血液サンプルは破棄された。
【０３０６】
ＴＫ分析
ａ）Ｍ４Ｎ−ＣＥＴグループ
【０３０７】
【表６】
2007500229.tif 000015
【０３０８】
一般に、異なる投与レベルのＭ４Ｎ−ＣＥＴの４時間の静脈内投与によって、初期の時点においては極度に高い血清濃度となり、注入終了後の３０分後でピークに達した（表７）。試験物の血清濃度は、その後の１５時間で減少した。
【０３０９】
ｂ）Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯグループ
【０３１０】
【表７】
2007500229.tif 000016
【０３１１】
一般に、４時間の異なる投与レベルのＭ４Ｎ−ＤＭＳＯの反復静脈内投与によって、極度に高い血清濃度となった。表９に報告されている血清濃度データは、検出範囲に対応するための血清の全身希釈後の結果である。これらの結果は、一般的に、Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯの血清濃度が、初期の時点において高く、最後の注射の３０分後にピークに達したことを示している。試験物の血清濃度は、その後の１５時間で低下した。このグループからの血清濃度に基づき、反復静脈内投与による投与時の、Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯの半減期間は、約１．５〜２時間であった。このＭＴＤ相におけるＭ４Ｎ−ＤＭＳＯの投与前血清濃度から、血液中において試験物の僅かな増大があったが、この保持は一般に最高の血清濃度の０．３％以下であったことが銘記される。
【０３１２】
この研究のＭＴＤ相の目的は、オスとメスのビーグル犬に対する二種類のＭ４Ｎ製剤（Cremaphor−エタノール又はジメチルスルホキシド）の最大耐容量を判断することにあった。Ｍ４Ｎ−ＣＥＴを受けた動物グループは、Cremaphor−エタノールの効果に合致する臨床徴候及び症候群である、そう痒、紅斑、蕁麻疹、及び眠気の反応を示した。Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯの反復注射を受けた動物グループは、１００ｍｇ／ｋｇで、注射部位でのいくらかの炎症と、僅かな悪心を示した。しかし、両方の動物は、２００ｍｇ／ｋｇのＭ４Ｎ−ＤＭＳＯの２又は３回の注射後は虚脱した。このグループからのＴＫ分析は、Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯの半減期が１．５〜２時間の範囲であることを示唆している。このＭＴＤ相における試験物の僅かな増大があったが、この保持は一般に最高の血清濃度の０．３％以下であった。結論として、この研究のＭＴＤ相は、重篤な有害臨床徴候及び症候群をもたらした投与量が同定され、したがって、この相の目的が達成されたことで成功であった。
【０３１３】
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【図面の簡単な説明】
【０３１４】
【図１Ａ】静脈内および腹腔内注射の３時間後における種々の器官へのＭ４Ｎの全身分布を示し、マウスに、１００μＣｉの３Ｈ−Ｍ４Ｎと６０ｍＭの未標識Ｍ４Ｎとを注射し、注射の３時間後に器官と血液を収集、及び計量し、Ｍ４Ｎを抽出し、これら器官抽出物のトリチウム含有率を測定し、各器官中のＭ４Ｎの量を、接種物の比活性に基づいて計算したものであり、比較的高い量のＭ４Ｎを含む各器官に見られた、１グラムの組織当たりのＭ４Ｎのマイクログラム単位の量を示している。
【図１Ｂ】静脈内および腹腔内注射の３時間後における種々の器官へのＭ４Ｎの全身分布を示し、マウスに、１００μＣｉの３Ｈ−Ｍ４Ｎと６０ｍＭの未標識Ｍ４Ｎとを注射し、注射の３時間後に器官と血液を収集、及び計量し、Ｍ４Ｎを抽出し、これら器官抽出物のトリチウム含有率を測定し、各器官中のＭ４Ｎの量を、接種物の比活性に基づいて計算したものであり、比較的低い量のＭ４Ｎを含む器官を示している。
【図２】図２は、種々の時点におけるＭ４Ｎの全身組織分布プロファイルを図示しており、マウスに、１００μＣｉの３Ｈ−Ｍ４Ｎと６０ｍＭの未標識のＭ４Ｎとを注射し、注射の４，６，１８時間後と６日後とに器官と血液を収集、及び計量し、Ｍ４Ｎを抽出し、これら器官抽出物のトリチウム含有率を測定し、各器官中のＭ４Ｎの量を、接種物の比活性に基づいて算出した。
【図３Ａ】明白な毒性を示していない、Ｍ４Ｎの長期経口給飼中のマウスの体重を示し、オスとメスのマウスに、９ｇの重さで、２８０ｍｇのＭ４Ｎを含有するフードボールを１４週間、連続給飼し、平均で、マウスは、一日当たり、９３．３ｍｇのＭ４Ｎを消費し、対照マウスには、Ｍ４Ｎを含有しないフードボールを給飼し、体重を周期的に記録した図。
【図３Ｂ】明白な毒性を示していない、Ｍ４Ｎの長期経口給飼中のマウスの体重を示し、オスとメスのマウスに、９ｇの重さで、２８０ｍｇのＭ４Ｎを含有するフードボールを１４週間、連続給飼し、平均で、マウスは、一日当たり、９３．３ｍｇのＭ４Ｎを消費し、対照マウスには、Ｍ４Ｎを含有しないフードボールを給飼し、体重を周期的に記録した図。
【図４Ａ】Ｍ４Ｎによる治療がヒト腫瘍異種移植片の生体内成長を阻害することを示し、無胸腺ヌードマウスに、ｓ．ｃ．で、各脇側に、ＭＣＦ−７乳腺癌細胞と、Ｈｅｐ３Ｂ肝細胞癌細胞、ＨＴ−２９結腸直腸癌細胞、及びＬＮＣａＰ前立腺癌細胞、を移植し、腫瘍が７〜８ｍｍの平均直径に達した時、マウスは、１００μＬのCremaphor−エタノール系溶液中に溶解した２ｍｇのＭ４Ｎを含有する注射を一日一回ｉ．ｐ．で、三週間にわたって受けた。対照マウスは溶媒のみを受け、腫瘍を７日毎に一度、二方向の垂直寸法（ＬとＷ）において測定し、腫瘍体積を式によって算出した図。
【図４Ｂ】Ｍ４Ｎによる治療がヒト腫瘍異種移植片の生体内成長を阻害することを示し、無胸腺ヌードマウスに、ｓ．ｃ．で、各脇側に、ＭＣＦ−７乳腺癌細胞と、Ｈｅｐ３Ｂ肝細胞癌細胞、ＨＴ−２９結腸直腸癌細胞、及びＬＮＣａＰ前立腺癌細胞、を移植し、腫瘍が７〜８ｍｍの平均直径に達した時、マウスは、１００μＬのCremaphor−エタノール系溶液中に溶解した２ｍｇのＭ４Ｎを含有する注射を一日一回ｉ．ｐ．で、三週間にわたって受けた。対照マウスは溶媒のみを受け、腫瘍を７日毎に一度、二方向の垂直寸法（ＬとＷ）において測定し、腫瘍体積を式によって算出した図。
【図４Ｃ】Ｍ４Ｎによる治療がヒト腫瘍異種移植片の生体内成長を阻害することを示し、無胸腺ヌードマウスに、ｓ．ｃ．で、各脇側に、ＭＣＦ−７乳腺癌細胞と、Ｈｅｐ３Ｂ肝細胞癌細胞、ＨＴ−２９結腸直腸癌細胞、及びＬＮＣａＰ前立腺癌細胞、を移植し、腫瘍が７〜８ｍｍの平均直径に達した時、マウスは、１００μＬのCremaphor−エタノール系溶液中に溶解した２ｍｇのＭ４Ｎを含有する注射を一日一回ｉ．ｐ．で、三週間にわたって受けた。対照マウスは溶媒のみを受け、腫瘍を７日毎に一度、二方向の垂直寸法（ＬとＷ）において測定し、腫瘍体積を式によって算出した図。
【図４Ｄ】Ｍ４Ｎによる治療がヒト腫瘍異種移植片の生体内成長を阻害することを示し、無胸腺ヌードマウスに、ｓ．ｃ．で、各脇側に、ＭＣＦ−７乳腺癌細胞と、Ｈｅｐ３Ｂ肝細胞癌細胞、ＨＴ−２９結腸直腸癌細胞、及びＬＮＣａＰ前立腺癌細胞、を移植し、腫瘍が７〜８ｍｍの平均直径に達した時、マウスは、１００μＬのCremaphor−エタノール系溶液中に溶解した２ｍｇのＭ４Ｎを含有する注射を一日一回ｉ．ｐ．で、三週間にわたって受けた。対照マウスは溶媒のみを受け、腫瘍を７日毎に一度、二方向の垂直寸法（ＬとＷ）において測定し、腫瘍体積を式によって算出した図。
【図５】異なる時点において異なる投与量のＭ４Ｎを与えられた犬におけるＭ４Ｎ血清濃度を示している図。
【図６】脳腫瘍の治療のための脳への前記ＮＤＧＡ誘導体の送達の種々の態様の具体例の略図であり、Ｍ４Ｎは親水性ＮＤＧＡを示し、Ｇ４Ｎは親油性ＮＤＧＡを示し、ＯＤは脳血液関門の浸透性崩壊を、ＳＣは皮下投与を示し、ＩＰは腹腔内投与を示し、ＩＭは筋肉内投与を示す。
【図７】腫瘍の治療のための、脳以外の組織への前記ＮＤＧＡ誘導体の送達の種々の態様の具体例の略図であり、Ｍ４Ｎは、親水性ＮＤＧＡを示し、Ｇ４Ｎは親油性ＮＤＧＡを示し、ＳＣは皮下投与を、ＩＰは腹腔内投与、ＩＭは筋肉内投与を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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