(57)【要約】本発明は、ムスカリンレセプターアンタゴニスト活性または抗コリン作用活性を有する新規ジフェニルメチル誘導体である式Ｉの化合物を提供する：2007528414.tif 000046ここで、ａ、ｂ、ｃ、ｅ、ｍ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４ａ、Ｒ４ｂ、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、本明細書中で定義したとおりである。式Ｉの化合物は、ムスカリンレセプターアンタゴニストである。本発明はまた、このような化合物を含有する薬学的組成物、このような化合物を調製する方法および中間体、ならびにこのような化合物を使用して肺障害を治療する方法を提供する。
2007528414.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物、あるいはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体であって：
【化１】
2007528414.tif 000038
ここで：
各Ｒ１およびＲ２は、別個に、（１〜４Ｃ）アルキル、（２〜４Ｃ）アルケニル、（２〜４Ｃ）アルキニル、（３〜６Ｃ）シクロアルキル、シアノ、ハロ、−ＯＲａ、−ＳＲａ、−ＮＲａＲｂ、−Ｓ（Ｏ）Ｒｃおよび−Ｓ（Ｏ）２Ｒｃから選択される；ここで、各ＲａおよびＲｂは、別個に、水素、（１〜４Ｃ）アルキル、（２〜４Ｃ）アルケニル、（２〜４Ｃ）アルキニルまたは（３〜６Ｃ）シクロアルキルを表わす；各Ｒｃは、別個に、（１〜４Ｃ）アルキル、（２〜４Ｃ）アルケニル、（２〜４Ｃ）アルキニルまたは（３〜６Ｃ）シクロアルキルを表わす；または２個の隣接したＲ１基または２個の隣接したＲ２基は、一緒に結合して、（３〜６Ｃ）アルキレン、（２〜４Ｃ）アルキレン−Ｏ−または−Ｏ−（２〜４Ｃ）アルキレン−Ｏ−を形成し；
ａおよびｂは、それぞれ別個に、０または１〜５の整数であり；
各Ｒ３は、別個に、フルオロまたは（１〜４Ｃ）アルキルであり；
ｃは、０または１〜３の整数であり；
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、別個に、水素、（１〜４Ｃ）アルキルおよびフェニル−（１〜４Ｃ）アルキルから選択されるか；あるいはＲ４ａおよびＲ４ｂは、それらが結合する窒素原子と一緒になって、（３〜６Ｃ）複素環を形成し、該複素環は、必要に応じて、１個の追加ヘテロ原子を含有し、該追加ヘテロ原子は、窒素、酸素またはイオウから選択され、ここで、該複素環は、非置換であるか、または１個もしくは２個の置換基で置換されており、該置換基は、別個に、（１〜４Ｃ）アルキルおよびフルオロから選択され；
ｅは、１または２であり；
ｍは、４、５または６であり；
Ｒ５は、水素、（１〜４Ｃ）アルキルおよび（３〜４Ｃ）シクロアルキルから選択され；
Ｒ６は、水素または非分枝（１〜４Ｃ）アルキルであるか；あるいはＲ６およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、結合されて、ピロリジン−２−イル基を形成し；
Ｒ７は、水素、（１〜６Ｃ）アルキル、（３〜６Ｃ）シクロアルキル、−ＣＨ２Ａｒ１、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＨおよび−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−（１〜４Ｃ）アルキルから選択され；ここで、Ａｒ１は、フェニルまたは（３〜５Ｃ）ヘテロアリールを表わし、ここで、該フェニルまたはヘテロアリール基は、非置換であるか、または１個〜３個の置換基で置換されており、該置換基は、別個に、ハロ、（１〜４Ｃ）アルキルおよび（１〜４Ｃ）アルコキシから選択され；ここで、各アルキルおよびアルコキシは、必要に応じて、１個〜３個のフルオロ置換基で置換されており；そして
Ｒ８は、水素または（１〜６Ｃ）アルキルであるか；あるいはＲ７およびＲ８は、それらが結合する窒素原子と一緒になって、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、モルホリン−１−イルまたはチオモルホリン−１−イル基を形成し；
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４ａ、Ｒ４ｂ、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲａ−ｃ中の各アルキル基は、必要に応じて、１個〜５個のフルオロ置換基で置換されている、
化合物、あるいはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体。
【請求項２】
ａ、ｂおよびｃがそれぞれ０を表わす、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ４ａおよびＲ４ｂが水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
ｅが１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
ｍが５である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ５が水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ６が水素または非分枝（１〜４Ｃ）アルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
ａ、ｂおよびｃが０であり；Ｒ４ａおよびＲ４ｂが水素であり；ｅが１であり；ｍが５であり；そしてＲ５が水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
ａ、ｂおよびｃが０であり；Ｒ４ａおよびＲ４ｂが水素であり；ｅが１であり；ｍが５であり；Ｒ５が水素であり；そしてＲ６が水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ７が、水素、（１〜４Ｃ）アルキル、（３〜５Ｃ）シクロアルキル、−ＣＨ２Ａｒ１および−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−（１〜３Ｃ）アルキルから選択され、ここで、Ａｒ１がフェニルを表わす、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ８が水素または（１〜４Ｃ）アルキルである、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
以下から選択される、請求項１に記載の化合物、あるいはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物：
２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−メチルアミノ）アセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド；
２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−アミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド；
２−アミノ−Ｎ−｛５−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）ピロリジン−１−イル］ペンチル｝プロピオンアミド；
ピロリジン−２−カルボン酸｛５−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）ピロリジン−１−イル］ペンチル｝アミド；
Ｎ−｛５−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）ピロリジン−１−イル］ペンチル｝−２−メチルアミノプロピオンアミド；
２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−エチルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド；
２，２−ジフェニル−２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−プロピルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝アセトアミド；
２−（（Ｓ）−１−｛５−［２−（２−メトキシエチルアミノ）アセチルアミノ］ペンチル｝ピロリジン−３−イル）−２，２−ジフェニルアセトアミド；
２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−ベンジルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド；
２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−ジメチルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド；
２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−シクロプロピルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド；
２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−シクロブチルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド；および
２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−シクロペンチルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。
【請求項１３】
薬学的に受容可能なキャリアと、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物の治療有効量とを含有する、薬学的組成物。
【請求項１４】
前記組成物が、さらに、β２アドレナリン作用性レセプターアゴニスト、ステロイド性抗炎症薬、ホスホジエステラーゼ−４インヒビター、およびそれらの組み合わせから選択される薬剤の治療有効量を含有する、請求項１３に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
前記組成物が、β２アドレナリン作用性レセプターアゴニストおよびステロイド性抗炎症薬の治療有効量を含有する、請求項１４に記載の薬学的組成物。
【請求項１６】
請求項１〜１２のいずれか１項の化合物を調製するためのプロセスであって、該プロセスは、以下：
（ａ）式ＩＩの化合物：
【化２】
2007528414.tif 000039
と、式ＩＩＩの化合物：
【化３】
2007528414.tif 000040
とを反応させる工程であって、ここで、Ｘ１は、脱離基を表わす、工程；
（ｂ）式ＩＶの化合物：
【化４】
2007528414.tif 000041
を、式Ｖの化合物：
【化５】
2007528414.tif 000042
またはそれらの反応性誘導体とカップリングする工程；
（ｃ）還元剤の存在下にて、式ＩＩの化合物と式ＶＩの化合物：
【化６】
2007528414.tif 000043
とを反応させる、工程；あるいは
（ｄ）Ｒ６が水素原子または非分枝（１〜４Ｃ）アルキル基を表わす式（Ｉ）の化合物について、式ＶＩＩの化合物：
【化７】
2007528414.tif 000044
であって、ここで、Ｘ２は、脱離基を表わす化合物と、式ＶＩＩＩの化合物：
【化８】
2007528414.tif 000045
とを反応させて、式Ｉの化合物を得る工程：
を包含する、プロセス。
【請求項１７】
前記プロセスが、さらに、式Ｉの化合物の薬学的に受容可能な塩を形成する工程を包含する、請求項１６に記載のプロセス。
【請求項１８】
請求項１６または１７に記載のプロセスにより調製される、生成物。
【請求項１９】
ムスカリンレセプターを含む生体系または試料を研究する方法であって、該方法は、以下：（ａ）該生体系または試料を請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物と接触させる工程；および（ｂ）該生体系または試料に対して該化合物により引き起こされる効果を決定する工程、を包含する、方法。
【請求項２０】
治療において使用するため、または医薬として使用するための請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２１】
肺障害を処置するための請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２２】
哺乳動物におけるムスカリンレセプターをアンタゴナイズするための請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２３】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物を含有する医薬。
【請求項２４】
医薬を製造するための請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項２５】
前記医薬が、肺障害の処置のためのものである、請求項２４に記載の使用。
【請求項２６】
前記医薬が、哺乳動物におけるムスカリンレセプターをアンタゴナイズするためのものである、請求項２５に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、ムスカリンレセプターアンタゴニスト活性または抗コリン作用活性を有する新規ジフェニルメチル化合物に関する。本発明はまた、このようなジフェニルメチル化合物を含有する薬学的組成物、このようなジフェニルメチル化合物を調製するためのプロセスおよび中間体ならびにこのようなジフェニルメチル化合物を使用して肺障害を処置する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
（当該技術の状況）
肺障害または呼吸器障害（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）および喘息）は、世界中で、無数の人々を苦しめており、このような障害は、罹患率および死亡率の主な原因である。
【０００３】
ムスカリンレセプターアンタゴニストは、気管支保護効果を与えることが知られており、従って、このような化合物は、呼吸器障害（例えば、ＣＯＰＤおよび喘息）を処置するのに有用である。ムスカリンレセプターアンタゴニストは、このような障害を処置するのに使用される場合、代表的には、吸入により、投与される。しかし、吸入により投与したときでさえ、相当量のムスカリンレセプターアンタゴニストは、しばしば、体循環に吸収されて、全身性副作用（例えば、口渇、散瞳および心血管副作用）を生じる。
【０００４】
さらに、吸入されたムスカリンレセプターアンタゴニストの多くは、作用の持続時間が比較的に短く、１日あたり数回投与する必要がある。このような複数回を毎日投薬するレジメンは、不便であるだけでなく、必要とする頻繁な投薬スケジュールに患者が従わないことが原因で不十分な処置となるリスクが著しい。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従って、新しいムスカリンレセプターアンタゴニストに対する必要性が存在する。特に、効力が高く、吸入により投与したときの全身性副作用を少なくした新しいムスカリンレセプターアンタゴニストに対する必要性が存在する。さらに、作用持続時間が長く、それにより、１日１回または１週間に１回の投薬が可能である吸入されたムスカリンレセプターアンタゴニストが必要とされている。このような化合物は、副作用（例えば、口渇および便秘）をなくすか少なくしつつ、肺障害（例えば、ＣＯＰＤおよび喘息）を処置するのに特に有効であると予想されている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
（発明の要旨）
本発明は、ムスカリンレセプターアンタゴニスト活性または抗コリン作用活性を有する新規ジフェニルメチル誘導体を提供する。他の特性のうち、本発明の化合物は、吸入により投与したとき、効力が高く全身性副作用が低いうえに作用持続時間が長いと予想されている。
【０００７】
従って、その組成物局面の１つでは、本発明は、式Ｉ：
【０００８】
【化９】
2007528414.tif 000003
の化合物、あるいはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体を提供し、
ここで：
各Ｒ１およびＲ２は、別個に、（１〜４Ｃ）アルキル、（２〜４Ｃ）アルケニル、（２〜４Ｃ）アルキニル、（３〜６Ｃ）シクロアルキル、シアノ、ハロ、−ＯＲａ、−ＳＲａ、−ＮＲａＲｂ、−Ｓ（Ｏ）Ｒｃおよび−Ｓ（Ｏ）２Ｒｃから選択され；ここで、各ＲａおよびＲｂは、別個に、水素、（１〜４Ｃ）アルキル、（２〜４Ｃ）アルケニル、（２〜４Ｃ）アルキニルまたは（３〜６Ｃ）シクロアルキルを表わし；各Ｒｃは、別個に、（１〜４Ｃ）アルキル、（２〜４Ｃ）アルケニル、（２〜４Ｃ）アルキニルまたは（３〜６Ｃ）シクロアルキルを表わすか；あるいは２個の隣接したＲ１基または２個の隣接したＲ２基は、一緒に結合して、（３〜６Ｃ）アルキレン、（２〜４Ｃ）アルキレン−Ｏ−または−Ｏ−（２〜４Ｃ）アルキレン−Ｏ−を形成し；
ａおよびｂは、それぞれ別個に、０または１〜５の整数であり；
各Ｒ３は、別個に、フルオロまたは（１〜４Ｃ）アルキルであり；
ｃは、０または１〜３の整数であり；
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、別個に、水素、（１〜４Ｃ）アルキルおよびフェニル−（１〜４Ｃ）アルキルから選択されるか；あるいはＲ４ａおよびＲ４ｂは、それらが結合する窒素原子と一緒になって、（３〜６Ｃ）複素環を形成し、該複素環は、必要に応じて、１個の追加ヘテロ原子を含有し、該追加ヘテロ原子は、窒素、酸素またはイオウから選択され、ここで、該複素環は、非置換であるか、または１個もしくは２個の置換基で置換されており、該置換基は、別個に、（１〜４Ｃ）アルキルおよびフルオロから選択され；
ｅは、１または２であり；
ｍは、４、５または６であり；
Ｒ５は、水素、（１〜４Ｃ）アルキルおよび（３〜４Ｃ）シクロアルキルから選択され；
Ｒ６は、水素または非分枝（１〜４Ｃ）アルキルであるか；あるいはＲ６およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、結合されて、ピロリジン−２−イル基を形成し；
Ｒ７は、水素、（１〜６Ｃ）アルキル、（３〜６Ｃ）シクロアルキル、−ＣＨ２Ａｒ１、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＨおよび−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−（１〜４Ｃ）アルキルから選択され；ここで、Ａｒ１は、フェニルまたは（３〜５Ｃ）ヘテロアリールを表わし、ここで、該フェニルまたはヘテロアリール基は、非置換であるか、または１個〜３個の置換基で置換されており、該置換基は、別個に、ハロ、（１〜４Ｃ）アルキルおよび（１〜４Ｃ）アルコキシから選択され；ここで、各アルキルおよびアルコキシは、必要に応じて、１個〜３個のフルオロ置換基で置換されており；そして
Ｒ８は、水素または（１〜６Ｃ）アルキルであるか；あるいはＲ７およびＲ８は、それらが結合する窒素原子と一緒になって、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、モルホリン−１−イルまたはチオモルホリン−１−イル基を形成し；
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４ａ、Ｒ４ｂ、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲａ−ｃ中の各アルキル基は、必要に応じて、１個〜５個のフルオロ置換基で置換されている。
【０００９】
その組成物局面の別のものでは、本発明は、薬学的に受容可能なキャリアと式Ｉの化合物あるいはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体の治療有効量とを含有する薬学的組成物に関する。このような薬学的組成物は、必要に応じて、他の治療薬を含有し得る。従って、１実施形態では、本発明は、このような薬学的組成物に関し、ここで、該組成物は、さらに、治療有効量のステロイド性抗炎症薬（例えば、コルチコステロイド）；β２アドレナリンレセプターアゴニスト；ホスホジエステラーゼ−４インヒビター；またはそれらの組み合わせを含有する。
【００１０】
本発明の化合物は、ムスカリンレセプターアンタゴニスト活性を有する。従って、式Ｉの化合物は、肺障害（例えば、慢性閉塞性肺疾患および喘息）を処置するのに有用であると予想されている。
【００１１】
従って、その方法局面の１つでは、本発明は、肺障害を処置するための方法に関し、該方法は、患者に、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体の治療有効量を投与する工程を包含する。
【００１２】
さらに、その方法局面の他のものでは、本発明は、患者における気管支拡張を与える方法に関し、該方法は、患者に、式Ｉの化合物、あるいはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体の気管支拡張発生量を投与する工程を包含する。
【００１３】
本発明はまた、慢性閉塞性肺疾患または喘息を処置する方法に関し、該方法は、患者に、式Ｉの化合物、あるいはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体の治療有効量を投与する工程を包含する。
【００１４】
その方法局面の別のものでは、本発明は、哺乳動物におけるムスカリンレセプターをアンタゴナイズするための方法に関し、該方法は、該哺乳動物に、式Ｉの化合物の治療有効量を投与する工程を包含する。
【００１５】
本発明の化合物は、ムスカリンレセプターアンタゴニスト活性を有するので、このような化合物はまた、研究手段として有用である。従って、その方法局面のさらに別のものでは、本発明は、生体系または試料を研究するため、またはムスカリンレセプターアンタゴニスト活性を有する新規化学化合物を発見するための研究手段として、式Ｉの化合物、あるいはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体を使用するための方法に関する。
【００１６】
本発明はまた、式Ｉの化合物、あるいはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体を調製するために有用なプロセスおよび新規中間体に関する。従って、その方法局面の別のものでは、本発明は、式Ｉの化合物を調製するプロセスに関し、該プロセスは、以下：
（ａ）式ＩＩの化合物と式ＩＩＩの化合物とを反応させる工程；
（ｂ）式ＩＶの化合物と式Ｖの化合物とを反応させる工程；
（ｃ）式ＩＩの化合物と式ＶＩの化合物とを反応させる工程；あるいは
（ｄ）Ｒ６が水素原子または非分枝（１〜４Ｃ）アルキル基を表わす式（Ｉ）の化合物について、式ＶＩＩの化合物と式ＶＩＩＩの化合物とを反応させて、式Ｉの化合物を提供する工程を包含し；ここで、式ＩＩ〜ＶＩＩＩの化合物は、本明細書中で定義したとおりである。
【００１７】
１実施形態では、上記プロセスは、さらに、式Ｉの化合物の薬学的に受容可能な塩を形成する工程を包含する。他の実施形態では、本発明は、本明細書中で記述した他のプロセスに関し、また、本明細書中で記述したプロセスのいずれかにより調製された生成物に関する。
【００１８】
本発明はまた、治療に使用するか医薬として使用するための式Ｉの化合物、あるいはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体に関する。
【００１９】
さらに、本発明は、医薬（特に、肺障害を処置するための医薬または哺乳動物におけるムスカリンレセプターをアンタゴナイズする医薬）を製造するための式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体の使用に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
（発明の詳細な説明）
その組成物局面の１つでは、本発明は、式Ｉの新規ジフェニルメチル化合物、あるいはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体に関する。これらの化合物は、１個またはそれ以上のキラル中心を含み得、従って、本発明は、特に明記しない限り、ラセミ混合物；純粋立体異性体（すなわち、鏡像異性体またはジアステレオマー）；立体異性体に富んだ混合物などに関する。本明細書中で特定の立体異性体が示されるか命名されている場合、特に明記しない限り、当業者は、本発明の組成物中にて少量の他の立体異性体が存在し得ることを理解するが、但し、この組成物の全体としての所望の有用性は、このような他の異性体の存在によってなくなるものではない。
【００２１】
特に、ｅが１である場合、式Ｉの化合物は、以下の部分式（分かり易くするために、任意の置換基なしで図示している）において、記号＊で示された炭素原子にて、キラル中心を含む：
【００２２】
【化１０】
2007528414.tif 000004
本発明の１実施態様では、記号＊で示された炭素原子は、（Ｒ）立体配置を有する。この実施態様では、式Ｉの化合物は、記号＊で示された炭素原子にて、（Ｒ）立体配置を有するか、この炭素原子で（Ｒ）立体配置を有する立体異性体形状に富んでいることが好ましい。本発明の他の実施態様では、記号＊で示された炭素原子は、（Ｓ）立体配置を有する。この実施態様では、式Ｉの化合物は、記号＊で示された炭素原子にて、（Ｓ）立体配置を有するか、この炭素原子で（Ｓ）立体配置を有する立体異性体形状に富んでいることが好ましい。
【００２３】
式Ｉの化合物はまた、数個の塩基性基（例えば、アミノ基）を含有し、従って、式Ｉの化合物は、遊離塩基または種々の塩形状で存在し得る。このような塩の全ての形状は、本発明の範囲内に含まれる。さらに、本発明の範囲内には、式Ｉの化合物の溶媒和物またはそれらの塩も含まれる。
【００２４】
さらに、適用可能な場合、式Ｉの化合物の全てのシス−トランスまたはＥ／Ｚ異性体（幾何異性体）、互変異性形状およびトポ異性体形状は、特に明記しない限り、本発明の範囲内に含まれる。
【００２５】
式Ｉの化合物だけでなく、その合成において使用される化合物はまた、同位体で標識された化合物（すなわち、この場合、１個またはそれ以上の原子は、天然に主として見出される原子量とは異なる原子量を有する原子に富んでいる）を含み得る。式（Ｉ）の化合物に取り込まれ得る同位元素の例には、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏおよび１７Ｏが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２６】
本発明の化合物を命名するのに本明細書中で使用される命名法は、本明細書中の実施例で例示されている。この命名法は、一般に、市販のＡｕｔｏＮｏｍソフトウェア（ＭＤＬ，Ｓａｎ  Ｌｅａｎｄｒｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）を使用して誘導される。
【００２７】
（代表的な実施形態）
以下の置換基および値は、本発明の種々の局面および実施形態の代表的な例を提供することを目的としている。これらの代表的な値は、このような局面および実施形態をさらに規定し説明することを目的とし、他の実施形態を除外したり本発明の範囲を限定する意図はない。このことに関して、特定の値または置換基が好ましいという表現は、特に明記しない限り、決して、他の値または置換基を本発明から除外する意図はない。
【００２８】
ａおよびｂの値は、別個に、０、１、２、３、４または５である；特に、別個に、０、１または２であり、そして、さらに特定すると、０または１である。１実施形態では、ａおよびｂの両方は、０である。
【００２９】
各Ｒ１およびＲ２は、存在するとき、それが結合するフェニル環の２、３、４、５または６位にあり得る。各Ｒ１およびＲ２は、別個に、（１〜４Ｃ）アルキル、（２〜４Ｃ）アルケニル、（２〜４Ｃ）アルキニル、（３〜６Ｃ）シクロアルキル、シアノ、ハロ、−ＯＲａ、−ＳＲａ、−ＮＲａＲｂ、−Ｓ（Ｏ）Ｒｃおよび−Ｓ（Ｏ）２Ｒｃから選択される。各ＲａおよびＲｂは、別個に、水素、（１〜４Ｃ）アルキル、（２〜４Ｃ）アルケニル、（２〜４Ｃ）アルキニルまたは（３〜６Ｃ）シクロアルキルを表わす。各Ｒｃは、別個に、（１〜４Ｃ）アルキル、（２〜４Ｃ）アルケニル、（２〜４Ｃ）アルキニルまたは（３〜６Ｃ）シクロアルキルを表わす。あるいは、２個の隣接したＲ１基、または２個の隣接したＲ２基は、一緒に結合して、（３〜６Ｃ）アルキレン、（２〜４Ｃ）アルキレン−Ｏ−または−Ｏ−（２〜４Ｃ）アルキレン−Ｏ−を形成し得る。それに加えて、Ｒ１、Ｒ２およびＲａ−ｃ中の各アルキル基は、必要に応じて、１個〜５個のフルオロ置換基で置換されており、１実施形態では、必要に応じて、１個〜３個のフルオロ置換基で置換されている。特定の実施形態では、Ｒ１またはＲ２は、別個に、（１〜４Ｃ）アルキル、フルオロ、クロロおよび−ＯＲａから選択される。別の特定の実施形態では、各Ｒ１およびＲ２は、（１〜２Ｃ）アルキルまたはフルオロである。代表的なＲ１基およびＲ２基には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、フルオロ、クロロ、メトキシ、エトキシ、ジフルオロメトキシおよびトリフルオロメトキシが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３０】
ｃの値は、０、１、２または３である；特に、０、１または２である；さらに特定すると、０または１である。ｃの特定の値は、０である。ａ、ｂおよびｃの各々が０である化合物が特に言及される。
【００３１】
各Ｒ３は、存在するとき、別個に、フルオロまたは（１〜４Ｃ）アルキルである。それに加えて、Ｒ３中の各アルキル基は、必要に応じて、１個〜５個のフルオロ置換基で置換されており、１実施形態では、必要に応じて、１個〜３個のフルオロ置換基で置換されている。特定の実施形態では、各Ｒ３は、別個に、（１〜２Ｃ）アルキルおよびフルオロから選択される。２個のＲ３置換基が存在するとき（ｃ＝２）、それらは、同一または異なる炭素原子上にあり得る。代表的なＲ３基には、メチル、エチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチルおよびフルオロが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３２】
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、別個に、水素、（１〜４Ｃ）アルキルおよびフェニル−（１〜４Ｃ）アルキルから選択される。Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、それらが結合する窒素原子と一緒になって、（３〜６Ｃ）複素環を形成し得、該複素環は、必要に応じて、１個の追加ヘテロ原子を含有し、該追加ヘテロ原子は、窒素、酸素またはイオウから選択される。この複素環は、非置換であるか、または１個もしくは２個の置換基で置換されており、該置換基は、別個に、（１〜４Ｃ）アルキルおよびフルオロから選択される。それに加えて、Ｒ４ａおよびＲ４ｂ中の各アルキル基は、必要に応じて、１個〜５個のフルオロ置換基で置換されており、１実施形態では、必要に応じて、１個〜３個のフルオロ置換基で置換されている。１実施形態では、Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、別個に、水素または（１〜４Ｃ）アルキルである。別の実施形態では、Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、別個に、水素または（１〜２Ｃ）アルキル（例えば、メチルおよびエチル）である。さらに別の実施形態では、Ｒ４ａおよびＲ４ｂの両方は、水素である。あるいは、別の特定の実施形態では、Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、それらが結合する窒素原子と一緒になって結合され、（３〜５Ｃ）複素環を形成し、該複素環は、必要に応じて、１個の追加ヘテロ原子を含有し、該追加ヘテロ原子は、窒素、酸素またはイオウから選択される。代表的な複素環には、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、ピペラジン−１−イル、４−（１〜４Ｃ）アルキルピペラジン−１−イル、モルホリン−４−イルおよびチオモルホリン−４−イルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３３】
ｅの値は、１または２である。１実施形態では、ｅは、１である。
【００３４】
ｍの値は、４、５または６である。１実施形態では、ｍは、５である。
【００３５】
Ｒ５は、水素、（１〜４Ｃ）アルキルまたは（３〜４Ｃ）シクロアルキルを表わす。（１〜４Ｃ）アルキルの例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルが挙げられる。（３〜４Ｃ）シクロアルキル基の例には、シクロプロピルおよびシクロブチルが挙げられる。それに加えて、Ｒ５中の各アルキル基は、必要に応じて、１個〜５個のフルオロ置換基で置換されており、１実施形態では、必要に応じて、１個〜３個のフルオロ置換基で置換されている。１実施形態では、Ｒ５は、水素または（１〜３Ｃ）アルキル（例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピルおよびイソプロピル）である。特定の実施形態では、Ｒ５は、水素またはメチルである。別の実施形態では、Ｒ５は、水素である。
【００３６】
Ｒ６は、水素または非分枝（１〜４Ｃ）アルキルである。それに加えて、Ｒ６中の各アルキル基は、必要に応じて、１個〜５個のフルオロ置換基で置換されており、１実施形態では、必要に応じて、１個〜３個のフルオロ置換基で置換されている。Ｒ６の特定の値には、水素およびメチルが挙げられる。特定の実施形態では、Ｒ６は、水素である。あるいは、Ｒ６およびＲ８は、それらが結合する原子と一緒になって、結合され得、ピロリジン−２−イル基を形成する。例えば、−ＣＨＲ６−ＮＲ７Ｒ８は、ピロリジン−２−イル基を形成する。
【００３７】
Ｒ７は、水素、（１〜６Ｃ）アルキル、（３〜６Ｃ）シクロアルキル、−ＣＨ２Ａｒ１、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＨおよび−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−（１〜４Ｃ）アルキルから選択される。それに加えて、Ｒ７中の各アルキル基は、必要に応じて、１個〜５個のフルオロ置換基で置換されており、１実施形態では、必要に応じて、１個〜３個のフルオロ置換基で置換されている。１実施形態では、Ｒ７は、水素を表わす。別の実施形態では、Ｒ７は、（１〜４Ｃ）アルキル（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルを含む）を表わす。Ｒ７の特定の値は、この実施態様では、メチル、エチル、ｎ−プロピルおよびイソプロピルである。特定の実施形態では、Ｒ７は、メチルである。さらに別の実施形態では、Ｒ７は、（３〜５Ｃ）シクロアルキル（例えば、シクロプロピル、シクロブチルおよびシクロペンチル）である。さらに別の実施形態では、Ｒ７は、−ＣＨ２Ａｒ１（−ＣＨ２−（フェニル）、すなわち、ベンジルを含めて）である。さらに別の実施形態では、Ｒ７は、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＨまたは−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−（１〜３Ｃ）アルキル（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−（ＣＨ２）２ＣＨ３および−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）２を含めて）である。Ｒ７の特定の値は、この実施態様では、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＨおよび−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３である。別の特定の実施形態では、Ｒ７は、水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、ベンジル、２−ヒドロキシエチルまたは２−メトキシエチルである。
【００３８】
Ｒ８は、水素または（１〜６Ｃ）アルキルである。それに加えて、Ｒ８中の各アルキル基は、必要に応じて、１個〜５個のフルオロ置換基で置換されており、１実施形態では、必要に応じて、１個〜３個のフルオロ置換基で置換されている。１実施形態では、Ｒ８は、水素または（１〜４Ｃ）アルキル（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルを含む）である。Ｒ８の特定の値は、水素、メチル、エチル、ｎ−プロピルおよびイソプロピルである。特定の実施形態では、Ｒ８は、水素またはメチルである。Ｒ８の特定の値は、水素である。あるいは、Ｒ７およびＲ８は、それらが結合する窒素原子と一緒になって、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、モルホリン−１−イルまたはチオモルホリン−１−イル基を形成し得る。１実施形態では、Ｒ７およびＲ８は、それらが結合する窒素原子と一緒になって、結合されて、ピロリジン−１−イルまたはピペリジン−１−イル基を形成する。
【００３９】
Ａｒ１は、フェニルまたは（３〜５Ｃ）ヘテロアリールを表わす。該フェニルまたはヘテロアリール基は、非置換であるか、または１個〜３個の置換基で置換されており、該置換基は、別個に、ハロ、（１〜４Ｃ）アルキルおよび（１〜４Ｃ）アルコキシから選択され、ここで、各アルキルおよびアルコキシは、必要に応じて、１個〜３個のフルオロ置換基で置換されている；
１実施形態では、Ａｒ１は、フェニルであり、ここで、該フェニル基は、非置換であるか、または１個、２個もしくは３個の置換基で置換されており、該置換基は、別個に、ハロ、（１〜４Ｃ）アルキルまたは（１〜４Ｃ）アルコキシから選択され、ここで、各アルキルおよびアルコキシ基は、必要に応じて、１個〜３個のフルオロ置換基で置換されている。代表的な置換基には、フルオロ、クロロ、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシ、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチルおよびトリフルオロメトキシが挙げられる。Ａｒ１の特定の値は、この実施態様では、フェニルである。
【００４０】
別の実施形態では、Ａｒ１は、（３〜５Ｃ）ヘテロアリール基であり、該（３〜５Ｃ）ヘテロアリール基は、１個または２個のヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、別個に、酸素、窒素またはイオウから選択される；ここで、該ヘテロアリール基は、非置換であるか、または１個もしくは２個の置換基で置換されており、該置換基は、別個に、ハロ、（１〜４Ｃ）アルキルまたは（１〜４Ｃ）アルコキシから選択される；ここで、各アルキルおよびアルコキシ基は、必要に応じて、１個〜３個のフルオロ置換基で置換されている。代表的なヘテロアリール基には、ピロール、イミダゾール、チアゾール、オキサゾール、フラン、チオフェン、ピラゾール、イソオキサゾール、イソチアゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジンおよびピリミジンの一価種が挙げられ、ここで、結合点は、利用できる任意の炭素または窒素環原子である。代表的な置換基には、フルオロ、クロロ、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシ、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチルおよびトリフルオロメトキシが挙げられる。Ａｒ１基の特定の例には、この実施態様では、２−フリル、２−チエニルおよび２−ピリジルが挙げられる。
【００４１】
特定の群の目的の化合物は、Ｒ５が水素または（１〜４Ｃ）アルキルである式Ｉの化合物である。
【００４２】
特定の群の目的の化合物は、ａおよびｂが０である式Ｉの化合物である。別の群の目的の化合物は、ａ、ｂおよびｃが０である式Ｉの化合物である。特定の群の目的の化合物は、ａ、ｂおよびｃが０である；そしてＲ４ａおよびＲ４ｂが水素である式Ｉの化合物である。
【００４３】
別の特定の群の目的の化合物は、ａ、ｂおよびｃが０である；Ｒ４ａおよびＲ４ｂが水素である；そしてＲ５が水素である式Ｉの化合物である。
【００４４】
別の特定の群の目的の化合物は、ａ、ｂおよびｃが０である；Ｒ４ａおよびＲ４ｂが水素である；Ｒ５が水素である；そしてＲ６が水素または非分枝（１〜４Ｃ）アルキル（例えば、メチル）である式Ｉの化合物である。
【００４５】
別の特定の群の目的の化合物は、ａ、ｂおよびｃが０であり、Ｒ４ａおよびＲ４ｂが水素であり、ｅが１であり、ｍが５であり、そしてＲ５が水素である式Ｉの化合物である。これらの化合物は、式Ｉａ：
【００４６】
【化１１】
2007528414.tif 000005
を有する化合物であるか、それらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体であり：ここで、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、本明細書中で定義したとおりである。
【００４７】
別の特定の群の目的の化合物は、ａ、ｂおよびｃが０であり、Ｒ４ａおよびＲ４ｂが水素であり、ｅが１であり、ｍが５であり、Ｒ５が水素であり、そしてＲ６が水素である式Ｉの化合物である。これらの化合物は、式Ｉｂ：
【００４８】
【化１２】
2007528414.tif 000006
を有する化合物であるか、それらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体であり：ここで、Ｒ７およびＲ８は、本明細書中で定義したとおりである。
【００４９】
特定の目的の化合物には、以下の化合物、あるいはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物が挙げられる：
２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−メチルアミノ）アセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド；
２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−アミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド；
２−アミノ−Ｎ−｛５−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）ピロリジン−１−イル］ペンチル｝プロピオンアミド；
ピロリジン−２−カルボン酸｛５−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）ピロリジン−１−イル］ペンチル｝アミド；
Ｎ−｛５−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）ピロリジン−１−イル］ペンチル｝−２−メチルアミノプロピオンアミド；
２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−エチルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド；
２，２−ジフェニル−２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−プロピルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝アセトアミド；
２−（（Ｓ）−１−｛５−［２−（２−メトキシエチルアミノ）アセチルアミノ］ペンチル｝ピロリジン−３−イル）−２，２−ジフェニルアセトアミド；
２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−ベンジルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド；
２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−ジメチルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド；
２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−シクロプロピルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド；
２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−シクロブチルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド；および
２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−シクロペンチルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。
【００５０】
（定義）
本発明の化合物、組成物、方法およびプロセスを記述する場合、以下の用語は、特に明記しない限り、以下の意味を有する。
【００５１】
「アルキル」との用語は、一価飽和炭化水素基であって、直鎖状または分枝状であり得るものを意味する。特に明記しない限り、このようなアルキル基は、代表的には、１個〜１０個の炭素原子を含有する。代表的なアルキル基には、例として、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシルなどが挙げられる。
【００５２】
「アルキレン」との用語は、二価飽和炭化水素基であって、直鎖状または分枝状であり得るものを意味する。特に明記しない限り、このようなアルキレン基は、代表的には、１個〜１０個の炭素原子を含有する。代表的なアルキレン基には、例として、メチレン、エタン−１，２−ジイル（「エチレン」）、プロパン−１，２−ジイル、プロパン−１，３−ジイル、ブタン−１，４−ジイル、ペンタン−１，５−ジイルなどが挙げられる。
【００５３】
「アルコキシ」との用語は、式（アルキル）−Ｏ−の一価基を意味し、ここで、アルキルは、本明細書中で定義したとおりである。代表的なアルコキシ基には、例として、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、イソブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどが挙げられる。
【００５４】
「アルケニル」との用語は、一価不飽和炭化水素基であって、直鎖状または状分枝であり得、そして少なくとも１個、代表的には、１個、２個または３個の炭素−炭素二重結合を有するものを意味する。特に明記しない限り、このようなアルケニル基は、代表的には、２個〜１０個の炭素原子を含有する。代表的なアルケニル基には、例として、エテニル、ｎ−プロペニル、イソプロペニル、ｎ−ブテ−２−エニル、ｎ−ヘキセ−３−エニルなどが挙げられる。「アルケニレン」との用語は、二価アルケニル基を意味する。
【００５５】
「アルキニル」との用語は、一価不飽和炭化水素基であって、直鎖または分枝であり得、そして少なくとも１個、代表的には、１個、２個または３個の炭素−炭素三重結合を有するものを意味する。特に明記しない限り、このようなアルキニル基は、代表的には、２個〜１０個の炭素原子を含有する。代表的なアルキニル基には、例として、エチニル、ｎ−プロピニル、ｎ−ブチ−２−イニル、ｎ−ヘキシ−３−イニルなどが挙げられる。「アルキニレン」との用語は、二価アルキニル基を意味する。
【００５６】
「アリール」との用語は、単一環（すなわち、フェニル）または縮合環（すなわち、ナフタレン）を有する一価芳香族炭化水素を意味する。特に明記しない限り、このようなアリール基は、代表的には、６個〜１０個の炭素原子を含有する。代表的なアリール基には、例として、フェニルおよびナフタレン−１−イル、ナフタレン−２−イルなどが挙げられる。「アリーレン」との用語は、２価アリール基を意味する。
【００５７】
「アザシクロアルキル」との用語は、１個の窒素原子を含有する一価複素環式環、すなわち、１個の炭素原子を窒素原子で置き換えたシクロアルキル基を意味する。特に明記しない限り、このようなアザシクロアルキル基は、代表的には、２個〜９個の炭素原子を含有する。アザシクロアルキル基の代表的な例は、ピロリジニル基およびピペリジニル基である。「アザシクロアルキレン」との用語は、二価アザシクロアルキル基を意味する。アザシクロアルキレン基の代表的な例は、ピロリジニレン基およびピペリジニレン基である。
【００５８】
「シクロアルキル」との用語は、一価飽和炭素環式炭化水素基を意味する。特に明記しない限り、このようなシクロアルキル基は、代表的には、３個〜１０個の炭素原子を含有する。代表的なシクロアルキル基には、例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどが挙げられる。「シクロアルキレン」との用語は、二価シクロアルキル基を意味する。
【００５９】
「ハロ」との用語は、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを意味する。
【００６０】
「ヘテロアリール」との用語は、一価芳香族基であって、単一環のまたは２つの縮合した環を有し、そして環内に、窒素、酸素またはイオウから選択される少なくとも１個のヘテロ原子（代表的には、１個〜３個のヘテロ原子）を含有するものを意味する。特に明記しない限り、このようなヘテロアリール基は、代表的には、全部で５個〜１０個の環原子を含有する。代表的なヘテロアリール基には、例として、ピロール、イミダゾール、チアゾール、オキサゾール、フラン、チオフェン、トリアゾール、ピラゾール、イソキサゾール、イソチアゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、ピリミジン、トリアジン、インドール、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ベンズイミダゾール、ベンズチアゾール、キノリン、イソキノリン、キナゾリン、キノキサリンなどの一価種が挙げられ、その結合点は、利用できる任意の炭素環原子または窒素環原子においてである。「ヘテロアリーレン」との用語は、二価ヘテロアリール基を意味する。
【００６１】
「ヘテロシクリル」または「複素環式」との用語は、一価飽和または不飽和（非芳香族）基であって、単一環または複数の縮合環を有し、そして環内に、窒素、酸素またはイオウから選択される少なくとも１個ヘテロ原子（代表的には、１個〜３個のヘテロ原子）を含有するものを意味する。特に明記しない限り、このような複素環式基は、代表的には、全部で２個〜９個の環炭素原子を含有する。代表的な複素環式基には、例として、ピロリジン、イミダゾリジン、ピラゾリジン、ピペリジン、１，４−ジオキサン、モルホリン、チオモルホリン、ピペラジン、３−ピロリンなどの一価種が挙げられ、その結合点は、利用できる任意の炭素または窒素環原子である。「ヘテロシクレン」との用語は、二価ヘテロシクリル基または複素環式基を意味する。
【００６２】
本明細書中で使用する特定の用語に対して、特定数の炭素原子が意図されている場合、その炭素原子数は、その用語に先行する括弧で示されている。例えば、「（１〜４Ｃ）アルキル」との用語は、１個〜４個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。
【００６３】
「薬学的に受容可能な塩」との用語は、患者（例えば、哺乳動物）に投与することが許容できる塩（例えば、所与の投薬レジメンに対する、受容可能な哺乳動物の安全性を有する塩）を意味する。このような塩は、薬学的に受容可能な無機塩基または有機塩基から、および薬学的に受容可能な無機酸または有機酸から誘導できる。薬学的に受容可能な無機塩基から誘導される塩には、アンモニウム、カルシウム、銅、三価鉄、二価鉄、リチウム、マグネシウム、第二マンガン、第一マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛などが挙げられる。特に、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウムおよびナトリウムの塩が好ましい。薬学的に受容可能な有機塩基から誘導される塩には、第一級、第二級および第三級アミン（置換アミン、環状アミン、および天然に存在するアミンなど（例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン（ｈｙｄｒａｂａｍｉｎｅ）、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルフォリン、ピペラジン（ｐｉｐｅｒａｚｉｎｅ）、ピペラジン（ｐｉｐｅｒａｄｉｎｅ）、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなど）を含む）の塩が挙げられる。薬学的に受容可能な酸から誘導された塩には、酢酸、アスコルビン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、ショウノウスルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、エディシリック（ｅｄｉｓｙｌｉｃ）酸、フマル酸、ゲンチシン酸、グルコン酸、グルクロン（ｇｌｕｃｏｒｏｎｉｃ）酸、グルタミン酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、ナフタレンスルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２，６−ジスルホン酸、ニコチン酸、硝酸、オロチン酸、パモ（ｐａｍｏｉｃ）酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸、キナホイック（ｘｉｎａｆｏｉｃ）酸などが挙げられる。クエン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、マレイン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、リン酸、硫酸および酒石酸は、特に好ましい。
【００６４】
「それらの塩」との用語は、酸の水素をカチオン（例えば、金属カチオンまたは有機カチオンなど）で置き換えた場合に形成される化合物を意味する。好ましくは、この塩は、薬学的に受容可能な塩であるが、このことは、患者に投与する目的ではない中間体化合物の塩には、必要ではない。
【００６５】
「溶媒和物」との用語は、溶質（すなわち、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩）の１つ以上の分子と溶媒の１つ以上の分子とにより形成された錯体または凝集体を意味する。このような溶媒和物は、代表的には、実質的に不変のモル比の溶質および溶媒を有する結晶化した固形物である。代表的な溶媒には、例として、水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、酢酸などが挙げられる。溶媒が水である場合、形成される溶媒和物は、水和物である。
【００６６】
「またはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体」との用語は、塩、溶媒和物および立体異性体の全ての順列（例えば、式Ｉの化合物の立体異性体の薬学的に受容可能な塩の溶媒和物）を含むことが意図される。
【００６７】
「治療有効量」とは、治療が必要な患者に投与した場合に、処置を達成するのに十分な量を意味する。
【００６８】
本明細書中で使用する場合、「処置する」または「処置」との用語は、患者（例えば、哺乳動物（特に、ヒト））における疾患または病態（例えば、ＣＯＰＤ）を処置することまたは処置を意味し、この用語は、以下を包含する：
（ａ）疾患または病態が起こるのを防止すること（すなわち、患者の予防的処置）；
（ｂ）疾患または病態を改善すること（すなわち、患者における疾患または病態をなくすかその退行を引き起こすこと）；
（ｃ）疾患または病態を抑制すること（すなわち、患者における疾患または病態の進行を遅くするか阻止すること）；または
（ｄ）患者における疾患または病態の症状を軽減すること。
【００６９】
「脱離基」との用語は、置換反応（例えば、求核置換反応）において別の官能基または原子で置き換えることができる官能基または原子を意味する。例として、代表的な脱離基には、クロロ基、ブロモ基およびヨード基；スルホン酸エステル基（例えば、メシレート、トリレート、ブロシレート、ノシレートなど）；ならびにアシルオキシ基（例えば、アセトキシ、トリフルオロアセトキシなど）が挙げられる。
【００７０】
「それらの保護誘導体」との用語は、その化合物の１つ以上の官能基を保護基またはブロッキング基で望ましくない反応から保護した特定化合物の誘導体を意味する。保護され得る官能基には、例として、カルボン酸基、アミノ基、水酸基、チオール基、カルボニル基などが挙げられる。カルボン酸に対する代表的な保護基には、エステル（例えば、ｐ−メトキシベンジルエステル）、アミドおよびヒドラジンが挙げられる；アミノ基に対しては、カルバメート（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）およびアミドが挙げられる；水酸基に対しては、エーテルおよびエステルが挙げられる；チオール基に対しては、チオエーテルおよびチオエステルが挙げられる；カルボニル基に対しては、アセタールおよびケタールが挙げられる；など。このような保護基は、当業者に周知であり、例えば、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＧ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第３版，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９およびそこで引用された参考文献で記述されている。
【００７１】
「アミノ保護基」との用語は、アミノ基での望ましくない反応を防止するのに適当な保護基を意味する。代表的なアミノ保護基には、１，１−ジ−（４’−メトキシフェニル）メチル；ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、ベンジル（Ｂｎ）、トリチル（Ｔｒ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、ホルミル、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７２】
「カルボキシ保護基」との用語は、カルボキシ基での望ましくない反応を防止するのに適切な保護基を意味する。代表的なカルボキシ保護基には、エステル（例えば、メチル、エチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ベンジル（Ｂｎ）、ｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）、９−フルオレニルメチル（Ｆｍ）、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）、ジフェニルメチル（ベンズヒドリル、ＤＰＭ））などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７３】
「ヒドロキシル保護基」との用語は、ヒドロキシル基における望ましくない反応を阻止するのに適切な保護基を意味する。代表的なヒドロキシル保護基には、シリル基（トリ（１〜６Ｃ）アルキルシリル基（例えば、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、トリエチルシリル（ＴＥＳ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）など）を含む）；エステル（アシル基）（（１〜６Ｃ）アルカノイル基（例えば、ホルミル、アセチルなど）を含む）；アリールメチル基（例えば、ベンジル（Ｂｎ）、ｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）、９−フルオロエニルメチル（Ｆｍ）、ジフェニルメチル（ベンズヒドリル、ＤＰＭ）など）が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、２個のヒドロキシル基はまた、アルキリデン基（例えば、プロパ−２−イリデン（これは、例えば、ケトン（例えば、アセトン）との反応により形成される））として、保護され得る。
【００７４】
（一般合成手順）
本発明のジフェニルメチル化合物は、以下の一般方法および手順を使用して、または当業者に容易に入手できる他の情報を使用することにより、容易に入手できる出発物質から調製され得る。本明細書中では、本発明の特定の実施形態が示され得るか、または記述され得るが、当業者は、本発明の全ての実施形態または局面が、本明細書中で記述される方法を使用して、または当業者に公知の他の方法、試薬および出発物質を使用することにより、調製され得ることを認識している。代表的または好ましい処理条件（例えば、反応温度、時間、反応物のモル比、溶媒、圧力など）が与えられる場合、特に明記しない限り、他の処理条件もまた使用され得ることが分かる。最適な反応条件は、使用する特定の反応物または溶媒に依存して変動し得るが、このような条件は、慣習的な最適化手順によって、当業者により容易に決定され得る。
【００７５】
さらに、当業者に明らかなように、特定の官能基が望ましくない反応を受けるのを防止するために、従来の保護基が必要とされ得るか、または望まれ得る。特定の官能基に適切な保護基、ならびにこのような官能基の保護および脱保護に適切な条件の選択は、当該技術分野で周知である。所望される場合、本明細書中で記述した手順で例示されたもの以外の保護基が使用され得る。例えば、多数の保護基およびそれらの導入および除去は、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＧ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第３版，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９およびそこで引用された参考文献で記述されている。  
【００７６】
例として、式Ｉの化合物は、以下の工程を包含するプロセスにより、調製され得る：
（ａ）式ＩＩの化合物：
【００７７】
【化１３】
2007528414.tif 000007
と、式ＩＩＩの化合物：
【００７８】
【化１４】
2007528414.tif 000008
とを反応させる工程であって、ここで、Ｘ１は、脱離基を表わす、工程；
（ｂ）式ＩＶの化合物：
【００７９】
【化１５】
2007528414.tif 000009
を、式Ｖの化合物：
【００８０】
【化１６】
2007528414.tif 000010
またはそれらの反応性誘導体とカップリングする工程；
（ｃ）還元剤の存在下にて、式ＩＩの化合物と式ＶＩの化合物：
【００８１】
【化１７】
2007528414.tif 000011
とを反応させる、工程；または
（ｄ）Ｒ６が水素原子または非分枝（１〜４Ｃ）アルキル基を表わす式（Ｉ）の化合物について、式ＶＩＩの化合物：
【００８２】
【化１８】
2007528414.tif 000012
であって、ここで、Ｘ２は、脱離基を表わす化合物と、式ＶＩＩＩの化合物：
【００８３】
【化１９】
2007528414.tif 000013
とを反応させて、式Ｉの化合物を得る工程；および必要に応じて、それらの薬学的に受容可能な塩を形成する工程。
【００８４】
これらの反応では、存在している特定の置換基に依存して、１個またはそれ以上の保護基が使用され得る。このような保護基は、使用するなら、通常の手順で除去されて、式Ｉの化合物が得られる。
【００８５】
一般に、上記プロセスにおいて、これらの出発物質のうちの１種の塩（例えば、酸付加塩）を使用する場合、その塩は、代表的には、この反応プロセスの前またはこの反応プロセスの間に、中和される。この中和反応は、代表的には、この塩を、１モル当量の酸付加塩に対して、１モル当量の塩基を有する塩と接触させることにより、達成される。
【００８６】
プロセス（ａ）（すなわち、式ＩＩおよびＩＩＩの化合物間での反応）では、Ｘ１で表わされる脱離基は、例えば、ハロ（例えば、クロロ、ブロモもしくはヨード）；またはスルホン酸エステル基（例えば、メシレートもしくはトシレート）であり得る。この反応は、好都合には、塩基（例えば、第三級アミン（例えば、ジイソプロピルエチルアミン））の存在下にて、実行される。好都合な溶媒には、ニトリル（例えば、アセトニトリル）が挙げられる。この反応は、好都合には、０℃〜１００℃の範囲の温度で、行われる。
【００８７】
式ＩＩの化合物は、Ｃｒｏｓｓらの米国特許第５，０９６，８９０号（その開示内容は、その全体について、本明細書中で参考として援用されている）で記載されているように、調製され得る。
【００８８】
あるいは、式ＩＩの化合物は、式ＩＸの化合物を脱保護することにより、調製できる：
【００８９】
【化２０】
2007528414.tif 000014
ここで、Ｐ１は、アミノ保護基（例えば、ベンジル基）を表わす。ベンジル基は、好都合には、例えば、水素またはギ酸アンモニウムおよび第ＶＩＩＩ族金属触媒（例えば、パラジウム）を使用して、還元により、除去される。
【００９０】
式ＩＸの化合物は、アミド結合形成条件下にて、式Ｘのカルボン酸と式ＨＮＲ４ａＲ４ｂのアミンとを反応させることにより、調製できる：
【００９１】
【化２１】
2007528414.tif 000015
式Ｘの化合物は、式ＸＩの化合物を加水分解することにより、調製され得る：
【００９２】
【化２２】
2007528414.tif 000016
式ＸＩの化合物は、Ｃｒｏｓｓらの米国特許第５，０９６，８９０号で記載されているように、調製できる。
【００９３】
式ＩＩＩの化合物は、例えば、化合物ＸＩＩとハロゲン化剤（例えば、塩化チオニル）または適当な塩化スルホニル（例えば、塩化ｐ−トルエンスルホニル）とを反応させることにより、式ＸＩＩの化合物から調製できる：
【００９４】
【化２３】
2007528414.tif 000017
式ＸＩＩの化合物は、従来のカップリング試薬および反応条件を使用して、アミノアルコールおよびアミノ酸から調製できる。例えば、代表的な条件は、本明細書中の実施例１で記述されている。
【００９５】
プロセス（ｂ）では、そのカップリング反応は、任意の通常のアミドカップリング試薬および反応条件を使用して、行うことができる。例えば、この反応では、典型的には、第三級アミン（例えば、ジイソプロピルエチルアミン）の存在下にて、そのカルボン酸を活性化するために、化合物Ｖのカルボン酸ハロゲン化物（例えば、カルボン酸塩化物）が使用でき、または脱水剤（例えば、ＨＡＴＵ（Ｏ−（７−アザベンゾ−トリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム−ヘキサフルオロホスフェート）が使用され得る。好都合な溶媒には、アミド（例えば、ジメチルホルムアミド）が挙げられる。このカップリングは、好都合には、０℃〜１００℃の範囲の温度で、実行される。
【００９６】
式ＩＶの化合物は、例えば、本明細書中のプロセス（ｃ）で記述されているように、還元剤の存在下にて、式ＸＩＩＩの化合物：
【００９７】
【化２４】
2007528414.tif 000018
と式ＸＩＶのアミン：
【００９８】
【化２５】
2007528414.tif 000019
とを反応させることにより、調製できる。
【００９９】
式ＸＩＩＩの化合物は、第三級アミン塩基（例えば、ジイソプロピルエチルアミン）の存在下にて、ジメチルスルホキシド中で、式ＸＶの化合物：
【０１００】
【化２６】
2007528414.tif 000020
と適当な酸化剤（例えば、三酸化イオウ−ピリジン錯体）とを反応させることにより、調製できる。
【０１０１】
式ＸＶの化合物は、式ＩＩの化合物と式ＸＶＩの化合物とを反応させることにより、調製できる：
【０１０２】
【化２７】
2007528414.tif 000021
ここで、Ｘ３は、脱離基（例えば、ハロ（例えば、クロロ、ブロモまたはヨード；あるいはスルホン酸エステル基（例えば、メシレートまたはトシレート）を含む）を表わす。この反応に代表的な条件は、例えば、本明細書中のプロセス工程（ａ）および実施例２で記述されている。
【０１０３】
あるいは、式ＩＶの化合物は、式ＩＩの化合物と式ＸＶＩＩの化合物とを反応させることにより、続いて、そのアミノ保護基を除去することにより、調製できる：
【０１０４】
【化２８】
2007528414.tif 000022
ここで、Ｐ２は、アミノ保護基（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）を表わし、そしてＰ３は、Ｒ５またはアミノ保護基（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）を表わす。このプロセスのバリエーションでは、Ｐ２およびＰ３は、それらが結合する窒素原子と一緒になって、結合されて、フタルイミド基を形成する。化合物ＩＩとの反応後、このようなフタルイミド基は、ヒドラジンで除去され得、Ｒ５が水素を表わす式ＩＶの化合物が得られる。
【０１０５】
プロセス（ｃ）では、その還元剤は、例えば、第ＶＩＩＩ族金属触媒（例えば、パラジウム）の存在下での水素、または水素化金属還元剤（ホウ水素化物（例えば、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム）を含む）であり得る。この反応は、好都合には、０℃〜１００℃の範囲の温度で、実行される。好都合な溶媒には、ハロゲン化炭化水素（例えば、ジクロロエタン）およびアルコール（例えば、メタノール）、またはそれらの組み合わせが挙げられる。
【０１０６】
式ＶＩの化合物は、第三級アミン塩基（例えば、ジイソプロピルエチルアミン）の存在下にて、ジメチルスルホキシド中で、適当な酸化剤（例えば、三酸化イオウ−ピリジン錯体）を使用して、式ＸＶＩＩＩの化合物を酸化することにより、調製できる：
【０１０７】
【化２９】
2007528414.tif 000023
プロセス（ｄ）では、Ｘ２で表わされる脱離基は、例えば、ハロ（例えば、クロロ、ブロモまたはヨード）；またはスルホン酸エステル基（例えば、メシレートまたはトシレート）であり得る。Ｘ２がクロロであるとき、その反応は、好都合には、アルカリ金属ヨウ化物（例えば、ヨウ化ナトリウム）の存在下にて、行われる。典型的には、この反応は、０℃〜１２０℃の範囲の温度で、行われる。好都合な溶媒には、アミド（例えば、ジメチルホルムアミド）が挙げられる。
【０１０８】
式ＶＩＩの化合物は、式ＩＶの化合物および適当なカルボン酸またはそれらの反応性誘導体（例えば、塩化クロロアセチル）から調製され得る。この反応の条件は、例えば、本明細書中の実施例６で説明されている。
【０１０９】
式Ｉの特定の化合物（例えば、Ｒ７が−（ＣＨ２）Ａｒ１（例えば、ベンジル）を表わすもの）は、それ自体、式Ｉの他の化合物のための中間体として、役立ち得ることが理解できる。それゆえ、−（ＣＨ２）Ａｒ１基は、保護基として働き得、例えば、触媒（例えば、パラジウム）の存在下にて、触媒水素化により、除去され得る。
【０１１０】
本明細書中で記述される特定の中間体は、新規であると考えられ、従って、このような化合物は、例えば、式Ｖ、ＶＩおよびＶＩＩの化合物およびそれらの塩を含めて、本発明のさらに他の局面として、提供される。
【０１１１】
本発明の代表的な化合物またはそれらの中間体を調製するための特定の反応条件および他の手順に関するさらなる詳細は、以下で示す実施例において記述されている。
【０１１２】
（薬学的組成物および薬学的処方物）
本発明のジフェニルメチル化合物は、代表的には、薬学的組成物または薬学的処方物の形態で、患者に投与される。このような薬学的組成物は、任意の受容可能な投与経路（吸入、経口、鼻内、局所（経皮を含めて）および非経口投与様式が挙げられるが、これらに限定されない）により、患者に投与され得る。
【０１１３】
本明細書中で考察される薬学的組成物中では、特定の投与様式に適切な本発明の化合物の任意の形態（すなわち、遊離塩基、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物など）が使用され得ることが理解される。
【０１１４】
従って、その組成物局面の１つでは、本発明は、薬学的に受容可能なキャリアまたは賦形剤と、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体の治療有効量とを含有する薬学的組成物に関する。必要に応じて、このような薬学的組成物は、所望される場合、他の治療剤および／または処方剤を含有し得る。
【０１１５】
本発明の薬学的組成物は、代表的には、本発明の化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体の治療有効量を含有する。代表的には、このような薬学的組成物は、約０．０１〜約９５重量％の活性剤（約０．０１〜約３０重量％（例えば、約０．０１〜約１０重量％）の活性剤を含めて）を含有する。
【０１１６】
本発明の薬学的組成物では、任意の従来のキャリアまたは賦形剤が使用され得る。特定のキャリアまたは賦形剤、またはキャリアまたは賦形剤の組合せの選択は、特定の患者または病態または疾患状態の型を処置するために使用されるべき投与様式に依存している。このことに関して、特定の投与様式に適切な薬学的組成物の調製は、十分に、薬学分野の当業者の範囲内である。さらに、このような化合物の成分は、例えば、Ｓｉｇｍａ，Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ  １４５０８，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ  ６３１７８から市販されている。さらなる例として、従来の処方技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，第２０版，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｈｉｔｅ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍａｒｙｌａｎｄ（２０００）；およびＨ．Ｃ．Ａｎｓｅｌら、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，第７版，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｈｉｔｅ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍａｒｙｌａｎｄ（１９９９）で記述されている。
【０１１７】
薬学的に受容可能なキャリアとして働くことができる物質の代表例には、以下が挙げられるが、これらに限定されない：（１）糖類（例えば、ラクトース、グルコースおよびショ糖）；（２）デンプン（例えば、コーンスターチおよびジャガイモデンプン）；（３）セルロースおよびその誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよびセルロース酢酸塩））；（４）粉末化トラガカント；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）賦形剤（例えば、カカオ脂および坐薬ワックス）；（９）油（例えば、落花生油、、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、とうもろこし油および大豆油）；（１０）グリコール（例えば、プロピレングリコール）；（１１）ポリオール（例えば、グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコール）；（１２）エステル（例えば、オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル）；（１３）寒天；（１４）緩衝剤（例えば、水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム）；（１５）アルギン酸；（１６）発熱物質非含有の水；（１７）等張生理食塩水；（１８）リンゲル液；（１９）エチルアルコール；（２０）リン酸緩衝液；（２１）圧縮噴霧剤ガス（例えば、クロロフルオロカーボンおよびヒドロフルオロカーボン）；ならびに（２２）薬学的組成物で使用される他の非毒性の適合性物質。
【０１１８】
本発明の薬学的組成物は、代表的には、本発明の化合物を薬学的に受容可能なキャリアおよび１種またはそれ以上の任意の成分と十分かつ密接に混合またはブレンドすることより、調製される。必要な場合または所望される場合、得られる均一にブレンドした混合物は、次いで、通常の手順および装置を使用して、錠剤、カプセル剤、丸薬、キャニスター、カートリッジ、ディスペンサーなどに成型または装填され得る。
【０１１９】
１実施形態では、本発明の薬学的組成物は、吸入投与に適切である。吸入投与に適切な薬学的組成物は、代表的には、エアロゾルまたは粉末の形態である。このような組成物は、一般に、周知の送達デバイス（例えば、噴霧吸入器、定量吸入器（ＭＤＩ）、乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）または類似の送達デバイス）を使用して、投与される。
【０１２０】
本発明の特定の実施形態では、この活性剤を含有する薬学的組成物は、噴霧吸入器を使用して、吸入により投与される。このような噴霧吸入デバイスは、代表的には、高速の空気流を生じ、これにより、この活性剤を含有する薬学的組成物は、患者の気道に運ばれる霧として、噴霧される。従って、この活性剤は、噴霧吸入器で使用するように処方される場合、代表的には、溶液を形成するように、適切なキャリアに溶解される。あるいは、この活性剤は、微粉化され、そして適切なキャリアと混ぜ合わされて、吸入可能な大きさの微粉化粒子の懸濁液を形成し得る。この場合、微粉化は、代表的には、約１０μｍ未満の直径を有する粒子を約９０％以上有するものとして、定義される。適切な噴霧デバイスは、例えば、ＰＡＲＩ  ＧｍｂＨ（Ｓｔａｒｎｂｅｒｇ，Ｇｅｒｍａｎ）により、商業的に提供される。他の噴霧デバイスには、Ｒｅｓｐｉｍａｔ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、および例えば、Ｌｌｏｙｄらへの米国特許第６，１２３，０６８およびＷＯ９７／１２６８７（Ｅｉｃｈｅｒら）で開示されたものが挙げられる。
【０１２１】
噴霧吸入器で使用するための代表的な薬学的組成物は、約０．０５μｇ／ｍｌ〜約１０ｍｇ／ｍＬの式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体を含む等張水溶液を含有する。
【０１２２】
本発明の別の特定の実施形態では、この活性剤を含有する薬学的組成物は、乾燥粉末吸入器を使用する吸入により、投与される。このような乾燥粉末吸入器は、代表的には、この活性剤を、自由流動粉末（これは、吸気の間、患者の気流に分散される）として、投与する。自由流動粉末を得るためには、この活性剤は、代表的には、適切な賦形剤（例えば、ラクトースまたはデンプン）と共に、処方される。
【０１２３】
乾燥粉末吸入器で使用するための代表的な薬学的組成物は、約１μｍと約１００μｍの間の粒径を有する乾燥ラクトースと、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体の微粉化粒子とを含有する。
【０１２４】
このような乾燥粉末処方物は、例えば、このラクトースを活性剤と混ぜ合わせ、次いで、それらの成分を乾燥ブレンドすることにより、製造され得る。あるいは、ら所望される場合、この活性剤は、賦形剤なしで、処方され得る。この薬学的組成物は、次いで、代表的には、乾燥粉末ディスペンサー、または乾燥粉末送達デバイスと併用するための吸入カートリッジまたはカプセルに充填される。
【０１２５】
乾燥粉末吸入器送達デバイスの例には、Ｄｉｓｋｈａｌｅｒ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ，Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｔｒｉａｎｇｌｅ  Ｐａｒｋ，ＮＣ）（例えば、Ｎｅｗｅｌｌらへの米国特許第５，０３５，２３７号を参照）；Ｄｉｓｋｕｓ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）（例えば、Ｄａｖｉｅｓらへの米国特許第６，３７８，５１９号を参照）；Ｔｕｒｂｕｈａｌｅｒ（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥ）（例えば、Ｗｅｔｔｅｒｌｉｎへの米国特許第４，５２４，７６９号を参照）；Ｒｏｔａｈａｌｅｒ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）（例えば、Ｈａｌｌｗｏｒｔｈらへの米国特許第４，３５３，３６５号を参照）およびＨａｎｄｉｈａｌｅｒ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）が挙げられる。適切なＤＰＩデバイスのさらなる例は、Ｃａｓｐｅｒらへの米国特許第５，４１５，１６２号、Ｅｖａｎｓへの第５，２３９，９９３号およびＡｒｍｓｔｒｏｎｇらへの第５，７１５，８１０号、およびそれらで引用された参考文献で記述されている。
【０１２６】
本発明のさらに別の特定の実施形態では、この活性剤を含有する薬学的組成物は、定量吸入器を使用した吸入によって、投与される。このような定量吸入器は、代表的には、圧縮噴霧剤ガスを使用して、計量した量の活性剤またはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異例体を放出する。従って、定量吸入器を使用して投与される薬学的組成物は、この活性剤の液化噴霧剤の溶液または懸濁液を含有する。任意の適切な液化噴霧剤が使用され得、これには、クロロフルオロカーボン（例えば、ＣＣｌ３Ｆ）およびヒドロフルオロアルカン（ＨＦＡ）（例えば、１，１，１，２−テトラフルオロエタン（ＨＦＡ  １３４ａ）および１，１，１，２，３，３，３，−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパン（ＨＦＡ  ２２７）が挙げられる。クロロフルオロカーボンはオゾン層に悪影響を与える懸念があるので、一般に、ＨＦＡを含有する処方物が好ましい。ＨＦＡ処方物の任意の追加成分には、共溶媒（例えば、エタノールまたはペンタン）および界面活性剤（例えば、ソルビタントリオレエート、オレイン酸、レシチンおよびグリセリン）が挙げられる。例えば、Ｐｕｒｅｗａｌらへの米国特許第５，２２５，１８３号、ＥＰ  ０７１７９８７  Ａ２（Ｍｉｎｎｅｓｏｔａ  Ｍｉｎｉｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ）およびＷＯ  ９２／２２２８６（Ｍｉｎｎｅｓｏｔａ  Ｍｉｎｉｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ）を参照。
【０１２７】
定量吸入器で使用する代表的な薬学的組成物は、約０．０１重量％〜約５重量％の式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体；約０重量％〜約２０重量％のエタノール；および約０重量％〜約５重量％の界面活性剤；残りは、ＨＦＡ噴霧剤を含有する。
【０１２８】
このような組成物は、代表的には、適切な容器（これは、活性剤、エタノール（存在する場合）および界面活性剤（存在する場合）を含む）に冷却または加圧したヒドロフルオロアルカンを加えることにより、調製される。懸濁液を調製するために、この活性剤は、微粉化され、次いで、この噴霧剤と混ぜ合わされる。この処方物は、次いで、定量吸入器デバイスの一部をなすエアロゾルキャニスターに充填される。ＨＦＡ噴霧剤と併用するように特別に開発された定量吸入器装置デバイスの例は、Ｍａｒｅｃｋｉへの米国特許第６，００６，７４５号およびＡｓｈｕｒｓｔらへの第６，１４３，２７７号で提供されている。あるいは、活性剤の微粉粒子上で界面活性剤の被覆を噴霧乾燥することにより、懸濁液処方物が調製され得る。例えば、ＷＯ  ９９／５３９０１（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｔｄ．）およびＷＯ  ００／６１１０８（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｔｄ．）を参照。
【０１２９】
吸入可能粒子を調製するプロセスおよび吸入投薬に適切な処方およびデバイスの別の例については、Ｇａｏらの米国特許第６，２６８，５３３号、Ｔｒｏｆａｓｔの同第５，９８３，９５６号、Ｂｒｉｇｇｎｅｒらの同第５，８７４，０６３号およびＪａｋｕｐｏｖｉｃらの同第６，２２１，３９８号；およびＷＯ  ９９／５５３１９（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｔｄ．）およびＷＯ  ００／３０６１４（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ  ＡＢ）を参照。
【０１３０】
他の実施形態では、本発明の薬学的組成物は、経口投与に適切である。経口投与に適切な薬学的組成物は、カプセル剤、錠剤、丸薬、ロゼンジ、カシュ剤、糖衣錠、粉剤、顆粒；または水性液体または非水性液体中の溶液または懸濁液；または水中油型液状乳濁液もしくは油中水型液状乳濁液；またはエリキシル剤もしくはシロップなどの形態であり得る；各々は、活性成分として、所定量の本発明の化合物を含有する。
【０１３１】
固形投薬形態（すなわち、カプセル剤、錠剤、丸薬など）で経口投与することが意図される場合、本発明の薬学的組成物は、代表的には、活性剤としての本発明の化合物および１つ以上の薬学的に受容可能なキャリア（例えば、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウム）を含有する。必要に応じて、または代替的に、このような固形投薬形態はまた、以下を含有し得る：（１）充填剤または増量剤（例えば、デンプン、ラクトース、ショ糖、グルコース、マンニトールおよび／またはケイ酸）；（２）結合剤（例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ショ糖および／またはアカシア）；（３）湿潤剤（例えば、グリセロール）；（４）崩壊剤（例えば、寒天−寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のケイ酸塩および／または炭酸ナトリウム；（５）溶液遅延剤（例えば、パラフィン）；（６）吸収促進剤（例えば、四級アンモニウム化合物）；（７）湿潤剤（例えば、セチルアルコールおよび／またはグリセリンモノステアレート；（８）吸収剤（例えば、カオリンおよび／またはベントナイト粘土）；（９）潤滑剤（例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固形ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよび／またはそれらの混合物；（１０）着色剤；ならびに（１１）緩衝剤。
【０１３２】
放出剤、湿潤剤、被覆剤、甘味料、香料および芳香剤、防腐剤および酸化防止剤もまた、本発明の薬学的組成物中に存在し得る。薬学的に受容可能な酸化防止剤の例には、以下が挙げられる：（１）水溶性酸化防止剤（例えば、アスコルビン酸、システイン塩酸塩、重硫酸ナトリウム、メタ重硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなど）；（２）油溶性酸化防止剤（例えば、パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α−トコフェロールなど）；および（３）金属キレート化剤（例えば、クエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸など）。錠剤、カプセル剤、丸薬などの被覆剤には、腸溶コーティングに使用されるもの（例えば、酢酸フタル酸セルロース（ＣＡＰ）、酢酸フタル酸ポリビニル（ＰＶＡＰ）、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メタクリル酸−メタクリル酸エステル共重合体、酢酸トリメリト酸セルロース（ＣＡＴ）、カルボキシメチルエチルセルロース（ＣＭＥＣ）、酢酸ケイ酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣＡＳ）などが挙げられる。
【０１３３】
もし望ましいなら、本発明の薬学的組成物はまた、一例として、割合を変えたヒドロキシプロピルメチルセルロース；または他の高分子マトリックス、リポソームおよび／または微小球体を使用して、その活性成分の遅延放出または制御放出を生じるように、処方され得る。
【０１３４】
それに加えて、本発明の薬学的組成物は、必要に応じて、乳白剤を含有し得、活性成分のみを放出するか、または優先的に、胃腸管の特定の部分において、必要に応じて、遅延様式で放出するように、処方され得る。使用できる包埋組成物の例には、高分子物質およびワックスが挙げられる。この活性成分はまた、もし適切なら、上記賦形剤の１種またはそれ以上と共に、マイクロカプセルの形態であり得る。
【０１３５】
経口投与に適切な液体投薬量形態には、例として、薬学的に受容可能な乳濁液、微小乳濁液、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシル剤が挙げられる。このような液体投薬量形態は、代表的には、この活性成分および不活性希釈剤（例えば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳濁液（例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール）、オイル（例えば、綿実油、落花生油、とうもろこし油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステルおよびそれらの混合物）を含有する。懸濁液は、この活性成分に加えて、懸濁剤（例えば、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天−寒天およびトラガカントおよびそれらの混合物）を含有し得る。
【０１３６】
経口投与向けのとき、本発明の薬学的組成物は、好ましくは、単位投薬量形態に包装される。「単位投薬量形態」との用語は、患者に投薬するのに適切な物理的に別個の単位を意味し、すなわち、各単位は、単独でまたは１種またはそれ以上の追加単位と組み合わせて、いずれかで所望の治療効果を生じるように計算された所定量の活性剤を含有する。例えば、このような単位投薬量形態は、カプセル剤、錠剤、丸薬などであり得る。
【０１３７】
本発明の化合物はまた、公知の経皮送達システムおよび賦形剤を使用して、経皮的に投与され得る。例えば、本発明の化合物は、浸透向上剤（例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールモノラウレート、アザシクロアルカン−２−オンなど）と混合され得、そしてパッチまたは類似の送達システムに取り込まれ得る。ゲル化剤、乳濁液および緩衝液を含めた追加賦形剤が、所望の場合、このような経皮組成物に使用され得る。
【０１３８】
本発明の薬学的組成物はまた、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体と共に同時投与される他の治療薬を含有し得る。例えば、本発明の薬学的組成物は、さらに、１種またはそれ以上の治療薬を含有し得、これは、他の気管支拡張薬（例えば、ＰＤＥ３インヒビター、アデノシン２ｂモジュレーターおよびβ２アドレナリンレセプターアゴニスト）；抗炎症薬（例えば、ステロイド性抗炎症薬（例えば、コルチコステロイド）；非ステロイド抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）およびＰＤＥ４インヒビター）；他のムスカリンレセプターアンタゴニスト（すなわち、抗コリン薬）；抗感染薬（例えば、グラム陽性抗生物質およびグラム陰性抗生物質または抗ウイルス薬）；抗ヒスタミン薬；プロテアーゼインヒビター；および求心神経遮断薬（例えば、Ｄ２アゴニストおよびニューロキニンモジュレーター）から選択される。本発明の特定の１局面では、本発明の化合物は、β２アドレナリンレセプターアゴニストおよびステロイド性抗炎症薬と共に、同時投与される。他の治療薬は、薬学的に受容可能な塩または溶媒和物の形態で使用され得る。さらに、もし適切なら、これらの他の治療薬は、光学的に純粋な立体異性体として、使用され得る。
【０１３９】
本発明の化合物と併用できる代表的なβ２アドレナリンレセプターアゴニストには、サルメテロール、サルブタモール、フォルモテロール、サルメファモール、フェノテロール、テルブタリン、アルブテロール、イソエタリン、メタプロテレノール、ビトルテロール、ピルブテロール、レバルブテロールなど、またはそれらの薬学的に受容可能な塩が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の化合物と併用できる他のβ２アドレナリンレセプターアゴニストには、以下が挙げられるが、これらに限定されない：３−（４−｛［６−（｛（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−［４−ヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）−フェニル］エチル｝アミノ）−ヘキシル］オキシ｝ブチル）ベンゼンスルホンアミドおよび３−（−３−｛［７−（｛（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−［４−ヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル｝−アミノ）ヘプチル］オキシ｝−プロピル）ベンゼンスルホンアミドおよび関連化合物（これらは、ＷＯ  ０２／０６６４２２（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｔｄ．）で開示されている）；３−［３−（４−｛［６−（［（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−［４−ヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル｝アミノ）ヘキシル］オキシ｝ブチル）−フェニル］イミダゾリジン−２，４−ジオンおよび関連化合物（これらは、ＷＯ  ０２／０７０４９０（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｔｄ．）で開示されている）；３−（４−｛［６−（｛（２Ｒ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル］−２−ヒドロキシエチル｝アミノ）ヘキシル］オキシ｝ブチル）−ベンゼンスルホンアミド、３−（４−｛［６−（｛（２Ｓ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル］−２−ヒドロキシエチル｝アミノ）ヘキシル］オキシ｝ブチル）−ベンゼンスルホンアミド、３−（４−｛［６−（｛（２Ｒ／Ｓ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル］−２−ヒドロキシエチル｝アミノ）ヘキシル］オキシ｝ブチル）−ベンゼンスルホンアミド、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−３−（４−｛［６−（｛（２Ｒ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル］−２−ヒドロキシエチル｝アミノ）ヘキシル］−オキシ｝ブチル）ベンゼンスルホンアミド、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−３−（４−｛［６−（｛（２Ｓ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル］−２−ヒドロキシエチル｝アミノ）−ヘキシル］オキシ｝ブチル）−ベンゼンスルホンアミド、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−３−（４−｛［６−（｛（２Ｒ／Ｓ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル］−２−ヒドロキシエチル｝アミノ）ヘキシル］−オキシ｝ブチル）ベンゼンスルホンアミドおよび関連化合物（これらは、ＷＯ  ０２／０７６９３３（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｔｄ．）で開示されている）；４−｛（１Ｒ）−２−［（６−｛２−［（２，６−ジクロロベンジル）オキシ］エトキシ｝ヘキシル）アミノ］−１−ヒドロキシエチル｝−２−（ヒドロキシメチル）フェノールおよび関連化合物（これらは、ＷＯ  ０３／０２４４３９（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｔｄ．）で開示されている）；Ｎ−｛２−［４−（（Ｒ）−２��ヒドロキシ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチル｝−（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−（３−ホルムアミド−４−ヒドロキシフェニル）エチルアミンおよび関連化合物（これらは、Ｍｏｒａｎらの米国特許第６，５７６，７９３号で開示されている）；Ｎ−｛２−［４−（３−フェニル−４−メトキシフェニル）アミノフェニル］エチル｝−（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−（８−ヒドロキシ−２（１Ｈ）−キノリノン−５−イル）エチルアミンおよび関連化合物（これらは、Ｍｏｒａｎらの米国特許第６，６５３，３２３号で開示されている）；およびそれらの薬学的に受容可能な塩。特定の実施形態では、このβ２−アドレナリンレセプターアゴニストは、Ｎ−｛２−［４−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチル｝−（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−（３−ホルムアミド−４−ヒドロキシフェニル）エチルアミンの結晶性一塩酸塩である。このβ２−アドレナリンレセプターアゴニストは、使用されるとき、この薬学的組成物中にて、治療有効量で存在している。代表的には、このβ２−アドレナリンレセプターアゴニストは、１用量あたり、約０．０５μｇ〜約５００μｇを供給するのに十分な量で、存在している。
【０１４０】
本発明の化合物と併用できる代表的なステロイド性抗炎症薬には、以下が挙げられるが、これらに限定されない：メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、デキサメサゾン、プロピオン酸フルチカゾン、６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソアンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステル、６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−１７α−プロピオニルオキシ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−（２−オキソ−テトラヒドロフラン−３Ｓ−イル）エステル、ベクロメタゾンエステル（例えば、その１７−プロピオネートエステルまたは１７，２１−ジプロピオネートエステル）、ブデソニド、フルニソリド、モメタゾンエステル（例えば、そのフロ酸エステル）、トリアムシノロンアセトニド、ロフレポニド、シクレソニド、ブチキソコルトプロピオネート、ＲＰＲ−１０６５４１、ＳＴ−１２６など、またはそれらの薬学的に受容可能な塩。このステロイド性抗炎症薬は、使用されるとき、この薬学的組成物中にて、治療有効量で存在する。代表的には、このステロイド性抗炎症薬は、１用量あたり、約０．０５μｇ〜約５００μｇを供給するのに十分な量で、存在している。
【０１４１】
代表的な組み合わせは、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異例体（これは、β２アドレナリンレセプターアゴニストとして、サルメテロールと同時投与される）およびプロピオン酸フルチカゾン（ステロイド性抗炎症薬として）である。別の代表的な組み合わせは、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異例体（これは、β２アドレナリンレセプターアゴニストとして、Ｎ−｛２−［４−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチル｝−（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−（３−ホルムアミド−４−ヒドロキシフェニル）エチルアミンの結晶性一塩酸塩と同時投与される）および６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソアンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステル（ステロイド性抗炎症薬として）である。
【０１４２】
他の適切な組合せには、例えば、以下が挙げられる：他の抗炎症薬（例えば、ＮＳＡＩＤ（例えば、クロモグリク酸ナトリウム）；ネドクロミルナトリウム；ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）インヒビター（例えば、テオフィリン、ＰＤＥ４インヒビターまたは混合ＰＤＥ３／ＰＤＥ４インヒビター）；ロイコトリエンアンタゴニスト（例えば、モンテルカスト）；ロイコトリエン合成のインヒビター；ｉＮＯＳインヒビター；プロテアーゼインヒビター（例えば、トリプターゼおよびエラスターゼインヒビター）；β−２−インテグリンアンタゴニストおよびアデノシンレセプターのアゴニストまたはアンタゴニスト（例えば、アデノシン２ａアゴニスト）；サイトカインアンタゴニスト（例えば、ケモカインアンタゴニスト（例えば、インターロイキン抗体（αＩＬ抗体）、具体的には、αＩＬ−４療法、αＩＬ−１３療法、またはそれらの組み合わせ））；またはサイトカイン合成のインヒビター。
【０１４３】
例えば、本発明の化合物と併用できる代表的なホスホジエステラーゼ−４（ＰＤＥ４）インヒビターまたは混合ＰＤＥ３／ＰＤＥ４インヒビターには、以下が挙げられるが、これらに限定されない：シス−４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸、２−カルボメトキシ−４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシフェニル）シクロヘキサン−１−オン；シス−［４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシフェニル）シクロヘキサン−１−オール］；シス−４−シアノ−４−［３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシフェニル］シクロヘキサン−１−カルボン酸など、またはそれらの薬学的に受容可能な塩。他の代表的なＰＤＥ４インヒビターまたは混合ＰＤＥ４／ＰＤＥ３インヒビターには、以下が挙げられる：ＡＷＤ−１２−２８１（ｅｌｂｉｏｎ）；ＮＣＳ−６１３（ＩＮＳＥＲＭ）；Ｄ−４４１８（ＣｈｉｒｏｓｃｉｅｎｃｅおよびＳｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ）；ＣＩ−１０１８またはＰＤ−１６８７８７（Ｐｆｉｚｅｒ）；ＷＯ９９／１６７６６で開示されたベンゾジオキソール化合物（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ）；Ｋ−３４（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ）；Ｖ−１１２９４Ａ（Ｎａｐｐ）；ロフルミラスト（Ｂｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎ）；ＷＯ９９／４７５０５で開示されたフタラジノン化合物（Ｂｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎ）；Ｐｕｍａｆｅｎｔｒｉｎｅ（Ｂｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎ、現在、Ａｌｔａｎａ）；アロフィリン（Ａｌｍｉｒａｌｌ−Ｐｒｏｄｅｓｆａｒｍａ）；ＶＭ５５４／ＵＭ５６５（Ｖｅｒｎａｌｉｓ）；Ｔ−４４０（Ｔａｎａｂｅ  Ｓｅｉｙａｋｕ）；およびＴ２５８５（Ｔａｎａｂｅ  Ｓｅｉｙａｋｕ）。
【０１４４】
本発明の化合物と共にまたはそれに加えて使用できる代表的なムスカリンアンタゴニスト（すなわち、抗コリン剤）には、以下が挙げられるが、これらに限定されない：アトロピン、硫酸アトロピン、酸化アトロピン、硝酸メチルアトロピン、臭化水素酸ホマトロピン、臭化水素酸ヒヨスチアミン（ｄ，ｌ）、臭化水素酸スコポラミン、イプラトロピウム臭化物、オキシトロピウム臭化物、チオトロピウム臭化物、メタンテリン、プロパンテリン臭化物、アニソトロピン臭化メチル、臭化クリジニウム、コピロレート（Ｒｏｂｉｎｕｌ）、ヨウ化イソプロパミド、臭化メペンゾラート、塩化トリジヘキシエチル（Ｐａｔｈｉｌｏｎｅ）、メチル硫酸ヘキソシクリウム、塩酸シクロペントレート、トロピカミド、塩酸トリヘキシフェニジル、ピレンゼピン、テレンゼピン、ＡＦ−ＤＸ  １１６およびメトクトラミンなど、またはそれらの薬学的に受容可能な塩；または塩として列挙した化合物については、それらの代替の薬学的に受容可能な塩。
【０１４５】
本発明の化合物と併用できる代表的な抗ヒスタミン剤（すなわち、Ｈ１−レセプターアンタゴニスト）には、エタノールアミン（例えば、マレイン酸カルビノキサミン、フマル酸クレマスチン、塩酸ジフェニルヒドラミンおよびジメンヒドリネート）；エチレンジアミン（例えば、マレイン酸ピリラミン（ｐｙｒｉｌａｍｉｎｅ  ａｍｌｅａｔｅ）、塩酸トリペレナミンおよびクエン酸トリペレナミン）；アルキルアミン（例えば、クロルフェニラミンおよびアクリバスチン）；ピペラジン（例えば、塩酸ヒドロキシジン、パモ酸ヒドロキシジン、塩酸シクリジン、乳酸シクリジン、塩酸メクリジンおよび塩酸セチリジン）；ピペリジン（例えば、アステミゾール、塩酸レボカバスチン、ロラタジンまたはそのデスカルボエトキシアナログ、テルフェナジンおよび塩酸フェキソフェナジン）；塩酸アゼラスチンなど、またはそれらの薬学的に受容可能な塩；または塩として列挙した化合物については、それらの代替的な薬学的に受容可能な塩が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４６】
本発明の化合物と併用して投与される他の治療薬の適切な用量は、約０．０５μｇ／日〜約１００ｍｇ／日の範囲である。
【０１４７】
以下の処方は、本発明の代表的な薬学的組成物を例示する。
【実施例】
【０１４８】
（処方実施例Ａ）
以下のようにして、吸入で投与する乾燥粉末を調製する：
成分                                                  量
本発明の化合物                                      ０．２ｍｇ
ラクトース                                          ２５ｍｇ
代表的な手順：本発明の化合物を微粉化し、次いで、ラクトースとブレンドする。次いで、このブレンドした混合物をゼラチン吸入カートリッジに装填する。粉末吸入器を使用して、このカートリッジの内容物を投与する。
【０１４９】
（処方実施例Ｂ）
以下のようにして、乾燥粉末吸入デバイスで使用する乾燥粉末処方を調製する：
代表的な手順：本発明の微粉化化合物とラクトースとのバルク処方比が１：２００の薬学的組成物を調製する。この組成物を乾燥粉末吸入デバイス（これは、１用量あたり、約１０μｇと約１００μｇとの間の本発明の化合物を送達できる）に充填する。
【０１５０】
（処方実施例Ｃ）
以下のようにして、定量吸入器での吸入投与用の乾燥粉剤を調製する：
代表的な手順：微粉化粒子（これは、１０μｍ未満の平均粒径を有する）としての本発明の化合物１０ｇを溶液（これは、脱イオン水２００ｍＬに溶解したレシチン０．２ｇから形成した）に分散させることにより、本発明の化合物５重量％およびレシチン０．１重量％を含有する懸濁液を調製する。この懸濁液を噴霧乾燥し、得られた物質を、１．５μｍ未満の平均粒径を有する粒子まで微粉化する。これらの粒子を、加圧１，１，１，２−テトラフルオロエタンと共に、カートリッジに装填する。
【０１５１】
（処方実施例Ｄ）
以下のようにして、定量吸入器で使用する薬学的組成物を調製する：
代表的な手順：微粉化粒子（これは、１０μｍ未満の平均粒径を有する）としての活性成分５ｇをコロイド溶液（これは、脱イオン水１００ｍＬに溶解したトレハロース０．５ｇおよびレシチン０．５ｇから形成した）に分散させることにより、本発明の化合物５重量％、レシチン０．５重量％およびトレハロース０．５重量％を含有する懸濁液を調製する。この懸濁液を噴霧乾燥し、得られた物質を、１．５μｍ未満の平均粒径を有する粒子まで微粉化する。これらの粒子を、加圧１，１，１，２−テトラフルオロエタンと共に、キャニスターに装填する。
【０１５２】
（処方実施例Ｅ）
以下のようにして、噴霧吸入器で使用する薬学的組成物を調製する：
代表的な手順：本発明の化合物０．１ｍｇを０．９％  ＮａＣｌ溶液（これは、クエン酸で酸性化した）１ｍＬに溶解することにより、噴霧器で使用する水性エアロゾル処方を調製する。この混合物を、その活性成分が溶解するまで、攪拌し超音波処理する。ＮａＯＨをゆっくりと加えることにより、この溶液のｐＨを３〜８の範囲の値に調節する。
【０１５３】
（処方実施例Ｆ）
以下のようにして、経口投与用の硬質ゼラチンカプセル剤を調製する：
成分                                                量
本発明の化合物                                    ２５０ｍｇ
ラクトース（噴霧乾燥）                            ２００ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム                          １０ｍｇ
代表的な手順：これらの成分を十分にブレンドし、次いで、硬質ゼラチンカプセルに装填する（カプセル剤１個あたり、４６０ｍｇの組成物）。
【０１５４】
（処方実施例Ｇ）
以下のようにして、経口投与用の懸濁液を調製する：
成分                                                量
本発明の化合物                                    １．０ｇ
フマル酸                                          ０．５ｇ
塩化ナトリウム                                    ２．０ｇ
メチルパラベン                                    ０．１５ｇ
プロピルパラベン                                  ０．０５ｇ
グラニュー糖                                      ２５．５ｇ
ソルビトール（７０％溶液）                        １２．８５ｇ
Ｖｅｅｇｕｍ  ｋ（Ｖａｎｄｅｒｂｉｌｔ  Ｃｏ．）  １．０ｇ
人口香味料                                        ０．０３５ｍＬ
着色料                                            ０．５ｍｇ
蒸留水                                            １００ｍＬまで十分に
代表的な手順：これらの成分を混合して、懸濁液を形成する（これは、懸濁液１０ｍＬあたり、活性成分１００ｍｇを含有する）。
【０１５５】
（処方実施例Ｈ）
注射用処方物を以下のように調製する：
成分                                                量
本発明の化合物                                    ０．２ｇ
酢酸ナトリウム緩衝液（０．４Ｍ）                  ２．０ｍＬ
ＨＣｌ（０．５Ｎ）またはＮａＯＨ（０．５Ｎ）      ｐＨ４まで十分に
水（蒸留、滅菌）                                  ２０ｍＬまで十分に
代表的な手順：上記成分をブレンドし、そのｐＨを、０．５Ｎ  ＨＣｌまたは０．５Ｎ  ＮａＯＨを使用して、４±０．５に調節する。
【０１５６】
（有用性）
本発明のジフェニルメチル化合物は、ムスカリンレセプターアンタゴニストとして有用であると予想され、従って、そのような化合物は、ムスカリンレセプターによって媒介される医学的状態（すなわち、ムスカリンレセプターアンタゴニストでの処置によって改善される医学的状態）を処置するのに有用であると予想される。このような病状としては、例えば、可逆性気道閉塞に関連するものを含めた肺障害または肺疾患（例えば、慢性閉塞性肺疾患（例えば、慢性的かつぜいぜいいう気管支炎および気腫）、喘息、肺線維症など）、アレルギー性鼻炎、鼻漏などが挙げられる。ムスカリンレセプターアンタゴニストで処置され得る医学的状態としては、尿生殖路障害（例えば、過敏性膀胱または排尿筋機能亢進およびそれらの症状）；胃腸管障害（例えば、過敏性腸症候群、憩室性疾患、噴門痙攣、胃腸過剰運動性障害および下痢）；心不整脈（例えば、洞徐脈）；パーキンソン病；認知障害（例えば、アルツハイマー病）；月経不全（ｄｉｓｍｅｎｏｒｒｈｅａ）などが挙げられる。
【０１５７】
１実施形態では、本発明の化合物は、哺乳動物（ヒトおよびペット動物（例えば、イヌ、ネコなど）を含めて）における平滑筋障害を処置するのに有用である。このような平滑筋障害には、例として、過敏性膀胱、慢性閉塞性肺疾患および過敏性腸症候群が挙げられる。
【０１５８】
平滑筋障害またはムスカリンレセプターによって媒介される他の状態を処置するのに使用されるとき、本発明の化合物は、代表的には、１日あたり、単一毎日用量または複数用量で、経口投与、直腸投与、非経口投与または吸入投与される。１用量あたり投与される活性剤の量または１日あたり投与される全量は、代表的に、患者の担当医により決定され、患者の状態の性質および重症度、処置される状態、患者の年齢および一般的な健康状態、活性剤に対する患者の耐性、投与経路などのような要因に依存している。
【０１５９】
代表的には、平滑筋障害またはムスカリンレセプターによって媒介される他の障害を処置するのに適切な用量は、約０．１４μｇ／ｋｇ／日〜約７ｍｇ／ｋｇ／日（約０．１５μｇ／ｋｇ／日〜約５ｍｇ／ｋｇ／日を含めて）の活性剤の範囲である。平均して７０ｋｇのヒトには、これは、約１０μｇ／日〜約５００ｍｇ／日の活性剤の量である。
【０１６０】
特定の実施形態では、本発明の化合物は、ヒトを含めた哺乳動物において、肺障害または呼吸器障害（例えば、ＣＯＰＤまたは喘息）を処置するのに有用である。このような障害を処置するのに使用されるとき、本発明の化合物は、代表的には、１日あたり複数用量、単一毎日用量または単一毎週用量で、吸入投与される。一般に、肺障害を処置する用量は、約１０μｇ／日〜約２００μｇ／日である。本明細書中で使用される場合、ＣＯＰＤは、慢性閉塞性気管支炎および気腫を包含する（例えば、Ｂａｒｎｅｓ，Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３４３：２６９−７８（２０００）を参照のこと）。
【０１６１】
肺障害を処置するのに使用されるとき、本発明の化合物は、必要に応じて、他の治療剤（例えば、β２−アドレナリンレセプターアゴニスト；コルチコステロイド、非ステロイド性抗炎症薬、またはそれらの組み合わせ）と併用して、投与される。
【０１６２】
吸入投与されるとき、本発明の化合物は、代表的には、気管支拡張を引き起こす効果を有する。従って、その方法局面の別のものでは、本発明は、患者において気管支拡張を引き起こす方法に関し、上記方法は、患者に、本発明の化合物の気管支拡張発生量を投与する工程を包含する。一般に、気管支拡張を引き起こす治療有効用量は、約１０μｇ／日〜約２００μｇ／日の範囲である。
【０１６３】
別の実施形態では、本発明の化合物は、過敏性膀胱を処置するのに使用される。過敏性膀胱を処置するのに使用するとき、本発明の化合物は、代表的には、１日あたり、単一毎日用量または複数用量、好ましくは、単一毎日用量で、経口投与される。好ましくは、過敏性膀胱を処置するための用量は、約１．０ｍｇ／日〜約５００ｍｇ／日の範囲である。
【０１６４】
さらに別の実施形態では、本発明の化合物は、過敏性腸症候群を処置するのに使用される。過敏性腸症候群を処置するのに使用されるとき、本発明の化合物は、代表的には、１日あたり、単一毎日用量または複数用量で、経口投与または直腸投与される。好ましくは、過敏性腸症候群を処置するための用量は、約１．０ｍｇ／日〜約５００ｍｇ／日の範囲である。
【０１６５】
本発明の化合物は、ムスカリンレセプターアンタゴニストであるので、このような化合物はまた、ムスカリンレセプターを有する生体系もしくは試料を調査または研究するための研究道具として有用である。このような生体系または試料は、Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３、Ｍ４および／またはＭ５ムスカリンレセプターを含み得る。ムスカリンレセプターを有する任意の適切な生体系または試料は、インビトロまたはインビボで行われ得るそのような研究で使用され得る。このような研究に適切な代表的な生体系またはサンプルとしては、細胞、細胞抽出物、原形質膜、組織サンプル、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、モルモット、ウサギ、イヌ、ブタなど）などが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６６】
この実施形態において、ムスカリンレセプターを含む生体系または試料は、本発明の化合物のムスカリンレセプターアンタゴナイズ量と接触される。次いで、ムスカリンレセプターをアンタゴナイズする効果が、従来の手順および機器（例えば、放射性リガンド結合アッセイおよび機能性アッセイ）を使用して決定される。このような機能性アッセイは、細胞内の環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）におけるリガンド媒介性変化、酵素アデニリルシクラーゼ（ｃＡＭＰを合成する酵素）の活性におけるリガンド媒介性変化、ＧＤＰに対する［３５Ｓ］ＧＴＰγＳのレセプター触媒交換を介するグアノシン５’−Ｏ−（γ−チオ）三リン酸（［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ）の単離膜への取り込みにおけるリガンド媒介性変化、遊離の細胞内カルシウムイオン（例えば、蛍光を接続した画像化プレート読み取り装置またはＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｉｎｃ．製のＦＬＩＰＲ（登録商標）を用いて測定される）におけるリガンド媒介性変化を含む。本発明の化合物は、上記に列挙した任意の機能性アッセイ、または類似の性質のアッセイにおいて、ムスカリンレセプター活性をアンタゴナイズするかまたはムスカリンレセプター活性を低下させる。本発明の化合物のムスカリンレセプターアンタゴナイズ量は、代表的には、約０．１ナノモル濃度〜約１００ナノモル濃度の範囲である。
【０１６７】
さらに、本発明の化合物は、ムスカリンレセプターアンタゴニスト活性を有する新規化合物を見出すための研究道具として使用され得る。この実施形態において、試験化合物または試験化合物群についての（例えば、インビトロ放射性リガンド置換アッセイによって決定されるような）ムスカリンレセプター結合データは、本発明の化合物についてのムスカリンレセプター結合データと比較されて、存在する場合には、ほぼ同じかまたはより優れたムスカリンレセプター結合性を有する試験化合物が同定される。本発明のこの局面は、別個の実施形態として、比較データの生成（適切なアッセイを使用する）および目的の試験化合物を同定するための試験データの分析の両方を包含する。
【０１６８】
別の実施形態では、本発明の化合物は、生体系において、そして、哺乳動物（特に、マウス、ラット、モルモット、ウサギ、イヌ、ブタ、ヒトなど）において、ムスカリンレセプターをアンタゴナイズするのに使用される。この実施形態では、式Ｉの化合物の治療有効量が哺乳動物に投与される。次いで、従来の手順および機器（それらの例は、上で記述されている）を使用して、ムスカリンレセプターをアンタゴナイズする効果が決定され得る。
【０１６９】
本発明の化合物は、他の性質のうち、Ｍ３ムスカリンレセプター活性の強力なインヒビターであることが見出されている。従って、特定の実施形態では、本発明は、Ｍ３レセプター亜型に対する阻害解離定数（Ｋｉ）が（例えば、インビトロ放射性リガンド置換アッセイで決定したとき）１００ｎＭ以下、好ましくは、５０ｎＭ以下、さらに好ましくは、１０ｎＭ以下である式Ｉの化合物に関する。
【０１７０】
さらに、本発明の化合物は、所望の作用持続時間を有すると予想されている。従って、別の特定の実施形態では、本発明は、約２４時間より長い作用持続時間を有する式Ｉの化合物に関する。
【０１７１】
さらに、本発明の化合物はまた、吸入投与されたとき、吸入投与される他の公知のムスカリンレセプターアンタゴニスト（例えば、チオトロピウム）と比較して、有効用量で、副作用（例えば、口の乾燥）が低いと予想されている。
【０１７２】
本発明の化合物の特性および有用性は、当業者に周知の種々のインビトロアッセイおよびインビボアッセイを使用して示され得る。例えば、代表的なアッセイは、以下の実施例にさらに詳細に記載される。
【０１７３】
（実施例）
以下の調製および実施例は、本発明の特定の実施形態を説明する。これらの実施例では、以下の略語は、以下の意味を有する：
ＡＣ         アデニリルシクラーゼ
ＡＣｈ       アセチルコリン
ＡＣＮ       アセトニトリル
ＢＯＣ       ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ＢＳＡ       ウシ血清アルブミン
ｃＡＭＰ      ３’−５’環状アデノシン一リン酸
ＣＨＯ       チャイニーズハムスター卵巣
ｃＭ５        クローン化チンパンジーＭ５レセプター
ＤＡＢＣＯ    １，４−ジアゾビシクロ［２．２．２］オクタン
ＤＣＭ       ジクロロメタン（すなわち、塩化メチレン）
ＤＩＰＥＡ    Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ｄＰＢＳ      ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水
ＤＭＦ       ジメチルホルムアミド
ＥＤＴＡ      エチレンジアミン四酢酸
ＥｔＯＡｃ    酢酸エチル
ＥｔＯＨ      エタノール
ＦＢＳ       ウシ胎児血清
ＦＬＩＰＲ    蛍光定量的画像プレート読み取り装置
ＨＡＴＵ      Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＥＰＥＳ    ４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸
ｈＭ１        クローン化ヒトＭ１レセプター
ｈＭ２        クローン化ヒトＭ２レセプター
ｈＭ３        クローン化ヒトＭ３レセプター
ｈＭ４        クローン化ヒトＭ４レセプター
ｈＭ５        クローン化ヒトＭ５レセプター
ＨＰＬＣ      高速液体クロマトグラフィー
ＩＰＡｃ      酢酸イソプロピル
ＭＣｈ       メチルコリン
ＭｅＯＨ      メタノール
ＭＴＢＥ      メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル
ＴＦＡ       トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ       テトラヒドロフラン
。
【０１７４】
本明細書中で使用する定義されていない他の略語は、それらの標準的で一般に受け入れられている意味を有する。特に明記しない限り、全ての物質（例えば、試薬、出発物質および溶媒）は、業者（例えば、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｆｌｕｋａなど）から購入し、さらに精製することなく、使用した。
【０１７５】
特に明記しない限り、ＨＰＬＣ分析は、Ａｇｉｌｅｎｔ（Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ）Ｓｅｒｉｅｓ  １１００機器（これは、Ｚｏｒｂａｘ  Ｂｏｎｕｓ  ＲＰ  ２．１×５０ｍｍカラム（Ａｇｉｌｅｎｔ）を備え、３．５ミクロンの粒径を有する）を使用して、行った。検出は、２１４ｎｍでのＵＶ吸光度により、行った。使用した移動相は、以下のとおりである（容量基準）：Ａは、ＡＣＮ（２％）、水（９８％）およびＴＦＡ（０．１％）である；そしてＢは、ＡＣＮ（９０％）、水（１０％）およびＴＦＡ（０．１％）である。ＨＰＬＣ  １０〜７０データは、６分間の勾配にわたって、１０〜７０％のＢの０．５ｍＬ／分の流速を使用して、得た（残りは、Ａであった）。同様に、ＨＰＬＣ  ５〜３５データおよびＨＰＬＣ  １０〜９０データは、５分間の勾配にわたって、５〜３５％Ｂ；または１０〜９０％Ｂを使用して得た。
【０１７６】
液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣＭＳ）データは、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ）モデルＡＰＩ−１５０ＥＸ機器を使用して、得た。ＬＣＭＳ  １０−９０データは、５分間の勾配にわたって、１０％〜９０％移動相Ｂを使用して、得た。
【０１７７】
小規模精製は、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ製のＡＰＩ  １５０ＥＸ  Ｐｒｅｐ  Ｗｏｒｋｓｔａｔｉｏｎシステムを使用して、行った。使用した移動相は、以下のとおりであった（容量基準）：Ａは、水および０．０５％  ＴＦＡである；そしてＢは、ＡＣＮおよび０．０５％  ＴＦＡである。アレイ（代表的には、約３〜５０ｍｇの回収試料サイズ）については、以下の条件を使用した：２０ｍＬ／分の流速；１５分の勾配および２０ｍｍ×５０ｍｍのＰｒｉｓｍ  ＲＰカラム（これは、５ミクロンの粒径を有する）（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｈｙｐｅｒｓｉｌ−Ｋｅｙｓｔｏｎｅ，Ｂｅｌｌｅｆｏｎｔｅ，ＰＡ）。大規模精製（代表的には、１００ｍｇより多い粗試料）については、以下の条件を使用した：６０ｍＬ／分の流速；３０分の勾配および４１．４ｍｍ×２５０ｍｍのＭｉｃｒｏｓｏｒｂ  ＢＤＳカラム（これは、１０ミクロンの粒径を有する）（Ｖａｒｉａｎ，Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ）。
【０１７８】
（実施例Ａ）
（２，２−ジフェニル−２−（Ｓ）−ピロリジン−３−イルアセトアミドの調製）
（工程Ａ：（Ｓ）−１−ベンジル−３−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）ピロリジンの調製）
（Ｓ）−１−ベンジル−３−ピロリジノール（４４．３ｇ、０．２５ｍｏｌ）および１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（３３．７ｇ、０．３ｍｏｌ）のｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル２５０ｍＬ撹拌溶液に、窒素雰囲気下にて、０℃で、２０分間にわたって、ｐ−トルエン塩化スルホニル（５２．４ｇ、０．２７５ｍｏｌ）を少しずつ加えた。その反応混合物を、０℃で、１時間撹拌した。氷浴を取り除き、その混合物を、外界温度で、一晩（２０±５時間）撹拌した。ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）を加え、続いて、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（２５０ｍＬ）を加えた。得られた混合物を、外界温度で、１時間撹拌した。層を分離し、有機層を、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（２５０ｍＬ）；塩化アンモニウム飽和水溶液（２５０ｍＬ）；ＮａＣｌ飽和水溶液（２５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム（８０ｇ）で乾燥した。この硫酸ナトリウムを濾過して除き、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で洗浄し、そして真空中で溶媒を除去して、灰白色固形物（収率９４％）として、７８．２ｇの表題中間体を得た。
【０１７９】
この中間体のＨＰＬＣ分析は、ＹＭＣ  ＯＤＳＡ  Ｃ１８  ４．６×５０ｍｍカラム（これは、５．０ミクロンの粒径を有する）を使用して、行った。検出は、２２０ｎｍでのＵＶ吸光度によった。使用した移動相は、以下のとおりであった（容量基準）：Ａは、ＭｅＯＨ（１０％）、水（９０％）およびＴＦＡ（０．１％）である；そしてＢは、ＭｅＯＨ（９０％）、水（１０％）およびＴＦＡ（０．１％）である。５分間にわたって、流速４．０ｍＬ／分のＡ中の０〜１００％Ｂを使用して、この中間体は、９５％の純度を有することが判明した。
【０１８０】
（工程Ｂ：（Ｓ）−１−ベンジル−３−（１−シアノ−１，１−ジフェニルメチル）−ピロリジンの調製）
ジフェニルアセトニトリル（１２．１８ｇ、６１．８ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１２０ｍＬ）撹拌溶液に、０℃で、５分間にわたって、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１０．６０ｇ、９４．６ｍｍｏｌ）を加えた。その反応混合物を、０℃で、１時間撹拌した。この反応混合物を、０℃で、（Ｓ）−１−ベンジル−３−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）−ピロリジン（２０．４８ｇ、６１．３ｍｍｏｌ）を一度に加えた。冷浴を取り除き、この反応混合物を５〜１０分間撹拌し、その時点で、この反応混合物は、褐色の均一溶液になった。次いで、この反応混合物を、４０℃で、一晩（２０±５時間）撹拌した。この反応混合物（山吹色懸濁液）を外界温度まで冷却した後、水（１５０ｍＬ）を加えた。次いで、殆どのＴＨＦを真空中で除去し、そしてＩＰＡｃ（２００ｍＬ）を加えた。層分離し、そして有機層を塩化アンモニウム飽和水溶液（１５０ｍＬ）；ＮａＣｌ飽和水溶液（１５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム（５０ｇ）で乾燥した。この硫酸ナトリウムを濾過により除き、ＩＰＡｃ（２０ｍＬ）で洗浄し、そして真空中で溶媒を除去して、淡褐色油状物（収率＞９９％）として、２３．８８ｇの表題中間体を得た。この中間体は、工程Ａで記述したＨＰＬＣ方法を使用して、７５％の純度を有することが判明した（これには、主に、過剰のジフェニルアセトニトリルが混入していた）。
【０１８１】
（工程Ｃ：（Ｓ）−３−（１−シアノ−１，１−ジフェニルメチル）ピロリジンの調製）
（Ｓ）−１−ベンジル−３−（１−シアノ−１，１−ジフェニルメチル）ピロリジンをＩＰＡｃ（約１ｇ／１０ｍＬ）に溶解し、その溶液を等容量の１Ｎ  ＨＣｌ水溶液と混合した。得られた層を分離し、そして水層を等容量のＩＰＡｃで抽出した。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濾過した。真空中で溶媒を除去して、淡黄色泡状固形物として、（Ｓ）−１−ベンジル−３−（１−シアノ−１，１−ジフェニルメチル）ピロリジン塩酸塩を得た。（注記：この塩酸塩はまた、工程Ｂのワークアップ中にて、調製できる）。
【０１８２】
（Ｓ）−１−ベンジル−３−（１−シアノ−１，１−ジフェニルメチル）ピロリジン塩酸塩（８．５５ｇ、２１．９８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４４ｍＬ）撹拌溶液に、炭素上パラジウム（１．７１ｇ）およびギ酸アンモニウム（６．９３ｇ、１０９．９ｍｍｏｌ）を加えた。その反応混合物を、撹拌しながら、３時間にわたって、５０℃まで加熱した。その反応物を外界温度まで冷却し、そして水（２０ｍＬ）を加えた。得られた混合物を、ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）で洗浄しつつ、セライトのパッドで濾過した。その濾液を集め、そして殆どのＭｅＯＨを真空中で除去した。その残渣をＩＰＡｃ（１００ｍＬ）および１０％炭酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）と混合した。得られた層を分離し、そして水層をＩＰＡｃ（５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、そして硫酸ナトリウム（２０ｇ）で乾燥した。この硫酸ナトリウムを濾過により除き、そしてＩＰＡｃ（２０ｍＬ）で洗浄した。真空中で溶媒を除去して、淡黄色油状物（収率９９．７％、ＨＰＬＣによる７１％純度）として、５．７５ｇの表題中間体を得た。
【０１８３】
（工程Ｄ：２，２−ジフェニル−２−（Ｓ）−ピロリジン−３−イルアセトアミドの調製）
磁気撹拌棒および窒素入口を備えた２００ｍＬフラスコに、（Ｓ）−３−（１−シアノ−１，１−ジフェニルメチル）ピロリジン（２．５１ｇ）および８０％Ｈ２ＳＯ４（１９．２ｍＬ；これは、９６％Ｈ２ＳＯ４（１６ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３．２ｍＬ）を使って、予め調製した）を充填した。次いで、９０℃で、２４時間またはＨＰＬＣにより示した場合に出発物質が消費されるまで、その反応混合物を加熱した。この反応混合物を外界温度まで冷却し、次いで、氷（約５０ｍＬの容量）に注いだ。そのｐＨが約１２になるまで、その混合物に、氷浴にて、撹拌しつつ、５０％ＮａＯＨ水溶液をゆっくりと加えた。ＤＣＭ（２００ｍＬ）を加え、この水溶液と混合し、その時点で、硫酸ナトリウムが沈殿し、そして濾過により除いた。その濾液を集め、そして層分離した。水層をＤＣＭ（１００ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせ、そして硫酸ナトリウム（５ｇ）で乾燥した。この硫酸ナトリウムを濾過により除き、そしてＤＣＭ（１０ｍＬ）で洗浄した。真空中で溶媒を除去して、淡黄色泡状固形物（およそ２．２ｇ、ＨＰＬＣによる８６％純度）として、粗生成物を得た。
【０１８４】
この粗生成物を、撹拌しつつ、ＥｔＯＨ（１８ｍＬ）に溶解した。この溶液に、Ｌ−酒石酸（１．８ｇ）のＥｔＯＨ（１４ｍＬ）温溶液を加え、得られた混合物を一晩（１５±５時間）撹拌した。得られた沈殿物を濾過により単離して、灰白色固形物（およそ３．２ｇ、ＨＰＬＣによる＞９５％純度）を得た。この固形物にＭｅＯＨ（１５ｍＬ）を加え、得られたスラリーを、７０℃で、一晩（１５時間）撹拌した。このスラリーを外界温度まで冷却し、そして濾過後、白色固形物（約２．６ｇ、ＨＰＬＣによる＞９９％純度）を得た。この固形物に、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）および１Ｎ  ＮａＯＨ水溶液（２５ｍＬ）を加えた。この混合物を、２つの異なる層が形成されるまで混合し、次いで、層分離し、そして水層をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、そして硫酸ナトリウム（１０ｇ）で乾燥した。この硫酸ナトリウムを濾過により除去し、そして真空中で溶媒を蒸発させて、灰白色泡状固形物（収率５８％）として、１．５５ｇの表題中間体を得た。
【０１８５】
ＨＰＬＣ分析は、Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＣＤ−２  Ｃ１８カラムを使用して、行った。検出は、２５４ｎｍでのＵＶ吸光度により、行った。使用した移動相は、以下のとおりであった（容量基準）：Ａは、ＭｅＯＨ（５％）、水（９５％）およびＴＦＡ（０．１％）である；そしてＢは、ＭｅＯＨ（９５％）、水（５％）およびＴＦＡ（０．１％）である。１５分間にわたって、流速１．０ｍＬ／分のＡ中の０〜１００％Ｂを使用して、この中間体は、＞９９％の純度を有することが判明した。
【０１８６】
（実施例１）
（２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−メチルアミノ）アセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミドの合成）
【０１８７】
【化３０】
2007528414.tif 000024
（工程Ａ：［（５−ヒドロキシペンチルカルバモイル）メチル］メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製）
５００ｍＬフラスコにて、ＤＣＭ（５０ｍＬ）に溶解したＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルサルコシンヒドロキシスクシンイミドエステル（２５ｇ、８７．３ｍｍｏｌ、１当量）に、ＤＣＭ（１２５ｍＬ）中の５−アミノ−１−ペンタノール（９．９１ｇ、９６．０ｍｍｏｌ、１．１当量）を滴下し、その反応混合物を、室温で、１８時間撹拌した。次いで、その溶液を分液漏斗に移し、有機層を、１Ｍ硫酸水素ナトリウム（３×２００ｍＬ）、２０％炭酸カリウム（２×２００ｍＬ）、ブライン（１×２００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして濃縮して、半固形物として、２３．２７ｇの表題中間体を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ６．３（二重項、ブロード、１Ｈ）、３．８５（一重項、シャープ、２Ｈ）、３．６５（二重項の二重項、ブロード、２ｈ）、３．３（二重項の二重項、ブロード、２ｈ）、２．９５（一重項、シャープ、３Ｈ）、２．４５（ブロード、１Ｈ）、１．５５（多重項、４Ｈ）、１．４５（多重項、１１Ｈ）。
【０１８８】
（工程Ｂ：トルエン−４−スルホン酸５−［２−（Ｎ’−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−メチルアミノ）アセチルアミノ］ペンチルエステルの調製）
［（５−ヒドロキシペンチルカルバモイル）メチル］メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２３．２７ｇ、８４．８ｍｍｏｌ）のＭＴＢＥ（１００ｍＬ）撹拌溶液に、ＤＡＢＣＯ（１２．３７ｇ、１１０．２ｍｍｏｌ、１．３当量）を加えた。この混合物に、塩化トシル（１９．４ｇ、１０２ｍｍｏｌ、１．２当量）のＭＴＢＥ（７０ｍＬ）溶液を滴下した。その反応混合物を、室温で、１８時間撹拌し、次いで、濾過し、そして固形物をＭＴＢＥで洗浄した。有機相を濃縮して、透明油状物を得、これを、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（これは、クロロホルム中の２〜５％ＭｅＯＨで溶出する）で精製した。適当な画分を合わせて、無色油状物として、２２．７ｇの表題中間体を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．７５（二重項、シャープ、２Ｈ）、７．３５（二重項、シャープ、２Ｈ）、６．１（二重項、ブロード、１Ｈ）、４．００（三重項、シャープ、２Ｈ）、３．８０（一重項、シャープ、２Ｈ）、３．２５（二重項の二重項、ブロード、２ｈ）、２．９５（一重項、シャープ、３Ｈ）、２．４５（一重項、シャープ、３Ｈ）、１．７（多重項、２Ｈ）、１．４０（多重項、１３Ｈ）。
【０１８９】
（工程Ｃ：（｛５−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）ピロリジン−１−イル］ペンチルカルバモイル｝メチル）メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製）
トルエン−４−スルホン酸５−［２−（Ｎ’−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’−メチル−アミノ）アセチルアミノ］ペンチルエステル（１．３７ｇ、４．６７ｍｍｏｌ、１当量）のＡＣＮ（１０ｍＬ）撹拌溶液に、ＤＩＰＥＡ（９００μＬ、５．１４ｍｍｏｌ、１．１当量）を加え、続いて、２，２−ジフェニル−２−（Ｓ）−ピロリジン−３−イルアセトアミド（実施例Ａから得た中間体）（１．３７ｇ、４．９０ｍｍｏｌ、１．０５当量）を加えた。その反応物を、５０℃で、１８時間撹拌し、次いで、室温まで冷却し、そして乾燥状態まで濃縮した。得られた残渣を、ＥｔＯＡｃとＤＣＭとの２：１溶液（５０ｍＬ）に溶解した。有機相を、１Ｍリン酸ナトリウム（４×３０ｍＬ）、２０％炭酸カリウム（２×３０ｍＬ）、ブライン（１×３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして濃縮して、淡黄色発泡体を得た。この粗製物質をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（これは、０．７５％水酸化アンモニウムを含有するクロロホルム中の７．５％ＭｅＯＨから１％水酸化アンモニウムを含有するクロロホルム中の１０％ＭｅＯＨまでで溶出する）で精製した。適当な画分を合わせて、白色発泡体として、１．４２ｇの表題中間体を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ３１Ｈ４４Ｎ４Ｏ２に対する計算値  ５３７．３；実測値  ５３７．３。
【０１９０】
（工程Ｄ：２−｛（Ｓ）１−［５−（２−メチルアミノアセチルアミノ）ペンチル］−ピロリジン３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミドの調製）
（｛５−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）ピロリジン−１−イル］ペンチルカルバモイル｝メチル）メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２３．４７ｇ、４３．７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６０ｍＬ）撹拌溶液に、ジオキサン（１００ｍＬ）中の４Ｎ  ＨＣｌを加えた。その反応混合物を、室温で、２時間撹拌し、次いで、乾燥状態まで濃縮した。その残渣を水（１００ｍＬ）に溶解し、この溶液をＤＣＭ（４×６０ｍＬ）で洗浄した。次いで、水相を２０％炭酸カリウム水溶液で塩基性にし、そしてＤＣＭ（４×６０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして濃縮した。次いで、その残渣を、ＴＦＡ（２．５当量）を含有する水（５０ｍＬ）に溶解し、そしてＨＰＬＣで精製して、ビス（トリフルオロアセテート）塩として、１７．５ｇの表題化合物を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ２６Ｈ３６Ｎ４Ｏ２に対する計算値  ４３７．３；実測値  ４３７．５。
【０１９１】
（実施例２）
（２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−アミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミドの合成）
【０１９２】
【化３１】
2007528414.tif 000025
（工程Ａ：１−ブロモ−５−（ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノペンタンの調製）
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルイミノジカルボキシレート（Ａｌｄｒｉｃｈ）（３．２０ｇ、０．１５ｍｏｌ）のＤＭＦ（１４０ｍＬ）溶液を５℃まで冷却し、そして水素化ナトリウム（６０％  鉱油、６５３ｍｇ、０．１６ｍｏｌ）をゆっくりと加えた。その反応混合物をゆっくりと室温まで温め、そして３時間撹拌した。この反応混合物に、１，５−ジブロモペンタン（２．０ｍＬ、０．１５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液を加えた。この反応混合物を、室温で、１２時間撹拌し、次いで、真空下にて濃縮し、そしてＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。有機相を、飽和炭酸水素ナトリウム（３×５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして真空下にて濃縮して、白色固形物として、５．２ｇの表題中間体を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｎａ＋］  Ｃ１５Ｈ２８ＢｒＮＯ４・Ｎａに対する計算値  ３８８．１；実測値  ３８８．０。
【０１９３】
（工程Ｂ：２−［（Ｓ）−１−（５−［ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル］アミノペンチル）−ピロリジン−３−イル］−２，２−ジフェニルアセトアミドの調製）
工程Ａから得た上記中間体（１．２９ｇ、３．５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．６２０ｍＬ、３．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）撹拌溶液に、実施例Ａの中間体である２，２−ジフェニル−２−（Ｓ）−ピロリジン−３−イルアセトアミド（４９５ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を４８時間撹拌し、次いで、真空下にて濃縮した。その残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、そして有機層を、飽和炭酸水素ナトリウム（２×１０ｍＬ）、ブライン（１×１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして真空下にて濃縮して、１．２ｇの表題中間体を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ３３Ｈ４７Ｎ３Ｏ５に対する計算値  ５６６．３；実測値  ５６６．４。
【０１９４】
（工程Ｃ：２−［（Ｓ）−１−（５−アミノペンチル）ピロリジン−３−イル］−２，２−ジフェニルアセトアミドの調製）
工程Ｂから得た中間体（１．２ｇ、２．１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（５ｍＬ）を加えた。その混合物を、室温で、２時間撹拌し、次いで、真空下にて濃縮した。その残渣をＤＣＭ（１０ｍＬ）で希釈し、そして有機層を、１Ｎ  ＮａＯＨ（１０ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして真空下にて濃縮して、７６０ｍｇの表題中間体を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ２３Ｈ３１Ｎ３Ｏに対する計算値  ３６６．３；実測値  ３６６．５。
【０１９５】
（工程Ｄ：２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−アミノアセチルアミノ）ペンチル］−ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミドの調製）
工程Ｃから得た中間体（０．０３５ｇ、０．１ｍｍｏｌ）、Ｎ−ＢＯＣ−グリシン（０．０２２ｇ、０．１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．０１８ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．５００ｍＬ）溶液を、室温で、１５分間撹拌した。ＨＡＴＵ（０．０３８ｍｇ、０．０００１ｍｍｏｌ）を加え、そして得られた混合物を、室温で、１２時間撹拌し、次いで、真空下にて濃縮した。その残渣に、ＤＣＭ（０．５００ｍＬ）およびＴＦＡ（０．２５０ｍＬ）を加え、この混合物を２時間撹拌し、次いで、濃縮した。その残渣に、水（０．５００ｍＬ）とＡＣＮ（０．５００ｍＬ）との１：１溶液を加え、この混合物をＨＰＬＣで精製して、ビス（トリフルオロアセテート）塩として、１４．６ｍｇの表題化合物を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ２５Ｈ３４Ｎ４Ｏ２に対する計算値  ４２３．３；実測値  ４２３．５。
【０１９６】
（実施例３）
（２−アミノ−Ｎ−｛５−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）ピロリジン−１−イル］ペンチル｝プロピオンアミドの合成）
【０１９７】
【化３２】
2007528414.tif 000026
実施例２の手順に従って、Ｎ−ＢＯＣ−グリシンに代えて、２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニルアミノプロピオン酸で置き換えて、ビス（トリフルオロアセテート）塩として、５２．１ｍｇの表題化合物を調製した。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ２６Ｈ３６Ｎ４Ｏ２に対する計算値  ４３７．３；実測値  ４３７．６。
【０１９８】
（実施例４）
（ピロリジン−２−カルボン酸｛５−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）ピロリジン−１−イル］ペンチル｝アミドの合成）
【０１９９】
【化３３】
2007528414.tif 000027
実施例２の手順に従って、Ｎ−ＢＯＣ−グリシンに代えて、ピロリジン−１，２−ジカルボン酸  １−ｔｅｒｔ−ブチルエステルで置き換えて、ビス（トリフルオロアセテート）塩として、５０．６ｍｇの表題化合物を調製した。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ２８Ｈ３８Ｎ４Ｏ２に対する計算値  ４６３．３；実測値  ４６３．６。
【０２００】
（実施例５）
（Ｎ−｛５−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）ピロリジン−１−イル］ペンチル｝−２−メチルアミノプロピオンアミドの合成）
【０２０１】
【化３４】
2007528414.tif 000028
実施例２の手順に従って、Ｎ−ＢＯＣ−グリシンに代えて、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメチルアミノ）プロピオン酸（０．０２４ｇ、０．１ｍｍｏｌ）で置き換えて、ビス（トリフルオロアセテート）塩として、３９．０ｍｇの表題化合物を調製した。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ２７Ｈ３８Ｎ４Ｏ２に対する計算値  ４５１．３；実測値  ４５１．６。
【０２０２】
（実施例６）
（２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−エチルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミドの合成）
【０２０３】
【化３５】
2007528414.tif 000029
（工程Ａ：２−｛（Ｓ）−１−［５−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロイソインドール−２−イル）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミドの調製）
２００ｍＬの三口フラスコに、実施例Ａから得た中間体である２，２−ジフェニル−２−（Ｓ）−ピロリジン−３−イルアセトアミド（２．８ｇ、１０ｍｍｏｌ）、Ｎ−（５−ブロモ−ペンチル）フタルイミド（３．５５ｇ、１２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４．２７ｍＬ、３０ｍｍｏｌ）およびＡＣＮ（１００ｍＬ）を充填した。その反応混合物を、５５℃で、８時間撹拌し、次いで、減圧下にて濃縮した。その残渣にＩＰＡｃを加え、この混合物を、０．５Ｎ  ＮａＯＨ（２×１００ｍＬ）、ブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして濃縮して、５ｇの表題中間体（収率１００％）を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ３１Ｈ３３Ｎ３Ｏ３に対する計算値  ４９６．３；実測値  ４９６．４。
【０２０４】
（工程Ｂ：２−［（Ｓ）−１−（５−アミノ）ペンチルピロリジン−３−イル］−２，２−ジフェニルアセトアミドの調製）
５０ｍＬの三口フラスコ（これには、磁気撹拌棒および窒素ガス入口を備え付けた）に、工程Ａから得た中間体（４．８９ｇ、９．８ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ（１０ｍＬ）を加えた。ヒドラジン（１．５４ｍＬ、４９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５ｍＬ）溶液をゆっくりと加え、その反応混合物を、室温で、２時間撹拌した。次いで、この反応混合物を濾過し、そして沈殿物をＤＣＭ（３×１００ｍＬ）で洗浄した。次いで、有機相を、０．５Ｎ  ＮａＯＨ（２×１００ｍＬ）、ブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして濃縮して、３．５８ｇの表題中間体（収率１００％）を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ２３Ｈ３１Ｎ３Ｏに対する計算値  ３６６．２；実測値  ３６６．３。
【０２０５】
（工程Ｃ：２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−クロロアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミドの調製）
２００ｍＬの三口フラスコ（これには、磁気撹拌棒、窒素ガス入口および滴下漏斗を備え付けた）に、２−クロロ塩化アセチル（１３２μＬ、１．６５ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ（７０ｍＬ）を加えた。その反応混合物を約０℃〜約１０℃の温度まで冷却し、そして工程Ｂから得た中間体（５５０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３１４μＬ、１．２当量、１．８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）溶液をゆっくりと加えた。次いで、この反応混合物を、室温で、２時間撹拌した。この反応混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３（２×５０ｍＬ）、ブライン（１×５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして濃縮して、６８０ｍｇの表題中間体（収率１００％）を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ２５Ｈ３２ＣｌＮ３Ｏ２に対する計算値  ４４２．２；実測値  ４４２．５。
【０２０６】
（工程Ｄ：２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−エチルアミノアセチルアミノ）ペンチル］−ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミドの調製）
工程Ｃから得た中間体（４４ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）撹拌溶液に、エチルアミン（１００μＬ）およびヨウ化ナトリウム（３０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を、８０℃で、１６時間加熱した。次いで、減圧下にて溶媒を除去した。その残渣に、酢酸と水との１：１溶液（１．０ｍＬ）を加え、この混合物をＨＰＬＣで精製して、ビス（トリフルオロアセテート）塩として、１１ｍｇの表題化合物を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ２７Ｈ３８Ｎ４Ｏ２に対する計算値  ４５１．３；実測値  ４５１．２。
【０２０７】
（実施例７）
（２，２−ジフェニル−２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−プロピルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝アセトアミドの合成）
【０２０８】
【化３６】
2007528414.tif 000030
上記実施例６の手順に従って、エチルアミンに代えて、プロピルアミン（１００μＬ）で置き換えて、ビス（トリフルオロアセテート）塩として、１３．１ｍｇの表題化合物を調製した。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ２８Ｈ４０Ｎ４Ｏ２に対する計算値  ４６５．３；実測値  ４６５．２。
【０２０９】
（実施例８）
（２−（（Ｓ）−１−｛５−［２−（２−メトキシエチルアミノ）アセチルアミノ］ペンチル｝ピロリジン−３−イル）−２，２−ジフェニルアセトアミドの合成）
【０２１０】
【化３７】
2007528414.tif 000031
実施例６の手順に従って、エチルアミンに代えて、２−メトキシエチルアミン（１１．２５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３５μＬ、０．２ｍｍｏｌ）で置き換えて、ビス（トリフルオロアセテート）塩として、１３．０ｍｇの表題化合物を調製した。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ２８Ｈ４０Ｎ４Ｏ３に対する計算値  ４８１．３；実測値  ４８１．２。
【０２１１】
（実施例９）
（２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−ベンジルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミドの合成）
【０２１２】
【化３８】
2007528414.tif 000032
実施例６の手順に従って、エチルアミンに代えて、ベンジルアミン（１６．１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３５μＬ、０．２ｍｍｏｌ）で置き換えて、ビス（トリフルオロアセテート）塩として、１４．５ｍｇの表題化合物を調製した。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ３２Ｈ４０Ｎ４Ｏ２に対する計算値  ５１３．３；実測値  ５１３．２。
【０２１３】
（実施例１０）
（２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−ジメチルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミドの合成）
【０２１４】
【化３９】
2007528414.tif 000033
実施例２の手順に従って、Ｎ−ＢＯＣ−グリシンに代えて、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ酢酸で置き換えて、ビス（トリフルオロアセテート）塩として、表題化合物を合成した。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ２７Ｈ３８Ｎ４Ｏ２に対する計算値  ４５１．３；実測値  ４５１．３。
【０２１５】
（実施例１１）
（２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−シクロプロピルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミドの合成）
【０２１６】
【化４０】
2007528414.tif 000034
実施例６の手順に従って、エチルアミンに代えて、シクロプロピルアミン（８．６ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３５μＬ、０．２ｍｍｏｌ）で置き換えて、ビス（トリフルオロアセテート）塩として、１６．９ｍｇの表題化合物を調製した。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ２８Ｈ３８Ｎ４Ｏ２に対する計算値  ４６３．３；実測値  ４６３．２。
【０２１７】
（実施例１２）
（２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−シクロブチルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミドの合成）
【０２１８】
【化４１】
2007528414.tif 000035
実施例６の手順に従って、エチルアミンに代えて、シクロブチルアミン（１０．７ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３５μＬ、０．２ｍｍｏｌ）で置き換えて、ビス（トリフルオロアセテート）塩として、１３．７ｍｇの表題化合物を合成した。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ２９Ｈ４０Ｎ４Ｏ２に対する計算値  ４７７．３；実測値  ４７７．２。
【０２１９】
（実施例１３）
（２−｛（Ｓ）−１−［５−（２−シクロペンチルアミノアセチルアミノ）ペンチル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミドの合成）
【０２２０】
【化４２】
2007528414.tif 000036
実施例６の手順に従って、エチルアミンに代えて、シクロペンチルアミン（１２．８ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３５μＬ、０．２ｍｍｏｌ）で置き換えて、ビス（トリフルオロアセテート）塩として、１４．６ｍｇの表題化合物を調製した。ＭＳ  ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ３０Ｈ４２Ｎ４Ｏ２に対する計算値  ４９１．３；実測値  ４９１．２。
【０２２１】
（アッセイ１  放射性リガンド結合アッセイ）
（Ａ．ｈＭ１ムスカリンレセプターサブタイプ、ｈＭ２ムスカリンレセプターサブタイプ、ｈＭ３ムスカリンレセプターサブタイプおよびｈＭ４ムスカリンレセプターサブタイプを発現する細胞からの膜調製）
クローニングされたヒトのｈＭ１ムスカリンレセプターサブタイプ、ｈＭ２ムスカリンレセプターサブタイプ、ｈＭ３ムスカリンレセプターサブタイプおよびｈＭ４ムスカリンレセプターサブタイプを定常発現するＣＨＯ細胞株をそれぞれ、１０％  ＦＢＳ（ウシ胎仔血清）および２５０μｇ／ｍＬ  ジェネテシンを補充したＨＡＭ’ｓ  Ｆ−１２からなる培地中でほぼコンフルーエンシーまで増殖させた。細胞を５％ＣＯ２、３７℃のインキュベーター内で増殖させ、ｄＰＢＳ中２ｍＭのＥＤＴＡを用いて浮遊させた。６５０×ｇでの５分間の遠心分離により、細胞を収集し、細胞ペレットを−８０℃にて凍結保存するか、または膜をすぐに調製した。膜の調製のために、細胞ペレットを溶解緩衝液に再懸濁し、Ｐｏｌｙｔｒｏｎ  ＰＴ−２１００組織破砕機（ｄｉｓｒｕｐｔｅｒ）（Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ  ＡＧ；２０秒×２バースト）を用いてホモジェネートした。粗製の膜を、４℃にて１５分間、４０，０００×ｇで遠心分離した。次いでこの膜ペレットを、再懸濁緩衝液で再懸濁し、Ｐｏｌｙｔｒｏｎ組織破砕機で再度ホモジェネートした。この膜懸濁液のタンパク質濃度を、Ｌｏｗｒｙ，Ｏ．ら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１９３：２６５（１９５１）に記載される方法で決定した。全ての膜を、−８０℃にてアリコートで凍結保存するかまたはすぐに使用した。調製したｈＭ５レセプター膜のアリコートを、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒから直接購入し、そして使用まで−８０℃で保存した。
【０２２２】
（Ｂ．ｈＭ１ムスカリンレセプターサブタイプ、ｈＭ２ムスカリンレセプターサブタイプ、ｈＭ３ムスカリンレセプターサブタイプ、ｈＭ４ムスカリンレセプターサブタイプおよびｈＭ５ムスカリンレセプターサブタイプに対する放射性リガンド結合アッセイ）
９６ウェルマイクロタイタープレートで１００μＬの総アッセイ体積にて、放射性リガンド結合アッセイを行った。ｈＭ１、ｈＭ２、ｈＭ３、ｈＭ４またはｈＭ５のムスカリンサブタイプのいずれかを定常発現するＣＨＯ細胞膜を、以下の特異的標的タンパク質濃度（μｇ／ウェル）にアッセイ緩衝液中で希釈した：ｈＭ１について１０μｇ、ｈＭ２について１０〜１５μｇ、ｈＭ３について１０〜２０μｇ、ｈＭ４について１０〜２０μｇ、およびｈＭ５について１０〜１２μｇ。これらの膜を、アッセイプレートへの添加の前に、Ｐｏｌｙｔｒｏｎ組織破砕機を使用して、短時間にホモジェネートした（１０秒間）。０．００１ｎＭ〜２０ｎＭの範囲の濃度のＬ−［Ｎ−メチル−３Ｈ］塩化メチルスコポラミン（［３Ｈ］−ＮＭＳ）（ＴＲＫ６６６、８４．０  Ｃｉ／ｍｍｏｌ，Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｂｕｃｋｉｎｇｈａｍｓｈｉｒｅ、Ｅｎｇｌａｎｄ）を使用して、放射性リガンドのＫＤ値を決定するための飽和結合研究を行った。１ｎＭおよび１１点の異なる試験化合物濃度において、［３Ｈ］−ＮＭＳを用いて試験化合物のＫｉ値を決定するための置換アッセイを行った。最初に、この試験化合物を、希釈緩衝液中に４００μＭの濃度に溶解させ、次いで、希釈緩衝液を用いて５つの系列に希釈し、１０ｐＭ〜１００μＭの範囲の最終濃度にした。アッセイプレートへの添加の順序および体積は、以下のとおりであった：２５μＬの放射性リガンド、２５μＬの希釈した試験化合物、そして５０μＬの膜。アッセイプレートを３７℃で６０分間インキュベートした。１％  ＢＳＡで前処理したＧＦ／Ｂガラス繊維フィルタープレート（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｉｎｃ．、Ｗｅｌｌｅｓｌｅｙ、ＭＡ）での急速濾過によって結合反応を終了した。フィルタープレートを、洗浄緩衝液（１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ）で３回リンスして、非結合性の放射能を除去した。次いで、このプレートを風乾し、５０μＬのＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ−２０液体シンチレーション流体（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｉｎｃ．、Ｗｅｌｌｅｓｌｅｙ、ＭＡ）を各ウェルに添加した。次いで、このプレートを、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｔｏｐｃｏｕｎｔ液体シンチレーションカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｉｎｃ．、Ｗｅｌｌｅｓｌｅｙ、ＭＡ）でカウントした。１部位競合モデルを使用してＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）を用いた非線形回帰分析により、結合データを分析した。Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式（Ｃｈｅｎｇ  Ｙ；Ｐｒｕｓｏｆｆ  Ｗ．Ｈ．、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、２２（２３）：３０９９−１０８（１９７３））を使用して放射性リガンドの観察されたＩＣ５０値およびＫＤ値から、試験化合物についてのＫｉ値を計算した。Ｋｉ値を、ｐＫｉ値に変換して、相乗平均および９５％信頼区間を決定した。次いで、これらの要約統計量をデータ報告のためにＫｉ値に逆変換した。
【０２２３】
このアッセイにおいて、より低いＫｉ値は、上記の試験化合物が、試験したレセプターに対してより高い結合親和性を有することを示唆する。このアッセイにおいて試験した本発明の例示的な化合物は、このアッセイにおいて、Ｍ３ムスカリンレセプターサブタイプに対して約１００ｎＭ未満のＫｉ値を有することを見出した。例えば、実施例１〜９の化合物は、Ｍ３ムスカリンレセプターに対して５０ｎＭ未満のＫｉ値を有することを見出した。
【０２２４】
（アッセイ２  ムスカリンレセプター機能効力アッセイ）
（Ａ．ｃＡＭＰ蓄積のアゴニスト媒介性阻害の遮断）
このアッセイにおいて、ｈＭ２レセプターを発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞において、試験化合物がフォルスコリン媒介性ｃＡＭＰ蓄積についてのオキソトレモリン阻害をブロックする能力を測定することによって、試験化合物の機能効力を決定した。
【０２２５】
ｃＡＭＰアッセイを、製造業者の指示書に従って、１２５Ｉ−ｃＡＭＰを用いたＦｌａｓｈｐｌａｔｅ  Ａｄｅｎｙｌｙｌ  Ｃｙｃｌａｓｅ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍ（ＮＥＮ  ＳＭＰ００４Ｂ、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．、Ｂｏｓｔｏｎ、ＭＡ）を使用した放射免疫アッセイ形式で行った。
【０２２６】
上の細胞培養および膜調製の節に記載されるように、細胞を、ｄＰＢＳで１回リンスし、トリプシン−ＥＤＴＡ溶液（０．０５％トリプシン／０．５３ｍＭ  ＥＤＴＡ）を用いて浮遊させた。５０ｍＬのｄＰＢＳ中で５分間６５０×ｇで遠心分離することによって、剥がした細胞を２回洗浄した。次いで、この細胞ペレットを１０ｍＬのｄＰＢＳ中に再懸濁し、Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｚ１  Ｄｕａｌ  Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｃｏｕｎｔｅｒ（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ、Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ、ＣＡ）を用いて、この細胞をカウントした。この細胞を６５０×ｇにて５分間再度遠心分離し、１．６×１０６〜２．８×１０６細胞／ｍＬのアッセイ濃度まで刺激緩衝液中に再懸濁した。
【０２２７】
試験化合物を、最初、希釈緩衝液（１ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡ（０．１％）を補充したｄＰＢＳ）中に４００μＭの濃度に溶解し、次いで、１００μＭ〜０．１ｎＭの範囲の最終モル濃度に希釈緩衝液を用いて系列希釈した。オキソトレモリンを、同様の様式で希釈した。
【０２２８】
アデニリルシクラーゼ（ＡＣ）活性のオキソトレモリン阻害を測定するために、２５μＬのフォルスコリン（ｄＰＢＳに希釈した２５μＭの最終濃度）、２５μＬの希釈オキソトレモリン、および５０μＬの細胞を、アゴニストアッセイウェルに添加した。試験化合物がオキソトレモリン阻害性ＡＣ活性をブロックする能力を測定するために、２５μＬのフォルスコリンおよびオキソトレモリン（ｄＰＢＳに希釈した、それぞれ、２５μＭおよび５μＭの最終濃度）、２５μＬの希釈試験化合物、および５０μＬの細胞を、残りのアッセイウェルに添加した。
【０２２９】
反応を、３７℃で１０分間インキュベートし、そして１００μＬの氷冷検出緩衝液を添加することによって、停止した。プレートをシールし、室温で一晩インキュベートし、そして翌朝ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  ＴｏｐＣｏｕｎｔ液体シンチレーションカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｉｎｃ．、Ｗｅｌｌｅｓｌｅｙ、ＭＡ）でカウントした。製造業者のユーザマニュアルに記載されるように、サンプルおよびｃＡＭＰ標準物について観察されたカウントに基づいて、生成されるｃＡＭＰの量（ｐｍｏｌ／ウェル）を計算した。非線形回帰（１部位競合式）を使用したＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）を用いた非線形回帰分析によって、データを分析した。Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式を使用し、ＫＤとしてオキソトレモリン濃度応答曲線のＥＣ５０を、そして［Ｌ］としてオキソトレモリンアッセイ濃度をそれぞれ使用して、Ｋｉを計算した。Ｋｉ値を、ｐＫｉ値に変換して、相乗平均および９５％信頼区間を決定した。次いで、これらの要約統計量をデータ報告のためにＫｉ値に逆転換した。
【０２３０】
このアッセイにおいて、より低いＫｉ値は、上記の試験化合物が、試験したレセプターにおいてより高い機能活性を有することを示す。このアッセイにおいて試験した本発明の例示的な化合物は、代表的に、ｈＭ２レセプターを発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞におけるフォルスコリン媒介性ｃＡＭＰ蓄積に対するオキソトレモリン阻害の遮断について、約１００ｎＭ未満のＫｉ値を有することが見出された。例えば、実施例１の化合物は、約１００ｎＭ未満のＫｉ値を有することが見出された。
【０２３１】
（Ｂ．アゴニスト媒介性［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合の遮断）
第二の機能アッセイにおいて、ｈＭ２レセプターを発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞において、この化合物がオキソトレモリン刺激性［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合をブロックする能力を測定することによって、試験化合物の機能効力を決定し得る。
【０２３２】
使用時に、凍結した膜を解凍し、次いで１ウェルあたり５〜１０μｇのタンパク質の最終標的組織濃度で、アッセイ緩衝液中に希釈した。膜を、Ｐｏｌｙｔｒｏｎ  ＰＴ−２１００組織破砕機を使用して短時間にホモジネートし、次いで、アッセイプレートに添加した。
【０２３３】
各実験において、アゴニストであるオキソトレモリンによる［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合の刺激に対するＥＣ９０値（９０％最大応答についての有効濃度）を決定した。
【０２３４】
試験化合物がオキソトレモリン刺激性［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合を阻害する能力を決定するために、以下のものを、９６ウェルプレートの各ウェルに添加した：［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ（０．４ｎＭ）を含む２５μＬのアッセイ緩衝液、２５μＬのオキソトレモリン（ＥＣ９０）およびＧＤＰ（３μＭ）、２５μＬの希釈した試験化合物、ならびにｈＭ２レセプターを発現する２５μＬのＣＨＯ細胞膜。次いで、このアッセイプレートを３７℃で６０分間インキュベートした。このアッセイプレートを、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  ９６−ウェルハーベスターを使用して１％ＢＳＡで前処理したＧＦ／Ｂフィルターで濾過した。上記のプレートを、３秒間氷冷洗浄緩衝液で３回リンスし、次いで、風乾または吸引乾燥した。Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ−２０シンチレーション液体（５０μＬ）を各ウェルに添加し、各プレートをシールし、ｔｏｐｃｏｕｎｔｅｒ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）で放射能をカウントした。非線形回帰（１部位競合式）を使用したＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）での非線形回帰分析によって、データを分析した。Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式を使用し、ＫＤとして試験化合物についての濃度応答曲線のＩＣ５０値を、そして［Ｌ］リガンド濃度としてアッセイにおけるオキソトレモリン濃度をそれぞれ使用して、Ｋｉを計算した。
【０２３５】
このアッセイにおいて、より低いＫｉ値は、上記の試験化合物が試験したレセプターでより高い機能活性を有することを示唆する。このアッセイにおいて試験した本発明の例示的な化合物は、代表的に、ｈＭ２レセプターを発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞におけるオキソトレモリン刺激性［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合に対する遮断について、約１００ｎＭ未満のＫｉ値を有することが見出された。例えば、このアッセイにおいて実施例１の化合物は、約１００ｎＭ未満のＫｉ値を有することが見出された。
【０２３６】
（Ｃ．ＦＬＩＰＲアッセイを介したアゴニスト媒介性カルシウム放出の遮断）
Ｇｑタンパク質と結合するムスカリンレセプターサブタイプ（Ｍ１、Ｍ３およびＭ５のレセプター）は、このレセプターにアゴニストが結合する場合にホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ）経路を活性化する。結果として、活性化ＰＬＣは、ホスファチジル（ｐｈｏｓｐｈａｔｙｌ）イノシトール二リン酸（ＰＩＰ２）をジアシルグリセロール（ＤＡＧ）およびホスファチジル−１，４，５−三リン酸（ＩＰ３）に加水分解し、次いで、細胞内貯蔵（すなわち、小胞体および筋小胞体）からのカルシウム放出を生じる。ＦＬＩＰＲ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ、ＣＡ）アッセイは、遊離のカルシウムが結合するときの蛍光を発するカルシウム感受性色素（Ｆｌｕｏ−４ＡＭ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ、Ｅｕｇｅｎｅ、ＯＲ）を使用して、上記細胞内カルシウムの増加を利用する。この蛍光事象を、ＦＬＩＰＲにより、リアルタイムにて測定した（このＦＬＩＰＲは、ヒトＭ１レセプターおよびヒトＭ３レセプター、ならびにチンパンジーＭ５レセプターを有するクローン化した細胞の単層由来の蛍光における変化を検出した）。アンタゴニストの効力は、アンタゴニストが細胞内カルシウムにおけるアゴニスト媒介性増加を阻害する能力によって決定された。
【０２３７】
ＦＬＩＰＲカルシウム刺激アッセイのために、アッセイを行う前の夜に、ｈＭ１レセプター、ｈＭ３レセプターおよびｃＭ５レセプターを定常発現するＣＨＯ細胞を９６ウェルＦＬＩＰＲプレートに播種した。ＦＬＩＰＲ緩衝液（カルシウムおよびマグネシウムを含まないＨａｎｋ’ｓ  Ｂｕｆｆｅｒｅｄ  Ｓａｌｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＨＢＳＳ）中の１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ  ７．４、２ｍＭ塩化カルシウム、２．５ｍＭプロベネシド）を用いて、Ｃｅｌｌｗａｓｈ（ＭＴＸ  Ｌａｂｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．）により、播種した細胞を２回洗浄して、増殖培地を除去し、そして５０μＬ／ウェルのＦＬＩＰＲ緩衝液を残した。次いで、３７℃、５％二酸化炭素で４０分間、５０μＬ／ウェルの４μＭ  ＦＬＵＯ−４ＡＭ（２×溶液を作製した）でこの細胞をインキュベートした。色素のインキュベーション期間の後、細胞を、ＦＬＩＰＲ緩衝液で２回洗浄し、５０μＬ／ウェルの最終体積を残した。
【０２３８】
アンタゴニスト効力を決定するために、オキソトレモリンについての細胞内Ｃａ２＋放出の用量依存性刺激を最初に決定し、それによって、後で、ＥＣ９０濃度でのオキソトレモリン刺激に対するアンタゴニスト効力を測定し得る。２０分間化合物希釈緩衝液で最初に細胞をインキュベートし、次いで、アゴニストを添加した。これは、ＦＬＩＰＲにより実行される。式ＥＣＦ＝（（Ｆ／１００−Ｆ）＾１／Ｈ）＊ＥＣ５０に関連して、以下のＦＬＩＰＲ測定およびデータ整理の節に記載した方法に従って、オキソトレモリンに対するＥＣ９０値を算出した。刺激プレート中で３×ＥＣＦのオキソトレモリン濃度を調製し、ＥＣ９０濃度のオキソトレモリンをアンタゴニスト阻害アッセイプレートの各ウェルに添加した。
【０２３９】
ＦＬＩＰＲについて使用するパラメータは、以下であった：０．４秒の暴露期間、０．５ワットのレーザー強度、４８８ｎｍの励起波長、および５５０ｎｍの放射波長。アゴニストを添加する前に、１０秒間蛍光における変化を測定することによりベースラインを決定した。アゴニスト刺激の後、ＦＬＩＰＲにより、１．５分間０．５〜１秒毎に蛍光の変化を連続的に測定して最大蛍光変化を得た。
【０２４０】
蛍光の変化を、各ウェルについてベースラインライン蛍光を差し引いた最大蛍光として表した。生データを、シグモイド用量応答についての組み込みモデルを使用して、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）を用いた非線形回帰により、薬物濃度の対数に対して分析した。Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式（ＣｈｅｎｇおよびＰｒｕｓｏｆｆ、１９７３）に従って、ＫＤとしてオキソトレモリンＥＣ５０値を、そしてリガンド濃度についてオキソトレモリンＥＣ９０を使用したＰｒｉｓｍによって、アンタゴニストＫｉ値を決定した。
【０２４１】
このアッセイにおいて、より低いＫｉ値は、上記の試験化合物が試験したレセプターにおいてより高い機能活性を有することを示唆する。このアッセイにおいて試験した本発明の例示的な化合物は、このアッセイにおいて代表的に、ｈＭ３レセプターを定常発現するＣＨＯ細胞におけるアゴニスト媒介性カルシウム放出の遮断に対し、約１００ｎＭ未満のＫｉ値を有することが見出された。例えば、このアッセイにおいて実施例１の化合物は、ｈＭ３レセプターに対して約１００ｎＭ未満のＫｉ値を有することが見出された。
【０２４２】
（アッセイ３  アセチルコリン誘導性気管支収縮のモルモットモデルにおける気管支保護（ｂｒｏｎｃｈｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ）の持続時間の決定）
このインビボアッセイを使用して、ムスカリンレセプターアンタゴニスト活性を示す試験化合物の気管支保護効果を評価した。
【０２４３】
体重２５０ｇと３５０ｇとの間の６匹のオスモルモット（Ｄｕｎｃａｎ−Ｈａｒｔｌｅｙ（ＨｓｄＰｏｃ：ＤＨ）Ｈａｒｌａｎ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）の群を、ケージカードによって個々に識別した。研究の間、動物に、自由に飼料と水を摂食可能とした。
【０２４４】
全身曝露投薬チャンバ（Ｒ＆Ｓ  Ｍｏｌｄｓ、Ｓａｎ  Ｃａｒｌｏｓ、ＣＡ）において、試験化合物を１０分間にわたって吸入により投与した。エアロゾルが、中央のマニホルドから６つの個々のチャンバに同時に送達されるように、投薬チャンバを準備した。モルモットを試験化合物またはビヒクル（ＷＦＩ）のエアロゾルに曝露した。２２ｐｓｉの圧力でガスの混合物（ＣＯ２＝５％、Ｏ２＝２１％およびＮ２＝７４％）により推進されるＬＣ  Ｓｔａｒ  Ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ  Ｓｅｔ（Ｍｏｄｅｌ  ２２Ｆ５１、ＰＡＲＩ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ，Ｉｎｃ．Ｍｉｄｌｏｔｈｉａｎ、ＶＡ）を使用して、これらのエアロゾルを水溶液から作製した。この運転圧での噴霧器を介したガス流は、約３Ｌ／分であった。生じたエアロゾルを、陽圧によってチャンバ内に推進した。非希釈空気を、エアロゾル化溶液を送達する間に使用した。１０分間の噴霧の間に、約１．８ｍＬの溶液を噴霧した。この値を、充填した噴霧器の噴霧前の重さと噴霧後の重さとを比較することによって、重量測定した。
【０２４５】
吸入経由で投与した試験化合物の気管支保護効果を、投与の１．５時間後、２４時間後、４８時間後および７２時間後に、全身プレチスモグラフィを使用して評価した。
【０２４６】
肺評価を開始する４５分前に、ケタミン（４３．７５ｍｇ／ｋｇ）、キシラジン（３．５０ｍｇ／ｋｇ）およびアセプロマジン（１．０５ｍｇ／ｋｇ）の筋肉内注射を用いて各モルモットを麻酔した。外科的部位を、剃毛し、７０％アルコールで消毒した後に、首腹側面の２〜３ｃｍの正中切開を施した。次いで、頚静脈を分離し、生理食塩水充填ポリエチレンカテーテル（ＰＥ−５０、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、Ｓｐａｒｋｓ、ＭＤ）でカニューレ挿入して、生理食塩中のＡＣｈ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）の静脈内注入を可能にした。次いで、気管を切開して分離し、１４Ｇのテフロン（登録商標）チューブ（＃ＮＥ−０１４、Ｓｍａｌｌ  Ｐａｒｔｓ、Ｍｉａｍｉ  Ｌａｋｅｓ、ＦＬ）でカニューレ挿入した。必要な場合、上述の麻酔用混合物のさらなる筋肉内注射によって麻酔を維持した。麻酔の深さをモニタリングし、そして動物が、動物の足をつまむことに応答する場合、または呼吸数が、１００回呼吸／分よりも多い場合、麻酔の深さを調整した。
【０２４７】
一旦カニューレ挿入が完了した場合、動物を、プレチスモグラフ（＃ＰＬＹ３１１４、Ｂｕｘｃｏ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ，Ｉｎｃ．、Ｓｈａｒｏｎ、ＣＴ）の中へ置き、食道圧カニューレ（ＰＥ−１６０、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、Ｓｐａｒｋｓ、ＭＤ）を、挿入して肺性推進圧（ｐｒｅｓｓｕｒｅ）を測定した。テフロン（登録商標）気管チューブをプレチスモグラフの開口部に取り付けて、モルモットにチャンバの外側からの室内空気を呼吸させた。次いで、チャンバをシールした。加熱灯を使用して体温を維持し、１０ｍＬの較正シリンジ（＃５５２０  Ｓｅｒｉｅｓ、Ｈａｎｓ  Ｒｕｄｏｌｐｈ、Ｋａｎｓａｓ  Ｃｉｔｙ、ＭＯ）を使用して４ｍＬの空気でモルモットの肺を３回膨張させて、下気道が、圧潰しないこと、および動物が過呼吸にならないことを確実にした。
【０２４８】
一旦ベースライン値が、コンプライアンスについて０．３〜０．９ｍＬ／ｃｍ  Ｈ２Ｏの範囲内であること、および抵抗について１秒間あたり０．１〜０．１９９ｃｍ  Ｈ２Ｏ／ｍＬの範囲内であることを決定した場合、肺評価を開始した。Ｂｕｘｃｏ肺測定コンピュータプログラムにより、肺性値の収集および導出を可能にした。
【０２４９】
このプログラムを始めることにより、実験プロトコルおよびデータ収集を開始した。各呼吸でプレチスモグラフ内に生じる時間に対する体積の変化を、Ｂｕｘｃｏ圧力トランスデューサを介して測定した。時間に対してこのシグナルを積分することによって、流動（ｆｌｏｗ）の測定を各呼吸について計算した。このシグナルを、Ｓｅｎｓｙｍ圧力トランスデューサ（＃ＴＲＤ４１００）を使用して収集した肺性推進圧（ｐｒｅｓｓｕｒｅ）変化とともに、Ｂｕｘｃｏ（ＭＡＸ  ２２７０）前置増幅器を介して、データ収集インタフェース（＃ＳＦＴ３４００および＃ＳＦＴ３８１３）に接続した。全ての他の肺のパラメータを、これら２つの入力から導いた。
【０２５０】
ベースライン値を５分間収集し、その後モルモットをＡＣｈでチャレンジした。以下の用量および実験開始からの所定時間で、ＡＣｈ（０．１ｍｇ／ｍＬ）を、シリンジポンプ（ｓｐ２１０ｉｗ，Ｗｏｒｌｄ  Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｉｎｃ．、Ｓａｒａｓｏｔａ、ＦＬ）から１分間静脈内に注入した：５分で１．９μｇ／分、１０分で３．８μｇ／分、１５分で７．５μｇ／分、２０分で１５．０μｇ／分、２５分で３０μｇ／分および３０分で６０μｇ／分。各ＡＣｈ投薬の３分後に、抵抗またはコンプライアンスがベースライン値に回復しなかった場合、１０ｍＬの較正シリンジからの４ｍＬの空気でモルモットの肺を３回膨張させた。記録した肺のパラメータは、呼吸数（呼吸／分）、コンプライアンス（ｍＬ／ｃｍ  Ｈ２Ｏ）および肺抵抗（１秒あたりのｃｍ  Ｈ２Ｏ／ｍＬ）を含んだ。一旦このプロトコルの３５分で肺機能測定を完了すると、モルモットをプレチスモグラフから取り出し、二酸化炭素窒息によって安楽死させた。
【０２５１】
データを以下の方法のうちの１つまたは両方で評価した：
（ａ）肺抵抗（ＲＬ、１秒あたりのｃｍ  Ｈ２Ｏ／ｍＬ）を、「圧力の変化」対「流動の変化」の比から計算した。ＡＣｈ（６０μｇ／分、ＩＨ）に対するＲＬ応答を、ビヒクルおよび試験化合物群について計算した。各前処置時間での、ビヒクル処置した動物における平均ＡＣｈ応答を計算し、これを使用して、対応する前処置時間での各試験化合物用量でのＡＣｈ応答の阻害％を計算した。「ＲＬ」についての阻害用量応答曲線を、Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）用ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ、バージョン３．００（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）を使用した４パラメータロジスティック式にフィットさせ、気管支保護ＩＤ５０（５０％までＡＣｈ（６０μｇ／分）気管支収縮剤応答を阻害するために必要な用量）を推定した。使用した式は、以下のとおりであった：
Ｙ＝Ｍｉｎ＋（Ｍａｘ−Ｍｉｎ）／（１＋１０（（ｌｏｇ  ＩＤ５０−Ｘ）＊勾配））
ここで、Ｘは、用量の対数であり、Ｙは応答（ＲＬにおいてのＡＣｈ誘導性増加の阻害％）である。Ｙは、Ｍｉｎで始まり、シグモイドの形で漸近的にＭａｘに近づく。
【０２５２】
（ｂ）以下の式（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｈｏｒａｃｉｃ  Ｓｏｃｉｅｔｙ．Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｍｅｔｈａｃｈｏｌｉｎｅ  ａｎｄ  ｅｘｅｒｃｉｓｅ  ｃｈａｌｌｅｎｇｅ  ｔｅｓｔｉｎｇ−１９９９．Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．１６１：３０９−３２９（２０００）に記載されるＰＣ２０値を計算するために使用した式から導かれる）を使用して、ＡＣｈまたはヒスタミンのチャレンジの範囲にわたる流動（ｆｌｏｗ）および圧力（ｐｒｅｓｓｕｒｅ）から導かれた肺抵抗値を使用して、量ＰＤ２（これは、ベースラインの肺抵抗を２倍に引き起こすために必要なＡＣｈまたはヒスタミンの量として定義される）を計算した。
【０２５３】
【数１】
2007528414.tif 000037
ここで、
Ｃ１＝Ｃ２より前のＡＣｈまたはヒスタミンの濃度
Ｃ２＝肺抵抗（ＲＬ）において少なくとも２倍の増加をもたらすＡＣｈまたはヒスタミンの濃度
Ｒ０＝ベースラインＲＬ値
Ｒ１＝Ｃ１後のＲＬ値
Ｒ２＝Ｃ２後のＲＬ値。
【０２５４】
有効用量を、５０μｇ／ｍＬの用量のＡＣｈに対する気管支収縮応答を、ベースラインの肺抵抗の２倍（ＰＤ２（５０））までに制限する用量と定義した。両側スチューデントｔ検定を使用して、データの統計学的分析を行った。Ｐ値＜０．０５を有意とみなした。
【０２５５】
概して、このアッセイにおいて投与後１．５時間でのＡＣｈ誘導性気管支収縮について約２００μｇ／ｍＬ未満のＰＤ２（５０）を有する試験化合物が、好ましい。例えば、実施例１の化合物は、投薬後１．５時間で、ＡＣｈ誘導性気管支収縮について約２００μｇ／ｍＬ未満のＰＤ２（５０）を有することが見出された。
【０２５６】
（アッセイ４  吸入モルモット唾液分泌アッセイ）
２００ｇ〜３５０ｇの体重のモルモット（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＭＡ）を、到着後少なくとも３日間屋内モルモットコロニーに環境馴化した。試験化合物またはビヒクルを、パイ形状の投薬チャンバ（Ｒ＆Ｓ  Ｍｏｌｄｓ、Ｓａｎ  Ｃａｒｌｏｓ、ＣＡ）において１０分間の期間にわたって吸入（ＩＨ）により投薬した。試験溶液を、滅菌水に溶解させ、５．０ｍＬの投薬溶液で充填した噴霧器を使用して送達した。モルモットを、３０分間吸入チャンバに拘束した。この時間の間、モルモットを、約１１０ｃｍ２の領域に制限した。この空間は、動物が自由に向きを変え、動物自身が位置を変え、そして毛づくろいを可能とするのに適切であった。２０分間の馴化後、２２ｐｓｉの圧力で屋内の気体によって推進されるＬＳ  Ｓｔａｒ  Ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ  Ｓｅｔ（Ｍｏｄｅｌ  ２２Ｆ５１、ＰＡＲＩ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ，Ｉｎｃ．Ｍｉｄｌｏｔｈｉａｎ、ＶＡ）から発生させたエアロゾルにモルモットを曝露した。噴霧が完了すると、モルモットを、処置１．５時間後、６時間後、１２時間後、２４時間後、４８時間後、または７２時間後に評価した。
【０２５７】
試験する１時間前に、０．８８ｍＬ／ｋｇ体積で、ケタミン４３．７５ｍｇ／ｋｇ、キシラジン３．５ｍｇ／ｋｇ、およびアセプロマジン１．０５ｍｇ／ｋｇの混合物の筋肉内（ＩＭ）注射でモルモットを麻酔した。動物を、加熱した（３７℃）ブランケット上で腹側を上にして配置し、その頭側を下向き勾配で２０°傾けた。４枚重ねの２×２インチのガーゼパッド（Ｎｕ−Ｇａｕｚｅ  Ｇｅｎｅｒａｌ−ｕｓｅ  ｓｐｏｎｇｅｓ、Ｊｏｈｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｊｏｈｎｓｏｎ、Ａｒｌｉｎｇｔｏｎ、ＴＸ）を、モルモットの口に挿入した。５分後、ムスカリンアゴニストのピロカルピン（３．０ｍｇ／ｋｇ、ＳＣ）を投与し、ガーゼパッドを直ちに廃棄し、新しい事前秤量したガーゼパッドで置き換えた。唾液を１０分間収集し、この１０分の時点で、ガーゼパッドを秤量し、蓄積した唾液の量（ｍｇ）を決定するために重量の差異を記録した。ビヒクルおよび各用量の試験化合物を受容した動物について、収集した唾液の平均量を計算した。ビヒクル群の平均を、１００％唾液分泌であるとみなした。得られた平均値（ｎ＝３以上）を使用して結果を計算した。二元配置ＡＮＯＶＡを使用して各時点で各用量について信頼区間（９５％）を計算した。このモデルは、Ｒｅｃｈｔｅｒ、「Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｔｉｃｈｏｌｉｎｅｒｇｉｃ  ｄｒｕｇ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｉｎ  ｍｉｃｅ  ｂｙ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ  ａｇａｉｎｓｔ  ｐｉｌｏｃａｒｐｉｎｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｓａｌｉｖａｔｉｏｎ」Ａｔａ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｏｘｉｃｏｌ  ２４：２４３−２５４（１９９６）に記載される手順の修正版である。
【０２５８】
各前処置時間で、ビヒクル処置した動物における唾液の平均重量を計算し、対応する前処置時間で、各用量で、唾液分泌の阻害％を計算するために使用した。Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）用ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ、バージョン３．００（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）を使用して、阻害の用量応答データを４パラメータロジスティック式にフィットさせ、抗唾液促進ＩＤ５０（５０％のピロカルピン誘発唾液分泌を阻害するのに必要な用量）を推定した。使用した式は以下のとおりであった：
Ｙ＝Ｍｉｎ＋（Ｍａｘ−Ｍｉｎ）／（１＋１０（（ｌｏｇ  ＩＤ５０−Ｘ）＊勾配））
ここで、Ｘは用量の対数であり、Ｙは応答（唾液分泌の阻害％）である。Ｙは、Ｍｉｎで始まり、シグモイドの形で漸近的にＭａｘに近づく。
【０２５９】
抗唾液促進ＩＤ５０と気管支保護ＩＤ５０との比を使用して、試験化合物の見かけ上の肺選択性指数を計算した。概して、約５より大きい見かけ上の肺選択性指数を有する化合物が好ましい。このアッセイにおいて、実施例１の化合物は、約５より大きい見かけ上の肺選択性指数を有した。
【０２６０】
（アッセイ５  意識のあるモルモットにおけるメタコリン誘導性の抑制応答）
体重２００ｇと３００ｇとの間の健康な成体のオスのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙモルモット（Ｈａｒｌａｎ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ）を、これらの研究に使用した。イソフルラン麻酔（効くまで）下で、動物に一般的な頚動脈カテーテルおよび頚静脈カテーテル（ＰＥ−５０チュービング）を取り付けた。このカテーテルを、肩甲下の領域への皮下トンネルを利用して外側に出した。全ての外科切開を、４−０  Ｅｔｈｉｃｏｎ  Ｓｉｌｋで縫合し、カテーテルをヘパリン（１０００ユニット／ｍＬ）でロックした。各動物に外科手術の終了時に、生理食塩水を投与（３ｍＬ、ＳＣ）し、ブプレノルフィンを投与（０．０５ｍｇ／ｋｇ、ＩＭ）した。動物を、保持室に戻す前に加熱パッド上で回復させた。
【０２６１】
外科手術後約１８〜２０時間で、動物を秤量し、動脈圧を記録するために各動物の頚動脈カテーテルをトランスデューサに接続した。動脈圧および心拍数を、Ｂｉｏｐａｃ  ＭＰ−１００  Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍを使用して記録した。動物を環境馴化させ、２０分間の期間安定させた。
【０２６２】
各動物にＭＣｈ（０．３ｍｇ／ｋｇ、ＩＶ）を頚静脈のラインを介した投与によりチャレンジし、心臓血管の応答を１０分間モニタリングした。次いで、この動物を、全身投薬チャンバ中に配置し、この全身投薬チャンバを、試験化合物溶液またはビヒクル溶液を含む噴霧器に接続した。この溶液を、呼吸可能な空気と５％二酸化炭素との混合気体を３Ｌ／分の流速で使用して１０分間噴霧した。次いでこの動物を全身チャンバから取り出し、それぞれのケージに戻した。投薬の１．５時間後および２４時間後で、動物をＭＣｈ（０．３ｍｇ／ｋｇ、ＩＶ）で再チャレンジし、血流力学的応答を決定した。その後、動物をペントバルビタールナトリウム（１５０ｍｇ／ｋｇ、ＩＶ）を用いて安楽死させた。
【０２６３】
ＭＣｈは、平均動脈圧（ＭＡＰ）を減少させ、心拍数を減少させる（徐脈）。ＭＡＰにおけるベースラインからのピークの減少（降圧応答）を、各ＭＣｈチャレンジについて（ＩＨ投薬の前後で）測定した。これらの応答は、強くなくかつ再現性がないため、徐脈の効果を分析のために使用しなかった。ＭＣｈ応答に対する処置の効果を、コントロールの降圧応答の阻害％（平均＋／−ＳＥＭ）として表す。適切な事後試験の二元配置ＡＮＯＶＡを使用して、処置時間および前処置時間の効果を試験した。ＭＣｈに対する降圧応答は、ビヒクルを用いた吸入投薬の１．５時間後および２４時間後では、相対的に変化しなかった。
【０２６４】
抗降圧ＩＤ５０の気管支保護ＩＤ５０に対する比を使用して、試験化合物の見かけの肺選択性を計算した。一般的に、５より大きい見かけの肺選択性指数を有する化合物が好ましい。このアッセイにおいて、実施例１の化合物は、５より大きい見かけの肺選択性指数を有した。
【０２６５】
本発明は、特定の局面またはこれらの実施形態を参照して記載されており、一方、本発明の真の精神および範囲から逸脱することなく、種々の変化がなされ得るか、または等価物が置換され得ることが、当業者によって理解される。さらに、適用可能な特許法および特許規則によって認められる範囲まで、各文献が個々に、本明細書中に参考として援用されているような同じ範囲まで、本明細書中に引用される全ての刊行物、特許および特許出願のその全体が、本明細書中に参考として援用される。
【国際調査報告】
2007528414.tif 000047
2007528414.tif 000048
2007528414.tif 000049
2007528414.tif 000050
2007528414.tif 000051