(57)【要約】  ２−ニトロペンタベンゾイルアデノシンまたは２−ニトロペンタアセチルアデノシンを中間体として用いた式Ｉ【化１】2007513134.tif 000018［式中、Ｒは、Ｃ１−６アルコキシ（直鎖または分枝）、フェノキシ基（置換されていないか、あるいはハロ、アミノ、ＣＦ３−、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによりモノ−置換またはジ−置換されている）、ベンジルオキシ基（置換されていないか、あるいはハロ、アミノ、ＣＦ３−、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによりモノ−置換またはジ−置換されている）、またはベンゾイル基（置換されていないか、あるいはハロ、アミノ、ＣＦ３−、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによりモノ−置換またはジ−置換されている）である］の２−置換アデノシンの合成が記載されている。本発明の方法は改善された収率および純度の生成物を提供する。
2007513134.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
2007513134.tif 000016
［式中、ＲはＣ１−６アルコキシ（直鎖または分枝）、フェノキシ基（置換されていないか、あるいはハロ、アミノ、ＣＦ３−、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによりモノ−置換またはジ−置換されている）、ベンジルオキシ基（置換されていないか、あるいはハロ、アミノ、ＣＦ３−、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによりモノ−置換またはジ−置換されている）、またはベンゾイル基（置換されていないか、あるいはハロ、アミノ、ＣＦ３−、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによりモノ−置換またはジ−置換されている）である］
の２−置換アデノシンの合成方法であって、２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンを２−置換アデノシンに変換することを含む、方法。
【請求項２】
Ｒが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、またはベンゾイルである、請求項１記載の方法。
【請求項３】
２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンが、脱保護およびＣ１−６アルコキシドアニオンまたはフェノキシドアニオンとの反応により２−置換アデノシンに変換される、請求項１または２記載の方法。
【請求項４】
アニオンが、ＭｅＯＨ／ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ／ｎ−ＢｕＬｉ、ＭｅＯＨ／ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ／ＮａＨまたはＭｅＯＨ／ＫＯｔＢｕから生成されるメトキシドアニオンである、請求項３記載の方法。
【請求項５】
ペンタベンゾイルアデノシンを２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンに変換することをさらに含む、請求項１から４のいずれか記載の方法。
【請求項６】
２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンの合成方法であって、ペンタベンゾイルアデノシンを２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンに変換することを含む、方法。
【請求項７】
ペンタベンゾイルアデノシンが、硝酸テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＮ）または硝酸テトラメチルアンモニウム（ＴＭＡＮ）をニトロ化試薬として用いてペンタベンゾイルアデノシンをニトロ化することにより２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンに変換される、請求項５または６記載の方法。
【請求項８】
２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンに混入しているＴＢＡＮまたはＴＭＡＮの量をニトロ化反応後に低減することをさらに含む、請求項７記載の方法。
【請求項９】
ＴＢＡＮまたはＴＭＡＮの量が２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンを水で洗浄することにより低減される、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
水での洗浄後２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンを再結晶することをさらに含む、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
アデノシンをペンタベンゾイルアデノシンに変換することをさらに含む、請求項５から１０のいずれか記載の方法。
【請求項１２】
ペンタベンゾイルアデノシンまたは２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンの合成方法であって、アデノシンをペンタベンゾイルアデノシンに変換することを含む、方法。
【請求項１３】
アデノシンがベンゾイルクロライドを用いてベンゾイル化される、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１４】
２−ニトロペンタベンゾイルアデノシン。
【請求項１５】
式Ｉの２−置換アデノシンの合成における２−ニトロペンタベンゾイルアデノシンの使用。
【請求項１６】
２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンまたは式Ｉの２−置換アデノシンの合成におけるペンタベンゾイルアデノシンの使用。
【請求項１７】
式Ｉの２−置換アデノシンの合成におけるベンゾイル化試薬の使用。
【請求項１８】
ペンタベンゾイルアデノシンのＴＢＡＮまたはＴＭＡＮでのニトロ化により形成された２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンに混入しているＴＢＡＮまたはＴＭＡＮの量を低減する方法であって、２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンを水で洗浄することを含む、方法。
【請求項１９】
水での洗浄後２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンを再結晶することをさらに含む、請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
式Ｉ
【化２】
2007513134.tif 000017
［式中、Ｒは、Ｃ１−６アルコキシ（直鎖または分枝）、フェノキシ基（置換されていないか、あるいはハロ、アミノ、ＣＦ３−、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによりモノ−置換またはジ−置換されている）、ベンジルオキシ基（置換されていないか、あるいはハロ、アミノ、ＣＦ３−、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによりモノ−置換またはジ−置換されている）、またはベンゾイル基（置換されていないか、あるいはハロ、アミノ、ＣＦ３−、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによりモノ−置換またはジ−置換されている）である］
の２−置換アデノシンの合成方法であって、アデノシンペンタアセテートを硝酸テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＮ）または硝酸テトラメチルアンモニウム（ＴＭＡＮ）を用いてニトロ化し、２−ニトロアデノシンペンタアセテートを生成すること；２−ニトロアデノシンペンタアセテートに混入しているＴＢＡＮまたはＴＭＡＮの量を低減すること；次に２−置換アデノシンを２−ニトロアデノシンペンタアセテートから生成することを含む、方法。
【請求項２１】
ＴＢＡＮまたはＴＭＡＮ混入物の量が、２−ニトロアデノシンペンタアセテートをイソプロパノールと共に粉砕し、次に粉砕した２−ニトロアデノシンペンタアセテートを水で洗浄することにより低減される、請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
２−置換アデノシンが、２−ニトロアデノシンペンタアセテートを脱保護し、Ｃ１−６アルコキシドアニオンまたはフェノキシドアニオンと反応させることにより２−ニトロアデノシンペンタアセテートから生成される、請求項２０または２１記載の方法。
【請求項２３】
２−置換アデノシンが、メタノール／ＮａＯＭｅ、メタノール／ｎ−ＢｕＬｉ、メタノール／ＮａＯＨ、メタノール／ＮａＨまたはメタノール／ＫＯｔＢｕからのメトキシドアニオンとの反応により２−ニトロアデノシンペンタアセテートから生成される２−メトキシアデノシンである、請求項２０から２２いずれか記載の方法。
【請求項２４】
アデノシンをアシル化することによりアデノシンペンタアセテートを合成することをさらに含む、請求項２０から２３のいずれか記載の方法。
【請求項２５】
アデノシンがアシル化され、アデノシンのＯ−トリ−アセチルおよび／またはテトラ−アセチル誘導体が形成され、該誘導体が単離され、次に単離された誘導体がアシル化され、アデノシンペンタアセテートが生成される、請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
アデノシンペンタアセテートを洗浄し、混入しているアデノシンテトラアセテートを除去した後、洗浄したアデノシンペンタアセテートをニトロ化し、２−ニトロアデノシンペンタアセテートを形成させる、請求項２４または２５記載の方法。
【請求項２７】
式Ｉの２−置換アデノシンの合成方法であって、アデノシンをアシル化し、アデノシンのＯ−トリ−アセチルおよび／またはテトラ−アセチル誘導体を形成させ、該誘導体を単離し、単離した誘導体をアシル化し、アデノシンペンタアセテートを生成し、次に２−置換アデノシンをアデノシンペンタアセテートから形成させることを含む、方法。
【請求項２８】
アデノシンペンタアセテートを洗浄し、混入しているアデノシンテトラアセテートの量を低減した後、２−置換アデノシンを洗浄したアデノシンペンタアセテートから生成することをさらに含む、請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
式Ｉの２−置換アデノシンの合成方法であって、アデノシンまたはアデノシンのアシル化誘導体をアシル化し、アデノシンペンタアセテートを形成し、アデノシンペンタアセテートを洗浄し、混入しているアデノシンテトラアセテートの量を低減し、次に２−置換アデノシンを洗浄したアデノシンペンタアセテートから生成することを含む、方法。
【請求項３０】
アデノシンペンタアセテートをニトロ化し、２−ニトロアデノシンペンタアセテートを生成し、次に２−置換アデノシンを２−ニトロアデノシンペンタアセテートから生成することをさらに含む、請求項２７から２９のいずれか記載の方法。
【請求項３１】
２−置換アデノシンが、メタノール／ＮａＯＭｅ、メタノール／ｎ−ＢｕＬｉ、メタノール／ＮａＯＨ、メタノール／ＮａＨまたはメタノール／ＫＯｔＢｕからのメトキシドアニオンを２−ニトロアデノシンペンタアセテートと反応させて生成した２−メトキシアデノシンである、請求項３０記載の方法。
【請求項３２】
２−ニトロアデノシンペンタアセテートを２−クロロアデノシンペンタアセテートに変換した後、２−置換アデノシンを２−クロロアデノシンペンタアセテートから生成することをさらに含む、請求項２０、２１、または３０のいずれか記載の方法。
【請求項３３】
２−クロロアデノシンペンタアセテートを２−置換アデノシンに変換することを含む、２−置換アデノシンの合成方法。
【請求項３４】
２−クロロアデノシンペンタアセテートを２−ニトロアデノシンペンタアセテートから生成することをさらに含む、請求項３３記載の方法。
【請求項３５】
２−置換アデノシンが２−メトキシアデノシンであり、２−クロロアデノシンペンタアセテートがメタノール／ＮａＯＭｅ、メタノール／ｎ−ＢｕＬｉ、メタノール／ＮａＯＨまたはメタノール／ＮａＨからのメトキシドアニオンを２−ニトロアデノシンペンタアセテートと反応させることにより２−メトキシアデノシンに変換される、請求項３２から３４のいずれか記載の方法。
【請求項３６】
請求項２０から３５のいずれか記載の方法により合成される２−置換アデノシン。
【請求項３７】
メタノール／ＮａＯＭｅ、メタノール／ｎ−ＢｕＬｉ、メタノール／ＮａＯＨ、メタノール／ＮａＨまたはメタノール／ＫＯｔＢｕからのメトキシドアニオンを２−ニトロアデノシンペンタアセテートと反応させることを含む、２−メトキシアデノシンの合成方法。
【請求項３８】
スキーム１または２に示される工程を含む、２−メトキシアデノシンの合成方法。
【請求項３９】
詳述されている２−メトキシアデノシンの合成方法。
【請求項４０】
純度が９６％より高い、２−メトキシアデノシン。
【請求項４１】
２−ニトロアデノシンペンタアセテートの合成方法であって、アデノシンペンタアセテートをＴＢＡＮまたはＴＭＡＮを用いてニトロ化し、２−ニトロアデノシンペンタアセテートを生成し、次に２−ニトロアデノシンペンタアセテートに混入しているＴＢＡＮまたはＴＭＡＮの量を低減することを含む、方法。
【請求項４２】
ＴＢＡＮまたはＴＭＡＮ混入物の量が、２−ニトロアデノシンペンタアセテートをイソプロパノールと共に粉砕し、次に粉砕した２−ニトロアデノシンペンタアセテートを水で洗浄することにより低減される、請求項４１記載の方法。
【請求項４３】
アデノシンペンタアセテート、２−ニトロアデノシンペンタアセテート、または式Ｉの２−置換アデノシンの合成方法であって、次の工程：アデノシンをアシル化し、アデノシンのＯ−トリ−アセチルおよび／またはテトラ−アセチル誘導体を形成させること、該誘導体を単離すること、次に単離した誘導体をアシル化し、アデノシンペンタアセテートを生成することを含む、方法。
【請求項４４】
アデノシンペンタアセテート、２−ニトロアデノシンペンタアセテート、または式Ｉの２−置換アデノシンの合成方法であって、次の工程：アデノシンまたはアデノシンのアシル化誘導体をアシル化し、アデノシンペンタアセテートを形成させること；次にアデノシンペンタアセテートを洗浄し、混入しているアデノシンテトラアセテートの量を低減することを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、スポンゴシン（２−メトキシアデノシン）のような２−置換アデノシンの合成、およびかかる化合物の合成において使用するための中間体の合成に関する。
【０００２】
天然物のスポンゴシンは、１９４５年、フロリダ沿岸部から集められた海綿動物であるクリプトテシア・クリプタ（Cryptotethia crypta）から最初に単離された（Bergmann and Feeney, J.Org. Chem. 1951, 16, 981；Ibid 1956, 21, 226）。スポンゴシンは、それが天然で見出された最初のメトキシプリンであっただばかりでなく、動物組織から単離された最初のＯ−メチル化合物の１つであったという点で珍しいヌクレオシドと考えられた。
【０００３】
スポンゴシンのいくつかの合成が既に報告されている。公開されたこれらの最初のものの１つがBergmannおよびStempien（J. Org. Chem. 1957, 22, 1575）によるものであり、ここでスポンゴシンはクロロメルクル２−メトキシアデノシンの２，３，５−トリ−Ｏ−ベンゾイル−Ｄ−リボフラノシルクロライドへの結合を介して形成された。この単純な結合反応により粗収率のスポンゴシンが提供され、次にこの３１％が温水から再結晶され、融点１９１〜１９１．５℃、旋光度−４３．５°（ＮａＯＨ）を示すスポンゴシンが提供された。
【０００４】
この主題の変法がOjha等（Nucleosides and Nucleotides, 1995, 14, 1889）により用いられた。彼らは最初に２−エチルチオアデニンを適当に保護されたリボースと結合させた。続く保護基および酸化の調節により、基質をナトリウムメトキシドと反応させ、最終工程で収率８７％のスポンゴシンを得た。カラムクロマトグラフィーによる精製（clean up）後の標的スポンゴシンの純度は、元素分析および融点（１８９〜１９０℃）の両方で証明された。
【０００５】
スポンゴシンの最も一般的な製造方法の１つは、２−置換塩素原子のメトキシドによる置換を介したものである。
【化１】
2007513134.tif 000003
【０００６】
この方法論は多くのグループにより上手く応用され、収率および純度の変化したスポンゴシンが提供されてきた：Schaeffer et al.；J. Am. Chem. Soc. 1958, 80, 3738（収率３５％、融点１９０〜１９２℃）；Bartlett et al.；J. Med. Chem. 1981, 24, 947（収率および純度は示されていない）；Sato et al.；Synth. Proceed. Nucleic Acid Chem. 1968, 1, 264。しかしながら、この方法は、出発物質である２−クロロアデノシンを合成するのが難しく、かつ高価であるという欠点に悩まされていた。
【０００７】
スポンゴシンは、イソグアノシンのヨウ化メチルによるメチル化反応における副産物としてCook等（J. Org. Chem. 1980, 45, 4020）により報告された。所望の１−メチルイソグアノシンおよびスポンゴシンの両方が不十分な粗収率（それぞれ、１９％および３０％）で得られた。粗スポンゴシン断片は、まずシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（溶出：クロロホルム／メタノール）により精製され、次に水から再結晶され、融点１８９〜１９２℃の試料（収率７％、純品）がもたらされた。
【０００８】
Deghati等（Tetrahedron Letters 41 (2000) 1291-1295）およびWanner等（Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 10 (2000) 2141-2144）により、２−ニトロアデノシンペンタアセテートのメタノール中のシアン化カリウムでの処理による２−ニトロアデノシンの合成における有意な副産物としてのスポンゴシンの形成が記載されている。２−ニトロアデノシンは収率たった１０％、そしてスポンゴシンは収率４７％で得られた（Deghati et al.）。２−ニトロアデノシンペンタアセテートがアデノシンペンタアセテートの硝酸テトラブチルアンモニウム／トリフルオロ酢酸無水物（ＴＢＡＮ／ＴＦＡＡ）でのニトロ化により生成され、（Wanner et al.において）アデノシンペンタアセテートがアデノシンの無水酢酸およびＤＭＡＰでの処理により形成された。
【化２】
2007513134.tif 000004
【０００９】
この方法の欠点は、スポンゴシンが高収率または高純度で生成されないことである。この方法のさらなる欠点は、毒性試薬であるシアン化カリウムの使用を含むことである。それゆえ、スポンゴシンの代わりの合成方法の提供、および生成スポンゴシンの収率および純度の改善が望まれている。
【００１０】
本発明者等は、Deghati等およびWanner等の方法により生成されるスポンゴシンの収率および純度が以下の多数の因子によって歯止めをかけられていると考えた：
ｉ）２−ニトロアデノシンペンタアセテートにＴＢＡＮが混入していること。このことが、続く２−ニトロアデノシンペンタアセテートのメトキシル化および脱保護を妨害し（これはＴＢＡＮの代わりに硝酸テトラメチルアンモニウム（ＴＭＡＮ）を用いた場合も同様である）、スポンゴシン生成物の純度および収率に不都合に影響する。ＴＢＡＮは両親媒性であり、それゆえ水性後処理によって除去することができないので、このことは特に問題となる。加えて、水相での２−ニトロアデノシンペンタアセテートの部分溶解性のため、このうちいくらかが水性後処理により失われ得る。
ｉｉ）アデノシンペンタアセテート中間体が低収率および低純度でのみ生成されること。本発明者等は、テトラ−アセチル化前駆体が主な副産物として存在することを見出した。
ｉｉｉ）ペンタ−アセチル化合物の５位のアセテート基が不安定であり、これにより、これらの化合物のテトラ−アセチル化合物への分解を生じる。例えば、本発明者等はアデノシンペンタアセテートをカラムクロマトグラフィーにより精製して、該化合物がこの工程で分解したことを示唆する証拠が存在した。この化合物を再結晶する試みは成功せず、それは結晶よりむしろ無定形の性質であった。
【００１１】
本発明者等は、意外なことにスポンゴシンおよび他の２−置換アデノシンの純度および収率がベンゾイル保護基の使用により非常に改善され得ることを見出した。
【００１２】
本発明により、式Ｉ
【化３】
2007513134.tif 000005
［式中、Ｒは、Ｃ１−６アルコキシ（直鎖または分枝）、フェノキシ基（置換されていないか、あるいはハロ、アミノ、ＣＦ３−、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによりモノ−置換またはジ−置換されている）、ベンジルオキシ基（置換されていないか、あるいはハロ、アミノ、ＣＦ３−、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによりモノ−置換またはジ−置換されている）、またはベンゾイル基（置換されていないか、あるいはハロ、アミノ、ＣＦ３−、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによりモノ−置換またはジ−置換されている）である］
の２−置換アデノシンの合成方法が提供され、該方法は、２−ニトロペンタベンゾイルアデノシンを２−置換アデノシンに変換することを含む。
【００１３】
好ましくは、Ｒは、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、またはベンゾイルである。
【００１４】
本発明者等は、２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンが、２−ニトロアデノシンペンタアセテートと比較して増大した有機溶解性、安定性および結晶化度を有することを見出した。それゆえ、２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンは、２−ニトロアデノシンペンタアセテートより扱い易く、この化合物より高収率および高純度で作られ得る。それにより生成されたスポンゴシンの収率および純度も改善される。他の２−置換アデノシンはまた、２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンを中間体として用いて高収率および高純度で生成され得る。
【００１５】
好ましくは、２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンは、２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンを適当なアニオン（例えば、Ｃ１−６アルコキシドアニオンまたはフェノキシドアニオン）と反応させることにより、あるいは２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンを脱保護し、適当なアニオン（例えば、Ｃ１−６アルコキシドアニオンまたはフェノキシドアニオン）と反応させることにより、２−置換アデノシンに変換される。スポンゴシンの合成は、シアン化カリウムおよびメタノールとの反応により達成されてもよい（Deghati等およびWanner等に詳述されている）。しかしながら、より毒性の低いメトキシドアニオンの供給源を用いることが好ましい。好ましい供給源は、ＭｅＯＨ／ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ／ｎ−ＢｕＬｉ、ＭｅＯＨ／ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ／ＮａＨまたはＭｅＯＨ／ＫＯｔＢｕである。
【００１６】
好ましい、２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンのメトキシル化方法は以下の実施例４に記載されている。
【００１７】
式Ｉの他の２−置換アデノシンは、２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンを水酸化ナトリウム、水素化ナトリウム、ブチルリチウム、ＫＯｔＢｕ、および適当なアルコール（例えば、Ｃ１−６アルコールまたはフェノール）で処理することにより、作られ得る。ＫＯｔＢｕはフェノールと共に用いられてもよい。
【００１８】
本発明により、２−ニトロペンタベンゾイルアデノシンがまた提供される。
【００１９】
本発明により、式Ｉの２−置換アデノシンの合成における２−ニトロペンタベンゾイルアデノシンの使用がさらに提供される。
【００２０】
本発明の好ましい方法は、ペンタベンゾイルアデノシンを２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンに変換することをさらに含む。
【００２１】
本発明のさらなる態様により、２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンまたは式Ｉの２−置換アデノシンの合成方法が提供され、該方法はペンタベンゾイルアデノシンを２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンに変換することを含む。
【００２２】
ペンタベンゾイルアデノシンの２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンへの変換は、硝酸テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＮ）または硝酸テトラメチルアンモニウム（ＴＭＡＮ）のような適当なニトロ化試薬でペンタベンゾイルアデノシンをニトロ化することにより達成され得る。好ましいニトロ化は、ＴＢＡＮまたはＴＭＡＮをトリフルオロ酢酸無水物と共に（ＴＢＡＮ／ＴＦＡＡまたはＴＭＡＮ／ＴＦＡＡ）用いて行われる。好ましくは、ＴＢＡＮ／ＴＦＡＡまたはＴＭＡＮ／ＴＦＡＡはジクロロメタン（ＤＣＭ）中のものである。
【００２３】
２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンは、２−ニトロアデノシンペンタアセテートと比較して増大した有機溶解性および結晶化度を有する。これらの特性の具体的な利点は、２−ニトロアデノシンペンタアセテートとは対照的に、ほとんどまたは全てのＴＢＡＮまたはＴＭＡＮが２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンから水性後処理により除去され得ることであり、好ましくは次に再結晶される。本発明者等はＴＭＡＮがＴＢＡＮより除去され易いことを見出したので、好ましくはＴＢＡＮよりむしろＴＭＡＮがニトロ化剤として用いられてもよい。好ましくは水性後処理において３〜５回の洗浄が行われ、好ましくは２または３回再結晶が行われる。
【００２４】
例えば、生成された２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンの水性後処理は、該化合物を有機溶媒（例えば、酢酸エチルまたはＤＣＭ）に溶解し、生じた溶液を水で洗浄することにより行われてもよい。一般に、最低３回の洗浄が大部分のＴＢＡＮまたはＴＭＡＮを除去するのに必要とされることが見出された。しかしながら、できるだけ多くのＴＢＡＮまたはＴＭＡＮの除去を確実なものとするために一般に５回の洗浄が行われる。
【００２５】
溶液を水で洗浄した後に有機溶媒を除去し、２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンをＥｔＯＡｃ／エタノールまたはジクロロメタン／エタノール中に溶解し、次に２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンをこの溶液から再結晶することにより、再結晶は行われ得る。
【００２６】
本発明者等は、ＴＢＡＮ／ＴＦＡＡでのニトロ化反応の粗生成物が、大量のＴＢＡＮの存在のため再結晶され得ないことを見出した。しかしながら、水性後処理後に該化合物はＥｔＯＡｃまたはＣＨ２Ｃｌ２とエタノールの混合物から容易に再結晶されることができた。ＴＢＡＮ以外の不純物も後処理工程後の混合物中に存在し、これらは再結晶により除去されることができた。最低１回の再結晶で十分であるが、ときには２または３回の再結晶がこれらの不純物の十分な除去に必要とされてもよい。
【００２７】
ペンタ−アセチル化合物と比較してペンタ−ベンゾイル化合物の増大した有機溶解性は、わずかな量の化合物のみが水性後処理および再結晶により失われることを確実なものとする。
【００２８】
好ましい、ペンタベンゾイルアデノシンのニトロ化方法は、以下の実施例２および３に記載されている。
【００２９】
本発明の好ましい方法は、アデノシンをペンタベンゾイルアデノシンに変換することをさらに含む。
【００３０】
本発明により、ペンタベンゾイルアデノシン、２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシン、または式Ｉの２−置換アデノシンの合成方法がさらに提供され、該方法はアデノシンをペンタベンゾイルアデノシンに変換することを含む。
【００３１】
アデノシンのペンタベンゾイルアデノシンへの変換は、ベンゾイルクロライドのような適当なベンゾイル化試薬でアデノシンをベンゾイル化することにより達成され得る。ピリジンのような適当な塩基がまた用いられる。ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）が溶媒として用いられてもよいが、よりきれいな結果となるので、好ましくはアデノシンはピリジン中に溶解／懸濁される。
【００３２】
好ましい、アデノシンのベンゾイル化方法は、以下の実施例１に記載されている。
【００３３】
ペンタベンゾイルアデノシンの使用の利点は、それがアデノシンペンタアセテートより容易に精製され得ることである。例えば、ペンタベンゾイルアデノシンは、水性後処理、次に再結晶により精製された。これは、生成物のいくぶんかの分解および損失が生じるカラムクロマトグラフィーを包含するアデノシンペンタアセテートの精製よりも好ましい。
【００３４】
本発明により、２−ニトロペンタベンゾイルアデノシンまたは式Ｉの２−置換アデノシンの合成におけるペンタベンゾイルアデノシンの使用がまた提供される。
【００３５】
本発明により、式Ｉの２−置換アデノシンの合成におけるベンゾイル化試薬の使用がさらに提供される。
【００３６】
本発明により、本発明の方法により合成された２−置換アデノシン、２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシン、またはペンタベンゾイルアデノシンがまた提供される。
【００３７】
本発明の方法は、アセチル保護基を用いるDeghati等およびWanner等の既知の方法より、容易かつ高収率および高純度での生成物の合成を可能にする。本発明者等は、これは本発明において用いられる化合物の増大した有機溶解性、安定性、および結晶化度によるものであると考えた。
【００３８】
本発明の別の態様により、式Ｉ
【化４】
2007513134.tif 000006
［式中、Ｒは、Ｃ１−６アルコキシ（直鎖または分枝）、フェノキシ基（置換されていないか、あるいはハロ、アミノ、ＣＦ３−、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによりモノ−置換またはジ−置換されている）、ベンジルオキシ基（置換されていないか、あるいはハロ、アミノ、ＣＦ３−、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによりモノ−置換またはジ−置換されている）、またはベンゾイル基（置換されていないか、あるいはハロ、アミノ、ＣＦ３−、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによりモノ−置換またはジ−置換されている）である］
の２−置換アデノシンの合成方法が提供され、該方法は、アデノシンペンタアセテートをＴＢＡＮまたはＴＭＡＮを用いてニトロ化して、２−ニトロアデノシンペンタアセテートを生成し；２−ニトロアデノシンペンタアセテートに混入しているＴＢＡＮまたはＴＭＡＮの量を低減し；次に、２−置換アデノシンを２−ニトロアデノシンペンタアセテートから生成することを含む。
【００３９】
好ましくは、Ｒは、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、またはベンゾイルである。
【００４０】
意外なことに、ＴＢＡＮまたはＴＭＡＮ混入物の量を低減する有効な方法は、２−ニトロアデノシンペンタアセテートをイソプロパノールと共に粉砕し、次に水で洗浄することであることが見出された。これにより、スポンゴシンまたは他の２−置換アデノシン生成物の純度および収率を有意に改善できた。
【００４１】
本発明により、アデノシンペンタアセテートのＴＢＡＮまたはＴＭＡＮでのニトロ化により形成された２−ニトロアデノシンペンタアセテートに混入しているＴＢＡＮまたはＴＭＡＮの量の低減方法がまた提供され、該方法は、２−ニトロアデノシンペンタアセテートをイソプロパノールと共に粉砕し、粉砕した２−ニトロアデノシンペンタアセテートを水で洗浄して、ＴＢＡＮまたはＴＭＡＮの量を低減することを含む。
【００４２】
本発明により、かかる方法により生成された２−ニトロアデノシンペンタアセテートがさらに提供される。
【００４３】
好ましいニトロ化は、ＴＢＡＮまたはＴＭＡＮをトリフルオロ酢酸無水物と共に（ＴＢＡＮ／ＴＦＡＡまたはＴＭＡＮ／ＴＦＡＡ）用いて行われる。好ましくは、ＴＢＡＮ／ＴＦＡＡまたはＴＭＡＮ／ＴＦＡＡはジクロロメタン（ＤＣＭ）中にある。アデノシンペンタアセテートの好ましいニトロ化方法は、以下の実施例５に記載されている。
【００４４】
２−ニトロアデノシンペンタアセテートは、２−ニトロアデノシンペンタアセテートを脱保護し、適当なアニオン（例えば、Ｃ１−６アルコキシドアニオンまたはフェノキシドアニオン）と反応させることにより、２−置換アデノシンに変換され得る。スポンゴシンの合成は、Deghati等およびWanner等に詳細に記載されているシアン化カリウムおよびメタノールとの反応により達成されてもよい。しかしながら、より低い毒性のメトキシドアニオンの供給源を用いることが好ましい。好ましい供給源は、ＭｅＯＨ／ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ／ｎ−ＢｕＬｉ、ＭｅＯＨ／ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ／ＮａＨ、またはＭｅＯＨ／ＫＯｔＢｕである。２−ニトロアデノシンペンタアセテートのスポンゴシンへの好ましい変換方法は、以下の実施例５に記載されている。他の２−置換アデノシンは２−ニトロアデノシンペンタアセテートの適当なＣ２−６アルコールまたはフェノールおよび水酸化ナトリウムでの処理により合成され得ると考えられている。
【００４５】
本発明のさらなる態様により、スポンゴシンの合成方法が提供され、該方法は２−ニトロアデノシンペンタアセテートをＭｅＯＨ／ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ／ｎ−ＢｕＬｉ、ＭｅＯＨ／ＮａＯＨ、またはＭｅＯＨ／ＮａＨで処理し、スポンゴシンを形成させることを含む。
【００４６】
本発明により、スポンゴシンを含む式Ｉの２−置換アデノシンの合成方法がまた提供され、該方法は、２−ニトロアデノシンペンタアセテートを脱保護し、次にＣ２−６アルコキシドアニオンまたはフェノキシドアニオンと反応させることを含む。これは適当なＣ２−６アルコールまたはフェノールおよび水酸化ナトリウム（またはＮａＨ、ＢｕＬｉ、またはＫＯｔＢｕ）との反応により達成され得ると考えられている。
【００４７】
本発明の方法は、アデノシンをアデノシンペンタアセテートに変換することをさらに含んでもよい。これは、Deghati等およびWanner等に詳細に記載されている方法により達成されてもよい。しかしながら、本発明者等は、この方法を用いると、アデノシンペンタアセテートが低収率および低純度でのみ生成され、テトラ−アセチル化前駆体が主な副産物として存在することを理解した。
【００４８】
本発明者等は、本発明の方法が、アデノシンをアシル化して、アデノシンのＯ−トリ−アセチルおよび／またはテトラ−アセチル誘導体を形成させ、該誘導体を単離し、単離した誘導体をアシル化して、アデノシンペンタアセテート中間体を生成することをさらに含む場合に、２−置換アデノシン生成物の収率および純度は改善され得ることを見出した。
【００４９】
本発明のさらなる態様により、アデノシンペンタアセテート、２−ニトロアデノシンペンタアセテート、または式Ｉの２−置換アデノシンの合成方法が提供され、該方法は、次の工程：アデノシンをアシル化して、アデノシンのＯ−トリ−アセチルおよび／またはテトラ−アセチル誘導体を形成させること、該誘導体を単離すること、次に単離した誘導体をアシル化して、アデノシンペンタアセテートを生成することを含む。
【００５０】
Ｏ−トリ−アセチルおよび／またはテトラ−アセチル誘導体は、カラムクロマトグラフィーを用いて単離され得る。
【００５１】
次に、アデノシンはニトロ化され、２−ニトロアデノシンペンタアセテートが形成され得る。次に、該２−ニトロアデノシンペンタアセテートは、例えば、本発明の方法を用いて式Ｉの２−置換アデノシンに変換され得る。
【００５２】
本発明者等はまた、ペンタ−アセチル化合物の５位のアセテート基が不安定であり、これにより、これらの化合物のテトラ−アセチル化合物への分解が生じることを見出した。例えば、本発明者等は、アデノシンペンタアセテートをカラムクロマトグラフィーにより精製したところ、該化合物がこの工程で分解したことを示唆する証拠が存在した。この化合物を再結晶する試みは成功せず、結晶というよりむしろ無定形の性質であった。
【００５３】
本発明者等は、本発明の方法が、別法として、あるいは追加的に、アデノシンペンタアセテート中間体を洗浄し、アデノシンテトラアセテートに混入している量を低減した後、洗浄したアデノシンペンタアセテートをニトロ化することを含む場合に、２−置換アデノシン生成物の収率および純度が改善され得ることを理解した。
【００５４】
本発明のさらなる態様により、アデノシンペンタアセテート、２−ニトロアデノシンペンタアセテート、または式Ｉの２−置換アデノシンの合成方法が提供され、該方法は次の工程：アデノシンまたはアデノシンのアシル化誘導体をアシル化して、アデノシンペンタアセテートを形成させること；次に、該アデノシンペンタアセテートを洗浄して、アデノシンテトラアセテートに混入している量を低減することを含む。
【００５５】
アデノシンペンタアセテートを洗浄するために、それは好ましくはクロロホルム中に溶解され、酢酸溶液（好ましくは、１Ｍ）で洗浄される。
【００５６】
次に、アデノシンペンタアセテートがニトロ化され、２−ニトロアデノシンペンタアセテートが形成され得る。次に、該２−ニトロアデノシンペンタアセテートは、例えば、本発明の方法を用いて式Ｉの２−置換アデノシンに変換され得る。
【００５７】
２−ニトロアデノシンペンタアセテートは毒性であると考えられている。従って、２−ニトロアデノシンペンタアセテートから生成された２−置換アデノシンにできるだけ少量の２−ニトロアデノシンペンタアセテートが混入していることを確実にすることが望まれ得る。本発明により、このことは、２−ニトロアデノシンペンタアセテートを２−クロロアデノシンペンタアセテートに変換した後、２−クロロアデノシンペンタアセテートを２−置換アデノシンに変換することにより達成され得る。
【００５８】
２−ニトロアデノシンペンタアセテートの２−クロロアデノシンペンタアセテートへの変換は、２−ニトロアデノシンペンタアセテートを塩化アンモニウムのような適当な塩素化試薬で塩素化することにより達成され得ると考えられている。
【００５９】
本発明のさらなる態様により、式Ｉの２−置換アデノシンの合成方法が提供され、該方法は、２−クロロアデノシンペンタアセテートを２−置換アデノシンに変換することを含む。
【００６０】
本発明により、２−置換アデノシンの合成におけるペンタ−アセチル化２−クロロアデノシンの使用がまた提供される。
【００６１】
２−クロロアデノシンペンタアセテートは、２−クロロアデノシンペンタアセテートを脱保護し、適当なアニオン（例えば、Ｃ１−６アルコキシドアニオンまたはフェノキシドアニオン）と反応させることにより、２−置換アデノシンに変換され得ると考えられている。スポンゴシンの合成は、Deghati等およびWanner等に詳細に記載されているシアン化カリウムおよびメタノールとの反応により達成され得ると考えられている。しかしながら、より毒性の低いメトキシドアニオンの供給源を用いるのが好ましい。好ましい供給源は、ＭｅＯＨ／ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ／ｎ−ＢｕＬｉ、ＭｅＯＨ／ＮａＯＨまたはＭｅＯＨ／ＮａＨである。他の２−置換アデノシンは、適当なＣ２−６アルコールまたはフェノールおよび水酸化ナトリウム（またはＢｕＬｉ、ＮａＨ、またはＫＯｔＢｕ）を用いて合成され得ると考えられている。
【００６２】
本発明により、式Ｉの２−置換アデノシン、または本発明の方法により生成される式Ｉの２−置換アデノシンの合成において使用するための中間体がまた提供される。
【００６３】
本発明の方法を用いて、高収率および高純度で２−置換アデノシンが合成され得る。例えば、本発明者等は、９６％より高い純度のスポンゴシンを合成することができた。
【００６４】
本発明の実施例はここで例示の目的で記載され、２−メトキシアデノシン（スポンゴシン）の好ましい合成方法を示す付随のスキーム１および２は参考にされるのみである。
【００６５】
実施例１
ペンタベンゾイルアデノシンの製造：
【化５】
2007513134.tif 000007
ピリジン（２０ｃｍ３）中のアデノシン（２．００ｇ、７．４７ｍｍｏｌ）懸濁液／溶液に、ベンゾイルクロライド（７．３５ｇ、６．０７ｃｍ３、５２．２９ｍｍｏｌ）を添加する。６５℃で４時間加熱し、反応混合物をエタノール（２０ｃｍ３）に注ぐ。溶媒を減圧除去する。残渣をＤＣＭ（３００ｃｍ３）間で分離させ、水（１００ｃｍ３）で洗浄し、水相をＤＣＭ（３×５０ｃｍ３）で洗浄し、有機相を合わせ、水（２×１００ｃｍ３）、塩水（１００ｃｍ３）で洗浄し、乾燥させる（ＭｇＳＯ４）。溶媒を減圧除去し、残渣を再結晶によりアセトン／ＥｔＯＨから精製し、所望の生成物（５．６６０ｇ、９６．２％）を無色固形物として得る。LCMS: 788 (M+H).
【００６６】
実施例２
ニトロ化試薬としてＴＭＡＮ／ＴＦＡＡを用いた２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンの製造：
【化６】
2007513134.tif 000008
ＤＣＭ（４０ｃｍ３）中の硝酸テトラメチルアンモニウム（１．３７ｇ、１１．４ｍｍｏｌ）の懸濁液に、トリフルオロ酢酸無水物（２．４０ｇ、１．６２ｃｍ３、１１．４ｍｍｏｌ）を加える。室温で１．５時間攪拌し、０℃まで冷却し、ＤＣＭ（５０ｃｍ３）中のペンタベンゾイルアデノシン（６．００ｇ、７．６２ｍｍｏｌ）溶液を添加する。室温まで１４時間かけて温め、溶媒を減圧除去し［ロータリーエバポレーターのウォータバスの温度を３０℃またはそれ以下に保つ］、残渣をＥｔＯＡｃ（２００ｃｍ３）に溶解し、水（３×１５０ｃｍ３）、塩水（５０ｃｍ３）で洗浄し、乾燥させる（ＭｇＳＯ４）。溶媒を減圧除去し、残渣をＤＣＭ／ＥｔＯＨ（２回）からの再結晶により精製し、所望の生成物（５．５９ｇ、８８．２％）をオフホワイトの固形物として得る。1H NMR (400MHz, CDCl3): 4.79 (1H, dd, J = 11.5, 4.2 Hz), 4.92 (2H, m), 6.08 (1H, t, J = 5.6 Hz), 6.16 (1H, dd, J = 5.8, 4.4 Hz), 6.57 (1H, d, J = 5.4 Hz), 7.39 (10H, m), 7.55 (5H, m), 7.85 (4H, m), 7.92 (2H, m), 8.04 (4H, m)および8.44 (1H, s). LCMS: 833 (M + H)および855 (M + Na).
【００６７】
実施例３
ニトロ化試薬としてＴＢＡＮ／ＴＦＡＡを用いた２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシンの製造：
【化７】
2007513134.tif 000009
ＤＣＭ（２０ｃｍ３）中の硝酸テトラブチルアンモニウム（１．１６ｇ、３．８１ｍｍｏｌ）溶液に、トリフルオロ酢酸無水物（０．８０ｇ、０．５３８ｃｍ３、３．８１ｍｍｏｌ）を加える。０℃で０．５時間攪拌し、次にＤＣＭ（２０ｃｍ３）中のペンタベンゾイルアデノシン（２．００ｇ、２．５４ｍｍｏｌ）溶液を０℃で添加する（必要に応じて、反応容器をアルミ箔でおおう）。室温まで１４時間かけて温め、反応混合物を氷／水に注ぎ、水相を分離させ、ＤＣＭ（４０ｃｍ３）で抽出し、有機相を合わせ、溶媒を減圧除去し［ロータリーエバポレーターのウォータバスの温度を３０℃またはそれ以下に保つ］、残渣をＥｔＯＡｃ（１５０ｃｍ３）に溶解し、水（５×７５ｃｍ３）、塩水（５０ｃｍ３）で洗浄し、乾燥させる（ＭｇＳＯ４）。溶媒を減圧除去し、残渣をＤＣＭ／ＥｔＯＨ（２回）からの再結晶により精製し、所望の生成物（１．６０４ｇ、７５．９％）を黄白色の固形物として得る。1H NMR (400MHz, CDCl3): 4.79 (1H, dd, J = 11.5, 4.2 Hz), 4.92 (2H, m), 6.08 (1H, t, J = 5.6 Hz), 6.16 (1H, dd, J = 5.8, 4.4 Hz), 6.57 (1H, d, J = 5.4 Hz), 7.39 (10H, m), 7.55 (5H, m), 7.85 (4H, m), 7.92 (2H, m), 8.04 (4H, m)および8.44 (1H, s). LCMS: 833 (M + H)および855 (M + Na).
【００６８】
実施例４
２−メトキシアデノシン（スポンゴシン）の製造：
【化８】
2007513134.tif 000010
ＭｅＯＨ（１０ｃｍ３）中の２−ニトロ−ペンタベンゾイルアデノシン（０．５２ｇ、０．６２ｍｍｏｌ）懸濁液に、ＭｅＯＨ（１０ｃｍ３）中のＮａＯＨ（０．１５ｇ、３．７０ｍｍｏｌ）の溶液を加える。室温で１６時間攪拌し、赤色溶液を得る。溶媒を減圧除去し、残渣を水に溶解し、０．２Ｍ  ＨＣｌ（酸化および脱プリン反応を生じるのを防ぐように滴下する）で中和する。溶媒を減圧除去し、残渣をＭｅＯＨ：水（１：１）（約４０ｃｍ３）に溶解［加熱が必要］し、反応混合物を冷凍庫（−２０℃）に一晩入れる。所望の生成物を反応混合物から沈殿させ、濾過により表題化合物（０．１００ｇ、５４％）を黄白色の固形物として得る。LCMS: 298 (M + H)、少量の不純物 329 (M + H)。さらなる精製を逆相クロマトグラフィーを用いて行うことができる。1H NMR (400MHz, CDCl3): 3.52 (1H, m), 3.60 (1H, m), 3.78 (3H, s), 3.89 (1H, dd, J = 7.2, 3.9 Hz), 4.12 (1H, m), 4.56 (1H, dd, J = 11.3, 6.1 Hz), 5.10 (1H, m), 5.11 (1H, d, J = 4.7 Hz), 5.35 (1H, d, J = 6.2 Hz), 5.75 (1H, d, J = 6.2 Hz), 7.27 (2H, br. s)および8.11 (1H, s).
【００６９】
実施例５
アデノシンペンタアセテートの製造
【化９】
2007513134.tif 000011
無水酢酸（１０ｍＬ）中のアデノシン（１．０ｇ、３．７４ｍｍｏｌ）溶液に、水素化ナトリウム（鉱油中６０％、０．９ｇ、２２．５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１１０℃で２０時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却させ、次に、氷／ＮａＨＣＯ３（２５０ｍＬ）に注いだ。ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）を添加し、有機相を水（３×１００ｃｍ３）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、次に溶媒を減圧除去した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シリカゲル６０）により精製し、ＥｔＯＡｃを増量させつつＥｔＯＡｃ：ヘプタン（１：１）で溶出し、所望の生成物（０．６ｇ、３１％）を得た。
【００７０】
２−ニトロ−アデノシンペンタアセテートの製造
【化１０】
2007513134.tif 000012
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の硝酸テトラメチルアンモニウム（６４２ｍｇ、４．７２ｍｍｏｌ）の懸濁液にトリフルオロ酢酸無水物（０．６８ｍＬ、４．７２ｍｍｏｌ）を添加し、生じた懸濁液を室温で１時間攪拌し、０℃まで冷却した。ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のアデノシンペンタアセテート（１．５０ｇ、３．１４ｍｍｏｌ）溶液を添加し、溶液を室温まで２．５時間かけて温めた。次に粗生成物を塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を減圧除去し、標題生成物を薄茶色固形物（１．３６ｇ、８３％）として得た。
【００７１】
２−メトキシアデノシン（スポンゴシン）の製造
【化１１】
2007513134.tif 000013
（ＭｅＯＨ中）２−ニトロ−アデノシンペンタアセテート（２７５ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）の溶液に室温でＮａＯＭｅ（７１ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を３時間攪拌した。塩化アンモニウム（７０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を減圧濃縮し、黄色油状物を得た。粗生成物をＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ（１５：１）まで増量させつつＥｔＯＡｃで溶出してシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、次にイソプロパノールから再結晶し、標題生成物を白色固形物（７０ｍｇ、４７％）として得た。
【００７２】
塩化アンモニウムの代わりに、クエン酸溶液または０．２  ＨＣＬを好ましく用いることができた。
【化１２】
2007513134.tif 000014
【化１３】
2007513134.tif 000015
【国際調査報告】
2007513134.tif 000019
2007513134.tif 000020
2007513134.tif 000021
2007513134.tif 000022