(57)【要約】  インターフェロン−タウ（ＩＦＮτ）を投与することにより被験者のサイトカインレベルを調節する方法が説明されている。より具体的には、ＩＦＮτを投与することにより自己免疫疾患、ウイルス感染、又は細胞増殖の疾患などの、血中インターロイキン１０（ＩＬ−１０）レベルの増加をもたらすことにより治療に応答する疾患を患っている患者のＩＬ−１０レベルをアップレギュレーションする方法が説明されている。また、ＩＦＮτを投与することによりインターロイキン−１２（ＩＬ−１２）及びインターフェロン−γ（ＩＦＮγ）の血中レベルを調節する方法も説明されている。様々な実施形態において、ＩＦＮτは、単独で、又は第２の治療薬と組み合わせて投与される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
血中インターロイキン−１０（ＩＬ−１０）レベルの増加に応答する疾患を治療するための薬剤の製造で使用する組成物であって、前記組成物はインターフェロン−タウ（ＩＦＮ−τ）の経口投与可能な製剤からなり、前記薬剤は５×１０８単位を超える１日用量で供給され、但し、疾患はＣ型肝炎ではない、組成物。
【請求項２】
前記ＩＦＮτは、ヒツジＩＦＮτとウシＩＦＮτとから選択される、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
ヒツジＩＦＮτは、配列番号２又は配列番号３として同定される配列を有する、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
前記経口投与可能な製剤は、腸管への投与を実現する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記疾患は、自己免疫疾患又は細胞増殖を特徴とする疾患である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
乾癬又は多発性硬化症の治療のための請求項５記載の組成物。
【請求項７】
第２の治療薬と組み合わせて供給される請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記第２の治療薬は、抗ウイルス薬、抗癌剤、抗炎症薬、及び自己免疫疾患の治療に好適な薬剤からなる群から選択される、請求項７記載の組成物。
【請求項９】
前記第２の治療薬は、ＩＦＮτを前記経口投与する前に、又は投与するのと同時に、又は投与した後に投与される、請求項７記載の組成物。
【請求項１０】
第２の治療薬を投与することは、ナタリズマブ、スタチン、ミコフェノール酸モフェチル、及びコパクソンからなる群から選択された第２の治療薬を投与することからなる、請求項７記載の組成物。
【請求項１１】
前記第２の治療薬はミコフェノール酸モフェチルである、臓器移植拒絶反応を治療又は予防するための、請求項７記載の組成物。
【請求項１２】
前記第２の治療薬はスタチンである、患者の炎症疾患を治療するための、請求項７記載の組成物。
【請求項１３】
前記第２の治療薬は、コラーゲン、レチノイド、アントラリン、カルポトリエン、コールタール、サリチル酸、及び免疫抑制剤から選択される、患者の乾癬を治療するための、請求項７記載の組成物。
【請求項１４】
患者の多発性硬化症の進行を遅らせるのに使用する、又は多発性硬化症に罹患している患者の再発のリスクを低減する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
乾癬患者を治療するのに使用する請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１６】
（ｉ）治療薬の投与又は（ｉｉ）疾病状態のためＩＦＮ−γが増加する危険のある患者のＩＦＮ−γの血中レベルの増加を防ぐのに使用する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１７】
前記患者は、ＩＦＮ−α又はＩＦＮ−βを用いた治療によりＩＦＮ−γレベルが増加しており、前記投与は、患者の症状が続く期間中継続している、請求項１６記載の組成物。
【請求項１８】
前記患者は、多発性硬化症に罹患しており、そしてＩＦＮ−βを用いた治療を受けている、請求項１６記載の組成物。
【請求項１９】
前記患者は、ウイルス感染に罹患しており、そしてＩＦＮ−αを用いた治療を受けている、請求項１６記載の組成物。
【請求項２０】
患者のインターロイキン−１２の血中レベルを減少させるのに使用する請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インターフェロン−タウ（ＩＦＮτ）を含む薬剤組成物及びその使用の方法に関する。より具体的には、本発明は、ＩＦＮτを単独で又は１種若しくは複数の治療薬と併用して投与することにより哺乳類のインターロイキン１０（ＩＬ−１０）療法に応答性のある疾病又は疾患を治療する方法に関する。本発明は、さらに、ＩＬ−１０の生産を刺激し、及び／又はインターロイキン１２（ＩＬ−１２）産生の減少を引き起こすことにより、ＩＬ−１０及び／又はＩＬ−２の血中レベル（ｌｅｖｅｌ）を調節する方法にも関する。本発明は、さらに、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）の血中レベルの上昇を防ぐ方法にも関する。本発明は、さらに、インターフェロン−タウ及び１種又は複数の追加の薬剤を使用する併用療法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
インターフェロン−タウ（これ以降「ＩＦＮτ」又は「インターフェロン−τ」）は、元々、反芻動物受胎産物の栄養外胚葉により生産される妊娠認識ホルモンとして発見された（Ｉｍａｋａｗａ、Ｋ．ら、Ｎａｔｕｒｅｓ、３３０：３７７−３７９、（１９８７）、Ｂａｚｅｒ、Ｆ．Ｗ．、及びＪｏｈｎｓｏｎ、Ｈ．Ｍ．、Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｐｒｏ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２６：１９−２２、（１９９１））。ＩＦＮτ遺伝子の分布は、ウシ、ヒツジ、及びヤギを含む反芻動物に限られる（Ａｌｅｘｅｎｋｏ、Ａ．Ｐ．ら、Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ａｎｄ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ．、１９：１３３５−１３４１、（１９９９））が、ヒト及びマウスを含む他の種に属す細胞においても活性を有することが証明されている（Ｐｏｎｔｚｅｒ、Ｃ．Ｈ．ら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、５１：５３０４−５３０７、（１９９１）、Ａｌｅｘｅｎｋｏ、Ａ．Ｐ．ら、Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ａｎｄ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ．、２０：８１７−８２２、（２０００））。例えば、ＩＦＮτは、抗ウイルス性（Ｐｏｎｔｚｅｒ、Ｃ．Ｈ．ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．、１５２：８０１−８０７、（１９８８））、抗増殖性（Ｐｏｎｔｚｅｒ、Ｃ．Ｈ．ら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、５１：５３０４−５３０７、（１９９１））、及び免疫調節作用（Ａｓｓａｌ−Ｍｅｌｉａｎｉ、Ａ．、Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｐｒｏ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、３３：２６７−２７５（１９９５））を有することを実証されている。
【０００３】
ＩＦＮτは、インターフェロン−α及びインターフェロン−βなどのＩ型インターフェロンと古典的に関連する活性の多くを示すが、ＩＦＮτと他のＩ型インターフェロンとの間にはかなりの相違が存在する。最も顕著な違いは、反芻動物種の妊娠に対するＩＦＮτの役割である。他のインターフェロンは、妊娠認識において類似活性をいっさい有しない。また、ウイルス誘導も異なる。ＩＦＮτを除くすべてのＩ型インターフェロンは、ウイルス及びｄｓＲＮＡにより容易に誘導される（Ｒｏｂｅｒｔｓら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ、１３：４３２（１９９２））。誘導されたＩＦＮ−α及びＩＦＮ−βは、一時的であり、約数時間続く。対照的に、ＩＦＮτ合成は、いったん誘導されると、数日間にわたって維持される（Ｇｏｄｋｉｎら、Ｊ  Ｒｅｐｒｏｄ．Ｆｅｒｔ．、６５：１４１（１９８２））。１つ１つの細胞について、他のＩ型インターフェロンよりも３００倍以上多いＩＦＮ−τが生産される（Ｃｒｏｓｓ、Ｊ．Ｃ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８８：３８１７−３８２１（１９９１））。
【０００４】
ＩＦＮτ及び他のＩ型インターフェロンのアミノ酸配列にもう１つ違いがある。インターフェロンα２ｂ、β１、ω１、及びτの間のアミノ酸配列類似率を以下の表にまとめた。
【０００５】
【表１】
2007528407.tif 000002
【０００６】
組換え型ヒツジＩＦＮτは、ＩＦＮα２ｂに４８．８パーセント相同性を有し、ＩＦＮβ１に３３．８パーセント相同性を有する。ＩＦＮτとＩＦＮαとの間、及びＩＦＮτとＩＦＮβとの間にこのような相同性があるため、対象に投与されたときにＩＦＮτがＩＦＮα又はＩＦＮβと同じように挙動するかどうかを予測することはできない。ＩＦＮτは、また、ヒト細胞のＩ型受容体について低い受容体結合親和性を有すると報告されている（Ｂｒｏｄ、Ｓ．、Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ａｎｄ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ．、１８：８４１（１９９９）、Ａｌｅｘｅｎｋｏ、Ａ．ら、Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ａｎｄ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ．、１７：７６９（１９９７））。さらに、ＩＦＮτが非内因性ヒトタンパク質であるという事実から、ＩＦＮτが人体に注射されたときに全身性中和抗体形成の潜在性が生じる（Ｂｒｏｄ、Ｓ．、Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ａｎｄ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ．、１８：８４１（１９９９））。ＩＦＮτと他のインターフェロンとの間にこのような違いがあるため、ＩＦＮτがヒトに投与されたときに治療的有用性をもたらすかどうかを予測することは困難である。
【０００７】
ＩＦＮτだけでなく、一般にタンパク質及びポリペプチドを使用するうえでの１つの制限因子は、非経口で与えられたときに血漿タンパク質及び血液細胞とのタンパク質相互作用の影響を受ける生体内分布に関係する。経口投与経路は、酸性条件により意図された標的に到達する前に分子を破壊する可能性のある、胃におけるタンパク質分解のせいでなおいっそう問題がある。例えば、胃及び膵酵素の作用により生成される、ポリペプチド及びタンパク質断片は、腸刷子縁膜内のエクソペプチダーゼ及びエンドペプチダーゼにより切断され、ジペプチド及びトリペプチドを生み出す。膵酵素によるタンパク質分解が避けられた場合、ポリペプチドは、刷子縁ペプチダーゼによる分解を受ける。胃通過を生き延びた可能性のあるポリペプチド又はタンパク質は、貫通障壁が細胞内への進入を防ぐ腸粘膜内の代謝作用を受ける。このような理由から、研究は、一定時間口腔内に保持されるトローチ剤又は溶液の形態でタンパク質を経口咽頭部に送達することに主に集中した。
【０００８】
サイトカインは、免疫細胞の生存、増殖、分化、及びエフェクター機能を制御する分泌調節タンパク質である。サイトカインは、増殖因子、コロニー刺激因子、インターロイキン、リンフォカイン、モノカイン、及びインターフェロンと様々に知られているこれら一群の調節因子を包含する。これらは、特定の標的細胞と相互作用し動物の状態に関する情報を伝達する細胞外培地内に見られる分子であり、標的組織内に適切な生物学的反応を生じさせる。
【０００９】
サイトカインは、ヘルパーＴ（Ｔｈ）細胞を含む様々な細胞により産生される。Ｔｈ細胞は、Ｔｈ１とＴｈ２の２つの機能的部分集合に分けられ、これらは、分泌するサイトカインのパターンにより区別することができる。Ｔｈ１細胞は、とりわけ、インターロイキン−２、インターフェロン−ガンマ、ＴＨＦアルファ及びベータ、並びにリンホトキシンを分泌し、細胞性免疫反応を引き起こす役割を有する。この反応は、特定の細菌及びウイルスなどの細胞内病原体を適切に除去するために重要である。Ｔｈ２細胞は、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、及びＩＬ−１３を分泌し、Ｂ細胞による高レベルのＩｇＧ１、ＩｇＡ、及びＩｇＥ生産を引き起こす、また好酸球などのエフェクター細胞を活性化する役割を有する。
【００１０】
Ｔｈ１又はＴｈ２のいずれかの細胞となりうる、方向付けられていない前駆細胞を代表する活性化Ｔ細胞の比較的大きな母集団が存在することが多い。Ｔｈ１又はＴｈ２表現型への方向付けは、抗原刺激の直後に発生するように見え、特定の細胞表面マーカー及び細胞シグナリング成分の発現の変化により特徴付けられる。サイトカインは、Ｔｈ１及びＴｈ２分化に関与するように思われ、存在するサイトカイン環境はＴｈ１又はＴｈ２増殖に影響を及ぼす可能性がある。したがって、Ｔｈ１又はＴｈ２細胞集団を調節する方法、特にＴｈ１細胞を減らしてＴｈ１産生サイトカインを減少させ、Ｔｈ２細胞を増やしてＴｈ２産生サイトカインを増加する方法が求められる。
【００１１】
分極又は偏向されたＴｈ２応答を発生するこのような方法は、Ｔｈ２細胞産生サイトカインが存在することで、疾病の発症及び重症度と相関することが実証されている。例えば、ＩＬ−１０療法が効く、又は他の何らかの形で、ＩＬ−１０と特定の疾病又は疾患との間のある連関を示すことが証明又は示唆されている疾病は、肝線維症（Ｎｅｌｓｏｎ、Ｄ．Ｒ．ら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ３８（４）：８５９−８６８（２００３）、Ｌｏｕｉｓ、Ｈ．、Ａｃｔａ  Ｇａｓｔｒ．Ｂｅｌｇ．６６（１）：７−１４（２００３））、肺線維症（Ａｒａｌ、Ｔ．ら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｌｕｎｇ．Ｃｅｌｌ．Ｍａｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２７８：Ｌ９１４−Ｌ９２２（２０００））、アルツハイマー病（Ｄｅ  Ｌｕｉｇｉ、Ａ．ら、Ｍｅｃｈ．Ａｇｅ．Ｄｅｖ．（１６）：１９８５−１９９５（２００１）、Ｒｅｍａｒｚｕｅ、Ｅ．Ｊ．、及びＢｏｌｌｅｎ、Ｅ．Ｌ．、Ｅｘｐ．Ｇｅｒｏｎｔｏｌ．３６（１）：１７１−１７６（２００１）、Ｔｏｗｎ、Ｔ．ら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ．１３２（１−２）：４９−５９（２００２））、卒中（Ｆｒｅｎｋｅｌ、Ｄ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７１（１２）：６５４９−６５５５（２００３））、抗リン脂質症候群（Ｋｒａｕｓｅ、Ｉら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３２（１２）：３４１４−３４２４（２００２））、アテローム性動脈硬化症（Ｏｈａｓｈｉ  Ｒ．ら、Ｍｅｄ  Ｓａｌ  Ｍｏｎｉｔ  １０（１１）：ＲＡ２５５−６０（２００４）、Ｚｉｍｍｅｒｍａｎ  ＭＡら、Ｊ  Ｓｕｒｇ  Ｒｅｓ  １２１（２）：２０６−１３（２００４）、Ｆｉｃｈｔｌｓｃｈｅｒｅｒ  Ｓら、Ｊ  Ａｍ  Ｃｏｌｌ  ＣａｒｄｉｏＩ  ４４（１）：４４−９（２００４）、Ｐｏｔｔｅａｕｚ  Ｓら、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ  Ｔｈｒｏｍｂ  Ｖａｓｃ  Ｂｉｏｌ  ２４（８）：１４７４−８（２００４））、臓器移植の拒絶反応（Ｚｈｅｎｇ  ＨＸら、Ｊ  Ｈｅａｒｔ  Ｌｕｎｇ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  ２３：５４１−６（２００４）、Ｆｉｓｃｈｅｒ  Ｓ．ら、Ｊ  Ｔｈｏｒａ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓ  Ｓｕｒｇ  １２６：１１７４−８０（２００３）、Ｓｅｍｂｅｉｌ  Ｒら、Ｔｒａｎｓｐｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １３（１）：１−８（２００４））、自閉症（Ｊｙｏｎｏｕｃｈｉ、Ｈ．ら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎ．１２０：１７０−１７９（２００１））、慢性閉塞性肺疾患（Ｔａｋａｎａｓｈｉ、Ｓ．ら、Ｅｕｒ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｊ．１４：３０９−３１４（１９９９））、Ｉ型真性糖尿病（Ｓｌａｖｉｎ  ＡＪら、Ｉｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １３（６）：８２５−３３（２００１０、Ｚｈａｎｇ  ＺＬら、Ａｃｔａ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｓｉｎ  ２４（８）：７５１−６（２００３））を含む様々な自己免疫疾患、関節リュウマチ（Ｔａｎａｋａ  Ｙら、Ｉｎｆｌａｍｍ  Ｒｅｓ  ４５（６）：２５３−８（１９９６）、Ｄｅｔａｎｉｃｏ  Ｔら、Ｃｌｉｎ  Ｅｘｐ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １３５（２）：３３６−４２（２００４）、Ｄｒｉｅｓｓｌｅｒ  Ｆら、Ｃｌｉｎ  Ｅｘｐ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １３５（１）：６４−７３（２００４））、乾癬（Ａｓａｄｕｌｌａｈ  Ｋら、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｒｅｖ  ５５（２）：２４１−６９（２００３）、Ａｓａｄｕｌｌａｈ  Ｋら、Ｃｕｒｒ  Ｄｒｕ���  Ｔａｒｇｅｔｓ  Ｉｎｆｌａｍｍ  Ａｌｌｅｒｇｙ  ３（２）：１８５−９２（２００４））、多発性硬化症（Ｓｏｏｓら、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ  ７５：４３−５０（１９９７））を含む関節炎、ブドウ膜炎（Ｋｅｚｕｋａ、Ｔ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７３（２）：１４５４−１４６２（２００４）、Ｓｕｎ，Ｂ．ら、Ｅｘｐ．Ｅｙｅ  Ｒｅｓ．７０：４９３−５０２（２０００））、アレルギー（Ｚｕａｎｙ−Ａｍｏｒｉｍ、Ｃ．ら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９５：２６４４−２６５１（１９９５）、Ｂｏｒｉｓｈ、Ｌ．ら、Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  ９７：１２８８−１２９６（１９９６））、炎症性大腸炎（Ｌｉ  ＭＣ及びＨｅ  ＳＨ、Ｗｏｒｌｄ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  １０（５）：６２０−５（２００４）、Ｂｒａａｔ  Ｈら、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｂｉｏｌ  Ｔｈｅｒ  ３（５）：７２５−３１（２００３））、並びに視神経炎（Ｎａｖｉｋａｓ、Ｖ．ら、Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４１（２）：１７１−１７８（１９９５））である。
【００１２】
また、インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）のダウンレギュレーションは、多発性硬化症の患者の治療に役立つ可能性があると報告されている（Ｔｕｏｈｙ、Ｖ．ら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ．、１１１（１−２）：５５（２０００））。インターフェロン−ガンマと多発性硬化症との連関も、文献に報告されている（Ｍｏｌｄｏｖａｎ、ｌ．Ｒ．ら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ．、１４１（１−２）：５５（２０００））。
【００１３】
これらの疾病又は疾患の多くは、様々な方法及び組成物で改善又は他の何らかの手段により治療することができるが、そのような方法及び組成物の多くは、いくつかの欠点を有し、そのような疾病又は疾患を治療するために安全で効果的な方法及び組成物が引き続き必要である。本発明は、この要求条件を満たす。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
インターロイキン１０は、非常に広い範囲にわたる病態に関連していることが判明した。そこで、哺乳類のＩＬ−１０療法に対し応答性のある疾病又は疾患を治療する組成物及び方法が提供される。
【００１５】
より一般的には、ＩＬ−１０を含む、Ｔｈ２細胞産生サイトカインの産生増大のために動物のＴｈ２細胞の産生へ免疫システムを偏向させる方法である。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
一態様では、哺乳類のＩＬ−１０療法に応答性のある疾病又は疾患を治療する方法は、約５×１０８単位を超えるＩＦＮτの１日用量を哺乳類に経口投与することを含む。
【００１７】
他の態様では、対象の自己免疫状態を治療する方法は、症状を和らげ、疾患の進行を抑制し、及び／又は疾患を解消しやすくするような方法で、対象の血中サイトカインレベルを調節することを含む。
【００１８】
他の態様では、対象の肝炎ウイルス感染以外、より具体的にはＣ型肝炎ウイルス感染以外のウイルス感染を治療する方法は、症状を和らげ、感染の進行を抑制し、及び／又は感染を解消しやすくするような方法で、対象の血清サイトカインレベルを調節することを含む。
【００１９】
他の態様では、対象の細胞増殖に関連する疾患を治療する方法は、症状を和らげ、連続する細胞増殖を抑制し、及び／又は増殖の問題を解消しやすくするような方法で、対象の血清サイトカインレベルを調節することを含む。
【００２０】
血中ＩＬ−１０のアップレギュレーションに応答する疾病又は疾患の持続的な進行を患っている、又はその危険性のある患者に、その患者又はモデル患者母集団の基準治療前血清サイトカインレベルに対して、選択された血清サイトカインレベルを調節するのに十分なＩＦＮτの用量を与える。
【００２１】
他の態様では、血中インターロイキン−１０（ＩＬ−１０）レベルの増加、及び適宜、血中インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）レベルの減少に応答性のある疾患を治療する薬剤の調製で使用する組成物であって、ＩＮＦτの経口投与製剤からなる組成物が提供される。薬剤は、好ましくは、約５×１０８単位を超える１日用量であるのが好ましい。
【００２２】
他の態様では、被験者の血中ＩＬ−１０レベルのアップレギュレーションの方法は、５×１０８単位を超える１日服用量のＩＦＮτを対象に経口投与し、ＩＦＮτ投与が行われない場合の対象における血中ＩＬ−１０レベルに比して、対象の血中ＩＬ−１０レベルの初期の測定可能な増加をもたらすことを含む。ＩＦＮτの対象への経口投与は、所望の臨床的終点に達するまで対象の血中ＩＬ−１０レベルの変化に関係なく、毎週少なくとも数時間定期的に継続する。
【００２３】
他の態様では、Ｃ型肝炎感染以外の、自己免疫状態又はウイルス感染を患っている対象のＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比を高める方法は、（ｉ）ＩＦＮτ投与が行われない場合にＩＦＮ−γレベルに関する対象の血中ＩＦＮ−γレベルに実質的な変化がなく、約５×１０８単位を超える１日服用量のＩＦＮτを対象に経口投与し、ＩＦＮτ投与が行われない場合に対象の血中ＩＬ−１０レベルに比して、対象血中Ｌ−１０レベルの初期の測定可能な増加、又は（ｉｉ）ＩＦＮτ投与が行われない場合にＩＦＮ−γレベルに比して、対象の血中ＩＦＮ−γレベルの減少をもたらすことと、所望の臨床的終点に達するまで、対象の血中ＩＬ−１０レベルの変化に関係なく、毎週少なくとも数回定期的にＩＦＮτを対象に経口投与し続けることとを含む。
【００２４】
他の態様では、（ｉ）治療薬の投与又は（ｉｉ）疾病状態のせいでＩＦＮ−γ血中レベルが増加する危険のある対象のＩＦＮ−γの血中レベルの増加を防ぐ方法が提供される。この方法は、好ましくは約５×１０８単位を超える服用量のＩＦＮτを対象に経口投与し、ＩＦＮτ投与が行われない場合のＩＦＮ−γ血中レベルに比して、対象のＩＦＮ−γ血中レベルを減少させることを含む。この方法は、自己免疫状態によりＩＦＮ−γレベルが増加した対象に使用された場合に、対象の症状の期間中にＩＦＮτを経口投与することを伴う。この方法は、ＩＦＮ−α又はＩＦＮ−βによる治療によりＩＦＮ−γレベルが増加した対象の治療の場合、対象の症状の期間中にＩＦＮτを投与することを伴う。
【００２５】
他の態様では、自己免疫疾患を患っている対象のＩＬ−１０／ＩＬ−１２血中比を増加させる方法は、約５×１０８単位を超える１日服用量のＩＦＮτを対象に経口投与し、ＩＦＮτの投与が行われない場合の対象の血中ＩＬ−１０レベルに比して、対象の血中ＩＬ−１０レベルの初期の測定可能な増加、及びＩＦＮτの投与が行われない場合のＩＬ−１２レベルに比して、対象のＩＬ−１２血中レベルの減少をもたらすことと、所望の臨床的終点に達するまで、対象の血中ＩＬ−１０レベルの変化に関係なく、毎週少なくとも数回定期的に対象にＩＦＮτを経口投与し続けることを含む。
【００２６】
一実施形態では、ＩＦＮτは、ヒツジＩＦＮτ又はウシＩＦＮτである。例示的なヒツジＩＦＮτ配列は、配列番号２又は配列番号３として識別される。
【００２７】
他の実施形態では、ＩＦＮτは、対象の腸管に経口投与される。
【００２８】
自己免疫状態を患っている被験者を治療する場合、一実施形態では、所望の臨床的終点は被験者の症状の緩和である。例示的な自己免疫状態は、多発性硬化症、Ｉ型真性糖尿病、関節リウマチ、紅斑性狼瘡、乾癬、重症筋無力症、グレーブス病、橋本慢性甲状腺炎、シェーグレン症候群、強直性脊椎炎、及び炎症性腸疾患を含む。
【００２９】
他の実施形態では、ＩＦＮτは、ウイルス感染がＣ型肝炎感染でないことを条件として、ウイルス感染を患っている被験者に経口投与される。ＩＦＮτは、ウイルス感染に関連する症状の軽減又は血中ウイルス価の低減などの、臨床的終点に到達するまで投与される。ウイルス感染は、ＤＮＡウイルス又はＲＮＡウイルスに由来する場合がある。例示的なウイルス感染は、エプスタインバールウィルス感染、ＨＩＶ感染、ヘルペスウイルス（ＥＢ、ＣＭＬ、単純ヘルペス）、乳頭腫、ポックスウイルス、ピコルナウイルス、アデノウイルス、ライノウィルス、ＨＴＬＶ  Ｉ、ＨＴＬＶ  ＩＩ、及びヒトロタウイルスを含む。
【００３０】
他の実施形態では、ＩＦＮτは、細胞増殖を特徴とする病気の治療のため経口投与される。ＩＦＮτは、その病気に関連する症状の軽減又は血中ウイルス価の低減などの、臨床的終点に到達するまで投与される。例示的な細胞増殖疾患は、ヒト肺大細胞癌、ヒト結腸腺癌、ヒト悪性黒色腫、ヒト腎臓腺癌、ヒト前骨髄球性白血病、ヒトＴ細胞リンパ腫、ヒト皮膚Ｔ細胞リンパ腫、ヒト乳腺腺癌、及びステロイド感受性のある腫瘍を含む。
【００３１】
他の実施形態では、ＩＦＮτの投与は、同時に、又は順次的に、第２の治療薬の投与と併用される。例示的な第２の治療薬は、抗ウイルス薬、抗癌剤、及び自己免疫疾患の治療に適している薬剤を含む。
【００３２】
他の態様では、対象の多発性硬化症の進行を遅くする方法は、約５×１０８単位を超える１日服用量のＩＦＮτを対象に経口投与し、ＩＦＮτの投与が行われない場合の対象の血中ＩＬ−１０レベルに比して、対象の血中ＩＬ−１０レベルの初期の測定可能な増加をもたらすことと、対象の血中ＩＬ−１０レベルの変化に関係なく、毎週少なくとも数回定期的に対象にＩＦＮτを経口投与し続けることを含む。
【００３３】
さらに他の態様では、多発性硬化症を患っている対象の病気再発のリスクを低減する方法は、約５×１０８単位を超える１日服用量のＩＦＮτを対象に経口投与し、ＩＦＮτの投与が行われない場合の対象の血中ＩＬ−１０レベルに比して、対象の血中ＩＬ−１０レベルの初期の測定可能な増加をもたらすことと、対象の血中ＩＬ−１０レベルの変化に関係なく、毎週少なくとも数回定期的に対象にＩＦＮτを経口投与し続けることとを含む。
【００３４】
さらに他の態様では、乾癬を患っている患者を治療する方法は、１回分のＩＦＮτを定期的に経口投与し、ＩＦＮτ投与が行われない場合の被験者の血中ＩＬ−１０レベルに比して、血清ＩＬ−１０レベルを高めることを含む。治療は、臨床的に適当な評価スコアが減少するまで続けられる。この減少は、好ましくは少なくとも約５０％、より好ましくは約７０％、なおいっそう好ましくは少なくとも約８０％である。例えば、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｓｔａｔｉｃ  Ｇｌｏｂａｌ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔスコアの少なくとも約７０％の減少が得られるが、それとは別に、落屑スコア、プラークスコア、又は紅斑スコアの少なくとも約５０％の減少が得られる。乾癬を患っている人の乾癬評価スコアを減少し、乾癬の再発と再発との間の時間を短縮する方法が考察される。
【００３５】
さらに他の態様では、被験者の自己免疫疾患を治療する方法が提供される。この方法は、ＩＦＮτ投与が行われない場合の対象の血中ＩＬ−１０レベルに比して、対象の血中ＩＬ−１０レベルの初期の測定可能な増加をもたらすのに十分な量のＩＦＮτを対象に投与することと、ＩＦＮτ投与が行われない場合の対象の血中ＩＬ−１０レベルに比して、対象の血中ＩＬ−１０レベルが高いままである選択された期間についてＩＦＮτの投与を中止することと、ＩＦＮτの投与を再開することとを含む。
【００３６】
本発明のこれら及び他の目的及び特徴は、付属の図面を参照しつつ本発明の以下の詳細な説明を読むとより完全に理解されるであろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３７】
配列表の簡単な説明
配列番号１は、ヒツジインターフェロン−τ（ＩＦＮτ）をコードする合成遺伝子のヌクレオチド配列である。
【００３８】
配列番号２は、成熟したウシのインターフェロン−τ（ＩＦＮτ、ｏＴＰ−１、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｙ００２８７、ＰＩＤ  ｇ１３５８）のアミノ酸配列に対応する。
【００３９】
配列番号３は、成熟したヒツジのＩＦＮτのアミノ酸配列に対応し、配列の位置５及び６にあるアミノ酸残基は配列番号２の配列に対して修飾されている。
【００４０】
配列番号４は、配列番号３のタンパク質を符号化する合成ヌクレオチド配列である。
【００４１】
配列番号５は、ヒトミエリンオリゴデンドロサイトタンパク質のアミノ酸配列に対応する（ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．ＢＣ０３５９３８）。
【００４２】
配列番号６は、ヒトミエリン塩基性タンパク質のアミノ酸配列に対応する（ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．ＮＭ ００２３８５）。
【００４３】
Ｉ．定義
インターフェロンτは、ＩＦＮτ又はインターフェロン−τと略記されるが、これは、特性（ｉ）（ａ）抗黄体退行特性、（ｂ）抗ウイルス特性、又は（ｃ）抗細胞増殖特性及び（ｉｉ）α−インターフェロンとの約４５から６８％のアミノ酸相同性又は知られているＩＦＮτ配列に対する約７０％を超えるアミノ酸相同性の２つの群のそれぞれからの少なくとも１つの特性を有する一群のインターフェロンタンパク質の１つを指す（例えば、Ｏｔｔら、Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  Ｒｅｓ．、１１：３５７（１９９１）、Ｈｅｌｍｅｒら、Ｊ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｆｅｒｔ．、７９：８３（１９８７）、Ｉｍａｋａｗａら、Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ、３：１２７（１９８９）、Ｗｈａｌｅｙら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２６９：１０８４６（１９９４）、Ｂａｚｅｒら、ＷＯ９４／１０３１３（１９９４））。アミノ酸相同性又は配列の「同一性」は、配列ギャップを最小にしつつ、重複及び同一性を最大にするように整列させたときにタンパク質のアミノ酸配列を比較することにより決定される。２つのアミノ酸又は２つの核酸配列の同一性の割合は、目視検査及び／又は数学的計算により決定することができるか、又はより好ましくは、利用可能な多数のコンピュータプログラムのうちの１つを使用して配列情報を比較することにより比較を実施する。ＩＦＮτ配列は、限定はしないが、乳牛（ウシ種、Ｈｅｌｍｅｒ  Ｓ．Ｄ．、Ｊ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｆｅｒｔ．、７９：８３（１９８７）、Ｉｍａｋａｗａ、Ｋ．、Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．、１１９：５３２（１９８８））、ヒツジ（ヒツジ種）、ジャコウウシ（ジャコウウシ種）、キリン（キリン種、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  ｎｏ．Ｕ５５０５０）、ウマ（ウマ）、シマウマ（サバンナシマウマ、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  ｎｏ．ＮＣ００５０２７）、カバ（ヒポパタマス種）、ゾウ（アフリカ象種）、ラマ（ラマ）、ヤギ（ヤギ種、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  ｎｏｓ．ＡＹ３５７３３６、ＡＹ３５７３３５、ＡＹ３４７３３４、ＡＹ３５７３３３、ＡＹ３５７３３２、ＡＹ３５７３３１、ＡＹ３５７３３０、ＡＹ３５７３２９、ＡＹ３５７３２８、ＡＹ３５７３２７）、及びシカ（シカ種）を含む、様々な反芻動物種において識別されている。これらの種の多くに対するＩＦＮτのヌクレオチド配列は、公開データベース及び／又は文献（例えば、Ｒｏｂｅｒｔｓ、Ｒ．Ｍ．ら、Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ａｎｄ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ．、１８：８０５（１９９８）、Ｌｅａｍａｎ  Ｄ．Ｗ．ら、Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  Ｒｅｓ．、１２：１（１９９３）、Ｒｙａｎ、Ａ．Ｍ．ら、Ａｎｉｍ．Ｇｅｎｅｔ．、３４：９（１９９６））で報告されている。ＩＦＮτは、上記の特徴の２つの群のそれぞれからの少なくとも１つの特徴を有する、上で引用されているものを例とする、反芻動物種からのＩＦＮτタンパク質を包含することが意図している。
【００４４】
ヒツジＩＦＮτ（ＯｖＩＦＮτ）は、本明細書で配列番号２と識別されているようなアミノ酸配列を有するタンパク質、及び本明細書で配列番号３と識別されているＩＦＮτタンパク質などの、タンパク質の活性に著しい影響を及ぼさない中性のアミノ酸置換などのアミノ酸置換及び変更を有するタンパク質を指す。ヒツジＩＦＮτタンパク質は、配列番号２と識別されている配列に対しより一般的には約８０％、より好ましくは９０％の配列相同性を有するものである。配列相同性は、例えば、厳密なアミノ酸比較により、又は多数の市販されているプログラムのうちの１つを使用して決定される。
【００４５】
疾患を治療することは、疾患の症状を軽減する、及び／又は疾患の重症度を低減するのに有効な治療物質を投与することを指す。
【００４６】
経口は、口による投与、また胃内投与を含む胃又は腸への直接投与を伴う経路を指す。
【００４７】
腸は、小腸（十二指腸、空腸、及び回腸）及び大腸（上行結腸、横行結腸、下行結腸、Ｓ状結腸、及び直腸）からなる、胃の下部開口部から肛門に至るまでの消化管の部分を指す。
【００４８】
「血中ＩＬ−１０レベルの測定可能な増加」は、同一の条件の下で測定された前処理レベルを超える、ＩＬ−１０の血中（血清及び／又は血液細胞）内の統計的に意味のある増加、典型的には少なくとも２０％の増加、より好ましくは少なくとも２５％の増加を指す。ここでは、市販の酵素免疫測定（ＥＬＩＳＡ）キットを使用して血液中のＩＬ−１０レベルを測定する方法について説明する。増加倍数は、時刻ｘでの値をスクリーニング又は基礎値で除算することにより決定される。増加率は、時刻ｘでの値とスクリーニング又は基礎値との差を求め、この差をスクリーニング又は基礎値で除算し、その商に１００を掛けることにより決定される。
【００４９】
「血中ＩＬ−１２レベルの測定可能な減少」は、同一の条件の下で測定された前処理レベルを超える、インターロイキン−１２の血中（血清及び／又は血液細胞）内の統計的に意味のある増加、典型的には少なくとも２０％の増加、より好ましくは少なくとも２５％の増加を指す。ここでは、市販の酵素免疫測定（ＥＬＩＳＡ）キットを使用して血液中のＩＬ−１２レベルを測定する方法について説明する。増加倍数は、時刻ｘでの値をスクリーニング又は基礎値で除算することにより決定される。増加率は、時刻ｘでの値とスクリーニング又は基礎値との差を求め、この差をスクリーニング又は基礎値で除算し、その商に１００を掛けることにより決定される。
【００５０】
「インターフェロン−ガンマ血中レベルを維持する」又は「インターフェロン血中レベルの実質的減少がない」は、インターフェロン−ガンマの血中（血清及び／又は血液細胞）レベルの統計的に意味のある変化がないことを指す。ここでは、市販の酵素免疫測定（ＥＬＩＳＡ）キットを使用して血液中のインターフェロン−ガンマレベルを測定する方法について説明する。
【００５１】
「５×１０８単位を超える１日容量」は、約５×１０８単位を超える抗ウイルスタンパク質を供給するのに十分なＩＦＮτの量を指し、ＩＦＮτの抗ウイルス活性は、以下の「方法」の節で説明されているような標準細胞変性効果阻害アッセイを使用して測定される。５×１０８単位を超える１日用量を供給するタンパク質の量（つまり、ｍｇ）は、タンパク質の特異抗ウイルス活性に応じて異なることは理解されるであろう。
【００５２】
ＩＩ．インターフェロン−τ組成及び治療方法
Ａ．インターフェロン−τ
同定すべき第１のＩＦＮτは、１８−１９ｋＤａタンパク質として、ヒツジＩＦＮτ（ＩＦＮτ）であった。受胎産物（胚及び周辺膜）ホモジネート中で、複数のイソ型が同定された（Ｍａｒｔａｌ、Ｊ．ら、Ｊ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｆｅｒｔｉｌ．５６：６３−７３（１９７９））。その後、受胎産物培養基中に放出された低分子量タンパク質が、精製され、熱に対して不安定であり、且つプロテアーゼの影響を受けやすいことが示された（Ｇｏｄｋｉｎ、Ｊ．Ｄ．ら、Ｊ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｆｅｒｔｉｌ．６５：１４１−１５０（１９８２））。ＩＦＮτは、元々、ヒツジトロホブラストタンパク質−１（ｏＴＰ−１）と呼ばれていたが、それは、ヒツジの母体認識の臨界期にヒツジ受胎産物の栄養外胚葉により最初に産生される一次分泌タンパク質であるからである。その後の実験において、ＩＦＮτは、ヒツジ及び乳牛などの反芻動物の妊娠に対する生理学的反応の確定に欠かせない妊娠認識ホルモンであると決定された（Ｂａｚｅｒ、Ｆ．Ｗ．、及びＪｏｈｎｓｏｎ、Ｈ．Ｍ．、Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２６：１９−２２（１９９１））。
【００５３】
Ｎ末端アミノ酸配列を表す合成オリゴヌクレオチドでヒツジ胚盤胞ライブラリーを探索することにより得られたＩＦＮτ  ｃＤＮＡ（Ｉｍａｋａｗａ、Ｋ．ら、Ｎａｔｕｒｅ、３３０：３７７−３７９、（１９８７））は、ヒト、マウス、ラット、及びブタからのＩＦＮ−αｓと４５〜５５％の相同性を有し、ＩＦＮ−Ωと現在呼ばれている、ウシＩＦＮ−αＩＩと７０％の相同性を有する予測アミノ酸配列を持つ。異なるイソ型を表すことができる複数のｃＤＮＡ配列が報告されている（Ｓｔｅｗａｒｔ、Ｈ．Ｊ．ら、Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．２：６５（１９８９）、Ｋｌｅｍａｎｎ、Ｓ．Ｗ．ら、Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．１８：６７２４（１９９０）、及びＣｈａｒｌｉｅｒ、Ｍ．ら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．７６：１６１−１７１（１９９１））。すべて、２３アミノ酸リーダー配列及び１７２アミノ酸成熟タンパク質についてコードする５８５塩基読み取り枠を有する、約１ｋｂである。加えてアミノ及びカルボキシル末端を持つ４ヘリックス束としてのＩＦＮτの予測構造は、さらに、Ｉ型ＩＦＮとしての分類を支持する（Ｊａｒｐｅ、Ｍ．Ａ．ら、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ７：８６３−８６７（１９９４））。
【００５４】
【表２】
2007528407.tif 000003
【００５５】
ＩＦＮτは、Ｉ型インターフェロン（上の表を参照）と古典的に関連する活性の一部を示すが、上述のようにそれと他のＩ型インターフェロンとの間にはかなりの相違が存在する。これらの相違は、生物活性、ウイルスによる誘発、誘発後の発現期間、他のＩ型インターフェロンとの相同性などを含む。他の相違は、ＩＦＮτ遺伝子の調節因子領域内に存在しうる。例えば、ウシＩＦＮτに対する遺伝子とのヒトトロホブラスト細胞系ＪＡＲのトランスフェクションの結果、抗ウイルス活性が得られたが、ウシＩＦＮ−Ω遺伝子とのトランスフェクションはそうでなかった。これは、ＩＦＮτ遺伝子発現に関与する一意的な相互作用因子を意味する。このことと、ＩＦＮτの近位プロモーター領域（１２６から転写開始部位までの）はＩＦＮ−α及びＩＦＮ−βのそれとの相同性が高いが、−１２６から−４５０までの領域は、相同性がなく、ＩＦＮτ発現のみを高める（Ｃｒｏｓｓ、Ｊ．Ｃ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８８：３８１７−３８２１（１９９１））。したがって、他のＩ型インターフェロンと比べて、異なる調節因子がＩＦＮτ発現に関与しているように見える。
【００５６】
ヒツジＩＦＮτの１７２アミノ酸配列は、例えば、米国特許第５，９５８，４０２号で記載されており、その相同性のあるウシＩＦＮτ配列は、例えば、Ｈｅｌｍｅｒら、Ｊ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｆｅｒｔ．、７９：８３−９１（１９８７）及びＩｍａｋａｗａ、Ｋ．ら、Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．、３：１２７（１９８９）で説明されている。これらの引用文献からのヒツジＩＦＮτ及びウシＩＦＮτの配列は、したがって、参照により組み込まれる。ヒツジＩＦＮτの例示的なアミノ酸配列は、配列番号２又は配列番号３としてここでは示されている。
【００５７】
１．ＩＦＮτの分離
Ｇｏｄｋｉｎ、Ｊ．Ｄ．ら、Ｊ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｆｅｒｔｉｌ．６５：１４１−１５０（１９８２）及びＶａｌｌｅｔ、Ｊ．Ｌ．ら、Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．３７：１３０７（１９８７）で説明されているように、ＩＦＮτは、妊娠しているヒツジから回収され、改変最小必須培地でｉｎ  ｖｉｔｒｏで培養された受胎産物から分離することができる。ＩＦＮτは、イオン交換クロマトグラフィ及びゲルろ過により受胎産物培地から精製することができる。分離されたＩＦＮτの相同性は、ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動（Ｍａｎｉａｔｉｓ、Ｔ．ら、ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＣＬＯＮＩＮＧ：Ａ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＭＡＮＵＡＬ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、ＮＹ（１９８２）、Ａｕｓｕｂｅｌ、Ｆ．Ｍ．ら、ＣＵＲＲＥＮＴ  ＰＲＯＴＯＣＯＬＳ  ＩＮ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＢＩＯＬＯＧＹ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、Ｍｅｄｉａ、ＰＡ（１９８８））により評価することができ、精製されたＩＦＮτ試料のタンパク質濃度の判定は、ビシンコニン（ＢＣＡ）アッセイ（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、ＩＬ、Ｓｍｉｔｈ、Ｐ．Ｋ．ら、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１５０：７６（１９８５））を使用して実施することができる。
【００５８】
２．ＩＦＮτの組換え型生産
組換え型ＩＦＮτタンパク質は、細菌又は酵母細胞などの適当な発現系を使用して、選択されたＩＦＮτポリヌクレオチド断片から生産することができる。ＩＦＮτヌクレオチド及びポリペプチド配列の分離は、本明細書に参照により組み込まれる、ＰＣＴ公開ＷＯ／９４／１０３１３において説明されている。
【００５９】
ＩＦＮτ発現ベクターを作るために、ＩＦＮτコード配列（例えば、配列番号１又は４）を発現ベクター、例えば、細菌発現ベクター内に入れ、標準的方法に従って発現させる。適当なベクターの実施例は、ラムダｇｔ１１（Ｐｒｏｍｅｇａ、ウィスコンシン州マジソン）、ｐＧＥＸ（Ｓｍｉｔｈ、Ｐ．Ｋ．ら、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１５０：７６（１９８５））、ｐＧＥＭＥＸ（Ｐｒｏｍｅｇａ）、及びｐＢＳ（Ｓｔｒａｔｅｇｅｎｅ、カリフォルニア州ラホーヤ）ベクターを含む。Ｔ７  ＲＮＡポリメラーゼプロモーター又はｔａｃプロモーターなどの適当なプロモーターを含む他の細菌発現ベクターも使用することができる。修飾ｐＩＮ  ＩＩＩ  ｏｍｐ−Ａ発現ベクターの中へのＩＦＮτ合成ポリヌクレオチドのクローニングについて、以下の「方法」の節で説明する。
【００６０】
本明細書で説明されている研究に関して、配列番号４内に存在するＩＦＮτコード配列は、メタノール調節アルコール酸化酵素（ＡＯＸ）プロモーター及びＰｈｏ１シグナル配列を含む、酵母細胞の転換に適した、ベクターにクローニングされた。このベクターを使用して、ピキアパストリス（Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ）宿主細胞を転換し、形質転換された細胞を使用して、メーカーの取扱説明書に従ってタンパク質を発現させた（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カリフォルニア州サンディエゴ）。
【００６１】
本発明の方法と併用するＩＦＮτを発現させるのに適している他の酵母ベクターは、２ミクロンのプラスミドベクター（Ｌｕｄｗｉｇ、Ｄ．Ｌ．ら、Ｇｅｎｅ、１３２：３３（１９９３））、酵母組み込みプラスミド（Ｓｈａｗ、Ｋ．Ｊ．ら、ＤＮＡ  ７：１１７（１９８８））、ＹＥＰベクター（Ｓｈｅｎ、Ｌ．Ｐ．ら、Ｓｃｉ．Ｓｉｎ．、２９：８５６（１９８６））、酵母動原体プラスミド（ＹＣｐｓ）、及び発現が調節可能な他のベクター（Ｈｉｔｚｅｍａｎ、Ｒ．Ａ．ら、米国特許第４，７７５，６２２号、Ｒｕｔｔｅｒ、Ｗ．Ｊ．ら、米国特許第４，７６９，２３８号、Ｏｅｄａ、Ｋ．ら、米国特許第４，７６６，０６８号）を含む。好ましくは、これらのベクターは、ＭＦα１プロモーター（Ｂａｙｎｅ、Ｍ．Ｌ．ら、Ｇｅｎｅ  ６６：２３５−２４４（１９８８））、ＧＡＤＰＨプロモーター（グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、Ｗｕ、Ｄ．Ａ．ら、ＤＮＡ、１０：２０１（１９９１））、又はガラクトース誘導ＧＡＬ１０プロモーター（Ｌｕｄｗｉｇ、Ｄ．Ｌ．ら、Ｇｅｎｅ、１３２：３３（１９９３）、Ｆｅｈｅｒ、Ｚ．ら、Ｃｕｒｒ．Ｇｅｎｅｔ．、１６：４６１（１９８９）、Ｓｈｅｎ、Ｌ．Ｐ．ら、Ｓｃｉ．Ｓｉｎ．、２９：８５６（１９８６））などの有効な酵母プロモーターを含む発現カセットを含む。酵母形質転換宿主は、典型的には、サッカロマイセスセレヴィシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）であるが、但し、形質転換に適した他の酵母も使用可能である（例えば、シゾサッカロミセスポンベ（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｐｏｍｂｅ）、ピキアパストリス（Ｐｉｃｈｉａ  ｐａｓｔｏｒｉｓ）など）。
【００６２】
さらに、ＩＮＦτポリペプチドを符号化するＤＮＡを多数の市販のベクター内にクローニングし、適切な宿主系内にポリペプチドの発現を生成することができる。これらの系は、上述の細菌及び酵母発現系、さらに、バキュロウイルス発現（Ｒｅｉｌｌｙ、Ｐ．Ｒ．ら「バキュロウイルス発現ベクター：実験マニュアル（ＢＡＣＵＬＯＶＩＲＵＳ  ＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮ  ＶＥＣＴＯＲＳ：Ａ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＭＡＮＵＡＬ）」（１９９２）、Ｂｅａｍｅｓら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、１１：３７８（１９９１）、Ｃｌｏｎｔｅｃｈ、カリフォルニア州パロアルト）、植物細胞発現、トランスジェニック植物発現、及び哺乳類細胞における発現（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ、カリフォルニア州パロアルト、Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ、メリーランド州ゲイザースバーグ）を含む。組換え型ポリペプチドは、融合タンパク質又は天然タンパク質として発現することができる。培養基内への発現配列の分泌を促進するリーダー配列などの発現ベクター内に、設計により多数の特徴を組み込むことができる。組換え技術により生産されるポリペプチドは、典型的には、溶解細胞又は培養基から分離される。精製は、塩類分留、イオン交換クロマトグラフィ、及び親和性クロマトグラフィを含む当業で知られている方法により実施できる。ＩＦＮτポリペプチドに基づいて生成された抗体を使用する、免疫親和性クロマトグラフィを上述のように採用することができる。
【００６３】
組換え型方法に加えて、ＩＦＮτタンパク質又はポリペプチドは、適切な抗体を使用するなど、親和性に基づく方法により選択された細胞から分離することができる。さらに、ＩＦＮτペプチド（例えば、配列番号２又は３）は、当業者に知られている方法を使用して化学合成することができる。
【００６４】
Ｂ．ＩＦＮτの投与
本発明を裏付けるため実施された研究において、ＩＬ−１０療法に応答する疾患を患っている患者にＩＦＮτを投与した。特に、ある研究では、多発性硬化症と診断された患者は、ＩＦＮτで治療された。他の研究では、ウイルス感染を患っている患者は、ＩＦＮτで治療された。これらの研究において、それぞれの患者のサイトカインＩＬ−１０、ＩＦＮ−γ、及びＩＬ−１２の血清レベルが監視された。次にこれらの研究について説明する。
【００６５】
１．多発性硬化症を患っているヒトへのＩＦＮτの投与
多発性硬化症を患っているヒトは、ＩＦＮτによる治療の臨床試験に登録された。実施例１で説明されているように、１５人の患者は、無作為に３治療群に分けられ、これは表１にまとめた。
【００６６】
【表３】
2007528407.tif 000004
【００６７】
治療前に、基準血清サイトカインレベルを判定するために、それぞれの被験者から血液試料を採取した。１日目の採血の後、それぞれの患者は、適切な服用量のＩＦＮτを経口摂取することにより治療を開始した。治療は、２８日間続け、研究の１日目、４日目、８日目、１５日目、２９日目、及び５７日目にそれぞれの患者から血液試料を採取した。ＩＦＮ−γ及びＩＬ−１０濃度について試料を分析した。
【００６８】
Ｉ群、ＩＩ群、ＩＩＩ群の患者のＩＬ−１０レベルは、それぞれ、図１Ａ〜１Ｃに示されている。図１Ａは、Ｉ群の５人の患者の血清ＩＬ−１０レベル（ｐｍ／ｍＬ）を示している。患者番号１０３、１０４、及び１０５の３人の患者は、４日目にＩＬ−１０レベルの増加を示したが、これらの患者の８日目の読み取りでは、ＩＬ−１０レベルが減少した。患者番号１０３及び１０４の８日目及び１５日目のＩＬ−１０レベルは、４日目のレベルからあまり大きくは変化していなかった。図１Ｂ及び１Ｃは、それぞれ、試験群ＩＩ及びＩＩＩの患者の結果を示している。ＩＦＮτの投与後、特にＩＩＩ群の患者では、血清ＩＬ−１０レベルのわずかな増加が示唆されている。
【００６９】
図１Ｄは、Ｉ群、ＩＩ群、及びＩＩＩ群に対する平均ＩＬ−１０血清レベルを示している。２日目と２８日目の間の、ＩＦＮτ投薬期間の試験群のＩＬ−１０にわずかなアップグレーションがあったが、実施例１に述べられている統計的分析に基づいて、このわずかなアップレギュレーションは、統計的に有意でなかった。ＩＦＮτの投薬後一定期間経ってからＩ群及びＩＩ群で続いていたＩＬ−１０血中レベルのわずかな増加は、２８日目に停止した。ＩＦＮτを最後に投薬してから３４日経った５７日目のＩＬ−１０血清レベルは、０日目と１日目に測定された基準レベルを超えたままであった。そこで、本発明では、ＩＦＮτの投与が行われない場合の被験者の血中ＩＬ−１０レベルに比して、被験者の血中ＩＬ−１０レベルの初期の測定可能な増加をもたらす十分な量のＩＦＮτが投与される、被験者の自己免疫疾患を治療する方法を検討する。次いで、ＩＦＮτの投与が行われない場合の対象の血中ＩＬ−１０レベルに比して、対象の血中ＩＬ−１０レベルが高いままである選択された期間についてＩＦＮτの投与が中止される。次いで、必要ならばＩＦＮτの投与を再開できる。
【００７０】
この研究では、ＩＦＮ−γの血中レベルも監視された。ＩＦＮ−γは、炎症性サイトカインであり、ＩＦＮ−γのアップレギュレーションは、多発性硬化症及び関節炎などの、自己免疫疾患を患っている患者の不快症状の高まりと相関する。インターフェロン−ベータ（ＩＦＮ−β）で多発性硬化症を治療するときに、ＩＦＮ−β治療の最初の２カ月間に細胞のＩＦＮ−γ−分泌の頻度が増加し、ＩＦＮ−γ血清レベルのこのような増加は、ＩＦＮ−βによる治療時に患者が経験する顕著な「インフルエンザに似た」症状に寄与する可能性のあることが報告されている。そのため、ＩＬ−１０レベルがＩＦＮ−γの同伴するアップレギュレーションなしで有利にアップレギュレーションされる自己免疫疾患を治療する方法が有益であろう。
【００７１】
図２Ａ〜２Ｄは、多発性硬化症を患い、ＩＦＮτで経口治療されている、Ｉ群、ＩＩ群、及びＩＩＩ群の患者のＩＦＮ−γ血中レベル（ｐｇ／ｍＬ）を示している。図２Ａは、０．２ｍｇのＩＦＮτで治療される、Ｉ群の患者の血清レベルを示している。１０１番、１０２番、１０４番、１０５番の患者はそれぞれ、治療過程においてＩＦＮ−γ血中レベルの減少を示した。血清レベルは、２８日目の治療中止後に増加した。１０３番の患者のＩＦＮ−γ血清レベルは、増加せず、本質的に変化はなかった。
【００７２】
図２Ｂは、ＩＩ群に属し、０．６ｍｇのＩＦＮτで毎日治療されている、患者のＩＦＮ−γ血中レベル（ｐｇ／ｍＬ）を示している。図２Ｃは、ＩＩＩ群に属し、１．８ｍｇのＩＦＮτで毎日治療されている、患者のＩＦＮ−γ血中レベル（ｐｇ／ｍＬ）を示している。上述のように、ＩＦＮτの初回分は、１日目の採血後に摂取され、最終回分は、２８日目に摂取された。したがって、１日目のデータ点及び「スクリーン」は、個々の患者の基準レベルである。ＩＩ群及びＩＩＩ群のすべての患者は、ＩＦＮ−γによる治療時に、ＩＦＮ−γ血清レベルの減少を経験するか、又はＩＦＮ−γ血清レベルの意味のある変化を受けなかった。
【００７３】
図２Ｄは、試験群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩのそれぞれの患者に対する、ＩＦＮ−γの平均血中レベル（ｐｇ／ｍＬ）をまとめたものである。ＩＦＮ−γ血中レベルの減少傾向は、特に、ＩＦＮτの投与量が多い場合（ＩＩＩ群）に明らかである。
【００７４】
図３Ａ〜３Ｅは、治療群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩから選択された個々の患者に対する、両方ともｐｇ／ｍＬを単位とする、ＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す図である。図３Ａは、治療群Ｉに属す１０１番の患者に対するサイトカイン生産速度を示す。血中ＩＬ−１０レベル（菱形）は、治療期間中に統計的に見て増加しない。ＩＦＮ−γ血中レベルは、経口投与されたＩＦＮτによる治療時に減少する。ＩＬ−１０及びＩＦＮ−γの基準レベルは、それぞれ、１５．８ｐｇ／ｍＬ及び１４．５ｐｇ／ｍＬであり、これは、初期ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比１．１を与える。ＩＦＮτによる治療時に、ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比は、約２．２に増加したが、これは、ＩＦＮ−γ血中レベルの減少によるものである。ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比は、治療が終了してから約１カ月後の５７日目に約１．１の基準比に戻った。そのため、ＩＦＮτによる治療期間中に、ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比は、約１００％増加した。
【００７５】
図３Ｂは、治療群Ｉに属す１０５番の患者に対するサイトカイン生産速度を示す。ＩＬ−１０及びＩＦＮ−γの基準レベルは、それぞれ、６．６ｐｇ／ｍＬ及び４９．２ｐｇ／ｍＬの平均であり、これは、初期ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比０．１３を与える。ＩＦＮτによる治療時に、ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比は、約０．２〜０．３に増加したが、これは、ＩＦＮ−γ血中レベルの減少によるものである。ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比は、治療が終了してから約１カ月後の５７日目に約０．１２の基準比に戻った。したがって、ＩＦＮτによる治療は、ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比を調節する効果を有し、この比を５０％超、より好ましくは８０％超増加させた。
【００７６】
図３Ｃは、治療群ＩＩＩに属す３０２番の患者に対するサイトカイン生産速度を示す。ＩＬ−１０及びＩＦＮ−γの基準レベル（スクリーン及び１日目の平均として取った）は、それぞれ、５．８ｐｇ／ｍＬ及び４．０ｐｇ／ｍＬであり、これは、初期ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比１．４５を与えた。ＩＦＮτによる治療時に、平均ＩＬ−１０血中レベル（４日目、８日目、１５日目のＩＬ−１０レベルの平均）は７．７ｐｇ／ｍＬであり、これは、基準ＩＬ−１０レベル（スクリーン及び１日目のＩＬ−１０血中レベルの平均）と統計的に異なっていなかった。ＩＦＮ−γレベルは、治療期間にわたって実質的に変化がなかった。この患者のＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比は、本質的に変化しなかった。
【００７７】
図３Ｄは、治療群ＩＩＩに属す３０３番の患者に対するサイトカイン生産速度を示す。ＩＬ−１０及びＩＦＮ−γの基準レベル（スクリーン及び１日目の平均として取った）は、それぞれ、４．４ｐｇ／ｍＬ及び３．６ｐｇ／ｍＬであり、これは、初期ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比１．２を与えた。ＩＦＮτによる治療時に、ＩＦＮ−γ血中レベルの減少により、ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比は８日目に約１１にまで増加し、２９日目に基準比に戻った。
【００７８】
図３Ｅは、治療群ＩＩＩに属す３０５番の患者に対するサイトカイン生産速度を示す。ＩＬ−１０及びＩＦＮ−γの基準レベル（スクリーン及び１日目の平均として取った）は、それぞれ、４．３ｐｇ／ｍＬ及び３４．８ｐｇ／ｍＬであり、これは、初期ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比０．１を与えた。ＩＦＮτによる治療中、ＩＬ−１０血中レベルは本質的に一定であり、ＩＦＮ−γ血中レベルはわずかに減少し、これにより、８日目にＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比は約１４％だけ増加し、０．１４になった。
【００７９】
そこで、一態様において、自己免疫疾患又はウイルス感染を患っている被験者のＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比を増加させる方法である。この方法は、（ｉ）ＩＦＮτ投与が行われない場合のＩＦＮ−γレベルに比して、対象の血中ＩＦＮ−γレベルに実質的な変化がないか、又は（ｉｉ）ＩＦＮτ投与が行われない場合のＩＦＮ−γレベルに比して、対象の血中ＩＦＮ−γレベルの減少があるときに、ＩＦＮτ投与が行われない場合の対象の血中ＩＬ−１０レベルに比して、対象の血中ＩＬ−１０レベルの初期の測定可能な増加をもたらす効果のある量のＩＦＮτを対象に投与することを含む。ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比は、少なくとも約１０％、好ましくは約２５％、より好ましくは約４０％、さらに好ましくは少なくとも約５０％だけ増加する。一実施形態では、ＩＦＮτは、ヒツジ又はウシＩＦＮτである。他の実施形態では、約５×１０８抗ウイルス単位（Ｕ）を超える服用量、より好ましくは０．５×１０９Ｕ以上の用量、さらに好ましくは１×１０９Ｕ以上の用量のＩＦＮτが投与される。
【００８０】
２．ウイルス感染を患っているヒトへの投与
他の研究では、Ｃ型肝炎ウイルスに感染した患者を募集した。患者は、経口ＩＦＮτ（配列番号３）による治療のため４つの試験群に分けられた。実施例２で説明されているように、試験群に属すそれぞれの被験者は、ＩＦＮτの１ｍｇ／ｍＬ溶液の制御された量を毎日３回自己投与した。試験群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩに属す患者は、毎日の合計用量として、１ｍｇ  ＩＦＮτ、３ｍｇ  ＩＦＮτ、又は９ｍｇ  ＩＦＮτをそれぞれ受けた（１ｍｇ  ＩＦＮτは約１×１０８抗ウイルス単位である）。治療期間は８４日間に及び、定められた間隔で患者は試験診療室に戻り、ＩＬ−１０及びＩＦＮ−γのレベルの分析のため血液試料を供給した。監視は、１６９日間、ＩＦＮτによる治療が終わってから８５日間続いた。
【００８１】
図４Ａ〜４Ｃは、試験群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩのそれぞれにおける６人の患者のＩＬ−１０血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を示すグラフである。図４Ａは、合計１日用量１ｍｇ（１×１０８Ｕ）について、毎日３回０．３３ｍｇのＩＦＮτで毎日治療される試験群Ｉの６人の患者のＩＬ−１０レベルを示している。すべての患者のデータは、ＩＬ−１０レベル増加への統計的に有意ではないけれどもわずかな傾向を示している。
【００８２】
図４Ｂは、８４日目まで毎日３回０．３３ｍｇのＩＦＮτ（３×１０８Ｕ／日）でそれぞれ毎日治療される試験群ＩＩの６人の患者のデータを示している。すべての患者のデータは、治療期間（第１日〜第８４日）にわたるＩＬ−１０レベル増加への統計的に有意ではないけれどもより明確な傾向を示している。ＩＦＮτ投薬を中止した後、８５日目〜１６９日目までの継続的監視期間に、ＩＬ−１０血中レベルはゆっくりと基準レベルに近づいた。
【００８３】
図４Ｃは、１日目から８４日目まで毎日３回３ｍｇのＩＦＮτ（９×１０８Ｕ／日）で毎日治療される試験群ＩＩＩの６人の患者のＩＬ−１０血清レベルを示している。すべての患者の血清ＩＬ−１０レベルは、ＩＦＮτの投薬に応答して統計的に増加した。ＩＦＮτ投薬の終了後、ＩＬ−１０血中レベルは、ほぼ３カ月間高いままであった。
【００８４】
図４Ｄは、図４Ａ〜４Ｃの試験群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩに対するＩＬ−１０血清レベルの要約グラフを示している。図４Ｄは、血清ＩＬ−１０レベルの増加率を試験群Ｉ（菱形、毎日３回０．３３ｍｇ）、試験群ＩＩ（正方形、毎日３回１ｍｇ）、及び試験群ＩＩＩ（三角形、毎日３回３ｍｇ）について時間の関数として示す。用量の関数としての血清ＩＬ−１０レベルの増加率は、図面から明白であり、最高用量９ｍｇ（毎日３回３ｍｇ、９×１０８Ｕ／日）で、治療の最初の１５日以内に１００％を超えるＩＬ−１０のアップレギュレーションを誘発する。毎日３ｍｇ投薬すると（試験群ＩＩ、正方形）、ＩＬ−１０の生産が生じ、試験１５日目までに約１５０％の増加を引き起こした。８４日の試験期間に１５０％の増加を維持するために毎日３ｍｇ投薬すれば十分であった。
【００８５】
図４Ｄは、さらに、ＩＦＮτの投薬が停止したときに、８５日目〜１６９日目までの期間に、基準、治療前レベルに関して継続的上昇を示している。試験群ＩＩＩ（毎日９ｍｇ  ＩＦＮτ）では、ＩＬ−１０レベルは、１６９日目までに基準レベルに戻らなかった。したがって、自己免疫疾患、特に多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、及びアレルギーを治療する方法であって、ＩＦＮτ投与が行われない場合の対象の血中ＩＬ−１０レベルに比して、対象の血中ＩＬ−１０レベルの初期の測定可能な増加をもたらすのに十分な量のＩＦＮτを対象に投与し、ＩＦＮτ投与が行われない場合の対象の血中ＩＬ−１０レベルに比して被験者の血中ＩＬ−１０レベルが増加したままの選択された期間にＩＦＮτの投与を中止し、必要ならば、症状が悪化したときなどにＩＦＮτの投与を再開することによる方法が検討される。血中ＩＬ−１０レベルの初期の測定可能な増加をもたらすのに十分なＩＦＮτの量は、約５×１０８Ｕ／日を超え、より好ましくは０．５×１０９Ｕ／日以上、さらに好ましくは１×１０９Ｕ／日以上である。ＩＦＮτの投与が中止される期間は、疾病状態により変わる可能性があるが、その疾病状態を患っている患者のＩＬ−１０レベルがＩＦＮτによる治療期間中とＩＦＮτによる治療の終了後に監視される研究から容易に決定される。このような研究からの結果を、一般的に、他の患者に適用し、推奨投薬パターンを得ることができる。それとは別に、ＩＦＮτの投与が中止される期間は、治療を再開すべきか決定するための非治療期間において、定期的に、例えば、毎週又は週２回、ＩＬ−１０血中レベルを実際に監視することにより、又は症状の患者認知の主観的指示により、個々の患者について追跡することができる。治療は、ＩＬ−１０レベルがその特定の患者の、又はモデル患者分布の治療前レベルに近づくとき、又は治療されている特定の患者の症状が悪化したときに再開する。
【００８６】
図５Ａ〜５Ｃは、この研究の患者に対する、ＩＦＮ−γ血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を示すグラフである。図５Ａは、毎日３回０．３３ｍｇのＩＦＮτで毎日治療されている、試験群Ｉに属す６人の患者のＩＦＮ−γレベルを示している。ＩＦＮ−γレベルを基準レベルに維持し、わずかに減少するＩＦＮ−γレベルに向かう全体的傾向があるのは明らかである。
【００８７】
図５Ｂは、毎日３回１．０ｍｇのＩＦＮτで毎日治療されている、試験群ＩＩに属す６人の患者のＩＦＮ−γレベルを示している。ほぼ３日目から１５日目までの間の初期治療におけるＩＦＮ−γレベルの減少は明白である。その後、レベルは、基準レベルに戻り、試験期間の残りの期間においてほぼ投薬前レベルに維持された。
【００８８】
図５Ｃは、毎日３回３ｍｇのＩＦＮτで毎日治療されている、試験群ＩＩＩＩに属す６人の患者のＩＦＮ−γ血清レベルを示している。一部の患者はＩＦＮ−γレベルの明確な減少を経験したが、治療群全体では、治療期間にわたってレベルの変化はほとんどないように見えた。投薬中止後のＩＦＮ−γレベルの増加は、８５日目〜１６９日目までの間に見られる。これは、ＩＦＮτの投与によりレベル減少がある程度達成されたことを示唆している。
【００８９】
図５Ｄは、平均血清ＩＦＮ−γレベルを試験群Ｉ（菱形、毎日３回０．３３ｍｇ）、試験群ＩＩ（円、毎日３回１ｍｇ）、及び試験群ＩＩＩ（三角形、毎日３回３ｍｇ）について時間の関数として示す、図５Ａ〜５Ｃの試験群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩの要約プロットである。ＩＦＮτの投与は、（１）レベルが本質的にスクリーンの投薬前レベルのままで、ＩＦＮ−γレベルの有意な変化を引き起こさなかったか、又は（２）基準の投薬前レベルからのＩＦＮτレベルの減少を引き起こしたことが明らかである。
【００９０】
そのため、他の態様では、対象のＩＦＮ−γの血中レベルを下げる方法は、ＩＦＮτ投与が行われない場合のＩＦＮ−γ血中レベルに比して、対象のＩＦＮ−γ血中レベルを減少させるのに有効な量のＩＦＮτを対象に投与することを含む。この方法は、特に、高いＩＦＮ−γレベルを引き起こす薬剤を摂取している患者、又はＩＦＮ−γレベルを高める疾患を患っている患者にとって有用である。そこで、ＩＦＮτ投与が行われない場合のＩＦＮ−γ血中レベルに比して、対象のＩＦＮ−γ血中レベルを減少させるのに有効な量のＩＦＮτを対象に投与することにより、（ｉ）治療薬の投与、又は（ｉｉ）疾病状態による、ＩＦＮ−γ血中レベル上昇の危険性のある対象のＩＦＮ−γ血中レベルの増加を防ぐ方法も検討される。上述のように、ＩＦＮ−βによる多発性硬化症の治療では、患者のＩＦＮ−γのレベルの増加が引き起こされる。ＩＦＮτの同時投与（同時又は順次投与）により、ＩＦＮ−γレベルを治療前のレベルに維持しやすくなる。典型的には、対象のＩＦＮ−γ血中レベルのそのような減少をもたらすのに十分なＩＦＮτの量は、約５×１０８Ｕ／日を超え、より好ましくは０．５×１０９Ｕ／日以上、さらに好ましくは１×１０９Ｕ／日以上である。
【００９１】
図６Ａ〜６Ｆは、図４〜５に関して説明されている治療群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩから選択された患者に対する、両方ともｐｇ／ｍＬを単位とする、ＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す。
【００９２】
図６Ａは、ＩＦＮτ  １ｍｇの毎日用量について、毎日３回０．３３ｍｇのＩＦＮτで治療される、試験群Ｉに属す１０１番の患者のＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す。ＩＬ−１０及びＩＦＮ−γの基準レベルは、それぞれ、平均で、５．２ｐｇ／ｍＬ及び３．９ｐｇ／ｍＬであり（スクリーン及び第１日目の値の平均）、これは、初期ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比１．３を与えた。ＩＦＮτによる治療中に、ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比は、２２日目に１．６に増加し、それ以降基準比に戻り、その後８４日目に投薬を中止した。
【００９３】
図６Ｂは、ＩＦＮτ  ３ｍｇの毎日用量について、毎日３回１．０ｍｇのＩＦＮτで治療される、試験群ＩＩに属す２０５番の患者のＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す。ＩＬ−１０及びＩＦＮ−γの基準レベルは、それぞれ、平均で、３．８ｐｇ／ｍＬ及び５．２ｐｇ／ｍＬであり（スクリーン及び第１日目の値の平均）、これは、初期ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比０．７３を与えた。ＩＦＮτによる治療時に、ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比は、１に近づき、１５日目に１に到達した。したがって、ＩＦＮτによる治療の結果として、比を約２５％に増やすことによりＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比の調節を行った。
【００９４】
図６Ｃは、ＩＦＮτ  ９ｍｇ（９×１０８Ｕ）の毎日用量について、毎日３回３．０ｍｇのＩＦＮτで治療される、試験群ＩＩＩに属す３０１番の患者のＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す。ＩＬ−１０及びＩＦＮ−γの基準レベルは、それぞれ、平均で、４．４ｐｇ／ｍＬ及び３．９ｐｇ／ｍＬであり（スクリーン及び第１日目の値の平均）、これは、初期ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比約１．０を与えた。ＩＦＮτにより治療時に、ＩＬ−１０レベルは実質的増加である４〜５倍に増加したが、ＩＦＮ−γレベルは、４〜５ｐｇ／ｍＬの初期レベル程度に維持された。そのため、ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γは、ＩＦＮτの投薬後、約１．０から約４．０に増加し、４倍の増加となった。
【００９５】
図６Ｄ〜６Ｆは、ＩＦＮτ  ９ｍｇの毎日用量について、毎日３回３．０ｍｇのＩＦＮτで治療される、試験群ＩＩＩに属す、３０３番、３０４番、及び３０５番の患者のＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す。ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比の分析は、図６Ｃで説明されているように、３０１番の患者のものと類似している。特に、図６Ｄは、３０３番の患者のデータを示している。この患者では、ＩＬ−１０血中濃度は、試験４３日目までに基準レベルから約４倍増加し、試験７１日目までに６倍以上に増加した。ＩＦＮ−γ血中レベルは、実質的に一定のままであった。そのため、ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ血液比は、約０．６の基準値から約３を超えて増加し、５倍の増加（５００％増加）となった。
【００９６】
図６Ｅは、ＩＩＩ群の３０４番の患者のデータを示している。患者のＩＬ−１０血中レベルは、ＩＦＮτによる治療時に４〜５倍増加したが、ＩＦＮ−γレベルは本質的に変化しなかった。そのため、ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比は、７１日目に初期値０．６から２．６に増加し、４００％を超える増加となった。
【００９７】
図６Ｆは、ＩＩＩ群の３０５番の患者のデータを示している。治療期間中のＩＬ−１０血中レベルの増加は明白であり、４３日目までに０．７ｐｇ／ｍＬから９ｐｇ／ｍＬ超まで増大した。ＩＦＮ−γレベルは、本質的に変化がなく、その結果、ＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比は１０倍増加した。
【００９８】
要約すると、ＩＩＩ群に属す患者について提示されているデータは、ＩＦＮτの投与はＩＬ−１０／ＩＦＮ−γ比を増加させる効果があったことを示している。特に、ＩＬ−１０血中レベルは、ＩＦＮτの経口投与により測定可能な形で増加したが、これは、ＩＬ−１０血中濃度の統計的増加により明らかである。ＩＬ−１０血中レベルは、２５％を超えて増加し、この患者母集団では、ＩＬ−１０血中濃度の増加は、かなり大きかった。
【００９９】
他の研究では、ウイルス感染を患っている５人の患者が、ＩＦＮτによる治療のため募集された。実施例３に示されている、この研究では、患者は、毎日用量１５ｍｇのＩＦＮτ（１．５×１０９抗ウイルス単位）として、毎日２回７．５ｍｇのＩＦＮτで治療された。第１の投薬は、午前中の朝食前に摂取され、第２の投薬は、夕食後少なくとも３時間してから摂取された。１１３日の試験期間にわたって定められた間隔で血液試料が採取され、試験の８４日目にＩＦＮτの投薬が終了した。それらの試料は、市販の方法を使用して血清中のＩＬ−１０、ＩＬ−１２、及びＩＦＮ−γレベルについて分析された。
【０１００】
図７Ａ〜７Ｂは、単位をｐｇ／ｍＬとして、５人の患者のＩＬ−１０血清レベル（図７Ａ）及びＩＦＮ−γ血清レベル（図７Ｂ）を日数の関数で示すグラフである。図７Ａに示されているように、これらの患者のうち３人（三角形、菱形、及びｘで表されている患者）は、１日目から８４日目までの間、ＩＦＮτ投薬の期間にわたって、ＩＬ−１０レベルの増加を示した。図７Ｂは、１日目から８４日目までの間の投薬期間に、５人の患者全員のＩＦＮ−γ血中レベルが減少したことを示している。投薬が終わると、ＩＦＮ−γレベルは、８５日目から１１３日目までの期間に見られるように、増大している。
【０１０１】
この研究の患者から採血した血液試料は、さらに、ＩＬ−１２レベルについても分析した。ＩＬ−１２は、炎症性サイトカインであり、多発性硬化症の発症の一因である。文献では、（１）ＩＬ−１２の生産増加が、多発性硬化症の発症の鍵となるメカニズムであり（Ｆｉｌｓｏｎら、Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１０６（２）：１２７（２００３））、（２）ＭＳ患者は、典型的に、ＩＬ−１０レベルの減少及びＩＬ−１２レベルの増加を示し、これらのサイトカインのレベルは、疾病段階と相関している（ｖａｎ  Ｂｏｘｅｌ−Ｄｅｚａｉｒｅら、Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｔ  ４５：６９５（１９９９））ことが報告されている。ウイルス感染に関して、ＩＬ−１２レベルが高いと、百日咳菌（Ｂ．ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）の細菌定着を悪化させることも示されている（Ｃａｒｔｅｒら、Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１３５（２）：２３３（２００４））。したがって、この研究に登録されている患者のＩＬ−１２レベルを監視することが望ましかった。
【０１０２】
図８Ａ〜８Ｄは、この研究（実施例３）の６人の患者に対する、ＩＬ−１０（菱形）、ＩＦＮ−γ（正方形）、及びＩＬ−１２（三角形）の血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を示す。実際のＩＬ−１２濃度は、図８Ａ〜８Ｄに示されている値の１０倍である（実際の値は、１つのグラフ内にすべてのデータを示せるように１０で除算した）。
【０１０３】
図８Ａは、４０１番の患者のデータを示している。図からわかるように、ＩＬ−１０レベルは、ＩＦＮτが投与された治療期間に増加し、ＩＦＮ−γは変化なしか、又はわずかに減少し、ＩＬ−１２は最初は変動し、その後、約２９日目以降にダウンレギュレーションされた。０．０８のＩＬ−１０／ＩＬ−１２比について、初期ＩＬ−１０レベルは、５３．１ｐｇ／ｍＬであり、初期基準ＩＬ−１２は、６９６ｐｇ／ｍＬであった。治療期間には、この比は、約０．１２〜０．１８の間で増加し、５７０〜１２００％の増加となった。この患者のＩＬ−１０レベルは、５３．１ｐｇ／ｍＬの基準値から１４０ｐｇ／ｍＬを超えるまで増加し、１６０％（２．６倍）を超える増加となった。
【０１０４】
図８Ｂは、４０２番の患者のデータを示し、図８Ｃは、４０３番の患者のデータを示している。４０２番の患者の初期基準ＩＬ−１０血中レベルは４２．７ｐｇ／ｍＬであった（スクリーン及び１日目の平均血中濃度）。ＩＬ−１０血中レベルは、濃度が６７ｐｇ／ｍＬに到達した４３日目にピークに達し、５６％の増加となった。ＩＦＮ−γ血中濃度は、基準レベルを中心として変動した。治療前のＩＬ−１２血中レベルは、０．０４６の初期ＩＬ−１０／ＩＬ−１２比に対して、９３４ｐｇ／ｍＬであった。４３日目に、ＩＬ−１０／ＩＬ−１２比は、０．０８８となり、基準比から９０％の増加であった。
【０１０５】
図８Ｃでは、患者の初期ＩＬ−１０／ＩＬ−１２比は０．１０であった（ＩＬ−１０＝１１８．５ｐｇ／ｍＬ、ＩＬ−１２＝１２２７  ｐｇ／ｍＬ）。この比は、治療期間中に増加し、比の値は４３日目に０．２２となり、ＩＬ−１０／ＩＬ−１２比は２．２倍であった。患者のＩＬ−１０血中レベルは、４３日目に、基準レベルよりも６３％高い値でピークに達した。
【０１０６】
図８Ｄは、４０４番の患者のデータを示している。０．０４５の初期ＩＬ−１０／ＩＬ−１２比について、この患者の初期ＩＬ−１０レベルは、６９．６ｐｇ／ｍＬであり、初期ＩＬ−１２は、１５５２ｐｇ／ｍＬであった。１．５×１０９Ｕ／日の用量のＩＦＮτによる治療時に、ＩＬ−１０血中レベルは、４３日目に１１３ｐｇ／ｍＬに上昇し、約６０％の増加となった。４３日目のＩＬ−１２は、９００ｐｇ／ｍＬに減少し、４３日目のＩＬ−１０／ＩＬ−１２比は０．１２となった。
【０１０７】
この研究の４０５番の患者の初期ＩＬ−１０血中濃度は、３４．９ｐｇ／ｍＬであり、初期ＩＬ−１２血中濃度は、９７６ｐｇ／ｍＬであった（ＩＬ−１０／ＩＬ−１２比０．０３６）（データは図に示されていない）。１．５×１０９Ｕ／日の用量のＩＦＮτの投与は、治療期間の７１日目にＩＬ−１０／ＩＬ−１２比を０．０５８に高める効果があり、これは６０％の増加であった。ＩＬ−１０血中濃度は、初期治療前レベルから７１日目のレベルまで２０％増加した。
【０１０８】
したがって、自己免疫疾患を患っている対象のＩＬ−１０／ＩＬ−１２血液比を高める方法は、ＩＦＮτの投与が行われない場合の対象の血中ＩＬ−１０レベルに比して、対象の血中ＩＬ−１０レベルの初期の測定可能な増加、及びＩＦＮτの投与が行われない場合のＩＬ−１２レベルに比して、対象のＩＬ−１２血中レベルの減少をもたらす効果のある量のＩＦＮτを対象に投与することを含む。さらに、ＩＦＮτの投与が行われない場合の対象の血中ＩＬ−１０レベルに比して、対象の血中ＩＬ−１０レベルの初期の測定可能な増加、及びＩＦＮτの投与が行われない場合のＩＬ−１２レベルに比して、対象のＩＬ−１２血中レベルの減少をもたらす効果のある量のＩＦＮτを対象に投与することにより、対象の自己免疫疾患の進行を抑制する方法も検討される。特に、約５×１０８Ｕを超えるＩＦＮτで治療された患者のＩＬ−１０血中レベルは２５％を超えて増加し、多くの場合、５０％であった。同じ患者について、ＩＦＮ−γ血中濃度は、本質的に変化ないか、又は減少し、ＩＬ−１２レベルは、一般に、減少した。
【０１０９】
要約すると、本発明は、治療を要する患者にＩＦＮτを経口投与することを考えたものであり、その際に、ＩＦＮτの初期用量は、その特定の患者に対する血中ＩＬ−１０レベルの増加、及び／又はＩＦＮ−γレベルの減少又は無変化、及び／又はＩＬ−１２レベルの減少が得られるように選択される。ＩＦＮτは、口腔ではなく、患者の腸管を標的とする形態で投与されるのが好ましい。用量の選択は、例えば、血中ＩＬ−１０レベルを、例えば、治療前及び治療開始後に監視することにより、行うこと、又は確認することができる。それとは別に、有効用量は、異なる疾病状態の下で与えられた用量に対するモデル患者応答からあらかじめ決定することができる。例えば、与えられ年齢範囲内の、指定された疾患、例えば、ウイルス感染又は自己免疫疾患を有する患者を、異なる初期ＩＦＮτレベルに応答する血中ＩＬ−１０の変化について監視して、その年齢／疾病プロファイルを持つ患者に適した用量をあらかじめ決定しておくことができ、そのような投薬指針を治療医師に提供することができる。本発明の一態様は、腸管へのタンパク質を標的とするのに適した経口送達形態、例えばＩＦＮ−タウの腸溶コーティング形態でＩＦＮτを含み、異なる患者疾患の下で有効用量、つまりＩＬ−１０血中レベルの測定可能な増加をもたらすのに有効な用量の指針となる生成物文献又は挿入物を含むＩＦＮτ治療キットを含む。好ましくは、挿入物は、用量の範囲及びＩＬ−１０応答の予測される初期変化を与える。
【０１１０】
初回投与後、又は血中ＩＬ−１０レベルの測定可能な増加をもたらす用量（有効用量）に到達したときに、有効用量ＩＦＮτの投与を、長い治療期間にわたって、好ましくは毎日又は毎週複数回ベースで継続する。長い間投与される有効用量は、有効用量が初回有効用量と同じ又は異なるかどうかに関係なく、長い治療期間にわたって実際の血中ＩＬ−１０レベルの挙動と独立して、血中ＩＬ−１０の初回の測定可能な増加をもたらす効果のあるものである。したがって、治療期間中、血中ＩＬ−１０レベルは、患者が血中ＩＬ−１０レベルの初回の測定可能な増加をもたらす効果のあるＩＦＮτ用量を受け続けるとしても、高水準で一定のままであり、増大し続けるか、又はさらには減少し続けることができる（例えば、感染ウイルスのレベルの減少に応じて）。この有効用量は、典型的には、約５×１０８単位／日を超え、最大約１０１２単位／日までの範囲であり、より具体的には、用量は、約５×１０８単位／日よりも多く、より好ましくは約５×１０９単位／日以上、さらに好ましくは約１×１０９単位／日以上である。用量は、血中ＩＬ−１０の所望の初期増加、１．５から４倍の通常の未治療レベルの範囲となるように調整することができる。
【０１１１】
一部の患者及び一部の疾患について、ＩＦＮτを他の治療剤と併用して投与することが検討されることが理解されるであろうし、また以下で詳細に説明する。例えば、ＩＦＮτと抗ウイルス薬との組合せは、一部の患者に有益と思われる。同様に、ＩＦＮτと自己免疫疾患の治療に使用される薬剤との組合せは、その疾患を治療するのに有益である。細胞増殖を患っている患者では、ＩＦＮτと化学療法薬との組合せも考えられる。より一般的に、ＩＦＮτと知られている薬剤との組合せが考えられ、例示的な併用療法計画が以下に示されている。ＩＦＮτと第２の薬剤との「組合せ」は、２つの薬剤の順次又は同時投与を意図し、順次投与は、即時又は非即時とすることができる。
【０１１２】
ＩＩＩ．使用法
上述のデータにより例示されているように、ＩＦＮτの投与は、被験者においてＩＬ−１０のアップレギュレーションに応答する疾病又は疾患を治療する方法となる。「ＩＬ−１０療法に応答性のある」疾病又は疾患は、疾病又は疾患の存在、進行、又は症状がＩＬ−１０、又は結果として血中ＩＬ−１０レベルの増大を引き起こす薬剤の投与後、変化するものである。上のデータは、さらに、ＩＦＮτの投与はインターフェロン療法に応答性のある疾病又は疾患を有する被験者を治療する際に有用であることを例示している。「インターフェロン療法に応答性のある」疾患は、疾患の存在、進行、又は症状がインターフェロン、特にＩ型インターフェロン、及びより具体的にはＩＦＮτの投与後に変化するものである。ＩＦＮα又はＩＦＮβによる治療に応答性のある疾患は、さらに、ＩＦＮτによる治療にも応答しうる。本明細書で説明されている方法は、例えば、類似の状況に置かれている患者又は治療される特定の個人患者に関する研究から決定された血中ＩＬ−１０レベルの増加により明らかなように、療法に有効な量だけ、好ましくは胃及び／又は腸へ投与するための経口投与可能な投薬形態のＩＦＮτを与えることを含む。血中ＩＬ−１０レベルを増加させるのに十分なＩＦＮτの用量は、さらに、ＩＦＮ−γレベルが減少するか、又はまったく変化がない状態で、ＩＬ−１２血中レベルの減少を引き起こす効果をもたらしうる。
【０１１３】
治療される疾病又は疾患は、典型的には、ＩＬ−１０療法などのサイトカイン療法に対し応答性のあるものである。様々な疾病又は疾患が、ＩＬ−１０療法に応答する可能性があり、したがって、単独でも、他の治療薬との併用でも、ＩＦＮτによる治療の影響を受けやすい。例えば、本発明の方法は、アルツハイマー病及び自閉症を含む神経疾患、肺線維症及び肝線維症を含む線維症、Ｉ型尿崩症などの、抗リン脂質症候群、関節炎、アレルギー、糖尿病を含む自己免疫疾患、クローン病及び潰瘍性結腸炎を含む炎症性腸疾患、乾癬、多発性硬化症、ブドウ膜炎、慢性気管支炎及び肺気腫を含む慢性閉塞性肺疾患、脳卒中を含む、細胞、組織、又は臓器への血流及び／又は酸素の減少による細胞、組織、又は臓器障害若しくは死を特徴とする疾病又は疾患、アテローム性動脈硬化症、及び臓器移植の拒絶反応を治療するために使用することができて都合がよい。
【０１１４】
Ａ．免疫系障害の治療
本発明の方法は、免疫系過敏性に関係する疾患を治療するのに有利である。免疫系過敏性は４種類ある（Ｃｌａｙｍａｎ、Ｃ．Ｂ．、Ｅｄ．、ＡＭＥＲＩＣＡＮ  ＭＥＤＩＣＡＬ  ＡＳＳＯＣＩＡＴＩＯＮ  ＥＮＣＹＣＬＯＰＥＤＩＡ  ＯＦ  ＭＥＤＩＣＩＮＥ、Ｒａｎｄｏｍ  Ｈｏｕｓｅ、ニューヨーク州ニューヨーク（１９９１））。Ｉ型、つまり即時型／アナフィラキシー性過敏性は、アレルゲン（例えば、花粉）に応答するマスト細胞脱顆粒により発生し、これは、喘息、アレルギー性鼻炎（枯草熱）、じんま疹（じんましん）、アナフィラキシーショック、及びアレルギー性の他の病気を含む。ＩＩ型、つまり自己免疫過敏性は、身体の自細胞上の認知された抗原に立ち向かう抗体によるものである。ＩＩＩ型過敏性は、様々な組織にとどまり、他の免疫応答を活性化する抗原／抗体免疫複合体の形成によるものであり、血清病、アレルギー性肺胞炎、及びときにブースターワクチン接種後に形成される大きな腫れなどの疾患に関与する。ＩＶ型過敏性は、感作Ｔ細胞からのリンフォカインの放出によるものであり、その結果炎症反応が生じる。実施例は、接触性皮膚炎、はしかの頻発、及びある種の薬物に対する「アレルギー」反応を含む。
【０１１５】
特定の状態がある一部の個人に過敏性を引き起こす可能性のあるメカニズムは、一般的にはよく理解されていないが、遺伝因子と外因子の両方を伴うことがある。例えば、細菌、ウイルス、又は薬物は、自己免疫疾患に対し遺伝子的疾病素質をすでに持っている個人の自己免疫反応の引き金となる役割を果たしうる。ある種の過敏性の出現は、他の種類の過敏性と相関する可能性があることが示唆されている。例えば、あるいくつかのありふれたアレルギーが自己免疫疾患の影響を受けやすいという考えが提案されている。
【０１１６】
自己免疫疾患は、特定の器官又は組織に主に制限されている疾患及び全身に影響を及ぼす疾患に大きく分けることができる。器官特的疾患（器官が影響を受ける）は、多発性硬化症（神経突起上のミエリンコーティング）、Ｉ型糖尿病（膵臓）、橋本慢性甲状腺炎（甲状腺）、悪性貧血（胃）、アジソン病（副腎）、重症筋無力症（神経筋接合部のアセチルコリン受容体）、関節リウマチ（継ぎ目）、ブドウ膜炎（目）、乾癬（皮膚）、ギランバレー症候群（神経細胞）、及びグレーブス病（甲状腺）を含む。全身性自己免疫疾患は、全身性紅斑性狼瘡及び皮膚筋炎を含む。他の自己免疫疾患は、白血球が水分分泌腺を攻撃するシェーグレン症候群である。シェーグレン症候群の顕著な特徴症状は、ドライアイと口内乾燥であるが、全身性疾患であり、多くの器官に影響を与える。
【０１１７】
過敏性疾患の他の例は、喘息、湿疹、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、他の湿疹様皮膚炎、脂漏性皮膚炎、鼻炎、扁平苔癬、ペンプルグス（Ｐｅｍｐｌｕｇｕｓ）、水疱性類天疱瘡、表皮水疱症、ユリトカリス（ｕｒｉｔｃａｒｉｓ）、血管性浮腫、脈管炎、紅斑、皮膚好酸球増多症、円形脱毛症、アテローム性動脈硬化症、原発性胆汁性肝硬変症、及びネフローゼ症候群を含む。関連する疾病は、セリアック病、直腸炎、好酸球性胃腸炎、肥満細胞症、炎症性腸疾患、クローン病、及び潰瘍性結腸炎、さらに、食品関連のアレルギーなどの腸の炎症を含む。強直性脊椎炎は、自己免疫炎症疾患のもう１つの例であり、脊椎の関節及び骨の一部又は全部が癒着する。
【０１１８】
本発明の方法を使用する治療に特に適合する、自己免疫疾患は、多発性硬化症、Ｉ型（インスリン依存性）真性糖尿病、紅斑性狼瘡、筋萎縮性側索硬化症、クローン病、リウマチ関節炎、口内炎、喘息、ブドウ膜炎、アレルギー、乾癬、強直性脊椎炎、重症筋無力症、グレーブス病、橋本慢性甲状腺炎、シェーグレン症候群、及び炎症性腸疾患を含む。
【０１１９】
本発明の方法は、上述のような自己免疫疾患を薬物療法により治療し、それにより緩和するために使用される。自己免疫疾患の治療は、ＥＡＥ、多発性硬化症の動物モデルの治療に関して本明細書では例示されている。自己免疫疾患を治療するために使用される場合、ＩＦＮτ投与の初期段階にＩＬ−１０の測定可能な増加をもたらすのに十分な用量のＩＦＮτが投与される。所望の有効用量が達成されると、患者は、ＩＬ−１０血中レベルがさらに変化しても関係なく、有効ＩＦＮτ投薬で長期間にわたり治療される。治療期間は、少なくとも患者が症状を示す期間に延長される。自己免疫疾患に関連する症状が止んだ後、用量を下方調整するか、又は治療を止めることができる。患者は、知られている抗炎症性又は免疫抑制性薬剤などの多の薬剤とのＩＦＮτ治療の治療期間に同時治療されることができる。
【０１２０】
一実施形態では、ＩＦＮτを投与することにより乾癬を患っている患者を治療する方法が提示される。乾癬は、大きく分けて、尋常性乾癬（プラーク乾癬）と膿疱性乾癬（膿疱性乾癬）の２種類がある。異なる種類の乾癬は、重症度、持続期間、身体上の位置、及び病巣の外観に応じて亜群に分けることができる。プラーク乾癬を患っている人にＩＦＮτを投与することについては、実施例４で説明されており、その結果、ＩＬ−１０血清レベルが増加し、肥厚した皮膚のパッチの重症度が低減される。皮膚損傷の重症度は、文献に記載されている様々なスコア検定、例えば、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｓｔａｔｉｃ  Ｇｌｏｂａｌ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔスコア、落屑スコア、プラークスコア、又は紅斑スコアを使用して評価することができる。ＩＦＮτによる治療は、臨床的に適当な評価スコアが減少するまで続けられる。この減少は、好ましくは少なくとも約５０％、より好ましくは約７０％、なおいっそう好ましくは少なくとも約８０％である。例えば、治療前のスコアに関して、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｓｔａｔｉｃ  Ｇｌｏｂａｌ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔスコアの少なくとも約７０％の減少が達成されると、患者は、ＩＦＮτによる治療を中止するか、又は異なる、典型的にはそれよりも低い用量のＩＦＮτによる治療を続ける。例えば、所望の評価スコア減少が達成されるまで、約５×１０８単位／日を超える用量を与えることができ、その後、２〜３×１０８単位／日以下などの少ない５×１０８単位／日の維持量を与える。こうして、本発明は、乾癬を患っている人の乾癬評価スコアを低減する方法を提供する。
【０１２１】
治療方法は、さらに、乾癬の発病から次の発病までの時間を延ばすためにも使用できる。乾癬は、様々な重症度の発病で再発する傾向があり、情動ストレス、皮膚損傷、及び身体的疾患などの多くの要因がきっかけで発病する。ＩＦＮτの経口投与による乾癬発病の治療は、皮膚損傷の数と重症度を改善し、また、その後の発病の再発までの期間を延ばす。特に、発生から発生までの間のＩＦＮτの維持量で治療され、維持期間中にＩＬ−１０血中レベルが上昇した患者の場合である。
【０１２２】
さらに、被験者のＩＬ−１０レベルを上昇させる用量のＩＦＮτを投与することにより、自己免疫疾患の進行を防ぐ方法も考えられる。さらに、好ましくはＩＦＮ−γレベルの変化がないか、又は少ないまま、ＩＬ−１０血清レベルを増加する効果のある用量のＩＦＮτを投与することにより、自己免疫疾患の発現を抑制する方法も考えられる。さらに、ＩＬ−１０／ＩＬ−１２血清比を高める効果のある用量のＩＦＮτを投与することにより、自己免疫疾患を治療する方法も考えられる。上述のように、ＩＦＮτの投薬は、経口形態で与えるのが好ましく、典型的には、約５×１０８単位／日よりも多い。
【０１２３】
Ｂ．ウイルス感染の治療
本発明の方法は、さらに、ウイルス感染に関連する疾患を治療するためにも使用される。ＩＦＮτの抗ウイルス活性は、ＩＦＮαｓに通常関連している毒作用を持たず、広範な治療用途がありＩＦＮτは、細胞に悪影響を及ぼすことなく治療活性を発揮する。ＩＦＮτの細胞毒性が相対的に欠如していることにより、生体内治療薬としてきわめて高い価値を有し、ＩＦＮτは、大半の他の知られている抗ウイルス薬及び他の知られているインターフェロンから際だったものとなっている。
【０１２４】
ウイルス複製を阻害するために、ＩＦＮτを含む製剤を経口投与することができる。ウイルス感染の治療で使用するために、患者の血中ＩＬ−１０の測定可能な増加を十分達成できる用量のタンパク質が投与される。これ以降、血中ＩＬ−１０レベルのさらなる変化、例えば、ウイルス量の減少によるＩＬ−１０血中レベルの低下とは無関係に、有効用量で治療が続けられる。ＩＦＮτの投与は、例えば血液ウイルス価又はウイルス感染に関連する症状の臨床的観察から測定されるように、ウイルス感染のレベルが減少するまで続けられる。
【０１２５】
ウイルス感染は、ＲＮＡウイルス又はＤＮＡウイルスによるものとしてよい。経口投与されたＩＦＮτにより治療することができる特異的ウイルス性疾患の例は、限定はしないが、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、非Ａ、非Ｂ、非Ｃ型肝炎、エプスタインバールウィルス感染、ＨＩＶ感染、ヘルペスウイルス（ＥＢ、ＣＭＬ、単純ヘルペス）、乳頭腫、ポックスウイルス、ピコルナウイルス、アデノウイルス、ライノウィルス、ＨＴＬＶ  Ｉ、ＨＴＬＶ  ＩＩ、及びヒトロタウイルスを含む。患者は、第２の抗ウイルス剤でＩＦＮτ治療期間に同時治療することができ、例示的な薬剤を以下に示す。
【０１２６】
Ｃ．細胞増殖の疾患の治療方法
他の実施形態では、過剰増殖を特徴とする疾患の治療が行われる。ＩＦＮτは、強力な抗細胞増殖活性（Ｐｏｎｔｚｅｒ、Ｃ．Ｈ．ら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、５１：５３０４−５３０７、（１９９１））を示し、したがって、経口投与した場合に無制御の細胞増殖を抑制、予防、又は遅延する作用をする。
【０１２７】
経口投与されたＩＦＮτにより治療することができるヒトの細胞増殖疾患の例は、限定はしないが、肺大細胞癌、結腸腺癌、皮膚癌（基底細胞癌及び悪性黒色腫）、腎臓腺癌、前骨髄球性白血病、Ｔ細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、乳腺腺癌、ステロイド感受性のある腫瘍、ヘアリー細胞白血病、カポジ肉腫、慢性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、表在性膀胱癌、卵巣癌、及び神経膠腫を含む。
【０１２８】
細胞増殖疾患の治療で使用するために、患者の血中ＩＬ−１０の初期の測定可能な増加を十分達成できる用量のＩＦＮτが投与される。これ以降、血中ＩＬ−１０レベルのさらなる変化、例えば、人体の癌細胞の減少によるＩＬ−１０血中レベルの低下とは無関係に、有効用量で治療が続けられる。有効用量のＩＦＮτの投与は、例えば特定の組織内の癌細胞の腫瘍サイズ又は範囲による測定に従って、所望のレベルの回帰が観察されるまで続けられる。
【０１２９】
患者は、第２の抗癌剤、例えば、シスプラチン、ドキソルビシン、又はタクソール、及び以下に示す他の薬剤で、ＩＦＮτ治療期間に同時治療することができる。
【０１３０】
Ｄ．治療計画の組合せ
ＩＦＮτと１つ又は複数の他の薬剤との組合せも考察される。（ｉ）第２の治療薬、（ｉｉ）経口投与後ＩＦＮτを安定化するか、又は活性の喪失からＩＦＮτを保護する効果のある薬剤、及び（ｉｉｉ）第２の治療薬及び安定化剤と併用するＩＦＮτの経口投与を含む、様々な併用治療計画が考察される。これらの様々な治療方法について以下で説明する。
【０１３１】
一実施形態では、ＩＦＮτの経口投与は、第２の治療薬の投与と併用される。この実施形態では、ＩＦＮτは、約５×１０８Ｕを超える１日用量で投与され、第２の薬剤は、通常薬剤の推奨投薬スケジュールに従って担当医により処方されたとおりに投与される。特定の疾病又は疾患に基づいて選択された、第２の薬剤は、ＩＦＮτの経口投与の前に、又はそれと同時に、又はその後に、適当な投与経路により投与することができる。
【０１３２】
自己免疫疾患の治療は、好ましい治療方法であり、例示的な併用計画は、自己免疫応答が指向される抗原の投与と併用するＩＦＮτの経口投与を含む。実施例は、多発性硬化症を治療するミエリン塩基性タンパク質とＩＦＮτ、関節リウマチを治療するコラーゲンとＩＦＮτ、及び重症筋無力症を治療するアセチルコリン受容体ポリペプチドとＩＦＮτの同時投与を含む。
【０１３３】
さらに、ＩＦＮτは、ステロイドなどの知られている免疫抑制剤とともに経口投与し、多発性硬化症などの自己免疫疾患を治療することができる。免疫抑制剤は、ＩＦＮτと相乗的に作用することができ、その結果、ＩＦＮτの等価用量又は免疫抑制剤単独により、さらに有効な治療効果が得られる。より一般的に、自己免疫疾患の治療のため薬物、つまり、治療薬と併用してＩＦＮτを投与することが考えられ、その場合、代表的薬物は、限定はしないが、アザチオプリン、シクロホスファミド、コルチコステロイド（プレドニゾン、プレドニゾロン、その他）、シクロスポリン、ミコフェノール酸モフェチル、抗胸腺細胞グロブリン、ムロモナブ−ＣＤ３モノクローナル抗体、メルカプトプリン、ミトキサントロン、酢酸グラチラマー（Ｃｏｐａｘｏｎｅ）、インターフェロン−ベータ（Ａｖｏｎｅｘ（ＴＭ）、Ｂｅｔａｓｅｒｏｎ（ＴＭ）、Ｒｉｂｉｆ（ＴＭ））、ダクリズマブ、メトトレキサート、シロリムス、タクロリムスなどを含む。
【０１３４】
一実施形態では、ＩＦＮτ及び選択的接着分子阻害剤、特に、インテグリン拮抗薬が、例えば、クローン病又は多発性硬化症などの自己免疫疾患の治療のため併用投与される。インテグリンは、細胞−細胞及び細胞−細胞外マトリックス相互作用を媒介する細胞表面接着分子の一群である。これらは、ヘテロ二量体として関連し機能分子を形成する膜貫通α及びβサブユニットからなる。今のところ、１８個のαサブユニット及び８個のβサブユニットが特定されており、２４個を超える異なるインテグリン受容体を形成する（Ｓａｎｄｂｏｒｎ、Ｗ．Ｊ．ら、Ａｍ．Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．、９８（１１）：２３７２（２００３））。アルファ−４インテグリン（α４インテグリン）は、リンパ球、単球、好酸球、及び好塩基性球、並びに低レベルでは、好中球上に発現する。α４インテグリンは、２つのβサブユニット、β１及びβ７のいずれかと対にすることができる。α４β１インテグリンは、最晩期抗原４（ＶＬＡ−４）と呼ばれ、血液脳関門内皮細胞上に存在する血管細胞接着分子−１（ＶＣＡＭ−１）又はフィブロネクチンを含む結合セグメント−１（ＣＳ−１）のいずれかに結合する。α４β１インテグリンは、細胞接着及び経内皮移動の重要な媒介であるとともに、炎症組織内の免疫細胞活性の調節因子でもある。α４β７は、粘膜固有層関連分子−１（ＬＰＡＭ−１）とも呼ばれ、腸管関連リンパ組織上に発現する粘膜血管アドレシン細胞接着分子−１に結合する。
【０１３５】
ナタリズマブ（Ａｎｔｅｇｒｅｎ（登録商標）、Ｅｌａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｇｅｎ）は、α４β１インテグリン拮抗薬としての活性を有するヒト化モノクローナル抗体である（Ｅｌｉｃｅｓ、Ｍ．Ｊ．、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ、４（１１）：１３５４（２００３）、ＷＯ９５／１９７９０）。抗体は、細胞表面上のα４インテグリンサブユニットに結合し、白血球のα４インテグリン媒介接着及び移行を阻害する。ナタリズマブは、炎症性腸疾患及び多発性硬化症の患者が関わる臨床試験において評価された（Ｓａｎｄｂｏｒｎ、Ｗ．Ｊ．ら、Ａｍ．Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．、９８（１１）：２３７２（２００３）、Ｍｉｌｌｅｒ、Ｄ．Ｈ．ら、Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．、３４８（１）：１５（２００３）、Ｅｌｉｃｅｓ、Ｍ．Ｊ．、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ、４（１１）：１３５４（２００３））。再発寛解型及び二次性進行型多発性硬化症の患者にナタリズマブによる短期治療を施すと、磁気共鳴映像法により評価されているように、新しい活動性病変の数が減少した（上記、Ｓａｎｄｂｏｒｎら参照）。再発性多発性硬化症の患者に関して、６カ月間に炎症性脳障害の減少及び再発の減少が観察された（上記Ｍｉｌｌｅｒら参照）。
【０１３６】
したがって、自己免疫疾患を患っている患者にＩＦＮτを経口投与すること、及びナタリズマブを追加投与することを含む併用治療計画が、実施例５に示されているように、考えられる。投薬計画は、他の要因とともに、患者、状態、及び重症度により異なる。例示的な投薬計画は、約５×１０８Ｕを超える１日用量のＩＦＮτの毎日の経口投与、及び約３ｍｇ／ｋｇの用量のナタリズマブの月１回（２８日毎）の静脈内投与を含む。自己免疫疾患を治療する際のＩＦＮτ及びナタリズマブの作用の異なるメカニズムのおかげで、治療結果がいっそう高められることが予想される。
【０１３７】
他の実施形態では、ＩＦＮτ及び乾癬を治療するのに有用な第２の薬剤が投与される、乾癬の治療計画が提示される。乾癬のＩＦＮτ治療と併用できる治療薬は、局所薬剤又は全身性薬剤を含むことができる。好適な治療薬は、ＴＮＦ−アルファ因子に対抗するモノクローナル抗体、すでに本明細書で説明されているスタチン及び酢酸グラチラマー、コラーゲン、レチノイドアントラリン、カルポトリエン、コールタール、サリチル酸、プロピオン酸クロベタゾール、アレファセプト、ヒドロキシウレア、及びエタナーセプトを含む、免疫抑制剤を含む。
【０１３８】
他の実施形態では、ＩＦＮτ及びスタチンは、例えば、多発性硬化症などの自己免疫疾患の治療のため併用投与される。スタチンは、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル酵素−ＣｏＡ還元酵素阻害剤（Ｈｍｇ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、ＨＲＩ、及びメバロン酸生合成阻害剤）である薬理作用のある物質の一群である。スタチンは、コレステロールを生産する肝臓内の酵素をブロックすることにより血清脂質（コレステロール）レベルを変化させる。動脈壁の炎症は、アテローム性動脈硬化症にも関与し、またスタチンは、炎症軽減にも関与している。
【０１３９】
ロバスタチン（Ｍｅｖａｃｏｒ（登録商標））、シンバスタチン（Ｚｏｃｏｒ（登録商標）、ベロスタチン）、プラバスタチン（Ｐｒａｖａｃｈｏｌ（登録商標））、フルバスタチン（Ｌｅｓｃｏｌ（登録商標））、アトルバスタチン（Ｌｉｐｉｔｏｒ（登録商標））、ロスバスタチン（Ｃｒｅｓｔｏｒ（登録商標））、及びセリバスタチン（Ｂａｙｃｏｌ（登録商標））を含む、処方に使用可能な複数のスタチンがある。これらの薬物は、典型的には、約５〜４０ｍｇの範囲で１日用量を経口で与えられる。他のスタチンは、イタバスタチン、メバスタチンなどを含む。
【０１４０】
関節リウマチ又は多発性硬化症などの炎症により引き起こされる疾患を患っている患者にＩＦＮτを経口投与すること、及びスタチンを追加投与することを含む併用治療計画が考えられる。投薬計画は、他の要因とともに、患者、状態、及び重症度により異なる。例示的な投薬計画は、約５×１０８Ｕを超える１日用量のＩＦＮτの経口投与、及び約５〜５０ｍｇのスタチンの一般に経口で与えられる毎日の投薬を含む。
【０１４１】
他の実施形態では、臓器拒絶反応のリスクを低減し、及び／又は予防するために、ＩＦＮτ及び免疫抑制剤ミコフェノール酸モフェチル（Ｃｅｌｌｏｅｐｔ（登録商標）、Ｈｏｆｆｍａｎ−Ｌａ  Ｒｏｃｈｅ  ＡＧ、ドイツ、グレンザッハ）が併用投与される。この実施形態は、実施例６で例示されている。ミコフェノール酸モフェチルは、イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤であり、特にＴ細胞及びＢ細胞におけるプリン合成を阻害する（Ｇｒｏｅｔｚｎｅｒ  Ｊ．ら、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ７７（４）：５６８（２００４））。この化合物は、動物モデル（腎臓、心臓、肝臓、腸、肢、小腸、膵臓ランゲルハンス島、骨髄など）における同種異系移植の生存を延長することが証明されている。この薬物は、さらに、イヌの腎臓及びラットの心臓同種移植片モデルにおける進行中急性拒絶を逆転し、ラットの大動脈及び心臓同種移植片及び霊長類の心臓異種移植片の増殖動脈疾患を抑制することが示されている。ミコフェノール酸モフェチルは、経口投与後に吸収され、その活性代謝産物であるミコフェノール酸に加水分解される。ミコフェノール酸は、イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼの強力で、選択的で、競合しない、可逆阻害剤であり、ＤＮＡに組み込まれることなくグアノシンヌクレオチド合成のデノボ経路を阻害する。これは、Ｔリンパ球及びＢリンパ球に対する強力な細胞静止作用を持ち、これは、プリンのデノボ合成での増殖に依存する。
【０１４２】
ミコフェノール酸モフェチルは、カプセル、錠剤の形態で、及び経口懸濁又は静脈内注射用のパワーとして経口投与に使用可能である。腎移植患者での使用には、日に２回１グラムの用量（１日用量２ｇ）を経口又は経静脈投与するのが推奨される。心臓移植患者の場合、日に２回１．５グラムの用量を経静脈又は経口投与することが推奨される。
【０１４３】
臓器移植患者にＩＦＮτを経口投与し、ミコフェノール酸モフェチルを投与して、臓器拒絶のリスクを低減し、及び／又は臓器拒絶を予防する併用治療計画が考えられる。ミコフェノール酸モフェチルは、遊離塩基又は塩の形態とすることができることは理解されるであろう。投薬計画は、他の要因とともに、患者、臓器移植の種類により異なる。例示的な投薬計画は、約５×１０８Ｕを超える１日用量のＩＦＮτの毎日の経口投与、及び１日約３ｍｇまでの用量のミコフェノール酸モフェチルの一般に経口又は経静脈で与えられる毎日の投薬を含む。
【０１４４】
Ｃ型肝炎以外の癌又はウイルス性疾患を治療する際に、ＩＦＮτは、例えば、治療効果のある量の１つ又は複数の化学療法薬剤と併用投与することができる。細胞増殖疾患の治療用の例示的な薬剤の種類は、限定はしないが、ナイトロジェンマスタード、エチレンイミン、メチルメラミン、スルホン酸アルキル、ニトロソウレア、トリアゼン、葉酸類似物質、ピリミジン類似物質、プリン類似物質、ビンカアルカロイド、エピポドフィロトキシン、抗生物質、酵素、生物反応修飾物質（例えば、サイトカイン）、白金配位錯体、アントラセンジオン、置換尿素、メチルヒドラジン誘導体、副腎皮質抑制剤、プロゲスチン、エストロゲン薬、抗エストロゲン剤、男性ホルモン、抗男性ホルモン、及びホルモン類似物質を放出するゴナドトロピンを含む。代表的な薬物は、限定はしないが、メクロレタミン、シクロホスファミド、イホスファミド、メルファラン、クロラムブシル、ヘキサメチルメラミン、チオテパ、ブスルファン、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ストレプトゾシン、ダカルバジン、メトトレキサート、フルオロウラシル、フロクスウリジン、シタラビン、メルカプトプリン、チオグアニン、ペントスタチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エトポシド、テニポシド、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、プリカマイシン、マイトマイシン、アスパラギナーゼ、インターフェロンアルファ、シスプラチン、カルボプラチン、ミトキサントロン、ヒドロキシウレア、プロカルバジン、ミトタン、アミノグリエチミド、プレドニゾン、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、ジエチルスチルベストロール、エチニールエストラディオール、タモキシフェン、プロピオン酸テストステロン、フルオキシメステロン、フルタミド、ロイプロリド、ジドブジン（ＡＺＴ）、ロイコボリン、メルファラン、シクロホスファミド、ダカルバジン、ジピリダモールなどを含む。
【０１４５】
ウイルス感染の治療のためＩＦＮτと同時投与するための例示的な薬剤は、限定はしないが、抗ヘルペスウイルス剤、抗レトロウイルス薬、及び抗ウイルス薬を含む。代表的な薬物は、アシクロビル、ファムシクロビル、フォスカネット、ガンシクロビル、イドクスウリジン、ソリブジン、トリフルリジン、バラシクロビル、ビダラビン、ディダノシン、スタブジン、ザルシタビン、ジドブジン、アマンタジン、インターフェロン−アルファ、リバビリン、リマンタジン、ラミブジン、プロテアーゼ阻害剤、非環状ヌクレオシドホスホン酸などを含む。
【０１４６】
アルツハイマー病は、ＩＦＮτを神経伝達増強薬であるアミロイドベータと併用投与すると有益である場合があり、これは、例えばタクリン、ドネペジル、リバスティグミン、メトリホナート、エパスチグミン、ニコチン、ピリドスチグミン、ネオスチグミン、フィゾスチグミン、塩化アンベノミウム、及びイチョウなどの抗コリンエステラーゼ阻害剤、セレギリン及びビタミンＥを含む、脳内カテコールアミンを増加させ、及び／又はニューロンへの酸化的損傷を低減する物質、ロバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、ロスバスタチン、及びセリバスタチンなどのスタチン（スタチンは免疫抑制特性も有する）を含む、抗炎症特性を有する非ステロイド系薬物、エンフェナム酸、エトフェナメート、フルフェナム酸、イソニキシン、メクロフェナム酸及びトルフェナム酸などのアミノアリールカルボン酸誘導体、アセクロフェナク、アセメタシン、プロンフェナク、クロピラク、エトドラク、フェンチアザク、インドメタシン、オキサメタシン、及びトロペシンなどのアリール酢酸誘導体、ブマジゾン、ブチブフェン、フェンブフェン、及びキセンブシンなどのアリール酪酸誘導体、クリダナク、ケトロラク、及びチノリジンなどのアリールカルボン酸誘導体、アルミノプロフェン、カルプロフェン、フェノプロフェン、イブプロフェン、インドプロフェン、ケトプロフェン、ナプロキセン、ピルプロフェン、及びザルトプロフェンなどのアリールプロピオン酸誘導体、ジフェナミゾール及びエピリゾールなどのピラゾール、アパゾン、ベンズピペリロン、フェプラゾン、オキシフェンブタゾン、ピペブゾン、ラミフェナゾン、及びチアゾリノブタゾンなどのピラゾロン、アセトアミノサロール、アスピリン、バルサラジド、ジフルニサル、ゲンチシン酸、サリチル酸イミダゾール、オルサラジン、パルサルミド、サリチル硫酸、サリチル酸ナトリウム、及びスルファサラジンなどのサリチル酸誘導体、及びアンピロキシカム、ドロキシカム、イソキシカム、ロルノキシカム、ピロキシカム、及びテノキシカムなどのチアジンカルボキシアミド、及びキサノメリン、ミラメリン、ＡＦ  １０２８、又はメムリックを含むコリン作動薬を含む。実施例７では、アルツハイマー病のネズミモデルについて説明しており、治療の有効性を判定するためにＩＦＮτ単独で、又は１つ若しくは複数の第２の治療薬と併用して治療されるアルツハイマー病を患っている患者の治療をどのように評価できるかを例示している。
【０１４７】
肝線維症のＩＦＮτ治療と組み合わせることができる治療薬は、線維症の原因に基づいて選択することができる。例えば、肝線維症がＣ型肝炎感染などの肝炎ウイルス感染を原因とする場合、様々な抗ウイルス薬を使用することができ、そのような抗ウイルス薬としては、パリビズマブなどのモノクローナル抗体、アンプレナビル、インディナビル、ロピナビル、ネルフィナビル、リトナビル、及びサクイナビルなどのペプチド模倣薬、アンプリゲン及びホミビルセンなどのポリヌクレオチド、アバカビル、アシクロビル、アデホビル、シドホビル、シタラビン、ディダノシン、ジデオキシアデノシン、エドクスジン、エムトリシタビン、ファムシクロビル、フロクスウリジン、ガンシクロビル、イドクスウリジン、イノシンプラノベクス、ラミブジン、ＭＡＤＵ、ペンシクロビル、ソリブジン、スタブジン、テノフォビル、トリフルリジン、バラシクロビル、バルガンシクロビル、ビダラビン、ザルシタビン、及びジドブジンなどのプリン／ピリミドン、及びオセルタミビル及びザナミビルなどのシアル酸類似物、並びにインターフェロン−アルファ、インターフェロン−β、及びインターフェロン−ガンマがある。実施例８では、肝線維症のモデルについて説明しており、治療の有効性を判定するためにＩＦＮτ単独で、又は１つ若しくは複数の第２の治療薬と併用して治療される肝線維症を患っている人の治療をどのように評価できるかを例示している。
【０１４８】
肝線維症が癌に次いで発生する場合、各種の抗細胞増殖剤を使用することができ、これは、ナイトロジェンマスタード、エチレンイミン、メチルメラミン、スルホン酸アルキル、ニトロソウレア、トリアゼン、葉酸類似物質、ピリミジン類似物質、プリン類似物質、ビンカアルカロイド、エピポドフィロトキシン、抗生物質、酵素、生物反応修飾物質（例えば、サイトカイン）、白金配位錯体、アントラセンジオン、置換尿素、メチルヒドラジン誘導体、副腎皮質抑制剤、プロゲスチン、エストロゲン、抗エストロゲン、男性ホルモン、抗男性ホルモン、及びホルモン類似物質を放出するゴナドトロピンを含む。代表的な薬物は、限定はしないが、メクロレタミン、シクロホスファミド、イホスファミド、メルファラン、クロラムブシル、ヘキサメチルメラミン、チオテパ、ブスルファン、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ストレプトゾシン、ダカルバジン、メトトレキサート、フルオロウラシル、フロクスウリジン、シタラビン、メルカプトプリン、チオグアニン、ペントスタチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エトポシド、テニポシド、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、プリカマイシン、マイトマイシン、アスパラギナーゼ、インターフェロンアルファ、シスプラチン、カルボプラチン、ミトキサントロン、ヒドロキシウレア、プロカルバジン、ミトタン、アミノグリエチミド、プレドニゾン、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、ジエチルスチルベストロール、エチニールエストラディオール、タモキシフェン、プロピオン酸テストステロン、フルオキシメステロン、フルタミド、ロイプロリド、ジドブジン（ＡＺＴ）、ロイコボリン、メルファラン、ダカルバジン、ジピリダモールなどを含む。当業者であれば、肝線維症が他の何らかの疾病又は疾患に次いで発生する場合に他の適切な治療薬を選択できる。
【０１４９】
肺線維症のＩＦＮτ治療と組み合わせることができる治療薬は、アレムツズマブ、アザチオプリン、バシリキシマブ、ブレキナル、シクロホスファミド、コルチコステロイド（プレドニゾン、プレドニゾロン、トリアムシノロン、ベータメタゾン、デキサメタゾンなど）、シクロスポリン、グスペリムス、６−メルカプトプリン、ミゾリビン、ピメクロリムス、ラパマイシン、ミコフェノール酸モフェチル、抗胸腺細胞グロブリン、ムロモナブ−ＣＤ３モノクローナル抗体、メルカプトプリン、ミトキサントロン、酢酸グラチラマー（Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標））、インターフェロン−ガンマ、インターフェロン−ベータ（Ａｖｏｎｅｘ（商標）、Ｂｅｔａｓｅｒｏｎ（商標）、Ｒｉｂｉｆ（商標））、ダクリズマブ、メトトレキサート、シロリムス、タクロリムスなどの免疫抑制剤を含む。酢酸グラチラマーは、チロシン、グルタミン酸塩、アラニン及びリシンからなる合成塩基性ランダム共重合体であり、例えば、抗炎症特性を有する。ＩＦＮτとともに投与した場合、酢酸グラチラマーは、より高いレベルのＩＬ−１０及びＴＧＦ−ベータ（Ｓｏｏｓ、Ｊ．Ｍ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１６９：２２３１（２００２））を含みうる。関節リウマチ、及び結核などの、肺線維症の原因となった基礎疾患が知られている特定の場合において、そのような疾病又は疾患を治療することが知られている治療薬を使用することができる。例えば、抗生物質による治療を、結核で使用することができ、バルデコキシブ、ルミラコキシブ及びエレコキシブを含むＣｏｘ−２阻害剤、さらには、例えば免疫抑制特性を利用するメトトレキサートすでに説明してある免疫抑制剤を含む以前に説明した非ステロイド系抗炎症薬を含む抗炎症薬を、関節リウマチで使用することができる。実施例９では、肺線維症のモデルについて説明しており、治療の有効性を判定するためにＩＦＮτ単独で、又は１つ若しくは複数の第２の治療薬と併用して治療される肺線維症を患っている人の治療をどのように評価できるかを例示している。
【０１５０】
抗リン脂質症候群のＩＦＮτ治療と組み合わせることができる治療薬は、未分画ヘパリン、ロブノックス、アセチルサリチル酸、及びクマディンなどの抗血液凝固剤、ヒドロキシクロロキン、メフロキン、プリマキン、プログアニル、及びドキシサイクリンを含む抗マラリア薬、プレドニゾン、プレドニゾロン、トリアムシノロン、ベータメタゾン、及びデキサメタゾンを含むコルチコステロイド、及び静脈内免疫グロブリンを含む免疫調節薬を含む。実施例１０では、抗リン脂質症候群のモデルについて説明しており、治療の有効性を判定するためにＩＦＮτ単独で、又は１つ若しくは複数の第２の治療薬と併用して治療される抗リン脂質症候群を患っている人の治療をどのように評価できるかを例示している。
【０１５１】
脳卒中のＩＦＮτ治療と組み合わせることができる治療薬は、ベンシクラン、シクロニカート、シンナリジンシクランデレート、ジクロロ酢酸ジイソプロピルアミン、エブルナモニン、ファスジル、フェノキセジルフルナリジン、イブジラスト、イフェンプロジル、ロメリジン、ナフロニル、ニカメタート、ニセルゴリン、ニモジピン、パパベリン、ペンチフィリン、ビンカミン、ビンポセチン、及びビキジルなどの脳血管拡張薬、アモトリフェン、ベンフロジルヘミスクシナート、ベンジオダロン、クロラシジン、クロモナル、クロベンフロールクロニトラート、クロリクロメン、ジラゼプ、エタフェノン、フェンジリン、ヘキソベンジン、六硝酸マンニトール、ニトログリセリン、ペントリニトロール、ペルヘキシリンプロパチルニトラート、トラピジル、トリメタジジン、及びビスナジンなどの冠拡張薬、及び組織プラスミノゲン活性化因子を含む。他の適当な薬剤は、ミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質（ＭＯＧ）又はそのペプチド、スタチン、及び酢酸グラチラマーなどの自己抗原を含む。ＭＯＧは、ヒトＭＯＧなどの哺乳類ＭＯＧであるのが好ましい。ヒトＭＯＧのヌクレオチド及びアミノ酸配列（配列番号５）は、当業で知られており、例えば、アクセッション番号ＢＣ０３５９３８としてＮＩＨ  Ｇｅｎｂａｎｋデータベースで見つけることができる。好適なＭＯＧペプチドは、長さが約１０から約１５０個のアミノ酸、典型的には約３０から約１００個のアミノ酸を含み、さらに、長さが約１０から５０個のアミノ酸でもよく、脳卒中患者の治療に有効である。一実施例として、ＭＯＧのアミノ酸３５からアミノ酸５５までのペプチドを使用することができる。他の実施例として、アミノ酸３７からアミノ酸４６までのＭＯＧのペプチドを使用することができる。脳卒中の治療で機能する、例えば、ヒツジ、ウシ、及びブタを含む、他の哺乳類種からのＭＯＧ及びそのペプチドは、本明細書の方法で使用することができる。したがって、適用可能なＭＯＧは、ヒトＭＯＧのアミノ酸配列と少なくとも約７０％の同一性、さらに少なくとも約８０％の同一性、さらに少なくとも約９０％の同一性を有するアミノ酸配列を有するものを含む。同一性の割合は、米国立衛生研究所から入手可能な、例えば、バージョン２．２．９を含む、上級ＢＬＡＳＴコンピュータプログラムを使用して配列情報を比較することにより、決定することができるか、又は他の類似のコンピュータプログラムを使用して決定することができる。ＢＬＡＳＴプログラムは、ＫａｒｌｉｎとＡｌｔｓｃｈｕｌの整列法に基づく。Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８７：２２６４−２２６８（１９９０）を参照、またＡｌｔｓｃｈｕｌら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ  ２１５：４０３−４１０（１９９０）、Ｋａｒｌｉｎ  Ａｎｄ  Ａｌｔｓｃｈｕｌ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：５８７３−５８７７（１９９３）、Ａｌｔｓｃｈｕｌら、Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：３３８９−３４０２（１９９７）で説明されているとおりである。したがって、上記の治療薬の１つ又は複数とのＩＦＮτの併用投与は、本発明の方法の範囲に含まれる。実施例１１では、脳卒中のモデルについて説明���ており、治療の有効性を判定するために、脳卒中を患い、ＩＦＮτ単独で、又は１つ若しくは複数の第２の治療薬と併用して治療される人の治療をどのように評価できるかを例示している。
【０１５２】
視神経炎のＩＦＮτ治療と組み合わせることができる治療薬は、スタチン、並びにスタチン、コルチコステロイド、及び酢酸グラチラマーを含む、本明細書ですでに説明されている免疫抑制剤を含む。実施例１２では、視神経炎のモデルについて説明しており、治療の有効性を判定するためにＩＦＮτ単独で、又は１つ若しくは複数の第２の治療薬と併用して治療される視神経炎を患っている人の治療をどのように評価できるかを例示している。
【０１５３】
慢性閉塞性肺疾患のＩＦＮτ治療と組み合わせることができる治療薬は、気管支拡張剤及びコルチコステロイドを含む。好適な気管支拡張薬は、例えば、アルブテロール、バンブテロール、ビトルテロール、カルブテロール、クレンブテロール、ジオキセテドリン、エフェドリン、フェノテロール、イソエタリン、マブテロール、ピルブテロール、プロトキロール、リミテロール、サルメテロール、ソテレノール、及びツロブテロールなどのエフェドリン誘導体、臭化フルトロピウム、臭化イプラトロピウム、臭化オキシトロピウム、及び臭化チトロピウムなどの第４アンモニウム化合物、及びアセフィリン、アンブフィリン、アミノフィリン、バミフィリン、ドキソフィリイン、エトフィリン、グアチリン、テオブロミン、及びテオフィリンなどのキサンチン誘導体を含む。他の好適な薬剤は、すでに説明されているスタチン、酢酸グラチラマー、及びコルチコステロイドを含む。実施例１３では、慢性閉塞性肺疾患のモデルについて説明しており、治療の有効性を判定するためにＩＦＮτ単独で、又は１つ若しくは複数の第２の治療薬と併用して治療される慢性閉塞性肺疾患を患っている人の治療をどのように評価できるかを例示している。
【０１５４】
自閉症のＩＦＮτ治療と組み合わせることができる治療薬は、フェモキセチン、フルオキセチン、フルボキサミン、インダルピン、塩酸インデロキサジン、ミルナシプラン、パロキセチン、セルトラリン、及びジメルジンを含むセロトニン取り込み阻害薬、アミスルプリド、ネモナプリド、レモキシプリド、スルピリド、及びスルトプリドなどの、ベンズアミドを含む、抗精神病薬、イロペリドン及びリスペリドンなどのベンズイソオキサゾール、ベンペリドール、ブロムペリドール、ドロペリドール、フルアニソン、ハロペリドール、メルペロン、モペロン、ピパンペロン、スピペロン、チミペロン、及びトリフルペリドールなどのブチロフェノン、アセトフェナジン、ブタペラジン、カルフェナジン、クロルプロマジン、クロスピラジン、シアメマジン、ジキシラジン、フルフェナジン、メパジン、及びメソリダジンなどのフェノチアジン、及びクロルプロチキセン、クロペンチキソール、フルペンチキソール、及びチオチキセンなどのチオキサンテン、並びに本明細書ですでに説明されているスタチン、酢酸グラチラマー、及びコルチコステロイドを含む抗炎症特性を有する薬物を含む。実施例１４では、自閉症のモデルについて説明しており、治療の有効性を判定するためにＩＦＮτ単独で、又は１つ若しくは複数の第２の治療薬と併用して治療される自閉症を患っている人の治療をどのように評価できるかを例示している。
【０１５５】
糖尿病のＩＦＮτ治療と組み合わせることができる治療薬は、インスリン、ベータ細胞関連自己抗原、及び例えば、熱ショックタンパク質１０、２２、２７、６０、６５、７０、及び９０を含む熱ショックタンパク質を含む。熱ショックタンパク質は、ヒト熱ショックタンパク質などの哺乳類の熱ショックタンパク質であるのが好ましく、その多くは、市販品を購入するか、又は他の何らかの形で、当業者に知られている方法により取得することができる。
【０１５６】
アテローム性動脈硬化症のＩＦＮτ治療と組み合わせることができる治療薬は、本明細書ですでに説明されている免疫抑制剤、例えば、熱ショックタンパク質１０、２２、２７、６０、６５、７０、及び９０を含む熱ショックタンパク質を含む。熱ショックタンパク質は、ヒト熱ショックタンパク質などの哺乳類の熱ショックタンパク質であるのが好ましい。他の好適な治療薬は、例えば、アスピリン、クロピドグレル、ジピリダモール、チクロピジン、及びスルフィンピラゾンなどの抗血小板薬、塩酸コレスチポール、及びコレスチラミン樹脂を含む胆汁酸抑制剤、ゲンフィブロジル、フェノフィブラート、及びクロフィブラートを含むフィブリン酸塩（フィブリン酸誘導体）、ロバスタチン（Ｍｅｖａｃｏｒ（登録商標））、シンバスタチン（Ｚｏｃｏｒ（登録商標）、ベロスタチン）、プラバスタチン（Ｐｒａｖａｃｈｏｌ（登録商標））、フルバスタチン（Ｌｅｓｃｏｌ（登録商標））、アトルバスタチン（Ｌｉｐｉｔｏｒ（登録商標））、ロスバスタチン（Ｃｒｅｓｔｏｒ（登録商標））、及びセリバスタチン（Ｂａｙｃｏｌ（登録商標））などの３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル補酵素Ａ（ＨＭＧ−ＣｏＡ）還元酵素阻害剤、クロルメロドリン、メラルリド、メルカプトメリンナトリウム、及びメルサリルを含む、有機水銀などの、利尿薬を含む、高血圧を伴う場合の抗高血圧薬、パマブロム、プロテオブロミン、及びテオブロミンを含む、プリン、カンレノン、オレアンドリン、及びスピロノラクトンなどのステロイド、アセタゾラミド、アンブシド、アゾセミド、ブメタニド、ブタゾラミド、クロフェナミド、クロパミド、ジスルファミド、フロセミド、及びトルセミドなどのスルホンアミド誘導体、及びアルチジド、ベンズチアジド、クロロチアジド、シクロペンチアジド、エチアジド、ヒドロクロロチアジド、インダパミド、メトラゾン、及びテクロチアジドなどのチアジド、アラセプリル、ベナゼプリル、カプトプリル、セロナプリル、シラザプリル、デラプリル、エナラプリル、リシノプリル、モベルチプリル、キナプリル、ラミプリル、及びテモカプリルなどのアンジオテンシン転換酵素阻害剤、アドラフィニル、アドレナロン、アミドフリン、アプラクロニジン、ブルドララジン、クロニジン、シクロペンタミン、エフェドリン、フェノキサゾリン、マタラミノール、メトキサミン、ミドドリン、モダフィニル、オクトドリン、オキシメタゾリン、フォレドリン、リルメニジン、及びチラミンなどのアルファアドレナリン作動薬、アセブトロール、アルプレノロール、アモスラロール、アロチノロール、アテノロール、ベフノロール、ベタキソロール、ベバントロール、ブニトロロール、塩酸ブチドリン、カラゾロール、カルテオロール、ジレベアロール、インデノロール、メピンドロール、モプロロール、ナドキソロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロプラノロール、スルフィナロール、テルタトロール、及びキシベノロールなどのベータアドレナリン遮断薬、ベプリジル、クレンチアゼム、ジルチアゼム、フェンジリン、ガロパミル、ミベフラジル、プレニラミン、セモチアジル、テロジリン、及びベラパミルなどのアリールアルキルアミンを含む、カルシウムチャンネル遮断薬、ア���ロジピン、アラニジピン、バルニジピン、ベニジピン、マニジピン、ニルバジピン、及びニトレンジピンなどのジヒドロピリジン誘導体、シンナリジン、ドタリジン、フルナリジン、リドフラジン、及びロメリジンなどのピペラジン誘導体、本明細書ですでに説明されているスタチン、酢酸グラチラマー、及びコルチコステロイドを含む、抗炎症特性を有する、本明細書ですでに説明されている免疫抑制剤及び薬物を含む。実施例１５では、アテローム性動脈硬化症のモデルについて説明しており、治療の有効性を判定するためにＩＦＮτ単独で、又は１つ若しくは複数の第２の治療薬と併用して治療されるアテローム性動脈硬化症を患っている人の治療をどのように評価できるかを例示している。
【０１５７】
アレルギーのＩＦＮτ治療と組み合わせることができる治療薬は、花粉、オブアルブミン、ミルク、小麦、ウシ、ブタ、又はヒツジ由来の肉を含む動物肉などの食品成分、ニンジン、及びブロッコリー、キャベツ、カリフラワー、芽キャベツ、及びカブなどのアブラナ科の野菜を含む野菜、ピーナッツ、ピスタチオ、カシューを含む木の実、及びダニ、Ｄｅｒ１（例えば、サッカロマイセスセレヴィシエからのもの、クローニングの配列は、Ｋｎｏｐ、Ｍ．ら、Ｅｍｂｏ  Ｊ．１５（４）７５３−７６３（１９９６）で説明されている）を含む小胞体分解剤、酢酸グラチラマー、及び本明細書ですでに説明されているスタチンとコルチコステロイドを含む、アレルギー誘発剤を含む。さらに、他の種からの当業で知られているＤｅｒ１タンパク質は、当業で知られているＤｅｒ１に似たタンパク質と同様に、使用することができる。
【０１５８】
炎症性大腸炎のＩＦＮτ治療と組み合わせることができる治療薬は、インフリキシマブ（腫瘍壊死−α因子、ＴＮＦ−アルファ因子に対抗するモノクローナル抗体）、本明細書ですでに説明されているスタチン、酢酸グラチラマー、アセチルタンニン酸、アルコファノン、次サリチル酸ビスマス、カテキン、ジフェノキシン、ジフェノキシレート、リダミジン、ロペラミド、ラセカドトリル、エンレイソウ、ウザリン、及びザルダリドなどの下痢止め薬、並びにベラドンナ、ヒヨスチアミン、臭化クリジニウム、グリコピロレート、塩酸ジシクロミン、メベベリン、臭化オチロニウム、及びシメトロピウムを含む鎮痙薬を含む。
【０１５９】
関節炎のＩＦＮτ治療と組み合わせることができる治療薬は、連鎖球菌細胞壁などの抗原、熱ショックタンパク質６０などの本明細書ですでに説明されているものを含む熱ショックタンパク質、ＩＩ型コラーゲンを含むコラーゲン、本明細書ですでに説明されている非ステロイド性抗炎症薬、ＴＮＦ−アルファ因子、本明細書ですでに説明されているスタチン、酢酸グラチラマー、メトトレキサート、及び本明細書ですでに説明されているＣＯＸ−２特異的阻害剤に対するモノクローナル抗体を含む。実施例１６では、関節炎のモデルについて説明しており、治療の有効性を判定するためにＩＦＮτ単独で、又は１つ若しくは複数の第２の治療薬と併用して治療される関節炎を患っている人の治療をどのように評価できるかを例示している。
【０１６０】
多発性硬化症のＩＦＮτ治療と組み合わせることができる治療薬は、ミエリン塩基性タンパク質及びそのペプチド、すでに本明細書で説明されているミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質及びそのペプチド、本明細書ですでに説明されているＴＮＦ−アルファ因子に対するモノクローナル抗体、酢酸グラチラマー、及びすでに説明されているコルチコステロイドとスタチンを含む。ミエリン塩基性タンパク質は、ヒトミエリン塩基性タンパク質などの哺乳類ミエリン塩基性タンパク質であるのが好ましい。ヒトミエリン塩基性タンパク質のヌクレオチド及びアミノ酸配列（配列番号６）は、例えば、アクセッション番号ＮＭ ００２３８５としてＮＩＨ  Ｇｅｎｂａｎｋデータベースで見つけることができる。ミエリン塩基性タンパク質の好適なペプチドは、約５から３０個までの長さのアミノ酸に由来するものを含む。好適なペプチドは、アミノ酸１からアミノ酸１１までの断片を含み、これは、アセチル基などの、５’末端での修飾を含むことができる。多発性硬化症の治療で機能する、例えば、ヒツジ、ウシ、及びブタを含む、他の哺乳類種からのミエリン塩基性タンパク質及びそのペプチドは、本明細書の方法で使用することができる。したがって、適用可能なミエリン塩基性タンパク質は、ヒトミエリン塩基性タンパク質のアミノ酸配列と少なくとも約７０％の同一性、さらに少なくとも約８０％の同一性、さらに少なくとも約９０％の同一性を有するアミノ酸配列を有するものを含む。
【０１６１】
ブドウ膜炎のＩＦＮτ治療と組み合わせることができる治療薬は、コルチコステロイドを含む、また全身に、又は目に投与する液滴の形態で投与することができる、スタチン、酢酸グラチラマー、及び本明細書ですでに説明されている他の免疫抑制剤、レチナールＳ抗原（ヒトレチナールＳ抗原は、例えば、Ｂｅｎｅｓｋｉ、Ｄ．Ａ．ら、Ｉｎｖｅｓ．Ｏｐｔｈ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．２５：６８６−６９０（１９８４）で説明されているように入手できる）、及び間質レチナール結合タンパク質（ＩＲＢＰ、ヒト配列はＬｉｏｕ、Ｇ．Ｉ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６４（１４）：８２００−８２０６（１９８９）に記載されている）を含むブドウ膜炎誘発剤、並びに当業で知られており、例えば、ＰＣＴ国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０２／２４３１１及びＰＣＴ／ＧＢ９８／０３６８６、Ｂｒａｕｄ、Ｖ．Ｍ．ら、Ｎａｔｕｒｅ  ３９１：７９５−７９９（１９９８）で説明されているＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−Ｅ、及びＨＬＡ−Ｇに由来するものを含むヒト白血球抗原（ＨＬＡ）−結合ペプチドを含む。
【０１６２】
臓器移植拒絶反応のＩＦＮτ治療と組み合わせることができる治療薬は、例えばスタチン、酢酸グラチラマー、アザチオプリン、コルチコステロイド、又はシクロホスファミドなどの、本明細書ですでに説明されている免疫抑制剤を含む。実施例１７では、臓器移植拒絶反応モデルについて説明しており、治療の有効性を判定するために、臓器移植を受け、ＩＦＮτ単独で、又は１つ若しくは複数の第２の治療薬と併用して治療される人の治療をどのように評価できるかを例示している。
【０１６３】
これらの併用治療計画では、第２の治療薬は、ＩＦＮτを経口投与する前に、又は同時に、又はその後に投与することができることは理解されるであろう。ＩＦＮτ及び第２の薬剤の投与のタイミングだけでなく、第２の薬剤の投与の好適な経路の選択は、当業者であれば容易に行える。第２の薬剤は、担当の薬品供給者が決定した、好適な経路により投与することができる。
【０１６４】
他の併用治療計画は、経口投与後、並びに特に、胃及び／又は腸管を通して輸送するときに、ＩＦＮτを保護し、及び／又は安定化させる効果のある薬剤と組み合わせたＩＦＮτの投与に関係する。安定剤は、胃及び／又は腸内を通してＩＦＮτの治療活性が失われる、つまり胃及び／又は腸内で変性するのを防ぐために使用される。使用する安定剤の例は、緩衝液、胃酸の分泌の拮抗薬、グリシン及びリシンなどのアミノ酸、デキストロース、マンノース、ガラクトース、フルクトース、乳糖、ショ糖、麦芽糖、ソルビトール、マンニトールなどの炭水化物類、タンパク質分解酵素阻害剤などを含む。
【０１６５】
好ましい一実施形態では、安定剤は、有機酸カルボン酸塩、例えば、クエン酸ナトリウム又はクエン酸カリウムなどのクエン酸の塩、又は無機塩などの制酸薬である。例示的な無機塩は、限定はしないが、水酸化アルミニウム（ＡＩ（ＯＨ）３）又はリン酸塩、水酸化マグネシウム（Ｍｇ（ＯＨ）２）、炭酸カルシウム（ＣａＣＯ３）、重炭酸ナトリウム、酸化マグネシウム、三ケイ酸マグネシウム、炭酸マグネシウム、水酸化アルミニウムゲル、及びこれらの組合せを含む。市販の制酸薬Ｍｙｌａｎｔａ（商標）は、水酸化アルミニウム及び水酸化マグネシウムを含み、経口投与可能な制酸薬として好適である。制酸薬は、典型的には、水に不溶であり、経口懸濁液として与えられる。
【０１６６】
制酸薬がＩＦＮτと組み合わせて与えられる治療計画では、ＩＦＮτの経口投与の前に、又はそれと同時に制酸薬を経口投与することを伴うことが好ましい。例えば、患者は、ＩＦＮτの５〜３０分前に制酸薬を摂取する。制酸薬は、ＩＦＮτが胃の中、より好ましくは腸管内で変性及び／又は分解するのを防ぎ、それにより、治療効果を達成するために必要なＩＦＮτの用量を削減することができる。上述のように、患者の血中ＩＬ−１０レベルの測定可能な増加をもたらすために５×１０８単位を超える程度のＩＦＮτの用量が必要である。ＩＬ−１０レベルの同じ増加は、ＩＦＮτが制酸薬の投与と同時に、又は投与後に投与される場合にＩＦＮτの用量を減らしても達成できる。
【０１６７】
プロトンポンプ阻害薬として知られている化合物のクラスも、経口投与後にＩＦＮτを保護及び／又は安定化する安定剤として投与することができる。プロトンポンプ阻害薬は、胃及び腸内の酸の放出を防ぎ、多くの場合、潰瘍、酸の逆流、又は胃酸過多を治療するために使用される。一般に、プロトンポンプ阻害薬は、置換ベンゾオキサゾールであり、ラベプラゾール（Ａｃｉｐｈｅｘ（登録商標））、ランソプラゾール（Ｐｒｅｖａｃｉｄ（登録商標））、オメプラゾール（Ｐｒｉｌｏｓｅｃ（登録商標））、及びパントプラゾール（Ｐｒｏｔｏｎｉｘ（登録商標））を含む。プロトンポンプ阻害薬は、ＩＦＮτの前又は同時に投与され、ＩＦＮτが胃の中、より好ましくは腸管内で変性及び／又は分解するのを防ぎ、それにより、治療効果を達成するために必要なＩＦＮτの用量を削減する効果を有する。上述のように、患者の血中ＩＬ−１０レベルの測定可能な増加をもたらすために、プロトンポンプ阻害薬又は制酸薬がない場合に、５×１０８単位を超える程度のＩＦＮτの用量が必要である。ＩＬ−１０レベルの同じ増加は、ＩＦＮτがプロトンポンプ阻害薬の投与と同時に、又は投与後に投与される場合にＩＦＮτの用量を減らしても達成できる。
【０１６８】
また、制酸薬及び上述の薬剤などの第２の治療薬と組み合わせてＩＦＮτを経口投与することにより患者を治療することも考えられる。この実施形態では、所望の臨床的終点に到達するために必要なＩＦＮτの用量は、制酸薬がない場合に必要な用量よりも少ない。第２の治療薬の用量は、必要ならば、制酸薬の存在及び／又はＩＦＮτとの相乗効果に基づいて調整することができる。
【０１６９】
同じ又は別のパッケージングの収めた、治療上効果のある用量のＩＦＮτ及び疾患を治療するか、又は疾患の症状を少なくとも部分的に緩和する活性を有する第２の治療薬、及びその使用説明書からなる、ウイルス感染、自己免疫疾患、又は細胞増殖を特徴とする疾患を持つ患者を治療するためのキットも考えられる。
【０１７０】
一実施形態では、キットは、（ｉ）毎日の全用量が５×１０８単位を超える１つ又は複数の単位用量のＩＦＮτ、（ｉｉ）多発性硬化症のための１つ又は複数の単位用量の第２の治療薬、及び（ｉｉｉ）使用説明書からなる。第２の治療薬は、好ましい実施形態では、ナタリズマブ、スタチン、又はミコフェノール酸モフェチルである。
【０１７１】
他の実施形態では、キットは、（ｉ）単位用量のＩＦＮτであって、単位用量は５×１０８単位を超える推奨１日用量の１／３から１／２であり、前記単位用量は経口投与に好適な形態である単位用量のＩＦＮτ、（ｉｉ）多発性硬化症のための単位用量の第２の治療薬であって、第２の治療薬について医師が処方する１日用量の１／３から１／２である単位用量の第２の治療薬、及び（ｉｉｉ）使用説明書からなる。医療担当者は、キットが１日用量の１／２である単位用量を含む場合に、毎日２つのキットの内容物を投与し、キットが１日用量の１／３である単位用量を含む場合に、毎日３つのキットの内容物を投与するように患者に処方する。第２の治療薬は、好ましい実施形態では、ナタリズマブ、スタチン、又はミコフェノール酸モフェチルである。
【０１７２】
他の実施形態では、キットは、（ｉ）抗酸剤、（ｉｉ）経口投与に好適な形態のＩＦＮτ，（ｉｉｉ）第２の治療薬、及び（ｉｖ）使用説明書からなる。抗酸剤は、上述の制酸剤のうちの１つとすることができ、第２の治療薬は、好ましい実施形態では、ナタリズマブ、スタチン、又はミコフェノール酸モフェチルである。
【０１７３】
特定の例示的なキットは、多発性硬化症治療を必要とする患者を治療するための治療用量のスタチン、治療用量よりも少ないＩＦＮτ、及び制酸薬、並びに使用説明書を含む。他の実施形態では、キットは、多発性硬化症治療を必要とする患者を治療するための治療用量のスタチン及び治療用量のＩＦＮτ並びに使用説明書を含む。他の実施形態では、キットは、多発性硬化症治療を必要とする患者を治療するための治療用量のナタリズマブ及びＩＦＮτ、並びに使用説明書を含む。他の実施形態では、キットは、多発性硬化症治療を必要とする患者を治療するための治療用量のナタリズマブ、治療用量よりも少ないＩＦＮτ、及び制酸薬、並びに使用説明書を含み、患者は、ＩＦＮτの経口投与の少なくとも５〜３０分前に制酸薬を摂取するよう指示される。当業者であれば、これらのキットは、考案された様々な組合せ及び投薬計画の単なる例であることを理解できるであろう。
【０１７４】
Ｅ．製剤及び用量
ＩＦＮτを含む経口製剤は、薬剤組成物を調合するための知られている方法に従って配合することができる。一般に、ＩＦＮτ治療組成物は、有効な量のＩＦＮτが好適な添加剤、担体、及び／又は賦形剤と組み合わされ、組成物の効果的な経口投与を行いやすくなるように配合される。例えば、ＩＦＮτを含む錠剤及びカプセルは、ＩＦＮτ（例えば、凍結乾燥ＩＦＮτタンパク質）を薬剤として許容される担体（例えば、乳糖、コーンスターチ、微結晶性セルロース、ショ糖）、結合剤（例えば、アルファデンプン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン）、崩壊剤（例えば、カルボキシメチルセルロースカルシウム、デンプン、低置換ヒドロキシプロピルセルロース）、界面活性剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ  ８０、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン共重合体）、抗酸化剤（例えば、Ｌ−シスチン、亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸ナトリウム）、潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク）などの添加剤と組み合わせることにより製造することができる。
【０１７５】
さらに、本発明のＩＦＮτポリペプチドは、固体、粉体、又は他の担体、例えば、乳糖、ショ糖、ソルビトール、マンニトール、じゃがいもデンプン、コーンスターチ、ミロペクチン、セルロース誘導体又はゼラチンなどのデンプンと混ぜることができ、また、ステアリン酸マグネシウム若しくはステアリン酸カルシウムなどの潤滑剤、又は錠剤形成に合わせて圧縮されたポリエチレングリコールワックスを含むこともできる。複数の層の担体又は希釈剤を使用することにより、徐放で動作する錠剤を製造することができる。
【０１７６】
経口投与用の液体製剤は、エリキシル剤、シロップ、又は懸濁液、例えば、ＩＦＮτ、砂糖、並びにエタノール、水、グリセロール、プロピレン、グリコール、及び場合によっては従来の性質の添加剤混合物の約０．１重量％から約３０重量％を含有する溶液の形態で製造することができる。
【０１７７】
他の好適な製剤は、腸管粘膜により吸収されるまで胃及び腸内に存続するようにタンパク質を保護する保護投薬形態である。タンパク質用の保護投薬形態は、当業で知られており、腸溶コーティング及び／又は粘膜接着ポリマーコーティングを含む。例示的な粘膜接着ポリマー製剤は、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）、カルボキシビニルポリマー、カルボマーなどを含む。活性形態のＩＦＮτを腸管に、特に小腸に送達するために摂取を介して胃に投与するように設計された投薬形態が考えられる。それとは別に、ＩＦＮτは、プロテアーゼ阻害剤と同時投与するか、又はポリマー材料で安定化させるか、又は脂質若しくはポリマー粒子でカプセル化して胃及び／又は腸環境から何らかの保護を行うようにすることができる。
【０１７８】
経口活性ＩＦＮτ薬剤組成物は、治療を必要とする個人に治療上有効な量だけ投与される。用量は、かなり異なる場合があり、疾患の重症度、患者の年齢及び体重、患者が摂取している可能性のある他の医薬品などの因子に依存する。この量又は用量は、典型的に、担当医師又は他の熟練者により決定される。用量は、典型的には、約６×１０８から５×１０１２単位／日、より好ましくは０．５×１０９から１×１０１２単位／日、さらに好ましくは約１×１０９から１×１０１２単位／日の範囲内である。特定の一実施形態では、約５×１０８単位／日を超える用量、より好ましくは０．５×１０９単位／日以上の用量、さらに好ましくは１×１０９単位／日以上の用量のＩＦＮτが経口投与される。
【０１７９】
血漿中で常時高いレベルのＩＦＮτを必要とする疾患では、約２から４時間の頻度の投与だと都合がよく、多発性硬化症などの他の疾患では、低頻度の間隔、例えば１日１回又は４８時間毎に１回、治療上有効な用量を投与することにより効果的に治療することができる。個々の用量の投与速度は、典型的には、治療される疾病の重症度を緩和しつつ最低限の総用量を投与することができるように担当医師により調整される。上述のように、この方法では、治療を必要とする患者に初回用量でＩＦＮτを経口投与し、生物学的マーカーを監視して初回用量レベルへの個々の患者の応答を測定する。監視は、例えば、ＥＬＩＳＡ又はラジオイムノアッセイキットを使用して、採血、及び血中のＩＬ−１０などのマーカーの分析を介して容易に行うことができる。したがって、他の態様では、ＩＦＮτ療法又はＩＬ−１０療法に応答する疾患を患っている人の治療に使用するキットが考えられる。このキットは、ＩＦＮτの経口投与用に設計された１つ又は複数の投薬形態単位を含む容器からなる第１の部分、及び血中ＩＬ−１０レベルを分析するために必要な構成要素などのＩＦＮτのバイオマーカーを監視するために必要な構成要素からなる第２の部分を含む。
【０１８０】
ＩＦＮτの投与は、一般に、臨床的終点に到達するまで継続する。その臨床的終点は、治療される疾患、疾患の重症度、及び患者の個々の特徴（年齢、体重、健康状態）により異なる。臨床的終点は、担当医師又は看護師により容易に決定され、症状の一時的又は永続的中止から疾患の解消まで様々である。
【０１８１】
例えば、乾癬などの自己免疫疾患を患っている患者では、ＩＦＮτによる治療は、乾癬が解消するか、評価スコアの望ましい低下が達成されるまで続けることができる。
【０１８２】
多発性硬化症の患者であれば、好適な臨床的終点は、症状の重症度の減少であろう。
【０１８３】
ウイルス感染を患っている人では、好適な臨床的終点は、ウイルス価の低下又はウイルス感染に関連する症状（熱、発疹、倦怠感など）の減衰である。
【０１８４】
細胞増殖を特徴とする疾患を患っている患者では、ＩＦＮτの投与を中止する臨床的終点は、腫瘍サイズの退縮により測定されるような細胞増殖率の退縮、又は腫瘍成長速度の減少により測定されるような細胞増殖の速度低下とすることが可能である。
【０１８５】
例えば、アルツハイマー病を患っている患者では、そのような患者の脳内の内因性アミロイド斑及び／又は神経原線維のもつれの減少が観察されうる。物忘れ、言語機能低下、錯乱、情動不安、及び躁鬱の減少、並びに標準的方法により測定される視覚情報知的操作能力の向上も観察されうる。
【０１８６】
肺線維症を患っている個人では、好適な臨床的終点は、呼吸能力の改善、肺の線維組織の量の減少からわかる疾病の進行速度の低下、及び／又は肺炎症の減少を含む。治療前と比較した治療後の呼吸能力を含む、肺機能の低下を改善するＩＦＮτの効果は、当業者に知られている方法により測定することができ、これは、例えば、Ｐｅｌｌｅｇｒｉｎｏ、Ｒ．ら、Ｅｕｒ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｊ．、１０：５４３−５４９（１９９７）で説明されているような強制的呼気量の測定を含む。肺の中の線維性瘢痕組織の増加の減少は、実施例９で説明されているように、肺組織ヒドロキシプロリン含有量の測定、又は当業で知られている他の類似の手順を含む当業者に知られている方法により測定することができる。肺炎症の減少は、実施例９で説明されているものを含む、当業で知られている方法により観察することができる。
【０１８７】
肝線維症の個人において、例えば、Ｄｅｓｍｅｔ、Ｖ．Ｊ．ら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．、１９：１５１３−１５２０（１９９４）又はＣｈｅｖａｌｌｉｅｒ、Ｍ．ら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、２０：３４９−３５５（１９９４）で説明されているスコアリング法による肝組織試料の組織学的試験を含む、当業者に知られている方法により測定された肝臓の線維性瘢痕組織の増加の減少を含む。当業で知られている、ここで実施例８において説明されている方法により得られる血清ヒアルロン酸レベル及び肝臓ヒドロキシプロリン含有量の減少も観察できる。さらに、当業で知られている標準的な方法により測定されるような、アスパラギン酸アミノトランスアミナーゼ（ＡＳＴ）及びアラニンアミノトランスアミナーゼ（ＡＬＴ）を含む、様々な肝臓酵素の血清レベルの減少も、監視することができる。
【０１８８】
脳卒中を経験した個人においては、好適な臨床的終点は、当業で知られているようなコンピュータ断層撮像法により決定され、例えば、Ｎａｂａｖｉ、Ｄ．Ｇ．ら、Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ、２１３：１４１−１４９（１９９９）で説明されているような、罹患した血管内の血流の増加を含む。他の臨床的終点は、顔、腕、若しくは脚のしびれ感の減少、又は脳卒中に関連する頭痛の激しさの減少を含む。さらに他の臨床的終点は、脳卒中による細胞、組織、又は臓器の損傷又は死の減少を含む。細胞又は組織の損傷のこのような減少は、コンピュータ断層撮影（ＣＡＴ）走査、磁気共鳴映像法、又は当業で知られている類似の方法を含む、脳撮像技術により評価することができる。
【０１８９】
視神経炎を経験した個人では、好適な臨床的終点は、視力の改善、視力の安定化（つまり、視力がそれ以上低下しない）、又は視力の低下速度の減少を含む。このような臨床的終点は、当業で知られているように当業者側で決定することができる。
【０１９０】
慢性閉塞性肺疾患の個人では、好適な臨床的終点は、肺機能の改善又は閉塞の程度の他の何らかの形の減少を含む。これらの臨床的終点は、例えば、肺機能試験により決定することができる。ある種の肺機能試験では、患者は、患者が空気を吸って吐き出すときの肺のサイズの変化を時間の関数として記録する機械的デバイスである肺活量計に息を吹き込む。
【０１９１】
自閉症の個人では、臨床的終点は、患者に関連する特定の症状に依存する。症状は、社会的技能、発語、コミュニケーション、及び反復挙動と日常作業の異常を含む。例えば、自閉症者は、無発話、非発話発声、反響言語、「Ｉ（私）」と「Ｙｏｕ（あなた）」の代名詞の混同、アイコンタクトの欠如、人への反応の欠如、及びつま先歩きを示すことがある。このような異常は、当業者に知られている方法により評価することができる。
【０１９２】
糖尿病、アレルギー、炎症性腸疾患、乾癬、関節炎、多発性硬化症、ブドウ膜炎、及び抗リン脂質症候群を含む、様々な自己免疫疾患を持つ個人では、臨床的終点は、特定の疾病又は疾患に依存する。例えば、抗リン脂質症候群を患っている個人では、好適な臨床的終点は、膜陰イオンリン脂質（例えば、抗カルジオリピン、抗ホスファチジルセリン）又はその関連する血漿タンパク質（例えば、β−２−糖タンパク質）に向かう抗体のレベルの減少を含む。そのような抗体及び／又は血漿タンパク質の定量は、例えば、Ｐｉｅｒａｎｇｅｌｉ、Ｓ．Ｓ．ら、Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．７４：１３６１−１３６７（１９９５）で説明されているような、酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）を含む、当業で知られている決まり切った方法により遂行することができる。
【０１９３】
抗リン脂質症候群の個人のさらに他の臨床的終点は、広範にわたる組織及び／又は臓器内に発生しうる、血管内血栓の減少を含む。血管内血栓の減少は、例えば、Ｎａｂａｖｉ、Ｄ．Ｇ．ら、Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ  ２１３：１４１−１４９（１９９９）で説明されているようなコンピュータ断層撮像法により罹患組織又は臓器内の血流を測定することにより観察することができる。血管内血栓の減少は、組織学的に検出することも可能である。皮膚又は他の関係のある組織を分析することができる。例えば、罹患腎臓からのバイオプシーは、糸球体及び／又は小動脈微小血栓の減少を示すことができる。さらに、Ｐｉｅｒａｎｇｅｌｉ、Ｓ．Ｓ．ら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ９４：１７４６−１７５１（１９９６）及び本明細書で説明されている実施例１０でさらに詳しく説明されているように、血栓のサイズだけでなく、消失速度も、光を静脈に透過させるために使用される光ファイバデバイス及び閉回路ビデオシステム、モニタ、及びレコーダを備える３室立体手術用顕微鏡で観察することができる。
【０１９４】
糖尿病の好適な臨床的終点は、インスリンなしで、又はインスリンの量を減らして、血糖値を制御できることを含む。
【０１９５】
様々なアレルギーに対する好適な臨床的終点は、アレルギー状態に関連する喘鳴、アレルギー性のくしゃみ、涙目、悪心、嘔吐、又は下痢の量の減少を含む、アレルギーの様々な症状の減少を含む。
【０１９６】
クローン病及び潰瘍性結腸炎を含む、炎症性腸疾患の好適な臨床的終点は、下痢の程度の減少、腹痛及び／又は筋けいれんの減少、大便中の血液量の減少、食欲増加、及び疾病に関連する発熱からの体温低下などの、この疾病の様々な症状の減少を含む。
【０１９７】
乾癬に関する好適な臨床的終点は、特徴的乾燥の量の減少、銀色の鱗屑で覆われた皮膚の赤色斑、又は患部関節の腫れ又は凝りの減少を含む。
【０１９８】
関節リウマチに見られるような関節炎の好適な臨床的終点は、患部関節の痛み及び腫れの量の減少、患者の運動範囲の拡大、並びに患部関節に付随する筋肉の強さの増大を含む。
【０１９９】
多発性硬化症の好適な臨床的終点は、発作の減少及び脳障害数の減少を含む。
【０２００】
前部ブドウ膜炎、中間部ブドウ膜炎、後部ブドウ膜炎、及びびまん性ブドウ膜炎を含む、ブドウ膜炎の好適な臨床的終点は、視力がそれ以上低下しないこと、及び飛蚊症の程度の減少を含む視力の改善を含む。痛み、赤み、及び羞明の減少も、前部ブドウ膜炎により観察されうる。
【０２０１】
アレルギーの好適な臨床的終点は、粘膜組織の腫れなどのアレルギー性反応の減少、患部組織の炎症の減少、及び全体的なＩｇＥレベルの減少を含む。
【０２０２】
臓器移植の好適な臨床的終点は、例えば、移植臓器の生着率の増加を含む。
【０２０３】
アテローム性動脈硬化症の好適な臨床的終点は、患者が示す特定の症状に依存する。例えば、患者は、１つ又は複数の血管内の血流の減少を示す場合がある。したがって、好適な臨床的終点は、選択された血管内の血流の増加を含む。血流速度は、レーザードップラー流量測定（ＬＤＦ）、磁気共鳴映像法（ＭＲＩ）、陽電子放出型断層撮影法（ＰＥＴ）、及び単光子放出コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）を含むコンピュータ断層（ＣＴ）撮像法を含む、当業者に知られている方法により測定することができる（Ｌｅｅｎｄｅｒｓ、Ｋ．Ｌ．ら、Ｂｒａｉｎ  １１３：２７−４７（１９９０）、Ｓａｋａｉ、Ｆ．ら、Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏｗ  Ｍｅｔａｂ．５：２０７−２１３（１９８８）、Ｒｅｍｐｐ、Ｋ．Ａ．ら、Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ  １９３：６３７−６４１（１９９４）、Ｂａｉｒｄ、Ａ．Ｅ．及びＷａｒａｃｈ、Ｓ．、Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏｗ  Ｍｅｔａｂ．１８：５８３−６０９（１９９８）、Ｄａｎｕｓ、Ｇ．ら、Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ  ２１３：１４１−１４９（１９９９）、Ｃａｌａｍａｎｔｅ、Ｆ．ら、Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏｗ  Ｍｅｔａｂ．１９：７０１−７３５（１９９９）、Ｇｉｎｓｂｅｒｇ、Ｍ．Ｄ．ら、Ｊ．Ｃｅｒｅｂ  Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏｗ  Ｍｅｔａｂ．２（１）：８９−９８（１９８２）、Ｆｕｋｕｄａ、０．、Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ  ３６（２）：３５８−３６４（１９９５）、Ｐｅｒｅｚ−Ｐｉｎｚｏｎら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌｏｇ．Ｓｃｉ．１５３（１）：２５−３１（１９９７）、Ｂｏｒｌｏｎｇａｎら、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．１０１０（１−２）：１０８−１１６（２００４））。患者がアテローム性動脈硬化症に由来する狭心症の症状を示す場合、この疾患に関連する痛みの減少が観察されうる。患者がアテローム性動脈硬化症に由来する末梢血管障害の症状を示す場合、間欠性跛行の減少及びインポテンスの減少が観察されうる。他の好適な臨床的終点は、当業者に知られている。
【０２０４】
所望の臨床的終点に達したら、ＩＦＮτによる毎日の治療を中止できるが、望むならば、又は必要に応じて、維持量を投与することができる。その後、症状に応じて、用量又は投与頻度、又はその両方を、臨床的終点が維持されるか、又は改善された状態が保持されるレベルにまで減らすことができる。
【０２０５】
ＩＶ．実施例
以下の実施例では、さらに、本明細書で説明されている発明を例示するが、いかなる形であっても、本発明の範囲を制限することは意図されていない。
【０２０６】
方法
Ａ．ＩＦＮτの生産
一実施形態では、合成ＩＦＮτ遺伝子は、ＩＦＮτアミノ酸配列を符号化するＤＮＡ配列の連続的部分を含むオリゴヌクレオチドを連結反応することにより標準的分子法（上記Ａｕｓｕｂｅｌら、１９８８）を使用して生成された。使用されるＤＮＡ配列は、配列番号１又は配列番号４のいずれかとするか、又はＩｍａｋａｗａ、Ｋ．ら、Ｎａｔｕｒｅ、３３０：３７７−３７９（１９８７）に示されているような配列とすることができる。その結果得られるＩＦＮτポリヌクレオチドコーディング配列は、位置１６から５３１にまたがる、つまり１７２個のアミノ酸のコーディング配列である。
【０２０７】
一実施形態では、完全な長さの合成遺伝子Ｓｔｕｌ／ＳＳｔｌ断片（５４０ｂｐ）を、修飾ｐＩＮ  Ｉｌｌ  ｏｍｐ−Ａ発現ベクターにクローニングし、大腸菌のコンピテントＳＢ２２１菌株に形質転換することができる。ＩＦＮτタンパク質の発現について、発現ベクターを運ぶ細胞を、０．１−１のＯＤ（５５０ｎｍ）のアンピシリンを含むＬ−培養液中で増殖させ、ＩＰＴＧ（イソプロピル−１−チオ−ｂ−Ｄ−ガラクトシド）で３時間かけて誘導し、遠心分離機で回収した。可溶性の組換え型ＩＦＮτは、超音波処理又は浸透圧分留により細胞から遊離させることができる。
【０２０８】
酵母の発現については、それぞれ５’及び３’末端にＳｔｕｌ及びＳａｃｌ制限酵素認識部位を含むＰＣＲ用プライマーとともにポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ、Ｍｕｌｌｉｓ、Ｋ．Ｂ．、米国特許第４，６８３，２０２号、Ｍｕｌｌｉｓ、Ｋ．Ｂ．ら、米国特許第４，６８３，１９５号）を使用してＩＦＮτ遺伝子を増幅することができる。増幅された断片は、Ｓｔｕｌ及びＳａｃｌｌで消化され、ｐＢＬＵＥＳＣＲＩＰＴ＋（ＫＳ）のＳａｃｌＩ及びＳｍａＩ部位に連結され、ｐＢＳＹ−ＩＦＮτを生成した。プラスミドｐＢＳＹ−ＩＦＮτは、Ｓａｃｌｌ及びＥｃｏＲＶにより消化され、合成ＩＦＮτ遺伝子を含む断片が分離された。酵母発現ベクターｐＢＳ２４Ｕｂ（Ｅｃｋｅｒ、Ｄ．Ｊ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６４：７７１５−７７１９（１９８９））は、ＳａＩｌより消化された。平滑末端は、Ｔ４  ＤＮＡポリメラーゼを使用して生成された。ベクターＤＮＡは、フェノール及びエタノール沈殿により抽出された（Ｓａｍｂｒｏｏｋ、Ｊ．ら、「分子クローニング：実験マニュアル（ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＣＬＯＮＩＮＧ：Ａ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＭＡＮＵＡＬ）」、Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、ＮＹ（１９８９））。回収されたプラスミドは、Ｓａｃｌｌにより消化され、アガロースゲル電気泳動法により精製され、ｐＢＳＹ−ＩＦＮτから分離されたＳａｃｌｌ−ＥｃｏＲＶ断片に連結された。その結果得られた組換え型プラスミドは、ｐＢＳ２４Ｕｂ−ＩＦＮτと指定された。
【０２０９】
組換え型プラスミドｐＢＳ２４Ｕｂ−ＩＦＮτは、大腸菌に形質転換された。ＩＦＮτ刺入を含む組換え型クローンが分離され、制限酵素分析により同定された。ＩＦＮτコーディング配列は、ｐＢＳ２４Ｕｂ−ＩＦＮτから分離され、アルコール酸化酵素（ＡＯＸ１）プロモーター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カリフォルニア州サンディエゴ）を含むピキアパストリスベクターにクローニングされた。次いで、このベクターを使用して、ピキアパストリスＧＳ１１５  Ｈｉｓ宿主細胞を形質転換し、メーカーの取扱説明書に従ってタンパク質を発現させた。ＳＤＳ−ＰＡＧＥ及び銀染色法による決定に従い、タンパク質は、培養基内に分泌され、連続ＤＥＡＥ−セルロース及びヒドロキシアパタイトクロマトグラフィにより電気泳動的に均一に精製された。
【０２１０】
Ｂ．特異的抗ウイルス活性を決定する抗ウイルスアッセイ
抗ウイルス活性は、標準細胞変性効果アッセイを使用して評価された（Ｆａｍｉｌｌｅｔｔｉ、Ｐ．Ｃ．ら、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、７８：３８７−３９４（１９８１）、Ｒｕｂｉｎｓｔｅｉｎ、Ｓ．ら、Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．、３７：７５５−７５８（１９８１））。簡単に言うと、ＩＦＮτの希釈は、Ｍａｄｉｎ−Ｄａｒｂｙウシ腎臓（ＭＤＢＫ）細胞で１６〜１８時間かけて３７℃でインキュベートされた。インキュベートに続いて、チャレンジとして水疱性口内炎ウイルスを使用する細胞変性効果アッセイでウイルス複製の阻害が決定された。１抗ウイルス単位（Ｕ）で、単層の破壊が５０％減少した。本明細書で説明されている研究に関して、特に断りのない限り、ＩＦＮτの比活性度は約１×１０８抗ウイルス単位／ｍｇタンパク質であった。
【実施例１】
【０２１１】
多発性硬化症患者へのＩＦＮτの投与
多発性硬化症を患っているヒトは、ＩＦＮτによる治療の臨床試験に登録された。１５人の患者を３つの治療群に無作為に分け、Ｉ群の患者には、０．２ｍｇ／日（２×１０７Ｕ／日）の用量のＩＦＮτを経口で与え、ＩＩ群の患者には、０．８ｍｇ／日（８×１０７Ｕ／日）の用量のＩＦＮτを経口で与え、ＩＩＩ群の患者には、１．８ｍｇ／日（１．８×１０８Ｕ／日）の用量のＩＦＮτを経口で与えた。
【０２１２】
ＩＦＮτによる治療前、スクリーニング日及び１日目に、基準血清サイトカイン濃度を判定するために、それぞれの被験者から血液試料を採取した。治療は、１日目の採血に続いてそれぞれの患者にＩＦＮτを経口投与することにより開始された。投与の前に、ＩＦＮτ（配列番号３）のバイアル及び注射器を冷蔵庫に保管し、２から８℃に維持した。薬剤の自己投与の前に、患者は、１つのバイアル及び１つの注射器を冷蔵庫から取り出した。注射器の先端からキャップを取り外し、注射器の先端を薬剤のビンの中に入れ、１日目の診療で指示されたとおりに適切な量を注射器内に引き抜いた。注射器の先端を口に入れ、プランジャーを押して注射器内容物を口の中に空けた。次いで、患者は、嚥下し、望むならば、コップ１杯の水を飲むことが許された。患者は、自分のダイアリーカードに、投薬の投与日時を記録した。
【０２１３】
研究の１日目、４日目、８日目、１５日目、２９日目、及び５７日目にそれぞれの患者から血液試料を採取した。市販のＥＬＩＳＡキット（Ｇｅｎｚｙｍｅ、マサチューセッツ州ケンブリッジ）を使用して、ＩＬ−１０濃度及びＩＦＮ−γ濃度について試料を分析した。これらの結果は、図１Ａ〜１Ｄ（ＩＬ−１０）及び図２Ａ〜２Ｄ（ＩＦＮ−γ）、さらに、図３Ａ〜３Ｅ（ＩＬ−１０及びＩＦＮ−γ）に示されている。
【０２１４】
Ａ．結果の統計的分析
再発寛解型多発性硬化症の１５人の患者を、４週間にわたり１日１回３種類の用量（０．２ｍｇ、０．６ｍｇ、及び１．８ｍｇ）のうちの１つの用量のＩＦＮτを使用し経口により治療した。血清試料は、スクリーニングと１日目、４日目、８日目、１５日目、２９日目、及び５７日目に取得され、ＩＬ−１０及びＩＦＮ−ガンマレベル（ｐｇ／ｍｌ）について評価された。３つの群の結果について、反復測定分散分析統計を使用して時間経過による評価を行った。９０個のデータ点（１日目〜５７日目）のうち、前値を繰り越すことにより９つの欠測値点に対する値を補完した。
【０２１５】
ＩＬ−１０：分析を行ったが、３つの投薬群の間に有意な差はなく（Ｆ＝２．９２、Ｐ＝０．０９２７）、時間の有意な影響もなく（Ｆ＝０．７０、Ｐ＝０．６２８５）、有意な時刻別群相互作用もなかった（Ｆ＝０．７４、Ｐ＝０．６８０３）。これは、２８日の投薬期間と２８日のフォローアップ期間にわたって３つのすべての群のＩＦＮτの投与後にＩＬ−１０レベルに変化がなかったことを示唆している。最低から最高までの投薬群に対する投薬の１日目から２９日目までの平均的変化は、それぞれ７％、３％、及び−２５％であった。３つの投薬群に対する５７日目までの平均的変化は、それぞれ１０％、−１０％、及び−３９％であった。すべての場合において、３つの群すべてのデータは、変化が大きかった。
【０２１６】
ＩＦＮ−γ：分析を行ったが、３つの投薬群の間に有意な差はなく（Ｆ＝１．０６、Ｐ＞０．３７６９）、時間の有意な影響もなく（Ｆ＝１．８６、Ｐ＝０．１１４０）、有意な時刻別群相互作用もなかった（Ｆ＝１．４５、Ｐ＝０．１８２０）。これは、２４日の投薬期間と２８日のフォローアップ期間にわたって３つのすべての群のＩＦＮτの投与後にＩＦＮ−γレベルに変化がなかったことを示唆している。最低から最高までの投薬群に対する投薬の１日目から２９日目までの平均的変化は、それぞれ−６３％、−１４％、及び３５％であった。３つの投薬群に対する５７日目までの平均的変化は、それぞれ−２７％、−４６％、及び２２％であった。ＩＬ−１０の分析と同様に、３つの群すべてのデータは、変化が大きかった。
【実施例２】
【０２１７】
Ｃ型肝炎に感染している患者へのＩＦＮτの１日３回投与
Ａ．ＩＦＮτの調製 
１日目に、１ビンのＩＦＮτ（配列番号３）を冷蔵庫から取り出し、患者は、表２に従って適切な量の試験物質を自己投与した。ＩＦＮτ（配列番号２）も、同様に、用意し、投与することができる。
【０２１８】
【表４】
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【０２１９】
Ｂ．患者服用指示
試験物質のすべてのバイアル及び注射器は、冷蔵庫に保管し、２から８℃に維持した。薬剤の自己投与の前に、患者は、１つのバイアル及び１つの注射器を冷蔵庫から取り出した。注射器の先端からキャップを取り外し、注射器の先端を薬剤のビンの中に入れ、１日目の診療で指示されたとおりに適切な量を注射器内に引き抜いた。
【０２２０】
注射器の先端を口に入れ、プランジャーを押して注射器内容物を口の中に空けた。次いで、患者は、試験物質を嚥下した。必要ならは、患者は、コップ１杯の水を飲むことが許された。患者は、自分のダイアリーカードに、試験物質投薬の投与日時を記録した。
【０２２１】
上記のステップを、朝１回、昼１回、夕方１回というように、約８時間間隔で１日に３回繰り返した。
【０２２２】
Ｃ．結果
１６９日の試験期間にわたって定められた間隔で血液試料を採取した。ＥＬＩＳＡキット（Ｇｅｎｚｙｍｅ、マサチューセッツ州ケンブリッジ）を使用し、メーカーの取扱説明書に従って、血清中のＩＬ−１０レベル及びＩＦＮ−γレベルについて試料を分析した。逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応を使用したＣ型肝炎のウイルス価、２’、５’−オリゴアデニル酸シンセターゼ（ＯＡＳ）、及びアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）の血清濃度も、決定され、ここに報告された。
【０２２３】
それぞれの被験者の結果は、図４Ａ〜４Ｄ（ＩＬ−１０レベル）及び図５Ａ〜５Ｄ（ＩＦＮ−γレベル）、及び図６Ａ〜６Ｆ（ＩＬ−１０及びＩＦＮ−γ）に示されている。
【０２２４】
Ｄ．結果の統計的分析
３つの群の結果について、反復測定分散分析統計を使用して時間経過による評価を行った。ＩＩ群の１人の患者に対するデータは、欠測基準血清試料であるため使用されなかった。２０４個のデータ点（１日目〜１６９日目）のうち、前値を繰り越すことにより両方の測定に対する７つの欠測値点に対する値を補完した。
【０２２５】
ＩＬ−１０：分析を行ったところ、３つの群の間に統計的有意な差があり（Ｆ＝１２．０８、Ｐ＝０．０００９）、時間の有意な影響があり（Ｆ＝１１．２０、Ｐ＝０．０００１）、有意な時刻別群相互作用もあった（Ｆ＝７．８８、Ｐ＝０．００１）。後者の所見は、３つの投薬群の間の時間によるＩＬ−１０応答率の差からはっきりわかる。最低投薬群（Ｉ群、０．３３ｍｇ  ＴＩＤ）では、１日目から４３日目までの間にＩＬ−１０レベルが２２％増加したが、ＩＩ群（１ｍｇ  ＴＩＤ）では、２９日目にピーク応答が１１４％になった。対照的に、ＩＩＩ群（３ｍｇ  ＴＩＤ）では、４３日目に３８７％増加し、７１日目までにピークは４８４％であった。
【０２２６】
有意な相互作用項は、さらに、８４日目に投薬が終了した後ＩＬ−１０レベルの投薬群間の差の減少により裏付けられ、Ｉ群は、８５日目の１１％利得から１６９日目の４％に減少し、ＩＩ群は、同じ期間に９５％から０．５％に減少した。したがって、２つの最低投薬群は、投薬終了後に基準６カ月に戻った。しかし、最高投薬群（ＩＩＩ群、３ｍｇ  ＴＩＤ）は１６９日目までに４５３％から１９４％に減少し、そのため、まだ、投薬が停止してから基準６カ月にわたって実質的な増加を示していた。
【０２２７】
ＩＦＮ−γ：分析を行ったが、３つの投薬群の間に有意な差はなく（Ｆ＝１．１３、Ｐ＞０．３４９９）、時間の有意な影響もなく（Ｆ＝１．５５、Ｐ＝０．１１８７）、有意な時刻別群相互作用もなかった（Ｆ＝１．３９、Ｐ＝０．１２７５）。これは、８４日の投薬期間と８４日のフォローアップ期間にわたって３つのすべての群のＩＦＮτの投与後にＩＦＮ−γレベルに有意な変化がなかったことを示している。最低から最高までの投薬群に対する投薬の１日目から８５日目までの平均的変化は、それぞれ−６％、８％、及び７％であった。興味深いことに、３つの投薬群に対する１６９日目までの平均的変化は、それぞれ４％、２１％、及び３１％であり、投薬終了後に投薬応答のあることが示唆されている。
【実施例３】
【０２２８】
Ｃ型肝炎に感染している患者へのＩＦＮτの１日２回投与
Ｃ型肝炎に感染している５人の患者を研究のため募集した。患者は、実施例２の方法に従ってＩＦＮτで治療され、それぞれの患者は、１日に２回、７．５ｍｇ、合計１日用量１５ｍｇ（１．５×１０９Ｕ）を受け取った。初回投薬は、朝、食事前に摂取された。第２回投薬は、夕食から少なくとも３時間後に摂取された。
【０２２９】
１１３日の試験期間にわたって定められた間隔で血液試料を採取した。それらの試料は、市販のＥＬＩＳＡキット（Ｇｅｎｚｙｍｅ、マサチューセッツ州ケンブリッジ）を使用して血清中のＩＬ−１０、ＩＬ−１２、及びＩＦＮ−γレベルについて分析された。結果は、患者のうち４人ついて、図７Ａ（ＩＬ−１０）、図７Ｂ（ＩＦＮ−γ）、及び図８Ａ〜８Ｄ（ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、及びＩＦＮ−γ）に示されている。
【実施例４】
【０２３０】
乾癬の治療のためのＩＦＮτの投与
頭皮を除く体表面の少なくとも１０％を覆う慢性尋常性乾癬（尋常性乾癬）の臨床診断のあった４５人の患者を３つの治療群に無作為に分けた。Ｉ群は、ＩＦＮτの１日用量を３ｍｇとして１日３回１ｍｇのＩＦＮτを経口投与して治療された。ＩＩ群は、ＩＦＮτの１日用量を９ｍｇとして１日３回３ｍｇのＩＦＮτを経口投与して治療された。ＩＩＩ群は、プラセボで治療された。ＩＦＮτの抗ウイルス活性は、約５×１０８抗ウイルス単位／ｍｇタンパク質と判定され、３ｍｇ用量は１．５×１０９単位／日に対応し、９ｍｇ用量は、４．５×１０９単位／日に対応する。ＩＦＮτは、薬剤として許容される賦形剤で液体として与えられ、それぞれの患者に即座に嚥下され、消化される。投薬は、８４日間続く。
【０２３１】
治療の１４日前に始まり、治療の最初の日の後、それぞれの患者は、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｓｔａｔｉｃ  Ｇｌｏｂａｌ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ（ＰＳＧＡ）を使用して毎日評価される。０、１、２、３、４、又は５のＰＳＧＡスコアが、以下の基準に基づいてそれぞれの患者に割り当てられる。
０＝残留変色を除き明瞭、
１＝病変の大半は、平均すると１になる硬結、紅斑、及び落屑を有する、
２＝病変の大半は、平均すると２になる硬結、紅斑、及び落屑を有する、
３＝病変の大半は、平均すると３になる硬結、紅斑、及び落屑を有する、
４＝病変の大半は、平均すると４になる硬結、紅斑、及び落屑を有する、
５＝病変の大半は、平均すると５になる硬結、紅斑、及び落屑を有する。
【０２３２】
硬結スコアは、以下の基準に従って０、１、２、３、４、又は５の値に割り当てられる。
０＝プラーク増大の証拠はない、
１＝最小のプラーク増大、約０．５ｍｍ、
２＝軽度のプラーク増大、約１ｍｍ、
３＝中程度のプラーク増大、約１．５ｍｍ、
４＝際だったプラーク増大、約２ｍｍ、
５＝重度のプラーク増大、約２．５ｍｍ以上。
【０２３３】
落屑スコアは、以下の基準に従って０、１、２、３、４、又は５の値に割り当てられる。
０＝落屑の証拠はない、
１＝最小、病変の５％未満にときおり細かな鱗屑がある、
２＝軽度、細かな鱗屑がたくさんある、
３＝中程度、粗い鱗屑がたくさんある、
４＝顕著、厚いが、ねばり強くない鱗屑がたくさんある、
５＝重度、非常に厚く、ねばり強い鱗屑がたくさんある。
【０２３４】
紅斑スコアは、以下の基準に従って０、１、２、３、４、又は５の値に割り当てられる。
０＝紅斑の証拠はない、色素沈着過度が存在しうる、
１＝かすかな紅斑、
２＝薄赤み、
３＝中程度の赤み、
４＝真っ赤、
５＝ほの暗い赤から深紅まで。
【０２３５】
それぞれの患者は、さらに、治療前に乾癬面積と重症度指数（ＰＡＳＩ）評価を与えられる（Ｆｒｅｄｒｉｋｋｓｏｎ、Ｔ．ら、Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃａ、１５７：２３８（１９７８））。ＰＡＳＩスコアは、Ｆｒｅｄｒｉｋｋｓｏｎら（上記）に従って、患者の頭部、胴体、上肢、及び下肢の病変の範囲及び重症度の評価から計算される。
【０２３６】
８４日の投薬期間に、それぞれの患者は、１日目、８日目、１５日目、２９日目、４３日目、５７日目、７１日目、及び８５日目に評価され、ＰＡＳＩスコア及びＰＳＧＡスコアを与えられる。研究後に、それぞれの患者は、再び、１１３日目と１６９日目に評価される。
【０２３７】
患者は、０、１、又は２のＰＳＧＡ、及び／又はＰＡＳＩスコアで７５％の改善を達成する。
【実施例５】
【０２３８】
第２の薬剤と組み合わせたＩＦＮτの投与
多発性硬化症を患っている患者は、ＩＦＮ−τにより治療され、１日２回、合計用量５．５×１０８Ｕを経口投与される。２８日毎に１回、患者は、３ｍｇ／ｋｇの用量のナタリズマブの静脈内注射により治療される。患者は、この計画に従って６カ月間治療され、その後、非造影プロトン密度Ｔ２強調ＭＲＩ及びガドリニウム造影Ｔ１強調ＭＲＩ走査を使用して脳障害について評価される。治療中、サイトカイン（ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、及びＩＦＮ−γ）レベルの分析のため血液試料が採取される。
【実施例６】
【０２３９】
第２の薬剤と組み合わせたＩＦＮτの投与
心臓移植患者は、１日２回、合計用量５．５×１０８ＵのＩＦＮ−τを経口投与し、ミコフェノール酸モフェチルを５００ｍｇ／日の用量で経口投与することにより治療される。治療中、サイトカイン（ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、及びＩＦＮ−γ）レベルの分析のため血液試料が定期的に採取される。治療は、患者の生存期間中続く。
【実施例７】
【０２４０】
アルツハイマー病に対するＩＦＮτ治療の効果
この実施例は、ＩＦＮτがアルツハイマー病の治療にどのように好都合であるかを示す。アルツハイマー病のトランスジェニックマウスモデルが使用される。マウスの一方の群は、ＩＦＮτ治療を受け、対照群は、何も受けない。ＩＦＮτによるトランスジェニックマウスの治療は、プラークの負担の減少、アミロイドベータペプチドの脳中レベルの減少、及びミクログリアと星状細胞の活性化の減少を示すことが予想される。
【０２４１】
ＡＰＰＶ７１７Ｆ突然変異を持つ９０日齢のヘテロ接合オスＰＤＡＰＰトランスジェニックマウス（つまり、Ｍｕｒｒｅｌｌ、Ｊ．ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５４（５０２８）：９７−９９（１９９１）で説明されているように、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の膜貫通領域内でＶａｌをＰｈｅに置き換える）をＴａｃｏｎｉｃ  Ｆａｒｍｓ（ニューヨーク州ジャーマンタウン）から購入し、「ＮＩＨ実験動物世話利用ガイド（ＮＩＨ  Ｇｕｉｄｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓ）」に従い標準実験条件の下で飼うことができる。マウスは、１２時間明るくし、１２時間暗くするサイクルで保持することができる。マウスが動物用のえさと生水に自由に接近することを許すことができる。
【０２４２】
プラークの負担を調べるためのマウスの脳の免疫組織化学的及び組織学的染色は、例えば、Ｗｅｉｎｅｒ、Ｈ．Ｌ．ら、Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．４８：５６７−５７９（２０００）で説明されているように実施できる。簡単に言うと、ホルマリンで固定された脳組織をトリス緩衝食塩水で洗浄し、脱水し、パラフィン内に埋め込むことができる。脳組織の矢状断面（例えば、１０マイクロメートルの断面）を空気乾燥させ、１時間かけて５８℃で焼くことができる。断面をＨｉｓｔｏｃｌｅａｒ（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、ジョージア州アトランタ）で脱パラフィン処理し、エタノールから水に徐々に変えることで再水和することができる。
【０２４３】
様々な用量のＩＦＮτ（例えば、約１×１０５Ｕ／日から約５×１０１２Ｕ／日）を経口（経胃）投与することによりマウスを治療することができる。
【実施例８】
【０２４４】
肝線維症に対するＩＦＮτ治療の効果
この実施例は、ＩＦＮτ治療が肝線維症の治療にどのように好都合であるかを示す。四塩化炭素処理により実験動物に肝線維症を誘発させる。四塩化炭素処理された動物からなる一方の群は、ＩＦＮτ治療を受け、対照群は、賦形剤のみを受ける。四塩化炭素処理されたラットは、ＩＦＮτで治療されたときに疾病の進行の低下を示すことが予想される。
【０２４５】
実施例７で説明されているように、体重２００から２５０グラムのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを、Ｔａｃｏｎｉｃ  Ｆａｒｍｓ（ニューヨーク州ジャーマンタウン）から購入して飼うことができる。
【０２４６】
Ｚｈａｎｇ、Ｌ．Ｊ．ら、Ｗｏｒｌｄ  Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．１０（１）：７７−８１（２００４）で説明されているように、四塩化炭素を腹腔内投与することにより肝線維症を誘発することができる。簡単に言うと、ラットは、週２回２ｍｌ／ｋｇの用量で５０％四塩化炭素塩水の腹腔内投与を受ける。
【０２４７】
肝臓組織をホルマリンで固定し、パラフィンに埋め込むことができる（Ｚｈａｎｇ、Ｌ．Ｊ．ら、Ｗｏｒｌｄ  Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．１０（１）：７７−８１（２００４））。断面を、ヘマトキシリン及びエオシン（ＨＥ）で染色し、光学顕微鏡の下で調べることができる。線維症の段階は、Ｄｅｓｍｅｔ、Ｖ．Ｊ．ら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  １９：１５１３−１５２０（１９９４）又はＣｈｅｖａｌｌｉｅｒ、Ｍ．ら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２０：３４９−３５５（１９９４）で述べられている基準に従って評価することができる。
【０２４８】
肝臓内のヒドロキシプロリン含有量を決定するために、肝臓をまず均質化して粉末にし、６Ｍの塩酸で加水分解することができる。（Ｗｅｎｇ、Ｈ．Ｌ．ら、Ｗｏｒｌｄ  Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．７（１）：４２−４８（２００１））ヒドロキシルプロリン含有量は、Ｋｉｖｉｒｉｋｋｏ、Ｋ．Ｌ．ら、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ  １９：２４９−２５５（１９６７）で説明されているように測定することができる。
【０２４９】
ラットは、四塩化炭素の投与前、投与中、又は投与後にＩＦＮτで治療することができる。様々な用量のＩＦＮτ（例えば、約１×１０５Ｕ／日から約５×１０１２Ｕ／日）を経口（経胃）投与することによりラットを治療することができる。対照群は、賦形剤のみを受ける。
【実施例９】
【０２５０】
肺線維症に対するＩＦＮτ治療の効果
この実施例は、ＩＦＮτ治療が肺線維症の治療にどのように好都合であるかを示す。ブレオマイシン処理により実験動物に肺線維症を誘発させる。ブレオマイシン処理された群からなる一方の群は、ＩＦＮτ治療を受け、対照群は、賦形剤のみを受ける。気管支肺胞洗浄及び血清ＴＮＦ−アルファのミエロペルオキシダーゼ活性などの炎症の指標を監視する。組織ヒドロキシプロリン含有量を測定することで、線維症の程度を監視する。ブレオマイシン処理されたマウスをＩＦＮτで治療すると、ヒドロキシプロリン含有量を測定することで決定されるとおり、線維症の程度が減少することが予想される。また、ＩＦＮτは、治療マウスと対照マウスの炎症マーカー（ＴＮＦ−アルファｍＲＮＡにより決定される、ミエロペルオキシダーゼ活性及びＴＮＦ−アルファの量）を減少させることが予想される。
【０２５１】
８週齢のオスＣ５７ＢＬ／６マウスをＨａｒｌａｎ（インディアナ州インディアナポリス）から購入し、実施例７で説明されているように保持することができる。
【０２５２】
肺線維症を誘発させるために、マウスに、気管内ブレオマイシンを１回服用させることができる（０．８ｍｇ／ｋｇ）（Ａｒａｉ、Ｔ．ら、Ａｍ  Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏ．Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｐｈｙｓｉｏ．２７８：Ｌ９１４−Ｌ９２２（２０００））。対照マウスを賦形剤で治療する。マウスは、セボフルランの吸入により、７日後に（炎症指標を調べるために）、又は２１日後に（繊維化指標を調べるに）屠殺することができる。その後、肺を摘出し、右心室から血液を取り出すことができる。１ｍｌの等張食塩水を吹き込んで気管支肺胞洗浄を実施し、気管内カニューレで肺から引き抜くことができる。
【０２５３】
気管支肺胞洗浄のミエロペルオキシダーゼ活性は、当業で知られているように決定することができる（Ａｒａｉ、Ｔ．ら、Ａｍ  Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２７８：Ｌ９１４−Ｌ９２２（２０００））。簡単に言うと、気管支肺胞洗浄は、５分間、４００ｇで遠心分離機にかけることができる。細胞ペレットを０．１Ｍ  Ｋ２ＨＰＯ４緩衝液中に再懸濁させ、９０秒間、超音波処理することができる。０．２５％ウシ血清アルブミンを含むＨａｎｋｓ’  ＢＳＳ  ０．３ｍｌ、０．１  ＭＫ２ＨＰ０４（ｐＨ７．０）０．０５ｍｌ、１．２５ｍｇ／ｍｌのｏ−ジアニシジン（Ｓｉｇｍａ、ミズーリ州セントルイス）０．０５ｍｌ、及び０．０５％  Ｈ２Ｏ２  ０．０５ｍｌを使用して、１２，０００ｇで１０分間遠心分離機にかけた後、浮遊物を混合し、１０分間、２５℃でインキュベートすることができる。反応は１％  ＮａＮ３  ０．５ｍｌ加えることにより終了させ、吸収率は４６０ｎｍで測定することができる。
【０２５４】
ブレオマイシン処理されたマウスは、ブレオマイシンが導入されるのと同時に、又は投与の前、又は投与の後にＩＦＮτで治療することができる。様々な用量のＩＦＮτ（例えば、約１×１０５Ｕ／日から約５×１０１２Ｕ／日）を経口（経胃）投与することによりマウスを治療することができる。対照群の中のブレオマイシン処理マウスは、賦形剤のみを受ける。
【実施例１０】
【０２５５】
抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）に対するＩＦＮτ治療の効果
この実施例は、ＩＦＮτがＡＰＳの治療にどのように好都合であるかを示す。ＡＰＳは、ヒト免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）抗カルジオリピン抗体の注射により実験動物において誘発される。抗体処理された群からなる一方の群は、ＩＦＮτ治療を受け、対照群は、賦形剤のみを受ける。１本の大腿静脈を傷つけて血栓を誘発させ、対照及びＩＦＮτ治療動物における、形成する血栓のサイズとともに、血栓の形成及び消失の時期を、治療の有効性の指標として使用する。ＩＦＮτで抗体処理マウスを治療すると、形成する初期血栓のサイズが減少し、血栓が形成するのに要する時間が延び、血栓が消失する時間が短縮することが予想される。
【０２５６】
Ｔ細胞欠損の、一連の交配及び戻し戻し交配を通じてヌード遺伝子をＣＤ−１マウスに移すことで開発された通常のオスＣＤ−１（登録商標）Ｎｕｄｅ  Ｍｉｃｅ（Ｃｒｌ：ＣＤ−１（登録商標）−ｎｕＢＲ、非近交系）を、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（マサチューセッツ州ウィルミントン）から購入し、実施例７で説明されているように保持することができる。
【０２５７】
ＩｇＧは、タンパク質ＧセハロースクロマトグラフィによりＡＰＳを持つ患者の血清から分離することができる。（Ｐｉｅｒａｎｇｅｌｉ、Ｓ．Ｓ．ら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ９４：１７４６−１７５１（１９９６））。ＩｇＧの純度は、ドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）により、１５０ｋＤの単一帯域を観察することにより決定することができる。タンパク質濃度は、ローリー法により決定することができる。タンパク質濃度を無菌食塩水で調節した後、溶液をろ過して殺菌してから動物に注射することができる。
【０２５８】
１日目、７日目、１４日目、及び２１日目に、アジュバント（Ａｄｊｕ−Ｐｒｉｍｅ、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．）の１５０μｇのＩｇＧ−ＡＰＳを皮下注射することによりマウスを免疫することができる（Ｐｉｅｒａｎｇｅｌｉ、Ｓ．Ｓ．ら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ９４：１７４６−１７５１（１９９６））。１週間間隔で血液標本をそれぞれの動物から採取し、マウス抗カルジオリピン抗体が存在しているかどうかを試験することができる。マウス抗カルジオリピン抗体（ＩｇＧ及びＩｇＭ）は、当業で知られているように、例えば、Ｐｉｅｒａｎｇｅｌｉ、Ｓ．Ｓ．ら、Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．７４：１３６１−１３６７（１９９５）で説明されているように、酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）により決定することができる。アルカリ性ホスファターゼ抗マウスＩｇＧ及び抗マウスＩｇＭをＥＬＩＳＡプロトコルにおいて二次抗体として使用することができる。呈色反応は、陽性の対照（例えば、約１００Ｇのリン脂質単位）が１．０Ｄ単位に到達したときに（典型的には、約２０又は３０分以内）停止されうる。
【０２５９】
マウスが比較的高いレベルの抗カルジオリピン抗体（例えば、約０．８ＯＤ、典型的には免疫してから約２週間後に出現）を産生することがわかった後、Ｐｉｅｒａｎｇｅｌｉ、Ｓ．Ｓ．ら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ９４：１７４６−１７５１（１９９６）で詳しく説明されているように、傷つまみにより血栓が誘発される。簡単に言うと、膝にまで及ぶマウス右鼠径部縦切開を行う前に、麻酔薬（ペントバルビタールナトリウム、腹腔内に６０ｎｍｇ／ｋｇ）で処理することができる。右大腿静脈を切開して遊離させ、ピンセットをくっつけて平坦な円形対向面（直径約０．１ｍｍとしてよい）が合わさりつまみ傷ができるようにすることにより、標準化血栓形成損傷を静脈内に作ることができる。
【０２６０】
光ファイバデバイスを使用して、静脈に光を透過させ、閉回路ビデオシステム（ＮＥＣ−ＮＣ−Ａ／ＣＣＤ  Ｃａｍｅｒａ、ＮＥＣ，ＵＳＡ，Ｉｎｃ．）、Ｐａｎａｓｏｎｉｃ  １２インチカラーモニタ、及びＵ−Ｍａｔｉｃ  Ｖ−５８００レコーダ（Ｓｏｎｙ  Ｃｏｒｐ．）を備える３室立体手術用顕微鏡（ＥＲＮＳＴ、Ｌｅｉｔｚ  ＧＭＢＨ、Ｗｅｔｚｌａｒ）を使用して、血栓のサイズ及び出現と消失の測度を視覚化し、測定することができる（Ｐｉｅｒａｎｇｅｌｉ、Ｓ．Ｓ．ら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ９４：１７４６−１７５１（１９９６））。
【０２６１】
ＡＰＳ患者からの抗体を注射した後、ＩＦＮτでマウスを治療することができる。様々な用量のＩＦＮτ（例えば、約１×１０５Ｕ／日から約５×１０１２Ｕ／日）を経口（経胃）投与することによりマウスを治療することができる。対照群は、賦形剤のみを受ける。
【実施例１１】
【０２６２】
脳卒中に対するＩＦＮτ治療の効果
この実施例は、ＩＦＮτが脳卒中の治療にどのように好都合であるかを示す。脳卒中を、実験動物に対し中大脳動脈を管腔内縫合で閉塞することにより誘発させる。脳卒中誘発群は、ＩＦＮτ治療を受け、対照群は、賦形剤のみを受ける。ＩＦＮτ治療の保護効果は、脳梗塞サイズの決定、脳内のアポトーシスを起こした細胞核の測定、当業で知られている尺度を使用した挙動の評価により評価することができる。脳卒中を起こし、ＩＦＮτで治療されたマウスは、対照マウスと比較したときに、脳梗塞サイズの減少、脳のアポトーシスを起こした核の減少、及び神経機能の改善を示すことが予想される。
【０２６３】
オスのＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ新生児ラット（９から１１日齢）を、Ｔａｃｏｎｉｃ  Ｆａｒｍｓ（ニューヨーク州ジャーマンタウン）から入手することができる。マウスは、実施例７で説明されているように保持することができる。
【０２６４】
Ｍａｉｅｒ、Ｃ．Ｍ．ら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ  ９４：９０−９６（２００１）及びＢｒｉｇｈｔ、Ｒ．ら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２４（３１）：６８８０−６８８８（２００４）で説明されているように、閉塞管腔内縫合を使用してＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットに脳虚血を誘発させることができる。簡単に言うと、動物にイソフルレンの麻酔を掛けた後、３−０ナイロン縫合糸のコーティングしていない３０ｍｍ長のセグメントの先端を火炎で丸める。縫合糸を外頸動脈の切り株部に挿入し、内頸動脈内の二股から約１９から約２０ｍｍのところまで進め、中大脳動脈の口を閉塞する。虚血してから２時間後に、縫合糸を取り除き、動物を回復させることができる。
【０２６５】
挙動は、Ｂｒｉｇｈｔ、Ｒ．ら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．、２４（３１）：６８８０−６８８８（２００４）で説明されている１〜４の尺度を使用して、再灌流してから２４時間後に評価することができ、この尺度は、グレード１：通常の姿勢、任意の方向への自発運動、グレード２：尾を持ち上げられたときに一方向に前足を伸ばす、グレード３：同時歩行するときに両前足を伸ばし、旋回パターンを取る、グレード４：異常姿勢、前足を伸ばし、旋回パターンを取り、自発歩行できない、というものである。
【０２６６】
アポトーシスを起こした細胞核は、Ｂｒｉｇｈｔ、Ｒ．ら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２４（３１）：６８８０−６８８８（２００４）で説明されているように、末端デオキシヌクレオチド転移酵素仲介性ビオチンＵＴＰニック末端標識（ＴＵＮＥＬ）により測定することができる。簡単に言うと、２時間中大脳動脈閉塞を受けた動物を、再灌流から７２時間後に屠殺し、通常の塩水で、続いて４％のパラホルムアルデヒドで心臓灌流させることができる。脳を分離し、４％のパラホルムアルデヒドで一晩固定し、約２から約３日間３０％のショ糖に浸け、ＯＣＴ抗凍結剤（Ｔｉｓｓｕｅ−Ｔｅｋ、Ｍｉｌｅｓ、Ｅｋｌｋａｒｔ、ＩＮ）で急速凍結することができる。
【０２６７】
それぞれの脳の同等の中脳領域から、それぞれの切片が少なくとも４８μｍ隔てられた冠状切片（１６μｍ）を取り出すことができる。スライドを染色し、それぞれの切片の同側皮質内の４つの定められた領域を撮像することができる。
【０２６８】
ラットは、虚血の誘発前、誘発中、又は誘発後にＩＦＮτで治療することができる。様々な用量のＩＦＮτ（例えば、約１×１０５Ｕ／日から約５×１０１２Ｕ／日）を経口（経胃）投与することによりラットを治療することができる。対照群は、賦形剤のみを受ける。
【実施例１２】
【０２６９】
視神経炎に対するＩＦＮτ治療の効果
この実施例は、ＩＦＮτが視神経炎の治療にどのように好都合であるかを示す。実験的アレルギー脳炎（ＥＡＥ）、視神経炎の動物モデルを試験動物に誘発させる。ＥＡＥ誘発群は、ＩＦＮτ治療を受け、対照群は、賦形剤のみを受ける。ＩＦＮτ治療の保護効果は、軸索脱髄の程度を決定することにより評価することができる。ＩＦＮτで治療されたＥＡＥ誘発マウスは、対照マウスと比較すると、軸索脱髄の減少を示すことが予想される。
【０２７０】
ＳＪＬ／ＪマウスをＪａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（メイン州バーハーバー）から購入し、実施例７で説明されているように保持することができる。
【０２７１】
ＥＡＥは、例えば、Ｇｕｙ、Ｊ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９５：１３８４７−１３８５２（１９９８）で説明されているように、項部内に皮下注入できる完全フロインドアジュバントの相同脊髄乳濁液で感作化することにより試験マウス内に誘発することができる。
【０２７２】
脱髄の程度は、Ｇｕｙ、Ｊ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９５：１３８４７−１３８５２（１９９８）で説明されているように、視神経の軸索伝達電子顕微鏡写真から導かれたミエリン鞘の測定閾値により定量することができる。
【０２７３】
簡単に言うと、マウスは、０．１Ｍ  ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中の４％パラホルムアルデヒドからなる固定剤による心臓破裂で犠牲にし、灌流させることができる。付着する視神経のある目を解剖することができ、組織標本を、５％のアクロレイン、０．１Ｍ  カコジル酸ナトリウム−ＨＣＬ緩衝液（ｐＨ７．４）、及び７％のショ糖中で後固定し、エタノール系に通して脱水し、５０℃で一晩重合させることができるＬＲ  Ｗｈｉｔｅに埋め込む。超薄切片（例えば約９０ｍｍ）を免疫細胞化学用のニッケルグリッド上に置くことができる。３０分間Ｔｗｅｅｎ  ２０とともに０．０１Ｍ  ＴＢＳ（ｐＨ７．２）中の２％の硬骨魚ゼラチン及び２％の脱脂粉乳上に浮かばせることにより、抗体の非特異的結合を阻止することができる。次いで、グリッドをウサギ抗アルブミン抗体と反応させ、洗浄し、その後、室温で約１時間１０ｎｍの金に結合された二次ヤギ抗ウサギＩｇＧ抗体と反応させることができる。次に、グリッドを脱イオン水ですすぐことができる。事後染色せずに、透過電子顕微鏡により免疫標識標本の写真を撮ることができる。
【０２７４】
脊髄乳濁液を注入する前、又は脊髄乳濁液を注入下後、又は視神経炎が誘発された後、マウスをＩＦＮτで治療することができる。様々な用量のＩＦＮτ（例えば、約１×１０５Ｕ／日から約５×１０１２Ｕ／日）を経口（経胃）投与することによりマウスを治療することができる。対照群は、賦形剤のみを受ける。
【実施例１３】
【０２７５】
慢性閉塞性肺疾患に対するＩＦＮτ治療の効果
この実施例は、ＩＦＮτが慢性閉塞性肺疾患の治療にどのように好都合であるかを示す。慢性気管支炎及び肺気腫を含む、慢性閉塞性肺疾患と診断された患者は、ＩＦＮτで治療される。ＩＦＮτ治療の保護効果は、肺機能の改善を決定することにより評価することができる。ＩＦＮτで治療される患者は、肺機能の改善を示すことが予想される。
【０２７６】
慢性閉塞性肺疾患と診断された被験者は、０．５×１０９抗ウイルス単位を超えるＩＦＮτを毎日使って治療することができる。肺機能の改善は、当業で知られているような肺活量計で評価することができる。
【実施例１４】
【０２７７】
自閉症に対するＩＦＮτ治療の効果
この実施例は、ＩＦＮτが自閉症の治療にどのように好都合であるかを示す。自閉症と診断された患者は、ＩＦＮτで治療される。ＩＦＮτ治療の有利な効果は、患者の以前の挙動の変化を判定することにより評価することができる。ＩＦＮτで治療された患者は、挙動の好ましい変化を示すことが予想される。
【０２７８】
自閉症と診断された被験者は、０．５×１０９抗ウイルス単位を超えるＩＦＮτを毎日使って治療することができる。社会的技能、発話、コミュニケーション、及び／又は反復挙動と日常作業の改善を含む、挙動の変化は、当業者に知られている方法により評価することができる。
【実施例１５】
【０２７９】
アテローム性動脈硬化症に対するＩＦＮτ治療の効果
この実施例は、ＩＦＮτがアテローム性動脈硬化症の治療にどのように好都合であるかを示す。アテローム性動脈硬化症は、低密度受容体（ＬＤＬ）−欠損マウスにおいて、高コレステロールの食べ物を与えることにより誘発される。マウスの一群は、ＩＦＮτ治療を受け、対照群は、賦形剤のみを受ける。ＩＦＮτ治療の保護効果は、マウスに発生する動脈硬化性プラークの程度を決定することにより評価することができる。ＩＦＮτで治療されたマウスは、対照マウスと比較すると、動脈硬化性プラークの減少を示すことが予想される。
【０２８０】
ＬＤＬ受容体欠損マウスをＪａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから購入し、実施例７で説明されているように保持することができる。
【０２８１】
アテローム性動脈硬化症は、Ｌｉｃｈｔｍａｎ、Ａ．Ｈ．ら、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｖａｓｃ．Ｂｉｏｌ．１９：１９３８−１９３４（１９９９）で説明されているように、高脂肪、高コレステロールの食事を与えることによりマウスに誘発させることができる。
【０２８２】
アテローム性動脈硬化症で塞がれている大動脈の表面積は、見開きのオイルレッドＯ染色により定量することができ、これについては、Ｌｉｃｈｔｍａｎ、Ａ．Ｈ．ら、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｖａｓｃ．Ｂｉｏｌ．１９：１９３８−１９３４（１９９９）で詳述されている。簡単に言うと、マウスは、特定の食事で１２週経過した後にエーテル吸入で犠牲にできる。左心室及び動脈樹をＰＢＳで灌流した後、心臓に結合している大動脈全体を解剖し、一晩ホルムアルデヒドに浸けておくことができる。次いで、大動脈をオイルレッドＯで染色し、外膜脂肪を除去し、大動脈を縦に開き、黒色のシリコーンで覆われた皿上に見開きでピン留めし、ＰＢＳに浸けたまま写真に撮ることができる。次いで、スライドを走査してコンピュータに取り込み、オイルレッドＯ染色病変で塞がっている表面積の割合を画像解析ソフトウェア（ＮＩＨ  Ｉｍａｇｅ）を使用することにより決定することができる。
【０２８３】
マウスは、コレステロールを多く含む食事にありついているときにＩＦＮτで治療することができる。様々な用量のＩＦＮτ（例えば、約１×１０５Ｕ／日から約５×１０１２Ｕ／日）を経口（経胃）投与することによりマウスを治療することができる。対照群のマウスは、賦形剤のみを受ける。
【実施例１６】
【０２８４】
自己免疫疾患に対するＩＦＮτ治療の効果
この実施例は、ＩＦＮτがマウスのコラーゲン誘発関節炎（ＣＩＡ）の治療及び／又は予防にどのように好都合であるかを示す。ＣＩＡは、ＩＩ型コラーゲンの注入によりＢａｌｂ  Ｃマウスに誘発される。誘発の前に、マウスは、ＩＦＮτ治療を受ける。ＩＦＮτ治療の有利な効果は、マウスのＣＩＡの発生の程度を決定することにより評価することができる。ＩＦＮτで治療されるマウスは、疾病の発生の減少を示すことが予想される。
【０２８５】
Ｂａｌｂ  ＣマウスのＣＩＡの発生の抑制は、ＣＩＡの誘発のためチキンＩＩ型コラーゲンで免疫付与した日にＢａｌｂ  Ｃマウスに単一の用量のＩＦＮτを注射することにより実施できる。コラーゲンをＨ３７Ｒａとともに完全フロインドアジュバント中で乳濁化し、尾の根元のいずれかの側に注射することができる。免疫付与した日に、４８時間経ってから、百日咳毒素も注射することができる。
【０２８６】
組換え型ヒツジＩＦＮτは、合成遺伝子構造物を使用してピキアパストリス内に発現できる。ＳＤＳ−ＰＡＧＥ及び銀染色法による決定に従い、タンパク質は、培養基内に分泌され、連続ＤＥＡＥ−セルロース及びヒドロキシアパタイトクロマトグラフィにより電気泳動的に均一に精製されるようにできる。
【０２８７】
マウスは、ＣＩＡの標識について毎日調べることができる。疾病の重症度は、１．一方のつま先の赤み、２．一方のつま先の赤み及び腫れ、３．一方のつま先の変形、４．それぞれの追加のつま先について、指数が指数に加えられる、という４つの尺度に基づいて関節炎指数として等級分けすることができる。
【０２８８】
マウスは、移植手術後、ＩＦＮτで治療することができる。様々な用量のＩＦＮτ（例えば、約１×１０５Ｕ／日から約５×１０１２Ｕ／日）を経口（経胃）投与することによりマウスを治療することができる。対照群のマウスは、賦形剤のみを受ける。
【実施例１７】
【０２８９】
臓器移植拒絶反応に対するＩＦＮτ治療の効果
この実施例は、ＩＦＮτが臓器移植拒絶反応を予防又は他の何らかの形で寛解するのにどのように好都合であるかを示す。ラットモデルにおける腎臓移植が実施される。ラットの一群は、ＩＦＮτを受け、対照群は、賦形剤のみを受ける。腎臓同種移植生存及び選択された免疫系細胞の存在により測定されるような、同種移植拒絶反応におけるＩＦＮτの効果が調べられる。ＩＦＮτによる治療は、腎臓同種移植生存率を高め、移植片内の選択された免疫系細胞の存在を減少させることが予想される。
【０２９０】
Ｉｎｂｒｅｄ  Ｆｉｓｈｅｒ  ３４４（Ｆ３４４）及びＬｅｗｉｓラットをＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｉｔａｌｉａ（イタリア、カルコ）から購入することができる。Ｌｅｗｉｓラットを臓器被提供者とし、Ｆｉｓｈｅｒラットを臓器提供者とすることができる。これらの動物は、実施例７で説明されているように保持することができる。
【０２９１】
腎臓移植は、Ｎｏｒｉｓ、Ｍ．ら、Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．、１２：１９３７−１９４６（２００１）で説明されているように行うことができる。簡単に言うと、左提供者腎臓を取り除き、腎血管がすでに分離され、固定されている、また左自然腎が取り除かれている被提供者の中の同じ位置に配置することができる。腎動脈、静脈、及び尿管の端々吻合術は、１０−Ｏ  Ｐｒｏｌｅｎ縫合糸を使用して実施することができる。右自然腎は、手術後１１日目に取り除くことができる。動物は移植された腎機能に依存するため、完全同種移植障害は、動物の死亡として定義することができる。
【０２９２】
選択された免疫系細胞の免疫組織化学分析は、Ｎｏｒｉｓ、Ｍ．ら、Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．、１２：１９３７−１９４６（２００１）で説明されているように行うことができる。簡単に言うと、マウスのモノクローナル抗体は、１）ＥＤ１抗原、２）ラットＭＨＣクラスＩＩ抗原単源性決定因子、３）ＣＤ４細胞表面糖タンパク質、４）ラットＣＤ８細胞表面糖タンパク質、５）ラット樹状細胞制約抗原の検出に使用することができる。すべての抗原は、間接的免疫蛍光技術により分析することができる。
【０２９３】
ラットは、移植手術後、ＩＦＮτで治療することができる。様々な用量のＩＦＮτ（例えば、約１×１０５Ｕ／日から約５×１０１２Ｕ／日）を経口（経胃）投与することによりラットを治療することができる。対照群のラットは、賦形剤のみを受ける。
【０２９４】
本発明は、特定の実施形態に関して説明されているが、これは、本発明から逸脱することなく、様々な変更及び修正を加えられることは当業者には明白なことであろう。
【図面の簡単な説明】
【０２９５】
【図１Ａ】多発性硬化症を患い、ＩＦＮτで経口治療を受ける患者のＩＬ−１０血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を、１〜２９日まで０．２ｍｇのＩＦＮτ（図１Ａ）で毎日治療される患者群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩについて、日数の関数として示すグラフである。
【図１Ｂ】多発性硬化症を患い、ＩＦＮτで経口治療を受ける患者のＩＬ−１０血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を、１〜２９日まで０．６ｍｇのＩＦＮτ（図１Ｂ）で毎日治療される患者群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩについて、日数の関数として示すグラフである。
【図１Ｃ】多発性硬化症を患い、ＩＦＮτで経口治療を受ける患者のＩＬ−１０血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を、１〜２９日まで１．８ｍｇのＩＦＮτ（図１Ｃ）で毎日治療される患者群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩについて、日数の関数として示すグラフである。
【図１Ｄ】１〜２９日まで、０．２ｍｇのＩＦＮτ（菱形、群Ｉ）、０．６ｍｇのｌＦＮτ（正方形、群ＩＩ）、及び１．８ｍｇのＩＦＮτ（三角形、群ＩＩＩ）で毎日治療される試験群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩのそれぞれに属す患者に対する平均ＩＬ−１０血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を示すグラフである。
【図２Ａ】多発性硬化症を患い、ＩＦＮτで経口治療を受ける患者のＩＦＮ−γ血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を、１〜２９日まで、０．２ｍｇのＩＦＮτ（図２Ａ）で毎日治療される患者群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩについて、日数の関数として示すグラフである。
【図２Ｂ】多発性硬化症を患い、ＩＦＮτで経口治療を受ける患者のＩＦＮ−γ血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を、１〜２９日まで、０．６ｍｇのＩＦＮτ（図２Ｂ）で毎日治療される患者群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩについて、日数の関数として示すグラフである。
【図２Ｃ】多発性硬化症を患い、ＩＦＮτで経口治療を受ける患者のＩＦＮ−γ血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を、１〜２９日まで、１．８ｍｇのＩＦＮτ（図２Ｃ）で毎日治療される患者群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩについて、日数の関数として示すグラフである。
【図２Ｄ】１〜２９日まで、０．２ｍｇのＩＦＮτ（菱形、群Ｉ）、０．６ｍｇのｌＦＮτ（正方形、群ＩＩ）、及び１．８ｍｇのＩＦＮτ（三角形、群ＩＩＩ）で毎日治療される試験群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩのそれぞれに属す患者に対する平均ＩＦＮ−γ血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を示すグラフである。
【図３Ａ】図１〜２に関して説明されている治療群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩから選択された個々の患者に対する、両方ともｐｇ／ｍＬを単位とする、ＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す図である。
【図３Ｂ】図１〜２に関して説明されている治療群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩから選択された個々の患者に対する、両方ともｐｇ／ｍＬを単位とする、ＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す図である。
【図３Ｃ】図１〜２に関して説明されている治療群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩから選択された個々の患者に対する、両方ともｐｇ／ｍＬを単位とする、ＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す図である。
【図３Ｄ】図１〜２に関して説明されている治療群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩから選択された個々の患者に対する、両方ともｐｇ／ｍＬを単位とする、ＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す図である。
【図３Ｅ】図１〜２に関して説明されている治療群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩから選択された個々の患者に対する、両方ともｐｇ／ｍＬを単位とする、ＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す図である。
【図４Ａ】Ｃ型肝炎を患い、ＩＦＮτで経口治療を受ける患者のＩＬ−１０血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を、毎日３回０．３３ｍｇのＩＦＮτで毎日治療を受ける試験群Ｉに属す６人の患者（図４Ａ）について日数の関数として示すグラフである。
【図４Ｂ】Ｃ型肝炎を患い、ＩＦＮτで経口治療を受ける患者のＩＬ−１０血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を、毎日３回１．０ｍｇのＩＦＮτで毎日治療を受ける試験群ＩＩに属す６人の患者（図４Ｂ）について日数の関数として示すグラフである。
【図４Ｃ】Ｃ型肝炎を患い、ＩＦＮτで経口治療を受ける患者のＩＬ−１０血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を、毎日３回３ｍｇのＩＦＮτで毎日治療を受ける試験群ＩＩＩに属す６人の患者（図４Ｃ）について日数の関数として示すグラフである。
【図４Ｄ】血清ＩＬ−１０レベルの増加率を試験群Ｉ（菱形、毎日３回０．３３ｍｇ）、試験群ＩＩ（正方形、毎日３回１ｍｇ）、及び試験群ＩＩＩ（三角形、毎日３回３ｍｇ）について時間の関数として示す、図４Ａ〜４Ｃの試験群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩの要約プロットである。
【図５Ａ】Ｃ型肝炎を患い、ＩＦＮτで経口治療を受ける患者のＩＦＮ−γ血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を、毎日３回０．３３ｍｇのＩＦＮτで毎日治療を受ける試験群Ｉに属す６人の患者（図５Ａ）について日数の関数として示すグラフである。
【図５Ｂ】Ｃ型肝炎を患い、ＩＦＮτで経口治療を受ける患者のＩＦＮ−γ血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を、毎日３回１．０ｍｇのＩＦＮτで毎日治療を受ける試験群ＩＩに属す６人の患者（図５Ｂ）について日数の関数として示すグラフである。
【図５Ｃ】Ｃ型肝炎を患い、ＩＦＮτで経口治療を受ける患者のＩＦＮ−γ血清レベル（ｐｇ／ｍＬ）を、毎日３回３ｍｇのＩＦＮτで毎日治療を受ける試験群ＩＩＩに属す６人の患者（図５Ｃ）について日数の関数として示すグラフである。
【図５Ｄ】平均血清ＩＦＮ−γレベルを試験群Ｉ（菱形、毎日３回０．３３ｍｇ）、試験群ＩＩ（円、毎日３回１ｍｇ）、及び試験群ＩＩＩ（三角形、毎日３回３ｍｇ）について時間の関数として示す、図５Ａ〜５Ｃの試験群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩの要約プロットである。
【図６Ａ】図４〜５に関して説明されている治療群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩから選択された個々の患者に対する、両方ともｐｇ／ｍＬを単位とする、ＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す図である。
【図６Ｂ】図４〜５に関して説明されている治療群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩから選択された個々の患者に対する、両方ともｐｇ／ｍＬを単位とする、ＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す図である。
【図６Ｃ】図４〜５に関して説明されている治療群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩから選択された個々の患者に対する、両方ともｐｇ／ｍＬを単位とする、ＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す図である。
【図６Ｄ】図４〜５に関して説明されている治療群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩから選択された個々の患者に対する、両方ともｐｇ／ｍＬを単位とする、ＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す図である。
【図６Ｅ】図４〜５に関して説明されている治療群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩから選択された個々の患者に対する、両方ともｐｇ／ｍＬを単位とする、ＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す図である。
【図６Ｆ】図４〜５に関して説明されている治療群Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩから選択された個々の患者に対する、両方ともｐｇ／ｍＬを単位とする、ＩＬ−１０（菱形）及びＩＦＮ−γ（正方形）血清濃度を示す図である。
【図７Ａ】ＩＦＮτ  ７．５ｍｇを毎日２回空腹時に投薬した場合の、Ｃ型肝炎を患い、ＩＦＮτで経口治療を受けている患者のＩＬ−１０血清レベル（図７Ａ）を日数の関数として示すグラフである。
【図７Ｂ】ＩＦＮτ  ７．５ｍｇを毎日２回空腹時に投薬した場合の、Ｃ型肝炎を患い、ＩＦＮτで経口治療を受けている患者のＩＦＮ−γ血清レベル（図７Ｂ）を日数の関数として示すグラフである。
【図８Ａ】ＩＬ−１２値が０．１×測定されたＩＬ−１２血清レベルとして表される、図７Ａ〜７Ｂに関して説明されているような治療を受けている患者について、ｐｇ／ｍＬを単位として、ＩＬ−１０（菱形）、ＩＦＮ−γ（正方形）、及びＩＬ−１２（三角形）血清レベルを示す図である。
【図８Ｂ】ＩＬ−１２値が０．１×測定されたＩＬ−１２血清レベルとして表される、図７Ａ〜７Ｂに関して説明されているような治療を受けている患者について、ｐｇ／ｍＬを単位として、ＩＬ−１０（菱形）、ＩＦＮ−γ（正方形）、及びＩＬ−１２（三角形）血清レベルを示す図である。
【図８Ｃ】ＩＬ−１２値が０．１×測定されたＩＬ−１２血清レベルとして表される、図７Ａ〜７Ｂに関して説明されているような治療を受けている患者について、ｐｇ／ｍＬを単位として、ＩＬ−１０（菱形）、ＩＦＮ−γ（正方形）、及びＩＬ−１２（三角形）血清レベルを示す図である。
【図８Ｄ】ＩＬ−１２値が０．１×測定されたＩＬ−１２血清レベルとして表される、図７Ａ〜７Ｂに関して説明されているような治療を受けている患者について、ｐｇ／ｍＬを単位として、ＩＬ−１０（菱形）、ＩＦＮ−γ（正方形）、及びＩＬ−１２（三角形）血清レベルを示す図である。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図１Ｄ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図３Ｅ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図４Ｄ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図５Ｄ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図６Ｄ】
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【図６Ｅ】
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【図６Ｆ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図８Ｄ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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