(57)【要約】【解決手段】試料チャンバーと、試料チャンバー内に細胞を含む流体生物試料が置かれた後、遠心分離機内の所定位置において顕微鏡スライドがマウントされるよう適合したスライドホルダーと、遠心分離装置は顕微鏡スライドと係合するために適合したベース（14）を有するボデイ（10）と、そのチャンバーに流体を導くための開放部（15）を有し、流体試料に対しチャンバーを形成するベース一端上の構造とで構成され、ベース（14）は開孔（18）およびベース（14）を横断して置かれた顕微鏡スライドの表面に関してはかかる開孔のエッジをシールする手段または細胞の通過を妨げ流体の通過を可能にする手段を支持することを含み、遠心分離装置はさらにバックプレートがベース（14）に係止された顕微鏡スライドのリアに対して閉じられた際にスライドはベースとカバープレート間に位置し、かつカバープレートはこの閉じられた位置に保持されるように構成したバックプレート（12）を含み、そのベース（14）はサポートフレーム（17）とそのサポートフレーム内で該開孔（18）と共に用意されたカウンタープレート（19）とで構成され、プレッシャープレートはフレキシブル弾性手段（40、42）により該フレームで支持され、そのフレキシブル弾性手段はカウンタープレートが“フロート”となり、かつバックプレートが閉じられたときにカウンタープレートとバックプレート間に位置する顕微鏡スライドと共にカウンタープレートが配列するようにしてある構成とした遠心分離装置。【選択図】図１
2007502974.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料チャンバーと、細胞を含む生物流体試料が試料チャンバー内に置かれた後遠心分離機内の設定位置内で顕微鏡スライドと共にマウントするようにしたスライドホルダーとの組み合せによる遠心分離装置であって、その遠心分離装置は、顕微鏡スライドに係止するためのベースを有するボデイと、そのチャンバーに流体を導くための開孔を有し流体試料のためにチャンバーを形成するベースの一端上の構造とで構成され、そのベースは、開孔と、ベースを横断して置かれた顕微鏡スライドの表面にてかかる開孔のエッジをシールするための手段を支持すること、または細胞の通過を妨げ流体の通過を可能にすることを含み、遠心分離装置はさらにバックプレートがベースに係止した顕微鏡スライドのリアに対し閉じられている際に、スライドはベースとカバープレート間に位置し、かつこの閉じられた位置にカバープレートが保持されるように構成したバックプレートを含み、そのベースはサポートフレームとそのサポートフレーム内に開孔を有するプレッシャープレートで構成され、プレッシャープレートは“フロート”状態になるようフレキシブル弾性手段によりそのフレームで支持され、かつバックプレートが閉じた際にプレッシャープレートとバックプレート間に位置する顕微鏡スライドとそれ自体が配列する、構成とした遠心分離装置。
【請求項２】
フレキシブル弾性マウント手段は、プレッシャープレートが、フレームの面と装置の閉じた位置でかかる顕微鏡スライドの主表面の平面と概して平行で二本の相互に垂直な軸の周囲で傾くようにした、請求項１による遠心分離装置。
【請求項３】
弾性フレキシブル支持手段は装置の部分に一体的に成形配置されたトーションバーで構成する前記請求項のいずれか１項による遠心分離装置。
【請求項４】
添付図面に示され参照され実質的に先に述べられた遠心分離装置。
【請求項５】
ある種の新規な特徴またはここに述べた特徴の組み合わせ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の説明
この発明は、試料チャンバーおよびスライドホルダーの組み合わせで構成される遠心分離装置に関するもので、試料チャンバー内の細胞を含んだ流体生物学的な試料が置かれた後、遠心分離機内の所定位置に顕微鏡スライドがマウントされるようにし、装置がそのように配列され、遠心分離機が作用した際に、薄層、理想的には細胞の単一層は流体からガラスの顕微鏡スライド上の予め決められた堆積領域に沈着する。かかる遠心分離装置は、ここに“具体的に特定される”として言及される。
【０００２】
具体的に特定される遠心分離装置の幅広い態様が既に知られている。かかる装置が開示された例として、例えば米国特許第4,391,710号、4,696,743号、4,853,188号、および4,874,582号明細書さらにヨーロッパ特許番号第0184374号および0047840号公報がある。ある種の例では再使用されており、それは装置が顕微鏡スライド上の液体試料から細胞を堆積させるために使用された後、スライドは移され、装置をクリーンにした後フレッシュなスライドが装着され、フレッシュな流体試料が試料チャンバー内に置かれて装置は再び遠心分離装置内におかれ、この繰り返しがされるようにしたものである。これらの構成におけるスライドは、当然にある種の着脱自在なクリップ手段等により支持されている。しかる後のある仕様の遠心分離装置は使い捨てであり、一回以上の使用ができないか適さないような仕様にデザインされており、それによって使用の都度、不適切なクリーニング工程での汚染問題が回避される。それらの避け難い使い捨て仕様に鑑みれば、後者仕様の装置は大部分が生産コストを押えるためにプラスチックとしてある。
【０００３】
具体的に特定された遠心分離の装置は一般的に次のような構成であり、つまり試料チャンバーおよび試料チャンバー内に細胞を含んだ流体の生物学的試料が遠心分離装機の所定位置内に置かれた後顕微鏡スライドと共にスライドホルダーが結合した構造であり、遠心分離の装置はかかる顕微鏡スライドを係合するために構成されたベースを有するボデイ、試料チャンバーに液体を導くための開孔を備えた試料チャンバーが形成されるベースの一端の構造、ベースは試料チャンバーと連通するための開孔およびベースを横断して位置する顕微鏡スライドの面に関してかかる開孔のエッジをシールするための、または細胞の通過を妨げ液体の通過をなすベース支持手段を含んでいる。かかる遠心分離の装置はさらにベースにヒンジ結合または他の固定手段で固定したバックプレートを含んでいる。
【０００４】
具体的に特定された種類の成形されたプラスチック遠心分離装置の特に一回使用に関して生じる問題点は、シーリング効果を確保するまたはスライドに関する試料チャンバーの連通孔エッジの見かけ上のシーリングである。出願人は英国特許出願番号第031047.7号にて、スライドのシールを効果的にするために該開孔の周辺にエラストマーによるガスケットを使用する提案をしてきた。しかし、過去に一般的なものであったとしては、開孔が設けられた装置のベースとスライド間に液体吸収紙シートまたはカードが介在したものであり、それらは遠心分離装置内の開孔と整列する孔を有し、試料からの液体を吸収するように作用し、一方スライド上に堆積する細胞、他の通過を阻止する。かかるフィルターカード配置のものは、特定された種類の小容量遠心分離装置に好ましい。しかし、フィルターカード紙に特殊な圧縮が使用され、閉じた位置での該ベース面の正確な配列がスライド面に対して保持されたフィルターカードに対して係合、支持するので、フィルターカードを越えた流体（および/または細胞材料）の洩れを回避させるためには、対向するスライド面とその面の適正な配列が必要である。
【０００５】
この発明の一つの目的は、改良された遠心分離装置を提供することである。
この発明の一つの特徴によれば、それは細胞を含む流体生物化学的試料が試料チャンバー内に置かれた後、遠心分離装置内の所定位置内で顕微鏡スライドとマウントされるように適した試料チャンバーとスライドホルダーの組合せにて構成される遠心分離装置を提供するもので、遠心分離装置は顕微鏡スライドと係合するために適したベースを有するボデイおよびそのチャンバーに液体を導くための開孔を有し、流体試料のためのチャンバーを形成するベースの一端上の配列とで構成し、ベースは開孔とベースを横断して置かれる顕微鏡スライドの表面に関してはかかる開孔のエッジをシーリングするためのまたは細胞の通過を防ぎ液体の通過を果たす手段を支持することを含み、遠心分離装置はさらにバックプレートがベースに係止した顕微鏡スライドのリヤに対して閉じられる際に、スライドはベースとカバープレート間に位置しかつこの閉じた位置にカバープレートを保持するように構成したバックプレートを含み、そのベースはサポートフレームとそのサポートフレーム内で開孔を備えたプレッシャープレートで構成され、プレッシャープレートはそれが“フロート”となることを可能にするようなフレキシブルな弾性手段によりそのフレームで支持され、かつバックプレートが閉じられるときにプレッシャープレートとバックプレートとの間に位置する顕微鏡スライドと共にそれ自身も配列している。
【０００６】
発明の一態様は添付された図面を参照して以下に説明される。
図１はこの発明による遠心分離装置の後方からみた斜視図で、バックプレートがボデイ部に関して開放し、そのボデイ部にはフィルターが装着された状態である。
図２は図１の遠心分離装置を拡大した後方からの立面図で、フィルターカードは除去され、同様に開放状態である。
図３はフィルターカードを除いた図１に相当する斜視図である。
図４は図１-３の装置のボデイ部縦断面の部分図であり、そして
図５は図１-４の遠心分離装置の背面上方からの部分斜視図で、バックプレートがボデイ部に対して閉じられ、顕微鏡スライドがそれらの間に位置している状態を表している。
図６はバックプレートが開放位置の斜視図で、図1-４遠心分離装置の変形例である。
【０００７】
図１-５を参照して、この発明による遠心分離装置は、ボデイ部10およびバックプレート12で構成され、ポリプロピレンのような適切なプラスチック材料による成形によって互いに一体的に形成され、バックプレート12は一体的な“リビングヒンジ”22の方法によってボデイ部10に結合している。図１-５に示すように、ボデイ部10はベース14を含み、後に述べるようにフレーム17が、前方に拡張した一体的構成の試料チャンバー16を備えたプレート19に隣接し、そのチャンバー16はベース14から離れた端部にて閉塞され、かつプレート19の面内でありまた隙間か開孔18で終結している。ロート状部15は試料チャンバー内の入口開口から上方に延び、それによって流体試料を試料チャンバー16内に入れられるようになっている。
【０００８】
ベース14はバックプレート12のように概ね長方形状であり、リビングヒンジ22はベース14の垂直なエッジの一つに沿って延長しており、さらに詳しくはフレーム17の縦エッジの一つに沿うものであり、バックプレート12の垂直なエッジに隣接している。バックプレート12の垂直なエッジは、リビングヒンジ22から離間しており、リビングヒンジ22から離間したベース14のエッジに隣接するボデイ10近傍に設けられたエレメント25と協働するフック部24を備え、エレメント、フック部24と共に係合配列を形成し、そうすることでバックプレートは、図５の26で示されベース14とバックプレート12間にホールドされ顕微鏡スライドと共にベース14上の閉塞された位置内に固定される。説明したように、バックプレート12の上方エッジは、指摘したようにスカラップまたはくぼみ状であり、それは次に述べるように、遠心分離の後、装置からスライドの移動に指にて顕微鏡スライド26の上方エッジを素早く握れるようにするためである。フィルターカード20は、フレーム17の後面に固定され、プレート19を覆って延長している。フィルターカード20は、液体吸収材または紙のシートで構成され、それは例えば超音波溶着によりその上端と下端で（図１に見られるように）フレーム17にされ、カウンタープレート19を覆って延長している。フィルターカード20は、開孔21を有し、それはポート18とサイズ、形状および位置が対応しており、さらに整列している。
【０００９】
装置の使用において、顕微鏡スライド26は、バックプレート12とベース14上のフィルターカード間に位置する（図１−３は、バックプレートの前面に沿ってフィットした顕微鏡スライド26の下端を支持するために一体的に設けたラグ31を示したもので、スライドと共にベース14に沿って閉じられる）。
【００１０】
装置は、しかる後遠心分離機（図示しない）内にマウントされ、その手段はジャーナルのようなバックプレートの側辺から突出したボス30が、遠心分離機のマウント構造内の補助スロットによって備えられたベアリング内に受容されるものである。遠心分離機が静止しているとき、装置も遠心分離機内で静止し、スライド26は傾いた位置となる。遠心分離機が回転した際、装置はボス30を軸に回転し、それはスライドが垂直である位置である。遠心分離機が回転した際、発生した遠心力はガラススライド26の表面に対して生物学的試料内の細胞の迅速な沈殿を起させ、ポート18のエッジおよびカード20内の開孔21のエッジにて仕切られた領域内にこれらの細胞は遠心分離機が停止した後にスライド上の薄層内に留まる。遠心分離機が停止した後、遠心分離の装置は遠心分離機から離れ、そしてバックプレートを開いた後にスライドは注意深く外される。係止部24、25は、適切に工夫されたもので、例えば我々の同時継続英国出願GB0301047.7にて述べられているように、バックプレート開放プロセスは係止部の部分を破壊するもので、遠心分離の装置は再使用できないことを保証している。
【００１１】
先に述べたように、ベース14は、周辺フレーム17およびセンターパネルまたはカウンタープレート19で構成され、フレーム17に関しカウンタープレート19を可動可能な手段でフレーム17に関してマウントしている。フレーム17およびカウンタープレート19は共に実質的に平面で後面を仕上げ面とし、すなわち試料チャンバー16から離れた面で、カウンタープレート19およびマウント手段のストレスのない状態としてあり、カウンタープレートのリア面は概して平行であって図4に示されるようにフレーム17のリア面の水平面後方に僅かなスペースを設けてある。試料チャンバー16および漏斗15はカウンタープレート19と共に硬質であり、周辺フレーム17に関してカウンタープレート19と共に僅かに動くことができる。
【００１２】
理想的には、装置の閉塞状態において、フィルターカードとポート18のエッジ間、または開孔21周辺領域におけるフィルターカードとスライド26間にギャップが無いということを確実にするために、液体成分のような試料の細胞成分はリークが考えられ、スライドは開孔21の周辺の総てをフィルターペーパーで均等に支持すべきであり、ポート18回りのカウンタープレートの部分も同様にフィルターペーパーに押し付けて均等に支持すべきである。したがって、理想的にはカウンタープレートおよびスライドの関連部分、そしてスライドに押し付けて支持するバックプレートの部分は、この状態を遂行するために実質的に平行とするべきである。さらに、開孔18、21の領域において、それらはフィルターカードに押し付けられたスライドそしてカウンタープレートに押し付けられる押圧力によりコントロールするべきである。不可避な生産誤差にもかかわらずこの状態を遂行するために、上記のようにカウンタープレート19は、フレーム17内にマウントされ、それはカウンタープレートが“フロート”状になるような方法であり、つまりフレーム17に関して僅かにその位置を調整するためである。図２に好例を示すように、このことは次のように遂行される。
【００１３】
フレーム17は、概して四辺形プレートの形で得られ、好ましくは硬質構成を有し（詳細を示していない）、一体的にプレートの前面から延びており、つまりカウンタープレートから延びた試料チャンバーの方向に延びている。カウンタープレート19およびサポート、または支持手段はフレーム17内のほぼ四辺形の開口部38内にマウントされ、それは開口部38の上端と下端夫々のトーションバー列40、42によってされ（図２に示される）、カウンタープレート19は開口部38にて相補する形態を有し、カウンタープレート19のサイドエッジと開口部38の隣接エッジの広いギャップ間にほぼ均一なギャップをもってマウントされ、プレート19の上部エッジと開口部38の上部エッジ間およびプレート19の下部エッジと開口部38の下部エッジ間でトーションバー配列にて収容している。説明した構成において、各トーションバー列は、第１のバー44、開口部38上方または下方エッジの夫々に隣接し、さらに開口部の一方の側部エッジから他方への開口部38の渡し、第２の平行バー46、上方コーナでの二つのラグ48間のスペースの渡し、またはカウンタープレート19の下部コーナでの二つのラグ49、カウンタープレート19よりも狭くかつ第1、第2のバー44、46の制限された中間部分を越え沿って延びた中間部50にて構成される。
【００１４】
図４に現したように、開放位置におけるバックプレート12を含めた装置の部分の非ストレス位置において、カウンタープレート19の背面は先に述べたように、フレーム17リア面の相対的に多少後方にセットする。この位置において、カウンタープレートのリア面は、フレーム17のリア面とほぼ平行になっている。バックプレートがスライドにて閉塞位置に移動し、そしてフィルターカード20がバックプレート、カウンタープレートそしてフレーム間に挿入された際、フィルターカードはスライド、カウンタープレート19、フレーム間に挿入され、カウンタープレート19は、フレーム17の前面に移る。これはスライドおよびフィルターカードを介してバックプレートにより与えられた押圧によるものであり、この位置変換は、弾性のねじれ、ト-ションバーの反発性、特にト-ションバー44の長さによるものである。次のようなことも起こり得るが、例えば不正確な生産で、バックプレートの閉塞位置においてバックプレートにより支持されたスライドの位置がフレーム17のリア面に適正に平行でない、または非ストレスの位置において、カウンタープレート19のリア面がフレーム17のリア面に平行にならなかったり、上部および下部トーションバー44、46反発性が違ったりで、必要ならトーションバー列のウェブ50の横断ねじれを釣り合わせ（図２に見られるような縦軸について）、カウンタープレート19をスライド/フィルターカードの組み合わせに完全に合わせて配列する事を可能にする。カウンタープレート19が図２に見られるように垂直軸に対して捩じられているその緩和は、長短のトーションバーに結合したウェブ50の横断の拡がり（例えば長いトーションバーに平行な拡がり）の大きさに依存するもので、概して水平軸に対する各トーションバー列の反発性が僅かに小さいことが必要である。
【００１５】
一方、上記において、リアカバーのフロント面およびフレームのリア面、カウンタープレートは、ほぼ平面として説明してあり、スライドガラスとフィルターカードをカウンタープレートとリアカバー間に強固なクランピングを確保するためにそれは優位であり、ポート18の周囲、環状領域180はカウンタープレートのリヤ面の余剰部を僅かに盛り上げて立ち上げかつバックプレート12を形成するために用意され、その前方に示されるように、水平、垂直に延びた複数のリブを有し、環状または筒状リブ182はバックプレートの閉塞位置内の環状領域180に整列するために位置し、水平および垂直リブのフロント面および環状領域182はスライド26のリア面に係合するための共通面内に横たわる。
【００１６】
図６は図１から図５の装置とは異なるものの説明であり、それには個々の開孔またはポート18a、18bで仕切られた二つの試料チャンバー（示していない）があり、それはカウンタープレート内でかつ夫々の漏斗に接続されている（個別にまたは一つの漏斗構成15aの部分で相互に分離することで仕切られる）。図６の変形は、ポート18a、18bに整列する個々の開孔を有するフィルターカード（示していない）の使用を意図したものである。
【００１７】
この態様において述べたフレーム、カウンタープレートおよびトーションバ-列は、遠心分離装置の他の部分と共に好ましくは単一体にて形成され、それはポリプロピレンのような適切なプラスチック材料にて単一なインジェクションモールドにてなされる。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】本発明による遠心分離装置の背面からみた斜視図
【図２】図１の遠心分離装置を拡大した背面立面図
【図３】フィルターカードを除いた図１に相当する斜視図
【図４】図１-３の装置のボデイ部縦断面の部分立面図
【図５】図１-４の遠心分離装置の背面上方からの部分斜視図
【図６】バックプレートが開放位置の斜視図
【符号の説明】
【００１９】
10：ボデイ
12：バックプレート
14：ベース
15：漏斗
16：試料チャンバー
17：フレーム
19：カウンタープレート
26：顕微鏡スライド
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
2007502974.tif 000008
【国際調査報告】
2007502974.tif 000009
2007502974.tif 000010