(57)【要約】  構造式Ｉの化合物はアンドロゲン受容体（ＡＲ）の組織選択的モジュレーターである。これらの化合物は筋緊張低下の増強や、骨粗鬆症、骨減少症、グルココルチコイド誘発性骨粗鬆症、歯周病、骨折、骨再建手術後の骨損傷、サルコペニア、虚弱、皮膚老化、男性性腺機能低下症、女性の閉経後症状、アテローム性動脈硬化症、高コレステロール血症、高脂血症、肥満症、再生不良性貧血及び他の造血障害、炎症性関節炎及び関節修復、ＨＩＶ消耗、前立腺癌、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、癌悪液質、アルツハイマー病、筋ジストロフィー、認知低下、性機能不全、睡眠時無呼吸、鬱病、早発卵巣不全、並びに自己免疫疾患等のアンドロゲン欠乏に起因するか又はアンドロゲン投与により改善することができる病態の治療に単剤又は他の活性物質との併用剤として有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造式Ｉ：
【化１】
2007534757.tif 000016
［式中、
Ｘ及びＹは各々独立して水素、ハロゲン、ヒドロキシ、及びＣ１−３アルキルから選択され、前記アルキルは場合により１〜７個のフッ素原子で置換されており、但し、Ｘがメチルであるとき、Ｙはメチル以外のものであるか；又は
ＸとＹはそれらが結合している炭素原子と一緒になって場合によりＣ３−６シクロアルキル基を形成することができ；
Ｚは水素、カルボニル（Ｃ１−３アルキル）、ヒドロキシ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシメチル、（Ｃ０−６アルキル）２アミノ、及びＣ１−３アルキルから選択され、前記アルコキシ及びアルキルは各々場合により１〜７個のフッ素原子で置換されており；但し、Ｘが水素であるとき、Ｙは水素以外のものである］の化合物又はその医薬的に許容可能な塩もしくは立体異性体。
【請求項２】
Ｘがメチルであり、Ｙが水素及びＣ１−３アルキルから選択されるか；又はＸとＹはそれらが結合している炭素原子と一緒になって場合によりシクロプロピル基を形成することができる請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｚが水素及びハロゲンから選択される請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｎ−［１（Ｒ）−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）エチル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド；
Ｎ−［１（Ｓ）−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）エチル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド；
Ｎ−［１−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）シクロプロピル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド；
Ｎ−［１（Ｒ）−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］−（５−ブロモピリジン）−２−イル）エチル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド；並びにその医薬的に許容可能な塩及び立体異性体から選択される請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
治療又は予防を必要とする哺乳動物における筋緊張低下、骨粗鬆症、骨減少症、グルココルチコイド誘発性骨粗鬆症、歯周病、骨折、骨再建手術後の骨損傷、サルコペニア、虚弱、皮膚老化、男性性腺機能低下症、女性の閉経後症状、アテローム性動脈硬化症、高コレステロール血症、高脂血症、肥満症、再生不良性貧血、造血障害、関節炎病態及び関節修復、ＨＩＶ消耗、前立腺癌、癌悪液質、筋ジストロフィー、アルツハイマー病、認知低下、性機能不全、睡眠時無呼吸、良性前立腺肥大、鬱病、早発卵巣不全、並びに自己免疫疾患から選択される病態の治療又は予防用医薬の製造における請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩もしくは立体異性体の使用。
【請求項６】
前記病態が骨粗鬆症である請求項５に記載の使用。
【請求項７】
請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩もしくは立体異性体と医薬的に許容可能なキャリヤーを含有する医薬組成物。
【請求項８】
単剤又はプロゲスチンもしくはプロゲスチン誘導体との併用剤としてのエストロゲン又はエストロゲン誘導体、ビスホスホネート、抗エストロゲン剤又は選択的エストロゲン受容体モジュレーター、ανβ３インテグリン受容体アンタゴニスト、カテプシンＫ阻害剤、ｎＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、破骨細胞液胞型ＡＴＰａｓｅ阻害剤、破骨細胞受容体に結合するＶＥＧＦのアンタゴニスト、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γのアクチベーター、カルシトニン、カルシウム受容体アンタゴニスト、副甲状腺ホルモン又はそのアナログ、成長ホルモン分泌促進剤、ヒト成長ホルモン、インスリン様成長因子、ｐ３８蛋白質キナーゼ阻害剤、骨形態形成蛋白質、ＢＭＰアンタゴニズムの阻害剤、プロスタグランジン誘導体、ビタミンＤ又はビタミンＤ誘導体、ビタミンＫ又はビタミンＫ誘導体、イプリフラボン、フッ化物塩、カルシウム栄養サプリメント、及びオステオプロテゲリンから選択される活性成分を更に含有する請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
前記ビスホスホネートがアレンドロネートである請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩もしくは立体異性体と医薬的に許容可能なキャリヤーを配合することを含む医薬組成物の製造方法。
【請求項１１】
関節炎病態が関節リウマチ及び変形性関節症から選択される請求項５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はフッ素付加４−アザステロイド誘導体、その合成、アンドロゲン受容体モジュレーターとしてのその使用に関する。より詳細には、本発明の化合物は組織選択的アンドロゲン受容体モジュレーター（ＳＡＲＭ）であるため、骨粗鬆症、歯周病、骨折、虚弱、及びサルコペニア等のアンドロゲン欠乏に起因するか又はアンドロゲン投与により改善することができる病態の治療に有用である。更に、本発明のＳＡＲＭは鬱病、性機能不全、及び認知低下等のテストステロン低下に関連する精神障害を治療するために使用することもできる。ＳＡＲＭは特定組織におけるアンタゴニストであるため、良性前立腺肥大や睡眠時無呼吸等のアンドロゲン濃度又は活性の上昇により発症する病態にも有用である。
【背景技術】
【０００２】
アンドロゲン受容体（ＡＲ）はエストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、グルココルチコイド受容体、及びミネラロコルチコイド受容体と共にステロイド／甲状腺ホルモン核受容体のスーパーファミリーに属する。ＡＲは多数の身体組織で発現され、テストステロン（Ｔ）やジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）等のアンドロゲンの生理学的及び病態生理学的作用を媒介する受容体である。構造的には、ＡＲはリガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）、ＤＮＡ結合ドメイン、及びアミノ末端ドメインの３つの機能的ドメインから構成される。ＡＲと結合し、内在ＡＲリガンドの作用に類似する作用をもつ化合物をＡＲアゴニストと言い、内在ＡＲリガンドの作用を阻害する化合物をＡＲアンタゴニストと言う。
【０００３】
ＡＲと結合するアンドロゲンリガンドはリガンド／受容体複合体を誘導し、細胞の核内に移行後に調節ＤＮＡ配列（アンドロゲン応答配列と言う）と結合する。その後、補因子と呼ばれる他の蛋白質が動員され、受容体と結合して遺伝子転写を生じる。
【０００４】
アンドロゲン療法は生殖障害や原発性及び二次性男性性腺機能低下症等の各種男性疾患を治療するために用いられている。更に、骨疾患、造血障害、神経筋疾患、リウマチ性疾患、消耗性疾患等の筋骨格障害の治療や、女性アンドロゲン欠乏症等のホルモン補充療法（ＨＲＴ）用として多数の天然又は合成ＡＲアゴニストが研究されている。更に、前立腺癌を治療するためにフルタミドやビカルタミド等のＡＲアンタゴニストが使用されている。従って、男性化や高密度リポ蛋白質コレステロール（ＨＤＬ）の抑制等のマイナスのアンドロゲン特性なしにアンドロゲンの所望の骨及び筋同化作用を生じるようにＡＲの機能を組織選択的に活性化（「アゴナイズ」）することができる化合物を入手できれば有用であろう。
【０００５】
最近の研究ではテストステロンとエストロゲンの併用投与を使用して閉経後骨粗鬆症で骨に及ぼすエストロゲンの有益な効果が報告されている［Ｈｏｆｂａｕｅｒら，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｅｄｏｃｒｉｎｏｌ．１４０：２７１−２８６（１９９９）］。大規模な２年間の二重盲検比較試験によると、結合型エストロゲン（ＣＥＥ）とメチルテストステロンの経口併用投与は脊椎及び股関節における骨量増加の促進に有効であることが立証され、結合型エストロゲン療法は単独で骨量減少を予防した［Ｊ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｍｅｄ．，４４：１０１２−１０２０（１９９９）］。
【０００６】
更に、ＣＥＥとメチルテストステロンで治療した女性ではホットフラッシュが減少することが立証されたが、治療した女性の３０％で全現行アンドロゲン薬物療法の合併症である座瘡と顔面発毛の有意増加を生じた［Ｗａｔｔｓら，Ｏｂｓｔｅｔ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．，８５：５２９−５３７（１９９５）］。他の研究によると、メチルテストステロンをＣＥＥに付加すると、ＨＤＬ値が低下することも判明した。従って、現行アンドロゲン療法の男性化の可能性と脂質プロフィルに及ぼす作用を鑑みると、組織選択的アンドロゲン受容体アゴニストを開発することが必要である。
【０００７】
アンドロゲンは男性の骨代謝に重要な役割を果たす［Ａｎｄｅｒｓｏｎら，“Ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｅｕｇｏｎａｄａｌ  ｍｅｎ  ｗｉｔｈ  ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ−ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｓｉｘ  ｍｏｎｔｈｓ  ｏｆ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｎ  ｂｏｎｅ  ｍｉｎｅｒａｌ  ｄｅｎｓｉｔｙ  ａｎｄ  ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｒｉｓｋ  ｆａｃｔｏｒｓ，”  Ｂｏｎｅ，１８：１７１−１７７（１９９６）］。テストステロン治療に対する治療応答によると、性腺機能が正常でも骨粗鬆症の男性では、アンドロゲンが重要な骨同化作用を発揮することが判明した。平均腰椎ＢＭＤはテストステロンエステル２５０ｍｇの筋肉内投与に応答して５〜６カ月間に０．７９９ｇ／ｃｍ２から０．８３９ｇ／ｃｍ２まで増加した。従って、ＳＡＲＭは男性の骨粗鬆症を治療するために使用することができる。
【０００８】
アンドロゲン抑制療法（ＡＤＴ）を受けているステージＤ前立腺癌（転移性）の男性にはアンドロゲン欠乏症が生じる。持続的ＧｎＲＨアゴニストにより内分泌去勢が行われ、ＡＲアンタゴニストによりアンドロゲン受容体が遮断される。ホルモン抑制に応答してこれらの男性はホットフラッシュ、有意骨量低下、脱力、及び疲労を生じた。ステージＤ前立腺癌の男性のパイロットテストでは、ＡＤＴを受けていない患者に比較してＡＤＴを１年以上受けた男性のほうが骨減少症（３８％に対して５０％）と骨粗鬆症（２５％に対して３８％）の発症率が高かった［Ｗｅｉら，Ｕｒｏｌｏｇｙ  ５４：６０７−６１１（１９９９）］。腰椎ＢＭＤはＡＤＴを受けた男性のほうが有意に低かった。従って、骨及び筋肉に拮抗作用のない前立腺組織選択的ＡＲアンタゴニストは単剤又は従来のＡＤＴの補助薬として前立腺癌の治療に有用であると思われる［Ａ．Ｓｔｏｃｈら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎ．Ｍｅｔａｂ．，８６：２７８７−２７９１（２００１）も参照］。
【０００９】
組織選択的ＡＲアンタゴニストは閉経後の女性の多嚢胞性卵巣症候群を治療することもできる。Ｃ．Ａ．Ｅａｇｌｅｓｏｎら，“Ｐｏｌｙｃｙｓｔｉｃ  ｏｖａｒｉａｎ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ：ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｔｈａｔ  ｆｌｕｔａｍｉｄｅ  ｒｅｓｔｏｒｅｓ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎ−ｒｅｌｅａｓｉｎｇ  ｈｏｒｍｏｎｅ  ｐｕｌｓｅ  ｇｅｎｅｒａｔｏｒ  ｔｏ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｂｙ  ｅｓｔｒａｄｉｏｌ  ａｎｄ  ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ，”Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．，８５：４０４７−４０５２（２０００）参照。
【００１０】
アンドロゲンは腎肥大とエリスロポエチン（ＥＰＯ）産生を刺激するのでＳＡＲＭは所定の造血障害を治療することもできる。組換えヒトＥＰＯの導入以前には慢性腎不全に起因する貧血を治療するためにアンドロゲンが使用された。更に、アンドロゲンは非重症再生不良性貧血及び骨髄異形成症候群の貧血患者の血清ＥＰＯ値を上昇させる。貧血の治療にはＳＡＲＭにより提供されるような選択的作用が必要である。
【００１１】
ＳＡＲＭは肥満症の治療の補助薬としての臨床価値もあると思われる。この体脂肪低下アプローチはアンドロゲン投与により肥満症患者の皮下及び内臓脂肪が減少したという報告により裏付けられる［Ｊ．Ｃ．Ｌｏｖｅｊｏｙら，“Ｏｒａｌ  ａｎａｂｏｌｉｃ  ｓｔｅｒｏｉｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｄｅｃｒｅａｓｅｓ  ａｂｄｏｍｉｎａｌ  ｆａｔ  ｉｎ  ｏｂｅｓｅ，ｏｌｄｅｒ  ｍｅｎ，”  Ｉｎｔ．Ｊ．Ｏｂｅｓｉｔｙ．１９：６１４−６２４（１９９５）］，［Ｊ．Ｃ．Ｌｏｖｅｊｏｙら，“Ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ  Ａｎｄｒｏｇｅｎｓ  Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ  Ｂｏｄｙ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｒｅｇｉｏｎａｌ  Ｂｏｄｙ  Ｆａｔ  Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｏｂｅｓｅ  Ｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌ  Ｗｏｍｅｎ−Ａ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｅｎｔｅｒ  Ｓｔｕｄｙ，”  Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．，８１：２１９８−２２０３（１９９６）］。従って、望ましくないアンドロゲン作用のないＳＡＲＭは肥満症の治療に有益であると思われる。
【００１２】
アンドロゲン受容体アゴニストはアルツハイマー病（ＡＤ）等の神経変性疾患に対する治療効果もあると思われる。アンドロゲンがアンドロゲン受容体を介して神経保護を誘導できることはＪ．Ｈａｍｍｏｎｄら，“Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｔｈｅ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｎｅｕｒｏｎｓ，”Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，７７：１３１９−１３２６（２００１）により報告されている。Ｇｏｕｒａｓらはテストステロンがアルツハイマーβ−アミロイドペプチドの分泌を低下させるため、ＡＤの治療に使用できることを報告している［（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，９７：１２０２−１２０５（２０００）］。ＡＤ進行に関与する蛋白質の過剰リン酸化の阻害によるメカニズムも記載されている［Ｓ．Ｐａｐａｓｏｚｏｍｅｎｏｓ，“Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ  ｐｒｅｖｅｎｔｓ  ｔｈｅ  ｈｅａｔ  ｓｈｏｃｋ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｏｖｅｒａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｇｌｙｃｏｇｅｎ  ｓｙｎｔｈａｓｅ  ｋｉｎａｓｅ−３β  ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｏｆ  ｃｙｃｌｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｋｉｎａｓｅ  ５  ａｎｄ  ｃ−Ｊｕｎ  ＮＨ２−ｔｅｒｍｉｎａｌ  ｋｉｎａｓｅ  ａｎｄ  ｃｏｎｃｏｍｉｔａｎｔｌｙ  ａｂｏｌｉｓｈｅｓ  ｈｙｐｅｒｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  τ：Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ，”  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，９９：１１４０−１１４５（２００２）］。
【００１３】
アンドロゲン受容体アゴニストは筋緊張及び筋力にも有益な効果があると思われる。最近の研究によると、「性腺機能が低下した健康な男性の生理的アンドロゲン補充は除脂肪体重、筋サイズ及び最大随意筋力の有意増加に結び付けられる」ことが立証された［Ｓ．Ｂｈａｓｉｎら，Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎ．，１７０：２７−３８（２００１）］。
【００１４】
アンドロゲン受容体モジュレーターは男性と女性の両方で性欲低下の治療に有用であると思われる。男性のアンドロゲン欠乏症は性欲低下に関係がある。Ｓ．Ｈｏｗｅｌｌら，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，８２：１５８−１６１。アンドロゲン値の低下は多くの女性でその後期生殖年間の性的関心の低下につながる。Ｓ．Ｄａｖｉｓ，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．，８４：１８８６−１８９１（１９９９）。ある研究では、循環遊離テストステロンは性欲と正の相関があった。同上。別の研究では、原発性又は続発性副腎不全の女性に生理的ＤＨＥＡ補充を行った（５０ｍｇ／日）。プラセボを投与した女性に比較して、ＤＨＥＡを投与した女性は性的想像、関心及び満足の頻度の増加を示した。Ｗ．Ａｒｌｔら，Ｎ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４１：１０１３−１０２０（１９９９），Ｋ．Ｍｉｌｌｅｒ，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．，８６：２３９５−２４０１（２００１）も参照。
【００１５】
更に、アンドロゲン受容体モジュレーターは認知障害の治療にも有用であると思われる。最近の研究では、閉経後の女性に４カ月間高用量の経口エストロゲンを単独又は高用量の経口メチルテストステロンと併用投与している。４カ月間のホルモン治療の前後に認知試験を実施した。調査によると、エストロゲン（１．２５ｍｇ）とメチルテストステロン（２．５０ｍｇ）を併用投与した女性はＢｕｉｌｄｉｎｇ  Ｍｅｍｏｒｙ作業に安定したレベルの成績を維持したが、エストロゲン（１．２５ｍｇ）のみを投与した女性は成績の低下を示した。Ａ．Ｗｉｓｎｉｅｗｓｋｉ，Ｈｏｒｍ．Ｒｅｓ．５８：１５０−１５５（２００２）。
【００１６】
国際出願ＷＯ０３／０７７９１９はフッ素付加４−アザステロイド誘導体、その合成、及びアンドロゲン受容体モジュレーターとしてのその使用を開示している。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
本発明は構造式Ｉ：
【００１８】
【化２】
2007534757.tif 000002
の化合物又はその医薬的に許容可能な塩もしくは立体異性体、その使用及び医薬組成物に関する。
【００１９】
これらの化合物はアンドロゲン受容体アゴニストとして有効であり、特にＳＡＲＭとして有効である。従って、これらの化合物はアンドロゲン欠乏に起因するかアンドロゲン投与により改善することができる病態の治療に有用である。
【００２０】
本発明は本発明の化合物と医薬的に許容可能なキャリヤーを含有する医薬組成物にも関する。
【課題を解決するための手段】
【００２１】
本発明において、本発明者らは（ｉ）Ｎ−Ｃ相互作用、（ｉｉ）転写抑制、及び（ｉｉｉ）転写活性化等のＡＲのリガンド誘発性活性化を特徴付ける一連のｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞アッセイを使用してＳＡＲＭとして機能する化合物を同定した。上記方法で同定された本発明のＳＡＲＭ化合物はｉｎ  ｖｉｖｏ組織選択的ＡＲアゴニズム、即ち骨におけるアゴニズム（骨粗鬆症の齧歯類モデルにおける骨形成の刺激）と前立腺におけるアンタゴニズム（去勢した齧歯類における前立腺増殖への最小限の作用とＡＲアゴニストにより誘導される前立腺増殖の拮抗作用）を示す。
【００２２】
ＳＡＲＭとして同定された本発明の化合物はアンドロゲン欠乏に起因し、アンドロゲン投与により改善することができる疾患又は病態の治療に有用である。このような化合物は単独療法として又はビスホスホネート、エストロゲン、ＳＥＲＭ、カテプシンＫ阻害剤、ανβ３インテグリン受容体アンタゴニスト、カルシトニン、及びプロトンポンプ阻害剤等の骨吸収阻害剤との併用剤として女性及び男性の骨粗鬆症の治療に理想的である。前記化合物は副甲状腺ホルモン又はそのアナログ等の骨形成を刺激する物質と併用することもできる。本発明のＳＡＲＭ化合物は前立腺癌や良性前立腺肥大（ＢＰＨ）等の前立腺疾患の治療にも使用できる。更に、本発明の化合物は皮膚（座瘡及び顔面発毛）への作用が最小限であり、多毛症の治療にも有用であると思われる。更に、本発明の化合物は筋増殖を刺激することができ、サルコペニアや虚弱の治療に有用であると思われる。肥満症の治療で内臓脂肪を減少するためにも使用することができる。更に、本発明の化合物は中枢神経系でアンドロゲンアゴニズムを示し、血管運動神経症状（ホットフラッシュ）を治療したり、エネルギーや性欲を増すために有用であると思われる。アルツハイマー病の治療にも使用できる。
【００２３】
本発明の化合物は骨を復元できるため、単剤又はＧｎＲＨアゴニスト／アンタゴニスト療法の補助薬として、あるいは前立腺でアンドロゲンを阻害し、骨量減少を最小限にすることができるため、抗アンドロゲン補充療法として前立腺癌の治療に使用することもできる。更に、本発明の化合物は骨を復元できるため、抗アンドロゲン剤治療の補助薬として、又は抗アンドロゲン特性があり、従来の骨温存性抗アンドロゲン剤に勝る利点があるため、単独療法として膵臓癌の治療に使用することもできる。更に、本発明の化合物は赤血球や血小板等の血球の数を増加することができ、再生不良性貧血等の造血障害の治療に有用であると思われる。従って、上記組織選択的アンドロゲン受容体アゴニズムに鑑み、本発明の化合物は性腺機能低下（アンドロゲン欠乏）男性のホルモン補充療法に最適である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２４】
本発明はアンドロゲン受容体モジュレーター、特に選択的アンドロゲン受容体モジュレーター（ＳＡＲＭ）として有用な化合物に関する。本発明の化合物は構造式Ｉ：
【００２５】
【化３】
2007534757.tif 000003
［式中、
Ｘ及びＹは各々独立して水素、ハロゲン、ヒドロキシ、及びＣ１−３アルキルから選択され、前記アルキルは場合により１〜７個のフッ素原子で置換されており、但し、Ｘがメチルであるとき、Ｙはメチル以外のものであるか；又は
ＸとＹはそれらが結合している炭素原子と一緒になって場合によりＣ３−６シクロアルキル基を形成することができ；
Ｚは水素、カルボニル（Ｃ１−３アルキル）、ヒドロキシ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシメチル、（Ｃ０−６アルキル）２アミノ、及びＣ１−３アルキルから選択され、前記アルコキシ及びアルキルは各々場合により１〜７個のフッ素原子で置換されており；但し、Ｘが水素であるとき、Ｙは水素以外のものである］の化合物又はその医薬的に許容可能な塩もしくは立体異性体である。
【００２６】
本発明の化合物の具体例を以下に挙げる：。
Ｎ−［１（Ｒ）−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）エチル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド；
Ｎ−［１（Ｓ）−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）エチル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド；
Ｎ−［１−（メチル）−１−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）エチル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド；
Ｎ−［１−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）シクロプロピル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド；
Ｎ−［１（Ｒ）−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］−（５−ブロモピリジン）−２−イル）エチル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド；並びにその医薬的に許容可能な塩及び立体異性体。
【００２７】
意外にも、本発明の化合物はｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏアッセイの適当な組合せで有利な医薬活性を示す。ＡＲのリガンド誘発性活性化を特徴付ける以下のｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞アッセイを本発明の例示化合物に実施した：（ｉ）細胞溶解液における内在発現されるヒトＡＲとの結合、（ｉｉ）組織培養における内在ヒトＡＲによるモデルプロモーターのトランス活性化、（ｉｉｉ）アンタゴニスト及びアゴニストモードの両者におけるＡＲのＮ末端ドメインとＣ末端ドメインの相互作用。これらの試験は化合物の部分アゴニスト活性を測定することを目的とする。
【００２８】
上記各ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイにおいて、本発明の化合物は適切なレベルの部分アゴニズム活性を示した。例えば内在発現されるＡＲに対する化合物親和性のヒドロキシアパタイト放射性リガンド置換アッセイにおいて、例示化合物は０．０５０マイクロモル以下の結合活性を示す。これは通常許容可能なＩＣ５０値である１．０マイクロモル以下の２０倍である。特定受容体に対する親和性は一般に薬剤としての所与化合物の効力に相関する。従って、ＩＣ５０値が０．０５０マイクロモルの化合物はＩＣ５０値が１．０マイクロモルの化合物よりも２０倍の効力があると思われる。
【００２９】
有益なｉｎ  ｖｉｔｒｏプロフィルに加え、本発明のＳＡＲＭ化合物はｉｎ  ｖｉｖｏでも組織選択的ＡＲアゴニズム、即ち骨におけるアゴニズム（骨粗鬆症の齧歯類モデルにおける骨形成の刺激）と去勢した齧歯類における前立腺増殖への最小限の作用を示すことができる。これらのアッセイの各々における適切な活性レベルを総合すると、本発明の化合物は顕著な特徴をもつ。
【００３０】
本発明の化合物は（Ｅ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ  ａｎｄ  Ｓ．Ｈ．Ｗｉｌｅｎ，Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｃａｒｂｏｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９４，１１１９−１１９０頁に記載されているように）不斉中心、キラル軸、及びキラル面をもつことができ、ラセミ化合物、ラセミ混合物、及び個々のジアステレオマーとして存在することができ、光学異性体を含むその可能な全異性体及び混合物が本発明に含まれる。
【００３１】
更に、本明細書に開示する化合物は互変異性体として存在することができ、一方の互変異性体構造しか図示していない場合にも両方の互変異性形態を本発明の範囲に含むものとする。例えば、下記化合物Ａに関する任意記載は互変異性体構造Ｂとその混合物も含み、その逆も同様である。波線は本発明の４−アザステロイド誘導体の残余を示す。
【００３２】
【化４】
2007534757.tif 000004
【００３３】
「アルキル」なる用語は総炭素原子数１〜１０、又はこの範囲の任意数の直鎖又は分岐鎖アルカンを意味する（即ち、メチル、エチル、１−プロピル、２−プロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル等）。（例えば「Ｃ０−８アルキル」における）「Ｃ０アルキル」なる用語はアルキル基が存在しないことを意味する。
【００３４】
本明細書で使用する「シクロアルキル」なる用語は架橋されていてもいなくてもよいし、構造的に制約されていてもいなくてもよい指定炭素原子数の非芳香族環状炭化水素基を意味する。このようなシクロアルキルの例としては限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、アダマンチル、シクロオクチル等が挙げられる。本明細書で使用する「Ｃ３−６シクロアルキル」の例としては限定されないが、以下のものが挙げられる。
【００３５】
【化５】
2007534757.tif 000005
【００３６】
「アルコキシ」とは酸素架橋により結合した指定炭素原子数の環状又は非環状アルキル基を意味する。従って、「アルコキシ」は上記アルキルとシクロアルキルの定義を含む。
【００３７】
「パーフルオロアルキル」とはその対応する水素をフッ素原子で完全に置換した炭素原子数１０までのアルキル鎖を意味する。
【００３８】
当業者に自明の通り、本明細書で使用する「ハロ」又は「ハロゲン」とはクロロ、フルオロ、ブロモ及びヨードを意味する。
【００３９】
「オキシ」なる用語は酸素（Ｏ）原子を意味する。「チオ」なる用語は硫黄（Ｓ）原子を意味する。「オキソ」なる用語は「＝Ｏ」を意味する。「カルボニル」なる用語は「Ｃ＝Ｏ」を意味する。
【００４０】
「置換」なる用語は指定置換基による置換の多重度を意味する。複数の置換基部分を開示又は請求の範囲に記載する場合には、置換される化合物は単数形又は複数形で開示又は請求の範囲に記載する置換基部分の１種以上で独立して置換することができる。独立して置換とは、（２個以上の）置換基が同一でも異なっていてもよいことを意味する。
【００４１】
任意置換基又は式Ｉに任意変数（例えばＲ５、Ｒ６等）が２回以上出現する場合には、出現毎の定義は各々独立している。また、置換基及び／又は変数の組み合わせはこのような組み合わせにより安定な化合物が得られる場合のみに許容可能である。
【００４２】
本明細書を通して使用する標準命名法では、先ず指定側鎖の末端部分を記載した後に結合点に向かって隣接する官能基を記載する。例えば、Ｃ１−５アルキルカルボニルアミノＣ１−６アルキル置換基は下式：
【００４３】
【化６】
2007534757.tif 000006
に等価である。
【００４４】
本発明の化合物を選択する際には、当業者に自明の通り、各種置換基、即ちＸ、Ｙ、Ｚ等は化学構造結合性の周知原理に従って選択すべきである。
【００４５】
置換基から環系内に引いた線は指定した結合が置換可能な環原子の任意のものに結合できることを示す。環系が多環式の場合には、結合は近接環のみの適切な炭素原子の任意のものと結合できる。
【００４６】
当然のことながら、本発明の化合物の置換基及び置換パターンは容易に入手可能な出発材料から当分野で公知の技術と下記方法により容易に合成できる化学的に安定な化合物が得られるように当業者が選択することができる。置換基自体が２個以上の基で置換されている場合には、当然のことながら、安定な構造が得られる限り、これらの多重基は同一炭素上にあってもよいし、異なる炭素上にあってもよい。「場合により１個以上の置換基で置換された」なる用語は「場合により少なくとも１個の置換基で置換された」なる用語と同義とみなし、このような場合には、１態様は０〜３個の置換基をもつ。
【００４７】
本発明の１態様において、Ｘ及びＹは各々独立して水素、ハロゲン、及びＣ１−３アルキルから選択され、前記アルキルは場合により１〜７個のフッ素原子で置換されている。Ｘ及びＹは各々独立して水素、ハロゲン、ヒドロキシ、及びＣ１−３アルキルから選択され、前記アルキルは場合により１〜７個のフッ素原子で置換されており、但し、Ｘがメチルであるとき、Ｙはメチル以外のものである。
【００４８】
本発明の更に別の態様において、ＸとＹはそれらが結合している炭素原子と一緒になって場合により例えばシクロプロピル又はシクロペンチル基等のＣ３−６シクロアルキル基を形成することができる。この態様の１変形例において、ＸとＹはそれらが結合している炭素原子と一緒になってシクロプロピル基を形成する。
【００４９】
本発明の１態様において、Ｚは水素、カルボニル（Ｃ１−３アルキル）、ヒドロキシ、Ｃ１−４アルコキシ、及びＣ１−３アルキルから選択され、前記アルコキシ及びアルキルは各々場合により１〜７個のフッ素原子で置換されている。本発明の１態様において、Ｚは水素、ハロゲン、（Ｃ０−６アルキル）２アミノＣ０−６アルキル、及びＣ１−３アルキルから選択され、前記アルキルは場合により１〜７個のフッ素原子で置換されている。この態様の１変形例において、Ｚは水素、ハロゲン、ＣＦ３、及びＣ１−３アルキルから選択される。別の変形例において、Ｚは臭素である。
【００５０】
本発明の１態様において、化合物はＮ−［１（Ｒ）−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）エチル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド；Ｎ−［１（Ｓ）−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）エチル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド；並びにその医薬的に許容可能な塩及び立体異性体から選択される。１変形例において、化合物はＮ−［１（Ｒ）−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）エチル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミドとその医薬的に許容可能な塩及び立体異性体である。
【００５１】
本発明の別の態様において、化合物はＮ−［１−（メチル）−１−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）エチル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド；Ｎ−［１−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）シクロプロピル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド；Ｎ−［１（Ｒ）−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］−（５−ブロモピリジン）−２−イル）エチル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド；並びにその医薬的に許容可能な塩及び立体異性体から選択される。この態様の１変形例において、化合物はＮ−［１−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）シクロプロピル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミドとその医薬的に許容可能な塩である。更に別の変形例において、化合物はＮ−［１−（メチル）−１−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）エチル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド；Ｎ−［１（Ｒ）−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］−（５−ブロモピリジン）−２−イル）エチル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド；並びにその医薬的に許容可能な塩及び立体異性体から選択される。
【００５２】
本発明の化合物はアンドロゲン受容体の組織選択的モジュレーター（ＳＡＲＭ）であることが判明した。１側面において、本発明の化合物は哺乳動物でアンドロゲン受容体の機能を活性化するため、特に骨及び／又は筋組織におけるアンドロゲン受容体の機能を活性化し、男性の前立腺又は女性の子宮におけるアンドロゲン受容体の機能を阻止又は阻害（「拮抗」）するために有用であると思われる。
【００５３】
本発明の別の側面は皮膚発毛又は声帯には影響を与えずに男性の前立腺又は女性の子宮でＡＲアゴニストにより誘導されるアンドロゲン受容体の機能を低下又は阻止し、血中脂質値を制御する臓器（例えば肝臓）には影響を与えずに骨及び／又は筋組織におけるアンドロゲン受容体の機能を活性化するための式Ｉの化合物の使用である。
【００５４】
本発明の代表的な化合物は一般にアンドロゲン受容体に対してマイクロモル未満の結合親和性を示す。従って、本発明の化合物はアンドロゲン受容体機能に関連する障害をもつ哺乳動物の治療に有用である。アンドロゲン欠乏症等のアンドロゲン受容体機能に関連する障害や、筋緊張低下の増強、骨粗鬆症、骨減少症、グルココルチコイド誘発性骨粗鬆症、歯周病、骨折（例えば、脊椎及び非脊椎骨折）、骨再建手術後の骨損傷、サルコペニア、虚弱、皮膚老化、男性性腺機能低下症、女性の閉経後症状、アテローム性動脈硬化症、高コレステロール血症、高脂血症、肥満症、再生不良性貧血及び他の造血障害、膵臓癌、炎症性関節炎及び関節修復、ＨＩＶ消耗、前立腺癌、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、癌悪液質、アルツハイマー病、筋ジストロフィー、認知低下、性機能不全、睡眠時無呼吸、鬱病、早発卵巣不全、並びに自己免疫疾患等のアンドロゲン補充により改善することができるか、又はアンドロゲン補充により回復させることができる障害を治療するために治療有効量の化合物（その医薬的に許容可能な塩を含む）を哺乳動物に投与する。治療は該当治療を必要とする哺乳動物に治療有効量の構造式Ｉの化合物を投与することにより実施される。更に、これらの化合物は単剤又は他の活性物質との併用剤として医薬組成物中の成分として有用である。
【００５５】
１態様では、本発明の化合物は限定されないが、骨粗鬆症、骨減少症、グルココルチコイド誘発性骨粗鬆症、歯周病、ＨＩＶ消耗、前立腺癌、癌悪液質、肥満症、関節炎病態、貧血（例えば再生不良性貧血）、筋ジストロフィー、アルツハイマー病、認知低下、性機能不全、睡眠時無呼吸、鬱病、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、及びアテローム性動脈硬化症等のアンドロゲン欠乏に起因するか又はアンドロゲン補充により改善することができる男性の病態を治療するために単剤又は他の活性物質との併用剤として使用することができる。治療は該当治療を必要とする男性に治療有効量の構造式Ｉの化合物を投与することにより実施される。
【００５６】
「関節炎病態」とは炎症性病変が関節に局限される疾患又は関節の任意炎症性病態を意味し、特に変形性関節症と関節リウマチが挙げられる（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；１ｓｔ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊａｎｕａｒｙ  １５，１９９２）。式Ｉの化合物はベーチェット病、滑液包炎及び腱炎、ＣＰＰＤ沈着症、手根管症候群、エーラー−ダンロス症候群、繊維筋肉痛、通風、感染性関節炎、炎症性腸疾患、若年性関節炎、紅斑性狼瘡、ライム病、マルファン症候群、筋炎、変形性関節症、骨形成不全症、骨壊死、多発動脈炎、リウマチ性多発性筋痛症、乾癬性関節炎、レイノー現象、反射性交感神経性ジストロフィー症候群、ライター症候群、関節リウマチ、強皮症、及びシェーグレン症候群等の関節炎病態を治療又は予防するために単剤又は併用剤として有用である。本発明の１態様は治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む関節炎病態の治療又は予防に関する。サブ態様は治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む変形性関節症の治療又は予防である。Ｃｕｔｏｌｏ  Ｍ，Ｓｅｒｉｏｌｏ  Ｂ，Ｖｉｌｌａｇｇｉｏ  Ｂ，Ｐｉｚｚｏｒｎｉ  Ｃ，Ｃｒａｖｉｏｔｔｏ  Ｃ，Ｓｕｌｌｉ  Ａ．Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．２００２  Ｊｕｎ；９６６：１３１−４２；Ｃｕｔｏｌｏ，Ｍ．Ｒｈｅｕｍ  Ｄｉｓ  Ｃｌｉｎ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍ  ２０００  Ｎｏｖ；２６（４）：８８１−９５；ＪＷ，Ｖａｎ  ｄｅｎ  Ｂｒｉｎｋ  ＨＲ．Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｐｒｏｄ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １９９２  Ｏｃｔ−Ｄｅｃ；２８（３−４）：２３１−４；Ｊａｎｓｓｏｎ  Ｌ，Ｈｏｌｍｄａｈｌ  Ｒ．；Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ  ２００１  Ｓｅｐ；４４（９）：２１６８−７５；及びＰｕｒｄｉｅ  ＤＷ．Ｂｒ  Ｍｅｄ  Ｂｕｌｌ  ２０００；５６（３）：８０９−２３参照。Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ，１７ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，ｐｐ．４４９−４５１も参照。
【００５７】
関節炎病態を治療するために併用する場合には、式Ｉの化合物は併用療法に有用であるとして本明細書に開示する任意薬剤と併用してもよいし、コルチコステロイド、細胞傷害性薬剤（又は他の疾患調節もしくは寛解誘導薬剤）、金療法、メトトレキセート、ＮＳＡＩＤ及びＣＯＸ−２阻害剤等の関節炎病態を治療又は予防することが知られている薬剤と併用してもよい。
【００５８】
別の態様では、本発明の化合物は限定されないが、骨粗鬆症、骨減少症、皮膚老化、グルココルチコイド誘発性骨粗鬆症、閉経後症状、歯周病、ＨＩＶ消耗、癌悪液質、肥満症、貧血（例えば再生不良性貧血）、筋ジストロフィー、アルツハイマー病、早発卵巣不全、認知低下、性機能不全、鬱病、炎症性関節炎及び関節修復、アテローム性動脈硬化症、並びに自己免疫疾患等のアンドロゲン欠乏に起因するか又はアンドロゲン補充により改善することができる女性の病態を治療するために単剤又は他の活性物質との併用剤として使用することができる。治療は該当治療を必要とする女性に治療有効量の構造式Ｉの化合物を投与することにより実施される。
【００５９】
式Ｉの化合物は哺乳動物（例えばヒト）の筋緊張の増強にも有用である。構造式Ｉの化合物は骨を復元し、骨量減少を最小限にし、骨ミネラル密度を維持するために従来のアンドロゲン抑制療法の補助薬として前立腺癌の治療で使用することもできる。このように、本化合物はＰ．Ｌｉｍｏｎｔａら，Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｒｕｇｓ，１０：７０９−７２０（２００１）；Ｈ．Ｊ．Ｓｔｒｉｃｋｅｒ，Ｕｒｏｌｏｇｙ，５８（Ｓｕｐｐｌ．２Ａ）：２４−２７（２００１）；Ｒ．Ｐ．Ｍｉｌｌａｒら，Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ，５６：７６１−７７２（２０００）；及びＡ．Ｖ．Ｓｃｈａｌｌｙら，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，２８：１５７−１６９（１９９７）に開示されている方法等のＧｎＲＨアゴニスト／アンタゴニストを含む従来のアンドロゲン抑制療法と併用することができる。構造式Ｉの化合物は前立腺癌の治療にフルタミド、２−ヒドロキシフルタミド（フルタミドの活性代謝産物）、ニルタミド、及びビカルタミド（Ｃａｓｏｄｅｘ（登録商標））等の抗アンドロゲン剤と併用することができる。
【００６０】
更に、本発明の化合物はそのアンドロゲンアンタゴニスト特性によるか又はフルタミド、２−ヒドロキシフルタミド（フルタミドの活性代謝産物）、ニルタミド、及びビカルタミド（Ｃａｓｏｄｅｘ（登録商標））等の抗アンドロゲン剤の補助薬として膵臓癌の治療に使用することもできる。
【００６１】
「癌を治療」又は「癌の治療」なる用語は癌病態をもつ哺乳動物に投与することを意味し、癌細胞を死滅させることにより癌病態を緩和する効果のみならず、癌の増殖及び／又は転移を抑制する効果も意味する。
【００６２】
構造式Ｉの化合物は脂質代謝に及ぼすマイナスの効果を最小限にすることができる。従って、その組織選択的アンドロゲンアゴニスト特性により、本発明の化合物は性腺機能低下（アンドロゲン欠乏）男性において既存のホルモン補充療法のアプローチに勝る利点を示す。
【００６３】
更に、本発明の化合物は赤血球や血小板等の血球の数を増加することができ、再生不良性貧血等の造血障害の治療に使用することができる。
【００６４】
本発明の１態様では、筋緊張低下の増強、骨粗鬆症、骨減少症、グルココルチコイド誘発性骨粗鬆症、歯周病、骨折、骨再建手術後の骨損傷、サルコペニア、虚弱、皮膚老化、男性性腺機能低下症、女性の閉経後症状、アテローム性動脈硬化症、高コレステロール血症、高脂血症、肥満症、再生不良性貧血及び他の造血障害、膵臓癌、炎症性関節炎及び関節修復、ＨＩＶ消耗、前立腺癌、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、癌悪液質、アルツハイマー病、筋ジストロフィー、認知低下、性機能不全、睡眠時無呼吸、鬱病、早発卵巣不全、並びに自己免疫疾患から選択される障害を治療又は改善するために治療有効量の式Ｉの化合物を哺乳動物に投与する。
【００６５】
別の態様では、筋緊張低下、骨粗鬆症、骨減少症、グルココルチコイド誘発性骨粗鬆症、歯周病、骨折、骨再建手術後の骨損傷、サルコペニア、アルツハイマー病、及び虚弱から選択される障害を治療又は改善するために治療有効量の化合物を使用することができる。
【００６６】
別の態様では、男性性腺機能低下症、女性の閉経後症状、アテローム性動脈硬化症、高コレステロール血症、高脂血症、肥満症、再生不良性貧血及び他の造血障害、膵臓癌、炎症性関節炎及び関節修復、ＨＩＶ消耗、前立腺癌、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、癌悪液質、筋ジストロフィー、認知低下、性機能不全、睡眠時無呼吸、鬱病、早発卵巣不全、並びに自己免疫疾患等の障害を治療又は改善するために本発明の化合物を使用することができる。
【００６７】
本発明の化合物はその純エナンチオマー形態で投与することができる。ラセミ混合物は多数の慣用方法の任意のものによりその個々のエナンチオマーに分離することができる。これらの方法としてはキラルクロマトグラフィー、キラル助剤による誘導体化後にクロマトグラフィー又は結晶化により分離する方法、及びジアステレオマー塩の分別結晶化が挙げられる。
【００６８】
本明細書で使用する場合に、アンドロゲン受容体の「アゴニスト」として機能する本発明の化合物はアンドロゲン受容体と結合し、当該受容体に特徴的な生理的又は薬理的応答を誘発することができる。「組織選択的アンドロゲン受容体モジュレーター」なる用語は所定組織における天然リガンドの作用に類似するが、他の組織ではそうではないアンドロゲン受容体リガンドを意味する。「部分アゴニスト」とは化合物の添加量に関係なく、受容体集団の最大活性化を誘導することができないアゴニストを意味する。「完全アゴニスト」は所与濃度でアンドロゲン受容体集団の完全活性化を誘導する。アンドロゲン受容体の「アンタゴニスト」として機能する本発明の化合物はアンドロゲン受容体と結合し、天然アンドロゲン受容体リガンドにより通常誘導されるアンドロゲン関連応答を阻止又は阻害することができる。
【００６９】
「医薬的に許容可能な塩」なる用語は無機塩基又は有機塩基と無機酸又は有機酸等の医薬的に許容可能な非毒性塩基又は酸から製造される塩を意味する。無機塩基から誘導される代表的な塩の非限定的な例としては、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、第二マンガン、第一マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛塩等が挙げられる。本発明の１変形例では、塩はアンモニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム及びナトリウム塩から選択される。医薬的に許容可能な非毒性有機塩基から誘導される塩の非限定的な例としては第一、第二、及び第三アミン、置換アミン（天然置換アミンを含む）、環状アミン、並びに塩基性イオン交換樹脂（例えばアルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミン等）の塩が挙げられる。
【００７０】
本発明の化合物が塩基性である場合には、無機及び有機酸等の医薬的に許容可能な非毒性酸から塩を製造することができる。使用することができる代表的な酸としては、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、樟脳スルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、マロン酸、粘液酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、プロピオン酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸等が挙げられる。１変形例では、酸はクエン酸、フマル酸、臭化水素酸、塩酸、マレイン酸、リン酸、硫酸、及び酒石酸から選択される。
【００７１】
上記に記載した医薬的に許容可能な塩及び他の典型的な医薬的に許容可能な塩の製造についてはＢｅｒｇら，“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ，”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，１９７７：６６：１−１９により詳細に記載されている。
【００７２】
更に留意すべき点として、生理的条件下で本発明の化合物中の脱プロトン化酸性部分（例えばカルボキシル基）はアニオン性となる可能性があり、この電荷はその後、プロトン化又はアルキル化塩基性部分（例えば第４級窒素原子）のカチオン電荷に対して体内で均衡する可能性があるので、本発明の化合物は潜在的に内部塩又は両性イオンである。
【００７３】
「治療有効量」なる用語は研究者、獣医、医師又は他の臨床技術者により求められる生物学的又は医学的応答を組織、系、動物又はヒトに誘発する構造式Ｉの化合物の量を意味する。
【００７４】
本明細書で使用する「組成物」なる用語は特定量の特定成分を含有する製剤と、特定量の特定成分の組み合わせにより直接又は間接的に得られる任意製剤を意味する。
【００７５】
「医薬的に許容可能」とはキャリヤー、希釈剤又は賦形剤が製剤の他の成分と適合可能でなければならず且つそのレシピエントに有害であってはならないことを意味する。
【００７６】
「化合物の投与」及び「化合物を投与する」なる用語は治療を必要とする個体に本発明の化合物又は発明の化合物のプロドラッグを提供することを意味する。
【００７７】
「アンドロゲン受容体により媒介される機能を組織選択的に調節する」なる用語は前立腺、精巣、精嚢、卵巣、子宮、及び他の生殖付属組織等のアンドロゲン産生（生殖）組織でこのような調節の不在下に同化（骨及び／又は筋）組織（骨及び筋）で選択的（又は差別的）にアンドロゲン受容体により媒介される機能を調節することを意味する。１態様では、同化組織におけるアンドロゲン受容体の機能は活性化され、アンドロゲン産生組織におけるアンドロゲン受容体の機能は阻止又は抑制される。別の態様では、同化組織におけるアンドロゲン受容体の機能は阻止又は抑制され、アンドロゲン産生組織におけるアンドロゲン受容体の機能は活性化される。
【００７８】
本発明の治療方法を実施するための構造式Ｉの化合物の投与はこのような治療又は予防を必要とする患者に有効量の構造式Ｉの化合物を投与することにより実施される。本発明の方法による予防投与の必要性は周知危険因子の使用により決定される。個々の化合物の有効量は最終分析では主治医により決定されるが、治療する厳密な疾患、前記疾患及び患者が併発している他の疾患又は病態の重篤度、選択した投与経路、患者に併用を要すると思われる他の薬剤及び治療、並びに医師の判断による他の因子等の因子によって異なる。
【００７９】
一定用量として処方する場合には、このような併用製剤は下記用量範囲内の本発明の化合物とその許容用量範囲内の他の医薬活性物質を使用する。あるいは、併用製剤が不適切な場合には、本発明の化合物を医薬的に許容可能な公知薬剤と順次使用することもできる。
【００８０】
一般に、構造式Ｉの化合物の１日用量は成人一人当たり約０．０１〜約１０００ｍｇ／日の範囲とすることができる。例えば、用量は約０．１〜約２００ｍｇ／日とする。経口投与の場合、組成物は治療する哺乳動物の症状に合わせて活性成分約０．０１〜約１０００ｍｇ、例えば０．０１、０．０５、０．１、０．５、１．０、２．５、３．０、５．０、６．０、１０．０、１５．０、２５．０、５０．０、７５、１００、１２５、１５０、１７５、１８０、２００、２２５及び５００ｍｇを含有する錠剤として提供することができる。
【００８１】
上記用量は１日１回投与してもよいし、合計１日用量を１日２回、３回又は４回に分けて投与してもよい。更に、投与に選択する個々の化合物の性質に基づいて、上記用量をより低頻度、例えば週１回、週２回、月１回等投与してもよい。単位用量は当然のことながら頻度が低くなるにつれて多くなる。
【００８２】
鼻孔内経路、経皮経路、直腸もしくは膣座剤、又は静脈内溶液により投与する場合には、当然のことながら投与レジメンの全期間を通して断続的ではなく持続的に投与する。
【００８３】
本発明の１例は上記化合物の任意のものと医薬的に許容可能なキャリヤーを含有する医薬組成物である。本発明の別の例は上記化合物の任意のものと医薬的に許容可能なキャリヤーを配合することにより製造される医薬組成物である。本発明の１例は上記化合物の任意のものと医薬的に許容可能なキャリヤーを配合することを含む医薬組成物の製造方法である。
【００８４】
本発明の方法で医療用に使用される組織選択的アンドロゲン受容体モジュレーターの製剤は構造式Ｉの化合物とその許容可能なキャリヤーと場合により他の治療活性成分を含有する。キャリヤーは製剤の他の成分と適合可能であり且つ製剤のレシピエント対象に有害でないという意味で医薬的に許容可能でなければならない。
【００８５】
従って、本発明は更に構造式Ｉの化合物とその医薬的に許容可能なキャリヤーを含有する医薬製剤を提供する。前記製剤としては経口、直腸、膣内、鼻孔内、局所及び非経口（皮下、筋肉内及び静脈内投与を含む）投与に適した製剤が挙げられる。１態様では、製剤は経口投与に適した製剤である。
【００８６】
式Ｉの化合物の適切な局所製剤としては経皮デバイス、エアゾール、クリーム、溶液、軟膏、ゲル、ローション、散布剤等が挙げられる。本発明の化合物を含有する局所医薬組成物は通常、医薬的に許容可能なビヒクルと混合した活性化合物約０．００５〜約５重量％を含有する。本発明の化合物を投与するのに有用な経皮パッチとしては当業者に周知のものが挙げられる。
【００８７】
製剤は単位剤形とすることができ、製薬分野で公知の任意方法により製造することができる。いずれの方法も１種以上の成分を構成するキャリヤーと活性化合物を配合する段階を含む。一般に、医薬製剤は活性化合物を液体キャリヤー、蝋状固体キャリヤー又は微粉状固体キャリヤーと均質混和した後に必要に応じて生成物を所望剤形に成形することにより製造される。
【００８８】
経口投与に適した本発明の製剤は規定量の活性化合物を各々含有するカプセル剤、カシェ剤、錠剤又はトローチ剤等の分離単位形態；散剤もしくは顆粒剤；又は水性液体もしくは非水性液体懸濁液もしくは溶液（例えばシロップ、エリキシル剤、又はエマルション）とすることができる。
【００８９】
錠剤は場合により１種以上の補助成分を加えて圧縮又は成形により製造することができる。圧縮錠はさらさらした形態（例えば散剤や顆粒剤）の活性化合物を場合により補助成分（例えば結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、崩壊剤又は着色剤）と混合し、適当な機械で圧縮することにより製造することができる。成形錠は好ましくは粉末形態の活性化合物と適切なキャリヤーの混合物を適当な機械で成形することにより製造することができる。適切な結合剤としては限定されないが、澱粉、ゼラチン、天然糖類（例えばグルコースやβ−ラクトース、コーン甘味料）、天然及び合成ガム（例えばアラビアガム、トラガカントガム又はアルギン酸ナトリウム）、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ロウ等が挙げられる。これらの剤形で使用される代表的な滑沢剤の非限定的な例としてはオレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム等が挙げられる。崩壊剤としては限定されないが、澱粉、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガム等が挙げられる。
【００９０】
合成及び天然ガム（例えばトラガカントガム、アラビアガム）、メチルセルロース等の適切なフレーバー入り懸濁剤又は分散剤中のシロップ又は懸濁液等の経口液体形態は活性化合物を溶液又は懸濁液に加えることにより製造することができる。使用可能なその他の分散剤としてはグリセリン等が挙げられる。
【００９１】
膣又は直腸投与用製剤は慣用キャリヤー、即ち粘膜に非毒性且つ非刺激性であり、構造式Ｉの化合物に適合可能であり、貯蔵安定性であり、構造式Ｉの化合物と結合又はその放出を妨害しない基剤を使用した座剤とすることができる。適切な基剤としてはカカオバター（カカオ脂）、ポリエチレングリコール（例えばカーボワックスやポリグリコール）、グリコール−界面活性剤組合せ、ステアリン酸ポリオキシル４０、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（例えばＴｗｅｅｎ、Ｍｙｒｊ、及びＡｒｌａｃｅｌ）、グリセリンゼラチン、及び水素化植物油が挙げられる。グリセリンゼラチン座剤を使用する場合には、メチルパラベンやプロピルパラベン等の防腐剤を使用することができる。
【００９２】
活性薬剤成分を含有する局所製剤は当分野で周知の各種キャリヤー材料（例えばアルコール類、アロエベラジェル、アラントイン、グリセリン、ビタミンＡ及びＥ油、鉱油、ＰＰＧ２プロピオン酸ミリスチル等）と混合し、例えばアルコール溶液、局所クレンザー、クレンジングクリーム、スキンジェル、スキンローション、及びクリーム又はジェル状シャンプーを形成することができる。
【００９３】
本発明の化合物は小さな一枚膜リポソーム、大きな一枚膜リポソーム及び多重膜リポソーム等のリポソーム送達システムの形態て投与することもできる。リポソームはコレステロール、ステアリルアミン又はホスファチジルコリン等の各種リン脂質から形成することができる。
【００９４】
本発明の化合物は化合物分子を結合する個々のキャリヤーとしてモノクローナル抗体を使用することにより送達することもできる。本発明の化合物は標的可能な薬剤キャリヤーとしての可溶性ポリマーと結合することもできる。このようなポリマーとしてはポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロプルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノール、又はパルミトイル残基で置換したポリエチレンオキシド−ポリリジンが挙げられる。更に、本発明の化合物は薬剤の制御放出を実施するのに有用な類の生分解性ポリマー（例えばポリ乳酸、ポリε−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート及びヒドロゲルの架橋又は両親媒性ブロックコポリマー）と結合することもできる。
【００９５】
非経口投与に適した製剤としては、レシピエントの血液に等張とすることができる活性化合物の滅菌水性調製物を含む製剤が挙げられる。このような製剤はレシピエント対象の血液に等張の化合物の溶液又は懸濁液とすると適切である。このような製剤は蒸留水と、蒸留水又は食塩水中５％デキストロースと、活性化合物を含有することができる。多くの場合には、使用する溶媒に対して適切な溶解度をもつ活性化合物の医薬的及び薬理的に許容可能な酸付加塩を使用すると有用である。有用な製剤は更に適切な溶媒で希釈すると、経口投与に適した溶液となる活性化合物を含む濃縮溶液又は固体も含む。
【００９６】
本発明の医薬組成物及び方法は更に、骨粗鬆症、歯周病、骨折、骨再建手術後の骨損傷、サルコペニア、虚弱、皮膚老化、男性性腺機能低下症、女性の閉経後症状、アテローム性動脈硬化症、高コレステロール血症、高脂血症、造血障害（例えば再生不良性貧血）、膵臓癌、アルツハイマー病、炎症性関節炎、及び関節修復等の上記病態の治療に通常適用される他の治療活性化合物を添加することができる。
【００９７】
骨粗鬆症の治療と予防には、骨吸収抑制剤、骨同化促進剤、及び厳密に定義されないメカニズムにより骨格に有益な他の物質（例えばカルシウムサプリメント、フラボノイド、及びビタミンＤアナログ）から選択される少なくとも１種の骨強化剤と本発明の化合物を併用投与することができる。歯周病、骨折、及び骨再建手術後の骨損傷の病態もこれらの併用治療が有効であると思われる。例えば、有効量のエストロゲン、ビスホスホネート、ＳＥＲＭ、カテプシンＫ阻害剤、ανβ３インテグリン受容体アンタゴニスト、破骨細胞液胞型ＡＴＰａｓｅ阻害剤、ポリペプチドオステオプロテゲリン、ＶＥＧＦのアンタゴニスト、チアゾリジンジオン、カルシトニン、蛋白質キナーゼ阻害剤、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）及びアナログ、カルシウム受容体アンタゴニスト、成長ホルモン分泌促進剤、成長ホルモン放出ホルモン、インスリン様成長因子、骨形態形成蛋白質（ＢＭＰ）、ＢＭＰ拮抗作用の阻害剤、プロスタグランジン誘導体、線維芽細胞増殖因子、ビタミンＤとその誘導体、ビタミンＫとその誘導体、大豆イソフラボン、カルシウム塩、及びフッ化物塩等の他の物質と本発明の化合物を有効に併用投与することができる。歯周病、骨折、及び骨再建手術後の骨損傷の病態もこれらの併用治療が有効であると思われる。
【００９８】
本発明の１態様では、単剤又はプロゲスチンもしくはプロゲスチン誘導体との併用剤としてのエストロゲン及びエストロゲン誘導体；ビスホスホネート；抗エストロゲン剤又は選択的エストロゲン受容体モジュレーター；ανβ３インテグリン受容体アンタゴニスト；カテプシンＫ阻害剤；破骨細胞液胞型ＡＴＰａｓｅ阻害剤；カルシトニン；並びにオステオプロテゲリンから選択される少なくとも１種の有効量の骨強化剤と本発明の化合物を有効に併用投与することができる。
【００９９】
骨粗鬆症の治療では、本発明の化合物の活性はエストロゲン、ビスホスホネート、ＳＥＲＭ、カルシトニン、カテプシンＫ阻害剤、破骨細胞液胞型ＡＴＰａｓｅ阻害剤、ＲＡＮＫ／ＲＡＮＫＬ／オステオプロテゲリン経路を妨害する物質、ｐ３８阻害剤又は破骨細胞生成もしくは破骨細胞活性化の他の任意阻害剤等の骨吸収抑制剤の活性と区別される。構造式Ｉの化合物は骨吸収を抑制するのではなく、例えば骨強度のかなりの部分を占める皮質骨に作用して骨形成の刺激を助長する。皮質骨が厚くなると、骨折の危険、特に股関節骨折の危険が減る。構造式Ｉの組織ＳＡＲＭを例えばエストロゲン又はエストロゲン誘導体、ビスホスホネート、抗エストロゲン剤、ＳＥＲＭ、カルシトニン、ανβ３インテグリン受容体アンタゴニスト、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、破骨細胞液胞型ＡＴＰａｓｅ阻害剤、及びカテプシンＫ阻害剤等の骨吸収抑制剤と併用すると、骨同化作用と骨吸収抑制作用の相補効果により特に有用である。
【０１００】
エストロゲン及びエストロゲン誘導体の非限定的な代表例としては、例えば、１７β−エストラジオール、エストロン、結合型エストロゲン（ＰＲＥＭＡＲＩＮ（登録商標））、ウマエストロゲン，１７β−エチニルエストラジオール等のエストロゲン活性をもつステロイド化合物が挙げられる。エストロゲン又はエストロゲン誘導体は単独で使用してもよいし、プロゲスチン又はプロゲスチン誘導体と併用してもよい。プロゲスチン誘導体の非限定的な例としてはノルエチンドロンや酢酸メドロキシプロゲステロンが挙げられる。
【０１０１】
同様に本発明の化合物と併用することができるビスホスホネートの非限定的な例を以下に挙げる。
（ａ）アレンドロネート（アレンドロン酸、４−アミノ−１−ヒドロキシブチリデン−１，１−ビスホスホン酸、アレンドロン酸ナトリウム、アレンドロン酸一ナトリウム三水和物又は４−アミノ−１−ヒドロキシブチリデン−１，１−ビスホスホン酸一ナトリウム三水和物とも言う。アレンドロネートはいずれも参考資料としてその開示内容全体を本明細書に組込む米国特許第４，９２２，００７号（Ｋｉｅｃｚｙｋｏｗｓｋｉら，発行日１９９０年５月１日）；５，０１９，６５１号（Ｋｉｅｃｚｙｋｏｗｓｋｉら，発行日１９９１年５月２８日）；５，５１０，５１７号（Ｄａｕｅｒら，発行日１９９６年４月２３日）；５，６４８，４９１号（Ｄａｕｅｒら，発行日１９９７年７月１５日）に記載されている）；
（ｂ）参考資料としてその開示内容全体を本明細書に組込む米国特許第４，９７０，３３５号（Ｉｓｏｍｕｒａら，発行日１９９０年１１月１３日）に記載されている［（シクロヘプチルアミノ）−メチレン］−ビスホスホネート（インカドロネート）；
（ｃ）いずれも参考資料としてその開示内容全体を本明細書に組込むベルギー特許第６７２，２０５号（１９６６）とＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ  ３２，４１１１（１９６７）に記載されている（ジクロロメチレン）−ビスホスホン酸（クロドロン酸）とその二ナトリウム塩（クロドロネート）；
（ｄ）［１−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジニル）−プロピリデン］−ビスホスホネート（ＥＢ−１０５３）；
（ｅ）（１−ヒドロキシエチリデン）−ビスホスホネート（エリドロネート）；
（ｆ）参考資料としてその開示内容全体を本明細書に組込む米国特許第４，９２７，８１４号（発行日１９９０年５月２２日）に記載されている［１−ヒドロキシ−３−（メチルペンチルアミノ）プロピリデン］−ビスホスホネート（イバンドロネート）；
（ｇ）（６−アミノ−１−ヒドロキシヘキシリデン）−ビスホスホネート（ネリドロネート）；
（ｈ）［３−（ジメチルアミノ）−１−ヒドロキシプロピリデン］−ビスホスホネート（オルパドロネート）；
（ｉ）（３−アミノ−１−ヒドロキシプロピリデン）−ビスホスホネート（パミドロネート）；
（ｊ）参考資料としてその開示内容全体を本明細書に組込む米国特許第４，７６１，４０６号に記載されている［２−（２−ピリジニル）エチリデン］−ビスホスホネート（ピリドロネート）；
（ｋ）［１−ヒドロキシ−２−（３−ピリジニル）−エチリデン］−ビスホスホネート（リセドロネート）；
（ｌ）参考資料としてその開示内容全体を本明細書に組込む米国特許第４，８７６，２４８号（Ｂｒｅｌｉｅｒｅら，発行日１９８９年１０月２４日）に記載されている｛［（４−クロロフェニル）チオ］メチレン｝−ビスホスホネート（チルドロネート）；
（ｍ）［１−ヒドロキシ−２−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エチリデン］−ビスホスホネート（ゾレンドロネート）；並びに
（ｎ）［１−ヒドロキシ−２−イミダゾピリジン−（１，２−ａ）−３−イルエチリデン］−ビスホスホネート（ミノドロネート）。
【０１０２】
本発明の方法及び組成物の１態様では、ビスホスホネートはアレンドロネート、クロドロネート、エチドロネート、イバンドロネート、インカドロネート、ミノドロネート、ネリドロネート、オルパドロネート、パミドロネート、ピリドロネート、リセドロネート、チルドロネート、ゾレドロネート、これらのビスホスホネートの医薬的に許容可能な塩及び混合物から選択される。１変形例では、ビスホスホネートはアレンドロネート、リセドロネート、ゾレドロネート、イバンドロネート、チルドロネート、及びクロドロネートから選択される。このクラスのサブクラスでは、ビスホスホネートはアレンドロネート、その医薬的に許容可能な塩及び水和物とその混合物である。アレンドロネートの医薬的に許容可能な特定塩はアレンドロン酸一ナトリウムである。アレンドロン酸一ナトリウムの医薬的に許容可能な水和物としては一水和物と三水和物が挙げられる。リセドロネートの医薬的に許容可能な特定塩はリセドロン酸一ナトリウムである。リセドロン酸一ナトリウムの医薬的に許容可能な水和物としては１／２〜５水和物が挙げられる。
【０１０３】
更に、本発明の方法及び組成物では、ラロキシフェン（例えば，米国特許第５，３９３，７６３号参照）、クロミフェン、ズクロミフェン、エンクロミフェン、ナフォキシジン、ＣＩ−６８０、ＣＩ−６２８、ＣＮ−５５，９４５−２７、Ｍｅｒ−２５、Ｕ−１１，５５５Ａ、Ｕ−１００Ａ、及びその塩等（例えば，米国特許第４，７２９，９９９号及び４，８９４，３７３号参照）の抗エストロゲン化合物を構造式Ｉの化合物と併用することができる。これらの物質はＳＥＲＭないし選択的エストロゲン受容体モジュレーターとも言われ、エストロゲンと同様であると考えられる経路により骨吸収を抑制することにより骨量低下を防ぐために当分野で公知の物質である。
【０１０４】
ＳＥＲＭの非限定的な代表例としては、例えばタモキシフェン、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、トレミフェン、アルゾキシフェン、ＥＭ−８００、ＥＭ−６５２、ＴＳＥ  ４２４、クロミフェン、ドロロキシフェン、イドキシフェン、及びレボルメロキシフェンが挙げられる［Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎら，“Ａ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｅｓｔｒｏｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓ，”  Ｈｕｍａｎ  Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｕｐｄａｔｅ，６：２１２−２２４（２０００）；Ｌｕｆｋｉｎら，Ｒｈｅｕｍａｔｉｃ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｌｉｎｉｃｓ  ｏｆ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａ，２７：１６３−１８５（２００１），及び“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｅｓｔｒｏｇｅｎ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｗｉｔｈ  ＳＥＲＭｓ，”Ａｎｎ．Ｒｅｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３６：１４９−１５８（２００１）］。
【０１０５】
ανβ３インテグリン受容体アンタゴニストは骨吸収を抑制し、骨粗鬆症等の骨障害の治療に構造式ＩのＳＡＲＭと併用することができる。ανβ３インテグリン受容体のペプチド及びペプチドミメティックアンタゴニストは科学文献と特許文献の両者に記載されている。例えば、Ｗ．Ｊ．Ｈｏｅｋｓｔｒａ  ａｎｄ  Ｂ．Ｌ．Ｐｏｕｌｔｅｒ，Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５：１９５−２０４（１９９８）とその引用文献；ＷＯ９５／３２７１０；ＷＯ９５／３７６５５；ＷＯ９７／０１５４０；ＷＯ９７／３７６５５；ＷＯ９８／０８８４０；ＷＯ９８／１８４６０；ＷＯ９８／１８４６１；ＷＯ９８／２５８９２；ＷＯ９８／３１３５９；ＷＯ９８／３０５４２；ＷＯ９９／１５５０６；ＷＯ９９／１５５０７；ＷＯ００／０３９７３；ＥＰ８５３０８４；ＥＰ８５４１４０；ＥＰ８５４１４５；米国特許第５，２０４，３５０号；５，２１７，９９４号；５，６３９，７５４号；５，７４１，７９６号；５，７８０，４２６号；５，９２９，１２０号；５，９５２，３４１号；６，０１７，９２５号；及び６，０４８，８６１号参照。
【０１０６】
他のανβ３アンタゴニストはＲ．Ｍ．Ｋｅｅｎａｎら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４０：２２８９−２２９２（１９９７）；Ｒ．Ｍ．Ｋｅｅｎａｎら，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．８：３１６５−３１７０（１９９８）；及びＲ．Ｍ．Ｋｅｅｎａｎら，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．８：３１７１−３１７６（１９９８）に記載されている。
【０１０７】
各種ανβ３インテグリン受容体アンタゴニストを記載した公開特許及び特許出願の他の非限定的な代表例としては、ベンザゼピン、ベンゾジアゼピン及びベンゾシクロヘプテンを含むものとして、ＰＣＴ特許出願ＷＯ９６／００５７４、ＷＯ９６／００７３０、ＷＯ９６／０６０８７、ＷＯ９６／２６１９０、ＷＯ９７／２４１１９、ＷＯ９７／２４１２２、ＷＯ９７／２４１２４、ＷＯ９８／１４１９２、ＷＯ９８／１５２７８、ＷＯ９９／０５１０７、ＷＯ９９／０６０４９、ＷＯ９９／１５１７０、ＷＯ９９／１５１７８、ＷＯ９７／３４８６５、ＷＯ９９／１５５０６、及び米国特許第６，１５９，９６４号；ジべンゾシクロヘプテン及びジベンゾキサゼピンを含むものとして、ＰＣＴ特許出願ＷＯ９７／０１５４０、ＷＯ９８／３０５４２、ＷＯ９９／１１６２６、ＷＯ９９／１５５０８、並びに米国特許第６，００８，２１３号及び６，０６９，１５８号；フェノール制約があるものとしてＰＣＴ特許出願ＷＯ９８／００３９５、ＷＯ９９／３２４５７、ＷＯ９９／３７６２１、ＷＯ９９／４４９９４、ＷＯ９９／４５９２７、ＷＯ９９／５２８７２、ＷＯ９９／５２８７９、ＷＯ９９／５２８９６、ＷＯ００／０６１６９、ヨーロッパ特許第ＥＰ０  ８２０，９８８号、ＥＰ０  ８２０，９９１号、並びに米国特許第５，７４１，７９６号、５７７３，６４４号、５，７７３，６４６号、５，８４３，９０６号、５，８５２，２１０号、５，９２９，１２０号、５，９５２，２８１号、６，０２８，２２３号及び６，０４０，３１１号；単環制約があるものとしてＰＣＴ特許出願ＷＯ９９／２６９４５、ＷＯ９９／３０７０９、ＷＯ９９／３０７１３、ＷＯ９９／３１０９９、ＷＯ９９／５９９９２、ＷＯ００／００４８６、ＷＯ００／０９５０３、ヨーロッパ特許第ＥＰ０  ７９６，８５５号、ＥＰ０  ９２８，７９０号、ＥＰ０  ９２８，７９３号、並びに米国特許第５，７１０，１５９号、５，７２３，４８０号、５，９８１，５４６号、６，０１７，９２６号及び６，０６６，６４８号；二環制約があるものとしてＰＣＴ特許出願ＷＯ９８／２３６０８、ＷＯ９８／３５９４９、及びＷＯ９９／３３７９８、ヨーロッパ特許第ＥＰ０  ８５３，０８４号、並びに米国特許第５，７６０，０２８号、５，９１９，７９２号、及び５，９２５，６５５号が挙げられる。
【０１０８】
カテプシンＫ（旧名カテプシンＯ２）はシステインプロテアーゼであり、いずれも参考資料としてその開示内容全体を本明細書に組込むＰＣＴ国際出願公開ＷＯ９６／１３５２３；米国特許第５，５０１，９６９号及び５，７３６，３５７号に記載されている。システインプロテアーゼ、特にカテプシンは腫瘍転移、炎症、関節炎、骨リモデリング等の多数の疾患病態に関係している。酸性ｐＨでカテプシンはＩ型コラーゲンを分解することができる。カテプシンプロテアーゼ阻害剤はコラーゲン繊維の分解を抑制することにより破骨細胞骨吸収を抑制することができるため、骨粗鬆症等の骨吸収疾患の治療に有用である。カテプシンＫ阻害剤の非限定的な例はＰＣＴ国際公開ＷＯ０１／４９２８８及びＷＯ０１／７７０７３に記載されている。
【０１０９】
ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤類（「スタチン」とも言う）のメンバーは新しい骨の成長を誘発し、骨粗鬆症の結果としての骨量低下を補充することが判明した（Ｔｈｅ  Ｗａｌｌ  Ｓｔｒｅｅｔ  Ｊｏｕｒｎａｌ，Ｆｒｉｄａｙ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ３，１９９９，Ｂ１頁参照）。従って、スタチンは骨吸収の治療に期待できる。ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の例としてはそのラクトン化又はジヒドロキシ開環酸体のスタチンとその医薬的に許容可能な塩及びエステルが挙げられ、限定されないが、ロバスタチン（米国特許第４，３４２，７６７号参照）；シンバスタチン（米国特許第４，４４４，７８４号参照）；ジヒドロキシ開環酸シンバスタチン、特にそのアンモニウム又はカルシウム塩；プラバスタチン、特にそのナトリウム塩（米国特許第４，３４６，２２７号参照）；フルバスタチン、特にそのナトリウム塩（米国特許第５，３５４，７７２号参照）；アトルバスタチン、特にそのカルシウム塩（米国特許第５，２７３，９９５号参照）；セリバスタチン、特にそのナトリウム塩（米国特許第５，１７７，０８０号参照）、ロスバスタチン（別称ＺＤ−４５２２）（米国特許第５，２６０，４４０号参照）及びピタバスタチン（別称ＮＫ−１０４）、イタバスタチン、又はニスバスタチン（ＰＣＴ国際出願公開ＷＯ９７／２３２００参照）が挙げられる。
【０１１０】
破骨細胞液胞型ＡＴＰａｓｅ阻害剤（プロトンポンプ阻害剤とも言う）を構造式ＩのＳＡＲＭと併用することができる。破骨細胞の頂膜に存在するプロトンＡＴＰａｓｅは骨吸収プロセスに重要な役割を果たすことが報告されている。従って、このプロトンポンプは骨粗鬆症や関連代謝疾患の治療と予防に潜在的に有用な骨吸収抑制剤の設計の魅力的なターゲットである［Ｃ．Ｆａｒｉｎａら，ＤＤＴ，４：１６３−１７２（１９９９）参照］。
【０１１１】
血管由来因子ＶＥＧＦは破骨細胞上のその受容体との結合により単離成熟ウサギ破骨細胞の骨吸収活性を刺激することが示されている［Ｍ．Ｎａｋａｇａｗａら，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，４７３：１６１−１６４（２０００）参照］。従って、ＫＤＲ／Ｆｌｋ−１及びＦｌｔ−１等の破骨細胞受容体と結合するＶＥＧＦのアンタゴニストの開発は骨吸収の治療又は予防の更に別のアプローチとなり得る。
【０１１２】
チアゾリジンジオン（ＴＺＤ）等のペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γ（ＰＰＡＲγ）のアクチベーターは破骨細胞様細胞形成と骨吸収をｉｎ  ｖｉｔｒｏで抑制する。Ｒ．Ｏｋａｚａｋｉら，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１４０：５０６０−５０６５（１９９９）により報告されている結果は骨髄細胞上の局所メカニズムとグルコース代謝の全身メカニズムを指摘している。ＰＰＡＲγアクチベーターの非限定的な例としてはトログリタゾン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、及びＢＲＬ  ４９６５３等のグリタゾンが挙げられる。
【０１１３】
カルシトニンも構造式ＩのＳＡＲＭと併用することができる。カルシトニンはサケ鼻孔スプレーとして使用することが好ましい（Ａｚｒａら，Ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ．１９９６．Ｉｎ：Ｊ．Ｐ．Ｂｉｌｅｚｉｋｉａｎら編，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｂｏｎｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ：Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；及びＳｉｌｖｅｒｍａｎ，“Ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ，”  Ｒｈｅｕｍａｔｉｃ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｌｉｎｉｃｓ  ｏｆ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａ，２７：１８７−１９６，２００１）。
【０１１４】
蛋白質キナーゼ阻害剤も構造式ＩのＳＡＲＭと併用することができる。キナーゼ阻害剤としてはＷＯ０１／１７５６２に開示されているものが挙げられ、１態様ではｐ３８阻害剤から選択される。本発明で有用なｐ３８阻害剤の非限定的な例としてはＳＢ  ２０３５８０が挙げられる［Ｂａｄｇｅｒら，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２７９：１４５３−１４６１（１９９６）］。
【０１１５】
骨同化促進剤は骨蛋白質マトリックスの産生を増すことにより骨を形成することが知られている物質である。このような骨同化促進剤としては例えば、天然又は置換された副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）とそのフラグメント、例えば天然ＰＴＨ（１−８４）、ＰＴＨ（１−３４）、そのアナログ、特に副甲状腺ホルモン皮下注射が挙げられる。ＰＴＨは骨を形成する細胞である骨芽細胞の活性を増加することにより、新しい骨の合成を促進することが判明した（Ｍｏｄｅｒｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，Ｖｏｌ．３，Ｎｏ．８，２０００）。ヒトＰＴＨの注射用組換え形態であるＦｏｒｔｅｏ（テリパラチド）は米国で骨粗鬆症の治療に認可されている。
【０１１６】
Ｇｏｗｅｎら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１０５：１５９５−６０４（２０００）に記載されているようにＰＴＨの分泌を誘導するカルシウム受容体アンタゴニストも本発明のＳＡＲＭと併用するのに有用である。
【０１１７】
その他の骨同化促進剤としては成長ホルモン分泌促進剤、成長ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン等が挙げられ、骨粗鬆症の治療に構造式Ｉの化合物と併用できる。代表的な成長ホルモン分泌促進剤は米国特許第３，２３９，３４５号、４，０３６，９７９号、４，４１１，８９０号、５，２０６，２３５号、５，２８３，２４１号、５，２８４，８４１号、５，３１０，７３７号、５，３１７，０１７号、５，３７４，７２１号、５，４３０，１４４号、５，４３４，２６１号、５，４３８，１３６号、５，４９４，９１９号、５，４９４，９２０号、５，４９２，９１６号及び５，５３６，７１６号；ヨーロッパ特許公開第０，１４４，２３０号及び０，５１３，９７４号；ＰＣＴ特許公開ＷＯ９４／０７４８６、ＷＯ９４／０８５８３、ＷＯ９４／１１０１２；ＷＯ９４／１３６９６、ＷＯ９４／１９３６７、ＷＯ９５／０３２８９、ＷＯ９５／０３２９０、ＷＯ９５／０９６３３、ＷＯ９５／１１０２９、ＷＯ９５／１２５９８、ＷＯ９５／１３０６９、ＷＯ９５／１４６６６、ＷＯ９５／１６６７５、ＷＯ９５／１６６９２、ＷＯ９５／１７４２２、ＷＯ９５／１７４２３、ＷＯ９５／３４３１１、及びＷＯ９６／０２５３０；論文Ｓｃｉｅｎｃｅ．２６０．１６４０−１６４３（Ｊｕｎｅ  １１，１９９３）；Ａｎｎ．Ｒｅｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２８：１７７−１８６（１９９３）；Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，４：２７０９−２７１４（１９９４）；及びＰｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９２：７００１−７００５（１９９５）に開示されている。
【０１１８】
インスリン様成長因子（ＩＧＦ）も構造式ＩのＳＡＲＭと併用することができる。インスリン様成長因子は単剤又はＩＧＦ結合蛋白質３及びＩＧＦ  ＩＩとの併用剤としてのインスリン様成長因子Ｉから選択することができる［Ｊｏｈａｎｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｒｏｓｅｎ，“Ｔｈｅ  ＩＧＦｓ  ａｓ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｂｏｎｅ  ｄｉｓｅａｓｅｓ，”  １９９６，Ｉｎ：Ｂｉｌｅｚｉｋｉａｎら編，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｂｏｎｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ：Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；及びＧｈｉｒｏｎら，Ｊ．Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ．Ｒｅｓ．１０：１８４４−１８５２（１９９５）参照］。
【０１１９】
骨形態形成蛋白質（ＢＭＰ）も構造式ＩのＳＡＲＭと併用することができる。骨形態形成蛋白質としてはＢＭＰ２、３、５、６、７と関連ＴＧＦβ及びＧＤＦ５が挙げられる［Ｒｏｓｅｎら，“Ｂｏｎｅ  ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ，”  １９９６．Ｉｎ：Ｊ．Ｐ．Ｂｉｌｅｚｉｋｉａｎら編，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｂｏｎｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ：Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；及びＷａｎｇ  ＥＡ，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１１：３７９−３８３（１９９３）］。
【０１２０】
ＢＭＰ拮抗作用の阻害剤も構造式ＩのＳＡＲＭと併用することができる。１態様では、ＢＭＰアンタゴニスト阻害剤はＢＭＰアンタゴニストＳＯＳＴ、ｎｏｇｇｉｎ、ｃｈｏｒｄｉｎ、ｇｒｅｍｌｉｎ、及びｄａｎの阻害剤から選択される［Ｍａｓｓａｇｕｅ  ａｎｄ  Ｃｈｅｎ，“Ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ  ＴＧＦ−ｂｅｔａ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ，”  Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖ．，１４：６２７−６４４，２０００；Ａｓｐｅｎｂｅｒｇら，Ｊ．Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ．Ｒｅｓ．１６：４９７−５００，２００１；及びＢｒｕｎｋｏｗら，Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．６８：５７７−８９（２００１）参照］。
【０１２１】
本発明の組織選択的アンドロゲン受容体モジュレーターは骨粗鬆症等の骨量低下に関連する病態の治療にポリペプチドオステオプロテゲリンと併用することもできる。オステオプロテゲリンは哺乳動物オステオプロテゲリンとヒトオステオプロテゲリンから選択することができる。ポリペプチドオステオプロテゲリンは腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーのメンバーであり、骨粗鬆症等の骨量低下の増加を特徴とする骨疾患を治療するのに有用である。参考資料としてその開示内容全体を本明細書に組込む米国特許第６，２８８，０３２号参照。
【０１２２】
プロスタグランジン誘導体も構造式ＩのＳＡＲＭと併用することができる。プロスタグランジン誘導体の非限定的な代表例はプロスタグランジン受容体ＥＰ１、ＥＰ２、ＥＰ４、ＦＰ、ＩＰとその誘導体のアゴニストから選択される［Ｐｉｌｂｅａｍら，“Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ  ａｎｄ  ｂｏｎｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，”  １９９６．Ｉｎ：Ｂｉｌｅｚｉｋｉａｎら編．Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｂｏｎｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ：Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；Ｗｅｉｎｒｅｂら，Ｂｏｎｅ，２８：２７５−２８１（２００１）］。
【０１２３】
線維芽細胞増殖因子も構造式ＩのＳＡＲＭと併用することができる。線維芽細胞増殖因子としてはａＦＧＦ、ｂＦＧＦ及びＦＧＦ活性をもつ関連ペプチドが挙げられる［Ｈｕｒｌｅｙ  Ｆｌｏｒｋｉｅｗｉｃｚ，“Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ａｎｄ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｆａｍｉｌｉｅｓ，”  １９９６．Ｉｎ：Ｊ．Ｐ．Ｂｉｌｅｚｉｋｉａｎら編．Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｂｏｎｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ：Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ］。
【０１２４】
骨吸収抑制剤と骨同化促進剤に加え、厳密に定義されないメカニズムにより骨格に有益であることが知られている他の物質もある。これらの物質も構造式ＩのＳＡＲＭと有利に併用することができる。
【０１２５】
ビタミンＤ及びビタミンＤ誘導体も構造式ＩのＳＡＲＭと併用することができる。ビタミンＤ及びビタミンＤ誘導体としては、例えば天然ビタミンＤ、２５−ＯＨ−ビタミンＤ３、１α，２５（ＯＨ）２ビタミンＤ３、１α−ＯＨ−ビタミンＤ３、１α−ＯＨ−ビタミンＤ２、ジヒドロタキステロール、２６，２７−Ｆ６−１α，２５（ＯＨ）２ビタミンＤ３、１９−ノル−１α，２５（ＯＨ）２ビタミンＤ３、２２−オキサカルシトリオール、カルシトリオール、１α，２５（ＯＨ）２−１６−エン−２３−イン−ビタミンＤ３（Ｒｏ２３−７５５３）、ＥＢ１０８９、２０−エピ−１α，２５（ＯＨ）２ビタミンＤ３、ＫＨ１０６０、ＥＤ７１、１α，２４（Ｓ）−（ＯＨ）２ビタミンＤ３、１α，２４（Ｒ）−（ＯＨ）２ビタミンＤ３が挙げられる［Ｊｏｎｅｓ  Ｇ．，“Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ：ｖｉｔａｍｉｎ  Ｄ  ａｎｄ  ａｎａｌｏｇｓ，”  １９９６．Ｉｎ：Ｊ．Ｐ．Ｂｉｌｅｚｉｋｉａｎら編．Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｂｏｎｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ：Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ参照］。
【０１２６】
ビタミンＫ及びビタミンＫ誘導体も構造式ＩのＳＡＲＭと併用することができる。ビタミンＫ及びビタミンＫ誘導体としてはメナテトレノン（ビタミンＫ２）が挙げられる［Ｓｈｉｒａｋｉら，Ｊ．Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ．Ｒｅｓ．，１５：５１５−５２１（２０００）参照］。
【０１２７】
イプリフラボン等の大豆イソフラボンも構造式ＩのＳＡＲＭと併用することができる。
【０１２８】
フッ化ナトリウム（ＮａＦ）やフルオロリン酸一ナトリウム（ＭＦＰ）等のフッ化物塩も構造式ＩのＳＡＲＭと併用することができる。カルシウム栄養サプリメントも構造式ＩのＳＡＲＭと併用することができる。カルシウム栄養サプリメントとしては炭酸カルシウム、クエン酸カルシウム、及び天然カルシウム塩が挙げられる（Ｈｅａｎｅｙ．Ｃａｌｃｉｕｍ．１９９６．Ｉｎ：Ｊ．Ｐ．Ｂｉｌｅｚｉｋｉａｎら編，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｂｏｎｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ：Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ）。
【０１２９】
骨吸収抑制剤、骨同化促進剤及び構造式Ｉの化合物と併用した場合に骨格に有益な効果を与えるために使用することができる他の物質の１日用量は当分野で公知の用量である。このような併用では、一般に構造式ＩのＳＡＲＭの１日用量は成人一人当たり約０．０１〜約１０００ｍｇ／日、例えば、約０．１〜約２００ｍｇ／日である。しかし、併用剤の効力の増加により各物質の用量を減らすように調整することができる。
【０１３０】
特に、ビスホスホネートを使用する場合には、約２．５〜約１００ｍｇ／日（遊離ビスホスホン酸として測定）、例えば５〜２０ｍｇ／日、又は約１０ｍｇ／日の用量が治療に適している。予防用には、約２．５〜約１０ｍｇ／日、特に約５ｍｇ／日を使用する。副作用を減らすために、構造式Ｉの化合物とビスホスホネートを週１回併用投与することが望ましい。週１回投与では、ビスホスホネート約１５ｍｇ〜約７００ｍｇ／週と構造式Ｉの化合物約０．０７〜約７０００ｍｇを別々又は１つの剤形で使用することができる。特に週１回投与では、構造式Ｉの化合物を放出制御送達装置で有利に投与することができる。
【０１３１】
アテローム性動脈硬化症、高コレステロール血症、及び高脂血症の治療には、構造式Ｉの化合物を１種以上の付加活性物質と有効に併用投与することができる。付加活性物質はＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、他の医薬活性をもつ物質、及び脂質改変効果と他の医薬活性を併有する物質から選択することができる。ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の非限定的な例としてはそのラクトン化又はジヒドロキシ開環酸体のスタチンとその医薬的に許容可能な塩及びエステルが挙げられ、限定されないが、ロバスタチン（米国特許第４，３４２，７６７号参照）；シンバスタチン（米国特許第４，４４４，７８４号参照）；ジヒドロキシ開環酸シンバスタチン、特にそのアンモニウム又はカルシウム塩；プラバスタチン、特にそのナトリウム塩（米国特許第４，３４６，２２７号参照）；フルバスタチン、特にそのナトリウム塩（米国特許第５，３５４，７７２号参照）；アトルバスタチン、特にそのカルシウム塩（米国特許第５，２７３，９９５号参照）；セリバスタチン、特にそのナトリウム塩（米国特許第５，１７７，０８０号参照）、及びニスバスタチン（別称ＮＫ−１０４）（ＰＣＴ国際出願公開ＷＯ９７／２３２００参照）が挙げられる。
【０１３２】
構造式Ｉの化合物と併用することができる他の活性物質としては限定されないが、ＨＭＧ−ＣｏＡシンターゼ阻害剤；スクアレンエポキシダーゼ阻害剤；スクアレンシンテターゼ阻害剤（別称スクアレンシンターゼ阻害剤）、ＡＣＡＴ−１又はＡＣＡＴ−２の選択的阻害剤とＡＣＡＴ−１及び−２のデュアル阻害剤を含むアシル−補酵素Ａ：コレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ）阻害剤；ミクロソームトリグリセリド転移蛋白質（ＭＴＰ）阻害剤；プロブコール；ナイアシン；ＳＣＨ−５８２３５（別称エゼチミブ）や米国特許第５，７６７，１１５号及び５，８４６，９６６号に記載されている１−（４−フルオロフェニル）−３（Ｒ）−［３（Ｓ）−（４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシプロピル）］−４（Ｓ）−（４−ヒドロキシフェニル）−２−アゼチジノン等のコレステロール吸収抑制剤；胆汁酸溶解剤；ＬＤＬ（低密度リポ蛋白質）受容体インデューサー；血小板凝集阻害剤（例えば糖蛋白質ＩＩｂ／ＩＩＩａフィブリノーゲン受容体アンタゴニスト及びアスピリン）；ヒトペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γ（ＰＰＡＲγ）アゴニスト、例えば一般にグリタゾンと呼ばれる化合物（例えばトログリタゾン、ピオグリタゾン及びロシグリタゾン）及びチアゾリジンジオンとして知られる構造クラスに含まれる化合物と、チアゾリジンジオン構造クラスに含まれないＰＰＡＲγアゴニスト；ＰＰＡＲαアゴニスト（例えばクロフィブレート、微粉状フェノフィブレートを含むフェノフィブレート、及びゲムフィブロジル）；ＰＰＡＲデュアルα／γアゴニスト；ビタミンＢ６（別称ピリドキシン）とその医薬的に許容可能な塩（例えばＨＣｌ塩）；ビタミンＢ１２（別称シアノコバラミン）；葉酸又はその医薬的に許容可能な塩もしくはエステル（例えばナトリウム塩及びメチルグルカミン塩）；酸化防止ビタミン類（例えばビタミンＣ及びＥ及びβカロチン）；β遮断薬；アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト（例えばロサルタン）；アンギオテンシン変換酵素阻害剤（例えばエナラプリル及びカプトプリル）；カルシウムチャネル遮断薬（例えばニフェジピン及びジルチアゼム）；エンドテリンアンタゴニスト；ＡＢＣ１遺伝子発現を増強するＬＸＲリガンド等の物質；ビスホスホネート化合物（例えばアレンドロン酸ナトリウム）；及びシクロオキシゲナーゼ−２阻害剤（例えばロフェコキシブ及びセレコキシブ）、並びにこれらの病態の治療に有用であることが知られている他の物質が挙げられる。
【０１３３】
構造式Ｉの化合物と併用する場合のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の１日用量は当分野で公知の用量に対応する。同様に、ＨＭＧ−ＣｏＡシンターゼ阻害剤；スクアレンエポキシダーゼ阻害剤；スクアレンシンテターゼ阻害剤（別称スクアレンシンターゼ阻害剤）、ＡＣＡＴ−１又はＡＣＡＴ−２の選択的阻害剤とＡＣＡＴ−１及び−２のデュアル阻害剤を含むアシル−補酵素Ａ：コレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ）阻害剤；ミクロソームトリグリセリド転移蛋白質（ＭＴＰ）阻害剤；プロブコール；ナイアシン；エゼチミブを含むコレステロール吸収抑制剤；胆汁酸溶解剤；ＬＤＬ（低密度リポ蛋白質）受容体インデューサー；血小板凝集阻害剤（例えば糖蛋白質ＩＩｂ／ＩＩＩａフィブリノーゲン受容体アンタゴニスト及びアスピリン）；ヒトペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γ（ＰＰＡＲγ）アゴニスト；ＰＰＡＲαアゴニスト；ＰＰＡＲデュアルα／γアゴニスト；ビタミンＢ６；ビタミンＢ１２；葉酸；酸化防止ビタミン類；β遮断薬；アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト；アンギオテンシン変換酵素阻害剤；カルシウムチャネル遮断薬；エンドテリンアンタゴニスト；ＡＢＣ１遺伝子発現を増強するＬＸＲリガンド等の物質；ビスホスホネート化合物；並びにシクロオキシゲナーゼ−２阻害剤の１日用量も当分野で公知の用量に対応するが、構造式Ｉの化合物との併用作用により、併用投与時には用量を多少減らすことができる。
【０１３４】
本発明の１態様は治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む哺乳動物における骨代謝回転マーカーの調節方法である。骨代謝回転マーカーの非限定的な例は尿中Ｉ型コラーゲンＣ−テロペプチド分解産物（ＣＴＸ）、尿中Ｉ型コラーゲン架橋Ｎ−テロペプチド（ＮＴＸ）、オステオカルシン（骨Ｇ１ａ蛋白質）、デュアルエネルギーＸ線吸収測定（ＤＸＡ）、骨特異的アルカリホスファターゼ（ＢＳＡＰ）、定量的超音波（ＱＵＳ）、及びデオキシピリジノリン（ＤＰＤ）架橋から選択することができる。
【０１３５】
本発明の方法によると、併用剤の個々の成分を治療中の異なる時点で別々に投与してもよいし、分離するか又は単一の併用形態で同時に投与してもよい。従って、本発明はこのような全同時又は交互治療レジメンを含むものであり、「投与」なる用語は相応に解釈すべきである。当然のことながら、本発明の化合物とアンドロゲン欠乏に起因するか又はアンドロゲンの付加により改善することができる疾患の治療に有用な他の物質との併用の範囲は理解される。
【０１３６】
本発明の化合物の製造の記載で使用する略語：
ＤＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジエチルアミン
ＤＨＴ：ジヒドロテストステロン
ＤＭＥＭ：ダルベッコ改変イーグル培地
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＥＤＣ：１−（３−ジメチルアミノプロピル）３−エチルカルボジイミドＨＣｌ
ＥＤＴＡ：エチレンジアミン四酢酸
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＥｔＯＨ：エタノール
ＦＣＳ：ウシ胎仔血清
ＦＮ（ＳＯ２Ｐｈ）２：Ｎ−フルオロベンゼンスルホンイミド
ＨＥＰＥＳ：（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸
ＨＯＡｔ：１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＯＢｔ：Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ：高性能液体クロマトグラフィー
ＩＰＡ：イソプロピルアルコール
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー／質量分析
ＬＤＡ：リチウムジイソプロピルアミド
ＬＧ：脱離基
ＭｅＯＨ：メタノール
ＭｇＳＯ４：硫酸マグネシウム
ＮＢＳ：Ｎ−ブロモスクシンイミド
ＮＭＭ：Ｎ−メチルモルホリン
Ｎ−ＣＢｚ−アラニン：Ｎ−カルボベンジルオキシグリシン
ｎ−Ｂｕ４ＮＩ：テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムヨージド
Ｒｔ又はｒｔ：室温
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー。
【０１３７】
本発明の化合物は文献公知又は実験手順に例示する他の標準操作に加え、以下のスキームに示すような反応を使用することにより製造することができる。従って、下記例証スキームは記載する化合物又は例証目的で使用する任意特定置換基により限定されない。スキームに示す置換基番号は必ずしも請求の範囲で使用する番号と相関せず、多くの場合には、分かりやすくするために、式Ｉの上記定義で許容される複数の置換基の代わりに置換基を１個だけ化合物に結合している。
【０１３８】
スキームＡ−Ｃは式Ｉの化合物を製造するための一般指針を示す。スキームＡは骨格である２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボン酸メチルエステルの合成方法を例証する。スキームＢは各種３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）］アミンの合成を例証する。スキームＣはフッ素付加４−アザステロイド誘導体をアミンとカップリングして式Ｉに記載の化合物を形成する経路を例証する。
【０１３９】
なお、スキームＡでは、特定脱離基ＬＧの選択は当然のことながら核構造に付加される特定置換基類により異なる。脱離基の選択と適用は合成有機化学分野で一般的なプラクティスであり、この情報は当業者に容易に認識され、入手可能である。例えば、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｓｍｉｔｈ，Ｍ，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  ＩＮＣ，１９９４，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ．ＩＳＢＮ  ０−０７−０４８７１６−２参照。
【０１４０】
【化７】
2007534757.tif 000007
2007534757.tif 000008
2007534757.tif 000009
（実施例１）
【０１４１】
【化８】
2007534757.tif 000010
2007534757.tif 000011
2007534757.tif 000012
【０１４２】
ステップＡ：Ｎ１−（３−アミノピリジン−２−イル）−Ｎ２−（カルボキシベンゾイル）アラニンアミド（１−３）
Ｎ−ＣＢｚ−アラニン（１−１，８７．７ｇ，３９２ｍｍｏｌ）、２，３−ジアミノピリジン（１−２，４７．１６ｇ，４３２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（９０．４ｇ，４７１ｍｍｏｌ）、ＮＭＭ（７９．５ｇ，７８５ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（６３．７ｇ，４７１ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（６００ｍＬ）中で混合し、１８時間撹拌した。次にロータリーエバポレーターで溶媒を除去し、炭酸カリウム５０ｇと塩化ナトリウム１００ｇを加えた水１．５Ｌで粘稠油状残渣を希釈した。ＥｔＯＡｃ３×６００ｍＬで抽出した。有機層を合わせて水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させると、暗褐色油状物が得られた。残渣を１，４−ジオキサンとトルエンの混合物で希釈し、ＮＭＭを除去すると、１−３（１１２ｇ，９１％）が茶色油状物として得られた。ＭＳ計算値Ｍ＋Ｈ：３１５．４，実測値３１５．４。
【０１４３】
ステップＢ：［１−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）エチル］カルバミン酸ベンジル（１−４）
アミド１−３（１１２ｇ，３５６ｍｍｏｌ）を氷酢酸（７５０ｍＬ）に溶かし、１５時間加熱還流した。次にロータリーエバポレーターで溶媒を除去した。粘稠油状残渣を１，４−ジオキサン溶液で希釈した。得られた茶色油状物を放置固化すると１−４（１１０ｇ，１０４％）が茶色固体として得られた。ＭＳ計算値Ｍ＋Ｈ：２９７．３，実測値２９７．３。
【０１４４】
ステップＣ：［１−（３Ｈ−イミダゾ−［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）エチル］アミン二塩酸塩（１−５）
１−４（１００ｇ，３１８ｍｍｏｌ）、酢酸（５００ｍＬ）、エタノール（５００ｍＬ）及び炭素（２０ｇ）１０％パラジウムの混合物を水素バルーン下に４８時間撹拌した。混合物をセライトパッドで濾過し、ロータリーエバポレーターで溶媒を除去した。得られた粘稠油状残渣を１，４−ジオキサン溶液で希釈した後、ジオキサンに再懸濁し、ジオキサン（２００ｍＬ）中４Ｍ  ＨＣｌを加えた。２時間撹拌後、得られた懸濁液を濾過し、固体を収集し、減圧乾燥すると、１−５（７０ｇ，９４％）が薄茶色固体として得られた。ＭＳ計算値Ｍ＋Ｈ：１６３．３，実測値１６３．３。
【０１４５】
ステップＤ：２α−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスタン−１７β−カルボン酸メチルエステル（１−７）
１−６（７．５ｇ，２１．６ｍｍｏｌ）の−７８℃のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液にＴＨＦ（１７．３ｍＬ，２５．９ｍｍｏｌ）中１．５Ｍ  ＬＤＡの溶液を２０分間滴下した後、１時間撹拌した。次にＦＮ（ＳＯ２Ｐｈ）２（１０．２ｇ，３２．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液を２０分間滴下した。３０分後に冷却浴を除去し、反応混合物を１４時間撹拌した。Ｅｔ２Ｏを加え、混合物を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、ブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）した後、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（溶離液ヘキサン→ＥｔＯＡｃ）に付すと、１−７（４．２ｇ）が無色固体として得られた。ＭＳ計算値Ｍ＋Ｈ：３６６，実測値３６６．１。
【０１４６】
ステップＥ：２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボン酸メチルエステル（１−８）
１−７（３０ｇ，８２．１ｍｍｏｌ）の−７８℃のＴＨＦ（４００ｍＬ）溶液にＴＨＦ（７１．１ｍＬ，１０７ｍｍｏｌ）中１．５Ｍ  ＬＤＡの溶液を３０分間滴下した後、１時間撹拌した。次にベンゼンスルフィン酸メチル（１９．２３ｇ，１２３ｍｍｏｌ）を１５分間滴下した。３０分後に冷却浴を除去し、反応混合物を１時間撹拌した。Ｅｔ２Ｏを加え、混合物を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、ブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）した後、濃縮した。残渣をトルエン（２００ｍＬ）に溶かし、２時間加熱還流した。溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（溶離液ヘキサン→５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に付すと、１−８（２０．４ｇ）が薄黄色固体として得られた。ＭＳ計算値Ｍ＋Ｈ：３６４．１，実測値３６４．１。
【０１４７】
ステップＦ：２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボン酸（１−９）
１−８（２．４ｇ，６．６ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（５０ｍＬ）溶液に水酸化リチウム（０．４１ｇ，９．９ｍｍｏｌ）の水（２０ｍＬ）溶液を加え、混合物を１００℃に３時間加熱した。冷却後、混合物を酢酸エチルで希釈した後に１Ｎ  ＨＣｌ、ブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）した後、濃縮すると、１−９（２．２ｇ）が薄黄色固体として得られた。ＭＳ計算値Ｍ＋Ｈ：３５０，実測値３５０。
【０１４８】
ステップＧ：Ｎ−［１−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）エチル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド（１−１０ａ及び１−１０ｂ）
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の１−９（０．５ｇ，１．４３ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（０．３２９ｇ，１．７１７ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（０．２３４ｇ，１．７１７ｍｍｏｌ）、ＮＭＭ（０．６２９ｍＬ，５．７２３ｍｍｏｌ）及び１−５（０．３４ｇ，１．４３１ｍｍｏｌ）の混合物をを周囲温度で１４時間撹拌した。混合物を水で希釈し、濾過し、固体を水洗した後、減圧乾燥した。５×１０ｃｍ  ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＡＤカラムで７０：３０ＩＰＡ／ヘキサン中０．１％ＤＥＡを溶離液として１００ｍｌ／分でクロマトグラフィーに付すと、先ず１−１０ａ（保持時間２１分，０．１５ｇ，２１％）が白色固体として得られ、次に１−１０ｂ（保持時間２８分，０．２３ｇ，３１．９％）が白色固体として得られた。化合物１−１０ａ中のイミダゾール環に隣接する炭素原子の立体化学配置を実施例４に記載するようなＸ線分析により決定した処、（Ｒ）であった。
１−１０ａ：１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）８．３８（ｍ，１Ｈ），８．０３（ｍ，１Ｈ），７．２６（ｍ，１Ｈ），６．５８（ｍ，１Ｈ），６．１８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２Ｈｚ），５．４４（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），３．４１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４Ｈｚ，１３Ｈｚ），２．９８（ｓ，３Ｈ），２．２１（ｍ，２Ｈ），１．９８（ｍ，２Ｈ），１．８６（ｍ，１Ｈ），１．７６（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．５９−１．７５（ｍ，５Ｈ），１．２８−１．４４（ｍ，４Ｈ），１．１０（ｍ，２Ｈ），０．９８（ｓ，３Ｈ），０．７４（ｓ，３Ｈ）。ＭＳ計算値Ｍ＋Ｈ：４９４．２９２６，実測値４９４．２９０９。
１−１０ｂ：１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）８．３９（ｍ，１Ｈ），８．０４（ｍ，１Ｈ），７．２６（ｍ，１Ｈ），６．４５（ｍ，１Ｈ），６．１２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２Ｈｚ），５．４２（ｍ，１Ｈ），３．３９（ｍ，１Ｈ），２．９７（ｓ，３Ｈ），２．２３（ｍ，２Ｈ），１．９７（ｍ，１Ｈ），１．８６（ｍ，２Ｈ），１．７６（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．７１（ｍ，２Ｈ），１．５５（ｍ，２Ｈ），１．２５−１．４（ｍ，４Ｈ），０．９９−１．１４（ｍ，３Ｈ），０．９２（ｓ，３Ｈ），０．６２（ｓ，３Ｈ）。ＭＳ計算値Ｍ＋Ｈ：４９４．２９２６，実測値４９４．２９２１。
【０１４９】
最終所望生成物を生成するのに適したアミンを使用した以外は化合物１−１０と同様に表１の実施例２−４を製造した。
【０１５０】
【表１】
2007534757.tif 000013
2007534757.tif 000014
【０１５１】
（実施例４）
【化９】
2007534757.tif 000015
【０１５２】
ステップＡ：Ｎ−［１（Ｒ）−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］−（５−ブロモピリジン）−２−イル）エチル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド（４−１）
１−１０ａ（０．５ｇ，１／０１ｍｍｏＬ）の０℃のメタノール（３ｍＬ）溶液にＮａＨＣＯ３（２４０ｍｇ）と臭素（６３ｕＬ）を加えた。１時間後に混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液とブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン→ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に付し、溶離フラクションを周囲条件下で７２時間放置して濃縮させると、生成物の無色結晶が生じた。結晶を濾取し、２４時間風乾した。ＭＳ  Ｍ＋Ｈ  実測値５７２．３。
【０１５３】
収集した結晶で単結晶Ｘ線結晶分析により化合物の構造を決定した。得られた結晶は空間群Ｐ２１２１２１及び格子定数ａ＝７．２９７５（１２），ｂ＝１８．８４１（３），ｃ＝１９．５８４（３）Å、Ｖ＝２６９２．７（８）Å３、及びＺ＝４の斜方晶系である。密度計算値は１．４５７ｇｃｍ−３である。結晶構造中の非対称単位の式はＣ２８Ｈ３５ＢｒＦＮ５Ｏ２，Ｈ２Ｏであり、１有機部分と１溶媒和水分子である。
【０１５４】
全回折測定はＣＣＤ面積検出器を取付けた回折計を使用し、Ｔ＝１００Ｋ、θ限界２８．２８°でＭｏ  Ｋα線（λ＝０．７１０７３Å）を使用して実施した。測定した３２１５３本の反射のうち６５６４本がユニークであり、４９４７本がＩ≧２σ（Ｉ）レベルで観測された。構造を直接法により求め、３４７パラメーターと全ユニーク反射を使用してＦ２でフルマトリックス最小二乗を使用して補正した。補正はＲ＝０．０３１，ｗＲ＝０．０５７，Ｓ＝０．９４，（Δ／σ）ｍａｘ≦０．０１の一致統計値に収斂した。
【０１５５】
（実施例５）
医薬組成物
本発明の特定態様として、サイズ０のハードゼラチンカプセルに合計量５８０〜５９０ｍｇを充填するために十分な微粉状ラクトースとＮ−［１−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）シクロプロピル］−２−フルオロ−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスト−１−エン−１７β−カルボキサミド１００ｍｇを配合する。
【０１５６】
以上、例証の目的で実施例により本発明の原理を教示したが、当然のことながら、本発明の実施は特許請求の範囲とその等価物に含まれる通常の全変形、応用、又は変更を含む。
【０１５７】
（アッセイ）
化合物のＳＡＲＭ活性確認のためのＩｎ  Ｖｉｔｒｏ及びＩｎ  Ｖｉｖｏアッセイ
本明細書に例示する化合物は以下の全アッセイで有利な活性を示した。
【０１５８】
内在発現されるＡＲに対する化合物親和性のヒドロキシアパタイト放射性リガンド置換アッセイ
材料：
結合用バッファー：ＴＥＧＭ（１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，１ｍＭ  ＥＤＴＡ，１０％グリセロール，１ｍＭβ−メルカプトエタノール，１０ｍＭモリブデン酸ナトリウム，ｐＨ７．２）。
５０％ＨＡＰスラリー：１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ，ｐＨ８．０及び１ｍＭ  ＥＤＴＡ中Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ  Ｈｙｄｒｏｘｙｌａｐａｔｉｔｅ，Ｆａｓｔ  Ｆｌｏｗ。
洗浄用バッファー：４０ｍＭ  Ｔｒｉｓ，ｐＨ７．５，１００ｍＭ  ＫＣｌ，１ｍＭ  ＥＤＴＡ  ａｎｄ  １ｍＭ  ＥＧＴＡ。
９５％  ＥｔＯＨ。
メチルトリエノロン，［１７α−メチル−３Ｈ］，（Ｒ１８８１＊）；ＮＥＮ  ＮＥＴ５９０。
メチルトリエノロン（Ｒ１８８１），ＮＥＮ  ＮＬＰ００５（９５％ＥｔＯＨに溶解）。
ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）［１，２，４，５，６，７−３Ｈ（Ｎ）］ＮＥＮ  ＮＥＴ４５３。
Ｈｙｄｒｏｘｙｌａｐａｔｉｔｅ  Ｆａｓｔ  Ｆｌｏｗ；Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ  Ｃａｔ＃３９１９４７。
モリブデン酸＝モリブデン酸（Ｓｉｇｍａ，Ｍ１６５１）。
【０１５９】
ＭＤＡ−ＭＢ−４５３細胞培地：
ＲＰＭＩ  １６４０（Ｇｉｂｃｏ  １１８３５−０５５）ｗ／完全培地５００ｍＬ中２３．８ｍＭ  ＮａＨＣＯ３，２ｍＭ  Ｌ−グルタミン
終濃度
１０ｍＬ（１Ｍ  Ｈｅｐｅｓ）２０ｍＭ
５ｍＬ（２００ｍＭ  Ｌ−ｇｌｕ）４ｍＭ
０．５ｍＬ（０．０１Ｎ  ＨＣｌ中１０ｍｇ／ｍＬヒトインスリンＣａｌｂｉｏｃｈｅｍ＃４０７６９４−Ｓ）１０μｇ／ｍＬ
５０ｍＬ  ＦＢＳ（Ｓｉｇｍａ  Ｆ２４４２）１０％
１ｍＬ（１０ｍｇ／ｍＬゲンタマイシンＧｉｂｃｏ＃１５７１０−０７２）２０μｇ／ｍＬ。
【０１６０】
細胞継代
細胞（Ｈａｌｌ  Ｒ．Ｅ．ら，Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ，３０Ａ：４８４−４９０（１９９４））をＰＢＳで２回リンスし、フェノールレッドフリートリプシン−ＥＤＴＡを同一ＰＢＳで１０倍に希釈する。細胞層をトリプシンで１回リンスし、更にトリプシンを注ぎ、細胞層を３７℃で〜２分間インキュベートした。フラスコの底をタッピングし、細胞の剥離の徴候をチェックする。細胞がフラスコからはがれ始めたら、完全培地を加えてトリプシンを不活化する。この時点で細胞をカウントした後、適当な濃度まで希釈し、フラスコ又は皿に分配し、更に培養する（通常は３〜６倍希釈）。
【０１６１】
ＭＤＡ−ＭＢ−４５３細胞溶解液の調製
ＭＤＡ細胞が７０〜８５％コンフルエントになったら、上記のようにはがし、１０００ｇで１０分間４℃にて遠心により収集する。細胞ペレットをＴＥＧＭ（１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，１ｍＭ  ＥＤＴＡ，１０％グリセロール，１ｍＭβ−メルカプトエタノール，１０ｍＭモリブデン酸ナトリウム，ｐＨ７．２）で２回洗浄する。最終洗浄後、細胞をＴＥＧＭに濃度１０７個／ｍＬで再懸濁する。細胞懸濁液を液体窒素又はエタノール／ドライアイス浴で急速凍結させ、ドライアイスで保存しながら−８０℃フリーザーに移す。結合アッセイを開始する前に、凍結したサンプルを氷水に放置し、解凍する（〜１時間）。次にサンプルを１２，５００ｇ〜２０，０００ｇで３０分間４℃にて遠心する。上清を使用してアッセイを直ちに開始する。上清５０μＬを使用する場合には、ＴＥＧＭバッファー５０μＬで試験化合物を調製することができる。
【０１６２】
多重化合物スクリーニングの手順
１×ＴＥＧＭバッファーを調製し、ＥｔＯＨ（反応混合物中終濃度２％）、３Ｈ−Ｒ１８８１又は３Ｈ−ＤＨＴ（反応混合物中終濃度０．５ｎＭ）及び１×ＴＥＧＭの順に同位体含有アッセイ混合物を調製する。［例えばサンプル１００個の場合、ＥｔＯＨ２００μＬ（１００×２）＋１：１０３Ｈ−Ｒ１８８１ストック４．２５μＬ＋１×ＴＥＧＭ２３００μＬ（１００×２３）］。化合物を系列希釈し、例えば終濃度が１μＭとなるように出発し、サンプル２個ずつで化合物を溶液２５μＬとする場合には、４×１μＭ溶液７５μＬを調製し、１００μＭ  ３μＬをバッファー７２μＬに加え、５倍系列希釈する。
【０１６３】
先ず３Ｈ−Ｒ１８８１トレース２５μＬと化合物溶液２５μＬを混合した後、受容体溶液５０μＬを加える。反応溶液を静かに混合し、約２００ｒｐｍで短時間遠心し、４℃で一晩インキュベートする。５０％ＨＡＰスラリー１００μＬを調製し、インキュベートした反応混合物に加えた後、ボルテックスし、氷上で５〜１０分間インキュベートする。反応混合物をインキュベートする間に反応混合物を更に２回ボルテックスし、ＨＡＰを再懸濁する。次にＴｈｅＦｉｌｔｅｒＭａｔｅ（登録商標）Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ｈａｒｖｅｓｔｅｒプレートウォッシャー（Ｐａｃｋａｒｄ）を使用して９６ウェルフォーマットのサンプルを洗浄用バッファーで洗浄する。洗浄工程によりリガンドと結合した発現受容体を含むＨＡＰペレットをＵｎｉｆｉｌｔｅｒ−９６  ＧＦ／Ｂフィルタープレート（Ｐａｃｋａｒｄ）に移す。フィルタープレート上のＨＡＰペレットをＭＩＣＲＯＳＣＩＮＴ（Ｐａｃｋａｒｄ）シンチラント５０μＬと共に３０分間インキュベートした後にＴｏｐＣｏｕｎｔマイクロシンチレーションカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ）でカウントする。Ｒ１８８１を基準としてＩＣ５０値を計算する。
【０１６４】
表１に示す実施例１−４の化合物を上記アッセイで試験した処、意外にもＩＣ５０値は０．０５０マイクロモル以下であることが判明した。
【０１６５】
アンドロゲン受容体のＮ末端及びＣ末端ドメインのリガンド誘発性相互作用の哺乳動物２ハイブリッドアッセイ（アゴニストモード；ＶＩＲＣＯＮ）
本アッセイはＡＲアゴニストが活性化アンドロゲン受容体により媒介される潜在的ｉｎ  ｖｉｖｏ男性化を反映するｒｈＡＲのＮ末端ドメイン（ＮＴＤ）とＣ末端ドメイン（ＣＴＤ）の相互作用を誘導する能力を評価する。ｒｈＡＲのＮＴＤとＣＴＤの相互作用はＣＶ−１サル腎細胞における哺乳動物２ハイブリッドアッセイと同様に、Ｇａｌ４ＤＢＤ−ｒｈＡＲＣＴＤ融合蛋白質とＶＰ１６−ｒｈＡＲＮＴＤ融合蛋白質のリガンド誘発性会合として定量される。
【０１６６】
トランスフェクションの前日にＣＶ−１細胞をトリプシン処理し、カウントした後、９６ウェルプレート又は（相応に規模拡大した）もっと大きいプレートにＤＭＥＭ＋１０％ＦＣＳを加え、細胞２０，０００個／ウェルを播種する。翌朝、製造業者により推奨される手順に従ってＬＩＰＯＦＥＣＴＡＭＩＮＥ  ＰＬＵＳ試薬（ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ）を使用し、ｐＣＢＢ１（ＳＶ４０初期プロモーター下に発現させたＧａｌ４ＤＢＤ−ｒｈＡＲＬＢＤ融合構築物）、ｐＣＢＢ２（ＳＶ４０初期プロモーター下に発現させたＶＰ１６−ｒｈＡＲ  ＮＴＤ融合構築物）及びｐＦＲ（Ｇａｌ４反応性ルシフェラーゼレポーター，Ｐｒｏｍｅｇａ）をＣＶ−１細胞にコトランスフェクトする。要約すると、ｐＣＢＢ１  ０．０５μｇ，ｐＣＢＢ２  ０．０５μｇ及びｐＦＲ  ０．１μｇのＤＮＡ混合物をＯＰＴＩ−ＭＥＭ（ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ）３．４μＬと「ＰＬＵＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ」（１．６μＬ，ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ）の混合物に加え、室温（ＲＴ）で１５分間インキュベートし、ＤＮＡプレコンプレックスを形成する。
【０１６７】
ウェル毎にＬＩＰＯＦＥＣＴＡＭＩＮＥ  Ｒｅａｇｅｎｔ（ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ）０．４μＬを第２のチューブでＯＰＴＩ−ＭＥＭ  ４．６μＬで希釈し、混合し、希釈ＬＩＰＯＦＥＣＴＡＭＩＮＥ  Ｒｅａｇｅｎｔを形成する。ＤＮＡプレコンプレックス（上記）と希釈ＬＩＰＯＦＥＣＴＡＭＩＮＥ  Ｒｅａｇｅｎｔ（上記）を合わせて混合し、室温で１５分間インキュベートする。細胞上の培地をＯＰＴＩ−ＭＥＭ４０μＬ／ウェルと交換し、ＤＮＡ−脂質複合体１０μＬを各ウェルに加える。複合体を培地と静かに混合し、３７℃で５％ＣＯ２下に５時間インキュベートする。インキュベーション後にＤ−ＭＥＭ２００μＬ／ウェルと活性炭で処理した１３％ＦＣＳを加えた後、３７℃で５％ＣＯ２下にインキュベートする。２４時間後に試験化合物を所望濃度（１ｎＭ−１０μＭ）で加える。４８時間後に製造業者のプロトコールに従ってＬＵＣ−Ｓｃｒｅｅｎシステム（ＴＲＯＰＩＸ）を使用してルシフェラーゼ活性を測定する。アッセイはアッセイ溶液１とアッセイ溶液２を順次５０μＬずつ加えることによりウェルで直接実施する。４０分間室温でインキュベーション後に２−５秒積分で発光を直接測定する。
【０１６８】
Ｒ１８８１で得られた活性に対するＥｍａｘとして試験化合物の活性を計算する。本発明の例示組織選択的アンドロゲン受容体モジュレーターはこのアッセイで弱いアゴニスト活性を示すか又は全く示さず、アゴニスト活性は５０％未満である。
【０１６９】
Ｈｅ  Ｂ，Ｋｅｍｐｐａｉｎｅｎ  ＪＡ，Ｖｏｅｇｅｌ  ＪＪ，Ｇｒｏｎｅｍｅｙｅｒ  Ｈ，Ｗｉｌｓｏｎ  ＥＭ，“Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｈｕｍａｎ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｌｉｇａｎｄ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｄｏｍａｉｎ  ｍｅｄｉａｔｅｓ  ｉｎｔｅｒ−ｄｏｍａｉｎ  ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  ＮＨ（２）−ｔｅｒｍｉｎａｌ  ｄｏｍａｉｎ，”  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：３７２１９−３７２２５（１９９９）参照。
【０１７０】
アンドロゲン受容体のトランス活性化調節（ＴＡＭＡＲ）
本アッセイは試験化合物がヒトＡＲを天然に発現するヒト乳癌細胞株であるＭＤＡ−ＭＢ−４５３細胞でＭＭＴＶ−ＬＵＣレポーター遺伝子からの転写を制御する能力を評価する。本アッセイはＬＵＣレポーター遺伝子に結合した変異ＭＭＴＶ  ＬＴＲ／プロモーターの誘導を測定する。
【０１７１】
１０％ＦＢＳ、４ｍＭ  Ｌ−グルタミン、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１０ｕｇ／ｍＬヒトインスリン、及び２０ｕｇ／ｍＬゲンタマイシンを加えたフェノールレッドフリーＲＰＭＩ  １６４０から構成される「指数増殖培地」で白色透明底９６ウェルプレートに細胞２０，０００〜３０，０００個／ウェルを播種する。インキュベーター条件は３７℃で５％ＣＯ２とする。トランスフェクションはバッチモードで実施する。細胞をトリプシン処理し、適正量の新鮮な培地中で正確な細胞数までカウントした後、Ｆｕｇｅｎｅ／ＤＮＡカクテルミックスと静かに混合し、９６ウェルプレートに播種する。全ウェルに培地＋脂質／ＤＮＡ複合体２００Ｔｌを加え、３７℃で一晩インキュベートする。トランスフェクションカクテルは無血清Ｏｐｔｉｍｅｍ、Ｆｕｇｅｎｅ６試薬及びＤＮＡから構成する。製造業者（Ｒｏｃｈｅ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ）のカクテル準備プロトコールに従う。脂質（Ｔｌ）とＤＮＡ（Ｔｇ）の比は約３：２とし、インキュベーション時間は室温で２０分間とする。トランスフェクションから１６〜２４時間後に、最終ＤＭＳＯ（ビヒクル）濃度が＜３％となるように細胞を試験化合物で処理する。細胞を試験化合物に４８時間暴露する。４８時間後に細胞をＰｒｏｍｅｇａ細胞培養溶解バッファーにより３０−６０分間溶解させた後、抽出液中のルシフェラーゼ活性を９６ウェルフォーマットルミノメーターでアッセイする。
【０１７２】
１００ｎＭ  Ｒ１８８１で得られた活性に対するＥｍａｘとして試験化合物の活性を計算する。
【０１７３】
Ｒ．Ｅ．Ｈａｌｌら，“ＭＤＡ−ＭＢ−４５３，ａｎ  ａｎｄｒｏｇｅｎ−ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  ｈｕｍａｎ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ  ｗｉｔｈ  ｈｉｇｈ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，”  Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，３０Ａ：４８４−４９０（１９９４）ａｎｄ  Ｒ．Ｅ．Ｈａｌｌら，“Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｇｅｎｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｂｙ  ｓｔｅｒｏｉｄｓ  ａｎｄ  ｒｅｔｉｎｏｉｃ  ａｃｉｄ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｂｒｅａｓｔ−ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ，”  Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ．，５２：７７８−７８４（１９９２）参照。
【０１７４】
Ｒ１８８１で得られた活性に対するＥｍａｘとして試験化合物の活性を計算する。本発明の例示組織選択的アンドロゲン受容体モジュレーターはこのアッセイで部分アゴニスト活性を示し、アゴニスト活性は１０％を上回り、１００％未満である。
【０１７５】
Ｉｎ  Ｖｉｖｏ前立腺アッセイ
最初期性的成熟年齢である９−１０週齢の雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを予防モードで使用する。その目的はアンドロゲン様化合物が精巣除去（去勢術［ＯＲＸ］）後７日間生じる腹側前立腺及び精嚢の迅速な退化（〜−８５％）を遅らせる程度を測定することである。
【０１７６】
ラットに去勢術（ＯＲＸ）を行う。各ラットを計量した後に、イソフルランガスを維持することにより麻酔する。陰嚢に１．５ｃｍ前後切開を形成する。右精巣を引き出す。精巣動脈と輸精管を精巣の近位０．５ｃｍに４．０絹糸で結紮する。結紮部位の遠位を小型外科用鋏で切断することにより精巣を摘出する。組織断端を陰嚢に戻す。左精巣にも同じ操作を繰返す。両方の断端を陰嚢に戻したら、陰嚢とその上部の皮膚を４．０絹糸で縫合する。Ｓｈａｍ−ＯＲＸでは、結紮と鋏による切断以外の全手順を実施する。ラットは１０−１５分以内に完全に意識と完全な運動を回復する。
【０１７７】
外科切開の縫合直後に１回分の用量の試験化合物をラットに皮下又は経口投与する。更に連続６日間治療を続ける。
【０１７８】
検死及びエンドポイント
先ずラットを計量した後に瀕死までＣＯ２チャンバーで麻酔する。心臓穿刺により全血約５ｍｌを採取する。次に死亡徴候とＯＲＸの完全性についてラットを試験する。次に、前立腺の腹側部分を探りだし、高度に定型化された方法で鈍的切開により摘出する。腹側前立腺を３−５秒間ふき取った後に計量する（ＶＰＷ）。最後に、精嚢を探りだし、摘出する。腹側精嚢を３−５秒間ふき取った後に計量する（ＳＶＷＴ）。
【０１７９】
このアッセイの一次データは腹側前立腺と精嚢の重量である。二次データとしては血清ＬＨ（黄体形成ホルモン）及びＦＳＨ（卵胞刺激ホルモン）と、骨形成及び男性化の可能な血清マーカーが挙げられる。データをＡＮＯＶＡ＋Ｆｉｓｈｅｒ  ＰＬＳＤポストホックテストにより分析し、群間の差異を確認する。試験化合物がＯＲＸによるＶＰＷ及びＳＶＷＴの低下を抑制する程度を評価する。
【０１８０】
Ｉｎ  Ｖｉｖｏ骨形成アッセイ：
７−１０カ月齢の雌Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを治療モードで使用し、成人女性にシミュレートする。ラットは７５−１８０日前に卵巣切除（ＯＶＸ）しておき、骨量低下を誘導すると共に、エストロゲン欠損骨減少症女性にシミュレートする。強力な骨吸収抑制剤であるアレンドロネート（０．００２８ｍｐｋ  ＳＣ，２回／週）の低用量投与による予備治療を０日目に開始する。１５日目に試験化合物による治療を開始する。試験化合物治療は１５−３１日に行い、３２日に検死する。目的は骨膜表面のフルオロクロム標識の増加により、アンドロゲン様化合物が骨形成量を増加する程度を測定することである。
【０１８１】
典型的アッセイでは、各群ラット７匹９群を試験する。
【０１８２】
１９日と２９日（治療５日目と１５日目）にカルセイン（８ｍｇ／ｋｇ）を各ラットに単回皮下注射する。
【０１８３】
検死及びエンドポイント
先ずラットを計量した後に瀕死までＣＯ２チャンバーで麻酔する。心臓穿刺により全血約５ｍｌを採取する。次に死亡徴候とＯＶＸの完全性についてラットを試験する。先ず、子宮を探りだし、高度に定型化された方法で鈍的切開により摘出し、３−５秒間ふき取った後に計量する（ＵＷ）。子宮を１０％中性緩衝ホルマリンに保存する。次に、右脚を股関節で切断する。大腿骨と脛骨を膝で分離し、実質的に肉を切り離した後に７０％エタノールに保存する。
【０１８４】
中心に大腿骨近位−遠位中間点をもつ中心右大腿骨の１ｃｍセグメントをシンチレーションバイアルに入れ、段階的アルコールとアセトンで脱水脱脂した後に、メタクリル酸メチル濃度を増加させながら溶液に導入する。９０％メタクリル酸メチル：１０％フタル酸ジブチルの混合物に埋込み、４８−７２時間重合させる。びんを割り、作製した骨の長軸が横断面にくるように、プラスチックブロックをＬｅｉｃａ  １６００  Ｓａｗ  Ｍｉｃｒｏｔｏｍｅのバイス様試料ホルダーに適合する形状に切り取る。厚さ８５μｍの３枚の横断面切片を作製し、ガラススライドに載置する。骨のほぼ中間点の切片１枚を各ラットから選択し、ブラインドコード化する。各切片の骨膜表面について総骨膜表面積、単一フルオロクロムラベル、二重フルオロクロムラベル、及びラベル間距離を評価する。
【０１８５】
このアッセイの一次データは骨形成の半独立マーカーである二重ラベルをもつ骨膜表面積の百分率と石灰化速度（ラベル間距離（μｍ）／１０ｄ）である。二次データとしては子宮重量と組織学的特徴が挙げられる。三次エンドポイントとしては骨形成と男性化の血清マーカーが挙げられる。データをＡＮＯＶＡ＋Ｆｉｓｈｅｒ  ＰＬＳＤポストホックテストにより分析し、群間の差異を確認する。試験化合物が骨形成エンドポイントを増加する程度を評価する。
【国際調査報告】
2007534757.tif 000017