(57)【要約】  化合物はチオペプチド、又はその誘導体もしくは類似体（そのチオペプチドはＣ末端カルボン酸基と、薬物への結合のための官能基を含む）を含み、その化合物が薬物を運び、又は輸送するのに適していることを特徴とする。【選択図】          図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
チオペプチド、又はその誘導体もしくは類似体を含む化合物であって、前記チオペプチドが、Ｃ末端カルボン酸基と、薬物への結合のための官能基とを含み、前記化合物が、薬物を運び、又は輸送するのに適していることを特徴とする化合物。
【請求項２】
前記化合物が、好ましくは生体内で、薬物を運び、もしくは輸送するのに適しており、又は薬物を運び、もしくは輸送することができる、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
前記化合物が、PepT1タンパク質又はPepT2タンパク質により輸送されるのに適している、請求項１又は２記載の化合物。
【請求項４】
前記チオペプチドが、少なくとも二つのアミノ酸又はその誘導体もしくは類似体を含む、請求項１から３のいずれかに記載の化合物。
【請求項５】
前記化合物が、チオジペプチド又はチオトリペプチド或いはこれらの誘導体もしくは類似体を含む、請求項１から４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
前記化合物が、Ｃ末端残基として、セリン、アスパラギン酸塩又はグルタミン酸塩残基を含む、請求項１から５のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
前記チオペプチドが、少なくとも一つのチオ基を含み、そのチオ基が、そのＮ末端で、又はＮ末端に向かって、結合される、請求項１から６のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
前記化合物が、式Ｉ：
H2N-CR1R2-CS-NR3-CR4R5-COX     (I)
（式中、R1、R2、R3、R4、及びR5は、独立に、水素；線状又は分岐アルキル基；ジアルキル基；N-アルキル基；及びアミノ酸残基の側鎖基からなる群から選ばれ、かつＸは、独立に、ヒドロキシル基；アミノ酸残基；アミド；第三残基へのアミド結合；ペプチド；及びチオペプチドからなる群から選ばれる）
を有する、請求項１から７のいずれかに記載の化合物。
【請求項９】
前記化合物が、式II：
H2N-CHR1-CS-NH-CHR4-COOH     (II)
（式中、R1、及びR4は、独立に、水素；線状又は分岐アルキル基；その他の官能基に結合されたアルキル鎖；及びアミノ酸残基の側鎖基からなる群から選ばれる）
を有する、請求項１から７のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１０】
前記官能基が、アミン；アミド；エステル；酸；アルコール；エーテル；チオール；チオエーテル；及びアリール、又は芳香族化合物を含む、請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
R4が、薬物分子に結合されるのに適している、請求項８から１０のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１２】
R4が、アルコール又はカルボン酸基を含む、請求項８から１１のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１３】
R4が、アルコール又はカルボン酸基に結合されたアルキル鎖を含む、請求項８から１２のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１４】
アルキル基又はアルキル鎖が、C1-C20鎖を含む、請求項１３記載の化合物。
【請求項１５】
R4が、アルコール又はカルボン酸基を含むアミノ酸側鎖基である、請求項８から１４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１６】
R4が、アミノ酸残基の側鎖基である、請求項８から１５のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１７】
R4が、セリン；スレオニン；グルタミン酸；アスパラギン酸；及びチロシンからなる群から独立に選ばれたアミノ酸側鎖基の側鎖基である、請求項８から１６のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１８】
R4が、セリン；グルタミン酸；又はアスパラギン酸の側鎖基である、請求項８から１５のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１９】
R4が、スペーシング手段を含み、そのスペーシング手段が、薬物をそれに結合された場合にチオペプチドから離れて隔てるのに適している、請求項８から１５のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２０】
スペーシング手段が、チオペプチド化合物及び薬物分子への結合のためにその末端に適当な官能化を有する、アルキル鎖、又はエーテル基、アミノ基、エステル基、アミド基もしくはカルボニル基を含むアルキル鎖を含む、請求項１９記載の化合物。
【請求項２１】
スペーシング手段が、〔-CH2-〕n（ｎの値は少なくとも１の整数である）を含む、請求項１９又は２０記載の化合物。
【請求項２２】
スペーシング手段が、〔-CH2-O-CH2-〕n（ｎは少なくとも１の整数である）を含む、請求項１９又は２０記載の化合物。
【請求項２３】
R1がアミノ酸残基の側鎖基を含む、請求項８から２２のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２４】
R1のアミノ酸側鎖基が、(i)Ｈ（グリシン）；(ii)Me（アラニン）；(iii)CH2Ph（フェニルアラニン）；(iv)CHMe2（バリン）；(v)CH2OH（セリン）；(vi)CH2SH（システイン）；(vii)CH2CO2H（アスパルテート）；(viii)CH2CONH2（アスパラギン）；及び(ix)(CH2)4NH2（リシン）からなる群から独立に選ばれる、請求項２３記載の化合物。
【請求項２５】
薬物が結合される官能基が、保護基により保護される、請求項１から２４のいずれかに記載の化合物。
【請求項２６】
チオペプチド、又はその誘導体もしくは類似体を含むことを特徴とする薬物キャリヤー。
【請求項２７】
チオペプチド、又はその誘導体もしくは類似体が請求項１から２５のいずれかに記載のチオペプチド、又はその誘導体もしくは類似体を含む、請求項２６記載の薬物キャリヤー。
【請求項２８】
薬物を含む薬物コンジュゲートであって、その薬物が、請求項１から２５のいずれかに記載の化合物、又は請求項２６もしくは２７記載の薬物キャリヤーに結合されることを特徴とする薬物コンジュゲート。
【請求項２９】
前記化合物又は薬物キャリヤーへの薬物の結合が、エステル結合、エーテル結合又はアミド結合による、請求項２８記載の薬物コンジュゲート。
【請求項３０】
薬物の結合が、化合物又は薬物キャリヤーの残基１又は２で生じる、請求項２８又は２９記載の薬物コンジュゲート。
【請求項３１】
化合物又は薬物キャリヤーが、薬物分子から放出又は外されることができる、請求項２８又は３０のいずれかに記載の薬物コンジュゲート。
【請求項３２】
薬剤としての使用のための、請求項２８から３１のいずれかに記載の薬物コンジュゲート。
【請求項３３】
経口投与可能な薬剤の調製のための請求項２８から３１のいずれかに記載のコンジュゲートの使用。
【請求項３４】
膜の第一面から膜の第二面への請求項２８から３２のいずれかに記載のコンジュゲートの輸送を検出するのに適したアッセイであって、そのアッセイが膜の第一面及び第二面におけるコンジュゲートの存在を検出するのに適した検出手段を含むことを特徴とするアッセイ。
【請求項３５】
検出手段がチオペプチドのUV吸収を検出するのに適している、請求項３４記載のアッセイ。
【請求項３６】
個体の治療方法であって、その方法が、このような治療を要する個体に請求項２８から３２のいずれかに記載のコンジュゲートを投与することを特徴とする治療方法。
【請求項３７】
薬物コンジュゲートが請求項１から２５のいずれかに記載の化合物又は請求項２６もしくは２７記載の薬物キャリヤーに結合された薬物分子を含む、請求項３６記載の個体の治療方法。
【請求項３８】
図を参照して本明細書に実質的に記載され、又は図により実質的に示された化合物又は薬物キャリヤー。
【請求項３９】
図を参照して本明細書に実質的に記載され、又は図により実質的に示された方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、薬物送出系特に、排他的ではないが、PepT1経路を利用する薬物送出系に関する。更に詳しくは、本発明は、ペプチド薬物キャリヤー分子としての使用のための、新規ペプチド及びペプチド類似体／誘導体、及びPepT1タンパク質により腸の壁を横切って血液に輸送されるペプチド薬物キャリヤー-薬物コンジュゲート、並びに薬剤中のその使用に関する。本発明は更にこのようなペプチド薬物キャリヤーを合成する方法に及ぶ。
【背景技術】
【０００２】
経口投与される、薬剤中に使用される薬物の大部分は構造変更を受け、或る場合には、腸中の実質的な分解を受け、これが薬物の生物学的活性の低下をしばしばもたらし得る。それ故、このような薬物の医療効力は経口摂取される場合に制限されることがある。更に、医療特性を示す多数の薬物が患者に経口投与し得ない。何とならば、それらが不十分な溶解性を有し、又はそれらが腸の壁を横切って血流に拡散することができないからである。それ故、不運なことに、このような薬物は医療治療における使用について完全に拒絶され、又は静脈内注射（これは観血的であり、多くの患者で関連する問題を有する）により患者に投与される必要がある。それ故、薬物（これらは静脈内注射され、又は全く使用されない）が経口投与され、生物学的活性の損失なしに腸を介して血液に移行し得るメカニズムを開発する必要がある。加えて、現在経口投与されるが、医療活性の減少され、又は低いレベルを示すこれらの薬物に関して腸の壁を横切る薬物分子の輸送を改良するようにとの要望がある。
PepT1は小腸の空腸付近で高度に発現され、小ペプチド、例えば、食物中のタンパク質の分解生成物を腸の壁を横切って血流に輸送する膜貫通タンパク質である。PepT1はジ-ペプチド及びトリ-ペプチドを腸壁を横切って有効に輸送する。PepT1による基質輸送はプロトン及び電気化学的勾配により誘導され、ペプチド薬物、例えば、β-ラクタム抗生物質、及びACEインヒビター、例えば、カプトプリルが患者により経口吸収し得るメカニズムを与える。それ故、小腸の柔毛を横切って自然に拡散しない薬物、又は不十分な溶解性を有し、静脈内注射のみにより投与し得る薬物がそれらをPepT1経路により腸の壁を横切って血流に輸送することにより経口投与可能にされるかもしれない。加えて、PepT1経路は又現在経口投与されるが、例えば、それらが血液に輸送される前にそれらが腸中で変性又は分解されるために生物学的活性の減少されたレベルを示す薬物の輸送を改良するのに利用されるかもしれない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
それ故、本発明の実施態様の目的は上記問題及び従来技術の問題に取り組み、医療業界に利用できるようにし得る薬物送出系を提供することであり、その結果、通常経口投与されるが、医療活性の低下され、又は低いレベルを示す薬物が改良されたそれらの性能を有し得る。加えて、その薬物送出系は又静脈内投与され、又は全く使用されない薬物が経口投与されることを可能にし得る。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明の第一の局面によれば、チオペプチド、又はその誘導体もしくは類似体（そのチオペプチドはＣ末端カルボン酸基と、薬物への結合のための官能基を含む）を含む化合物であって、その化合物が薬物を運び、又は輸送するのに適していることを特徴とする化合物が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００５】
化合物は好ましくは生体内で、薬物を運び、もしくは輸送するのに適しており、又はそうすることができることが好ましい。本明細書に使用される“薬物”という用語はあらゆる医薬上又は医療上活性な化合物又は分子を含むことが意図されている。例えば、薬物は不十分な溶解性を有してもよく、又はあまりにも極性であり使用中の場合に膜を横切らないことがある。本発明に従って使用し得る、好適な薬物の例として、坑ウイルス薬、抗生物質、β-ブロッカー、神経伝達物質、ホルモン薬、及び坑癌薬物が挙げられる。薬物の好ましい例として、アドレナリン、ドーパミン、GABA、アサイクロバー、スルホンアミド、エナラプリレート、ブリマミドをベースとするH2アンタゴニスト、プロプラノロール、ベスタチン、又はステロイド系薬物が挙げられるかもしれない。
有利には、また好ましくは、第一局面のチオペプチド化合物は医療に全く使用されず、又は静脈内に投与すべきである薬物が患者に経口投与されることを可能にする。加えて、有利には、チオペプチド化合物は通常経口投与されるが、経口摂取された場合に医療活性の低下された、又は低いレベルを示し得る薬物、例えば、不十分な溶解性を有する薬物の性能を改良する。薬物を経口で、即ち、口により投与することは静脈内注射（これは大半の患者について非常に不快であり、或る範囲のその他の健康上のリスクを有する）によるよりも極めて簡単かつ非観血的である。それ故、有利には、本発明の化合物の使用は、使用され、経口投与し得る薬物の数を大いに増大するであろう。
【０００６】
本発明者らは本発明の化合物が薬物分子をチオペプチドの官能基に結合させ、それにより“化合物-薬物”コンジュゲートを生成し得ることを見出した。加えて、本発明者らはこのコンジュゲート薬物が、例えば、腸の壁を横切っての、改良された輸送特性を有することを見出した。本発明者らはいずれの仮説により束縛されたくないが、コンジュゲートが活性輸送メカニズムにより第一の部位から第二の部位に輸送可能であり、移動され、又は運ばれ得ると考える。活性輸送メカニズムの例は共輸送体であり、これはプロトン依存性共輸送体であってもよい。特に、本発明者らはこのようなコンジュゲートがPepT1経路により輸送されるかもしれないと考える。それ故、化合物はPepT1基質として作用するのに適していることが好ましい。
PepT1は小腸の空腸中で最も強く発現される。しかしながら、PepT1は又肝臓、脳、並びに腎臓の皮質及び髄質から単離されていた。それ故、本発明の化合物は腸、肝臓、脳のいずれか、又は腎臓等中で輸送され、このようなものとして、化合物がこれらの組織のいずれ中でも輸送され得ることが認められるであろう。しかしながら、好ましい実施態様において、本発明の化合物は、例えば、小腸、特に空腸中で、腸のライニングを横切って輸送され得る。
第二のイソ型、PepT2（これはPepT1と約50％の配列相同性を共有する）は又腎臓中で見られ、そこでそれが糸球体濾過物からペプチドを再吸収する。それ故、本発明の化合物は又PepT2経路を利用することができ、それにより輸送されるという有利な性質を有することが認められるであろう。
【０００７】
Brandschら（J.Biol.Chem., 273巻, 3864-3864, 1998）は、チオ-Phe-Proチオペプチド及びPepT1のための基質についてのコンホメーションの要件の研究におけるその使用を開示している。Brandschらの上記文献はチオペプチドへの薬物分子の結合、チオペプチドの加水分解耐性、チオペプチドによる薬物搬送又は薬物輸送を示していない。それ故、本発明の化合物はその官能基を介して結合される第一の局面の化合物の能力、及び薬物を生体内で輸送するその化合物の能力のためにBrandschらの上記文献に開示されたチオペプチドに対して有意な驚くべき利点を示す。
チオペプチドは少なくとも二つのアミノ酸又はその誘導体もしくは類似体、或いは少なくとも三つのアミノ酸又はその誘導体もしくは類似体、或いは少なくとも四つのアミノ酸又はその誘導体もしくは類似体を含むことが好ましい。それ故、その化合物はジペプチドもしくはトリペプチド又はこれらの誘導体もしくは類似体を含んでもよい。それ故、その化合物はチオジペプチドもしくはチオトリペプチド又はこれらの誘導体もしくは類似体を含んでもよい。その化合物はジペプチドを含むことが好ましい。それ故、その化合物はチオジペプチドを含むことが最も好ましい。有利には、チオジペプチドが一層長いペプチドと較べて都合の良い小分子であり、それ故、合成するのに比較的簡単である。更に、それらの小さいサイズのために、それらは又PepT1/PepT2経路による良好な輸送特性を示す。
【０００８】
アミノ酸はタンパク質中に普通に見られる20のアミノ酸のレパートリーから選ばれてもよい。化合物は酸性又は塩基性アミノ酸を含んでもよい。化合物は疎水性又は親水性アミノ酸を含んでもよい。化合物は第二の残基又はＣ末端残基としてセリン残基、アスパラギン酸塩（アスパルテート）残基又はグルタミン酸塩（グルタメート）残基を含むことが好ましい。
本発明者らはセリン残基、アスパラギン酸塩残基、又はグルタミン酸塩残基が薬物をチオペプチドに結合する有利な手段に相当することを見出した。
好ましくは、チオペプチドが少なくとも一つのチオ基を含み、そのチオ基がそのＮ末端で、又はＮ末端に向かって、結合されることが好ましい。しかしながら、そのチオ基がチオペプチドのＣ末端で、又はＣ末端に向かって、結合されてもよい。チオ基はチオペプチドのカルボニル基を置換することが好ましい。好ましくは、ペプチドの隣接残基間のペプチド結合の酸素が硫黄により置換されて、チオペプチドを生成する。チオペプチドは一つより多いチオ基、例えば、二つ以上のチオ基を含んでもよい。それ故、チオペプチドが二つのアミノ酸を含む場合、ペプチドの二つの残基間のペプチド結合の酸素が硫黄により置換されて、チオペプチドを生成する。チオペプチドが三つのアミノ酸を含む場合、ペプチドの第一残基と第二残基及び／又は第二残基と第三残基の間のペプチド結合の酸素が硫黄により置換されて、チオペプチドを生成してもよく、以下同様である。第一アミノ酸残基と第二アミノ酸残基の間のペプチド結合が硫黄により置換されることが好ましい。
【０００９】
有利には、チオペプチド中の少なくとも一つのチオ基の硫黄原子の効果は
(i)それが驚くことにトランスポーターへの化合物-薬物コンジュゲートの有効な結合を可能にし、
(ii)それがコンジュゲートを殆どのペプチドと違って加水分解に実質的に耐性にし、かつ
(iii)それが驚くことに腸の壁を横切って血流へのコンジュゲートの迅速な生体内の輸送を可能にすることである。
化合物はチオジペプチド（これは一緒に結合された二つのアミノ酸残基を含む）を含むことが最も好ましい。しかしながら、チオジペプチドはペプチドを技術的に言うものではない。何とならば、二つのアミノ酸残基が互いに結合される場合、それがペプチド結合(CONH)を欠いていると考えられるかもしれないからである。これはチオ基の存在のためであり、それが得られるチオペプチドの二つの残基の一つのカルボニル基(CO)を置換してCSNH結合を形成する。本明細書に使用される“チオペプチド”という用語は、少なくとも一つのチオ-官能基を含む、一緒に結合された少なくとも二つのアミノ酸を意味する。化合物がジペプチドを含む場合、チオペプチドはペプチド結合を含まない（即ち、CSNH結合のみを含む）と考えられるかもしれない。
チオペプチドが一緒に結合された複数のアミノ酸残基を含む場合、ペプチド中のペプチド結合の数が最小に保たれることが好ましい。好ましくは、チオペプチドは４個以下のペプチド結合、更に好ましくは、３個以下のペプチド結合、更に好ましくは、２個以下のペプチド結合を含み、最も好ましくはペプチド結合を含まない。例えば、CSNH結合はペプチド結合が二つのアミノ酸の縮合により形成された場合に形成される。例えば、化合物がトリペプチドを含む場合、チオペプチドは一つ又はゼロ個のペプチド結合と、一つ又は二つのチオ(CSNH)結合を有すると考えられるかもしれない。
有利には、また好ましくは、化合物が、例えば、ペプチダーゼによる、加水分解に実質的に耐性である。何とならば、チオペプチドが少ないペプチド結合を有し、又はペプチド結合を全く有さず、さもないとペプチダーゼにより消化されるからである。化合物はチオペプチド結合がペプチド(CONH)結合を置換することを特徴とする、チオジペプチド、又はその誘導体もしくは類似体を含むことが好ましく、そのペプチドのＣ末端残基はセリンを含む。
【００１０】
化合物は、チオ(CSNH)結合がペプチド(CONH)結合を置換することを特徴とする、チオジペプチド、又はその誘導体もしくは類似体を含むことが好ましく、そのペプチドのＣ末端は酸性アミノ酸、例えば、アスパラギン酸塩又はグルタミン酸塩を含む。
化合物は式Ｉ：
H2N-CR1R2-CS-NR3-CR4R5-COX
（式中、R1、R2、R3、R4、及びR5は独立に水素；線状又は分岐アルキル基；ジアルキル基；N-アルキル基；及びアミノ酸残基の側鎖基からなる群から選ばれてもよく、かつＸは独立にヒドロキシル基；アミノ酸残基；アミド；第三残基へのアミド結合；ペプチド；及びチオペプチドからなる群から選ばれてもよい）
を有してもよい。
R2は水素であってもよいことが好ましい。R3は水素であってもよいことが好ましい。R5は水素であってもよいことが好ましい。Ｘはヒドロキシル基であってもよいことが好ましい。
それ故、好ましい実施態様において、化合物は式II：
H2N-CHR1-CS-NH-CHR4-COOH
（式中、R1、及びR4は独立に水素；線状又は分岐アルキル基；ジアルキル基；N-アルキル基；アルコキシ基；及びアミノ酸残基の側鎖基からなる群から選ばれてもよい）
を有してもよい。
好ましくは、最も好ましい実施態様において、化合物は式II：
H2N-CHR1-CS-NH-CHR4-COOH
（式中、R1、及びR4は独立に水素；線状又は分岐アルキル基；その他の官能基に結合されたアルキル鎖；及びアミノ酸残基の側鎖基からなる群から選ばれてもよい）
を有してもよい。好適な官能基の例として、アミン；アミド；エステル；酸；アルコール；エーテル；チオール；チオエーテル；及びアリール、又は芳香族化合物が挙げられる。
【００１１】
R1及びR4は夫々、チオペプチドの第一アミノ酸残基及び第二アミノ酸残基の官能基であることが認められるであろう。
R4は薬物分子に結合されるのに適していることが好ましい。好ましい実施態様において、R4はアルコール又はカルボン酸基を含む。R4はアルキル鎖を含むことが好ましく、そのアルキル鎖はアルコール又はカルボン酸基に結合される。アルキル基又はアルキル鎖はC1-C20鎖、好ましくはC1-C15鎖を含んでもよい。アルキル基又はアルキル鎖はC1-C10鎖、更に好ましくはC1-C6鎖、最も好ましくはC1-C3鎖を含んでもよいことが考えられる。鎖は直線状又は分岐であってもよい。しかしながら、鎖は直線状であることが好ましい。アルキル基又はアルキル鎖はメチル、エチル、プロピル、ブチル、又はペンチル鎖であってもよい。
R4はアミノ酸残基の側鎖基を含むことが好ましい。R4はDNAコードされたアミノ酸のアミノ酸側鎖基を含むことが特に好ましい。R4のアミノ酸側鎖基は独立に酸性アミノ酸残基、塩基性アミノ酸残基、疎水性アミノ酸残基又は親水性アミノ酸残基のアミノ酸側鎖基から選ばれてもよい。
R4はアルコール又はカルボン酸基を含むアミノ酸側鎖であることが好ましい。それ故、好ましい実施態様において、R4はアルコール又はカルボキシル基を含む、アミノ酸側鎖である。それ故、R4はセリン、スレオニン、グルタミン酸、アスパラギン酸、及びチロシンからなる群から独立に選ばれたアミノ酸側鎖基を含むことが好ましい。R4はセリン、グルタミン酸、又はアスパラギン酸のアミノ酸側鎖基を含むことが最も好ましい。
R4はスペーシング手段を含んでもよく、そのスペーシング手段が薬物をそれに、好ましくはそのＣ末端アミノ酸に結合された場合にチオペプチドから離れて隔てるのに適している。これは、例えば、特別な薬物をR4の反応性基に結合することが容易ではない場合に有利であるかもしれず、これはそれに結合される薬物の特別な構造及び／又は型に依存するかもしれない。このような場合、(i)薬物分子をスペーシング手段に結合し、次いでスペーシング手段を薬物と一緒にR4に結合し、又は(ii)スペーシング手段の末端に向かって、もしくはその末端にR4の反応性基でもって、R4にスペーシング手段を有することが有益であろう。図６（特に、グループＦ、Ｇ、Ｈ及びＩ）に示されたチオペプチド-薬物コンジュゲートは夫々本発明に従って好適なスペーシング手段を含む。
【００１２】
当業者はスペーシング手段又はスペーサーとして化合物中に含まれてもよい、鎖の型を認めるであろう。例えば、スペーシング手段はチオペプチド化合物、そしてまた好ましくは、薬物分子への結合のためにその末端に適当な官能化を含む、アルキル鎖、又はエーテル基、アミノ基、エステル基、アミド基もしくはカルボニル基を含むアルキル鎖を含んでもよい。チオペプチド及び薬物へのスペーシング手段の結合は、例えば、エステル結合によるものであってもよい。
スペーシング手段は鎖中に少なくとも一つ、好ましくは少なくとも二つ、更に好ましくは、少なくとも三つの原子を含んでもよい。原子の実際の型は原子の数及びサイズ（これらは薬物をチオペプチドから離れて隔てる効果を与える）よりも重要ではないことが認められるであろう。それ故、例として、スペーシング手段中の１個以上の原子は炭素原子もしくは酸素原子、又はこれらの組み合わせであってもよい。
スペーシング手段は直鎖又は分岐鎖を含んでもよい。しかしながら、鎖は直線状であることが好ましい。スペーシング手段又はスペーサーは少なくとも５個、10個、15個、20個、25個、もしくは30個又はそれより多い原子を含んでもよいと考えられる。スペーサーの式及び長さはチオペプチドに結合される薬物分子の型により決められることが認められるであろう。
スペーシング手段は反復単位、又は鎖を含んでもよい。例えば、スペーシング手段は〔-CH2-〕n（ｎの値は少なくとも１の整数である）を含んでもよい。しかしながら、ｎは１より大きくてもよい整数であり、それ故、実質的には〔-CH2-〕nの反復単位である。好適なスペーシング手段の別の例は〔-CH2-O-CH2-〕n（ｎは少なくとも１の整数である）を含む。しかしながら、ｎは１より大きくてもよい整数であり、それ故、実質的には〔-CH2-O-CH2-〕nの反復単位である。
【００１３】
有利には、また好ましくは、薬物分子がチオペプチドのR4に結合される場合、チオペプチドはPepT1タンパク質による基質認識、及びそれによる輸送に好ましい、Ｃ末端COOH基を含む。実施例及び図２はPepT1のための基質の構造を示し、これはＣ末端カルボン酸基を含むチオジペプチドを含むことが好ましい。
R1はアルキル鎖を含むことが好ましい。アルキル基又はアルキル鎖は本明細書に定義されたC1-C20鎖を含んでもよい。R1はあらゆるアミノ酸残基の側鎖基を含んでもよい。R1はDNAコードされたアミノ酸のアミノ酸側鎖基を含むことが特に好ましい。R1は酸性、塩基性、疎水性又は親水性のアミノ酸残基のアミノ酸側鎖基から独立に選ばれた側鎖基を含んでもよい。例えば、アミノ酸側鎖基は(i)Ｈ（グリシン）；(ii)Me（アラニン）；(iii)CH2Ph（フェニルアラニン）；(iv)CHMe2（バリン）；(v)CH2OH（セリン）；(vi)CH2SH（システイン）；(vii)CH2CO2H（アスパラギン酸塩）；(viii)CH2CONH2（アスパラギン）；及び(ix)(CH2)4NH2（リシン）からなる群から独立に選ばれてもよい。
好ましい実施態様において、R1は図１中の欄Ｄに示された側鎖基のいずれかから選ばれる。
好ましい実施態様において、R1及びR4はあらゆるアミノ酸残基の側鎖基であってもよい。R1及びR4は互いに同じであってもよく、又は互いに異なってもよいと考えられる。
図６は本発明の好ましいチオペプチドの選択を示す。例えば、好ましい実施態様において、チオペプチドは第一アミノ酸残基としてのアラニン、及び第二アミノ酸残基としてのセリンを含むチオジペプチドを含んでもよい。薬物がセリン残基の反応性基に結合される。
別の好ましい実施態様において、チオペプチドは第一アミノ酸残基としてのアラニン、及び第二アミノ酸残基としてのアスパラギン酸塩を含んでもよい。薬物分子がアスパラギン酸塩残基の反応性基に結合される。
別の好ましい実施態様において、チオペプチドは第一アミノ酸残基としてのアラニン、及び第二アミノ酸残基としてのグルタミン酸塩を含んでもよい。薬物分子がグルタミン酸塩残基の反応性基に結合される。
【００１４】
薬物が結合される官能基は、好ましくはそれへの薬物の結合の前に、保護基により保護されてもよい。好適な保護基として、エステル結合、チオエーテル結合、又はカルバメート結合を介して窒素、酸素又は硫黄に結合されたt-ブチル、ベンジル、メトキシベンジル、アリル又はフルオレニルが挙げられるかもしれない。官能基は好適な還元剤の添加により化合物への薬物の結合の前に脱保護されてもよい。還元剤は１電子還元剤を含んでもよい。例えば、ベンジル型保護が除去される場合、ナトリウム／液体アンモニアを含む好適な還元剤の使用が、チオペプチド官能基との重大な反応を生じないで、有効であるとわかる。脱保護は薬物の結合に供される官能基の遊離をもたらす。
本発明のチオペプチド化合物の誘導体又は類似体は生体内のペプチドの半減期を増大又は減少する誘導体又は類似体を含んでもよい。誘導体又は類似体は、例えば、ペプチダーゼによる加水分解に対する高められた耐性を示すことが好ましい。本発明のペプチドの半減期を増大することができる誘導体又は類似体の例として、ペプトイド誘導体、ペプチドのD-アミノ酸誘導体、及びペプチド-ペプトイドハイブリッドが挙げられる。
本発明のチオペプチドは幾つかの手段（例えば、生物学的系におけるプロテアーゼ活性）による分解を受けてもよい。このような分解はペプチドの生物学的利用能、ひいてはその生物学的機能を得るペプチドの能力を制限するかもしれない。生物学的状況において高められた安定性を有するペプチド誘導体又は類似体が設計され、生成し得る広範囲の良く確立された技術がある。このようなペプチド誘導体はプロテアーゼ媒介分解に対する増大された耐性の結果として改良された生物利用能を有し得る。本発明の使用に適したペプチド誘導体又は類似体はそれが誘導されるペプチドよりもプロテアーゼ耐性であることが好ましい。ペプチド誘導体及びそれが誘導されるペプチドのプロテアーゼ耐性は公知のタンパク質分解アッセイにより評価し得る。ペプチド及びペプチド誘導体又は類似体に関するプロテアーゼ耐性の相対値がその後に比較し得る。
【００１５】
本発明のチオペプチドのペプトイド誘導体はペプチドの構造の知識から容易に設計し得る。ペプトイド化合物はそれらを本発明のペプチド誘導体／類似体としての使用に適するようにする二つの性質を有する：
(i)ペプトイド残基中で、NHを伴う水素結合が可能ではないであろう。
(ii)ペプトイドが酵素分解に耐性である。
市販のソフトウェアが良く確立されたプロトコルに従ってペプトイド誘導体を開発するのに使用されてもよい。
レトロペプトイド（全てのアミノ酸が逆の順序でペプトイド残基により置換される）が又ペプチドを模倣することができる。レトロペプトイドは、一つのペプトイド残基を含むペプチド又はペプトイド-ペプチドハイブリッドと較べて、リガンド結合溝中で反対方向に結合すると予想される。結果として、ペプトイド残基の側鎖はもとのペプチド中の側鎖と同じ方向に向くことができる。
本発明のペプチドの修飾形態の更なる実施態様はペプチドのD-アミノ酸形態を含む。例えば、チオペプチド中のアミノ酸残基の少なくとも一つはD-異性体である。第一アミノ酸残基は実施例に記載されるように、D-異性体、例えば、D-アラニンであることが好ましい。チオペプチドがトリペプチドである場合、アミノ酸残基の少なくとも二つがD-異性体であってもよい。それ故、相当するチオペプチドの誘導体、又は類似体は加水分解に対する高められた耐性を示すことが好ましい。L-アミノ酸ではなくD-アミノ酸を使用するペプチドの調製は通常の代謝プロセスによるこのような薬剤の望ましくない分解を大いに減少し、その投与の頻度とともに、投与される必要がある薬剤の量を減少する。
本発明の第二の局面によれば、チオペプチド、又はその誘導体もしくは類似体を含む薬物キャリヤーが提供される。
【００１６】
チオペプチド、又はその誘導体もしくは類似体は第一の局面のチオペプチド、又はその誘導体もしくは類似体を含むことが好ましい。チオペプチド、又はその誘導体もしくは類似体は、Ｃ末端カルボン酸基、及び好ましくは、薬物への結合のための官能基を含むことが好ましい。その化合物は薬物を運び、又は輸送するのに適していることが好ましい。薬物キャリヤーはチオジペプチド又はチオトリペプチドを含むことが好ましい。チオペプチドのＣ末端アミノ酸残基は薬物分子に結合されるのに適していることが好ましい。官能基はチオペプチドのＣ末端に、又はそれに向かって、存在することが好ましい。
アミノ酸はタンパク質、又はその他のDNAコードされないアミノ酸中に普通に見られる20のアミノ酸のレパートリーから選ばれてもよい。化合物は酸性又は塩基性アミノ酸を含んでもよい。化合物は疎水性又は親水性アミノ酸を含んでもよい。化合物は、例えば、チオペプチドがジペプチドである場合に、好ましくは第二残基として、セリン、グルタミン酸塩又はアスパラギン酸塩残基を含むことが好ましい。チオペプチドは少なくとも一つのチオ基（それはＮ末端残基に存在してもよく、好ましくはペプチドのカルボニル基を置換する）を含むことが好ましい。
官能基は薬物分子に結合されるのに適しているアルコール又はカルボキシル基を含むことが好ましい。
薬物キャリヤーは第一の局面の式Ｉ、好ましくは式IIを有してもよい。
【００１７】
本発明の第三の局面によれば、薬物を含む薬物コンジュゲートが提供され、その薬物は第一の局面の化合物又は第二の局面の薬物キャリヤーに結合される。
それ故、第一の局面の化合物又は第二の局面の薬物キャリヤーは薬物分子に結合されるのに適していてもよく、それにより“化合物-薬物”又は“薬物キャリヤー-薬物”（以下、“薬物コンジュゲート”と称される）を生成する。化合物又は薬物キャリヤーへの薬物の結合は共有結合によることが好ましい。薬物分子と第一の局面の化合物又は第二の局面の薬物キャリヤーの間の共有結合は化合物又は薬物キャリヤーの官能基又は反応性基及び薬物の官能基又は反応性基を反応させることにより得られてもよいことが当業者により認められるであろう。化合物又は薬物キャリヤーは少なくとも一つの官能基を含むことが好ましく、その官能基は薬物分子と反応するのに適している。化合物又は薬物キャリヤーの官能基はチオペプチドのＮ末端残基又はＣ末端残基に存在してもよい。当業者は薬物分子と反応する、官能基又は反応性基の型を認めるであろう。例えば、その少なくとも一つの官能基は酸素基、カルボニル基、ヒドロキシル基又はカルボン酸基であってもよく、これは第一アミノ酸残基又は第二アミノ酸残基に存在してもよい。
本発明は薬物それ自体の選択に及ばないことが認められるべきである。本発明者らは第一の局面の化合物又は第二の局面のキャリヤーに結合される薬物分子の生物学的活性を調べなかった。本発明者らは幾つかの異なる薬物類似体分子又は“試験”分子（これらが図１、４及び６に示される）を試験して前記類似体分子を第一の局面の化合物又は第二の局面のキャリヤーに結合し、それによりコンジュゲートを生成することの効力を調べた。この目的のために、本発明者らは実施例３に記載されたように、合成された夫々の薬物コンジュゲートのKi値を測定した。
又、本発明者らは実施例４に記載されたような、流出実験を使用してPepT1経路による薬物コンジュゲートの輸送を試験した。これらの薬物類似体分子は生物学的活性を有していなかった。何となれば、それらが試験分子であるのにすぎなかったからである。しかしながら、これらの薬物類似体分子又は“試験”分子は生物学的活性な薬物分子に近似するように本発明者らにより特別に選ばれた。異なる薬物類似体“試験”分子（これらは第一の局面の化合物又は第二の局面のキャリヤーに結合された）の例が図１の欄Ｂ及びＣ中に基Ｙとして示され、そしてまた図６に示される。
図１及び６に示されたような、本発明者らにより試験された幾つかの類似体は現在使用中の薬物に密接に関連していることが認められるであろう。例えば、図６中の類似体B16はGABA類似体であり、神経伝達物質に近似し、類似体B26はニコチン酸類似体であり、ニコチンアミド（これはコレステロールレベルを低下するのに使用し得る）に近似し、類似体B28はステアリン酸類似体（これは坑炎症性プロスタグランジンに似ている）であり、類似体B30はコール酸類似体、即ち、ステロイドである。
【００１８】
それ故、生物学的活性な薬物分子を第一の局面の化合物又は第二の局面のキャリヤーに結合することが好ましいことが認められるであろう。それ故、例のみとして、第一の局面のチオペプチド、第二の局面の薬物キャリヤー、又は第三の局面の薬物コンジュゲートへの結合に適している生物学的活性な薬物分子として、アルコール基、チオール基、酸基又はアミノ基を有するものが挙げられ、これらについてその後の加水分解が所望の活性薬物を放出するであろう。コンジュゲートの利点として、例えば、低溶解性、又は高極性を有する薬物の増大された経口吸収、それらの放出の制御（例えば、一層長く持続する類似体、又は遅延放出）、及びPepT1/PepT2タンパク質を発現する細胞（例えば、肺中の）による選択的吸収が挙げられる。
チオペプチドキャリヤーへの結合に適しており、合成され、試験されたコンジュゲートがそれについてのモデルとして選ばれた、薬物の例として、以下のものが挙げられる（これらについて、“cfコンジュゲートB/C”は図６からのモデル化合物の相当するクラスを示す）。
抗生物質：ノルフロキサシン、シプロフロキサシン、オフロキサシン（cfコンジュゲートＢ）
坑癌薬：メトトレキセート（cfコンジュゲートＢ）
タキソール（cfコンジュゲートＣ）
坑ヒスタミン薬：セチリジン（cfコンジュゲートＢ）
フェロフェナジン（cfコンジュゲートＢ又はＣ）
テルフェナジン（cfコンジュゲートＣ）
坑高血圧薬：バルサルタン、カプトプリル（cfコンジュゲートＢ）
ロサルタン（cfコンジュゲートＣ）
坑炎症薬：イブプロフェン及び関連類似体（cfコンジュゲートＢ）
プロスタグランジン及びトロンボキサン（cfコンジュゲートＣ）
坑マラリア薬：キニン、及び類似体、例えば、メフロキン（cfコンジュゲートＣ）
坑ウイルス薬：AZT、ラミブジン、アサイクロバー（cfコンジュゲートＣ）
βブロッカー：エピネフリン、テルブタリン、プロプラノロール（cfコンジュゲートＣ）
気管支拡張薬：アドレナリン、サルブタモール（cfコンジュゲートＣ）
コレステロール低下薬：ニコチン酸(B26)、アシピモックス（cfコンジュゲートＢ）
コンパクチン（cfコンジュゲートＣ）
CNS薬：アドレナリン、アポモルヒネ（cfコンジュゲートＣ）
鎮静剤：オキサゼパム、ロラゼパム、テマゼパム（cfコンジュゲートＣ）
ステロイド：エストラジオール、テストステロン、コルチゾンの類似体（cfコンジュゲートＣ）
【００１９】
薬物は化合物又は薬物キャリヤーの官能基が反応し得る少なくとも一つの官能基を含むことが好ましい。上記について、当業者は化合物又は薬物キャリヤーと反応する、官能基又は反応性基の型を認めるであろう。例えば、薬物分子の官能基はカルボン酸基又はヒドロキシル基を含んでもよい。第一の局面の化合物又は第二の局面の薬物キャリヤーへの薬物の結合はエステル結合によることが好ましい。薬物の結合は化合物又は薬物キャリヤーの残基１又は２で生じることが好ましい。
第一の局面の化合物又は第二の局面の薬物キャリヤーへの薬物の結合はエステル結合、もしくはエーテル結合、又はアミド結合によってもよいと考えられる。
本明細書に示された式中の、R1、R2、R3、R4、及び／又はR5のいずれかの変化は薬物の不利な特徴がチオペプチドの第一残基の性質により最小にし得るように本発明の化合物又は薬物キャリヤーを修飾することを可能にし得る。第一アミノ酸残基（Ｎ末端の）のR1はこのような修飾に適していることが好ましい。例えば、コンジュゲートが薬剤中の使用について医薬上許されるように、第一の局面の化合物、又は第二の局面の薬物キャリヤーの正味の電荷を変更することが有益であるかもしれない。例えば、化合物又は薬物キャリヤーに結合される薬物が酸性である場合、塩基性化合物又は薬物キャリヤーを使用することにより化合物-薬物コンジュゲートの正味の電荷を中和することが有利であるかもしれない。それ故、化合物又は薬物キャリヤーの正味の電荷はR1基、R2基、R3基、R4基、及び／又はR5基のいずれかの選択及び／又は修飾により調節し得る。正味の電荷はR1基の選択及び／又は修飾により調節し得ることが好ましい。
【００２０】
又、コンジュゲートが生体内のその標的環境又は位置に達する時に化合物／薬物キャリヤーと薬物の間の結合が分解し得るように化合物又は薬物キャリヤーを設計することにより、薬物分子をコンジュゲートから選択的に外すことが可能であり得ると考えられる。例えば、コンジュゲートが酸性環境、例えば、傷つけられた組織の領域（これは低いpHを有し得る）に存在する時に薬物との結合が分解し得るように適当なアミノ酸残基を有するチオペプチド薬物キャリヤーを設計することが可能である。又、或る種の酵素が或る種の組織中でのみ発現され、又は完全に機能性であるかもしれず、コンジュゲートが一つ以上の特別な組織に達する時にチオペプチド-薬物結合がこのような酵素により消化し得る。
それ故、第一の局面の化合物又は第二の局面の薬物キャリヤーは薬物分子から放出され、又は外されることができるかもしれない。
化合物はL-異性体の形態であることが好ましい。夫々のアミノ酸がL-異性体であることが好ましい。有利には、L-異性体の使用がチオペプチドと薬物の間の結合を改良する。
薬物コンジュゲートはそれらが互いに充分なアフィニティーを有するようにPepT1（又はPepT2）キャリヤータンパク質に結合するのに適しており、それらの間の結合はコンジュゲートがPepT1経路を使用する輸送中に、即ち、小腸を横切って輸送されている間にキャリヤータンパク質に結合されたままであるように充分に強いことが認められるであろう。加えて、その結合はコンジュゲートが小腸を横切って輸送された時にキャリヤータンパク質から外し得るように充分に弱い。
それ故、薬物コンジュゲートは約0.01-10mM、好ましくは、約0.05mM-5mMのKiでPepT1タンパク質又はPepT2タンパク質と結合するのに適しているかもしれない。薬物コンジュゲートは約0.1-3mM、更に好ましくは、約0.2-1mM、最も好ましくは約0.3mM-7mMのKiでPepT1タンパク質又はPepT2タンパク質と結合するのに適していることが好ましい。Kiが約0.5mM±0.5mMであることが特に好ましい。
【００２１】
本発明の第四の局面によれば、薬剤としての使用のための、第三の局面のコンジュゲートが提供される。
経口投与可能な薬剤の調製のための第三の局面のコンジュゲートの使用が提供されることが好ましい。
薬剤又はコンジュゲートは個体に経口投与されることが好ましい。薬剤又はコンジュゲートはPepT1/T2経路により血流に輸送されるのに適しているかもしれない。
薬剤は多種の症状（これらはチオペプチドに結合された薬物の性質により決められるであろう）を治療するのに使用し得ることが認められるであろう。チオペプチドにより運び得る好適な薬物の例が先に示されている。それ故、例のみとして、薬剤は癌、アレルギー反応、高血圧、炎症、マラリア、ウイルス感染症、気管支感染症、例えば、気管支炎を治療するのに使用し得る。
本発明の第三の局面のコンジュゲートは単一療法（即ち、本発明の化合物又はその誘導体単独の使用）で使用し得ることが認められるであろう。又、本発明のコンジュゲートは佐剤として、又は既知の治療薬と組み合わせて使用し得る。
本発明のコンジュゲートは特に組成物が使用される様式に応じて幾つかの異なる形態を有する組成物中で組み合わされてもよい。こうして、例えば、組成物は粉末、錠剤、カプセル、液体、ゲル、ヒドロゲル、エアロゾル、スプレー、ミセル、リポソームの形態又はヒトもしくは動物に投与し得るあらゆるその他の好適な形態であってもよい。本発明の組成物のビヒクルはそれが与えられる対象により良く寛容され、好ましくは化合物の経口送出を可能にするものであるべきであることが認められるであろう。
【００２２】
本発明のコンジュゲートを含む組成物は幾つかの方法で使用し得る。例えば、全身投与が好ましく、この場合、コンジュゲートが錠剤、カプセル又は液体の形態で経口摂取されることが好ましい組成物内に含まれてもよい。又、組成物が吸入（例えば、鼻内）により投与し得ることが可能である。或る状況では、組成物が注射により血流に投与されてもよい。注射は静脈内（巨丸剤又は注入）又は皮下（巨丸剤又は注入）であってもよい。
又、コンジュゲートは遅い放出装置又は遅延放出装置内に混入されてもよい。このような装置は、例えば、摂取され、腸中に保持されてもよく、コンジュゲートが数週又は更には数ヶ月にわたって放出されてもよい。このような装置は本発明のコンジュゲートによる長期治療が必要とされ、通常頻繁な投与（例えば、少なくとも毎日の注射）を必要とする場合に特に有利であるかもしれない。
薬物：コンジュゲートの1:1の化学量論量のために、本発明のコンジュゲートにおいて必要とされる、コンジュゲート、ひいては薬物の量がその生物学的活性及び生物利用能により決められ、これが順に投与の様式、使用される薬物の物理化学的性質、及び薬物が単一療法として又は複合療法で使用されるかどうかに依存することが認められるであろう。投与の頻度が又上記因子そして特に治療される対象内のコンジュゲートの半減期により影響されるであろう。
投与される最適用量は当業者により決められてもよく、使用中の特別なコンジュゲート／薬物、製剤の強さ、投与の様式、及び症状の進行により変化するであろう。治療される特別な対象に依存する付加的な因子（対象年齢、体重、性別、食事、及び投与の時間を含む）が用量を調節する必要をもたらすであろう。
既知の操作、例えば、医薬工業により通常使用される操作（例えば、生体内実験、臨床試験等）が本発明の化合物の特別な製剤を確立し、治療養生法（例えば、毎日の用量及び投与の頻度）を正確にするのに使用し得る。
【００２３】
一般に、本発明のコンジュゲートの体重1kg当り0.01μg〜体重1kg当り1.0gの毎日の用量が特別な医療症状の予防及び／又は治療に使用されてもよい。毎日の用量が体重1kg当り0.01mg〜体重1kg当り100mgであることが更に好ましい。毎日の用量が単一投与（例えば、単一の毎日の錠剤）として与えられてもよい。又、コンジュゲートは１日中に２回以上の投与を必要とするかもしれない。例として、本発明のコンジュゲートは25mg〜5000mgの２回（又は症状の重度に応じてそれより多い）の毎日の用量として投与されてもよい。治療を受ける患者は起床後に最初の用量、次いで夕方に２回目の用量（２回の投薬養生法の場合）又はその後に３もしくは４時間間隔で服用してもよい。又、遅い放出装置が反復用量を投与することを必要としないで最適用量を患者に与えるのに使用されてもよい。
本発明は治療有効量の薬物及び本発明の化合物又は薬物キャリヤーを含む医薬組成物を提供する。一実施態様において、コンジュゲートの量は約0.01mgから約800mgまでの量である。別の実施態様において、コンジュゲートの量は約0.01mgから約500mgまでの量である。別の実施態様において、コンジュゲートの量は約0.01mgから約250mgまでの量である。別の実施態様において、コンジュゲートの量は約0.1mgから約60mgまでの量である。別の実施態様において、コンジュゲートの量は約0.1mgから約20mgまでの量である。
本発明は医薬組成物の製造方法を提供し、その方法は治療有効量の薬物、本発明の化合物又は薬物キャリヤー、及び医薬上許されるビヒクルを合わせることを含む。“治療有効量”は、対象に投与された時に特定の医療症状の予防及び／又は治療を与える薬物の量である。“対象”は脊椎動物、哺乳類、家畜動物又はヒトである。
本明細書に言及される“医薬上許されるビヒクル”は医薬組成物を製剤化するのに有益な当業者に知られているあらゆる生理学的ビヒクルである。医薬上許されるビヒクルは、経口投与に適していることが好ましい。好ましい実施態様において、医薬ビヒクルは液体であり、医薬組成物は溶液の形態である。別の実施態様において、医薬上許されるビヒクルは固体であり、組成物は粉末又は錠剤の形態である。更なる実施態様において、医薬ビヒクルはゲルであり、組成物はクリーム等の形態である。
【００２４】
固体ビヒクルは矯味矯臭薬、滑剤、可溶化剤、懸濁剤、充填剤、滑剤、圧縮助剤、バインダー又は錠剤崩壊剤として又作用し得る一種以上の物質を含み得る。それは又カプセル化材であってもよい。粉末中で、ビヒクルは微細な活性薬物と混合している微細な固体である。錠剤中で、薬物が好適な比率で必要な圧縮特性を有するビヒクルと混合され、所望の形状及びサイズで圧縮される。粉末及び錠剤は99％までの活性薬物を含むことが好ましい。好適な固体ビヒクルとして、例えば、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、ラクトース、デキストリン、澱粉、ゼラチン、セルロース、ポリビニルピロリジン、低融解ワックス及びイオン交換樹脂が挙げられる。
液体ビヒクルは溶液、懸濁液、エマルション、シロップ、エリキシル剤及び加圧組成物を調製するのに使用される。活性薬物が医薬上許される液体ビヒクル、例えば、水、有機溶媒、その両方の混合物又は医薬上許される油もしくは脂肪中で溶解又は懸濁し得る。液体ビヒクルはその他の好適な医薬添加剤、例えば、可溶化剤、乳化剤、緩衝剤、防腐剤、甘味料、矯味矯臭薬、懸濁剤、増粘剤、着色剤、粘度調節剤、安定剤又は浸透圧調節剤を含み得る。経口投与及び非経口投与に適した液体ビヒクルの例として、水（上記のような添加剤、例えば、セルロース誘導体、好ましくはナトリウムカルボキシメチルセルロース溶液を一部含む）、アルコール（１価アルコール及び多価アルコール、例えば、グリコールを含む）及びそれらの誘導体、及び油（例えば、分別ヤシ油及び落花生油）が挙げられる。非経口投与について、ビヒクルは又油状エステル、例えば、オレイン酸エチル及びミリスチン酸イソプロピルであってもよい。無菌液体ビヒクルが非経口投与のための無菌液体形態の組成物中で有益である。加圧組成物のための液体ビヒクルはハロゲン化炭化水素又はその他の医薬上許される噴射剤であってもよい。
【００２５】
コンジュゲートを注射することが所望される場合には、無菌溶液又は懸濁液である液体医薬組成物が、例えば、筋肉内、鞘内、硬膜外、腹腔内、静脈内そして特に皮下、脳内又は脳心室内の注射により利用し得る。薬物は無菌水、食塩水、又はその他の適当な無菌注射可能な媒体を使用して投与の時点で溶解又は懸濁し得る無菌固体組成物として調製されてもよい。ビヒクルは必要かつ不活性なバインダー、懸濁剤、滑剤、香料、甘味料、防腐剤、色素、及び被覆剤を含むことが意図されている。
本発明のコンジュゲートはその他の溶質又は懸濁剤（例えば、溶液を等張にするのに充分な食塩水又はグルコース）、胆汁塩、アカシアゴム、ゼラチン、ソルビタンモノオレエート、ポリソルベート80（エチレンオキサイドと共重合されたソルビトール及びその酸無水物のオレイン酸エステル）等を含む無菌溶液又は懸濁液の形態で経口投与し得る。本発明のコンジュゲートは液体又は固体組成物形態で経口投与されることが好ましい。経口投与に適した組成物として、固体形態、例えば、ピル、カプセル、顆粒、錠剤、及び粉末、並びに液体形態、例えば、溶液、シロップ、エリキシル剤、及び懸濁液が挙げられる。非経口投与に有益な形態として、無菌溶液、エマルション、及び懸濁液が挙げられる。
第五の局面によれば、膜の第一の面から膜の第二の面への第三の局面のコンジュゲートの輸送を検出するのに適しているアッセイが提供され、そのアッセイは膜の第一の面及び第二の面におけるコンジュゲートの存在を検出するのに適している検出手段を含む。
膜は胃、肝臓、脳、又は腎臓に存在してもよい。膜は好ましくは腸、更に好ましくは、小腸、最も好ましくは、小腸の空腸に存在する。
検出手段はチオペプチドのUV吸収、好ましくは、その高UV吸収を検出するのに適しているかもしれない。UV吸収は、例えば、HPLCを使用することにより検出されてもよい。この方法では、検出手段が細胞又は小胞中のチオペプチドコンジュゲートを検出するのに使用されてもよい。
【００２６】
本発明の第一の局面の化合物又は本発明の第二の局面の薬物キャリヤーは普通に知られている化学合成技術を使用して合成されてもよい。本発明の化合物又は薬物キャリヤーを合成するための方法の例が図３及び４に開示され、実施例で説明される。
本発明の化合物及び薬物キャリヤーがつくられる多くの方法があることが当業者により認められるであろう。しかしながら、チオ官能基の硫黄原子はその分子による潜在的な問題を生じ、本明細書に開示された方法が有効な解決策を与える。本明細書に開示された合成の工程のいずれかの小さな変化が本発明から依然として利益を受けつつなされてもよいことが認められるであろう。
第六の局面によれば、個体の治療方法が提供され、その方法はこのような治療を要する個体に、第三の局面の薬物コンジュゲートを投与することを含む。
薬物コンジュゲートは第一の局面の化合物又は第二の局面の薬物キャリヤーに結合された薬物分子を含むことが好ましい。
本明細書（特許請求の範囲、要約書及び図面を含む）に記載された特徴の全て、及び／又はこうして開示されたあらゆる方法又はプロセスの工程の全ては、このような特徴及び／又は工程の少なくとも一部が相互に排除的である組み合わせを除いて、あらゆる組み合わせで上記局面のいずれかと組み合わされてもよい。
本発明の一層良好な理解のために、またその実施態様が実施し得る方法を示すために、例として、添付図面が今参照される。
【実施例】
【００２７】
実施例１−本発明のチオペプチド化合物の製造
本発明の目的は口により現在投与できない薬物の経口投与を可能にする、薬物-薬物キャリヤーコンジュゲートの調製を可能にする、薬物キャリヤー化合物をつくることであった。加えて、このような薬物-薬物キャリヤーコンジュゲートは現在経口投与されるが、口により投与された場合に生物学的活性の減少されたレベルを示す薬物の効力を改良するのに又使用し得る。この目的を達成するために、下記の工程を行なった。
a)或る範囲のチオペプチド薬物キャリヤー類似体を調製した。
b)薬物キャリヤーを合成する方法を開発して、広範囲の類似体の迅速な合成を促進するとともに、又薬物キャリヤーの調製を安価かつ大規模に可能にした。
c)バイオアッセイを開発して薬物キャリヤー類似体の効力を試験した。
d)迅速に作用する輸送バイオアッセイを少量の薬物基質を用いて開発した。
e)腸のライニングを横切るPepT1による経口利用できない薬剤の生体内輸送を実証した。
1)或る範囲のチオペプチドキャリヤー分子の調製
本発明者らは図２に示される、PepT1タンパク質のための、構造Ａとして示された、基質の3D基質モデルに関するそれらの研究に基づいた。図２に示された提案されたPepT1基質モデルを精製しようと試みながら、図２中に構造Ｂとして示されたチオペプチド類似体薬物キャリヤーを調製した。本発明者らは驚くことに構造Ｂが三つの主要な有利な特徴を示し、即ち、(i)それがPepT1に有効に結合し（Ki 0.3mM、典型的な天然基質、in vitroアッセイ）、(ii)それが迅速に生体内で輸送され、かつ(iii)それが、殆どのペプチドと違って、加水分解に耐性であることを発見した。それ故、図２中に構造Ｂとして示されたチオペプチドは小腸の柔毛を横切って自然に拡散せず、又は不十分な溶解性を有する薬物の潜在的なキャリヤーであると考えられたが、但し、薬物を位置Ｘで化合物Ｂに結合する方法が考案し得ることを条件とした。それ故、図２に示された化合物Ｃのセリン類似体、アスパラギン酸塩類似体又はグルタミン酸類似体をつくり、この場合、Ｘはエステル結合を介して薬物に連結され、それにより薬物コンジュゲートを生成する、ヒドロキシ基又はカルボン酸基である。
【００２８】
2)保護されたチオペプチドセリン薬物キャリヤーの調製
次いでカルボン酸反応性基を有する薬物の結合のために好適に保護されるチオペプチドキャリヤーの組を調製するための方法を考案した。保護されたチオペプチドセリン薬物キャリヤー化合物の合成方法が図３に要約される。特別な戦略及び保護基の選択を設計して多量の薬物キャリヤー分子（それに薬物分子がその後に結合し得る）の調製を可能にした。好適な保護基として、エステル結合、チオエーテル結合、又はカルバメート結合を介して窒素、酸素又は硫黄に結合されたt-ブチル、ベンジル、メトキシベンジル、アリル又はフルオレニルが挙げられる。
キャリヤー分子への薬物の結合の前の最終工程は、キャリヤー（それに薬物分子が結合される）の官能基の脱保護である。これはベンジル型保護の除去のため、それにより薬物の結合に供される官能基を遊離するための、Na/NH3（液体）、即ち、ナトリウム／液体アンモニア（又は同様の１電子還元剤）の添加により達成される。
本発明の薬物キャリヤー／化合物への薬物の結合後に、コンジュゲートをその後に全体的に脱保護した。この方法は非常に迅速な大範囲の薬物-キャリヤーコンジュゲートの調製を可能にした。
3)薬物コンジュゲートの調製
図４を参照して、上記(2)で製造された薬物キャリヤーチオペプチドへの或る範囲のカルボン酸（これらは“試験”薬物分子として作用した）の成功裏の結合が示される。薬物キャリヤーへのカルボン酸“試験”分子の結合後に、輸送の効力が調べられるようにコンジュゲートをその後に脱保護した。図４に示されたコンジュゲートＡ、Ｂ、Ｄ及びＥの全てがPepT1に良く結合することが実証された（下記の実施例３を参照のこと）。加えて、PepT1経路による類似体Ｅの実際の輸送が又示された（下記の実施例４を参照のこと）。
【００２９】
本発明者らは多数のチオペプチド-薬物類似体コンジュゲートを合成し、これらをPepT1への結合、そして又PepT1経路による輸送（流出輸送）について試験した。図６を参照して、45のチオペプチド-薬物類似体コンジュゲートの化学構造が示される。コンジュゲートを８グループ、A-Iに分ける。
グループＡ（1A-7A）はチオジペプチドキャリヤー（その第一アミノ酸残基のR1基が番号1-7により示されるように変化される）の第二アミノ酸残基の酸素原子に結合されたフェニルメチル基を含むチオジペプチドに相当する。
グループＢ（8B-30B）は第一アミノ酸残基としてのアラニン、及び第二アミノ酸残基（それに種々のR2基（即ち、薬物類似体）が結合される）としてのセリンを含むチオジペプチドに相当する。
グループＣ（31C-34C）は第一アミノ酸残基としてのアラニン、及び第二アミノ酸残基（それに種々のR3基（即ち、薬物類似体）が結合される）としてのアスパラギン酸塩を含むチオジペプチドに相当する。
グループＥ（41E）は第一アミノ酸残基としてのアラニン、及び示されたように薬物類似体に結合された、第二アミノ酸残基としてのグルタミン酸塩を含むチオジペプチドに相当する。
グループＦ（23F＆43F）は第一アミノ酸残基としてのアラニン、及び第二アミノ酸残基（それに種々のR5基（即ち、薬物類似体）が結合される）としてのセリンを含むチオジペプチドに相当する。
グループＧ（45G-47G）は第一アミノ酸残基としてのアラニン、及び第二アミノ酸残基（そのスペーサー鎖〔-CH2-O-CH2-〕の長さが示されるようにｎ＝０、１、又は２と変化され、薬物類似体に結合される）としてのアスパラギン酸塩を含むチオジペプチドに相当する。
【００３０】
グループＨ（48H＆49H）は第一アミノ酸残基としてのアラニン、及び第二アミノ酸残基（そのスペーサー鎖〔-CH2-〕の長さがｎ＝９又は15と変化され、薬物類似体に結合される）としてのセリンを含むチオジペプチドに相当する。
グループＩ（50I-52I）は第一アミノ酸残基としてのアラニン、及び第二アミノ酸残基（そのスペーサー鎖〔-CH2-〕の長さがｎ＝８、12、又は14と変化され、薬物類似体に結合される）としてのセリンを含むチオジペプチドに相当する。
図７を参照して、夫々のコンジュゲートに関するデータを要約する表が示される。それ故、その表は合成された夫々のコンジュゲートに関するKi結合データ、そして又合成されたコンジュゲートの大部分に関する流出輸送データを示す。加えて、本発明者らは又本発明の第一の局面の化合物の類似体又は誘導体、即ち、加水分解耐性チオペプチドの効力を調べた。本発明者らは第一アミノ酸残基がD-異性体、即ち、D-Ala-ΨS-Ser(OBn)であり、L-異性体ではないチオペプチド薬物コンジュゲートを調製した。
図６に使用された夫々のコンジュゲートに関するコードについて、図４に示されたコンジュゲートＡはB14（図６に示される）に相当し、図４に示されたコンジュゲートＢは図６に示されたB26に相当し、コンジュゲートＣはB16に相当し、コンジュゲートＤはB12に相当し、コンジュゲートＥはB8に相当する。
【００３１】
実施例２−本発明のチオ基化合物の妥当性
Listerら（J. Physiol., 1995, 484.1, 173-182）に記載された方法を使用する、生体内輸送実験を使用して、腸壁を横切るチオペプチドの輸送中の本発明の化合物中のチオ基の重要性を調べた。それ故、本発明者らは試験チオペプチド、Phe-ΨS-Ala、即ち、フェニルアラニン及びアラニンのチオジペプチドを調製した。この実験の目的のために、このチオペプチドを薬物類似体分子にコンジュゲートしなかった。次いで、ラット空腸を使用して、本発明者らは腸壁を横切るこの試験チオペプチドの輸送の直接の測定を行なった。通常のジペプチド、D-Phe-L-Ala（標準の、加水分解できないジペプチド）を対照として使用した。結果はチオペプチドが、HPLC分析により検出されたように、非チオ対照化合物ジペプチドよりも有効に輸送されることを示した。
a)1mMのD-Phe-L-Gln（非チオジペプチド対照）が全体の乾燥腸1g当り0.244（±0.036）マイクロモル／分で輸送される。
b)1mMのL-Phe-L-Alaのチオペプチド類似体が全体の乾燥腸1g当り3.09（±0.047）マイクロモル／分で輸送される。
結果はチオペプチドがPepT1により認識され、その基質であるだけでなく、
(a)PepT1輸送メカニズムが依然として働き、かつ
(b)チオペプチドが、ペプチド結合の欠如のために（即ち、それがチオ結合で置換された）、小腸の柔毛付近に存在するペプチダーゼに耐性であることを明らかに示す。
データはチオペプチドが、それ故、対照ジペプチドD-Phe-L-Gln（これはペプチダーゼにより分解される、ペプチド結合を有する）の速度の約13倍で輸送されることを示す。
【００３２】
実施例３−PepT1タンパク質へのチオペプチド-薬物コンジュゲートの結合
試験すべき化合物と競合して放射能標識ジペプチド〔3H〕-D-Phe-L-Gln（17.4Ci/ミリモル、注文合成、ケンブリッジ・リサーチ・バイオケミカルズ、ストックトン-オン-ツリーズ、UK）の摂取を、既に記載されたように行なった（Meredithら, J. Physiol., 1998, 512, 629-634）。簡単に言えば、５卵母細胞を適当な濃度の試験化合物とともに、又は試験化合物を用いずにトレーサー（0.4μM）〔3H〕-D-Phe-L-Glnとともに摂取媒体（95mM NaCl、2mM KCl、1mM CaCl2、0.42mM MgCl2、10mM Tris/Mes pH 5.5）100μL中で室温でインキュベートした。１時間のインキュベーション後に、卵母細胞を氷冷摂取媒体1mL中で連続して５回洗浄し、次いでバイアル中で２％(w/v) SDS100μLで個々に溶解し、液体シンチレーションをカウントした。
定量的結合データをMeredithらの1998年の上記文献に説明された記載された方法を使用して結合された薬物代理物を含む多数のチオジペプチドキャリヤーについて生じ、下記の表２、及び図７に示す。表２に示された５種の化合物は図４に示されるような、E(209)、B(210)、A(211)、D(212)及びC(213)である。示されたチオペプチドキャリヤー分子の夫々が本発明によるものであり、夫々の化合物が第二アミノ酸残基にセリンアミノ酸側鎖基を含む。
【００３３】
【表１】
2007517851.tif 000003
【００３４】
上記表２中の夫々の数の後の括弧中のコードは、図６に使用された夫々の化合物に相当するコンジュゲートコードである。
データが又図５として示された棒チャートに示される。これらの試験キャリヤー薬物コンジュゲートに関するKi結合値は0.02mMから0.6mMまでの範囲である。それ故、本発明の夫々のコンジュゲートに関する結合データはそれらがPepT1キャリヤータンパク質の良好な基質であることを示す。
図8a及び8bを参照して、異なる薬物類似体にコンジュゲートされた幾つかのチオペプチドのKi値の測定を示す幾つかの例示の追加データが示される。図8a及び8bに示された化合物コードは下記の類似体に相当する：RAP4-25：B18、RAP4-26：B24、RAP4-27：B25、RAP4-28：B19、RAP4-29：B17、RAP4-30：B23、RAP4-31：B22、RAP4-32：F42、RAP4-33：F43、及びRAP4-34：B20。
図７中の表について、この研究で調製された夫々のコンジュゲートに関する相当するKi値が示される。
【００３５】
実施例４−流出アッセイを使用するチオペプチドの輸送
流出実験をTempleら, J. Biol. Chem., 1998, 273, 20-22に記載されたように行なった。簡単に言えば、PepT1発現卵母細胞に〔3H〕-D-Phe-L-Gln（17.4Ci/ミリモル）4.6nlを微量注入し、15分間にわたって回収した。５卵母細胞を陰性対照（即ち、摂取溶液pH5.5）及び陽性対照（即ち、pH5.5の摂取溶液中の20mMジペプチドGly-Gln）とともに、10mMの潜在的基質（即ち、チオジペプチド-薬物類似体コンジュゲート）を含む摂取溶液（pH5.5）100μL中でインキュベートした。室温で90分のインキュベーション後に、培地50μLを除去し、カウントのためにシンチレーションバイアルに入れた。卵母細胞を氷冷摂取培地1mL中で連続して５回洗浄し、次いでバイアル中で２％(w/v)のSDS100μLで個々に溶解し、液体シンチレーションをカウントした。
放射能標識ジペプチドの流出はPepT1による活性輸送の陽性指示である。しかしながら、負の流出は基質がPepT1により輸送されないことを必ずしも意味しないことが認められるべきである。何とならば、それがPepT1タンパク質への特別なコンジュゲートのKi値に依存するからである。
行なわれたアッセイでは、ジペプチドGly-Gln（これはPepT1により輸送されることが知られている）が標識D-Phe-L-Glnの約30％を卵母細胞中に残らさせた。同じ濃度で、試験物質（試験されるコンジュゲート）が以下のように評価される。
＜（測定可能な流出、しかしD-Phe-L-Glnの50％以上が残存する、Gly-Gln対照よりも輸送しない）
＝（Gly-Glnの効果と同様の流出、即ち、標識D-Phe-L-Glnの25-50％が残存する）
＞（Gly-Glnよりも多い流出、即ち、標識D-Phe-L-Glnの25％未満が残存する）
【００３６】
行なわれた流出輸送データの要約が図７に示される。下記のコンジュゲートがGly-Gln（これは生体内で輸送されることが知られている）よりも良好に輸送されたことがわかる：B22、G45、G46、及びI50。下記のコンジュゲートが対照ペプチドGly-Glnと同じ位に良く輸送された：B8、B9、B10、B11、B15、B20、B25、B30、F43、G47、H48、H49、及びI52。最後に、下記のコンジュゲートが輸送された（実験条件下で対照ペプチドよりも迅速ではないが）：B12、B14、B16、B17、B19、B23、B26、B29、C36、F42、及びI51。しかしながら、このコンジュゲートに関する輸送がたとえ対照よりも小さいとしても、PepT1経路を使用する輸送が依然として実証されたこと、及びチオペプチドが依然として輸送効力を示すことが認められるであろう。
【００３７】
Temple（J. Biol. Chem., 198, 273, 20-22）に記載された方法を使用するトランス-刺激アッセイを使用して、化合物209（図４に示されたＥ；図６に示されたB8）を輸送について試験し、それからの放射能標識対照ジペプチド、D-Phe-L-Glnの流出はそれが実際に輸送されることを示した。薬物又は薬物類似体に結合されたチオジペプチドの文献中の論文はなく、それ故、このようなコンジュゲートが活発に輸送される例はない。
それ故、本発明の発明者らは化合物209(E)が
a)1mＭでD-Phe-L-Glnの摂取を88％（±1.4）抑制し、0.3mM（±0.06）のKiを示し、かつ
b)2mMで、化合物209(E)が10mM Gly-Glnについての72％と較べて54％の流出を与え、それがGly-Glnよりも有効に輸送されることを示すことを示した。
輸送データを５回の実験からの平均cpm（１分当りのカウント）として測定した：
卵母細胞中に残存する対照4852（±89）
10mM Gly-Gln 1347（±126）
2mMコンジュゲート2237（±594）
これらの上記チオペプチド類似体に加えて、付加的な類似体を図１及び６に示されたように調製した。修飾（図１の欄Ａ中の構造Ｂ、及び欄Ｄの全て）の二つが薬物キャリヤー化合物それ自体に関するものであり、それ故、合成の早期に変化を必要とすることが注目されるべきである。これらの後者の二つの修飾が薬物送出の観点から重要である。何とならば、チオペプチド中の第一アミノ酸残基の側鎖の変化が薬物送出系の“微細チューニング”を可能にし、その結果、例えば、pH5.5で薬物-薬物キャリヤーコンジュゲートの好ましい総合の中性があった場合、薬物の不利な特徴がアミノ酸残基１の性質により相殺されるからである。第二アミノ酸残基をアスパラギン酸塩に変化することはヒドロキシル官能基を有する薬物の結合を可能にし、キャリヤーへの結合に適し得る薬物の潜在的な数の大きな増大をもたらす。
図9a及び9bを参照して、化合物B29(299)及びB30(298)に関するD-Phe-L-Glnの抑制の例示のデータが示される。これらは単一濃度の結合／流出実験であり、そのために基質の5mM溶液が濾過され（低溶解性のために）、その後に抑制（図9aに示されるような）又は流出（図9bに示されるような）について試験された。化合物B30はステロイドであり、本発明者らは非常に驚くことに（喜ばしいことに）チオペプチドキャリヤーがこのような分子とコンジュゲートし得ること、及び流出輸送研究がそれがPepT1経路、即ち、対照ジペプチドGly-Glnと同様の流出により輸送されることを示すことがわかった。
上記のように、本発明者らは又本発明の第一の局面の化合物の類似体又は誘導体の効力を調べ、第一アミノ酸残基がD-異性体：D-Ala-ΨS-Ser(OBn)であるチオペプチド薬物コンジュゲートを調製した。このD-異性体類似体はPepT1の基質であり、1.07mMのKiを有していた。加えて、そのD-異性体類似体はその相当するL-異性体よりも加水分解耐性であった。
【００３８】
実施例５−ラットにおける単一用量毒性研究
毒性試験はチオジペプチド、Ala-ΨS-Ser.tfa(トリフルオロ酢酸塩)約5gを必要とし、それが試験対象としてのラットに送出された。
研究デザイン：
１日目に５匹の雄及び５匹の雌への700mg/kgの単一経口用量
臨床観察：15日間にわたって毎日
体重：１日目、８日目及び15日目
予定された終了：15日目
試験物質製剤化
ビヒクルとしての生理食塩水を使用して投薬製剤を成功裏に調製した。試験物質の濃度は140mg/mlであり、5ml/kgの容積で投薬され、700mg/kgの用量をもたらした。
【００３９】
併発性死亡
併発性死亡はなかった。
臨床観察
治療関連の知見はなかった。
体重
全ての動物が15日目に体重を増加した。
予定された終了時の巨視的知見
予定された終了時に巨視的知見はなく、これらは治療に関連されると考えられた。
結論
結論すると、本明細書に記載された実験及びデータは薬物キャリヤー分子としての本発明のチオペプチド化合物の効力、及びPepT1タンパク質を使用して生体内で膜を横切って薬物-キャリヤーコンジュゲートを輸送し得る方法を示す。図６に示されたような、使用された薬物類似体は、生物学的に活性な薬物分子、例えば、ステロイド類似体(B30)の構造との強い類似性を有していた。それ故、本発明者らは多数のチオペプチド-薬物類似体コンジュゲートを設計し、合成した。次いでPepT1タンパク質への結合によるKi値を測定した。結果はそれらがPepT1/PepT2の良好な基質として作用することを示す。加えて、本発明者らは流出研究を使用して多数のコンジュゲートの輸送を試験した。これらの研究はコンジュゲートがPepT1経路により成功裏に輸送されることを示す。最後に、本明細書に示された毒性データはチオペプチド-類似体コンジュゲートが試験下でラットに毒性ではないことを示す。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】本発明の第三の局面に従って試験し得るチオペプチドコンジュゲートの変化を示す表を表す。
【図２】本発明の第一の局面の化合物又は本発明の第二の局面の薬物キャリヤーがPepT1の天然ジペプチド基質に関係する方法を要約する。
【図３】本発明の保護されたチオペプチドセリン薬物キャリヤーの合成に関する略図を示す。
【図４】本発明の第三の局面の薬物コンジュゲートの合成に関する略図を示す。
【図５】本発明の第二の局面の薬物キャリヤーに関する結合データを示す棒グラフを示す。
【図６】本発明の第三の局面に従って試験し得るチオペプチドコンジュゲートの更なる変化を示す。
【図７】図６に示された種々のチオペプチドコンジュゲート、並びに利用できる場合の夫々のコンジュゲートに関する、夫々の結合データ（Ki値）、及び流出輸送データを要約する表を示す。
【図８ａ】本発明のチオペプチド類似体のKi値の測定に関する例示のデータを示す。図中、化合物RAP4-25はB18に相当し、RAP4-26はB24に相当し、RAP4-27はB25に相当し、RAP4-28はB19に相当し、RAP4-29はB17に相当し、RAP4-30はB23に相当し、RAP-31はB22に相当し、RAP4-32はF42に相当し、RAP4-33はF43に相当し、RAP4-34はB20に相当する。
【図８ｂ】本発明のチオペプチド類似体のKi値の測定に関する例示のデータを示す。図中、化合物RAP4-25はB18に相当し、RAP4-26はB24に相当し、RAP4-27はB25に相当し、RAP4-28はB19に相当し、RAP4-29はB17に相当し、RAP4-30はB23に相当し、RAP-31はB22に相当し、RAP4-32はF42に相当し、RAP4-33はF43に相当し、RAP4-34はB20に相当する。
【図９ａ】化合物コード298がB30に相当し、コード299がB29に相当する、チオペプチド類似体の結合／流出に関する例示のデータを示す。
【図９ｂ】化合物コード298がB30に相当し、コード299がB29に相当する、チオペプチド類似体の結合／流出に関する例示のデータを示す。
【図１】
2007517851.tif 000004
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８ａ】
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【図８ｂ】
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【図９ａ】
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【図９ｂ】
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【国際調査報告】
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