(57)【要約】  本発明は、遊離塩基形または酸付加塩形の、式Ｉ【化１】2007502798.tif 000020〔式中、ＸおよびＹは、ＸおよびＹが同時にＣＨまたはＣＨ２ではないとの条件下で、ＣＨ、ＣＨ２または２価もしくは３価ヘテロ原子であり；ｍおよびｏは、互いに独立して０または１である。ただし、ｍが０であるとき、Ｙと隣接Ｃ原子の間の点線は結合であり、かつＹはＣＨまたは３価ヘテロ原子であり、ｍが１であるとき、Ｙと隣接Ｃ原子の間の点線は存在せず、かつＹはＣＨ２または２価ヘテロ原子であり、ｏが０であるとき、Ｘと隣接Ｃ原子の間の点線は結合であり、かつＸはＣＨまたは３価ヘテロ原子であり、ｏが１であるとき、Ｘと隣接Ｃ原子の間の点線は存在せず、かつＸはＣＨ２または２価ヘテロ原子である；Ａは(ＣＲ３Ｒ４)ｐであり、そしてＱは(ＣＲ９Ｒ１０)ｎであり；ｎおよびｐは、互いに独立して０または１であり；Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１３、およびＲ１４は、互いに独立して水素、ハロゲン、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルキルＳＯ２、ＳＯ３Ｈ、カルボキシ、(Ｃ１−４)アルコキシカルボニル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ＯＨまたはＮＲ１５Ｒ１６であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、互いに独立して水素、(Ｃ１−４)アルキル、カルボキシ、(Ｃ１−４)アルコキシカルボニルまたは(Ｃ１−４)アルコキシであるか、または、ＸがＣＨもしくはＣＨ２であるとき、Ｒ１およびＲ２はまたＯＨもしくはＮＲ１５Ｒ１６であり得るか、またはＹがＣＨもしくはＣＨ２であるとき、Ｒ１１、Ｒ１２はまたＯＨもしくはＮＲ１５Ｒ１６あり得て；Ｒ５、Ｒ８、Ｒ１５およびＲ１６は、互いに独立して水素、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、Ｒ１７Ｏ−Ｃ(Ｏ)−(Ｃ１−４)アルキルまたは(反応性基)−(Ｃ１−４)アルキルであり；そしてＲ１７は水素または(Ｃ１−４)アルキルである。〕の化合物を提供する。
2007502798.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
遊離塩基形または酸付加塩形の、式Ｉ
【化１】
2007502798.tif 000015
〔式中、
ＸおよびＹは、ＸおよびＹが同時にＣＨまたはＣＨ２ではないとの条件下で、ＣＨ、ＣＨ２または２価もしくは３価ヘテロ原子であり；
ｍおよびｏは、互いに独立して０または１である。ただし、
ｍが０であるとき、Ｙと隣接Ｃ原子の間の点線は結合であり、かつＹはＣＨまたは３価ヘテロ原子であり、
ｍが１であるとき、Ｙと隣接Ｃ原子の間の点線は存在せず、かつＹはＣＨ２または２価ヘテロ原子であり、
ｏが０であるとき、Ｘと隣接Ｃ原子の間の点線は結合であり、かつＸはＣＨまたは３価ヘテロ原子であり、
ｏが１であるとき、Ｘと隣接Ｃ原子の間の点線は存在せず、かつＸはＣＨ２または２価ヘテロ原子である；
Ａは(ＣＲ３Ｒ４)ｐであり、そしてＱは(ＣＲ９Ｒ１０)ｎであり；
ｎおよびｐは、互いに独立して０または１であり；
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１３、およびＲ１４は、互いに独立して水素、ハロゲン、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルキルＳＯ２、ＳＯ３Ｈ、カルボキシ、(Ｃ１−４)アルコキシカルボニル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ＯＨまたはＮＲ１５Ｒ１６であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、互いに独立して水素、(Ｃ１−４)アルキル、カルボキシ、(Ｃ１−４)アルコキシカルボニルまたは(Ｃ１−４)アルコキシであるか、または、ＸがＣＨもしくはＣＨ２であるとき、Ｒ１およびＲ２はまたＯＨもしくはＮＲ１５Ｒ１６であり得るか、またはＹがＣＨもしくはＣＨ２であるとき、Ｒ１１、Ｒ１２はまたＯＨもしくはＮＲ１５Ｒ１６あり得て；
Ｒ５、Ｒ８、Ｒ１５およびＲ１６は、互いに独立して水素、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、Ｒ１７Ｏ−Ｃ(Ｏ)−(Ｃ１−４)アルキルまたは(反応性基)−(Ｃ１−４)アルキルであり；そして
Ｒ１７は水素または(Ｃ１−４)アルキルである。〕
の化合物。
【請求項２】
ＸがＯ、ＳまたはＣＨ２であり、かつＹがＯ、ＳまたはＣＨ２であるが、ただし、ＸおよびＹが両方とも同時にＣＨ２ではない、請求項１記載の、遊離塩基形または酸付加塩形の式Ｉの化合物。
【請求項３】
４,８−ジメチル−２,３,４,９,１０,１１−ヘキサヒドロ−１,６−ジオキサ−４,１３−ジアザ−８−アゾニア−ペンタセンクロライド；８−エチル−４−メチル−２,３,４,９,１０,１１−ヘキサヒドロ−１,６−ジオキサ−４,１３−ジアザ−８−アゾニア−ペンタセンクロライド；４,８−ジメチル−３,８,９,１０−テトラヒドロ−２Ｈ−１,６,１１−トリオキサ−８,１３−ジアザ−４−アゾニア−ペンタセンテトラフルオロボレート；４,８−ジメチル−２,３,９,１０−テトラヒドロ−４Ｈ−１,６−ジオキサ−１１−チア−４,１３−ジアザ−８−アゾニア−ペンタセンクロライド；および８−(３−エトキシカルボニル−プロピル)−４−メチル−３,８,９,１０−テトラヒドロ−２Ｈ−１,６,１１−トリオキサ−８,１３−ジアザ−４−アゾニア−ペンタセンクロライド
から選択される、請求項１記載の式Ｉの化合物。
【請求項４】
請求項１−３のいずれかに記載の化合物および薬学的に許容される賦形剤または希釈剤を含む、組成物。
【請求項５】
式Ｉの化合物またはその塩の製造法であり、式III
【化２】
2007502798.tif 000016
〔式中、Ａ、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１４およびｏのラジカルおよび記号は、式Ｉの化合物について請求項１で定義の通りである。〕
のフェノール誘導体と、式IV
【化３】
2007502798.tif 000017
〔式中、Ｑ、Ｙ、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３およびｍのラジカルおよび記号は、式Ｉの化合物について請求項１で定義の通りであり、Ｒ１８はオキソまたはｐ−ニトロフェニル−Ｎ＝を意味し、そしてＲ１９はヒドロキシを意味する。〕
のニトロソまたはジアゾ化合物を反応させ；
得られた式Ｉの化合物を遊離塩基形または酸付加塩形で回収する
段階を含む、方法。
【請求項６】
(ｉ)遊離塩基形または酸付加塩形の、式Ｉ
【化４】
2007502798.tif 000018
〔式中、
ＸおよびＹは、ＸおよびＹが同時にＣＨまたはＣＨ２ではないとの条件下で、ＣＨ、ＣＨ２または２価もしくは３価ヘテロ原子であり；
ｍおよびｏは、互いに独立して０または１である。ただし、
ｍが０であるとき、Ｙと隣接Ｃ原子の間の点線は結合であり、かつＹはＣＨまたは３価ヘテロ原子であり、
ｍが１であるとき、Ｙと隣接Ｃ原子の間の点線は存在せず、かつＹはＣＨ２または２価ヘテロ原子であり、
ｏが０であるとき、Ｘと隣接Ｃ原子の間の点線は結合であり、かつＸはＣＨまたは３価ヘテロ原子であり、
ｏが１であるとき、Ｘと隣接Ｃ原子の間の点線は存在せず、かつＸはＣＨ２または２価ヘテロ原子であり；
Ａは(ＣＲ３Ｒ４)ｐであり、そしてＱは(ＣＲ９Ｒ１０)ｎであり；
ｎおよびｐは、互いに独立して０または１であり；
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１３およびＲ１４は、互いに独立して水素、ハロゲン、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルキルＳＯ２、ＳＯ３Ｈ、カルボキシ、(Ｃ１−４)アルコキシカルボニル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ＯＨまたはＮＲ１５Ｒ１６であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、互いに独立して水素、(Ｃ１−４)アルキル、カルボキシ、(Ｃ１−４)アルコキシカルボニルまたは(Ｃ１−４)アルコキシであるか、または、ＸがＣＨまたはＣＨ２であるとき、Ｒ１およびＲ２はまたＯＨもしくはＮＲ１５Ｒ１６であり得るか、またはＹがＣＨもしくはＣＨ２であるとき、Ｒ１１、Ｒ１２はまたＯＨもしくはＮＲ１５Ｒ１６であり得て；
Ｒ５、Ｒ８、Ｒ１５およびＲ１６は、互いに独立して水素、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、Ｒ１７Ｏ−Ｃ(Ｏ)−(Ｃ１−４)アルキルまたは(反応性基)−(Ｃ１−４)アルキルであり；そしてＲ１７は水素または(Ｃ１−４)アルキルである。〕
の化合物、または式II
【化５】
2007502798.tif 000019
〔式中、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１３およびＲ１４は、互いに独立して水素、ハロゲン、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルキルＳＯ２、ＳＯ３Ｈ、カルボキシ、(Ｃ１−４)アルコキシカルボニル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ＯＨまたはＮＲ１５Ｒ１６であり、そして
Ｒ２１およびＲ２２は水素、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、フェニル、フェニルアルキル、カルボキシまたはハロゲンであり；
Ｒ１４およびＲ２２は、それらが結合している炭素原子と一体となって、また飽和または不飽和環を形成でき；
Ｒ２１およびＲ１３は、それらが結合している炭素原子と一体となって、また飽和または不飽和環を形成でき；
Ｒ５、Ｒ８、Ｒ２０およびＲ２３は、水素、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ポリオキシヒドロカルビル、フェニル、フェニルアルキルであり；
Ｒ８およびＲ２０は、それらが結合している窒素原子と一体となって、また飽和または不飽和環を形成でき、
Ｒ２３およびＲ５は、それらが結合している窒素原子と一体となって、また飽和または不飽和環を形成でき、
Ｒ２２およびＲ２３は、それらが結合している原子と一体となって、また飽和または不飽和環を形成でき、
Ｒ５はＲ６と共に、それらが結合している原子と一体となって、また飽和または不飽和環を形成でき、
Ｒ７はＲ８と共に、それらが結合している原子と一体となって、また飽和または不飽和環を形成でき、
Ｒ２０はＲ２１と共に、それらが結合している原子と一体となって、また飽和または不飽和環を形成できる。〕
の化合物を含む組成物を適用し、
(ii)該化合物が脳内の標的組織と化学的に結合するのに充分な時間置き、そして
(iii)該化合物を、近赤外線照射により検出する
ことを含む、脳内の標的組織を標識する方法。
【請求項７】
該標的組織がアミロイドプラークである、請求項６記載の方法。
【請求項８】
アミロイドプラーク発生および／または凝集が関与する疾患を同定するための、請求項７記載の方法。
【請求項９】
アルツハイマー病を同定するための、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
近赤外線造影剤としての、請求項１から３のいずれかに記載の遊離塩基形または酸付加塩形の式Ｉの化合物の使用。
【請求項１１】
近赤外線造影剤としての、請求項６で定義の式IIの化合物の使用。
【請求項１２】
アミロイドプラークを造影するための近赤外線造影剤としての、請求項１０または１１に記載の使用。
【請求項１３】
反応性基を介して生体分子と共有結合した請求項１から３のいずれかに記載の式Ｉの化合物を含む、複合体。
【請求項１４】
生体分子が、ヌクレオシド、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、核酸、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、ポリサッカライド、オリゴサッカライド、モノサッカライド、薬物または分子量５００未満の小分子から選択される、請求項１３記載の複合体。
【請求項１５】
近赤外線照射を使用して検出できる、請求項１３または１４に記載の複合体。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の要約
本発明は、新規近赤外線造影剤および脳内のアミロイドプラークを標識する方法における該薬剤の使用に関する。特に、本発明の薬剤は、アルツハイマー病のような神経学的疾患および血管疾患における、アミロイド形成および／または蓄積の同定に有用である。
【０００２】
発明の背景
アルツハイマー病は、６５歳以上の集団の８％、および８０歳以上の集団の少なくとも３５％が罹患する。検死の前にアルツハイマー病の確定診断が可能となる方法は現在なく、医師が数種の試験および観察の結果の比較により推定アルツハイマー病との診断しかできず、約８０から９０％の診断精度を導く。アルツハイマー病の特徴に充分な特異性および感受性を有する造影剤が、アルツハイマー病を診断する方法における大きな進歩を可能にするであろう。
【０００３】
アルツハイマー病は、認知症、認知障害および記憶喪失により特徴付けられる、脳の神経変性疾患である。βアミロイドペプチドＡβ１−４０およびＡβ１−４２がアミロイド前駆体タンパク質の主要な代謝物であり、罹患した個体の老人斑および脳血管のアミロイド沈着に見られる。脳内のβアミロイドペプチド凝集体の形成および蓄積は、アルツハイマー病の発症および進行の重要な因子と見なされる。本疾患の他の特徴は、微小管関連タンパク質タウの過リン酸化と続く神経原線維変化の形成である。
【０００４】
現在、アルツハイマー病の唯一の最終的確認は、脳内のアミロイド沈着物および神経原線維変化の死後の組織学的試験である。診断するための臨床症状の早期の評価がしばしば困難であり、信用できない。従って、生存している脳内のアミロイドプラークおよび神経原線維変化の位置および密度を特異的に証明できる、インビボ造影剤の必要性がある。このような薬剤は、アルツハイマー病の早期の検出および疾患進行のモニタリングのための、ならびに処置の有効性を評価するための有用な診断ツールであろう。
【０００５】
神経原線維変化は、細胞骨格系要素であり、周期的に制限されたアミロイド線維に対になったらせん状フィラメントで凝集した、過リン酸化されたタウタンパク質から成る。アミロイドプラークの主成分は、より大きなアミロイド前駆体タンパク質の開裂により産生された３９−４３アミノ酸長βアミロイドペプチドである。βアミロイドペプチドのほとんど排他的に形成される散在プラーク以外に、アミロイドプラークは、多くの関連する細胞性生成物を含む、複合病巣である。βアミロイドの沈着は疾患の非常に早期に起こり、臨床症状が発現する前に長く進行する。
【０００６】
アミロイド沈着のインビボでの直接造影は、沈着が、多くの正常組織と同じ生理学的特性(例えば密度および水分含量)を有するため、困難である。しかしながら、近赤外(ＮＩＲ)領域の６００から１０００nmの範囲の波長の光で生物学的組織を照射および造影する方法は、利用可能である。
【０００７】
蛍光造影において、光の外部供給源、例えばレーザーからのエネルギーを吸収し、ほとんど直ぐに低エネルギーの長波長で再放出する。生物学的組織が、６００から１０００nmスペクトル領域の長波長光に相対的に高い透過性を有するため、伝達可視化の形での非吸収放射および再放出蛍光照射の両方の検出は組織特異的データを提供する。深い(すなわち、センチメートルの範囲)組織の造影は、ＮＩＲ光を、ＮＩＲ蛍光色素と組み合わせて使用することにより、達成される。近赤外蛍光造影は、組織自己蛍光の最小化の利点を有し、故に標的／背景比を改善する。
【０００８】
インビボ脳造影に適した薬剤は、近赤外線照射により検出可能となるために充分量脳に入るために、血液−脳関門を通過でき、低分子量かつ親油性でなければならない。さらに、それらは急速に分解することなく、アミロイドプラークと高親和性を有し、かつ特異的に結合しなければならない。
【０００９】
発明の開示
本発明は、近赤外造影に使用できる、新規造影剤を提供する。
【００１０】
本発明の一つの局面において、遊離塩基形または酸付加塩形の、式Ｉ
【化１】
2007502798.tif 000003
〔式中、
ＸおよびＹは、ＸおよびＹが同時にＣＨまたはＣＨ２ではないとの条件下で、ＣＨ、ＣＨ２または２価もしくは３価ヘテロ原子であり；
ｍおよびｏは、互いに独立して０または１である。ただし、
ｍが０であるとき、Ｙと隣接Ｃ原子の間の点線は結合であり、かつＹはＣＨまたは３価ヘテロ原子であり、
ｍが１であるとき、Ｙと隣接Ｃ原子の間の点線は存在せず、かつＹはＣＨ２または２価ヘテロ原子であり、
ｏが０であるとき、Ｘと隣接Ｃ原子の間の点線は結合であり、かつＸはＣＨまたは３価ヘテロ原子であり、
ｏが１であるとき、Ｘと隣接Ｃ原子の間の点線は存在せず、かつＸはＣＨ２または２価ヘテロ原子である；
Ａは(ＣＲ３Ｒ４)ｐであり、そしてＱは(ＣＲ９Ｒ１０)ｎであり；
ｎおよびｐは、互いに独立して０または１であり；
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１３、およびＲ１４は、互いに独立して水素、ハロゲン、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルキルＳＯ２、ＳＯ３Ｈ、カルボキシ、(Ｃ１−４)アルコキシカルボニル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ＯＨまたはＮＲ１５Ｒ１６であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、互いに独立して水素、(Ｃ１−４)アルキル、カルボキシ、(Ｃ１−４)アルコキシカルボニルまたは(Ｃ１−４)アルコキシであるか、または、ＸがＣＨもしくはＣＨ２であるとき、Ｒ１およびＲ２はまたＯＨもしくはＮＲ１５Ｒ１６であり得るか、またはＹがＣＨもしくはＣＨ２であるとき、Ｒ１１、Ｒ１２はまたＯＨもしくはＮＲ１５Ｒ１６あり得て；
Ｒ５、Ｒ８、Ｒ１５およびＲ１６は、互いに独立して水素、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、Ｒ１７Ｏ−Ｃ(Ｏ)−(Ｃ１−４)アルキルまたは(反応性基)−(Ｃ１−４)アルキルであり；そして
Ｒ１７は水素または(Ｃ１−４)アルキルである。〕
の化合物が提供される。
【００１１】
本発明の好ましい局面において、式Ｉの化合物は、ＸがＯ、ＳまたはＣＨ２であり、かつＹがＯ、ＳまたはＣＨ２であるが、ただし、ＸおよびＹが両方ともＣＨ２ではない、遊離塩基形または酸付加塩形の形で提供される。
【００１２】
本式の化合物は、その構造の観点からカチオン性電荷を有し、そのため、常にアニオン、例えば、無機またはカルボン酸、例えばクロライド、ブロマイド、テトラフルオロボレートまたはトリフルオロアセテートの脱プロトン化に由来するアニオンを伴う。
【００１３】
本明細書の上記およびいずれの場所でも、下記用語は下記意味を有する：
ＨａｌまたはハロゲンはＩ、Ｂｒ、ＣｌまたはＦを意味する。
有機ラジカルまたは化合物は分枝または非分枝であり得る。
【００１４】
“アルキル基”は分枝または非分枝であり、好ましくは１個から４個の炭素原子を含む。アルキルは、例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチルを意味する。
“アルコキシ基”は分枝または非分枝であり、好ましくは１個から４個の炭素原子を含む。アルコキシは、例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシを意味する。
【００１５】
“アルキルカルボニル”は、式−Ｃ(Ｏ)Ｒａ(ここで、Ｒａは上記で定義のアルキルラジカルである)のラジカルを意味する。
【００１６】
図面の簡単な説明
図１：このグラフは、実施例３の化合物の、３mg／kgの本発明の薬剤をi.v.注射した雌１６ヶ月齢トランスジェニックＡＰＰ２３マウスのＡＤプラークへの特異的結合係数を示す。特異的結合係数は、蛍光シグナル(トランスジェニックマウス)から蛍光シグナル(非トランスジェニックマウス)を減じ、蛍光シグナル(トランスジェニックマウス)で割ったものと定義する。
【００１７】
本発明の一つの局面において、式Ｉの化合物は、波長６００−１０００nmの近赤外線照射で検出できる。
【００１８】
本発明のさらに別の局面において、本発明の化合物は、好ましくは下記特性を示す：
(ｉ)アミロイドプラークへの特異性
(ii)血液−脳関門浸透
(iii)溶解性
(iv)近赤外線照射により検出可能
【００１９】
本発明の化合物のアミロイドプラークへの特異性は、本発明の化合物と該アミロイドプラークの間に化学的相互作用が存在するときに生じると確定する。この化学的会合は：共有結合、イオン結合、親水性−親水性相互作用または疎水性−疎水性相互作用を含む。
【００２０】
本発明の一つの局面において、式Ｉの化合物および薬学的に許容される賦形剤または希釈剤を含む組成物が提供される。
【００２１】
本発明のさらに別の局面において、波長６００−１０００nmの近赤外線照射により検出できる、本発明の化合物を含む、組成物が提供される。
【００２２】
本発明の組成物は、本発明の化合物を含み、適用と矛盾しない、任意のかつすべての溶媒、分散媒体、コーティング、等張および吸収遅延剤などを含むことを意図する。何らかの慣用の媒体または薬剤が活性化合物と適合できる限り、このような媒体は本発明の組成物で使用できる。補助的活性化合物も本組成物に包含できる。
【００２３】
例えば、本発明の組成物を対照に適用するとき、それは意図する投与経路に適合するように製剤する。投与経路の例は、非経腸、例えば、静脈内、皮内、皮下、経口(例えば、吸入)、経皮(局所)、経粘膜、および直腸投与を含む。非経腸、皮内または皮下適用に使用するための溶液または懸濁液は、下記成分を含み得る：注射用水、生理食塩水、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒のような滅菌希釈剤；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンのような抗菌剤；アスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウムのような抗酸化剤；エチレンジアミンテトラ酢酸またはシクロデキストリンのようなキレート化剤；酢酸、クエン酸またはリン酸のような緩衝剤および塩化ナトリウムまたはデキストロースのような張性調節剤。ｐＨは、酸または塩基、例えば塩酸または水酸化ナトリウムで調節できる。
【００２４】
本発明の化合物または組成物は、細胞またはベクターに結合でき、例えば、静脈内注射、局所投与または定位の注射により、対象に送達される。
【００２５】
本発明の組成物は、さらに１個またはそれ以上の下記の成分を、記載の濃度で含んでよく、最終浸透圧を約２５０ミリオスモル(mOsm)から約３３０ミリオスモルに塩化ナトリウムまたは塩化カリウムで調節する：約５−５０mMの濃度でＫ／ＮａＨＣＯ３；約０−８８mMの濃度でＭｇＣｌ２；約４−１０４mMの濃度でＫＣｌ；約０−１.５mMの濃度でＮａ３ＰＯ４；および約０−０.６mMの濃度でＣａＣｌ２。好ましくは、緩衝溶液を、autoretic試薬組成のｐＨを約７から約８に、最も好ましくは約７.４に維持するように製剤し、従って、１個またはそれ以上の下記の成分を、記載の濃度で含んでよく、最終浸透圧を約２８０mOsmから約３００mOsmに調節する：約０−１５０mMの濃度でＴｒｉｓ／ＴＥＡ；約０−１２１mMの濃度でＫ２Ｏｘ／ＥＤＴＡ；および約０−１５５mMの濃度でＫＣｌ／ＮａＣｌ。
【００２６】
本発明の組成物はまた、細胞膜の通過を促進するために、ある種のアニオンおよびカチオン(例えば、アルキル金属クロライド)も含み得る。アニオンの非限定的例は、ビカーボネート、クロライドボレート、バルビタール、オキサレート(Ｏｘ)またはエチレンジアミン−テトラ酢酸(ＥＤＴＡ)を含む。すべてのアニオンが細胞膜を通る浸透の促進に有効であることが判明しているわけではないことに注意すべきである。カチオンの非限定的例は、ナトリウム(例えばＮａＣｌ)、カリウム(例えばＫＣｌ)、トリスヒドロキシメチルアミノメタン(Ｔｒｉｓ)、(Ｔｒｉｓ[ヒドロキシメチル]−アミノメタン−塩酸(Ｔｒｉｓ−ＨＯ)またはトリエタノールアミン(ＴＥＡ)を含む。
【００２７】
本発明のさらなる局面において、反応性基を介して生体分子と共有結合した本発明の化合物を含む、複合体を提供する。生体分子は：ヌクレオシド、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、核酸、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、ポリサッカライド、オリゴサッカライド、モノサッカライド、薬物、または、例えば、ＭＷ５００未満の小分子から選択し得る。
【００２８】
本明細書で使用する“反応性基”なる用語は、特に表１に定義した基を意味する。
【００２９】
【表１】
2007502798.tif 000004
【００３０】
本発明の別の局面において、式Ｉの化合物およびその塩の製造法であり、式III
【化２】
2007502798.tif 000005
〔式中、Ａ、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１４およびｏのラジカルおよび記号は、式Ｉの化合物について上に記述した通りである。〕
のフェノール誘導体と、式IV
【化３】
2007502798.tif 000006
〔式中、Ｑ、Ｙ、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３およびｍのラジカルおよび記号は、式Ｉの化合物について上に記述した通りであり、Ｒ１８はオキソまたはｐ−ニトロフェニル−Ｎ＝を意味し、そしてＲ１９はヒドロキシを意味する。〕
のニトロソまたはジアゾ化合物を反応させ；
得られた式Ｉの化合物を遊離塩基形または酸付加塩形で回収する
段階を含む、方法を提供する。
【００３１】
本発明の化合物は、例えば、実施例１−５に記載の通り製造できる。反応混合物の後処理およびこのようにして得た化合物の精製は、既知の方法に従って行い得る。酸付加塩は遊離塩基から既知の方法で製造でき、逆もそうである。式IIIおよびIVの出発物質は、既知であるか、当分野で既知の方法にまたは実施例に記載のものに従って製造できる。
【００３２】
本発明は、本発明の化合物または組成物を適用することにより、脳内の標的組織を標識する方法を提供する。“適用する”なる用語は、その最も広い意味で使用し、本発明の化合物または組成物を対象の体内または身体の一部に挿入するすべての手段を包含する。対象は、例えば、ヒト、ラット、マウス、イヌ、ネコまたはブタを含む、すべての哺乳動物を意味する。
【００３３】
本発明の化合物または組成物の対象への適用は、全身的または局所的であり得る。例えば、本発明の化合物を、それが体中に送達されるように対象に適用し得る。あるいは、本発明の化合物を、目的の特異的臓器または組織に局所的に適用し得る。この局所適用は、生存対象でのインビボまたは組織サンプルを身体から摘出した後インビトロであり得る。本発明の化合物または組成物の適用の例は、実施例部分に記載する。
【００３４】
本発明の化合物または組成物を適用後、近赤外線照射を使用した化合物の検出を行う。検出に必要な化合物の用量は、当分野の当業者により容易に決定できる。本発明の化合物の用量を漸増させ、適当なコントロールとの比較することにより、必要な化合物の正確な用量を決定できる。
【００３５】
アミロイド沈着の造影はまたアミロイド沈着の用量を決定できるように、定量的に行い得る。定量分析のために、蛍光画像を目的の領域を基準に分析する。
【００３６】
本発明の一つの局面において：
(ｉ)遊離塩基形または酸付加塩形の式Ｉの化合物の化合物を含む組成物を適用し、
(ii)該化合物が脳内の標的組織と化学的に結合するのに充分な時間置き、そして
(iii)該化合物を、近赤外線照射により検出する
ことを含む、脳内の標的組織を標識する方法を提供する。
【００３７】
本発明の別の局面において：
(ｉ)ＸがＯ、ＳまたはＣであり、かつＹがＯ、ＳまたはＣＨ２であるが、ただし、ＸおよびＹが両方とも同時にＣＨ２ではない、遊離塩基形または酸付加塩形の式Ｉの化合物の化合物を含む組成物を適用し、
(ii)該化合物が脳内の標的組織と化学的に結合するのに充分な時間置き、そして
(iii)該化合物を、近赤外線照射により検出する
ことを含む、脳内の標的組織を標識する方法を提供する。
【００３８】
本発明のさらに別の局面において、
(ｉ)遊離塩基形または酸付加塩形の、式Ｉ
【化４】
2007502798.tif 000007
〔式中、
ＸおよびＹは、ＸおよびＹが同時にＣＨまたはＣＨ２ではないとの条件下で、ＣＨ、ＣＨ２または２価もしくは３価ヘテロ原子であり；
ｍおよびｏは、互いに独立して０または１である。ただし、
ｍが０であるとき、Ｙと隣接Ｃ原子の間の点線は結合であり、かつＹはＣＨまたは３価ヘテロ原子であり、
ｍが１であるとき、Ｙと隣接Ｃ原子の間の点線は存在せず、かつＹはＣＨ２または２価ヘテロ原子であり、
ｏが０であるとき、Ｘと隣接Ｃ原子の間の点線は結合であり、かつＸはＣＨまたは３価ヘテロ原子であり、
ｏが１であるとき、Ｘと隣接Ｃ原子の間の点線は存在せず、かつＸはＣＨ２または２価ヘテロ原子であり；
Ａは(ＣＲ３Ｒ４)ｐであり、そしてＱは(ＣＲ９Ｒ１０)ｎであり；
ｎおよびｐは、互いに独立して０または１であり；
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１３およびＲ１４は、互いに独立して水素、ハロゲン、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルキルＳＯ２、ＳＯ３Ｈ、カルボキシ、(Ｃ１−４)アルコキシカルボニル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ＯＨまたはＮＲ１５Ｒ１６であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、互いに独立して水素、(Ｃ１−４)アルキル、カルボキシ、(Ｃ１−４)アルコキシカルボニルまたは(Ｃ１−４)アルコキシであるか、または、ＸがＣＨまたはＣＨ２であるとき、Ｒ１およびＲ２はまたＯＨもしくはＮＲ１５Ｒ１６であり得るか、またはＹがＣＨもしくはＣＨ２であるとき、Ｒ１１、Ｒ１２はまたＯＨもしくはＮＲ１５Ｒ１６であり得て；
Ｒ５、Ｒ８、Ｒ１５およびＲ１６は、互いに独立して水素、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、Ｒ１７Ｏ−Ｃ(Ｏ)−(Ｃ１−４)アルキルまたは(反応性基)−(Ｃ１−４)アルキルであり；そしてＲ１７は水素または(Ｃ１−４)アルキルである。〕
の化合物、
【００３９】
または式II
【化５】
2007502798.tif 000008
〔式中、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１３およびＲ１４は、互いに独立して水素、ハロゲン、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルキルＳＯ２、ＳＯ３Ｈ、カルボキシ、(Ｃ１−４)アルコキシカルボニル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ＯＨまたはＮＲ１５Ｒ１６であり、そして
Ｒ２１およびＲ２２は水素、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、フェニル、フェニルアルキル、カルボキシまたはハロゲンであり；
Ｒ１４およびＲ２２は、それらが結合している炭素原子と一体となって、また飽和または不飽和環を形成でき；
Ｒ２１およびＲ１３は、それらが結合している炭素原子と一体となって、また飽和または不飽和環を形成でき；
Ｒ５、Ｒ８、Ｒ２０およびＲ２３は、水素、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ポリオキシヒドロカルビル、フェニル、フェニルアルキルであり；
Ｒ８およびＲ２０は、それらが結合している窒素原子と一体となって、また飽和または不飽和環を形成でき、
Ｒ２３およびＲ５は、それらが結合している窒素原子と一体となって、また飽和または不飽和環を形成でき、
Ｒ２２およびＲ２３は、それらが結合している原子と一体となって、また飽和または不飽和環を形成でき、
Ｒ５はＲ６と共に、それらが結合している原子と一体となって、また飽和または不飽和環を形成でき、
Ｒ７はＲ８と共に、それらが結合している原子と一体となって、また飽和または不飽和環を形成でき、
Ｒ２０はＲ２１と共に、それらが結合している原子と一体となって、また飽和または不飽和環を形成できる。〕
の化合物を含む組成物を適用し、
(ii)該化合物が脳内の標的組織と化学的に結合するのに充分な時間置き、そして
(iii)該化合物を、近赤外線照射により検出する
ことを含む、脳内の標的組織を標識する方法を提供する。
【００４０】
本発明の化合物および組成物は、脳内のアミロイドプラークのような病理学的組織の標識に有用なマーカーである。これはアミロイドプラークの形成および／または蓄積が関与する疾患の同定、診断および予防に、および、アミロイドプラークの形成および／または蓄積が関与する疾患の治療的処置の効果のモニタリングに有用である。これらの疾患は、例えば、アルツハイマー病、ダウン症候群、記憶および認知障害、認知症、アミロイドニューロパシー、脳の炎症、神経および脳の外傷、血管アミロイド症またはアミロイド症を伴う脳出血を含む。
【００４１】
本発明の別の局面において本発明の化合物および組成物は、脳内のアミロイドプラークの同定のための近赤外線造影剤として使用する。
【００４２】
下記実施例は、本発明の方法および組成物を限定するものではなく説明するものである。通常遭遇し、当分野の当業者には明白である種々の条件およびパラメーターの他の適当な修飾および適合は、本発明の精神および範囲内である。
【００４３】
実施例１：４,８−ジメチル−２,３,４,９,１０,１１−ヘキサヒドロ−１,６−ジオキサ−４,１３−ジアザ−８−アゾニア−ペンタセンクロライドの合成
１−メチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−キノリン−７−オール(２０.０mg、１２３μmol)の水(５００μｌ)および２Ｍ  ＨＣｌ(１００μｌ)の溶液を、０℃に冷却し、亜硝酸ナトリウム(８.５７mg、１２３μmol)の水溶液を添加する。反応混合物を０℃で６０分撹拌し、ＮａＨＣＯ３の飽和溶液で中和し、酢酸エチルで抽出する。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させ、溶媒を減圧下除去する。得られたニトロソ中間体および４−メチル−２−Ｈ−ベンズ[１,４]オキサジン−６−オール(２４.５mg、１４８μmol)を、エタノール(１.００μl)および２Ｍ  ＨＣｌ(１００μl)の混合物に溶解し、還流下で１時間加熱する。溶液を減圧下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(ＳｉＯ２、ジクロロメタン／メタノール＝１０／３)で精製して、表題化合物を青色結晶として得る、ｍｐ：２４５−２４８℃；
【表２】
2007502798.tif 000009
【００４４】
実施例２：８−エチル−４−メチル−２,３,４,９,１０,１１−ヘキサヒドロ−１,６−ジオキサ−４,１３−ジアザ−８−アゾニア−ペンタセンクロライドの合成
１−エチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−キノリン−７−オール(５０.０mg、２７６μmol)の水(１ml)および２Ｍ  ＨＣｌ(２５０μl)の溶液を、０℃に冷却し、亜硝酸ナトリウム(２０.０mg、２８７μmol)の水(４００μl)溶液を添加する。反応混合物を０℃で６０分撹拌し、ＮａＨＣＯ３の飽和溶液で中和し、および酢酸エチルで抽出する。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させ、溶媒を減圧下除去する。ニトロソ中間体(２５.０mg、１２１μmol)および４−メチル−２−Ｈ−ベンズ[１,４]オキサジン−６−オール(２０.１mg、１２１μmol)をエタノール(７５０μl)および２Ｍ  ＨＣｌ(１２４μl)の混合物に溶解し、還流下で３時間加熱する。溶液を減圧下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(ＳｉＯ２、ジクロロメタン／メタノール／水／酢酸＝１０／１０／１／１)で精製して、表題化合物を青色結晶として得る、ｍｐ：２４５−２４７℃；
【表３】
2007502798.tif 000010
【００４５】
実施例３：４,８−ジメチル−３,８,９,１０−テトラヒドロ−２Ｈ−１,６,１１−トリオキサ−８,１３−ジアザ−４−アゾニア−ペンタセンテトラフルオロボレート
４−ニトロ−ベンゼンジアゾニウムテトラフルオロボレート(５７４mg、２.４２mmol)を１０％Ｈ２ＳＯ４(４００μl)に溶解し、４−メチル−２−Ｈ−ベンズ[１,４]オキサジン−６−オール(４００mg、２.４２mmol)のメタノール(２ml)に添加する。反応混合物を３０分、室温で撹拌し、２５％水性アンモニアの添加により中和し、赤色沈殿を沈降させる。粗ジアゾ中間体を、再結晶(ｎ−ブタノール)により精製する；ｍｐ：１６２−１６５℃。
【００４６】
ジアゾ中間体(５６０mg、１.７８mmol)および４−メチル−２−Ｈ−ベンズ[１,４]オキサジン−６−オール(３２６mg、１.９６mmol)をエタノール(１０ml)および水(１ml)の混合物に溶解する。３２％ＨＣｌ(７００μl)添加後、反応混合物を７０℃で還流下１時間撹拌し、続いて溶液を減圧下濃縮する。残渣を水に溶解し、四ホウ酸ナトリウムの飽和溶液で処理する。沈殿を沈降させ、カラムクロマトグラフィー(ＳｉＯ２、ジクロロメタン／メタノール＝１０／２)で精製して、表題化合物を青色結晶として得る、ｍｐ：２３５−２３８℃。
【表４】
2007502798.tif 000011
【００４７】
実施例４：４,８−ジメチル−２,３,９,１０−テトラヒドロ−４Ｈ−１,６−ジオキサ−１１−チア−４,１３−ジアザ−８−アゾニア−ペンタセンクロライド
４−ニトロ−ベンゼンジアゾニウムテトラフルオロボレート(２８７mg、１.２１mmol)を１０％Ｈ２ＳＯ４(２００μl)に溶解し、４−メチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ[１,４]チアジン(２００mg、１.２１mmol)のメタノール(２ml)溶液に添加する。反応混合物を３０分、室温で撹拌し、２５％水性アンモニアで中和し、赤色沈殿を沈降させる。粗ジアゾ中間体をさらに精製せずに次段階に使用する。ジアゾ中間体(１５０mg、４７７μmol)および４−メチル−２−Ｈ−ベンズ[１,４]オキサジン−６−オール(１１９mg、７１６μmol)をエタノール(４ml)および水(４００μl)の混合物に溶解する。３２％ＨＣｌ(１８７μl)添加後、反応混合物を７０℃で、還流下１時間撹拌し、続いて溶液を減圧下濃縮する。粗生成物をカラムクロマトグラフィー(ＳｉＯ２、ジクロロメタン／メタノール＝１０／３)で精製して：表題化合物を青色結晶として得る；ｍｐ：２５０−２５２℃。
【表５】
2007502798.tif 000012
【００４８】
実施例５：８−(３−エトキシカルボニル−プロピル)−４−メチル−３,８,９,１０−テトラヒドロ−２Ｈ−１,６,１１−トリオキサ−８,１３−ジアザ−４−アゾニア−ペンタセンクロライド
３,４−ジヒドロ−２Ｈ−１、４−ベンズオキサジン−６−オール(２００mg、１.３２mmol)、炭酸カリウム(１８３mg、１.３２mmol)および４−ブロモ−酪酸エチルエステル(２１７μl、１.４６mmol)の無水ジメチルホルムアミド(１ml)溶液を、６５℃で、１６時間、アルゴン下撹拌する。反応混合物を水(２０ml)に注ぎ、水性相を２Ｍ  ＨＣｌで中和し、酢酸エチル(３×５０ml)で抽出する。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させ、溶媒を減圧下除去する。粗生成物をカラムクロマトグラフィー(ＳｉＯ２、ヘキサン／酢酸エチル＝２／１)で精製し、無色油状物を得る；
【表６】
2007502798.tif 000013
【００４９】
実施例３のジアゾ中間体(１５０mg、５６５μmol)および４−(６−ヒドロキシ−２,３−ジヒドロ−ベンゾ[１,４]オキサジン−４−イル)−酪酸エチルエステル(２１３mg、６７８μmol)をエタノール(１ml)および水(１００μl)の混合物に溶解する。３２％ＨＣｌ(２２２μl)添加後、反応混合物を７０℃で還流下１時間加熱し、溶液を減圧下濃縮する。残渣をカラムクロマトグラフィー(ＳｉＯ２、ジクロロメタン／メタノール＝１０／２)で精製して、表題化合物を青色結晶として得る、ｍｐ：２４２−２４５℃。
【００５０】
実施例６：本発明の化合物のＵＶ／ＶＩＳおよび蛍光特性
ＵＶ／ＶＩＳおよび蛍光スペクトルを記録し、分析する。ＵＶ／ＶＩＳスペクトルについで、１.０００cm路長のセルを備えた、Perkin ElmerのLambda 19スペクトロメーターを使用する。スキャン速度は１２０nm／分である。蛍光データを、冷却したR928ディテクター(スリット１mm)を備えたSpex Fluorolog(I.S.A.)スペクトロメーター上に得る。量子収率を、Cresylviolett(励起５９５nm、収率(yield)＝０.５４)を標準として使用することにより測定する。
【００５１】
【表７】
2007502798.tif 000014
【００５２】
実施例７：本発明の化合物またはチオフラビンＳを使用した、ＡＰＰ２３マウスおよびヒトアルツハイマー病(ＡＤ)脳切片の標識
２６ヶ月齢のＡＰＰ２３マウスからの４マイクロメーター厚のパラフィン切片をキシレン中で脱パラフィン処理し、再水和する。１０mgの本発明の薬剤(化合物実施例３)を１ml  ジメチルスルホキシドに溶解し、脱イオン水で１：１０に希釈する。この染色溶液を切片上に約２０分適用する。切片背景を、９５％エタノールで洗浄することにより浄化する。最後に、切片を９９％エタノールで脱水し、キシレン中で浄化し、VectashieldＴＭにマウントする。ＡＤ脳皮質からの２０マイクロメーター厚のcryotome切片を空気乾燥させ、４％ＰＦＡに５分固定する。水道水で洗浄後、切片をチオフラビンＳまたは本発明の薬剤(化合物実施例３)のいずれかで染色し、上記の通りさらに処理する。本発明薬剤をジメチルスルホキシドに溶解し、最終濃度０.０１％に５０％エタノールで希釈し、チオフラビンＳを５０％エタノールに溶解し、最終濃度は０.０１％である。
【００５３】
実施例８：アミロイドプラークへのインビトロ結合特性
本発明の薬剤(化合物実施例３)の凝集したＡＰペプチドＡβ−４０への結合を、溶液中で示差蛍光分光学およびチオフラビン移動により測定する。本発明の薬剤(化合物実施例３)の蛍光スペクトルは、β−アミロイド結合により６８０−７２０nmの範囲でわずかに減少した傾向強度を示す。示差スペクトルを種々の濃度の本発明の薬剤(化合物実施例３)で記録し、蛍光強度シフトは凝集したＡβの濃度と依存する。高濃度の本発明の薬剤(化合物実施例３)で飽和が観察され、本発明の薬剤(化合物実施例３)のＫｄ値は０.２μMと概算される。他の実験で、凝集したＡβをチオフラビンＴとインキュベートし、ここで、４６０−５６０nm(励起４４５nm)での蛍光強度は、凝集Ａβへのチオフラビンの結合を示す。本発明の薬剤(化合物実施例３)の添加は、濃度依存的蛍光減少をもたらし、チオフラビンが凝集したＡβから移動したことを示唆し、本発明の薬剤(化合物実施例３)の見かけの結合定数を計算できる。本実験は、０.３７μM−３μMのチオフラビン濃度で行い、本発明の薬剤(化合物実施例３)の見かけの結合定数は試験したすべてのチオフラビン濃度で０.１μM−０.２μMであり、高いチオフラビン濃度で増加しない。
【００５４】
実施例９：ＡＰＰ２３マウスにおけるＡβのインビボ標識
注射溶液を、１０mgの本発明の薬剤を、９.８ml滅菌水で希釈した０.２mLジメチルスルホキシドに溶解して新たに調製する。低濃度を、さらに水で希釈することにより調製する。２１ヶ月齢の４匹のＡＰＰ２３雌マウスに、化合物を１回注射する(注射容量：１ml／１００体重ｇｒ)。処置動物を１時間後に断頭して殺す。脳を摘出し、ドライアイス上で凍結させる。１４μm厚の切片をcryotomeで切断し、融解マウントし、空気乾燥させる。染色を上記の通り行う。切片を、慣用の蛍光顕微鏡および共焦点顕微鏡を使用して分析する。
【００５５】
(ｉ)ＡＰＰ２３マウス脳切片(アミロイド沈着があるが、神経原線維変化はない)の染色：本発明の薬剤は、ＡＰＰ２３マウスの脳切片でアミロイドプラークおよび血管アミロイド沈着を強く染色する。
(ii)ヒトＡＤ脳切片(アミロイド沈着および神経原線維変化の両方がある)の染色：脳切片をＡＤ患者の前頭皮質から取り、本発明の薬剤で染色し、結果をチオフラビンＳ染色と比較する。本発明の薬剤は、強くかつ染色的にアミロイド沈着を染色する。
(iii)ＡＰＰ２３マウスのエキソビボ染色：本発明の薬剤のＡＰＰ２３マウスへの静脈内投与は、エキソビボで分析して、アミロイド沈着の選択的かつ強力な染色に至る。
【００５６】
実施例１０：近赤外線造影を使用した、インビボでのβアミドイドプラークおよび神経原線維変化の標識およびリアルタイム検出
インビボ近赤外造影のために、１０−２４ヶ月齢トランスジェニックＡＰＰ２３マウス(３＜ｎ＜５)およびコントロールとして、同じ年齢の非トランスジェニックＡＰＰ２３マウス(３＜ｎ＜４)に、尾静脈に０.１、１および３mg／kgの本発明の薬剤(０.１、１および３mg／１０ml、０.９％食塩水中)を静脈内(ｉ.ｖ.)注射する。画像を全身投与３０、６０、１２０および２４０分後に取る。図１のグラフは、実施例３の化合物の、３mg／kgの本発明の薬剤をｉ.ｖ.注射された雌１６ヶ月齢トランスジェニックＡＰＰ２３マウスのＡＤプラークへの特異的結合を示す。ここで、特異的結合は、蛍光シグナル(トランスジェニックマウス)から蛍光シグナル(非トランスジェニックマウス)を減じ、蛍光シグナル(トランスジェニックマウス)で割ったものと定義する。
【００５７】
蛍光シグナル強度、すなわち特異的結合の有意な差異が、トランスジェニックＡＰＰ２３および非トランスジェニックコントロールマウスの間で、本発明の薬剤の投与６０、１２０および２４０後に観察され、従って、本発明の薬剤が、アルツハイマー病を同定するために脳内のアミロイドプラークを標識する能力を証明する。
【図面の簡単な説明】
【００５８】
【図１】このグラフは、実施例３の化合物の、３mg／kgの本発明の薬剤をi.v.注射した雌１６ヶ月齢トランスジェニックＡＰＰ２３マウスのＡＤプラークへの特異的結合を示す。特異的結合は、蛍光シグナル(トランスジェニックマウス)から蛍光シグナル(非トランスジェニックマウス)を減じ、蛍光シグナル(トランスジェニックマウス)で割ったものと定義する。
【図１】
2007502798.tif 000021
【国際調査報告】
2007502798.tif 000022
2007502798.tif 000023
2007502798.tif 000024
2007502798.tif 000025