(57)【要約】  この発明は、植物起源から得られる食欲抑制性組成物に関するものである。一層詳細には、この発明は、トウワタ属植物の抽出生成物を含む食欲抑制性組成物、食欲抑制性組成物を製造する方法、及び食欲を抑制する方法に関係する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記を含む食欲抑制性組成物：
トウワタ属植物の植物物質の抽出生成物
及び希釈剤、充填剤、塩及び結合剤よりなる群から選択する少なくとも一種の添加物。
【請求項２】
植物物質を、葉、茎、花、果実、種子及び根よりなる群から選択する、請求項１に記載の食欲抑制性組成物。
【請求項３】
植物を、Ａ．インカルナタ、Ａ．クラサビカ、Ａ．シリアカ及びＡ．ツベロサよりなる群から選択する、請求項１に記載の食欲抑制性組成物。
【請求項４】
抽出生成物が、下記式(Ｉ)に従う化合物を含む、請求項１に記載の食欲抑制性組成物：
【化１】
2007532553.tif 000012
(式中、Ｒ1は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ2は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ4は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ5は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ6は、水素、Ｃ1〜Ｃ18部分、又は糖質部分であり；そして、
点線は、随意の二重結合を表す)。
【請求項５】
抽出生成物が、下記式(ＩＩ)に従う化合物を含む、請求項１に記載の食欲抑制性組成物：
【化２】
2007532553.tif 000013
(式中、Ｒ1は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ4は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ5は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ6は、水素、Ｃ1〜Ｃ18部分、又は糖質部分であり；そして、
点線は、随意の二重結合を表す)。
【請求項６】
抽出生成物が、下記式(ＩＩＩ)に従う化合物を含む、請求項１に記載の食欲抑制性組成物：
【化３】
2007532553.tif 000014
(式中、Ｒ1は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ2は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ4は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ6は、水素、Ｃ1〜Ｃ18部分、又は糖質部分であり；そして、
点線は、随意の二重結合を表す)。
【請求項７】
食欲抑制性組成物を製造する方法であって、下記を含む当該方法：
トウワタ属植物の植物物質を用意し；
該植物物質を溶媒と接触させ、それにより、食欲抑制性組成物を単離する。
【請求項８】
植物物質を浸解することを更に含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
植物物質を、葉、茎、花、果実、種子及び根よりなる群から選択する、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
植物を、Ａ．インカルナタ、Ａ．クラサビカ、Ａ．シリアカ及びＡ．ツベロサよりなる群から選択する、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
溶媒を、水、アルコール、アルカン類、ハロカーボン類、エーテル類、芳香族溶媒、ケトン類、水性溶媒系及び超臨界液体よりなる群から選択する、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
抽出生成物が、下記式(Ｉ)に従う化合物を含む、請求項７に記載の方法：
【化４】
2007532553.tif 000015
(式中、Ｒ1は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ2は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ4は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ5は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ6は、水素、Ｃ1〜Ｃ18部分、又は糖質部分であり；そして、
点線は、随意の二重結合を表す)。
【請求項１３】
抽出生成物が、下記式(ＩＩ)に従う化合物を含む、請求項７に記載の方法：
【化５】
2007532553.tif 000016
(式中、Ｒ1は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ4は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ5は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ6は、水素、Ｃ1〜Ｃ18部分、又は糖質部分であり；そして、
点線は、随意の二重結合を表す)。
【請求項１４】
抽出生成物が、下記式(ＩＩＩ)に従う化合物を含む、請求項７に記載の方法：
【化６】
2007532553.tif 000017
(式中、Ｒ1は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ2は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ4は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ6は、水素、Ｃ1〜Ｃ18部分、又は糖質部分であり；そして、
点線は、随意の二重結合を表す)。
【請求項１５】
食欲を抑制する方法であって、下記：
治療上有効な量の、トウワタ属植物の植物物質の抽出生成物を含む組成物を個体に投与する
ことを含む当該方法。
【請求項１６】
植物物質を、葉、茎、花、果実、種子及び根よりなる群から選択する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
植物を、Ａ．インカルナタ、Ａ．クラサビカ、Ａ．シリアカ及びＡ．ツベロサよりなる群から選択する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
抽出生成物が、下記式(Ｉ)に従う化合物を含む、請求項１５に記載の方法：
【化７】
2007532553.tif 000018
(式中、Ｒ1は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ2は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ4は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ5は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ6は、水素、Ｃ1〜Ｃ18部分、又は糖質部分であり；そして、
点線は、随意の二重結合を表す)。
【請求項１９】
抽出生成物が、下記式(ＩＩ)に従う化合物を含む、請求項１５に記載の方法：
【化８】
2007532553.tif 000019
(式中、Ｒ1は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ4は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ5は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ6は、水素、Ｃ1〜Ｃ18部分、又は糖質部分であり；そして、
点線は、随意の二重結合を表す)。
【請求項２０】
抽出生成物が、下記式(ＩＩＩ)に従う化合物を含む、請求項１５に記載の方法：
【化９】
2007532553.tif 000020
(式中、Ｒ1は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ2は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ4は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ6は、水素、Ｃ1〜Ｃ18部分、又は糖質部分であり；そして、
点線は、随意の二重結合を表す)。
【請求項２１】
個体が、哺乳動物である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２２】
個体が、肥満であるか又は肥満関連疾患を有する、請求項１５に記載の方法。
【請求項２３】
肥満関連疾患を、ＩＩ型糖尿病、高コレステロール血症及びメタボリックシンドロームよりなる群から選択する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
個体が、腹部肥満、アテローム発生性異脂肪血症、高血圧、インスリン抵抗性、グルコース不耐性、前炎症状態、及び前血栓症状態よりなる群から選択する少なくとも一つの危険因子を有する、請求項２３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、植物性起源から得られる食欲抑制性組成物に関するものである。一層詳細には、この発明は、トウワタ属植物の抽出物を含む食欲抑制性組成物、食欲抑制性組成物の製造方法、及び個体の食欲を抑制する方法に関係する。
【背景技術】
【０００２】
肥満した成人は、近年、有意に増加している。例えば、最近の報告は、米国人の約６４％が太りすぎであり、３０％より多くが肥満であると評価している[米国食品医薬品局、米国保健社会福祉省、２００４年３月１２日発表]。同様の報告は、不健康なダイエットと動かないことが、米国人の予防可能な死亡の主因となろうとしていることを示唆している。従って、肥満及び肥満関連疾患例えばＩＩ型糖尿病、高コレステロール血症、及び／又はメタボリックシンドローム(シンドロームＸとしても知られている)は、現代社会にとって重大な問題である[Han等、Obesity Research, 10(9):923-931 (2002)；Borow, New England J. of Med., 348(21):2057-2058 (2003)も参照されたい]。
【０００３】
メタボリックシンドロームは、それ自体、病気ではなく、腹部肥満、アテローム発生性異脂肪血症、高血圧、インスリン抵抗性、グルコース不耐性、前炎症状態、及び前血栓症状態などの危険因子が一個人に集中的に存在するものである[Grundy等、Circulation, 109(3):433-8 (2004)]。かかる危険因子の少なくとも一つ(特に、３つ以上)が存在する場合には、その個人は、糖尿病、心臓病、及び／又は脳卒中を含む様々な病気の増大した危険を有している。メタボリックシンドロームを有する個人は又、他の病気例えば多嚢胞性卵巣症候群、脂肪肝、コレステロール胆石、喘息、睡眠障害、及びある種の癌になり易い。殆どの開業医は、体重減少をメタボリックシンドロームを治療するための第一の「療法」と考えている。体重減少は又、肥満及び肥満関連疾患(II型糖尿病及び高コレステロール血症を含むが、これらに限られない)を治療するための効果的な療法とも考えられている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
それ故、食欲は、肥満及び肥満関連疾患を治療するための標的足りうる一つの重要な調節経路である[Marx, Science, 299(5608):846-849 (2003)も参照されたい]。食欲を抑制することのできる幾つかの配合物は、市販されている。多くのかかる公知の食欲抑制性配合物は、麻黄及びカフェインの混合物を含む[Bents, Annals of Internal Medicine, 138(6):468-471 (2003)]。かかる混合物を含む食欲抑制性配合物は有効ではあるが、麻黄投与には、潜在的に有害な副作用が、特に刺激物例えばカフェインと共に用いた場合に伴う[米国食品医薬品局、米国保険社会福祉省、２００３年２月２８日発表]。前述の潜在的に有害な副作用の故に、米国食品医薬品局は、麻黄を含む食事サプリメントの販売を禁止した[米国食品医薬品局、米国保険社会福祉省、２００４年２月６日発表]。従って、一層安全な食欲抑制性配合物が必要とされている。
【０００５】
Van Heerden等の米国特許第６，３７６，６５７号は、ステロイド化合物を含む食欲抑制性組成物を開示している。これらの食欲抑制性組成物は、トリコカウロン及びフーディア属の砂漠の多肉植物(例えば、フーディア・ゴルドニー)に由来する。同様に、国際特許公開Ｎｏ．ＷＯ０３／０４１７２７は、スタペリア及びオルベア属の砂漠の多肉植物に由来する食欲抑制活性を有する組成物を開示している。かかる砂漠の多肉植物は、乾燥又は半乾燥地域に自生しており、それ故、それらを繁殖及び培養するのを極めて困難にする仕方で水を貯えるように適応している。例えば、かかる多肉植物は、典型的には、硬く重々しくクチン化した外表面の葉を少数有し、内部植物組織からの蒸発を最少にしている。一層特に、フーディア・ゴルドニー植物は、成熟するのに５年近くかかり、一ヵ月に(植物当たり)約０．２グラムの新しい植物物質しか産生せず、有意の領域を占める(植物当たり約５００平方センチメートル(ｃｍ2)を超える)。従って、フーディア・ゴルドニー植物は、一年に、１平方メートル当たり約４３グラムの新しい植物物質しか産生することができない。それ故、前述の植物は、食欲抑制性組成物の満足できる起源を与えない。
【０００６】
ガガイモ科の植物は、トウワタ属並びに多様な属例えばトリコカウロン、フーディア、スタペリア、及びオルベアを含んでいる。同じ植物の科に属する植物属の間の多様性は、周知である。かかる多様性は、しばしば、植物により産生される化学化合物によって示される。例えば、ナス科植物は、ニコチアナ・タバクム(タバコ)及びリコペルシコン・エスクレンタム(トマト)を包含し、タバコ植物は、ニコチンを産生するが、トマト植物は、産生しない。
【０００７】
トウワタ属は、ヒト及び家畜の死を引き起こしうる有害な毒性強心配糖体を含みうる約７５種の非多肉の「乳液を分泌する草物」を含むガガイモ科に属する植物の属である[米国農務省、天然資源保護局、植物案内、Butterfly Milkweed, ２００１年１月１７日]。かかるトウワタ植物は、しばしば、幾つかの種の蝶の芋虫の食物起源として成長する。これらの毒性の強心配糖体は、これらの蝶の幼虫内に蓄積して該蝶をいやな味にし、それにより、捕食者に対して有効な化学的防御を与えている。トウワタ属の植物例えばアスクレピアス・ツベロサに由来する組成物は、胸及び上気道上部の感染症の治療に用いられてきた[Physicians' Desk Reference for Herbal Medicines, 第二版、598-599 (2000)]。報告が、アスクレピアス・ツベロサに由来する組成物が、抗炎症性及び／又は抗痙攣性有することを示唆しても、前述の呼吸器系の病気の治療におけるそれらの効力は、科学的に確認されたものではない[Physicians' Desk Reference website, Pleurisy Root (2004)]。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
発明の概要
この発明は、個体における食欲の抑制のための組成物及び方法を提供する。開示された方法を利用して、肥満であり且つ／又は肥満関連疾患を患っている個体を治療することができる。
【０００９】
この発明の一つの面は、植物起源に由来する組成物を提供する。開示された植物性組成物は、有意の食欲抑制活性を有し、それ故、個体における食欲を抑制することができる。有利には、これらの開示した食欲抑制性組成物は、容易に栽培できる、非多肉性の、トウワタ属の植物に由来する。従って、この発明のこの面の一具体例において、これらの食欲抑制性組成物は、トウワタ属の植物の抽出生成物を含む。
【００１０】
この発明の他の面は、食欲抑制性組成物の製造方法であって、トウワタ属の植物の植物物質を用意し、その植物物質を溶媒と接触させ、それにより、食欲抑制性組成物を単離することを含む当該製造方法を提供する。これらの方法は、植物物質を例えば破砕し、浸解し、或は粉砕することによって破壊する工程を含みうる。
【００１１】
更なる面において、この発明は、食欲を抑制する方法であって、治療上有効な量のトウワタ属植物の抽出生成物を含む組成物を個体に投与することを含む当該方法を提供する。この発明の方法は、個体の食欲を、適度に且つ安全に減少させるために用いられてきた。
【００１２】
尚更なる面において、この発明は、肥満又は肥満関連疾患を治療する方法であって、治療上有効な量のトウワタ属植物の抽出生成物を含む組成物を個体に投与することを含む当該方法を提供する。
【００１３】
図面の簡単な説明
これらの開示した食欲抑制性組成物の目的、特徴及び利点は、下記の記載を、この発明の方法及び組成物により処理した動物の食物摂取を対照用動物と比較して示した単独の図面と共に読むことにより明確となろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
発明の詳細な説明
この発明は、トウワタ属植物の抽出生成物を含む組成物が、有意の食欲抑制活性を有することを示す。この発明による抽出生成物を含む如何なる組成物(例えば、溶液又は乾燥調製物)も、食欲を抑制するための自然の代替物として利用することができ、それにより、個体における体重喪失と、一層良好な健康レベルを促進する。
【００１５】
従って、開示した食欲抑制性組成物は、個体における食欲を効果的に抑制し、阻害し、低下させ、或は縮小させるために投与することができる。それ故、これらの食欲抑制性組成物は又、体重を制御し、又は肥満もしくはII型糖尿病、高コレステロール血症、及びメタボリックシンドロームを含む(但し、これらに限定されない)肥満関連疾患を治療するために個体に投与することもできる。
【００１６】
ここで用いる場合、「食欲抑制性」は、食物を無制限に(又は、同等のスケジュールで)摂取させた場合の、統計的に有意で検出可能又は測定可能な食物摂取の減少を指す。
【００１７】
ここで用いる場合、用語「抽出生成物」は、植物物質の抽出物から得られ、単離され、及び／又は誘導された任意の化合物、任意の薬剤、及び／又はそれらの混合物を指す。用語「植物物質」は、葉、茎、花、果実、種子、根、及びこれらの組合せを含む(但し、これらに限られない)任意の植物物質を指す。他の具体例において、この植物物質は、植物の地上部分のみを含む。
【００１８】
典型的には、これらの食欲抑制性組成物は、トウワタ属の植物の抽出生成物を含む。有利には、トウワタ属の植物は、栽培及び繁殖が容易であり、植物物質の優れた起源を提供する。その上、トウワタ属植物は、高含量の食欲抑制性化合物を有している。
【００１９】
ここで用いる場合、用語「容易に栽培できる」は、発芽させるのが比較的容易であり、病原体に対して適度に抵抗性であり、慣用の栽培の実施によく応答し、有意な量の植物物質を産生し、そして野外で一成長シーズン中に(又は、温室中で、一年間に)多数の作物を生産することのできる植物を指す。かかる性質を有する植物は、伝統的に知られており、市販されている野菜作物を含む。この発明の一面において、容易に栽培できる植物は、約一年未満で、好ましくは約半年未満で、一層好ましくは約１／４年で、種子から成熟期まで成長する植物である。他の面において、容易に栽培できる植物は、植物あたり、一ヵ月で、新鮮な植物物質を、約０．５グラムより多く、好ましくは約１．０グラムより多く、一層好ましくは約１．５グラムより多く、更に一層好ましくは約２．０グラムより多く提供することのできる植物である。更に別の面において、容易に栽培できる植物は、植物当たり、約２５ｃｍ2未満、好ましくは約１５ｃｍ2未満、一層好ましくは約１０ｃｍ2の面積を占める植物である。更なる面において、容易に栽培できる植物は、一年間で、１平方メートル当たり、約５００グラムより多くの、好ましくは約１．０キログラムより多くの、一層好ましくは約１．５キログラムより多くの、尚一層好ましくは約２．０キログラムより多くの新鮮な植物物質を与えることのできる植物である。
【００２０】
この発明のトウワタ属植物には、Ａ．インカルナタ、Ａ．クラサビカ、Ａ．シリアカ、及びＡ．ツベロサが含まれるが、これらに限られない。典型的には、これらの植物を、Ａ．インカルナタ、Ａ．クラサビカ、及びＡ．シリアカよりなる群から選択する。
【００２１】
ここに示したように、トウワタ植物は、食欲抑制活性を有する化合物及び／又は薬剤(「食欲抑制性化合物」)を産生する。トウワタ植物(及び開示した食欲抑制性組成物)の食欲抑制活性は、一般に、下記式Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩに従う一種以上の食欲抑制性化合物の存在に帰せられる：
【化１】
2007532553.tif 000002
【化２】
2007532553.tif 000003
【化３】
2007532553.tif 000004
(式中、Ｒ1は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ2(存在する場合)は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ4は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ5(存在する場合)は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ6は、水素、Ｃ1〜Ｃ18部分、又は糖質部分であり；そして、
点線は、随意の二重結合を表す)。
【００２２】
ここで用いる場合、用語「Ｃ1〜Ｃ18部分」は、１〜１８炭素原子を含む。典型例には、ここで規定したアルキル、アルキレン、ヘテロアルキル、アルケニル、アシル、及びアリール基が含まれる。当然、幾つかの具体例において、個々の置換基は、上述の用語の一つより多くによって記載されうる。
【００２３】
「アルキル」は、ここで用いる場合、１８個以下の炭素原子(例えば、１〜１０、及び１〜８炭素原子)を含む直鎖及び分枝鎖炭化水素基を含む。
【００２４】
「アルキレン」は、ここで用いる場合、一つ以上の置換基を更に含むアルキル基(規定したもの)を指す。
【００２５】
加えて、「ヘテロアルキル」は、ここで用いる場合、ヘテロ原子例えばＯ、Ｐ、Ｓ又はＮを更に含むアルキル基を指す。
【００２６】
「アルケニル」は、ここで用いる場合、少なくとも一つの炭素−炭素二重結合を更に含むアルキル基を指す。
【００２７】
「アシル」は、ここで用いる場合、下記の化学式Ａを有する置換基を指す：
【化４】
2007532553.tif 000005
(式中、Ｒ'''は、上で規定した部分であるが、１〜１７炭素原子を含んでいる)。好適具体例において、Ｒ'''は、アリール及びアルキレン、特にアルキレンアリール(即ち、アリール置換基を有するアルキレン基)よりなる群から選択される。代表的なアシル基には、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、ベンゾイル、トルオイル、フェニルアセチル、チグロイル、及びシンナモイルが含まれる。幾つかの具体例において、Ｒ1は、好ましくは、アシル基(詳細には、ベンゾイル、チグロイル、又はシンナモイル)である。幾つかの具体例において、アシル基は、下記のように、ヘテロ原子を含むアリール基を含む。
【００２８】
用語「アリール」は、ここでは、単環式又は多環式芳香族基(好ましくは、単環式又は二環式芳香族基、例えば、フェニル又はナフチル)として規定される。「アリール」基は、置換されてなくても、例えば一つ以上(特に、１〜３個の)ハロ、アルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、ハロアルキル、ニトロ及び／又はシアノ置換基で置換されていてもよい。このアリール基は又、少なくとも一つのヘテロ原子例えばＯ、Ｐ、Ｓ又はＮを含むこともできる。
【００２９】
用語「糖質部分」は、ここで用いる場合、ペントース、ヘキソース、ヘプトース、又はオクトース糖類、これらの類似体又は誘導体(デオキシ糖類、ジデオキシ糖類、アミノ糖類、及び糖酸類を含むが、これらに限られない)を指す。この用語は、二糖類、オリゴ糖類、及び多糖類(これらは、２個以上の糖がグリコシド結合により結合された糖よりなる)を包含する。
【００３０】
式Ｉ、ＩＩ及びＩＩＩに従う食欲抑制性化合物は、下記式ＩＶに従う食欲抑制性化合物を包含する：
【化５】
2007532553.tif 000006
(式中、Ｒ2(存在する場合)は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ4は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ5(存在する場合)は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；そして、
Ｒ6は、水素、Ｃ1〜Ｃ18部分、又は糖質部分である)。
【００３１】
式Ｉ、ＩＩ及びＩＩＩに従う食欲抑制性化合物には、下記式Ｖに従う食欲抑制性化合物も含まれる：
【化６】
2007532553.tif 000007
(式中、Ｒ2(存在する場合)は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ4は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；
Ｒ5(存在する場合)は、水素又はＣ1〜Ｃ18部分であり；そして、
Ｒ6は、水素、Ｃ1〜Ｃ18部分、又は糖質部分である)。
【００３２】
式ＩＶ及びＶは、共に、ヒドロキシル又はアルコキシ置換基を共にＣ１７位(即ち、ＯＲ2)及びＣ８位(ＯＲ5)に含んで示されているが、式ＩＶ及びＶは又、ヒドロキシル又はアルコキシ置換基をＣ１７位に含まない食欲抑制性化合物(上記の式ＩＩに示した通り)、及びヒドロキシル又はアルコキシ置換基をＣ８位に含まない食欲抑制性化合物(上記の式ＩＩＩに示した通り)をも包含している。
【００３３】
式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ及び／又はＶに従う食欲抑制性化合物は、ステロイド化合物である。一具体例において、これらのステロイド化合物は、プレグナン配糖体である(即ち、Ｒ6は、糖質部分である)。他の具体例において、これらのステロイド化合物は、プレグナンアグリコンである(即ち、Ｒ6は、水素である)。
【００３４】
この発明の前には、有意の食欲抑制活性を有する抽出物であって容易に栽培できる植物起源から得られるものは、利用可能とされていない。Ａ．ツベロサから得られたステロイド骨格を有する特定の化合物の開示[Abe等、Chem.Pharm.Bull.(Tokyo)48(7):1017-1022 (2000)]にもかかわらず、食欲抑制活性を有するトウワタ属の抽出生成物の如何なる開示も示唆もされていない。その上、式Ｉ及びＩＩＩ(及びときに式ＩＶ及びＶ)は、酸素部分をＣ１７位(即ち、ＯＲ2)に含み、これは、Abe及び／又は米国特許第６，３７６、６５７号に開示されたステロイド化合物中には存在していない。国際特許公開Ｎｏ．ＷＯ０３／０４１７２７は、ヒドロキシル基をＣ１７に有するステロイド化合物を開示しているが、国際特許公開Ｎｏ．ＷＯ０３／０４１７２７は、ヒドロキシルとカルボキシル基を、上記の式Ｉ及びＩＩＩ(及びときに式ＩＶ及びＶ)に示したように、Ｃ１７位で合わせることは、開示も示唆もしていない。
【００３５】
同様に、式Ｉ及びＩＩ(及びときに式ＩＶ及びＶ)は、酸素部分をＣ８に含み(即ち、ＯＲ5)、これは、米国特許第６，３７６，６５７号に開示されたステロイド化合物中には存在しない。Abe及び国際特許公開Ｎｏ．ＷＯ０３／０４１７２７は、ヒドロキシル基をＣ８位に有するステロイド化合物を開示しているが、これらの文献は、ヒドロキシルとカルボキシル基を、式Ｉ及びＩＩＩ(及びときに式ＩＶ及びＶ)に示したように、Ｃ１７位で合わせることは、開示も示唆もしていない。
【００３６】
かかる差異は、実質的に異なる活性を生じうる。例えば、一つの糖残基だけが異なる強心配糖体は、例えば分配係数により測定して、実質的に異なる薬物速度論を有する[Desai, 「Cardiac Glycosides」、Virginia Commonwealth University website, 2000]。
【００３７】
これらの開示した食欲抑制性組成物は、典型的には、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、及び／又はＶに従う食欲抑制性化合物の混合物を含む。従って、この発明は、相加的(又は、好ましくは相乗的)効果を示しうる混合物を企図している。
【００３８】
トウワタ属植物は、周知の方法により成長されて収穫される。例えば、これらの植物は、農地で成長させることができる。一層好ましくは、これらの植物は、環境的に制御された水栽培用温室内で標準的水耕法を用いて成長される。水耕法は、植物生育条件の再現可能な最適化を容易にし、それ故、食欲抑制性化合物含有量の最大化を容易にする。水耕法は又、植物の収穫をも容易にする。加えて、制御された生育条件は、任意の最終生成物の標準化を容易にする点において有利である。
【００３９】
これらの植物を成長させる条件は又、食欲抑制性化合物の含量にも影響を与えうる。特に、ストレス(例えば、熱ストレス、脱水、物理的傷、及び／又は化学的誘導因子への曝露)状態に置かれた植物は、かかる状態に置かれていない植物より高い食欲抑制性化合物含量を有すると予想される。如何なる伝統的に公知の化学的誘導因子でも、公知の適用スケジュールに従って、トウワタ属植物の栽培中に利用することができる。
【００４０】
前に記載のように、これらのステロイド化合物は、典型的には、トウワタ属植物の植物物質を抽出することにより単離される。葉、茎、花、果実、根、及びこれらの組合せを含む任意の植物物質を抽出することができる。一具体例においては、上記の地上植物部分を抽出する。他の具体例では、植物の根を用いる。
【００４１】
この発明の食欲抑制性化合物のトウワタ属植物からの高い収率を得るための一つの典型的な抽出方法は、次のステップを含む：(１)新鮮な又は新鮮な凍結させた植物物質を容易し；(２)その植物物質を破砕し；そして(３)その植物物質を、十分量の溶媒を含む溶液中で抽出し；そして(４)その抽出物を単離する。この抽出物は、更に：(５)固体物質をその抽出物から除去し；(６)溶媒成分を除去し；(７)その結果の残留物を水溶液に再懸濁させ；そして(８)如何なる水不溶性物質をも除去した後に、ステップ(６)を反復して一層精製された形態の抽出生成物を形成することによって処理することができる。様々な具体例において、この植物物質は、浸解、粉砕により、或は植物物質を破砕することにより破砕することができる。
【００４２】
好適具体例において、新鮮な植物組織は、液体窒素中で急速に凍結させてから粉砕或は溶媒中で浸解する(例えば、ポリトロン又はワーリングブレンダーを用いて)。この抽出物から固体を、例えば濾過、遠心分離、又は他の当分野で公知の方法によって除去した後で、該抽出物の食欲抑制性化合物含量を、適宜、分光測光法を含む任意の公知の方法によって測定することができる。
【００４３】
この発明の抽出方法における利用のための溶媒には、周知の有機溶媒例えば水、アルコール、アルカン類、ハロカーボン類、エーテル類、芳香族溶媒、ケトン類、水性溶媒、エステル類、及び超臨界液体が含まれるが、これらに限られない。一具体例において、エタノールは、この発明の実施に好適なアルコールである。最終的抽出ステップにエタノール性溶媒を組み込む利益は、エタノール性溶媒は、摂取可能な生成物と相溶性であり、それ故、丸薬、カプセル、錠剤、及び他の当分野で公知の摂取可能な形態への組込みに適していることである。
【００４４】
トウワタ属抽出生成物を含む組成物は、錠剤化し、カプセル封入し又は別の方法で経口投与用に配合することができる(例えば、ガム又はキャンディー)。これらの組成物は、医薬組成物(例えば、要指示薬)、ニュートラシューティカル組成物(例えば、食事サプリメント)として、又は食品若しくは飲料添加物(米国食品医薬局により規定)として提供することができる。
【００４５】
これらの組成物は、典型的には、少なくとも一種の適当な希釈剤、充填剤、塩、崩壊剤、結合剤、潤滑剤、流動促進剤、湿潤剤、制御された放出用のマトリクス、着色料、調味料、キャリアー、賦形剤、緩衝剤、安定剤、可溶化剤、市販の補助剤、及び／又は他の当分野で公知の添加剤を含む。
【００４６】
製薬ビヒクル、賦形剤、又は媒質として役立つ任意の製薬上許容しうる(即ち、当分野で公知の、無菌で、許容可能に非毒性の)液体、半固体、又は固体希釈剤を用いることができる。典型的な希釈剤には、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、マグネシウムステアレート、カルシウムホスフェート、鉱油、カカオバター、及びカカオ脂、メチル及びプロピルヒドロキシベンゾエート、タルク、アルギネート、炭水化物、特にマンニトール、α−ラクトース、無水ラクトース、セルロース、シュークロース、デキストロース、ソルビトール、改変デキストラン、アラビアゴム、及び澱粉が含まれるが、これらに限られない。かかる組成物は、本発明の食欲抑制性化合物の物理的状態、安定性、イン・ビボ放出速度、及びイン・ビボクリアランスに影響を与えうる。
【００４７】
製薬上許容しうる充填剤には、例えば、ラクトース、微晶質セルロース、二カルシウムホスフェート、三カルシウムホスフェート、硫酸カルシウム、デキストロース、マンニトール、及び／又はシュークロースが含まれる。カルシウムトリホスフェート、炭酸マグネシウム、及び塩化ナトリウムを含む塩も又、これらの医薬組成物における充填剤として用いることができる。
【００４８】
結合剤は、この抽出生成物を含む組成物を硬い錠剤を形成するように支持するために利用することができる。典型的な結合剤には、天然産物に由来する物質例えばアラビアゴム、トラガカントゴム、澱粉及びゼラチンが含まれる。他の適当な結合剤には、メチルセルロース(ＭＣ)、エチルセルロース(ＥＣ)及びカルボキシメチルセルロース(ＣＭＣ)が含まれる。
【００４９】
実施例３及び４の両方に示したように、この発明の方法は、適度且つ安全に、食欲を減少させて食物消費の低下を生じさせるために用いられてきた。これらの食欲を抑制する方法は、個体に、治療上有効な量のトウワタ属植物の植物物質の抽出生成物を含む組成物を投与することを含む。
【００５０】
他の具体例において、この発明は、肥満又は肥満関連疾患を治療する方法であって、治療上有効な量のトウワタ属植物の植物物質の抽出生成物を含む組成物を個人に投与することを含む当該方法を提供する。肥満及びＩＩ型糖尿病、高コレステロール血症、及びメタボリックシンドロームを含む(但し、これらに限られ内)肥満関連疾患は、治療が企図される。一つの面において、この個人は、腹部肥満、アテローム発生性異脂肪血症、高血圧、インスリン抵抗性、グルコース不耐性、前炎症状態、及び前血栓症状態よりなる群から選択する少なくとも一つの危険因子を有している。
【００５１】
ここで用いる場合、「腹部肥満」は、増大したウエスト周囲を有する個人を指し、典型的には、約４０インチ(１０２センチメートル)より大きいウエストを有する男性及び約３５インチ(８９センチメートル)より大きいウエストを有する女性に存在する。別の面において、腹部肥満は、約２５を超える、一層典型的には約３０を超えるボディマス指数(即ち、[個人の体重(ポンド)／個人の身長(インチ)2×７０３])を有する個人を指す。
【００５２】
「アテローム発生性異脂肪血症」は、個体における上昇したトリグリセリド濃度(血清濃度≧１５０ｍｇ／ｄＬ)及び／又は低下した高密度リポタンパク質コレステロール濃度(男性で血清濃度≦４０ｍｇ／ｄＬ又は女性で血清濃度≦５０ｍｇ／ｄＬ)を指す。
【００５３】
「高血圧」は、約１３０ｍｍＨｇを超える収縮期圧及び／又は約８５ｍｍＨｇを超える心弛緩期圧を有する個体を指す。
【００５４】
「インスリン抵抗性」は、所定濃度のインスリンが、期待されるより小さい効果を生じる状態を指す。インスリン抵抗性は、一般に、グリセリン制御及びケトン症の予防のために、一日当たり２００単位以上のインスリンを必要とする個体を指す。
【００５５】
「グルコース不耐性」は、約１００ｍｇ／ｄＬを超える。血清グルコース濃度を有する個体を指す。
【００５６】
ここで用いる場合、「前炎症状態」は、上昇したＣ反応性タンパク質濃度を指し、「前血栓症状態」は、一般に知られているように、健康な個体と比較して増大したプラスミノーゲンアクチベーターインヒビター(ＰＡＩ)−１及びフィブリノーゲンレベルを指す。
【００５７】
従って、一具体例において、用語「治療上有効な量」は、個体における食欲を低下させ、減少させ及び／又は阻害するのに十分なトウワタ属抽出生成物を含む組成物の量を指す。別の具体例においては、用語「治療上有効な量」は、肥満又は肥満関連疾患例えばＩＩ型糖尿病、高コレステロール血症及び／又はメタボリックシンドロームと関係する状態の症状及び／又は病状を緩和し、改善し、防止し、及び／又は取り除くのに十分なトウワタ属抽出生成物を含む組成物の量を指す。
【００５８】
この発明の方法は、症状が明らかであってもなくても、トウワタ属抽出生成物を含む組成物を投与することを企図している(即ち、予防的投与を企図している)。シブトラミン及びオルリスタットなどの体重喪失用治療剤の好適投薬量は、様々な治療及び予防目的ために、当分野で公知であるので、この発明の食欲抑制性組成物の適当な投薬量は、標準的方法によって、容易に決定することができる。
【００５９】
これらの方法は、単独で用いることもできるし、又は例えば他の治療剤(他の食欲抑制性組成物又は配合物)の投与及び／若しくは運動プログラムを含む他の療法と共に用いることもできる。
【００６０】
この発明の治療方法が、ヒトの医学及び獣医学の分野において有用であることは、認められよう。従って、治療すべき患者又は個体は、哺乳動物好ましくはヒトであってもよいし、他の動物であってもよい。獣医学目的に関して、患者には、例えば、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ及びヤギなどの家畜；イヌ及びネコなどの家庭動物；外来動物及び／又は動物園の動物；マウス、ラット、ウサギ、モルモット及びハムスターを含む研究室動物；並びにニワトリ、七面鳥、アヒル及びガチョウなどの家禽類が含まれる。
【００６１】
この発明の方法において、食欲抑制性組成物は、任意公知の投与経路によって投与することができる。例えば、トウワタ属植物の抽出生成物を含む組成物は、注射用に配合することもできるし、又は経口投与、鼻投与、経皮投与又は他の形態の投与のために配合することもできる。典型的には、これらの食欲抑制性組成物は、局所投与、経口投与、又は鼻投与のために配合され、特に経口投与用に配合される。幾つかの具体例において、これらの食欲抑制性組成物は、非毒性アルコール又は水溶液を利用して調製される。
【００６２】
典型的な治療過程は、かなりの期間(例えば、３ヵ月)にわたって、個体における食欲を抑制するのに有効な量のトウワタ属抽出生成物を含む組成物の、多数回の日々の投与(例えば、毎日３回)を含むことができる。一具体例において、現在好適な投与量は、一日一回の投与である。これらの組成物は、個体に、任意の時点で投与することができる。典型的には、これらの組成物は、食物の消費が予想される少なくとも１時間前に投与される。
【００６３】
当然、これらは、単に、典型的な治療スケジュールであって、他のシュケジュールも企図される。各症例において、かかるスケジュール及び前述の投与様式の適否は、当業者によって、日常的手順を用いて決定される。例えば、当業者は、この明細書に開示された情報を得て、ヒト患者の治療養生法を、この明細書に従って行なった臨床的試みに基づいて、最適化することができるであろう。
【００６４】
下記の実施例は、この発明を一層詳細に記載するために与えるものであり、添付の請求の範囲を説明することを意図しており、制限することを意図するものではない。
【実施例】
【００６５】
実施例１
トウワタ属植物物質を抽出する方法
トウワタ属植物物質を抽出し、それにより、抽出生成物を含み且つ食欲抑制活性を有する組成物を提供するための２つの典型的方法を記載する。第一の抽出方法は、プレグナン配糖体に富む抽出生成物を与える。第二の抽出方法は、おそらく、例えば、上記の式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ及びＶのＲ6により表される糖質部分の加水分解の故に、プレグナンアグリコンに富む抽出生成物を与える。加えて、両プロトコールを利用して得られた抽出物を、液体クロマトグラフィー質量スペクトル分析(「ＬＣ−ＭＳ」)によって分析して、これらの抽出生成物を含む組成物に関する更なる情報を与えた。
【００６６】
第一の方法において、水耕法で生育させた新鮮な根物質を、−２０℃で凍結させた。この凍結させた根物質を、乾燥するまで、４８時間にわたって凍結乾燥した。その乾燥した根物質を乳鉢と乳棒によって粉砕した。次いで、１０グラムの根物質を、０．５リットルの塩化メチレンとメタノールの混合物(容積で約１部のメタノールに対して約１部の塩化メチレン)中で、２４時間にわたって抽出した。固体の植物物質をＭｉｒａｃｌｏｔｈ(商標)濾紙による濾過によって除去し、残っている溶媒を、減圧下で、３８℃の水浴を有する回転蒸発装置を用いて除去した。この乾燥させた粗抽出物を、２５０ミリリットル(ｍｌ)の超純水に溶解させて、０．５リットルの塩化メチレンに対して分配を行なった。この塩化メチレン画分を保存して、溶媒を回転蒸発により除去した。水画分を捨てた。この乾燥抽出物を１５０ｍｌのメタノールに溶解させて、３００ｍｌのヘキサンに対して２回分配を行なった。このメタノール画分の溶媒を回転蒸発により除去した。その結果生成した「活性」画分を、３００ｍｌの水に溶解させて、−２０℃で凍結させ、凍結乾燥を行なって、乾燥粉末形態の抽出生成物を与えた。
【００６７】
第二の方法においては、水耕法で生育させた新鮮な根物質を、−２０℃で凍結させた。この凍結させた根物質を、乾燥するまで、４８時間にわたって凍結乾燥した。その乾燥した根物質を、乳鉢と乳棒により粉砕した。次いで、１０グラムの乾燥根物質を、２４時間にわたって、０．５リットルの１００％エタノール中で抽出した。固体の植物物質を、Ｍｉｒａｃｌｏｔｈ(商標)濾紙による濾過により除去し、残っている溶媒を、この抽出物から、３８℃の水浴を有する回転蒸発装置を用いて除去した。この乾燥抽出物を、０．５リットルの０．５Ｎ ＨＣｌに２４時間にわたって溶解させた。固体植物物質を、同濾紙による濾過により除去した。この溶液のｐＨを２０〜２２％の水酸化アンモニウム(約４５ｍｌ)により、約９．５に調節した。この塩基性溶液に、１．０リットルのクロロホルムを加えた。クロロホルム画分を分離して、そのクロロホルムを回転蒸発装置を用いて除去した。この乾燥生成物を、−２０℃で保存した。
【００６８】
１キログラムの新鮮な植物物質当たり約２重量パーセントの食欲抑制性抽出生成物が得られる(即ち、１キログラムのトウワタ属植物物質当たり２０グラムの抽出生成物)。この抽出生成物の更なる精製(例えば、クロマトグラフィー法による)は、この食欲抑制性抽出生成物の効力を増大させ且つ／又は個体において効果的に食欲を抑制するのに必要な投与量を低下させることができた。
【００６９】
実施例２
プレグナン構造の単離と同定
この発明の抽出生成物を含む組成物を分析して、それらがプレグナンステロイド化合物を含むかどうかを測定した。ＬＣ−ＭＳ分析は、式Ｉ、ＩＩ及び／又はＩＩＩに従うプレグナン構造が、実施例１の典型的抽出法により調製したＡ．インカルナタ及びＡ．クラサビカの抽出生成物中に存在することを確認した。
【００７０】
この実施例は、更に、この発明の組成物が、典型的には、プレグナンの配糖体とアグリコンの混合物を含むことを示す。例えば、ＨＰＬＣ分画を、実施例１の第二の抽出方法により調製したＡ．クラサビカの抽出生成物について行なった。その結果生成したピークの幾つかに対応する画分のその後の分析は、２つのプレグナン主鎖の構造同定へと導いた。ＭＳ分画パターン及び／プロトン及び炭素１３ＮＭＲ実験を用いて、特定のプレグナン主鎖を同定した。
【００７１】
実施例３
食欲抑制性組成物のラットへの投与及び
測定されたラットの摂食行動に対する効果
３つの研究を行なって、この発明の抽出生成物を含む組成物の動物被験者に対する食欲抑制活性を評価した。動物研究を、実施例１の第一の抽出方法により調製したＡ．インカルナタの抽出生成物を用いて行なった。
【００７２】
研究１：
９匹の体重約４００グラムのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを粉末食餌(保証されたゲッ歯類用粉餌＃５００２Ｍ、PMI Nutrition Int., インディアナ、Richmond在)で飼育し、３匹ずつ３つの群(対照用群、比較用食欲抑制性組成物(即ち、フーディア・ゴルドニー抽出物)を与える群、及びこの発明の抽出生成物を与える群)に分けた。この飼料を食餌がこぼれる量を最少にする特別にデザインされた給餌用容器(シリーズ１４８給餌器、Unifab Crop., ミシガン、Kalamazoo在)により供給した。
【００７３】
処理の２４時間前に、食餌容器の重量及び９匹すべてのラットの体重を測定して、記録した。これらの容器の重量を、処理の直前に再び測定して、投薬前の２４時間にわたる動物の平均食餌消費を与えた。これらの３群の各々に、(１)対照用ビヒクル、(２)フーディア・ゴルドニーの抽出物、又は(３)実施例１の第一の方法の抽出生成物を、開始の０日目(午後３時)に腹腔内注射により与えた。
【００７４】
対照用群には、キャリアー、特に、２重量パーセント(「ｗｔ．％」)のカルボキシメチルセルロース(ＣＭＣ)のみを含む溶液をＩＰ注射で与えた。対照用群には、食欲抑制性組成物を投与しなかった。第二の群には、９０ｍｇのフーディア・ゴルドニー抽出物及び２．０ｗｔ．％ ＣＭＣを含む溶液２ｍｌをＩＰ注射で与えた。第三の群には、１２０ｍｇのトウワタ属抽出生成物及びＣＭＣを含む溶液２ｍｌをＩＰ注射で与えた(該トウワタ属抽出物は、実施例１の第一の抽出方法により調製した)。
【００７５】
フーディア・ゴルドニー抽出物は、フーディア・ゴルドニーの苗条を２４時間にわたって０．５リットルの塩化メチレンとメタノールの１対１混合物中で抽出することにより調製した。この溶媒を除去して、乾燥した粗抽出物を与え、次いで、２５０ミリリットル(ｍｌ)の超純水に溶解させて、０．５リットルの塩化メチレンに対して分配を行なった。この塩化メチレン画分を保存して、溶媒を除去して乾燥抽出物を与えた。この乾燥抽出物を、１５０ｍｌのメタノールに溶解させて、３００ｍｌのヘキサンに対して２回分配を行なった。そのメタノール画分を保存して、溶媒を除去した。その結果生成した乾燥抽出物を、３００ｍｌの水に溶解させて、−２０℃で凍結させ、凍結乾燥して、乾燥粉末を与えた。
【００７６】
様々な食餌容器の重量を、投薬後、約１６時間及び２４時間で測定した。体重も、第１日目の午後３：３５(投与後約２４．５時間)に測定した。この２４時間給餌の研究は、Product Safety Labs (ニュージャージー、Dayton在)で行なった。
【００７７】
表Ｉに示したデータは、この発明の組成物の食欲抑制活性を示している。例えば、対照用群のラットの食欲は、約１７．５パーセントだけ減少したのに、フーディア・ゴルドニー抽出物を含む溶液を与えた群のラットの食欲は、約８７．２パーセントだけ減少し、トウワタ属抽出生成物を含む溶液を与えた群のラットの食欲は、約９３．０パーセント減少した。明らかに、この実施例は、これらの開示した食欲抑制性組成物が有意の食欲抑制活性を有することを示している。
【００７８】
【表１】
2007532553.tif 000008
【００７９】
研究２：
９匹の雄のウィスターラット(各動物は、体重約１５０グラム)を、３匹ずつ、３つの群(対照用群と、この発明の抽出生成物の異なる投与量を与える２つの群)に分けた。これらのラットを、粉末食餌(保証されたゲッ歯類用粉餌＃５００２Ｍ、PMI Nutrition Int., インディアナ、Richmond在)で、投薬前少なくとも２週間飼育した。
【００８０】
Ａ．インカルナタの抽出生成物(実施例１の第一の抽出方法を用いて得たもの)を、蒸留水に懸濁させた。この溶液約１．２５ｍｌを、経口胃管栄養法によりこれらの動物に投与した。対照用群には、１．２５ｍｌの水だけを与えた(即ち、対照用群には、食欲抑制性組成物は投与しなかった)。第二の群には、４０ｍｇのトウワタ属抽出生成物を水中に含む溶液１．２５ｍｌを与えた(トウワタ属抽出生成物は、実施例１の第一の抽出方法により調製した)。第三の群には、６０ｍｇのトウワタ属抽出生成物を水中に含む溶液１．２５ｍｌを与えた(この抽出生成物は、トウワタ属抽出物と同様に調製した)。
【００８１】
食物消費を投薬後２４時間で測定した。この研究は、Ｒｕｔｇｅｒｓ大学のSmall Animal Research Facilities of Cook Collegeで行なった。
【００８２】
表ＩＩに示したデータセットは、更に、この発明の組成物の食欲抑制活性を示している。例えば、４０ｍｇのトウワタ属抽出生成物を含む溶液を与えた群のラットの食欲は、対照用群と比較して約２１．４パーセント減少した。加えて、６０ｍｇのトウワタ属抽出生成物を含む溶液を与えた群のラットの食欲は、対照用群と比較して約４５．１パーセント減少した。それ故、この実施例は、開示した食欲抑制性組成物が有意の食欲抑制活性を有することを示している。
【００８３】
【表２】
2007532553.tif 000009
【００８４】
研究３：
１０匹の雄のウィスターラット(各動物は、体重約３７５グラム)を５匹ずつ２つの群に分けた(対照用群と、この発明の抽出生成物を与える群)。これらのラットを、投薬の少なくとも２週間前から、粉末食餌(保証されたゲッ歯類用粉餌＃５００２Ｍ、PMI Nutrition Int., インディアナ、Richmond在)で飼育した。
【００８５】
実施例１の第一の抽出方法を用いて得られたＡ．インカルナタの抽出生成物を、蒸留水と２．０重量パーセント(ｗｔ．％)のＣＭＣを含む溶液に懸濁させた。対照用群には、ＣＭＣ溶液のみを１．２５ｍｌ与えた(即ち、対照用群には、食欲抑制性組成物を投与しなかった)。第二の群には、１７０ｍｇのトウワタ属抽出生成物を含む溶液１．２５ｍｌを与えた(このトウワタ属抽出生成物は、実施例１の第一の抽出方法により調製した)。
【００８６】
試験物質及び対照は、経口胃管栄養法により送達し、食物消費は、２４時間ごとに４８時間モニターした。すべての動物の食物消費を、投薬前２４時間にわたってもモニターした。この研究は、Ｒｕｔｇｅｒｓ大学のSmall Animal Research Facilities of Cook Collegeで行なった。
【００８７】
表ＩＩＩに示したデータセットは、更に、この発明の組成物の食欲抑制活性を示している。例えば、対照用群のラットの食欲は、２４時間後に、約７．８パーセントだけ増大したのに、トウワタ属抽出生成物を含む溶液を与えた群のラットの食欲は、約２３．７パーセント減少した。更に、対照用群のラットの食欲は、４８時間後に、約１３．１パーセントだけ減少したのに、トウワタ属抽出生成物を含む溶液を与えた群のラットの食欲は、約４３．３パーセント減少した。それ故、この実施例は、開示した食欲抑制性組成物が、有意の食欲抑制活性を有することを示している。
【００８８】
最後に、域外にある動物(群の他の動物と比較して不釣り合いに減少した食欲を有した動物)を、ここに報告した第二群から除いた。それ故、この群の動物数は、４となった。
【００８９】
【表３】
2007532553.tif 000010
【００９０】
研究４：
１５匹の雄のウィスターラット(各動物は、体重約２７０グラム)を５匹ずつ３つの群に分けた(対照用群、食欲抑制性組成物(即ち、フーディア・ゴルドニー抽出物を含む)を与える群、及びこの発明の抽出生成物を与える群)。これらのラットを、投薬の少なくとも２週間前から、粉末食餌(保証されたゲッ歯類用粉餌＃５００２Ｍ、PMI Nutrition Int., インディアナ、Richmond在)で飼育した。
【００９１】
対照用群には、２ｗｔ．％ ＣＭＣ溶液のみを含む溶液０．５ｍｌを与えた(即ち、対照用群には、食欲抑制性組成物を投与しなかった)。第二の群には、２ｗｔ．％ ＣＭＣ及び３０ｍｇのエフェドラフリーのＴｒｉｍ Ｓｐａ(商標)(Ｔｒｉｍ Ｓｐａ(商標)錠剤を、この目的のために粉砕した)を含む溶液０．５ｍｌを与えた。第三の群には、３０ｍｇのＡ．インカルナタ抽出生成物(実施例１の第一の抽出方法により得た)と２ｗｔ．％ ＣＭＣを含む溶液０．５ｍｌを与えた。試験物質及び対照は、経口胃管栄養法により送達した。
【００９２】
ＴｒｉｍＳｐａ(商標)は、フーディア・ゴルドニーを成分として記載している市販のニュートラシューティカル体重喪失用生成物である。これらの錠剤は、約５重量パーセントのフーディア・ゴルドニー植物物質(根を除いた全植物)を含む。
【００９３】
表ＩＶに示したデータセットも又、この発明の組成物の食欲抑制活性を示している。例えば、トウワタ属抽出生成物を与えた群のラットの食欲は、処理の５日後に、対照用群と比較して約４０．３パーセント減少した。更に、この実施例は、開示した食欲抑制性組成物が、市販のフーディア・ゴルドニー植物物質を含む組成物と比較して、有意の食欲抑制活性を有することを示している。
【００９４】
【表４】
2007532553.tif 000011
【００９５】
実施例４
食欲抑制性組成物のラットへの投与及び
ラットの摂食行動に対して測定された効果
研究は又、更なる別の抽出方法が、食欲抑制活性を有する抽出生成組成物を与えるかどうかを決定するためにも行なった。これらの動物研究は、下記の２つの方法により調製したＡ．インカルナタの抽出生成物を用いて行なった。
【００９６】
下記の抽出方法の両方において、水耕法温室を利用して生育させたＡ．インカルナタ植物から得られた根物質を先ず収穫してから、６０日近く凍結保存して、その後、乾燥するまで凍結乾燥した。この凍結乾燥した根物質を、１８０日近く保存した後、下記の２つの抽出方法の一つによって抽出した：
【００９７】
第一の抽出方法において、２００グラムの上記の凍結乾燥した根物質を、２４時間にわたって、２．０リットルの塩化メチレンとメタノールの混合物(容積で、約１部の塩化メチレンに対して約１部のメタノール)中で抽出した。その抽出物を、濾紙を用いて濾過して、残っている溶媒を、減圧下で、回転蒸発装置を用いて除去した。その乾燥した粗抽出物を、１．５リットルの蒸留水に溶解させて、１．５リットルの塩化メチレンに対して分配を行なった。その塩化メチレン画分を保存して、溶媒を回転蒸発により除去した。水画分は捨てた。この乾燥抽出生成物を、１リットルのメタノールに溶解させて、１リットルのヘキサンに対して分配を行なった。そのメタノール画分の溶媒を、回転蒸発により除去した。ヘキサン画分は捨てた。その結果生成した「活性」画分は、３．８グラムのこの発明の抽出生成物を与えた。
【００９８】
第二の抽出方法において、２００グラムの上記の凍結乾燥した根物質を、２４時間にわたって、２．０リットルの９５％エタノール中で抽出した。その抽出物を、濾紙を用いて濾過して、残っている溶媒を、減圧下で、回転蒸発装置を用いて除去した。その乾燥した粗抽出物を、１．５リットルの蒸留水に溶解させて、１．５リットルの酢酸エチルに対して分配を行なった。その酢酸エチル画分を保存して、溶媒を回転蒸発により除去した。水画分は捨てた。その結果生成した「活性」酢酸エチル画分は、４．０グラムのこの発明の抽出生成物を与えた。こうして、第二の抽出方法は、一層大きい抽出生成物収率を生じ、第一の方法と比較して、一層早く且つ一層簡単であった(単一の分配工程しか用いない)。
【００９９】
１５匹の雄のウィスターラット(各動物は、体重約１７６〜２００グラム)を、ランダムに、５匹ずつ、３つの群に分けた(対照用群、この実施例の第一の抽出方法を用いて得られた抽出生成物を与える群、及びこの実施例の第二の抽出方法を用いて得られた抽出生成物を与える群)。これらのラットを、別々に、ケージに入れて、食餌(ＡＩＮ−７６Ａペレット、Dyets Inc., ペンシルベニア、Bethlehem在)と水を無制限に摂らせた。
【０１００】
処理の２４時間前に、食餌容器の重量を、１５匹すべてのラットについて測定して記録した(こうして、食物摂取を測定した)。全１５匹の動物に、２．０ｗｔ．％ ＣＭＣを含む溶液１ｍｌを経口胃管栄養法により与えた。
【０１０１】
これらの食餌容器を、処理直前に再び重量測定して、投薬前の第二の平均動物食餌消費を与えた。
【０１０２】
その後５日間にわたって、対照用群には、キャリアー、特に、２重量パーセント(「ｗｔ．％」) カルボキシメチルセルロース(ＣＭＣ)のみを含む溶液を経口胃管栄養法により与えた。対照用群には、食欲抑制性組成物は投与しなかった。
【０１０３】
その後５日間にわたって、第二の群には、３０ｍｇのトウワタ属抽出生成物と２．０ｗｔ．％ ＣＭＣを含む溶液１ｍｌを経口胃管栄養法により与えた(この抽出生成物は、この実施例の第一の抽出方法を用いて得た)。
【０１０４】
同様に、第三の群には、その後５日間にわたって、３０ｍｇのトウワタ属抽出生成物と２．０ｗｔ．％ ＣＭＣを含む溶液１ｍｌを経口胃管栄養法により与えたが、その抽出生成物は、この実施例の第二の抽出方法を用いて得たものであった。
【０１０５】
様々な食餌容器の重量を、各投薬の約２４時間後に測定した。図１に示したデータセットは、更に、この発明の組成物の食欲抑制活性を示している。例えば、トウワタ属抽出生成物を含む溶液を与えた群のラットの食欲は、対照用群と比較して約５０パーセント減少した。それ故、この実施例も又、開示した食欲抑制性組成物が、有意の食欲抑制活性を有することを示している。
【０１０６】
その上、この実施例は、大規模栽培を利用して生育させたトウワタ属植物が有意の食欲抑制活性を有すること、トウワタ属抽出生成物の活性成分が室温で安定であること、及びこの実施例に記載した一層簡単な抽出方法が有効な食欲抑制性組成物を与えることを示している。
【０１０７】
この発明は、上に記載し、例示した具体例に限られるものではなく、添付の請求の範囲から離れることなく、変形物及び改変物であってよい。
【図面の簡単な説明】
【０１０８】
【図１】この発明の方法及び組成物により処理した動物の食物摂取を対照用動物と比較して示した図である。
【図１】
2007532553.tif 000021
【国際調査報告】
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