(57)【要約】  Ｒｈｏ−キナーゼの新規な阻害剤が開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2007507549.tif 000006
［式中、
ＸはＯを示すか、またはＲ３ＸはＦ、ＣｌもしくはＢｒを示し；
Ｒ１は、水素またはＣ１−６アルキルを示し；
Ｒ２は、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ、置換されていてもよいフェニル、ヘテロアリールまたはＣＯＮＲ４Ｒ５を示し；
Ｒ３は、置換されていてもよいフェニル、Ｃ３−７シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ＮＨ２、Ｒ４Ｒ５Ｎ、アシルアミノ、ヒドロキシ、ＣＯ２Ｒ４、ＣＯＮＲ４Ｒ５、ＮＲ４ＣＯＲ５、ＮＲ４ＣＳＲ５、ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、ＮＲ４ＳＯ２Ｒ５およびＯａｌｋＮＲ４Ｒ５からなる群から選択される基によって置換されていてもよいＣ１−６アルキル、置換されていてもよいフェニル、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルを示し；
Ｒ４およびＲ５は、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキルアルキル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリルおよびヘテロシクリルアルキルから選択される基を示し；
ａｌｋは、Ｃ２−４直鎖または分枝鎖アルキレン鎖である］
で示される化合物および生理学上許容される塩。
【請求項２】
式（ＩＩ）
【化２】
2007507549.tif 000007
［式中、
Ｒ１は、Ｃ１−４アルキルを示し；
Ｒ２は、置換されていてもよいフェニルまたはＣＯＮＲ４Ｒ５を示し；
Ｒ３は、置換されていてもよいフェニルまたはヘテロアリールを示し；
Ｒ４およびＲ５は、独立して、水素、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル、置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルおよびヘテロシクリルアルキルから選択される基を示すか、またはＲ４およびＲ５は、一緒になって環を形成する］
で示される請求項１記載の化合物および生理学上許容される塩。
【請求項３】
４−｛１−エチル−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−７−フェニル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−フラザン−３−アミン；
４−｛１−エチル−７−（４−フルオロフェニル）−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−フラザン−３−アミン；
４−｛１−エチル−７−｛３−［（エチルアミノ）メチル］フェニル｝−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−フラザン−３−アミン；および
４−｛７−｛［（３Ｓ）−３−アミノ−１−ピロリジニル］カルボニル｝−１−エチル−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−フラザン−３−アミン
からなる群から選択される請求項１記載の化合物。
【請求項４】
必要とする対象に、安全かつ有効量の請求項１記載の化合物を投与することを特徴とするＲｈｏ−キナーゼを阻害する方法。
【請求項５】
疾患が、高血圧、慢性および鬱血性心不全、虚血性アンギナ、心臓肥大および線維症、再狭窄、慢性腎不全、アテローム性動脈硬化症、喘息、男性勃起障害、女性性機能障害および過活動膀胱症候群、卒中、多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、炎症性疼痛、関節リウマチ、過敏性大腸症候群、炎症性腸疾患、クローン病、ＣＮＳ内で病変を横切る新たな軸索成長および軸索再配線を誘導するニューロン再生を必要とする適応症、脊髄損傷、急性ニューロン損傷、パーキンソン病、アルツハイマー病、癌、腫瘍転移、ウイルス性および細菌性感染、インスリン耐性および糖尿病からなる群から選択される請求項４記載の方法。
【請求項６】
疾患が高血圧、慢性および鬱血性心不全、虚血性アンギナ、喘息、男性勃起障害、女性性機能障害、卒中、炎症性腸疾患、脊髄損傷、緑内障および腫瘍転移からなる群から選択される請求項５記載の方法。
【請求項７】
疾患が高血圧、慢性および鬱血性心不全および虚血性アンギナからなる群から選択される請求項５記載の方法。
【請求項８】
請求項１記載の化合物および適当な担体を含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
重要で大きな酵素ファミリーは、蛋白質キナーゼ酵素ファミリーである。現在では、約５００の異なる蛋白質キナーゼが知られている。蛋白質キナーゼは、ＡＴＰ−Ｍｇ２＋複合体のγ−リン酸基をアミノ酸側鎖へ転移することにより、様々な蛋白質においてアミノ酸側鎖のリン酸化を触媒する働きをする。これらの酵素は、蛋白質中のセリン、トレオニンおよびチロシン残基のヒドロキシル基の可逆的リン酸化を通じて、細胞内のシグナル伝達過程の大部分を制御し、それ故に、細胞機能、成長、分化および破壊（アポトーシス）を制御する。研究により、蛋白質キナーゼは、シグナル伝達、転写調節、細胞運動性および細胞分裂を含む多くの細胞機能の主要な調節因子であることが示されている。幾つかの癌遺伝子は蛋白質キナーゼをコードしていることも示されており、キナーゼが腫瘍形成に関与することが示唆される。これらの過程は、多くの場合、各キナーゼそれ自体が１またはそれ以上のキナーゼにより調節され得るという互いにかみ合った複雑な経路により高度に調節されている。結果として、異常なもしくは不適切な蛋白質キナーゼ活性は、かかる異常なキナーゼ活性に関連する疾患状態の発症に寄与し得る。それらの生理学的な関連性、多様性および遍在性に起因して、蛋白質キナーゼは、生化学的および医学的研究において最も重要でかつ広く研究されている酵素ファミリーの１つとなっている。
【０００２】
蛋白質キナーゼファミリーの酵素は、典型的に、それらがリン酸化するアミノ酸残基に基づいて、２つの主要なサブファミリー：蛋白質チロシンキナーゼおよび蛋白質セリン／トレオニンキナーゼに分類される。セリン／トレオニンキナーゼ（ＰＳＴＫ）は、サイクリックＡＭＰ−およびサイクリックＧＭＰ−依存蛋白質キナーゼ、カルシウム−およびリン脂質−依存蛋白質キナーゼ、カルシウム−およびカルモジュリン−依存蛋白質キナーゼ、カゼインキナーゼ、細胞分裂周期の蛋白質キナーゼおよびその他を含む。これらのキナーゼは、通常、細胞質に由来するか、または、恐らくは、蛋白質を固着することによる細胞の顆粒画分に関連付けられる。異常な蛋白質セリン／トレオニンキナーゼ活性は、関節リウマチ、乾癬、敗血症ショック、骨減少、多数の癌および他の増殖性疾患のごとき多数の病状に関与しているかまたはそう考えられている。従って、セリン／トレオニンキナーゼおよびそれらが関与するシグナル伝達経路は、薬剤設計のための重要な標的である。チロシンキナーゼはチロシン残基をリン酸化する。チロシンキナーゼは細胞制御において同様に重要な働きをする。これらのキナーゼは、上皮増殖因子受容体、インスリン受容体、血小板由来成長因子受容体およびその他のものを含む、成長因子およびホルモンのごとき分子のための幾つかの受容体を含む。研究により、多数のチロシンキナーゼが、細胞の外側に位置する受容体ドメインおよび内側に位置するキナーゼドメインを有する膜貫通型蛋白質であることが示されている。チロシンキナーゼの修飾因子をさらに同定するために多くの研究も進行している。
【０００３】
細胞により利用される主要なシグナル伝達系は、ＲｈｏＡ−シグナル伝達経路である。ＲｈｏＡは、成長因子、ホルモン、機械的ストレス、浸透圧変化ならびに高濃度の代謝産物、例えばグルコースのごとき幾つかの細胞外刺激により活性化され得る、小ＧＴＰ結合蛋白質である。ＲｈｏＡ活性化は、ＧＴＰ結合、コンホメーション変化、翻訳後修飾（ゲラニルゲラニル化およびファルネシル化）およびその内因性ＧＴＰａｓｅ活性の活性化を含む。活性化されたＲｈｏＡは、ＲＯＣＫｓ（ＲＯＣＫ１およびＲＯＣＫ２、以下「ＲＯＣＫ」または「ＲＯＣＫｓ」とも言う）を含む幾つかのエフェクター蛋白質と相互作用し得、そして細胞質および核へシグナルを伝達する。
【０００４】
ＲＯＣＫ１および２は、物理的結合を介するＲｈｏＡ−ＧＴＰ複合体により活性化され得るキナーゼの一のファミリーを構成する。活性化されたＲＯＣＫｓは、多数の基質をリン酸化し、そして中心的な細胞機能において重要な役割を果たす。ＲＯＣＫｓのための基質は、ミオシン軽鎖ホスファターゼ（ＭＢＳ、ＭＹＰＴ１とも言う）のミオシン結合サブユニット、アデュシン、モエシン、ミオシン軽鎖（ＭＬＣ）、ＬＩＭキナーゼならびに転写因子ＦＨＬを含む。これらの基質のリン酸化は、蛋白質の生物学的活性を調節し、故に、外部刺激に対する細胞応答を変更する手段を提供する。よく示される一例は、平滑筋収縮におけるＲＯＣＫの関与である。フェニレフリンによる刺激の際に、血管に由来する平滑筋は収縮する。研究により、フェニレフリンがｂ−アドレナリン受容体を刺激し、そしてＲｈｏＡの活性化に至ることが示されている。活性化されたＲｈｏＡは、順次、ＲＯＣＫ１のキナーゼ活性を刺激し、そしてそれが順次、ＭＢＳをリン酸化する。かかるリン酸化は、ミオシン軽鎖ホスファターゼの酵素活性を阻害し、そしてカルシウム−依存ミオシン軽鎖キナーゼ（ＭＬＣＫ）によりミオシン軽鎖それ自体のリン酸化を増大させ、そして結果としてミオシン−アクチン束の収縮を増大させ、平滑筋収縮に至る。この現象はカルシウム感作と言われる場合もある。平滑筋収縮に加えて、ＲＯＣＫｓは、アポトーシス、細胞遊走、転写活性化、線維症、細胞質分裂、炎症および細胞増殖を含む細胞機能に関与していることも示されている。さらに、ニューロンにおいて、ＲＯＣＫは、ミエリン関連糖蛋白質（ＭＡＧ）などのミエリンに関連する阻害因子により、軸索成長の阻害において重要な役割を果たす。ＲＯＣＫ−活性は、ニューロンの発達において、成長円錐の崩壊も仲介する。両過程は、ＲＯＣＫに誘導される基質のリン酸化、例えばＬＩＭキナーゼおよびミオシン軽鎖ホスファターゼにより仲介され、結果としてニューロンのアクチン−ミオシン系の収縮を増大させると考えられている。
【０００５】
本発明者は、ＲＯＣＫ活性の阻害剤であり、かつ他の蛋白質キナーゼに比べて興味深い選択性を示す、新規アザベンゾイミダゾール化合物を見出した。かかる誘導体は、不適切なＲＯＣＫ活性に関連する疾患の処置において有用である。
【０００６】
発明の詳細な記載
本発明は、下記の化合物を包含する。
かくして、本発明は、式（Ｉ）
【化１】
2007507549.tif 000002
【０００７】
［式中、
ＸはＯを示すか、またはＲ３ＸはＦ、ＣｌもしくはＢｒを示し；
Ｒ１は、水素またはＣ１−６アルキルを示し；
Ｒ２は、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ、置換されていてもよいフェニル、ヘテロアリールまたはＣＯＮＲ４Ｒ５を示し；
Ｒ３は、置換されていてもよいフェニル、Ｃ３−７シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ＮＨ２、Ｒ４Ｒ５Ｎ、アシルアミノ、ヒドロキシ、ＣＯ２Ｒ４、ＣＯＮＲ４Ｒ５、ＮＲ４ＣＯＲ５、ＮＲ４ＣＳＲ５、ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、ＮＲ４ＳＯ２Ｒ５およびＯａｌｋＮＲ４Ｒ５からなる群から選択される基によって置換されていてもよいＣ１−６アルキル、置換されていてもよいフェニル、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルを示し；
Ｒ４およびＲ５は、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキルアルキル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリルおよびヘテロシクリルアルキルから選択される基を示し；
ａｌｋは、Ｃ２−４直鎖または分枝鎖アルキレン鎖である］
で示される化合物および生理学上許容される塩を提供する。
【０００８】
上記式（Ｉ）において定義される置換基Ｒ１〜Ｒ５のいずれも、少なくとも１つの不斉中心を含有することは明らかであり、本発明は、生じる可能性のあるエナンチオマーおよびラセミ体を包含するその混合物の全てを包含するものと解釈されるべきである。
【０００９】
かくして、本発明は、式（ＩＩ）
【化２】
2007507549.tif 000003
【００１０】
［式中、
Ｒ１は、Ｃ１−４アルキルを示し；
Ｒ２は、Ｂｒ、置換されていてもよいフェニルまたはＣＯＮＲ４Ｒ５を示し；
Ｒ３は、置換されていてもよいフェニルまたはヘテロアリールを示し；
Ｒ４およびＲ５は、独立して、水素、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル、置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルおよびヘテロシクリルアルキルから選択される基を示すか、またはＲ４およびＲ５は、一緒になって環を形成する］
で示される化合物および生理学上許容される塩を提供する。
【００１１】
上の式（Ｉ）において定義される任意の置換基Ｒ１ないしＲ５は、少なくとも１つの不斉中心を含んでもよいことが理解され得、また本発明は、そこから生じる全ての可能なエナンチオマーおよびラセミ体を含むそれらの混合物を含むことが理解されるべきである。
【００１２】
例えば、アルコキシ、アルキルチオ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、所望により置換されたアルキル、例えば、アミノアルキル、シクロアルキルアルキル、アラルキル、ヘテロアリールアルキルもしくはヘテロシクリルアルキルなどの、基もしくは基の部分としてのアルキルなる用語は、直鎖または分岐鎖のＣ１−６アルキル基を言う。
【００１３】
ハロゲンなる用語は、フッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素を含む。
【００１４】
例えば、アリールオキシ、アラルキルもしくはアリールアミノなどの、基もしくは基の部分としてのアリールなる用語は、所望により置換されたフェニル、もしくは縮合二環式アリール基、例えば、ナフチルを言う。
基もしくは基の部分としてのアリール、所望により置換されたフェニル、ヘテロアリール、Ｃ３−７シクロアルキル、ならびに基もしくは基の部分としての４−７員ヘテロシクリルなる用語は、１ないし３個の置換基で所望により置換されてもよいかかる基を含み、該置換基は、同じであっても異なってもよく、かつ、ハロゲン、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリルアルキル、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、トリフルオロアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、ヘテロシクリルアミノ、アシルアミノ、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、ジアルキルアミノアルキル、アシルアミノアルキル、アリールアミノアルキル、ヘテロアリールアミノアルキル、シクロアルキルアミノアルキル、ヘテロシクリルアミノアルキル、ヒドロキシアルキル、ＣＯＮＲ４Ｒ５、ＣＳＮＲ４Ｒ５、ＣＨ２ＣＯＮＲ４Ｒ５、カルボキシ、カルボキサミド、アルコキシカルボニル、−アミノアルコキシ、ジアルキルアミノアルコキシ、アシルアミノアルコキシ、スルホンアミド、アミノスルホニル、シアノ、ホルミル、ニトロ、Ｒ２１ＯもしくはＲ６Ｓ（Ｏ）ｎ［ここで、Ｒ６は、アルキル、アリール、ヘテロアリールもしくはヘテロシクリルアルコキシから選択される基であり、かつｎは０、１もしくは２である］から選択され、或いは、該基のそれぞれは、１０員環までを含む縮合二環系の部分を形成し得、そして少なくとも部分的に飽和され得る。
【００１５】
例えばヘテロアリールオキシなどの、基もしくは基の部分としてのヘテロアリールなる用語は、５もしくは６員環もしくは５，６もしくは６，６縮合二環系を言う。
ヘテロアリールが５員の基である場合には、それはＯ、ＮもしくはＳから選択されるヘテロ原子を含み、そして所望によりさらに１ないし３個の窒素原子を含んでもよい。かかる基の例は、フラニル、チエニル、イソオキサゾリル、オキサゾリルもしくはイミダゾリルを含む。
【００１６】
ヘテロアリールが６員の基である場合には、それは１ないし３個の窒素原子を含む。かかる基の例は、ピリジル、ピリミジニルもしくはトリアジニルを含む。
【００１７】
５，６縮合二環式ヘテロアリール基なる用語は、５員環が酸素、硫黄もしくはＮＨ基を含み、かつ所望により１ないし２個の窒素原子をさらに含んでもよく、そして６員環が所望により１ないし３個の窒素原子を含む基を言う。かかる基の例は、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾイミダゾール、ベンゾトリアゾールもしくはインドリルを含む。
【００１８】
６，６−縮合二環式ヘテロアリール基なる用語は、１つの環に少なくとも１個の窒素原子を含み、かつそれぞれの環に３個までの窒素原子を含んでもよい、二環式ヘテロアリール基を言う。かかる基の例は、キノリニル、イソキノリニルもしくはナフチリジニルを含み、また、６，６縮合二環式ヘテロアリール基なる用語は、部分的に飽和した炭素環式基に縮合した６員のヘテロアリール基も言う。かかる基の例は、テトラヒドロキノリニルもしくはテトラヒドロイソキノリニルを含む。
【００１９】
例えば、ヘテロシクリルアルキルもしくはヘテロシクリルアルキリデンなどの、基もしくは基の部分としてのヘテロシクリルなる用語は、その基にある炭素もしくは窒素原子を介して式（１）の化合物の残りに結合され、かつＮ、ＯもしくはＳ（Ｏ）ｎから選択される１もしくは２個のヘテロ原子を含む、架橋されたヘテロシクリル基または４−７員ヘテロシクリル基を言い、そして、ヘテロシクリル基が環員としてＮＨを含むか、またはヘテロシクリル基が１級もしくは２級アミノ基により置換される場合には、該用語は、そのＮ−アルキル、Ｎ−置換されていてもよいフェニル、Ｎ−アラルキル、Ｎ−スルホニル、もしくはＮ−アシル誘導体も含む。複素環なる用語は、架橋された複素環も含む。かかる複素環の例は、所望により置換されたピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、ホモピペラジン、モルホリン、チオモルホリンおよび（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル）−アミンを含む。
【００２０】
例えば、シクロアルキルアルキルもしくはシクロアルキルイデンなどの、基もしくは基の部分としてのシクロアルキルなる用語は、３−７員の炭素環式基を言う。
【００２１】
１１員環までを含み、かつ少なくとも部分的に飽和されている縮合二環系なる用語は、炭素環および複素環の６，５、６，６および６，７の二環系を含む。かかる６，５および６，６炭素環系の例は、二環が、少なくとも部分的に飽和されている５−、６−もしくは−員の炭素環に縮合したベンゼン環を含むもの、例えば、テトラヒドロナフチル、インダニルもしくはインデニルを包含する。かかる６，５、６，６もしくは６，７複素環の例は、１つの環が、Ｏ、ＳもしくはＮから選択される１もしくは２個のヘテロ原子を含む５，６もしくは７員環に縮合したベンゼンであるもの、例えば、インドリニル、イソインドリニル、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イソインドール−５−イル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾチエニル、１，３−ベンゾジオキソリル、ベンゾピロリル、１，３−ベノゾジチオリル、１，４−ベンゾジオキサニル、クロマニル、クロメニルもしくは２，３、４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｃ］アゼピン−８−イルを含む。
【００２２】
基もしくはアシルアミノ基の部分としてのアシルなる用語は、アルカノイル、アロイル、アラルカノイル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカロニルもしくはアラルコキシカルボニル基を言う。
式（Ｉ）の化合物は、無機および有機酸と共に塩を形成し、そして本発明は、生理学的に許容される無機および有機酸と共に形成されるかかる塩を含む。
【００２３】
Ｒ１の好ましい例は、限定するものではないが、Ｃ１−６アルキル、例えば、エチルを包含する。Ｒ２の好ましい例は、限定するものではないが、置換されていてもよいフェニル（例えば、フェニル、またはハロゲン、例えば、フルオロまたはアルキルアミノアルキル、例えば、エチルアミノメチルから選択される一または二個の基によって置換されたフェニル）、複素環式アミド、例えば、３−アミノピロリジン−１−イル−カルボニルを包含する。
Ｒ３の好ましい例は、限定するものではないが、置換されていてもよいフェニル（例えば、４−フルオロフェニル）を包含する。
Ｘの好ましい例は、Ｏである。
【００２４】
ＲＯＣＫｓの阻害剤は、様々な疾患の治療における使用が提案されてきた。それらは、心血管疾患、例えば、高血圧、慢性および鬱血性心不全、虚血性アンギナ、心臓肥大および線維症、再狭窄、慢性腎不全、およびアテローム性動脈硬化症を含む。加えて、その筋弛緩性の性質のために、それは、喘息、男性勃起障害、女性性機能障害および過活動膀胱症候群のためにも適している。ＲＯＣＫ阻害剤は、抗炎症性を有することが示されている。故に、それらは、神経炎症性疾患、例えば、卒中、多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、および炎症性疼痛、ならびに他の炎症性疾患、例えば、関節リウマチ、過敏性大腸症候群、炎症性腸疾患およびクローン病のための処置として用いられ得る。加えて、神経突起の伸長を誘導するそれらの効果に基づいて、ＲＯＣＫ阻害剤は、ＣＮＳ内で病変を横切る新たな軸索成長および軸索再配線（ａｘｏｎａｌ  ｒｅｗｉｒｉｎｇ）を誘導するニューロン再生のための有用な薬剤であり得るだろう。故に、ＲＯＣＫ阻害剤は、ＣＮＳ疾患、例えば、脊髄損傷、急性神経損傷（卒中、外傷性脳損傷）、パーキンソン病、アルツハイマー病および他の神経変性疾患の再生（回復）処置のために有用である可能性が高い。ＲＯＣＫ阻害剤は細胞増殖および細胞遊走を減じるので、それらは癌および腫瘍転移の処置においても有用であり得るだろう。さらに、ＲＯＣＫ阻害剤がウイルス侵入の際に細胞骨格の再構成を抑制し、故に、それらが抗ウイルスおよび抗バクテリアへの適用において潜在的な治療価値も有することを示す証拠がある。ＲＯＣＫ阻害剤は、インスリン抵抗性ならびに糖尿病の処置のために有用でもある。
【００２５】
好ましくは、ＲＯＣＫ阻害剤は、高血圧、慢性および鬱血性心不全、虚血性アンギナ、喘息、男性勃起障害、女性性機能障害、卒中、炎症性腸疾患、脊髄損傷、緑内障、および腫瘍転移の治療に有用である。
より好ましくは、ＲＯＣＫ阻害剤は、高血圧、慢性および鬱血性心不全、および虚血性アンギナの治療に有用である。
【００２６】
本明細書中用いるように、用語「有効量」は、例えば、研究者もしくは臨床医により探求されるべき組織、系、動物もしくはヒトの生物学的もしくは医学的応答を導き得る、薬剤もしくは医薬の量を意味する。さらに、用語「治療的に有効量」は、かかる量を受けていない対応する対象に比べて、結果として、疾患、障害もしくは副作用の処置、治癒、予防もしくは改善を向上させるか、または疾患もしくは障害の進行速度を減少させる、任意の量を意味する。該用語は、その範囲内に、正常な生理学的機能を増強するために有効な量も含む。
【００２７】
本明細書中用いるように、用語「所望により」は、続いて記載される事象が存在しても存在しなくてもよいことを意味し、そして、存在する事象および存在しない事象の両方を含む。
【００２８】
本明細書中用いるように、用語「生理機能性誘導体」は、本発明の化合物の任意の医薬上許容される誘導体、例えば、エステルもしくはアミドを言い、哺乳類に投与される際に、本発明の化合物もしくはその有効な代謝産物を（直接的もしくは間接的に）提供し得る。かかる誘導体は、過度の実験がなくとも、そして、Ｂｕｒｇｅｒ’ｓ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，５ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｖｏｌ  １：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅの教示を参照して当業者に明らかであり、該文献は、生理機能性誘導体を説明する範囲において、出典明示により本明細書の一部となす。
【００２９】
本明細書中用いるように、用語「溶媒和物」は、溶質（本明細書中、式（Ｉ）の化合物またはその塩もしくは生理機能性誘導体）および溶媒により形成される可変の化学量論の複合体を言う。本発明の目的のために、かかる溶媒は、溶質の生物学的活性と相互作用しなくともよい。適当な溶媒の例は、水、メタノール、エタノールおよび酢酸を含むが、これらに限定されない。好ましくは、用いられる溶媒は、医薬上許容される溶媒である。適当な医薬上許容される溶媒の例は、水、エタノールおよび酢酸を含むが、これらに限定されない。最も好ましくは、用いられる溶媒は水である。
【００３０】
本明細書中用いるように、用語「置換された」は、別記しない限り、特定の一もしくは複数の置換基での置換、許容されるべき多自由度の置換を言う。
【００３１】
本明細書中記載の特定の化合物は、１またはそれ以上のキラル原子を含んでもよく、またはそうでなければ、２つのエナンチオマーとして存在し得る。本発明の化合物は、エナンチオマーの混合物ならびに純粋なエナンチオマーもしくはエナンチオマーに富む混合物を含む。本発明の範囲内には、上の式（Ｉ）により示される化合物の個々の異性体ならびにそれらが完全もしくは部分的に平衡した任意の混合物も含まれる。本発明は、１またはそれ以上のキラル中心が反転したその異性体との混合物として、上の式により示される化合物の個々の異性体も含む。また、式（Ｉ）の化合物の任意の互変体および互変体の混合物が、式（Ｉ）の化合物の範囲内に含まれることも理解される。
【００３２】
典型的に、本発明の塩は、医薬上許容される塩である。用語「医薬上許容される塩」に包含される塩は、本発明の化合物の非毒性の塩を言う。本発明の化合物の塩は、式（Ｉ）の化合物中の置換基上にある窒素に由来する酸付加塩を含んでもよい。代表的な塩は、以下の塩を含む：酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、炭酸水素塩、亜硫酸水素塩、重洒石酸塩、ホウ酸塩、ブロミド、エデト酸カルシウム、カンシラート、炭酸塩、クロリド、クラブラン酸塩、クエン酸塩、ジヒドロクロリド、エデト酸塩、エジシラート、エストラート、エシラート、フマル酸塩、グルセプタート、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニラート、ヘキシルレゾルシナート、ヒドラバミン、ヒドロブロミド、ヒドロクロリド、ヒドロキシナフトアート、ヨージド、イセチオナート、ラクタート、ラクトビオナート、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデラート、メシラート、臭化メチル、硝酸メチル、硫酸メチル、マレイン酸一カリウム、ムカート、ナプシラート、ニトラート、Ｎ−メチルグルカミン、オキサラート、パモアート（エンボナート）、パルミタート、パントテナート、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクトロナート、カリウム、サリチル酸塩、ナトリウム、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、琥珀酸塩、タンニン酸塩、洒石酸塩、テオクラート、トシラート、トリエチオジド、トリメチルアンモニウムおよび吉草酸塩。医薬上許容されない他の塩は、本発明の化合物の調製において有用であってもよく、そしてこれらはさらに本発明の態様を形成する。
【００３３】
治療における使用のために、治療的に有効量の式（Ｉ）の化合物ならびにその塩、溶媒和物および生理機能性誘導体が、未処理の化学物質として投与されることも可能であるが、医薬組成物として活性成分を提供することも可能である。従って、本発明は、治療的に有効量の式（Ｉ）の化合物およびその塩、溶媒和物および生理機能性誘導体ならびに１またはそれ以上の医薬上許容される担体、希釈剤もしくは賦形剤を含む、医薬組成物をさらに提供する。式（Ｉ）の化合物およびその塩、溶媒和物および生理機能性誘導体は、上記したものである。担体、希釈剤もしくは賦形剤は、処方の他の成分と適合性があり、かつそのレシピエントに有害でないという点で、許容される必要がある。本発明の別の態様に従って、式（Ｉ）の化合物もしくはその塩、溶媒和物および生理機能性誘導体を、１またはそれ以上の医薬上許容される担体、希釈剤もしくは賦形剤と混合することを含む、医薬処方の調製方法も提供される。
【００３４】
医薬処方は、単位用量あたり予め決定した量の活性成分を含む単位投与形態にて提供されてもよい。かかる一単位は、処置されるべき状態、投与経路ならびに患者の年齢、体重および状態に依存して、例えば、０．５ｍｇないし１ｇ、好ましくは、１ｍｇないし７００ｍｇ、より好ましくは、５ｍｇないし１００ｍｇの式（Ｉ）の化合物を含んでもよく、或いは医薬処方は、単位用量あたり予め決定した量の活性成分を含む単位投与形態にて提供されてもよい。好ましい単位投与処方は、本明細書中上記したように、１日用量もしくは細分割用量（ｓｕｂ−ｄｏｓｅ）の活性成分またはその適切なフラクションを含むものである。さらに、かかる医薬処方は、調剤技術においてよく知られた任意の方法により調製されてもよい。
【００３５】
医薬処方は、任意の適切な経路、例えば、経口（頬側もしくは舌下を含む）、直腸、経鼻、局所（頬側、舌下もしくは経皮を含む）、経膣もしくは非経口（皮下、筋肉内、静脈内もしくは皮内を含む）経路による投与に適用されてもよい。かかる処方は、調剤技術において知られている任意の方法、例えば、活性成分を担体もしくは賦形剤と結合させることにより、調製されてもよい。
【００３６】
経口投与のために適する医薬処方は、個別単位、例えば、カプセル剤もしくは錠剤；散剤もしくは顆粒剤；水性もしくは非水性液体中の溶液もしくは懸濁液；食用泡沫体もしくはホイップ；または水中油型の液体エマルジョンもしくは油中水型の液体エマルジョンとして提供されてもよい。
【００３７】
例えば、経口投与のために、錠剤もしくはカプセル剤の形態では、有効な薬剤成分は、経口用の非毒性の医薬上許容される不活性担体、例えば、エタノール、グリセロール、水などと合わせられ得る。散剤は、化合物を適当な微細な大きさに粉砕し、次いで、同様に粉砕された医薬担体、例えば、デンプンもしくはマンニトールなどの食用炭水化物と混合することにより、調製される。着香剤、防腐剤、分散剤および着色剤も提供され得る。
【００３８】
カプセル剤は、上記のように、粉末混合物を調製し、次いで、形成されたゼラチンシースに充填することにより作られる。流動促進剤および滑沢剤、例えば、コロイドシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムもしくは固体ポリエチレングリコールは、濾過操作の前に粉末混合物に加えられ得る。カプセル剤が摂取される場合には、崩壊剤もしくは溶解剤、例えば、寒天、炭酸カルシウムもしくは炭酸ナトリウムも加えられて、薬剤の有用性を向上し得る。
【００３９】
さらに、所望されるかまたは必要な場合には、適当な結合剤、滑沢剤、崩壊剤および着色剤も、その混合物中に組み込まれ得る。適当な結合剤は、デンプン、ゼラチン、天然糖、例えばグルコースもしくはβ−ラクトース、コーン甘味料、天然および合成ゴム、例えば、アカシア、トラガカントゴムもしくはアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどを含む。これらの投与形態にて用いられる滑沢剤は、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどを含む。崩壊剤は、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどを含むが、これらに限定されない。錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、顆粒化もしくはスラッギングし、滑沢剤および崩壊剤を加え、次いで押圧して製錠することにより作られる。粉末混合物は、適当には粉砕されている化合物を、上記したような希釈剤もしくは塩基、および所望により、カルボキシメチルセルロース、アルギナート（ａｌｉｇｉｎａｔｅ）、ゼラチンもしくはポリビニルピロリドンなどの結合剤、パラフィンなどの溶液遅延剤、第４塩などの吸収促進剤および／またはベントナイト、カオリンもしくはリン酸ジカルシウムなどの吸収剤と混合することにより調製される。粉末混合物は、例えば、シロップ、デンプンペースト、アカディア（ａｃａｄｉａ）粘液またはセルロースもしくはポリマー物質の溶液などの結合剤と一緒に湿らせ、次いで、スクリーンから押し出すことにより顆粒化され得る。造粒の別法として、粉末混合物を打錠機に通し、完全に形成されていないスラグを得、それを顆粒にすることもできる。顆粒剤は、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクもしくは鉱油を加えることにより潤滑化されて、錠剤形成ダイに付着するのを防ぎ得る。次いで、潤滑化された混合物は錠剤に圧縮される。本発明の化合物は、自由流動性の不活性担体とも合わせられ、次いで、顆粒化もしくはスラッギング工程に付されることなく、直接的に錠剤に圧縮され得る。セラックのシーリングコート、糖もしくはポリマー物質のコーティングおよびワックスのポリッシュコーティングからなる無色もしくは不透明の保護コーティングが提供され得る。染料がこれらのコーティングへ加えられ、異なる単位投与形を区別し得る。
【００４０】
溶液、シロップおよびエリキシルなどの経口用流体は、一定量が予め決定した量の化合物を含むように、単位投与形態にて調製され得る。シロップは、適当に風味付けられた水溶液中に化合物を溶解することにより調製され得、一方で、エリキシルは、非毒性アルコール性ビヒクルを用いることにより調製される。懸濁液は、非毒性ビヒクル中に化合物を分散させることにより処方され得る。溶解剤および乳化剤、例えばエトキシル化されたイソステアリールアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテル、防腐剤、風味添加剤、例えば、ハッカ油もしくは天然甘味料もしくはサッカリンもしくは他の人工甘味料なども加えられ得る。
【００４１】
適切な場合には、経口投与のための投与単位処方はマイクロカプセル化され得る。該処方は、粒子状物質をポリマー、ワックスなどでコーティングするかまたはその中に埋め込むことにより、放出を延長または維持するようにも調製され得る。
【００４２】
式（Ｉ）の化合物ならびにその塩、溶媒和物および生理機能性誘導体は、リポソームデリバリーシステム、例えば、小さな一枚膜ベシクル、大きな一枚膜ベシクルおよび多重層ベシクルの形態にても投与され得る。リポソームは、様々なリン脂質、例えば、コレステロール、ステアリルアミンもしくはホスファチジルコリンから形成され得る。
【００４３】
式（Ｉ）の化合物ならびにその塩、溶媒和物および生理機能性誘導体は、化合物分子が結合している個々の担体としてモノクローナル抗体を用いることにより送達されてもよい。化合物は、標的可能な薬剤担体として可溶性ポリマーに結合されてもよい。かかるポリマーは、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノールもしくはパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシドポリリジンを含み得る。さらに、該化合物は、薬剤の放出制御を達成する際に有用である生分解性ポリマーの類、例えば、ポリ乳酸、ポレプシロン（ｐｏｌｅｐｓｉｌｏｎ）カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリラートおよびヒドロゲルの架橋もしくは両親媒性ブロックコポリマーに結合されてもよい。
【００４４】
経皮投与に適する医薬処方は、長時間にわたってレシピエントの表皮に密着したままであるように意図された個別パッチとして提供されてもよい。例えば、活性成分は、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，３（６），３１８（１９８６）にて一般的に記載されるように、イオン導入によりパッチから送達されてもよい。
【００４５】
局所投与に適する医薬処方は、軟膏、クリーム、懸濁液、ローション、散剤、溶液、ペースト、ゲル、スプレー、エアロゾルもしくは油脂として処方されてもよい。
【００４６】
眼もしくは例えば口腔および皮膚などの他の外部組織の処置のために、好ましくは、該処方は、局所用軟膏もしくはクリームとして適用される。軟膏中に処方される場合には、活性成分はパラフィン系もしくは水混和性軟膏基剤のどちらかと一緒に用いられてもよい。或いは、活性成分は、水中油型クリーム基剤もしくは油中水型基剤と共に、クリーム中に処方されてもよい。
【００４７】
眼への局所投与に適する医薬処方は、活性成分が適当な担体、特に水性溶媒中に溶解もしくは懸濁されている点眼剤を含む。
【００４８】
口腔への局所投与に適する医薬処方は、ロゼンジ、パステルおよび洗口剤を含む。
直腸投与に適する医薬処方は、坐剤もしくは浣腸剤として提供されてもよい。
【００４９】
担体が固体であるところの経鼻用投与に適する医薬処方として、かぎタバコを吸うような方法にて投与される、すなわち、鼻の近くに置いた粉末の容器から鼻腔を介して迅速に吸引することにより投与される、例えば、粒径が２０ないし５００ミクロンの範囲にある、粗い粉末が挙げられる。経鼻スプレーもしくは経鼻ドロップとして投与するための、担体が液体である適当な処方は、活性成分の水性もしくは油性溶液を含む。
【００５０】
吸入による投与に適する医薬処方は、微細な粒子ダストもしくはミストを含み、様々な種類の一定量加圧式エアロゾル、ネブライザーもしくは吸入器を用いてもたらされてもよい。
経膣投与に適する医薬処方は、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、泡沫体もしくはスプレー処方として提供されてもよい。
【００５１】
非経口投与に適する医薬処方は、抗酸化剤、バッファー、静菌剤および処方を対象のレシピエントの血液と等張にする溶質を含んでもよい水性および非水性滅菌注入溶液；ならびに懸濁剤および増粘剤を含んでもよい水性および非水性滅菌懸濁液を含む。該処方は、一回投与もしくは複数投与用容器、例えば、密封されたアンプルおよびバイアル中にて提供されてもよく、そして使用直前に、注入のために滅菌液体担体、例えば水を加えることのみを必要とする、フリーズドライ（凍結乾燥）された状態で貯蔵されてもよい。即席の注入溶液および懸濁液は、滅菌散剤、顆粒剤および錠剤から調製されてもよい。
【００５２】
特に上記した成分に加えて、該処方は、問題となっている処方の型を考慮した、当該技術分野にて慣用的な他の剤も含んでもよく、例えば、経口投与に適当なものは着香剤を含んでもよいことが理解されるべきである。
【００５３】
治療的に有効量の本発明の化合物は、例えば、ヒトもしくは他の動物の年齢および体重、処置を要する正確な状態およびその重篤度、処方の性質ならびに投与経路を含む多数の因子に依存し得、そして結局は担当の医師もしくは獣医の判断であろう。しかしながら、腫瘍の成長、例えば、大腸もしくは乳癌の処置のための式（Ｉ）の化合物の有効量は、一般的には、１日につきレシピエント（哺乳類）の体重１ｋｇあたり０．１ないし１００ｍｇの範囲であり、そしてより一般的には、１日につき体重１ｋｇあたり１ないし１０ｍｇの範囲であろう。故に、７０ｋｇの成体哺乳類について、１日あたりの実際量は、通常、７０ないし７００ｍｇであり、そしてこの量は、１日につき１回の投与か、またはより一般的には、１日の全投与量が同じになるように１日につき多数の（２、３、４、５もしくは６回のごとき）細分割用量にて与えられてもよい。その塩もしくは溶媒和物もしくは生理機能性誘導体の有効量は、式（Ｉ）の化合物それ自体の有効量の割合として決定されてもよい。同様の用量が、上記した他の状態の処置のために適切であろうと考えられる。
【００５４】
本発明の化合物は、標準的な化学を含む様々な方法により作られてもよい。前に定義した任意の変量は、別記しない限り、引き続き、前に定義した意味を有するだろう。例示的な一般的な合成方法が以下に示され、さらに本発明の特定化合物が実施例にて調製される。
【００５５】
一般式（Ｉ）の化合物は、以下の合成スキームに部分的に記載されている、有機合成技術分野にて知られている方法により調製されてもよい。以下に記載の全スキームにおいて、必要な場合には、官能基もしくは反応基のための保護基が化学の一般的原則に従って用いられることが十分に理解される。保護基は有機合成の標準的な方法に従って操作される（Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎおよびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ（１９９１）Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ）。これらの基は、化合物合成の都合のよい段階において、当業者に容易に明かである方法を用いて除去される。過程ならびに反応条件の選択およびそれらを実施する順番は、式（Ｉ）の化合物の調製に整合性があるものとする。
【００５６】
構造式８を有する化合物は、スキーム１に記載される手順にしたがって調製することができる。適当に置換したピリジン誘導体１をカリウムｔ−ブトキシドおよびｔ−ブチルヒドロペルオキシドで処理することにより、ピリドン２を提供し、それを塩素化し、得られたジクロリドを第１級アミンで処理して、アミノピリジン３を得ることができる。該第２の塩化物をナトリウム塩で置換し、次いで、還元することにより構造５を提供し、次いで、それを、種々のカップリング剤を用いて、シアノ酢酸とカップリングさせて対応するシアノアセトアミド（示さない）を提供することができる。該アミドを次いで、氷酢酸で脱水して、アザベンゾイミダゾール６を得ることができる。該ニトリル６を亜硝酸で処理することによってオキシム７に変換することができ、次いで、さらに、ヒドロキシルアミンおよび塩基での処理によって、アミノフラザン構造８に合成することができる。
【００５７】
スキーム１
【化３】
2007507549.tif 000004
【００５８】
構造式８の化合物は、さらに、種々の構造に変換することができる（スキーム２）。パラジウム触媒によるカップリングが９のような化合物を提供することができる。別法では、ＬＤＡ、次いで、ＢｕＬｉでの処理により、対応するリチウム試薬を提供し、種々の親電子物質、例えば、二酸化炭素でそれをクエンチして酸を提供することができ、次いで、それを種々のアミンとカップリングしてアミド１０を得ることができる。
【００５９】
スキーム２
【化４】
2007507549.tif 000005
【００６０】
本発明の適当な化合物の例は、下記に挙げる化合物および実施例１〜４に示す化合物を包含する。これらは、単なる例示であり、何ら限定するものではない。
４−｛１−エチル−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−７−フェニル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−フラザン−３−アミン；
４−｛１−エチル−７−（４−フルオロフェニル）−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−フラザン−３−アミン；
４−｛１−エチル−７−｛３−［（エチルアミノ）メチル］フェニル｝−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−フラザン−３−アミン；
４−｛７−｛［（３Ｓ）−３−アミノ−１−ピロリジニル］カルボニル｝−１−エチル−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−フラザン−３−アミン；
（３−｛［２−（４−アミノ−フラザン−３−イル）−７−ブロモ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−６−イル］オキシ｝フェニル）カルバミン酸１，１−ジメチルエチル；
Ｎ−（３−｛［２−（４−アミノ−フラザン−３−イル）−７−ブロモ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−６−イル］オキシ｝フェニル）アセトアミド。
【実施例】
【００６１】
下記の実施例は、説明のみを目的とし、何ら限定しようとするものではない。
【００６２】
実施例１
４−｛１−エチル−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−７−フェニル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−フラザン−３−アミン
工程１．  ３−ブロモ−５−ニトロ−４−ピリドン
３−ニトロ−４−ピリドン（５０．０ｇ，３５７ｍｍｏｌ）をＨ２Ｏ（５００ｍＬ）中に懸濁し、臭素（２３．０ｍＬ，４４６ｍｍｏｌ）を滴下し、次いで、該不均一混合物を７０℃に２時間温め、次いで、０℃に冷却し、ろ過した。得られた固体をＨ２Ｏで洗浄し、乾燥させて、標題化合物を褐色固体として得た（６２．０ｇ，７９％）。
【００６３】
工程２．  ３−ブロモ−４−クロロ−５−ニトロピリジン
工程１由来の生成物（２５．０ｇ，１１４ｍｍｏｌ）をトルエン（５０ｍＬ）中に懸濁し、ＰＯＣｌ３（５３ｍＬ，５７０ｍｍｏｌ）を加え、該スラリーを９０℃に一晩加熱した。該混合物を冷却し、濃縮し、残渣を注意深く、氷および飽和Ｋ２ＣＯ３溶液でクエンチし、次いで、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせ、Ｈ２Ｏおよびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮して、標題化合物を油状物として得（２６．１ｇ，９７％）、それを静置により結晶化させた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ２３７，２３９［Ｍ＋Ｈ］＋
【００６４】
工程３．  ３−ブロモ−４−クロロ−５−ニトロ−２−ピリドン
ＴＨＦ（５００ｍＬ）を−７８℃に冷却し、該ＴＨＦ中に無水ＮＨ３（〜２００ｍＬ）を凝縮した。カリウムｔ−ブトキシド（３１．０ｇ，２７５ｍｍｏｌ）を加え、該混合物を〜−３５℃に温めた。工程２由来の生成物（２６．０ｇ，１１０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２００ｍＬ）中において０℃に冷却し、ｔ−ＢｕＯＯＨ（デカン中における５Ｍ，２２ｍＬ，１１０ｍｍｏｌ）の溶液を５分にわたって加えた。次いで、該溶液を１時間にわたって、該ＫＯｔ−Ｂｕ溶液に滴下し、次いで、−３５℃で１時間攪拌し、次いで、注意深く、〜５０ｍＬの飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液でクエンチした。該混合物を通気し、室温に一晩温め、次いで、有機物を濃縮し、ＮＨ４Ｃｌ溶液で残渣を酸性化し、ろ過した。該固体を冷Ｈ２Ｏで洗浄し、乾燥させて、標題化合物を焦げ茶色固体として得た（２６．８ｇ，９６％）。
【００６５】
工程４．  ３−ブロモ−２，４−ジクロロ−５−ニトロピリジン
工程３由来の生成物（２６．８ｇ，１０６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（３００ｍＬ）中に懸濁し、ＰＯＣｌ３（４０ｍＬ，４１８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を９０℃に一晩加熱した。該混合物を冷却し、濃縮し、残渣を注意深く、氷および飽和Ｋ２ＣＯ３溶液でクエンチし、次いで、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせ、Ｈ２Ｏおよびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮して、標題化合物を暗色油状物として得た。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ２７２，２７４［Ｍ＋Ｈ］＋
【００６６】
工程５．  ３−ブロモ−２−クロロ−４−エチルアミノ−５−ニトロピリジン
工程４由来の生成物（１８ｇ，６６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１５０ｍＬ）中に溶解し、Ｅｔ３Ｎ（９．８ｍＬ，７０ｍｍｏｌ）を加え、次いで、エチルアミン（ＴＨＦ中における２Ｍ，３３ｍＬ，６６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で２時間攪拌し、次いで、Ｈ２Ｏ中に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせ、Ｈ２Ｏおよびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮して、標題化合物をオレンジ色の油状物として得た（１６．５ｇ，８９％）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ２８０，２８２［Ｍ＋Ｈ］＋
【００６７】
工程６．  ３−ブロモ−４−エチルアミノ−２−（４−フルオロフェノキシ）−５−ニトロピリジン
工程５由来の生成物（１０．０ｇ，３５．６ｍｍｏｌ）、４−フルオロフェノール（４．４ｇ，３９．２ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（１０ｇ）をアセトニトリル（１００ｍＬ）中において合わせ、週末にかけて８０℃に加熱した。次いで、該混合物をＨ２Ｏ中に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせ、Ｈ２Ｏおよびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮して油状物を得、それをクロマトグラフィー（ヘキサン中における５−３０％ＥｔＯＡｃ）に付して、標題化合物を黄色固体として得た（１０．４ｇ，８２％）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３５６，３５８［Ｍ＋Ｈ］＋
【００６８】
工程７．  ５−ブロモ−Ｎ４−エチル−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−３，４−ピリジンジアミン
工程６由来の生成物（２．７ｇ，７．６ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ（３０ｍＬ）中に溶解し、１ｍＬ濃ＨＣｌを加え、次いで、ＳｎＣｌ２（１０．０ｇ）を徐々に加えた。該混合物を室温で２時間攪拌し、次いで、濃縮し、残渣を飽和Ｋ２ＣＯ３溶液でクエンチし、次いで、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせ、Ｈ２Ｏおよびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮して、標題化合物を暗色油状物として得た（２．３ｇ，９１％）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３２６，３２８［Ｍ＋Ｈ］＋
【００６９】
工程８．  Ｎ−｛５−ブロモ−４−（エチルアミノ）−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−３−ピリジニル｝−２−シアノアセトアミド
工程７由来の生成物（２．２４ｇ，６．９ｍｍｏｌ）、シアノ酢酸（１．１７ｇ，１３．７ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（２．６０ｇ，１３．７ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）中において合わせ、Ｅｔ３Ｎ（３．８ｍＬ，２７．４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で一晩攪拌した。次いで、該混合物をＨ２Ｏ中に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を合わせ、Ｈ２Ｏおよびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮して、標題化合物を暗色固体として得（２．７ｇ，９９％）、それを精製することなく用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３９３，３９５［Ｍ＋Ｈ］＋
【００７０】
工程９．  ｛７−ブロモ−１−エチル−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝アセトニトリル
工程８由来の生成物（２．７ｇ，６．９ｍｍｏｌ）をＨＯＡｃ中、１００℃に１時間加熱し、次いで、冷却し、濃縮した。残渣を氷および飽和Ｋ２ＣＯ３溶液で塩基性にし、次いで、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせ、Ｈ２Ｏおよびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮し、残渣をクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物を褐色固体として得た（２．２５ｇ，８６％）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３７５，３７７［Ｍ＋Ｈ］＋
【００７１】
工程１０．  ４−｛７−ブロモ−１−エチル−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−フラザン−３−アミン
工程９由来の生成物（２．２５ｇ，６ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中に溶解し、６Ｍ  ＨＣｌ（３ｍＬ）を加え、次いで、ＮａＮＯ２（０．４１４ｇ，６ｍｍｏｌ，〜１００ｍｇずつ）を加えた。該混合物を１時間攪拌し、得られた沈殿物をろ過し、乾燥させ、次いで、ジオキサン（１５ｍＬ）中に懸濁し、ＮＨ２ＯＨ（５０％水溶液，６００μＬ）およびＥｔ３Ｎ（３ｍＬ）と合わせ、１００℃に１時間加熱した。次いで、該溶液を冷却し、Ｈ２Ｏ中に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮して固体を得、それをジオキサン（１０ｍＬ）中に再懸濁し、Ｅｔ３Ｎ（３ｍＬ）と合わせ、次いで、密閉チューブ中、１４０℃に３時間加熱し、次いで、冷却し、Ｈ２Ｏ中に注ぎ入れた。該混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮して、標題化合物をオフホワイト色の固体として得た（１．３ｇ，５２％）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４１９，４２１［Ｍ＋Ｈ］＋
【００７２】
工程１１．  ４−｛１−エチル−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−７−フェニル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−フラザン−３−アミン
工程１０由来の生成物（１００ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）をジオキサン（２ｍＬ）および２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３（０．３ｍＬ）中におけるフェニルボロン酸（４４ｍｇ，０．３５ｍｍｏｌ）および（ｄｐｐｆ）２ＰｄＣｌ２（２０ｍｇ）と合わせ、９０℃に一晩加熱した。該混合物を冷却し、Ｈ２Ｏ中に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮し、粗物質を逆相ＨＰＬＣによって精製して、標題化合物を褐色固体として得た（４５ｍｇ，４５％）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４１７［Ｍ＋Ｈ］＋
【００７３】
実施例２
４−｛１−エチル−７−（４−フルオロフェニル）−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−フラザン−３−アミン
実施例１，工程１０由来の生成物を、４−フルオロフェニルボロン酸を用いることを除き、実施例１，工程１１のように処理して標題化合物を褐色固体として得た。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４３５［Ｍ＋Ｈ］＋
【００７４】
実施例３
４−｛１−エチル−７−｛３−［（エチルアミノ）メチル］フェニル｝−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−フラザン−３−アミン
工程１．  ３−｛２−（４−アミノ−フラザン−３−イル）−１−エチル−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル｝ベンズアルデヒド
実施例１，工程１０由来の生成物を、３−ホルミルベンゼンボロン酸を用いることを除き、実施例１，工程１１に記載のように処理して標題化合物を茶色固体として得た。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４４５［Ｍ＋Ｈ］＋
【００７５】
工程２．  ４−｛１−エチル−７−｛３−［（エチルアミノ）メチル］フェニル｝−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−フラザン−３−アミン
工程１由来の生成物（１０６ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（２ｍＬ）中に溶解し、ＥｔＮＨ２（７０％水性  １００μＬ）およびＮａ（ＯＡｃ）３ＢＨで処理し、室温で一晩攪拌した。該混合物を濃縮し、残渣を逆相ＨＰＬＣによって精製して、標題化合物をオフホワイト色の固体として得た（７７ｍｇ，６７％）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４７４［Ｍ＋Ｈ］＋
【００７６】
実施例４
４−｛７−｛［（３Ｓ）−３−アミノ−１−ピロリジニル］カルボニル｝−１−エチル−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−フラザン−３−アミン
工程１．  ２−（４−アミノ−フラザン−３−イル）−１−エチル−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−カルボン酸
ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍ，１．５ｍＬ，３．８ｍｍｏｌ）を、ｉ−Ｐｒ２ＮＨ（５６０μＬ，４．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）中溶液に加えた。次いで、該溶液を、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中における実施例１，工程１０由来の生成物（８００ｍｇ，１．９ｍｍｏｌ）の冷却した（−７８℃）溶液に滴下した。得られた混合物を５分間攪拌し、次いで、ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍ，２．４ｍＬ，３．１ｍｍｏｌ）を加え、該暗色溶液をさらに１０分間攪拌し、次いで、該溶液中にＣＯ２ガスをバブルし（すぐに黄色沈殿が生じる）、該混合物を室温に温めた。該不均一混合物を濃縮し、ＭｅＯＨ中に溶解し、次いで、水性ＨＣｌで処理し、再濃縮して、標題化合物を褐色固体として得た。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３８５［Ｍ＋Ｈ］＋
【００７７】
工程２．  ４−｛７−｛［（３Ｓ）−３−アミノ−１−ピロリジニル］カルボニル｝−１−エチル−６−［（４−フルオロフェニル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−フラザン−３−アミン
工程１由来の生成物（２００ｍｇ，〜０．５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）中に溶解し、カルボニルジイミダゾール（２４０ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）で処理し、室温で一晩攪拌した。次いで、該溶液を３−（Ｓ）−ＢＯＣ−アミノピロリジン（２８０ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）で処理し、一晩攪拌した。該溶液をＨ２Ｏ中に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮して油状物を得、それをＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中に溶解し、ＴＦＡ（１ｍＬ）で１時間処理し、次いで、濃縮した。粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、標題化合物を白色固体として得た（８９ｍｇ，３９％）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４５３［Ｍ＋Ｈ］＋
【００７８】
実施例５
（３−｛［２−（４−アミノ−フラザン−３−イル）−７−ブロモ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−６−イル］オキシ｝フェニル）カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
標題化合物は、実施例１，工程６−１０の一般的方法によって、３−ブロモ−２−クロロ−４−エチルアミノ−５−ニトロピリジンおよび（３−ヒドロキシフェニル）カルバミン酸１，１−ジメチルエチルから出発して調製された。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ５１６／５１８［Ｍ＋Ｈ］＋
【００７９】
実施例６
Ｎ−（３−｛［２−（４−アミノ−フラザン−３−イル）−７−ブロモ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−６−イル］オキシ｝フェニル）アセトアミド
標題化合物は、実施例１，工程６−１０の一般的方法によって、３−ブロモ−２−クロロ−４−エチルアミノ−５−ニトロピリジンおよび３−アセトアミドフェノールから出発して調製された。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４５８／４６０［Ｍ＋Ｈ］＋
【００８０】
ＲＯＣＫキナーゼアッセイ：
ＲＯＣＫ阻害剤活性は、Ｓｆ９細胞中に発現されたヒト組み換えＲＯＣＫ１キナーゼドメイン（アミノ酸２−５４３）を用いて測定された（ＷＯ９９６７２８３参照）。該酵素は、Ｈｉｓ−タグＮＴＡカラムおよびＳｏｕｒｃｅ１５  ＨＰＬＣクロマトグラフィーを用いて精製した。Ｒｏｃｋ−１活性のアッセイは、ペプチド基質およびＡＴＰ３３とのインキュベーションを含み、それに続くＰ３３の該ペプチド中への取り込みをシンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ− Amersham Pharmacia）によって定量した。
ＩＣ５０決定のために、試験化合物を典型的には、１０ｍＭで１００％ＤＭＳＯ中に溶解し、次いで、１００％ＤＭＳＯ中において連続希釈した。典型的には、化合物を３倍希釈において、５０μＭ〜０．８ｎＭのアッセイ濃度を有する１１点希釈範囲にわたってアッセイした。ＩＣ５０値は、注文した曲線フィッティングソフトウェアによって計算し、次いで、ｐＩＣ５０に変換した。
【００８１】
アッセイは、不透明の白色壁３８４ウェルプレート中、全アッセイ容量２０μｌで行われた。該アッセイは：１ｎＭ  ｈＲＯＣＫ１；１μＭ  ビオチン化ペプチド（ビオチン−Ａｈｘ−ＡＫＲＲＲＬＳＳＬＲＡ−ＣＯＮＨ２）；１μＭ  ＡＴＰ；１ウェルにつき１．８５ｋＢｑ  ＡＴＰ（□−３３Ｐ）；２５ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ  ｐＨ７．４；１５ｍＭ  ＭｇＣｌ２；０．０１５％  ＢＳＡを含有した。反応物は、２２℃で１２０分間インキュベートし、次いで、６０ｍＭ  ＥＤＴＡおよびストレプトアビジンＰＶＴ  ＳＰＡビーズを含有する溶液５０μｌの添加によって終止した。該ＳＰＡビーズは、１ウェルあたり０．１４ｍｇの濃度まで加えられた。該プレートを２２℃で１０分間インキュベートした後、１５００ｒｐｍで１分間遠心分離した。Ｐ３３取り込みは、Ｐａｃｋａｒｄ  ＴｏｐＣｏｕｎｔにおけるシンチレーションカウンティングによって定量した。
【００８２】
限定するものではないが、特許および特許出願を包含する本明細書に引用される全ての出版物は、あたかも個々の出版物の各々が特別かつ個々に、その全体が示されているかのように出典明示によって本明細書の一部とされることが示されているかの如く、出典明示により、本明細書の一部とされる。
上記の記載は、好ましい具体例を包含する本発明を完全に開示するものである。本明細書中に開示される特定の具体例の修飾および改良は、特許請求の範囲の範囲内である。さらに工夫することなく、当業者は、上記の記載を用いて本発明をその完全な範囲まで利用することができると確信する。したがって、本明細書の実施例は、単なる例示として解釈されるべきであり、本発明の範囲を何ら限定するものではない。独占的な財産または特権を請求する本発明の具体例は、特許請求の範囲に示すとおりである。
【国際調査報告】
2007507549.tif 000008