(57)【要約】  本発明は、結核治療のための抗マイコバクテリア作用を有する複合薬および組成物を提供する。  本複合体および組成物には、化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な非毒性塩、【化１】2007537242.tif 000035および定量の１つ以上の第一選択抗結核薬が用いられる。【選択図】  なし
2007537242.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療上有効な量の化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な毒性塩、
【化１】
2007537242.tif 000033
ならびに治療上有効な量のイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドからなる群から選択される１つ以上の第一選択抗結核薬を含む、抗マイコバクテリア作用を有する複合薬。
【請求項２】
製剤上許容可能な賦形剤と混合された請求項１に記載の抗マイコバクテリア作用を有する複合薬を含む抗マイコバクテリア医薬組成物。
【請求項３】
前記製剤上許容可能な賦形剤は、酸化防止剤、不活性希釈剤、界面活性剤、潤滑剤、および乳濁剤から選択される請求項２に記載の抗マイコバクテリア医薬組成物。
【請求項４】
有効な結核治療に有用な、請求項１に記載の抗マイコバクテリア作用を有する複合薬。
【請求項５】
マイコバクテリウム−ツベルクローシス、マイコバクテリウムアビウム−イントラセルラー複合体、Ｍ．フォーツイタム、Ｍ．カンサシ、および他の関連したマイコバクテリア類の感受性菌および多剤耐性菌から選択されるマイコバクテリアに感染した状態／細胞を治療する請求項１に記載の抗マイコバクテリア作用を有する複合薬。
【請求項６】
有効な結核治療に有用な、請求項２に記載の抗マイコバクテリア医薬組成物。
【請求項７】
マイコバクテリウム−ツベルクローシス、マイコバクテリウムアビウム−イントラセルラー複合体、Ｍ．フォーツイタム、Ｍ．カンサシ、および他の関連したマイコバクテリア類の感受性菌および多剤耐性菌から選択されるマイコバクテリアに感染した状態／細胞を治療する請求項２に記載の抗マイコバクテリア組成物。
【請求項８】
治療完了時に感受性および薬剤耐性のＭ．ツベルクローシスを根絶している請求項１に記載の抗マイコバクテリア作用を有する複合薬。
【請求項９】
治療完了時に感受性および薬剤耐性のＭ．ツベルクローシスを根絶している請求項２に記載の抗マイコバクテリア医薬組成物。
【請求項１０】
乾式造粒法、湿式造粒法、または直接打錠法を用いて、化学式（Ｉ）に示す化合物またはその製剤上許容可能な塩と、
【化２】
2007537242.tif 000034
１つ以上の第一選択抗結核薬とを組合せることを含む、抗マイコバクテリア医薬組成物を調製するプロセス。
【請求項１１】
化学式（Ｉ）に示す化合物またはその製剤上許容可能な非毒性塩、およびリファンピシ
ンを含む請求項１に記載の複合薬。
【請求項１２】
化学式（Ｉ）に示す化合物またはその製剤上許容可能な非毒性塩、およびイソニアジド
を含む請求項１に記載の複合薬。
【請求項１３】
化学式（Ｉ）に示す化合物またはその製剤上許容可能な非毒性塩、ならびにイソニアジ
ドおよびリファンピシンを含む請求項１に記載の複合薬。
【請求項１４】
化学式（Ｉ）に示す化合物またはその製剤上許容可能な非毒性塩、ならびにイソニアジ
ド、リファンピシン、およびピラジナミドを含む請求項１に記載の複合薬。
【請求項１５】
化学式（Ｉ）に示す化合物またはその製剤上許容可能な非毒性塩、ならびにピラジナミ
ドおよびエタンブトールを含む請求項１に記載の複合薬。
【請求項１６】
化学式（Ｉ）に示す化合物またはその製剤上許容可能な非毒性塩、ならびにリファンピ
シンおよびピラジナミドを含む請求項１に記載の複合薬。
【請求項１７】
１２．５ｍｇ／ｋｇまたは２５．０ｍｇ／ｋｇの化学式（Ｉ）に示す化合物あるいはその製剤上許容可能な非毒性塩、ならびに２０．０ｍｇ／ｋｇのリファンピシンを含む請求項１に記載の複合薬。
【請求項１８】
１２．５ｍｇ／ｋｇまたは２５．０ｍｇ／ｋｇの化学式（Ｉ）に示す化合物あるいはその製剤上許容可能な非毒性塩、ならびに２５．０ｍｇ／ｋｇのイソニアジドを含む請求項１に記載の複合薬。
【請求項１９】
１２．５ｍｇ／ｋｇまたは２５．０ｍｇ／ｋｇの化学式（Ｉ）に示す化合物あるいはその製剤上許容可能な非毒性塩、ならびに２５．０ｍｇ／ｋｇのイソニアジドおよび２０．０ｍｇ／ｋｇのリファンピシンを含む請求項１に記載の複合薬。
【請求項２０】
１２．５ｍｇ／ｋｇまたは２５．０ｍｇ／ｋｇの化学式（Ｉ）に示す化合物あるいはその製剤上許容可能な非毒性塩、ならびに２５．０ｍｇ／ｋｇのイソニアジド、２０．０ｍｇ／ｋｇのリファンピシン、および１５０．０ｍｇ／ｋｇのピラジナミドを含む請求項１に記載の複合薬。
【請求項２１】
１２．５ｍｇ／ｋｇまたは２５．０ｍｇ／ｋｇの化学式（Ｉ）に示す化合物あるいはその製剤上許容可能な非毒性塩、ならびに１５０．０ｍｇ／ｋｇのピラジナミドおよび１００．０ｍｇ／ｋｇのエタンブトールを含む請求項１に記載の複合薬。
【請求項２２】
３．１２ｍｇ／ｋｇ、６．２５ｍｇ／ｋｇ、または１２．５ｍｇ／ｋｇの化学式（Ｉ）に示す化合物あるいはその製剤上許容可能な非毒性塩、ならびに２５０．０ｍｇ／ｋｇのイソニアジド、２０．０ｍｇ／ｋｇのリファンピシン、および１５０．０ｍｇ／ｋｇのピラジナミドを含む請求項１に記載の複合薬。
【請求項２３】
３．１２ｍｇ／ｋｇ、６．２５ｍｇ／ｋｇ、または１２．５ｍｇ／ｋｇの化学式（Ｉ）に示す化合物あるいはその製剤上許容可能な非毒性塩、ならびに２０．０ｍｇ／ｋｇのリファンピシンおよび１５０．０ｍｇ／ｋｇのピラジナミドを含む請求項１に記載の複合薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、多剤耐性結核や潜伏結核を含む結核を治療するための、有効な量の化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な塩、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬に関する。
【０００２】
さらに、本発明は、１つ以上の製剤上許容可能な賦形剤と混合された、有効な量の化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な塩と、１つ以上の第一選択抗結核薬との複合薬を含む医薬組成物に関する。本組成物は多剤耐性結核や潜伏結核を含む結核を治療するために用いることができる。
【０００３】
さらに、本発明は、多剤耐性結核や潜伏結核を含む結核を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００４】
世界的に、結核は未だ主たる死因の１つである。毎年約８百万人が新規感染し、３百万人が死亡している。約１７億人（世界人口の３分の１）が潜伏性マイコバクテリウム−ツベルクローシスに感染していると推定されている（コウチ（Ｋｏｃｈｉ，Ａ．）『Ｔｕｂｅｒｃｌｅ．』１９９１年、７２、１〜６頁）。潜伏結核の感染者にとって、本疾病が後に再活性化する可能性は２〜２３％である（パリッシュ（Ｐａｒｒｉｓｈ，ＮＭ．）、ディック（Ｄｉｃｋ，ＪＤ．）、バイサイ（Ｂｉｓｈａｉ，ＷＲ．）『Ｔｒｅｎｄｓ．Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ．』１９８０年、６、１０７〜１１２頁）。ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染などの免疫が抑制された状態においては、結核再活性化の危険が劇的に高まる。
【０００５】
薬剤耐性病原体の出現に伴い、治療の現状は非常に難しくなり、多くの場合、全く有効ではなくなる。多剤耐性結核の治療は難しく、とくに発展途上国においてこの疾病による死亡率は高い。今後２０年間で、１０億人以上の人間が新たに結核に感染し、そのうち３５百万人の人間がこの疾病のために死亡すると予測されている（世界保健機構ファクトシ−トＮｏ．１０４、抗結核薬開発のための世界協力、結核対策開発科学計画エグゼクティブサマリ、http://www.who.int/inf-fs/en/fact104.html ）。ＨＩＶ合併結核の出現により、この疾病は今日の世界における致死病の１つとして深刻なものとなっている。世界保健機構（ＷＨＯ）は薬剤耐性菌の拡散を防止するために、結核感染を直ちに管理する必要性を重点的に宣言している。
【０００６】
現在の結核治療における問題の１つに、Ｍ．ツベルクローシスが休止つまり潜伏状態へと移行することが挙げられる。従って、現行規定の複合薬療法を用いた活性結核の治療において細菌量が相当量減少するのに対して、一定割合の細菌は休止状態へと移行し、いかなる明白な疾病を引き起こすことなく数か月または数年にわたって宿主の体内で生存する。しかしながら、後に細菌が再活性化し、再び活性結核を引き起こすことがある。今日、結核再発は、宿主の体内に生存している潜伏性有機体の再活性化によるものと考えられている  （ステッド（Ｓｔｅａｄ、ＷＷ．）『Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｄｉｓ．』１９８２年、９５、７２９〜７４５頁、ステッド、ケルビー（Ｋｅｒｂｙ，ＧＲ．）、シュロイター（Ｓｃｈｌｅｕｔｅｒ）、ヨーダル（Ｊｏｒｄａｈｌ，ＣＷ．）『Ａｎｎ．Ｉｎｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．』１９６８年、６８、７３１〜７４５頁）。
【０００７】
Ｍ．ツベルクローシスに対処するために用いられた最初の薬剤は、Ｍ．ツベルクローシスの成長を阻害することが見出されたストレプトマイシン（１９４４年）であった。過去３０年にわたって、以下のような数種類の化合物が臨床診療に導入されてきた。
【０００８】
ａ）長時間作用型リファマイシン（リファペンチン、リファブチン、およびリファラジル等）（ジェイビス（Ｊａｖｉｓ，Ｂ．）、ラム（Ｌａｍｂ，ＨＭ．）『Ｄｒｕｇｓ』１９９８年、５６、６０７〜６１６頁、マクレガー（ＭｃＧｒｅｇｏｒ，ＭＭ．）、オリアロ（Ｏｌｌｉａｒｏ，Ｐ．）、ウォルマランズ（Ｗｏｌｍａｒａｎｓ，Ｌ．）『Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．』１９９６年、１５４、１４６２〜１４６７頁、ショーン（Ｓｈｏｅｎ，ＣＭ．）、デステファノ（ＤｅＳｔｅｆａｎｏ，ＭＳ．）、シナモン（Ｃｙｎａｍｏｎ，ＭＨ．）『Ｃｌｉｎ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．』２０００年、３０（増刊号３）、Ｓ２８８〜Ｓ２９頁）
ｂ）フルオロキノロン化合物（レボフロキサシン、モキシフロキサシン、およびガチフロキサシン等）（ジイ（Ｊｉ，Ｂ）、ルーニス（Ｌｏｕｎｉｓ，Ｎ．）、トルフォット−パーノット（Ｔｒｕｆｆｏｔ−Ｐｅｒｎｏｔ，Ｃ．）、グロセット（Ｇｒｏｓｓｅｔ）『Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．』１９９５年、３９、１３４１〜１３４４頁、ミヤザキ（Ｍｉｙａｚａｋｉ，Ｅ．）、ミヤザキ（Ｍｉｙａｚａｋｉ，Ｍ．）、チェン（Ｃｈｅｎ，ＪＭ．）、チェイソン（Ｃｈａｉｓｓｏｎ，ＲＥ．）、バイサイ『Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．』１９９９年、４３、８５〜８９頁、ファン−トムク（Ｆｕｎｇ−Ｔｏｍｃ，Ｊ．）、ミナシアン（Ｍｉｎａｓｓｉａｎ，Ｂ．）、コレイク（Ｋｏｌｅｋ，Ｂ．）、ワショー（Ｗａｓｈｏ，Ｔ．）、フクズコ（Ｈｕｃｚｋｏ，Ｅ．）、ボナー（Ｂｏｎｅｒ，Ｄ．）『Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．』２０００年、４５、４３７〜４４６頁）
ｃ）オキサゾリジノン化合物（シナモン、クレメンス（Ｋｌｅｍｅｎｓ，ＳＰ．）、シャープ（Ｓｈａｒｐｅ，ＣＡ．）、チェース（Ｃｈａｓｅ，ＳＣ．）『Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．』１９９９年、４３、１１８９〜１１９１頁）
ｄ）ニトロイミダゾピラン（ストローバー（Ｓｔｒｏｖｅｒ，ＣＫ．）、ワレナー（Ｗａｒｒｅｎｅｒ，Ｐ．）、ヴァンデヴァブター（ＶａｎＤｅｖａｂｔｅｒ，Ｄ．）『Ｎａｔｕｒｅ』２０００年、４０５、９６２〜９６６頁）
しかしながら、これらの化合物はいずれも、多剤耐性および／または潜伏結核を有効に治療する望ましい可能性を示さなかった。
【０００９】
リファペンチンおよびリファラジルは、より少ない量（間欠治療）の薬剤投与で結核を有効に治療する。これら２つの薬剤の組合せは、潜伏結核の防止にリファンピシンよりも有効であることが報告されている。しかしながら、これらの薬剤は、リファンピシンと同一のファーマコフォアを有するため、耐性菌に対する活性スペクトルの著しい向上は見られず、Ｍ．ツベルクローシスの多剤耐性菌に対して微量ではあまり有効ではない。さらに、これらの化合物の多くは毒性があることが証明されている。
【００１０】
結核治療には、ｐ−アミノサリサイクリック酸、イソニアジド、ピラジナミド、エタンブトール、エチオナミド、およびリファンピシン等の数多くの薬剤が単独でまたは組合せて用いられてきた。ストレプトマイシン耐性菌に感染した患者の治療において、これらの薬剤がストレプトマイシンよりも有効であることが見出されたことにより、結核が有効に治療される時代となりつつある。
【００１１】
現在の結核治療においては、４つの第一選択薬、すなわちイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドの複合薬が個々に単一薬剤としての調剤物または薬剤量を固定した組合せで投与される。有効な治療のために、急速に増殖するＭ．ツベルクローシスを殺菌する目的のみならず薬剤耐性の出現を防止する目的で複合薬が用いられる初期または導入期において、上記した４つの第一選択薬が患者に投与される。次いで、間欠的に分裂しているＭ．ツベルクローシスを殺菌するために滅菌用薬剤、すなわちイソニアジド、リファンピシン、およびピラジナミドが投与される維持期に入る（ジンダニ（Ｊｉｎｄａｎｉ，Ａ．）、エイバー（Ａｂｅｒ，ＶＲ．）、エドワーズ（Ｅｄｗａｒｄｓ，ＥＡ．）、ミッチソン（Ｍｉｔｃｈｉｓｏｎ，ＤＡ．）『Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｄｉｓ．』１９８０年、１２１、３９〜４９頁、グロセット（Ｇｒｏｓｓｅｔ，Ｊ．）『Ｔｕｂｅｒｃｕｌｅ』１９７８年、５９、２８７〜２９７頁、東アフリカ／英国医学研究協議会研究会『Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｄｉｓ．』１９７７年、１１５、３〜８頁；シンガポール結核対策協会／英国医学研究協議会『Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｄｉｓ．』１９７９年、１１９、５７９〜５８５頁、英国胸部疾患学会および結核対策協会『Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｄｉｓ．』１９８２年、１２６、４６０〜４６２頁、スナイダー（Ｓｎｉｄｅｒ，ＤＥ．）、ロゴウスキー  （Ｒｏｇｏｗｓｋｉ，Ｊ．）、ジルスキー（Ｚｉｅｒｓｋｉ，Ｍ．）、ベック（Ｂｅｋ，Ｅ．）、ロング（Ｌｏｎｇ，ＭＷ．）『Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｄｉｓ．』１９８２年、１２５、２６５〜２６７頁）。
【００１２】
上記第一選択薬の複合薬は共に、感受性Ｍ．ツベルクローシス感染に対する治療に４〜６か月間用いられるが、このような複合薬の治療は、特に多剤耐性菌に感染した患者に対して必ずしも成功を収めない。６か月という長期の治療は、しばしば好ましくない副作用を引き起こす。さらに、比較的長期にわたる治療への遵守は低くなるのが一般的である。このような遵守不良は、しばしば治療の失敗、さらには薬剤耐性の進行に繋がる。
【００１３】
一方、治療に用いられるサイクロセリン、クロファジミン、およびカプレオマイシン等の第二選択薬は、より高価であり、深刻な副作用を引き起こす可能性があり、第一選択薬に劣る。
【００１４】
置換ピロール誘導体は他種類の化合物を構成し、抗マイコバクテリア剤として期待されている。多くのピロール誘導体が合成され、抗結核活性について試験されている（デイッダ（Ｄｅｉｄｄａ，Ｄ．）ら『Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．』１９９８年、３０３５〜３０３７頁、ビアバ（Ｂｉａｖａ，Ｍ．）ら『Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ  Ｒｅｓ．』１９９９年、１９〜３４頁、ビアバら『Ｂｉｏｏｒｇ．＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．』１９９９年、９、２９８３〜２９８８頁、チェレット（Ｃｅｒｒｅｔｏ，Ｆ．）ら『Ｅｕｒ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．』１９９２年、２７、７０１〜７０８頁、ジレット（Ｇｉｌｌｅｔ，Ｃ．）ら『Ｅｕｒ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．−Ｃｈｉｍｉｃａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａ』１９７６年、１１（２）、１７３〜１８１頁、ラグノー（Ｒａａｇｎｏ，Ｒ．）ら『Ｂｉｏｏｒｇ＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．』２０００年、８、１４２３〜１４３２頁）。動物モデルにおける実験的な結核に対して、ここで開示されている化合物の生体内活性や毒性は報告されておらず、これらの化合物は、薬剤ではなく薬剤候補に過ぎない。すなわち、これらの化合物は商業的関心よりも学術的関心に基づいたものである。
【００１５】
よって、結核を防止、治療、および／または減少させ、ならびに／あるいは多剤耐性結核および／または潜伏結核の脅威を排除するために用いることが可能なより新しい療法を発展させることが急務である。
【００１６】
代替となる療法は、
ａ）治療の全体期間を短縮し、および／または全薬剤量を著しく減少させ、
ｂ）多剤耐性結核に対して有効な治療を提供し、
ｃ）潜伏結核に対してより有効な治療を提供し、かつ
ｄ）副作用を最低限に抑制、または防止する、という点を満たすように現行の療法よりも優れていなくてはならない。
【００１７】
本発明者らのＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９（ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）において、本発明者らは、Ｍ．ツベルクローシスの感受性菌および薬剤耐性菌に対して良い乃至は優れた阻害活性を示すいくつかの置換ピロール誘導体、およびその製剤上許容可能な塩について記載した。Ｍ．ツベルクローシスの感受性菌および多剤耐性菌に対して最も活性的ないくつかの化合物のＭＩＣ値は、０．１２〜０．５μｇ／ｍｌであった。さらに、いくつかの化合物はＭ．ツベルクローシスに感染した動物に対して治療上著しい生体内活性を示し、かつ、マウスの場合の致死量50がイソニアジドでは１３３ｍｇ／ｋｇであるのに対して、約７００ｍｇ／ｋｇであり、安全であることが見出された。さらには、本化合物は優れた薬物動態を有する。ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９（ＷＯ０４／０２６８２８Ａ）に言及することにより、そのすべての内容は本出願に組み込まれるものである。
【００１８】
本発明者らは、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９（ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示した数多くのピロール誘導体がいくつかの第一選択薬と組合せて用いられる場合に相乗効果をもたらし、これによって多剤耐性結核および潜伏結核を含む結核の新しい治療が提供されることを見出した。ここに記載される治療は、当該分野における公知の薬剤療法よりも優れている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１９】
発明の目的
本発明の目的は、多剤耐性結核および潜伏結核を含む結核を有効に治療するための、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９（ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示した１つ以上のピロール誘導体、および１つ以上の他の抗結核薬を含む複合薬を提供することにある。
【００２０】
本発明のさらなる目的は、相乗的に有効な量のＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９（ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および有効な量の１つ以上の第一選択抗結核薬を含む新規の複合薬を提供することにある。
【００２１】
本発明のさらなる目的は、マイコバクテリウム−ツベルクローシス、マイコバクテリウムアビウム−イントラセルラー複合体、Ｍ．フォーツイタム、Ｍ．カンサシ、または他の関連したマイコバクテリア類の１つ以上の感受性菌および多剤耐性菌を含むがこれらに限定されないマイコバクテリアに感染した状態／細胞に対する阻害および／または治療上有効な、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９（ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示した１つ以上のピロール誘導体、および１つ以上の他の抗結核薬を含む複合薬を提供することにある。
【００２２】
本発明のさらなる目的は、結核の有効な治療を提供することにある。
【００２３】
本発明のさらなる目的は、治療期間を６か月よりも短縮することにある。
【００２４】
本発明のさらなる目的は、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９  （ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬を、治療を必要とする患者に投与することを含む結核治療を提供することにある。
【００２５】
本発明のさらなる目的は、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９  （ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬を、治療を必要とする患者に投与することを含む、感受性菌および薬剤耐性菌を根絶する結核治療を提供することにある。
【００２６】
本発明のさらなる目的は、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９  （ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬を、治療を必要とする患者に投与することを含む、感受性および薬剤耐性のＭ．ツベルクローシスを根絶する有効な結核治療を提供することにある。
【００２７】
本発明のさらなる目的は、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９  （ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬を、治療を必要とする患者に投与することを含む、マイコバクテリウム−ツベルクローシス、マイコバクテリウムアビウム−イントラセルラー複合体、Ｍ．フォーツイタム、Ｍ．カンサシ、または他の関連したマイコバクテリア類等の１つ以上の感受性菌および薬剤耐性菌を根絶する有効な結核治療を提供することにある。
【００２８】
本発明のさらなる目的は、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９  （ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬から構成される医薬組成物を、治療等を必要とする患者に投与することを含む、Ｍ．ツベルクローシス、マイコバクテリウムアビウム−イントラセルラー複合体、Ｍ．フォーツイタム、Ｍ．カンサシ、および他の関連したマイコバクテリア類を含むがこれらに限定されない１つ以上の多剤耐性菌を治療および／または阻害する方法を提供することにある。
【００２９】
本発明のさらなる目的は、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９  （ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬を治療を必要とする患者に投与することを含む治療終了後に結核の再発を防止する方法を提供することにある。
【００３０】
本発明のさらなる目的は、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９  （ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬を、治療を必要とする患者に投与することを含む治療終了後にＭ．ツベルクローシス感染の再発を防止する方法を提供することにある。
【００３１】
本発明のさらなる目的は、多剤耐性結核および潜伏結核を含む結核を有効に治療するための、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９（ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬から構成される医薬組成物を提供することにある。
【００３２】
本発明のさらなる目的は、相乗的に有効な量のＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９（ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および有効な量の１つ以上の第一選択抗結核薬から構成される医薬組成物を提供することにある。
【００３３】
本発明のさらなる目的は、マイコバクテリウム−ツベルクローシス、マイコバクテリウムアビウム−イントラセルラー複合体、Ｍ．フォーツイタム、Ｍ．カンサシ、および他の関連したマイコバクテリア類の１つ以上の感受性菌および多剤耐性菌を含むがこれらに限定されないマイコバクテリアに感染した状態／細胞に対する阻害および／または治療上有効な、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９（ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬から構成される医薬組成物を提供することにある。
【００３４】
本発明のさらなる目的は、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９  （ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬から構成される医薬組成物を、治療を必要とする患者に投与することを含む有効な結核治療を提供することにある。
【００３５】
本発明のさらなる目的は、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９  （ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および１つ以上の第一選択抗結核薬から構成される医薬組成物を、治療を必要とする患者に投与することを含む、感受性菌および薬剤耐性菌を根絶する結核治療を提供することにある。
【００３６】
本発明のさらなる目的は、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９  （ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬から構成される医薬組成物を、治療を必要とする患者に投与することを含む、感受性および薬剤耐性のＭ．ツベルクローシスを根絶する有効な結核治療を提供することにある。
【００３７】
本発明のさらなる目的は、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９  （ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬から構成される医薬組成物を、治療を必要とする患者に投与することを含む、マイコバクテリウム−ツベルクローシス、マイコバクテリウムアビウム−イントラセルラー複合体、Ｍ．フォーツイタム、Ｍ．カンサシ、または他の関連したマイコバクテリア類等の１つ以上の感受性菌および薬剤耐性菌を根絶する有効な結核治療を提供することにある。
【００３８】
本発明のさらなる目的は、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９  （ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬から構成される医薬組成物を、治療を必要とする患者に投与することを含む治療終了後に結核の再発を防止する方法を提供することにある。
【００３９】
本発明のさらなる目的は、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９  （ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬から構成される医薬組成物を、治療を必要とする患者に投与することを含む治療終了後にＭ．ツベルクローシス感染の再発を防止する方法を提供することにある。
【００４０】
本発明のさらなる目的は、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９  （ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬から構成される医薬組成物を、治療等を必要とする患者に投与することを含む、Ｍ．ツベルクローシス、マイコバクテリウムアビウム−イントラセルラー複合体、Ｍ．フォーツイタム、Ｍ．カンサシ、および他の関連したマイコバクテリア類を含むがこれらに限定されない１つ以上の多剤耐性菌を治療および／または阻害する方法を提供することにある。
【００４１】
本発明のさらなる目的は、有効な量のＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９（ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示したピロール誘導体、および有効な量の１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬から構成される組成物を調製するプロセスを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００４２】
発明の概要
本発明は、治療上有効な量の化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な非毒性塩、
【００４３】
【化１】
2007537242.tif 000003
【００４４】
ならびに治療上有効な量のイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドからなる群から選択される１つ以上の第一選択抗結核薬を含む、抗マイコバクテリア作用を有する複合薬に関する。
【００４５】
さらに本発明は、乾式造粒法、湿式造粒法、または直接打錠法を用いて、化学式（Ｉ）に示す化合物またはその製剤上許容可能な塩と、
【００４６】
【化２】
2007537242.tif 000004
【００４７】
１つ以上の第一選択抗結核薬とを組合せることを含む、抗マイコバクテリア医薬組成物を調製するプロセスを提供する。
【００４８】
さらに本発明は、多剤耐性結核や潜伏結核を治療するための、治療上有効な量の化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な非毒性塩、
【００４９】
【化３】
2007537242.tif 000005
【００５０】
ならびに治療上有効な量のイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドから選択される１つ以上の第一選択抗結核薬を含む抗マイコバクテリア作用を有する複合薬を提供する。
【００５１】
さらに本発明は、マイコバクテリウム−ツベルクローシス、マイコバクテリウムアビウム−イントラセルラー複合体、Ｍ．フォーツイタム、Ｍ．カンサシ、および他の関連したマイコバクテリア類の感受性菌および多剤耐性菌を含むがこれらに限定されない１つ以上のマイコバクテリアに感染した状態／細胞を治療および／または阻害するための、治療上有効な量の化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な非毒性塩、
【００５２】
【化４】
2007537242.tif 000006
【００５３】
ならびに治療上有効な量のイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドから選択される１つ以上の第一選択抗結核薬を含む、抗マイコバクテリア作用を有する複合薬を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００５４】
発明の詳細な説明
特に明記されない限り、本明細書において用いられる技術的および科学的用語は、本発明が属する当該分野における当業者に一般的に理解されているものと同一の意味を有する。本明細書に記載されるものと同様または同等の方法および物質はいずれも本発明の実施または試験に用いることが可能である。
【００５５】
特に明記されない限り、「含む」、「含有する」、「構成される」、および「有する」等の語は、「含むがこれに限定されない」ことを意味し、含むという述語の主語である一般的記載を、目的語である特定または同等の項目または物質に限定するものとして解釈してはならない。
【００５６】
本発明に係る実施形態は互いに排他的ではなく、種々に組合せて実施してもよい。記載される本発明の実施形態および開示される実施例は、添付の請求項に記載される本発明を説明するためのものであり、限定するためのものではない。
【００５７】
本発明のために、以下の用語を以下のように定義する。
【００５８】
化合物、複合薬、または組成物「を〜に投与する」、「の投与」、および  「を投与」という語は、化合物、複合薬、組成物、または化合物のプロドラッグを、治療を必要とする患者に提供することを意味するものとして理解されるべきである。
【００５９】
本明細書において用いられる「共投与」という語は、複合薬中に存在する個々の化合物を共にまたは別々に投与するという意味を包括するものとして意図されている。「共投与」は、複合薬に含まれる化合物のうち２種類以上の化合物を一緒に投与し、残りの化合物を別々に又は一緒に、もしくはその他の方法で投与するという組合せを包括することができる。各化合物を異なるタイミングおよび異なる経路で別々に投与することも、共投与と見なすことができる。個々の化合物の投与経路が同一の場合、共投与には、複合薬に含まれる２種類以上の化合物を組み合わせて投与することも含まれる。例えば、個々の化合物が全て同一経路（経口投与等）で投与される場合、複合薬中の個々の化合物の１種類以上を、その同一経路での投与に適した剤形に調剤可能である。「共投与」は、複合薬に含まれる１種類以上の化合物を一緒に（単一の剤形等で）または別々に投与することを包含するとも解釈される。
【００６０】
本明細書において用いられる「組成物」という語は、特定成分から構成される生成物のみならず、特定成分の組合せにより直接的または間接的に生成されるいずれの生成物も包括するものとして意図されている。「組成物」は、単一の化合物または１つより多い化合物を含んでいてもよい。「組成物」は、１つ以上の有効成分を含んでいてもよい。
【００６１】
「根絶」という語は、本発明による治療を受けた対象臓器、すなわち感染した動物またはヒトの肺臓または脾臓において、指定された潜伏期間後に培養可能なマイコバクテリアが存在しないということを意味する。
【００６２】
「賦形剤」という語は、充填剤、希釈剤、および担体等の、有効成分ではない医薬生成物または組成物を意味する。医薬組成物の調製に有用な賦形剤は、製剤上許容可能であることが好ましい。
【００６３】
本明細書において用いられる「製剤上許容可能」という語は、担体、充填剤、希釈剤、または賦形剤は、調剤される他の成分と併用可能であり、摂取された場合に有害でないということを意味する。
【００６４】
「医薬組成物」という語は、１つまたは複数の有効成分、製剤上許容可能な１つまたは複数の賦形剤のみから構成される生成物のみならず、２つ以上の任意の成分の組合せ、複合、または凝集、１つ以上の成分および／または賦形剤の分離、あるいは１つ以上の成分および／または賦形剤の他の種類の反応または相互作用から、直接的または間接的に生成されるいずれの生成物も包括するものとして意図されている。従って、本発明による医薬組成物は、有効成分、１つまたは複数の付加的な有効成分、および製剤上許容可能な賦形剤を混合して生成されるいずれの組成物をも含む。
【００６５】
「相乗」または「相乗的」という語は、以下を含むがこれらに限定されない。
【００６６】
（i ）数量または分量において、特定の化合物、有効成分、または薬剤が１つ以上の他の有効成分、化合物、または薬剤と組合せられる場合、個々に投与する場合に必要となる投薬量よりも少ない投与量で投与可能となること、ならびに／あるいは
（ii）性質／時間において、特定の有効成分、化合物、または薬剤を組合せる場合、個々に投与する場合よりも効力が向上することや、治療期間が短縮すること。
【００６７】
ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９（ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）では、抗マイコバクテリア活性を示すピロール誘導体が開示されている。生体内効力および低毒性から明らかとなるように、これらの誘導体は、従来知られている化合物よりも優れていることが見出されている。ここに開示された９０余りの化合物の中でも、本出願における化学式（Ｉ）に示す化合物としても指定されている、化合物番号１２、すなわちＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドおよびその製剤上許容可能な非毒性塩は、Ｍ．ツベルクローシスの感受性菌および多剤耐性菌に対して優れた抗マイコバクテリア活性を示すことが見出された。
【００６８】
【化５】
2007537242.tif 000007
【００６９】
なお、化学式（Ｉ）に示す化合物への言及には、その製剤上許容可能な非毒性酸付加塩も含まれる。適切な塩は、有機酸および無機酸のいずれを用いて生成されてもよく、マレイン酸、フマル酸、安息香酸、アスコルビン酸、パモン酸、コハク酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、酢酸、プロピオン酸、酒石酸、クエン酸、グルコン酸、ステアリン酸、パルミチン酸、イタコン酸、グリコール酸、ｐ−アミノ安息香酸、グルタミン酸、ベンゼンスルファミック酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、リン酸、硫酸、硝酸、塩酸、臭化水素酸等を用いて生成される塩を含む。
【００７０】
治療上有効な量の化学式（Ｉ）に示す化合物は、望ましい抗結核特性を有することが見出された。しかしながら、化学式（Ｉ）に示す化合物がイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミド等のいくつかの第一選択抗結核薬と共投与される場合に、相乗効果があることが観察されている。相乗効果とは、化学式（Ｉ）に示す化合物および１つ以上の上記第一選択抗結核薬を共投与した場合の治療効果が、有効な量の化合物（Ｉ）、または、治療上有効な量のこれらの第一選択抗結核薬のいずれかを個々に投与した場合に得られる治療効果よりも大きいことを意味する。さらに、化学式（Ｉ）に示す化合物および１つ以上のこれらの第一選択抗結核薬を共投与した場合の治療効果は、第一選択抗結核薬を相互に組合せて投与した場合に得られる治療効果よりも大きい。
【００７１】
個々の成分を組合せた場合、個々に投与する場合に必要となる量よりも少ない量で投与可能になるという点において、この相乗効果には利点がある。従って、例えば、最大強度の薬剤量における１つの成分の使用に対して十分に反応しない治療対象に対しても有効な治療を行うことが可能となる。
【００７２】
よって、化学式（Ｉ）に示す化合物または第一選択抗結核薬を個々に投与した場合、あるいは第一選択抗結核薬を相互に組合せて投与した場合の効果と比較して、化学式（Ｉ）に示すピロール化合物、ならびにイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドの１つ以上を共投与する場合には結核治療を向上する効果が得られることが分かった。
【００７３】
化学式（Ｉ）に示す化合物または第一選択抗結核薬を個々に投与した場合、あるいは第一選択抗結核薬を相互に組合せて投与した場合の結核の不完全な撲滅に対して、化学式（Ｉ）に示すピロール化合物、ならびにイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドの１つ以上を共投与する場合には結核の根絶する効果が得られることが分かった。
【００７４】
「根絶」という語は、本発明による複合薬を用いた治療後に、対象臓器すなわち感染した動物の肺臓または脾臓において、培養可能なマイコバクテリアが観察されないことを意味する。なお、現行の薬剤療法、すなわちエタンブトール、イソニアジド、ピラジナミド、およびリファンピシンといった第一選択抗結核薬の１つ以上の組合せを用いて行われる、感染した動物に対する治療の終了時点では、著しく培養可能な量の結核菌が、対象臓器すなわち肺臓および脾臓から回収される。このことは、以下の表５、６、および７に示されるデータより明らかとなろう。
【００７５】
培養可能なマイコバクテリアを計測する方法の１つにおいては、治療終了時点で治療した動物を犠死させ、対象臓器すなわち肺臓および脾臓を無菌状態で取り出し、無菌培地においてホモジナイズし、ホモジネートの１０倍の順次希釈液を培地プレートに載置する。元の試験管に残っているホモジネートも総数計測用の培地含有プレートに載置する。潜伏期間後にマイコバクテリアの成長が見られない場合、Ｍ．ツベルクローシスを根絶したと考えられる。当業者は、他の公知の方法を用いて、培養可能なマイコバクテリアを計測することもできよう。
【００７６】
結核を治療するための現在の療法においては、イソニアジド、リファンピシン、ピラジナミド、およびエタンブトールを、それぞれ体重１ｋｇあたり２５．０ｍｇ、２０．０ｍｇ、１５０．０ｍｇ、１００．０ｍｇの量で組合せて、すなわち薬剤全体では２９５ｍｇ／ｋｇの量で投与する（エンクワイア（Ｅｎｑｕｉｒｅ，ＪＡＦ．）、ジャン（Ｊａｎｎ，ＬＣ．）、シナモン『Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．』２００２年、４６、１０２２〜１０２５頁、アン（Ａｎｎｅ，ＭＪ．）、レナーツ（Ｌｅｎｅｒｔｓ，Ａ．）、シャロン（Ｓｈａｒｏｎ，ＥＣ．）、ケミエレウスキー（Ｃｈｅｍｉｅｌｅｗｓｋｉ，ＡＪ．）、シナモン『Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．』１９９９年、４３、２３５６〜２３６０頁、シナモン、クレメンス『Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．』１９９６年、４０、２９８〜３０１頁）。一方、本発明に係る一実施形態においては、化学式（Ｉ）に示す化合物を第一選択抗結核薬と組合せて用いる療法を、総量２９５ｍｇ／ｋｇよりも少ない量のイソニアジド、リファンピシン、ピラジナミド、およびエタンブトールで実現可能である。例えば、一実施形態においては、イソニアジド、リファンピシン、ピラジナミド、およびエタンブトールを、現在の治療において用いられる量よりも少ない総量約２００ｍｇ／ｋｇで投与してもよい。
【００７７】
さらに、個々の成分をより少ない量で投与することによって、多くの場合、副作用を最小限に抑える、または避けることが可能となる。
【００７８】
化学式（Ｉ）に示す化合物、および１つ以上の公知の第一選択抗結核薬を組合せて共投与することで、従来報告されていない新しい方向が結核治療に加えられる。
【００７９】
さらに、上記の組合せにより、Ｍ．ツベルクローシスの薬剤耐性菌への反応が調整され、「即効性」が得られる。よって、マイコバクテリアを治療対象から完全かつ有効に撲滅するのに要する時間は、現行実施のように公知の薬剤を単独でまたは相互に組合せて用いた場合に要する時間に比べて著しく短縮される。一実施形態においては、本発明による複合薬を用いた治療に要する時間は、第一選択抗結核薬を組合せた現行規定の療法による治療に要する時間の３分の１であることが分かっている。
【００８０】
さらに重要なことには、化学式（Ｉ）に示す化合物と、リファンピシンおよびピラジナミド等の公知の抗結核薬とを組合せて投与した場合、化学式（Ｉ）に示す化合物の血中Ｃmax 値は、約１２倍の増加となることが本発明者らの研究により見出された。Ｔ１／２値およびＡＵＣ値も同様に向上したことが観察された。
【００８１】
重要なことに、本発明に係る一実施形態において、化学式（Ｉ）に示す化合物またはその製剤上許容可能な塩と１つ以上の第一選択抗結核薬とを組合せた場合、治療終了後におけるマイコバクテリア感染の再発を防止することが見出された。
【００８２】
別のタイミングや別の経路で各化合物を別々に投与することが好ましい場合がある。従って、組合せられた成分、すなわち化学式（Ｉ）に示すピロール誘導体および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬は、実質的に同時またはいずれかの順序で投与されなくてもよい。１つの化合物の薬物動態学的効果のピークが他の化合物の薬物動態学的効果のピークと一致するように投与のタイミングを調整してもよい。
【００８３】
全ての有効成分は、順次共投与可能な、別々な個々の剤形に調剤可能である。また、投与経路が同一（経口投与等）の場合、２つ以上の有効な化合物を単一の剤形に調剤し、共投与してもよいが、上記の共投与方法は双方とも同一の治療または療法の一部である。
【００８４】
本発明に係る一実施形態において、化学式（Ｉ）に示すピロール化合物および第一選択抗結核薬は、適切な剤形で別々に経口共投与される。
【００８５】
本発明による調剤物、複合薬、および組成物は、適切な製剤上許容可能な賦形剤を用いて実現される。
【００８６】
本結核治療においては、治療上有効な量の化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−  ［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な非毒性塩、
【００８７】
【化６】
2007537242.tif 000008
【００８８】
ならびに治療上有効な量のイソニアジド、リファンピシン、およびエタンブトールのいずれかを含む１つ以上の第一選択抗結核薬を含む抗マイコバクテリア作用を有する複合薬を、治療を必要とする患者に共投与する。
【００８９】
本発明は、さらなる局面において、より短い治療期間で有効な結核治療を提供する。
【００９０】
本発明の一実施例においては、治療期間が２〜３か月にまで短縮する。本発明の他の実施例においては、結核を引き起こす感受性菌および薬剤耐性菌が根絶される。感受性菌および薬剤耐性菌の例としては、Ｍ．ツベルクローシス、マイコバクテリウムアビウム−イントラセルラー複合体、Ｍ．フォーツイタム、Ｍ．カンサシ、および他の関連したマイコバクテリア類が挙げられる。
【００９１】
本発明は、さらなる局面において、治療終了後に結核の再発を防止する方法を提供する。本方法は、治療上有効な量の化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［  ［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な非毒性塩、
【００９２】
【化７】
2007537242.tif 000009
【００９３】
ならびに治療上有効な量のイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドから選択される１つ以上の第一選択抗結核薬を含む、抗マイコバクテリア作用を有する複合薬を、治療を必要とする患者に共投与することを含む。
【００９４】
再発は、マイコバクテリウム−ツベルクローシス、マイコバクテリウムアビウム−イントラセルラー複合体、Ｍ．フォーツイタム、Ｍ．カンサシ、および他の関連したマイコバクテリア類の休止状態、つまり潜伏状態にある感受性菌および多剤耐性菌の再活性化により引き起こされることがある。
【００９５】
本発明は、さらなる局面において、多剤耐性結核および潜伏結核を含む結核を治療するための、相乗的に有効な量の化学式（Ｉ）に示す化合物Ｎ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な非毒性塩、
【００９６】
【化８】
2007537242.tif 000010
【００９７】
ならびに治療上有効な量のイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドから選択される１つ以上の第一選択抗結核薬を含む、相乗的な抗マイコバクテリア作用を有する複合薬を提供する。
【００９８】
本発明は、さらなる局面において、
（i ）化学式（Ｉ）に示す化合物またはその製剤上許容可能な非毒性塩、ならびに
（ii）イソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドから選択される１つ以上の第一選択抗結核薬を、治療を必要とする患者に定量で共投与することを含む、治療において相乗的に有効な結核治療を実現する。
【００９９】
ここで、上記量の（i ）単独および上記量のイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、またはピラジナミド単独では、治療において相乗的に有効なレベルの結核治療を得るのに不十分であるが、上記量の（i ）およびイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、またはピラジナミドの１つ以上を組合せた場合の効果は、各量の（i ）、およびイソニアジド、リファンピシン、エタンブトールまたはピラジナミドを用いて得られる結核治療の治療効果を合算したレベルよりも優れている。
【０１００】
本発明は、さらなる局面において、製剤上許容可能な賦形剤と混合された、治療上有効な量の化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な非毒性塩と、
【０１０１】
【化９】
2007537242.tif 000011
【０１０２】
治療上有効な量のイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドから選択される１つ以上の第一選択抗結核薬との複合薬を含む結核治療のための抗マイコバクテリア医薬組成物を提供する。
【０１０３】
本組成物は、多剤耐性結核および潜伏結核の治療にも用いることが可能である。
【０１０４】
本発明は、さらなる局面において、マイコバクテリウム−ツベルクローシス、マイコバクテリウムアビウム−イントラセルラー複合体、Ｍ．フォーツイタム、Ｍ．カンサシ、および他の関連したマイコバクテリア類の感受性菌および多剤耐性菌を含むがこれらに限定されない１つ以上のマイコバクテリアに感染した状態／細胞に対する治療および／または阻害のための、製剤上許容可能な賦形剤と混合された、治療上有効な量の化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な非毒性塩と、
【０１０５】
【化１０】
2007537242.tif 000012
【０１０６】
治療上有効な量のイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドから選択される１つ以上の第一選択抗結核薬との複合薬を含む抗マイコバクテリア医薬組成物を提供する。
【０１０７】
本発明は、さらなる局面において、製剤上許容可能な賦形剤と混合された、治療上有効な量の化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な非毒性塩と、
【０１０８】
【化１１】
2007537242.tif 000013
【０１０９】
治療上有効な量のイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドから選択される１つ以上の第一選択抗結核薬との複合薬を含む抗マイコバクテリア医薬組成物を、治療を必要とする患者に共投与することを含む治療終了後に結核感染の再発防止に有用な方法を提供する。
【０１１０】
再発は、マイコバクテリウム−ツベルクローシス、マイコバクテリウムアビウム−イントラセルラー複合体、Ｍ．フォーツイタム、Ｍ．カンサシ、および他の関連したマイコバクテリア類の休止状態、つまり潜伏状態にある感受性菌および多剤耐性菌の再活性化により引き起こされることがある。
【０１１１】
本発明は、さらなる局面において、１つ以上の製剤上許容可能な賦形剤と混合された、治療上有効な量の化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な非毒性塩と、
【０１１２】
【化１２】
2007537242.tif 000014
【０１１３】
治療上有効な量のイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドから選択される１つ以上の第一選択抗結核薬との複合薬を含む抗マイコバクテリア医薬組成物を、治療を必要とする患者に共投与することを含む有効な結核治療であり、治療期間を２〜３か月に短縮するのみならず、感受性および薬剤耐性のＭ．ツベルクローシスを根絶する結核治療を提供する。
【０１１４】
本発明は、さらなる局面において、多剤耐性結核および潜伏結核を含む結核を治療するための、１つ以上の製剤上許容可能な賦形剤と混合された、相乗的に有効な量の化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な非毒性塩と、
【０１１５】
【化１３】
2007537242.tif 000015
【０１１６】
治療上有効な量のイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドから選択される１つ以上の第一選択抗結核薬との複合薬を含む相乗的な抗マイコバクテリア医薬組成物を提供する。
【０１１７】
本発明は、さらなる局面において、製剤上許容可能な賦形剤と混合された、治療上有効な量の化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な非毒性塩と、
【０１１８】
【化１４】
2007537242.tif 000016
【０１１９】
治療上有効な量のイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドから選択される１つ以上の第一選択抗結核薬との複合薬を投与することを含む、Ｍ．ツベルクローシス、マイコバクテリウムアビウム−イントラセルラー複合体、Ｍ．フォーツイタム、Ｍ．カンサシ、および他の関連したマイコバクテリア類を含むがこれらに限定されない１つ以上の多剤耐性菌を治療および／または阻害する方法を提供する。
【０１２０】
本発明は、さらなる局面において、多剤耐性結核および潜伏結核を含む結核を治療するための、１つ以上の製剤上許容可能な賦形剤と混合された、治療上有効な量の化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な非毒性塩と、
【０１２１】
【化１５】
2007537242.tif 000017
【０１２２】
治療上有効な量のイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミドから選択される１つ以上の第一選択抗結核薬との複合薬を含む抗マイコバクテリア医薬組成物を調製するプロセスを提供する。化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な非毒性塩、および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬から構成される医薬組成物は、経口投与されることが好ましい。経口投与は、１つ以上の製剤上許容可能な賦形剤と混合した上記成分を含有する錠剤の形態をとるによって可能である。投薬量を正確にし、迅速な分散を可能とし、そして、重要なことに、患者に治療遵守を促すのに、経口用調剤物は有用である。
【０１２３】
調剤または組成物において利用できる製剤上許容可能な賦形剤としては、酸化防止剤、充填剤、不活性希釈剤、界面活性剤、ならびに潤滑剤および乳濁剤等の従来の添加物の１つ以上が挙げられる。
【０１２４】
利用可能な酸化防止剤は、アスコルビン酸、ブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、フマル酸、リンゴ酸、プロピルガレート、アスコルビン酸ナトリウム、およびメタ重亜硫酸ナトリウム等を含むがこれらに限定されない。
【０１２５】
利用可能な不活性希釈剤は、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム、デキストレート、第２リン酸カルシウム、硬化植物性油、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、マンニトール、微結晶性セルロース、ポリメタクリレート、粉末セルロース、アルファ澱粉、ソルビトール、澱粉、および第３リン酸カルシウム等を含むがこれらに限定されない。
【０１２６】
利用可能な界面活性剤は、ドキュセートナトリウム（ジオクチルナトリウムスルホサクシネート）およびラウリル硫酸ナトリウム等のイオン性界面活性剤、ならびにグリセリルモノオレエート、ポリオキシエチレン、ポリソルベート８０等のソルビタン脂肪酸エステル、およびポリビニルアルコール等の非イオン性界面活性剤等を含むがこれらに限定されない。
【０１２７】
医薬組成物に利用可能な適切な潤滑剤は、ステアリン酸マグネシウム、ステアリルフマル酸ナトリウム、硬化植物性油、硬化ヒマシ油、硬化綿実油、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、およびコロイド状二酸化ケイ素等を含むがこれらに限定されない。
【０１２８】
潤滑剤は、有効な潤滑効果が得られるように選択される。例えば、典型的な調剤物は、０重量％〜１０重量％の潤滑剤を含有する。一実施形態においては、調剤物は０．２重量％〜２重量％の潤滑剤を含有する。
【０１２９】
医薬組成物に利用可能な適切な乳濁剤は、二酸化チタン、タルク、およびコロイド状二酸化ケイ素等を含むがこれらに限定されない。
【０１３０】
化学式（Ｉ）に示す化合物、１つ以上の抗結核化合物、および製剤上許容可能な担体を含む薬剤量固定の組合せにおける医薬組成物は、当該分野における従来の方法を用いて調製可能である。例えば、これらを組合せた錠剤は、以下のような制限されない技術のいずれを用いても調製可能である。
【０１３１】
i ）各有効成分および医薬賦形剤を篩にかけ、次いで、生成された粉末混合物を熱や溶媒なしで圧縮することにより造粒を行う乾式造粒法（リーバーマン（Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ，Ｈ．Ａ．）編『Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ』第１巻、１７３頁、マーセル・デッカー（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ）社、１９８０年）
ii）各有効成分および医薬賦形剤を篩にかけ、次いで、生成された粉末を接着剤を用いて固着させ、向上した流動性および高い粘着力を有する粒状生成物を圧力下で生成する湿式造粒法
iii ）予備処理なしに各有効成分および医薬賦形剤を直接打錠する直接打錠法（ランド（Ｌｕｎｄ，Ｗ．）編『Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｄｅｘ，  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ』１０頁、イギリス薬剤師会協議会）
【０１３２】
本発明の例として、以下のような制限されない混合物を包括する複合薬および医薬組成物が挙げられる。
ａ）化学式（Ｉ）に示す化合物またはその製剤上許容可能な非毒性塩、およびリファンピシン
ｂ）化学式（Ｉ）に示す化合物またはその製剤上許容可能な非毒性塩、およびイソニアジド
ｃ）化学式（Ｉ）に示す化合物またはその製剤上許容可能な非毒性塩、イソニアジド、およびリファンピシン
ｄ）化学式（Ｉ）に示す化合物またはその製剤上許容可能な非毒性塩、イソニアジド、リファンピシン、およびピラジナミド
ｅ）化学式（Ｉ）に示す化合物またはその製剤上許容可能な非毒性塩、ピラジナミド、およびエタンブトール
ｆ）化学式（Ｉ）に示す化合物またはその製剤上許容可能な非毒性塩、リファンピシン、およびピラジナミド
【０１３３】
本発明の他の例として、以下のような制限されない混合物を包括する複合薬および医薬組成物が挙げられる。
ａ）１２．５ｍｇ／ｋｇまたは２５．０ｍｇ／ｋｇの化学式（Ｉ）に示す化合物あるいはその製剤上許容可能な非毒性塩、ならびに２０．０ｍｇ／ｋｇのリファンピシン
ｂ）１２．５ｍｇ／ｋｇまたは２５．０ｍｇ／ｋｇの化学式（Ｉ）に示す化合物あるいはその製剤上許容可能な非毒性塩、ならびに２５．０ｍｇ／ｋｇのイソニアジド
ｃ）１２．５ｍｇ／ｋｇまたは２５．０ｍｇ／ｋｇの化学式（Ｉ）に示す化合物あるいはその製剤上許容可能な非毒性塩、２５．０ｍｇ／ｋｇのイソニアジド、ならびに２０．０ｍｇ／ｋｇのリファンピシン
ｄ）１２．５ｍｇ／ｋｇまたは２５．０ｍｇ／ｋｇの化学式（Ｉ）に示す化合物あるいはその製剤上許容可能な非毒性塩、２５．０ｍｇ／ｋｇのイソニアジド、２０．０ｍｇ／ｋｇのリファンピシン、ならびに１５０．０ｍｇ／ｋｇのピラジナミド
ｅ）１２．５ｍｇ／ｋｇまたは２５．０ｍｇ／ｋｇの化学式（Ｉ）に示す化合物あるいはその製剤上許容可能な非毒性塩、１５０．０ｍｇ／ｋｇのピラジナミド、ならびに１００．０ｍｇ／ｋｇのエタンブトール
ｆ）３．１２ｍｇ／ｋｇ、６．２５ｍｇ／ｋｇ、または１２．５ｍｇ／ｋｇの化学式（Ｉ）に示す化合物あるいはその製剤上許容可能な非毒性塩、２５０．０ｍｇ／ｋｇのイソニアジド、２０．０ｍｇ／ｋｇのリファンピシン、ならびに１５０．０ｍｇ／ｋｇのピラジナミド
ｇ）３．１２ｍｇ／ｋｇ、６．２５ｍｇ／ｋｇ、または１２．５ｍｇ／ｋｇの化学式（Ｉ）に示す化合物あるいはその製剤上許容可能な非毒性塩、２０．０ｍｇ／ｋｇのリファンピシン、ならびに１５０．０ｍｇ／ｋｇのピラジナミド
【０１３４】
化学式（Ｉ）に示す化合物の合成
化学式（Ｉ）に示す化合物およびその製剤上許容可能な塩は、言及により本出願に組み込まれるＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９（ＷＯ０４／０２６８２８Ａ１）に開示した方法を含むがこれに限定されない公知の方法のいずれを用いても合成可能である。
【０１３５】
Ｎ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドの調製例を以下に示す。
Ｎ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル）］−２−メチル−５−フェニルピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドの調製
【０１３６】
工程１
１−（４−クロロフェニル）ペンタン−１，４−ジオン
無水塩化アルミニウム（２７．０ｇｍ、２０５．９ｍｍｏｌ）を含有する１２６ｍｌのよく攪拌したクロロベンゼン懸濁液に、オキソペンタノイルクロリド（２３．０ｇｍ、１７１．６ｍｍｏｌ）を３０〜３５分間にわたり室温（２５〜３０℃）で滴下して加えた。反応混合物を同温度で１時間攪拌した。固体氷および塩酸（１０ｍｌ）を加えて反応混合物を分解した後、析出した固形物を濾過し、濾過物をロータリーエバポレータで脱水してすべての溶媒を取り除いた。残渣物を酢酸エチル（４００ｍｌ）に溶解し、水（２×１００ｍｌ）および食塩水（１００ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を蒸発させて取り除いた。このようにして得られた粗生成物を、クロロホルムを溶出液として用いて、シリカゲル（１００〜２００ｍｅｓｈ）上でクロマトグラフィーにかけ、掲題の化合物８．６ｇｍ（２４．０７％）を得た。
【０１３７】
工程２
Ｎ−（５−メチル−２−フェニルピロリル）−４ピリジルカルボキサミド
ベンゼン（６．０ｍｌ）中の１−（クロロフェニル）ペンタン−１，４−ジオン（６．０ｇ、２８．５０ｍｍｏｌ、工程１で得られたもの）およびイソニコチン酸ヒドラジド（４．３０ｇｍ、３１．３５ｍｍｏｌ）の混合物を、分子篩を通して還流した。２時間後、減圧下でベンゼンを取り除き、残渣物を酢酸エチルに溶解し、水（２×１００ｍｌ）および食塩水（１×５０ｍｌ）で洗浄した。酢酸エチル層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を蒸発させて取り除いた。このようにして得られた粗生成物を、クロロホルム中の０．２％メタノールを溶出液として用いて、シリカゲル（１００〜２００ｍｅｓｈ）上でカラム・クロマトグラフィーにかけて精製し、掲題の化合物３．５０ｇｍ（３９．４２％）を得た。
【０１３８】
工程３
Ｎ−（３−｛［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル｝−２−メチル−５−フェニルピロリル）−４−ピリジルカルボキサミド
Ｎ−（５−メチル−２−フェニルピロリル）−４−ピリジルカルボキサミド（０．３００ｇｍ、１．０８３ｍｍｏｌ、工程２で得られたもの）の攪拌したアセトニトリル溶液（５．０ｍｌ）に、１−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジン塩酸塩（０．２８８ｇｍ、１．０８３ｍｍｏｌ）、４０％ホルムアルデヒド（０．０３２ｇｍ、１．０８３ｍｍｏｌ）、および酢酸（０．０９ｍｌ）の混合物を滴下して加えた。完全に加えた後、反応混合物を室温で４時間攪拌した。反応混合物を水酸化ナトリウム（２０％水溶液）で中和し、酢酸エチル（２×５０ｍｌ）を用いて抽出した。
【０１３９】
結合した酢酸エチル抽出物を、水（２×２５ｍｌ）および食塩水（１×２０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を蒸発させて取り除いた。この粗生成物を薄層クロマトグラフィーにかけると２つのスポットが示され、これらをシリカゲル（１００〜２００ｍｅｓｈ）上でカラム・クロマトグラフィーにかけて分離した。
【０１４０】
８０％酢酸エチル−ヘキサン混合物を用いて溶出された極性が高い方の化合物は、２４．３４％（０．１３０ｇｍ）の収率で得られ、以下のような性質を有するＮ−（３−｛［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル｝−２−メチル−５−フェニルピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドであると同定された。
【０１４１】
融点８０〜８２℃、質量分析：ｍ／ｚ５２０（Ｍ+ １）
1 ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，( ．）、２：１３（ｓ，３Ｈ，ＣＨ3 ）、２．６０（ｂｓ，４Ｈ，２×Ｎ−ＣＨ2 ）、３．１８（ｂｓ，４Ｈ，２×Ｎ−ＣＨ2 ）、３．４１（ｓ，２Ｈ，Ｎ−ＣＨ2 ）、６．２４（ｓ，１Ｈ，Ｈ−４）、６．９７−７．０３（４Ｈ，ｍ，ＡｒＨ）、７．２２−７．２９（ｍ，５Ｈ，ＡｒＨ）、７．５３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ，ピリジル環）、８．５０（ｂｓ，ｌＨ，ＮＨＤ2 Ｏ交換可能）、８．７０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ，ピリジル環）
【０１４２】
薬理学試験
化学式（Ｉ）に示す化合物の基本的な抗マイコバクテリア活性は、同時係属中のＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＮ０２／００１８９において報告されている。細菌学的、毒物学的、および薬物動態学的に行われたさらなる研究を以下に記載する。以下に記載する試験に用いられた化学式（Ｉ）の化合物は、化学式（Ｉ）に示す化合物の塩酸塩（Ｎ−（３−［［
４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミド）の塩酸塩）である。            
【０１４３】
試験管内研究
最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）測定のための寒天希釈検査
マイコバクテリア菌株に対する各化合物のＭＩＣを、米国臨床研究所規格委員会（ＮＣＣＬＳ）のＭ２４−Ｔ２推奨に従い寒天希釈法により測定した。化合物をＤＭＳＯ中に溶解し、２倍に希釈してそれぞれの化合物の１０の順次希釈液を得た。適当な量の化合物を、１０％のミドルブルック補足オレイン酸−アルブミン−デキストロース（ＯＡＤＣ）増菌成分を０．０３μｇ／ｍｌ〜１６μｇ／ｍｌの濃度で補足したミドルブルック７Ｈ１０寒天培地の二重プレートに入れた。０．０５％のツイーン８０及び１０％のＡＤＣ補足を含むミドルブルック７Ｈ９液体培地で供試生物（マイコバクテリア菌株）を培養した。３７℃で７日間インキュベートした後、液体培地を濁度１．０マックファーランド標準に調整し、０．１０％のツイーン８０を含む無菌生理食塩水で生体をさらに１０倍に希釈した。結果として得られたマイコバクテリア懸濁液を、薬剤を補足した７Ｈ１０培地プレートに垂らした（３〜５μｌ／スポット）。プレートを密封し、３〜４週間垂直にしたまま３７℃でインキュベートした。供試生物の増殖を完全に阻害した化合物の最も低い希釈値としてＭＩＣを記録した。試験分離株としては、１つ以上の標準的な抗結核剤に対して一般的に感受性／耐性である臨床分離株を用いた。試験のそれぞれの回には、適切な基準菌株及び対照薬剤が用いられた。
【０１４４】
化学式（Ｉ）に示す化合物の抗マイコバクテリア活性
化学式（Ｉ）に示す化合物の塩酸塩（Ｎ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドの塩酸塩）によって示された、Ｍ．ツベルクローシスの約２００の感受性および耐性の臨床分離株に対する試験管内活性を、表１にまとめる。
【０１４５】
【表１】
2007537242.tif 000018
【０１４６】
化学式（Ｉ）に示す化合物のマイコバクテリア活性
図１は、Ｍ．ツベルクローシスＨ37Ｒｖに対する、化学式（Ｉ）に示す化合物の殺菌曲
線を示す。
【０１４７】
図２は、化学式（Ｉ）に示す化合物および公知の抗結核薬を含む組合せの殺菌曲線を示す。
【０１４８】
図３は、化学式（Ｉ）に示す化合物および公知の抗結核薬を含む組合せの殺菌曲線を示す。
【０１４９】
化学式（Ｉ）に示す化合物の阻害活性が殺菌力または静菌力を有するかどうかを判定するために、Ｍ．ツベルクローシス培養株を、化学式（Ｉ）に示す化合物の異なる条件下（ＭＩＣの１倍、２倍、４倍、８倍、１６倍）でインキュベートした。２１日間毎日、固定
量（０．１ｍｌ）の培養株を全てのフラスコから取り出した。試料を１０倍に希釈してミドルブルック７Ｈ１０培地にスポットし、結核菌を計測した。
【０１５０】
Ｍ．ツベルクローシス数において、治療なしの対照より３ｌｏｇの減少を示す濃度および時間を殺菌力のある濃度とした。化学式（Ｉ）に示す化合物は、Ｍ．ツベルクローシスに対して、薬剤量によっては殺菌作用を示すことが見出され、ＭＩＣの８倍および１６倍
の濃度において殺菌力がある（生菌数が３ｌｏｇ減少）と判定された。生菌数測定法によって判定されるＭ．ツベルクローシスＨ３７Ｒｖ菌株に対する化学式（Ｉ）に示す化合物の殺菌曲線を図１に示す。
【０１５１】
相乗効果研究
複合薬の場合の化学式（Ｉ）に示す化合物の相乗効果を、公知の抗結核薬と組合せて、格子状マイクロ液体培地検査で判定した。相乗効果を試験するために、化学式（Ｉ）に示す化合物の順次希釈液を、他の抗結核薬剤、すなわちイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびモキシフロキサシンの存在下で、マイコバクテリア培養株に加えた。２８日後、異なる複合薬を含むプレート全ての内容物に完全な成長停止が見られた。確認できる成長を示さない複合薬における最も高い希釈値を、その複合薬におけるＭＩＣ値とした。各化合物のＭＩＣが４倍以上に向上した場合、その化合物には他の薬剤との相乗効果があるとした。
【０１５２】
表２にまとめるように、化学式（Ｉ）に示す化合物は、リファンピシンを用いた場合は試験管内のマイクロ液体培地希釈検査において相乗効果を示し、エタンブトールを用いた場合は相加効果を示し、イソニアジドの存在下では影響を受けないことが分かった。
【０１５３】
【表２】
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【０１５４】
単独または組合せにおける生体内効果研究
化学式（Ｉ）に示す化合物の効力を、肺結核のマウルモデルを用いてさらに評価した。マイコバクテリウム−ツベルクローシス培養株を、０．０５％のツイーン８０および１０％のＡＤＣ補足を含むミドルブルック７Ｈ９液体培地を用いて、３７℃で７日間培養した。動物に接種するため、液体培養株を短時間の超音波処理および沈降分離で細分化し、１×１０7 ＣＦＵ' ｓ／０．２ｍｌの濃度になるまで７Ｈ９液体培地で適切に希釈した。
【０１５５】
小型分離ケージ（病原体なし、生物学的安全性レベル３環境）で飼育した生後４週間の雌の非近交系スイスアルビノマウスが研究を通して使用された。後尾の血管に細分化したＭ．ツベルクローシスの懸濁液を０．２ｍｌ静脈内接種することで感染させた。感染したマウスを無作為に６匹毎のグループに分けた。感染後１４日目に治療を開始した。治療には、化学式（Ｉ）に示す化合物およびイソニアジドを無菌水に溶解したもの、ならびにリファンピシンを１０％のＤＭＳＯに溶解して水で希釈したものを用いた。薬剤は、毎朝投与前に調製した。治療は、１週間あたり５日間、１か月の間行われた。全ての薬剤を強制飼養で投与し、投与量は体重１ｋｇあたり５０ｍｇ、２５ｍｇ、１２．５ｍｇとした。対照グループの感染したが治療されないマウスは治療開始時（初期対照）又は治療期間終了時（後期対照）に死亡させた。最後の薬剤投与を行った５日後にマウスを頚部脱臼で犠死させた。脾臓及び右肺臓を無菌状態で取り除き、組織均質化装置でホモジナイズした。ホモジネートの１０倍の順次希釈液を少なくとも４〜６つ、選択したミドルブルック７Ｈ１１の寒天二重プレートに入れた。３７℃で４週間インキュベートした後、菌集落数を記録した。生菌細胞数はｌｏｇ10の値に変換した。対照との比較において、生菌数２ｌｏｇの減少を示した化合物は大幅な効果を有すると考えられた。
【０１５６】
化学式（Ｉ）に示す化合物の単独治療、ならびにイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミド等の第一選択抗結核薬との組合せにおける活性を評価するために、生体内長期実験を行った。これらの研究において、異なる組合せの効力を、治療後１か月、２か月、３か月等の異なる時点において評価した。
【０１５７】
生体内効力研究の結果
表３に示すように、化学式（Ｉ）に示す化合物で単独治療を行った場合、対象臓器における生菌は対照動物と比較して著しく（＞２ｌｏｇ）減少したことが観察された。
【０１５８】
Ｍ．ツベルクローシスの感受性菌／耐性菌に感染した動物において、化学式（Ｉ）に示す化合物の場合、体重１ｋｇあたり１２．５ｍｇの薬剤量で治療された動物の臓器には２ｌｏｇの減少が見られたのに対して、イソニアジドの場合、感受性菌では２５ｍｇ／ｋｇ以上の濃度で細菌数に同等の減少が見られたが、耐性菌では５０ｍｇ／ｋｇとなるまで効果がなかった。
【０１５９】
さらに、化学式（Ｉ）に示す化合物を用いた治療の長期的効果（２〜３か月）を判定するための研究において、対象臓器にマイコバクテリア数の減少が見られた。３か月治療した動物の３３％で、マイコバクテリアの完全除去が見られた。それぞれの結果を、表４および表５にまとめる。
【０１６０】
【表３】
2007537242.tif 000020
【０１６１】
【表４】
2007537242.tif 000021
【０１６２】
【表５】
2007537242.tif 000022
【０１６３】
薬物動態学的研究
化学式（Ｉ）に示す化合物によって得られ維持される生物学的利用能性および血漿レベルを判定するために、この化合物の薬物動態学的な予備研究をマウスおよびイヌを用いて行った。
【０１６４】
表６にまとめる本研究の結果では、化学式（Ｉ）に示す化合物は、生物学的利用能（５６．４０％）であり、イソニアジドよりも良い半減期およびＣmax を有し、濃度＞ＭＩＣ
値の血漿状態をより長い時間維持することが示された。
【０１６５】
【表６】
2007537242.tif 000023
【０１６６】
毒性研究
化学式（Ｉ）に示す化合物の急毒性は、齧歯動物を用いて経口投与により判定された。致死量50はマウスでは７００ｍｇ／ｋｇ、ラットでは７９３ｍｇ／ｋｇであり、イソニアジドの致死量50よりも良いことが分かった。結果を表７にまとめる。
【０１６７】
【表７】
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【０１６８】
さらに、化学式（Ｉ）に示す化合物は、エームス（Ａｍｅｓ）変異原性試験に用いられる全ての細菌株に対して非変異原性であることが見出された。
【０１６９】
化学式（Ｉ）に示す化合物および１つ以上の抗結核薬を含む組合せの抗マイコバクテリア活性に関する実験
【０１７０】
複合薬の試験管内活性
化学式（Ｉ）に示す化合物および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬の殺菌効果を、治療に要する薬剤量および時間の点から判定した。
【０１７１】
化学式（Ｉ）に示す化合物、ならびにイソニアジド、リファンピシン、およびピラジナミドの複合薬（ＬＩＲＺ）は、１０日目にＭＩＣの８倍および１６倍でマイコバクテリア殺菌効果を発揮した（図２）のに対して、化学式（Ｉ）に示す化合物を含まないイソニアジド、リファンピシン、およびピラジナミドの複合薬（ＩＲＺ）は、２０日目になってから殺菌効果を示した。
【０１７２】
生菌数測定法により判定される、Ｍ．ツベルクローシスに対する、化学式  （Ｉ）に示す化合物および公知の抗結核薬（イソニアジド（Ｉ）、リファンピシン（Ｒ）、およびピラジナミド（Ｚ））の複合薬の殺菌曲線を、図２に示す。
【０１７３】
さらに、化学式（Ｉ）に示す化合物、ならびにリファンピシンおよびピラジナミド（イソニアジドなし）の、化合物「Ａ」を構成する複合薬において、マイコバクテリア殺菌活性の同等の効果が観察された。この複合薬は、１４日目にＭＩＣの８倍および１６倍でマイコバクテリア殺菌活性を示した。
【０１７４】
生菌数測定法により判定される、Ｍ．ツベルクローシスに対する、化学式  （Ｉ）に示す化合物および公知の抗結核薬（リファンピシン（Ｒ）およびピラジナミド（Ｚ））の、イソニアジドを含まない複合薬の殺菌曲線を、図３に示す。
【０１７５】
複合薬の生体内活性
化学式（Ｉ）に示す化合物および１つ以上の第一選択抗結核薬を含む複合薬を用いて治療したマウスでは、試験された組合せ全てにおいて結核菌数の著しい減少が観察された。化合物（Ｉ）ならびにイソニアジドおよびリファンピシンの複合薬、化合物（Ｉ）ならびにイソニアジド、リファンピシン、およびピラジナミドの複合薬等の、化学式（Ｉ）に示す化合物および２つまたは３つの抗結核薬を含む複合薬を用いて治療した動物では、１か月後の減少幅が最大となった。
【０１７６】
治療１か月後のマウスモデルにおける化学式（Ｉ）に示す化合物および公知の抗結核薬を含む複合薬において観察される生体内効力を、表８にまとめる。
【０１７７】
さらに、Ｍ．ツベルクローシスの感受性菌／耐性菌に感染し、化学式（Ｉ）に示す化合物、ならびにイソニアジド、リファンピシン、およびピラジナミド等の２つまたは３つの公知の抗結核化合物の複合薬を用いて治療した６６％の動物の臓器において、２か月の治療で菌成長停止となった。
【０１７８】
治療２か月後のマウスモデルにおける化学式（Ｉ）に示す化合物および公知の抗結核薬を含む複合薬において観察される生体内効力を、表９にまとめる。
【０１７９】
さらに、Ｍ．ツベルクローシスの感受性菌／耐性菌に感染し、化学式（Ｉ）に示す化合物、ならびにイソニアジド、リファンピシン、およびピラジナミド等の２つまたは３つの公知の抗結核化合物の複合薬を用いて治療した動物において、３か月の治療で完全な菌成長停止が見られた。
【０１８０】
治療３か月後のマウスモデルにおける化学式（Ｉ）に示す化合物および公知の抗結核薬を含む複合薬において観察される生体内効力を、表１０にまとめる。
【０１８１】
重要なことに、より少ない薬剤量（１２．５ｍｇ／ｋｇ、６．２５ｍｇ／ｋｇ、および３．１２ｍｇ／ｋｇ）の化学式（Ｉ）に示す化合物、ならびに公知の抗結核薬（イソニアジド、リファンピシン、およびピラジナミド）の複合薬は、優れた生体内効力を示し、治療２か月後で、Ｍ．ツベルクローシスの感受性菌／耐性菌に感染した動物の臓器を完全に滅菌することが見出された。結果を表１１に示す。
【０１８２】
【表８】
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【０１８３】
【表９】
2007537242.tif 000026
【０１８４】
【表１０】
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【０１８５】
【表１１】
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【０１８６】
さらに、化学式（Ｉ）に示す化合物とイソニアジド、リファンピシン、およびピラジナミドとの複合薬を用いて、感染した動物を継続治療した場合の生体内効力を、表１２にまとめる。
【０１８７】
表１３に示すように、化学式（Ｉ）に示す化合物、ならびに２つの公知の抗結核化合物、すなわちリファンピシンおよびピラジナミドを含む他の複合薬を用いて、マウスを２か月間治療した場合の生体内効力は、対象臓器からマイコバクテリア数を減少させるのに有効であることが見出された。
【０１８８】
【表１２】
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【０１８９】
【表１３】
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【０１９０】
複合薬の薬物動態学的研究
化学式（Ｉ）に示す化合物とリファンピシンおよびピラジナミドとの複合薬によって得られ維持される生物学的利用能性および血漿レベルを判定するために、これらの化合物の組合せの薬物動態学的な予備研究をマウスおよびイヌを用いて行った。
【０１９１】
表１４にまとめる本研究の結果では、化学式（Ｉ）に示す化合物、ならびにリファンピシンおよびピラジナミドの複合薬を投与した場合、化学式（Ｉ）に示す化合物の血中Ｃmax 値は約１２倍の増加することが示されている。Ｔ１／２およびＡＵＣ値においても同様の向上が観察されている。結果を表１４にまとめる。
【０１９２】
【表１４】
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【０１９３】
複合薬の急毒性研究
化学式（Ｉ）に示す化合物、ならびにイソニアジド、リファンピシン、およびピラジナミドの複合薬を、スイスアルビノマウスに単一経口薬剤として投与した。マウスを１４日間、観察した。臨床症状や死亡は何も観察されなかった。１５日目にマウスを犠死させたが、臓器に病理学上の変化は何も見られなかった。得られた予備研究結果を、表１５にまとめる。
【０１９４】
【表１５】
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【０１９５】
さらに、化学式（Ｉ）に示す化合物および公知の第一選択抗結核薬を含む複合薬は、生体内小核試験において陰性であり、よって非遺伝毒性であることが見出された。
【０１９６】
以上に示したように、化学式（Ｉ）に示すＮ−（３−［［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジニル］メチル］−２−メチル−５−フェニル−ピロリル）−４−ピリジルカルボキサミドまたはその製剤上許容可能な非毒性塩、ならびにイソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミド等の現行規定の第一選択抗結核薬を組合せてなる本発明の複合薬および医薬組成物は、
ａ）潜伏結核および多剤耐性結核を含む結核に対して、現行規定の薬剤を用いた場合よりも優れた、高度に有効な治療を提供すること、
ｂ）現行規定の薬剤とは異なり、本複合薬および組成物は、マイコバクテリウム−ツベルクローシス、マイコバクテリウムアビウム−イントラセルラー複合体、Ｍ．フォーツイタム、Ｍ．カンサシ、および他の関連したマイコバクテリア類の感受性菌および多剤耐性菌を含むがこれらに限定されないマイコバクテリアに感染した状態／細胞に対する阻害および／または治療に高度に有効であること、
ｃ）現行規定の薬剤とは異なり、本複合薬および組成物は、治療終了後にＭ．ツベルクローシス感染の再発防止に高度に有効であること、
ｄ）「即効性」が得られるため、マイコバクテリアを治療対象から完全かつ有効に撲滅するのに要する時間は、現行実施のように公知の薬剤を単独でまたは相互に組合せて用いた場合に要する時間に比べて著しく短縮され、ここで、感受性および薬剤耐性のＭ．ツベルクローシスを根絶するために、本複合薬または医薬組成物を用いた治療に要する時間は、現行規定の薬剤を用いた治療に要する時間の３分の１であること、
ｅ）治療上有効な量の化学式（Ｉ）に示す化合物は、イソニアジド、リファンピシン、エタンブトール、およびピラジナミド等の現行規定の第一選択抗結核薬のいくつかと共投与した場合に相乗効果をもたらし、ここで、相乗効果は、有効な量の化合物（Ｉ）、または、治療上有効な量の上記第一選択抗結核薬のいずれかを個々に投与した場合に得られる治療効果よりも大きく、化学式  （Ｉ）に示す化合物およびこれらの第一選択抗結核薬を共投与した場合の治療効果は、第一選択抗結核薬を相互に組合せて投与した場合に得られる治療効果よりも大きいこと、
ｆ）個々の成分を組合せた場合、個々に投与する場合に必要となる量よりも少ない量で投与できるようになるという点において、この相乗効果には利点があるために、例えば、最大強度の薬剤量における１つの成分の使用に対して十分に反応しない治療対象に対しても治療が有効となること、および／または
ｇ）組合せ効果が相加的である場合よりも相対的に少ない量で個々の成分を投与できるために、現行において行われている治療に伴う副作用が最小限に抑制されること、が十分に明らかとなった。
【図面の簡単な説明】
【０１９７】
【図１】図１は、Ｍ．ツベルクローシスＨ37Ｒｖに対する、化学式（Ｉ）に示す化合物の殺菌曲線を示す。
【図２】図２は、化学式（Ｉ）に示す化合物および公知の抗結核薬を含む組合せの殺菌曲線を示す。
【図３】図３は、化学式（Ｉ）に示す化合物および公知の抗結核薬を含む組合せの殺菌曲線を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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