(57)【要約】    本発明は形質転換成長因子−β（ＴＧＦ−β）第Ｉ型受容体（ＡＬＫ５）及びアクチビン第Ｉ型受容体（ＡＬＫ４）の少なくとも１種に対する抑制活性が２−ピリジルが置換されたイミダゾール誘導体、前記誘導体の製造方法、及び前記受容体により誘発された各種疾患の予防及び治療剤に使用される前記誘導体の医薬的用途に関するものである。【選択図】  図１
2007533734.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学式１で表される化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩。
化学式１
【化１】
2007533734.tif 000031
前記化学式１において、
Ｒ1は置換された、ナフチル基、アントラセニル基、またはフェニル基であり、前記置換基はハロゲン原子、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル基、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6ハロアルキル基、−Ｏ−（ＣＨ2）n−Ｐｈ、−Ｓ−（ＣＨ2）n−Ｐｈ、シアノ基、フェニル基、及びＣＯ2Ｒ（この時、Ｒは水素原子またはＣ1-6アルキル基であり、ｎは０または１〜３の整数である）で構成された群から選択された1種以上であり、またはＲ1は５〜７員の芳香族または非芳香族環で融合されたフェニル基またはピリジル基であり、この時、環はＮ、Ｏ及びＳから独立的に選択された３種以下のヘテロ原子を含有することができ、前記融合されたフェニル基またはピリジル基はハロゲン原子、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル基、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6ハロアルキル基、シアノ基、フェニル基、または＝Ｏで置換することができ、
Ｒ2は水素原子、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル基、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルキル基、フェニル基、ＮＨ2、ＮＨ（ＣＨ2）n−Ｐｈ、ＮＨ−Ｃ1-6アルキル基、ハロゲン原子、ＣＮ、ＮＯ2、ＣＯＮＨＲ、またはＳＯ2ＮＨＲであり（この時、Ｒは水素原子またはＣ1-6アルキル基であり、ｎは０または１〜３の整数である）、
Ｒ3は水素原子、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ3-7シクロアルキル基、−（ＣＨ2）p−ＮＯ2、−（ＣＨ2）p−ＮＲ4Ｒ5、−（ＣＨ2）p−ＣＨＯ、−（ＣＨ2）p−ＣＯＮＨＯＨ、−（ＣＨ2）p−ＣＮ、−（ＣＨ2）p−ＣＯ2Ｈ、−（ＣＨ2）p−ＣＯ2Ｒ4、−（ＣＨ2）p−ＣＯＮＲ4Ｒ5、−（ＣＨ2）p−テトラゾール、−（ＣＨ2）p−ＣＯＲ4、−（ＣＨ2）q−（ＯＲ6）2、−（ＣＨ2）p−ＯＲ4、−（ＣＨ2）p−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＮ、−（ＣＨ2）p−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯ2Ｈ、−（ＣＨ2）p−ＣＨ−ＣＯ2Ｒ4、−（ＣＨ2）p−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯＮＲ4Ｒ5、−（ＣＨ2）p−ＮＨＣＯＲ4、−（ＣＨ2）p−ＮＨＣＯ2Ｒ4、−（ＣＨ2）p−ＣＯＮＨＳＯ2Ｒ4、−（ＣＨ2）p−ＮＨＳＯ2Ｒ4または−（ＣＨ2）p−ＣＨ＝ＣＨ−テトラゾールであり、
Ｒ4及びＲ5は各々水素原子、またはＣ1-6アルキル基であり、
Ｒ6はＣ1-6アルキル基であり、
ｐは０または１〜４の整数であり、
ｑは１〜４の整数であり、
ＸはＣ1-10アルキレン基、Ｃ2-10アルケニレン基、またはＣ2-10アルキニレン基であり、
Ａ1とＡ2のうち一つはＮであり、もう一つはＮＲ7であり、及び
Ｒ7は水素原子、ＯＨ、Ｃ1-6アルキル基、またはＣ3-7シクロアルキル基である。
【請求項２】
前記Ｒ1はハロゲン原子、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1-6−アルキル基、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル基、及びフェニル基の中から選択された少なくとも１種の置換基で置換されたフェニル基、またはＲ1は５〜７員の芳香族または非芳香族環で融合されたフェニル基であり、この時、環はＮ、Ｏ及びＳから独立的に選択された２種以下のヘテロ原子を含有することができ、前記融合されたフェニル基またはピリジル基はハロゲン原子、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル基、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6ハロアルキル基、または＝Ｏで置換することができ、
Ｒ2は水素原子以外の置換基として、前記置換基はピリジル環窒素のオルトの位置で置換され、
Ｒ3は−（ＣＨ2）p−ＣＯＮＨＯＨ、−（ＣＨ2）p−ＣＮ、−（ＣＨ2）p−ＣＯ2Ｈ、−（ＣＨ2）p−ＣＯＮＲ4Ｒ5、または−（ＣＨ2）p−テトラゾールであり、
Ｒ4及びＲ5は各々水素原子またはＣ1-3アルキル基であり、
ｐは０、１または２であり、
ＸはＣ1-6アルキレン基であり、及び
Ａ1とＡ2のうち一つはＮであり、もう一つはＮＲ7であり、この時Ｒ7は水素原子である
ことを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項３】
前記化学式１で表される化合物が、
４−（（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリル、
４−（（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリル、
３−（（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（２−（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンゾニトリル、
４−（２−（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（３−（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンゾニトリル、
４−（３−（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（（５−（６−エチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（（５−（６−ｎ−プロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（（５−（６−イソプロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（（５−（６−ｎ−ブチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリル、
３−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（５−（６−エチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（５−（６−ｎ−プロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（５−（６−イソプロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（５−（６−ｎ−ブチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（２−（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（２−（５−（６−エチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（２−（５−（６−ｎ−プロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（２−（５−（６−イソプロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（２−（５−（６−ｎ−ブチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
３−（２−（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
３−（２−（５−（６−エチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
３−（２−（５−（６−ｎ−プロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
３−（２−（５−（６−イソプロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
３−（２−（５−（６−ｎ−ブチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、及び
その薬剤学的に許容可能な塩の中から選択されることを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項４】
請求項１の化学式１で表される化合物、薬剤学的に許容可能なその塩、またはその溶媒和物（solvate）が含有していることを特徴とする薬剤組成物および薬剤学的に許容可能な賦形剤または担体。
【請求項５】
請求項１の化合物、薬剤学的に許容可能なその塩、またはその溶媒和物を哺乳類に治療学的有効量を投与し、ＴＧＦ−β及びアクチビンのうち少なくとも１種のシグナルパスウェイ（signaling pathway）を抑制する方法。
【請求項６】
請求項１の化合物、薬剤学的に許容可能なその塩、またはその溶媒和物を哺乳類に治療学的有効量を投与し、過剰細胞外マトリクスの蓄積を抑制する方法。
【請求項７】
請求項１の化合物、薬剤学的に許容可能なその塩、またはその溶媒和物を哺乳類に治療学的有効量を投与し、癌細胞の転移を抑制する方法。
【請求項８】
請求項１の化合物、薬剤学的に許容可能なその塩、またはその溶媒和物を哺乳類に治療学的有効量を投与し、ＴＧＦ−βのシグナルパスウェイを抑制することで、ＴＧＦ−βの過剰発現により媒介される悪性腫瘍を治療する方法。
【請求項９】
請求項１の化合物、薬剤学的に許容可能なその塩、またはその溶媒和物を哺乳類に治療学的有効量を投与し、
糸球体腎炎、糖尿病性腎症、ループス腎炎、高血圧による腎臓病、間質腎線維症、薬による合併症による線維症、ＨＩＶと関連した腎臓病、臓器移植懐死、全ての病因による肝線維症、感染による肝臓の機能障害、酒による肝炎、胆道系疾患、肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、感染性のある、または毒性物質による突発性肺線維症、心筋梗塞後の心臓線維症、うっ性心不全、拡張型心筋症、心筋炎、血管狭窄症、再狭窄、アテローム性動脈硬化、眼球損傷、角膜損傷、 増殖性硝子体網膜症、外傷または手術での傷を治療する間に発生する真皮への過度または肥厚性瘢痕、またはケロイドの形成、腹膜及び皮下癒着、皮膚硬化症、線維硬化症、全身性進行性硬化、皮膚筋炎、多発性筋炎、関節炎、骨粗鬆症、潰瘍、損傷した神経機能、男性の勃起不全、アルツハイマー病、レイノー症候群、線維癌、腫瘍転移の成長、放射能による線維症、そして繊維化が主要構成成分である疾患、及び血栓症からなる群から選択された疾病の治療方法。
【請求項１０】
前記哺乳類がヒトであることを特徴とする請求項８記載の治療方法。
【請求項１１】
前記哺乳類がヒトであることを特徴とする請求項９記載の治療方法。
【請求項１２】
前記哺乳類がヒトであることを特徴とする請求項１０記載の治療方法。
【請求項１３】
前記哺乳類がヒトであることを特徴とする請求項１１記載の治療方法。
【請求項１４】
前記Ｒ2がＣ1-4アルキル基であることを特徴とする請求項２記載の化合物。
【請求項１５】
哺乳類に投与する際、請求項１の化合物を放出することを特徴とするプロドラッグ（prodrug）。
【請求項１６】
内因的に除去されるまで不活性なものに精製する担体と結合されたヒドロキシ基を含む請求項１の化合物であることを特徴とする請求項１５記載のプロドラッグ。
【請求項１７】
少なくとも１つ以上のキラル中心を含むことを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項１８】
鏡像異性体であることを特徴とする請求項１７記載の化合物。
【請求項１９】
ジアステレオマーであることを特徴とする請求項１７記載の化合物。
【請求項２０】
請求項１の化合物、薬剤学的に許容可能なその塩、またはその溶媒和物を哺乳類に治療学的有効量を投与し、血栓症を抑制する方法。
【請求項２１】
前記哺乳類がヒトであることを特徴とする請求項２０記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は形質転換成長因子−β（ＴＧＦ−β）第Ｉ型受容体（ＡＬＫ５）及びアクチビン第Ｉ型受容体（ＡＬＫ４）の少なくとも１種に対する抑制活性が２−ピリジルが置換されたイミダゾール誘導体、前記誘導体の製造方法、及び前記受容体により誘発された各種疾患の予防及び治療剤に使用される前記誘導体の医薬的用途に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
ＴＧＦ（Transforming growth factor）−βは細胞分裂と分化、傷の治療、細胞外基質の生成、及び免疫抑制に対する多面的な組成物としてのＴＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２及びＴＧＦ−β３を含むタンパク質群である。前記超科（superfamily）を構成する別の物質としてはアクチビン、インヒビン、骨形成タンパク質、成長と分化因子、及びミュラー管（Mullerian）抑制物質がある。
【０００３】
ＴＧＦ−β１は２個の非常によく保存された単一膜セリン／スレオニンキナーゼである第Ｉ型受容体（ＡＬＫ５）とＴＧＦ−β第II型受容体を通してシグナルを伝達する。リガンドによりオリゴマー化が誘導されると、第II型受容体はＡＬＫ５のＧＳ付近のセリン／スレオニン残基を高リン酸化させ、スマッド（Smad）タンパク質の結合部位を生成させることで、ＡＬＫ５の活性化を誘導する。活性化されたＡＬＫ５は再びスマッド２タンパク質とスマッド３タンパク質のＣ−末端のＳＳＸＳ−モチーフをリン酸化させ、これらのタンパク質の受容体からの分離とスマッド４との２量複合体形成を誘導する。スマッド複合体は核内に移動して特定ＤＮＡと結合する補助因子と補助調節物と会合して細胞外基質構成物と基質分解性プロテアーゼ抑制剤の転写を活性化させる。
【０００４】
アクチビン（Activin）はＴＧＦ−βと類似する方法でシグナルを伝達する。アクチビンはセリン／スレオニンキナーゼであるアクチビン第II型受容体（ＡｃｔＲIIＢ）と結合し、活性化された第II型受容体はＡＬＫ４のＧＳ付近のセリン／スレオニン残基を高リン酸化させる。そして、活性化されたＡＬＫ４は再びスマッド２タンパク質とスマッド３タンパク質をリン酸化させる。その結果として形成されたスマッド４とスマッドの２量複合体はアクチビンによって誘導される遺伝子転写を調節する。
【０００５】
数多くの動物実験を通してＴＧＦ−βの糸球体発現と線維症（fibrosis）間の連関性を明らかにし、例えば、増殖性糸球体腎炎に関するＴｈｙ−１ラットモデル、抗−ＧＢＭ糸球体腎炎に関するラビットモデル、及び巣状分節状糸球体硬化症に関する５／６腎摘出術ラットモデルである［Bitzer, M. et al., Kidney Blood Press. Res. 21:1-12 (1998)］。また、Ｔｈｙ−１腎炎モデルにおいて、ＴＧＦ−βを中和する抗体が糸球体の組織学を増進させた例もある［Border, W. A. et al., Nature 346:371-374 (1990)］。
【０００６】
マウスの近位尿細管細胞とヒトのメサンギウム細胞においては、高血糖条件下でＴＧＦ−β ｍＲＮＡ及びタンパク質合成が増加する［Wahab, N. A. et al., Biochem. J. 316:985-992 (1996)；Rocco, M. V. et al., Kidney Int. 41:107-114 (1992)］。腎臓病を患ったことのある糖尿病患者は糸球体内にＴＧＦ−β ｍＲＮＡとタンパク質の蓄積が増加する［Yoshioka, K. et al., Lab. Invest. 68:154-163 (1993)］。慢性的な間隙性腎線維症においては、コラーゲンＩ、III、Ｖ、VII、及びフィブロネクチンが増加し、管最下部の膜が厚くなり、間質部分が拡張される［Eddy, A. A., J. Am. Soc. Nephrol. 7:2495-2508 (1996)］。
【０００７】
ブレオマイシン、シリカ、石綿そして放射物による場合を含む肺線維症に対する多様な動物モデルでは、ＴＧＦ−β遺伝子発現とタンパク質生成が増加する［Phan, S. H. and Kunkel, S. L., Exp. Lung Res. 18:29-43 (1992)；Williams, A. O. et al., Am. J. Pathol. 142:1831-1840 (1993)；Rube, C. E. et al., Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 47:1033-1042 (2000)］。特発性肺線維症と隣接した組織切片でのＴＧＦ−β１タンパク質とコラーゲン遺伝子の発現の同時増加は、ヒトの肺線維疾患で観察される［Broekelmann, T. J. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 6642-6646 (1991)］。サルコイド、じん肺症、石綿症及び放射能によって誘導される線維症にかかった患者に対し、ＴＧＦ−β産物が増加されたと報告されている［Khalil, N. et al., Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. 14:131-138 (1996)；Jagirdar, J. et al., Environ. Health Perspect. 105:1197-1203 (1997)］。抗−ＴＧＦ−β抗体とＴＧＦ−β−溶解性受容体は、部分的にブレオマイシンによって誘導された肺線維症のげっ歯類モデルにおいて、線維症を抑制することができる［Giri, S. N. ea al., Thorax 48:959-966 (1993)；Wang, Q. et al., Thorax 54:805-812 (1999)］。タバコの煙は慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）における末梢気道病変を引き起こす最も重要な要因のうちの一つである［Wright, J. M. et al., Am. Rev. Respir. Dis. 146:240-262 (1992)］。ＣＯＰＤは気道閉塞の機能的異常によるもので、ゆっくり進行して不可逆的な疾患である。ＴＧＦ−□はＣＯＰＤのような慢性の炎症性疾患に見られる気道リモデリングによって生じると考えられている［Takizawa, H. Int. J. Mol. Med. 1:367-378 (1998)；Ning, W. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101:14895-14900(2004)］。
【０００８】
肝線維症において、肝星細胞（ＨＳＣ）は細胞外マトリクスタンパク質の主源泉である。活性化された肝星細胞による細胞外マトリクス生成はＴＧＦ−β１の活動を通して著しく増加する［Friedman, S. L., Prog. Liver Dis. 14:101-130 (1996)；Pietrangelo, A., Semin. Liver Dis. 16:13-30 (1669)］。肝からＴＧＦ−β１が過剰発現されたトランスジェニックマウスにおいては、腎線維症のような肝以外の疾患だけでなく、肝線維症も発病する［Sanderson, N. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92:2572-2576(1995)］。
【０００９】
ＴＧＦ−β１及びその受容体は細胞外基質の過剰発現をもたらす、損傷された血管と線維増殖性血管の傷から過剰発現される［Saltis, J. et al., Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 23:193-200 (1996)；McCaffrey, T. A. et al., J. Clin. Invest. 96:2667-2675 (1995)］。
【００１０】
抗−ＴＧＦ−β抗体は傷跡を減少させ、ラットモデルにおいてネオダーミス（neodermis）の細胞構造形成を増進させ［Shah, M., J. Cell. Sci. 108:985-1002 (1995)］、ラビットモデルにおいては、角膜の傷の治療が改善され［Moller-Pedersen, T., Curr. Eye Res. 17:736-747 (1998)］、ラットモデルにおいて、胃潰瘍の傷の治療を加速化させた［Ernst, H., Gut 39:172-175 (1996)］。
【００１１】
放射能線維症は正常なヒト組織が、治療により、または偶然放射能に過多露出された場合によく発生される。最近レビューされたように、ＴＧＦ−β１は放射能線維症の開示、展開そして持続に重要な役割を果たす［ Martin, M. et al., Int. J. Tadiat. Oncol. Biol. Phys. 47:277-290 (2000)］。
【００１２】
臓器移植において、慢性的な拒否反応は多くの場合において複雑な問題を発生させ、腎臓のような数個の臓器の場合、拒否反応が移植失敗の主な原因となる。ヒトの場合、肺と腎臓移植の慢性的拒否反応は、その組織内でＴＧＦ−βの発現増加と連関がある［El-Gamel, A. et al., Eur. J. Cardiothorac. Surg. 13:424-430 (1998)；Shihab, F. S. et al., J. Am. Soc. Nephrol. 6:286-294 (1995)］。
【００１３】
ＴＧＦ−βは腹膜癒着に関与する［Saed, G. M. et al., Wound Repair Regeneration 7:504-510 (1999)］。腹膜及び皮下線維性癒着はＡＬＫ５及びＡＬＫ４のうち少なくとも１種の抑制剤により防止することができる。
【００１４】
数種類の癌の末期段階にある腫瘍細胞と、その中の基質細胞は一般的にＴＧＦ−βを過剰発現させる。これは血管形成と細胞運動性の刺激、免疫体系の抑制、そして腫瘍細胞と細胞外基質の相互作用の増加を発生させる［Hojo, M. et al., Nature 397:530-531 (1999)］。結果的に腫瘍細胞は更に侵略を始め、遠く離れた器官に転移する［Maehara, Y. et al., J. Clin. Oncol. 17:607-614 (1999)；Picon, A. et al., Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 7:497-504 (1998)］。
【００１５】
１型プラスミノーゲン活性化因子阻害剤（ＰＡＩ−１）は、組織型プラスミノーゲン活性因子とウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性因子の主な生理学的抑制剤である。ＰＡＩ−１のレベル上昇は血栓症と血管疾患をもたらし、高いプラズマＰＡＩ−１は線維素溶解と凝固間の自然のバランスを壊すことによって凝固亢進状態を促進させる可能性があることを示唆している［Vaughan, D. E., J. Invest. Med. 46:370-376 (1998)］。また、ＴＧＦ−□はＰＡＩ−１の発現を刺激することが知られている［Dennler, S. et al., EMBO J. 17:3091-3100］。従って、ＴＧＦ−□のシグナルパスウェイ抑制剤によるＰＡＩ−１の生成抑制は、新規の線溶療法を実現させた。
【００１６】
アクチビンシグナルとアクチビンの過剰発現は、細胞外マトリクスの蓄積と線維症［Matsuse, T. et al., Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 13:17-24 (1995)；Inoue, S. et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 205:441-448 (1994)；Matsuse, T. et al., Am. J. Pathol. 148:707-713 (1996)；De Bleser et al., Hepatology 26:905-912 (1997)；Pawlowski, J. E., et al., J. Clin. Invest. 100:639-648 (1997)；Sugiyama, M. et al., Gastroenterology 114:550-558 (1998)；Munz, B. et al., EMBO J. 18:5205-5215 (1999)］、炎症を引き起こす反応［Rosendahl, A. et al., Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 25:60-68 (2001)］、悪液質または消耗［Matzuk, M. M. et al., Proc. Natl. Acd. Sci. USA 91:8817-8821 (1994)；Coerver, K. A. et al., Mol. Endocrinol. 10:534-543 (1996)；Cipriano, S. C. et al., Edocrinology 141:2319-2327 (2000)］、中枢神経系での疾患または病理的反応［Logan, A. et al., Eur. J. Neurosci. 11:2367-2374 (1999)；Logan, A. et al., Exp. Meurol. 159:504-510 (1999)；Masliah, E. et al., Neurochem. Int. 39:393-400 (2001)；De Groot, C. J. A. et al., J. Neuropathol. Exp. Neurol. 58:174-187 (1999)；John, G. R. et al., Nat. Med. 8:1115-1121 (2002)］、及び高血圧［Dahly, A. J. et al., Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 283:R757-767 (2002)］を含む病理学的障害と関連している。研究は、ＴＧＦ−β及びアクチビンは細胞外基質の生成を誘導するように相互的に活動することができることを見せている［Sugiyama, M. et al., Gastroenterology 114:550-558(1998)］。
【００１７】
従って、本発明による好ましい化合物によって、スマッド２とスマッド３によるＡＬＫ５およびＡＬＫ４のうち少なくとも１種のリン酸化を抑制することはシグナルパスウェイを含む疾患を治療及び予防することができることが確認できる。
【００１８】
ＷＯ 00/61576及び米国特許2003/0149277 A1にはＡＬＫ５抑制剤としてトリアリルイミダゾール誘導体とその使用が開示されている。また、WO 01/62756 A1には、ＡＬＫ５抑制剤としてピリジニルイミダゾール誘導体とその使用について、WO 02/055077 A1にはＡＬＫ５としてイミダゾリル環状アセタール（imidazolyl cyclic acetal）誘導体とその使用について開示されている。そして、WO 03/087304 A2には三置換へテロアリールとその使用について開示されている。
【００１９】
【特許文献１】国際特許公開WO 00/61576
【特許文献２】米国特許2003/0149277 A1
【特許文献３】国際特許公開WO 01/62756 A1
【特許文献４】国際特許公開WO 02/055077 A1
【特許文献５】国際特許公開WO 03/087304 A2
【特許文献６】国際特許公開WO 02/096875号
【非特許文献１】Bitzer, M. et al., Kidney Blood Press. Res. 21:1-12 (1998)
【非特許文献２】Border, W. A. et al., Nature 346:371-374 (1990)
【非特許文献３】Wahab, N. A. et al., Biochem. J. 316:985-992 (1996)
【非特許文献４】Rocco, M. V. et al., Kidney Int. 41:107-114 (1992)
【非特許文献５】Yoshioka, K. et al., Lab. Invest. 68:154-163 (1993)
【非特許文献６】Eddy, A. A., J. Am. Soc. Nephrol. 7:2495-2508 (1996)
【非特許文献７】Phan, S. H. and Kunkel, S. L., Exp. Lung Res. 18:29-43 (1992)
【非特許文献８】Williams, A. O. et al., Am. J. Pathol. 142:1831-1840 (1993)
【非特許文献９】Rube, C. E. et al., Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 47:1033-1042 (2000)
【非特許文献１０】Broekelmann, T. J. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:6642-6646 (1991)
【非特許文献１１】Khalil, N. et al., Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. 14:131-138 (1996)
【非特許文献１２】Jagirdar, J. et al., Environ. Health Perspect. 105:1197-1203 (1997)
【非特許文献１３】Giri, S. N. ea al., Thorax 48:959-966 (1993)
【非特許文献１４】Wang, Q. et al., Thorax 54:805-812 (1999)
【非特許文献１５】Wright, J. M. et al., Am. Rev. Respir. Dis. 146:240-262 (1992)
【非特許文献１６】Takizawa, H. Int. J. Mol. Med. 1:367-378 (1998)
【非特許文献１７】Ning, W. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101:14895-14900 (2004)
【非特許文献１８】Friedman, S. L., Prog. Liver Dis. 14:101-130 (1996)
【非特許文献１９】Pietrangelo, A., Semin. Liver Dis. 16:13-30 (1669)
【非特許文献２０】Sanderson, N. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92:2572-2576 (1995)
【非特許文献２１】Saltis, J. et al., Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 23:193-200 (1996)
【非特許文献２２】McCaffrey, T. A. et al., J. Clin. Invest. 96:2667-2675 (1995)
【非特許文献２３】Shah, M., J. Cell. Sci. 108:985-1002 (1995)
【非特許文献２４】Moller-Pedersen, T., Curr. Eye Res. 17:736-747 (1998)
【非特許文献２５】Ernst, H., Gut 39:172-175 (1996)
【非特許文献２６】Martin, M. et al., Int. J. Tadiat. Oncol. Biol. Phys. 47:277-290 (2000)
【非特許文献２７】El-Gamel, A. et al., Eur. J. Cardiothorac. Surg. 13:424-430 (1998)
【非特許文献２８】Shihab, F. S. et al., J. Am. Soc. Nephrol. 6:286-294 (1995)
【非特許文献２９】Saed, G. M. et al., Wound Repair Regeneration 7:504-510 (1999)
【非特許文献３０】Hojo, M. et al., Nature 397:530-531 (1999)
【非特許文献３１】Maehara, Y. et al., J. Clin. Oncol. 17:607-614 (1999)
【非特許文献３２】Picon, A. et al., Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 7:497-504 (1998)
【非特許文献３３】Vaughan, D. E., J. Invest. Med. 46:370-376 (1998)
【非特許文献３４】Dennler, S. et al., EMBO J. 17:3091-3100
【非特許文献３５】Matsuse, T. et al., Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 13:17-24 (1995)
【非特許文献３６】Inoue, S. et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 205:441-448 (1994)
【非特許文献３７】Matsuse, T. et al., Am. J. Pathol. 148:707-713 (1996)
【非特許文献３８】De Bleser et al., Hepatology 26:905-912 (1997)
【非特許文献３９】Pawlowski, J. E., et al., J. Clin. Invest. 100:639-648 (1997)
【非特許文献４０】Sugiyama, M. et al., Gastroenterology 114:550-558 (1998)
【非特許文献４１】Munz, B. et al., EMBO J. 18:5205-5215 (1999)
【非特許文献４２】Rosendahl, A. et al., Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 25:60-68 (2001)
【非特許文献４３】Matzuk, M. M. et al., Proc. Natl. Acd. Sci. USA 91:8817-8821 (1994)
【非特許文献４４】Coerver, K. A. et al., Mol. Endocrinol. 10:534-543 (1996)
【非特許文献４５】Cipriano, S. C. et al., Edocrinology 141:2319-2327 (2000)
【非特許文献４６】Logan, A. et al., Eur. J. Neurosci. 11:2367-2374 (1999)
【非特許文献４７】Logan, A. et al., Exp. Meurol. 159:504-510 (1999)
【非特許文献４８】Masliah, E. et al., Neurochem. Int. 39:393-400 (2001)
【非特許文献４９】De Groot, C. J. A. et al., J. Neuropathol. Exp. Neurol. 58:174-187 (1999)
【非特許文献５０】John, G. R. et al., Nat. Med. 8:1115-1121 (2002)
【非特許文献５１】Dahly, A. J. et al., Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 283:R757-767 (2002)
【非特許文献５２】Sugiyama, M. et al., Gastroenterology 114:550-558(1998)
【非特許文献５３】Liquid Crystals 10:273-287 (1991)
【非特許文献５４】Kelly, S. M. Liquid 10:273-287 (1991)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２０】
本発明の発明者は２−ピリジルが置換されたイミダゾール誘導体の新規化合物を合成し、合成された新規化合物がＡＬＫ５及びＡＬＫ４のうち少なくとも１種に対して優れた抑制活性を示すため、ＡＬＫ５及びＡＬＫ４により媒介される多様な疾患、例えば、糸球体腎炎、糖尿病性腎症、ループス腎炎、高血圧による腎臓病、間質腎線維症、薬による合併症による線維症、ＨＩＶと関連した腎臓病、臓器移植懐死、全ての病因による肝線維症、感染による肝臓の機能障害、酒による肝炎、胆道系疾患、肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、感染性のある、または毒性物質による突発性肺線維症、心筋梗塞後の心臓線維症、うっ性心不全、拡張型心筋症、心筋炎、血管狭窄症、再狭窄、アテローム性動脈硬化、眼球損傷、角膜損傷、 増殖性硝子体網膜症、外傷または手術での傷を治療する間に発生する真皮への過度または肥厚性瘢痕、またはケロイドの形成、腹膜及び皮下癒着、皮膚硬化症、線維硬化症、全身性進行性硬化、皮膚筋炎、多発性筋炎、関節炎、骨粗鬆症、潰瘍、損傷した神経機能、男性の勃起不全、アルツハイマー病、レイノー症候群、線維癌、腫瘍転移の成長、放射能による線維症、及び血栓症などの治療及び予防に有用であることを明らかにすることで本発明を完成するに至った。
【課題を解決するための手段】
【００２１】
本発明は下記化学式１で表される化合物及びその薬剤学的に許容可能な塩をその特徴とする。
化学式１
【化１】
2007533734.tif 000003
【００２２】
前記化学式１において、
Ｒ1は置換された、ナフチル基、アントラセニル基、またはフェニル基であり、前記置換基はハロゲン原子、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル基、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6ハロアルキル基、−Ｏ−（ＣＨ2）n−Ｐｈ、−Ｓ−（ＣＨ2）n−Ｐｈ、シアノ基、フェニル基、及びＣＯ2Ｒ（この時、Ｒは水素原子またはＣ1-6アルキル基であり、ｎは０または１〜３の整数である）で構成された群から選択され、またはＲ1は５〜７員の芳香族または非芳香族環で融合されたフェニル基またはピリジル基であり、この時、環はＮ、Ｏ及びＳから独立的に選択された３種以下のヘテロ原子を含有することができ、前記融合されたフェニル基またはピリジル基はハロゲン原子、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル基、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6ハロアルキル基、シアノ基、フェニル基、または＝Ｏで置換することができる。
【００２３】
Ｒ2は水素原子、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル基、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルキル基、フェニル基、ＮＨ2、ＮＨ（ＣＨ2）n−Ｐｈ、ＮＨ−Ｃ1-6アルキル基、ハロゲン原子、ＣＮ、ＮＯ2、ＣＯＮＨＲ、またはＳＯ2ＮＨＲである（この時、Ｒは水素原子またはＣ1-6アルキル基であり、ｎは０または１〜３の整数である）。
【００２４】
Ｒ3は水素原子、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ3-7シクロアルキル基、−（ＣＨ2）p−ＮＯ2、−（ＣＨ2）p−ＮＲ4Ｒ5、−（ＣＨ2）p−ＣＨＯ、−（ＣＨ2）p−ＣＯＮＨＯＨ、−（ＣＨ2）p−ＣＮ、−（ＣＨ2）p−ＣＯ2Ｈ、−（ＣＨ2）p−ＣＯ2Ｒ4、−（ＣＨ2）p−ＣＯＮＲ4Ｒ5、−（ＣＨ2）p−テトラゾール、−（ＣＨ2）p−ＣＯＲ4、−（ＣＨ2）q−（ＯＲ6）2、−（ＣＨ2）p−ＯＲ4、−（ＣＨ2）p−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＮ、−（ＣＨ2）p−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯ2Ｈ、−（ＣＨ2）p−ＣＨ−ＣＯ2Ｒ4、−（ＣＨ2）p−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯＮＲ4Ｒ5、−（ＣＨ2）p−ＮＨＣＯＲ4、−（ＣＨ2）p−ＮＨＣＯ2Ｒ4、−（ＣＨ2）p−ＣＯＮＨＳＯ2Ｒ4、−（ＣＨ2）p−ＮＨＳＯ2Ｒ4または−（ＣＨ2）p−ＣＨ＝ＣＨ−テトラゾールであり、
【００２５】
Ｒ4及びＲ5は各々水素原子、またはＣ1-6アルキル基であり、
Ｒ6はＣ1-6アルキル基であり、
ｐは０または１〜４の整数であり、
ｑは１〜４の整数であり、
ＸはＣ1-10アルキレン基、Ｃ2-10アルケニレン基、またはＣ2-10アルキニレン基であり、
Ａ1とＡ2のうち一つはＮであり、もう一つはＮＲ7であり、及び
Ｒ7は水素原子、ＯＨ、Ｃ1-6アルキル基、またはＣ3-7シクロアルキル基である。
前記化学式１の構造において、二重結合線上の点線は互変異性環を形成することができることを示したものであり、非置換された窒素に二重結合が位置するようになる。
【００２６】
前記化学式１で表される化合物において、好ましくは、Ｒ1は任意に置換されたフェニル基またはナフチル基である。更に好ましくは、Ｒ1はハロゲン原子、ＯＨ、−Ｃ1-6アルキル基、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル基、及びフェニル基で構成される群から選択された置換基で置換されたフェニル基であるか、またはＲ1は５〜７員の芳香族または非芳香族の環で融合されたフェニル基であり、この時、環はＮ、Ｏ及びＳから独立的に選択された２種以下のヘテロ原子を含有することができ、前記融合されたフェニル基またはピリジル基はハロゲン原子、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル基、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6ハロアルキル基、または＝Ｏで置換することができる。具体的に、Ｒ1はベンゾ［１，３］ジオキソリル（dioxolyl）、２，３−ジヒドロベンゾ［１，４］ジオキシニル（dioxinyl）、 ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾ［１，２，５］オキサジアゾリル、ベンゾ［１，２，５］チアジアゾリル、キノキサリニル、ジヒドロベンゾフラニル、ベンゾイミダゾリル、Ｃ１−６ベンゾイミダゾリル、［１，２，４］トリアゾロ［１，５−α］ピリジル、ベンゾ［１，４］オキサジニル−３−オン、ベンゾオキサゾニル−２−オンまたはベンゾ［１，４］オキサジニルが含まれる。
【００２７】
前記化学式１で表される化合物において、Ｒ2は水素原子以外の化合物であることが好ましい。Ｒ2が水素原子以外である時、ピリジル環窒素のオルトの位置で置換される。また、Ｒ2はＣ1-4アルキル基であることがより更に好ましい。
前記化学式１で表される化合物において、Ｒ3は−（ＣＨ2）p−ＣＯＮＨＯＨ、−（ＣＨ2）p−ＣＮ、−（ＣＨ2）p−ＣＯ2Ｈ、−（ＣＨ2）p−ＣＯＮＲ4Ｒ5、または−（ＣＨ2）p−テトラゾールであることが好ましい。
前記化学式１で表される化合物において、Ｒ4及びＲ5は各々水素原子またはＣ1-3アルキル基であることが好ましい。
前記化学式１で表される化合物において、ｐは０、１または２であることが好ましい。
前記化学式１で表される化合物において、ＸはＣ1-6アルキレン基であることが好ましい。
前記化学式１で表される化合物において、Ａ1とＡ2のうち一つはＮであり、もう一つはＮＲ7であることが好ましく、この時Ｒ7は水素原子である。
前記化学式１で表される化合物において、代表的な化合物を具体的に例示すると下記の通りである。
【００２８】
４−（（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリル、
４−（（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリル、
３−（（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（２−（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンゾニトリル、
４−（２−（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（３−（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンゾニトリル、
４−（３−（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（（５−（６−エチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（（５−（６−ｎ−プロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（（５−（６−イソプロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（（５−（６−ｎ−ブチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリル、
３−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（５−（６−エチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（５−（６−ｎ−プロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（５−（６−イソプロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（５−（６−ｎ−ブチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（２−（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（２−（５−（６−エチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（２−（５−（６−ｎ−プロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（２−（５−（６−イソプロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（２−（５−（６−ｎ−ブチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
３−（２−（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
３−（２−（５−（６−エチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
３−（２−（５−（６−ｎ−プロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
３−（２−（５−（６−イソプロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
３−（２−（５−（６−ｎ−ブチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、及び
その薬剤学的に許容可能な塩が含まれる。
【００２９】
本発明による前記化学式１で表される化合物はその大きさが約１０００ダルトン以下で典型的な有機低分子（非ペプチド性低分子）である。非ペプチド性低分子の分子量は、好ましくは約７５０ダルトン以下であり、より好ましくは約５００ダルトン以下であり、最も好ましくは約３００ダルトン以下である。
【００３０】
また、前記化学式１で表される化合物は患者に投与する際、放出が容易に設計された‘プロドラッグ（prodrug）’形態で提供することができる。プロドラッグの製造は化学式１で表される化合物に含まれる置換基に応じて、当分野で一般的に知られた公知方法による。例えば、ヒドロキシル基が含まれた置換基は内因性酵素（endogenous enzymes）、または生体内の特定受容体や位置に、特異的な酵素により除去されるまでその化合物を生物学的不活性なものを生成することができる担体と結合させることができる。
【００３１】
また、本発明による前記化学式１で表される化合物が構造的にカルボキシル基またはフェノール性ヒドロキシ基などを含んでおり、本質的に酸性であればナトリウム、カリウム、カルシウムまたは金と共に薬剤学的に許容可能な塩を形成することもできる。また、本発明による前記化学式１で表される化合物はアンモニア、アルキルアミン類、ヒドロキシアルキルアミン類、及びＮ−メチルグリカミン（Ｎ−methylglycamine）の中から選択された薬剤学的に許容可能なアミン類と共に塩を形成することもできる。また、本発明による前記化学式１で表される化合物は酸で処理し、酸付加塩を形成することもできる。酸は当分野で公知されたものであり、例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、メタンスルホン酸、リン酸、ｐ−ブロモフェニルスルホン酸、炭酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸、シュウ酸、マロン酸、サリチル酸、リンゴ酸、フマル酸、アスコルビン酸、マレイン酸、酢酸などを含む無機及び有機酸が含まれる。酸付加塩を製造する方法として、遊離塩基状態の前記化学式１で表される化合物を有効量の酸（例えば、塩酸）で処理することで、酸付加塩（例えば、塩化水素塩）を製造することができる。また、酸付加塩は適切な塩基性水溶液（例えば、水酸化ナトリウム、重炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、またはアンモニア）で処理し、遊離塩基に再び転換させることもできる。
【００３２】
また、本発明による前記化学式１で表される化合物の一部は水溶液及び有機溶媒のような溶媒を使用して結晶化または再結晶化させることができる。そのような場合、溶媒和物が形成される。従って、本発明は前記化学式１で表される化合物の水和物はもちろん、凍結乾燥のような方法により製造可能な多様な量の水が含有された化合物と同様な化学量論的な溶媒和物も、本発明の範囲に含まれる。
【００３３】
また、本発明による前記化学式１で表される化合物が少なくとも一つのキラル中心が存在すると、鏡像異性体またはジアステレオマーが存在し得る。また、アルケニル基を含む前記化学式１で表される化合物はシス−またはトランス−異性体が存在し得る。従って、本発明は前記化学式１で表される化合物の異性体混合物または各々の分離された異性体が本発明の範囲に含まれる。
【００３４】
また、本発明による前記化学式１で表される化合物は互変異性型でも存在し得るため、本発明は互変異性混合物または各々の互変異性を本発明の範囲に含む。
また、本発明は前記化学式１で表される化合物の放射性誘導体を含み、これらの放射性化合物は生体研究分野で有用である。
【００３５】
本発明において‘アルキル基’は炭素数１〜１０（好ましくは炭素数１〜６、より好ましくは炭素数１〜４）の飽和脂肪族炭化水素基を称するもので、直鎖または分枝鎖でもある。例えば、アルキル基はメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘプチル基、及び２−エチルヘキシル基が含まれ、本発明はこれらに局限されない。また、アルキル基は場合によって少なくとも１つの置換基、例えば、アルコキシ基、シクロアルコキシ基、アミノ基、ニトロ基、カルボキシ基、シアノ基、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、スルホ基、またはメルカプト基で置換することができる。
【００３６】
本発明において‘アルキレン基’は炭素数１〜１０（好ましくは炭素数１〜６、より好ましくは炭素数１〜４）の飽和脂肪族炭化水素を称するもので、本発明はこれらに局限されない。アルキレン基は直鎖または分枝鎖でもあり、具体的に例を挙げると、メチレン基、エチレン基、プロピレン基、イソプロピレン基、ブチレン基、イソブチレン基、ｓｅｃ−ブチレン基、ｔ−ブチレン基、ｎ−ペンチレン基、ｎ−ヘプチレン基、及び２−エチルへキシレン基が含まれる。また、アルキレン基は場合によっては少なくとも１つの置換基、例えば、アルコキシ基、シクロアルコキシ基、アミノ基、ニトロ基、カルボキシ基、シアノ基、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、スルホ基、またはメルカプト基で置換することができる。
【００３７】
本発明において‘アルケニレン基’は炭素数２〜１０（好ましくは炭素数２〜６、より好ましくは炭素数２〜４）の二重結合が少なくとも１つ存在する脂肪族炭化水素を称するもので、アルキレン基と同様に直鎖または分枝鎖でもある。例えば、アルケニレン基はアリレン基、イソプレニレン基、２−ブテニレン基、及び２−ヘキセニレン基が含まれ、本発明はこれらに極言されない。また、アルケニレン基は場合によって、少なくとも１つの置換基、例えば、アルコキシ基、シクロアルコキシ基、ヘテロシクロアルコキシ基、アリールオキシ基、ヘテロアリールオキシ基、アラルキルオキシ基、ヘテロアリールアルコキシ基、アミノ基、ニトロ基、カルボキシ基、シアノ基、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、スルホ基、メルカプト基、アルキルスルファニル基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル機、アミノカルボニル基、アルキルカルボニルアミノ基、シクロアルキルカルボニルアミノ基、シクロアルキルカルボニルアミノ基、シクロアルキルアルキルカルボニルアミノ基、アリールカルボニルアミノ基、アラルキルカルボニルアミノ基、ヘテロシクロアルキルカルボニルアミノ基、ヘテロシクロアルキルアルキルカルボニルアミノ基、ヘテロアリールカルボニルアミノ基、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ基、尿素基、チオ尿素基、スルファモイル基、スルファミド基、アルコキシカルボニル基、またはアルキルカルボニルオキシ基で置換することができる。
【００３８】
本発明において‘アルキニレン基’は炭素数２〜１０（好ましくは炭素数２〜６、より好ましくは炭素数２〜４）の三重結合が少なくとも１つ存在する脂肪族炭化水素を称するもので、直鎖または分枝鎖でもある、例えば、アルキニレン基はプロパルギレン基及びブチニレン基が含まれ、本発明はこれらに局限されない。また、アルキニレン基は場合によっては少なくとも１つの置換基、例えば、アルコキシ基、シクロアルコキシ基、ヘテロシクロアルコキシ基、アリールオキシ基、ヘテロアリールオキシ基、アラルコキシ基、ヘテロアリールアルコキシ基、アミノ基、ニトロ基、カルボキシ基、シアノ基、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、スルホ基、メルカプト基、アルキルスルファニル基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルフォニル基、アミノカルボニル基、アルキルカルボニルアミノ基、シクロアルキルカルボニルアミノ基、シクロアルキルアルキルカルボニルアミノ基、アリールカルボニルアミノ基、アラルキルカルボニルアミノ基、ヘテロシクロアルキルカルボニルアミノ基、ヘテロシクロアルキルアルキルカルボニルアミノ基、ヘテロアリールカルボニルアミノ基、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ基、尿素基、チオ尿素基、スルファモイル基、スルファミド基、アルコキシカルボニル基、またはアルキルカルボニルオキシ基で置換することができる。
【００３９】
本発明において‘シクロアルキル基’は炭素数３〜１０（好ましくは炭素数４〜８）の脂肪族炭素環を称する。例えば、シクロプロピル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、、アダマンチル基、ノルボルニル基、クビル（cuyl）基、オクタヒドロインデニル基、及びデカヒドロナフチル基を含むシクロアルキル基、ビシクロ［３．２．１］オクチル基、ビシクロ［２．２．２］オクチル基、ビシクロ［３．３．１］ノニル基、及びビシクロ［３．２．３］ノニル基を含むビシクロアルキル基が含まれる。
【００４０】
本発明において‘アルコキシ基’は−Ｏ−アルキル基を意味し、この時、アルキルは前記で定義した通りである。
本発明において‘ハロアルキル基’はハロゲン原子を少なくとも１つ以上含むアルキルを意味する。例えば、ハロアルキル基はフルオロメチル基、クロロメチル基、ブロモメチル基、及びトリフルオロメチル基が含まれている。
本発明において‘ハロゲン基’または‘ハロ基’はフッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。
【００４１】
本発明において‘ＡＬＫ５及びＡＬＫ４のうち少なくとも１種の抑制剤’は、抑制性スマッド（例えば、スマッド６及びスマッド７）以外のＡＬＫ５及びＡＬＫ４のうち少なくとも１種の受容体、好ましくはｐ３８または第II型受容体に対して選択的に抑制する化合物を意味する。
本発明において‘ＡＬＫ５−及びＡＬＫ４−のうち少なくとも１種の媒介疾患’はＡＬＫ５及びＡＬＫ４のうち少なくとも１種により媒介または調節される任意の疾患、例えば、ＴＧＦ−β及びアクチビンのうち少なくとも１種のシグナルパスウェイでスマッド２及びスマッド３のリン酸化の抑制により調節される疾患を言う。
【００４２】
本発明において‘潰瘍’は糖尿病性潰瘍、慢性潰瘍、胃潰瘍、及び十二指腸潰瘍を挙げることができるが、これらにのみ局限されない。
【００４３】
また、本発明は前記化学式１で表される化合物の製造方法を含む。前記化学式１で表される化合物は公知されているか、または市販中の出発物質を使用して当業者に知られている通常の手順を行い製造が可能である。出発物質が商業的に利用可能でなければ、本発明で記述されているか、または当業界に公知されている方法により製造して使用することもできる。
【００４４】
反応式１
【化２】
2007533734.tif 000004
【００４５】
本発明による前記化学式１で表される化合物において、Ａ1＝Ｎであり、Ａ2＝ＮＨ、またはＡ1＝ＮＨであり、Ａ2＝Ｎである化合物の製造方法は前記反応式１に表すことができる。特に、前記化学式２で表される置換された２−メチルピリジンをＬＤＡまたはＬｉＨＭＤＳのような塩基を使用して脱水素化反応をさせた後、前記化学式３ａ（この時Ｒ8はＣ1-6アルキル基）、３ｂまたは３ｃで表される化合物と反応させ、前記化学式４で表されるケトン化合物を製造する。前記化学式３ｃで表されるメトキシ−メチル−アミドは相応する前記化学式３ｂで表される酸塩化物とＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩化水素を反応させて製造することができる。その後、前記化学式４で表されるケトン化合物をＨＢｒとＤＭＳＯを使用して酸化反応を行い、前記化学式５で表されるジケトン化合物を製造する。そして、前記化学式５で表されるジケトン化合物を酢酸アンモニウム存在下で前記化学式６で表される置換されたアルデヒド化合物、または保護アルデヒド誘導体と適切に縮合反応させ、前記化学式１で表される化合物を製造する。前記反応式において、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＸは各々前記化学式１で定義した通りである。前記化学式６で表されるアルデヒド化合物は一般的な製造方法［ＷＯ 02/096875号；Liquid Crystals 10:273-287 (1991)］により製造することができる。また、前記反応式１による製造方法を行う際、前記化学式４で表されるケトン化合物は塩酸または酢酸と亜硝酸ナトリウムで処理して前記化学式７で表されるα−ケト・オキシム化合物を製造した後、酢酸アンモニウム存在下で、前記化学式６で表される置換されたアルデヒド化合物、または保護アルデヒド誘導体と縮合反応させ、Ｎ−ヒドロキシイミダゾール化合物を加えた後、亜リン酸トリエチルで処理し、前記化学式１で表される化合物を製造することができる。
【００４６】
また、本発明による前記化学式１で表される化合物において、Ｒ3＝−（ＣＨ2）p−ＣＮまたは−（ＣＨ2）p−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＮである化合物から下記反応式２により前記化学式１で表される化合物を製造することもできる。下記反応式２において、Ｒ1、Ｒ2、Ｘ及びｐは各々前記化学式１で定義した通りであり、Ｒ4及びＲ5は各々水素原子、またはＣ1-6アルキル基である。
反応式２
【化３】
2007533734.tif 000005
【００４７】
前記化学式１〜６で表される本発明による最終目的化合物は通常の方法、例えば、カラムクロマトグラフィ及び再結晶法などにより分離し収得することができる。
前記化学式１で表される化合物は適切な投与経路、例えば、経口、口腔内、舌下、直腸内、膣内、鼻腔内、局所性または非経口（静脈内、筋肉内、皮下、及び冠動脈内を含む）投与により投与することができる。
本発明の局所製剤は、例えば、軟膏、クリームまたはローション、眼軟膏剤および点眼液または点耳液、含浸ドレッシングおよびエアロゾルの形態で提供することができ、その他にも既存の適合した添加剤、例えば、防腐剤、薬物透過を助ける溶媒、または軟膏及びクリームのような皮膚軟化剤を含有することができる。
【００４８】
また、本発明の製剤はクリームまたは皮膚軟膏剤の基材、及びローション用エタノールまたはオレイル・アルコールのような常用性の既存の担体を含有することができる。このような担体は製剤の約１質量％〜９８質量％の範囲で存在することができる。更に好ましくは、担体は製剤中に約８０質量％以下で存在することである。
【００４９】
疾病の治療または予防を目的として前記化学式１で表される化合物を経口、口腔内または舌下投与する場合、投与量は平均体重が７０ｋｇの成人患者を基準する時、一般的に５０〜５０００ｍｇ／日である。従って、一般成人患者の場合、薬剤学的に許容可能な賦形剤または担体を使用して、有効化合物が２５〜５００ｍｇほど含有されるように錠剤またはカプセル剤に剤形化し、１日１回〜数回に分けて単回または複数回投与により服用する。非経口投与のための剤形においては、有効化合物は２５〜２５０ｍｇの単回投与量が投与されるが、実質的に医師は各々患者に対して患者の年齢、体重及び患者の特性によって最も適当な投与量を決定する。前記投与量は平均的な場合を例示したものであり、個人的な差によってその投与量が高いか、または低いこともあり、これらは本発明の範囲に属する。
【００５０】
ヒトに適用する際、前記化学式１で表される化合物は単独で投与することができるが、一般的に投与方式と標準薬学的慣行（standard phamaceutical practice）を考慮して選択された薬剤学的担体と混合させて投与することができる。例えば、前記化合物は澱粉またはラクトースのような賦形剤を含有させて錠剤形態で、またはカプセルまたは包嚢（ovules）を単独で、または賦形剤を含有させてカプセルまたは包嚢（ovules）形態で、または味を付けたり色を付ける化学薬品を含有させてエリキシル剤または懸濁剤形態に剤形化して、経口、口腔内または舌下に投与することができる。このような液体製剤は懸濁剤（例えば、メチルセルロース、ウイテプゾールのような半合成グリセリド、または杏仁油とＰＥＧ−６エステルの混合物、またはＰＥＧ−８とカプリル／カプリン酸グリセリドの混合物のようなグリセリド混合物）などの薬剤学的に許容可能な添加剤と共に製造される。また、非経口的には、例えば、静脈内、筋肉内、皮下、及び冠動脈内を通して注射することができる。また、非経口投与のためには前記化合物を無菌の水溶液形態で使用することがもっとも好ましく、例えば、塩類、またはマンニトール、グルコースなどの単糖類のような物質を含有させ、血液等張液を作り使用することもできる。
【００５１】
従って、本発明は前記化学式１で表される化合物、薬剤学的に許容可能な塩、またはこれらの溶媒和物と共に薬剤学的に許容可能な希釈剤または担体が含有されている薬剤学的組成物を提供する。
また、本発明は前記化学式１で表される化合物、薬剤学的に許容可能な塩、またはこれらの溶媒和物、またはこれを含有する薬剤学的組成物の医薬品用途を提供する。
また、本発明は前記化学式１で表される化合物、薬剤学的に許容可能な、これらの塩、これらの溶媒和物、またはこれを含有する薬剤学的組成物、哺乳類においてＡＬＫ５及びＡＬＫ４のうち少なくとも１種により媒介される疾患の治療を目的とする医薬品製造に使用することを含む。
【００５２】
ＡＬＫ５−及びＡＬＫ４−のうち少なくとも１種の媒介疾患には糸球体腎炎、糖尿病性腎症、ループス腎炎、高血圧による腎臓病、間質腎線維症、薬による合併症による線維症、ＨＩＶと関連した腎臓病、臓器移植懐死、全ての病因による肝線維症、感染による肝臓の機能障害、酒による肝炎、胆道系疾患、肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、感染性のある、または毒性物質による突発性肺線維症、心筋梗塞後の心臓線維症、うっ性心不全、拡張型心筋症、心筋炎、血管狭窄症、再狭窄、アテローム性動脈硬化、眼球損傷、角膜損傷、 増殖性硝子体網膜症、外傷または手術での傷を治療する間に発生する真皮への過度または肥厚性瘢痕、またはケロイドの形成、腹膜及び皮下癒着、皮膚硬化症、線維硬化症、全身性進行性硬化、皮膚筋炎、多発性筋炎、関節炎、骨粗鬆症、潰瘍、損傷した神経機能、男性の勃起不全、アルツハイマー病、レイノー症候群、線維癌、腫瘍転移の成長、放射能による線維症、及び血栓症などが含まれる。但し、ＡＬＫ５及びＡＬＫ４のうち少なくとも１種の媒介疾患が前記列挙された疾患に局限されるわけではない。
【００５３】
また、本発明は哺乳類において、ＡＬＫ５及びＡＬＫ４のうち少なくとも１種によるスマッド２またはスマッド３のリン酸化抑制により、ＴＧＦ−β及びアクチビンのうち少なくとも１種のシグナルパスウェイを抑制する方法を提供する。
また、本発明は哺乳類において、ＡＬＫ５及びＡＬＫ４のうち少なくとも１種によるスマッド２またはスマッド３のリン酸化を抑制することで、ＴＧＦ−β及びアクチビンのうち少なくとも１種のシグナルパスウェイを抑制させ、過剰細胞外マトリクス蓄積を減少させる方法を提供する。
また、本発明は哺乳類において、ＴＧＦ−βのシグナルパスウェイの抑制により癌細胞の転移を抑制する方法を提供する。
また、本発明は哺乳類において、ＴＧＦ−βのシグナルパスウェイの抑制によりＴＧＦ−βと発現により媒介される悪性腫瘍の治療方法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００５４】
次に、実施例に基づいて本発明を具体的に説明するが、本発明は、以下の実施例により何ら限定されるものではない。下記の実施例での電子噴霧イオン化質量分析（ＥＳＩ−ＭＳ）はＱ−Ｔｏｆ２質量分析器（Micromass，Manchester，UK）を使用して行った。
【００５５】
（実施例１）３−（（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリルの合成（化合物番号５）
【００５６】
【化４】
2007533734.tif 000006
【００５７】
酢酸（３ｍＬ）に１−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−２−（６−メチルピリジン−２−イル）エタン−１，２−ジオン（５０ｍｇ，０．１９ｍｍｏｌ）を溶解させた後、３−（ホルミルメチル）ベンゾニトリル（２８ｍｇ，０．１９ｍｍｏｌ）［国際特許公開ＷＯ 02/096875号］とＮＨ4ＯＡｃ（８６ｍｇ，１．１１ｍｍｏｌ）を添加した後、１２０℃で３時間加熱し、攪拌した。０℃まで冷却した後、２８％ＮＨ4ＯＨ溶液を加えて反応混合物のｐＨを７〜８に調節した。ＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）で抽出した後、有機層を水（５ｍＬ）と塩水（５ｍＬ）で洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過した後、減圧下で蒸留した。濃縮物をシリカゲルを充填したＭＰＬＣ（溶出液：ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2、１：１９（ｖ／ｖ））で精製することで固体の３−（（４−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリル２６ｍｇ（３６％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３９５．１３（ＭＨ+）；1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．５２（ｓ、１Ｈ）、７．４６（ｍ、１Ｈ）、７．４０（ｔ、１Ｈ）、７．３３（ｄ、１Ｈ）、７．３２−７．２６（ｍ、２Ｈ）、７．０９−７．０４（ｍ、２Ｈ）、６．９０（ｄ、１Ｈ）、６．８２（ｄ、１Ｈ）、５．９６（ｓ、２Ｈ）、４．１０（ｓ、２Ｈ）、２．３８（ｓ、３Ｈ）
【００５８】
（実施例２）３−（（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミドの合成（化合物番号６）
【００５９】
【化５】
2007533734.tif 000007
【００６０】
エタノール（４ｍＬ）に３−（（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリル（７０ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）を溶解させた後、室温で３０％Ｈ2Ｏ2溶液（０．５９ｍｍｏｌ）と６Ｎ ＮａＯＨ溶液（０．０４ｍｍｏｌ）を添加した後、５０〜６０℃で３時間攪拌した。０℃まで冷却した後、１Ｎ ＮＣｌ溶液を加えて反応混合物のｐＨを７〜８に調節した。エタノールを減圧下で蒸留した。濃縮物をＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）に加えて、水（１５ｍＬ）と塩水（１５ｍＬ）で洗浄した後、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた後、濾過し、減圧下で蒸留した。濃縮物をシリカゲルを充填したＭＰＬＣ（溶出液：ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2、１：９（ｖ／ｖ））で精製することで固体の３−（（３−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）１Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド２３ｍｇ（３３％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ４１３．１１（ＭＨ+）；1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．５９（ｓ、１Ｈ）、７．５２（ｄ、１Ｈ）、７．３７（ｄｄ、１Ｈ）、７．２４（ｍ、２Ｈ）、７．１５（ｔ、１Ｈ）、７．０１（overlapped、１Ｈ）、７．００（ｓ、１Ｈ）、６．８８（ｄ、１Ｈ）、６．７５（ｄ、１Ｈ）、６．７０（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、６．０２（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、５．９２（ｓ、２Ｈ）、４．００（ｓ、２Ｈ）、２．３４（ｓ、３Ｈ）
【００６１】
（実施例３）４−（（１−ヒドロキシ−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリルの合成（化合物番号３０）
【００６２】
【化６】
2007533734.tif 000008
【００６３】
ｔ−ブチルメチルエーテル（２．５ｍＬ）に１−（６−メチルピリジン−２−イル）−２−（キノキサリン−６−イル）エタン−１，２−ジオン １−オキシム（６７ｍｇ，０．２３ｍｍｏｌ）を溶解させた。前記反応液に４−（ホルミルメチル）ベンゾニトリル（１０１ｍｇ，０．６９ｍｍｏｌ）[国際特許公開ＷＯ 02/096875号]とＮＨ4ＯＡｃ（８９ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）をメタノール（１．２ｍＬ）に溶解させて添加した後、室温で夜通し攪拌した。０℃まで冷却させた後、ＮａＨＣＯ3飽和溶液を加えて反応混合物のｐＨを７〜８に調節した。反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2（４０ｍＬ）と水（４０ｍＬ）で層分離した。水層はＣＨ2Ｃｌ2（３×１５ｍＬ）で繰り返し抽出した。有機層を集めて無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥した後、濾過し、減圧下で蒸留した。濃縮物をシリカゲルを充填したＭＰＬＣ（溶出液：ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2、１：３０→１：１９（ｖ／ｖ））で精製することで固体の４−（（１−ヒドロキシ−５−（６−メチルピリジン−２−イル）４−（キノキサリン−６イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリル３８ｍｇ（４０％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ４１９．２３（ＭＨ+）；1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．８６（ｍ、２Ｈ）、８．３５（ｄ、１Ｈ）、８．１７（ｄ、１Ｈ）、８．０６（ｄｄ、１Ｈ）、７．６２（ｍ、２Ｈ）、７．５６（ｍ、２Ｈ）、７．５２（ｔ、１Ｈ）、７．３６（ｄ、１Ｈ）、７．０６（ｄ、１Ｈ）、４．３１（ｓ、２Ｈ）、２．６１（ｓ、３Ｈ）
【００６４】
（実施例４）４−（（５−６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミドの合成（化合物番号３１）
【００６５】
【化７】
2007533734.tif 000009
【００６６】
エタノール（１６ｍＬ）とＤＭＳＯ（４ｍＬ）の混合溶液に４−（（１−ヒドロキシ−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリル（２６４ｍｇ、０．６３１ｍｍｏｌ）を溶解させた後、室温で３０％Ｈ2Ｏ2溶液（６．６２ｍｍｏｌ）と６Ｎ ＮａＯＨ溶液（０．４７ｍｍｏｌ）を添加し、５０〜６０℃で夜通し攪拌した。０℃まで冷却させた後、１Ｎ ＮＣｌ溶液を加え、反応混合物のｐＨを７〜８に調節した。エタノールを減圧下で蒸留した。濃縮物にＣＨ2Ｃｌ2（３０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）を加えて層分離した。水層はＮａＣｌで飽和させた後、ＣＨ2Ｃｌ2（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機層は塩水（３０ｍＬ）で洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥した後、濾過し、減圧下で蒸留した。濃縮物を無水ＤＭＦ（２０ｍＬ）に溶かした後、亜リン酸トリエチル（２．３９ｍｍｏｌ）を加えて１００℃で３日間加熱、攪拌した。反応混合物を室温まで冷却した後、減圧下で乾燥、蒸留した。反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2（３０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）で層分離し、水層はＣＨ2Ｃｌ2（２×３０ｍＬ）で繰り返し抽出した。有機層を集めてＮａＨＣＯ3飽和溶液（４０ｍＬ）と塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥、濾過した後、減圧下で蒸留した。濃縮物をシリカゲルを充填したＭＰＬＣ（溶出液：ＮｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2、１：９→１：５（ｖ／ｖ））で精製することで固体の４−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド９６ｍｇ（３６％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ４２１．１４（ＭＨ+）；1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ １２．０１（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．８３（ｍ、２Ｈ）、８．３８（ｓ、１Ｈ）、８．１５（ｄｄ、２Ｈ）、７．５５（ｄ、２Ｈ）、７．４２（ｄｄ、１Ｈ）、７．３３（ｄ、１Ｈ）、７．２１（ｄ、２Ｈ）、６．９５（ｄ、１Ｈ）、６．６２（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、５．８３（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、４．１３（ｓ、２Ｈ）、２．２９（ｓ、３Ｈ）
【００６７】
（実施例５）４−（２−（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミドの合成（化合物番号４８）
【００６８】
【化８】
2007533734.tif 000010
【００６９】
メタノール（５０ｍＬ）に４−（２−（１，３−ジオキソラン−２−イル）エチル）ベンゾニトリル（１．５０ｇ、７．３４ｍｍｏｌ）［Kelly, S. M. Liquid 10:273-287 (1991)］を溶解させた後、室温で３０％Ｈ2Ｏ2溶液（２５．７０ｍｍｏｌ）と６Ｎ ＮａＯＨ溶液（７．３４ｍｍｏｌ）を添加して５０〜６０℃で２時間攪拌した。０℃まで冷却させた後、１Ｎ ＨＣｌ溶液を加えて反応混合物のｐＨを７〜８に調節した。メタノールを減圧、蒸留して、濃縮物はＣＨ2Ｃｌ2（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機層を塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥、濾過した後、減圧下で蒸留した。濃縮物をシリカゲルを充填しＭＰＬＣ（溶出液：ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２、１：１９→１：９（ｖ／ｖ））で精製することで固体の４−（２−（１，３−ジオキソラン−２−イル）エチル）ベンズアミド１．５８ｇ（９７％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．７４（ｄｄ、２Ｈ）、７．２９（ｄ、２Ｈ）、６．０１（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、５．７１（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、４．８９（ｔ、１Ｈ）、３．９９（ｍ、２Ｈ）、３．８８（ｍ、２Ｈ）、２．８０（ｍ、２Ｈ）、１．９９（ｍ、２Ｈ）
【００７０】
ＴＨＦ（２２ｍＬ）に４−（２−（１，３−ジオキソラン−２−イル）エチル）ベンズアミド（０．５０ｇ、２．２６ｍｍｏｌ）を溶解させた後、室温で１Ｎ ＨＣｌ溶液（２０ｍＬ）を添加した。反応混合物を８０〜９０℃で１時間加熱し攪拌した後、室温まで冷却した。反応混合物を塩で飽和させた後、ＣＨＣｌ３（２０ｍＬ）で５回抽出した。有機層は無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥、濾過した後、減圧下で蒸留することで固体の４−（２−ホルミルエチル）ベンズアミド０．４０ｇ（９８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ９．８２（ｔ、１Ｈ）、７．７４（ｍ、２Ｈ）、７．２７（ｍ、２Ｈ）、６．１４（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、６．０３（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、３．０１（ｍ、２Ｈ）、２．８１（ｍ、２Ｈ）
【００７１】
ｔ−ブチルメチルエーテル（３５ｍＬ）とメタノール（２５ｍＬ）の混合溶液に１−（６−メチルピリジン−２−イル）−２−（キノキサリン−６−イル）エタン−１，２−ジオン（１．０５ｇ、３．７９ｍｍｏｌ）を溶解させた。前記反応液に、４−（２−ホルミルエチル）ベンズアミド（１．００ｇ、５．６９ｍｍｏｌ）とＮＡ4ＯＡｃ（１．４６ｇ、１８．９５ｍｍｏｌ）を添加した後、室温で夜通し攪拌した。０℃まで冷却した後、ＮａＨＣＯ3飽和溶液を加えて反応混合物のｐＨを７〜８に調節した。溶媒を除去した後、反応混合物はＣＨ2Ｃｌ2（３×２５ｍＬ）で抽出した後、有機層は無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥、濾過した後、減圧下で蒸留した。濃縮物はシリカゲルを充填したＭＰＬＣ（溶出液：ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2、１：１９→１：９（ｖ／ｖ））で精製することで固体の４−（２−（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチルベンズアミド１．０８ｇ（６６％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ４３５．１９；1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．８２（ｄ、２Ｈ）、７．６４（ｄ、２Ｈ）、７．４３（ｔ、１Ｈ）、７．３２（ｄ、１Ｈ）、７．１７（ｄ、２Ｈ）、６．９９（ｄ、１Ｈ）、６．５８（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、６．０９（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、３．０６（ｓ、４Ｈ）、２．４５（ｓ、３Ｈ）
【００７２】
（実施例６）４−（３−（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）プロピル）ベンゾニトリルの合成（化合物番号１３）
【００７３】
【化９】
2007533734.tif 000011
【００７４】
酢酸（８ｍＬ）に１−ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−２−（６−メチルピリジン−２−イル）エタン−１，２−ジオン（２３０ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）を溶解させた後、４−（３−ホルミルプロピル）ベンゾニトリル（１５６ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）［Kelly, S. M. Liquid 10:273-287 (1991)］とＮＨ4ＯＡｃ（３９６ｍｇ、５．１４ｍｍｏｌ）を添加し、１２０℃で３時間加熱、攪拌した。０℃まで冷却させた後、２８％ＮＨ4ＯＨ溶液を加えて反応混合物のｐＨを７〜８に調節した。反応混合物はＣＨ2Ｃｌ2（３×３０ｍＬ）で抽出した後、有機層は無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥、濾過した後、減圧下で蒸留した。濃縮物をシリカゲルを充填したＭＰＬＣ（溶出液：ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2、１：３０→１：１９（ｖ／ｖ））で精製することで固体の４−（３−（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）プロピル）ベンゾニトリル１３０ｍｇ（３６％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ４２３．１４；1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ １０．６３（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、７．５１（ｄ、２Ｈ）、７．４２（ｄｄ、１Ｈ）、７．３０（ｄ、１Ｈ）、７．２４（ｄ、２Ｈ）、７．１０−７．０４（ｍ、２Ｈ）、６．９３（ｄ、１Ｈ）、６．８２（ｄ、１Ｈ）、５．９８（ｓ、２Ｈ）、２．７４（ｍ、４Ｈ）、２．４７（ｓ、３Ｈ）、２．０７（ｍ、２Ｈ）
【００７５】
（実施例７）３−（（５−（６−メチルピリジン−２イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリルの合成（化合物番号４０）
【００７６】
【化１０】
2007533734.tif 000012
【００７７】
ｔ−ブチルメチルエーテル（３５０ｍＬ）とメタノール（３５０ｍＬ）の混合液に１−（６−メチルピリジン−２−イル）−２−（キノキサリン−６−イル）エタン−１，２−ジオン（４０．０ｇ、１４４．２６ｍｍｏｌ）［国際特許公開ＷＯ 02/055077 A1］を溶解させた後、3−（ホルミルメチル）ベンゾニトリル（２３．０３ｇ、１５８．６９ｍｍｏｌ）［国際特許公開ＷＯ 02/096875 A1］を添加し、ｔ−ブチルメチルエーテル（３５０ｍＬ）と３−（ホルムメチル）ベンゾニトリル（２３．０３ｇ、１５８．６９ｍｍｏｌ）の混合液と、メタノール（３５０ｍＬ）とＮＨ４ＯＡｃ（１１１．００ｇ、１．４４ｍｏｌ）の混合液を添加し、４５℃で夜通し攪拌した。０℃まで冷却させた後、ＮａＨＣＯ３飽和溶液を加えて反応混合物のｐＨを７〜８に調節した。溶媒を除去した後、反応混合物はＣＨ2Ｃｌ2（３×８００ｍＬ）で抽出した後、有機層は無水ＭｇＳＯ4で乾燥、濾過した後、減圧下で蒸留した。濃縮物はシリカゲルを充填したＭＰＬＣ（溶出液：ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2、１：１９→１：９（ｖ／ｖ））で精製することで固体の３−（（５−（６−メチルピリジン−２イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリル２８．９８ｇ（５０％、未精製化合物）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ４０３．１４；1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．８４（ｍ、２Ｈ）、８．３９（ｓ、１Ｈ）、８．１５（ｓ、２Ｈ）、７．５６（ｓ、１Ｈ）、７．４６（ｍ、３Ｈ）、７．３７（ｄ、１Ｈ）、７．３２（ｔ、１Ｈ）、６．９９（ｄ、１Ｈ）、４．１７（ｓ、２Ｈ）、２．３７（ｓ、３Ｈ）
【００７８】
（実施例８）３−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミドの合成（化合物番号４１）
【００７９】
【化１１】
2007533734.tif 000013
【００８０】
エタノール（２５０ｍＬ）に３−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１−（３）Ｈ−イミダゾール−2−イル）メチル）ベンゾニトリル（２８．９８ｇ、７２．５８ｍｍｏｌ）を溶解させた後、３０％Ｈ２Ｏ２（４．８５ｍＬ、３９．９２ｍｍｏｌ）と１Ｎ ＮａＯＨ（２５０ｍＬ）を添加し、４０℃で３０分間加熱し３０％Ｈ2Ｏ2（４．８５ｍＬ、３９．９２ｍｍｏｌ）を加えて攪拌した。３０分後、０℃まで冷却させた後、１Ｎ ＨＣｌ溶液を加えて反応混合物のｐＨを７〜８に調節した。溶媒を除去した後、反応混合物はＣＨ2Ｃｌ2（３×４５０ｍＬ）で繰り返し抽出した後、有機層は無水ＭｇＳＯ4で乾燥、濾過した後、減圧下で蒸留した。濃縮物をシリカゲルを充填したＭＰＬＣ（溶出液：ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2、１：９→１：５（ｖ／ｖ））で精製することで固体の３−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド１８．４９ｇ（６１％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ４２１．２３；1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．７９（ｓ、２Ｈ）、８．３４（ｓ、１Ｈ）、８．０６（ｓ、２Ｈ）、７．７１（ｓ、１Ｈ）、７．５５（ｄ、１Ｈ）、７．４１（ｔ、１Ｈ）、７．３４（ｄ、１Ｈ）、７．２９（ｄ、１Ｈ）、７．１９（ｔ、１Ｈ）、６．９６（ｄ、１Ｈ）、６．８３（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、６．３０（ｂｒ ｓ、１Ｈ），４．１３（ｓ、２Ｈ）２．３６（ｓ、３Ｈ）
【００８１】
（実施例９）３−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）塩酸ベンズアミドの合成（化合物番号５８）
【００８２】
【化１２】
2007533734.tif 000014
【００８３】
乾燥したＣＨ2Ｃｌ2（４０ｍＬ）に３−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド（５．０ｇ、１１．８９ｍｍｏｌ）を溶解した後、ガラス濾過器で濾過し、乾燥したＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で洗浄した。０℃まで冷却させた後、Ｅｔ2Ｏ（１８ｍＬ，１８ｍｍｏｌ）溶液と１．０Ｍ ＨＣｌの混合液を反応混合物に添加し、室温で１５分間攪拌し、減圧下で蒸留した後、リン酸塩で夜通し乾燥させて、黄白色粉末の３−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）塩酸ベンズアミド５．２５ｇ（９７％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6）δ ９．０３（ｓ、２Ｈ）、８．４８（ｄ、１Ｈ）、８．１９（ｄ、１Ｈ）、８．１１（ｍ、１Ｈ）、８．０６（ｄ、１Ｈ）、８．０４（ｄ、１Ｈ）、７．８３（ｍ、１Ｈ）、７．８０（ｔ、１Ｈ）、７．７４（ｍ、１Ｈ）、７．４８（ｍ、２Ｈ）、７．４５（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、７．３８（ｄ、１Ｈ）、４．５４（ｓ、２Ｈ）、２．５４（ｓ、３Ｈ）
【００８４】
（実施例１０）３−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）硫酸ベンズアミドの合成（化合物番号５９）
【００８５】
【化１３】
2007533734.tif 000015
【００８６】
乾燥したＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）に３−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミドを溶解した後、１０％Ｈ2ＳＯ4とエタノール（８０μＬ、０．１４ｍｍｏｌ）の混合液を添加し、室温で１５分間攪拌した。反応混合液をＭｅＯＨ（１ｍＬ）に加えた後、無水Ｅｔ2Ｏ（１５ｍＬ）に注ぎ、沈殿物を濾過してリン酸塩で夜通し乾燥させて、黄白色粉末の３−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）硫酸ベンズアミド５４ｍｇ（８８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6）δ ９．０３（ｓ、２Ｈ）、８．４１（ｄ、１Ｈ）、８．２２（ｄ、１Ｈ）、８．０１−７．８８（ｍ、３Ｈ）、７．８３（ｍ、１Ｈ）、７．７９（ｔ、１Ｈ）、７．６２（ｄ、１Ｈ）、７．４９（ｔ、１Ｈ）、７．４４（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、７．３９（ｄ、１Ｈ）、７．３５（ｄ、１Ｈ）、４．４５（ｓ、２Ｈ）、２．５８（ｓ、３Ｈ）
【００８７】
前記実施例１〜１０と類似した方法により合成された化合物を下記表１に示し、質量分析の結果も共に示した。
【００８８】
【表１】
2007533734.tif 000016
【００８９】
2007533734.tif 000017
【００９０】
2007533734.tif 000018
【００９１】
2007533734.tif 000019
【００９２】
2007533734.tif 000020
【００９３】
2007533734.tif 000021
【００９４】
2007533734.tif 000022
【００９５】
2007533734.tif 000023
【００９６】
2007533734.tif 000024
【００９７】
2007533734.tif 000025
【００９８】
2007533734.tif 000026
【００９９】
2007533734.tif 000027
【０１００】
2007533734.tif 000028
【０１０１】
2007533734.tif 000029
【０１０２】
2007533734.tif 000030
【０１０３】
［生物学的データ］
本発明による化合物の生物学的活性は下記試験方法を利用して評価した。
【０１０４】
（１）スマッド３のＡＬＫ５キナーゼのリン酸化抑制を評価するための無細胞分析
ヒスチジン（histidine）で表された、活発なＡＬＫ５（Ｔ２０４Ｄ）とスマッド３のタンパク質は、インビトロジェン社のBacNBlueのバキュロ・ウイルス（bacurovirus）発現システムを利用して昆虫細胞内で発現させた。発現されたタンパク質はQiagenのＮｉ−ＮＴＡ樹脂カラムを使用して精製した。精製されたスマッド３タンパク質（２００ｎｇ）は０．１M  ＮａＨＣＯ3コーティング用緩衝液（１００μＬ）と混合してピペットでフラッシュプレートにコーティングした。プレートはフタを閉じて室温で１６時間培養した。その後、プレートをコーティング緩衝液（２００μＬ）で３度洗い、室温で１時間ＰＢＳ緩衝液内の１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を阻害させる。精製されたＡＬＫ５タンパク質（１００ｎｇ）、２０ｍＭ ｔ−塩酸（ｐＨ７．４）が含まれている反応緩衝液（１００μＬ）、５ｍＭ ＭｇＣｌ2、１ｍＭ ＣａＣｌ2、１ｍＭ ＤＴＴ、１μＭ ＡＴＰおよび２μＣｉ γ−32ｐ−ＡＴＰ、および各々異なる濃度の前記化学式１で表される試験化合物が溶解された１００％ＤＭＳＯ溶液（１μＬ）を混合した。そして、分析試料はスマッド３でコーティングされたフラッシュプレートにＡＬＫ５反応混合物を添加し、３０℃で３時間培養した後、緩衝液を除去し、１０ｍＭピロリン酸塩ナトリウム溶液（２００μＬ）で３度洗浄した。その後、フラッシュプレートを空気中で乾燥させ、パッカード社のTopCountで数えた。
【０１０５】
本発明による前記化学式１で表される化合物は典型的にＩＣ50値が１０μＭ以下であった。いくつかの化合物はＩＣ50値が１μＭ以下であり、またいくつかの化合物はＩＣ50値が５０ｎＭ以下であった。
【０１０６】
（２）スマッド３のＡＬＫ４キナーゼのリン酸化抑制を評価するための無細胞分析
本発明による前記化学式１で表される試験化合物によるスマッド３のＡＬＫ４キナーゼリン酸化の抑制活性を調べるための実験である。前記ＡＬＫ５抑制評価方法において、ヒスチジンで表されたＡＬＫ５の代りにＡＬＫ４を使用すること以外は類似した方法によって行った。
その結果、本発明による前記化学式１で表される化合物は典型的にＩＣ50値が１０μＭ以下であった。また、いくつかの化合物はＩＣ50値が１μＭ以下であった。
【０１０７】
（３）ＴＧＦ−βシグナルの細胞的抑制を評価するための分析
本発明による前記化学式１で表される化合物の生物学的活性はＨｅｐＧ２細胞内で試験化合物のＴＧＦ−βにより誘導されたスマッド結合発光酵素（ＳＢＥ−Ｌｕｃ）伝達活性およびＰＡＩ−１−発光酵素（ｐ３ＴＰ−Ｌｕｘ）伝達活性を抑制する能力を測定することで決めた。ＨｅｐＧ２細胞は一時的にＤＭＥＭ培地［１０％ＦＢＳ、ペニシリン１００Ｕ／ｍＬ、Ｌ−グルタミン２ｍＭ、ピルビン酸ナトリウム１ｍＭ、および非必須アミノ酸］で育ったＳＢＥ−Ｌｕｃ伝達構造またはｐ３ＴＰ−Ｌｕｘ伝達構造を感染させた。感染された細胞を９６−ウェルプレートにウェル当り２．５×１０4細胞濃度で敷き、０．５％ＦＢＳが含まれた培地で３〜６時間ほど３７℃の５％ＣＯ2培養器に入れて置いておいた。そして、細胞は前記化学式１で表される試験化合物が存在する場合とそうでない場合に分けて１％ＤＭＳＯが含まれたスタベーション培地で５ｎｇ／ｍＬ ＴＧＦ−βリガンドで刺激し、３７℃の５％ＣＯ2培養器に入れて２４時間培養した。培地を洗い、細胞破砕液の発光活性を発光分析システム（Promega）を利用して評価した。
【０１０８】
本発明による前記化学式１で表される化合物は典型的にＩＣ50値が１０μＭ以下であった。いくつかの化合物はＩＣ50値が１μＭ以下であり、またいくつかの化合物がＩＣ50値が５０ｎＭ以下であった。
【図面の簡単な説明】
【０１０９】
【図１】本発明による化合物番号６、９、１０、１３および３１によるＨｅｐＧ２細胞でのＴＧＦ−βにより誘導されたＳＢＥ−Ｌｕｃ伝達活性結果を表す。
【図２】本発明による化合物番号４１によるＨｅｐＧ２細胞でのＴＧＦ−βにより誘導されたＳＢＥ−Ｌｕｃ伝達活性結果を表す。
【図３】本発明による化合物番号４１によるＨｅｐＧ２細胞でのＴＧＦ−βにより誘導された３ＴＰ−Ｌｕｘ伝達活性結果を表す。
【図４】本発明による化合物番号４１によるＨｅｐＧ２細胞でのＴＧＦ−βにより誘導されたＰＡＩ−１プロモーター−Ｌｕｃ伝達活性結果を表す。
【図５】本発明による化合物番号４１によるＨａＣａＴヒト・ケラチノサイト生成細胞でのＴＧＦ−βにより誘導されたＰＩＰ−１の発現結果を表す。
【図６】本発明による化合物番号４１によるヒト皮膚線維芽細胞でのＴＧＦ−βにより誘導されたスマッド２およびスマッド３リン酸化の結果を表す。
【図７Ａ】本発明による化合物番号４１による、ラットの胆管結さつによる肝線維症の結果を表す。肝繊維症はラットに４週間胆管結さつを行って誘導し、次に薬剤を胆管結さつラットに１週間に３回、４週間経口投与した。
【図７Ｂ】本発明による化合物番号４１による、ラットの胆管結さつによる肝線維症の結果を表す。
【図８】本発明による化合物番号４１による体外タンパク質キナーゼの活性化の結果を表す。
【図１】
2007533734.tif 000032
【図２】
2007533734.tif 000033
【図３】
2007533734.tif 000034
【図４】
2007533734.tif 000035
【図５】
2007533734.tif 000036
【図６】
2007533734.tif 000037
【図７Ａ】
2007533734.tif 000038
【図７Ｂ】
2007533734.tif 000039
【図８−１】
2007533734.tif 000040
【図８−２】
2007533734.tif 000041
【手続補正書】
【提出日】平成19年1月23日(2007.1.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学式１で表される化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩。
化学式１
【化１】
2007533734.tif 000042
前記化学式１において、
Ｒ1は置換された、ナフチル基、アントラセニル基、またはフェニル基であり、前記置換基はハロゲン原子、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル基、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6ハロアルキル基、−Ｏ−（ＣＨ2）n−Ｐｈ、−Ｓ−（ＣＨ2）n−Ｐｈ、シアノ基、フェニル基、及びＣＯ2Ｒ（この時、Ｒは水素原子またはＣ1-6アルキル基であり、ｎは０または１〜３の整数である）で構成された群から選択された1種以上であり、またはＲ1は５〜７員の芳香族または非芳香族環で融合されたフェニル基またはピリジル基であり、この時、環はＮ、Ｏ及びＳから独立的に選択された３種以下のヘテロ原子を含有することができ、前記融合されたフェニル基またはピリジル基はハロゲン原子、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル基、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6ハロアルキル基、シアノ基、フェニル基、または＝Ｏで置換することができ、
Ｒ2は水素原子、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル基、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルキル基、フェニル基、ＮＨ2、ＮＨ（ＣＨ2）n−Ｐｈ、ＮＨ−Ｃ1-6アルキル基、ハロゲン原子、ＣＮ、ＮＯ2、ＣＯＮＨＲ、またはＳＯ2ＮＨＲであり（この時、Ｒは水素原子またはＣ1-6アルキル基であり、ｎは０または１〜３の整数である）、
Ｒ3は水素原子、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ3-7シクロアルキル基、−（ＣＨ2）p−ＮＯ2、−（ＣＨ2）p−ＮＲ4Ｒ5、−（ＣＨ2）p−ＣＨＯ、−（ＣＨ2）p−ＣＯＮＨＯＨ、−（ＣＨ2）p−ＣＮ、−（ＣＨ2）p−ＣＯ2Ｈ、−（ＣＨ2）p−ＣＯ2Ｒ4、−（ＣＨ2）p−ＣＯＮＲ4Ｒ5、−（ＣＨ2）p−テトラゾール、−（ＣＨ2）p−ＣＯＲ4、−（ＣＨ2）q−（ＯＲ6）2、−（ＣＨ2）p−ＯＲ4、−（ＣＨ2）p−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＮ、−（ＣＨ2）p−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯ2Ｈ、−（ＣＨ2）p−ＣＨ−ＣＯ2Ｒ4、−（ＣＨ2）p−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯＮＲ4Ｒ5、−（ＣＨ2）p−ＮＨＣＯＲ4、−（ＣＨ2）p−ＮＨＣＯ2Ｒ4、−（ＣＨ2）p−ＣＯＮＨＳＯ2Ｒ4、−（ＣＨ2）p−ＮＨＳＯ2Ｒ4または−（ＣＨ2）p−ＣＨ＝ＣＨ−テトラゾールであり、
Ｒ4及びＲ5は各々水素原子、またはＣ1-6アルキル基であり、
Ｒ6はＣ1-6アルキル基であり、
ｐは０または１〜４の整数であり、
ｑは１〜４の整数であり、
ＸはＣ1-10アルキレン基、Ｃ2-10アルケニレン基、またはＣ2-10アルキニレン基であり、
Ａ1とＡ2のうち一つはＮであり、もう一つはＮＲ7であり、及び
Ｒ7は水素原子、ＯＨ、Ｃ1-6アルキル基、またはＣ3-7シクロアルキル基である。
【請求項２】
前記Ｒ1はハロゲン原子、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1-6−アルキル基、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル基、及びフェニル基の中から選択された少なくとも１種の置換基で置換されたフェニル基、またはＲ1は５〜７員の芳香族または非芳香族環で融合されたフェニル基であり、この時、環はＮ、Ｏ及びＳから独立的に選択された２種以下のヘテロ原子を含有することができ、前記融合されたフェニル基またはピリジル基はハロゲン原子、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル基、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6ハロアルキル基、または＝Ｏで置換することができ、
Ｒ2は水素原子以外の置換基として、前記置換基はピリジル環窒素のオルトの位置で置換され、
Ｒ3は−（ＣＨ2）p−ＣＯＮＨＯＨ、−（ＣＨ2）p−ＣＮ、−（ＣＨ2）p−ＣＯ2Ｈ、−（ＣＨ2）p−ＣＯＮＲ4Ｒ5、または−（ＣＨ2）p−テトラゾールであり、
Ｒ4及びＲ5は各々水素原子またはＣ1-3アルキル基であり、
ｐは０、１または２であり、
ＸはＣ1-6アルキレン基であり、及び
Ａ1とＡ2のうち一つはＮであり、もう一つはＮＲ7であり、この時Ｒ7は水素原子である
ことを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項３】
前記化学式１で表される化合物が、
４−（（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリル、
４−（（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリル、
３−（（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（２−（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンゾニトリル、
４−（２−（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（３−（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンゾニトリル、
４−（３−（４−（ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（（５−（６−エチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（（５−（６−ｎ−プロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（（５−（６−イソプロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（（５−（６−ｎ−ブチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンゾニトリル、
３−（（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（５−（６−エチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（５−（６−ｎ−プロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（５−（６−イソプロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
３−（（５−（６−ｎ−ブチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）ベンズアミド、
４−（２−（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（２−（５−（６−エチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（２−（５−（６−ｎ−プロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（２−（５−（６−イソプロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
４−（２−（５−（６−ｎ−ブチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
３−（２−（５−（６−メチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
３−（２−（５−（６−エチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
３−（２−（５−（６−ｎ−プロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
３−（２−（５−（６−イソプロピルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、
３−（２−（５−（６−ｎ−ブチルピリジン−２−イル）−４−（キノキサリン−６−イル）−１（３）Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチル）ベンズアミド、及び
その薬剤学的に許容可能な塩の中から選択されることを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項４】
請求項１の化学式１で表される化合物、薬剤学的に許容可能なその塩、またはその溶媒和物（solvate）が含有していることを特徴とする薬剤組成物および薬剤学的に許容可能な賦形剤または担体。
【請求項５】
請求項１の化合物、薬剤学的に許容可能なその塩、またはその溶媒和物を有効成分として含有する、哺乳類のＴＧＦ−β及びアクチビンのうち少なくとも１種のシグナルパスウェイ（signaling pathway）を抑制するための医薬組成物。
【請求項６】
請求項１の化合物、薬剤学的に許容可能なその塩、またはその溶媒和物を有効成分として含有する、哺乳類の過剰細胞外マトリクスの蓄積を抑制するための医薬組成物。
【請求項７】
請求項１の化合物、薬剤学的に許容可能なその塩、またはその溶媒和物を有効成分として含有する、哺乳類の癌細胞の転移を抑制するための医薬組成物。
【請求項８】
請求項１の化合物、薬剤学的に許容可能なその塩、またはその溶媒和物を有効成分として含有する、哺乳類のＴＧＦ−βのシグナルパスウェイを抑制することにより、ＴＧＦ−βの過剰発現により媒介される悪性腫瘍を治療するための医薬組成物。
【請求項９】
請求項１の化合物、薬剤学的に許容可能なその塩、またはその溶媒和物を有効成分として含有する、哺乳類の疾病の治療ための医薬組成物であって、
該疾病が、糸球体腎炎、糖尿病性腎症、ループス腎炎、高血圧による腎臓病、間質腎線維症、薬による合併症による線維症、ＨＩＶと関連した腎臓病、臓器移植懐死、全ての病因による肝線維症、感染による肝臓の機能障害、酒による肝炎、胆道系疾患、肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、感染性のある、または毒性物質による突発性肺線維症、心筋梗塞後の心臓線維症、うっ性心不全、拡張型心筋症、心筋炎、血管狭窄症、再狭窄、アテローム性動脈硬化、眼球損傷、角膜損傷、 増殖性硝子体網膜症、外傷または手術での傷を治療する間に発生する真皮への過度または肥厚性瘢痕、またはケロイドの形成、腹膜及び皮下癒着、皮膚硬化症、線維硬化症、全身性進行性硬化、皮膚筋炎、多発性筋炎、関節炎、骨粗鬆症、潰瘍、損傷した神経機能、男性の勃起不全、アルツハイマー病、レイノー症候群、線維癌、腫瘍転移の成長、放射能による線維症、そして繊維化が主要構成成分である疾患、及び血栓症からなる群から選択されたものである、医薬組成物。
【請求項１０】
前記哺乳類がヒトであることを特徴とする請求項５〜９のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記Ｒ2がＣ1-4アルキル基であることを特徴とする請求項２記載の化合物。
【請求項１２】
哺乳類に投与する際、請求項１の化合物を放出することを特徴とするプロドラッグ（prodrug）。
【請求項１３】
内因的に除去されるまで不活性なものに精製する担体と結合されたヒドロキシ基を含む請求項１の化合物であることを特徴とする請求項１２記載のプロドラッグ。
【請求項１４】
少なくとも１つ以上のキラル中心を含むことを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項１５】
鏡像異性体であることを特徴とする請求項１４記載の化合物。
【請求項１６】
ジアステレオマーであることを特徴とする請求項１４記載の化合物。
【請求項１７】
請求項１の化合物、薬剤学的に許容可能なその塩、またはその溶媒和物を有効成分として含有する、哺乳類の血栓症を抑制するための医薬組成物。
【請求項１８】
前記哺乳類がヒトであることを特徴とする請求項１７記載の医薬組成物。
【国際調査報告】
2007533734.tif 000043
2007533734.tif 000044