【手続補正書】
【提出日】平成28年10月17日(2016.10.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
高純度のＡＡＶベクター製剤を生成する方法であって、この方法は、
（ａ）組換えＡＡＶベクター粒子を有する細胞及び細胞培養上清を収集する工程と、
（ｂ）濃縮された収集物を生成するために、接線流ろ過を用いて工程（ａ）で収集された前記細胞及び前記細胞培養上清を濃縮する工程と、
（ｃ）溶解物を生成するために顕微溶液化によって、工程（ｂ）で生成された前記濃縮された収集物を溶解する工程と、
（ｄ）浄化された溶解物を生成するために工程（ｃ）で生成された前記溶解物をろ過する工程と、
（ｅ）高純度のＡＡＶベクター粒子を有するカラム溶出液を生成するために、工程（ｄ）で生成された前記浄化された溶解物をイオン交換カラムクロマトグラフィーにかける工程、及び濃縮されたカラム溶出液を生成するために選択的に接線流ろ過によって前記カラム溶出液を濃縮する工程と、
（ｆ）前記カラム溶出液または工程（ｅ）で生成された前記濃縮されたカラム溶出液を塩化セシウムと混合し、混合物を生成する工程、並びに真正（ｂｏｎａ  ｆｉｄｅ）ＡＡＶベクター粒子を空のカプシドＡＡＶベクター粒子及び他のベクター関連産物から実質的に分離するために、当該混合物を遠心分離にかける工程と、
（ｇ）工程（ｆ）で分離された前記真正ＡＡＶベクター粒子を収集する工程、及び接線流ろ過によって前記収集された真正ＡＡＶベクター粒子を緩衝液交換にかける工程と、
（ｈ）ＡＡＶベクター製剤を生成するために界面活性剤によって工程（ｇ）の結果として生じた前記真正ＡＡＶベクター粒子を製剤化する工程と、
（ｉ）工程（ｈ）で生成される前記ＡＡＶベクター製剤をろ過し、前記ＡＡＶベクター粒子の少なくとも９０％が真正ＡＡＶ粒子である高純度のＡＡＶベクター製剤を生成する工程と、
を有する方法。
【請求項２】
請求項１記載の高純度のＡＡＶベクター製剤を生成する方法において、前記真正ＡＡＶベクター粒子は、工程（ｉ）で生成される前記高純度のＡＡＶベクター製剤の中に１００ｍｇ／ｍＬの濃度で存在するものである、方法。
【請求項３】
請求項１記載の高純度のＡＡＶベクター製剤を生成する方法において、前記真正ＡＡＶベクター粒子は、工程（ｉ）で生成される前記高純度のＡＡＶベクター製剤の中に１ｍＬあたり１０15粒子の濃度で存在するものである、方法。
【請求項４】
請求項１記載の高純度のＡＡＶベクター製剤を生成する方法において、前記真正ＡＡＶベクター粒子は、工程（ｉ）で生成される前記高純度のＡＡＶベクター製剤の中に１ｍＬあたり１０16粒子の濃度で存在するものである、方法。
【請求項５】
請求項１記載の高純度のＡＡＶベクター製剤を生成する方法において、前記真正ＡＡＶベクター粒子は、工程（ｉ）で生成される前記高純度のＡＡＶベクター製剤の中に１ｍＬあたり１０17粒子の濃度で存在するものである、方法。
【請求項６】
請求項１記載の高純度のＡＡＶベクター製剤を生成する方法において、工程（ａ）の前記組換えＡＡＶベクター粒子は、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ８およびＡＡＶ９からなる群から選択されるＡＡＶに由来するものである、方法。
【請求項７】
請求項１記載の高純度のＡＡＶベクター製剤を生成する方法において、前記真正ＡＡＶベクター粒子は、ｓｉＲＮＡ、アンチセンス分子、およびｍｉＲＮＡ、リボザイム、およびｓｈＲＮＡからなる群から選択される核酸をコードする導入遺伝子を有するものである、方法。
【請求項８】
請求項１記載の高純度のＡＡＶベクター製剤を生成する方法において、前記真正ＡＡＶベクター粒子は、インスリン、グルカゴン、成長ホルモン（ＧＨ）、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、成長ホルモン放出因子（ＧＲＦ）、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、黄体形成ホルモン（ＬＨ）、ヒト絨毛性腺刺激ホルモン（ｈＣＧ）、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、アンギオポエチン、アンギオスタチン、顆粒球コロニー刺激因子（ＧＣＳＦ）、エリトロポエチン（ＥＰＯ）、結合組織成長因子（ＣＴＧＦ）、塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）、酸性線維芽細胞成長因子（ａＦＧＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）、形質転換成長因子α（ＴＧＦα）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、インスリン成長因子ＩおよびＩＩ（ＩＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−ＩＩ）、ＴＧＦβ、アクチビン、インヒビン、骨形態形成タンパク質（ＢＭＰ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、ニュートロフィンＮＴ−３およびＮＴ４／５、毛様体神経栄養因子（ＣＮＴＦ）、グリア細胞株由来神経栄養因子（ＧＤＮＦ）、ニュールツリン、アグリン、ネトリン−１およびネトリン−２、肝細胞成長因子、エフリン、ノギン、ソニックヘッジホッグ、およびチロシン水酸化酵素からなる群から選択される遺伝子産物をコードする導入遺伝子を有するものである、方法。
【請求項９】
請求項１記載の高純度のＡＡＶベクター製剤を生成する方法において、前記真正ＡＡＶベクター粒子は、トロンボポエチン（ＴＰＯ）、インターロイキン（ＩＬ１からＩＬ−１７）、単球走化性タンパク質、白血病抑制因子、顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子、Ｆａｓリガンド、腫瘍壊死因子αおよびβ、インターフェロンα、βおよびγ、幹細胞因子、ｆｌｋ−２／ｆｌｔ３リガンド、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤおよびＩｇＥ、キメラ免疫グロブリン、ヒト化抗体、一本鎖抗体、Ｔ細胞受容体、キメラＴ細胞受容体、一本鎖Ｔ細胞受容体、クラスＩおよびクラスＩＩ  ＭＨＣ分子からなる群から選択される遺伝子産物をコードする導入遺伝子を有するものである、方法。
【請求項１０】
請求項１記載の高純度のＡＡＶベクター製剤を生成する方法において、前記真正ＡＡＶベクター粒子は、カルバモイル合成酵素Ｉ、オルニチン・トランスカルバミラーゼ、アルギニノコハク酸合成酵素、アルギニノコハク酸分解酵素、アルギナーゼ、フマリルアセト酢酸ヒドラーゼ、フェニルアラニン水酸化酵素、アルファ−１  アンチトリプシン、グルコース−６−ホスファターゼ、ポルホビリノゲン・デアミナーゼ、第Ｖ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、シスタチオニンβ合成酵素、側鎖ケト酸デカルボキシラーゼ、アルブミン、イソバレリルＣｏＡ脱水素酵素、プロピオニルＣｏＡカルボキシラーゼ、メチルマロニルＣｏＡムターゼ、グルタリルＣｏＡ脱水素酵素、インスリン、ベータ−グルコシダーゼ、ピルビン酸カルボキシラーゼ、肝臓ホスホリラーゼ、ホスホリラーゼキナーゼ、グリシンデカルボキシラーゼ、ＲＰＥ６５、Ｈ−タンパク質、Ｔ−タンパク質、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）配列、ジストロフィンｃＤＮＡ配列からなる群から選択された、代謝の先天的異常の修正に有用なタンパク質をコードする導入遺伝子を有するものである、方法。
【請求項１１】
請求項１０記載の高純度のＡＡＶベクター製剤を生成する方法において、前記遺伝子産物は、第ＶＩＩＩ因子または第ＩＸ因子である、方法。
【請求項１２】
請求項１記載の方法において、工程（ｆ）の前記遠心分離は、単一の工程で実施されるものである、方法。
【請求項１３】
請求項１記載の方法において、工程（ｆ）の前記遠心分離は、密度勾配超遠心分離である、方法。
【請求項１４】
請求項１記載の方法において、工程（ｅ）の前記カラム溶出液は、濃縮されたカラム溶出液を生成するために接線流ろ過によって濃縮されるものである、方法。
【請求項１５】
請求項１記載の方法であって、さらに、工程（ｃ）で生成された前記溶解物にヌクレアーゼを追加する工程を有する、方法。