【手続補正書】
【提出日】平成28年1月17日(2016.1.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体試料に含まれる特定成分の定量分析を行うための乾燥試薬の製造方法であって、
増加または減少が紫外領域の光を用いる透過法によって測定されるニコチンアミド補酵素および前記乾燥試薬を平滑化するための平滑化剤を溶解液に溶解させることにより試薬溶液を調整する工程と、
分析用具の基材またはカバーに所定量の前記試薬溶液を滴下した後に、乾燥させる工程と、
を含み、
前記平滑化剤は、アルカリと界面活性剤との組み合わせである、乾燥試薬の製造方法。
【請求項２】
請求項１に記載の乾燥試薬の製造方法であって、
前記界面活性剤は、ｎ−オクタノイル−Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンおよび３−［（３−コールアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネートから選択される少なくとも一種である、乾燥試薬の製造方法。
【請求項３】
請求項２に記載の乾燥試薬の製造方法であって、
前記平滑化剤は、糖類を更に含む、乾燥試薬の製造方法。
【請求項４】
請求項３に記載の乾燥試薬の製造方法であって、
前記糖類は、スクロースであり、前記試薬溶液を調整する工程において、前記試薬溶液中のスクロースの濃度は、６Ｗ／Ｖ％以上になるように調整される、乾燥試薬の製造方法。
【請求項５】
請求項２ないし４のいずれかに記載の乾燥試薬の製造方法であって、
前記試薬溶液を調整する工程において、前記試薬溶液中のｎ−オクタノイル−Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンの濃度は、２Ｗ／Ｖ％以上になるように調整される、乾燥試薬の製造方法。
【請求項６】
請求項３に記載の乾燥試薬の製造方法であって、
前記糖類は、Ｄ−ソルビトールおよびスクロースから選択される少なくとも一種であり、前記試薬溶液を調整する工程において、前記試薬溶液中のＤ−ソルビトールの濃度は、６Ｗ／Ｖ％以上になるように調整され、スクロースの濃度は、３Ｗ／Ｖ％以上になるように調整され、
前記界面活性剤は、前記試薬溶液を調整する工程において、前記試薬溶液中のｎ−オクタノイル−Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンの濃度は、３Ｗ／Ｖ％以上になるように調整され、前記試薬溶液中の３−［（３−コールアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネートの濃度は、０．１Ｗ／Ｖ％以上になるように調整される、乾燥試薬の製造方法。
【請求項７】
液体試料に含まれる特定成分の定量分析を行うための乾燥試薬であって、
ニコチンアミド補酵素と、
前記乾燥試薬を平滑化するための平滑化剤と、
を含んでおり、
前記ニコチンアミド補酵素の増加または減少が、紫外領域の光を用いる透過法によって測定されるように構成されており、
前記平滑化剤は、アルカリと界面活性剤との組み合わせである、乾燥試薬。
【請求項８】
請求項７に記載の乾燥試薬であって、
前記界面活性剤は、ｎ−オクタノイル−Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンおよび３−［（３−コールアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネートから選択される少なくとも一種である、乾燥試薬。
【請求項９】
請求項８に記載の乾燥試薬であって、
前記平滑化剤は、糖類を更に含む、乾燥試薬。
【請求項１０】
請求項７ないし９のいずれかに記載の乾燥試薬であって、
前記アルカリは、水酸化ナトリウムである、乾燥試薬。
【請求項１１】
請求項９または１０に記載の乾燥試薬であって、
前記糖類は、Ｄ−ソルビトールおよびスクロースから選択される少なくとも一種の化合物である、乾燥試薬。
【請求項１２】
請求項７ないし１１のいずれかに記載の乾燥試薬であって、
前記乾燥試薬は、分析用具の内部に収容されており、
前記分析用具は、前記紫外領域の光を透過させる測定室を備え、
前記乾燥試薬は、前記測定室に配置されている、乾燥試薬。
【請求項１３】
請求項１２に記載の乾燥試薬であって、
前記分析用具は、毛細管現象により前記測定室に前記液体試料を移送するための毛細管流路を備えており、
前記乾燥試薬は、前記毛細管流路によって移送された前記液体試料によって撹拌することなく溶解される、乾燥試薬。
【請求項１４】
液体試料に含まれる特定成分の定量分析を行うための分析用具であって、
内部に請求項７ないし１３のいずれかに記載の乾燥試薬を収容している、分析用具。
【請求項１５】
請求項１４に記載の分析用具であって、
内部に測定室を備えており、
前記測定室は、前記ニコチンアミド補酵素の増加または減少を測定するために、前記紫外領域の光を透過させる部分であり、前記乾燥試薬は、前記測定室に配置されている、分析用具。
【請求項１６】
請求項１５に記載の分析用具であって、
毛細管現象により前記測定室に前記液体試料を移送するための毛細管流路を備えており、前記乾燥試薬は、前記毛細管流路によって移送される前記液体試料によって撹拌することなく溶解される、分析用具。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【発明の名称】乾燥試薬の製造方法、乾燥試薬、およびそれを用いた分析用具
【技術分野】
【０００１】
本発明は、液体試料に含まれる成分の分析に用いられる乾燥試薬の製造方法、乾燥試薬、およびそれを用いた分析用具に関する。
【背景技術】
【０００２】
液体試料中に含まれるＡＳＴ（アスパルテートアミノトランスフェラーゼ）やＬＤＨ（ラクテートデヒドロゲナーゼ）などの成分の量を酵素法により測定するための試薬において、検出試薬としてニコチンアミド補酵素(たとえば、β−ＮＡＤ＋、β−ＮＡＤＨ、β−ＮＡＤＰ＋、β−ＮＡＤＰＨ)、がよく用いられる。たとえば、特許文献１には、ニコチンアミド補酵素を含有し、液体試料中に含まれる成分を測定するために使用される液状試薬が記載されている。この液状試薬において、ニコチンアミド補酵素の増加または減少が、紫外領域の波長（３４０ｎｍ）の光を用いた透過法によって測定される。
【０００３】
検出試薬としてニコチンアミド補酵素を含有する乾燥試薬を備えた、液体試料中に含まれる成分の量を簡易に測定するための分析用具が提案されている。たとえば、特許文献２には、基板上に多層のゼラチン層が形成され、その中にニコチンアミド補酵素の一種であるβ−ＮＡＤ＋を含んでいる分析用具が記載されている。この分析用具は、β−ＮＡＤ＋が還元されて生じるβ−ＮＡＤＨを直接検出するのではなく、β−ＮＡＤＨ検出剤として電子伝達剤とホルマザン染料前駆体を含んでいる。具体的には、電子伝達剤としてジアホラーゼが用いられている。また、ホルマザン染料前駆体として、ニトロテトラゾリウムブルー（以後、ＮＴＢという）が用いられている。このＮＴＢの色変化が、可視領域の波長の光を用いる反射法により検出される。
【０００４】
また、特許文献３には、液体試料が内部に供給される試料供給口と、前記液体試料の測定が行われる測定室と、前記試料供給口と前記測定室とを連通する流路とから構成される分析用具が記載されている。前記流路および前記測定室は、複数のプレート部材の積層によって形成され、これらの複数のプレート部材のうち少なくとも１つは通気性を有する多孔質のプレート部材である。この分析用具において、液体試料の移送は、毛細管現象ではなく、試料供給口から圧力を加えることなどにより行われる。この分析用具の測定室には、乾燥試薬が配置されている。この乾燥試薬でも、β−ＮＡＤ＋が検出試薬として用いられている。この乾燥試薬もまた、β−ＮＡＤ＋が還元されて生じるβ−ＮＡＤＨを直接検出するのではなく、β−ＮＡＤ＋が還元されて生じるβ−ＮＡＤＨを検出するβ−ＮＡＤＨ検出剤を含んでいる。電子伝達剤として、ジアホラーゼが用いられている。ホルマザン染料前駆体として、水溶性テトラゾリウム塩であるＷＳＴ−４が用いられている。このＷＳＴ−４の色変化が、可視領域の波長を用いた透過法により検出される。
【０００５】
一方で、特許文献４に、透明基板と透明カバーとからなる分析用具とそれを測定するための分析装置が記載されている。この分析用具では、透明基板と透明カバーとを貼り合わせることによって、乾燥試薬が配置された測定室と液体試料を前記測定室に移送するための毛細管流路が形成されている。測定室に移送された液体試料は、前記乾燥試薬を溶解する。乾燥試薬中に含まれている検出試薬が液体試料中の特定成分と反応して生じた色の変化を、前記分析装置が、可視領域の光を用いる透過法により測定する。この分析用具は、液体試料を密閉して測定を行うので、前記分析装置内が汚れることを防止できる。これにより、前記分析装置内の洗浄が不要となる。また、この分析装置は、光学系を改良することにより小型化されている。なお、この乾燥試薬は、検出試薬としてニコチンアミド補酵素を含むものではない。
【０００６】
しかしながら、前記従来技術においては、次に述べるように、未だ改善すべき余地があった。
【０００７】
すなわち、特許文献１ないし３に記載されているように、ニコチンアミド補酵素を用いた酵素法は広く採用されている。しかし、その測定値に互換性がないと、患者データの比較ができず、診断に支障をきたす恐れがある。そのため、国際的には、国際臨床化学連合（ＩＦＣＣ）により、標準測定法（ＩＦＣＣ勧告法）が提示されている。また、日本においては、日本臨床化学会（ＪＳＣＣ）により、ＪＳＣＣ勧告法が公表されている。これらの勧告法の大きな特徴は、紫外領域の波長である３４０ｎｍで、ニコチンアミド補酵素の量を直接測定することにある。このような勧告法は、一般的に、特許文献１に記載されている液状試薬に適用されるものであるが、特許文献２および３に記載されているような簡易測定用の分析用具でも採用されることが好ましい。
【０００８】
ところが、反射法では、紫外領域の波長（３４０ｎｍ）の光による測定は原理上困難である。従って、特許文献２に記載されているような反射法を用いる分析用具においては、上記の勧告法とは異なる、可視領域の光を用いる測定原理を採用せざるを得ない。
【０００９】
特許文献３および４に記載されている分析用具は、透過法による測定を行うものである。上述したように、特許文献３および４に記載されている分析用具は、ニコチンアミド補酵素の量を、紫外領域の波長で直接測定するものではない。特許文献３に記載の分析用具においては、液体試料の移送は、試料供給口から圧力を加えることなどにより行われる。このような分析用具を測定するための分析装置は、液体試料を移送するポンプなどを備えるため、大型化する傾向がある。分析装置を小型化できるという観点では、特許文献４に記載されているような、毛細管現象により液体試料を移送する分析用具を採用することが好ましい。
【００１０】
特許文献４に記載された分析用具においては、測定室に配置された乾燥試薬を用いて、可視光による測定が行われる。このような分析用具に対して上記の勧告法を適用し、特に、紫外光を用いる透過法により精度の良い測定を行うためには、乾燥試薬を前記測定室中で一様に溶解させる必要がある。従って、前記測定室に配置された乾燥試薬は、ひび割れが無く、かつ平滑でなければならない。しかし、ニコチンアミド補酵素を溶解した試薬溶液は、単純に乾燥させるだけでは、平滑にならず、ひび割れが入ってしまうことが判明した。このような乾燥試薬は、撹拌することなく溶解した場合、ムラが生じるため、紫外領域の光を用いて測定する場合、目的とする吸光度を得ることが困難である。また、乾燥試薬のひび割れは、液体試料が測定室に流入する際に気泡を噛みこむ要因となる。このような測光部に存在する気泡は、測定値の誤差要因となってしまう。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】特開平８−２４８０２８号公報
【特許文献２】特公平５−６０３６０号公報
【特許文献３】国際公開第２００９／０９０７５６号パンフレット
【特許文献４】特開平１０−１９７５２６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、前記したような事情のもとで考え出されたものであって、液体試料に含まれる成分を定量するためにニコチンアミド補酵素の増減を紫外領域の光を用いる透過法により測定する場合に、精度のよい測定のできる乾燥試薬の製造方法、乾燥試薬、およびそれを用いた分析用具を提供することをその課題としている。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
上記の課題を解決するため、本発明では、次の技術的手段を講じている。
【００１４】
本発明の第１の側面により提供される乾燥試薬の製造方法は、液体試料に含まれる特定成分の定量分析を行うための乾燥試薬の製造方法であって、増加または減少が紫外領域の光を用いる透過法によって測定されるニコチンアミド補酵素および前記乾燥試薬を平滑化するための平滑化剤を溶解液に溶解させることにより試薬溶液を調整する工程と、分析用具の基材またはカバーに所定量の前記試薬溶液を滴下した後に、乾燥させる工程と、を含み、前記平滑化剤は、アルカリと界面活性剤との組み合わせであることを特徴としている。
【００１５】
好ましくは、前記界面活性剤は、ｎ−オクタノイル−Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンおよび３−［（３−コールアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネートから選択される少なくとも一種である構成とされている。
【００１６】
好ましくは、前記平滑化剤は、糖類を更に含む構成とされている。なお、本発明でいう「糖類」は、単糖類、二糖類などのオリゴ糖、および糖アルコールを含む概念である。
【００１７】
好ましくは、前記糖類は、スクロースであり、前記試薬溶液を調整する工程において、前記試薬溶液中のスクロースの濃度は、６Ｗ／Ｖ％以上になるように調整される構成とされている。
【００１８】
好ましくは、前記試薬溶液を調整する工程において、前記試薬溶液中のｎ−オクタノイル−Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンの濃度は、２Ｗ／Ｖ％以上になるように調整される構成とされている。
【００１９】
好ましくは、前記糖類は、Ｄ−ソルビトールおよびスクロースから選択される少なくとも一種であり、前記試薬溶液を調整する工程において、前記試薬溶液中のＤ−ソルビトールの濃度は、６Ｗ／Ｖ％以上になるように調整され、スクロースの濃度は、３Ｗ／Ｖ％以上になるように調整され、前記界面活性剤は、前記試薬溶液を調整する工程において、前記試薬溶液中のｎ−オクタノイル−Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンの濃度は、３Ｗ／Ｖ％以上になるように調整され、前記試薬溶液中の３−［（３−コールアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネートの濃度は、０．１Ｗ／Ｖ％以上になるように調整される構成とされている。
【００２０】
本発明の第２の側面により提供される乾燥試薬は、液体試料に含まれる特定成分の定量分析を行うための乾燥試薬であって、ニコチンアミド補酵素と、前記乾燥試薬を平滑化するための平滑化剤と、を含んでおり、前記ニコチンアミド補酵素の増加または減少が、紫外領域の光を用いる透過法によって測定されるように構成されており、前記平滑化剤は、アルカリと界面活性剤との組み合わせであることを特徴としている。
【００２１】
好ましくは、前記界面活性剤は、ｎ−オクタノイル−Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンおよび３−［（３−コールアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネートから選択される少なくとも一種である構成とされている。
【００２２】
好ましくは、前記平滑化剤は、糖類を更に含む構成とされている。
【００２３】
好ましくは、前記アルカリは、水酸化ナトリウムである構成とされている。
【００２４】
好ましくは、前記糖類は、Ｄ−ソルビトールおよびスクロースから選択される少なくとも一種の化合物である構成とされている。
【００２５】
好ましくは、前記乾燥試薬は、分析用具の内部に収容されており、前記分析用具は、前記紫外領域の光を透過させる測定室を備え、前記乾燥試薬は、前記測定室に配置されている構成とされている。
【００２６】
好ましくは、前記分析用具は、毛細管現象により前記測定室に前記液体試料を移送するための毛細管流路を備えており、前記乾燥試薬は、前記毛細管流路によって移送された前記液体試料によって撹拌することなく溶解される構成とされている。
【００２７】
本発明の第３の側面により提供される分析用具は、液体試料に含まれる特定成分の定量分析を行うための分析用具であって、内部に本発明の第２の側面により提供される乾燥試薬を収容していることを特徴としている。
【００２８】
好ましくは、前記分析用具は、内部に測定室を備えており、前記測定室は、前記ニコチンアミド補酵素の増加または減少を測定するために、前記紫外領域の光を透過させる部分であり、前記乾燥試薬は、前記測定室に配置されている構成とされている。
【００２９】
好ましくは、前記分析用具は、毛細管現象により前記測定室に前記液体試料を移送するための毛細管流路を備えており、前記乾燥試薬は、前記毛細管流路によって移送される前記液体試料によって撹拌することなく溶解される構成とされている。
【００３０】
本発明のその他の特徴および利点は、添付図面を参照して以下に行なう発明の実施の形態の説明から、より明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】本発明に係る乾燥試薬を備えた分析用具の一例を示す平面図である。
【図２】図１に示す分析用具のII−II線に沿う断面図である。
【図３】図３（Ａ）ないし図３（Ｃ）は、図１に示す分析用具の動作を説明する断面図である。
【図４】比較例１の乾燥試薬の表面状態を示す写真である。
【図５】比較例１の乾燥試薬上に、液体試料が移送された状態を示す写真である。
【図６】比較例２の乾燥試薬の表面状態を示す写真である。
【図７】実施例２の乾燥試薬の表面状態を示す写真である。
【図８】実施例５の乾燥試薬の表面状態を示す写真である。
【図９】比較例１と実施例２の吸光度のタイムコースを比較するグラフである。
【図１０】比較例１と実施例５の吸光度のタイムコースを比較するグラフである。
【図１１】比較例１と実施例６の吸光度のタイムコースを比較するグラフである。
【図１２】比較例３の乾燥試薬の表面状態を示す写真である。
【図１３】実施例７の乾燥試薬の表面状態を示す写真である。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
以下、本発明の好ましい実施の形態について、図面を参照して具体的に説明する。
【００３３】
図１および図２は、本発明が適用された乾燥試薬およびこの乾燥試薬を含む分析用具の一例を示している。この分析用具Ａは、診療所や、病院の病棟に設置されている小型の分析装置にセットして、血清中に含まれる成分の量の定量分析に用いられるものである。血清は、本発明でいう液体試料の一例に相当するものである。分析用具Ａは、血清以外の液体試料にも適用できる。血清以外の液体試料としては、具体的には、たとえば、全血、血漿、尿、唾、間質液などの生体試料が挙げられる。これらの液体試料は、そのまま適用してもよいし、希釈液で希釈して適用してもよい。図１および図２に示すように、分析用具Ａは、カバー１、基材２、スペーサー３、毛細管流路３０，３２、測定室３１、および乾燥試薬４を備えている。なお、以降の説明において、上下方向などの方向は、図面の記載にしたがったものとする。
【００３４】
カバー１は、たとえばポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）を材料とし、紫外線透過性を有する透明の板状部材である。この板状部材の厚みは、０．１ｍｍである。カバー１としては、紫外線透過性を有する板状部材であればどのようなものでも使用できる。具体的には、たとえば、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）を材料とする板状部材が挙げられる。また、厚みも０．１ｍｍに限られない。具体的には、たとえば、厚みは０．１ｍｍ〜１．０ｍｍであることが好ましく、０．１ｍｍ〜０．２ｍｍであることがより好ましい。カバー１には、試料供給口１０および空気抜き１１が形成されている。図２に示すように、試料供給口１０は、分析装置が具備するノズル５が血清Ｓを分析用具Ａに供給するための開口部である。空気抜き１１は、分析用具Ａの内部において、毛細管現象による血清Ｓの移送が円滑に行われるようにするために形成された開口部である。
【００３５】
基材２は、カバー１と同様、たとえばＰＭＭＡを材料とする紫外線透過性を有する透明の板状部材である。この板状部材の厚みは、０．１ｍｍである。基材２としては、紫外線透過性を有する板状部材であればどのようなものでも使用可能である。具体的には、たとえば、ＰＥＴを材料とする板状部材が挙げられる。また、厚みも０．１ｍｍに限られない。具体的には、たとえば、厚みは０．１ｍｍ〜１．０ｍｍであることが好ましく、０．１ｍｍ〜０．２ｍｍであることがより好ましい。図１および図２に示すように、基材２において、後述する測定室３１の底壁部となる部分に乾燥試薬４が形成され、配置される。
【００３６】
図１および図２に示すように、スペーサー３は、カバー１と基材２とを貼り合わせるとともに、分析用具Ａの内部に毛細管流路３０，３２および測定室３１を形成するためのものである。スペーサー３としては、たとえば、厚みが０．５ｍｍの両面テープが用いられる。この厚みにより、測定室のセル長が規定される。この両面テープは、合成樹脂製のフィルムの両面に粘着剤を塗布したものである。スペーサー３に後述する毛細管流路３０，３２および測定室３１の形状の貫通口を形成し、カバー１と基材２とをスペーサー３を用いて貼り付けることにより、毛細管流路３０，３２および測定室３１が形成される。なお、スペーサー３の厚みは、０．５ｍｍに限られない。分析用具Ａは、血清Ｓ中に大量に含有される成分の量を測定するためのものである場合は、スペーサー３の厚みを薄くすることにより、感度が低くなるように調整される。逆に、分析用具Ａは、血清Ｓ中に微量にしか含まれない成分の量を測定するためのものである場合は、スペーサー３の厚みを厚くすることにより、高感度化される。
【００３７】
図２に示すように、毛細管流路３０は、ノズル５により試料供給口１０から供給された血清Ｓを後述の測定室３１に毛細管現象により移送するためのものである。また、毛細管流路３２は、血清Ｓを測定室３１から空気抜き１１まで移送するためのものである。毛細管流路３２は、測定室３１に血清Ｓを確実に満たすために設けられている。
【００３８】
図１および図２に示すように、測定室３１は、分析用具Ａの内部に形成されており、上壁部、側壁部、および底壁部により囲まれた小さい空間である。測定室３１は、後述する乾燥試薬４を収容するためのものである。図２に示すように、乾燥試薬４は、測定室３１の底壁面３１ａに固着されている。血清Ｓは、測定室３１に、毛細管流路３０から流入する。流入した血清Ｓは、乾燥試薬４を溶解する。溶解した試薬は、測定室３１中に拡散する。この時、溶解した試薬と血清Ｓの撹拌は行われない。なお、乾燥試薬４を測定室３１の上壁面３１ｂに固着することもできる。また、他の試薬と分離しないと安定性が保てない試薬がある場合には、これらの試薬を分離して含有する複数の乾燥試薬４を上壁面３１ｂと底壁面３１ａの両方に固着して、配置することも可能である。
【００３９】
図１および図２に示すように、毛細管流路３０，３２および測定室３１の上壁部は、カバー１により形成されている。側壁部は、スペーサー３により形成されている。また、底壁部は、基材２により形成されている。カバー１および基材２の表面には、毛細管現象が生じやすくするために、紫外線処理やプラズマ処理などの物理的処理が行われる。また、カバー１および基材２の表面処理は、物理的処理に限られず、界面活性剤を塗布することにより行ってもよい。
【００４０】
乾燥試薬４は、血清Ｓに含まれる特定の成分を検出するための複数の試薬が混合され、乾燥されたものである。乾燥試薬４は、検出試薬としてニコチンアミド補酵素を含有している。ニコチンアミド補酵素は、ある種の酸化還元酵素が触媒する反応に必要なものである。ニコチンアミド補酵素としては、具体的には、β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（β−ＮＡＤ＋）、β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド還元型（β−ＮＡＤＨ）、β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（β−ＮＡＤＰ＋）、β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸還元型（β−ＮＡＤＰＨ）が挙げられる。酸化還元酵素が触媒する反応により、β−ＮＡＤ＋とβ−ＮＡＤＨとが相互変換される。また、β−ＮＡＤＰ＋とβ−ＮＡＤＰＨとが相互変換される。これらのうち、還元型のニコチンアミド補酵素であるβ−ＮＡＤＨおよびβ−ＮＡＤＰＨは、３４０ｎｍ付近に吸収極大を有している。従って、ニコチンアミド補酵素を必要とする検出系において、分析装置は、β−ＮＡＤＨまたはβ−ＮＡＤＰＨの増加または減少を検出することによって血清Ｓに含まれる特定の成分の定量を行う。
【００４１】
ニコチンアミド補酵素が関与する検出系によって検出可能な成分として、グルコース、尿酸、中性脂肪、アンモニア、クレアチニンなどの物質、および、クレアチンキナーゼ、トランスアミナーゼ、ロイシンアミノペプチダーゼ、α−アミラーゼ、ラクテートデヒドロゲナーゼなどの酵素が挙げられる。
【００４２】
たとえば、ラクテートデヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）は乳酸からピルビン酸が生じる反応を触媒する。その際、β−ＮＡＤ＋がβ−ＮＡＤＨに還元される。上述したように、β−ＮＡＤ＋とβ−ＮＡＤＨで、紫外領域の波長における吸収スペクトルが、著しく異なっている。β−ＮＡＤ＋は、２６０ｎｍ付近にしか吸収を持たないが、β−ＮＡＤＨは、３４０ｎｍ付近にも吸収を持っている。よって、３４０ｎｍにおけるβ−ＮＡＤＨの吸光度の増加を測定することにより、ＬＤＨの活性を検出することができる。
【００４３】
【化１】
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【００４４】
乾燥試薬４は、平滑化剤を含有している。この平滑化剤は、乾燥試薬４の形状を平滑化し、ひび割れを防止するためのものである。上述したように、乾燥試薬４は、分析装置Ａの測定室３１に配置されている。乾燥試薬４は、測定室３１中で血清Ｓにより撹拌することなく溶解される。この乾燥試薬４の溶解液に紫外光を照射することにより、測定が行われる。溶解液の撹拌が行われないため、乾燥試薬４の表面に凹凸が存在すると、溶解液中の試薬濃度にムラが生じ易い。また、乾燥試薬４にひび割れがあると、溶解液中に気泡が生じ易い。その結果、測定データにばらつきが生じ易い。従って、乾燥試薬４の表面は平滑である必要がある。そのため、乾燥試薬４では、平滑化剤が用いられている。平滑化剤は、アルカリと、糖類および界面活性剤から選択される少なくとも一種との組合せである。
【００４５】
ここで、本発明でいう「糖類」は、単糖類、二糖類などのオリゴ糖、および糖アルコールを含む概念である。糖類は、単独で使用してもよいし、二種以上を併用してもよい。界面活性剤もまた同様である。また、糖類と界面活性剤とを併用してもよい。アルカリは、具体的には、水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）である。糖類として、具体的には、グリセリン、Ｄ−ソルビトール、スクロース、トレハロースが挙げられる。また、前記界面活性剤として、具体的には、ｎ−オクタノイル−Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン（ＭＥＧＡ８）、３−［（３−コールアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳ）が挙げられる。ＭＥＧＡ８は、β−ＮＡＤ＋を含有する乾燥試薬４の平滑化に特に適している。ＣＨＡＰＳは、β−ＮＡＤＨを含有する乾燥試薬４の平滑化に特に適している。
【００４６】
平滑化剤の内、ＮａＯＨは、その水溶液を試薬溶解液として使用することができる。この場合、ＮａＯＨの濃度は、０．５〜１．５Ｎであることが好ましく、１．０Ｎに調整することがより好ましい。
【００４７】
糖類としてスクロースを単独で使用する場合、その濃度を６Ｗ／Ｖ％以上に調整することが好ましい。また、界面活性剤としてＣＨＡＰＳを単独で使用する場合、その濃度を２Ｗ／Ｖ％以上とすることが好ましい。
【００４８】
糖類と界面活性剤とを併用して使用する場合、濃度を次のように調整して使用することが好ましい。たとえば、糖類として、Ｄ−ソルビトールを使用する場合、その濃度は、６Ｗ／Ｖ％以上に調整することが好ましい。また、スクロースを使用する場合、その濃度は、３Ｗ／Ｖ％以上とすることが好ましい。界面活性剤として、ＭＥＧＡ８を使用する場合、その濃度は、３Ｗ／Ｖ％以上に調整することが好ましい。また、ＣＨＡＰＳを使用する場合、その濃度は、０．１Ｗ／Ｖ％以上とすることが好ましい。
【００４９】
これらの平滑化剤は、いわゆる賦形剤または接着剤として機能する。β−ＮＡＤ＋やβ−ＮＡＤＨのような低分子の粉体は、結合水が少ないために、粉体同士の結合能が低い。このような成分が混合した試薬を乾燥させた場合、乾燥試薬の表面は、細かいひび割れが発生する。また、軽い衝撃で割れてしまう。これは乾燥過程において、より乾燥しやすい粉体分子が、試薬溶液の表面を覆うことで、粉体の性質がそのまま更新されることが原因と推測される。このような成分が配合されている乾燥試薬４の場合は、粉体を分散させ、さらに水和させることでひび割れが改善できる。
【００５０】
たとえばスクロースやトレハロース、または、グリセリンやＤ−ソルビトールのようなポリオールなど結合水を含む糖類が添加された場合、これらの糖類は、乾燥試薬４の乾燥過程において、粉体分子を分散させながら乾燥する。乾燥過程において結合した糖類分子は、マトリクスを形成し、その中にβ−ＮＡＤ＋やβ−ＮＡＤＨのような粉体分子を取り込む。このことにより、分子同士が結合しやすい糖類の性質が維持される。その結果、乾燥試薬４のひび割れが改善すると推測される。ＭＥＧＡ８やＣＨＡＰＳのような界面活性剤もまた同様の作用でひび割れ改善に寄与すると考えられる。
【００５１】
分析用具Ａは、次のようにして製造される。先ず、ニコチンアミド補酵素および平滑化剤を溶解液に溶解させることにより試薬溶液が調整される。溶解液として、具体的には、純水、緩衝液などが挙げられる。次に、所定量の試薬溶液を、基材２の測定室３１となる部分に点着し、所定の条件下、乾燥させることにより乾燥試薬４が形成される（図１および図２参照）。次に、基材２の上にスペーサー３として両面テープを貼ってセル長を確保し、その上に基材２と同素材のカバー１を貼り合わせることにより、分析用具Ａが作製される（図１および図２参照）。なお、ニコチンアミド補酵素は、検出系により適切なものが選択される。平滑化剤は、上記から選択される。スペーサー３には、毛細管流路３０，３２および測定室３１の形状の貫通口が形成されている。試薬溶液の点着は、先にスペーサー３を基材２に貼り付けた後、基材２の測定室３１に該当する部分に行うようにしてもよい。カバー１には、試料供給口１０と空気抜き１１とが形成されている。
【００５２】
次に、図２および図３（Ａ）ないし図３（Ｃ）を用いて、本発明に係る乾燥試薬４を含む分析用具Ａの動作について説明する。
【００５３】
分析用具Ａを用いた測定は、紫外領域の波長の光を用いる透過法によって行われる。図２によく表れているように、この紫外領域の光は、乾燥試薬４が配置されている測定室３１に向かって、矢印で示すように照射される。分析用具Ａを分析装置にセットすると、測定室３１の下方には光源素子６が配置される。この光源素子６は、測定室３１に３４０ｎｍ付近の波長の光を照射するためのものである。光源素子６が照射する紫外領域の光は、ニコチンアミド補酵素の増減を検出可能なものであればどのようなものでもよく、２００ｎｍ〜４００ｎｍから選択することが好ましい。測定室３１の上方には、分析装置の受光素子７が配置されている。受光素子７は、測定室３１を透過した光を受光するためのものである。
【００５４】
図３（Ａ）に示すように、分析装置のノズル５が、試料供給口１０を介して分析用具Ａ内に血清Ｓを供給する。血清Ｓは、矢印で示すように、毛細管流路３０を毛細管現象により測定室３１に向かって移動する。次に、図３（Ｂ）に示すように、血清Ｓは、測定室３１に流れ込む。血清Ｓは、測定室３１を満たした後、引き続いて毛細管流路３２を矢印で示すように移動する。なお、ノズル５は、分析用具Ａの内部を満たすのに十分の量の血清Ｓを、引き続いて試料供給口１０に流し込む。次に、図３（Ｃ）に示すように、血清Ｓは、測定室３１に配置された乾燥試薬４を溶解する。この血清Ｓによる乾燥試薬４の溶解は、撹拌をすることなく行われる。次に、光源素子６が、測定室３１に３４０ｎｍ付近の波長の紫外光を矢印で示すように照射する。この光は、測定室３１の試薬溶解液を透過し、受光素子７によって受光される。分析装置は、受光素子７の受光量に基づき血清Ｓ中の特定成分の量を算出する。乾燥試薬には、ニコチンアミド補酵素が含まれているので、β−ＮＡＤＨまたはβ−ＮＡＤＰＨの増加または減少を検出することによって、血清Ｓに含まれる特定の成分の定量分析が行われる。
【００５５】
以上のように、本実施形態によれば、分析用具Ａに収容される乾燥試薬４は、乾燥試薬４を平滑化するための平滑化剤を含有している。これにより、乾燥試薬４は、ひび割れや凹凸の少ない平滑なものとなる。この乾燥試薬４は、血清Ｓによって溶解された場合に、気泡や試薬の濃度ムラが生じ難い。従って、ニコチンアミド補酵素の量を紫外領域の光を用いる透過法により測定することにより、血清Ｓに含まれる特定成分の定量分析を実行する場合に、精度のよい分析結果を得ることができる。これにより、簡易測定用の分析用具Ａでも、ＩＦＣＣ勧告法やＪＳＣＣ勧告法を適用した測定が可能となる。
【００５６】
乾燥試薬４が含有する平滑化剤は、糖類および界面活性剤の少なくともいずれかと、アルカリとの組合せである。この平滑化剤により、平面が平滑な乾燥試薬を適切に形成することができる。これにより、血清Ｓに含まれる特定成分の定量分析を実行する場合に、精度のよい分析結果を得ることができる。
【００５７】
分析用具Ａは、紫外光を照射する測定室３１に乾燥試薬４を配置しているので、血清Ｓに溶解された試薬の移送を必要としない。移送による試薬濃度のムラが生じないので、精度のよい測定を行うことができる。
【００５８】
分析用具Ａは、毛細管現象により測定室３１に血清Ｓを移送するための毛細管流路３０を備えており、乾燥試薬４は、毛細管流路３０によって移送される血清Ｓによって撹拌することなく溶解される。これにより、分析用具Ａを測定するための分析装置に、血清Ｓを移送させるためのポンプなどの部品が必要ない。また、測定室３１の試薬の溶解液を撹拌するための撹拌装置も必要ない。従って、分析用具Ａおよび前記分析装置を小型化することができる。また、これらの製造コストを低く抑えることができる。
【００５９】
本発明は、上述した実施形態の内容に限定されない。本発明に係る乾燥試薬の製造方法の各工程の具体的な構成は、種々に変更自在である。同様に、本発明に係る乾燥試薬および分析用具の具体的な構成は、種々に設計変更自在である。
【実施例】
【００６０】
以下、実施例及び比較例に基づいて本実施形態の効果を具体的に説明する。なお、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００６１】
本実施形態の図１ならびに図２に示す乾燥試薬４およびこの乾燥試薬４を含む分析用具Ａを作製した。先ず、乾燥試薬４を形成するための試薬溶液を調整した。
【００６２】
［実施例１］
β−ＮＡＤ＋（オリエンタル酵母工業株式会社製）１３．２７ｍｇを純水０．２３４ｍＬに添加して完全に溶解させ、１Ｎ−ＮａＯＨ（和光純薬工業株式会社製）を０．０１６ｍＬ添加して攪拌し、第１溶液を調製した。β−ＮＡＤ＋１３．２７ｍｇ、界面活性剤ＭＥＧＡ８（株式会社同仁化学研究所製）１５．０ｍｇを純水０．２３４ｍＬに添加して完全に溶解させ、１Ｎ−ＮａＯＨを０．０１６ｍＬ添加して攪拌し、第２溶液を調製した。第１溶液を２０μＬ、第２溶液を１０μＬ混合し、試薬溶液を調整した。この場合、試薬溶液におけるＭＥＧＡ８の濃度は、２Ｗ／Ｖ％となる。
【００６３】
［実施例２］
実施例１の第２溶液をそのまま試薬溶液とした。この場合、試薬溶液におけるＭＥＧＡ８の濃度は、６Ｗ／Ｖ％となる。
【００６４】
［実施例３］
β−ＮＡＤ＋１３．２７ｍｇを純水０．２３４ｍＬに添加して完全に溶解させ、１Ｎ−  ＮａＯＨを０．０１６ｍＬ添加して攪拌し、第１溶液を調製した。β−ＮＡＤ＋１３．２７ｍｇ、スクロース（ナカライテスク株式会社製）５０．０ｍｇを純水０．２３４ｍＬに添加して完全に溶解させ、１Ｎ‐ＮａＯＨを０．０１６ｍＬ添加して攪拌し、第２溶液を調製した。第１溶液を２１μＬと第２溶液を９μＬとを混合し、試薬溶液を調整した。この場合、試薬溶液におけるスクロースの濃度は、６Ｗ／Ｖ％となる。
【００６５】
［実施例４］
実施例３の第１溶液１５μＬと第２溶液１５μＬとを混合し、試薬溶液を調整した。この場合、試薬溶液におけるスクロースの濃度は、１０Ｗ／Ｖ％となる。
【００６６】
［実施例５］
実施例３の第２溶液をそのまま試薬溶液とした。この場合、試薬溶液におけるスクロースの濃度は、２０Ｗ／Ｖ％となる。
【００６７】
［実施例６］
β−ＮＡＤ＋１３．２７ｍｇ、Ｄ−ソルビトール（ナカライテスク株式会社製）１５．０ｍｇ、ＭＥＧＡ８  ７．５ｍｇを純水０．２３４ｍＬに添加して完全に溶解させ、１Ｎ−ＮａＯＨを０．０１６ｍＬ添加して攪拌し、試薬溶液を調製した。この場合、試薬溶液におけるＤ−ソルビトールの濃度は、６Ｗ／Ｖ％、ＭＥＧＡ８の濃度は、３Ｗ／Ｖ％となる。
【００６８】
［比較例１］
β−ＮＡＤ＋１３．２７ｍｇを純水０．２５ｍＬに溶解させて、試薬溶液を調製した。この試薬溶液は、ＮａＯＨ、界面活性剤、および糖類のいずれも含んでいない点で、本実施形態の乾燥試薬４と相違している。
【００６９】
［比較例２］
β−ＮＡＤ＋１３．２７ｍｇを純水０．２３４ｍＬに添加して完全に溶解させ、１Ｎ‐ＮａＯＨを０．０１６ｍＬ添加して攪拌し、試薬溶液を調製した。この試薬溶液は界面活性剤および糖類のいずれも含んでいない点で、本実施形態の乾燥試薬４と相違している。
【００７０】
次に、上記の試薬溶液を用いて、乾燥試薬４を形成し、分析用具Ａを作製した。比較例１および比較例２についても同様に乾燥試薬、分析用具を作製した。試薬溶液を、ＰＭＭＡ製の基材２の測定室３１に該当する部分に１．２μＬ点着し、低湿保管庫（商品名：ＭｃＤｒｙ、エクアールシー株式会社製）に入れて、室温、１％ＲＨの条件下、一晩乾燥させて乾燥試薬４を形成した。次に、基材２の上にスペーサー３としての０．４８８ｍｍ厚の両面テープを貼ってセル長を確保し、その上に基材２と同素材のカバー１を貼り合わせることにより分析用具Ａを作製した。この分析用具Ａは、測定室３１が、測光部径：２．５ｍｍ、セル長：０．４８８ｍｍ、容積：２．３９μＬになるように構成されている。
【００７１】
図４ないし図６は、比較例１、比較例２で作製した乾燥試薬の表面状態を示している。図４は、β−ＮＡＤ＋のみの乾燥試薬の表面状態である。乾燥試薬の表面にはひび割れが生じている。また、図４からはわかりにくいが、乾燥試薬の全体形状は、ドーナツ状であり、中央部が窪んでいる。図５は、β−ＮＡＤ＋のみの乾燥試薬に、後述するＬＤＨ反応系Ｒ１試薬とヒト血清とを混合した血清希釈液を供給した時の状態を示している。血清希釈液が、矢印Ｎ１で示すように、分析用具の測定室３１に流入する際に、ひび割れの中に残っていた空気により気泡が生じている。図６は、比較例２の乾燥試薬の表面状態を示している。この乾燥試薬は、β−ＮＡＤ＋の他にＮａＯＨを含有している点で、比較例１と相違している。この場合でも、乾燥試薬の表面には、比較例１と同様、ひび割れが生じている。
【００７２】
図７および図８は、実施例２および実施例５で作製した乾燥試薬４の表面状態を示している。図７は、実施例２の乾燥試薬４の表面状態を示している。この乾燥試薬４は、ＮａＯＨの他に界面活性剤であるＭＥＧＡ８を含有している。乾燥試薬４を形成するための試薬溶液は、６Ｗ／Ｖ％のＭＥＧＡ８を含んでいる。この乾燥試薬４の表面は、平滑で、ひび割れがない。また、図８は  実施例５の乾燥試薬４の表面状態を示している。乾燥試薬４は、ＮａＯＨの他にスクロースを含有している。この乾燥試薬４を形成するための試薬溶液は、２０Ｗ／Ｖ％のスクロースを含んでいる。この乾燥試薬４の表面は、実施例２の乾燥試薬４と同様、平滑で、ひび割れが生じていない。
【００７３】
分析用具Ａの評価は、ＬＤＨ反応系Ｒ１試薬を用いて行われる。ＬＤＨ反応系Ｒ１試薬は、血清中に含まれるラクテートデヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）の基質である乳酸を供給するためのものである。分析用具ＡがＬＤＨを測定するものである場合、乳酸は乾燥試薬４中に含有されるべきものであるが、評価の便宜のため乳酸を含有するＬＤＨ反応系Ｒ１試薬を作製し、ヒト血清と混合して血清希釈液とした。このＬＤＨ反応系Ｒ１試薬の調整方法を以下に示す。
【００７４】
Ｎ−シクロヘキシル−２−アミノエタンスルホン酸（ＣＨＥＳ）（株式会社同仁化学研究所製）３１．０９ｇを室温で純水に溶解後、水酸化ナトリウム水溶液でｐＨを９．４に調製し、１００ｍＬとした（以下、ＣＨＥＳ緩衝液という）。また、界面活性剤溶液として、デオキシコール酸ナトリウム（和光純薬工業株式会社製）２５ｍｇを純水に溶解させ、５ｍＬとしたデオキシコール酸ナトリウム水溶液を調製した。乳酸リチウム（和光純薬工業株式会社製）３８．４ｍｇを純水０．７ｍＬに溶解させ、ＣＨＥＳ緩衝液０．２ｍＬ、デオキシコール酸ナトリウム水溶液０．１ｍＬを添加して攪拌し、ＬＤＨ反応系Ｒ１試薬を調製した。
【００７５】
作製した分析用具Ａの試料供給口１０に、前記した血清希釈液（ＬＤＨ反応系Ｒ１試薬とヒト血清との混合溶液）を５μＬ供給した。そして、３７℃で３分間反応させた。その結果、β−ＮＡＤ＋がβ−ＮＡＤＨに還元されるので、分光光度計を用いて３４０ｎｍの波長でその増加量のタイムコース測定を行った。比較例１および比較例２の分析用具の測定もまた同様に行った。
【００７６】
図９ないし図１１は、比較例１の分析用具、実施例２、実施例５、および実施例６の分析用具Ａに前述の血清希釈液を供給した際のタイムコースを示している。図９は、比較例１と実施例２のタイムコースを比較したものである。ＭＥＧＡ８を含有している乾燥試薬４は、β−ＮＡＤ＋のみの乾燥試薬よりも、吸光度の増加量が大きい。比較例１の乾燥試薬は、ドーナツ状に乾燥しており、溶解液の試薬濃度は中央部ほど薄くなっている。比較例１の分析用具では、乾燥試薬が溶解した試薬溶解液の撹拌を行わないので、試薬濃度の低い部分の吸光度が低くなる。
【００７７】
図１０は、比較例１と実施例５のタイムコースを比較したものである。スクロースを含有している乾燥試薬４は、β−ＮＡＤ＋のみの乾燥試薬よりも、実施例２と同様の理由で、吸光度の増加量が大きい。また、図１１は、比較例１と実施例６のタイムコースを比較したものである。ＮａＯＨならびにＭＥＧＡ８およびＤ−ソルビトールを含有している乾燥試薬４は、β−ＮＡＤ＋のみの乾燥試薬よりも、実施例２と同様の理由で、吸光度の増加量が大きい。界面活性剤と糖類とを組み合わせた場合は、界面活性剤または糖類を単独で添加するよりも低い濃度で効果を生じる。
【００７８】
表１は、実施例１ないし実施例６の分析用具Ａ、ならびに、比較例１および比較例２の分析用具を用いて、各ｎ＝１０回測定し、７０秒後および８０秒後の吸光度のばらつき（ＣＶ値：％）を示したものである。前記したように、実施例１および実施例２の乾燥試薬４は、ＮａＯＨおよびＭＥＧＡ８を含有している。実施例３ないし実施例５の乾燥試薬４は、ＮａＯＨおよびスクロースを含有している。また、実施例６の乾燥試薬４は、ＮａＯＨならびにＤ−ソルビトールおよびＭＥＧＡ８を含有している。表１から明らかなように、乾燥試薬４が、ＮａＯＨと、界面活性剤および糖類の少なくともいずれかと、を含む場合には、吸光度のばらつきが小さい。乾燥試薬４の表面が平滑であるため、気泡の発生や溶解液中の試薬濃度が不均一になることが防止されるからである。ここで、ＣＶ値（変動係数）は、数値のばらつきの指標であり、標準偏差を平均値で割ったものに１００を乗じたものである。
【００７９】
【表１】
2013165709.tif 000002
【００８０】
［実施例７］
トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（ナカライテスク株式会社製）６．０５７ｇを純水に溶解後、塩酸（ナカライテスク株式会社製）でｐＨ７．５に調製し、５０ｍＬとした（以下、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液という）。β−ＮＡＤＨ（オリエンタル酵母工業株式会社製）を１．０６ｍｇ、糖類としてスクロース（ナカライテスク株式会社製）７．５ｍｇ、界面活性剤として３−［（３−コールアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳ）（株式会社同仁化学研究所製）０．２５ｍｇを０．２３８ｍＬの純水に溶解させ、前記Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液を０．０１３ｍＬ添加して攪拌し、試薬溶液を調製した。この場合、試薬溶液におけるスクロースの濃度は、３Ｗ／Ｖ％、ＣＨＡＰＳ濃度は、０．１Ｗ／Ｖ％となる。なお、本実施例は、ニコチンアミド補酵素として、β−ＮＡＤ＋の代わりにβ−ＮＡＤＨを使用している点で、実施例１ないし実施例６と相違している。
【００８１】
［比較例３］
β−ＮＡＤＨ１．０６ｍｇを純水０．２５ｍＬに溶解させて、試薬溶液を調製した。なお、本比較例は、ニコチンアミド補酵素として、β−ＮＡＤ＋の代わりにβ−ＮＡＤＨを使用している点で、比較例１および比較例２と相違している。
【００８２】
上記の試薬溶液を、基材２の測定室３１に相当する部分に２．３９μＬ点着し、低湿保管庫に入れて、室温、１％ＲＨの条件下、一晩乾燥させて乾燥試薬４を形成した。次に、基材２の上に０．４８８ｍｍ厚の両面テープを貼ってセル長を確保し、その上に基材２と同素材のカバー１を貼り合わせることにより実施例７の分析用具Ａを作製した。この分析用具Ａは、測定室が、測光部径：２．５ｍｍ、セル長：０．４８８ｍｍ、容積：２．３９μＬになるように構成されている。比較例３についても同様に乾燥試薬、分析用具を作製した。
【００８３】
このように作製した実施例７の分析用具Ａの試料供給口１０に、ヒト血清を５μＬ点着した。そして、３７℃で５分間反応させた。分光光度計を用いて３４０ｎｍの波長でタイムコース測定した。比較例３の分析用具の測定もまた同様に行った。
【００８４】
図１２は、比較例３で作製したβ−ＮＡＤＨのみを含有する乾燥試薬の表面状態である。乾燥試薬の周囲にひび割れが生じている。また、図１２からはわかりにくいが、乾燥試薬の全体形状は、ドーナツ状であり、中央部が凹状になっている。図１３は、実施例７で作製した乾燥試薬４の表面状態を示している。乾燥試薬４は、ＮａＯＨの他にスクロースおよびＣＨＡＰＳを含有している。上述したように、この乾燥試薬４を形成するための試薬溶液は、３Ｗ／Ｖ％のスクロースおよび０．１Ｗ／Ｖ％のＣＨＡＰＳを含んでいる。そのため、乾燥試薬４の表面は、平滑で、ひび割れが生じていない。
【００８５】
表２は、実施例７の分析用具Ａおよび比較例３の分析用具を用いて各ｎ＝１０回測定し、１２０秒後および１４３秒後の吸光度のばらつき（ＣＶ値：％）を示したものである。表２から明らかなように、ＮａＯＨ、スクロース、およびＣＨＡＰＳを含む実施例７の分析用具Ａは、比較例３の分析用具よりも吸光度のばらつきが小さい。
【００８６】
【表２】
2013165709.tif 000003
【符号の説明】
【００８７】
Ａ  分析用具
Ｓ  血清（液体試料）
１  カバー
２  基材
３０  毛細管流路
３１  測定室
４  乾燥試薬