(57)【要約】３−Ｏ−（３’,３’−ジメチルスクシニル）ベツリン酸（ＤＳＢ）の塩を開示する。具体的には、ＤＳＢのＮ−メチル−Ｄ−グルカミンおよびアルカリ金属塩の調製、薬学的評価、およびin vivo でのバイオアベイラビリティー評価を開示する。これらの塩を含有する医薬組成物はＨＩＶおよび関連疾患を処置する方法に用いる。さらに、ＤＳＢの塩の製造方法および医薬組成物を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
３−Ｏ−（３’,３’−ジメチルスクシニル）ベツリン酸のＮ−メチル−Ｄ−グルカミン塩。
【請求項２】
３−Ｏ−（３’,３’−ジメチルスクシニル）ベツリン酸のジ−（Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン）塩。
【請求項３】
請求項１または２に記載の塩および製薬的に許容し得る担体または希釈剤を含有する医薬組成物。
【請求項４】
担体または希釈剤が無水溶媒である請求項３記載の医薬組成物。
【請求項５】
さらにシクロデキストリンを含有する請求項４記載の医薬組成物。
【請求項６】
さらにヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを含有する請求項５記載の医薬組成物。
【請求項７】
有効量の請求項２記載の塩を対象に投与することを含んでなるＨＩＶ感染を処置する方法。
【請求項８】
前記塩を少なくとも１つのさらなる活性成分と組み合わせて投与する請求項７記載の方法。
【請求項９】
さらなる活性成分が抗ウイルス剤である請求項８記載の方法。
【請求項１０】
前記塩を免疫調節剤、抗癌剤、抗菌剤、抗真菌剤またはその組合せと組み合わせて患者に投与する請求項７記載の方法。
【請求項１１】
対象に有効量の請求項３記載の医薬組成物を投与することを含んでなるＨＩＶ感染を処置する方法。
【請求項１２】
前記医薬組成物を少なくとも１つのさらなる活性成分と組み合わせて投与する請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
さらなる活性成分が抗ウイルス剤である請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
前記化合物を、免疫調節剤、抗癌剤、抗菌剤、抗真菌剤またはその組合せと組み合わせて患者に投与する請求項１１記載の方法。
【請求項１５】
有効量の請求項４記載の医薬組成物を患者に投与することを含んでなるＨＩＶ感染を処置する方法。
【請求項１６】
前記医薬組成物を少なくとも１つのさらなる活性成分と組み合わせて投与する請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
有効量の請求項５記載の医薬組成物を患者に投与することを含んでなるＨＩＶ感染を処置する方法。
【請求項１８】
前記医薬組成物を少なくとも１つのさらなる活性成分と組み合わせて投与する請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
有効量の請求項６記載の医薬組成物を投与することを含んでなるＨＩＶ感染を処置する方法。
【請求項２０】
前記医薬組成物を少なくとも１つのさらなる活性成分と組み合わせて投与する請求項１９記載の方法。
【請求項２１】
Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンと３−Ｏ−（３’,３’−ジメチルスクシニル）ベツリン酸とを無水溶媒中で混合して３−Ｏ−（３’,３’−ジメチルスクシニル）ベツリン酸Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン塩を得ることを含んでなる請求項１記載の塩の製造方法。
【請求項２２】
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの存在下で混合を行う請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
請求項３記載の医薬組成物を含んでなる投与剤形。
【請求項２４】
固体の経口投与剤形、非経口の投与剤形、液体の投与剤形、懸濁液の投与剤形または直腸坐薬である請求項２３記載の投与剤形。
【請求項２５】
錠剤である請求項２３記載の投与剤形。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、「ＤＳＢ」としても知られる３−Ｏ−（３’,３’−ジメチルスクシニル）ベツリン酸の新規な塩の形態に関する。本発明はさらに、ＤＳＢの塩の形態を含有する医薬組成物を用いてＨＩＶおよび関連疾患を処置する方法に関する。本発明はさらに、ＤＳＢの塩を含有する医薬組成物の投与剤形に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）は、レトロウイルスのサブファミリーであるレンチウイルスの仲間である。ＨＩＶが感染すると免疫系の細胞に侵入する；ＨＩＶは体の免疫系を破壊し患者は日和見感染症や新生物に罹りやすくなる。免疫異常は進行性、かつ不可逆性であって数年間における死亡率は高く１００％に達する。
【０００３】
ＨＩＶ−１は、Ｔ４リンパ球、ＯＫＴ４としても知られる細胞表面分化抗原ＣＤ４を発現する免疫系細胞、Ｔ４およびｌｅｕ３に対して栄養性かつ細胞変性的である。ウイルス指向性はウイルスエンベロープの糖タンパク質、ｇｐｌ２０と細胞表面のＣＤ４分子との間の相互作用のためである（Dalgleish et al., Nature,312:763-767（1984））。この相互作用は、感受性細胞のＨＩＶによる感染を媒介するのみならず、ＨＩＶは、細胞表面に分化抗原ＣＤ４（ＯＫＴ４、Ｔ４およびｌｅｕ３としても知られる）を発現する免疫系細胞であるＴ４リンパ球に対して栄養性で細胞変性でもある。このウイルスの親和性はウイルスエンベロープの糖タンパク質であるｇｐ１２０と細胞表面のＣＤ４分子との間の相互作用に起因している（Dalgleish et al., Nature 312:763-767, 1984）。これらの相互作用は、ＨＩＶによる感受性細胞の感染を媒介するだけでなく、感染および非感染Ｔ細胞のウイルス誘導性の融合の要因でもある。この細胞融合の結果、ＡＩＤＳ患者において巨大多核合胞体、細胞死およびＣＤ４細胞の進行性欠乏がもたらされる。これら事象はさらにＨＩＶ誘発の免疫低下とこれに続く続発症、日和見感染および新生物をもたらす。
【０００４】
ＣＤ４＋Ｔ細胞に加えて、ＨＩＶ宿主としては、血液単球を含む単核食細胞系統（Dalgleish et al., supra）、組織マクロファージ、皮膚のランゲルハンス細胞、およびリンパ節内の樹枝状細網細胞が挙げられる。ＨＩＶはまた向神経性であって、中枢神経系の単球やマクロファージに感染し重篤な神経損傷を与える可能性がある。マクロファージや単球はＨＩＶの主たる蓄積場所である。これらはＣＤ４を有するＴ細胞と相互作用し融合してＴ細胞を枯渇させＡＩＤＳの発病に寄与している。
【０００５】
ＨＩＶ治療のための薬剤は大きく進歩した。ＨＩＶ治療薬としては、特に限定はされないが、ＡＺＴ、３ＴＣ、ｄｄＣ、ｄ４Ｔ、ｄｄＩ、テノホビル、アバカビル、ネビラピン、デラビルジン、エファビレンツ、サキナビル、リトナビル、インディナビル、ネルフィナビル、ロピナビル、アンプレナビルおよびアタザナビル、またはその他の任意の抗レトロウイルス薬若しくは抗体で相互の組み合わせ若しくは生物学的な基礎の治療薬と関連したもの、例えば、ｇｐ４１由来のペプチド・エンフュービルタイド（フューゼオン；チメリス−ロシュ）または可溶性ＣＤ４、ＣＤ４に対する抗体、およびＣＤ４若しくは抗ＣＤ４の複合体、または本明細書においてさらに示したものが少なくともひとつ含まれる。これら薬物の組み合わせは特に効果的で血漿中のウイルスＲＮＡレベルを検出不可な程度にまで低下させウイルス抵抗の発達を遅らせることができ、患者の健康状態及び寿命の改良をもたらす。
【０００６】
これらの進歩にも拘わらず、現在可能な薬物療法には依然として問題がある。多くの薬物は重篤な毒性と副作用（例えば、脂肪の再分配）を有し、複雑な投与計画が必要なためにコンプライアンスを低下させて結果的にその効果を制限する。組み合わせ療法においてさえ期間を超えるとＨＩＶの耐性種がしばしば出現する。これら薬剤の高い費用もまた、特に先進国外において幅広い使用を制限するものとなっている。
【０００７】
これらの問題を回避するため、更に薬剤を開発する必要性が依然として存在する。理想的には、組み合わせ療法の道具に加えてウイルス・ライフサイクルの異なるステージを標的とし、毒性は最小でと製造コストの低いものがよい。
【０００８】
ベツリン酸とプラタン酸は、Syzigium claviflorumから単離されており、抗ＨＩＶ活性を有することが示されている。ベツリン酸およびプラタン酸はＨ９リンパ球細胞内のＨＩＶ複製に対してＥＣ50がそれぞれ１．４μＭ、６．５μＭ、Ｔ．Ｉ．値がそれぞれ９．３および１４であった。ベツリン酸を水素化するとジヒドロベツリン酸が得られ、これはわずかに強い抗ＨＩＶ効果を有していてＥＣ50が０．９、治療指数（Ｔ．Ｉ．）の値が１４を示した（Fujioka,T., et al., J.Nat.Prod., 57:243-247（1994））。ベツリン酸を、例えば３’,３’−ジメチルグルタリルおよび３’,３’−ジメチルサクシニルのような置換アシル基でエステル化するとより活性の強い誘導体が得られる（Kashiwada,Y., et al., J.Med.Chem., 39:1016-1017（1996））。アシル化ベツリン酸およびジヒドロベツリン酸誘導体は強力な抗ＨＩＶ剤であって米国特許第５,６７９,８２８号にも記載がある。抗ＨＩＶ分析によって、３−Ｏ−（３’,３’−ジメチルスクシニル）−ベツリン酸およびジヒドロベツリン酸アナログはいずれも、後天的に感染したＨ９リンパ球において非常に強力な抗ＨＩＶ活性を示した（それぞれ、ＥＣ50は１．７×１０-5μＭ未満）。これらの化合物は、それぞれ９７０,０００および４００,０００を超える顕著な治療指数値を示した。
【０００９】
米国特許第５,４６８,８８８号は、ルパンの２８−アミド誘導体を開示し、これらがＨＩＶ感染細胞に関して細胞保護効果を有することが記載されている。
【００１０】
ベツリン酸を含め数多くのトリペルテノイド類は、抗癌薬としての用途を含めいくつかの医学的応用が知られている。Andersonらは、ＷＯ９５／０４５２６において、細胞が最適な速度で増殖するのに必要なポリアミンに対するそれらの活性を含め、癌治療において用いられているトリテルペノイドの誘導体について検討している。これらトリテルペノイドのいくつかは、特にオルニチン脱カルボキシル化により、最適な細胞増殖に必要なポリアミンの酵素合成を妨害し、癌細胞の増殖を阻害することが分かっている。ベツリン酸はまた、抗炎症活性を有することが報告されており、これは、５−リポキシゲナーゼを含むロイコトリエン生合成に関与する酵素を阻害する能力によるものである。
【００１１】
Ｃｈａｎ（英国特許第１,４２５,６０１）は、ジヒドロベツリン酸のカルボキシル化された誘導体を医薬組成物に含有させることができることを開示しているが、これら化合物がどのような用途を有するかについての示唆はない。
【００１２】
特開平１−１４３８３２号は、ベツリンおよびその３,２８−ジエステルが癌治療の分野において有用であることを開示している。
【００１３】
本明細書の一部を構成する米国特許第６,１７２,１１０Ｂ１には、次式：
【化１】
2007529544.tif 000002
［式中、
Ｒ1はＣ2−Ｃ20置換または非置換のカルボキシアシルであり、Ｒ2はＣ2−Ｃ20置換または非置換のカルボキシアシルであり、Ｒ3は水素ハロゲンアミノ置換されていることもあるモノ−またはジ−アルキルアミノ、または−ＯＲ4であり、Ｒ4は水素、Ｃ1-4アルカノイル、ベンゾイル、またはＣ2−Ｃ20置換または非置換のカルボキシアシルであり、場合により点線はＣ20とＣ29との間の二重結合を示す］
を有するベツリンおよびジヒドロベツリン誘導体またはそれらの製薬的に許容し得る塩が開示されている。
【００１４】
米国特許第６,１７２,１１０号に記載の誘導体は、ベツリンおよびジヒドロベツリンのＣ３ヒドロキシまたはＣ２８ヒドロキシ基のＣ２〜Ｃ２０置換または非置換アシル基を導入して対応の３−Ｏ−アシルおよび／または２８−Ｏ−アシル誘導体を得ることによって形成される。これらの化合物は、少なくとも１つの上記のベツリン誘導体を、場合により１またはそれ以上の公知の抗ＡＩＤＳ治療剤または免疫賦活剤と組み合わせて投与することにより、レトロウイルス、特にＨＩＶに感染した患者を処置するのに有用であると記載されている。
【００１５】
米国特許第６０／４１３４５１号には、３,３−ジメチルサクシニルベツリンが開示されており、本明細書の一部を構成するZhu, Y-M. et al., Bioorg. Chem Lett. 11:3115-3118 （2001）；Kashiwada Y. et al., J. Nat. Prod. 61:1090-1095 （1998）；Kashiwada Y. et al., J. Nat. Prod. 63:1619-1622 （2000）;およびKashiwada Y. et al., Chem. Pharm. Bull. 48:1387-1390 （2000）には、ジメチルサクシニルベツリン酸およびジメチルサクシニルオレアノール酸が開示されている。コハク酸によるベツリンの３’炭素のエステル化により、ＨＩＶ−１活性を阻害することが可能な化合物が生じた（Pokrovskii, A.G. et al., Gos. Nauchnyi Tsentr Virusol. Biotekhnol．"Vector," 9:485-491 （2001））。
【００１６】
国際公開公報ＷＯ０２／２６７６１には、真菌感染の処置のためのベツリンおよびそのアナログの使用が開示されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
ウイルスの薬物耐性株に対して有効な新しいＨＩＶ阻害方法が必要とされている。一態様では、本発明は承認されている治療法とは異なる方法でウイルスを阻害する治療方法および化合物を提供する。具体的な態様では、本発明は、溶解度およびバイオアベイラビリティーが増大した、承認されている治療法とは異なる方法でin vivo でウイルスを阻害するＤＳＢの塩を含有する治療組成物を提供する。本発明の組成物はヒトにおけるＨＩＶ−１感染を処置するために使用することができる。
【００１８】
本発明の化合物および方法は、新規の作用メカニズムを有するものであり、それゆえ現在の治療法では効かないＨＩＶ株に対して活性である。したがって、本発明はＨＩＶ／ＡＩＤＳの処置について完全に新しい方法を提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
発明の要旨
本発明は、３−Ｏ−（３’,３’−ジメチルスクシニル）ベツリン酸（“ＤＳＢ”）の特定の塩の形態、その製造、それを含有する医薬組成物およびその使用方法に関する。具体的には、本発明はアミン塩、例えばＤＳＢのＮ−メチル−Ｄ−グルカミン（ＮｍＧ）塩の形態に関する。本発明はまた、ＤＳＢのこれら塩の形態を含有する医薬組成物および投与剤形に関する。これら組成物および投与剤形はＨＩＶおよび関連疾患の処置方法において使用することができる。さらに、ＤＳＢの塩および医薬組成物の製造方法もまた提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
発明の詳細な記載
本発明の第１の態様は、３−Ｏ−（３’,３’−ジメチルスクシニル）ベツリン酸（以下「ＤＳＢ」と称する）の塩の形態に関する。ＤＳＢは、以下の式：
【化２】
2007529544.tif 000003
を有する。
【００２１】
本発明の第２の態様は、ＤＳＢのＮｍＧ塩に関する。一態様では、ＤＳＢのグルカミン塩は、ＤＳＢのジ−（Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン）塩である（ジ−ＮｍＧ塩）。ＤＳＢのジ−（ＮｍＧ）塩は、ＤＳＢ１分子あたり２つのＮｍＧ分子が結合しており、分子式はＣ50Ｈ90Ｎ2Ｏ16、分子量９７５．２８であり、以下の式：
【化３】
2007529544.tif 000004
を有する。
【００２２】
本発明の第３の態様は、医薬組成物に関する。ＤＳＢのジ−（Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン）塩等のＤＳＢのＮｍＧ塩および製薬的な担体または希釈剤を含有する医薬組成物に関する。
【００２３】
本発明の第４の態様は、ＤＳＢのＮｍＧ塩の製造方法に関する。本発明の一態様では、この塩の製造方法はＮｍＧおよびＤＳＢを水溶液中で混合して３−Ｏ−（３’,３’−ジメチルスクシニル）ベツリン酸,Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン塩を得ることを含んでなる。混合は、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン等のシクロデキストリンの存在下で行うことができる。
【００２４】
本発明の第５の態様は、ＤＳＢのＮｍＧ塩の医薬組成物を含んでなる、経口用錠剤等の投与剤形に関する。本投与剤形は、ヒトの患者において、ＨＩＶ等のレトロウイルス感染を処置するために用いることができる。
【００２５】
本発明の第６の態様は、ヒトの患者において、ＨＩＶ等のレトロウイルス感染を処置するためのＤＳＢのＮｍＧ塩を含有する医薬組成物の使用方法に関する。
【００２６】
ＤＳＢの任意の非毒性の製薬的に許容し得るアミンまたは４級アンモニウム塩を本発明において用いることができる。これらの塩は、化合物の最後の単離および精製中に in situで製造する、または別途、遊離酸の形態の精製された化合物を適当な有機酸と反応させ、形成した塩を単離することにより製造することができる。これらには、非毒性のアンモニウム、４級アンモニウムおよびアミンカチオンが含まれ、例えば、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、エチルアミン、Ｎ−メチルグルカミンなどが挙げられるがこれに限定されない。
【００２７】
特に興味深いのは、ＤＳＢのＮｍＧ塩、即ち３−Ｏ−（３’,３’−ジメチルスクシニル）ベツリン酸Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン塩およびアルカリ金属塩の形態である。これらの塩の形態はＤＳＢと、ＮｍＧまたはアルカリ金属水酸化物とを混合して、ＤＳＢのモノおよびジ塩を形成することにより製造した。本発明の塩の形態は増大したバイオアベイラビリティーを有する。
【００２８】
本発明の塩は抗レトロウイルス活性を有し、場合により、抗レトロウイルス化合物、抗ＨＩＶ化合物および／または免疫賦活化合物または抗ウイルス抗体またはその断片等のさらなる製薬的に活性な成分とともに、レトロウイルス感染の処置に適した化合物および組成物を提供する。
【００２９】
「抗レトロウイルス活性」または「抗ＨＩＶ活性」なる語は、下記の少なくとも一つを阻止する能力を意図する；
（１）宿主細胞遺伝子内へのウイルスのプロＤＮＡの集積
（２）レトロウイルスの細胞への結合
（３）ウイルスの細胞内への侵入
（４）ウイルス複製を許す細胞代謝
（５）ウイルスの細胞間拡散阻止
（６）ウイルス抗原の合成および／または細胞発現
（７）ウイルス出芽または成熟化
（８）ウイルスコード酵素（例えば、逆転写酵素、インテグラーゼ、プロテアーゼ等）の活性、および／または
（９）既に知られている、例えば免疫低下等のレトロウイルス若しくはＨＩＶの病原性作用のいずれか。
【００３０】
本発明のＤＳＢの塩は、単独でまたは当分野で公知の他の治療形態と組み合わせて、レトロウイルス（例えばＨＩＶ）感染の処置のために使用することができる。但し、本発明のＤＳＢの塩は、正常な細胞に対する毒性が比較的低いか、あるいは実質的に毒性がないので、それらの有用性は確立したレトロウイルス感染に限定されない。例えば、本発明のＤＳＢの塩は、例えば血液バンクで維持されている血液製剤の処置に使用することができる。現在、国の血液供給はＨＩＶ抗体について試験されている。しかしながら、その試験は依然として完全ではなく、試験結果が陰性であってもＨＩＶウイルスを含むサンプルが存在し得る。血液および血液製剤を本発明のＤＳＢの塩で処理すれば、検出されなかったレトロウイルスを除去し若しくは低減させて安全性の幅を更に追加することができる。
【００３１】
本発明のＤＳＢの塩は、他のＨＩＶ−１治療法によっては十分に処置されない患者におけるＨＩＶの処置に用いることができる。したがって、本発明はさらに、その細胞が感染しているＨＩＶ−１が他のＨＩＶ−１治療法に応答しない、そのような処置が必要な処置方法に関する。さらに別の態様では、本発明の方法は、ＨＩＶ感染に用いられる薬物に対して耐性であるＨＩＶに感染した患者に対して実施される。種々の応用において、ＨＩＶは、プロテアーゼ阻害剤、逆転写酵素阻害剤、侵入阻害剤、ヌクレオシドアナログ、ワクチン、結合阻害剤、免疫調節剤および／または他の任意の阻害剤の１またはそれ以上に対して耐性である。いくつかの態様では、本発明の組成物および方法は、ＨＩＶ感染の処置に用いられる１またはそれ以上の薬物に対して耐性であるＨＩＶに感染した患者に対して実施される。例えば、ジドブジン、ラミブジン、ジダノシン、ザルシタビン、スタブジン、アバカビル、ネビラピン、デラビルジン、エムトリシタビン、エファビレンツ、サクイナビル、リトナビル、ロピナビル、インディナビル、ネルフィナビル、テノホビル、アンプレナビル、アデフォビル、アタザナビル、ホスアンプレナビル、エンフュービルタイド、ヒドロキシ尿素、ＡＬ−７２１、アンプリゲン、ブチル化ヒドロキシトルエン；ポリマンノアセテート、カスタノスペルミン；コントラカン；クリームファーマテックス、ＣＳ−８７、ペンシクロビル、ファムシクロビル、アシクロビル、シトフォビル、ガンシクロビル、デキストラン硫酸塩、Ｄ−ペニシラミンアミン三ナトリウムホスホノギ酸塩、フシジン酸、ＨＰＡ−２３、エフロルニチン、ノンオキシノール、ペンタミジンイソチオネート、ペプチドＴ、フェニトイン、イソニアジド、リバビリン、リファブチン、アンサマイシン、トリメトトレキセート、ＳＫ−８１８、スラミン、ＵＡ００１、およびそれらの組合せが挙げられるがこれに限定されない。
【００３２】
更に、本発明のＤＳＢの塩は個人間のＨＩＶ感染の伝染を予防するための予防薬として使用することができる。例えば、ＤＳＢの塩をＨＩＶ感染の妊娠した女性および／または胎児に対して経口的にまたは注射により妊娠中または誕生直前、誕生時若しくは誕生後に投与して新生児の感染の可能性を低減させることができる。また、ＤＳＢの塩を誕生直前に膣投与して新生児が産道から感染することを予防できる。さらには、ＤＳＢの塩の一つ以上を含む局所組成物のレトロウイルス阻害有効量を性的交渉の前に膣またはその他の粘膜に適用することによって、本発明のＤＳＢの塩は性的交渉の間のＨＩＶ感染を予防するために使用することができる。例えば、感染した男性から未感染の女性への伝染またはその逆の場合の伝染を予防するため、本発明のＤＳＢの塩を使用することができる。
【００３３】
本発明の医薬組成物は、場合により１またはそれ以上の上記のさらなる成分と組み合わせて少なくとも１つのＤＳＢの塩を含有しうる。同様に、処置方法は、本明細書に記載の少なくとも１つのＤＳＢの塩を、単独または本明細書にさらに記載するさらなる成分と組み合わせて含有する医薬組成物を用いる。処置のそのような様式としては、本明細書に記載した少なくとも１つのさらなる薬物による化学療法が挙げられる。
【００３４】
一態様では、本発明の医薬組成物は少なくとも一つの他の抗ウイルス剤を含有しうる。例えば限定はされないが、ＡＺＴ（ジドブジン、レトロビル（登録商標）、グラクソスミスクライン）、３ＴＣ（ラミブジン、EPIVIR（登録商標）、グラクソスミスクライン）、ＡＺＴ＋３ＴＣ（COMBIVIR（登録商標）、グラクソスミスクライン）、ＡＺＴ＋３ＴＣ＋アバカビル（TRIZIVIR（登録商標）、グラクソスミスクライン）、ｄｄＩ（ジダノシン、VIDEX（登録商標）、ブリストルマイヤーズ・スクイブ）、ｄｄＣ（ザルシタビン、HIVID（登録商標）、ホフマン・ラロシュ）、Ｄ４Ｔ（スタブジン、ZERIT（登録商標）、ブリストルマイヤーズ・スクイブ）、テノフォビル（VIREAD（登録商標）、ギリード）、アバカビル（ZIAGEN（登録商標）、グラクソスミスクライン）、ネビラピン（VIRAMUNE（登録商標）、ベーリンガー・インゲルハイム）、デラビルジン（Pfizer）、エファビレンツ（SUSTIVA（登録商標）、デュポン・ファーマシューティカルズ）、サキナビル（INVIRASE（登録商標）、FORTVASE（登録商標）、ホフマン・ラロシュ）、リトナビル（NORVIR（登録商標）、アボット・ラボラトリーズ）、インディナビル（CRIXIVAN（登録商標）、メルクアンドカンパニー）、ネルフィナビル（VIRACEPT（登録商標）、ファイザー）、ロピナビル、アムプレナビル（AGENERASE（登録商標）、グラクソスミスクライン）、アデフォビル（PREVEON（登録商標）、HEPSERA（登録商標）、ギリード・サイエンシス）、アタザナビル（ブリストルマイヤーズ・スクイブ）、フォスアムプレナビル（LEXIVA（登録商標）、グラクソスミスクライン）、およびヒドロキシウレア（HYDREA（登録商標）、ブリストルマイヤーズ・スクイブ）、または他の任意の抗レトロウイルス薬若しくは抗体をそれら互いどうしを組合せて、あるいは例えばｇｐ４１由来のペプチドエンフビルチド（FUZEON（登録商標）；ロシュ・トリメリス）、Ｔ−１２４９、可溶性ＣＤ４、ＣＤ４に対する抗体、ＣＤ４のコンジュゲート若しくは抗ＣＤ４、または本明細書においてさらに記載するような生物学的な治療剤と組み合わせて含むことができる。
【００３５】
少なくとも１つのＤＳＢの塩とともに最適に用いられるさらなる適当な抗ウイルス薬としては、アムホテリシンＢ（FUNGIZONE（登録商標））；ヘミスフェリックス・バイオファルマによって開発されたアンプリジェン（ミスマッチＲＮＡ）；BETASERON（登録商標） （β-インターフェロン、カイロン）；ブチル化ヒドロキシトルエン；カロシン（ポリマンノアセテート）；カスタノスペルミン；コントラカン（ステアリン酸誘導体）；クリーム・ファルマテクス（塩化ベンザルコニウムを含む）；ジドブジンの５−無置換誘導体；ペンシクロビル（DENAVIR（登録商標）、ノバルティス）；ファムシクロビル（FAMVIR（登録商標）、ノバルティス）；アシクロビル（ZOVIRAX（登録商標）、グラクソスミスクライン）；シトフォビル（VISTIDE（登録商標）、ギリード）；ガンシクロビル（CYTOVENE（登録商標）、ホフマン・ラロシュ）；硫酸デキストラン；Ｄ−ペニシラミン（3-メルカプト-D-バリン）；FOSCARNET（登録商標）（ホスホノギ酸三ナトリウム、アストラゼネカ）；フシジン酸；グリチルリチン（甘草成分）；ＨＰＡ−２３（アンモニウム-21-タングスト-9-アンチモン酸塩）；ORNIDYL（登録商標）（エフロルニチン、アベンティス）；ノノキシノール；ペンタミジン・イセチオネート（PENTAM-300）；ペプチドＴ（オクタペプチド・シーケンス、ペニンシュラ・ラボラトリーズ）；フェニトイン（ファイザー）；ＩＮＨまたはイソニアジド；リバビリン（VIRAZOLE（登録商標）、バリーント・ファーマシューティカルズ）；リファブチン、アンサマイシン（MYCOBUTIN（登録商標）、ファイザー）；ＣＤ４−ＩｇＧ２（プロジェニクス・ファーマシューティカルズ）またはその他のＣＤ−４含有若しくはＣＤ−４関連分子；トリメトレキサート（メディミューン）；スマミンおよびその類縁体（バイエル）；およびWELLFERON（登録商標）（α-インターフェロン、グラクソスミスクライン）が挙げられるがこれに限定されない。
【００３６】
本発明の薬学的組成物はまたさらに免疫調節薬を含むことができる。本発明に従って、ベツリン酸またはベツリン誘導体とともに最適に使用される適当な免疫調節薬としては、ＡＢＰＰ（ブロプリリミン）；Ａｍｐｌｉｇｅｎ（ミスマッチＲＮＡ、Hemispherx Biopharma）、抗ヒトインターフェロンα抗体；アスコルビン酸およびその誘導体；インターフェロン−β；シアメキソン；シクロスポリン；シメチジン；ＣＬ−２４６,７３８；ＧＭ−ＣＳＦを含むコロニー刺激因子；ジニトロクロロベンゼン；ＨＥ２０００（ホリス・エデン・ファーマスーティカルズ）；インターフェロン−γ；グルカン；ハイパーイミューン・γ−グロブリン（バイエル）；イミュチオール（ジエチルチオカルバメートナトリウム）；インターロイキン−１（ホフマン・ラロシュ、アムジェン）；インターロイキン−２（ＩＬ−２）（カイロン）；イソプリノシン（イノシン・プラノベクス）；クレスチン；ＬＣ−９０１８（ヤクルト）；レンチナン（山之内）；ＬＦ−１６９５；メチオニン−エンケファリン；ミノファーゲンＣ；ムラミルトリペプチド、ＭＴＰ−ＰＥ；ナルトレキソン（バール・ラボラトリーズ）；ＲＮＡ免疫調節剤；ＲＥＭＵＮＥ（登録商標）（イミューンレスポンス・コーポレーション）；ＲＥＴＩＣＵＬＯＳＥ（登録商標）（アドバンスト・ウイルス・リサーチ・コーポレーション）；小柴胡湯；朝鮮人参；胸腺体液性因子；チモペンチン；胸腺因子５；チモシン１（ＺＡＤＡＸＩＮ（登録商標）、サイクロン）；チモスチミュリン；ＴＮＦ（腫瘍壊死因子、ジュネンテック）；およびビタミン製剤が挙げられるが、これに限定されない。
【００３７】
本発明の医薬組成物はまた、抗癌治療薬をさらに含有することができる。最適な使用のための適当な抗癌治療薬剤としては、組合せ治療に用いることができる抗癌剤の化合物または製薬上許容される塩もしくはプロドラッグを含む新生物の阻害に有効な抗癌組成物例えば、アルキル化剤（ブスルファン、シス−プラチン、マイトマイシンＣ、およびカルボプラチン）、抗分裂剤（コルヒチン、ビンブラスチン）、タキソール（パクリタキセル（タキソール（登録商標）ブリストル−マイヤーズ・スクイブ）、ドセタキセル（タキソテール（登録商標）アベンティス）等）、トポＩ阻害剤（カンプトセシン、イリノテカンおよびトポテカン（ＨＹＣＡＭＴＩＮ（登録商標）グラクソスミスクライン）等）、トポＩＩ阻害剤（ドキソルビシン、ダウノルビシンおよびエトポシド（ＶＰ１６））、ＲＮＡ／ＤＮＡ代謝拮抗剤（５−アザシチジン、５−フルオロウラシルおよびメトトレキセート）、ＤＮＡ代謝拮抗剤（５−フルオロ−２’−デオキシウリジン、アラ−Ｃ、ヒドロキシ尿素、チオグアニン）、および抗体（trastuzumab（HERCEPTIN（登録商標）ジェネンテック）、およびリツキシマブ（RITUXAN（登録商標）ジェネンテックおよびバイオジェン−アイデック））、メルファラン、クロラムブチル、シクロホスファミド、イフォスファミド、ビンクリスチン、ミトグアゾン、エピルビシン、アクラルビシン、ブレオマイシン、ミトキサントロン、エリプチニウム、フルダラビン、オクトレオチド、レチノイン酸、タモキシフェン、アラノシン、およびそれらの組み合わせ等が挙げられるが、これに限定されない。
【００３８】
本発明はさらに、本発明の化合物および製薬的に許容し得るその塩と組み合わせて使用するための、抗菌治療薬、抗寄生虫治療薬および抗真菌治療薬を提供する方法を提供する。抗微生物治療薬の例としては、ペニシリン、アンピシリン、アモキシシリン、シクラシリン、エピシリン、メチシリン、ナフシリン、オキサシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、フルクロキサシリン、カルベニシリン、セファレキシン、セファラジン、セファドキシル、セファクロル、セフォキシチン、セフォタキシム、セフチゾキシム、セフィネノキシン、セフトリアキソン、モキサラクタム、イミペネム、クラブラン酸塩、チメンチン、スルバクタム、エリスロマイシン、ネオマイシン、ゲンタマイシン、ストレプトマイシン、メトロニダゾール、クロロアムフェニコール、クリンダマイシン、リンコマイシン、キノロン、リファンピン、スルホンアミド、バシトラシン、ポリミキシンＢ、バンコマイシン、ドキシサイクリン、メタサイクリン、ミノサイクリン、テトラサイクリン、アムホテリシンＢ、シクロセリン、シプロフロキサシン、ノルフロキサシン、イソニアジド、エタンブトール、およびナリジクス酸、並びにそれら化合物の各々の誘導体および関連する形態等が挙げられる。
【００３９】
抗寄生虫治療薬の例としては、ビチオール、クエン酸ジエチルカルバマジン、メベンダゾール、メトリホネート、ニクロサミン、ニリダゾール、オキサムニキンおよび他のキニン誘導体、クエン酸ピペラジン、プラジカンテル、ピランテルパモ酸塩およびチアベンダゾール、並びにそれら化合物の各々の誘導体および関連する形態等が挙げられる。
【００４０】
抗真菌治療薬の例としては、ムホテリシンＢ、クロトリマゾール、硝酸エコナゾール、フルシトシン、グリセオフルビン、ケトコナゾールおよびミコナゾール、並びにそれら化合物の各々の誘導体および関連する形態等が挙げられる。アクレアシンＡおよびパピュロカンジンＢもまた抗真菌化合物として挙げられる。
【００４１】
本発明の好ましい対象動物はヒトである。具体的な態様では、本発明はヒトの患者の治療に有用である。
【００４２】
「治療」なる語は、レトロウイルス関連病変の予防、軽減または治癒の目的で本発明のＤＳＢの塩を対象に投与することを意味する。
【００４３】
薬物が同時に患者に提供される場合、または各薬物の投与間隔が生物学的活性の重複を許容するような時間である場合、互いに組み合わせて提供されたと考えられる。
【００４４】
本発明の一態様では、医薬組成物は３−Ｏ−（３’,３’−ジメチルスクシニル）ベツリン酸のジ−（Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン）塩を含有する。
【００４５】
本発明によれば投与のための薬学的組成物は本発明のＤＳＢの塩を少なくとも一つ、薬学的に許容される形態で含み、任意で薬学的に許容される担体と組み合わせ得る。これら組成物はその目的を達成するための任意の手段で投与することができる。本発明のＤＳＢの塩の投与計画および投与量はレトロウイルス病変治療の臨床技術の専門家により決定することができる。
【００４６】
例えば、皮下、静脈内、筋肉内、経皮または口腔内のような非経口的投与が可能である。或いは、若しくは並行して経口投与も可能である。投与量は患者の年齢、健康状態および体重；同時治療か前治療か；あるならば治療の回数；および望まれる効果の性質に依存する。
【００４７】
本発明の範囲内の組成物は、意図した目的を達成するのに有効な量の少なくとも一つの本発明のＤＳＢの塩を含有するすべての組成物を包含する。必要な量は個々に変わるが、各成分の最適な有効量の決定は当業者の技術範囲内でなされる。少なくとも１つのＤＳＢの塩の典型的な用量は約０．０５〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重を含む。ある態様では、１またはそれ以上のＤＳＢの塩の有効投与量は約０．１〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の活性成分、好ましくは約０．１〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重の活性成分を含む。またある態様では、１またはそれ以上のＤＳＢの塩のより好ましい用量は、約０．２〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重を含む。１またはそれ以上のＤＳＢの塩の有効な投与量は約０．５〜約５ｍｇ／ｋｇ体重を含む。またある態様では、１またはそれ以上のＤＳＢの塩の投与量は約１０〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重を含む。
【００４８】
種々の用量の本発明の組成物を投与して、ＤＳＢが種々の血漿レベルでもたらされる。ある態様では、好ましい用量は、患者の血漿中のＤＳＢのトラフ濃度が約１マイクロモル濃度（μＭ）〜約１ミリモル濃度（ｍＭ）となるような量である。ある態様では、用量は、患者の血漿中のＤＳＢのトラフ濃度が約４μＭ（２．３４μｇ／ｍＬ）〜約１０００μＭ、約４０μＭ〜約１０００μＭ、あるいは約４００μＭ〜約１０００μＭとなるような量である。ある態様では、用量は、患者の血漿中のＤＳＢのトラフ濃度が約４μＭ（２．３４μｇ／ｍＬ）〜約２００μＭ、約１０μＭ〜約２００μＭ、あるいは約４０μＭ〜約２００μＭとなるような量である。ある態様では、用量は、患者の血漿中のＤＳＢのトラフ濃度が約４μＭ（２．３４μｇ／ｍＬ）またはそれ以上、少なくとも約１０μＭかそれ以上、少なくとも約４０μＭかそれ以上、少なくとも約１００μＭかそれ以上、または少なくとも２００μＭかそれ以上となるような量である。ある態様では、用量は、患者の血漿中のＤＳＢのトラフ濃度が約４００μＭとなるような量である。「トラフ濃度」とは、患者に次の投薬を行う直前の血漿中のＤＳＢの濃度である。
【００４９】
種々の量の１またはそれ以上の本発明の塩を本発明にしたがって投与することができる。ある態様では、約１０ｍｇ〜約１０００ｍｇの本発明の１またはそれ以上の塩の活性成分を１日１回投与することができる。ある態様では、約５０ｍｇ〜約５００ｍｇの本発明の１またはそれ以上の塩の活性成分を１日１回投与することができる。ある態様では、２５ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇまたは５００ｍｇの本発明の１またはそれ以上の塩の活性成分を１日１回投与することができる。１日に投与する１またはそれ以上の塩の量は、２４時間で投与される１またはそれ以上の塩の合計量によって決定される。本発明の１またはそれ以上の塩を２４時間で複数回投与することを指示する投与レジメは、２４時間で投与した蓄積量が上記に挙げた範囲内であれば本発明の範囲内である。
【００５０】
また、治療のための投与は、少なくとも一つのさらなる本発明のＤＳＢの塩または抗ウイルス薬や免疫賦活剤等の他の治療薬を、先に、同時に、続いて若しくは補助的に投与することを包含する。そのようなアプローチにおいては、第二の薬物の投与量は第一の薬物投与量と同等か、または異なってもよい。本発明のある態様では、各薬物の推奨量を毎日交代で投与する。
【００５１】
本発明化合物の投与はまた、追加免疫薬若しくは免疫調節薬を用いる、先の、同時の、続いてのまたは補助的な治療を包含し得る。薬学的な活性化合物に加えて、本発明の薬学的組成物は賦形剤および補助物を含む薬学的に許容される適切な担体を含むことが可能であって、これら担体は該活性化合物を薬学的に使用される製剤に加工することを容易にする。ある態様においては、これらの製剤は、特に経口的に投与され製剤は、例えば錠剤、糖衣錠、カプセルであり、また経直腸的に投与される製剤は例えば坐剤であり、注射若しくは経口投与のための適切な溶液も同様に、約０．０１％から約９９％の活性成分を賦形剤とともに含有する。さらに別の態様では、製剤は、約２０％〜約７５％の活性化合物を賦形剤とともに含有する。
【００５２】
本発明の医薬製剤は、それ自身公知の、例えば慣用的な混合、造粒、打錠、溶解、または凍結乾燥工程等の方法で製造する。こうして、経口のための薬学的製剤は活性化合物を賦形剤と組み合わせて、状況により得られた混合物をすりつぶして、適切な補助剤を加えた後、顆粒混合物を加工し、必要ならまたは望ましいならば錠剤若しくは糖衣錠核を得る。
【００５３】
適切な賦形剤としては、例えば単糖類のような充填剤（例えば乳糖、スクロース、マンニトール、ソルビトール等）；セルロース類および／またはリン酸カルシウム、例えば、リン酸三カルシウムまたはリン酸水素カルシウム；例えばトウモロコシデンプン、小麦デンプン、米デンプン、馬鈴薯デンプン等を用いたデンプン糊、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／またはポリビニルピロリドンのような結合剤がある。望ましいなら、上記のデンプンやカルボキシメチルデンプン、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、アルギン酸若しくはアルギン酸ナトリウムのようなアルギン酸の塩のような崩壊剤を加えることもできる。補助剤は何よりも流動調節剤および滑沢剤であり、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸若しくはステアリン酸マグネシウムやステアリン酸カルシウムのようなステアリン酸塩、および／またはポリエチレングリコールである。糖衣錠核は適切なコーティングをして提供され、望ましいならば胃液に抵抗的なコーティングがされる。この目的のため、単糖類の濃縮溶液が使用され、任意でアラビアガム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコールおよび／または二酸化チタン、ラッカー溶液、適切な有機溶媒若しくは溶媒混合物等を含む。胃液に抵抗的な被膜化のためには、アセチルセルロースフタレートやヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートのような適切なセルロース剤の溶液が使用される。例えば、薬物の同定や有効成分量の特徴づけのため、染料や顔料を錠剤や糖衣錠コーティングに加えることもできる。
【００５４】
経口的に使用されるその他の薬学的製剤には、ゼラチン製の押し込み型カプセルのほか、ゼラチンとグリセロールやソルビトールのような可塑剤でできた軟かい密閉カプセルが含まれる。押し込み型カプセルは、ラクトースのような充填剤、デンプン類のような結合剤、および／またはタルク、ステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤、および任意で安定化剤と混合した顆粒状の活性化合物を含むことができる。軟カプセルにおいては、活性化合物を脂肪油または液体パラフィン中に溶解若しくは懸濁させる。さらに、安定化剤を添加することもできる。
【００５５】
経直腸的な使用が可能な薬学的製剤には、例えば活性化合物と坐剤の基剤を組み合わせた坐剤が含まれる。適切な坐剤の基剤には例えば天然または合成トリグリセリド、またはパラフィン炭化水素がある。更には、活性化合物と基剤より構成されるゼラチン直腸カプセルを使用することも可能である。可能な基剤としては、例えば液体トリグリセリド、ポリエチレングリコール、またはパラフィン炭化水素が含まれる。
【００５６】
非経口投与のための適切な剤形には、水溶性形態、例えば水溶性塩とした活性化合物の水溶液が含まれる。さらには、適切な油性注射用懸濁液としての活性化合物の懸濁液を投与することもできる。適切な親油性溶媒若しくは基剤には、ゴマ油のような脂肪油、オレイン酸エチルやトリグリセリドのような合成脂肪酸エステルが含まれる。懸濁液の粘度を増大させる物質を含み得る水性注射用懸濁液は、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトールおよび／またはデキストランを含む。状況により、該懸濁液は安定化剤を含むことができる。
【００５７】
経口投与のための液体の投与剤形としては、製薬的に許容し得るエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシルが挙げられる。この液体の投与剤形は、活性化合物に加えて、当分野で一般的に用いられている不活性な希釈剤（例えば水または他の溶媒）、可溶化剤および乳化剤（例えば水または他の溶媒）、例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、シクロデキストリン（例えばヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン）、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、ベンジル安息香酸塩、プロピレングリコール、１,３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（例えば、綿実油、ピーナッツ油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセリン、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステルおよびそれらの混合物等の可溶化剤および乳化剤を含有していてもよい。
【００５８】
懸濁剤は、活性化合物に加えて、懸濁剤（例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、セルロース、微晶性セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天、およびトラガカント、およびそれらの組合せ）を含有していてもよい。
【００５９】
本発明の全身投与のための薬学的剤形は腸溶性、非経口または局所投与のための剤形とすることができる。実際、これら三つのタイプの剤形は有効成分の全身投与を達成するために同時に使用することができる。
【００６０】
経口投与のための適切な剤形としては、硬若しくは軟ゼラチンカプセル、糖衣錠、丸剤、錠剤（コーティングされた錠剤を含む）、エリキシル、懸濁液、シロップまたは吸入用製剤とその徐放性製剤を含む。
【００６１】
経口投与用のこれら剤形に加えて固体の投与量形態には直腸坐剤が含まれる。
【００６２】
また、本発明のＤＳＢの塩は、生分解性の徐放性担体と調合してインプラントの形態で投与することができる。あるいは、本発明のＤＳＢの塩を活性成分の継続的な放出のための経皮パッチとして製剤化することができる。
【００６３】
局所投与のための適当な製剤としては、クリーム、ジェル、ゼリー、粘液、ペースト、および軟膏が挙げられる。適当な注射用溶液としては、皮下、静脈内および筋肉内注射が可能な溶液が挙げられる。あるいは、ＤＳＢの塩を輸注溶液、鼻内吸入またはスプレー、粘膜または膣へのデリバリーシステム（例えば、リング、泡、クリーム、ジェル）、坐薬およびタンポンの剤形で投与することができる。
【００６４】
性交渉や出産の際の個人間におけるＨＩＶ感染を予防するための予防的局所組成物は、一つ以上のＤＳＢの塩と少なくとも一つの薬学的に許容される局所用担体若しくは希釈剤を含む。該局所組成物は、例えば、軟膏、クリーム、ジェル、ローション、ペースト、ゼリー、スプレー、フォーム、またはスポンジの形態とすることができる。予防的局所製剤中のＤＳＢの塩の用量は、一般に、約１０００ｍｇより少なく、ある態様では約０．０１ｍｇから約１００ｍｇである。該局所製剤は他の予防的成分を含むことができる。担体および希釈剤は製剤中の他の成分との混合可能性および患者への無害性の意味で許容できるものである必要がある。
【００６５】
予防的局所製剤は経膣、経直腸または局所投与に適したものを含む。該製剤は適当な場合には、別個の投与量単位でもって都合よく提供され、製剤学の既知の方法で製造され得る。そのような方法はすべて活性成分を液状の担体、ジェル、若しくは粉砕した固体の担体またはその両方になじませて、必要な場合は生成物を所望の形態に形成する工程を含む。
【００６６】
経膣投与に適した予防的剤形は、活性成分のほか、技術的に知られている適切な担体を含むペッサリー、タンポン、クリーム、ジェル、ペースト、ゼリー、フォーム、スプレー、または水性若しくは油性懸濁液、溶液または乳液（液状剤形）として提供され得る。液状剤形は例えば懸濁剤、乳化剤、食用油のような非水系基剤、または保存剤のような慣用的な添加剤を含むことができる。これらの製剤は性的交渉の際のＨＩＶ感染および新生児の産道感染の両方を予防するのに有用である。一つの例では、性的交渉の前または出産の直前に経膣投与を行なうことができる。
【００６７】
ある態様では、経直腸または経膣投与に適した固体の担体を有する予防的製剤は単位投与量坐剤として表される。適切な担体にはカカオバターおよびその他の当該分野で通常使用される物質が含まれる。例えば坐剤は、一つ以上のＤＳＢの塩を一つ以上の軟化させた若しくは溶融させた担体と混合し、型に入れて冷却し成型して製造し得る。
【００６８】
本発明の予防的剤形はまたドロップの形状とすることができ、一つ以上の分散剤、可溶化剤または懸濁剤を含む水性若しくは非水性基剤でもって製剤化され得る。液状スプレーは加圧パックから提供され得る。
【００６９】
本発明の予防的剤形は遅延型輸送を与えるように適合可能である。また、該予防的剤形は例えば殺精子薬、抗菌薬および抗ウイルス薬のようなその他の活性成分を含むことができる。
【００７０】
本発明の誘導体は、生分解性の徐放性担体と結合させて埋め込み型の形態で投与することも可能である。あるいは、本発明の誘導体は、有効成分を連続的に放出する経皮投与用パッチとしての剤形も可能である。
【００７１】
本発明の塩は、塩基またはカチオン形成化合物（例えばＮｍＧ）とＤＳＢとを水溶液中で混合することにより製造する。混合はヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン等のシクロデキストリンの存在下で行う。ＤＳＢの遊離酸は、米国特許第５,６７９,８２８号に記載されている合成法によって得ることができる。
【００７２】
ここに、本発明を一般的に説明したが、本発明は、以下の実施例を参照すれば、より容易く理解されよう。
【実施例】
【００７３】
実施例１
３−Ｏ−（３’,３’−ジメチルスクシニル）ベツリン酸のジ−（Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン）塩の製造
Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン２．０９７４０ｇをメチルアルコール２５０ｍＬに溶解した。一晩攪拌しながらＤＳＢ３．１３２９５ｇを加えると、懸濁液は透明になった。溶媒を窒素ガス気流で除去した。粘稠な無色の油状物が形成した。メチルアルコール２００ｍＬを加えてこの油状物を溶解させた。攪拌した混合物にジエチルエーテル２００ｍＬをゆっくりと加えて、白色の固体を得た。真空濾過により固形物を単離して５．５１９９３ｇの結晶性の固体を得た。この固体を７２時間真空下で乾燥して４．９７３７ｇの物質を得た。
【００７４】
実施例２
３−Ｏ−（３’,３’−ジメチルスクシニル）ベツリン酸のジ−ナトリウム塩の製造
ＤＳＢ１．３５５３１ｇをメタノール５０ｍＬに溶解した。固形の水酸化ナトリウム０．１８７５８ｇを脱イオン水２．０ｍＬに溶解した。２つの混合物を混合し、メタノール１５ｍＬでさらに希釈した。混合物が透明になったら、メタノール混合物を、窒素気流により２５ｍＬになるまで濃縮した。ジエチルエーテル９０ｍＬを加えた。真空濾過の後、常温で真空乾燥して１．４５９８６ｇの二ナトリウム塩を得た。
【００７５】
実施例３
３−Ｏ−（３’,３’−ジメチルスクシニル）ベツリン酸二カリウム塩の製造
ＤＳＢ４．１４６５７ｇをメタノール５０ｍＬに溶解した。固形の８５％水酸化カリウム０．９５２８７ｇを脱イオン水１０ｍＬに溶解した。２つの混合物を混合し、メタノール２５０ｍＬでさらに希釈した。混合物が透明になったら、窒素気流によりメタノールを除去した。得られた白色の固体をメタノール５０ｍＬに溶解し、ジエチルエーテル２００ｍＬで析出させた。真空濾過の後、常温で真空乾燥して４．２９６７９ｇの二カリウム塩を得た。
【００７６】
実施例４
本発明の塩の評価および比較例
Ａ.溶解度
ＤＳＢの、ＮｍＧ、カリウムおよびナトリウム塩（それぞれＤＳＢ−（ＮｍＧ）2、ＤＳＢ−Ｋ2およびＤＳＢ−（Ｎａ）2）の溶解度に関する定量的な結果を、それぞれTable１、２および３に示す。濃度は、賦形剤を重量で加える場合を除いて、ｍｇ／ｍＬで示す。これらの濃度はｍｇ／ｇで示す。表示した濃度は、純度またはさらなる塩のモル質量に関して補正因子を考慮に入れていない。大部分の場合において、良好な製剤は透明の溶液と記載されている。しかし、いくつかの製剤では、薬物を溶解させても、やや着色しているかまたは濁りがみられた。大部分の製剤は、マグネティック・スターラー・プレート上、室温にて混合した。ビタミンＥ ＴＰＧＳ（ジ−α−トコフェリルポリエチレングリコール１０００コハク酸塩）を含む製剤は、混合物を液体に保つために４０〜４５℃に維持した。
【００７７】
特に興味深いことに、これら塩は水中に１０％ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを含有する溶媒中で形成した。この溶媒系中の２７．７ｍｇ／ｍＬのＤＳＢ−（Ｎａ）2の溶液は濁っているが、この溶媒中５０．０ｍｇ／ｍＬのＤＳＢ−（ＮｍＧ）2の溶液は透明である。このことは、この溶媒中でのＤＳＢ−（ＮｍＧ）2の溶解度は、ＤＳＢ−（Ｎａ）2よりも高いことを示唆している。
【００７８】
ｐＨに対するＤＳＢ−（ＮｍＧ）2の溶解度を２５℃で測定した。ＤＳＢ−（ＮｍＧ）2は、塩基性および中性条件で可溶性であると肉眼で観察された。ｐＨ９．４６１での溶解度は７．５３７ｍｇ／ｍＬ、ｐＨ１０．６９１での溶解度は７．４６３ｍｇ／ｍＬであると観察された。ＤＳＢ−（ＮｍＧ）2は、２５℃で強酸性の溶液に不溶性であると肉眼で観察された。
【００７９】
ＤＳＢ−（ＮｍＧ）2の、どちらも極性溶媒である脱イオン水およびプロピレングリコールにおいては平衡定数が非常に高かった（Table ４参照）。脱イオン水中でのＤＳＢ−（ＮｍＧ）2の溶解度（＞１８ｍｇ／ｍＬ、誘電率＝８８．０）と比較して、メタノール中（３７．０３ｍｇ／ｍＬ、誘電率＝３２．６）とエタノール中（２４．９９ｍｇ／ｍＬ、誘電率＝２４．３）では、溶解度が誘電率と共に減少している。これは、ＤＳＢ−（ＮｍＧ）2のイオンの性質と一致している。
【表１】
2007529544.tif 000005
【表２】
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【表３】
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【表４】
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【表５】
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【００８０】
Ｂ．インビボバイオアベイラビリティー
雄性のSprague Dawleyラットにおいて経口バイオアベイラビリティー試験を行った。この試験の目的は、遊離酸あるいはＮｍＧ、ＮａまたはＫの塩のうちの一形態としてとして投与されるＤＳＢの種々の製剤の薬物動力学を比較することであった。遊離酸または塩の溶液または懸濁液を経口ゾンデを用いて強制経口投与し、ノミナルの経口用量を２５mg/kgとした。投与した各塩について、投与量は相当する遊離酸の量を基準にした。グループ番号と製剤を以下に示す。
グループ番号および製剤
グループ１：２５ｍｇ／ｍＬ ＤＳＢ遊離酸［２％ＤＭＡ（ジメチルアセトアミド）、１４％ビタミンＥ ＴＰＧＳ、８４％Ｃａｐｔｅｘ（選択された高純度植物脂肪酸とプロピレングリコールから形成されたジエステル（トリグリセリド））中］
グループ２：２５ｍｇ／ｍＬ ＤＳＢ遊離酸［水中の４％ビタミンＥ ＴＰＧＳおよび９６％カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）（０．５％）の懸濁液中］
グループ３：４１．７ｍｇ／ｍＬ ＤＳＢ−（ＮｍＧ）2塩［８４％水、４％エタノール、および１２％ＰＥＧ４００中］（２５ｍｇ／ｍＬの遊離酸に相当）
グループ４：４１．７ｍｇ／ｍＬ ＤＳＢ−（ＮｍＧ）2塩［８４％水、４％エタノール、および１０％ＰＥＧ４００、２％ビタミンＥ ＴＰＧＳ（２５ｍｇ／ｍＬの遊離酸に相当）中］
グループ５：４１．７ｍｇ／ｍＬ ＤＳＢ−（ＮｍＧ）2塩［水中、１０％ヒドロキシ−β−シクロデキストリン中］（２５ｍｇ／ｍＬの遊離酸に相当）
グループ６：２５ｍｇ／ｍＬ 微粉化ＤＳＢ遊離酸［０．５％ＣＭＣ懸濁液中］
グループ７：２５ｍｇ／ｍＬ 微粉化ＤＳＢ遊離酸［０．５％ＣＭＣ懸濁液およびビタミンＥ ＴＰＧＳ中］
グループ８：２８．３ｍｇ／ｍＬ ＤＳＢ−Ｋ2塩［水中、１０％ヒドロキシ−β−シクロデキストリン中］（２５ｍｇ／ｍＬの遊離酸に相当）
グループ９：１３．５ｍｇ／ｍＬ ＤＳＢ−（Ｎａ）2塩［水中、１０％ヒドロキシ−β−シクロデキストリン中］（１２．５ｍｇ／ｍＬの遊離酸に相当）
グループ１０：２５ｍｇ／ｍＬ ＤＳＢ遊離酸［９６％Ｃａｐｔｅｘ２００、４％ビタミンＥ ＴＰＧＳ中］
【００８１】
血液サンプルを以下の時間（０．２５、０．５、１、２、４、６、１２および２４時間）で心臓穿刺により採取した（ｎ＝ラット２頭／製剤／時点）。経口製剤のバイオアベイラビリティーは、ラットにおけるＤＳＢ試験から得られた静脈内投与後に報告された投与量調整したＡＵＣINF（ＡＵＣINF＝６３．３μgｈ／ｍL）に対する、投与量調節の割合を仮定して経口投与量調整したＡＵＣINFの比として計算した。
【００８２】
この試験の結果をTable ５に示す。ＮｍＧ塩の製剤は、４９〜７１％の範囲にある最も高い経口バイオアベイラビリティーを示した。投与量が同じグループ５、８、９の、１０％ヒドロキシ−β−シクロデキストリン水溶液の溶媒中でのバイオアベイラビリティーは、ＮｍＧ＞カリウム＞ナトリウム塩の順であった。
【表６】
2007529544.tif 000010
【００８３】
実施例５
ＨＩＶ感染のＳＣＩＤ−ｈｕ Ｔｈｙ／ＬｉｖモデルマウスにおけるＤＳＢ−（ＮｍＧ）2の in vivoでの抗ＨＩＶ効果のキャラクタリゼーション
この試験を行い、１日２回、２２日間強制経口投与で処置した雄性のＳＣＩＤ−ｈｕＴｈｙ／Ｌｉｖマウス（７頭／群）において、ＤＳＢ（ＤＳＢ−（ＮｍＧ）2）のＮｍＧ塩１００および３００ｍｇ／ｋｇ／日の用量の抗ウイルス活性を評価した（投与量は遊離酸の量として換算、即ち用量中に存在するＤＳＢの量）。３００ｍｇ／ｋｇ／日の投与量レベルで、非感染のＳＣＩＤ−ｈｕＴｈｙ／Ｌｉｖマウスの群に投与してこの投与量レベルの許容性を調べた。ポジティブコントロールとして、３０ｍｇ／ｋｇ／日にて３ＴＣ（ラミブジン）を１日一回２２日間経口強制投与した。６週齢の雄性のＣ．Ｂ１７ＳＣＩＤマウスを入手し、単一のドナーから得たヒト胎児組織を移植した。１４週目に、マウスにヒト胎児肝臓およびヒト胎児胸腺の断片を腎臓被膜下に移植し、ＳＣＩＤ−ｈｕＴｈｙ／Ｌｉｖマウスを作製した。移植片がおよそ３０ｍｍ3に達したら、ラットを実験に付した。ＢＳＬ３ガイドラインに従い、制限された動物防護施設内で、麻酔下にＳＣＩＤ−ｈｕＴｈｙ／ＬｉｖマウスにＨＩＶ−１を接種した。各Ｔｈｙ／Ｌｉｖ移植片を５０μＬ（１、０００ＴＣＩＤ５０）のＮＬ４−３バッチＪＫＷＳ１Ｄ３（希釈率１：２）またはＲＰＭＩ１６４０培地とともに１〜３カ所に２５０μＬのハミルトンガラス注射筒と３０ゲージ×１／２インチの先のとがっていない針を用いて注射した。この実験のために、移植片を組織移植から１８週間後に接種した。接種後２１日目にすべての移植片を回収した。
【００８４】
投与用ビークルを１０％ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンのＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）溶液とした。各投与前に投与用溶液を新たに調製し、ＤＳＢ遊離酸を１００および３００ｍｇ／ｋｇ／日で投与するために１２および３８ｍｇ／ｍＬの濃度にした。
【００８５】
１日２回マウスに経口強制投与を行い（２００μＬ／投与）、毒性の兆候について観察した。３００ｍｇ／ｋｇ／日で処置したマウスにおいて毒性が観察されたので、５日間の回復期間（処置せず）の後、処置の開始後７日目から投与量のレベルを１５０ｍｇ／ｋｇ／日に減らした。処置したマウスは、投与時に毒性の兆候について観察し、２〜５日毎に体重を測定した。最初の投与から１日後にＮＬ４−３をマウスに接種し（ＡＭ投与から１〜２時間後）、投与を２２間行った。
【００８６】
接種から２１日後に、Ｔｈｙ／Ｌｉｖ移植片を外科的に切除し、冷却した滅菌ＰＢＳ／２％ＦＢＳ（ウシ胎児血清）を含有する６ウェルの組織培養プレートに移した。滅菌したナイロンメッシュ袋に移植片を入れ、これを６０ｍｍ組織培養皿内のＰＢＳ／２％ＦＢＳ中に浸し、ピンセットを用いて組織をナイロンの層と層との間で散らすことにより、単細胞懸濁液を作製した。細胞をＣｏｕｌｔｅｒカウンターで計数し、適当な数の細胞を各々の分析のために分注した。ｐ２４ＥＬＩＳＡのために、２．５×１０6細胞のペレットを４００μＬのｐ２４溶解緩衝液に再懸濁し、４℃で一晩旋回させ−２０℃に保存した。branched DNA assayによるＲＮＡ定量のため、５×１０6細胞の乾燥ペレットを凍結し、−８０℃に保存した。ＦＡＣＳ解析のために、１０6細胞／ウェルを９６ウェルプレートに加えて固定、染色し、同じ日に４色ＦＡＣＳ解析により解析した。
【００８７】
ウイルス接種の２４時間前から開始したＤＳＢ−（ＮｍＧ）2の１００および１５０ｍｇ／ｋｇ／日での１日２回の経口強制投与は、この試験において、ＮＬ４−３に対し、強力で、用量依存的な抗ウイルス活性を示した。最も高い投与量レベルでは、ｐ２４は９９％減少し（未処置の１０6細胞あたり４４０ｐｇのｐ２４に対し、１４ｐｇ）およびＨＩＶ−１ＲＮＡは９７％（１０6細胞あたり１０3.4対１０5.6コピー）減少し、ＣＤ４+ＣＤ８+胸腺細胞におけるＭＨＣ−Ｉ発現はより正常なレベルにまで減少した（平均蛍光強度２５０対５３０）。１００ｍｇ／ｋｇ／日で、移植片のｐ２４およびウイルスＲＮＡについて、顕著ではないが統計的に有意な減少が認められ（１０6細胞あたりｐ２４ ６９ｐｇおよび１０4.0コピー）、１０％ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンビークル単独での処置の後では減少は認められなかった（１０6細胞あたりｐ２４ ５９０ｐｇおよび１０5.6コピー）。
【００８８】
ウイルス接種の２４時間前から開始した３ＴＣの１００ｍｇ／ｋｇ／日での１日一回の経口強制投与により、ｐ２４は９７％減少し（１０6細胞あたりｐ２４３５ｐｇ対４４０ｐｇ）、ＨＩＶ−１ＲＮＡは９６％減少し（１０6細胞あたり１０4.2対１０5.6コピー）、胸腺細胞の生存率は維持され（胸腺細胞の生存率７１％）、この試験において抗ウイルス活性が実証された。
【００８９】
これらのデータは、ＤＳＢ−（ＮｍＧ）2がインビボでＨＩＶ−１複製の強力な阻害剤であることを示している。このモデルでは、ＤＳＢ−（ＮｍＧ）2は３ＴＣと同様の効力を示した。
【００９０】
まとめ
ＤＳＢのこれらの塩はすべて、遊離酸の水溶解度（約１００μｇ／ｍＬ）と比較して有意に高い水溶解度を示した。ＤＳＢのＮｍＧ塩は、１０％ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン水溶液中での溶解度が、カリウム塩とナトリウム塩の両方と比較して明らかに高かった。ラットのバイオアベイラビリティー試験では、５種類のＤＳＢのこれら塩の製剤（ＮｍＧ塩３種、ナトリウム塩１種およびカリウム塩１種）と遊離酸を含有する５種類の製剤を調べた。ＮｍＧ塩の製剤は、４９％〜７１％の範囲の最も高い経口バイオアベイラビリティーを示した。さらに、ＳＣＩＤ−ｈｕマウスを用いた実験では、ＤＳＧ−（ＮｍＧ）2が in vivo でＨＩＶ複製の強力な阻害剤であることが示された。
【００９１】
上記の具体的な態様は、一般的な概念から逸脱することなく、現状の知見を適用することにより、様々な応用に対してこのような具体的態様を容易に修飾および／または適合化することができるという本発明の性質を十分に明らかにするものであり、そのような適合化や修飾は、開示した態様の均等の意味と範囲に含まれると解釈されると意図するものである。本明細書における表現や用語は、説明を目的としたものであって限定を意味するものではないと理解されるものである。
【００９２】
本明細書において引用した文献はすべて参考のために援用される。
【国際調査報告】
2007529544.tif 000011