(57)【要約】  発作などの、哺乳動物におけるＣＲＦの分泌過多を明示する障害の治療を含む、種々の障害の治療において有用性を有するＣＲＦ受容体アンタゴニストを開示する。本発明のＣＲＦ受容体アンタゴニストは、その医薬上許容される塩、エステル、溶媒和物、立体異性体およびプロドラッグを含む、以下の構造式（ａ）（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｙ、ＡｒおよびＨｅｔは本明細書の記載と同意義である）を有する。ＣＲＦ受容体アンタゴニストおよび医薬上許容される担体を含有する組成物、ならびにそれを用いる方法もまた開示されている。2007515474.tif 000079
2007515474.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の構造式：
【化１】
2007515474.tif 000078
［式中：
「---」は任意の二重結合の第二の結合を表し；
Ｒ１は水素、アルキル、置換アルキル、−ＮＨ２またはハロゲンであり；
Ｒ２は−ＮＲ７Ｒ8または−ＯＲ１０であり；
Ｒ３は結合、水素またはアルキルであり；
Ｙは＝（ＣＲ４）−または−（Ｃ＝Ｏ）−であり；
Ｒ４は水素、アルキル、置換アルキル、チオアルキル、アルキルスルフィニルまたはアルキルスルホニルであり；
Ａｒはフェニル、１個もしくは２個のＲ５で置換されていてもよいフェニル、ピリジル、または１個もしくは２個のＲ５で置換されていてもよいピリジルであり；
Ｒ５は、各々の場合において、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シアノ、ハロゲン、アルキルスルフィニルまたはアルキルスルホニルであり；
Ｈｅｔは、１個もしくは２個のＲ６で置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ６は、各々の場合において、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シアノ、ハロゲン、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１またはヒドロキシであり；
Ｒ７は水素、アルキル、置換アルキル、複素環、置換複素環、複素環式アルキル、置換複素環式アルキル、アルコキシアルキル、置換アルコキシアルキル、アリール、置換アリール、アリールオキシアルキル、置換アリールオキシアルキル、アリールアルキルまたは置換アリールアルキルであり；
Ｒ８はアルキル、置換アルキル、複素環、置換複素環、複素環式アルキル、置換複素環式アルキル、アルコキシアルキル、置換アルコキシアルキル、アリール、置換アリール、アリールオキシアルキル、置換アリールオキシアルキル、アリールアルキルまたは置換アリールアルキルであるか；または
Ｒ７とＲ８は、それらが結合する窒素原子と一緒になって、１、２または３個のＲ９で置換されていてもよい複素環を形成し；
Ｒ９は、各々の場合において、ヒドロキシ、アルキルスルホニル、アルキルスルフィニル、−ＣＨ２−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１３、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、置換ヘテロアリールアルキル、アリール、置換アリール、複素環、置換複素環、アルコキシアルキルまたは置換アルコキシアルキルであり；
Ｒ１０はアルキル、置換アルキル、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、置換ヘテロアリールアルキル、アリールオキシアルキルまたは置換アリールオキシアルキルであり；
Ｒ１１とＲ１２は、同一または異なり、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、複素環、置換複素環、複素環式アルキル、置換複素環式アルキル、アルコキシアルキル、置換アルコキシアルキル、アリール、置換アリール、アリールオキシアルキル、置換アリールオキシアルキル、アリールアルキルまたは置換アリールアルキルであり；および
Ｒ１３はアルキル、置換アルキル、複素環、置換複素環、アルコキシまたは置換アルコキシを意味する］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩、エステル、溶媒和化合物、立体異性体もしくはプロドラック。
【請求項２】
Ｒ１が水素、アルキルまたは置換アルキルであるところの、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２が−ＮＲ７Ｒ８であるところの、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ７とＲ８が、それらが結合する窒素原子と一緒になって、１個のＲ９で置換されている複素環を形成するところの、請求項３記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ９がヒドロキシ、アルキルスルホニル、アルキルスルフィニル、アルキル、置換アルキル、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、置換ヘテロアリールアルキル、アリール、置換アリール、複素環、置換複素環、アルコキシアルキルまたは置換アルコキシアルキルであるところの、請求項４記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ３が結合であるところの、請求項１記載の化合物。
【請求項７】
Ｙが＝（ＣＲ４）−であるところの、請求項６記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ４が水素、アルキルまたは置換アルキルであるところの、請求項７記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ３が水素またはアルキルであるところの、請求項１記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙが−（Ｃ＝Ｏ）−であるところの、請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
Ａｒが１個のＲ５で置換されているところの、請求項１記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ５がアルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シアノまたはハロゲンであるところの、請求項１１記載の化合物。
【請求項１３】
Ｈｅｔが１個のＲ６で置換されているところの、請求項１記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ６がアルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シアノまたはハロゲンであるところの、請求項１３記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ２が−ＯＲ１０であるところの、請求項１記載の化合物。
【請求項１６】
Ｙが＝（ＣＲ４）−であるところの、請求項３記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ５がアルキル、置換アルキル、アルコキシまたは置換アルコキシであるところの、請求項１６記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ８がアルキル、置換アルキル、複素環式アリールアルキル、置換複素環式アリールアルキル、アルコキシアルキル、置換アルコキシアルキル、アリールオキシアルキル、置換アリールオキシアルキル、アリールアルキルまたは置換アリールアルキルであるところの、請求項１７記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ７が水素、アルキル、置換アルキルまたはアルコキシアルキルであるところの、請求項１８記載の化合物。
【請求項２０】
請求項１に記載の化合物、および医薬上許容される担体または希釈体を含む、組成物。
【請求項２１】
哺乳動物におけるＣＲＦの分泌過多を明らかに示す障害の治療方法であって、該動物に請求項２０の医薬組成物を有効量投与することを含む、方法。
【請求項２２】
障害が発作であるところの、請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
障害が鬱病であるところの、請求項２１記載の方法。
【請求項２４】
障害が強迫神経症であるところの、請求項２１記載の方法。
【請求項２５】
障害が過敏性腸症候群であるところの、請求項２１記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、米国特許仮出願番号６０／５３２，０４４（２００３年１２月２２日出願）の優先権を主張するものであり、その内容を出典明示により本明細書の一部とする。
【０００２】
（技術分野）
本発明は、一般に、ＣＲＦ受容体アンタゴニストに、そしてそれらを必要とする哺乳動物にかかるアンタゴニストを投与することによる障害の治療方法に関する。
【０００３】
（従来技術）
最初の副腎皮質刺激ホルモン放出因子（ＣＲＦ）はヒツジの視床下部から単離され、４１−アミノ酸ペプチドと同定された（非特許文献１）。その後、ヒトとラットのＣＲＦの配列が単離され、同一であるが、４１−アミノ酸残基の７個においてヒツジＣＲＦと異なると決定された（非特許文献２、非特許文献３）。
【０００４】
ＣＲＦは、内分泌、神経および免疫系機能において大きな改変を引き起こすことが判明している。ＣＲＦは、副腎皮質刺激ホルモン（「ＡＣＴＨ」）、β−エンドルフィン、および脳下垂体前葉からの他のプロオピオメラノコルチン（「ＰＯＭＣ」）由来ペプチドの基礎放出およびストレス解放の主たる生理調節物質であると考えられている（非特許文献１）。簡単に言えば、ＣＲＦは、脳（非特許文献４）、脳下垂体（非特許文献５、非特許文献６）、副腎（非特許文献７）および脾臓（非特許文献８）の全体にわたって分散されていることが判明している原形質膜受容体と結合することにより、その生物作用を開始すると考えられている。ＣＲＦ受容体はＣＲＦ刺激のｃＡＭＰの細胞内産生における増加を媒介するＧＴＰ結合蛋白（非特許文献９）と結びつけられる（非特許文献１０）。ＣＲＦに対する受容体は、現在は、ラット（非特許文献１１）、およびヒト脳（非特許文献１２、非特許文献１３）からクローン化される。この受容体は、７回膜貫通ドメインを含んでなる４１５アミノ酸蛋白である。ラットとヒトの配列の同一性の比較は、アミノ酸レベルで高度の相同性（９７％）を示す。
【０００５】
ＡＣＴＨおよびＰＯＭＣの産生を刺激するその役割に加えて、ＣＲＦは、ストレスに対する多種の内分泌反応、自動反応および行動反応を調整すると考えられており、情動障害の病態生理に関連するかもしれない。さらに、ＣＲＦは、免疫系、中枢神経系、内分泌系および循環器系間の連絡における重要な中間物質であると考えられている（非特許文献１４、非特許文献１５、非特許文献１６）。概して、ＣＲＦは、重要な中枢神経系の神経伝達物質のひとつであると思われ、ストレスに対する身体の全応答を統合するにおいて、重要な役割を果たす。
【０００６】
ＣＲＦの脳への直接投与は、ストレスの多い環境に曝露された動物で観察される反応と同一の行動反応、生理反応、および内分泌反応を引き起こす。例えば、ＣＲＦの脳室内注入は、行動活性化（非特許文献１７）、脳波の持続性活性化（非特許文献１８）、交感神経副腎髄質経路の刺激（非特許文献１９）、心拍数および血圧の増加（非特許文献２０）、酸素消費の増加（非特許文献２１）、胃腸活動の変化（非特許文献２２）、食物消費の抑制（非特許文献２３）、性行動の修飾（非特許文献２４）、および免疫機能の低下（非特許文献２５）をもたらす。さらに、臨床データは、ＣＲＦが鬱病、不安症関連障害、および神経性食欲不振において、脳に過剰に分泌されうることを示唆する（非特許文献２６）。従って、臨床データは、ＣＲＦ受容体アンタゴニストがＣＲＦ分泌過多を明白に示す神経精神障害の治療に有用でありうる新規の抗鬱薬および／または抗不安薬であると示唆する。
【０００７】
最初のＣＲＦ受容体アンタゴニスは、ペプチド（例えば、特許文献１（Rivierら）、非特許文献２７を参照のこと）であった。これらのペプチドは、ＣＲＦ受容体アンタゴニストがＣＲＦに対する薬理学的反応を減弱しうることを確立したが、ペプチドＣＲＦ受容体アンタゴニストには、ペプチド治療に通常認められる欠点（安定性の欠如および限定された経口活性を含む）がある。最近になって、小分子のＣＲＦ受容体アンタゴニストが報告された。いくつかの公開されている特許公報として、特許文献２、特許文献３、および特許文献４が挙げられ、それらの全てが、ＣＲＦアンタゴニストとしてピラゾロピリミジン化合物を開示する。公開公報の特許文献５は、チロシンキナーゼ阻害剤として特定のピラゾロピリミジン化合物を記載する。
【０００８】
ＣＲＦの生理学的意義のため、ＣＲＦ受容体との有意な結合活性を有し、かつＣＲＦ受容体に対する拮抗能を有する、生理学的に活性な低分子の開発は、今も望ましい目標である。かかるＣＲＦ受容体アンタゴニストは、一般に、内分泌、精神および神経の異常もしくは疾患（ストレス関連障害を含む）の治療に有用でありうる。
【０００９】
ＣＲＦ受容体アンタゴニストの投与を介してのＣＲＦ調整の達成に向って有意な前進がなされたが、当該分野において効果的な低分子ＣＲＦ受容体アンタゴニストに対する要求がある。かかるＣＲＦ受容体アンタゴニストを含有する医薬組成物に対する要求、ならびに、例えば、ストレス関連障害を治療するためのそれらの使用に関する方法に対する要求もある。本発明は、これらの要求を満足させ、他の関連した利点を提供する。
【特許文献１】米国特許第４，６０５，６４２号明細書
【特許文献２】米国特許第６，３１３，１２４号明細書
【特許文献３】国際公開第０１／２３３８８号パンフレット
【特許文献４】国際公開第９７／２９１０９号パンフレット
【特許文献５】国際公開第９８／５４０９３号パンフレット
【非特許文献１】Valeら、Science 213:1394-1397, 1981
【非特許文献２】Rivierら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80:4851, 1983
【非特許文献３】Shibaharaら、EMBO J. 2:775, 1983
【非特許文献４】DeSouzaら、Science 224:1449-1451, 1984
【非特許文献５】DeSouzaら、Methods Enzymol. 124:560, 1986
【非特許文献６】Wynnら、Biochem. Biophys. Res. Comm. 110:602-608, 1983
【非特許文献７】Udelsmanら、Nature 319:147-150, 1986
【非特許文献８】Webster, E.L.およびE.B. DeSouza, Endocrinology 122:609-617, 1988
【非特許文献９】Perrinら、Endocrinology 118:1171-1179, 1986
【非特許文献１０】Bilezikjian, L.M.およびW.W. Vale, Endocrinology 113:657-662, 1983
【非特許文献１１】Perrinら、Endo 133（6）:3058-3061, 1993
【非特許文献１２】Chenら、PNAS 90（19）:8967-8971, 1993
【非特許文献１３】Vitaら、FEBS 335（1）:1-5, 1993
【非特許文献１４】Croffordら、J. Clin. Invest. 90:2555-2564, 1992
【非特許文献１５】Sapolskyら、Science 238:522-524, 1987
【非特許文献１６】Tildersら、Regul. Peptides 5:77-84, 1982
【非特許文献１７】Suttonら、Nature 297:331, 1982
【非特許文献１８】Ehlersら、Brain Res. 278:332, 1983
【非特許文献１９】Brownら、Endocrinology 110:928, 1982
【非特許文献２０】Fisherら、Endocrinology 110:2222, 1982
【非特許文献２１】Brownら、Life Sciences 30:207, 1982
【非特許文献２２】Williamsら、Am. J. Physiol. 253:G582, 1987
【非特許文献２３】Levineら、Neuropharmacology 22:337, 1983
【非特許文献２４】Sirinathsinghjiら、Nature 305:232, 1983
【非特許文献２５】Irwinら、Am. J. Physiol. 255:R744, 1988
【非特許文献２６】DeSouza, Ann. Reports in Med. Chem. 25:215-223, 1990
【非特許文献２７】Rivierら、Science 224:889, 1984
【００１０】
（発明の開示）
概して、本発明は、ＣＲＦ受容体アンタゴニスト、さらに具体的には以下の一般構造式（Ｉ）：
【化１】
2007515474.tif 000003
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｙ、Ａｒ、およびＨｅｔは、以下に同意義である）
を有するＣＲＦ受容体アンタゴニスト（それらの医薬上許容される塩、エステル、溶媒和化合物、立体異性体、およびプロドラックを含む）に関する。
【００１１】
本発明のＣＲＦ受容体アンタゴニストは、広範囲の治療的適用にわたって有用であり、多様の障害もしくは疾患（ストレス関連障害を含む）を治療するのに使用されうる。かかる方法は、有効量の本発明のＣＲＦ受容体アンタゴニストを、好ましくは医薬組成物の形態で、それらを必要とする動物に投与することを包含する。従って、別の実施形態において、１種もしくは複数種の本発明のＣＲＦ受容体アンタゴニスト、および医薬上許容される担体および／または希釈剤を含有する医薬組成物が、開示されている。
【００１２】
これらのおよび他の本発明の態様は、以下の詳細な記載を参照して明らかになるだろう。この目的のため、特定の手順、化合物および／または組成物をさらに詳細に記載する、種々の文献が本明細書にて列挙されており、それらを出典明示により本明細書の一部とする。
【００１３】
（発明の詳細な記載）
本発明は、一般に、副腎皮質刺激ホルモン放出因子（ＣＲＦ）受容体アンタゴニストとして有用な化合物に関する。
【００１４】
第一の実施形態において、本発明のＣＲＦ受容体アンタゴニストは、その医薬上許容される塩、エステル、溶媒和化合物、立体異性体もしくはプロドラックを含め、以下の構造式（Ｉ）：
【化２】
2007515474.tif 000004
【００１５】
［式中：
「---」は任意の二重結合の第二の結合を表し；
Ｒ１は水素、アルキル、置換アルキル、−ＮＨ２またはハロゲンであり；
Ｒ２は−ＮＲ７Ｒ8または−ＯＲ１０であり；
Ｒ３は結合、水素またはアルキルであり；
Ｙは＝（ＣＲ４）−または−（Ｃ＝Ｏ）−であり；
Ｒ４は水素、アルキル、置換アルキル、チオアルキル、アルキルスルフィニルまたはアルキルスルホニルであり；
Ａｒはフェニル、１個もしくは２個のＲ５で置換されていてもよいフェニル、ピリジル、または１個もしくは２個のＲ５で置換されていてもよいピリジルであり；
Ｒ５は、各々の場合において、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シアノ、ハロゲン、アルキルスルフィニルまたはアルキルスルホニルであり；
Ｈｅｔは、１個もしくは２個のＲ６で置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ６は、各々の場合において、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シアノ、ハロゲン、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１またはヒドロキシであり；
【００１６】
Ｒ７は水素、アルキル、置換アルキル、複素環、置換複素環、複素環式アルキル、置換複素環式アルキル、アルコキシアルキル、置換アルコキシアルキル、アリール、置換アリール、アリールオキシアルキル、置換アリールオキシアルキル、アリールアルキルまたは置換アリールアルキルであり；
Ｒ８はアルキル、置換アルキル、複素環、置換複素環、複素環式アルキル、置換複素環式アルキル、アルコキシアルキル、置換アルコキシアルキル、アリール、置換アリール、アリールオキシアルキル、置換アリールオキシアルキル、アリールアルキルまたは置換アリールアルキルであるか；または
Ｒ７とＲ８は、それらが結合する窒素原子と一緒になって、１、２または３個のＲ９で置換されていてもよい複素環を形成し；
Ｒ９は、各々の場合において、ヒドロキシ、アルキルスルホニル、アルキルスルフィニル、−ＣＨ２−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１３、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、置換ヘテロアリールアルキル、アリール、置換アリール、複素環、置換複素環、アルコキシアルキルまたは置換アルコキシアルキルであり；
【００１７】
Ｒ１０はアルキル、置換アルキル、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、置換ヘテロアリールアルキル、アリールオキシアルキルまたは置換アリールオキシアルキルであり；
Ｒ１１とＲ１２は、同一または異なり、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、複素環、置換複素環、複素環式アルキル、置換複素環式アルキル、アルコキシアルキル、置換アルコキシアルキル、アリール、置換アリール、アリールオキシアルキル、置換アリールオキシアルキル、アリールアルキルまたは置換アリールアルキルであり；および
Ｒ１３はアルキル、置換アルキル、複素環、置換複素環、アルコキシまたは置換アルコキシを意味する］
を有する。
【００１８】
本明細書において使用する、上記の語は、以下の意味を有する：
「アルキル」は、１〜１０個の炭素原子を含有する直鎖もしくは分岐、非環状もしくは環状、不飽和もしくは飽和の脂肪族炭化水素を意味し、「低級アルキル」なる語は、アルキルと同じ意味を有するが、１〜６個の炭素原子を含有する。代表的な飽和直鎖アルキルとして、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル等が挙げられ、飽和分岐アルキルとして、イソプロピル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソペンチル等が挙げられる。代表的な飽和環状アルキルとして、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、−ＣＨ２−シクロプロピル、−ＣＨ２−シクロブチル、−ＣＨ２−シクロペンチル、−ＣＨ２−シクロヘキシル等が挙げられ、不飽和環状アルキルとして、シクロペンテニルおよびシクロヘキセニル等が挙げられる。環状アルキルは、「単素環式環」と呼ばれ、単素二環式環および単素多環式環（例、デカリンおよびアダマンチル等）を包含する。不飽和アルキルは、隣接した炭素原子間に少なくとも１個の二重結合もしくは三重結合を含有する（それぞれ「アルケニル」または「アルキニル」と呼ばれる）。代表的な直鎖および分岐のアルケニルとして、エチレニル、プロピレニル、１−ブテニル、２−ブテニル、イソブチレニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、3−メチル−１−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニル等が挙げられ、代表的な直鎖および分岐のアルキニルとして、アセチレニル、プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−メチル−１ブチニル等が挙げられる。
【００１９】
「アルキリデニル」は、同じ炭素原子から２個の水素原子が離脱した二価のアルキル（例、＝ＣＨ２、＝ＣＨＣＨ３、＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、＝Ｃ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３等）を表す。
【００２０】
「アリール」は、芳香族炭素環式基（例、フェニルもしくはナフチル）を意味する。
【００２１】
「アリールアルキル」は、アリール基で置換された少なくとも１個のアルキル水素原子を有するアルキル（例、ベンジル（つまり、−ＣＨ２フェニル）、−ＣＨ２−（１または２−ナフチル）、−（ＣＨ２）２フェニル、−（ＣＨ２）３フェニル、−ＣＨ（フェニル）２等）を意味する。
【００２２】
「アリールオキシアルキル」は、酸素架橋を介してアルキルに結合したアリール（つまり、アリール−Ｏ−アルキル−）（例、−メチル−Ｏ−フェニル等）を意味する。
【００２３】
「ヘテロアリール」は、窒素、酸素および硫黄から選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有し、少なくとも１個の炭素原子を含有する、５〜１０員の芳香族複素環式環（単環式および二環式系の両方を含む）を意味する。代表的なヘテロアリールとして、（これに限定されないが）フリル、ベンゾフラニル、チオフェニル、ベンゾチオフェニル、ピロリル、インドリル、イソインドリル、アザインドリル、ピリジル、キノリニル、イソキノリニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、ベンゾオキサゾリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ベンズイミダゾリル、チアゾリル、ベンゾチアゾリル、イソチアゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、シンノリニル、フタラジニル、およびキナゾリニルが挙げられる。
【００２４】
「ヘテロアリールアルキル」は、ヘテロアリール基で置換された少なくとも１個のアルキル水素原子を有するアルキル（例、−ＣＨ２−ピリジニル、−ＣＨ２−ピリミジニル等）を意味する。
【００２５】
「複素環」（本明細書において「複素環式環」とも呼ぶ）は、飽和、不飽和または芳香族のいずれかであり、窒素、酸素および硫黄（窒素および硫黄ヘテロ原子は、場合により酸化されることもあり、窒素ヘテロ原子は、場合により四級化されることもある）から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する、５〜７員の単環式、または７〜１４員の多環式の複素環式環を意味し、上記の複素環のいずれかが、ベンゼン環だけでなく三環系（および三環より大きい環系）複素環式環に縮合される二環式環を含む。複素環は、任意のヘテロ原子もしくは炭素原子を介して結合されうる。複素環として、上記に定義されるヘテロアリールが挙げられる。従って、上記に列挙した芳香族ヘテロアリールの他に、複素環として、（これに限定されないが）モルホリニル、ピロリジノニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペリジニル（ｐｉｐｅｒｉｚｉｎｙｌ）、ヒダントイニル、バレロラクタミル、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロプリジニル、テトラヒドロピリミジニル（ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｒｉｍｉｄｉｎｙｌ）、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニル等が挙げられる。
【００２６】
「複素環式アルキル」は、複素環で置換された少なくとも１個のアルキル水素原子を有するアルキル（例、−ＣＨ２モルホリニル等）を意味する。
【００２７】
本明細書において使用される「置換」なる語は、少なくとも１個の水素原子が置換基で置換された上記の基のいずれか（つまり、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、複素環または複素環式アルキル）を意味する。ケト置換基（「−Ｃ（＝Ｏ）−」）の場合、２個の水素原子が置換される。本発明の範囲内の「置換基」として、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキル、アルコキシ、チオアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、アリール、置換アリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、置換ヘテロアリールアルキル、複素環、置換複素環、複素環式アルキル、置換複素環式アルキル、−ＮＲａＲｂ、−ＮＲａＣ（＝Ｏ）Ｒｂ、−ＮＲａＣ（＝Ｏ）ＮＲａＲｂ、−ＮＲａＣ（＝Ｏ）ＯＲｂ−ＮＲａＳＯ２Ｒｂ、−ＯＲａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲａＲｂ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲａＲｂ、−ＳＨ、−ＳＲａ、−ＳＯＲａ、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲａＲｂ、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲａ、−ＯＳ（＝Ｏ）２Ｒａ、−Ｓ（＝Ｏ）２ＯＲａ（ここで、ＲａとＲｂは、同一または異なって、独立して、水素、アルキル、ハロアルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、置換ヘテロアリールアルキル、複素環、置換複素環、複素環式アルキルまたは置換複素環式アルキルである）が挙げられる。
【００２８】
「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を意味する。
【００２９】
「ハロアルキル」は、ハロゲンで置換された少なくとも１個の水素原子を有するアルキル（例、トリフルオロメチル等）を意味する。ハロアルキルは、アルキルが１個もしくは複数個のハロゲン原子で置換された置換アルキルの特定の形態である。
【００３０】
「アルコキシ」は、酸素架橋を介して結合したアルキル部分（つまり、−Ｏ−アルキル）（例、−Ｏ−メチル、−Ｏ−エチル等）を意味する。
【００３１】
「チオアルキル」は、硫黄架橋を介して結合したアルキル部分（つまり、−Ｓ−アルキル）（例、−Ｓ−メチル、−Ｓ−エチル等）を意味する。
【００３２】
「アルキルアミノ」および「ジアルキルアミノ」は、窒素架橋を介して結合した１個または２個のアルキル部分（つまり、−ＮＨアルキルまたは−Ｎ（アルキル）（アルキル））（例、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ等）を意味する。
【００３３】
「ヒドロキシアルキル」は、少なくとも１個のヒドロキシル基で置換されたアルキルを意味する。
【００３４】
「モノ−もしくはジ（シクロアルキル）メチル」は、１個もしくは２個のシクロアルキル基で置換されたメチル基（例、シクロプロピルメチル、ジシクロプロピルメチル等）を表す。
【００３５】
「アルキルカルボニルアルキル」は、−Ｃ（＝Ｏ）アルキル基で置換されたアルキルを表す。
【００３６】
「アルキルカルボニルオキシアルキル」は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏアルキル基もしくは−ＯＣ（＝Ｏ）アルキル基で置換されたアルキルを表す。
【００３７】
「アルコキシアルキル」は、−Ｏ−アルキル基で置換されたアルキルを表す。
【００３８】
「アルキルチオアルキル」は、−Ｓ−アルキル基で置換されたアルキルを表す。
【００３９】
「モノ−またはジ（アルキル）アミノ」は、それぞれ１個のアルキルまたは２個のアルキルで置換されたアミノを表す。
【００４０】
「モノ−またはジ（アルキル）アミノアルキル」は、モノ−またはジ（アルキル）アミノで置換されたアルキルを表す。
【００４１】
「アルキルスルホニルおよびアルキルスルフィニル」は、それぞれスルホニル（−Ｓ（＝Ｏ）２−）またはスルフィニル（−Ｓ（＝Ｏ）−）で置換されたアルキルを表す。
【００４２】
本明細書において示される本発明の実施形態は、例としての目的であって、限定する目的ではない。本発明の第一実施形態において、Ｒ３は、結合であり、Ｙは、以下の構造式（ＩＩ）において、＝（ＣＲ４）−であり、さらなる一実施形態において、Ｙは、以下の構造式（ＩＩＩ）において−（Ｃ＝Ｏ）−である。
【化３】
2007515474.tif 000005
（ＩＩ）                      （ＩＩＩ）
【００４３】
本発明のさらなる実施形態（Ｙは、＝（ＣＲ４）−である）は、Ｒ２が、−ＮＲ７Ｒ８である場合、構造式（ＩＶ）を有し、Ｒ２が、−ＯＲ１０である場合、構造式（Ｖ）を有する。
【化４】
2007515474.tif 000006
（ＩＶ）                    （Ｖ）
【００４４】
本発明のさらなる実施形態（Ｙは、＝（ＣＲ４）−である）において、Ｒ２は、−ＮＲ７Ｒ８である（式中、Ｒ７とＲ８は、以下の構造式（ＶＩ〜ＶＩＩＩ）において、それらが結合する窒素原子と共に０、１、２、または３個のＲ９で置換されうる６環原子（これらに限定されない）により例示される複素環式環を形成する）。
【化５】
2007515474.tif 000007
（ＶＩ）                （ＶＩＩ）              （ＶＩＩＩ）
【００４５】
本発明のさらなる実施形態（Ｙは、＝（ＣＲ４）−である）において、Ｒ２は、−ＮＲ７Ｒ８である（式中、Ｒ７とＲ８は、以下の構造式（ＩＸ）において、それらが結合する窒素原子と共に、二環式複素環を形成する）。
【化６】
2007515474.tif 000008
（ＩＸ）
【００４６】
本発明のさらなる実施形態において、Ａｒは、２個のＲ５（式中、各Ｒ５は、以下の構造式（Ｘ）に示される如く、同一でも異なってもよい）で置換されたフェニルであり、Ｈｅｔは、以下の構造式（ＸＩ）においてＲ６で置換されたピリジルである。
【化７】
2007515474.tif 000009
（Ｘ）                        （ＸＩ）
【００４７】
本発明の化合物は、通常、遊離塩基として利用されうる。別法として、本発明の化合物は、酸付加塩の形態で使用されてもよい。本発明の遊離塩基性アミノ化合物の酸付加塩は、当技術分野で周知の方法で調製されてもよく、有機酸および無機酸から合成してもよい。適切な有機酸として、マレイン酸、フマル酸、安息香酸、アスコルビン酸、コハク酸、メタンスルホン酸、酢酸、シュウ酸、プロピオン酸、酒石酸、サリチル酸、クエン酸、グルコン酸、乳酸、マンデル酸、ケイ皮酸、アスパラギン酸、ステアリン酸、パルミチン酸、グリコール酸、グルタミン酸、およびベンゼンスルホン酸が挙げられる。適当な無機酸として、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、および硝酸が挙げられる。従って、構造式（Ｉ）の用語「医薬上許容される塩」は、あらゆる全ての許容しうる塩の形態を包含することを意図する。
【００４８】
一般的に、構造式（Ｉ）の化合物は、実施例に記載される典型的な方法によるのみでなく、当業者に周知の有機合成法に従って、合成されてもよい。例えば、構造式（Ｉ）の合成は、一般的に、以下の反応スキーム１に従って、進行しうる。
【００４９】
反応スキーム１
【化８】
2007515474.tif 000010
【００５０】
４−アミノ安息香酸エステルａのアミノ官能基は、（所望により）置換マロンアルデヒドと縮合させて、対応する４−ピラゾール−１−イル安息香酸エステルｂを得てもよい。ＬＡＨ、ＳＯＣｌ２、およびＮａＣＮと反応させて、ピラゾロフェニルアセトニトリル化合物ｃに変換した後、Ｎａ／カルボン酸エチルエステルおよびヒドラジンと反応させて、ビス−ピラゾールｄを得る。適宜置換されたβ−ケトエステルと反応させて、ピラゾロピリミジンｅを得、それをＰＯＣｌ３と反応させて、クロリドｆを得る。クロリドｆをアミンまたはアルコールと反応させて、化合物ｇを得る。別法として、ｅをアルキル化して、ｇを得ることができる。
【００５１】
組み込まれたＲ２基は、当業者に周知の標準の方法（例えば酸化／還元、加水分解等）を用いて、さらに処理されまたは反応して、本発明のさらなる例を提供しうる。
【００５２】
反応スキーム２
【化９】
2007515474.tif 000011
【００５３】
本発明のピラゾロピリミジン核に至る利用可能な合成経路はたくさんある。反応スキーム２において、所望により置換されていてもよいハロベンズアルデヒドｈをトシルメチルイソシアニド（ＴｏｓＭＩＣ）と反応させて、フェニルアセトニトリルiを形成させる。iとＮａＨおよびＥｔＯＡｃとを反応させて、３−ヒドロキシブタ−２−エンニトリルｊを得、それはヒドラジンＨＢｒとの反応で閉環されて、３−アミノ２−フェニルピラゾールｋを得る。β−ケトエステルを加えて、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−オールｌを得る。末端臭素をＨｅｔで置換して本発明の化合物を得る。
【００５４】
反応スキーム３
【化１０】
2007515474.tif 000012
【００５５】
置換アセトニトリルｍをカルボニル化合物ｎと反応させ（ここで、Ｒ’は、良好な脱離基（例、アルコキシ、シアノ、またはハロであり、Ｒ”は、アルコキシなどの基である）、シアノエステルｏを得る。ｏをヒドラジンと反応させて、置換ピラゾールｐを得る。ｐをβ−ケトエステルｑと反応させて、ピラゾロピリミジンｒを得る。ＰＯＣｌ３と反応させて、クロリドｓを得て、アミンもしくはアルコールと反応させて、化合物ｔを得る。
【００５６】
ＣＲＦ受容体アンタゴニストとしての化合物の効果は、様々なアッセイ法により、決定されうる。本発明の適当なＣＲＦアンタゴニストは、ＣＲＦのその受容体への特異的結合を阻害し、ＣＲＦと関連する活性を拮抗することができる。構造式（Ｉ）の化合物は、この目的のため一般に認められた１種もしくは数種のアッセイにより、ＣＲＦアンタゴニストとしての活性について評価されうる。上記アッセイとして、（これらに限定されないが）DeSouzaら（J. Neuroscience 7:88, 1987）およびBattagliaら（Synapse 1:572, 1987）により開示されたアッセイが挙げられる。上記の通り、適当なＣＲＦアンタゴニストには、ＣＲＦ受容体親和性を示す化合物が含まれる。ＣＲＦ受容体親和性は、放射性標識したＣＲＦ（例えば、［１２５Ｉ］チロシン−ＣＦＲ）のその受容体（例えば、ラット大脳皮質膜から調製される受容体）への結合を阻害する化合物の能力を測定する結合の研究により、決定されうる。DeSouzaら（上記、１９８７年）により記載される放射リガンド結合アッセイは、ＣＲＦ受容体に対する化合物の親和性を決定するためのアッセイを提供する。かかる活性は、典型的には、受容体からの放射性標識したリガンドの５０％を置換するのに必要な化合物の濃度としてのＩＣ５０から算出され、以下の式により、算出される「Ｋｉ」値として、報告される。
【数１】
2007515474.tif 000013
式中、Ｌは、放射リガンドであり、ＫＤは、受容体に対する放射リガンドの親和力である（Cheng and Prusoff、Biochem. Pharmacol. 22:3099、1973）。
【００５７】
ＣＲＦ受容体結合を抑制することに加えて、化合物のＣＲＦ受容体アンタゴニスト活性は、ＣＲＦに関連する活性を拮抗する化合物の能力によって、確立されうる。例えば、ＣＲＦは、種々の生化学プロセス（アデニル酸シクラーゼ活性を含む）を誘導することが知られている。従って、化合物は、ＣＲＦにより誘導されるアデニル酸シクラーゼ活性を拮抗するそれらの能力により、例えばｃＡＭＰ濃度の測定することにより、ＣＲＦアンタゴニストとして評価されうる。Battagliaら（前掲、１９８７）により記載されたＣＲＦにより誘導されるアデニル酸シクラーゼ活性のアッセイは、ＣＲＦ活性を拮抗する化合物の能力を決定するためのアッセイを提供する。従って、ＣＲＦ受容体アンタゴニスト活性は、一般的に、初期の結合アッセイ法（例、DeSouza（上記、１９８７）により開示された）、次のｃＡＭＰスクリーニングプロトコル（例、Battaglia（前掲、１９８７）により開示された）を含むアッセイ技法により、決定される。
【００５８】
ＣＲＦ受容体結合親和性に関して、本発明のＣＲＦ受容体アンタゴニストは、１０μＭ未満のＫｉを有しうる。本発明の一実施形態において、ＣＲＦ受容体アンタゴニストは、１μＭ未満のＫｉを有する。別の実施形態において、Ｋｉは、０．２５μＭ（つまり、２５０ｎＭ）未満である。以下にさらに詳細に記載するＫｉ値は、実施例２４に記載の方法により、検定されうる。
【００５９】
本発明のＣＲＦ受容体アンタゴニストは、ＣＲＦ受容体部位で活性を示し、広範囲の障害もしくは疾患（内分泌、精神、および神経の障害もしくは疾患を含む）の治療のための治療薬として使用されうる。さらに具体的には、本発明のＣＲＦ受容体アンタゴニストは、ＣＲＦの分泌過多から生じる生理学的異常もしくは障害を治療するのに有用でありうる。ＣＲＦは、ストレスに対する内分泌反応、行動反応および自動反応を活性化し、調整する重要な神経伝達物質であると考えられているので、本発明のＣＲＦ受容体アンタゴニストは、神経精神障害の治療に使用されうる。本発明のＣＲＦ受容体アンタゴニストによって治療可能でありうる神経精神障害として、情動障害（例、鬱病）；不安症関連障害（例、全般性不安障害、パニック障害、強迫性障害、異常攻撃）、心臓血管系異常（例、不安定狭心症および反応性高血圧症））；摂食障害（例、神経性食欲不振、過食症、および過敏性腸症候群）が挙げられる。ＣＲＦアンタゴニストは、脳卒中だけでなく様々な疾患状態に関連するストレス誘導性免疫の抑制に有用でありうる。本発明のＣＲＦアンタゴニストの他の使用は、炎症性疾患（例、慢性関節リウマチ、ブドウ膜炎、喘息、炎症性腸疾患および胃腸の運動性疾患）、疼痛、クッシング病、点頭痙攣、癲癇ならびに他の幼児と成人の両方における発作、および種々の物質乱用と禁断症状（アルコール症を含む）の治療に有用でありうる。
【００６０】
本発明の別の実施形態において、１種もしくは複数種のＣＲＦ受容体アンタゴニストを含有する医薬組成物が、開示される。投与の目的上、本発明の化合物は、医薬組成物として処方されうる。本発明の医薬組成物は、本発明のＣＲＦ受容体アンタゴニスト（つまり、構造式（Ｉ）の化合物）と医薬上許容される担体および／または希釈剤を含んでなる。ＣＲＦ受容体アンタゴニストは、特定の障害を治療するのに有効な量、つまり、患者にとって許容できる毒性を有するＣＲＦ受容体アンタゴニスト活性を実現するのに十分な量で、医薬組成物中に存在する。本発明の医薬組成物は、投与の経路に応じて適用量当り０．１ｍｇ〜２５０ｍｇ、さらに典型的には１ｍｇ〜６０ｍｇの量で、ＣＲＦ受容体アンタゴニストを含有する。当業者は、適切な濃度および適用量を容易に決定することができる。
【００６１】
医薬上許容される担体および／または希釈剤に関して、当業者は、精通している。液体溶液として処方される組成物に関して、許容される担体および／または希釈剤として、食塩水および無菌水が挙げられ、場合により、酸化防止剤、緩衝剤、静菌薬および他の一般的な添加剤を含有してもよい。上記組成物は、さらに、ＣＲＦ受容体アンタゴニストの他に、希釈剤、拡散剤および界面活性剤、結合剤、および潤滑剤を含有する丸剤、カプセル、顆粒、または錠剤として処方されることが可能である。当業者は、適切な方法で、容認された実践（例、Remington's Pharmaceutical Sciences, Gennaro, Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA 1990に開示された方法）に従って、ＣＲＦ受容体アンタゴニストを処方しうる。
【００６２】
加えて、プロドラックも、本発明の範囲内である。プロドラックは、上記のプロドラッグが患者に投与されると、インビボで構造式（Ｉ）の化合物を放出する任意の共有結合された担体である。プロドラックは、一般的に、所定の操作またはインビボのいずれかで、修飾が切断され、親化合物を生じるような方法で官能基を修飾することにより、調製される。
【００６３】
立体異性体に関して、構造式（Ｉ）の化合物は、キラル中心を有してもよく、ラセミ化合物、ラセミ混合物としておよび個々の鏡像異性体もしくはジアステレオマーとして、存在してもよい。全ての上記の異性体の形態は、それらの混合物を含めて、本発明に含まれる。さらに、構造式（Ｉ）の化合物の結晶形のいくつかは、多形体として存在するものもあり、それらは、本発明に含まれる。さらに、構造式（Ｉ）の化合物は、さらに、水または他の有機溶媒と溶媒和化合物を形成することもある。このような溶媒和化合物は、同様に本発明の範囲内に含まれる。
【００６４】
別の実施形態において、本発明は、多様の障害もしくは疾患（内分泌障害もしくは疾患、精神障害もしくは疾患および神経障害もしくは疾患を含む）を治療する方法を提供する。上記の方法には、本発明の化合物を障害もしくは疾患を治療するのに十分な量、哺乳類に投与することが含まれる。上記の方法には、本発明のＣＲＦ受容体アンタゴニストの好ましくは医薬組成物の形態での系統的投与が、含まれる。本明細書において使用される系統的投与には、経口および非経口の投与方法が含まれる。経口投与のための、適切なＣＲＦ受容体アンタゴニスの医薬組成物として、粉末、顆粒、丸剤、錠剤、およびカプセル、さらに液体、シロップ、懸濁液、および乳濁液が挙げられる。これらの組成物には、香料、防腐剤、沈殿防止剤、増稠剤および乳化剤、ならびに他の医薬上許容される添加剤が、さらに含まれうる。非経口投与のための、本発明の化合物は、ＣＲＦ受容体アンタゴニストの他に、緩衝剤、酸化防止剤、静菌薬、および上記溶液中で一般的に使用される他の添加剤を含有しうる水性注射液中で、調製されることができる。
【００６５】
別の実施形態において、本発明は、放射性もしくは非放射性医薬品により、体内の特定の部位の可視化診断を可能にする。本発明の化合物の使用は、患者の生理学的評価、機能的評価、または生物的評価、或いは、疾患の検出および評価または病理学的検出および評価を提供しうる。放射性医薬品は、シンチグラフィー、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）、コンピューター断層撮影（ＣＴ）、および単一光子放射型コンピューター断層撮影（ＳＰＥＣＴ）において利用される。上記の適用のため、放射性同位体として、ヨウ素（Ｉ）（１２３Ｉ（ＰＥＴ）、１２５Ｉ（ＳＰＥＣＴ）、および１３１Ｉを含む）、テクネチウム（Ｔｃ）（９９Ｔｃ（ＰＥＴ）を含む）、リン（Ｐ）（３１Ｐおよび３２Ｐを含む）、クロム（Ｃｒ）（５１Ｃｒを含む）、炭素（Ｃ）（１１Ｃを含む）、フッ素（Ｆ）（１８Ｆを含む）、タリウム（Ｔｌ）（２０１Ｔｌを含む）およびそれらに類する陽電子ならびに電離放射線の放出源のような元素が包含される。非放射性医薬品は、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、蛍光透視法、および超音波に利用される。上記の適用のため、同位体として、ガドリニウム（Ｇｄ）（１５３Ｇｄを含む）、鉄（Ｆｅ）、バリウム（Ｂａ）、マンガン（Ｍｎ）、およびタリウム（Ｔｌ）、のような元素が包含される。上記の物質は、さらに、混合物中の特定の標的部位の存在を同定するのに有用であり、また混合物中の分子を標識するのに有用である。
【００６６】
上記の如く、本発明の化合物の投与は、非常に多様な障害もしくは疾患を治療するのに利用されうる。具体的には、本発明の化合物は、様々な病気（例えば、鬱病、不安障害、パニック障害、強迫性障害、異常攻撃、不安定狭心症、反応性高血圧症、神経性食欲不振、過食症、過敏性腸症候群、ストレス誘導性免疫の抑制、脳卒中、炎症、疼痛、クッシング病、点頭痙攣、癲癇、および物質乱用もしくは禁断症状を含む）の治療のために哺乳類に投与されうる。
【００６７】
以下の実施例は、限定するのではなく、例示する目的で提供される。
実施例
本発明のＣＲＦ受容体アンタゴニストは、実施例１ないし２３に開示される方法により調製されうる。実施例２４は受容体結合親和力の測定方法を提供し、実施例２５は本発明の化合物をＣＲＦ刺激性アデニレートシクラーゼ活性についてスクリーニングするアッセイを開示する。
【００６８】
分析用ＨＰＬＣ−ＭＳ方法１
プラットフォーム：アギレント（Agilent）１１００シリーズ：自動−試料供給装置、ＵＶ検出装置（２２０ｎＭおよび２５４ｎM）、ＭＳ検出装置（ＡＰＣＩ）を装着；
ＨＰＬＣカラム：ＹＭＣ  ＣＤＳ  ＡＱ、Ｓ−５、５μ、２．０ｘ５０ｍｍカートリッジ；
ＨＰＬＣ勾配：１．０ｍＬ／分、２．５分にて水中１０％アセトニトリルから水中９０％アセトニトリルまで、９０％を１分間維持する。アセトニトリルおよび水は共に０．０２５％ＴＦＡを有する。
【００６９】
分析用ＨＰＬＣ−ＭＳ方法２
プラットフォーム：アギレント１１００シリーズ：自動−試料供給装置、ＵＶ検出装置（２２０ｎＭおよび２５４ｎM）、ＭＳ検出装置（ＡＰＣＩ）を装着；
ＨＰＬＣカラム：Phenomenex  Synergi-Max  RP、２．０ｘ５０ｍｍカラム；
ＨＰＬＣ勾配：１．０ｍＬ／分、１３．５分にて水中５％アセトニトリルから水中９５％アセトニトリルまで、９５％を２分間維持する。アセトニトリルおよび水は共に０．０２５％ＴＦＡを有する。
【００７０】
分析用ＨＰＬＣ−ＭＳ方法３
プラットフォーム：アギレント１１００シリーズ：自動−試料供給装置、ＵＶ検出装置（２２０ｎＭおよび２５４ｎM）、ＭＳ検出装置（電子噴射）を装着；
ＨＰＬＣカラム：XTerra  MS、Ｃ１８、５μ、３．０ｘ２５０ｍｍカラム；
ＨＰＬＣ勾配：１．０ｍＬ／分、４６分にて水中１０％アセトニトリルから水中９０％アセトニトリルまで、９９％アセトニトリルにまで飛び越え、９９％アセトニトリルを８．０４分間維持する。アセトニトリルおよび水は共に０．０２５％ＴＦＡを有する。
【００７１】
分析用ＨＰＬＣ−ＭＳ方法４
プラットフォーム：アギレント１１００シリーズ：自動−試料供給装置、ＵＶ検出装置（２２０ｎＭおよび２５４ｎM）、ＭＳ検出装置（ＡＰＣＩ）およびBerger  FCM  １２００  ＣＯ２ポンプモジュールを装着；
ＨＰＬＣカラム：Berger  Pyridine、ＰＹＲ  ６０Ａ、６μ、４．６ｘ１５０ｍｍカラム；
ＨＰＬＣ勾配：４．０ｍＬ／分、１２０バール；１．６７分にて超臨界ＣＯ２中１０％メタノールから超臨界ＣＯ２中６０％メタノールまで、６０％を１分間維持する。メタノールは１．５％水を有する。背圧を１４０バールに制御した。
【００７２】
分取用ＨＰＬＣ−ＭＳ
プラットフォーム：島津  ＨＰＬＣ：ギルソン（Gilson）２１５自動−試料供給装置／画分収集装置、ＵＶ検出装置およびPＥ  Sciex  ＡＰＩ１５０ＥＸ質量検出装置を装着；
ＨＰＬＣカラム：ＢＨＫ  ＯＤＳ−Ｏ／Ｂ、５μ、３０ｘ７５ｍｍ；
ＨＰＬＣ勾配：３５ｍＬ／分、７分にて水中１０％アセトニトリルから１００％アセトニトリルまで、１００％アセトニトリルを３分間維持する。０．０２５％ＴＦＡを有する。
【００７３】
略語：
ＬＡＨ：水素化アルミニウムリチウム
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＥＡＡ：アセト酢酸エチル
ＬＣ−ＭＳ：液体クロマトグラフィー−質量分光法
ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３：トリアセトキシホウ水素化ナトリウム
Ｐｄ−Ｃ：炭素上パラジウム（１０％）
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
トスミック：トシルメチルイソシアニド
ｔＲ：保持時間（分）
【００７４】
実施例１
【化１１】
2007515474.tif 000014
工程１Ａ：
４−網の−２−メトキシ安息香酸メチル１ａ（６．８２ｇ、３７．７ミリモル）の６Ｎ  ＨＣｌ中冷却懸濁液に、亜硝酸ナトリウム溶液（２．６０ｇ、３７．７ミリモル）を滴下した。０℃にて２０分間攪拌した後、塩化スズ・二水和物（２４．７ｇ、１０９．３ミリモル）を少しずつ添加した。得られた懸濁液を０℃で１．５時間攪拌し、濾過した。集めた固体をＥｔＯＨに懸濁させ、それにマロンアルデヒドビス（ジメチルアセタール）（７．５ｍＬ、４５．７ミリモル）を添加し、この反応混合物を一夜還流に付した。ＥｔＯＨを蒸発させた後、残渣をＥｔＯＡｃと水の間で抽出し、有機相を乾燥させ、蒸発乾固させた。残渣を２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いてシリカゲルプラグに通し、安息香酸メチルおよびエチルの混合物としての化合物１ｂ（７．４３ｇ）を得た。
【００７５】
工程１Ｂ：
１ｂ（１０．６ｇ）の乾燥ジエチルエーテル（２００ｍＬ）中溶液に、０℃にてＬＡＨ粉末（１．７４ｇ）をゆっくりと添加した。０℃にて４５分間攪拌した後、反応混合物を氷水上にデカントし、水相をｐＨ４．０にまで酸性化した。単離した後、該アルコールをＤＣＭ中の塩化チオニル（１０ｍｌ）と一緒に２．５時間還流し、氷水上にデカントし、ＤＣＭで抽出した。該塩化ベンジル粗製物をＤＭＳＯ（１００ｍｌ）中のＮａＣＮ（３．６５ｇ、７４．４ミリモル）と共に８０℃にて４５分間加熱した。ＤＭＳＯを除去して、クロマトグラフィー精製に付して、化合物１ｃ（５．９８ｇ）を得た。
【００７６】
工程１Ｃ：
１ｃ（５．９８ｇ、１ミリモル）のＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）中溶液に、金属ナトリウム（１．０ｇ、４３．５ミリモル）を少しずつ添加し、その混合物を一夜還流した。得られた懸濁液を氷水上にデカントし、ｐＨ４．０にまで酸性化した。有機相を乾燥させ、蒸発乾固させ、ヒドラジン・一臭化水素酸塩（１５．３ｇ、１３５．４ミリモル）と混合し、ＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（６：１）中で５時間還流した。有機相を乾燥させ、蒸発乾固させて化合物１ｄ（１０．４ｇ）を得た。
【００７７】
工程１Ｄ：
１ｄ（７．５ｇ、２７．９ミリモル）の混合物をＡｃＯＨ（１００ｍＬ）中のアセト酢酸エチル（５．０ｍＬ）と一緒に３時間還流した。ＡｃＯＨを蒸発させ、ジエチルエーテル中に沈殿させて、濾過して化合物１ｅ（１０．４ｇ）を得た。
【００７８】
工程１Ｅ：
１ｅ（２．１ｇ、６．３ミリモル）のアセトニトリル中懸濁液に、ＰＯＣｌ３（２．２ｍｌ、２４．１ミリモル）を添加し、該混合物を５時間還流させて、氷水上にデカントし、ＥｔＯＡｃで抽出し、クロマトグラフィーで精製して化合物１ｆ（１．８８ｇ）を得た。
【００７９】
工程１Ｆ：
該塩素のイソプロピルアミンとの置換を、１ｆ（３０ｍｇ）と過剰量のアミンとをアセトニトリル（０．８ｍＬ）に懸濁させ、マイクロ波で１６０℃に１６分間加熱し、Ｓｃｉｅｘ２分取用ＬＣ−ＭＳシステムで精製し、化合物１−１（１３．５ｍｇ）を得た。
【００８０】
【化１２】
2007515474.tif 000015
【表１】
2007515474.tif 000016
【表１−２】
2007515474.tif 000017
【表１−３】
2007515474.tif 000018
【表１−４】
2007515474.tif 000019
【表１−５】
2007515474.tif 000020
【表１−６】
2007515474.tif 000021
【表１−７】
2007515474.tif 000022
【表１−８】
2007515474.tif 000023
【表１−９】
2007515474.tif 000024
【表１−１０】
2007515474.tif 000025
【００８１】
実施例２
【化１３】
2007515474.tif 000026
【００８２】
工程２Ａ
本発明のＲ４位に水素を導入するために、実施例１の合成スキームを工程１Ｃで修飾し、実施例２の合成スキームを得た。１ｃ（１．０ｇ）のＨＣＯ２Ｅｔ（２０ｍＬ）中溶液に、金属ナトリウム（０．１３ｇ）を少しずつ加え、該混合物を１．５時間還流した。得られた懸濁液を氷水上にデカントし、ｐＨ４．０にまで酸性化した。有機相を乾燥、蒸発乾固させ、ヒドラジン・一臭化水素酸塩（１．５８ｇ）と混合し、ＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（６：１）中で１時間還流した。ＥｔＯＨを蒸発させ、該混合物をＥｔＯＡｃとＮａＯＨ（水性）の間に抽出させた。有機相を乾燥、蒸発乾固させて化合物２ａ（１．２０ｇ）を得た。
【００８３】
工程２Ｂ：
２ａ（１．２ｇ）の混合物をＡｃＯＨ（３０ｍＬ）中のアセト酢酸エチル（１．０ｍＬ）と一緒に２時間還流した。ＡｃＯＨを蒸発させ、ジエチルエーテル中に沈殿させ、濾過させて化合物２ｂ（１．０ｇ）を得た。
【００８４】
工程２Ｃ：
２ｂ（１．０ｇ）のアセトニトリル（３０ｍＬ）中懸濁液に、ＰＯＣｌ３（２．０ｍＬ）を添加し、該混合物を一夜還流させ、氷水上にデカントし、ＥｔＯＡｃで抽出し、クロマトグラフィー精製に付して化合物２ｃ（０．９２ｇ）を得た。
【００８５】
工程２Ｄ：
該塩素のイソプロピルアミンとの置換を、２ｃ（３０ｍｇ）と過剰量のアミンとをアセトニトリル（０．８ｍＬ）に懸濁させ、マイクロ波で１６０℃に１６分間加熱し、Ｓｃｉｅｘ２分取用ＬＣ−ＭＳシステムで精製し、化合物２−２（１４．８ｍｇ）を得た。反応するアミンに応じて、２ｃのアミンとの反応により、以下の表に列挙される化合物が得られた。
【００８６】
【化１４】
2007515474.tif 000027
【表２】
2007515474.tif 000028
【００８７】
実施例３
【化１５】
2007515474.tif 000029
【００８８】
工程３Ａ：
７−アザインドール（２４ｍｇ）の乾燥１，４−ジオキサン中溶液に１５分間攪拌しながらＮａＨ（１２ｍｇ）を添加した。化合物１ｆ（３５ｍｇ）を一夜攪拌しながら添加した。分取用ＬＣ−ＭＳ精製に付して、化合物３−１（６．１ｍｇ）を得た。反応するアミンに応じて、１ｆのアミンとの反応により、以下の表に列挙される化合物が得られた。
【００８９】
【化１６】
2007515474.tif 000030
【表３】
2007515474.tif 000031
【００９０】
実施例４
【化１７】
2007515474.tif 000032
【００９１】
工程４Ａ：
化合物４ａ（４０ｇ、アルドリッチ）をＴＨＦ（２００ｍＬ）に溶かした。ナトリウムメトキシド溶液（４８ｍＬ、ＭｅＯＨ中２５％）を滴下し、反応混合物を室温で６時間攪拌した。水（１５０ｍＬ）でクエンチして、該混合物を４Ｎ  ＨＣｌで中和し、ＤＣＭで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、シリカゲルクロマトグラフィーに付して精製し、化合物４ｂ（１７．７ｇ）を得た。
【００９２】
工程４Ｂ：
カリウムｔ-ブチルオキシド（７．３ｇ）のＤＭＥ（４０ｍＬ）中懸濁液を窒素下で-５０℃に冷却した。ＤＭＥ（４０ｍＬ）中のトスミック（９．１ｇ）を温度を維持しながら滴下した。該反応混合物に、化合物４ｂ（１０ｇ）を３０分間攪拌しながら導入した。ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）を加え、反応混合物を３０分間還流した。ＤＭＥおよびＭｅＯＨの大部分を除去した後、残渣を水（１００ｍＬ）および酢酸エチル（１００ｍＬ）に再懸濁させ、酢酸で中和した。有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーで精製して化合物４ｃ（７．０ｇ）を得た。
【００９３】
工程４Ｃ：
窒素下、ＴＨＦ（８０ｍＬ）に溶かした化合物４ｃ（６．２５ｇ）に、ＮａＨ（２．３ｇ、油中６０％）および酢酸エチル（１．５ｍＬ）を添加した。該混合物を手持ち式加熱ガンで該混合物から小さな泡が発生するまでゆっくりと加熱した。酢酸エチルを加え、還流を保持した。反応物を室温に１時間保持し、水（１００ｍＬ）でクエンチし、ジエチルエーテル（１００ｍＬ）で抽出した。水溶液を４Ｎ  ＨＣｌで中和し、酢酸エチル（１００ｍＬアリコート）で２回抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して化合物４ｄ（６．５ｇ）を得た。
【００９４】
工程４Ｄ：
化合物４ｄ（１２．１ｇ）およびヒドラジン：ＨＢｒ（５．６１ｇ）をＥｔＯＨ：Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ、９：１の混合液）に溶かし、該混合物を２時間還流した。濃縮した後、混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）と飽和炭酸水素ナトリウム（１５０ｍＬ）の間に分配させた。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して化合物４ｅ（１２．２ｇ）を得た。
【００９５】
工程４Ｅ：
化合物４ｅ（１２．２ｇ）および酢酸アセチル（９．０６ｇ）をエタノール（５０ｍＬ）と一緒に混合し、該混合物を一夜還流した。冷却後、結晶が形成し、それを収穫した。濾液をさらにジエチルエーテルで処理し、化合物４ｆ（１０．７６ｇ）を得た。
【００９６】
工程４Ｆ：
化合物４ｆ（２．０ｇ）をＰＯＣｌ３（１．３４ｍＬ、１４．４４ミリモル）およびＥｔ３Ｎ（１．６ｍＬ）に溶かし、それにジオキサン（１０ｍＬ）を加え、該混合物を２時間還流させた。反応混合物を氷上に注ぎ、炭酸ナトリウムを添加してｐＨ７に調整した。ＥｔＯＡｃで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、蒸発させ、つづいてクロマトグラフィーに付して、化合物４ｇ（２．０ｇ）を得た。
【００９７】
工程４Ｇ：
エタノール（１０ｍＬ）中の化合物４ｇ（１．０ｇ）に、イソプロピルアミン（２．０当量）を添加した。反応混合物を加圧容器中で一夜加熱した。エタノールを除去し、カラムクロマトグラフィーに付して、化合物４ｈ（０．９５ｇ）を得た。イソプロピルアミンの代わりにＮ−エチル−Ｎ−メトキシエチルアミンを用いて化合物４ｈ．１を得た。イソプロピルアミンの代わりに（Ｓ）−２−（メトキシメチル）ピロリジンを用いて化合物４ｈ．２を得た。
【００９８】
工程４Ｈ：
ジオキサン（２０ｍＬ）中の化合物４ｈ（０．８ｇ）に、ＣｕＩ（０．０３ｇ）、ＮａＩ（０．６３ｇ）およびトランス−１，２−ジアミノシクロヘキサン（０．００３６ｍＬ）を添加し、この混合物を１１０℃で一夜加熱した。反応混合物を濾過し、ジオキサンを除去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、ブラインで洗浄した。シリカゲルを介する濾過を行い、化合物４ｉ（０．８１ｇ）を得た。
【００９９】
工程４ｉ：
ジオキサン（２ｍＬ）中の化合物４ｉ（４０ｍｇ）に、イミダゾール（１．５当量）、ＣｕＩ（２６．８ｍｇ）、Ｋ２ＣＯ３（５３．２ｍｇ）、トランス−１，２−ジアミノシクロヘキサン（０．００１５ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチレンジアミン（０．００１４ｍＬ）を添加し、この反応混合物を１１０℃に一夜加熱した。該反応混合物を濾過し、分取用ＨＰＬＣを介して精製し、化合物４−１（８．３ｍｇ）を得た。該発明のＲ２およびＨｅｔ位については、この反応スキームにて使用する試薬に応じて、以下の表の化合物を得た。
【０１００】
【化１８】
2007515474.tif 000033
【表４】
2007515474.tif 000034
【表４−２】
2007515474.tif 000035
【０１０１】
実施例５
中間体の調製
【化１９】
2007515474.tif 000036
【０１０２】
工程５Ａ：
３−アミノ−５−メチルピラゾール（２０．０ｇ、２０６ミリモル）、アセト酢酸エチル（３２．０ｇ、２４７ミリモル）、酢酸（６ｍＬ）およびジオキサン（１５０ｍＬ）の溶液を１６時間還流した。白色固体が沈殿し、それを濾過で集めた。フィルターケーキをエーテルで洗浄し、白色固体として５ａ（２９．０ｇ、８６％）を得た。
【０１０３】
工程５Ｂ：
５ａ（９．０ｇ，５５ミリモル）のアセトニトリル（５０ｍＬ）中懸濁液に、オキシ塩化リン（１２．７ｇ、８３ミリモル）を添加した。該混合物を攪拌し、密封管中９０℃にて１６時間加熱した。冷却した反応混合物を氷上に注いだ。該混合物を炭酸水素ナトリウム固体で中和し、ついで酢酸エチルで抽出した。合した有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、暗褐色油にまで濃縮した。生成粗製物を溶出液としてヘキサン中３０％酢酸エチルを用いるシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、白色固体として５ｂ（９．９ｇ、９９％）を得た。
【０１０４】
工程５Ｃ：
臭素（５．３ｇ、３３ミリモル）を、０℃にて、５ｂ（６．７ｇ、３７ミリモル）の１：１のメタノール／水（６０ｍＬ）中溶液に滴下した。１０分後、混合物を濾過し、形成された沈殿物を集めた。該固体を冷メタノールで洗浄し、ついで得られた橙色固体の半分を５０ｍＬのアセトニトリルに懸濁させた。２−メトキシエチルアミン（２．５ｇ、３３ミリモル）を添加し、該混合物を攪拌し、密封管中９０℃にて１６時間加熱した。該混合物を濃縮し、ついで残渣を乾燥ＤＭＦ（２５ｍＬ）に溶かし、水素化ナトリウム（２．１ｇの鉱油中６０％分散液、５３ミリモル）およびヨードエタン（８．１ｇ、５２ミリモル）で処理した。該混合物を８５℃で１６時間加熱し、ついで還流温度で１６時間加熱した。１００ｍＬの水を加え、ついで該混合物を酢酸エチルで抽出した。合した有機抽出液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮して、残渣をヘキサン／酢酸エチル（３：１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、５ｃ（０．９５ｇ、収率１６％）を得た。
【０１０５】
同様に、以下の化合物を調製した：
２−メトキシエチルアミンの代わりにジエチルアミンを用い、アルキル化工程を削除することで５ｄを；
２−メトキシエチルアミンの代わりにジ−Ｎ−プロピルアミンを用い、アルキル化工程を削除することで５ｅを；
２−メトキシエチルアミンの代わりにＮ−プロピルベンジルアミンを用い、アルキル化工程を削除することで５ｆを；
２−メトキシエチルアミンの代わりにＮ‘−ベンジル−Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンを用い、アルキル化工程を削除することで５ｇを調製した。
【０１０６】
実施例６
【化２０】
2007515474.tif 000037
【０１０７】
工程６Ａ：
化合物１ｆ（７０６ｍｇ、２．０ミリモル）、（Ｓ）−プロリノール（２６３ｍｇ、２．６ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（３９０ｍｇ、３．０ミリモル）のアセトニトリル（２０ｍＬ）中懸濁液を還流温度で３時間加熱した。溶媒を蒸発させ、水を加え、混合物をクロロホルムで抽出した。合した有機抽出液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮して６ａ（７２０ｍｇ）を得た。
【０１０８】
工程６Ｂ：
エチルマロニルクロリド（１０ｍｇ、０．０６ミリモル）を、室温にて、６ａ（２０ｍｇ、０．０５ミリモル）、ＤＩＰＥＡ（１０ｍｇ、０．０８ミリモル）およびＤＭＡＰ（１ｍｇ）のクロロホルム（０．５ｍＬ）中溶液に添加した。該混合物を１６時間放置し、ついで溶媒を蒸発させた。残渣をメタノールに溶かし、分取性ＨＰＬＣ／ＭＳで直接的に精製し、ＴＦＡ塩として６−１（２１ｍｇ）を得た。
【０１０９】
【化２１】
2007515474.tif 000038
【表５】
2007515474.tif 000039
【０１１０】
実施例７
【化２２】
2007515474.tif 000040
【０１１１】
工程７Ａ：
水素化ナトリウム（４ｍｇの鉱油中６０％分散液、０．１０ミリモル、２当量）を６ａ（２０ｍｇ、０．０５ミリモル）のＤＭＦ（０．５ｍＬ）中溶液に添加し、該混合物を室温で１５分間攪拌した。ヨードエタン（１６ｍｇ、０．１０ミリモル、２当量）を添加し、混合物を密封バイアル中７５℃で３時間加熱した。該混合物をメタノールで希釈し、分取性ＨＰＬＣ／ＭＳで直接的に精製し、ＴＦＡ塩として７−１（１３ｍｇ）を得た。
【０１１２】
【化２３】
2007515474.tif 000041
【表６】
2007515474.tif 000042
【０１１３】
実施例８
【化２４】
2007515474.tif 000043
【０１１４】
工程８Ａ：
１ｆ（５０ｍｇ、０．１４ミリモル）および２−メトキシエチルアミン（０．０４０ｍＬ、０．４６ミリモル）のアセトニトリル（２ｍＬ）中溶液を、密封管中、マイクロ波反応装置にて１５０℃で１０００秒間加熱した。酢酸エチルを加え、該混合物を水およびブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して油として８ａ（４５ｍｇ）を得た。
【０１１５】
工程８Ｂ：
水素化ナトリウム（１５ｍｇの鉱油中６０％分散液、０．３８ミリモル）を８ａ（４５ｍｇ、０．１１ミリモル）のＤＭＦ（０．５ｍＬ）中溶液に添加し、該混合物を室温で１５分間攪拌した。１−フルオロ−２−ヨードエタン（３０ｍｇ、０．１７ミリモル）を添加し、混合物を密封バイアル中８０℃で３時間加熱した。酢酸エチルを加え、該混合物を水およびブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過して濃縮した。残渣を、ヘキサン／酢酸エチル（１：１）で溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーで精製し、８−１（６ｍｇ）を得た。
【０１１６】
【化２５】
2007515474.tif 000044
【表７】
2007515474.tif 000045
【表７−２】
2007515474.tif 000046
【表７−３】
2007515474.tif 000047
【表７−４】
2007515474.tif 000048
【０１１７】
実施例９
【化２６】
2007515474.tif 000049
【０１１８】
工程９Ａ：
ベンジルアミン（６２０ｍｇ、５．８ミリモル）、４−ブロモ酪酸エチル（７５０ｍｇ、３．８ミリモル）、炭酸カリウム（１．６ｇ、１２ミリモル）およびＤＭＦ（５ｍＬ）の混合物を室温で１７時間攪拌した。水を添加し、混合物をジクロロメタンで２回抽出した。合した有機層を水で２回、ブラインで１回洗浄し、ついで硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、蒸発させてガムとして９ａ粗製物（約１ｇ）を得た。
【０１１９】
工程９Ｂ：
１ｆ（５０ｍｇ、０．１４ミリモル）、９Ａ粗製物（３３ｍｇ、約０．１３ミリモル）、アセトニトリル（１ｍＬ）およびトリエチルアミン（０．０２０ｍＬ、０．１６ミリモル）の混合物を密封管中マイクロ波にて１５０℃で４５分間加熱した。該混合物をメタノールで希釈し、分取性ＨＰＬＣ／ＭＳで直接的に精製し、ＴＦＡ塩として９−１（約１５ｍｇ）を得た。
【０１２０】
工程９Ｃ：
９−１（１０ｍｇ、０．０２ミリモル）のＴＨＦ／水（２ｍＬ）中溶液を水酸化リチウム水和物（２．５ｍｇ、０．０６ミリモル）で処理した。該混合物を室温で２時間攪拌し、ついでメタノールで希釈し、分取性ＨＰＬＣ／ＭＳで直接的に精製し、ＴＦＡ塩として９−２（４ｍｇ）を得た。
【０１２１】
【化２７】
2007515474.tif 000050
【表８】
2007515474.tif 000051
【０１２２】
実施例１０
２−メチル−４−（ピラゾール−１−イル）フェニルボロン酸ピナコールエステル試薬の合成
【化２８】
2007515474.tif 000052
【０１２３】
工程１０Ａ：
４−ブロモ−３−メチルアニリン（１０．２ｇ）を６Ｎ  ＨＣｌ（８５ｍＬ）に懸濁させ、０℃に冷却した。亜硝酸ナトリウム（４ｇ）の水４０ｍＬ中溶液を１０分間にわたって添加した。反応物を０℃で１５分間攪拌し、つづいて塩化第一スズ（１２Ｎ  ＨＣｌ２５ｍＬ中に３６ｇ）を添加した。反応物を０℃で２時間攪拌した。反応物を濾過し、濾過ケーキを冷水で洗浄し、淡褐色固体としての４−ブロモ−３−メチルフェニルヒドラジン塩酸塩１０ａ（２０ｇ）を得た。
【０１２４】
工程１０Ｂ：
化合物１０ａ（２０ｇ）を５０ｍＬのエタノールに懸濁させた。マロンジアルデヒドビス−ジメチルアセタール（１１．０ｍＬ、６７ミリモル）を添加し、反応物を８５℃に２時間加熱した。該反応混合物を炭酸水素ナトリウムで中和し、ＤＣＭで洗浄することで抽出した。合した有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させて濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶かし、混合物をセライトパッドで濾過した。濾液を蒸発させ、油状残渣をカラムクロマトグラフィー（１：１の酢酸エチル：ヘキサン）で精製し、アンバー色油としての１−（４−ブロモ−３−メチルフェニル）ピラゾール１０ｂ（９．６ｇ、７３％）を得た。
【０１２５】
工程１０Ｃ：
化合物１０ｂ（２．０ｇ）のジオキサン（１５ｍＬ）中溶液に、ビス（ピナコラート）ジボロン（２．４ｇ）、酢酸カリウム（２．４ｇ）および１，１‘−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンジクロロパラジウム（ＩＩ）（５００ｍｇ）を添加した。反応物を８５℃に１２時間加熱した。反応混合物をセライトパッドを介して濾過し、濾過ケーキを酢酸エチルで洗浄した。濾液を褐色液体にまで濃縮し、それをカラムクロマトグラフィー（２０％酢酸エチル：ヘキサン）で精製し、２−メチル−４−（ピラゾール−１−イル）フェニルボロン酸ピナコールエステル１０ｃ（１．８ｇ、７５％）を黄色油として得た；ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＝２８５．０。
２−クロロ−４−（ピラゾール−１−イル）フェニルボロン酸ピナコールエステル１０ｄもまた、上記した方法により調製した。
【０１２６】
実施例１１
ボロン酸中間体の合成
【化２９】
2007515474.tif 000053
【０１２７】
工程１１Ａ：
ｎ−ブチルリチウム（７．９ｍＬ、ヘキサン中２．５Ｍ溶液、２０ミリモル）を−７８℃での化合物１０ｂ（４．７ｇ、２０ミリモル）のＴＨＦ（１００ｍＬ）中溶液に添加した。該混合物を１時間にわたって−２５℃にまで加温させ、ついで該混合物を−７８℃に冷却した。トリメチルボレート（３．４ｍＬ、３０ミリモル）を添加し、反応物を室温にまで加温させた。ついで、塩酸（１Ｎ、１００ｍＬ）を加え、混合物を１６時間攪拌した。水層のｐＨを水酸化ナトリウムおよびリン酸二水素ナトリウム溶液を用いて３−４に調整し、ついで該混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を濃縮し、残渣をエーテルと０．５Ｎ  水酸化ナトリウム溶液の間に分配した。該水層を２つの部分の付加的なエーテルで抽出し、濃塩酸を用いてｐＨを３−４にまで酸性化した。該混合物を酢酸エチルで抽出し、合した酢酸エチル抽出液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて２−メチル−４−（ピラゾール−１−イル）フェニルボロン酸（化合物１１ａ，３．５ｇ）をアンバー色ガムとして得た。
【０１２８】
実施例１２
ボロン酸中間体の合成
【化３０】
2007515474.tif 000054
【０１２９】
工程１２Ａ：
２−クロロ−４−メチル−５−ニトロピリジン（５．０ｇ、２９ミリモル、１．０当量）をヒドラジン溶液（５０ｍＬ、ＴＨＦ中１Ｍ溶液）に溶かし、該混合物を攪拌し、密封管中、８０℃にて２２時間加熱した。冷却した反応混合物を濾過し、得られた固体をエーテルで洗浄し、５．７ｇの緑がかった褐色固体を得た。この固体（５．７ｇ、２４ミリモル、１．０当量）、マロンアルデヒドビス（ジメチルアセタール）（５．９ｇ、３１ミリモル、１．３当量）および酢酸（５０ｍＬ）の混合物を攪拌し、密封管中、８０℃にて５時間加熱した。溶媒を蒸発させ、ついで炭酸水素ナトリウム水溶液（２００ｍＬ）を添加し、該混合物を２ｘ２００ｍＬの酢酸エチルで抽出した。合した有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をエタノールから再結晶し、黄色固体としての１２ａ（２．６ｇ、収率５３％）を得た。
【０１３０】
工程１２Ｂ：
１２ａ（２．６ｇ、１３ミリモル）および１０％Ｐｄ／Ｃ（２００ｍｇ）のＴＨＦ／メタノール（１：１、３０ｍＬ）中混合物を、４０ｐｓｉの水素の下、Ｐａｒｒ装置で室温にて２時間振とうさせた。反応混合物をセライトパッドを介して濾過し、濾液を明緑色油にまで濃縮した。該油を３Ｎ  塩酸（１０ｍＬ）に再懸濁させ、０℃に冷却し、ついで亜硝酸ナトリウム（８３５ｍｇ、１２ミリモル、１．１当量）の水（２ｍＬ）中溶液で滴下処理した。該混合物を０℃で１時間攪拌し、ついで２ｍＬの半飽和のヨウ化カリウムを添加し、該混合物を室温で２２時間攪拌した。炭酸水素ナトリウム飽和水溶液を添加し、ついで該混合物を２ｘ１００ｍＬの酢酸エチルで抽出し、合した有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過して濃縮した。残渣を溶出液としてヘキサン／酢酸エチル（４：１）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、黄色固体としての１２ｂ（１．２３ｇ、３３％）を得た。
【０１３１】
工程１２Ｃ：
ｎ−ブチルリチウム（１．８ｍＬ、ペンタン中２．０Ｍ溶液、３．６ミリモル）を−７８℃での化合物１２ｂ（６００ｍｇ、２．１ミリモル）およびトリイソプロピルボレート（９００ｍｇ、４．８ミリモル）のＴＨＦ（５ｍＬ）中溶液に滴下した。該混合物を１時間にわたって室温にまで加温し、ついで該混合物を−７８℃に冷却し、さらなるトリイソプロピルボレート（４００ｍｇ、２．１ミリモル）で処理し、つづいてさらなるｎ−ブチルリチウム（０．５ｍＬ、ペンタン中２．０Ｍ溶液、１．０ミリモル）で処理した。該混合物を再び室温にまで１時間にわたって加温し、ついで０．８ｍＬの１Ｎ  塩酸を添加し、該混合物を１時間攪拌した。この混合物を濾過し、該固体をメタノールおよび酢酸エチルですすぎ、ついで濾液を濃縮した。残渣をヘキサン／酢酸エチル（１：１）で溶出するシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、１２ｃ（２２０ｍｇ、収率５２％）を赤色固体として得た。
【０１３２】
実施例１３
【化３１】
2007515474.tif 000055
【０１３３】
工程１３Ａ：
水素化ナトリウム（１．５４ｇ、油中６０％分散液、３８．５ミリモル、２当量）を室温でのシアノアセトンナトリウム塩（２．５ｇ、２３ミリモル、１．２当量）のＤＭＦ（４０ｍＬ）中溶液に添加した。該混合物を１５分間攪拌し、ついで２−フルオロ−３−メチル−５−ニトロピリジン（３．０ｇ、１９．２ミリモル、１．０当量）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中溶液を滴下した。反応混合物を室温で６時間攪拌した。該反応物を５ｇの氷で、つづいて１５０ｍＬの水および１０ｍＬの酢酸でクエンチした。該混合物を酢酸エチルで抽出し、ついで合した有機抽出液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を溶出液としてヘキサン中３０％酢酸エチルを用いるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、１３ａ（１．８５ｇ、収率４４％）を橙色油として得た。
【０１３４】
工程１３Ｂ：
１３ａ（１．８ｇ、８．２ミリモル、１．０当量）、ヒドラジン・一臭化水素酸塩（１．０ｇ、８．８ミリモル、１．１当量）、エタノール（３０ｍＬ）および水（３ｍＬ）の混合物を還流温度で１７時間加熱した。溶媒を蒸発させ、残渣を溶出液としてヘキサン／酢酸エチル（１：１）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーにより直接的に精製し、１３ｂ（１．８ｇ、収率９４％）を黄色泡沫体として得た。
【０１３５】
工程１３Ｃ：
１３ｂ（１．８ｇ、７．７ミリモル、１．０当量）、エタノール（１５ｍＬ）、酢酸（１５ｍＬ）およびアセト酢酸エチル（１．６ｇ、１２．４ミリモル、１．６当量）の混合物を密封管中１０５℃で１９時間加熱した。溶媒を蒸発させ、残渣をフリットガラスフィルター上に堆積させ、エーテルですすぎ、１３ｃ（１．０ｇ、収率４３％）を黄色固体として得た。
【０１３６】
工程１３Ｄ：
１３ｃ（３００ｍｇ、１．０ミリモル、１．０当量）、オキシ塩化リン（３４０ｍｇ、２．２ミリモル、２．２当量）およびアセトニトリル（１０ｍＬ）の混合物を３時間還流させた。反応物を氷上に注ぎ、炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、ついで酢酸エチルで抽出した。合した酢酸エチル抽出液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。アセトニトリル（１０ｍＬ）およびジエチルアミン（０．３０ｍＬ、２．９ミリモル、２．９当量）を該残渣に加え、混合物を還流温度で１時間加熱した。混合物を濃縮し、ついでヘキサン／酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより直接的に精製し、１３ｄ（３００ｍｇ、収率８４％）を得た。
【０１３７】
工程１３Ｅ：
１０％Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ）を１３ｄ（２００ｍｇ、０．５６ミリモル、１．０当量）のエタノール（６ｍＬ）およびＴＨＦ（６ｍＬ）中窒素散布溶液に添加した。該混合物をパール振とう器にて３５ｐｓｉの水素気体の下室温で２時間振とうさせた。該混合物を窒素でパージし、濾過した。濾液を濃縮し、アミノピリジン粗製物を得た。このアミノピリジン粗製物（全体量）の４Ｎ  塩酸（５ｍＬ）中氷冷溶液に、亜硝酸ナトリウム（４３ｍｇ、０．６２ミリモル、１．１当量）の水（１ｍＬ）中溶液を滴下した。該混合物を０℃で１時間攪拌し、つづいてヨウ化カリウム（１５０ｍｇ、０．９０ミリモル、１．６当量）の水（１．５ｍＬ）中溶液を滴下した。該混合物を室温で２時間攪拌し、ついで２０ｍＬの炭酸水素ナトリウム飽和水溶液を加え、該混合物を酢酸エチルで抽出した。合した有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を溶出液としてクロロホルム／メタノール／水性アンモニア（９５：５：０．０１）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、１３ｅ（７３ｍｇ、収率２７％）を得た。
【０１３８】
工程１３Ｆ：
１３ｅ（２０ｍｇ、０．０５ミリモル、１．０当量）のジオキサン（１ｍＬ）中溶液に、炭酸カリウム（１４ｍｇ、０．１ミリモル、２．０当量）、ピラゾール（６ｍｇ、０．０９ミリモル、１．８当量）、ヨウ化銅（Ｉ）（６ｍｇ、０．０３ミリモル、０．６当量）、トランス−１，２−ジアミノシクロヘキサン（５ｍｇ、０．０４ミリモル、０．８当量）およびＮ，Ｎ‘−ジメチルエチレンジアミン（５ｍｇ、０．０６ミリモル、１．１当量）を添加した。該混合物を攪拌し、密封管にて９０℃で１６時間加熱した。反応混合物をセライトパッドを介して濾過し、濃縮し、分取性ＨＰＬＣ／ＭＳで精製して１３−１（７ｍｇ、収率３０％）をＴＦＡ塩として得た。
【０１３９】
【化３２】
2007515474.tif 000056
【表９】
2007515474.tif 000057
【０１４０】
実施例１４
【化３３】
2007515474.tif 000058
【０１４１】
工程１４Ａ：
２−アミノ−５−ブロモ−４−メチルピリジン（１ｇ、５．４ミリモル）および２，５−ジヒドロキシテトラヒドロフラン（２．８ｇ、２７ミリモル）の酢酸（１０ｍＬ）中溶液を密封管中９０℃で２時間加熱した。該反応混合物を濃縮し、残渣をヘキサン／酢酸エチル（４：１）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、１４ａ（９００ｍｇ、収率７１％）を明黄色油として得た。
【０１４２】
工程１４Ｂ：
ｎ−ブチルリチウム（３．６ｍＬ、ペンタン中２．０Ｍ溶液、７．２ミリモル）を−７８℃での化合物１４ａ（８６０ｍｇ、３．６ミリモル）およびトリイソプロピルボレート（１．４ｇ、７．３ミリモル）のＴＨＦ（６ｍＬ）中溶液に滴下した。混合物を室温にまで１時間にわたって加温し、ついで、４Ｎ塩酸（０．５ｍＬ）を加え、混合物を１０分間攪拌した。混合物を２ｘ２５ｍＬのジクロロメタンで抽出し、ついで有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して１４ｂ（２５０ｍｇ）を黄色油として得た。水層を濃縮し、ついで固体の残渣をエタノールで洗浄した。合したエタノール濾液を濃縮し、さらなる１４ｂ（５００ｍｇ）を黄色油として得た。
【０１４３】
実施例１５
【化３４】
2007515474.tif 000059
【０１４４】
工程１５Ａ：
テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（４６ｍｇ、０．０４ミリモル）を５ｅ（１６５ｍｇ、０．５１ミリモル）および１１ａ（８０ｍｇ、０．４０ミリモル）のトルエン／エタノール（２ｍＬ）中溶液に添加した。２．０Ｍ炭酸ナトリウム水溶液（０．６ｍＬ、１．２ミリモル）を添加し、混合物を攪拌し、密封バイアル中、９０℃で３時間加熱した。冷却した混合物を酢酸エチルで抽出し、ついで合した有機抽出液をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をヘキサン／酢酸エチル（２：１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。得られた部分精製の生成物の３分の２を再びシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、１５−１（６ｍｇ）を油状物として得た。
【０１４５】
【化３５】
2007515474.tif 000060
【表１０】
2007515474.tif 000061
【０１４６】
実施例１６
【化３６】
2007515474.tif 000062
【０１４７】
工程１６Ａ：
テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（３０ｍｇ、０．０２６ミリモル）を５ｃ（１６４ｍｇ、０．５０ミリモル）および１０ｃ（２８４ｍｇ、１．０ミリモル）のジオキサン／水（２０ｍＬ）中溶液に添加した。炭酸カリウム（２０７ｍｇ、１．５ミリモル）を添加し、混合物を攪拌し、密封バイアル中、１００℃で１６時間加熱した。冷却した混合物を酢酸エチルで抽出し、ついで合した有機抽出液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を分取性ＨＰＬＣ／ＭＣで精製し、１６−１（８１ｍｇ、収率３１％）をＴＦＡ塩として得た。
【０１４８】
【化３７】
2007515474.tif 000063
【表１１】
2007515474.tif 000064
【０１４９】
実施例１７
【化３８】
2007515474.tif 000065
【０１５０】
工程１７Ａ：
塩化アセチル（２０ｍＬ、２８０ミリモル）を、氷浴中、攪拌しながらメタノール（２００ｍＬ）に添加した。（Ｓ）−２−アミノ酪酸（１０．０ｇ、９７ミリモル）をメタノール溶液に添加し、該混合物を還流温度で６４時間加熱した。冷却した溶液を蒸発乾固させ、ついで残渣をトルエンと一緒に３回共蒸発させ、減圧下で乾燥させ、１７ａ（１４．８ｇ）を白色固体として得た。
【０１５１】
工程１７Ｂ：
１７ａ（９８ｍｇ、０．６５ミリモル）、１Ｆ（１５０ｍｇ、０．４２ミリモル）、トリエチルアミン（０．０８８ｍＬ、０．６３ミリモル）およびアセトニトリル（１．５ｍＬ）の混合物を、マイクロ波反応容器中、１５０℃で３５分間加熱した。混合物を酢酸エチルと水性炭酸水素ナトリウムの間に分配し、ついで有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をヘキサン／酢酸エチル（１：１）で溶出するシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、１７−１（７０ｍｇ）を黄褐色固体として得た。ＨＰＬＣ−ＭＳ（方法２）ｔＲ＝５．０７  ＭＨ＋＝４３５．０。
【０１５２】
実施例１８
【化３９】
2007515474.tif 000066
【０１５３】
工程１８Ａ：
水酸化リチウム水和物（１０ｍｇ、０．２３ミリモル）を１７−１（６５ｍｇ、０．１５ミリモル）、ＴＨＦ（２ｍＬ）および水（１ｍＬ）の混合物に添加した。該混合物を室温で９０分間激しく攪拌し、ついで該混合物を２Ｎ塩酸（０．１２ｍＬ、０．２４ミリモル）で酸性化した。溶媒を蒸発させた。固体の残渣を水で洗浄し、トルエンと一緒に共蒸発させ、ついで減圧下で乾燥させ、１８ａを粘着性固体として得た。
【０１５４】
工程１８Ｂ：
１８ａ（全体量）、ＨＯＢＴ（２７ｍｇ、０．２０ミリモル）、アセトアミドオキシム（１５ｍｇ、０．２１ミリモル）およびジクロロメタン（２ｍＬ）の混合物をＤＩＣ（０．０３０ｍＬ、０．２０ミリモル）と室温で処理した。ＤＭＦ（０．２５ｍＬ）を添加し、該混合物を１０分間攪拌し、ついで乾固するまで濃縮した。酢酸エチルを加え、混合物を炭酸水素ナトリウム飽和水溶液、水およびブラインで連続して洗浄した。酢酸エチル層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮して１８ｂ粗製物を得た。
【０１５５】
工程１８Ｃ：
酢酸ナトリウム（２８ｍｇ、０．３０ミリモル）を１８ｂ粗製物（全体量）のエタノール／水（５：１、１．２ｍＬ）中溶液に添加し、該混合物を密封管中７５℃で１．５時間加熱した。溶媒を蒸発させた。残渣をジクロロメタンと水性炭酸水素ナトリウムの間に分配し、ついで有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をヘキサン／酢酸エチル（２：３）で溶出するシリカゲル上のクロマトグラフィーに付して１８−１（３０ｍｇ、１７−１からの収率４４％）を得た。ＨＰＬＣ−ＭＳ（方法２）ｔＲ＝４．９７  ＭＨ＋＝４５９．０。
【０１５６】
実施例１９
【化４０】
2007515474.tif 000067
【０１５７】
工程１９Ａ：
４−ブロモ−２−フルオロベンジルアルコール（９．７１ｇ、４７ミリモル）、ＣｕＩ（８．９ｇ、４７ミリモル）、Ｎ，Ｎ‘−ジメチルエチレンジアミン（０．４４ｍＬ）、トランス−１，２−ジアミノシクロヘキサン（０．５２ｍＬ）、ピラゾール（４．７ｇ、６９ミリモル）および炭酸カリウム（６４ｇ、４６０ミリモル）のジオキサン（２００ｍＬ）中混合物を１００℃にて１９時間加熱した。冷却した混合物を濾過し、ついで濾液を蒸発させた。残渣を酢酸エチルに溶かし、有機混合物を水およびブラインで洗浄し、ついで硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濃縮を行って１９ａを得、その全体量を次の反応工程に使用した。
【０１５８】
工程１９Ｂ：
塩化チオニル（６．９ｍＬ、９５ミリモル）を１９ａ（上記工程からの全体量）のジクロロメタン（５０ｍＬ）中溶液に滴下し、混合物を２．５時間還流した。冷却した混合物を氷水上に注ぎ、ジクロロメタンで抽出した。合した有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮して１９ｂ（１２ｇ）を褐色固体として得た。
【０１５９】
工程１９Ｃ：
ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）を１９ｂ粗製物（１２ｇ）およびシアン化ナトリウム（２．３ｇ、４７ミリモル）の混合物に添加し、得られた懸濁液を攪拌し、８０℃で４５分間加熱した。ＤＭＳＯを減圧下で除去し、ついで残渣をヘキサン／酢酸エチルで溶出するクロマトグラフィーに付して１９ｃ（２．２ｇ）を得た。
【０１６０】
工程１９Ｄ：
１９ｃ（２．２ｇ、１０ミリモル）の酢酸エチル（５０ｍＬ）中溶液に、金属ナトリウム（４００ｍｇ、１７ミリモル）を少しずつ添加し、該混合物を７０℃で１６時間加熱した。得られた懸濁液を氷水上にデカントし、塩酸で該混合物をｐＨ４に酸性化した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をエタノール／水（６：１、５０ｍＬ）に溶かし、ついでヒドラジン・一臭化水素酸塩（４．５２ｇ、４１ミリモル）を加え、混合物を攪拌し、２２時間還流した。混合物を濃縮し、ついで酢酸エチルに溶かし、水およびブラインで洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて１９ｄ粗製物を得、その全体量を次の反応工程に使用した。
【０１６１】
工程１９Ｅ：
１９ｄ（上記の工程からの全体量）およびアセト酢酸エチル（２．１ｇ、１６ミリモル）のエタノール／酢酸（１：１、１０ｍＬ）中懸濁液を１８時間還流させた。溶媒を蒸発させ、ついで残渣をフリットガラスフィルターに堆積させ、エーテルで洗浄し、１９ｅ（６００ｍｇ）を固体として得た。
【０１６２】
工程１９Ｆ：
１９ｅ（６００ｍｇ、１．８５ミリモル）のジオキサン（２．５ｍＬ）中懸濁液に、トリエチルアミン（０．５２ｍＬ、３．７ミリモル）およびオキシ塩化リン（０．４３ｍＬ、４．６ミリモル）を加え、該混合物を１時間還流した。冷却した混合物を氷水上に注ぎ、ついで酢酸エチルで抽出した。合した有機抽出液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮して１９ｆ（５００ｍｇ）を得、それをさらに精製することなく使用した。
【０１６３】
工程１９Ｇ：
１９ｆ（５７ｍｇ、０．１７ミリモル）および２−（メトキシエチル）エチルアミン（０．０３１ｍＬ、０．２５ミリモル）のアセトニトリル（０．５ｍＬ）中懸濁液を密封管中１６０℃でマイクロ波反応装置にて１６時間加熱した。その混合粗製物を分取性ＨＰＬＣ／ＭＳによる精製に付し、１９−１（１７ｍｇ）をＴＦＡ塩として得た。
【０１６４】
【化４１】
2007515474.tif 000068
【表１２】
2007515474.tif 000069
【０１６５】
実施例２０
【化４２】
2007515474.tif 000070
【０１６６】
工程２０Ａ：
炭酸ナトリウム（５００ｍｇ、４．７ミリモル）を２−メトキシエチルアミン（０．２０ｍＬ、２．３ミリモル）および３−ブロモ−１，１，１−トリフルオロプロパン（０．４０ｍＬ、３．８ミリモル）のＤＭＦ（２ｍＬ）中溶液に添加した。該混合物を室温で４８時間攪拌し、ついで水を加え、該混合物をジクロロメタンで抽出した。合した有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、２０ａを油状物として得た。
【０１６７】
工程２０Ｂ：
２０ａ粗製物の半分を１ｆ（３０ｍｇ）と実施例１の最終工程の操作にしたがって反応させ、分取性ＨＰＬＣ／ＭＳ精製により２０−１（１３ｍｇ）をＴＦＡ塩として得た。
【０１６８】
【化４３】
2007515474.tif 000071
【表１３】
2007515474.tif 000072
【０１６９】
実施例２１
【化４４】
2007515474.tif 000073
【０１７０】
工程２１Ａ：
１ｅ（３０ｍｇ、０．０９ミリモル）のＤＭＦ（２ｍＬ）中溶液に、水素化ナトリウム（約１０ｍｇ、鉱油中６０％分散液、０．２５ミリモル）を添加し、該混合物を室温にて５分間攪拌した。４−フルオロベンジルブロミド（約１００ｍｇ、０．３０ミリモル）を添加し、該混合物を密封バイアル中室温にて２時間攪拌した。混合物を分取性ＨＰＬＣ／ＭＳを用いて直接的に精製し、化合物２１−１（８ｍｇ）をＴＦＡ塩として得た。ＨＰＬＣ−ＭＳ（方法２）ｔＲ＝１．４９  ＭＨ＋＝４４４．１。
【０１７１】
実施例２２
【化４５】
2007515474.tif 000074
【０１７２】
工程２２Ａ：
テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１５ｍｇ、０．０１３ミリモル）を４ｈ．１（５０ｍｇ、０．１２ミリモル）およびフラン−３−ボロン酸（２３ｍｇ、０．２１ミリモル）のジオキサン（１ｍＬ）中溶液に添加した。炭酸カリウム（４０ｍｇ、０．２９ミリモル）の水（０．２０ｍＬ）中溶液を添加し、該混合物を攪拌し、密封バイアル中、１００℃で１６時間加熱した。冷却混合物をメタノールで希釈し、濾過し、分取性ＨＰＬＣ／ＭＳで直接的に精製し、２２−１（２２ｍｇ、收率３４％）をＴＦＡ塩として得た。
【０１７３】
【化４６】
2007515474.tif 000075
【表１４】
2007515474.tif 000076
【０１７４】
実施例２３
【化４７】
2007515474.tif 000077
【０１７５】
工程２３Ａ：
ｎ−ブチルリチウム（０．８０ｍＬ、ヘキサン中２．５Ｍ溶液、２．０ミリモル）を−７８℃でのオキサゾール（０．１３８ｍＬ、２．０ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）中溶液に滴下した。４５分後、塩化亜鉛（８ｍＬ、ＴＨＦ中０．５Ｍ溶液、４．０ミリモル）を添加し、該混合物を０℃に加温し、この温度で１時間攪拌した。４ｈ．２（９１ｍｇ、０．２０ミリモル）のＴＨＦ（２．５ｍＬ）中溶液を、つづいてテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（４６ｍｇ、０．０４ミリモル）を添加した。混合物を１．５時間還流させ、ついでジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（２５ｍｇ、０．０３６ミリモル）を添加し、混合物をさらに１．５時間還流させた。炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、該混合物を酢酸エチルで抽出した。合した酢酸エチル抽出液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮し、ついで溶出液としてヘキサン／酢酸エチルを用いるシリカゲルクロマトグラフィーにより部分的に精製した。その部分的に精製された生成物をメタノール溶液としてカチオン交換カラム（５００ｍｇ  Ｖａｒｉａｎ  ＳＣＸ、Ｈ＋形態、ジクロロメタンおよびメタノールで予め洗浄されている）に充填した。不純物をメタノールで溶出し、つづいて該生成物をメタノール中１Ｍアンモニアで溶出し、２３−１（１８ｍｇ、收率２１％）を淡黄色固体として得た。ＨＰＬＣ−ＭＳ（方法２）ｔＲ＝４．９２  ＭＨ＋＝４３４．０。
【０１７６】
実施例２４
本発明の化合物は、一般に、Grigoriadisら（Mol. Pharmacol. 第５０巻、６７９−６８６頁、１９９６）およびHoareら（Mol. Pharmacol 第６３巻、７５１−７６５頁、２００３）に記載されるような、標準的放射性リガンド結合アッセイによりＣＲＦ受容体との結合活性について評価されうる。放射性標識されたＣＲＦリガンドを利用することにより該アッセイは使用され、本発明の化合物の結合活性をＣＲＦ受容体サブタイプで評価しうる。
【０１７７】
簡単に言えば、該結合アッセイは放射性標識されたＣＲＦリガンドをＣＲＦ受容体から移動させることを含む。より詳しくは、該結合アッセイは、ヒトＣＲＦ受容体で安定的にトランスフェクトされた細胞から由来の１−１０μｇの細胞膜を用いて、９６−ウェルのアッセイプレートで行われる。各ウェルは、目的とする化合物または対照となるリガンド（例えば、サウバジン（sauvagine）、ウロコチン（urocotin）ＩまたはＣＲＦ）を含有する約０．０５ｍｌのアッセイバッファー（例えば、ダルベッコ・リン酸緩衝セイライン、１０ｍＭ  塩化マグネシウム、２ｍＭ  ＥＤＴＡ）、０．０５ｍｌの［１２５Ｉ］チロシン−サウバジン（最終濃度約１５０ｐＭまたはScatchard分析により測定した場合のおよそのＫＤ）、および０．１ｍｌのＣＲＦ受容体を含有する細胞膜懸濁液を受ける。該混合物を２２℃で２時間インキュベートし、つづいてガラスファイバーフィルターでの急速濾過により結合およびフリー放射性リガンドを分離させる。３回洗浄した後、フィルターを乾燥させ、放射性活性（１２５Ｉからのオージェ電子）をシンチレーションカウンターを用いて計数する。すべての放射性リガンド結合データは非線形最小二乗曲線適合プログラムプリズム（GraphPad Software Inc）またはＸＬfit（ID Business Solutions Ltd）を用いて分析されうる。
【０１７８】
実施例２５
ＣＲＦ刺激のアデニレートシクラーゼ活性
本発明の化合物はまた、種々の機能試験により評価されてもよい。例えば、本発明の化合物はＣＲＦ刺激のアデニレートシクラーゼ活性についてスクリーニングされうる。ＣＲＦ刺激のアデニレートシクラーゼ活性を測定するためのアッセイは、全細胞調製に対するアッセイに適合するように修飾を加えて、一般に、Battagliaら（Synapse １：５７２，１９８７）に記載されているように実施されてもよい。
【０１７９】
さらに詳しくは、標準的なアッセイ混合物は、０．１ｍｌの最終容量にて、以下の：２ｍＭ  Ｌ−グルタミン、２０ｍＭ  ＨＲＰＥＳ、および１ｍＭ  ＩＭＢＸ／ＤＭＥＭバッファーを含有してもよい。刺激実験において、特定の受容体サブタイプの薬理学的順位のプロフィールを確立するために、ＣＲＦ受容体をトランスフェクトさせた全細胞を９６−ウェルプレートに置き、種々の濃度のＣＲＦ関連の、および非関連のペプチドと一緒に３７℃で３０分間インキュベートする。インキュベーション後に、標準的な市販のキット、例えばApplied Biosystems製のｃＡＭＰ−Ｓｃｒｅｅｎ（登録商標）を用いてサンプル中のｃＡＭＰを測定する。化合物の機能を評価するために、細胞と、ｃＡＭＰ産生の５０％刺激を惹起する単一濃度のＣＲＦまたは関連ペプチドを種々の濃度の競合化合物および上記したように測定されたｃＡＭＰと一緒に３７℃で３０分間インキュベートする。
【０１８０】
本発明の具体的な実施形態は説明のために本明細書中に記載されているが、本発明の精神および範囲を逸脱することなく、種々の修飾がなされてもよい。したがって、本発明は添付した特許請求の範囲により限定される場合を除き、限定されるものではない。
【国際調査報告】
2007515474.tif 000080
2007515474.tif 000081
2007515474.tif 000082
2007515474.tif 000083
2007515474.tif 000084
2007515474.tif 000085