(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）：2007511571.tif 000023［式中、Ｒ１およびＲ２の一方はＨであり、他方は−ＮＨＣＯＮＨＲ４であり、  ここに、Ｒ４は、フェニルまたはナフチル基（−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ１−６ハロアルキル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、ハロゲン、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、ＯＨ、ＮＯ２から独立して選択される１個以上の置換基により置換されていてもよい）、Ｃ３−７シクロアルキルであるか、あるいはＲ４は、それが結合しているＮＨと一緒になって、モルホリノ基を形成し；  Ｒ３はＨまたはＮＨＲ５であり、ここに、Ｒ５はＨ、−キノリニルまたは−イソキノリニル、−（ＣＯＮＨ）ｐフェニル（ここに、ｐは０または１であり、フェニルは、ハロゲン、−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ１−６ハロアルキル、−モルホリノ、−ＳＯ２ＮＨ２、ベンゾチアゾール（メチルにより置換されている）から独立して選択される１個以上の置換基により置換されていてもよい）である］で示される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体に関する。
2007511571.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2007511571.tif 000019
［式中、Ｒ１およびＲ２の一方はＨであり、他方は−ＮＨＣＯＮＨＲ４であり、
ここに、Ｒ４は、フェニルまたはナフチル基（−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ１−６ハロアルキル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、ハロゲン、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、ＯＨ、ＮＯ２から独立して選択される１個以上の置換基により置換されていてもよい）、Ｃ３−７シクロアルキルであるか、あるいはＲ４は、それが結合しているＮＨと一緒になって、モルホリノ基を形成し；
Ｒ３はＨまたはＮＨＲ５であり、ここに、Ｒ５はＨ、−キノリニルまたは−イソキノリニル、−（ＣＯＮＨ）ｐフェニル（ここに、ｐは０または１であり、フェニルは、ハロゲン、−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ１−６ハロアルキル、−モルホリノ、−ＳＯ２ＮＨ２、ベンゾチアゾール（メチルにより置換されている）から独立して選択される１個以上の置換基により置換されていてもよい）である］
で示される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体。
【請求項２】
Ｒ４が、フェニル基（−Ｃ１−６ハロアルキル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、ハロゲンから独立して選択される１個以上の置換基により置換されていてもよい）またはＣ３−７シクロアルキルである、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ３がＨまたは−ＮＨＲ５であり、ここに、Ｒ５がＨ、キノリニル、−（ＣＯＮＨ）ｐフェニル（式中、ｐは０または１であり、フェニルは、ハロゲン、−Ｃ１−６ハロアルキル−モルホリノ、−ＳＯ２ＮＨ２、ベンゾチアゾール、（メチルにより置換されている）から独立して選択される１個以上の置換基により置換されていてもよい）である、請求項１または２記載の化合物。
【請求項４】
式（１ａ）：
【化２】
2007511571.tif 000020
［式中、Ｒ６およびＲ７の一方はＨであり、他方は−ＮＨＣＯＮＨＲ９であり；
Ｒ９は、フェニル基（−Ｃ１−６ハロアルキル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、ハロゲンから独立して選択される１個以上の置換基により置換されていてもよい）またはＣ３−７シクロアルキルであり；
Ｒ８は、ＨまたはＮＨＲ１０であり；
Ｒ１０は、Ｈキノリニル、−（ＣＯＮＨ）ｐフェニル（式中、ｐは０または１であり、フェニルは、ハロゲン、−Ｃ１−６ハロアルキル、−モルホリノ、−ＳＯ２ＮＨ２、ベンゾチアゾール（メチルにより置換されていてもよい）から独立して選択される１個以上の置換基により置換されていてもよい）である、請求項１〜３いずれか１項記載の化合物。
【請求項５】
ＮＨＣＯＮＨＲ９が、
【化３】
2007511571.tif 000021
である、請求項４記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１０がＨ、
【化４】
2007511571.tif 000022
である、請求項４または５記載の化合物。
【請求項７】
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（３−イソキノリン−５−イルフェニル）尿素；
１−シクロヘキシル−３−（３−イソキノリン−５−イルフェニル）尿素；
１−［３−（１−アミノ−イソキノリン−５−イル）−フェニル］−３−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−尿素；
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（５−｛３−［３−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−ウレイド］−フェニル｝−イソキノリン−１−イル）−尿素；
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−｛３−［１−（キノリン−６−イルアミノ）−イソキノリン−５−イル］−フェニル｝−尿素；
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（４−｛１−［４−（６−メチル−ベンゾチアゾール−２−イル）−フェニルアミノ］−イソキノリン−５−イル｝−フェニル）−尿素；
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（３−｛１−［４−（６−メチル−ベンゾチアゾール−２−イル）−フェニルアミノ］−イソキノリン−５−イル｝−フェニル）−尿素；
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（４−イソキノリン−５−イルフェニル）尿素；
１−インダン−５−イル−３−（３−イソキノリン−５−イル−フェニル）−尿素；
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−｛３−［１−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−イソキノリン−５−イル］−フェニル｝−尿素；
３−｛５−［３−（３−シクロヘキシル−ウレイド）−フェニル］−イソキノリン−１−イルアミノ｝−ベンゼンスルホンアミド；
からなる群から選択される、請求項１〜６いずれか１項記載の化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体。
【請求項８】
治療的に有効な量の請求項１〜７いずれか１項記載の化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体および１種以上の医薬上許容される担体、希釈剤および賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項９】
さらに成長因子受容体機能を阻害する薬剤を含む、請求項８記載の医薬組成物。
【請求項１０】
治療において用いるための請求項１〜７いずれか１項記載の化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体。
【請求項１１】
哺乳動物における少なくとも１つの不適切なＴＩＥ−２、ＥｐｈＢ４およびＶＥＧＦＲ−２活性により介在される障害の治療方法であって、該哺乳動物に請求項１〜７いずれか１項記載の化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体を投与することを含む方法。
【請求項１２】
少なくとも１つの不適切なＴＩＥ−２、ＥｐｈＢ４およびＶＥＧＦＲ−２活性により介在される障害の治療に用いるための医薬の製造における、請求項１〜７いずれか１項記載の化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体の使用。
【請求項１３】
哺乳動物における少なくとも１つの不適切なＴＩＥ−２、ＥｐｈＢ４およびＶＥＧＦＲ−２活性により介在される障害の治療方法であって、該哺乳動物に（ｉ）請求項１〜７いずれか１項記載の化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体および（ｉｉ）成長因子受容体機能を阻害する薬剤を投与することを含む方法。
【請求項１４】
少なくとも１つの不適切なＴＩＥ−２、ＥｐｈＢ４およびＶＥＧＦＲ２活性により介在される障害の治療用の医薬の製造における、請求項１〜７いずれか１項記載の化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体および長因子受容体機能を阻害する薬剤の使用。
【請求項１５】
哺乳動物における不適切な血管新生により特徴付けられる障害の治療方法であって、該哺乳動物に請求項１〜７いずれか１項記載の化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体を投与することを含む方法。
【請求項１６】
不適切な血管新生の治療用の医薬の製造における、請求項１〜７いずれか１項記載の化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体の使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な記載】
【０００１】
発明の背景
本発明は、イソキノリン誘導体、それを含有する組成物および医薬、ならびにその製造方法およびかかる化合物、組成物および医薬の使用に関する。かかるイソキノリン誘導体は、不適切または病的な血管新生に付随する疾患の治療に対して治療的に有効である可能性がある。
【０００２】
酵素の重要で大きなファミリーとして、蛋白質キナーゼ酵素ファミリーがある。現在、約５００の異なる公知の蛋白質キナーゼが存在する。蛋白質キナーゼは、ＡＴＰ−Ｍｇ２＋複合体のγ−ホスフェートを該アミノ酸側鎖への移動により、種々の蛋白質アミノ酸側鎖のリン酸化を触媒する働きを有する。酵素は、細胞内において多くのシグナリングプロセスを制御し、したがって、蛋白質のセリン、トレオニンおよびチロシン残基のヒドロキシル基の可逆的リン酸化により、細胞機能、成長、分化および破壊（アポトーシス）を支配する。研究は、蛋白質キナーゼが、シグナル伝達、転写制御、細胞活動および細胞分化を含む、多くの細胞機能の主要なレギュレーターであることを示している。また、いくつかの腫瘍遺伝子は、蛋白質キナーゼをコードすることが示されており、キナーゼが腫瘍遺伝子の役割を果たすことを示唆している。これらのプロセスは、個々のキナーゼが、それ自体１つ以上のキナーゼにより制御されるだろう、複合相互経路により、高度に制御される。結果として、異常または不適切な蛋白質キナーゼ活性は、かかる異常なキナーゼ活性に付随する病態の増加に寄与しうる。これらの病的関連性、多様性および偏在性のために、蛋白質キナーゼは、生化学および医薬研究における酵素の最も重要かつ広く研究されるファミリーの一つとなっている。
【０００３】
酵素の蛋白質キナーゼファミリーは、典型的には、２つの大きなサブファミリー：蛋白質チロシンキナーゼ（ＰＴＫ）およびプロテインセリン／スレオニンキナーゼに、それらがリン酸化するアミノ酸残基に基づいて分類される。セリン／スレオニンキナーゼ（ＰＳＴＫ）は、環状ＡＭＰ−および環状ＧＭＰ−依存性蛋白質キナーゼ、カルシウム−およびリン脂質−依存性蛋白質キナーゼ、カルシウム−およびカルモデュリン−依存性蛋白質キナーゼ、カゼインキナーゼ、細胞分裂サイクル蛋白質キナーゼ等を含む。これらのキナーゼは、通常、細胞質に存在するか、あるいは、蛋白質を固定することにより細胞の顆粒画分に結合していると考えられる。多くの病理学、例えば関節リウマチ、乾癬、敗血性ショック、骨喪失、多くの癌および他の増殖性障害において、異常な蛋白質セリン／スレオニンキナーゼ活性は関与しているか、あるいはその疑いがある。したがって、セリン／スレオニンキナーゼおよびそれらの一部であるシグナル伝達経路は、薬剤の設計において重要な標的である。チロシンキナーゼリンは、チロシン残基をリン酸化する。チロシンキナーゼは、細胞レギュレーションにおいて同様の重要な役割を果たす。これらのキナーゼは、表皮性成長因子受容体、インスリン受容体、血小板由来成長因子受容体等を含む、成長因子およびホルモンのような分子に関する、いくつかの受容体を含む。研究は、多くのチロシンキナーゼが、細胞の外側に位置するそれらの受容体ドメインを、および内部にそれらのキナーゼドメインを有する、膜貫通蛋白質であることを示している。また、多くの研究が、チロシンキナーゼのモジュレーターを同定するために同様に行われている
【０００４】
血管新生のプロセスは、以前から存在する血管系からの新血管、一般的には毛細管の発達である。血管新生は、（ｉ）内皮細胞の活性化；（ｉｉ）血管浸透性の増加；（ｉｉｉ）仮のフィブリンゲル細胞外マトリックスの形成を誘発する、一連の基底膜の分解および血漿成分の管外遊出；（ｉｖ）内皮細胞の増殖および移動；（ｖ）機能的な毛細管を形成する、移動した内皮細胞の再組織化；（ｖｉ）毛細管ループ形成；および（ｖｉｉ）基底膜の蓄積および新しく形成した血管の周囲の細胞の回復；を含むものとして定義される。正常な血管新生は、胚発生から成熟までの組織成長の間に活性化され、ついで、成熟期間の相対的な静止期に入る。また、正常な血管新生は、創傷治癒の間、および女性の生殖サイクルのある段階において活性化する。不適切な血管新生は、種々の網膜症；虚血性疾患；アテローム性動脈硬化症；慢性炎症性障害；および癌を含む、多くの病態に付随する。病態における血管新生の役割は、例えば、Fan et al, Trends in Pharmacol Sci. 16:54-66； Shawver et al, DDT Vol. 2, No. 2 February 1997； Folkmann, 1995, Nature Medicine 1:27-31において議論されている。
【０００５】
癌において、固体腫瘍の成長は、血管新生進行として示される。また、白血病の進行、ならびに悪性腹水および胸水に付随する液体の蓄積も、プロ血管新生因子が関連する。（Folkmann, J., J. Nat'l. Cancer Inst., 1990, 82, 4-6を参照）。その結果、プロ血管新生経路の標的化は、満たされていない大きな医薬要求において新しい治療を提供するために、広く進められている戦略である。血管新生および固体腫瘍の脈管形成に関連するチロシンキナーゼの役割は、興味を引くものである。
【０００６】
最近まで、この分野での最大の興味は、成長因子、例えば血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）および血管内皮成長因子受容体（複数でも可）（ＶＥＧＦＲ）と称されるその受容体に焦点がむけられていた。固体腫瘍の脈管形成、造血性癌の進行および血管透過性の修飾におけるＶＥＧＦおよびＶＥＧＦＲの役割は、化学界において大きな興味を引いている。ポリペプチドであるＶＥＧＦは、インビトロで内皮細胞に関して分裂性であり、インビボで血管新生応答を刺激する。また、ＶＥＧＦは、不適切な血管新生と関係がある（Pinedo, H.M. et al The Oncologist, Vol.5, No. 90001, 1-2, April 2000）。ＶＥＧＦＲ（複数でも可）は、蛋白質チロシンキナーゼ（ＰＴＫ）である。ＰＴＫは、細胞成長の調節および分化に関連する蛋白質において、特定のチロシル残基のリン酸化を触媒する（A.F. Wilks, Progress in Growth Factor Research, 1990, 2, 97-111； S.A. Courtneidge, Dev. Supp.l, 1993, 57-64; J.A. Cooper, Semin. Cell Biol., 1994, 5(6), 377-387; R.F. Paulson, Semin. Immunol., 1995, 7(4), 267-277； A.C. Chan, Curr. Opin. Immunol., 1996, 8(3), 394-401）。
【０００７】
ＶＥＧＦに関する３種のＰＴＫ受容体：ＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）；ＶＥＧＦＲ−２（Ｆｌｋ−１またはＫＤＲ）およびＶＥＧＦＲ−３（Ｆｌｔ−４）が同定されている。これらの受容体は、血管新生に関与し、シグナル伝達に関与する（Mustonen, T. et al J. Cell Biol. 1995:129:895-898）。特にＶＥＧＦＲ−２に関心があり、これは、内皮細胞において主に発現する膜貫通受容体ＰＴＫである。ＶＥＧＦＲ−２のＶＥＧＦによる活性化は、腫瘍血管新生を開始する、シグナル伝達経路の重大な工程である。ＶＥＧＦ発現は、腫瘍細胞に対して構成的であり、また、ある種の刺激に関する応答に対してアップレギュレートされうる。刺激の一例は低酸素であり、ＶＥＧＦ発現は、腫瘍および関連宿主組織の両方でアップレギュレートされる。ＶＥＧＦリガンドは、その細胞外ＶＥＧＦ結合部位と結合することにより、ＶＥＧＦＲ−２を活性化する。これは、ＶＥＧＦＲの受容体二量化および細胞内ＶＥＧＦＲ−２のキナーゼドメインでチロシン残基の自動リン酸化を誘発する。キナーゼドメインは、ＡＴＰからチロシン残基にホスフェートを移動させるのに作用し、かくして、最終的に血管新生の開始を誘発する、ＶＥＧＦＲ−２のダウンストリームのシグナリング蛋白質に対して結合部位を提供する（McMahon, G., The Oncologist, Vol. 5, No. 90001, 3-10, April 2000）。
【０００８】
内皮−特異的受容体チロシンキナーゼＴＩＥ−２に関するリガンドである、アンジオポイエチン１（Ａｎｇ１）は、新規の血管新生因子（Davis et al, Cell, 1996, 87:1161-1169; Partanen et al, Mol. Cell Biol, 12:1698-1707 (1992)；米国特許第５，５２１，０７３号；第５，８７９，６７２号；第５，８７７，０２０号；および第６，０３０，８３１号）である。頭文字ＴＩＥは、「チロシンキナーゼ含有ＩｇおよびＥＧＦホモロジードメイン」を意味する。ＴＩＥは、血管内皮細胞および早期の造血細胞において排他的に発現される、受容体チロシンキナーゼの群を同定するのに用いられる。典型的には、ＴＩＥ受容体キナーゼは、細胞外折り畳み部位を構成し、鎖内ジスルフィド結合により安定化される、ＥＧＦ−様ドメインおよびイムノグロブリン（ＩＧ）様ドメインの存在により特徴付けられる（Partanen et al Curr. Topics Microbiol. Immunol., 1999, 237:159-172）。血管発達の早期に機能するＶＥＧＦとは異なって、Ａｎｇ１およびその受容体ＴＩＥ−２は、血管発達の後期、すなわち血管再構築（再構築は、血管内腔の形成を意味する）および成熟の期間に機能する（Yancopoulos et al, Cell, 1998, 93:661-664;  Peters, K.G., Circ. Res., 1998, 83(3):342-3; Suri et al, Cell 87, 1171-1180 (1996)）。
【０００９】
したがって、ＴＩＥ−２の阻害は、血管新生により開始される新脈管構造の再構築および成熟を中断させ、それにより、血管新生プロセスを中断させる働きをすることが期待される。さらに、ＶＥＧＦＲ−２のキナーゼドメイン結合部位での阻害は、チロシン残基のリン酸化反応を遮断し、血管新生の開始を阻止するように作用する。恐らくは、ＴＩＥ−２および／またはＶＥＧＦＲ−２の阻害は、腫瘍血管新生を妨害し、腫瘍成長を遅延させるか、または絶つように作用する。したがって、癌または他の不適切な血管新生に付随する障害の治療を提供することができる。
【００１０】
ＥｐｈＢ４は、本来、Bennett BD et alにより、ＨＴＫとしてJ Biol Chem（1994 May 13;269(19):14211-8）に記載されている、他の受容体チロシンキナーゼである。エフリン−Ｂ２およびＥｐｈＢ４ノックアウトマウスにおける血管障害の最近の研究は、エフリン−Ｂ２リガンドおよびその同起源ＥｐｈＢ４受容体間の相互作用は、動脈−静脈ドメインの境界を定義することを強く示唆している。エフリン−Ｂ２リガンドは、いくつかの他の非血管組織、例えば血管内皮細胞に隣接する間葉細胞において広く発現するが、ＥｐｈＢ４受容体は、血管内皮細胞に独特に局在する。ＥｐｈＢ４受容体は、膜貫通蛋白質でもあるそれらの各々のエフリン−Ｂ２リガンドにより活性化されるだけでなく、ＥｐｈＢ４受容体は、また、そのエフリン−Ｂ２リガンドを活性化する。ＥｐｈＢ４対立遺伝子に対してヘテロ接合性の胚は、野生型と比較して明らかな異常を示さない。しかしながら、ホモ接合性の胚は、内皮細胞成長遅延からの心血管異常を示し、心臓成長を妨げ、高い胚の死亡率を示す。これらの結果は、ＥｐｈＢ４シグナリング経路が、脈管形成、血管新生および血管成熟において不可欠な役割を担い、また、これらの事象が、癌およびアテローム性動脈硬化症に密接に結びついていることを明らかに示している。
【００１１】
本発明の化合物は、上記した１種以上の、特にＴｉｅ−２、ＶＥＧＦＲ−２およびＥｐｈＢ４蛋白質からなる群から選択されるチロシンキナーゼに対して活性を有し、不適切な血管新生、脈管形成、血管成熟または細胞運動を阻害または防止することにより癌またはまたはアテローム性動脈硬化症に関与する。
【００１２】
発明の概要
本発明の一の態様において、式（Ｉ）：
【化１】
2007511571.tif 000003
［式中、Ｒ１およびＲ２の一方はＨであり、他方は−ＮＨＣＯＮＨＲ４であり、
ここに、Ｒ４は、フェニルまたはナフチル基（−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ１−６ハロアルキル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、ハロゲン、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、ＯＨ、ＮＯ２から独立して選択される１個以上の置換基により置換されていてもよい）、Ｃ３−７シクロアルキルであるか、あるいはＲ４は、それが結合しているＮＨと一緒になって、モルホリノ基を形成し；
Ｒ３はＨまたはＮＨＲ５であり、ここに、Ｒ５はＨ、−キノリニルまたは−イソキノリニル、−（ＣＯＮＨ）ｐフェニル（ここに、ｐは０または１であり、フェニルは、ハロゲン、−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ１−６ハロアルキル、−モルホリノ、−ＳＯ２ＮＨ２、ベンゾチアゾール（メチルにより置換されていてもよい）から独立して選択される１個以上の置換基により置換されていてもよい）である］
で示される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体を提供する。
【００１３】
本発明の第２の態様において、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体および１種以上の医薬上許容される担体、希釈剤および賦形剤を含む、医薬組成物を提供する。
【００１４】
本発明の第３の態様において、治療において用いるための、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体を提供する。
【００１５】
本発明の第４の態様において、哺乳動物の障害の方法であって、該障害が、少なくとも１つの不適切なＴＩＥ−２、ＥｐｈＢ４およびＶＥＧＦＲ−２活性により介在され、該哺乳動物に、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体を投与することを含む方法を提供する。
【００１６】
本発明の第５の態様において、少なくとも１つの不適切なＴＩＥ−２、ＥｐｈＢ４およびＶＥＧＦＲ−２活性により介在される障害の治療において用いるための医薬の製造における、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体の使用を提供する。
【００１７】
本発明の第６の態様において、哺乳動物の疾患の治療方法であって、該障害が、少なくとも１つの不適切なＴＩＥ−２、ＥｐｈＢ４およびＶＥＧＦＲ−２活性により介在され、該哺乳動物に、（ｉ）式（Ｉ）で示される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体および（ｉｉ）成長因子受容体機能を阻害する薬剤を投与することを含む方法を提供する。
【００１８】
本発明の第７の態様において、少なくとも１つの不適切なＴＩＥ−２、ＥｐｈＢ４およびＶＥＧＦＲ−２活性により介在される障害の治療用の医薬の製造における、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体および成長因子受容体機能を阻害する薬剤の使用を提供する。
【００１９】
本発明の第８の態様において、哺乳動物の障害の治療方法であって、該障害が、不適切な血管新生により特徴付けられ、該哺乳動物に式（Ｉ）で示される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体を投与することを含む方法を提供する。
【００２０】
本発明の第９の態様において、不適切な血管新生の治療用の医薬の製造における、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体の使用を提供する。
【００２１】
発明の詳細な記載
本明細書で用いられる場合、「有効量」なる用語は、例えば研究者または臨床医により求められる、組織、系、動物またはヒトの生物学的または医学的応答を誘発する薬剤または医薬の量である。さらに、「治療的に有効な量」なる用語は、かかる量を投与されていない対応する対象と比較して、疾患、障害または副作用の良好な治療、治癒、予防または軽減効果を生じさせるか、あるいは、疾患または障害の進行速度を軽減させるいずれもの量を意味する。また、この用語は、その範囲内に、正常な生理学的機能を増強するのに有効な量を含む。
【００２２】
本明細書で用いられる場合、「アルキル」なる用語は、特定の数の炭素原子を有する、直鎖または分枝鎖炭化水素ラジカルを意味する。「アルキル」の例としては、本明細書で用いられる場合、限定するものではないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル等が挙げられる。本明細書で用いられる場合、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」なる用語は、少なくとも１つ、最大６個の炭素原子を含有する、上記と同意義のアルキル基を意味する。本発明において有用な、分枝鎖または直鎖「Ｃ１−Ｃ６アルキル」基の例としては、限定するものではないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、イソブチル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチルおよびイソペンチルが挙げられる。
【００２３】
本明細書で用いられる場合、「ハロゲン」なる用語は、フッ素（Ｆ）、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）、またはヨウ素（Ｉ）を意味し、「ハロ」なる用語は、ハロゲンラジカル、フルオロ（−Ｆ）、クロロ（−Ｃｌ）、ブロモ（−Ｂｒ）およびヨウド（−Ｉ）を意味する。
【００２４】
本明細書で用いられる場合、「Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル」なる用語は、少なくとも１つの上記と同意義のハロ基により置換された、少なくとも１つ、最大６個の炭素原子を含有する、上記と同意義のアルキル基を意味する。本発明で有用な分枝鎖または直鎖「Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル」基の例としては、限定するものではないが、１個以上のハロ、例えばフルオロ、クロロ、ブロモおよびヨウドにより独立して置換されている、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチルおよびｎ−ブチルが挙げられる。
【００２５】
本明細書で用いられる場合、「Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル」なる用語は、３〜７個の炭素原子を有する、非芳香族炭化水素環を意味する。体表的な「Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル」基は、限定するものではないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルが挙げられる。
【００２６】
本明細書で用いられる場合、「アルコキシ」なる用語は、Ｒａが上記と同意義であるアルキルであるＲａＯ−を意味し、「Ｃ１−Ｃ６アルコキシ」なる用語は、アルキル部が少なくとも１つ、最大で６個の炭素原子を含有する、上記と同意義のアルコキシ基を意味する。本発明において有用な代表的なＣ１−Ｃ６アルコキシ基は、限定するものではないが、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシおよびｔ−ブトキシを含む。
【００２７】
本明細書で用いられる場合、「ハロアルコキシ」なる用語は、Ｒａが上記と同意義のハロアルキルである、ＲａＯ−基を意味し、「Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ」なる用語は、ハロアルキル部が少なくとも１つ、最大で６個の炭素原子を含有する、上記と同意義のハロアルコキシ基を意味する。本発明において有用なＣ１−Ｃ６ハロアルコキシ基は、限定するものではないが、トリフルオロメトキシを含む。
【００２８】
本明細書で用いられる場合、「所望により」なる用語は、その後に記載される事象が、生じても生じなくてもよいことを意味し、生じたおよび生じなかった両方の事象を含む。
【００２９】
本明細書で用いられる場合、「生理学的に機能的な誘導体」なる用語は、哺乳動物に投与した場合に、（直接的または間接的に）本発明化合物またはその活性代謝物を提供することができる、本発明の化合物のいずれもの医薬上許容される誘導体、エステルまたはアミドを意味する。かかる誘導体は、過度の実験なく、Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 5th Edition, Vol 1: Principles and Practice（生理学的に機能的な誘導体を教示する範囲を出典明示することにより本明細書に組み入れる）の示唆を参照して、当業者には明らかである。
【００３０】
本明細書で用いられる場合、「溶媒和物」なる用語は、溶質（本発明において、式（Ｉ）で示される化合物たはその塩もしくは生理学的に機能的な誘導体）および溶媒により形成される種々の化学量論的複合体を意味する。本発明の目的に対するかかる溶媒は、溶質の生物学的活性を妨害しない。適当な溶媒の例としては、限定するものではないが、水、メタノール、エタノールおよび酢酸を含む。好ましくは、用いられる溶媒は、医薬上許容される溶媒である。適当な医薬上許容される溶媒の例としては、限定するものではないが、水、エタノールおよび酢酸が挙げられる。最も好ましくは、用いられる溶媒は水である。
【００３１】
本明細書で用いられる場合、「置換された」なる用語は、指定の置換基による置換を意味し、特記しないかぎり、多重度の置換も可能である。
【００３２】
本明細書で用いられる場合、「本発明の化合物」なる用語は、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩、溶媒和物または生理学的に機能的な誘導体を含む。
【００３３】
一の具体例において、Ｒ４は、フェニル基（−Ｃ１−６ハロアルキル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、ハロゲンから独立して選択される１個以上の置換基により置換されていてもよい）またはＣ３−７シクロアルキルを意味する。
【００３４】
一の具体例において、Ｒ３はＨまたはＮＨＲ５であり、ここに、Ｒ５は、Ｈ、−キノリニル、−（ＣＯＮＨ）ｐフェニル（式中、ｐは０または１であり、フェニルは、ハロゲン、−Ｃ１−６ハロアルキル、−モルホリノ、−ＳＯ２ＮＨ２、ベンゾチアゾール（メチルにより置換されている）から独立して選択される１個以上の置換基により置換されていてもよい）である。
【００３５】
好ましくは、化合物は、式（１ａ）：
【化２】
2007511571.tif 000004
［式中：
Ｒ６およびＲ７の一方はＨであり、他方は−ＮＨＣＯＮＨＲ９であり、ここに、Ｒ９は、フェニル基（各々、−Ｃ１−６ハロアルキル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、ハロゲンから独立して選択される１個以上の置換基により置換されていてもよい）またはＣ３−７シクロアルキルであり；
Ｒ８は、ＨまたはＮＨＲ１０であり、ここに、Ｒ１０は、Ｈ、−キノリニル、−（ＣＯＮＨ）ｐフェニル（ここに、ｐは０または１であり、フェニルは、ハロゲン、−Ｃ１−６ハロアルキル、−モルホリノ、−ＳＯ２ＮＨ２、メチルにより置換されているベンゾチアゾールから独立して選択される１個以上の置換基により置換されていてもよい）である］
で示される化合物である。
【００３６】
好ましくは、Ｒ９は、フルオロおよびトリフルオロメチルにより二置換されたフェニルである。
【００３７】
より好ましくは、ＮＨＣＯＮＨＲ９は：
【化３】
2007511571.tif 000005
である。
【００３８】
好ましくは、Ｒ１０は、Ｈ、
【化４】
2007511571.tif 000006
である。
【００３９】
本発明の化合物の特定の例としては：
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（３−イソキノリン−５−イルフェニル）尿素；
１−シクロヘキシル−３−（３−イソキノリン−５−イルフェニル）尿素；
１−［３−（１−アミノ−イソキノリン−５−イル）−フェニル］−３−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−尿素；
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（５−｛３−［３−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−ウレイド］−フェニル｝−イソキノリン−１−イル）−尿素；
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−｛３−［１−（キノリン−６−イルアミノ）−イソキノリン−５−イル］−フェニル｝−尿素；
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（４−｛１−［４−（６−メチル−ベンゾチアゾール−２−イル）−フェニルアミノ］−イソキノリン−５−イル｝−フェニル）−尿素；
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（３−｛１−［４−（６−メチル−ベンゾチアゾール−２−イル）−フェニルアミノ］−イソキノリン−５−イル｝−フェニル）−尿素；
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（４−イソキノリン−５−イルフェニル）尿素；
１−インダン−５−イル−３−（３−イソキノリン−５−イル−フェニル）−尿素；
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−｛３−［１−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−イソキノリン−５−イル］−フェニル｝−尿素；
３−｛５−［３−（３−シクロヘキシル−ウレイド）−フェニル］−イソキノリン−１−イルアミノ｝−ベンゼンスルホンアミド；
が挙げられる。
【００４０】
典型的には、本発明の塩は医薬上許容される塩である。「医薬上許容される塩」なる用語に含まれる塩は、本発明の化合物の無毒性の塩である。本発明の化合物の塩は、式（Ｉ）で示される化合物の置換基上の窒素から誘導される酸付加塩を含みうる。代表的な塩としては、下記塩：酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、エデト酸カルシウム、カンシル酸塩、カルボン酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エデシル酸塩、エストレート、エシレート、フマル酸塩、グルセプテート、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニレート、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエート、ヨウダイド、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシレート、メチルブロマイド、メチルニトレート、メチルスルフェート、一カリウムマレイン酸塩、ムケート、ナプシル酸塩、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミン、シュウ酸塩、パモ酸塩（エンボネート）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、カリウム、サリチル酸塩、ナトリウム、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、琥珀酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクレート、トシレート、トリエチオダイド、トリメチルアンモニウムおよび吉相酸塩が挙げられる。医薬上許容されない他の塩は、本発明の化合物の調製に有用でありえ、これらは本発明の一の態様を形成する。
【００４１】
治療において用いられる場合、治療的に有効な量の式（Ｉ）で示される化合物ならびにその塩、溶媒和物および生理学的に機能的な誘導体は、化合物自体として投与することができるが、医薬組成物として活性成分を提供することもできる。したがって、本発明は、さらに、治療的に有効な量の式（Ｉ）で示される化合物ならびにその塩、溶媒和物および生理学的に機能的な誘導体および１種以上の医薬上許容される担体、希釈剤または賦形剤を含む医薬組成物を提供する。式（Ｉ）で示される化合物ならびにその塩、溶媒和物および生理学的に機能的な誘導体は、上記と同意義である。担体（複数でも可）、希釈剤（複数でも可）または賦形剤（複数でも可）は、処方の他の成分と適合し、その受容者に有害でないという意味で許容されるべきである。本発明の他の態様により、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体を、１種以上の医薬上許容される担体、希釈剤または賦形剤と混合することを含む、医薬組成物の製造方法を提供する。
【００４２】
医薬組成物は、単位投与あたりの所定の活性成分を含有する単位剤形で提供される。かかるユニットは、例えば０．５ｍｇ〜１ｇ、好ましくは１ｍｇ〜７００ｍｇ、より好ましくは５ｍｇ〜１００ｍｇの式（Ｉ）で示される化合物を、治療する症状、投与経路および患者の年齢、体重および症状に応じて含有するか、あるいは医薬組成物は、単位用量当たりの所定の量の活性成分を含有する単位剤形で与えることができる。好ましい単位投与組成物は、１日の投与量または上記したサブ投与量あるいはその適当なフラクションの活性成分を含有するものである。さらに、かかる医薬組成物は、医薬分野でよく知られた方法により製造することができる。
【００４３】
医薬組成物は、いずれもの適当な投与経路、例えば経口（口腔または舌下を含む）、直腸、鼻腔、局所（口腔、舌下または経皮を含む）、膣または非経口（皮下、筋肉内、静脈内または皮内を含む）経路による投与に適用することができる。かかる組成物は、医薬の分野でよく知られた方法により、例えば活性成分を、担体（複数でも可）または賦形剤（複数でも可）を一緒にして調製することができる。
【００４４】
経口用途に適した医薬組成物は、別個のユニット、例えばカプセルまたは錠剤；粉末または顆粒；水性または非水性溶液中の溶液または懸濁液；食用の泡沫体または発泡剤；または水中油型液体エマルジョンまたは油中水型液体エマルジョンとして調製することができる。
【００４５】
例えば、錠剤またはカプセルの形態での経口投与に関して、活性薬剤成分は、経口、無毒性医薬上許容される不活性担体、例えばエタノール、グリセロール、水等と組み合わせることができる。粉末は、化合物を適当に微細な粒度に粉砕し、同様に粉砕した医薬担体、例えば食用炭水化物、例えばスターチまたはマンニトールと混合することにより調製する。フレーバー、保存剤、分散剤および着色剤もまた存在することができる。
【００４６】
カプセルは、上記したように粉末混合物を調製し、形成ゼラチン殻に充填することにより製造する。流動促進剤および滑沢剤、例えばコロイド状シリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたは固体ポリエチレングリコールは、充填操作の前に、粉末混合物に添加することができる。崩壊剤または可溶化剤、例えば寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムもまた、カプセルを摂取した場合に、薬剤の利用能を改善するために添加することができる。
【００４７】
さらに、望ましいまたは必要な場合、適当な結合剤、滑沢剤、崩壊剤および着色剤もまた、混合物に封入することができる。適当な結合剤は、スターチ、ゼラチン、天然の糖、例えばグルコースまたはベータ−ラクトース、コーンシロップ、天然および合成ガム、例えばアカシア、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックス等を含む。これらの剤形に用いられる滑沢剤は、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム等を含む。崩壊剤は、限定するものではないが、スターチ、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガム等を含む。錠剤は、例えば粉末混合物を調製し、造粒するか、あるいはスラッギングし、滑沢剤および崩壊剤を添加し、錠剤に圧搾することにより形成することができる。粉末混合物は、適当に粉砕した化合物を、希釈剤または上記したような基剤、および所望により、結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、アルギナート、ゼラチンまたはポリビニルピロリドン、溶解遅延剤、例えばパラフィン、吸収促進剤、例えば４級塩および／または吸収剤、例えばベントナイト、カオリンまたはリン酸二カルシウムと一緒に混合することにより調製する。粉末混合物は、結合剤、例えばシロップ、スターチペースト、アカディア粘液またはセルロース誘導体またはポリマー物質の溶液と湿式造粒し、ふるいに掛けることができる。造粒の別法として、粉末混合物を錠剤機に通し、結果として得られた不完全に形成したスラッグを顆粒に粉砕することができる。顆粒は、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱油を添加する手段により、錠剤形成の金型に貼り付くのを防止するために滑沢化することができる。ついで、滑沢化混合物を錠剤に圧搾する。また、本発明の化合物は、自由流動性不活性担体と組み合わせて、造粒またはスラギング工程を経ることなく、直接錠剤に圧搾することもできる。セラックのシーリングコート、糖またはポリマー物質のコーティングおよびワックスの光沢コーティングからなる透明または不透明な保護コーティングを施すこともできる。染料を、異なる単位剤形を区別するためにコーティング剤に添加することができる。
【００４８】
経口流体、例えば溶液、シロップおよびエリキシルは、所定の量として、予め測定した量の化合物を含有するように、単位剤形に調製することができる。シロップは化合物を適当な味付けした水溶液中に溶解することにより調製することができ、一方エリキシルは、無毒性アルコールビヒクルを用いることにより調製する。懸濁液は、化合物を無毒性ビヒクル中に分散されることにより調製することができる。可溶化剤および乳化剤、例えばエトキシル化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテル、保存剤、フレーバー添加剤、例えばペパーミント油または天然甘味料またはサッカリンまたは他の人工甘味料等も添加することができる。
【００４９】
適当な場合、経口投与用投与単位組成物は、マイクロカプセル化することができる。また、処方は、例えばコーティングするか、あるいはポリマーまたはワックス中に微粒子物質を埋め込むことにより放出を遅延または持続させるように、調製することができる。
【００５０】
また、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩、溶媒和物および生理学的に機能的な誘導体は、リポソームデリバリー系、例えば小さな単層ベシクル、大きな単層ベシクルおよび多層ベシクルの形態で投与することもできる。リポソームは、種々のリン脂質、例えばコレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンから形成することができる。
【００５１】
また、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩、溶媒和物および生理学的に機能的な誘導体は、モノクローナル抗体を、化合物分子と結合する個々の担体として用いることによりデリバリーすることができる。また、化合物は、標的化可能薬剤担体としての可溶性ポリマーと結合することができる。かかるポリマーは、ポリビニルピロリドン、ピラン共重合体、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルタミドフェノールまたはパルミトイル残基により置換されたポリエチレンオキシデポリリシンを含みうる。さらに、化合物は、薬剤放出の制御を行うのに有用な、一群の生分解性ポリマー、例えばポリ乳酸、ポレプシロンカプロラクタム、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレートおよびヒドロゲルの架橋または両親媒性ブロック共重合体と結合することができる。
【００５２】
経皮投与に適した医薬組成物は、長期間、受容者の表皮と密接な接触を保持することを目的とする、個別のパッチとして提供することができる。例えば、活性成分は、一般的にPharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986)に記載されるようなイオン導入によるパッチからデリバリーすることができる。
【００５３】
局所投与に適した医薬組成物は、軟膏、クリーム、懸濁液、ローション、粉末、溶液、ペースト、ゲル、スプレー、エアロゾールまたは油として処方することができる。
【００５４】
眼または他の外部組織、例えば口および皮膚の治療に関して、組成物は、好ましくは、局所用軟膏またはクリームとして適用される。軟膏に処方される場合、活性成分は、パラフィンまたは水混和性軟膏基剤と一緒に用いることができる。別法として、活性成分は、クリームに、水中油型クリームまたは油中水型基剤と処方することができる。
【００５５】
眼への局所投与に適した医薬組成物は、活性成分を適当な担体、特に水性溶媒に溶解または懸濁させた点眼剤を含む。
口への局所投与に適した医薬組成物は、ロゼンジ、トローチおよび洗口剤を含む。
【００５６】
直腸投与に適した医薬組成物は、坐剤または浣腸剤として提供することができる。
【００５７】
担体が固体である鼻腔投与に適した医薬組成物は、鼻から吸い込む方法で投与する、すなわち、鼻の近くに保持した粉末のコンテナから鼻を介して迅速吸入される、例えば、２０〜５００ミクロンの粒度を有する粗粉末を含む。鼻スプレーまたは鼻滴剤として投与される、担体が液体である適当な処方は、活性成分の水溶液または油性溶液を含む。
吸入による投与に適した医薬組成物は、種々の型の計量加圧型エアロゾール、噴霧器または吸入器の手段により生成される、微細粒子粉末または霧を含む。
【００５８】
膣投与に適した医薬組成物は、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、泡沫体またはスプレー処方として提供することができる。
【００５９】
局所投与に適した医薬組成物は、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤および組成物を意図する受容者の血液と等張性にする溶質を含有してもよい、水性および非水性滅菌注射溶液；および懸濁化剤および増粘剤を含んでいてもよい水性および非水性滅菌懸濁液を含む。組成物は、単位投与量または複数回投与用容器、例えば封入アンプルおよびバイアルで提供することができ、凍結乾燥条件で貯蔵することができ、使用直前に、滅菌液体担体、例えば注射用水を添加する必要がある。即席注射溶液および懸濁液は、滅菌粉末、顆粒および錠剤から調製することができる。
【００６０】
成分、特に上記した成分の添加において、処方の型に関係した問題点を有する組成物は、当該分野において慣用的な他の薬剤を含みうること、例えば、経口投与に適した処方はフレーバー剤を含みうることは理解できるだろう。
【００６１】
本発明の化合物の治療的に有効な量は、例えば、動物の年齢および体重、治療を必要とする正確な症状およびその重度、処方の性質および投与経路を含む多くの因子に依存し、かかりつけの医師または獣医の判断により最終的に決定されるだろう。しかしながら、新生物成長、例えば結腸癌または乳癌の治療に関する式（Ｉ）で示される化合物の有効量は、一般的には、１日あたり０．１〜１００ｍｇ／受容者の体重（動物）ｋｇの範囲、より一般的には、１日あたり１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲だろう。かくして、７０ｋｇの成人場合、１日あたりの実際の量は、通常、７０〜７００ｍｇであり、この量は、１日あたり単回投与または、より通常には、１日の総投与量が同じになるように、複数回（例えば、２、３、４、５または６回）のサブ投与量で投与される。有効量の塩または溶媒和物またはその生理学的に機能的な誘導体は、有効量の式（Ｉ）で示される化合物それ自体の割合として測定することができる。同様の投与量が、上記した他の症状の治療にも適していると考えられる。
【００６２】
本発明の化合物およびその塩、溶媒和物または生理学的に機能的な誘導体は、単独、または他の治療剤と組み合わせて、上記した症状の治療に用いることができる。特に、抗癌治療において、他の化学療法剤、ホルモン剤または抗体剤との組み合わせが、外科的治療および放射線治療との組み合わせと同様に考えられる。かくして、本発明の組み合わせ療法は、少なくとも１種の式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩または溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体の投与、および少なくとも１つの他の癌の治療法の使用を含む。好ましくは、本発明の組み合わせ療法は、少なくとも１種の式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩、溶媒和物またはその生理学的に機能的な誘導体、および少なくとも１つの他の医薬的に活性な薬剤、好ましくは、抗新生物剤の投与を含む。式（Ｉ）で示される化合物（複数でも可）および他の医薬的に活性な薬剤（複数でも可）は、一緒に、または別個に投与することができ、別個に投与する場合、これは、同時に、または順次連続して投与することができる。式（Ｉ）で示される化合物（複数でも可）および他の医薬的に活性な薬剤（複数でも可）の量および投与の相対的なタイミングは、所望の組み合わせ治療効果を達成できるように選択されるだろう。
【００６３】
式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩、溶媒和物またはその生理学的に機能的な誘導体および少なくとも１種の付加的な癌療法は、かかる他の抗癌療法との治療的に適当な組み合わせで、併用して、あるいは、別個に組み合わせて用いることができる。一の具体例において、他の抗癌療法は、少なくとも１種の抗新生物剤を投与することを含む、少なくとも１つの付加的な化学療法である。式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩、溶媒和物またはその生理学的に機能的な誘導体と、他の抗新生物剤との組み合わせ投与は、本発明に従った組み合わせで、（１）両方の化合物を含む単一の医薬組成物または（２）一方の化合物をそれぞれに含む別個の医薬組成物で、同時に投与することができる。別法として、組み合わせは、一の抗新生物剤を最初に投与し、他を２番目に投与するか、またはその逆である、連続法で別個に投与することができる。かかる連続投与は、時間が密接していても、離れていてもよい。
【００６４】
抗新生物剤は、細胞−サイクル特異的手段で抗新生物効果を誘発することができ、すなわち、フェーズ特異的であり、細胞サイクルの特定のフェーズで作用するか、あるいは、ＤＮＡに結合し、非細胞−サイクル特異的手段で作用することができ、すなわち、非−細胞サイクル特異性であり、他の機構により作用する。
【００６５】
式Ｉで示される化合物およびその塩、溶媒和物または生理学的に機能的な誘導体との組み合わせに有用な抗新生物剤は、以下のものを含む：
（１）限定するものではないが、ジテルペノイド、例えばパクリタキセルおよびそのアナログドセタキセル；ビンカアルカノイド、例えばビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシンおよびビノレルビン；エピドフィロトキシン（epipodophyllotoxin）、例えばエトポシドおよびテニポシド；フルオロピリミジン、例えば５−フルオロウラシルおよびフルオロデオキシウリジン；代謝拮抗剤、例えばアロプリノール、フルデュラビン（fludurabine）、メトトレキサート、クラドラビン、シタラビン、メルカプトプリンおよびチオグアニン；およびカンプトテシン、例えば９−アミノカンプトセシン、イリノテカン、トポテカン、ＣＰＴ−１１および７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０−カンプトテシンの種々の光学形態を含む、細胞サイクル特異的抗新生物剤；
【００６６】
（２）限定するものではないが、アルキル化剤、例えばメルファラン、クロラムブシル、シクロホスファミド、メクロレタミン、ヘキサメチルメラミン、ブスルファン、カルムスチン、ロムスチンおよびダカルバジン；抗腫瘍抗生物質、例えばドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシン、イダルビシン、マイトマイシン−Ｃ、ダクチノマイシンおよびマイトラマイシン；およびプラチナ配位複合体、例えばシスプラチン、カルボプラチンおよびオキサリプラチンを含む、細胞毒性化学療法剤；
【００６７】
（３）限定するものではないが、抗エストロゲン剤、例えばタモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェンおよびヨウドキシフェン；プロゲステロン、例えば、酢酸メゲストロール；アロマターゼ阻害剤、例えばアナストロゾール、レトラゾール、ボラゾールおよびエキセメスタン；抗アンドロゲン剤、例えばフルタミド、ニルタミド、ビカルタミドおよび酢酸シプロテロン；ＬＨＲＨアゴニストおよびアンタゴニスト、例えば酢酸ゴセレリンおよびルプロライド、テストステロン５α−ジヒドロレダクターゼ阻害剤、例えばフィナステライド；メタロプロテイナーゼ阻害剤、例えばマリマスタト；抗プロゲストゲン剤；ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベータ受容体機能阻害剤；成長因子機能阻害剤、例えば肝細胞成長因子の機能阻害剤；ｅｒｂ−Ｂ２、ｅｒｂ−Ｂ４、表皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、血小板誘発成長因子受容体（ＰＤＧＦＲ）、血管内皮成長因子受容体（ＶＥＧＦＲ、およびＥｐＨＢ４、ＴＩＥ−２（本発明に記載のＶＥＧＦＲ、ＥｐＨＢ４およびＴＩＥ−２阻害剤以外）；および他のチロシンキナーゼ阻害剤、例えばＣＤＫ２の阻害剤およびＣＤＫ４阻害剤を含む、他の化学療法剤。
【００６８】
式（Ｉ）で示される化合物およびその塩、溶媒和物または生理学的に機能的な誘導体は、蛋白質キナーゼＴＩＥ−２、ＥｐＨＢ４および／またはＶＥＧＦＲ−２の阻害の結果およびその成長が、ＴＩＥ−２、ＥｐＨｂＢ４および／またはＶＥＧＦＲ−２蛋白質キナーゼ活性に依存する選択した細胞株に対するその効果として抗癌活性を有すると考えられる。
【００６９】
かくして、また、本発明は、医薬治療、特に少なくとも１つの不適切なＴＩＥ−２、ＥｐＨＢ４およびＶＥＧＦＲ−２活性により介在される障害の治療において用いるための、式（Ｉ）で示される化合物およびその医薬上許容される塩または溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体を提供する。
【００７０】
本発明に記載する不適切なＴＩＥ−２、ＥｐＨＢ４および／またはＶＥＧＦＲ−２活性は、特定の哺乳動物対象において期待される正常なＴＩＥ−２、ＥｐＨＢ４および／またはＶＥＧＦＲ−２活性から逸脱したいずれものＴＩＥ−２、ＥｐＨＢ４および／またはＶＥＧＦＲ−２活性である。不適切なＴＩＥ−２、ＥｐＨＢ４および／またはＶＥＧＦＲ−２活性は、例えば、活性の異常な増加またはＴＩＥ−２、ＥｐＨＢ４および／またはＶＥＧＦＲ−２活性のタイミングおよび／または制御の逸脱の形態であってもよい。かかる不適切な活性は、例えば、不適切または非制御活性化を誘発する蛋白質キナーゼの過剰発現または突然変異から生じうる。さらに、また、望ましくないＴＩＥ−２、ＥｐＨＢ４および／またはＶＥＧＦＲ−２活性は、異常な源、例えば悪性で存在しうることは理解できるだろう。すなわち、ＴＩＥ−２、ＥｐＨＢ４および／またはＶＥＧＦＲ−２活性のレベルは、不適切と見なされるべき異常というよりむしろ、異常な源から誘発される活性である。同様に、本明細書に記載の不適切な血管新生は、特定の哺乳動物対象において考えられる正常な血管新生活性から逸脱した、いずれもの血管新生活性である。不適切な血管新生は、例えば、活性の異常な増加または血管新生活性のタイミングおよび／または制御の逸脱の形態であってもよい。かかる不適切な活性は、例えば、不適切または非制御活性化を誘発する蛋白質キナーゼの過剰発現または突然変異から生じうる。さらに、また、望ましくない血管新生活性は、異常な源、例えば悪性で存在しうることは理解できるだろう。すなわち、血管新生活性のレベルは、不適切と見なされるべき異常というよりむしろ、異常な源から誘発される活性である。
【００７１】
本発明は、非調節ＴＩＥ−２、ＥｐＨＢ４および／またはＶＥＧＦＲ−２活性に関連する障害を予防および／または治療するための、ＴＩＥ−２、ＥｐＨＢ４および／またはＶＥＧＦＲ−２の調整、調節または阻害方法に関する。また、特に本発明の化合物は、ある種の形態の癌の治療に用いることができる。さらに、本発明の化合物は、ある種の既存の癌両方との相加相乗効果を得るのに用いることができ、および／またはある種の既存の癌化学療法剤および放射療法の有効性を回復するのに用いることとができる。
【００７２】
また、本発明の化合物は、関節炎および再狭窄を含む血管増殖障害；肝硬変およびアテローム性動脈硬化症を含む線維静障害；糸球体腎炎、糖尿病性ネフロパシー、悪性腎硬化症、血栓微少血管症候群、臓器移植拒絶反応および糸球体症を含むメサンギウム細胞増殖性障害；および乾癬、小児糖尿病、慢性創傷治癒、炎症および神経変性疾患を含む代謝性障害を含む、新血管形成および／または血管浸透性に付随する障害の領域における、細胞増殖により特徴付けられる哺乳動物を苦しませる１つ以上の疾患の治療に有用である。
【００７３】
本発明のさらなる態様において、感受性悪性腫瘍を含む、少なくとも１つの不適切なＴＩＥ−２、ＥｐＨＢ４およびＶＥＧＦＲ−２活性により介在される障害を患っている哺乳動物の治療方法であって、該対象に、式（Ｉ）で示される化合物または医薬上許容されるその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体を投与することを含む方法を提供する。好ましい具体例において、疾患は癌である。
【００７４】
本発明のさらなる態様において、癌を患っている哺乳動物の治療方法であって、該対象に、式（Ｉ）で示される化合物または医薬上許容されるその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体を投与することを含む方法を提供する。好ましい具体例において、疾患は癌である。
【００７５】
本発明のさらなる態様において、少なくとも１つの不適切なＴＩＥ−２、ＥｐＨＢ４およびＶＥＧＦＲ−２活性により特徴付けられる場外の治療用の医薬の製造における、式（Ｉ）で示される化合物、または医薬上許容される塩または溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体の使用を提供する。好ましい具体例において、疾患は癌である。
【００７６】
本発明のさらなる態様において、癌および悪性腫瘍の治療用の医薬の製造における、式（Ｉ）で示される化合物または医薬上許容される塩または溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体の使用を提供する。
【００７７】
本発明の化合物での治療を必要とする哺乳動物は、典型的にはヒトである。
【００７８】
他の具体例において、治療的に有効な量の式（Ｉ）で示される化合物または医薬上許容される塩または溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体および成長因子受容体機能を阻害する薬剤は、不適切なＴＩＥ−２ＥｐＨＢ４およびＶＥＧＦＲ−２活性により介在される障害の治療、例えば癌の治療のために、組み合わせて哺乳動物に投与することができる。かかる成長因子受容体は、例えば、ＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ｅｒｂＢ２およびｅｒｂＢ４を含む。成長因子受容体および成長因子受容体機能を阻害する薬剤は、例えばKath, John C., Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10(6):803-818およびShawver et al DDT Vol 2, No. 2 February 1997に記載されている。
【００７９】
式（Ｉ）で示される化合物または医薬上許容される塩または溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体およびおよび成長因子受容体機能を阻害する薬剤は、同時に組み合わせて、または治療的に適した組み合わせで連続して使用することができる。組み合わせは、本発明に従った組み合わせで、（１）両方の化合物を含む単一の医薬組成物または（２）一方の化合物をそれぞれに含む別個の医薬組成物で、同時に使用することができる。別法として、組み合わせは、一方を最初に投与し、他を２番目に投与するか、またはその逆である、連続法で別個に投与することができる。かかる連続投与は、時間が密接していても、離れていてもよい。
【００８０】
本発明の他の態様において、哺乳動物の障害の治療方法であって、該障害が不適切な血管新生により介在され、該哺乳動物に式（Ｉ）で示される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体を投与することを含む方法を提供する。一の具体例において、不適切な血管新生活性は、少なくとも１つの不適切なＶＥＧＦＲ２、ＥｐＨＢ４、またはＴＩＥ−２活性による。他の具体例において、不適切な血管新生は、不適切なＶＥＧＦＲ２およびＴＩＥ−２活性による。さらなる具体例において、方法は、さらに、ＶＥＧＦＲ２阻害剤単独を式（Ｉ）で示される化合物または医薬上許容される塩または溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体と一緒に投与することを含む。好ましくは、障害は癌である。
【００８１】
本発明の他の態様において、哺乳動物の不適切な血管新生により特徴付けられる障害の治療において用いる医薬の製造における、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体の使用を提供する。一の具体例において、不適切な血管新生活性は、少なくとも１つの不適切なＶＥＧＦＲ２、ＥｐＨＢ４、ＶＥＧＦＲ３またはＴＩＥ−２活性による。他の具体例において、不適切な血管新生活性は、不適切なＶＥＧＦＲ２、ＥｐＨＢ４およびＴＩＥ−２活性による。さらなる具体例において、使用は、さらに、該医薬を製造するためにＶＥＧＦＲ２阻害剤の使用を含む。
【００８２】
式（Ｉ）で示される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的に機能的な誘導体とＶＥＧＦＲ２阻害剤との組み合わせは、本発明に従った組み合わせで、（１）両方の化合物を含む単一の医薬組成物または（２）一方の化合物をそれぞれに含む別個の医薬組成物で、同時に使用することができる。別法として、組み合わせは、一方を最初に投与し、他を２番目に投与するか、またはその逆である、連続法で別個に投与することができる。かかる連続投与は、時間が密接していても、離れていてもよい。
【００８３】
本発明の化合物は、標準的な化学を含む種々の方法により製造することができる。いずれもの上記した可変基は、特記しない限り、前記の定義を引き継ぐ。実例的一般合成法を、下記し、ついで本発明の特定の化合物を実施例において調製する。
【００８４】
一般式（Ｉ）で示される化合物は、以下の合成スキームにより部分的に説明される有機合成法の、当該分野で公知の方法により調製することができる。下記のすべてのスキームにおいて、必要な場合、一般的な化学原理に従って、感受性または反応性基に関する保護基が用いられることは理解できるだろう。保護基は、標準的な有機合成法に従って操作する（T. W. Green and P. G. M. Wuts (1991) Protecting groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons）。これらの基は、当業者に明らかである方法を用いて化合物の合成の有利な段階で除去される。進行および反応条件およびその施行順の選択は、式（Ｉ）で示される化合物の調製と整合的であるべきである。当業者には、式（Ｉ）で示される化合物に立体中心が存在する場合は明らかだろう。したがって、本発明は、可能性ある立体異性体を含み、単にラセミ化合物だけでなく、同様に各々のエナンチオマーも含む。化合物が単一のエナンチオマーとして望まれる場合、立体特異的合成によるか、または最終生成物またはいずれかの有利な中間体を分割することにより得ることができる。最終生成物、中間体または出発物質の分割は、当該分野で公知の適当な方法により行うことができる。例えば、E. L. Eliel, S. H. WilenおよびL. N. Manderによる Stereochemistry of Organic Compounds (Wiley-Interscience, 1994）を参照。
【００８５】
式（Ｉ）で示される化合物は、一般的に、下記の説明例に記載される合成手順に従って調製することができ、特定の実施例によりさらに説明する。
【化５】
2007511571.tif 000007
【００８６】
本発明のある種の具体例は、ここに実施例により説明されるだろう。実施例の化合物に与えられる物理データは、これらの化合物の特定の構造に一致する。
【００８７】
実施例
本明細書で用いられる場合、これらの工程、スキームおよび実施例において用いられる略号および慣例は、現在の自然科学の文献、例えばJournal of the American Chemical SocietyまたはJournal of Biological Chemistryにおいて用いられるものと一致する。標準的な一文字表記または三文字表記は、一般的に、アミノ酸残基を指定するのに用いられ、これらは特記しない限り、Ｌ−構造と考える。特記しない限り、すべての出発物質は、商業的供給業者から入手し、さらに精製することなく用いた。特に、下記の略号を、本明細書の実施例および全体にわたって用いることができる：
【表１】
2007511571.tif 000008
【００８８】
エーテルに関するすべての言及は、ジエチルエーテルを意味し；ブラインは、ＮａＣｌの飽和水溶液を意味する。特記しない限り、すべての温度は、℃（摂氏）で記載する。すべての反応は、特記しない限り、不活性雰囲気下、室温にて行われる。
【００８９】
１ＨＮＭＲスペクトルは、Ｖａｒｉａｎ ＶＸＲ−３００、Ｖａｒｉａｎ Ｕｎｉｔｙ−３００、Ｖａｒｉａｎ Ｕｎｉｔｙ−４００装置、Ｂｒｕｃｋｅｒ ＡＶＡＮＣＥ−４００またはＧｅｎｅｒａｌ Ｅｌｅｃｔｒｉｃ ＱＥ−３００で記録した。化学シフトは、百万あたりに部（ｐｐｍ、δ単位）で記載する。カップリング定数は、ヘルツ（Ｈｚ）の単位である。スプリットパターンは、多重度で表し、ｓ（シングレット）、ｄ（ダブレット）、ｔ（トリプレット）、ｑ（カルテット）、ｑｕｉｎｔ（クインテット）、ｍ（マルチプレット）、ｂｒ（ブロード）として記載する。
【００９０】
ＨＰＬＣは、下記の条件により、Ｇｉｌｓｏｎ ＨＰＬＣまたはＳｈｉｍａｚｕ ＨＰＬＣシステムで記録した。カラム：５μｍのＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ−１８を詰めた５０×４．６ｍｍ（ｉｄ）のステンレススチール；流速：２．０ｍＬ／分；移動相：Ａ相＝５０ｍＭの酢酸アンモニウム（ｐＨ７．４）、Ｂ相＝アセトニトリル、０〜０．５分（Ａ：１００％、Ｂ：０％）、０．５〜３．０分（Ａ：１００〜０％、Ｂ：０〜１００％）、３．０〜３．５分（Ａ：０％、Ｂ：１００％）、３．５〜３．７分（Ａ：０〜１００％、Ｂ：１００〜０％）、３．７〜４．５分（Ａ：１００％、Ｂ：０％）；検出：ＵＶ２５４ｎｍ；注入容量：３μＬ。
【００９１】
低分解能質量スペクトル（ＭＳ）は、ＪＯＥＬ ＪＭＳ−ＡＸ５０５ＨＡ、ＪＯＥＬ ＳＸ−１０２またはＳＣＩＥＸ−ＡＰＩｉｉｉ分光計で記録し；ＬＣ−ＭＳは、マイクロマス２ＭＤおよびＷａｔｅｒｓ２６９０で記録し；高分解能ＭＳは、ＪＯＥＬＳＸ−１０２Ａ分光計を用いて得た。すべての質量スペクトルは、エレクトロスプレーイオン化法（ＥＳＩ）、化学イオン化法（ＣＩ）、電子衝撃法（ＥＩ）により、あるいは、高速原子衝突法（ＦＡＢ）により行った。赤外（ＩＲ）スペクトルは、Ｎｉｃｏｌｅｔ ５１０ ＦＴ−ＩＲ分光計で、１−ｍｍのＮａＣｌセルを用いて記録した。ほとんどの反応は、ＵＶライト、５％エタノール性リンモリブデン酸またはｐ−アニスアルデヒド溶液で視覚化する、０．２５ｍｍのＥ．Ｍｅｒｃｋシリカゲルプレート（６０Ｆ−２５４）の薄層クロマトグラフィーによりモニターした。フラッシュカラムクロマトグラフィーは、シリカゲル（２３０−４００ｍｅｓｈ、Ｍｅｒｃｋ）で行った。
【００９２】
実施例１．
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（３−イソキノリン−５−イルフェニル）尿素
【化６】
2007511571.tif 000009
【００９３】
ａ．５−ブロモイソキノリン
ＣＨ２Ｃｌ２（５００ｍＬ）中のＡｌＣｌ３（１５６．７ｇ、１．１８ｍｏｌ）の懸濁液に、ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）中のイソキノリン（６０５ｍｍｏｌ、７１ｍＬ）の溶液を、反応混合物が穏やかに還流する速度で滴下した。滴下後、ＣＨ２Ｃｌ２を蒸留により除去した。黒褐色残渣を１２０℃で溶かし、ついで、温度を１００℃に調節した。混合物に、Ｂｒ２（３１ｍＬ、６０５ｍｍｏｌ）を２時間にわたって１００℃で滴下し、同じ温度で３０分間撹拌し、ついで、７５℃で一晩撹拌した。混合物を室温に冷却し、ついで、注意深く氷水に注いだ。水性混合物をＮａＯＨ水溶液で塩基性化し、エーテルで抽出した。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。続いて、ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィーで２回、ついで、再結晶（ヘキサンから）により精製して、標題化合物（３４．５ｇ、２８％）を得た。
【００９４】
ｂ．５−（３−ニトロフェニル）イソキノリン
５−ブロモイソキノリン（４．１６ｇ、２０ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２９０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）および３−ニトロフェニルボロン酸（３．６７ｇ、２２ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ２ガスでフラッシュし、ジオキサン（２００ｍＬ）、エタノール（４０ｍＬ）および２ＭのＫ２ＣＯ３水溶液（２００ｍＬ）を加えた。混合物を１００℃で一晩撹拌した。冷却した後、混合物を蒸発させてジオキサンを除去し、ついで、ＡｃＯＥｔで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ついで、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。蒸発した後、残渣をＳｉＯ２カラムクロマトグラフィーで精製して、標題化合物（４．６５ｇ、９３％）を得た。
【００９５】
ｃ．５−（３−アミノフェニル）イソキノリン
５−（３−ニトロフェニル）イソキノリン（７５１ｍｇ、３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｚｎ粉末（ｃａ１ｇ）を加え、室温にて一晩撹拌した。不溶性物質を濾過により取り除き、溶媒を除去した。残渣をＡｃＯＥｔで抽出した。有機層をＮａＨＣＯ３水溶液およびブラインで洗浄し、ついで、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。蒸発させた後、残渣を、ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィーおよびＳＣＸ−ＳＰＥに付して、標題化合物（５２１ｍｇ、７９％）を得た。
【００９６】
ｄ．１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（３−イソキノリン−５−イルフェニル）尿素
ＴＨＦ（１．５ｍＬ）中の５−（３−アミノフェニル）イソキノリン（３０ｍｇ、０．１３６ｍｍｏｌ）の溶液に、２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）フェニルイソシアネート（２４μＬ、０．１６ｍｍｏｌ）を加え、ついで、室温にて３日間撹拌した。混合物をＳＣＸ−ＳＰＥで精製し、ついで、形成した固体をＭｅＯＨで洗浄して、標題化合物（６１．２ｍｇ、９８％）を得た。
【００９７】
実施例２．
−シクロヘキシル−３−（３−イソキノリン−５−イルフェニル）尿素
【化７】
2007511571.tif 000010
５−（３−アミノフェニル）イソキノリンおよびシクロヘキシルイソシアネートから、実施例１ｄに記載のように標題化合物を調製した。
【００９８】
実施例３および４．
１−［３−（１−アミノ−イソキノリン−５−イル）−フェニル］−３−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−尿素（実施例３）および１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（５−｛３−［３−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−ウレイド］−フェニル｝−イソキノリン−１−イル）−尿素（実施例４）
【化８】
2007511571.tif 000011
【００９９】
ａ．５−ブロモイソキノリンＮ−オキシド
ＣＨ２Ｃｌ２（５００ｍＬ）中の５−ブロモイソキノリン（２０．８ｇ、１００ｍｍｏｌ）の溶液に、ｍＣＰＢＡ（８０％アッセイ、２３．７ｇ、１１０ｍｍｏｌ）を加え、４５℃で一晩撹拌した。冷却した後、混合物をＮａ２Ｓ２Ｏ３でクエンチし、ついで、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａＯＨ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ついで蒸発させた。続いて、再結晶（ＣＨ２Ｃｌ２−エーテルから）に付して、標題化合物（２０．１ｇ、９０％）を得た。
【０１００】
ｂ．５−ブロモ−１−クロロイソキノリン
ＣＨ２Ｃｌ２（５００ｍＬ）中の５−ブロモイソキノリンＮ−オキシド（２０．１ｇ、８９．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＰＯＣｌ３（２０ｍＬ、２１５ｍｍｏｌ）を加え、４５℃で一晩撹拌した。冷却した後、混合物を蒸発させて、ＰＯＣｌ３を除去し、ついで、水を加えた。混合物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ついで、蒸発させた。形成した固体をＭｅＯＨで洗浄して、標題化合物（１６．１ｇ、７４％）を得た。
【０１０１】
ｃ．１−アミノ−５−ブロモイソキノリン
飽和ＮＨ３−ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中の５−ブロモ−１−クロロイソキノリン（２．０ｇ、８．２５ｍｍｏｌ）の懸濁液を、オートクレーブ中で１８０℃に１５日間加熱した。冷却した後、溶媒を蒸発させて除去した。残渣をＣＨ２Ｃｌ２で洗浄し、ついで、ＳＣＸＳＰＥで精製した。形成した固体をヘキサンで洗浄して、標題化合物（１．５７ｇ、８５％）を得た。
【０１０２】
ｄ．１−アミノ−５−（４−アミノフェニル）イソキノリン
１−アミノ−５−ブロモイソキノリンおよび４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）アニリンから実施例１ｂに記載のように標題化合物を調製した。
【０１０３】
ｅ．１−［３−（１−アミノ−イソキノリン−５−イル）−フェニル］−３−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−尿素および１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（５−｛３−［３−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−ウレイド］−フェニル｝−イソキノリン−１−イル）−尿素
１−アミノ−５−（４−アミノフェニル）イソキノリンから、実施例１ｄに記載のように混合物として標題化合物を調製した。これらの化合物をカラムクロマトグラフィーにより分離した。
【０１０４】
実施例５．
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−｛３−［１−（キノリン−６−イルアミノ）−イソキノリン−５−イル］−フェニル｝−尿素
【化９】
2007511571.tif 000012
【０１０５】
ａ．５−ブロモ−１−（キノリン−６−イル）アミノイソキノリン
ｉＰｒＯＨ（１００ｍＬ）中の５−ブロモ−１−クロロイソキノリン（３．０ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）の懸濁液に、６−アミノキノリン（４．５ｇ、３１．２ｍｍｏｌ）、４ＭのＨＣｌ−ジオキサン（５ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１５ｍＬ）を加え、８０℃で３日間撹拌した。冷却した後、混合物を蒸発させて溶媒を除去し、ついで、ＡｃＯＥｔ中に懸濁させた。混合物をＮａＨＣＯ３水溶液で塩基性化し、ついで、形成した沈殿物を濾過により回収し、ＡｃＯＥｔで洗浄して、標題化合物（３．４ｇ、７８％）を得た。
【０１０６】
ｂ．５−（４−アミノフェニル）−１−（キノリン−６−イル）アミノイソキノリン
５−ブロモ−１−（キノリン−６−イル）アミノイソキノリンおよび４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）アニリンから、実施例１ｂに記載のように標題化合物を調製した。
【０１０７】
ｃ．１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−｛３−［１−（キノリン−６−イルアミノ）−イソキノリン−５−イル］−フェニル｝−尿素
５−（４−アミノフェニル）−１−（キノリン−６−イル）アミノイソキノリンから、実施例１ｄに記載のように標題化合物を調製した。
【０１０８】
実施例６．
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（４−｛１−［４−（６−メチル−ベンゾチアゾール−２−イル）−フェニルアミノ］−イソキノリン−５−イル｝−フェニル）−尿素
【化１０】
2007511571.tif 000013
【０１０９】
ａ．１−［４−（６−メチル−ベンゾチアゾール−２−イル）−フェニル］アミノ−５−ブロモイソキノリン
５−ブロモ−１−クロロイソキノリンおよび４−（６−メチル−ベンゾチアゾール−２−イル）−フェニルアミンから、実施例４ａに記載のように標題化合物を調製した。
【０１１０】
ｂ．［５−（４−アミノ−フェニル）−イソキノリン−１−イル］−［４−（６−メチル−ベンゾチアゾール−２−イル）−フェニル］−アミン
１−［４−（６−メチル−ベンゾチアゾール−２−イル）−フェニル］アミノ−５−ブロモイソキノリンおよび４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）アニリンから、実施例１ｂに記載のように標題化合物を調製した。
【０１１１】
ｃ．１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（４−｛１−［４−（６−メチル−ベンゾチアゾール−２−イル）−フェニルアミノ］−イソキノリン−５−イル｝−フェニル）−尿素
［５−（４−アミノ−フェニル）−イソキノリン−１−イル］−［４−（６−メチル−ベンゾチアゾール−２−イル）−フェニル］−アミンから、実施例１ｄに記載のように標題化合物を調製した。
【０１１２】
実施例７．
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（３−｛１−［４−（６−メチル−ベンゾチアゾール−２−イル）−フェニルアミノ］−イソキノリン−５−イル｝−フェニル）−尿素
【化１１】
2007511571.tif 000014
【０１１３】
ａ．［５−（３−アミノ−フェニル）−イソキノリン−１−イル］−［４−（６−メチル−ベンゾチアゾール−２−イル）−フェニル］−アミン
１−［４−（６−メチル−ベンゾチアゾール−２−イル）−フェニル］アミノ−５−ブロモイソキノリンおよび３−アミノフェニルボロン酸塩酸塩から、実施例１ｂに記載のように標題化合物を調製した。
【０１１４】
ｂ．１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（３−｛１−［４−（６−メチル−ベンゾチアゾール−２−イル）−フェニルアミノ］−イソキノリン−５−イル｝−フェニル）−尿素
［５−（３−アミノ−フェニル）−イソキノリン−１−イル］−［４−（６−メチル−ベンゾチアゾール−２−イル）−フェニル］−アミンから、実施例１ｄに記載のように標題化合物を調製した。
【０１１５】
実施例８．
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（４−イソキノリン−５−イルフェニル）尿素
【化１２】
2007511571.tif 000015
【０１１６】
ａ．５−（４−アミノフェニル）イソキノリン
５−ブロモイソキノリンおよび４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）アニリンから、実施例１ｂに記載のように標題化合物を調製した。
【０１１７】
ｂ．１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（４−イソキノリン−５−イルフェニル）尿素
５−（４−アミノフェニル）イソキノリンから、実施例１ｄに記載のように標題化合物を調製した。
【０１１８】
実施例９．
１−インダン−５−イル−３−（３−イソキノリン−５−イル−フェニル）−尿素
５−（４−アミノフェニル）イソキノリンおよび５−インダニルイソシアネートから、実施例１ｄに記載のように標題化合物を調製した。
【化１３】
2007511571.tif 000016
【０１１９】
実施例１０．
１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−｛３−［１−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−イソキノリン−５−イル］−フェニル｝−尿素
【化１４】
2007511571.tif 000017
【０１２０】
ａ．５−（３−ニトロフェニル）イソキノリンＮ−オキシド
ペル酢酸（６４ｍＬのＡｃＯＨおよび３２ｍＬの３０％のＨ２Ｏ２から調製した）の溶液に、５−（３−ニトロフェニル）イソキノリン（３．７５ｇ、１５ｍｍｏｌ）を添加し、ついで、８０℃で一晩撹拌した。冷却した後、混合物をＡｃＯＥｔで抽出した。有機層を水、ＮａＨＣＯ３水溶液、ＮａＨＳＯ３水溶液およびブラインで洗浄し、ついで、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。蒸発させた後、残渣をＳｉＯ２のカラムクロマトグラフィーにより、ついで、ＭｅＯＨからの再結晶により精製して、標題化合物を得た（収率は測定していない）。
【０１２１】
ｂ．１−クロロ−５−（３−ニトロフェニル）イソキノリン
５−（３−ニトロフェニル）イソキノリンＮ−オキシドから、実施例３ｂに記載のように標題化合物を調製した。
【０１２２】
ｃ．１−［４−（モルホリン−４−イルフェニル）アミノ］−５−（３−ニトロフェニル）イソキノリン
１−クロロ−５−（３−ニトロフェニル）イソキノリンおよび４−モルホリン−４−イルアニリンから、実施例４ａに記載のように標題化合物を調製した。
【０１２３】
ｄ．５−（３−アミノフェニル）−１−［４−（モルホリン−４−イルフェニル）アミノ］イソキノリン
１−［４−（モルホリン−４−イルフェニル）アミノ］−５−（３−ニトロフェニル）イソキノリンから、実施例１ｃに記載のように標題化合物を調製した。
【０１２４】
ｅ．１−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−３−｛３−［１−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−イソキノリン−５−イル］−フェニル｝−尿素
５−（３−アミノフェニル）−１−［４−（モルホリン−４−イルフェニル）アミノ］イソキノリンから、実施例１ｄに記載のように標題化合物を調製した。
【０１２５】
実施例１１．
３−｛５−［３−（３−シクロヘキシル−ウレイド）−フェニル］−イソキノリン−１−イルアミノ｝−ベンゼンスルホンアミド
【化１５】
2007511571.tif 000018
【０１２６】
ａ．３−［５−（３−ニトロフェニル）イソキノリン−１−イルアミノ］ベンゼンスルホンアミド
１−クロロ−５−（３−ニトロフェニル）イソキノリンおよび３−アミノベンゼンスルホンアミドから、実施例４ａに記載のように標題化合物を調製した。
【０１２７】
ｂ．３−［５−（３−アミノフェニル）イソキノリン−１−イルアミノ］ベンゼンスルホンアミド
３−［５−（３−ニトロフェニル）イソキノリン−１−イルアミノ］ベンゼンスルホンアミドおよび３−アミノベンゼンスルホンアミドから、実施例１ｃに記載のように標題化合物を調製した。
【０１２８】
ｃ．３−｛５−［３−（３−シクロヘキシル−ウレイド）−フェニル］−イソキノリン−１−イルアミノ｝−ベンゼンスルホンアミド
３−［５−（３−アミノフェニル）イソキノリン−１−イルアミノ］ベンゼンスルホンアミドおよびシクロヘキシルイソシアネートから、実施例１ｄに記載のように標題化合物を調製した。
【０１２９】
生物学的データ
ＴＩＥ−２酵素アッセイ（ＴＩＥ２−Ｅ）
ＴＩＥ−２酵素アッセイは、ＬＡＮＣＥ法（Ｗａｌｌａｃ）およびＧＳＴ−ＴＩＥ２を用い、バキュロウイルス発現組み換え体は、ＧＳＴによりタグ化されるＴＩＥ２細胞内ドメインを構成する（アミノ酸７６２−１１０４、ＧｅｎＢａｎｋ受入番号Ｌ０６１３９）。この方法により、ビオチニル化合成、Ｄ１−１５（ビオチン−Ｃ６−ＬＥＡＲＬＶＡＹＥＧＷＶＡＧＫＫＫアミド）中のチロシン残基のＡＴＰから、γ−ホスフェートの移動を触媒する、純粋な酵素の能力を測定した。このペプチドリン酸化は、以下の方法により検出した：酵素予備活性化に関して、ＧＳＴ−ＴＩＥ２を３０分間室温にて、２２．５ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中の、２ｍＭのＡＴＰ、５ｍＭのＭｇＣｌ２および１２．５ｍＭのＤＴＴとインキュベートした。予備活性化ＧＳＴ−ＴＩＥ２を、３０分間室温にて、９６ウェルプレートにて、１ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）中の、１μＭのＤ１−１５ペプチド、８０μＭのＡＴＰ、１０ｍＭのＭｇＣｌ２、０．１ｍｇ／ｍｌのＢＳＡおよび試験化合物（１０ｍＭのＤＭＳＯ中貯蔵液を希釈した、最終ＤＭＳＯ濃度は２．４％だった）とインキュベートした。反応を、ＥＤＴＡを添加することにより停止させた（最終濃度４５ｍＭ）。ついで、ストレプトアビジン結合−ＡＰＣ（アロフィコシアニン、分子プローブ）およびユウロピウム標識化抗リン酸化チロシン抗体（Ｗａｌｌａｃ）を、それぞれ、最終濃度１７μｇ／ウェルおよび２．１μｇ／ウェルで加えた。ＡＰＣシグナルを、ＡＲＶＯマルチラベルカウンター（ＷａｌｌａｃＢｅｒｔｈｏｌｄＪａｐａｎ）を用いて測定した。活性の阻害パーセントを、ブランクの対照ウェルと相対的に計算した。活性の５０％を阻害する試験化合物の濃度（ＩＣ５０）を、非線形回帰（Ｌｅｖｅｒｎｂｅｒｇ−Ｍａｒｑｕａｒｄｔ）および等式：ｙ＝Ｖｍａｘ（１−ｘ／（Ｋ＋ｘ））＋Ｙ２（式中、「Ｋ」は、ＩＣ５０と等しい）を用いて補間した。ＩＣ５０値を、ｐＩＣ５０値、すなわち、モル濃度での−ｌｏｇＩＣ５０に変換した。
【０１３０】
ＶＥＧＦ−Ｒ２酵素アッセイ（ＶＥＧＦ−Ｅ）
酵素アッセイ：
本発明で示される化合物を、血管内皮成長因子２（ＶＥＧＦＲ２）チロシンキナーゼ阻害活性に関して、基質リン酸化アッセイにて試験した。このアッセイは、小分子有機化合物のペプチド基質のチロシンリン酸化を阻害する能力を評価する。
【０１３１】
均一時間分解蛍光（ＨＴＲＦ）アッセイ
基質リン酸化アッセイは、アミノ−末端ＧＳＴ−タグ化融合蛋白質としてのＳｆ９昆虫細胞で発現された、ＶＥＧＦＲ２触媒ドメインを用いた。
自己リン酸化により、ペプチド基質の添加前に、酵素を完全に活性化することができる。このアッセイは、ＡＴＰおよびマグネシウムと緩衝液中で予備インキュベーションすることによる自己リン酸化により活性化した酵素を用いて行った。ついで、活性化酵素を希釈し、滴定化合物に加え、基質を混合する。
２００ｎＭのＶＥＧＦＲ２酵素を、２０分間室温にて、１００ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．２）、７５μＭのＡＴＰ、０．３ｍＭのＤＴＴ、０．１ｍｇ／ｍＬのＢＳＡおよび１０ｍＭのＭｇＣｌ２を含有する緩衝液中で酵素をインキュベートすることにより活性化した。活性化後、ＶＥＧＦＲ２を、２倍希釈緩衝液：２００ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、０．２ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ、０．６ｍＭのＤＴＴ中に１００倍希釈した。２０μＬの希釈した酵素混合物を、２０μＬの２倍基質混合物（１５０μＭのＡＴＰ、２０ｍＭのＭｇＣｌ２、０．７２μＭのビオチニル化ペプチド）中に、アッセイプレートにおいて加えた。最終アッセイ条件は：１００ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．２）、７５μＭのＡＴＰ、１０ｍＭのＭｇＣｌ２、０．１ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ、０．３ｍＭのＤＴＴ、０．３６μＭのビオチニル化ペプチドおよび１ｎＭのＶＥＧＦＲ２酵素である。アッセイプレートを、１．５時間室温にてインキュベートし、ついで、３０μＬの１００ｍＭのＥＤＴＡをウェルに添加して、酵素反応を停止させた。ついで、４０μＬ／ウェルのＨＴＲＦ混合物を、リン酸化基質検出用のアッセイプレートに加えた。最終アッセイ濃度は：１００ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．２）、０．１ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ、１５ｎＭのストレプトアビジン標識化アロフィコシアニン（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）および１ｎＭのユウロピウム標識化抗ホスホチロシン抗体（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）であった。アッセイプレートを、シールせず、Ｗａｌｌａｃ Ｍｕｌｔｉｌａｂｅｌ Ｃｏｕｎｔｅｒ１４２０（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）にてカウントした。
投与応答データを、データ換算式：１００＊（Ｕ１−Ｃ２）／（Ｃ１−Ｃ２）対化合物濃度（式中、Ｕは、未知の値であり、Ｃ１はＤＭＳＯに関して得られた平均対照値であり、Ｃ２は０．０５ＭのＥＤＴＡに関して得られた平均対照値）で計算して、％対照としてプロットした。データを、ｙ＝（（Ｖｍａｘ＊ｘ）／（Ｋ＋ｘ））（式中、Ｖｍａｘは漸近線の最大値であり、ＫはＩＣ５０である）により記載される曲線にフィットさせた。各々の化合物の結果を、ｐＩＣ５０＝−Ｌｏｇ１０（Ｋ）として計算して、ｐＩＣ５０として記録した。
【０１３２】
ＥｐｈＢ４酵素アッセイ
ＥｐｈＢ４酵素アッセイは、シンチレーション近接アッセイ法を用いて、酵素活性を測定する。この方法は、ビオチニル化合成ペプチドのチロシン残基のＡＴＰからのγ−ホスフェートの移動を触媒する純粋な酵素の能力を測定する。ＥｐｈＢ４酵素活性アッセイに用いたペプチドは、ビオチン−Ａｈｘ−ＭＡＨＦＥＮＹＥＦＦＨＡＫＫＫ−ＣＯＮＨ２（配列番号：１）であった。用いた酵素はＧＳＴ−ＥｐｈＢ４であり、バキュロウイルス発現組み換え体は、ＧＳＴによりタグ化された、ヒトＥｐｈＢ４細胞内ドメイン（アミノ酸６００−９１４、ＢＲ＃２１４５４）を構成する。ペプチドリン酸化を、以下の方法で検出した：酵素予備活性に関して、７．４μＭのＧＳＴ−ＥｐｈＢ４を、３０分間室温にて、３０ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中の５０μＭのＡＴＰおよび１０ｍＭのＭｇＣｌ２と、インキュベートした。ついで、予備活性化ＧＳＴ−ＥｐｈＢ４を、３時間室温にて、９６ウェルプレートにおいて、１００ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）中の、６μＭのペプチド、１μＭのＡＴＰ、１０ｍＭのＭｇＣｌ２、０．１ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ、５μＣｉ／ｍｌのＰ３３、１ｍＭのＤＴＴ、１ｍＭのＣＨＡＰＳ、５ｍＭのＫＣｌおよび２３−２５μＭの試験化合物とインキュベートした。各々の反応を、１００ｍＭのＥＤＴＡ／１×ＰＢＳ、ｐＨ７．２中の、０．１ｍｇのストレプトアビジンＳＰＡビーズに添加することにより停止さえた。シグナルを、Ｗａｌｌａｃ Ｔｒｉｌｕｘシンチレーションカウンター（Ｗａｌｌａｃ）を用いてカウントした。活性の阻害パーセントを、ポジティブ（Ｃ１）およびネガティブ（Ｃ２）対照ウェルに相対的に、１００＊（１−（Ｕ１−Ｃ２）／（Ｃ１−Ｃ２））を用いて計算した。試験化合物の濃度を、等式：ｙ＝（（Ｖｍａｘ＊ｘ）／（Ｋ＋ｘ））＋Ｙ２（式中、「Ｋ」はＩＣ５０と同じである）を用いて決定した。ＩＣ５０値を、ｐＩＣ５０値、すなわち、モル濃度中−ｌｏｇＩＣ５０に変換した。
【０１３３】
実施例の化合物は、すべて、試験した３つのキナーゼの少なくとも１つに対して、ｐＩＣ＞５．０の阻害活性を示した。
【国際調査報告】
2007511571.tif 000024
2007511571.tif 000025
2007511571.tif 000026
2007511571.tif 000027