(57)【要約】本発明は、1つまたは複数のナノ粒子活性物質の組成物、少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤の組成物、および少なくとも1つの抗体またはその断片の組成物、ならびに、所望の部位への、1つまたは複数の活性物質の送達を標的化するための、このような組成物の使用法を対象とする。1つまたは複数の活性物質は、好ましくは約2ミクロン以下の粒径を有する。標的化された送達は、例えば、疾患検出、画像化、またはドラッグデリバリーのために使用することができる。2007511513.tif 000007
2007511513.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下を含むナノ粒子活性物質組成物： 
（a）活性物質の粒子が、約2000nm未満の有効平均粒径を有する、少なくとも1つの難溶性の活性物質； 
（b）活性物質の表面と結合した、少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤；および、
（c）PEG誘導体化された表面安定剤と結合した、少なくとも1つの抗体またはその断片であって、断片が、標的部位に対して特異的に結合する能力を有する、抗体または断片。
【請求項２】
その他の賦形剤を含まない、少なくとも1つの活性物質および少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤の総合計乾燥重量に基づいて、少なくとも1つの活性物質が、重量の約99.5%〜約0.001%、約95%〜約0.1%、または約90%〜約0.5%からなる群より選択される量で存在する、請求項1記載の組成物。
【請求項３】
その他の賦形剤を含まない、少なくとも1つの活性物質および少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤の総合計乾燥重量に基づいて、少なくとも1つの表面安定剤が、重量の約0.5%〜約99.999%、約5.0%〜約99.9%、または約10%〜約99.5%からなる群より選択される量で存在する、請求項1または2記載の組成物。
【請求項４】
抗体またはその断片が、（a）PEG誘導体化された表面安定剤に直接付着している；または（b）PEG誘導体化された表面安定剤に、リンカーを介して付着している、請求項1または2記載の組成物。
【請求項５】
リンカーがビオチン官能基である、請求項4記載の組成物。
【請求項６】
抗体がIgD、IgA、IgM、IgE、またはIgG免疫グロブリンである、請求項1〜5のいずれか一項記載の組成物。
【請求項７】
抗体が、キメラ抗体、ヒト化抗体、および異種接合体抗体からなる群より選択される、請求項1〜6のいずれか一項記載の組成物。
【請求項８】
抗体断片が、
（a）IgD、IgA、IgM、IgE、もしくはIgG免疫グロブリン由来である；および/または
（b）Fab領域、F(ab')2領域、Fab領域、Fab'領域、Fv領域、VL領域、VH領域、およびそれらの断片からなる群より選択される、
請求項1〜5のいずれか一項記載の組成物。
【請求項９】
PEG誘導体化された表面安定剤が、PEG誘導体化されたリン脂質、PEG誘導体化されたコレステロール、PEG誘導体化されたコレステロール誘導体、PEG誘導体化されたビタミンA、PEG誘導体化されたビタミンE、およびPEG誘導体化されたDPPEからなる群より選択される、請求項1〜8のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１０】
少なくとも2つの表面安定剤を含む、請求項1記載の組成物。
【請求項１１】
少なくとも1つの表面安定剤が、陰イオン性表面安定剤、陽イオン性表面安定剤、双性イオン性表面安定剤、およびイオン性表面安定剤からなる群より選択される、請求項10記載の組成物。
【請求項１２】
少なくとも1つの表面安定剤が、以下からなる群より選択される、請求項11または11記載の組成物：
塩化セチルピリジニウム、ゼラチン、カゼイン、リン脂質、デキストラン、グリセロール、アラビアゴム、コレステロール、トラガカント、ステアリン酸、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸カルシウム、モノステアリン酸グリセロール、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ロウ、ソルビタンエステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール、ドデシルトリメチルアンモニウムブロミド、ステアリン酸ポリオキシエチレン、コロイド性二酸化ケイ素、ホスフェート、ドデシル硫酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒプロメロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、フタル酸ヒプロメロース、非晶質セルロース、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、トリエタノールアミン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、エチレンオキシドおよびホルムアルデヒドとの4-(1,1,3,3-テトラメチルブチル)-フェノール重合体、ポロキサマー；ポロキサミン、荷電したリン脂質、ジオクチルスルホスクシナート、スルホコハク酸ナトリウムのジアルキルエステル、ラウリル硫酸ナトリウム、アルキルアリールポリエーテルスルホナート、ステアリン酸スクロースとジステアリン酸スクロースとの混合物、p-イソノニルフェノキシポリ-(グリシドール)、デカノイル-N-メチルグルカミド；n-デシルβ-D-グルコピラノシド；n-デシルβ-D-マルトピラノシド；n-ドデシルβ-D-グルコピラノシド；n-ドデシルβ-D-マルトシド；ヘプタノイル-N-メチルグルカミド；n-ヘプチル-β-D-グルコピラノシド；n-ヘプチル-β-D-チオグルコシド；n-ヘキシル-β-D-グルコピラノシド；ノナノイル-N-メチルグルカミド；n-ノイルβ-D-グルコピラノシド；オクタノイル-N-メチルグルカミド；n-オクチル-β-D-グルコピラノシド；オクチル-β-D-チオグルコピラノシド；リゾチーム、酢酸ビニルおよびビニルピロリドンのランダム共重合体、陽イオン性重合体、陽イオン性生体高分子、陽イオン性多糖、陽イオン性セルロース誘導体、陽イオン性アルギネート、陽イオン性非重合体化合物、陽イオン性リン脂質、陽イオン性脂質、ポリメチルメタクリラートトリメチルアンモニウムブロミド、スルホニウム化合物、ポリビニルピロリドン-2-ジメチルアミノエチルメタクリラートジメチルサルフェート、ヘキサデシルトリメチルアンモニウムブロミド、ホスホニウム化合物、四級アンモニウム化合物、ベンジル-ジ(2-クロロエチル)エチルアンモニウムブロミド、ココナッツトリメチルアンモニウムクロライド、ココナッツトリメチルアンモニウムブロミド、ココナッツメチルジヒドロキシエチルアンモニウムクロライド、ココナッツメチルジヒドロキシエチルアンモニウムブロミド、デシルトリエチルアンモニウムクロライド、デシルジメチルヒドロキシエチルアンモニウムクロライド、デシルジメチルヒドロキシエチルアンモニウムクロライドブロミド、C12-l5ジメチルヒドロキシエチルアンモニウムクロライド、C12-l5ジメチルヒドロキシエチルアンモニウムクロライドブロミド、ココナッツジメチルヒドロキシエチルアンモニウムクロライド、ココナッツジメチルヒドロキシエチルアンモニウムブロミド、ミリスチルトリメチルアンモニウムメチルサルフェート、ラウリルジメチルベンジルアンモニウムクロライド、ラウリルジメチルベンジルアンモニウムブロミド、ラウリルジメチル(エテノキシ)4アンモニウムクロライド、ラウリルジメチル(エテノキシ)4アンモニウムブロミド、N-アルキル(Cl2-18)ジメチルベンジルアンモニウムクロライド、N-アルキル(Cl4-18)ジメチル-ベンジルアンモニウムクロライド、N-テトラデシルジメチルベンジルアンモニウムクロライド一水和物、ジメチルジデシルアンモニウムクロライド、N-アルキルおよび(C12-14)ジメチル1-ナフチルメチルアンモニウムクロライド、トリメチルアンモニウムハライド、アルキル-トリメチルアンモニウム塩、ジアルキル-ジメチルアンモニウム塩、ラウリルトリメチルアンモニウムクロライド、エトキシル化されたアルキルアミドアルキルジアルキルアンモニウム塩、エトキシル化されたトリアルキルアンモニウム塩、ジアルキルベンゼンジアルキルアンモニウムクロライド、N-ジデシルジメチルアンモニウムクロライド、N-テトラデシルジメチルベンジルアンモニウム、クロライド一水和物、N-アルキル(C12-14)ジメチル1-ナフチルメチルアンモニウムクロライド、ドデシルジメチルベンジルアンモニウムクロライド、ジアルキルベンゼンアルキルアンモニウムクロライド、ラウリルトリメチルアンモニウムクロライド、アルキルベンジルメチルアンモニウムクロライド、アルキルベンジルジメチルアンモニウムブロミド、C12トリメチルアンモニウムブロミド、C15トリメチルアンモニウムブロミド、C17トリメチルアンモニウムブロミド、ドデシルベンジルトリエチルアンモニウムクロライド、ポリ-ジアリルジメチルアンモニウムクロライド（DADMAC）、ジメチルアンモニウムクロライド、アルキルジメチルアンモニウムハロゲン化物、トリセチルメチルアンモニウムクロライド、デシルトリメチルアンモニウムブロミド、ドデシルトリエチルアンモニウムブロミド、テトラデシルトリメチルアンモニウムブロミド、メチルトリオクチルアンモニウムクロライド、POLYQUAT 10（商標）、テトラブチルアンモニウムブロミド、ベンジルトリメチルアンモニウムブロミド、コリンエステル、ベンザルコニウムクロライド、ステアラルコニウムクロライド化合物、セチルピリジニウムブロミド、セチルピリジニウムクロライド、四級ポリオキシエチルアルキルアミンのハロゲン塩、MIRAPOL（商標）、ALKAQUAT（商標）、アルキルピリジニウム塩；アミン、アミン塩、アミンオキシド、イミドアゾリニウム塩、プロトン化された四級アクリルアミド、メチル化された四級重合体、および陽イオン性グアー（guar）。
【請求項１３】
生体付着性である、請求項1〜12のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１４】
活性物質が結晶相、非晶相、半結晶相、半非晶相、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項1〜13のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１５】
活性物質粒子の有効平均粒径が、約1900nm未満、約1800nm未満、約1700nm未満、約1600nm未満、約1500nm未満、約1400nm未満、約1300nm未満、約1200nm未満、約1100nm未満、約1000nm未満、約900nm未満、約800nm未満、約700nm未満、約600nm未満、約500nm未満、約400nm未満、約300nm未満、約250nm未満、約200nm未満、約100nm未満、約75nm未満、および約50nm未満からなる群より選択される、請求項1〜14のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１６】
請求項1記載の活性物質組成物の有効平均粒径と異なる有効平均粒径を有する少なくとも1つのさらなる活性物質組成物をさらに含む、請求項1〜15のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１７】
活性物質が、以下からなる群より選択される、請求項1〜16のいずれか一項記載の組成物：
機能性食品、COX-2阻害剤、レチノイド、抗癌剤、NSAIDS、タンパク質、ペプチド、ヌクレオチド、抗肥満薬、栄養補助食品、カロテノイド、副腎皮質ステロイド、エラスターゼ阻害剤、抗真菌薬、腫瘍学療法、抗嘔吐薬、鎮痛剤、心臓血管薬、抗炎症薬、駆虫薬、抗不整脈薬、抗生物質、血液凝固阻止剤、抗うつ薬、抗糖尿病薬、抗癲癇薬、抗ヒスタミン剤、降圧薬、抗ムスカリン剤、抗放線菌薬、抗腫瘍薬、免疫抑制薬、抗甲状腺剤、抗ウイルス薬、抗不安薬、鎮静剤、収斂剤、βアドレナリン受容体遮断剤、血液製剤および代用品、強心剤、造影剤、副腎皮質ステロイド、咳抑制剤、診断薬剤、診断画像化剤、利尿剤、ドーパミン作動薬、止血剤、免疫薬、脂質調節薬、筋弛緩剤、副交感神経作動薬、甲状腺傍のカルシトニンおよびバイホスホナート（biphosphonate）、プロスタグランジン、放射性薬物、性ホルモン、抗アレルギー薬、刺激薬、食欲減退剤、交感神経作動薬、甲状腺薬、血管拡張薬、キサンチン、アシクロビル、アルプラゾラム、アルトレタミン（altretamine）、アミロライド、アミオダロン、ベンズトロピンメシレート、ブプロピオン、カベルゴリン、カンデサルタン、セリバスタチン、クロルプロマジン、シプロフロキサシン、シサプリド、クラリスロマイシン、クロニジン、クロピドグレル、シクロベンザプリン、シプロヘプタジン、デラビルジン、デスモプレッシン、ジルチアゼム、ジピリダモール、ドラセトロン（dolasetron）、マレイン酸エナラプリル、エナラプリラート、ファモチジン、フェロジピン、フラゾリドン、グリピジド、イルベサルタン、ケトコナゾール、ランソプラゾール、ロラタジン、ロクサピン、メベンダゾール、メルカプトプリン、乳酸ミルリノン、ミノサイクリン、ミトキサントロン、ネルフィナビルメシレート、ニモジピン、ノルフロキサシン、オランザピン、オメプラゾール、ペンシクロビル、ピモジド、タコリムス（tacolimus）、クアゼパム、ラロキシフェン、リファブチン、リファンピン、リスペリドン、リザトリプタン（rizatriptan）、サキナビル、セルトラリン、シルデナフィル、アセチル-スルフィソキサゾール、テマゼパム、チアベンダゾール、チオグアニン、トランドラプリル、トリアムテレン、トリメトレキセート、トログリタゾン、トロバフロキサシン、ベラパミル、硫酸ビンブラスチン、ミコフェノール酸、アトバコン、アトバコン、プログアニル、セフタジジム、セフロキシム、エトポシド、テルビナフィン、サリドマイド、フルコナゾール、アムサクリン、ダカルバジン、テニポシド、アセチルサリチル酸、ならびに皮膚への適用に有用な活性物質。
【請求項１８】
機能性食品が、栄養補助食品、ビタミン、ミネラル、薬用植物、ルテイン、葉酸、脂肪酸、果実抽出物、野菜抽出物、ホスファチジルセリン、リポ酸、メラトニン、グルコサミン/コンドロイチン、バルバドスアロエ、グッグル、グルタミン、アミノ酸、緑茶、リコピン、全体食品、食品添加物、薬用植物、植物栄養素、抗酸化剤、果実のフラボノイド成分、月見草油、亜麻仁、魚油、海洋動物油、およびプロバイオティクスからなる群より選択される、請求項17記載の組成物。
【請求項１９】
抗癌剤が、アルキル化剤、代謝拮抗剤、アントラセンジオン、天然物、ホルモン、アンタゴニスト、放射線増感剤、白金配位錯体、副腎皮質性抑制剤、免疫抑制剤、置換された尿素、およびCOX-2阻害剤からなる群より選択される、請求項17記載の組成物。
【請求項２０】
（a）アルキル化剤が、クロルメチン（chlormethine）、クロラムブシル（chlorambucile）、メルファラン、ウラムスチン（uramustine）、マンノムスチン（mannomustine）、エストラムスチンホスフェート（extramustinephoshate）、メクロレタミンオキシド（mechlore-thaminoxide）、シクロホスファミド、イホスファミド、トリホスファミド（trifosfamide）、トレタミン（tretamine）、チオテパ、トリアジクオン、マイトマイシン、ブスルファン、ピポスルファン、ピポスルファム（piposulfam）、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ストレプトゾトシン（streptozotocine）、ミトブロニトール（mitobronitole）、ダカルバジン、およびプロカルバジンからなる群より選択される；または、
（b）代謝拮抗剤が、メトトレキセート、フルオロウラシル、フロクスウリジン、テガフール、シタラビン、イドクスウリジン、フルシトシン、メルカプトプリン、チオグアニン、アザチオプリン、チアミプリン（tiamiprine）、ビダラビン、ペントスタチン、およびピューロマイシン（puromycine）からなる群より選択される；または、
（c）天然物が、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エトポシド、テニポシド、アドリアマイシン（adriamycine）、ダウノマイシン（daunomycine）、ドクチノマイシン（doctinomycin）、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ミトラマイシン、ブレオマイシン、マイトマイシン、L-アスパラギナーゼ、α-インターフェロン、カンプトセシン、タキソール、およびレチノイン酸からなる群より選択される；または、
（d）ホルモンもしくはアンタゴニストが、プレドニゾン、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、ジエチルスチルベストロール、エチニルエストラジオール、タモキシフェン、プロピオン酸テストステロン、フルオキシメステロン、フルタミド、ロイプロリドからなる群より選択される；または、
（e）抗癌薬が、シスプラチン、カルボプラチン、ミトキサントロン、ヒドロキシ尿素、ミトタン、アミノグルテチミド、シクロスポリン、アザチオプリン、スルファサラジン、メトキサレン、およびサリドマイドからなる群より選択される、
請求項19記載の組成物。
【請求項２１】
NSAIDが、ナブメトン、チアラミド、プロカゾン（proquazone）、ブフェキサマック、フルミゾール（flumizole）、エピラゾール（epirazole）、チノリジン、チメガジン、ダプソン、アスピリン、ジフルニサル、ベノリレート（benorylate）、ホスフォサル（fosfosal）、ジクロフェナク、アルクロフェナク、フェンクロフェナク（fenclofenac）、エトドラク、インドメタシン、スリンダク、トルメチン、フェンチアザク、チロミソール（tilomisole）、カルプロフェン（carprofen）、フェンブフェン、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、オキサプロジン、スプロフェン、チアプロフェン酸、イブプロフェン、ナプロキセン、フェノプロフェン、インドプロフェン、ピルプロフェン、フルフェナミック（flufenamic）、メフェナミック（mefenamic）、メクロフェナミック（meclofenamic）、ニフルミック（niflumic）、オキシフェンブタゾン、フェニルブタゾン、アパゾン、フェプラゾン、ピロキシカム、スドキシカム（sudoxicam）、イソキシカム（isoxicam）、およびテノキシカムからなる群より選択される、請求項17記載の組成物。
【請求項２２】
COX-2阻害剤が、ニメスリド（nimesulide）、セレコキシブ、ロフェコキシブ、メロキシカム、バルデコキシブ（valdecoxib）、パレコキシブ（parecoxib）、エトリコキシブ（etoricoxib）、フルルビプロフェン、ナブメトン、エトドラク、イグラチモド（iguratimod）、フロスリド（flosulide）、ピロキシカム、ジクロフェナク、ルミラコキシブ（lumiracoxib）、モンテルカスト（monteleukast）、プランルカスト、ヘプチニルスルフィド（heptinylsulfide）、
2007511513.tif 000006
からなる群より選択される、請求項17記載の組成物。
【請求項２３】
活性物質粒子が、約2ミクロン未満、約1900nm未満、約1800nm未満、約1700nm未満、約1600nm未満、約1500nm未満、約1400nm未満、約1300nm未満、約1200nm未満、約1100nm未満、約1000nm未満、約900nm未満、約800nm未満、約700nm未満、約600nm未満、約500nm未満、約400nm未満、約300nm未満、約250nm未満、約200nm未満、約150nm未満、約100nm未満、約75nm未満、および約50nm未満からなる群より選択される有効平均粒径を有するように、哺乳類への投与の際に活性物質粒子が再分散する、請求項1〜22のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２４】
活性物質粒子が、約2ミクロン未満、約1900nm未満、約1800nm未満、約1700nm未満、約1600nm未満、約1500nm未満、約1400nm未満、約1300nm未満、約1200nm未満、約1100nm未満、約1000nm未満、約900nm未満、約800nm未満、約700nm未満、約600nm未満、約500nm未満、約400nm未満、約300nm未満、約250nm未満、約200nm未満、約150nm未満、約100nm未満、約75nm未満、および約50nm未満からなる群より選択される有効平均粒径を有するように、生物関連媒体中で再分散する、請求項1〜23のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２５】
生物関連媒体が、水、水性電解質溶液、塩の水溶液、酸の水溶液、塩基の水溶液、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項24記載の組成物。
【請求項２６】
液体剤形に製剤化された組成物であって、剤形が、2000mPa・s未満、約2000mPa・s〜約1mPa・s、約1900mPa・s〜約1mPa・s、約1800mPa・s〜約1mPa・s、約1700mPa・s〜約1mPa・s、約1600mPa・s〜約1mPa・s、約1500mPa・s〜約1mPa・s、約1400mPa・s〜約1mPa・s、約1300mPa・s〜約1mPa・s、約1200mPa・s〜約1mPa・s、約1100mPa・s〜約1mPa・s、約1000mPa・s〜約1mPa・s、約900mPa・s〜約1mPa・s、約800mPa・s〜約1mPa・s、約700mPa・s〜約1mPa・s、約600mPa・s〜約1mPa・s、約500mPa・s〜約1mPa・s、約400mPa・s〜約1mPa・s、約300mPa・s〜約1mPa・s、約200mPa・s〜約1mPa・s、約175mPa・s〜約1mPa・s、約150mPa・s〜約1mPa・s、約125mPa・s〜約1mPa・s、約100mPa・s〜約1mPa・s、約75mPa・s〜約1mPa・s、約50mPa・s〜約1mPa・s、約25mPa・s〜約1mPa・s、約15mPa・s〜約1mPa・s、約10mPa・s〜約1mPa・s、および約5mPa・s〜約1mPa・sからなる群より選択される、20℃、ずれ率0.1（1/s）で測定された粘性を有する、請求項1〜25のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２７】
剤形の粘性が、1mlあたりほぼ同濃度の活性物質における同一活性物質の非ナノ粒子組成物の液体剤形の粘性の、約1/200未満、約1/100未満、約1/50未満、約1/25未満、および約1/10未満からなる群より選択される、請求項26記載の組成物。
【請求項２８】
剤形の粘性が、1mlあたりほぼ同濃度の活性物質における同一活性物質の非ナノ粒子組成物の液体剤形の粘性の、約5%未満、約10%未満、約15%未満、約20%未満、約25%未満、約30%未満、約35%未満、約40%未満、約45%未満、約50%未満、約55%未満、約60%未満、約65%未満、約70%未満、約75%未満、約80%未満、約85%未満、および約90%未満からなる群より選択される、請求項27または28記載の組成物。
【請求項２９】
投与に続く哺乳類被検体の血漿における分析時に、活性物質のTmaxが、同用量で投与された同一活性物質の非ナノ粒子組成物のTmaxよりも小さい、請求項1〜28のいずれか一項記載の組成物。
【請求項３０】
Tmaxが、同用量で投与された同一活性物質の非ナノ粒子組成物によって示されるTmaxの約90%以下、約80%以下、約70%以下、約60%以下、約50%以下、約30%以下、約25%以下、約20%以下、約15%以下、約10%以下、および約5%以下のTmaxからなる群より選択される、請求項29記載の組成物。
【請求項３１】
投与に続く哺乳類被検体の血漿における分析時に、活性物質のCmaxが、同用量で投与された同一活性物質の非ナノ粒子組成物のCmaxを上回る、請求項1〜30のいずれか一項記載の組成物。
【請求項３２】
Cmaxが、同用量で投与された同一活性物質の非ナノ粒子組成物によって示されるCmaxよりも、少なくとも約50%、少なくとも約100%、少なくとも約200%、少なくとも約300%、少なくとも約400%、少なくとも約500%、少なくとも約600%、少なくとも約700%、少なくとも約800%、少なくとも約900%、少なくとも約1000%、少なくとも約1100%、少なくとも約1200%、少なくとも約1300%、少なくとも約1400%、少なくとも約1500%、少なくとも約1600%、少なくとも約1700%、少なくとも約1800%、または少なくとも約1900%大きいCmaxからなる群より選択される、請求項31記載の組成物。
【請求項３３】
投与に続く哺乳類被検体の血漿における分析時に、活性物質のAUCが、同用量で投与された同一活性物質の非ナノ粒子組成物のAUCを上回る、請求項1〜32のいずれか一項記載の組成物。
【請求項３４】
AUCが、同用量で投与された同一活性物質の非ナノ粒子製剤によって示されるAUCよりも、少なくとも約25%、少なくとも約50%、少なくとも約75%、少なくとも約100%、少なくとも約125%、少なくとも約150%、少なくとも約175%、少なくとも約200%、少なくとも約225%、少なくとも約250%、少なくとも約275%、少なくとも約300%、少なくとも約350%、少なくとも約400%、少なくとも約450%、少なくとも約500%、少なくとも約550%、少なくとも約600%、少なくとも約750%、少なくとも約700%、少なくとも約750%、少なくとも約800%、少なくとも約850%、少なくとも約900%、少なくとも約950%、少なくとも約1000%、少なくとも約1050%、少なくとも約1100%、少なくとも約1150%、または少なくとも約1200%大きいAUCからなる群より選択される、請求項33記載の組成物。
【請求項３５】
摂食下で投与された時に、絶食条件と比較して有意に異なる吸収レベルを生じない、請求項1〜34のいずれか一項記載の組成物。
【請求項３６】
絶食状態に対して、摂食状態で投与された時に、本発明の活性物質組成物の吸収における差異が、約100%未満、約90%未満、約80%未満、約70%未満、約60%未満、約50%未満、約40%未満、約30%未満、約25%未満、約20%未満、約15%未満、約10%未満、約5%未満、および約3%未満からなる群より選択される、請求項35記載の組成物。
【請求項３７】
絶食状態のヒトに対する組成物の投与が、摂食状態の被検体に対する組成物の投与と生物学的に同等である、請求項1〜36のいずれか一項記載の組成物。
【請求項３８】
「生物学的同等性」が、
（a）CmaxおよびAUCの両方についての、0.80〜1.25の間の90%信頼区間；または
（b）AUCについての0.80〜1.25の間の90%信頼区間、およびCmaxについての0.70〜1.43の間の90%信頼区間
によって確立される、請求項37記載の組成物。
【請求項３９】
経口投与、肺投与、直腸投与、眼投与、結腸投与、非経口投与、槽内投与、腟内投与、腹腔内投与、局部投与、口内投与、経鼻投与、および局所投与からなる群より選択される投与のために製剤化される、請求項1〜38のいずれか一項記載の組成物。
【請求項４０】
液状分散、経口懸濁液、ゲル、エアロゾル、軟膏、乳剤、錠剤、カプセル、サシェ剤、ロゼンジ、粉末、丸剤、顆粒、徐放製剤、速溶製剤、凍結乾燥製剤、遅延放出製剤、持続放出製剤、拍動放出製剤（pulsatile release formulation）、および即時放出製剤と徐放製剤との混合物からなる群より選択される剤形へと製剤化される、請求項1〜39のいずれか一項記載の組成物。
【請求項４１】
1つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤、担体、またはこれらの組み合わせをさらに含む、請求項1〜40のいずれか一項記載の組成物。
【請求項４２】
薬剤製造のための、請求項1〜41のいずれか一項記載の組成物の使用法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、1つまたは複数のナノ粒子活性物質の組成物、少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤、および少なくとも1つの抗体またはその断片を対象とする。また、所望の部位への1つまたは複数の活性物質の標的化送達のための、このような組成物を使用する方法も本発明に包含される。1つまたは複数の活性物質は、好ましくは約2ミクロン未満の粒径を有する。標的化される送達は、たとえば、疾患感知、画像化、または薬物送達のために使用することができる。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
I. ナノ粒子活性物質組成物に関する背景
ナノ粒子活性物質組成物は、最初に米国特許第5,145,684号（「684号特許」）に記載されており、架橋されていない表面安定剤をこれらの表面に吸着し、もしくはこれらの表面と結合された難溶性の治療薬または診断薬からなる粒子である。684号特許は、抗体または抗体断片を含む組成物を記載していないので、本発明は、684号特許に開示されたもの以上の改善がある。
【０００３】
ナノ粒子活性物質組成物を作製する方法は、たとえば米国特許第5,518,187号および第5,862,999号であるMethod of Grinding Pharmaceutical Substances、米国特許第5,718,388号であるContinuous Method of Grinding Pharmaceutical Substances；および米国特許第5,510,118号であるProcess of Preparing Therapeutic Compositions Containing Nanoparticlesに記載されている。
【０００４】
また、ナノ粒子活性物質組成物は、たとえば以下に記載されており、これらの全てが、具体的に参照として組み入れられる：米国特許第5,298,262号であるUse of Ionic Cloud Point Modifiers to Prevent Particle Aggregation During Sterilization、同第5,302,401号であるMethod to Reduce Particle Size Growth During Lyophilization、同第5,318,767号であるX-Ray Contrast Compositions Useful in Medical Imaging、同第5,326,552号であるNovel Formulation For Nanoparticulate X-Ray Blood Pool Contrast Agents Using High Molecular Weight Non-ionic Surfactants、同第5,328,404号であるMethod of X-Ray Imaging Using Iodinated Aromatic Propanedioates、同第5,336,507号であるUse of Charged Phospholipids to Reduce Nanoparticle Aggregation、同第5,340,564号であるFormulations Comprising Olin 10-G to Prevent Particle Aggregation and Increase Stability、同第5,346,702号であるUse of Non-Ionic Cloud Point Modifiers to Minimize Nanoparticulate Aggregation During Sterilization、同第5,349,957号であるPreparation and Magnetic Properties of Very Small Magnetic-Dextran Particles、同第5,352,459号であるUse of Purified Surface Modifiers to Prevent Particle Aggregation During Sterilization、同第5,399,363号および5,494,683号であるSurface Modified Anticancer Nanoparticles、同第5,401,492号であるWater Insoluble Non-Magnetic Manganese Particles as Magnetic Resonance Enhancement Agents、同第5,429,824号であるUse of Tyloxapol as a Nanoparticulate Stabilizer、同第5,447,710号であるMethod for Making Nanoparticulate X-Ray Blood Pool Contrast Agents Using High Molecular Weight Non-ionic Surfactants、同第5,451,393号であるX-Ray Contrast Compositions Useful in Medical Imaging、同第5,466,440号であるFormulations of Oral Gastrointestinal Diagnostic X-Ray Contrast Agents in Combination with Pharmaceutically Acceptable Clays、同第5,470,583号であるMethod of Preparing Nanoparticle Compositions Containing Charged Phospholipids to Reduce Aggregation、同第5,472,683号であるNanoparticulate Diagnostic Mixed Carbamic Anhydrides as X-Ray Contrast Agents for Blood Pool and Lymphatic System Imaging、同第5,500,204号であるNanoparticulate Diagnostic Dimers as X-Ray Contrast Agents for Blood Pool and Lymphatic System Imaging、同第5,518,738号であるNanoparticulate NSATD Formulations、同第5,521,218号であるNanoparticulate Iododipamide Derivatives for Use as X-Ray Contrast Agents、同第5,525,328号であるNanoparticulate Diagnostic Diatrizoxy Ester X-Ray Contrast Agent for Blood Pool and Lymphatic System Imaging、同第5,543,133号であるProcess of Preparing X-Ray Contrast Compositions Containing Nanoparticles、同第5,552,160号であるSurface Modified NSAID Nanoparticles、同第5,560,931号であるFormulations of Compounds as Nanoparticulate Dispersions in Digestible Oils or Fatty Acids、同第5,565,188号であるPolyalkylene Block Copolymers as Surface Modifiers for Nanoparticles、同第5,569,448号であるSulfated Non-ionic Block Copolymer Surfactant as Stabilizer Coatings for Nanoparticle Compositions、同第5,571,536号であるFormulations of Compounds as Nanoparticulate Dispersions in Digestible Oils or Fatty Acids、同第5,573,749号であるNanoparticulate Diagnostic Mixed Carboxylic Anydrides as X-Ray Contrast Agents for Blood Pool and Lymphatic System Imaging、同第5,573,750号であるDiagnostic Imaging X-Ray Contrast Agents、同第5,573,783号であるRedispersible Nanoparticulate Film Matrices With Protective Overcoats、同第5,580,579号であるSite-specific Adhesion Within the GI Tract Using Nanoparticles Stabilized by'High Molecular Weight, Linear Poly (ethylene Oxide) Polymers、同第5,585,108号であるFormulations of Oral Gastrointestinal Therapeutic Agents in Combination with Pharmaceutically Acceptable Clays、同第5,587,143号であるButylene Oxide-Ethylene Oxide Block Copolymers Surfactants as Stabilizer Coatings for Nanoparticulate Compositions、同第5,591,456号であるMilled Naproxen with Hydroxypropyl Cellulose as Dispersion Stabilizer、同第5,593,657号であるNovel Barium Salt Formulations Stabilized by Non-ionic and Anionic Stabilizers、同第5,622,938号であるSugar Based Surfactant for Nanocrystals、同第5,628,981号であるImproved Formulations of Oral Gastrointestinal Diagnostic X-Ray Contrast Agents and Oral Gastrointestinal Therapeutic Agents、同第5,643,552号であるNanoparticulate Diagnostic Mixed Carbonic Anhydrides as X-Ray Contrast Agents for Blood Pool and Lymphatic System Imaging、同第5,718,388号であるContinuous Method of Grinding Pharmaceutical Substances、同第5,718,919号であるNanoparticles Containing the R(-)Enantiomer of Ibuprofen、同第5,747,001号であるAerosols Containing Beclomethasone Nanoparticle Dispersions、同第5,834,025号であるReduction of Intravenously Administered Nanoparticulate Formulation Induced Adverse Physiological Reactions、同第6,045,829号であるNanocrystalline Formulations of Human Immunodeficiency Virus (HIV) Protease Inhibitors Using Cellulosic Surface Stabilizers、同第6,068,858号であるMethods of Making Nanocrystalline Formulations of Human Immunodeficiency Virus (HIV) Protease Inhibitors Using Cellulosic Surface Stabilizers、同第6,153,225号であるInjectable Formulations of Nanoparticulate Naproxen、同第6,165,506号であるNew Solid Dose Form of Nanoparticulate Naproxen、同第6,221,400号であるMethods of Treating Mammals Using Nanocrystalline Formulations of Human Immunodeficiency Virus (HIV) Protease Inhibitors、同第6,264,922号であるNebulized Aerosols Containing Nanoparticle Dispersions、同第6,267,989号であるMethods for Preventing Crystal Growth and Particle Aggregation in Nanoparticle Compositions、同第6,270,806号であるUse of PEG-Derivatized Lipids as Surface Stabilizers for Nanoparticulate Compositions、同第6,316,029号であるRapidly Disintegrating Solid Oral Dosage Form、同第6,375,986号であるSolid Dose Nanoparticulate Compositions Comprising a Synergistic Combination of a Polymeric Surface Stabilizer and Dioctyl Sodium Sulfosuccinate、同第6,428,814号であるBioadhesive Nanoparticulate Compositions Having Cationic Surface Stabilizers、同第6,431,478号であるSmall Scale Mill、同第6,432,381号であるMethods for Targeting Drug Delivery to the Upper and/or Lower Gastrointestinal Tract、同第6,592,903号であるNanoparticulate dispersions comprising a synergistic combination of a polymeric surface stabilizer and dioctyl sodium sulfosuccinate、および同第6,582,285号であるApparatus for sanitary wet milling。加えて、2002年1月31日に発表された米国特許出願第20020012675 A1号であるControlled Release Nanoparticulate Compositions、および国際公開公報第02/098565号であるSystem and Method for Milling Materialsについてのには、ナノ粒子活性物質組成物を記載しており、これらは具体的に参照として組み入れられる。これらの参照のいずれにも、抗体またはその断片を含むナノ粒子活性物質組成物を記載されていない。
【０００５】
非晶質小粒子組成物は、たとえば米国特許第4,783,484号であるParticulate Composition and Use Thereof as Antimicrobial Agent、同第4,826,689号であるMethod for Making Uniformly Sized Particles from Water-Insoluble Organic Compounds、同第4,997,454号であるMethod for Making Uniformly-Sized Particles From Insoluble Compounds、同第5,741,522号であるUltrasmall, Non-aggregated Porous Particles of Uniform Size for Entrapping Gas Bubbles Within and Methods、および同第5,776,496号であるUltrasmall Porous Particles for Enhancing Ultrasound Back Scatterに記載されている。
【０００６】
II. 抗体に関する背景
抗体は、免疫系の2つの重要な抗原認識分子のうちの1つである。その他の抗原認識分子はT細胞上に見いだされ、T細胞受容体（TcR）と呼ばれる。IgD、IgA、IgM、IgE、およびIgGとして知られる抗体または免疫グロブリン（Ig）の5つの異なるクラスがある。IgGの4つのサブクラスおよびIgAの2つのサブクラスがある。
【０００７】
抗体は、抗原を認識する。抗原は、特異的免疫応答を誘導することができる物質である。http://www.medicine.dal.ca/micro/education/pimunit/atb.htm.を参照されたい。
【０００８】
IgGによって例示される抗体は、ジスルフィド結合で連結された2つの同一の重鎖と2つの同一の軽鎖とで構成されるY形のタンパク質である。重鎖は、最も大きい（したがって、最も重い）。2つの型の軽鎖（κまたはλ）が存在し、各抗体は、どちらか一方の型を有する。重鎖および軽鎖は、折りたたまれてドメインとなり、ジスルフィド架橋によって共に保持される。
【０００９】
抗体の最も重要な2つの領域は（1）Fab領域および（2）Fc領域である。Fab領域に関して、「F」は、断片を表し、「ab」は、抗原結合を表す。これは、抗原結合が生じる領域である。抗体のFab部分は、重鎖および軽鎖の両方のN末端ドメインに作製される。この抗体のドメインは、この領域では抗体間でこのように高い可変性があるので、可変（V）ドメイン（重鎖上ではVH、軽鎖上ではVL）と呼ばれている。可変性が高いことにより、何千もの異なる抗原の認識することができる。
【００１０】
抗体のFc部分は、可変性が制限されており、（抗原結合に対する）抗体の生物活性の原因となる。Fc部分は、抗体クラス（およびサブクラス）間で変化するが、クラス内では同一である。重鎖のC末端は、Fc領域を形成する。Fc領域は、受容体結合において重要な役割を果たす。
【００１１】
抗体によって認識される抗原のそれぞれの部分は、エピトープとして公知である。抗原のそれぞれのエピトープは、抗体のFab領域の1つに対して結合する。2つのタンパク質間の相互作用は、非共有結合性の結合力を含む。従って、結合は可逆的であり、相互作用の強度は、抗原と抗体とが共にどれほど十分に「適合する」か、並びにその他のFabが結合するための第二のエピトープがあるかどうかに依存する。
【００１２】
上記のように、抗体または免疫グロブリンには、IgA、IgM、IgD、IgE、およびIgGを含む5つの異なる種類がある。IgAは、循環において低レベルで（濃度は、通常約3.5mg/mlである）単量体の形態で見いだされるが、これは、粘膜表面において最も一般的で、かつ最も活性であり、この場合、これは二量体タンパク質として現れる。IgAは、細気管支、鼻粘膜、前立腺、膣、および小腸などの粘膜表面において一次防御をもたらす。また、IgAは、唾液、涙、および母乳、特に初乳で豊富である。
【００１３】
IgMは、B細胞の表層膜上の「表面抗体」（sIgM）として、または形質細胞によって血液に分泌される5サブユニットの巨大分子として見いだすことができる。表面IgMは、膜を介して結合しなければならないので、分泌型とはFc領域が構造的に異なっている。表面IgMは、必須膜タンパク質として直接結合するものの、これは、IgE様のIgM Fc受容体とは結合しない。分泌型IgMは、「五量体」分子として見いだされる。5つのIgMサブユニットは、共に保持されて、それぞれの分子において複数の結合部位を提供する。五量体IgMは、クモ様に細菌の表面上の抗原に対して結合する。
【００１４】
IgDは、sIgMと全く同じように大部分のBリンパ球の表面上で見いだされる。これまでに、この抗体の機能は知られていないが、これが抗原受容体として作用すること、およびこれがB細胞活性化のために必要なことが示唆されている。IgDのごく小量が分泌されるが、分泌型抗体としてのその機能は、不明である。
【００１５】
IgAのように、IgEは、特に粘膜の表面にて有効である。これは、血液において、および組織においても活性である。大部分のIgEは、肥満細胞および好塩基球上のその受容体に対して結合するので、この抗体の血清濃度は、通常非常に低い。IgEの産生は、サイトカインによって制御されており、このクラスは、I型過敏性反応（アレルギー性およびアナフィラキシー性）の原因となる。IgEは、寄生虫感染に応答して非常に増大することが見いだされている。
【００１６】
IgGは、血液中で最も豊富なクラスの抗体である（血清中濃度は、13mg/mlである）。4つのサブクラスのIgGがあり（全て、単量体である）、これらは、通常抗原に対して非常に高い親和性を有する。IgMと異なり、IgGは、血流に残って、組織に入ることができる。また、IgGは、胎盤関門を通過する抗体の唯一のクラスである。従って、IgGは、新生児自身の免疫系が抗体産生に寄与することができるまで、新生児のための唯一の抗体保護を提供する。産生される抗体IgGのサブクラスは、サイトカインの存在（特に、IL-4およびIL-2）に依存し、それぞれのクラスは、それ自体が特別な活性を有する。また、IgGは、血液および組織において毒素（たとえば、細菌感染から）を中和するのに重要な役割を果たす。http://www.medicine.dal.ca/micro/education/pimunit/atb.htmを参照されたい。
【００１７】
抗体分子は、その他の分子上の特定の形状を非常に正確に「認識」して結合するため、これらは、標的化ツールとして使用することができる。たとえば、The Study of Antibody Recognition（著作権）、http://www.antibodyresource.com/を参照されたい。
【００１８】
自己と複数の異なる種との両者間を区別するために、抗体は、分子レベルでの認識を高度に識別する方法を有する必要がある。この特異性は、抗体結合の相補的性質の結果である。抗体結合のこの特徴は、抗原と抗体結合ポケットに存在するアミノ酸残基との間の免疫学的に調整された相互作用（すなわち、電荷-電荷、双極子-双極子、H-結合形成、およびファンデルワールス）の結果である。20個のアミノ酸の多様な化学的性質を利用することによって、免疫系は、表面上任意の所与の抗原の形状、電荷、および疎水性に適応することができる抗体結合ポケットのアレイを産生することができる。抗体結合の相補的性質は、X線結晶学を用いて確認された。
【００１９】
また、抗体結合によって示される高度の相補性は、これらの抗原に対する親和性の高い抗体も与える。成熟した免疫反応に関して、抗体親和性は、典型的には105〜1012M-1の範囲に入る。最近、「正常な」免疫反応の親和性の上限がほぼ1010M-1であることが提唱されている。
【００２０】
2つの型の抗体試料が公知である。第一の型であるポリクローナル抗体は、ヤギ、ヒツジ、マウス、または最も都合よくはウサギなどの哺乳類を免疫することによって得ることができる。免疫化の後、血液を取り除いて（周期的に、必要に応じて）、血清から抗体を直接精製することができる。ポリクローナル抗体は、抗体産生のためにコードする遺伝形質が異なる種々のB細胞から生じる。ポリクローナル試料では、いくつかの抗体が、動物を免疫した抗原に対して特異的である。残りの抗体は、動物がその生存期間を通して曝露されたその他の異なる抗原と遭遇することによって誘発された。
【００２１】
抗体試料の第二の型であるモノクローナル抗体は、より複雑な過程に由来する。本明細書においては、哺乳類（たいていは近交系マウス）を抗原で免疫する。繰り返し免疫化後に、動物の脾臓を取り出す。脾臓は、B細胞産生を担っているので、脾細胞は、抗体産生を生じさせる遺伝情報を含む。残念ながら、これらの脾細胞を培養することはできない。その結果、これらは、これらのインビトロで増殖する能力のために、いわゆる、「不死の」骨髄腫細胞と融合される。ハイブリドーマ細胞と呼ばれる、得られた融合細胞を、比色（colorometric）酵素結合免疫吸光アッセイ法（ELISA）などの適切な免疫アッセイ法でスクリーニングする。このアッセイ法を使用することにより、抗原特異的抗体を産生するハイブリドーマ細胞を選択することができる。所与のハイブリドーマ細胞は、単一のB細胞に由来するため、これは、モノクローナル抗体を産生する。一旦、単一のハイブリドーマ系統が選択されたら、これを健康なマウスに注射する。骨髄腫細胞様のハイブリドーマ細胞は、腫瘍を生じる能力を有し；従って、ハイブリドーマ系統で注射後、腫瘍は、宿主マウス内で増殖する。この腫瘍が増殖したときに、これは腹水（モノクローナル抗体が豊富な体液）を産生する。
【００２２】
ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体はどちらも、特定の利点を提供する。ポリクローナル抗体は、モノクローナル抗体技術の費用と比較して、産生するのが安価である。加えて、免疫された動物の血清から大量のポリクローナル抗体（〜10mg/mL）を産生することができる。最後に、高親和性ポリクローナル抗体は、単に初回免疫化の2ヵ月後〜3ヵ月後に単離することができる。
【００２３】
しかし、モノクローナル抗体は、ポリクローナル抗体以上の特定の利点を有する。その不死性のために、ハイブリドーマ細胞を、インビトロで凍結させ、溶解し、かつ再培養することができる。その結果、所与のモノクローナル系統について、試験のための抗体の一定かつ再生可能な供給源が存在する。加えて、所定のモノクローナル抗体の組成物は、その化学組成を分子レベルで詳細に解析することができる。たとえば、X線結晶学および遺伝子配列方法は、モノクローナル抗体にのみ適用することができる。この詳細レベルは、結合に関する機構の問題を試験するときに、特に有用である。
【００２４】
これらが生理学的役割を果たすためには、抗体は、抗原に対して洗練された特異性および高親和性を示すことが必要とされる。これらの特性により、標的化ツールとして抗体を使用することができる。
【００２５】
III. PEG誘導体化された表面安定剤に関する背景
ナノ粒子活性物質のためのポリエチレングリコール（PEG）誘導体化された表面安定剤は、最初に米国特許第6,270,806号に記載されており、これは、具体的に参照として組み入れられる。このような表面安定剤の例は、PEG誘導体化されたリン脂質、PEG誘導体化されたコレステロール、PEG誘導体化されたコレステロール誘導体、PEG誘導体化されたビタミンA、またはPEG誘導体化されたビタミンE表面安定剤である。
【００２６】
PEG誘導体化された脂質は、たとえば、米国特許第5,672,662号（「662号特許」）であるPoly (Ethylene Glycol) and Related Polymers Monosubstituted with Propionic or Butanoic Acids and Functional Derivatives Thereof for Biotechnical Applications、およびYuda et al., Prolongation of Liposome Circulation Time by Various Derivatives of Polyethyleneglycols, Biol. Pharm. Bull., 19:1347-1351, 1347-1348, 1349 (1996)に記載されている。
【００２７】
PEG誘導体化された表面安定剤は、いくつかの理由のために望ましいことがある。たとえば、PEG誘導体化された表面安定剤は、成分ナノ粒子活性物質についての循環時間を増大させることができる。加えて、PEG誘導体化された表面安定剤は、成分ナノ粒子活性物質の毒性を減少させることができる。そのうえ、PEG誘導体化された表面安定剤は、成分ナノ粒子活性物質の安定性を増大させることができる。
【００２８】
IV. 標的化された薬剤送達に関する背景
新規治療分子の開発の進歩が、これらの分子の治療的使用を可能にするための送達技術の開発の進歩を上回った。たとえば、核においてのみ活性であるアンチセンスオリゴヌクレオチドは、莫大な可能性を有するが；しかし、これらの核コンパートメントへの輸送があまりに乏しいことにより、これらにはごくわずかな価値しか与えられなかった。その他の例は、プラスミドDNA、転写因子、および細胞内標的に対する抗体を含む。従って、特定の細胞下の位置に対する治療薬の標的化は、重要な挑戦である。さらに癌転移または炎症の部位などの体の特定の位置への高分子薬物の送達の挑戦も、満足されず、かつ重要な挑戦の好例である。
【００２９】
新薬の有用性を増大することに加えて、標的化された送達は、公知の薬物の毒性を減少させることもできる。Pasqualini et al., Cancer treatment by targeted drug delivery to tumor vasculature in a mouse model, Science, 279:323-4 （Jan. 16, 1998）を参照されたい。
【００３０】
良好な薬物標的化は、非常に複雑な問題である。これは、種々の分布上および速度過程に、並びに時に薬物の代謝および性質に影響を及ぼすことを含む。薬物標的化をデザインする際に考慮される要素は、生物学的および細胞の膜の性質、薬物受容体の分布および存在、並びに薬物代謝を担う酵素、時間-血漿濃度プロフィール、および局所血流を含む。N. Boder., Retrometablic Approaches to Drug Targeting, pp. 1-27, in Membranes and Barriers: Targeted Drug Delivery, NIDA Rsearch Monograph, Number 154 (1995)を参照されたい。
【００３１】
この過程を補助する一つの方法は、関心対象の標的部位に対して物理的に薬物を適用することである。たとえば、Durect Corporationは、薬物流を移植片などの標的器官、組織、または合成医学的構造に向けるために使用することができる専売の小型化カテーテル技術を開発する。部位特異的送達では、薬物の治療的濃度を、同様の用量に全身を曝露することなく所望の標的に対して投与することができる。http://www.durect.com/wt/durect/page_name/deliveryを参照されたい。この方法の不利な点とは、このような技術を使用して、正確に、粘液細胞、癌細胞、上皮細胞などの特定の細胞型を常に標的化することができないことである。
【００３２】
薬物送達において、両親媒性成分の自己構築が長年探索されており、最も顕著な例は、リポソーム担体の開発である。この挑戦は、これらの系の固有の不安定性により、これらの価値を比較的少なくしてしまったという点で、むしろフラストレーションを引き起こした。肝臓の細網内皮系による体循環からのリポソームの迅速な除去は、リン脂質成分のPEG化（PEGylation）によって対処されてきたが、これは、PEG化されていない脂質製剤は、循環から迅速に消去され、適度なPEG化では、劇的に超分子集合体の安定性を減少するという板挟みが生じた。http://www.biomed.mat.ethz.ch/research/res_topics/Project3を参照されたい。
【００３３】
薬物標的化のためのその他のアプローチは、退行代謝性（retrometabolic）アプローチを含む。N. Bodor, Retrometabolic Approaches to Drug Targeting, pp. 1-27, in Membranes and Barriers: Targeted Drug Delivery, NIDA Research Monograph, Number 154 (1995)を参照されたい。
【００３４】
さらにその他の方法は、その構造の一部として、本質的に所望の部位を標的化する薬物をデザインすることを使用する。たとえば、Davis et al., Conformationally Constrained Peptide Drugs Targeted at the Blood-Brain Barrier, pp 47-60, in Membranes and Barriers: Targeted Drug Delivery, NIDA Research Monograph, Number 154 (1995)を参照されたい。このアプローチでの問題は、従来の既存の薬物のための薬物送達を改善するために使用することができないことである。そのうえ、このような薬物をデザインするには、費用がかかり、時間がかかり得る。
【００３５】
標的化された薬物送達のもう一つの例は、Chourasia et al., Pharmaceutical Approaches to Colon Targeted Drug Delivery Systems,  J. Pharm. Pharmaceut. Sci., 6 (1):33-66 (2003)によって記載されている。この参照では、経口送達が、治療薬の投与の広く認められた経路になったが、消化管には、薬物送達に対するいくつかの膨大な障壁が存在することを述べている。結腸薬物送達は、クローン病、潰瘍性大腸炎、結直腸癌、およびアメーバ症などの、結腸と関連した局部疾患の治療のためだけでなく、タンパク質および治療的ペプチドの送達のためのその潜在性のためにも、薬物送達のために重要性の増大が進んだ。
【００３６】
経口投与された薬物を結腸へ標的化するための種々の戦略は、担体と薬物の共有結合、pH感受性重合体でのコーティング、時限放出される系の製剤、結腸細菌によって特異的に分解される担体の開発、生体付着性系、および浸透圧制御された薬物送達系を含む。
【００３７】
担体と薬物の共有結合は、薬物の結合または生物学的性質を変化させる可能性があり、従って、望ましくない。そのうえ、これらのアプローチはいずれも、実質的に任意の薬物を任意の所望の部位に標的化するように適用できない。
【００３８】
当技術分野において、より優れた選択性、局在化された活性物質送達、および従来の活性物質溶液もしくは微小粒子製剤、または従来技術のナノ粒子活性物質製剤で観察される有効性を有する標的化活性物質送達の方法に対する要求がある。本発明は、これらの要求を満たす。
【発明の開示】
【００３９】
発明の概要
本発明は、好ましくは約2ミクロン未満の有効平均粒径を有する、1つまたは複数のナノ粒子活性物質を含む組成物を、少なくとも1つの抗体またはその断片を利用して作製することができるという驚くべきかつ予想外の発見を対象とする。本組成物は、所望の標的部位に1つまたは複数の活性物質の送達を標的化するのに有用である。標的化された送達は、たとえば疾患検出、画像化、または薬物送達のために使用することができる。
【００４０】
本発明の一つの態様は、（1）好ましくは約2ミクロン未満の粒径を有する、1つまたは複数の活性物質；（2）1つもしくは複数の活性物質の表面に吸着されたか、または結合した少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤；および（3）少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤と直接もしくは間接的に結合した少なくとも1つの抗体、またはその断片を含む組成物を対象とする。抗体またはその断片は、関心対象の標的部位と特異的に結合する。好ましくは、1つまたは複数の活性物質は、少なくとも1つの液体媒体に難溶性である。
【００４１】
また、本発明は、本発明の組成物を含む薬学的組成物を包含する。薬学的組成物は、好ましくは、（1）好ましくは約2ミクロン未満の粒径を有する、少なくとも1つの活性物質；（2）活性物質の表面に吸着されたか、または結合した少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤；（3）少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤と直接もしくは間接的に結合した少なくとも1つの抗体、またはその断片；および（4）少なくとも1つの薬学的に許容される担体、並びに任意の所望の賦形剤を含む。
【００４２】
本発明は、本発明の組成物を作製する方法をさらに開示する。このような方法は、活性物質を少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤および少なくとも1つの抗体またはその断片と、活性物質/PEG誘導体化された表面安定剤/抗体組成物を提供するために十分な時間および条件下で接触させることを含む。生じる活性物質は、好ましくは約2ミクロン未満の粒径を有する。少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤および少なくとも1つの抗体またはその断片は、活性物質の破砕の前、その間、またはその後のいずれかに活性物質と接触させることができる。好ましくは、PEG誘導体化された表面安定剤は、活性物質の破砕の間に活性物質と接触させ、次いで抗体またはその断片を、活性物質/PEG誘導体化された表面安定剤組成物と接触させる。
【００４３】
最後に、本発明は、本発明の組成物を利用する標的化された活性物質送達の方法を包含する。このような方法では、本発明の組成物中に存在する抗体またはその断片は、関心対象の部位に特異的に標的化し、または結合する。これにより、本発明の組成物中に存在する活性物質が、関心対象の標的部位に送達されることとなる。抗体、または結合能を有するその断片は、関心対象の任意の部位と結合するように選ぶことができる。本方法により、より有効な、かつより少用量で活性物質を投与することが必要な組成物を生じることができる。
【００４４】
前述の一般的記述、並びに以下の図面の簡単な記述および詳細な記述は、両者とも例示的かつ説明的であり、主張したとおりの本発明のさらなる説明を提供することが企図される。その他の目的、利点、および新規の特徴は、以下の本発明の詳細な記載から当業者には直ちに明らかであろう。
【００４５】
発明の詳細な説明
本発明は、好ましくは約2ミクロン未満の粒径を有する、1つまたは複数の活性物質を含む組成物を、少なくとも1つの抗体またはその断片を利用して作製することができるという驚くべきかつ予想外の発見を対象とする。本組成物は、所望の部位に1つまたは複数の活性物質の送達を標的化するのに有用である。本組成物および方法により、劇的に優れた生物学的利用能、減少した毒性および望ましくない副作用、治療活性の迅速な発症、並びに従来技術活性物質組成物と比較した有効性を生じさせことができる。
【００４６】
標的化された送達は、たとえば疾患検出、画像化、または薬物送達のために使用することができる。たとえば、Akerman et al., Nanocrystal Targeting In Vivo, PNAS, 12617-12621 （Oct. 1, 2002）は、特異的血管マーカーを標的化するペプチドがそれに付着された半導体量子ドット（qdot）を利用する疾患検出および標的化を記載する。この参照は、ナノ粒子活性物質の使用も、標的化ツールとしての抗体も教示せず、または示唆しない。
【００４７】
本発明の活性物質送達系は、病気にかかった生物学的表面または関心対象の標的部位に対して高濃度の活性物質を選択的に分配するための独特の機会を提供する。病気にかかったか、または標的部位に対する活性物質曝露を最適化することにより、治療または診断の潜在性を劇的に増強することができる。
【００４８】
本発明の組成物は（1）好ましくは約2ミクロン未満の粒径を有し、かつ好ましくは少なくとも1つの液体媒体に難溶性である、1つまたは複数の活性物質；（2）1つもしくは複数の活性物質の表面に吸着されたか、または結合した少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤；および（3）たとえばリンカーを経て、少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤と直接もしくは間接的に結合されている少なくとも1つの抗体、またはその断片を含む。抗体またはその断片は、関心対象の標的部位と特異的に結合する。
【００４９】
抗体またはその断片は、適切な付着メカニズムを使用して、直接または間接的にPEG誘導体化された表面安定剤に付着することができる。たとえば、直接の結合は、抗体またはその断片をPEG誘導体化された表面安定剤に共有結合で結合することによって達成することができる。たとえば、間接的な結合は、多価のアダプター要素を使用して、またはその他の非共有結合性カップリングを経て、達成することができる。最も一般的な多価アダプターエレメントは、ビオチンおよびストレプトアビジンである。
【００５０】
また、本発明は、1つまたは複数の非毒性生理学的に許容される担体、アジュバント、または媒体（まとめて担体と称する）と共に本発明の活性物質組成物を含む。本組成物は、注射剤（たとえば、静脈内、筋肉内、または皮下）、固体、液体、またはエアロゾル形態で経口投与、膣、経鼻、直腸、眼、局部的（粉末、軟膏、または液滴）、頬側、大槽内、腹腔内、または局所的投与等のために処方することができる。
【００５１】
本発明の組成物において、抗体またはその断片が、PEG誘導体化された表面安定剤に対する付着後に、標的化のために必要とされるその結合能を保持することを予想外に発見した。本発明の標的化局面は、本発明の組成物中に存在する抗体またはその断片が、関心対象の標的部位と結合する能力に依存的である。PEG誘導体化された表面安定剤に対する直接もしくは間接的な抗体またはその断片の付着が、抗体またはその断片が関心対象の標的部位と結合する能力を変化させる場合、本発明の組成物の有用性は、劇的に減弱し、または失われるであろう。
【００５２】
抗体およびその断片は、それが相補構造を有する標的部位と非共有結合的に結合するように、抗体、または結合能を有するその断片が、三次元構造を有する「鍵と鍵穴」機構の標的部位と結合する。従って、抗体、または結合能を有するその断片の三次元構造の修飾は、抗体が標的部位と特異的に結合する能力を破壊することができる。
【００５３】
さらに、本発明の組成物において、PEG誘導体化された表面安定剤は、表面安定剤に対する抗体またはその断片の付着後に望んだとおりに機能することも驚くべき発見であった。従来の文献で、特に米国特許第6,270,806号で広範に論議されているように、PEG誘導体化された表面安定剤は、活性物質の表面に吸着するか、または結合して、粒径増大に対して活性物質を「安定化する」ように機能する。粒径増大は、活性物質凝集によって、並びに活性物質の可溶化およびその後の再結晶化によって生じ得る。PEG誘導体化された表面安定剤は、これらの事象が生じるのを防止することにより、活性物質の化学的および物理的安定度を維持する。PEG誘導体化された表面安定剤に対する抗体またはその断片の付着が、表面安定剤が活性物質を安定化する能力を変化させないことは、驚くべき発見であった。これは、あたかもPEG誘導体化された表面安定剤が、抗体またはその断片の付着後に、もはや活性物質の粒径増大を防げるように機能せず、活性物質組成物が、小粒子組成物に処方されることによって与えられる恩典を失うかのように、有意である。
【００５４】
最後に、活性物質が、それに対して付着した抗体またはその断片を有するPEG誘導体化された表面安定剤付着後にもその活性を保持していることは、驚くべき発見であった。
【００５５】
本発明の組成物の、同じ活性物質の従来の組成物と比較した恩典は、以下を含むが、これらに限定されるわけではない：（1）劇的に改善された活性物質標的化；（2）増大された生物学的利用能；（3）減少した毒性；（4）同じ薬理効果を得るために必要な、より少用量の活性物質；（5）より小さな錠剤もしくはその他の固体剤形サイズまたはより少ない液状用量体積；（6）より迅速な作用開始；（7）投薬の頻度の強力な減少；（8）摂食対絶食状態で投与した場合に、実質的に同様か、または生物学的に同等な活性物質組成物の薬物動態学的プロフィール；（9）活性物質組成物についての増大された溶解速度；（10）投与後の本発明の組成物中に存在する活性物質粒子の高い再分散性；（11）高用量充填などの、経口、静脈内、皮下、または筋肉内注射のための改善された性能特性；（12）改善されたTmax、Cmax、およびAUCプロフィールなどの、改善された薬物動態学的プロフィール；（13）低粘性液体活性物質剤型を作製することができる；（14）低粘性を有する液体活性物質組成物について、消費および消化するのがより容易であるより軽便な製剤であるとの認識による、より優れた被検者コンプライアンス；（15）低粘性を有する液体活性物質組成物について、コップまたは注射器を使用することができるために調剤が容易；および（16）活性物質組成物は、有機溶媒または極度のpHを必要としない。
【００５６】
本発明は、本明細書において、下記および本出願の全体にわたって記載されているいくつかの定義を使用して記載される。
【００５７】
「約」とは、当業者によって理解され、およびそれが使用される状況でいくらかの範囲で変動する。それが使用される状況を考えて、当業者に明白でない用語の使用である場合、「約」は、特定の用語の最大10%増または10%減を意味すると考えられる。
【００５８】
「従来の」または「非ナノ粒子活性物質」とは、可溶化される活性物質または約2ミクロンを上回る有効平均粒径を有する活性物質を意味する。「約2ミクロンを上回る有効平均粒径」は、組成物の粒子の少なくとも50%が、約2ミクロンを上回るサイズを有することを意味する。
【００５９】
本明細書に使用される「ナノ粒子」とは、約2ミクロン未満の有効平均粒径を有する粒子の活性物質組成物を指す。「約2ミクロン未満の有効平均粒径」は、組成物の粒子の少なくとも50%が、約2ミクロン未満のサイズを有することを意味する。
【００６０】
本明細書に使用される「薬学的に許容される」とは、健全な医学的確定診断の範囲内にあり、過剰毒性、刺激、アレルギー応答、またはその他の問題もしくは合併症のないヒトおよび動物の組織との接触に使用するための適した、相当な利益/危険の比で釣り合っている化合物、材料、組成物、および/または剤形を指す。
【００６１】
本明細書に使用される「薬学的に許容される塩」とは、親化合物がこれらの酸または塩基塩を作製することによって修飾されている誘導体を指す。薬学的に許容される塩の例は、アミンなどの塩基性残基の無機質または有機酸塩；カルボン酸などの酸性残基のアルカリまたは有機酸塩；等を含むが、これらに限定されるわけではない。薬学的に許容される塩は、従来の無毒の塩、またはたとえば無毒の無機もしくは有機酸から形成される親化合物の四級アンモニウム塩を含む。たとえば、このような従来の無毒の塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸に由来するもの；酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、2-アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタン二スルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸などの有機酸から調製された塩を含む。
【００６２】
本明細書に使用される「難水溶性活性物質」とは、約30mg/ml未満、好ましくは約20mg/ml未満、好ましくは約10mg/ml未満、または好ましくは約1mg/ml未満の溶解度を有する活性物質を意味する。このような活性物質は、循環内で吸収される前に消化管から除去される傾向がある。さらに、難水溶性活性物質は静脈内投与技術に関して安全でない傾向があり、主に高水溶性の活性物質と組み合わせて使用される。
【００６３】
安定な活性物質粒子に関して本明細書に使用される「安定」とは、以下のパラメータの1つまたは複数を含むが、これらに限定されるわけではない：(1)活性物質粒子が、微粒子間引力によって目に見えて綿状にならないか、もしくはかたまりにならないか、またはさもなければ時間とともに粒径が有意に増大しないこと；(2)非晶相から結晶相への転換などによって、活性物質粒子の物理的な構造が時間とともに変更されないこと；(3)活性物質粒子が化学的に安定であること；および/または(4)活性物質が本発明の組成物の調製の際に活性物質の融点の、またはそれ以上の加熱工程に供されていない場合。
【００６４】
活性物質用量に関して本明細書に使用される「治療上有効な量」とは、このような治療を必要とする被験体の有意な人数に投与される活性物質に対して特異的薬理学的反応を提供する用量を意味する。特定の例における特定の被験体に投与される「治療上有効な量」は、このような用量が当業者によって「治療上有効な量」とみなされる場合であっても、本明細書に記載されている疾患を常に有効に治療するわけではないと考えられる。本記載全体を通して、活性物質用量は、特定の例においては、経口用量として、または血液中で測定される活性物質レベルに関して測定される。
【００６５】
I. 本発明の活性物質組成物の好ましい特徴
A. 活性物質標的化
本発明は、活性物質の特定の部位に対する標的化を可能にする。標的化は、選択的に標的部位と結合する能力を有する少なくとも1つの抗体またはその断片をPEG誘導体化された表面安定剤に対して、直接もしくは間接的のいずれかで結合すること、または付着することによって達成される。PEG誘導体化された表面安定剤は、活性物質の表面に吸着されるか、または結合する。後で詳しく述べるように、PEG誘導体化された表面安定剤は、活性物質に対して共有結合されない。
【００６６】
PEG誘導体化は、抗体に直接結合するための、または抗体もしくはその断片と表面安定剤とを接続するリンカーに対して結合するための活性部位を提供するので、PEG誘導体化された表面安定剤は、小粒子活性物質と抗体またはその断片とを併用するための最適なツールである。
【００６７】
1. ビオチン化された抗体
本明細書に記載した最初の実施例では、リンカーとしてタンパク質アビジンを使用して、ビオチン化されたモノクローナル抗体を、ビオチン化されたPEG誘導体化された表面安定剤に間接的に結合させる。広範なビオチン化されたモノクローナル抗体を種々の生物学的標的に利用できる。適用は、局所製剤からパクリタキセルなどの抗癌薬の腫瘍に標的化される注射用製剤までの範囲であってもよい。
【００６８】
下記の実施例に使用した抗体は、インテグリンαVβ3と選択的に結合するが、これは、血管形成の間に内皮細胞に発現される細胞接着受容体である。
【００６９】
2. 治療対象となる例示的な標的、疾患、および/または症状
a. 食道上皮細胞
本発明の組成物で治療することができる食道の病気の例は、食道癌および酸逆流疾患を含む。
【００７０】
毎年、胃腸悪性腫瘍の約200,000例の新たな症例が米国において診断される。大部分のこれらの悪性腫瘍は、結腸直腸腫瘍であるが、食道癌も上昇しており、全ての胃腸悪性腫瘍の約5%を占める。高発生率であるため、結直腸癌は、この疾患についての診断および治療を改善するための研究開発を試みるための主な標的であった。しかし、食道癌に罹患している集団が直面する予後不良を改善することができたのは、ごくわずかであった。
【００７１】
毎年約12,300例の新たな症例がある食道癌は、米国では比較的まれであるが、疾患に関連する死亡率は、極めて高い。診断された患者の約98%がこの疾患で死亡しており、疾患の発病率は、いまだ未知の理由のために、驚くべき速度で増大している。多くの癌性症状と同様に、疾患に関連する危険因子は、多面的であり、年齢、治療食、遺伝学、および環境曝露の全てが、疾患の病因に関係していた。特に、本疾患は、胃食道逆流および肺癌のための治療をする患者と関連していた。加えて、バレット食道（Barrett's Esophagus）として公知の前癌症状である食道腺癌に関連する多くの報告があった。バレット食道は、長期胃食道逆流疾患の患者の10%が経験する慢性粘膜傷害から生じる遠位食道の上皮裏打ちの異形成の証拠によって診断される。食道の末端部分の上皮裏打ちにおける酸性環境に対する絶え間ない曝露により、時間と共に、上皮細胞形質転換を誘導すると考えられる。
【００７２】
食道癌を治療する際の主な問題のうちの1つは、全ての現在の化学療法的/化学的予防薬が、胃および下位腸領域への送達を最大にするように処方されてきたことである。または、口腔は、口洗浄液として処方される薬剤を使用して局所的に治療される。食道（口腔を胃と連結する約9インチの筋肉の管）は、両投与処方計画において回避される。
【００７３】
食道上皮細胞の表面に標的化される送達のための本発明に従った活性物質組成物は（1）食道症状または疾患を治療する際に有用な少なくとも1つの活性物質；（2）少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤；および（3）標的化される上皮細胞と特異的に結合する少なくとも1つの抗体またはその断片を含むことができる。
【００７４】
このような組成物が、食道癌の治療のために使用される場合、組成物は、たとえば少なくとも1つの抗癌性活性物質を含むことができる。また、PEG誘導体化されていないおよびPEG誘導体化された、さらなる表面安定剤、賦形剤、および担体を組成物に使用することもできる。抗癌薬の例は、 米国特許第5,399,363号および第5,494,683号である、Surface Modified Anticancer Nanoparticlesにより提供されており、これらは、具体的に参照として組み入れられる。
【００７５】
b. 胃食道逆流疾患（GERD）
それ以外は健康な成人アメリカ人の最大44%が、少なくとも月に一度胸焼けに苦しむことが、証拠により示されている。本集団の約7%が、一日一度程度の胸焼けを経験する。内視鏡的または組織学的検査などの客観的手段に基づいて、成人集団の約2%が、胃食道逆流疾患（GERD）に罹患すると推定された。GERDの発病率は、40歳後に著しく増大し、徴候を経験している患者が医療を求める前に何年も放っておかれることはまれではない。
【００７６】
ほとんど全員が、特に食後に、わずかな酸逆流を経験する。酸逆流は、平滑筋の二次的な蠕動収縮を誘導して、食道の壁を刺激し、胸焼けとして公知の不快感または疼痛を生じさせ得る。
【００７７】
食事後には、下位食道括約筋（LES）は、通常閉じたままである。これが不適当な時間に弛緩すると、酸および食品粒子を食道に逆流させる。二次的な蠕動により、酸および食品の約90%が胃に戻される。蠕動が終わると、LESは再び閉じる。食道内の残りの酸は、事実上アルカリ性である唾液が連続して嚥下することによって中和され、次いで、胃内で消去される。
【００７８】
胃食道逆流は、一般的な集団に生じる正常な生理的現象かつ軽度〜重篤な徴候を生じ得る病態生理学的現象である。GERDは、胃または十二指腸内容物の食道への逆流によって生じる組織構造の何らかの症候性臨床状態または変化として説明することができる。
【００７９】
重大なGERDを有する患者では、嚥下障害が一般的であり、食道における狭窄症の形成の徴候の可能性もある。喘息、咳嗽、または間欠性の喘鳴などの肺徴候および嗄声を伴った声帯炎症が一部の患者に生じる。
【００８０】
GERDの合併症は、食道糜爛、食道潰瘍、および食道狭窄症；異常な（バレット）上皮と正常な食道上皮の置換；並びに肺吸引を含む。
【００８１】
GERDの治療を食道に標的化する能力が非常に望まれている。
【００８２】
c. 感染
ウイルス感染、細菌感染、プリオン感染、などの外来因子の感染を治療する際に有用な活性物質組成物は（1）抗菌薬または抗ウイルス薬などの少なくとも1つの活性物質；（2）少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤；および（3）感染因子と特異的に結合する少なくとも1つの抗体またはその断片を含むことができる。このような組成物は、感染因子に対して高い結合親和性を有し、従来の療法と比較して、活性物質用量および副作用を減少させることができる。
【００８３】
本発明の組成物を使用して治療することができる感染症の例は、ヘリコバクター・ピロリ（Helicobacter pylori）感染である。ヘリコバクター・ピロリ感染を治療するための本発明に従った組成物は、ヘリコバクター・ピロリに特異的に結合する抗体またはその断片を含むことができる。
【００８４】
ヘリコバクター・ピロリは、胃および十二指腸（ちょうど胃の下の小腸の部分）に生存するらせん形の細菌である。胃は、全く細菌を含まず、実際に無菌であったと考えられていたが、ヘリコバクター・ピロリによりこれが変更された。
【００８５】
十二指腸潰瘍を有する人はほとんど全て、ヘリコバクター・ピロリに感染している。逆に、ヘリコバクター・ピロリをもたない人が十二指腸潰瘍を今後発病することは、ほどんどない。胃潰瘍は、通常ヘリコバクター・ピロリによって生じるが、米国における約30%の胃潰瘍は、ヘリコバクター・ピロリをもたない人において生じ、アスピリンおよびその他の非ステロイド性抗炎症剤（NSAID）に関連している可能性がある。大部分の胃腺癌およびリンパ腫は、現在または過去にヘリコバクター・ピロリに感染している人に生じる。
【００８６】
十二指腸消化性潰瘍は、小腸の最初の部分である胃の端を過ぎて1〜2インチで生じる。大部分の十二指腸潰瘍は、ヘリコバクター・ピロリに感染した患者に生じる。十二指腸潰瘍をシメチジン、ラニチジン、およびサモチジン（samotidine）などの制酸剤または薬物で治療する場合、これらは、通常、薬物を止めたときに戻ってきてしまう。酸を減少させる薬物は高価であり、十二指腸潰瘍の問題は治療しない。ヘリコバクター・ピロリを死滅させることによって、多くの十二指腸潰瘍患者を治療することができることが、現在証明されている。ヘリコバクター・ピロリ細菌の死滅後、大部分の患者（80%）は、酸を減少させる薬物を止めることができる。
【００８７】
消化性潰瘍の最も一般的な原因は、胃のヘリコバクター・ピロリ感染である。胃潰瘍は、十二指腸潰瘍と同様に挙動することが予想され、その結果、ヘリコバクター・ピロリを死滅させた後に、これらが繰り返されるはずはない。胃潰瘍は、しかし、十二指腸潰瘍よりも複雑であるが、胃潰瘍のための抗生物質療法の有効性は、十二指腸潰瘍で見られるものと同様のようである（ヘリコバクター・ピロリが根絶される場合、治癒率70〜90%）。
【００８８】
約30%の胃潰瘍は、ヘリコバクター・ピロリによって生じるのではなく、これは、たとえば、関節炎のために摂取されるアスピリン型薬物療法の腐食作用のためである。ヘリコバクター・ピロリが存在する場合にも、これらの胃潰瘍は、抗生物質療法による恩典を受け得る。
【００８９】
胃癌（胃腺癌）は、ヘリコバクター・ピロリと関連していることが多い（70〜90%）。胃癌およびヘリコバクター・ピロリの広範な総説において、Eurogast Study Groupが、ヘリコバクター・ピロリの存在によって胃癌のリスクが約6倍になり、これが全ての胃癌の約半分の原因であることを決定した。おそらく、慢性胃炎により、腸管異形成（萎縮性胃炎）に至り、次いで悪性転換を受ける。最終段階では、ヘリコバクター・ピロリは、もはや生検上で検出されていないが、免疫学的試験では、過去の感染の徴候を示し得る。
【００９０】
胃癌を治療するための本発明に従った組成物は、ヘリコバクター・ピロリ感染に関したか否かにかかわらず、癌細胞と特異的に結合する抗体またはその断片を含むことができる。
【００９１】
粘膜結合リンパ組織（MALT）は、胃において軽度のリンパ腫を生じさせる悪性転換を受け得る。遡及的生検試験では、このようなMALTリンパ腫の90%が、ヘリコバクター・ピロリと関連していることを示す。初期の報告では、ヘリコバクター・ピロリの治療後に局在化されたMALTに関して、約50%の治癒を示す。MALTを治療するための本発明に従った組成物は、MALT組織と特異的に結合する抗体またはその断片を含むことができる。
【００９２】
潰瘍疾患のない慢性胃病患者では、ヘリコバクター・ピロリ療法の役割は証明されていなかった。一部の患者では、即時反応が見られるが、その他では、段階的な改善が数ヶ月にわたって生じる。ヘリコバクター・ピロリが根絶された後に、慢性嘔吐を伴う患者が緩解されることを示す、いくつかの報告がある。
【００９３】
ヘリコバクター・ピロリによって生じるか、または悪化するかもしれない、いくつかの種々の状態がある。赤鼻は、顔の上の赤い皮膚発疹であり、これは、ヘリコバクター・ピロリ療法に応答するかもしれない。ヘリコバクター・ピロリを有する患者は、胃粘膜の透過性が増大され、食品に由来する未処理の抗原に潜在的に曝露される。これは、免疫問題の素因となるかもしれない。ヘリコバクター・ピロリ抗体は、GUTのいくつかの組織と交差反応し、そして自己免疫性状態がヘリコバクター・ピロリで起こりうる。ヘリコバクター・ピロリが治療されたときに、皮膚発疹が時折消滅した。多くの患者は、ヘリコバクター・ピロリが治療されると、十分満足な状態およびエネルギーレベルに改善を受け、そしてこれは、ガルフ・ベテランス症候群（Gulf Veterans Syndrome）および慢性疲労症候群の治療でも考慮される。慢性口臭がある多くの人々は、ヘリコバクター・ピロリの治療に応答する。これは、口細菌、並びに洞および歯周病が、同じ抗生物質に反応するためであるかもしれない。ヘリコバクター・ピロリは、口臭（消化不良、塩酸欠乏症等）の原因である可能性もある。www.helico.comを参照されたい。
【００９４】
抗生物質をヘリコバクター・ピロリに対して特異的に標的化する能力により、治療の有効性を劇的に増大することができるであろう。
【００９５】
d. 炎症
炎症は、組織損傷または傷害によって生じ、発赤、熱、膨張、および疼痛によって特徴づけられる防御反応である。炎症の主な目的とは、刺激物を局在化させて根絶し、周囲組織を修復することである。宿主の生存のためには、炎症は、必要かつ有益な過程である。炎症反応は、以下の3つの主要な段階を含む：第一の、血流を増大する毛管の拡張；第二の、微小血管の構造的変化および血流からの血漿タンパクの逃避；および第三の、内皮を介した白血球遊出および傷害の部位における蓄積。
【００９６】
白血球接着カスケードは、白血球の血管外遊走で終わる一連の接着および活性化事象であり、これによって細胞は、炎症を起こした部位にその効果を及ぼす。
【００９７】
急性および慢性炎症における接着分子の役割は、インビトロでのモデル系およびインビボの微小循環試験を使用して調査されている。炎症研究の究極の目標は、内皮に対する白血球接着を調整するか、またはブロックすることによって、炎症を制御するための方法を開発することである。基礎研究によって開発されるこれらのアイデアは、抗炎症剤を開発するプロジェクトを現代の研究に寄与する。抗炎症薬は、炎症反応の遮断薬、抑制因子、またはモジュレーターとして機能する。
【００９８】
所望の部位に抗炎症剤を標的化する能力により、有意にこれらの有効性を増大することができ、並びに用量を減少させることができる。このように用量が減少されることにより、NSAIDと関連した胃刺激などの副作用をより生じなくすることができる。
【００９９】
e. 上皮細胞
標的薬剤は、たとえば上皮細胞などの任意の生物学的標的であることができる。上皮細胞は、たとえば、角膜の前側上皮、バレット上皮、繊毛上皮、円柱上皮、内縁上皮、立方上皮、半規管上皮、胚上皮、歯肉上皮、腺上皮、重層上皮、水晶体上皮、間葉上皮、筋肉上皮、嗅上皮、単層扁平上皮、色素上皮、多列上皮、呼吸上皮、精上皮、単層上皮、層別化された繊毛円柱上皮、重層扁平上皮、表面上皮、および移行上皮などの上皮組織由来であることができる。
【０１００】
要するに、本発明の一つの態様において、組成物は、任意の上皮細胞表面を治療する際に有用である。
【０１０１】
B. 増大された生物学的利用能
本発明の好ましい態様において、活性物質組成物は、従前の活性物質製剤と比較して、同じ活性物質の同じ用量での生物学的利用能が増大されることを示し、より少用量を必要とする。これは、本発明の組成物により、活性物質を標的化することができ、標的部位において活性物質の実質的な溶解を生じるためである。
【０１０２】
本発明の活性物質組成物は、分散用量または固体用量の活性物質が固体の性質であるので、小用量体積に濃縮された活性物質を送達することができる。対照的に、溶液の微小粒子活性物質は、同じ量の活性物質を送達するために非常に大きな製剤体積を必要とする。特に高齢者、青少年、および乳児などの患者集団のためには、より小さな固体製剤サイズまたは体積が有意である。
【０１０３】
固体活性物質粒子は、多くの活性物質分子を含むが、可溶化された活性物質は、分子によって標的部位分子に送達される。多数の分子が固体粒子と共に一度に送達されることにより、より速く治療活性が発生し；すなわち、本発明の活性物質組成物は、従来の微小粒子の溶液活性物質製剤と比較して、送達単位あたりにより多く活性物質分子を提供する。
【０１０４】
生物学的利用能が増強されることにより、より低用量を使用することができ、これにより、活性物質に関連した毒性が減少されることとなる。この点に関して、本発明の組成物中に処方したときの、より低用量の活性物質により、同じ活性物質の従来の形態のより大用量と同じか、またはより優れた治療的有効性を達成することができる。このようなより低用量は、従来の活性物質製剤と比較して本発明の組成物がより優れた生物学的利用能であるために現実化することができる。大部分の活性物質は、有害な副作用を有し得る。従って、低用量の活性物質を投与できることは、有害な副作用がより少ないことを意味する。
【０１０５】
C. 改善された薬物動態学的プロフィール
また、本発明の活性物質組成物は、哺乳類被検体に投与したときに、好ましくは望ましい薬物動態学的プロフィールを示す。望ましい薬物動態学的プロフィールは、好ましくは以下を含むが、これらに限定されるわけではない：（1）活性物質のTmaxが、投与に続く哺乳類被検体の血漿においてアッセイしたときに、同じ用量で投与した同じ活性物質の従来の非ナノ粒子形態についてのTmaxよりも少ない；（2）活性物質のCmaxが、投与に続く哺乳類被検体の血漿においてアッセイしたときに、同じ用量で投与した同じ活性物質の従来の非ナノ粒子形態についてのCmaxよりも高い；および/または（3）活性物質のAUCが、投与に続く哺乳類被検体の血漿においてアッセイしたときに、同じ用量で投与した同じ活性物質の従来の非ナノ粒子形態についてのAUCよりも高い。
【０１０６】
本明細書に使用される望ましい薬物動態学的プロフィールは、活性物質の初回投与後に測定される薬物動態学的プロフィールである。組成物は、本明細書に記載され、および当業者に公知であるような任意の方法で処方することができる。
【０１０７】
好ましい活性物質組成物は、同じ用量で投与される同じ活性物質の非ナノ粒子製剤での薬物動態学的試験と比較して、同じ活性物質の非ナノ粒子製剤によって示されるTmaxの約100%以下、約90%以下、約80%以下、約70%以下、約60%以下、約50%以下、約40%以下、約30%以下、約25%以下、約20%以下、約15%以下、または約10%以下であるTmaxを示す。
【０１０８】
好ましい活性物質組成物は、同じ用量で投与される同じ活性物質の非ナノ粒子製剤での薬物動態学的試験と比較して、同じ活性物質の非ナノ粒子製剤によって示されるCmaxの少なくとも約10%、少なくとも約20%、少なくとも約30%、少なくとも約40%、少なくとも約50%、少なくとも約60%、少なくとも約70%、少なくとも約80%、少なくとも約90%、または少なくとも約100%であるCmaxを示す。
【０１０９】
好ましい活性物質組成物は、同じ用量で投与される同じ活性物質の非ナノ粒子製剤での薬物動態学的試験と比較して、同じ活性物質の非ナノ粒子製剤によって示されるAUCの少なくとも約10%、少なくとも約20%、少なくとも約30%、少なくとも約40%、少なくとも約50%、少なくとも約60%、少なくとも約70%、少なくとも約80%、少なくとも約90%、または少なくとも約100%であるAUCを示す。
【０１１０】
本発明によれば、所望の薬物動態学的プロフィールを提供するいずれの製剤も投与のために適している。このようなプロフィールを与える製剤の例示的な型は、液状分散、ゲル、エアロゾル、軟膏、クリーム、および固体剤形である。
【０１１１】
D. 組成物を摂取する被検体の摂食または絶食状態による影響を受けない、本発明の活性物質組成物の薬物動態学的プロフィール
特定の薬物は、標準的試験食の直後の投与と比較して、絶食条件下で投与されたときに、有意に低い血漿レベルを有することが示された。この有意差は、望ましくない。
【０１１２】
本発明のナノ粒子活性物質組成物は、好ましくはこの問題を軽減する。すなわち、本発明の組成物は、絶食条件と比較して、摂食下で投与したときに、好ましくは吸収レベルの相違を減少させ、またはより好ましくは有意な相違を生じない。
【０１１３】
従って、本発明は、組成物を摂取する被検体の摂食または絶食状態によって実質的に影響を受けない薬物動態学的プロフィールを有する活性物質組成物を包含する。これは、本発明の活性物質組成物が、摂食、対絶食状態で投与されるときに、活性物質が吸収される量または活性物質吸収の速度に実質的に相違がないことを意味する。
【０１１４】
また、本発明は、絶食状態の被検体に対する投与が、摂食状態の被検体に対する投与と生物学的に同等である活性物質組成物を包含する。「生物学的等価性」は、好ましくは、U.S. Food and Drug Administration規制指針下で、CmaxとAUCとの両方について0.80〜1.25の間の90%信頼区間（CI）によって、またはEuropean Medicines Evaluation Agency（EMEA）規制指針下で、AUCについて0.80〜1.25の間の90% CI、およびCmaxについて0.70〜1.43の間の90% CIによって確立される（Tmaxは、USFDAおよびEMEA規制指針下では、生物学的等価性決定には関与しない）。
【０１１５】
摂食状態に対して絶食状態で投与されるときの、本発明の活性物質組成物の吸収（AUC）、Cmax、およびTmaxの相違は、好ましくは、約100%未満、約90%未満、約80%未満、約70%未満、約60%未満、約50%未満、約40%未満、約30%未満、約25%未満、約20%未満、約15%未満、約10%未満、約5%未満、または約3%未満である。
【０１１６】
食品と共にまたは食品無しのいずれかで用量を摂取することを患者が徹底する必要がないので、食品の効果を実質的に排除する剤形の恩典には、便宜の増大が含まれ、これは、患者のコンプライアンスを増大させる。不十分な患者のコンプライアンスにより、活性物質を投与する目的が無駄になってしまう可能性があるので、これは有意である。
【０１１７】
E. 本発明の活性物質組成物の溶解プロフィール
本発明の好ましい態様において、本発明の活性物質組成物は、固体用量で処方したときに、予想外に劇的な溶解プロフィールを有する。溶解がより速くなるにつれて、一般により速い作用開始およびより優れた生物学的利用能を引き起こし、投与された活性物質の迅速な溶解が好ましい。
【０１１８】
本発明の活性物質組成物は、固体用量で処方されたときに、好ましくは、約5分以内に組成物の少なくとも約20%が溶解される溶解プロフィールを有する。本発明のその他の態様において、好ましくは活性物質組成物の少なくとも約30%または約40%が、約5分以内で溶解される。本発明のさらにその他の態様において、好ましくは活性物質組成物の少なくとも約40%、約50%、約60%、約70%、または約80%が、約10分以内で溶解される。最後に、本発明のもう一つの態様において、好ましくは活性物質組成物の少なくとも約70%、約80%、約90%、または約100%が、約20分以内に溶解される。
【０１１９】
溶解は、好ましくは識別される媒体中で測定される。このような溶出溶媒は、胃液中で非常に異なる溶解プロフィールを有する2つの産物について、2つの非常に異なる溶解曲線を生じ；すなわち、溶出溶媒により、組成物のインビボにおける溶解が予測される。例示的な溶出溶媒は、0.025Mで界面活性物質ラウリル硫酸ナトリウムを含む水溶媒質である。溶解される量の決定は、分光光度法によって行うことができる。溶解を測定するために動翼法（European Pharmacopoeia）を使用することができる。
【０１２０】
F. 本発明の活性物質組成物の再分散性プロフィール
好ましくは、本発明の組成物は、再分散された活性物質粒子の有効平均粒径が約2ミクロン未満であるように再分散するものである。これは、投与により、本発明の活性物質組成物が、剤形に組み込む前と実質的に同じ粒径に再分散せず、剤形が、少粒子組成物中に活性物質を処方することによってもたらされる恩典を失うかもしれない場合に有意である。
【０１２１】
これは、ナノ粒子系の極めて高い表面自由エネルギーおよび自由エネルギーの全体的減少を達成するための熱力学的推進力のために、投与により小粒径に再分散されず、「凝集塊」またはかたまりになった活性物質粒子が形成されない場合に、ナノ粒子活性物質組成物が、活性物質の小粒径からの恩典があるためである。このようなかたまりになった粒子の形成により、剤形の生物学的利用能が低下する可能性がある。
【０１２２】
そのうえ、本発明の活性物質組成物は、再分散された活性物質粒子の有効平均粒径が約2ミクロン未満となるように、バイオ関連(biorelevant)水性媒質における再構成/再分散によって証明されるような、ヒトまたは動物などの哺乳類に投与することによる活性物質粒子の劇的な再分散を示す。このようなバイオ関連水性媒質は、媒質のバイオ関連のための基礎を形成する所望のイオン強度を示す任意の水性培地およびpHでありうる。所望のpHおよびイオン強度は、人体で見いだされる生理学的条件を代表するものである。このようなバイオ関連水性媒質は、たとえば所望のpHおよびイオン強度を示す電解質水溶液、または任意の塩、酸、もしくは塩基の水溶液、またはこれらの組み合わせでありうる。
【０１２３】
バイオ関連pHは、当技術分野において周知である。たとえば、胃では、pHは、わずかに2未満(しかし、典型的には1よりも大きい)から4または5の範囲である。小腸では、pHは4〜6の範囲であることができ、結腸では、これは6〜8の範囲でありうる。また、バイオ関連イオン強度は、当技術分野において周知である。絶食状態の腸管の液体は、約0.1Mのイオン強度を有し、一方、絶食状態の胃液は、約0.14Mイオン強度を有する。たとえば、Lindahl et al.,Characterization of Fluids from the Stomach and Proximal Jejunum in Men and Women, Pharm.Res., 14 (4)： 497-502 (1997)を参照されたい。
【０１２４】
試験溶液のpHおよびイオン強度は、特異的化学物質含量よりも重要であると考えられる。従って、適切なpHおよびイオン強度値は、強酸、強塩基、塩、単一または複数の共役酸塩基対(すなわち、その酸の弱酸および対応する塩)、一塩基酸および多塩基酸電解質、などの多数の組み合わせを介して得ることができる。
【０１２５】
代表的な電解質溶液は、約0.001〜約0.1Mの濃度の範囲であるHCl溶液、約0.001〜約0.1Mの濃度の範囲であるNaCl溶液、およびこれらの混合物でありうるが、これらに限定されるわけではない。たとえば、電解質溶液は、約0.1M以下のHCl、約0.01M以下のHCl、約0.001M以下のHCl、約0.1M以下のNaCl、約0.01M以下のNaCl、約0.001M以下のNaCl、およびこれらの混合物でありうるが、これらに限定されるわけではない。これらの電解質溶液のうち、0.01MのHClおよび/または0.1MのNaClは、近位消化管のpHおよびイオン強度条件のために、絶食させたヒト生理学的条件を最もよく表す。
【０１２６】
0.001MのHCl、0.01MのHCl、および0.1MのHClの電解質濃度は、それぞれpH 3、pH 2、およびpH 1に対応する。従って、0.01MのHCl溶液は、胃で見られる典型的な酸性条件をシミュレートする。0.1MのNaCl溶液は、胃腸液を含む体の全体にわたって見いだされるイオン強度条件のかなりの近似値を提供するが、ヒト消化管内の摂食条件をシミュレートするために0.1Mより高濃度を使用してもよい。
【０１２７】
所望のpHおよびイオン強度を示す塩、酸、塩基、またはこれらの組み合わせの例示的な溶液は、リン酸/リン酸塩+塩化物のナトリウム、カリウム、およびカルシウム塩、酢酸/酢酸塩+塩化物のナトリウム、カリウム、およびカルシウム塩、炭酸/炭酸水素塩+塩化物のナトリウム、カリウム、およびカルシウム塩、クエン酸/クエン酸塩+塩化物のナトリウム、カリウム、およびカルシウム塩を含むが、これらに限定されるわけではない。
【０１２８】
本発明のその他の態様において、本発明の再分散された(水性、バイオ関連、または任意のその他の適切な媒質に再分散された)活性物質粒子は、約1900nm未満、約1800nm未満、約1700nm、約1600nm未満、約1500nm未満、約1400nm未満、約1300nm未満、約1200nm未満、約1100nm未満、約1000nm未満、約900nm未満、約800nm未満、約700nm未満、約600nm未満、約500nm未満、約400nm未満、約300nm未満、約250nm未満、約200nm未満、約150nm未満、約100nm未満、約75nm未満、または約50nm未満と光散乱法、顕微鏡観察、またはその他の適切な方法によって測定される有効平均粒径を有する。
【０１２９】
再分散性は、当技術分野において公知の任意の適当な手段を使用して試験することができる。たとえば、Solid Dose Nanoparticulate Compositions Comprising a Synergistic Combination of a Polymeric Surface Stabilizer and Dioctyl Sodium Sulfosuccinateについての米国特許第6,375,986号の実施例の節を参照されたい。
【０１３０】
G. 生体付着性活性物質組成物
本発明の活性物質組成物は、生体付着特性を示し得る。このような組成物は、下記により詳細を示す、1つまたは複数の陽イオン性表面安定剤を含む。陽イオン性表面安定剤は、PEG誘導体化することができ、またはこれは、PEG誘導体がされた表面安定剤と接合して使用される第2の表面安定剤であることができる。
【０１３１】
生体付着という用語は、2つの生物表面間または生物表面と合成表面との間の任意の誘引性相互作用を指す。生体付着性活性物質組成物の場合、生体付着という用語は、活性物質組成物と生物学的基質（すなわち、胃腸のムチン、肺組織、鼻粘膜など）との間の付着を記載するために使用される。たとえば、米国特許第6,428,814号であるBioadhesive Nanoparticulate Compositions Having Cationic Surface Stabilizersを参照されたい（これは、具体的に参照として組み入れられる）。本発明による活性物質の生体付着性製剤は、生物学的基質に対して例外的な生体付着を示す。
【０１３２】
生体付着性活性物質組成物は、組成物を生物表面に適用することが望ましい任意の状況に有用である。生体付着性活性物質組成物は、ヒト裸眼では見えない連続的かつ一様なフィルムで標的化される表面をコーティングする。
【０１３３】
生体付着は、本発明の標的細胞と活性物質との間の曝露の遷延をもたらし、これにより投与された用量の吸収および生物学的利用能を増大させる。組成物の標的化局面と組み合わせた生体付着性局面は、劇的な治療的有効性をもたらすことができるので、本発明の生体付着性組成物は、特に有益である。
【０１３４】
H. 低粘性液体活性物質組成物
従来の微結晶性もしくは非ナノ粒子、または可溶化された活性物質組成物の液体剤形は、比較的大容積で、非常に粘稠性の物質であることが予想され、患者集団によって十分に受け入れられないと考えられる。液体剤形は、特に高齢者、小児、および乳児などの患者集団に有用であり得るので、これは有意である。
【０１３５】
本発明の活性物質組成物の液体剤形は、従来の微結晶性または可溶化された活性物質組成物の液体剤形以上に有意な利点を提供する。本発明の活性物質組成物の液体剤形の低粘性および絹のような質感は、調製および使用の両方に利点を生じる。これらの利点は、たとえば（1）摂取するのがより容易であるより軽便な製剤であるとの認識による、より優れた被検者コンプライアンス；（2）高度に粘稠性の製剤と比較した調剤の容易さ；（3）より小さな用量体積およびしたがってより少ない被検体消費体積をもたらす、より高濃度の活性物質を製剤化する可能性；ならびに（4）より簡単な全体的製剤化懸念を含む。
【０１３６】
本発明による活性物質組成物の液体剤形の粘性は、好ましくは、活性物質のほぼ同じmlあたりの濃度において、同じ活性物質の非ナノ粒子組成物の局所的液状経口剤形の約1/200未満、約1/175未満、約1/150未満、約1/125未満、約1/100未満、約1/75未満、約1/50未満、または約1/25未満である。
【０１３７】
典型的には、20℃で測定された本発明の液状活性物質剤形の粘性は、0.1（1/s）のずり速度にて、約2000mPa・s〜約1mPa・s、約1900mPa・s〜約1mPa・s、約1800mPa・s〜約1mPa・s、約1700mPa・s〜約1mPa・s、約1600mPa・s〜約1mPa・s、約1500mPa・s〜約1mPa・s、約1400mPa・s〜約1mPa・s、約1300mPa・s〜約1mPa・s、約1200mPa・s〜約1mPa・s、約1100mPa・s〜約1mPa・s、約1000mPa・s〜約1mPa・s、約900mPa・s〜約1mPa・s、約800mPa・s〜約1mPa・s、約700mPa・s〜約1mPa・s、約600mPa・s〜約1mPa・s、約500mPa・s〜約1mPa・s、約400mPa・s〜約1mPa・s、約300mPa・s〜約1mPa・s、約200mPa・s〜約1mPa・s、約175mPa・s〜約1mPa・s、約150mPa・s〜約1mPa・s、約125mPa・s〜約1mPa・s、約100mPa・s〜約1mPa・s、約75mPa・s〜約1mPa・s、約50mPa・s〜約1mPa・s、約25mPa・s〜約1mPa・s、約15mPa・s〜約1mPa・s、約10mPa・s〜約1mPa・s、または約5mPa・s〜約1mPa・sである。
【０１３８】
粘性は、濃度および温度依存的である。典型的には、高濃度について、より高い粘性を生じ、一方で、高温になるにつれ、より低い粘性を生じる。上記で定義された粘性は、約20℃で得られた測定を指す。（20℃の水の粘性は、1mPa・sである。）本発明は、異なる温度で測定された同等の粘性を包含する。
【０１３９】
本発明の液状製剤は、任意の体積で、しかし、好ましくは同じ活性物質の非ナノ粒子組成物もしくは可溶化された組成物の液体剤形と同じか、またはより小体積の用量に処方することができる。
【０１４０】
I. 組み合わせ薬物動態学的プロフィール組成物
本発明の一つの態様において、上記した薬物動態学的プロフィールを提供する第一の活性物質組成物を、少なくとも1つのその他の活性物質と異なる薬物動態学的プロフィールを生じる組成物、具体的には、血流中により遅い吸収を、したがって、より長いTmaxおよび典型的にはより低いCmaxを示すものを同時投与する。第二の組成物は、同じか、または異なる活性物質を含むことができる。
【０１４１】
たとえば、第二の活性物質製剤は、より長いTmax、および典型的にはより低いCmaxを生じる従来の粒径を有することができる。または、第二、第三、もしくは第四の活性物質組成物は、たとえば（1）それぞれの組成物の有効平均粒径；（2）それぞれの組成物の活性物質の濃度；または（3）それぞれの組成物のための活性物質の同一性において、第一のものと、および互いに異なることができる。異なる粒径では、異なるTmax値を生じる。第一の製剤によって提供される迅速な疼痛寛解と第二（または第三、第四など）の製剤によって提供される持続性の疼痛寛解の組み合わせにより、必要とされる用量の頻度を減少させることができる。
【０１４２】
好ましくは、「速効性の」製剤および「より持続性の」製剤の同時投与が望まれる場合、2つの製剤は、単一の組成物、たとえば二重の放出組成物中で組み合わされる。
【０１４３】
II. 組成物
本発明は（1）1つもしくは複数の抗体またはその断片；（2）1つまたは複数の活性物質；および（3）1つまたは複数のPEG誘導体化された表面安定剤を含む組成物を提供する。
【０１４４】
A. 抗体またはその断片
抗体またはその断片は、当技術分野において周知の手順によって、PEG誘導体化された表面安定剤に対して直接または間接的に付着することができる。
【０１４５】
1. 本発明に有用な抗体またはその断片
標的部位（たとえば、分析物、エピトープ、または抗原）と特異的に反応する能力を有する任意の抗体またはその断片が本発明に有用である。抗体またはその断片は、任意の5つの異なるクラスの抗体または免疫グロブリン、たとえばIgD、IgA、IgM、IgE、およびIgGであることができる。加えて、本発明に利用される抗体またはその断片は、任意のIgGの4つの異なるサブクラスから、またはIgAの2つの異なるサブクラスのいずれかからのものであることができる。
【０１４６】
抗体のFまたはFab領域は、抗原に対する結合部位を含む免疫グロブリン分子の部分である。本領域のアミノ酸の正確な配列は、体が遭遇し得る多種多様な抗原に対応するために分子間で広く変化する。それぞれの分子上には、2つのこのような領域がある（個々に、Fab断片またはF-ab断片と呼ばれる）。文字Yのような分子が成形され、F(ab)2断片は、2つの分岐部分の上半分に位置する。（残りの分子の、幹および下部の分岐は、Fc断片である）。本発明による抗体断片は、たとえば1つもしくは複数の抗体のFab領域、またはVL領域もしくはVH領域などの結合能を有するFab領域の一部であることができる。F(ab')2、Fab、Fab'、およびFvは、免疫グロブリンの可変領域から作製することができる例示的な抗原結合断片である。
【０１４７】
抗体断片は、無処置の抗体以上にいくつかの利点を提供する。たとえば、抗体断片は、Fc相互作用によって生じる非特異性の減少をもたらす（多くの細胞は、抗体のFc部分に結合するために受容体を有する）。加えて、抗体断片は、巨大タンパク質エピトープによる立体障害の減少の結果として、一般に固相適用に関して、抗原検出においてより高い感受性を提供する。加えて、抗体断片は、Fc関連エフェクター機能（たとえば、補体結合および細胞膜受容体相互作用）の非存在下での抗原-抗体結合試験のための最高の選択である。さらに、抗体断片は、腫瘍組織透過などの改善された体内分布特性を有する。抗体断片は、無処置の抗体よりも低い免疫原性を提供し、このような断片は、より容易にクロス・キャピラリー（cross capillaries）し、組織表面に拡散することができ、接合体に結合していない抗体断片は、無処置の免疫グロブリンよりも迅速にクリアされ；従って、より多くの断片治療的薬剤が標的化領域に到達する。Fc領域の除去により、Fc受容体を有する食細胞による異化反応に対してより感受性ではない抗体断片が生じる。最後に、抗体断片は、断片が無処置の免疫グロブリンよりも組織透過に優れ、Fc受容体による非特異的な結合を回避するので、免疫組織化学的な試験に有用である。Pierce Life Science and Analytical Research Products （Pierce Chemical Co. 1994）を参照されたい。
【０１４８】
本明細書に使用される「抗体」という用語は、抗体（たとえば、Fab、F(ab)2）の抗原結合形態についての言及を含む。「抗体」という用語は、標的部位（たとえば、分析物、エピトープ、または抗原）に特異的に結合し、および認識する、免疫グロブリン遺伝子によって実質的にコードされるポリペプチド、またはその断片を指すことが多い。しかし、無処置の抗体の消化に関して種々の抗体断片を定義することができ、当業者であれば、このような断片を化学的または組換えDNA法を利用することによって、新規に合成してもよいことを認識するであろう。また、本明細書に使用される抗体という用語は、単鎖Fv、キメラ抗体（すなわち、異なる種に由来する定常領域および可変領域を含む）、ヒト化抗体（すなわち、非ヒト供給源由来の相補性決定領域（CDR）を含む）、および異種接合体抗体（たとえば、二重特異性抗体）などの抗体断片を含む。
【０１４９】
「標的部位」、「分析物」、および「抗原」という用語は、抗体を作製することができ、および/または抗体が特異的に免疫反応性である物質についての言及を含む。抗原内の特異的免疫反応性部位は、エピトープまたは抗原決定基として公知である。これらのエピトープは、タンパク質のアミノ酸などの重合体組成物において単量体の線形配列であることができ、またはより複雑な二次もしくは三次構造からなるか、または含むことができる。当業者であれば、全ての免疫原（すなわち、免疫応答を誘発することができる物質）が、抗原であるが；しかし、ハプテンなどのいくつかの抗原は、免疫原ではなく、担体分子にカップリングすることによって免疫原になり得ることを認識する。特定の抗原と免疫学的に反応性の抗体は、インビボまたはファージもしくは同様のベクターにおける組換え抗体のライブラリーの選択などの組換え法によって作製することができる。たとえば、Huse et al., Science, 246:1275-1281 (1989);Ward et al., Nature, 341:544-546 (1989);およびVaughan et al., Nature Biotech., 14:309-314 (1996)を参照されたい。
【０１５０】
「免疫学的に反応性の条件」または「免疫反応性条件」は、実質的に特定のエピトープを含む反応混合物中の任意のその他のエピトープに結合する抗体よりも、検出可能な程度（たとえば、バックグラウンド以上の少なくとも2倍）に特定のエピトープに対して反応性の抗体をそのエピトープに結合させることができる条件を意味する。免疫学的に反応性の条件は、抗体結合反応の形式に依存的であり、典型的には、免疫アッセイプロトコルに利用されるものである。例示的な免疫アッセイ形式および条件の記述については、Harlow and Lane, Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Publications, New York (1988) を参照されたい。
【０１５１】
「特異的に反応性」という用語は、抗体と抗体の抗原結合部位によって認識されるエピトープを有する標的部位との間の結合反応についての言及を含む。
【０１５２】
2. 抗体またはその断片の例示的な市販の供給源
抗体および抗体断片の多くの市販の供給源がある。たとえばAbcam Ltd.（www.abcam.com）、Fusion Antibodies Ltd.（Belfast, N. Ireland；www/fusionantibodies.com）；Abgent（San Diego, Ca；www.abgent.com）；Abkem Iberia（Vigo, Spain；http://www.abkemiberia.com/）；Academy Bio-Medical Co., Inc.（Houston, TX；www.academybiomed.com）；およびAccurate Chemical and Scientific Corp.（Westbury, NY；www.accuratechemical.com）などの抗体を販売する247社のオンライン会社の一覧を提供するhttp://www.antibodyresource.com/onlinecomp.htmlを参照されたい。
【０１５３】
カスタム・モノクローナル抗体およびポリクローナル抗体を供給する多くの市販の会社もある。http://www.antibodyresource.com/customantibody.htmlにおいて、このような供給元125社が列挙されている。
【０１５４】
3. 当技術分野において公知の抗体またはその断片を作製する方法
多くの抗体作製法が公知である。たとえば、J. Janin, Nature, 277:491-492 (1979); Wolfenden et al., Biochemistry, 20:849-855 (1981); Kyte and Doolite, J. Mol, Biol., 157:105-132 (1982);およびRose et al., Science, 229:834-838 (1985)を参照されたい。以下の考察は、利用できる技術の一般的な概要として提示されるが；当業者であれば、以下の方法の多くのバリエーションが公知であることを認識するであろう。
【０１５５】
本発明の標的部位と特異的に反応性の抗体を産生するために、多くの免疫原を使用することができる。たとえば、モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体の産生のために、単離された組換え、合成、または天然のポリヌクレオチドを抗原として使用することができる。発現ライブラリーをスクリーニングするため、または本発明の推定上の標的部位が非天然の二次、三次、もしくは四次構造で発現されるか、もしくは変性されるその他のアッセイ法のための抗体の形成の前に、ポリペプチドを任意に変性させ、任意に減少させる。
【０１５６】
加えて、抗体は、その天然に存在する（全長）形態の、および組換え形態の両方の、このような標的部位の個々の、対立形質の、系統の、または種の変異体を含む所望の標的部位に対して生じさせることができる。抗体は、その天然の配置または非天然の配置のいずれかの標的部位に対して生じさせることもできる。
【０１５７】
次いで、本発明の標的部位（たとえば、分析物、抗原、タンパク質など）を、抗体を産生することができる動物に注射する。その後に本発明の組成物に使用するために、モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体のいずれかを作製することができる。好ましくは、モノクローナル抗体が本発明の組成物に利用される。
【０１５８】
ポリクローナル抗体を産生する方法は、当業者に公知である。簡単には、精製されたタンパク質、適切な担体（たとえば、GST、スカシガイ（keyhole limpet）ヘモノシアニンなど）に結合されたタンパク質、もしくは組換えワクシニア（vaccinia）ウイルス（米国特許第4,722,848号を参照されたい）などの免疫化ベクターに組み込まれたタンパク質などの抗原、分析物、または標的部位をアジュバントと混合し、動物を混合物で免疫する。免疫原製剤に対する動物の免疫応答は、試験血を採取し、関心対象のタンパク質に対する反応性の力価を決定することによってモニターされる。適切に免疫原に対して高力価の抗体が得られたときに、血液を動物から収集し、抗血清を調製する。望まれる場合には、タンパク質に反応性の抗体を濃縮するために抗血清のさらなる分画が行われる（たとえば、Coligan, Current Protocols in Immunology, Wiley/Greene, NY (1991);およびHarlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press, NY (1989)を参照されたい）。
【０１５９】
モノクローナル抗体は、所望の抗体を分泌する雑種細胞から調製される。モノクローナル抗体を抗原が由来するタンパク質に対する結合についてスクリーニングする。特異的モノクローナル抗体およびポリクローナル抗体は、通常、その同族の一価の抗原に対して、親和定数が少なくとも106〜107リットル/モル、通常少なくとも108リットル/モル、好ましくは少なくとも109リットル/モル、より好ましくは、少なくとも1010リットル/モル、および最も好ましくは少なくとも1011リットル/モルである抗体結合部位を有すると考えられる。
【０１６０】
種々の免疫アッセイ形式を使用して、特定の標的部位と特異的に反応性の抗体（モノクローナルまたはポリクローナル）を選択してもよい。たとえば、タンパク質と特異的に免疫反応性のモノクローナル抗体を選択するために、固相ELISA免疫アッセイ法が使用される。免疫アッセイ形式の記述および選択的反応性を決定するために使用することができる条件については、Harlow and Lane, Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Publications, New York (1988)を参照されたい。その他の例示的かつ当技術分野において周知の免疫アッセイ形式は、競合的免疫アッセイ法、放射免疫アッセイ法、ウエスタンブロット法、間接的免疫蛍光アッセイ法等を含む。
【０１６１】
いくつかの場合には、マウス、齧歯類、霊長類、ヒトなどの種々の哺乳類宿主に由来するモノクローナル抗体を調製することが望ましい。たとえば、このようなモノクローナル抗体を調製するための技術の記述は、Basic and Clinical Immunology, 9th ed., Stites et al., Eds. （Appleton & Lange Publications, San Mateo, CA, 1998）、およびその中の参照文献、Harlow and Lane, Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Publications, New York (1988); Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, 2nd ed. （Academic Press, New York, N.Y. 1986）；および Kohler and Milstein, Nature, 256:495-497 (1975)において見いだされる。簡単に要約すると、この方法は、抗原（すなわち、標的部位または分析物）で動物を注射することによって進行する。次いで、動物を屠殺し、その脾臓から細胞を採取して、これを骨髄腫細胞と融合させる。その結果が、インビトロで複製することができる雑種細胞または「ハイブリドーマ」である。次いで、ハイブリドーマの集団をスクリーニングして、それぞれが標的部位または抗原に対する単一の抗体種を分泌する個々のクローンを単離する。このように、得られた個々の抗体種は、抗原物質上で認識される特定の部位に応答して生じる免疫動物に由来する不死化された、かつクローン化された単一のB細胞の産物である。
【０１６２】
その他の適切な技術は、ファージまたは同様のベクターにおける組換え抗体のライブラリーの選択を含む（たとえば、Huse et al., Science, 246:1275-1281 (1989); Ward et al., Nature, 341:544-546 (1989);およびVaughan et al., Nature Biotechnology, 14:309-314 (1996)を参照されたい。または、高結合活性ヒトモノクローナル抗体は、再編成されていないヒト重鎖および軽鎖Ig遺伝子座の断片を含むトランスジェニックマウス（すなわち、ミニ遺伝子座トランスジェニックマウス）から得ることができる。Fishwild et al., Nature Biotech., 14: 845-851 (1996)を参照されたい。また、組換え免疫グロブリンを産生してもよい。 Cabilly, 米国特許第4,816,567号；およびQueen et al., Proc. Nat'l Acad. Sci., 86:10029-10033 (1989)を参照されたい。
【０１６３】
最後に、Fc切片ではなく、抗原結合性部分を含む抗体タンパク質の断片は、Fc切片を特異的に切断するプロテアーゼで抗体全体を処理することによって産生することができる。
【０１６４】
B. 活性物質
本発明は、多種多様な活性物質で実施することができる。たとえば、本発明の組成物は、少なくとも1つの活性な、治療的な、または診断的な薬剤（ひとまとめにして「薬物」と称する）を含むことができる。治療薬は、タンパク質、ペプチド、およびヌクレオチドなどの生物製剤を含む医薬品、またはX線造影剤を含む造影剤などの診断薬であることができる。
【０１６５】
活性物質は、別々の結晶相か、半結晶相か、非晶相か、準非晶質相か、またはこれらの組み合わせのいずれかとして存在する。
【０１６６】
2つ以上の活性物質を組み合わせて使用することができる。加えて、本発明の組成物は、同時投与し、連続投与し、または従来のものである第二（または、第三、第四など）の活性物質と共に同時処方する（活性物質がPEG誘導体化された表面安定剤および抗体またはその断片と結合されていないことを意味する）ことができる。
【０１６７】
活性物質は、好ましくは難溶性であり、少なくとも一つの液状分散媒に分散できる。「難溶性」とは、活性物質が液状分散媒において、約30mg/ml未満、約20mg/ml未満、約10mg/ml未満、または約1mg/ml未満の溶解度を有することを意味する。有用な液状分散媒は、水、塩水溶液、ベニバナ油、並びにエタノール、t-ブタノール、ヘキサン、およびグリコールなどの溶媒を含むが、これらに限定されるわけではない。好ましい液状分散媒は、水である。
【０１６８】
1. 一般的活性物質
活性物質は、たとえば以下を含む、種々の公知の薬物類から選択することができる：機能性食品、COX-2阻害剤、レチノイド、抗癌剤、NSAIDS、タンパク質、ペプチド、ヌクレオチド、抗肥満薬、機能性食品、栄養補助食品、カロテノイド、コルチコステロイド、エラスターゼ阻害剤、抗真菌剤、腫瘍学療法、抗催吐剤、鎮痛剤、心臓血管剤、抗炎症剤、駆虫剤、抗不整脈剤、抗生物質(ペニシリンを含む)、抗凝血剤、抗うつ薬、抗糖尿病剤、抗癲癇薬、抗ヒスタミン剤、降圧薬、抗ムスカリン剤、抗ミコバクテリア剤、抗腫瘍薬、免疫抑制薬、抗甲状腺剤、抗ウイルス薬、抗不安薬、鎮静剤(催眠薬および神経遮断薬)、収斂剤、βアドレナリン受容体遮断剤、血液製剤および代用品、心筋変力性因子、造影剤、コルチコステロイド、咳抑止剤(去痰薬および粘液溶解薬)、診断剤、画像診断薬、利尿剤、ドーパミン作動薬(抗パーキンソン症候群薬)、止血薬、免疫剤、脂質調節剤剤、筋弛緩剤、副交感神経様作用薬、副甲状腺カルシトニンおよびバイホスホネート、プロスタグランジン、放射性医薬、性ホルモン(ステロイドを含む)、抗アレルギー薬、刺激剤、および食欲抑制剤、交感神経様作用薬、甲状腺剤、血管拡張剤およびキサンチン。
【０１６９】
本発明に有用な代表的活性物質の例は、以下を含むが、これらに限定されるわけではない：アシクロビル、アルプラゾラム、アルトレタミン、アミロライド、アミオダロン、ベンズトロピンメシレート、ブプロピオン、カベルゴリン、カンデサルタン、セリバスタチン、クロルプロマジン、シプロフロキサシン、シサプリド、クラリスロマイシン、クロニジン、クロピドグレル、シクロベンザプリン、シプロヘプタジン、デラビルジン、デスモプレッシン、ジルチアゼム、ジピリダモール、ドラセトロン、マレイン酸エナラプリル、エナラプリラート、ファモチジン、フェロジピン、フラゾリドン、グリピジド、イルベサルタン、ケトコナゾール、ランソプラゾール、ロラタジン、ロクサピン、メベンダゾール、メルカプトプリン、乳酸ミルリノン、ミノサイクリン、ミトキサントロン、ネルフィナビル・メシレート、ニモジピン、ノルフロキサシン、オランザピン、オメプラゾール、ペンシクロビル(penciclovir)、ピモジド、タコリムス(tacolimus)、クアゼパム、ラロキシフェン、リファブチン、リファンピン、リスペリドン、リザトリプタン(rizatriptan)、サキナビル、セルトラリン、シルデナフィル、アセチル-スルフィソキサゾール、テマゼパム、チアベンダゾール、チオグアニン、トランドラプリル、トランドラプリル、トリアムテレン、トリメトレキセート、トログリタゾン、トロバフロキサシン、ベラパミル、硫酸ビンブラスチン、ミコフェノラート、アトバクオン、アトバクオン、プログアニル、セフタジジム、セフロキシム、エトポシド、テルビナフィン、サリドマイド、フルコナゾール、アムサクリン、ダカルバジン、テニポシド、およびアセチルサリチラート。
【０１７０】
例示的な機能性食品および栄養補助食品は、たとえば、Roberts et al., Nutraceuticals： The Complete Encyclopedia of Supplements, Herbs, Vitamins, and Healing Foods (American Nutraceutical Association, 2001)に記載されており、これは具体的に参照として取り込まれる。機能性食品または栄養補助食品は、植物化学物質または機能性食品としても公知であり、一般に、栄養補助食品、ビタミン、ミネラル、草本、または体に対して医学的もしくは薬学的効果を有する治癒食品類の任意の一つである。例示的な機能性食品または栄養補助食品はルテイン、葉酸、脂肪酸(たとえば、DHAおよびARA)、果実および植物抽出物、ビタミンおよびミネラルサプリメント、ホスファチジルセリン、リポ酸、メラトニン、グルコサミン/コンドロイチン、アロエベラ(Aloe Vera)、ググル(Guggul)、グルタミン、アミノ酸(たとえば、イソ-ロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、スレオニン、トリプトファン、およびバリン)、緑茶、リコピン、自然食品、食品添加物、草本、植物栄養素、抗酸化剤、果実のフラボノイド成分、マツヨイグサ油、亜麻種子、魚油、および海洋動物油、並びにプロバイオティクを含むが、これらに限定されるわけではない。また、機能性食品および栄養補助食品は、「ファルマフード(pharmafoods)」としても公知の、所望の特質を有するように遺伝的に操作されたバイオ操作食品を含む。
【０１７１】
エアロゾル製剤で投与される活性物質は、好ましくはタンパク質、ペプチド、気管支拡張剤、コルチコステロイド、エラスターゼ阻害剤、鎮痛剤、抗真菌剤、嚢胞性線維症療法、喘息療法、肺気腫療法、呼吸窮迫症候群療法、慢性気管支炎療法、慢性閉塞性肺疾患療法、器官-移植拒絶反応療法、結核および肺のその他の感染のための治療法、真菌感染療法、後天性免疫不全症候群と関連した呼吸疾患療法、腫瘍学薬物、制吐薬、鎮痛薬、および心臓血管剤からなる群より選択される。
【０１７２】
これらのクラスの活性物質および各クラス内の種の一覧の記述は、Martindale, The Extra Pharmacopoeia、第29版 （The Pharmaceutical Press, London, 1989）において見いだすことができ、これは具体的に参照として組み入れられる。活性物質は、市販されており、および/または当技術分野において公知の技術によって調製することができる。
【０１７３】
2. 抗癌活性物質
有用な抗癌剤は、好ましくはアルキル化剤、代謝拮抗剤、天然物、ホルモンおよびアンタゴニスト、並びに放射線増感剤などの種々の薬剤から選択される。
【０１７４】
アルキル化剤の例は、以下を含む：(1)たとえばクロルメチン、クロラムブシル、メルファラン、ウラムスチン、マンノムスチン、エクストラマスチネフォスフェート、メクロレタミンオキシド、シクロホスファミド、イホスファミド、およびトリホスファミドなどのbis-(2-クロロエチル)-アミン基を有するアルキル化剤；(2)たとえばトレタミン、チオテパ、トリアジクオン、およびマイトマイシンなどの置換されたアジリジン基を有するアルキル化剤；(3)たとえばブスルファン、ピポスルファン、およびピポスルファムなどのアルキルスルホネート型のアルキル化剤；(4)たとえばカルムスチン、ロムスチン、セムスチン、またはストレプトゾトシンなどのアルキル化N-アルキル-N-ニトロソ尿素誘導体；並びに(5)ミトブロニトール、ダカルバジン、およびプロカルバジン型のアルキル化剤。
【０１７５】
代謝拮抗剤の例は、以下を含む：(1)たとえばメトトレキセートなどの葉酸類似体；(2)たとえばフルオロウラシル、フロクスウリジン、テガフール、シタラビン、イドクスウリジン、およびフルシトシンなどのピリミジン類似体；並びに(3)たとえばメルカプトプリン、チオグアニン、アザチオプリン、チアミプリン、ビダラビン、ペントスタチン、およびピューロマイシンなどのプリン誘導体。
【０１７６】
天然物の例は、以下を含む：(1)たとえばビンブラスチンおよびビンクリスチンなどのビンカアルカロイド；(2)たとえばエトポシドおよびテニポシドなどのエピドフィロトキシン；(3)たとえばアドリアマイシン、ダウノマイシン、ドクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ミトラマイシン、ブレオマイシン、およびマイトマイシンなどの抗生物質；(4)たとえばL-アスパラギナーゼなどの酵素；(5)たとえばαインターフェロンなどの生体応答調節剤；(6)カンプトセシン；(7)タキソール；並びに(8)レチノイン酸などのレチノイド。
【０１７７】
ホルモンおよびアンタゴニストの例は、以下を含む：(1)たとえばプレドニゾンなどのコルチコステロイド；(2)たとえばカプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、および酢酸メゲストロールなどのプロゲスチン；(3)たとえばジエチルスチルベストロールおよびエチニルエストラジオールなどのエストロゲン；(4)たとえばタモキシフェンなどの抗エストロゲン；(5)たとえばプロピオン酸テストステロンおよびフルオキシメステロンなどのアンドロゲン；(6)たとえばフルタミドなどの抗アンドロゲン；並びに(7)たとえばロイプロリドなどの生殖腺刺激ホルモン類似体。
【０１７８】
種々の薬剤の例は、以下を含む：(1)たとえば1,2,4-ベンゾトリアジン-3-アミン1,4-ジオキシド(SR 4889)および1,2,4-ベンゾトリアジン-7-アミン1,4-ジオキシド(WIN 59075)などの放射線増感剤；(2)シスプラチンおよびカルボプラチンなどの白金配位化合物；(3)たとえばミトキサントロンなどのアントラセンジオン；(4)たとえばヒドロキシ尿素などの置換尿素；並びに(5)たとえばミトタンおよびアミノグルテチミドなどの副腎皮質性抑止剤。
【０１７９】
加えて、抗癌剤は、たとえばシクロスポリン、アザチオプリン、スルファサラジン、メトキサレン、およびサリドマイドなどの免疫抑制剤でありうる。
【０１８０】
また、抗癌剤は、COX-2阻害剤でありうる。
【０１８１】
3. 鎮痛薬
鎮痛薬は、たとえば、NSAIDまたはCOX-2阻害剤でありうる。
【０１８２】
本発明の組成物に処方することができる例示的なNSAIDSは、適切な非酸性および酸性の化合物を含むが、これらに限定されるわけではない。適切な非酸性化合物は、たとえば、ナブメトン、チアラミド、プロカゾン、ブフェキサマック、フルミゾール、エピラゾール、チノリジン、チメガジン、およびダプソンを含む。適切な酸性の化合物は、たとえばカルボン酸およびエノール酸を含む。適切なカルボン酸NSAIDは、たとえば以下を含む：(1)アスピリン、ジフルニサル、ベノリレート、およびフォスフォサルなどのサリチル酸およびこれらのエステル；(2)ジクロフェナク、アルクロフェナック、およびフェンクロフェナックを含むフェニル酢酸などの酢酸；(3)エトドラク、インドメタシン、スリンダク、トルメチン、フェンチアザク、およびチロミソールなどの単素環式並びに複素環式酢酸；(4)カルプロフェン、フェンブフェン、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、オキサプロジン、スプロフェン、チアプロフェン酸、イブプロフェン、ナプロキセン、フェノプロフェン、インドプロフェン、およびピルプロフェンなどのプロピオン酸；並びに(5)フルフェナミク、メフェナム、メクロフェナミク、およびニフルミクなどのフェナム酸。適切なエノール酸NSAIDは、たとえば以下を含む：(1)オキシフェンブタゾン、フェニルブタゾン、アパゾン、およびフェプラゾンなどのピラゾロン；および(2)ピロキシカム、スドキシカム、イソキシカム、およびテノキシカムなどのオキシカム。
【０１８３】
本発明のナノ粒子ニメスリド(nimesulide)組成物と組み合わせて処方することができる例示的なCOX-2阻害剤は、以下を含むが、これらに限定されるわけではない：セレコキシブ(SC-58635, CELEBREX(登録商標), Pharmacia/Searle & Co.)、ロフェコキシブ(MK-966, L-748731, VIOXX(登録商標), Merck & Co.)、メロキシカム(MOBIC(登録商標), Abbott Laboratories, Chicago, IL、およびBoehringer Ingelheim Pharmaceuticalsによって共販売された)、バルデコキシブ(BEXTRA(登録商標), G.D. Searle & Co.)、パレコキシブ(G.D. Searle & Co.)、エトリコキシブ(MK-663；Merck)、SC-236(4-[5-(4-クロロフェニル)-3-(トリフルオロメチル)-1H-ピラゾール-1-イル)]ベンゼンスルホンアミドの化学名； G.D. Searle & Co., Skokie, IL)；NS-398(N-(2-シクロヘキシルオキシ-4-ニトロフェニル)メタンスルホンアミド；Taisho Pharmaceutical Co., Ltd., Japan)；SC-58125(メチルスルホンスピロ(2.4)ヘプト-5-エンI；Pharmacia/Searle & Co.)；SC-57666(Pharmacia/Searle & Co.)；SC-558(Pharmacia/Searle & Co.)；SC-560(Pharmacia/Searle & Co.)；エトドラク(Lodine(登録商標), Wyeth-Ayerst Laboratories, Inc.)；DFU(5,5-ジメチル-3-(3-フルオロフェニル)-4-(4-メチルスルホニル)フェニル2(5H)-フラノン)；モンテルカスト(MK-476)、L-745337(5-メタンスルホンアミド-6-(2,4-ジフルオロチオ-フェニル)-1-インダノン)、L-761066、L-761000、L-748780(全てMerck & Co.)；DUP-697(5-ブロモ-2-(4-フルオロフェニル)-3-(4-(メチルスルホニル)フェニル；DuPont Merck Pharmaceutical Co.)；PGV 20229(1-(7-tert-ブチル-2,3-ジヒドロ-3,3-ジメチルベンゾ(b)フラン-5-イル)-4-シクロプロピルブタン-1-オン；Procter & Gamble Pharmaceuticals)；イグラチモド(T-614；3-ホルミルアミノ-7-メチルスルホニルアミノ-6-フェノキシ-4H-1-ベンゾピラン-4-オン；Toyama Corp., Japan)；BF 389 (Biofor, USA)；CL 1004(PD 136095)、PD 136005、PD 142893、PD 138387、およびPD 145065(全てParke-Davis/Warner-Lambert Co.)；フルルビプロフェン(ANSAID(登録商標)；Pharmacia & Upjohn)；ナブメトン(FELAFEN(登録商標)；SmithKline Beecham, plc)；フロスリド(CGP28238；Novartis/Ciba Geigy)；ピロキシカム(FELDANE(登録商標)；Pfize)；ジクロフェナク(VOLTAREN(登録商標)およびCATAFLAM(登録商標)、Novartis)；ルミラコキシブ(COX-189；Novartis)；D 1367(Celltech Chiroscience, plc)；R 807(3ベンゾイルジフルオロメタン・スルホンアニリド、ジフルミドン)；JTE-522(Japan Tobacco, Japan)；FK-3311(4'-アセチル-2'-(2,4-ジフルオロフェノキシ)メタンスルホンアニリド)、FK867、FR 140423、およびFR 115068(全てFujisawa, Japan)；GR 253035(Glaxo Wellcome)；RWJ 63556(Johnson & Johnson)；RWJ 20485(Johnson & Johnson)；ZK 38997(Schering)；S 2474((E)-(5)-(3,5-ジ-tert-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)-2-エチル-1,2-イソチアゾリジン-1,1-ジオキシドインドメタシン；Shionogi & Co., Ltd., Japan)；RS 57067およびRS 104897などのゾメピラック類似体(Hoffmann La Roche)；RS 104894(Hoffmann La Roche)；SC 41930(Monsanto)；pranlukast(SB 205312、Ono-1078、ONON(登録商標)、ULTAIR(登録商標)；SmithKline Beecham)；SB 209670(SmithKline Beecham)；並びにAPHS(heptinylsulfide)。
【０１８４】
4. 経皮適用に有用な活性物質
本発明による活性物質は、経皮適用に使用することができる活性物質、たとえば日焼け止め、化粧品、真皮に対する医薬の局所適用（α-ヒドロキシ製剤などの、にきび薬、抗しわ薬）、モイスチャライザー、脱臭剤などを含むが、これらに限定されるわけではない。
【０１８５】
C. 表面安定剤
1. 一次表面安定剤
本発明の組成物は、少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤を含む。「PEG誘導体化された」とは、表面安定剤が少なくとも1つのペンダントPEG基の共有結合によって修飾されていることを意味する。
【０１８６】
本発明のPEG誘導体化された表面安定剤は、好ましくは活性物質粒子の表面に吸着されるか、または結合されている。本明細書において特に有用なPEG誘導体化された表面安定剤は、好ましくは活性物質粒子またはそれ自体と化学的に反応しない。好ましくは、PEG誘導体化された表面安定剤の個々の分子は、本質的に分子間の交差結合がない。
【０１８７】
PEG誘導体化された表面安定剤は、約2ミクロン未満の有効平均粒径に活性物質粒子を維持するために十分な量の活性物質の表面に吸着されるか、または結合される。
【０１８８】
2つ以上のPEG誘導体化された表面安定剤を、本発明の組成物および方法に使用することができる。
【０１８９】
好ましくは、PEG誘導体化された表面安定剤は、PEG誘導体化された脂質であるが、表面安定剤として有用である大部分の材料（下記の補助的な表面安定剤の節を参照されたい）をPEGで修飾することができる。加えて、本明細書に記載されている多くの表面安定剤は、プルロニクス（pluronics）などのPEG鎖を含む。適切なPEG誘導体化された脂質表面安定剤は、PEG誘導体化されたリン脂質、PEG誘導体化されたコレステロール、PEG誘導体化されたコレステロール誘導体、PEG誘導体化されたビタミンA、およびPEG誘導体化されたビタミンEを含むが、これらに限定されるわけではない。
【０１９０】
表面安定剤上のPEG置換基の分子量は、化合物の循環半減期に影響を及ぼす。約4000〜約5000Daなどの高分子量のPEGを有する誘導体化された表面安定剤は、長い循環半減期を有し、2000Daのより低分子量でも有用である。約750〜約800Daなどのより低いPEG分子量を有する誘導体化された表面安定剤も有用であるが、循環半減期は、このより低分子量では損なわれ始める。たとえば、Allen, Long-circulating (sterically stabilized) liposomes for targeted drugdelivery, TiPS, 15:215-220, 218 (1994);およびYuda et al., Prolongation of Liposome Circulation Time by Various Derivatives of Polyethyleneglycols, Biol. Pharm. Bull., 19:1347-1351, 1347-1348, 1349 (1996)を参照されたい。
【０１９１】
PEG誘導体を含み、かつまたこれらの末端にDPP-PEG-OHおよびDSPE-PEG-COOHなどの官能基（たとえば、α-(ジパルミトイルホスファチジル)-Ω-ヒドロキシポリオキシエチレンおよびジステアロイルホスファチジル-N-(3-カルボキシプロピオニルポリオキシエチレンスクシニル)エタノールアミン）を有するリポソームは、機能的末端基を欠いた同じ分子量のPEG誘導体化されていない化合物およびPEG誘導体化された化合物と比較して、化合物の循環半減期が長くなる。Yuda et al.の1349。さらに、末端基および官能基を有し、かつ低分子量（例えば約1000Da以下）を有するPEG誘導体化された化合物は、機能的末端基を欠いた同じ分子重量のPEG誘導体化されていない化合物およびPEG誘導体化された化合物と比較して、より長い循環時間を生じる。
【０１９２】
本発明の表面安定剤として有用な、2つの例示的な市販のPEG-リポソームは、PEG-5000（商標）およびPEG-2000（商標）である。（Nektar Therapeutics, Inc.）。
【０１９３】
2. 二次的または補助的な表面安定剤
また、本発明の組成物は、少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤に加えて、1つまたは複数の補助的PEG誘導体化されていない表面安定剤を含むこともできる。
【０１９４】
本発明の補助的表面安定剤は、好ましくは活性物質粒子の表面に吸着されるか、または結合される。本明細書において特に有用な補助的表面安定剤は、好ましくは活性物質粒子またはそれ自体と化学的に反応しない。好ましくは、補助的表面安定剤の個々の分子は、本質的に分子間架橋がない。
【０１９５】
2つ以上の補助的表面安定剤を本発明の組成物および方法に使用することができる。
【０１９６】
適切な補助的表面安定剤は、好ましくは公知の有機および無機医薬賦形剤から選択することができる。このような賦形剤は、種々の重合体、低分子量オリゴマー、天然物、および界面活性物質を含む。好ましい表面安定剤は、非イオン性およびイオン性の界面活性剤を含む。2つ以上の表面補助安定剤を組み合わせて使用することができる。
【０１９７】
適切な表面安定剤は、好ましくは公知の有機および無機の医薬賦形剤から選択することができる。このような賦形剤は、種々の重合体、低分子量オリゴマー、天然物、および界面活性物質を含む。好ましい補助的な表面安定剤は、非イオン性、陽イオン性、双性イオン性、およびイオン性の化合物を含む。
【０１９８】
表面安定剤の代表例は、以下を含む:ゼラチン、カゼイン、レシチン(ホスファチド)、デキストラン、アラビアゴム、コレステロール、トラガカンタ、ステアリン酸、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸カルシウム、モノステアリン酸グリセロール、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ロウ、ソルビタンエステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（たとえば、セトマクロゴール1000などのマクロゴールエーテル）、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（たとえば、Tween20（登録商標）およびTween80（登録商標）などの市販のTween（登録商標）（ICI Speciality Chemicals））；ポリエチレングリコール（たとえば、Carbowax 3550（登録商標）およびCarbowax 934（登録商標）（Union Carbide））、ポリオキシエチレンステアラート、コロイド性二酸化ケイ素、ホスフェート、ドデシル硫酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース（たとえば、HPC、HPC-SL、およびHPC-L）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（HPMC）、フタル酸ヒドロキシプロピルメチル-セルロース、非晶質セルロース、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、トリエタノールアミン、ポリビニルアルコール（PVA）、ポリビニルピロリドン（PVP）、エチレンオキシドおよびホルムアルデヒドとの4-(1,1,3,3-テトラメチルブチル)-フェノール重合体（チロキサポール、スペリオン（superione）、およびトリトンとしても公知）、ポロキサマー（たとえば、Pluronic F68（登録商標）およびPluronic F108（登録商標）、これらは、エチレンオキシドおよびプロピレンオキシドのブロック共重合体である）；ポロキサミン（たとえば、ポロキサミン908（登録商標）としても公知のTetronic908（登録商標））、これは、プロピレンオキシドおよびエチレンオキシドのエチレンジアミンへの経時的添加に由来する四官能性ブロック共重合体である（BASF Wyandotte Corporation, Parsippany, N.J.））；Tetronic 1508（登録商標）（T-1508）（BASF Wyandotte Corporation）；スルホコハク酸ナトリウムのジアルキルエステル（たとえば、Aerosol OT（登録商標）、これは、スルホコハク酸ナトリウム（DOSS）のジオクチルエステルである（American Cyanamid））；Duponol P（登録商標）、これは、ラウリル硫酸ナトリウムである（DuPont）；Tritons X-200（登録商標）、これは、アルキルアリールポリエーテルスルホナートである（Rohm and Haas）；Crodestas F-110（登録商標）、これは、ショ糖ステアラートおよびショ糖ジステアレートの混合物である（Croda Inc.）；p-イソノニルフェノキシポリ-(グリシドール)、Olin-10G（登録商標）またはSurfactant 10-G（登録商標）としても公知（Olin Chemicals, Stamford, CT）；Crodestas SL-40（登録商標）（Croda, Inc.）；およびSA9OHCO、これはC18H37CH2C(O)N(CH3)-CH2(CHOH)4(CH2OH)2である（Eastman Kodak Co.）；デカノイル-N-メチルグルカミド；n-デシルβ-D-グルコピラノシド；n-デシルβ-D-マルトピラノシド；n-ドデシルβ-D-グルコピラノシド；n-ドデシルβ-D-マルトシド；ヘプタノイル-N-メチルグルカミド；n-ヘプチルβ-D-グルコピラノシド；n-ヘプチルβ-D-チオグルコシド；n-ヘキシルβ-D-グルコピラノシド；ノナノイル-N-メチルグルカミド；n-ノイルβ-D-グルコピラノシ���；オクタノイル-N-メチルグルカミド；n-オクチル-β-D-グルコピラノシド；オクチルβ-D-チオグルコピラノシド；リゾチーム、ビニルピロリドンと酢酸ビニルのランダム共重合体など。
【０１９９】
大部分のこれらの表面安定剤は、公知の医薬賦形剤であり、Handbook of Pharmaceutical Excipients, published jointly by the American Pharmaceutical Association and The Pharmaceutical Society of Great Britain （The Pharmaceutical Press, 1986）に詳述されており、具体的に参照として組み入れられる。表面安定剤は、市販でおよび/または当技術分野において公知の技術によって調製することができる。
【０２００】
有用な陽イオン性表面安定剤の例は、重合体、生体重合体、多糖体、セルロース誘導体、アルギナート、リン脂質、並びに双性イオン性安定剤などの非重合体化合物、ポリ-n-メチルピリジニウム、アントリュルピリジニウムクロライド（anthryul pyridinium chloride）、陽イオン性リン脂質、ジミリストイルホスファチジルグリセロールなどの荷電したリン脂質、キトサン、ポリリジン、ポリビニルイミダゾール、ポリブレン、ポリメチルメタクリラートトリメチルアンモニウムブロミド（PMMTMABr）、ヘキシルデシルトリメチルアンモニウムブロミド（HDMAB）、およびポリビニルピロリドン-2-メタクリル酸ジメチルアミノエチルジメチル硫酸を含むが、これらに限定されるわけではない。
【０２０１】
その他の有用な陽イオン性安定剤は、以下のものなどの、陽イオン性脂質、スルホニウム、ホスホニウム、および四級アンモニウム化合物を含むが、これらに限定されるわけではない：ステアリルトリメチルアンモニウムクロライド、ベンジル-ジ(2-クロロエチル)エチルアンモニウムブロミド、ココナッツトリメチルアンモニウムクロライドまたはブロミド、ココナッツメチルジヒドロキシエチルアンモニウムクロライドまたはブロミド、ドデシルトリメチルアンモニウムブロミド、デシルトリエチルアンモニウムクロライド、デシルジメチルヒドロキシエチルアンモニウムクロライドまたはブロミド、C12-15ジメチルヒドロキシエチルアンモニウムクロライドまたはブロミド、ココナッツジメチルヒドロキシエチルアンモニウムクロライドまたはブロミド、ミリスチルトリメチルアンモニウムメチルサルフェート、ラウリルジメチルベンジルアンモニウムクロライドまたはブロミド、ラウリルジメチル(エテノキシ)4アンモニウムクロライドまたはブロミド、N-アルキル(Cl2-18)ジメチルベンジルアンモニウムクロライド、N-アルキル(Cl4-18)ジメチル-ベンジルアンモニウムクロライド、N-テトラデシルジメチルベンジルアンモニウムクロライド一水和物、ジメチルジデシルアンモニウムクロライド、N-アルキル(C12-14)ジメチル1-ナフチルメチルアンモニウムクロライド、トリメチルアンモニウムハライド、アルキル-トリメチルアンモニウム塩およびジアルキル-ジメチルアンモニウム塩、ラウリルトリメチルアンモニウムクロライド、エトキシル化されたアルキアミドアルキルジアルキルアンモニウム塩（ethoxylated alkyamidoalkyldialkylammonium salt）および/またはエトキシル化されたトリアルキルアンモニウム塩、ジアルキルベンゼンジアルキルアンモニウムクロライド、N-ジデシルジメチルアンモニウムクロライド、N-テトラデシルジメチルベンジルアンモニウム、塩化物一水和物、N-アルキル(C12-14)ジメチル1-ナフチルメチルアンモニウムクロライド、およびドデシルジメチルベンジルアンモニウムクロライド、ジアルキルベンゼンアルキルアンモニウムクロライド、ラウリルトリメチルアンモニウムクロライド、アルキルベンジルメチルアンモニウムクロライド、アルキルベンジルジメチルアンモニウムブロミド、C12、C15、C17トリメチルアンモニウムブロミド、ドデシルベンジルトリエチルアンモニウムクロライド、ポリ-ジアリルジメチルアンモニウムクロライド（DADMAC）、ジメチルアンモニウムクロライド、アルキルジメチルアンモニウムハロゲン化物、トリセチルメチルアンモニウムクロライド、デシルトリメチルアンモニウムブロミド、ドデシルトリエチルアンモニウムブロミド、テトラデシルトリメチルアンモニウムブロミド、メチルトリオクチルアンモニウムクロライド（ALIQUAT 336（商標））、POLYQUAT 10（商標）、テトラブチルアンモニウムブロミド、ベンジルトリメチルアンモニウムブロミド、コリンエステル（脂肪酸のコリンエステルなど）、ベンザルコニウムクロライド、ステアラルコニウムクロライド化合物（ステアリルトリモニウムクロライドおよびジ-ステアリルジモニウムクロライドなど）、セチルピリジニウムブロミドまたはクロライド、四級ポリオキシエチルアルキルアミンのハロゲン塩、MIRAPOL（商標）、およびALKAQUAT（商標）（Alkaril Chemical Company）、アルキルピリジニウム塩；アルキルアミン、ジアルキルアミン、アルカノールアミン、ポリエチレンポリアミン、N,N-ジアルキルアミノアルキルアクリラート、およびビニルピリジンなどのアミン、ラウリルアミンアセテート、ステアリルアミンアセテート、アルキルピリジニウム塩、およびアルキルイミダゾリウム塩などのアミン塩、アミンオキシド、イミドアゾリニウム塩、プロトン化された四級アクリルアミド、ポリ[ジアリルジメチルアンモニウムクロライド]およびポリ-[N-メチルビニルピリジウムクロライド]などのメチル化された四級重合体、並びに陽イオン性グアー。
【０２０２】
このような例示的陽イオン性表面安定剤およびその他の有用な陽イオン性表面安定剤は、J. Cross and E. Singer, Cationic Surfactants: Analytical and Biological Evaluation (Marcel Dekker, 1994); P. and D. Rubingh (Editor), Cationic Surfactants: Physical Chemistry (Marcel Dekker, 1991);およびJ. Richmond, Cationic Surfactants: Organic Chemistry, (Marcel Dekker, 1990)に記載されている。
【０２０３】
特に好ましい非重合体一次安定剤は、塩化ベンザルコニウム、カルボニウム化合物、ホスホニウム化合物、オキソニウム化合物、ハロニウム化合物、陽イオン性有機金属化合物、四級亜リン酸化合物、ピリジニウム化合物、アニリニウム化合物、インモニウム化合物、ヒドロキシルアンモニウム化合物、一級アンモニウム化合物、二級アンモニウム化合物、三級アンモニウム化合物、および式NR1R2R3R4（+）の四級アンモニウム化合物などの任意の非重合体化合物である。式NR1R2R3R4（+）の化合物については、
（i）R1〜R4のいずれもCH3ではない；
（ii）R1〜R4のうちの1つが、CH3である；
（iii）R1〜R4のうちの3つが、CH3である；
（iv）R1〜R4の全てが、CH3である；
（v）R1〜R4のうちの2つが、CH3であり、R1〜R4のうちの1つがC6H5CH2であり、R1〜R4のうちの1つが7炭素原子以下のアルキル鎖である；
（vi）R1〜R4のうちの2つが、CH3であり、R1〜R4のうちの1つが、C6H5CH2であり、R1〜R4のうちの1つが、19炭素原子以上のアルキル鎖である；
（vii）R1〜R4のうちの2つが、CH3であり、R1〜R4のうちの1つが、C6H5(CH2)n基（式中n＞lである）である；
（viii）R1〜R4のうちの2つが、CH3であり、R1〜R4のうちの1つが、C6H5CH2であり、R1〜R4のうちの1つが少なくとも1つのヘテロ原子を含む；
（ix）R1〜R4のうちの2つが、CH3であり、R1〜R4のうちの1つが、C6H5CH2であり、R1〜R4のうちの1つが少なくとも1つのハロゲンを含む；
（x）R1〜R4のうちの2つが、CH3であり、R1〜R4のうちの1つが、C6H5CH2であり、R1〜R4のうちの1つが、少なくとも1つの環状断片を含む；
（xi）R1〜R4のうちの2つが、CH3であり、R1〜R4のうちの1つがフェニル環である；または
（xii）R1〜R4のうちの2つが、CH3であり、R1〜R4のうちの2つが、純粋な脂肪族の断片である。
【０２０４】
このような化合物は、以下を含むが、これらに限定されるわけではない：ベヘンアルコニウムクロライド、ベンゼトニウムクロライド、セチルピリジニウムクロライド、ベヘントリモニウムクロライド、ラウルアルコニウムクロライド、セタルコニウムクロライド、セトリモニウムブロミド、セトリモニウムクロライド、セチルアミンハイドロフルオライド、クロルアリルメタンアミンクロライド（Quaternium-15）、ジステアリルジモニウムクロライド（Quaternium-5）、ドデシルジメチルエチルベンジルアンモニウムクロライド（Quaternium-14）、Quaternium-22、Quaternium-26、Quaternium-18ヘクトライト、塩酸ジメチルアミノエチルクロライド、塩酸システイン、ジエタノールアンモニウムPOE(10)オレチルエーテルホスフェート、ジエタノールアンモニウムPOE(3)オレイルエーテルホスフェート、タロウアルコニウムクロライド、ジメチルジオクタデシルアンモニウムベントナイト、ステアラルコニウムクロライド、ドミフェンブロミド、安息香酸デナトニウム、ミリスタルコニウムクロライド、ラウルトリモニウムクロライド、エチレンジアミンジヒドロクロライド、塩酸グアニジン、ピリドキシンHCl、塩酸イオフェタミン、メグルミンハイドロクロライド、メチルベンゼトニウムクロライド、ミルトリモニウムブロミド、オレイルトリモニウムクロライド、ポリクオータニウム-1、塩酸プロカイネ、ココベタイン、ステアラルコニウムベントナイト、ステアラルコニウムヘクトナイト、ステアリルトリヒドロキシエチルプロピレンジアミンジヒドロフルオライド、タロウトリモニウムクロライド、およびヘキサデシルトリメチルアンモニウムブロミド。
【０２０５】
D. 活性物質、表面安定剤、または抗体もしくはその断片の標識化
本発明の活性物質、表面安定剤、または抗体もしくはその断片は、検出可能なシグナルで標識していてもよい。このような標識化は、本発明の組成物を疾患検出または画像化のために利用するときに、特に好ましい。
【０２０６】
このような標識化は、活性物質、表面安定剤、または抗体もしくはその断片と検出可能なシグナルを提供する物質を共有結合性または非共有結合性に連結することによって達成される。多種多様な標識および接合技術が公知であり、科学文献および特許文献において広範に報告されている。適切な標識は、たとえば、放射性ヌクレオチド、酵素、基質、補因子、阻害剤、蛍光部分、化学発光部分、磁性粒子等を含む。
【０２０７】
本発明の活性物質、表面安定剤、または抗体もしくはその断片を標識する手段は、重要な本発明の局面でなく、現在公知であるか、または後に開発される多くの方法によって達成することができる。
【０２０８】
本発明に使用するために適した検出可能な標識は、たとえば分光学的、放射性同位元素的、光化学的、生化学的、免疫化学的、電気的、光学的、または化学的手段を含む適切な手段によって検出可能な任意の組成物を含む。本発明に有用な標識は、標識されたストレプトアビジン接合体で染色するためのビオチン、磁気ビーズ、蛍光色素（たとえば、フルオレセイン、テキサスレッド、ローダミン、緑色蛍光タンパク質など）、放射標識（たとえば、3H、125I、35S、14C、または32P）、酵素（たとえば、ELISAに一般に使用される西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、およびその他）、フルオロフォア、化学発光薬剤、および金コロイドまたは色ガラスまたはプラスチック（たとえば、ポリスチレン、ポリプロピレン、乳液など）ビーズなどの比色標識を含むが、これらに限定されるわけではない。標識の選択は、必要とされる感度、安定性要求、利用できる計測手段、および活性物質との接合の容易さ、表面安定剤、または抗体もしくはその断片に依存する。
【０２０９】
非放射性プローブは、間接的手段によって標識されることが多い。たとえば、リガンド分子は、活性物質、表面安定剤、または抗体もしくはその断片に共有結合させることができる。次いで、リガンドを本質的に検出可能であるか、または酵素、フルオロフォア、もしくは化学発光化合物などの検出可能なシグナル系に共有結合された抗リガンド分子に結合させる。標識として興味深い酵素は、主にホスファターゼ、エステラーゼ、およびグリコシダーゼなどの加水分解酵素、またはオキシドレダクターゼ、特にペルオキシダーゼである。蛍光化合物は、フルオレセインおよびその誘導体、ローダミンおよびその誘導体、ダンシル、ウンベリフェロンなどを含む。化学発光は、ルシフェリンおよび2,3-ジヒドロフタラジンジオン、たとえばルミノールを含む。リガンドおよび抗リガンドには、広く変更を加えていてもよい。リガンドが、天然の抗リガンド（すなわち、ビオチン、チロキシン、およびコルチゾールなどのリガンド）を有する場合、これをその標識された天然に存在する抗リガンドと組み合わせて使用することができる。または、任意のハプテンの、または抗原性の化合物を抗体と組み合わせて使用することができる。
【０２１０】
このような標識を検出する手段は、当業者に周知である。従って、たとえば、放射標識は、写真フィルムまたはシンチレーションカウンターを使用して検出してもよく、蛍光マーカーは、放射される光を検出するための光検出器を使用して検出してもよい。酵素標識は、典型的には酵素に基質を提供し、基質に対する酵素の作用によって産生される反応生成物を検出することによって検出され、および比色標識は、単に有色の標識を視覚化することによって検出される。
【０２１１】
免疫沈降およびX線結晶学の次に、抗体結合現象を理解するためのもう一つの重要なアプローチは、モデル抗体リガンドとして発光プローブの使用によるものであった。抗体に関連した現象を探索する手段としての発光の使用は、特定の利点を有する。適切に選んだ発光分子を使用する場合、抗体結合部位の化学組成および分子認識特性を決定することができる。加えて、発光は、会合定数および動力学的結合パラメーターを定量化することができる有効な分光学的シグナルである。
【０２１２】
発光分子に特異的な、または発光分子によって誘発された、種々の抗体が公知である。発光抗体プローブについてのデータで最も広範囲に試験されたセットが、フルオレセインに関して存在する。この系に関して存在する広範な数の試験により、抗フルオレセイン抗体が、抗体結合のための一般的な方法となった。ポリクローナルおよびモノクローナル抗体は両方とも、フルオレセインイソチオシアネートで調製されたタンパク質複合体での免疫化を経て誘発された。抗体親和性は、104M-1から＞1012M-1の範囲と報告されていた。一般に、フルオレセインの抗体結合は、水溶液中のフルオレセインのものと比較して、90%までの蛍光の消光を生じる。
【０２１３】
E. ナノ粒子活性物質粒径
本発明の組成物は、約2ミクロン未満（すなわち、2000nm）の有効平均粒径を有するナノ粒子活性物質粒子を含む。本発明の好ましい態様において、ナノ粒子活性物質粒子は、約1900nm未満、約1800 nm未満、約1700nm未満、約1600nm未満、約1500nm未満、約1400nm未満、約1300nm未満、約1200nm未満、約1100nm未満、約1000nm未満、約900nm未満、約800nm未満、約700nm未満、約600nm未満、約500nm未満、約400nm未満、約300nm未満、約250nm未満、約200nm未満、約150nm未満、約100nm未満、約75nm未満、約50nm未満の、光散乱法、顕微鏡観察、またはその他の適切な方法によって測定される有効平均粒径を有する。
【０２１４】
本明細書で使用される粒径は、当業者に周知の従来の粒径測定技術によって測定される、重量平均粒径に基づいて決定される。このような技術は、たとえば沈降場流動分画、光量子相関分光法、光散乱、および円板遠心分離を含む。
【０２１５】
「約2ミクロン未満の有効平均粒径」とは、上述の技術によって測定したときに、活性物質粒子の少なくとも50%が、重量あたりの有効平均未満の、すなわち約2ミクロン未満、1900nm、1800nmなどの粒径を有することを意味する。好ましくは、活性物質粒子の少なくとも約70%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、または少なくとも約99%は、有効平均未満の、すなわち約2ミクロン未満、1900nm、1800nmなどの有効平均粒径を有する。
【０２１６】
本発明において、ナノ粒子活性物質組成物のD50の値は、活性物質粒子の重量の50%以下があてはまる粒径である。同様に、D90は、それぞれ活性物質粒子の重量の90%以下があてはまる粒径である。
【０２１７】
F. ナノ粒子活性物質およびPEG誘導体化された表面安定剤の濃度
少なくとも1つの活性物質および1つまたは複数のPEG誘導体化された表面安定剤の相対量は、広範に変更することができる。表面安定剤の最適の量は、たとえば選択される具体的活性物質、親水性親油性バランス（HLB）、融点、表面安定剤の水溶性、および表面安定剤の水溶液の表面張力になどに依存し得る。
【０２１８】
好ましくは、少なくとも1つの活性物質の濃度は、その他の賦形剤を含まない少なくとも1つの活性物質と少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤との総組み合わせ重量に基づいて、重量の約99.5%〜約0.001%、約95%〜約0.1%、または約90%〜約0.5%で変更することができる。        
【０２１９】
少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤の濃度は、その他の賦形剤を含まない少なくとも1つの活性物質と少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤との総組み合わせ重量に基づいて、重量の約0.5%〜約99.999%、約5.0%〜約99.9%、または約10%〜約99.5%で変更することができる。
【０２２０】
G. その他の医薬賦形剤
また、本発明による薬学的組成物は、1つまたは複数の結着剤、充填物薬剤、滑沢剤、懸濁剤、甘味料、香料、防腐剤、緩衝液、湿潤剤、崩壊剤、発泡性薬剤、およびその他の賦形剤を含んでいてもよい。このような賦形剤は、当技術分野において公知である。
【０２２１】
充填物薬剤の例は、乳糖一水和物、乳糖無水物、および種々のデンプンであり；結着剤の例は、種々のセルロースおよび架橋されたポリビニルピロリドン、Avicel（登録商標）PH101およびAvicel（登録商標）PH102などの微結晶性セルロース、微結晶性セルロース、並びにケイ化された微結晶性セルロース（ProSolv SMCC（商標））である。
【０２２２】
圧縮される粉末の流動性に対して作用する薬剤を含む、適切な潤滑剤は、Aerosil（登録商標）200などのコロイド性二酸化ケイ素、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、およびシリカゲルである。
【０２２３】
甘味料の例は、ショ糖、キシリトール、ナトリウムサッカリン、シクラメート、アスパルテーム、およびアクスルファーム（acsulfame）などの任意の天然のまたは人工の甘味料である。香料の例は、Magnasweet（登録商標）（MAFCOの商標）、風船ガム風味、および果実風味などである。
【０２２４】
防腐剤の例は、ソルビン酸カリウム、メチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸およびその塩、ブチルパラベンなどのベンパラヒドロキシ安息香酸のその他のエステル、エチルもしくはベンジルアルコールなどのアルコール、フェノールなどのフェノール化合物、または塩化ベンザルコニウムなどの四級化合物である。
【０２２５】
適切な希釈剤は、微結晶性セルロース、乳糖、第二リン酸カルシウム、糖類、および/または前述のいずれかの混合物などの薬学的に許容される不活性充填剤を含む。希釈剤の例は、Avicel（登録商標）PH101およびAvicel（登録商標）PH102などの微結晶性セルロース；乳糖一水和物、乳糖無水物、およびPharmatose（登録商標）DCL21などの乳糖；Emcompress（登録商標）などの第二リン酸カルシウム；マンニトール；デンプン；ソルビトール；ショ糖；並びにグルコースを含む。
【０２２６】
適切な崩壊剤は、軽く架橋されたポリビニルピロリドン、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、トウモロコシデンプン、および化工デンプン、クロスカルメロースナトリウム、クロス-ポビドン、ナトリウムデンプングリコラート、およびこれらの混合物を含む。
【０２２７】
発泡性薬剤の例は、有機酸と炭酸塩または炭酸水素塩などの発泡性対である。適切な有機酸は、たとえばクエン酸、酒石酸、リンゴ酸、フマル酸、アジピン酸、コハク酸、およびアルギン酸、並びに無水物および酸性塩を含む。適切な炭酸塩および炭酸水素塩は、たとえば炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、炭酸マグネシウム、炭酸ナトリウムグリシン、炭酸L-リジン、および炭酸アルギニンを含む。または、発泡性対の炭酸水素ナトリウム成分だけが存在してもよい。
【０２２８】
III. ナノ粒子活性物質製剤の作製方法
ナノ粒子活性物質組成物は、たとえば、製粉、沈澱、または均質化技術を使用して作製することができる。ナノ粒子活性物質組成物を作製する例示的方法は、684号特許に記載されている。ナノ粒子活性物質組成物を作製する方法は、米国特許第5,518,187号であるMethod of Grinding Pharmaceutical Substances、 米国特許第5,718,388号であるContinuous Method of Grinding Pharmaceutical Substances、米国特許第5,862,999号であるMethod of Grinding Pharmaceutical Substances、米国特許第5,665,331号であるCo-Microprecipitation of Nanoparticulate Pharmaceutical Agents with Crystal Growth Modifiers、 米国特許第5,662,883号であるCo-Microprecipitation of Nanoparticulate Pharmaceutical Agents with Crystal Growth Modifiers、米国特許第5,560,932号であるMicroprecipitation of Nanoparticulate Pharmaceutical Agents、米国特許第5,543,133号であるProcess of Preparing X-Ray Contrast Compositions Containing Nanoparticles、米国特許第5,534,270号であるMethod of Preparing Stable Drug Nanoparticles、米国特許第5,510,118号であるProcess of Preparing Therapeutic Compositions Containing Nanoparticles、および米国特許第5,470,583号であるMethod of Preparing Nanoparticle Compositions Containing Charged Phospholipids to Reduce Aggregationに記載されており、これらの全てが、具体的に参照として組み入れられる。
【０２２９】
生じるナノ粒子活性物質分散は、固体または液状の用量製剤、液状分散、経口懸濁液、ゲル、エアロゾル、軟膏、クリーム、錠剤、カプセル、サシェ剤、ロゼンジ、粉末、丸剤、および顆粒などの（しかし、これらに限定されるわけではない）任意の適切な剤形で利用することができる。
【０２３０】
加えて、生じるナノ粒子活性物質分散は、徐放製剤、速溶（fast melt）製剤、凍結乾燥製剤、遅延性放出製剤、長期放出製剤、パルス状放出製剤、および即時放出と徐放製剤とが混合されたものなどの（しかし、これらに限定されるわけではない）任意の適切な剤形で利用することができる。
【０２３１】
A. ナノ粒子活性物質分散を得るための製粉
ナノ粒子活性物質分散を得るための活性物質の製粉は、活性物質が難溶性である液状分散媒体中に活性物質粒子を分散させること、続いて粉砕媒体の存在下において機械的手段を適用して、活性物質の粒径を所望の有効平均粒径に減少させることを含む。
【０２３２】
活性物質粒子は（1）少なくとも1つの抗体もしくはその断片；（2）少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤；または（3）PEG誘導体化された表面安定剤に対して直接または間接的に付着された、少なくとも1つの抗体もしくはその断片などのこれらの組み合わせの存在下においてサイズを減少させることができる。
【０２３３】
好ましい態様において、活性物質粒子は、抗体が直接または間接的に表面安定剤に対して付着された後に、少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤の存在下においてサイズが減少される。
【０２３４】
または、摩滅の前後のいずれかにおいて、活性物質粒子を（1）少なくとも1つの抗体もしくはその断片；（2）少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤；または（3）これらの組み合わせと接触させることができ、その結果、少なくとも1つの抗体またはその断片が、PEG誘導体化された表面安定剤に対して直接または間接的に付着される。
【０２３５】
希釈剤などのその他の化合物を、破砕過程の前に、間に、または後に、活性物質組成物に添加することもできる。分散は、連続的に、またはバッチ様式で製造することができる。
【０２３６】
B. ナノ粒子活性物質組成物を得るための沈澱
所望のナノ粒子活性物質組成物を形成するもう一つの方法は、微小沈澱による。これは、1つもしくは複数のPEG誘導体化された表面安定剤および/または少なくとも1つの抗体もしくはその断片、並びに微量有毒溶媒または可溶化された重金属不純物のいずれも含まない1つもしくは複数のコロイド安定性増強表面活性物質の存在下において、活性物質の安定な分散を調製する方法である。
【０２３７】
このような方法は、たとえば以下の工程を含む：
（1）適切な溶媒に少なくとも1つの活性物質を溶解する工程；
（2）工程（1）由来の製剤を、
（a）少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤、
（b）少なくとも1つの抗体もしくはその断片；または
（c）（a）および（b）の組み合わせ
を含む溶液に添加して、透明な溶液を形成する工程；並びに、
（3）適切な非溶媒を使用して工程（2）由来の製剤を沈殿させる工程。
【０２３８】
好ましい態様において、工程（2）は、少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤の存在下において行われる。粒径減少の後、次いで抗体をPEG誘導体化された表面安定剤に対して直接または間接的に付着させる。
【０２３９】
本方法は、存在するならば、従来の手段による分散の透析またはダイアフィルトレーションおよび濃縮により、任意の形成された塩の除去を伴うことができる。分散は、連続的に、またはバッチモードで製造することができる。
【０２４０】
C. ナノ粒子活性物質組成物を得るための均質化
ナノ粒子活性物質組成物を調製する例示的な均質化方法は、米国特許第5,510,118号であるProcess of Preparing Therapeutic Compositions Containing Nanoparticlesに記載されている。このような方法は、活性物質粒子を、液状分散媒体中に分散させること、続いて所望の有効平均粒径に活性物質の粒径を減少させるための分散に供して均質化することを含む。
【０２４１】
活性物質粒子は（1）少なくとも1つの抗体もしくはその断片；（2）少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤；または（3）これらの組み合わせ（すなわち、PEG誘導体化された表面安定剤に付着された少なくとも1つの抗体またはその断片）の存在下においてサイズを減少させることができる。
【０２４２】
好ましい態様において、活性物質粒子は、少なくとも1つの表面安定剤の存在下においてサイズを減少させ、続いて抗体をPEG誘導体化された表面安定剤に直接または間接的に付着させる。
【０２４３】
または、摩滅の前後のいずれかにおいて、活性物質粒子を（1）少なくとも1つの抗体もしくはその断片；（2）少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤；または（3）これらの組み合わせ（すなわち、PEG誘導体化された表面安定剤に付着された少なくとも1つの抗体またはその断片）と接触させることができる。希釈剤などのその他の化合物を、サイズ減少過程の前に、間に、または後に、いずれかで活性物質組成物に添加することもできる。分散は、連続的に、またはバッチ様式で製造することができる。
【０２４４】
IV. 本発明のナノ粒子活性物質組成物を使用する方法
本発明のナノ粒子活性物質組成物は、活性物質の標的化された送達方法に使用することができる。このような方法において、組成物中に存在する抗体またはその断片は、選択的に標的部位と結合する。
【０２４５】
本発明のナノ粒子活性物質組成物は、経口、肺、直腸、目、結腸、非経口的（たとえば、静脈内、筋肉内、または皮下）、大槽内、腟内、腹腔内、局部的（たとえば、粉末、軟膏、または滴）、頬側、経鼻、および局所的投与などの任意の薬学的に許容される様式で被検体に投与することができる。本明細書で使用される「被検体」という用語は、動物、好ましくはヒトまたは非ヒトを含む哺乳類を意味するために使用される。患者および被検体という用語は、交換可能に使用してもよい。
【０２４６】
本発明の組成物は、任意の薬学的に許容される用量に処方することができる。例示的な固体剤形は、液状分散、液状の懸濁液、ゲル、エアロゾル、軟膏、クリーム、錠剤、カプセル、サシェ剤、ロゼンジ、粉末、丸剤、または顆粒を含むが、これらに限定されるわけではない。剤形は、たとえば、速溶剤形、徐放剤形、凍結乾燥剤形、遅延性放出剤形、長期放出剤形、パルス状放出剤形、および即時放出と徐放剤形とが混合されたもの、またはこれらの組み合わせであることができる。
【０２４７】
非経口注射に適した組成物は、生理学的に許容される滅菌水溶液または非水溶液、分散物、懸濁液、乳濁液、および滅菌した注射可能な溶液または分散物に再構成する滅菌散剤を含んでよい。適当な水溶性および非水溶性担体、希釈剤、溶媒、または溶剤の例には、水、エタノール、ポリオール（プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセロールなど）、適当なそれらの混合物、植物油（オリーブ油など）、およびオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルが含まれる。適切な流動性は、例えば、レシチン等のコーティングの使用、分散物の場合は必要とする粒径の保持、および界面活性物質の使用により保持できる。
【０２４８】
ナノ粒子活性物質組成物は、保存剤、湿潤剤、乳化剤、および調剤薬剤などの補助剤を含んでもよい。微生物の増殖防止は、パラベン、クロロブタノール、フェノール、およびソルビン酸等の様々な抗細菌剤や抗真菌剤により確実にすることができる。また、糖、および塩化ナトリウムなどの等張剤を含むことも望ましい。注射可能な剤形の持続性の吸収は、モノステアリン酸アルミニウム、およびゼラチンなど、吸収を遅延させる薬剤の使用によりもたらされる。
【０２４９】
経口投与用の固形剤形には、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、および粒剤が含まれる。このような固形剤形においては、ナノ粒子活性物質が以下のうちの少なくとも一つと混合される：（a）クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムなどの一つまたは複数の不活性な賦形剤（または、担体）；（b）デンプン、ラクトース、ショ糖、ブドウ糖、マンニトール、およびケイ酸などの充填剤または増量剤；（c）カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ショ糖、およびアカシアなどの結合剤；（d）グリセロール等の湿潤剤、（e）アガー-アガー、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、特定の複合ケイ酸塩、および炭酸ナトリウムなどの崩壊剤；（f）パラフィンなどの液体遅延剤；（g）四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤；（h）セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロールなどの加湿剤、（i）カオリンおよびベントナイトなどの吸着剤；ならびに、（j）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、またはそれらの混合物などの滑沢剤。カプセル剤、錠剤、および丸剤の場合、剤形は緩衝剤も含んでよい。
【０２５０】
経口投与のための液体剤形は、薬学的に許容される乳剤、分散剤、溶液、懸濁液、シロップ、およびエリキシル剤等を含む。活性物質に加えて、液体剤形は、当技術分野において一般的に使用される、水または他の溶媒、可溶化剤、および乳化剤などの不活性な希釈剤を含んでもよい。これら不活性な希釈剤の他に、組成物はまた、加湿剤などの補助剤、乳化および懸濁剤、甘味剤、着香剤、および香料剤を含んでよい。
【０２５１】
また、特定の組成物および投与方法に対して望ましい治療的応答を得るために有効な活性成分の量を得るため、本発明のナノ粒子組成物中の活性物質の実際の用量レベルを変化させることができる。したがって、選択された投与レベルは所望の治療効果、投与経路、活性物質の効力、所望の治療期間、およびその他の要素に左右される。
【０２５２】
一日用量は、単回用量または複数回用量で投与できる。任意の特定の患者に対する具体的な投与レベルは、体重、全身の健康状態、性別、食事、投与の時間と経路、投与活性物質の効力、吸収および排泄の速度、他の薬物との組合せ、ならびに治療される特定の疾患の重症度などの様々な要因に依存すると考えられる。
【０２５３】
以下の実施例は、本発明を例示するために示される。しかし、本発明はこれら実施例に記載の具体的な条件や詳細に制限されないと理解されるべきである。なお、本明細書全体を通じて、米国特許を含む公的に利用可能な文献への参照は、すべて参照として本明細書に組み入れられる。
【０２５４】
また、以下の実施例における製剤のいくつかは、光学顕微鏡を使用して調査した。本明細書において、「安定な」ナノ粒子分散(一様なブラウン運動)は、「凝集性」分散(運動のない比較的大きな不均一粒子)から容易に識別可能であった。
【０２５５】
実施例1
本実施例は、生物学的に活性なリガンドを用いた難水溶性ナノ粒子活性物質およびPEG誘導体化されたリン脂質表面安定剤を含む組成物の調製を証明する。リガンドは、PEG鎖の末端に共有結合性に結合されたビオチン官能基である。結合実験を蛍光アビジンで行って、表面安定剤上のビオチン官能基の活性が活性物質の製粉を経た粒径減少後にも維持されることを確認した。
【０２５６】
実施例に使用した活性物質は、パクリタキセルであった。パクリタキセルは、抗悪性腫瘍薬と呼ばれる医薬群に属する。これは、卵巣癌、乳癌、特定の型の肺癌、皮膚癌、および粘膜癌を治療するために使用され、後天性免疫不全症候群（AIDS）の患者ではより一般的に見つけられる。また、その他の種類の癌を治療するために使用してもよい。パクリタキセルは、以下の化学構造を有する。
2007511513.tif 000003
【０２５７】
ナノ粒子パクリタキセル分散は、5重量%パクリタキセルおよび1.25重量%PEG誘導体化されたリン脂質安定剤の水性スラリーを製粉することによって調製した。製剤を、0.8mmのYTZ摩滅媒体の存在下において、15mL瓶の中で12〜36時間ボールミルにかけた。
【０２５８】
PEG誘導体化された異なるリン脂質を含む、以下の2つの製剤を調製した：（1）1,2ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン-N-[ビオチニル(ポリエチレングリコール)2000]（ナトリウム塩）を含む「活性」製剤、および（2）1,2ジステアロイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン-N-[メトキシ(ポリエチレングリコール)2000]を含む「対照」製剤（どちらもAvanti Polar Lipids製）。
【０２５９】
製粉されたパクリタキセル製剤の粒径分布（表1）は、Horiba LA910粒径分布アナライザー（Horiba Instruments, Irvine, CA）を使用して、静電気レーザー光散乱によって測定した。製粉後のパクリタキセル粒子の平均、D50、およびD90を下記に示す。
【０２６０】
（表１）製粉されたパクリタキセル製剤の特徴
2007511513.tif 000004
【０２６１】
製剤が蛍光アビジンを結合する能力を特徴づけるために、簡単な結合試験を行った。それぞれのナノ粒子パクリタキセル製剤の試料を洗浄して、結合していないPEG誘導体化されたリン脂質を除去した。ナノ粒子パクリタキセル粒子（その表面に結合したPEG誘導体化された表面安定剤を有する）を微量遠心分離によって単離し、脱イオン水に再懸濁した。
【０２６２】
洗浄した試料をアビジン-FITC接合体（Sigma）と共に室温で1時間インキュベートした。遊離の（結合していない）アビジン-FITCを微量遠心分離によってナノ粒子パクリタキセル粒子から分離した。粒子画分を単離して、エピ蛍光（epifluorescence）および位相差顕微鏡法によって解析するために小量で分散させた。
【０２６３】
活性な分散は、高度に蛍光性であり、アビジン-FITC結合を示したが、一方、対照製剤は、検出可能な蛍光を示さなかった（図1）。これは、表面安定剤のビオチン活性が維持されており、製粉後に失われていないことを証明する。これらの結果は、PEG誘導体化されたリン脂質が、ナノ粒子活性物質表面安定剤として首尾よく使用することができ、生物学的に関連したリガンドを活性型で提示することができることを示唆する。
【０２６４】
実施例2
本実施例は、難水溶性ナノ粒子活性物質および蛍光ローダミン標識をもつPEG誘導体化されたリン脂質表面安定剤を含む組成物の調製を記載される。エピ蛍光顕微鏡観察を利用して、蛍光表面安定剤が活性物質と結合され、製粉後に蛍光を発する能力を維持することを証明した。この実施例で利用した難水溶性活性物質は、X線造影剤安息香酸、3,5-ビス(アセチルアミノ)-2,4,6-トリヨード-4-(エチル-3-エトキシ-2-ブテノアート)エステル（「WIN 68209」）であった。
【０２６５】
以下の、WIN68209の2つの分散を調製した：（1）5重量%WIN 68209および0.67% PEG誘導体化された1,2-ジステアロイル-d62-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン（PEG誘導体化されたDSPE、Avanti Polar Lipids）の分散、並びに（2）5重量%WIN 68209および0.05% ローダミン標識したPEG誘導体化された1,2-ジパルミトイル-d62-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン（PEG誘導体化されたDPPE、Avanti Polar Lipids、Molecular probesによるカスタム合成）の分散。
【０２６６】
5重量%WIN 68209および0.67% PEG誘導体化されたDSPEの水性スラリー、並びに重量%WIN 68209および0.05% ローダミン標識したPEG誘導体化されたDPPEの水性スラリーをそれぞれ、0.8mmのYTZ摩滅媒体の存在下において、15mL瓶の中で13時間ボールミルにかけた。
【０２６７】
製粉されたWIN 68209粒子の粒径分布は、Horiba LA910粒径分布アナライザー（Horiba Instruments, Irvine, CA）において静電気レーザー光散乱によって決定した。製粉されたWIN 68209分散は、以下の特性を有した：平均粒径207nm、D50 197nm、D90 284nm（30秒間の超音波処理後）。
【０２６８】
WIN 68209分散は、位相差およびエピ蛍光顕微鏡観察によって撮像した。WIN 68209分散は、エピ蛍光性イルミネーションをもつ明るい蛍光を発し、表面安定剤が、製粉後にその蛍光特性を維持したことを示した（図2）。このタイプの表面安定剤は、これが結合しているナノ粒子活性物質の蛍光画像化および定量化に有用であり得る。
【０２６９】
実施例3
本実施例の目的は、少なくとも1つの抗体を含むナノ粒子活性物質組成物の培養内皮細胞に対する標的化を証明することであった。以下の実施例では、ビオチン化されたモノクローナル抗体を、リンカーとしてタンパク質ストレプトアビジンを使用して、ビオチン化されたPEG誘導体化された表面安定剤に間接的に結合させる。
【０２７０】
本実施例で利用した難水溶性活性物質は、X線造影剤安息香酸、3,5-ビス(アセチルアミノ)-2,4,6-トリヨード-4-(エチル-3-エトキシ-2-ブタノアート)エステル（「WIN 68209」）であった。
【０２７１】
WIN 68209のナノ粒子分散の調製：
後述するように、WIN 68209の試料をPEG誘導体化された1,2-ジステアロイル-d62-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン（PEG誘導体化されたDSPE、Avanti Polar Lipids）の存在下において製粉した。標的化および蛍光特性は、修飾型の、PEG誘導体化された1,2-ジパルミトイル-d62-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン（PEG誘導体化されたDPPE、Avanti Polar Lipids）を少量含めることによって与えられた。PEG誘導体化されたDPPEの画分を、蛍光ローダミン標識（DPPE-PEG-ローダミン、Custom Synthesis、Molecular Probes）または、PEG鎖に付着させたビオチン官能基（DPPE-PEG-ビオチン、Avanti Polar Lipids）のいずれかで修飾した。DPPE-PEG-ローダミンは、蛍光検出を経て化合物のトラッキングが可能であるが、一方、DPPE-PEG-ビオチンは、抗体結合のための活性なビオチン基を提示する。
【０２７２】
0.05重量% PEG-DPPE-ローダミン、0.05重量% DPPE-PEG-ビオチン、0.62% PEG誘導体化されたDSPE、および5重量% WIN 68209の水性スラリーを、0.8mmのYTZ摩滅媒体の存在下において、15ml瓶の中で12〜18時間、室温でボールミルにかけた（活性）。第二の試料は、同じ総量の安定剤を維持してDPPE-PEG-ビオチンなしで調製し、陰性対照として使用した（対照）。
【０２７３】
得られる、WIN 68209の製粉された分散の平均、D50、およびD90の粒径をHoriba LA-910 Laser Scattering Particle Size Distribution Analyzer（Horiba Instruments, Irvine, CA）を使用して、静電気レーザー光散乱によって決定した（表2）。
【０２７４】
（表２）製粉されたWIN 68209組成物の特徴
2007511513.tif 000005
【０２７５】
インテグリン特異的抗体の選択的結合の確認：
本実施例に使用した抗体は、血管形成の間に内皮細胞上に発現される細胞接着受容体であるインテグリンαVβ3に対して選択的に結合する。抗体がαVβ3陽性ヒト臍静脈内皮細胞（HUVEC、CRL-1730、 American Type Culture Collection）に対してWIN 68209粒子を標的化する能力は、をストレプトアビジンコーティングされた蛍光ポリスチレン微粒子（Fluoresbrite YG, 6um, Polysciences）を使用して確認した。微粒子を、ビオチン化された抗体（CD146, Chemicon International）と共にリン酸緩衝生理食塩水（PBS, Invitrogen）中で1時間インキュベートし、次いで細胞培養に添加した。結合は、位相差およびエピ蛍光顕微鏡観察によって評価した。微粒子は、HUVECに対して強く結合したが、受容体を発現しないNIH/3T3線維芽細胞（CRL-1568、American Type Culture Collection）には結合せず、これにより抗体選択性を確認した（図3）。
【０２７６】
インテグリン特異抗体を含むナノ粒子WIN 68209組成物の調製：
製粉したWIN 68209活性試料を、ビオチン官能性をもたせた安定剤に対するストレプトアビジン結合を経てビオチン化された抗内皮細胞モノクローナル抗体で装飾した。簡潔には、薬をリン酸緩衝生理食塩水（PBS、Invitrogen）中で室温にて1時間インキュベートすることにより、ビオチン化された抗体を、1：10のモル比で、試ストレプトアビジン（S0677、Sigma）に対して事前に結合させた。ナノ粒子WIN68209分散を洗浄して、ストレプトアビジン/抗体複合体に対して競合するかもしれない可溶性DPPE-PEG-ビオチンを除去した。分散を微量遠心分離し、ナノ粒子WIN 68209粒子をペレットにして、これを単離し、脱イオン水に再懸濁した。洗浄したWIN68209ナノ粒子を室温で1時間インキュベートすることによって、ストレプトアビジン/抗体複合体で標識した。ナノ粒子WIN 68209は、ストレプトアビジンに対して50倍の重量過剰で使用した。対照試料も同様に処置した。
【０２７７】
活性試料および対照試料の選択的結合能力の決定：
上記のとおりに処理した活性試料および対照試料をHUVECと共にインキュベートした。HUVECに対するWIN 68209粒子の結合は、エピ蛍光および位相差顕微鏡法によって評価した。
【０２７８】
結果：
活性試料中に存在するWIN 68209の粒子がHUVECと結合することが、見いだされた（図4）。対照試料（ビオチン化された安定剤を欠く）中に存在するWIN 68209の粒子は、高い親和性で内皮細胞と結合しなかった。抗体-粒子結合（たとえば、ストレプトアビジンまたは抗体）の任意の成分の除去により、特異的結合が消失した（データ示さず）。
【０２７９】
結論：
本実施例は、本発明のナノ粒子WIN 68209組成物が、組成物中に存在する抗体またはその断片の結合特異性に基づいて、関心対象の部位に特異的に標的化することを証明する。従って、本発明の組成物は、難溶性の活性物質の特異的標的化を提供する。
【０２８０】
明細書の全体を通じて、米国特許を含む公的に利用できる文書に対する任意かつ全ての参照は、具体的に参照として組み入れられる。
【０２８１】
本発明の精神または範囲から逸脱することなく、本発明の方法および組成物に種々の修飾および変更を行うことができることが、当業者には明らかであろう。従って、本発明は、本発明の修飾および変更が、添付の請求の範囲およびこれらの均等の範囲内に入ることを条件として、これらを包含することが企図される。
【図面の簡単な説明】
【０２８２】
【図１】図1Aは、アビジン-FITCと共にインキュベートした活性製剤を示す（位相差）。図1Bは、アビジン-FITCと共にインキュベートした活性製剤を示す（エピ蛍光）。図1Cは、アビジン-FITCと共にインキュベートした対照製剤を示す（位相差）。図1Dは、アビジン-FITCと共にインキュベートした対照製剤を示す（エピ蛍光）。
【図２】図2Aは、位相差によって撮像した蛍光WIN68209の分散を示す。図2Bは、エピ蛍光によって撮像した蛍光WIN68209の分散を示す。
【図３】図3Aは、HUVECに対する抗インテグリンαVβ3コーティングされた微粒子結合を示す。図3Bは、NIH 3T3線維芽細胞に結合できない抗インテグリンαVβ3コーティングされた微粒子を示す。
【図４】図4Aは、エピ蛍光によって示される、HUVECに強く結合した、活性試料中の抗体装飾されたナノ粒子WIN68209粒子を示す。図4Bは、位相差によって示される、HUVECに強く結合した、活性試料中の抗体装飾されたナノ粒子WIN68209粒子を示す。図4Cは、エピ蛍光によって示される、対照試料中のナノ粒子WIN68209粒子がHUVECに強く結合できなかったことを示す。図4Dは、位相差によって示される、対照試料中のナノ粒子WIN68209粒子がHUVECに強く結合できなかったことを示す。
【図１】
2007511513.tif 000008
【図２】
2007511513.tif 000009
【図３】
2007511513.tif 000010
【図４】
2007511513.tif 000011
【手続補正書】
【提出日】平成18年7月19日(2006.7.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下を含むナノ粒子活性物質組成物： 
（a）活性物質の粒子が、約2000nm未満の有効平均粒径を有する、少なくとも1つの難溶性の活性物質； 
（b）活性物質の表面と結合した、少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤；および、
（c）PEG誘導体化された表面安定剤と結合した、少なくとも1つの抗体またはその断片であって、断片が、標的部位に対して特異的に結合する能力を有する、抗体または断片。
【請求項２】
（a）その他の賦形剤を含まない、少なくとも1つの活性物質および少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤の総合計乾燥重量に基づいて、少なくとも1つの活性物質が、重量の約99.5%〜約0.001%、約95%〜約0.1%、もしくは約90%〜約0.5%からなる群より選択される量で存在する；
（b）その他の賦形剤を含まない、少なくとも1つの活性物質および少なくとも1つのPEG誘導体化された表面安定剤の総合計乾燥重量に基づいて、少なくとも1つの表面安定剤が、重量の約0.5%〜約99.999%、約5.0%〜約99.9%、もしくは約10%〜約99.5%からなる群より選択される量で存在する；または、
（c）（a）および（b）の組み合わせである、
請求項1記載の組成物。
【請求項３】
抗体またはその断片が、（a）PEG誘導体化された表面安定剤に直接付着している；または（b）PEG誘導体化された表面安定剤に、リンカーを介して付着している、請求項1または2記載の組成物。
【請求項４】
リンカーがビオチン官能基である、請求項3記載の組成物。
【請求項５】
（a）抗体がIgD、IgA、IgM、IgE、もしくはIgG免疫グロブリンである；
（b）抗体が、キメラ抗体、ヒト化抗体、および異種接合体抗体からなる群より選択される；または、
（c）（a）および（b）の組み合わせである
請求項1〜4のいずれか一項記載の組成物。
【請求項６】
抗体断片が、
（a）IgD、IgA、IgM、IgE、もしくはIgG免疫グロブリン由来である；および/または
（b）Fab領域、F(ab')2領域、Fab'領域、Fv領域、VL領域、VH領域、およびそれらの断片からなる群より選択される、
請求項1〜4のいずれか一項記載の組成物。
【請求項７】
PEG誘導体化された表面安定剤が、PEG誘導体化されたリン脂質、PEG誘導体化されたコレステロール、PEG誘導体化されたコレステロール誘導体、PEG誘導体化されたビタミンA、PEG誘導体化されたビタミンE、およびPEG誘導体化されたDPPEからなる群より選択される、請求項1〜6のいずれか一項記載の組成物。
【請求項８】
少なくとも2つの表面安定剤を含む、請求項1〜7のいずれか一項記載の組成物。
【請求項９】
少なくとも1つの表面安定剤が、非イオン性表面安定剤、陰イオン性表面安定剤、陽イオン性表面安定剤、双性イオン性表面安定剤、およびイオン性表面安定剤からなる群より選択される、請求項1〜8のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１０】
少なくとも1つの表面安定剤が、以下からなる群より選択される、請求項1〜9のいずれか一項記載の組成物：
塩化セチルピリジニウム、ゼラチン、カゼイン、リン脂質、デキストラン、グリセロール、アラビアゴム、コレステロール、トラガカント、ステアリン酸、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸カルシウム、モノステアリン酸グリセロール、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ロウ、ソルビタンエステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール、ドデシルトリメチルアンモニウムブロミド、ステアリン酸ポリオキシエチレン、コロイド性二酸化ケイ素、ホスフェート、ドデシル硫酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒプロメロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、フタル酸ヒプロメロース、非晶質セルロース、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、トリエタノールアミン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、エチレンオキシドおよびホルムアルデヒドとの4-(1,1,3,3-テトラメチルブチル)-フェノール重合体、ポロキサマー；ポロキサミン、荷電したリン脂質、ジオクチルスルホスクシナート、スルホコハク酸ナトリウムのジアルキルエステル、ラウリル硫酸ナトリウム、アルキルアリールポリエーテルスルホナート、ステアリン酸スクロースとジステアリン酸スクロースとの混合物、p-イソノニルフェノキシポリ-(グリシドール)、デカノイル-N-メチルグルカミド；n-デシルβ-D-グルコピラノシド；n-デシルβ-D-マルトピラノシド；n-ドデシルβ-D-グルコピラノシド；n-ドデシルβ-D-マルトシド；ヘプタノイル-N-メチルグルカミド；n-ヘプチル-β-D-グルコピラノシド；n-ヘプチル-β-D-チオグルコシド；n-ヘキシル-β-D-グルコピラノシド；ノナノイル-N-メチルグルカミド；n-ノイルβ-D-グルコピラノシド；オクタノイル-N-メチルグルカミド；n-オクチル-β-D-グルコピラノシド；オクチル-β-D-チオグルコピラノシド；リゾチーム、酢酸ビニルおよびビニルピロリドンのランダム共重合体、陽イオン性重合体、陽イオン性生体高分子、陽イオン性多糖、陽イオン性セルロース誘導体、陽イオン性アルギネート、陽イオン性非重合体化合物、陽イオン性リン脂質、陽イオン性脂質、ポリメチルメタクリラートトリメチルアンモニウムブロミド、スルホニウム化合物、ポリビニルピロリドン-2-ジメチルアミノエチルメタクリラートジメチルサルフェート、ヘキサデシルトリメチルアンモニウムブロミド、ホスホニウム化合物、四級アンモニウム化合物、ベンジル-ジ(2-クロロエチル)エチルアンモニウムブロミド、ココナッツトリメチルアンモニウムクロライド、ココナッツトリメチルアンモニウムブロミド、ココナッツメチルジヒドロキシエチルアンモニウムクロライド、ココナッツメチルジヒドロキシエチルアンモニウムブロミド、デシルトリエチルアンモニウムクロライド、デシルジメチルヒドロキシエチルアンモニウムクロライド、デシルジメチルヒドロキシエチルアンモニウムクロライドブロミド、C12-l5ジメチルヒドロキシエチルアンモニウムクロライド、C12-l5ジメチルヒドロキシエチルアンモニウムクロライドブロミド、ココナッツジメチルヒドロキシエチルアンモニウムクロライド、ココナッツジメチルヒドロキシエチルアンモニウムブロミド、ミリスチルトリメチルアンモニウムメチルサルフェート、ラウリルジメチルベンジルアンモニウムクロライド、ラウリルジメチルベンジルアンモニウムブロミド、ラウリルジメチル(エテノキシ)4アンモニウムクロライド、ラウリルジメチル(エテノキシ)4アンモニウムブロミド、N-アルキル(Cl2-18)ジメチルベンジルアンモニウムクロライド、N-アルキル(Cl4-18)ジメチル-ベンジルアンモニウムクロライド、N-テトラデシルジメチルベンジルアンモニウムクロライド一水和物、ジメチルジデシルアンモニウムクロライド、N-アルキルおよび(C12-14)ジメチル1-ナフチルメチルアンモニウムクロライド、トリメチルアンモニウムハライド、アルキル-トリメチルアンモニウム塩、ジアルキル-ジメチルアンモニウム塩、ラウリルトリメチルアンモニウムクロライド、エトキシル化されたアルキルアミドアルキルジアルキルアンモニウム塩、エトキシル化されたトリアルキルアンモニウム塩、ジアルキルベンゼンジアルキルアンモニウムクロライド、N-ジデシルジメチルアンモニウムクロライド、N-テトラデシルジメチルベンジルアンモニウム、クロライド一水和物、N-アルキル(C12-14)ジメチル1-ナフチルメチルアンモニウムクロライド、ドデシルジメチルベンジルアンモニウムクロライド、ジアルキルベンゼンアルキルアンモニウムクロライド、ラウリルトリメチルアンモニウムクロライド、アルキルベンジルメチルアンモニウムクロライド、アルキルベンジルジメチルアンモニウムブロミド、C12トリメチルアンモニウムブロミド、C15トリメチルアンモニウムブロミド、C17トリメチルアンモニウムブロミド、ドデシルベンジルトリエチルアンモニウムクロライド、ポリ-ジアリルジメチルアンモニウムクロライド（DADMAC）、ジメチルアンモニウムクロライド、アルキルジメチルアンモニウムハロゲン化物、トリセチルメチルアンモニウムクロライド、デシルトリメチルアンモニウムブロミド、ドデシルトリエチルアンモニウムブロミド、テトラデシルトリメチルアンモニウムブロミド、メチルトリオクチルアンモニウムクロライド、POLYQUAT 10（商標）、テトラブチルアンモニウムブロミド、ベンジルトリメチルアンモニウムブロミド、コリンエステル、ベンザルコニウムクロライド、ステアラルコニウムクロライド化合物、セチルピリジニウムブロミド、セチルピリジニウムクロライド、四級ポリオキシエチルアルキルアミンのハロゲン塩、MIRAPOL（商標）、ALKAQUAT（商標）、アルキルピリジニウム塩；アミン、アミン塩、アミンオキシド、イミドアゾリニウム塩、プロトン化された四級アクリルアミド、メチル化された四級重合体、および陽イオン性グアー（guar）。
【請求項１１】
活性物質が結晶相、非晶相、半結晶相、半非晶相、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項1〜10のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１２】
活性物質粒子の有効平均粒径が、約1900nm未満、約1800nm未満、約1700nm未満、約1600nm未満、約1500nm未満、約1400nm未満、約1300nm未満、約1200nm未満、約1100nm未満、約1000nm未満、約900nm未満、約800nm未満、約700nm未満、約600nm未満、約500nm未満、約400nm未満、約300nm未満、約250nm未満、約200nm未満、約100nm未満、約75nm未満、および約50nm未満からなる群より選択される、請求項1〜11のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１３】
請求項1記載の活性物質組成物の有効平均粒径と異なる有効平均粒径を有する少なくとも1つのさらなる活性物質組成物をさらに含む、請求項1〜12のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１４】
活性物質が、以下からなる群より選択される、請求項1〜13のいずれか一項記載の組成物：
機能性食品、COX-2阻害剤、レチノイド、抗癌剤、NSAIDS、タンパク質、ペプチド、ヌクレオチド、抗肥満薬、栄養補助食品、カロテノイド、副腎皮質ステロイド、エラスターゼ阻害剤、抗真菌薬、腫瘍学療法、抗嘔吐薬、鎮痛剤、心臓血管薬、抗炎症薬、駆虫薬、抗不整脈薬、抗生物質、血液凝固阻止剤、抗うつ薬、抗糖尿病薬、抗癲癇薬、抗ヒスタミン剤、降圧薬、抗ムスカリン剤、抗放線菌薬、抗腫瘍薬、免疫抑制薬、抗甲状腺剤、抗ウイルス薬、抗不安薬、鎮静剤、収斂剤、βアドレナリン受容体遮断剤、血液製剤および代用品、強心剤、造影剤、副腎皮質ステロイド、咳抑制剤、診断薬剤、診断画像化剤、利尿剤、ドーパミン作動薬、止血剤、免疫薬、脂質調節薬、筋弛緩剤、副交感神経作動薬、甲状腺傍のカルシトニンおよびバイホスホナート（biphosphonate）、プロスタグランジン、放射性薬物、性ホルモン、抗アレルギー薬、刺激薬、食欲減退剤、交感神経作動薬、甲状腺薬、血管拡張薬、キサンチン、アシクロビル、アルプラゾラム、アルトレタミン（altretamine）、アミロライド、アミオダロン、ベンズトロピンメシレート、ブプロピオン、カベルゴリン、カンデサルタン、セリバスタチン、クロルプロマジン、シプロフロキサシン、シサプリド、クラリスロマイシン、クロニジン、クロピドグレル、シクロベンザプリン、シプロヘプタジン、デラビルジン、デスモプレッシン、ジルチアゼム、ジピリダモール、ドラセトロン（dolasetron）、マレイン酸エナラプリル、エナラプリラート、ファモチジン、フェロジピン、フラゾリドン、グリピジド、イルベサルタン、ケトコナゾール、ランソプラゾール、ロラタジン、ロクサピン、メベンダゾール、メルカプトプリン、乳酸ミルリノン、ミノサイクリン、ミトキサントロン、ネルフィナビルメシレート、ニモジピン、ノルフロキサシン、オランザピン、オメプラゾール、ペンシクロビル、ピモジド、タコリムス（tacolimus）、クアゼパム、ラロキシフェン、リファブチン、リファンピン、リスペリドン、リザトリプタン（rizatriptan）、サキナビル、セルトラリン、シルデナフィル、アセチル-スルフィソキサゾール、テマゼパム、チアベンダゾール、チオグアニン、トランドラプリル、トリアムテレン、トリメトレキセート、トログリタゾン、トロバフロキサシン、ベラパミル、硫酸ビンブラスチン、ミコフェノール酸、アトバコン、アトバコン、プログアニル、セフタジジム、セフロキシム、エトポシド、テルビナフィン、サリドマイド、フルコナゾール、アムサクリン、ダカルバジン、テニポシド、アセチルサリチル酸、ならびに皮膚への適用に有用な活性物質。
【請求項１５】
（a）機能性食品が、栄養補助食品、ビタミン、ミネラル、薬用植物、ルテイン、葉酸、脂肪酸、果実抽出物、野菜抽出物、ホスファチジルセリン、リポ酸、メラトニン、グルコサミン/コンドロイチン、バルバドスアロエ、グッグル、グルタミン、アミノ酸、緑茶、リコピン、全体食品、食品添加物、薬用植物、植物栄養素、抗酸化剤、果実のフラボノイド成分、月見草油、亜麻仁、魚油、海洋動物油、およびプロバイオティクスからなる群より選択される；または、
（b）NSAIDが、ナブメトン、チアラミド、プロカゾン（proquazone）、ブフェキサマック、フルミゾール（flumizole）、エピラゾール（epirazole）、チノリジン、チメガジン、ダプソン、アスピリン、ジフルニサル、ベノリレート（benorylate）、ホスフォサル（fosfosal）、ジクロフェナク、アルクロフェナク、フェンクロフェナク（fenclofenac）、エトドラク、インドメタシン、スリンダク、トルメチン、フェンチアザク、チロミソール（tilomisole）、カルプロフェン（carprofen）、フェンブフェン、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、オキサプロジン、スプロフェン、チアプロフェン酸、イブプロフェン、ナプロキセン、フェノプロフェン、インドプロフェン、ピルプロフェン、フルフェナミック（flufenamic）、メフェナミック（mefenamic）、メクロフェナミック（meclofenamic）、ニフルミック（niflumic）、オキシフェンブタゾン、フェニルブタゾン、アパゾン、フェプラゾン、ピロキシカム、スドキシカム（sudoxicam）、イソキシカム（isoxicam）、およびテノキシカムからなる群より選択される；または、
（c）COX-2阻害剤が、ニメスリド（nimesulide）、セレコキシブ、ロフェコキシブ、メロキシカム、バルデコキシブ（valdecoxib）、パレコキシブ（parecoxib）、エトリコキシブ（etoricoxib）、フルルビプロフェン、ナブメトン、エトドラク、イグラチモド（iguratimod）、フロスリド（flosulide）、ピロキシカム、ジクロフェナク、ルミラコキシブ（lumiracoxib）、モンテルカスト（monteleukast）、プランルカスト、ヘプチニルスルフィド（heptinylsulfide）、
2007511513.tif 000012
からなる群より選択される；または、
（d）抗癌剤が、アルキル化剤、代謝拮抗剤、アントラセンジオン、天然物、ホルモン、アンタゴニスト、放射線増感剤、白金配位錯体、副腎皮質性抑制剤、免疫抑制剤、置換された尿素、およびCOX-2阻害剤からなる群より選択される、
請求項14記載の組成物。
【請求項１６】
（a）アルキル化剤が、クロルメチン（chlormethine）、クロラムブシル（chlorambucile）、メルファラン、ウラムスチン（uramustine）、マンノムスチン（mannomustine）、エストラムスチンホスフェート（extramustinephoshate）、メクロレタミンオキシド（mechlore-thaminoxide）、シクロホスファミド、イホスファミド、トリホスファミド（trifosfamide）、トレタミン（tretamine）、チオテパ、トリアジクオン、マイトマイシン、ブスルファン、ピポスルファン、ピポスルファム（piposulfam）、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ストレプトゾトシン（streptozotocine）、ミトブロニトール（mitobronitole）、ダカルバジン、およびプロカルバジンからなる群より選択される；または、
（b）代謝拮抗剤が、メトトレキセート、フルオロウラシル、フロクスウリジン、テガフール、シタラビン、イドクスウリジン、フルシトシン、メルカプトプリン、チオグアニン、アザチオプリン、チアミプリン（tiamiprine）、ビダラビン、ペントスタチン、およびピューロマイシン（puromycine）からなる群より選択される；または、
（c）天然物が、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エトポシド、テニポシド、アドリアマイシン（adriamycine）、ダウノマイシン（daunomycine）、ドクチノマイシン（doctinomycin）、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ミトラマイシン、ブレオマイシン、マイトマイシン、L-アスパラギナーゼ、α-インターフェロン、カンプトセシン、タキソール、およびレチノイン酸からなる群より選択される；または、
（d）ホルモンもしくはアンタゴニストが、プレドニゾン、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、ジエチルスチルベストロール、エチニルエストラジオール、タモキシフェン、プロピオン酸テストステロン、フルオキシメステロン、フルタミド、ロイプロリドからなる群より選択される；または、
（e）抗癌薬が、シスプラチン、カルボプラチン、ミトキサントロン、ヒドロキシ尿素、ミトタン、アミノグルテチミド、シクロスポリン、アザチオプリン、スルファサラジン、メトキサレン、およびサリドマイドからなる群より選択される、
請求項15記載の組成物。
【請求項１７】
（a）活性物質粒子が、約2ミクロン未満、約1900nm未満、約1800nm未満、約1700nm未満、約1600nm未満、約1500nm未満、約1400nm未満、約1300nm未満、約1200nm未満、約1100nm未満、約1000nm未満、約900nm未満、約800nm未満、約700nm未満、約600nm未満、約500nm未満、約400nm未満、約300nm未満、約250nm未満、約200nm未満、約150nm未満、約100nm未満、約75nm未満、および約50nm未満からなる群より選択される有効平均粒径を有するように、哺乳類への投与の際に活性物質粒子が再分散する；
（b）活性物質粒子が、約2ミクロン未満、約1900nm未満、約1800nm未満、約1700nm未満、約1600nm未満、約1500nm未満、約1400nm未満、約1300nm未満、約1200nm未満、約1100nm未満、約1000nm未満、約900nm未満、約800nm未満、約700nm未満、約600nm未満、約500nm未満、約400nm未満、約300nm未満、約250nm未満、約200nm未満、約150nm未満、約100nm未満、約75nm未満、および約50nm未満からなる群より選択される有効平均粒径を有するように、生物関連媒体中で再分散する；または、
（c）（a）および（b）の組み合わせである、
請求項1〜16のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１８】
生物関連媒体が、水、水性電解質溶液、塩の水溶液、酸の水溶液、塩基の水溶液、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項17記載の組成物。
【請求項１９】
（a）投与に続く哺乳類被検体の血漿における分析時に、活性物質のTmaxが、同用量で投与された同一活性物質の非ナノ粒子組成物のTmaxよりも小さい；
（b）投与に続く哺乳類被検体の血漿における分析時に、活性物質のCmaxが、同用量で投与された同一活性物質の非ナノ粒子組成物のCmaxを上回る；
（c）投与に続く哺乳類被検体の血漿における分析時に、活性物質のAUCが、同用量で投与された同一活性物質の非ナノ粒子組成物のAUCを上回る；または、
（d）（a）、（b）および（c）の任意の組み合わせである、
請求項1〜18のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２０】
（a）Tmaxが、同用量で投与された同一活性物質の非ナノ粒子組成物によって示されるTmaxの約90%以下、約80%以下、約70%以下、約60%以下、約50%以下、約30%以下、約25%以下、約20%以下、約15%以下、約10%以下、および約5%以下のTmaxからなる群より選択される；
（b）Cmaxが、同用量で投与された同一活性物質の非ナノ粒子組成物によって示されるCmaxよりも、少なくとも約50%、少なくとも約100%、少なくとも約200%、少なくとも約300%、少なくとも約400%、少なくとも約500%、少なくとも約600%、少なくとも約700%、少なくとも約800%、少なくとも約900%、少なくとも約1000%、少なくとも約1100%、少なくとも約1200%、少なくとも約1300%、少なくとも約1400%、少なくとも約1500%、少なくとも約1600%、少なくとも約1700%、少なくとも約1800%、もしくは少なくとも約1900%大きいCmaxからなる群より選択される；
（c）AUCが、同用量で投与された同一活性物質の非ナノ粒子製剤によって示されるAUCよりも、少なくとも約25%、少なくとも約50%、少なくとも約75%、少なくとも約100%、少なくとも約125%、少なくとも約150%、少なくとも約175%、少なくとも約200%、少なくとも約225%、少なくとも約250%、少なくとも約275%、少なくとも約300%、少なくとも約350%、少なくとも約400%、少なくとも約450%、少なくとも約500%、少なくとも約550%、少なくとも約600%、少なくとも約750%、少なくとも約700%、少なくとも約750%、少なくとも約800%、少なくとも約850%、少なくとも約900%、少なくとも約950%、少なくとも約1000%、少なくとも約1050%、少なくとも約1100%、少なくとも約1150%、もしくは少なくとも約1200%大きいAUCからなる群より選択される；または、
（d）（a）、（b）および（c）の任意の組み合わせである、
請求項19記載の組成物。
【請求項２１】
摂食下で投与された時に、絶食条件と比較して有意に異なる吸収レベルを生じない、請求項1〜20のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２２】
絶食状態に対して、摂食状態で投与された時に、本発明の活性物質組成物の吸収における差異が、約100%未満、約90%未満、約80%未満、約70%未満、約60%未満、約50%未満、約40%未満、約30%未満、約25%未満、約20%未満、約15%未満、約10%未満、約5%未満、および約3%未満からなる群より選択される、請求項21記載の組成物。
【請求項２３】
絶食状態のヒトに対する組成物の投与が、摂食状態の被検体に対する組成物の投与と生物学的に同等である、請求項1〜22のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２４】
「生物学的同等性」が、
（a）CmaxおよびAUCの両方についての、0.80〜1.25の間の90%信頼区間；または
（b）AUCについての0.80〜1.25の間の90%信頼区間、およびCmaxについての0.70〜1.43の間の90%信頼区間
によって確立される、請求項23記載の組成物。
【請求項２５】
（a）経口投与、肺投与、直腸投与、眼投与、結腸投与、非経口投与、槽内投与、腟内投与、腹腔内投与、局部投与、口内投与、経鼻投与、および局所投与からなる群より選択される投与のために製剤化される；
（b）液状分散、経口懸濁液、ゲル、エアロゾル、軟膏、乳剤、錠剤、カプセル、サシェ剤、ロゼンジ、粉末、丸剤および顆粒からなる群より選択される剤形へと製剤化される；
（c）徐放製剤、速溶製剤、凍結乾燥製剤、遅延放出製剤、持続放出製剤、拍動放出製剤（pulsatile release formulation）、および即時放出製剤と徐放製剤との混合物からなる群より選択される剤形へと製剤化される；または、
（d）（a）、（b）および（c）の任意の組み合わせである、
請求項1〜24のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２６】
1つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤、担体、またはこれらの組み合わせをさらに含む、請求項1〜25のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２７】
薬剤製造のための、請求項1〜26のいずれか一項記載の組成物の使用法。
【国際調査報告】
2007511513.tif 000013
2007511513.tif 000014
2007511513.tif 000015
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