(57)【要約】  式（Ｉａ）2007529462.tif 000061または（Ｉｂ）2007529462.tif 000062  式中、記号、指標および置換基は以下の意味を有し、Ｒ１はＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３であり、Ｒ２はＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、Ｅｔ、Ｎ−Ｐｒ、ｉ−Ｐｒ、ｎ−Ｂｕ、ｔ−Ｂｕ、フェニル、チエニル、フリル、チアゾリルであり、Ｒ１またはＲ２いずれかはＨでなければならず、Ｒ３はＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、Ｅｔ、ｎ−Ｐｒ、ｉ−Ｐｒ、ｎ−Ｂｕ、ｔ−Ｂｕ、フェニル、チエニル、フリル、チアゾリル、次いで、Ｘは例えば式（ＩＩ）2007529462.tif 000063または式（ＩＩＩ）2007529462.tif 000064（Ｒ４はＨ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３）であり、または式（ＩＶ）2007529462.tif 000065または式（Ｖ）2007529462.tif 000066（Ｙは式（ＶＩ）2007529462.tif 000067または式（ＶＩＩ）2007529462.tif 000068）である］の少なくとも１つの化合物、または式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の前記で規定された化合物の医薬上許容される塩、エステルまたはアミドまたはプロドラッグ、および医薬で有用な医薬上許容される担体を含む医薬組成物。該化合物は、Ｅ−、Ｔ−またはＬ−セレクチン結合によって媒介されるイン−ビトロおよびイン−ビボ結合プロセスを調節するために適用される。
2007529462.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉａ）または（Ｉｂ）：
【化１】
2007529462.tif 000050
［式中、記号、指標および置換基は以下の意味を有し、
Ｒ１はＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣＨ３であり、
Ｒ２はＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、Ｅｔ、ｎ−Ｐｒ、ｉ−Ｐｒ、ｎ−Ｂｕ、ｔ−Ｂｕ、フェニル、チエニル、フリルまたはチアゾリルであり、
Ｒ１またはＲ２いずれかはＨでなければならず、
Ｒ３はＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、Ｅｔ、ｎ−Ｐｒ、ｉ−Ｐｒ、ｎ−Ｂｕ、ｔ−Ｂｕ、フェニル、チエニル、フリルまたはチアゾリルであり、
−Ｘ−は：
（ａ）
【化２】
2007529462.tif 000051
（ｍは０または１であり；ｎは１ないし６の整数である）
（ｂ）
【化３】
2007529462.tif 000052
（Ｒ４はＨ、ＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３である）
（ｃ）
【化４】
2007529462.tif 000053
（Ｒ５はＨ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＣＨ３、ＮＨ２、ＮＨアルキル、ＮＨアリール、またはＮＨアシルであり、−Ｋ−は−Ｓ−または−Ｏ−であり、およびＴはＯ、Ｓまたは［Ｈ，Ｈ］である）
（ｄ）
【化５】
2007529462.tif 000054
（−Ｅ−は−（ＣＨ２−）ｋＮＨであり、ｋは０、１、２または３であり、ｑは１ないし６の整数である）
であり、
−Ｙは：
【化６】
2007529462.tif 000055
（ｓは０または１であり、
Ｒ６はＣＯ２Ｈ、ＣＯ２アルキル、ＣＯ２アリール、ＣＯ２ＮＨ２、ＣＯ２アラルキル、ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２ＮＨ２、ＰＯ（ＯＨ）２、１−Ｈ−テトラゾリル−、ＣＨＯ、ＣＯＣＨ３、ＣＨ２ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨアルキル、Ｎ（アルキル）アルキル’、ＯＣＨ３、ＣＨ２ＯＣＨ３、ＳＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＮまたはＣＦ３であり、
Ｒ７はＲ６から独立してＨ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮまたはＮＯ２であり、
Ｒ８はＲ６およびＲ７から独立してＨ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ２またはＲ６であり、
Ｒ９ａはＨ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＣＨ３、ＯＣＨ３、ＳＨまたはＮＨ２であり、
ｔは０、１または２であり、
−Ｗ−は−（ＣＨ２−）ｖ、シス−ＣＨ＝ＣＨ−またはトランス−ＣＨ＝ＣＨ−であり、ｖは０、１または２であり；
Ｒ６がＮＨ２である場合、Ｒ７またはＲ８またはＲ９ａはＨであってはならず；
−Ｗ−がシス−ＣＨ＝ＣＨ−またはトランス−ＣＨ＝ＣＨ−である場合、Ｒ６はＮＨ２またはＳＨであってはならない）
であり
−Ｚは：
【化７】
2007529462.tif 000056
（Ｒ９ｂはＲ９ａから独立してＨ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＣＨ３、ＯＣＨ３、ＳＨ、ＮＨ２である）
である］
の少なくとも１つの化合物、または式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の前記規定の化合物の医薬上許容される塩、エステルまたはアミドまたはプロドラッグ、および医薬で有用な医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項２】
該化合物は式（Ａ１）、（Ｂ１）、（Ａ２）または（Ｂ２）によって定義される請求項１記載の医薬組成物。
【化８】
2007529462.tif 000057
［式中、−Ｘ−および−Ｙ−は前記定義に同じであって、ここに、−Ｘ’−は
【化９】
2007529462.tif 000058
であり、ここに、−Ｙ’は
【化１０】
2007529462.tif 000059
（Ｒ１０はＣＯ２Ｈ、ＣＯ２アルキル、ＣＯ２アリール、ＣＯ２ＮＨ２、ＣＯ２アラルキル、ＣＨ２ＳＯ３Ｈ、ＣＨ２ＳＯ２ＮＨ２、ＣＨ２ＰＯ（ＯＨ）２、１−Ｈ−テトラゾリル、ＣＨＯ、ＣＯＣＨ３、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＮＨ２、ＣＨ２ＮＨアルキル、ＣＨ２Ｎ（アルキル）アルキル’、ＣＨ２ＯＣＨ３、またはＣＨ２ＳＨであり、
Ｒ１１はＣＯ２Ｈ、ＣＯ２アルキル、ＣＯ２アリール、ＣＯ２ＮＨ２、ＣＯ２アラルキル、ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２ＮＨ２、ＰＯ（ＯＨ）２、１−Ｈ−テトラゾリル、ＣＨＯ、ＣＯＣＨ３、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨアルキル、Ｎ（アルキル）アルキル’、ＯＣＨ３またはＳＨである）
である］
【請求項３】
該化合物が式（Ｃ）または（Ｄ）：
【化１１】
2007529462.tif 000060
［式中、−Ｘ’−およびＹ’は請求項２で定義したものと同じである］
によって定義される請求項１記載の医薬組成物。
【請求項４】
式（Ａ１）、（Ａ２）、（Ｂ１）、（Ｂ２）、（Ｃ）または（Ｄ）の少なくとも１つの化合物を含む、請求項２および／または３記載の医薬組成物。
【請求項５】
式（Ｃ）の一般構造式を有する請求項３記載の化合物。
【請求項６】
式（Ｄ）の一般構造式を有する請求項３記載の化合物。
【請求項７】
請求項１で定義された式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の構造式を有する少なくとも１つの化合物の有効量を患者に投与する工程を含む、ｓＬｅｘまたはｓＬｅａおよびチロシン硫酸残基へのＰ−セレクチン、Ｌ−セレクチンまたはＥ−セレクチンの結合を阻害する方法。
【請求項８】
ｓＬｅｘまたはｓＬｅａおよびチロシン硫酸残基へのＰ−セレクチン、Ｌ−セレクチンまたはＥ−セレクチンの結合を阻害する、患者の治療用の医薬の製造のための、請求項１で定義された式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の構造式を有する化合物の使用。
【請求項９】
炎症障害、およびセレクチン媒介プロセスが役割を果たす他の医薬的疾患の治療、診断または予防用の医薬を製造するための、請求項１で定義された式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の構造式を有する化合物の使用。
【請求項１０】
診断剤または治療剤の薬物標的化用のビヒクルを製造するための、請求項１で定義された式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の構造式を有する化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般には、Ｅ−セレクチン、Ｐ−セレクチンまたはＬ−セレクチンによって媒介されるイン・ビトロおよびイン・ビボプロセスを調節するための化合物、組成物および方法に関する。さらに詳しくは、新規なクラスの小分子ＰＳＧＬ−１ミメティックスおよびそれらの使用を記載する。開示された小分子はトリヒドロキシフェニルサブユニットを含み、セレクチン−媒介機能を効果的に阻害する。
【背景技術】
【０００２】
組織が微生物によって侵入され、感染され、または損傷されると、炎症プロセスは白血球および他の免疫系成分を感染または負傷の部位に指し向ける。このプロセス内では、白血球（白血球細胞）は、微生物の飲み込みまたは消化において主要な役割を果たす。かくして、白血球の感染されたまたは損傷された組織への動員は、効果的な免疫防御を準備するのに重要である。一般には、血流を通って循環する白血球細胞が見出される。血流が患部組織に移動するには、白血球細胞は侵入されたまたは損傷された組織を認識でき、患部組織近くの毛細血管内皮の壁に結合でき、毛細血管の細胞壁を通じて患部組織に拡散できなければならない。従って、白血球は内皮細胞壁上を転がり、次いで、該壁に接着されなければならない。この細胞接着事象は、免疫応答の最も重要な態様の１つである。この細胞接着の第一の工程はセレクチンファミリーのメンバーによって媒介される。血管接着分子のセレクチンファミリーは３つの構造的に類似するカルシウム−依存性炭水化物結合性細胞表面蛋白質であるＥ−、Ｐ−およびＬ−セレクチンよりなる。Ｅ−セレクチンは炎症した内皮のみに発現され、Ｐ−セレクチンは炎症した内皮ならびに血小板に発現され、これはＥ−セレクチンに対して構造的な類似性を有する。Ｌ−セレクチンは白血球で発現され、やはり、Ｐ−およびＥ−セレクチンに対して構造的類似性を有する。
【０００３】
該セレクチンは膜貫通蛋白質であって、アミノ末端レクチンドメイン、表皮成長因子（ＥＧＦ）様ドメイン、可変形の補体受容体関連リピート、疎水性ドメインにわたる領域および細胞質ドメインよりなる。白血球の接着に導く結合相互作用は、白血球の表面での、セレクチンのレクチンドメイン、および種々の炭水化物リガンドの接触によって媒介されるようである。全ての３つのセレクチンは、低い親和性をもって、ほとんどの白血球の表面に存在するグリコシル部位である炭水化物シアリルＬｅｗｉｓｘ（ｓＬｅｘ）、に結合できる。構造的に関連するグリコシル部位であるシアリルＬｅｘｉｓａ（ｓＬｅａ）は圧倒的に癌細胞の表面で見出される［Ｋ．Ｏｋａｚａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．；Ｊ．Ｓｕｒｇ．Ｒｅｓ．；１９９８；７８（１）；７８−８４およびＲ．Ｐ．ＭｃＥｖｅｒ  ｅｔ  ａｌ．；Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ；１９９７；１４（５）；５８５−５９１］。Ｐ−セレクチンの場合には、区別される高親和性糖蛋白質リガンドが記載されており［Ｒ．Ｐ．ＭｃＥｖｅｒ；Ｒ．Ｄ．Ｃｕｍｍｉｎｇｓ；Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．；１９９７；１００；４８５−４９２］、所謂ＰＳＧＬ−１（Ｐ−セレクチン糖蛋白質リガンド−１）であり、これは、ｓＬｅｘ部位による、ならびにそのペプチド成分の一部、特に、硫酸化チロシン残基によって高親和性セレクチン結合に寄与する［Ｒ．Ｐ．ＭｃＥｖｅｒ；Ｅｒｎｓｔ  Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  Ｒｅｓ．Ｆｏｕｎｄ．Ｗｏｒｋｓｈｏｐ；２００４；４４；１３７−１４７］。ＰＳＧＬ−１は、最高の親和性をもってＰ−セレクチンに結合する最も重要なセレクチンリガンドであるが、それはＥ−およびＬ−セレクチンにも結合する［Ｇ．Ｃｏｎｓｔａｎｔｉｎ；Ｄｒｕｇ  Ｎｅｗｓ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔ；２００４；１７（９）；５７９−５８６］。それは圧倒的に白血球で発現されるホモダイマーシアロムチンである。
【０００４】
それらの低い基礎発現とは対照的に、Ｅ−およびＰ−セレクチンの発現は炎症の間にアップレギュレートされ、白血球の炎症組織への実質的な動員に至る。セレクチン−媒介細胞接着は感染と戦うのに必要であるが、そのような細胞接着が望ましくないか、あるいは過剰であり、その結果、修復の代わりに酷い組織の損傷をもたらす種々の状況がある。多くの急性および慢性炎症障害（例えば、喘息、慢性閉塞性肺病（ＣＯＰＤ）、乾癬など）の場合、対応する接着分子、特に、Ｅ−およびＰ−セレクチンの組織発現の顕著な上昇と同時に、活性化された白血球の組織への浸潤の間の関連性が証明されている。
【０００５】
白血球細胞の浸潤もまた移植および移植片拒絶のコースにおいて炎症兆候で役割を果たし得る。また、血液凝固のプロセスは、白血球がＬ−セレクチンおよびその対応するリガンドＰＳＧＬ−１をともに保有し、かくして、ＰＳＧＬ−１を介してそれ自体と相互作用でき、それらもまたＰ−セレクチンを運ぶ血小板にも結合することができるために起こる、白血球−白血球、および白血球−血小板結合によってさらに促進される。
【０００６】
従って、セレクチン−媒介細胞接着の阻害は、非常に初期の段階において炎症カスケードと干渉し、それを停止させる有望な可能性を提供する。小分子セレクチン阻害剤は、同時に、汎用−セレクチン−アンタゴニストとして全ての３つのセレクチンを阻害して、セレクチンの間の可能な冗長性を回避するはずである［Ｍ．Ｓｐｅｒａｎｄｉｏ  ｅｔ  ａｌ．；Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ；２００４；１；１８５−１９５］。
【０００７】
ｓＬｅｘ／ｓＬｅａの他に、天然の高親和性リガンドＰＳＧＬ−１は、小分子セレクチン阻害剤の設計のためのもう１つの鋳型構造である。ｓＬｅｘ／ｓＬｅａと比較して、ＰＳＧＬ−１は全ての３つのセレクチンに対して高い親和性を示す。新規な小分子を見出し、それを検出するために、セレクチン結合につきＰＳＧＬ−１と競合する薬物は、従って、炎症性障害を治療するための新規なクラスの効果的な汎用−セレクチンアンタゴニストを開発するための有望な戦略である。セレクチン阻害剤は、セレクチン、ならびに鋳型構造としてのリガンド様ＰＳＧＬ−１を用いて設計することができる。というのは、それらはセレクチンおよびＰＳＧＬ−１または同様な構造モチーフを持つ他のリガンドの間の結合を阻害することが意図されるからである。
【０００８】
新規な小分子セレクチン阻害剤は、薬物様であって、潜在的経口生物学的利用性を有するというある種の要件を満たすことができよう。用語「薬物同様性」は文献に記載されている［Ｌｉｐｉｎｓｋｉ；Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．Ｒｅｖ．；１９９７；２３；３−２５］。他の分子特性の他に、受動的に輸送される分子は、薬物様となるために５００未満の相対的分子量を有すると考えられる。これらの規則に従い、５００未満の相対的分子量を持つ化合物を小分子として定義するのが一般的であるが、これは分子が薬物様であって、それにより、経口的に生物学的に利用可能となる必要条件である。また、高度に極性の炭水化物部位またはペプチド成分の存在は薬物同様性の概念と合致しない［Ｈ．Ｕｌｂｒｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ．；Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．；２００３；２４（１２）；６４０−６４７．Ｄ．Ｓｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．；２００１；４４；２０９４−２１０７］。さらに、所望の化合物は、小腸の細胞によって最も遅く摂取され／吸収できるように、胃腸管を介して通過する間に安定でなければならず、このことはほとんどのグリコシド分子およびペプチド構造ではあてはまらない。セレクチン阻害性能力を持つ典型的な先行技術の例として後に引用するほとんどの構造は、不都合なＡＤＭＥ特性を持ち大きな非薬物様分子である一方高い効力を有するか、または不都合なＡＤＭＥ特性を持ち小ないし中サイズのｓＬｅｘ−またはｓＬｅａ−グルコミメティックスである一方低い効力を有するか、そのいずれかである。
【０００９】
ＥＰ１  ０８１  １５１  Ａ１は、異常な血管形成の治療用の新規な生物活性化合物を
開示する。
【００１０】
【化１】
2007529462.tif 000003
【００１１】
該構造は、ＶＣＡＭならびにＥ−セレクチン発現の優れた阻害剤でもあるが、セレクチン−媒介結合の阻害剤ではない新規な抗炎症物質である。
【００１２】
ＵＳ  ６，３４０，７００  Ｂ１は、一酸化窒素ＮＯを生じるＮＯ−シンターゼ酵素に対する阻害活性、および／または反応性酸素種（ＲＯＳ）を捕獲する活性を有し、炎症病の治療においてこのように好都合な効果を生じ得る化合物を提供する。典型的な化合物は、
【００１３】
【化２】
2007529462.tif 000004
【００１４】
である。また、これらの化合物に導くより小さな中間体の製造も挙げられる。これらの中間体の医薬的使用は特許請求されていない。例えば、これらの中間体の１つは、
【００１５】
【化３】
2007529462.tif 000005
【００１６】
である。
ＷＯ  ９９／２９７０６のジサリシレートおよびジサリシレート系Ｃ−グリコシドは医療においてセレクチン−リガンド構造ミメティックスとして作用する。それらはｓＬｅｘである天然セレクチンリガンドのシアル酸および／またはフコースを欠くらしい。低いないしは中程度の生物学的活性を持つ炭水化物遊離ｓＬｅｘ−グリコミメティックスの群の
典型的化合物は、
【００１７】
【化４】
2007529462.tif 000006
【００１８】
である。
３つの極性の、恐らくは荷電したカルボキシル基の存在のため、この構造は、可能性として貧弱な経口生物学的利用性を示す、これまで定義されたＬｉｐｉｎｓｋｉの規則と合致しない。さらなる炭水化物部位は、経口生物学的利用性の潜在能力をさらに低下させる。
【００１９】
ＷＯ  ０３／０９７６５８によると、セレクチン結合によって媒介されるイン・ビトロおよびイン・ビボプロセスを調節するための化合物はベンジルアミノスルホン酸であり、これは、炭水化物またはグリコミメティックに結合することができる。開示された該化合物はほとんどのものがｍＭ範囲の活性を有する。１５０５の相対的分子量を持つ最も優れた化合物の１つは、
【００２０】
【化５】
2007529462.tif 000007
【００２１】
である。
ＷＯ  ９９／２９７０５はｓＬｅｘ−およびｓＬｅａ−グルコミメティックスを記載し、これは、セレクチン−媒介障害の治療で有用であり得る。典型的な化合物は、
【００２２】
【化６】
2007529462.tif 000008
【００２３】
である。
該化合物のほとんどは炭水化物様構造を網羅し、従って、炭水化物に関連する典型的な薬物動態学的な不利を有するようである。少数の非グリコシドｓＬｅｘ−およびｓＬｅａ−グリコミメティックスが記載されている。平均して、開示された構造の活性はｍＭ範囲のものである。
【００２４】
ＷＯ  ９７／０１５６９はｓＬｅｘおよびｓＬｅａのミメティックスとしてのジグリコシル化１，２ジオールを開示する。これらのグリコシド化合物は大きくて、腸において消化的分解の傾向があり、これは、共に、経口生物学的利用性を損じる。その例は、
【００２５】
【化７】
2007529462.tif 000009
【００２６】
である。
ＷＯ  ００／３３８３６の置換された５−員複素環はＥ−およびＰ−セレクチンのみに対して阻害活性を呈する。該化合物はｓＬｅｘ−グリコミメティックスである。最も優れた化合物の１つは、７７３の相対分子量を持つ
【００２７】
【化８】
2007529462.tif 000010
【００２８】
である。これらの分子についての臨床的開発は報告されていない。
ＥＰ  ０  ７５８  ２４３  Ｂ１は、結合の阻害を介する細胞表面に存在するｓＬｅｘまたはｓＬｅａへのＥ−、Ｐ−および／またはＬ―セレクチンの結合によって特徴付けられる、病気を治療または予防するための医薬における成分としてのマンノピラノシルオキシ−フェニル−安息香酸または同様な酸を記載する。（乾癬または関節リウマチのような）炎症性病気とは別に、敗血症ショック、再還流負傷および癌のような他の病気に言及されている。これらの分子もまた炭水化物部位を保有し、従って、低い生物学的利用性を有するに過ぎないであろう。
【００２９】
Ｄ．Ｂｏｃｋ  Ｅｔ  ａｌ．，  ［Ｎｅｗ  Ｄｒｕｇｓ，２００３，Ｄ０４，２８；ｐ．２８］は炎症標的であるセレクチンの阻害剤としての、セレクチンアンタゴニスト、特に、ビモシアモースの役割を記載する。
【００３０】
【化９】
2007529462.tif 000011
【００３１】
ＥＰ  ０  ８４０  ６０６  Ｂ１から、ビモシアモースのような化合物が知られている。例えば、１，６−ビス−［３−（カルボキシメチルフェニル）−４−（２−α−Ｄ−マンンピラノシルオキシ）フェニル］ヘキサン、およびヘプタン、ブタンおよびペンタン誘導体を含めたその誘導体がそれである。再度、ｓＬｅｘまたはｓＬｅａに結合するセレクチンを阻害するためのそれらの使用が述べられている。ビモシアモースおよび関連化合物は、元来、ｓＬｅｘ−およびｓＬｅａ−グルコミメティックスとして開発されてきた。しかしながら、最近の研究は、ビモシアモースがＰＳＧＬ−１ミメティックと考えることが
できるという仮説を裏付ける［Ｅ．Ａｙｄｔ，Ｇ．Ｗｏｌｆｆ；Ｐａｔｈｏｂｉｏｌｏｇｙ；２００２−２００３；７０；２９７−３０１］。ビモシアモースは８６２の相対的分子量を有し、２つのマンノースユニットを網羅し、これは、該分子が経口的に利用可能であることを妨げると思われる。これは、現在臨床試験中である唯一のセレクチン阻害剤のようである。しかし、これらの分子は１を超える炭水化物部位でさえ保有し、経口生物学的利用性を欠くことが知られている。
【００３２】
セレクチンを有する第一の細胞およびセレクチンに対するリガンドを有する第二の細胞の間の結合をイン・ビトロで阻害するための異なる方法は、共有結合により架橋した脂質組成物が第一の細胞と相互作用するのを許す点で、ＥＰ  ０  ９０２  ６８１  Ｂ１に記載されている。ある割合の脂質はフコオリゴ糖、ラクトースまたは酸性単糖のような付着した糖類を有し、さらなる割合のものは架橋しており、および付着した糖類を持たないある割合のものは中性ｐＨで負に荷電した酸性基を有する。これらの脂質組成物は、白血球または癌細胞の血管内皮、血小板またはリンパ系組織への接着において局所的変化で用いられる。これらの組成物は共有結合しているので、それらは５００をはるかに超える相対的分子量を持つマルチマーに似ている。さらに、それらは同様に炭水化物部位を含有する。全てのこれらの特性は経口生物学的利用性をほとんどないものとする。
【００３３】
ＷＯ  ２００４／０１８５０２は、Ｎ−末端にある没食子酸または１，３，５−ベンゼントリカルボン酸をそれに付加することができるＧｌｕ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−Ｖａｌコンセンサスモチーフを持つペプチド含有構造であるヒトＰ−セレクチンに選択的に結合する化合物の誘導体を記載する。治療または診断方法におけるそのような化合物の使用に加えて、炎症性障害を治療することが記載されている。高親和性セレクチン阻害剤を開発するための鋳型構造としてＰＳＧＬ−１を考慮する必要性が記載されている。化合物評価のために用いられる生物学的イン・ビトロアッセイのタイプもこれを反映する。記載された分子はヒトＰ−セレクチンに対して高い阻害能力を有するが、Ｅ−およびＬ−セレクチンに対しては有しない。しかしながら、それらの分子および生物学的特性はほとんど経口的な生物学的利用性をないものとする。それらは、ペプチダーゼによって分解されるであろうそれらのペプチド部位のため消化管を通過しないようである。痕跡量が小腸に到達する場合、それらは、恐らくは、それらの高い分子量のため受動的輸送によって吸収されない。最も優れた化合物は７００を超える相対的分子量を有し、従って、もはや小さな分子薬物とは考えることができない。典型的な２つの構造は
【００３４】
【化１０】
2007529462.tif 000012
【００３５】
および
【００３６】
【化１１】
2007529462.tif 000013
【００３７】
であり、それにより、
【００３８】
【化１２】
2007529462.tif 000014
【００３９】
は典型的なペプチド体である。
ＷＯ  ０１／８９５３１は、ａ）Ｐ−セレクチンのレクチンおよびＥＧＦ様（ＬＥ）ドメイン、ｂ）各々がｓＬｅｘと複合体化されたＰ−セレクチンＬＥおよびＥ−セレクチンＬＥ、およびｃ）チロシン硫酸化およびｓＬｅｘ双方によって修飾されたＰＳＧＬ−１ペプチドの機能的断片と複合体化したＰ−セレクチンＥＬの結晶および三次元構造と相互作用する（活性化または阻害する）剤を同定するための方法を提供する。
【００４０】
そのような非常に複雑な医薬分野において、セレクチン−媒介機能、例えば、セレクチン−依存性細胞接着の阻害剤の新規な種類を同定するための、およびセレクチン−リガンド相互作用に関連する疾患を阻害するそのような化合物を使用する方法の開発のための、当該分野における強力な医学的要望が存在する。市場で入手できる利用可能な抗炎症医薬療法のほとんどは、いくつかの深刻な欠点／副作用を有し、炎症カスケードの異なる工程を標的化するコルチコステロイドまたはＮＳＡＩＤ（非ステロイド抗炎症薬物）を含む。これとは異なり、セレクチン機能の阻害は、非常に初期の段階において炎症カスケードに介入する治療的概念である。ほとんど全ての有望なセレクチン阻害剤は、これまで市販の薬物とはならなかったが、これは少なくとも、それらの吸収−分布−代謝−排出（ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ−ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ−ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ−ｅｘｃｒｅｔｉｏｎ）（ＡＤＭＥ）挙動において、かくして、関節リウマチ、敗血症ショック、アテローム性動脈硬化症、再還流負傷および多くのその他のもののようなほとんどの炎症性障害の治療で必要とされる経口生物学的利用性において問題を引き起こす、それらの低い生物学的活性および／または高い分子量のためではない。
【００４１】
セレクチン阻害剤の分野で公表された化合物のほとんどはペプチド−および／または炭水化物−担持構造であり、これは、ペプチダーゼおよび／またはグリコシダーゼによる分解および修飾の傾向がある。炭水化物−担持構造は、さらに、高い分子量、高度なキラリティー、アノマー性、および脂質二層を通っての輸送の低い確率のような不利を有する。同様な不利はペプチド−担持化合物で知られている。かくして、これらの化合物は、経口生物学的利用が可能なセレクチン阻害剤および一般に市販される薬物の開発のための必要
条件である小さなかつ薬物様分子と考えることができない。
【００４２】
少数の非グリコシドおよび非ペプチド化合物がこの分野で記載されており、これは、高い相対的分子量および／または低い生物学的活性を持つ分子である。ほとんど全ての化合物はｓＬｅｘおよびｓＬｅａに基づいて設計されており、従って、グリコミメティックスである。しかしながら、炎症性障害を治療するためのｓＬｅｘ−およびｓＬｅａ−グリコミメティックスを設計する概念は今日成功しているとは判明していない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００４３】
本発明の目的は、セレクチン−媒介プロセスを優れて阻害することができ、先行技術化合物よりもそれらのイン・ビトロまたはイン・ビボ適用の間により少ない負の副作用を有する新規な小分子、特に、非グリコシル化／非グリコシドおよび非ペプチド化合物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００４４】
これらのグリコミメティックスのほとんどとは異なり、本発明の化合物はグリコシダーゼまたはペプチダーゼとなりにくい。これまで開発されたセレクチン阻害剤のほとんどはｓＬｅｘ−またはｓＬｅａ−グリコミメティックスである。しかしながら、本発明は、ＰＳＧＬ−１様生物学的イン・ビトロアッセイに基づいて発明された新規で優れた小さな薬物様セレクチン阻害剤を提供する。結合分子／受容体としてのセレクチン−リガンドおよびＰ−、Ｅ−またはＬ−セレクチンキメラとしてのＰＳＧＬ−１−代替物を意味するバイオアッセイが確立された。用いるＰＳＧＬ−１−代替物はｓＬｅｘ−チロシン−硫酸−ポリマーである。チロシン−硫酸残基ならびにｓＬｅｘ−残基はポリアクリルアミドマトリックスに共有結合されており、ここに、それらは統計学的に分布している。ムチン様分子ＰＳＧＬ−１および構造的に関連するリガンドを模倣するこの技術は広く用いられており、ｓＬｅｘ−チロシン−硫酸−ポリマーの用法は非常に良好なセレクチン−結合結果を与える［Ｎ．Ｖ．Ｂｏｖｉｎ；Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｓｏｃ  Ｓｙｍｐ．；２００２；（６９）：１４３−６０．Ｎ．Ｖ．Ｂｏｖｉｎ；Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊ．Ｊ．；１９９８；１５（５）；４３１−４６．Ｔ．Ｖ．Ｐｏｃｈｅｃｈｕｅｖａ  ｅｔ  ａｌ．；Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ．；２００３；１３（１０）；１７０９−１２．Ｇ．Ｗｅｉｔｚ−Ｓｃｈｍｉｄｔ  ｅｔ  ａｌ．；Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．；１９９６；２３８；１８４−１９０］。また、この技術はＷＯ  ２００４／０１８５０２におけるアッセイを確立するのに用いられたが、リガンドの炭水化物部位はｓＬｅｘではなく、ｓＬｅａであるという制限がある。ｓＬｅａは、一般的には、生理学的ＰＳＧＬ−１結合に関与することが知られておらず、ｓＬｅｘとは異なりＰＳＧＬ−１の炭水化物部位として記載されていなかったリガンドである。さらに、該分子は、医薬における有効成分として適用した場合に良好な生物学的利用性を示すはずである。
【００４５】
本発明は、式（Ｉａ）または（Ｉｂ）：
【００４６】
【化１３】
2007529462.tif 000015
【００４７】
［式中、記号、指標および置換基は以下の意味を有し：
Ｒ１はＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３であり、
Ｒ２はＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、Ｅｔ、ｎ−Ｐｒ、ｉ−Ｐｒ、ｎ−Ｂｕ、ｔ−Ｂｕ、フェニル、チエニル、フリル、チアゾリルであり、
Ｒ１またはＲ２はＨでなければならず、
Ｒ３はＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、Ｅｔ、ｎ−Ｐｒ、ｉ−Ｐｒ、ｎ−Ｂｕ、ｔ−Ｂｕ、フェニル、チエニル、フリル、チアゾリルであり、
−Ｘ−は：
（ａ）
【００４８】
【化１４】
2007529462.tif 000016
【００４９】
（ｍは０、１であり；
ｎは１ないし６の整数である）
（ｂ）
【００５０】
【化１５】
2007529462.tif 000017
【００５１】
（Ｒ４はＨ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３である）
（ｃ）
【００５２】
【化１６】
2007529462.tif 000018
【００５３】
（Ｒ５はＨ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＣＨ３、ＮＨ２、ＮＨアルキル、ＮＨアリール、ＮＨアシルであり、−Ｋ−は−Ｓ−または−Ｏ−であり、
およびＴはＯ、Ｓまたは［Ｈ，Ｈ］である）
（ｄ）
【００５４】
【化１７】
2007529462.tif 000019
【００５５】
（−Ｅ−は−（ＣＨ２−）ｋＮＨ−であり、ｋは０、１、２、３、およびｑは１ないし６の整数である）
であり
−Ｙは：
【００５６】
【化１８】
2007529462.tif 000020
【００５７】
（ｓは０または１であり、
Ｒ６はＣＯ２Ｈ、ＣＯ２アルキル、ＣＯ２アリール、ＣＯ２ＮＨ２、ＣＯ２アラルキル、ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２ＮＨ２、ＰＯ（ＯＨ）２、１−Ｈ−テトラゾリル−、ＣＨＯ、ＣＯＣＨ３、ＣＨ２ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨアルキル、Ｎ（アルキル）アルキル’、ＯＣＨ３、ＣＨ２ＯＣＨ３、ＳＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＮ、ＣＦ３であり、
Ｒ７はＲ６から独立してＨ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ２であって、
Ｒ８はＲ６およびＲ７から独立してＨ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｒ６であり、
Ｒ９ａはＨ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＣＨ３、ＯＣＨ３、ＳＨ、ＮＨ２であり、
ｔは０、１、２であり、
−Ｗ−は−（ＣＨ２−）ｖ、シス−ＣＨ＝ＣＨ−またはトランス−ＣＨ＝ＣＨ−、およびｖは０、１、２であり；
Ｒ６がＮＨ２である場合、Ｒ７またはＲ８またはＲ９ａはＨであってはならず；
−Ｗ−がシス−ＣＨ＝ＣＨ−またはトランス−ＣＨ＝ＣＨ−である場合、Ｒ６はＮＨ２またはＳＨであってはならない）
であり
−Ｚは：
【００５８】
【化１９】
2007529462.tif 000021
【００５９】
（Ｒ９ｂはＲ９ａから独立してＨ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＣＨ３、ＯＣＨ３、ＳＨ、ＮＨ２である）である］
の一般構造式を有する少なくとも１つの化合物、または式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の前記で特定された化合物の医薬上許容される塩、エステルまたはアミドおよびプロドラッグ、および医薬で有用な医薬上許容される担体を含む医薬組成物を提供する。
【００６０】
好ましい医薬組成物は式（Ａ１）、（Ｂ）、（Ａ２）または（Ｂ２）の化合物を含む。
【００６１】
【化２０】
2007529462.tif 000022
【００６２】
［式中、−Ｘ−および−Ｙは前記定義に同じであって、ここに、−Ｘ’−は
【００６３】
【化２１】
2007529462.tif 000023
【００６４】
であり、ここに、−Ｙ’は
【００６５】
【化２２】
2007529462.tif 000024
【００６６】
（Ｒ１０はＣＯ２Ｈ、ＣＯ２アルキル、ＣＯ２アリール、ＣＯ２ＮＨ２、ＣＯ２アラルキル、ＣＨ２ＳＯ３Ｈ、ＣＨ２ＳＯ２ＮＨ２、ＣＨ２ＰＯ（ＯＨ）２、１−Ｈ−テトラゾリル、ＣＨＯ、ＣＯＣＨ３、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＮＨ２、ＣＨ２ＮＨアルキル、ＣＨ２Ｎ（アルキル）アルキル’、ＣＨ２ＯＣＨ３、ＣＨ２ＳＨであり、
Ｒ１１はＣＨ２Ｈ、ＣＯ２アルキル、ＣＯ２アリール、ＣＯ２ＮＨ２、ＣＯ２アラルキル、ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２ＮＨ２、ＰＯ（ＯＨ）２、１−Ｈ−テトラゾリル、ＣＨＯ、ＣＯＣＨ３、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨアルキル、Ｎ（アルキル）アルキル’、ＯＣＨ３、ＳＨである）である］
さらに特に好ましい医薬組成物は式（Ｃ）および（Ｄ）の化合物を含む。
【００６７】
【化２３】
2007529462.tif 000025
【００６８】
［式中、−Ｘ’−およびＹ’は前記定義に同じである］
これらの化合物（Ｃ）および（Ｄ）はそれ自体が新規な化合物でもある。
【００６９】
前記した全ての化合物は細胞接着を阻害する能力を呈し、セレクチン−ならびにＰＳＧ
Ｌ−１様媒介結合を阻害する。該化合物はｓＬｅｘ／ｓＬｅａとセレクチンの相互作用を阻害し、また、セレクチンおよびチロシン硫酸残基の間の相互作用も阻害する能力を有する。従って、それらは急性および慢性炎症障害、ならびにセレクチン媒介プロセスが役割を果たす他の医薬的疾患の治療で有用である。
【００７０】
用語「医薬」は診断適用も含む。
用語「医薬」は、セレクチン媒介プロセスの役割を果たす医薬的疾患を予防するための予防的適用も含む。
【００７１】
用語「医薬」は、本発明の化合物を診断剤または治療剤の薬物標的化のためのビヒクルとして用いることができる適用も含む。
【００７２】
さらなる好ましい変形において、本発明は、式（Ａ１）、（Ａ２）、（Ｂ１）、（Ｂ２）、（Ｃ）または（Ｄ）の少なくとも１つの化合物を含む医薬組成物を提供する。
【００７３】
本発明は、さらに、ｓＬｅｘまたはｓＬｅａおよびチロシン硫酸へのＰ−、Ｅ−またはＬ−セレクチンの結合を阻害する式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の構造を有する少なくとも１つの化合物の有効量を患者に投与する工程を含む、ｓＬｅｘまたはｓＬｅａおよびチロシン硫酸残基へのＰ−セレクチン、Ｌ−セレクチンまたはＥ−セレクチンの結合を阻害する方法を提供する。前記で示した式（Ｉａ）または（Ｉｂ）を有する化合物はＥ−、Ｐ−またはセレクチン結合を阻害するように作用することが判明した。
【発明を実施するための最良の形態】
【００７４】
本明細書中で用いるように、用語「アルキル」は、限定されるものではないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどを含めた、１または２または３または４または５または６または７または８または９または１０または１１または１２の炭素原子の一価直鎖または分岐鎖の基を意味する。
【００７５】
用語「アリール」は、限定されるものではないが、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、フルオレニル、（１，２）−ジヒドロナフチル、インデニル、インダニル、チエニル、ベンゾチエニル、チエノピリジルなどを含めた、炭素環および複素環の芳香族基を意味する。
【００７６】
用語（アリールアルキルともいわれる）「アラルキル」は、限定されるものではないが、ベンジル、１−ナフチルメチル、２−ナフチルメチル、フルオロベンジル、クロロベンジル、ブロモベンジル、ヨードベンジル、アルコキシベンジル（ここに、「アルコキシ」はメトキシ、エトキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどを意味する）、ヒドロキシベンジル、アミノベンジル、ニトロベンジル、グアニジノベンジル、フルオレニルメチル、フェニルメチル（ベンジル）、１−フェニルエチル、２−フェニルエチル、１−ナフチルエチルなどを含めた、アルキル基に結合したアリール基を意味する。
【００７７】
本明細書中で用いられる用語「医薬上許容される塩、エステル、アミドおよびプロドラッグ」とは、過度な毒性や、刺激、またはアレルギー反応など無しに患者の組織と接触させて用いるのに適した、健全な医学的判断の範囲内で、合理的な利益／危険性比率に相応し、かつそれらの意図した使用で効果的な本発明の化合物のカルボキシレート塩、アミノ酸付加塩、エステル、アミドおよびプロドラッグ、ならびに可能であれば本発明の化合物の双性イオン形態をいう。用語「塩」とは、本発明の化合物の比較的非毒性の無機および有機酸付加塩をいう。これらの塩は、化合物の最終的な単離および精製の間にイン・サイチュにて、あるいはその遊離した形態の精製された化合物を適当な無機または有機塩また
は塩基と別々に反応させ、かく形成された塩を単離することによって調製することができる。本発明の化合物の代表的な塩は臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、二硫酸塩、硝酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、吉草酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、ホウ酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシレート、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩、メシレート、グルコヘプトネート、ラクチオビオネート、ラウリルスルホン酸塩などを含む。これらはナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム等、ならびに限定されるものではないが、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミン等を含めた非毒性アンモニウム、第四級アンモニウムおよびアミンカチオンのような、アルカリおよびアルカリ土類金属に基づくカチオンを含むことができる。
【００７８】
本発明の化合物の医薬上許容される非毒性エステルの例は、アルキル基が直鎖または分岐鎖であるＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５およびＣ６アルキルエステルを含む。許容されるエステルはＣ５、Ｃ６およびＣ７シクロアルキルエステルならびに、限定されるものではないが、ベンジルのようなアリールアルキルエステルも含む。Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５およびＣ６アルキルエステルが好ましい。本発明の化合物のエステルは慣用的な方法に従って調製することができる。
【００７９】
本発明の化合物の医薬上許容される非毒性アミドの例はアンモニア、第一級Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５およびＣ６アルキルアミンおよび第二級Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５およびＣ６ジアルキルアミンに由来するアミドを含み、ここに、該アルキル基は直鎖または分岐鎖である。第二級アミンの場合においては、該アミンは１つの窒素原子を含有する５または６員複素環の形態であってもよい。アンモニア、Ｃ１、Ｃ２およびＣ３アルキル第一級アミドおよびＣ１ないしＣ２ジアルキル第二級アミドに由来するアミドが好ましい。本発明の化合物のアミドは慣用的方法に従って調製することができる。
【００８０】
用語「プロドラッグ」とは、イン・ビトロにて、非活性から活性な状態へイン・ビボで迅速に変換されて、例えば、血液またはイン・ビボ代謝における加水分解により前記式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の親化合物を生じる１以上の化合物をいう。
【００８１】
また、医薬上活性な組成物は、本発明の化合物、またはＥ−セレクチンまたはＰ−セレクチンまたはＬ−セレクチン結合を阻害する、またはそれと競合する他の化合物を含有することができるとも考えられる。
【００８２】
本発明の医薬上活性な組成物は医薬上許容される担体および式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の化合物を含み、それにより、医薬上許容される担体は医学上適当なナノ粒子、デンドリマー、リポソーム、マイクロバブルまたはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）でもあり得る。本発明の医薬組成物は、非経口注射用の、固体または液体形態の経口投与用の、直腸または局所投与用などの、本明細書中では集合的に担体とよばれている１以上の生理学上許容される担体、アジュバントまたはビヒクルと共に処方された前記構造（Ｉａ）または（Ｉｂ）を有する１以上の化合物を含むことができる。
【００８３】
該組成物はヒトおよび動物に経口、直腸、非経口（静脈内、筋肉内、皮内または皮下）、槽内、膣内、腹腔内、局所（粉末、軟膏または点剤）、またはバッカルとして、または吸入により（霧化、または鼻スプレーとして）いずれかで投与することができる。
【００８４】
非経口注射に適した組成物は生理学的に許容される滅菌水性または非水性溶液、安定化剤、酸化剤、保存剤（例えば、アスコルビン酸、亜硫酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、ベンジルアルコール、ＥＤＴＡ）、分散剤、懸濁液またはエマルジョン、および滅菌
注射溶液または分散液への復元用の滅菌粉末を含むことができる。適当な水性および非水性担体、希釈剤、溶媒またはビヒクルの例は水、エタノール、ポリオール（プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセロール等）、その適当な混合物、（オリーブ油またはキャノーラ油）のような植物油、およびオレイン酸エチルのような注射用有機エステルを含む。適切な流動性は、例えば、レシチンのようなコーティングの使用によって、分散液の場合には必要な粒子サイズの維持によって、および界面活性剤の使用によって維持することができる。
【００８５】
これらの組成物は保存剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤のようなアジュバントを含有することもできる。微生物の作用の防止は、種々の抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸等によって確認することができる。等張剤、例えば、糖類、塩化ナトリウム等を含むのも望ましいであろう。注射用医薬形態の延長された吸収は、吸収を遅延させる剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンの使用によって実現することができる。
【００８６】
所望であれば、より効果的な分布のために、化合物は、ポリマーマトリックス、リポソームおよびマイクロスフィアのような遅延または適時放出または標的化送達システムに一体化させることができる。それらは、例えば、細菌−保持フィルターを介する濾過によって、または滅菌水、またはいくつかの他の滅菌注射媒体の形態の滅菌剤を使用直前に配合することによって滅菌することができる。
【００８７】
経口投与用の固体投与形態はカプセル、錠剤、丸剤、粉末および顆粒を含む。そのような固体投与形態において、活性な化合物またはプロドラッグエステルは、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウム、または（ｉ）充填剤または展延剤、例えば、澱粉、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよびケイ酸、（ｉｉ）結合剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよびアカシア、（ｉｉｉ）保湿剤、例えば、グリセロール、（崩壊剤、例えば、寒天−寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカ澱粉、アルギン酸、ある種の複合シリケートおよび炭酸ナトリウム、（ｖ）溶液遅延剤、例えば、パラフィン、（ｖｉ）吸収加速剤、例えば、第四級アンモニウム化合物、（ｖｉｉ）湿潤剤、例えば、セチルアルコールおよびグリセロールモノステアレート、（ｖｉｉｉ）吸着剤、例えば、カオリンおよびベントナイト、および（ｉｘ）滑沢剤、例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよびその混合物のような少なくとも１つの不活性な慣用的賦形剤（または担体）と混合される。カプセル、錠剤、および丸剤の場合には、投与形態は緩衝剤を含むこともできる。
【００８８】
同様なタイプの固体組成物を、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコール等のような賦形剤を用いる軟ゼラチンカプセルおよび硬ゼラチンカプセルにおける充填剤として使用することもできる。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤および顆粒のような固体投与形態は、腸溶コーティングおよび当該分野でよく知られた他のもののような、コーティングおよびシェルで調製することができる。それらは乳白剤を含有することができ、腸管のある部分で活性化合物または複数化合物を遅延して放出させるような組成物とすることもできる。使用することができる埋め込み組成物の例はポリマー物質およびワックスである。活性化合物は、適切であれば、１つ以上の前記賦形剤とともにマイクロカプセル化形態とすることもできる。
【００８９】
経口投与用の液体投与形態は医薬上許容されるエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシル剤を含む。活性化合物に加えて、液体投与形態は、水または他の溶媒、安定化剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，
３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油、特に、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ胚芽油、オリーブ油、キャノーラ油、ヒマシ油およびゴマ油、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、またはこれらの物質の混合物などのような、当該分野で通常使用される不活性な希釈剤を含有することができる。そのような不活性希釈剤以外に、組成物は湿潤剤、乳化および懸濁化剤、甘味剤、フレーバー剤および香料剤などのアジュバントを含むこともできる。
【００９０】
懸濁液は、活性化合物に加えて、懸濁化剤、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天−寒天、トラガカント、またはこれらの物質の混合物等を含有することができる。
【００９１】
直腸投与用の組成物は好ましくは坐薬であり、これは、本発明の化合物を、常温では固体であるが、体温では液体であって、従って、直腸または膣腔では融解し、活性成分を放出させるカカオバター、ポリエチレングリコールまたは坐薬ワックスのような適当な非刺激性賦形剤または担体と混合することによって調製することができる。本発明の化合物の局所投与用の投与形態は軟膏、粉末、スプレーおよび吸入剤を含む。
【００９２】
活性成分は、滅菌条件下で、生理学上許容される担体および、所望により、任意の必要な保存剤、緩衝液またはプロペラントと混合される。目処方、目軟膏、懸濁液、粉末および溶液も本発明の範囲内にあると考えられる。
【００９３】
本発明の化合物はリポソームに一体化し、またはそれと結合させることもでき、リポソームの形態で投与することもできる。当該分野で知られているように、リポソームは、一般には、リン脂質または他の脂質物質から由来する。リポソームは、水性媒体中に分散された単層または多層水和液体結晶によって形成される。リポソームを形成することができるあらゆる非毒性の生理学上許容される代謝された脂質を用いることもできる。リポソーム形態の本発明の組成物は、本発明のセレクチン結合阻害剤に加えて、安定化剤、保存剤、賦形剤などを含有することができる。好ましい脂質は、天然および合成双方の、リン脂質およびホスファチジルコリン（レシチン）である。リポソームを形成する方法は当該分野でよく知られている。
【００９４】
非経口投与形態は、分解に対する化合物の保護に適した生物学的利用性促進剤（例えば、酵素阻害剤、抗酸化剤）を含有することもできる。本発明の組成物における有効成分の現実の用量レベルは、特定の組成物および投与の方法についての所望の治療的応答を得るのに効果的である量の有効成分を得るように変化させることができる。選択された用量レベルは、従って、所望の治療効果、投与の経路、治療の所望の継続期間、および他の因子に依存する。単一用量または分割用量で宿主に投与される本発明における化合物の合計１日投与量は、体重１キログラム当たり５０ｍｇまでの範囲とすることができる。投与単位組成物は、１日投与量をなすように用いることができるそのようなその約量を含有することができる。しかしながら、いずれかの特定の患者のための特定の用量レベルは、ヒトまたは他の動物であるかを問わず、体重、一般的な健康、性別、食事、投与の時間および経路、吸収および排出の速度、他の薬物との組合せ、および治療すべき特定の病気の重症度を含めた種々の因子に依存するであろうことが理解されるだろう。
【００９５】
特に、本発明の化合物を用いて、炎症および細胞−細胞認識および接着に関連する種々の病気を治療することができる。例えば、本発明の化合物は患者に投与して、ＣＯＰＤ、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、クローン病、敗血症ショック、乾癬、アトピー性皮膚炎および関節リウマチのような慢性炎症病、および心臓発作に続いて起こる再還流組織負
傷、発作、アテローム性動脈硬化症、および器官移植、外傷ショック、多器官不全、多発性硬化症のような自己免疫疾患、喘息および炎症性腸病を治療することができる。それぞれの場合において、有効量の本発明の化合物を単独、あるいは医薬上活性な組成物の一部としてそのような治療を必要とする患者に投与する。また、化合物の組合せをそのような投与を必要とする患者に投与することができると認識される。本発明の化合物を投与して、細胞−細胞接着に関連する他の病気を治療することもできる。本発明の化合物はＥ−セレクチンまたはＰ−セレクチンまたはＬ−セレクチンの結合を阻害するので、この相互作用に関連するいずれの病気もこの結合相互作用の阻害によって潜在的に治療することができる。
【００９６】
いくつかの白血球細胞で見出されているのに加え、ｓＬｅａは肺癌細胞および結腸癌細胞を含めた種々の癌細胞で見出される。ｓＬｅａに関連する細胞接着はある種の癌の転移に関与するらしく、ｓＬｅａ結合の阻害剤はいくつかの形態の癌の治療で有用であると示唆されている。
【００９７】
本発明の化合物の多くは、以下の一般的合成スキームに従って合成することができる。
スキーム１
【００９８】
【化２４】
2007529462.tif 000026
【００９９】
スキーム１において、タイプ（１）のアミノ酸を、加熱下で、酸性メタノールと反応させて対応するメチルエステル（２）とする。エステル（２）を、技術水準の条件下で（すなわち、塩素化溶媒中のＮ’−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド（ＥＤＣ）、トリエチルアミンおよび４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ））トリメトキシ−フェニル−アルキル酸とアミド（３）まで反応させる。別法として、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）およびヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）をこの反応工程で用いることができる。アミド（３）は、ハロゲン化溶媒中で−７８℃ないし室温にて過剰の三臭化ホウ素でそれを処理し、引き続いて、水性仕上げ処理することによって酸（４）に変換する。しかしながら、ある場合には、それを三臭化ホウ素で処理する前に、アセトニトリル中の水酸化リチウム水溶液でエステル（３）を加水分解する必要があろう。（４）のような化合物に導くスキーム１に示された一連の合成は（１）のようなＹ−Ｈ形成ブロックに還元されるのみならず、一般には、全ての他のＹ−Ｈタイプの形
成ブロックに適応することができ、前のパラグラフに示したタイプ（Ａ１）、（Ａ２）、（Ｂ１）および（Ｂ２）の化合物に導かれる。
【０１００】
スキーム２
【０１０１】
【化２５】
2007529462.tif 000027
【０１０２】
スキーム２において、（５）のようなカルボキシ置換チオフェンを、酸性エタノール中で加熱下、対応するエチルエステル（６）まで反応させる。無水クロロホルムおよび氷酢酸中でエステル（６）をＮ−ブロモスクシンイミドで臭素化して、（７）が得られ、これを、技術水準のＳｕｚｕｋｉ変換下（すなわち、テトラキス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム、炭酸ナトリウム水溶液、エタノール、トルエン）、さらに２−アミノ−ベンゼンボロン酸とビアリール（８）まで反応させる。ビアリール（８）を塩素化溶媒中でトリメトキシ−フェニル−アルキル酸、ＥＤＣ、トリエチルアミンおよびＤＭＡＰとアミド（９）まで反応させる。別法として、ＤＩＣおよびＨＯＢｔをこの反応工程で用いることができる。アミド（９）を、ハロゲン化溶媒中で−７８℃ないし室温にて過剰の三臭化ホウ素でそれを処理し、続いて、水性仕上げ処理することによって酸（１０）に変換する。しかしながら、ある場合には、それを三臭化ホウ素で処理する前に、アセトニトリル中の水酸化リチウム水溶液でエステル（９）を加水分解する必要があろう。
【０１０３】
スキーム３
【０１０４】
【化２６】
2007529462.tif 000028
【０１０５】
スキーム３において、３−ブロモ安息香酸メチル（１１）を、不活性条件下で、Ｓｕｚｕｋｉ−タイプの塩基性条件（ジメトキシメタン中のＰｄ（ＰＰｈ３）４および炭酸水素ナトリウム水溶液）下で、トリメトキシフェニルボロン酸とタイプ（１２）のビフェニルまで反応させ、これを、さらに、アセトニトリル中の水酸化リチウム水溶液で加水分解して、対応するカルボン酸（１３）が得られ、これを、無水ジクロロメタン中の塩化オキサリルとの反応によってタイプ（１４）の形成ブロックに変換した。
【０１０６】
スキーム４
【０１０７】
【化２７】
2007529462.tif 000029
【０１０８】
スキーム４において、塩基性条件（塩素化溶媒中のトリエチルアミン）下で、（１４）のような酸塩化物を一般的タイプ（１５）のアニリンと反応させて、アニリド（１６）を形成させる。別法として、ピリジンをこの反応工程で用いることができる。アニリド（１６）を、ハロゲン下溶媒中、−７８℃ないし室温にて過剰の三臭化ホウ素でそれを処理し、引き続いて、水性仕上げ処理することによって、トリヒドロキシフェニル（１７）に変換する。
【０１０９】
Ｒ６および／またはＲ８がカルボン酸官能性を含有する場合、それらを先にそれらの対応するメチルまたはエチルエステルとして保護し、その後、加水分解して、カルボン酸官能性を放出させる。ＭｅＣＮまたはＴＨＦ／ＭｅＯＨ中のＬｉＯＨを用いるか、またはＢＢｒ３での処理下であるかを問わず、エステル加水分解を行い、続いて、水を加える。
【０１１０】
（１７）のような化合物に導くスキーム４で示された一連の合成は（１５）のようなＸ−Ｙ−ＨおよびＹ−Ｈ結合ブロックに還元されるのみならず、一般には、全ての他のＸ−Ｙ−ＨおよびＹ−Ｈタイプの形成ブロックに適用することができ、先のパラグラフに示したようにタイプ（Ａ１）、（Ａ２）、（Ｂ１）および（Ｂ２）に導かれる。
【０１１１】
スキーム５
【０１１２】
【化２８】
2007529462.tif 000030
【０１１３】
トリヒドロキシシンナミック部位を含有するタイプ（２１）の化合物では、スキーム５による一連の合成を適用することができる。無水ジクロロメタン中の塩化オキサリルとの反応によって、タイプ（１８）のトリヒドロキシ桂皮酸を対応する酸塩化物（１９）に変換する。（１９）のような酸塩化物を塩基性条件（塩素化溶媒中のトリエチルアミン）下で一般的タイプ（１５）のアニリンと反応させて、アニリド（２０）を形成させる。別法として、ピリジンをこの反応工程で用いることができる。−７８℃ないし室温におけるジクロロメタン中での過剰の三臭化ホウ素での（２０）の処理、および水性仕上げ処理に続いて、所望の化合物（２１）が得られる。
【０１１４】
スキーム６
【０１１５】
【化２９】
2007529462.tif 000031
【０１１６】
スキーム６においては、形成ブロック（２６）の創製が概説され、そこでは、フラン（２３）はメチルフロエート（２２）のＮＢＳ−臭素化によって得ることができ、タイプ（２５）のピナコリルボランは（２４）のようなアニリンのＰｄ−触媒ホウ素化によって得ることができる。（２３）および（２５）のＰｄ（ＰＰｈ３）４でのＳｕｚｕｋｉ−タイプのカップリングによりタイプ（２６）のビアリールに導かれる。
【０１１７】
スキーム７
【０１１８】
【化３０】
2007529462.tif 000032
【０１１９】
スキーム７において、タイプ（２６）のビアリールを、技術水準の条件（すなわち、塩素化溶媒中のＮ’−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド（ＥＤ
Ｃ）、トリエチルアミンおよび４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ））下でトリメトキシ−フェニル−アルキル酸とタイプ（２７）のアミドまで反応させる。別法として、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）およびヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）をこの反応工程で用いることができる。次いで、ＭｅＣＮ中のＬｉＯＨを用いるか、またはＴＨＦ／ＭｅＯＨを用いるかを問わず、（２７）をタイプ（２８）の酸まで加水分解する。−７８℃ないし室温におけるジクロロメタン中の過剰の三臭化ホウ素での（２８）の処理、および水性仕上げ処理により化合物（２９）が得られ、これを、最終的に炭素上のＰｄおよびギ酸アンモニウムで水素化して、一般構造式（３０）の所望の化合物を得る。
【０１２０】
本発明を以下の代表的な実施例によってさらに説明する。
実施例１
｛３−［３−（２，３，４−トリヒドロキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−フェニル｝−酢酸（３４）
スキーム８
【０１２１】
【化３１】
2007529462.tif 000033
【０１２２】
工程１：ＭｅＯＨ（２１ｍＬ）に（３−アミノ−フェニル）−酢酸（（３１）、７００ｍｇ、４．６３ミリモル）を溶解させ、濃硫酸（０．２７ｍＬ、５．０９ミリモル）を加える。反応混合物を還流下で２日間攪拌する。混合物を室温（ｒｔ）まで冷却し、減圧下で溶媒を除去し、ＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルの短いパッド上でそれをフラッシュすることによって残渣を予め精製する。再度溶媒を除去し、残渣をＥｔＯＡｃおよび飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１＋１）の間に分配する。水性層をＥｔＯＡｃで３回抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＮａＳＯ４で乾燥する。減圧下で溶媒を除去し、油ポンプ真空中でさらに精製することなく残渣を乾燥して、生成物（３２）を淡黄色油（７０８ｍｇ、９２％）として得る。1H NMR (400MHz, CDCl3): 3.51 (s, 2 H); 3.67 (s, 3 H); 6.57
(dd, 1 H, Jl = 7.8Hz, J2= 1.8Hz); 6.60 (br.Ψt, 1 H, J = 1.8Hz); 6.65 (br.d, 1 H, J = 7.8Hz); 7.08 (Ψt, 1 H, J = 7.8Hz)。
【０１２３】
工程２：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。ＥＤＣ塩酸塩（１８７ｍｇ、０．９８ミリモル）およびトリエチルアミン（０．１４ｍＬ、１．００ミリモル）を無水ジクロロメタン（３．５ｍＬ）に溶解させ、室温にて５分間攪拌する。３−（２，３，４−ト
リメトキシ−フェニル）−プロピオン酸（２３４ｍｇ、０．９７ミリモル）およびＤＭＡＰ（１２ｍｇ、０．１０ミリモル）を加え、１０分間攪拌する。エステル（３２）（１０７ｍｇ、０．６５ミリモル）を加え、反応溶液を室温にて一晩攪拌する。
【０１２４】
反応溶液を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液、続いて水で加水分解し、層を分離し、水性層をジクロロメタンで抽出し（３回）、合わせた有機層を水およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。減圧下で溶媒を除去する。
【０１２５】
粗生成物を分取用ラジアルクロマトグラフィー（シリカゲル６０ＰＦ、ＥｔＯＡｃ／ＣｙＨ  １＋１）によって精製して、生成物（３３）を白色固体（２０９ｍｇ、８３％）として得る。［Ｋ．Ｃ．Ｎｉｃｏｌａｏｕ；Ｐ．Ｓ．Ｂａｒａｎ；Ｙ．−Ｌ．Ｚｈｏｎｇ；Ｋ．Ｓｕｇｉｔａ；Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．；２００２；１２４；１０；２２１２−２２２０］。lH NMR (400MHz, CDCl3): 2.62 (t, 2 H, J = 7.5Hz); 2.95 (t, 2 H, J = 7.5Hz); 3.58 (s, 2 H); 3.67 (s, 3 H); 3.82 (s, 3 H); 3.84 (s, 3 H); 3.91 (s, 3
H); 6.59 (d, 1 H, J = 8.6Hz); 6.86 (d, 1 H, J = 8.6Hz); 6.98 (br.d, 1 H, J = 7.8Hz); 7.32 (Ψt, 1 H, J = 7.8Hz); 7.38 (br.d, 1 H, J = 7.8Hz); 7.41 (br.s, 1 H)。
【０１２６】
工程３：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。（３３）（１３９ｍｇ、０．３６）を無水ジクロロメタン（１．８ｍＬ）に溶解させ、−７８℃まで冷却し（アセトン／ドライアイス浴）、ＢＢｒ３（０．５１ｍＬ、５．３９ミリモル）をゆっくりと加える。反応混合物を−７８℃にてさらに３０分間攪拌する。冷却浴を取り除き、反応混合物を室温にて３時間攪拌する。
【０１２７】
反応混合物を０℃まで冷却し、激しい攪拌下で水（０．５０ｍＬ）をゆっくりと加え、続いて、ジクロロメタン（１．０ｍＬ）およびメタノール（２．０ｍＬ）を加える。反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥する。減圧下で溶媒を除去し、分取用ＲＰ  ＨＰＬＣ（グラジエント、水／ＭｅＣＮ  ９５：５ないし５：９５）によって粗生成物を精製して、｛３−［３−（２，３，４−トリヒドロキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−フェニル｝−酢酸（３４）を白色固体（６９ｍｇ、５７％）として得る。［Ｔ．Ｐ．Ｋｏｇａｎ；Ｂ．Ｄｕｐｒe；Ｈ．Ｂｕｉ；Ｋ．Ｌ．ＭｃＡｂｅｅ；Ｊ．Ｍ．Ｋａｓｓｉｒ；Ｉ．Ｌ．Ｓｃｏｔｔ；Ｘ．Ｈｕ；Ｐ．Ｖａｎｄｅｒｓｌｉｃｅ；Ｐ．Ｊ．Ｂｅｃｋ；Ｒ．Ａ．Ｆ．Ｄｉｘｏｎ  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．；１９９８；４１；１０９９−１１１１］。lH NMR (400MHz, CD3OD): 2.67 (t, 2 H, J = 7.6Hz); 2.92 (t, 2 H, J = 7.6Hz); 3.61 (s, 2 H); 6.31 (d, 1 H, J = 8.3Hz); 6.50 (d, 1 H, J = 8.3Hz); 7.05 (br.d, 1 H, J = 7.8Hz); 7.28 (Ψt, 1 H, J = 7.8Hz); 7.48 (br.d, 1 H, J = 7.8Hz); 7.49 (br.s, 1 H)。
【０１２８】
実施例２
（５−｛２−［２−（２，３，４−トリヒドロキシフェニル）−アセチルアミノ］−フェニル｝−チオフェン−２−イル］酢酸（４１）
スキーム９
【０１２９】
【化３２】
2007529462.tif 000034
【０１３０】
工程１：チオフェン−２−イル−酢酸（３５）（２．４４ｇ、１７．１ミリモル）をエタノール（３５ｍＬ）に溶解させ、発煙塩酸水溶液（数滴）を加える。反応混合物を７０℃にて１９時間攪拌する。混合物を室温まで冷却し、減圧下で溶媒を除去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶解させる。この有機層を５％Ｎａ２ＣＯ３水溶液で３回洗浄し、合わせた水性層をＥｔＯＡｃで３回抽出する。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。減圧下で溶媒を除去し、残渣を、油ポンプ真空中でさらに精製することなく乾燥して、生成物（３６）を淡茶色油（２．７８ｇ、９５％）として得る。［Ｊ．Ｋｕｎｅｓ；Ｖ．Ｂａｌｓａｎｅｋ；Ｍ．Ｐｏｕｒ；Ｖ．Ｂｕｃｈｔａ；Ｃｏｌｌｅｃｔ．Ｃｚｅｃｈ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２００１，６６；１２；１８０９−１８３０］。1H NMR
(400MHz, CDC13): 1.26 (t, 3 H, J = 7.1Hz); 3.81 (s, 2 H); 4.17 (q, 2 H, J = 7.1Hz); 6.91-6.96 (m, 2 H); 7.20 (d, 1H, J = 4.8Hz)。
【０１３１】
工程２：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。エステル（３６）（１．３０ｇ、７．６４ミリモル）を無水クロロホルム（６．０ｍＬ）および氷酢酸（６．０ｍＬ）に溶解させ、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．３９ｇ、７．７９ミリモル）を何回かに分けて加え、混合物を室温にて２３時間攪拌する。混合物を等容量の水で希釈し、有機層を分離し、１Ｍ  ＮａＯＨ水溶液、水、再度、１Ｍ  ＮａＯＨ水溶液、および水（２回）で洗浄する。最後に、有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。減圧下で溶媒を除去する。分取用ラジアルクロマトグラフィー（シリカゲル６０ＰＦ、ＣｙＨ／ＥｔＯＡｃ
５＋１）によって粗生成物を精製して、生成物（３７）を不純物が混じった（ＮＭＲによると：２０％副産物）オレンジ色液体（１．６１ｇ、８５％）として得られ、これをさ
らに精製することなく用いる。［Ｐ．Ｍ．Ｊａｃｋｓｏｎ；Ｃ．Ｊ．Ｍｏｏｄｙ；Ｐ．Ｓｈａ；Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．１；１９９０；２９２９−２９１８］。1H NMR (400MHz, CDCl3): 1.26 (t, 3 H, J = 7.1Hz), 3.73 (s, 2 H); 4. 17
(q, 2 H, J = 7.1Hz); 6.67 (d, 1 H, J = 3.5Hz); 6.88 (d, 1 H, J = 3.5Hz)。
【０１３２】
工程３：（以下の反応は無酸素Ｎ２雰囲気中で行う）。エタノール（１．４７ｍＬ）、テトラキス−（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（０）（５９．０ｍｇ、２．５モル％）およびＮａ２ＣＯ３水溶液（１．６０ｇ、５．６０ミリモル；２．０ｍＬ  Ｈ２Ｏに予め溶解）を順次に加えて、２−アミノ−ベンゼンボロン酸（３４１ｍｇ、２．２０ミリモル）をトルエン（１６ｍＬ）に溶解させる。反応混合物を５回脱気し、Ｎ２を再度満たす。臭化物（３７）（４９８ｍｇ、２．００ミリモル）を加え、トルエン（４．５ｍＬ）で濯ぎ、再度脱気し（５回）、反応溶液を１００℃にて２１時間攪拌する。反応溶液をＥｔＯＡｃおよびブライン（１＋１）の間に分配し、分離された水性層をＥｔＯＡｃで３回抽出する。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。減圧下で溶媒を除去し、粗生成物を分取用ラジアルクロマトグラフィー（シリカゲル６０ＰＦ、ＣｙＨ／ＥｔＯＡｃ  ６＋１，  後に３＋１）によって精製して、生成物（３８）を淡黄色固体（３００ｍｇ、５７％）として得る。［Ｎ．Ｍｉｙａｕｒａ；Ａ．Ｓｕｚｕｋｉ；Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．；１９９５；９５；２４５７］。1H NMR (400MHz, CDCl3): 1.28 (t, 3 H, J = 7.1Hz); 3.82 (s, 2 H); 4.19 (q, 2 H, J = 7.1Hz); 6.77-6.84 (m, 2 H); 6.91 (d, 1 H, J = 3.5Hz); 7.04 (d, 1 H, J = 3.5Hz); 7.13 (td, 1 H, J = 7.8Hz, 1.3Hz);
7.25 (d, 1 H, J = 7.8Hz)。
【０１３３】
工程４：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。ＥＤＣ塩酸塩（８６．３ｍｇ、０．４５ミリモル）を無水ジクロロメタン（１．４ｍＬ）に懸濁させ、トリエチルアミン（０．０６３ｍＬ、０．４５ミリモル）を加え、室温にて１０分間攪拌する。２−（２，３，４−トリメトキシ−フェニル）−酢酸（７４．７ｍｇ、０．３３ミリモル）およびＤＭＡＰ（３．７ｍｇ、０．０３ミリモル）を加え、１５分間攪拌する。エステル（３８）（６４．９ｍｇ、０．３０ミリモル）を加え、反応溶液を室温にて２２時間攪拌する。反応溶液をジクロロメタンおよび水（１＋１）の間に分配し、層を分離し、水性層をジクロロメタンで抽出する（３回）。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。粗生成物を分取用ラジアルクロマトグラフィー（シリカゲル６０ＰＦ、ＣｙＨ／ＥｔＯＡｃ  ３＋２）によって精製して、生成物（３９）を黄色油（１１８ｍｇ、８４％）として得る。1H NMR (400MHz, CDCl3): 1.29 (t, 3 H, J = 7.1Hz); 3.58 (s, 2 H); 3.74 (s, 3 H); 3.78 (s, 3 H); 3.79-3.80 (m, 2 H); 3.86 (s, 2 H); 4.20 (q, 2 H, J = 7.1Hz); 6.58 (d, lH, J = 8.6Hz); 6.59 (d, 1 H, J = 3.5Hz); 6.75 (d, 1 H, J = 3.5Hz); 6.85 (d, 1 H, J = 8.6 Hz); 7.05 (t, 1 H, J = 7.8Hz); 7.26 (dd, 1 H, J = 7.8Hz, 1.3 Hz); 7.30 (td, 1 H, J = 7.8Hz, 1.3Hz); 7.90 (br.s; 1 H), 8.38 (d, 1 H, J =
8.3Hz)。
【０１３４】
工程５：エステル（３９）（１１８ｍｇ、０．２５ミリモル）をメタノール（８．０ｍＬ）に溶解させ、１Ｍ  ＬｉＯＨ水溶液（１．７６ｍＬ、１．７６ミリモル）を加え、室温にて２０時間攪拌する。減圧下で溶媒を除去し、残渣をＣＨＣｌ３および０．５Ｍ  ＨＣｌ（１＋１）の間に分配する。水性層を分離し、ＣＨＣｌ３で３回抽出する。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。減圧下で溶媒を除去し、油ポンプ真空中でさらに精製することなく残渣を乾燥して、粗生成物（４０）を淡茶色フォーム（１２０ｍｇ、定量的）として得る。1H NMR (400MHz, CDCl3): 3.58 (s, 2 H); 3.73 (s, 3 H); 3.78 (s, 3 H); 3.85 (s, 2 H); 3.86 (s, 3 H); 6.58-6.61 (m, 1 H); 6.59 (d, 1 H, J = 8.3Hz); 6.77 (d, 1 H, J = 3.5Hz); 6.86 (d, 1 H, J = 8.3 Hz); 7.06 (t, 1
H, J = 7.8Hz); 7.22-7.27 (m, 1 H); 7.31 (td, 1 H, J = 7.8 Hz, 1.3 Hz); 7.86 (br.s, 1 H); 8.37 (d, 1 H, J = 8.3Hz)。
【０１３５】
工程６：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。（４０）（１１８ｍｇ、０．２７ミリモル）を無水ジクロロメタン（２．５ｍＬ）に溶解させ、−７８℃まで冷却し（アセトン／ドライアイス）、１Ｍ  ＢＢｒ３溶液をゆっくりとジクロロメタン（１．６１ｍＬ、１．６１ミリモル）に加える。反応混合物を−７８℃にてさらに３０分間攪拌する。冷却浴を取り除き、反応混合物を室温にて４時間攪拌する。反応混合物を０℃まで冷却し、激しい攪拌下で水（１．００ｍＬ）をゆっくり加える。反応混合物をＥｔＯＡｃおよび水（１＋１）の間に分配する。分離された水性層をＥｔＯＡｃで抽出し（２回）、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。減圧下で溶媒を除去し、粗生成物を分取用ＲＰ  ＨＰＬＣ（グラジエント、水／ＣＨ３ＣＮ  ９５：５ないし５：９５）によって精製して、（５−｛２−［２−（２，３，４−トリヒドロキシフェニル）−アセチルアミノ］−フェニル｝−チオフェン−２−イル）酢酸（４１）を淡茶色フォーム（５３ｍｇ、５０％）として得る。1H NMR (400MHz, CDCl3): 3.54 (s, 2 H); 3.82 (s, 2 H); 6.34 (d, 1 H, J = 8.3Hz); 6.49 (d, 1 H, J = 8.3Hz); 6.76 (d, 1 H, J = 3.3HZ); 6.81 (d, 1 H, J = 3.3Hz); 7.18 (t, l H, J = 7.6Hz); 7.32 (t, 1 H, J = 7.8Hz); 7.39
(d, l H, J = 7.3Hz); 7.90 (d, 1 H, J = 8.1Hz); 8.20 (br.s, 1 H)。
【０１３６】
実施例３
（５−｛２−［（２’，３’，４’−トリヒドロキシ−ビフェニル−３−カルボニル）−アミノ］−フェニル｝−チオフェン−２−イル）−酢酸（４８）および
（５−｛２−［（２’，３’，４’−トリヒドロキシ−ビフェニル−３−カルボニル）−アミノ］−フェニル｝−チオフェン−２−イル）−酢酸メチルエステル（４９）
スキーム１０
【０１３７】
【化３３】
2007529462.tif 000035
【０１３８】
工程１：（以下の反応はＮ２雰囲気中で行う）。トルエン（１５．０ｍＬ）中の２，３，４−トリメトキシフェニルボロン酸（４２）（１．４０ｇ、６．６０ミリモル）の溶液に、水（５．２ｍＬ）中のＥｔＯＨ（２．０ｍＬ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２０８ｍｇ、０．１８ミリモル）およびＮａ２ＣＯ３・１０Ｈ２Ｏ（４．８１ｇ、１６．８０ミリモル）を加える。得られた混合物を注意深く脱気する（真空およびＮ２でのフラッシュを交互に５回）。トルエン（９．０ｍＬ）中の３−ブロモ安息香酸メチル（１１）（１．２９ｇ、６．００ミリモル）の溶液をシリンジによって加え、得られた混合物を再度注意深く脱気し、１００℃にて一晩攪拌する。混合物をブライン／ＥｔＯＡｃ（１＋１）の間に分配し、層を分離し、水性層をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、溶媒を除去する。粗生成物を分取用ラジアルクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ＣｙＨ  １＋５）によって精製して、２’，３’，４’−トリメトキシ−ビフェニル−３−カルボン酸メチルエステル（４３）を黄色味がかった油（１．０７ｇ、５８％）として得る。lH NMR (400MHz, CDCl3): 3.66 (s, 3 H); 3.89 (s, 3 H); 3.92 (s, 6 H); 6.74 (d, 1 H, J = 8.6Hz); 7.03 (d, 1 H, J = 8.6Hz); 7.44 (t, 1 H, J = 7.8Hz); 7.70 (d, 1 H, J = 7.6Hz); 7.97 (d, 1 H, J = 7.8Hz); 8.15 (br.s 1 H)。
【０１３９】
工程２：２’，３’，４’−トリメトキシ−ビフェニル−３−カルボン酸メチルエステル（４３）（５６６ｍｇ、１．８７ミリモル）をＭｅＣＮ（１９．０ｍＬ）に室温で溶解させ、１Ｍ  ＬｉＯＨ水溶液（９．３６ｍＬ、９．３６ミリモル）を加える。反応混合物を室温で一晩攪拌する。反応混合物（冷却浴）を１Ｍ塩酸でクエンチして（ｐＨを約３と
する）。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。粗生成物をＥｔＯＡｃ／ＣｙＨ  １＋３から再結晶して、２’，３’，４’−トリメトキシ−ビフェニル−３−カルボン酸（４４）を白色固体（３９２ｍｇ、７２％）として得る。1H NMR (400MHz, CD3OD: 3.68 (s, 3 H); 3.93 (br.s, 6 H); 6.92 (d, 1 H, J = 8.6Hz); 7.11 (d, 1 H, J = 8.6Hz); 7.54 (t, 1 H, J = 7.7Hz); 7.75 (d, 1 H, J = 7.6Hz); 8.01 (d, 1 H, J = 7.8Hz); 8.18 (br.s 1 H)。
【０１４０】
工程３：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。２’，３’，４’−トリメトキシ−ビフェニル−３−カルボン酸（４４）（１０７ｍｇ、０．３７ミリモル）を無水ＤＣＭ（３．０ｍＬ）に溶解させ、無水ＤＭＦ（３滴，  触媒量）を加える。次いで、温度を水浴で約１５℃に保つことによって、塩化オキサリル（４２μＬ、０．４８ミリモル）をゆっくりと加え、濁った混合物を室温にてさらに２時間攪拌する。塩化２’，３’，４’−トリメトキシ−ビフェニル−３−カルボニル（４５）の形成された粗溶液を無水ＤＣＭ（４．５ｍＬ）および無水ピリジン（０．７５ｍＬ）中の［５−（２−アミノ−フェニル）−チオフェン−２−イル］−酢酸メチルエステル（４６）（７０ｍｇ、０．２８ミリモル）の氷冷溶液に移す。反応混合物を室温にて３時間攪拌する。反応混合物を氷冷１Ｍ塩酸に注ぎ、ＤＣＭで抽出し（３回）、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。粗生成物を分取用ラジアルクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ＣｙＨ  １＋３，  後に１＋２）によって精製して、（５−｛２−［（２’，３’，４’−トリメトキシ−ビフェニル−３−カルボニル）−アミノ］−フェニル｝−チオフェン−２−イル）−酢酸メチルエステル（４７）を茶色味がかった粘性固体（９６ｍｇ、  ６５％）として得る。1H NMR (400MHz, CDC13): 3.64 (s, 3 H); 3.71 (s, 3 H); 3.84 (s, 2 H); 3.90 (s, 3 H); 3.92 (s, 3 H); 6.75 (d, l H, J = 8.8Hz); 6.97 (d, 1 H, J = 3.5Hz); 7.01 (d, 1 H, J = 8.8Hz); 7.03 (d, 1 H, J = 3.5Hz); 7.16 (br.t, 1 H, J = 7.6Hz); 7.36-7.43 (m, 2 H); 7.46 (t, 1 H, J = 7.7Hz); 7.67 (Ψdd, 2 H, J1 = 7.6Hz,
J2 = 1.5Hz); 7.91 (br.s 1 H); 8.41 (br.s 1 H); 8.50 (d, 1 H, J = 8.6Hz)。
【０１４１】
工程４：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。（５−｛２−［（２’，３’，４’−トリメトキシ−ビフェニル−３−カルボニル）−アミノ］−フェニル｝−チオフェン−２−イル）−酢酸メチルエステル（４７）（６６ｍｇ、０．１３ミリモル）を−７８℃にて無水ＤＣＭ（３．４ｍＬ）に溶解させ、ＤＣＭ中のＢＢｒ３の１Ｍ溶液（１．０５ｍＬ、１．０５ミリモル）を滴下し、−７８℃にてさらに３０分間攪拌する。ゆっくりと加温した後、反応混合物を室温にてさらに４時間攪拌する。反応混合物を０℃まで冷却し、激しい攪拌下で水およびＤＣＭを滴下し、続いて、ＭｅＯＨを滴下して、混合物をホモジナイズする。加水分解された反応混合物を水およびＥｔＯＡｃの間に分配し、水性層をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた有機層をブラインで洗浄し、それをＮａ２ＳＯ４で乾燥する。粗生成物を分取用ＲＰ  ＨＰＬＣ（グラジエント、水／ＣＨ３ＣＮ  ９５：５ないし５：９５）によって精製して、（５−｛２−［（２’，３’，４’−トリヒドロキシ−ビフェニル−３−カルボニル）−アミノ］−フェニル｝−チオフェン−２−イル）−酢酸（４８）（８ｍｇ、１３％）を白色固体として、および（５−｛２−［（２’，３’，４’−トリヒドロキシ−ビフェニル−３−カルボニル）−アミノ］−フェニル｝−チオフェン−２−イル）−酢酸メチルエステル（４９）（１４ｍｇ、２３％）を茶色フォームとして得る。1H NMR (400MHz, CD3OD) (48): 3.86 (s, 2 H); 6.49 (d, 1 H, J = 8.6Hz); 6.74 (d, 1 H, J = 8.6Hz); 6.98 (d, 1 H, J = 3.0Hz); 7.19 (d, 1 H, J = 3.3Hz); 7.36 (t, 1 H, J = 7.6Hz); 7.43 (t, 1 H, J = 7.6Hz); 7.51 (t, 1 H, J = 7.8Hz); 7.62 (d, 1 H, J = 7.8Hz); 7.71-7.84 (m, 3 Hz); 8.08 (br.s 1 H); (49): 3.66 (s, 3 H); 3.88 (s, 2 H); 6.49 (d, 1 H, J = 8.3Hz); 6.74 (d, 1 H, J = 8.3Hz); 6.97 (d, 1
H, J = 3.5Hz); 7.19 (d, 1 H, J = 3.5Hz); 7.36 (td, 1 H, J1 = 7.6Hz, J2 = 1.5Hz); 7.43 (td, 1 H, J1 = 7.6Hz, J2 = 1.5Hz); 7.51 (t, 1 H, J = 7.8Hz); 7.62 (dd, 1 H, J1 = 7.6Hz, J2 = 1.5Hz); 7.73 (d, 1 H, J = 7.8Hz); 7.81 (Ψdd, 2 H, Jl = 7.6H
z, J2= 1.5Hz); 8.09 (br.s 1 H)。
【０１４２】
実施例４
４−メチル−３−［３−（２，３，４−トリヒドロキシ−フェニル）−アクリロイルアミノ］−安息香酸（５４）および
４−メチル−３−［３−（２，３，４−トリヒドロキシ−フェニル）−アクリロイルアミノ］−安息香酸メチルエステル（５５）
スキーム１１
【０１４３】
【化３４】
2007529462.tif 000036
【０１４４】
工程１：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。トランス−２，３，４−トリメトキシ桂皮酸（５０）（２００ｍｇ、０．８４ミリモル）を室温にて無水ＤＣＭ（４．４ｍＬ）に溶解させ、無水ＤＭＦ（３滴、触媒量）を加える。次いで、塩化オキサリル（９６μＬ、１．０９ミリモル）をゆっくりと加え、濁った混合物を室温にてさらに２時間攪拌する。溶媒を除去し、残渣を油ポンプ真空中で乾燥して、塩化トランス−２，３，４−トリメトキシ桂皮酸（５１）（約０．８４ミリモル）を黄色固体として得る。酸塩化物（５１）（１０８ｍｇ、０．４２ミリモル）を無水ＤＣＭ（４．０ｍＬ）に溶解させ、それを、無水ＤＣＭ（２．０ｍＬ）および無水ピリジン（１．２ｍＬ）中の３−アミノ−４−メチル安息香酸メチル（５２）（６９ｍｇ、０．４２ミリモル）の氷冷溶液に加える。得られた反応混合物を室温にて一晩攪拌する。反応混合物を氷冷１Ｍ塩酸に注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた有機層をブラインで洗浄し、それをＮａ２ＳＯ４で乾燥する。粗生成物をＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルの短いパッドを通す濾過によって精製し、溶媒を除去して、４−メチル−３−［３−（２，３，４−トリメトキシ−フェニル）−アクリロイルアミノ］−安息香酸メチルエステル（５３）（９９ｍｇ、６１％）を淡黄色固体として得る。1H NMR (400MHz, CDCl3): 2.35 (s, 3 H); 3.87 (s, 3 H); 3.88 (s, 6 H);
3.91 (br.s, 3 H); 6.59 (d, 1 H, J = 15.6Hz); 6.68 (d, 1 H, J = 8.6Hz); 7.08 (br.s, 1 H); 7.20-7.29 (m, 2 H); 7.77 (br.d, 1 H, J = 8.6Hz); 7.90 (d, 1 H, J = 15.6Hz); 8.55 (br.s 1 H)。
【０１４５】
工程２：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。アニリド（５３）（４０ｍｇ、０．１０ミリモル）を−７８℃にて無水ＤＣＭ（１．３ｍＬ）に溶解させ、ＤＣＭ中のＢＢｒ３の１Ｍ溶液（８３０μＬ、０．８３ミリモル）を滴下し、−７８℃にてさらに３０分間攪拌する。ゆっくりと加温した後、反応溶液を室温にてさらに４時間攪拌する。反応混合物を０℃まで冷却し、激しい攪拌下で水およびＤＣＭを滴下し、続いて、ＭｅＯＨを滴下して、混合物をホモジナイズする。加水分解された反応混合物を水およびＥｔＯＡｃの間に分配し、水性層をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた有機層をブラインで洗浄し、それをＮａ２ＳＯ４で乾燥する。粗生成物を分取用ＲＰ  ＨＰＬＣ（グラジエント、水／ＣＨ３ＣＮ  ９５：５ないし５：９５）によって精製して、４−メチル−３−［３−（２，３，４−トリヒドロキシ−フェニル）−アクリロイルアミノ］−安息香酸（５４）（６．５ｍｇ、１９％）を黄色味がかった固体として、および４−メチル−３−［３−（２，３，４−トリヒドロキシ−フェニル）−アクリロイルアミノ］−安息香酸メチルエステル（５５）（９ｍｇ、２５％）を黄色味がかった固体として得る。lH NMR (400MHz, CD3OD) (54): 2.40 (s, 3 H); 6.43 (d, 1 H, J = 8.6Hz); 6.90 (d, 1 H, J = 15.6Hz); 6.97 (d, 1 H, J = 8.6Hz); 7.40 (d, 1 H, J = 8.1Hz); 7.83 (dd, 1 H, J1 = 8.1Hz, J2 =
1.5Hz); 7.93 (d, 1 H, J = 15.6Hz); 8.17 (br.s, 1 H); (55): 2.40 (s, 3 H); 3.93 (s, 3 H); 6.43 (d, 1 H, J = 8.6Hz); 6.90 (d, 1 H, J = 15.7Hz); 6.97 (d, 1 H, J =
8.6Hz); 7.40 (d, 1 H, J = 8.1Hz); 7.82 (dd, 1 H, J1= 7.8Hz, J2 = 1.7Hz); 7.93 (d, 1 H, J = 15.9Hz); 8.18 (br.s, 1 H)。
【０１４６】
実施例５  
５−｛２−アミノ−４−［２−（３，４，５−トリヒドロキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−フェニル｝−２−メチル−フラン−３−カルボン酸（６２）
スキーム１２
【０１４７】
【化３５】
2007529462.tif 000037
【０１４８】
工程１：（以下の反応は光を排除して行う）。２−メチル−フラン−３−カルボン酸メチルエステル（２２）（２．００ｍＬ、１５．９ミリモル）をクロロホルム（１１ｍＬ）および氷酢酸（１１ｍＬ）に溶解させ、ＮＢＳ（３．８５ｇ、２１．６ミリモル）を何回かに分けて７５分の間に加える。反応懸濁液を室温にてさらに１６時間攪拌する。水を反応混合物に加え、水性層をＤＣＭで抽出し（２回）、合わせた有機層を２Ｍ  ＮａＯＨ水溶液、水およびブラインで洗浄し、それをＮａ２ＳＯ４で乾燥して、５−ブロモ−２−メチル−フラン−３−カルボン酸メチルエステル（２３）（２．８０ｇ、８０％）を赤茶色油として得る。さらに精製しない。1H NMR (400MHz, CDCl3): 2.54 (s, 3 H); 3.80 (s, 3 H); 6.53 (s, 1 H)。
【０１４９】
工程２：（以下の反応はＮ２雰囲気中で行う）。ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）ＣＨ２Ｃｌ２（２４５ｍｇ、０．３０ミリモル）、ＫＯＡｃ（２．５２ｇ、２５．７ミリモル）およびビス−（ピナコラト）ジボロン（３．８１ｇ、１５．００ミリモル）を無水ＤＭＳＯ（５０ｍＬ）に溶解させ、４−ブロモ−３−ニトロ−フェニルアミン（５６）（２．１７ｇ、１０．００ミリモル）を加える。混合物を注意深く脱気し、Ｎ２を再度フラッシュし（５回）、それを８０℃にて２４時間攪拌する。反応混合物を室温まで冷却し、それを水およ
びトルエンの間に分配する。水性層をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた有機層を水およびブラインで洗浄し、それをＮａ２ＳＯ４で乾燥する。得られた粗残渣を、ＥｔＯＡｃ／ＣｙＨ（１＋１）を用いるシリカゲルの短いパッドを通して濾過して、３−ニトロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェニルアミン（５７）（２．０４ｇ、７７％）を暗い赤色固体として得る。さらに精製しない。1H NMR (400MHz, CDCl3): 1.37 (s, 12 H); 3.95 (br.s, 2 H); 6.87 (dd, 1 H,
Jl = 7.8Hz, J2= 2.3Hz); 7.30 (d, 1 H, J = 8.1Hz); 7. 35 (d, 1 H, J = 2.3Hz)。
【０１５０】
工程３：（以下の反応はＮ２雰囲気中で行う）。Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（５９ｍｇ、０．０５ミリモル）および５−ブロモ−２−メチル−フラン−３−カルボン酸メチルエステル（２３）（４４７ｍｇ、２．０４ミリモル）をＤＭＥ（３ｍＬ）に溶解させ、室温にて１０分間攪拌する。３−ニトロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェニルアミン（５７）（４６５ｍｇ、１．７６ミリモル）、続いて、１Ｍ炭酸水素ナトリウム水溶液（５．１０ｍＬ、５．１０ミリモル）を加える。反応混合物を注意深く脱気し、Ｎ２でフラッシュし（５回）、９０℃にて４．５時間攪拌する（還流）。反応混合物を室温まで冷却し、減圧下で有機溶媒を除去し、残渣を水およびＥｔＯＡｃの間に分配する。水性層をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた有機層を水およびブラインで洗浄し、それをＮａ２ＳＯ４で乾燥する。得られた粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ＣｙＨ  １＋３、後に１＋２）によって精製して、５−（４−アミノ−２−ニトロ−フェニル）−２−メチル−フラン−３−カルボン酸メチルエステル（５８）（１６７ｍｇ、３４％）を赤色固体として得る。lH NMR (400MHz, CDCl3): 2.57 (s, 3 H); 3.81 (s, 3 H); 4.05 (br.s, 2 H); 6.68 (s,
1 H); 6.81 (dd, 1 H, J1= 8.3Hz, J2 = 2.3Hz); 6.99 (d, 1 H, J = 2.3Hz); 7.39 (d,
1 H, J = 8.3Hz)。
【０１５１】
工程４：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。ＥＤＣ・ＨＣｌ（１３８ｍｇ、０．７２ミリモル）およびＥｔ３Ｎ（１０１μＬ、０．７２）を無水ＤＣＭ（４．５ｍＬ）に懸濁させ、得られた溶液を室温で５分間攪拌する。２−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−酢酸（１６３ｍｇ、０．７２ミリモル）およびＤＭＡＰ（８ｍｇ、０．０７ミリモル）を加え、得られた溶液を１０分間攪拌する。５−（４−アミノ−２−ニトロ−フェニル）−２−メチル−フラン−３−カルボン酸メチルエステル（５８）（１００ｍｇ、０．３６ミリモル）を加え、反応溶液を室温で２２時間攪拌する。反応溶液を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液および水でクエンチし、層を分離し、水性層をＤＣＭで抽出する（３回）。合わせた有機層を水およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。粗生成物を分取用ラジアルクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ＣｙＨ  １＋１）によって精製して、２−メチル−５−｛２−ニトロ−４−［２−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−フェニル｝−フラン−３−カルボン酸メチルエステル（５９）（９６ｍｇ、５５％）を黄色固体として得る。1H NMR (400MHz, CDC13): 2.55 (s, 3 H); 3.65 (s, 2 H); 3.79 (s, 3 H); 3.81 (s, 6 H); 3.82 (s, 3 H); 6.50 (s, 2 H); 6.77 (s, 1 H); 7.53 (d, 1 H, J = 8.6Hz); 7.66 (dd, 1 H, Jl= 8.6Hz, J2 = 2.0Hz); 7.93 (br.s, 1 H); 7.96 (d, 1 H, J = 2.0Hz)。
【０１５２】
工程５：２−メチル−５−｛２−ニトロ−４−［２−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−フェニル｝−フラン−３−カルボン酸メチルエステル（５９）（５０ｍｇ、０．１０ミリモル）を室温にてＴＨＦ（１．０ｍＬ）およびＭｅＯＨ（０．５ｍＬ）に溶解させ、１Ｍ  ＬｉＯＨ水溶液（５２５μＬ、０．５２ミリモル）を加える。反応混合物を室温にて１７時間攪拌する。１Ｍ塩酸（５８０μＬ、０．５８ミリモル）を滴下し、混合物をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた有機層をブラインで洗浄し、それをＮａ２ＳＯ４で乾燥する。得られた粗生成物を分取用ＴＬＣ（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ  ９＋１）によって精製して、２−メチル−５−｛２−ニトロ−４−
［２−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−フェニル｝−フラン−３−カルボン酸（６０）（３５ｍｇ、７１％）を茶色粘性固体として得る。1H NMR (400MHz, CDCl3): 2.61 (s, 3 H); 3.70 (s, 2 H); 3.86 (s, 3 H); 3.87 (s, 6 H); 6.51
(s, 2 H); 6.85 (s, 1 H); 7.29 (br.s, 1 H); 7.58 (d, 1 H, J = 8.6Hz); 7.62 (dd, 1 H, J1= 9.0Hz, J2 = 2.2Hz); 7.98 (d, 1 H, J = 2.0Hz)。
【０１５３】
工程６：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。２−メチル−５−｛２−ニトロ−４−［２−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−フェニル｝−フラン−３−カルボン酸（６０）（３３ｍｇ、０．０７ミリモル）を無水ＤＣＭ（１．０ｍＬ）に溶解させ、溶液を−７８℃まで冷却し、ＢＢｒ３（６６μＬ、０．７０ミリモル）を滴下する。反応混合物を−７８℃にて１０分間攪拌し、その後、室温にてさらに２時間ゆっくりと加温する。反応混合物を０℃まで冷却し、水およびＤＣＭ、続いて、ＭｅＯＨを滴下して、混合物をホモジナイズし、溶媒を除去する。粗生成物をＭｅＯＨに懸濁させ、それをセライトの短いパッドを通して濾過して、２−メチル−５−｛２−ニトロ−４−［２−（３，４，５−トリヒドロキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−フェニル｝−フラン−３−カルボン酸（６１）（２２ｍｇ、７２％）を茶色固体として得る。1H NMR (400MHz, CD3OD): 2.62 (s, 3 H); 3.53 (s, 2 H); 6.40 (s, 2 H); 6.88 (s, 1 H); 7.73
(d, 1 H, J = 8.6Hz); 7.80 (dd, 1 H, J1 = 8.6Hz, J2 = 2.0Hz); 8.24 (d, 1 H, J = 2.0Hz)。
【０１５４】
工程７：（以下の反応はＮ２雰囲気中で行う）。２−メチル−５−｛２−ニトロ−４−［２−（３，４，５−トリヒドロキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−フェニル｝−フラン−３−カルボン酸（６１）（２１ｍｇ、０．０５ミリモル）をＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）に溶解させ、室温にて、炭素上のＰｄ（１０％（ｗ／ｗ）Ｐｄ含有量、１１．５ｍｇ、０．００５ミリモル）、続いてＮＨ４ＣＯ２Ｈ（６８ｍｇ、１．０８ミリモル）を加える。反応混合物を注意深く脱気し（Ｎ２でフラッシュし）、それを室温にて１７時間攪拌する。反応混合物をセライトの短いパッドを通して濾過し、溶媒を除去する。分取用ＲＰ  ＨＰＬＣ（グラジエント、水／ＣＨ３ＣＮ  ９５：５ないし５：９５）によって粗生成物を精製して、５−｛２−アミノ−４−［２−（３，４，５−トリヒドロキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−フェニル｝−２−メチル−フラン−３−カルボン酸（６２）（４．６ｍｇ、２３％）を白色固体として得る。1H NMR (400MHz, CD3OD): 2.69 (s, 3 H); 3.50 (s, 2 H); 6.39 (s, 2 H); 6.91 (s, 1 H) ; 7.13 (br.d, 1 H, J = 8.6Hz); 7.57 (d,
1 H, J = 8.6Hz) 7.65 (br.s, 1 H)。
【０１５５】
実施例６
｛４−［２−（３，４，５−トリヒドロキシ−フェニル）−アセチル］−ピペラジン−１−イル｝−酢酸エチルエステル（６５）
スキーム１３
【０１５６】
【化３６】
2007529462.tif 000038
【０１５７】
工程１：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。ＥＤＣ・ＨＣｌ（１８８ｍｇ、０．９８ミリモル）およびＥｔ３Ｎ（１３７μＬ、０．９８ミリモル）を無水ＤＣＭ（１．０ｍＬ）に懸濁させ、得られた溶液を室温にて５分間攪拌する。２−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−酢酸（１６３ｍｇ、０．７２ミリモル）およびＤＭＡＰ（８ｍｇ、０．０７ミリモル）を加え、得られた溶液を１０分間攪拌する。１−（エトキシカルボニルメチル）ピペラジン（６３）（１１２ｍｇ、０．６５ミリモル）を加え、反応溶液を室温で一晩攪拌する。反応溶液を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液および水でクエンチし、層を分離し、水性層をＤＣＭで抽出する（３回）。合わせた有機層を水およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。粗生成物を分取用ラジアルクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ  １０＋１）によって精製して、｛４−［２−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−アセチル］−ピペラジン−１−イル｝−酢酸エチルエステル（６４）（９９ｍｇ、４０％）を無色油として得る。1H NMR (400MHz, CDC13): 1.25 (t, 3 H, J = 7.1Hz); 2.48 (br.m, 2 H); 2.58 (br.m, 2 H); 3.21 (br.s, 2 H); 3.53 (br.m, 2 H); 3.65 (s, 2 H); 3.71 (br.m, 2 H); 3.81 (s, 3 H); 3.82 (s, 6 H); 4.16 (q, 2 H, J = 7.1Hz); 6.42 (s, 2 H)。
【０１５８】
工程２：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。｛４−［２−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−アセチル］−ピペラジン−１−イル｝−酢酸エチルエステル（６４）（９９ｍｇ、０．２６ミリモル）を無水ＤＣＭ（６．０ｍＬ）に溶解させ、−７８℃まで溶液を冷却し、ＤＣＭ中の１Ｍ  ＢＢｒ３溶液（２．３０ｍＬ、２．３０ミリモル）を滴下する。反応混合物を−７８℃にて３０分間攪拌し、その後、−２０℃にてさらに４時間ゆっくりと加温する。水を滴下し、混合物をＥｔＯＡｃで抽出する（３回）。合わせた有機層をブラインで洗浄し、それをＮａ２ＳＯ４で乾燥する。粗生成物を分取用ＲＰ  ＨＰＬＣ（グラジエント、水／ＣＨ３ＣＮ  ９５：５ないし５：９５）によって精製して、｛４−［２−（３，４，５−トリヒドロキシ−フェニル）−アセチル］−ピペラジン−１−イル｝−酢酸エチルエステル（６５）（３４ｍｇ、４０％）を粘性のある茶色味がかった固体として得る。1H NMR (400MHz, CD3OD): 1.35 (t, 3 H, J = 7.1Hz); 3.14-3.24 (br.m, 2 H); ca 3.32 (br.m, 2 H); 3.65 (s, 2 H); 3.78-4.00 (br.m, 4 H); 4.12 (s,
2 H); 4.34 (q, 2 H, J = 7.1Hz); 6.29 (s, 2 H)。
【０１５９】
実施例７
｛４−［３−（３，４，５−トリヒドロキシ−フェニル）−プロピオニル］−ピペラジン−１−イル｝−酢酸（６８）
スキーム１４
【０１６０】
【化３７】
2007529462.tif 000039
【０１６１】
工程１：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。ＥＤＣ・ＨＣｌ（３７６ｍｇ、１．９６ミリモル）およびＥｔ３Ｎ（２７５μＬ、１．９６ミリモル）を無水ＤＣＭ（２．０ｍＬ）に懸濁させ、得られた溶液を室温にて５分間攪拌する。３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオン酸（３４６ｍｇ、１．４４ミリモル）およびＤＭＡＰ（１７ｍｇ、０．１４ミリモル）を加え、得られた溶液を１５分間攪拌する。１−（エトキシカルボニルメチル）ピペラジン（６３）（２２４ｍｇ、１．３０ミリモル）を加え、反応溶液を室温にて一晩攪拌する。反応溶液を水でクエンチし、層を分離し、水性層をＥｔＯＡｃで抽出する（３回）。合わせた有機層をシリカゲルの短いパッドを通して濾過し、溶媒を除去する。粗生成物を分取用ラジアルクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ  ９＋１）によって精製して、｛４−［３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオニル］−ピペラジン−１−イル｝−酢酸エチルエステル（６６）（４２６ｍｇ、８３％）を無色油として得る。1H NMR (400MHz, CDCl3): 1.26 (t, 3 H, J = 7.1Hz); 2.45-2.70 (br.m, 6 H); 2.89 (t, 2 H, J = 7.7Hz); 3.26 (br.s, 2 H); 3.43- 3.56 (br.m, 2 H); 3.61-3.76 (br.m, 2 H); 3.80 (s, 3 H); 3.83 (s, 6 H); 4.18
(q, 2 H, J = 7.1Hz); 6.41 (s, 2 H)。
【０１６２】
工程２：｛４−［３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオニル］−ピペラジン−１−イル｝−酢酸エチルエステル（６６）（１００ｍｇ、０．２５ミリモル）を室温にてＭｅＯＨ（２．０ｍＬ）に溶解させ、２Ｍ  ＮａＯＨ水溶液（２６０μＬ、０．５２ミリモル）を加える。反応混合物を還流下で１時間攪拌する。１Ｍ塩酸水溶液（５５０μＬ、０．５５ミリモル）を加え、混合物をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、溶媒を除去して、｛４−［３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオニル］−ピペラジン−１−イル｝−酢酸（６７）（８８ｍｇ、９５％）を茶色粘性固形物として得る。さらに精製しない。1H NMR (400MHz, CDCl3/CD3OD 9+1): 2.54 (br.t, 2 H); 2.78 (t, 2
H, = 7.5Hz); 2.83-3.10 (br.m, 2 H); 3.24 (s, 2 H); 3.43-3.62 (br.m, 2 H); 3.68 (s, 3 H); 3.73 (s, 6 H); 3.74-3.85 (br.m, 4 H); 6.34 (s, 2 H)。
【０１６３】
工程３：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。｛４−［３−（３，４，５−トリ
メトキシ−フェニル）−プロピオニル］−ピペラジン−１−イル｝−酢酸（６７）（８８ｍｇ、０．２４ミリモル）を無水ＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解させ、溶液を−７８℃まで冷却し、ＢＢｒ３（３３０μＬ、３．５０ミリモル）を滴下する。反応混合物を−７８℃にて３０分間攪拌し、その後、−２０℃にてさらに４時間加温する。水を滴下し、溶媒を除去する。粗生成物を分取用ＲＰ  ＨＰＬＣ（グラジエント、水／ＣＨ３ＣＮ  ９５：５ないし５：９５）によって精製して、｛４−［３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオニル］−ピペラジン−１−イル｝−酢酸（６８）（２ｍｇ、２％）を白色固体として得る。1H NMR (400MHz, CD3OD): 2.67 (t, 2 H, J = 6.9Hz); 2.79 (t, 2 H, J = 6.9Hz); 2.86-2.96 (br.m, 2 H); 3.23-3.31 (br.m, 2 H); 3.67-3.77 (br.m, 2 H); 3.80-3.93 (br.m, 2 H); 3.95 (s, 2 H); 6.25 (s, 2 H)。
【０１６４】
実施例８
｛２’−［３−（３，４，５−トリヒドロキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−ビフェニル−３−イル｝−酢酸メチルエステル（７３）
スキーム１５
【０１６５】
【化３８】
2007529462.tif 000040
【０１６６】
工程１：（以下の反応は無酸素Ｎ２雰囲気中で行う）。エタノール（０．８ｍＬ）、テトラキス−（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（０）（３０ｍｇ、２．２モル％）およびＮａ２ＣＯ３十水和物（９４４ｍｇ、３．３０ミリモル；１．２ｍＬ  Ｈ２Ｏに予め溶解）を、順次、トルエン（６．０ｍＬ）中の溶解させた２−アミノ−ベンゼンボロン酸（７０）（２０１ｍｇ、１．３０ミリモル）に加える。反応混合物を５回脱気し、Ｎ２を再度満たす。（３−ブロモ−フェニル）−酢酸メチルエステル（６９）（２７０ｍｇ、１．１８ミリモル）をトルエン（６．０ｍＬ）に加え、再度脱気し（５回）、反応溶液を１００℃にて一晩攪拌する。反応溶液をＥｔＯＡｃおよびブライン（１＋１）の間に分配し、分離された水性層をＥｔＯＡｃで３回抽出する。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。減圧下で溶媒を除去し、粗生成物を分取用ラジアルクロマトグラフィー（シリカゲル  ６０ＰＦ、ＣｙＨ／ＥｔＯＡｃ  ３＋１）によって精製して、（２’−アミノ−ビフェニル−３−イル）−酢酸メチルエステル（７１）をオレンジ色油（３０４ｍｇ、８１％）として得る。1H NMR (400MHz, CDCl3): 3.66 (s, 2 H); 3.69 (s, 3 H); 3.62-3.86 (br.s, 2 H); 6.75 (d, 1 H, J = 8.1Hz); 6.80 (t, 1 H, J = 7.3Hz
); 7.11 (d, 1 H, J = 7.3Hz); 7.15 (d, 1 H, J = 8.1Hz); 7.22-7.26 (br.m, 1 H); 7.32-7.42 (m, 3 H)。
【０１６７】
工程２：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。ＥＤＣ・ＨＣｌ（６１ｍｇ、０．３２ミリモル）およびＥｔ３Ｎ（４４μＬ、０．３２ミリモル）を無水ＤＣＭ（１．０ｍＬ）に懸濁させ、得られた溶液を室温にて５分間攪拌する。３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオン酸（５５ｍｇ、０．２３ミリモル）およびＤＭＡＰ（２ｍｇ、０．０２ミリモル）を加え、得られた溶液を１５分間攪拌する。（２’−アミノ−ビフェニル−３−イル）−酢酸メチルエステル（７１）（５０ｍｇ、０．２１ミリモル）を加え、反応溶液を室温にて一晩攪拌する。反応溶液を水でクエンチし、層を分離し、水性層をＤＣＭで抽出する（３回）。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。粗生成物を分取用ラジアルクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ＣｙＨ  １＋１）によって精製して、｛２’−［３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−ビフェニル−３−イル｝−酢酸メチルエステル（７２）（４６ｍｇ、４８％）を黄色油として得る。1H NMR (400MHz, CDCl3): 2.50 (t, 2 H, J = 7.6Hz); 2.90 (t, 2 H, J = 7.7Hz); 3.64 (s, 2 H); 3.65 (s, 3 H); 3.77 (s, 6 H); 3.78 (s, 3 H); 6.38 (s, 2 H); 7.09-7.18 (m, 3 H); 7.19-7.28 (m, 3 H); 7.34 (d, 1 H,
J = 8.1Hz); 7.38 (d, 1 H, J = 7.8Hz); 8.31 (br.d, 1 H, J = 7.8Hz)。
【０１６８】
工程３：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。｛２’−［３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−ビフェニル−３−イル｝−酢酸メチルエステル（７２）（４６ｍｇ、０．１０ミリモル）を無水ＤＣＭ（１．０ｍＬ）に溶解させ、溶液を−７８℃まで冷却し、ＢＢｒ３（８５μＬ、０．９０ミリモル）を滴下する。反応混合物を−７８℃にて３０分間攪拌し、その後、室温にてさらに２時間ゆっくりと加温する。氷水を滴下し、層を分離し、水性層をＤＣＭで抽出する（３回）。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。粗生成物を分取用ＲＰ  ＨＰＬＣ（グラジエント、水／ＣＨ３ＣＮ  ９５：５ないし５：９５）によって精製して、｛２’−［３−（３，４，５−トリヒドロキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−ビフェニル−３−イル｝−酢酸メチルエステル（７３）（２ｍｇ、５％）を得る。1H NMR (400MHz, CD3CN): 2.43 (t, 2 H, J = 7.6Hz); 2.69 (t, 2 H, J = 7.6Hz); 3.66 (s, 3 H); 3.70 (s, 2 H); 6.25 (s, 2 H); 7.18-7.34 (m, 5 H); 7.35-7.44 (m, 2 H); 7.65 (br.s, 1 H);
7.89 (br.d, 1 H, J = 8.3Hz)。
【０１６９】
実施例９
４−［３−（３，４，５−トリヒドロキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−シクロヘキサンカルボン酸（７６）
スキーム１６
【０１７０】
【化３９】
2007529462.tif 000041
【０１７１】
工程１：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。ＥＤＣ・ＨＣｌ（１７５ｍｇ、０．９１ミリモル）およびＥｔ３Ｎ（１２７μＬ、０．９１ミリモル）を無水ＤＣＭ（８．０ｍＬ）に懸濁させ、得られた溶液を室温にて５分間攪拌する。３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオン酸（２１９ｍｇ、０．９１ミリモル）およびＤＭＡＰ（２２ｍｇ、０．１８ミリモル）を加え、得られた溶液を１０分間攪拌する。シス−４−アミノ−シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル（７４）（１３６ｍｇ、０．８７ミリモル）を加え、反応溶液を室温にて２日間攪拌する。溶媒を除去し、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ＣｙＨ  ３＋１、後にＥｔＯＡｃ）によって精製して、シス−｛４−［３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル（７５）（２５４ｍｇ、７６％）を無色粘性油として得る。1H NMR (400MHz, CDCl3): 1.40-1.51 (m, 2 H); 1.59-1.70 (m, 4 H); 1.70-1.82 (m, 2 H); 2.40-2.48 (m, 3 H); 2.88 (t, 2 H, J = 7.6Hz); 3.65 (s, 3 H); 3.79 (s, 3 H); 3.82 (s, 6 H); 3.86-3.95 (m, 1 H); 5.33 (br.d, 1 H, J = 7.3Hz); 6.40 (s, 2 H)。
【０１７２】
工程２：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。シス−｛４−［３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル（７５）（８２ｍｇ、０．２１ミリモル）を無水ＤＣＭ（２．０ｍＬ）に溶解させ、溶液を−７８℃まで冷却し、ＢＢｒ３（２０５μＬ、２．１７ミリモル）を滴下する。反応混合物を−７８℃にて２０分間攪拌し、その後、室温にてさらに２時間ゆっくりと加温する。水を滴下し、続いて、ＤＣＭおよびＭｅＯＨを滴下し、溶媒を除去する。粗生成物を分取用ＲＰ  ＨＰＬＣ（グラジエント、水／ＣＨ３ＣＮ  ９５：５ないし５：９５）によって精製して、シス−４−［３−（３，４，５−トリヒドロキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−シクロヘキサンカルボン酸（７６）（７ｍｇ、１０％）を無色粘性固形物として得る。1H NMR (400MHz, CD3OD): 1.47-1.60 (m, 2 H); 1.62-1.73 (m, 4 H); 1.91-2.02 (m, 2 H); 2.42 (t, 2 H, J = 7.6Hz); 2.47-2.54 (m, 1 H); 2.71 (t, 2 H, J = 7.3Hz); 3.75-3.84 (m, 1 H); 6.23 (s, 2 H)。
【０１７３】
実施例１０
４−［３−（３，４，５−トリヒドロキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−安息香酸（７９）
スキーム１７
【０１７４】
【化４０】
2007529462.tif 000042
【０１７５】
工程１：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。ＥＤＣ・ＨＣｌ（８０ｍｇ、０．４１ミリモル）およびＥｔ３Ｎ（５８μＬ、０．４１ミリモル）を無水ＤＣＭ（２．０ｍＬ）に懸濁させ、得られた溶液を室温にて５分間攪拌する。３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオン酸（７０ｍｇ、０．２９ミリモル）およびＤＭＡＰ（５ｍｇ、０．０４ミリモル）を加え、得られた溶液を１０分間攪拌する。４−アミノ−安息香酸メチルエステル（７７）（４２ｍｇ、０．２７ミリモル）を加え、反応溶液を室温にて２日間攪拌する。反応溶液を水でクエンチし、層を分離し、水性層をＤＣＭで抽出する（３回）。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、それを、ＥｔＯＡｃを用いてシリカゲルの短いパッドを通して濾過して、４−［３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−安息香酸メチルエステル（７８）（９１ｍｇ、８８％）を白色固体として得る。さらに精製しない。1H NMR (400MHz, CDCl3): 2.60
(t, 2 H, J = 7.6Hz); 2.91 (t, 2 H, J = 7.6Hz); 3.70 (s, 6 H); 3.76 (s, 3 H); 3.83 (s, 3 H); 6.35 (s, 2 H); 7.55 (d, 2 H, J = 8.3Hz); 7.91 (d, 2 H, J = 8.6Hz); 8.09 (s, 1 H)。
【０１７６】
工程２：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。４−［３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−安息香酸メチルエステル（７８）（４５ｍｇ、０．１２ミリモル）を無水ＤＣＭ（１．２ｍＬ）に溶解させ、反応を−７８℃に冷却し、ＢＢｒ３（９０μＬ、０．９６ミリモル）を滴下する。反応混合物を−７８℃にて３０分間攪拌し、その後、室温にてさらに３時間ゆっくりと加温する。氷−水／ＴＨＦ（１＋１）、続いて、ＭｅＯＨを滴下し、溶媒を除去する。粗生成物を分取用ＲＰ  ＨＰＬＣ（グラジエント、水／ＣＨ３ＣＮ  ９５：５ないし５：９５）によって精製して、４−［３−（３，４，５−トリヒドロキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−安息香酸（７９）（１７ｍｇ、４４％）を白色固体として得る。1H NMR (400MHz, CD3OD): 2.65 (t, 2
H, J = 7.5Hz); 2.83 (t, 2 H, J = 7.5Hz); 6.29 (s, 2 H); 7.68 (d, 2 H, J = 8.3Hz); 7.99 (d, 2 H, J = 8.6Hz)。
【０１７７】
実施例１１
（５−｛２−［（３’，４’，５’−トリヒドロキシ−ビフェニル−２−カルボニル）−アミノ］−フェニル｝−チオフェン−２−イル）−酢酸（８７）
スキーム１８
【０１７８】
【化４１】
2007529462.tif 000043
【０１７９】
工程１：（以下の反応はＮ２雰囲気中で行う）。トルエン（１１ｍＬ）中の２−ブロモ安息香酸メチル（８０）（９２２ｍｇ、４．２９ミリモル）の溶液に、水（３．８ｍＬ）中のＰｄ（ＰＰｈ３）４（２９７ｍｇ、０．２６ミリモル）およびＮａ２ＣＯ３・１０Ｈ２Ｏ（３．４３ｇ、１２．００ミリモル）を加える。得られた混合物を注意深く脱気する（真空およびＮ２でのフラッシングを交互に５回）。トルエン（１０ｍＬ）中の３，４，５−トリメトキシフェニルボロン酸（８１）（１．００ｇ、４．７２ミリモル）の溶液をシリンジによって加え、得られた混合物を再度注意深く脱気し、得られた混合物を１００℃にて一晩攪拌する。混合物をブライン／ＥｔＯＡｃ（１＋１）の間に分配し、層を分離し、水性層をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ＣｙＨ  １＋７、後に１＋５）によって精製して、３’，４’，５’−トリメトキシ−ビフェニル−２−カルボン酸メチルエステル（８２）を黄色固体（１．３０ｇ、９９％）として得る。1H NMR (400MHz, CDCl3): 3.65 (s, 3 H); 3.84 (s, 6 H); 3.87 (s, 3 H);
6.52 (s, 2 H); 7.35-7.42 (m, 2 H); 7.50 (t, 1 H, J = 8.0Hz); 7.73 (d, 1 H, J = 8.0Hz)。
【０１８０】
工程２：３’，４’，５’−トリメトキシ−ビフェニル−２−カルボン酸メチルエステル（８２）（６２６ｍｇ、２．０８ミリモル）をＭｅＯＨ（１４ｍＬ）に室温にて溶解させ、１Ｍ  ＬｉＯＨ水溶液（４．２ｍＬ、４．２０ミリモル）を加える。反応混合物を還流下で８時間攪拌する。溶媒を除去し、残渣を１Ｍ塩酸水溶液およびＥｔＯＡｃの間に分配し、層を分離し、水性層をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。溶媒を除去し、ＥｔＯＡｃ／ＣｙＨ  １＋２から残渣
を再結晶して、３’，４’，５’−トリメトキシ−ビフェニル−２−カルボン酸（８３）を白色固体（４２３ｍｇ、７９％）として得る。1H NMR (400MHz, CD3OD: 3.84 (s, 3 H); 3.89 (s, 6 H); 6.68 (s, 2 H); 7.42-7.49 (m, 2 H); 7.57 (t, 1 H, J = 7.5Hz); 7.76 (d, 1 H, J = 8.0Hz)。
【０１８１】
工程３：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。３’，４’，５’−トリメトキシ−ビフェニル−２−カルボン酸（８３）（５４ｍｇ、０．１８ミリモル）を無水ＤＣＭ（１．３ｍＬ）に溶解させ、無水ＤＭＦ（１滴、触媒量）を加える。次いで、温度を水浴で約２０℃に維持することによって、塩化オキサリル（２１μＬ、０．２４ミリモル）をゆっくりと加え、濁った混合物を室温にてさらに２時間攪拌する。溶媒を除去し、真空中で乾燥して粗塩化３’，４’，５’−トリメトキシ−ビフェニル−２−カルボニル（８４）を黄色固体として得る。さらに精製しない。
【０１８２】
工程４：ＤＣＭ（１．０ｍＬ）中の塩化３’，４’，５’−トリメトキシ−ビフェニル−２−カルボニル（８４）（０．１８ミリモル）の溶液を、無水ＤＣＭ（２．０ｍＬ）および無水ピリジン（０．５ｍＬ）中の［５−（２−アミノ−フェニル）チオフェン−２−イル］−酢酸メチルエステル（４６）（４６ｍｇ、０．１８ミリモル）の氷冷溶液に加える。反応混合物を０℃にて１時間攪拌し、および室温にて２０時間攪拌する。反応混合物を氷冷１Ｍ塩酸水溶液に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２回）およびＤＣＭ（２回）で抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。粗生成物を分取用ラジアルクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ＣｙＨ  １＋２）によって精製して、（５−｛２−［（３’，４’，５’−トリメトキシ−ビフェニル−２−カルボニル）−アミノ］−フェニル｝−チオフェン−２−イル）−酢酸メチルエステル（８５）を淡茶色固体（５８ｍｇ、５９％）として得る。1H NMR (400MHz, CDCl3): 3.70 (s, 3 H); 3.76 (s, 6 H); 3.78 (s, 2 H); 3.80 (s, 3 H); 6. 29 (d, 1 H, J = 3.4Hz); 6.60 (s, 2 H); 6.75
(d, 1 H, J = 3.4Hz); 7.07 (t, 1 H, J = 7.6Hz); 7,23 (d, 1 H, J = 7.6Hz); 7.31 (t, 1 H, J = 8.0Hz); 7.37-7.43 (m, 2 H); 7.48 (t, 1 H, J = 7.6Hz); 7.52 (s, 1 H);
7.69 (d, 1 H, J = 8.0Hz); 8.45 (d, 1 H, J = 8.0Hz)。
【０１８３】
工程５：（５−｛２−［（３’，４’，５’−トリメトキシ−ビフェニル−２−カルボニル）−アミノ］−フェニル｝−チオフェン−２−イル）−酢酸メチルエステル（８５）（５６ｍｇ、０．１１ミリモル）をＭｅＣＮ（３．８ｍＬ）に室温で溶解させ、１Ｍ  ＬｉＯＨ水溶液（７６０μＬ、０．７６ミリモル）を加える。反応混合物を室温にて１８時間攪拌する。反応混合物（冷却浴）を２Ｍ塩酸水溶液でクエンチする。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、（５−｛２−［（３’，４’，５’−トリメトキシ−ビフェニル−２−カルボニル）−アミノ］−フェニル｝−チオフェン−２−イル）−酢酸（８６）（５５ｍｇ、９９％）を茶色固体として得る。1H NMR (400MHz, CDCl3): 3.76 (s, 6 H), 3.80 (s, 3 H); 3.83 (s, 2
H); 6.32 (d, 1 H, J = 3.5Hz); 6.60 (s, 2 H); 6. 78 (d, 1 H, J = 3.5Hz); 7.07 (t, 1 H, J = 7.6Hz); 7.23 (d, 1 H, J = 7,6Hz); 7.32 (t, 1 H, J = 7.6Hz); 7.36-7.54
(m, 3 H); 7.69 (d, 1 H, J = 8.0Hz); 8.43 (d, 1 H, J = 8.0Hz)。
【０１８４】
工程６：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。（５−｛２−［（３’，４’，５’−トリメトキシ−ビフェニル−２−カルボニル）−アミノ］−フェニル｝−チオフェン−２−イル）−酢酸（８６）（５５ｍｇ、０．１１ミリモル）を−７８℃にて無水ＤＣＭ（３．２ｍＬ）に溶解させ、ＤＣＭ（７３０μＬ、０．７３ミリモル）中のＢＢｒ３の１Ｍ溶液を滴下し、−７８℃にてさらに３０分間攪拌する。ゆっくりと加温した後、反応溶液を室温にてさらに４時間攪拌する。反応混合物を０℃まで冷却し、水を滴下する。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた有機層をブラインで洗浄し、それをＮａ２ＳＯ４で乾燥する。粗生成物を分取用ＲＰ  ＨＰＬＣ（グラジエント、水／ＣＨ３ＣＮ  ９
５：５ないし５：９５）によって精製して、（５−｛２−［（３’，４’，５’−トリヒドロキシ−ビフェニル−２−カルボニル）−アミノ］−フェニル｝−チオフェン−２−イル）−酢酸（８７）（１０ｍｇ、１８％）を黄色固体として得る。1H NMR (400MHz, CD3OD): 3.88 (s, 2 H); 6.50 (s, 2 H); 6.66 (d, 1 H, J = 3.5Hz); 6.93 (d, 1 H, J = 3.5Hz); 7.23 (t; 1 H, J = 7.3Hz); 7.35 (t, 1 H, J = 7.6 Hz); 7.38-7.46 (m, 3 H); 7.50 (t, 1 H, J = 7.3Hz); 7.62 (d, 1 H, J = 8.0Hz); 7.84 (d, 1 H, J = 8.0Hz)。
【０１８５】
実施例１２
３−｛３−［３−（３，４，５−トリヒドロキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−フェニルアミノ｝−安息香酸（９２）
スキーム１９
【０１８６】
【化４２】
2007529462.tif 000044
【０１８７】
工程１：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。ＥＤＣ・ＨＣｌ（４０２ｍｇ、２．１０ミリモル）およびＥｔ３Ｎ（２９３μＬ、２．１０ミリモル）を無水ＤＣＭ（１７ｍＬ）に懸濁させ、得られた溶液を室温にて５分間攪拌する。３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオン酸（４８０ｍｇ、２．００ミリモル）およびＤＭＡＰ（２４ｍｇ、０．２０ミリモル）を加え、得られた溶液を５分間攪拌する。３−ニトロ−フェニルアミン（８８）（４１４ｍｇ、３．００ミリモル）を加え、反応溶液を室温にて２
４時間攪拌する。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液および水でクエンチし、層を分離し、水性層をＥｔＯＡｃで抽出する（３回）。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。粗生成物を分取用ラジアルクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ＣｙＨ  １＋１）によって精製して、Ｎ−（３−ニトロ−フェニル）−３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオンアミド（８９）（５０８ｍｇ、７０％）を黄色固体として得る。1H NMR (400MHz, CDCl3): 2.65 (t, 2 H, J = 7.5Hz); 2.98 (t,
2 H, J = 7.5Hz); 3.79 (s, 6 H); 3.81 (s, 3 H); 6.42 (s, 2 H); 7.41 (s, 1 H); 7.45 (t, 1 H, J = 8.3Hz); 7.84 (d, 1 H, J = 8.3Hz); 7.92 (d, 1 H, J = 8. 3Hz); 8.31 (s, 1 H)。
【０１８８】
工程２：（以下の反応はＮ２雰囲気中で行う）。Ｎ−（３−ニトロ−フェニル）−３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオンアミド（８９）（１００ｍｇ、０．２８ミリモル）をＭｅＯＨ（４．５ｍＬ）に溶解させ、炭素上のＰｄ（１０％（ｗ／ｗ）Ｐｄ含有量、２９．５ｍｇ、０．０２８ミリモル）、続いて、ＮＨ４ＣＯ２Ｈ（１７５ｍｇ、２．７７ミリモル）を室温にて加える。反応混合物を注意深く脱気し（Ｎ２でフラッシュし）、それを室温にて７５分間攪拌する。反応混合物をセライトの短いパッドを通して濾過し、溶媒を除去する。残渣をＥｔＯＡｃで処理し、再度セライトの短いパッドを通して濾過し、溶媒を除去して、Ｎ−（３−アミノ−フェニル）−３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオンアミド（９０）（９１ｍｇ、９９％）を白色固体として得る。さらに精製しない。1H NMR (400MHz, CD3OD): 2.65 (t, 2 H, J = 7.5Hz); 2.98 (t, 2 H, J = 7.5Hz); 3.75 (s, 3 H); 3.82 (s, 6 H); 6.50 (dd, 1 H, J1 = 8.0Hz,
J2 = 2.0Hz); 6.58 (s, 2 H); 6.80 (dd, 1 H, J1 = 8.0 Hz, J2 = 2.0Hz); 7.02-7.07 (m, 1 H); 7.04 (t, 1 H, J = 8.0Hz)。
【０１８９】
工程３：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。二口丸底フラスコにＰｄ２（ｄｂａ）３（５．５ｍｇ、０．００６ミリモル）、２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）ビフェニル（２ｍｇ、０．００５ミリモル）、３−ブロモ安息香酸メチル（１１）（５１ｍｇ、０．２４ミリモル）およびリン酸カリウム（７１ｍｇ、０．３３ミリモル）を充填し、それを注意深く脱気する（Ｎ２をフラッシュする）。乾燥した脱気ＤＭＥ（１．０ｍＬ）中のＮ−（３−アミノ−フェニル）−３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオンアミド（９０）（９１ｍｇ、０．２７ミリモル）の溶液を加え、得られた混合物を８５℃にて１５時間攪拌する。反応懸濁液を室温まで冷却し、それをＥｔＯＡｃで希釈し、セライトの短いパッドを通して濾過し、溶媒を除去する。粗生成物を分取用ラジアルクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ＣｙＨ  １＋１）によって精製して、３−｛３−［３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−フェニルアミノ−安息香酸メチルエステル（９１）（９７ｍｇ、８７％）を黄色固体として得る。1H NMR (400MHz, (CD3)2SO): 2.59 (t, 2 H, J = 7.8Hz); 2.83 (t, 2 H, J = 7.8Hz); 3.60 (s, 3 H), 3.72 (s, 6 H); 3.82 (s, 3 H); 6.54 (s, 2 H); 6.75 (d, 1 H, J =
7.8 Hz); 7.07 (d, 1 H, J = 8.0Hz); 7.16 (t, 1 H, J = 8.0 Hz); 7.29-7.40 (m, 3 H); 7.48 (s, 1 H), 7.63 (s, 1 H); 8.40 (s, 1 H); 9,83 (s, 1 H)。
【０１９０】
工程４：（以下の反応は無水Ｎ２雰囲気中で行う）。３−｛３−［３−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−フェニルアミノ−安息香酸メチルエステル（９１）（３６ｍｇ、０．０８ミリモル）を−７８℃にてＤＣＭ（２．３ｍＬ）に溶解させ、ＤＣＭ中のＢＢｒ３の１Ｍ溶液（９３０μＬ、０．９３ミリモル）を滴下し、−７８℃にてさらに３０分間攪拌する。ゆっくりと加温した後、反応溶液を室温にてさらに４時間攪拌する。反応混合物を０℃まで冷却し、水／ＴＨＦ（１＋１）を滴下し、溶媒を除去する。粗生成物を分取用ＲＰ  ＨＰＬＣ（グラジエント、水／ＣＨ３ＣＮ  ９５：５ないし５：９５）によって精製して、３−｛３−［３−（３，４，５−トリヒドロキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−フェニルアミノ｝−安息香酸（９２）（１０ｍｇ
、３３％）を白色固体として得る。1H NMR (400MHz, CD3OD): 2. 60 (t, 2 H, J = 7.7Hz); 2.85 (t, 2 H, = 7.7Hz); 6.29 (s, 2 H); 6.70 (dd, 1 H, J1= 8.0Hz, J2 = 2.0Hz);
7.06 (d, 1 H, J = 8.0Hz), 7.21 (t, 1 H, J = 8.0Hz), 7.33-7.37 (m, 2 H), 7.45 (mc, 1 H); 7.50-7.54 (m, 1 H); 7.77 (s, 1 H)。
【０１９１】
以下のスキーム２０で言及する化合物は、本明細書中において特に好ましい化合物として言及される化合物である。
【０１９２】
スキーム２０
【０１９３】
【化４３】
2007529462.tif 000045
【０１９４】
シアリルルイスＸチロシン硫酸アッセイ（ｓＬｅｘ  ＴＳＡ）：
本発明の化合物を、ＰＳＧＬ−１代替物としてのポリマーマトリックスに連結したｓＬｅｘおよびチロシン硫酸残基へのＰ−、Ｌ−またはＥ−セレクチンキメラ分子の結合を阻害するそれらの能力につき分子レベルでアッセイする。選択された５０％阻害濃度（ＬＣ５０−値）を決定する。
【０１９５】
マイクロタイタープレートを炭酸緩衝液ｐＨ９．６中でヤギ抗ヒトＦｃ  ｍＡＢ（１０μｇ／ｍｌ）で一晩コーティングする。アッセイ緩衝液（２５ｍＭの４−（２−ヒドロキ
シエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭ  ＣａＣｌ２  ｐＨ７．４）中での洗浄およびブロッキング（アッセイ緩衝液中３％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ））の後、プレートをヒトＰ−セレクチン−ＩｇＧ−キメラ（０．６１ｎＭ、各々、１５０ｎｇ／ｍＬ）またはヒトＬ−セレクチン−ＩｇＧ−キメラ（０．６１ｎＭ、各々、８９ｎｇ／ｍＬ）またはヒトＥ−セレクチン−ＩｇＧ−キメラ（０．６１ｎＭ、各々、１３１ｎｇ／ｍＬ）と共に３７℃にて２時間インキュベートする。１５％ｓＬｅｘ、１０％チロシン−硫酸および５％ビオチンを運ぶ５μｌのｓＬｅｘ−チロシン硫酸ポリアクリルアミド（１ｍｇ／ｍｌ）を、２０μｌのストレプトアビジン−ペルオキシダーゼ溶液（１ｍｇ／ｍｌ）、およびＣａＣｌ２を含まない２５μｌのアッセイ緩衝液と複合体化する。アッセイで用いるために、リガンド複合体をアッセイ緩衝液中で１：１００００希釈し、さらに、２％ＤＭＳＯを含むアッセイ緩衝液中の種々の量の化合物で１：１希釈する。この混合物をＥ−またはＰ−セレクチンで予めコーティングしたウェルに加える。３７℃における２時間のインキュベーションの後、ウェルを０．００５％ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート（ＴＷＥＥＮ  ２０）を含むアッセイ緩衝液中で６回洗浄し、２０μｌの３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）／Ｈ２Ｏ２基質溶液で１０ないし１５分間発色させ、２０μｌの１Ｍ  Ｈ２ＳＯ４で停止させる。（Ｐａｃｋａｒｄ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，  Ｄｒｅｉｅｉｃｈ，ドイツ国から販売されている）Ｆｕｓｉｏｎアルファ−ＦＰリーダーにて４５０ｎｍ  ｖｓ．６２０ｎｍにおいて光学密度を測定することによって、結合したｓＬｅｘ−チロシン硫酸リガンド複合体を測定する。
【０１９６】
【表１】
2007529462.tif 000046
【０１９７】
【表２】
2007529462.tif 000047
【０１９８】
流動条件下でのフローチャンバーアッセイ／細胞接着およびローリング
血管中の流動に類似する動的条件下で細胞結合を阻害する化合物の能力を評価するために、Ｐ−セレクチン、Ｌ−セレクチンおよびＥ−セレクチンキメラ分子へのＨＬ−６０細胞／種々の細胞系の結合に対処し／テストするフローチャンバーアッセイを行う。
【０１９９】
平行フローチャンバーシステムを用い、流動条件下で細胞付着を測定する。３５ｍｍのポリスチレン培養皿を、各々、２．５μｇ／ｍｌまたは１０μｇ／ｍｌの濃度のヒトＥ−またはＰ−セレクチン−ＩｇＧキメラを含有するコーティング緩衝液（５０ｍＭのトリス−（ヒドロキシメチル）アミノメタン緩衝液（トリス）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、２ｍＭ
ＣａＣｌ２；ｐＨ７．４）で室温にて１時間コートする。コーティング溶液の除去の後、非特異的結合部位を、室温にて、コーティング緩衝液中の１％ＢＳＡでさらに１時間ブロックする。アッセイ緩衝液（「Ｒｏｓｗｅｌｌ  Ｐａｒｋ  Ｍｅｍｏｒｉａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  １６４０」（ＲＰＭＩ  １６４０）＋１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ）で洗浄した後、皿を平行プレート層流チャンバー（Ｇｌｙｃｏｔｅｃｈ，  ロックビル（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ），  ＭＤから販売）に嵌合させ、ＰＣに連結されたＣＣＤカメラ（ＪＶＣ）を備えた（オリンパス，  ハンブルク，  ドイツ国から販売される）倒立位相差顕微鏡上に設置する。ペリスタポンプ（イズマテック（Ｉｓｍａｔｅｃ），  Ｗｅｒｔｈｅｉｍ−Ｍｏｎｄｆｅｌｄ，ドイツ国から販売）を使用し、再−循環システムを、１２５μＭ化合物
またはビヒクル対照（ＤＭＳＯ）を含有するアッセイ緩衝液で平衡化する。細胞（１００万／ｍｌ）をチャンバーに加え、高い流速で２分間分配させる。次いで、流速を減少させ、その結果、１ダイン／ｃｍ２の計算された流動剪断が得られる。１０の低出力視野の一連の映像を５分の連続した流れの後にデジタル的に記録する。阻害のパーセンテージは、独立した実験にて、化合物の存在  ｖｓ  不存在下でコートされた皿表面に付着した視野当たりの細胞の平均数から計算する。
【０２００】
【表３】
2007529462.tif 000048
【０２０１】
平行人工膜浸透アッセイ（ＰＡＭＰＡ）
テスト化合物をＤＭＳＯに１０ｍＭで溶解させ、ＰＢＳ（各々、ｐＨ７．４またはｐＨ４．０）で５００μＭまで希釈し、その結果、「ドナー溶液」を得る。人工膜として用いるために、ドデカン中のレシチンの１％溶液（ｗ／ｖ）を調製し、音波処理する。次いで、５μｌのレシチン／ドデカン混合物を注意深く各ドナープレートウェルにピペットで入れる。人工膜の適用直後に、ドナー溶液を含有する１５０μｌの薬物をドナープレートの各ウェルに加える。アクセプタープレートの各ウェルに３００μｌの緩衝液（各々、ｐＨ７．４またはｐＨ４．０の５％ＤＭＳＯを含むＰＢＳ）を満たし、薬物−充填ドナープレートをアクセプタープレート上に置き、膜が緩衝液と接触するのを確認する。蓋を設置した後、組み立てられたプレートを湿らせたタオルを備えた密閉ボックスに移し、室温にて１６時間インキュベートする。次いで、アクセプタープレートのウェルをＬＣ／ＭＳで分析する。
【０２０２】
【表４】
2007529462.tif 000049
【手続補正書】
【提出日】平成18年11月14日(2006.11.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉａ）または（Ｉｂ）：
【化１】
2007529462.tif 000069
［式中、記号、指標および置換基は以下の意味を有し、
（Ｔが−Ｘ−中の一部としてのＯである
【化２】
2007529462.tif 000070
または
【化３】
2007529462.tif 000071
の場合の−Ｘ−、−Ｘ−の向きは、カルボニル基が−Ｙに直接結合した変形に限定される）は、
（ａ）
【化４】
2007529462.tif 000072
（ｍは０または１であり；ｎは１ないし３の整数である）
（ｂ）
【化５】
2007529462.tif 000073
（Ｒ１はＨ、ＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３である）
（ｃ）
【化６】
2007529462.tif 000074
（Ｒ２はＨ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＣＨ３、ＮＨ２、ＮＨアルキル、ＮＨアリールまたはＮＨアシルであり、−Ｋ−は−Ｓ−または−Ｏ−であり、およびＴはＯまたは［Ｈ，Ｈ］である）
（ｄ）
【化７】
2007529462.tif 000075
（ｋは０、１または２であり、ｑは１ないし３の整数である）
−Ｙは、
【化８】
2007529462.tif 000076
（ｓは０または１であり、
Ｒ３はＣＯ２Ｈ、ＣＯ２アルキル、ＣＯ２アリール、ＣＯ２ＮＨ２、ＣＯ２アラルキル、ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２ＮＨ２、ＰＯ（ＯＨ）２、１−Ｈ−テトラゾリル−、ＣＨＯ、ＣＯＣＨ３、ＣＨ２ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨアルキル、Ｎ（アルキル）アルキル’、ＯＣＨ３、ＣＨ２ＯＣＨ３、ＳＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＮまたはＣＦ３であり、
Ｒ４はＲ３から独立してＨ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮまたはＮＯ２であり、
Ｒ５はＲ３およびＲ４から独立してＨ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＮＯ２またはＲ３であり、
Ｒ６はＨ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＣＨ３、ＯＣＨ３、ＳＨまたはＮＨ２であり、
ｔは０、１または２であり、
−Ｗ−は−（ＣＨ２−）ｖ、シス−ＣＨ＝ＣＨ−またはトランス−ＣＨ＝ＣＨ−であり、ｖは０、１または２であり；
Ｒ３がＮＨ２である場合、Ｒ４またはＲ５またはＲ６はＨであってはならず；
−Ｗ−がシス−ＣＨ＝ＣＨ−またはトランス−ＣＨ＝ＣＨ−である場合、Ｒ３はＮＨ２またはＳＨであってはならない）
であり、
−Ｚは、
【化９】
2007529462.tif 000077
（Ｒ７はＲ６から独立して、Ｈ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＣＨ３、ＯＣＨ３、ＳＨまたはＮＨ２である）
である］
の少なくとも１つの化合物、または式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の前記で規定された化合物の医薬上許容される塩、エステル、アミドまたはプロドラッグ、および医薬で有用な医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項２】
該化合物が式（Ａ１）、（Ｂ１）、（Ａ２）または（Ｂ２）によって定義される請求項１記載の医薬組成物。
【化１０】
2007529462.tif 000078
［式中、−Ｘ−および−Ｙは前記定義に同じであって、−Ｘ’−（−Ｘ’−における一部としての
【化１１】
2007529462.tif 000079
の場合、−Ｘ’−の向きは、カルボニル機能が−Ｙと直接結合する変形に制限される）は、
【化１２】
2007529462.tif 000080
であり、
ここに、−Ｙ’は、
【化１３】
2007529462.tif 000081
（Ｒ８はＣＯ２Ｈ、ＣＯ２アルキル、ＣＯ２アリール、ＣＯ２ＮＨ２、ＣＯ２アラルキル、ＣＨ２ＳＯ３Ｈ、ＣＨ２ＳＯ２ＮＨ２、ＣＨ２ＰＯ（ＯＨ）２、１−Ｈ−テトラゾリル、ＣＨＯ、ＣＯＣＨ３、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＮＨ２、ＣＨ２ＮＨアルキル、ＣＨ２Ｎ（アルキル）アルキル’、ＣＨ２ＯＣＨ３またはＣＨ２ＳＨであり、
Ｒ９はＣＯ２Ｈ、ＣＯ２アルキル、ＣＯ２アリール、ＣＯ２ＮＨ２、ＣＯ２アラルキル、ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２ＮＨ２、ＰＯ（ＯＨ）２、１−Ｈ−テトラゾリル、ＣＨＯ、ＣＯＣＨ３、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨアルキル、Ｎ（アルキル）アルキル’、ＯＣＨ３またはＳＨである）
である］
【請求項３】
該化合物が式（Ｃ）または（Ｄ）：
【化１４】
2007529462.tif 000082
［式中、−Ｘ’−およびＹ’は請求項２で定義したものと同じである］
によって定義される請求項１記載の医薬組成物。
【請求項４】
式（Ａ１）、（Ａ２）、（Ｂ１）、（Ｂ２）、（Ｃ）または（Ｄ）の少なくとも１つの化合物を含む、請求項２および／または３記載の医薬組成物。
【請求項５】
式（Ｃ）の一般構造式を有する請求項３記載の化合物。
【請求項６】
式（Ｄ）の一般構造式を有する請求項３記載の化合物。
【請求項７】
請求項１で定義された式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の構造式を有する少なくとも１つの化合物の有効量を患者に投与する工程を含む、ｓＬｅｘまたはｓＬｅａおよびチロシン硫酸残基へのＰ−セレクチン、Ｌ−セレクチンまたはＥ−セレクチンの結合を阻害する方法。
【請求項８】
ｓＬｅｘまたはｓＬｅａおよびチロシン硫酸残基へのＰ−セレクチン、Ｌ−セレクチンまたはＥ−セレクチンの結合を阻害する、患者の治療用の医薬の製造のための、請求項１で定義された式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の構造式を有する化合物の使用。
【請求項９】
炎症障害、およびセレクチン媒介プロセスが役割を果たす他の医薬的疾患の治療、診断または予防用の医薬を製造するための、請求項１で定義された式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の構造式を有する化合物の使用。
【請求項１０】
診断剤または治療剤の薬物標的化用のビヒクルを製造するための、請求項１で定義された式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の構造式を有する化合物の使用。
【国際調査報告】
2007529462.tif 000083
2007529462.tif 000084
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