(57)【要約】  本発明は、カテプシンＫ、Ｌ、Ｓ及びＢの阻害剤を含めて、ただしこれらだけに限定されないシステインプロテアーゼ阻害剤である、下式（Ｉ）（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４の意味は本明細書中に示されている）の新規クラスの化合物に関する。これらの化合物は、骨粗しょう症、骨関節炎、リウマチ様関節炎など骨吸収の阻害が指摘されている疾患を治療するのに有用である。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
化学式
【化１】
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を有し、Ｃ、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｐ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩから各々独立に選択される７０個以下の非水素原子を有し、化合物の分子は、前記化学式中のＣＨ−ＮＨ領域がＳ２とＳ３の間のカテプシンと有利に相互作用し、Ｒ１がカテプシン活性部位のＳ１と有利に相互作用するが活性部位のＳ３とは有利に相互作用せず、Ｒ２がカテプシン活性部位のＳ２と有利に相互作用するが活性部位のＳ３とは有利に相互作用せず、Ｒ３がカテプシン活性部位のＳ３と有利に相互作用するが活性部位のＳ２又はＳ１とは有利に相互作用しないように、カテプシンと相互作用する、化合物。
（式中、Ｒ４は、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３と一緒に、窒素の塩基度がｐＫａ６未満に低下するような非水素電子吸引性置換基である）
【請求項２】
前記カテプシンがカテプシンＢ、Ｆ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｌ２、Ｏ、Ｓ、Ｗ又はＺから選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記カテプシンがカテプシンＫ、Ｌ、Ｓ又はＢから選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ４がカテプシン活性部位のサブサイトＳ２、Ｓ３及びＳ１それぞれと有利に相互作用しない、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２が、以下の３つの距離基準、すなわち、カテプシンのＣα２６の７Å以内であること、Ｃα６８の８．５Å以内であること及びＣα１３４の７Å以内であることを同時に満たす少なくとも１個の炭素又は硫黄原子を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ３が、以下の２つの距離基準、すなわち、カテプシンのＣα６６の５．５Å以内であること及びＣα６０の７Å以内であることを同時に満たす少なくとも１個の炭素又は硫黄原子を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
窒素が、６未満のｐＫａを有し、カテプシンのグリシン６６のカテプシンアミドカルボニルと水素結合を形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ２が非極性領域を含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ２が親油性領域を含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ３が非極性領域を含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ３が親油性領域を含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
請求項１に記載の第二級アミンの窒素のｐＫａが水系媒体中で＜５である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ４が−ＣＦ３、−ＣＨＦ２、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＦ２Ｒ５及び−ＣＨＦＲ５から選択される基であり、Ｒ５がハロ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、ケト、シアノ、ヘテロシクリル、Ｃ３−８シクロアルキル、ＳＯｍＣ１−３アルキル、ＮＨ２、ＮＯ２又はＯ（Ｃ＝Ｏ）Ｃ１−３アルキルから選択される１から４個の置換基で場合によっては置換されていてもよいＣ１−６アルキル、アリール又はヘテロアリールであり、ｍが０から２の整数である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ１が、カテプシンのＣα２５の５Å以内の少なくとも１個の炭素原子を有する、カテプシン活性部位のサブサイトＳ１に安定に収まる領域を含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
前記カテプシンがカテプシンＢ、Ｆ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｌ２、Ｏ、Ｓ、Ｗ又はＺから選択される、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１６】
前記化合物がカテプシンのシステイン２５の硫黄と共有結合を形成する、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ１が非免疫原性である、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１８】
前記化合物が、精製酵素アッセイにおいて１０マイクロモル濃度未満のＩＣ５０を有するカテプシンの活性部位に結合する、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１９】
共有結合が前記化合物の求電子性カルボニル炭素に対して形成される、請求項１４に記載の化合物。
【請求項２０】
前記化合物とカテプシンの間で共有結合が形成されない、請求項１に記載の化合物。
【請求項２１】
薬剤として許容される担体に付随して、請求項１から２０のいずれか一項に記載の化合物又はその薬剤として許容される塩を含む、薬剤組成物。
【請求項２２】
カテプシン活性を阻害する医薬品、又は哺乳動物におけるカテプシン依存性症状を治療し、若しくは予防する医薬品、又は哺乳動物における骨量の減少を阻止し、若しくは骨量の減少を抑制する医薬品、又は哺乳動物における骨粗しょう症を治療し、若しくは予防する医薬品、又は哺乳動物におけるリウマチ様関節炎症状を治療し、若しくは予防する医薬品、又は哺乳動物における骨関節炎の進行を治療し、若しくは予防する医薬品、又は哺乳動物における癌を治療する医薬品の製造における請求項１から２０のいずれか一項に記載の化合物又はその薬剤として許容される塩の使用。
【請求項２３】
薬物療法に使用するための、請求項１から２０のいずれか一項に記載の化合物又はその薬剤として許容される塩。
【請求項２４】
請求項１から２０のいずれか一項に記載の化合物又は薬剤として許容されるその塩の治療有効量を哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物におけるカテプシン依存性症状を治療し、若しくは予防する方法、又は哺乳動物における骨量の減少を阻止し、若しくは骨量の減少を抑制する方法、又は哺乳動物における骨粗しょう症を治療し、若しくは予防する方法、又は哺乳動物におけるリウマチ様関節炎症状を治療し、若しくは予防する方法、又は哺乳動物における骨関節炎の進行を治療し、若しくは予防する方法、又は哺乳動物における癌を治療する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般に、タンパク質活性の阻害剤に関し、特にカテプシン阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
多数のカテプシンがシステインプロテアーゼのパパインスーパーファミリーに属する。これらのプロテアーゼは、結合組織の正常な生理学的及び病理学的分解において機能する。カテプシンは、細胞内タンパク質分解及び代謝回転及び再構築において主要な役割を果たす。これらのカテプシンは、多種多様な組織に天然に存在する。これまで、いくつかのカテプシンが特定され、いくつかのソースによって配列決定されてきた。例えば、カテプシンＢ、Ｆ、Ｈ、Ｌ、Ｋ、Ｓ、Ｗ及びＺがクローン化された。また、カテプシンＫの配列は、参照によりその全体を本明細書に援用する、１９９６年５月９日に公開されたＰＣＴ出願第９６／１３５２３号、Ｋｈｅｐｒｉ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，  Ｉｎｃ．に見出すことができる。カテプシンＬは、正常なリソソームタンパク質分解及びこれだけに限定されないが黒色腫の転移を含めたいくつかの病態に関係している。カテプシンＳは、アルツハイマー病、並びに若年発症糖尿病、多発性硬化症、尋常性天ぽうそう、グレーブス病、重症筋無力症、全身性エリテマトーデス、リウマチ様関節炎及び橋本甲状腺腫を含めて、ただしこれらだけに限定されないある種の自己免疫異常；喘息を含めて、ただしこれだけに限定されないアレルギー性疾患；並びに臓器移植又は組織移植片の拒絶を含めて、ただしこれらだけに限定されない同種免疫応答に関係している。腫瘍においてはカテプシンＢレベルが増加し、この酵素が再分配され、腫瘍浸潤及び転移における役割が示唆される。また、異常なカテプシンＢ活性は、リウマチ様関節炎、骨関節炎、ニューモシスチスカリニ、急性すい炎、炎症性気道疾患、骨及び関節の障害などの病態と関係している。
【０００３】
Ｅ−６４（トランス−エポキシスクシニル−Ｌ−ロイシルアミド−（４−グアニジノ）ブタン）などのシステインプロテアーゼ阻害剤は、骨吸収を阻止するのに有効であることが知られている。参照によりその全体を本明細書に援用するＤｅｌａｉｓｓｅ，Ｊ．Ｍ．等、１９８７、Ｂｏｎｅ  ８：３０５−３１３を参照されたい。最近、カテプシンＫがクローン化され、破骨細胞中で特異的に発現されることが見出された。参照によりそれら全体を援用する、Ｔｅｚｕｋａ，Ｋ．等、１９９４、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２６９：１１０６−１１０９；Ｓｈｉ，Ｇ．Ｐ．等、１９９５、ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ  ３５７：１２９−１３４；Ｂｒｏｍｍｅ，Ｄ．及びＯｋａｍｏｔｏ，Ｋ．、１９９５、Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  Ｈｏｐｐｅ  Ｓｅｙｌｅｒ  ３７６：３７９−３８４；Ｂｒｏｍｍｅ，Ｄ．等、１９９６、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７１：２１２６−２１３２；Ｄｒａｋｅ，Ｆ．Ｈ．等、１９９６、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７１：１２５１１−１２５１６を参照されたい。クローニングと同時に、常染色体劣性疾患であり、骨吸収が減少する大理石骨病表現型を特徴とするピクノディスオストーシスが、カテプシンＫ遺伝子中に存在する変異に位置づけられた。これまで、カテプシンＫ遺伝子中で特定されたすべての変異は、不活性タンパク質をもたらすことが知られている。参照によりそれら全体を援用する、Ｇｅｌｂ，Ｂ．Ｄ．等、１９９６、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２７３：１２３６−１２３８；Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｍ．Ｒ．等、１９９６、Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ  ６：１０５０−１０５５を参照されたい。したがって、カテプシンＫは、破骨細胞によって媒介される骨吸収に関与すると考えられる。
【０００４】
カテプシンＫは３７ｋＤａプレプロ酵素として合成され、リソソーム区画に局在し、低ｐＨにおいて成熟２７ｋＤａ酵素におそらく自己活性化される。参照によりそれら全体を援用する、ＭｃＱｕｅｎｅｙ，Ｍ．Ｓ．等、１９９７、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７２：１３９５５−１３９６０；Ｌｉｔｔｌｅｗｏｏｄ−Ｅｖａｎｓ，Ａ．等、１９９７、Ｂｏｎｅ  ２０：８１−８６を参照されたい。カテプシンＫは、アミノ酸レベルにおいて５６％の配列が同一であるカテプシンＳと最も密接な関係がある。カテプシンＫのＳ２Ｐ２基質特異性はカテプシンＳのそれと類似しており、アルギニンなどの正に帯電した残基及びフェニルアラニン、ロイシンなどの疎水性残基に対してそれぞれＰ１位及びＰ２位が優先される。参照によりそれら全体を援用する、Ｂｒｏｍｍｅ，Ｄ．等、１９９６、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７１：２１２６−２１３２；Ｂｏｓｓａｒｄ，Ｍ．Ｊ．等、１９９６、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７１：１２５１７−１２５２４を参照されたい。カテプシンＫは、広いｐＨ範囲で活性であり、ｐＨ４から８でかなりの活性を有し、したがって、ｐＨが約４から５である破骨細胞の吸収窩において良好な触媒活性を示す。
【０００５】
骨における主要なコラーゲンであるヒトＩ型コラーゲンは、カテプシンＫの良好な基質である。参照によりその全体を本明細書に援用するＫａｆｉｅｎａｈ，Ｗ．等、１９９８、Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ  ３３１：７２７−７３２を参照されたい。カテプシンＫに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いたインビトロでの実験によれば、カテプシンＫ  ｍＲＮＡの翻訳がおそらくは抑制されるためにインビトロでの骨吸収が減少する。参照によりその全体を本明細書に援用する、Ｉｎｕｉ，Ｔ．等、１９９７、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７２：８１０９−８１１２を参照されたい。カテプシンＫの結晶構造は決定されている。参照によりそれら全体を援用する、ＭｃＧｒａｔｈ，Ｍ．Ｅ．等、１９９７、Ｎａｔ  Ｓｔｒｕｃｔ  Ｂｉｏｌ  ４：１０５−１０９；Ｚｈａｏ，Ｂ．等、１９９７、Ｎａｔ  Ｓｔｒｕｃｔ  Ｂｉｏｌ  ４：１０９−１１を参照されたい。また、カテプシンＫの選択的ペプチド系阻害剤が開発された。参照によりそれら全体を援用する、Ｂｒｏｍｍｅ，Ｄ．等、１９９６、Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ  ３１５：８５−８９；Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｓ．Ｋ．等、１９９７、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ  ９４：１４２４９−１４２５４を参照されたい。したがって、カテプシンＫ阻害剤は骨吸収を減少させることができる。かかる阻害剤は、骨粗しょう症などの骨吸収が関与する障害を治療するのに有用なはずである。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、それを必要とする哺乳動物におけるカテプシン依存性症状又は病態を治療及び／又は予防することができる化合物を提供する。本発明は、一般式
【０００７】
【化２】
2007503401.tif 000003
の化合物を提供する。式中、Ｒ４は、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３と一緒に、水系媒体中で窒素のｐＫａを＜６に減少させるのに十分な電子吸引性を有する非水素置換基であり、
Ｒ１はカテプシンの活性部位のＳ１サブサイトに結合する置換基であり、
Ｒ２はカテプシンの活性部位のＳ２サブサイトに結合する置換基であり、
Ｒ３はカテプシンの活性部位のＳ３サブサイトに結合する置換基である。
【０００８】
より具体的には、本発明は次式の化合物を提供する。
【０００９】
【化３】
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式中、Ｒ１はカテプシンの活性部位のＳ１サブサイトに結合する置換基であり、Ｒ２はカテプシンの活性部位のＳ２サブサイトに結合する置換基であり、Ｒ３はカテプシンの活性部位のＳ３サブサイトに結合する置換基である。
【００１０】
プロテアーゼ阻害剤の活性部位を表す特別な命名法が案出された。参照により本明細書に援用する米国特許第６，３３３，４０２号を参照されたい。基質の切れやすい結合のアミノ側の残基から始まり該結合から遠位方向に、残基はＰ１、Ｐ２、Ｐ３などと命名される。切れやすい結合に続く残基はＰ１’、Ｐ２’、Ｐ３’などと呼ばれる。全体構造がきわめて異なるタンパク質阻害剤の主鎖は、Ｐ３とＰ３’の間の領域がきわめて類似しており、Ｐ２、Ｐ１及びＰ１’が特に高い類似性を有することが見出された。各プロテアーゼ活性部位は、基質又は阻害剤の残基Ｐ１、Ｐ２などの側鎖を受け入れるサブサイトＳ１、Ｓ２などを有し、基質又は阻害剤のＰ１’、Ｐ２’などの側鎖を受け入れるサブサイトＳ１’、Ｓ２’などを有することが一般に認められている。基質に対するプロテアーゼ特異性及びプロテアーゼに対する阻害剤特異性を与えるのは、ＳサブサイトとＰ側鎖の相互作用である。この命名法は、プロテアーゼの非ペプチド阻害剤を参照するために一般化され、プロテアーゼサブサイトＳ１、Ｓ２などと相互作用する非ペプチド阻害剤の領域はそれぞれＰ１、Ｐ２などと称される。
【００１１】
ジペプチドカテプシン阻害剤中のＰ２−Ｐ３アミド結合は、置換エチルアミン部分で置換することができる。Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４基の電子吸引性は一緒になって生理学的ｐＨにおいてＰ２アミンを非塩基性にする。したがって、この断片は、カテプシンのパパインファミリー全体の中で保存されているカテプシングリシンと重要な中性水素結合を形成することができる。
【００１２】
アミドとアニリンのどちらもカルボニル基と水素結合を形成することができるが、代謝的障害を有する。エチルアミンは単独で塩基性であり、生体系においてプロトン化され、標的酵素への結合を抑制する電荷を生じる。電子吸引性が十分なＲ４（又はより具体的にはトリフルオロエチルアミン）を用いると、このアミンはプロトン化されず、カテプシン活性部位において受容体酸素に対して優れた水素結合をもたらす。カテプシンにおいては重要な受容体酸素は活性部位のＳ２サブサイトとＳ３サブサイトの間に位置し、カテプシンＫにおいてはこれはＧｌｙ６６である。この残基は、カテプシンＢ、Ｆ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｌ２、Ｏ、Ｓ、Ｗ及びＺ、ｆａｌｃｉｐａｉｎ、ｆａｌｃｉｐａｉｎ−１並びにｆａｌｃｉｐａｉｎ  ２を含めて、この全パパインタンパク質ファミリー中の保存された残基である。したがって、カテプシンのＳ２サブサイトとＳ３サブサイトを結合する阻害剤断片を連結する非塩基性エチルアミンリンカーを使用することによって、対応するアミドよりも強力な阻害が可能になる。
発明の詳細な説明
本発明は、化学式
【００１３】
【化４】
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を有し、Ｃ、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｐ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩから各々独立に選択される７０個以下の非水素原子を有する組成物に関する。式中、Ｒ４は、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３と一緒に、窒素の塩基度がｐＫａ６未満に低下するような非水素電子吸引性置換基であり、
該組成の分子は、化学式中のＣＨ−ＮＨ領域がＳ２とＳ３の間のカテプシンと有利に相互作用し、Ｒ１がカテプシン活性部位のＳ１と有利に相互作用するがＳ３とは有利に相互作用せず、Ｒ２がカテプシン活性部位のＳ２と有利に相互作用するがＳ３とは有利に相互作用せず、Ｒ３がカテプシン活性部位のＳ３と有利に相互作用するがＳ２及びＳ１とは有利に相互作用しないように、カテプシンと相互作用する。
【００１４】
本発明の一クラスにおいては、カテプシンはカテプシンＢ、Ｆ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｌ２、Ｏ、Ｓ、Ｗ及びＺから選択される。本発明のサブクラスにおいては、カテプシンはカテプシンＫ、Ｌ、Ｓ及びＢから選択される。本発明のさらに別のサブクラスにおいては、カテプシンはカテプシンＬである。本発明のさらに別のサブクラスにおいては、カテプシンはカテプシンＳである。本発明のさらに別のサブクラスにおいては、カテプシンはカテプシンＢである。本発明のさらに別のサブクラスにおいては、カテプシンはカテプシンＦである。
【００１５】
本発明の一クラスにおいては、Ｒ４は、カテプシン活性部位のサブサイトＳ２、Ｓ３及びＳ１とそれぞれ有利に相互作用しない。本発明の別のクラスにおいては、Ｒ４は−ＣＦ３、−ＣＨＦ２、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＦ２Ｒ５及び−ＣＨＦＲ５から選択され、Ｒ５はハロ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、ケト、シアノ、ヘテロシクリル、Ｃ３−８シクロアルキル、ＳＯｍＣ１−３アルキル、ＮＨ２、ＮＯ２又はＯ（Ｃ＝Ｏ）Ｃ１−３アルキルから選択される１から４個の置換基で場合によっては置換されていてもよいＣ１−６アルキル、アリール又はヘテロアリールであり、ｍは０から２の整数である。
【００１６】
本発明の一クラスにおいては、Ｒ２は、以下の３つの距離基準、すなわち、カテプシンのＣα２６の７Å以内であること、Ｃα６８の８．５Å以内であること及びＣα１３４の７Å以内であることを同時に満たす少なくとも１個の炭素又は硫黄原子を有する。本発明の別のクラスにおいては、Ｒ２は非極性領域を含む。本発明の別のクラスにおいては、Ｒ２は親油性領域を含む。
【００１７】
本発明の一クラスにおいては、Ｒ１は、カテプシンのＣα２５の５Å以内の少なくとも１個の炭素原子を有する、カテプシン活性部位のサブサイトＳ１に安定に収まる領域を含む。本発明の別のクラスにおいては、Ｒ１は非免疫原性である。
【００１８】
本発明の一クラスにおいては、Ｒ３は、以下の２つの距離基準、すなわち、カテプシンのＣα６６の５．５Å以内であること及びＣα６０の７Å以内であることを同時に満たす少なくとも１個の炭素又は硫黄原子を有する。本発明の別のクラスにおいては、Ｒ３は非極性領域を含む。本発明の別のクラスにおいては、Ｒ３は親油性領域を含む。
【００１９】
本発明の一クラスにおいては、窒素は６未満のｐＫａを有し、カテプシンのグリシン６６のカテプシンアミドカルボニルと水素結合を形成する。
【００２０】
本発明の一クラスにおいては、本化合物は１０００ダルトン未満の分子量を有する。本発明の一クラスにおいては、本化合物はカテプシンのシステイン２５と共有結合を形成する。本発明の一クラスにおいては、本化合物は、精製酵素アッセイにおいて１０マイクロモル未満のＩＣ５０を有するカテプシンの活性部位に結合する。
【００２１】
本発明の一クラスにおいては、請求項１に示される第二級アミンの窒素のｐＫａは水系媒体中で＜５である。
【００２２】
本明細書では「親油性」という用語は、別個の実体として、水よりも非極性溶媒（例えば、シクロヘキサン）に溶解する化合物を指す。分子に結合した状況における「親油基」という用語は、高い炭化水素含有量を有し、それによって非極性溶媒又は脂質相に対する高い親和性を基に付与する分子領域を指す。親油基は、例えば、炭素が３０個未満のアルキル又はシクロアルキル鎖（好ましくは、ｎ−アルキル）とすることができる。さらに説明すると、親油基としては、脂肪酸、エステル及びアルコール、他の脂質分子など天然及び合成の芳香族及び非芳香族部分に結合したアルキル鎖などが挙げられる。親油性分子の他の例は、アダマンタン、バックミンスターフラーレンなどのかご構造及びベンゼン、ペリレン、フェナントレン、アントラセン、ナフタレン、ピレン、クリセン、ナフタセンなどの芳香族炭化水素である。本明細書の「親油基」という用語に具体的に含まれるものは、アルキル鎖、シクロアルキル鎖、アリール環又はヘテロアリール環の炭素及び結合水素である。本明細書の「親油基」という用語は二価の硫黄も含む。
【００２３】
「実質的に相同」という用語は、アミノ酸配列と関連して使用されるときには、配列が実質的に同一又は類似しており、コンホメーションにおける相同性を生じ、したがって類似の生物活性を生じる配列を指す。この用語は、配列の共通の進化を意味するものではない。一般に、「実質的に相同な」配列は、所望の活性に関与することが知られている任意の領域に少なくともわたって、配列が少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも８０％同一である。最も好ましくは、末端位置以外の５残基以下が異なる。少なくとも上述の領域における配列の相違は、「保存的修飾」の形であることが好ましい。
【００２４】
「保存的修飾」は、（ａ）以下に示すアミノ酸の保存的置換及び（ｂ）末端、ドメイン間の境界、ループ又は（例えば、Ｘ線回折分析又はＮＭＲによってその構造を明瞭に分解することができないことによって示される）比較的高い移動度の他のセグメントにおける、アミノ酸の単一又は複数の挿入又は欠失として定義される。約５個以下のアミノ酸は、末端を除いて、特定の座位に挿入され又は欠失し、その修飾は、活性に重要な結合部位を含むことが知られている領域の外側であることが好ましい。
【００２５】
保存的置換は、以下の５つのグループ、すなわち、（１）小さな脂肪族非極性又はわずかに極性の残基：Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ（Ｐｒｏ、Ｇｌｙ）、（２）負に帯電した極性残基及びそのアミドＡｓｐ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、（３）正に帯電した極性残基：Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、（４）大きい脂肪族非極性残基：Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ（Ｃｙｓ）及び（５）大きい芳香族残基：Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐの１つの中での交換と本明細書では定義される。残基Ｐｒｏ、Ｇｌｙ及びＣｙｓは、コンホメーション上の特別な役割を有するので括弧に入れられている。Ｃｙｓはジスルフィド結合の形成に関与する。Ｇｌｙは鎖に柔軟性を与える。Ｐｒｏは、鎖に剛性を与え、アルファヘリックスを乱す。これらの残基は、ポリペプチドのある領域においては必須となり得るが、他の所では置換可能である。半保存的置換は、上記（１）、（２）及び（３）を含むスーパーグループ（ａ）又は上記（４）及び（５）を含むスーパーグループ（ｂ）に限定される上記グループ（１）から（５）の２つのグループの間の交換であると定義される。
【００２６】
本明細書の「カテプシン」又は「カテプシン類」という用語は、パパインファミリーに属し、すなわち酵素の活性型がパパインと同様に折りたたまれている酵素を指す（ＮＣＢＩ  Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ  Ｄｏｍａｉｎ  Ｄａｔａｂａｓｅ  ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ／ｃｄｄ／ｃｄｄｓｒｖ．ｃｇｉ？ｕｉｄ＝１５０４５中のＣｏｎｓｅｒｖｅｄ  Ｄｏｍａｉｎ  ｓｍａｒｔ００６４５．７）。ヒト、マウス、ウサギ、霊長類、ラット及びプラスモディウム  ファルシパルム（ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）におけるカテプシンのみを本明細書では参照する。具体的に含まれるヒトカテプシンはＢ、Ｆ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｌ２、Ｏ、Ｓ、Ｗ及びＺであり、前記ヒトカテプシンのうち最も類似したものと（これらの酵素の活性型と比較して）８０％を超える配列同一性を示すマウス、ウサギ、霊長類及びラットの酵素も具体的に含まれる。プラスモディウム  ファルシパルム由来のｆａｌｃｉｐａｉｎ、ｆａｌｃｉｐａｉｎ−１及びｆａｌｃｉｐａｉｎ−２、並びにこれらのうち最も類似したものとやはりこれらの酵素の活性型と比較して８０％を超える配列同一性を示すプラスモディウム  ファルシパルム由来の任意の他の酵素も具体的に含まれる。
【００２７】
カテプシン中の特定のアミノ酸残基（例えば、グリシン６６）又はＣα（例えば、Ｃα６６）は、カテプシンＫの活性型に使用される残基番号付けと図１に示される一次配列アラインメントの組み合わせによって本明細書では参照される。この配列アラインメントは、図中で標識されたヒトカテプシン及びｆａｌｃｉｐａｉｎ類に対するタンパク質の活性型の関連部分に対するものである。図において、本明細書で参照され鍵となる残基番号の一部は、並べられた配列の上に垂直に配列されて示されている。参照される他の残基番号は、最も近い番号の残基から数えることによって、又はカテプシンＫ配列を直接参照することによって見つけることができる。番号付けは、ヒトカテプシンＫに対するＳＷＩＳＳＰＲＯＴプライマリアクセッション＃Ｐ４３２３５に基づいて得られ、タンパク質の活性型ＣＨＡＩＮ中の第１の残基（＃Ｐ４３２３５中の残基番号１１５）は本明細書では残基番号１に再設定される。本明細書の配列アラインメントは、他のヒトカテプシン及びｆａｌｃｉｐａｉｎ類に対してカテプシンＫ残基の参照を一般化するために使用される。マウス、ウサギ、霊長類及びラットカテプシン中の残基の表記は、以下に明示される最も相同性の高い配列に対する、デフォルトパラメータを用いた標準一次配列アラインメントによって示される。
【００２８】
【化５】
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2007503401.tif 000009
【００２９】
定義：本明細書の「有利に相互作用する」という用語における「有利に」という用語は、リガンド分子のコンピュータモデルがカテプシンのコンピュータモデルの活性部位に配置されてリガンド：カテプシン錯体を形成し、そのリガンド：カテプシン錯体がＭＭＦＦ９４ｓ（Ｔ．Ａ．  Ｈａｌｇｒｅｎ、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  （１９９９）、２０、ｐｐ．７２０−７２９）などの標準分子力学力場を用いてエネルギー最小化される分子モデリング計算の有利な結果を意味する。活性部位へのリガンドの最初の配置は「ドッキング」とも呼ばれ、本明細書で述べられるようにリガンドの置換基と酵素のサブサイトのリガンド：酵素相互作用が最適になるようになされる。活性部位のコンピュータモデルは、（非タンパク質原子を差し引いた）対象のカテプシンについて利用可能な場合にはＸ線結晶構造（例えば、カテプシンＫのタンパク質データバンク登録１ＭＥＭ）に基づき、Ｘ線結晶構造が利用不可能な場合には、Ｘ線構造が利用可能である最も類似したカテプシンに基づく相同性によって組み立てられた構造を使用することができ、又はＸ線構造が利用可能である最も類似したカテプシンを単にそのまま使用することができる。エネルギー最小化の始めにおいては、どのタンパク質原子もリガンドを収容するように調節されないが、エネルギー最小化中には、リガンドの６Å以内に少なくとも１個の原子を有するタンパク質側鎖全体はエネルギーを最小化しつつ移動することができる。酵素の主鎖原子は、エネルギー最小化中に移動することはできない。連続誘電性水溶媒を使用することができるが、その他の点ではＳｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒ  Ｉｎｃ．のソフトウエアプログラムＭａｃｒｏＭｏｄｅｌにおけるそれと類似したデフォルトパラメータ及び標準分子力学エネルギー最小化の挙動が想定される。「モデリング計算の有利な結果」とは、エネルギー最小化が終了した後に、リガンドと活性部位の有害な立体的相互作用が存在せず、リガンドと活性部位のエネルギー安定化水素結合及び親油性相互作用が存在することを意味する。リガンドがシステイン−２５の活性部位硫黄と共有結合を形成すると考えられる場合には、エネルギー最小化は、計算に供されたモデルのリガンド：カテプシン錯体中の共有結合を含むことができる。本明細書において特許請求されるリガンドとカテプシンの相互作用は、かかるエネルギー最小化から得られるリガンド：カテプシン錯体の形状に基づく。
【００３０】
本発明の一実施態様においては、リガンドの置換基とＳ２の有利な相互作用には、以下の３つの距離、すなわち、カテプシンのＣα２６の７Å以内であること、Ｃα６８の８．５Å以内であること及びＣα１３４の７Å以内であることを同時に満たす置換基の少なくとも１個の炭素又は二価の硫黄原子を有する必要がある。本発明の別の実施態様においては、リガンドの置換基とＳ２の有利な相互作用には、残基６７、６８、１３４のうちの２個の残基の原子の５．５Å以内にある置換基の親油基の少なくとも１個の原子を有する必要がある。カテプシンＢのみに関係する本発明の別の実施態様においては、リガンドの置換基とＳ２の有利な相互作用には、置換基とカテプシンＢのグルタミン酸２０９の水素結合を有する必要がある。
【００３１】
本発明の一実施態様においては、リガンドの置換基とＳ３の有利な相互作用には、以下の２つの距離、すなわち、カテプシンのＣα６６の５．５Å以内であること及びＣα６０の７Å以内であることを同時に満たす置換基の少なくとも１個の炭素又は二価の硫黄原子を有する必要がある。本発明の別の実施態様においては、リガンドの置換基とＳ３の有利な相互作用には、残基６０又は６１のどちらかの残基のＣα６６及び原子の５．５Å以内にある置換基の親油基の少なくとも１個の原子を有する必要がある。本発明の別の実施態様においては、リガンドの置換基とＳ３の有利な相互作用には、残基６０又は６１のどちらかの５．５Å以内にある置換基の親油基の少なくとも１個の原子を有する必要がある。
【００３２】
本発明の一実施態様においては、リガンドの置換基とＳ１の有利な相互作用には、Ｃα２５の５Å以内にある置換基の少なくとも１個の炭素原子を有する必要がある。本発明の別の実施態様においては、リガンドの置換基とＳ１の有利な相互作用には、残基２５の活性部位システイン硫黄とリガンドの求電子性炭素、好ましくはカルボニル又はニトリル炭素との共有結合を有する必要がある。
【００３３】
本発明の一実施態様においては、リガンドの化学式中のＣＨ−ＮＨ領域と、Ｓ２とＳ３の間のカテプシンとの有利な相互作用は、Ｇｌｙ６６のペプチド酸素の４Å以内にある化学式のＮ及びＣα６６の５．５Å以内にある化学式のＣ（Ｒ４と直接結合しているＣのみを指す）を有する必要がある。本発明の別の実施態様においては、リガンドの化学式中のＣＨ−ＮＨ領域と、Ｓ２とＳ３の間のカテプシンとの有利な相互作用には、残基６６のアミドＯに水素結合する化学式のＮＨを有する必要がある。
【００３４】
本明細書では「アルキル」は、別段の記載がないかぎり１個から１０個の炭素原子を有する分枝及び直鎖飽和脂肪族炭化水素基を含むものとする。例えば、「Ｃ１−Ｃ１０アルキル」におけるＣ１−Ｃ１０は、線状、分枝又は環式配列の１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の炭素を有する基を含むと定義される。例えば、「Ｃ１−Ｃ１０アルキル」としてはメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシルなどが具体的に挙げられる。
【００３５】
「アルコキシ」又は「アルキルオキシ」は、酸素架橋によって結合した、別段の記載がないかぎり上で定義されたアルキル基である。
【００３６】
「シクロアルキル」又は「炭素環」という用語は、別段の記載がないかぎり３個から８個の総炭素原子のアルカン環、又はこの範囲の任意の数のアルカン環（すなわち、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル又はシクロオクチル）を意味するものとする。
【００３７】
本明細書では「アリール」は、少なくとも１個の環が芳香族であり、各環が最高１２原子の安定な単環式又は二環式炭素環を意味するものとする。かかるアリール成分の例としては、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル、フェナントリル、アントリル又はアセナフチルが挙げられる。アリール置換基が二環式であり１個の環が非芳香族である場合には、結合は芳香環を介すると理解される。
【００３８】
本明細書では「ヘテロアリール」という用語は、少なくとも１個の環が芳香族でありＯ、Ｎ及びＳからなる群から選択される１個から４個のヘテロ原子を含む、各環が最高１０原子の安定な単環式、二環式又は三環式環を表す。この定義の範囲内にあるヘテロアリール基としては、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンズオキサゾリル、カルバゾリル、カルボリニル、シンノリニル、フラニル、インドリニル、インドリル、インドラジニル（ｉｎｄｏｌａｚｉｎｙｌ）、インダゾリル、イソベンゾフラニル、イソインドリル、イソキノリル、イソチアゾリル、イソキサゾリル、ナフタピリジニル（ｎａｐｈｔｈｐｙｒｉｄｉｎｙｌ）、オキサジアゾリル、オキサゾリル、オキサゾリン、イソキサゾリン、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリドピリジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリル、キノキサリニル、テトラゾリル、テトラゾロピリジル（ｔｅｔｒａｚｏｌｏｐｙｒｉｄｙｌ）、チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル、トリアゾリル、ジヒドロベンゾイミダゾリル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾチオフェニル、ジヒドロベンズオキサゾリル、ジヒドロインドリル、ジヒドロキノリニル、メチレンジオキシベンゼン、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、キノリニル、イソキノリニル、オキサゾリル、テトラヒドロキノリンなどが挙げられるが、これらだけに限定されない。ヘテロアリール置換基が二環式であり、１個の環が非芳香族であり又はヘテロ原子を含まない場合には、結合はそれぞれ芳香環又はヘテロ原子を含む環を介すると理解される。ヘテロアリールが窒素原子を含む場合には、対応するそのＮ−酸化物もこの定義に包含されると理解される。
【００３９】
本明細書では「ハロ」又は「ハロゲン」は、クロロ、フルオロ、ブロモ及びヨードを含むことを当業者は理解されたい。「ケト」という用語はカルボニル（Ｃ＝Ｏ）を意味する。本明細書では「アルコキシ」という用語は、分子の残部に酸素原子を介して結合したアルキル部分（アルキルは上で定義されている）を意味する。アルコキシの例としては、メトキシ、エトキシなどが挙げられる。
【００４０】
「ヒドロキシアルキル」という用語は、２個のヒドロキシ基が存在する場合にはそれらは同じ炭素原子上にないことを前提に、１個又は２個のヒドロキシ基で置換された、１個から６個の炭素原子の一価の線状炭化水素基又は３個から６個の炭素の一価の分枝炭化水素基を意味する。代表例としては、ヒドロキシメチル、２−ヒドロキシエチル、２−ヒドロキシプロピル、３−ヒドロキシプロピルなどが挙げられるが、これらだけに限定されない。
【００４１】
本明細書では「複素環」又は「ヘテロシクリル」という用語は、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２からなる群から選択される１個から４個のヘテロ原子を含む、別段の記載がないかぎり５員環から１０員環非芳香環を意味するものとし、二環式基を含む。したがって、「ヘテロシクリル」としては、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピペリジニル、テトラヒドロチオフェニルなどが挙げられるが、これらだけに限定されない。複素環が窒素を含む場合には、対応するそのＮ−酸化物もこの定義に包含されると理解される。
【００４２】
本発明は、式Ｉの化合物のＮ−酸化物誘導体及び保護誘導体も含む。例えば、式Ｉの化合物が酸化可能な窒素原子を含むときには、当分野で周知の方法によってこの窒素原子をＮ−酸化物に転化することができる。また、式Ｉの化合物がヒドロキシ、カルボキシ、チオールなどの基又は窒素原子を含む任意の基を含むときには、これらの基を適切な保護基で保護することができる。適切な保護基の包括的なリストは、その開示を参照によりその全体を本明細書に援用するＴ．Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．  １９８１に見出すことができる。式Ｉの化合物の保護誘導体は、当分野で周知の方法によって調製することができる。
【００４３】
上述の化合物と薬剤として許容される担体とを含む薬剤組成物も本発明の範囲に含まれる。本発明は、薬剤として許容される担体と本願に具体的に開示される化合物のいずれかとを含む薬剤組成物も包含すると企図される。本発明のこれらの側面及び他の側面は、本明細書に含まれる教示から明らかである。
【００４４】
本発明の化合物の薬剤として許容される塩は、形成された無機酸又は有機酸として本発明の化合物の従来の無毒の塩を含む。例えば、従来の無毒の塩としては、塩化水素酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸から誘導される塩、及び酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸、トリフルオロ酢酸などの有機酸から調製される塩が挙げられる。上記薬剤として許容される塩及び他の典型的な薬剤として許容される塩の調製は、参照により本明細書に援用するＢｅｒｇ等、”Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ”、Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．、１９７７：６６：１−１９にさらに詳細に記述されている。本発明の化合物の薬剤として許容される塩は、塩基性部分又は酸性部分を含む本発明の化合物から従来の化学方法によって合成することができる。一般に、塩基化合物の塩は、イオン交換クロマトグラフィーによって、或いは遊離塩基を化学量論的量又は過剰の所望の塩形成性無機酸又は有機酸と適切な溶媒又は溶媒の様々な組み合わせの中で反応させることによって、調製される。同様に、酸性化合物の塩は、適切な無機塩基又は有機塩基との反応によって形成される。
【００４５】
本発明の化合物は、カテプシンの阻害剤であり、したがって、哺乳動物、好ましくはヒトにおけるカテプシン依存性疾患又は症状の治療又は予防に有用である。具体的には、本発明の化合物は、カテプシンＫの阻害剤であり、したがって、哺乳動物、好ましくはヒトにおけるカテプシンＫ依存性疾患又は症状の治療又は予防に有用である。
【００４６】
「カテプシン依存性疾患又は症状」とは、１種類以上のカテプシンの活性に依存する病態を指す。「カテプシンＫ依存性疾患又は症状」とは、カテプシンＫの活性に依存する病態を指す。カテプシンＫ活性に関連する疾患としては、骨粗しょう症、グルココルチコイドによって誘発される骨粗しょう症、パジェット病、異常増加した骨代謝回転、歯周病、歯の損失、骨折、リウマチ様関節炎、骨関節炎、補綴周辺の骨溶解、骨形成不全症、肥満、アテローム性動脈硬化症、慢性閉塞性肺疾患、若年発症糖尿病、多発性硬化症、尋常性天ぽうそう、グレーブス病、重症筋無力症、全身性エリテマトーデス、リウマチ様関節炎及び橋本甲状腺腫、喘息、同種免疫応答、寄生虫感染、癌、転移性骨疾患、悪性高カルシウム血症、多発性骨髄腫などが挙げられる。特許請求の化合物を用いてかかる症状を治療する際には、必要な治療量は、具体的な疾患に応じて変わり、当業者は容易に確認することができる。治療と予防の両方が本発明の範囲によって企図されるが、これらの症状の治療は好ましい用途である。
【００４７】
本発明の実施態様は、上記の化合物のいずれか又は薬剤組成物のいずれかの治療有効量を哺乳動物に投与する段階を含む、それを必要とする哺乳動物においてカテプシン活性を阻害する方法である。
【００４８】
実施態様の一クラスは、カテプシン活性がカテプシンＫ活性である方法である。
【００４９】
本発明の別の実施態様は、上記の化合物のいずれか又は薬剤組成物のいずれかの治療有効量を哺乳動物に投与する段階を含む、それを必要とする哺乳動物においてカテプシン依存性症状を治療又は予防する方法である。
【００５０】
実施態様の一クラスは、カテプシン活性がカテプシンＫ活性である方法である。
【００５１】
本発明の別の実施態様は、上記の化合物のいずれか又は薬剤組成物のいずれかの治療有効量を哺乳動物に投与する段階を含む、それを必要とする哺乳動物において骨量の減少を阻止する方法である。本発明の別の実施態様は、上記の化合物のいずれか又は薬剤組成物のいずれかの治療有効量を哺乳動物に投与する段階を含む、それを必要とする哺乳動物において骨量の減少を抑制する方法である。骨吸収の阻害におけるカテプシンＫ阻害剤の有用性は文献によって知られている。Ｓｔｒｏｕｐ  Ｇ．Ｂ．等、”Ｐｏｔｅｎｔ  ａｎｄ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｃａｔｈｅｐｓｉｎ  Ｋ  ｌｅａｄｓ  ｔｏ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｂｏｎｅ  ｒｅｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｉｎ  ａ  ｎｏｎｈｕｍａｎ  ｐｒｉｍａｔｅ．”  Ｊ．  Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ．  Ｒｅｓ．、１６：１７３９−１７４６；２００１及びＶｏｔｔａ，  Ｂ．Ｊ．等、”Ｐｅｐｔｉｄｅ  ａｌｄｅｈｙｄｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｃａｔｈｅｐｓｉｎ  Ｋ  ｉｎｈｉｂｉｔ  ｂｏｎｅ  ｒｅｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｂｏｔｈ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ａｎｄ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ．”  Ｊ．  Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ．  Ｒｅｓ．  １２：１３９６−１４０６；１９９７を参照されたい。
【００５２】
本発明の別の実施態様は、上記の化合物のいずれか又は薬剤組成物のいずれかの治療有効量を哺乳動物に投与する段階を含む、それを必要とする哺乳動物において骨粗しょう症を治療又は予防する方法である。骨粗しょうの治療又は予防におけるカテプシンＫ阻害剤の有用性は文献によって知られている。Ｓａｆｔｉｇ  Ｐ．等、”Ｉｍｐａｉｒｅｄ  ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔ  ｂｏｎｅ  ｒｅｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｌｅａｄｓ  ｔｏ  ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ  ｉｎ  ｃａｔｈｅｐｓｉｎ  Ｋ−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ  ｍｉｃｅ．”  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ９５：１３４５３−１３４５８；１９９８を参照されたい。
【００５３】
本発明の別の実施態様は、上記の化合物のいずれか又は薬剤組成物のいずれかの治療有効量を哺乳動物に投与する段階を含む、それを必要とする哺乳動物においてリウマチ様関節炎を治療又は予防する方法である。関節周囲の骨の進行性破壊がリウマチ様関節炎（ＲＡ）患者における関節機能不全及び能力障害の主原因であることは文献によって知られている。Ｇｏｌｄｒｉｎｇ  ＳＲ、”Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｏｆ  ｂｏｎｅ  ｅｒｏｓｉｏｎｓ  ｉｎ  ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ”．  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．  １４：４０６−１０、２００２を参照されたい。ＲＡ患者から得られた関節組織の分析によって、カテプシンＫ陽性破骨細胞が、リウマチ様の滑膜損傷に関連する病巣の骨吸収を媒介する細胞タイプである証拠が得られた。Ｈｏｕ，Ｗ−Ｓ等、”Ｃｏｍｐａｒｉｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｃａｔｈｅｐｓｉｎ  Ｋ  ａｎｄ  Ｓ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｗｉｔｈｉｎ  ｔｈｅ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｎｄ  Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｃ  Ｓｙｎｏｖｉｕｍ”、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  ４６：６６３−７４、２００２を参照されたい。また、全般的な骨量の減少は、重篤なＲＡに付随する罹患（ｍｏｒｂｉｌｉｔｙ）の主原因である。股関節部骨折及び脊髄骨折の頻度は、慢性ＲＡ患者においてかなり増加する。Ｇｏｕｌｄ等、”Ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔｉｃ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｉｓ  ｔｈｅ  ｐｒｉｎｃｉｐａｌ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｌｅａｄｉｎｇ  ｔｏ  ｓｅｃｏｎｄａｒｙ  ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ  ｉｎ  ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ”．  Ｊ．  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．  ２５：１２８２−９、１９９８を参照されたい。関節下骨における再吸収の治療又は予防及び全般的な骨量の減少の治療又は予防におけるカテプシンＫ阻害剤の有用性は、リウマチ様関節炎の進行に対する薬理学的介入の合理的手法である。
【００５４】
本発明の別の実施態様は、上記の化合物のいずれか又は薬剤組成物のいずれかの治療有効量を哺乳動物に投与する段階を含む、それを必要とする哺乳動物において骨関節炎の進行を治療又は予防する方法である。骨関節炎（ＯＡ）は、関節軟骨表面の侵食、関節周囲の軟骨内骨化／骨増殖症並びに軟骨下骨硬化症及び嚢胞形成を含めて、関節の明確な変化を伴うことが文献によって知られている。Ｏｅｔｔｍｅｉｅｒ  Ｒ  ＆  Ａｂｅｎｄｒｏｔｈ，Ｋ、”Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｄ  ｂｏｎｅ：  ｏｓｔｅｏｌｏｇｉｃ  ｔｙｐｅｓ  ｏｆ  ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｈｉｐ”、Ｓｋｅｌｅｔａｌ  Ｒａｄｉｏｌ．  １８：１６５−７４、１９８９を参照されたい。最近、軟骨下骨硬化症がＯＡの惹起及び進行に寄与している可能性が示唆された。関節が繰り返しの衝撃荷重に反応して軟骨下骨が硬化すると、関節によって力を減衰及び分散させることが困難になり、関節は関節軟骨表面全体にわたってより大きな機械的応力にさらされる。これは、軟骨の摩耗及び線維化を加速する。Ｒａｄｉｎ，ＥＬ及びＲｏｓｅ  ＲＭ、”Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｓｕｂｃｈｏｎｄｒａｌ  ｂｏｎｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｒｔｉｌａｇｅ  ｄａｍａｇｅ．”  Ｃｌｉｎ．  Ｏｒｔｈｏｐ．  ２１３：３４−４０、１９８６を参照されたい。カテプシンＫ阻害剤などの抗吸収剤による過剰な関節下骨吸収の阻害によって、軟骨下骨代謝回転が阻害され、したがってＯＡ進行に有利な影響を及ぼすことができる。上記仮説に加えて、最近、ＯＡ患者から得られた滑膜及び関節軟骨試料から、滑膜線維芽細胞、マクロファージ様細胞及び軟骨細胞においてカテプシンＫタンパク質が発現することが確認された。Ｈｏｕ，  Ｗ−Ｓ等、”Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  Ｃａｔｈｅｐｓｉｎ  Ｋ  ａｎｄ  Ｓ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｗｉｔｈｉｎ  ｔｈｅ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｎｄ  Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｃ  Ｓｙｎｏｖｉｕｍ”、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  ４６：６６３−７４、２００２及びＤｏｄｄ  ＲＡ等、”Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｃａｔｈｅｐｓｉｎ  Ｋ  ｍｅｓｓｅｎｇｅｒ  ＲＮＡ  ｉｎ  ｇｉａｎｔ  ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｃ  ｓｙｎｏｖｉａｌ  ｔｉｓｓｕｅｓ”．  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  ４２：１５８８−９３、１９９９及びＫｏｎｔｔｉｎｅｎ等、”Ａｃｉｄｉｃ  ｃｙｓｔｅｉｎｅ  ｅｎｄｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  ｃａｔｈｅｐｓｉｎ  Ｋ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｓｕｐｅｒｆｉｃｉａｌ  ａｒｔｉｃｕｌａｒ  ｈｙａｌｉｎｅ  ｃａｒｔｉｌａｇｅ  ｉｎ  ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ”、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  ４６：９５３−６０、２００２を参照されたい。
したがって、これらの最近の研究によって、骨関節炎の進行に伴う関節軟骨中のＩＩ型コラーゲンの破壊におけるカテプシンＫの役割が示された。したがって、本発明において記述される骨関節炎の治療又は予防におけるカテプシンＫ阻害剤の有用性は、２つの異なる機序を含む。１つは、破骨細胞によって進められる軟骨下骨代謝回転の阻害であり、２つめは、ＯＡ患者の滑膜及び軟骨におけるＩＩ型コラーゲン低下の直接阻害である。
【００５５】
本発明の別の実施態様は、上記の化合物のいずれか又は薬剤組成物のいずれかの治療有効量を哺乳動物に投与する段階を含む、それを必要とする哺乳動物において癌を治療する方法である。カテプシンＫはヒト乳癌において発現されることが文献によって知られている。Ｌｉｔｔｌｅｗｏｏｄ−Ｅｖａｎｓ  ＡＪ等、”Ｔｈｅ  ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅａｓｅ  ｃａｔｈｅｐｓｉｎ  Ｋ  ｉｓ  ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．”  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ５７（２３）：５３８６−９０、Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  １，１９９７を参照されたい。
【００５６】
本発明の例は、それを必要とする哺乳動物における骨粗しょう症の治療及び／又は予防用医薬品の調製における上記化合物のいずれかの使用である。本発明のさらに別の例は、カテプシン機能に関係する骨量の減少、骨吸収、骨折、転移性骨疾患及び／又は障害の治療及び／又は予防用医薬品の調製における上記化合物のいずれかの使用である。
【００５７】
本発明の化合物は、標準の製薬業務に従って薬剤組成物中で単体で或いは好ましくは薬剤として許容される担体又は希釈剤と組み合わせて、ミョウバンなどの公知のアジュバントと場合によっては組み合わせて、哺乳動物、好ましくはヒトに投与することができる。本化合物は、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下、直腸及び局所投与経路を含めて、経口又は非経口投与することができる。
【００５８】
経口用錠剤の場合においては、一般に使用される担体としてはラクトース、コーンスターチなどが挙げられ、ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤が一般に添加される。カプセル剤の経口投与の場合には、有用な希釈剤としてラクトース、乾燥コーンスターチなどが挙げられる。本発明による治療化合物の経口使用の場合には、選択された化合物は、例えば、錠剤又はカプセル剤の形で、或いは水溶液又は懸濁液として投与することができる。錠剤又はカプセル剤の形の経口投与の場合には、活性薬物成分は、ラクトース、デンプン、スクロース、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、マンニトール、ソルビトールなどの薬剤として許容される無毒の経口不活性担体と組み合わせることができる。液体剤形の経口投与の場合には、経口薬物成分は、エタノール、グリセリン、水などの任意の薬剤として許容される無毒の経口不活性担体と組み合わせることができる。さらに、所望又は必要であれば、適切な結合剤、潤滑剤、崩壊剤及び着色剤を混合物に加えることもできる。適切な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、グルコース、ベータ−ラクトースなどの天然の糖、トウモロコシ甘味料、アラビアゴム、トラガカントなどの天然及び合成ゴム、又はアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどが挙げられる。これらの剤形に使用される潤滑剤としては、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。崩壊剤としては、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが挙げられるが、これらだけに限定されない。水性懸濁液が経口用に必要であるときには、活性成分は乳化剤及び懸濁剤と混合される。必要に応じて、ある種の甘味剤及び／又は香味料を添加することができる。筋肉内、腹腔内、皮下及び静脈内用途の場合には、活性成分の無菌溶液が通常調製され、溶液のｐＨは適切に調節及び緩衝されるべきである。静脈内用途の場合には、溶質の全濃度は、調製物を等張にするために制御されるべきである。
【００５９】
本発明の化合物は、小さな単層小胞、大きい単層小胞、多層小胞などのリポソーム送達システムの形で投与することもできる。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミン、ホスファチジルコリンなどの様々なリン脂質から形成することができる。
【００６０】
本発明の化合物は、化合物分子がカップリングする個々の担体としてモノクローナル抗体を使用して送達することもできる。本発明の化合物は、標的となり得る薬物担体として可溶性ポリマーとカップリングすることもできる。かかるポリマーとしては、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシ−エチルアスパルトアミド−フェノール、ポリエチレンオキシド−パルミトイル残基で置換されたポリリジンなどが挙げられる。また、本発明の化合物は、薬物を制御放出するのに有用な生分解性ポリマーの１クラス、例えば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸とポリグリコール酸のコポリマー、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート及びヒドロゲルの架橋又は両親媒性ブロック共重合体とカップリングすることができる。
【００６１】
本発明の化合物は、骨粗しょう症、グルココルチコイドによって誘発される骨粗しょう症、パジェット病、異常増加した骨代謝回転、歯周病、歯の損失、骨折、リウマチ様関節炎、骨関節炎、補綴周辺の骨溶解、骨形成不全症、肥満、アテローム性動脈硬化症、慢性閉塞性肺疾患、若年発症糖尿病、多発性硬化症、尋常性天ぽうそう、グレーブス病、重症筋無力症、全身性エリテマトーデス、リウマチ様関節炎及び橋本甲状腺腫、喘息、同種免疫応答、寄生虫感染、癌、転移性骨疾患、悪性高カルシウム血症、多発性骨髄腫を治療又は予防するのに有用な公知の薬剤と組み合わせても有用である。今回開示される化合物と骨粗しょう症又は他の骨障害を治療又は予防するのに有用な他の薬剤との組み合わせは本発明の範囲内にある。当業者は、関係する薬物及び疾患の個別の特性に基づいて薬剤のどの組み合わせが有用であるかを識別することができるはずである。かかる薬剤としては、有機ビスホスホナート、エストロゲン受容体モジュレーター、アンドロゲン受容体モジュレーター、破骨細胞プロトンＡＴＰａｓｅ阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、インテグリン受容体拮抗物質、ＰＴＨなどの骨芽細胞同化剤、薬剤として許容されるそれらの塩及び混合物などが挙げられる。好ましい組み合わせは、本発明の化合物と有機ビスホスホナートである。別の好ましい組み合わせは、本発明の化合物とエストロゲン受容体モジュレーターである。別の好ましい組み合わせは、本発明の化合物とアンドロゲン受容体モジュレーターである。別の好ましい組み合わせは、本発明の化合物と骨芽細胞同化剤である。
【００６２】
「有機ビスホスホナート」としては、化学式
【００６３】
【化６】
2007503401.tif 000010
の化合物などが挙げられるが、これだけに限定されない。式中、ｎは０から７の整数であり、Ａ及びＸは、ｎが０であるときにＡとＸの両方がＨ及びＯＨから選択されないように、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ２、ＳＨ、フェニル、Ｃ１−Ｃ３０アルキル、Ｃ３−Ｃ３０分枝又はシクロアルキル、２個又は３個のＮを含む二環構造体、Ｃ１−Ｃ３０置換アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルキル置換ＮＨ２、Ｃ３−Ｃ１０分枝又はシクロアルキル置換ＮＨ２、Ｃ１−Ｃ１０ジアルキル置換ＮＨ２、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル置換チオ、チオフェニル、ハロフェニルチオ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル置換フェニル、ピリジル、フラニル、ピロリジニル、イミダゾリル、イミダゾピリジニル及びベンジルからなる群から独立に選択され、或いはＡとＸはそれらが結合している炭素原子又は原子と一緒にＣ３−Ｃ１０環を形成する。
【００６４】
上記化学式においては、アルキル基は、化学式に対して十分な原子が選択されるという条件で直鎖、分枝又は環式とすることができる。Ｃ１−Ｃ３０置換アルキルは、多種多様な置換基を含むことができ、フェニル、ピリジル、フラニル、ピロリジニル、イミダゾニル（ｉｍｉｄａｚｏｎｙｌ）、ＮＨ２、Ｃ１−Ｃ１０アルキル又はジアルキル置換ＮＨ２、ＯＨ、ＳＨ及びＣ１−Ｃ１０アルコキシからなる群から選択されるものを含む非限定的な例を含むことができる。
【００６５】
上記化学式は、Ａ及び／又はＸ置換基に対する複合炭素環式、芳香族及びヘテロ原子構造も包含するものとし、その非限定的な例としてはナフチル、キノリル、イソキノリル、アダマンチル及びクロロフェニルチオが挙げられる。
【００６６】
ビスホスホナートの薬剤として許容される塩及び誘導体も本発明において有用である。塩の非限定的な例としては、アルカリ金属、アルカリ金属、アンモニウム及びモノ、ジ、トリ又はテトラＣ１−Ｃ３０アルキル置換アンモニウムからなる群から選択されるものが挙げられる。好ましい塩は、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム及びアンモニウム塩からなる群から選択されるものである。より好ましいのはナトリウム塩である。誘導体の非限定的な例としては、エステル、水和物及びアミドからなる群から選択されるものが挙げられる。
【００６７】
本発明の治療薬に関して本明細書では「ビスホスホナート」及び「ビスホスホナート類」という用語は、ジホスホナート、ビホスホン酸及びジホスホン酸並びにこれらの材料の塩及び誘導体も包含することに留意されたい。ビスホスホナート又はビスホスホナート類に関する具体的命名法の使用は、特に示さない限り本発明の範囲を限定するものではない。当業者によって現在使用されている命名法が複雑なので、本発明におけるビスホスホナート化合物の特定の重量又は百分率の表記は、本明細書において特に示さない限り酸活性重量基準である。例えば、「アレンドロネート、薬剤として許容されるその塩及びその混合物からなる群から選択される骨吸収阻害ビスホスホナート約５ｍｇ（アレンドロン酸活性重量基準）」という句は、選択されたビスホスホナート化合物の量がアレンドロン酸５ｍｇに基づいて計算されたことを意味する。
【００６８】
本発明に有用なビスホスホナートの非限定的な例としては、アレンドロン酸としても知られるアレンドロネート、アレンドロネートナトリウム、アレンドロネート一ナトリウム三水和物又は４−アミノ−１−ヒドロキシブチリデン−１，１−ビスホスホン酸一ナトリウム三水和物が挙げられる。
アレンドロネートは、１９９０年５月１日に発行されたＫｉｅｃｚｙｋｏｗｓｋｉ他、米国特許第４，９２２，００７号、１９９１年５月２８日に発行されたＫｉｅｃｚｙｋｏｗｓｋｉ他、同５，０１９，６５１号、１９９６年４月２３日に発行されたＤａｕｅｒ他、同５，５１０，５１７号、１９９７年７月１５日に発行されたＤａｕｅｒ他、同５，６４８，４９１号に記載されている。これらすべてを参照によりその全体を本明細書に援用する。
参照によりその全体を本明細書に援用する、１９９０年１１月１３日に発行されたＩｓｏｍｕｒａ他、米国特許第４，９７０，３３５号に記載のシクロヘプチルアミノメチレン−１，１−ビスホスホン酸、ＹＭ  １７５、山之内（以前はシマドロネートとして知られていたインカドロネート）。
１，１−ジクロロメチレン−１，１−ジホスホン酸（クロドロン酸）及び二ナトリウム塩（クロドロネート、Ｐｒｏｃｔｅｒ  ａｎｄ  Ｇａｍｂｌｅ）は、ベルギー特許第６７２，２０５号（１９６６）及びＪ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ  ３２、４１１１（１９６７）に記載されている。この両方を参照によりその全体を本明細書に援用する。
１−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジニル）−プロピリデン−１，１−ビスホスホン酸（ＥＢ−１０５３）。
１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸（エチドロン酸）。ＢＭ−２１０９５５としても知られる１−ヒドロキシ−３−（Ｎ−メチル−Ｎ−ペンチルアミノ）プロピリデン−１，１−ビスホスホン酸、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ−Ｍａｎｎｈｅｉｍ（イバンドロネート）は、参照によりその全体を本明細書に援用する、１９９０年５月２２日に発行された米国特許第４，９２７，８１４号に記載されている。
１−ヒドロキシ−２−イミダゾ−（１，２−ａ）ピリジン−３−イエチリデン（ミノドロネート）。
６−アミノ−１−ヒドロキシヘキシリデン−１，１−ビスホスホン酸（ネリドロネート（ｎｅｒｉｄｒｏｎａｔｅ））。
３−（ジメチルアミノ）−１−ヒドロキシプロピリデン−１，１−ビスホスホン酸（オルパドロネート（ｏｌｐａｄｒｏｎａｔｅ））。
３−アミノ−１−ヒドロキシプロピリデン−１，１−ビスホスホン酸（パミドロネート）。
［２−（２−ピリジニル）エチリデン］−１，１−ビスホスホン酸（ピリドロネート（ｐｉｒｉｄｒｏｎａｔｅ））は、参照によりその全体を本明細書に援用する米国特許第４，７６１，４０６号に記載されている。
１−ヒドロキシ−２−（３−ピリジニル）−エチリデン−１，１−ビスホスホン酸（リセドロネート）。
参照によりその全体を本明細書に援用する米国特許第４，８７６，２４８号に記載の（４−クロロフェニル）チオメタン−１，１−ジスホスホン酸（チルドロネート）。
１−ヒドロキシ−２−（１Ｈ−イミダゾル−１−イル）エチリデン−１，１−ビスホスホン酸（ゾレドロネート）。
【００６９】
ビスホスホナートの非限定的な例としては、アレンドロネート、シマドロネート、クロドロネート、エチドロネート、イバンドロネート、インカドロネート、ミノドロネート、ネリドロネート、オルパドロネート、パミドロネート、ピリドロネート、リセドロネート、チルドロネート及びゾレンドロネート（ｚｏｌｅｎｄｒｏｎａｔｅ）並びに薬剤として許容されるそれらの塩及びエステルが挙げられる。特に好ましいビスホスホナートは、アレンドロネート、特にアレンドロン酸のナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム又はアンモニウム塩である。好ましいビスホスホナートの例は、アレンドロン酸のナトリウム塩、特にアレンドロン酸の水和ナトリウム塩である。この塩は、水の整数モル又は水の非整数モルで水和することができる。好ましいビスホスホナートのさらなる例は、アレンドロン酸の水和ナトリウム塩、特に水和塩がアレンドロネート一ナトリウム三水和物であるときである。
【００７０】
ビスホスホナート活性成分（ａｃｔｉｖｅ）の２個以上の混合物を利用できることがわかる。
【００７１】
有機ビスホスホナートの正確な投与量は、投薬スケジュール、選択された特定のビスホスホナート、年齢、サイズ、性別及び哺乳動物又はヒトの状態、治療すべき障害の性質及び重症度、並びに他の関連する医学的要因及び物理的要因に応じて変わる。したがって、薬剤として有効な正確な量は、前もって特定することができず、治療奉仕者又は臨床家が容易に決定することができる。適切な量は、動物モデルからの定常的な実験法及びヒト臨床試験によって決定することができる。一般に、ビスホスホナートの適切な量は骨吸収阻害効果が得られるように選択され、すなわちビスホスホナートの骨吸収阻害量が投与される。ヒトの場合、ビスホスホナートの有効な経口用量は、一般に、約１．５から約６０００μｇ／ｋｇ体重、好ましくは約１０から約２０００μｇ／ｋｇ体重である。アレンドロネート一ナトリウム三水和物の場合、投与される通常のヒト用量は、一般に、約２ｍｇ／日から約４０ｍｇ／日、好ましくは約５ｍｇ／日から約４０ｍｇ／日である。米国においては、アレンドロネート一ナトリウム三水和物の現在承認されている投与量は、骨粗しょう症予防用に５ｍｇ／日、骨粗しょう症治療用に１０ｍｇ／日、及びパジェット病治療用に４０ｍｇ／日である。
【００７２】
別の投薬計画においては、ビスホスホナートは毎日以外の間隔、例えば週１回の投薬、週２回の投薬、隔週の投薬及び月２回の投薬で投与することができる。週１回の投薬計画では、アレンドロネート一ナトリウム三水和物は３５ｍｇ／週又は７０ｍｇ／週の投与量で投与される。
【００７３】
「選択的エストロゲン受容体モジュレーター」とは、機序にかかわらず受容体へのエストロゲンの結合を妨害又は阻害する化合物を指す。エストロゲン受容体モジュレーターの例としては、エストロゲン、プロゲストーゲン、エストラジオール、ドロロキシフェン、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、ＴＳＥ−４２４、タモキシフェン、イドキシフェン、ＬＹ３５３３８１、ＬＹ１１７０８１、トレミフェン、フルベストラント、４−［７−（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ−４−メチル−２−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３−イル］−フェニル−２，２−ジメチルプロパノアート、４，４’−ジヒドロキシベンゾフェノン−２，４−ジニトロフェニル−ヒドラゾン及びＳＨ６４６が挙げられるが、これらだけに限定されない。
【００７４】
「エストロゲン受容体ベータモジュレーター」は、エストロゲン受容体ベータを選択的にアゴナイズ（ａｇｏｎｉｚｅ）又は拮抗する化合物である（ＥＲ  Ａｇｏｎｉｚｉｎｇ  ＥＲは、ＥＲによって媒介される事象を介して、トリプトファンヒドロキシラーゼ遺伝子（ＴＰＨ、セロトニン合成において鍵となる酵素）の転写を増加させる。）。エストロゲン受容体ベータ作用物質の例は、その両方を参照によりそれら全体を援用する、２００１年１１月８日に公開されたＰＣＴ国際出願第０１／８２９２３号及び２００２年５月２０日に公開された同０２／４１８３５号に見ることができる。
【００７５】
「アンドロゲン受容体モジュレーター」とは、機序にかかわらず受容体へのアンドロゲンの結合を妨害又は阻害する化合物を指す。アンドロゲン受容体モジュレーターの例としては、フィナステリド及び他の５α−レダクターゼ阻害剤、ニルタミド、フルタミド、ビカルタミド、リアロゾール及びアビラテロンアセタートが挙げられる。
【００７６】
「破骨細胞プロトンＡＴＰａｓｅの阻害剤」とは、破骨細胞の頂端膜上にあり骨吸収プロセスにおいて重要な役割を果たすと報告されているプロトンＡＴＰａｓｅの阻害剤を指す。このプロトンポンプは、骨粗しょう症及び関係する代謝病の治療及び予防に有用な可能性のある骨吸収阻害剤を設計するための興味深い標的である。参照によりその全体を本明細書に援用するＣ．  Ｆａｒｉｎａ等、”Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔ  ｖａｃｕｏｌａｒ  ｐｒｏｔｏｎ  ＡＴＰａｓｅ  ａｓ  ｎｏｖｅｌ  ｂｏｎｅ  ａｎｔｉｒｅｓｏｒｐｔｉｖｅ  ａｇｅｎｔｓ”、ＤＤＴ、４：１６３−１７２（１９９９））を参照されたい。
【００７７】
「ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤」とは、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼの阻害剤を指す。ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼに対して抑制活性を有する化合物は、当分野で周知のアッセイによって容易に特定することができる。例えば、米国特許第４，２３１，９３８号６カラム及び国際公開第８４／０２１３１号３０−３３ページに記載又は引用されたアッセイを参照されたい。「ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤」及び「ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの阻害剤」という用語は、本明細書において使用されるときには同じ意味を有する。
【００７８】
使用することができるＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の例としては、ロバスタチン（ＭＥＶＡＣＯＲ（登録商標）；米国特許第４，２３１，９３８号、同４，２９４，９２６号及び同４，３１９，０３９号参照）、シンバスタチン（ＺＯＣＯＲ（登録商標）；米国特許第４，４４４，７８４号、同４，８２０，８５０号及び同４，９１６，２３９号参照）、プラバスタチン（ＰＲＡＶＡＣＨＯＬ（登録商標）；米国特許第４，３４６，２２７号、同４，５３７，８５９号、同４，４１０，６２９号、同５，０３０，４４７号及び同５，１８０，５８９号参照）、フルバスタチン（ＬＥＳＣＯＬ（登録商標）；米国特許第５，３５４，７７２号、同４，９１１，１６５号、同４，９２９，４３７号、同５，１８９，１６４号、同５，１１８，８５３号、同５，２９０，９４６号及び同５，３５６，８９６号参照）、アトルバスタチン（ＬＩＰＩＴＯＲ（登録商標）；米国特許第５，２７３，９９５号、同４，６８１，８９３号、同５、４８９，６９１号及び同５，３４２，９５２号参照）及びセリバスタチン（リバスタチン及びＢＡＹＣＨＯＬ（登録商標）としても知られる；米国特許第５，１７７，０８０号参照）が挙げられるが、これらだけに限定されない。本発明の方法に使用することができるこれら及びさらに別のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の構造式は、Ｍ．  Ｙａｌｐａｎｉ、”Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  Ｌｏｗｅｒｉｎｇ  Ｄｒｕｇｓ”、Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＆  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ、ｐｐ．８５−８９、Ｆｅｂｒｕａｒｙ  ５，１９９６の８７ページ及び米国特許第４，７８２，０８４号及び同４，８８５，３１４号に記載されている。本明細書ではＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤という用語は、薬剤として許容されるすべてのラクトン及び開いた酸（ｏｐｅｎ−ａｃｉｄ）の形（すなわち、ラクトン環が開いて遊離酸を形成している）並びにＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ抑制活性を有する化合物の塩及びエステル型を含み、そのために、かかる塩、エステル、開いた酸及びラクトン型の使用は本発明の範囲内に含まれる。ラクトン部分及びその対応する開いた酸の形を以下に構造Ｉ及びＩＩとして図示する。
【００７９】
【化７】
2007503401.tif 000011
開いた酸の形が存在し得るＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤においては、塩及びエステル型は開いた酸から好ましくは形成することができ、かかる形すべては本明細書で使用される「ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤」という用語の意味に含まれる。好ましくは、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤はロバスタチン及びシンバスタチン、最も好ましくはシンバスタチンから選択される。本明細書では、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤に関する「薬剤として許容される塩」という用語は、遊離酸を適切な有機又は無機塩基と反応させることによって一般に調製される、本発明に使用される化合物の無毒の塩、特にナトリウム、カリウム、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、亜鉛、テトラメチルアンモニウムなどの陽イオンから形成される塩、並びにアンモニア、エチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、リジン、アルギニン、オルニチン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、ジエタノールアミン、プロカイン、Ｎ−ベンジルフェネチルアミン、１−パラクロロベンジル−２−ピロリジン−１’−イル−メチルベンズ−イミダゾール、ジエチルアミン、ピペラジン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンなどのアミンから形成される塩を意味するものとする。ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の塩のさらなる例としては、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、炭酸水素塩、硫酸水素塩、酒石酸水素塩、ホウ酸塩、臭化物塩、エデト酸カルシウム、カンシラート、炭酸塩、塩化物塩、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストラート、エシレート、フマル酸塩、グルセプテート、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレソシナート、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物塩、イソチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシラート、硫酸メチル、粘液酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、トリエチオダイド及び吉草酸塩が挙げられるが、これらだけに限定されない。
【００８０】
記載されたＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤化合物のエステル誘導体は、温血動物の血流に吸収されたときに薬物の形で放出し薬物の治療効力を改善するように開裂することができるプロドラッグとして働くことができる。
【００８１】
上で使用される「インテグリン受容体拮抗物質」とは、αｖβ３インテグリンに対する生理学的リガンドの結合に選択的に拮抗し、それを阻害し又はそれに対抗する化合物、αｖβ５インテグリンに対する生理学的リガンドの結合に選択的に拮抗し、それを阻害し又はそれに対抗する化合物、αｖβ３インテグリンとαｖβ５インテグリンの両方に対する生理学的リガンドの結合に拮抗し、それを阻害し又はそれに対抗する化合物、及び毛細管内皮細胞上で発現される特定のインテグリンの活性に拮抗し、それを阻害し又はそれに対抗する化合物を指す。この用語は、αｖβ６、αｖβ８、α１β１、α２β１、α５β１、α６β１及びα６β４インテグリンの拮抗物質も指す。この用語は、αｖβ３、αｖβ５、αｖβ６、αｖβ８、α１β１、α２β１、α５β１、α６β１及びα６β４インテグリンの任意の組み合わせの拮抗物質も指す。Ｈ．Ｎ．  Ｌｏｄｅ等、ＰＮＡＳ  ＵＳＡ  ９６：１５９１−１５９６、１９９９は、自発的な腫瘍転移の根絶における抗血管形成αｖインテグリン拮抗物質と腫瘍特異抗体−サイトカイン（インターロイキン−２）融合タンパク質の相乗効果を認めた。彼らの結果は、この組み合わせが、癌及び転移性腫瘍成長を治療する可能性を有することを示唆した。αｖβ３インテグリン受容体拮抗物質は、現在利用可能なすべての薬物の機序とは異なる新しい機序によって骨吸収を阻害する。インテグリンは、細胞−細胞及び細胞−マトリックス相互作用を媒介するヘテロ二量体の膜貫通接着受容体である。α及びβインテグリンサブユニットは、非共有結合的に相互作用し、二価の陽イオンに依存する様式で細胞外基質リガンドに結合する。破骨細胞上で最も豊富なインテグリンはαｖβ３（＞１０７／破骨細胞）であり、これは細胞骨格組織において細胞遊走及び分極に重要な律速の役割を果たすと考えられる。αｖβ３拮抗効果は、骨吸収の阻害、最狭窄の阻止、黄斑変性症の阻止、関節炎の阻止並びに癌及び転移性増殖の阻止から選択される。
【００８２】
「骨芽細胞同化剤」とは、ＰＴＨなどの骨を構築する薬剤である。副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）又はそのアミノ末端断片及び類似体の間欠投与は、動物及びヒトにおいて、骨量の減少を予防し、抑止し、部分的に逆転させ、骨形成を刺激することが示された。考察については、Ｄ．Ｗ．  Ｄｅｍｐｓｔｅｒ等、”Ａｎａｂｏｌｉｃ  ａｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄ  ｈｏｒｍｏｎｅ  ｏｎ  ｂｏｎｅ”、Ｅｎｄｏｃｒ  Ｒｅｖ  １４：６９０−７０９、１９９３を参照されたい。いくつかの研究によって、骨形成を刺激しそれによって骨量及び骨強度を増加させる副甲状腺ホルモンの臨床上の利点が示された。結果は、ＲＭ  Ｎｅｅｒ等、Ｎｅｗ  Ｅｎｇ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３４４  １４３４−１４４１、２００１に報告された。
【００８３】
また、ＰＴＨｒＰ−（１−３６）などの副甲状腺ホルモン関連タンパク質断片又は類似体は、強力な抗カルシウム尿効果を示し［Ｍ．Ａ．  Ｓｙｅｄ等、”Ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄ  ｈｏｒｍｏｎｅ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ−（１−３６）  ｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ  ｒｅｎａｌ  ｔｕｂｕｌａｒ  ｃａｌｃｉｕｍ  ｒｅａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｉｎ  ｎｏｒｍａｌ  ｈｕｍａｎ  ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ：  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｏｆ  ｈｕｍｏｒａｌ  ｈｙｐｅｒｃａｌｃｅｍｉａ  ｏｆ  ｍａｌｉｇｎａｎｃｙ”、ＪＣＥＭ  ８６：１５２５−１５３１（２００１）参照］、骨粗しょう症を治療する同化剤としての可能性も有し得る。
【００８４】
一定用量として処方される場合には、かかる組み合わせ生成物は、下記投与量範囲内の本発明の化合物とその承認された投与量範囲内の他の活性薬剤とを使用する。或いは、本発明の化合物は、組み合わせ処方が不適当なときには、公知の許容される薬剤と逐次的に使用することができる。
【００８５】
本発明の化合物に関して「投与」という用語及びその変形（例えば、化合物を「投与すること」）は、治療を必要とする動物の系に化合物又は化合物のプロドラッグを導入することを意味する。本発明の化合物又はそのプロドラッグが１個以上の他の活性薬剤（例えば、細胞毒性薬など）と組み合わせて提供されるときには、「投与」及びその変形は、化合物又はそのプロドラッグと他の薬剤との同時及び逐次導入を含むと各々理解される。本発明は、本発明の化合物のプロドラッグをその範囲に含む。一般に、かかるプロドラッグは、本発明の化合物の機能的誘導体であり、必要とされる化合物にインビボで容易に変換され得る。したがって、本発明の治療方法において、「投与すること」という用語は、具体的に開示される化合物又は具体的に開示されなくてもよいが患者に投与された後に指定の化合物にインビボで変換される化合物を用いた、記載されるさまざまな症状の治療を包含するものとする。適切なプロドラッグ誘導体の選択及び調製のための従来の手順は、例えば、参照によりその全体を本明細書に援用する”Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ”、ｅｄ．  Ｈ．  Ｂｕｎｄｇａａｒｄ、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、１９８５に記載されている。これらの化合物の代謝産物としては、本発明の化合物を生物学的環境に導入することによって生成される活性種などが挙げられる。
【００８６】
本明細書では「組成物」という用語は、指定成分を指定量で含む生成物、及び各指定成分を指定量で組み合わせて直接的又は間接的に得られる任意の生成物を包含するものとする。
【００８７】
本明細書では「治療有効量」という用語は、研究者、獣医師、医師又は他の臨床家によって求められる、組織、系、動物又はヒトにおける生物学的又は医学的応答を誘発する活性化合物又は薬剤の量を意味する。
【００８８】
本明細書では疾患を「治療する」又は疾患の「治療」という用語は、疾患を予防すること、すなわち疾患に曝された又は疾患にかかりやすい恐れがあるが疾患の徴候をまだ経験も示しもしていない哺乳動物において疾患の臨床症状を発生させないこと、疾患を阻止すること、すなわち、疾患又はその臨床症状の発生を抑止又は抑制すること、或いは疾患を軽減すること、すなわち、疾患又はその臨床症状を退行させることを含む。
【００８９】
本明細書では「骨吸収」という用語は、破骨細胞が骨を分解するプロセスを指す。
【００９０】
本発明は、薬剤として許容される担体又は希釈剤を伴う又伴はない本発明の化合物の治療有効量の投与を含む、骨粗しょう症又は他の骨障害の治療において有用な薬剤組成物も包含する。本発明の適切な組成物としては、本発明の化合物と薬理学的に許容される担体、例えば、ｐＨレベルが例えば７．４の食塩水とを含む水溶液が挙げられる。この溶液は、患者の血流中に局所的大量瞬時投与によって導入することができる。
【００９１】
本発明の化合物がヒト対象に投与されるときには、１日用量は、通常、処方する医師によって決定され、投与量は、一般に、個々の患者の年齢、体重及び応答並びに患者の症候の重症度に応じて変わる。
【００９２】
一適用例においては、カテプシン依存性症状の治療を行う哺乳動物に化合物の適切な量が投与される。本発明の経口投与量は、示された効果に対して使用されるときには、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重／日（ｍｇ／ｋｇ／日）から約１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．０１から１０ｍｇ／ｋｇ／日、最も好ましくは０．１から５．０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。経口投与の場合、組成物は、活性成分０．０１、０．０５、０．１、０．５、１．０、２．５、５．０、１０．０、１５．０、２５．０、５０．０、１００及び５００ミリグラムを含む錠剤の形で好ましくは提供され、治療される患者の症状によって投与量が調節される。医薬品は、一般に、活性成分約０．０１ｍｇから約５００ｍｇ、好ましくは、活性成分約１ｍｇから約１００ｍｇを含む。静脈内の場合、最も好ましい用量は、定速注入中約０．１から約１０ｍｇ／ｋｇ／分の範囲である。有利には、本発明の化合物は、単一の１日量で投与することができ、或いは全１日用量を１日２回、３回又は４回の分割用量で投与することができる。また、本発明に好ましい化合物は、適切な鼻腔内ビヒクルの局所的使用によって、又は当業者に周知の経皮皮膚貼付薬の剤形を用いた経皮経路によって、鼻腔内形式で投与することができる。経皮送達システムの形で投与するために、投与は投与計画を通して間欠的ではなく連続的であることは言うまでもない。
【００９３】
本発明の化合物は、カテプシンによって媒介される症状を治療するのに有用な他の薬剤と併用することができる。かかる組み合わせの個々の成分は、治療中の異なるときに別個に、或いは分割又は単一混合剤形で同時に投与することができる。したがって、本発明は、かかる同時又は交互の治療計画すべてを包含すると理解され、「投与すること」という用語はそれに応じて解釈すべきである。本発明の化合物とカテプシンによって媒介される症状を治療するのに有用な他の薬剤との組み合わせの範囲は、エストロゲン機能に関係する障害を治療するのに有用な任意の薬剤組成物とのあらゆる組み合わせを原則的には含むと理解される。
【００９４】
したがって、本発明の範囲は、有機ビスホスホナート、エストロゲン受容体モジュレーター、アンドロゲン受容体モジュレーター、破骨細胞プロトンＡＴＰａｓｅの阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの阻害剤、インテグリン受容体拮抗物質、ＰＴＨなどの骨芽細胞同化剤並びに薬剤として許容されるそれらの塩及び混合物から選択される第２の薬剤と組み合わせた特許請求される化合物の使用を包含する。
【００９５】
本発明のこれらの側面及び他の側面は、本明細書に含まれる教示から明らかである。
【００９６】
本発明の１つ以上の実施態様の詳細は、付随する上記記載に示されている。本明細書に記載されたものと類似又は等価なあらゆる方法及び材料を本発明の実施又は試験において使用することができるが、好ましい方法及び材料を以下に記載する。本発明の他の特徴、目的及び利点は、明細書本文及び特許請求の範囲から明白である。明細書及び添付された特許請求の範囲においては、単数形は、状況が明確にそれ以外のことを指示するのでなければ、複数の指示対象を含む。特に断らない限り、本明細書において使用されるすべての技術用語及び科学用語は、本発明が属する分野の当業者によって一般に理解されているのと同じ意味を有する。本明細書に引用されるすべての特許及び刊行物を参照により本明細書に援用する。
【００９７】
上記記載は説明のためだけにあり、開示された厳密な形式に本発明を限定するものではなく、本明細書に添付の特許請求の範囲によって限定するものである。
【００９８】
スキーム
本発明の化合物は、下記スキーム１に従って調製することができる。すなわち、α−アミノエステルは、ハロアルキルケトンに添加して、ＴｉＣｌ４、ＭｇＳＯ４、トリフルオロ酢酸イソプロピルなどの脱水剤の存在下でイミンに脱水することができるアミナールを形成することができる。シアノ水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素ナトリウムなどの還元剤によるイミンの還元によってアミンが得られる。エステル加水分解及び適切に置換されたアミノアセトニトリルを用いたアミド形成によって本発明の化合物が得られる。Ｄ系上の置換基がハロゲンである場合には、適切なボロン酸を用いたパラジウム触媒の鈴木カップリングによって本発明の別の化合物が得られる。或いは、適切なアミンを用いた銅触媒又はパラジウム触媒Ｂｕｃｈｗａｌｄカップリングによって本発明の別の化合物が得られる。或いは、パラジウム触媒カルボキシル化とそれに続く適切なアミンを用いたアミド形成によって本発明の別の化合物が得られる。
【００９９】
【化８】
2007503401.tif 000012
【０１００】
本発明の化合物は、下記スキーム２に従って調製することもできる。ケトン又はアルデヒドは、アミノアルコールと縮合して環式アミナールを生成することができる。グリニャール試薬又は有機リチウム試薬３当量で処理して適切なアルキル化アミノアルコールを得る。Ｊｏｎｅｓ酸化又はＨ５ＩＯ６／ＣｒＯ３などのクロム系を用いて、或いは二段階酸化（例えば、塩化オキサリル／ＤＭＳＯ／Ｅｔ３Ｎとそれに続くＮａＣｌＯ）によって、アルコールを酸化して対応するカルボン酸を得る。スキーム１に記載のペプチドカップリング及び鈴木反応によって本発明の化合物を得る。
【０１０１】
【化９】
2007503401.tif 000013
【０１０２】
本発明の化合物は、下記スキーム３に従って調製することもできる。ケトン又はアルデヒドは、アミノアルコールと縮合して非環式アミナールを生成することができる。複数当量のグリニャール試薬又は有機リチウム試薬で処理して適切なアルキル化アミノアルコールを得る。このアルコールは、スキーム２に記載の方法によって本発明の化合物に転化することができる。
【０１０３】
【化１０】
2007503401.tif 000014
【０１０４】
本発明の化合物は、スキーム４によって調製することもできる。適切に置換されたアセタートは、（ＬＤＡ、ＫＨＭＤＳ、ＮａＨ又はｎＢｕＬｉを含めて、ただしこれらだけに限定されない）適切な塩基を用いてエノール化し、パラホルムアルデヒドで処理してジオールを生成することができる。このジオールは、ＤＡＳＴなどのフッ素化試薬を用いて二フッ化物に転化することができる。次いで、エステルの加水分解とそれに続くクルチウス転位によってアミンが得られる。このアミンは適切に置換されたアルファ−ブロモエステルを置換してアルファ−アミノエステルを生成することができる。これは、スキーム１に記載の方法によって本発明の化合物に転化することができる。
【０１０５】
【化１１】
2007503401.tif 000015
【０１０６】
本発明の化合物は、下記スキーム５に従って調製することもできる。アルデヒド又はヘミアセタールは、アルコール部分を適切な保護基で保護し、水を共沸除去しながら、アミノアルコールと縮合することができる。得られたイミンをグリニャール試薬又は有機リチウム試薬で処理して適切なアルキル化アミノアルコールを得る。次いで、アルコール保護基を除去することができ、アルコールは、スキーム２に記載の方法によって、又は鈴木反応をまず実施し、続いてアルコールをＨ５ＩＯ６／ＣｒＯ３で酸化し、次いでペプチドカップリングによって、本発明の化合物に転化することができる。
【０１０７】
【化１２】
2007503401.tif 000016
【０１０８】
本発明の化合物は、下記スキーム６に従って調製することもできる。スキーム１、２又は５に記載のアルファ−アミノアミドとアルファ−アミノ酸のペプチドカップリングとそれに続く生成第一級アミドの脱水（Ｖｏｅｇｅｌ，Ｊ．Ｊ．；Ｂｅｎｎｅｒ，Ｓ．Ａ．  Ｈｅｌｖ．  Ｃｈｅｍ．  Ａｃｔａ  １９９６、７９、１８６３）によって本発明の化合物が生成する。
【０１０９】
【化１３】
2007503401.tif 000017
【０１１０】
スキーム２、３及び５の始めに使用されるアミノアルコールのいくつかの合成は、スキーム７から１１に記載されている。例えば、Ｒ＝Ｍｅである（２Ｓ）−２−アミノ−４−フルオロ−４−メチルペンタン−１−オールの合成は下記スキーム７に記載されている。２箇所が保護された（ｄｉｐｒｏｔｅｃｔｅｄ）適切なアスパラギン酸から出発して、標準の文献手順（すなわち、混合無水物形成とそれに続くＮａＢＨ４還元）によってカルボキシ基をアルコールに還元することができる。次いで、保護された２−アミノ−４−メチルペンタン−１，４−ジオール（Ｒ＝Ｍｅ）を適切なグリニヤール又は有機リチオ化反応によって生成することができる。最後に、ヒドロキシ部分をＤＡＳＴなどのフッ素化剤を用いて所望のフルオロに転化することができる。次いで、このアミノアルコールの保護体又は非保護体をスキーム１、２、３及び５によって本発明の化合物に転化することができる。
【０１１１】
【化１４】
2007503401.tif 000018
【０１１２】
４−フルオロロイシノールもスキーム８によって合成することができる。４，５−デヒドロロイシンは、下記スキームに記載のとおり（４Ｓ）−４−（２−メチルプロパ−２−エニル）−１，３−オキサゾリジン−２−オンに転化される。次いで、この中間体は、ＨＦ−ピリジンなどのフッ化水素処理試薬で処理されて（４Ｓ）−４−（２−フルオロ−２−メチルプロピル）−１，３−オキサゾリジン−２−オンを生成する。次いで、塩基加水分解（すなわち、Ｂａ（ＯＨ）２又はＮａＯＨ）によって（２Ｓ）−２−アミノ−４−フルオロ−４−メチルペンタン−１−オールを得る。
【０１１３】
【化１５】
2007503401.tif 000019
【０１１４】
Ｒ＝Ｍｅである４，４−ジフルオロ−Ｌ−ノルバリンの合成は下記スキーム９に記載されている。２箇所が保護された適切なセリンから出発して、（ＰｈＯ）３Ｐ＋ＭｅＩ−などの試薬を用いてヨウ素化を実施することができる。得られたヨウ化物の亜鉛化（ｚｉｎｃａｔｉｏｎ）をＺｎ−Ｃｕ合金及びＴＭＳＣｌを用いて進めることができる。次いで、得られた亜鉛酸塩は、塩化アルカノイルとパラジウム触媒カップリング反応を起こしてケトンを生成することができる。最後に、ケトン部分をＤＡＳＴなどのフッ素化剤を用いて所望のジフルオロ誘導体に転化することができる。次いで、このアミノ酸又はアミノアルコールの保護体又は非保護体をスキーム１、２、３及び５によって本発明の化合物に転化することができる。
【０１１５】
【化１６】
2007503401.tif 000020
【０１１６】
本発明に使用されるアミノアルコールは、スキーム１０によって合成することもできる。保護アミノ酸は、ＥｔＯＨなどの溶媒又はＥｔＯＨとＴＨＦなどの混合溶媒系中で、ＬｉＣｌなどの添加剤を伴う又は伴わないＮａＢＨ４などの還元剤を用いて還元される。次いで、アミノ保護基は、保護基の性質に応じた適切な方法によって除去される。
【０１１７】
【化１７】
2007503401.tif 000021
【０１１８】
本発明に使用される（２Ｓ，４Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン−１−オールの合成はスキーム１１に記載されている。Ｎ−ベンゾイル−５，５，５−トリフルオロロイシン（Ｏｊｉｉｍａ等  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．、１９８９、５４、４５１１−４５２２）は、還流条件下で６Ｍ  ＨＣｌなどの酸水溶液を用いて加水分解することができる。次いで、アミノ酸ＨＣｌ塩中間体は、Ｎ−アセチル−５，５，５−トリフルオロロイシンに転化され、アミノ基キラル中心は酵素的な方法によって分割される（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ、１９９６、２６、１１０９−１１１５）。次いで、単離された５，５，５−トリフルオロ−Ｌ−ロイシンはカルバミン酸ベンジルなどの保護基で保護され、カルボン酸基はエステル化される。次いで、４位における２種類のジアステレオマーはフラッシュカラムクロマトグラフィーによって分離される。次いで、鏡像異性体の一方の（２Ｓ，４Ｓ）保護アミノ酸は、スキーム１０に記載されたアミノアルコールに転化される。
【０１１９】
【化１８】
2007503401.tif 000022
【０１２０】
Ｒ５が水素でありＲ６がアリール又はヘテロアリールである本発明の化合物は、以下に示すスキーム１２によって調製することもできる。アリール又はヘテロアリールアルデヒドとアルコール部分が適切な保護基で保護されたアミノアルコールとの縮合と、それに続く式ハロ−（Ｄ）ｎ−Ｌｉ又はハロ−（Ｄ）ｎ−ＭｇＸ（式中、Ｄは発明の概要で定義されたとおりである）のグリニヤール又は有機リチウム試薬を用いた生成イミンの処理と、それに続く酸素保護基の除去によって、アルキル化アミノアルコールが得られる。次いで、アルキル化アミノアルコールは、スキーム２に記載の方法によって、又はまず式Ｒ７−Ｂ（ＯＨ）２のボロン酸エステルを用いて鈴木反応を実施し、次いでアルコールをＨ５ＩＯ６／ＣｒＯ３などの適切な酸化剤で酸化して酸を生成し、最後に酸を前記ペプチドカップリング条件下でアミノアセトニトリルで処理することによって、本発明の化合物に転化される。
【０１２１】
【化１９】
2007503401.tif 000023
【０１２２】
本発明の化合物は、下記スキーム１３に従って調製することもできる。ヨウ化ナトリウムの存在下、ジメチルホルムアミドなどの適切な有機溶媒中の、適切にＮ−保護されたアミノ酸誘導体とオキセタントシラートの反応によって、対応するオキセタンエステルが得られ、これをジボランで処理してオルトエステルを得る。アミノ保護基を除去してアミンが得られ、これを上記反応条件下で式Ｒ６ＣＨＯのアルデヒド（式中、Ｒ６はアリール又はヘテロアリールである）又は式Ｒ６Ｃ（ＯＨ）（ＯＲ）のヘミアセタール（式中、Ｒはアルキル基である）と縮合させてイミンを得る。イミンを上記反応条件下でグリニヤール又は有機リチウム試薬で処理してＮ−アルキル化誘導体を得る。オルトエステルを除去すると対応するカルボン酸が生成し、次いでこれはペプチドカップリング条件下でアミノアセトニトリルと縮合され、続いて上述した鈴木反応によって本発明の化合物に転化される。
【０１２３】
【化２０】
2007503401.tif 000024
【０１２４】
本発明の化合物は、スキーム１４に示すとおりに調製することもできる。適切なＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ６基を含むハロゲン化アリールをビス（ピナコラート）ジボロンとカップリングさせてアリールピナコラートを生成することができる。これをＲ７−臭化物と鈴木条件下でカップリングさせて本発明の化合物を得ることができる。
【０１２５】
【化２１】
2007503401.tif 000025
【０１２６】
本発明の化合物は、下記スキーム１５に従って調製することもできる。スキーム１、２又は５に記載の適切に置換されたアミノ酸とアルファ−アミノエステル、アルコール又はケトンとのペプチドカップリングによって本発明の化合物が生成する。アルファ−アミノアルコールの場合、生成物アルコールの酸化によって本発明の化合物であるケトンが得られる。アルファ−アミノエステルの場合、生成物エステルの加水分解とそれに続く適切なアミンとのアミド形成によって本発明の化合物であるアミドが得られる。
【０１２７】
【化２２】
2007503401.tif 000026
【０１２８】
スキーム１、２、６及び１５に示す酸は、スキーム１６に示すとおりに調製することもできる。適切に置換された臭化ベンジル、ヨウ化ベンジル又はベンジルトリフラート（鏡像異性でもラセミでもよい）は、塩基条件下でアルファアミノエステルとカップリングさせることができる。次いで、塩基水溶液で加水分解して、本発明の実施例に転化することができる酸が得られる。
【０１２９】
【化２３】
2007503401.tif 000027
【０１３０】
以下の実施例に本発明の選択された化合物の合成を説明する。これらの実施例は特許請求される本発明を説明するものであって、本発明の範囲を限定するものと解釈すべきではない。表１は、具体例が、それに対して活性であるカテプシン（例えば、カテプシンＫ）の活性部位に結合したときに、本明細書に記載された距離判定基準にどのように合致するかを示す。
【実施例１】
【０１３１】
Ｎ１−（シアノメチル）−Ｎ２−（２，２，２−トリフルオロ−１−フェニルエチル）−Ｌ−ロイシンアミドの合成
【０１３２】
【化２４】
2007503401.tif 000028
【０１３３】
Ｌ−ロイシンメチルエステル塩酸塩（９７５ｍｇ、５．３７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）溶液に２，２，２−トリフルオロアセトフェノン（０．７５ｍＬ、５．３４ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（３．５ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を添加した。ＴｉＣｌ４（０．５５ｍＬ、５．０ｍｍｏｌ）の０．４５ｍＬジクロロメタン溶液を滴下し、その混合物を終夜撹拌した。次いで、追加のＴｉＣｌ４（０．４ｍＬ、３．６ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を３時間撹拌した。ＮａＣＮＢＨ３（１０５０ｍｇ、１６．７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液を添加し、その混合物を２時間撹拌した。１Ｎ  ＮａＯＨに注ぎ、酢酸エチル（２×）で抽出した。有機相を１Ｎ  ＮａＯＨ及び塩水で洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で脱水し、蒸発させた。ＩＳＣＯカラムクロマトグラフィー（３０％から９０％酢酸エチル／へキサン勾配）によって精製してメチルＮ−（２，２，２−トリフルオロ−１−フェニルエチル）−Ｌ−ロイシナートを得た。
【０１３４】
メチルＮ−（２，２，２−トリフルオロ−１−フェニルエチル）−Ｌ−ロイシナート（１５０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）の２：１  ＴＨＦ／ＭｅＯＨ室温溶液に１Ｍ  ＬｉＯＨを添加した。混合物を終夜撹拌し、濃縮した。残渣を酢酸エチルとｐＨ３．５リン酸緩衝液に分配した。有機相を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濃縮してＮ−（２，２，２−トリフルオロ−１−フェニルエチル）−Ｌ−ロイシンを得た。
【０１３５】
Ｎ−（２，２，２−トリフルオロ−１−フェニルエチル）−Ｌ−ロイシン（１４９ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）、アミノアセトニトリル塩酸塩（１０２ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）及びＰｙＢＯＰ（２６０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）の混合物をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解した。トリエチルアミン（０．３ｍＬ、２．１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を終夜撹拌し、次いでｐＨ３リン酸緩衝液に注ぎ、３：１エーテル／酢酸エチルで抽出した。有機相をＮａＨＣＯ３飽和水溶液及び塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、蒸発させた。ＩＳＣＯカラムクロマトグラフィー（２０％から５０％酢酸エチル／へキサン勾配）によって精製して、Ｎ１−（シアノメチル）−Ｎ２−（２，２，２−トリフルオロ−１−フェニルエチル）−Ｌ−ロイシンアミドをジアステレオマーの１：１混合物として得た。
【０１３６】
ＭＳ（＋ＡＰＣＩ）：３１３．９［Ｍ＋１］。
【実施例２】
【０１３７】
Ｎ２−［１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］−Ｎ１−（シアノメチル）−Ｌ−ロイシンアミドの合成
【０１３８】
【化２５】
2007503401.tif 000029
【０１３９】
実施例１の方法を用いて、Ｎ２−［１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］−Ｎ１−（シアノメチル）−Ｌ−ロイシンアミドを調製した。
【０１４０】
ＭＳ（−ＥＳＩ）：４０３．９、４０５．９［Ｍ−１］−
【実施例３】
【０１４１】
Ｎ１−（シアノメチル）−Ｎ２−｛［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］［４−（メチルスルホニル）フェニル］メチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの合成
【０１４２】
【化２６】
2007503401.tif 000030
【０１４３】
段階１：メチルＮ−｛（４−ブロモフェニル）［４−（メチルスルホニル）フェニル］メチレン｝−Ｌ−ロイシナート
（４−ブロモフェニル）［４−（メチルスルホニル）フェニル］メタノン（２０２ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）、Ｌ−ロイシンメチルエステル塩酸塩（３２８ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）及びカンファースルホン酸（５２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）のトルエン溶液をＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋトラップを用いて１８時間還流した。溶媒を減圧除去し、生成した残渣をクロマトグラフィーにかけＥｔＯＡｃとへキサンを溶離剤として用いて精製して、標記化合物と出発（４−ブロモフェニル）［４−（メチルスルホニル）フェニル］メタノンの１：１混合物を得た。
【０１４４】
段階２：メチルＮ−｛（４−ブロモフェニル）［４−（メチルスルホニル）フェニル］メチル｝−Ｌ−ロイシナート
段階１から得られたメチルＮ−｛（４−ブロモフェニル）［４−（メチルスルホニル）フェニル］メチレン｝ロイシナートと（４−ブロモフェニル）［４−（メチルスルホニル）フェニル］メタノンの１：１混合物（１８５ｍｇ、約０．２ｍｍｏｌ）の酢酸／メタノール（１：３、４ｍＬ）溶液に固体添加漏斗を用いて水素化ホウ素ナトリウム（約４００ｍｇ）を３０分ごとに２日間にわたって分割添加した（添加は夜間は停止された）。反応混合物をＥｔＯＡｃと水に分配し、有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮した。生成した混合物をクロマトグラフィーにかけＥｔＯＡｃとへキサンを溶離剤として用いて精製した。メチルＮ−｛（４−ブロモフェニル）［４−（メチルスルホニル）フェニル］メチル｝−Ｌ−ロイシナートは無色のゴムとして得られ、（４−ブロモフェニル）［４−（メチルスルホニル）フェニル］メタノールは白色固体として得られた。
【０１４５】
段階３：Ｎ−｛（４−ブロモフェニル）［４−（メチルスルホニル）フェニル］メチル｝−Ｌ−ロイシン
段階２から得られたメチルＮ−｛（４−ブロモフェニル）［４−（メチルスルホニル）フェニル］メチル｝−Ｌ−ロイシナート（８１ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）とＭｅＯＨ（０．５ｍＬ）の溶液に１Ｎ  ＬｉＯＨ（０．３ｍＬ、０．３ｍｍｏｌ）を添加した。生成した混合物を室温で１８時間撹拌し、次いでＥｔＯＡｃと水＋１Ｎ  ＨＣｌ（０．５ｍＬ）に分配した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、減圧濃縮して、無色ゴム状の標記化合物を得た。
【０１４６】
段階４：Ｎ２−｛（４−ブロモフェニル）［４−（メチルスルホニル）フェニル］メチル｝−Ｎ１−（シアノメチル）−Ｌ−ロイシンアミド
段階３から得られたＮ−｛（４−ブロモフェニル）［４−（メチルスルホニル）フェニル］メチル｝−Ｌ−ロイシン（７６ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１４６ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）、アミノアセトニトリル塩酸塩（５２ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）の−１０℃冷却ＤＭＦ（１．１ｍＬ）溶液にＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１３ｍＬ、０．７５ｍｍｏｌ）を添加した。反応を室温で１８時間進行させ、ＥｔＯＡｃと水に分配した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、減圧濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーにかけＥｔＯＡｃとへキサンを溶離剤として用いて精製して無色ゴム状の標記化合物を得た。
【０１４７】
段階５：Ｎ１−（シアノメチル）−Ｎ２−｛［４−（メチルスルホニル）フェニル］［４’−（メチルチオ）−１，１’−ビフェニル−４−イル］メチル｝−Ｌ−ロイシンアミド
段階４から得られたＮ２−｛（４−ブロモフェニル）［４−（メチルスルホニル）フェニル］メチル｝−Ｎ１−（シアノメチル）−Ｌ−ロイシンアミド（７２ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、４−（メチルチオ）フェニルボロン酸（３７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）のエチレングリコールジメチルエーテル（ｌｍＬ）溶液と２Ｍ炭酸ナトリウム水溶液の不均一混合物を減圧脱気し、窒素パージした。
【０１４８】
この混合物に［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）、ジクロロメタン錯体（１９ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）を添加し、続いて脱気し窒素パージした。反応混合物を効率的に撹拌しながら８５℃で１６時間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃとＮＨ４ＯＡｃ水溶液２５％ｗ／ｖに分配した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、減圧濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーにかけＥｔＯＡｃとへキサンを溶離剤として用いて精製して無色ゴム状の標記化合物を得た。
【０１４９】
段階６：Ｎ１−（シアノメチル）−Ｎ２−｛［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］［４−（メチルスルホニル）フェニル］メチル｝−Ｌ−ロイシンアミド
Ｎ１−（シアノメチル）−Ｎ２−｛［４−（メチルスルホニル）フェニル］［４’−（メチルチオ）−１，１’−ビフェニル−４−イル］メチル｝−Ｌ−ロイシンアミド（６３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、タングステン酸ナトリウム二水和物（２ｍｇ、０．００６ｍｍｏｌ）、硫酸水素テトラブチルアンモニウム（４ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）の溶液に３０％ｗ／ｖ過酸化水素水溶液（１００μＬ、０．９ｍｍｏｌ）を添加し、生成した混合物を室温で１０分間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃと水＋１Ｍ  ＮａＨＳＯ３（約３：１）に分配した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、減圧濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーにかけＥｔＯＡｃとへキサンを溶離剤として用いて精製して無色ゴム状の標記化合物を得た。
【０１５０】
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：５６８．２［Ｍ＋１］＋。
【実施例４】
【０１５１】
Ｎ１（シアノメチル）−Ｎ２｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの合成
【０１５２】
【化２７】
2007503401.tif 000031
【０１５３】
段階１：（２Ｓ）−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−４−メチルペンタン−２−アミン
Ｌ−ロイシノール（６．０ｇ）の室温ジクロロメタン（１００ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（１１ｍＬ）、ＤＭＡＰ（０．１ｇ）及び塩化ｔ−ブチルジメチルシリル（８．５ｇ）を添加した。混合物を室温で２時間撹拌し、次いで水を添加した。有機層を分離し、水層をジクロロメタンでさらに抽出した。混合有機層を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧除去して標記化合物を得た。残渣を次の反応にそのまま使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ３．４８（ｍ、２Ｈ）、３．３２（ｍ、１Ｈ）、２．７６（ｍ、１Ｈ）、１．７８（ｍ、１Ｈ）、１．２２−１．０２（ｍ、２Ｈ）、０．８８（ｍ、１５Ｈ）、０．０６（ｓ、６Ｈ）。
【０１５４】
段階２：（２Ｓ）−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−４−メチル−Ｎ−［（１Ｅ）−２，２，２−トリフルオロエチリデン］ペンタン−２−アミン
段階１から得られた（２Ｓ）−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−４−メチルペンタン−２−アミン（５０ｇ）とトリフルオロアセトアルデヒド（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔａｌｄｅｈｙｄｅ）メチルヘミアセタール（３５ｍＬ）のトルエン（３００ｍＬ）溶液を１６時間加熱還流した。加熱還流中に水はＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋトラップに収集された。溶媒を減圧蒸発させ、残渣をＳｉＯ２上でへキサンと酢酸エチル（９：１）を溶離剤として用いて精製して標記化合物を得た。
【０１５５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ７．８８（ｍ、１Ｈ）、３．７６−３．４５（ｍ、３Ｈ）、１．６０−１．２５（ｍ、３Ｈ）、０．８８（ｍ、１５Ｈ）、０．０６（ｓ、３Ｈ）、０．０４（ｓ、３Ｈ）。
【０１５６】
段階３：（２Ｓ）−２−｛［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］アミノ｝−４−メチルペンタン−１−オール
ｎ−ＢｕＬｉ（２．５Ｍへキサン溶液、４２ｍＬ）を１，４−ジブロモベンゼン（２５．８ｇ）の−７０℃  ＴＨＦ（４００ｍＬ）溶液に添加し、その混合物を２５分間撹拌した。次いで、（２Ｓ）−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−４−メチル−Ｎ−［（１Ｅ）−２，２，２−トリフルオロエチリデン］ペンタン−２−アミン（３１ｇ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液を滴下し、その混合物を１．５時間撹拌した。次いで、それを酢酸エチル（５００ｍＬ）、水（２Ｌ）、氷（３００ｇ）及び塩化アンモニウム（１００ｇ）の混合物に激しく撹拌しながら徐々に注いだ。有機層を分離し、水層を酢酸エチル（２×５００ｍＬ）でさらに抽出した。混合有機層を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧除去して残渣を得た。これをそのまま使用した。上で得られた残渣をＴＨＦ（２５０ｍＬ）に溶解し、溶液を０℃に冷却したフッ化ｔ−ブチルアンモニウム（１１０ｍＬ）の１Ｍ  ＴＨＦ溶液を滴下し、その混合物を４時間反応させた。それを酢酸エチル（３００ｍＬ）、水（２Ｌ）及び塩化アンモニウム（１００ｇ）に激しく撹拌しながら注いだ。有機層を分離し、水層を酢酸エチル（２×１００ｍＬ）でさらに抽出した。混合有機層を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧除去して残渣を得た。これをＳｉＯ２上で溶離剤として酢酸エチルとへキサン（１：５から１：４）の勾配を用いて精製して標記化合物を得た。
【０１５７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ７．６（２Ｈ、ｄ）、７．４５（２Ｈ、ｄ）、４．５５（１Ｈ、ｍ）、３．６５−３．７（１Ｈ、ｍ）、３．５−３．５５（１Ｈ、ｍ）、３．２５−３．３５（１Ｈ、ｍ）、２．６−２．７（１Ｈ、ｍ）、２．２５−２．３５（１Ｈ、ｍ）、１．６５−１．７５（１Ｈ、ｍ）、１．３−１．４（１Ｈ、ｍ）、１．２−１．３（１Ｈ、ｍ）、０．７５−０．９（６Ｈ、ｄｄ）。
【０１５８】
段階４：（２Ｓ）−４−メチル−２−（｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルチオ）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル}アミノ）ペンタン−１−オール
段階３から得られた臭化物（２７．７ｇ）、４−（メチルチオ）フェニルボロン酸（１５．７ｇ）、２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３（１００ｍＬ）及びｎ−プロパノール（５００ｍＬ）からなる懸濁液に窒素気流を１５分間通した。次いで、Ｐｄ（ＯＡｃ）２とＰＰｈ３の１：３混合物（３．５ｇ）を添加し、反応物を７０℃に加温し、窒素下で８時間撹拌した。混合物を室温に冷却し、酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水（２Ｌ）と氷（５００ｇ）の上に注いだ。酢酸エチル層を分離し、水層を酢酸エチル（２００ｍＬ）でさらに抽出した。混合酢酸エチル抽出物を０．５Ｎ  ＮａＯＨ（２×２００ｍＬ）、ＮＨ４Ｃｌ水溶液、塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を除去して残渣を得た。これをＳｉＯ２上のクロマトグラフィーにかけ酢酸エチルとへキサンの勾配（１：４から１：３）を用い、再度アセトンとトルエン（１：１０）を用いて精製した。加温されたへキサン（２００ｍＬ）に残渣を溶解し、その溶液を撹拌しながら０℃に冷却した。得られた固体をろ過し、乾燥して標記化合物を得た。
【０１５９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ７．７（２Ｈ、ｄ）、７．６５（２Ｈ、ｄ）、７．６（２Ｈ、ｄ）、７．３５（２Ｈ、ｄ）、４．５−４．６（１Ｈ、ｍ）、３．７（１Ｈ（ＯＨ）、ｍ）、３．５−３．６（１Ｈ、ｍ）、３．３−３．４（１Ｈ、ｍ）、２．７（１Ｈ、ｍ）、２．５（３Ｈ、ｓ）、２．３−２．４（１Ｈ（ＮＨ）、ｍ）、１．６５−１．７５（１Ｈ、ｍ）、１．２−１．４（３Ｈ、ｍ）、０．８−０．９（６Ｈ、ｄｄ）。
【０１６０】
段階５：（２Ｓ）−４−メチル−２−（｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝アミノ）ペンタン−１−オール
段階４から得られたスルフィド（１９ｇ）の０℃トルエン（４００ｍＬ）溶液にＮａ２ＷＯ４・２Ｈ２Ｏ（０．１６ｇ）及びＢｕ４ＮＨＳＯ４（０．８１ｇ）を添加した。次いで、３０％過酸化水素（１２．２ｍＬ）を徐々に添加し、混合物を室温で４．５時間撹拌した。その混合物を氷、希チオ硫酸ナトリウム水溶液及び酢酸エチルの混合物に徐々に注いだ。有機層を分離し、水層を酢酸エチル（２×１００ｍＬ）でさらに抽出した。混合有機層を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧除去して残渣を得た。これをＳｉＯ２上で溶離剤として酢酸エチルとへキサン（１：１）を用いて精製して生成物を得た。
【０１６１】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ８．０５（２Ｈ、ｄ）、８．０（２Ｈ、ｄ）、７．８５（２Ｈ、ｄ）、７．７（２Ｈ、ｄ）、４．６−４．７（１Ｈ、ｍ）、３．７５（１Ｈ、ｍ）、３．６（１Ｈ、ｍ）、３．３５−３．４５（１Ｈ、ｍ）、３．２（３Ｈ、ｓ）、２．７−２．８（１Ｈ、ｍ）、２．３５−２．４５（１Ｈ、ｍ）、１．７−１．８（１Ｈ、ｍ）、１．２−１．５（２Ｈ、ｍ）、０．８−０．９５（６Ｈ、ｄｄ）。
【０１６２】
段階６：Ｎ−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンの調製
Ｈ５ＩＯ６／ＣｒＯ３（０．４４Ｍ  ＣＨ３ＣＮ溶液５２９ｍＬ；以下の注記参照）の懸濁液を０℃に冷却し、段階５から得られたアルコール（２０ｇ）のＣＨ３ＣＮ（２３０ｍＬ）溶液を滴下した。その混合物を０から５℃で３．５時間撹拌した。それをｐＨ４  Ｎａ２ＨＰＯ４（１．５Ｌ）に激しく撹拌しながら注ぎ、混合物をジエチルエーテル（３×２５０ｍＬ）で抽出した。混合エーテル抽出物を水と塩水（１：１）、希ＮａＨＳＯ３水溶液及び塩水で洗浄した。有機抽出物を硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、溶媒を蒸発乾固させて残渣を得た。これを後続の精製のために２つのバッチに分けた。
【０１６３】
上で得られた粗製酸（１０ｇ）を酢酸イソプロピル（２５０ｍＬ）に溶解し、冷０．１Ｎ  ＮａＯＨ（３×２５０ｍＬ）で抽出した。混合抽出物をジエチルエーテル（２５０ｍＬ）で洗浄し、次いで６Ｎ  ＨＣｌでｐＨ４に徐々に酸性化した。カルボン酸を酢酸イソプロピル（２×２５０ｍＬ）で抽出し、酢酸イソプロピル層を脱水し、濃縮して本質的に純粋な生成物を得た。これを次の段階にそのまま使用した。
【０１６４】
注：酸化試薬（Ｈ５ＩＯ６／ＣｒＯ３）は、ＨＰＬＣ等級ＣＨ３ＣＮ（水０．５％を含む）を用い水を添加しなかった以外は、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ３９（１９９８）５３２３−５３２６に記載のとおり調製された。
【０１６５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ８．０５（２Ｈ、ｄ）、７．９５（２Ｈ、ｄ）、７．８（２Ｈ、ｄ）、７．６５（２Ｈ、ｄ）、４．４５−４．５５（１Ｈ、ｍ）、３．５５−３．６（１Ｈ、ｍ）、３．２（３Ｈ、ｓ）、２．８−３．０（ブロード  ｍ、ＮＨ／ＯＨ）  １．９５−２．０５（１Ｈ、ｍ）、１．５５−１．６（２Ｈ、ｍ）、０．９−１．０（６Ｈ、ｍ）。
段階７：Ｎ１（シアノメチル）−Ｎ２｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの調製
段階７から得られた酸（９ｇ）のＤＭＦ（２００ｍＬ）溶液に、ベンゾトリアゾル−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（１１．６ｇ）、アミノアセトニトリル塩酸塩（３．９４ｇ）を添加し、その混合物を０℃に冷却した。トリエチルアミン（９．９ｍＬ）を滴下し、混合物を室温に加温し、１６時間撹拌した。それを氷と炭酸水素ナトリウム飽和水溶液の中に注ぎ、ジエチルエーテル（３×１００ｍＬ）で抽出した。混合抽出物を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧除去した。残渣をＳｉＯ２上のクロマトグラフィーにかけ酢酸エチルとへキサン（１：１）を用いて精製した。次いで、標記化合物をジエチルエーテル中で１６時間撹拌し、ろ過し、乾燥させた（ｍｐ  １４０．５℃）。
【０１６６】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ８．０（２Ｈ、ｄ）、７．９５（２Ｈ、ｄ）、７．８（２Ｈ、ｄ）、７．６５（２Ｈ、ｄ）、４．３５−４．４５（１Ｈ、ｍ）、４．１−４．２（２Ｈ、ｍ）、３．４５−３．５５（１Ｈ、ｍ）、３．１５（３Ｈ、ｓ）、２．６５−２．７（１Ｈ、ｍ）、１．８５−１．９５（１Ｈ、ｍ）、１．４−１．６（２Ｈ、ｍ）、０．８５−０．９５（６Ｈ、ｍ）。
【実施例５】
【０１６７】
Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの調製
【０１６８】
【化２８】
2007503401.tif 000032
【０１６９】
段階１：ベンジル（３Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−ヒドロキシブタノアート
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アスパラギン酸４−ベンジルエステル（３０ｇ）をジメトキシエタン（９０ｍＬ）に溶解し、その溶液を−５℃に冷却した。Ｎ−メチルモルホリン（１０．３２ｍＬ）、続いてクロロギ酸イソブチル（１２．７ｍＬ）を温度が−１０℃未満に維持されるように添加した。混合物を０．５時間熟成させた。固体を素早くろ過し、ジメトキシエタン（９０ｍＬ）で洗浄した。−５０℃に冷却されたろ液に水素化ホウ素ナトリウム（４．４ｇ）を水溶液（４５ｍＬ）として、温度が−３０℃から−１５℃に維持されるように慎重に添加した。すべての水素化物が添加された後に、水（５００ｍＬ）を温度が−１５℃未満に維持されるように添加した。懸濁液をろ過し、固体を水（４００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させてベンジル（３Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−ヒドロキシブタノアートを得た。
【０１７０】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ７．３−７．４５（５Ｈ、ｍ）、５．８５−５．９５（１Ｈ、ＮＨ）、５．１５（２Ｈ、ｓ）、３．９５−４．１（２Ｈ、ｍ）、３．５−３．７（２Ｈ、ｍ）、２．５５−２．７５（２Ｈ、ｍ）、１．４（９Ｈ、ｓ）。
【０１７１】
段階２：ベンジル［（４Ｓ）−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−４−イル］アセタート
段階１から得られ、ジクロロエタン（９２５ｍＬ）に溶解されたアルコール（９５．７ｇ）にピリジン（６２５ｍＬ）を添加し、混合物を０から５℃に冷却した。無水ｐ−トルエンスルホン酸無水物（１０５．７ｇ）を添加し、混合物を室温に加温し、１時間撹拌した。次いでそれを９０℃に２時間加熱した。混合物を冷却し、ジクロロメタン（１０００ｍＬ）で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ（３×６００ｍＬ）で洗浄した。有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、溶媒を減圧除去した。残渣をＳｉＯ２上のクロマトグラフィーにかけ１：１の比率の酢酸エチルとへキサン、続いて酢酸エチルを用いて精製して、ベンジル［（４Ｓ）−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−４−イル］アセタートを得た。
【０１７２】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＳＯＣＤ３）  δ  ７．８（１Ｈ、ＮＨ）、７．３−７．４５（５Ｈ、ｍ）、５．０５−５．１５（２Ｈ、ｍ）、４．４−４．５（１Ｈ、ｍ）、４．１−４．２（１Ｈ、ｍ）、４．０−４．０５（１Ｈ、ｍ）、３．６−３．８（２Ｈ、ｍ）。
【０１７３】
段階３：（４Ｓ）−４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）−１，３−オキサゾリジン−２−オン
臭化メチルマグネシウム（３Ｍジエチルエーテル溶液２２７ｍＬ）をトルエン（３４０ｍＬ）とＴＨＦ（３４０ｍＬ）の混合物に−２０℃で添加した。次いで、段階２から得られたエステル（４０ｇ）を温かいＴＨＦ溶液（１７０ｍＬ）として温度を−１０℃未満に維持しながら滴下し、混合物を２時間熟成した。次いで、その混合物を水（１０００ｍＬ）と酢酸（２００ｍＬ）の混合物に徐々に添加し、その混合物を室温で２時間撹拌した。水層を分離し、有機層を水（２×２００ｍＬ）で抽出した。ジクロロメタン及び連続抽出装置を用いて生成物を混合水層から抽出した。ヘプタンを利用してジクロロメタン抽出物を蒸発乾固させた。残渣をＳｉＯ２上のクロマトグラフィーにかけエタノールとジクロロメタン（１：３０）を用いて精製して（４Ｓ）−４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）−１，３−オキサゾリジン−２−オンを得た。
【０１７４】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ６．１−６．４（１Ｈ、ＮＨ）、４．４５−４．５５（１Ｈ、ｍ）、４．１−４．２（１Ｈ、ｍ）、３．９５−４．０５（１Ｈ、ｍ）、３．７（１Ｈ、ｓ）、１．６５−１．８５（２Ｈ、ｍ）、１．２５（６Ｈ、ｍ）。
【０１７５】
段階４：（４Ｓ）−４−（２−フルオロ−２−メチルプロピル）−１，３−オキサゾリジン−２−オン
段階３から得られたアルコール（４７．８ｇ）をジクロロメタン（１００ｍＬ）溶液として（ジエチルアミノ）硫黄トリフルオリド（４８．５ｇ）の−７０℃ジクロロメタン（５００ｍＬ）溶液に添加した。混合物を室温に加温し、１時間撹拌した。次いで、それをＮａＨＣＯ３飽和水溶液（８００ｍＬ）の０℃混合物に慎重に添加した。有機層を分離し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液で洗浄した。その水溶液をジクロロメタン（１００ｍＬ）でさらに抽出し、混合ジクロロメタン層を脱水し、濃縮した。残渣をＳｉＯ２上のクロマトグラフィーにかけ酢酸エチルとへキサン（１：５）、続いて酢酸エチルを用いて精製して（４Ｓ）−４−（２−フルオロ−２−メチルプロピル）−１，３−オキサゾリジン−２−オンを得た。
【０１７６】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＳＯＣＤ３）  δ  ７．６（１Ｈ、ＮＨ）、４．４−４．５（１Ｈ、ｍ）、３．９５−４．０５（１Ｈ、ｍ）、３．９−３．９５（１Ｈ、ｍ）、１．８−１．９５（２Ｈ、ｍ）、１．２５−１．４（６Ｈ、２ｓ）。
【０１７７】
段階５：（２Ｓ）−２−アミノ−４−フルオロ−４−メチルペンタン−１−オール
段階４から得られ、９０％エチルアルコール水溶液（２１６ｍＬ）に溶解されたフルオロ誘導体（２１．０ｇ）に水酸化カリウム（２１．９ｇ）を添加した。混合物を４時間加熱還流し、室温に冷却した。次いで、混合物を濃縮し、トルエン（３×３００ｍＬ）と同時蒸発させた。残渣をジクロロメタン（５００ｍＬ）に溶解し、０．５時間撹拌した。懸濁液をセライトによってろ過し、セライトをジクロロメタン（３×１００ｍＬ）で洗浄した。ろ液を濃縮乾固して（２Ｓ）−２−アミノ−４−フルオロ−４−メチルペンタン−１−オールを得た。
【０１７８】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）  δ  ３．４−３．５（１Ｈ、ｍ）、３．２−３．３（１Ｈ、ｍ）、３．０−３．１（１Ｈ、ｍ）、１．５−１．７（２Ｈ、ｍ）、１．３５（３Ｈ、ｓ）、１．３（３Ｈ、ｓ）。
【０１７９】
段階６：（２Ｓ）−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−４−フルオロ−４−メチルペンタン−２−アミン
段階５から得られたアミノアルコール（２１．０ｇ）をジクロロメタン（３００ｍＬ）に溶解し、その溶液を０℃に冷却した。４−（ジメチルアミノ）ピリジン（０．０５１ｇ）及び塩化ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（２１ｇ）、続いてトリエチルアミン（２５ｍＬ）を添加した。その混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を０℃塩化アンモニウム飽和水溶液に徐々に注ぎ、ジクロロメタン（３×３００ｍＬ）で抽出した。有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、溶媒を減圧除去して（２Ｓ）−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−４−フルオロ−４−メチルペンタン−２−アミンを得た。
【０１８０】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）  δ  ３．６−３．６５（１Ｈ、ｍ）、３．４−３．５（１Ｈ、ｍ）、３．１−３．２（１Ｈ、ｍ）、１．６−１．８（２Ｈ、ｍ）、１．３５−１．４５（６Ｈ、ｍ）、０．９３（９Ｈ、ｓ）、０．１（６Ｈ、ｓ）。
【０１８１】
段階７：（２Ｓ）−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−４−フルオロ−４−メチル−Ｎ−［（１Ｅ）−２，２，２−トリフルオロエチリデン］ペンタン−２−アミン
段階６から得られ、ベンゼン（１２６ｍＬ）に溶解されたアミン（３１．５ｇ）にトリフルオロアセトアルデヒドメチルヘミアセタール（２１．６ｍＬ）を添加した。その溶液をＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋトラップを用いて終夜加熱還流して水を収集した。反応混合物を室温に冷却し、濃縮乾固した。残渣をＳｉＯ２上で４％酢酸エチルのへキサン溶液を用いて精製して（２Ｓ）−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−４−フルオロ−４−メチルペンタン−２−アミンを得た。
【０１８２】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ７．９−７．９５（１Ｈ、ｍ）、３．７５−３．８５（１Ｈ、ｍ）、３．７−３．７５（１Ｈ、ｍ）、３．５３−３．６（１Ｈ、ｍ）、１．９−２．０（２Ｈ、ｍ）、１．３−１．４（６Ｈ、ｍ）、０．９（９Ｈ、ｓ）、０．１（３Ｈ、ｓ）、０．０５（３Ｈ、ｓ）。
【０１８３】
段階８：（２Ｓ）−２−｛［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］アミノ｝−４−フルオロ−４−メチルペンタン−１−オール
１，４−ジブロモベンゼン（０．２６ｇ）の−７５℃  ＴＨＦ（４ｍＬ）溶液にｎ−ＢｕＬｉ（２．５Ｍへキサン溶液０．４２ｍＬ）を添加し、その混合物を２０分間熟成した。段階７から得られたイミン（０．３２９ｇ）のＴＨＦ（２ｍＬ）溶液を添加し、その混合物を２時間熟成した。次いで、混合物を水（５０ｍＬ）、ＮＨ４Ｃｌ（１ｇ）及び砕氷の混合物に添加した。それを酢酸エチル（２×２５ｍＬ）で抽出し、混合酢酸エチル層を脱水し、蒸発乾固させた。
【０１８４】
ジブロモベンゼン（１．２ｇ）、ｎ−ＢｕＬｉ（１．８４ｍＬ）及びイミン（１．３８ｇ）を用いた以外は同じ手順を繰り返し、反応混合物を上記の通り処理した。両方の調製物から得られた混合残渣をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した。フッ化ｎ−テトラブチルアンモニウム（１Ｍ  ＴＨＦ溶液６ｍＬ）を添加し、その混合物を＋５℃で１６時間撹拌した。それを水（５０ｍＬ）、塩化アンモニウム（１ｇ）及び砕氷の混合物に注ぎ、有機層を分離した。その水溶液を酢酸エチル（２×１５ｍＬ）でさらに抽出し、混合有機層を脱水し、濃縮した。残渣をＳｉＯ２上で酢酸エチルとへキサン（１：５）を用いて精製して（２Ｓ）−２−｛［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］アミノ｝−４−フルオロ−４−メチルペンタン−１−オールを得た。
【０１８５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ７．６５（２Ｈ、ｍ）、７．５（２Ｈ、ｍ）、４．５−４．６（１Ｈ、ｍ）、３．８（１Ｈ、ｍ）、３．６（１Ｈ、ｍ）、３．３−３．４（１Ｈ、ｍ）、２．８５−２．０（１Ｈ、ｍ）、２．５５（１Ｈ、ｍ）、１．７−１．９（２Ｈ、ｓ）、１．３−１．４（６Ｈ、ｍ）。
【０１８６】
段階９：Ｎ−［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］−４−フルオロ−Ｌ−ロイシン
Ｈ５ＩＯ６／ＣｒＯ３（０．４４Ｍ  ＣＨ３ＣＮ溶液６６ｍＬ；注）の懸濁液を０℃に冷却し、段階８から得られたアルコール（１．５５ｇ）のＣＨ３ＣＮ（５ｍＬ）溶液を滴下した。その混合物を０から５℃で３．５時間撹拌した。それをｐＨ４  Ｎａ２ＨＰＯ４（２００ｍＬ）に激しく撹拌しながら注ぎ、その混合物をジエチルエーテル（３×５０ｍＬ）で抽出した。混合エーテル抽出物を水と塩水（１：１）、続いて希ＮａＨＳＯ３水溶液及び塩水で洗浄した。それを硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、溶媒を蒸発乾固させて、次の段階にそのまま使用されたＮ−［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］−４−フルオロ−Ｌ−ロイシンを得た。
【０１８７】
注：酸化試薬（Ｈ５ＩＯ６／ＣｒＯ３）は、ＨＰＬＣ等級ＣＨ３ＣＮ（水０．５％を含む）を用い水を添加しなかった以外は、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ３９（１９９８）５３２３−５３２６に記載のとおり調製された。
【０１８８】
段階１０：Ｎ２−［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］−Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｌ−ロイシンアミド
ジイソプロピルエチルアミン（４．２ｍＬ）を、段階９から得られた酸（１．５ｇ）、１−アミノ−１−シクロプロパンカルボニトリル塩酸塩（１．１８ｇ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾル−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（１．９４ｇ）及びジメチルホルムアミド（５ｍＬ）の０℃懸濁液に添加し、その混合物を室温で４８時間反応させた。次いで、それを氷と希塩化アンモニウム水溶液の上に注いだ。混合物を酢酸エチルとエーテル（１：１）で抽出し、混合有機層をｐＨ３希Ｎａ２ＨＰＯ４及び塩水で洗浄した。溶媒を蒸発乾固させ、残渣をＳｉＯ２上のクロマトグラフィーにかけ酢酸エチルとへキサン（１：２）を用いて精製して、次の段階に十分な純度のＮ２−［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］−Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｌ−ロイシンアミドを得た。
【０１８９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ８．１５（１Ｈ、ＮＨ）、７．６（２Ｈ、ｍ）、７．４５（２Ｈ、ｍ）、４．３５−４．４５（１Ｈ、ｍ）、３．４５−３．５５（１Ｈ、ｍ）、１．９−２．１（２Ｈ、ｍ）、１．７５−１．８５（１Ｈ、ＮＨ）、１．３５−１．５５（８Ｈ、ｍ）、１．１−１．１５（１Ｈ、ｍ）、０．９５−１．０５（１Ｈ、ｍ）。
【０１９０】
段階１１：Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｎ２−｛［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルチオ）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミド
段階１０から得られた臭化物（０．３３８ｇ）、４−（メチルチオ）フェニルボロン酸（０．２５２ｇ）、２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３（０．８ｍＬ）及びＤＭＦ（４ｍＬ）からなる懸濁液に窒素気流を１５分間通した。次いで、ＰｄＣｌ２・ｄｐｐｆ（０．１ｇ）を添加し、反応物を８５℃に加温し、窒素下で５時間撹拌した。その混合物を室温に冷却し、酢酸エチル（１０ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）と氷に注いだ。酢酸エチル層を分離し、水層を酢酸エチルでさらに抽出した。混合酢酸エチル抽出物を脱水し、溶媒を減圧除去した。残渣をＳｉＯ２上のクロマトグラフィーにかけ酢酸エチルとへキサン（１：２）を用いて精製して、Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルチオ）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドを得た。
【０１９１】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ８．１５（１Ｈ、ＮＨ）、７．１−７．２（４Ｈ、ｍ）、７．５−７．５５（２Ｈ、ｍ）、７．３５−７．４（２Ｈ、ｍ）、４．３−４．４（１Ｈ、ｍ）、３．４５−３．５５（１Ｈ、ｍ）、２．７５−２．８（１Ｈ、ＮＨ）、２．５（３Ｈ、ｓ）、１．９−２．０５（２Ｈ、ｍ）、１．３−１．５（８Ｈ、ｍ）、１．０−１．１（１Ｈ、ｍ）、０．８５−０．９５（１Ｈ、ｍ）。
【０１９２】
段階１２：Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの調製
段階１１から得られたスルフィド（０．２６５ｇ）のトルエン（５ｍＬ）とジクロロメタン（５ｍＬ）の０°溶液にＮａ２ＷＯ４・２Ｈ２Ｏ（０．００２ｇ）及びｎ−Ｂｕ４ＮＨＳＯ４（０．０１ｇ）を添加した。次いで、３０％過酸化水素（０．１３７ｍＬ）を徐々に添加し、その混合物を室温で３時間撹拌した。その混合物を氷、希チオ硫酸ナトリウム水溶液及び酢酸エチルの混合物に徐々に注いだ。有機層を分離し、水層を酢酸エチルでさらに抽出した。混合有機層を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧除去して残渣を得た。これをＳｉＯ２上で溶離剤として酢酸エチル、へキサン及びジクロロメタン（１：１：０．１）を用いて精製した。残渣をジエチルエーテル中ですり潰してＮ１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドを得た。
【０１９３】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ８．２（１Ｈ、ＮＨ）、８．０５−８．１（２Ｈ、ｍ）、７．９５−８．０（２Ｈ、ｍ）、７．８（２Ｈ、ｍ）、７．６５（２Ｈ、ｍ）、４．３５−４．４５（１Ｈ、ｍ）、３．５−３．６（１Ｈ、ｍ）、３．２（３Ｈ、ｓ）、２．８−２．９（１Ｈ、ＮＨ）、１．９−２．１（２Ｈ、ｍ）、１．３−１．５（８Ｈ、ｍ）、１．０５−１．１５（１Ｈ、ｍ）、０．９−１．０（１Ｈ、ｍ）。
【実施例６】
【０１９４】
Ｎ２−［１−（３−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］−Ｎ１−（シアノメチル）−Ｌ−ロイシンアミドの合成
【０１９５】
【化２９】
2007503401.tif 000033
【０１９６】
２，２，２−トリフルオロアセトフェノンが１−（３−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエタノンで置換された実施例１に記載の手順を用いて標記化合物を調製した。
【０１９７】
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：４０６．０、４０８．１［Ｍ＋１］＋。
【実施例７】
【０１９８】
Ｎ１−（シアノメチル）−Ｎ２−［２，２，２−トリフルオロ−１−（４−ピペラジン−１−イルフェニル）エチル］−Ｌ−ロイシンアミド
【０１９９】
【化３０】
2007503401.tif 000034
【０２００】
段階１：Ｎ２−（１−｛４−［４−（ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシラート）ピペラジン−１−イル］フェニル｝−２，２，２−トリフルオロエチル）−Ｎ１−（シアノメチル）−Ｌ−ロイシンアミド
Ｎ２−［１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］−Ｎ１−（シアノメチル）−Ｌ−ロイシンアミド（実施例２）（１００ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（２．３ｍｇ、０．００２５ｍｍｏｌ）、ビフェニル−２−イル（ジ−ｔｅｒｔ−ブチル）ホスフィン（３ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（７４ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）及びｔｅｒｔ−ブチルピペラジン−１−カルボキシラート（５６ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）のジメトキシエタン（０．５ｍＬ）溶液を−７８℃に冷却し、高真空下で３分間ポンプ注入し、次いで窒素をフラスコに入れた。次いで、その混合物を８０℃で１時間加熱した。室温に冷却後、混合物をシリカゲルカラムに直接かけ、酢酸エチル／へキサンで溶出させて標記化合物を得た。
【０２０１】
段階２：Ｎ１−（シアノメチル）−Ｎ２−［２，２，２−トリフルオロ−１−（４−ピペラジン−１−イルフェニル）エチル］−Ｌ−ロイシンアミド
段階１から得られた化合物（１３９ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（０．５ｍＬ）溶液にメタンスルホン酸（５３ｕＬ、０．８２ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を終夜撹拌した。次いで、酢酸エチルを添加し、その混合物を飽和炭酸水素ナトリウム、塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムを用いて脱水し、ろ過し、溶媒を減圧蒸発させた。シリカゲルクロマトグラフィーにかけ９３％ジクロロメタン、０．６％水酸化アンモニウム及び６．４％メタノールで溶出させて精製して標記化合物を得た。
【０２０２】
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：４１２．２［Ｍ＋１］＋。
【実施例８】
【０２０３】
【化３１】
2007503401.tif 000035
【０２０４】
Ｎ２−（（１Ｓ）−１−｛４’−［１−（アミノカルボニル）シクロプロピル］ビフェニル−４−イル｝−２，２，２−トリフルオロエチル）−Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｌ−ロイシンアミドの合成
段階１：１−（４−ブロモフェニル）シクロプロパンカルボニトリルの調製
４−ブロモフェニルアセトニトリル（１８．０ｇ）の水酸化ナトリウム（５０％Ｗ／Ｗ水溶液）２２ｍＬの室温溶液に１−ブロモ−２−クロロエタン（１２．０ｍＬ）及び塩化ベンジルトリメチルアンモニウム（６２７ｍｇ）を添加した。その混合物を６０℃で終夜加熱した。反応混合物を室温に冷却し、ジエチルエーテルを添加した（３００ｍＬ。エーテル層を水（１００ｍＬ）、塩化水素（１００ｍＬ、１０％ＨＣｌ水溶液）及び塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧除去した。残渣をジエチルエーテルとへキサンを用いてすり潰して精製して標記化合物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ７．６０（２Ｈ、ｄ）、７．３５（２Ｈ、ｄ）、１．７４−１．８０（２Ｈ、ｍ）、１．５２−１．５７（２Ｈ、ｍ）。
【０２０５】
段階２：１−（４−ブロモフェニル）シクロプロパンカルボン酸の調製
段階１から得られた１−（４−ブロモフェニル）シクロプロパンカルボニトリル（１３ｇ）のエチルアルコール（１１０ｍＬ）室温溶液に水酸化ナトリウム（２５％Ｗ／Ｗ  ＮａＯＨ水溶液）溶液５６ｍＬを添加した。その混合物を１００℃で終夜加熱した。それを室温に冷却し、氷と塩化水素（１Ｎ）に注ぎ、ジクロロメタン（２×１００ｍＬ）で抽出した。混合抽出物を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧除去して標記化合物を得た。
【０２０６】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ７．５０（２Ｈ、ｄ）、７．３５（２Ｈ、ｄ）、１．５３−１．６０（２Ｈ、ｍ）、１．１８−１．２２（２Ｈ、ｍ）。
【０２０７】
段階３：１−（４−ブロモフェニル）シクロプロパンカルボキサミドの調製
段階２から得られた１−（４−ブロモフェニル）シクロプロパンカルボン酸（１．５ｇ）の−１５℃クロロホルム（６０ｍＬ）溶液にクロロギ酸イソブチル（９００μＬ）及びトリエチルアミン（１．１ｍＬ）を徐々に添加した。その反応混合物を−１５℃で２時間撹拌した。次いで、それをアンモニアガスで飽和させ、−１５℃で１０分間撹拌した。反応混合物を室温で１時間静置し、次いで水（６０ｍＬ）に注ぎ、分配した。水層をジクロロメタン（２×６０ｍＬ）で抽出した。混合抽出物を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧除去した。残渣をジエチルエーテルとへキサンを用いて精製して標記化合物を得た。
【０２０８】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ７．５４（２Ｈ、ｄ）、７．４０（２Ｈ、ｄ）、６．４５（１Ｈ、ｂｓ）、５．９６（１Ｈ、ｂｓ）、１．４２−１．４８（２Ｈ、ｍ）、０．９８−１．０２（２Ｈ、ｍ）。
【０２０９】
段階４：Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの調製
実施例５、段階９から得られたＮ２−［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］−Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｌ−ロイシンアミド（２．０ｇ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（１．２４ｇ）及び酢酸カリウム（１．５３ｇ）のＤＭＦ（４０ｍＬ）懸濁液に窒素気流を１５分間通した。次いで、触媒［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）とジクロロメタン（１８１ｍｇ）の錯体（１：１）を添加し、その混合物を窒素下で６５℃に終夜加温した。その混合物を室温に冷却し、酢酸エチルとへキサン（１：１、１００ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）と氷（５０ｇ）の上に注いだ。有機層を分離し、水層を酢酸エチルとへキサン（１：１、３×５０ｍＬ）でさらに抽出した。混合抽出物を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を除去すると残渣が生成し、それをＳｉＯ２上のクロマトグラフィーにかけ酢酸エチルとへキサン（１：３から１：２）を用いて精製して標記化合物を得た。
【０２１０】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ８．１５（１Ｈ、ｂｓ）、７．７８（２Ｈ、ｄ）、７．５０（２Ｈ、ｄ）、４．３１−４．４０（１Ｈ、ｍ）、３．４７−３．５４（１Ｈ、ｍ）、２．７２−２．８０（２Ｈ、ｍ）、１．３２−１．４８（９Ｈ、ｍ）、１．０５−１．１１（１Ｈ、ｍ）、０．８７−０．９５（１Ｈ、ｍ）。
【０２１１】
段階５：Ｎ２−（（１Ｓ）−１−｛４’−［１−（アミノカルボニル）シクロプロピル］ビフェニル−４−イル｝−２，２，２−トリフルオロエチル）−Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｌ−ロイシンアミドの調製
段階４から得られたボロナート（１５０ｍｇ）、段階３から得られた１−（４−ブロモフェニル）シクロプロパンカルボキサミド（１１０ｍｇ）及び２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３（４００μＬ）のＤＭＦ（４ｍＬ）溶液に窒素気流を１５分間通した。次いで、触媒［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）とジクロロメタン（１２ｍｇ）の錯体（１：１）を添加し、その混合物を窒素下で８０℃に３時間加温した。その混合物を室温に冷却し、氷（１０ｇ）と炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（２０ｍＬ）に注ぎ、５０％酢酸エチル（３×３０ｍＬ）で抽出した。混合抽出物を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を除去すると残渣が生成し、それをＳｉＯ２上のクロマトグラフィーにかけ溶離剤として酢酸エチルとへキサン（５０から７０％）を用いて精製し、続いてジエチルエーテルを用いてスイッシュして標記化合物を得た。
【０２１２】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ８．２０（１Ｈ、ｂｓ）、７．７５（２Ｈ、ｄ）、７．７０（２Ｈ、ｄ）、７．６０（２Ｈ、ｄ）、７．５５（２Ｈ、ｄ）、６．３７（１Ｈ、ｂｓ）、５．８７（１Ｈ、ｂｓ）、４．３５−４．４３（１Ｈ、ｍ）、３．５２−３．５８（１Ｈ、ｍ）、１．９２−２．０５（２Ｈ、ｍ）、１．４２−１．５０（６Ｈ、ｍ）、１．３５−１．４２（４Ｈ、ｍ）、１．０３−１．１２（３Ｈ、ｍ）、０．９２−０．９８（１Ｈ、ｍ）。
【実施例９】
【０２１３】
Ｎ２−［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］−Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−４，４−ジフルオロ−Ｌ−ノルバリンアミド
【０２１４】
【化３２】
2007503401.tif 000036
【０２１５】
段階１：メチルＮ−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−３−ヨード−Ｌ−アラニナートの調製
カルボベンジルオキシ−Ｌ−セリン（２５ｇ、１０４ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（２００ｍＬ）溶液にジアゾメタンのエーテル溶液を淡黄色が持続するまで添加した。溶媒を減圧蒸発させた。その残渣にＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４００ｍＬ）及びヨウ化メチルトリフェノキシホスホニウム（５０ｇ、１１０ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を１５分間撹拌し、次いで、メタノール（１５ｍＬ）を添加し、次いでその混合物を２０％チオ硫酸ナトリウム上に注ぎ、酢酸エチル：へキサン（２Ｌ）の１：１混合物で抽出した。有機層を水、塩水（３×）で洗浄し、硫酸マグネシウムを用いて脱水し、ろ過し、溶媒を減圧蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにかけ酢酸エチルとへキサンを用いて精製した。得られた化合物をジエチルエーテル／へキサン中ですり潰し、ろ過し、風乾してメチルＮ−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−３−ヨード−Ｌ−アラニナートを得た。
【０２１６】
段階２：メチルＮ−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−４−オキソ−Ｌ−ノルバリナートの調製
段階１から得られたメチルＮ−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−３−ヨード−Ｌ−アラニナート（１０ｇ、２７．５ｍｍｏｌ）、亜鉛−銅合金（３．３ｇ）のベンゼン（１１０ｍＬ）溶液及びＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（７．４ｍＬ）の混合物を超音波浴中で２時間超音波処理した。この期間にわたって、１，２−ジブロモエタン（０．２４ｍＬ）及びクロロトリメチルシラン（０．１７ｍＬ）を３分割して添加した。次いで、この混合物に塩化ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．９５８ｇ、１．４ｍｍｏｌ）及び塩化アセチル（２．５ｍＬ、３５．２ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を７０℃で２時間加熱した。室温に冷却後、その混合物をセライト上で酢酸エチルを用いてろ過し、次いで有機層を塩化アンモニウム飽和溶液、塩水（２×）で洗浄し、硫酸マグネシウムを用いて脱水し、ろ過し、溶媒を減圧蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにかけ酢酸エチルとへキサンを用いて精製して、メチルＮ−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−４−オキソ−Ｌ−ノルバリナートを得た。
【０２１７】
段階３：メチルＮ−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−４，４−ジフルオロ−Ｌ−ノルバリナートの調製
メチルＮ−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−４−オキソ−Ｌ−ノルバリナート（１．３ｇ、４．６５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）とメタノール（０．０１９ｍＬ）の０℃溶液にＤＡＳＴ（２．４６ｍＬ）を徐々に添加した。氷浴を除去し、熱水（５７℃）浴で置換した。熱水浴を３回交換し、次いで、混合物を室温で終夜撹拌した。その混合物を冷飽和ＮａＨＣＯ３上に徐々に注ぎ、酢酸エチルで抽出し、塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムを用いて脱水し、ろ過し、溶媒を減圧蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにかけ酢酸エチルとへキサンを用いて精製して、メチルＮ−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−４，４−ジフルオロ−Ｌ−ノルバリナートを得た。
【０２１８】
段階４：ベンジル（１Ｓ）−３，３−ジフルオロ−１−（ヒドロキシメチル）ブチルカルバメートの調製
メチルＮ−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−４，４−ジフルオロ−Ｌ−ノルバリナート（１．５９ｇ、５．２９ｍｍｏｌ）のエタノール（５０ｍＬ）溶液に塩化リチウム（９１９ｍｇ）を添加し、その混合物を１０分間撹拌した。水素化ホウ素ナトリウム（８２０ｍｇ）を徐々に添加し、その混合物を２時間撹拌した。次いで、水素化ホウ素ナトリウム（１００ｍｇ）を追加し、撹拌を３０分間続けた。その混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌで徐々に中和し、続いて一定分量の水を添加した。その混合物を酢酸エチル（２×）で抽出し、塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムを用いて脱水し、ろ過し、溶媒を減圧蒸発させてベンジル（１Ｓ）−３，３−ジフルオロ−１−（ヒドロキシメチル）ブチルカルバメートを得た。
【０２１９】
段階５：（２Ｓ）−１−（（ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル）オキシ）−４，４−ジフルオロペンタン−２−アミンの調製
（段階４から得られた）ベンジル（１Ｓ）−３，３−ジフルオロ−１−（ヒドロキシメチル）ブチルカルバメートのエタノール（２５ｍＬ）溶液に木炭担持パラジウム（１０％、１５０ｍｇ）を添加し、その混合物をＨ２雰囲気（風船）下で２時間撹拌した。ジクロロメタンを添加し、その混合物をセライトによってろ過した。溶媒を減圧蒸発させた。残渣をジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（１ｍＬ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（１０ｍｇ）及びクロロ−ｔ−ブチルジメチルシラン（８４４ｍｇ）を添加した。その混合物を終夜撹拌し、次いで水及び塩水を添加した。その混合物を酢酸エチル（２×）で抽出し、塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムを用いて脱水し、ろ過し、溶媒を減圧蒸発させて（２Ｓ）−１−（（ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル）オキシ）−４，４−ジフルオロペンタン−２−アミンを得た。
【０２２０】
段階６：（２Ｓ）−１−（（ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル）オキシ）−４，４−ジフルオロ−Ｎ−（（１Ｅ）−２，２，２−トリフルオロエチリデン）ペンタン−２−アミンの調製
段階５から得られた（２Ｓ）−１−（（ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル）オキシ）−４，４−ジフルオロペンタン−２−アミンとトリフルオロアセトアルデヒドメチルヘミアセタール（８０％、０．９ｍＬ）のベンゼン（２０ｍＬ）溶液をＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋ装置を用いて終夜還流した。溶媒を減圧蒸発させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにかけ酢酸エチルとへキサンを用いて精製して（２Ｓ）−１−（（ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル）オキシ）−４，４−ジフルオロ−Ｎ−（（１Ｅ）−２，２，２−トリフルオロエチリデン）ペンタン−２−アミンを得た。
【０２２１】
段階７：（２Ｓ）−２−（（（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル）アミノ）−４，４−ジフルオロペンタン−１−オールの調製
１，４−ジブロモベンゼン（３３０ｍｇ）の−７８℃  ＴＨＦ（５．２ｍＬ）溶液に２．５Ｍ  ｎ−ＢｕＬｉのへキサン（０．５２ｍＬ）溶液を添加し、その溶液を３０分間熟成した。次いで、（２Ｓ）−１−（（ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル）オキシ）−４，４−ジフルオロ−Ｎ−（（１Ｅ）−２，２，２−トリフルオロエチリデン）ペンタン−２−アミン（３３３ｍｇ）のＴＨＦ（５．２ｍＬ）溶液を添加した。その混合物を−７８℃で４５分間撹拌し、次いで冷飽和塩化アンモニウム上に注ぎ、酢酸エチル（２×）で抽出し、塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムを用いて脱水し、ろ過し、溶媒を減圧蒸発させた。氷／水浴で冷却されたＴＨＦ（１０ｍＬ）に残渣を溶解し、フッ化ｎ−テトラブチルアンモニウム（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、１．５ｍＬ）を添加した。その混合物を０℃で１時間撹拌し、冷水に注ぎ、酢酸エチル（２×）で抽出し、塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムを用いて脱水し、ろ過し、溶媒を減圧蒸発させて（２Ｓ）−２−（（（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル）アミノ）−４，４−ジフルオロペンタン−１−オールを得た。
【０２２２】
段階８：Ｎ２−［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］−Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−４，４−ジフルオロ−Ｌ−ノルバリンアミドの調製
Ｈ５ＩＯ６／ＣｒＯ３（０．４４Ｍ  ＣＨ３ＣＮ溶液２７ｍＬ；注）の懸濁液を０℃に冷却し、段階７から得られたアルコール（７４０ｍｇ）のＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）溶液を滴下した。その混合物を０℃で４時間撹拌し、さらにＨ５ＩＯ６／ＣｒＯ３（０．４４Ｍ  ＣＨ３ＣＮ溶液２×１０ｍＬ）を添加した。次いで、その混合物をｐＨ４  Ｎａ２ＨＰＯ４緩衝剤に激しく撹拌しながら注ぎ、その混合物を酢酸エチルで抽出し、塩水（２×）、続いて希ＮａＨＳＯ３水溶液及び塩水で洗浄した。その混合物を硫酸マグネシウムで脱水し、ろ過し、溶媒を蒸発乾固させてＮ−［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］−４，４−ジフルオロ−Ｌ−ノルバリンを得た。これを次の段階にそのまま使用した。
【０２２３】
注：酸化試薬（Ｈ５ＩＯ６／ＣｒＯ３）は、ＨＰＬＣ等級ＣＨ３ＣＮ（水０．５％を含む）を用い水を添加しなかった以外は、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ３９（１９９８）５３２３−５３２６に記載のとおり調製された。
【０２２４】
上で得られた酸（３４０ｍｇ）、１−アミノ−１−シクロプロパンカルボニトリル塩酸塩（２２７ｍｇ）、ベンゾトリアゾル−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（４９８ｍｇ）及びジメチルホルムアミド（４．５ｍＬ）の混合物にトリエチルアミン（０．４２ｍＬ）を添加し、その混合物を室温で４８時間反応させた。次いで、それを希炭酸水素ナトリウム上に注いだ。その混合物をエチルエーテル（３×）で抽出し、混合有機層を塩水（３×）で洗浄し、ろ過された硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を蒸発乾固させ、残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィーにかけ酢酸エチル４０％とへキサンを用いて精製してＮ２−［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］−Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−４，４−ジフルオロ−Ｌ−ノルバリンアミドを得た。
【０２２５】
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：４５４．１、４５６．２［Ｍ＋１］＋。
【実施例１０】
【０２２６】
Ｎ２−［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］−Ｎ１−（シアノメチル）−４，４−ジフルオロ−Ｌ−ノルバリンアミド
【０２２７】
【化３３】
2007503401.tif 000037
【０２２８】
段階８において１−アミノ−１−シクロプロパンカルボニトリル塩酸塩でアミノアセトニトリル塩酸塩を置換した実施例９に記載の手順を用いて標記化合物を得た。
【０２２９】
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：４２８、４３０．１［Ｍ＋１］＋。
【実施例１１】
【０２３０】
４−フルオロ−Ｎ１−［（２Ｒ，３Ｓ）−２−メチル−４−オキソテトラヒドロフラン−３−イル］−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミド
【０２３１】
【化３４】
2007503401.tif 000038
【０２３２】
段階１：Ｎ２−［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］−４−フルオロ−Ｎ１−［（２Ｒ，３Ｓ）−２−メチル−４−オキソテトラヒドロフラン−３−イル］−Ｌ−ロイシンアミド
実施例５、段階９から得られた酸（５００ｍｇ）、（４Ｓ，５Ｒ）−４−アミノ−５−メチルジヒドロフラン−３（２Ｈ）−オン塩酸塩（２２７ｍｇ）（国際公開第００／６９８５５号）、ベンゾトリアゾル−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（７４４ｍｇ）及びジメチルホルムアミド（７ｍＬ）の混合物にトリエチルアミン（０．６３ｍＬ）を添加し、その混合物を室温で３時間反応させた。次いで、それを希炭酸水素ナトリウム上に注いだ。その混合物をエチルエーテル（３×）で抽出し、混合有機層を塩水（３×）で洗浄し、ろ過された硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を蒸発乾固させ、残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィーにかけ酢酸エチル３０％とへキサンを用いて精製して標記化合物を得た。
【０２３３】
段階２：４−フルオロ−Ｎ１−［（２Ｒ，３Ｓ）−２−メチル−４−オキソテトラヒドロフラン−３−イル］−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルチオ）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミド
段階１から得られた臭化物（２００ｍｇ）、４−（メチルチオ）フェニルボロン酸（１０４ｍｇ）、２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液（０．５１ｍＬ）及びＤＭＦ（３ｍＬ）の混合物１５分間。ＰｄＣｌ２ｄｐｐｆ２（１７ｍｇ）を−７８℃に冷却し、高真空下で５分間ポンプ注入し、次いで窒素をフラスコに入れ、その混合物を８０℃で加熱し、窒素下で３時間撹拌した。その混合物を室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、飽和塩化アンモニウム、塩水（３×）で洗浄し、硫酸マグネシウムを用いて脱水し、ろ過し、溶媒を減圧蒸発させた。シリカゲルクロマトグラフィーにかけ３５％酢酸エチル／へキサンを溶離剤として用いて精製して標記化合物を得た。
【０２３４】
段階３：４−フルオロ−Ｎ１−［（２Ｒ，３Ｓ）−２−メチル−４−オキソテトラヒドロフラン−３−イル］−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミド
段階２から得られたスルフィド（１２０ｍｇ）の酢酸エチル（２ｍＬ）溶液にＮａ２ＷＯ４・２Ｈ２Ｏ（１ｍｇ）及びｎ−Ｂｕ４ＮＨＳＯ４（４ｍｇ）を添加した。次いで、３０％過酸化水素（０．０６ｍＬ）を徐々に添加し、その混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、過酸化水素（０．０６ｍＬ）を追加した。次いで、その混合物に酢酸エチルを添加し、濃Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（２×）、塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムを用いて脱水し、ろ過し、溶媒を減圧蒸発させた。シリカゲルクロマトグラフィーにかけ５５％酢酸エチル／へキサンを溶離剤として用いて精製して標記化合物を得た。
【０２３５】
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：５５９．１［Ｍ＋１］＋。
【実施例１２】
【０２３６】
Ｎ１−（１−シアノ−１−メチルエチル）−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの合成
【０２３７】
【化３５】
2007503401.tif 000039
【０２３８】
段階１：２−アミノ−２−メチルプロパンニトリル塩酸塩の調製
塩化アンモニウム（１５．５ｇ）の０℃水（５０ｍＬ）溶液にアセトン（１７ｍＬ）のジエチルエーテル（５０ｍＬ）溶液を添加した。次いで、シアン化ナトリウム（１１．９ｇ）の水（３５ｍＬ）溶液を、温度が１０℃を決して超えない速度で徐々に添加した。シアン化物溶液の添加後、反応混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで終夜静置した。エーテル層を分離し、水層をジエチルエーテル（２×３０ｍＬ）で抽出した。混合有機層を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧除去して残渣を得た。これをメチルアルコール（８０ｍＬ）で希釈した。その溶液を−７８℃で冷却し、アンモニアガスで飽和させた（プランジャー弁及びサーモウェルを備えたＡｃｅ圧力管を使用した）。反応混合物を室温で２日間静置した。過剰のアンモニアを気流で追い出し、メチルアルコールを蒸発除去した。残渣をジエチルエーテル（５０ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却し、次いで塩化水素溶液（１．０Ｍジエチルエーテル溶液）４０ｍＬを添加した。その混合物を３０分間撹拌し、ろ過して標記化合物を得た。
【０２３９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＳＯＣＤ３）  δ  ９．４５（１Ｈ、ｓ）、１．７０（６Ｈ、ｓ）。
【０２４０】
段階２：Ｎ１−（１−シアノ−１−メチルエチル）−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの調製
実施例４、段階６から得られた酸（１．２ｇ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）溶液にベンゾトリアゾル−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（１．５５ｇ）、段階１から得られた２−アミノ−２−メチルプロパンニトリル塩酸塩（７２０ｍｇ）を添加し、その混合物を０℃に冷却した。トリエチルアミン（１．３ｍＬ）を滴下し、混合物を室温に加温し、７２時間撹拌した。それを氷と炭酸水素ナトリウム飽和水溶液の中に注ぎ、ジエチルエーテル（３×５０ｍＬ）で抽出した。混合抽出物を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧除去した。残渣をＳｉＯ２上のクロマトグラフィーにかけ溶離剤として酢酸エチルとへキサン（１：２から１：１）の勾配を用いて精製し、続いてジエチルエーテルとへキサンを用いてすり潰して標記化合物を得た。
【０２４１】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ８．０８（２Ｈ、ｄ）、７．９５（２Ｈ、ｄ）、７．８０（２Ｈ、ｄ）、７．６８（１Ｈ、ｂｓ）、７．６５（２Ｈ、ｄ）、４．３２−４．４２（１Ｈ、ｍ）、３．４３−３．５２（１Ｈ、ｍ）、３．２０（３Ｈ、ｓ）、２．６５−２．７５（１Ｈ、ｍ）、１．９０−２．００（１Ｈ、ｍ）、１．５７（３Ｈ、ｓ）、１．５２（３Ｈ、ｓ）、１．５２−１．５７（１Ｈ、ｍ）、１．４０−１．５０（１Ｈ、ｍ）、０．９０−０．９８（６Ｈ、ｍ）。
【実施例１３】
【０２４２】
Ｎ１−（シアノメチル）−３−（１−メチルシクロプロピル）−Ｎ２−｛２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−アラニンアミド
【０２４３】
【化３６】
2007503401.tif 000040
【０２４４】
段階１：メチルＮ−（ジフェニルメチレン）−４−メチレンノルバリナート
メチルＮ−（ジフェニルメチレン）グリシナート（１２．０ｇ、４７．４ｍｍｏｌ）の０℃  ＴＨＦ（１１８ｍＬ）溶液に１Ｍカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドのＴＨＦ（４９ｍＬ、４９ｍｍｏｌ）溶液を添加した。その混合物は明黄色になり、さらに約１５分間撹拌した。３−ブロモ−２−メチルプロペン（５．２ｍＬ、５１．３ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を室温で２日間撹拌した。水でクエンチした後、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。シリカゲル上でクロマトグラフィーにかけへキサン：ＥｔＯＡｃ（６：１）で溶出させてジアルキル化生成物２．２ｇを極性のより低い成分として得たさらに溶出させると、標記化合物が極性のより高い成分として得られた。
【０２４５】
１Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）  δ  ７．６２−７．１８（ｍ、１０Ｈ）、４．７２（ｓ、１Ｈ）、４．６４（ｓ、１Ｈ）、４．２０（ｄｄ、１Ｈ）、３．６４（ｓ、３Ｈ）、２．６２（ｄｄ、１Ｈ）、２．５０（ｄｄ、１Ｈ）、１．４８（ｓ、３Ｈ）。
【０２４６】
段階２：メチルＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−４−メチレンノルバリナート
段階１から得られたメチルＮ−（ジフェニルメチレン）−４−メチレンノルバリナート（６．２ｇ、２０．２ｍｍｏｌ）と０．５Ｍ  ＨＣｌ（６０ｍＬ）水溶液の混合物を室温で終夜撹拌した。混合物全体をＥｔ２Ｏ（２×）で洗浄した。０℃に冷却後、１Ｍ  ＮａＯＨ（４０ｍＬ、４０ｍｍｏｌ）水溶液、続いてＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）及びクロロギ酸ベンジル（４ｍＬ、２８ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を０℃で２時間撹拌した。次いで、ＥｔＯＡｃ層を分離し、水（２×）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。シリカゲル上でクロマトグラフィーにかけへキサン：ＥｔＯＡｃ（６：１）、次いで（３：１）で溶出させて無色オイルの標記化合物を得た。
【０２４７】
１Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）  δ  ７．４０−７．２５（ｍ、５Ｈ）、６．５４（ｄ、１Ｈ）、５．０６（ｓ、２Ｈ）、４．８２（ｓ、１Ｈ）、４．７８（ｓ、１Ｈ）、４．４０（ｍ、１Ｈ）、３．６８（ｓ、３Ｈ）、２．５２（ｄｄ、１Ｈ）、２．４０（ｄｄ、１Ｈ）、１．７４（ｓ、３Ｈ）。
【０２４８】
段階３：メチルＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−（１−メチルシクロプロピル）アラニナート
０℃のＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）にジエチル亜鉛（２ｍＬ、１９．５ｍｍｏｌ）を添加し、続いてトリフルオロ酢酸（１．５ｍＬ、１９．５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（８ｍＬ）溶液を滴下した。１５分間撹拌した後、ジヨードメタン（１．６ｍＬ、２０．０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（８ｍＬ）溶液を添加した。その混合物を１５分間撹拌すると透明溶液が得られた。段階２から得られたメチルＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−４−メチレンノルバリナート（２．７５ｇ、９．９ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、その混合物を室温で終夜撹拌した。０．１Ｍ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）水溶液でクエンチした後、ＣＨ２Ｃｌ２層を分離し、希塩水で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ４）、濃縮して粗製標記化合物を得た。
【０２４９】
１Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）  δ  ７．３５（ｍ、５Ｈ）、６．５８（ｄ、１Ｈ）、５．０８（ｍ、２Ｈ）、４．４０（ｍ、１Ｈ）、３．６８（ｓ、３Ｈ）、１．７５（ｄｄ、１Ｈ）、１．６２（ｄｄ、１Ｈ）、１．０８（ｓ、３Ｈ）、０．４５（ｍ、１Ｈ）、０．２２（ｍ、３Ｈ）。
【０２５０】
段階４：ベンジル２−ヒドロキシ−１−［（１−メチルシクロプロピル）メチル］エチルカルバメート
段階３から得られた粗製エステルのＥｔＯＨ（４０ｍＬ）とＴＨＦ（４０ｍＬ）の０℃に冷却された溶液にＬｉＣｌ（１．７ｇ）、続いてＮａＢＨ４（１．６ｇ）を添加した。その混合物を室温で終夜撹拌し、０．５Ｍ  ＨＣｌ水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。ＥｔＯＡｃ抽出物を希塩水（２×）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。クロマトグラフィーによって精製して無色オイルの標記化合物２ｇを得た。
【０２５１】
１Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）  δ  ７．３５（ｍ、５Ｈ）、５．９８（ｄ、１Ｈ）、５．０６（ｍ、２Ｈ）、３．８５（ｍ、１Ｈ）、３．７２（ｔ、１Ｈ）、３．５０（ｍ、２Ｈ）、１．６０（ｄｄ、１Ｈ）、１．３４（ｄｄ、１Ｈ）、１．０５（ｓ、３Ｈ）、０．４０−０．１５（ｍ、４Ｈ）。
【０２５２】
段階５：２−アミノ−３−（１−メチルシクロプロピル）プロパン−１−オール
ベンジル２−ヒドロキシ−１−［（１−メチルシクロプロピル）メチル］−エチルカルバメート（２．０ｇ、７．６ｍｍｏｌ）と１０％Ｐｄ／Ｃ（２００ｍｇ）のＥｔＯＨ（８０ｍＬ）溶液と、１Ｍ  ＨＣｌ水溶液２ｍＬとの混合物をＨ２雰囲気（風船）で終夜撹拌した。触媒をろ過除去し、ろ液を濃縮して標記化合物を得た。
【０２５３】
１Ｈ  ＮＭＲ（メタノール−ｄ４）  δ  ３．７２（ｄｄ、１Ｈ）、３．４０（ｄｄ、１Ｈ）、３．２２（ｍ、１Ｈ）、１．５０−１．３０（ｍ、２Ｈ）、１．０６（ｓ、３Ｈ）、０．４５−０．２５（ｍ、４Ｈ）。
【０２５４】
段階６：Ｎ１−（シアノメチル）−３−（１−メチルシクロプロピル）−Ｎ２−｛２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−アラニンアミド
標記化合物は、段階５から得られたアミノアルコールから実施例５、段階６から１２に記載のと同じ方法によって調製された。
【０２５５】
１Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）  δ  ８．０６（ｂｒ  ｓ、１Ｈ）、８．００（ｄ、２Ｈ）、７．９４（ｄ、２Ｈ）、７．７８（ｄ、２Ｈ）、７．６２（ｄ、２Ｈ）、４．４８（ｍ、１Ｈ）、４．１２（ｍ、２Ｈ）、３．５５（ｍ、１Ｈ）、３．１６（ｓ、３Ｈ）、１．６４（ｍ、２Ｈ）、１．１０（ｓ、３Ｈ）、０．４８−０．２０（ｍ、４Ｈ）。
【０２５６】
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：４９４（ＭＨ＋）。
【実施例１４】
【０２５７】
Ｎ１−（シアノメチル）−Ｎ２−（２，２，２−トリフルオロ−１−｛４−［（４−メチルピペラジン−１−イル）カルボニル］フェニル｝エチル）−Ｌ−ロイシンアミドの合成
【０２５８】
【化３７】
2007503401.tif 000041
【０２５９】
段階１：Ｎ２−｛１−［４−（ヒドロキシカルボニル）フェニル］−２，２，２−トリフルオロエチル｝−Ｎ１−（シアノメチル）−Ｌ−ロイシンアミド
ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（５８ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（１５５ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）及びＮ２−［１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］−Ｎ１−（シアノメチル）−Ｌ−ロイシンアミド（実施例２、１．２ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の混合物のトリブチルアミン（２．５ｍＬ）と水（０．６ｍＬ）の溶液をテフロン被覆磁気棒を備えた鋼鉄製容器（ｓｔｅｅｌ  ｂｏｍｂ）に入れた。この系を一酸化炭素で３回パージし（各回１００ｐｓｉ（０．７ＭＰａ））、最後にこのガスを圧力３００ｐｓｉ（２ＭＰａ）で充填した。反応混合物を連続撹拌しながら１６０℃で２０時間加熱した。次いで、系を室温に冷却し、圧力を開放し、生成した残渣をＥｔＯＡｃと水＋塩酸水溶液に分配してｐＨを２．５から３．０に調節した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーにかけＥｔＯＡｃ、へキサン及び酢酸を溶離剤として用いて精製して、黄色のオレンジ泡状の標記化合物を得た。
【０２６０】
段階２：Ｎ１−（シアノメチル）−Ｎ２−（２，２，２−トリフルオロ−１−｛４−［（４−メチルピペラジン−１−イル）カルボニル］フェニル｝エチル）−Ｌ−ロイシンアミド
段階１から得られたＮ２−｛１−［４−（ヒドロキシカルボニル）フェニル］−２，２，２−トリフルオロエチル｝−Ｎ１−（シアノメチル）−Ｌ−ロイシンアミド（４８０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）とベンゾトリアゾル−１−イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスホナート（１．３５ｇ、２．６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（８ｍＬ）溶液にＮ−メチルピペラジン（０．２９ｍＬ、２．６ｍｍｏｌ）、続いてトリエチルアミン（０．５４ｍＬ、３．９ｍｍｏｌ）を徐々に添加した。反応混合物を室温で３時間撹拌した。生成した混合物をＥｔＯＡｃと水＋塩酸水溶液に分配してｐＨを２．５から３．０に調節した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーにかけＭｅＯＨ、ＥｔＯＡｃと濃ＮＨ４ＯＨを溶離剤として用いて精製して白色泡状の標記化合物を得た。
【０２６１】
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：４５４．３［Ｍ＋１］＋。
【実施例１５】
【０２６２】
Ｎ１−｛（１Ｓ）−１−［２−（メチルチオ）エチル］−２−オキソプロピル｝−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの合成
【０２６３】
【化３８】
2007503401.tif 000042
【０２６４】
段階１：Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ１−メトキシ−Ｎ１−メチル−Ｌ−メチオニンアミド
Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−メチオニン（１．０ｇ、４．０ｍｍｏｌ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾル−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（３．３ｇ、８．７ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（１．０ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）氷冷溶液にトリエチルアミン（２．２ｍＬ、１５．８ｍｍｏｌ）を滴下した。生成した混合物を室温で１８時間撹拌し、次いでＥｔＯＡｃとＮａＨＣＯ３半飽和水溶液に分配した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーにかけＥｔＯＡｃとへキサンを溶離剤として用いて精製して無色シロップ状の標記化合物を得た。
【０２６５】
段階２：ｔｅｒｔ−ブチル｛（１Ｓ）−１−［２−（メチルチオ）エチル］−２−オキソプロピル｝カルバメート
段階１から得られたＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ１−メトキシ−Ｎ１−メチル−Ｌ−メチオニンアミド（２００ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却されたＴＨＦ溶液にメチルリチウム１．４Ｍのへキサン（１．１ｍｏｌ、１．５ｍｍｏｌ）溶液を添加した。反応物をこの温度で２時間撹拌し、次いで酢酸アンモニウム２５％ｗ／ｖ水溶液で冷クエンチ（ｃｏｌｄ−ｑｕｅｎｃｈ）した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーにかけＥｔＯＡｃとへキサンを溶離剤として用いて精製して無色ゴム状の標記化合物を得た。
【０２６６】
段階３：（３Ｓ）−３−アミノ−５−（メチルチオ）ペンタン−２−オン、塩酸塩
段階２から得られたｔｅｒｔ−ブチル｛（１Ｓ）−１−［２−（メチルチオ）エチル］−２−オキソプロピル｝カルバメート（１４０ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）に塩化水素４．０Ｍの１，４−ジオキサン溶液（３ｍＬ、１２ｍｍｏｌ）を添加した。生成した混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧除去し、生成した残渣をトルエン（２×１０ｍＬ）と共沸混合させて白色固体の標記化合物を得た。
【０２６７】
段階４：Ｎ１−｛（１Ｓ）−１−［２−（メチルチオ）エチル］−２−オキソプロピル｝−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミド
段階３から得られた（３Ｓ）−３−アミノ−５−（メチルチオ）ペンタン−２−オン、塩酸塩（１０４ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）、Ｎ−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシン（実施例４、段階６、１２７ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）及びＯ−（７−アザベンゾトリアゾル−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（１８７ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）懸濁液を１０℃に冷却し、次いでトリエチルアミン（１１５μＬ、０．８３ｍｍｏｌ）を徐々に添加した。反応混合物を室温で３時間撹拌した。生成した混合物をＥｔＯＡｃとＮａＨＣＯ３半飽和水溶液に分配した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーにかけＥｔＯＡｃとへキサンを溶離剤として用いて精製して白色泡状の標記化合物を得た。
【０２６８】
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：５７３．５［Ｍ＋１］＋。
【実施例１６】
【０２６９】
Ｎ１−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドの合成
【０２７０】
【化３９】
2007503401.tif 000043
【０２７１】
（３Ｓ）−３−アミノ−５−（メチルチオ）ペンタン−２−オン、塩酸塩でＬ−メチオニンアミド塩酸塩を置換した実施例１５、段階４に記載の手順を用いて標記化合物を得た。これをＥｔＯＡｃとへキサン（１：２）から結晶化させて白色固体を得た。
【０２７２】
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：５７４．３［Ｍ＋１］＋。
【実施例１７】
【０２７３】
Ｎ−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンの合成
【０２７４】
【化４０】
2007503401.tif 000044
【０２７５】
段階１：メチルＮ−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニナート
（３Ｓ）−３−アミノ−５−（メチルチオ）ペンタン−２−オン、塩酸塩でメチルＬ−メチオニナート塩酸塩を置換した実施例１５、段階４に記載の手順を用いて標記化合物を得た。これをＥｔＯＡｃとへキサン（１：２）から結晶化させて白色固体を得た。
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：５８９．３［Ｍ＋１］＋。
【０２７６】
段階２：Ｎ−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニン
段階１から得られたメチルＮ−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニナート（１００ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）とＭｅＯＨ（０．５ｍＬ）の氷冷溶液に１．０Ｎ  ＬｉＯＨ（０．２５ｍＬ、０．２５ｍｍｏｌ）を滴下し、生成した溶液を室温で１８時間撹拌した。その溶液をＥｔＯＡｃと水＋１Ｎ  ＨＣｌ（１ｍＬ）に分配した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーにかけＥｔＯＨ、ＥｔＯＡｃ及びＡｃＯＨを溶離剤として用いて精製して白色泡状の標記化合物を得た。これをＥｔＯＡｃとへキサン（６ｍＬ、１：２）から結晶化させて白色固体を得た。
【０２７７】
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：５７５．０［Ｍ＋１］＋。
【実施例１８】
【０２７８】
Ｎ１−［（１Ｓ）−１−シアノ−３−（メチルチオ）プロピル］−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの合成
【０２７９】
【化４１】
2007503401.tif 000045
【０２８０】
実施例１６から得られたＮ１−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（３５０ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）とピリジン（８５μＬ、１．０５ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン溶液を１０℃に冷却した。次いで、無水トリフルオロ酢酸（６５μＬ、０．４６ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃと水に分配した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーにかけＥｔＯＡｃとへキサンを溶離剤として用いて精製して無色ゴム状の標記化合物を得た。
【０２８１】
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：５５６．３［Ｍ＋１］＋。
【実施例１９】
【０２８２】
Ｎ−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシル−Ｎ１−メチル−Ｌ−メチオニンアミドの合成
【０２８３】
【化４２】
2007503401.tif 000046
【０２８４】
実施例１７から得られたＮ−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニン（１００ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、メチルアミン塩酸塩（３５ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）及びＯ−（７−アザベンゾトリアゾル−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（１５０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）懸濁液を１０℃に冷却し、次いでトリエチルアミン（１１０μＬ、０．７９ｍｍｏｌ）を徐々に添加した。反応混合物を室温で１８時間撹拌した。生成した混合物をＥｔＯＡｃとＮａＨＣＯ３半飽和水溶液に分配した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーにかけＥｔＯＡｃとへキサンを溶離剤として用いて精製して白色泡状の標記化合物を得た。これをＥｔＯＡｃとへキサンから結晶化させて白色固体を得た。
【０２８５】
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：５８８．１［Ｍ＋１］＋。
【実施例２０】
【０２８６】
（２Ｓ）−２−｛［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］アミノ｝−４，４−ジクロロ−Ｎ−（１−シアノシクロプロピル）ブタンアミドの合成
【０２８７】
【化４３】
2007503401.tif 000047
【０２８８】
段階１  エチル（２Ｓ）−２−アミノ−４，４−ジクロロブタノアート
氷冷エタノール２５ｍＬに塩化アセチル（２．０ｍＬ、２８ｍｍｏｌ）を滴下した。次いで、［Ｃｈｅｍ．−Ｚｔｇ  １１４、２４９−２５１（１９９０）及びＳｙｎｔｈｅｓｉｓ  １９９６、１４１９に従って調製された］（Ｓ）−２−アミノ−４，４−ジクロロブタン酸（１．０ｇ、５．８ｍｍｏｌ）を一括添加した。その混合物を１８時間還流し、濃縮し、残渣を飽和ＮａＨＣＯ３溶液とジクロロメタンに分配した。有機層を分配し、脱水し（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、濃縮してオイル状残渣を得た。シリカゲル充填物にこれを通して精製し、３０％酢酸エチルのへキサン溶液で溶出させて純粋な標記化合物を得た。
【０２８９】
段階２  エチル（２Ｓ）−２−｛（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］アミノ｝−４，４−ジクロロブタノアート
［Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  １９８３、１０５、２３４３−２３５０に従って調製された］エチル（２Ｓ）−２−アミノ−４，４−ジクロロブタノアート（２９８ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）、（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチルトリフルオロアセテート（８６２ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（２８４ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下６０℃で６時間適切に加熱した。混合物をＮａＨＣＯ３溶液と酢酸エチルに分配した。有機層を分離し、脱水し（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、濃縮した。ＩＳＣＯカラムクロマトグラフィー（２％から１５％酢酸エチル／へキサン勾配）によって精製してジアステレオマーの８７：１３混合物として標記化合物を得た。
【０２９０】
ＭＳ（＋ＡＰＣＩ）：４３８．８［Ｍ＋１］及び４４０．８［Ｍ＋３］。
【０２９１】
段階３  （２Ｓ）−２−｛［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］アミノ｝−４，４−ジクロロブタン酸
エチル（２Ｓ）−２−｛［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］アミノ｝−４，４−ジクロロブタノアート（３２５ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液にトリメチルシラノール酸カリウム（１７８ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を室温で１．５時間撹拌し、次いで濃縮した。残渣を酢酸エチルと１Ｎ  ＨＣｌに分配した。有機層を分離し、脱水し（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、濃縮して標記化合物をオイルとして得た。これを次の段階にそのまま使用した。
【０２９２】
ＭＳ（−ＡＰＣＩ）：４０７．９［Ｍ−１］。
【０２９３】
段階４  （２Ｓ）−２−｛［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］アミノ｝−４，４−ジクロロ−Ｎ−（１−シアノシクロプロピル）ブタンアミド
（２Ｓ）−２−｛［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２，２−トリフルオロエチル］アミノ｝−４，４−ジクロロブタン酸（２７５ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）、１−アミノ−１−シクロプロパンカルボニトリル塩酸塩（１５９ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）及びＨＡＴＵカップリング試薬（３０５ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）の混合物をＤＭＦ（４ｍＬ）に溶解した。トリエチルアミン（０．３ｍＬ、２．１ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を終夜撹拌し、次いでＮａＨＣＯ３溶液と酢酸エチルに注いだ。有機層を分離し、塩水、１Ｎ  ＨＣｌ及び再度塩水で洗浄した。有機層を分離し、脱水し（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、濃縮してオイル３９３ｍｇを得た。これをカラムクロマトグラフィーにかけ６：３：１トルエン：酢酸エチル：ジクロロメタンで溶出させて精製した。純粋な生成物をジエチルエーテルを用いてスイッシュして、白色固体の標記化合物をジアステレオマーの８５：１５混合物として得た。
【０２９４】
ＭＳ（−ＡＰＣＩ）：４７１．９［Ｍ−１］。
【０２９５】
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）  「主異性体」、δ  ８．９５（ｓ、１Ｈ）、７．６１（ｄ、２Ｈ、７．３８（ｄ、２Ｈ）、６．１９（ｄｄ、１Ｈ）、４．３８−４．２５（ｍ、１Ｈ）、３．４５−３．３８（ｂｓ、２Ｈ）、２．５−２．３（ｍ、２Ｈ）、１．４３−１．３２（ｍ、２Ｈ）、１．０２−０．９５（ｍ、１Ｈ）、０．７５−０．６８（ｍ、１Ｈ）。
【０２９６】
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）  「副異性体」、δ  ８．８９（ｓ、１Ｈ）、７．６５−７．６１（ｍ、１Ｈ）、７．４３（ｄ、１Ｈ）、６．２３−６．１９（ｍ、１Ｈ）、４．３８−４．２５（ｍ、１Ｈ）、３．４５−３．３８（ｂｓ、２Ｈ）、２．５−２．３（ｍ、２Ｈ）、１．４３−１．３２（ｍ、２Ｈ）、１．０２−０．９５（ｍ、１Ｈ）、０．７５−０．６８（ｍ、１Ｈ）。
【実施例２１】
【０２９７】
Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２−ジフルオロ−１−［４−（３−メチル−２−チエニル）フェニル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミド
【０２９８】
【化４４】
2007503401.tif 000048
【０２９９】
段階１：（２Ｓ）−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−Ｎ−［（１Ｚ）−２，２−ジフルオロエチリデン］−４−メチルペンタン−２−アミンの調製
（２Ｓ）−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−４−メチルペンタン−２−アミン（実施例４、段階１、８．５ｇ、３６．８ｍｍｏｌ）及びジフルオロアセトアルデヒドエチルヘミアセタール（５．０ｇ、３９．７ｍｍｏｌ）の混合物のベンゼン溶液をＤｅａｎ−ｓｔａｒｋトラップを用いて終夜還流した。溶媒を減圧除去した。残渣を短いシリカカラムを通過させ、へキサン：ＥｔＯＡｃ（１０：１）で溶出させて淡黄色オイルの標記化合物を得た。
【０３００】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ７．７２（ｍ、１Ｈ）、６．１２（ｄｔ、１Ｈ）、３．７０（ｄｄ、１Ｈ）、３．５４（ｄｄ、１Ｈ）、３．３６（ｍ、１Ｈ）、１．４８（ｍ、２Ｈ）、１．３２（ｍ、１Ｈ）、０．９５−０．７８（ｍ、１５Ｈ）、０．０６（ｓ、３Ｈ）、０．０２（ｓ、３Ｈ）。
【０３０１】
段階２：（２Ｓ）−２−｛［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２−ジフルオロエチル］アミノ｝−４−メチルペンタン−１−オールの調製
ｎ−ＢｕＬｉ（２．５Ｍへキサン溶液、１．４３ｍＬ）を１，４−ジブロモベンゼン（８８４ｍｇ）の−７０℃ＴＨＦ（８．５ｍＬ）溶液に添加し、その混合物を１５分間撹拌した。次いで、（２Ｓ）−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−４−メチル−Ｎ−［（１Ｅ）−２，２−ジフルオロエチリデン］ペンタン−２−アミン（１．０ｇ）のＴＨＦ（８．５ｍＬ）溶液を滴下し、その混合物を１．５時間撹拌した。次いで、それを冷塩化アンモニウム飽和溶液に激しく撹拌しながら徐々に注いだ。３分割した酢酸エチルでそれを抽出した。混合有機層を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧除去して残渣を得た。これをＳｉＯ２上で溶離剤としてへキサンと酢酸エチル（９０：１０から７５：２５）の勾配を用いて精製して標記化合物を得た。上で得られた化合物（２００ｍｇ）をＣＨ３ＣＮ（４ｍＬ）に溶解し、その溶液を０℃に冷却した。ＨＦ−ピリジン（４０Ｍ）を滴下し、その混合物を１６時間反応させた。それを炭酸水素ナトリウム飽和溶液に注ぎ、酢酸エチルを添加し、それを激しく振とうした。有機層を分離し、水層を酢酸エチル（２×５０ｍＬ）でさらに抽出した。混合有機層を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧除去して残渣を得た。これをＳｉＯ２上で溶離剤としてへキサンと酢酸エチル（８０：２０から６０：４０）の勾配を用いて精製して標記化合物を得た。
【０３０２】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ７．６（２Ｈ、ｄ）、７．４５（２Ｈ、ｄ）、６．０（１Ｈ、ｄｔ）、４．２５（１Ｈ、ｍ）、３．６５（１Ｈ、ｔ）、３．５−３．５５（１Ｈ、ｍ）、３．３−３．３５（１Ｈ、ｍ）、２．５５−２．６５（１Ｈ、ｍ）、２．１５−２．２５（１Ｈ、ｍ）、１．６−１．７（１Ｈ、ｍ）、１．３−１．４（１Ｈ、ｍ）、１．２−１．３（１Ｈ、ｍ）、０．９（３Ｈ、ｄ）、０．８（３Ｈ、ｄ）。
【０３０３】
段階３：Ｎ−［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２−ジフルオロエチル］−Ｌ−ロイシンの調製
Ｈ５ＩＯ６／ＣｒＯ３（０．４Ｍ  ＣＨ３ＣＮ溶液５．５ｍＬ；以下の注記参照）の懸濁液を０℃に冷却し、段階２から得られたアルコール（２５０ｍｇ）のＣＨ３ＣＮ（３．７ｍＬ）溶液を滴下した。その混合物を０から５℃で３．５時間撹拌した。その後、酸化剤２．０ｍＬを添加した。１．５時間後、これをＮａ２ＨＰＯ４緩衝剤（１０ｍＬ中０．４ｇ）に激しく撹拌しながら注ぎ、その混合物をジエチルエーテル（３×２０ｍＬ）で抽出した。混合エーテル抽出物を水と塩水（１：１）、希ＮａＨＳＯ３水溶液及び塩水で洗浄した。有機抽出物を硫酸マグネシウムで脱水し、ろ過し、溶媒を蒸発乾固させて残渣を得た。これをさらに精製せずに使用した。
【０３０４】
注：酸化試薬（Ｈ５ＩＯ６／ＣｒＯ３）は、ＨＰＬＣ等級ＣＨ３ＣＮ（水０．５％を含む）を用い水を添加しなかった以外は、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ３９（１９９８）５３２３−５３２６に記載のとおり調製された。
【０３０５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ７．５５（２Ｈ、ｄ）、７．４（２Ｈ、ｄ）、６．０５（１Ｈ、ｄｔ）、３．９５−４．０５（１Ｈ、ｍ）、３．４５（１Ｈ、ｔ）、２．７−３．０（ブロード  ｍ、ＮＨ／ＯＨ）、１．８５−１．９５（１Ｈ、ｍ）、１．５（２Ｈ、ｔ）、０．９５（３Ｈ、ｄ）、０．９（３Ｈ、ｄ）。
【０３０６】
段階４：Ｎ２−［（１Ｓ）−１−（４−ブロモフェニル）−２，２−ジフルオロエチル］−Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−Ｌ−ロイシンアミドの調製
段階３から得られた酸（２５８ｍｇ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾル−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（３３７ｍｇ）、１−アミノシクロプロパンカルボニトリル塩酸塩（１７５ｍｇ）を添加した。撹拌１分後、ジイソプロピルエチルアミン（０．４５ｍＬ）を滴下し、その混合物を１６時間撹拌した。それを炭酸水素ナトリウム飽和水溶液に注ぎ、酢酸エチル（３×１５ｍＬ）で抽出した。混合抽出物を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧除去した。残渣をＳｉＯ２上のクロマトグラフィーにかけへキサンと酢酸エチル（８０：２０から５０：５０）を用いて精製した。
【０３０７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ８．０５（１Ｈ、ｍ）、７．５５（２Ｈ、ｄ）、７．４（２Ｈ、ｄ）、６．０５（１Ｈ、ｄｔ）、３．９５−４．０５（１Ｈ、ｍ）、３．２５−３．３（１Ｈ、ｍ）、２．４−２．４５（１Ｈ、ｍ）、１．８−１．９（１Ｈ、ｍ）、１．４−１．５５（２Ｈ、ｍ）、０．９５−１．１（２Ｈ、ｍ）、０．９５（６Ｈ、ｔ）。
【０３０８】
段階５：Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２−ジフルオロ−１−［４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの調製
段階４から得られた臭化アリール（５．２３ｇ）とビス（ピナコラート）ジボロン（３．８ｇ）のＤＭＦ（６０ｍＬ）溶液に酢酸カリウム（３．７ｇ）及びＰｄＣｌ２ｄｐｐｆ（３０９ｍｇ）を添加した。その懸濁液に窒素気流を１分間通した。反応混合物を８０℃で１６時間加熱した。それを室温に冷却し、分液漏斗に移した。ＮａＨＣＯ３飽和溶液（約１２０ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）を添加した。有機層を分離し、２分割したＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で水層をさらに抽出した。混合有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濃縮した。粗製材料をシリカゲル（８０：２０から５０：５０  ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ）で精製して所望のボロナートを得た。
【０３０９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ８．１５（ｂｓ、ＮＨ）、７．７２（２Ｈ、ｄ）、７．４０（２Ｈ、ｄ）、６．０２（１Ｈ、ｄｔ）、３．９５（１Ｈ、ｍ）、３．２５（１Ｈ、ｑ）、２．３８（１Ｈ、ｍ）、１．７２（１Ｈ、ｍ）、１．２７−１．５０（１６Ｈ、ｍ）、０．８５−１．０５（８Ｈ、ｍ）。
【０３１０】
段階６：Ｎ１−（１−シアノシクロプロピル）−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２−ジフルオロ−１−［４−（３−メチル−２−チエニル）フェニル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの調製
密封可能なマイクロ波用管中で、段階６から得られたアリールボロナート（２００ｍｇ）、２−ブロモ−３−メチルチオフェン（１１５ｍｇ）、２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３（０．６５ｍＬ）、ＤＭＦ（４．３ｍＬ）及びＰｄＣｌ２ｄｐｐｆ（１１ｍｇ）からなる懸濁液に窒素気流を１分間通した。次いで、混合物を１２０℃（吸収レベル：高）で５００秒間（固定保持時間：オフ）マイクロ波（ＳｍｉｔｈＣｒｅａｔｏｒ）加熱した。それを室温に冷却し、酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈し、炭酸水素ナトリウム飽和溶液に注いだ。酢酸エチル層を分離し、水層を酢酸エチル（２×１５ｍＬ）でさらに抽出した。混合酢酸エチル抽出物を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を除去すると残渣が得られた。これをＳｉＯ２上のクロマトグラフィーにかけへキサンと酢酸エチルの勾配（８０：２０から５０：５０  ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ）を用いて精製した。
【０３１１】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３）  δ  ８．１３（ｂｓ、ＮＨ）、７．５０（４Ｈ、ｓ）、７．３７（１Ｈ、ｄ）、６．９７（１Ｈ、ｄ）、６．０５（１Ｈ、ｔ）、４．００（１Ｈ、ｍ）、３．３０（１Ｈ、ｍ）、２．４２（１Ｈ、ｍ）、２．３２（３Ｈ、ｓ）、１．８５（１Ｈ、ｍ）、１．４０−１．５３（２Ｈ、ｍ）、１．３０−１．４０（２Ｈ、ｍ）、０．８５−１．０３（８Ｈ、ｍ）。
【実施例２２】
【０３１２】
Ｎ１（１−シアノトリル）−Ｎ２｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの合成
【０３１３】
【化４５】
2007503401.tif 000049
【０３１４】
Ｎ−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシン（実施例４、段階６、２１ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）の混合物のＤＭＦ（１．４ｍＬ）溶液に２−フェニルグリシノニトリル塩酸塩（８．６ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）を添加する。Ｎ−メチルモルホリン（４１μＬ、０．３６８ｍｍｏｌ）及びＮ−プロピルホスホン酸無水物、環式三量体５０％（５５μＬ、０．０９２ｍｍｏｌ）を順次添加し、その混合物を終夜撹拌した。揮発性物質をＧｅｎｅｖａｃ  ＨＴ−４中で蒸発させた。残渣を、ＢＴＭＡカルボナートシリカゲルで３０分間処理されたＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解し、ＳｉＯＨ  ＳＰＥカートリッジ（５００ｍｇ）によってろ過した。その溶液をＡｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ−２１で処理し、再度ろ過した。溶液を濃縮して各エピマーの１：１混合物を得た。
【０３１５】
ＭＳ（−ＥＳＩ）：５５６．０［Ｍ−１］−
【実施例２３】
【０３１６】
Ｎ１（シアノシクロプロピル）−Ｎ２｛（１Ｓ）−２，２−ジフルオロ−１−［２’，４’−ジフルオロ−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの合成
【０３１７】
【化４６】
2007503401.tif 000050
【０３１８】
段階６の２−ブロモ−３−メチルチオフェンが１−ブロモ−２，４−ジフルオロベンゼンで置換された実施例２１に記載の手順を用いて、標記化合物を白色固体として得た。
【０３１９】
ＭＳ（＋ＡＰＩ）：４４８．１［Ｍ＋１］＋。
【実施例２４】
【０３２０】
ベンジル３−オキソ−４−［（Ｎ−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシル）アミノ］アゼパン−１−カルボキシラートの合成
【０３２１】
【化４７】
2007503401.tif 000051
【０３２２】
段階１：ベンジル３−ヒドロキシ−４−［（Ｎ−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシル）アミノ］アゼパン−１−カルボキシラート
Ｎ−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシン（実施例４、段階６、６０５ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）、ベンジル４−アミノ−３−ヒドロキシアゼパン−１−カルボキシラート（国際公開第０１３４５６５号、Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ４４、１３８０、２００１、３２６ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）及びＰｙＢＯＰ（７２４ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ  １０ｍＬの０℃溶液にトリエチルアミン（０．４５ｍＬ、３．２ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を１時間撹拌し、室温に１時間加温し、次いでＮａＨＣＯ３とエーテルに分配した。有機相をｐＨ３．５リン酸緩衝液、次いで塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水した。シリカゲルクロマトグラフィー（６５％酢酸エチル：へキサンから１００％酢酸エチルの勾配）によって精製して標記化合物を各異性体の混合物として得た。
【０３２３】
段階２：ベンジル３−オキソ−４−［（Ｎ−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシル）アミノ］アゼパン−１−カルボキシラート
ベンジル３−ヒドロキシ−４−［（Ｎ−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシル）アミノ］アゼパン−１−カルボキシラート（９８ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３ｍＬ）０℃溶液にＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペルヨージナンを添加した。その混合物を室温に加温し、１５時間撹拌し、次いで酢酸エチルと１Ｍ  ＮａＯＨに分配した。有機相を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水した。シリカゲルクロマトグラフィー（４０％から７０％酢酸エチル：へキサン勾配）によって精製して各ジアステレオマーの混合物として標記化合物を得た。
【０３２４】
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：６８８．４［Ｍ＋１］＋
【実施例２５】
【０３２５】
Ｎ１−［３−オキソ−１−（ピリジン−２−イルスルホニル）アゼパン−４−イル］−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの合成
【０３２６】
【化４８】
2007503401.tif 000052
【０３２７】
段階１：Ｎ１−（３−ヒドロキシアゼパン−４−イル）−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミド
ベンジル３−ヒドロキシ−４−［（Ｎ−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシル）アミノ］アゼパン−１−カルボキシラート（実施例２４、段階１，７１０ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）と１０％Ｐｄ／Ｃ（４９０ｍｇ）の混合物の２：１  ＥｔＯＨ：ＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）溶液に水素を流し、水素風船下で２時間撹拌した。反応混合物をセライトによってろ過し、濃縮して標記化合物を得た。
【０３２８】
段階２：Ｎ１−［３−ヒドロキシ−１−（ピリジン−２−イルスルホニル）アゼパン−４−イル］−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミド
Ｎ１−（３−ヒドロキシアゼパン−４−イル）−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミド（５６７ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）０℃溶液にトリエチルアミン（０．２５ｍＬ、１．８ｍｍｏｌ）及び塩化２−ピリジンスルホニル（２０４ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を室温に１時間加温し、次いでジクロロメタンとＮａＨＣＯ３に分配した。有機相を塩水で洗浄し、綿を通してろ過し、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（７０％酢酸エチル：へキサンから１００％酢酸エチルの勾配）によって精製して標記化合物を各異性体の混合物として得た。
【０３２９】
段階３：Ｎ１−［３−オキソ−１−（ピリジン−２−イルスルホニル）アゼパン−４−イル］−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミド
Ｎ１−［３−ヒドロキシ−１−（ピリジン−２−イルスルホニル）アゼパン−４−イル］−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミド（４６０ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１５ｍＬ）室温溶液にＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペルヨージナン（４２０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を１時間撹拌し、次いでジクロロメタンで希釈し、１Ｍ  ＮａＯＨ、次いで塩水で洗浄した。有機相を綿に通してろ過し、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（６０％酢酸エチル：へキサンから１００％酢酸エチルの勾配）によって精製して標記化合物を各ジアステレオマーの混合物として得た。
【０３３０】
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：６９５．３［Ｍ＋１］＋
【実施例２６】
【０３３１】
Ｎ２−［（４−ブロモフェニル）（４−メトキシフェニル）メチル］−Ｎ１−（シアノメチル）−Ｌ−ロイシンアミドの合成
【０３３２】
【化４９】
2007503401.tif 000053
【０３３３】
段階１：（４−ブロモフェニル）（４−メトキシフェニル）メタノール
１，４−ジブロモベンゼン（９．１ｇ、３８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８０ｍＬ）溶液を−７８℃に冷却し、ｎ−ブチルリチウム（１６ｍＬ、２．５Ｍへキサン溶液）を滴下した。１５分後、ｐ−アニスアルデヒド（５ｇ、ＴＨＦ４．５ｍＬ中３７ｍｍｏｌ）を滴下した。さらに２０分後、反応混合物をメタノール（５ｍＬ）及び塩化アンモニウム飽和水溶液（１００ｍＬ）でクエンチした。反応混合物を酢酸エチル各１００ｍＬで３回抽出し、混合有機層を塩水（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムを用いて脱水し、減圧濃縮して標記化合物を得た。これを次の段階に直接使用した。
【０３３４】
段階２：メチルＮ−［（４−ブロモフェニル）（４−メトキシフェニル）メチル］−Ｌ−ロイシナート
（４−ブロモフェニル）（４−メトキシフェニル）メタノール（１．１５ｇ、３．９ｍｍｏｌ）を臭化テトラブチルアンモニウム（１３０ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）と一緒にジクロロメタン（４ｍＬ）に溶解した。次いで、４８％臭化水素酸水溶液（３．３ｍＬ）を添加し、その反応混合物を４０時間激しく撹拌した。生成物を水（２０ｍＬ）とジクロロメタン（３０ｍＬ）に分配し、硫酸マグネシウムを用いて脱水した。有機層を約１０ｍＬに濃縮し、Ｌ−ロイシンメチルエステル（遊離塩基）をジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液として添加し、続いてトリエチルアミン（３ｍＬ）を添加した。反応混合物を３５℃で２０分間撹拌した（白色沈殿物が出現した）。反応物をエーテル（５０ｍＬ）と水（３０ｍＬ）に取った。これらの相を分離し、有機層を塩化アンモニウム飽和水溶液（３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。硫酸マグネシウムで脱水し減圧濃縮した後、メチルＮ［（４−ブロモフェニル）（４−メトキシフェニル）メチル］−Ｌ−ロイシナートを得た。これをシリカゲル上で１０％酢酸エチル、９０％へキサンを用いて精製した。
【０３３５】
段階３：Ｎ−［（４−ブロモフェニル）（４−メトキシフェニル）メチル］−Ｌ−ロイシン
メチルＮ−［（４−ブロモフェニル）（４−メトキシフェニル）メチル］−Ｌ−ロイシナート（１．２５ｇ、３ｍｍｏｌ）の約２：１：１  ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／水６０ｍＬ室温溶液に水酸化リチウム一水和物（２５０ｍｇ、６ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を終夜撹拌し、濃縮した。残渣をジクロロメタン（５０ｍＬ）とｐＨ３．５リン酸緩衝液（５０ｍＬ）に分配した。水相を分離しジクロロメタン各５０ｍＬで２回洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで脱水し、減圧濃縮して固体を得た。これを最小量の冷ジクロロメタン中ですり潰してＮ−［（４−ブロモフェニル）（４−メトキシフェニル）メチル］−Ｌ−ロイシンを得た。
【０３３６】
段階４：Ｎ２−［（４−ブロモフェニル）（４−メトキシフェニル）メチル］−Ｎ１−（シアノメチル）−Ｌ−ロイシンアミド
Ｎ−［（４−ブロモフェニル）（４−メトキシフェニル）メチル］−Ｌ−ロイシン（１４９ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）とアミノアセトニトリル塩酸塩（８７ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）の混合物をジメチルホルムアミド５ｍＬに溶解した。ＨＡＴＵ（１５３ｍｇ、０．４０３ｍｍｏｌ）を一括添加し、続いてトリエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．３１ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を終夜撹拌し、次いでｐＨ４リン酸緩衝液（４０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機相を水各５０ｍＬで３回で洗浄し、硫酸ナトリウムを用いて脱水し、減圧濃縮した。シリカゲル（３０％酢酸エチル／へキサン）によって精製してＮ２−［（４−ブロモフェニル）（４−メトキシフェニル）メチル］−Ｎ１−（シアノメチル）−Ｌ−ロイシンアミドを得た。
【０３３７】
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：４４３．９［Ｍ＋１］。
【０３３８】
カテプシン結合
実施例１から２６の各々を以下の手順に供した。コンピュータによって作製されたモデルにおいて、化合物のエネルギーはカテプシンＫの活性部位において最小化された。カテプシンＫのコンピュータ作製モデルはタンパク質データバンク登録１ＭＥＭの結晶構造に基づいており、水素が付加されたが、エネルギー最小化の始めにおいて非水素のエネルギー最小化は行われなかった（したがって、タンパク質側鎖は、Ｘ線結晶構造の形状を保持した）。化合物の結合配向は、以下の仮定に基づいて決定された。すなわち、１）共有結合は、化合物中の「１」と標識された求電子性炭素間のＳ１において形成される。これによって、本発明の化学式と組み合わせて、Ｒ１とＲ２に対応する分子断片が決定される。２）本発明の式に対応する化合物の断片の場合、アミン水素はＧｌｙ６６の酸素と水素結合を形成し、したがってこれらの２個の原子間の距離は４Å未満である。３）Ｒ２及びＲ３に対応する化合物の各断片は、それぞれ、化合物の化学構造上の標識炭素原子に従ってカテプシンサブサイトＳ２及びＳ３に配置された。例えば、表１中のカテプシンＣαに対する距離が表１に記載の距離の１オングストローム以内であるように、構造中の「２」と標識された炭素はＳ２に配置され、「３」と標識された炭素はＳ３に配置された。これらの配置は手操作で近似的に行われたが、有利な相互作用をもたらすように意図的に配置された。ラセミ混合物として合成された化合物の場合、本発明の化学式に対応する鏡像異性体が計算に使用された。エネルギー最小化は、ソフトウエアＭａｃｒｏＭｏｄｅｌによりＭＭＦＦｓ力場を用いて実施された。化合物の全原子は移動することができるが、カテプシンＫの場合には化合物の６Å以内の原子を有するタンパク質側鎖のみ移動することができる。この場合、側鎖全体が移動することができる。水に対応する連続溶媒オプションを有するエネルギー最小化のデフォルトパラメータが選択された。化合物に対するエネルギー最小化の結果は好都合なものであった。すなわち、リガンドとカテプシンＫの活性部位との有害な立体的相互作用は存在せず、活性部位とリガンドの有利な相互作用（親油性相互作用及び水素結合）が表１に記載の距離によって確認される。表１に、上述したように化合物とカテプシンＫによって形成されたエネルギー最小のリガンド−酵素複合体から得られる距離を示す。「Ｇｌｙ６６  Ｈ結合」の列は、化合物のアミン水素とＧｌｙ６６の酸素との間に形成される水素結合の距離である。表１中のＲ２の下にある３つの列は、カテプシン中のＣαに対応するＣα標識が頭に付く。これらの列は、カテプシン中の示されたＣαと、その化合物の構造中の「２」と標識された炭素との距離を示す。同様に、表１中の「Ｒ３」の下にある２つの列は、カテプシン中の示されたＣαと、その化合物の構造中の「３」と標識された炭素との距離を示す。カテプシン中の残基２５のシステイン硫黄と、その化合物の構造中の「１」と標識された求電子性炭素との共有結合によって、その化合物の構造中の「１」と標識された炭素の＜５Åの距離が確保された。したがって、実施例１から２６は、本明細書に記載された距離判定基準に合致する。
【０３３９】
【表１】
2007503401.tif 000054
【０３４０】
精製酵素アッセイ
本願において開示される化合物は、以下のアッセイにおいて活性を示した。また、本願において開示される化合物は、以前に開示された化合物よりも薬理学的プロファイルが向上している。
【０３４１】
カテプシンＫアッセイ
試験化合物５００μＭから０．００８５μＭの段階希釈物（１／３）がジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中で調製された。次いで、各希釈物のＤＭＳＯ  ２μＬをアッセイ緩衝剤５０μＬ（ＭＥＳ、５０ｍＭ（ｐＨ５．５）；ＥＤＴＡ、２．５ｍＭ；ＤＴＴ、２．５ｍＭ及び１０％ＤＭＳＯ）及びヒトカテプシンＫ（０．４ｎＭ）のアッセイ緩衝溶液２５μＬに添加した。アッセイ溶液を振とうプレート上で５から１０秒間混合し、室温で１５分間インキュベートした。Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−ＡＭＣ（８μＭ）のアッセイ緩衝剤２５μＬ溶液をアッセイ溶液に添加した。クマリン脱離基（ＡＭＣ）の加水分解に続いて、分光蛍光分析（Ｅｘλ＝３５５ｎｍ；Ｅｍλ＝４６０ｎｍ）を１０分間行った。用量反応曲線の標準数学モデルに実験値をフィッティングさせることによって阻害割合を計算した。
【０３４２】
カテプシンＬアッセイ
試験化合物５００μＭから０．００８５μＭの段階希釈物（１／３）がジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中で調製された。次いで、各希釈物のＤＭＳＯ  ２μＬをアッセイ緩衝剤５０μＬ（ＭＥＳ、５０ｍＭ（ｐＨ５．５）；ＥＤＴＡ、２．５ｍＭ；ＤＴＴ、２．５ｍＭ及び１０％ＤＭＳＯ）及びヒトカテプシンＬ（０．５ｎＭ）のアッセイ緩衝溶液２５μＬに添加した。アッセイ溶液を振とうプレート上で５から１０秒間混合し、室温で１５分間インキュベートした。Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−ＡＭＣ（８μＭ）のアッセイ緩衝剤２５μＬ溶液をアッセイ溶液に添加した。クマリン脱離基（ＡＭＣ）の加水分解に続いて、分光蛍光分析（Ｅｘλ＝３５５ｎｍ；Ｅｍλ＝４６０ｎｍ）を１０分間行った。用量反応曲線の標準数学モデルに実験値をフィッティングさせることによって阻害割合を計算した。
【０３４３】
カテプシンＢアッセイ
試験化合物５００μＭから０．００８５μＭの段階希釈物（１／３）がジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中で調製された。次いで、各希釈物のＤＭＳＯ  ２μＬをアッセイ緩衝剤５０μＬ（ＭＥＳ、５０ｍＭ（ｐＨ５．５）；ＥＤＴＡ、２．５ｍＭ；ＤＴＴ、２．５ｍＭ及び１０％ＤＭＳＯ）及びヒトカテプシンＢ（４．０ｎＭ）のアッセイ緩衝溶液２５μＬに添加した。アッセイ溶液を振とうプレート上で５から１０秒間混合し、室温で１５分間インキュベートした。Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−ＡＭＣ（８μＭ）のアッセイ緩衝剤２５μＬ溶液をアッセイ溶液に添加した。クマリン脱離基（ＡＭＣ）の加水分解に続いて、分光蛍光分析（Ｅｘλ＝３５５ｎｍ；Ｅｍλ＝４６０ｎｍ）を１０分間行った。用量反応曲線の標準数学モデルに実験値をフィッティングさせることによって阻害割合を計算した。
【０３４４】
カテプシンＳアッセイ
試験化合物５００μＭから０．００８５μＭの段階希釈物（１／３）がジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中で調製された。次いで、各希釈物のＤＭＳＯ  ２μＬをアッセイ緩衝剤５０μＬ（ＭＥＳ、５０ｍＭ（ｐＨ５．５）；ＥＤＴＡ、２．５ｍＭ；ＤＴＴ、２．５ｍＭ及び１０％ＤＭＳＯ）及びヒトカテプシンＳ（２０ｎＭ）のアッセイ緩衝溶液２５μＬに添加した。アッセイ溶液を振とうプレート上で５から１０秒間混合し、室温で１５分間インキュベートした。Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−ＡＭＣ（８μＭ）のアッセイ緩衝剤２５μＬ溶液をアッセイ溶液に添加した。クマリン脱離基（ＡＭＣ）の加水分解に続いて、分光蛍光分析（Ｅｘλ＝３５５ｎｍ；Ｅｍλ＝４６０ｎｍ）を１０分間行った。用量反応曲線の標準数学モデルに実験値をフィッティングさせることによって阻害割合を計算した。
【配列表】
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【国際調査報告】
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