【手続補正書】
【提出日】平成28年9月8日(2016.9.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞を含む試料を保持する保持部が複数配列された試料ケースによって保持された前記細胞を観察する細胞観察装置であって、
前記試料ケースを載置するための載置部と、
第１の電極と第２の電極とを含む電極対が複数配列された電気刺激部とを備え、
前記第１の電極及び前記第２の電極の少なくとも一方は、前記保持部と対向する先端部を除いて絶縁物で被覆されて、前記先端部によって外部に露出された電極部を形成し、
前記第１の電極と前記第２の電極との間には、前記電極部から上方に抜ける空間が形成されており、
前記電極対は、前記電極部が前記試料と間隙を形成するように配置される、
細胞観察装置。
【請求項２】
前記電極対の前記絶縁物で被覆されている部分の少なくとも一部は、濡れ性を有する、
請求項１記載の細胞観察装置。
【請求項３】
前記電極対は、前記第２の電極が前記第１の電極を囲むような円筒状である、
請求項１又は２記載の細胞観察装置。
【請求項４】
前記第１の電極は、前記保持部と対向する先端部を除いて絶縁物で被覆されており、
前記第２の電極は、全体が外部に露出している、
請求項３記載の細胞観察装置。
【請求項５】
前記第１及び第２の電極は、平板状であり、互いに平行になるように配置されている、
請求項１又は２記載の細胞観察装置。
【請求項６】
前記電気刺激部は、前記第１及び第２の電極の間に配置された平板状の絶縁体をさらに有する、
請求項５に記載の細胞観察装置。
【請求項７】
前記第１及び第２の電極は、棒状であり、互いに平行になるように配置されている、
請求項１又は２記載の細胞観察装置。
【請求項８】
前記第１の電極の前記電極部及び前記第２の電極の前記電極部は、前記保持部の底面に沿って互いに平行な棒状電極を成している、
請求項７記載の細胞観察装置。
【請求項９】
前記第２の電極の前記電極部は、前記第１の電極の前記電極部を囲むようなリング状である、
ことを特徴とする請求項７記載の細胞観察装置。
【請求項１０】
前記第２の電極の前記電極部は、前記第１の電極の前記電極部に対向する曲線状である、
請求項７記載の細胞観察装置。
【請求項１１】
前記第１の電極は棒状であり、
前記第２の電極は平板状であり、
前記第１の電極は、前記第２の電極の表面に沿って配置されている、
請求項１又は２記載の細胞観察装置。
【請求項１２】
第１の電極と第２の電極とを含む電極対を有する電気刺激部を用いて細胞を観察する細胞観察方法であって、
細胞を含む試料を保持する保持部を有する試料ケースを配置するステップと、
前記試料ケースの前記保持部内に前記電極対を配置するステップと、
前記電極対により電気刺激を前記試料に与えるステップと、
電気刺激が与えられた前記試料を観察するステップと、を備え、
前記第１の電極及び前記第２の電極の少なくとも一方は、前記保持部と対向する先端部を除いて絶縁物で被覆されて、前記先端部によって外部に露出された電極部を形成し、
前記第１の電極と前記第２の電極との間には、前記電極部から上方に抜ける空間が形成されており、
前記電極対を配置するステップでは、前記電極部が前記試料と間隙を形成するように、前記電極対を前記保持部内に配置する、
細胞観察方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の名称】細胞観察装置及び細胞観察方法
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
上記課題を解決するため、本発明の細胞観察装置は、細胞を含む試料を保持する保持部が複数配列された試料ケースによって保持された細胞を観察する細胞観察装置であって、試料ケースを載置するための載置部と、第１の電極と第２の電極とを含む電極対が複数配列された電気刺激部とを備え、第１の電極及び第２の電極の少なくとも一方は、保持部と対向する先端部を除いて絶縁物で被覆されて、先端部によって外部に露出された電極部を形成し、第１の電極と第２の電極との間には、電極部から上方に抜ける空間が形成されており、電極対は、電極部が試料と間隙を形成するように配置される。
あるいは、本発明の別の形態の細胞観察方法は、第１の電極と第２の電極とを含む電極対を有する電気刺激部を用いて細胞を観察する細胞観察方法であって、細胞を含む試料を保持する保持部を有する試料ケースを配置するステップと、試料ケースの保持部内に電極対を配置するステップと、電極対により電気刺激を試料に与えるステップと、電気刺激が与えられた試料を観察するステップと、を備え、第１の電極及び第２の電極の少なくとも一方は、保持部と対向する先端部を除いて絶縁物で被覆されて、先端部によって外部に露出された電極部を形成し、第１の電極と第２の電極との間には、電極部から上方に抜ける空間が形成されており、電極対を配置するステップでは、電極部が試料と間隙を形成するように、電極対を保持部内に配置する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
このような細胞観察装置あるいは細胞観察方法によれば、試料ケースに複数配列された保持部内に第１の電極と第２の電極とを含む電極対が配置されることにより、この電極対により溶液に浸された細胞を含む試料に対して電流による電気刺激が与えられる。ここで、電極対を構成する第１の電極と第２の電極との間には、いずれかの電極の先端部における外部に露出した電極部から上方に抜ける空間が形成されているので、電極対が保持部内に挿入される際に第１の電極と第２の電極との間の電極部近傍には溶液が満たされる。これにより、電極対の先端で発生した気泡や細胞から発生するガスを電極間の空間を通じて保持部外に排出させることができると同時に、電気刺激に応じて保持部内で発生する熱も電極間の溶液を通じて保持部外に拡散させることができる。その結果、電気刺激に応じた細胞の反応を、気泡、ガス、或いは熱の影響無く正確に観察することができる。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４５】
ここで、図６〜９には、陽極１７ｂの先端が１ｍｍの長さで露出された電極対１０７を備える細胞観察装置１を用いた細胞の観察結果を示している。ただし、この場合の電極対１０７は、陰極１０７ａの先端が陽極１７ｂの先端よりもウェル２１の底面側に突出した構造を有している。図６は、ウェル２１内で１００μｌの溶液（培養液）に浸された試料Ｓを対象に電極対１０７への印加電圧７Ｖで得られた複数のウェル２１で観察される光強度の時間変化を示す波形図であり、図７は、２００μｌの溶液に浸された試料Ｓを対象に印加電圧７Ｖで得られた光強度の時間変化を示す波形図であり、図８は、１００μｌの溶液に浸された試料Ｓを対象に印加電圧２Ｖで得られた光強度の時間変化を示す波形図であり、図９は、２００μｌの溶液に浸された試料Ｓを対象に印加電圧２Ｖで得られた光強度の時間変化を示す波形図であり、それぞれの図において、（ａ）は、陽極１７ｂを絶縁体７１ｂで被覆していない場合、（ｂ）は、陽極１７ｂを絶縁体７１ｂで被覆した場合の測定結果を示している。図７及び図９の測定結果は、溶液Ｌの量が多いため、ウェル２１内での溶液Ｌの液面が高い場合を示す。