(57)【要約】  ムスカリン性アセチルコリン受容体アンタゴニストおよびそれを用いる方法が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造式Ｉ：
【化１】
2007510731.tif 000039
［式中：
Ｒ１−は、Ｎ原子の正電荷と結合したアニオンを示し；
Ｒ２は、直鎖または分枝鎖低級アルキル基（好ましくは１〜６個の炭素原子を有する）、シクロアルキル基（５〜６個の炭素原子を有する）、シクロアルキル−アルキル（６〜１０個の炭素原子を有する）、ヘテロシクロアルキル（５〜６個の炭素原子およびヘテロ原子としてＮまたはＯを有する）、ヘテロシクロアルキル−アルキル（６〜１０個の炭素原子およびヘテロ原子としてＮまたはＯを有する）、アリール、置換されていてもよいアリール、ヘテロアリール、および置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ３は、（Ｃ２−Ｃ１２）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−フェニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−ＯＨ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−ＣＮ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−ＣＦ３、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−ＯＣＨ３、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｏ−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−ＯＣＨ３および（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｏ−（Ｃ１−Ｃ６）アリールからなる群から選択され、好ましいＲ３置換基は、エンド位にある］
を有する化合物。
【請求項２】
指し示されたＨ原子がエキソ位にある請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１−が塩化物、臭化物、ヨウ化物、硫酸塩、ベンゼンスルホン酸塩およびトルエンスルホン酸塩からなる群から選択される請求項１記載の化合物。
【請求項４】
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（シクロヘキシルメチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（シクロプロピルメチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−８−ブチル−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−８−（４−クロロブチル）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−ドデシル−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（２−プロペン−１−イル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタンヨウ化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（フェニルメチル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（２−ヒドロキシエチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−エチル−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−プロピル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（５−ヘキセン−１−イル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（４，４，４−トリフルオロブチル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（３−フェニルプロピル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（２−シクロヘキシルエチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（３−シアノプロピル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−［２−（メチルオキシ）エチル］−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（２−｛［２−（メチルオキシ）エチル］オキシ｝エチル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
Ｎ−（エンド）−（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−（８−エンド）−８−（５−ヘキセン−１−イル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
Ｎ−（エンド）−（３−エンド）−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−（８−エンド）−メチル−８−｛２−［（フェニルメチル）オキシ］エチル｝−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
Ｎ−（エンド）−（３−エンド）−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（３−フェニルプロピル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；および
Ｎ−（エンド）−（３−エンド）−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−［３−（フェニルオキシ）プロピル］−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
からなる群から選択される請求項１記載の化合物。
【請求項５】
請求項１記載の化合物およびその医薬上許容される担体を含む、ムスカリン性アセチルコリン受容体媒介性疾患の治療のための医薬組成物。
【請求項６】
安全かつ有効量の請求項１記載の化合物を投与することを特徴とする、必要のある哺乳動物においてアセチルコリンのその受容体に対する結合を阻害する方法。
【請求項７】
安全かつ有効量の請求項１記載の化合物を投与することを特徴とする、アセチルコリンがその受容体に結合するムスカリン性アセチルコリン受容体媒介性疾患を治療する方法。
【請求項８】
疾患が、慢性閉塞性肺疾患、慢性気管支炎、喘息、慢性呼吸閉塞、肺線維症、肺気腫およびアレルギー性鼻炎からなる群から選択される請求項７記載の方法。
【請求項９】
投与が口または鼻を介する吸入を介するものである請求項８記載の方法。
【請求項１０】
投与がリザーバー・ドライパウダー吸入器、マルチドース・ドライパウダー吸入器または定量吸入器から選択される薬剤ディスペンサーを介するものである請求項９記載の方法。
【請求項１１】
化合物がヒトに投与され、投与量１ｍｇにつき１２時間以上の作用持続時間を有する請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
化合物が２４時間以上の作用持続時間を有する請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
化合物が３６時間以上の作用持続時間を有する請求項１２記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は、８−アゾニアビシクロ［３，２，１］オクタンの新規な誘導体、医薬組成物、その製法、およびＭ３ムスカリン性アセチルコリン受容体媒介性疾患の治療におけるその使用に関する。
【０００２】
発明の背景
末梢および中枢神経系におけるコリン作動性ニューロンから放出されるアセチルコリンは、２つの主要なクラスのアセチルコリン受容体−ニコチンおよびムスカリン性アセチルコリン受容体との相互作用によって、多くの異なる生物学的プロセスに影響を及ぼす。ムスカリン性アセチルコリン受容体（ｍＡＣｈＲｓ）は、７回膜貫通ドメインを有するＧ−タンパク質結合型受容体のスーパーファミリーに属する。Ｍ１−Ｍ５と呼ばれるｍＡＣｈＲｓの５つのサブタイプが存在し、各々が別個の遺伝子の産物である。これら５つのサブタイプの各々は、独特の薬理学的特性を示す。ムスカリン性アセチルコリン受容体は、脊椎動物の器官に幅広く分布しており、ここに、これらの受容体は、生命維持機能の多くの媒介となっている。ムスカリン性受容体は、阻害性および興奮性作用の両方の媒介となることができる。例えば、気道に見られる平滑筋において、Ｍ３ｍＡＣｈＲｓが収縮応答の媒介となる。参考に、Ｃａｕｌｆｉｅｌｄ（１９９３  Ｐｈａｒｍａｃ．Ｔｈｅｒ．５８：３１９−７９）を参照のこと。
【０００３】
肺において、ｍＡＣｈＲｓは、気管および気管支における平滑筋、粘膜下腺、および副交感神経節に局在している。ムスカリン性受容体密度は、副交感神経節において最も大きく、次いで、粘膜下腺から気管平滑筋、次いで気管支平滑筋の順に密度が減少する。ムスカリン性受容体は、肺胞にはほとんど存在しない。肺におけるｍＡＣｈＲ発現および機能の参考のために、ＦｒｙｅｒおよびＪａｃｏｂｙ（１９９８  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ  １５８（５，ｐｔ３）  Ｓ  １５４−６０）を参照のこと。
【０００４】
ｍＡＣｈＲｓの３つのサブタイプ、Ｍ１、Ｍ２およびＭ３ｍＡＣｈＲｓが、肺において重要なものとして同定された。気道平滑筋に位置するＭ３ｍＡＣｈＲｓは、筋収縮の媒介となる。Ｍ３ｍＡＣｈＲｓの刺激は、刺激性Ｇタンパク質Ｇｑ／１１（Ｇｓ）の結合を介して、酵素ホスホリパーゼＣを活性化し、その結果、ホスファチジルイノシトール−４，５−ビホスフェートの遊離を導き、それにより、収縮性タンパク質のリン酸化をもたらす。Ｍ３ｍＡＣｈＲｓは、また、肺の粘膜下腺にも見られる。該Ｍ３ｍＡＣｈＲｓ集団の刺激は、粘液分泌をもたらす。
【０００５】
Ｍ２ｍＡＣｈＲｓは、気道平滑筋におけるコリン作動性受容体集団の約５０−８０％を構成する。その正確な機能は今だ不明であるが、それらは、ｃＡＭＰ生成の阻害を介して、気道平滑筋のカテコールアミン媒介性弛緩を阻害する。ニューロンＭ２ｍＡＣｈＲｓは、節後副交感神経に位置する。正常な生理学的条件下で、ニューロンＭ２ｍＡＣｈＲｓは、副交感神経からのアセチルコリン放出を厳格に調節する。阻害性Ｍ２ｍＡＣｈＲｓもまた、いくつかの種の肺における交感神経において同定されている。これらの受容体は、ノルアドレナリンの放出を阻害し、かくして、肺への交感神経入力を減少させる。
【０００６】
Ｍ１ｍＡＣｈＲｓは、肺副交感神経節に見られ、そこで、それらは、神経伝達を増強するように機能する。これらの受容体はまた、末梢性肺実質に局在しているが、該実質におけるその機能は知られていない。
【０００７】
肺におけるムスカリン性アセチルコリン受容体機能不全は、種々の異なる病態生理学的状態において注目されている。特に、喘息および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）において、炎症性の状態が、肺平滑筋に分布する副交感神経における阻害性Ｍ２ムスカリン性アセチルコリン自己受容体機能の喪失を導き、その結果、迷走神経刺激後のアセチルコリン放出増加を引き起こす（Ｆｒｙｅｒら、１９９９  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ  ６４  （６−７）  ４４９−５５）。該ｍＡＣｈＲ機能不全は、Ｍ３ｍＡＣｈＲｓの刺激増加によって媒介される気道活動過多および応答過多をもたらす。かくして、強力なｍＡＣｈＲアンタゴニストの同定は、これらのｍＡＣｈＲ−媒介性病態における療法として有用であろう。
【０００８】
ＣＯＰＤは、慢性気管支炎、慢性気管支梢炎および気腫を包含する種々の進行性の健康問題を包含する不明確な用語であり、それは、世界における死亡および罹患の主要な原因である。喫煙は、ＣＯＰＤの発症の主要な危険因子であり、アメリカ合衆国だけでほぼ五千万人が紙巻きタバコを吸っており、毎日、概算で三千人が習慣にし始めている。その結果として、ＣＯＰＤは、２０２０年までに、世界中の健康負担として上位５つのなかに入ると予想される。現在、吸入抗−コリン作動薬療法は、ＣＯＰＤの一次療法として「最も基準となるもの（gold standards）」と考えられている（Ｐａｕｗｅｌｓら、２００１  Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．１６３：１２５６−１２７６）。
【０００９】
気道過反応性疾患の治療のための抗−コリン作動薬療法の使用を支持する大きな証拠にもかかわらず、肺の徴候に対する臨床上使用のために入手可能な抗−コリン作動性化合物は、比較的少数である。より詳細には、アメリカ合衆国において、現在、イプラトロピウム（Ｉｐｒａｔｒｏｐｉｕｍ）臭化物（Ａｔｒｏｖｅｎｔ（登録商標）；アルブテロールと併用したＣｏｍｂｉｖｅｎｔ（登録商標））が気道過反応性疾患の治療のために市販されている唯一の吸入用抗−コリン作動薬である。該化合物は強力な抗−ムスカリン剤であるが、作用が短く、そのため、ＣＯＰＤ患者に緩解を提供するには、１日に４回ほどの多くの投与を必要とする。欧州およびアジアにおいて、近年、長期作用性抗−コリン作動薬チオトロピウム（Ｔｉｏｔｒｏｐｉｕｍ）臭化物（Ｓｐｉｒｉｖａ（登録商標））が承認されたが、該製品は、現在、アメリカ合衆国において入手できない。かくして、ｍＡＣｈＲｓにて阻害をもたらすことができる、長期作用性で、かつ、喘息およびＣＯＰＤのような気道過反応性疾患の治療のために１日１回投与することのできる新規な化合物に対する要望が依然としてある。
【００１０】
ｍＡＣｈＲｓは、体中に広く分布しているので、抗−コリン作動薬を呼吸管に局所的に与えることができることが、使用される薬物の低投与量を可能にするので、特に有益である。さらに、長期作用性であり、特に、受容体または肺に保持される局所作用性薬物を設計できることが、全身に抗−コリン作動薬を使用した場合に見られうる望ましくない副作用の回避を可能にするであろう。
【００１１】
発明の概要
本発明は、アセチルコリンがＭ３ｍＡＣｈＲに結合するムスカリン性アセチルコリン受容体（ｍＡＣｈＲ）媒介性疾患の治療法であって、有効量の式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩を投与することを特徴とする方法を提供する。
【００１２】
本発明は、また、必要とする哺乳動物において、アセチルコリンのその受容体への結合を阻害する方法であって、有効量の式（Ｉ）の化合物を上記哺乳動物に投与することを特徴とする方法に関する。
【００１３】
【化１】
2007510731.tif 000002
【００１４】
発明の詳細な記載
本発明は、式（Ｉ）
【化２】
2007510731.tif 000003
［式中：
指し示されるＨ原子は、エキソ位であり；
Ｒ１−は、Ｎ原子の正電荷と結合したアニオンを示し；
Ｒ１−は、限定するものではないが、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硫酸塩、ベンゼンスルホン酸塩およびトルエンスルホン酸塩であってもよく；
Ｒ２は、直鎖または分枝鎖低級アルキル基（好ましくは１〜６個の炭素原子を有する）、シクロアルキル基（５〜６個の炭素原子を有する）、シクロアルキル−アルキル（６〜１０個の炭素原子を有する）、ヘテロシクロアルキル（５〜６個の炭素原子およびヘテロ原子としてＮまたはＯを有する）、ヘテロシクロアルキル−アルキル（６〜１０個の炭素原子およびヘテロ原子としてＮまたはＯを有する）、アリール、置換されていてもよいアリール、ヘテロアリール、および置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ３は、（Ｃ２−Ｃ１２）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−フェニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−ＯＨ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−ＣＮ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−ＣＦ３、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−ＯＣＨ３、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｏ−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−ＯＣＨ３および（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｏ−（Ｃ１−Ｃ６）アリールからなる群から選択され、好ましいＲ３置換基は、エンド位にある］
によって示される８−アゾニアビシクロ［３，２，１］オクタンの新規な誘導体、医薬組成物、その製法、およびＭ３ムスカリン性アセチルコリン受容体媒介性疾患の治療におけるその使用に関する。
【００１５】
アリール、ヘテロアリール、および複素環含有部分の全ては、下記に定義されるように置換されていてもよい。
本明細書中で使用される場合、「アリール、ヘテロアリール、および複素環含有部分」なる語は、環およびアルキルの両方、もし包含されるならば、アルケニル環、例えば、アリール、アリールアルキル、およびアリールアルケニル環を示す。「部分」および「環」なる語は、全体を通じて、交換可能に使用されうる。
【００１６】
本明細書中で使用される場合、「置換されていてもよい」なる語は、特に定義されないかぎり、ハロゲン、例えば、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素；ヒドロキシ；ヒドロキシ置換されたＣ１−１０アルキル；Ｃ１−１０アルコキシ、例えば、メトキシまたはエトキシ；Ｓ（Ｏ）ｍ’Ｃ１−１０アルキル（ここに、ｍ’は０、１または２である）、例えば、メチルチオ、メチルスルフィニルまたはメチルスルホニル；アミノ、モノおよびジ置換アミノ、例えば、ＮＲ４Ｒ５基；ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ４；Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５；Ｃ（Ｏ）ＯＨ；Ｓ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５；ＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ４、Ｃ１−１０アルキル、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、またはｔ−ブチル；ハロ置換Ｃ１−１０アルキル、例えば、ＣＦ３；置換されていてもよいアリール、例えば、フェニル、または置換されていてもよいアリールアルキル、例えば、ベンジルまたはフェネチル、置換されていてもよい複素環、置換されていてもよい複素環式アルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいヘテロアリールアルキル（ここに、これらのアリール、ヘテロアリール、または複素環部分は、ハロゲン；ヒドロキシ；ヒドロキシ置換アルキル；Ｃ１−１０アルコキシ；Ｓ（Ｏ）ｍ’Ｃ１−１０アルキル；アミノ、モノおよびジ置換アルキルアミノ、例えば、ＮＲ４Ｒ５基；Ｃ１−１０アルキルまたはハロ置換Ｃ１−１０アルキル、例えば、ＣＦ３によって、１〜２回置換されていてもよい）などの基を意味する。
【００１７】
適当な医薬上許容される塩は、当業者によく知られており、無機酸および有機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、酢酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、乳酸、シュウ酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、安息香酸、サリチル酸、フェニル酢酸およびマンデル酸の塩基性塩を包含する。さらに、式（Ｉ）の化合物の医薬上許容される塩は、また、医薬上許容されるカチオンと共に形成されていてもよい。適当な医薬上許容されるカチオンは、当業者によく知られており、アルカリ、アルカリ土類、アンモニウムおよび第四アンモニウムカチオンを包含する。
【００１８】
本明細書で使用される場合、下記の用語は以下に示すとおりである。
・「ハロ」−全ハロゲン、すなわち、クロロ、フルオロ、ブロモおよびヨード。
・「Ｃ１−１０アルキル」または「アルキル」−鎖長が限定されないかぎり、１〜１０個の炭素原子の直鎖および分枝鎖の両方の基であり、限定するものではないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉｓｏ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル等を包含する。
【００１９】
・「シクロアルキル」は、本明細書で使用される場合、好ましくは３〜８個の炭素原子からなる、環状基を意味し、限定するものではないが、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル等を包含する。
・「アルケニル」は、本明細書中で使用される場合、全ての事象において、鎖長が限定されないかぎり、２−１０個の炭素原子の直鎖または分枝鎖基を意味し、限定するものではないが、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、２−メチル−１−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル等を包含する。
・「アリール」−フェニルおよびナフチル。
【００２０】
・「ヘテロアリール」（それ自体あるいは「ヘテロアリールオキシ」または「ヘテロアリールアルキル」等のいずれかの組み合わせで）−１以上の環がＮ、ＯまたはＳからなる群から選択される１以上のヘテロ原子を含有する５−１０員の芳香環系、例えば、限定するものではないが、ピロール、ピラゾール、フラン、チオフェン、キノリン、イソキノリン、キナゾリニル、ピリジン、ピリミジン、オキサゾール、テトラゾール、チアゾール、チアジアゾール、トリアゾール、イミダゾール、またはベンゾイミダゾール。
【００２１】
・「複素環」（それ自体あるいは「複素環式アルキル」または「ヘテロシクロアルキル」等のいずれかの組み合わせで）−１以上の環がＮ、ＯまたはＳからなる群から選択される１以上のヘテロ原子を含有する飽和または部分不飽和４−１０員環系、例えば、限定するものではないが、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モノホリン、テトラヒドロピラン、チオモルホリンまたはイミダゾリジン。さらに、硫黄がスルホンまたはスルホキシドに酸化されていてもよい。
・「アリールアルキル」または「ヘテロアリールアルキル」または「複素環式アルキル」は、別記しないかぎり、本明細書中で使用される場合、本明細書中で定義されるとおりのアリール、ヘテロアリールまたは複素環部分に結合した上記のとおりのＣ１−１０アルキルを意味する。
【００２２】
・「スルフィニル」−対応するスルフィドの酸化物Ｓ（Ｏ）。「チオ」なる語は、スルフィドを示し、「スルホニル」なる語は、完全に酸化されたＳ（Ｏ）２基を示す。
【００２３】
本発明において有用な好ましい化合物は：
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（シクロヘキシルメチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（シクロプロピルメチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−８−ブチル−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−８−（４−クロロブチル）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−ドデシル−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（２−プロペン−１−イル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタンヨウ化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（フェニルメチル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（２−ヒドロキシエチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−エチル−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−プロピル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（５−ヘキセン−１−イル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（４，４，４−トリフルオロブチル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（３−フェニルプロピル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（２−シクロヘキシルエチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（３−シアノプロピル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−［２−（メチルオキシ）エチル］−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（２−｛［２−（メチルオキシ）エチル］オキシ｝エチル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
Ｎ−（エンド）−（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−（８−エンド）−８−（５−ヘキセン−１−イル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
Ｎ−（エンド）−（３−エンド）−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−（８−エンド）−メチル−８−｛２−［（フェニルメチル）オキシ］エチル｝−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；
Ｎ−（エンド）−（３−エンド）−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（３−フェニルプロピル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物；および
Ｎ−（エンド）−（３−エンド）−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−［３−（フェニルオキシ）プロピル］−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
を包含する。
【００２４】
製法
調製
式（Ｉ）の化合物は、合成手法（そのいくつかは、下記のスキームにおいて説明される）を適用することによって得られうる。これらのスキームに提供される合成は、本明細書中に概説される反応との適合性を達成するように、適当に保護された置換基を用いて、反応する種々の異なるＲ１、Ｒ２およびＲ３を有する式（Ｉ）の化合物を製造するために応用可能である。この場合、その後に続く脱保護により、次いで、一般に開示される性質を有する化合物を得る。いくつかのスキームは、特定の化合物を用いて示されるが、これは単なる例示目的に過ぎない。
【００２５】
一般的な製法をスキームＩに示す。該合成は、化合物１を用いて開始した。ＨＣ（ＣＮ）（Ｒ２）（Ｒ２）由来のアニオンとのカップリング反応により、２を提供した。次いで、Ｒ３−Ｒ１での処理により、式（Ｉ）の第四アンモニウム塩をもたらした。
【００２６】
スキームＩ
【化３】
2007510731.tif 000004
【００２７】
式（Ｉ）の化合物を導くより特別な製法をスキームＩＩに概説する。ジフェニルアセトニトリルの１を用いるアルキル化により、化合物３を提供した。次いで、ＣＦ３（ＣＨ２）３Ｂｒでの処理により、第四アンモニウム塩４を提供した。
【００２８】
スキームＩＩ
【化４】
2007510731.tif 000005
【００２９】
式（Ｉ）のＮ−エンド化合物への特定の経路をスキームＩＩＩに説明する。ヨウ素およびポリマーに支持されたトリフェニルホスフィンを用いるアルコール５の処理により、ヨウ化物６を得、それを次いで、塩基性条件下、二置換アセトニトリル誘導体１３との反応によって、化合物７に変換することができる。７のベンジル基の除去により、第二級アミン８を誘導する。Ｒ３−Ｒ１および臭化メチルを用いる８の連続したＮ−アルキル化により、ジアステレオ異性体混合物として、式（Ｉ）の第四アンモニウム塩１０を提供する。ＤＣＭ、ＥＡまたはヘキサンなどの溶媒からなる有機溶媒混合物中での再結晶化により、式（Ｉ）の純粋なＮ−エンド異性体１１を得る。
【００３０】
スキームＩＩＩ
【化５】
2007510731.tif 000006
試薬および条件：ａ）ヨウ素、ポリマーに支持されたトリフェニルホスフィン、ＤＣＭ；ｂ）ＮａＨ、ＤＭＦ；ｃ）ＣｌＣＯ２ＣＨＣｌＣＨ３、ｍｗ、１４０℃またはＨ２、１０％Ｐｄ（ＯＨ）２；ｄ）Ｒ３−Ｒ１、Ｋ２ＣＯ３、アセトニトリル；ｅ）ＭｅＢｒ、アセトン；ｆ）再結晶化
【００３１】
別法では、第二級アミン８は、Ｎ−Ｂｏｃ保護されたアルコール誘導体１４から、スキームＩＶに示されるように、ＢＯＣ基の同時除去を伴って二置換アセトニトリル１３で置換することができるトシラート誘導体の生成によって調製することができる。
【００３２】
スキームＩＶ
【化６】
2007510731.tif 000007
試薬および条件：ａ）塩化トシル、ＴＥＡ；ｂ）ＮａＨ、ＤＭＦ
【００３３】
合成例
本発明をここに、単なる例示であって、本発明の範囲の制限として解釈されるべきではない下記の実施例を引用して記載する。ほとんどの試薬および中間体は、市販されているか、または文献に記載される手法にしたがって調製される。文献に記載されていない中間体の調製もまた、下記に説明される。
【００３４】
フラッシュカラムクロマトグラフィーは、別記しないかぎり、Ｍｅｒｃｋ９３８５シリカを用いて実施した。
ＬＣ／ＭＳ分析は、下記の条件下で行った。
カラム：３．３ｃｍｘ４．６ｍｍ ＩＤ，３μｍ  ＡＢＺ＋ＰＬＵＳ
流速：３ｍｌ／分
注入量：５μｌ
温度：室温
溶媒：Ａ：０．１％ギ酸＋１０ｍＭ酢酸アンモニウム
Ｂ：９５％アセトニトリル＋０．０５％ギ酸
勾配：  時間 Ａ％ Ｂ％
０．００  １００        ０
０．７０  １００        ０
４．２０      ０    １００
５．３０      ０    １００
５．５０  １００        ０
【００３５】
Ｇｉｌｓｏｎ分取ＨＰＬＣは、下記の条件下で行った。
カラム：７５ｘ３３ｍｍ ＩＤ，Ｓ−５μｍ，１２ｎｍ
流速：３０ｍＬ／分
注入量：０．８００ｍＬ
室温
溶媒Ａ：水中における０．１％トリフルオロ酢酸
溶媒Ｂ：アセトニトリル中における０．１％トリフルオロ酢酸
【００３６】
中間体１：３−（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピオニトリルの調製
【化７】
2007510731.tif 000008
【００３７】
ａ）（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル）−メタノールの調製
（エンド）−３−（ヒドロキシメチル）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（０．５０ｇ，２．０５ｍｍｏｌ）およびＬｉＡｌＨ４（６．１６ｍＬ，ＴＨＦ中１．０Ｍ，６．１６ｍｍｏｌ）の混合物をマイクロ波反応器中、８０℃で６０分間加熱した。次いで、該溶液を飽和Ｎａ２ＳＯ４溶液と混合し、セライトでろ過し、濃縮して、標題化合物を得た（０．３１ｇ，９７％）。
LCMS (ES) m/z 156 (M+H)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.28 (s, 1H), 1.59 (m, 4H),  1.90 (m, 1H),  2.13 (m, 4H), 2.32 (s, 3H), 3.17 (s, 2H), 3.59 (d, 2H).
【００３８】
ｂ）（エンド）−３−ヨードメチル−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタンの調製
ヨウ素（６．６７ｇ，２５．８ｍｍｏｌ）および（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル）−メタノール（２．０ｇ，１２．９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１２０ｍＬ）中溶液をＰＰｈ３（樹脂上，８．６ｇ，３ｍｍｏｌ／ｇ，２５．８ｍｍｏｌ）と混合した。得られた混合物を１７時間攪拌し、ろ過し、濃縮して、標題化合物を得た（２．６３ｇ，７７％）。
LCMS (ES) m/z 266 (M+H)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 2.05 (m, 4H),  2.39 (m, 3H),  2.79 (d, 3H), 2.98 (m, 2H), 3.45 (d, 2H), 3.81 (s, 2H).
【００３９】
ｃ）３−（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピオニトリルの調製
（エンド）−３−ヨードメチル−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン（１．０６ｇ，４．０ｍｍｏｌ）およびＰｈ２ＣＨＣＮ（２．３２ｇ，１２．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中溶液をＮａＨ（０．２８８ｇ，１２．０ｍｍｏｌ）と混合した。得られた混合物を室温で６０分間攪拌した。次いで、ろ過および逆相ＨＰＬＣ（Ｇｉｌｓｏｎ）による精製により、標題化合物を得た（１．１６ｇ，９３％）。
LCMS (ES) m/z 331 (M+H)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.64 (m, 2H), 2.14 (m, 1H), 2.26 (m, 2H),  2.34 (m, 2H), 2.52 (m, 2H), 2.75 (m, 5H), 3.83 (s, 2H), 7.39 (d, 10H).
【００４０】
一般的調製法
３−（（３−エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピオニトリル（３３．０ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（０．５ｍＬ）およびＭｅＣＮ（０．５ｍＬ）中溶液をＲＢｒ（１．０ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（２７．６ｍｇ，０．２０ｍｍｏｌ）と混合した。得られた混合物を室温で、ある特定の反応時間（下記実施例で明記する）攪拌した。次いで、それをＤＭＳＯ（０．３ｍＬ）で希釈し、濃縮した。逆相ＨＰＬＣ（Ｇｉｌｓｏｎ）による精製により、目的化合物を得た。
【００４１】
実施例１
【化８】
2007510731.tif 000009
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（シクロヘキシルメチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝７日）に従うことによって、収率１５％で調製された。
LCMS (ES) m/z 427 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.29 (m, 3H), 1.43 (m, 2H), 1.83 (m, 8H), 2.19 (m, 1H),  2.42 (m, 6H), 3.00 (m, 2H), 3.04 (s, 3H), 3.10 (d, 2H), 3.84 (s, 2H), 7.35 (m, 2H), 7.43 (m, 4H),  7.49 (m, 4H)
【００４２】
実施例２
【化９】
2007510731.tif 000010
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（シクロプロピルメチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝７０時間）に従うことによって、収率５１％で調製された。
LCMS (ES) m/z 385 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 0.48 (m, 2H), 0.83 (m, 2H), 1.13 (m, 1H), 1.82 (m, 2H), 2.22 (m, 1H),  2.42 (m, 6H), 3.01 (m, 2H), 3.12 (m, 3H), 3.19 (d, 2H), 3.90 (m, 2H), 7.35 (m, 2H), 7.43 (m, 4H),  7.50 (m, 4H).
【００４３】
実施例３
【化１０】
2007510731.tif 000011
（３−エンド）−８−ブチル−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝７０時間）に従うことによって、収率２６％で調製された。
LCMS (ES) m/z 387 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.04 (m, 3H), 1.45 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 1.84 (d, 2H), 2.21 (m, 1H),  2.45 (m, 6H), 3.00 (m, 2H), 3.02 (s, 3H), 3.20 (m, 2H), 3.83 (s, 2H), 7.35 (m, 2H), 7.42 (m, 4H),  7.49 (m, 4H).
【００４４】
実施例４
【化１１】
2007510731.tif 000012
（３−エンド）−８−（４−クロロブチル）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝７０時間）に従うことによって、収率３７％で調製された。
LCMS (ES) m/z 421 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.88 (m, 6H), 2.18 (m, 1H),  2.45 (m, 6H), 3.01 (m, 2H), 3.04 (s, 3H), 3.28 (m, 2H), 3.67 (m, 2H), 3.84 (s, 2H), 7.35 (m, 2H), 7.42 (m, 4H),  7.49 (m, 4H).
【００４５】
実施例５
【化１２】
2007510731.tif 000013
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−ドデシル−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝７０時間）に従うことによって、収率１０％で調製された。
LCMS (ES) m/z 499 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 0.95 (t, 3H), 1.36 (m, 18H), 1.73 (m, 2H), 1.82 (d, 2H), 2.18 (m, 1H), 2.46 (m, 6H), 3.00 (d, 2H), 3.02 (s, 3H), 3.19 (m, 2H), 3.82 (s, 2H), 7.35 (m, 2H), 7.42 (m, 4H), 7.49 (m, 4H).
【００４６】
実施例６
【化１３】
2007510731.tif 000014
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（２−プロペン−１−イル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタンヨウ化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝３時間）に従うことによって、収率３７％で調製された。
LCMS (ES) m/z 371 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.83 (m, 2H), 2.20 (m, 1H), 2.36 (m, 2H), 2.47 (m, 4H), 3.02 (m, 5H), 3.85 (s, 2H), 3.92 (d, 2H), 5.71 (m, 2H), 6.09 (m, 1H), 7.35 (m, 2H), 7.42 (m, 4H), 7.51 (m, 4H).
【００４７】
実施例７
【化１４】
2007510731.tif 000015
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（フェニルメチル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝３時間）に従うことによって、収率３９％で調製された。
LCMS (ES) m/z 421 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.85 (d, 2H), 2.17 (m, 1H),  2.45 (m, 4H), 2.73 (m, 2H), 2.92 (s, 3H), 3.04 (d, 2H), 3.86 (s, 2H), 4.45 (s, 2H), 7.34 (m, 2H), 7.42 (m, 4H), 7.48 (m, 4H),  7.56 (m, 5H).
【００４８】
実施例８
【化１５】
2007510731.tif 000016
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（２−ヒドロキシエチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝１０日）に従うことによって、収率４０％で調製された。
LCMS (ES) m/z 375 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.84 (m, 2H), 2.04 (m, 1H), 2.22 (m, 2H), 2.34 (m, 2H), 2.50 (m, 2H),  2.74 (s, 1H), 2.95 (d, 1H), 3.01 (d, 1H), 3.14 (s, 1H), 3.33 (s, 3H), 3.40 (m, 1H), 3.81 (m, 1H), 3.99 (m, 2H), 7.35 (m, 2H), 7.42 (m, 4H), 7.48 (m, 4H).
【００４９】
実施例９
【化１６】
2007510731.tif 000017
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−エチル−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝７０時間）に従うことによって、収率６０％で調製された。
LCMS (ES) m/z 359 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.32 (t, 3H), 1.83 (d, 2H), 2.21 (m, 1H), 2.36 (m, 4H),  2.52 (m, 2H), 3.02 (m, 5H), 3.35 (m, 2H), 3.81 (s, 2H), 7.35 (m, 2H), 7.42 (m, 4H), 7.49 (m, 4H).
【００５０】
実施例１０
【化１７】
2007510731.tif 000018
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−プロピル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝７０時間）に従うことによって、収率２０％で調製された。
LCMS (ES) m/z 373 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.02 (t, 3H), 1.74 (m, 1H), 1.81 (d, 2H), 2.18 (m, 1H), 2.34 (m, 2H), 2.45 (m, 4H), 3.00 (m, 2H), 3.02 (s, 3H), 3.17 (m, 2H), 3.82 (s, 2H), 7.35 (m, 2H), 7.42 (m, 4H), 7.49 (m, 4H).
【００５１】
実施例１１
【化１８】
2007510731.tif 000019
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（５−ヘキセン−１−イル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝７０時間）に従うことによって、収率２９％で調製された。
LCMS (ES) m/z 413 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.48 (m, 2H), 1.79 (m, 4H), 2.18 (m, 3H), 2.42 (m, 6H),  3.00 (m, 5H), 3.22 (m, 2H), 3.82 (s, 2H), 5.05 (m, 2H), 5.86 (m, 1H), 7.35 (m, 2H), 7.42 (m, 4H), 7.49 (m, 4H).
【００５２】
実施例１２
【化１９】
2007510731.tif 000020
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（４，４，４−トリフルオロブチル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝７０時間）に従うことによって、収率２３％で調製された。
LCMS (ES) m/z 441 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.80 (d, 2H), 2.03 (m, 2H), 2.19 (m, 1H), 2.41 (m, 8H),  3.01 (m, 2H), 3.06 (s, 3H), 3.30 (m, 2H), 3.87 (s, 2H), 7.35 (m, 2H), 7.42 (m, 4H), 7.49 (m, 4H).
【００５３】
実施例１３
【化２０】
2007510731.tif 000021
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（３−フェニルプロピル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝７日）に従うことによって、収率４３％で調製された。
LCMS (ES) m/z 449 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.78 (d, 2H), 2.07 (m, 2H), 2.26 (m, 4H), 2.46 (m, 3H),  2.71 (t, 2H), 2.97 (d, 2H), 2.99 (s, 3H), 3.21 (m, 2H), 3.80 (s, 2H), 7.25 (m, 2H), 7.31 (m, 4H), 7.41 (m, 5H), 7.47 (m, 4H).
【００５４】
実施例１４
【化２１】
2007510731.tif 000022
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（２−シクロヘキシルエチル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝７日）に従うことによって、収率２１％で調製された。
LCMS (ES) m/z 441 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.04 (m, 2H), 1.29 (m, 4H), 1.62 (m, 2H), 1.75 (m, 7H), 2.18 (m, 1H),  2.34 (m, 4H), 2.49 (m, 2H), 3.00 (m, 5H), 3.24 (m, 2H), 3.82 (s, 2H), 7.35 (m, 2H), 7.42 (m, 4H), 7.49 (m, 4H).
【００５５】
実施例１５
【化２２】
2007510731.tif 000023
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−（３−シアノプロピル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝７日）に従うことによって、収率４８％で調製された。
LCMS (ES) m/z 398 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.83 (d, 2H), 2.17 (m, 3H),  2.42 (m, 6H), 2.60 (t, 2H), 3.01 (m, 2H), 3.06 (s, 3H), 3.32 (m, 2H), 3.87 (s, 2H), 7.35 (m, 2H), 7.42 (m, 4H), 7.49 (m, 4H).
【００５６】
実施例１６
【化２３】
2007510731.tif 000024
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−［２−（メチルオキシ）エチル］−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝７日）に従うことによって、収率２４％で調製された。
LCMS (ES) m/z 389 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.80 (d, 2H), 2.18 (m, 1H),  2.34 (m, 2H), 2.48 (m, 4H), 3.00 (m, 2H), 3.10 (s, 3H), 3.38 (s, 3H), 3.50 (m, 2H), 3.81 (m, 2H), 3.93 (s, 2H), 7.35 (m, 2H), 7.42 (m, 4H), 7.49 (m, 4H).
【００５７】
実施例１７
【化２４】
2007510731.tif 000025
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（２−｛［２−（メチルオキシ）エチル］オキシ｝エチル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
標題化合物は、一般的な実験法（反応時間＝７日）に従うことによって、収率２８％で調製された。
LCMS (ES) m/z 433 (M)+; 1H-NMR(CDCl3) δ 1.80 (d, 2H), 2.18 (m, 1H),  2.34 (m, 2H), 2.48 (m, 4H), 3.01 (m, 2H), 3.11 (s, 3H), 3.36 (s, 3H), 3.50 (m, 2H), 3.56 (m, 2H), 3.64 (m, 2H), 3.91 (m, 2H), 3.96 (s, 2H), 7.35 (m, 2H), 7.43 (m, 4H), 7.49 (m, 4H).
【００５８】
中間体２：（３−エンド）−ｔｅｒｔ−ブチル ３−（ヒドロキシメチル）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボキシレート
【化２５】
2007510731.tif 000026
炭素上の水酸化パラジウム（パールマン（Pearlman）触媒，２．６ｇ，２０％（ｗ／ｗ））を含有するエタノール（４５ｍｌ）および６Ｎ  ＨＣｌ（２ｍｌ）中における（３−エンド）−（８−ベンジル−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル）メタノール（２．３１ｇ，１０ｍｍｏｌ）の溶液を室温で１８時間、水素化した（５５ｐｓｉ  Ｈ２）。触媒のろ過後、ろ液を真空下で濃縮した。残渣をＥｔＯＨ（４５ｍｌ）および６Ｎ  ＨＣｌ（２ｍｌ）中に再溶解し、それに、炭素上の水酸化パラジウム（２．６ｇ）を加えた。反応混合物を室温で２日間、水素化した（５５ｐｓｉ  Ｈ２）。触媒をセライトでろ過し、ろ液を蒸発させた。残渣およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（３．２ｇ，１５ｍｍｏｌ）を６０ｍｌのジオキサン：１Ｎ  ＮａＯＨ（２：１）中に溶解し、室温で一晩攪拌した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチル（３Ｘ５０ｍｌ）と水（５０ｍｌ）の間に分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。残留油状物をアミノプロピルＳＰＥカートリッジ（３０ｇ）上に負荷し、ＤＣＭ（４Ｘ３０ｍｌ）、ＥＡ（４Ｘ３０ｍｌ）およびＭｅＯＨ（２Ｘ３０ｍｌ）で溶出することによって精製した。ＤＣＭフラクションを合わせ、蒸発させて、無色油状物を得た（１．９５ｇ，８１％）。
LC/MS: 1.65 min (100 %), MH+: 242. NMR (CDCl3): 4.15 ppm (broad, 2H), 3.64 ppm (d, 2H),  2.20 ppm (broad, 2H),1.97 ppm (broad, 2H), 1.85 ppm (m, 1H), 1.60 ppm (m, 2H), 1.40-1.50 ppm (s+broad, 11H)
【００５９】
中間体３：（３−エンド）−ｔｅｒｔ−ブチル ３−（｛［（４−メチルフェニル）スルホニル］オキシ｝メチル）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボキシレート
【化２６】
2007510731.tif 000027
（３−エンド）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（ヒドロキシメチル）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボキシレート（８４０ｍｇ，３．４８ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５ｍｌ）中溶液に、塩化トシル（１．３３ｇ，６．９７ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（９１ｍｌ，７．３５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１６時間攪拌した。該混合物を１０ｍｌのＤＣＭおよび２ｍｌの飽和ＮａＨＣＯ３で希釈した。有機層を疎水性フリットで単離し、真空下で濃縮した。残渣をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（１１０ｇのシリカ，６５分でＥＡ／２０％〜６０％ヘキサンを用いて溶出する）によって精製して、標題化合物を得た（１．２４ｇ，９０％）。
LC/MS: m/z, 396 (M+H)+, 2.43 min.
【００６０】
中間体４：（３−エンド）−３−（ヨードメチル）−８−（フェニルメチル）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタン
【化２７】
2007510731.tif 000028
ヨウ素（５．０８ｇ，２０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１００ｍｌ）中溶液に、［８−（フェニルメチル）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル］メタノール（２．３１ｇ，１０ｍｍｏｌ）およびポリマーで支持されたＰＰｈ３（９．０ｇ，２．２１ｍｍｏｌ／ｇ，２０ｍｍｏｌ）を加えた。１７時間攪拌後、反応混合物をろ過し、真空下で濃縮して、標題化合物を得た（３．０７ｇ，９０％）。
LC/MS: m/z, 342 (M+H)+, 1.42 min.
【００６１】
中間体５：（３−エンド）−２，２−ジフェニル−３−［８−（フェニルメチル）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル］プロパンニトリル
【化２８】
2007510731.tif 000029
１００ｍｌ丸底フラスコ中における（３−エンド）−３−（ヨードメチル）−８−（フェニルメチル）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタン（２．１ｇ，６．１６ｍｍｏｌ）、Ｐｈ２ＣＨＣＮ（３．５６ｇ，１８．５ｍｍｏｌ）およびＮａＨ（０．４４ｇ，１８．５ｍｍｏｌ）の混合物を３０分間、アルゴンでフラッシュした後、攪拌下でゆっくりとＤＭＦ（２０ｍｌ）を加えた。得られた混合物を室温で６０分間攪拌した後、ＥＡ（２００ｍｌ）および水（１００ｍｌ）で希釈した。水層を分離し、ＥＡ（２Ｘ１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を蒸発させ、残渣をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（１１０ｇのシリカ、６５分でＥＡ／２０％〜６０％ヘキサンを用いて溶出する）によって精製して、標題化合物を得た（１．５０ｇ，６０％）。
LC/MS: m/z, 407 (M+H)+, 1.90 min; 1H-NMR(CDCl3)  1.29 (d, 2H), 1.74 (m, 2H), 2.04-2.15 (m, 5H), 2.66 (s, 2H), 3.15(s, 2H), 3.52 (s, 2H), 7.24-7.41 (m, 15H).
【００６２】
中間体６：（３−エンド）−３−（８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル）−２，２−ジフェニルプロパンニトリル
【化２９】
2007510731.tif 000030
【００６３】
ａ）（３−エンド）−２，２−ジフェニル−３−［８−（フェニルメチル）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル］プロパンニトリルから
１．５ｍｌのＤＣＥ中における（３−エンド）−２，２−ジフェニル−３−［８−（フェニルメチル）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル］プロパンニトリル（８２ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）の溶液に０℃にて、クロロギ酸１−クロロエチル（１１５ｍｇ，０．８ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。該混合物をマイクロ波中、１４０℃で８０分間加熱した。ＬＣ／ＭＳは、〜７０％の所望の生成物および１３％の出発材料を示した。反応時間のさらなる延長は、ＬＣ／ＭＳによって評価したとき、収率を改善しなかった。反応混合物を１ｍｌのＭｅＯＨでクエンチし、１時間熱還流した。溶媒蒸発後、残渣を逆相Ｇｉｌｓｏｎ  ＨＰＬＣにより、アセトニトリル／水／０．１％ＴＦＡ（１０／９０〜７０／３０，ｖ／ｖ，１２分かける）で溶出して精製して、標題化合物を得た（５６ｍｇ，８８％）。
LC/MS: m/z, 317 (M+H), 1.54 min.
【００６４】
ｂ）（３−エンド）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（｛［（４−メチルフェニル）スルホニル］オキシ｝メチル）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボキシレートから
（３−エンド）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（｛［（４−メチルフェニル）スルホニル］オキシ｝メチル）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボキシレート（０．４６ｇ，１．１６ｍｍｏｌ）、Ｐｈ２ＣＨＣＮ（０．６７ｇ，３．３１ｍｍｏｌ）およびＮａＨ（８４ｍｇ，３．５ｍｍｏｌ）の混合物に、アルゴン下で１０分間、６ｍｌの乾燥ＤＭＦをゆっくりと加えた。得られた混合物をマイクロ波反応器中、２２０℃で６０分間加熱した。該溶液をろ過し、Ｇｉｌｓｏｎ逆相ＨＰＬＣにより、アセトニトリル／水／０．１％ＴＦＡ（１０／９０〜７０／３０，ｖ／ｖ，１２分かける）で溶出して精製して、標題化合物をＴＦＡ塩として得た（４００ｍｇ，８０％）。
LC/MS: m/z, 317 (M+H), 1.64 min
【００６５】
中間体７：（３−エンド）−３−［８−（５−ヘキセン−１−イル）−８−アザビシクロ  ［３．２．１］オクタ−３−イル］−２，２−ジフェニルプロパンニトリル
【化３０】
2007510731.tif 000031
１０ｍｌの乾燥アセトニトリル中における（３−エンド）−３−（８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル）−２，２−ジフェニルプロパンニトリル（ＴＦＡ塩，２５６ｍｇ，０．５９ｍｍｏｌ）の溶液に、６−ブロモ−１−ヘキセン（１０８ｍｇ，０．６５ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（４４７ｍｇ，３．２４ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物を１６時間熱還流し、ろ過し、真空下で濃縮した。粗残渣を１０ｇのアミノプロピルＳＰＥカートリッジ上に負荷し、トルエン（３ｘ５ｍｌ）およびＥＡ（３ｘ５ｍｌ）で連続的に溶出することによって精製した。トルエンフラクション２および３ならびにＥＡフラクション１および２を合わせ、蒸発させて、標題化合物を薄黄色油状物として得た（１５０ｍｇ，６４％）。
LC/MS: m/z, 399 (M+H), 1.93 min.
【００６６】
実施例１８：Ｎ−（エンド）−（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−（８−エンド）−８−（５−ヘキセン−１−イル）−８−メチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
【化３１】
2007510731.tif 000032
１ｍｌのアセトン中における（３−エンド）−３−［８−（５−ヘキセン−１−イル）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル］−２，２−ジフェニルプロパンニトリル（３００ｍｇ，０．７５ｍｍｏｌ）の溶液に、ｔ−ブチルエーテル中におけるブロモメタン（２Ｍ，７．５ｍｌ，１５ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（１０４ｍｇ，０．７５ｍｍｏｌ）を加え、次いで、室温で１６時間攪拌した。ＤＣＭ（２０ｍｌ）の添加およびろ過後、ろ液を真空下で濃縮して粗生成物を得、それをＤＣＭ／ＥＡ／ヘキサンで再結晶化して、〜２５０ｍｇの白色固体を得た。それは、ＮＭＲによって測定したとき、〜５％エキソ異性体を含有していた。同条件下でもう一度再結晶化することにより、純粋なエンド異性体を得た（１４８ｍｇ，４０％）。
LC/MS: m/z, 413 (M+H), 1.93 min.
【００６７】
中間体８：（３−エンド）−２，２−ジフェニル−３−（８−｛２−［（フェルメチル）オキシ］エチル｝−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル）プロパンニトリル
【化３２】
2007510731.tif 000033
中間体７のために概説された標準的な手法にしたがって、（３−エンド）−３−（８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル）−２，２−ジフェニルプロパンニトリル（ＴＦＡ塩，１６０ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）を２−ブロモエチルフェニルメチルエーテル（８０ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）と反応させて、標題化合物を得た（１５０ｍｇ，９０％）。
LC/MS: m/z, 451 (M+H), 1.93 min.
【００６８】
中間体９
（３−エンド）−２，２−ジフェニル−３−［８−（３−フェニルプロピル）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル］プロパンニトリル
【化３３】
2007510731.tif 000034
中間体７のために概説された標準的な手法にしたがって、（３−エンド）−３−（８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル）−２，２−ジフェニルプロパンニトリル（ＴＦＡ塩，１６０ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）を３−ブロモプロピルベンゼン（７４ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）と反応させて、標題化合物を得た（１４０ｍｇ，８７％）。
LC/MS: m/z, 435 (M+H), 1.85 min
【００６９】
中間体１０
（３−エンド）−２，２−ジフェニル−３−｛８−［３−（フェニルオキシ）プロピル］−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル｝プロパンニトリル
【化３４】
2007510731.tif 000035
中間体７のために概説された標準的な手法にしたがって、（３−エンド）−３−（８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル）−２，２−ジフェニルプロパンニトリル（ＴＦＡ塩，１６０ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）を３−ブロモプロピルフェニルエーテル（８０ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）と反応させて、標題化合物を得た（１５０ｍｇ，９０％）。
LC/MS: m/z, 451 (M+H), 2.00 min.
【００７０】
実施例１９：Ｎ−（エンド）−（３−エンド）−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−（８−エンド）−メチル−８−｛２−［（フェニルメチル）オキシ］エチル｝−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
【化３５】
2007510731.tif 000036
実施例１８において概説された標準的な手法にしたがって、（３−エンド）−２，２−ジフェニル−３−（８−｛２−［（フェニルメチル）オキシ］エチル｝−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル）プロパンニトリル（１５０ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）をブロモメタン（２Ｍ，３．３ｍｌ，６．６ｍｍｏｌ）と反応させて、標題化合物を得た（１１５ｍｇ，６３％）。
LC/MS: m/z, 465 (M+H), 2.01 min.
【００７１】
実施例２０：Ｎ−（エンド）−（３−エンド）−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−（３−フェニルプロピル）−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
【化３６】
2007510731.tif 000037
実施例１８において概説された標準的な手法にしたがって、（３−エンド）−２，２−ジフェニル−３−［８−（３−フェニルプロピル）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル］プロパンニトリル（１４０ｍｇ，０．３ｍｍｏｌ）をブロモメタン（２Ｍ，３．２ｍｌ，６．４ｍｍｏｌ）と反応させて、標題化合物を得た（１００ｍｇ，５９％）。
LC/MS: m/z, 449 (M+H), 2.02 min.
【００７２】
実施例２１：Ｎ−（エンド）−（３−エンド）−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−［３−（フェニルオキシ）プロピル］−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン臭化物
【化３７】
2007510731.tif 000038
実施例１８において概説された標準的な手法にしたがって、（３−エンド）−３−（８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル）−２，２−ジフェニルプロパンニトリル（１５０ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）をブロモメタン（２Ｍ，３．３ｍｌ，６．６ｍｍｏｌ）と反応させて、標題化合物を得た（１１５ｍｇ，６３％）。
LC/MS: m/z, 465 (M+H), 2.04 min.
【００７３】
略語
ＢＯＣ      ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ＤＣＭ      ジクロロメタン
ＤＭＦ      ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ    ジメチルスルホキシド
ＥＳ        エレクトロスプレーイオン化
ＨＰＬＣ    高圧液体クロマトグラフィー
ＬＣＭＳ    液体クロマトグラフィー質量分析
ＮＭＲ      核磁気共鳴
ＳＰＥ      固相抽出
ＴＥＡ      トリエチルアミン
ＴＦＡ      トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ      テトラヒドロフラン
ＴＬＣ      薄層クロマトグラフィー
【００７４】
生物学的実施例
本発明のＭ３ｍＡＣｈＲにおける化合物の阻害効果は、下記のイン・ビトロおよびイン・ビボアッセイによって決定される。
【００７５】
カルシウム動員による受容体活性化の阻害の分析
ＣＨＯ細胞に発現されたｍＡＣｈＲｓの刺激を、以前に記載されたように１０、受容体活性化カルシウム動員をモニターすることによって分析した。Ｍ３ｍＡＣｈＲｓを安定に発現しているＣＨＯ細胞を９６ウェル黒壁／透明底プレート中で培養した。１８〜２４時間後、培地を吸引し、１００μｌの負荷培地（アール塩、０．１％ＲＩＡ−等級ＢＳＡ（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ  ＭＯ）および４μＭ  Ｆｌｕｏ−３−アセトキシメチルエステル蛍光インジケーター色素（Ｆｌｕｏ−３  ＡＭ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）を含有するＥＭＥＭ）で置換し、３７℃で１時間インキュベートした。次いで、該色素含有培地を吸引し、新しい培地（Ｆｌｕｏ−３  ＡＭを含有しない）で置換し、細胞を３７℃で１０分間インキュベートした。次いで、細胞を３回洗浄し、１００μｌのアッセイバッファー（０．１％ゼラチン（Ｓｉｇｍａ）、１２０ｍＭ  ＮａＣｌ、４．６ｍＭ  ＫＣｌ、１ｍＭ  ＫＨ２ＰＯ４、２５ｍＭ  ＮａＨＣＯ３、１．０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１．１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１１ｍＭグルコース、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４））中、３７℃で１０分間インキュベートした。５０μｌの化合物（該アッセイ中、最終で１ｘ１０−１１−１ｘ１０−５Ｍ）を加え、プレートを３７℃で１０分間インキュベートした。次いで、プレートを、色素負荷された細胞が６ワットアルゴンレーザーからの励起光（４８８ｎｍ）に曝露される蛍光強度プレートリーダー（ＦＬＩＰＲ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ）中に置いた。０．１％ＢＳＡを含有するバッファー中で調製された５０μｌのアセチルコリン（０．１−１０ｎＭ最終）を５０μｌ／秒の速度で添加することによって、細胞を活性化した。細胞質カルシウム濃度の変化としてモニターされるカルシウム動員は、５６６ｎｍ発光強度の変化として測定された。発光強度の変化は、直接、細胞質カルシウムレベルに関係する１１。全９６ウェル由来の発光した蛍光は、冷却ＣＣＤカメラを用いて同時に測定される。毎秒、データポイントを集める。次いで、ＧｒａｐｈＰａｄ  ＰＲＩＳＭソフトウェアを用いて、該データをプロットおよび分析した。
【００７６】
メタコリン誘導性気管支収縮
メタコリンに対する気道応答は、覚醒非拘束ＢａｌｂＣマウス（各群ｎ＝６）におて決定された。気圧プレスチモグラフィーを用いて、メタコリンでの気管支攻撃の間に起こる気道抵抗の変化に相関することが示されている１２小休止の増加（enhanced pause）（Ｐｅｎｈ）を測定した（測定単位なし）。マウスを５０μｌのビヒクル（１０％ＤＭＳＯ）中における５０μｌの化合物（０．００３−１０μｇ／マウス）の鼻腔内投与によって前処理し、次いで、プレスチモグラフィーチャンバー中に置いた。該チャンバー中では一度、該マウスを１０分間平衡化した後、５分間、ベースラインＰｅｎｈ測定を行った。次いで、マウスをメタコリンのエーロゾル（１０ｍｇ／ｍｌ）で２分間攻撃した。Ｐｅｎｈは、メタコリンエーロゾルの始めに開始し、その後５分間続けて、７分間連続的に記録した。各マウスのデータは、ＧｒａｐｈＰａｄ  ＰＲＩＳＭソフトウェアを用いることによって、分析およびプロットした。
【００７７】
ムスカリン性受容体放射性リガンド結合アッセイ
ＳＰＡフォーマットにおける０．５ｎＭ  ［３Ｈ］−Ｎ−メチルスコポラミン（ＮＭＳ）を用いる放射性リガンド結合研究を用いて、ムスカリン性アンタゴニストのＭ１、Ｍ２、Ｍ３、Ｍ４およびＭ５ムスカリン性アセチルコリン受容体に対する結合を評価する。９６ウェルプレート中において、ＳＰＡビーズを受容体含有膜と共に、４℃で３０分間プレインキュベートする。次いで、５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳおよび試験化合物を加え、室温で（振盪しながら）２時間インキュベートする。次いで、ビーズをスピンダウンし、シンチレーションカウンターを用いてカウントする。
【００７８】
単離したモルモット気管における効力および作用持続時間の評価
成体雄性Ｈａｒｔｅｌｙモルモット（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ，  Ｒａｌｅｉｇｈ，  ＮＣ；  ４００−６００ｇ）から気管を取り出し、修飾したＫｒｅｂｓ−Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ溶液中に置いた。該溶液の組成（ｍＭ）は、ＮａＣｌ  １１３．０、ＫＣｌ  ４．８、ＣａＣｌ２  ２．５、ＫＨ２ＰＯ４  １．２、ＭｇＳＯ４  １．２、ＮａＨＣＯ３  ２５．０およびデキストロース１１．０であり、それを９５％Ｏ２：５％ＣＯ２のガスで満たし、３７℃で維持した。各気管から付着組織を除去し、縦に切開した。綿棒で管腔表面をやさしくこすることによって、上皮を除去した。個々のストリップを、幅が約２軟骨輪になるように切断し、Ｋｒｅｂｓ−Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ溶液を含有し、Ｇｒａｓｓ  ＦＴ０３Ｃ力−変位変換器に連結された１０−ｍｌウォータージャケット付き器官浴中に絹糸で吊した。Ａｐｐｌｅ  Ｇ４コンピューター上で作動するＭＰ１００ＷＳ／Ａｃｋｎｏｗｌｅｄｇｅデータ獲得システム（ＢＩＯＰＡＣ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｇｏｌｅｔａ，  ＣＡ，  ｗｗｗ．ｂｉｏｐａｃ．ｃｏｍ）によって、機械的応答を等尺的に記録した。組織は、長さ−張力評価によって最適であることが決定された１．５ｇの静止張力下で平衡化させ、Ｋｒｅｂｓ−Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ溶液で１５分毎に１時間洗浄した。平衡化期間後、肺組織を１０μＭカルバコールでプラトーに達するまで収縮させ、それをデータ分析のための基準収縮として用いた。次いで、組織を、ベースラインの状態に達するまで１時間にわたり１５分毎にリンスした。次いで、調製物を少なくとも３０分間放置した後、実験を開始した。
【００７９】
濃度−応答曲線は、１ｎＭで開始した半対数的増加におけるカルバコールの累積的添加（Ｖａｎ  Ｒｏｓｓｕｍ，  １９６３，  Ａｒｃｈ．  Ｉｎｔ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎ．，  １４３：２９９）によって得られた。応答がプラトーに達するまで、各濃度で調製物と接触させた後、次のカルバコール濃度を添加した。対の組織をｍＡＣｈＲアンタゴニスト化合物またはビヒクルに３０分間曝露した後、カルバコール累積濃度−応答曲線を作成した。全データは、ｎが異なる動物の数である、平均±標準誤差（ｓ．ｅ．ｍ．）として与えられる。
【００８０】
表面潅流（作用持続時間）研究のために、組織をＫｒｅｂｓ−Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ溶液で２ｍｌ／分にて、実験期間の間、連続的に表面潅流した。アゴニストおよびアンタゴニストのストック溶液を、表面潅流管系に挿入した２２ゲージ針で注入した（０．０２ｍｌ／分）。Ｍａｃｉｎｔｏｓｈ  Ｇ４コンピューター（Ａｐｐｌｅ，  Ｃｕｐｅｒｔｉｎｏ，  ＣＡ  ｗｗｗ．ａｐｐｌｅ．ｃｏｍ）と適合した市販のデータ獲得システム（ＭＰ１００ＷＳ／Ａｃｋｎｏｗｌｅｄｇｅ；  ＢＩＯＰＡＣ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｇｏｌｅｔａ，  ＣＡ，  ｗｗｗ．ｂｉｏｐａｃ．ｃｏｍ）を用いて、機械的応答を等尺的に記録した。組織を１．５ｇの最適な静止張力下で吊り下げた。６０分の平衡化期間後、実験期間の間、組織をカルバコール（１μＭ）で収縮させた。持続的な収縮に達したら、イソプロテレノール（１０μＭ）を投与して該組織を最大限に弛緩させ、この変化を基準として用いた。イソプロテレノール曝露を停止し、カルバコールにより誘導された緊張を回復させた。ムスカリン性受容体アンタゴニストを１組織につき１濃度にて、阻害の持続的なレベルに達するまで注入した。次いで、化合物を除去し、再び、カルバコールにより誘導された緊張を回復させた。
【００８１】
下記のパラメーターを各濃度のアンタゴニストについて決定し、ｎ匹の動物について平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ．として表した。カルバコールにより誘導された収縮の阻害は、基準応答（イソプロテレノール）に対するパーセントとして表し、この弛緩の２分の１を達成するのに必要な時間を測定した（応答のオンセット）。化合物除去後の緊張回復は、最大緊張回復の２分の１を達成するのに必要な時間として測定された（応答のオフセット）。アンタゴニストの除去後６０および１８０分に、阻害の残存レベルを測定し、イソプロテレノール基準に対するパーセントとして表した。
アンタゴニスト濃度−応答曲線は、アンタゴニスト除去後０、６０および１８０分での最大弛緩データをプロットすることによって得られた。回復（シフトと呼ばれる）は、０分阻害曲線ＩＣ５０と６０分および１８０分にて同様の緊張回復を生じる化合物の濃度の比から算出された。
【００８２】
応答のオンセットおよびオフセットに関する２分の１時間を、対応する濃度に対してプロットし、データを非線形回帰で適合させた。これらの値をＩＣ５０（阻害濃度−応答曲線から決定した）で当てはめ、Ｏｔ５０（そのＩＣ５０濃度にて、オンセット応答の２分の１に達するのに必要な時間）およびＲｔ５０（そのＩＣ５０濃度にて、回復応答の２分の１に達するのに必要な時間）と称した。
【００８３】
処方−投与
したがって、本発明は、さらに、式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩、溶媒和物、もしくは生理学的に機能的な誘導体（例えば、塩およびエステル）、および医薬上許容される担体または賦形剤、および所望により、１以上の他の治療成分を含む医薬処方を提供する。
以後、「活性成分」なる語は、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬上許容される塩、溶媒和物、もしくは生理学的に機能的な誘導体を意味する。
式（Ｉ）の化合物は、口または鼻を介する吸入によって投与されるであろう。
【００８４】
吸入による肺への局所送達のための乾燥粉末組成物は、例えば、吸入器または吹き入れ器において使用するための、例えばゼラチン製の、カプセルおよびカートリッジ中、または例えば薄層状アルミニウムホイル製の、ブリスター中において提供されうる。粉末ブレンド処方は、一般に、本発明の化合物および適当な粉末基剤（担体／希釈剤／賦形剤物質）、例えば、単糖類、二糖類または多糖類（例えば、ラクトースまたはデンプン）、有機または無機塩（例えば、塩化カルシウム、リン酸カルシウムまたは塩化ナトリウム）、ポリアルコール（例えば、マンニトール）、またはその混合物の吸入用粉末ミックスを含有し、あるいは該吸入用粉末ミックスを１以上の付加的な材料、例えば、下記に論じるように、処方の化学的および／または物理的安定性または性能を改善するために該ブレンド処方中に含ませる添加剤またはその混合物と共に含有する。ラクトースの使用が好ましい。各カプセルまたはカートリッジは、一般に、２０μｇ〜１０ｍｇの式（Ｉ）の化合物を、所望により別の治療活性成分と共に、含有していればよい。別法では、本発明の化合物は、賦形剤を用いないで提供されてもよく、または例えば共沈もしくはコーティングによって、該化合物、任意の他の治療活性材料および賦形剤を含んでなる粒子に成形してもよい。
【００８５】
適当には、薬剤ディスペンサーは、リザーバー（reservoir）・ドライパウダー吸入器（ＲＤＰＩ）、マルチドース（multi-dose）・ドライパウダー吸入器（ＭＤＰＩ）および定量吸入器（ＭＤＩ）からなる群から選択されるタイプのものである。
リザーバー・ドライパウダー吸入器（ＲＤＰＩ）によって、複数回分の（計量されていない投与量）の薬剤を乾燥粉末形態で含むのに適当な貯蔵器形態パックを有し、該貯蔵器から送達位置へ薬剤投与量を計量しながら供給するための手段を含む吸入器が意味される。計量手段は、例えば、計量カップまたは穴あきプレートを含んでいてもよく、それは、カップが貯蔵器由来の薬剤で満たされる第１の位置から、計量された薬剤用量が吸入患者に利用可能になる第２の位置へ移動可能である。
【００８６】
マルチドース・ドライパウダー吸入器（ＭＤＰＩ）によって、乾燥粉末形態で薬剤を投薬するのに適当な吸入器であって、薬剤が、複数回分の所定の投与量（またはその一部）の薬剤を含有する（または運搬する）マルチドース・パック内に含まれる吸入器が意味される。好ましい態様において、担体は、ブリスターパック形態を有するが、また、例えば、カプセルベースのパック形態や、プリンティング、ペインティングおよび真空吸蔵（vacuum occlusion）を包含するいずれかの適当な加工処理によって、その上に薬剤が負荷された担体含むこともできる。
【００８７】
該処方は、予め計量することができ（例えば、Ｄｉｓｋｕｓ，ＧＢ  ２２４２１３４またはＤｉｓｋｈａｌｅｒ、ＧＢ  ２１７８９６５、２１２９６９１および２１６９２６５参照）、または使用時に計量することができる（例えば、Ｔｕｒｂｕｈａｌｅｒ，ＥＰ６９７１５参照）。単位投与用装置の例は、Ｒｏｔａｈａｌｅｒである（ＧＢ  ２０６４３３６参照）。Ｄｉｓｋｕｓ吸入装置は、複数のコンテナを明確にするように（各コンテナはその中に、好ましくはラクトースと組み合わせた、式（Ｉ）の化合物を含有する吸入可能な処方を有する）、その長さに沿って一定間隔があいた複数の凹部を有するベースシート、およびそれを剥離可能に密閉する蓋シートから形成される細長いストリップを含む。好ましくは、該ストリップは、ロール状に巻かれるように十分に柔軟である。蓋シートおよびベースシートは、好ましくは、互いに閉じられていない先端部分を有し、該先端部分の少なくとも１つは、巻き上げ手段に取り付けられるように構成されている。また、好ましくは、ベースシートと蓋シートとの間の密閉シールは、それらの幅全体にまで及んでいる。蓋シートは、好ましくは、ベースシートから縦方向に、該ベースシートの一方の先端から剥がされる。
【００８８】
一の態様において、マルチドース・パックは、薬剤を乾燥粉末形態で包み込むための複数のブリスターを含むブリスターパックである。該ブリスターは、典型的には、薬剤放出を容易にするために、規則的に配置される。
一の態様において、マルチドース・ブリスターパックは、一般に、円板形態のブリスターパック上に環状に配置された複数のブリスターを含む。別の態様において、マルチドース・ブリスターパックは、例えば、ストリップまたはテープからなる形態で細長い。
【００８９】
好ましくは、マルチドース・ブリスターパックは、互いに剥離可能に固定された２つの部材間で定義される。ＵＳ特許第５，８６０，４１９号、第５，８７３，３６０号および第５，５９０，６４５号は、該一般的種類の薬剤パックを記載する。該態様において、装置は、通常、各薬剤投与量を利用するために、部材をばらばらに剥離するための剥離手段を含む開封ステーションと共に提供される。適当には、該装置は、剥離可能な部材が、その長さに沿って一定間隔をおいた複数の薬剤コンテナを明確にする細長いシートである場合の使用に適応し、該装置は、各コンテナを順番に表示させるための表示手段と共に提供される。より好ましくは、該装置は、シートの１つが複数のポケットを有するベースシートであり、他方が蓋シートであり、各ポケットおよび蓋シートの隣接部分がコンテナの各々を明確にしている場合の使用に適応し、該装置は、蓋シートおよびベースシートを開封ステーションでばらばらに引っ張るための駆動手段を含む。
【００９０】
定量吸入器（ＭＤＩ）によって、エーロゾル形態で薬剤を投薬するのに適当な薬剤ディスペンサーが意味され、ここに、該薬剤は、プロペラントベースのエーロゾル薬剤処方を含有するのに適当なエーロゾルコンテナ中に含まれる。該エーロゾルコンテナは、典型的には、エーロゾル形態の薬剤処方を患者に放出するための計量バルブ、例えば、スライドバルブと共に提供される。該エーロゾルコンテナは、一般に、予め決められた量の薬剤を各作動時にバルブによって送達するように設計され、それは、コンテナを固定したままバルブを押し下げることによって、またはバルブを固定したままコンテナを押し下げることによって開くことができる。
【００９１】
吸入による肺への局所送達のためのスプレー組成物は、例えば、水性溶液または懸濁液として、または適当な液化プロペラントを用いて加圧したパック、例えば、定量吸入器から送達されるエーロゾルとして処方されてもよい。吸入に適当なエーロゾル組成物は、懸濁液または溶液のいずれかであることができ、一般に、所望により別の治療活性成分と組み合わせた式（Ｉ）の化合物および適当なプロペラント、例えば、フルオロカーボンまたは水素含有クロロフルオロカーボンまたはその混合物、特に、ヒドロフルオロアルカン、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラ−フルオロエタン、特に、１，１，１，２−テトラフルオロエタン、１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパンまたはその混合物を含有する。二酸化炭素または他の適当な気体もまた、プロペラントとして使用してもよい。該エーロゾル組成物は、賦形剤を含有していなくてもよく、または所望により、当該分野でよく知られた付加的な処方賦形剤、例えば、界面活性剤、例えば、オレイン酸またはレシチンおよび共溶媒、例えば、エタノールを含有していてもよい。加圧式処方は、一般に、バルブ（例えば、計量バルブ）で閉められ、マウスピースと共に提供されるアクチュエーター中に取り付けられたキャニスター（例えば、アルミニウム製のキャニスター）中に保持されるであろう。
【００９２】
吸入による投与のための薬剤は、望ましくは、制御された粒径を有する。肺への局所的送達のための気管支系への吸入に最適な空気力学的粒径は、通常、１−１０μｍ、好ましくは２−５μｍである。肺への全体的送達を達成するための肺胞領域中への吸入に最適な空気力学的粒径は、５−３μｍ、好ましくは１−３μｍである。２０μｍより大きい空気力学的粒径を有する粒子は、一般に、吸入した場合は、大きすぎて末梢気道に到達できない。処方の平均空気力学的粒径は、例えば、カスケードインパクションによって測定されうる。平均幾何学的粒径は、例えば、レーザー回折、光学的手段によって測定されうる。
【００９３】
所望の粒径を達成するために、製造される活性成分の粒子は、通常の手段によって、例えば、結晶化制御、微粉化またはナノミリングによって、サイズを減少させてもよい。所望のフラクションを空気分級によって分離させてもよい。別法では、所望の大きさの粒子を、例えば、スプレードライし、スプレードライパラメーターを所望の範囲の大きさの粒子を生じるように調節することによって、直接製造してもよい。好ましくは、該粒子は結晶性であるが、所望により、非晶質材料を使用してもよい。ラクトースなどの賦形剤を使用する場合、一般に、賦形剤の粒径は、本発明の吸入される薬剤よりもはるかに大きいであろう。そのような「粗大な（coarse）」担体は、呼吸に適さない。賦形剤がラクトースである場合、典型的には、それは、８５％以下のラクトース粒子がＭＭＤ６０−９０μｍを有し、１５％以上がＭＭＤ１５μｍ未満を有する粉砕されたラクトースとして存在するであろう。担体のほかに、乾燥粉末ブレンド中の添加材料は、呼吸に適していてもよく（すなわち、空気力学的に１０ミクロン未満）、または呼吸に適さなくてもよい（すなわち、空気力学的に１０ミクロンより大きい）。
【００９４】
使用されうる適当な添加材料は、アミノ酸、例えば、ロイシン；水溶性または水不溶性の天然または合成界面活性剤、例えば、レシチン（例えば、大豆レシチン）および固体状脂肪酸（例えば、ラウリン酸、パルミチン酸、およびステアリン酸）およびその誘導体（例えば、塩およびエステル）；ホスファチジルコリン；糖エステルを包含する。添加材料は、また、着色料、味マスキング剤（例えば、サッカリン）、帯電防止剤、滑沢剤（例えば、公開されたＰＣＴ特許出願第ＷＯ８７／９０５２１３号を参照のこと。その教示は、出典明示により本明細書の一部とされる）、化学的安定化剤、バッファー、保存料、吸収促進剤、および当業者に既知の他の材料を包含しうる。
【００９５】
また、徐放性コーティング材料（例えば、ステアリン酸またはポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン、ポリ乳酸）を活性材料または粒子を含有する活性材料上に使用してもよい（例えば、特許第ＵＳ３，６３４，５８２号、第ＧＢ１，２３０，０８７号、第ＧＢ１，３８１，８７２号を参照のこと。その教示は、出典明示により本明細書の一部とされる）。
【００９６】
鼻腔内スプレーは、水性または非水性ビヒクルと共に、増粘剤、バッファー塩あるいはｐＨを調整するための酸またアルカリ、等張性調整剤または抗酸化剤などの薬剤を添加して処方されうる。
噴霧による吸入のための溶液は、水性ビヒクルと共に、酸またはアルカリ、バッファー塩、等張性調整剤または抗菌剤などの薬剤を添加して処方されうる。それらは、ろ過またはオートクレーブ中での加熱によって滅菌されてもよく、あるいは非滅菌製品として提供されてもよい。
好ましい単位投与量処方は、本明細書中に上記したような活性成分の有効投与量、またはその適当なフラクションを含有するものである。
【００９７】
本明細書および添付の特許請求の範囲を通し、文脈上他の意味に解すべき場合をのぞき、「含む」なる語および「含まれた」「含んでいる」などのそのバリエーションは、示された整数または工程あるいは整数の群を含むものと理解されるべきであるが、いずれの他の整数または工程あるいは整数または工程の群を排除するものではない。
特許および特許出願を含め、本明細書中で引用された全ての出版物は、あたかも個々の出版物が詳細かつ個々に、出典明示により全体が示されるかの如く本明細書の一部とされることが示されているかの如く、出典明示により本明細書の一部とされる。
上記の記載は、その好ましい具体例を包含する本発明を十分に開示するものである。本明細書中に特に開示される具体例の修飾および改良は、添付の特許請求の範囲の範囲内にある。さらに工夫することなく、当業者は、上記の記載を用いて、本発明をその完全な範囲まで利用することができると確信する。したがって、本明細書中の実施例は、単なる例示として解釈されるべきであり、何ら本発明の範囲を制限するものではない。排他的財産または特典が請求される本発明の具体例は、特許請求の範囲のとおり定義される。
【国際調査報告】
2007510731.tif 000040