(57)【要約】本発明は、脈管形成疾患（例えば、癌、自己免疫疾患または寄生生物による感染）を含む、多くの状態のうちの１つを患う被験体を処置するための組成物および方法を提供する。詳細には、本発明の１種以上の化合物および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物ならびにそれらの化合物を使用する方法ならびに脈管形成状態（例えば、種々の癌、リンパ腫、および不適切な血管新生によって特徴付けられる疾患）、および自己免疫疾患（例えば、慢性関節リウマチ、および乾癬）を含む、種々の疾患および状態を処置するための薬学的組成物を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ａ−Ｂの化合物であって、
Ａは、以下
【化１】
2007537147.tif 000010
からなる群より選択される部分であり、
ここで、Ｒ２は、水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり、そしてＸは、ハロゲン、ジアルキルスルフィニウム（ｄｉａｌｋｙｌｓｕｌｆｉｎｉｕｍ）、チオアルコキシまたはチオアリールオキシであり；そして
Ｂは、アルカノイル基、アロイル基、カルバモイル基または置換カルバモイル基である；
化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物であって、Ｂは、式
【化２】
2007537147.tif 000011
の部分であり、
ここで、
Ｒ３は、水素またはアルキルであり；
Ｒ４およびＲ５は、各々、独立して、水素、置換アルキルもしくは非置換アルキル、置換アリールもしくは非置換アリール、置換アリールアルキルもしくは非置換アリールアルキル、置換ヘテロアリールもしくは非置換ヘテロアリールまたは置換ヘテロアルキルもしくは非置換ヘテロアルキルであるか；あるいは
Ｒ３およびＲ５は、一緒になってアルキレン基を形成し；
Ｚは、−Ｃ（Ｏ）−または−アルキレン−Ｃ（Ｏ）−であり；そして
Ｐは、−ＯＲ６または−Ｎ（Ｒ７）Ｒ８であり、ここで、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、各々、独立して、水素、置換アルキルもしくは非置換アルキル、置換アリールもしくは非置換アリールまたは置換アザシクロアルキルもしくは非置換アザシクロアルキルであるか、あるいはＲ７およびＲ８は、該Ｒ７および該Ｒ８が結合する窒素原子と一緒になって、複素環式環構造を形成する、化合物。
【請求項３】
請求項１に記載の化合物であって、Ｂは、構造
【化３】
2007537147.tif 000012
の部分であり、
ここで、Ｒ５は、置換直鎖Ｃ１−Ｃ６アルキルもしくは非置換直鎖Ｃ１−Ｃ６アルキル、置換分枝Ｃ１−Ｃ６アルキルもしくは非置換分枝Ｃ１−Ｃ６アルキル、置換環状Ｃ１−Ｃ６アルキルもしくは非置換環状Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールであるか；あるいはＲ３およびＲ５は一緒になって、Ｃ３−Ｃ６アルキレン基を形成する、化合物。
【請求項４】
請求項３に記載の化合物であって、Ｒ５は、直鎖Ｃ１−Ｃ６アルキルまたは分枝Ｃ１−Ｃ６アルキル、ヒドロキシル置換された直鎖Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはヒドロキシル置換された分枝Ｃ１−Ｃ６アルキルであり；そして
Ｒ３、Ｒ７およびＲ８は、各々、水素である、化合物。
【請求項５】
以下
【化４】
2007537147.tif 000013
【化５】
2007537147.tif 000014
からなる群より選択される化合物。
【請求項６】
請求項１または請求項２に記載の化合物および薬学的に受容可能なキャリアを含む、薬学的組成物。
【請求項７】
被験体における脈管形成疾患を処置する方法であって、該方法が、治療的に有効な量の請求項１または請求項２に記載の化合物を、該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項８】
前記脈管形成疾患が、癌である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記脈管形成疾患が、リンパ腫である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
被験体における自己免疫疾患を処置する方法であって、該方法が、治療的に有効な量の請求項１または請求項２に記載の化合物を、該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１１】
前記自己免疫疾患が、慢性関節リウマチ、乾癬または多発性硬化症である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
被験体における寄生生物による感染を処置する方法であって、該方法が、治療的に有効な量の請求項１または請求項２に記載の化合物を、該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１３】
前記感染が、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種およびＬｅｉｓｈｍａｎｉａ種からなる群より選択される寄生生物による、請求項１２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
本出願は、２００３年１２月２９日に出願した米国仮特許出願番号第６０／５３３，４３１号からの優先権を主張し、その出願の全内容が本明細書中に参考として援用される。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
新脈管形成は、新しい血管が形成されることによる基本的なプロセスであり、それは、種々の正常な身体活動（例えば、生殖、発生および創傷修復）に必要不可欠である。そのプロセスは、完全に理解されていないが、内皮細胞の増殖、毛細血管の原発性細胞を刺激も阻害も両方する分子の複合体相互作用に関与すると考えられる。正常な状態の下で、これらの分子は、長期間、静止状態（すなわち、毛細血管の増殖が１つもない）において微小血管系を維持するようであり、それは、数週間、いくつかの場合において数十年間もの長い間、持続し得る。しかし、必要な場合（例えば、創傷修復の間）、それらの同様の細胞は、５日間内に急速な増殖を起こし得、そして代謝回転し得る（非特許文献１および非特許文献２）。
【０００３】
新脈管形成は、正常な状態の下で高度に制御されたプロセスであるが、多くの疾患（「脈管形成疾患」として特徴付けられる）は、持続性の制御されていない新脈管形成によって促進されるか、または特徴付けられる。他に示さない限り、制御されていない新脈管形成は、特定の疾患を直接的に引き起こし得るか、または存在する病理学的状態を悪化させ得るかのいずれかである。例えば、眼の新血管形成は、失明の最も一般的な原因として関係し、およそ２０の眼の疾患を決定づける。特定の存在する状態（例えば、関節炎）において、新しく形成された毛細血管は、関節に侵入して、軟骨を破壊する。糖尿病において、網膜に形成された新しい毛細血管は、硝子体に侵入し、出血し、そして失明を引き起こす。固形腫瘍の増殖および転移もまた、新脈管形成に依存している（非特許文献３および非特許文献４）。例えば、２ミリメートルより大きいサイズに成長する腫瘍は、その腫瘍独自の血液供給を得なければならず、そして新しい毛細血管の増殖を誘導することによって、その腫瘍独自の血液供給を得ることが、示されている。一旦、これらの新しい血管が、腫瘍に包埋されると、それらは、腫瘍に栄養分を提供して、腫瘍細胞が循環に入り、離れた部位（例えば、肝臓、肺または骨組織）へ転移するための手段として役立ち得る（非特許文献５）。
【０００４】
フマギリンは、抗菌薬および抗原虫薬として使用されている公知の化合物である。その物理化学的性質および製造方法は、周知である（特許文献１および非特許文献６）。フマギリンおよびフマギリンアナログの特定の型はまた、抗脈管形成活性を示すことが、報告されている。しかし、そのようなインヒビター（例えば、ＴＮＰ−４７０）の使用は、それらの急速な代謝分解、不安定な血中濃度によって制限され得、そして用量を制限する中枢神経系（ＣＮＳ）副作用によって制限され得る。
【特許文献１】米国特許第２，８０３，５８６号明細書
【非特許文献１】Ｆｏｌｋｍａｎ，Ｊ．およびＳｈｉｎｇ，Ｙ．「Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」第２６７（１６）巻、ｐ．１０９３１−１０９３４
【非特許文献２】Ｆｏｌｋｍａｎ，Ｊ．およびＫｌａｇｓｂｒｕｎ，Ｍ．「Ｓｃｉｅｎｃｅ」１９８７年、第２３５巻、ｐ．４４２−４４７
【非特許文献３】Ｆｏｌｋｍａｎ，Ｊ．「Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ」１９８６年、第４６巻、ｐ．４６７−４７３
【非特許文献４】Ｆｏｌｋｍａｎ，Ｊ．「Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ」１９８９年、第８２巻、ｐ．４−６
【非特許文献５】Ｗｅｉｄｎｅｒ，Ｎ．ら「Ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ」１９９１年、第３２４（１）巻、ｐ．１−８
【非特許文献６】Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１９６２年、第４８巻、ｐ．７３３−７３５
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従って、より効果があり、神経毒性がより少なく、より安定で、そして／またはより長い血清半減期である新脈管形成インヒビターについての必要性が、今もなお存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
（発明の要旨）
本発明は、脈管形成疾患（例えば、癌、自己免疫疾患または寄生生物による感染）を含む、多くの状態のうちの１つを患う被験体を処置するための組成物および方法を提供する。
【０００７】
１つの実施形態において、本発明は、一般式Ａ−Ｂの化合物を提供し、ここで、Ａは、以下の式Ｉ〜ＶＩＩ：
【０００８】
【化６】
2007537147.tif 000002
【０００９】
【化７】
2007537147.tif 000003
の１つに示されるような構造を有する基である。式Ｉ〜ＶＩの各々において、シクロヘキサン環の底部（すなわち、Ｉ、ＩＩ＜ＩＩＩ、ＩＶおよびＶＩＩにおけるスピロエポキシドに対して４位、またはＶおよびＶＩにおける−ＣＨ２Ｘ基に対して４位）の酸素原子は、Ｂについての付着点であり、Ｒ２は、水素またはＣ１−Ｃ６アルキル、好ましくはメチルである。式ＶＩにおいて、Ｘは、ハロゲン原子、ジアルキルスルフィニウム（ｄｉａｌｋｙｌｓｕｌｆｉｎｉｕｍ）基、チオアルコキシ基、チオアリールオキシ基または別の適切な脱離基である。好ましくは、Ｘは、臭素、塩素またはヨウ素である。より好ましくは、Ｘは、塩素である。
【００１０】
Ｂは、アルカノイル基、アロイル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはＮ置換カルバモイル基である。
【００１１】
本発明はまた、式Ａ−Ｂの１種以上の化合物および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物ならびにそれらの化合物を使用する方法ならびに脈管形成状態（例えば、種々の癌、リンパ腫、および不適切な血管新生によって特徴付けられる疾患）、および自己免疫疾患（例えば、慢性関節リウマチ、および乾癬）を含む、種々の疾患および状態を処置するための薬学的組成物を提供する。
【００１２】
本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明および添付の特許請求の範囲から明らかである。
【００１３】
（発明の詳細な説明）
本発明は、酵素メチオニンアミノペプチダーゼ−２（ＭｅｔＡＰ−２）のインヒビターである化合物、それらの化合物のうちの１種以上を含む薬学的組成物、ならびにＭｅｔＡｐ−２の阻害に応答する脈管形成状態および他の状態（例えば、癌（固形腫瘍およびリンパ様の悪性腫瘍を含む）、寄生生物による感染症および自己免疫疾患）を含む、多くの状態のうちの１つを患う被験体を処置するための方法を提供する。
【００１４】
１つの実施形態において、本発明の化合物は、式Ａ−Ｂの化合物を含み、ここで、Ａは、上記の式Ｉ〜ＶＩに示した構造から選択され、Ｂは、以下：
【００１５】
【化８】
2007537147.tif 000004
の式であり、ここで、Ｒ３は、水素またはアルキル、好ましくはＣ１−Ｃ４アルキルである。Ｒ４およびＲ５は、各々、独立して、水素、置換アルキルもしくは非置換アルキル、置換アリールもしくは非置換アリール、置換アリールアルキルもしくは非置換アリールアルキル、置換ヘテロアリールもしくは非置換ヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールアルキルもしくは非置換ヘテロアリールアルキルである。好ましくは、Ｒ４は水素であり、そしてＲ５は水素でない。Ｚは、−Ｃ（Ｏ）−または−アルキレン−Ｃ（Ｏ）−であり；そしてＹは、−ＯＲ６または−Ｎ（Ｒ７）Ｒ８であり、ここで、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、各々、独立して、水素、置換アルキルもしくは非置換アルキル、置換アリールもしくは非置換アリールまたは置換アザシクロアルキルもしくは非置換アザシクロアルキルである。Ｒ７およびＲ８はまた、そのＲ７およびＲ８が結合する窒素原子と一緒になって、複素環式環構造を形成する。
【００１６】
好ましい実施形態において、Ｂは、以下
【００１７】
【化９】
2007537147.tif 000005
の構造であり、ここで、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ７およびＲ８は、上記に定めた意味を有する。この実施形態において、Ｒ５は、好ましくは、置換直鎖Ｃ１−Ｃ６アルキルもしくは非置換直鎖Ｃ１−Ｃ６アルキル、置換分枝Ｃ１−Ｃ６アルキルもしくは非置換分枝Ｃ１−Ｃ６アルキル、または置換環状Ｃ１−Ｃ６アルキルもしくは非置換環状Ｃ１−Ｃ６アルキル、置換アリールもしくは非置換アリール、置換アリールアルキルもしくは非置換アリールアルキルまたは置換ヘテロアリールもしくは非置換ヘテロアリールである。適切な置換基としては、ヒドロキシル基およびアミノ基が挙げられる。別の実施形態において、Ｒ５は、２０個の天然に存在するアミノ酸のうちの１つの側鎖（例えば、アスパラギン酸の側鎖、グルタミン酸の側鎖、アラニンの側鎖、ロイシンの側鎖、バリンの側鎖、アスパラギンの側鎖、グルタミンの側鎖、トリプトファンの側鎖、トレオニンの側鎖、アルギニンの側鎖、システインの側鎖、メチオニンの側鎖、チロシンの側鎖、フェニルアラニンの側鎖、リジンの側鎖、ヒスチジンの側鎖、イソロイシンの側鎖、またはセリンの側鎖）である。Ｒ５についての好ましい同一性としては、疎水性であるアミノ酸側鎖（例えば、バリンの側鎖、ロイシンの側鎖、イソロイシンの側鎖、アラニンの側鎖、フェニルアラニンの側鎖、メチオニンの側鎖およびトリプトファンの側鎖）、および極性であるが荷電されていないアミノ酸側鎖（例えば、アスパラギンの側鎖、グルタミンの側鎖、セリンの側鎖、トレオニンの側鎖、およびチロシンの側鎖）が挙げられる。別の実施形態において、Ｒ３およびＲ５は一緒になって、Ｃ３−Ｃ６アルキレン基を形成する。Ｒ５が結合する炭素原子は、キラルであり、そして２つの可能な立体化学のうちのいずれかに存在し得る。例えば、−Ｎ（Ｒ３）−ＣＨ（Ｒ５）−Ｃ（Ｏ）−単位は、α−アミノ酸のＤ−構造またはＬ−構造と等価の構造を有し得る。好ましい実施形態において、この基は、α−アミノ酸のＤ−構造と等価の構造を有する。
【００１８】
本発明の化合物において、Ｒ１−Ｒ８のどれもが、アルキル基である場合、好ましいアルキル基は、置換直鎖Ｃ１−Ｃ６アルキル基もしくは非置換直鎖Ｃ１−Ｃ６アルキル基、置換分枝Ｃ１−Ｃ６アルキル基もしくは非置換分枝Ｃ１−Ｃ６アルキル基または置換環状Ｃ１−Ｃ６アルキル基もしくは非置換環状Ｃ１−Ｃ６アルキル基である。特に好ましいアルキル基は、直鎖Ｃ１−Ｃ４アルキル基または分枝Ｃ１−Ｃ４アルキル基である。置換アルキル基としては、少なくとも１つの水素でない置換基（例えば、アミノ基、アルキルアミノ基またはジアルキルアミノ基）；ハロゲン（例えば、フルオロ置換基、クロロ置換基、ブロモ置換基またはヨード置換基）；またはヒドロキシル基が挙げられる。
【００１９】
Ｒ４およびＲ５のうちの少なくとも１つが、置換アリール基もしくは非置換アリール基または置換ヘテロアリール基もしくは非置換ヘテロアリール基である場合、好ましい基としては、置換フェニルおよび非置換フェニル、置換ナフチルおよび非置換ナフチル、置換インドリルおよび非置換インドリル、置換イミダゾリルおよび非置換イミダゾリルならびに置換ピリジルおよび非置換ピリジルが挙げられる。Ｒ４およびＲ５のうちの少なくとも１つが、置換アリールアルキルもしくは非置換アリールアルキルまたは置換ヘテロアリールアルキルもしくは非置換ヘテロアリールアルキルである場合、好ましい基としては、置換ベンジル基および非置換ベンジル基、置換ナフチルメチル基および非置換ナフチルメチル基、置換インドリルメチル基および非置換インドリルメチル基、置換イミダゾリルメチル基および非置換イミダゾリルメチル基ならびに置換ピリジルミチル基および非置換ピリジルメチル基が挙げられる。アリール基上、ヘテロアリール基上、アリールアルキル基上およびヘテロアリールアルキル基上の好ましい置換基は、アミノ、アルキル置換されたアミノ、ハロゲン（例えば、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨード）；ヒドロキシル基およびアルキル基、好ましくは直鎖Ｃ１−Ｃ６アルキル基または分枝Ｃ１−Ｃ６アルキル基、最も好ましくはメチル基からなる群より独立して選択される。
【００２０】
アルキル、置換アルキルまたは水素に加えて、Ｒ７およびＲ８はまた、各々独立して、置換アザシクロアルキル基もしくは非置換アザシクロアルキル基または置換アザシクロアルキルアルキル基もしくは非置換アザシクロアルキルアルキル基であり得る。適切な置換アザシクロアルキル基としては、Ｎ−アルキル置換基、好ましくはＣ１−Ｃ４アルキル置換基およびより好ましくはＮ−メチル置換基を有するアザシクロアルキル基が挙げられる。Ｒ７およびＲ８はまた、そのＲ７およびＲ８が結合する窒素原子と一緒になって、複素環式環系（例えば、置換５員アザシクロアルキル基もしくは非置換５員アザシクロアルキル基または置換６員アザシクロアルキル基もしくは非置換６員アザシクロアルキル基あるいは置換５員ジアザシクロアルキル基もしくは非置換５員ジアザシクロアルキル基または置換６員ジアザシクロアルキル基もしくは非置換６員ジアザシクロアルキル基）を形成し得る。好ましくは、ジアザシクロアルキル基としては、Ｎ−アルキル置換基（例えば、Ｃ１−Ｃ４アルキル置換基）またはより好ましくは、メチル置換基が挙げられる。
【００２１】
本発明の具体的な化合物としては、以下：
【００２２】
【化１０】
2007537147.tif 000006
【００２３】
【化１１】
2007537147.tif 000007
【００２４】
【化１２】
2007537147.tif 000008
に示す構造の化合物が挙げられる。
【００２５】
本発明はまた、本発明の化合物の塩を含む。好ましい塩は、薬学的に受容可能な塩である。「薬学的に受容可能な塩」としては、親の化合物の所望の生物学的活性を保持し、あらゆる望ましくない毒物学的な効果を与えない塩が挙げられる。そのような塩の例は、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸など）の塩；および有機酸（例えば、酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、リンゴ酸、安息香酸、パモイック酸（ｐａｍｏｉｃ  ａｃｉｄ）、アルギン酸、メタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸など）の塩である。また含まれるものは、ナトリウム、カリウム、リチウム、亜鉛、銅、バリウム、ビスマス、カルシウムなどを含む、カチオン（例えば、アルカリ金属およびアルカリ土類金属）の塩；アンモニウムおよび有機カチオン（例えば、アルキルアンモニウム、ジアルキルアンモニウム、トリアルキルアンモニウムおよびテトラアルキルアンモニウム）の塩である。２種以上の上記の塩の組み合わせもまた、本発明の範囲内である。
【００２６】
本発明の化合物は、当該分野に公知である方法を使用して調製され得る。実施例に示すように、以下の化合物１が、本発明の特定の化合物の合成における出発物質として使用され得る。化合物１の合成は、米国特許第６，５４８，４７７号に記載され、その全体が本明細書中に参考として援用される。
【００２７】
【化１３】
2007537147.tif 000009
本発明の化合物は、酵素メチオニンアミノペプチダーゼ−２（ＭｅｔＡＰ−２）のインヒビターであり、それによって、米国特許第６，５４８，４７７号および公開ＰＣＴ出願ＷＯ０３／０９２６０８（その全体が本明細書中に参考として援用される）に記載される種々の疾患および状態を含む、この酵素が治療標的である種々の疾患および状態を処置するために使用され得る。
【００２８】
１つの例として、ＭｅｔＡＰ−２のインヒビターは、内皮細胞の増殖を阻害し、それによって、抗新脈管形成活性を示す。従って、本発明の化合物は、被験体における脈管形成疾患を処置する方法に使用され得る。その方法は、治療的に有効な量の本発明の化合物をその被験体に投与し、それによって、その被験体における脈管形成疾患を処置する工程を包含する。
【００２９】
本明細書中に使用される場合、用語「脈管形成疾患」としては、異常または望ましくない（例えば、刺激されるか、または抑制される）血管の形成（新脈管形成）によって特徴付けられるか、または引き起こされる疾患、障害または状態が挙げられる。異常または望ましくない新脈管形成は、直接的に特定の疾患を引き起こし得るか、または存在する病理学的状態を悪化させ得るかのいずれかであり得る。脈管形成疾患の例としては、眼の障害（例えば、糖尿病性網膜症、未熟児の網膜症、角膜移植拒絶、水晶体後線維増殖症、血管新生緑内障、ルベオーシス、黄斑変性症に起因する網膜新血管形成、低酸素症、感染介入または外科的介入に関連した眼における新脈管形成、眼の腫瘍およびトラコーマ、ならびに新血管形成が失明を引き起こし得る他の異常な眼の新血管形成状態）；皮膚に影響を与える障害（例えば、乾癬および化膿性肉芽腫）；癌（例えば、進行性の増殖が、癌腫および肉腫の腫瘍細胞、肺癌、脳癌、腎臓癌、結腸癌、肝臓癌、膵臓癌、胃癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、黒色腫および前述の癌のあらゆる転移性型による新脈管形成の連続的な誘導に依存する癌腫および肉腫）；小児疾患（例えば、血管線維腫、および血友病者の関節）；血管障害（例えば、血管腫症、およびアテローム斑内の毛細血管増殖）；外科手術に関連した障害（例えば、過形成性瘢痕、創傷肉芽形成および血管付着）および自己免疫疾患（例えば、関節において新しい血管が、関節軟骨を破壊し得るリウマチ様関節炎、免疫関節炎および変形性関節症および強皮症）が挙げられる。
【００３０】
用語、脈管形成疾患としてはまた、過剰または異常な内皮細胞の刺激（腸管癒着症、クローン病、アテローム性動脈硬化症、強皮症、および過形成性瘢痕（すなわち、ケロイド）；病理学的結果（例えば、ネコ引っ掻き病（Ｒｏｃｈｅｌｅ  ｎｉｎａｌｉａ  ｑｕｉｎｔｏｓａ）および潰瘍（ヘリコバクターピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ）））のような新脈管形成を有する疾患が挙げられるが、それらに限定されない）によって特徴付けられる疾患が挙げられる。さらに、本発明の化合物は、産児制限因子（新脈管形成依存の排卵および胎盤の構築を阻害するためのそれらの能力の効力によって）として有用であり、そして外科手術前に被験体への投与によって出血を減少させるためにもまた、使用され得る。
【００３１】
本発明の化合物はまた、胸腺腫を患う被験体を処置するために使用され得る。従って、本発明は、患者における胸腺腫を処置する方法を提供し、その方法は、治療的に有効な量の本発明の化合物をその患者に投与する工程を包含する。
【００３２】
本発明の化合物はまた、免疫系の抑制が所望される臨床プロトコルにおける免疫抑制剤として使用され得る。従って、本発明は、被験体における免疫抑制された状態を誘導する方法を提供し、その方法は、本発明の化合物の免疫抑制性の量をその被験体に投与する工程を包含する。例えば、本発明の化合物は、ドナーから臓器移植、組織移植または細胞移植を受けているか、あるいは受けた被験体における免疫機能を抑制するために使用され得る。１つの実施形態において、移植される組織、臓器または細胞は、骨髄、幹細胞、膵臓細胞（例えば、島細胞）、または角膜である。別の実施形態において、移植される臓器は、固形臓器（例えば、肝臓、腎臓、心臓または肺）である。
【００３３】
本発明の化合物はまた、リンパ様悪性腫瘍を患う被験体（例えば、哺乳動物（例えば、ヒト））を処置するために使用され得る。その方法は、有効な量のＭｅｔＡＰ−２インヒビターを被験体に投与して、それによって、リンパ様悪性腫瘍を患う被験体を処置する工程を包含する。
【００３４】
本発明の化合物はまた、リウマチ病（例えば、慢性関節リウマチ、狼瘡、強直性脊椎炎（ａｋｙｌｏｓｉｎｇ  ｓｐｏｎｄｙｌｉｔｉｓ）、乾癬性関節炎、強皮症、川崎病およびＰｒｉｍｅｒ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｒｈｅｕｍａｔｉｃ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ、第１１版（Ｊｏｈｎ  Ｈ．Ｋｌｉｐｐｅｌ、ＭＤ、編者；Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ：Ａｔｌａｎｔａ  ＧＡ（１９９７））に記載される他のリウマチ病）を処置するために使用され得る。
【００３５】
本明細書中で使用される場合、用語「リンパ様悪性腫瘍」としては、リンパ系細胞のあらゆる悪性腫瘍が挙げられる。リンパ様悪性腫瘍の例としては、リンパ性白血病（例えば、慢性リンパ性白血病および急性リンパ性白血病、ならびにリンパ腫（例えば、ホジキン病および非ホジキンリンパ腫））が挙げられる。用語「非ホジキンリンパ腫」としては、Ｔ細胞リンパ腫（例えば、前駆（末梢）Ｔ細胞リンパ芽球性、成人Ｔ細胞、節外性ナチュラルキラー／Ｔ細胞、鼻型、腸疾患型Ｔ細胞、肝脾Ｔ細胞、皮下脂肪組織炎様Ｔ細胞、皮膚（ｓｋｉｎ）（皮膚（ｃｕｔａｎｅｏｕｓ））リンパ腫、未分化大細胞末梢Ｔ細胞、および血管免疫芽細胞性Ｔ細胞リンパ腫）；およびＢ細胞リンパ腫（例えば、前駆Ｂリンパ芽球性、小リンパ球、Ｂ細胞前リンパ球性、リンパ形質細胞性、脾臓辺縁帯、節外性辺縁帯ＭＡＬＴ、節性辺縁帯、小胞、マントル細胞、びまん性大細胞Ｂ細胞、原発性縦隔大Ｂ細胞、原発性滲出およびバーキットリンパ腫）が挙げられる。非ホジキンリンパ腫としてはまた、ＡＩＤＳ関連リンパ腫および中枢神経系リンパ腫が挙げられる。
【００３６】
別の局面において、本発明は、寄生生物による感染症（例えば、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種（例えば、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）による感染症、またはＬｅｉｓｈｍａｎｉａ種（例えば、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ  ｄｏｎａｖａｎｉ）による感染症）を患う被験体を処置する方法を提供する。その方法は、治療的に有効な量の本発明の化合物をその被験体に投与する工程を包含する。
【００３７】
さらなる局面において、本発明は、自己免疫疾患を患う被験体を処置する方法を提供する。その方法は、治療的に有効な量の本発明の化合物をその被験体に投与する工程を包含する。
【００３８】
本明細書中で使用される場合、用語「自己免疫疾患」としては、そのヒト自身の身体を攻撃するヒトの免疫系に関連するか、またはヒトの免疫系によって引き起こされる障害、疾患または状態が挙げられる。免疫系は、その独自の組織に対する抗体を作製する。実質的に、身体のあらゆる部分は、自己免疫疾患に感受性がある。自己免疫疾患の例としては、免疫系がヒトの赤血球を破壊する自己免疫性溶血性貧血；肝臓の炎症を引き起こす自己免疫性肝炎；腎臓損傷を引き起こすＩｇＡ腎症としてもまた公知であるベルジェ病；倦怠感の感覚、または疾患の漠然とした感覚を引き起こす慢性疲労症候群；腸の炎症を引き起こすクローン病；皮膚および筋肉に影響を与える皮膚筋炎；筋肉の慢性痛および硬直を引き起こす線維筋痛症；甲状腺に影響を与えるグレーヴズ病；甲状腺の慢性炎症である橋本甲状腺炎；低血小板数を引き起こし、そして正常な血液凝固を妨げる特発性血小板減少性紫斑病；皮膚、眼、ならびに口および生殖器の内層に影響を与える扁平苔癬；身体が神経系の部分を攻撃する多発性硬化症；激しい筋衰弱を引き起こす重症筋無力症；皮膚損傷およびそう痒を引き起こす乾癬；心臓を含む身体器官に損傷を引き起こし、その後連鎖球菌感染を引き起こすリウマチ熱；身体が関節を攻撃するリウマチ様関節炎；皮膚、腸、および他の構造に関与する強皮症；眼および口の乾燥を引き起こすシェーグレン症候群；身体が関節およびまた腎臓の結合組織を攻撃する全身性エリテマトーデス；個体が十分なインスリンを生産しない状態である１型糖尿病；腸の炎症も引き起こす潰瘍性大腸炎；ならびに皮膚色素の減少を引き起こす白斑が挙げられるが、これらに制限されない。好ましい実施形態において、自己免疫疾患は、リウマチ様関節炎でない。
【００３９】
本明細書中で使用される場合、「寄生生物による感染」としては、あらゆる寄生生物によって引き起こされる感染が挙げられる。寄生生物による感染の例としては、例えば、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種（例えば、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）によって引き起こされる感染、またはＬｅｉｓｈｍａｎｉａ種（例えば、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ  ｄｏｎａｖａｎｉ）種によって引き起こされる感染が挙げられる。さらに寄生生物による感染の例としては、例えば、Ｂａｂｅｓｉａ、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ、Ｅｉｍｅｒｉａ、Ｉｓｏｓｐｏｒａ、Ａｔｏｘｏｐｌａｓｍａ、Ｃｙｓｔｏｉｓｏｓｐｏｒａ、Ｈａｍｍｏｎｄｉａ、Ｂｅｓｎｉｏｔｉａ、Ｓａｒｃｏｃｙｓｔｉｓ、Ｆｒｅｎｋｅｌｉａ、Ｈａｅｍｏｐｒｏｔｅｕｓ、Ｌｅｕｃｏｃｙｔｏｚｏｏｎ、Ｔｈｅｉｌｅｒｉａ、ＰｅｒｋｉｎｓｕｓおよびＧｒｅｇａｒｉｎａ  ｓｐｐ．；Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｒｉｎｉｉ；Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒａ  ｐｈｙｌｕｍ（例えば、Ｎｏｓｅｍａ、Ｅｎｔｅｒｏｃｙｔｏｚｏｏｎ、Ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｏｚｏｏｎ、Ｓｅｐｔａｔａ、Ｍｒａｚｅｌｉａ、Ａｍｂｌｙｏｓｐｏｒａ、Ａｍｅｓｏｎ、Ｇｌｕｇｅａ、ＰｌｅｉｓｔｏｐｈｏｒａおよびＭｉｃｒｏｐｏｒｉｄｉｕｍ  ｓｐｐ．）のメンバー；ならびにＡｓｃｅｔｏｓｐｏｒａ  ｐｈｙｌｕｍ（例えば、Ｈａｐｌｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）のメンバーによって引き起こされる感染が挙げられる。
【００４０】
本明細書中で使用される場合、「被験体」としては、温血動物、好ましくはヒトを含む哺乳動物が挙げられる。好ましい実施形態において、その被験体は、霊長類である。さらにより好ましい実施形態において、その被験体は、ヒトである。
【００４１】
本明細書中で使用される場合、用語、被験体に「投与する工程」としては、被験体における所望の位置への化合物の送達のための任意の適切な経路（非経口経路または経口経路、筋肉内注射、皮下／皮内注射、静脈内注射、口内投与、経皮送達のいずれかによる送達および直腸経路、結腸経路、膣経路、鼻腔内経路または気道経路による投与を含む）による被験体への新脈管形成インヒビター化合物（例えば、（本明細書中で記載されるような）薬学的処方物における新脈管形成インヒビター化合物）の調剤、送達または適用が挙げられる。
【００４２】
本明細書中で使用される場合、用語「有効な量」は、（例えば、被験体における脈管形成疾患を処置するために十分な）所望の結果を達成するための用量における必要な期間での有効な量を含む。本明細書中で定義される場合、新脈管形成インヒビター化合物の有効な量は、因子（例えば、被験体の疾患状態、年齢および体重ならびに被験体における所望の応答を誘発するための新脈管形成インヒビター化合物の能力）に従って変化し得る。用量レジメンは、最適な治療応答を提供するために調整され得る。有効な量はまた、新脈管形成インヒビター化合物のあらゆる毒性の影響または有害な影響（例えば、副作用）より、治療的に有益な効果が上回っている量である。
【００４３】
本発明の化合物の治療的に有効な量（すなわち、有効用量）は、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜３０ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜２５ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは約０．１ｍｇ／ｋｇ体重〜２０ｍｇ／ｋｇ体重、およびさらにより好ましくは約１ｍｇ／ｋｇ体重〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、２ｍｇ／ｋｇ体重〜９ｍｇ／ｋｇ体重、３ｍｇ／ｋｇ体重〜８ｍｇ／ｋｇ体重、約４ｍｇ／ｋｇ体重〜７ｍｇ／ｋｇ体重または５ｍｇ／ｋｇ体重〜６ｍｇ／ｋｇ体重の範囲であり得る。当業者は、特定の因子（疾患または障害の重症度、以前の処置、被験体の一般的な健康状態および／または年齢、ならびにいくらかでもあれば、存在する他の疾患が挙げられるが、それらに限定されない）が、被験体を有効に処置するために必要とされる用量に影響し得ることを理解する。さらに、治療的に有効な量の本発明の化合物を用いる被験体の処置としては、単一の処置が挙げられ得るか、または好ましくは一連の処置が挙げられ得る。一例において、被験体は、約１週と１０週との間、好ましくは約２週と８週との間、より好ましくは約３週と７週との間、およびさらにより好ましくは約４週間、５週間または６週間、１週につき１回、約０．１ｍｇ／ｋｇ体重と２０ｍｇ／ｋｇ体重との間の範囲の本発明の化合物を用いて処置され得る。処置のために使用される化合物の有効な用量が、特定の処置の過程にわたって増加または減少し得ることもまた理解される。
【００４４】
本発明の方法はさらに、脈管形成疾患を処置するために公知である別の薬学的に活性な化合物（例えば、化学療法剤（例えば、タキソール（Ｔａｘｏｌ）、パクリタキセル（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）、またはアクチノマイシンＤ（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ  Ｄ））、または抗糖尿病薬（例えば、トルブタミド（Ｔｏｌｂｕｔａｍｉｄｅ））；あるいは本発明の化合物の活性を増強し得る化合物（例えば、ヘパリンまたは硫酸化シクロデキストリン））と組み合わせて、治療的に有効な量の新脈管形成インヒビター化合物を、被験体に投与する工程を包含する。使用され得る他の薬学的に活性な化合物は、Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、第１３版、Ｔ．Ｒ．Ｈａｒｒｉｓｏｎら編、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ：Ｎ．Ｙ．、ＮＹ；およびｔｈｅ  Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  第５０版、１９９７年、Ｏｒａｄｅｌｌ、Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ  Ｃｏ．に見出され得、それらの全内容は、明白に本明細書中に参考として援用される。本発明の化合物および他の薬学的に活性な化合物は、同じ薬学的組成物または異なる薬学的組成物中で（同時にまたは異なる時間に）被験体に投与され得る。
【００４５】
（薬学的組成物）
本発明はまた、本発明の１種以上の化合物を含む薬学的に受容可能な処方物を提供する。そのような薬学的に受容可能な処方物としては代表的に、本発明の１種以上の化合物ならびに薬学的に受容可能なキャリアおよび／または賦形剤が挙げられる。本明細書中で使用される場合、「薬学的に受容可能なキャリア」としては、生理的に適合性である任意および全ての溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などが挙げられる。薬学的に活性な物質についてのそのような媒体および薬剤の使用は、当該分野において周知である。任意の従来の媒体または薬剤が、本発明の化合物と不適合である範囲を除いて、薬学的組成物におけるその使用が企図される。
【００４６】
脈管形成疾患を処置するために公知の補充の薬学的に活性な化合物（例えば、化学療法剤（例えば、タキソール、パクリタキセル、またはアクチノマイシンＤ）、または抗糖尿病薬（例えば、トルブタミド）；あるいは新脈管形成インヒビター化合物の新脈管形成阻害活性を増強し得る化合物（例えば、ヘパリンまたは硫酸化シクロデキストリン））もまた、本発明の組成物の中に組み込まれ得る。使用され得る適切な薬学的に活性な化合物は、Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（前出）に見出され得る。
【００４７】
本発明の薬学的組成物は、その意図される投与経路と適合するように処方される。投与経路の例としては、非経口（例えば、静脈内、皮内、皮下）投与、経口（例えば、吸入）投与、経皮（局所的）投与、経粘膜投与、直腸投与が挙げられる。非経口適用、皮内適用、または皮下適用のために使用される溶液または懸濁液としては、以下の成分；滅菌希釈剤（例えば、注射用水）、生理食塩水、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒；抗菌剤（例えば、ベンジルアルコールまたはメチルパラベン）；酸化防止剤（例えば、アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウム）；キレート剤（例えば、エチレンジアミン四酢酸）；緩衝液（例えば、酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩）および張度の調整のための薬剤（例えば、塩化ナトリウムまたはデキストロース）が挙げられ得る。ｐＨは、酸または塩基（例えば、塩酸または水酸化ナトリウム）を用いて調整され得る。非経口調製物は、ガラスまたはプラスチックで作製されるアンプル、使い捨て注射器あるいは複数回投与バイアル中に含まれ得る。
【００４８】
注射のために適切な薬学的組成物としては、滅菌水溶液（水溶性の場合）または分散物および注射用の滅菌溶液もしくは分散物の即時調製物のための滅菌粉末が挙げられる。静脈内投与のために、適切なキャリアとしては、生理食塩水、静菌水（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬＴＭ（ＢＡＳＦ、Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ、ＮＪ））、またはリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）が挙げられる。全ての場合において、薬学的組成物は、滅菌されなければならず、容易にシリンジアビリティ（ｓｙｒｉｎｇａｂｉｌｉｔｙ）が存在する程度まで流体であるべきである。それは、製造および貯蔵の条件下で安定でなければならず、そして微生物（例えば、細菌および菌類）の汚染作用に対して保護されなければならない。キャリアは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコールなど）、およびそれらの適切な混合物を含む溶媒または分散媒体であり得る。適切な流動性は、例えば、コーティング（例えば、レシチン）の使用、分散物の場合に必要とされる粒子サイズの維持、および界面活性剤の使用によって維持され得る。微生物の作用の防止は、種々の抗菌剤および抗真菌剤（例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなど）によって達成され得る。多くの場合において、組成物中に等張剤（例えば、糖、ポリアルコール（例えば、マンニトールまたはソルビトール））または塩化ナトリウムを含むことが好ましい。注射用組成物の延長された吸収は、吸収を遅らせる薬剤（例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチン）を組成物中に含むことによって、ほぼなされ得る。
【００４９】
滅菌注射用溶液は、上に列挙した成分の１つまたはそれらの組み合わせとともに適切な溶媒中に必要とされる量の本発明の化合物を組み込むことによって調製され得、必要な場合、続いて濾過滅菌され得る。一般に、分散物は、新脈管形成インヒビター化合物を、基礎分散物媒体および上に列挙した成分から必要とされる他の成分を含む滅菌ビヒクルの中に組み込むことによって調製され得る。滅菌注射溶液の調製のための滅菌粉末の場合において、調製の好ましい方法は、新脈管形成インヒビター化合物および以前のそれらの濾過滅菌した溶液に由来する任意のさらなる所望の成分の粉末を生じる真空乾燥および凍結乾燥である。
【００５０】
経口組成物としては一般に、不活性希釈剤または食用キャリアが挙げられる。それらは、ゼラチンカプセル中に含まれ得るか、または錠剤の中に圧縮され得る。経口治療投与の目的のために、新脈管形成インヒビター化合物は、賦形剤と共に組み込まれ得、錠剤、トローチまたはカプセルの形態で使用され得る。経口組成物としてはまた、腸溶コーティングが挙げられ得る。経口組成物はまた、うがい薬としての使用のための流体キャリアを使用して調製され得、ここで、流体キャリア中の新脈管形成インヒビター化合物は、経口的に適用され、口の中でくちゅくちゅされ（ｓｗｉｓｈｅｄ）、喀出されるか、または嚥下される。
【００５１】
薬学的に適合可能な結合剤、および／またはアジュバント物質としては、上記組成物の一部が挙げられ得る。錠剤、丸薬、カプセル、トローチなどは、任意の以下の成分または類似の天然の化合物；結合剤（例えば、微結晶性セルロース、トラガカントまたはゼラチン）；賦形剤（例えば、デンプンまたはラクトース）、崩壊（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒａｔｉｎｇ）剤（例えば、アルギン酸、プリモゲル（Ｐｒｉｍｏｇｅｌ）、またはコーンスターチ）；滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウムまたはステルート（Ｓｔｅｒｏｔｅ））；流動促進剤（ｇｌｉｄａｎｔ）（例えば、コロイド状二酸化ケイ素）；甘味剤（例えば、スクロースまたはサッカリン）；矯味矯臭剤（例えば、ペパーミント、サリチル酸メチルまたはオレンジ矯味）を含み得る。吸入による投与のために、新脈管形成インヒビター化合物は、適切な推進薬（例えば、ガス（例えば、二酸化炭素））を含む加圧された容器またはディスペンサーあるいは噴霧器からのエアロゾールスプレーの形態で送達される。
【００５２】
全身投与もまた、経粘膜的手段または経皮的手段によってであり得る。経粘膜投与または経皮投与のために、浸透されるべき障害物に適切な浸透剤が、処方物中に使用される。そのような浸透剤は一般に公知であり、例えば、経粘膜投与のために、洗浄剤、胆汁塩、およびフシジン酸誘導体が挙げられる。経粘膜投与は、鼻スプレーまたは座剤の使用を介して達成され得る。経皮投与のために、新脈管形成インヒビター化合物は、当該分野において一般に公知の軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、軟膏（ｓａｌｖｅ）、ゲル、またはクリームの中に処方される。
【００５３】
本発明の薬学的組成物はまた、直腸送達のために座剤（例えば、従来の座剤ベース（例えば、カカオバターおよび他のグリセリド）を有する）または保留浣腸剤の形態で調製され得る。
【００５４】
１つの実施形態において、新脈管形成インヒビター化合物は、身体からの急速な排出に対して化合物を保護するキャリア（例えば、インプラントおよびマイクロカプセル化送達系を含む制御放出処方物）と共に調製される。生分解性、生体適合性ポリマー（例えば、エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸）が、使用され得る。そのような処方物の調製のための方法は、当業者に明白である。物質もまた、Ａｌｚａ  ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎおよびＮｏｖａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃから市販されて得られ得る。リポソーム懸濁液もまた、薬学的に受容可能なキャリアとして使用され得る。これらは、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号、米国特許第５，４５５，０４４号、米国特許第５，５７６，０１８号および米国特許第４，８８３，６６６号（それらの全ての内容は、本明細書中に参考として援用される）に記載される当業者に公知の方法に従って調製され得る。
【００５５】
本発明の化合物はまた、少なくとも数週間〜１ヶ月以上の間、被験体に対する新脈管形成インヒビター化合物の持続性放出を可能にする薬学的組成物の中に組み込まれ得る。そのような処方物は、米国特許第５，９６８，８９５号に記載され、その内容は本明細書中に参考として援用される。
【００５６】
投与の容易さおよび用量の均一性のために、単位用量形態において経口組成物または非経口組成物を処方することは、特に利点がある。本明細書中で使用される場合、単位用量形態とは、処置される被験体のために単一用量として適した物理学的に別の単位をいい；各単位は、必要とされる薬学的キャリアと関連して、所望の治療効果を産生するように計算された本発明の１種以上の化合物の所定の量を含む。本発明の単位用量形態の詳細は、治療化合物の独特の特性および達成される特定の治療効果、ならびに個体の処置のためのそのような化合物を合成する分野における固有の制限によって決定され直接的に依存する。
【００５７】
そのような化合物の毒性および治療効果は、細胞培養物または実験動物における標準的な薬学的手順（例えば、ＬＤ５０（５０％の個体群に対する致死用量）およびＥＤ５０（５０％の個体群における治療効果用量）を決定すること）によって決定され得る。毒性と治療効果との用量比は、治療指数であり、それは、ＬＤ５０／ＥＤ５０比として表され得る。大きい治療指数を示す本発明の化合物が、好ましい。有毒な副作用を示す化合物が使用され得るが、非感染性の細胞への可能性のある損傷を最小化するために、影響を与える組織の部位にそのような化合物を標的とする送達系を設計するために、注意されるべきであり、それによって副作用を減少させる。
【００５８】
細胞培養物アッセイおよび動物研究から得られるデータが、ヒトにおける使用のための用量範囲を処方する際に使用され得る。本発明の化合物の用量は、好ましくは、ほとんどまたは全く毒性のないＥＤ５０を含む循環濃度の範囲内である。用量は、使用される用量形態および利用される投与経路に依存して、この範囲内で変化し得る。本発明の方法において使用される任意の化合物のために、治療効果用量が最初に、細胞培養物アッセイから見積もられ得る。用量は、細胞培養物において決定される場合、ＩＣ５０（すなわち、症状の最大半減阻害を達成する化合物の濃度）を含む循環している血漿濃度範囲を達成するために動物モデルにおいて処方され得る。
【００５９】
そのような情報は、ヒトにおける有用な用量をより正確に決定するために使用され得る。
【００６０】
血漿のレベルは、例えば、高速液体クロマトグラフィーによって測定され得る。
【００６１】
（本発明の化合物の活性を検出するためのアッセイ）
本発明の化合物は、種々の周知のアッセイ（例えば、ラット大動脈環新脈管形成阻害アッセイ）または絨毛尿膜（ＣＡＭ）アッセイにおいて新脈管形成を調節（例えば、阻害または刺激）するためのそれらの能力について試験され得る。ＣＡＭアッセイは、Ｌｉｅｋｅｎｓ  Ｓら（１９９７）Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ９：１７３−１８１（その内容は、本明細書中に参考として援用される）に記載されるように、本質的に実施され得る。簡潔に言えば、新鮮な受精させた卵を、３７℃で３日間インキュベートする。３日目に、殻を割り、その卵を組織培養プレートの中に置いて、３８℃でインキュベートする。そのアッセイのために、試験される新脈管形成インヒビター化合物を、ナイロンメッシュ上のコラーゲンのマトリックス上に付着させる。次いで、そのメッシュを絨毛尿膜を覆うために使用し、その卵を３７℃でインキュベートする。新脈管形成が起こる場合、２４時間以内にそのメッシュを通じて新しい毛細血管が形成し、増殖する。次いで、新脈管形成（例えば、ＦＧＦ誘発新脈管形成）を調節（例えば、阻害）するための新脈管形成インヒビター化合物（種々の濃度で）の能力を、測定し得る。
【００６２】
本発明の化合物はまた、ヒト内皮細胞増殖を調節（例えば、阻害または刺激）するためのそれらの能力について試験され得る。ヒト臍静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）は、トリプシン含有培地を用いる臍静脈の灌流によって単離され得る。次いで、ＨＵＶＥＣは、５％ＣＯ２および７％Ｏ２の下で３７℃にて２．５％ウシ胎仔血清および２．０ｎｇ／ｍｌの組換えヒト塩基性線維芽細胞成長因子（ｒｂＦＧＦ、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｔａｋｅｄａ，Ｏｓａｋａ，日本）で補充されたＧＩＴ培地（Ｄｉａｇｏ  Ｅｉｙｏｕ  Ｋａｇａｋｕ，Ｃｏ．，日本）において培養され得る。次いで、ＨＵＶＥＣは、２×１０３／１００μｌの培地の細胞密度で９６−ウェルマイクロタイタープレート（Ｎｕｎｃ，１−６７００８）上にプレートされる。次の日、ｒｂＦＧＦを含む１００μｌの培地（最終濃度２ｎｇ／ｍｌ）および種々の濃度における各新脈管形成インヒビター化合物は、各ウェルに添加され得る。新脈管形成インヒビター化合物を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解して、次いで最終ＤＭＳＯ濃度が０．２５％を超えないように培地と共に希釈する。
【００６３】
５日の培養後、培地を取り出し、１００μｌの１ｍｇ／ｍｌＭＴＴ（３−（４，５−ジメチル２−トリアゾリル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムブロマイド）溶液をウェルに添加し、マイクロタイターを４時間３７℃に維持した。次いで、１００μｌの１０％ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）溶液をウェルに添加し、マイクロタイターを５時間〜６時間３７℃に維持する。細胞数に対する新脈管形成インヒビター化合物の効果を決定するために、５９０ｎｍでの各ウェルの光学密度を、光学密度計を使用して測定した。
【００６４】
インビトロでの毛細血管内皮細胞の移動を調節するための本発明の新脈管形成インヒビター化合物の能力もまた、（Ｆａｌｋら（１９８０）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．３３：２３９−２４７（その内容は、本明細書中に参考として援用される）に記載されるような）Ｂｏｙｄｅｎチャンバアッセイを使用して試験され得る。簡潔に言えば、ウシ毛細血管内皮細胞を、フィブロネクチン（７．３μｇフィブロネクチン／ｍｌ  ＰＢＳ）で予めコーティングされた核酸孔（ｎｕｃｌｅｏｐｏｒｅ）フィルターの一面の無血清ＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ’ｓ  Ｍｅｄｉｕｍ）において１つのウェルにつき１．５×１０４細胞にプレートした。新脈管形成インヒビター化合物を、エタノール中に溶解して、エタノールの最終濃度が０．０１％を越えないようにＤＭＥＭ中で希釈する。細胞を、３７℃で４時間、２００μｇ／ｍｌにおける内皮マイトジェン（Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｍａｓｓ．）および無血清ＤＭＥＭ中の異なる濃度の新脈管形成インヒビター化合物に曝露する。このインキュベーションの終わりに、フィルター中の８ミクロンの細孔を通って移動する細胞の数を、四連で１００倍で接眼レンズのグリッドを用いて細胞を数えることによって測定する。
【００６５】
腫瘍増殖を調節するための本発明の化合物の能力は、インビボにおいて試験され得る。動物モデル（例えば、その腹腔内に移植されるマウス細網肉腫（Ｍ５０７６）を有するＣ５７ＢＬ／６Ｎマウス）が、使用され得る。腹水における腫瘍細胞は、遠心分離によって回収され得、生理食塩水中で懸濁される。その細胞懸濁液（１匹のマウスあたり２×１０６細胞／１００μｌ）を、マウスの右側腹部の中に接種する。次いで、腫瘍を持ったマウスを、腫瘍接種の後、１日に始めて１２日間、試験化合物（１％のエタノールを含む５％アラビア（ａｒａｂｉｃ）ガム溶液で懸濁された種々の濃度）を用いて皮下に処置する。
【００６６】
その腫瘍増殖を、数日間の間隔でカリパスを用いて２つの方向における腫瘍サイズを測定することによって決定し得る。
【００６７】
最終的に、ＭｅｔＡＰ２の活性を調節するための本発明の化合物の能力は、以下のように試験され得る。組換えヒトＭｅｔＡＰ２は、ＬｉおよびＣｈａｎｇ、（１９９６）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２２７：１５２に記載されるように、発現され得、昆虫細胞から精製され得る。次いで、種々の量の試験化合物を、１ｎＭの精製された組換えヒトＭｅｔＡＰ２を含む緩衝液Ｈ（１０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ、ｐＨ７．３５、１００ｍＭ  ＫＣｌ、１０％グリセロール、および０．１Ｍ  Ｃｏ２＋）に添加し、３０分間３７℃でインキュベートした。酵素反応を開始するために、メチオニン残基（例えば、Ｍｅｔ−Ｇｌｙ−Ｍｅｔ）を含むペプチドを、反応混合物（１ｍＭの濃度）に添加する。放出されたメチオニンを、続いて、Ｚｏｕら（１９９５）Ｍｏｌ．Ｇｅｎ．Ｇｅｎｅｔｉｃｓ２４６：２４７−２５３の方法を使用して異なる時点（例えば、０分、２分、３分および５分）で定量化する。
【００６８】
本発明はさらに、以下の実施例によって例示され、制限されるように解釈されるべきではない。この出願全体にわたって記載される全ての参考文献、特許および公開された特許出願ならびに図面の内容は、本明細書中で参考として援用される。
【００６９】
本発明の種々の局面は、以下の小節においてさらに詳細に記載される。
【実施例】
【００７０】
（実施例１  化合物２の合成）
化合物１を、米国特許第６，５４８，４７７号（その教示は、その全体が本明細書中に参考として援用される）の実施例５に記載されるように合成した。化合物１（１．０ｇ、２．３６ミリモル）を、２０ｍLの１，４ジオキサンに溶解した。その攪拌した溶液に、ジオキサン（０．６５ｍＬ、２．５９ミリモル、１．１当量）中の４．０Ｍ  ＨＣＬを添加して、その反応物を、真空中で濃縮した後、さらに１５分間攪拌した。次いで、水における２０％アセトニトリルから凍結乾燥して、アセトニトリル−水グラジエントを用いて逆相分取ＨＰＬＣによって精製した。
【００７１】
（実施例２  化合物３の合成）
化合物１（５０２ｍｇ、１．２ミリモル）を、窒素で洗い流した５０ｍＬ丸底フラスコ中で１０ｍＬの１，４ジオキサンに溶解した。その攪拌した溶液に、ジオキサン（０．７３ｍＬ、２．９２ミリモル、２．５当量）中の４．０Ｍ  ＨＣｌを添加して、その反応物を、ＬＣ−ＭＳが出発物質の完全な消失を示した時点でさらに２時間攪拌した。化合物３に変換するために十分に純粋であった濃い白いオイルへと、その反応混合物を真空中で濃縮した。あるいは、アセトニトリル−水グラジエントを用いて、逆相分取ＨＰＬＣによって精製し得た。
【００７２】
（実施例３  化合物４の合成）
化合物３（５００ｍｇ、１．２ミリモル）を、窒素で洗い流した５０ｍＬ丸底フラスコ中で８．０ｍＬの乾燥ＴＨＦ中に溶解した。カリウムｔ−ブトキシド（２５１ｍｇ、２．３ミリモル）を添加して、その反応混合物を、ＬＣ−ＭＳが出発物質の完全な消失を示した時点で１時間攪拌した。その反応混合物を減圧で濃縮し、ジクロロメタンで再懸濁した。有機層を、２×飽和炭酸水素ナトリウム、２×水、および２×生理食塩水で洗浄して、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させて、透明な濃いオイルに濃縮した。それを、アセトニトリル−水グラジエントを用いて、逆相分取ＨＰＬＣによって精製した。
【００７３】
（実施例４  化合物５の合成）
酢酸水銀（ＩＩ）（３１９ｍｇ、１．０ミリモル）を、１ｍＬの水に溶解した。ＴＨＦ（１ｍＬ）を添加し、黄−オレンジの懸濁液を形成させた。５分間室温で攪拌した後、化合物Ｉ（４２４ｍｇ、１．０ミリモル）を、一部分に添加した。その溶液はすぐに透明になった。室温で１時間の攪拌後、その反応物をアイスバスで冷却し、それを３Ｎ  ＮａＯＨ（１ｍＬ）に添加して、続いて、水素化ホウ素ナトリウム（１９ｍｇ、０．５ミリモル、２当量）を、１ｍＬの３Ｎ  ＮａＯＨ中に溶解した。別の攪拌時間の後、その反応混合物を、沈殿した水銀の除去を容易にするために分液漏斗中で一晩静置させた。生理食塩水を、水層に添加し、エーテルで２回抽出した。次いで、その混合した有機抽出物を、生理食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、白い泡に濃縮した。その生成物を、アセトニトリル−水グラジエントを用いて、逆相分取ＨＰＬＣによって精製した。
【００７４】
（実施例５  内皮細胞の増殖の阻害）
本発明の一連の化合物を、ヒト内皮細胞増殖を調節するためのそれらの能力について試験した。このアッセイのために、ヒト臍静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）を、３７℃の加湿したインキュベーター中のＣｌｏｎｅｔｉｃｓ内皮増殖培地（ＥＧＭ）において維持した。細胞をトリプシンで分離し、室温で５分間３００×ｇにて遠心分離によって粒状にした。ＨＵＶＥＣを、１ウェルあたり５，０００細胞にて９６−ウェルプレートに添加した。６時間のインキュベーションの後、培地を、０．５ｎＭ  ｂＦＧＦおよび所望の濃度の試験化合物で補充された０．２ｍｌの新鮮なＥＧＭと取り替えた。試験化合物を最初に、１０ｍＭまたは０．１ｍＭのいずれかの貯蔵濃度におけるエタノール中で溶解し、続いて１ｐＭ〜１０μＭの濃度を得るためにＥＧＭ中で希釈した。３７℃にて４８時間後、培地を新鮮なｂＦＧＦを補充されたＥＧＭおよび試験化合物と取り替えた。３７℃にてさらなる４８時間のインキュベーションの後、ＭＴＴ（３−［４，５−ジメチルチアゾリル］−２，５−ジフェニル−テトラゾリウムブロマイド）１ｍｇ／ｍｌを添加した。３７℃にて２〜４時間後、培地を１つのウェルあたり０．１ｍｌのイソプロパノールと取り替えた。プレートを、室温で１５分間振盪機の上に置き、５７０ｎｍにて光学密度を測定するためにＬ  ａｂｓｙｓｔｅｍｓ  Ｍｕｌｔｉｓｋａｎプレート分光光度計において分析した。
【００７５】
このアッセイの結果を図１に示し、本発明の化合物が、ナノモル濃度で内皮細胞増殖を阻害し得ることを示す。
【００７６】
（等価物）
当業者は、本明細書中に記載される本発明の特定の実施形態との多くの等価物を認識するか、または慣例の実験のみを使用して確実にし得る。そのような等価物は、添付の特許請求の範囲に包含されると意図される。
【国際調査報告】
2007537147.tif 000015
2007537147.tif 000016
2007537147.tif 000017
2007537147.tif 000018