(57)【要約】軸索再生の速度の改善した神経再生デバイスが提供され、そしてその製造のための方法もまた開示される。このデバイスは、生体適合性の吸収可能なポリマー（ポリ−４−ヒドロキシブチレートとしても公知である）から形成される。神経再生を改善する増殖因子、薬物、または細胞は、このデバイスへと取り込まれ得る。このデバイスは、移植により投与され、この際、好ましくは、縫合は使用されない。一つの局面では、このデバイスは、手術中に切断された神経束末端を捕まえるために容易に使用され、そしてインサイチュで導管へと形成され得るラップの形態である。望ましい場合、このラップの末端は、この導管を密封するために一緒に溶解され得、そして適所に保持される。このデバイスの長所は、使用後にデバイスが除去される必要がないということである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
多孔性導管の形態である、ポリヒドロキシアルカノエートポリマーを含む神経再生デバイス。
【請求項２】
請求項１に記載のデバイスであって、ここで、前記ポリマーが、４−ヒドロキシブチレートを含む、デバイス。
【請求項３】
請求項２に記載のデバイスであって、ここで、前記ポリマーが、ポリ−４−ヒドロキシブチレートである、デバイス。
【請求項４】
請求項１に記載のデバイスであって、ここで、前記導管の孔が、直径５μｍよりも大きい、デバイス。
【請求項５】
請求項１に記載のデバイスであって、ここで、この導管の孔が、直径５００μｍ未満である、デバイス。
【請求項６】
請求項１に記載のデバイスであって、ここで、前記導管が、神経細胞、増殖因子、および薬物からなる群より選択される材料を含む、デバイス。
【請求項７】
神経再生デバイスを調製するための方法であって、ここで、該デバイスが、ポリヒドロキシアルカノエートポリマーを多孔性導管の形態で含み、ここで、該デバイスが、塩粒子と組み合わせた該ポリマーの溶媒中での熱的に誘導された相分離、該ポリマー溶媒を除去する工程、および該塩粒子を除去する工程とにより調製される、方法。
【請求項８】
請求項７に記載の方法であって、該方法が、アルコールで浸出し、続いて水または界面活性剤を含有する溶液で浸出する工程を包含する、方法。
【請求項９】
請求項１に記載のデバイスを調製するための請求項７に記載の方法であって、ここで、該デバイスが、熱的に誘導された相分離とポーラゲン（ｐｏｒａｇｅｎ）浸出との組み合わせにより調製される、方法。
【請求項１０】
請求項８に記載の方法であって、ここで、前記界面活性剤がポリソルベートである、方法。
【請求項１１】
神経の修復または再生の方法であって、該方法が、神経再生デバイスを提供する工程を包含し、該神経再生デバイスは、巻かれた多孔性導管の形態であるポリヒドロキシアルカノエートポリマーを含む、方法。
【請求項１２】
請求項１１に記載の方法であって、該方法は、切断された神経末端を前記導管へと挿入する工程または該神経末端を該ポリマーで巻く工程、およびこれを導管中に密封する工程を包含する、方法。
【請求項１３】
請求項１２に記載の方法であって、ここで、前記デバイスが、熱の適用により密封される、方法。
【請求項１４】
請求項１１に記載の方法であって、動物またはヒトにおいて、１０ｍｍの坐骨神経ギャップを横切って、１日当たり少なくとも０．８ｍｍの軸索再生速度を提供する、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般的に、ポリ−４−ヒドロキシブチレートおよびそのコポリマーに由来する神経再生デバイスに関する。
【０００２】
本願は、２００３年８月２２日に出願されたＵ．Ｓ．Ｓ．Ｎ．６０／４９７，１７３に対して優先権を主張する。
【背景技術】
【０００３】
（発明の背景）
いくつかの報告が、神経が損傷された場合に、損なわれた運動機能および感覚機能の両方を回復するための、切断された神経を回復する代替的な方法の使用を記載する。現存する顕微手術の技術は、縫合により緊張しない様式で、切断された神経末端を一直線に整列させようとする。神経の欠陥が相当な場合、神経移植片が使用される。しかし、このアプローチは、追加の神経末端に傷害を生み出し、その結果、近位断端（脊髄または後根にさらに接続された神経末端）における再生軸索が、遠位断端（脊髄にもはや接続されていない神経）に再接続するのを妨害する傷跡組織の形成をもたらす。ドナー部位の病的状態はまた、神経移植片が使用される場合に生じ得る。
【０００４】
このアプローチを改良するため、研究者は、切断された神経末端を再構成するための代替の無縫合方法、ならびにまた、より大きな神経ギャップをブリッジすることを試行し、移植片の使用を回避するための代替の無縫合方法を検討している。接着物質（ａｄｈｅｓｉｖｅ）（例えば、シアノアクリレート接着剤（ｇｌｕｅ）およびフィブリン）ならびに二酸化炭素レーザーを用いる組織の溶接が、評価されている。しかし、これらの方法は、明らかに結果を改善しなかった（非特許文献１）。管状導管の使用はまた、傷跡を形成する組織の浸潤を妨害または遅延させ、潜在的には、この導管内で神経増殖因子の濃度を局所的に増加させ、そしてまた、移植片を使用せずに、より大きな欠陥をブリッジし得る方法として試験されている。このアプローチでは、切断された神経末端は、さらなる傷害が最小限になる様式で、管状導管を神経ガイドチャネルの反対の末端の内側へ設置することにより、近位へと引き寄せられる。
【０００５】
種々の材料が、神経チャンネル導管のための候補として試験され、そしていくつかが臨床的に使用されている。これらとしては、シリコーンゴム、ポリグラクチンのメッシュ、アクリルコポリマーチューブ、および他のポリエステルが挙げられる。しかし、Ａｅｂｉｓｃｈｅｒら、特許文献１により、これらの材料から調製されたデバイスに関して、重大な欠点があることが報告されている。これら重大な欠点としては、炎症性の応答、傷跡組織の形成、および感覚機能または運動機能の喪失が挙げられる。Ｉｎｔｅｇｒａ  ＬｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅｓおよびＮｅｕｒｏｒｅｇｅｎ，ＬＬＣの２社が、わずかな神経ギャップ（ｎｅｕｒｏ  ｇａｐ）をブリッジするための、コラーゲンからできた神経チャンネル導管（ＮｅｕｒａＧｅｎ  Ｎｅｒｖｅ  ＧｕｉｄｅＴＭ）およびポリグリコール酸からできた神経チャンネル導管（ＮｅｕｒｏｔｕｂｅＴＭ）を商品化した。
【０００６】
これらの結果を改善するために、幾人かの研究者が、神経再生のための材料としてのポリ−３−ヒドロキシブチレート（ＰＨＢ）の使用、ならびに、神経細胞死を妨害し、そして神経再生を促進するための増殖因子およびシュワン細胞の使用を調べた。Ａｅｂｉｓｃｈｅｒらの特許文献１は、ＰＨＢから形成されたデバイスを含む管状の圧電性神経導管を開示する。非特許文献１、非特許文献２、および非特許文献３もまた、神経再生のためのＰＨＢ導管を開示する。Ｗｉｂｅｒｇの特許文献２は、ＰＨＢを含む神経修復単位およびヒトシュワン細胞を含むアルギン酸マトリックスを開示し、そして特許文献３はまた、シュワン細胞を含むＰＨＢ導管を開示する。非特許文献３は、例えば、ＰＨＢ導管を用いてラットの坐骨神経における１０ｍｍの神経ギャップをブリッジする軸索再生の速度（第７日目にはラットの坐骨神経における１０ｍｍの神経ギャップの約１０％、第１４日目にはラットの坐骨神経における１０ｍｍの神経ギャップの５０％、そして第３０日目には、完全な再生）を開示する。
【特許文献１】国際公開第８８／０６８６６号パンフレット
【特許文献２】国際公開第０３／０４１７５８号パンフレット
【特許文献３】国際公開第０１／５４５９３号パンフレット
【非特許文献１】Ｈａｚａｒｉら、Ｊ．Ｈａｎｄ  Ｓｕｒｇｅｒｙ，２４Ｂ：２９１〜２９５，１９９９
【非特許文献２】Ｌｊｕｎｇｂｅｒｇら、第１９巻、Ｍｉｃｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，ｐｐ．２５９〜２６４（１９９９）
【非特許文献３】Ｈａｚａｒｉら、第５２巻、Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊ．Ｈａｎｄ  Ｓｕｒｇｅｒｙ，ｐｐ．６５３〜６５７（１９９９）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
これらの肯定的な結果にもかかわらず、軸索再生の速度が神経移植片を用いて得られる速度と少なくとも匹敵するように、この速度を増加させることがさらに非常に望ましい。運動機能および／または感覚機能の再生の程度を改善することもまた望ましい。
【０００８】
従って、迅速な軸索再生を可能にする神経再生のための神経ガイド導管を改善することが、本発明の目的である。
【０００９】
神経再生を促進する細胞および増殖因子、ならびに／または神経細胞死を妨害もしくは遅延させる細胞および増殖因子と組み合わせられ得る神経ガイド導管を提供することは、本発明のさらなる目的である。
【００１０】
この神経再生デバイスを調製および移植するための方法を提供することが、本発明のなお別の目的である。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
（発明の要旨）
軸索再生の速度の改善した神経再生デバイスが提供され、そしてその製造のための方法もまた開示される。このデバイスは、生体適合性の吸収可能なポリマー（ポリ−４−ヒドロキシブチレートとしても公知である）から形成される。神経再生を改善する増殖因子、薬物、または細胞は、このデバイスへと取り込まれ得る。このデバイスは、移植により投与され、この際、好ましくは、縫合は使用されない。一つの局面では、このデバイスは、手術中に切断された神経束末端を捕まえるために容易に使用され、そしてインサイチュで導管へと形成され得るラップの形態である。望ましい場合、このラップの末端は、この導管を密封するために一緒に溶解され得、そして適所に保持される。このデバイスの長所は、使用後にデバイスが除去される必要がないということである。その理由は、このデバイスは、患者の体により緩徐に分解され、そして取り除かれ、インサイチュでは神経再生に必要とされる時間をすぎても、なお機能的であり、そして傷跡組織が排除されるのを補助する。このデバイスはまた、細胞に優しい様式で分解し、そして非常に酸性または炎症性の代謝物質を放出しない。さらに、このデバイスは、可撓性があり、強度が大きく、再生している神経を坐滅せず、扱い易く、自己移植片を収集する必要性を排除することにより外科手術時間を減少させ、そして遅延することなく外科医がこの神経を修復するのを可能にする。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
（本発明の詳細な説明）
切断された神経または損傷された神経の修復についてのデバイスが、提供される。これらのデバイスは、縫合ベースの修復、神経を修復する移植片、および／または、神経再生を促進する神経細胞、増殖因子もしくは他の物質を局所的に投与するのが望ましい場所の代わりに使用され得る。
【００１３】
（Ｉ．定義）
ポリ−４−ヒドロキシブチレートは、４−ヒドロキシブチレート単位を含むホモポリマーを意味する。これは、ＰＨＡ４４００またはＰ４ＨＢと呼ばれ得る。ポリ−４−ヒドロキシブチレートのコポリマーは、１個以上の異なるヒドロキシ酸単位と共にヒドロキシブチレートを含む任意のポリマーを意味する。
【００１４】
生体適合性とは、毒性でなく、かつ、インビボで長期の炎症性の応答または慢性の応答を惹起しない物質をいう。これらの物質の任意の代謝物が、生体適合性であるはずである。
【００１５】
生体分解は、上記ポリマーが、好ましくは、２年未満、より好ましくは、１年未満で、インビボで崩壊しなければならないことを意味する。生体分解とは、動物またはヒトにおけるプロセスをいう。このポリマーは、表面侵食、バルク侵食、加水分解、またはこれらの機構の組み合わせにより、崩壊し得る。
【００１６】
（ＩＩ．ポリマー）
上記ポリマーは、生体適合性かつ生体分解性であるべきである。上記ポリマーは、代表的には、発酵により調製される。好ましいポリマーは、ポリ−４−ヒドロキシブチレートおよびこのコポリマーである。これらのポリマーの例は、トランスジェニックな発酵方法を用いて、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡのＴｅｐｈａ，Ｉｎｃ．により生産され、そして５０，０００〜１，０００，０００の範囲に重量平均分子量を有する。
【００１７】
ポリ−４−ヒドロキシブチレート（ＰＨＡ４４００）は、発酵プロセスにより生み出される非常に柔軟な熱可塑性物質である（米国特許第６，５４８，５６９号、Ｗｉｌｌｉａｍｓら、を参照のこと）。生合成経路にもかかわらず、このポリエステルの構造は、比較的単純である。このポリマーは、ポリヒドロキシアルカノエート（ＰＨＡ）と呼ばれる、より大きなクラスの材料群に属し、これらの材料は、多くの微生物により産生される（総説としては、Ｓｔｅｉｎｂｕｃｈｅｌ，Ａ．（１９９１）、Ｐｏｌｙｈｙｄｒｏｘｙａｌｋａｎｏｉｃ  ａｃｉｄｓ、Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ，（Ｂｙｒｏｍ，Ｄ．編）、ｐｐ．１２３〜２１３．Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｓｔｏｃｋｔｏｎ  Ｐｒｅｓｓ．Ｓｔｅｉｎｂｕｃｈｅｌ，Ａ．およびＶａｌｅｎｔｉｎ，Ｈ．Ｅ．（１９９５）ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ．Ｌｅｔｔ．１２８：２１９〜２２８；およびＤｏｉ，１９９０、Ｍｉｃｒｏｂａｉａｌ  Ｐｏｌｙｅｓｔｅｒｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：ＶＣＨを参照のこと）。そもそも、これらのポリエステルは、細胞内の貯蔵顆粒として産生され、そしてエネルギー代謝を調節するのに役立つ。これらはまた、これらの熱可塑性の特性のために、そして生産の比較的容易さのために、商業的に興味を持たれている。ＰＨＡ４４００を産生するためのいくつかの生合成経路が、現在公知である。ＰＨＡ４４００の化学合成が試行されるが、ほとんどの適用にとって必要な十分な高分子量のコポリマーを生産することは不可能である（Ｈｏｒｉら、１９９５、Ｐｏｌｙｍｅｒ  ３６：４７０３〜４７０５を参照のこと）。
【００１８】
Ｔｅｐｈａ，Ｉｎｃ．（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）は、ＰＨＡ４４００を生産し、そしてＰＨＡ４４００についてのＤｅｖｉｃｅ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｆｉｌｅを、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）に提出した。ＰＨＡポリマーの分子量を制御する方法は、米国特許第５，８１１，２７２号、Ｓｎｅｌｌら、により開示され、そして医学的使用に関するＰＨＡポリマーを精製する方法が、米国特許第６，２４５，５３７号、Ｗｉｌｌｉａｍｓら、により開示されている。インビボでの１年未満の崩壊速度を有するＰＨＡは、米国特許第６，５４８，５６９号、Ｗｉｌｌｉａｍｓら、およびＰＣＴ  ＷＯ  ９９／３２５３６、Ｍａｒｔｉｎら、により開示されている。ＰＨＡは、一定範囲の医学的デバイスを生産するのに有用であることが公知である。例えば、米国特許第６，５１４，５１５号、Ｗｉｌｌｉａｍｓ、は、組織操作骨格を開示し、米国特許第６，５５５，１２３号および米国特許第６，５８５，９９４号、ＷｉｌｌｉａｍｓおよびＭａｒｔｉｎは、軟部組織（ｓｏｆｔ  ｔｉｓｓｕｅ）の修復、増強、および関節内補充療法（ｖｉｓｃｏｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ）を開示し、米国特許第６，５９２，８９２号、Ｗｉｌｌｉａｍｓは、洗浄可能な使い捨てポリマー製品を開示し、そしてＰＣＴ  ＷＯ  ０１／１９３６１、ＷｉｌｌｉａｍｓおよびＭａｒｔｉｎは、ＰＨＡプロドラッグの治療上の組成物を開示する。ＰＨＡの他の用途は、ＷｉｌｌｉａｍｓおよびＭａｒｔｉｎ、２００２、Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ：Ｐｏｌｙｅｓｔｅｒｓ，ＩＩＩ（Ｄｏｉ，Ｙ．およびＳｔｅｉｎｂｕｃｈｅｌ，Ａ．編）、第４巻、ｐｐ．９１〜１２７．Ｗｅｉｎｈｅｉｍ：Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨにより概説されている。
【００１９】
（ＩＩＩ．製造方法および投与方法）
この神経再生デバイスは、好ましくは、粒子浸出、相分離、凍結乾燥、圧縮成形、または繊維への溶融押し出しおよびその後の織物構成物への処理によって、多孔性形態で、製造される。例えば、このデバイスは、不織構造、織り込まれた構造または編まれた構造として加工され得る。好ましくは、このデバイスの孔は、直径約５μｍ〜５００μｍの間である。このデバイスは、修復されるべき神経のギャップよりもわずかに長いべきである。好ましくは、このデバイスは、修復されるギャップよりもいずれかの末端において約２ｍｍ長い。このデバイスの直径は、前もって形成された場合、このデバイスが再生神経に対して圧力を及ぼさないように、十分に大きく、しかし神経末端において十分な密封を提供するために十分に小さくあるべきである。この実際の大きさは、修復されるべき神経の直径に依存する。理想的には、このデバイスは、ポリマーの材料のようなシートから形成され得、このシートは、神経末端の周囲に巻かれ、神経導管チャンネルへと固定され、（神経束の予め作製された管末端への挿入とは対照的に）切断された末端をつなげることを容易にする。望ましい場合には、このポリマーは、細胞（例えば、シュワン細胞）と共に、および／または薬物もしくは増殖因子と組み合わせて、予め散布（ｓｅｅｄ）され得る。好ましくは、後者は、溶媒鋳込（ｓｏｌｖｅｎｔ  ｃａｓｔｉｎｇ）、噴霧乾燥（ｓｐｒａｙ  ｄｒｙｉｎｇ）、または溶融押出（ｍｅｌｔ  ｅｘｔｒｕｓｉｏｎ）のような方法を用いて、このデバイスを通して一様に分散される。必要な場合、上記細胞、増殖因子または薬物は、ミクロスフェア、ナノスフェア、微粒子および／またはマイクロカプセルの形態でカプセル化され、そして上記多孔性デバイスへと散布され得る。
【実施例】
【００２０】
非限定的な実施例は、上記神経再生デバイスを調製するための方法およびこれらのデバイスを用いて達成され得る軸索再生の速度を示す。
【００２１】
（実施例１  凍結乾燥、水抽出によるＰＨＡ多孔性発泡体シートの調製）
ＰＨＡ４４００（ＧＰＣによるＭｗ  ８００Ｋ）を、５重量／容積％にてジオキサン中に溶解した。このポリマー溶液を、１００  ｍ〜２５０  ｍのステンレススチールこし器でこしたナトリウム粒子と混合した。この混合物は、１重量部の塩粒子および２重量部のポリマー溶液を含有した。この塩／ポリマー混合物の１０ｇ〜１２ｇ部分を、Ｍｙｌａｒ（登録商標）シート上に注ぎ、そして３００〜５００のスチールスペーサーにより分離された第二のＭｙｌａｒ（登録商標）シートで覆った。この塩／ポリマー混合物を、Ｃａｒｖｅｒプレスを用いて一定の厚さにプレスした。この混合物を、−２６℃に予め冷却されたアルミニウムプレートの間で−２６℃に凍結させた。頂部のＭｙｌａｒ（登録商標）シートを除去し、その間にこのサンプルを凍結した。このサンプルを、凍結中に凍結乾燥器に移し、そして一晩凍結乾燥し、ジオキサン溶媒を除去し、塩粒子を含有するＰＨＡ４４００発泡体を得た。このサンプルを、底部Ｍｙｌａｒ（登録商標）シートから除去し、そしてこの塩粒子を、サンプルから脱イオン化水へと浸出し、一枚の非常に多孔性のＰＨＡ４４００発泡体（サンプルＡと呼ぶ）を得た。
【００２２】
（実施例２  ＰＨＡ多孔性発泡体シートの調製、凍結乾燥、界面活性剤抽出）
上記塩が、水ではなくて０．０２５％のＴｗｅｅｎ８０を含有する水性溶液へと外に浸出する点を除いて、ＰＨＡ４４００の多孔性発泡体シートを、実施例１と同様に調製した。これを、サンプルＢと呼んだ。
【００２３】
（実施例３  ＰＨＡ多孔性発泡体シートの調製、ジオキサンのエタノール抽出、塩の水抽出）
ＰＨＡ４４００（ＧＰＣによるＭｗ  ８００Ｋ）を、５重量／容積％にてジオキサン中に溶解した。このポリマー溶液を、１００  ｍ〜２５０  ｍのステンレススチールこし器でこしたナトリウム粒子と混合した。この混合物は、１重量部の塩粒子および２重量部のポリマー溶液を含有した。この塩／ポリマー混合物の１０ｇ〜１２ｇ部分を、Ｍｙｌａｒ（登録商標）シート上に注ぎ、そして３００〜５００のスチールスペーサーにより分離された第二のＭｙｌａｒ（登録商標）シートで覆った。この塩／ポリマー混合物を、Ｃａｒｖｅｒプレスを用いて一定の厚さにプレスした。この混合物を、−２６℃に予め冷却されたアルミニウムプレートの間で−２６℃に凍結させた。頂部のＭｙｌａｒ（登録商標）シートを、このサンプルを凍結しながら除去した。このサンプルを、凍結中に冷エタノール（９５％）のバスに移し、ジオキサン溶媒を除去し、そして塩粒子を含有するＰＨＡ４４００発泡体を得た。ジオキサンの除去後、このサンプルを、底部Ｍｙｌａｒ（登録商標）シートから除去し、そしてこの塩粒子を、サンプルから脱イオン化水へと浸出し、一枚の非常に多孔性のＰＨＡ４４００発泡体（サンプルＣと呼ぶ）を得た。
【００２４】
（実施例４  ＰＨＡ多孔性発泡体シートの調製、ジオキサンのエタノール抽出、塩の界面活性剤抽出）
上記塩が、水ではなくて０．０２５％のＴｗｅｅｎ８０を含有する水性溶液へと外に浸出する点を除いて、ＰＨＡ４４００の多孔性発泡体シートを、実施例３と同様に調製した。これを、サンプルＤと呼んだ。
【００２５】
（実施例５  神経移植片またはＰＨＡ導管の移植）
３０匹の雄性Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを一群当たり６匹の５つの群に分けた。１０ｍｍの坐骨神経の断片を、各動物で露出し、切除し、次いで、自系の神経移植片または、上記神経末端を実施例１〜実施例４に由来する発泡体で巻き、そして熱的にこの末端を融解して封を形成したＰＨＡ４４００導管の、いずれかにブリッジ（ｂｒｉｄｇｅ）した。一つの群は、自系の神経移植片を受け取り、残った群の各々にサンプルＡ、サンプルＢ、サンプルＣ、またはサンプルＤに由来する導管を移植した。各群の３匹の動物を、手術後（ｐｏｓｔ−ｏｐｅｒａｔｉｖｅ）の第１０日目および第２０日目に屠殺し、そして修復部位を収集した。固定後、この組織をブロックし、切り出し、次いで、ＰＧＦ（全−ニューロンのマーカー（ｐａｎ−ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｍａｒｋｅｒ））およびＳ１００（シュワン細胞に対する抗体マーカー）に対するポリクローナル抗体を用いて染色した。次いで、軸索再生およびＳＣ（シュワン細胞）再生の距離および軸索再生の面積を定量化した。
【００２６】
十分に扱われたＰＨＡ４４００の４つのサンプルは、全て可塑性であり、十分な引っ張り応力を有し、そして縫合を保持していた。収集時に、創傷感染の徴候はなく、炎症の巨視的な徴候および吻合の失敗はなかった。両収集時において、このＰＨＡ４４００管は、その構造を維持しており、崩壊の形跡はなく、そしてこの管は、下にある筋肉（ｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇ  ｍｕｓｃｌｅ）に接着しなかった。巨視的には、４つのＰＨＡ４４００サンプルの間には、差異がないように見えた。
【００２７】
最も離れたＰＧＰおよびＳ１００の陽性繊維が、導管へと到達した距離を、各群について、第１０日目および第２０日目に測定した。第１０日目までに、ＰＧＰ陽性繊維が、ＰＨＡ４４００導管の４つの全ての遠位断端において同定された。これは、１０ｍｍの神経ギャップがブリッジされたことを示した。これは、１日当たり少なくとも１ｍｍの軸索再生速度を示す。このギャップ間のＳ１００染色繊維の連続性の骨格もまた観察した。これらの結果は、第２０日目で維持されていた。
【００２８】
第１０日目に、ＳＣおよび軸索は、導管の中心を通って直線状に再生するように見えた。第２０日目に、再生の質が良くなり、その結果、移植片の腔、特に近位部分の半分における移植片の腔が、ＰＧＰ陽性繊維およびＳ１００陽性繊維で充填された。この繊維を、導管腔に閉じ込め、そしてこの神経ガイドの多孔性の壁を横切らなかった（ｔｒａｖｅｒｓｅ）。
【００２９】
第１０日目に、ＰＧＰ染色の最大の百分率面積を、ＰＨＡ４４００−サンプルＣ由来の導管（３９．８％）において観察した（表１を参照のこと）。第２０日目までに、ＰＨＡ４４００−サンプルＤ由来の導管は、遠位断端の軸索再生の最大の百分率を支持した（５５．９％）。第１０日目〜第２０日目までの再生面積の最大の発展が、ＰＨＡ４４００−サンプルＢ由来の導管において得られ、この遠位断端の軸索再生の百分率面積の８６％の増加を伴った。
【００３０】
【表１】
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これらの結果から、ＰＨＡ４４００に由来する導管を用いた軸索再生の速度は、ＰＨＢ導管について以前に報告されたものを超えて、より速くそして有意に改良されていることが明らかである。
【手続補正書】
【提出日】平成17年6月18日(2005.6.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
多孔性導管の形態である、ポリヒドロキシアルカノエートポリマーを含む神経再生デバイスであって、ここで、該ポリヒドロキシアルカノエートポリマーが、４−ヒドロキシブチレートを含む、神経再生デバイス。
【請求項２】
請求項１に記載のデバイスであって、ここで、前記ポリマーが、ポリ−４−ヒドロキシブチレートである、デバイス。
【請求項３】
請求項１に記載のデバイスであって、ここで、前記導管の孔が、直径５μｍよりも大きい、デバイス。
【請求項４】
請求項１に記載のデバイスであって、ここで、この導管の孔が、直径５００μｍ未満である、デバイス。
【請求項５】
請求項１に記載のデバイスであって、ここで、前記導管が、神経細胞、増殖因子、および薬物からなる群より選択される材料を含む、デバイス。
【請求項６】
神経再生デバイスを調製するための方法であって、該デバイスが、ポリヒドロキシアルカノエートポリマーを多孔性導管の形態で含み、ここで、該ポリヒドロキシアルカノエートが、４−ヒドロキシブチレートを含み、そして該デバイスが、塩粒子と組み合わせた該ポリマーの溶媒中での熱的に誘導された相分離、該ポリマー溶媒を除去する工程、および該塩粒子を除去する工程により調製される、方法。
【請求項７】
請求項６に記載の方法であって、ここで、該方法が、アルコールで浸出し、続いて水または界面活性剤を含有する溶液で浸出する工程を包含する、方法。
【請求項８】
請求項１に記載のデバイスを調製するための請求項６に記載の方法であって、ここで、該デバイスが、熱的に誘導された相分離とポーラゲン（ｐｏｒａｇｅｎ）浸出との組み合わせにより調製される、方法。
【請求項９】
請求項７に記載の方法であって、ここで、前記界面活性剤がポリソルベートである、方法。
【請求項１０】
神経の修復または再生の方法であって、該方法が、神経再生デバイスを提供する工程を包含し、該神経再生デバイスは、巻かれた多孔性導管の形態であるポリヒドロキシアルカノエートポリマーを含み、ここで、該ポリヒドロキシアルカノエートが、４−ヒドロキシブチレートを含む、方法。
【請求項１１】
請求項１０に記載の方法であって、該方法は、切断された神経末端を前記導管へと挿入する工程または該神経末端を該ポリマーで巻く工程、およびこれを導管中に密封する工程を包含する、方法。
【請求項１２】
請求項１１に記載の方法であって、ここで、前記デバイスが、熱の適用により密封される、方法。
【請求項１３】
請求項１１に記載の方法であって、動物またはヒトにおいて、１０ｍｍの坐骨神経ギャップを横切って、１日当たり少なくとも０．８ｍｍの軸索再生速度を提供する、方法。
【国際調査報告】
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