【手続補正書】
【提出日】平成28年7月25日(2016.7.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
平坦な基板と、
前記基板の表面に疎水性の物質により規則的に高密度に配列するよう形成された容量が４０００×１０-18ｍ3以下の複数の微小チャンバーと、
試験用水溶液が満たされた状態の前記複数の微小チャンバーの開口部に前記試験用水溶液を液封するよう形成された脂質二重膜と、
を備える高密度微小チャンバーアレイ。
【請求項２】
請求項１記載の高密度微小チャンバーアレイであって、
前記複数の微小チャンバーは、厚さが１０マイクロメートル以下の前記疎水性の物質による薄膜に、円形に換算したときに直径が４０マイクロメートル以下となるよう形成されている、
高密度微小チャンバーアレイ。
【請求項３】
請求項１記載の高密度微小チャンバーアレイであって、
前記複数の微小チャンバーは、厚さが５００ナノメートルを含む所定厚範囲の前記疎水性の物質による薄膜に、円形に換算したときに直径が１マイクロメートルを含む所定直径範囲となるよう形成されている、
高密度微小チャンバーアレイ。
【請求項４】
請求項１ないし３のうちのいずれか１つの請求項に記載の高密度微小チャンバーアレイであって、
前記脂質二重膜には、膜タンパク質が再構成されている、
高密度微小チャンバーアレイ。
【請求項５】
平坦な第１基板と、前記第１基板の表面に疎水性の第１物質により規則的に高密度に配列するよう形成された容量が４０００×１０-18ｍ3以下の複数の第１微小チャンバーと、第１試験用水溶液が満たされた状態の前記複数の第１微小チャンバーの開口部に前記第１試験用水溶液を液封するよう形成された第１脂質膜と、を有する第１微小チャンバー部材と、
平坦な第２基板と、前記第２基板の表面に疎水性の第２物質により規則的に高密度に配列するよう形成された容量が４０００×１０-18ｍ3以下の複数の第２微小チャンバーと、第２試験用水溶液が満たされた状態の前記複数の第２微小チャンバーの開口部に前記第２試験用水溶液を液封するよう形成された第２脂質膜と、を有する第２微小チャンバー部材と、
を備え、
前記第１微小チャンバー部材と前記第２微小チャンバー部材は、前記第１微小チャンバー部材の前記複数の第１微小チャンバーが形成された面と前記第２微小チャンバー部材の前記複数の第２微小チャンバーが形成された面とが接するように接合されてなる、
高密度微小チャンバーアレイ。
【請求項６】
請求項５記載の高密度微小チャンバーアレイであって、
前記複数の第１微小チャンバーは、厚さが１０マイクロメートル以下の前記疎水性の第１物質による薄膜に、円形に換算したときに直径が４０マイクロメートル以下となるよう形成されており、
前記複数の第２微小チャンバーは、厚さが１０マイクロメートル以下の前記疎水性の第２物質による薄膜に、円形に換算したときに直径が４０マイクロメートル以下となるよう形成されている、
高密度微小チャンバーアレイ。
【請求項７】
請求項５記載の高密度微小チャンバーアレイであって、
前記複数の第１微小チャンバーは、厚さが５００ナノメートルを含む第１所定厚範囲の前記疎水性の第１物質による薄膜に、円形に換算したときに直径が１マイクロメートルを含む第１所定直径範囲となるよう形成されており、
前記複数の第２微小チャンバーは、厚さが５００ナノメートルを含む第２所定厚範囲の前記疎水性の第２物質による薄膜に、円形に換算したときに直径が１マイクロメートルを含む第２所定直径範囲となるよう形成されている、
高密度微小チャンバーアレイ。
【請求項８】
請求項５ないし７のうちのいずれか１つの請求項に記載の高密度微小チャンバーアレイであって、
前記複数の第１微小チャンバーと前記複数の第２微小チャンバーは、異なる形状に形成されている、
高密度微小チャンバーアレイ。
【請求項９】
請求項５ないし８のうちのいずれか１つの請求項に記載の高密度微小チャンバーアレイであって、
前記第１微小チャンバー部材の第１脂質膜と前記第２微小チャンバー部材の第２脂質膜とが接合して得られる脂質二重膜には、膜タンパク質が再構成されている、
高密度微小チャンバーアレイ。
【請求項１０】
高密度微小チャンバーアレイの製造方法であって、
平坦な基板の表面に疎水性の物質により容量が４０００×１０-18ｍ3以下の複数の微小チャンバーを規則的に高密度に配列するよう形成するチャンバー形成工程と、
試験用水溶液が満たされた状態の前記複数の微小チャンバーの開口部に前記試験用水溶液を液封するよう脂質二重膜を形成する膜形成工程と、
を備える高密度微小チャンバーアレイの製造方法。
【請求項１１】
請求項１０記載の高密度微小チャンバーアレイの製造方法であって、
前記膜形成工程は、前記複数の微小チャンバーが形成された面が略水平な底面を形成する液体流路に前記試験用水溶液を流すことにより前記複数の微小チャンバーに前記試験用水溶液を充填し、前記液体流路に前記脂質二重膜を形成する脂質を含有する脂質含有有機溶媒を流すことにより前記脂質の親水基が前記複数の微小チャンバーの試験用水溶液側に向いた状態の第１脂質膜を前記微小チャンバーの開口部に形成し、前記液体流路に膜形成用水溶液を流すことにより前記脂質の疎水基が前記第１脂質膜側を向いた状態の第２脂質膜を前記第１脂質膜に重ねるように形成することにより脂質二重膜を形成する工程である、
高密度微小チャンバーアレイの製造方法。
【請求項１２】
請求項１１記載の高密度微小チャンバーアレイの製造方法であって、
前記膜形成工程は、前記複数の微小チャンバーに前記試験用水溶液を充填する際には、前記試験用水溶液として、前記試験用水溶液に少なくともタンパク質を可溶化または懸濁化した状態のタンパク質含有液体を前記複数の微小チャンバーに充填する工程である、
高密度微小チャンバーアレイの製造方法。
【請求項１３】
請求項１２記載の高密度微小チャンバーアレイの製造方法であって、
前記タンパク質含有液体におけるタンパク質は、膜タンパク質を含む細胞膜断片，タンパク質を埋め込んだ脂質二重膜，水溶性タンパク質，タンパク質を取り込んだリポソーム，界面活性剤により可溶化させたタンパク質のいずれかである、
高密度微小チャンバーアレイの製造方法。
【請求項１４】
請求項１０または１１記載の高密度微小チャンバーアレイの製造方法であって、
前記膜形成工程の後に、前記脂質二重膜に膜タンパク質を再構成する再構成工程、
を備える高密度微小チャンバーアレイの製造方法。
【請求項１５】
請求項１４記載の高密度微小チャンバーアレイの製造方法であって、
前記再構成工程は、膜タンパク質を含む細胞膜断片，タンパク質を埋め込んだ脂質二重膜，水溶性タンパク質，タンパク質を取り込んだリポソーム，界面活性剤により可溶化させたタンパク質のいずれかを前記脂質二重膜に導入し、前記脂質二重膜にタンパク質を組み込んで膜タンパク質とする工程である、
高密度微小チャンバーアレイの製造方法。
【請求項１６】
請求項１０ないし１５のうちのいずれか１つの請求項に記載の高密度微小チャンバーアレイの製造方法であって、
前記チャンバー形成工程は、前記基板の表面に前記疎水性の物質の薄膜を形成し、前記薄膜の表面の前記複数の微小チャンバーを形成する部分以外の部分にレジストを形成し、ドライエッチングにより前記薄膜に前記複数の微小チャンバーを形成し、前記レジストを除去する、工程である、
高密度微小チャンバーアレイの製造方法。
【請求項１７】
高密度微小チャンバーアレイの製造方法であって、
平坦な第１基板の表面に疎水性の第１物質により容量が４０００×１０-18ｍ3以下の複数の第１微小チャンバーを規則的に高密度に配列するよう形成すると共に第１試験用水溶液が満たされた状態の前記複数の第１微小チャンバーの開口部に前記第１試験用水溶液を液封するよう第１脂質膜を形成して第１微小チャンバー部材を得る第１微小チャンバー部材形成工程と、
平坦な第２基板の表面に疎水性の第２物質により容量が４０００×１０-18ｍ3以下の複数の第２微小チャンバーを規則的に高密度に配列するよう形成すると共に第２試験用水溶液が満たされた状態の前記複数の第２微小チャンバーの開口部に前記第２試験用水溶液を液封するよう第２脂質膜を形成して第２微小チャンバー部材を得る第２微小チャンバー部材形成工程と、
前記第１微小チャンバー部材の前記複数の第１微小チャンバーが形成された面と前記第２微小チャンバー部材の前記複数の第２微小チャンバーが形成された面とが接合されるよう前記第１微小チャンバー部材と前記第２微小チャンバー部材とを接合する接合工程と、
を備える高密度微小チャンバーアレイの製造方法。
【請求項１８】
請求項１７記載の高密度微小チャンバーアレイの製造方法であって、
前記第１微小チャンバー部材形成工程は、前記複数の第１微小チャンバーが形成された面が略水平な底面を形成する第１液体流路に前記第１試験用水溶液を流すことにより前記複数の第１微小チャンバーに前記第１試験用水溶液を充填し、前記第１液体流路に第１脂質を含有する第１脂質含有有機溶媒を流すことにより前記第１試験用水溶液が満たされた前記複数の第１微小チャンバーの開口部が前記第１脂質における親水基が前記第１試験用水溶液側に向いた状態の第１脂質膜により液封されるよう該第１脂質膜を形成する工程であり、
前記第２微小チャンバー部材形成工程は、前記複数の第２微小チャンバーが形成された面が略水平な底面を形成する第２液体流路に前記第２試験用水溶液を流すことにより前記複数の第２微小チャンバーに前記第２試験用水溶液を充填し、前記第２液体流路に第２脂質を含有する第２脂質含有有機溶媒を流すことにより前記第２試験用水溶液が満たされた前記複数の第２微小チャンバーの開口部が前記第２脂質における親水基が前記第２試験用
水溶液側に向いた状態の第２脂質膜により液封されるよう該第２脂質膜を形成する工程である、
高密度微小チャンバーアレイの製造方法。
【請求項１９】
請求項１７または１８記載の高密度微小チャンバーアレイの製造方法であって、
前記第２微小チャンバー部材形成工程は、前記複数の第２微小チャンバーに前記第２試験用水溶液を充填する際に、前記第２試験用水溶液として、前記第２試験用水溶液に少なくともタンパク質を可溶化または懸濁化した状態のタンパク質含有液体を前記複数の第２微小チャンバーに充填する工程である、
高密度微小チャンバーアレイの製造方法。
【請求項２０】
請求項１９記載の高密度微小チャンバーアレイの製造方法であって、
前記タンパク質含有液体におけるタンパク質は、膜タンパク質を含む細胞膜断片，タンパク質を埋め込んだ脂質二重膜，水溶性タンパク質，タンパク質を取り込んだリポソーム，界面活性剤により可溶化させたタンパク質のいずれかである、
高密度微小チャンバーアレイの製造方法。
【請求項２１】
請求項１７ないし２０のうちのいずれか１つの請求項に記載の高密度微小チャンバーアレイの製造方法であって、
前記第１微小チャンバー部材形成工程は、前記第１基板の表面に前記第１物質の第１薄膜を形成し、前記第１薄膜の表面の前記複数の第１微小チャンバーを形成する部分以外の部分に第１レジストを形成し、ドライエッチングにより前記第１薄膜に前記複数の第１微小チャンバーを形成し、前記第１レジストを除去する工程であり、
前記第２微小チャンバー部材形成工程は、前記第２基板の表面に前記第２物質の第２薄膜を形成し、前記第２薄膜の表面の前記複数の第２微小チャンバーを形成する部分以外の部分に第２レジストを形成し、ドライエッチングにより前記第２薄膜に前記複数の第２微小チャンバーを形成し、前記第２レジストを除去する工程である、
高密度微小チャンバーアレイの製造方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
こうした本発明の第２の高密度微小チャンバーアレイにおいて、前記複数の第１微小チャンバーは、厚さが１０マイクロメートル以下の前記疎水性の第１物質による薄膜に円形に換算したときに直径が４０マイクロメートル以下となるよう形成されているものとしたり、厚さが２マイクロメートル以下の前記疎水性の第１物質による薄膜に円形に換算したときに直径が１０マイクロメートル以下となるよう形成されているものとしたり、厚さが１マイクロメートル以下の前記疎水性の第１物質による薄膜に円形に換算したときに直径が５マイクロメートル以下となるよう形成されているものとしたりすることもできる。また、前記複数の第２微小チャンバーは、厚さが１０マイクロメートル以下の前記疎水性の第２物質による薄膜に円形に換算したときに直径が４０マイクロメートル以下となるよう形成されているものとしたり、厚さが２マイクロメートル以下の前記疎水性の第１物質による薄膜に円形に換算したときに直径が１０マイクロメートル以下となるよう形成されているものとしたり、厚さが１マイクロメートル以下の前記疎水性の第１物質による薄膜に円形に換算したときに直径が５マイクロメートル以下となるよう形成されているものとしたりすることもできる。こうすれば、第１基板の表面や第２基板の表面に第１薄膜や第２膜を形成し、第１薄膜や第２薄膜に複数の第１微小チャンバーや第２微小チャンバーを形成する手法を用いて高密度微小チャンバーアレイを形成することができ、高密度チャンバーアレイを比較的容易に形成することができる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
本発明の第２の高密度微小チャンバーアレイにおいて、前記複数の第１微小チャンバーは、厚さが５００ナノメートルを含む第１所定厚範囲の前記疎水性の第１物質による薄膜に、円形に換算したときに直径が１マイクロメートルを含む第１所定直径範囲となるよう形成されており、前記複数の第２微小チャンバーは、厚さが５００ナノメートルを含む第２所定厚範囲の前記疎水性の第２物質による薄膜に、円形に換算したときに直径が１マイクロメートルを含む第２所定直径範囲となるよう形成されている、ものとすることもできる。試験対象の生体分子の反応速度の大きさや生体分子の含有率を考慮すると共に製造の容易さも思慮すると、微小チャンバーの厚さや直径は数百ナノメートルから数マイクロメートルが好適であると考えられる。ここで、「第１所定厚範囲」や「第２所定厚範囲」は、例えば、５００ナノメートルの０．１倍の５０ナノメートル以上で５００ナノメートルの１０倍の５マイクロメートル以下の範囲としたり、５００ナノメートルの０．５倍の２５０ナノメートル以上で５００ナノメートルの２倍の１マイクロメートル以下の範囲としたりすることができる。なお、「第１所定厚範囲」と「第２所定厚範囲」は、同一の範囲であってもよく異なる範囲であってもよい。また、「第１所定直径範囲」や「第２所定直径範囲」は、例えば、１マイクロメートルの０．１倍の１００ナノメートル以上で１マイクロメートルの１０倍の１０マイクロメートル以下の範囲としたり、１マイクロメートルの０．５倍の５００ナノメートル以上で１マイクロメートルの２倍の２マイクロメートル以下の範囲としたりすることができる。なお、「第１所定直径範囲」と「第２所定直径範囲」は、同一の範囲であってもよく異なる範囲であってもよい。