【手続補正書】
【提出日】平成28年2月15日(2016.2.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
無菌注射剤の製造施設内における、ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤の製造方法であって、ＰＴＨペプチド含有溶液調製工程の開始から凍結乾燥手段への搬入工程終了の間の工程のうち、１以上のグレードＡの環境を有する工程において、ＰＴＨペプチド含有溶液と同無菌注射剤製造施設内空気に含まれる酸化能を有する物質との接触を抑制することを特徴とする方法であって、同ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤とは、当該製剤中のＰＴＨペプチド量と全ＰＴＨ類縁物質量の和に対するいずれのＰＴＨ類縁物質の量も１．０％以下であり、及びＰＴＨペプチド量と全ＰＴＨ類縁物質量の和に対する全ＰＴＨ類縁物質量が５．０％以下であることを少なくとも意味する、ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤の製造方法。
【請求項２】
ＰＴＨペプチド含有溶液調製工程の開始から凍結乾燥手段への搬入工程終了の間の工程のうち、１以上のグレードＡの環境を有する工程が、ＰＴＨペプチド含有溶液充填工程の開始から凍結乾燥手段への搬入工程終了の間の工程であって、かつ、グレードＡの環境を有する工程、である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
更に、凍結乾燥後のバイアル封栓工程においても凍結乾燥物が無菌注射剤製造施設内空気に含まれる酸化能を有する物質と接触されることを抑制することを含む、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
凍結乾燥手段への搬入工程においてＰＴＨペプチド含有溶液と無菌注射剤製造施設内空気に含まれる酸化能を有する物質との接触を抑制することを特徴とする、請求項１乃至３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記接触の抑制が、無菌注射剤製造施設内空気が凍結乾燥手段内へ流入することを抑制する手段が講じられた凍結乾燥庫を用いることを特徴とする、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
凍結乾燥手段への搬入工程が３時間以上にわたる該工程である、請求項４又は５に記載の方法。
【請求項７】
前記凍結乾燥手段が、凍結乾燥前ＰＴＨペプチド含有溶液を収容する容器を搬出入する際に開く小扉部分に生じる開口部に備えられた容易に開閉可能な副扉を有する凍結乾燥庫であり、それにより前記搬入工程において、該副扉を容器搬入時のみ開け搬入後は速やかに閉めることで凍結乾燥前ＰＴＨペプチド含有溶液と無菌注射剤製造施設内空気に含まれる酸化能を有する物質との接触を抑制する、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項８】
前記凍結乾燥手段が、凍結乾燥前ＰＴＨペプチド含有溶液を収容する容器を該手段に搬出入する際に開く小扉部分に生じる開口部を有する凍結乾燥庫であり、無菌注射剤製造施設内空気が凍結乾燥手段内へ流入することを抑制する手段が、流動空気の流れを該開口部から庫内に向かわない方向に変える整風カバーである、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項９】
凍結乾燥手段内を不活性ガスで置換することで凍結乾燥前ＰＴＨペプチド含有溶液と無菌注射剤製造施設内空気に含まれる酸化能を有する物質との接触を抑制することを特徴とする、請求項４又は６に記載の方法。
【請求項１０】
前記凍結乾燥手段が、凍結乾燥前ＰＴＨペプチド含有溶液を収容する容器を搬出入する際に開く小扉部分に生じる開口部に備えられた容易に開閉可能な副扉を有する凍結乾燥庫であり、それにより前記搬入工程において、該副扉を溶液容器搬入時のみ開け搬入後に速やかに閉めること、並びに凍結乾燥手段内を不活性ガスで置換することで凍結乾燥前ＰＴＨペプチド含有溶液と無菌注射剤製造施設内空気に含まれる酸化能を有する物質との接触を抑制することを特徴とする、請求項４又は６に記載の方法。
【請求項１１】
前記凍結乾燥手段が、凍結乾燥前ＰＴＨペプチド含有溶液を収容する容器を該手段に搬出入する際に開く小扉部分に生じる開口部を有し、更に該開口部に整風カバーを備える凍結乾燥庫であり、それにより前記搬入工程において、該整風カバーが流動空気の流れを庫内に向かわない方向に変えること、並びに凍結乾燥手段内を不活性ガスで置換することで凍結乾燥前ＰＴＨペプチド含有溶液と無菌注射剤製造施設内空気に含まれる酸化能を有する物質との接触を抑制することを特徴とする、請求項４又は６に記載の方法。
【請求項１２】
前記不活性ガスが窒素である、請求項９乃至１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記ＰＴＨペプチド含有溶液を収容する容器がガラス製バイアルである、請求項１乃至１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＰＴＨがヒトＰＴＨ（１−３４）である、請求項１乃至１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
無菌注射剤製造施設内空気環境が、１）グレードＡの空気であり、２）粒径０．３μｍの粒子を９９．９７％以上の効率で捕らえる性能を有するＨＥＰＡフィルターを通過した清浄な空気が上から下方に向かって一方向の気流として維持されており、且つ、３）含有オゾン濃度が０．００１〜０．１ｐｐｍの空気環境である、請求項１乃至１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
無菌注射剤製造施設内空気環境が、含有ホルムアルデヒド濃度０．１ｐｐｍ以下の空気環境である、請求項１乃至１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤が、下記の
１）類縁物質１：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より６４Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（１−ａ）〜（１−ｃ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（１−ａ）  Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（配列番号：１）の質量数＋１６Ｄａ、
（１−ｂ）  Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ（配列番号：２）の質量数＋１６Ｄａ、及び
（１−ｃ）  Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３）の質量数＋４Ｄａ；
２）類縁物質２：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より３６Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（２−ａ）〜（２−ｃ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（２−ａ）  Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（配列番号：１）の質量数＋１６Ｄａ、
（２−ｂ）  Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ（配列番号：２）の質量数＋１６Ｄａ、及び
（２−ｃ）  Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３）の質量数＋４Ｄａ；
３）類縁物質３：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より３２Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（３−ａ）〜（３−ｂ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（３−ａ）  Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（配列番号：１）の質量数＋１６Ｄａ、及び
（３−ｂ）  Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ（配列番号：２）の質量数＋１６Ｄａ；
４）類縁物質４：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より４８Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（４−ａ）〜（４−ｂ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（４−ａ）  Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（配列番号：１）の質量数＋１６Ｄａ、及び
（４−ｂ）  Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３）の質量数＋４Ｄａ；
５）類縁物質５：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より４８Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（５−ａ）〜（５−ｂ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（５−ａ）  Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ（配列番号：２）の質量数＋１６Ｄａ、及び
（５−ｂ）  Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３）の質量数＋４Ｄａ；
６）類縁物質６：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より２０Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（６−ａ）〜（６−ｂ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（６−ａ）  Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ（配列番号：２）の質量数＋１６Ｄａ、及び
（６−ｂ）  Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３）の質量数＋４Ｄａ；
７）類縁物質９：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より３２Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（９−ａ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（９−ａ）  Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３）の質量数＋４Ｄａ；
８）類縁物質１０：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より１６Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（１０−ａ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（１０−ａ）  Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３）の質量数＋１６Ｄａ；及び
９）類縁物質１１：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より４Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（１１−ａ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（１１−ａ）  Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３）の質量数＋４Ｄａ
からなる群から選択される１種以上のＰＴＨ類縁物質、並びに、
１０）類縁物質７
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より１６Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（７−ａ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（７−ａ）  Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（配列番号：１）の質量数＋１６Ｄａ；  及び
１１）類縁物質８
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より１６Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（８−ａ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（８−ａ）  Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ（配列番号：２）の質量数＋１６Ｄａ；
を含む、請求項１乃至１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤が、下記の
１）類縁物質１’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の８位および１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に、並びに２３位トリプトファンに対応する残基が下記構造式（ａ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
【化１】
2015096548.tif 000001
；
２）類縁物質２’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の８位および１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に、並びに２３位トリプトファンに対応する残基が下記構造式（ｂ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
【化２】
2015096548.tif 000002
；
３）類縁物質３’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の８位および１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
４）類縁物質４’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に、並びに２３位トリプトファンに対応する残基が上記構造式（ａ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
５）類縁物質５’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に、並びに２３位トリプトファンに対応する残基が上記構造式（ａ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
６）類縁物質６’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に、並びに２３位トリプトファンに対応する残基が上記構造（ｂ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
７）類縁物質９’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の２３位トリプトファンに対応する残基が上記構造式（ａ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
８）類縁物質１０’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の２３位トリプトファンに対応する残基が下記構造式（ｃ−１）又は（ｃ−２）で示されるトリプトファン一酸化物残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
【化３】
2015096548.tif 000003
； 及び
９）類縁物質１１’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の２３位トリプトファンに対応する残基が上記構造式（ｂ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
からなる群から選択される１種以上のＰＴＨ類縁物質、並びに、
１０）類縁物質７’
ヒトＰＴＨ（１−３４）の８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；  及び
１１）類縁物質８’
ヒトＰＴＨ（１−３４）の１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
を含む、請求項１乃至１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
請求項１〜１８のいずれか１項に記載の方法により製造された、ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤。
【請求項２０】
無菌注射剤の製造施設内における、高純度のＰＴＨペプチドを有効成分として含有する凍結乾燥製剤の製造方法であって、該製造方法は、グレードＡの環境下、凍結乾燥前ＰＴＨペプチド含有溶液を凍結乾燥手段へ搬入する際に無菌注射剤製造施設内空気に含まれる酸化能を有する物質と接触されるのを抑制したことを特徴とする方法であり、但し前記高純度とは、当該製剤中のＰＴＨペプチド量と全ＰＴＨ類縁物質量の和に対するいずれのＰＴＨ類縁物質の量も１．０％以下であり、及びＰＴＨペプチド量と全ＰＴＨ類縁物質量の和に対する全ＰＴＨ類縁物質量が５．０％以下であることを少なくとも意味し、前記搬入工程は３時間以上にわたる工程であり、且つ前記グレードＡの環境はＨＥＰＡフィルターを通過した清浄な空気が上から下方に向かって一方向の気流として維持されている環境であり、該ＨＥＰＡフィルター直下２０ｃｍの位置の気流が０．２〜１．０ｍ／ｓの流速気流である、前記製造方法。
【請求項２１】
ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤の検査方法であって、該方法は、該ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤中における下記のＰＴＨ類縁物質１乃至１１、
１）類縁物質１：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より６４Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（１−ａ）〜（１−ｃ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（１−ａ）  Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（配列番号：１）の質量数＋１６Ｄａ、
（１−ｂ）  Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ（配列番号：２）の質量数＋１６Ｄａ、及び
（１−ｃ）  Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３）の質量数＋４Ｄａ；
２）類縁物質２：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より３６Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（２−ａ）〜（２−ｃ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（２−ａ）  Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（配列番号：１）の質量数＋１６Ｄａ、
（２−ｂ）  Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ（配列番号：２）の質量数＋１６Ｄａ、及び
（２−ｃ）  Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３）の質量数＋４Ｄａ；
３）類縁物質３：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より３２Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（３−ａ）〜（３−ｂ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（３−ａ）  Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（配列番号：１）の質量数＋１６Ｄａ、及び
（３−ｂ）  Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ（配列番号：２）の質量数＋１６Ｄａ；
４）類縁物質４：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より４８Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（４−ａ）〜（４−ｂ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（４−ａ）  Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（配列番号：１）の質量数＋１６Ｄａ、及び
（４−ｂ）  Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３）の質量数＋４Ｄａ；
５）類縁物質５：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より４８Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（５−ａ）〜（５−ｂ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（５−ａ）  Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ（配列番号：２）の質量数＋１６Ｄａ、及び
（５−ｂ）  Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３）の質量数＋４Ｄａ；
６）類縁物質６：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より２０Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（６−ａ）〜（６−ｂ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（６−ａ）  Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ（配列番号：２）の質量数＋１６Ｄａ、及び
（６−ｂ）  Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３）の質量数＋４Ｄａ；
７）類縁物質７：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より１６Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（７−ａ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（７−ａ）  Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（配列番号：１）の質量数＋１６Ｄａ；
８）類縁物質８：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より１６Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（８−ａ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（８−ａ）  Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ（配列番号：２）の質量数＋１６Ｄａ；
９）類縁物質９：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より３２Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（９−ａ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（９−ａ）  Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３）の質量数＋４Ｄａ；
１０）類縁物質１０：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より１６Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（１０−ａ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（１０−ａ）  Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３）の質量数＋１６Ｄａ；及び
１１）類縁物質１１：
製剤に含有されたＰＴＨペプチドの質量数より４Ｄａ大きな質量数を有し、且つ当該類縁物質をトリプシン消化した際に、以下の（１１−ａ）のフラグメントに対応する消化物を生じる前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
（１１−ａ）  Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３）の質量数＋４Ｄａ、
からなる群から選択される１種以上の存在を確認、及び／又は存在量を定量することを特徴とする方法。
【請求項２２】
ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤の検査方法であって、該方法は、該ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤中における下記のＰＴＨ類縁物質１’乃至１１’、
１）類縁物質１’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の８位および１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に、並びに２３位トリプトファンに対応する残基が下記構造式（ａ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
【化４】
2015096548.tif 000004
；
２）類縁物質２’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の８位および１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に、並びに２３位トリプトファンに対応する残基が下記構造式（ｂ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
【化５】
2015096548.tif 000005
；
３）類縁物質３’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の８位および１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
４）類縁物質４’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に、並びに２３位トリプトファンに対応する残基が上記構造式（ａ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
５）類縁物質５’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に、並びに２３位トリプトファンに対応する残基が上記構造式（ａ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
６）類縁物質６’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に、並びに２３位トリプトファンに対応する残基が上記構造（ｂ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
７）類縁物質７’
ヒトＰＴＨ（１−３４）の８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
８）類縁物質８’
ヒトＰＴＨ（１−３４）の１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
９）類縁物質９’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の２３位トリプトファンに対応する残基が上記構造式（ａ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
１０）類縁物質１０’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の２３位トリプトファンに対応する残基が下記構造式（ｃ−１）又は（ｃ−２）で示されるトリプトファン一酸化物残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
【化６】
2015096548.tif 000006
；及び
１１）類縁物質１１’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の２３位トリプトファンに対応する残基が上記構造式（ｂ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物、
からなる群から選択される１種以上の存在を確認、及び／又は存在量を定量することを特徴とする方法。
【請求項２３】
前記ＰＴＨ類縁物質の定量が、ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤に由来する試料を高速液体クロマトグラフィーに付して紫外部吸収を測定した際のクロマトグラム上における前記ＰＴＨ類縁物質に相当するピークの面積を計算することを含む、請求項２１又は２２に記載の方法。
【請求項２４】
ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤に由来する試料を高速液体クロマトグラフィーに付して紫外部吸収を測定した際のクロマトグラム上における前記ＰＴＨ類縁体に相当するピークの面積と、同一クロマトグラム上におけるＰＴＨペプチドに相当するピーク面積或いはＰＴＨペプチドのピーク面積とそれ以外に検出された全てのＰＴＨ類縁物質のピーク面積の和を比較することで当該ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤中のＰＴＨペプチドの純度を算出することを含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記クロマトグラム上で前記ＰＴＨ類縁物質のいずれか２種以上が１又は２以上の単一ピークとして検出されるクロマトグラフィー条件を適用した場合において、当該ピークの面積と、同一クロマトグラム上におけるＰＴＨペプチドに相当するピーク面積或いはＰＴＨペプチドのピーク面積とそれ以外に検出された全てのＰＴＨ類縁物質のピーク面積の和を比較することで当該ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤中のＰＴＨペプチドの純度を算出することを含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤中のＰＴＨペプチド量と全ＰＴＨ類縁物質量の和に対する少なくとも１種のＰＴＨ類縁物質の量が１．０％以下、及び／又はＰＴＨペプチド量と全ＰＴＨ類縁物質量の和に対する全ＰＴＨ類縁物質量が５．０％以下であることを保証するための、請求項２１乃至２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
更に、高速液体クロマトグラフィー質量分析計を用いて前記ＰＴＨ類縁物質の質量数を検出することを含む、請求項２１乃至２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
更に、前記クロマトグラム上で単一ピークを与える物質を分取し、当該物質をトリプシン消化して生じるフラグメントの質量数を同定することを含む、請求項２１乃至２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
請求項２１乃至２８のいずれか１項に記載の検査方法を実施する工程を含む、ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤から成る無菌注射剤の製造方法。
【請求項３０】
無菌注射剤の製造施設内における、高純度のＰＴＨペプチドを有効成分として含有する凍結乾燥製剤の製造方法であって、前記高純度の凍結乾燥製剤は、下記の、
１）類縁物質１’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の８位および１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に、並びに２３位トリプトファンに対応する残基が下記構造式（ａ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
【化７】
2015096548.tif 000007
２）類縁物質２’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の８位および１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に、並びに２３位トリプトファンに対応する残基が下記構造式（ｂ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
【化８】
2015096548.tif 000008
３）類縁物質３’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の８位および１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
４）類縁物質４’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に、並びに２３位トリプトファンに対応する残基が上記構造式（ａ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
５）類縁物質５’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に、並びに２３位トリプトファンに対応する残基が上記構造式（ａ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
６）類縁物質６’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に、並びに２３位トリプトファンに対応する残基が上記構造（ｂ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
７）類縁物質９’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の２３位トリプトファンに対応する残基が上記構造式（ａ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
８）類縁物質１０’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の２３位トリプトファンに対応する残基が下記構造式（ｃ−１）又は（ｃ−２）で示されるトリプトファン一酸化物残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；及び
【化９】
2015096548.tif 000009
９）類縁物質１１’：
ヒトＰＴＨ（１−３４）の２３位トリプトファンに対応する残基が上記構造式（ｂ）で示される残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物
からなる群から選択される１種以上のＰＴＨ類縁物質、並びに、
１０）類縁物質７’
ヒトＰＴＨ（１−３４）の８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；及び
１１）類縁物質８’
ヒトＰＴＨ（１−３４）の１８位メチオニンに対応する残基がメチオニンスルホキシド残基に変化した前記ＰＴＨペプチドの酸化物；
を含み、さらに、前記高純度の凍結乾燥製剤とは、当該製剤中のＰＴＨペプチド量と全ＰＴＨ類縁物質量の和に対するいずれのＰＴＨ類縁物質の量も１．０％以下であり、及びＰＴＨペプチド量と全ＰＴＨ類縁物質量の和に対する全ＰＴＨ類縁物質量が５．０％以下であることを少なくとも意味し、該凍結乾燥製剤の製造方法は、グレードＡの環境下、凍結乾燥前のＰＴＨペプチド含有溶液と無菌注射剤製造施設内空気に含まれる酸化能を有する物質との接触を抑制したことを特徴とする、前記ＰＴＨペプチド含有凍結乾燥製剤の製造方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８６】
（３）  ＰＴＨ類縁物質の検出と定量
ＰＴＨ含有凍結乾燥製剤中のＰＴＨ類縁物質は、当該製剤を生理食塩液１ｍＬで溶解し、その溶解液と添加液（塩化ベンザルコニウム０．２５ｇに５０ｍＭ硫酸緩衝液（ｐＨ２．３）を加えて５０ｍＬとしたもの）を９：１の割合で混合して試料を作製し、当該試料１００μＬを、下記の段落〔００８７〕〜〔００８９〕に記載の条件下のＨＰＬＣに付すことにより、検出または定量する。なお、試料は５℃付近の一定温度に付してＨＰＬＣに付す。ここで、ＰＴＨ類縁物質に関し「含む」とは、前記ＨＰＬＣで検出されることを意味し、「含まない」とは、前記ＨＰＬＣで検出されないことを意味する。