【手続補正書】
【提出日】平成28年8月2日(2016.8.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の名称】畜肉用消臭組成物
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００２】
牛肉、豚肉、鳥肉のような畜肉は、良質なタンパク質の供給源であると同時に、美味な食品の一つであるため、日本での消費量は高度経済成長期に急増して以来、現在も高い水準で維持されている。そして、その消費量の拡大に対応するために、様々な国から日本に畜肉が輸入されるようになってきている。しかしながら、畜肉は、生産国の地域の特性、飼育方法により、肉質、風味が異なり、日本人の嗜好にそぐわないものもある。特に、牧草のみで飼育した牛の肉は、飼料である牧草由来の匂いであるグラス臭が問題となっている。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００３】
また、畜肉を長時間冷凍保存したり、畜肉を冷凍後再加熱等処理することにより、畜肉の脂質が酸化されて生じる酸化臭は、ｗａｒｍｅｄ−ｏｖｅｒ  ｆｌａｖｏｒ（ＷＯＦ）といわれ、畜肉製品の不快臭として問題となっている。これらの臭いの存在により、臭いに敏感な日本人の味覚にそぐわない畜肉製品が発生する事態が生じている。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００４】
グラス臭や酸化臭の主な原因物質は、揮発性アルデヒド類であることが知られており、特にヘキサナールが不快臭の原因となっていることが明らかにされている。このため、不快な畜肉臭を消臭する目的でヘキサナールを中心とする揮発性アルデヒドを低減化する様々な検討がなされている。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
一般的には、畜肉類を調理する際、不快臭を低減させるために、ショウガ、ネギ、ニンニク、コショウ、ローレル、サンショウ等の香辛料を入れて呈味改善を行っている。さらに、醤油や味噌などの調味料を加えることにより、畜肉由来の不快臭の感じ方を抑える方法も一般的である。しかし、これらの方法は、香辛料や調味料由来の特徴的な香味や色がついてしまうため、その用途は極端に限定されてしまっている。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
しかし、上記特許文献１〜４に記載されている技術は、畜肉に特有の不快臭を低減する効果はあるものの、もろみやレモン果汁、香辛料由来、昆布由来の風味が付くため、畜肉の加工方法や調理方法が限定される。また、特許文献５に記載されている技術は、アルギニンによる畜肉の不快臭低減効果はあるが、アルギニン自体が苦味を呈することから、畜肉にも苦味が付くことが問題となる。さらに、特許文献６に記載されている技術は、トレハロースが高価であるため、畜肉に多量のトレハロースを添加することはコスト面で難しい。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
大豆を含む原料を麹菌で発酵させた発酵分解物から得られる高分子多糖には、抗アレルギー作用（特許文献７参照）、免疫調節作用（特許文献８参照）などあることが知られているが、畜肉特有の不快臭に対する消臭効果は全く知られていない。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
本発明の課題は、飲食品の風味を損なうことなく畜肉に特有な不快臭のみを抑制することのできる畜肉用消臭組成物を提供することである。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討を行った結果、大豆を含む原料を麹菌（アスペルギルス・オリゼあるいはアスペルギルス・ソヤ）で発酵させた発酵分解物から得られる水溶性多糖には、畜肉の特有な不快臭を低減させる効果があること、また、該水溶性多糖を有効成分として含有する組成物は、飲食品の風味を損なうことなく畜肉に特有な不快臭のみを抑制できることを見出し、本発明を完成させた。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
本発明の畜肉用消臭組成物および調味液は、飲食品の風味を損なうことなく畜肉に特有な不快臭のみを効果的に抑制することができる。また、本発明の畜肉用消臭組成物の有効成分である水溶性多糖は、大豆原料由来の成分であるため、安全性にも優れている。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明の畜肉用消臭組成物は、大豆を含む原料を麹菌で発酵させた発酵分解物から得られる水溶性多糖を有効成分とする。水溶性多糖は、１０個以上の単糖がグルコシド結合した水溶性の糖であり、多糖を構成する単糖として、例えば、グルコース、マンノース、フコース、アラビノース、ガラクツロン酸などが挙げられるが、単糖の構造は特に限定されない。原料としては、丸大豆、脱脂加工大豆などの大豆を利用するが、麹菌の生育が良好となるように他の成分を含んでもよく、例えば、小麦、小麦グルテン、米、トウモロコシなどを用いることができる。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
大豆を含む原料を加熱処理した後、これに麹菌を生育させることによって本発明の畜肉用消臭組成物の有効成分である水溶性多糖を得ることができる。すなわち、麹菌が生育することによって産出されるアミラーゼ、セルラーゼなどが、畜肉特有の不快臭を低減する効果を発揮しない多糖を分解し、不快臭を低減する効果を有する多糖は分解しないため、本発明の有効成分である多糖を効果的に得ることができる。麹菌は、アスペルギルス・オリゼやアスペルギルス・ソヤの使用が、該当する多糖を容易に製造できる観点から望ましい。大豆を含む原料を麹菌で発酵させた発酵分解物については、醤油が、大豆、小麦、食塩を原料とし、麹菌で数ヶ月から１年発酵熟成させたものであることから、醤油から本発明の組成物の有効成分である水溶性多糖を得ることもできる。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
本発明の有効成分として、畜肉特有の不快臭をマスキングする水溶性多糖を、醤油のような液体から回収するためには、最終濃度が５０％（ｖ／ｖ）のエタノール濃度になるようにエタノールを添加した後、得られる沈殿物を透析し、透析膜を通過しない画分を回収することによって得られる。エタノールの代わりにメタノールやイソプロパノール等も使用できるが、食の安全性や法制度の面からもエタノールを使用することが好ましい。透析膜の代わりに、限外ろ過膜を用いる方法やゲルろ過カラムを用いる方法も利用することができる。また、これらの方法を組み合わせることにより、更に純度の高い水溶性多糖を得ることも可能である。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
本発明の畜肉用消臭組成物は、水溶性多糖を有効成分として組成物中に含んでいればよく、組成物中の水溶性多糖の濃度は特に限定されない。水溶性多糖が組成物中に含まれる濃度は、グルコースを標準物質として用いたフェノール−硫酸法等にて測定する方法等で求めることが可能である。本発明の畜肉用消臭組成物は、グルコースを標準物質として用いたフェノール−硫酸法で、その組成物の乾燥固形分中に、水溶性多糖が５０％（ｗ／ｗ）以上含まれていることが好ましく、この含量の水溶性多糖が含まれている組成物であれば、その物性が固形状であっても液体状であっても用いることができる。
一方、水溶性多糖にガラクツロン酸が含有することは、水溶性多糖を硫酸にて加水分解後、生成した単糖をＨＰＬＣ、ＧＣ、ＧＣ−ＭＳなどの機器分析にて分析することにより確認することができる。硫酸の代わりに塩酸、トリフルオロ酢酸、トリクロロ酢酸等を使用することもできる。機器分析によって求められるガラクツロン酸と単糖の濃度比より、ガラクツロン酸比を求めることができる。ここでの単糖とは、一般的に大豆の多糖の構成単糖として知られているグルコース、ガラクトース、ガラクツロン酸、フコース、ラムノース、キシロース、アラビノース、マンノースのことを指す。単糖としてガラクツロン酸を１０％以上含む水溶性多糖では、畜肉特有の不快臭をマスキングする効果が高いことから、本発明の組成物の有効成分である水溶性多糖はガラクツロン酸比が１０％以上であることが好ましい。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
水溶性多糖の分子量は、ゲル濾過クロマトグラフィー法やＬＣ−ＭＳ法等で求めることができる。ＬＣ−ＭＳ法は機器が非常に高価で簡単に使用することが難しいため、ゲル濾過クロマトグラフィー法で分子量を測定することが好ましい。大豆を含む原料を麹菌で発酵させる段階で、大豆由来の多糖はほとんど分解されるが、ガラクツロン酸を含む分子量が１０，０００以上の水溶性多糖は麹菌によって分解されない。この方法で得られる分子量が１０，０００以上の水溶性多糖は、経済性、安全性に優れているため、本発明の畜肉用消臭組成物の有効成分として最適である。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
本発明の水溶性多糖を含む畜肉用消臭組成物は、固形状の組成物の場合、組成物を固形状のまま畜肉に添加することにより、または、固形状の組成物を水に分散させて液体状にしてから畜肉に添加することによって、畜肉由来の不快臭を抑制することができる。あるいは、畜肉を調理する際に、組成物を含有させて用いることができる。
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
本発明の調味液は、本発明の畜肉用消臭組成物を０．１％（ｗ／ｖ）以上、かつ、エタノールを含有した水に溶解させることにより得られる。畜肉用消臭組成物が液体状の場合、液体中に畜肉用消臭組成物が乾燥固形物換算で０．１％（ｗ／ｖ）以上含まれるように混ぜ合わせて、調味液として使用することが可能である。エタノール濃度は、３〜１５％（ｖ／ｖ）の範囲であればよいが、好ましくは５〜１０％（ｖ／ｖ）の濃度範囲がよい。エタノール濃度が低すぎる場合、浸透効果が少ないため畜肉特有の不快臭に対する低減効果が少ない。エタノール濃度が高すぎると水溶性多糖の溶解度が減少し、内容物の一部が析出しやすくなり、製品の品質が不安定になる。また、調理時にエタノール臭やエタノールに関連する臭いが付与されて、本来の肉のおいしさを味わえなくなる。また同様の理由で、しょうゆ、味噌、酢、香辛料、レモンなど香りが強いものは本発明の調味液には含まない方が好ましいが、ほとんど香りを発しない塩、砂糖、食品添加物等を添加しても構わない。
【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
本発明の調味液は、水溶性多糖を含有するだけでも効果を発揮するが、さらにエタノール存在下において畜肉特有の不快臭を低減する効果が高く、相乗的に効果を発揮させることができる。また、調味液として使用する場合には、保存中の防ばい性の観点から、エタノールを含有することが好ましい。
【手続補正１９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
本発明の調味液は、様々な畜肉の調理や加工法に用いることができる。例えば、揚げ物、筑前煮、焼き肉、照り焼き、カレー、シチュー、ハヤシなどに用いることができる。また、本発明の調味液で処理した畜肉は、冷凍食品、チルド食品、レトルト食品など数多くの調味食品に利用することができる。
【手続補正２０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２８】
本明細書の実施例では、畜肉はすべてオーストラリア産牛挽肉を使用した。
牛挽肉に、本発明の畜肉用消臭組成物、あるいは、本発明の調味液を練りこみ、肉重量が８ｇになるように計量し、球状に成型した後フライパンで加熱することで、肉パテを調製し、この肉パテを使用してヘキサナールの分析および官能評価を行った。
【手続補正２１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３０】
［ヘキサナールの分析］
畜肉から生じるヘキサナールの分析は、Ｇｅｒｓｔｅｌ社の加熱脱着装置を装着したアジレント社製ＧＣ（ＨＰ７８９０）−ＭＳ（ＨＰ５９７５）を用いて行った。ＧＣ−ＭＳの分析条件は以下の通りである。
＜ＧＣ条件＞
ＧＣカラム    ； ＨＰ  ＩＮＮＯＷａｘ（内径０．２５ｍｍ、長さ６０ｍ、
膜厚０．２５μｍ）
オーブン温度  ； ４０℃（１．５分）−（５℃／分）−２５０℃（１５分）
流量          ； １．８ｍｌ／分
インジェクション温度   ； ２５０℃
インジェクションモード ； スプリットレス
なお、ヘキサナール濃度が低い試験区ほど畜肉の脂肪酸の酸化やグラス臭が抑制され、不快臭を感じにくくなるということを示している。
【手続補正２２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３４】
さらに、畜肉臭（牛肉の嫌な臭い）の評価基準（表２）を用いて、パネラー４名によりコントロールと水溶性多糖を比較する官能評価を行った。表３に官能評価結果を示すが、本発明の水溶性多糖を有効成分とする組成物を使用することにより、肉の嫌な臭いが抑制できることが確認できた。また、コントロールは油の酸化臭を強く感じるが、水溶性多糖を添加した群では、油の酸化臭はマスキングされ、食欲をそそる肉の香りだけがするという評価もあった。
【手続補正２３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３６】
【表３】
2015043749.tif 000001
【手続補正２４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３７】
実施例２で調製した大豆を含む原料を麹菌で発酵させた発酵分解物から得られる水溶性多糖と、多糖の１種であるセルロース（ガラクツロン酸比０％）、ポリガラクツロン酸（ガラクツロン酸比８４％）の３種類の多糖を、それぞれ肉パテ１個（８ｇ）あたり４．１ｍｇ添加することにより調製した肉パテを用いて、畜肉臭低減効果の確認を行った。その結果、図２に示すように、ガラクツロン酸を含有する多糖はヘキサナールを低減化する効果を有していたが、セルロースのようにガラクツロン酸を含まない多糖では充分な効果を確認することができなかった。
【手続補正２５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３８】
最適な水溶性多糖量を検証するために、表４記載の成分量になるように配合した調味液を添加した肉パテを実施例１の通り調製した。「牛肉臭（嫌な臭い）」を表２の各評価基準を用いて、パネラー３名により官能評価を行った。その結果、表５に示すように、水溶性多糖濃度が濃くなるほど、畜肉臭が抑制されることが確認できた。特に、１．０ｍｇ／ｍｌ（０．１％（ｗ／ｖ））以上の濃度では、畜肉臭はほとんど感知されることがなく、良好な効果を期待できることがわかった。試験群１，２，５について、ヘキサナールの分析を行った結果、試験群１でコントロールのヘキサナール濃度に比べ約５０％に、試験群２で約８０％まで低減させることがわかった。（図３）。
【手続補正２６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４０】
【表５】
2015043749.tif 000002
【手続補正２７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４２】
表７に示すように、エタノールが存在することで畜肉臭が抑制されていることがわかる。しかし、エタノール濃度が２０％（ｖ／ｖ）以上になると、エタノール臭が強く感じられるようになり、エタノールが反応することによって生成するエステル臭を中心とする華やかな香りもすることが確認できた。
【手続補正２８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４３】
【表６】
2015043749.tif 000003
【手続補正２９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４４】
【表７】
2015043749.tif 000004