(57)【要約】  抗原性作用物を含有する容器を有する小突起メンバーおよび哺乳動物（例えばヒト）に予防接種するためのそのようなメンバーの使用方法が開示される。小突起メンバーは、実質的に低下した皮膚反応とともに抗原性作用物（例えばワクチン抗原）を皮内に送達するために使用される。このことは、誘導量を送達し、その後、１回以上の続いてのブースター量を送達することによって達成される。誘導量はブースター量よりも相対的に大きい。この技術は、広範な種々の治療ワクチンのために広い応用性を有して有効性と使用の簡便性を改善する。
2007521092.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物に抗原性作用物を送達する方法であって、
送達メンバーの各々が、角質層に穿刺するように形造られた複数の小突起および該抗原性作用物の充填量を含有する容器を含有し、該送達メンバーが哺乳動物の皮膚部位に適用される時に、該容器が、哺乳動物に抗原性作用物を伝達する関係に置かれるよう適合されている、少なくとも２種の経皮送達メンバーを提供し；
誘導量の該抗原性作用物を、該少なくとも２種の経皮送達メンバーの第１によって送達し；
該誘導量の該抗原性作用物の該送達後少なくとも約７日目に、該誘導量の約５０重量％までからなる第１のブースター量の該抗原性作用物を、該少なくとも２種の経皮送達メンバーの第２によって送達すること：
を含んでなる、方法。
【請求項２】
該誘導量の該抗原性作用物が少なくとも約１０ｍｇであり、そして該第１のブースター量の該抗原性作用物が約５ｍｇ以下である、請求項１の方法。
【請求項３】
該第１のブースター量の該抗原性作用物が、該誘導量の該抗原性作用物を送達する該段階後、少なくとも１４日目に送達される、請求項１の方法。
【請求項４】
該抗原性作用物の該充填量が、該第１および第２の経皮送達メンバーにおいて実質的に同じであり、この場合、該誘導量の該抗原性作用物を送達する該段階が、該第１の経皮送達メンバーを第１の時間の間該哺乳動物と接触したままにすることを含み、そして該第１のブースター量の該抗原性作用物を送達する該段階が、該第２の経皮送達メンバーを第２の時間の間該哺乳動物と接触したままにすることを含み、そして該第１の時間の間が該第２の時間の間よりも長い、請求項１の方法。
【請求項５】
該第１の時間の間が少なくとも約０．５時間である、請求項４の方法。
【請求項６】
該第２の時間の間が約０．２５時間未満である、請求項５の方法。
【請求項７】
該第１の経皮送達メンバーが、該第２の経皮送達メンバーの該抗原性作用物の充填量を超える該抗原性作用物の充填量を有する、請求項１の方法。
【請求項８】
該第１の経皮送達メンバーが、該第２の経皮送達メンバーと約同じ時間の間哺乳動物と皮膚に穿刺する接触のままにして置かれる、請求項７の方法。
【請求項９】
該第１のブースター量の該抗原性作用物を送達する該段階後少なくとも約７日目に第３の経皮送達メンバーによって第２のブースター量の該抗原性作用物を送達することを含む、請求項１の方法。
【請求項１０】
該第１および第２の経皮送達メンバーが金属からなり、そして接着性裏張りを含む、請求項１の方法。
【請求項１１】
該第１および第２の経皮送達メンバーが、５ｃｍ２未満の皮膚接触面積にわたって皮膚に穿刺する、請求項１の方法。
【請求項１２】
該抗原性作用物に対する局部的皮膚反応を実質的に低下させる段階をさらに含む、請求項１の方法。
【請求項１３】
該抗原性作用物が、タンパク質、多糖複合体、オリゴ糖、リポタンパク質、サブユニットワクチン、ボルデテラ・ペルタッシス（組み換えＰＴ  ａｃｃｉｎｃｅ−無細胞）、クロストリジウム・テタニ（精製、組み換え体）、コリネバクテリウム・ジフテリエ（精製、組み換え体）、サイトメガロウイルス（糖タンパク質サブユニット）、Ａ群連鎖球菌（糖タンパク質サブユニット、破傷風トキソイドとの複合糖質Ａ群多糖、トキシング（ｔｏｘｉｎｇ）サブユニット担体に結合したＭタンパク質／ペプチド、Ｍタンパク質、多価タイプ−特異エピトープ、システインプロテアーゼ、Ｃ５ａペプチダーゼ）、Ｂ型肝炎ウイルス（組み換えＰｒｅＳ１，Ｐｒｅ−Ｓ２，Ｓ，組み換えコアタンパク質）、Ｃ型肝炎ウイルス（組み換え体−表面タンパク質およびエピトープを発現した）、ヒトパピローマウイルス（キャプシドタンパク質、ＴＡ−ＧＮ組み換えタンパク質Ｌ２およびＥ７［ＨＰＶ−６由来］、ＨＰＶ−１１由来ＭＥＤＩ−５０１組み換えＶＬＰＬ１、４価組み換えＢＬＰＬ１［ＨＰＶ−６由来］、ＨＰＶ−１１、ＨＰＶ−１６およびＨＰＶ−１８、ＬＡＭＰ−Ｅ７［ＨＰＶ−１６由来］）、レジオネラ・ニューモフィラ（精製細菌表面タンパク質）、ナイセリア・メニンギチデス（破傷風トキソイドとの複合糖質）、シュードモナス・エルギノサ（合成ペプチド）、風疹ウイルス（合成ペプチド）、肺炎双球菌（髄膜炎菌Ｂ  ＯＭＰと複合した複合糖質［１，４，５，６Ｂ，９Ｎ，１４，１８Ｃ，１９Ｖ，２３Ｆ］、ＣＲＭ１９７と複合した複合糖質［４，６Ｂ，９Ｖ，１４，１８Ｃ，１９Ｆ，２３Ｆ］、ＣＲＭ１９７０と複合した複合糖質［１，４，５，６Ｂ，９Ｖ，１４，１８Ｃ，１９Ｆ，２３Ｆ］）、トレポネマ・パリダム（表面リポタンパク質）、水痘帯状疱疹ウイルス（サブユニット、糖タンパク質）、ビブリオ・コレラエ（複合体リポ多糖）、全ウイルス、細菌、弱化ウイルスもしくは死滅ウイルス、サイトメガロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ヒトパピローマウイルス、風疹ウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、弱化もしくは死滅細菌、ボルデテラ・ペルタッシス、クロストリジウム・テタニ、コリネバクテリウム・ジフテリエ、Ａ群連鎖球菌、レジオネラ・ニューモフィラ、ナイセリア・メニンギチデス、シュードモナス・エルギノサ、肺炎双球菌、トレポネマ・パリダム、ビブリオ・コレラエ、フルワクチン、ライム病ワクチン、狂犬病ワクチン、麻疹ワクチン、おたふくかぜワクチン、水痘ワクチン、痘瘡ワクチン、肝炎ワクチン、百日咳ワクチン、ジフテリアワクチン、核酸、一本鎖および二本鎖核酸、スーパーコイルプラスミドＤＮＡ、線状プラスミドＤＮＡ、コスミド、細菌人工染色体（ＢＡＣ）、酵母人工染色体（ＹＡＣ）、哺乳動物人工染色体、およびＲＮＡ分子からなる群から選ばれる、請求項１の方法。
【請求項１４】
容器が免疫学的に増強するアジュバントを含有する、請求項１の方法。
【請求項１５】
該アジュバントが、リン酸アルミニウムゲル、水酸化アルミニウム、藻類グルカン、β−グルカン、コレラ毒素Ｂサブユニット、ＣＲＬ１００５、ｘ＝８とｙ＝２０５の平均値をもつＡＢＡブロックポリマー、γ−インシュリン、直鎖状（非分枝状）β−Ｄ（２−＞１）ポリフルクトフラノキシル−α−Ｄ−グルコース、ゲルブアジュバント、Ｎ−アセチルグルコサミン−（β−１−４）−Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−グルタミン（ＧＭＤＰ）、ジメチルジオクタデシルアンモニウムクロリド（ＤＤＡ）、亜鉛Ｌ−プロリン塩錯体（Ｚｎ−Ｐｒｏ−８）、イミキモド（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン、ＩｍｍＴｈｅｒＴＭ、Ｎ−アセチルグルコアミニル−Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−ｉｓｏＧｌｕ−Ｌ−Ａｌａ−グリセロジパルミテート、ＭＴＰ−ＰＥリポソーム、Ｃ５９Ｈ１０８Ｎ６Ｏ１９ＰＮａ−３Ｈ２Ｏ（ＭＴＰ）、ムラメチド、Ｎａｃ−Ｍｕｒ−Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−Ｇｌｎ−ＯＣＨ３、Ｐｌｅｕｒａｎ、β−グルカン、ＱＳ−２１、Ｓ−２８４６３、４−アミノ−ａ，ａ−ジメチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−エタノール、ｓｃｌａｖｏペプチド、ＶＱＧＥＥＳＮＤＫ・ＨＣｌ（ＩＬ−１β  １６３−１７１ペプチド）、スレオニル−ＭＤＰ（ＴｅｒｍｕｒｔｉｄｅＴＭ）、Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−スレオニル−Ｄ−イソグルタミン、インターロイキン１８、ＩＬ−２，ＩＬ−１２，ＩＬ−１５、ＤＮＡオリ
ゴヌクレオチド、ＣｐＧ含有オリゴヌクレオチド、γ−インターフェロン、ＮＦκＢ調節伝達タンパク質、ヒート・ショックタンパク質（ＨＳＰ）、ＧＴＰ−ＧＤＰ、ロキソリビン、ＭＰＬ（Ｒ）、ムラパルミチンおよびＴｈｅｒａｍｉｄｅＴＭからなる群から選ばれる、請求項１４の方法。
【請求項１６】
該容器がヒドロゲル調合物を含有する、請求項１の方法。
【請求項１７】
該ヒドロゲル調合物が巨大分子ポリマーネットワークを含有する、請求項１６の方法。
【請求項１８】
該巨大分子ポリマーネットワークが、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、メチルセルロース（ＭＣ）、ヒドロキシエチルメチルセルロース（ＨＥＭＣ）、エチルヒドロキシエチルセルロース（ＥＨＥＣ）、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（ｎ−ビニルピロリドン）およびプルロニックからなる群から選ばれる、請求項１７の方法。
【請求項１９】
該容器が、該第１および第２の送達メンバーの少なくとも１つに処置されたコーティングを含有する、請求項１の方法。
【請求項２０】
該コーティングが低揮発度の対イオンをさらに含有する、請求項１９の方法。
【請求項２１】
該低揮発度の対イオンが、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、酒石酸、アジピン酸、シトラコン酸、フマール酸、グルタル酸、イタコン酸、メグルトール、メサコン酸、コハク酸、シトラリンゴ酸（ｃｉｔｒａｍａｌｉｃ  ａｃｉｄ）、タルトロン酸、クエン酸、トリカルバリル酸、エチレンジアミン四酢酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、炭酸、硫酸、およびリン酸、およびそれらの混合物からなる群から選ばれる、請求項２０の方法。
【請求項２２】
該低揮発度の対イオンが、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、メチルグルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、リジン、アルギニン、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、アンモニアおよびモルホリン、およびそれらの混合物からなる群から選ばれる、請求項２０の方法。
【請求項２３】
該容器が界面活性剤を含有する、請求項１の方法。
【請求項２４】
該界面活性剤が、ナトリウムラウロアンホアセテート、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、塩化セチルピリジニウム（ＣＰＣ）、塩化ドデシルトリメチルアンモニウム（ＴＭＡＣ）、塩化ベンズアルコニウム、ポリソルベート、例えばツイーン２０およびツイーン８０、ソルビタン誘導体、ラウリン酸ソルビタン、アルコキシル化アルコール、およびラウレス−４からなる群から選ばれる、請求項２３の方法。
【請求項２５】
該容器が両親媒性ポリマーを含有する、請求項１の方法。
【請求項２６】
該両親媒性ポリマーが、セルロース誘導体、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、メチルセルロース（ＭＣ）、ヒドロキシエチルメチルセルロース（ＨＥＭＣ）、エチルヒドロキシエチルセルロース（ＥＨＥＣ）、およびプルロニックからなる群から選ばれる、請求項２５の方法。
【請求項２７】
該容器が通路（ｐａｔｈｗａｙ）の開存性（ｐａｔｅｎｃｙ）モジュレーターを含有する、請求項１の方法。
【請求項２８】
該通路の開存性モジュレーターが、浸透剤、塩化ナトリウム、双性イオン化合物、アミノ酸、抗炎症剤、ベタメタソン２１−リン酸二ナトリウム塩、トリアムシノロンアセトニド２１−リン酸二ナトリウム、ヒドロコルタメート塩酸塩、ヒドロコーチゾン２１−リン酸二ナトリウム塩、メチルプレドニソロン２１−リン酸二ナトリウム塩、メチルプレドニソロン２１−コハク酸ナトリウム塩、パラメタソンリン酸二ナトリウム塩、プレドニソロン２１−コハク酸ナトリウム塩、抗凝固剤、クエン酸、クエン酸塩、クエン酸ナトリウム）、デキストラン硫酸ナトリウム、およびＥＤＴＡからなる群から選ばれる、請求項２７の方法。
【請求項２９】
該容器が血管収縮薬を含有する、請求項１の方法。
【請求項３０】
該血管収縮薬が、エピネフリン、ナファゾリン、テトラヒドロゾリン、インダナゾリン、メチゾリン、トラマゾリン、チマゾリン、オキシメタゾリン、キシロメタゾリン、アミデフリン、カファミノール、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、エピネフリン、フェリプレッシン、インダナゾリン、メチゾリン、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、オクトドリン、オルニプレッシン、オキシメタゾリン、フェニレフリン、フェニルエタノールアミン、フェニルプロパノールアミン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシンおよびキシロメタゾリンからなる群から選ばれる、請求項２９の方法。
【請求項３１】
該容器が抗酸化剤を含有する、請求項１の方法。
【請求項３２】
該抗酸化剤が、クエン酸ナトリウム、クエン酸、エチレン−ジニトリロ−四酢酸（ＥＤＴＡ）、アスコルビン酸、メチオニン、およびアスコルビン酸ナトリウムからなる群から選ばれる、請求項３１の方法。
【請求項３３】
該容器が可溶化剤／錯化剤を含有する、請求項１の方法。
【請求項３４】
該可溶化剤／錯化剤が、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、グルコシル−α−シクロデキストリン、マルトシル−α−シクロデキストリン、グルコシル−β−シクロデキストリン、マルトシル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、メチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−α−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンおよびスルホブチルエーテル−γ−シクロデキストリンからなる群から選ばれる、請求項３３の方法。
【請求項３５】
該哺乳動物がヒトを含む、請求項１の方法。
【請求項３６】
哺乳動物に予防接種する方法であって、
送達メンバーの各々が、角質層に穿刺するように形造られた少なくとも１個の小突起および抗原性作用物の充填量を有する容器を含有し、該容器が、該哺乳動物に抗原性作用物を伝達する関係に置かれている、少なくとも２種の経皮送達メンバーを提供し；
誘導量の該抗原性作用物を、該少なくとも２種の経皮送達メンバーの第１によって送達し；
その後少なくとも約７日目に、該誘導量の約５０重量％までであるブースター量の該抗原性作用物を、該少なくとも２種の経皮送達メンバーの第２によって送達すること：
を含んでなる、方法。
【請求項３７】
哺乳動物に予防接種する方法であって、
送達メンバーの各々が、角質層に穿刺するように形造られた少なくとも１個の小突起および抗原性作用物の充填量を有する容器を含有し、該容器が、該哺乳動物に抗原性作用物を伝達する関係に置かれている、少なくとも２種の経皮送達メンバーを提供し；
誘導量の該抗原性作用物を該少なくとも２種の経皮送達メンバーの第１によって送達し；該誘導量の約５０重量％までであるブースター量の該抗原性作用物を、該少なくとも２種の経皮送達メンバーの第２によって送達すること：
を含んでなる、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般に、活性作用物送達システムおよび方法に関する。より具体的には、本発明は小突起アレイ（ｍｉｃｒｏｐｒｏｊｅｃｔｉｏｎ  ａｒｒａｙ））を介する抗原性作用物の経皮送達に関する。
【背景技術】
【０００２】
抗原性作用物、例えばワクチンの送達または投与が、経口、経鼻、筋肉内（ＩＭ）、皮下（ＳＣ）および皮内（ＩＤ）を含む、種々の投与経路をとおして達成できることは周知である。さらに、投与経路がある種の免疫応答に強く影響できることもよく報告されている。参照、例えば、非特許文献１。
【０００３】
多数の市販ワクチンはＩＭもしくはＳＣ経路によって投与される。ほとんどすべての場合、それらは注射器と針を用いる慣用の注射によって投与されるが、ある場合には高速度の液体ジェット注入器がいくつか成功した。参照、例えば、非特許文献２。
【０００４】
より慣用の投与経路の代替法として、皮膚の免疫器官としての機能を利用するＩＤ送達経路に置くことがますます興味を増しつつある。参照、例えば、非特許文献３、非特許文献４および非特許文献５。
【０００５】
皮膚に侵入する病原体は、種々のメカニズムをとおして微生物を排除することができる高度に組織化し、かつ多様な分化した特定の細胞集団と対決させられる。表皮のランゲルハンス細胞（ＬＣ）は、生存している皮膚において見いだされる強力な抗原提示細胞である。リンパ球および皮膚マクロファージは皮膚中に浸透し、半連続的なネットワークを形成する。ケラチン細胞とランゲルハンス細胞は、免疫学的に活性のある化合物の多様なアレイを生成するために発現するか、または誘導することができる。共同してこれらの細胞は、生来および特殊な両免疫応答を最終的に制御する複雑な一連の事象を統合する。
【０００６】
ＬＣの正常な機能は、抗原を検出、捕捉、そして提示して侵入病原体に対する免疫応答を喚起することである。ＬＣは、表皮の（ｅｐｉｃｕｔａｎｅｏｕｓ）抗原を自己のものにし、局部の皮膚に流出しているリンパ節に運び、そして処理した抗原をＴ細胞に提示することによってこの機能を遂行する。免疫系における皮膚の役割の議論は、非特許文献６および非特許文献７に見い出すことができる。
【０００７】
皮膚の免疫系の効力は、皮膚を標的とした予防接種戦略の成功と安全に寄与している。皮膚の乱切法による生の弱毒天然痘ワクチンを用いる予防接種は、致命的な疱瘡の地球規模の根絶へと成功裏に導いた。種々のワクチンの標準ＩＭ用量の１／５〜１／１０を用いる皮内注射は、多くのワクチンによる免疫応答を誘導することに効果的であり、一方、低用量の狂犬病ワクチンは皮内適用のために商業的に認可された。
【０００８】
これらの利点にもかかわらず、具体的に、ヒトの表皮および／または真皮中に抗原を送達するための実際的な、信頼できる、そして最小の侵入方法は、今なお開発下にある。皮内注射に対する重大な制約は、慣用の注射針の使用が、非常に高いレベルの目と手の調整および指の器用さを必要とすることである。したがって、針の不要なワクチン送達システムの開発における関心が増大しつつある。
【０００９】
独立した研究室が、タンパク質およびＤＮＡに基づく抗原を含む高分子に対して、針の不要な免疫化を例証した。Ｇｌｅｎｎらは、未処置の皮膚に適用された、アジュバントと
混合された破傷風トキソイド、コレラ毒素を含有する溶液が、抗コレラ毒素抗体を誘導することができることを例証した。非特許文献８。
【００１０】
Ｔａｎｇらは、さらに、ヒトのがん胎児性抗原をコードしているアデノウイルスベクターの局所投与が、抗原に特異的な抗体を誘導することを例証した。非特許文献９。また、Ｆａｎらは、Ｂ型肝炎表面抗原をコードしている裸のＤＮＡの局所適用が、細胞性および体液性免疫応答を誘導できることを例証した。非特許文献１０。
【００１１】
したがって、経皮的送達は、その他には、皮下注射、静脈内注入または経口により送達されることを要する抗原性作用物を投与する方法にも備える。経皮的ワクチン送達はこれらの領域の両方において改良を与える。経口送達に比較した場合、経皮送達は、消化管の苛酷な環境を避け、胃腸の薬物代謝を回避し、初回の通過効果を低下し、そして消化および肝臓酵素による可能性のある失活を避ける。一方、消化管は経皮的投与の間ワクチンに支配されない。
【００１２】
本明細書で使用されるような、用語「経皮的」は、皮膚の実質的切り込み（ｃｕｔ）もしくは侵入、例えば外科的ナイフによる切り込みまたは皮下針による皮膚の穿刺なしの、皮膚をとおして局部組織、特に真皮および表皮、または全身的循環系への抗原性作用物（例えば、ワクチンもしくは他の免疫学的に活性のある作用物）の送達を指す一般的用語である。経皮的な作用物送達は、受動的拡散による送達ならびに電気的（例えばイオン導入（ｉｏｎｔｏｐｈｏｒｅｓｉｓ））および超音波（例えば、ホノホレシス（ｐｈｏｎｏｐｈｏｒｅｓｉｓ））のような外部エネルギー源に基づく能動的送達を含む。
【００１３】
受動的な経皮作用物送達システムは、これはより一般的であるが、典型的には、高濃度の活性作用物を含有する薬物容器（ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ）を含む。容器は皮膚に接触するよう適用され、これが作用物を皮膚をとおし、患者の体組織もしくは血流中に拡散させる。
【００１４】
当該技術分野において周知のように、経皮的な薬物流動（フルｘ）は、皮膚の状態、薬物分子の大きさと物理的／化学的性質、および皮膚を横断する濃度勾配に依存する。多くの薬物にとって皮膚の低い浸透性のために、受動的経皮送達は限られた適用法であった。この低い浸透性は、角質層、脂質二重層によって囲まれたケラチン繊維で満たされた平らな死細胞（すなわち、ケラチン細胞）からなる最も外側の皮膚層に主として因るものである。脂質二重層のこの高度に整った構造は、角質層に対して、特に、親水性で高分子量の薬物、およびタンパク質、裸のＤＮＡおよびウイルスベクターのような巨大分子に対して相対的に浸透し難い特質を与える。結果的に、経皮送達は、一般に、限定された親水性をもつ低分子量化合物（＜５００ダルトン）の受動送達に限られていた。このことは一般に、免疫学的に有効量の抗原性作用物の送達を不可能にする。
【００１５】
受動的な経皮拡散性作用物の流動を増大する１つの一般的方法は、作用物、皮膚の浸透促進剤、例えば化学的浸透促進剤、脱毛剤、吸蔵剤（ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ）および巨大分子に対して浸透性を増大する水和技術によって皮膚を前処理するか、またはそれらを同時送達することを必要とする。しかしながら、これらの方法は、長い着用（ｗｅａｒｉｎｇ）時間なしには治療用量を送達することはできないであろうし、それらは相対的に非効率の送達手段である。さらにまた、化学的浸透促進剤の効果は無刺激な濃度に限定される。経皮的な流動を促進するこれらの方法の効力は、より大きいタンパク質のためには、主としてそれらのサイズによってまた限定されてきた。
【００１６】
また、経皮的に送達される作用物の量を増進するためには、最も外側の皮膚層に機械的に侵入させるか、またはそれを破壊し、それによって皮膚中への経路を作成するするよう
開発された多くの技術およびシステムも存在している。そのような物理的な浸透促進法は、サンドペーパー研磨、テープ脱皮および二股（ｂｉｆｒｕｃａｔｅｄ）針を含む。これらの技術が浸透性を増加させるけれども、薬物の吸収に及ぼすそれらの効果の大きさを予測するのは困難である。レーザー切除、その他の物理的な浸透増進法は比較的再現性のある効果を提供するかもしれないが、それは現在は扱いにくく、かつ高価である。
【００１７】
スカリファイアー（ｓｃａｒｉｆｉｅｒ（乱切器））として既知である初期の予防接種デバイスは、一般に、適用領域の皮膚に適用され、そしてその領域を引っ掻くか、または小さい切り込みを作る複数の尖叉または針を含む。ワクチンは、皮膚に局所的に適用される（特許文献１に開示されるように）か、またはスカリファイアー尖叉に適用された濡れた液として適用される（特許文献２，３および４に開示されるように）。
【００１８】
しかしながら、ワクチンのような活性作用物を送達するためにスカリファイアーを使用することの深刻な欠点は、経皮的な作用物の流動と得られる送達された用量を決定するのが困難なことである。また、穿刺をそらしたり抵抗する皮膚の弾力性で、変形し、かつ跳ね返る性質によって、ごく小さい穿刺エレメントは、しばしば皮膚に一様に侵入せず、そして／または皮膚への侵入において作用物の液状皮膜が拭い去られる。
【００１９】
その上、皮膚の自己回復処理により、皮膚に作られた穿刺孔または間隙は、角質層から穿刺エレメントの除去後はに閉ざす傾向にある。したがって、皮膚の弾力性が、皮膚中へのこれらのエレメントの侵入に際してごく小さい穿刺エレメントに適用された活性作用物の液状皮膜を除去するように作用する。さらにまた、穿刺エレメントによって形成された極小間隙は、デバイスの除去後に急速に回復し、その結果、穿刺エレメントによって作成された通路をとおして液状の作用物溶液の通過を制約し、次にそのようなデバイスの経皮的流動を制約する。
【００２０】
経皮的な作用物送達を増進するために、極小穿刺エレメントを用いる他のシステムおよび装置は、特許文献５、特許文献６、特許文献７、特許文献８、特許文献９、ならびに特許文献１０、特許文献１１、特許文献１２、特許文献１３、特許文献１４、特許文献１５、特許文献１６、特許文献１７、特許文献１８、特許文献１９、特許文献２０、特許文献２１、特許文献２２および特許文献２３に開示されており、これらのすべては、完全に引用によって本明細書に組み入れられている。
【００２１】
これらの先行技術システムは、皮膚の最外層（すなわち、角質層）を穿刺するように、種々の形式およびサイズの穿刺エレメントを用いる。これらの引用文献に開示されている穿刺エレメント、または小突起は、一般に、薄い、平らな部分、例えばパッドもしくはシートから垂直に伸びている。一般に、複数の小突起が、列状に配列されて経皮送達パッチを提供する。これらの若干のデバイスの穿刺エレメントは、顕著に小さく、あるものはわずか約２５〜４００ミクロンの小突起の長さとわずか約５〜５０ミクロンの小突起の厚さを有する。これらの極小の穿刺／切り込みエレメントは、対応して、角質層中にそこを通して経皮的に作用物を送達するための小さい微小間隙／微小切り込みを作成する。
【００２２】
したがって、小突起アレイのパッチ技術は、皮膚をとおして経皮的に送達することができる作用物の種類の数を増加するように開発されつつある。適用に際して、小突起は、皮膚（角質層）の移送バリヤーをとおす表面の通路（ｐａｔｈｗａｙ）を作成して、親水性で巨大分子の送達を容易にする。小突起アレイを介して皮内に抗原性作用物（例えば、ワクチン抗原）を送達する場合、皮膚反応は、一次免疫後に最小であることが見い出された。それにもかかわらず、ブースター投与後の局部的発赤および浮腫を含む皮膚反応を最小にする必要性が残されている。
【００２３】
したがって、本発明の目的は、小突起を用いて抗原性作用物を経皮的に送達することによって哺乳動物を予防接種する方法を提供することである。
【００２４】
本発明のさらなる目的は、複数回の投与により抗原性作用物を経皮的に送達することである。
【００２５】
本発明のなおその他の目的は、経皮的に送達される予防接種に対する皮膚反応を最小にすることである。
【特許文献１】米国特許第５，４８７，７２６号
【特許文献２】米国特許第４，４５３，９２６号
【特許文献３】米国特許第４，１０９，６５５号
【特許文献４】米国特許第３，１３６，３１４号
【特許文献５】米国特許第５，８７９，３２６号
【特許文献６】米国特許第３，８１４，０９７号
【特許文献７】米国特許第５，２５０，０２３号
【特許文献８】米国特許第３，９６４，４８２号
【特許文献９】米国特許再出願第２５，６３７号
【特許文献１０】ＷＯ９６／３７１５５
【特許文献１１】ＷＯ９６／３７２５６
【特許文献１２】ＷＯ９６／１７６４８
【特許文献１３】ＷＯ９７／０３７１８
【特許文献１４】ＷＯ９８／１１９３７
【特許文献１５】ＷＯ９８／００１９３
【特許文献１６】ＷＯ９７／４８４４０
【特許文献１７】ＷＯ９７／４８４４１
【特許文献１８】ＷＯ９７／４８４４２
【特許文献１９】ＷＯ９８／００１９３
【特許文献２０】ＷＯ９９／６４５８０
【特許文献２１】ＷＯ９８／２８０３７
【特許文献２２】ＷＯ９８／２９２９８
【特許文献２３】ＷＯ９８／２９３６５
【非特許文献１】ＬｅＣｌｅｒｃ，ｅｔ．，“Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ａ  Ｆｏｒｅｉｇｎ  Ｅｐｉｔｏｐｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ａｔ  ｔｈｅ  Ｓｕｒｆａｃｅ  ｏｆ  Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  Ｂｃｔｅｒｉａ：Ｉｍｐａｃｔａｎｃｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｒｏｕｔｅ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ，”Ｖａｃｃｉｎｅ，ｖｏｌ．７，ｐｐ．２４２−２４８（１９８９）
【非特許文献２】Ｐａｒｅｎｔ  ｄｕ  Ｃｈａｔｅｌｅｔ，ｅｔ  ａｌ．，Ｖａｃｃｉｎｅ，ｖｏｌ．１５，ｐｐ．４４９−４５８（１９９７）
【非特許文献３】Ｔａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．３８８，ｐｐ．７２９−７３０（１９９７）
【非特許文献４】Ｆａｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１７，ｐｐ．８７０−８７２（１９９９）
【非特許文献５】Ｂｏｓ，Ｊ．Ｄ．，ｅｄ．，Ｓｋｉｎ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍ（ＳＩＳ），Ｃｕｔａｎｅｏｕｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｍａｔｏｌｏｇｙ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，ｐｐ．４３−１４６（２ｎｄＥｄ．，１９９７）
【非特許文献６】Ｆｉｃｈｔｅｌｉｕｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ａｒｃｈ．Ａｌｌｅｒｇｙ，ｖｏｌ３７，ｐｐ．６０７−６２０（１９７０）
【非特許文献７】Ｓａｕｄｅｒ，Ｊ．，Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ，ｖｏｌ．９５，ｐｐ．１０５−１０７（１９９０）
【非特許文献８】Ｇｌｅｎｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．３９１，ｐ．８５１（１９９８）
【非特許文献９】Ｔａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．３８８，ｐｐ．７２９−７３０（１９９７）
【非特許文献１０】Ｆａｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｇｙ，ｖｏｌ．１７，ｐｐ．８７０−８７２（１９９９）
【発明の開示】
【００２６】
上記目的ならびに以下に記述され、明らかになるであろうそれらにしたがって、本発明による抗原性作用物、例えばワクチンを経皮的に送達するための送達メンバー（ｍｅｍｂｅｒ）または免疫化パッチは、小突起アレイおよび少なくとも１種の抗原性作用物を受け入れるように適合された容器を含む。小突起アレイは、皮膚の最外層（すなわち、角質層）をとおして切り込み、皮膚の下側の表皮および／または真皮中に侵入するように適合される複数の皮膚に穿刺する小突起を含有する。好ましくは、小突起は、毛細血管床に達し、かつ有意な出血を惹起するほど深く穿刺しない。
【００２７】
本発明の１つの実施態様では、送達メンバーは、少なくとも約１０個の小突起／ｃｍ２、より好ましくは、少なくとも約２００〜２０００個の小突起／ｃｍ２の範囲における小突起密度を有する。他の実施態様では、送達メンバーは単一の小突起を含有する。
【００２８】
１つの実施態様では、送達メンバーは、ステンレススチール、チタン、ニッケル・チタン合金または類似する生体適合性材料から構築される。
【００２９】
別の実施態様では、送達メンバーは、非伝導性材料、例えばポリマーから構築される。あるいはまた、送達メンバーは、非伝導性材料、例えばＰａｒｙｌｅｎｅ（Ｒ）によりコーティングされてもよい。
【００３０】
本発明の１つの実施態様によれば、宿主または哺乳動物に抗原性作用物を送達する（すなわち、予防接種）方法は、少なくとも２種の経皮送達メンバーを有する送達システムであって、各経皮送達メンバーが、角質層に穿刺するように形造られた複数の小突起（またはそのアレイ）および抗原性作用物を受け入れるように適合された容器を有し、容器は哺乳動物に抗原性作用物を伝達する関係に置かれ、誘導量の抗原性作用物を第１の経皮送達メンバーにより送達し、そして少なくとも約７日後にブースター量の抗原性作用物を第２の経皮送達メンバーにより送達し、ブースター量が誘導量の約５０重量％までである、送達システムを提供することを含む。
【００３１】
本発明の少なくとも１つの実施態様では、容器は、小突起とは離れているがそれに伝達する位置に置かれる送達メンバーの領域を含有する。他の実施態様では、容器は、送達メンバー上、好ましくは、小突起上に処置される生体適合性コーティングを含有する。なお他の実施態様では、容器は、本システムが、さらに、固形媒質と協同するよう適合される水和媒質を含む固形媒質を含有する。
【００３２】
本発明によれば、比較的大用量の抗原性作用物が、第１の送達メンバーを介して最初の適用段階において皮内に送達され、その後、１回以上の比較的小用量の抗原性作用物が１回以上の続いての適用段階において第２の送達メンバーを介して皮内に送達される。典型的には、続いての適用段階で送達される抗原性作用物の量は、第１の適用段階で送達された量の約５０重量％未満である。
【００３３】
本発明の１つの実施態様によれば、実質的に同じサイズと構造の小突起アレイを有する２種の送達メンバーを含んでなる送達システムは、２段階法において利用される。第１の
用量投与では、小突起アレイは、１回以上の続いての用量投与における接触時間に比較してより長い時間、哺乳動物との皮膚穿刺接触において放置される。この方式では、第１の小突起アレイは、続いての投与よりも大用量の抗原性作用物を送達する。
【００３４】
好ましくは、第１の用量の抗原性作用物を送達する場合、小突起は、宿主もしくは哺乳動物（例えば、ヒトの患者）の皮膚に、少なくとも約０．５時間、より好ましくは、少なくとも約１時間、なおより好ましくは、１〜２４時間の間、皮膚穿刺関係において維持される。続いての１回以上の用量の抗原性作用物を送達する場合、小突起は、好ましくは、１時間未満、より好ましくは、０．２５時間未満の間、皮膚と皮膚穿刺関係において維持される。
【００３５】
本発明の第２の実施態様によれば、患者に適用される第１の小突起アレイは、続いて適用される小突起アレイに比較して、より多数の小突起、より効果的な皮膚接触面積および／または容器中に、より高濃度の抗原性作用物を有する。この方法では、第１に適用される小突起アレイは、続いて適用される小突起アレイよりも比較的高用量の抗原性作用物を送達する。
【００３６】
好ましくは、第１の送達メンバーの適用と第２の送達メンバーの適用との間の時間は、少なくとも７日、より好ましくは、少なくとも１４日、なおより好ましくは、少なくとも約２１日である。しかしながら、最初の適用と続いてのブースター適用との間の時間が、送達される特定の抗原性作用物ならびに患者の年齢（例えば、子供もしくは成人）によって大いに変わり得ることを、当業者は評価することができる。
【００３７】
さらにまた、第１の適用と１回以上の続いてのブースター適用における抗原性作用物の相対的な量もまた、特定の抗原性作用物およびその推奨される用量、ならびに患者の年齢に大きく依存するであろう。
【００３８】
本発明によれば、抗原性作用物は、タンパク質に基づくワクチン、多糖に基づくワクチンおよび核酸に基づくワクチンを含むワクチン、ウイルスおよび細菌を含んでもよい。
【００３９】
抗原性作用物を含有する本発明の実行において有用な市販のワクチンは、限定されるものではないが、フルワクチン、ライム病ワクチン、狂犬病ワクチン、麻疹ワクチン、おたふくかぜワクチン、水痘ワクチン、痘瘡ワクチン、肝炎ワクチン、百日咳ワクチンおよびジフテリアワクチンを含む。
【００４０】
他の適当な抗原性作用物は、限定されるものではないが、タンパク質、多糖複合体、オリゴ糖およびリポタンパク質を含む。これらのサブユニットワクチンは、ボルデテラ・ペルタッシス（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）（組み換えＰＴ  ａｃｃｉｎｃｅ−無細胞）、クロストリジウム・テタニ（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ）（精製、組み換え体）、コリネバクテリウム・ジフテリエ（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）（精製、組み換え体）、サイトメガロウイルス（糖タンパク質サブユニット）、Ａ群連鎖球菌（ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）（糖タンパク質サブユニット、破傷風トキソイドとの複合糖質Ａ群多糖、トキシング（ｔｏｘｉｎｇ）サブユニット担体に結合したＭタンパク質／ペプチド、Ｍタンパク質、多価タイプ−特異エピトープ、システインプロテアーゼ、Ｃ５ａペプチダーゼ）、Ｂ型肝炎ウイルス（組み換えＰｒｅＳ１，Ｐｒｅ−Ｓ２，Ｓ，組み換えコアタンパク質）、Ｃ型肝炎ウイルス（組み換え体−表面タンパク質およびエピトープを発現した）、ヒトパピローマウイルス（キャプシドタンパク質、ＴＡ−ＧＮ組み換えタンパク質Ｌ２およびＥ７［ＨＰＶ−６由来］、ＨＰＶ−１１由来ＭＥＤＩ−５０１組み換えＶＬＰＬ１、４価組み換えＢＬＰＬ１［ＨＰＶ−６由来］、ＨＰＶ−１１、ＨＰＶ−１６およびＨＰＶ−１８、ＬＡＭＰ−Ｅ７［ＨＰＶ
−１６由来］）、レジオネラ・ニューモフィラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）（精製細菌表面タンパク質）、ナイセリア・メニンギチデス（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ）（破傷風トキソイドとの複合糖質）、シュードモナス・エルギノサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）（合成ペプチド）、風疹ウイルス（合成ペプチド）、肺炎双球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）（髄膜炎菌Ｂ  ＯＭＰと複合した複合糖質［１，４，５，６Ｂ，９Ｎ，１４，１８Ｃ，１９Ｖ，２３Ｆ］、ＣＲＭ１９７と複合した複合糖質［４，６Ｂ，９Ｖ，１４，１８Ｃ，１９Ｆ，２３Ｆ］、ＣＲＭ１９７０と複合した複合糖質［１，４，５，６Ｂ，９Ｖ，１４，１８Ｃ，１９Ｆ，２３Ｆ］）、トレポネマ・パリダム（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐａｌｌｉｄｕｍ）（表面リポタンパク質）、水痘帯状疱疹（Ｖａｒｉｃｅｌｌａ  ｚｏｓｔｅｒ）ウイルス（サブユニット、糖タンパク質）およびビブリオ・コレラエ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ）（複合体リポ多糖）を含む。
核酸を含んでなるワクチンは、限定されるものではないが、一本鎖および二本鎖核酸、例えば、スーパーコイルプラスミドＤＮＡ；線状プラスミドＤＮＡ；コスミド；細菌人工染色体（ＢＡＣ）；酵母人工染色体（ＹＡＣ）；哺乳動物人工染色体；およびＲＮＡ分子、例えば、ｍＲＮＡを含む。核酸のサイズは数千キロベースまでであってもよい。さらに、本発明のある実施態様では、核酸はタンパク質性作用物と結合されていても、または１種以上の化学的改変体、例えばホスホロチオン酸（ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏａｔｅ）部分を含んでもよい。コードする核酸の配列は、免疫応答が望まれる抗原の配列を含有する。さらに、ＤＮＡの場合には、プロモーターおよびポリアデニル化配列もまたワクチン構築物中に組み入れられる。コードできる抗原は、感染性疾患、病原体のすべての抗原成分、ならびにがん抗原を含む。かくして、核酸は、例えば感染性疾患、がん、アレルギー、自己免疫および炎症性疾患の分野における応用を見い出す。
【００４１】
ワクチン抗原とともにワクチンを含有してもよい適当な免疫応答増強アジュバントは、リン酸アルミニウムゲル；水酸化アルミニウム；藻類グルカン：β−グルカン；コレラ毒素Ｂサブユニット；ＣＲＬ１００５：ｘ＝８とｙ＝２０５の平均値をもつＡＢＡブロックポリマー；γ−インシュリン；直鎖状（非分枝）β−Ｄ（２−＞１）ポリフルクトフラノキシル−α−Ｄ−グルコース；ゲルブアジュバント；Ｎ−アセチルグルコサミン−（β−１−４）−Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−グルタミン（ＧＭＤＰ）、ジメチルジオクタデシルアンモニウムクロリド（ＤＤＡ）、亜鉛Ｌ−プロリン塩錯体（Ｚｎ−Ｐｒｏ−８）；イミキモド（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン；ＩｍｍＴｈｅｒＴＭ：Ｎ−アセチルグルコアミニル−Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−ｉｓｏＧｌｕ−Ｌ−Ａｌａ−グリセロールジパルミテート；ＭＴＰ−ＰＥリポソーム：Ｃ５９Ｈ１０８Ｎ６Ｏ１９ＰＮａ−３Ｈ２Ｏ（ＭＴＰ）；ムラメチド（Ｍｕｒａｍｅｔｉｄｅ）：Ｎａｃ−Ｍｕｒ−Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−Ｇｌｎ−ＯＣＨ３；Ｐｌｅｕｒａｎ：β−グルカン；ＱＳ−２１；Ｓ−２８４６３：４−アミノ−ａ，ａ−ジメチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−エタノール；ｓｃｌａｖｏペプチド：ＶＱＧＥＥＳＮＤＫ・ＨＣｌ（ＩＬ−１β  １６３−１７１ペプチド）；およびスレオニル−ＭＤＰ（ＴｅｒｍｕｒｔｉｄｅＴＭ）：Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−スレオニル−Ｄ−イソグルタミン、およびインターロイキン１８、ＩＬ−２，ＩＬ−１２，ＩＬ−１５を含む。アジュバントはまたＤＮＡオリゴヌクレオチド、例えば、ＣｐＧ含有オリゴヌクレオチドを含む。さらに、ＩＬ−１８、ＩＬ−２，ＩＬ−１２，ＩＬ−１５、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、γ−インターフェロンのような免疫調節リンホカイン、ならびにＮＦκＢ調節伝達タンパク質をコードしている核酸配列が使用されてもよい。
【００４２】
全ウイルスまたは全細菌は、限定されるものではないが、弱化ウイルスもしくは死滅ウイルス、例えば、サイトメガロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ヒトパピローマウイルス、風疹ウイルスおよび水痘帯状疱疹ウイルス、弱化もしくは死滅細菌、例えば、ボルデテラ・ペルタッシス、クロストリジウム・テタニ、コリネバクテリウム・
ジフテリエ、Ａ群連鎖球菌、レジオネラ・ニューモフィラ、ナイセリア・メニンギチデス、シュードモナス・エルギノサ、肺炎双球菌、トレポネマ・パリダム、およびビブリオ・コレラエ、およびそれらの混合物を含む。
【００４３】
本発明の若干の実施態様では、送達システムはさらにヒドロゲルを含む。容器が小突起と離れて置かれる前記実施態様において、抗原性作用物は、好ましくは、ヒドロゲルにおいて製剤化される。その他の実施態様では、ヒドロゲルは抗原性作用物を含有せず、したがって、水和媒質として機能する。
【００４４】
ヒドロゲルは、好ましくは、巨大分子ポリマーネットワークを有する水に基づくヒドロゲルを含む。本発明の好適な実施態様では、ポリマーネットワークは、限定されるものではないが、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、メチルセルロース（ＭＣ）、ヒドロキシエチルメチルセルロース（ＨＥＭＣ）、エチルヒドロキシエチルセルロース（ＥＨＥＣ）、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（ｎ−ビニルピロリドン）およびプルロニックを含む。
【００４５】
ヒドロゲルおよびその調合物は、好ましくは、双性イオン性、両性イオン性、陽イオン性、陰イオン性または非イオン性であってもよい１種の界面活性剤を含む。適当な界面活性剤は、限定されるものではないが、ナトリウムラウロアンホアセテート、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、塩化セチルピリジニウム（ＣＰＣ）、塩化ドデシルトリメチルアンモニウム（ＴＭＡＣ）、塩化ベンズアルコニウム、ポリソルベート、例えばツイーン２０およびツイーン８０、他のソルビタン誘導体、例えばラウリン酸ソルビタン、およびアルコキシル化アルコール、例えばラウレス−４を含む。
【００４６】
本発明のさらなる実施態様では、ヒドロゲル調合物は、両親媒性を有するポリマー材料もしくはポリマーを含み、これらは、限定されるものではないが、セルロース誘導体、例えばヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、メチルセルロース（ＭＣ）、ヒドロキシエチルメチルセルロース（ＨＥＭＣ）もしくはエチルヒドロキシエチルセルロース（ＥＨＥＣ）、ならびにプルロニックを含む。
【００４７】
本発明のその他の実施態様では、ヒドロゲル調合物は、少なくとも１種の通路（ｐａｔｈｗａｙ）の開存性（ｐａｔｅｎｃｙ）モジュレーターを含有し、これらは、限定されるものではないが、浸透剤（例えば塩化ナトリウム）、双性イオン化合物（例えばアミノ酸）、および抗炎症剤、例えば、ベタメタソン２１−リン酸二ナトリウム塩、トリアムシノロンアセトニド２１−リン酸二ナトリウム、ヒドロコルタメート塩酸塩、ヒドロコーチゾン２１−リン酸二ナトリウム塩、メチルプレドニソロン２１−リン酸二ナトリウム塩、メチルプレドニソロン２１−コハク酸ナトリウム塩、パラメタソンリン酸二ナトリウム塩およびプレドニソロン２１−コハク酸ナトリウム塩、および抗凝固剤、例えばクエン酸、クエン酸塩（例えばクエン酸ナトリウム）、デキストラン硫酸ナトリウム、およびＥＤＴＡを含有してもよい。
【００４８】
本発明のなおその他の実施態様では、ヒドロゲル調合物は、少なくとも１種の血管収縮薬を含有し、これらは、限定されるものではないが、エピネフリン、ナファゾリン、テトラヒドロゾリン、インダナゾリン、メチゾリン、トラマゾリン、チマゾリン、オキシメタゾリン、キシロメタゾリン、アミデフリン、カファミノール、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、エピネフリン、フェリプレッシン、インダナゾリン、メチゾリン、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、オクトドリン、オルニプレッシン、オキシメタゾ
リン、フェニレフリン、フェニルエタノールアミン、フェニルプロパノールアミン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシンおよびキシロメタゾリン、およびそれらの混合物を含有してもよい。
【００４９】
先に指摘したように、本発明の若干の実施態様では、容器は、送達システムの少なくとも１種の小突起メンバー上に処置された固形コーティングを含有する。固形コーティングを作成するために小突起メンバーに適用されたコーティング調合物は、生体適合性の担体中に溶解されても、または担体中に懸濁されてもよい、そこに含有される少なくとも１種の抗原性作用物、好ましくは、ワクチンを有する水性および非水性調合物を含有してもよい。
【００５０】
本発明の１つの実施態様では、コーティング調合物は可溶化剤／錯化剤を含有し、これらは、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、グルコシル−α−シクロデキストリン、マルトシル−α−シクロデキストリン、グルコシル−β−シクロデキストリン、マルトシル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、メチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−α−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、およびスルホブチルエーテル−γ−シクロデキストリンを含んでもよい。もっとも好適な可溶化剤／錯化剤は、β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンおよびスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンである。
【００５１】
本発明の１つの実施態様では、コーティング調合物は少なくとも１種の界面活性剤を含有し、これらは、双性イオン性、両性イオン性、陽イオン性、陰イオン性または非イオン性であってもよい。適当な界面活性剤の例は、ナトリウムラウロアンホアセテート、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、塩化セチルピリジニウム（ＣＰＣ）、塩化ドデシルトリメチルアンモニウム（ＴＭＡＣ）、塩化ベンズアルコニウム、ポリソルベート、例えばツイーン２０およびツイーン８０、他のソルビタン誘導体、例えばラウリン酸ソルビタン、およびアルコキシル化アルコール、例えばラウレス−４を含む。
【００５２】
本発明の１つの実施態様では、界面活性剤の濃度は、コーティング調合物の約０．００１〜２ｗｔ．％の範囲である。
【００５３】
本発明のさらなる実施態様では、コーティング調合物は、両親媒性を有する少なくとも１種のポリマー材料もしくはポリマーを含み、これらは、限定されるものではないが、セルロース誘導体、例えばヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、メチルセルロース（ＭＣ）、ヒドロキシエチルメチルセルロース（ＨＥＭＣ）もしくはエチルヒドロキシエチルセルロース（ＥＨＥＣ）、ならびにプルロニックを含んでもよい。
【００５４】
本発明の１つの実施態様では、両親媒性を呈するポリマーの濃度は、好ましくは、コーティング調合物の約０．０１〜２０ｗｔ．％の範囲である。
【００５５】
その他の実施態様では、コーティング調合物は、次の群：ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（ｎ−ビニルピロリドン）、ポリエチレングリコールおよびそれらの混合物、および類似のポリマー、から選ばれる親水性ポリマーを含む。
【００５６】
本発明の好適な実施態様では、コーティング調合物中の親水性ポリマーの濃度は、約０．０１〜２０ｗｔ．％の範囲である。
【００５７】
本発明のその他の実施態様では、コーティング調合物は生体適合性担体を含有し、これらは、限定されるものではないが、ヒトアルブミン、生物工学的に作成されたヒトアルブミン、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸、ポリヒスチジン、ペントサンポリサルフェート、ポリアミノ酸、スクロース、トレハロース、メレジトース、ラフィノースおよびスタキオースを含んでもよい。
【００５８】
好ましくは、コーティング調合物中の生体適合性担体の濃度は、約２〜７０ｗｔ．％の範囲、より好ましくはコーティング調合物の約５〜５０ｗｔ．％範囲である。
【００５９】
さらなる実施態様では、コーティング調合物は安定化剤を含有し、これらは限定されるものではないが、非還元糖、多糖化、還元もしくはＤＮアーゼ阻害剤を含んでもよい。
【００６０】
その他の実施態様では、コーティング調合物は血管収縮薬を含有し、これらは、限定されるものではないが、アミデフリン、カファミノール、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、エピネフリン、フェリプレッシン、インダナゾリン、メチゾリン、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、オクトドリン、オルニプレッシン、オキシメタゾリン、フェニレフリン、フェニルエタノールアミン、フェニルプロパノールアミン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシン、キシロメタゾリン、およびそれらの混合物を含んでもよい。もっとも好適な血管収縮薬は、エピネフリン、ナファゾリン、テトラヒドロゾリン、インダナゾリン、メチゾリン、トラマゾリン、チマゾリン、オキシメタゾリンおよびキシロメタゾリンである。
【００６１】
使用される場合、血管収縮薬の濃度は、好ましくは、コーティングの約０．１ｗｔ．％〜１０ｗｔ．％範囲である。
【００６２】
本発明のなおその他の実施態様では、コーティング調合物は、少なくとも１種の「通路の開存性モジュレーター」を含有し、これらは、限定されるものではないが、浸透剤（例えば塩化ナトリウム）、双性イオン化合物（例えばアミノ酸）、および抗炎症剤、例えば、ベタメタソン２１−リン酸二ナトリウム塩、トリアムシノロンアセトニド２１−リン酸二ナトリウム、ヒドロコルタメート塩酸塩、ヒドロコーチゾン２１−リン酸二ナトリウム塩、メチルプレドニソロン２１−リン酸二ナトリウム塩、メチルプレドニソロン２１−コハク酸ナトリウム塩、パラメタソンリン酸二ナトリウム塩およびプレドニソロン２１−コハク酸ナトリウム塩、および抗凝固剤、例えばクエン酸、クエン酸塩（例えばクエン酸ナトリウム）、デキストラン硫酸ナトリウム、アスピリンおよびＥＤＴＡを含有してもよい。
【００６３】
本発明のその他の実施態様では、コーティング調合物は少なくとも１種の抗酸化剤を含有し、これらは、金属イオン封鎖剤、例えばクエン酸ナトリウム、クエン酸、ＥＤＴＡ（エチレン−ジニトリロ−四酢酸）または遊離基捕捉剤、例えばアスコルビン酸、メチオニン、アスコルビン酸ナトリウム、および類するものであってもよい。現在、好適な抗酸化剤はＥＤＴＡおよびメチオニンを含む。
【００６４】
本発明のある実施態様では、コーティング調合物の粘度は低揮発度対イオンを添加することによって増進される。１つの実施態様では、作用物は調合物ｐＨにおいて正電荷を有し、そして粘度を増進する対イオンは、少なくとも２つの酸性ｐＫａを有する酸を含む。適当な酸は、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、酒石酸、アジピン酸、シトラコン酸、フ
マール酸、グルタル酸、イタコン酸、メグルトール、メサコン酸、コハク酸、シトラリンゴ酸（ｃｉｔｒａｍａｌｉｃ  ａｃｉｄ）、タルトロン酸、クエン酸、トリカルバリル酸、エチレンジアミン四酢酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、炭酸、硫酸およびリン酸を含む。
【００６５】
その他の好適な実施態様は、作用物は調合物ｐＨにおいて正電荷を有し、そして対イオンの少なくとも１種は少なくとも２つの酸性ｐＫａを有する酸である、対イオンの粘度増進混合物に対向される。他の対イオンは１つ以上のｐＫａを有する酸である。適当な酸の例は、塩化水素酸、臭化水素酸、、硝酸、硫酸、マレイン酸、リン酸、ベンゼンスルホン酸、メタンスルホン酸、クエン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、グルクロン酸、乳酸、リンゴ酸、ピルビン酸、酒石酸、タルトロン酸、フマール酸、酢酸、プロピオン酸、ペンタン酸，炭酸、マロン酸、アジピン酸、シトラコン酸、レブリン酸、グルタル酸、イタコン酸、メグルトール、メサコン酸、シトラリンゴ酸、クエン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、トリカルバリル酸およびエチレンジアミン四酢酸を含む。
【００６６】
一般に、本発明の特記される実施態様では、対イオンの量は、抗原性作用物の電荷を中和しなければならない。そのような実施態様では、対イオンもしくは対イオンの混合物は、調合物のｐＨにおいて作用物に存在する電荷を中和するのに必要な量で存在する。対イオン（遊離酸もしくは塩として）の過剰量が、ｐＨを調節し、かつ十分な緩衝能力を与えるために調合物に添加されてもよい。
【００６７】
その他の好適な実施態様は、作用物は正電荷を有し、そして対イオンは、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、塩化水素酸、グリコール酸および酢酸の群から選ばれる対イオンの粘度増進混合物である。好ましくは、対イオンは調合物に添加されて、約２０〜２００ｃｐの範囲の粘度を達成する。
【００６８】
好適な実施態様では、粘度増進対イオンは、低揮発度弱酸のような酸性対イオンである。低揮発度弱酸対イオンは、少なくとも１つの酸性ｐＫａおよび約５０℃以上の融点またはＰａｔｍにおいて約１７０℃以上の沸点を表す。そのような酸の例は、クエン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、グルクロン酸、乳酸、リンゴ酸、ピルビン酸、酒石酸、タルトロン酸およびフマール酸を含む。
【００６９】
その他の好適な実施態様では、対イオンは強酸である。強酸は少なくとも１つの約２未満のｐＫａを表すとして定義できる。そのような酸の例は、塩化水素酸、臭化水素酸、硝酸、スルホン酸、硫酸、マレイン酸、リン酸、ベンゼンスルホン酸およびメタンスルホン酸を含む。
【００７０】
その他の好適な実施態様は、対イオンの少なくとも１種が強酸であり、そして対イオンの少なくとも１種が低揮発度弱酸である、対イオンの混合物に対向される。
【００７１】
その他の好適な実施態様は、対イオンの少なくとも１種が強酸であり、そして対イオンの少なくとも１種が高い揮発度を有する弱酸である、対イオンの混合物に対向される。揮発性弱酸対イオンは、少なくとも１つの約２以上のｐＫａおよび約５０℃未満の融点またはＰａｔｍにおいて約１７０℃未満の沸点を表す。そのような酸の例は、酢酸、プロピオン酸、ペンタン酸およびそれに類する酸を含む。
【００７２】
好ましくは、酸性対イオンは、調合物のｐＨにおいて抗原性作用物に存在する正電荷を中和するのに必要な量で存在する。対イオン（遊離酸もしくは塩として）の過剰量が、ｐＨを調節し、かつ十分な緩衝能力を与えるために調合物に添加されてもよい。
【００７３】
本発明のなお他の実施態様では、具体的には、抗原性作用物が負電荷を有する場合、コーティング調合物はさらに低揮発度塩基性対イオンを含有する。
【００７４】
好適な実施態様では、コーティング調合物は低揮発度の弱塩基対イオンを含有する。低揮発度弱塩基は、少なくとも１つの塩基性ｐＫａおよび約５０℃以上の融点またはＰａｔｍにおいて約１７０℃以上の沸点を表す。そのような塩基の例は、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、メチルグルカミンおよびグルコサミンを含む。
【００７５】
その他の実施態様では、低揮発度対イオンは、少なくとも１つの酸性ｐＫａおよび少なくとも２つの塩基性ｐＫａを示す塩基性双性イオンを含有し、この場合、塩基性ｐＫａの数が酸性ｐＫａの数を超える。そのような化合物の例はヒスチジン、リジンおよびアルギニンを含む。
【００７６】
なお他の実施態様では、低揮発度対イオンは、少なくとも１つの約１２以上のｐＫａを表す強塩基を含有する。そのような塩基の例は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウムおよび水酸化マグネシウムを含む。
【００７７】
他の好適な実施態様は、強塩基および低揮発度をもつ弱塩基を含有する塩基性対イオンの混合物を含有する。あるいはまた、適当な対イオンは強塩基および高揮発度の弱塩基を含む。高揮発度塩基は、少なくとも１つの約１２未満の塩基性ｐＫａおよび約５０℃未満の融点またはＰａｔｍにおいて約１７０℃未満の沸点を表す。そのような塩基の例は、アンモニアおよびモルホリンを含む。
【００７８】
好ましくは、塩基性対イオンは、調合物のｐＨにおいて抗原性作用物に存在する負電荷を中和するのに必要な量で存在する。対イオン（遊離塩基もしくは塩として）の過剰量が、ｐＨを調節し、かつ十分な緩衝能力を与えるために調合物に添加されてもよい。
発明の詳細な記述
本発明を詳細に記述する前に、この発明が、もちろんそれ自体変わってもよい具体的に例示される材料、方法または構造に限定されないことを理解すべきである。かくして、本明細書に記述されるものと類似または等価の多くの材料および方法が本発明の実行において使用できるけれども、好適な材料および方法が本明細書で記述される。
【００７９】
また、本明細書で使用される技術は本発明の特定の実施態様のみを記述する目的のためにあり、限定されることを意図するものではない。
【００８０】
外に定義されなければ、本明細書で使用されるすべての技術および科学用語は、本発明が関係する当業者によって普通に理解されるものと同じ意味を有する。
【００８１】
さらに、本明細書に引用されるすべての出版物、特許および特許出願は、前出もしくは後出にかかわらず、完全に引用によってここに組み入れられている。
【００８２】
最後に、本明細書および添付される請求項に使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、内容が明らかに別に指示しない限り、複数指示物を含む。かくして、例えば、「抗原性作用物」に関しては２種以上のそのような作用物を含み；「小突起」に関しては２種以上のそのような小突起を含む、等々。
【００８３】
定義
用語「皮内の（ｉｎｔｒａｄｅｒｍａｌ）」、「皮内の（ｉｎｔｒａｃｕｔａｎｅｏｕｓ）」、「皮内に（ｉｎｔｒａｄｅｒｍａｌｌｙ））」、「皮内に（ｉｎｔｒａｃｕｔａ
ｎｅｏｕｓｌｙ）」、「経皮的（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ）」、「経皮的（ｔｒａｎｓｃｕｔａｎｅｏｕｓ）」、「経皮的に（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌｌｙ）」および「経皮的に（ｔｒａｎｓｃｕｔａｎｅｏｕｓｌｙ）」は、抗原性作用物が、皮膚中に、そして／または皮膚をとおして表皮層および／または皮膚の下層の真皮層中に送達されることを意味すると本明細書では互換性をもって使用される。
【００８４】
本明細書で使用されるような用語「経皮的流動（フルｘ）」は経皮的送達の速度を意味する。
【００８５】
用語「抗原性作用物」および「ワクチン」は、本明細書では互換性をもって使用され、そして免疫学的に活性な作用物もしくは作用物、例えば抗原を含有する物質もしくは混合物の組成物を指し、これは免疫学的に有効な量において投与された場合、有益な免疫応答を惹起することができる。かくして、用語「抗原性作用物」および「ワクチン」は、限定されるものではないが、タンパク質に基づくワクチン、多糖に基づくワクチン、核酸に基づくワクチン、ウイルスおよび細菌を含む。
【００８６】
本発明において使用できる適当な抗原性作用物は、限定されるものではないが、タンパク質、多糖複合体、オリゴ糖およびリポタンパク質の形態における抗原を含む。これらのサブユニットワクチンは、ボルデテラ・ペルタッシス（組み換えＰＴ  ａｃｃｉｎｃｅ−無細胞）、クロストリジウム・テタニ（精製、組み換え体）、コリネバクテリウム・ジフテリエ（精製、組み換え体）、サイトメガロウイルス（糖タンパク質サブユニット）、Ａ群連鎖球菌（ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）（糖タンパク質サブユニット、破傷風トキソイドとの複合糖質Ａ群多糖、トキシング（ｔｏｘｉｎｇ）サブユニット担体に結合したＭタンパク質／ペプチド、Ｍタンパク質、多価タイプ−特異エピトープ、システインプロテアーゼ、Ｃ５ａペプチダーゼ）、Ｂ型肝炎ウイルス（組み換えＰｒｅＳ１，Ｐｒｅ−Ｓ２，Ｓ，組み換えコアタンパク質）、Ｃ型肝炎ウイルス（組み換え体−表面タンパク質およびエピトープを発現した）、ヒトパピローマウイルス（キャプシドタンパク質、ＴＡ−ＧＮ組み換えタンパク質Ｌ２およびＥ７［ＨＰＶ−６由来］、ＨＰＶ−１１由来ＭＥＤＩ−５０１組み換えＶＬＰＬ１、４価組み換えＢＬＰＬ１［ＨＰＶ−６由来］、ＨＰＶ−１１、ＨＰＶ−１６およびＨＰＶ−１８、ＬＡＭＰ−Ｅ７［ＨＰＶ−１６由来］）、レジオネラ・ニューモフィラ（精製細菌表面タンパク質）、ナイセリア・メニンギチデス（破傷風トキソイドとの複合糖質）、シュードモナス・エルギノサ（合成ペプチド）、風疹ウイルス（合成ペプチド）、肺炎双球菌（髄膜炎菌Ｂ  ＯＭＰと複合した複合糖質［１，４，５，６Ｂ，９Ｎ，１４，１８Ｃ，１９Ｖ，２３Ｆ］、ＣＲＭ１９７と複合した複合糖質［４，６Ｂ，９Ｖ，１４，１８Ｃ，１９Ｆ，２３Ｆ］、ＣＲＭ１９７０と複合した複合糖質［１，４，５，６Ｂ，９Ｖ，１４，１８Ｃ，１９Ｆ，２３Ｆ］）、トレポネマ・パリダム（表面リポタンパク質）、水痘帯状疱疹ウイルス（サブユニット、糖タンパク質）およびビブリオ・コレラエ（複合体リポ多糖）を含む。
【００８７】
また、限定されるものではないが、フルワクチン、ライム病ワクチン、狂犬病ワクチン、麻疹ワクチン、おたふくかぜワクチン、水痘ワクチン、痘瘡ワクチン、肝炎ワクチン、百日咳ワクチンおよびジフテリアワクチンを含む、抗原性作用物を含有する多数の市販のワクチンが本発明により利用される。
【００８８】
本発明の方法にしたがって送達できる核酸を含んでなるワクチンは、限定されるものではないが、一本鎖および二本鎖核酸、例えば、スーパーコイルプラスミドＤＮＡ；線状プラスミドＤＮＡ；コスミド；細菌人工染色体（ＢＡＣ）；酵母人工染色体（ＹＡＣ）；哺乳動物人工染色体；およびＲＮＡ分子、例えば、ｍＲＮＡを含む。核酸のサイズは数千キロベースまでであってもよい。さらに、本発明のある実施態様では、核酸はタンパク質性作用物と結合されていても、または１種以上の化学的改変体、例えばホスホロチオン酸（
ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏａｔｅ）部分を含んでもよい。コードする核酸の配列は、免疫応答が望まれる抗原の配列を含有する。さらに、ＤＮＡの場合には、プロモーターおよびポリアデニル化配列もまたワクチン構築物中に組み入れられる。コードされていてもよい抗原は、感染性疾患、病原体のすべての抗原成分、ならびにがん抗原を含む。かくして、核酸は、例えば感染性疾患、がん、アレルギー、自己免疫および炎症性疾患の分野において応用を見い出す。
【００８９】
ワクチン抗原とともにワクチンを含有してもよい適当な免疫応答増強アジュバントは、リン酸アルミニウムゲル；水酸化アルミニウム；藻類グルカン：β−グルカン；コレラ毒素Ｂサブユニット；ＣＲＬ１００５：ｘ＝８とｙ＝２０５の平均値をもつＡＢＡブロックポリマー；γ−インシュリン；直鎖状（非分枝）β−Ｄ（２−＞１）ポリフルクトフラノキシル−α−Ｄ−グルコース；ゲルブアジュバント；Ｎ−アセチルグルコサミン−（β−１−４）−Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−グルタミン（ＧＭＤＰ）、ジメチルジオクタデシルアンモニウムクロリド（ＤＤＡ）、亜鉛Ｌ−プロリン塩錯体（Ｚｎ−Ｐｒｏ−８）；イミキモド（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン；ＩｍｍＴｈｅｒＴＭ：Ｎ−アセチルグルコアミニル−Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−ｉｓｏＧｌｕ−Ｌ−Ａｌａ−グリセロールジパルミテート；ＭＴＰ−ＰＥリポソーム：Ｃ５９Ｈ１０８Ｎ６Ｏ１９ＰＮａ−３Ｈ２Ｏ（ＭＴＰ）；ムラメチド：Ｎａｃ−Ｍｕｒ−Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−Ｇｌｎ−ＯＣＨ３；Ｐｌｅｕｒａｎ：β−グルカン；ＱＳ−２１；Ｓ−２８４６３：４−アミノ−ａ，ａ−ジメチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−エタノール；ｓｃｌａｖｏペプチド：ＶＱＧＥＥＳＮＤＫ・ＨＣｌ（ＩＬ−１β  １６３−１７１ペプチド）；およびスレオニル−ＭＤＰ（ＴｅｒｍｕｒｔｉｄｅＴＭ）：Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−スレオニル−Ｄ−イソグルタミン、およびインターロイキン１８、ＩＬ−２，ＩＬ−１２，ＩＬ−１５を含む。アジュバントはまたＤＮＡオリゴヌクレオチド、例えば、ＣｐＧ含有オリゴヌクレオチドを含む。さらに、ＩＬ−１８、ＩＬ−２，ＩＬ−１２，ＩＬ−１５、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、γ−インターフェロンのような免疫調節リンホカイン、ならびにＮＦκＢ調節伝達タンパク質をコードしている核酸配列が使用されてもよい。
【００９０】
全ウイルスまたは全細菌は、限定されるものではないが、弱化ウイルスもしくは死滅ウイルス、例えば、サイトメガロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ヒトパピローマウイルス、風疹ウイルスおよび水痘帯状疱疹ウイルス、弱化もしくは死滅細菌、例えば、ボルデテラ・ペルタッシス、クロストリジウム・テタニ、コリネバクテリウム・ジフテリエ、Ａ群連鎖球菌、レジオネラ・ニューモフィラ、ナイセリア・メニンギチデス、シュードモナス・エルギノサ、肺炎双球菌、トレポネマ・パリダム、およびビブリオ・コレラエ、およびそれらの混合物を含む。
【００９１】
特記されるワクチンは、遊離の塩基、酸、荷電もしくは無荷電の分子、分子複合体の成分または製薬学的に許容できる塩のような形態において存在してもよい。さらに、体ｐＨ、酵素などにおいて容易に加水分解される活性作用物の単純な誘導体（例えば、エーテル、エステル、アミドなど）が使用されてもよい。
【００９２】
１種以上の抗原性作用物が本発明の作用物源、容器および／またはコーティング中に組み入れられてもよく、そして用語「抗原性作用物」の使用は、２種以上のそのような作用物の使用を決して除外しないことを理解しなければならない。
【００９３】
本明細書で使用されるように、用語「生物学的に有効な量」または「生物学的に有効な割合」は、抗原性作用物が免疫学的に活性な作用物であり、そして所望の免疫学的結果、しばしば有益な結果を刺激もしくは開始するのに必要な免疫学的に活性な作用物の量または割合を指すことを意味する。本発明のヒドロゲル調合物およびコーティングにおいて使
用される免疫学的に活性な作用物の量は、所望の免疫学的結果を達成するのに要する活性作用物の量を送達するのに必要なその量である。実際に、これは、送達される特定の免疫学的に活性な作用物、送達部位、および皮膚中への抗原性作用物もしくはワクチンの送達のための溶解および放出速度論に依存して広く変わるであろう。
【００９４】
本明細書で使用されるように、用語「小突起」は、角質層をとおして生きている動物、特に哺乳動物、より具体的にはヒトの皮膚の下側の表皮、または表皮および真皮中に穿刺もしくは切り込むように適合された穿刺エレメントを指す。本発明の１つの実施態様では、小突起は、１０００ミクロン未満の突起部の長さを有する。さらなる実施態様では、小突起は、５００ミクロン未満、より好ましくは２５０ミクロン未満の突起部の長さを有する。小突起は、典型的には、約５〜５０ミクロンの幅と厚さを有する。また、小突起は、約７５〜５００ミクロンの幅を有してもよい。小突起は、種々の形式、例えば。ニードル、中空ニードル、ブレード、ピン、パンチおよびそれらの組み合わせ物において形成されてもよい。それ自体、用語「小突起」「ミクロプロトルージョン（ｍｉｃｒｏｐｒｏｔｒｕｓｉｏｎ」、「ミクロブレード」および「ミクロニードル」は、前後を通じて互換性をもって使用される。
【００９５】
本明細書で使用されるように、用語「送達メンバー」および「小突起メンバー」は、一般に、角質層を穿刺するように列に配列された複数の小突起を含んでなる小突起アレイを意味する。送達メンバーは、薄いシートから複数の小突起を刻み込んだり、型抜きし、そしてシートの平面から小突起を折り畳んだり、曲げることによって作成して、図１に示され、そしてＴｒａｕｔｍａｎらの米国特許第６，０８３，１９６号に記述されるような形態を形成してもよく、これは引用によって完全に本明細書に組み入れられている。また、小突起メンバーは他の既知の方法、例えば、米国特許第６，０５０，９８８号に開示されるように、各帯びの端に沿って小突起を有する１個以上の帯びを形成することによって作成されてもよく、これは引用によって完全に本明細書に組み入れられている。他の小突起アレイおよび同アレイを作成する方法は、Ｇｏｄｓｈａｌｌらの米国特許第５，８７９，３２６号およびＫａｍｅｎらの米国特許第５，９８３，１３６号に記述される。また、小突起アレイは、乾燥した薬物学的に活性な作用物の容器を保持する１本以上の中空の針を含んでなってもよい。
【００９６】
本発明は、実質的に、宿主に抗原性作用物を送達する（すなわち予防接種）ための慣用の方法に伴われる不利益および欠点を減少または除去する。本明細書で詳細に検討されるように、本発明は、抗原性作用物を皮内に送達するための独特な２段階の皮内予防接種を提供する。２段階の皮内予防接種法は、実質的に、皮内の抗原適用が行われる皮膚部位における局所的皮膚反応（発赤および浮腫）を減少させる。
【００９７】
各送達メンバーは、そこから伸びる複数の角質層に穿刺する小突起および送達されるべき抗原性作用物（例えば。ワクチン抗原）を含有する容器を有する小突起アレイを含む。容器は、皮膚部位への送達メンバーの適用後、穿刺する小突起によって角質層をとおして切り込まれた間隙に対して抗原性作用物を伝達する関係になるよう適合され、位置される。
【００９８】
少なくとも１つの実施態様では、容器は、米国特許出願第６０／５１４，４３３号および同第６０／５１４，３８７号に例示され、記述されるように、小突起とは離れているが、それと連携して配置される送達メンバーの別個の領域を含有する；この開示は、引用によって完全に本明細書に組み入れられている。
【００９９】
本発明の１つの実施態様では、容器は、小突起アレイの皮膚に接するかまたは皮膚と離れた側に重層された薄膜の形態における材料（例えば、ポリマーのゲル材料）を含有する
。このタイプの容器は、ＴｈｅｅｕｗｅｓらのＷＯ９８／２８０３７において開示されている；この開示は、引用によって完全に本明細書に組み入れられている。
【０１００】
本発明のさらなる実施態様では、容器は、送達メンバー上、好ましくは、少なくとも１個のその小突起上、より好ましくは各小突起の穿刺チップ上に処置される生体適合性コーティングを含有する。典型的には、小突起は、約４００ミクロン未満、より好ましくは約３００ミクロン未満の深さへの皮膚侵入を可能にする長さを有する。皮膚の角質層を穿刺する際に、容器中に含有された抗原性作用物が予防接種療法のために皮膚中に放出される。
【０１０１】
ここで図１を参照すれば、本発明による使用のための角質層に穿刺する小突起メンバー１０の１つの実施態様が示される。図１は複数の小突起１２を有するメンバー１０の一部分を示す。小突起１２は、開口部１６を有するシート１４から実質的に９０°角で伸びている。メンバー１０は、場合によっては、図３に示されるように、皮膚にシステム２０を接着するために接着剤２４を有する裏張り２２に付着されてもよい。
【０１０２】
図１、２および３に示される小突起メンバー１０の実施態様では、小突起１２は、好ましくは、薄い金属シート１４から複数の小突起１２を刻み込んだり、型抜きし、そしてシートの平面から小突起を曲げることによって作成される。ステンレススチールおよびチタンのような金属が好適である。金属小突起メンバーおよびそれを作成する方法はＴｒａｕｔｍａｎらの米国特許第６，０８３，１９６号；Ｚｕｃｋ、米国特許第６，０５０，９８８号；およびＤａｄｄｏｎａら，米国特許第６，０９１，９７５号に開示されている；これらの開示は引用によって完全に本明細書に組み入れられている。
【０１０３】
本発明により使用されてもよい他の小突起メンバーは、シリコンチップエッチング技術を用いてシリコンを刻み込むか、または刻み込まれた微小鋳型を用いてプラスティックを成形することによって形成される。シリコンおよびプラスティックの小突起メンバーは、Ｇｏｄｓｈａｌｌらの米国特許第５，８７９，３２６号に開示されている；これの開示は引用によって本明細書に組み入れられている。
【０１０４】
本発明によれば、小突起メンバー１０は、種々の金属、例えば、ステンレススチール、チタン、ニッケル・チタン合金または類似する生体適合性材料から製造されてもよい。好ましくは、小突起メンバー１０はチタンから製造される。
【０１０５】
本発明によれば、小突起メンバー１０は、また、非伝導性材料、例えばポリマーから構築されてもよい。あるいはまた、小突起メンバー１０は、非伝導性材料、例えばＰａｒｙｌｅｎｅによりコーティングされてもよい。
【０１０６】
本発明により使用されてもよい小突起メンバーは、限定されるものではないが、米国特許第６，０８３，１９６号、米国特許第６，０５０，９８８号および米国特許第６，０９１，９７５号に開示されているメンバーを含む；これらは引用によって完全に本明細書に組み入れられている。
【０１０７】
本発明により使用されてもよい他の小突起メンバーは、シリコンチップエッチング技術を用いてシリコンを刻み込むか、または刻み込まれた微小鋳型を用いてプラスティックを成形することによって形成されるメンバー、例えば、米国特許第５，８７９，３２６号に開示されているメンバーを含む；これは引用によって完全に本明細書に組み入れられている。
【０１０８】
本発明にしたがって送達されてもよい適当な抗原性作用物は、限定されるものではない
が、タンパク質に基づくワクチン、多糖に基づくワクチンおよび核酸に基づくワクチンを含むワクチン、ウイルスおよび細菌を含む。
【０１０９】
さらなる適当な抗原性作用物は、タンパク質、多糖複合体、オリゴ糖およびリポタンパク質の形態における抗原を含む。これらのサブユニットワクチンは、ボルデテラ・ペルタッシス（組み換えＰＴ  ａｃｃｉｎｃｅ−無細胞）、クロストリジウム・テタニ（精製、組み換え体）、コリネバクテリウム・ジフテリエ（精製、組み換え体）、サイトメガロウイルス（糖タンパク質サブユニット）、Ａ群連鎖球菌（糖タンパク質サブユニット、破傷風トキソイドとの複合糖質Ａ群多糖、トキシング（ｔｏｘｉｎｇ）サブユニット担体に結合したＭタンパク質／ペプチド、Ｍタンパク質、多価タイプ−特異エピトープ、システインプロテアーゼ、Ｃ５ａペプチダーゼ）、Ｂ型肝炎ウイルス（組み換えＰｒｅＳ１，Ｐｒｅ−Ｓ２，Ｓ，組み換えコアタンパク質）、Ｃ型肝炎ウイルス（組み換え体−表面タンパク質およびエピトープを発現した）、ヒトパピローマウイルス（キャプシドタンパク質、ＴＡ−ＧＮ組み換えタンパク質Ｌ２およびＥ７［ＨＰＶ−６由来］、ＨＰＶ−１１由来ＭＥＤＩ−５０１組み換えＶＬＰＬ１、４価組み換えＢＬＰＬ１［ＨＰＶ−６由来］、ＨＰＶ−１１、ＨＰＶ−１６およびＨＰＶ−１８、ＬＡＭＰ−Ｅ７［ＨＰＶ−１６由来］）、レジオネラ・ニューモフィラ（精製細菌表面タンパク質）、ナイセリア・メニンギチデス（破傷風トキソイドとの複合糖質）、シュードモナス・エルギノサ（合成ペプチド）、風疹ウイルス（合成ペプチド）、肺炎双球菌（髄膜炎菌Ｂ  ＯＭＰと複合した複合糖質［１，４，５，６Ｂ，９Ｎ，１４，１８Ｃ，１９Ｖ，２３Ｆ］、ＣＲＭ１９７と複合した複合糖質［４，６Ｂ，９Ｖ，１４，１８Ｃ，１９Ｆ，２３Ｆ］、ＣＲＭ１９７０と複合した複合糖質［１，４，５，６Ｂ，９Ｖ，１４，１８Ｃ，１９Ｆ，２３Ｆ］）、トレポネマ・パリダム（表面リポタンパク質）、水痘帯状疱疹ウイルス（サブユニット、糖タンパク質）およびビブリオ・コレラエ（複合体リポ多糖）を含む。
【０１１０】
抗原性作用物を含有するさらなる市販のワクチンは、限定されるものではないが、フルワクチン、ライム病ワクチン、狂犬病ワクチン、麻疹ワクチン、おたふくかぜワクチン、水痘ワクチン、痘瘡ワクチン、肝炎ワクチン、百日咳ワクチンおよびジフテリアワクチンを含む。
【０１１１】
核酸を含んでなるワクチンは、限定されるものではないが、一本鎖および二本鎖核酸、例えば、スーパーコイルプラスミドＤＮＡ；線状プラスミドＤＮＡ；コスミド；細菌人工染色体（ＢＡＣ）；酵母人工染色体（ＹＡＣ）；哺乳動物人工染色体；およびＲＮＡ分子、例えば、ｍＲＮＡを含む。核酸のサイズは数千キロベースまでであってもよい。さらに、本発明のある実施態様では、核酸はタンパク質性作用物と結合されていても、または１種以上の化学的改変体、例えばホスホロチオン酸（ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏａｔｅ）部分を含んでもよい。コードする核酸の配列は、免疫応答が望まれる抗原の配列を含有する。さらに、ＤＮＡの場合には、プロモーターおよびポリアデニル化配列もまたワクチン構築物中に組み入れられる。コードされていてもよい抗原は、感染性疾患、病原体のすべての抗原成分、ならびにがん抗原を含む。かくして、核酸は、例えば感染性疾患、がん、アレルギー、自己免疫および炎症性疾患の分野において応用を見い出す。
【０１１２】
ワクチン抗原とともにワクチンを含有してもよい適当な免疫応答増強アジュバントは、リン酸アルミニウムゲル；水酸化アルミニウム；藻類グルカン：β−グルカン；コレラ毒素Ｂサブユニット；ＣＲＬ１００５：ｘ＝８とｙ＝２０５の平均値をもつＡＢＡブロックポリマー；γ−インシュリン；直鎖状（非分枝）β−Ｄ（２−＞１）ポリフルクトフラノキシル−α−Ｄ−グルコース；ゲルブアジュバント；Ｎ−アセチルグルコサミン−（β−１−４）−Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−グルタミン（ＧＭＤＰ）、ジメチルジオクタデシルアンモニウムクロリド（ＤＤＡ）、亜鉛Ｌ−プロリン塩錯体（Ｚｎ−Ｐｒｏ−８）；イミキモド（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］
キノリン−４−アミン；ＩｍｍＴｈｅｒＴＭ：Ｎ−アセチルグルコアミニル−Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−ｉｓｏＧｌｕ−Ｌ−Ａｌａ−グリセロールジパルミテート；ＭＴＰ−ＰＥリポソーム：Ｃ５９Ｈ１０８Ｎ６Ｏ１９ＰＮａ−３Ｈ２Ｏ（ＭＴＰ）；ムラメチド（Ｍｕｒａｍｅｔｉｄｅ）：Ｎａｃ−Ｍｕｒ−Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−Ｇｌｎ−ＯＣＨ３；Ｐｌｅｕｒａｎ：β−グルカン；ＱＳ−２１；Ｓ−２８４６３：４−アミノ−ａ，ａ−ジメチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−エタノール；ｓｃｌａｖｏペプチド：ＶＱＧＥＥＳＮＤＫ・ＨＣｌ（ＩＬ−１β  １６３−１７１ペプチド）；およびスレオニル−ＭＤＰ（ＴｅｒｍｕｒｔｉｄｅＴＭ）：Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−スレオニル−Ｄ−イソグルタミン、およびインターロイキン１８、ＩＬ−２，ＩＬ−１２，ＩＬ−１５を含む。アジュバントはまたＤＮＡオリゴヌクレオチド、例えば、ＣｐＧ含有オリゴヌクレオチドを含む。さらに、ＩＬ−１８、ＩＬ−２，ＩＬ−１２，ＩＬ−１５、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、γ−インターフェロンのような免疫調節リンホカイン、ならびにＮＦκＢ調節伝達タンパク質をコードしている核酸配列が使用されてもよい。他のアジュバントは、ヒート・ショックタンパク質（ＨＳＰ）；ＧＴＰ−ＧＤＰ；ロキソリビン，ＭＰＬ（Ｒ）；ムラパルミチン；およびＴｈｅｒａｍｉｄｅＴＭを含む。アジュバントは好ましくは、非刺激性で非感作性である。
【０１１３】
全ウイルスまたは全細菌は、限定されるものではないが、弱化ウイルスもしくは死滅ウイルス、例えば、サイトメガロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ヒトパピローマウイルス、風疹ウイルスおよび水痘帯状疱疹ウイルス、弱化もしくは死滅細菌、例えば、ボルデテラ・ペルタッシス、クロストリジウム・テタニ、コリネバクテリウム・ジフテリエ、Ａ群連鎖球菌、レジオネラ・ニューモフィラ、ナイセリア・メニンギチデス、シュードモナス・エルギノサ、肺炎双球菌、トレポネマ・パリダム、およびビブリオ・コレラエ、およびそれらの混合物を含む。
【０１１４】
特記される抗原性作用物もしくはワクチンは、遊離の塩基、酸、荷電もしくは無荷電の分子、分子複合体の成分または製薬学的に許容できる塩のような形態において存在してもよい。さらに、体ｐＨ、酵素などにおいて容易に加水分解される活性作用物の単純な誘導体（例えば、エーテル、エステル、アミドなど）が使用されてもよい。
【０１１５】
すでに指示されたように、１つの実施態様によって、送達される抗原性作用物はヒドロゲル調合物において含有されてもよい。特記される実施態様では、かくして送達メンバーは、ヒドロゲルおよびそれを受け入れるための手段（例えば、ゲルパック）を含み、例えば、２００３年１０月２４日提出の同時係属米国特許出願第６０／５１４，３８７号、２００３年１０月２４日提出の同第６０／５１４，４３３号、２００３年１０月３１日提出の同第６０／５１６，１８４号および２００３年１１月２１日提出の同第６０／５２４，０６２号に開示されており；これらは引用によって完全に本明細書に組み入れられている。
【０１１６】
先に指摘したように、本発明の少なくとも１つの実施態様では、ヒドロゲル調合物は少なくとも１種の抗原性作用物を含有する。本発明の別な実施態様では、ヒドロゲル調合物は抗原性作用物を含有せず、それ故、単に水和メカニズムである。
【０１１７】
本発明によれば、ヒドロゲル調合物が抗原性作用物を含有しない場合、抗原性作用物は前記のように小突起１２の上にコーティングされるか、または２００３年１０月２４日提出の特記される同時係属米国特許出願第６０／５１４，３８７号に開示されるように、小突起アレイの皮膚側、またはアレイの上部表面において、同様に引用によって完全に本明細書に組み入れられているＰＣＴ公開ＷＯ９８／２８０３７に開示されるように固形薄膜中に含有されるかいずれかである。特記される同時係属出願において詳細に議論されるように、固形薄膜は、典型的には、抗原性作用物、ポリマー材料、例えばヒドロキシエチル
セルロース（ＨＥＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、メチルセルロース（ＭＣ）、ヒドロキシエチルメチルセルロース（ＨＥＭＣ）、エチルヒドロキシエチルセルロース（ＥＨＥＣ）、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（ｎ−ビニルピロリドン）もしくはプルロニック、可塑剤、例えばグリセロール、プロピレングリコールもしくはポリエチレングリコール、界面活性剤、例えばツイーン２０もしくはツイーン８０、および揮発性溶剤、例えば水、イソプロパノールもしくはエタノールからなる液状調合物を注型することによって作成される。注型と続く溶剤の蒸発後に、固形薄膜が作成される。
【０１１８】
好ましくは、本発明のヒドロゲル調合物は、水に基づくヒドロゲルを含有する。ヒドロゲルは、それらの高い水含量と生体適合性のために好適な調合物である。
【０１１９】
当該技術分野において周知のように、ヒドロゲルは、水中で膨潤する巨大分子ポリマーネットワークである。適当なポリマーネットワークの例は、限定されるものではないが、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、メチルセルロース（ＭＣ）、ヒドロキシエチルメチルセルロース（ＨＥＭＣ）、エチルヒドロキシエチルセルロース（ＥＨＥＣ）、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（ｎ−ビニルピロリドン）およびプルロニック含む。もっとも好適なポリマー材料はセルロース誘導体である。特記されるポリマーは、異なる平均分子量を呈する種々の等級において得ることができ、したがって異なるレオロジー特性を示す。
【０１２０】
好ましくは、ポリマー材料の濃度は、ヒドロゲル調合物の約０．５〜４０ｗｔ．％の範囲内である。
【０１２１】
本発明のヒドロゲル調合物は、好ましくは、調合物および小突起メンバー１０および皮膚および場合によっては固形薄膜との間の最適な接触を確立するために重要である十分な湿潤特性を調合物が発揮することを、保証するのに十分な表面活性を有する。
【０１２２】
本発明によれば、十分な湿潤特性は、少なくとも１種の湿潤剤、例えば両親媒性を有する界面活性剤またはポリマーをヒドロゲル調合物に組み入れることによって達成される。場合によっては、また湿潤剤は固形薄膜中に組み入れられてもよい。
【０１２３】
本発明によれば、界面活性剤は、双性イオン性、両性イオン性、陽イオン性、陰イオン性または非イオン性であってもよい。適当な界面活性剤の例は、ナトリウムラウロアンホアセテート、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、塩化セチルピリジニウム（ＣＰＣ）、塩化ドデシルトリメチルアンモニウム（ＴＭＡＣ）、塩化ベンズアルコニウム、ポリソルべート、例えばツイーン２０およびツイーン８０、他のソルビタン誘導体、例えばラウリン酸ソルビタン、およびアルコキシル化アルコール、例えばラウレス−４を含む。もっとも好適な界面活性剤はツイーン２０、ツイーン８０およびＳＤＳを含む。
【０１２４】
両親媒性を有する適当なポリマー材料もしくはポリマーは、限定されるものではないが、セルロース誘導体、例えばヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、メチルセルロース（ＭＣ）、ヒドロキシエチルメチルセルロース（ＨＥＭＣ）もしくはエチルヒドロキシエチルセルロース（ＥＨＥＣ）、ならびにプルロニックを含む。
【０１２５】
好ましくは、界面活性剤の濃度は、ヒドロゲル調合物の約０．００１〜２ｗｔ．％の範囲内である。両親媒性を示すポリマーの濃度は、好ましくは、ヒドロゲル調合物の約０．
５〜４０ｗｔ．％の範囲内である。
【０１２６】
当業者によっては評価できるように、特記される湿潤剤は分離しても、また組み合わせても使用できる。
【０１２７】
本発明によれば、ヒドロゲル調合物は、引用によって完全に本明細書に組み入れられている２００１年９月８日提出の同時係属米国特許出願第０９／９５０，４３６号に開示されるそれらのような、少なくとも１種の通路の開存性モジュレーターまたは「抗癒合剤（ａｎｔｉ−ｈｅａｌｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）」を含んでもよい。特記した同時係属出願において記述されるように、通路の開存性モジュレーターは、皮膚の自然癒合過程を防ぐか減少させ、それによって、小突起メンバー２０による角質層に形成された通路もしくは微小間隙の閉鎖を防ぐ。そのような薬剤の例は、限定されるものではないが、浸透剤（例えば、塩化ナトリウム）および双性イオン化合物（例えば、アミノ酸）を含む。
【０１２８】
特記した同時係属出願において定義されるように、用語「通路の開存性モジュレーター（ｐａｔｈｗａｙ  ｐａｔｅｎｃｙ  ｍｏｄｕｌａｔｏｒ）」または「抗癒合剤（ａｎｔｉ−ｈｅａｌｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）」は、さらに、抗炎症剤、例えばベタメタソン２１−リン酸二ナトリウム塩、トリアムシノロンアセトニド２１−リン酸二ナトリウム、ヒドロコルタメート塩酸塩、ヒドロコーチゾン２１−リン酸二ナトリウム塩、メチルプレドニソロン２１−リン酸二ナトリウム塩、メチルプレドニソロン２１−コハク酸ナトリウム塩、パラメタソンリン酸二ナトリウム塩およびプレドニソロン２１−コハク酸ナトリウム塩、および抗凝固剤、例えばクエン酸、クエン酸塩（例えばクエン酸ナトリウム）、デキストラン硫酸ナトリウム、およびＥＤＴＡを含む。
【０１２９】
ヒドロゲル調合物は、引用によって完全に本明細書に組み入れられている２００３年９月２９日提出の同時係属米国特許出願第１０／６７４，６２６号および２００３年１０月２４日提出の同第６０／５１４号に開示されるそれらのような、少なくとも１種の血管収縮薬を含有してもよい。特記した同時係属出願において記述されるように、血管収縮薬は、小突起メンバーの適用中および適用後の出血を制御するために使用される。好適な血管収縮薬は、限定されるものではないが、アミデフリン、カファミノール、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、エピネフリン、フェリプレッシン、インダナゾリン、メチゾリン、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、オクトドリン、オルニプレッシン、オキシメタゾリン、フェニレフリン、フェニルエタノールアミン、フェニルプロパノールアミン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシン、キシロメタゾリン、およびそれらの混合物を含む。もっとも好適な血管収縮薬は、エピネフリン、ナファゾリン、テトラヒドロゾリン、インダナゾリン、メチゾリン、トラマゾリン、チマゾリン、オキシメタゾリンおよびキシロメタゾリンを含む。
【０１３０】
本発明によれば、ヒドロゲル調合物はまた、非水性溶媒、例えばエタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールおよび類するもの、染料、顔料、不活性賦形剤、浸透増進剤、添加物、および当該技術分野において既知の製薬学的生産物または経皮デバイスの他の慣用成分を含んでもよい。
【０１３１】
本発明のヒドロゲル調合物は、調合物がゲルパック中に含有され、適用過程においてその完全な状態を保持でき、そしてそれが小突起メンバーの開口部をとおし皮膚の通路中に流れるよう十分に流体であるような十分な粘度を発揮する。
【０１３２】
ニュートン性を表すヒドロゲル調合物では、ヒドロゲル調合物の粘度は、好ましくは、２５℃における測定されて約２〜３０ポアズ（Ｐ）の範囲内にある。せん断で薄くなる（
ｓｈｅａｒ−ｔｈｉｎｎｉｎｇ）ヒドロゲル調合物では、２５℃で測定される粘度は、好ましくは、せん断速度それぞれ６６７／ｓおよび２６６７／ｓにおいて、１．５〜３０Ｐまたは０．５〜１０Ｐの範囲内である。ダイラタント調合物では、２５℃で測定される粘度は、好ましくは、せん断速度６６７／ｓにおいて、１．５〜３０Ｐの範囲内である。
本発明によれば、ヒドロゲル調合物が１種の前記抗原性作用物を含有する場合、作用物は過剰飽和または飽和以下の濃度において存在してもよい。送達システムに用いられる抗原性作用物の量は、抗原性作用物の治療学的に有効な量を送達して所望の結果を達成するのに必要な量である。実際には、これは、特定の抗原性作用物、送達部位、症状の重篤度および所望される治療効果に依存して広く変化するであろう。したがって、本発明の方法に組み入れられる抗原性作用物の治療学的に有効な量について一定の範囲を定めることは実際的ではない。
【０１３３】
本発明の１つの実施態様では、抗原性作用物の濃度は、ヒドロゲル調合物の少なくとも１〜４０ｗｔ．％の範囲内にある。
【０１３４】
ここに図２を参照すれば、小突起１２上に処置された固形コーティングの形態において抗原を含有する容器１８を有する小突起１２を有する小突起メンバー１０が示される。本発明によれば、コーティング１８は小突起１２を部分的もしくは完全に覆ってもよい。
【０１３５】
コーティング１８は、タンパク質抗原および場合によってはいずれか免疫応答増強アジュバントの揮発性液体の溶液もしくは懸濁液中に小突起１２を浸漬することによって小突起１２に適用することができる。液体溶液または懸濁液は約１〜２０ｗｔ．％の抗原性作用物濃度を有しなければならない。揮発性液体は、水、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、エタノール、イソプロピルアルコールおよびそれらの混合液であってもよい。これらの中で、水がもっとも好適である。
【０１３６】
本発明によれば、コーティング１８は種々の既知の方法によって小突起１２に適用することができる。好ましくは、コーティング１８は、皮膚に侵入する小突起メンバー１０のそれらの部分または小突起１２に適用されるだけである。
【０１３７】
抗原性作用物を含有する揮発性液体の溶液もしくは懸濁液は、浸漬、噴霧および／または他の既知の微量流体処置技術によって小突起アレイに適用されてもよい。好ましくは、皮膚組織中に侵入する小突起アレイのそれらの部分のみが、抗原性作用物によりコーティングされる。適当な小突起コーティングおよびそのようなコーティングを適用するのに有用な装置は、２００１年１０月２６日提出の米国特許出願第１０／０４５，８４２号、２００２年３月１５日提出の同第１０／０９９，６０４号、および同第６０／２８５，５７６号に開示されている；これらの開示は引用によって本明細書に組み入れられている。
【０１３８】
そこに開示されたコーティング方法および本明細書に開示されたコーティング組成物を使用すれば、代表的な金属（すなわちチタン）小突起アレイにおける皮膚穿刺小突起のチップ（ｔｉｐ、先端）のみを正確かつ均一にコーティングすることが可能である。１つのそのようなコーティング方法は浸漬コーティングを含む。浸漬コーティングは、コーティング溶液または調合液中に小突起を部分的または全体的に浸漬することによって小突起をコーティングする手段として記述することができる。部分浸漬技術の使用によって、小突起の先端のみにコーティングを限定することが可能である。
【０１３９】
さらなるコーティング法はローラーコーティング機構を用いるローラーコーティングを含み、同様に小突起の先端へのコーティングに限定する。ローラーコーティング法は、２００２年３月１５日提出の米国特許出願第１０／０９９，６０４号に開示されていて、これは引用によって完全に本明細書に組み入れられている。前記出願において詳細に議論されているように、開示されたローラーコーティング法は、皮膚の穿刺中に小突起から容易には外されない平滑なコーティングを提供する。
【０１４０】
本発明によれば、小突起は、コーティングの容量を受入れ、そして／または増大するよう適合された手段、例えば、隙間（未掲載）、溝（未掲載）、表面の凹凸（未掲載）または類似の修飾を含み、この場合、この手段は、より大量のコーティングが処置できる増加した表面積を与える。
【０１４１】
本発明の範囲内で用いることができるその他のコーティング方法は噴霧コーティングを含む。本発明によれば、噴霧コーティングはコーティング組成物のエアゾル懸濁液の形成を含む。１つの実施態様では、約１０〜２００ピコリットルの小滴サイズをもつエアゾル懸濁液が小突起１０上に噴霧され、次いで乾燥される。
【０１４２】
またパターン（ｐａｔｔｅｒｎ）コーティングが小突起１２をコーティングするために使用されてもよい。パターンコーティングは、小突起表面上に沈積させる液体の位置を定めるための分配システムを用いて適用できる。沈積させる液体の量は、好ましくは、０．１〜２０ナノリットル／小突起の範囲内である。適当な精密定量液体ディスペンサーは米国特許第５，９１６，５２４号；同第５，７４３，９６０号；同第５，７４１，５５４号および同第５，７３８，７２８号において開示されている；これらは引用によって完全に本明細書に組み入れられている。
【０１４３】
小突起のコーティング調合液または溶液は、また、既知のソレノイドバルブ・ディスペンサー、場合によっては流体運動手段および電気分野の使用により一般に制御される位置決定手段を使用するインクジェット技術を用いて適用されてもよい。印刷工業からの他の液体分配技術または当該技術分野において既知の類似の液体分配技術が、本発明のパターンコーティングを適用するために使用されてもよい。
【０１４４】
さらにまた、小突起チップのコーティングでは、小突起アレイの１ｃｍ２当たり少なくとも０．２μｇ、より好ましくは、アレイの１ｃｍ２当たり少なくとも２μｇの抗原性作用物の付加が容易に達成できる。典型的な５ｃｍ２アレイでは、これは、少なくとも１μｇ、好ましくは少なくとも１０μｇの抗原性作用物の付加に言い換えられ、ほとんどの予防接種のためには十分である。
【０１４５】
抗原性作用物の小突起チップのコーティングに関して、抗原性作用物送達効率（Ｅｄｅｌ）は非常に増進される；Ｅｄｅｌは、予め定められた時間当たりコーティングから放出される抗原性作用物の重量パーセントとして定義される。本発明の抗原性作用物を含有する溶液もしくは懸濁液のチップコーティングでは、１時間に少なくとも３０％、好ましくは１５分間に少なくとも５０％というＥｄｅｌが達成できる。かくして、本発明は、当該技術分野において使用される慣用のマクロチン（ｍａｃｒｏｔｉｎｅ）皮膚穿刺デバイスを超える有意な費用上の有益性を提供する。
【０１４６】
前述のように、本発明の１つの実施態様によれば、固形コーティングを形成するために小突起メンバー１０に適用されるコーティング調合物は、そこに処置される少なくとも１種の抗原性作用物を有する水性および非水性調合物を含んでもよい。本発明によれば、抗原性作用物は生体適合性担体内に溶解されても、また担体内に懸濁されてもよい。
【０１４７】
本発明によれば、コーティング調合物は、好ましくは、少なくとも１種の湿潤剤、例えば両親媒性を有する界面活性剤およびまたはポリマーを含有する。界面活性剤は、双性イオン性、両性イオン性、陽イオン性、陰イオン性または非イオン性であってもよい。適当な界面活性剤は、ナトリウムラウロアンホアセテート、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ
）、塩化セチルピリジニウム（ＣＰＣ）、塩化ドデシルトリメチルアンモニウム（ＴＭＡＣ）、塩化ベンズアルコニウム、ポリソルべート、例えばツイーン２０およびツイーン８０、他のソルビタン誘導体、例えばラウリン酸ソルビタン、およびアルコキシル化アルコール、例えばラウレス−４を含む。もっとも好適な界面活性剤はツイーン２０、ツイーン８０およびＳＤＳを含む。
【０１４８】
好ましくは、界面活性剤の濃度は、コーティング調合物の約０．００１〜２ｗｔ．％の範囲内である。
【０１４９】
両親媒性を有する適当なポリマー材料もしくはポリマーは、限定されるものではないが、セルロース誘導体、例えばヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、メチルセルロース（ＭＣ）、ヒドロキシエチルメチルセルロース（ＨＥＭＣ）もしくはエチルヒドロキシエチルセルロース（ＥＨＥＣ）、ならびにプルロニックを含む。
【０１５０】
本発明の１つの実施態様では、両親媒性を示すポリマーの濃度は、好ましくは、コーティング調合物の約０．０１〜２０ｗｔ．％の範囲内である。
【０１５１】
当業者によって評価できるように、上記湿潤剤は分離されても組み合わされて使用されてもよい。
【０１５２】
本発明によれば、コーティング調合物は、親水性ポリマーをさらに含んでもよい。好ましくは、親水性ポリマーは、次の群：ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（ｎ−ビニルピロリドン）、ポリエチレングリコールおよびそれらの混合物、および類似のポリマーから選ばれる。当該技術分野において周知のように、前記ポリマーは粘度を増大させる。
【０１５３】
コーティング調合物中の親水性ポリマーの濃度は、好ましくは、約０．０１〜２０ｗｔ．％の範囲内である。
【０１５４】
本発明によれば、コーティング調合物は、引用によって完全に本明細書に組み入れられている２００２年４月２０日提出の同時係属米国特許出願第１０／１２７，１０８号に開示されるそれらのような、生体適合性担体をさらに含んでもよい。適当な生体適合性担体は、ヒトアルブミン、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸、ポリヒスチジン、ペントサンポリサルフェート、ポリアミノ酸、スクロース、トレハロース、メレジトース、ラフィノースおよびスタキオースを含む。
【０１５５】
コーティング調合物中の生体適合性担体の濃度は、好ましくは、約２〜７０ｗｔ．％の範囲、より好ましくは、コーティング調合物の約５〜５０ｗｔ．％範囲内である。
【０１５６】
コーティング調合物、それ故コーティングは、さらに血管収縮薬を含有してもよい。好適な血管収縮薬は、限定されるものではないが、アミデフリン、カファミノール、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、エピネフリン、フェリプレッシン、インダナゾリン、メチゾリン、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、オクトドリン、オルニプレッシン、オキシメタゾリン、フェニレフリン、フェニルエタノールアミン、フェニルプロパノールアミン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシン、キシロメタゾリン、およびそれらの混合物を含む。もっとも好適な血管収縮薬は、エピネフリン、ナファゾリン、テトラヒドロゾリン、インダナゾリン、メチゾリン、トラマゾリン、チマゾリン、オキシメタゾリンおよびキシロメタゾリンを含む。
【０１５７】
使用される場合、血管収縮薬の濃度は、好ましくは、コーティング調合物の約０．１ｗｔ．％〜１０ｗｔ．％の範囲である。
【０１５８】
本発明のなおその他の実施態様では、コーティング調合物は、少なくとも１種の「通路の開存性モジュレーター」を含有する。適当な通路の開存性モジュレーターは、限定されるものではないが、浸透剤（例えば塩化ナトリウム）、双性イオン化合物（例えばアミノ酸）、および抗炎症剤、例えば、ベタメタソン２１−リン酸二ナトリウム塩、トリアムシノロンアセトニド２１−リン酸二ナトリウム、ヒドロコルタメート塩酸塩、ヒドロコーチゾン２１−リン酸二ナトリウム塩、メチルプレドニソロン２１−リン酸二ナトリウム塩、メチルプレドニソロン２１−コハク酸ナトリウム塩、パラメタソンリン酸二ナトリウム塩およびプレドニソロン２１−コハク酸ナトリウム塩、および抗凝固剤、例えばクエン酸、クエン酸塩（例えばクエン酸ナトリウム）、デキストラン硫酸ナトリウム、アスピリンおよびＥＤＴＡを含む。
【０１５９】
本発明によれば、コーティング調合物はまた、非水性溶媒、例えばエタノール、クロロホルム、エーテル、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールおよび類するもの、染料、顔料、不活性賦形剤、浸透増進剤、添加物、および当該技術分野において既知の製薬学的生産物または経皮デバイスの他の慣用成分を含んでもよい。
【０１６０】
本発明のある実施態様では、抗原性作用物を含有するコーティング調合物の粘度および安定性は低揮発度対イオンを添加することによって増進される。１つの実施態様では、作用物は調合物ｐＨにおいて正電荷を有し、そして粘度を増進する対イオンは、少なくとも２つの酸性ｐＫａを有する酸を含む。適当な酸は、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、酒石酸、アジピン酸、シトラコン酸、フマール酸、グルタル酸、イタコン酸、メグルトール、メサコン酸、コハク酸、シトラリンゴ酸（ｃｉｔｒａｍａｌｉｃ  ａｃｉｄ）、タルトロン酸、クエン酸、トリカルバリル酸、エチレンジアミン四酢酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、炭酸、硫酸およびリン酸を含む。
【０１６１】
その他の好適な実施態様は、作用物が調合物ｐＨにおいて正電荷を有し、そして対イオンの少なくとも１種は少なくとも２つの酸性ｐＫａを有する酸である、対イオンの粘度増進混合物に対向される。他の対イオンは１つ以上のｐＫａを有する酸である。適当な酸の例は、塩化水素酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、マレイン酸、リン酸、ベンゼンスルホン酸、メタンスルホン酸、クエン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、グルクロン酸、乳酸、リンゴ酸、ピルビン酸、酒石酸、タルトロン酸、フマール酸、酢酸、プロピオン酸、ペンタン酸，炭酸、マロン酸、アジピン酸、シトラコン酸、レブリン酸、グルタル酸、イタコン酸、メグルトール、メサコン酸、シトラリンゴ酸、クエン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、トリカルバリル酸およびエチレンジアミン四酢酸を含む。
【０１６２】
一般に、本発明の特記される実施態様では、対イオンの量は、抗原性作用物の電荷を中和しなければならない。そのような実施態様では、対イオンもしくは対イオンの混合物は、調合物のｐＨにおいて作用物に存在する電荷を中和するのに必要な量で存在する。対イオン（遊離酸もしくは塩として）の過剰量が、ｐＨを調節し、かつ十分な緩衝能力を与えるために調合物に添加されてもよい。
【０１６３】
１つの好適な実施態様では、作用物は正電荷を有し、そして対イオンは、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、塩化水素酸、グリコール酸および酢酸の群から選ばれる対イオンの粘度増進混合物である。好ましくは、対イオンは調合物に添加されて、約２０〜２００ｃｐの範囲の粘度を達成する。
【０１６４】
好適な実施態様では、粘度増進対イオンは、低揮発度の弱酸のような酸性対イオンである。低揮発度弱酸対イオンは、少なくとも１つの酸性ｐＫａおよび約５０℃以上の融点またはＰａｔｍにおいて約１７０℃以上の沸点を表す。そのような酸の例は、クエン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、グルクロン酸、乳酸、リンゴ酸、ピルビン酸、酒石酸、タルトロン酸およびフマール酸を含む。
【０１６５】
その他の好適な実施態様では、対イオンは強酸である。強酸は少なくとも１つの約２未満のｐＫａを表すとして定義できる。そのような酸の例は、塩化水素酸、臭化水素酸、硝酸、スルホン酸、硫酸、マレイン酸、リン酸、ベンゼンスルホン酸およびメタンスルホン酸を含む。
【０１６６】
その他の好適な実施態様は、対イオンの少なくとも１種が強酸であり、かつ対イオンの少なくとも１種が低揮発度弱酸である、対イオンの混合物に対向される。
【０１６７】
その他の好適な実施態様は、対イオンの少なくとも１種が強酸であり、かつ対イオンの少なくとも１種が高い揮発度を有する弱酸である、対イオンの混合物に対向される。揮発性弱酸対イオンは、少なくとも１つの約２以上のｐＫａおよび約５０℃未満の融点またはＰａｔｍにおいて約１７０℃未満の沸点を表す。そのような酸の例は、酢酸、プロピオン酸、ペンタン酸およびそれに類する酸を含む。
【０１６８】
酸性対イオンは、調合物のｐＨにおいて作用物に存在する正電荷を中和するのに必要な量で存在する。対イオン（遊離酸もしくは塩として）の過剰量が、ｐＨを調節し、かつ十分な緩衝能力を与えるために調合物に添加されてもよい。
【０１６９】
本発明のなお他の実施態様では、具体的には、抗原性作用物が負電荷を有する場合、コーティング調合物はさらに低揮発度塩基性対イオンを含有する。
【０１７０】
好適な実施態様では、コーティング調合物は低揮発度の弱塩基対イオンを含有する。低揮発度弱塩基は、少なくとも１つの塩基性ｐＫａおよび約５０℃以上の融点またはＰａｔｍにおいて約１７０℃以上の沸点を表す。そのような塩基の例は、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、メチルグルカミンおよびグルコサミンを含む。
【０１７１】
その他の実施態様では、低揮発度対イオンは、少なくとも１つの酸性ｐＫａおよび少なくとも２つの塩基性ｐＫａを表す塩基性双性イオンを含有し、この場合、塩基性ｐＫａの数が酸性ｐＫａの数を超える。そのような化合物の例はヒスチジン、リジンおよびアルギニンを含む。
【０１７２】
なお他の実施態様では、低揮発度対イオンは、少なくとも１つの約１２以上のｐＫａを表す強塩基を含有する。そのような塩基の例は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウムおよび水酸化マグネシウムを含む。
【０１７３】
他の好適な実施態様は、強塩基および低揮発度をもつ弱塩基を含有する塩基性対イオンの混合物を含有する。あるいはまた、適当な対イオンは強塩基および高揮発度の弱塩基を含む。高揮発度塩基は、少なくとも１つの約１２未満の塩基性ｐＫａおよび約５０℃未満の融点またはＰａｔｍにおいて約１７０℃未満の沸点を表す。そのような塩基の例は、アンモニアおよびモルホリンを含む。
【０１７４】
好ましくは、塩基性対イオンは、調合物のｐＨにおいて抗原性作用物に存在する負電荷を中和するのに必要な量で存在する。対イオン（遊離塩基もしくは塩として）の過剰量が
、ｐＨを調節し、かつ十分な緩衝能力を与えるために調合物に添加されてもよい。
【０１７５】
低揮発度の対イオンの使用に関するさらなる議論は、２００３年６月３０日提出の米国特許出願第６０／４８４，０２０号および２００３年６月３０日提出の同第６０／４８４，０２０号において見いだされる；これらの開示は引用によって本明細書に完全に組み入れられている。
【０１７６】
本発明のその他の実施態様では、コーティング調合物は少なくとも１種のバッファーを含有する。適当なバッファーの例は、アスコルビン酸、クエン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、グルクロン酸、乳酸、リンゴ酸、ピルビン酸、酒石酸、タルトロン酸、フマール酸、マレイン酸、リン酸、トリカルバリル酸、マロン酸、アジピン酸、シトラコン酸、グルタル酸、イタコン酸、メサコン酸、シトラリンゴ酸、ジメチロールプロピオン酸、チグリン酸、グリセリン酸、メタクリル酸、イソクロトン酸、ｂ−ヒドロキシ酪酸、クロトン酸、アンゲリカ酸、ヒドラクリル酸（ｈｙｄｒａｃｒｙｌｉｃ  ａｃｉｄ）、アスパラギン酸、グルタミン酸、またはそれらの混合物を含む。
【０１７７】
本発明の１つの実施態様では、コーティング調合物は少なくとも１種の抗酸化剤を含有し、これらは、金属イオン封鎖剤、例えばクエン酸ナトリウム、クエン酸、ＥＤＴＡ（エチレン−ジニトリロ−四酢酸）または遊離基捕捉剤、例えばアスコルビン酸、メチオニン、アスコルビン酸ナトリウム、および類するものであってもよい。現在、好適な抗酸化剤はＥＤＴＡおよびメチオニンを含む。
【０１７８】
本発明の特記される実施態様では、抗酸化剤の濃度は、コーティング調合物の約０．０１〜２０ｗｔ．％も範囲内である。
【０１７９】
また、他の既知の調合物の添加物が、コーティング調合物の必須の溶解度と粘度特性および乾燥したコーティングの物理的に完全な状態に悪影響を及ぼさないかぎりコーティング調合物に添加されてもよい。
【０１８０】
好ましくは、コーティング調合物は、各小突起１０を効果的にコーティングするために、約５００センチポアズ未満でかつ３センチポアズを超える粘度を有する。より好ましくは、コーティング調合物は約３〜２００センチポアズの範囲内の粘度を有する。
【０１８１】
本発明によれば、所望のコーティングの厚さは、シートの単位面積当たりの小突起の密度およびコーティング調合物の粘度と濃度ならびに選ばれるコーティング方法に依存する。好ましくは、コーティングの厚さは５０ミクロン未満である。
【０１８２】
１つの実施態様では、コーティングの厚さは、小突起表面から測定されて２５ミクロン未満、より好ましくは１０ミクロン未満である。なおより好ましくは、コーティングの厚さは約１〜１０ミクロンの範囲内である。
【０１８３】
すべての場合に、コーティングが適用された後、コーティング調合物は種々の手段によって小突起１２上で乾燥される。本発明の好適な実施態様では、コーティングされたメンバーは、周囲の室条件下で乾燥される。しかしながら、小突起上でコーティング調合物を乾燥するために、種々の温度と湿度レベルが使用されてもよい。さらに、コーティングメンバーは、加熱、ライオファイル、凍結乾燥されるか、または類似の技術が使用されて、コーティングから水が除去されてもよい。
【０１８４】
小突起メンバー１０は、２００１年１０月１２日提出の同時係属の米国特許出願第０９／９７６，７６２号において詳細に記述されているように、好ましくは、リテイナー・リ
ング（ｒｅｔａｉｎｅｒ  ｒｉｎｇ）中に吊るされる（ｓｕｓｐｅｎｄｅｄ）；これは引用によって本明細書に完全に組み入れられている。リテイナー・リング中に小突起メンバー１０を設置した後、小突起メンバー１０は、２００１年１０月１２日提出の同時係属の米国特許出願第０９／９７６，７９８号に開示されているように、好ましくはインパクト・アプリケーター（ｉｍｐａｃｔ  ａｐｐｌｉｃａｔｏｒ）を用いて患者の皮膚に適用される、これは引用によって本明細書に完全に組み入れられている。
【実施例１】
【０１８５】
この実施例は、比較的低用量によるブースター投与（ｂｏｏｓｔｉｎｇ）が十分な免疫応答を与えつつ、皮膚応答を最小にするか否かを検討する。一般的治療プログラムは、一次免疫における大用量のワクチンの皮内投与と、それに続く比較的低用量のワクチンによる１回以上の皮内ブースター免疫からなる。
【０１８６】
実験は、８０ｍｇまでの卵アルブミンが１時間の適用時間にわたって送達されたことを例証した。大量（ｂｏｌｕｓ）送達（５秒適用）は、約２５ｍｇの送達をもたらした。さらに、これらの実験は、卵アルブミンの送達がアレイ上の卵アルブミン量を調節することによって制御できることを例証した。
【０１８７】
これらの結果に基づき、２つの免疫化プログラムが皮膚応答を低下させるために効果的であった。最初のプログラムは、同一のコーティングした小突起アレイによる一次免疫の投与およびブースター投与を伴う。しかしながら、一次誘導免疫の間の着用（ｗｅａｒｉｎｇ）時間はブースター免疫の間の着用時間よりも長い。例えば、一次免疫投与は２４時間位の長時間実施されてもよい。ブースター免疫投与は３０分間位、好ましくは１５分未満の長さである。これらの投与期間は一次免疫における大用量のワクチンの送達を達成する。続いて、比較的低用量のワクチンがブースター免疫において投与される。
【０１８８】
第２のプログラムは、異なる小突起アレイによる一次免疫の投与およびブースター投与を伴う。一次免疫化とブースター免疫化における着用時間は同一である。実際には、一次免疫は、最大用量のワクチンを送達するシステム、例えば、高い抗原濃度のコーティングを有する小突起アレイにより実施される。続いて、ブースター免疫は、比較的低用量のワクチンを送達するシステム、例えば、低い抗原濃度のコーティングを有する小突起アレイにより実施される。着用時間は３０分位の長時間、好ましくは１５分位の長さであってもよい。あるいはまた、小突起の密度または皮膚の接触面積を調節することが、また、ブースター免疫投与のために送達される抗原の量を効果的に低下できる。
【０１８９】
本発明の方法は、望ましくない皮膚反応を回避しつつ便利な皮内予防接種療法を可能にし、そして有効性を改善し、簡便性を与えるために、広範な種々の治療ワクチンの皮内送達に広く応用可能である。
【０１９０】
本発明の精神および範囲を逸脱することなく、当業者は本発明に種々の変更および改変を作成して種々の使用法および条件にそれを適合できる。それ自体、これらの変更および改変は、厳密に、正当に、次の請求項の等価の完全な範囲内にあり、かつ範囲内にあることを意図する。
【図面の簡単な説明】
【０１９１】
【図１】図１は、本発明にしたがう小突起アレイの部分遠近図である。
【図２】図２は、小突起上に固形抗原を含有するコーティングを有する小突起アレイの部分遠近図である。
【図３】図３は、本発明において有用な皮内抗原送達デバイスの横断面図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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