(57)【要約】インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法での介入のための診断薬としてのＦｃγ受容体（Ｆｃ＆ｇｇｒ；Ｒ）多型の使用方法が提供される。この方法には、個体のＦｃ＆ｇｇｒ；ＲＩＩＩＡ遺伝子の対立遺伝子パターンまたはＦｃ＆ｇｇｒ；ＲＩＩＡ遺伝子の対立遺伝子パターンを検出すること、および、対立遺伝子パターンがＩＬ−２免疫療法に対するポジティブな治療応答の予測であるかどうかを決定することが含まれる。Ｆｃ＆ｇｇｒ；ＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ／Ｆホモ接合遺伝子型の存在、および／または、Ｆｃ＆ｇｇｒ；ＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ対立遺伝子の１つもしくは両方のコピー存在、および／または、Ｆｃ＆ｇｇｒ；ＲＩＩＡ  １３１Ｒ対立遺伝子の１つまたは両方のコピー存在は、ＩＬ−２免疫療法に対するポジティブな治療応答の指標であり、したがって、免疫疾患の処置のためのＩＬ−２免疫療法での医学的な介入の指標である。
2007515185.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測する必要がある個体において、インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測するための診断方法であって、前記方法には、前記個体のＦｃγ受容体ＩＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＩＡ）遺伝子についての対立遺伝子パターンを検出することが含まれ、ここでは、ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ／Ｆ遺伝子型の存在が、前記ＩＬ−２免疫療法に対してポジティブな治療応答を示す個体の指標である、方法。
【請求項２】
前記個体に、ガンの処置のためのＩＬ−２免疫療法が必要である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記個体が、前記ガンの細胞の表面上に発現される細胞表面抗原を標的とする抗体での処置をもまた受けている、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記抗体が免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記ガンがＢ細胞リンパ腫である、請求項２、３、または４のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６】
前記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、請求項２、３、または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記ＦｃγＲＩＩＩＡ遺伝子についての対立遺伝子パターンが、対立遺伝子特異的ハイブリダイゼーション、プライマー特異的エクステンション、オリゴヌクレオチドライゲーションアッセイ、制限酵素部位の分析、および一本鎖高次構造多型分析からなる群より選択される方法によって検出される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測する必要がある個体において、インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測するための診断方法であって、前記方法には、前記個体のＦｃγ受容体ＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＡ）遺伝子についての対立遺伝子パターンを検出することが含まれ、ここでは、ヘテロ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｈ／Ｒ遺伝子型の存在、またはホモ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ／Ｒ遺伝子型の存在が、前記ＩＬ−２免疫療法に対してポジティブな治療応答を示す個体の指標である、方法。
【請求項１０】
前記個体に、ガンの処置のためのＩＬ−２免疫療法が必要である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記個体が、前記ガンの細胞の表面上に発現される細胞表面抗原を標的とする抗体での処置をもまた受けている、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記抗体が免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ガンがＢ細胞リンパ腫である、請求項１０、１１、または１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
前記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、請求項１０、１１、または１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１６】
前記ＦｃγＲＩＩＩＡ遺伝子についての対立遺伝子パターンが、対立遺伝子特異的ハイブリダイゼーション、プライマー特異的エクステンション、オリゴヌクレオチドライゲーションアッセイ、制限酵素部位の分析、および一本鎖高次構造多型分析からなる群より選択される方法によって検出される、請求項９〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＩＡ）１５８Ｆ／Ｆ遺伝子型を含む個体の免疫機能を高めるための方法であって、前記方法には、インターロイキン−２免疫療法を前記個体に投与することが含まれる、方法。
【請求項１８】
前記ＩＬ−２免疫療法に、少なくとも１用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその生物学的活性のある変異体を、前記個体に投与することが含まれる、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
多用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその変異体が前記個体に投与される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＩＬ−２またはその変異体が１日１回の投与レジュメにしたがって投与される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記ＩＬ−２またはその変異体が、１週間に２回または１週間に３回の投与レジュメにしたがって投与される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＩＬ−２またはその変異体が皮下投与される、請求項１７から２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記ＩＬ−２またはその変異体が、単量体ＩＬ−２薬学的組成物、多量体ＩＬ−２組成物、凍結乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物、および噴霧乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物として提供される、請求項１７から２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記ＩＬ−２が、ヒトＩＬ−２のアミノ酸配列を有しているか、またはヒトＩＬ−２のアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有しているその変異体のアミノ酸配列を有している、組み換えによって生産されたＩＬ−２である、請求項１７から２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記その変異体が、ｄｅｓ−アラニル−１，セリン１２５ヒトインターロイキン−２である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記個体に対して免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体を投与することをさらに含む、請求項１７から２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記個体がガンについて処置されている、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記ガンがＢ細胞リンパ腫である、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、抗ＣＤ２０抗体またはその抗原結合断片である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、請求項２７に記載の方法。
【請求項３２】
前記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、テレックス、ＭＤＸ−０１０、ＥＭＤ  ７２０００、エルビタックス、ＷＸ−Ｇ２５０、ＩＤＭ−１、ＭＤＸ−２１０、ＺＡＭＹＬ、キャンパス、およびそれらの抗原結合断片からなる群より選択される、請求項２７に記載の方法。
【請求項３３】
ヘテロ接合型Ｆｃγ受容体ＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＡ）１３１Ｈ／Ｒ遺伝子型またはホモ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ／Ｒ遺伝子型を含む個体の免疫機能を高めるための方法であって、前記方法には、インターロイキン−２免疫療法を前記個体に投与することが含まれる、方法。
【請求項３４】
前記ＩＬ−２免疫療法に、少なくとも１用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその生物学的活性のある変異体を、前記個体に投与することが含まれる、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
多用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその変異体が前記個体に投与される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記ＩＬ−２またはその変異体が１日１回の投与レジュメにしたがって投与される、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記ＩＬ−２またはその変異体が、１週間に２回または１週間に３回、週に２回もしくは３回の投与レジュメにしたがって投与される、請求項３５に記載の方法。
【請求項３８】
前記ＩＬ−２またはその変異体が皮下投与される、請求項３３から３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
前記ＩＬ−２またはその変異体が、単量体ＩＬ−２薬学的組成物、多量体ＩＬ−２組成物、凍結乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物、および噴霧乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物として提供される、請求項３３から３８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４０】
前記ＩＬ−２が、ヒトＩＬ−２のアミノ酸配列を有しているか、またはヒトＩＬ−２のアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有しているその変異体のアミノ酸配列を有している、組み換えによって生産されたＩＬ−２である、請求項３３から３９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４１】
前記その変異体が、ｄｅｓ−アラニル−１，セリン１２５ヒトインターロイキン−２である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記個体に対して免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体を投与することをさらに含む、請求項３３から４１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４３】
前記個体がガンについて処置されている、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記ガンがＢ細胞リンパ腫である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、抗ＣＤ２０抗体またはその抗原結合断片である、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４８】
前記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、テレックス、ＭＤＸ−０１０、ＥＭＤ  ７２０００、エルビタックス、ＷＸ−Ｇ２５０、ＩＤＭ−１、ＭＤＸ−２１０、ＺＡＭＹＬ、キャンパス、およびそれらの抗原結合断片からなる群より選択される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４９】
ホモ接合型ＦｃγＩＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＩＡ）１５８Ｆ／Ｆ遺伝子型を含む個体のガンを処置するための方法であって、前記方法には、インターロイキン−２免疫療法を前記個体に投与することが含まれる、方法。
【請求項５０】
前記ＩＬ−２免疫療法に、少なくとも１用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその生物学的活性のある変異体を、前記個体に投与することが含まれる、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
多用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその変異体が前記個体に投与される、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記ＩＬ−２またはその変異体が１日１回の投与レジュメにしたがって投与される、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記ＩＬ−２またはその変異体が、１週間に２回または１週間に３回、週毎に２回もしくは３回の投与レジュメにしたがって投与される、請求項５１に記載の方法。
【請求項５４】
前記ＩＬ−２またはその変異体が皮下投与される、請求項４９から５３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５５】
前記ＩＬ−２またはその変異体が、単量体ＩＬ−２薬学的組成物、多量体ＩＬ−２組成物、凍結乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物、および噴霧乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物として提供される、請求項４９から５４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５６】
前記ＩＬ−２が、ヒトＩＬ−２のアミノ酸配列を有しているか、またはヒトＩＬ−２のアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有しているその変異体のアミノ酸配列を有している、組み換えによって生産されたＩＬ−２である、請求項４９から５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５７】
前記その変異体が、ｄｅｓ−アラニル−１，セリン１２５ヒトインターロイキン−２である、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記個体に対して免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体を投与することをさらに含む、請求項４９から５７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５９】
前記個体がガンについて処置されている、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記ガンがＢ細胞リンパ腫である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
前記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、抗ＣＤ２０抗体またはその抗原結合断片である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６４】
前記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、テレックス、ＭＤＸ−０１０、ＥＭＤ  ７２０００、エルビタックス、ＷＸ−Ｇ２５０、ＩＤＭ−１、ＭＤＸ−２１０、ＺＡＭＹＬ、キャンパス、およびそれらの抗原結合断片からなる群より選択される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６５】
ヘテロ接合型ＦｃγＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＡ）１３１Ｈ／Ｒ遺伝子型またはホモ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ／Ｒ遺伝子型を含む個体のガンを処置するための方法であって、前記方法には、インターロイキン−２免疫療法を前記個体に投与することが含まれる、方法。
【請求項６６】
前記ＩＬ−２免疫療法に、少なくとも１用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその生物学的活性のある変異体を、前記個体に投与することが含まれる、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
多用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその変異体が前記個体に投与される、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
前記ＩＬ−２またはその変異体が１日１回の投与レジュメにしたがって投与される、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
前記ＩＬ−２またはその変異体が、１週間に２回または１週間に３回、週毎に２回もしくは３回の投与レジュメにしたがって投与される、請求項６７に記載の方法。
【請求項７０】
前記ＩＬ−２またはその変異体が皮下投与される、請求項６５から６９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７１】
前記ＩＬ−２またはその変異体が、単量体ＩＬ−２薬学的組成物、多量体ＩＬ−２組成物、凍結乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物、および噴霧乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物として提供される、請求項６５から７０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７２】
前記ＩＬ−２が、ヒトＩＬ−２のアミノ酸配列を有しているか、またはヒトＩＬ−２のアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有しているその変異体のアミノ酸配列を有している、組み換えによって生産されたＩＬ−２である、請求項６５から７１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７３】
前記その変異体が、ｄｅｓ−アラニル−１，セリン１２５ヒトインターロイキン−２である、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
前記個体に対して免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体を投与することをさらに含む、請求項６５から７３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７５】
前記個体がガンについて処置されている、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】
前記ガンがＢ細胞リンパ腫である、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
前記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】
前記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、抗ＣＤ２０抗体またはその抗原結合断片である、請求項７７に記載の方法。
【請求項７９】
前記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、請求項７５に記載の方法。
【請求項８０】
前記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、テレックス、ＭＤＸ−０１０、ＥＭＤ  ７２０００、エルビタックス、ＷＸ−Ｇ２５０、ＩＤＭ−１、ＭＤＸ−２１０、ＺＡＭＹＬ、キャンパス、およびそれらの抗原結合断片からなる群より選択される、請求項７５に記載の方法。
【請求項８１】
インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測する必要がある個体におけるインターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測するための、診断方法において使用されるキットであって、前記キットには、Ｆｃγ受容体ＩＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＡ）遺伝子の多型領域に隣接して、または多型領域に特異的にハイブリダイズする少なくとも１つのプローブまたはプライマーが含まれ、前記多型領域には、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ対立遺伝子をコードするヌクレオチドが含まれている、キット。
【請求項８２】
使用のための説明書がさらに含まれている、請求項８１に記載のキット。
【請求項８３】
インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測する必要がある個体におけるインターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測するための、診断方法において使用されるキットであって、前記キットには、Ｆｃγ受容体ＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＡ）遺伝子の多型領域に隣接して、または多型領域に特異的にハイブリダイズする少なくとも１つのプローブまたはプライマーが含まれ、前記多型領域には、ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ対立遺伝子をコードするヌクレオチドが含まれている、キット。
【請求項８４】
使用のための説明書がさらに含まれている、請求項８３に記載のキット。
【請求項８５】
インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測する必要がある個体において、インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測するための診断方法あって、前記方法には、前記個体のＦｃγ受容体ＩＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＩＡ）遺伝子の対立遺伝子パターンを検出することが含まれ、ここでは、ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｌ遺伝子型、ヘテロ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｒ遺伝子型、またはヘテロ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｈ遺伝子型の存在が、前記ＩＬ−２免疫療法に対するポジティブな治療応答を示す個体の指標である、方法。
【請求項８６】
前記個体に、ガンの処置のためのＩＬ−２免疫療法が必要である、請求項８５に記載の方法。
【請求項８７】
前記個体が、前記ガンの細胞の表面上に発現される細胞表面抗原を標的とする抗体での処置をもまた受けている、請求項８６に記載の方法。
【請求項８８】
前記抗体が免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体である、請求項８７に記載の方法。
【請求項８９】
前記ガンがＢ細胞リンパ腫である、請求項８６、８７、または８８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９０】
前記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、請求項８９に記載の方法。
【請求項９１】
前記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、請求項８６、８７、または８８のいずれかに記載の方法。
【請求項９２】
前記ＦｃγＲＩＩＩＡ遺伝子についての対立遺伝子パターンが、対立遺伝子特異的ハイブリダイゼーション、プライマー特異的エクステンション、オリゴヌクレオチドライゲーションアッセイ、制限酵素部位の分析、および一本鎖高次構造多型分析からなる群より選択される方法によって検出される、請求項８５〜９１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９３】
ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＩＡ）４８Ｌ／Ｌ遺伝子型を含む個体の免疫機能を高めるための方法であって、前記方法には、インターロイキン−２免疫療法を前記個体に投与することが含まれる、方法。
【請求項９４】
前記ＩＬ−２免疫療法に、少なくとも１用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその生物学的活性のある変異体を、前記個体に投与することが含まれる、請求項９３に記載の方法。
【請求項９５】
多用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその変異体が前記個体に投与される、請求項９４に記載の方法。
【請求項９６】
前記ＩＬ−２またはその変異体が１日１回の投与レジュメにしたがって投与される、請求項９５に記載の方法。
【請求項９７】
前記ＩＬ−２またはその変異体が、１週間に２回または１週間に３回の投与レジュメにしたがって投与される、請求項９５に記載の方法。
【請求項９８】
前記ＩＬ−２またはその変異体が皮下投与される、請求項９３〜９７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９９】
前記ＩＬ−２またはその変異体が、単量体ＩＬ−２薬学的組成物、多量体ＩＬ−２組成物、凍結乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物、および噴霧乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物として提供される、請求項９３〜９８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１００】
前記ＩＬ−２が、ヒトＩＬ−２のアミノ酸配列を有しているか、またはヒトＩＬ−２のアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有しているその変異体のアミノ酸配列を有している、組み換えによって生産されたＩＬ−２である、請求項９３〜９９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０１】
前記その変異体が、ｄｅｓ−アラニル−１，セリン１２５ヒトインターロイキン−２である、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０２】
前記個体に対して免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体を投与することをさらに含む、請求項９３〜１０１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０３】
前記個体がガンについて処置されている、請求項１０２に記載の方法。
【請求項１０４】
前記ガンがＢ細胞リンパ腫である、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０５】
前記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０６】
前記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、抗ＣＤ２０抗体またはその抗原結合断片である、請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０７】
前記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０８】
前記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、テレックス、ＭＤＸ−０１０、ＥＭＤ  ７２０００、エルビタックス、ＷＸ−Ｇ２５０、ＩＤＭ−１、ＭＤＸ−２１０、ＺＡＭＹＬ、キャンパス、およびそれらの抗原結合断片からなる群より選択される、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０９】
ヘテロ接合型Ｆｃγ受容体ＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＡ）１３１Ｈ／Ｒ遺伝子型またはホモ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ／Ｒ遺伝子型を含む個体のガンを処置するための方法であって、前記方法には、インターロイキン−２免疫療法を前記個体に投与することが含まれる、方法。
【請求項１１０】
前記ＩＬ−２免疫療法に、少なくとも１用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその生物学的活性のある変異体を、前記個体に投与することが含まれる、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１１】
多用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその変異体が前記個体に投与される、請求項１１０に記載の方法。
【請求項１１２】
前記ＩＬ−２またはその変異体が１日１回の投与レジュメにしたがって投与される、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１３】
前記ＩＬ−２またはその変異体が、１週間に２回または１週間に３回、週に２回もしくは３回の投与レジュメにしたがって投与される、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１４】
前記ＩＬ−２またはその変異体が皮下投与される、請求項１０９〜１１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１５】
前記ＩＬ−２またはその変異体が、単量体ＩＬ−２薬学的組成物、多量体ＩＬ−２組成物、凍結乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物、および噴霧乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物として提供される、請求項１０９〜１１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１６】
前記ＩＬ−２が、ヒトＩＬ−２のアミノ酸配列を有しているか、またはヒトＩＬ−２のアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有しているその変異体のアミノ酸配列を有している、組み換えによって生産されたＩＬ−２である、請求項１０９〜１１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１７】
前記その変異体が、ｄｅｓ−アラニル−１，セリン１２５ヒトインターロイキン−２である、請求項１１６に記載の方法。
【請求項１１８】
前記個体に対して免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体を投与することをさらに含む、請求項１０９〜１１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１９】
前記個体がガンについて処置されている、請求項１１８に記載の方法。
【請求項１２０】
前記ガンがＢ細胞リンパ腫である、請求項１１９に記載の方法。
【請求項１２１】
前記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２２】
前記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、抗ＣＤ２０抗体またはその抗原結合断片である、請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２３】
前記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、請求項１１９に記載の方法。
【請求項１２４】
前記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、テレックス、ＭＤＸ−０１０、ＥＭＤ  ７２０００、エルビタックス、ＷＸ−Ｇ２５０、ＩＤＭ−１、ＭＤＸ−２１０、ＺＡＭＹＬ、キャンパス、およびそれらの抗原結合断片からなる群より選択される、請求項１１９に記載の方法。
【請求項１２５】
インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測する必要がある個体におけるインターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測するための、診断方法において使用されるキットであって、前記キットには、Ｆｃγ受容体ＩＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＩＡ）遺伝子の多型領域に隣接して、または多型領域に特異的にハイブリダイズする少なくとも１つのプローブまたはプライマーが含まれ、前記多型領域には、ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ対立遺伝子をコードするヌクレオチドが含まれている、キット。
【請求項１２６】
使用のための説明書がさらに含まれている、請求項１２５に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、予知医学の分野に、より具体的には、免疫応答疾患の処置ストラテジーを評価するための診断法としての、Ｆｃγ受容体（ＦｃγＲ）多型の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
インターロイキン−２（ＩＬ−２）は、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞およびＴ細胞の増殖および機能についての強い刺激因子である（非特許文献１）。この自然界に存在しているリンホカインは、種々の悪性腫瘍に対して、単独で、あるいは、リンホカイン活性化キラー（ＬＡＫ）細胞または腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）と組み合わせた場合のいずれかで、抗腫瘍活性を有することが示されている（例えば、非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４；非特許文献５；および非特許文献６を参照のこと）。ＩＬ−２の抗腫瘍活性は、転移性黒色腫および腎細胞ガンを有している患者において、市販されているＩＬ−２処方物であるプロロイキン（Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標））を使用して記載されている。リンパ腫を含む他の疾患もまた、ＩＬ−２での処置に応答するようである（非特許文献７）。しかし、腫瘍の増殖に関してポジティブな治療結果を得るために使用される高用量のＩＬ−２は、多くの場合に、発熱および悪寒、低血圧および毛細血管漏出（血管漏出症候群、すなわち、ＶＬＳ）、ならびに神経学的変化を含む深刻な副作用を引き起こす（例えば、非特許文献８；非特許文献９；および非特許文献１０を参照のこと）。
【０００３】
モノクローナル抗体は、徐々に、固形腫瘍、例えば、乳ガンの処置について、さらには、ＣＤ２０細胞表面抗原を発現するＢ細胞型のリンパ腫の処置について、選択される方法となってきている。生体外での研究においては、ＣＤ２０に対するモノクローナル抗体がアポトーシスによる細胞死を生じることが明らかにされている（非特許文献１１）。他の研究では、Ｂ細胞の死が主に、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）によって媒介されていることが報告されている。
【０００４】
抗ＣＤ２０抗体の抗腫瘍活性についての考えられる免疫学的根拠が原因で、ＮＫ細胞の機能を高める他のサイトカインとの組み合わせが試験されている。ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β、γ−ＩＦＮ、およびＩＬ−２のようなサイトカインは、別のＮＫ機能であるＡＤＣＣの増強作用について試験されている。全てが、ＡＤＣＣを増強させることにおいて活性であるようであるが、それぞれの因子には、その自身の特異的毒性が伴う。例えば、非特許文献１２；非特許文献１３を参照のこと。ＩＬ−２およびモノクローナル抗体であるリツキサン（Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標）；ＩＤＥＣ−Ｃ２Ｂ８；ＩＤＥＣ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｃｏｒｐ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）との併用療法についての現在行われている研究では、これらの２つの治療薬での非ホジキンＢ細胞リンパ腫患者において臨床応答が改善されることが示されている（特許文献１）。
【０００５】
リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）は、ヒトＩｇＧ１と、マウス抗ＣＤ２０モノクローナル抗体から単離されたマウス可変領域を有しているκ定常領域を含む、キメラ抗ＣＤ２０モノクローナル抗体ＩＤＥＣ−２Ｂ８（非特許文献１４）である。リツキシマブは、低−中期の高悪性度の非ホジキンリンパ腫について有効な処置であることが示されている（例えば、非特許文献１５；非特許文献；非特許文献１７；非特許文献１８；非特許文献１９；非特許文献２０；非特許文献２１４；非特許文献２２；非特許文献２３を参照のこと）。しかし、低悪性度のＮＨＬを有している患者の３０％〜５０％は、このモノクローナル抗体に対して臨床的な応答は示さない（非特許文献９；非特許文献１０）。正確な作用機構は判っていないが、リツキシマブの抗リンパ腫作用は、補体媒介性細胞傷害性（ＣＭＣ）、抗体依存性細胞傷害性、細胞増殖の阻害、および最終的には、アポトーシスの直接の誘導がその原因の一部であるという証拠が示されている。
【０００６】
ＡＤＣＣは、ＩｇＧのＦｃ部分についての白血球受容体（ＦｃγＲ）によって媒介される。Ｆｃ受容体は膜に結合した糖タンパク質であり、これは、好中球、マクロファージ、ならびに、その主な機能が免疫グロブリン、免疫複合体、および他の粒子に結合してそれらを内在化させる他のタイプの細胞の表面上で発現される。様々なタイプのＦｃγＲは、種々の免疫エフェクター細胞上で発現され得る。特異的なＦｃγＲの取り込みにより、エフェクター細胞の活性化または阻害が生じる。
【０００７】
したがって、これまでに同定されているＦｃγＲは、３つのクラスに分けられ：ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３２）、およびＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６）は、エフェクター細胞を活性化させ；ＦｃγＲＩＩＢは活性化を阻害し；そしてＦｃγＲＩＩＩＢは他のＦｃγＲと共同して作用する。ＦｃγＲＩＩＩＡは、ＮＫ細胞、マクロファージ、および単球上に存在するが、ＦｃγＲＩＩＡとＦｃγＲＩＩＢは主にマクロファージ上に発現され、ＮＫ細胞上には発現されない。活性な受容体の取り込みにより、サイトカインの放出および炎症反応のような免疫活性が促進され、一方、阻害因子受容体の取り込みによっては、主に、免疫活性化を伴わずに免疫複合体の除去が生じる。
【０００８】
ＡＤＣＣにおいては、リツキシマブはガン細胞の表面上にあるＣＤ２０抗原に結合し、その後、エフェクター細胞（例えば、ＮＫ細胞およびマクロファージ）を、これらのエフェクター細胞上のＦｃγＲを介して架橋する。ナチュラルキラー細胞（これは、ヒトの末梢血リンパ球のおよそ１５％を占める）は、腫瘍細胞に対するＡＤＣＣを媒介する主なエフェクター細胞である。ＮＫ細胞の表面上にある低親和性ＦｃγＲＩＩＩＡ受容体は、ＩｇＧ抗体を認識してこれに結合する。ＮＫ細胞上へのＦｃγＲＩＩＩＡの取り込みは、リツキシマブのような治療的に投与されるＩｇＧモノクローナル抗体の抗腫瘍活性の原因となっている基本的機構であると考えられている（非特許文献２４；非特許文献２５；非特許文献２６；非特許文献２７）。ＮＫ細胞の細胞傷害性は、ＩＬ−２およびＩＬ−１２のようなサイトカインによって活性化される。
【０００９】
最近になって、特異的なＩｇＧサブクラスに対して異なる結合親和性を有しているこれらのＦｃγＲについて３つの多型が同定された：ＦｃγＲＩＩＩＡの１つの多型は、成熟配列の１５８位にバリン（Ｖ）残基またはフェニルアラニン（Ｆ）残基のいずれかを有しており、ＦｃγＲＩＩＩＡの３対立遺伝子多型は、成熟配列の４８位に、ロイシン（Ｌ）残基、アルギニン（Ｒ）残基、またはヒスチジン（Ｈ）残基のいずれかを有しており、そして、ＦｃγＲＩＩＡの１つの多型は、成熟配列の１３１位に、ヒスチジン（Ｈ）残基またはアルギニン（Ｒ）残基のいずれかを有している。ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｖ対立遺伝子は、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ対立遺伝子よりも良好にヒトＩｇＧ１に結合し（非特許文献２８）、そして１５８Ｖ対立遺伝子の増強させられた結合により、エフェクター細胞の活性の増強と、良好なＡＤＣＣが生じる（非特許文献２９；非特許文献３０９）。ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｒ対立遺伝子とＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｈ対立遺伝子は、報告によれば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４に対して、ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ対立遺伝子よりも高い親和性を有している（非特許文献３１）。ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｈ対立遺伝子は、ＩｇＧ２に対して、ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ対立遺伝子よりも高い親和性を有しているが、ＩｇＧ１に対するこれらの対立遺伝子形態の親和性においては、有意な差は報告されていない（非特許文献３２）。結果として、ＦｃγＲＩＩＩＡの４８Ｌ／Ｌ、ＦｃγＲＩＩＩＡの１５８Ｆ／Ｆ、またはＦｃγＲＩＩＡの１３１Ｒ／Ｒについてのホモ接合性は、特異的ＩｇＧサブクラスと相互作用する能力を弱める。これらの多型のうちの後者２つは、リツキシマブに対する臨床応答の指標であることが明らかにされている。したがって、より早い応答速度は、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｖ／Ｖ遺伝子型（非特許文献３３；非特許文献３４）またはＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｈ／Ｈ遺伝子型（非特許文献３４）に関係している。さらに、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｖ／Ｖ遺伝子型およびＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｈ／Ｈ遺伝子型の両方を有している個体は、長期間、病状の一次的な回復を示す（非特許文献３４）。
【特許文献１】米国特許公開番号２００３０１８５７９６明細書
【非特許文献１】Ｍｏｒｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９７６）１９３：１００７−１０１１
【非特許文献２】Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．（１９８７）３１６：８８９−８９７
【非特許文献３】Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，Ａｎｎ．Ｓｕｒｇ．（１９８８）２０８：１２１−１３５
【非特許文献４】Ｔｏｐａｌｉａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．（１９８８）６：８３９−８５３
【非特許文献５】Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．（１９８８）３１９：１６７６−１６８０
【非特許文献６】Ｗｅｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．（１９９２）１０：３３−４０
【非特許文献７】Ｇｉｓｓｅｌｂｒｅｃｈｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ（１９９４）８３（８）：２０２０−２０２２
【非特許文献８】Ｄｕｇｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ（１９９２）１２：１１５−１２２
【非特許文献９】Ｇｉｓｓｅｌｂｒｅｃｈｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ（１９９４）８３：２０８１−２０８５
【非特許文献１０】Ｓｚｎｏｌ  ａｎｄ  Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ，Ｂｌｏｏｄ（１９９４）８３：２０２０−２０２２
【非特許文献１１】Ｓｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ（１９９８）９１：１６４４−１６５２
【非特許文献１２】Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９８６）２３３（４７７０）：１３１８−１３２１
【非特許文献１３】Ｇｏｌｌｏｂ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ．（１９９８）１０２（３）：５６１−５７５
【非特許文献１４】Ｒｅｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ（１９９４）８３：４３５−４４５
【非特許文献１５】Ｍａｌｏｎｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ（１９９４）８４：２４５７−２４６６）
【非特許文献１６】ＭｃＬａｕｇｈｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．（１９９８）１６：１６２８２５−２８３３
【非特許文献１７】Ｍａｌｏｎｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ（１９９７）９０：２１８８−２１９５
【非特許文献１８】Ｈａｉｎｓｗｏｒｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ（２０００）９５：３０５２−３０５６
【非特許文献１９】Ｃｏｌｏｍｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ（２００１）９７：１０１−１０６
【非特許文献２０】Ｃｏｉｆｆｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ（１９９８）９２：１９２７−１９３２
【非特許文献２１】Ｆｏｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．（２０００）１８：３１７−３２
【非特許文献２２】Ａｎｄｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓ．（１９９７）２５：７０５−７０８
【非特許文献２３】Ｖｏｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ．Ｏｎｃｏｌ．（１９９９）１０：５８ａ
【非特許文献２４】Ｃｌｙｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．（２０００）６：４４３−４４６
【非特許文献２５】Ｃｏｏｐｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２００１）２２：６３３−６４０
【非特許文献２６】ＬｅｉｂｓｏｎＩｍｍｕｎｉｔｙ（１９９７）６：６５５−６６１
【非特許文献２７】Ｒｏｉｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（２００１）（第６版）；Ｍｏｓｂｙ，Ｅｄｉｎｂｕｒｇｈ，ＵＫ
【非特許文献２８】Ｋｏｅｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ（１９９７）９０：１１０９−１１１４
【非特許文献２９】Ｓｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（２００１）１７６：６５９１−６６０４
【非特許文献３０】Ｖａｎｃｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．（１９９３）１５１；６４２９−６４３
【非特許文献３１】ｄｅ  Ｈａａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．（１９９６）１５６（８）：３９４８−３９５５
【非特許文献３２】Ｐａｒｒｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．（１９９２）９０：１５３７−１５４６
【非特許文献３３】Ｃａｒｔｒｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ（２００２）９９：７５４−７５８
【非特許文献３４】Ｗｅｎｇ  ａｎｄ  ＬｅｖｙＪ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．（２００３）２１：１−８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
モノクローナル抗体治療に対する応答性におけるこれらの多型の重要性を考慮すると、これらの多型を他の免疫調節因子に対する臨床応答の診断薬として使用することができる他の手段が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
（発明の要約）
インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法での介入のための診断薬としてのＦｃγ受容体（ＦｃγＲ）多型の使用方法が提供される。この方法には、個体のＦｃγＲＩＩＩＡ遺伝子の対立遺伝子パターンまたはＦｃγＲＩＩＡ遺伝子の対立遺伝子パターンを検出すること、および、対立遺伝子パターンがＩＬ−２免疫療法に対するポジティブな治療応答の予測であるかどうかを決定することが含まれる。ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ／Ｆホモ接合遺伝子型の存在、および／または、ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ対立遺伝子の１つもしくは両方のコピーの存在、および／または、ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ対立遺伝子の１つまたは両方のコピーの存在は、ＩＬ−２免疫療法に対するポジティブな治療応答の指標であり、したがって、免疫疾患の処置のためのＩＬ−２免疫療法での医学的な介入の指標である。
【００１２】
この診断方法については、その免疫応答に障害が生じている固体を同定することにおける用途が見出されており、そしてそのための、ＩＬ−２免疫療法によってＦｃγＲによって媒介される免疫応答を効果的に高めるその能力を増強させるための手段を提供することができる。したがって、本発明によってまた、これらの特定のＦｃγＲ多型を有している個体の免疫疾患を処置するための方法も適用される。ここでは、処置には、ＩＬ−２免疫療法を、単独で、または、ＦｃγＲＩＩＩＡによって媒介されるかもしくはＦｃγＲＩＩＡによって媒介される免疫応答を介して治療効果を提供する１つ以上の他の薬と組み合わせて投与することが含まれる。本発明の方法を使用して処置することができる免疫疾患としては、Ｂ細胞リンパ腫、ならびに、乳ガン、結腸ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、および他のガンを含む固形腫瘍のようなガンが挙げられるが、これらに限定はされない。
【００１３】
以下の実施形態が本発明に含まれる：
１．インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測する必要がある個体においてインターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測するための診断方法であって、上記方法には、上記個体のＦｃγ受容体ＩＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＩＡ）遺伝子についての対立遺伝子パターンを検出することが含まれ、ここでは、ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ／Ｆ遺伝子型の存在が、上記ＩＬ−２免疫療法に対してポジティブな治療応答を示す個体の指標である、方法。
２．上記個体に、ガンの処置のためのＩＬ−２免疫療法が必要である、１に記載の方法。
３．上記個体が、上記ガンの細胞の表面上に発現される細胞表面抗原を標的とする抗体での処置をもまた受けている、２に記載の方法。
４．上記抗体が免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体である、３に記載方法。
５．上記ガンがＢ細胞リンパ腫である、２、３、または４のいずれか１つに記載の方法。
６．上記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、５に記載の方法。
７．上記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、２、３、または４に記載の方法。
８．上記ＦｃγＲＩＩＩＡ遺伝子についての対立遺伝子パターンが、対立遺伝子特異的ハイブリダイゼーション、プライマー特異的エクステンション、オリゴヌクレオチドライゲーションアッセイ、制限酵素部位の分析、および一本鎖高次構造多型分析からなる群より選択される方法によって検出される、１〜７のいずれか１つに記載の方法。
９．インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測する必要がある個体においてインターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測するための診断方法であって、上記方法には、上記個体のＦｃγ受容体ＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＡ）遺伝子についての対立遺伝子パターンを検出することが含まれ、ここでは、ヘテロ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｈ／Ｒ遺伝子型の存在、またはホモ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ／Ｒ遺伝子型の存在が、上記ＩＬ−２免疫療法に対してポジティブな治療応答を示す個体の指標である、方法。
１０．上記個体に、ガンの処置のためのＩＬ−２免疫療法が必要である、９に記載の方法。
１１．上記個体が、上記ガンの細胞の表面上に発現される細胞表面抗原を標的とする抗体での処置をもまた受けている、１０に記載の方法。
１２．上記抗体が免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体である、１１に記載の方法。
１３．上記ガンがＢ細胞リンパ腫である、１０、１１、または１２のいずれかに記載の方法。
１４．上記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、１３に記載の方法。
１５．上記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、１０、１１、または１２のいずれかに記載の方法。
１６．上記ＦｃγＲＩＩＩＡ遺伝子についての対立遺伝子パターンが、対立遺伝子特異的ハイブリダイゼーション、プライマー特異的エクステンション、オリゴヌクレオチドライゲーションアッセイ、制限酵素部位の分析、および一本鎖ＤＮＡ高次構造多型分析からなる群より選択される方法によって検出される、９〜１５のいずれか１つに記載の方法。
１７．ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＩＡ）１５８Ｆ／Ｆ遺伝子型を含む個体の免疫機能を高めるための方法であって、上記方法には、インターロイキン−２免疫療法を上記個体に投与することが含まれる、方法。
１８．上記ＩＬ−２免疫療法に、少なくとも１用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその生物学的活性のある変異体を、上記個体に投与することが含まれる、１７に記載の方法。
１９．多用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその変異体が上記個体に投与される、１８に記載の方法。
２０．上記ＩＬ−２またはその変異体が１日１回の投与レジュメにしたがって投与される、１９に記載の方法。
２１．上記ＩＬ−２またはその変異体が、１週間に２回または１週間に３回の投与レジュメにしたがって投与される、１９に記載の方法。
２２．上記ＩＬ−２またはその変異体が皮下投与される、１７から２１のいずれか１つに記載の方法。
２３．上記ＩＬ−２またはその変異体が、単量体ＩＬ−２薬学的組成物、多量体ＩＬ−２組成物、凍結乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物、および噴霧乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物として提供される、１７から２２のいずれか１つに記載の方法。
２４．上記ＩＬ−２が、ヒトＩＬ−２のアミノ酸配列を有しているか、またはヒトＩＬ−２のアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有しているその変異体のアミノ酸配列を有している、組み換えによって生産されたＩＬ−２である、１７から２３のいずれか１つに記載の方法。
２５．上記その変異体が、ｄｅｓ−アラニル−１，セリン１２５ヒトインターロイキン−２である、２４に記載の方法。
２６．上記個体に対して免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体を投与することをさらに含む、１７から２５のいずれか１つに記載の方法。
２７．上記個体がガンについて処置されている、２６に記載の方法。
２８．上記ガンがＢ細胞リンパ腫である、２７に記載の方法。
２９．上記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、２８に記載の方法。
３０．上記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、抗ＣＤ２０抗体またはその抗原結合断片である、２９に記載の方法。
３１．上記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、２７に記載の方法。
３２．上記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、テレックス（Ｔｈｅｒｅｘ）、ＭＤＸ−０１０、ＥＭＤ  ７２０００、エルビタックス（Ｅｒｂｉｔｕｘ）、ＷＸ−Ｇ２５０、ＩＤＭ−１、ＭＤＸ−２１０、ＺＡＭＹＬ、キャンパス（Ｃａｍｐａｔｈ）、およびそれらの抗原結合断片からなる群より選択される、２７に記載の方法。
３３．ヘテロ接合型Ｆｃγ受容体ＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＡ）１３１Ｈ／Ｒ遺伝子型またはホモ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ／Ｒ遺伝子型を含む個体の免疫機能を高めるための方法であって、上記方法には、インターロイキン−２免疫療法を上記個体に投与することが含まれる、方法。
３４．上記ＩＬ−２免疫療法に、少なくとも１用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその生物学的活性のある変異体を、上記個体に投与することが含まれる、３３に記載の方法。
３５．多用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその変異体が上記個体に投与される、３４に記載の方法。
３６．上記ＩＬ−２またはその変異体が１日１回の投与レジュメにしたがって投与される、３５に記載の方法。
３７．上記ＩＬ−２またはその変異体が、１週間に２回または１週間に３回、週に２回もしくは３回の投与レジュメにしたがって投与される、３５に記載の方法。
３８．上記ＩＬ−２またはその変異体が皮下投与される、３３から３７のいずれか１つに記載の方法。
３９．上記ＩＬ−２またはその変異体が、単量体ＩＬ−２薬学的組成物、多量体ＩＬ−２組成物、凍結乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物、および噴霧乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物として提供される、３３から３８のいずれか１つに記載の方法。
４０．上記ＩＬ−２が、ヒトＩＬ−２のアミノ酸配列を有しているか、またはヒトＩＬ−２のアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有しているその変異体のアミノ酸配列を有している、組み換えによって生産されたＩＬ−２である、３３から３９のいずれか１つに記載の方法。
４１．上記その変異体が、ｄｅｓ−アラニル−１，セリン１２５ヒトインターロイキン−２である、４０に記載の方法。
４２．上記個体に対して免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体を投与することをさらに含む、３３から４１のいずれか１つに記載の方法。
４３．上記個体がガンについて処置されている、４２に記載の方法。
４４．上記ガンがＢ細胞リンパ腫である、４３に記載の方法。
４５．上記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、４４に記載の方法。
４６．上記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、抗ＣＤ２０抗体またはその抗原結合断片である、４５に記載の方法。
４７．上記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、４３に記載の方法。
４８．上記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、テレックス、ＭＤＸ−０１０、ＥＭＤ  ７２０００、エルビタックス、ＷＸ−Ｇ２５０、ＩＤＭ−１、ＭＤＸ−２１０、ＺＡＭＹＬ、キャンパス、およびそれらの抗原結合断片からなる群より選択される、４３に記載の方法。
４９．ホモ接合型ＦｃγＩＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＩＡ）１５８Ｆ／Ｆ遺伝子型を含む個体のガンを処置するための方法であって、上記方法には、インターロイキン−２免疫療法を上記個体に投与することが含まれる、方法。
５０．上記ＩＬ−２免疫療法に、少なくとも１用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその生物学的活性のある変異体を、上記個体に投与することが含まれる、４９に記載の方法。
５１．多用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその変異体が上記個体に投与される、５０に記載の方法。
５２．上記ＩＬ−２またはその変異体が１日１回の投与レジュメにしたがって投与される、５１に記載の方法。
５３．上記ＩＬ−２またはその変異体が、１週間に２回または１週間に３回、週毎に２回もしくは３回の投与レジュメにしたがって投与される、５１に記載の方法。
５４．上記ＩＬ−２またはその変異体が皮下投与される、４９から５３のいずれか１つに記載の方法。
５５．上記ＩＬ−２またはその変異体が、単量体ＩＬ−２薬学的組成物、多量体ＩＬ−２組成物、凍結乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物、および噴霧乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物として提供される、４９から５４のいずれか１つに記載の方法。
５６．上記ＩＬ−２が、ヒトＩＬ−２のアミノ酸配列を有しているか、またはヒトＩＬ−２のアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有しているその変異体のアミノ酸配列を有している、組み換えによって生産されたＩＬ−２である、４９から５５のいずれか１つに記載の方法。
５７．上記その変異体が、ｄｅｓ−アラニル−１，セリン１２５ヒトインターロイキン−２である、５６に記載の方法。
５８．上記個体に対して免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体を投与することをさらに含む、４９から５７のいずれか１つに記載の方法。
５９．上記個体がガンについて処置されている、５８に記載の方法。
６０．上記ガンがＢ細胞リンパ腫である、５９に記載の方法。
６１．上記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、６０に記載の方法。
６２．上記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、抗ＣＤ２０抗体またはその抗原結合断片である、６１に記載の方法。
６３．上記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、５９に記載の方法。
６４．上記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、テレックス、ＭＤＸ−０１０、ＥＭＤ  ７２０００、エルビタックス、ＷＸ−Ｇ２５０、ＩＤＭ−１、ＭＤＸ−２１０、ＺＡＭＹＬ、キャンパス、およびそれらの抗原結合断片からなる群より選択される、５９に記載の方法。
６５．ヘテロ接合型ＦｃγＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＡ）１３１Ｈ／Ｒ遺伝子型またはホモ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ／Ｒ遺伝子型を含む個体のガンを処置するための方法であって、上記方法には、インターロイキン−２免疫療法を上記個体に投与することが含まれる、方法。
６６．上記ＩＬ−２免疫療法に、少なくとも１用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその生物学的活性のある変異体を、上記個体に投与することが含まれる、６５に記載の方法。
６７．多用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその変異体が上記個体に投与される、６６に記載の方法。
６８．上記ＩＬ−２またはその変異体が１日１回の投与レジュメにしたがって投与される、６７に記載の方法。
６９．上記ＩＬ−２またはその変異体が、１週間に２回または１週間に３回、週毎に２回もしくは３回の投与レジュメにしたがって投与される、６７に記載の方法。
７０．上記ＩＬ−２またはその変異体が皮下投与される、６５から６９のいずれか１つに記載の方法。
７１．上記ＩＬ−２またはその変異体が、単量体ＩＬ−２薬学的組成物、多量体ＩＬ−２組成物、凍結乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物、および噴霧乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物として提供される、６５から７０のいずれか１つに記載の方法。
７２．上記ＩＬ−２が、ヒトＩＬ−２のアミノ酸配列を有しているか、またはヒトＩＬ−２のアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有しているその変異体のアミノ酸配列を有している、組み換えによって生産されたＩＬ−２である、６５から７１のいずれか１つに記載の方法。
７３．上記その変異体が、ｄｅｓ−アラニル−１，セリン１２５ヒトインターロイキン−２である、７２に記載の方法。
７４．上記個体に対して免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体を投与することをさらに含む、６５から７３のいずれか１つに記載の方法。
７５．上記個体がガンについて処置されている、７４に記載の方法。
７６．上記ガンがＢ細胞リンパ腫である、７５に記載の方法。
７７．上記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、７６に記載の方法。
７８．上記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、抗ＣＤ２０抗体またはその抗原結合断片である、７７に記載の方法。
７９．上記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、７５に記載の方法。
８０．上記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、テレックス、ＭＤＸ−０１０、ＥＭＤ  ７２０００、エルビタックス、ＷＸ−Ｇ２５０、ＩＤＭ−１、ＭＤＸ−２１０、ＺＡＭＹＬ、キャンパス、およびそれらの抗原結合断片からなる群より選択される、７５に記載の方法。
【００１４】
８１．インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測する必要がある個体におけるインターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測するための、診断方法において使用されるキットであって、上記キットには、Ｆｃγ受容体ＩＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＡ）遺伝子の多型領域に隣接して、または多型領域に特異的にハイブリダイズする少なくとも１つのプローブまたはプライマーが含まれ、上記多型領域には、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ対立遺伝子をコードするヌクレオチドが含まれている、キット。
８２．使用のための説明書がさらに含まれている、８１に記載のキット。
８３．インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測する必要がある個体におけるインターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測するための、診断方法において使用されるキットであって、上記キットには、Ｆｃγ受容体ＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＡ）遺伝子の多型領域に隣接して、または多型領域に特異的にハイブリダイズする少なくとも１つのプローブまたはプライマーが含まれ、上記多型領域には、ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ対立遺伝子をコードするヌクレオチドが含まれている、キット。
８４．使用のための説明書がさらに含まれている、８３に記載のキット。
８５．インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測する必要がある個体においてインターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測するための診断方法あって、上記方法には、上記個体のＦｃγ受容体ＩＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＩＡ）遺伝子の対立遺伝子パターンを検出することが含まれ、ここでは、ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｌ遺伝子型、ヘテロ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｒ遺伝子型、またはヘテロ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｈ遺伝子型の存在が、上記ＩＬ−２免疫療法に対してポジティブな治療応答を示す個体の指標である、方法。
８６．上記個体に、ガンの処置のためのＩＬ−２免疫療法が必要である、８５に記載の方法。
８７．上記個体が、上記ガンの細胞の表面上に発現される細胞表面抗原を標的とする抗体での処置をもまた受けている、８６に記載の方法。
８８．上記抗体が免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体である、８７に記載の方法。
８９．上記ガンがＢ細胞リンパ腫である、８６、８７、または８８に記載の方法。
９０．上記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、８９に記載の方法。
９１．上記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、８６、８７、または８８に記載の方法。
９２．上記ＦｃγＲＩＩＩＡ遺伝子についての対立遺伝子パターンが、対立遺伝子特異的ハイブリダイゼーション、プライマー特異的エクステンション、オリゴヌクレオチドライゲーションアッセイ、制限酵素部位の分析、および一本鎖高次構造多型分析からなる群より選択される方法によって検出される、８５から９１に記載の方法。
９３．ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＩＡ）４８Ｌ／Ｌ遺伝子型を含む個体の免疫機能を高めるための方法であって、上記方法には、インターロイキン−２免疫療法を上記個体に投与することが含まれる、方法。
９４．上記ＩＬ−２免疫療法に、少なくとも１用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその生物学的活性のある変異体を、上記個体に投与することが含まれる、９３に記載の方法。
９５．多用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその変異体が上記個体に投与される、９４に記載の方法。
９６．上記ＩＬ−２またはその変異体が１日１回の投与レジュメにしたがって投与される、９５に記載の方法。
９７．上記ＩＬ−２またはその変異体が、１週間に２回または１週間に３回の投与レジュメにしたがって投与される、９５に記載の方法。
９８．上記ＩＬ−２またはその変異体が皮下投与される、９３から９７に記載の方法。
９９．上記ＩＬ−２またはその変異体が、単量体ＩＬ−２薬学的組成物、多量体ＩＬ−２組成物、凍結乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物、および噴霧乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物として提供される、９３から９８に記載の方法。
１００．上記ＩＬ−２が、ヒトＩＬ−２のアミノ酸配列を有しているか、またはヒトＩＬ−２のアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有しているその変異体のアミノ酸配列を有している、組み換えによって生産されたＩＬ−２である、９３から９９に記載の方法。
１０１．上記その変異体が、ｄｅｓ−アラニル−１，セリン１２５ヒトインターロイキン−２である、１００に記載の方法。
１０２．上記個体に対して免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体を投与することをさらに含む、９３から１０１に記載の方法。
１０３．上記個体がガンについて処置されている、１０２に記載の方法。
１０４．上記ガンがＢ細胞リンパ腫である、１０３に記載の方法。
１０５．上記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、１０４に記載の方法。
１０６．上記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、抗ＣＤ２０抗体またはその抗原結合断片である、１０５に記載の方法。
１０７．上記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、１０３に記載の方法。
１０８．上記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、テレックス、ＭＤＸ−０１０、ＥＭＤ  ７２０００、エルビタックス、ＷＸ−Ｇ２５０、ＩＤＭ−１、ＭＤＸ−２１０、ＺＡＭＹＬ、キャンパス、およびそれらの抗原結合断片からなる群より選択される、１０３に記載の方法。
１０９．ヘテロ接合型Ｆｃγ受容体ＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＡ）１３１Ｈ／Ｒ遺伝子型またはホモ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ／Ｒ遺伝子型を含む個体のガンを処置するための方法であって、上記方法には、インターロイキン−２免疫療法を上記個体に投与することが含まれる、方法。
１１０．上記ＩＬ−２免疫療法に、少なくとも１用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその生物学的活性のある変異体を、上記個体に投与することが含まれる、１０９に記載の方法。
１１１．多用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその変異体が上記個体に投与される、１１０に記載の方法。
１１２．上記ＩＬ−２またはその変異体が１日１回の投与レジュメにしたがって投与される、１１１に記載の方法。
１１３．上記ＩＬ−２またはその変異体が、１週間に２回または１週間に３回、週に２回もしくは３回の投与レジュメにしたがって投与される、１１１に記載の方法。
１１４．上記ＩＬ−２またはその変異体が皮下投与される、１０９から１１３に記載の方法。
１１５．上記ＩＬ−２またはその変異体が、単量体ＩＬ−２薬学的組成物、多量体ＩＬ−２組成物、凍結乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物、および噴霧乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物として提供される、１０９から１１４に記載の方法。
１１６．上記ＩＬ−２が、ヒトＩＬ−２のアミノ酸配列を有しているか、またはヒトＩＬ−２のアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有しているその変異体のアミノ酸配列を有している、組み換えによって生産されたＩＬ−２である、１０９から１１５に記載の方法。
１１７．上記その変異体が、ｄｅｓ−アラニル−１，セリン１２５ヒトインターロイキン−２である、１１６に記載の方法。
１１８．上記個体に対して免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体を投与することをさらに含む、１０９から１１７に記載の方法。
１１９．上記個体がガンについて処置されている、１１８に記載の方法。
１２０．上記ガンがＢ細胞リンパ腫である、１１９に記載の方法。
１２１．上記Ｂ細胞リンパ腫が非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、１２０に記載の方法。
１２２．上記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、抗ＣＤ２０抗体またはその抗原結合断片である、１２１に記載の方法。
１２３．上記ガンが、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）からなる群より選択される、１１９に記載の方法。
１２４．上記ＩｇＧ１モノクローナル抗体が、テレックス、ＭＤＸ−０１０、ＥＭＤ  ７２０００、エルビタックス、ＷＸ−Ｇ２５０、ＩＤＭ−１、ＭＤＸ−２１０、ＺＡＭＹＬ、キャンパス、およびそれらの抗原結合断片からなる群より選択される、１１９に記載の方法。
１２５．インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測する必要がある個体におけるインターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測するための、診断方法において使用されるキットであって、上記キットには、Ｆｃγ受容体ＩＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＩＡ）遺伝子の多型領域に隣接して、または多型領域に特異的にハイブリダイズする少なくとも１つのプローブまたはプライマーが含まれ、上記多型領域には、ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ対立遺伝子をコードするヌクレオチドが含まれている、キット。
１２６．使用のための説明書がさらに含まれている、１２５に記載のキット。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
（詳細な説明）
本発明は、その必要があるヒト被験体、特に、受容体媒介性の抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を介してその治療効果を媒介する抗ガンモノクローナル抗体との組み合わせたＩＬ−２免疫療法が考えられる個体において、インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法に対する治療応答を予測するための診断方法に関する。本発明の方法では、ＩＬ−２免疫療法での介入がポジティブな治療応答を生じる可能性があるかどうかを決定するための診断ツールとして、Ｆｃγ受容体（ＦｃγＲ）機能的多型が利用される。具体的な目的は、成熟ヒトＦｃγＲＩＩＩＡの１５８位でのバリン（Ｖ）／フェニルアラニン（Ｆ）多型（配列番号６の１７６位に対応する、ここでは、Ｖ残基が示される；配列番号５に示されるヌクレオチド配列によってコードされる）；成熟ヒトＦｃγＲＩＩＩＡの４８位でのロイシン（Ｌ）／アルギニン（Ｒ）／ヒスチジン（Ｈ）３対立遺伝子多型（配列番号６の６６位に対応する、ここでは、Ｌ残基が示される；配列番号５に示されるヌクレオチド配列によってコードされる）；および成熟ヒトＦｃγＲＩＩＡの１３１位でのヒスチジン（Ｈ）／アルギニン（Ｒ）多型（配列番号１２の１６５位に対応する、ここでは、Ｒ残基が示される；配列番号１１（ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．ＮＭ＿０２１６４２）に示されるヌクレオチド配列によってコードされる）である。
【００１６】
ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｖ／Ｆ多型は、成熟ＦｃγＲＩＩＩＡ配列または前駆体ＦｃγＲＩＩＩＡ配列が、この多型の位置の番号の基準とされているかに応じて、１５８Ｖ／Ｆ多型および１７６Ｖ／Ｆ多型の両方として、科学文献に記載されている。本発明の目的については、これらの２つの用語は同義的に使用される。ヒトＦｃγＲＩＩＩＡをコードする全長の配列が配列番号１に示され、翻訳されたアミノ酸配列が配列番号２に示される。ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．ＮＭ＿０００５６９を参照のこと。このコード配列には、３つの可能性のある翻訳開始コドンが含まれている。翻訳が配列番号１の１８５位のヌクレオチド（すなわち、第１の開始コドン）で翻訳が開始する場合は、Ｇ／Ｔ置換により、翻訳されるポリペプチドの２１２位のアミノ酸残基においてＶ／Ｆ多型が生じる（配列番号４を参照のこと、配列番号３によってコードされる）。配列番号１の２９３位のヌクレオチド（すなわち、第２の開始コドン）で翻訳が開始する場合は、Ｇ／Ｔ置換により、翻訳されるポリペプチドの１７６位のアミノ酸残基においてＶ／Ｆ多型が生じる（配列番号６を参照のこと、配列番号５によってコードされる）。配列番号１の３４４位のヌクレオチド（すなわち、第３の開始コドン）で翻訳が開始する場合は、Ｇ／Ｔ置換により、翻訳されるポリペプチドの１５９位のアミノ酸残基においてＶ／Ｆ多型が生じる（配列番号８を参照のこと、配列番号７によってコードされる）。これらの配列の全てが、多型のそれぞれの位置でＶ残基を示す。バリン（Ｖ）残基のフェニルアラニン（Ｆ）残基での置換を生じるＧ／Ｔ置換の正確な位置は、配列番号１の８１８位のヌクレオチド、配列番号３の６３４位のヌクレオチド、配列番号５の５２６位のヌクレオチド、および配列７の４７５位のヌクレオチドである。本発明のさらなる目的については、第２の翻訳開始コドンが開始部位として機能し、したがって、翻訳されるポリペプチドは配列番号６に示される配列を有する。これは、配列番号５によってコードされる。配列番号５の５２６位でのＧ／Ｔ置換は、配列番号９に示される配列を生じる。これは、この配列の１７６位にフェニルアラニン（Ｆ）残基を示す、配列番号１０のヒトＦｃγＲＩＩＩＡポリペプチドをコードする。これは、成熟ヒトＦｃγＲＩＩＩＡ配列の１５８位でのフェニルアラニン置換に対応する。成熟ヒトＦｃγＲＩＩＩＡの１５８位での多型は、３つの可能性のある遺伝子型を生じる。２コピーの１５８Ｖ対立遺伝子を有している個体は、ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｖ／Ｖ遺伝子型を有していると記され、一方、２コピーの１５８Ｆ対立遺伝子を有している個体は、ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ／Ｆ遺伝子型を有していると記される。１５８Ｖ対立遺伝子と１５８Ｆ対立遺伝子の両方のコピーを有している個体は、ヘテロ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｖ／Ｆ遺伝子型を有していると記される。
【００１７】
ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｒ／Ｈ３対立遺伝子多型は、成熟ＦｃγＲＩＩＩＡ配列または前駆体ＦｃγＲＩＩＩＡ配列が、それぞれ、この多型の位置の番号の基準とされているかに応じて、ＦｃｒγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｒ／Ｈ多型およびＦｃγＲＩＩＩＡ  ６６Ｌ／Ｒ／Ｈ多型の両方として、科学文献に記載されている。本発明の目的については、これらの２つの用語は同義的に使用される。翻訳が配列番号１の１８５位のヌクレオチド（すなわち、第１の開始コドン）で開始する場合は、Ｔ／Ｇ置換またはＴ／Ａ置換により、翻訳されるポリペプチドの１０２位のアミノ酸残基において、それぞれ、Ｌ／ＲまたはＬ／Ｈ多型が生じる（配列番号４を参照のこと、配列番号３によってコードされる）。配列番号１の２９３位のヌクレオチド（すなわち、第２の開始コドン）で翻訳が開始する場合は、Ｔ／Ｇ置換またはＴ／Ａ置換により、翻訳されるポリペプチドの６６位のアミノ酸残基において、それぞれ、Ｌ／ＲまたはＬ／Ｈ多型が生じる（配列番号６を参照のこと、配列番号５によってコードされる）。配列番号１の３４４位のヌクレオチド（すなわち、第３の開始コドン）で翻訳が開始する場合は、Ｔ／Ｇ置換またはＴ／Ａ置換により、翻訳されるポリペプチドの４９位のアミノ酸残基において、それぞれ、Ｌ／ＲまたはＬ／Ｈ多型が生じる（配列番号８を参照のこと、配列番号７によってコードされる）。これらの配列の全てが、多型のそれぞれの位置でＬ残基を示す。ロイシン（Ｌ）残基のアルギニン（Ｒ）またはヒスチジン（Ｈ）残基での置換を生じるＴ／Ｇ置換またはＴ／Ａ置換の正確な位置は、配列番号１の４８９位のヌクレオチド、配列番号３の３０５位のヌクレオチド、配列番号５の１９７位のヌクレオチド、および配列７の１４６位のヌクレオチドである。本発明の目的については、第２の翻訳開始コドンが開始部位として機能し、したがって、翻訳されるポリペプチドは配列番号６に示される配列を有する。これは、配列番号５によってコードされる。配列番号５の１９７位でのＴ／Ｇ置換またはＴ／Ａ置換は、配列番号６の６６位でのロイシン（Ｌ）のアルギニン（Ｒ）またはヒスチジン（Ｈ）での置換を生じる。これは、成熟ヒトＦｃγＲＩＩＩＡ配列の４８位での、ロイシン（Ｌ）のアルギニン（Ｒ）またはヒスチジン（Ｈ）での置換に対応する。成熟ヒトＦｃγＲＩＩＩＡの４８位での３対立遺伝子多型は、本発明の目的である、以下の可能なＬを有している遺伝子型を生じる。２コピーの４８Ｌ対立遺伝子を有している個体は、ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｌ遺伝子型を有していると記される。４８Ｌと４８Ｒ対立遺伝子の両方のコピーを有している個体は、ヘテロ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｒ遺伝子型を有していると記され、一方、４８Ｌと４８Ｈ対立遺伝子の両方のコピーを有している個体は、ヘテロ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｈ遺伝子型を有していると記される。
【００１８】
ＦｃγＲＩＩＡをコードするＤＮＡの「従来の」バージョンには、配列番号１１の４９４位にＧ（グアニン）が含まれている；一方、「多型」バージョンでは、この位置にＡ（アデニン）が含まれている。ＧのＡでの置換は、配列番号１２の１６５位にコードされるアミノ酸残基の、アルギニンからヒスチジンへの変化を生じる。これは、成熟ヒトＦｃγＲＩＩＡ配列の１３１位に対応する。成熟ヒトＦｃγＲＩＩＡの１３１位での多型は、以下の３つの遺伝子型を生じる：ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｈ／Ｈ、ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ／Ｒ、およびヘテロ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｈ／Ｒ。
【００１９】
低親和性ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ対立遺伝子の１つ以上のコピー、および／または低親和性ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ対立遺伝子の１つ以上のコピー、および／または低親和性ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ対立遺伝子の１つ以上のコピーを有している個体は、高親和性のＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｖ対立遺伝子の両方のコピーを有している個体、および／またはＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｈもしくは４８Ｒ対立遺伝子の両方のコピーを有している個体、および／または高親和性ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｈ対立遺伝子の両方のコピーを有している個体と比較して、ＦｃγＲによって媒介される免疫応答が欠損している。「ＦｃγＲによって媒介される免疫応答」は、特に、ＡＤＣＣによって媒介される免疫応答が意図され、これにより、それについて個体が処置されている免疫疾患の少なくとも１つの症状が緩和または緩解が生じる。「欠損」により、そのＦｃγＲとの相互作用を介してその細胞傷害作用を媒介する因子とともに提示した場合に、個体が有効なＦｃγＲによって媒介される免疫応答を増大させることができず、したがって、因子の提示によってはポジティブな治療応答を誘発することができないことが意図される。このような個体は、活性なＦｃγＲ、特に、ＦｃγＲＩＩＩＡまたはＦｃγＲＩＩＡとのＩｇＧの相互作用を介してその細胞傷害性を媒介する抗ガンモノクローナル抗体に対して耐性である。
【００２０】
本発明は、インターロイキン−２（ＩＬ−２）免疫療法での介入によって、ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ／Ｆ遺伝子型を有している個体、および／またはヘテロ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｈ／Ｒ遺伝子型を有している個体、あるいは、ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ／Ｒ遺伝子型を有している個体を、応答しやすい状態に転換させることができることの発見に基づく。「応答しやすい状態」により、そのＦｃγＲとの相互作用を介してその細胞傷害作用を媒介する因子とともに提示した場合に、個体が有効なＦｃγＲによって媒介される免疫応答を増大させることができ、したがって、因子の提示によってはポジティブな治療応答を誘発できることが意図される。
【００２１】
理論に束縛されることはないが、ＩＬ−２免疫療法での介入によって、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球／マクロファージ、および好中球を含むＦｃγＲを有している細胞の拡大および活性化を誘導することができ、それによって、治療薬、例えば、抗ガン抗体のＡＤＣＣによって媒介される細胞傷害作用を増大させることができる。結果として、ＩＬ−２またはその生物学的に活性な変異体での免疫治療的介入によって、低親和性ＩｇＧ  ＦｃγＲＩＩＩＡおよび／またはＦｃγＲＩＩＡアロタイプを有している個体においてさらに効率よくＡＤＣＣを促進するために十分な臨界閾値を得ることができる。
【００２２】
さらに、そして再び、理論に束縛されることはないが、その治療効果についてＦｃγＲとの相互作用を介してＡＤＣＣによって媒介される細胞傷害性に依存する抗ガン治療薬、例えば、抗ガン抗体との組み合わせにおける、ＩＬ−２免疫療法に対する全体的な応答は、３つの鍵となる変量に依存するようである：腫瘍抗原の発現レベル、ＩＬ−２の投与後のＮＫ細胞の数の増加、およびＦｃγＲ遺伝子型。したがって、例えば、被験体に、リツキサン（登録商標）；ＩＤＥＣ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｃｏｒｐ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）でのガンの処置が現在施されている場合は、最初の治療応答は、処置される腫瘍上のＣＤ２０抗原の発現レベルに依存し続ける。特定のＮＨＬ組織学、例えば、慢性リンパ球性白血病、形質細胞は、低いレベルでＣＤ２０抗原を発現し、したがって、ＣＤ２０標的化治療薬、例えば、リツキシマブに応答する可能性は低い。さらに、リツキシマブの反復的な使用によって、腫瘍ＣＤ２０の発現がダウンレギュレートされる腫瘍回避機構を駆動させることができる。ＮＫ細胞のＩＬ−２の増加は、腫瘍ＣＤ２０抗原の発現が低い／腫瘍ＣＤ２０抗原を発現していない個体においてリツキシマブ応答を回復させることにおいてはあまり効果がないと予想される。別の例としては、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｖ対立遺伝子を保有している個体（すなわち、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｖ／Ｖまたは１５８Ｖ／Ｆ遺伝子型）は、リツキシマブだけに応答するはずである；応答速度が遅い場合には、これは、弱い応答者の組織学（例えば、ＣＬＬおよび形質細胞）、あるいは、リツキシマブの反復使用の前の応答における腫瘍回避の結果としての、低レベルのＣＤ２１０の発現に関係している可能性がある。
【００２３】
再び、理論に束縛されることはないが、ＩＬ−２での処置後のＮＫ細胞数の増加（すなわち、ＩＬ−２によって誘導される免疫再構成）は、リツキシマブ再発性／難治性被験体において、リツキシマブ／ＩＬ−２併用療法に対する全体的な応答を決定するための鍵であり得る。少ないＮＫ細胞数は、不十分なＡＤＣＣを生じる。理論上の臨界閾値を上回るＩＬ−２の投与後のＮＫの増加は、効果的なリツキシマブの使用を回復させる／促進するように作用する。
【００２４】
最後に、そして再び、理論に束縛されることはないが、ＦｃγＲ遺伝子型は、全体的な応答速度において役割を果たす。ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｖ対立遺伝子は、高い親和性でＩｇＧ１に結合し、したがって、リツキシマブＩｇＧ１抗体に対する全体的な臨床応答速度は、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｖ／Ｖの保有者において最も高いと予想される。しかし、ＩＬ−２は、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｖ／Ｖまたは１５８Ｖ／Ｆ表現形を有しているが、化学療法／放射線治療の結果として、または年齢の結果としての、免疫システムが損傷しているまたは免疫システムに障害がある個体においても、効果的なＦｃＲ細胞媒介性ＡＤＣＣを回復させることができる。ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８多型は、ＩｇＧ１についての親和性を決定することにおいて支配的なようであるが、しかし、成熟ヒトＦｃγＲＩＩＩＡの４８位に３対立遺伝子Ｌ／Ｒ／Ｈ多型を有している完全連鎖が明らかに存在している。ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ対立遺伝子は、ＩｇＧ１について低い結合親和性を示し、したがって、ＩＬ−２はＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ／Ｆの保有者においてＡＤＣＣを促進することにおいて最も利点を付与する可能性が高い。同様に、ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌは、４８Ｒまたは４８Ｈ対立遺伝子のいずれよりもＩｇＧ１に対して低い親和性で結合し、したがって、ＩＬ−２はＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌの保有者、すなわち、ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｌ、ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｒ、またはＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｈ遺伝子型に対して最も利点を付与するであろうと予想される。
【００２５】
「ＩＬ−２免疫療法」によって、ＩＬ−２または本明細書において以下で定義されるその生物学的に活性な変異体の少なくとも１つの治療有効用量の投与が意図される。ＩＬ−２またはその変異体の「治療有効用量または量」によって、投与された場合に、特に、ガンについて、免疫応答について個体の処置に関するポジティブな治療応答をもたらす量が意図される。具体的な目的は、ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ／Ｆ遺伝子型、および／またはヘテロ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｈ／Ｒ遺伝子型、またはホモ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ／Ｒを保有している個体を、上記の応答することができる状態に変化させる、ＩＬ−２またはその変異体の量である。
【００２６】
ＩＬ−２免疫療法で複数回の治療有効用量の投与が意図される場合は、ＩＬ−２またはその変異体は、毎日の投与レジュメにしたがって投与することができ、また、断続的に投与することもできる。ＩＬ−２またはその変異体の「断続的」な投与によっては、例えば、１日おき、２日に１回、３日に１回などで治療有効量を投与することができることが意図される。いくつかの実施形態においては、ＩＬ−２免疫療法には、ＩＬ−２またはその変異体の治療有効用量の、週に２回の投与、または週に３回の投与が含まれる。「週に２回」または「１週間に２回」によって、２用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその変異体が、７日間の期間内に被験体に投与され、これは、最初の週の第１日目にＩＬ−２の投与を開始して、最短で７２時間の用量間隔であり、最長で９６時間の用量間隔で行われることが意図される。「週に３回」または「１週間に３回」によって、３用量の治療有効用量のＩＬ−２またはその変異体が、７日間の期間内に被験体に投与され、最短で４８時間の用量間隔であり、最長で７２時間の用量間隔で行われることが意図される。本発明の目的については、このタイプのＩＬ−２の投与は、「断続的なＩＬ−２免疫療法」と呼ばれる。本発明の方法にしたがうと、患者には、所望される治療応答が得られるまで、１週間またはそれ以上の週のサイクルにわたって、ＩＬ−２またはその変異体での断続的なＩＬ−２免疫療法（すなわち、治療有効量のＩＬ−２またはその変異体の、週に２回または週に３回の投与）を投与することができる。ＩＬ−２またはその変異体は、本明細書中で以下に記載されるような、任意の許容される投与経路によって投与することができる。
【００２７】
したがって、本発明によって、その必要がある個体、特に、ＦｃγＲとのその相互作用を介して細胞傷害作用を媒介する第２の因子での治療を現在受けている個体において、ＩＬ−２免疫療法に対する治療応答を予測するための診断方法が提供される。この方法には、個体のＦｃγＲＩＩＩＡ遺伝子、およびＦｃγＲＩＩＡ遺伝子についての対立遺伝子パターンを検出すること、そしてそれによって、そのＦｃγＲ遺伝子についての個体の遺伝子型を特定することが含まれる。ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ／Ｆ遺伝子型の存在、および／またはＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ対立遺伝子の少なくとも１つのコピーの存在は、ＩＬ−２免疫療法での介入によってポジティブな治療応答が提供される個体の指標である。「ポジティブな治療応答」によって、ＩＬ−２免疫療法を現在受けている個体が、現在治療を受けている個体の免疫疾患の１つ以上の症状の改善を示すことが意図される。
【００２８】
したがって、例えば、個体が、本明細書中で以下に記載されるガンを含むガンに罹患している場合は、「ポジティブな治療応答」は、ＩＬ−２免疫療法にともなう疾患の改善、および／またはＩＬ−２免疫療法にともなう疾患の１つ以上の症状の改善である。ＩＬ−２免疫療法は、個体に施される処置の唯一の系列であり得る。あるいは、ＩＬ−２免疫療法は、第２の治療薬、具体的には、ＦｃγＲＩＩＩＡおよび／またはＦｃγＲＩＩＡとのその相互作用を介してその細胞傷害作用を媒介する抗ガン剤と同時に投与することができる。したがって、例えば、ポジティブな治療応答は、以下の疾患の改善の１つ以上をいう：（１）腫瘍の大きさの縮小；（２）ガン細胞の数の減少；（３）腫瘍の増殖の阻害（すなわち、いくらか遅くする、好ましくは、停止させる）；（４）末梢の器官へのガン細胞の浸潤の阻害（すなわち、いくらか遅くする、好ましくは、停止させる）；（５）腫瘍の転移の阻害（すなわち、いくらか遅くする、好ましくは、停止させる）；および（６）ガンに伴う１つ以上の症状のいくらかの緩和。このような治療応答は、さらに、改善の程度として特徴付けることができる。したがって、例えば、改善は、完全寛解として特徴付けることができる。「完全寛解」により、身体の検査、研究室での試験、核による試験、放射線学的検査（すなわち、ＣＴ（コンピューター断層撮影法）、および／またはＭＲＩ（核磁気共鳴影像法）、ならびに、試験に入る時点での全ての最初の異常またはその時点でポジティブである部位について繰り返される他の非侵襲的な手順によって確認される全ての測定することができるか、あるいは評価することができる疾患の全ての症状および兆候の消滅が意味される。あるいは、この疾患の改善は、部分寛解として分類される場合もある。「部分寛解」によっては、処置前の測定値と比較して、全ての測定することができる病変の垂直直径の測定値の和の５０％よりも大きい減少が意図される（評価することができる応答だけを有している患者については、部分寛解は適用されない）。
【００２９】
１つの実施形態においては、ＩＬ−２免疫療法と組み合わせて投与される物質は、抗ガン抗体、特に、ＩｇＧ１／ＦｃγＲによって媒介されるＡＤＣＣを介してその細胞傷害作用を媒介するモノクローナル抗体である。このようなモノクローナル抗体としては、リツキサン（登録商標）（これは、新生物性Ｂ細胞上のＣＤ２０抗原を標的とし、非ホジキンＢ細胞リンパ腫および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）を含むＢ細胞リンパ腫の処置に有効である）；テレックス（ＭＵＣ１に特異的なヒト化ＨＭＦＧ１、これは、乳ガン、ならびに卵巣ガンおよび結腸ガンを含む他のＭＵＣ１ポジティブ腫瘍について開発された）；ＭＤＸ−０１０（活性化Ｔ細胞に対するヒト抗ＣＴＬＡ−４ネガティブ調節因子；黒色腫、濾胞性リンパ腫、結腸ガン、および前立腺ガンについて開発された）；ＥＭＤ  ７２０００およびエルビタックス（ＩＭＣ−２２５）（ＦＧＥＲポジティブであるガン、最も顕著なものは結腸ガンについて開発された、ヒト抗ＥＧＦＲ）；ＷＸ−Ｇ２５０（ＭＮ抗原に特異的である；腎細胞ガンおよび子宮頸ガンについて開発された）；ＩＤＭ−１（卵巣ガンの処置のため）；ＭＤＸ−２１０（乳ガンおよび卵巣ガンの処置のため）；ＺＡＭＹＬ（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の処置のため）；およびキャンパス（ＣＬＬの処置のため）が挙げられるが、これらに限定はされない。個体には、１用量以上の治療有効用量の抗ガンモノクローナル抗体が、１用量以上の治療有効用量のＩＬ−２またはその生物学的に活性な変異体の投与と組み合わせて、投与される。
【００３０】
個体の対立遺伝子パターンは、当該分野で公知の任意の検出方法を使用して検出することができる。検出方法としては、本明細書中で以下にさらに記載される抗体をベースとする診断方法および／または核酸をベースとする診断方法を使用する、種々のＦｃγＲＩＩＩＡおよび／またはＦｃγＲＩＩＡ対立遺伝子変異体の存在について、個体に由来する血液細胞またはＤＮＡを試験することが挙げられるが、これに限定はされない。１つの実施形態においては、対立遺伝子パターンは、個体から得られたＤＮＡ試料中のＦｃγＲＩＩＩＡ遺伝子のそれぞれのコピーが、配列番号１に示されるＦｃγＲＩＩＩＡコード領域の５２６位にＴを含むかまたはＧを含むか、ならびに／あるいは、個体の免疫細胞の表面上に発現されたＦｃγＲＩＩＩＡポリペプチドに、成熟ヒトＦｃγＲＩＩＩＡの１５８位（すなわち、配列番号２に示される全長の翻訳産物の１７６位）に対応するバリン残基が含まれているかまたはフェニルアラニン残基が含まれているかを決定することによって、検出される。別の実施形態においては、対立遺伝子パターンは、個体から得られたＤＮＡ試料中のＦｃγＲＩＩＡ遺伝子のそれぞれのコピーに、配列番号３に示されるＦｃγＲＩＩＡコード領域の４９４位にＧが含まれているかまたはＡが含まれているか、ならびに／あるいは、個体の免疫細胞の表面上に発現されたＦｃγＲＩＩＡポリペプチドに、成熟ヒトＦｃγＲＩＩＡの１３１位（すなわち、配列番号４に示される全長の翻訳産物の１６５位）に対応するヒスチジン残基が含まれているかまたはアルギニン残基が含まれているかを決定することによって検出される。
【００３１】
ＦｃγＲＩＩＩＡ遺伝子と、ＦｃγＲＩＩＡ遺伝子の対立遺伝子パターンを検出するための方法は当該分野で周知である。例えば、Ｋｏｅｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ｂｌｏｏｄ  ９０：１１０９−１１１４（ＦｃγＲＩＩＩＡ遺伝子型の検出のためのネスティッドＰＣＲをベースとする対立遺伝子特異的制限分析アッセイ）およびＪｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９６）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  １９９：５５−５９（ＦｃγＲＩＩＡ遺伝子型の検出のためのＰＣＲをベースとする対立遺伝子特異的制限酵素消化）；Ｍｏｒｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．，（２００３）Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ  ４２：５２８−５３３（ＦｃγＲＩＩＩＡ遺伝子型の検出のための一本鎖ＤＮＡ高次構造多型アッセイ）；Ｄａｌｌ’Ｏｚｚｏ  ｅｔ  ａｌ．，（２００３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｉ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２７７：１８５−１９２（ＦｃγＲＩＩＩＡ遺伝子型の検出のための、実時間多重対立遺伝子特異的ＰＣＲおよびＳＹＢＲグリーンＩ蛍光色素の存在下での融解曲線分析）；ならびに、米国特許第５，８３０，６５２号および同第５，９８５，５６１号（フローサイトメトリーによるＦｃγＲＩＩＡまたはＦｃγＲＩＩＩＡ表現形の検出、ＰＣＲをベースとする対立遺伝子特異的制限分析アッセイおよび一本鎖ＤＮＡ高次構造多型を使用する遺伝子型分類）；ｄｅ  Ｈａｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９６）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １５６（８）：３９４８（ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｒ／Ｈ遺伝子型の検出）に開示されている遺伝子型分類方法を参照のこと。これらのそれぞれは、その全体が引用により本明細書中に組み入れられる。
【００３２】
本発明の１つの実施形態においては、個体のＦｃγＲＩＩＡまたはＦｃγＲＩＩＩＡ遺伝子型（すなわち、対立遺伝子パターン）は、以下のいずれかによって決定される：１）適切な免疫細胞の表面上に存在しているＦｃγＲＩＩＡまたはＦｃγＲＩＩＩＡポリペプチドの１つ以上の対立遺伝子形態の免疫学的検出（すなわち、「表現形の特性決定」）；あるいは、２）核酸の増幅または配列決定を伴う、あるいは伴わない、核酸プローブを使用する、１つ以上のＦｃγＲＩＩＡまたはＦｃγＲＩＩＩＡ対立遺伝子形態をコードするＤＮＡまたはＲＮＡの分子検出（すなわち、「遺伝子型の特性決定」）。
【００３３】
第１の方法においては、白血球細胞またはそのサブセットが、当該分野で周知の方法、例えば、勾配遠心分離および／または免疫吸着を使用して試験される個体から単離される。ＦｃγＲＩＩＡまたはＦｃγＲＩＩＩＡの異なる対立遺伝子形態の間を識別することができる抗体が、その後、単離された細胞に添加されて、それぞれの対立遺伝子形態の存在と相対的な量が決定される。抗体はポリクローナル抗体であっても、モノクローナル抗体であってもよいが、モノクローナルであることが好ましい。細胞に対する特異的な抗体の結合の測定は、任意の周知の方法によって行うことができ、これには、定量的フローサイトメトリー、または酵素結合もしくは蛍光結合免疫アッセイが含まれるが、これらに限定はされない。特定の対立遺伝子の存在またはそれらが存在しないこと、ならびに対立遺伝子パターン（すなわち、ホモ接合性対ヘテロ接合性）は、個体から得られた値を、既知の遺伝子型の個体の集団から確立された基準と比較することによって決定される。
【００３４】
別の実施形態においては、ＤＮＡ試料は、個体から得られ、そして特定のＦｃγＲＩＩＡまたはＦｃγＲＩＩＩＡ対立遺伝子に対応するＤＮＡ配列の存在が決定される。ＤＮＡは、任意の細胞供給源または体液から得ることもできる。臨床診療において利用することができる細胞供給源の限定的ではない例として、血液細胞、口腔細胞、子宮頸と膣の細胞、尿に由来する上皮細胞、胎児細胞、または生検によって得られる組織中に存在している任意の細胞が挙げられる。体液としては、血液、尿、脳脊髄液、および生検部位の組織滲出液が挙げられる。ＤＮＡは、当該分野での標準である多数の方法のいずれかを使用して、細胞供給源または体液から抽出される。ＤＮＡを抽出するために使用される特定の方法が、供給源の性質に応じて変化することは理解されるであろう。いくつかの実施形態においては、細胞供給源または体液は、ＰＭＢＣまたは血清である。
【００３５】
一旦、抽出されると、ＤＮＡは、さらに操作されることなく、本発明において使用することができる。あるいは、ＦｃγＲＩＩＡまたはＦｃγＲＩＩＩＡの全てまたは一部に対応するＤＮＡ領域を、ＰＣＲまたは当該分野で公知の他の増幅方法によって増幅することもできる。この場合は、増幅される領域は、プライマーとして使用される特定の隣接配列の選択によって指定することができる。この工程での増幅により、ＦｃγＲＩＩＡまたはＦｃγＲＩＩＩＡのＤＮＡ配列の濃度を上昇させるという利点が提供される。増幅することができるＤＮＡ配列の長さは、８０ｂｐから３０ｋｂｐまでの範囲である。好ましくは、それぞれの受容体の異なる対立遺伝子形態の間で異なる配列を含む比較的短いセグメントを定義するプライマーが使用される。好ましい検出方法は、目的の多型部位を重複し（すなわち、ＦｃγＲＩＩＡ  １３１ＨまたはＲ対立遺伝子；ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８ＶまたはＦ対立遺伝子、あるいは、ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ、Ｒ、またはＨ対立遺伝子）、そして多型領域の周辺の約５、１０、１５、２０、２５、または３０ヌクレオチドを有しているプローブを使用する、対立遺伝子特異的ハイブリダイゼーションである。
【００３６】
ＦｃγＲＩＩＡまたはＦｃγＲＩＩＩＡ対立遺伝子特異的ＤＮＡ配列の存在は、任意の公知の方法によって決定することができ、これらの方法には、直接的なＤＮＡ配列決定、対立遺伝子特異的オリゴヌクレオチドとのハイブリダイゼーション、および一本鎖ＤＮＡ高次構造多型（ＳＳＣＰ）が含まれるがこれらに限定はされない。直接的な配列決定は、例えば、Ｍａｘａｍ−Ｇｉｌｌｂｅｒｔ法を使用するか、または例えば、Ｓａｎｇｅｒ法を使用する酵素による配列決定による、化学的な配列決定によって行うことができる。後者の場合には、特異的なオリゴヌクレオチドが標準的な方法を使用して合成され、デオキシヌクレオチド配列決定反応のプライマーとして使用される。
【００３７】
好ましくは、個体に由来するＤＮＡについて、特異的増幅プライマーを使用するポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）による増幅が行われ、その後、対立遺伝子特異的オリゴヌクレオチドとハイブリダイゼーションさせられる。あるいは、増幅されたＤＮＡ領域のＳＳＣＰ分析が、対立遺伝子パターンを決定するために使用される場合もある。最も好ましくは、対立遺伝子特異的ＰＣＲが使用される。ここでは、対立遺伝子特異的オリゴヌクレオチドがプライマーとして使用され、そして、増幅産物の存在または増幅産物が存在しないことによって、特定の対立遺伝子の存在または特定の対立遺伝子が存在しないことが示される。
【００３８】
別の実施形態においては、ＦｃγＲＩＩＡまたはＦｃγＲＩＩＩＡを発現する細胞が免疫吸着によって単離され、グアニジンチオシアネート−フェノール−クロロホルム抽出のような周知の方法を使用して、免疫精製された細胞からＲＮＡが単離される（Ｃｈｏｍｏｃｙｚｎｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８７）Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１６２：１５６）。その後、単離されたＲＮＡについて、対立遺伝子特異的オリゴヌクレオチドプライマーを使用するポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）によって、逆転写と増幅の組み合わせが行われる。プライマーのアニーリングについての条件は、特異的な逆転写と増幅を確実にするように選択される；したがって、増幅産物の出現は、使用された特定のプライマーによって特定された対立遺伝子の存在の診断である。別の実施形態においては、ＦｃγＲＩＩＡまたはＦｃγＲＩＩＩＡをコードするＲＮＡは、対立遺伝子非依存性の様式で逆転写され、増幅され、その後、増幅されたＦｃγＲＩＩＡまたはＦｃγＲＩＩＩＡをコードするｃＤＮＡが、対立遺伝子特異的オリゴヌクレオチドに対するハイブリダイゼーションによって、または直接的なＤＮＡ配列決定によって同定される。ＦｃγＲＩＩＡ遺伝子についての対立遺伝子特異的プライマーに関しては、例えば、上記で引用された参考文献を参照のこと。ここでは、ＰＣＲをベースとする方法が、特定のＦｃγＲＩＩＡまたはＦｃγＲＩＩＩＡ対立遺伝子の存在、あるいはそれが存在しないことを検出するために利用される。
【００３９】
１つの実施形態においては、被験体の遺伝子型は、２００４年４月７日に提出され、引用によりその全体が本明細書中に組み入れられる、共有にかかる米国特許出願番号６０／５６０，６４９、「Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｂａｓｅｄ  Ａｓｓａｙｓ  Ｆｏｒ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｏｆ  Ｆｃ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ，」に記載されているように決定される。
【００４０】
免疫疾患について処置が必要であり、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８  Ｆ／Ｆ遺伝子型；ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８  Ｌ／Ｌ遺伝子型、ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８  Ｌ／Ｒ遺伝子型、またはＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８  Ｌ／Ｈ遺伝子型；ならびに／あるいは、ＦｃγＲＩＩＡ  １３１  Ｈ／Ｒ遺伝子型、またはＦｃγＲＩＩＡ  １３１  Ｒ／Ｒ遺伝子型の保有者として同定されている個体は、本明細書において上記で定義されたようなＩＬ−２免疫療法での介入に適している候補である。したがって、本発明によって、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８  Ｆ／Ｆ遺伝子型および／またはＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８  Ｌ／Ｌ遺伝子型、ＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８  Ｌ／Ｒ遺伝子型、またはＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８  Ｌ／Ｈ遺伝子型；ならびに／あるいは、ＦｃγＲＩＩＡ  １３１  Ｈ／Ｒ遺伝子型、またはＦｃγＲＩＩＡ  １３１  Ｒ／Ｒ遺伝子型の保有者である個体の免疫機能を高めるため、ならびに、そのような個体の免疫疾患を処置するための方法もまた提供される。この方法には、そのような個体にＩＬ−２免疫療法を投与することが含まれる。上記のように、ＩＬ−２免疫療法は、単独での処置とすることができ；あるいは、個体には、別の薬剤での処置、具体的には、ＦｃγＲＩＩＩＡまたはＦｃγＲＩＩＡとの相互作用、およびこの相互作用によって誘発されるＡＤＣＣ経路を介してその治療効果を媒介する薬剤での処置を受けさせることもできる。１つの実施形態においては、個体は、免疫疾患、特に、ガンに罹患しており、ＩＬ−２免疫療法が単独で、あるいは抗ガンモノクローナル抗体と組み合わせて投与される。本発明の方法を使用して処置することができるガンの例としては、以下に列挙されるＢ細胞リンパ腫、乳ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、前立腺ガン、結腸ガン、黒色腫、腎細胞ガン、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）；および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）が挙げられるが、これらに限定はされない。上記のように、個体には、１用量以上の治療有効用量のＩＬ−２またはその生物学的に活性な変異体の投与と組み合わせて、１用量以上の治療有効用量の抗ガンモノクローナル抗体が投与される。
【００４１】
ＩＬ−２免疫療法と抗ガンモノクローナル抗体治療の組み合わせによって、抗腫瘍活性が提供される。「抗腫瘍活性」によって、細胞増殖速度の低下が意図され、したがって、既存の腫瘍または治療の間に生じる腫瘍の増殖速度の低下、および／あるいは、既存の新生物（腫瘍）細胞または新しく形成される新生物細胞の崩壊が意図され、したがって、治療の間に腫瘍の全体の大きさの縮小が意図される。本発明の方法にしたがうＩＬ−２免疫療法と少なくとも１つの抗ガンモノクローナル抗体の組み合わせでの治療を受ける被験体は、目的の特定のガンの処置に関して効果的である生理学的応答を経験する。
【００４２】
ガン治療プロトコールとＩＬ−２またはその変異体において使用される治療薬（単数または複数）を含む別の薬学的組成物は、当該分野で公知の任意の医学的に許容される方法にしたがって、同じまたは異なる投与経路を使用して投与することができる。適切な投与経路としては、非経口投与（例えば、皮下（ＳＣ）、筋肉内（ＩＭ）、静脈内（ＩＶ）、または注入）、経口、肺への、鼻孔への、局所、経皮、および坐剤による投与が挙げられる。ＩＬ−２またはその変異体が肺投与によって投与される場合は、治療有効用量は、血流中のＩＬ−２またはその変異体の可溶性レベルが、非経口、例えば、ＳＣ、ＩＭ、またはＩＶによって投与される治療有効用量を用いて得られるレベルと等しくなるように、調節される。好ましくは、ＩＬ−２またはその変異体を含む薬学的組成物は、静脈内（ＩＶ）注射、筋肉内（ＩＭ）注射、または皮下（ＳＣ）注射を含む、任意の形態での注射によって投与される。本発明のいくつかの実施形態においては、ＩＬ−２またはその変異体を含む薬学的組成物は、ＩＭ注射またはＳＣ注射によって、特に、ガン治療プロトコールにおいて使用される治療薬（単数または複数）が投与される領域に対して局所的なＩＭまたはＳＣ注射によって、投与される。ＩＬ−２免疫療法が別の薬剤、特に、抗ガンモノクローナル抗体またはその抗原結合断片と同時に投与される場合は、この薬剤を含む薬学的組成物は、例えば、静脈内に投与される。静脈内に投与される場合は、抗ガンモノクローナル抗体またはその抗原結合断片を含む薬学的組成物は、約０．５時間から約５時間の時間をかけた注入によって投与することができる。いくつかの実施形態においては、注入は、投与される抗ガンモノクローナル抗体と、投与される抗ガンモノクローナル抗体の量に応じて、約０．５時間から約２．５時間の時間をかけて、約０．５時間から約２．０時間の時間をかけて、約０．５時間から約１．５時間の時間をかけて、または約１．５時間の時間をかけて行われる。
【００４３】
ＩＬ−２免疫療法の過程の間に投与されるＩＬ−２またはその変異体のそれぞれの量に影響を与える要因としては、投与の態様、投与頻度（すなわち、毎日、または週に２回もしくは週に３回のような断続的な投与）、治療を受ける特定の疾患、疾患の重篤度、病歴、個体が別の治療薬、例えば、抗ガンモノクローナル抗体での治療を現在受けているかどうか、治療を受けている個体の年齢、身長、体重、健康状態、生理的状態が挙げられるが、これらに限定されない。一般的には、治療を受ける被験体の体重が重ければ重いほど、この薬剤の用量は多くなることが好ましい。
【００４４】
本発明の１つの実施形態においては、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ／Ｆ遺伝子型および／またはＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｈ／ＲもしくはＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ／Ｒ遺伝子型を有している個体が、Ｂ細胞リンパ腫、より具体的には、非ホジキンＢ細胞リンパ腫についてのＩＬ−２免疫療法と抗ＣＤ２０抗体治療の組み合わせを受ける。本発明の治療方法は、その異常なＢ細胞型がＣＤ２０表面抗原を発現する任意の非ホジキンＢ細胞リンパ腫の処置に向けられる。「ＣＤ２０表面抗原」によって、初期プレＢ細胞の発生の間に発現され、成熟Ｂ細胞の間中維持されるが、血漿細胞段階で失われる、３３〜３７ｋＤの不可欠な膜リンタンパク質が意図される。ＣＤ２０は正常なＢ細胞上で発現されるが、この表面抗原は通常は、新生物性のＢ細胞上では極めて高いレベルで発現される。Ｂ細胞リンパ腫および慢性リンパ球性白血病の９０％以上、そしてプレＢ細胞急性リンパ芽球性白血病の約５０％が、この表面抗原を発現する。
【００４５】
ＩＬ−２免疫療法および抗ＣＤ２０抗体での現在の治療は、その衰えずに増殖している細胞がＣＤ２０表面抗原を発現する、任意のタイプのガンの処置において有用であり得ると考えられている。したがって、例えば、ガンが異常なＴ細胞の増殖を伴う場合、および異常なＴ細胞の集団がＣＤ２０表面抗原を発現する場合は、本発明の方法に従う現在の治療によって、そのガンの処置に関してポジティブである治療応答が提供される。ＣＤ２０表面抗原を発現する（しかし、Ｂ細胞と比較して少量である）ヒトＴ細胞の集団が同定されている（Ｈｕｌｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９３）Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ  １４：１９６−２０４を参照のこと）。
【００４６】
本発明の方法は、ＲＥＡＬ分類（Ｒｅｖｉｓｅｄ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ａｎｄ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｌｙｍｐｈｏｍａ  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ）システムにしたがって分類されるＢ細胞リンパ腫の治療的処置において有用であることもまた認識される。このようなＢ細胞リンパ腫としては、前駆体Ｂ細胞新生物、例えば、Ｂリンパ芽球性白血病／リンパ腫；末梢Ｂ細胞新生物（Ｂ細胞慢性リンパ球性白血病／小リンパ球性リンパ腫、リンパ形質細胞リンパ腫／免疫細胞種、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、濾胞性中心リンパ腫（濾胞性）（びまん性小細胞リンパ腫、びまん性混合小細胞および大細胞リンパ腫、ならびにびまん性大細胞型リンパ腫を含む）、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（節外性リンパ腫、節性リンパ腫、および脾リンパ腫を含む）、ヘアリー細胞白血病、形質細胞腫／骨髄腫、縦隔原発性のサブタイプのびまん性大細胞Ｂ細胞リンパ腫（胸腺）、バーキットリンパ腫、バーキット様高悪性度Ｂ細胞リンパ腫；ならびに、分類されていない低悪性度または高悪性度Ｂ細胞リンパ腫を含む）として分類されるリンパ腫が挙げられるが、これらに限定はされない。
【００４７】
「非ホジキンＢ細胞リンパ腫」によっては、異常な制御することができないＢ細胞の増殖に関係している非ホジキンをベースとするリンパ腫の任意のものが意図される。本発明の目的については、このようなリンパ腫は、Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ分類方法（「Ｔｈｅ  Ｎｏｎ−Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ  Ｌｙｍｐｈｏｍａ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｊｅｃｔ，」Ｃａｎｃｅｒ  ４９（１９８２）：２１１２−２１３５を参照のこと）にしたがって呼ばれる。すなわち、これらのＢ細胞リンパ腫は、低悪性度、中悪性度、および高悪性度に分類される。低悪性度のＢ細胞リンパ腫には、小細胞リンパ腫、濾胞性小切れ込み核細胞リンパ腫、および濾胞性混合小切れ込み核細胞リンパ腫が含まれ；中悪性度のリンパ腫には、濾胞性大細胞性リンパ腫、びまん性小切れ込み核細胞リンパ腫、びまん性小細胞大細胞混合型リンパ腫、およびびまん性大細胞型リンパ腫が含まれ；そして、高悪性度のリンパ腫には、大細胞性免疫芽球性リンパ腫、リンパ芽球性リンパ腫、ならびに、バーキット型および非バーキット型の小非切れ込み核細胞リンパ腫が含まれる。
【００４８】
本発明の方法は、既存のリンパ腫または固形腫瘍の処置に関するが、これらの方法は、治療の間に生じるさらなる腫瘍の増殖を妨げることにおいても有用であり得ることが認識されている。本発明の方法は、低悪性度のＢ細胞リンパ腫を有している被験体、特に、以下の標準的な化学療法後に再発した被験体の処置において有用である。低悪性度のＢ細胞リンパ腫は、中悪性度および高悪性度のＢ細胞リンパ腫よりも痛みが少なく、再発／緩解の経過を特徴とする。したがって、これらのリンパ腫の処置は、再発のエピソードが回数および重篤度に関して軽減されるように、本発明の方法を使用して改善される。
【００４９】
抗ガンモノクローナル抗体と組み合わせたＩＬ−２免疫療法についての特定の治療プロトコールは当該分野で公知である。このようなプロトコールは、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ／Ｆ遺伝子型；および／またはＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｌ、もしくはＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｒ、もしくはＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｈ遺伝子型；および／またはＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｈ／Ｒ、もしくはＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ／Ｒ遺伝子型の保有者として同定されている個体を処置するために利用することができる。例えば、同時係属中の米国特許公開番号２００３−０１８５７９６（Ｂ細胞リンパ腫）、および２００３年７月３１日に提出された代理人番号５９５１６−２７８の「Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ  Ｌｅｕｋｅｍｉａ」と題された同時係属中の米国特許出願番号６０／４９１，３７１（これらの内容は引用によりそれらの全体が本明細書中に組み入れられる）に開示されている処置プロトコールを参照のこと。投与されるＩＬ−２（自然界に存在している配列、またはＩＬ−２の生物学的活性を保持しているその変異体、例えば、本明細書中に開示されている突然変異タンパク質のいずれか）の量は、約０．１から約１５ｍＩＵ／ｍ２の範囲であり得る。腎細胞ガンおよび転移性黒色腫のような適応症については、ＩＬ−２またはその生物学的に活性な変異体は、３００，０００から８００，０００  ＩＵ／ｋｇ／８時間の高用量の静脈内ボーラスとして投与される場合もある。Ｂ細胞リンパ腫およびＣＬＬのＩＬ−２免疫療法について推奨される用量については、上記の米国特許出願を参照のこと。
【００５０】
ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ／Ｆ遺伝子型；および／またはＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｌ、もしくはＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｒ、もしくはＦｃγＲＩＩＩＡ  ４８Ｌ／Ｈ遺伝子型；および／またはＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｈ／Ｒ、もしくはＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ／Ｒ遺伝子型を有している個体が、ＩＬ−２免疫療法と抗ガンモノクローナル抗体での処置を受けている場合は、これらの治療薬は、併用療法によって個体に提示される。「併用療法」によって、ヒト被験体に対するＩＬ−２と少なくとも１つの抗ガン抗体の提示が意図され、その結果、両方の物質の組み合わせの治療効果が、治療を受けている被験体において生じる。併用療法は、ＩＬ−２またはその変異体を含む薬学的組成物の少なくとも１用量の治療有効量と、少なくとも１つの抗ガン抗体またはその抗原結合断片を含む少なくとも１用量の治療有効用量の薬学的組成物とを、特定の投与レジュメにしたがって投与することによって行うことができる。別々の薬学的組成物の投与は、両方の物質の組み合わせの治療効果が治療を受けている被験体において生じる限りは、同じタイミングでも（すなわち、同時に）、また、異なるタイミングでも（すなわち、連続して、いずれかの順序で、同じ日に、または異なる日に）行うことができる。
【００５１】
これらの治療薬を治療有効成分として含む別々の組成物は、当該分野で公知の任意の許容される方法を使用して投与することができる。したがって、例えば、ＩＬ−２またはその変異体を含む薬学的組成物は、静脈内（ＩＶ）注射、筋肉内（ＩＭ）注射、または皮下（ＳＣ）注射を含む、任意の形態での注射によって投与することができる。本発明のいくつかの実施形態においては、ＩＬ−２またはその変異体を含む薬学的組成物は、ＳＣ注射によって投与される。本発明の他の実施形態においては、ＩＬ−２またはその変異体を含む薬学的組成物は徐放処方物であるか、または徐放機器を使用して投与される処方物である。このような機器は当該分野で周知であり、例として、経皮パッチ、ＩＬ−２またはその変異体を含む非徐放型薬学的組成物を用いて得られる徐放効果を得るための種々の用量で、持続的な定常様式で長時間にわたる薬剤の投与を提供することができる小型の埋め込み型ポンプが挙げられる。抗ガン抗体またはその抗原結合断片を含む薬学的組成物は、例えば、静脈内に投与される。静脈内に投与される場合は、抗ガン抗体を含む薬学的組成物は、約１時間から約１０時間の時間をかけて注入によって投与することができる。いくつかの実施形態においては、投与される抗ガン抗体に応じて、抗体の注入は、約２時間から約８時間の時間をかけて、約３時間から約７時間の時間をかけて、約４時間から約６時間の時間をかけて、または約６時間の時間をかけて行われる。
【００５２】
上記の投与レジュメにしたがう治療を受ける被験体が部分寛解を示すか、または長期間の一次的な回復後に再発を示す場合は、その後の併用療法の過程が、疾患の完全寛解が得られるまで必要とされる場合がある。したがって、最初の処置期間後の処置を休む期間の後、被験体は、抗ガン抗体の投与とのＩＬ免疫療法の併用を含む、１回以上のさらなる処置期間を受け得る。処置期間の間に処置を休むこのような期間は、本明細書においては、中断期間と呼ばれる。中断期間の長さが、これらの２つの治療薬を用いた併用療法の処置期間の前のいずれかの時点で得られる腫瘍応答の程度（すなわち、完全寛解対部分寛解）に応じて変化することが理解される。
【００５３】
用語「ＩＬ−２」は本明細書中で使用される場合は、正常な末梢血リンパ球によって生産され、そして体内に低濃度で存在するリンホカインをいう。ＩＬ−２は、Ｍｏｒｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９７６）Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９３：１００７−１００８によって最初に記載され、そして刺激されたＴリンパ球の増殖を誘導するその能力が原因で、Ｔ細胞増殖因子と最初は呼ばれていた。これは、１３，０００から１７，０００の範囲の分子量であることが報告されているタンパク質であり（Ｇｉｌｌｉｓ  ａｎｄ  Ｗａｔｓｏｎ（１９８０）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１５９：１７０９）、６〜８．５の範囲に等電点を有している。
【００５４】
本発明の方法で使用される本明細書中に記載される薬学的組成物中に存在するＩＬ−２は自然界に存在しているものである場合も、また、組み換え技術によって得られるものである場合もあり、そして例えば、マウス、ラット、ウサギ、霊長類、ブタ、およびヒトのような哺乳動物である供給源を含む任意の供給源に由来し得る。多数の種に由来するＩＬ−２配列が当該分野で周知である。例えば、限定的ではないが、以下を参照のこと：ヒトＩＬ−２（ヒト（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．ＡＡＨ６６２５４；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．ＡＡＨ６６２５４配列の２１〜１５３位の残基によって示され、本明細書中で配列番号１４に示される成熟配列）；アカゲザルＩＬ−２（アカゲザル（Ｍａｃａｃａ  ｍｕｌａｔｔｏ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ５１４９８；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ５１４９８配列の２１〜１５４位の残基によって示される成熟配列）；ヒヒＩＬ−２（アヌビスヒヒ（Ｐａｐｉｏ  ａｎｕｂｉｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｑ８６５Ｙ１；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．８５６Ｙ１配列の２１〜１５４位の残基によって示される成熟配列）；スーティーマンガベイＩＬ−２（スーティーマンガベイ（Ｃｅｒｃｏｃｅｂｕｓ  ｔｏｒｑｕａｔｕｓ  ａｔｙｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ４６６４９；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ４６６４９配列の２１〜１５４位の残基によって示される成熟配列）；カニクイザルＩＬ−２（カニクイザル（Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｑ２９６１５；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｑ２９６１５配列の２１〜１５４位の残基によって示される成熟配列）；テナガザルＩＬ−２（シロテナガザル（Ｈｙｌｏｂａｔｅｓ  ｌａｒ；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．ＩＣＧＩ２；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．ＩＣＧＩ２配列の２１〜１５３位の残基によって示される成熟配列）；リスザルＩＬ−２（リスザル（Ｓａｉｍｉｒｉ  ｓｃｉｕｒｅｕｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｑ８ＭＫＨ２；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｑ８ＭＫＨ２配列の２１〜１５４位の残基によって示される成熟配列）；ウシＩＬ−２（ウシ（Ｂｏｓ  ｔａｕｒｕｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ０５０１６；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ０５０１６配列の２１〜１５５位の残基によって示される成熟配列；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．ＮＰ−８５１３４０に報告されている変異体前駆体配列もまた参照のこと；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．ＮＰ−８５１３４０配列の２４〜１５８位の残基によって示される成熟配列）スイギュウＩＬ−２（スイギュウ（Ｂｕｂａｌｕｓ  ｂｕｂａｌｉｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ｑ９５ＫＰ３；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｑ９５ＫＰ３配列の２１〜１５５���の残基によって示される成熟配列）；ウマＩＬ−２（ウマ（Ｅｑｕｕｓ  ｃａｂａｌｌｕｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ３７９９７；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ３７９９７配列の２１〜１４９位の残基によって示される成熟配列）；ヤギＩＬ−２（ヤギ（Ｃａｐｒａ  ｈｉｒｃｕｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ３６８３５；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ３６８３５配列の２１〜１５５位の残基によって示される成熟配列）；ヒツジＩＬ−２（ヒツジ（Ｏｖｉｓ  ａｒｉｅｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ１９１１４；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ１９１１４配列の２１〜１５５位の残基によって示される成熟配列）；ブタＩＬ−２（イノシシ（Ｓｕｓ  ｓｃｒｏｆａ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ２６８９１；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ２６８９１の２１〜１５４位の残基によって示される成熟配列）；アカシカＩＬ−２（アカシカ（Ｃｅｒｖｕｓ  ｅｌａｐｈｕｓ；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ５１７４７；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ５１７４７配列の２１〜１６２位の残基によって示される成熟配列）；イヌＩＬ−２（イヌ（Ｃａｎｉｓ  ｆａｍｉｌｉａｒｉｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｑ２９４１６；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｑ２９４１６配列の２１〜１５５位の残基によって示される成熟配列）；ネコＩＬ−２（ネコ（Ｆｅｌｉｓ  ｃａｔｕｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｑ０７８８５；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｑ０７８８５配列の２１〜１５４位の残基によって示される成熟配列）；ウサギＩＬ−２（アカウサギ（Ｏｒｙｃｔｏｌａｇｕｓ  ｃｕｎｉｃｕｌｕｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｏ７７６２０；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｏ７７６２０配列の２１〜１５３位の残基によって示される成熟配列）；シャチＩＬ−２（シャチ（Ｏｒｃｉｎｕｓ  ｏｒｃａ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｏ９７５１３；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｏ９７５１３配列の２１〜１５２位の残基によって示される成熟配列）；キタゾウアザラシＩＬ−２（キタゾウアザラシ（Ｍｉｒｏｕｎｇａ  ａｎｇｕｓｔｉｒｏｓｔｒｉｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｏ６２６４１；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｏ６２６４１配列の２１〜１５４位の残基によって示される成熟配列）；ハツカネズミＩＬ−２（ハツカネズミ（Ｍｕｓ  ｍｕｓｃｕｌｕｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．ＮＰ＿０３２３９２；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．ＮＰ＿０３２３９２配列の２１〜１６９位の残基によって示される成熟配列）；野生セイブニセマウスＩＬ−２（アルジェリアハツカネズミ（Ｍｕｓ  ｓｐｒｅｔｕｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｑ０８８６７��ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｑ０８８６７配列の２１〜１６６位の残基によって示される成熟配列）；ドブネズミＩＬ−２（ドブネズミ（Ｒａｔｔｕｓ  ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ１７１０８；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｐ１７１０８の２１〜１５５位の残基によって示される成熟配列）；スナネズミＩＬ−２（スナネズミ（Ｍｅｒｉｏｎｅｓ  ｕｎｇｕｉｃｕｌａｔｕｓ）；前駆体配列、ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｑ０８０８１；ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．Ｑ０８０８１の２１〜１５５位の残基によって示される成熟配列）；これらの上記のＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｕｍｂｅｒにおいて開示される変異体ＩＬ−２ポリペプチドのいずれか；これらのＧｅｎＢａｎｋに報告されているもののそれぞれは、それらの全体が引用により本明細書中に組み入れられる。ＩＬ−２の任意の供給源は、本発明を実施するために利用することができるが、特に、治療を受けている被験体がヒトである場合には、ＩＬ−２がヒト供給源に由来することが好ましい。いくつかの実施形態においては、本発明の方法において使用されるＩＬ−２は、組み換えによって生産され、例えば、組み換え体ヒトＩＬ−２タンパク質であり、微生物宿主から得られたものが含まれるが、これに限定はされない。
【００５５】
本発明の方法において有用である薬学的組成物には、ＩＬ−２の生物学的に活性な変異体が含まれる場合があり、このような変異体としては、任意の種に由来するＩＬ−２の変異体が挙げられる。このような変異体は、自然界に存在しているポリペプチドの所望される生物学的活性を保持しているはずであり、その結果として、変異体ポリペプチドを含む薬学的組成物は、被験体に投与された場合に、自然界に存在しているポリペプチドを含む薬学的組成物と同じ治療効果を有する。すなわち、変異体ポリペプチドは、自然界に存在しているポリペプチドについて観察されている様式と同じ様式で、薬学的組成物において治療有効成分として作用するであろう。変異体ポリペプチドが所望される生物学的活性を保持しているかどうか、そしてしたがって、薬学的組成物において治療有効成分として作用するかどうかを決定するための方法は、当該分野において利用することができる。生物学的活性は、本発明に記載されるアッセイを含む、自然界に存在しているポリペプチドまたはタンパク質の活性を測定するために特異的に設計されたアッセイを使用して測定することができる。さらに、生物学的に活性である自然界に存在しているポリペプチドに対して惹起させられた抗体を、変異体ポリペプチドに結合するそれらの能力について試験することができ、ここでは、効率のよい結合は、自然界に存在しているポリペプチドの立体構造と同様の立体構造を有しているポリペプチドの指標である。
【００５６】
自然界に存在しているＩＬ−２または天然のＩＬ−２の適切な生物学的に活性な変異体は、そのポリペプチドの断片、類似体、および誘導体であり得る。「断片」によって、完全なポリペプチド配列および構造の一部のみから構成されるポリペプチドが意図され、そしてこれは、自然界に存在しているポリペプチドのＣ末端欠失またはＮ末端欠失であり得る。「類似体」によって、自然界に存在しているポリペプチドまたは自然界に存在しているポリペプチドの断片のいずれかの類似体が意図される。ここでは、類似体には、１つ以上のアミノ酸の置換、挿入、または欠失を有している自然界に存在しているポリペプチド配列および構造が含まれる。本明細書中に記載されているもののような「突然変異タンパク質」および１つ以上のペプトイドを有しているペプチド（ペプチド模倣物）もまた、用語類似体に含まれる（国際公開番号ＷＯ９１／０４２８２を参照のこと）。また、２００４年７月７日に提出され、表題「Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−２  Ｍｕｔｅｉｎｓ」と題されている米国特許出願番号６０／５８５，９８０、さらには、２００４年３月５日に提出され、表題「Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−２  Ｍｕｔｅｉｎｓ」と題されている米国特許出願番号６０／５５０，８６８もまた参照のこと。これらの出願は、それらの全体が引用により本明細書中に組み入れられる。
【００５７】
「誘導体」によって、目的の自然界に存在しているポリペプチドの、自然界に存在しているポリペプチドの断片の、またはそれらのそれぞれの類似体の任意の適切な修飾（例えば、糖化、リン酸化、重合（例えば、ポリエチレングリコールとの）、または他の外来部分の付加）が、自然界に存在しているポリペプチドの所望される生物学的活性が保持される限りにおいて意図される。ポリペプチド断片、類似体、および誘導体を作成するための方法は、当該分野において一般的に利用することができる。
【００５８】
例えば、ポリペプチドのアミノ酸配列変異体は、目的の自然界に存在しているポリペプチドをコードするクローン化されたＤＮＡ配列中の変異によって調製することができる。突然変異誘発およびヌクレオチド配列の変更のための方法は当該分野で周知である。例えば、Ｗａｋｌｅｒ  ａｎｄ  Ｇａａｓｔｒａ，  ｅｄｓ（１９８３）Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（ＭａｃＭｉｌｌａｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）；Ｋｕｎｋｅｌ（１９８５）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８２：４８８−４９２；Ｋｕｎｋｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８７）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．１５４：３６７−３８２；Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８９）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｐｌａｉｖｉｅｗ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）；米国特許第４，８７３，１９２号；およびそれらの中で引用されている参考文献；（これらは、引用により本明細書中に組み入れられる）を参照のこと。目的のポリペプチドの生物学的活性には影響を与えない適切なアミノ酸置換に関する指針は、Ｄａｙｈｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，（１９７８）Ａｔｌａｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ（Ｎａｔｌ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｆｏｕｎｄ．，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．）（これは引用により本明細書中に組み入れられる）のモデルにおいて見ることができる。保存的置換（例えば、類似の特性を有している別のアミノ酸での１つのアミノ酸の交換）が好ましい場合がある。保存的置換の例としては、Ｇｌｙ⇔Ａｌａ、Ｖａｌ⇔Ｉｌｅ⇔Ｌｅｕ、Ａｓｐ⇔Ｇｌｕ、Ｌｙｓ⇔Ａｒｇ、Ａｓｎ⇔Ｇｌｎ、およびＰｈｅ⇔Ｔｒｐ⇔Ｔｙｒが挙げられるが、これらに限定はされない。
【００５９】
残基の置換、欠失、または挿入のいずれかによって変化させることができるＩＬ−２タンパク質の領域に関する指針は当該分野において見ることができる。例えば、Ｂａｚａｎ（１９９２）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５７：４１０−４１２；ＭｃＫａｙ（１９９２）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５７：４１２；Ｔｈｅｚｅ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９６）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ  １７：４８１−４８６；Ｂｕｃｈｌｉ  ａｎｄ  Ｃｉａｒｄｅｌｌｉ（１９９３）Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．３０７：４１１−４１５；Ｃｏｌｌｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８５：７７０９−７７１３；Ｋｕｚｉｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：５７３１；Ｅｃｋｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ９：４８８−４９８で議論されている、構造／機能の関係、および／または結合についての研究を参照のこと。これらの内容は、それらの全体が引用により本明細書中に組み入れられる。
【００６０】
目的のＩＬ−２ポリペプチドの変異体を構築することにおいては、修飾は、変異体が所望される活性を持ち続けるように行われる。明らかに、変異体ポリペプチドをコードするＤＮＡ中に作成される任意の変異は、リーディングフレームの外側の配列を置き換えることはあってはならず、好ましくは、ｍＲＮＡの二次構造を生じることができる相補領域を生じることもない。欧州特許出願公開番号７５，４４４を参照のこと。
【００６１】
ＩＬ−２の生物学的に活性な変異体は、一般的には、参照ＩＬ−２ポリペプチド分子、例えば、自然界に存在しているヒトＩＬ−２（これは、比較のための基準物とされる）のアミノ酸配列と、少なくとも約７０％、好ましくは、少なくとも約８０％、より好ましくは、少なくとも約９０から９５％またはそれ以上、そして最も好ましくは、少なくとも約９８％、９９％またはそれ以上のアミノ酸配列同一性を有する。パーセント配列同一性は、１２のギャップ開始ペナルティーと、２のギャップ伸張ペナルティー、６２のＢＬＯＳＵＭマトリックスを用いるアフィンギャップ検索を使用して、Ｓｍｉｔｈ−Ｗａｔｅｒｍａｎ相同性検索アルゴリズムを使用して決定される。Ｓｍｉｔｈ−Ｗａｔｅｒｍａｎ相同検索アルゴリズムは、Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｗａｔｅｒｍａｎ，Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．（１９８１）２：４８２−４８９に教示されている。変異体は、例えば、わずか１から１５個のアミノ酸残基が異なる、わずか１から１０個の残基、例えば、６〜１０個、わずか５個、わずか４個、３個、２個、またはさらには１個のアミノ酸残基が異なる場合がある。
【００６２】
２つのアミノ酸配列の最適なアラインメントに関して、変異体アミノ酸配列の連続するセグメントは、参照アミノ酸配列と比較して、さらなるアミノ酸残基を有している場合も、アミノ酸残基が欠失している場合もある。参照アミノ酸配列との比較に使用される連続しているセグメントには、少なくとも２０個の連続しているアミノ酸残基が含まれ、これは、３０個、４０個、５０個、またはそれ以上のアミノ酸残基であり得る。保存的な残基置換またはギャップに関する配列同一性についての補正を行うことができる（Ｓｍｉｔｈ−Ｗａｔｅｒｍａｎ相同性検索アルゴリズムを参照のこと）。
【００６３】
目的の自然界に存在しているＩＬ−２ポリペプチドの生物学的に活性な変異体は、わずか１〜１５個のアミノ酸、わずか１から１０個、例えば、６〜１０個、わずか５個、わずか４個、３個、２個、またはさらには、１個のアミノ酸残基が、自然界に存在しているポリペプチドとは異なる場合がある。
【００６４】
ＩＬ−２活性を有しているポリペプチドの正確な化学的構造は、多数の要因に応じて変化する。イオン化することができるアミノ基およびカルボキシル基が分子中に存在するので、特定のポリペプチドは、酸性塩または塩基塩として得ることができ、また、自然界に存在している形態で得ることもできる。適切な環境条件においた場合に、その生物学的活性を保持している全てのこのような調製物が、本明細書中で使用されるようなＩＬ−２活性を有しているポリペプチドの定義に含まれる。さらに、ポリペプチドの一次アミノ酸配列は、糖部分を使用して誘導することによって（糖化）、あるいは、脂質、リン酸、アセチル基などの他の補助的な分子によって、増強させられる場合がある。これはまた、単糖類との結合によって増強させることもできる。このような増強の特定の態様は、生産宿主の翻訳後プロセシングシステムを通じて行われる；他のこのような修飾は、生体外で導入される場合もある。いずれの場合においても、このような修飾には、ポリペプチドのＩＬ−２活性が破壊されない限りは、本明細書中で使用されるＩＬ−２ポリペプチドの定義に含まれる。このような修飾は、種々のアッセイにおいて、ポリペプチドの活性を増強するかまたは減少させるかのいずれかにより、活性に定量的または定性的な影響を与え得ると予想される。さらに、鎖の中の個々のアミノ酸残基は、酸化、還元、または他の誘導によって修飾することができ、そしてポリペプチドは、活性を保持している断片を生じるように切断することができる。活性を破壊させることのないこのような変更は、本明細書中で使用される目的のＩＬ−２ポリペプチドの定義からポリペプチド配列を除去することはない。
【００６５】
ポリペプチド変異体の調製および使用に関する実質的な指針は当該分野において提供されている。ＩＬ−２変異体を調製することにおいては、当業者であれば、自然界に存在しているタンパク質のヌクレオチドまたはアミノ酸配列に対するどの修飾によって、本発明の方法において使用される薬学的組成物の治療的活性のある成分としての使用に適している変異体が生じるかを容易に決定することができる。
【００６６】
本発明の方法で使用されるＩＬ−２またはその変異体は任意の供給源に由来するものであり得るが、好ましくは、組み換えによって生産されたものである。「組み換え体ＩＬ−２」または「組み換え体ＩＬ−２変異体」によって、自然界に存在している配列のＩＬ−２に匹敵する生物学的活性を有しており、そして、例えば、Ｔａｎｉｇｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８３）Ｎａｔｕｒｅ  ３０２：３０５−３１０およびＤｅｖｏｓ（１９８３）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １１：４３０７−４３２３に記載されている組み換えＤＮＡ技術によって調製された、インターロイキン−２またはその変異体、あるいは、Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８４）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２４：１４３１−１４３３によって記載されている突然変異によって変化させられたＩＬ−２が意図される。一般的には、ＩＬ−２をコードする遺伝子がクローニングされ、その後、形質転換された生物、好ましくは、微生物、そして最も好ましくは、本明細書中に記載されるような大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）の中で発現させられる。宿主生物は、発現条件下でＩＬ−２を生産するように外来遺伝子を発現する。合成の組み換え体ＩＬ−２はまた、真核生物、例えば、酵母またはヒトの細胞中で作成することもできる。細胞からのＩＬ−２の増殖、回収、破壊、または抽出のためのプロセスは、例えば、米国特許第４，６０４，３７７号；同第４，７３８，９２７号；同第４，６５６，１３２号；同第４，５６９，７９０号；同第４，７４８，２３４号；同第４，５３０，７８７号；同第４，５７２，７９８号；同第４，７４８，２３４号；および同第４，９３１，５４３号（これらの全体が引用により本明細書中に組み入れられる）に実質的に記載されている。
【００６７】
変異体ＩＬ−２タンパク質の例については、欧州（ＥＰ）特許公開番号ＥＰ  １３６，４８９（ここでは、自然界に存在しているＩＬ−２のアミノ酸配列における以下の変化：Ａｓｎ２６からＧｌｎ２６；Ｔｒｐ１２１からＰｈｅ１２１；Ｃｙｓ５８からＳｅｒ５８またはＡｌａ５８、Ｃｙｓ１０５からＳｅｒ１０５またはＡｌａ１０５；Ｃｙｓ１２５からＳｅｒ１２５またはＡｌａ１２５；以下の全ての残基の欠失Ａｒｇ１２０；およびそのＭｅｔ−１形態の１つ以上が開示されている）；および、１９８３年１０月１３日に提出された欧州特許出願番号８３３０６２２１．９（公開番号ＥＰ  １０９，７４８として１９８４年５月３０日に公開された）（これは、ベルギー特許第８９３，０１６号および共有にかかる米国特許第４，５１８，５８４号に等しい（ここでは、自然界に存在しているヒトＩＬ−２にしたがって番号付けされた１２５位のシステインが欠失しているか、または自然界に存在しているアミノ酸によって置き換えられている、組み換え体ヒトＩＬ−２突然変異タンパク質；アラニル−ｓｅｒ１２５−ＩＬ−２と、ｄｅｓ−アラニル−ｓｅｒ１２５−ＩＬ−２が開示されている））に記載されている組み換え体ＩＬ−２突然変異タンパク質を参照のこと。米国特許第４，７５２，５８５号（ここでは、以下の変異体ＩＬ−２タンパク質が開示されている）
【００６８】
【化１】
2007515185.tif 000003
）、および米国特許第４，９３１，５４３号（ここでは、本明細書中の実施例で使用されるＩＬ−２突然変異タンパク質ｄｅｓ−アラニル−１，セリン１２５ヒトＩＬ−２、ならびに、他のＩＬ−２突然変異タンパク質が開示されている）もまた参照のこと。
【００６９】
欧州特許公開番号ＥＰ  ２００，２８０号（１９８６年１２月１０日に公開された）（ここでは、１０４位のメチオニンが保存的なアミノ酸によって置き換えられている、組み換え体ＩＬ−２突然変異タンパク質が開示されている）もまた参照のこと。例としては、以下の突然変異タンパク質が挙げられる：
【００７０】
【化２】
2007515185.tif 000004
。欧州特許公開番号ＥＰ  １１８，６１７、および米国特許第５，７００，９１３号（ここでは、Ｎ末端アミノ酸として自然界に存在しているＩＬ−２のメチオニンの代わりにアラニンを有している、非糖化ヒトＩＬ−２変異体；最初のメチオニンが欠失おり、その結果、プロリンがＮ末端アミノ酸である非糖化ヒトＩＬ−２；およびＮ末端メチオニンとプロリンアミノ酸の間にアラニンが挿入されている、非糖化ヒトＩＬ−２が開示されている）もまた参照のこと。
【００７１】
他のＩＬ−２突然変異タンパク質としては、ＷＯ９９／６０１２８に開示されている突然変異タンパク質（２０位のアスパラギン酸がヒスチジンまたはイソロイシンで置換されている、８８位のアスパラギン酸がアルギニン、グリシン、またはイソロイシンで置換されているか、または１２６位のグルタミンがロイシンまたはグルタミン酸で置換されている）（これは、ＮＫ細胞に関してＴ細胞受容体を発現する細胞によって発現される高親和性ＩＬ−２についての選択的な活性と、低いＩＬ−２毒性を有していることが報告されている）；米国特許第５，２２９，１０９号に開示されている突然変異タンパク質（３８位のアルギニンがアラニンで置換されている、または４２位のフェニルアラニンがリジンで置換されている）（これは、自然界に存在しているＩＬ−２と比較して高親和性ＩＬ−２受容体に対して低い結合を示すが、ＬＡＫ細胞を刺激する能力を保っている）；国際公開番号ＷＯ  ００／５８４５６に開示されている突然変異タンパク質（自然界に存在しているＩＬ−２において、自然界に存在している（ｘ）Ｄ（ｙ）が交互に現れるか、または欠失しており、ここでＤはアスパラギン酸であり、（ｘ）はロイシン、イソロイシン、グリシン、またはバリンであり、そして（ｙ）はバリン、ロイシン、またはセリンである）（これは、血管漏出症候群を軽減させると主張されている）；国際公開番号ＷＯ  ００／０４０４８に開示されているＩＬ−２  ｐ１−３０ペプチド（ＩＬ−２のヘリックスＡ全体を含み、ＩＬ−２受容体のｂ鎖と相互作用する、ＩＬ−２の最初の３０個のアミノ酸に対応する）（これは、ＮＫ細胞を刺激し、そしてＬＡＫ細胞を誘導することが報告されている）；ならびに、これもまたＷＯ  ００／０４０４８に開示されているＩＬ−２  ｐ１−３０ペプチドの突然変異体形態（２０位のアスパラギン酸がリジンで置換されている）（これは、血管からの出血を誘導することはできないが、ＬＡＫ細胞を生じる能力は残っていることが報告されている）が挙げられる。さらに、ＩＬ−２は、高い可溶性と、変更された薬物動態プロフィールを提供するように、ポリエチレングリコールで修飾することができる（米国特許第４，７６６，１０６号を参照のこと）。
【００７２】
毒性が低いと予想されるＩＬ−２突然変異タンパク質のさらなる例は、同時係属中の、２００４年３月５日に提出され、米国仮特許出願番号６０／５５０，８６８が割り当てられ、その全体が引用により本明細書中に組み入れられる、表題「Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ＩＬ−２  Ｍｕｔｅｉｎｓ」に開示されている。これらの突然変異タンパク質には、成熟ヒトＩＬ−２配列の１２５位のシステインのセリンでの置換と、成熟ヒトＩＬ−２配列中の少なくとも１つのさらなるアミノ酸置換が含まれている、成熟ヒトＩＬ−２（配列番号１４）のアミノ酸配列が含まれている。その結果、この突然変異タンパク質は以下の機能特性を有している：同程度の量のｄｅｓ−アラニル−１、Ｃ１２５ＳヒトＩＬ−２，またはＣ１２５ＳヒトＩＬ−２と比較して、同等のアッセイ条件下で、１）ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の増殖を維持または増強する、および、２）低いレベルの、ＮＫ細胞によるプロ炎症性サイトカインの生産を誘導する。いくつかの実施形態においては、さらなる置換は、以下からなる群より選択される：
【００７３】
【化３】
2007515185.tif 000005
；ここでは、アミノ酸残基の位置は、成熟ヒトＩＬ−２アミノ酸配列（配列番号１４）の番号付けにしたがう。他の実施形態においては、これらの突然変異タンパク質には、成熟ヒトＩＬ−２配列の１２５位のシステインのアラニンでの置換と、成熟ヒトＩＬ−２配列内の少なくとも１つのさらなるアミノ酸の置換が含まれており、その結果、この突然変異タンパク質は、これらの同じ機能特性を有する。いくつかの実施形態においては、さらなる置換は、以下からなる群より選択される：
【００７４】
【化４】
2007515185.tif 000006
；ここでは、アミノ酸残基の位置は、成熟ヒトＩＬ−２アミノ酸配列（配列番号１４）の番号付けにしたがう。別の実施形態においては、これらの突然変異タンパク質には、成熟ヒトＩＬ−２配列内に少なくとも１つのさらなるアミノ酸置換を有している、成熟ヒトＩＬ−２（配列番号１４）のアミノ酸配列が含まれ、その結果、突然変異タンパク質は、これらの同じ機能特性を有する。いくつかの実施形態においては、さらなる置換は、以下からなる群より選択される：
【００７５】
【化５】
2007515185.tif 000007
；ここでは、アミノ酸残基の位置は、成熟ヒトＩＬ−２アミノ酸配列（配列番号１４）の番号付けにしたがう。この同時係属中の出願において開示されているさらなる突然変異タンパク質には、上記で同定された突然変異タンパク質が含まれるが、成熟ヒトＩＬ−２配列の１位の最初のアラニン残基が欠失しているものは除外される。
【００７６】
毒性が低いと予想されるＩＬ−２突然変異タンパク質のさらなる例は、２００４年７月７日に提出され、米国仮特許出願番号６０／５８５，９８０が割り当てられた、表題「Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−２  Ｍｕｔｅｉｎｓ」と題されている同時係属中の出願（これは、引用により本明細書中に組み入れられる）に開示されている。この出願に記載されている組み合わせ突然変異体としては、１２５位のシステインのセリンでの置換と、成熟ヒトＩＬ−２配列中に少なくとも２つのさらなるアミノ酸置換を有している成熟ヒトＩＬ−２アミノ酸配列が挙げられるが、これに限定はされない。その結果、突然変異タンパク質は以下の機能特性を有している：同程度の量のｄｅｓ−アラニル−１、Ｃ１２５ＳヒトＩＬ−２、またはＣ１２５ＳヒトＩＬ−２と比較して、同等のアッセイ条件下で、１）ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の増殖を維持または増強する、および、２）低いレベルの、ＮＫ細胞によるプロ炎症性サイトカインの生産を誘導する。ここでは、ＮＫ細胞の増殖およびプロ炎症性サイトカインの生産は、ＮＫ−９２生体アッセイを使用してアッセイされる。いくつかの実施形態においては、突然変異タンパク質には、１位のアラニンの欠損がさらに含まれる。いくつかの実施形態においては、さらなる置換が、以下からなる群より選択される：
【００７７】
【化６】
2007515185.tif 000008
用語ＩＬ−２は、本明細書中で使用される場合は、第２のタンパク質に融合させられたＩＬ−２、または、投与頻度を少なくするため、もしくはＩＬ−２耐性を改善するために、ポリプロリンもしくは水溶性ポリマーに共有結合させられたＩＬ−２を含む、ＩＬ−２融合体または結合体もまた含むように意図される。例えば、ＩＬ−２（または本明細書中で定義されるようなその変異体）は、当該分野で公知の方法を使用して、ヒトアルブミンまたはアルブミン断片に融合させることができる（ＷＯ  ０１／７９２５８を参照のこと）。あるいは、ＩＬ−２は、ポリプロリンまたはポリエチレングリコールホモポリマーに、そしてポリオキシエチルポリオールに（ここでは、ホモポリマーは未置換であるか、または一方の末端がアルキル基で置換されており、そしてポリオールは、未置換である）当該分野で公知の方法を使用して、共有結合させることができる（例えば、米国特許第４，７６６，１０６号、同第５，２０６，３４４号、および同第４，８９４，２２６号を参照のこと）。
【００７８】
治療有効成分としてＩＬ−２を含む任意の薬学的組成物を、本発明の方法において使用することができる。このような薬学的組成物は当該分野で公知であり、これには、米国特許第４，７４５，１８０号；同第４，７６６，１０６号；同第４，８１６，４４０号；同第４，８９４，２２６号；同第４，９３１，５４４号；および同第５，０７８，９９７号（これらは引用により本明細書中に組み入れられる）に開示されている薬学的組成物が含まれるが、これらに限定はされない。したがって、当該分野で公知である、ＩＬ−２またはその変異体を含む液体組成物、凍結乾燥組成物、または噴霧乾燥組成物は、本発明の方法にしたがってその後に被験体に投与される、水性または非水性の溶液または懸濁液として調製することができる。これらの組成物のそれぞれには、治療有効成分または予防上有効である成分として、ＩＬ−２またはその変異体が含まれる。「治療有効成分または予防上有効である成分」によって、ＩＬ−２またはその変異体が組成物に組み込まれて、薬学的組成物が被験体に投与された際に被験体の疾患または症状の処置または予防に関して所望される治療応答または予防応答をもたらすことが意図される。薬学的組成物には、調製または保存の間にタンパク質の安定性と生物学的活性を失うことに関係する問題を最小にするために、適切な安定剤、充填剤、またはそれらの両方が含められることが好ましい。
【００７９】
本発明の好ましい実施形態においては、本発明の方法において有用なＩＬ−２を含む薬学的組成物は、安定化させられた単量体ＩＬ−２またはその変異体を含む組成物、多量体ＩＬ−２またはその変異体を含む組成物、および安定化させられた凍結乾燥もしくは噴霧乾燥させられたＩＬ−２またはその変異体を含む組成物である。
【００８０】
安定化させられた単量体ＩＬ−２またはその変異体を含む薬学的組成物は、２０００年１０月３日に提出され、ＰＣＴ番号ＰＣＴ／ＵＳ００／２７１５６が割り当てられた、表題「Ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ  Ｌｉｑｕｉｄ  ３  Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ−Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ」の同時係属中のＰＣＴ出願に開示されている。この開示は、引用により本明細書中に組み入れられる。「単量体」ＩＬ−２によって、本明細書中に記載される薬学的組成物の中の、それらの単量体形態として実質的に存在しており、凝集していない形態であるタンパク質分子が意図される。したがって、ＩＬ−２の共有または疎水性オリゴマーまたは凝集物は存在しない。簡単に説明すると、これらの液体組成物中のＩＬ−２またはその変異体は、保存の間にＩＬ−２またはその変異体が凝集物を形成することを少なくするために十分な量のアミノ酸塩基とともに処方される。アミノ酸塩基は、アミノ酸またはアミノ酸の組み合わせであり、ここでは任意の所定のアミノ酸は、その遊離の塩基の形態、またはその塩の形態のいずれかで存在する。好ましいアミノ酸は、アルギニン、リジン、アスパラギン酸、およびグルタミン酸からなる群より選択される。これらの組成物には、さらに、ＩＬ−２またはその変異体の安定性について許容される範囲内に液体組成物のｐＨを維持するための緩衝化剤が含まれる。ここでは、緩衝化剤は、その塩の形態を実質的に含まない酸、その塩の形態である酸、または酸とその塩形態の混合物である。好ましくは、酸は、コハク酸、クエン酸、燐酸、およびグルタミン酸からなる群より選択される。このような組成物は、本明細書中では、安定化させられた単量体ＩＬ−２薬学的組成物と呼ばれる。
【００８１】
これらの組成物中のアミノ酸塩基は、液体である薬学的組成物の保存の間の凝集物の形成に対して、ＩＬ−２またはその変異体を安定化させるように作用する。一方、その塩の形態を実質的に含まない酸、その塩の形態である酸、または酸とその塩形態の混合物の、緩衝化剤としての使用によっては、ほぼ等張である浸透圧を有している液体組成物が得られる。液体の薬学的組成物には、他の安定剤、より具体的には、メチオニン、非イオン性界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）、およびＥＤＴＡが、ポリペプチドの安定性をさらに高めるために、さらに配合される場合がある。このような液体の薬学的組成物は、安定化されていると言われる。なぜなら、その塩の形態を実質的に含まない酸、その塩の形態である酸、または酸とその塩形態の混合物と組み合わせてアミノ酸塩基の添加によって、これらの２つの成分の組み合わせが存在しない条件下で処方された液体の薬学的組成物と比較して、高い保存安定性を有している組成物が得られるからである。
【００８２】
安定化させられた単量体ＩＬ−２またはその変異体を含むこれらの液体の薬学的組成物は、水溶液の形態で使用されるか、あるいは、後で使用するために凍結状態で、もしくは液体の形態に後で再構成するための乾燥形態で、または本発明の方法にしたがう被験体への投与に適切な他の形態で保存されるかのいずれかであり得る。「乾燥形態」によって、液体の薬学的組成物または処方物が凍結による乾燥（すなわち、凍結乾燥；例えば、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｐｏｌｌｉ（１９８４）Ｊ．Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｓｃｉ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．３８：４８−５９を参照のこと）、噴霧乾燥（Ｍａｓｔｅｒｓ（１９９１）、ｉｎ  Ｓｐｒａｙ−Ｄｒｙｉｎｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ（５ｔｈ  ｅｄ；Ｌｏｎｇｍａｎ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ，Ｅｓｓｅｚ，Ｕ．Ｋ．，ｐｐ．４９１−６７６；Ｂｒｏａｄｈｅａｄ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌ．Ｉｎｄ．Ｐｈａｒｍ．１８：１１６９−１２０６；およびＭｕｍｅｎｔｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９４）Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１１：１２−２０を参照のこと）、または風乾（Ｃａｒｐｅｎｔｅｒ  ａｎｄ  Ｃｒｏｗｅ（１９８８）Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ  ２５：４５９−４７０；およびＲｏｓｅｒ（１９９１）Ｂｉｏｐｈａｒｍ．４：４７−５３）のいずれかによって乾燥させられることが意図される。
【００８３】
その凝集していない単量体状態のＩＬ−２を含むＩＬ−２処方物の他の例として、Ｗｈｉｔｔｉｎｇｔｏｎ  ａｎｄ  Ｆａｕｌｄｓ（１９９３）Ｄｒｕｇｓ  ４６（３）：４４６−５１４に記載されている処方物が挙げられる。これらの処方物には、組み換え体ＩＬ−２産物が含まれる。ここでは、組み換え体ＩＬ−２突然変異タンパク質であるテセロイキン（Ｔｅｃｅｌｅｕｋｉｎ）（アミノ末端にメチオニン残基が付加されている非糖化ヒトＩＬ−２）は、０．２５％のヒト血清アルブミンとともに、凍結乾燥させられた粉末に処方され、これは、等張性の生理食塩水で再構成される。そして組み換え体ＩＬ−２突然変異タンパク質であるバイオロイキン（Ｂｉｏｌｅｕｋｉｎ）（アミノ末端にメチオニン残基が付加されており、ヒトＩＬ−２配列の１２５位のシステイン残基がアラニンで置換されている、ヒトＩＬ−２）は、０．１から１．０ｍｇ／ｍｌのＩＬ−２突然変異タンパク質が酸と混合されるように処方される。ここでは、処方物は、３．０から４．０のｐＨを有し、緩衝液を含まないことが有利であり、１０００ｍｍｈｏｓ／ｃｍ未満の伝導率（５００ｍｍｈｏｓ／ｃｍ未満であることが有利である）を有する。ＥＰ  ３７３，６７９；Ｘｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９６）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．Ｒｅｓ．１３（４）：６４３−６４４；およびＰｒｅｓｔｒｅｌｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９５）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．Ｒｅｓ．１２（９）：１２５０−１２５８を参照のこと。
【００８４】
多量体ＩＬ−２またはその変異体を含む薬学的組成物の例は、共有にかかる米国特許第４，６０４，３７７号に開示されている。この開示は、引用により本明細書中に組み入れられる。「多量体」によって、タンパク質分子が平均して１０〜５０個の分子が会合している微小凝集形態で薬学的組成物中に存在することが意図される。これらの多量体は、ゆるく結合した、物理的に会合しているＩＬ−２分子として存在する。これらの組成物の凍結乾燥形態は、商品名プロロイキン（Ｃｈｉｒｏｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｅｍｅｒｙｖｉｌｌｅ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）として市販されている。この参考文献中に開示される凍結乾燥させられた処方物には、選択的に酸化させられた、微生物によって生産された組み換え体ＩＬ−２が含まれており、ここでは、組み換え体ＩＬ−２は、水中に組み換え体ＩＬ−２が溶解することを確実にするための、多量の十分な量のドデシル硫酸ナトリウムを提供する、マンニトールのような水溶性担体と混合される。これらの組成物は、非経口投与のための水性の注射液の再構成に適しており、ヒト患者において安定であり、十分に寛容される。再構成されても、ＩＬ−２またはその変異体はその多量体状態を維持する。多量体ＩＬ−２またはその変異体を含む、このような凍結乾燥させられた組成物または液体の組成物は、本発明の方法に含まれる。このような組成物は、本明細書中では、多量体ＩＬ−２薬学的組成物と呼ばれる。
【００８５】
本発明の方法ではまた、ＩＬ−２またはその変異体を含む、安定化させられた凍結乾燥させられた、または噴霧乾燥させられた薬学的組成物が使用される場合もある。これらは、本発明の方法にしたがって投与するために、液体または他の適切な形態になるように再構成され得る。このような薬学的組成物は、２０００年１１月２８日に提出された米国特許出願番号０９／７２４，８１０の表題「Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−２」と題された同時係属中の出願、および２０００年１２月２７日に提出された国際出願ＰＣＴ／ＵＳ００／３５４５２に開示されている。これらは引用により本明細書中に組み入れられる。これらの組成物には、さらに、少なくとも１つの充填剤、乾燥プロセスの間タンパク質を安定化させるために十分な量の少なくとも１つの物質、またはこれらの両方が含まれる場合がある。「安定化させられた」によって、ＩＬ−２タンパク質またはその変異体が、その単量体または多量体形態を保ち、さらに、組成物の固形または乾燥粉末形態を得るための凍結乾燥または噴霧乾燥後の品質、純度、および能力についてのその他の鍵となる特性を保つことが意図される。これらの組成物においては、充填剤として使用される好ましい担体材料として、グリシン、マンニトール、アラニン、バリン、またそれらの任意の組み合わせが挙げられ、最も好ましいものはグリシンである。充填剤は、使用される物質に応じて、０％から約１０％（ｗ／ｖ）の範囲で処方物中に存在する。安定剤としての使用に好ましい担体材料としては、任意の糖または糖アルコール、あるいは任意のアミノ酸が挙げられる。好ましい糖としては、スクロース、トレハロース、ラフィノース、スタキオース、ソルビトール、グルコース、ラクトース、デキストロース、またはそれらの任意の組み合わせが挙げられ、好ましいものはスクロースである。安定剤が糖である場合は、これは、約０％から約９．０％（ｗ／ｖ）の範囲で、好ましくは、約０．５％から約５．０％の範囲で、より好ましくは、約１．０％から約３．０％の範囲で、最も好ましくは、約１．０％で存在する。安定剤がアミノ酸である場合は、これは、約０％から約１．０％（ｗ／ｖ）の範囲で、好ましくは、約０．３％から約０．７％の範囲で、最も好ましくは、約０．５％で存在する。これらの安定化させられた凍結乾燥組成物または噴霧乾燥組成物には、状況に応じて、メチオニン、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）またはその塩、例えば、エチレンジアミン四酢酸ニナトリウムまたは他のキレート化剤（これは、メチオニンの酸化に対してＩＬ−２またはその変異体を保護する）が含まれる場合がある。この様式でのこれらの物質の使用は、同時係属中の米国仮特許出願番号６０／１５７６９６（これは引用により本明細書中に組み入れられる）に記載されている。安定化させられた凍結乾燥組成物または噴霧乾燥組成物は、緩衝化剤を使用して処方される場合がある。緩衝化剤により、処方プロセスの間、または乾燥形態の組成物の再構成の後のような液相の中で、許容される範囲、好ましくは、約ｐＨ４．０から約ｐＨ８．５に薬学的組成物のｐＨが維持される。緩衝液は、これらが乾��プロセスと適合し、処理の間および保存の際のタンパク質の品質、純度、能力、および安定性に影響を及ぼさないように選択される。
【００８６】
先に記載された安定化させられた単量体、多量体、および安定化させられた凍結乾燥させられたまたは噴霧乾燥させられたＩＬ−２薬学的組成物は、本発明の方法での使用に適している組成物を呈する。しかし、ＩＬ−２またはその変異体を治療有効成分として含む任意の薬学的組成物が本発明の方法に含まれる。
【００８７】
本明細書中で使用される場合は、用語「抗ガン抗体」には、ガン細胞、特に、目的の特定のガンの細胞上にある特定の細胞表面抗原を標的化するように設計された抗体が含まれる。好ましくは、抗ガン抗体はモノクローナルの性質であり、好ましくは、ＩｇＧ１モノクローナル抗体である。適切なＩｇＧ１モノクローナル抗体としては、リツキサン（登録商標）（これは、新生物性Ｂ細胞上のＣＤ２０抗原を標的とし、非ホジキンＢ細胞リンパ腫および慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）を含むＢ細胞リンパ腫の処置に有効である）；テレックス（ＭＵＣ１特異的ヒト化ＨＭＦＧ１、これは、乳ガン、ならびに、卵巣ガンおよび結腸ガンを含む他のＭＵＣ１ポジティブ腫瘍に対して開発された）；ＭＤＸ−０１０（活性化Ｔ細胞に対するヒト抗ＣＴＬＡ−４ネガティブ調節因子；これは、黒色腫、濾胞性リンパ腫、結腸ガンおよび前立腺ガンに対して開発された）；ＥＭＤ  ７２０００およびエルビタックス（ＩＭＣ−２２５）（ＥＧＦＲポジティブガン、最も顕著なものは、結腸ガンに対して開発されたヒト抗ＥＧＦＲ）；ＷＸ−Ｇ２５０（ＭＮ抗原特異的；腎細胞ガンおよび子宮頸ガンに対して開発された）；ＩＤＭ−１（卵巣ガンの処置のため）；ＭＤＸ−２１０（乳ガンおよび卵巣ガンの処置のため）；ＺＡＭＹＬ（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の処置のため）；ならびに、キャンパス（ＣＬＬの処置のため）が挙げられるが、これらに限定はされない。以下の議論は、Ｂ細胞リンパ腫を処置する目的の抗ＣＤ２０抗体に関するものであるが、その概念は、抗体についての上記のリストに同様に適用することができる。
【００８８】
本明細書中で使用される場合は、用語「抗ＣＤ２０抗体」には、ＣＤ２０  Ｂ細胞表面抗原を特異的に認識する任意の抗体が含まれ、これには、ポリクローナル抗ＣＤ２０抗体、モノクローナル抗ＣＤ２０抗体、ヒト抗ＣＤ２０抗体、ヒト化抗ＣＤ２０抗体、キメラ抗ＣＤ２０抗体、異種抗ＣＤ２０抗体、およびＣＤ２０  Ｂ細胞表面抗原を特異的に認識するこれらの抗ＣＤ２０抗体の断片が含まれる。好ましくは、抗体は、モノクローナルの性質である。「モノクローナル抗体」によって、実質的に均質な抗体の集団から得られる抗体が意図される。すなわち、集団に含まれる個々の抗体は、少量で存在する、可能性がある自然界に存在している突然変異を除いて同一である。モノクローナル抗体は高度に特異的であり、１つの抗原性部位、すなわち、本発明のＣＤ２０  Ｂ細胞表面抗原に対して向けられている。さらに、異なる決定基（エピトープ）に向けられた種々の抗体を通常含む従来の（ポリクローナル）抗体調製物とは対照的に、それぞれのモノクローナル抗体は、抗原上の１つの決定基に向けられている。修飾語「モノクローナル」は、抗体の実質的に均質な集団から得られるとして抗体の特徴を示し、そして任意の特定の方法による抗体の生産が必要であるとは解釈されない。例えば、本発明にしたがって使用されるモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，（１９７５）Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５によって最初に記載されたハイブリドーマ法によって作成することができ、また、組み換えＤＮＡ法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号）によって作成することもできる。「モノクローナル抗体」はまた、例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４−６２８およびＭａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７に記載されている技術を使用してファージ抗体ライブラリーから単離される場合もある。
【００８９】
マウスを起源とする抗ＣＤ２０抗体は、本発明の方法での使用に適している。このようなマウス抗ＣＤ２０抗体の例としては、Ｂ１抗体（米国特許第６，０１５，５４２号に記載されている）；１Ｆ５抗体（Ｐｒｅｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８９）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．７：１０２７）；ＮＫＩ−Ｂ２０およびＢＣＡ−Ｂ２０抗ＣＤ２０抗体（Ｈｏｏｉｊｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９５）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５５：８４０−８４６）；ならびにＩＤＥＣ−２Ｂ８（ＩＤＥＣ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｃｏｒｐ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａから市販されている）；２Ｈ７抗体（Ｃｌａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８５）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８２：１７６６−１７７０に記載されている）；ならびに、Ｃｌａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８５）（前出）およびＳｔａｓｈｅｎｋｏ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８０）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２５：１６７８−１６８５に記載されている他の抗体が挙げられるが、これらに限定はされない。
【００９０】
用語「抗ＣＤ２０抗体」には、本明細書中で使用される場合は、キメラ抗ＣＤ２０抗体が含まれる。「キメラ抗体」により、組み換えデオキシリボ核酸技術を使用して導かれることが最も好ましく、そしてヒト（免疫学的に「関係している」種、例えば、チンパンジーを含む）成分とヒト以外の成分の両方を含む抗体が意図される。したがって、キメラ抗体の定常領域は、自然界に存在しているヒト抗体の定常領域と実質的に同一であることが最も好ましい；キメラ抗体の可変領域は、ヒト以外の供給源に由来し、そしてＣＤ２０細胞表面抗原に特異的な所望される抗原特異性を有することが最も好ましい。ヒト以外の供給源は任意の脊椎動物である供給源であり、これは、ヒトＣＤ２０細胞表面抗原に対する抗体、またはヒトＣＤ２０細胞表面抗原を含む物質を作成するために使用することができる。このようなヒト以外の供給源としては、齧歯類（例えば、ウサギ、ラット、マウスなど；例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照のこと）およびヒト以外の霊長類（例えば、旧世界ザル（Ｏｌｄ  Ｗｏｒｌｄ  Ｍｏｎｋｅｙ）、類人猿（Ａｐｅ）など；例えば、米国特許第５，７５０，１０５号および同第５，７５６，０９６号を参照のこと）が挙げられるが、これらに限定はされない。最も好ましくは、ヒト以外の成分（可変領域）はマウスである供給源に由来する。本明細書中で使用される場合には、表現「免疫学的に活性」は、キメラ抗ＣＤ２０抗体についての言及において使用される場合には、ヒトＣ１ｑに結合し、ヒトＢリンパ球細胞株の補体依存性溶解（「ＣＤＣ」）を媒介し、そして抗体依存性細胞傷害性（「ＡＤＣＣ」）を通じてヒトの標的細胞を溶解させるキメラ抗体を意味する。キメラ抗ＣＤ２０抗体の例としては、商品名リツキサン（登録商標）；ＩＤＥＣ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｃｏｒｐ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）として市販されており、米国特許第５，７３６，１３７号、同第５，７７６，４５６号、および同第５，８４３，４３９号に記載されているＩＤＥＣ−Ｃ２Ｂ８；米国特許第５，７５０，１０５号に記載されているキメラ抗体；米国特許第５，５００，３６２号；同第５，６７７，１８０号、同第５，７２１，１０８号；および同第５，８４３，６８５号に記載されているキメラ抗体が挙げられるが、これらに限定はされない。
【００９１】
ヒト化抗ＣＤ２０抗体もまた、本明細書中で使用される場合には、用語抗ＣＤ２０抗体に含まれる。「ヒト化」によって、非ヒト免疫グロブリン配列に由来する最小配列を含む抗ＣＤ２０抗体の形態が意図される。大部分については、ヒト化抗体はヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）であり、ここでは、レシピエントの超可変領域に由来する残基が、所望される特異性、親和性、および能力を有しているヒト以外の種、例えば、マウス、ラット、ウサギ、もしくはヒト以外の霊長類の超可変領域（ドナー抗体）に由来する残基で置き換えられている。例えば、米国特許第５，２２５，５３９号；同第５，５８５，０８９号；同第５，６９３，７６１号；同第５，６９３，７６２号；同第５，８５９，２０５号を参照のこと。いくつかの場合には、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク残基が、対応するヒト以外の残基で置き換えられている（例えば、米国特許第５，５８５，０８９号；同第５，６９３，７６１号；同第５，６９３，７６１号を参照のこと）。さらに、ヒト化抗体には、レシピエント抗体中に、またはドナー抗体中には見ることができない残基が含まれる場合がある。これらの修飾は、抗体の能力をさらに洗練させるために（例えば、所望される親和性を得るために）行われる。一般的には、ヒト化抗体には、少なくとも１つ、通常は２つの可変ドメインの実質的に全てが含まれる。ここでは、超可変領域の全てまたは実質的に全ては、ヒト以外の免疫グロブリンのものに相当し、そして、フレームワーク領域の全てまたは実質的に全ては、ヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体には、状況に応じて、少なくとも、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の一部、通常は、ヒト免疫グロブリンの定常領域の一部が含まれる。さらなる詳細については、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ  ３３１：５２２−５２５；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８８）Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９；およびＰｒｅｓｔａ（１９９２）Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３−５９６を参照のこと。
【００９２】
用語抗ＣＤ２０抗体にはまた、ヒト以外の哺乳動物宿主、より具体的には、トランスジェニックマウスの中で生産され、不活化させられた内因性免疫グロブリン（Ｉｇ）遺伝子座を特徴とする、異種抗ＣＤ２０抗体または修飾された抗ＣＤ２０抗体も含まれる。このようなトランスジェニック動物においては、宿主免疫グロブリンの軽サブユニットおよび重サブユニットの発現のための能力を有している内因性遺伝子は、非機能的にされ、そして同様のヒト免疫グロブリン遺伝子座と置換される。これらのトランスジェニック動物は、軽または重宿主免疫グロブリンサブユニットが実質的に存在しない状況で、ヒト抗体を生産する。例えば、米国特許第５，９３９，５９８号を参照のこと。
【００９３】
抗ＣＤ２０抗体の断片は、これらが所望される全長の抗体の親和性を保持している限りは、本発明の方法での使用に適している。したがって、抗ＣＤ２０抗体の断片は、ＣＤ２０  Ｂ細胞表面抗原に結合する能力を保持している。抗体の断片には、全長の抗体の一部、一般的には、その抗原結合領域または可変領域が含まれる。抗体断片の例として、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖ断片、ならびに単鎖抗体分子が挙げられるが、これらに限定はされない。「単鎖Ｆｖ」または「ｓＦｖ」抗体断片によって、抗体のＶＨおよびＶＬドメインを含む断片が意図される。ここでは、これらのドメインは、一本鎖のポリペプチド鎖の中に存在する。例えば、米国特許第４，９４６，７７８号；同第５，２６０，２０３号；同第５，４５５，０３０号；同第５，８５６，４５６号を参照のこと。一般的には、Ｆｖポリペプチドにはさらに、ＶＨドメインとＶＬドメインの間に、ポリペプチドリンカーが含まれ、これによって、ｓＦｖは抗原の結合のための所望される構造を形成することができる。ｓＦｖの概要については、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ（１９９４）ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｖｏｌ．１１３、Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）、ｐｐ２６９−３１５を参照のこと。
【００９４】
抗体または抗体断片は、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４（１９９０）に記載されている技術を使用して作成される抗体ファージライブラリーから単離することができる。Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４−６２８およびＭａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７には、それぞれファージライブラリーを使用した、マウスおよびヒト抗体の単離が記載されている。これに続く文献には、鎖のシャッフリング（Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９−７８３）、ならびに、非常に大きなファージライブラリーを構築するためのストラテジーとしてのコンビナトリアル感染、および生体内での組み換え（Ｗａｔｅｒｈｏｕｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９３）Ｎｕｃｌｅｉｃ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２１：２２６５−２２６６）による、高親和性（ｎＭ範囲）のヒト抗体の生産が記載されている。したがって、これらの技術は、モノクローナル抗体の単離のための従来のモノクローナル抗体ハイブリドーマ技術についての実行可能な代案である。
【００９５】
ヒト化抗体には、ヒト以外である供給源に由来する１つ以上のアミノ酸残基がその中に導入されている。これらのヒト以外のアミノ酸残基は、多くの場合は、「ドナー」残基と呼ばれ、これは、通常、「ドナー」の可変ドメインから得られる。ヒト化は、基本的には、Ｗｉｎｔｅｒと共同研究者らの方法（Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５；Ｒｉｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８８）Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２７；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４−１５３６）にしたがって、齧歯類ＣＤＲまたはＣＤＲ配列を対応するヒト抗体の配列で置換することによって行うことができる。例えば、米国特許第５，２２５，５３９号；同第５，５８５，０８９号；同第５，６９３，７６１号；同第５，６９３，７６２号；同第５，８５９，２０５号を参照のこと。したがって、このような「ヒト化」抗体には、実質的に完全なものよりも小さいヒト可変ドメインがヒト以外の種に由来する対応する配列によって置換されている抗体が含まれる場合がある。実際、ヒト化抗体は、その中のいくつかのＣＤＲ残基および可能性のあるいくつかのフレームワーク残基が、齧歯類抗体中の同様の部位に由来する残基によって置換されている典型的なヒト抗体である。例えば、米国特許第５，２２５，５３９号；同第５，５８５，０８９号；同第５，６９３，７６１号；同第５，６９３，７６２号；同第５，８５９，２０５号を参照のこと。米国特許第６，１８０，３７０号および国際公開番号ＷＯ  ０１／２７１６０もまた参照のこと。ここでは、予め決定された抗原に対する親和性が改善されているヒト化抗体と、そのようなヒト化抗体を生産するための技術が開示されている。
【００９６】
抗体断片の生産のための種々の技術が開発されている。伝統的には、これらの断片は、完全な抗体のタンパク質分解的消化によって導かれている（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２４：１０７−１１７（１９９２）およびＢｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：８１を参照のこと）。しかし、これらの断片は、現在は、組み換え宿主細胞から直接生産させることができる。例えば、抗体断片は、上記で議論された抗体ファージライブラリーから単離することができる。あるいは、Ｆａｂ’−ＳＨ断片を、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）から直接回収し、化学的にカップリングさせてＦ（ａｂ’）２断片を形成させることができる（Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：１６３−１６７）。別のアプローチにしたがうと、Ｆ（ａｂ’）２断片は、組み換え宿主細胞培養物から直接単離することができる。抗体断片の生産のための他の技術は当業者に明らかであろう。
【００９７】
さらに、上記の抗ＣＤ２−抗体の任意のものが、本発明の方法での使用の前に結合させられる場合もある。このような結合抗体は当該分野で利用することができる。したがって、抗ＣＤ２０抗体は、間接標識または間接標識アプローチを使用して標識することができる。「間接標識」または「間接標識アプローチ」により、キレート化剤が抗体に共有結合させられ、そして少なくとも２つの放射性核種がキレート化剤に挿入されることが意図される。例えば、Ｓｒｉｖａｇｔａｖａ  ａｎｄ  Ｍｅａｓｅ（１９９１）Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏ．１８：５８９−６０３に記載されているキレート化剤および放射性核種を参照のこと。あるいは、抗ＣＤ２０抗体は、「直接標識」または「直接標識アプローチ」を使用して標識される場合もある。ここでは、放射性核種が、抗体に直接共有結合させられる（通常は、アミノ酸残基を介して）。好ましい放射性核種は、Ｓｒｉｖａｇｔａｖａ  ａｎｄ  Ｍｅａｓｅ（１９９１）（前出）に提供されている。間接標識アプローチが特に好ましい。例えば、米国特許第６，０１５，５４２号に記載されている抗ＣＤ２０抗体の標識された形態を参照のこと。
【００９８】
抗ＣＤ２０抗体は、通常、薬学的に許容される緩衝液（例えば、滅菌の生理食塩水、滅菌の緩衝用水、プロピレングリコール、上記の組み合わせなど）の中に、標準的な技術によって提供される。非経口的に投与することができる薬剤を調製するための方法は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１８ｔｈ  ｅｄ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ．Ｃｏ．：Ｅａｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ，１９９０）に記載されている。例えば、国際公開番号ＷＯ  ９８／５６４１８もまた参照のこと。これには、本発明の方法での使用に適している安定化させられた抗体の薬学的処方物が記載されている。
【００９９】
本発明によって、また、本発明の診断方法において使用されるキットも提供される。このようなキットには、Ｆｃγ受容体ＩＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＡ）遺伝子の多型領域に隣接して、または多型領域に特異的にハイブリダイズする少なくとも１つのプローブまたはプライマーが含まれる。ここでは、多型領域には、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ対立遺伝子をコードするヌクレオチドが含まれている。このようなキットにより、個体の中にこの対立遺伝子が存在することを検出する、好ましくは、ホモ接合型１５８Ｆ／Ｆ遺伝子型を検出することができる。あるいは、キットには、Ｆｃγ受容体ＩＩＡ（ＦｃγＲＩＩＡ）遺伝子の多型領域に隣接して、または多型領域に特異的にハイブリダイズする少なくとも１つのプローブまたはプライマーが含まれる。ここでは、多型領域には、ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ対立遺伝子をコードするヌクレオチドが含まれている。このようなキットにより、個体の中にこの対立遺伝子の少なくとも１つのコピーが存在していることを検出することができる。これらのキットは組み合わせることができ、その結果、両方の遺伝子に特異的なプライマーまたはプローブがキットに含まれる。さらに、このキットには、使用についての説明書を含めることができる。
【０１００】
以下の実施例は、説明のために提供され、限定のために提供されるものではない。
【実施例１】
【０１０１】
材料および方法
Ａ．ＩＬ−２
使用したＩＬ−２処方物は、Ｅｍｅｒｙｖｉｌｌｅ，ＣａｌｉｆｏｒｎｉａのＣｈｉｒｏｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎより、商品名プロロイキン（登録商標）として製造されている。この処方物中のＩＬ−２は、組み換えによって生産された、非糖化ヒトＩＬ−２突然変異タンパク質であり、アルデスロイキンと呼ばれている。これは、最初のアラニン残基が除去されており、１２５位のシステイン残基がセリン残基で置き換えられているという点で自然界に存在しているヒトＩＬ−２アミノ酸配列とは異なる（ｄｅｓ−アラニル−１，セリン１２５ヒトインターロイキン−２と呼ばれる）。このＩＬ−２突然変異タンパク質を、米国特許第４，９３１，５４３号に記載されているように、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）の中で発現させ、その後、透析と陽イオン交換クロマトグラフィーによって精製した。プロロイキン（登録商標）として販売されているＩＬ−２処方物は、１．３ｍｇ（２２ＭＩＵ）のタンパク質を含むバイアルの中に入った、滅菌の、白色から黄色がかった白色の、防腐剤の入っていない凍結乾燥させられた粉末として提供されている。
【０１０２】
Ｂ．抗ＣＤ２０抗体
この実施例および以下の実施例で使用した抗ＣＤ２０抗体は、リツキサン（登録商標）（リツキシマブ；ＩＤＥＣ−Ｃ２Ｂ８；ＩＤＥＣ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｃｏｒｐ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）である。これは、そのパッケージ封入用量で投与される（６時間かけて３７５ｍｇ／ｍ２が注入される）。
【０１０３】
Ｃ．遺伝子型分類
活性なＦｃγＲとのＩｇＧ  ＦｃγＲの相互作用を介して媒介される抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）は、リツキシマブの治療活性の根底のある重要な機構であるようである。ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６）およびＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３２）における遺伝子の多型は、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）患者においてリツキシマブに対する臨床応答に影響を与えることが報告されている。例えば、Ｗｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，（２００３）Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．２１（２１）：３９４０−７を参照のこと。インターロイキン−２（プロロイキン（登録商標）は、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球／マクロファージ、および好中球を含む、ＦｃＲを有している細胞の増殖および活性化を誘導することができ、それによって、モノクローナル抗体によって媒介されるＡＤＣＣを促進することができる。
【０１０４】
したがって、被験体を、５５９位のヌクレオチドでのニ対立遺伝子機能的多型（Ｇ→Ｔ）（これは、１５８位のアミノ酸のバリン（Ｖ）からフェニルアラニン（Ｆ）への置換を示す）を含むＦｃγＲＩＩＩａ中の１つ以上の既知の多型について、この位置でのそれらのＦｃγＲＩＩＩａ遺伝子型（１５８ＦＦ、１５８ＦＶ、または１５８ＶＶ）を決定するために評価した。例えば、Ｋｏｅｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ｂｌｏｏｄ  ９０（３）：１１０９−１４を参照のこと。１つ以上のさらなる多型部位での被験体の遺伝子型（例えば、４８Ｌ／Ｒ／Ｈ、１３１Ｒ／Ｈ、１７６Ｆ／Ｖなど）もまた、決定することができる。例えば、Ｗｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，（２００３）（前出）；ｄｅ  Ｖｒｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９６）Ｂｌｏｏｄ  ８８（８）：３０２２−７；ｄｅ−Ｈａｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９６）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９６  １５６（８）：３９４８−５５を参照のこと。
【０１０５】
被験体の遺伝子型分類は、基本的には、Ｋｏｅｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ｂｌｏｏｄ  ９０（３）：１１０９−１１１４、および／またはＬｅｐｐｅｒｓ−ｖａｎ  ｄｅ  Ｓｔｒａａｔ  ｅｔ  ａｌ．，（２０００）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２４２（１−２）：１２７−３２に記載されているように行った。簡単に説明すると、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を使用して、遺伝子型分類される被験体から得られた試料（例えば、全血またはＰＢＭＣ）から標的多型を含む配列を増幅させた。遺伝子型を分類するための別の方法は、２００４年４月７日に提出された、米国仮特許出願番号６０／５６０，６４９（これは、その全体が引用により本明細書中に組み入れられる）に詳細に記載されている。
【０１０６】
Ｄ．応答の格付け
腫瘍応答の格付けは、非ホジキンリンパ腫についての応答基準を標準化するための国際ワークショップ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｗｏｒｋｓｈｏｐ  ｔｏ  Ｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｆｏｒ  Ｎｏｎ−Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ  Ｌｙｍｐｈｏｍａｓ）の報告（Ｃｈｅｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９９）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１７：１２４４−１２５３を参照のこと）、および以下のようなプロトコールによって定義されている基準に基づいて行った：
・完全寛解（ＣＲ）  −  全ての以前には異常であった放射線学的検査、脳脊髄液（ＣＳＦ）が正常化している、臨床的に検出可能な疾患が存在していないと定義される。応答は、少なくとも１ヶ月間は持続しなければならない。化学療法の以前にはリンパ腫についてポジティブである骨髄を有していた患者は、繰り返して生検をしなければならず、これによって１ヶ月後に、リンパ腫についてネガティブであると確認される。
【０１０７】
・部分寛解（ＰＲ）  −  新しい病変が存在せず、少なくとも１ヶ月間持続する、全ての測定可能な全腫瘍量の少なくとも５０％の減少と定義される（測定可能な腫瘍に対してのみ適応することができる）。
【０１０８】
患者を、以下についてもまた（例えば、プロロイキン（登録商標）ＩＬ−２およびリツキシマブ療法の効果について）評価した：
・反応持続期間  −  最初の立証された応答から進行性の疾患になるまでの時間として定義される。
【０１０９】
・増殖抑制期間  −  試験に入ってから進行性の疾患、再発、または死亡までの時間として定義される。
【０１１０】
・安定疾患（ＳＤ）  −  進行性疾患が存在しない、全腫瘍量の５０％未満の減少と定義される。
【０１１１】
・進行性疾患（ＰＤ）  −  全腫瘍量の２５％以上の増加を示すか、または新しい部位での疾患の出現として定義される。
【０１１２】
・  再発（Ｒ）  −  完全寛解の立証後の腫瘍の出現として定義される。
【実施例２】
【０１１３】
ヒトＢ細胞非ホジキンリンパ腫の異種移植モデルにおけるＩＬ２−リツキシマブの併用
ＩＬ−２（プロロイキン（登録商標）とリツキシマブの併用投与を、以下のように、ヒトＢ細胞リンパ腫の２つの異なる異種移植モデルにおいて評価した。ＮａｍａｌｗａおよびＤａｕｄｉ異種移植モデルについては、例えば、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９８）Ｌｅｕｋｅｍｉａ  １２（１２）：２０２９−２０３３を参照のこと。
【０１１４】
ＮａｍａｌｗａおよびＤａｕｄｉヒトＢ細胞株を、ＮＫコンピテントＢａｌｂ／ｃヌードマウス（ｎ＝１０／グループ）において皮下腫瘍として増殖させた（１００〜２００ｍｍ３の段階）。Ｎａｍａｌｗａ／Ｂａｌｂ／ｃヌードマウスモデルは、ＣＤ２０の低レベルの発現と関係しており、これは、侵攻性／高悪性度の疾患のモデルとして認識されている。Ｄａｕｄｉ／Ｂａｌｂ／ｃヌードモデルは、ＣＤ２０を高レベルで発現し、侵攻性の低い／低悪性度の疾患プロフィールに関係している。さらに、ＮＫ細胞は、ＩＬ−２のようなサイトカインによる活性化が存在しない条件下では、Ｄａｕｄｉ腫瘍細胞を溶解させることはできない。例えば、Ｄａｍｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３８（６）：１７７９−１７８５を参照のこと。種々のマウスモデルについて選択される特性を以下に示す：
【０１１５】
【化７】
2007515185.tif 000009
ＮａｍａｌｗａまたはＤａｕｄｉ腫瘍細胞をマウスに移植し、リツキシマブおよび／またはＩＬ−２の投与を、腫瘍が１００〜２００ｍｍ３の段階に達した時点で、通常は、腫瘍細胞の移植後８〜１２日目に開始した。
【０１１６】
単剤投与レジュメは以下の通りである。マウスの１つのグループには、０．２５ｍｇ／ｋｇのＩＬ−２を毎日皮下投与（ｓ．ｃ．）した（低用量の毎日投与のグループ）。別のグループのマウスには、週に３回、１、３、５、８、１０、１２、１５、１７、１９、２２、２４、および２６日目に、ＩＬ−２（１ｍｇ／ｋｇのｓ．ｃ．）を投与した。第３のグループのマウスには、１、８、１５、および２２日目に、リツキシマブをｉ．ｖ．またはｉ．ｐ．で投与した（例えば、１０ｍｇ／ｋｇ、１回／週、ｉ．ｐ．）。さらに、Ｄａｕｄｉマウスについては、別のグループに、リツキシマブのＦ（ａｂ’）２断片を、１回／週（１、８、１５、および２２日目）に１０ｍｇ／ｋｇをｉ．ｖ．またはｉ．ｐ．で投与した。対照動物には、賦形剤のみを投与した。
【０１１７】
併用剤投与レジュメもまた、上記の投与量で、毎日投与、または週に３回の投与のいずれかでＩＬ−２を投与した動物に対して、１、８、１５、および２２日目にリツキシマブを投与することによって試験した。Ｄａｕｄｉ動物のグループにもまた、ＩＬ−２（毎日、または週に３回）とリツキシマブＦ（ａｂ’）（１回／週）の併用剤を投与した。単剤および併用剤の全ての投与レジュメが良好な耐容性を示した。
【０１１８】
Ａ．Ｎａｍａｌｗａモデル
Ｎａｍａｌｗａマウスモデルにおいては、単剤としてのＩＬ−２の毎日または週に３回の投与は、腫瘍の増殖を阻害することにおいては同等に有効であった。特に、毎日または週に３回のＩＬ−２の投与レジュメによっては、Ｎａｍａｌｗａマウスモデルにおいて、約４０〜６０％の腫瘍の増殖の、統計学的に有意な阻害（ｐ＜０．０５、ＡＮＯＶＡ）が得られた。
【０１１９】
Ｎａｍａｌｗａ腫瘍は、通常は、リツキシマブに耐性である。１０、２５、または５０ｍｇ／ｋｇ、１回／週でリツキシマブを投与した場合には、Ｎａｍａｌｗａ動物については腫瘍の効力に差は見られなかった（約０〜３０％の腫瘍増殖の阻害、ｐ＞０．０５、ＡＮＯＶＡ）。
【０１２０】
リツキシマブ−ＩＬ−２の併用投与を投与したＮａｍａｌｗａ腫瘍の動物は、ＩＬ−２のみを投与した動物と比較して、週に１回のリツキシマブ（１０ｍｇ／ｋｇ）と組み合わせた毎日のＩＬ−２（０．５ｍｇ／ｋｇ、ｓ．ｃ．）によってわずかに高い効力を示した（ｐ＝０．０４６、ＡＮＯＶＡ）。さらに、週に３回の、リツキシマブ１０ｍｇ／ｋｇとのＩＬ−２（１ｍｇ／ｋｇ）の併用は、ＩＬ−２のみを投与した（１ｍｇ／ｋｇ、３回／週、ｐ＞０．０５、ＡＮＯＶＡ）動物を上回るような改善は示さなかった。
【０１２１】
Ｂ．Ｄａｕｄｉモデル
Ｄａｕｄｉ腫瘍の動物は、通常は、単剤ＩＬ−２投与（毎日または週に３回のいずれか）に対して耐性であった。ＩＬ−２のみを毎日投与した（０．５ｍｇ／ｋｇ、毎日×１２回、その後１週間休む、を２サイクル）動物のＤａｉｄｕ腫瘍の容積は、対照と比較してわずかに減少した（ｐ＝０．０４７、ＡＮＯＶＡ）。Ｄａｕｄｉ腫瘍の動物への週に３回のＩＬ−２の投与（１または１．５ｍｇ／ｋｇ、３回／週を×４週間）もまた、対照と比較してわずかな腫瘍容積の減少を示した（ｐ＝０．０１、ＡＮＯＶＡ）。
【０１２２】
しかし、Ｄａｉｄｉ腫瘍は、リツキシマブの投与に対する応答性が高かった。Ｄａｕｄｉ腫瘍の有意な増殖阻害と用量応答効果は、１０および５０ｍｇ／ｋｇ、１回／週のリツキシマブを投与した動物においても見られた。同様の結果が、リツキシマブ（１０ｍｇ／ｋｇ、１回／週）および毎日のＩＬ−２（０．２５ｍｇ／ｋｇ、毎日）の併用投与を使用して得られた。
【０１２３】
週に３回のＩＬ−２と週に１回のリツキシマブの併用投与によって、単剤のＩＬ−２、単剤のリツキシマブ、および毎日のＩＬ−２と週に１回のリツキシマブの併用と比較して、有意な腫瘍増殖の阻害と他覚的な腫瘍応答が得られることは際立っている。ＩＬ−２とリツキシマブとの間での明らかな相乗作用もまた、リツキシマブおよびＩＬ−２のそれぞれと比較して、４１日目および５７日目までの増殖抑制期間の有意な遅延によって明らかになった。
【０１２４】
さらに、単剤のＩＬ−２の投与と、リツキシマブＦ（ａｂ’）２、１０ｍｇ／ｋｇと週に３回のＩＬ−２（１ｍｇ／ｋｇ、３回／週）の併用療法との間では有意な差は観察されなかった。このことは、ＩＬ−２とリツキシマブの併用療法の効力が、ＤａｕｄｉモデルのＩｇＧ１  Ｆｃによって媒介されるエフェクター機構に依存していることを示している。
【０１２５】
したがって、Ｄａｕｄｉ異種移植モデルにおけるＩＬ−２とリツキシマブの併用によって、有意な持続性の腫瘍応答が生じる。臨床的な観察を、表Ａにまとめる。
【０１２６】
【化８】
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＊応答は、最初からの縮小の程度によって定義する、すなわち、ＣＲ（１００％）；ＰＲ（５０〜９９％）；ＭＲ（２５〜４９％）；ＳＤ（±２５％）
まとめると、単剤ＩＬ−２は、侵攻性が低い／低悪性度のＤａｕｄｉモデルと比較して、侵攻性／高悪性度のＮａｍａｌｗａモデルにおいてより有効であった。さらに、リツキシマブに対する腫瘍の応答性は、ＣＤ２０発現の表現形（すなわち、Ｄａｕｄｉ  ＣＤ２０高＞Ｎａｍａｌｗａ  ＣＤ２０低）と良好な相関関係にあり、疾患状態とは逆の関係（低悪性度  Ｄａｕｄｉ＞高悪性度  Ｎａｍａｌｗａ）にあるようであった。高悪性度のＮａｍａｌｗａモデルにおいては、ＩＬ−２とリツキシマブの毎日の投与は、単剤ＩＬ−２と比較してわずかに増大した効率を示した。Ｄａｕｄｉモデルにおいては、週に３回のＩＬ−２とリツキシマブは、明確な相乗効果を示し、そして低悪性度のＤａｕｄｉ腫瘍モデルにおいては増殖抑制期間が長くなった。リツキシマブのＦ（ａｂ’）２断片は活性を失った。このことから、ＩＬ−２／リツキサン併用療法による抗腫瘍応答の促進におけるＩｇＧ１  Ｆｃ−ＦｃＲによって媒介されるＡＤＣＣの重要な役割が明らかである。
【実施例３】
【０１２７】
第１相ＩＬ２−リツキシマブ併用療法
２つの並行する第１相試験を、再発した、または難治性のＢ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）患者において、リツキシマブとＩＬ−２での併用療法を評価するために行った。Ｇｌｕｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，（２００４）Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１０（７）：２２５３−２２６４を参照のこと。
【０１２８】
３４人の進行性ＮＨＬの患者に、リツキシマブ（３７５ｍｇ／ｍ（２）、ｉ．ｖ．、毎週、１〜４週間）と、漸増用量のｓ．ｃ．ＩＬ−２（２〜７．５百万国際単位（ＭＩＵ）、毎日（ｎ＝１９）、たとえば、２、４、５、６、および７．５ＭＩＵ）または４．５〜１８ＭＩＵ（例えば、４．５、１０、１４、または１８ＭＩＵ）を週に３回（ｎ＝１５）、２〜５週間）を投与した。
【０１２９】
これらの試験によって決定したＩＬ−２の最大耐量は、６ＭＩＵ（毎日のｓ．ｃ．ＩＬ−２）または１４ＭＩＵ（３回／週）のいずれかであった。
【０１３０】
毎日投与スケジュールＭＴＤに組み入れた９人の患者のうち、５人は臨床応答を示した。ＭＴＤでの週に３回のスケジュールについては、５人の患者のうちの４人が応答し、そして毎日投与よりもＮＫ細胞の数が大きく増加した。応答は、様々なＮＨＬサブタイプにおいても見られた。毎日ＩＬ−２を投与した被験体においては、応答は、びまん性大細胞型リンパ腫、ＭＡＬＴ型リンパ腫、濾胞性リンパ腫、およびリンパ形質細胞性リンパ腫で見られた。週に３回のＩＬ−２を投与した被験体においては、応答は、びまん性大細胞型リンパ腫、濾胞性リンパ腫、小細胞型リンパ腫、濾胞中心細胞リンパ腫、濾胞性混合型リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、およびマントル細胞リンパ腫の患者で見られた。全ての応答は持続性のようであった。
【０１３１】
ＮＫ細胞の数は、週に３回のレジュメについての臨床応答と相関していた。最大用量のレベルでは、平均のＮＫ細胞数は５週目に最も多かった。さらに、ＡＤＣＣ活性は、応答性である安定疾患の患者においては、ＩＬ−２療法の後に高まり、そして維持された。Ｇｌｕｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，（２００４）Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１０（７）：２２５３−２２６４をまた参照のこと。
【０１３２】
したがって、リツキシマブ療法にＩＬ−２を加えることは安全であり、週に３回のＩＬ−２の投与を用いることにより、応答と相関関係にあるＮＫ細胞の増殖が生じる。
【実施例４】
【０１３３】
リツキシマブ難治性または再発性被験体におけるＩＬ２−リツキシマブ併用療法
リツキシマブ難治性であるかまたはリツキシマブでの処置後６ヶ月以内に再発した、低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）患者におけるＩＬ−２（プロロイキン（登録商標）とリツキシマブの併用を評価する第ＩＩ相試験（本明細書中ではＩＬ２ＮＨＬ０３と記載する）を開始した。リツキシマブを、１、２、３、および４週に、３７５ｍｇ／ｍ２（ＩＶ）の用量で毎週投与し、プロロイキン（登録商標）を、８週間にわたって週に３回皮下（ＳＣ）投与した（２、３、４、および５週の間は１４ＭＩＵ；６、７、８、および９週の間は１０ＭＩＵ）。この試験の評価項目には、全奏功率（ＯＲＲ）、ＮＫ細胞の拡大およびＮＫ細胞機能の評価、ならびにＦｃγＲＩＩＩＡおよびＲｃγＲＩＩＡ多型を含めた。
【０１３４】
・評価することができる患者は以下のように定義した：被験体には４週間のリツキシマブ療法と、所定のプロロイキン（登録商標）用量およびスケジュールの７０％を投与しなければならない。応答を以下のように評価した。腫瘍の測定は、最も長い直径とその最大垂線を使用して、垂直直径の測定に基づいて行った。
【０１３５】
４４人の患者を今日までに登録し、２７人は、腫瘍応答について、現在、１６週で評価することができる。５人について臨床応答が報告されており、２人については完全寛解であり、３人については部分寛解であり、これには、以前のＹ−９０イブリツモマブ・チウキセタン（Ｚｅｖａｌｉｎ）ではうまくいかなかった患者のＰＲが含まれていた；５人の患者は安定疾患を有していた。
【０１３６】
Ａ．１５８  Ｆ／Ｖ多型
２０人の患者を、実施例１において上記に記載したように遺伝子型について分類した。２０人のこのグループにおいては、４人が臨床応答を示したことが報告され、これには、１人の完全寛解と３人の部分回復が含まれていた。（表Ｂ、下記）。さらに、４人の患者は、４ヶ月以上にわたって安定疾患（ＳＤ）を有していた。
【０１３７】
【化９】
2007515185.tif 000011
このリツキシマブ難治性／再発性の集団においては、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８アロタイプの頻度が、正常な／報告されたＦＬ  ＮＨＬ集団におけるそれぞれ、３２〜３９％と４６〜５１％と比較して、ホモ接合型１５８  Ｆ／Ｆ（１３／２０；６５％）の被験体における顕著な増加と、ヘテロ接合型ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｖ／Ｆ（５／２０；２５％）の低い頻度に明らかに偏っていることは、明確である。以下の表１を参照のこと。
【０１３８】
【表１】
2007515185.tif 000012
驚くべきことに、ＦｃγＲＩＩａ  １５８多型に遺伝子型分類されている臨床応答を示すヒトは全て、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ／Ｆ／遺伝子型を発現していた。これは、応答率が低いことと、リツキシマブだけに対する応答の期間と関係している。以下の表２を参照のこと。
【０１３９】
【表２】
2007515185.tif 000013
さらに、腫瘍の容積の変化の割合を遺伝子型分類した患者において測定した場合には、腫瘍の容積は、１５８  Ｆ／Ｆ患者においてより顕著に縮小していた（図３）。
【０１４０】
ＮＫ細胞の数を、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ／Ｆの保有者である患者のサブセットにおいて、試験の１０週目に得、臨床状態と相関させた。結果を図２に示す。これらのデータは、ＮＫＣＤ１６＋ＣＤ５６＋細胞の数の、疾患状態（ＰＤ＝進行性疾患；ＳＤ＝安定疾患；ＰＲ／ＣＲ＝部分寛解／完全寛解）とのポジティブな相関関係を示している。
【０１４１】
表３には、この試験での、低悪性度のＮＨＬ疾患型とＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８遺伝子型との間の関係をまとめる。
【０１４２】
【表３】
2007515185.tif 000014
。
【０１４３】
Ｂ．１３１Ｈ／Ｒ多型
リツキシマブ難治性または再発性患者の遺伝子型もまた、他の患者の集団と比較して、ホモ接合型ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｈ／Ｈ患者の高い割合（７／１７（４２％））と、ＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｈ／Ｒ患者の低い割合（５／１７（２９％））の増加を示した。
【０１４４】
【表４】
2007515185.tif 000015
さらに、今日までに評価した臨床応答を示すヒトの全てがＦｃγＲＩＩＡ  １３１−Ｒ保有者であり、リツキシマブ療法に対しては不良な治療成績を有していた。以下の表５を参照のこと。
【０１４５】
【表５】
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結論として、遺伝子多型ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ／ＦおよびＦｃγＲＩＩＡ  １３１Ｒ／Ｒは、単剤であるリツキシマブに対する乏しい臨床応答に関係している。しかし、ＦｃγＲを保有している細胞を効率よく拡大させ活性化させる、ＩＬ−２での免疫療法による介入によって、低親和性ＩｇＧ  ＦｃγＲアロタイプを保有している患者においてより有効にＡＤＣＣを導くために十分なＮＫ細胞数の臨界閾値を得ることができ、したがって、抗ガンモノクローナル抗体療法に対して効率よく応答する能力をそのような個体に回復させることができる。
【実施例５】
【０１４６】
未処置の被験体におけるＩＬ２−リツキシマブの併用療法
難治性または以前の化学療法の後に再発した、リツキシマブで処置されていない濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）患者を、１５８位と１３１位のアミノ酸でのＦｃγＲＩＩＩＡ多型と、リツキシマブのみ、およびＩＬ−２と組み合わせたリツキシマブに対する臨床応答との間の関係について試験した。治療群を多型状態によって階層化し、被験体に、リツキシマブのみを（ｉ．ｖ．、３７５ｍｇ／ｍ２、４週間の間毎週）、または週に３回の皮下ｒｈＩＬ−２（プロロイキン（登録商標）と組み合わせたこの投与プロトコールにしたがって８週間（最初の４週間の間は１４ＭＩＵ、その後の４週間の間は１０ＭＩＵ）リツキシマブを投与した。
【０１４７】
全血試料および腫瘍生検を、その後の遺伝子発現プロファイリング、およびこれらの２つのＦｃγＲＩＩＩＡ多型とＦｃγＲＩＩＡ多型についての遺伝子型の特性決定のために採取した。処置プロトコールの開始後１４週目の臨床結果は、遺伝子型およびＮＫ細胞数と相関していた。
【０１４８】
本明細書中に記載された全ての刊行物および特許出願は、本発明が属する分野の当業者のレベルの指標である。全ての刊行物および特許文献は、個々の刊行物または特許出願が、引用により組み入れられるように詳細に、かつ個々に示されているかのように、同じ程度にそれらの全体が引用により本明細書中に組み入れられる。
【０１４９】
当業者は、本明細書中に記載される本発明の特異的な実施形態と等価である多くのことを認識し、そして、日常的に行われている実験以上のものを使用することなく確認できる。このような等価物は、本明細書中に開示される実施形態の範囲に含まれると意図される。
【図面の簡単な説明】
【０１５０】
【図１】図１は、ＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｖ／Ｆ多型の位置を示す。これは、配列番号１の内部の３つの可能性のある開始コドンのうちのどれがヒトＦｃγＲＩＩＩＡ配列についてのオープンリーディングフレームを開始するために使用されるかに依存する。配列番号１の１８５位のヌクレオチド（すなわち、第１の開始コドン）で翻訳が開始する場合は、Ｇ／Ｔ置換により、翻訳されるポリペプチドの２１２位のアミノ酸残基においてＶ／Ｆ多型が生じる（配列番号４を参照のこと）。配列番号１の２９３位のヌクレオチド（すなわち、第２の開始コドン）で翻訳が開始する場合は、Ｇ／Ｔ置換により、翻訳されるポリペプチドの１７６位のアミノ酸残基においてＶ／Ｆ多型が生じる（配列番号６を参照のこと）。配列番号１の３４４位のヌクレオチド（すなわち、第３の開始コドン）で翻訳が開始する場合は、Ｇ／Ｔ置換により、翻訳されるポリペプチドの１５９位のアミノ酸残基においてＶ／Ｆ多型が生じる（配列番号８を参照のこと）。
【図２】図２は、本明細書中以下の実験のセクションに記載される、ＩＬ２ＮＨＬ０３試験におけるＦｃγＲＩＩＩＡ  １５８Ｆ／Ｆ患者のサブセットについてのＣＤ１６／５６＋ＮＫ細胞数と臨床状態の相関関係を示す。
【図３】図３は、リツキシマブ−ＩＬ−２の併用投与の開始後８週間で測定した、遺伝子型分類をした患者における腫瘍の容積の割合（％）の変化を示すグラフである。投与レジュメは、実施例４に詳細に記載される。
【図４Ａ】図４のパネルＡおよびＢは、ＦｃγＲＩＩＩａおよびＦｃγＲＩＩＩｂ遺伝子に由来するヌクレオチド配列のアラインメントを示す。図４Ａでは、ＦｃγＲＩＩＩａ（上段、標識されたＨＳＦＣＧＲ３１、遺伝子Ｂともまた呼ばれる）およびＦｃγＩＩＩｂ（下段、標識されたＨＳＦＣＧＲ３２、遺伝子Ａともまた呼ばれる）に由来する部分的なｃＤＮＡ配列をアラインメントする。図４Ａにはまた、四角の中に：遺伝子Ａまたは遺伝子Ｂを示す位置（４７３位、５３１位、および６４１位）、さらには、５５９位の１ヌクレオチド多型（遺伝子Ａにのみ存在する）（これは、Ｖ→Ｆ置換を示す）も示される。
【図４Ｂ】図４のパネルＡおよびＢは、ＦｃγＲＩＩＩａおよびＦｃγＲＩＩＩｂ遺伝子に由来するヌクレオチド配列のアラインメントを示す。図４Ｂでは、遺伝子Ａと遺伝子Ｂのエキソン４がアラインメントされ、２つの遺伝子の間での様々なヌクレオチドの差が示され、これには、エキソン４の最初の塩基に関して番号付けされた、３１３位での高度に特異的なヌクレオチドのバリエーションが含まれる。
【図５】図５のパネルＡからＮは、配列番号１から１４を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５Ａ−１】
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【図５Ａ−２】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ−１】
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【図５Ｃ−２】
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【図５Ｄ】
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【図５Ｅ】
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【図５Ｆ】
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【図５Ｇ】
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【図５Ｈ】
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【図５Ｉ−１】
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【図５Ｉ−２】
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【図５Ｊ】
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【図５Ｋ−１】
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【図５Ｋ−２】
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【図５Ｌ】
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【図５Ｍ】
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【図５Ｎ】
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【国際調査報告】
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