(57)【要約】  単独で、又は皮膚に対して有益な他の薬剤と組み合わせて、化粧品用ビヒクルと合わせた、皮膚に有益な美容物質としての、好ましくは皮膚美白剤としての、Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）の抽出物を開示する。本発明の抽出物、組成物及び方法は、有効な皮膚美白特性を有し、皮膚への送達が容易であり得、市販でき、費用効率が高く、天然において入手可能である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
次のものを含む組成物を皮膚に塗布することを含む、皮膚美白の美容方法：
ａ．Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）抽出物０．０００００１重量％から５０重量％及び
ｂ．化粧品的に許容可能な担体。
【請求項２】
前記組成物がさらに日焼け防止剤を含む、請求項１に記載の美容方法。
【請求項３】
前記日焼け防止剤が微粉化金属酸化物である、請求項２に記載の美容方法。
【請求項４】
前記抽出物が、前記組成物の０．００００１重量％から１０重量％をしめる、請求項１から請求項３の何れか１項に記載の美容方法。
【請求項５】
前記抽出物が、前記組成物の０．００１重量％から７重量％を占める、請求項１から請求項３の何れか１項に記載の美容方法。
【請求項６】
前記抽出物が、前記組成物の０．０１重量％から５重量％を占める、請求項１から請求項３の何れか１項に記載の美容方法。
【請求項７】
前記Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）抽出物が有機溶媒抽出物である、請求項１から請求項６の何れか１項に記載の美容方法。
【請求項８】
前記組成物が、α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸、ポリヒドロキシ酸、ヒドロキノン、ｔ−ブチルヒドロキノン、ビタミンＢ及び／又はＣ誘導体、二酸、レチノイド、レゾルシノール誘導体、バニリン酸、ベツリン酸、ヒドロラクチン及びこれらの混合物からなる群から選択される、皮膚有益物質をさらに含む、請求項１から請求項７の何れか１項に記載の美容方法。
【請求項９】
前記組成物が、ベンゾフェノン−３、ベンゾフェノン−４、ベンゾフェノン−８、メトキシシンナメート、エチルジヒドロキシプロピル−ＰＡＢＡ、グリセリルＰＡＢＡ、ホモサラート、アントラニル酸メチル、オクトクリレン、オクチルジメチルＰＡＢＡ、オクチルメトキシシンナメート（ＰＡＲＳＯＬ  ＭＣＸ）、サリチル酸オクチル、ＰＡＢＡ、２−フェニルベンズイミダゾール−５−スルホン酸、サリチル酸ＴＥＡ、３−（４−メチルベンジリデン）−カンファー、ベンゾフェノン−１、ベンゾフェノン−２、ベンゾフェノン−６、ベンゾフェノン−１２、４−イソプロピルジベンゾイルメタン、ブチルメトキシジベンゾイルメタン（ＰＡＲＳＯＬ  １７８９）、エトクリレン及びこれらの混合物からなる群から選択される有機日焼け防止剤をさらに含む、請求項１から請求項８の何れか１項に記載の美容方法。
【請求項１０】
次のものを含む化粧品組成物：
ａ．Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）抽出物、０．０００００１から５０重量％及び
ｂ．化粧品的に許容可能な担体。
【請求項１１】
前記抽出物が、Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）の有機溶媒抽出物である、請求項１０に記載の化粧品組成物。
【請求項１２】
前記抽出物が、前記組成物の０．００００１重量％から１０重量％を成す、請求項１０又は請求項１１に記載の化粧品組成物。
【請求項１３】
前記抽出物が、前記組成物の０．００１重量％から７重量％を成す、請求項１０又は請求項１１に記載の化粧品組成物。
【請求項１４】
前記抽出物が、前記組成物の０．０１重量％から５重量％を成す、請求項１０又は請求項１１に記載の化粧品組成物。
【請求項１５】
α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸、ポリヒドロキシ酸、ヒドロキノン、ｔ−ブチルヒドロキノン、ビタミンＢ及び／又はＣ誘導体、二酸、レチノイド、レゾルシノール誘導体、バニリン酸、ベツリン酸、ヒドロラクチン及びこれらの混合物からなる群から選択される皮膚有益物質をさらに含む、請求項１０から請求項１４の何れか１項に記載の化粧品組成物。
【請求項１６】
ベンゾフェノン−３、ベンゾフェノン−４、ベンゾフェノン−８、メトキシシンナメート、エチルジヒドロキシプロピル−ＰＡＢＡ、グリセリルＰＡＢＡ、ホモサラート、アントラニル酸メチル、オクトクリレン、オクチルジメチルＰＡＢＡ、オクチルメトキシシンナメート（ＰＡＲＳＯＬ  ＭＣＸ）、サリチル酸オクチル、ＰＡＢＡ、２−フェニルベンズイミダゾール−５−スルホン酸、サリチル酸ＴＥＡ、３−（４−メチルベンジリデン）−カンファー、ベンゾフェノン−１、ベンゾフェノン−２、ベンゾフェノン−６、ベンゾフェノン−１２、４−イソプロピルジベンゾイルメタン、ブチルメトキシジベンゾイルメタン（ＰＡＲＳＯＬ  １７８９）、エトクリレン及びこれらの混合物からなる群から選択される有機日焼け防止剤をさらに含む、請求項１０から請求項１５の何れか１項に記載の化粧品組成物。
【請求項１７】
Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ（ニグロスポラ）の有機溶媒抽出物。
【請求項１８】
Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）の有機溶媒抽出物。
【請求項１９】
請求項１８に記載の有機抽出物を含む化粧品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）の抽出物を含有する、ヒト皮膚への局所適用のための組成物及び、トリートメントならびにコンディショニングのための、特に皮膚の美白のための、該組成物の使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
肌の色素沈着の程度に関心を持つ人は多い。例えば、シミ又はそばかすのある人は、このような色素沈着スポットを目立たなくさせたいと願うであろう。また他の人は、日光への曝露により生じた皮膚の黒ずみを低下させるか、又は元々の皮膚の色を明るくしたいと望むことがあろう。このニーズに応えるために、メラニン細胞での色素産生を低下させる製品を開発しようと多くの試みが行われてきた。しかし、今までのところ同定された物質は、効率が悪いか、又は、例えば毒性もしくは皮膚への刺激など、望ましくない副作用を持つ傾向がある。したがって、全体的な効能が向上した新規の皮膚美白剤ならびに製造において加工を容易にするのにそれ自身役立つ物質が依然として求められている。
【０００３】
本発明は、少なくともある部分、真菌Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）の抽出物が、既知の皮膚美白剤と少なくとも同等である、及び／又は既知の皮膚美白剤よりも顕著に優れた皮膚美白活性を有するという発見に基づくものである。美容用途のためのＮｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）の使用は、これまで知られていなかった。
【発明の開示】
【０００４】
本発明は、先行技術の欠点を改善し、１つには、医薬的又は化粧品的に許容可能な担体及びＮｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）の抽出物を含有する新規組成物を含む。本発明組成物は、Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）の抽出物、好ましくはその有機溶媒抽出物を０．０００００１から５０重量％含有する。好ましくは、最適な皮膚美白活性を最少コストで得るための前記抽出物の量は、０．００００１％から１０重量％、より好ましくは０．００１％から約７重量％、さらにより好ましくは、０．０１％から５重量％である。
【０００５】
本発明の好ましい実施形態において、α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸、ポリヒドロキシ酸、ヒドロキノン、ｔ−ブチルヒドロキノン；ビタミンＢ及び／又はＣ誘導体（例えばナイアシンアミド）；二酸、レチノイド、レゾルシノール誘導体、ベツリン酸、バニリン酸、ベツリン酸、ヒドロラクチン及びそれらの混合物など、本組成物においてさらなる皮膚有益物質が含まれ得る。有機及び無機（例えば微粉化金属酸化物）日焼け防止剤もまた含まれ得る。有機日焼け防止剤には、ベンゾフェノン−３、ベンゾフェノン−４、ベンゾフェノン−８、メトキシシンナメート、エチルジヒドロキシプロピル−ＰＡＢＡ、グリセリルＰＡＢＡ、ホモサラート、アントラニル酸メチル、オクトクリレン、オクチルジメチルＰＡＢＡ、オクチルメトキシシンナメート（ＰＡＲＳＯＬ  ＭＣＸ）、サリチル酸オクチル、ＰＡＢＡ、２−フェニルベンズイミダゾール−５−スルホン酸、サリチル酸ＴＥＡ、３−（４−メチルベンジリデン）−カンファー、ベンゾフェノン−１、ベンゾフェノン−２、ベンゾフェノン−６、ベンゾフェノン−１２、４−イソプロピルジベンゾイルメタン、ブチルメトキシジベンゾイルメタン（ＰＡＲＳＯＬ  １７８９）、エトクリレン及びそれらの混合物が含まれる。
【０００６】
本発明はまた、Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）抽出物を含有する本発明の組成物を皮膚に局所的に塗布することによる、皮膚をコンディショニングする方法も含む。本発明はまた、好ましくは、皮膚に本発明の組成物を塗布することによる、皮膚美白の方法を含む。
【０００７】
本発明の組成物は、皺、たるみ及び光損傷などの皮膚状態の予防又は修復に有用である。本発明の組成物及び方法は、効果的な皮膚美白特性を有し、皮膚への送達がより容易であ得、費用効果が高く、天然源から入手可能である。
【０００８】
本発明の詳細な説明
本発明は、Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）の抽出物を含有する、ヒト皮膚への局所適用のための組成物及び、トリートメントならびにコンディショニングのための、特に皮膚の美白のための、該組成物の使用方法に関する。
【０００９】
Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ（ニグロスポラ）は、土壌、腐植質及び種子に広く分布する糸状黒色真菌である。Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ（ニグロスポラ）コロニーは、急速に成長し、緻密で羊毛状であり、最初は白色であるが、黒色部分のある灰色になり、反対の黒色になる。Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）は、分生子を強制的に放出する分生子柄を作る。この分生子は黒色で孤立しており、単細胞で、わずかに扁平で水平であり、赤道部分に細い発芽溝がある。Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）は、Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ（ニグロスポラ）属の最もよく知られた種であり、特にハワイ諸島及び太平洋周辺で見出すことができる。本組成物での使用に適切なＮｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）の抽出物は、有機溶媒抽出物、例えばアルコール抽出物（メタノール）又は酢酸エチル抽出物である。
【００１０】
本発明によると、Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）の抽出物は、本組成物の約０．０００００１％から約５０重量％の量で本組成物中に添加しなければならない。好ましくは、最適な皮膚美白活性を最少コストで得るための本抽出物の量は、約０．００００１％から約１０％、より好ましくは約０．００１％から約７％、さらにより好ましくは約０．０１％から約５％の量である。
【００１１】
本明細書中で使用する場合、「化粧品組成物」という用語は、ヒト皮膚への局所適用のための組成物を述べるものとする。
【００１２】
本明細書中で使用する場合、「含有する」という用語は、「含む」、「構成される」、「から構成される」、「から成る」及び／又は、「から基本的に成る」、を意味する。
【００１３】
「皮膚」という用語は、本明細書中で使用する場合、顔面、頸部、胸部、背中、腕、腋下、手、足及び頭皮を含む。
【００１４】
実施例を除き、又は明確に指示される場合を除き、物質の量又は反応の状態、物質の物理特性及び／又は使用を指示する本明細書中の数字は全て、「約」という用語で修飾されると理解されたい。量は全て、別段の断りがない限り、本組成物の重量によるものである。
【００１５】
濃度の何らかの範囲を指定する場合、いかなる特定の上限濃度も何らかの特定のより低い濃度を伴い得ることに留意されたい。
【００１６】
ＮＩＧＲＯＳＰＯＲＡ  ＳＰＨＡＥＲＩＣＡ（ニグロスポラ・スフェリカ）
本発明による抽出物は、真菌界、子嚢菌門；Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ（ニグロスポラ）属；及びスフェリカ種の物質由来である。本発明に従い使用する場合、Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）をハワイ諸島及び太平洋周辺で採取した。採取後、その生物を第一の培地で増殖成長させ、そこから特異的な株を単離し、取り出して第二の培地中で増殖成長させる。次に、Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）を第二の培地から単離し、次いで抽出を行う。本発明に従い使用する培養及び抽出技術は、公知のものか、又は微生物学分野の当業者がさらに発展させたものである。本微生物を増殖成長させる具体的な培養プロトコール及びスクリーニングを行う抽出物を調製するために使用した抽出プロトコールは、本明細書中下記で説明する。培養及び抽出プロトコールの、培地調製及び抽出方法に対する詳細なレシピを下記でさらに述べる。
【００１７】
リードコレクション（ｌｅａｄ  ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）の詳細
次の表は、採取物の地理的位置、微生物単離に使用した培地及び該微生物の成長の形態的特徴及び寒天単離プレート上での微生物成長の特徴に関する情報を含有する。
【００１８】
【表１】
2007537173.tif 000002
【００１９】
真菌培養のための発酵培地及びプロトコール
【００２０】
【表２】
2007537173.tif 000003
【００２１】
１Ｌの海水に培地成分を添加し、ｐＨ＝４．０±０．２に調整し、２５℃にて１６日間、固定相液体中で発酵を行う。
【００２２】
抽出プロトコール
ＨＰ−２０レジンビーズ（ＤＩＡＩＯＮブランド、Ｍｉｔｓｕｂｉｓｉ，Ｊａｐａｎ）のおよそ等量を全培養液に添加し、２時間振盪し、ろ過して、Ｈ２Ｏの等量で２回洗浄し、真空下に４５分間置いて乾燥させ、ＭｅＯＨ（メタノール）の等量で残渣を抽出する。その他の適切な有機溶媒には、これらに限定されないが、エタノール、アセトン、酢酸エチル、クロロホルムなどが含まれる。最後に抽出物をろ過し、溶媒を除去する。
【００２３】
微生物の同定
微生物がＮｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）であることは、次の手段を用いて確認した。脂肪酸プロファイル及びライブラリーマッチを含む標本結果は、Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ＩＤ  Ｉｎｃ．，Ｎｅｗａｒｋ，Ｄｅｌａｗａｒｅにより行った。
【００２４】
任意の皮膚有益物質
適切なさらなる皮膚有益物質には、老化防止剤、皺とり剤、皮膚美白剤、にきび防止剤及び皮脂抑制剤が含まれる。こうした例には、α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸、ポリヒドロキシ酸、ヒドロキノン、ｔ−ブチルヒドロキノン、ビタミンＢ及びビタミンＣ誘導体、二酸、レチノイド、ベツリン酸；バニリン酸；アラントイン、胎盤抽出物；ヒドロラクチン；及びレゾルシノール誘導体が含まれる。
【００２５】
化粧品的に許容可能な担体
化粧品的に許容されるビヒクルは、組成物を皮膚に塗布した際にその分散を促進するように、組成物中の皮膚有益成分に対する、希釈剤、分散剤又は担体として作用し得る。
【００２６】
ビヒクルは、水性、無水又はエマルジョンであり得る。組成物は、水性又はエマルジョンが好ましく、特に油中水滴型又は水中油滴型エマルジョンが好ましく、水中油滴型エマルジョンが好ましい。水分が存在する場合、水分は５％から９９重量％の範囲であり得、好ましくは２０％から７０％、最も好ましくは４０％から７０％の範囲である。
【００２７】
水に加え、やや揮発性の溶媒も本発明の組成物中で担体として機能し得る。一価Ｃ１−Ｃ３アルカノールが最も好ましい。これらには、エチルアルコール、メチルアルコール及びイソプロピルアルコールが含まれる。一価アルカノールの量は、１％から７０重量％の範囲であり得、好ましくは１０％から５０％、最適には１５％から４０％の間である。
【００２８】
皮膚軟化剤も化粧品的に許容される担体として機能し得る。これらは、シリコーン油及び合成エステルの形を取り得る。皮膚軟化剤の量は、０．１％から５０重量％の範囲のいずれでもあり得、好ましくは１％から２０％の間である。
【００２９】
シリコーン油は、揮発性種と非揮発性種とに分類され得る。本明細書で使用する場合、「揮発性」という用語は、周囲温度で測定可能な蒸気圧を有する物質を指す。揮発性シリコーン油は、ケイ素原子を３から９個、好ましくは４から５個含む、環状又は直鎖ポリジメチルシロキサンから選択することが好ましい。一般に、直鎖揮発性シリコーン物質の粘度は、２５℃で約５センチストーク未満であり、環状物質の粘度は通常、約１０センチストーク未満である。皮膚軟化物質として有用な非揮発性シリコーン油には、ポリアルキルシロキサン、ポリアルキルアリールシロキサン及びポリエーテルシロキサンコポリマーが含まれる。本明細書で有用な本質的に非揮発性であるポリアルキルシロキサンには、例えば、粘度が約２５℃で約５から約２５００万センチストークであるポリジメチルシロキサンが含まれる。本発明の組成物において有用な好ましい非揮発性軟化剤の中でも、粘度が２５℃で約１０から約４００センチストークのポリジメチルシロキサンが挙げられる。
【００３０】
エステル皮膚軟化剤の中には以下のものがある。
【００３１】
（１）炭素原子１０個から２０個を有する脂肪酸の、アルケニル又はアルキルエステル。その例には、ネオペンタン酸イソアラキジル、イソナノン酸イソノニル、ミリスチン酸オレイル、ステアリン酸オレイル及びオレイン酸オレイルが含まれる。
【００３２】
（２）エトキシル化脂肪アルコールの脂肪酸エステルなどのエーテル−エステル。
【００３３】
（３）多価アルコールエステル。エチレングリコールのモノ及びジ脂肪酸エステル、ジエチレングリコールのモノ及びジ脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール（２００−６０００）のモノ及びジ脂肪酸エステル、プロピレングリコールのモノ及びジ脂肪酸エステル、モノオレイン酸ポリプロピレングリコール２０００、モノステアリン酸ポリプロピレングリコール２０００、エトキシル化プロピレングリコールモノステアレート、グリセリルモノ及びジ脂肪酸エステル、ポリグリセリンポリ脂肪エステル、エトキシル化グリセリルモノステアレート、１，３−ブチレングリコールモノステアレート、１，３−ブチレンジステアリン酸グリコール、ポリオキシエチレンポリオール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル及びポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルは満足できる多価アルコールエステルである。
【００３４】
（４）蜜蝋、鯨蝋、ミリスチン酸ミリスチリル、ステアリン酸ステアリル、ベヘン酸アラキジルなどのワックスエステル。
【００３５】
（５）ステロールエステル（例えばコレステロール脂肪酸エステル）。
【００３６】
炭素原子１０から３０個を有する脂肪酸も本発明の組成物に対する化粧品として許容される担体に含まれ得る。このカテゴリーの例には、ペラルゴン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、ヒドロキシステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リシノール酸、アラキジン酸、ベヘン酸、エルカ酸が含まれる。
【００３７】
多価アルコール型湿潤剤も本発明の組成物において化粧品的に許容される担体として利用し得る。湿潤剤は、皮膚軟化剤の有効性を増強する、皮膚薄片を軽減する、重層した皮膚薄片の除去を刺激する、及び皮膚感触を改善することにおいて役立つ。典型的な多価アルコールには、グリセロール、ポリアルキレングリコールが含まれ、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ポリプロピレングリコールを含むアルキレンポリオール及びその誘導体、ポリエチレングリコール及びその誘導体、ソルビトール、ヒドロキシプロピルソルビトール、ヘキシレングリコール、１，３−ブチレングリコール、１，２，６−ヘキサントリオール、エトキシル化グリセロール、プロポキシル化グリセロールならびにそれらの混合物がより好ましい。最良の結果を得るために、湿潤剤は、プロピレングリコール又はヒアルロン酸ナトリウムであることが好ましい。湿潤剤の量は、組成物の０．５％から３０重量％の範囲のいずれかであり得、好ましくは１％から１５重量％である。
【００３８】
本発明による組成物の化粧品的に許容可能な担体の一部として増粘剤も使用し得る。典型的な増粘剤には、架橋アクリラート（例えばＣａｒｂｏｐｏｌ  ９８２）、疎水性修飾アクリラート（例えばＣａｒｂｏｐｏｌ  １３８２）、タウレートポリマー、セルロース誘導体及び天然ゴムが含まれる。有用なセルロース誘導体の中でも、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、エチルセルロース及びヒドロキシメチルセルロースが挙げられる。本発明に適切な天然ゴムには、グアー、キサンタン、菌核、カラギナン、ペクチン及びこれらのゴムの組合せが含まれる。増粘剤の量は、０．０００１％から５％の範囲であり得、通常０．００１％から１％であり、最適には０．０１％から０．５重量％である。
【００３９】
水、溶媒、シリコーン、エステル、脂肪酸、湿潤剤及び／又は増粘剤は、合わせて１から９９．９重量％の量で、好ましくは８０から９９重量％の量で化粧品的に許容可能な担体を構成する。
【００４０】
使用する乳化剤の平均親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）に大きく依存して、油中水滴型エマルジョン又は水中油滴型エマルジョンを得るために、油又は油性物質も乳化剤と共に添加し得る。
【００４１】
界面活性剤を本発明の美容組成物に添加し得る。界面活性剤の総濃度は、組成物の０．１％から４０重量％の範囲であり得、好ましくは組成物の１％から２０％、最適には１％から５重量％の範囲である。界面活性剤は、陰イオン性、非イオン性、陽イオン性及び両性活性剤からなる群から選択され得る。特に好ましい非イオン性界面活性剤は、疎水性物質１モル当たりエチレンオキシド又はプロピレンオキシド２から１００モルが縮合している、Ｃ１０−Ｃ２０脂肪族アルコール又は酸疎水性物質；アルキレンオキシド２から２０モルが縮合しているＣ２−Ｃ１０アルキルフェノール；エチレングリコールのモノ及びジ脂肪酸エステル；脂肪酸モノグリセリド；ソルビタン；モノ及びジＣ８−Ｃ２０脂肪酸；ブロックコポリマー（酸化エチレン／酸化プロピレン）；及びポリオキシエチレンソルビタンならびにそれらの組合せなどである。アルキルポリグリコシド及び糖脂肪アミド（例えばメチルグルコンアミド）も適当な非イオン性界面活性剤である。
【００４２】
好ましい陰イオン性界面活性剤には、石けん、アルキルエーテル硫酸塩及びスルホン酸塩、アルキル硫酸塩及びスルホン酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキル及びジアルキルスルホコハク酸塩、Ｃ８−Ｃ２０アシルイセチオン酸塩、アシルグルタミン酸塩、Ｃ８−Ｃ２０アルキルエーテルリン酸塩及びそれらの組合せが含まれる。
【００４３】
任意成分
本発明の化粧品組成物において、可塑剤、カラミン、抗酸化剤、キレート剤ならびに日焼け防止剤を場合によっては添加し得る。
【００４４】
他の補助的副成分も本化粧品組成物に組み込み得る。これらの成分には、着色剤、顔料、乳白剤及び香料が含まれ得る。このような他の補助的副成分の量は、本組成物の０．００１％から２０重量％までの範囲の何れかであり得る。
【００４５】
日焼け防止剤として使用する場合、金属酸化物を単独で、又は混合物において、及び／又は有機日焼け防止剤と組み合わせて使用し得る。有機日焼け防止剤の例には、これらに限定されないが、以下の表に記載のものが含まれる。
【００４６】
化粧品組成物中の有機日焼け防止剤の量は、約０．１重量％から約１０重量％の範囲であることが好ましく、約１重量％から５重量％がより好ましい。好ましい有機日焼け防止剤は、その有効性及び市販されているという理由から、ＰＡＲＳＯＬ  ＭＣＸ及びＰａｒｓｏｌ  １７８９である。
【００４７】
【表３】
2007537173.tif 000004
2007537173.tif 000005
【００４８】
組成物の使用
本発明による、真菌抽出物及び組成物は、主に、ヒト皮膚への局所適用のための、ならびに皮膚の美白のための、皮膚における色素沈着の程度を軽減するための、又は皮膚の色調を均一にするための、個人ケア製品を意図する。
【００４９】
使用時に、適切な容器もしくはアプリケーターから、本組成物の少量、例えば１ｍＬから５ｍＬを皮膚の露出部に塗布し、次に、必要に応じて、手もしくは指又は適切な道具を用いて皮膚に広げ及び／又は擦り込む。
【００５０】
製品形態及び包装
本発明の化粧品組成物は、粘度が４，０００から１０，０００ｍＰａｓのローション、粘度が１０，０００から２０，０００ｍＰａｓの液状クリーム、又は粘度が２０，０００から１００，０００ｍＰａｓ以上のクリームとして処方することができる。本組成物の粘度及び消費者の使用目的に合った適切な容器に本組成物を詰め得る。例えば、ローション又は液状クリームは、ボトルもしくはロールボールアプリケータ又は高圧ガス駆動エアロゾル装置又は指での操作に適切なポンプを取り付けた容器に詰め得る。本組成物がクリームである場合、チューブ又は蓋付き広口ビンなど、変形しないボトル又は絞り出し容器に本組成物を単純に貯蔵し得る。本組成物が固形又は半固形スティックの場合、本組成物を手動で又は機械を用いて押し出すか又は突き出すのに適切な容器に本組成物を詰め得る。
【００５１】
したがって、本発明は本明細書で定義したとおりの化粧品的に許容可能な組成物を収める密閉容器も提供する。
【００５２】
以下の実施例は、本発明実施の最良の態様を例示するための本発明の原理の例であり、限定するものではない。
【００５３】
（実施例１）
この実施例は、Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）の本発明抽出物を用いた新規メラニン合成の低下について述べる。続く実施例を通して使用するＮｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）の抽出物は、本明細書上記で述べた手段に従い調製した。
【００５４】
器官培養法
８ヶ月齢有色ブタ由来の廃棄皮膚の毛を剃って除毛し、破片を除去するためによく洗浄し、微生物含量を減らす。次に、清浄化した皮膚を採皮刀でおよそ１ｍｍ厚ｘ７５ｃｍ２に切り、ペニシリン（１００ユニット／ｍＬ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍＬ）、カナマイシン（２００ユニット／ｍＬ）、グルタミン（２ｍＭ）及びファンギゾン（０．５μｇ／ｍＬ）を含有するダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ、カタログ番号１１８８５０７）が入った組織培養フラスコに入れた。５％二酸化炭素存在下で３７℃にて一晩、全フラスコをインキュベートした。このようにすることで、メラニン阻害剤を添加する前に皮膚を１８時間平衡化させた。傷、紅斑がある、又は色素が不均一である皮膚の部位は廃棄した。
【００５５】
翌朝、皮膚に４ｍｍ直径の穴を開けてバイオプシー試料を採取し、９６ウェル組織培養プレートに移した。バイオプシー試料が入った各ウェルに、ペニシリン（１００ユニット／ｍＬ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍＬ）、グルタミン（２ｍＭ）、ヒドロコルチゾン（１００μｇ／ｍＬ）及び０．４μＣｉ／ｍＬ  １４Ｃ−チオウラシル（Ｍｏｒａｖｅｋ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を含有する新鮮なＤＭＥＭ１８０μＬを天然抽出物（抽出物は、最初にＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）中で溶解させ、リン酸緩衝食塩水で希釈した。）２０μＬとともに添加した。全てのプレートをインキュベーターに戻し３日間インキュベートした。
【００５６】
３日間のインキュベーション期間の後、自動プレート洗浄装置を用いて、室温で２回、０．１Ｍ炭酸緩衝液（ｐＨ１０）でそれぞれ３０分及び２時間、バイオプシー試料を洗浄することにより、取り込まれなかった過剰な放射性標識を除去した。次に１Ｎ  ＮａＯＨ／３％Ｈ２Ｏ２  １００μＬを添加することによりバイオプシー試料を漂白して溶解させ、次いで６０℃で一晩インキュベートした。
【００５７】
乾燥後、２Ｎ  ＨＣｌ  ５０μＬを各ウェルに添加し、試料を再溶解／中和して、次いでシンチレーションカクテル（Ｐａｃｋａｒｄ  ＭｉｃｒｏＳｃｉｎｔ−４０）２２０μＬを添加した。この試料を数回混合して均一に分散するようにし、密封して、Ｐａｃｋａｒｄ  ＴｏｐＣｏｕｎｔシンチレーションカウンターを用いて放射性標識取り込みを調べた。放射性標識取り込みの低下は、新規メラニン合成の低下に変換される。
【００５８】
【表４】
2007537173.tif 000006
【００５９】
（実施例２）
ＭｅｌａｎｏＤｅｒｍ組織モデル法
暗色皮膚の個体から得たメラニン細胞を含有するＭｅｌａｎｏＤｅｒｍ組織同等モデル（Ｍａｔ  Ｔｅｋ，Ａｓｈｌａｎｄ，ＭａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓからのＭＥＬ−３００）を利用して、ブタ器官培養において得た結果を確認した。供給者の使用説明書に従いＭｅｌａｎｏＤｅｒｍを培養した。
【００６０】
１４日間にわたり２日ごとに培地を交換し、天然抽出物を含む処理物を５０から１００μｇ／ｍＬの最終濃度で培地フェーズに添加した。ポジティブ対照、すなわち既知の皮膚美白剤であるコジック酸を含めた。各培地交換時に、廃液の一部に対して、細胞毒性及びストレスの指標としての乳酸デヒドロゲナーゼレベルの分析を行った。乳酸デヒドロゲナーゼレベルがビヒクル対照溶媒（水又はエタノール）を超えることはなかった。
【００６１】
製造者により提供されるアッセイを用いて、各ＭｅｌａｎｏＤｅｒｍ内のメラニン含量の測定を行った。各ＭｅｌａｎｏＤｅｒｍを、プロテイナーゼＫ（５ｍｇ／ｍＬ）２０μＬを含有する緩衝液（１％ＳＤＳ、０．０５ｍＭ  ＥＤＴＡ、１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ６．８）４５０μＬ中でホモジェナイズし、４５℃で一晩インキュベートした。翌朝、炭酸ナトリウム（５００ｍＭ）５０μＬ及び過酸化水素（３０％溶液）１０μＬを各試料に添加し、８０℃にて３０分間インキュベートし、次いで冷却した。クロロホルム：メタノール（２：１）１００μＬで試料を抽出し、１０分間遠心分離（１０，０００ｇ）した後、最上層のフェーズの光学密度（４０５ｎｍ）を測定した。次いで、未処理又はビヒクル対照（水又はエタノール）に対する光学密度読み取りを計算した。
【００６２】
【表５】
2007537173.tif 000007
【００６３】
（実施例３）
本発明の範囲内の化粧品組成物を調製した。
【００６４】
撹拌しながらフェーズＡ成分を７０℃から８５度に加熱することにより、下表で示すベース処方を調製した。別の容器中で、撹拌しながら７０℃から８５℃にてフェーズＢ成分を加熱した。次いで両フェーズを７０℃から８５℃に維持しながら、フェーズＡをフェーズＢに添加した。この混合物を少なくとも１５分間７０℃から８５℃で撹拌し、次いで冷却した。
【００６５】
【表６】
2007537173.tif 000008
【００６６】
（実施例４）
本発明の範囲内のさらなる化粧品組成物を次のとおり調製した。
１．フェーズＡを８０℃に加熱。
２．別の容器でフェーズＢを７５℃に加熱。
３．ＢをＡに添加し、３０分間、加熱をやめて混合。
４．５０℃にてフェーズＣを添加し、１０分間混合。
【００６７】
【表７】
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【００６８】
（実施例５−１２）
本発明の範囲内で、実施例３の方法に従い、一連のさらなる組成物を調製し、下表で列挙する。
【００６９】
【表８】
2007537173.tif 000010
【手続補正書】
【提出日】平成18年3月8日(2006.3.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次のものを含む組成物を皮膚に塗布することを含む、皮膚美白の美容方法：
ａ．Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）抽出物０．０００００１重量％から５０重量％及び
ｂ．化粧品的に許容可能な担体。
【請求項２】
前記組成物がさらに日焼け防止剤を含む、請求項１に記載の美容方法。
【請求項３】
前記日焼け防止剤が微粉化金属酸化物である、請求項２に記載の美容方法。
【請求項４】
前記抽出物が、前記組成物の０．００００１重量％から１０重量％をしめる、請求項１から請求項３の何れか１項に記載の美容方法。
【請求項５】
前記抽出物が、前記組成物の０．００１重量％から７重量％を占める、請求項１から請求項３の何れか１項に記載の美容方法。
【請求項６】
前記抽出物が、前記組成物の０．０１重量％から５重量％を占める、請求項１から請求項３の何れか１項に記載の美容方法。
【請求項７】
前記Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）抽出物が有機溶媒抽出物である、請求項１から請求項６の何れか１項に記載の美容方法。
【請求項８】
前記組成物が、α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸、ポリヒドロキシ酸、ヒドロキノン、ｔ−ブチルヒドロキノン、ビタミンＢ及び／又はＣ誘導体、二酸、レチノイド、レゾルシノール誘導体、バニリン酸、ベツリン酸、ヒドロラクチン及びこれらの混合物からなる群から選択される、皮膚有益物質をさらに含む、請求項１から請求項７の何れか１項に記載の美容方法。
【請求項９】
前記組成物が、ベンゾフェノン−３、ベンゾフェノン−４、ベンゾフェノン−８、メトキシシンナメート、エチルジヒドロキシプロピル−ＰＡＢＡ、グリセリルＰＡＢＡ、ホモサラート、アントラニル酸メチル、オクトクリレン、オクチルジメチルＰＡＢＡ、オクチルメトキシシンナメート（ＰＡＲＳＯＬ  ＭＣＸ）、サリチル酸オクチル、ＰＡＢＡ、２−フェニルベンズイミダゾール−５−スルホン酸、サリチル酸ＴＥＡ、３−（４−メチルベンジリデン）−カンファー、ベンゾフェノン−１、ベンゾフェノン−２、ベンゾフェノン−６、ベンゾフェノン−１２、４−イソプロピルジベンゾイルメタン、ブチルメトキシジベンゾイルメタン（ＰＡＲＳＯＬ  １７８９）、エトクリレン及びそれらの混合物からなる群から選択される有機日焼け防止剤をさらに含む、請求項１から請求項８の何れか１項に記載の美容方法。
【請求項１０】
次のものを含有する化粧品組成物：
ａ．Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）抽出物、０．０００００１から５０重量％及び
ｂ．化粧品的に許容可能な担体及び
ｃ．皮膚有益物質及び／又は日焼け防止剤（皮膚有益物質は、α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸、ポリヒドロキシ酸、ヒドロキノン、ｔ−ブチルヒドロキノン、ビタミンＢ及び／又はＣ誘導体、二酸、レチノイド、レゾルシノール誘導体、バニリン酸、ベツリン酸、ヒドロラクチン及びそれらの混合物からなる群から選択される。）。
【請求項１１】
前記抽出物が、Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）の有機溶媒抽出物である、請求項１０に記載の化粧品組成物。
【請求項１２】
前記抽出物が、前記組成物の０．００００１重量％から１０重量％を成す、請求項１０又は請求項１１に記載の化粧品組成物。
【請求項１３】
前記抽出物が、前記組成物の０．００１重量％から７重量％を成す、請求項１０又は請求項１１に記載の化粧品組成物。
【請求項１４】
前記抽出物が、前記組成物の０．０１重量％から５重量％を成す、請求項１０又は請求項１１に記載の化粧品組成物。
【請求項１５】
前記日焼け防止剤が、微分化金属酸化物を含む、請求項１０から請求項１４の何れか１項に記載の化粧品組成物。
【請求項１６】
前記日焼け防止剤が、ベンゾフェノン−３、ベンゾフェノン−４、ベンゾフェノン−８、メトキシシンナメート、エチルジヒドロキシプロピル−ＰＡＢＡ、グリセリルＰＡＢＡ、ホモサラート、アントラニル酸メチル、オクトクリレン、オクチルジメチルＰＡＢＡ、オクチルメトキシシンナメート（ＰＡＲＳＯＬ  ＭＣＸ）、サリチル酸オクチル、ＰＡＢＡ、２−フェニルベンズイミダゾール−５−スルホン酸、サリチル酸ＴＥＡ、３−（４−メチルベンジリデン）−カンファー、ベンゾフェノン−１、ベンゾフェノン−２、ベンゾフェノン−６、ベンゾフェノン−１２、４−イソプロピルジベンゾイルメタン、ブチルメトキシジベンゾイルメタン（ＰＡＲＳＯＬ  １７８９）、エトクリレン及びそれらの混合物からなる群から選択される有機日焼け防止剤を含む、請求項１０から請求項１５の何れか１項に記載の化粧品組成物。
【請求項１７】
化粧品組成物中の有機日焼け防止剤の量が、化粧品組成物の０．１重量％から１０重量％の範囲である、請求項１６に記載の化粧品組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
本発明の組成物は、皮膚有益物質及び／又は日焼け防止剤をさらに含有する。この皮膚有益物質は、α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸、ポリヒドロキシ酸、ヒドロキノン、ｔ−ブチルヒドロキノン；ビタミンＢ及び／又はＣ誘導体（例えばナイアシンアミド）；二酸、レチノイド、レゾルシノール誘導体、ベツリン酸、バニリン酸、ベツリン酸、ヒドロラクチン及びそれらの混合物から選択される。有機及び無機（例えば微粉化金属酸化物）日焼け防止剤もまた含まれ得る。有機日焼け防止剤には、ベンゾフェノン−３、ベンゾフェノン−４、ベンゾフェノン−８、メトキシシンナメート、エチルジヒドロキシプロピル−ＰＡＢＡ、グリセリルＰＡＢＡ、ホモサラート、アントラニル酸メチル、オクトクリレン、オクチルジメチルＰＡＢＡ、オクチルメトキシシンナメート（ＰＡＲＳＯＬ  ＭＣＸ）、サリチル酸オクチル、ＰＡＢＡ、２−フェニルベンズイミダゾール−５−スルホン酸、サリチル酸ＴＥＡ、３−（４−メチルベンジリデン）−カンファー、ベンゾフェノン−１、ベンゾフェノン−２、ベンゾフェノン−６、ベンゾフェノン−１２、４−イソプロピルジベンゾイルメタン、ブチルメトキシジベンゾイルメタン（ＰＡＲＳＯＬ  １７８９）、エトクリレン及びそれらの混合物が含まれ得る。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
本発明はまた、Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）抽出物を含有する本発明の組成物を皮膚に局所的に塗布することによる、皮膚をコンディショニングする方法も含む。本発明はまた、Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ  ｓｐｈａｅｒｉｃａ（ニグロスポラ・スフェリカ）抽出物０．０００００１重量％から５０重量％を含有する組成物を皮膚に塗布することによる、皮膚美白の方法も含む。
【国際調査報告】
2007537173.tif 000011
2007537173.tif 000012
2007537173.tif 000013