(57)【要約】  本発明は医薬の分野に関し、そして糖尿病を処置および予防する、グルコースレベルを制御することのできる物質として適用することができる。グルコースレベルを制御することのできる、生物学的に活性な、一般式Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２の新規テトラペプチド、リシル−グルタミル−アスパルチル−トリプトファンを提案し、そして有効量の一般式Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２のテトラペプチド、リシル−グルタミル−アスパルチル−トリプトファンを含む薬理物質を提案する。糖尿病の予防および／または処置の方法であって、活性ペプチド薬剤として有効量のＬｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２テトラペプチドを含む薬理物質を、０．１〜３０ｇ／ｋｇ（体重）の用量で、少なくとも１日１回、治療効果を得るために必要な期間、患者に投与することを含む方法を提案する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２［配列番号：１］のテトラペプチド、リシル−グルタミル−アスパルチル−トリプトファンアミド。
【請求項２】
グルコースレベル制御の生物学的活性を示す、配列１の一般式Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２［配列番号：１］のテトラペプチド、リシル−グルタミル−アスパルチル−トリプトファンアミド。
【請求項３】
グルコースレベルを制御することができ；活性ペプチド薬剤および薬学的に許容される担体を含み、その活性成分として有効量のテトラペプチドＬｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２を含むことを特徴とする、ペプチド様医薬物質組成物。
【請求項４】
前記物質が経口投与に好適な形態で存在する、請求項３に記載の物質。
【請求項５】
前記物質が非経腸投与に好適な形態で存在する、請求項３に記載の物質。
【請求項６】
糖尿病の予防および／または処置法であって、活性ペプチド薬剤として有効量のＬｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２テトラペプチドを含む薬理物質を、０．１〜３０μｇ／ｋｇ（体重）の用量で、少なくとも１日１回、治療効果を得るために必要な期間、患者に投与することからなる方法。
【請求項７】
薬理物質が非経腸投与を意図されている、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
薬理物質が経口投与を意図されている、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
請求項３〜５に記載の薬理物質が、０．１〜３０μｇ／ｋｇ（体重）の用量で投与されるとき活性である、請求項７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は医薬の分野に関し、そして糖尿病処置のための、グルコース濃度を制御する物質として適用することができる。
【０００２】
この物質の最も近い類似適応症のうち、１型糖尿病の処置に使用される既知のインシュリン製剤が存在する。選択された製剤は、組み換えまたは遺伝的に修飾された、速効型のヒトインシュリン製剤：Ａｃｔｒａｐｉｄ、Ｈｕｍｕｌｉｎ  Ｒ、Ｉｎｓｕｍａｎ  Ｒ、Ｂｉｏｓｕｌｉｎ  Ｒ、および遅効型のヒトインシュリン製剤：Ｐｒｏｔｏｐｈａｎｅ、Ｈｕｍｕｌｉｎ  Ｎ、Ｉｎｓｕｍａｎ−ＢａｓａｌおよびＢｉｏｓｕｌｉｎ  Ｎならびに速効および遅効のヒトインシュリンアナログである。ＨｕｍａｌｏｇおよびＮｏｖｏｒａｐｉｄ製剤は、超速効型の製剤であり、それらは、速効型のインシュリンと比較して、素早く発現する効果および、ピーク効果のわずかに短い期間について顕著である；それらは食後グルコースレベル低下率のさらなる低下に有効である。
【０００３】
それでもなお、インシュリン治療は、何らかの合併症、例えばアレルギー反応、低血糖状態、インシュリン抵抗性およびインシュリン後脂肪異栄養症へと導き得る補充治療である。２型糖尿病医療はまた、ＮｏｖｏｎｏｒｍまたはＲｅｐａｇｌｉｎｉｄおよびＳｔａｒｌｉｘのような速効型製剤の、治療への導入のために変化した。伝統的には、Ｇｌｉｂｅｎｃｌａｍｉｄｅグループ、Ｇｌｉｐｉｚｉｄｅ、Ｇｌｉｋｌａｚｉｄｅグループ、ＧｌｉｋｖｉｄｏｎおよびＡｍａｒｉｌ（Ｇｌｉｍｅｐｉｒｉｄ）のようなスルホニルウレアが使用され、これは、遅効型製剤であり、そしてこのグループの他の製剤と比較して顕著な利点を有する。Ｄｉａｂｅｔｏｎ  ＭＲおよびＧｌｉｂｅｎｅｓｅ抑制剤は、遅効型の製剤である。糖尿病を有する患者はしばしば、いわゆるスルホニル尿素に対する２次抵抗性を示すことに注意すべきであり、これは残留インシュリン分泌の上昇によって引き起こされる。スルホニル尿素は顕著な副作用：消化不良性障害、アレルギー反応、骨髄機能抑圧、肝臓および腎臓に対する毒性効果、低血糖を有する。
【０００４】
また、メトホルミン（Ｇｌｕｃｏｐｈａｇｅ、Ｓｉｏｆｏｒ等）のようなビグアナイド類、Ｇｌｉｔａｚｏｎｅまたはインシュリン抵抗性改善薬：ＡｃｔｏｓおよびＡｖａｎｄｉａ、ならびにα−グルコシダーゼ阻害剤：ＡｃａｒｂｏｓｅおよびＭｅｇｌｉｔｏｌが使用される。これらの経口製剤はインシュリンに対する組織感受性を増加させ、そして炭水化物代謝に対する明確な正常化効果を発揮する。それにもかかわらず、それらの適用は、低い効果または副作用のために制限され得る（Balabolkin M. I. , Diabetology. -M. : Meditzina, 2000.-672 p.: Register of Pharmaceutical Substances of Russia. Edition 10. -RLS-2003, Moscow.-2003.-1438 pp.）。
インシュリンのものと同様の生物学的活性を示す既知のデカペプチドインシュリンフラグメントが存在する（ロシア特許第２０７８７６９号、Peptide Fragment, possessing biological insulin similar activity 、国際特許分類（ＩＣＩ）Ａ６１  Ｋ  ３８／２８、１９９７）。
【０００５】
ペプチドｐ２７７（ヒト熱ショックタンパク質（ｈｓｐ６０）アナログのエピトープ（ロシア特許第２１５９２５０号、Peptide p277 analogues and pharmacological substances on its basis for treatment and diagnostics of diabetes mellitus、国際特許分類（ＩＣＩ）Ａ６１  Ｋ  ３９／００、３８／００、２０００）が知られている。
【０００６】
それにもかかわらず、上記特許に記載の生物学的活性は、これらのペプチドのインシュリン様効果を示し、そして１型糖尿病処置用ペプチド物質を開発するために使用され得る。
【０００７】
特許（ＥＰ第１２６８５１８号、Insulin potentiating peptides、国際特許分類（ＩＣＩ）Ｃ０７Ｋ５／１０；  Ａ６１Ｋ３８／０７  ；Ａ６１Ｋ３８／０８、２００１）に記載のインシュリン増強小ペプチドが知られており、これは糖尿病予防および／または処置用医薬製剤および方法の原型であった。これらの小ペプチドは、糖尿病処置に使用され得るペプチド薬剤として使用することができる。
【０００８】
本ペプチド化合物が構造的的類似性を有さないテトラペプチドであることに注意するべきである。
【０００９】
本発明は、２型および１型糖尿病を有する患者において、グルコースレベルを制御する、ペプチド様の生物学的に活性な新規化合物を得ることを意図する。
【００１０】
本発明は、配列１の一般式Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２［配列番号：１］の新規テトラペプチド、リシル−グルタミル−アスパルチル−トリプトファンアミドを記載する。
【００１１】
テトラペプチドは、溶液中において、伝統的なペプチド合成法によって得られる（Yakubke Kh. - D., Eshkeit Kh. Amino acids, peptides, proteins:ドイツ語からの翻訳-Mir, Moscow.-1985 - 456 pp.）。
【００１２】
本発明は生物学的活性を示す、すなわち、グルコースレベルを制御する、配列１の一般式、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２［配列番号：１］のテトラペプチド、リシル−グルタミル−アスパルチル−トリプトファンアミドを記載する。
【００１３】
Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２テトラペプチドの血中グルコースレベルのに対する制御効果は、アロキサン糖尿病において実験的に示された。アロキサン糖尿病は膵臓β細胞の傷害と関係し、インシュリン欠乏および糖新生活性化のための顕著な高血糖を伴うと考えられる。
【００１４】
テトラペプチドＬｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２は無毒であることが実験的に証明された。
【００１５】
本発明の医薬物質は、その活性ペプチド薬剤として、有効量の配列番号１の一般式Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２［配列番号：１］のテトラペプチド、リシル−グルタミル−アスパルチルトリプトファンアミドを含み、そして糖尿病の症例においてグルコースレベルを制御する。
【００１６】
本明細書における“医薬物質”との記載は、有効量の一般式Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２のテトラペプチドを含む任意の薬剤形態の使用を意味し、これは糖尿病の症例において血中グルコースレベルを制御する物質としての医薬において、その予防的および／または治療的使用を見出すことができる。
【００１７】
本明細書における“治療上有効量”との記載は、その活性および毒性の量的指標に従って、ならびに利用可能な特定の知識に関して、この薬剤形態において有効であるべきであるような活性ペプチドの量の使用を意味する。
【００１８】
本発明に適合する医薬組成物を得るためには、有効成分として本発明のテトラペプチドを、医薬担体と、薬剤学において許容される配合方法に従って混合する。
【００１９】
担体は、体への導入、例えば非経腸投与または経口投与に望ましい、物質の薬剤形態に依存して、様々な形態を有し得る。
【００２０】
経口投与に望ましい投与形態の薬剤組成物を製造するために、全ての既知の医薬成分を使用することができる。
【００２１】
非経腸投与用担体には、通常滅菌水が含まれるが、安定性または滅菌維持のための手段として他の成分を使用することができる。
【００２２】
本発明は、医薬物質が好ましくは、非経腸投与用または経口投与用に処方されるべきであることを前提としている。
【００２３】
本発明はまた、糖尿病の予防および／または処置法であって、ペプチド薬剤として有効量のテトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２を含む薬理物質を、０．１〜３０ｇ／ｋｇ（体重）の用量で、少なくとも１日１回、治療効果を得るために必要な期間に渡り、患者に投与することを含む方法に関する。
【００２４】
糖尿病の予防および／または処置法は、薬理物質の患者への予防的もしくは処置的非経腸もしくは経口投与からなる。
【００２５】
本発明のテトラペプチドは、０．１〜３０μｇ／ｋｇ（体重）の用量で導入されるとき、活性であるが、より低い／高い用量は、処置される病理学的過程の特徴および重症度に依存して許容される。
【００２６】
本発明の技術的成果は、インシュリン分泌増加によるグルコースレベルの制御およびインシュリンに対する組織感受性の増加である。
【００２７】
本出願の対象技術成果を得る可能性は、信頼の置ける実験と当該技術分野において確立されている方法によって得られた臨床データによって肯定される。
【００２８】
本発明を表によって説明する。
【００２９】
表１は、テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２の、アロキサン糖尿病を有するラットの血中グルコースレベルに対する効果を示す（処置）。
【００３０】
表２は、テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２の、アロキサン糖尿病を有するラットの血中グルコースレベルに対する効果を示す。（予防および処置）。
【００３１】
表３は、異なる用量のテトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２の、アロキサン糖尿病を有するラットの血中グルコースレベルに対する効果を示す。
【００３２】
表４は、テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２の、アロキサン糖尿病を有するラットの血中インシュリンレベルに対する効果を示す。
【００３３】
表５は、アロキサン糖尿病を有するラットにおける、グルコース耐性試験の結果を示す（テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２コース終了後４４日目）。
【００３４】
表６は、アロキサン糖尿病を有するラットの血中グルコースレベルに対するインシュリンの効果を示す（テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２コース終了後２８日目）。
【００３５】
表７は、本試験における糖尿病を有する患者分布を示す。
【００３６】
表８は、インシュリンで処置された１型および２型糖尿病を有する患者に対する、テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２の非経腸投与の効果を示す。
【００３７】
本発明はテトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２合成の例によって（実施例１）、テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２生物学的活性の例によって（実施例２、３、４、５、６、７）、そして、その薬理学的特徴を示し、そして予防および／または処置効果を得る可能性を確認する、テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２臨床適用の結果の例によって（実施例８）説明される。
【実施例】
【００３８】
実施例１  Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２テトラペプチドの合成
１．製品名：リシル−グルタミル−アスパルチル−トリプトファンアミド
２．構造式：
【化１】
2007537140.tif 000002
３．イオン対なしでの分子式：Ｃ２６Ｈ３７Ｎ７Ｏ８。
４．イオン対なしでの分子量：５７５，６２。
５．イオン対：なし。
６．外見：白色無定形粉末、無臭。
【００３９】
７．合成方法：ペプチドを、下記スキームにより、溶液中で、伝統的な合成方法によって得る：
【化２】
2007537140.tif 000003
Ｚ        −ベンジルオキシカルボニル基；
ＢＯＣ    −ｔｅｒｔ．ブチルオキシカルボニル基；
ＯＳｕ    −Ｎ−オキシスクシンイミドエステル；
ＯＢｚｌ  −ベンジルエステル；
ＤＣＣ    −Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド；
ＨＯＢＴ  −Ｎ−オキシベンゾトリアゾール。
【００４０】
Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミドを溶媒として使用した。アスパラギン酸を加えるとき、トリエチルアミンの塩化によるα−ＣＯＯＨ基の保護を適用した。ＢＯＣ保護基をトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）溶液で、そしてＺ保護基を酵素的加水分解で除去した。生成物を順相カラムでの分取クロマトグラフィー（シリカゲル）の方法によって抽出し、精製した。
【００４１】
最終産物の特徴：
・アミノ酸分析
【表１】
2007537140.tif 000004
・ペプチド含有量９７．４８％（ＨＰＬＣによる、２２０ｎｍ）；
・薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）−単一、Ｒｆ＝０．６４（プレート、ＰＴＳＸ−Ｐ−Ｖ−ＵＶ  Ｓｏｒｂｆｉｌ、シリカゲルＳＴＸ−１ＶＥ  ８−１２μｍ、アセトニトリル：水、３：１）；
・水分含有量：７％；
・０．０１％溶液のｐＨ：４．０５；
・ＵＶ−スペクトル：２８０ｎｍで最高点−トリプトファンインドール環；
・旋光度：［α］Ｄ２３：−２６．５３°（ｃ＝１．０；Ｈ２Ｏ）、“Ｐｏｌａｍａｔ  Ａ”、Carl Zeiss Jena
【００４２】
合成例：
１．ＢＯＣ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨ（Ｉ）、Ｎ−ｔｅｒｔ．ブチルオキシカルボニル−（γ−ベンジル）グルタミル−（β−ベンジル）アスパルテート。
４．３４ｇ（０．０１００ｍｏｌ）のＮ−ｔｅｒｔ．ブチルオキシカルボニル−（γ−ベンジル）グルタミン酸Ｎ−オキシスクシンイミドエステル（ＢＯＣ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−ＯＳｕ）を、２０ｍｌのジメチルホルムアミドに溶解し、そして１．７２ｍｌ（０．０１２５ｍｏｌ）のトリエチルアミンおよび２．８０ｇ（０．０１２５ｍｏｌ）のβ−ベンジルアスパルテートを加える。混合物を２４時間、室温にて撹拌する。その後、生成物を０．５Ｎ硫酸溶液（１５０ｍｌ）で沈殿させ、酢酸エチル（３×３０ｍｌ）で抽出し、０．５Ｎ硫酸溶液（２×２０ｍｌ）、水、５％重炭酸ナトリウム溶液（１×２０ｍｌ）、水、０．５Ｎ硫酸溶液（２×２０ｍｌ）、水で、洗浄する。生成物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。酢酸エチルを濾過し、そして真空下で４０°にて除去し、残さを真空下でＰ２Ｏ５で乾燥させる。５．６８ｇ（約１００％）の油状物を得る。Ｒｆ＝０．４２（ベンゼン−アセトン  ２：１、Ｓｏｒｂｆｉｌプレート、シリカゲル−８〜１２μｍ、ＵＶおよび塩素／ベンジジンによって展開）。
【００４３】
２．ＴＦＡ・Ｈ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨ（ＩＩ）、（γ−ベンジル）グルタミル−（β−ベンジル）アスパラギン酸トリフルオロアセテート。
５．６８ｇ（約０．０１ｍｏｌ）のＮ−ｔｅｒｔ．ブチルオキシカルボニル−（γ−ベンジル）グルタミル−（β−ベンジル）アスパルテート（Ｉ）を、２０ｍｌのジクロロメタン−トリフルオロ酢酸混合物（３：１）に溶解する。２時間後、溶媒を真空下で、４０℃にて除去する。除去をジクロロメタン（２×１０ｍｌ）のさらなる分割量の添加により繰り返す。残さを真空下で、ＮａＯＨで乾燥させる。５．８０ｇ（約１００％）の油状物を得る。Ｒｆ＝０．６３（ｎ−ブタノール−ピリジン−酢酸−水、１５：１０：３：１２）。
【００４４】
３．Ｚ−Ｌｙｓ（Ｚ）−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨ（ＩＩＩ）、Ｎ，Ｎε−ジベンジルオキシカルボニルリシル−（γ−ベンジル）グルタミル−（β−ベンジル）アスパルテート。
５．６５ｇ（０．０１ｍｏｌ）の（γ−ベンジル）グルタミル−（β−ベンジル）アスパルテートトリフルオロアセテート（ＩＩ）を１０ｍｌのジメチルホルムアミドに溶解し、２．８０ｍｌ（０．０２ｍｏｌ）のトリエチルアミンおよび６．６４ｇ（０．０１３ｍｏｌ）のＮ，Ｎε−ジベンジルオキシカルボニルリシンＮ−オキシスクシンイミドエステルを加える。反応混合物を２４時間、室温にて撹拌する。
生成物を０．５ｎ硫酸溶液（１５０ｍｌ）で沈殿させ、酢酸エチル（３×３０ｍｌ）により抽出し、０．５ｎ硫酸溶液（２×２０ｍｌ）、水、５％重炭酸ナトリウム溶液（１×２０ｍｌ）、水、０．５ｎ硫酸溶液（２×２０ｍｌ）、水で洗浄し、そして無水硫酸ナトリウムで乾燥させる。酢酸エチルを濾過し、そして真空下で４０°にて除去する。残さを酢酸エチル／ヘキサン系で再結晶化させる。生成物を濾過し、真空下でＰ２Ｏ５で乾燥させる。収率は６．０４ｇ（７２％）である。融点（Ｔｍｌ）は１４２℃である。Ｒｆ＝０．６０（ベンゼン−アセトン、１：１）。
【００４５】
４．Ｚ−Ｌｙｓ（Ｚ）−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｐｒｏ−ＯＢｚｌ（ＩＶ）、１０２４,１５  Ｎ，Ｎε−ジベンジルオキシカルボニルリシル−（γ−ベンジル）グルタミル−（β−ベンジル）アスパルチル−トリプトファンアミド。
１．８ｇ（７．２μｍｏｌ）のトリプトファンアミド塩酸塩（ＨＣｌ・Ｈ−Ｔｒｐ−ＮＨ２）を１５ｍｌのテトラヒドロフランに懸濁し、そして１．０ｍｌ（７．２ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを、撹拌しながら加える。５分後、４．０ｇ（４．８ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎε−ジベンジルオキシカルボニルリシル−（γ−ベンジル）グルタミル−（β−ベンジル）アスパルテート（ＩＩＩ）および０．８ｇ（５．８ｍｍｏｌ）のＮ−オキシベンゾトリアゾールを加える。混合物を０℃へと冷却する。その後、０℃へと冷却された１．２ｇ（５．８ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド溶液を、５ｍｌのテトラヒドロフラン中に加える。混合物をこの温度で、２時間撹拌し、そして一晩室温にて混合させる。反応混合物を氷冷水（１５０ｍｌ）へと注ぎ、残さを粉砕し、濾取する。残さを酢酸エチル（２００ｍｌ）中に懸濁させ、そして生じたゲルを連続的に、１ＮのＨ２ＳＯ水溶液（２×１００ｍｌ）、５％ＮａＨＣＯ３（２×１００ｍｌ）、水（２×１００ｍｌ）中の１ＮのＨ２ＳＯ４（２×１００ｍｌ）、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄する。溶媒を真空下で除去し、そして生成物を２回、イソプロピルアルコール中で結晶化する。収率は４．９ｇ（９５％）であり、Ｒｆ＝０．６７（ベンゼン−アセトン、２：１）である。
【００４６】
５．Ｈ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２（Ｖ）、リシル−グルタミル−アスパルチル−トリプトファンアミド、５７５,６２
４．７ｇのＮ，Ｎε−ジカルボベンゼンオキシリシル−（γ−ベンジル）グルタミル−（β−ベンジル）アスパルチル−トリプトファンアミド（ＩＶ）をメタノール／水（５：１）系中で、Ｐｄ／Ｃ触媒で水素化する。脱保護反応の完了をベンゼン／アセトン（２：１）およびアセトニトリル／水（１：３）系中におけるＴＬＣ法によって観察する。反応が完了したとき、触媒を濾取し、濾液を真空下で除去し、そして残さを水／メタノール系において再結晶する。生成物を真空下でＫＯＨで乾燥させる。収率は２．６ｇ（９０％）である。Ｒｆ＝０．６４（アセトニトリル／水、１：１）。
精製のために、２．６ｍｇの生成物を５ｍｌのアセトニトリル−水混合物（１：３）に溶解し、そして“Ｓｉｇｍａ”シリカゲル、２３０〜４００バッグ（４０〜６３μ）を有する２１×４．５ｃｍカラムにのせる。アセトニトリル−水（１：３）系による溶出。１ｇのクロマトグラフ的に均一な物質を得た。
【００４７】
６．最終生成物の分析。
・ペプチド含有量をＮｕｃｌｅｏｓｉｌカラムＣ１８、４．６×２５０ｍｍでのＨＰＬＣによって明確にする。Ａ：０．１％ＴＦＡ；Ｂ：ＭｅＣＮ；グラジエント３０分でＢ０→３０％。流速は１ｍｌ／分である。２２０ｎｍで検出、１９０〜６００ｎｍで走査、サンプル体積は２０μｌである。ペプチド含有量９７．４８％。
・アミノ酸分析をＡＡＡ“Ｔ−３３９”テスター、Ｐｒａｇｕｅで行う。
【表２】
2007537140.tif 000005
・ＴＬＣ：単一、Ｒｆ＝０．６４（アセトニトリル／水、３：１、Ｓｏｒｂｆｉｌプレート、８〜１２μｍシリカゲル、塩素／ベンジジンおよびＵＶによって現像）。
・水分含有量：７％（重量測定法において、乾燥による質量減少によると、１００℃にて−２０ｍｇ）。
・０．０１％溶液のｐＨ：４．０５（電位差滴定）
・旋光度：［α］Ｄ２３：−２６．５３°（ｃ＝１．０  Ｈ２Ｏ）、“Ｐｏｌａｍａｔ  Ａ”、Carl Zeiss Jena。
・ＵＶスペクトル：２８０ｎｍでピーク−トリプトファンのインドール環、“Ｂｅｃｋｍａｎ  ＤＵ  ６５０”、０．００１％水溶液。
【００４８】
実施例２．  テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２の、ラットにおけるアロキサン糖尿病の経過に対する効果（処置法）
平均体重３７５±３５ｇを有する２１匹の白雑種雄ラットで試験を行った。血中のグルコース濃度の測定の後、全動物をランダムに２つのグループへと分けた。次いで、全動物に、１ｍｌのアロキサン溶液（“Ｓｐｏｆａ”）を３５ｍｇ／ｋｇの用量で、単回静脈内投与した。１５日目に、対照動物は１日１回、０．３ｍｌの０．９％ＮａＣｌ溶液を腹腔内投与され、メイングループのラットはＬｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２を、ラットあたり３μｇ（０．３ｍｌの０．９％ＮａＣｌ溶液中）の用量で、１１日間投与された。
【００４９】
表１は試験の結果を示し、これはＬｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２テトラペプチド投与が全試験を通じて３８．４％（３０〜４７．７％）の動物において、血中グルコースレベルの確かな減少に貢献したことを示す。Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２テトラペプチド関連グルコースレベル減少は、メイングループにおける死亡率の減少と相関した。対照グループの動物において、調査の終わりには（アロキサン投与後８４日目）、死亡率が７０％であったが、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２テトラペプチドを投与されたラットでは３６．４％であった。したがって、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２テトラペプチド投与はアロキサン糖尿病動物において２倍の死亡率減少を可能とした。
【００５０】
実施例３．  ラットにおけるアロキサン糖尿病の経過に対するＬｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２の効果（予防および処置法）
平均体重３７５±３５ｇを有する１５匹の白雑種雄ラットで試験を行った。動物をランダムに２つのグループに分けた。対照動物は１日１回、０．３ｍｌの０．９％ＮａＣｌ溶液を静脈内投与されるが、一方、メイングループ動物はＬｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドを、ラットあたり３μｇ（０．３ｍｌの０．９％ＮａＣｌ溶液中）の用量で７日間投与された。その後、全動物を１ｍｌのアロキサン溶液（“Ｓｐｏｆａ”）の３５ｍｇ／ｋｇの用量での単回静脈内投与に付した。Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドを、アロキサンの投与後、３日間投与した。その後、対照ラットを８日目から２８日目まで（全部で１１日）、同じ用量での２回目のＬｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドコースに付した。
【００５１】
試験の結果を表２に示す。第１に、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドの健康動物への投与は、血中グルコースレベルの減少を導かなかったことを言及すべきである。対照動物は、アロキサン投与後の全試験期間の間、開始レベルと比較して１．９〜４．９倍の血中グルコース濃度の上昇を伴う糖尿病の発症を示した。Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドの１コースに付されたラットは、対照と比較して、２２〜３０％の血中グルコースレベルの減少を示した。Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドの２回目のコース後、これらの動物は全試験期間（２８、３３、４０日目）において血中グルコースレベルの完全な正常化を示したが、一方で対照グループの動物において、血中グルコースレベルは、それぞれ、２；４．２；３．８倍増加であった。
【００５２】
Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドで処置された８匹中２匹のみが糖尿病の重症な形態であると報告したが、一方で対照グループにおいては７匹中５匹であり、すなわち、対照グループにおいてこの指標は２．９倍高いことに注意するべきである。
【００５３】
試験の終了時（アロキサン投与後４０日目）、５７．１％の対照動物と７５％のＬｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチド処置動物が生存していた。
【００５４】
試験の結果は、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドは死亡率の減少を伴うアロキサン糖尿病ラットにおけるグルコースレベルの正常化に貢献することを示す。
【００５５】
実施例４．  異なる用量でのＬｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドの、ラットにおけるアロキサン糖尿病の経過に対する効果
平均体重３７５±３５ｇを有する２３匹の白雑種雄ラットで試験を行った。全動物を１ｍｌのアロキサン溶液（“Ｓｐｏｆａ”）の３５μｇ／ｋｇの用量での単回静脈内投与に付した。
【００５６】
次いで、動物をランダムに３つのグループに分けた。対照動物は０．３ｍｌの０．９％ＮａＣｌ溶液を、１日１回腹腔内投与された。第２および第３グループのラットはテトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２を、ラットあたり１μｇ（０．１ｍｌの０．９％ＮａＣｌ溶液中）、および１０μｇ（１．０ｍｌの０．９％ＮａＣｌ溶液中）の用量で、７日間投与された。
【００５７】
表３はこの試験の結果を示す。テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２の１μｇの用量でのラットへの投与は、テトラペプチドコースの終了後１日目および４日目で、対照と比較して、それぞれ、１７．３および１２．３％、血中グルコースレベルにおける顕著な増加に貢献した。テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２の１０μｇの用量におけるラットへの投与は、１、４、７、１７日目で、それぞれ、３０；２３．８；２６；１２．７％のグルコースレベルのより顕著な減少さえ導いた。これらのデータは、テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２用量の増加が、動物の血中グルコースレベルに対して顕著に影響することを示す。
【００５８】
実施例５．  テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２のアロキサン糖尿病ラットの血中グルコースレベルに対する効果
平均体重３７５±３５ｇを有する１８匹の白雑種雄ラットで試験を行った。血中グルコースレベルの測定の後、全動物をランダムに２つのグループへと分けた。次いで、全動物を、１ｍｌのアロキサン溶液（“Ｓｐｏｆａ”）の３５ｍｇ／ｋｇの用量で、単回静脈内注射に付した。１５日後、対照動物は１日１回、０．３ｍｌの０．９％ＮａＣｌ溶液を腹腔内投与され、メイングループのラットはテトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２を、ラットあたり３μｇ（０．３ｍｌの０．９％ＮａＣｌ溶液中）の用量で、１１日間投与された。
【００５９】
試験の結果を表４において示し、これはアロキサン投与後１５日目に動物は糖尿病を示したことを示す。テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２を投与されたラットにおいて、血中のインシュリン含有量は、該物質が投与された後８日の間、対照グループのラットにおけるよりも３．９倍高かった。試験の間に行われた全ての下記測定は、ラットの血中インシュリンの量を示す（１３〜１８％）が、対照動物の血中にはインシュリンが全くなかった。実験終了時（アロキサン投与後７０日目）、６２．５％の対照動物が生存し、テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２を投与された動物では７０％が生存した。
【００６０】
この試験の結果の分析は、テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２のアロキサン糖尿病を有するラットへの投与がインシュリン血中レベルの維持に貢献し、これはインシュリン産生細胞構造および機能の部分的修復に由来し得ることが示された。
【００６１】
実施例６．  テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２のアロキサン糖尿病ラットにおける糖曲線の指標に対する効果（処置法）
以前の試験に参加した１３匹の雄ラットで試験を行った（処置法−テトラペプチド、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２投与の終了後４４日）。同じ体重を有する７匹の健康ラットが別グループを構成した。全動物が、それらの血中グルコース濃度を測定した後、１ｍｌの２％グルコース溶液を静脈内投与された。
【００６２】
表５は試験の結果を示し、これは健康ラットにおいて、グルコース投与後、その濃度は、開始レベル（１００％）と比較して、５分後−２０３．９％、３０分−１５６．３％、６０分−１２４．６％、１２０分−１１４．５％であったことを示す。対照動物において、同じ指標は、それぞれ、１２９．８；１２７．５；１２３．５；１２１．１％であった。これらのデータは、アロキサン障害後の膵臓機能の強い抑制を示す。Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドを投与されたラットにおける同じ指標は、１４２．９；９７．３；９５．６；７７．９％であった。この試験の結果はＬｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドがアロキサン糖尿病を有するラットにおいて膵臓機能を刺激することができることを示す。
【００６３】
実施例７．  Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチド投与後のアロキサン糖尿病ラットにおける血中グルコースレベルに対するインシュリン作用
以前の試験に参加した１３匹の雄ラットで試験を行った（処置法−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチド投与の終了後２８日目）。類似の体重を有する８匹の健康ラットが別グループを構成した。全動物が、インシュリン（０．３単位）を静脈内投与され、そしてそれらの血中グルコース濃度をその後測定した。
【００６４】
試験の結果を表６に示す。健康な動物は、グルコースレベルの強い生理的低下を示したが、一方で対照動物（アロキサン糖尿病を有する）において、この指標が２．８倍低かった。Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドで処置したアロキサン糖尿病動物は、対照グループと比較して、インシュリン投与後に、グルコースレベルの顕著な、２倍近い減少を示した。これらのデータはＬｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドのインシュリンに対する組織感受性を大いに維持する能力を示す。
【００６５】
Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドの特徴は、試験の間、糖尿病処置の場合における血中グルコースレベルを制御する物質として、予防的および治療的適用に推薦することができることを示した。
【００６６】
下記本発明のテトラペプチドの臨床試験の結果はその薬理学的特徴を示し、そして発明の実施の可能性を確認する。
【００６７】
実施例８．  Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドを、糖尿病を有する患者において適用することの効果
１６〜８３歳の３６名の患者において調査を行った（男７名、女２９名）。２３名の患者は１型糖尿病と、１３名の患者は２型糖尿病と診断された。疾患期間は１年〜３０年で異なった。３２名の患者がインシュリンを投与されていた。糖尿病を有する患者の大部分が無報酬(deconpensated)で入院していた。これらの患者における空腹時での血中グルコースレベルは９．５〜２７μｍ／ｌで；糖化ヘモグロビンは７．８〜１２．７％で変動した。全患者は固定食（rigid diet）を処方された。全患者を、年齢、性別、疾患の期間およびステージに関して、ランダムに２つのグループに分けた（表７）。標準の処置法と並行して、１６名の患者にＬｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドを、１０μｇの用量で（１ｍｌの０．９％ＮａＣｌ溶液中）、筋肉内、１日１回で１０日間で処方した。２型糖尿病を有する４名の患者に、標準の処置コースと共に、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドを、１００μｇの用量で（錠剤１個）、１日２回、食前、１０日間で処方した。対照グループの患者は、１ｍｌの０．９％のＮａＣｌ溶液をプラセボとして、同じスキームに従って投与された。
【００６８】
Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチド効果の試験結果を表８に示す。８名の患者において（インシュリンで処置された１６名の内）、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドコースはインシュリン１日量の、平均８単位の減少をもたらし、これは補償を達成できる。
【００６９】
６名の患者について、インシュリン用量は変化しないままであり、そして補償が記録された。２名のみの患者について、補償を得るために、インシュリン用量を増加した：１番目の患者は４単位；２番目の患者は１４単位。同時に、対照グループにおいて（１６名のインシュリン投与患者）、２名のみの患者について、インシュリン用量は変化しないままであり、１４名の患者について、補償を得るために、インシュリン用量を４〜８単位増加させた。
【００７０】
Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドを錠剤で毎日投与されている、２型糖尿病（１名の患者）および１型糖尿病（３名の患者）を有するメイングループの患者において、インシュリン用量は２５単位減少し、そして経口抗糖尿病薬で処置されている患者において、完全補償を達成し、そして製剤用量は事実上２倍減少した。
【００７１】
したがって、糖尿病を有する患者におけるＬｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドの適用は、インシュリンに対する組織感受性を上昇させ、そしてある程度膵臓機能の修復に貢献する。Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドのより高い効果が記録された（これはメイングループの患者の５０％でインシュリン用量が減少したが、対照グループにおいて、患者はこの結果を示さなかったことにより証明される）ことに注意するべきである。
【００７２】
上記の確認のため、病歴記録から３例の抜粋を挙げる。
【００７３】
病歴記録１番からの抜粋
患者Ｋ、６９歳、グループ２障害。患者は１７年間糖尿病を有する。ｌ９８６年から彼女は抗糖尿病薬を錠剤で投与され、１９９６年からこれらの薬剤がインシュリンで置き換えられた。患者の検査は、末期糖尿病合併症を示した。
診断：２型糖尿病、インシュリンに対する２次抵抗性、糖尿病性網膜症、多発性神経障害、糖尿病性腎症、症候性高血圧。
処置入院時：血中グルコースレベル−１０μｍｏｌ／ｌ、食後２時間−１４μｍｏｌ／ｌ。血液臨床検査−正常、尿タンパク−０．６６ｇ／ｌまで、ＥＣＧ−左心室肥大。インシュリン１日量−８２単位。
治療：食事、ビタミンＢ群、berlition、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２テトラペプチド含有非経腸形態の医薬組成物を、１０μｇ、筋肉内、１０日間。
１８日目に退院：空腹時の血中グルコースレベル−５．９μｍｏｌ／ｌ。インシュリン１日量−５６単位（開始レベルと比較して２６単位の減少）。凝血指標に顕著な改善がある。
【００７４】
病歴記録２番からの抜粋
患者Ｍ、４０歳、グループ２障害。彼は１３年間糖尿病を有し、疾患発症直後からインシュリン処置された。
診断：１型糖尿病、中度、糖尿病性網膜症、多発性神経障害、脳症。
処置入院時：空腹時血中グルコースレベル−１７．８μｍ／ｌ。臨床血液および尿検査−正常。インシュリン１日量−４０単位。
治療：食事、ビタミンＢ群、Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２テトラペプチド含有非経腸形態の医薬組成物を、１０μｇ、筋肉内、１０日間。
１５日目に退院：空腹時血中グルコースレベル３．４μｍｏｌ／ｌ。インシュリン１日量−３２単位（開始レベルと比較して８単位の減少）。
【００７５】
病歴記録３番からの抜粋
患者Ｌ、８３歳。彼女は２５年間糖尿病を有し、異なる抗糖尿病ピルで処置された。徹底的な食事制限に従い、最近の患者の状態は満足のいくものである。
診断：２型糖尿病、糖尿病網膜症。
処置入院時：空腹時血中グルコースレベル−１１μｍｏｌ／ｌ。臨床血液および尿検査−正常。１日２錠のdiabetonを摂取する。患者が錠剤の抗糖尿病製剤に抵抗性を示したので、彼女はインシュリン投与を勧められた。しかし、患者はインシュリン処置を拒否し、これが彼女がＬｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドを含む経口形態の医薬組成物を、１００μｇ（１錠）、１日２回、食前、１０日間、２錠のdiabeton錠剤の摂取と共に処方された理由である。２日目における空腹時グルコースレベルは、６μｍｏｌ／ｌであった。そこで、diabetonの用量を２倍減少させた。Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２、テトラペプチドでの処置コースの終了後、血中グルコースレベルは正常の範囲内のままであった。患者の現在の状態は満足のいくものである。
【００７６】
【表３】
2007537140.tif 000006
【００７７】
【表４】
2007537140.tif 000007
【００７８】
【表５】
2007537140.tif 000008
【００７９】
【表６】
2007537140.tif 000009
【００８０】
【表７】
2007537140.tif 000010
【００８１】
【表８】
2007537140.tif 000011
【００８２】
【表９】
2007537140.tif 000012
【００８３】
【表１０】
2007537140.tif 000013
【配列表】
2007537140000001.xml
【手続補正書】
【提出日】平成18年8月23日(2006.8.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】変更
【補正の内容】
【配列表】
2007537140000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成19年7月18日(2007.7.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００３】
それでもなお、インシュリン治療は、何らかの合併症、例えばアレルギー反応、低血糖状態、インシュリン抵抗性およびインシュリン後脂肪異栄養症へと導き得る補充治療である。２型糖尿病医療はまた、ＮｏｖｏｎｏｒｍまたはＲｅｐａｇｌｉｎｉｄおよびＳｔａｒｌｉｘのような速効型製剤の、治療への導入のために変化した。伝統的には、Ｇｌｉｂｅｎｃｌａｍｉｄｅグループ、Ｇｌｉｐｉｚｉｄｅ、Ｇｌｉｋｌａｚｉｄｅグループ、ＧｌｉｋｖｉｄｏｎおよびＡｍａｒｉｌ（Ｇｌｉｍｅｐｉｒｉｄ）のようなスルホニルウレアが使用され、これは、遅効型製剤であり、そしてこのグループの他の製剤と比較して顕著な利点を有する。Ｄｉａｂｅｔｏｎ  ＭＲおよびＧｌｉｂｅｎｅｓｅ遅延型は、遅効型の製剤である。糖尿病を有する患者はしばしば、いわゆるスルホニルウレアに対する２次抵抗性を示すことに注意すべきであり、これは残留インシュリン分泌の上昇によって引き起こされる。スルホニルウレアは顕著な副作用：消化不良性障害、アレルギー反応、骨髄機能抑圧、肝臓および腎臓に対する毒性効果、低血糖を有する。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−ＮＨ２テトラペプチドの血中グルコースレベルに対する制御効果は、アロキサン糖尿病において実験的に示された。アロキサン糖尿病は膵臓β細胞の傷害と関係し、インシュリン欠乏および糖新生活性化のための顕著な高血糖を伴うと考えられる。
【国際調査報告】
2007537140.tif 000015
2007537140.tif 000016
2007537140.tif 000017
2007537140.tif 000018