(57)【要約】  本発明は、悪性腫瘍を処置するための治療剤として有用なヘッジホッグシグナル伝達の新規の阻害剤を提供する。この化合物は一般式Ｉを有する［式中、Ａは、炭素環又は複素環であり；Ｘは、アルキレン、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）、ＮＲ4Ｃ（ＮＨ）、ＮＲ4ＳＯ、ＮＲ4ＳＯ2、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）ＮＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ4、Ｃ（Ｓ）ＮＲ4、Ｃ（ＮＨ）ＮＲ4、ＮＲ4ＰＯ又はＮＲ4ＰＯ（ＯＨ）｛式中、Ｒ4はＨ又はアルキルである｝Ｙは、Ｎ、ＣＨ又はＣＲ3であり；Ｒ1は、それぞれがヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル、ハロアルキル又はアルコキシで任意に置換される、アルキル、シクロアルキル、アリール又は複素環から成る群から選択され；Ｒ2は、それぞれがヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル又はアルコキシで任意に置換される、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アシル又はアルコキシであり；Ｒ3は、それぞれがヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル又はアルコキシで任意に置換される、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アシル又はアルコキシであり；ｍは、０〜３であり；ｎは、０〜３であり；並びに、それらの塩及び溶媒和物である］。
2007535569.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物：
【化１】
2007535569.tif 000046
［式中、
Ａは、炭素環又は複素環であり；
Ｘは、アルキレン、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）、ＮＲ4Ｃ（ＮＨ）、ＮＲ4ＳＯ、ＮＲ4ＳＯ2、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）ＮＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ4、Ｃ（Ｓ）ＮＲ4、Ｃ（ＮＨ）ＮＲ4、ＮＲ4ＰＯ又はＮＲ4ＰＯ（ＯＨ）｛式中、Ｒ4はＨ又はアルキルである｝
Ｙは、Ｎ、ＣＨ又はＣＲ3であり；
Ｒ1は、それぞれがヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル、ハロアルキル又はアルコキシで任意に置換される、アルキル、シクロアルキル、アリール又は複素環から成る群から選択され；且つ、当該シクロアルキル、アリール及び複素環は、任意に−（ＣＨ2）s−（Ｑ）u−（ＣＨ2）t−Ｚ｛式中、Ｑは、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ2、Ｃ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）、ＮＲ4ＳＯ、ＮＲ4ＳＯ2、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）ＮＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ4、又はＣ（Ｓ）ＮＲ4で更に置換され｝；且つ、Ｚは、ヒドロキシル、アミノ、ハロゲン、アルキルスルホニル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、ハロアルキル、炭素環、複素環、或いはヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ若しくはアルコキシアルコキシで置換された炭素環又は複素環であり；且つ、ｓ及びｔは独立して０〜５であり、ｕは０又は１であり；
Ｒ2は、それぞれがヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル又はアルコキシで任意に置換される、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アシル又はアルコキシであり；
Ｒ3は、それぞれがヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル又はアルコキシで任意に置換される、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アシル又はアルコキシであり；
ｍは、０〜３であり；
ｎは、０〜３であり；
並びに、それらの塩及び溶媒和物である］。
【請求項２】
Ａが、Ａ1及びＡ2から成る群から選択される環である、請求項１に記載の化合物：
【化２】
2007535569.tif 000047
｛式中、Ｚ1は、Ｏ、Ｓ、又はＲ5がＨ若しくはアルキルであるＮＲ5であり；Ｚ2は、ＣＨ、ＣＲ2'又はＮであり；Ｒ2は、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル又はアルコキシであり；Ｒ2'は、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル又はアルコキシであり；且つ、ｎは０〜３である。｝
【請求項３】
Ａが、Ｚ1がＳであり且つＺ2がＣＨ又はＮである環Ａ1である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ａが環Ａ2である、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ2又はＲ2’がＣｌ又はＭｅである、請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
ＡがＡ2aである、請求項２に記載の化合物。
【化３】
2007535569.tif 000048
【請求項７】
ＸがＮＲ4Ｃ（Ｏ）である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
ＸがＮＲ4ＳＯ4である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ4がＨ又はＭｅである、請求項７に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ4がＨである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ3がＭｅ又はＦである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ3がＭｅであり、ｍが１又は２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ3がＦであり、ｍが１又は２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
ｍが０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ1が式ＩＩａ〜ＩＩｍから成る群から選択される、請求項１に記載の化合物：
【化４】
2007535569.tif 000049
｛式中、
Ｗは、Ｏ、Ｓ、又はＲ7がＨ又はアルキルであるＮＲ7であり；
Ｒ6は、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル又はアルコキシであり；
且つｏは０〜３である。｝
【請求項１６】
Ｒ1が式ＩＩａの基である、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ6がアルコキシであり、ｏが１又は２である、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ1が式ＩＩａ1〜ＩＩａ28の群から選択される、請求項１６に記載の化合物：
【化５】
2007535569.tif 000050
【請求項１９】
Ａが環Ａ1又はＡ2である、請求項１６に記載の化合物。
【請求項２０】
Ａが環Ａ2である、請求項１６に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｒ3がＭｅ又はＦである、請求項１６に記載の化合物。
【請求項２２】
ｍが０である、請求項３に記載の化合物。
【請求項２３】
ＸがＮＲ4Ｃ（Ｏ）である、請求項３に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｒ1が式ＩＩｂの基である、請求項１５に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒ6がアルキル又はハロアルキルである、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｒ1が式ＩＩｂ1の基である、請求項２４に記載の化合物。
【化６】
2007535569.tif 000051
【請求項２７】
Ａが環Ａ1又はＡ2である、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２８】
Ａが環Ａ2である、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２９】
Ｒ3がＨ、Ｍｅ又はＦである、請求項２４に記載の化合物。
【請求項３０】
Ｒ3がＨである、請求項２４に記載の化合物。
【請求項３１】
ＸがＮＲ4Ｃ（Ｏ）である、請求項２４に記載の化合物。
【請求項３２】
請求項１に記載の化合物及び医薬として許容される担体を含んで成る組成物。
【請求項３３】
有効量の請求項１に記載の化合物を、哺乳動物に投与することを含んで成る、哺乳動物における癌を処置する方法。
【請求項３４】
前記癌が、基底細胞癌、延髄芽細胞腫、膵臓腺癌、小細胞肺癌、乳癌、横紋筋肉腫、食道癌、胃癌、胆道癌である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
有効量の請求項１に記載の化合物を、哺乳動物に投与することを含んで成る、哺乳動物における血管形成を阻害する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この非仮出願は、２００４年４月３０付けで出願された米国特許仮出願第６０／５６６，８４３号に対する優先権を主張する。その全ての開示は、引用文献により本明細書中に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、哺乳動物における治療及び／又は予防に有用な有機化合物に関し、特にヘッジホッグシグナル伝達経路を阻害するキノキサリン化合物に関し、そして過剰増殖疾病及び血管形成介在疾病の処置において有用である。
【背景技術】
【０００３】
ヘッジホッグ（Ｈｈ）タンパク質は、胚パターン形成に関するセグメントポラリティー遺伝子として、キイロショウジョウバエにおいて初めて同定された（Ｎｕｓｓｌｅｉｎ−Ｖｏｌｈａｒｄ他，Ｒｏｕｘ．Ａｒｃｈ．Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．１９３：２６７−２８２（１９８４））。ショウジョウバエヘッジホッグの３つのオルソログ（ソニック、デザート及びインディアン）が、その後同定され、魚、トリ及び哺乳動物を含む全ての脊椎動物において生じる。デザートヘッジホッグ（ＤＨｈ）は、マウスの胚発生並びに成体齧歯動物及びヒトの双方において、主に精巣で発現し；インディアンヘッジホッグ（ＩＨｈ）は、胚発生の間の骨発達及び成体における骨形成に関連し；そして、ソニックヘッジホッグ（ＳＨｈ）は、脊索及び発達する脊椎動物の胚のフロアプレート（ｆｌｏｏｒ ｐｌａｔｅ）において高いレベルで発現する。インビトロでの外植片試験及び遺伝子組み換え動物におけるＳＨｈの異所性発現は、ＳＨｈがニューロンチューブパターン形成において重要な役割を果たすことを示した（Ｅｃｈｅｌａｒｄ他，ｓｕｐｒａ．；Ｅｒｉｃｓｏｎ他，Ｃｅｌｌ ８１：７４７−５６（１９９５）；Ｍａｒｔｉ他，Ｎａｔｕｒｅ ３７５：３２２−５（１９９５）；Ｋｒａｕｓｓ他，Ｃｅｌｌ ７５，１４３２−４４（１９９３）；Ｒｉｄｄｌｅ他，Ｃｅｌｌ ７５：１４０１−１６（１９９３）；Ｒｏｅｌｉｎｋ他，Ｃｅｌｌ ８１：４４５−５５（１９９５）；Ｈｙｎｅｓ他，Ｎｅｕｒｏｎ １９：１５−２６（１９９７））。Ｈｈは、肢（Ｋｒａｕｓｓ他，Ｃｅｌｌ ７５：１４３１−４４（１９９３）；Ｌａｕｆｅｒ他，Ｃｅｌｌ ７９，９９３−１００３（１９９４））、体節（Ｆａｎ ａｎｄ Ｔｅｓｓｉｅｒ−Ｌａｖｉｇｎｅ，Ｃｅｌｌ ７９，１１７５−８６（１９９４）；Ｊｏｈｎｓｏｎ他，Ｃｅｌｌ ７９：１１６５− ７３（１９９４））、肺（Ｂｅｌｌｕｓｃｉ他，Ｄｅｖｅｌｏｐ．１２４：５３−６３（１９９７））、及び皮膚（Ｏｒｏ他，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７６：８１７−２１（１９９７））の発達においても役割を果たす。同様に、ＩＨｈ及びＤＨｈは、骨、腸及び胚の細胞発達に関連する（Ａｐｅｌｑｖｉｓｔ他，Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．７：８０１−４（１９９７）；Ｂｅｌｌｕｓｃｉ他，Ｄｅｖ．Ｓｕｐｐｌ．１２４：５３−６３（１９９７）；Ｂｉｔｇｏｏｄ他，Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．６：２９８−３０４（１９９６）；Ｒｏｂｅｒｔｓ他，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ １２１：３１６３−７４（１９９５））。
【０００４】
ヒトＳＨｈは、正常なヘッジホッグシグナル伝達活性に関与する２０ｋＤａのＮ末端フラグメント；及びＮ末端フラグメントがコレステロール部分と複合する、オートプロセシング活性に関与する２５ｋＤａＣ末端フラグメントを自己触媒開裂によりもたらす、４５ｋＤａの前駆体タンパク質として合成される（Ｌｅｅ，Ｊ．Ｊ．，他（１９９４） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６６，１５２８− １５３６；Ｂｕｍｃｒｏｔ，Ｄ．Ａ．．他（１９９５）,ＭｏＩ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１５，２２９４−２３０３；Ｐｏｒｔｅｒ，Ｊ．Ａ．，他（１９９５）Ｎａｔｕｒｅ ３７４，３６３−３６６）。Ｎ末端フラグメントは、Ｃ末端でコレステロールを通して膜に結合した、完全長前駆体配列のアミノ酸残基２４〜１９７から成る（Ｐｏｒｔｅｒ，Ｊ．Ａ．，他（１９９６）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７４，２５５−２５８；Ｐｏｒｔｅｒ，Ｊ．Ａ．，他（１９９５）Ｃｅｌｌ ８６，２１−３４）。コレステロール複合体は、ヘッジホッグシグナルの組織局在に関与する。
【０００５】
細胞表面では、Ｈｈシグナルは、１２膜貫通ドメインタンパク質Ｐａｔｃｈｅｄ（Ｐｔｃ）（Ｈｏｏｐｅｒ ａｎｄ Ｓｃｏｔｔ，Ｃｅｌｌ ５９：７５１−６５（１９８９）；Ｎａｋａｎｏ他，Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５０８−１３（１９８９））、及びＧタンパク質結合様受容体Ｓｍｏｏｔｈｅｎｅｄ（Ｓｍｏ）（Ａｌｃｅｄｏ他，Ｃｅｌｌ ８６：２２１-２３２（１９９６）；ｖａｎ ｄｅｎ Ｈｅｕｖｅｌ ａｎｄ Ｉｎｇｈａｍ,Ｎａｔｕｒｅ ３８２：５４７−５５１（１９９６））により中継されていると考えられる。遺伝学的及び生化学的証拠の双方は、Ｐｔｃｈ及びＳｍｏが多成分受容体複合体の一部である受容体モデルを支持する（Ｃｈｅｎ ａｎｄ Ｓｔｒｕｈｌ，Ｃｅｌｌ ８７：５５３−６３（１９９６）；Ｍａｒｉｇｏ他，Ｎａｔｕｒｅ ３８４：１７６−９（１９９６）；Ｓｔｏｎｅ他，Ｎａｔｕｒｅ ３８４：１２９−３４（１９９６））。ＨｈのＰｔｃｈへの結合では、Ｓｍｏ上でのＰｔｃｈの正常な阻害効果は解放され、Ｓｍｏが原形質膜を横切るＨｈシグナルを変換するのを可能にする。しかし、ＰｔｃｈがＳｍｏ活性を制御する厳密な機構は、いまだ明らかにされていない。
【０００６】
Ｓｍｏにより開始されるシグナル伝達カスケードは、核に移行するＧｌｉ転写因子の活性化をもたらし、それらは標的遺伝子の転写を制御する。Ｇｌｉは、ネガティブフィードバックループにおいて、Ｐｔｃ及びＨｉｐ１などのＨｈ経路阻害剤の転写に影響することが示され、これはＨｈ経路活性の厳密な制御が適切な細胞分化及び器官形成に必要であることを示している。Ｈｈシグナル伝達経路の制御されていない活性化は、悪性腫瘍、特に脳、皮膚及び筋肉並びに血管形成のものと関連している。これに対する説明は、Ｈｈ経路が、Ｇ１−Ｓ移行に関連するサイクリンＤなどの細胞周期進行に関連する遺伝子の活性化により、成体における細胞増殖を制御することが示されたことである。また、ＳＨｈは、ｐ２１（サイクリン依存性キナーゼの阻害剤）により介在される細胞周期の停止をブロックする。増殖に関連するＥＧＦＲ経路における要素（ＥＧＦ、Ｈｅｒ２）、並びに血管形成に関連するＰＤＧＦ（ＰＤＧＦα）及びＶＥＧＦ経路における要素を誘導することにより、Ｈｈシグナル伝達は更に癌に関わる。Ｐｔｃｈ遺伝子における機能変異の欠損は、基底細胞母斑症候群（ＢＣＮＳ）（多重基底細胞癌（ＢＣＣ）により特徴付けられる遺伝性疾病）を有する患者において同定された。機能不全Ｐｔｃｈ遺伝子変異は、散発性基底細胞癌腫瘍の高いパーセンテージにも関連していた（Ｃｈｉｄａｍｂａｒａｍ他，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５６：４５９９−６０１（１９９６）；Ｇａｉｌａｎｉ他，Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔ．１４：７８−８１（１９９６）；Ｈａｈｎ他．Ｃｅｌｌ ８５：８４１−５１（１９９６）；Ｊｏｈｎｓｏｎ他，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７２：１６６８−７１（１９９６）；Ｕｎｄｅｎ他，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５６：４５６２−５：Ｗｉｃｋｉｎｇ他．Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．６０：２１−６（１９９７））。Ｐｔｃｈ機能の欠損は、基底細胞癌における制御されないＳｍｏシグナル伝達を引き起こすと考えられる。同様に、Ｓｍｏ変異体の活性化は、散発性ＢＣＣ腫瘍において同定され（Ｘｉｅ他，Ｎａｔｕｒｅ ３９１：９０−２（１９９８））、これはＳＨｈのための受容体複合体におけるシグナル伝達サブユニットとしてＳｍｏの役割を強調する。
【０００７】
シクロパミン（Ｇ０−Ｇ１で細胞周期を停止し、ＳＣＬＣにおいてアポトーシスを誘導することが示された、天然のアルカロイド）などの、ヘッジホッグシグナル伝達の様々な阻害剤が研究された。シクロパミンは、そのヘプタヘリカルバンドル（ｈｅｐｔａｈｅｌｉｃａｌ ｂｕｎｄｌｅ）に結合することによりＳｍｏを阻害すると信じられている。ホルスコリンは、Ｇｌｉ転写因子を不活性に保つタンパク質キナーゼＡ（ＰＫＡ）を活性化することにより、ＳｍｏからＨｈ経路の下流を阻害することが示された。これらの及び他の化合物の有利性にもかかわらず、ヘッジホッグシグナル伝達経路の有力な阻害剤への必要性が依然として存在する。
【発明の開示】
【０００８】
本発明の要約
本発明の１つの側面において、一般式（Ｉ）を有する新規のヘッジホッグ阻害剤を提供する
【化１】
2007535569.tif 000003
［式中、
Ａは、炭素環又は複素環であり；
Ｘは、アルキレン、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）、ＮＲ4Ｃ（ＮＨ）、ＮＲ4ＳＯ、ＮＲ4ＳＯ2、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）ＮＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ4、Ｃ（Ｓ）ＮＲ4、Ｃ（ＮＨ）ＮＲ4、ＮＲ4ＰＯ又はＮＲ4ＰＯ（ＯＨ）｛式中、Ｒ4はＨ又はアルキルである｝
Ｙは、Ｎ、ＣＨ又はＣＲ3であり；
Ｒ1は、それぞれがヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル、ハロアルキル又はアルコキシで任意に置換される、アルキル、シクロアルキル、アリール又は複素環から成る群から選択され；且つ、当該シクロアルキル、アリール及び複素環は、任意に−（ＣＨ2）s−（Ｑ）u−（ＣＨ2）t−Ｚ｛式中、Ｑは、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ2、Ｃ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）、ＮＲ4ＳＯ、ＮＲ4ＳＯ2、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）ＮＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ4、又はＣ（Ｓ）ＮＲ4で更に置換され｝；且つ、Ｚは、ヒドロキシル、アミノ、ハロゲン、アルキルスルホニル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、ハロアルキル、炭素環、複素環、或いはヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ若しくはアルコキシアルコキシで置換された炭素環又は複素環であり；且つ、ｓ及びｔは独立して０〜５であり、ｕは０又は１であり；
Ｒ2は、それぞれがヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル又はアルコキシで任意に置換される、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アシル又はアルコキシであり；
Ｒ3は、それぞれがヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル又はアルコキシで任意に置換される、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アシル又はアルコキシであり；ｍは、０〜３であり；
ｎは、０〜３であり；
並びに、それらの塩及び溶媒和物である］。
【０００９】
本発明の別の側面において、式Ｉの化合物及び担体、希釈剤又は賦形剤を含んで成る組成物を提供する。
【００１０】
本発明の別の側面において、有効量の式Ｉの化合物を、癌の処置を必要としている哺乳動物に投与することを含んで成る、癌を処置するための方法を提供する。
【００１１】
本発明の別の側面において、細胞を式Ｉの化合物と接触させることを含んで成る、細胞におけるヘッジホッグシグナル伝達を阻害するための方法を提供する。
【００１２】
本発明の別の側面において、有効量の式Ｉの化合物を哺乳動物に投与することを含んで成る、哺乳動物におけるヘッジホッグシグナル伝達に関連する疾患又は症状を処置するための方法を提供する。
【００１３】
好ましい実施態様の詳細な説明
定義：
「アシル」は、Ｒがアルキル、炭素環、複素環、炭素環アルキル又は複素環アルキル（ここで、アルキル、炭素環及び複素環は、本明細書中で定義した通りである）である、式−Ｃ（Ｏ）−Ｒにより表される置換基を含むカルボニルを意味する。アシル基はとしては、アルカノイル（例えば、アセチル）、アロイル（例えば、ベンゾイル）、及びヘテロアロイルが挙げられる。
【００１４】
「アルキル」は、分岐又は非分岐の、飽和又は不飽和（すなわち、アルケニル、アルキニル）脂肪族炭化水素基（特段の断りのない限り、最大１２の炭素原子を有する）を意味する。別の用語（例えば、「アルキルアミノ」）の一部として用いる場合、アルキル部分は、飽和炭化水素鎖であることができるが、「アルケニルアミノ」及び「アルキニルアミノ」などの不飽和炭化水素鎖も含む。アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソ-ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、２−メチルブチル、２，２−ジメチルプロピル、ｎ−ヘキシル、２−メチルペンチル、２，２−ジメチルブチル、ｎ−ヘプチル、３−ヘプチル、２−メチルヘキシルなどが挙げられる。「低級アルキル」、「Ｃ1〜Ｃ4アルキル」及び「１〜４の炭素原子のアルキル」という用語は同義であり、そして交換可能に用いられてメチル、エチル、１−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、１−ブチル、ｓｅｃ−ブチル又はｔ−ブチルを意味する。断りのない限り、置換アルキル基は、同一又は異なり得る、１、２、３又は４つの置換基を含むことができる。上記の置換アルキル基の例としては、シアノメチル、ニトロメチル、ヒドロキシメチル、トリチルオキシメチル、プロピオニルオキシメチル、アミノメチル、カルボキシメチル、カルボキシエチル、カルボキシプロピル、アルキルオキシカルボニルメチル、アリルオキシカルボニルアミノメチル、カルバモイルオキシメチル、メトキシメチル、エトキシメチル、ｔ−ブトキシメチル、アセトキシメチル、クロロメチル、ブロモメチル、ヨードメチル、トリフルオロメチル、６−ヒドロキシヘキシル、２，４−ジクロロ（ｎ−ブチル）、２−アミノ（イソ−プロピル）、２−カルバモイルオキシエチルなどが挙げられるが、これらに限定されない。アルキル基は、炭素環基で置換することもできる。例としては、シクロプルピルメチル、シクロブチルメチル、シクロペンチルメチル、及びシクロヘキシルメチル基、並びに対応する−エチル、−プロピル、−ブチル、−ペンチル、−ヘキシル基などが挙げられる。置換アルキルとしては、置換メチル、例えば「置換Ｃn〜Ｃmアルキル」基と同一の置換基により置換したメチル基が挙げられる。置換メチル基の例としては、ヒドロキシメチル、保護ヒドロキシメチル（例えば、テトラヒドロピラニルオキシメチル）、アセトキシメチル、カルバモイルオキシメチル、トリフルオロメチル、クロロメチル、カルボキシメチル、ブロモメチル及びヨードメチルなどの基が挙げられる。
【００１５】
「アミジン」は、ＲがＨ又はアルキル又はアラルキルである、基−Ｃ（ＮＨ）−ＮＨＲを意味する。具体的なアミジンは、基−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ）−ＮＨ2である。
【００１６】
「アミノ」は、１級（すなわち、−ＮＨ2）、２級（すなわち、−ＮＲＨ）及び３級（すなわち、−ＮＲＲ）アミンを意味する。２級及び３級アミンとしては、アルキルアミン、ジアルキルアミン、アリールアミン、ジアリールアミン、アラルキルアミン及びジアラルキルアミンが挙げられる。具体的な２級及び３級アミンは、メチルアミン、エチルアミン、プロピルアミン、イソプロピルアミン、フェニルアミン、ベンジルアミン、ジメチルアミン、ジエチルアミン、ジプロピルアミン及びジイソプロピルアミンである。
【００１７】
本明細書中で用いる場合、「アミノ保護基」は、反応が化合物上の他の官能基上で実施される間に、アミノ基をブロック及び保護するために一般的に用いる基の誘導体を指す。このような保護基の例としては、カルバメート、アミド、アルキル及びアリール基、イミン、並びに除去されて所望のアミン基を再生することのできる多くのＮ−ヘテロ原子誘導体が挙げられる。これらの基の更なる例は、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，”Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，２ｎｄ  ｅｄ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ，１９９１，ｃｈａｐｔｅｒ  ７；Ｅ．Ｈａｓｌａｍ，”Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，Ｊ．Ｇ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ，Ｅｄ．，Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ，１９７３，Ｃｈａｐｔｅｒ  ５，及びＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，”Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ，１９８１において見出される。「保護アミノ」という用語は、上記のアミノ保護基の１つで置換したアミノ基を指す。
【００１８】
単独で又は別の用語の一部として用いられる場合の「アリール」は、指定された数の炭素原子、又は数が指定されていない場合は最大で１４個の炭素原子を有する、縮合しているか否かを問わない、炭素環芳香族基を意味する。アリール基としては、フェニル、ナフチル、ビフェニル、フェナントレニル、ナフタセニルなどが挙げられる（例えば、Ｌａｎｇ’ｓ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｄｅａｎ，Ｊ．Ａ．，ｅｄ）１３ｔｈ  ｅｄ．Ｔａｂｌｅ７−２［１９８５］を参照）。特定の実施態様にいおては、アリールはフェニルであることができる。置換フェニル又は置換アリールは、特段の断りのない限り、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アルキル（例えば、Ｃ1〜Ｃ6アルキル）、アルコキシ（例えば、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ）、ベンジルオキシ、カルボキシ、保護カルボキシ、カルボキシメチル、保護カルボキシメチル、ヒドロキシメチル、保護ヒドロキシメチル、アミノメチル、保護アミノメチル、トリフルオロメチル、アルキルスルホニルアミノ、アリールスルホニルアミノ、ヘテロシクリルスルホニルアミノ、ヘテロシクリル、アリール、又は他の特定された基から選択される１、２、３、４又は５（例えば、１〜２、１〜３又は１〜４）の置換基で置換されたフェニル基又はアリール基を意味する。これらの置換基中の１つの又は複数のメチン（ＣＨ）及び／又はメチレン（ＣＨ2）基は、次に、上記で示したのと同様の基で置換することができる。「置換フェニル」という用語の例としては、モノ−又はジ（ハロ）フェニル基、例えば２−クロロフェニル、２−ブロモフェニル、４−クロロフェニル、２，６−ジクロロフェニル、２，５−ジクロロフェニル、３，４−ジクロロフェニル、３−クロロフェニル、３−ブロモフェニル、４−ブロモフェニル、３，４−ジブロモフェニル、３−クロロ−４−フルオロフェニル、２−フルオロフェニルなど；モノ−又はジ（ヒドロキシ）フェニル基、例えば４−ヒドロキシフェニル、３−ヒドロキシフェニル、２，４−ジヒドロキシフェニル、それらの保護ヒドロキシ誘導体など；ニトロフェニル基、例えば３−又は４−ニトロフェニル；シアノフェニル基、例えば４−シアノフェニル；モノ−又はジ（低級アルキル）フェニル基、例えば４−メチルフェニル、２，４−ジメチルフェニル、２−メチルフェニル、４−（イソ−プロピル）フェニル、４−エチルフェニル、３−（ｎ−プロピル）フェニルなど；モノ−又はジ（アルコキシ）フェニル基、例えば３，４−ジメトキシフェニル、３−メトキシ−４−ベンジルオキシフェニル、３−メトキシ−４−（１−クロロメチル）ベンジルオキシ−フェニル、３−エトキシフェニル、４−（イソプロポキシ）フェニル、４−（ｔ−ブトキシ）フェニル、３−エトキシ−４−メトキシフェニルなど；３−又は４−トリフルオロメチルフェニル；モノ−又はジカルボキシフェニル又は（保護カルボキシ）フェニル基、例えば４−カルボキシフェニル、；モノ−又はジ（ヒドロキシメチル）フェニル又は（保護ヒドロキシメチル）フェニル、例えば３−（保護ヒドロキシメチル）フェニル又は３，４−ジ（ヒドロキシメチル）フェニル；モノ−又はジ（アミノメチル）��ェニル又は（保護アミノメチル）フェニル、例えば２−（アミノメチル）フェニル又は２，４−（保護アミノメチル）フェニル；又は、モノ−もしくはジ（Ｎ−（メチルスルホニルアミノ））フェニル、例えば３−（Ｎ−メチルスルホニルアミノ）フェニルが挙げられるが、これらに限定されない。また、「置換フェニル」という用語は、置換基の異なる２置換フェニル基、例えば、３−メチル−４−ヒドロキシフェニル、３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル、２−メトキシ−４−ブロモフェニル、４−エチル−２−ヒドロキシフェニル、３−ヒドロキシ−４−ニトロフェニル、２−ヒドロキシ−４−クロロフェニルなど、及び置換基の異なる３置換フェニル基、例えば、３−メトキシ−４−ベンジルオキシ−６−メチルスルホニルアミノ、３−メトキシ−４−ベンジルオキシ−６−フェニルスルホニルアミノ、及び置換基の異なる４置換フェニル基、例えば３−メトキシ−４−ベンジルオキシ−５−メチル−６−フェニルスルホニルアミノを表す。置換フェニル基としては、２−クロロフェニル、２−アミノフェニル、２−ブロモフェニル、３−メトキシフェニル、３−エトキシ−フェニル、４−ベンジルオキシフェニル、４−メトキシフェニル、３−エトキシ−４−ベンジルオキシフェニル、３，４−ジエトキシフェニル、３−メトキシ−４−ベンジルオキシフェニル、３−メトキシ−４−（１−クロロメチル）ベンジルオキシ−フェニル、３，４−ジエトキシフェニル、３−メトキシ−４−ベンジルオキシフェニル、３−メトキシ−４−（１−クロロメチル）ベンジルオキシ−フェニル、３−メトキシ−４−（１−クロロメチル）ベンジルオキシ−６−メチルスルホニルアミノフェニル基が挙げられる。縮合アリール環は、置換アルキル基と同じ方法において、本明細書中で特定された任意（例えば、１、２又は３）の置換基で置換することもできる。
【００１９】
単独の及びカルボシクロアルキル基などの複合基中の部分として用いる場合の「カルボシクリル」、「炭素環式」、「炭素環」及び「カルボシクロ」は、飽和又は不飽和、芳香族又は非芳香族であることができ、且つ架橋することのできる、３〜１４個の炭素原子（例えば、３〜７個の炭素原子）を有する単環式、二環式、又は三環式脂肪族環を指す。飽和炭素環基としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロへキシル基が挙げられる。特定の実施態様において、炭素環基は、シクロプロピル及びシクロヘキシルである。別の特定の実施態様において、炭素環基はシクロヘキシルである。不飽和炭素環としては、芳香族、前に規定した例えばフェニルのような、例えばアリール基が挙げられる。「置換カルボシクリル」、「炭素環」及び「カルボシクロ」という用語は、「置換アルキル」基と同じ置換基により置換されたこれらの基を意味する。
【００２０】
本明細書中で用いる場合、「カルボキシ保護基」は、反応が化合物上の他の官能基上で実施される間に、カルボン酸基をブロック又は保護するために一般的に用いるカルボン酸基のエステル誘導体の１つを指す。このようなカルボン酸保護基の例としては、４−ニトロベンジル、４−メトキシベンジル、３，４−ジメトキシベンジル、２，４−ジメトキシベンジル、２，４，６−トリメトキシベンジル、２，４，６−トリメチルベンジル、ペンタメチルベンジル、３，４−メチレンジオキシベンジル、ベンズヒドリル、４，４’−ジメトキシベンズヒドリル、２，２’，４，４’−テトラメトキシベンズヒドリル、アルキル、例えばｔ−ブチル又はｔ−アミル、トリチル、４−メトキシトリチル、４，４’−ジメトキシトリチル、４，４’，４’’−トリメトキシトリチル、２−フェニルプロップ−２−イル、トリメチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、フェナシル、２，２，２−トリクロロエチル、ベータ−（トリメチルシリル）エチル、ベータ−（ジ（ｎ−ブチル）メチルシリル）エチル、ｐ−トルエンスルホニルエチル、４−ニトロベンジルスルホニルエチル、アリル、シナミル（ｃｙｎｎａｍｙｌ）、１−（トリメチルシリルメチル）プロップ−１−エン−３−イル、などの部分が挙げられる。誘導体化カルボン酸が、分子の他の位置におけるその後の反応の条件に対して安定であり、適切な時点で分子の残りの部分を崩壊することなく取り除くことができる限り、用いるカルボキシ保護基の種は重要でない。特に、カルボキシ保護分子を強求核塩基又はラネーニッケルなどの高度に活性化された金属触媒を用いる還元条件にかけないことが重要である。（このような厳しい分離条件は、以下で議論した、アミノ保護基及びヒドロキシ保護基を分離する際に避けることもできる。）カルボン酸保護基としては、アリル及びｐ−ニトロベンジル基が挙げられる。セファロスポリン、ペニシリン及びペプチドの技術において用いられる類似のカルボキシ保護基を、カルボキシ基置換基を保護するのに用いることもできる。これらの基の更なる例は、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，”Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，２ｎｄ ｅｄ．，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，１９９１，ｃｈａｐｔｅｒ５；Ｅ．Ｈａｓｌａｍ，”Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，Ｊ．Ｇ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ，Ｅｄ．，Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，１９７３，Ｃｈａｐｔｅｒ ５，及びＴ．Ｗ． Ｇｒｅｅｎｅ，”Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ，１９８１，Ｃｈａｐｔｅｒ５において見出される。「保護カルボキシ」という用語は、上記のカルボキシ保護基の１つで置換したカルボキシ基を指す。
【００２１】
「グアニジン」は、はＲがＨ又はアルキル又はアラルキルである、基−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ）−ＮＨＲを意味する。具体的なグアニジン基は、−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ）−ＮＨ2である。
【００２２】
単独の及びヘテロシクロアルキル基などの複合基における部分として用いる場合の「複素環基」、「複素環式」、「複素環」、「ヘテロシクリル」、又は「ヘテロシクロ」は、交換可能に用いられ、環原子が炭素及び少なくとも１つのヘテロ原子（窒素、硫黄又は酸素）である（例えば１〜４個のヘテロ原子）、指定された数の原子（例えば５〜１４個の環原子）を有する、任意の単環式、二環式、又は三環式の、飽和又は不飽和の、芳香族（ヘテロアリール）又は非芳香族環を指す。典型的には、５−員環は０〜２個の二重結合を有し、６−又は７−員環は０〜３個の二重結合を有し、窒素又は硫黄ヘテロ原子は任意に酸化することができる（例えば、ＳＯ、ＳＯ2）、そして任意の窒素ヘテロ原子は任意に四級化することができる。非芳香族複素環としては、モルホリニル（モルホリノ）、ピロリジニル、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、２，３−ジヒドロフラニル、２Ｈ−ピラニル、テトラヒドロピラニル、チイラニル、チエタニル、テトラヒドロチエタニル、アジリジニル、アゼチジニル、１−メチル−２−ピロリル、ピペラジニル及びピペリジニルが挙げられる。「ヘテロシクロアルキル」基は、上記で定義したアルキル基と共有結合した、上記に定義した複素環基である。硫黄又は酸素原子及び１〜３個の窒素原子を含む５員複素環としては、チアゾリル、例えばチアゾリル−２−イル及びチアゾリル−２−イルＮオキシド、チアジアゾリル、例えば１，３，４−チアジアゾール５−イル及び１，２，４−チアジアゾール５−イル、オキサゾリル、例えばオキサゾール２−イル、及びオキサジアゾリル、例えば１，３，４−オキサジアゾール５−イル、及び１，２，４−オキサジアゾール５−イルが挙げられる。２〜４個の窒素原子を含む５−員環複素環としては、イミダゾリル、例えばイミダゾール２−イル；チアゾリル、例えば１，３，４−トリアゾール５−イル；１，２，３−トリアゾール５−イル、１，２，４−トリアゾール５−イル、及びテトラゾリル、例えば１Ｈ−テトラゾール５−イルが挙げられる。ベンゾ縮合５員複素環としては、ベンズオキサゾール２−イル、ベンズチアゾール２−イル及びベンズイミダゾール２−イルが挙げられる。１〜３個の窒素原子及び任意に硫黄または酸素原子を含む６員複素環としては、ピリジル、例えばピリド−２−イル、ピリド−３−イル、及びピリド−４−イル；ピリミジル、例えばピリミド−２−イル及びピリミド−４−イル；トリアジニル、例えば１，３，４−トリアジン−２−イル及び１，３，５−トリアジン−４−イル；ピリダジニル、例えばピリダジン−３−イル、及びピラジニルが挙げられる。特定の実施態様において、６員複素環としては、ピリジンＮ−オキシド及びピリダジンＮ−オキシド並びにピリジル、ピリミド−２−イル、ピリミド−４−イル、ピリダジニル及び１，３，４−トリアジン−２−イル基が挙げられる。任意に置換した複素環のための置換基、及び上記で議論した５−及び６−員環系の更なる例は、Ｗ．Ｄｒｕｃｋｈｅｉｍｅｒ他，米国特許第４，２７８，７９３号中に見出すことができる。
【００２３】
単独の及びヘテロアルキル基などの複合基中の部分として用いる場合の「ヘテロアリール」は、少なくとも１つの環が、窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を含む５−、６−又は７−員環である、指定された数の原子を有する任意の単環式、二環式、又は三環式芳香族環系を指す。特定の実施態様において、ヘテロアリール基は少なくとも１つのヘテロ原子を含む（Ｌａｎｇ’ｓ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｓｕｐｒａ）。任意の上記のヘテロアリール環がベンゼン環に縮合したニ環式基は、定義に含まれる。特定の実施態様において、ヘテロアリールは、少なくとも１つの窒素及び／又は酸素ヘテロ原子を組み込む。以下の環系は、「ヘテロアリール」という用語により示されるヘテロアリール（置換又は非置換されることができる）基の例である；チエニル、フリル、イミダゾリル、ピラゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、テトラゾリル、チアトリアゾリル、オキサトリアゾリル、ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、チアジニル、オキサジニル、トリアジニル、チアジアジニル、オキサジアジニル、ジチアジニル、ジオキサジニル、オキサチアジニル、テトラジニル、チアトリアジニル、オキサトリアジニル、ジチアジアジニル、イミダゾリニル、ジヒドロピリミジル、テトラヒドロピリミジル、テトラゾロ［１，５−ｂ］ピリダジニル及びプリニル、並びにベンゾ縮合誘導体、例えばベンゾオキサゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾイミダゾリル及びインドリル。特定の実施態様において、「ヘテロアリール」としては、１，３−チアゾール２−イル、４−（カルボキシメチル）−５−メチル−１，３−チアゾール２−イル、４−（カルボキシメチル）−５−メチル−１，３−チアゾール２−イル ナトリウム塩、１，２，４−チアジアゾール５−イル、３−メチル−１，２，４−チアジアゾール５−イル、１，３，４−トリアゾール５−イル、２−メチル−１，３，４−トリアゾール５−イル、２−ヒドロキシ−１，３，４−トリアゾール５−イル、２−カルボキシ−４−メチル−１，３，４−トリアゾール５−イル ナトリウム塩、２−カルボキシ−４−メチル−１，３，４−トリアゾール５−イル、１，３−オキサゾール２−イル、１，３，４−オキサジアゾール５−イル、２−メチル−１，３，４−オキサジアゾール５−イル、２−（ヒドロキシメチル）−１，３，４−オキサジアゾール５−イル、１，２，４−オキサジアゾール５−イル、１，３，４−チアジアゾール５−イル、２−チオール−１，３，４−チアジアゾール５−イル、２−（メチルチオ）−１，３，４−チアジアゾール５−イル、２−アミノ−１，３，４−チアジアゾール５−イル、１Ｈ−テトラゾール５−イル、１−メチル−１Ｈ−テトラゾール５−イル、１−（１−（ジメチルアミノ）ｅｔｈ−２−イル）−１Ｈ−テトラゾール５−イル、１−（カルボキシメチル）−１Ｈ−テトラゾール５−イル、１−（カルボキシメチル）−１Ｈ−テトラゾール５−イル ナトリウム塩、１−（メチルスルホン酸）−１Ｈ−テトラゾール５−イル、１−（メチルスルホン酸）−１Ｈ−テトラゾール５−イル ナトリウム塩、２−メチル−１Ｈ−テトラゾール５−イル、１，２，３−トリアゾール５−イル、１−メチル−１，２，３−トリアゾール５−イル、２−メチル−１，２，３−トリアゾール５−イル、４−メチル−１，２，３−トリアゾール５−イル、ピリド−２−イル Ｎ−オキシド、６−メトキシ−２−（ｎ−オキシド）−ピリダゾ−３−イル、６−ヒドロキシピリダゾ−３−イル、１−メチルピリド−２−イル、１−メチルピリド−４−イル、２−ヒドロキシピリミド−４−イル、１，４，５，６−テトラヒドロ−５，６−ジオキソ４−メチル−ａｓ−トリアジン−３−イル、１，４，５，６−テトラヒドロ−4−（ホルミルメチル）−５，６−ジオキソ−ａｓ−トリアジン−３−イル、２，５−ジヒドロ−５−オキソ−６−ヒドロキシ−ａｓトリアジン−３−イル、２，５−ジヒドロ−５−オキソ−６−ヒドロキシ−ａｓ−トリアジン−３−イル ナトリウム塩、２，５−ジヒドロ−５−オキソ−６−ヒドロキシ−２−メチル−ａｓトリアジン−３−イル ナトリウム塩、２，５−ジヒドロ−５−オキソ−６−ヒドロキシ−２−メチル−ａｓ−トリアジン−３−イル、２，５−ジヒドロ−５−オキソ−６−メトキシ−２−メチル−ａｓ−トリアジン−３−イル、２，５−ジヒドロ−５−オキソ−ａｓ−トリアジン−３−イル、２，５−ジヒドロ−５−オキソ−２−メチル−ａｓ−トリアジン−３−イル、２，５−ジヒドロ−５−オキソ−２，６−ジメチル−ａｓ−トリアジン−３−イル、テトラゾロ[１，５−ｂ]ピリダジン−６−イル及びＳ−アミノテトラゾロ[１，５−ｂ]−ピリダジン−６−イルが挙げられる。或いは、「ヘテロアリール」基としては、４−（カルボキシメチル）−５−メチル−１，３−チアゾール２−イル、４−（カルボキシメチル）−５−メチル−１，３−チアゾール２−イル ナトリウム塩、１，３，４−トリアゾール５−イル、２−メチル−１，３，４−トリアゾール５−イル、１Ｈ−テトラゾール５−イル、１−メチル−１Ｈ−テトラゾール５−イル、１−（１−（ジメチルアミノ）ｅｔｈ−２−イル）−１Ｈ−テトラゾール５−イル、１−（カルボキシメチル）−１Ｈ−テトラゾール５−イル、１−（カルボキシメチル）−１Ｈ−テトラゾール５−イル ナトリウム塩、１−（メチルスルホン酸）−１Ｈ−テトラゾール５−イル、１−（メチルスルホン酸）−１Ｈ−テトラゾール５−イル ナトリウム塩、１，２，３−トリアゾール５−イル、１，４，５，６−テトラヒドロ−５，６−ジオキソ−４−メチル−ａｓ−トリアジン−３−イル、１，４，５，６−テトラヒドロ−４−（２−ホルミルメチル）−５，６−ジオキソ−ａｓ−トリアジン−３−イル、２，５−ジヒドロ−５−オキソ−６−ヒドロキシ−２−メチル−ａｓ−トリアジン−３−イル ナトリウム塩、２，５−ジヒドロ−５−オキソ−６−ヒドロキシ−２−メチル−ａｓ−トリアジン−３−イル、テトラゾロ[１，５−ｂ]ピリダジン−６−イル、及び８−アミノテトラゾロ[１，５−ｂ]ピリダジン−６−イルが挙げられる。
【００２４】
本明細書中で用いる場合、「ヒドロキシ保護基」は、反応が化合物上の他の官能基上で実施される間に、ヒドロキシ基をブロック又は保護するために一般的に用いるヒドロキシ基の誘導体を指す。このような保護基の例としては、テトラヒドロピラニルオキシ、アセトキシ、カルバモイルオキシ、トリフルオロ、クロロ、カルボキシ、ブロモ及びヨード基が挙げられる。これらの基の更なる例は、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，”Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，２ｎｄ  ｅｄ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ，１９９１，ｃｈａｐｔｅｒｓ２−３；Ｅ．Ｈａｓｌａｍ，”Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，Ｊ．Ｇ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ，Ｅｄ．，Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ，１９７３，Ｃｈａｐｔｅｒ５、及びＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，”Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ，１９８１に見出される。「保護ヒドロキシ」という用語は、上記のもののようなヒドロキシ保護基で置換したヒドロキシ基を指す。
【００２５】
「医薬として許容される塩」としては、酸及び塩基付加塩の双方を挙げられる。「医薬として許容される酸付加塩」は、無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、炭酸、リン酸など、及び有機酸の脂肪族、脂環式、芳香族、芳香脂肪族（ａｒａｌｉｐｈａｔｉｃ）、複素環式、カルボン酸、スルホン酸のクラスから選択することのできる有機酸、例えばギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸（ｍａｌｏｎｅｉｃ ａｃｉｄ）、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、グルタミン酸、アントラニル酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、エンボン酸（ｅｍｂｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸などにより形成される、生物学的効果及び遊離塩基の特性を保持し、生物学的に又は他に好ましくなくはない塩を指す。
【００２６】
「医薬として許容される塩基付加塩」としては、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウムの塩などの無機塩基から誘導されたものを挙げられる。特別の塩は、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、カルシウム及びマグネシウムの塩である。医薬として許容された無毒の有機塩基から誘導された塩としては、１級、２級及び３級アミン、置換アミン、例えば天然の置換アミン、環状アミン類及び塩基性イオン交換樹脂、例えばイソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２-ジエチルアミノエタノール、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン（ｈｙｄｒａｂａｍｉｎｅ）、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペリジン（ｐｉｐｅｒｉｚｉｎｅ）、ピペリジン、Ｎ-エチルピペリジン、ポリアミン樹脂などの塩が挙げられる。特定の実施態様において、無毒の有機塩基は、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、コリン、及びカフェインである。
【００２７】
本明細書中で用いる場合、「及びそれらの塩及び溶媒和物」という語句は、本発明の化合物が１又は複数の塩又は溶媒和物の形態で存在し得ることを意味する。例えば、本発明の化合物は、１つの特定の塩又は溶媒和物の形態において実質的に純粋であることができ、或いは２つ以上の塩又は溶媒和物の形態の混合物であることができる。
【００２８】
本発明は、一般式Ｉを有する新規の化合物を提供する：
【化２】
2007535569.tif 000004
｛式中、Ａ、Ｘ、Ｙ、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は、本明細書中に定義した通りである。｝
【００２９】
Ａは、それぞれがヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル又はアルコキシで任意に置換される、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アシル又はアルコキシから成る群から選択される、０〜３（例えば、ｎは０〜３である）個のＲ2基で置換された炭素環又は複素環である。特定の実施態様において、Ａは任意に置換されるアリール又はヘテロアリールである。特定の実施態様において、Ａは、任意に置換されるベンゼン、チオフェン、チアゾール、イミダゾール、ピロール、Ｎ−アルキルピロール、ピラゾール又はＮ−アルキルピラゾールである。特定の実施態様において、Ａは、Ａ1及びＡ2から成る群から選択される環である：
【化３】
2007535569.tif 000005
｛式中、Ｚ1は、Ｏ、Ｓ、又はＲ5がＨ若しくはアルキルであるＮＲ5であり；Ｚ2は、ＣＨ、ＣＲ2'又はＮであり；Ｒ2は、それぞれがヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル又はアルコキシで任意に置換される、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アシル又はアルコキシであり；Ｒ2'は、それぞれがヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル又はアルコキシで任意に置換される、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アシル又はアルコキシであり；且つ、ｎは０〜３である。｝特定の実施態様において、Ａは、式Ａ1の環である。特定の実施態様において、Ａは、Ｚ1がＳであり、Ｚ2がＣＨ又はＮである環Ａ1である。別の実施態様において、Ｚ1はＳであり、Ｚ2はＣＨである（すなわち、チオフェン）。別の実施態様において、Ｚ1はＳであり、Ｚ2はＮである（すなわち、チアゾール）。特定の実施態様において、Ｒ2'はＨである。特定の実施態様において、Ｒ2'はメチルである。別の特定の実施態様において、Ａは式Ａ2の環である。特定の実施態様において、Ｒ2'はメチルである。特定の実施態様において、Ａは環Ａ2である。このような実施態様において、Ｒ2は存在しないことができる（すなわち、ｎは０である）。別の実施態様において、ｎは１であり、Ｒ2はＣｌである。特定の実施態様において、Ａは環Ａ1a、Ａ1b又はＡ2aである：
【化４】
2007535569.tif 000006
【００３０】
特定の実施態様において、Ａは式Ａ1aの環である。別の実施態様において、Ａは式Ａ1bの環である。別の実施態様において、Ａは式Ａ2aの環である。
【００３１】
Ｘは、アルキレン、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）、ＮＲ4Ｃ（ＮＨ）、ＮＲ4ＳＯ、ＮＲ4ＳＯ2、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）ＮＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ4、Ｃ（Ｓ）ＮＲ4、Ｃ（ＮＨ）ＮＲ4、ＮＲ4ＰＯ又はＮＲ4ＰＯ（ＯＨ）｛式中、Ｒ4はＨ又はアルキルである｝である。或いは、Ｘは、アルキレン、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）、ＮＲ4ＳＯ、ＮＲ4ＳＯ2、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）ＮＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ4、Ｃ（Ｓ）ＮＲ4、ＮＲ4ＰＯ又はＮＲ4ＰＯ（ＯＨ）｛式中、Ｒ4はＨ又はアルキルである｝である。特定の実施態様において、Ｘは、環Ａ及びＲ1の間にアミド結合を形成するＮＲ4Ｃ（Ｏ）である。特定の実施態様において、Ｘは、環Ａ及びＲ1の間にアミジン結合を形成するＮＲ4Ｃ（ＮＨ）である。別の実施態様において、Ｘは、環Ａ及びＲ1の間にチオアミド結合を形成するＮＲ4Ｃ（Ｓ）である。別の実施態様において、Ｘは、環Ａ及びＲ1の間に尿素結合を形成するＮＲ4Ｃ（Ｏ）ＮＨである。別の実施態様において、Ｘは、ＮＲ2と共に、環Ａ及びＲ1の間にチオ尿素結合を形成するＮＲ4Ｃ（Ｓ）ＮＨである。
【００３２】
Ｙは、Ｎ、ＣＨ又はＣＲ3である。特定の実施態様において、Ｙは、ＣＨ又はＣＲ3である。別の実施態様において、ＹはＣＨである。別の実施態様において、ＹはＮである。
【００３３】
Ｒ1は、それぞれがヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル、ハロアルキル又はアルコキシで任意に置換される、アルキル、シクロアルキル、アリール又は複素環から成る群から選択され；且つ、当該シクロアルキル、アリール及び複素環は、任意に−（ＣＨ2）s−（Ｑ）u−（ＣＨ2）t−Ｚ｛式中、Ｑは、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ2、Ｃ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）、ＮＲ4ＳＯ、ＮＲ4ＳＯ2、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）ＮＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ4、又はＣ（Ｓ）ＮＲ4である｝で更に置換され；且つ、Ｚは、ヒドロキシル、アミノ、ハロゲン、アルキルスルホニル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、ハロアルキル、炭素環、複素環、或いはヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ若しくはアルコキシアルコキシで置換された炭素環又は複素環であり；且つ、ｓ及びｔは独立して０〜５であり、ｕは０又は１である。或いは、それぞれがヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル又はアルコキシで任意に置換される、シクロアルキル、アリール又は複素環から成る群から選択される。
【００３４】
特定の実施態様において、Ｒ1は、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル、ハロアルキル又はアルコキシで任意に置換される、シクロアルキル、アリール又は複素環であり；且つ、当該シクロアルキル、アリール及び複素環は、−（ＣＨ2）s−（Ｑ）u−（ＣＨ2）t−Ｚ｛式中、Ｑは、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ2、Ｃ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）、ＮＲ4ＳＯ、ＮＲ4ＳＯ2、ＮＲ4Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＮＲ4Ｃ（Ｓ）ＮＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ4、又はＣ（Ｓ）ＮＲ4である｝で更に置換され；且つ、Ｚは、ヒドロキシル、アミノ、ハロゲン、アルキルスルホニル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、ハロアルキル、炭素環、複素環、或いはヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ若しくはアルコキシアルコキシで置換された炭素環又は複素環であり；且つ、ｓ及びｔは独立して０〜５であり、ｕは０又は１である。
【００３５】
特定の実施態様において、ＱはＣ（Ｏ）である。別の実施態様において、ＱはＣ（Ｏ）ＮＨである。別の実施態様において、ＱはＣ（Ｏ）Ｏである。別の実施態様において、ＱはＳＯ2である。別の実施態様において、ＱはＳＯ2ＮＨである。別の実施態様において、ＱはＮＨである。１つの実施態様において、ｓは０である。別の実施態様において、ｓは０〜３である。１つの実施態様において、ｔは０である。別の実施態様において、ｔは０〜３である。１つの実施態様において、ｕは０である。別の実施態様において、ｕは１である。
【００３６】
特定の実施態様において、Ｚは、ピペリジン、ピペラジン、ピロリジン、モルホリノ、ピラゾール、トリアゾール、ピロリドン、イミダゾール及びチオモルホリンから成る群から選択される炭素環又は複素環である。特定の実施態様において、Ｚは、ピペリジン−１−イル、４−ヒドロキシ−ピペリジン−ｌ−イル、Ｎ−メチル−ピペリジン−４−イル、ピペラジン−１−イル、Ｎ−メチル−ピペラジン−１−イル、Ｎ−エチル−ピペラジン−１−イル、Ｎ−アセチル−ピペラジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、３，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル、モルホリン−１−イル、チオモルホリン−１−イル、３，５−ジメチル−モルホリン−ｌ−イル、Ｎ−ヒドロキシエチル−ピペラジン−１−イル、ピラゾール−１−イル、１，２，４−トリアゾール−ｌ−イル、ピロリド−２−オン−ｌ−イル及びイミダゾール−５−イルから成る群から選択される炭素環又は複素環である。別の特定の実施態様において、Ｚは、ヒドロキシ、ジメチルアミノ、ＣＦ3、メトキシカルボニル又はメトキシである。
【００３７】
或いは、Ｒ1は、それぞれがヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル又はアルコキシで任意に置換される、シクロアルキル、アリール又は複素環から成る群から選択される。特定の実施態様において、Ｒ1は、任意に置換されるアリール又はヘテロアリールである。特定の実施態様において、Ｒ1は、任意に置換されるフェニル基である。別の特定の実施態様において、Ｒ1は、任意に置換されるピリジン基である。特定の実施態様において、Ｒ1は、式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩｃ、ＩＩｄ、ＩＩｅ、ＩＩｆ、ＩＩｇ、ＩＩｈ、ＩＩｉ、ＩＩｊ、ＩＩｋ、ＩＩｌ又はＩＩｍである：
【化５】
2007535569.tif 000007
【化６】
2007535569.tif 000008
｛式中、Ｗは、Ｏ、Ｓ、又はＲ7がＨ又はアルキルであるＮＲ7であり；Ｒ6は、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル又はアルコキシであり；且つｏは０〜３である｝。特定の実施態様において、ＷはＳである。特定の実施態様において、Ｒ1は、式ＩＩａの基である。このような実施態様において、Ｒ6はアルコキシであることができ、ｏは、１、２又は３である。特定のＩＩａ基は、ＩＩａ1〜ＩＩａ28である；
【化７】
2007535569.tif 000009
【化８】
2007535569.tif 000010
【００３８】
別の特定の実施態様において、Ｒ1は、式ＩＩｂの基である。このような実施態様において、Ｒ6はアルキル又はハロアルキル（例えば、ＣＦ3）であることができる。特定のＩＩｂ基は、ＩＩｂ1〜ＩＩｂ3である；
【化９】
2007535569.tif 000011
【００３９】
特定の実施態様において、Ｒ1は、式ＩＩｃの基である。このような実施態様において、ＷはＳであることができ、ｏは０である。別の特定の実施態様において、Ｒ1は、式ＩＩｄの基である。このような実施態様において、ｏは０であることができる。別の特定の実施態様において、Ｒ1は、式ＩＩｅの基である。このような実施態様において、ｏは０であることができる。別の特定の実施態様において、Ｒ1は、式ＩＩfの基である。このような実施態様において、ｏは０であることができる。
【００４０】
Ｒ2は、それぞれがヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、アルキル、アシル、アルキルスルホニル又はアルコキシで任意に置換される、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アシル又はアルコキシである。ｎは０〜３、例えば０又は１である。特定の実施態様において、Ｒ2はヒドロキシルである。特定の実施態様において、Ｒ2は、アルキル、又はハロゲン、メチル若しくはトリフルオロメチルで置換したアルキルである。特定の実施態様において、Ｒ2はアシル、例えばアルカノイル（例えば、アセチル）である。特定の実施態様において、Ｒ2はハロゲン、例えばＣｌ又はＦである。別の特定の実施態様において、Ｒ2はアルコキシ、例えばメトキシ又はエトキシである。
【００４１】
Ｒ3は、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、ハロアルキル、アシル又はアルコキシであり；且つ、ｍは０〜３である。特定の実施態様において、ｍは０である（すなわち、Ｒ3は存在しない）。別の特定の実施態様において、ｍは１〜３であり、Ｒ3はハロゲン（例えば、Ｆ）又はアルキル（例えば、メチル）である。
【００４２】
本発明の特定の化合物としては、以下のものが挙げられるがこれらに限定されない：
【化１０】
2007535569.tif 000012
【化１１】
2007535569.tif 000013
【化１２】
2007535569.tif 000014
【化１３】
2007535569.tif 000015
【化１４】
2007535569.tif 000016
【化１５】
2007535569.tif 000017
【化１６】
2007535569.tif 000018
【化１７】
2007535569.tif 000019
【化１８】
2007535569.tif 000020
【化１９】
2007535569.tif 000021
【化２０】
2007535569.tif 000022
【化２１】
2007535569.tif 000023
【化２２】
2007535569.tif 000024
【化２３】
2007535569.tif 000025
【化２４】
2007535569.tif 000026
【化２５】
2007535569.tif 000027
【化２６】
2007535569.tif 000028
【００４３】
本発明の化合物は、１又は複数の不斉炭素原子を含むことができる。従って、これらの化合物は、ジアステレオマー、エナンチオマー又はそれらの混合物として存在することができる。これらの化合物の合成は、出発物質又は中間体として、ラセミ酸塩、ジアステレオマー又はエナンチオマーを用いることができる。ジアステレオマー化合物は、クロマトグラフィー法又は結晶化法により分離することができる。同様に、エナンチオマー混合物は、同一の技術又は当業界で知られた他のものを用いて分離することができる。それぞれの不斉炭素原子は、Ｒ又はＳ配置において存在することができ、これらの配置の双方は本発明の範囲内である。
【００４４】
本発明は、上記の化合物のプロドラッグも包含する。適切なプロドラッグとしては、解放されて（例えば、加水分解されて）、生理学的条件下で親化合物を生み出す、既知のアミノ保護及びカルボキシ保護基が挙げられる。プロドラッグの特定のクラスは、アミノ、アミジノ、アミノアルキレンアミノ、イミノアルキレンアミノ又はグアニジノ基中の窒素原子が、ヒドロキシ（ＯＨ）基、アルキルカルボニル（−ＣＯ−Ｒ）基、アルコキシカルボニル（−ＣＯ−ＯＲ）、アシルオキシアルキル−アルコキシカルボニル（−ＣＯ−Ｏ−Ｒ−Ｏ−ＣＯ−Ｒ）基（式中、Ｒは、一価又はニ価の基及び上記で定義した通りである）、又は式−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＰ１Ｐ２−ハロアルキルを有する基（式中、Ｐ１及びＰ２は、同一であるか又は異なっており、Ｈ、低級アルキル、低級アルコキシ、シアノ、ハロ低級アルキル又はアリールである）で置換された化合物である。プロドラッグ化合物は、上記の本発明の化合物を活性化アシル化合物と反応させて、本発明の化合物中の窒素原子を活性化アシル化合物のカルボニルと結合させることにより調製することができる。適切な活性化カルボニル化合物は、カルボニル炭素に結合した優れた脱離基含み、アシルハロゲン化物、アシルアミン、アシルピリジニウム塩、アシルアルコキシド、特にアシルフェノキシド、例えばｐ−ニトロフェノキシアシル、ジニトロフェノキシアシル、フルオロフェノキシアシル、及びジフルオロフェノキシアシルを含む。反応は一般的に発熱であり、不活性溶媒中で低温、例えば−７８〜約５０Ｃで実施する。反応は、通常炭酸カリウムまたは重炭酸ナトリウムなどの無機塩基、又はアミン（例えば、ピリジン、トリエチルアミンなど）などの有機塩基の存在下でも実施する。プロドラッグを調整する１つの方法は、１９９７年４月１５日に出願されたＵＳＳＮ０８／８４３，３６９（ＰＣＴ公開ＷＯ９８４６５７６に対応する）に記載され、その内容は、その全てが引用文献により本明細書中に組み込まれる。
【００４５】
合成
本発明の化合物は、商業的に入手可能な出発物質から標準的な有機合成法を用いて調製する。本発明の化合物の調製において用いる合成手順は化合物中に存在する特定の置換基に依存し、有機合成において標準的であるように様々な保護及び脱保護手順が必要であり得ることが理解されるだろう。ＸがＮＲ4Ｃ（Ｏ）である本発明の化合物は、一般的なスキーム１に従って調製することができる。
【化２７】
2007535569.tif 000029
【００４６】
アミン出発物質は適切な酸塩化物Ｃｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1によりアシル化し、次に得られる化合物を酢酸及び臭化水素酸の混合物中でＢｒ2を用いてアルファ−臭素化する。次に、アルファ−ブロモケトンは、酢酸ナトリウムなどの塩基の存在下で、適切な１，２−フェニレンジアミン又は２，３−ピリジンジアミンと反応させることにより、最終的なキノキサリン又は５−アゾキノキサリン生成物に変換する。同様のスキームは、アシル化段階において適切なチオ酸塩化物Ｃｌ−Ｃ（Ｓ）−Ｒ1を用いることにより、本発明のチオアミド化合物（すなわち、ＸがＮＲ4Ｃ（Ｓ）である）を調製するのに用いることができる。この合成スキーム及びその後の合成スキームにおける出発物質及び試薬は、商業的に入手可能であるか、或いは商業的に入手可能な出発物質を用いて、確立された有機化学技術により調製することができる。
【００４７】
ＸがＮＲ4Ｃ（Ｏ）ＮＨである本発明の化合物は、一般的なスキーム２に従って調製することができる。
【化２８】
2007535569.tif 000030
【００４８】
アミン出発物質を適切なイソシアネートＲ1−ＮＣＯを用いて処理し、所望の尿素を形成する。次に、得られる化合物を、酢酸及び臭化水素酸の混合物中でＢｒ2を用いてアルファ臭素化する。このアルファ−ブロモケトンは、酢酸ナトリウムなどの塩基の存在下で、適切な１，２−フェニレンジアミン又は２，３−ピリジンジアミンと反応させることにより、最終的なキノキサリン又は５−アゾキノキサリン生成物に変換する。同様のスキームは、イソシアネートの代わりに適切なイソチオシアネートＲ1−ＮＣＳを用いることにより、本発明のチオ尿素化合物（すなわち、ＸがＮＲ4Ｃ（Ｓ）ＮＨである）を調製するのに用いることができる。
【００４９】
ＸがＮＲ4ＳＯ2である本発明の化合物は、一般的なスキーム３に従って調製することができる。
【化２９】
2007535569.tif 000031
【００５０】
アミン出発物質を、トリエチルアミン又はジイソプロピルエチルアミンなどの非求核の存在下で、塩基適切な塩化スルホニルＲ1−Ｓ（Ｏ2）Ｃｌを用いて処理し、所望のスルホンアミドを形成する。次に、得られる化合物を、酢酸及び臭化水素酸の混合物中でＢｒ2を用いてアルファ臭素化する。このアルファ−ブロモケトンは、酢酸ナトリウムなどの塩基の存在下で、適切な１，２−フェニレンジアミン又は２，３−ピリジンジアミンと反応させることにより、最終的なキノキサリン又は５−アゾキノキサリン生成物に変換する。
【００５１】
本発明の化合物は、ヘッジホッグシグナル伝達を阻害し、例えばＰａｔｃｈｅｄがＳｍｏｏｔｈｅｎｅｄを抑制できないか、又は不十分に抑制する（Ｐｔｃ機能喪失表現型）場合、及び／又はＳｍｏｏｔｈｅｎｅｄがＰａｔｃｈｅｄ抑制に関わらず活性である（Ｓｍｏ機能獲得表現型）場合の、異常なヘッジホッグシグナル伝達に関連する癌の処置に有用である。このような癌型の例としては、基底細胞癌、神経外胚様性腫瘍例えば延髄芽細胞腫、髄膜腫、血管腫、神経膠芽腫、膵臓腺癌、扁平上皮肺癌、軟骨性肉腫、乳癌、横紋筋肉腫、食道癌、胃癌、胆道癌、腎臓癌、甲状腺癌が挙げられる。本発明の化合物は、他の抗癌処置、例えば放射線療法又は化学療法の投与の前、同時、又は後に投与することができる。適切な細胞増殖抑制化学療法化合物としては、（ｉ）代謝拮抗剤、例えばシタラビン、フルダラビン、５-フルオロ−２’−デオキシウリジン、ゲムシタビン、水酸化尿素又はメトトレキサート；（ｉｉ）ＤＮＡフラグメント化剤、例えばブレオマイシン、（ｉｉｉ）ＤＮＡ架橋剤、例えばクロラムブシル、シスプラチン、シクロホスファミド又はナイトロジェンマスタード；（ｉｖ）挿入剤、例えばアドリアマイシン（ドキソルビシン）又はミトキサントロン；（ｖ）タンパク質合成阻害剤、例えばＬ−アスパラギナーゼ、シクロヘキシミド、ピューロマイシン又はジフテリア毒素；（Ｖｉ）トポイソメラーゼ毒、例えばカンプトセシン又はトポテカン；（ｖｉｉ）トポイソメラーゼＩＩ毒、例えばエトポシド（ＶＰ−１６）又はテニポシド；（ｖｉｉｉ）微小管標的剤、例えばコルセミド、コルヒチン、パクリタキセル、ビンブラスチン又はビンクリスチン；（ｉｘ）キナーゼ阻害剤、例えばフラボピリドール、スタウロスポリン、ＳＴＩ５７１（ＣＰＧ  ５７１４８Ｂ）又はＵＣＮ−０１）（７−ヒドロキシスタウロスポリン）；（ｘ）混合型治験薬、例えばチオプラチン（ｔｈｉｏｐｌａｔｉｎ）、ＰＳ−３４１、フェニル酪酸塩、ＥＴ１８−ＯＣＨ3又はファルネシル転移酵素抑制剤（Ｌ−７３９７４９、Ｌ−７４４８３２）；ポリフェノール、例えばケルセチン、レスベラトロル、ピセアタンノール、エピガロカテキンガレート、テアフラビン、フラバノール、プロシアニジン、ベツリン酸及びそれらの誘導体；（ｘｉ）ホルモン、例えばグルココルチコイド又はフェンレチニド；（ｘｉｉ）ホルモンアンタゴニスト、例えばタモキシフェン、フィナステリド又はＬＨＲＨアンタゴニストが挙げられるが、これらに限定されない。特定の実施態様において、本発明の化合物は、シスプラチン、ドキソルビシン、タキソール、タキソテール及びマイトマイシンＣから成る群から選択される細胞増殖抑制化合物と同時投与する。
【００５２】
本発明のも用いることのできる別のクラスの活性化合物は、死受容体に結合することによりアポトーシスを感作又は誘導することができるものである（「死受容体アゴニスト」）。死受容体のこのようなアゴニストとしては、死受容体リガンド、例えば腫瘍壊死因子ａ（ＴＮＦ−α）、腫瘍壊死因子β（ＴＮＦ−β、リンホトキシン−α）、ＬＴ−β（リンホトキシン−β）、ＴＲＡＩＬ（Ａｐｏ２Ｌ、ＤＲ４リガンド）、ＣＤ９５（Ｆａｓ、ＡＰＯ−１）リガンド、ＴＲＡＭＰ（ＤＲ３、ＡＰＯ−３）リガンド、ＤＲ６リガンド、並びに任意の当該リガンドのフラグメント及び誘導体が挙げられる。特定の実施態様において、死受容体リガンドはＴＮＦ−αである。別の特定の実施態様において、死受容体リガンドはＡｐｏ２Ｌ／ＴＲＡＩＬである。更に、死受容体アゴニストは、死受容体に対するアゴニスト抗体、例えば抗ＣＤ９５抗体、抗ＴＲＡＩＬ−Ｒ１（ＤＲ４）抗体、抗ＴＲＡＩＬ−Ｒ２（ＤＲ５）抗体、抗ＴＲＡＩＬ−Ｒ３抗体、抗ＴＲＡＩＬ−Ｒ４（ＤＲ４）抗体、抗ＤＲ６抗体、抗ＴＮＦ−Ｒ１抗体及び抗ＴＲＡＭＰ（ＤＲ３）抗体、並びに任意の当該抗体のフラグメント及び誘導体を含んで成る。
【００５３】
アポトーシスのために細胞を感作することを目的として、本発明の化合物は、放射線治療と組み合わせて用いることができる。「放射線治療」という語句は、新生組織形成の処置における電磁波又は微粒子放射線の使用を指す。放射線治療は、標的領域に送達された高線量放射線が、腫瘍組織及び正常組織の双方における再生細胞の死をもたらすという原則に基づいている。放射線用量は一般的に、放射線吸収線量（ｒａｄ）、時間及び分画に関して規定され、癌専門医により慎重に規定されなければならない。患者が受ける放射線の量は、様々な考慮、例えば体の他の器官との関連における腫瘍の場所、及び腫瘍の広がりの程度に依存する。放射線治療剤の例は、放射線治療において提供されるが、それに限定されず、当業界で知られている（Ｈｅｌｌｍａｎ，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｃａｎｃｅｒ，ｉｎ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  Ｉ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２４８７５（Ｄｅｖｉｔａ  ｅｔ  ａｌ．，４ｔｈ  ｅｄ．，ｖｏｌ１，１９９３））。放射線治療における最近の進歩としては、三次元原体外照射治療、強度変調放射線治療（ＩＭＲＴ）、定位的放射線治療、近接照射治療（組織内照射治療）が挙げられ、後者は移植した「シード」として腫瘍内に直接放射線源を置く。これらのより新しい治療法は、腫瘍により多量の放射線を供給する。それは、標準的な外照射治療と比較した場合のそれらの効果の増大を説明する。
【００５４】
ベータ−放射核種を用いた電離放射線は、電離粒子の緩やかな線エネルギー付与（ＬＥＴ）及びその中距離（典型的には、組織中で数ミリメーター）により、放射線治療適用に最も有用であると考えられる。ガンマ線は、より大きな距離にわたって、より低レベルで用量を供給する。アルファ粒子は、他の極端な状態を表し、それらは非常に高いＬＥＴ用量を供給するが、極度に限定された範囲を有するので、処置する組織の細胞と密接に接触しているべきである。更に、アルファ放射体は一般的に重金属であり、それは可能性のある化学的性質を制限し、処置した領域からの核種漏出による不当な危険性を与える。処置する腫瘍に依存して、全ての種類の放射体は、本発明の範囲内であると考えられる。更に、本発明は、多様な非電離放射線、例えば紫外線（ＵＶ）放射線、高エネルギー可視光、マイクロ波放射（高熱療法）、赤外線の（ＩＲ）放射線及びレーザーを包含する。本発明の特定の実施態様において、ＵＶ放射線を適用する。
【００５５】
本発明の化合物は血管形成を阻害し、それゆえに腫瘍、特に固形腫瘍、例えば大腸、肺、膵臓、卵巣、乳房及び神経膠腫などの血管形成により介在される疾患又は症状の処置において有用である。更に、本発明の化合物は、黄斑変性、例えば湿潤年齢関連性黄斑変性を処置するのに有用である。本発明の化合物は、炎症／免疫疾患、例えばクローン、炎症性腸疾患、シェーグレン症候群、喘息、臓器移植拒絶、全身性エリテマトーデス、慢性関節リウマチ、乾癬性関節炎、乾癬及び多発性硬化症を処置するのにも有用である。本発明の化合物は、脱毛剤としても有用である。
【００５６】
本発明は、本発明の化合物及び治療用不活性担体、希釈剤又は賦形剤を含む医薬組成物又は薬剤、並びにこのような組成物及び薬剤を調製するために本発明の化合物を使用する方法も含む。典型的には、本発明の方法において用いる本発明の化合物は、周囲温度、適切なｐＨ、所望の純度で、生理学的に許容される担体（すなわち、生薬投与形態中で用いる用量及び濃度で受容者に対して非毒性である担体）と共に混合することにより製剤する。製剤のｐＨは、主に化合物の特定の使用及び濃度に依存するが、約３〜約８の範囲であることができる。本明細書中での使用のための阻害化合物は、滅菌製剤であることができる。凍結乾燥製剤又は水溶液が許容されるが、化合物は固体組成物として保存することができる。
【００５７】
本発明の組成物は、優れた医療行為に一致した様式で、製剤、服用、及び投与する。これとの関連における考慮の要素としては、処置する特定の疾患、処置する特定の哺乳動物、個々の患者の臨床症状、疾患の原因、薬剤の送達部位、投与の方法、投与のスケジューリング、及び医者に知られた他の要素が挙げられる。投与する化合物の「有効量」はそのような考慮により決定され、ヘッジホッグ経路シグナル伝達を減少させるのに必要な最小量であり、或いはヘッジホッグシグナル伝達に応答する腫瘍の大きさ、体積若しくは質量の減少、又はこのような腫瘍の大きさ、体積若しくは質量の増大における減少をもたらすのに必要な最小量である。或いは、化合物の「有効量」は、悪性細胞の数又は悪性細胞の数の増大の程度を減少させるのに必要な量を意味する。或いは、「有効量」は、抗ヘッジホッグ経路感知腫瘍に罹患した患者の生存を増大させるのに必要な本発明の化合物の量である。このような量は、正常な細胞、又は全体として哺乳動物に毒性である量より低いことができる。非悪性適応に関して、「有効量」は、特定の適応又はその症状の重症度を軽減するのに必要な本発明の化合物の量を意味する。
【００５８】
一般的に、非経口で投与する本発明の化合物の初期の医薬として有効な量は、約０．０１〜約１００ｍｇ／ｋｇの範囲、例えば一日あたり患者の体重の約０．１〜約２０ｍｇ／ｋｇ、たとえｇ場約０．３〜約１５ｍｇ／ｋｇ／日である。経口単位投与形態、例えば錠剤及びカプセルは、約２５〜約１０００ｍｇの本発明の化合物を含むことができる。
【００５９】
本発明の化合物は、任意の適切な手段、例えば経口、局所、経皮、非経口、皮下、腹腔内、肺内、及び鼻腔内、並びに局所処置に必要であれば、病巣内投与により投与することができる。非経口注入としては、筋肉内、静脈内、動脈内、腹膜内、又は皮下投与が挙げられる。適切な経口投与形態の例は、約９０〜３０ｍｇの無水ラクトース、約５〜４０ｍｇのクロスカルメロースナトリウム、約５〜３０ｍｇのポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）Ｋ３０、及び約１〜１０ｍｇのステアリン酸マグネシウムを配合した、約２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２５０ｍｇ、又は５００ｍｇの本発明の化合物を含む錠剤である。粉末化した成分を最初に一緒に混合し、次にＰＶＰの溶液と混合する。得られる組成物を、乾燥し、造粒し、ステアリン酸マグネシウムと混合し、そして従来の装置を用いて錠剤形態に固める。エアロゾル製剤は、本発明の化合物（例えば５〜４００ｍｇ）を適切なバッファー溶液（例えば、リン酸バッファー）中に混合し、必要であれば等張化剤（例えば、塩化ナトリウムなどの塩）を添加することにより調製することができる。溶液は、典型的には、例えば０．２ミクロンフィルターを用いてろ過し、不純物及び汚染物質を取り除く。局所製剤としては、軟膏、クリーム、ローション、粉末、溶液、ペッサリー、スプレー、エアロゾル及びカプセルが挙げられる。軟膏及びクリームは、適切な増粘剤及び／又はゲル化剤及び／又は溶媒の添加により、水溶性基剤又は油性基剤と製剤することができる。このような基剤としては、水及び／又は油、例えば液体パラフィン又は植物油、例えば落花生油若しくはヒマシ油又は溶媒、例えばポリエチレングリコールが挙げられる。用いることのできる増粘剤としては、ソフトパラフィン、ステアリン酸アルミニウム、セトステアリルアルコール、ポリエチレングリコール、微結晶ワックスと蜜蝋が挙げられる。ローションは、水性又は油性基剤と製剤することができ、１又は複数の乳化剤、安定化剤、分散剤、懸濁剤又は増粘剤を含むことができる。外部適用のための粉末は、任意の適切な粉末、例えばタルク、ラクトース又はデンプンを用いて形成することができる。ドロップは水性又は非水性基剤を用いて製剤することができ、１又は複数の分散剤、可溶化剤又は懸濁剤を含んで成る。
【実施例】
【００６０】
実施例
本発明は、以下の実施例への言及によってより完全に理解されるだろう。しかし、それらは本発明の範囲を制限するものとして解釈されるべきではない。本明細書中で用いる省略は以下の通りである：
【００６１】
ＤＩＰＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン；
ＤＭＡＰ：４−ジメチルアミノピリジン；
ＤＭＥ：１，２−ジメトキシエタン；
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド；
ＥＤＣ：１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド；
ＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アゾベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸塩；
ＨＯＡｃ：酢酸
ＨＯＢｔ：ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＮＢＳ：Ｎ−ブロモスクシンアミド；
ＲＯＥＳＹ：回転座標系オーバーハウザー効果ＳｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐＹ
ＴＡＳＦ：トリス（ジメチルアミノ）スルホニウムジフルオロトリメチルケイ酸塩；
ＴＨＦ；テトラヒドロフラン；
【００６２】
特に断りのない限り、全ての試薬は商業的に得た。窒素の雰囲気下で炉乾燥ガラス器を用いて反応を実施した。空気及び感湿液体及び溶液は、シリンジ又はステンレス鋼カニューレにより移した。有機溶液は、ロータリーエバポレーターにより減圧下（約１５ｍｍＨｇ）で濃縮した。特に断りのない限り、全ての溶媒は商業的に得た。生成物のクロマトグラフィー精製を、Ｉｓｃｏ  ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｃｏｍｐａｎｉｏｎ及び媒体の使用により行った。反応時間は、例としてのみ与えられる。反応のコースの後に、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）及び液体クロマトグラフィー−質量分析（ＬＣ−ＭＳ）が続いた。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、ＥＭ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  シリカゲル６０Ｆ254プレート（２５０μｍ）上で実施した。展開したクロマトグラムの可視化は、蛍光クエンチングにより行った。ＬＣ−ＭＣは、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  １０ＡＤ  ＬＣを用いて、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘカラム（５０×４．６ｍｍ、５μｍ）上で、３ｍＬ／分で操作して得た。２１４及び２５４ｎｍで測定するＳｈｉｍａｄｚｕ  ＳＰＤ−１０Ａを用いた。シングル４極子質量分析法は、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓの質量分析計上で実施した。核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは、1Ｈに対して４００ＭＨｚで操作するＶａｒｉａｎ  Ｉｎｏｖａ分光計上で得、１００万分の１（ｐｐｍ）のテトラメチルシラン（ＴＭＳ）を内部基準にした。1Ｈ ＮＭＲに関するデータは以下のように記録する：ケミカルシフト（δ、ｐｐｍ）、多重度（ｓ、一重項；ｂｓ、ブロードな一重項；ｄ、二重項；ｔ、三重項；ｑ、四重項；ｑｕｉｎｔ、五重項；ｓｅｘｔ、六重項；ｈｅｐｔ、七重項；ｍ、多重項；ｂｍ、ブロードな多重項）、及び積分。全ての最終生成物の構造及び純度は、少なくとも１つの以下の技術により評価した：ＬＣ−ＭＳ、ＮＭＲ、ＴＬＣ。
【００６３】
実施例１  一般的な手順
実施例２〜１１の化合物は、以下の一般的な手順に従って調製した。
【化３０】
2007535569.tif 000032
【００６４】
Ａ：還元手順
１０ｍｌのＨＯＡｃ中の適切なニトロ芳香族（１当量）の磁気的に撹拌した溶液に、３２５のメッシュ（ｍｅｓｈ）鉄粉末（１０当量）を一回で添加した。得られた懸濁液を３０分間で１２０℃まで加熱し、次に氷中に注いだ。得られた溶液を、ＥｔＯＡｃ（３×２０ｍｌ）で抽出した。混合した有機物を、飽和ＮａＨＣＯ3（３×１０ｍｌ）で洗い、固体無水ＭｇＳＯ4で乾燥させ、その後濃縮した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、所望のアニリンを得た。
【００６５】
Ｂ：アシル化手順
２０ｍｌのジクロロメタン中の適切なアニリン（１当量）の磁気的に撹拌した溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（２．１当量）を添加し、その後適切な酸塩化物（１．４当量）を一回で添加した。反応物を室温で一晩撹拌した。反応物を室温で一晩撹拌した。得られた溶液を更に３時間撹拌し、その後３０ｍｌの１ＮのＨＣｌにより急冷した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×３０ｍｌ）で抽出した。混合した有機物を、飽和ＮａＨＣＯ3（１×２０ｍｌ）で洗い、固体無水ＭｇＳＯ4で乾燥させ、その後濃縮した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、所望のアミドを得た。
【００６６】
Ｃ：臭素化手順
１ｍｌのベンゼン中の適切なアセトフェノン（１当量）の磁気的に撹拌した溶液に、０℃でＨＯＡｃ中の１ｍｌの３０％ＨＢｒをゆっくり添加し、温度を保持した。次に、Ｂｒ2（１．１当量）を液滴により添加し、得られた溶液を０℃で１時間撹拌した。反応物を氷上に注ぎ、その溶液を固体ＮａＨＣＯ3で中和し、その後ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍｌ）で抽出した。混合した有機物を、固体無水ＭｇＳＯ4で乾燥させ、その後濃縮した。得られたα−ブロモアセトフェノンは、精製をせずに次の反応に持ち込んだ。
【００６７】
Ｄ：キノキサリン形成手順
５ｍｌのエタノール中の適切なα−ブロモアセトフェノン（１当量）の磁気的に撹拌した溶液に、適切な１，２−フェニレンジアミン（２．７当量）を添加し、その後ＤＩＰＥＡ（３．４当量）を添加した。得られた溶液を、空気雰囲気で室温で一晩撹拌した。得られた反応物を濃縮し、その後水中の０〜９０％グラジエントのＣＨ3ＣＮを用いて（双方とも０．０５％のＴＦＡを含む）、Ｃ−１８カラム上で逆相クロマトグラフィーにより精製した。画分を含む生成物を凍結乾燥し、粉末を得た。
【００６８】
実施例２  Ｎ−（４−クロロ−３−（キノキサリン−３−イル）フェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミド
【化３１】
2007535569.tif 000033
２’−クロロ−５’−ニトロ−アセトフェノン（０．２２ｇ、１．１ｍｍｏｌ）及び鉄粉末（０．６４ｇ、１１ｍｍｏｌ）を用いて、手順Ａを実施した。粗生成物を、シリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、ＥｔＯＡｃ：ヘキサン（０：１〜１：０）で溶出して、所望の２’−クロロ−５’−アミノ−アセトフェノンを得た。
【００６９】
２０ｍｌのジクロロメタン中の２’−クロロ−５’−アミノ−アセトフェノン（０．７２ｇ、４．２ｍｍｏｌ）の磁気的に撹拌した溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（２．２ｍｌ、１２．６ｍｍｏｌ）を添加した。３，５−ジメトキシベンゾイル塩化物（１．３９ｇ、６．９ｍｍｏｌ）を一回で添加した。反応物を２時間室温で撹拌し、第二の部分の３，５−ジメトキシベンゾイル塩化物（１．２６ｇ、６．３ｍｍｏｌ）を添加し、その後ジイソプロピルエチルアミン（１．０ｍｌ、５．７ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を更に３時間撹拌し、その後３０ｍｌの１ＮのＨＣｌにより急冷した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×３０ｍｌ）で抽出した。混合した有機物を、飽和ＮａＨＣＯ3（１×２０ｍｌ）で洗い、固体無水ＭｇＳＯ4で乾燥させ、その後濃縮した。粗生成物をシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、ＥｔＯＡｃ：ヘキサン（０：１〜２：５）で溶出して、所望のＮ−（３−アセチル−４−クロロフェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミドを得た。
【００７０】
Ｎ−（３−アセチル−４−クロロフェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミド（０．１ｇ、０．３ｍｍｏｌ）及びＢｒ2（０．０１７ｍｌ、０．３３ｍｍｏｌ）を用いて手順Ｃを実施し、Ｎ−（３−（２−ブロモアセチル）−４−クロロフェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミドを得た。
【００７１】
Ｎ−（３−（２−ブロモアセチル）−４−クロロフェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミド（０．０２９ｇ、０．０７ｍｍｏｌ）、１，２−フェニレンジアミン（０．０２１ｇ、０．１９ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０４２ｍｌ、０．２４ｍｍｏｌ）を用いて手順Ｄを実施し、Ｎ−（４−クロロ−３−（キノキサリン−３−イル）フェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミドを淡褐色粉末として得た。
【００７２】
1Ｈ  ΝＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）δ９．２６（ｓ，１Ｈ）,８．１５−８．１８（ｍ，２Ｈ），７．９１−７．９２（ｍ，２Ｈ），７．８０−７．８２（ｍ，２Ｈ），７．５４（ｄ，１Ｈ），６．９６（ｄ，２Ｈ），６．６１（ｔ．１Ｈ），３．８３（ｓ，６Ｈ）ｐｐｍ）；ＭＳ（Ｑｌ）ＸＸＸ（Ｍ）+。
【００７３】
実施例３  Ｎ−（４−クロロ−３−（６−メチルキノキサリン−２−イル）フェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミド
【化３２】
2007535569.tif 000034
Ｎ−（３−（２−ブロモアセチル）−４−クロロフェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミド（０．０４５ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、４−メチル−１，２−フェニレンジアミン（０．０２２ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０６ｍｌ、０．３４ｍｍｏｌ）を用いて手順Ｄを実施した。得られたＮ−（４−クロロ−３−（６−メチルキノキサリン−２−イル）フェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミドは軽い粉末であり、６−及び７−メチル化生成物の混合物から成っていた。
【００７４】
1Ｈ  ΝＭＲ（ＣＤＣｌ3,４００ＭＨｚ）δ９．２１（s,１Ｈ），８．０８（ｄ，１Ｈ），７．９０−７．９６（ｍ，３Ｈ），７．６８（ｄ，１Ｈ），７．５６（ｄ，１Ｈ），６．９８（ｄ，２Ｈ），６．６４（ｔ，１Ｈ），３．８３（ｓ，６Ｈ）ｐｐｍ）；ＭＳ（Ｑｌ）４３４．３（Ｍ）+。
【００７５】
実施例４  Ｎ−（４−クロロ−３−（５，７−ジメチルキノキサリン−３−イル）フェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミド
【化３３】
2007535569.tif 000035
Ｎ−（３−（２−ブロモアセチル）−４−クロロフェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミド（０．０４４ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、３，５−ジメチル−１，２−フェニレンジアミン（０．０２０ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０６ｍｌ、０．３４ｍｍｏｌ）を用いて、手順Ｄを実施した。得られたＮ−（４−クロロ−３−（５，７−ジメチルキノキサリン−３−イル）フェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミドは軽い粉末であり、その位置化学は実施例１０に類似するものにより決定した。
【００７６】
1Ｈ  ΝＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００  ＭＨｚ）δ９．２２（ｓ，１Ｈ），７．９５（ｄ，１Ｈ），７．８６−７．９０（ｍ，２Ｈ），７．７８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．５６（ｄ，１Ｈ），７．５１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．７９−７．００（ｍ，２Ｈ），６．６２−６．６６（ｍ，１Ｈ），３．８６（ｓ，６Ｈ），２．８２（ｓ，３Ｈ），２．５９（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ；ＭＳ（Ｑｌ）４４８．０（Ｍ）+。
【００７７】
実施例５  Ｎ−（４−クロロ−（３−（５−メチルキノキサリン−３−イル）フェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミド
【化３４】
2007535569.tif 000036
Ｎ−（３−（２−ブロモアセチル）−４−クロロフェニル）−３，５−クメトキシベンズアミド（０．０２３ｇ、０．０６ｍｍｏｌ）、２，３−ジアミノトルエン（０．０２７ｇ、０．２２ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０５ｍｌ、０．３０ｍｍｏｌ）を用いて、手順Ｄを実施した。Ｎ−（４−クロロ−（３−（５−メチルキノキサリン−３−イル）フェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミドは軽い粉末であり、その位置化学は実施例１０に類似するものにより決定した。
【００７８】
1Ｈ  ΝＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００  ＭＨｚ）δ９．２６（ｓ，１Ｈ），８．００−８．０３（ｍ，１Ｈ），７．９６  （ｄ，１Ｈ），７．８９−７．９１（ｍ，１Ｈ），７．８５（ｄｄ，１Ｈ），７．６５−７．７４（ｍ，２Ｈ），７．５１４（ｄ，１Ｈ），６．９６−７．９８（ｍ，２Ｈ），６．６１−６．６２（ｍ，１Ｈ），３．８３（ｓ，６Ｈ），２．８５（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ；ＭＳ（Ｑｌ）４３４．０（Ｍ）+。
【００７９】
実施例６  Ｎ−（４−クロロ−３−（５，６−ジメチルキノキサリン−３−イル）フェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミド
【化３５】
2007535569.tif 000037
Ｎ−（３−（２−ブロモアセチル）−４−クロロフェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミド（０．０３４ｇ、０．０８ｍｍｏｌ）、３，４−ジメチルベンゼン−１，２−ジアミン（０．０１７ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０４２ｍｌ、０．２４ｍｍｏｌ）を用いて、手順Ｄを実施した。Ｎ−（４−クロロ−３−（５，６−ジメチルキノキサリン−３−イル）フェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミドは軽い粉末であり、その位置化学は実施例１０に類似するものにより決定した。
【００８０】
1Ｈ  ΝＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００  ＭＨｚ）δ９．２６（ｓ，１Ｈ），８．００−８．０３（ｍ，１Ｈ），７．９６（ｄ，１Ｈ），７．８９−７．９１（ｍ，１Ｈ），７．８５（ｄｄ，１Ｈ），７．６５−７．７４（ｍ，２Ｈ），７．５１４（ｄ，１Ｈ），６．９６−７．９８（ｍ，２Ｈ），６．６１−６．６２（ｍ，１Ｈ），３．８３（ｓ，６Ｈ），２．８５（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ；ＭＳ（Ｑｌ）ＸＸＸ（Ｍ）+。
【００８１】
実施例７  Ｎ−（４−クロロ−３−（キノキサリン−３−イル）フェニル）−６−（トリフルオロメチル）−２−メチルピリジン−３−カルボキサミド
【化３６】
2007535569.tif 000038
１−（５−アミノ−２−クロロフェニル）エタノン（０．４ｇ、２．４ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．７ｍｌ、５．０ｍｍｏｌ）及び２−メチル−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−カルボニル塩化物（０．７６ｇ、３．４ｍｍｏｌ）を用いて、手順Ｂを実施した。
【００８２】
Ｎ−（３−アセチル−４−クロロフェニル）−６−（トリフルオロメチル）−２−メチルピリジン−３−カルボキサミド（０．１ｇ、０．３ｍｍｏｌ）及びＢｒ2（０．０１７ｍｌ、０．３３ｍｍｏｌ）用いて手順Ｃを実施し、Ｎ−（３−（２−ブロモアセチル）−４−クロロフェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミドを得た。
【００８３】
Ｎ−（３−（２−ブロモアセチル）−４−クロロフェニル）−６−（トリフルオロメチル）−２−メチルピリジン−３−カルボキサミド（０．０２９ｇ、０．０７ｍｍｏｌ）、１，２−フェニレンジアミン（０．０２１ｇ、０．１９ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０４２ｍｌ、０．２４ｍｍｏｌ）を用いて手順Ｄを実施し、Ｎ−（４−クロロ−３−（キノキサリン−３−イル）フェニル）−３，５−ジメトキシベンズアミドを淡褐色粉末として得た。
【００８４】
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）δ９．３０（ｓ，１Ｈ），８．１７−８．２４（ｍ，２Ｈ），７．９５−８．００（ｍ，２Ｈ），７．８４−７．９０（ｍ，３Ｈ）,７．５９−７．６４（ｍ，３Ｈ）,２．８１（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ；ＭＳ（Ｑｌ）４４３．１（Ｍ）+。
【００８５】
実施例８  Ｎ−（４−クロロ−３−（６−メチルキノキサリン−２−イル）フェニル）−６−（トリフルオロメチル）−２−メチルピリジン−３−カルボキサミド
【化３７】
2007535569.tif 000039
Ｎ−（３−（２−ブロモアセチル）−４−クロロフェニル）−６−トリフルオロメチ）−２−メチルピリジン−３−カルボキサミド（０．０４２ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）、４−メチル−１，２−フェニレンジアミン（０．０２５ｇ、０．２０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０５２ｍｌ、０．３０ｍｍｏｌ）を用いて手順Ｄを実施した。得られたＮ−（４−クロロ−３−（６−メチルキノキサリン−２−イル）フェニル）−６−（トリフルオロメチル）−２−メチルピリジン−３−カルボキサミドは軽い粉末であり、６−及び７−メチル化生成物の混合物から成っていた。
【００８６】
1Ｈ ΝＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００  ＭＨｚ）δ９．２２（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｄ，１Ｈ），７．８６−７．９８（ｍ，４Ｈ）,７．７７（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．７１（ｄ，１Ｈ），７．５６−７．６２（ｍ，２Ｈ），２．８０（ｓ，３Ｈ），２．６４（ｓ，３Ｈ） ｐｐｍ；ＭＳ （Ｑｌ）４５７．１（Ｍ）+。
【００８７】
実施例９  Ｎ−（４−クロロ−３−（５，７−ジメチルキノキサリン−３−イル）フェニル）−６−（トリフルオロメチル）−２−メチルピリジン−３−カルボキサミド
【化３８】
2007535569.tif 000040
Ｎ−（３−（２−ブルモアセチル）−４−クロロフェニル）−６−（トリフルオロメチル）−２−メチルピリジン−３−カルボキサミド（０．０３８ｇ、０．０９ｍｍｏｌ）、３，５−ジメチル−１，２−フェニレンジアミン（０．０２９ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０５２ｍｌ、０．３０ｍｍｏｌ）を用いて手順Ｄを実施した。得られたＮ−（４−クロロ−３−（５，７−ジメチルキノキサリン−３−イル）フェニル）−６−（トリフルオロメチル）−２−メチルピリジン−３−カルボキサミドは軽い粉末であり、その位置化学は実施例１０に類似するものにより決定した。
【００８８】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ，４００  ＭＨｚ）δ１１．０５（ｓ，１Ｈ），８．４１（ｓ，１Ｈ），８．２２（ｄ，１Ｈ），７．９２（ｄ，１Ｈ），７．８１−７．８６（ｍ，１Ｈ），７．７７（ｄ，１Ｈ），７．６８（ｄ，１Ｈ），７．５７（ｂｒ ｓ，１Ｈ），６．Ｓｌ（ｄ，１Ｈ），２．６６（ｓ，３Ｈ），２．５１（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（Ｑｌ）ＸＸＸ（Ｍ）+。
【００８９】
実施例１０  Ｎ−（４−クロロ−３−（５−メチルキノキサリン−３−イル）フェニル）−６−（トリフルオロメチル）−２−メチルピリジン−３−カルボキサミド
【化３９】
2007535569.tif 000041
Ｎ−（３−（２−ブロモアセチル）−４−クロロフェニル）−６−（トリフルオロメチル）−２−メチルピリジン−３−カルボキサミド（０．０２６ｇ、０．０６ｍｍｏｌ）、２，３−ジアミノトルエン（０．０１８ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０５ｍｌ、０．３０ｍｍｏｌ）を用いて手順Ｄを実施した。Ｎ−（４−クロロ−３−（５−メチルキノキサリン−３−イル）フェニル）−６−（トリフルオロメチル）−２−メチルピリジン−３−カルボキサミドは粉末であり、その位置化学はＲＯＥＳＹ実験の進行の間の、中心のフェニル環の２位におけるキノキサリンメチルからプロトンへの磁化の転移及びキノキサリン２位のけるプロトンへの非転移の観察により決定した。
【００９０】
1Ｈ ΝＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）δ９．２６（ｓ，１Ｈ），８．００−８．０３（ｍ，１Ｈ），７．９６（ｄ，１Ｈ），７．８９−７．９１（ｍ，１Ｈ），７．８５（ｄｄ，１Ｈ），７．６５−７．７４（ｍ，２Ｈ），７．５１４（ｄ，１Ｈ），６．９６−７．９８（ｍ，２Ｈ），６．６１−６．６２（ｍ，１Ｈ），３．８３（ｓ，６Ｈ），２．８５（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ；ＭＳ（Ｑｌ）４５７．１（Ｍ）+。
【００９１】
実施例１１  Ｎ−（４−クロロ−３−（５，６−ジメチルキノキサリン−３−イル）フェニル）−６−（トリフルオロメチル）−２−メチルピリジン−３−カルボキサミド
【化４０】
2007535569.tif 000042
Ｎ−（３−（２−ブルモアセチル）−４−クロロフェニル）−６−（トリフルオロメチル）−２−メチルピリジン−３−カルボキサミド（０．０１８ｇ、０．０４ｍｍｏｌ）、３，４−ジメチルベンゼン−１，２−ジアミン（０．０１ｇ、０．０７ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０５２ｍｌ、０．３ｍｍｏｌ）を用いて手順Ｄを実施した。Ｎ−（４−クロロ−３−（５，６−ジメチルキノキサリン−３−イル）フェニル）−６−（トリフルオロメチル）−２−メチルピリジン−３−カルボキサミドは軽い粉末であり、その位置化学は実施例１０に類似するものにより決定した。
【００９２】
1Ｈ ΝＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）δ９．１８（ｓ，１Ｈ），７．８９−７．９８（ｍ，３Ｈ），７．８３−７．８７（ｍ，１Ｈ）,７．６８（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．６４ （ｄ，１Ｈ），７．６４−７．６１（ｍ，２Ｈ），２．７８（ｓ，３Ｈ），２．７５（ｓ，３Ｈ），２．５４（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ；ＭＳ（Ｑｌ）４７１．３（Ｍ）+。
【００９３】
実施例１２  一般的手順
実施例１３の化合物は、以下の一般的手順に従って調製した。
【化４１】
2007535569.tif 000043
【００９４】
Ａ：臭素化手順
４０ｍｌのベンゼン中の適切なアセトフェノン（１当量）の磁気的に撹拌した溶液に、０℃でＨＯＡｃ中の４０ｍｌの３０％ＨＢｒをゆっくり添加し、温度を保持した。次に、Ｂｒ2（１．０５当量）を液滴により添加し、得られた溶液を０℃で１５分間撹拌した。反応物を氷上に注ぎ、その後ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍｌ）で抽出した。混合した有機物を、固体無水ＭｇＳＯ4で乾燥させ、その後濃縮した。得られた粗アルファ−ブロモアセトフェノンは、フラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。
【００９５】
Ｂ：キノキサリン形成手順
２００ｍｌのエタノール中の適切なアルファ−ブロモアセトフェノン（１当量）の磁気的に撹拌した溶液に、適切な１，２−フェニレンジアミン（２．４当量）を添加し、その後酢酸ナトリウム（３当量）を添加した。得られた溶液を温め、空気雰囲気で一晩還元及び撹拌した。生成物は沈殿を形成し、反応物は減圧濾過し、固体を５０ｍｌの冷たいエタノールで洗い、その後５０ｍｌの０．１ＮのＨＣｌで洗った。得られた生成物は、更なる精製をせずに続けた。
【００９６】
Ｃ：還元手順
１００ｍｌのＨＯＡｃ中の適切なニトロ芳香族（１当量）の磁気的に撹拌した溶液に、３２５のメッシュ鉄粉末（３当量）を一回で添加した。得られた懸濁液は１時間室温で撹拌し、その間に有機物を完全に溶解し、暗赤色の溶液を形成させた。次に、反応物を氷中に注ぎ、得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×２００ｍｌ）で抽出した。混合した有機物を、飽和ＮａＨＣＯ3（３×２００ｍｌ）で洗い、固体無水ＭｇＳＯ4で乾燥させ、その後濃縮した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、所望のアニリンを得た。
【００９７】
Ｄ：アシル化手順
２０ｍｌのＤＭＦ中の適切な酸（１．０５当量）の磁気的に撹拌した溶液に、ＥＤＣ（２．０当量）及びＤＩＰＥＡ（２．０当量）を添加し、その後６−クロロ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２当量）を添加した。得られた溶液を更に３０分間室温で撹拌し、その後適切なアニリンを添加し、室温で一晩撹拌を継続した。反応物を１００ｍｌの水で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍｌ）で抽出した。混合した有機物を、水（３×１００ｍｌ）で洗い、固体無水ＭｇＳＯ4で乾燥させ、その後濃縮した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、所望のアミドを得た。
【００９８】
実施例１３  Ｎ−（４−クロロ−３−キノキサリン−２−イル−フェニル）−４−メタンスルホニル−ベンズアミド
【化４２】
2007535569.tif 000044
２’−クロロ−５’−ニトロ−アセトフェノン（４．０ｇ、２０ｍｍｏｌ）及び臭素（１．１３ｍｌ、２２ｍｍｏｌ）で手順Ａを実施した。粗生成物をシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＥｔＯＡｃ：ヘキサン（０：１〜１：４）で溶出して、所望の２−ブロモ−２’クロロ−５’−ニトロアセトフェノン（５．４ｇ、１９．２ｍｍｏｌ）を得た。
【００９９】
２−ブロモ−２’クロロ−５’−ニトロアセトフェノン（１４．１６ｇ、５０ｍｍｏｌ）、１，２−フェニレンジアミン（１３．１ｇ、１２０ｍｍｏｌ）及びＮａＯＡｃ（１２．４、１５０ｍｍｏｌ）を用いて手順Ｂを実施し、所望の２−（２−クロロ−５−ニトロ−フェニル）−キノキサリン（８．６ｇ、３０ｍｍｏｌ）を得た。
【０１００】
キノキサリン（８．６ｇ、３０ｍｍｏｌ）及びＦｅ（５．２ｇ、９０ｍｍｏｌ）を用いて手順Ｃを実施、アニリン（５．３ｇ、２０．７ｍｍｏｌ）を得た。
【０１０１】
４−（メチルスルホニル）安息香酸（１０２ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（１８６ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．１６ｍｌ、０．９３ｍｍｏｌ）、６−クロロ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１６２ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）及びアニリン（１１９ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を用いて手順Ｄを実施した。粗生成物をシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＥｔＯＡｃ：ヘキサン（０：１〜３：２）で溶出して、所望の４−クロロ−３−キノキサリン−２−イル−フェニルアミン（１０４ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を得た。
【０１０２】
1Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ6−ＤＭＳＯ，３００ＭＨｚ）δ１０．８１（ｓ，１Ｈ），９．２５（ｓ，１Ｈ），８．２３−８．１５（ｍ，４Ｈ），８．１１−８．００（ｍ，３Ｈ），７．９７−７．９０（ｍ，２Ｈ），７．６９（ｓ，１Ｈ），３．３０（ｓ，３Ｈ） ｐｐｍ）；ＭＳ（Ｑｌ）４３８．０（Ｍ）+。
【０１０３】
実施例１４  ヘッジホッグシグナル伝達阻害試験
マウスレポーター細胞株−１０Ｔ１／２−ＧｌｉＬｕｃ［ｓ１２］細胞（細胞株Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２  ＡＴＣＣ＃ＣＣＬ−２２６）；マウス胎児線維芽細胞）；成長培地：１０％のウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、１０ユニット／ｍＬのペニシリン、１００ｕｇ／ｍＬのストレプトマイシン、２ｍＭのグルタミン、及び１０ｍＭのＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．２を追加した、Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅｓ’  Ｍｅｄｉｕｍ（ＭＥＭ；Ｅａｒｌｅ’ｓ塩）。
【０１０４】
ヒトレポーター細胞株−ＨＥＰＭ−ＧｌｉＬｕｃ［ＭＺ２４］−細胞（ＨＥＰＭ由来、胚口蓋間充織  ＡＴＣＣ  ＃ＣＲＬ−１４８６）；成長培地：１０〜２０％のウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、１０ユニット／ｍＬのペニシリン、１００ｕｇ／ｍＬのストレプトマイシン、２ｍＭのグルタミン、及び１０ｍＭのＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．２を追加した、最小必須培地（ＭＥＭ；Ｅａｒｌｅ’ｓ塩）。
【０１０５】
ソニックヘッジホッグ−組み換えヒトＳＨｈＮ末端オクチル化複合体。
【０１０６】
マイクロタイタープレート（ＭＴＰｓ）−ルシフェラーゼアッセイのために、細胞を９６ウエルＭＴＰ中にめっきする（ｐｌａｔｅ）（白色、平底、クリアビュー）。
【０１０７】
ルシフェラーゼ試験培地−０．５％のＦＢＳ、１０ユニット／ｍＬのペニシリン、１００ｕｇ／ｍＬストレプトマイシン、２ｍＭのグルタミン、及び１０ｍＭのＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．２を追加したＤＭＥＭ。
【０１０８】
ＰＢＳ／Ｃａ／Ｍｇミックス−０．５ｍＭのＣａＣｌ2及び１ｍＭのＭｇＣｌ2を追加したリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）。
【０１０９】
試験手順
ヘッジホッグ応答性Ｇｌｉプロモーターにより駆動されるルシフェラーゼレポーター遺伝子を含むように遺伝子組み換えしたＳ１２及びＭＺ２４細胞を、３７℃、５％のＣＯ2で、成長培地中において組織培養皿上に保持した。細胞培地は、３〜４日毎に密集度以下で継代した。（ｓ１２に対しては１：２０〜１：４０；ＭＺ２４に対しては１：３〜１：１０）。細胞を集め、それらが１ウエル、１００ｕｌあたりに１０，０００〜２０，０００細胞（ｓ１２）、又は２０，０００〜３０，０００細胞（ＭＺ２４）でマイクロタイタープレート中にめっきされるように、成長培地で希釈した。細胞を更に、３７℃、５％ＣＯ2で２４〜４８時間インキュベートした。
【０１１０】
２４〜４８時間のインキュベーション後に、マイクロタイタープレート中の成長培地を、０．１〜０．３ｕｇ／ｍｌ（Ｓ１２）又は０．５〜１．０ｕｇ／ｍｌ（ＭＺ２４）のソニックヘッジホッグ−オクチル複合体、及び試験化合物を含むそして含まないルシフェラーゼ試験培地（１ウエルあたり１００ｕｌ）により置き換えた。次いで、細胞を更に２４時間インキュベートした。
【０１１１】
次いで、培地を取り除き、基質をストレートの溶解バッファーの代わりに、１：１のＰＢＳ／Ｃａ／Ｍｇ：溶解バッファーで再構成する、製造業者手順への変更を用いて、マイクロタイタープレートをルシフェラーゼレポーター遺伝子試験キット（ＬｕｃＬｉｔｅ（登録商標））にかけた。簡潔には、ＰＢＳ／Ｃａ／Ｍｇを溶解バッファーを用いて１：１で混合し、１０ｍＬを各基質バイアル（１０００−試験キットの）に添加した。次いで、マイクロタイタープレートから試験培地を廃棄し、１００ｕｌのこの基質を各ウエルに添加した。プレートを室温で２０〜３０分間インキュベートし、次にルシフェラーゼレポーター遺伝子の相対的発現レベルを表す相対的ライトユニット（Ｒｅｌａｔｉｖｅ  Ｌｉｇｈｔ  Ｕｎｉｔ）（ＲＬＵＳ）を、Ｔｏｐｃｏｕｎｔリーダー（Ｐａｃｋａｒｄ）又はＡｎａｌｙｓｔリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）を用いて測定した。
【０１１２】
以下の表１は、マウス［ｓ１２］又はヒト［ＭＺ２４］Ｇｌｉレポーター細胞株のいずれかを用いて上記の手順に従って試験した特定の化合物に対する平均ＩＣ50値を表し、ヘッジホッグシグナル経路伝達の阻害を示す。
【０１１３】
【表１】
2007535569.tif 000045
【国際調査報告】
2007535569.tif 000052
2007535569.tif 000053
2007535569.tif 000054
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