(57)【要約】  本発明は、一般式（Ｉ）の化合物、それらの製造方法、それらを含む薬剤及びそれらの製造、並びに医薬的活性剤としてのそれらの化合物の使用、を説明する。前記化合物は、タンパク質キナーゼ阻害剤、特にsrcファミリーのチロシンキナーゼ阻害剤としての活性を示し、それ故に、前記チロシンキナーゼが媒介する疾患の処置のために有用である。
2007529451.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物
【化１】
2007529451.tif 000017
［ここで、
Ｒ1は−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−アルキル又は−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（アルキル）2｛これらのアルキル基は、任意に
−ＯＨ；
−ＮＨ（アルキル）；
−Ｎ（アルキル）2；
−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−アルキル；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−アルキル；
−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（アルキル）2；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2；
−Ｏ−アルキル；
−ヘテロシクリル；
−ＮＨ−ヘテロシクリル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−アルキル；
−Ｓ（Ｏ）2−ＮＨ2;又は
−Ｓ（Ｏ）−アルキル
で置換されている（全てのアルキル基は任意に−ＯＨで置換されている）｝；
あるいは下記基：
−ＣＮ；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ヘテロシクリル；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2；又は
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）-アルキル｛このアルキルは任意に−ＮＨ（アルキル）；又は−Ｎ（アルキル）2により置換されている｝であり；そして
Ｒ2は、
ハロゲン；
ヘテロシクリル；
アルキル；
−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−アルキル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−アルキル；
−(ＣＨ2)m−Ｓ（Ｏ）2−ＮＨ2；
−（ＣＨ2)m−Ｓ（Ｏ）2−Ｎ（アルキル）2；
−(ＣＨ2)m−Ｓ（Ｏ）2−ＮＨ-（アルキル）；
−Ｏ−アルキル；又は
−Ｓ（Ｏ）n−アルキルであり｛全てのアルキル基は任意に
−ＯＨ；
−Ｏ−アルキル；
−ＮＨ−アルキル；若しくは
−Ｎ（アルキル）2；
で置換されている｝；
Ｘは−ＣＨ＝又は−Ｎ＝であり；
ｍは、０，１，２，３，４，５又は６であり；
ｎは、０，１又は２である］、及び医薬として許容されるその塩。
【請求項２】
Ｘが−ＣＨ＝であり；
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−アルキルであり、当該アルキル基は、任意に
−ＯＨ；
−ＮＨ（アルキル）；
−Ｎ（アルキル）2；
−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−アルキル；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−アルキル；
−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（アルキル）2；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2；
−Ｏ−アルキル；
−ヘテロシクリル；
−ＮＨ−ヘテロシクリル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−アルキル；
−Ｓ（Ｏ）2−ＮＨ2;又は
−Ｓ（Ｏ）−アルキル
で置換されており、全てのアルキル基は任意に−ＯＨで置換されており；且つ
Ｒ2が請求項１で示した意味を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘが−ＣＨ＝であり；
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−メチル；又は
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−エチルであり、このメチル又はエチルが置換されておらず、又は
１回
−ＯＨ；
−ピロリジニル；又は
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3
で置換されており；且つ
Ｒ2が請求項１で示した意味を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｘが−ＣＨ＝であり；
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−エチル；又は
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−メチルであり、このエチル又はメチルが１回
−ＯＨ；又は
−ピロリジニル
で置換されており；且つ
Ｒ2がモルホリン−４−イル；
４−メチル−ピペラジン−１−イル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3；
−Ｏ−アルキル；又は
−Ｓ（Ｏ）n−アルキルであり、全てのアルキルが任意に１回
−ＯＨ；
−Ｏ−アルキル；
−ＮＨ−アルキル；若しくは
−Ｎ（アルキル）2；
で置換されており；
ｎは０，１又は２である、
請求項１に記載の化合物；及び
医薬として許容されるその塩。
【請求項５】
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−フェニルアミノ］−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−ヒドロキシ−エチル）−アミド；
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−ヒドロキシ−エチル）−アミド；
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−フェニルアミノ］−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（（Ｒ）−１−ピロリジン−２−イルメチル）−アミド；及び
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（（Ｒ）−１−ピロリジン−２−イルメチル）−アミド、である、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｘが−ＣＨ＝であり；
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）2−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3であり；且つ
Ｒ2がモルホリン−４−イル；
４−メチル−ピペラジン−１−イル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3；
−Ｏ−アルキル；又は
−Ｓ（Ｏ）n−アルキルであり、全てのアルキルが任意に１回
−ＯＨ；
−Ｏ−アルキル；
−ＮＨ−アルキル；若しくは
−Ｎ（アルキル）2；
で置換されており；
ｎは０，１又は２である、
請求項１に記載の化合物；及び
医薬として許容されるその塩。
【請求項７】
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−メタンスルホニルアミノ−エチル）アミド；
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−フェニルアミノ］−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−メタンスルホニルアミノ−エチル）アミド；
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−（３−メタンスルホニルアミノ−フェニルアミノ)−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−メタンスルホニルアミノ−エチル）アミド；
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［３−（２−ヒドロキシ−エチルスルファニル）−フェニルアミノ]−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−メタンスルホニルアミノ−エチル）アミド；
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ]−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−メタンスルホニルアミノ−エチル）アミド；及び
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−（３−メチルスルファニル−フェニルアミノ）−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−メタンスルホニルアミノ−エチル）アミド、
である、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
Ｘが−ＣＨ＝であり；
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2であり；且つ
Ｒ2がモルホリン−４−イル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3；
−Ｏ−アルキル；又は
−Ｓ（Ｏ）n−アルキルであり、全てのアルキルが任意に１回
−ＯＨ；
−Ｏ−アルキル；
−ＮＨ−アルキル；若しくは
−Ｎ（アルキル）2；
で置換されており；
ｎは０，１又は２である、
請求項６に記載の化合物；及び
医薬として許容されるその塩。
【請求項９】
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸アミド；及び
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−フェニルアミノ］−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸アミド
である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｘが−ＣＨ＝であり；
Ｒ1が−ＣＮであり；且つ
Ｒ2がモルホリン−４−イル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3；
−Ｏ−アルキル；又は
−Ｓ（Ｏ）n−アルキルであり、全てのアルキルが任意に１回
−ＯＨ；
−Ｏ−アルキル；
−ＮＨ−アルキル；若しくは
−Ｎ（アルキル）2；
で置換されており；
ｎは０，１又は２である、
請求項１に記載の化合物；及び
医薬として許容されるその塩。
【請求項１１】
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）−フェニルアミノ］−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボニトリル ;
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボニトリル；及び
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（２−ヒドロキシ−エトキシ）フェニルアミノ］−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボニトリル
である、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｘが−Ｎ＝であり；
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）2−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3であり；且つ
Ｒ2がアルキル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3；
−Ｏ−アルキル；又は
−Ｓ（Ｏ）n−アルキルであり、全てのアルキルが任意に１回
−ＯＨ；
−Ｏ−アルキル；
−ＮＨ−アルキル；若しくは
−Ｎ（アルキル）2；
で置換されており；
ｎは０，１又は２である、
請求項１に記載の化合物；及び
医薬として許容されるその塩。
【請求項１３】
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２− （６−メチル−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−メタンスルホニルアミノ−エチル）アミド、である、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
以下の反応工程
（ａ）一般式（ＩＩ）の化合物
【化２】
2007529451.tif 000018
のカルボン酸基を式（Ｖ）の相当のアミド
【化３】
2007529451.tif 000019
［ここで、
Ｒ3は−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−アルキル又は−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（アルキル）2｛これらのアルキル基は、任意に
−ＯＨ；
−ＮＨ（アルキル）；
−Ｎ（アルキル）2；
−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−アルキル；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−アルキル；
−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（アルキル）2；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2；
−Ｏ−アルキル；
−ヘテロシクリル；
−ＮＨ−ヘテロシクリル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−アルキル；
−Ｓ（Ｏ）2−ＮＨ2;又は
−Ｓ（Ｏ）−アルキル
で置換されており（全てのアルキル基は任意に−ＯＨで置換されている）｝；
あるいは下記基：
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ヘテロシクリル；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2；又は
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）-アルキル（このアルキルは任意に−ＮＨ（アルキル）；又は−Ｎ（アルキル）2により置換されている）である］
に変換する工程、
ｂ）一般式（Ｖ）の化合物のメチルチオ基を、式（ＶＩ）の相当のスルホキシド
【化４】
2007529451.tif 000020
（ここで、Ｒ3は上文に示した意味を有する）
に変換する工程；
ｃ）式（ＶＩ）のスルホキシド基を、式（ＩＩ−Ａ）
【化５】
2007529451.tif 000021
（ここで、Ｒ2及びＸは、請求項１の式（Ｉ）で示した意味を有する）
の各アニリンで置換して一般式（Ｉａ）の相当の化合物
【化６】
2007529451.tif 000022
（ここで、Ｒ3は上文で示した意味を有し；
且つＲ2及びＸは請求項１の式（Ｉ）で示した意味を有する）
の各アニリンで置換する工程；
（ｄ）所望により、工程（ｃ）から得られた式（Ｉａ）の第一級アミド誘導体を請求項１に記載の式（Ｉ）の、その相当の７−カルボニトリル誘導体に更に変換する工程；並びに
（ｅ）所望により、（ｃ）又は（ｄ）から得られた式（Ｉ）の前記化合物を医薬として許容される塩に変換する工程、
を実施することによる、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物の製造方法。
【請求項１５】
医薬として許容される賦形剤と一緒に、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の１又は複数の化合物を活性成分として含む薬物。
【請求項１６】
ｓｒｃファミリーチロシンキナーゼの不適切な活性化により媒介される疾患の処置のための請求項１５に記載の薬物。
【請求項１７】
ガンの処置のための請求項１５に記載の薬物。
【請求項１８】
炎症性−、免疫学的−、ＣＮＳ障害又は骨疾患の処置のための請求項１５に記載の薬物。
【請求項１９】
ｓｒｃファミリーチロシンキナーゼの不適切な活性化により媒介される疾患の処置のための薬物の製造のための請求項１〜１３のいずれか１項に記載の１又は複数の化合物の使用。
【請求項２０】
ガンの処置のための薬物の製造のための請求項１〜１３のいずれか１項に記載の１又は複数の化合物の使用。
【請求項２１】
ｓｒｃファミリーチロシンキナーゼ阻害剤としての請求項１〜１３のいずれか１項に記載の１又は複数の化合物の使用。
【請求項２２】
ガンの処置のための請求項１〜１３のいずれか１項に記載の１又は複数の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規の二環式ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン類、それらの製造方法、それらを含む薬剤及びそれらの製造、並びに医薬的活性剤としてのそれらの化合物の使用に関する。
【０００２】
いくつかの置換された二環式の窒素複素環式化合物は、それらのタンパク質キナーゼ及びそれらのチロシンキナーゼ阻害活性について当業界で知られている。WO02/090360は、キナーゼ酵素阻害剤として、及び過増殖病(hyperproliferatie direse)の処置にとって有用なピリド［２，３−ｄ］ピリミジンを開示する。
【０００３】
WO03/000011号は、タンパク質キナーゼ阻害剤としての、及び一般的に骨疾患、癌及びシグナル化症害の処置のためのピリド［２，３−ｄ］ピリミジンのリン−含有誘導体を開示する。
【０００４】
WO96/15128号は、タンパク質チロシンキナーゼの阻害剤としての、及びアテローム硬化症、再狭窄、乾癬、細菌感染及び癌の処置のための６−アリール−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジンを開示する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
上文で言及した文献に示される進展にもかかわらず、治療指数の向上、例えば、幾つか例を挙げると、活性、耐性、選択性又は安定性の向上を示す新規化合物についての必要性が依然存在している。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、下記一般式：
【化１】
2007529451.tif 000003
［ここで、
Ｒ1は−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−アルキル又は−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（アルキル）2｛これらのアルキル基は、任意に
−ＯＨ；
−ＮＨ（アルキル）；
−Ｎ（アルキル）2；
−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−アルキル；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−アルキル；
−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（アルキル）2；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2；
−Ｏ−アルキル；
−ヘテロシクリル；
−ＮＨ−ヘテロシクリル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−アルキル；
−Ｓ（Ｏ）2−ＮＨ2;又は
−Ｓ（Ｏ）−アルキル
で置換されている（全てのアルキル基は任意に−ＯＨで置換されている）｝；
あるいは下記基：
−ＣＮ；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ヘテロシクリル；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2；又は
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）-アルキル｛このアルキルは任意に−ＮＨ（アルキル）；又は−Ｎ（アルキル）2により置換されている｝であり；そして
Ｒ2は、
ハロゲン；
ヘテロシクリル；
アルキル；
−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−アルキル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−アルキル；
−(ＣＨ2)m−Ｓ（Ｏ）2−ＮＨ2；
−（ＣＨ2)m−Ｓ（Ｏ）2−Ｎ（アルキル）2；
−(ＣＨ2)m−Ｓ（Ｏ）2−ＮＨ-（アルキル）；
−Ｏ−アルキル；又は
−Ｓ（Ｏ）n−アルキルであり｛全てのアルキル基が任意に
−ＯＨ；
−Ｏ−アルキル；
−ＮＨ−アルキル；若しくは
−Ｎ（アルキル）2；
で置換されている｝；
Ｘは−ＣＨ＝又は−Ｎ＝であり；
ｍは、０，１，２，３，４，５又は６であり；
ｎは、０，１又は２である］の新規化合物、及び医薬として許容されるその塩である。
【０００７】
本発明の化合物は、タンパク質キナーゼ阻害剤、特にsrcファミリーのチロシンキナーゼ阻害剤としての活性を示し、そしてそれ故に、前記チロシンキナーゼにより介在される疾患の処置のために有用である。チロシンキナーゼのファミリーは、ペプチド及びタンパク質のチロシン残基をリン酸化することによる細胞シグナル化及び細胞増殖の調節において重要な役割を演じる。チロシンキナーゼの不適切な活性化が、種々の疾患状態、例えば炎症性、免疫学的、CNS症害、又は腫瘍学的障害又は骨疾患に関与することが知られている。例えば、Susa, M.,など., Trends Pharmacol. Sci., 21 (2000) 489-495；Biscardi, J. S., et al., Adv. Cancer Res. 76 (2000) 61-119を参照のこと。
【０００８】
本発明の化合物は、例えば移植片拒絶、炎症性腸症候群、リウマチ性関節炎、乾癬、再狭窄、アレルギー性喘息、アルツハイマー病、パーキンソン病、発作、骨粗鬆症、癌及び良性過形成の予防及び治療において活性剤として使用され得る。
【０００９】
本発明の化合物は、驚くべきことに、当業界で既知の化合物と比較して、ｓｒｃ−チロシンキナーゼに対する同程度の活性とともに、代謝の安定性及び選択性の向上を示すことが明らかとなった。
【００１０】
本発明の目的は、式Iの化合物及び医薬として許容される塩並びにそれらの鏡像異性体形、上記化合物の調製、それらを含む薬剤及びそれらの製造、並びに疾患、特に上文で言及した疾患の制御又は予防、又は対応する薬剤の製造への上記化合物の使用方法である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本明細書で使用する場合、用語「アルキル」とは、１〜６個、好ましくは１〜４個の炭素原子を含む、飽和の直鎖又は枝分かれ鎖の炭化水素、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、２−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル及びそれらの異性体を意味する。「任意に置換された」アルキル基は、置換されていないか、あるいは、１回又は可能なら、２回置換されている、上文で定義したようなアルキル基である。
【００１２】
本明細書で使用する場合、「（Ｃ1−Ｃ4）アルキル」とは、１〜４個の炭素原子を含む、飽和の直鎖又は枝分かれ鎖の炭化水素、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、２−ブチル、ｔ−ブチルを意味する。
【００１３】
用語「ヘテロシクリル」は、本明細書で使用する場合、１〜３、好ましくは１又は２個の炭素原子が窒素−、酸素−又は硫黄原子、あるいは基−Ｓ（Ｏ）２−で置換されている、５〜１０員の単環又は二環式の芳香族又は非芳香族炭化水素を意味する。前記ヘテロシクリル基は、アルキル、オキソ又は−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２で１回又は２回任意に置換されている。例としては、２−オキソ−イミダゾリジン−１−イル；ピロリジン−２−イル；ピロリジン−３−イル；２−オキソピロリジン−１−イル；１−メチル−ピロリジン−２−イル；イミダゾール−４−イル；ピラゾール−３−イル；２−メチル−ピラゾール−３−イル；１−メチル−ピラゾール−５−イル；１，５−ジメチル−ピラゾール−３−イル；４−カルバモイル−ピラゾール−３−イル；ピペリジン−３−イル；ピペリジン−４−イル；１−メチル−ピペリジン−４−イル；モルホリン−４−イル；ピリジン−２−イル；１−アザ−ビシクロ［２．２．２］オクタ−３−イル又は４，４−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］オキサチイン−６−イル、がある。
【００１４】
本明細書で使用する場合、ハロゲンの用語は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素を意味し、好ましくはフッ素、塩素及び臭素であり、そしてより好ましいのはフッ素及び塩素である。
【００１５】
好ましくは、式Ｉの置換基Ｒ2はパラ又はメタ位に位置する。
【００１６】
本発明の好ましい態様は、
Ｘが−ＣＨ＝であり；
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−アルキルであり、当該アルキル基は、任意に
−ＯＨ；
−ＮＨ（アルキル）；
−Ｎ（アルキル）2；
−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−アルキル；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−アルキル；
−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（アルキル）2；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2；
−Ｏ−アルキル；
−ヘテロシクリル；
−ＮＨ−ヘテロシクリル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−アルキル；
−Ｓ（Ｏ）2−ＮＨ2;又は
−Ｓ（Ｏ）−アルキル
で置換され、全てのアルキル基は任意に−ＯＨで置換されており；且つ
Ｒ2が上文で示した意味を有する、式Ｉの化合物である。
【００１７】
本発明の別の態様は、
Ｘが−ＣＨ＝であり；
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−メチル；又は
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−エチルであり、このメチル又はエチルが置換されておらず、又は
１回
−ＯＨ；
−ピロリジニル；又は
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3
で置換されており；且つ
Ｒ2が上文で示した意味を有する、式Ｉの化合物である。
【００１８】
本発明の更に別の態様は、
Ｘが−ＣＨ＝であり；
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−エチル；又は
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−メチルであり、このエチル又はメチルが１回
−ＯＨ；又は
−ピロリジニル
で置換されており；且つ
Ｒ2がモルホリン−４−イル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3；
−Ｏ−アルキル；又は
−Ｓ（Ｏ）n−アルキルであり、全てのアルキルが任意に１回
−ＯＨ；
−Ｏ−アルキル；
−ＮＨ−アルキル；若しくは
−Ｎ（アルキル）2；
で置換されており；
ｎは０，１又は２である、
式Ｉの化合物；及び
医薬として許容されるその塩、である。
【００１９】
そのような化合物は、例えば、
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−フェニルアミノ］−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−ヒドロキシ−エチル）−アミド；
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−ヒドロキシ−エチル）−アミド；
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−フェニルアミノ］−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（（Ｒ）−１−ピロリジン−２−イルメチル）−アミド；
又は６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（（Ｒ）−１−ピロリジン−２−イルメチル）−アミド、である。
【００２０】
本発明の更に別の態様は、
Ｘが−ＣＨ＝であり；
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）2−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3であり；且つ
Ｒ2がモルホリン−４−イル；
４−メチル−ピペラジン−１−イル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3；
−Ｏ−アルキル；又は
−Ｓ（Ｏ）n−アルキルであり、全てのアルキルが任意に１回
−ＯＨ；
−Ｏ−アルキル；
−ＮＨ−アルキル；若しくは
−Ｎ（アルキル）2；
で置換されており；
ｎは０，１又は２である、
式Ｉの化合物；及び
医薬として許容されるその塩、である。
【００２１】
そのような化合物は、例えば
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−メタンスルホニルアミノ−エチル）アミド；
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−フェニルアミノ］−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−メタンスルホニルアミノ−エチル）アミド；
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−（３−メタンスルホニルアミノ−フェニルアミノ)−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−メタンスルホニルアミノ−エチル）アミド；
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［３−（２−ヒドロキシ−エチルスルファニル）−フェニルアミノ]−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−メタンスルホニルアミノ−エチル）アミド；
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ]−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−メタンスルホニルアミノ−エチル）アミド；又は
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−（３−メチルスルファニル−フェニルアミノ）−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−メタンスルホニルアミノ−エチル）アミド
である。
【００２２】
本発明の更に別の態様は、
Ｘが−ＣＨ＝であり；
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2であり；且つ
Ｒ2がモルホリン−４−イル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3；
−Ｏ−アルキル；又は
−Ｓ（Ｏ）n−アルキルであり、全てのアルキルが任意に１回
−ＯＨ；
−Ｏ−アルキル；
−ＮＨ−アルキル；若しくは
−Ｎ（アルキル）2；
で置換されており；
ｎは０，１又は２である、
式Ｉの化合物；及び
医薬として許容されるその塩、である。
【００２３】
そのような化合物は、例えば：
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸アミド；又は
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−フェニルアミノ］−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸アミド
である。
【００２４】
本発明の更に別の態様は、
Ｘが−ＣＨ＝であり；
Ｒ1が−ＣＮであり；且つ
Ｒ2がモルホリン−４−イル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3；
−Ｏ−アルキル；又は
−Ｓ（Ｏ）n−アルキルであり、全てのアルキルが任意に１回
−ＯＨ；
−Ｏ−アルキル；
−ＮＨ−アルキル；若しくは
−Ｎ（アルキル）2；
で置換されており；
ｎは０，１又は２である、
式Ｉの化合物；及び
医薬として許容されるその塩、である。
【００２５】
そのような化合物は、例えば：
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）−フェニルアミノ］−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボニトリル ;
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボニトリル；又は
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（２−ヒドロキシ−エトキシ）フェニルアミノ］−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボニトリル
である。
【００２６】
本発明の更に別の態様は、
Ｘが−Ｎ＝であり；
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）2−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3であり；且つ
Ｒ2がアルキル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3；
−Ｏ−アルキル；又は
−Ｓ（Ｏ）n−アルキルであり、全てのアルキルが任意に１回
−ＯＨ；
−Ｏ−アルキル；
−ＮＨ−アルキル；若しくは
−Ｎ（アルキル）2；
で置換されており；
ｎは０，１又は２である、
式Ｉの化合物；及び
医薬として許容されるその塩、である。
【００２７】
そのような化合物は、例えば：
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２− （６−メチル−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−メタンスルホニルアミノ−エチル）アミド
である。
【００２８】
本発明の更に別の態様は、本発明の化合物の製造方法であり、
ここで、
（ａ）一般式（ＩＩ）の化合物
【化２】
2007529451.tif 000004
のスルフィド基は相当のスルホキシドに変換され、このスルホキシド基を、
（ｂ）式（ＩＩ−Ａ）
【化３】
2007529451.tif 000005
（ここで、Ｒ2及びＸは、本明細書の前文で示した意味を有する）
の各アニリンで置換して一般式（ＩＶ）の化合物
【化４】
2007529451.tif 000006
を生成させ、
（ｃ）式（ＩＶ）の−ＣＯＯＨ基は式（Ｉ）のアミド誘導体に変換され；そして
（ｄ）所望により、（ｃ）から得られた第一級アミド誘導体はその相当の式（Ｉ）の７−カルボニトリル誘導体に更に変換され；そして
（ｅ）所望により、（ｃ）又は（ｄ）から得られた一般式（Ｉ）の前記化合物は医薬として許容される塩に変換される。
【００２９】
更に詳細に説明すると、Ｒ1がアミド基を介して結合している式（Ｉ）の化合物は、一般式（Ｉａ）によって表される。かかる化合物は、式（ＩＩ）のカルボン酸から、当業界で周知の標準的な反応を用いて調製することができる。一般式（Ｉａ）の化合物の合成をスキーム１に示す。ここで、Ｒ3は、基−ＣＮを除き、上文で示した意味を有しており、従って、
Ｒ3は−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−アルキル又は−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（アルキル）2｛これらのアルキル基は、任意に
−ＯＨ；
−ＮＨ（アルキル）；
−Ｎ（アルキル）2；
−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−アルキル；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−アルキル；
−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（アルキル）2；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2；
−Ｏ−アルキル；
−ヘテロシクリル；
−ＮＨ−ヘテロシクリル；
−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）2−アルキル；
−Ｓ（Ｏ）2−ＮＨ2;又は
−Ｓ（Ｏ）−アルキル
で置換されている（全てのアルキル基は任意に−ＯＨで置換されている）｝；
あるいは下記基：
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ヘテロシクリル；
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2；又は
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）-アルキル（このアルキルは任意に−ＮＨ（アルキル）；又は−Ｎ（アルキル）2により置換されている）であり；
且つＲ2及びＸは上文で示した意味を有する。
【００３０】
一般式（Ｉ）の化合物、又は医薬として許容されるその塩、の誘導体は、化学的に関連する化合物の調製に適用可能であることが当業者知られている任意の方法によって調製することができる。かかる方法は、式（Ｉ）のジアジン誘導体、又は医薬として許容される塩を調製するのに使用する場合、本発明の更なる特徴として提供され、そして以下のスキーム１からスキーム４の代表例によって例示される。ここで、特に断らない限り、Ｒ1、Ｒ2及びＸは、本明細書の前文で示した意味を有する。必要な出発材料は市販のものか、あるいは、有機化学の標準的手順により得ることができるものである。このような出発材料の調製は、以下の実施例内で説明する。あるいは、必要な出発材料は、例示する手順に類似の、有機化学者の通常の技術範囲内にある手順により得られる。
【００３１】
【化５】
2007529451.tif 000007
【００３２】
あるいは、カルボン酸（ＩＩ）は、スキーム（ＩＩ）に従い、最初に、カルボキサミド（Ｖ）に変換することができ、続いて、２位をアニリンで置換してもよく、ここで、Ｒ3、Ｒ2及びＸは上文で示した意味を有する。
【００３３】
【化６】
2007529451.tif 000008
【００３４】
式（Ｉａ）又は（Ｖ）（ここで、Ｒ3は−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2である）の第一カルボキサミドが、従来の方法、例えばＳＯＣｌ2又はＰＯＣｌ3による脱水により、一般式（Ｉｂ）のニトリルに変換することができる。式（Ｉｂ）の前記ニトリルはまた、スキーム３に従う既知のピリミジン誘導体（ＶＩＩ）から調製することもでき、ここで、Ｒ2は本明細書の前文で示した意味を有し、そしてＬは適切な脱離基である。
【００３５】
【化７】
2007529451.tif 000009
【００３６】
段階１：
式（Ｂ）の３−（２，６−ジクロロ−フェニル）−ピルビン酸、又は、概してアリールピルビン酸を式（Ａ）の適切なピリミジンカルバルデヒドと縮合することで化合物（II）が得られる。前記縮合反応は、水又はメタノール（ＭｅＯＨ）又は１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）中、水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）により、又はジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、１−メチル−２−ピロリジノン（ＮＭＰ）又はテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシレート（ＫＯｔＢｕ）により、塩基性条件下で行われ得る。他方では、縮合反応は、酢酸ナトリウムの存在下で酢酸中で行われる。反応温度は、室温（ＲＴ）〜１５０℃の範囲である。
【００３７】
段階２，６及び１０：
式（ＩＩ）、（Ｖ）又は（ＩＸ）のピリドピリミジンの２位のメチルチオ、あるいは任意な他のアルキルチオ又はアリールチオ基は、式（ＩＩＩ）、（ＶＩ）又は（ＩＸ）のその相当のスルホン又はスルホキシドへの酸化により、適切な脱離基に変換することができる。適切な試薬は例えば、−４０℃〜＋６５℃の範囲の温度での不活性溶媒、例えばジクロロメタン（ＣＨ2Ｃｌ2）、クロロホルム（ＣＨＣｌ3）又はメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）中の、３−クロロペルオキシ安息香酸（ｍＣＰＢＡ）又は２−ベンゼンスルホニル−３−フェニル−オキサジリジンである。
【００３８】
段階３，７及び１１：
段階２，６又は１０由来のスルホキシド又はスルホンは、式（ＩＶ）、（Ｉａ，スキーム２）又は（Ｉｂ）の２−アニリノ置換ピリドピリミジンを得るために、精製された形で又は粗生成物としてアニリンと反応させることができる。当該反応は、溶媒としての過剰のアニリンにおいて、又は不活性溶媒、例えばＣＨ2Ｃｌ2、トルエン、アセトニトリル、ＤＭＦ、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）又はＮＭＰにおいて、及び０℃〜１５０℃の範囲の温度で行われる。酸、例えばトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）又は塩酸（ＨＣｌ）が前記反応を触媒するために添加され得る。ｍＣＰＢＡが前の酸化段階のために使用された場合、粗反応混合物に存在する、形成されたｍ−クロロ安息香酸が、触媒として作用することができる。
【００３９】
段階４及び５：
式（ＩＶ）又は（ＩＩ、スキーム２）の適切なカルボン酸は、当業界において知られている標準的な方法により、式（Ｉａ、スキーム１）又は（Ｖ）のアミド誘導体に変換することができる。例えば、前記酸は最初に、カルボジイミド又はカルボニルジイミダゾール又は塩化オキサリルとの反応により活性化され、そして続いて、適切な置換されたアミン又はアンモニアと、単離することなく反応させられる。当該反応は、０℃〜１５０℃の範囲の温度で、不活性溶媒、例えばＴＨＦ、ＣＨ2Ｃｌ2又はＮＭＰ中で最もよく行われる。
【００４０】
段階８：
（ＶＩＩＩ）における適切な脱離基「Ｌ」はトリフレートであり、これは、塩基、例えばトリエチルアミン（ＮＥｔ3）、ピリジン、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（ＫＯｔＢｕ）、リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）、ＮａＨ又はＫ2ＣＯ3の存在下で、不活性溶媒、例えばＴＨＦ、ＣＨ2Ｃｌ2又はＮＭＰ中でのトリフルオロメタンスルホン酸無水物（Ｔｆ2Ｏ）又はＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド（ＰｈＮ(Ｔｆ)2）との反応により、（ＶＩＩ）から調製され得る。別の脱離基は、ＰＯＣｌ3又はＰＯＢｒ3によるピリドンのハロゲン化により導入することができる塩素又は臭素原子である。
【００４１】
段階９：
（ＶＩＩＩ）における脱離基「Ｌ」は、ＲＴ〜１８０℃の温度で、不活性溶媒、例えばジグリム、ＤＭＦ、ＮＭＰ又はスルホラン中で無機シアン化物、例えばシアン化カリウム（ＫＣＮ）、シアン化ナトリウム（ＮａＣＮ）又はシアン化銅（ＣｕＣＮ）により置換することができ、その結果（ＩＸ）が得られる。好ましくは、この反応はまた、遷移金属触媒、例えばＰｄ又はＮｉ触媒により触媒され得る。この場合、シアン化亜鉛（Ｚｎ(ＣＮ)2）が、シアン化物源として適用され得る。
【００４２】
Ｒ3又はＲ2における側鎖によっては、反応順序の間、保護を必要とすることがある。これには、当業界において良く知られている標準の保護及び保護解除方法が適用され得る。例えば、第一級及び第二級アミンが、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）又はベンジルオキシカルボニルで保護した形で適用され、そして保護基は、酸、例えばＨＣｌ又はトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）による処理により最後の反応段階として除去され得る。
【００４３】
一般式Iの化合物は、１又は複数のキラル中心を含み、そして次に、ラセミ形で、又は光学的活性形で存在することができる。ラセミ体は、既知の方法に従って、鏡像異性体に分離され得る。例えば、結晶化により分離され得るジアステレオマー塩は、光学的活性の酸、例えばＤ−又はＬ−酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸、乳酸又は樟脳スルホン酸との反応により、ラセミ混合物から形成される。あるいは、鏡像異性体の分離はまた、市販のキラルＨＰＬＣ−相上でのクロマトグラフィーを用いることにより達成され得る。
【００４４】
本発明の化合物は、それらの医薬として許容される塩の形で存在することができる。用語「医薬として許容される塩」とは、式Iの化合物の生物学的有効性及び性質を保持し、そして適切な非毒性有機又は無機酸又は有機又は無機塩基から形成される、従来の酸付加塩又は塩基付加塩を言及する。酸付加塩は、無機酸、例えば塩酸、臭酸、ヨウ酸、硫酸、スルファミド酸、リン酸及び硝酸に由来するそれらの塩、及び有機酸、例えばｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、琥珀酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸及び同様のものに由来するそれらの塩を包含する。塩基付加塩は、アンモニア、カリウム、ナトリウム及び第四級アンモニウム水酸化物、例えばテトラメチルアンモニウム水酸化物に由来するそれらの塩を包含する。医薬化合物の塩への化学的変性は、化合物の改良された物理的及び化学的安定性、吸湿性、流動性及び溶解性を得るために、当業者に良く知られている技法である。それらは、例えば、Bastin,R. J. et al, Organic Proc. Res. Dev. 4 (2000) 427-435に記載されている。
【００４５】
本発明の化合物及びそれらの医薬として許容される塩は、例えば医薬調製物の形で薬剤として使用され得る。医薬調製物は、錠剤、被覆された錠剤、糖剤、硬質及び軟質ゼラチンカプセル、溶液、エマルジョン又は懸濁液の形で経口投与され得る。しかしながら、投与はまた、例えば坐剤の形で直腸的に、又は例えば注射用溶液の形で非経口的にもたらされ得る。
【００４６】
上文で言及した医薬調製物は、本発明の化合物を、医薬的に不活性な無機又は有機担体により処理することにより得られる。ラクトース、コーンスターチ又はその誘導体、タルク、ステアリン酸又はその塩、及び同様のものが、例えば錠剤、被覆された錠剤、糖剤、及び硬質ゼラチンカプセルのためのそのような担体として使用され得る。軟質ゼラチンカプセルのための適切な担体は、例えば、植物油、ワックス、脂肪、半固体及び液体ポリオール、及び同様のものである。しかしながら、活性物質の性質に依存して、担体は、軟質ゼラチンカプセルの場合、常に必要とされるものではない。溶液の生成のための適切な担体は、シロップ、水、ポリオール、グリセロール、植物油及び同様のものである。坐剤のための適切な担体は、例えば天然又は硬化された油、ワックス、脂肪、半液体又は液体ポリオール、及び同様のものである。
【００４７】
さらに、医薬調製物は、保存剤、溶解剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、甘味剤、着色剤、風味剤、浸透圧を変えるための塩、緩衝液、マスキング剤、又は酸化防止剤を含むことができる。それらはまた、他の治療的に価値ある物質も含むことができる。
【００４８】
好ましい医薬調製物は、次の方法を用いることにより得られた：
１．注文製作された管ＧＬ２５、４ｃｍにおいて4.0gのガラスビーズを計量する（管の半分をビーズにより満たす）。
２．５０ｍｇの化合物を添加し、ヘラにより分散し、そしてボルテックスにかける。
３．２ｍｌのゼラチン溶液（ビーズ：ゼラチン溶液（重量）＝２：１）を添加し、そしてボルテックスにかける。
４．キャップし、そして光の保護のためにアルミ箔でラップする。
５．ミル用のカウンターバランスを用意する。
６．Retschミルにおいて４時間、20/秒で微粉砕する（ある物質に関しては、30/秒で24時間まで）。
７．４００ｇで２分間の遠心分離により溶液体バイアルに連結した、フィルターホルダー上の二層のフィルター（１００μｍ）によるビーズからの懸濁液を抽出する。
８．抽出物を測定シリンダーに移す。
９．最終体積に達するか、又は抽出物が透明になるまで、少量（ここにおいては、１ｍｌ段階）での洗浄を繰り返す。
１０．ゼラチンにより最終体積まで満たし、そして均質化する。
【００４９】
上記調製は、１〜１０μｍの粒子サイズを有する式Ｉの化合物の微小懸濁液を生成する。当該懸濁液は、経口投与のために適切であり、後述するin vivo薬物動態試験において使用した。
【００５０】
ｓｒｃ−ファミリーのチロシンキナーゼの阻害
ｓｒｃ−ファミリーのチロシンキナーゼの阻害剤としての本発明の化合物の活性は、以下のアッセイを用いることで証明した。本明細書で使用する場合、Ｒｏはペプチド：ＮＨ2−Ａ−Ｅ−Ｅ−Ｅ−Ｉ−Ｙ−Ｇ−Ｅ−Ｆ−Ｅ−Ａ−Ｋ−Ｋ−Ｋ−Ｋ−ＣＯＮＨ2 ;Ｊａｌ３３−Ｒｏはペプチド：Ｊａｌ３３−Ｇ−アミノカプリル酸−Ａ−Ｅ−Ｅ−Ｅ−Ｉ−Ｙ−Ｇ−Ｅ−Ｆ−Ｅ−Ａ−Ｋ−Ｋ−Ｋ−Ｋ−ＣＯＮＨ2を指し、ここで、Ｊａｌ３３はLightCycler-Red 640-N-ヒドロキシスクシンイミドエステルであり；ＰＴ６６はプロテインチロシンキナーゼのリン酸化チロシンを検出することができるホスホチロシン特異的抗体を指し；そしてＴＣＥＰはトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィンを指し：Lck Cisbio Mab PT66-Kは抗ホスホチロシン（ＰＴ６６）−クリプテートを指し；そしてSrc EG&G Wallac PT66 Eu-W1024はＥｕ３＋−標識抗ホスホチロシン（ＰＴ６６）−クリプテートを指す。
【００５１】
ＳＲＣ−阻害剤アッセイパラメーター：
反応混合物：
ＡＴＰ：５μＭ
ペプチド（Ro＋Ja133-Ro）：１０μＭ
Ja133-Ro 196nM
Ro 9.8μM
PT66 230ng/ml
【００５２】
アッセイ緩衝液： 4mMのMgCl2
2mMのTCEP
50mMのHEPES
0.1％Tween20 (pH7.3)
酵素： 2.5U/ml
阻害剤： 最大25μM
最少0.42nM
【００５３】
材料：
Eu−標識ホスホチロシン抗体：−Lck Cisbio Mab PT66-K用、
−Src EG & G Wallac PT66Eu-W1024用（すべて市販品）。
【００５４】
ペプチド：Ｒｏ：ＮＨ2−Ａ−Ｅ−Ｅ−Ｅ−Ｉ−Ｙ−Ｇ−Ｅ−Ｆ−Ｅ−Ａ−Ｋ−Ｋ−Ｋ−Ｋ−ＣＯＮＨ2、及びa133-Ro：Ja133-G-アミノカプリル酸Ａ−Ｅ−Ｅ−Ｅ−Ｉ−Ｙ−Ｇ−Ｅ−Ｆ−Ｅ−Ａ−Ｋ−Ｋ−Ｋ−Ｋ−ＣＯＮＨ2、ここでJa133はLightCycler-Red 640−Ｎ-ヒドロキシスクシンイミドエステルである；ここで、両ペプチドは、Zinsser SMP350ペプチド合成機上で、最適化された固相ペプチド合成プロトコール（Merrifield, Fed. Proc. Fed. Amer. Soc. Exp. Biol. 21 (1962) 412）により合成された。手短に言及すれば、ペプチドが160mg（22.8μモル）のRink-Linker変性ポリスチレン固相上で、側鎖機能に依存して、一時的ピペリジン不安定Fmoc−及び永久的酸不安定tert-Bu-, BOC-及びOtert-Bu-基により、それぞれ保護された20倍過剰のアミノ酸を反復して接合することによりアセンブリーされた。基質配列ＡＥＥＥＩＹＧＥＦＥＡＫＫＫＫは、スペーサーアミノ酸アミノカプリル酸及びグリシンによりさらに固定されたN−末端であった。N−末端一時的保護基の切断の後、まだ結合され、そして保護されているペプチドが、1.5倍量のLightCycler−Red640−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（Roche Diagnostics GmbHにより市販されている）及びトリエチルアミンにより標識された。３時間後、樹脂が、青色の樹脂の溶出物が無色になるまで、ジメチルホルムアミド及びイソプロパノールにより洗浄された。十分に保護され、そして標識されたペプチドが、固相から除去され、そして80％トリフルオロ酢酸、10％エタンジチオール、５％チオアニソール及び5％水の混合物による処理により、永久保護基から開放された。最終的に、基質は、分離用逆相HPLC精製により単離された。精製は、12.2mgのRP-HPLC単一ピークの純粋な青色材料（凍結乾燥物）を生成した。同一性は、MALDI質量分光計［2720.0］により証明された。
【００５５】
酵素：Upstate Lck (p56lck, 活性)、Upstate Src (p60c-src, 一部精製された)は、UBIにより購入された。
【００５６】
時間分解蛍光アッセイ：リーダー：Perkin Elmer, Wallac Viktor 1420-040複数ラベルカウンター；液体取扱いシステム：Backman Coulter, Biamek 2000。ATP, Tween20, HEPESは、Roche Molecular Biochemicalsから購入し、MgCl2及びMnCl2はMerck Euralabから購入し、TCEPはPierceから購入し、384ウェル低体積蛍光プレートはFalconから購入した。
【００５７】
アッセイの説明：
最初に、酵素が、対応する量の本発明の阻害剤と共に水性溶液において15℃で15分間、プレインキュベートされる。次に、リン酸化反応が、ＡＴＰ、ペプチド及びＰＴ６６を含む反応混合物を添加し、そして続いて振盪することにより開始される。この反応の進行はすぐに、適切なウェルプレートリーダーにおいて、時間分解蛍光分光計を用いてモニターされる。
【００５８】
ＩＣ50−値は、非線上曲線適合（Excelfit）を用いることにより、反応から入手され得る。
【００５９】
【表１】
2007529451.tif 000010
【表２】
2007529451.tif 000011
【００６０】
腫瘍阻害に対するin vivoアッセイ：
原発腫瘍を生成するために、ＨＴ−２９結腸癌細胞（100μlの体積中、2.5×106個）を、１ｍｌの注射器及び２６Ｇの針を用いて、雄重症複合免疫不全（ＳＣＩＤ）マウスの左側腹部中に皮下注射する。ＨＴ−２９細胞は、ＮＣＩから得られ、そして細胞銀行に寄与されていた。細胞を融解し、そして実験に使用の前、in vitroで拡張した。マウスを、９日目、処理グループに割り当てる。グループ分けのために（ｎ＝12匹のマウス/グループ）、動物をランダム化し、グループ当たり約１２０ｍｍ3の類似する平均原発腫瘍体積を得る。試験化合物を、実際の体重に基づいて10ml/kgの投与体積で、７．５％ゼラチン、０．２２％ＮａＣｌ中、懸濁液として１日当たり１度、経口投与する。処理を１０日目で開始し、そして研究の最終日の30日目まで行う。皮下原発腫瘍を、電気カリパスを用いて、腫瘍細胞移植の7日後に開始して、２つの寸法（長さ及び幅）で、週当たり２度、測定する。原発腫瘍の体積を、式：Ｖ［ｍｍ3］＝（長さ［ｍｍ］×幅［ｍｍ］）/２を用いて計算する。さらに、動物の体重を、毎週、少なくとも２度、記録する。最後に、研究の終わりに、腫瘍を外植(explant)し、そして計量する。
【００６１】
以下の実施例、引用文献は、本発明、特許請求の範囲に記載されているそれらの範囲の理解を助けるために提供されている。本発明の精神を逸脱することなく前述の手順を変更することができることは理解されるであろう。
【００６２】
出発材料
ａ）エチル３−（２，６−ジクロロフェニル）−２−オキソプロピオナート
１２．４ｇのマグネシウム粉末をアルゴン雰囲気の下１時間攪拌して乾燥させることで活性化した。２５０ｍｌの乾燥エーテルを添加した。２５ｇの２，６−ジクロロベンジルブロマイドを１５０ｍｌのエーテルに溶解し、この１０ｍｌの溶液を攪拌したマグネシウム懸濁液に添加した。少量のヨウ素を添加し、そして混合物を穏やかに１０分間加温して反応を開始させた。続いて、２，６−ジクロロベンジルブロマイド溶液の残りを室温（ＲＴ）で１時間後に添加し、そして混合物を続いて２時間還流させた。
【００６３】
上記グリニャール溶液を−３０℃に冷却し、そして１５０ｍｌのエーテル中の２９．５ｇのシュウ酸ジエチルに素早く添加し、これを予め−５０℃に添加した。混合物を室温で放置し、そして室温での攪拌を更に１４時間続けた。
【００６４】
混合物を塩酸溶液で洗浄し、真空下で乾燥して濃縮した。最初の群の８．１ｇの結晶性の表題の生成物を濾過で単離した。第二の群の８．７ｇのものは、全ての揮発成分を７０℃／２０ｍｂａｒで蒸発させた後に得られた。
【００６５】
ｂ）３−（２，６−ジクロロフェニル）−２−オキソプロピオン酸
７０ｍｌのエタノール中の８．１ｇの上記エチルエステルを５０ｍｌの１．６ＭのＮａＯＨと一緒に室温で４時間攪拌した。混合物をジクロロメタンで希釈し、そして水性ＨＣｌでｐＨを１〜２に酸性化し、続いてジクロロメタンで抽出した。一まとめにしたジクロロメタン相を１ＭのＮａＯＨで抽出し、水相を再び酸性化し、そして更にもう１回ジクロロメタンで抽出した。溶媒を真空下で蒸発させることにより５．０ｇの表題の生成物が生成した。
【００６６】
ｃ）６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−メチルスルファニルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸
試験ｂ）由来の３．０ｇの生成物を２０ｍｌの乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中に溶解し、そして−２０℃に冷却した。２．５５ｇのカリウムｔｅｒｔ−ブチレートをゆっくりと添加した。−１０℃で、１．７７７ｇの４−アミノ−２−メチルスルファニルピリミジン−５−カルバルデヒドを添加し、そして混合物を７０℃に加温した。生じた懸濁液を追加の３０ｍｌのＤＭＦで希釈し、そして７０℃での混合を３時間続けた。
【００６７】
混合物をＲＴに冷却し、そして３００ｍｌの水で希釈した。塩酸でｐＨ１〜２に酸性化して、粗製生成物を沈殿させ、そして濾過し、そして更にクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル＋５％酢酸）で精製した。
表題生成物の収量１．３５ｇ
【００６８】
ｄ）６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−メチルスルファニルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（７−メタンスルホニルアミノ−エチル）−アミド
試験ｃ）由来の０．４５ｇの生成物を１０ｍｌの乾燥ＤＭＦに溶解させ、０．２１５ｇのカルボニルジイミダゾールを添加し、そして混合物を室温で１時間攪拌した。４ｍｌのＤＭＦ中の０．２２８ｇの２−メチルスルホニルアミノ−エチルアミンを一滴ずつ添加し、そして混合物を更に２時間攪拌した。混合物を２００ｍｌの水で希釈した。粗製の表題の生成物が沈殿し、そしてこれを濾過で回収した。濾液をジクロロメタンで抽出し、有機相を乾燥して蒸発させ、そして残渣を粗製生成物の第一沈殿物と一緒にした。シリカ上でのクロマトグラフィーにより３７５ｍｇの表題の生成物が生成した。
【００６９】
ｅ）２−（｛［６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−メチルスルファニル−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボニル］−アミノ｝−メチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
０．２ｇの出発材料ｃ）、０．０９６ｇの１，１’−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、及び０．１５３ｇの（Ｒ）−２−アミノメチル−１−Ｂｏｃ−ピロリジン（Astatechから購入）から、試験ｄ）と同様に行った。
【００７０】
ＤＭＦ中の反応混合物を１００ｍｌの水で希釈し、そして沈殿した粗製生成物を濾過により単離した。濾液を塩酸で酸性化し、そしてジクロロメタンで抽出した。上文由来の粗製生成物をジクロロメタン中に溶解し、そして、希塩酸で洗浄し、続いて他のジクロロメタン抽出物と一まとめにした。残渣の蒸発及びシリカゲル上でのクロマトグラフィーにより、１５２ｍｇの表題の生成物が生成した。
【００７１】
ｆ）６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−メチルスルファニル−８Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−オン
５０ｍｌのテトラリン中の５．０ｇの４−アミノ−２−メチルスルファニルピリミジン−５−カルバルデヒドの混合物に対し、１０．９１ｇの２，６−ジクロロフェニル酢酸、１０．７６ｇのトリエチルアミン及び２２．４５ｇの塩化ピバロイルを連続して添加した。混合物を１９０℃で３０分間攪拌し、続いて追加の２．０４ｍｌの塩化ピバロイルを添加した。３０分後、２．０４ｍｌの塩化ピバロイルの次の部分を添加し、そして温度を１９５℃に上昇させた。更に３０分及び６０分後、２以上の部分の塩化ピバロイルを添加し、そして最後に攪拌を更に１時間１９５℃で続けた。
【００７２】
約４０ｍｌの溶媒を真空下で除去し、１００ｍｌのエーテルを添加し、そして沈殿した粗製生成物を濾過により単離した。粗製生成物をエーテル及び水で洗浄して４．１６ｇの表題の生成物を生成させた。
【００７３】
ｇ）トリフルオロ−メタンスルホン酸６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−メチルスルファニル−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イルエステル
４．０ｇの出発材料ｆ）を２０ｍｌの乾燥Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）中で懸濁し、そして０．５６２ｇの６０％水素化ナトリウムで処理した。３０分４０℃で攪拌した後、混合物を室温で冷却し、そして７．０２ｇのＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミドを添加した。室温で４５分経過した後、追加の２．０１ｇのＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミドを添加し、そして攪拌を更に３０分間続けた。
【００７４】
溶媒を真空下６０℃で除去し、そして残渣をシリカ上でのクロマトグラフィーにより精製して、約２５％のフェニルトリフルオロメタンスルホンアミドを含む５．３８ｇの表題の生成物を生成させた。２．４ｇのこの材料を、ジクロロメタン中で溶解して炭酸ナトリウム水溶液中で洗浄することにより更に精製し、次の段階に使用する１．７２ｇのものを生成させた。
【００７５】
ｈ）６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−メチルスルファニル−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボニトリル
上記由来の１．７２ｇの出発材料ｇ）を、０．４２３ｇのテトラキス−（トリフェニルホスフィノ）パラジウム（０）及び０．８５９ｇのシアン化亜鉛を含む１７．５ｍｌの乾燥ＮＭＰ中で９０℃で７５分間処理した。溶媒を真空下で蒸発させ、そして残渣をシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけることで０．５０ｇの表題の生成物が生成した。
【００７６】
最終生成物
実施例１
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（ピロリジン−２−イルメチル）−アミド
３６ｍｇの７０％メタクロロペルオキシ安息香酸（ｍＣＰＢＡ）を４ｍｌのジクロロメタン中に溶解し、この溶液を硫酸ナトリウム上での濾過により乾燥させた。乾燥したｍＣＰＢＡ溶液を４ｍｌのジクロロメタン中の７５ｍｇの出発材料ｅ）の溶液に室温で添加し、そして酸化反応をＴＬＣでモニタリングした。１時間後、出発材料が消費され、そして過剰のｍＣＰＢＡは、数滴のジメチルスルフィドの添加によりクエンチングされた。３７ｍｇの４−モルホリノアニリンを添加し、そして攪拌を室温で１４時間続けた。
【００７７】
混合物をジクロロメタンで希釈し、そして１０％酢酸水溶液で洗浄した。有機相の蒸発及び残渣のクロマトグラフィーにより６７ｍｇのＢｏｃ保護された表題の生成物が生成した。
【００７８】
上述の材料を２ｍｌのジクロロメタン中に溶解させ、そして２ｍｌの２Ｍの塩酸／エーテル溶液と一緒に室温で３時間攪拌した。沈殿を濾過で単離し、少量のメタノール中で溶解し、そして炭酸水素カリウム水溶液とジクロロメタンの混合物で希釈した。ジクロロメタン相を分離し、乾燥させ、そして蒸発させることにより４１ｍｇの表題の生成物を生成させた。
1Ｈ−ＮＭＲ (ＣＤＣ１3)：９．１５ (ｓ，１Ｈ); ８．４７（ｂｒ，ｓ，１Ｈ）； ７．９５（ｓ，１Ｈ）； ７．６９ (ｂｒ ｍ， ３Ｈ)； ７．４０ (ｄ， ２Ｈ)； ７．２６ (ｔ，１Ｈ) ； ６．９８（ｄ， ２Ｈ)； ３．８９ (ｔ， ４Ｈ)； ３．４８ (ｍ， １Ｈ)；３． ３４ (ｍ， １Ｈ) ; ３．１７ (ｍ， ５Ｈ)； ２．９４ (ｍ， ２Ｈ)； １．６０−２． ００ (ｍ， ３Ｈ)； １．４０ (ｍ， １Ｈ);
【００７９】
実施例２
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ]−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−メタンスルホニルアミノ−エチル）アミド
実施例１と同様に、１．５０ｍｇの出発材料ｄ）を２９ｍｇのｍＣＰＢＡを用いてジクロロメタン中室温で酸化した。
【００８０】
２２ｍｇの４−（４−メチルピペラジノ）アニリンを添加し、そして混合物を１４時間室温で攪拌した。追加の１０ｍｌのジクロロメタンを用いて希釈した後、混合物を水で洗浄し、有機相を乾燥させ、そして蒸発させ、そしてシリカ上でのクロマトグラフィー（ジクロロメタン１９／メタノール１／アンモニア０．５）で更に精製した。表題の化合物の収量４４ｍｇ。
1Ｈ−ＮＭＲ (ＣＤ３ＯＤ)： ９．２８（ｓ，１H)； ８．１８（ｓ，１H)； ７．７８ (ｂｒ ｄ， ２Ｈ）；７．４８ (d， ２Ｈ)； ７． ３６ (ｔ， １Ｈ) ； ７．０３ (d， ２Ｈ); ４．６０（ｂｒ，ｓ，１Ｈ）； ３．４６ (ｔ， ２Ｈ)； ３．２６ (ｔ) 及び(t, together ６Ｈ)； ３．２０ (ｓ， ３Ｈ)； ２．６５ (ｔ， ４Ｈ)； ２．３６ (ｓ， ３Ｈ)．
【００８１】
実施例３
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［３−（２−ヒドロキシ−エチルスルファニル）−フェニルアミノ]−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸（２−メタンスルホニルアミノ−エチル）アミド
６０ｍｇの出発材料ｄ）を実施例１と同様にｍＣＰＢＡで酸化した。２７ｍｇの３−（２−ヒドロキシエチルスルファニル）アニリンを添加し、そして反応混合物を１５時間室温で攪拌した。混合物を１０ｍｌのジクロロメタンで希釈し、１０％の酢酸水溶液で洗浄し、そして乾燥して蒸発させた。最初に、シリカ上でのカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール）、続いて、調製用ＨＰＬＣ−ＭＳ、そして最終的にシリカ上での調製用ＴＬＣ（ジクロロメタン／メタノール）による精製は、１２ｍｇの表題の生成物を生成させた。
1Ｈ−ＮＭＲ (ＣＤＣ１3)： ９．２１ (ｓ，１Ｈ) ; ８．９１ (ｂｒ ｓ， １Ｈ)； ８．０７ (ｓ， １Ｈ)； ７．８３ (ｂｒ ｓ， １Ｈ)； ７．７７ (ｓ， １Ｈ)； ７．４３ (ｄ， ２Ｈ); ７．３１ (ｔ， １Ｈ) ; ７．２５ (ｍ， １Ｈ)； ７．０５ (ｄ, １Ｈ) ; ６．８５ (ｂｒ ｓ 及びｄ, ２Ｈ); ５．６７ (ｂｒ， １Ｈ) ； ４．１３ (ｍ， ２Ｈ); ３．５８ (ｍ， ２Ｈ)； ３．３５ (ｍ， ４Ｈ)； ２．９３ (ｓ， ３Ｈ)．
【００８２】
実施例４
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（２−ヒドロキシ−エトキシ）フェニルアミノ］−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボニトリル
３．５ｍｌ中のジクロロメタン中の１００ｍｇの出発材料ｈ）を、３０１ｍｇの２−ベンゼンスルホニル−３−フェニル−オキサジリジンを用いて室温で処理した。５．５時間後、過剰の酸化試薬は、７０ｍｇのジメチルスルフィドを添加することでクエンチングした。２．５ｍｌのＮＭＰ中の２６５ｍｇの４−（２−ヒドロキシエチル）アニリンを添加し、そして混合物を室温で１８．５時間攪拌した。
【００８３】
溶媒を真空下除去し、そして残渣をシリカ上でのクロマトグラフィーにかけることで、過剰のアニリン試薬が混入した２２０ｍｇの粗製生成物が生成した。当該粗製生成物を酢酸エチル中に溶解し、そして希塩酸水溶液で洗浄した。有機相を乾燥させ、蒸発させ、そして残渣を最終的にヘプタンで粉砕して９４ｍｇの表題の生成物を生成させた。
1Ｈ−ＮＭＲ (ＣＤＣ１3)： ９．１９ (ｓ， １Ｈ)； ８．０８（ｓ，１Ｈ)； ７．８０ （ｂｒ，ｍ，２H)； ７．６３ (ｂｒ ｓ， １Ｈ) ； ７．５２ （d， ２Ｈ)； ７．４２ (ｔ， １Ｈ)； ７．００ (ｄ， ２Ｈ)； ４．１２ (ｍ， ２Ｈ)； ３．９９ (ｍ， ２Ｈ)；
【００８４】
実施例５
６−（２，６−ジクロロ−フェニル）−２−［４−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−フェニルアミノ］−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸アミド
１ｍｌのＴＨＦ中の、実施例３に由来する２０ｍｇの生成物を１３．５ｍｇのトリメチルシラノール酸カリウムと一緒にアルゴン雰囲気下で混合した。混合物は、マイクロ波リアクター内で１００℃に２０分間加熱した。
【００８５】
冷却した反応混合物を０．１ｍｌの水で希釈し、そして少量のアルミナクロマトグラフィー材料を添加した。この懸濁液を乾燥するまで蒸発し、そして残渣をシリカクロマトグラフィーカラムに充填した。酢酸エチル６／ヘプタン１を用いた溶出により６ｍｇの表題の生成物が生成した。
1Ｈ−ＮＭＲ (ＤＭＳＯ−ｄ６)： １０．２４（ｂｒ，ｓ，１Ｈ）； ９．４１ (ｓ， １Ｈ)； ８．３１ (ｓ， １Ｈ)； ８．１３（ｂｒ，ｓ，１Ｈ)； ７．９２ (ｍ， ２Ｈ); ７．５６ (ｍ， ３Ｈ); ７．４２ (ｔ， １Ｈ)； ６．９９ (d， ２Ｈ); ４．８７ (ｔ， １Ｈ); ４．００ (ｔ， ２Ｈ)； ３．７３ (ｍ， ２Ｈ)
【００８６】
実施例６
実施例１に記載の手順と同様に、但し、上述の相当の出発材料を用いて、以下の化合物を得ることができる：
【表３】
2007529451.tif 000012
【表４】
2007529451.tif 000013
【００８７】
実施例７
実施例４に記載の手順と同様に、但し、上述の相当の出発材料を用いて、以下の化合物を得ることができる：
【表５】
2007529451.tif 000014
【００８８】
実施例８
実施例５に記載の手順と同様に、但し、上述の相当の出発材料を用いて、以下の化合物を得ることができる：
【表６】
2007529451.tif 000015
【００８９】
【表７】
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【国際調査報告】
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2007529451.tif 000024
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