(57)【要約】  本発明は、複合補体カスケードインヒビターおよび複合補体カスケードインヒビターを用いて患者を処置する方法に関する。
2007535474.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
複合した（ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ）補体インヒビターを含んでなる組成物。
【請求項２】
式（Ｉ）もしくは式（ＩＶ）：
（Ｄ−Ｌ）ｎ−Ｐ          Ｄ−Ｌｎ−Ｐｎ’
（Ｉ）                  （ＩＶ）
［式中：
Ｄは補体カスケードインヒビターである化合物から各出現ごとに独立して選択され；
Ｌは各出現ごとに独立して選択される場合による（各出現ごとに）連結基であり；
ｎは１、２、３、４、５もしくは６であり；
ｎ’は１、２、３もしくは４であり；そして
ＰはＤの薬物動態学的特性を高める化合物から各出現ごとに独立して選択される］
を有する請求項１の組成物。
【請求項３】
組成物が式（Ｉ）を有し、そしてｎが１、２、４もしくは６である請求項２の組成物。
【請求項４】
ＤをＰに連結する結合が生理的条件下で実質的に非加水分解性である請求項２の組成物。
【請求項５】
ＤがＣ１ｓサブコンポーネント、Ｃ１ｒサブコンポーネント、ＭＡＳＰ−２サブコンポーネントに結合するか、もしくはＣ５ａ受容体アンタゴニストである請求項２の組成物。
【請求項６】
ＤがＣ１ｓサブコンポーネントもしくはＭＡＳＰ−２サブコンポーネントの少なくとも１つに結合する請求項２の組成物。
【請求項７】
Ｄが芳香族化合物である請求項２の組成物。
【請求項８】
Ｄが非ペプチドである請求項２の組成物。
【請求項９】
Ｄが約１００分子量単位〜約２０００分子量単位の範囲内の分子量を有する小分子である請求項２の組成物。
【請求項１０】
Ｄが約４００分子量単位〜約１２００分子量単位の範囲内の分子量を有する小分子である請求項２の組成物。
【請求項１１】
Ｄが約４００分子量単位〜約２０００分子量単位の範囲内の分子量を有する小分子である請求項２の組成物。
【請求項１２】
Ｄが非芳香族化合物である請求項２の組成物。
【請求項１３】
Ｄが芳香族グアニジンである請求項２の組成物。
【請求項１４】
Ｄが芳香族もしくは複素芳香族アミジンである請求項２の組成物。
【請求項１５】
Ｄが式（ＩＩ）：
【化１】
2007535474.tif 000093
［式中：
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はＨ、Ｃ１〜４アルキル、アミノ、Ｃ１〜４アルコキシもしくはヒドロキシから独立して選択され；
Ｕはチオフェニル−Ｒ５、ベンジレン、フェニレン、ＮＨもしくは結合であり；
Ｒ５はＳＯ２、ＮＨもしくは結合であり；
Ｚはアリーレン、ヘテロアリーレン、アラルキレン、シクロアルキレン、シクロヘテロエンであり；
ＷはＣ（＝Ｏ）−Ｏ、ＨＣ（ＣＨ３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）、Ｏ、ＮＨ、Ｓ、ＣＨ２、Ｃ（＝Ｏ）もしくは結合であり；
Ｔはアリーレン、ヘテロアリーレン、アラルキレン、シクロアルキレン、シクロヘテロエン、Ｃ１〜４アルキル、Ｏ、Ｓ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノもしくはニトロであり；
Ｘはアミノ、カルボキシ、ヒドロキシル、チオール、ハロゲン、オレフィン、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、アミノアルキル、カルボキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、メルカプトアルキル、またはＬもしくはＰへの結合であり；
Ｖはメチル、エチルもしくはＣｌであり；そして
Ｒ４はＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミジニル、アミノメチル、ＮＨ２、尿素もしくはグアニジニルである］
の化合物である請求項２の組成物。
【請求項１６】
Ｄが：
【化２】
2007535474.tif 000094
［ここで：
ＸはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨもしくはＣ（＝Ｏ）であり、そして
Ｒ４はＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミジニル、アミノメチル、ＮＨ２、尿素もしくはグアニジニルである］
である請求項２の組成物。
【請求項１７】
Ｄが：
【化３】
2007535474.tif 000095
［ここで：
ＸはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨもしくはＣ（＝Ｏ）であり；
Ｒ６はＣ１〜４アルキル、Ｏ、Ｓ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノ、フェニル、ピラゾリルもしくはニトロであり；そして
Ｖはメチルもしくはエチルである］
である請求項２の組成物。
【請求項１８】
Ｄが：
【化４】
2007535474.tif 000096
［ここで：
ＸはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨもしくはＣ（＝Ｏ）であり；
Ｒ６はＣ１〜４アルキル、Ｏ、Ｓ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノ、フェニル、ピラゾリルもしくはニトロであり；そして
Ｖはメチルもしくはエチルである］
である請求項２の組成物。
【請求項１９】
Ｄが式（Ｖ）：
【化５】
2007535474.tif 000097
［式中：
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はＨ、Ｃ１〜４アルキル、アミノ、Ｃ１〜４アルコキシもしくはヒドロキシから独立して選択され；
Ｕはチオフェニル−Ｒ５、ベンジレン、フェニレン、ＮＨもしくは結合であり；
Ｒ５はＳＯ２、ＮＨもしくは結合であり；
Ｚはアリーレン、ヘテロアリーレン、アラルキレン、シクロアルキレン、シクロヘテロエンであり；
ＷはＣ（＝Ｏ）−Ｏ、ＨＣ（ＣＨ３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）、Ｏ、ＮＨ、Ｓ、ＣＨ２、Ｃ（＝Ｏ）もしくは結合であり；
Ｔはアリーレン、ヘテロアリーレン、アラルキレン、シクロアルキレン、シクロヘテロエン、Ｃ１〜４アルキル、Ｏ、Ｓ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノもしくはニトロであり；
Ｘはアミノ、カルボキシ、ヒドロキシル、チオール、ハロゲン、オレフィン、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、アミノアルキル、カルボキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、メルカプトアルキル、またはＬもしくはＰへの結合であり；
存在する場合、Ｙはアミノ、カルボキシ、ヒドロキシル、チオール、ハロゲン、オレフィン、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、アミノアルキル、カルボキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、メルカプトアルキル、尿素、グアニジニル、またはＬもしくはＰへの結合であり；そして
Ｖはメチル、エチルもしくはＣｌである］
の化合物である請求項２の組成物。
【請求項２０】
Ｄが群：
【化６】
2007535474.tif 000098
［ここで：
ＸはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨもしくはＣ（＝Ｏ）であり、
存在する場合、ＹはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨ、Ｃ（＝Ｏ）、グアニジニルもしくは尿素であり、
Ｖはメチル、エチルもしくはＣｌであり、そして
Ｒ６はＨ、Ｃ１〜４アルキル、ＯＨ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノ、フェニル、ピラゾリルもしくはニトロである］
から選択される請求項１９の組成物。
【請求項２１】
Ｄが：
【化７】
2007535474.tif 000099
［ここで：
ＸはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨもしくはＣ（＝Ｏ）であり、
存在する場合、ＹはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨ、Ｃ（＝Ｏ）、尿素もしくはグアニジニルであり、そして
Ｖはメチルもしくはエチルである］
である請求項１９の組成物。
【請求項２２】
Ｄが：
【化８】
2007535474.tif 000100
［ここで：
ＸはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨもしくはＣ（＝Ｏ）であり、
存在する場合、ＹはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨ、Ｃ（＝Ｏ）、尿素もしくはグアニジニルであり、
Ｖはメチルもしくはエチルであり、そして
Ｒ６はＨ、Ｃ１〜４アルキル、ＯＨ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノもしくはニトロである］
である請求項１９の組成物。
【請求項２３】
Ｄが：
【化９】
2007535474.tif 000101
［ここで：
ＸはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨもしくはＣ（＝Ｏ）であり；
存在する場合、ＹはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨ、Ｃ（＝Ｏ）、尿素もしくはグアニジニルであり、
Ｖはメチルもしくはエチルであり、そして
Ｒ６はＨ、Ｃ１〜４アルキル、ＯＨ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノ、フェニル、ピラゾリルもしくはニトロである］
である請求項１９の組成物。
【請求項２４】
Ｌが群：
【化１０】
2007535474.tif 000102
【化１１】
2007535474.tif 000103
【化１２】
2007535474.tif 000104
［ここで、ＡＡはアミノ酸であり、そしてｍは１〜１２である］、
【化１３】
2007535474.tif 000105
［ここで、ＡＡはアミノ酸であり、そしてｍは１〜１２である］、および
【化１４】
2007535474.tif 000106
から選択される請求項２の組成物。
【請求項２５】
Ｐがポリアルキレンオキシド、デキストラン、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、炭水化物に基づくポリマー、および活性化ポリマーよりなる群から選択されるポリマーである請求項２の組成物。
【請求項２６】
Ｐが約７５０式量単位（ｆｏｒｍｕｌａ  ｗｅｉｇｈｔ  ｕｎｉｔ）〜約６０，０００式量単位の分子量を有するモノメチル末端（ｍｏｎｏｍｅｔｈｙｌ−ｔｅｒｍｉｎａｔｅｄ）ポリエチレングリコールである請求項２５の組成物。
【請求項２７】
Ｐが約７５０式量単位の分子量を有するモノメチル末端ポリエチレングリコールである請求項２５の組成物。
【請求項２８】
Ｐが約１０，０００式量単位の分子量を有するモノメチル末端ポリエチレングリコールである請求項２５の組成物。
【請求項２９】
Ｐが約２０，０００式量単位の分子量を有するモノメチル末端ポリエチレングリコールである請求項２５の組成物。
【請求項３０】
Ｐが約４０，０００式量単位の分子量を有するモノメチル末端ポリエチレングリコールである請求項２５の組成物。
【請求項３１】
Ｐが約６０，０００式量単位の分子量を有するモノメチル末端ポリエチレングリコールである請求項２５の組成物。
【請求項３２】
Ｐが式（ＩＩＩ）：
【化１５】
2007535474.tif 000107
［式中：
ＭはＣＨ３、ＨＣ＝ＣＨ−Ｃ（＝Ｏ）、Ｏ＝ＣＨ−ＣＨ２、Ｈ２Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ２、Ｃｌ−Ｈ３Ｎ＋−ＨＮ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２、Ｏ＝Ｃ＝Ｎ−ＣＨ２ＣＨ２、ＨＳ−ＣＨ２ＣＨ２、Ｈ２Ｃ＝ＣＨ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２ＣＨ２、
【化１６】
2007535474.tif 000108
であり；
ｊは１７〜１４００であり；そして
ＡはＯ−ＣＨ２−ＣＨ（＝Ｏ）、Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２＝ＣＨ２、Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ２、ＮＨ２、Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ３＋Ｃｌ−、ＳＨ、Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ＝ＣＨ２、
【化１７】
2007535474.tif 000109
【化１８】
2007535474.tif 000110
である］
を有する活性化ポリマーである請求項２５の組成物。
【請求項３３】
Ｄが式（ＩＩ）もしくは式（Ｖ）：
【化１９】
2007535474.tif 000111
［式中：
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はＨ、Ｃ１〜４アルキル、アミノ、Ｃ１〜４アルコキシもしくはヒドロキシから独立して選択され；
Ｕはチオフェニル−Ｒ５、ベンジレン、フェニレン、ＮＨもしくは結合であり；
Ｒ５はＳＯ２、ＮＨもしくは結合であり；
Ｚはアリーレン、ヘテロアリーレン、アラルキレン、シクロアルキレン、シクロヘテロエンであり；
ＷはＣ（＝Ｏ）−Ｏ、ＨＣ（ＣＨ３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）、Ｏ、ＮＨ、Ｓ、ＣＨ２、Ｃ（＝Ｏ）もしくは結合であり；
Ｔはアリーレン、ヘテロアリーレン、アラルキレン、シクロアルキレン、シクロヘテロエン、Ｃ１〜４アルキル、Ｏ、Ｓ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノもしくはニトロであり；
Ｘはアミノ、カルボキシ、ヒドロキシル、チオール、ハロゲン、オレフィン、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、アミノアルキル、カルボキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、メルカプトアルキル、またはＬもしくはＰへの結合であり；
存在する場合、Ｙはアミノ、カルボキシ、ヒドロキシル、チオール、ハロゲン、オレフィン、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、アミノアルキル、カルボキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、メルカプトアルキル、尿素、グアニジニル、またはＬもしくはＰへの結合であり；そして
Ｖはメチル、エチルもしくはＣｌであり；そして
Ｒ４はＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミジニル、アミノメチル、ＮＨ２、尿素もしくはグアニジニルである］
の化合物であり；
Ｌが群：
【化２０】
2007535474.tif 000112
【化２１】
2007535474.tif 000113
【化２２】
2007535474.tif 000114
［ここで、ＡＡはアミノ酸であり、そしてｍは１〜１２である］、
【化２３】
2007535474.tif 000115
［ここで、ＡＡはアミノ酸であり、そしてｍは１〜１２である］、および
【化２４】
2007535474.tif 000116
から独立して選択される場合による（各出現ごとに）連結基であり；そして
Ｐが式（ＩＩＩ）：
【化２５】
2007535474.tif 000117
［式中：
ＭはＣＨ３、ＨＣ＝ＣＨ−Ｃ（＝Ｏ）、Ｏ＝ＣＨ−ＣＨ２、Ｈ２Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ２、Ｃｌ−Ｈ３Ｎ＋−ＨＮ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２、Ｏ＝Ｃ＝Ｎ−ＣＨ２ＣＨ２、ＨＳ−ＣＨ２ＣＨ２、Ｈ２Ｃ＝ＣＨ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２ＣＨ２、
【化２６】
2007535474.tif 000118
であり；
ｊは１７〜１４００であり；そして
ＡはＯ−ＣＨ２−ＣＨ（＝Ｏ）、Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２＝ＣＨ２、Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ２、ＮＨ２、Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ３＋Ｃｌ−、ＳＨ、Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ＝ＣＨ２、
【化２７】
2007535474.tif 000119
である］
を有する活性化ポリマーである請求項２の組成物。
【請求項３４】
患者に請求項２の複合補体インヒビターを投与することを含んでなる、補体カスケードの活性化を抑制するために患者を処置する方法。
【請求項３５】
患者が遺伝性血管浮腫、敗血症性ショック、心肺バイパスにおけるポストポンプ（ｐｏｓｔ  ｐｕｍｐ）症候群、発作性夜間血色素尿症、臓器拒絶反応、創傷、脳損傷、喘息、橋本甲状腺炎、全身性エリテマトーデスの糸球体腎炎および皮膚病変、他の糸球体腎炎、水疱性類天疱瘡、疱疹状皮膚炎、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、重症筋無力症、インシュリン抵抗性、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性血小板減少性紫斑病、関節リウマチ、多発性硬化症、神経障害ギラン・バレー症候群、ミラー・フィッシャー症候群ならびにアルツハイマー病よりなる群から選択される疾患にかかっている請求項３４の方法。
【請求項３６】
請求項２の複合補体インヒビターの治療的に有効な量を処置を必要とする哺乳類に投与することを含んでなる、補体カスケードの古典経路もしくはＭＢＬ経路により媒介される急性もしくは慢性疾患の症状を処置する方法。
【請求項３７】
該急性もしくは慢性疾患が炎症、組織損傷もしくは自己免疫性疾患である請求項３６の方法。
【請求項３８】
該化合物を炎症、組織損傷およびその組み合わせよりなる群から選択される補体により媒介される疾患の処置を必要とする哺乳類に投与する請求項３６の方法。
【請求項３９】
該炎症もしくは組織損傷が、卒中、心筋梗塞、出血性ショックもしくは手術、またはその組み合わせの後に起こる請求項３８の方法。
【請求項４０】
該化合物をクローン病の腸炎、再狭窄もしくは乾癬の処置を必要とする哺乳類に投与する請求項３６の方法。
【請求項４１】
該化合物を臓器もしくは移植片の移植の前、間もしくは後に、哺乳類によるそのような臓器もしくは移植片の拒絶を改善するために哺乳類に投与する請求項３６の方法。
【請求項４２】
移植が個体内、同種の個体間、もしくは異種の個体間である請求項４１の方法。
【請求項４３】
臓器が腎臓、心臓、肺および肝臓よりなる群から選択される請求項４１の方法。
【請求項４４】
該化合物をＩＬ−２処置、骨髄移植もしくは膵炎の毒性および副作用を減らすために有効な量で、（１）ＩＬ−２での該哺乳類の処置、（２）該哺乳類における骨髄移植もしくは（３）該哺乳類における膵炎の発症の前、間もしくは後に哺乳類に投与する請求項３６の方法。
【請求項４５】
該化合物を自己免疫性疾患と診断されている哺乳類に投与する請求項３６の方法。
【請求項４６】
該化合物をアジソン病、Ｉ型糖尿病、橋本甲状腺炎、全身性エリテマトーデスの糸球体腎炎および皮膚病変、他の糸球体腎炎、水疱性類天疱瘡、疱疹状皮膚炎、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、重症筋無力症、インシュリン抵抗性、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性血小板減少性紫斑病、免疫複合体誘発性脈管炎糸球体腎炎、ＩＩ型コラーゲン誘発性関節炎、関節リウマチもしくはアレルギー性神経炎と診断されている哺乳類に投与する請求項３６の方法。
【請求項４７】
該化合物を重症筋無力症（ＭＧ）、関節リウマチもしくは全身性エリテマトーデスと診断されている哺乳類に投与する請求項３６の方法。
【請求項４８】
該化合物を神経変性疾患と診断されている哺乳類に投与する請求項３６の方法。
【請求項４９】
該神経変性疾患が多発性硬化症（ＭＳ）、ギラン・バレー症候群（ＧＢＳ）、ミラー・フィッシャー症候群（ＭＦＳ）、アルツハイマー病（ＡＤ）もしくは変異型クロイツフェルト・ヤコブ病（ｖＣＪＤ）である請求項４８の方法。
【請求項５０】
該化合物を成人呼吸促進症候群の症状を患っている哺乳類に投与する請求項３６の方法。
【請求項５１】
該化合物を敗血症性ショックの状態の哺乳類に投与する請求項３６の方法。
【請求項５２】
該化合物を遺伝性血管浮腫、発作性夜間血色素尿症、創傷治癒、脳損傷、喘息、血液透析、感染、皮膚病、炎症性腸疾患、骨粗鬆症、変形性関節症、熱傷（熱傷および凍傷）、溶血性貧血もしくは心肺バイパスにおけるポストポンプ症候群の処置を必要とする哺乳類に投与する請求項３６の方法。
【請求項５３】
個体に請求項２の複合補体インヒビターを投与することにより補体カスケードの活性化を抑制することを含んでなる、個体における細胞移植もしくは移植片の拒絶を改善する方法。
【請求項５４】
個体が心不全、糖尿病、卒中、パーキンソン病、アルツハイマー病、認知症、肝疾患、腎臓病、熱傷および創傷よりなる群から選択される症状を有する請求項５３の方法。
【請求項５５】
移植片が個体内、同種の個体間もしくは異種の個体間の組織の移動である請求項５３の方法。
【請求項５６】
細胞移植が個体内、同種の個体間もしくは異種の個体間である請求項５３の方法。
【請求項５７】
細胞移植の細胞が幹細胞、一次細胞、組織培養由来の細胞、膵島細胞、インシュリンを発現する細胞、グルコース調節ホルモンを発現する細胞もしくは糖尿病の処置に有用な因子を発現する細胞である請求項５３の方法。
【請求項５８】
個体が哺乳類である請求項５３の方法。
【請求項５９】
臓器を請求項２の複合補体インヒビターと接触させることを含んでなる、臓器保存溶液中の臓器における補体活性化を防ぐ方法。
【請求項６０】
異物を請求項２の複合補体インヒビターと接触させることを含んでなる、個体への異物の挿入に応答する補体活性化を防ぐ方法。
【請求項６１】
異物が外科的インプラント、人工臓器もしくは人工関節である請求項６０の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願へのクロスリファレンス
本願は、２００３年７月３日に出願された米国仮出願第６０／４８４，８５４号および２００４年５月１４日に出願された米国仮出願第６０／５７１，３７４号の利益を請求し、これらの開示は、それらの全部が引用することにより本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は新規化合物および患者におけるある種の疾患を処置することにおけるそれらの使用に関する。さらに特に、本発明は複合（ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ）補体カスケードインヒビターに関する。
【背景技術】
【０００３】
補体カスケードは、望ましい免疫応答におけるその役割を包含する、よく研究された目的および効果を有する。しかしながら、補体カスケードの望ましくない開始は、炎症および組織損傷を特徴とするある種のよく知られている疾患に関与している。従って、遺伝性血管浮腫、敗血症性ショック、心肺バイパスにおけるポストポンプ症候群、発作性夜間血色素尿症、臓器拒絶反応、創傷、脳損傷、喘息、橋本甲状腺炎、全身性エリテマトーデスの糸球体腎炎および皮膚病変、他の糸球体腎炎、水疱性類天疱瘡、疱疹状皮膚炎、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、重症筋無力症、インシュリン抵抗性、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性血小板減少性紫斑病、関節リウマチ、多発性硬化症、神経障害ギラン・バレー症候群、ミラー・フィッシャー症候群およびアルツハイマー病を包含する、そのような疾患を処置するために用いることができる補体カスケードインヒビターが開発されている。例えば、特許文献１および特許文献２を参照。
【０００４】
補体カスケードの望ましくない開始は、同様に細胞移植および移植片と関連する合併症に関与している。細胞移植および移植片は、心不全、糖尿病、卒中、パーキンソン病、アルツハイマー病、認知症、肝疾患、腎臓病、熱傷および創傷のような疾患を処置するために望ましいことが知られている。しかしながら、この処置は、細胞移植および移植片の免疫原性の性質のために実際には有効でないことが多く、補体カスケードの活性化にそして最終的には拒絶につながる。従って、補体カスケードインヒビターは、拒絶を改善するために望ましい。
【０００５】
しかしながら、患者を処置するために用いる化合物に改善された薬物動態学的特性を与えることはいつも望ましい。タンパク質薬剤へのポリエチレングリコール（ＰＥＧ）の共有結合は、インビボ循環時間、水溶性を増加するためにそしてこれらの薬剤の抗原性を減少するために用いられている。例えば、特許文献３を参照。その生物学的標的と相互作用する活性残基を妨げることなしに、例えばインシュリンおよびヘモグロビンのような巨大タンパク質にいくつかのポリマー分子を連結することは可能である。ポリマーへの低分子タンパク質およびペプチドの連結後に活性を維持することは、これらの生体活性物質は生物学的活性と関連しない結合部位をほとんど有さないことが多いので、より困難である。非ペプチド性小分子薬剤へのポリマー連結は、主としてプロドラッグ戦略に限られている。例えば、特許文献４、特許文献５および特許文献６を参照。これらの方法において、小分子はエステルのような代謝的に不安定な共有結合部分によって非抗原性ポリマーに連結される。薬剤は、小分子が細胞中に細胞膜を越えて運ばれることを可能にするためにエステルの酵素加水分解により非抗原性ポリマーから遊離されなければならない。
【０００６】
補体カスケードインヒビターは細胞表面上の受容体と結合するので、それらは細胞膜を横断する必要はない。従って、代謝的に不安定な共有結合を用いる小分子プロドラッグ方法は、不必要に制限する。しかしながら、タンパク質薬剤および小分子プロドラッグの場合におけるように、細胞膜を横断しない小分子補体カスケードインヒビターの薬物動態学的特性を調節するための技術を有することは、それにもかかわらず同等に重要である。従って、小分子補体カスケードインヒビターの薬物動態学的特性を調節するための手段の満たされていない必要性がある。
【０００７】
本発明はこれらならびに他の重要な目的に関する。
【特許文献１】米国特許第６，４９２，４０３号明細書
【特許文献２】米国特許第６，５１５，００２号明細書
【特許文献３】米国特許第５，７１１，９４４号明細書
【特許文献４】米国特許第５，６１４，５４９号明細書
【特許文献５】米国特許第５，６２２，９８６号明細書
【特許文献６】米国特許第６，１２７，３５５号明細書
【発明の開示】
【０００８】
［発明の要約］
本発明は、一つには、複合補体カスケードインヒビターを含んでなる化合物に関する。該化合物は補体カスケードの成分における受容体に都合よく結合することができ、そしてそれにより補体カスケードを阻害するかもしくはカスケードから形成されるタンパク質（例えばＣ３ａおよびＣ５ａ）の効果を阻害することができる。
【０００９】
一つの態様として、本発明は複合補体インヒビターを含んでなる、患者を処置するための薬剤を提供する。
【００１０】
別の態様として、本発明は、複合補体インヒビターを患者に投与することを含んでなる、補体カスケードの活性化を抑制するために患者を処置する方法を提供する。
【００１１】
本発明のこれらおよび他の態様は、本記述および請求項からいっそう明らかになる。
［実施態様の詳細な記述］
本発明は、一つには、複合補体カスケードインヒビターを含んでなる化合物に関する。該化合物は補体カスケードの成分における受容体に都合よく結合することができ、そしてそれにより補体カスケードを阻害するかもしくはカスケードから形成されるタンパク質（例えばＣ３ａおよびＣ５ａ）の効果を阻害することができる。
【００１２】
「コンジュゲートした」は、本開示において用いる場合、ポリマー部分が該用語の直後の部分に共有結合されていることを意味すると理解される。従って、本開示の目的のために、複合補体カスケードインヒビターは、共有結合したポリマー部分を有する補体カスケードインヒビターである。ポリマーは、以下に定義するように、ポリアルキレンオキシド、デキストラン、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、炭水化物に基づくポリマー、および「活性化」ポリマーよりなる群から選択することができる。
【００１３】
補体カスケードインヒビターは、補体カスケードを阻害する任意の化合物であることができる。そのような化合物の例には、米国特許第６，４９２，４０３号および第６，５１５，００２号、ならびに２００３年５月２８日に出願された米国第６０／３８３，１３０号および第１０／４４５，８１７号（クライアントリファレンス１４２０００１下）に開示されるものが包含され、これらの開示は、それらの全部が引用することにより本明細書に組み込まれる。
【００１４】
本発明の一つの態様として、式（Ｉ）：
（Ｄ−Ｌ）ｎ−Ｐ
（Ｉ）
［式中：
Ｄは補体カスケードインヒビターである化合物から各出現ごとに独立して選択され；
Ｌは各出現ごとに独立して選択される場合による（各出現ごとに）連結基であり；
ｎは１、２、３、４、５もしくは６であり；そして
ＰはＤの薬物動態学的特性を高める化合物である］
の化合物が提供される。
【００１５】
好ましい態様として、Ｄは、生理的条件下で実質的に非加水分解性である結合によりＰに連結される（場合によるＬを介してを包含する）。
【００１６】
好ましい態様として、ｎは１である。
【００１７】
別の好ましい態様として、ｎは２である。
【００１８】
別の好ましい態様として、ｎは４である。
【００１９】
式（Ｉ）は全ての可能な組み合わせ、例えば、（Ｄ）ｎ−Ｐ、Ｄ−Ｌ−Ｄ−Ｌ−ＰおよびＤ−Ｌ−Ｐ−Ｌ−Ｄを包含する（Ｄ−Ｌ）ｎ−Ｐ、ならびに（Ｄ）ｎ−Ｐ−（Ｄ−Ｌ）ｎを含むと理解される。
補体カスケードインヒビター
Ｃ１ｓサブコンポーネント、Ｃ１ｒサブコンポーネント、Ｃ１ｑサブコンポーネント、Ｃ５ａ受容体、Ｃ３、Ｄ因子、Ｂ因子、Ｃ３ａ受容体およびＭＡＳＰ−２に結合する化合物が包含されるがこれらに限定されるものではない、多数の小分子補体カスケードインヒビターは当該技術分野において既知であり、そして本発明のコンジュゲートした化合物の成分として用いることができる。適当な補体カスケードインヒビターには、例えば、米国特許第６，４９２，４０３号および第６，５１５，００２号、ならびに２００３年５月２８日に出願された米国第６０／３８３，１３０号および第１０／４４５，８１７号（クライアントリファレンス１４２０００１下）に開示される化合物のような、Ｃ１ｓサブコンポーネントに結合する化合物が包含され、これらの開示はそれらの全部が引用することにより本明細書に組み込まれる。
【００２０】
適当な補体カスケードインヒビターにはまた、例えば、米国特許第５，６５２，２３７号に開示される化合物（この開示は、その全部が引用することにより本明細書に組み込まれる）およびＷＯ  ００／６１６０８に開示されるもののような、Ｃ１ｒサブコンポーネントに結合する化合物も包含される。
【００２１】
適当な補体カスケードインヒビターにはまた、例えば、ＷＯ  ０２／１４２６５に開示される化合物のような、Ｃ５ａ受容体に結合する化合物も包含され、この開示はその全部が引用することにより本明細書に組み込まれる。
【００２２】
Ｄは補体カスケードを阻害する任意の化合物であることができると理解されるように、前述の例は本開示の範囲を限定するものではない。ＤをＬに、もしくは直接Ｐに結合するための適当な地点は、特定の結合機序に関して立体相互作用を考慮すること、異なるそれぞれの結合点を用いていくつかのＤ−Ｌ−ＰもしくはＤ−Ｐ化合物を製造すること、および例えばＰ．Ｇｉｃｌａｓ，Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ  Ｓｙｓｔｅｍ，ｐｐ２２５−２３６．編者  Ｌａｍｂｒｉｓ  Ｊ．Ｄ．；Ｈｏｌｅｒｓ  Ｍ．Ｖ．のような既知の方法を用いて生物学的活性に関してそれらの化合物をスクリーニングすることにより決定することができる。一般に、Ｄは、相補的な基と結合を形成するのに適当な基、例えば、アミノ、カルボキシ、ヒドロキシル、チオール、ハロゲン、オレフィン、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、アミノアルキル、カルボキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキルおよびメルカプトアルキルを有するか、もしくはそれで置換されることができる。
【００２３】
一つの態様として、ＤはＣ５ａ受容体アンタゴニストである。
【００２４】
一つの態様として、ＤはＣ１ｒサブコンポーネントに結合する化合物である。
【００２５】
一つの態様として、ＤはＣ１ｑサブコンポーネントに結合する化合物である。
【００２６】
好ましい態様として、ＤはＭＡＳＰ−２サブコンポーネントに結合する化合物である。
【００２７】
好ましい態様として、ＤはＣ１ｓサブコンポーネントに結合する化合物である。
【００２８】
好ましい態様として、ＤはＣ１ｓサブコンポーネントおよびＭＡＳＰ−２サブコンポーネントの両方に結合する化合物である。
【００２９】
好ましい態様として、Ｄは非ペプチドである。
【００３０】
好ましい態様として、Ｄは約１００分子量単位（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｗｅｉｇｈｔ  ｕｎｉｔ）〜約２０００分子量単位（ならびにその中の範囲および特定の分子量の全ての組み合わせおよびサブコンビネーション）、好ましくは約４００分子量単位〜約１２００分子量単位、あるいはまた約４００分子量単位〜約２０００分子量単位の範囲の分子量を有する小分子である。
【００３１】
一つの態様として、Ｄは非芳香族化合物である。
【００３２】
一つの態様として、Ｄは芳香族化合物である。
【００３３】
一つの態様として、Ｄは芳香族グアニジンである。
【００３４】
好ましい態様として、Ｄは芳香族および／もしくは複素芳香族アミジンである。
【００３５】
好ましい態様として、Ｄは式（ＩＩ）：
【００３６】
【化１】
2007535474.tif 000003
【００３７】
［式中：
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はＨ、Ｃ１〜４アルキル、アミノ、Ｃ１〜４アルコキシもしくはヒドロキシから独立して選択され；
Ｕはチオフェニル−Ｒ５、ベンジレン、フェニレン、ＮＨもしくは結合であり；
Ｒ５はＳＯ２、ＮＨもしくは結合であり；
Ｚはアリーレン、ヘテロアリーレン、アラルキレン、シクロアルキレン、シクロヘテロエンであり；
ＷはＣ（＝Ｏ）−Ｏ、ＨＣ（ＣＨ３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）、Ｏ、ＮＨ、Ｓ、ＣＨ２、Ｃ（＝Ｏ）もしくは結合であり；
Ｔはアリーレン、ヘテロアリーレン、アラルキレン、シクロアルキレン、シクロヘテロエン、Ｃ１〜４アルキル、Ｏ、Ｓ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノもしくはニトロであり；
Ｘはアミノ、カルボキシ、ヒドロキシル、チオール、ハロゲン、オレフィン、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、アミノアルキル、カルボキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、メルカプトアルキル、またはＬもしくはＰへの結合であり；
Ｖはメチル、エチルもしくはＣｌであり；そして
Ｒ４はＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミジニル、アミノメチル、ＮＨ２、尿素もしくはグアニジニルである］
の化合物である。
【００３８】
Ｄ、ＬおよびＰは、それらの元の「親」化合物と（Ｄ−Ｌ）ｎ−Ｐ化合物の一部としてのそれらの個々の同一物との間でわずかに異なる式を有することが理解される。しかしながら、当業者は２つの式を区別することを必要と考えず、例えば、Ｄ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｌ結合（「連結」化合物）は、当然のことながら、ＨＯＯＣ−Ｌ親と組み合わせたＤ−ＮＨ２親の結果である。同様に、ＮＨ２−ＣＨ２−ＮＨ２親リンカーは、化合物の一部である場合にＨＮ−ＣＨ２−ＮＨであることは容易に理解される。従って、特定されない限り、本明細書は、便宜上、親および連結形態を同義的に用いる。
【００３９】
一つの態様として、Ｄは：
【００４０】
【化２】
2007535474.tif 000004
【００４１】
［ここで：
Ｒ４はＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミジニル、アミノメチル、ＮＨ２、尿素もしくはグアニジニルであり、そして
Ｘは、ＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨもしくはＣ（＝Ｏ）である］
である。
【００４２】
一つの態様として、Ｄは：
【００４３】
【化３】
2007535474.tif 000005
【００４４】
［ここで：
ＸはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨもしくはＣ（＝Ｏ）であり；
Ｒ６はＣ１〜４アルキル、Ｏ、Ｓ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノもしくはニトロであり；そして
Ｖはメチルもしくはエチルである］
である。
【００４５】
一つの態様として、Ｄは：
【００４６】
【化４】
2007535474.tif 000006
【００４７】
［ここで：
ＸはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨもしくはＣ（＝Ｏ）であり；
Ｒ６はＣ１〜４アルキル、Ｏ、Ｓ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノ、フェニル、ピラゾリルもしくはニトロであり；そして
Ｖはメチルもしくはエチルである］
である。
場合による連結基
存在する場合、ＬはＤをＰに、これらの部分の間に空間を与えながら、連結するように働く化合物であることができる。本明細書は、例えば、リンカーの末端（ｔｅｒｍｉｎａｌ  ｅｎｄ）が開示される説明において、「リンカー」の一部の略語として「スペーサー」という用語を使用し、一群のリンカーはＮＨ２（もしくは他の末端）−スペーサー−ＳＨ（もしくは他の末端）と表されることができると理解される。
【００４８】
Ｌは各出現ごとに任意であり、そして各出現ごとに独立して選択される。従って、例えば、ｎが３である場合に、本発明の複合補体インヒビターは、連結基なしほどしかもしくは３個の異なる連結基ほどもを有することができる。
【００４９】
好ましい態様として、Ｌは群：
【００５０】
【化５】
2007535474.tif 000007
【００５１】
【化６】
2007535474.tif 000008
【００５２】
【化７】
2007535474.tif 000009
【００５３】
【化８】
2007535474.tif 000010
【００５４】
［ここで、ＡＡはアミノ酸であり、そしてｍは１〜１２である］、
【００５５】
【化９】
2007535474.tif 000011
【００５６】
［ここで、ＡＡはアミノ酸であり、そしてｍは１〜１２である］、および
【００５７】
【化１０】
2007535474.tif 000012
【００５８】
から選択される。
薬物動態学的修飾因子
一つの態様として、薬物動態学的修飾因子（式（Ｉ）におけるＰ）は、ポリアルキレンオキシド（ポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシドおよびポリ（エチレン−プロピレン）オキシドを包含する）、デキストラン、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、炭水化物に基づくポリマー、および「活性化」ポリマーよりなる群から選択されるポリマーであることができる。
【００５９】
好ましい態様として、薬物動態学的修飾因子は、約７５０式量単位（ｆｏｒｍｕｌａ  ｗｅｉｇｈｔ  ｕｎｉｔ）〜約６０，０００式量単位（ならびにその中の範囲および特定の分子量の全ての組み合わせおよびサブコンビネーション）、好ましくは約２０，０００分子量単位〜約４０，０００分子量単位の分子量を有するモノメチル末端ポリエチレングリコールである。
【００６０】
また、好ましい態様として、薬物動態学的修飾因子は、式（ＩＩＩ）：
【００６１】
【化１１】
2007535474.tif 000013
【００６２】
［式中：
ＭはＣＨ３、ＨＣ＝ＣＨ−Ｃ（＝Ｏ）、Ｏ＝ＣＨ−ＣＨ２、Ｈ２Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ２、Ｃｌ−Ｈ３Ｎ＋−ＨＮ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２、Ｏ＝Ｃ＝Ｎ−ＣＨ２ＣＨ２、ＨＳ−ＣＨ２ＣＨ２、Ｈ２Ｃ＝ＣＨ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２ＣＨ２、
【００６３】
【化１２】
2007535474.tif 000014
【００６４】
であり；
ｊは約１７〜約１４００（ならびにその中の範囲および特定の数の全ての組み合わせおよびサブコンビネーション）であり；そして
ＡはＯ−ＣＨ２−ＣＨ（＝Ｏ）、Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２＝ＣＨ２、Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ２、ＮＨ２、Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ３＋Ｃｌ−、ＳＨ、Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ＝ＣＨ２、
【００６５】
【化１３】
2007535474.tif 000015
【００６６】
である］
の活性化ポリマーである。
【００６７】
本発明の代わりの態様として、式（ＩＶ）：
Ｄ−Ｌｎ−Ｐｎ’
（ＩＶ）
［式中：
Ｄは補体カスケードインヒビターである化合物から各出現ごとに独立して選択され；
Ｌは各出現ごとに独立して選択される場合による（各出現ごとに）連結基であり；
ｎは１もしくは２であり；
ｎ’は１、２、３もしくは４であり；そして
ＰはＤの薬物動態学的特性を高める化合物から各出現ごとに独立して選択される］
の化合物が提供される。
【００６８】
式（ＩＶ）は全ての可能な組み合わせ、例えば、（Ｄ）ｎ−Ｐｎ’、例えばＤ−Ｌ（−Ｐ）−Ｐ、Ｐ−Ｄ−Ｐ、Ｄ−Ｌ−Ｐ−Ｌ−Ｐ、Ｄ−Ｌ−Ｐ−Ｌ−Ｄ、Ｐ−Ｄ−Ｌ−Ｄ−Ｌ−ＰおよびＤ−Ｌ−Ｐ−Ｐ−Ｌ−Ｄを包含する（Ｄ−Ｌ）ｎ−Ｐｎ’、ならびに（Ｄ）ｎ−Ｐｎ’−（Ｄ−Ｌ）ｎを含むと理解される。
【００６９】
代わりの態様として、Ｄは式（Ｖ）：
【００７０】
【化１４】
2007535474.tif 000016
【００７１】
［式中：
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はＨ、Ｃ１〜４アルキル、アミノ、Ｃ１〜４アルコキシもしくはヒドロキシから独立して選択され；
Ｕはチオフェニル−Ｒ５、ベンジレン、フェニレン、ＮＨもしくは結合であり；
Ｒ５はＳＯ２、ＮＨもしくは結合であり；
Ｚはアリーレン、ヘテロアリーレン、アラルキレン、シクロアルキレン、シクロヘテロエンであり；
ＷはＣ（＝Ｏ）−Ｏ、ＨＣ（ＣＨ３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）、Ｏ、ＮＨ、Ｓ、ＣＨ２、Ｃ（＝Ｏ）もしくは結合であり；
Ｔはアリーレン、ヘテロアリーレン、アラルキレン、シクロアルキレン、シクロヘテロエン、Ｃ１〜４アルキル、Ｏ、Ｓ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノもしくはニトロであり；
Ｘはアミノ、カルボキシ、ヒドロキシル、チオール、ハロゲン、オレフィン、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、アミノアルキル、カルボキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、メルカプトアルキル、またはＬもしくはＰへの結合であり；
存在する場合、Ｙはアミノ、カルボキシ、ヒドロキシル、チオール、ハロゲン、オレフィン、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、アミノアルキル、カルボキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、メルカプトアルキル、尿素、グアニジニル、またはＬもしくはＰへの結合であり；そして
Ｖはメチル、エチルもしくはＣｌである］
の化合物である。
【００７２】
好ましい態様として、Ｄは群：
【００７３】
【化１５】
2007535474.tif 000017
【００７４】
【化１６】
2007535474.tif 000018
【００７５】
［ここで：
ＸはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨもしくはＣ（＝Ｏ）であり、
存在する場合、ＹはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨ、Ｃ（＝Ｏ）、尿素もしくはグアニジニルであり、
Ｖはメチルもしくはエチルであり、そして
Ｒ６はＨ、Ｃ１〜４アルキル、ＯＨ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノ、フェニル、ピラゾリルもしくはニトロである］
から選択される。
場合による連結基
存在する場合、ＬはＤをＰに、これらの部分の間に空間を与えながら、連結するように働く化合物であることができ、そして実質的に上記のとおりである。
薬物動態学的修飾因子
本態様として、薬物動態学的修飾因子は実質的に上記のとおりである。
【００７６】
ｎ＝１およびｎ’＝２の式（ＩＶ）の化合物の一例は：
【００７７】
【化１７】
2007535474.tif 000019
【００７８】
［ここで：
Ｄは式（Ｖ）の化合物であり、そして
ｊは約１７〜約１４００（ならびにその中の範囲および特定の数の全ての組み合わせおよびサブコンビネーション）である］
である。
賦形剤
一つの態様として、賦形剤は、製薬学的組成物における活性化合物の賦形剤として用いられる化合物の既知の群から選択される。賦形剤は、典型的に、例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１９８０）（この開示は、その全部が本明細書に引用することにより本明細書に組み込まれる）に記述されているように、選択される投与経路および標準的な製薬学的慣習に基づいて選択される。
【００７９】
代わりの態様として、活性化合物はリン酸緩衝食塩水に溶解される。
使用の方法
別の態様として、本発明は、複合補体インヒビターを患者に投与することを含んでなる、補体カスケードの活性化を抑制するために患者を処置する方法を提供する。
【００８０】
該化合物は補体カスケードの成分における受容体に都合よく結合することができ、そしてそれにより補体カスケードを阻害するかもしくはカスケードから形成されるタンパク質（例えばＣ３ａおよびＣ５ａ）の効果を阻害することができる。補体カスケードを抑制する必要性は、補体カスケードの活性化が有害な影響を有して起こるある種の疾患の結果、もしくは補体カスケードの活性化の結果が望ましくないある種の臨床処置（移植、移植片など）においてであることができる。本明細書は、前述の想定および補体カスケードが抑制されるべきであると当業者が認識する任意の時の両方を含むために「疾患」という用語を使用する。
【００８１】
本発明の化合物は、遺伝性血管浮腫、敗血症性ショック、心肺バイパスにおけるポストポンプ症候群、発作性夜間血色素尿症、臓器拒絶反応、創傷、脳損傷、喘息、橋本甲状腺炎、全身性エリテマトーデスの糸球体腎炎および皮膚病変、他の糸球体腎炎、水疱性類天疱瘡、疱疹状皮膚炎、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、重症筋無力症、インシュリン抵抗性、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性血小板減少性紫斑病、関節リウマチ、多発性硬化症、神経障害ギラン・バレー症候群、ミラー・フィッシャー症候群ならびにアルツハイマー病を包含する、多数の疾患を処置するために用いることができる。意図される他の疾患は、米国特許第６，５１５，００２号および第６０／３８３，１３０号に開示され、これらの全開示はそれらの全部が引用することにより本明細書に組み込まれる。
【００８２】
一つの態様として、本発明は、補体カスケードの活性化を抑制することを含んでなる、個体における細胞移植もしくは移植片の拒絶を改善する方法を含んでなる。
【００８３】
移植片は、個体内、同種の個体間もしくは異種の個体間（「異種移植片」）の組織の移動をさす。
【００８４】
細胞移植は、個体内、同種の個体間もしくは異種の個体間の細胞の移動をさす。移植される細胞には、幹細胞、１つもしくはそれ以上のドナー動物からの一次細胞、組織培養由来の細胞、膵島細胞、インシュリンを発現する細胞、グルコース調節ホルモンを発現する細胞、または糖尿病の処置のための因子を発現する細胞が包含される。
【００８５】
細胞移植および移植片は、心不全、糖尿病、卒中、パーキンソン病、アルツハイマー病、認知症、肝疾患、腎臓病、熱傷および創傷のような疾患を処置するために望ましいことが知られている。しかしながら、この処置は、細胞移植および移植片の免疫原性の性質のために実際には有効でないことが多く、補体カスケードの活性化にそして最終的には拒絶につながる。従って、補体カスケードインヒビターは、拒絶を改善するために望ましい。ＲＪ  Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｏｒｃｉｎｅ  Ｎｅｕｒａｌ  Ｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ  Ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｉｍｍｕｎｏｃｏｍｐｅｔｅｎｔ  Ｒａｔ：Ｉｍｍｕｎｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  Ｇｒａｆｔｉｎｇ  Ｏｆ  Ｅｘｐａｎｄｅｄ  Ｎｅｕｒａｌ  Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ  Ｃｅｌｌｓ，Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２００１，１０６（１）：２０１−１６；Ｗ  Ｂｅｎｎｅｔ，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｏｆ  Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ  Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  Ｏｎ  Ｉｓｌｅｔｓ  Ｏｆ  Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ：Ａ  Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  Ｂｅｔｗｅｅｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｉｓｌｅｔｓ  Ａｎｄ  Ｉｓｌｅｔｓ  Ｉｓｏｌａｔｅｄ  Ｆｒｏｍ  Ｎｏｒｍａｌ  Ａｎｄ  ｈＤＡＦ  Ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  Ｐｉｇｓ，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，Ｊｕｌ  ２７，２００１，７２（２）：３１２−９；ＲＰ  Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｓｌｅｔ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  Ａｓ  Ａ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｆｏｒ  Ｄｉａｂｅｔｅｓ−Ａ  Ｗｏｒｋ  Ｉｎ  Ｐｒｏｇｒｅｓｓ，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ．，Ｆｅｂ  １２，２００４，３５０（７）：６９４−７０５；Ｔ  Ｌｕｎｄｇｒｅｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｓｏｌｕｂｌｅ  Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １（ＴＰ１０）Ｐｒｅｓｅｒｖｅｓ  Ａｄｕｌｔ  Ｐｏｒｃｉｎｅ  Ｉｓｌｅｔ  Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ  Ａｆｔｅｒ  Ｉｎｔｒａｐｏｒｔａｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  Ｉｎｔｏ  Ｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓ  Ｍｏｎｋｅｙｓ，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  Ｐｒｏｃ．Ｆｅｂ−Ｍａｒ  ２００１，３３（１−２）：７２５；Ｗ  Ｂｅｎｎｅｔ，ｅｔ  ａｌ．，Ｄａｍａｇｅ  Ｔｏ  Ｐｏｒｃｉｎｅ  Ｉｓｌｅｔｓ  Ｏｆ  Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ  Ａｆｔｅｒ  Ｅｘｐｏｓｕｒｅ  Ｔｏ  Ｈｕｍａｎ  Ｂｌｏｏｄ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ，Ｏｒ  Ａｆｔｅｒ  Ｉｎｔｒａｐｏｒｔａｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  Ｔｏ  Ｃｙｎｏｍｏｌｏｇｕｓ  Ｍｏｎｋｅｙｓ：Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  Ｏｆ  Ｓｃｒ１  Ａｎｄ  Ｈｅｐａｒｉｎ，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，Ｍａｒ  １５，２０００，６９（５）：７１１−９；Ｒ  Ｒｅｃａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｆｏｒ  Ｃ３ａ  Ａｎａｐｈｙｌａｔｏｘｉｎ  Ｉｓ  Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  Ｂｙ  Ｎｏｒｍａｌ  Ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ  Ｓｔｅｍ／Ｐｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ，Ａｎｄ  Ｃ３ａ  Ｅｎｈａｎｃｅｓ  Ｔｈｅｉｒ  Ｈｏｍｉｎｇ−Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  Ｔｏ  ＳＤＦ−１，Ｂｌｏｏｄ，Ｍａｙ  １５，２００３，１０１（１０）：３７８４−９３（Ｅｐｕｂ  Ｊａｎ  ２，２００３）；Ｋ  Ｔｅｒａｎｉｓｈｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ  Ｏｆ  Ａｎｔｉ−Ｇ��ｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｂｙ  Ｔｈｅ  Ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ  Ｉｎｆｕｓｉｏｎ  Ｏｆ  Ｇａｌ  Ｔｙｐｅ  ２  Ａｎｄ  ６  Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  Ｉｎ  Ｂａｂｏｏｎｓ，Ｘｅｎｏｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，Ｊｕｌｙ  ２００３，１０（４）：３５７−６７；Ｋ  Ｔｅｒａｎｉｓｈｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ  Ｏｆ  Ａｎｔｉ−Ｇａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｉｎ  Ｂａｂｏｏｎｓ  Ｂｙ  Ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ  Ｔｈｅｒａｐｙ  Ｗｉｔｈ  Ｂｏｖｉｎｅ  Ｓｅｒｕｍ  Ａｌｂｕｍｉｎ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ  Ｔｏ  Ｇａｌ  Ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，Ｊａｎ  １５，２００２，７３（１）：１２９−３０；ＪＺ  Ａｐｐｅｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  Ｏｆ  Ｐｌａｔｅｌｅｔ  Ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ  Ｉｎ  Ｂａｂｏｏｎｓ：Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  Ｆｏｒ  Ｍｉｘｅｄ  Ｃｈｉｍｅｒｉｓｍ  Ｉｎ  Ｘｅｎｏｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．Ｉ．Ｔｈｅ  Ｒｏｌｅｓ  Ｏｆ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ  Ｏｆ  Ａ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ  Ｒｅｇｉｍｅｎ  Ａｎｄ  Ｏｆ  Ｐｉｇ  Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  Ｂｌｏｏｄ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，Ｏｃｔ  １５，２００１，７２（７）：１２９９−３０５；Ｍ  Ｂａｓｋｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｅａｒａｎｃｅ  Ｏｆ  Ｍｏｂｉｌｉｚｅｄ  Ｐｏｒｃｉｎｅ  Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  Ｂｌｏｏｄ  Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  Ｉｓ  Ｄｅｌａｙｅｄ  Ｂｙ  Ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ  Ｏｆ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｇｏｃｙｔｉｃ  Ｒｅｔｉｃｕｌｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｉｎ  Ｂａｂｏｏｎｓ，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，Ｏｃｔ  １５，２００１，７２（７）：１２７８−８５；Ｌ  Ｂｕｈｌｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｈｉｇｈ−Ｄｏｓｅ  Ｐｏｒｃｉｎｅ  Ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ  Ｃｅｌｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  Ｃｏｍｂｉｎｅｄ  Ｗｉｔｈ  ＣＤ４０  Ｌｉｇａｎｄ  Ｂｌｏｃｋａｄｅ  Ｉｎ  Ｂａｂｏｏｎｓ  Ｐｒｅｖｅｎｔｓ  Ａｎ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ａｎｔｉ−Ｐｉｇ  Ｈｕｍｏｒａｌ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，Ｊｕｎ  １５，２０００，６９（１１）：２２９６−３０４を参照。
【００８６】
一つの態様として、本発明は、複合補体インヒビターを個体に投与することにより補体カスケードの活性化を抑制することを含んでなる、個体における細胞移植もしくは移植片の拒絶を改善する方法を含んでなる。個体は、補体カスケードの少なくとも一部を有する任意の動物であることができ、そして一つの態様として、個体は哺乳類である。
【００８７】
望ましくない補体媒介性炎症反応に起因する臓器保存と関連する組織損傷は、臓器保存溶液に補体インヒビターを加えることにより克服できることが見出されている。Ｂｅｒｇａｍａｓｃｈｉｎｉ  Ｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃ１  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｐｏｔｅｎｔｉａｔｅｓ  ｔｈｅ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｏｒｇａｎ  ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｏｎ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｃｅｌｌｓ  ｄｕｒｉｎｇ  ｃｏｌｄ  ｓｔｏｒａｇｅ，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  Ｐｒｏｃ．Ｆｅｂ−Ｍａｒ  ２００１，３３（１−２）：９３９−４１を参照。
【００８８】
一つの態様として、本発明は、複合補体インヒビターと臓器を接触させることを含んでなる、臓器保存溶液中の臓器における補体活性化を防ぐ方法を含んでなる。
【００８９】
移植は、個体内、同種の個体間もしくは異種の個体間であることができる。
【００９０】
一つの態様として、本発明は、複合補体インヒビターと物体を接触させることを含んでなる、個体への異物の挿入に応答する補体活性化を防ぐ方法を含んでなる。個体は、補体カスケードの少なくとも一部を有する任意の動物であることができ、そして一つの態様として、個体は哺乳類である。一つの態様として、物体は外科的インプラント、人工臓器もしくは人工関節、または補体活性化が望ましくない同様の物体である。
【００９１】
一つの態様として、複合補体インヒビターは式（Ｉ）もしくは式（ＩＶ）：
（Ｄ−Ｌ）ｎ−Ｐ          Ｄ−Ｌｎ−Ｐｎ’
（Ｉ）                  （ＩＶ）
［式中：
Ｄは補体カスケードインヒビターである化合物から各出現ごとに独立して選択され；
Ｌは各出現ごとに独立して選択される任意の（各出現ごとに）連結基であり；
ｎは１、２、３、４、５もしくは６であり；
ｎ’は１、２、３もしくは４であり；そして
ＰはＤの薬物動態学的特性を高める化合物である］
を有する化合物である。
【００９２】
一つの態様として、Ｄは式（ＶＩ）：
【００９３】
【化１８】
2007535474.tif 000020
【００９４】
［式中：
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３および場合によりＲ３’は、Ｈ、Ｃ１〜４アルキル、アミノ、Ｃ１〜４アルコキシもしくはヒドロキシルから独立して選択され、ここで、Ｒ３’は、点線が二重結合を表す場合には存在せず；
Ｕはチオフェニル−Ｒ５、ベンジレン、フェニレン、ＮＨもしくは結合であり；
Ｒ５はＳＯ２、ＮＨもしくは結合であり；
Ｚはアリーレン、ヘテロアリーレン、アラルキレン、シクロアルキレン、シクロヘテロエンであり；
ＷはＣ（＝Ｏ）−Ｏ、ＨＣ（ＣＨ３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）、Ｏ、ＮＨ、Ｓ、ＣＨ２、Ｃ（＝Ｏ）もしくは結合であり；
Ｔはアリーレン、ヘテロアリーレン、アラルキレン、シクロアルキレン、シクロヘテロエン、Ｃ１〜４アルキル、Ｏ、Ｓ、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノもしくはニトロであり；
Ｘはアミノ、カルボキシ、ヒドロキシル、チオール、ハロゲン、オレフィン、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、アミノアルキル、カルボキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、メルカプトアルキル、またはＬもしくはＰへの結合であり；
存在する場合、Ｙ’はアミノ、カルボキシ、ヒドロキシル、チオール、ハロゲン、オレフィン、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、アミノアルキル、カルボキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、メルカプトアルキル、尿素、グアニジニル、Ｈ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミジニル、アミノメチル、ＮＨ２、またはＬもしくはＰへの結合であり；そして
Ｖはメチル、エチルもしくはＣｌである］
の化合物である。
【００９５】
一つの態様として、Ｌは存在し、そして群：
【００９６】
【化１９】
2007535474.tif 000021
【００９７】
【化２０】
2007535474.tif 000022
【００９８】
【化２１】
2007535474.tif 000023
【００９９】
［ここで、ＡＡはアミノ酸であり、そしてｍは１〜１２である］、
【０１００】
【化２２】
2007535474.tif 000024
【０１０１】
［ここで、ＡＡはアミノ酸であり、そしてｍは１〜１２である］、および
【０１０２】
【化２３】
2007535474.tif 000025
【０１０３】
から選択される。
【０１０４】
一つの態様として、Ｐは式（ＩＩＩ）：
【０１０５】
【化２４】
2007535474.tif 000026
【０１０６】
［式中：
ＭはＣＨ３、ＨＣ＝ＣＨ−Ｃ（＝Ｏ）、Ｏ＝ＣＨ−ＣＨ２、Ｈ２Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ２、Ｃｌ−Ｈ３Ｎ＋−ＨＮ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２、Ｏ＝Ｃ＝Ｎ−ＣＨ２ＣＨ２、ＨＳ−ＣＨ２ＣＨ２、Ｈ２Ｃ＝ＣＨ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２ＣＨ２、
【０１０７】
【化２５】
2007535474.tif 000027
【０１０８】
であり；
ｊは１７〜１４００であり；そして
ＡはＯ−ＣＨ２−ＣＨ（＝Ｏ）、Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２＝ＣＨ２、Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ２、ＮＨ２、Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ３＋Ｃｌ−、ＳＨ、Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ＝ＣＨ２、
【０１０９】
【化２６】
2007535474.tif 000028
【０１１０】
である］
を有する活性化ポリマーである。
【０１１１】
投与する有用な投薬量および特定の投与形態は、当業者に容易に明らかであるように、年齢、体重および処置する特定の領域、ならびに薬剤の特定の構成および形態のような因子により異なる。典型的に、投薬量は、より低いレベルで投与され、そして望ましい治療効果が得られるまで増加される。有効成分および担体の相対的比率は、例えば、化合物の溶解性および化学的性質、選択される投与経路ならびに標準的な製薬学的慣習により決定することができる。
【０１１２】
予防もしくは処置に最も適当である本発明の化合物の投薬量は、投与の形態、選択される特定の化合物および処置下の特定の患者の生理的特徴によって異なる。一般に、低投薬量を最初に使用し、そして必要に応じて、該状況下での所望の効果に到達するまで少しずつ増加することができる。治療的ヒト投薬量は、ラットを用いる生理学的研究に基づいて、一般に１日当たり約０．０１ｍｇ〜約６００ｍｇ／ｋｇ体重、ならびにその中の範囲の全ての組み合わせおよびサブコンビネーションに及ぶことができる。あるいはまた、治療的ヒト投薬量は、約０．４ｍｇ〜約１０ｇ以上であることができ、そして１日１回〜数回いくつかの異なる投薬量単位で投与することができる。一般的に言えば、経口投与はより高い投薬量を必要とし得る。
【０１１３】
本発明の方法に用いる化合物は、患者の体内で薬剤の作用部位と活性薬剤との接触をもたらす任意の手段により、例えば、経口的にもしくは非経口的に投与することができる。
【０１１４】
非経口投与には、以下の経路：静脈内、筋肉内、皮下、直腸、眼球内、滑液嚢内、経皮を包含する経上皮、眼、舌下および口腔；眼、皮膚、眼球、直腸、および吸入エアロゾルによる鼻孔吸入を包含する局所的による投与が包含される。
【０１１５】
遊離塩基もしくは薬理学的に許容しうる塩としての活性化合物の溶液は、ヒドロキシプロピルセルロースのような界面活性剤と適当に混合した水において製造することができる。分散液もまた、グリセロール、液状ポリエチレングリコールおよびその混合物において、そして油において製造することができる。保存および使用の通常の条件下で、これらの製剤は微生物の増殖を防ぐために防腐剤を含有することができる。
【０１１６】
注入可能な用途に適当な製薬学的形態には、例えば、滅菌した水性溶液もしくは分散液および滅菌した注入可能な溶液もしくは分散液の即時調製用の滅菌した粉末が包含される。全ての場合において、該形態は好ましくは無菌であり、そして容易に注入できる（ｐｒｏｖｉｄｅ  ｅａｓｙ  ｓｙｒｉｎｇａｂｉｌｉｔｙ）ように流動性である。それは好ましくは製造および保存の条件下で安定であり、そして好ましくは細菌および真菌のような微生物の汚染作用から保護される。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール(例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液状ポリエチレングリコールなど)、その適当な混合物、および植物油を含有する溶媒もしくは分散媒質であることができる。適切な流動性は、例えば、レシチンのようなコーティングの使用により、分散液の場合には必要な粒子サイズの維持により、そして界面活性剤の使用により保つことができる。微生物の作用の防止は、様々な抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどにより成し遂げられることができる。多くの場合において、等張剤、例えば、糖もしくは塩化ナトリウムを含むことは好ましい。注入可能な組成物の長期吸収は、吸収を遅らせる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンの使用により成し遂げられることができる。
【０１１７】
滅菌した注入可能な溶液は、必要に応じて、様々な上記に列挙する他の成分とともに、適切な溶媒において、必要な量の活性化合物を導入すること、続いて濾過滅菌により製造することができる。一般に、分散液は、基本分散媒質および上記に列挙するものからの必要な他の成分を含有する滅菌した賦形剤に滅菌した有効成分を導入することにより製造することができる。滅菌した注入可能な溶液の製造用の滅菌した粉末の場合、好ましい製造方法には、有効成分の粉末をその前もって滅菌濾過した溶液から任意の追加の所望の成分に加えてもたらす真空乾燥および凍結乾燥技術を包含することができる。
【０１１８】
化合物は、個々の治療薬としてもしくは他の治療薬との組み合わせにおいて、薬剤と併せて使用するために利用可能な任意の通常手段により投与することができる。他の治療成分には、抗生物質、抗ウイルス剤、抗真菌剤、ステロイド性および非ステロイド性抗炎症薬を包含する抗炎症薬、麻酔薬、制吐薬、免疫抑制剤、ならびにその混合物が包含されるが、これらに限定されるものではない。
【０１１９】
そのような追加の成分には、下記のもののいずれかが包含される：
ａ．抗菌剤−アミカシン、アプラマイシン、アルベカシン、バンベルマイシン、ブチロシン、ジベカシン、ジヒドロストレプトマイシン、フォーチミシン（１つもしくは複数）、フラジオマイシン、ゲンタマイシン、イスパマイシン（Ｉｓｐａｍｉｃｉｎ）、カナマイシン、ミクロノマイシン、ネオマイシン、ウンデシレン酸ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、リボスタマイシン、シソマイシン、スペクチノマイシン、ストレプトマイシン、ステレプトニコジド（Ｓｔｒｅｐｔｏｎｉｃｏｚｉｄ）およびトブラマイシンのようなアミノグリコシド；アジダムフェニコール（Ａｚｉｄａｍｆｅｎｉｃｏｌ）、クロラムフェニコール、パルミチン酸クロラムフェニコール、パントテン酸クロラムフェニコール、フロルフェニコール、チアンフェニコールのようなアンフェニコール；リファミド、リファンピン、リファマイシンおよびリファキシミンのようなアンサマイシン；β−ラクタム；イミペネムのようなカルバペネム；１−カルバ（デチア）セファロスポリン、セファクター（Ｃｅｆａｃｔｏｒ）、セファドロキシル、セファマンドール、セファトリジン、セファゼドン（Ｃｅｆａｚｅｄｏｎｅ）、セファゾリン、セフィキシム、セフメノキシム、セフォジジム、セフォニシド、セフォペラゾン、セフォラニド、セフォタキシム、セフォチアム、セフピミゾール、セフピリミド（Ｃｅｆｐｉｒｉｍｉｄｅ）、セフポドキシムプロキセチル、セフロキサジン、セフスロジン、セフタジジム、セフテラム、セフテゾール、セフチブテン、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフロキシム、セフゾナム、セファセトリルナトリウム、セファレキシン、セファログリシン、セファロリジン、セファロスポリン、セファロチン、セファピリンナトリウム、セフラジンおよびピブセファレキシン（Ｐｉｖｃｅｆａｌｅｘｉｎ）のようなセファロスポリン；セフブペラゾン、セフメタゾール、セフミノクス、セフェタン（Ｃｅｆｅｔａｎ）およびセフォキシチンのようなセファマイシン；アズトレオナム、カルモナムおよびチゲモナン（Ｔｉｇｅｍｏｎａｎ）のようなモノバクタム；フロモキセフおよびモキソラクタム（Ｍｏｘｏｌａｃｔａｍ）のようなオキサセフェム；アミジノシリン、アムジノシリン、ピボキシル、アモキシシリン、アンピシリン（Ａｍｐｉｃｉｌｌａｎ）、アパルシリン、アスポキシシリン、アジドシラン（Ａｚｉｄｏｃｉｌｌａｎ）、アズロシリン（Ａｚｌｏｃｉｌｌａｎ）、バカンピシリン、ベンジルペニシリン酸、ベンジルペニシリン、カルベニシリン、カルフェシリン、カリンダシリン、クロメトシリン（Ｃｌｏｍｅｔｏｃｉｌｌｉｎ）、クロキサシリン、シクラシリン、ジクロキサシリン、ジフェニシリン（Ｄｉｐｈｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）、エピシリン、フェンベニシリン（Ｆｅｎｂｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）、フロキシシリン（Ｆｌｏｘｉｃｉｌｌｉｎ）、ヘタシリン、レナンピシリン、メタンピシリン（Ｍｅｔａｍｐｉｃｉｌｌｉｎ）、メチシリン、メズロシリン、ナフシリン、オキサシリン、ペナメシリン（Ｐｅｎａｍｅｃｉｌｌｉｎ）、ペネタメートヒドリオジド（Ｐｅｎｅｔｈａｍａｔｅ  Ｈｙｄｒｉｏｄｉｄｅ）、ベネタミンペニシリンＧ、ベンザチンペニシリンＧ、ベンズヒドリルア��ンペニシリンＧ、ペニシリンＧカルシウム、ヒドラバミン（Ｈｙｄｒａｇａｍｉｎｅ）ペニシリンＧ、ペニシリンＧカリウム、プロカインペニシリンＧ、ペニシリンＮ、ペニシリンＯ、ペニシリンＶ、ベンザチンペニシリンＶ、ヒドラバミンペニシリンＶ、ペニメピサイクリン（Ｐｅｎｉｍｅｐｉｃｙｃｌｉｎｅ）、フェネチシリン、ピペラシリン、ピバピシリン（Ｐｉｖａｐｉｃｉｌｌｉｎ）、プロピシリン、キナシリン（Ｑｕｉｎａｃｉｌｌｉｎ）、スルベニシリン、タランピシリン、テモシリンおよびチカルシリンのようなペニシリン；クリンダマイシンおよびリンコマイシンのようなリンコスミド（Ｌｉｎｃｏｓｕｍｉｄｅ）；アジスロマイシン、カルボマイシン、クラリスロマイシン、エリスロマイシン（１つもしくは複数）および誘導体、ジョサマイシン、ロイコマイシン、ミデカマイシン、ミオカマイシン、オレアンドマイシン、プリマイシン（Ｐｒｉｍｙｃｉｎ）、ロキタマイシン、ロサラマイシン（Ｒｏｓａｒａｍｉｃｉｎ）、ロキシスロマイシン、スピラマイシンおよびトロレアンドマイシンのようなマクロライド；アンフォマイシン、バシトラシン、カプレオマイシン、コリスチン、エンデュラシジン（Ｅｎｄｕｒａｃｉｄｉｎ）、エンビオマイシン、フサファンギン、クラミシジン（１つもしくは複数）、グラミシジンＳ、ミカマイシン、ポリミキシン、ポリミキシンβ−メタンスルホン酸、プリスチナマイシン、リストセチン、テイコプラニン、チオストレプトン、ツベラクチノマイシン、チロシジン、チロトリシン、バンコマイシン、バイオマイシン（１つもしくは複数）、バージニアマイシンおよび亜鉛バシトラシンのようなポリペプチド；スピサイクリン（Ｓｐｉｃｙｃｌｉｎｅ）、クロルテトラサイクリン、クロモサイクリン（Ｃｌｏｍｏｃｙｃｌｉｎｅ）、デメクロサイクリン、ドキシサクリン、グアメサイクリン（Ｇｕａｍｅｃｙｃｌｉｎｅ）、ライムサイクリン、メクロサイクリン、メタサイクリン、ミノサイクリン、オキシテトラサイクリン、ペニメピサイクリン（Ｐｅｎｉｍｅｐｉｃｙｃｌｉｎｅ）、ピパサイクリン（ｐｉｐａｃｙｃｌｉｎｅ）、ロリテトラサイクリン、サンサイクリン（Ｓａｎｃｙｃｌｉｎｅ）、セノシクリン（Ｓｅｎｏｃｉｃｌｉｎ）およびテトラサイクリンのようなテトラサイクリン；ならびにサイクロセリン、ムピロシンおよびチュベリンのような他のもの。
ｂ．合成抗菌剤−ブロジモプリム、テトロキソプリムおよびトリメトプリムのような２，４−ジアミノピリミジン；フラルタドン、フラゾリウム（Ｆｕｒａｚｏｉｕｍ）、ニフラデン（Ｎｉｆｕｒａｄｅｎｅ）、ニフラテル、ニフルフォリン（Ｎｉｆｕｒｆｏｌｉｎｅ）、ニフルピリノール、ニフルプラジン、ニフルトイノール（Ｎｉｆｕｒｔｏｉｎｏｌ）およびニトロフラントインのようなニトロフラン；アミフロキサシン（Ａｍｉｆｌｏｘａｃｉｎ）、シノキサシン、シプロフロキサシン、ジフロキサシン、エノキサシン、フレロキサシン、フルメキン、ロメフロキサシン、ミロキサシン、ナリジクス酸、ノルフロキサシン、オフロキサシン、オキソリン酸、ペルフロキサシン（Ｐｅｒｆｌｏｘａｃｉｎ）、ピペミド酸、ピロミド酸、ロソキサシン（Ｒｏｓｏｘａｃｉｎ）、テマフロキサシンおよびトスフロキサシンのようなキノロンおよびそのアナログ；アセチルスルファメトキシピラジン、アセチルスルフィソキサゾール、アゾスルファミド、ベンジルスルファミド、クロラミン−β、クロラミン−Ｔ、ジクロラミン−Ｔ、ホルモスルファチアゾール、Ｎ．ｓｕｐ．２−ホルミル−スルフィソミジン、Ｎ．ｓｕｐ．４−β−Ｄ−グルコシルスルファニルアミド、マフェニド、４’−（メチル−スルファモイル）スルファニルアニリド、ｐ−ニトロスルファチアゾール、ノプリルスルファミド（Ｎｏｐｒｙｌｓｕｌｆａｍｉｄｅ）、フタリルスルファセタミド、フタリルスルファチアゾール、サラゾスルファジミジン（Ｓａｌａｚｏｓｕｌｆａｄｉｍｉｄｉｎｅ）、スクシニルスルファチアゾール、スルファベンズアミド、スルファセタミド、スルファクロルピリダジン、スルファクリソイジン、スルファシチン、スルファジアジン、スルファジクラミド（Ｓｕｌｆａｄｉｃｒａｍｉｄｅ）、スルファジメトキシン、スルファドキシン、スルファエチドール、スルファグアニジン、スルファグアノール（Ｓｕｌｆａｇｕａｎｏｌ）、スルファレン、スルファロキシック酸（Ｓｕｌｆａｌｏｘｉｃ  Ａｃｉｄ）、スルファメラジン、スルファメータ、スルファメタジン、スルファメチゾール、スルファメトミジン（Ｓｕｌｆａｍｅｔｈｏｍｉｄｉｎｅ）、スルファメトキサゾール、スルファメトキシピリダジン、スルファメトロール（Ｓｕｌｆａｍｅｔｒｏｌｅ）、スルファミドクリソイジン、スルファモキソール、スルファニルアミド、スルファニルアミドメタンスルホン酸トリエタノールアミン塩、４−スルファニルアミドサリチル酸、Ｎ．ｓｕｐ．４−スルファニリルスルファニルアミド、スルファニリル尿素、Ｎ−スルファニリル−３，４−キシラミド（Ｎ−Ｓｕｌｆａｎｉｌｙｌ−３，４−ｘｙｌａｍｉｄｅ）、スルファニトラン、スルファペリン、スルファフェナゾール、スルファプロキシリン、スルファピラジン、スルファピリジン、スルファソミゾール（Ｓｕｌｆａｓｏｍｉｚｏｌｅ）、スルファシマジン（Ｓｕｌｆａｓｙｍａｚｉｎｅ）、スルファチアゾール、スルファチオ尿素、スルファトラミド、スルフィソミジンおよびスルフィソキサゾールのようなスルホンアミド；アセダプソン、アセジアスルホン（Ａｃｅｄｉａｓｕｌｆｏｎｅ）、アセトスルホン、ダプソン、ジアチモスルホン（Ｄｉａｔｈｙｍｏｓｕｌｆｏｎｅ）、グルコスルホン、ソラスルホン、スクシスルホン、スルファニル酸、ｐ−スルファニリルベンジルアミン、ｐ、ｐ’−スルホニルジアニリン−Ｎ，Ｎ’−ジガラクトシド、スルホキソンおよびチアゾールスルホンのようなスルホン；ならびにクロホクトール、ヘキセジン（Ｈｅｘｅｄｉｎｅ）、マガイニン、メテナミン、メテナミンアンヒドロメチレン−クエン酸塩、馬尿酸メテナミン、マンデル酸メテナミン、スルホサリチル酸メテナミン、ニトロキソリン、スクアラミンおよびキシボモル（Ｘｉｂｏｍｏｌ）のようなその他のもの。
ｃ．抗真菌剤（抗生物質）−アンフォテリシン−Ｂ、カンジシジン、デルモスタチン、フィリピン、フンギクロミン、ハチマイシン、ハマイシン（Ｈａｍｙｃｉｎ）、ルセンソマイシン、メパルトリシン、ナタマイシン、ニスタチン、ペチロシン、ペリマイシン（Ｐｅｒｉｍｙｃｉｎ）のようなポリエン；ならびにアザセリン、グリセオフルビン、オリゴマイシン、ピロルニトリン、シッカニン、ツベルシジンおよびビリジン（Ｖｉｒｉｄｉｎ）のような他のもの。
ｄ．抗真菌剤（合成）−ナフチフィンおよびテルビナフィンのようなアリルアミン；ビフォナゾール、ブトコナゾール、クロルダントイン、クロルミダゾール（Ｃｈｌｏｒｍｉｄａｚｏｌｅ）、クロコナゾール、クロトリマゾール、エコナゾール、エニルコナゾール、フィンチコナゾール（Ｆｉｎｔｉｃｏｎａｚｏｌｅ）、イソコナゾール、ケトコナゾール、ミコナゾール、オモコナゾール、硝酸オキシコナゾール、スルコナゾールおよびチオコナゾールのようなイミダゾール；フルコナゾール、イトラコナゾール、テルコナゾールのようなトリアゾール；ならびにアクリゾルシン、アモロルフィン、ビフェナミン、ブロモサリチルクロラニリド（Ｂｒｏｍｏｓａｌｉｃｙｌｃｈｌｏｒａｎｉｌｉｄｅ）、ブクロサミド、クロフェネシン、シクロピロクス、クロキシキン（Ｃｌｏｘｙｑｕｉｎ）、コパラフィネート、ジアムタゾール、２塩酸塩、エキサラミド、フルシトシン、ハレタゾール（Ｈａｌｅｔｈａｚｏｌｅ）、ヘキセチジン、ロフルカルバン（Ｌｏｆｌｕｃａｒｂａｎ）、ニフラテル、ヨウ化カリウム、プロピオン酸、ピリチオン、サリチルアニリド、スルベンチン、テノニトロゾール（Ｔｅｎｏｎｉｔｒｏｚｏｌｅ）、トルシクレート、トリンデート（Ｔｏｌｉｎｄａｔｅ）、トルナフテート、トリセチン、ウジョチオン（Ｕｊｏｔｈｉｏｎ）およびウンデシレン酸のような他のもの。
ｅ．抗緑内障薬−ダピプラゾーク（Ｄａｐｉｐｒａｚｏｋｅ）、ジクロルフェナミド、ジピベフリンおよびピロカルピンのような抗緑内障薬。
ｆ．抗炎症薬−コルチコステロイド、エトフェナメート、メクロフェナム酸、メファナム酸、ニフルム酸のようなアミノアリールカルボン酸誘導体；アセメタシン、アンフェナク、シンメタシン（Ｃｉｎｍｅｔａｃｉｎ）、クロピラク（Ｃｌｏｐｉｒａｃ）、ジクロフェナク、フェンクロフェナク、フェンクロラク、フェンクロジック酸（Ｆｅｎｃｌｏｚｉｃ  Ａｃｉｄ）、フェンチアザク、グルカメタシン（Ｇｌｕｃａｍｅｔａｃｉｎ）、イソゼパク（Ｉｓｏｚｅｐａｃ）、ロナゾラク（Ｌｏｎａｚｏｌａｃ）、メチアジン酸、オキサメタシン、プログルメタシン、スリンダク、チアラミドおよびトルメチンのようなアリール酢酸誘導体；ブチブフェンおよびフェンブフェンのようなアリール酪酸誘導体；クリダナク、ケトロラクおよびチノリジンのようなアリールカルボン酸；ブクロクス酸、カルプロフェン、フェノプロフェン、フルノキサプロフェン（Ｆｌｕｎｏｘａｐｒｏｆｅｎ）、イブプロフェン、イブプロキサム、オキサプロジン、ピケトプロフェン（Ｐｉｋｅｔｏｐｒｏｆｅｎ）、ピルプロフェン、プラノプロフェン、プロチジン酸およびチアプロフェン酸のようなアリールプロピオン酸誘導体；メピリゾールのようなピラゾール；クロフェゾン、フェプラゾン、モフェブタゾン、オキシフェンブタゾン、フェニルブタゾン、フェニルピラゾリジニノン（Ｐｈｅｎｙｌ  Ｐｙｒａｚｏｌｉｄｉｎｉｎｏｎｅ）、スキシブゾンおよびチアゾリノブタゾン（Ｔｈｉａｚｏｌｉｎｏｂｕｔａｚｏｎｅ）のようなピラゾロン；ブロモサリゲニン、フェンドサル（Ｆｅｎｄｏｓａｌ）、サリチル酸グリコール、メサラミン、サリチル酸１−ナフチル、オルサラジンおよびスルファサラジンのようなサリチル酸誘導体；ドロキシカム（Ｄｒｏｘｉｃａｍ）、イソキシカムおよびピロキシカムのようなチアジンカルボキサミド；ならびにｅ−アセトアミドカプロン酸、Ｓ−アデノシルメチオニン、３−アミノ−４−ヒドロキシ酪酸、アミキセトリン（Ａｍｉｘｅｔｒｉｎｅ）、ベンダザック、ブコローム、カルバゾン、ジフェンピラミド（Ｄｉｆｅｎｐｉｒａｍｉｄｅ）、ジタゾール、グアイアズレン、ミコフェノール酸の複素環式アミノアルキルエステルおよび誘導体、ナブメトン、ニメスリド、オルゴテイン、オキサセプロール（Ｏｘａｃｅｐｒｏｌ）、オキサゾール誘導体、パラニリン（Ｐａｒａｎｙｌｉｎｅ）、ピフォキシム（Ｐｉｆｏｘｉｍｅ）、２−置換された−４，６−ジ−第三ブチル−ｓ−ヒドロキシ−１，３−ピリミジン、プロクアゾン（Ｐｒｏｑｕａｚｏｎｅ）およびテニダップのようなその他のもの。
ｇ．防腐剤−アレキシジン（Ａｌｅｘｉｄｉｎｅ）、アンバゾン（Ａｍｂａｚｏｎｅ）、クロルヘキシジンおよびピクロキシジン（Ｐｉｃｌｏｘｙｄｉｎｅ）のようなグアニジン；塩化ボミル（Ｂｏｍｙｌ  Ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ヨウ素酸カルシウム、ヨウ素、１塩化ヨウ素、３塩化ヨウ素、ヨードホルム、ポビドン−ヨード、次亜塩素酸ナトリウム、ヨウ素酸ナトリウム、シムクロセン、ヨウ化チモール、トリクロカルバン、トリクロサンおよびトロクロセンカリウムのようなハロゲン／ハロゲン化合物；フラゾリドン、２−（メトキシメチル）−５−ニトロフラン、ニドロキシゾン（Ｎｉｄｒｏｘｙｚｏｎｅ）、ニフロキシム、ニフルジド（Ｎｉｆｕｒｚｉｄｅ）およびニトロフラゾンのようなニトロフラン；アセトメロクトール、クロロキシレノール、ヘキサクロロフェン、サリチル酸１−ナフチル、２，４，６−トリブロモ−ｍ−クレゾールおよび３’，４’，５−トリクロロサリチルアニリドのようなフェノール；アミノキヌリド（Ａｍｉｎｏｑｕｉｎｕｒｉｄｅ）、クロロキシン（Ｃｈｌｏｒｏｘｉｎｅ）、クロルキナルドール、クロキシキン（Ｃｌｏｘｙｑｕｉｎ）、エチルヒドロクプレイン、ハルキノール、ヒドラスチン、８−ヒドロキシキノリンおよび硫酸塩のようなキノリン；ならびにホウ酸、クロロアゾジン、酢酸ｍ−クレシル、硫酸銅およびイクタモールのような他のもの。
ｈ．抗ウイルス剤−２−アセチル−ピリジン−５−（（２−ピリジルアミノ）チオカルボニル）チオカルボノヒドラゾン、アシクロビル、ジデオキシアデノシン、ジデオキシシチジン、ジデオキシイノシン、エドクスジン、フロクスウリジン、ガンシクロビル、イドクスウリジン、ＭＡＤＵ、ピリジノン、トリフルリジン、ビドラルビン（Ｖｉｄｒａｒｂｉｎｅ）およびジドブジン（Ｚｉｄｏｖｕｄｌｉｎｅ）のようなプリン／ピリミジノン；アセチルロイシンモノエタノールアミン、アクリジナミン（Ａｃｒｉｄｉｎａｍｉｎｅ）、アルキルイソオキサゾール、アマンタジン、アミジノマイシン（Ａｍｉｄｉｎｏｍｙｃｉｎ）、クミンアルデヒド、チオセミカルブゾン（Ｔｈｉｏｓｅｍｉｃａｒｂｚｏｎｅ）、ホスカメット（Ｆｏｓｃａｍｅｔ）ナトリウム、ケトキサル（Ｋｅｔｈｏｘａｌ）、リゾチーム、メチサゾン、モロキシジン、ポドフィロトキシン、リバビリン、リマンタジン、スタルリマイシン（Ｓｔａｌｌｉｍｙｃｉｎ）、スタトロン（Ｓｔａｔｏｌｏｎ）、チモシン、トロマンタジン（Ｔｒｏｍａｎｔａｄｉｎｅ）およびキセナゾイック酸（Ｘｅｎａｚｏｉｃ  ａｃｉｄ）。
ｉ．免疫抑制剤−メチルプレドニソロン、アトガム、チモグロブリン、ＯＫＴ３、バシリキシマブ、ダクリズマブ、ラパマイシン、プレドニゾン、サイクロスポリン、タクロリムス、ミコフェノール酸モフェチルおよびアザチオプリン。
製造方法
別の態様として、本発明は補体カスケードインヒビターを製造する方法を提供する。
【０１２０】
図１は、中間体２〜９上に連結のための適当なハンドルを提供するように主要骨格（ｋｅｙ  ｓｃａｆｆｏｌｄ）１（米国仮出願６０／３８３１３０）上に二官能性リンカー（式ＩにおけるリンカーＬ）を導入するために用いることができる８つの方法論を要約する概略図を説明する。Ｘ＝ＮＨ２もしくはＯＨの場合、骨格１は、それぞれ、ピリジンのような塩基の存在下でクロロギ酸ｐ−ニトロフェニルで処理することにより、ｐ−ニトロフェニルカルバメートもしくはｐ−ニトロフェニルカーボネートに事前に活性化されることができる。このｉｎ−ｓｉｔｕ生成中間体を塩基、好ましくはトリエチルアミンもしくはジイソプロピルエチルアミンの存在下で適当なリンカー（ＮＨ２−スペーサー−Ｙ’）と直ちに反応させて尿素もしくはカルバメート２を生成せしめる（経路ａ）。Ｘ＝ＮＨ２の場合、骨格１を活性化カルバメートもしくはイソシアネートを含有するリンカーと直接反応させて尿素４（Ｗ’＝ＮＨ）を生成せしめることができる。Ｘ＝ＮＨ２の場合、骨格１はまたカーボネートまたは活性化酸官能基（もしくは酸塩化物）を含有するリンカーで処理してそれぞれカルバメート４（Ｗ’＝Ｏ）もしくはアミド４（Ｗ’＝ＣＨ２）を生成せしめることもできる。この経路の別のバリエーションとして、骨格１上の求核剤（Ｘ＝ＳＨもしくはＯＨ）は、求核置換反応においてリンカー上の優れた脱離基を置換することによりアルキル化されて中間体７を製造することができる（経路ｆ）。さらに、骨格１上の優れた脱離基（好ましくは、ＬＧ＝Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ｐ−ニトロフェノール、メチルスルホネートもしくはｐ−トルエンスルホネート）を用いて適当な二官能性リンカーをアルキル化して中間体３もしくは６（ここで、Ｚ＝ＮＨ、ＳもしくはＯ）を生成せしめることができる（それぞれ、経路ｂおよびｅに記述するとおり）。あるいはまた、Ｘが酸塩化物もしくは活性化酸である場合、これを経路ｄに示すようにアミン含有リンカーで処理してアミド５を生成せしめることができる。経路ｄにおいて、活性化酸は、多数の標準的なペプチドカップリング試薬、好ましくはＤＩＣ／ＤＭＡＰで処理することによりｉｎ  ｓｉｔｕで生成せしめることができる。最後に、骨格１とリンカーとの連結は、Ｘに導入される適当なマイケルアクセプターで共役付加を実施することにより成し遂げられることができる。従って、塩基の存在下で、アクリルアミドもしくはビニルスルホンと適当な求核剤（Ｚ＝ＮＨもしくはＳ）を保有するリンカーとの反応は、所望の中間体８もしくは９を生成せしめる（それぞれ、経路ｇおよびｈに記述するとおり）。
【０１２１】
図２は、中間体１１〜１８上に連結のための適当なハンドルを提供するように主要骨格１０（米国仮出願６０／３８３１３０）上に二官能性リンカーを導入するために用いることができる８つの方法論を要約する概略図を説明する。Ｘ＝ＮＨ２もしくはＯＨの場合、骨格１は、それぞれ、ピリジンのような塩基の存在下でクロロギ酸ｐ−ニトロフェニルで処理することにより、ｐ−ニトロフェニルカルバメートもしくはｐ−ニトロフェニルカーボネートに事前に活性化されることができる。このｉｎ−ｓｉｔｕ生成中間体を塩基、好ましくはトリエチルアミンもしくはジイソプロピルエチルアミンの存在下で適当なリンカー（ＮＨ２−スペーサー−Ｙ’）と直ちに反応させて尿素もしくはカルバメート１１を生成せしめる（経路ａ）。Ｘ＝ＮＨ２の場合、骨格１０を活性化カルバメートもしくはイソシアネートを含有するリンカーと直接反応させて尿素１３（Ｗ’＝ＮＨ）を生成せしめることができる。Ｘ＝ＮＨ２の場合、骨格１０はまたカーボネートまたは活性化酸官能基（もしくは酸塩化物）を含有するリンカーで処理して、それぞれカルバメート１３（Ｗ’＝Ｏ）もしくはアミド１３（Ｗ’＝ＣＨ２）を生成せしめることもできる。この経路の別のバリエーションとして、骨格１０上の求核剤（Ｘ＝ＳＨもしくはＯＨ）は、求核置換反応においてリンカー上の優れた脱離基を置換することによりアルキル化されて中間体１６を製造することができる（経路ｆ）。さらに、骨格１０上の優れた脱離基（好ましくは、ＬＧ＝Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ｐ−ニトロフェノール、メチルスルホネートもしくはｐ−トルエンスルホネート）を用いて適当な二官能性リンカーをアルキル化して中間体１２もしくは１５（ここで、Ｚ＝ＮＨ、ＳもしくはＯ）を生成せしめることができる（それぞれ、経路ｂよびｅに記述するとおり）。あるいはまた、Ｘが酸塩化物もしくは活性化酸である場合、これを経路ｄに示すようにアミン含有リンカーで処理してアミド１４を生成せしめることができる。経路ｄにおいて、活性化酸は、多数の標準的なペプチドカップリング試薬、好ましくはＤＩＣ／ＤＭＡＰで処理することによりｉｎ  ｓｉｔｕで生成せしめることができる。最後に、骨格１０とリンカーとの連結は、Ｘに導入される適当なマイケルアクセプターで共役付加を実施することにより成し遂げられることができる。従って、塩基の存在下で、アクリルアミドもしくはビニルスルホンと適当な求核剤（Ｚ＝ＮＨもしくはＳ）を保有するリンカーとの反応は、所望の中間体１７もしくは１８を生成せしめる（それぞれ、経路ｇおよびｈに記述するとおり）。
【０１２２】
図３は、上記の中間体のような、リンカー−薬剤複合体へのＰＥＧ連結の９つの戦略を要約する概略図を説明する。
【０１２３】
一つの一般的な連結戦略は、薬剤−リンカー１９とＰＥＧ反応性官能基（−ＮＨ２もしくは−ＣＯ２Ｈ）との間のアミド結合形成を含む。例えば、Ｙ’＝ＣＯ２Ｈの場合、ＰＥＧ−アミンおよび化学量論のＤＭＡＰの存在下でのカルボジイミドカップリングにより２０を生成せしめる（ＤＣＭ中でＴＦＡでの脱保護後）。ＨＢＴＵ、ＰｙＢｏｐもしくはＤＰＰＡのような他のカップリング試薬を同様に用いることができる。Ｙ’がカルボン酸エステルである場合、エステルの加水分解によりカルボン酸を生成せしめ、それを前述のようにＰＥＧ−アミンに連結することができる。あるいはまた、アミン官能基（Ｙ’＝ＮＨ２）を含有するリンカーを同様のアミド化試薬によりＰＥＧ−カルボン酸に連結して、２２（モノマーのＰＥＧ）もしくは２１（複数のＰＥＧ単位）を生成せしめることができる。市販されているＰＥＧ−活性化エステル（例えば、ＰＥＧ−ＣＯ−Ｎ−ヒドロキシスクシニミジルエステル）を同様にこの目的に用いることができる。
【０１２４】
薬剤−リンカー複合体にＰＥＧを連結するための第二の一般的な戦略は、スルフィド結合を生成せしめる、適切な求電子剤への求核チオール付加もしくは置換を含む。例えば、チオールを含有するＰＥＧをハロゲン化物（Ｙ’＝Ｂｒ）もしくはメシレート（Ｙ’＝ＯＨから合成する）を含有するリンカーと反応させて、２４を生成せしめることができる。あるいはまた、チオールを含有するリンカーをＰＥＧ上のマレイミド基に付加して２６を生成せしめることができる。これらの場合の各々において、反応性パートナー上の官能基はまた逆にすることもできる（リンカー対ＰＥＧ）。
【０１２５】
連結のための第三の一般的な戦略は、ＰＥＧとリンカーとの間の尿素もしくはカルバメートの形成を含む。例えば、薬剤−リンカー複合体１９がアミン官能基（Ｙ’＝ＮＨ２）を含有する場合、アミン塩基とクロロギ酸ｐ−ニトロフェニルのような試薬を用いて活性化カルバメートを形成することができる［Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３８，３２３６−３２４５（１９９５）］。この活性化カルバメートをＰＥＧ−アミンと反応させて、２３を生成せしめることができる。同様に、Ｙ’＝ＯＨの場合、クロロギ酸ｐ−ニトロフェニルのような試薬を用いて活性化カーボネートを形成することができる。ＰＥＧ−アミンとこのカーボネート中間体との反応により、２５を生成せしめる。この場合もまた、これらの場合の各々において、反応性パートナー上の官能基を逆にすることができる（リンカー対ＰＥＧ）。
【０１２６】
図４は、ＰＥＧ単位当たり複数の薬剤−リンカー部分（式（Ｉ）におけるｎ＝２もしくはｎ＝４の場合のような）を合成するためのいくつかの代表的戦略を示す。一つの態様として、ＰＥＧ部分は、ＰＥＧの各末端で単に官能性化することができ（（例えば：Ｈ２ＮＣＨ２ＣＨ２−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）二官能性化ＰＥＧ）、もしくはＰＥＧ構築物に様々な分枝を含有することができる（例えば：四分枝状ＰＥＧ）。関連する連結化学は、図３に関して記述するものと同様である。例えば、二官能性アミン−ＰＥＧ（ＰＥＧ−（ＮＨ２）２）を過剰の１９（Ｙ’＝ＣＯ２Ｈ）と連結して二官能性部分２７を生成せしめることができる。同様に、複数官能性化アミン−ＰＥＧ（ＰＥＧ−（ＮＨ２）ｎ）を活性化カルバメート（１９（Ｙ’＝ＮＨ２）から合成する）もしくはカーボネート（１９（Ｙ’＝ＯＨ）から合成する）と反応させて、それぞれ、２９および３０を生成せしめることができる。あるいはまた、反応性マレイミド部分で官能性化したＰＥＧを塩基性条件下で１９（Ｙ’＝ＳＨ）と反応させて２８を生成せしめることができる。さらに、複数のカルボン酸基を有する分枝状ＰＥＧを標準的なアミド結合形成条件を用いて１９（Ｙ’＝−ＮＨＲ（Ｒ＝Ｈ、Ｍｅ））に連結して３１を生成せしめることができる。
【０１２７】
図１〜４に記述する戦略を実施するために用いる方法論は、有機およびペプチド化学の技術分野において訓練を受けたものにとって慣用的である。
【０１２８】
例えば、それぞれ、アミンもしくはアルコールからアミドもしくはエステルを形成することは、典型的に、ＤＩＣ／ＤＭＡＰの組み合わせを用いて（ここで、ラセミ化は問題ではなかった）もしくはＨＢＴＵ／ＨＯＢＴの組み合わせを用いて（ここで、アミノ酸のα−中心のラセミ化は潜在的な問題であった）成し遂げられた。これはまた、多数の他の標準的な縮合剤（ＥＤＣ、ＰｙＢＯＰ、ＨＡＴＵ、ＴＢＴＵ、ＨＯＢＴ／活性化エステルもしくはＤＩＣ／ＨＯＢＴ）を用いて成し遂げることもできる。（１）Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ，Ｍ．；Ｔｈｅ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８４．（２）Ｂｕｎｉｎ，Ｂ．；Ｔｈｅ  Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  Ｉｎｄｅｘ：Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９８．（３）Ｊ  Ｏｒｇ  Ｃｈｅｍ．１９９９，６４（２２）：８０６３−８０７５．尿素形成は、一般に、イソシアネートとアミンとの反応もしくはクロロギ酸ｐ−ニトロフェニルでの活性化に続く第二のアミンとの反応により成し遂げられた。（１）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９５，３８，３２３６−３２４５．共役付加およびマレイミドへのチオール付加は、前述のように実施した。（１）Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９９，１２１，７９６７−７９６８．（２）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２００３，１４（２）：４６４−７２．（３）Ｎａｔ  Ｓｔｒｕｃｔ  Ｂｉｏｌ．２０００，７（４）：３０９−１１．（４）Ｍａｒｃｈ，Ｊ．：Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，＆  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ：Ｗｉｌｅｙ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９２．
今度は図５を参照して、アニリン３２（米国第６０／３８３，１３０号に記述される）を図２に記述するようにリンカー６２、６３もしくは６４に連結して対応するアミド３３、カルバメート３４および尿素３５を生成せしめることができる。化合物３３、３４および３５におけるＲ９が保護されたアミンであり、そしてＹ’がＯＨ、保護されたアミンもしくはカルボン酸である場合、Ｒ９上の保護基を除き、そしてビス−Ｂｏｃ保護されたＳ−メチルイソチオ尿素（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＵＳ）とさらに反応させてグアニジン３６、３７および３８を生成せしめることができる。Ｒ９がニトロ基である場合、これをアミンに還元し、そして同様に処理して化合物３６、３７および３８を生成せしめることができる。
【０１２９】
今度は図６を参照して、化合物３９を形成するためにリンカーに連結したビアリールチオフェンアミジン（米国第６０／３８３，１３０号に記述される）をいくつかの方法によってＰＥＧ分子に結合することができる。例えば、Ｙ’＝ＣＯ２Ｈの場合、ＰＥＧ−アミン（ＰＥＧ−ＮＨ２）および化学量論のＤＭＡＰの存在下でのカルボジイミドカップリングにより４０を生成せしめる（ＤＣＭ中でＴＦＡでの脱保護後）。ＨＢＴＵ、ＰｙＢｏｐもしくはＤＰＰＡのような他のカップリング試薬を同様に用いることができる。Ｙ’がカルボン酸エステルである場合、エステルの加水分解によりカルボン酸を生成せしめ、それを前述のようにＰＥＧ−ＮＨ２に連結することができる。あるいはまた、アミン官能基（Ｙ’＝ＮＨ２）を含有するリンカーを同様のアミド化試薬によりＰＥＧ−ＣＯ２Ｈに連結して、４３を生成せしめることができる。市販されているＰＥＧ−活性化エステル（例えば、ＰＥＧ−ＣＯ−Ｎ−ヒドロキシスクシニミジルエステル）を同様にこの目的に用いることができる。
【０１３０】
薬剤−リンカー複合体３９にＰＥＧを連結するための第二の一般的な戦略は、スルフィド結合を生成せしめる、適切な求電子剤への求核チオール付加もしくは置換を含む。例えば、チオールを含有するＰＥＧをハロゲン化物（Ｙ’＝Ｂｒ）もしくはメシレート（Ｙ’＝ＯＨから合成する）を含有するリンカーと反応させて、４２を生成せしめることができる。
【０１３１】
連結のための第三の一般的な戦略は、ＰＥＧとリンカーとの間の尿素もしくはカルバメートの形成を含む。例えば、薬剤−リンカー複合体５がアミン官能基（Ｙ’＝ＮＨ２）を含有する場合、アミン塩基とクロロギ酸ｐ−ニトロフェニルのような試薬を用いて活性化カルバメートを形成することができる［Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３８，３２３６−３２４５（１９９５）］。この活性化カルバメートをＰＥＧ−ＮＨ２と反応させて、４１（Ｙ”＝ＮＨ）を生成せしめることができる。同様に、Ｙ’＝ＯＨの場合、クロロギ酸ｐ−ニトロフェニルのような試薬を用いて活性化カーボネートを形成することができる。ＰＥＧ−ＮＨ２とこのカーボネート中間体との反応により、４１（Ｙ”＝Ｏ）を生成せしめる。
【０１３２】
図７は、リンカーなしに薬剤分子に直接ＰＥＧ部分を結合する方法を記述する。この方法は、実施例５において使用した。
【０１３３】
Ｔｅｏｃ保護されたビス−アニリン４４（米国第６０／３８３，１３０号に記述される）をＴＢＡＦで処理し、そして得られるビス−アニリンをビス−Ｂｏｃ保護されたＳ−メチルイソチオ尿素（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＵＳ）で処理し、それはより少ない立体障害のアミンと主に反応して化合物４５を生成せしめる。化合物４５を図３に関して記述するようにクロロギ酸ｐ−ニトロフェニル、続いてＰＥＧ−アミン（ＰＥＧ−ＮＨ２）で処理し、そしてＴＦＡで脱保護して化合物４６を生成せしめることができる。
【０１３４】
あるいはまた、４５を図３に関して記述するようにＰＥＧ−酸（ＰＥＧ−ＣＯ２Ｈ）で処理し、そしてＴＦＡで脱保護して化合物４７を生成せしめることができる。
【０１３５】
図８は、実施例６に記述する化合物の製造の代替経路を説明する。アニリン４８（米国第６０／３８３，１３０号に記述される）をジイソプロピルエチルアミンの存在下で塩化アセトキシアセチルでアシル化し、続いてアセチル基を鹸化して第一級アルコール４９を生成せしめた。４９のニトロ基の還元、続いて得られるアニリンの酢酸における１，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチル−２−チオプソイド尿素でのグアニジニル化によりアルコール５１を生成せしめた。第一級アルコールを塩化メシルで活性化した。得られるメシレート５２を３−メルカプトプロピオンアミドＰＥＧ−２０ＫＤａ（Ｒａｐｐ  Ｐｏｌｙｍｅｒｅ）と連結した。最後に、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１）での全体的脱保護によりＰＥＧ付加（ＰＥＧｙｌａｔｅｄ）化合物５３を生成せしめた（実施例６、代替経路）。
【０１３６】
図９は、実施例６における化合物の製造の代替経路を説明する。リンカー５７は、ブロモ酢酸ｔｅｒｔ−ブチルでの３−メルカプトプロピオン酸メチルのアルキル化、続いてＴＦＡでのｔｅｒｔ−ブチル基の除去により２段階で製造する。次に、リンカー５７をＤＩＣ／ＤＭＡＰを用いて中間体５８（米国第６０／３８３，１３０号に記述される）に連結する。メチルエステルの加水分解、続いてＴＢＡＦでのＴｅｏｃ保護基の除去および前述のようなグアニジニル化により酸６０を生成せしめる。この中間体のポリマーへの連結は標準的な条件（ＤＣＭ中のＤＩＣ／ＤＭＡＰ）、続いてＴＦＡでの全体的脱保護を用いて成し遂げられて所望の化合物６１を生成せしめる（実施例６）。
【０１３７】
図１０は、増加した平均分子量を有するＰＥＧ−コンジュゲートおよび特に増加した平均分子量（＞３５Ｋ）を有する多価ＰＥＧ−コンジュゲートを合成する方法を記述する。中間体４５は、アミン塩基とクロロギ酸ｐ−ニトロフェニルのような試薬を用いて活性化カルバメートに転化することができる［Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３８，３２３６−３２４５（１９９５）］。この活性化カルバメートを化合物６２のような二官能性化ＰＥＧと反応させて遊離のカルボン酸末端を有するＰＥＧコンジュゲート６３を生成せしめることができる。この酸を、より大きい分子量を有するコンジュゲート６５を生成せしめるために６４のような単官能性ＰＥＧの存在下で、もしくは２価ＰＥＧ−コンジュゲート６７を生成せしめるために化合物６６のような二官能性ＰＥＧの存在下でジイソプロピルカルボジイミドで活性化することができる。化合物６７をＴＦＡで処理して活性化合物６８を生成せしめることができる。
【０１３８】
今度は図１１を参照して、多価ＰＥＧ−コンジュゲートを合成するために方法を記述する。ビス−Ｂｏｃ保護されたリシンのヒドロキシスクシンイミドエステル６９を６６のような二官能性ＰＥＧに連結することができ、それはＴＦＡで処理すると４価ＰＥＧ種７０を生成せしめる。中間体４５は、アミン塩基とクロロギ酸ｐ−ニトロフェニルのような試薬を用いることにより活性化カルバメートに転化することができる［Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３８，３２３６−３２４５（１９９５）］。この活性化カルバメートをＤＩＥＡの存在下で７０と反応させて４価ＰＥＧ−薬剤コンジュゲートを生成せしめることができ、それはＴＦＡで処理すると活性の４価ＰＥＧ−薬剤コンジュゲート７１を生成せしめる。
【０１３９】
本発明の化合物およびコンジュゲートは、当業者に周知である多数の方法において製造することができる。化合物は、例えば、下記の方法もしくは当業者により認識されるようなそれへのバリエーションにより合成することができる。本発明と関連して開示される全ての方法は、ミリグラム、グラム、マルチグラム、キログラム、マルチキログラムもしくは商業工業規模を包含する任意の規模で実施されることが意図される。
【０１４０】
本発明の方法において用いる化合物は、１個もしくはそれ以上の非対称的に置換された炭素原子を含有することができ、そして光学活性体もしくはラセミ体で単離されることができる。従って、特定の立体化学もしくは異性体が特に示されない限り、構造の全てのキラル、ジアステレオマー、ラセミ体および全ての幾何異性体が意図される。そのような光学活性体を製造しそして単離する方法は、当該技術分野において周知である。例えば、立体異性体の混合物は、ラセミ体の分割、順相、逆相およびキラルクロマトグラフィー、選択的塩形成、再結晶化などが包含されるがこれらに限定されるものではない標準的な技術により、またはキラル出発物質からのキラル合成によるかもしくは標的キラル中心の意図的合成により分離することができる。
【０１４１】
容易に理解されるように、存在する官能基は、合成の過程において保護基を含有することができる。保護基は、ヒドロキシル基およびカルボキシル基のような官能基に選択的に付加されそしてそれから取り除かれることができる化学官能基としてそれ自体既知である。これらの基は、化合物がさらされる化学反応条件に対してそのような官能基を不活性にするために化学化合物に存在する。様々な保護基のいずれかを本発明で用いることができる。好ましい保護基には、ベンジルオキシカルボニル基およびｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基が包含される。本発明に従って用いることができる他の好ましい保護基は、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，Ｐ．Ｇ．Ｍ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ２ｄ．Ｅｄ．，Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９１に記述され得る。
定義
任意の変記号が任意の置換基においてもしくは任意の式において１回より多く存在する場合、各存在におけるその定義は、あらゆる他の存在でのその定義から独立している。従って、例えば、基もしくは複数の基が０〜２個のＱで置換されると示される場合、該基（１つもしくは複数）は場合により２個までのＱで置換されていてもよく、そして各基における各出現ごとにのＱは、可能なＱの定義されたリストから独立して選択される。置換基および／もしくは変記号の組み合わせは、そのような組み合わせが安定な化合物をもたらす場合に限り許容される。置換基への結合が環における２個の原子を連結する結合を横断するように示される場合、そのような置換基は該環上の任意の原子に結合されることができる。
【０１４２】
「生理的条件下で実質的に非加水分解性の」は、ヒトにおいてインビボで典型的に見られる条件をさす。そのような結合には、アミド、尿素、炭素−炭素、カルバメート、エーテル、チオエーテル、チオ尿素、チオアミド、アミン、オキシム、ヒドラジドおよびケトンが包含される。
【０１４３】
「製薬学的に許容しうる」という語句は、妥当な利益／危険比に相応する、過度の毒性、刺激、アレルギー反応または他の問題もしくは合併症なしにヒトおよび動物の組織と接触して使用するために、適切な医学的判断の範囲内で、適当である化合物、物質、組成物および／もしくは投与形態物をさすために本明細書において用いられる。
【０１４４】
本明細書において用いる場合、「製薬学的に許容しうる塩」は、酸もしくは塩基塩を製造することにより改変される開示化合物の誘導体をさす。適当な塩のリストは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１７ｔｈ  ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１９８５，ｐ．１４１８に見出され、その開示は引用することにより本明細書に組み込まれる。
【０１４５】
バッファーには、例えば、リン酸塩、クエン酸塩、スルホサリチル酸塩および酢酸塩バッファーが包含される。より完全なリストは米国薬局方に見出されることができ、その開示はその全部が本明細書に引用することにより本明細書に組み込まれる。
略語
ＰＥＧ                ポリエチレングリコール
ＴＦＡ                トリフルオロ酢酸
Ｅｔ３Ｎ              トリエチルアミン
ＴＨＦ                テトラヒドロフラン
ＥｔＯＡｃ            酢酸エチル
ｒｔ                  室温
ＮａＯＨ              水酸化ナトリウム
ＭｇＳＯ４            硫酸マグネシウム
ＤＣＭ                ジクロロメタン
ＣＨ２Ｃｌ２          塩化メチレン
ＮａＨＣＯ３          炭酸水素ナトリウム
ＭｅＯＨ              メタノール
ＴＬＣ                薄層クロマトグラフィー
ＡｃＯＨ              酢酸
Ｈ２Ｏ                水
ＳｉＯ２              二酸化ケイ素
ＥＳＩ−ＭＳ          エレクトロスプレーイオン化質量分析
Ｂｏｃ                ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ＤＩＣ                ジイソプロピルカルボジイミド
１Ｈ  ＮＭＲ          プロトン核磁気共鳴
ＣＤＣｌ３            重水素化クロロホルム
ｈ                    時間
ＭＷ                  分子量
ｍＬ                  ミリリットル
ＭｅＯＤ              重水素化メタノール
ｍｇ                  ミリグラム
ｇ                    グラム
μＬ                  マイクロリットル
ｍｉｎ                分
ＨＰＬＣ              高圧液体クロマトグラフィー
ｍｍｏｌ              ミリモル
ｍｏｌ                モル
ＤＩＥＡ              ジイソプロピルエチルアミン
ＥｔＯＡｃ            酢酸エチル
ＮＨ４Ｃｌ            塩化アンモニウム
ＥｔＯＨ              エタノール
Ｎａ２ＣＯ３          炭酸ナトリウム
ＰＴＬＣ              分取薄層クロマトグラフィー
Ｅｔ２Ｏ              ジエチルエーテル
ＲＰ−ＨＰＬＣ        逆相高圧液体クロマトグラフィー
ＤＭＡＰ              ４−ジメチルアミノピリジン
ＨＢＴＵ              Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テト
ラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸塩
ＨＯＢＴ              １−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物
ＥＤＣ                １−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミ
ン塩酸塩
ＨＡＴＵ              Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’
，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸塩
ＴＢＴＵ              ２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３
−テトラメチルウロニウムテトラフルオロホウ酸塩
ＰｙＢＯＰ            ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−
ホスホニウムヘキサフルオロリン酸塩
ＤＰＰＡ              アジ化ジフェニルホスホリル
ＤＩＰＣ              ２−ジメチルアミノイソプロピルクロリド塩酸塩
Ｍｓ−Ｃｌ            塩化メシル
ＮａＯＨ              水酸化ナトリウム
Ｔｅｏｃ              トリメチルシリルエトキシカルボニル
ＤＭＳＯ              ジメチルスルホキシド
Ｈ２ＳＯ４            硫酸
ＨＮＯ３              硝酸
ＨＣｌ                塩酸
ａｑ                  水性
Ｈｅｘ                ヘキサン
ＣＨ３ＣＮ            アセトニトリル
ＫＮＯ３              硝酸カリウム
Ｐｄ（ＰＰｈ３）４    テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（０）
ＬＣＭＳ              液体クロマトグラフィー質量分析
Ｋ２ＣＯ３            炭酸カリウム
ＰＥＧ  ２０Ｋ        ２０，０００ダルトンポリエチレングリコール
ＴＢＡＦ              フッ化テトラブチルアンモニウム
ＤＴＮＢ              ５，５’−ジチオビス（２−ニトロ安息香酸）
ＣＤ３ＯＤ            重水素化メタノール
ＰＧ                  保護基
ＬＧ、ＬＧ１、ＬＧ２  脱離基
本発明を以下の実施例においてさらに記述する。
[実施例]
【実施例１】
【０１４６】
１１−［３’−（５−カルバムイミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−４−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル］−ウンデカン酸ビス−トリフルオロアセテートのｍＰＥＧ２０Ｋアミド
【０１４７】
【化２７】
2007535474.tif 000029
【０１４８】
ａ）８−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオン
【０１４９】
【化２８】
2007535474.tif 000030
【０１５０】
ＴＨＦ（６０ｍＬ）中の２−アミノ−３−メチル安息香酸（９．０７ｇ、６０ｍｍｏｌ）の溶液にジイソプロピルエチルアミン（２０．９ｍＬ）およびジクロロメタン（６０ｍＬ）中のトリホスゲン（５．９４ｇ、２０ｍｍｏｌ）の溶液を３０分の期間にわたって同時に加えた。添加を完了した後に、混合物を周囲温度で１６時間攪拌した。固体を濾過し、そしてエーテル（２ｘ１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３ｘ５０ｍＬ）で洗浄し、そして高真空中で乾燥させて表題化合物（１０．０２ｇ、９４％の収率）を白色の固体として生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）：δ１１．０２（ｓ，１Ｈ），７．７６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．５７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．１７−７．１３（ｍ，１Ｈ），２．３２（ｓ，３Ｈ）。
ｂ）８−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオン
【０１５１】
【化２９】
2007535474.tif 000031
【０１５２】
氷水浴中の８−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオン（（実施例１：段階ａ）９．２７ｇ、５２．４ｍｍｏｌ）を入れたフラスコに濃Ｈ２ＳＯ４（９０ｍＬ）を５分の期間にわたって加えた。１０分間攪拌した後に、発煙ＨＮＯ３（２．９ｍＬ）を１５分にわたって加えた。反応混合物を氷水浴中でさらに３０分、周囲温度で３０分間攪拌し、次に攪拌しながら氷にゆっくりと注ぎ込んだ。固体を集め、Ｈ２Ｏ（３ｘ５０ｍＬ）で洗浄し、そして高真空中で乾燥させて表題化合物（１０．４ｇ、８９％の収率）を黄色の固体として生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１１．６５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．４６−８．４３（ｍ，２Ｈ），２．４４（ｓ，３Ｈ）。
ｃ）２−アミノ−３−メチル−５−ニトロ−安息香酸メチルエステル
【０１５３】
【化３０】
2007535474.tif 000032
【０１５４】
メタノール（３０ｍＬ）中の８−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオン（（実施例１：段階ｂ）１．０４ｇ、４．６８ｍｍｏｌ）の懸濁液にメタノール中のナトリウムメトキシドの溶液（０．５Ｍ、０．９４ｍＬ、４．７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を周囲温度で１時間攪拌し、そして飽和ＮＨ４Ｃｌの添加により中和した。メタノールを減圧下で除き、そして得られる混合物を濾過した。固体をＨ２Ｏ（２回）で洗浄し、高真空中で乾燥させて生成物（０．９７ｇ、９９％の収率）を黄色の固体として生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６）：δ８．４８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．７Ｈｚ），８．０２−８．０１（ｍ，１Ｈ），７．７５（ｂｒ，ｓ，２Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ）。
ｄ）２−ブロモ−３−メチル−５−ニトロ−安息香酸メチルエステル
【０１５５】
【化３１】
2007535474.tif 000033
【０１５６】
臭化銅（ＩＩ）（７．４０ｇ、３３．１ｍｍｏｌ）を入れたフラスコに周囲温度でＭｅＣＮ（３０ｍＬ）中の亜硝酸ｔ−ブチル（４．５０ｍＬ、３７．９ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。５分間攪拌した後に、ＭｅＣＮ（５０ｍＬ）中の２−アミノ−３−メチル−５−ニトロ−安息香酸メチルエステル（（実施例１：段階ｃ）４．９７ｇ、２３．７ｍｍｏｌ）の懸濁液を加えた。混合物を周囲温度で１５分間、６５℃で２０分間攪拌し、次に周囲温度まで冷却して戻した。反応物を濾過し、そして濾液を濃縮して濃褐色の固体を生成せしめた。固体をヘキサンで研和し、濾過し、そしてヘキサン（４ｘ５０ｍＬ）で洗浄した。全てのヘキサン層を合わせ、そして濃縮して表題生成物（５．７ｇ、８８％の収率）を淡黄色の固体として生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ８．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．５Ｈｚ），８．２１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．９Ｈｚ），３．９９（ｓ，３Ｈ），２．５９（ｓ，３Ｈ）。
ｅ）２−ブロモ−３−メチル−５−ニトロ−安息香酸
【０１５７】
【化３２】
2007535474.tif 000034
【０１５８】
エタノール（５０ｍＬ）中の２−ブロモ−３−メチル−５−ニトロ−安息香酸メチルエステル（（実施例１：段階ｄ）５．０４ｇ）の溶液にａｑ  ＮａＯＨの溶液（４Ｍ、１０．１ｍＬ、４０．５ｍｍｏｌ）を加え、そして周囲温度で１６ｈ攪拌した。得られる赤色に着色した溶液を濃縮乾固させ、最小量のＨ２Ｏに溶解し、そして１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ３〜４に酸性化した。固体を濾過し、Ｈ２Ｏ（３ｘ５０ｍＬ）で洗浄し、高真空下で乾燥させて表題化合物（４．５ｇ、９４％の収率）を淡黄色の固体として生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）：δ８．３６−８．３５（ｍ，１Ｈ），８．２４−８．２３（ｍ，１Ｈ），２．５３（ｓ，３Ｈ）。
ｆ）（２−ブロモ−３−メチル−５−ニトロ−フェニル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０１５９】
【化３３】
2007535474.tif 000035
【０１６０】
ｒｔでｔｅｒｔ−ブタノール（２５ｍＬ）中の２−ブロモ−３−メチル−５−ニトロ−安息香酸（（実施例１：段階ｅ）５２０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．４ｍＬ、２．１ｍｍｏｌ）の攪拌溶液にアジ化ジフェニルホスホリル（４５３μＬ、２．１ｍｍｏｌ）を加えた。１５分後に、反応物を８０℃に１６ｈ加熱した。ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）を加え、そして溶液をクエン酸（３ｘ３０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３（２ｘ３０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）の溶液で抽出した。カラムクロマトグラフィーにより精製して表題化合物を白色の固体として生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ８．９３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），７．７７（ａｐｐ  ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．７，２．８Ｈｚ），７．２６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），２．５１（ｓ，３Ｈ），１．５５（ｓ，９Ｈ）。
ｇ）２−ブロモ−３−メチル−５−ニトロ−フェニルアミン
【０１６１】
【化３４】
2007535474.tif 000036
【０１６２】
（２−ブロモ−３−メチル−５−ニトロ−フェニル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（（実施例１：段階ｆ）４３５ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸およびＤＣＭ（全部で１０ｍＬ）の１：１混合物の１０ｍＬに溶解した。１ｈ攪拌した後に、溶媒を真空中で除き、そして黄色の固体残留物（３０６ｍｇ）をさらに精製せずに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．４６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．８Ｈｚ），７．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．８Ｈｚ），６．６２（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ）。
ｈ）｛［４−（６’−アミノ−２’−メチル−４’−ニトロ−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル］−イミノ−メチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０１６３】
【化３５】
2007535474.tif 000037
【０１６４】
スターラーバーを有するフラスコに｛［４−（３−ジヒドロキシボラニル−ベンゼンスルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル］−イミノ−メチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（米国仮出願６０／３８３１３０（７５２ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ））、２−ブロモ−３−メチル−５−ニトロ−フェニルアミン（（実施例１：段階ｇ）３０６ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）、水性Ｎａ２ＣＯ３（２Ｍ、４ｍＬ、８ｍｍｏｌ）、エタノール（４ｍＬ）およびトルエン（８ｍＬ）を入れた。溶液にアルゴンを１０分間散布し、そしてＰｄ（ＰＰｈ３）４（２９４ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を加えた。二相の溶液を８０℃で１６ｈ不活性雰囲気下で強く攪拌し、次にｒｔに冷却した。ＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）を加え、そして層を分離した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３（２ｘ２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、そして硫酸ナトリウム上で乾燥させた。真空中での溶媒の除去、続いて残留物のカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中１０〜４０％のＥｔＯＡｃ）により表題化合物（２４５ｍｇ、３３％）を黄色の固体として生成せしめた。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ８．０３（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．２，２．１，８．１Ｈｚ），７．９１（ｓ，１Ｈ），７．９０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），７．６９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．５３（ａｐｐ  ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．７，２．３Ｈｚ），７．５０（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．４，７．７Ｈｚ），７．４４（ａｐｐ  ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．５，２．３Ｈｚ），３．７０（ｓ，２Ｈ），２．５９（ｓ，３Ｈ），２．００（ｓ，３Ｈ），１．５１（ｓ，９Ｈ）。
ｉ）１１−｛４−アミノ−３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−ウンデカン酸メチルエステル
【０１６５】
【化３６】
2007535474.tif 000038
【０１６６】
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の｛［４−（６’−アミノ−２’−メチル−４’−ニトロ−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル］−イミノ−メチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（（実施例１：段階ｈ）１１８ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の溶液にトリエチルアミン（１３９μＬ、１ｍｍｏｌ）を加えた。１１−クロロカルボニル−ウンデカン酸メチルエステル（７３ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）を５分にわたって滴下して加えた。３０分の攪拌後に、反応は完了しなかった。反応が完了するまで、酸塩化物の追加分（３ｘ１ｅｑ）を同様に加えた。ＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）の添加、続いてＮａＨＣＯ３（２ｘ２０ｍＬ）およびブライン（３０ｍＬ）での水性処理（ａｑｕｅｏｕｓ  ｗｏｒｋｕｐ）により粗アミド（２０６ｍｇ）をガラスとして生成せしめた。残留物をＥｔＯＨ（５ｍＬ）に溶解し、そして４ＭのａｑＮＨ４Ｃｌ（１ｍＬ）を加えた。鉄粉（１６５ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加え、そして反応物を７５℃で１ｈ加熱した。冷却した混合物を０．２２μｍのフィルターを通して濾過し、そして固体を５ｍＬずつの（５ｍＬ  ｐｏｒｔｉｏｎｓ  ｏｆ）ＭｅＯＨおよびＥｔＯＡｃで洗浄した。追加のＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）を加え、そして有機溶液をクエン酸（２ｘ２０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３（２ｘ３０ｍＬ）、水（３０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。乾燥および溶液の濃縮により表題化合物（１６５ｍｇ）を生成せしめ、それをさらに精製せずに使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ３７Ｈ５０Ｎ４Ｏ７Ｓ３についての計算値（Ｍ＋Ｈ）：７５９．３；実測値：７５９．４。
ｊ）１１−｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ，Ｎ−ビス−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ））グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−ウンデカン酸
【０１６７】
【化３７】
2007535474.tif 000039
【０１６８】
ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の１１−｛４−アミノ−３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−ウンデカン酸メチルエステル（（実施例１：段階ｉ）１２２ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の溶液に水酸化ナトリウム（１Ｍ、１ｍＬ）を加えた。溶液をｒｔで１８ｈ攪拌し、溶液をＡｃＯＨ（５００μＬ）でクエンチし、そして溶媒を真空中で除いた。残留物をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）、ＡｃＯＨ（５００μＬ）に溶解し、そしてＮ，Ｎ−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｓ−メチル−イソチオ尿素（１４５ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を４０℃で１６ｈ攪拌し、そして溶媒を真空中で除いた。残留物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）と水（２０ｍＬ）との間で分配し、そして有機層をブライン（２０ｍＬ）で洗浄した。乾燥および溶液の濃縮により残留物を生成せしめ、それをＳｉＯ２上でクロマトグラフィーにかけた（６：４  Ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ、次に２５：７５：５  Ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ）。残留物をＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｃ−１８カラム、ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）によりさらに精製して１１５ｍｇの生成物を生成せしめた。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．１６（ｓ，１Ｈ），８．０１（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．２，１．９，７．９Ｈｚ），７．８７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），７．６５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．５３（ｍ，１Ｈ），７．５０（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．４，７．７Ｈｚ），７．３９（ｍ，１Ｈ），２．６６（ｓ，３Ｈ），２．２９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），２．０５（ｓ，３Ｈ），１．９３（ｍ，２Ｈ），１．６１（ｍ，２Ｈ），１．５３（ｓ，１８Ｈ），１．４９（ｓ，９Ｈ），１．０−１．４０（ｓ，１２Ｈ），０．９４（ｍ，２Ｈ）。
ｋ）１１−［３’−（５−カルバムイミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−４−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル］−ウンデカン酸ビス−トリフルオロアセテートのｍＰＥＧ２０Ｋアミド
【０１６９】
【化３８】
2007535474.tif 000040
【０１７０】
ＤＣＭ（１５ｍＬ）中の１１−｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ，Ｎ−ビス−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ））グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−ウンデカン酸（（実施例１：段階ｊ）３０ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（４．６ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）の溶液にジイソプロピルカルボジイミド（ＤＣＭ中０．２Ｍ、１５μＬ）を滴下して加えた。溶液をｒｔで１５分間攪拌し、そしてｍＰＥＧ２０Ｋ−ＮＨ２（３２７ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液をｒｔで１８ｈ（４ｈ後にニンヒドリン陰性）攪拌した。ＤＣＭ（１０ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１ｍＬ）を加え、続いてＥｔ２Ｏ（〜１００ｍＬ）をゆっくりと加えた。溶液を冷却して沈殿を完了し、そして固体を濾過によって集めた。一部の固体（１２７ｍｇ）を乾燥させ、そして１：１のＴＦＡ／ＤＣＭに再溶解した。２ｈ攪拌した後に、溶媒を真空中で除き、そして高真空下で乾燥させた。ＨＰＬＣ精製（Ｃ１８カラム、３０ｍｉｎにわたってＨ２Ｏ中１０〜５５％のＣＨ３ＣＮ）により１０４ｍｇの純粋なＰＥＧ付加化合物を生成せしめた。δ３．６２でＰＥＧ抑制を有する１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ９．２０（ｓ，１Ｈ），８．５−９．０（Ｈ２Ｏピーク），８．３７（ｓ，１Ｈ），８．２２（ｓ，１Ｈ），８．０７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．７７（ｓ，１Ｈ），７．６５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．５３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．４１（ｓ，１Ｈ），７．０５（ｓ，１Ｈ），７．００（ｓ，３Ｈ），３．８２（ｍ，ＰＥＧサテライト），３．６２（ｍ，ＰＥＧメチレン），３．４７（ｍ，ＰＥＧサテライト），３．３９（ｓ，３Ｈ，ＰＥＧ−ＯＭｅ末端），２．６５（ｓ，３Ｈ），２．２６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），２．０５（ｓ，３Ｈ），２．０４（ｍ，１Ｈ），１．９３（ｍ，１Ｈ），１．６２（ｍ，２Ｈ），１．０２−１．３８（ｍ，１２Ｈ），０．９５（ｍ，２Ｈ）。
【実施例２】
【０１７１】
６−｛３−［３’−（５−カルバムイミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−４−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ヘキサン酸ビス−トリフルオロアセテートのｍＰＥＧ２０Ｋアミド
【０１７２】
【化３９】
2007535474.tif 000041
【０１７３】
ａ）４−ブロモ−５−メチル−３−ニトロ安息香酸メチルエステル
【０１７４】
【化４０】
2007535474.tif 000042
【０１７５】
４−ブロモ−３−メチル安息香酸メチルエステル（１０．１３ｇ、４４ｍｍｏｌ）を室温でＨ２ＳＯ４（１２０ｍＬ）およびＴＦＡ（１５ｍＬ）の混合物に溶解した。溶液を氷浴上で冷却し、そしてＫＮＯ３（４．６５ｇ、４６ｍｍｏｌ）を３０ｍｉｎにわたって少しずつ加え、混合物を周囲温度で４時間攪拌し、その間にそれはｒｔまで温まった。ＴＬＣ分析（ミニ水性ワークアップ後）は、出発物質の完全な消失を示した（３０％  ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）。溶液を氷上に注ぎ、そして水性スラリーをＥｔＯＡｃ（３ｘ１５０ｍＬ）で抽出した。有機層を５％  Ｎａ２ＣＯ３（３ｘ７５ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３（３ｘ５０ｍＬ）、水（２ｘ１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、次に硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶液の濃縮により黄色がかった固体／ゲル物質（１１．６ｇ）を生成せしめ、それはＴＬＣにより１スポットであった。１Ｈ  ＮＭＲ分析は、ｏ−およびｍ−ニトロベンゾエート誘導体に対応する、〜２：１の比率の２つの主要生成物を示した。該物質をさらに精製せずに次の段階に進めた。
ｂ）４−ブロモ−５−メチル−３−ニトロ安息香酸
【０１７６】
【化４１】
2007535474.tif 000043
【０１７７】
４−ブロモ−５−メチル−３−ニトロ安息香酸メチルエステル（実施例２：段階ａ（１１．６ｇ、４２．３ｍｍｏｌ））をｒｔでＭｅＯＨ（４００ｍＬ）に溶解し、そして２Ｎ  ＮａＯＨ（４３ｍＬ）を添加漏斗によって３０ｍｉｎにわたって滴下して加えた。溶液を１２ｈ攪拌し、その間に沈殿物が現れ、そして出発物質は消失した（ＴＬＣは、３０％のＥｔＯＡｃにおいてベースラインスポットのみを示す）。ｐＨを濃ＨＣｌで〜２に調整し、そしてメタノールを真空中で除いた。ＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）を水性スラリーに加え、そして層を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（２ｘ５０ｍＬ）で抽出し、そして次に廃棄した。合わせた有機抽出物のＴＬＣ分析は、２つの生成物を示した（ヘキサン中４０％のＥｔＯＡｃ、４％  ＡｃＯＨ）。合わせた有機抽出物をｏ−ニトロ安息香酸（ＴＬＣ、Ｈｅｘ中４０％のＥｔＯＡｃ、４％  ＡｃＯＨ上で低い方のスポット）の除去が完了するまで０．５Ｎ  ＮａＨ２ＰＯ４／０．５Ｎ  ＮａＯＡｃの３：１溶液（〜３０ｘ５０ｍＬずつ）で洗浄した。次に、有機層をブラインで洗浄し、そして硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶液の濃縮により５．４ｇ（４７％）の白色の固体を生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．１０（ｍ，２Ｈ），２．５４（ｓ，３Ｈ）。
ｃ）（４−ブロモ−３−メチル−５−ニトロ−フェニル）−カルバミン酸２−トリメチルシラニル−エチルエステル
【０１７８】
【化４２】
2007535474.tif 000044
【０１７９】
ｒｔで１，４−ジオキサン（８０ｍＬ）中の２−ブロモ−３−メチル−５−ニトロ−安息香酸（実施例２：段階ｂ（５．２ｇ、２０ｍｍｏｌ））およびジイソプロピルエチルアミン（３．６６ｍＬ、２１ｍｍｏｌ）の攪拌溶液にアジ化ジフェニルホスホリル（４．３１ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を加えた。ｒｔで３０分後に、反応物を９０℃に５分間加熱した。トリメチルシリルエタノール（５．７３ｍＬ、４０ｍｍｏｌ）を加え、そして溶液を９５℃で１６ｈ攪拌した。溶媒を真空中で除き、そして残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と水（３０ｍＬ）との間で分配した。有機層を水性クエン酸（３ｘ３０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３（２ｘ３０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）でさらに洗浄した。カラムクロマトグラフィー（９：１  Ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ）により精製して表題化合物（４．１ｇ）を黄色の固体として生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．７３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），７．４１（ｂｒ  ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７Ｈｚ），７．０１（ｓ，１Ｈ），４．２４（ｍ，２Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），１．０２（ｍ，２Ｈ），０．０４（ｓ，９Ｈ）。
ｄ）（３−アミノ−４−ブロモ−５−メチル−フェニル）−カルバミン酸２−トリメチルシラニル−エチルエステル
【０１８０】
【化４３】
2007535474.tif 000045
【０１８１】
ＥｔＯＨ（２７ｍＬ）および水（５４ｍＬ）中の（４−ブロモ−３−メチル−５−ニトロ−フェニル）−カルバミン酸２−トリメチルシラニル−エチルエステル（実施例２：段階ｃ（４．１ｇ、１０．９ｍｍｏｌ））およびＮＨ４Ｃｌ（５．８４ｇ、１０９ｍｍｏｌ）の懸濁液に鉄粉（６．１ｇ、１０９ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を８５℃で１４ｈ加熱した。冷却した混合物をセライトを通して濾過し、そして固体を１：１のＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ（２００ｍＬ）で洗浄した。濾液を真空中で濃縮し、そして残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）とＨ２Ｏ（３０ｍＬ）との間で分配した。有機溶液を水（３０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。乾燥および溶液の濃縮によりアニリン（３．２４ｇ、８６％）を褐色の固体として生成せしめ、それをさらに精製せずに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ６．９６（ｓ，１Ｈ），６．５４（ｓ，１Ｈ），６．３９（ｓ，１Ｈ），４．２６（ｍ，２Ｈ），４．１６（ｓ，２Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），１．０６（ｍ，２Ｈ），０．０８（ｓ，９Ｈ）。
ｅ）［３−アミノ−５−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェニル］−カルバミン酸２−トリメチルシラニル−エチルエステル
【０１８２】
【化４４】
2007535474.tif 000046
【０１８３】
酢酸パラジウム（１０６ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）、２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）ビフェニル（６５８ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ）、（３−アミノ−４−ブロモ−５−メチル−フェニル）−カルバミン酸２−トリメチルシラニル−エチルエステル（（実施例２：段階ｄ）３．２４ｇ、９．３８ｍｍｏｌ）をフラスコにおいて合わせ、そしてアルゴン雰囲気下に置いた。ｐ−ジオキサン（４０ｍＬ）、続いてトリエチルアミン（５．２３ｍＬ、３８ｍｍｏｌ）およびピナコールボラン（４．０８ｍＬ、２８ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を８０℃で１ｈ攪拌し、その間にｐｐｔが現れた。溶媒を真空中で除き、そして残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）とａｑ．ＮＨ４Ｃｌ（５０ｍＬ）との間で分配した。有機層をＮＨ４Ｃｌ（２ｘ３０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）でさらに洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空中で濃縮し、そして残留物をＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（８：２  Ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ）により精製して生成物（２．４４ｇ、６６％）を褐色の固体として生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ６．７７（ｓ，１Ｈ），６．３８（ｓ，１Ｈ），６．２８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．９Ｈｚ），４．９１（ｓ，２Ｈ），４．２３（ｍ，２Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），１．３２（ｓ，１２Ｈ），１．０３（ｍ，２Ｈ），０．０５（ｓ，９Ｈ）。
ｆ）｛６−アミノ−３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−２−メチル−ビフェニル−４−イル｝−カルバミン酸２−トリメチルシラニル−エチルエステル
【０１８４】
【化４５】
2007535474.tif 000047
【０１８５】
スターラーバーを有するフラスコに［３−アミノ−５−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェニル］−カルバミン酸２−トリメチルシラニル−エチルエステル（実施例２：段階ｅ（２．３４ｇ、５．９６ｍｍｏｌ））、｛［４−（３−ブロモ−ベンゼンスルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル］−イミノ−メチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（（米国仮出願６０／３８３１３０）２．９３ｇ、５．９６ｍｍｏｌ）、水性Ｎａ２ＣＯ３（２Ｍ、１１．９ｍＬ、２３．８ｍｍｏｌ）、エタノール（１２ｍＬ）およびトルエン（２４ｍＬ）を入れた。溶液にアルゴンを１０分間散布し、そしてＰｄ（ＰＰｈ３）４（６８９ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を加えた。二相の溶液を８０℃で１６ｈ不活性雰囲気下で強く攪拌し、次にｒｔに冷却した。ＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）を加え、そして層を分離した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３（２ｘ２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、そして硫酸ナトリウム上で乾燥させた。真空中での溶媒の除去、続いて残留物のカラムクロマトグラフィー（８５：１５  ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ）により表題化合物（２．２４ｇ、５５％）を薄褐色の固体として生成せしめた。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．９８（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．３，１．９，７．８Ｈｚ），７．８９（ｍ，２Ｈ），７．６１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．５（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．３，７．７Ｈｚ），６．８８（ｓ，１Ｈ），６．５５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７Ｈｚ），６．４７（ｓ，１Ｈ），４．２６（ｍ，２Ｈ），３．４２（ｓ，２Ｈ），２．５６（ｓ，３Ｈ），１．９（ｓ，３Ｈ），１．５２（ｓ，９Ｈ），１．０６（ｍ，２Ｈ），０．０８（ｓ，９Ｈ）。
ｇ）６−｛３−［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシカルボニルアミノ）−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ヘキサン酸エチルエステル
【０１８６】
【化４６】
2007535474.tif 000048
【０１８７】
乾式ＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）中の｛２−アミノ−３’−［５−（イミノ−メトキシカルボニルアミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−４−イル｝−カルバミン酸２−トリメチルシラニル−エチルエステル（（実施例２：段階ｆ）０．０２０ｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）の溶液を６−イソシアナト−ヘキサン酸エチルエステル（５．３０μＬ、０．０３０ｍｍｏｌ）で処理し、そして室温で４０ｍｉｎ攪拌した。反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、そして水（１ｘ１５ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、そして真空中で濃縮して生成物６−｛３−［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシカルボニルアミノ）−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ヘキサン酸エチルエステル（０．０２５ｇ、９８％）を黄色がかった白色の固体として生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．２２（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．９２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），７．７２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．６５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），７．５６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．２８（ｓ，１Ｈ），４．２９（ｍ，２Ｈ），３．０６−３．００（ｍ，２Ｈ），２．７０（ｓ，３Ｈ），２．３３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），２．０１（ｓ，３Ｈ），１．６０（ｑｕｉｎｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．５４（ｓ，９Ｈ），１．４０−１．３６（ｍ，２Ｈ），１．１２（ｍ，２Ｈ），１．２８（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），０．０９（ｓ，９Ｈ）。ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ３９Ｈ５５Ｎ５Ｏ９Ｓ３Ｓｉについての計算値（Ｍ＋Ｈ）：８６２．３；実測値：８６１．９。
ｈ）６−｛３−［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシカルボニルアミノ）−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ヘキサン酸
【０１８８】
【化４７】
2007535474.tif 000049
【０１８９】
ＴＨＦ：水（２：１、１５ｍＬ）中の６−｛３−［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシカルボニルアミノ）−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ヘキサン酸エチルエステル（（実施例２：段階ｇ）０．４３７ｇ、０．５０７ｍｍｏｌ）の溶液を固体ＬｉＯＨ（０．０９７ｇ、４．０６ｍｍｏｌ）で処理し、そして室温で１８．５ｈ攪拌した。ＴＨＦを真空中で除き、そして残留水溶液を氷酢酸でｐＨ５に酸性化した。溶液をＣＨ２Ｃｌ２（３ｘ５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、そして真空中で濃縮して生成物６−｛３−［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシカルボニルアミノ）−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ヘキサン酸（０．４２２２ｇ、９９％）を黄色がかった白色の固体として生成せしめた。ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ３７Ｈ５１Ｎ５Ｏ９Ｓ３Ｓｉについての計算値（Ｍ＋Ｈ）：８３４．３；実測値：８３４．２。
ｉ）６−（３−｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ，Ｎ−ビス−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ））グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イル｝−ウレイド）−ヘキサン酸
【０１９０】
【化４８】
2007535474.tif 000050
【０１９１】
乾式ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の６−｛３−［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシカルボニルアミノ）−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ヘキサン酸（（実施例２：段階ｈ）０．４２２ｇ、０．５０６ｍｍｏｌ）の溶液をフッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＨＦ中１Ｍ、３．３９ｍＬ、３．３９ｍｍｏｌ）で処理し、そして４０℃で４ｈ攪拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。残留物をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、そして水（４ｘ５０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、そして真空中で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中４％のＭｅＯＨ）により生成物６−（３−｛４−アミノ−３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−２−イル｝−ウレイド）−ヘキサン酸（０．２００ｇ、５７％）を黄色がかった白色の固体として生成せしめた。該物質をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の１，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチル−２−チオプソイド尿素（０．２５２ｇ、０．８７０ｍｍｏｌ）および酢酸（０．５ｍＬ）と合わせ、そして４０℃で２ｈ攪拌した。溶媒を真空中で除いた。シリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中４％のＭｅＯＨ、次にＣＨ２Ｃｌ２中１０％のＭｅＯＨ）により表題化合物（０．２１５ｇ、８０％）を白色の固体として生成せしめた。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．２２（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｍ，１Ｈ），７．８９（ｍ，１Ｈ），７．７２（ｍ，１Ｈ），７．６９（ｍ，１Ｈ），７．５３（ｍ，１Ｈ），７．３２（ｍ，１Ｈ），３．０１（ｍ，２Ｈ），２．６６（ｓ，３Ｈ），２．２７（ｔ，２Ｈ，７．４Ｈｚ），１．９７（ｓ，３Ｈ），１．５７（ｍ，２Ｈ），１．５４（ｓ，１８Ｈ），１．５１（ｓ，９Ｈ），１．３７（ｍ，２Ｈ），１．２７（ｍ，２Ｈ）。
ｊ）６−｛３−［３’−（５−カルバムイミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−４−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ヘキサン酸ビス−トリフルオロアセテートのｍＰＥＧ２０Ｋアミド
【０１９２】
【化４９】
2007535474.tif 000051
【０１９３】
０℃でＤＣＭ（２３ｍＬ）中の６−（３−｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イル｝−ウレイド）−ヘキサン酸（実施例２：段階ｉ（２１０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ））およびＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（３２ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の溶液にジイソプロピルカルボジイミド（ＤＣＭ中０．２Ｍ、１．１２５ｍＬ）を滴下して加えた。溶液を０℃で３０分間攪拌し、そしてｍＰＥＧ２０Ｋ−ＮＨ２（３．２５ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液をｒｔまで温め、そしてｒｔで６ｈ（ＴＬＣ上でニンヒドリン陰性）攪拌した。ＤＣＭ（１０ｍＬ）を加え、続いてＥｔ２Ｏをゆっくりと加えて緩やかな沈殿を誘導した。追加のほんの少しのエーテルを加えて完全な沈殿を保証し、そして固体を濾過によって集め、そしてＤＣＭ／Ｅｔ２Ｏで洗浄して〜３．３ｇの粗ＰＥＧ付加化合物を生成せしめた。固体塊を２０％  ＭｅＯＨ／ＤＣＭに再溶解し、そしてＥｔ２Ｏをゆっくりと加えて沈殿を誘導した。固体を濾過によって集め、そして固体ケークを高真空下で乾燥させた。ＨＰＬＣによる「粗」物質の分析は純度〜９８％を示し、そして小分子出発物質不純物がなかった（濾液のＨＰＬＣ分析による）。乾燥したＰＥＧ付加化合物をＤＣＭ（８ｍＬ）に再溶解し、そしてＨ２Ｏ（０．１ｍＬ）、続いてＴＦＡ（８ｍＬ）を加えた。１．５ｈ攪拌した後に、ＭｅＯＨを加え（４ｍＬ）、続いてＥｔ２Ｏをゆっくりと加えて緩やかな沈殿を誘導した。一部の物質をＨＰＬＣ精製（Ｃ１８カラム、３０分にわたってＨ２Ｏ（０．１％  ＴＦＡ）中１０〜５５％のＣＨ３ＣＮ）に供し、１２０ｍｇのＰＥＧ付加化合物を生成せしめた。２つのバッチのＰＥＧ（ＨＰＬＣ精製対沈殿のみ）は同一であった。１Ｈ  ＮＭＲ分析および分析ＨＰＬＣは、２つの間で純度における＜０．５％の差を示した。沈殿したＰＥＧ付加化合物の純度は＞９９．２％（ＨＰＬＣ、λ＝２１４，２５４）であると決定され、ここで、いずれの単一の不純物も総面積の０．３％より多くを含んでならなかった。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＣＤ３ＯＤ）（δ３．６２でＰＥＧ抑制を有する）：δ８．２４（ｓ，１Ｈ），８．０３（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．２，１．９，７．９Ｈｚ），７．８２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．２Ｈｚ），７．６９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．９Ｈｚ），７．４９（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．３，７．９Ｈｚ），６．８８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．９Ｈｚ），４．２２（ｓ，ＤＯＨ），３．８１（ｍ，ＰＥＧサテライト），３．６２（ｍ，ＰＥＧメチレン），３．４５（ｍ，ＰＥＧサテライト），３．３６（ｓ，３Ｈ，ＰＥＧ−ＯＭｅ末端），３．０３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），２．６７（ｓ，３Ｈ），２．１５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．９７（ｓ，３Ｈ），１．５５（ｍ，２Ｈ），１．３７（ｍ，２Ｈ），１．２２（ｍ，２Ｈ）。
【実施例３】
【０１９４】
１１−［３’−（５−カルバムイミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル］−ウンデカン酸トリフルオロアセテートのｍＰＥＧ２０Ｋアミド
【０１９５】
【化５０】
2007535474.tif 000052
【０１９６】
ａ）１１−｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−ウンデカン酸エチルエステル
【０１９７】
【化５１】
2007535474.tif 000053
【０１９８】
ジクロロメタン（１ｍＬ）中の１１−クロロカルボニル−ウンデカン酸エチルエステル（０．０８ｇ、０．２９ｍｍｏｌ）の溶液を室温でジクロロメタン（５ｍＬ）中の｛［４−（２’−アミノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル］−イミノ−メチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（米国仮出願６０／３８３１３０（０．１０ｇ、０．１９ｍｍｏｌ））およびトリエチルアミン（０．０４ｍＬ、０．２９ｍｍｏｌ）の溶液に滴下して加え、そして１時間攪拌した。次に、反応混合物を蒸発させ、そして粗混合物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル（２：１））によって精製して０．０６０ｇの１１−｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−ウンデカン酸エチルエステルを生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．９９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），７．９５（ｓ，１Ｈ），７．８６（ｓ，１Ｈ），７．６７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．６１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．４４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．３３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．１６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），６．６９（ｓ，１Ｈ），６．６０−６．４０（ｂｓ，１Ｈ），４．１２（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），２．６０（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），２．０５−１．９３（ｍ，５Ｈ），１．６２（ｍ，４Ｈ），１．５２（ｓ，９Ｈ），１．３２−１．０３（ｍ，１５Ｈ）。質量スペクトル（ＬＣＭＳ，ＥＳＩ）Ｃ３８Ｈ５１Ｎ３Ｏ７Ｓ３についての計算値７５７．２９（Ｍ＋１）；実測値：７５７．９２。
ｂ）１１−｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−ウンデカン酸
【０１９９】
【化５２】
2007535474.tif 000054
【０２００】
室温で数時間メタノール（１ｍＬ）中の１１−｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−ウンデカン酸エチルエステル（実施例３：段階ａ（０．０６ｇ、０．０８ｍｍｏｌ））の溶液に水酸化ナトリウムの１Ｍ溶液（０．２４ｍＬ）を滴下して加えた。次に、反応混合物を蒸発させ、そして１ＮのＨＣｌをｐＨが１になるまで滴下して加えた。生成物を酢酸エチルで抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、そして真空中で蒸発させて０．０５ｇの１１−｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−ウンデカン酸を生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．９９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），７．９５（ｓ，１Ｈ），７．８９（ｓ，１Ｈ），７．６８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），７．６２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．４５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．３３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），７．１６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），６．７１（ｓ，１Ｈ），２．６０（ｓ，３Ｈ），２．３７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），２．０３（ｓ，３Ｈ），２．０５−１．９４（ｍ，２Ｈ），１．６４（ｍ，４Ｈ），１．５３（ｓ，９Ｈ），１．３２−１．０４（ｍ，１２Ｈ）。質量スペクトル（ＬＣＭＳ，ＥＳＩ）Ｃ３６Ｈ４７Ｎ３Ｏ７Ｓ３についての計算値７２９．２６（Ｍ＋１）；実測値：７２９．９０。
ｃ）１１−｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−ウンデカン酸のｍＰＥＧ２０Ｋアミド
【０２０１】
【化５３】
2007535474.tif 000055
【０２０２】
室温でジクロロメタン（４．０ｍＬ）中の１１−｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−ウンデカン酸（（実施例３：段階ｂ）０．０３０ｇ、０．０４１１ｍｍｏｌ）およびジメチルアミノピリジン（０．００８ｇ、０．０６１６ｍｍｏｌ）の溶液にジイソプロピルカルボジイミド（０．００５ｇ、０．０４１１ｍｍｏｌ）を滴下して加え、そして１０分間攪拌した。ｍＰＥＧ２０Ｋ−ＮＨ２（０．４１２ｇ、０．０２０６ｍｍｏｌ）を最小量のジクロロメタンに溶解し、そして反応物に滴下して加え、そして一晩攪拌させた。次に、反応混合物を蒸発させ、そして生成物をイソプロパノールから２回再結晶化させ、続いて逆相ＨＰＬＣで精製して（アセトニトリル／水（０．１％  ＴＦＡ））０．３７０ｇのＰＥＧ付加生成物を生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ８．１３（ｓ，１Ｈ），７．９７（ｍ，２Ｈ），７．７１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．６２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．４６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．３１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．１３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），６．９８（ｓ，１Ｈ），６．２５（ｓ，１Ｈ），２．５９（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｍ，２Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ），２．０７−１．９７（ｍ，２Ｈ），１．６４（ｍ，４Ｈ），１．５３（ｓ，９Ｈ），１．３６−１．０６（ｍ，１２Ｈ）。
ｄ）１１−［３’−（５−カルバムイミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル］−ウンデカン酸トリフルオロアセテートのｍＰＥＧ２０Ｋアミド
【０２０３】
【化５４】
2007535474.tif 000056
【０２０４】
トリフルオロ酢酸（３．０ｍＬ）をジクロロメタン（３．０ｍＬ）中の１１−｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−ウンデカン酸のｍＰＥＧ２０Ｋアミド（実施例３：段階ｃ（０．３７０ｇ、０．０１８ｍｍｏｌ））の溶液に滴下して加え、そして１時間攪拌した。次に、反応物を蒸発させ、そして逆相ＨＰＬＣによって精製して０．２００ｇのＰＥＧ付加生成物をトリフルオロ酢酸塩として生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（δ３．６２でＰＥＧ抑制を有する）（ＣＤＣｌ３）：δ１０．１（ｓ，２Ｈ），８．６５（ｓ，１Ｈ），８．２０（ｓ，１Ｈ），７．９３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．８９（ｓ，１Ｈ），７．５５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．４７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．２５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．１０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），６．３６（ｓ，１Ｈ），２．５８（ｓ，３Ｈ），２．１２（ｍ，２Ｈ），１．９９（ｓ，３Ｈ），１．９８−１．９２（ｍ，２Ｈ），１．５５（ｍ，４Ｈ），１．２６−０．９５（ｍ，１２Ｈ）。
【実施例４】
【０２０５】
４−（５−｛３−［３’−（５−カルバムイミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−４−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ペンチルオキシ）−安息香酸ビス−トリフルオロアセテートのｍＰＥＧ２０Ｋアミド
【０２０６】
【化５５】
2007535474.tif 000057
【０２０７】
ａ）４−［５−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−イソインドール−２−イル）−ペンチルオキシ］−安息香酸メチルエステル
【０２０８】
【化５６】
2007535474.tif 000058
【０２０９】
アセトン（１５０ｍＬ）中の４−ヒドロキシ−安息香酸メチルエステル（３．０１ｇ、１９．８ｍｍｏｌ）、２−（５−ブロモ−ペンチル）−イソインドール−１，３−ジオン（３．９ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（１．８２ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）の混合物を加熱して２４ｈ還流した。反応混合物をｒｔまで冷却し、そして溶媒を真空中で除いた。粗生成物（ｃｒｕｄｅ）をＥｔＯＡｃに希釈し、そして１Ｎ  ＮａＯＨおよびブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を真空中で除いた。粗生成物をＥｔＯＡｃから再結晶化して表題化合物を白色の固体（４ｇ、８３％）として生成せしめた。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．９５−７．９８（ｍ，２Ｈ），７．８３−７．８６（ｍ，２Ｈ），７．７０−７．７３（ｍ，２Ｈ），６．８６−６．８９（ｍ，２Ｈ），４．００（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．２２Ｈｚ），３．８８（ｓ，３Ｈ），３．７３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２９Ｈｚ），１．８２−１．８９（ｍ，２Ｈ），１．７３−１．８１（ｍ，２Ｈ），１．５０−１．５７（ｍ，２Ｈ）。
ｂ）４−（５−アミノ−ペンチルオキシ）−安息香酸メチルエステル
【０２１０】
【化５７】
2007535474.tif 000059
【０２１１】
ＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ、４：１）中の４−［５−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−イソインドール−２−イル）−ペンチルオキシ］−安息香酸メチルエステル（１ｇ、２．７２ｍｍｏｌ、実施例４：段階ａ）およびヒドラジン（９８．４μＬ、３．１３ｍｍｏｌ）の懸濁液を６５℃に２ｈ加熱した。ｒｔで反応混合物に追加のヒドラジンを加えた（１７１μＬ、５．４４ｍｍｏｌ）。反応混合物を７０℃に２ｈ加熱し、次にｒｔで一晩攪拌した。炭酸カリウム（３０ｍＬ、１Ｎ水性）および塩化メチレン（２００ｍＬ）を反応物に加えた。有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させた。溶媒を真空中で除いて表題化合物を白色の固体（５００ｍｇ、７７％）として生成せしめた。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．９５−８．００（ｍ，２Ｈ），６．８８−６．９２（ｍ，２Ｈ），４．０２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．４３Ｈｚ），３．８８（ｓ，３Ｈ），２．７１−２．７６（ｍ，２Ｈ），１．７９−１．８６（ｍ，２Ｈ），１．４９−１．５６（ｍ，４Ｈ）。
ｃ）４−（５−｛３−［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシカルボニルアミノ）−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ペンチルオキシ）−安息香酸メチルエステル
【０２１２】
【化５８】
2007535474.tif 000060
【０２１３】
ｒｔで塩化メチレン（５ｍＬ）中の｛２−アミノ−３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−４−イル｝−カルバミン酸２−トリメチルシラニル−エチルエステル（３０３ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ、実施例２：段階ｆ）およびピリジン（３９．８μＬ、０．４９ｍｍｏｌ）の溶液にクロロギ酸４−ニトロフェニル（９９．２ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をｒｔで２ｈ攪拌した。反応混合物に４−（５−アミノ−ペンチルオキシ）−安息香酸メチルエステル（１１７ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ、実施例４：段階ｂ）およびトリエチルアミンを加え、そしてｒｔで２ｈ攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃに希釈し、水およびブラインで洗浄し、そして硫酸マグネシウム上で乾燥させた。真空中での溶媒の除去、続いてフラッシュクロマトグラフィー（５０〜６０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）にかけて表題化合物を黄色の固体（２８０ｍｇ、６６．５％）として生成せしめた。ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ４４Ｈ５７Ｎ５Ｏ１０Ｓ３Ｓｉについての計算値：９４０．３（Ｍ＋１）；実測値：９３９．９。
ｄ）４−（５−｛３−［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシカルボニルアミノ）−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ペンチルオキシ−安息香酸
【０２１４】
【化５９】
2007535474.tif 000061
【０２１５】
１，４−ジオキサン／水（２：１、１０ｍＬ）中の４−（５−｛３−［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシカルボニルアミノ）−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ペンチルオキシ）−安息香酸メチルエステル（（実施例４：段階ｃ）２８０ｍｇ、０．２９８ｍｍｏｌ）の溶液に水酸化リチウム（４５．８ｍｇ、２．０８ｍｍｏｌ）をｒｔで２日にわたって加えた。溶媒を真空中で除いた。残留物を水に希釈し、酢酸でｐＨ〜５に酸性化し、そしてＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、そして硫酸マグネシウム上で乾燥させた。溶媒を真空中で除いて表題化合物を黄色の固体（２７６ｍｇ、１００％）として生成せしめた。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＣＤ３ＯＤ）：δ７．９３−７．９９（ｍ，３Ｈ），７．８３−７．８６（ｍ，２Ｈ），７．５２−７．５９（ｍ，２Ｈ），７．１５−７．２０（ｍ，２Ｈ），６．８５−６．８９（ｍ，２Ｈ），４．２１−４．２６（ｍ，２Ｈ），３．９９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．４３Ｈｚ），３．１３−３．２４（ｍ，２Ｈ），２．６１（ｓ，３Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ），１．７５−１．８３（ｍ，２Ｈ），１．４３−１．５６（ｍ，１３Ｈ），１．０２−１．０８（ｍ，２Ｈ），０．０７（ｓ，９Ｈ）。
ｅ）４−［５−（３−｛４−アミノ−３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−２−イル｝−ウレイド）−ペンチルオキシ］−安息香酸
【０２１６】
【化６０】
2007535474.tif 000062
【０２１７】
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の４−（５−｛３−［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシカルボニルアミノ）−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ペンチルオキシ）−安息香酸（（実施例４：段階ｄ）２７６ｍｇ、０．２９８ｍｍｏｌ）の溶液にフッ化テトラブチルアンモニウム溶液（２．３８ｍＬ、ＴＨＦ中１Ｍ）を３５℃で２日にわたって加えた。溶媒を真空中で除いた。残留物をＥｔＯＡｃに希釈し、水およびブラインで洗浄し、そして硫酸マグネシウム上で乾燥させた。溶媒を真空中で除いて表題化合物を褐色の固体（３００ｍｇ、１００％）として生成せしめた。ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ３７Ｈ４４Ｎ５Ｏ８Ｓ３についての計算値：７８２．２（Ｍ＋１）；実測値：７８１．８。
ｆ）４−（５−｛３−［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ’，Ｎ”−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ）−６−メチル−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ペンチルオキシ）−安息香酸
【０２１８】
【化６１】
2007535474.tif 000063
【０２１９】
５％  ＡｃＯＨ／ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の４−［５−（３−｛４−アミノ−３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−２−イル｝−ウレイド）−ペンチルオキシ］−安息香酸（２３３ｍｇ、０．２９８ｍｍｏｌ、実施例４：段階ｅ）の溶液に１，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチル−２−チオプソイド尿素（４３３ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）を３５℃で２日にわたって加えた。溶媒を真空中で除き、そして残留物をフラッシュクロマトグラフィー（１〜６％  ＭｅＯＨ／塩化メチレン）により精製して表題化合物を黄色の固体（７０ｍｇ、２３％）として生成せしめた。ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ４８Ｈ６１Ｎ７Ｏ１２Ｓ３についての計算値：１０２４．４（Ｍ＋１）；実測値：１０２４．０。
ｇ）４−（５−｛３−［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ’，Ｎ”−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ）−６−メチル−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ペンチルオキシ）−安息香酸のｍＰＥＧ２０Ｋアミド
【０２２０】
【化６２】
2007535474.tif 000064
【０２２１】
ＤＣＭ（２ｍＬ、無水）中の４−（５−｛３−［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ’，Ｎ”−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ）−６−メチル−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ペンチルオキシ）−安息香酸（実施例４：段階ｆ（４２．７ｍｇ、４１．７μｍｏｌ））、ジイソプロピルカルボジイミド（５．２６ｍｇ、４１．７μｍｏｌ）、４−（ジメチルアミノ）ピリジン（９．８ｍｇ、４１．７μｍｏｌ）およびｍＰＥＧ２０Ｋ−ＮＨ２（６７３ｍｇ、３２μｍｏｌ）を用いて実施例２：段階ｊにおけるカップリング方法に従った。Ｅｔ２Ｏでの沈殿による同様の精製により表題化合物を白色の固体（６５０ｍｇ、９２％）として生成せしめた。δ３．６２でＰＥＧ抑制を有する１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ８．０３−７．９７（ｍ，２Ｈ），７．８４−７．７６（ｍ，３Ｈ），７．６４−７．５４（ｍ，１Ｈ），７．４６−７．３９（ｍ，１Ｈ），７．３３−７．３１（ｍ，１Ｈ），７．１０−７．０２（ｍ，２Ｈ），６．８７−６．８３（ｍ，２Ｈ），４．０２−３．９６（ｍ，２Ｈ），３．２５−３．１９（ｍ，２Ｈ），２．６３（ｓ，３Ｈ），２．０３（ｓ，３Ｈ），１．８２−１．７５（ｍ，２Ｈ），１．５６（ｓ，９Ｈ），１．５２（ｓ，９Ｈ），１．４９（ｓ，９Ｈ），１．４８−１．４５（ｍ，４Ｈ）。
ｈ）４−（５−｛３−［３’−（５−カルバムイミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−４−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ペンチルオキシ）−安息香酸ビス−トリフルオロアセテートのｍＰＥＧ２０Ｋアミド
【０２２２】
【化６３】
2007535474.tif 000065
【０２２３】
４−（５−｛３−［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ’，Ｎ”−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ）−６−メチル−ビフェニル−２−イル］−ウレイド｝−ペンチルオキシ）−安息香酸のｍＰＥＧ２０Ｋアミド（実施例４：段階ｇ（６５０ｍｇ、２９．５μｍｏｌ））を実施例２：段階ｊにおけるようにＤＣＭ中のＴＦＡで処理した。Ｅｔ２Ｏでの沈殿およびＲＰ−ＨＰＬＣによる同様の精製により表題化合物を白色の固体（２６８ｍｇ、４１．３％）として生成せしめた。δ３．５９でＰＥＧ抑制を有する１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＣＤ３ＯＤ）：δ８．２９−８．２６（ｍ，１Ｈ），８．０５−８．００（ｍ，１Ｈ），７．８５−７．８２（ｍ，１Ｈ），７．７８−７．７４（ｍ，２Ｈ），７．７１−７．６５（ｍ，１Ｈ），７．５９−７．５５（ｍ，１Ｈ），７．５２−７．４７（ｍ，１Ｈ），６．９２−６．８７（ｍ，３Ｈ），４．０３−３．９７（ｍ，２Ｈ），３．１３−３．０７（ｍ，２Ｈ），２．６７（ｓ，３Ｈ），１．９７（ｓ，３Ｈ），１．８２−１．７５（ｍ，２Ｈ），１．５１−１．４２（ｍ，４Ｈ）。
【実施例５】
【０２２４】
４−（２’−アミノ−４’−グアニジノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−カルボキサミジンビス−トリフルオロアセテートのｍＰＥＧ２０Ｋ２’−尿素
【０２２５】
【化６４】
2007535474.tif 000066
【０２２６】
ａ）｛［４−（２’，４’−ジアミノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル］−イミノ−メチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０２２７】
【化６５】
2007535474.tif 000067
【０２２８】
｛２−アミノ−３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−４−イル｝−カルバミン酸２−トリメチルシラニル−エチルエステル（実施例２：段階ｆ（１ｇ、１．４８ｍｍｏｌ））をＴＨＦ（２５ｍＬ）中に溶解した。これにＴＢＡＦ（１Ｍ、１．６２ｍＬ、１．６２ｍｍｏｌ）を加え、そして反応物を３時間攪拌しながら４０℃まで温めた。追加のＴＢＡＦ（１．４８ｍＬ、１．４８ｍｍｏｌ）を加え、そして反応物をｒｔで一晩攪拌した。溶媒を真空中で除き、残留物をＥｔＯＡｃ中に溶解し、そして水で数回洗浄した（５回洗浄）。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、そして溶媒を真空中で除いて、表題化合物を黄色の固体（８００ｍｇ、１００％）としてもたらした。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ８．０３（ｓ，１Ｈ），７．９５−７．９３（ｍ，１Ｈ），７．８９−７．８８（ｍ，１Ｈ），７．５９−７．５３（ｍ，２Ｈ），６．０８（ｍ，１Ｈ），５．９９（ｍ，１Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ），１．８５（ｓ，３Ｈ），１．５２（ｓ，９Ｈ）。
ｂ）４−｛４’−［Ｎ’，Ｎ”−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）］−｝−｛［４−（２’−アミノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル］−イミノ−メチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０２２９】
【化６６】
2007535474.tif 000068
【０２３０】
｛［４−（２’，４’−ジアミノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル］−イミノ−メチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（（実施例５：段階ａ）３４２ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（４ｍＬ）および酢酸（２００μＬ）中に溶解した。これに１，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチル−２−チオプソイド尿素（２０３ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ中の懸濁液としてゆっくりと加え、そして反応物をｒｔで一晩攪拌した。溶媒を真空中で除き、続いてＳｉＯ２フラッシュカラムクロマトグラフィー精製し（ヘキサン中４０％のＥｔＯＡｃ）、それにより表題化合物（２３５ｍｇ、４７％）を白色の固体として生成せしめた。ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ３５Ｈ４６Ｎ６Ｏ８Ｓ３についての計算値：７７５．３（Ｍ＋１）；実測値：７７４．８。
ｃ）４−｛４’−［Ｎ’，Ｎ”−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）］−｝−｛［４−（２’−アミノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル］−イミノ−メチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルのｍＰＥＧ２０Ｋ２’−尿素
【０２３１】
【化６７】
2007535474.tif 000069
【０２３２】
４−｛４’−［Ｎ’，Ｎ”−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）］−｝−｛［４−（２’−アミノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル］−イミノ−メチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（実施例５：段階ｂ（６７ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ））およびピリジン（７．２μＬ、０．０９ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１．５ｍＬ）中に溶解した。反応物を０℃に冷却し、続いてジイソプロピルエチルアミン（１６μＬ、０．１８ｍｍｏｌ）およびクロロギ酸ｐ−ニトロフェニル（１５．７ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を加え、そして反応物を０℃で３０分間攪拌した。これにｍＰＥＧ２０Ｋ−ＮＨ２（２５０ｍｇ、０．０１２５ｍｍｏｌ）を加えた。反応物をｒｔで２時間攪拌した。これにジイソプロピルエチルアミン（３２μＬ、０．３６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（触媒量）を加え、そして反応物をｒｔで一晩攪拌した。溶媒を真空中で除き、そして残留物をＤＣＭ／ＭｅＯＨ中に溶解した。ＤＣＭ／ＭｅＯＨ溶液にエーテル（４Ｘ容量）をゆっくりと加えてＰＥＧ付加化合物を沈殿させた。１Ｈ−ＮＭＲ（δ３．６１でＰＥＧ抑制を有する）（ＣＤＣｌ３／ＣＤ３ＯＤ）：δ８．１１（ｓ，１Ｈ），８．０２−８．０１（ｍ，１Ｈ），７．８５（ｓ，１Ｈ），７．６８−７．６２（ｍ，２Ｈ），７．４５（ｓ，１Ｈ），２．６３（ｓ，３Ｈ），１．９６（ｓ，１Ｈ），１．５５（ｓ，９Ｈ），１．４９（ｓ，９Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ）。
ｄ）４−（２’−アミノ−４’−グアニジノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−カルボキサミジンビス−トリフルオロアセテートのｍＰＥＧ２０Ｋ２’−尿素
【０２３３】
【化６８】
2007535474.tif 000070
【０２３４】
４−｛４’−［Ｎ’，Ｎ”−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）］−｝−｛［４−（２’−アミノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル］−イミノ−メチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルのｍＰＥＧ２０Ｋ２’−尿素（実施例５：段階ｃ）をＤＣＭ（５ｍＬ）およびＴＦＡ（５ｍＬ）中に溶解し、そして反応物をｒｔで１時間攪拌した。溶媒を真空中で除き、次に残留物をＤＣＭ／ＭｅＯＨ中に溶解し、そしてエーテルを加えて生成物を沈殿させ、それを濾過により集めた。ＲＰ−ＨＰＬＣ（１０〜１００％  ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ、λ＝２４５ｎｍ、４０分）により精製して表題化合物を白色の固体（１９０ｍｇ、段階ｃおよびｄの全収率７６％）として生成せしめた。１Ｈ−ＮＭＲ（δ３．６０でＰＥＧ抑制を有する）（ＣＤＣｌ３／ＣＤ３ＯＤ）：δ８．２７（ｓ，１Ｈ），８．０６−８．０３（ｍ，１Ｈ），７．８５（ｓ，１Ｈ），７．７１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．９１Ｈｚ，Ｊ＝７．６７Ｈｚ），７．５８（ｓ，１Ｈ），７．５３−７．５０（ｍ，２Ｈ），２．６９（ｓ，３Ｈ），１．９８（ｓ，１Ｈ）。
【実施例６】
【０２３５】
経路ａ  ３−｛［３’−（５−カルバムイミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−４−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル］−メチルスルファニル｝−プロピオン酸ビス−トリフルオロアセテートのｍＰＥＧ２０Ｋアミド
【０２３６】
【化６９】
2007535474.tif 000071
【０２３７】
ａ）３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメチルスルファニル−プロピオン酸メチルエステル
【０２３８】
【化７０】
2007535474.tif 000072
【０２３９】
ＴＨＦ中のブロモ−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．５ｍＬ、１０．２ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（３．４ｍＬ、３０．７ｍｍｏｌ）の溶液に３−メルカプト−プロピオン酸メチルエステル（３．４ｍＬ、３０．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応物をｒｔで３ｈ攪拌し、次に濃縮し、そして残留物をＥｔＯＡｃと１Ｎ  ＮａＯＨとの間で分配した。有機層を１Ｎ  ＮａＯＨで２ｘ洗浄して全ての過剰の遊離チオールを除いた（エルマン試薬でモニターする）。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、そして濃縮して所望の生成物を透明な油状物（２．１ｇ、８８％）として生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ３．４５（ｓ，３Ｈ），２．９１（ｓ，２Ｈ），２．６６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），２．４２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．２３（ｓ，９Ｈ）。
ｂ）３−カルボキシメチルスルファニル−プロピオン酸メチルエステル
【０２４０】
【化７１】
2007535474.tif 000073
【０２４１】
３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメチルスルファニル−プロピオン酸メチルエステル（２．１ｇ、実施例６、経路ａ、段階ａにおいて製造するとおり）をＤＣＭ中５０％のＴＦＡで４ｈ処置した。混合物を真空中で濃縮して生成物を固体として生成せしめ、それをさらに精製せずに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ３．７３（ｓ，３Ｈ），３．３１（ｓ，２Ｈ），２．９５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），２．７４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）。
ｃ）３−｛［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシカルボニルアミノ）−ビフェニル−２−イルカルバモイル］−メチルスルファニル｝−プロピオン酸
【０２４２】
【化７２】
2007535474.tif 000074
【０２４３】
ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中の３−カルボキシメチルスルファニル−プロピオン酸メチルエステル（１９２ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ、実施例６、段階ｂにおいて製造するとおり）の溶液をＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（２３２ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルカルボジイミド（１７２μＬ、１．１ｍｍｏｌ）で処理し、そして室温で１０ｍｉｎ攪拌した。反応混合物に｛６−アミノ−３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−２−メチル−ビフェニル−４−イル｝−カルバミン酸２−トリメチルシラニル−エチルエステル（２４８ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ、実施例２、段階ｆにおいて製造するとおり）を加え、そして得られる混合物をｒｔで６ｈ攪拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈し、そして次に飽和ＮａＨＣＯ３で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、そして濃縮して２５０ｍｇの油状物を粗３−｛［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシカルボニルアミノ）−ビフェニル−２−イルカルバモイル］−メチルスルファニル｝−プロピオン酸メチルエステルとして生成せしめた。ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ３６Ｈ４８Ｎ４Ｏ９Ｓ４Ｓｉについての計算値：８３７．２１（Ｍ＋Ｈ）；実測値：８３６．９、７３７．１。ＬＣ−ＭＳは、この粗物質が〜９０％純粋であることを示し、そしてさらに精製せずに使用した。従って、この油状物をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）に溶解し、そして１Ｎ  ＮａＯＨ（１０ｍＬ）を強く攪拌しながらゆっくりと加えた。混合物は濁っていき、そして５０℃まで温めた。〜４ｈ後に、ＴＬＣにより反応は完了していた。反応物をＡｃＯＨで酸性化し、そして次に真空中で濃縮した。残留物をＤＣＭとＨ２Ｏとの間で分配し、そして有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、そしてもう一度濃縮した。残留物をＳｉＯ２上でクロマトグラフィー（フラッシュクロマトグラフィー、溶出：１００％のＤＣＭ〜ＤＣＭ中１０％のＭｅＯＨ）にかけて１６０ｍｇの表題化合物を黄褐色の半固体として生成せしめた。ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ３５Ｈ４６Ｎ４Ｏ９Ｓ４Ｓｉについての計算値：８２３．２（Ｍ＋Ｈ）；実測値：８２２．９、７２３．２。
ｄ）３−（｛４−アミノ−３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−メチルスルファニル）−プロピオン酸
【０２４４】
【化７３】
2007535474.tif 000075
【０２４５】
ＴＨＦ（６０ｍＬ）中の３−｛［３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−４−（２−トリメチルシラニル−エトキシカルボニルアミノ）−ビフェニル−２−イルカルバモイル］−メチルスルファニル｝−プロピオン酸（０．６５０ｇ、０．７９０ｍｍｏｌ、実施例６、経路ａ、段階ｃにおいて製造するとおり）の溶液をフッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＨＦ中１Ｍ、３．２０ｍＬ、３．１６ｍｍｏｌ）で処理し、そして４０℃に４．５ｈ温めた。溶媒を真空中で除き、そして残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、そして水（４ｘ７５ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、そして真空中で濃縮して生成物３−（｛４−アミノ−３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−メチルスルファニル）−プロピオン酸（０．３４０ｇ、６３％）を白色のガラス状固体として生成せしめた。ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ２９Ｈ３４Ｎ４Ｏ７Ｓ４についての計算値：６７９．１３（Ｍ＋１）；実測値：６７８．８０。
ｅ）３−（｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−メチルスルファニル）−プロピオン酸
【０２４６】
【化７４】
2007535474.tif 000076
【０２４７】
５％のＡｃＯＨを有するＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中の３−（｛４−アミノ−３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−メチルスルファニル）−プロピオン酸（０．３４０ｇ、０．５０１ｍｍｏｌ、実施例６、経路ａ、段階ｄにおいて製造するとおり）の溶液を１，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチル−２−チオプソイド尿素で処理し、そして４０℃に４ｈ温めた。溶媒を真空中で除いた。シリカゲルクロマトグラフィー（０．５％ずつ上昇するＣＨ２Ｃｌ２中２〜４％のＭｅＯＨ）により表題化合物（０．１９４ｇ、４２％）を白色のガラス状固体として生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ８．３８５（ｓ，１Ｈ），８．０３１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），８．００８（ｓ，１Ｈ），７．８８７（ｓ，１Ｈ），７．６２４（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．４３０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．３４０（ｓ，１Ｈ），３．００８（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝５０Ｈｚ，Ｊ＝１７．２Ｈｚ），２．５９９（ｓ，３Ｈ），２．５３８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），２．４８３（ｓ，１Ｈ），２．５４８（ｓ，２Ｈ），２．００６（ｓ，３Ｈ），１．５４９（ｓ，９Ｈ），１．５１４（ｓ，９Ｈ），１．４９２（ｓ，９Ｈ）。
ｆ）３−（｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−メチルスルファニル）−プロピオン酸のｍＰＥＧ２０Ｋアミド
【０２４８】
【化７５】
2007535474.tif 000077
【０２４９】
ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中の３−（｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−メチルスルファニル）−プロピオン酸（０．１２０ｇ、０．１３０ｍｍｏｌ、実施例６、経路ａ、段階ｅにおいて製造するとおり）の溶液をＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（３０．６ｍｇ、０．２５１ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ、２０．４μＬ、０．１３０ｍｍｏｌ）で処理し、そして室温で１０ｍｉｎ攪拌した。ｍＰＥＧ２０Ｋ−ＮＨ２（２．１０４ｇ、０．１００ｍｍｏｌ、Ｒａｐｐ  Ｐｏｌｙｍｅｒｅ  ＧＭＢＨ、Ｔｕｅｂｉｎｇｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を固体として加え、そして混合物を室温で１８ｈ攪拌した。サンプルをニンヒドリン染色でいくらかの残留するｍＰＥＧ２０Ｋ−ＮＨ２が存在しないことについて調べた。溶媒を真空中で除いた。残留物を最小量のＣＨ２Ｃｌ２中１０％  ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）を有する大型エルレンマイヤーフラスコに移し、そして溶液が濁ってくるまで無水ジエチルエーテルをゆっくりと加え、そして生成物が沈殿し始めた。懸濁液を２０分間攪拌し、そして次に４℃に３０分間冷却して完全な沈殿を保証した。固体を濾過し、そして真空デシケーター中で乾燥させた。表題化合物（２．０８ｇ、９８％）は、白色の固体として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１滴のＣＤ３ＯＤ）：δ８．２０３（ｓ，１Ｈ），８．０４０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），８．０３０（ｓ，１Ｈ），７．８１６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），７．６６０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．５４０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），７．４５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），３．０８０（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝２８Ｈｚ，Ｊ＝１１Ｈｚ），２．６１７（ｓ，３Ｈ），２．２８７（ｍ，４Ｈ），１．９９６（ｓ，３Ｈ），１．５４８（ｓ，９Ｈ），１．５１８（ｓ，９Ｈ），１．５０２（ｓ，９Ｈ）。
ｇ）３−｛［３’−（５−カルバムイミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−４−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル］−メチルスルファニル｝−プロピオン酸ビス−トリフルオロアセテートのｍＰＥＧ２０Ｋアミド
【０２５０】
【化７６】
2007535474.tif 000078
【０２５１】
ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）中の３−（｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−メチルスルファニル）−プロピオン酸のｍＰＥＧ２０Ｋアミド（２．０６ｇ、０．００１ｍｍｏｌ、実施例６、経路ａ、段階ｆにおいて製造するとおり）の溶液を０℃に冷却し、そしてトリフルオロ酢酸（１０．００ｍＬ）で処理した。溶液を室温まで温めておき、そして４．５ｈ攪拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。残留物を最小量のＣＨ２Ｃｌ２中１０％  ＭｅＯＨ（１３ｍＬ）を有する大型エルレンマイヤーフラスコに移した。溶液が濁るようになるまでジエチルエーテルを加え、そして沈殿物が形成し始めた（〜１１０ｍＬのＥｔ２Ｏ）。混合物を室温で１０分間攪拌し、次に４℃に３０分間冷却して完全な沈殿を保証した。固体を濾過し、そして真空デシケーター中で乾燥させた。分取ＨＰＬＣ（４０分にわたって１％  ＴＦＡ／水中２０〜６０％のアセトニトリル）により生成物（１．６０ｇ、７７％）を白色の固体として生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１滴のＣＤ３ＯＤ）：δ８．２４１（ｓ，１Ｈ），８．１０２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．８３６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），７．６８４（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．５６６（ｓ，１Ｈ），７．５０２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．０９０（ｓ，１Ｈ），３．０７８（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝２８，１１Ｈｚ），２．６８７（ｓ，３Ｈ），２．２４４（ｍ，４Ｈ），２．０４８（ｓ，３Ｈ）。
経路ｂ  ３−｛［３’−（５−カルバムイミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−４−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル］−メチルスルファニル｝−プロピオン酸ビス−トリフルオロアセテートのｍＰＥＧ２０Ｋアミド
【０２５２】
【化７７】
2007535474.tif 000079
【０２５３】
ａ）（｛４−［６’−（２−ヒドロキシ−アセチルアミノ）−２’−メチル−４’−ニトロ−ビフェニル−３−スルホニル］−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル｝−イミノ−メチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０２５４】
【化７８】
2007535474.tif 000080
【０２５５】
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の｛［４−（６’−アミノ−２’−メチル−４’−ニトロ−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル］−イミノ−メチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２１６ｍｇ、０．３８４ｍｍｏｌ、実施例１、段階ｈにおいて製造するとおり）の溶液にＤＩＥＡ（２１２μＬ、１．１５ｍｍｏｌ）および塩化アセトキシアセチル（５４ｍＬ、０．５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液をｒｔで３ｈｒ攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして真空中で濃縮して２５６ｍｇの粗油状物を生成せしめ、それをさらに精製せずに使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ２８Ｈ３０Ｎ４Ｏ９Ｓ３についての計算値：６６３．１（Ｍ＋Ｈ）；実測値：６６２．７、５６３．０（Ｍ−Ｂｏｃ）。ＭｅＯＨ（２．５ｍＬ）中の上記で得られる粗中間体の溶液に１Ｎ  ＮａＯＨ（２．５ｍＬ）を加え、そして混合物をｒｔで４５分間攪拌し、この時点でＴＬＣはアセチル基の完全な加水分解と一致した。反応混合物を酢酸で中和し、真空中で濃縮し、そして残留物をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ３との間で分配した。有機層を水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして真空中で濃縮して２２０ｍｇ（９２％、２段階にわたる粗収率）の表題化合物を生成せしめ、それをさらに精製せずに使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ２６Ｈ２８Ｎ４Ｏ８Ｓ３についての計算値：６２１．１（Ｍ＋Ｈ）；実測値：６２０．７、５２１．０（Ｍ−Ｂｏｃ）。
ｂ）（｛４−［４’−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ−６’−（２−ヒドロキシ−アセチルアミノ）−２’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル］−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル｝−イミノ−メチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０２５６】
【化７９】
2007535474.tif 000081
【０２５７】
ＥｔＯＨ（２．２ｍＬ）中の（｛４−［６’−（２−ヒドロキシ−アセチルアミノ）−２’−メチル−４’−ニトロ−ビフェニル−３−スルホニル］−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル｝−イミノ−メチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２２０ｍｇ、０．３５４ｍｍｏｌ、実施例６、経路ｂ、段階ａにおいて製造するとおり）の溶液にＮＨ４Ｃｌの溶液（１．１ｍＬ、３．２Ｍ、３．５４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を５０℃で３０分間強く攪拌した。鉄粉（１００ｍｇ、１．７７ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を８０℃に３．５ｈ加熱した。反応混合物を濾過し（０．２μ、Ｗｈｅａｔｏｎシリンジフィルター）、そして濾液を固体に濃縮し、それをＥｔＯＡｃと１Ｎ  Ｎａ２ＣＯ３との間で分配した。有機層を別の一部の（ａｎｏｔｈｅｒ  ｐｏｒｔｉｏｎ  ｏｆ）Ｎａ２ＣＯ３で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして濃縮して粗所望生成物を生成せしめた。ＰＴＬＣ（４ｘ１５００μプレート、ＤＣＭ中５％のＭｅＯＨ）を用いて精製して５８ｍｇの所望のアニリンを生成せしめた。ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ２６Ｈ３０Ｎ４Ｏ６Ｓ３についての計算値：５９１．１（Ｍ＋Ｈ）；実測値：５９１．０、４９１．０（Ｍ−Ｂｏｃ）。ＭｅＯＨ／ＡｃＯＨ（１０：１、５ｍＬ）中のこのアニリン（５５ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ’−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｓ−メチルイソチオ尿素（７８ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ）を加えた。反応混合物を４０℃まで温め、そして３ｈ攪拌した。混合物を真空中で固体に濃縮し、それをＰＴＬＣ（２ｘ１０００μプレート、１：１  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）上で精製して４５ｍｇ（６０％）の表題化合物を透明な油状物として生成せしめた。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３；４００ＭＨｚ）：δ１１．６０（ｓ，１Ｈ），１０．２７（ｓ，１Ｈ），８．２０（ｍ，２Ｈ），８．０４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），７．９０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．６４（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．４０−７．４５（ｍ，２Ｈ），４．４２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．８４および３．９９（ＡＢ  カルテット，２Ｈ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ），２．５５（ｓ，３Ｈ），１．９３（ｓ，３Ｈ），１．５７（ｓ，９Ｈ），１．５３（ｓ，９Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ）。ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ３７Ｈ４８Ｎ６Ｏ１０Ｓ３についての計算値：８３３．２（Ｍ＋Ｈ）；実測値：８３２．８，７３２．８，６３２．９、５３３．１。
ｃ）メタンスルホン酸｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−メチルエステル
【０２５８】
【化８０】
2007535474.tif 000082
【０２５９】
０℃でＤＣＭ（１ｍＬ）中の（｛４−［４’−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ−６’−（２−ヒドロキシ−アセチルアミノ）−２’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル］−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル｝−イミノ−メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４０ｍｇ、４８μｍｏｌ、実施例６、経路ｂ、段階ｂにおいて製造するとおり）およびジイソプロピルエチルアミン（１００μＬ、１９２μｍｏｌ）の溶液に塩化メタンスルホニル（１０μＬ、１３０μｍｏｌ）を加えた。溶液を０℃で３０分間攪拌し、そして次に温めておき、そしてｒｔで５ｈ攪拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、そして残留物をクロマトグラフィー（ＰＴＬＣ、１：１  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１０００μ  ＳｉＯ２プレート）にかけて４０ｍｇ（９７％）の所望の表題化合物をガラス状の固体として生成せしめた。ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ３８Ｈ５０Ｎ６Ｏ１２Ｓ４についての計算値：９１１．２（Ｍ＋Ｈ）；実測値：９１０．７、８１０．８、７１０．８、６１１．１。
ｄ）３−｛［３’−（５−カルバムイミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−４−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル］−メチルスルファニル｝−プロピオン酸ビス−トリフルオロアセテートのｍＰＥＧ２０Ｋアミド
【０２６０】
【化８１】
2007535474.tif 000083
【０２６１】
ＤＣＭ（１．５ｍＬ）中のメタンスルホン酸｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル｝−メチルエステル（２１ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ、実施例６、経路ｂ、段階ｃにおいて製造するとおり）およびジイソプロピルエチルアミン（１００μＬ、１９２μｍｏｌ）の溶液にｍＰＥＧ２０Ｋ−ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）２−ＳＨ（３５０ｍｇ、１６．７μｍｏｌ、Ｒａｐｐ  Ｐｏｌｙｍｅｒｅ  ＧＭＢＨ、Ｔｕｅｂｉｎｇｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を加えた。得られる溶液をｒｔで攪拌し、そして反応進行をエルマン試薬（ＤＴＮＢ）を用いてＴＬＣ上でモニターした。全ての遊離チオールが消費された後に（〜２ｈ）、反応混合物をＭｅＯＨ（３ｍＬ）で希釈し、そして次にジエチルエーテルをゆっくりと加えることにより沈殿させた。いったん反応混合物が濁ってくると、それを４℃で静置させて完全な沈殿を誘導した。固体をブフナー漏斗上に集め、そして吸引により乾燥させた。固体を反応容器に移し、そして１：１  ＴＦＡ／ＤＣＭで２ｈ処理した。反応混合物を真空中で濃縮し、そして粗生成物を水に再溶解し、そしてＣ−１８  ＲＰ−ＨＰＬＣ（λ＝２１４、２５４；勾配：３０分にわたってＨ２Ｏ（０．１％  ＴＦＡ）中２０〜６０％のＣＨ３ＣＮ）を用いて精製して表題化合物（２２０ｍｇ、６３％）を白色の固体として生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δ３．６２でＰＥＧ抑制を有する）：δ８．２４（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．８４（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），７．６８（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．５７（ｓ，１Ｈ），７．５０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．０９（ｓ，１Ｈ），３．６２（ｍ，ＰＥＧ  ＣＨ２），３．３６（ｓ，３Ｈ，ＰＥＧ−ＯＣＨ３），３．０８（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝２８，１１Ｈｚ），２．６９（ｓ，３Ｈ），２．２４（ｍ，４Ｈ），２．０５（ｓ，３Ｈ）。
【実施例７】
【０２６２】
６−［３’−（５−カルバムイミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−４−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル］−ヘキサン酸ビス−トリフルオロアセテートのｍＰＥＧ３０Ｋアミド
【０２６３】
【化８２】
2007535474.tif 000084
【０２６４】
表題化合物は、実施例２、段階ｊについて記述するのと同様の方法を用いて合成した。従って、ＤＣＭ（２．５ｍＬ）中の６−（３−｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イル｝−ウレイド）−ヘキサン酸（４０ｍｇ，０．０４２６ｍｍｏｌ、実施例２、段階ｉにおいて製造するとおり）およびＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（９．１ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）の溶液にジイソプロピルカルボジイミド（６．２μＬ、０．０３９９ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を１０分間攪拌し、そして次にｍＰＥＧ３０Ｋ−ＮＨ２（８００ｍｇ、０．０２６６ｍｍｏｌ、ＮＯＦ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｊａｐａｎ）を加えた。反応物をｒｔで６ｈ攪拌した（ＴＬＣ上でニンヒドリン陰性）。ＤＣＭ（１０ｍＬ）を加え、続いてＥｔ２Ｏをゆっくりと加えて緩やかな沈殿を誘導した。追加のほんの少しのエーテルを加えて完全な沈殿を保証し、そして固体を濾過により集め、そしてＤＣＭ／Ｅｔ２Ｏで洗浄して〜７００ｍｇの粗ＰＥＧ付加化合物を生成せしめた。沈殿を繰り返した。ＨＰＬＣによる粗物質の分析は、純度が〜９８％であることを示した。乾燥させたＰＥＧ付加化合物をＴＦＡ（ＤＣＭ中５０％、６ｍＬ）で処理した。２ｈ攪拌した後に、ＭｅＯＨを加え（４ｍＬ）、続いてＥｔ２Ｏをゆっくりと加えて緩やかな沈殿を誘導した。固体を集め、そして沈殿を上記のように繰り返した。固体を濾過により集め、そして真空中で乾燥させて純粋な表題化合物を白色の固体（６４０ｍｇ）として生成せしめた。分析ＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｃ１８カラム、１０分にわたってＨ２Ｏ中１０〜８０％のＣＨ３ＣＮ（０．１％  ＴＦＡ、λ＝２１４、２５４））は、純度＞９９％を示した。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）（δ３．６２でＰＥＧ抑制を有する）：δ８．４５（ｓ，１Ｈ），８．１１（ｍ，１Ｈ）７．９３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．５Ｈｚ），７．８３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．７３（ｍ，１Ｈ），７．６１（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．２，７．６Ｈｚ），７．０４（ｍ，１Ｈ），３．６２（ｍ，ＰＥＧメチレン），３．２８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，ＰＥＧ−ＣＨ２Ｎ），３．１０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），２．７６（ｓ，３Ｈ），２．１９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），２．０３（ｓ，３Ｈ），１．６２（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｍ，２Ｈ），１．３２（ｍ，２Ｈ）。
【実施例８】
【０２６５】
６−［３’−（５−カルバムイミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−４−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル］−ヘキサン酸テトラ−トリフルオロアセテートの二置換（ｂｉｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ）−ＰＥＧ２０Ｋ−（ＮＨ２）２との連結
【０２６６】
【化８３】
2007535474.tif 000085
【０２６７】
表題化合物は、実施例７において使用するものと同一の方法を用いて合成した。従って、ＤＣＭ（１ｍＬ）中のジイソプロピルカルボジイミド（５．６μＬ、０．０３６ｍｍｏｌ）、６−（３−｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イル｝−ウレイド）−ヘキサン酸（３４ｍｇ、０．０３６５ｍｍｏｌ、実施例２、段階ｉにおいて製造するとおり）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（８ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）およびＰＥＧ２０Ｋ−（ＮＨ２）２（２５５ｍｇ、０．０１２２ｍｍｏｌ、Ｒａｐｐ  Ｐｏｌｙｍｅｒｅ  ＧＭＢＨ、Ｔｕｅｂｉｎｇｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）の反応、続いてＴＦＡ処理、そして実施例７におけるのと同じワークアップおよび精製により、〜２００ｍｇの表題化合物を白色の固体として生成せしめた。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）（δ３．６でＰＥＧ抑制を有する）：δ８．４５（ｓ，１Ｈ），８．１２（ｍ，１Ｈ）７．９２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．５Ｈｚ），７．８３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．７３（ｍ，１Ｈ），７．６１（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．２，７．６Ｈｚ），７．０３５（ｍ，１Ｈ），３．６２（ｍ，ＰＥＧメチレン），３．３６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，ＰＥＧ−ＣＨ２Ｎ），３．１０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），２．７６（ｓ，３Ｈ），２．２２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），２．０２（ｓ，３Ｈ），１．６２（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｍ，２Ｈ），１．３２（ｍ，２Ｈ）。
【実施例９】
【０２６８】
３−｛［３’−（５−カルバムイミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−２−メチル−ビフェニル−４−イルカルバモイル］−メチルスルファニル｝−プロピオン酸トリフルオロアセテートのｍＰＥＧ２０Ｋアミド
【０２６９】
【化８４】
2007535474.tif 000086
【０２７０】
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の（｛４−［４’−（２−ブロモ−アセチルアミノ）−２’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル］−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル｝−イミノ−メチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４５ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ、実施例２３４、段階ａ、ＷＯ−０３０９９８０５において製造するとおり）およびＥｔ３Ｎ（１５μＬ）の溶液に、ｍＰＥＧ２０Ｋ−ＮＨＣＯ（ＣＨ２）２ＳＨ（１．１３ｇ、０．０５６ｍｍｏｌ、Ｒａｐｐ  Ｐｏｌｙｍｅｒｅ、ＧＭＢＨ、Ｔｕｅｂｉｎｇｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を加えた。反応物をＡｒ下でｒｔで１ｈ攪拌した。反応の完了は、エルマン試薬を用いてモニターした。反応混合物を真空中で濃縮し、そして残った残留物をＥｔ２Ｏで研和し、次にＴＦＡ（ＤＣＭ中２５％）で４０分間処理した。ＴＦＡ／ＤＣＭの除去およびＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｃ１８カラム、３０分にわたってＨ２Ｏ中２０〜６０％のＣＨ３ＣＮ（０．１％  ＴＦＡ、λ＝２１４、２５４））上での残留物の精製により純粋な表題化合物をＴＦＡ塩として生成せしめた。分析ＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｃ１８カラム、１０分にわたってＨ２Ｏ中１０〜８０％のＣＨ３ＣＮ（０．１％  ＴＦＡ、λ＝２１４、２５４））は、単一のピークを与えた。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）（δ３．６２でＰＥＧ抑制を有する）：δ８．３８（ｓ，１Ｈ），８．０３−８．０６（ｍ，１Ｈ）７．９７（ｍ，１Ｈ），７．７１（ｍ，２Ｈ），７．５６−７．６１（ｍ，２Ｈ），７．２１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．１Ｈｚ），３．６２（ｍ，ＰＥＧメチレン），３．３７−３．４（ｍ，５Ｈ），３．３６（ｓ，３Ｈ，ＰＥＧ−ＯＭｅ），２．９７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈ），２．７５（ｓ，３Ｈ），２．６０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），２．２６（ｓ，３Ｈ）。
【実施例１０】
【０２７１】
４−（２’−アミノ−４’−グアニジノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−カルボキサミジン（オクタ）−トリフルオロアセテートの４価（４アーム）ＰＥＧ２’−尿素コンジュゲート
（ペンタエリトリトールコア）
【０２７２】
【化８５】
2007535474.tif 000087
【０２７３】
表題化合物は、実施例５、段階ｃおよびｄに記述するのと同様の方法を用いて合成した。４−｛４’−［Ｎ’，Ｎ”−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）］−｝−｛［４−（２’−アミノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル］−イミノ−メチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（実施例５：段階ｂ（１５５ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ））およびピリジン（１９μＬ、０．０２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１．５ｍＬ）中に溶解した。反応物を０℃に冷却し、続いてジイソプロピルエチルアミン（１６μＬ、０．１８ｍｍｏｌ）およびクロロギ酸ｐ−ニトロフェニル（３５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を加え、そして反応物を０℃次にｒｔで３０分間攪拌した。これに４価４アームＰＥＧ２０Ｋ−ＮＨ２（５００ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（３００μＬ）を加えた。反応物をｒｔで１４ｈ攪拌した。溶媒を真空中で除き、そして残留物をＤＣＭ中に溶解した。エーテル（４Ｘ容量）をＤＣＭ／ＭｅＯＨ溶液にゆっくりと加えてＰＥＧ付加化合物を沈殿させた。固体を集め、そして沈殿をもう２回繰り返した。固体をｒｔでＴＦＡ（ＤＣＭ中５０％、５ｍＬ）で１ｈ処理した。溶媒を真空中で除き、そして残留物をＭｅＯＨ／ＤＣＭに溶解し、そしてＥｔ２Ｏで３回沈殿させた。集めた固体をＲＰ−ＨＰＬＣ  ＨＰＬＣ（Ｃ１８カラム、３０分にわたってＨ２Ｏ中２０〜６０％のＣＨ３ＣＮ（０．１％  ＴＦＡ、λ＝２１４、２５４））上で精製して４００ｍｇの表題化合物を黄褐色の固体として生成せしめた。１Ｈ−ＮＭＲ（δ３．６２でＰＥＧ抑制を有する）（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．４４（ｓ，１Ｈ），８．１２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．９２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．８２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．７１（ｓ，１Ｈ），７．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．０４（ｓ，１Ｈ），３．６２（ｍ，ＰＥＧメチレン），３．２７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝４．７Ｈｚ），２．７６（ｓ，３Ｈ），２．０２（ｓ，１Ｈ）。
【実施例１１】
【０２７４】
４−（２’−アミノ−４’−グアニジノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−カルボキサミジンビス−トリフルオロアセテートのＨＯＯＣ−ＰＥＧ５Ｋ２’−尿素
【０２７５】
【化８６】
2007535474.tif 000088
【０２７６】
表題化合物は、以下の量：ＤＣＭ（１ｍＬ）中の４−｛４’−［Ｎ’，Ｎ”−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）］−｝−｛［４−（２’−アミノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−イル］−イミノ−メチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（実施例５：段階ｂ（３０ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ））、ピリジン（２４μＬ、０．３ｍｍｏｌ）、クロロギ酸ｐ−ニトロフェニル（７．３ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（２００μＬ）およびＨ２Ｎ−ＰＥＧ５Ｋ−ＣＯＯＨ（１００ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ、ＮＯＦ、Ｊａｐａｎ）を用いて実施例１０に記述するように合成した。同様のワークアップおよび精製（沈殿およびＲＰ−ＨＰＬＣ）により３５ｍｇの純粋なＢｏｃ保護された中間体を生成せしめた。前述のようなＴＦＡでの処理、続いてＭｅＯＨ／ＤＣＭ／Ｅｔ２Ｏ沈殿により、表題化合物を白色の固体として生成せしめた。１Ｈ−ＮＭＲ（δ３．６２でＰＥＧ抑制を有する）（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．４３（ｓ，１Ｈ），８．０９−８．１４（ｍ，１Ｈ），７．９２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），７．８２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．６０−７．６６（ｍ，２Ｈ），７．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），３．６２（ｍ，ＰＥＧメチレン），３．１８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），２．７６（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），２．０４（ｓ，１Ｈ），１．５６−１．６８（ｍ，６Ｈ），１．３７−１．４６（ｍ，２Ｈ）。
【実施例１２】
【０２７７】
４−（２’−アミノ−４’−グアニジノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−カルボキサミジンテトラ−トリフルオロアセテートの２価４５Ｋ  ＰＥＧコンジュゲート
【０２７８】
【化８７】
2007535474.tif 000089
【０２７９】
ＤＣＭ（１ｍＬ）中の４−（２’−アミノ−４’−グアニジノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−カルボキサミジンのトリス−Ｂｏｃ保護されたＨＯＯＣ−ＰＥＧ５Ｋ２’−尿素（３３ｍｇ、０．００６５ｍｍｏｌ、実施例１１において製造するとおり）およびＤＭＡＰ（３ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）の溶液にジイソプロピルカルボジイミド（ＤＣＭ中１０％の溶液の１０μＬ、０．００６４ｍｍｏｌ）を加えた。反応物をｒｔで１０分間攪拌し、次にＰＥＧ３５Ｋ−（ＮＨ２）２（８１ｍｇ、０．００２３ｍｍｏｌ、ＮＯＦ、Ｊａｐａｎ）を一度に加えた。反応物をｒｔで一晩攪拌させた。溶媒を真空中で除き、そして残留物を実施例７に記述するようにＤＣＭ／Ｅｔ２Ｏから沈殿させた。集めた固体をアイソクラチック勾配（３０分にわたって３５％  ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．１％  ＴＦＡ））を用いてＲＰ−ＨＰＬＣ上で精製して生成物（遅い画分）から過剰のＨＯＯＣ−ＰＥＧ５Ｋ−小分子コンジュゲート（早い画分）を除いた。遅い画分をＴＦＡ（ＤＣＭ中５０％、２ｍＬ）で４ｈ処理し、そして反応混合物を真空中で濃縮した。残留物をＲＰ−ＨＰＬＣ上でもう一度クロマトグラフィーにかけて分析ＲＰ−ＨＰＬＣおよび１Ｈ  ＮＭＲにより立証した場合に純粋な表題化合物を生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（δ３．６２でＰＥＧ抑制を有する）（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．４２（ｓ，１Ｈ），８．０９−８．１１（ｍ，１Ｈ），７．９１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．７Ｈｚ），７．８１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．７１（ｓ，１Ｈ），７．６０−７．６２（ｍ，１Ｈ），７．０４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），３．６２（ｍ，ＰＥＧメチレン），３．２５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．１７（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），２．７５（ｓ，３Ｈ），２．１８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），２．０２（ｓ，１Ｈ），１．９０−１．９８（ｍ，２Ｈ），１．７２−１．７９（ｍ，２Ｈ），１．５６−１．６７（ｍ，６Ｈ）。
【実施例１３】
【０２８０】
４−（２’−アミノ−４’−グアニジノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−カルボキサミジン（オクタ）−トリフルオロアセテートの４価ＰＥＧ２’−尿素コンジュゲート
（リシンで末端分枝した）
【０２８１】
【化８８】
2007535474.tif 000090
【０２８２】
ｒｔでＤＣＭ（３．５ｍＬ）中のＰＥＧ３５Ｋ−（ＮＨ２）２（１ｇ、２８．６ｍｍｏｌ、ＮＯＦ、Ｊａｐａｎ）およびＤＭＡＰ（０．０３５ｍｇ、０．２８６ｍｍｏｌ）の溶液にＢｏｃ−Ｎ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（１０２ｍｇ、０．２２９ｍｍｏｌ、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）を加えた。粘性のある反応混合物を２４ｈ強く攪拌し、次にＤＣＭで希釈し、そしてＥｔ２Ｏを混濁するまでゆっくりと加えた。沈殿が完了するまで混合物を４℃で静置させた。固体を濾過により集め、そして該方法をもう３回繰り返した。白色の固体を集め、そしてＴＦＡ（ＤＣＭ中５０％）でｒｔで４ｈ処理した。反応混合物を濃縮乾固させ、そして残留物を過剰のＤＩＥＡを加えることにより中和し、そして真空中で蒸発させて所望の中間体を固体として生成せしめた。実施例７に記述する同じ方法に従って、一部の回収された固体（３００ｍｇ、０．００８６ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２ｍＬ）中の６−（３−｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イル｝−ウレイド）−ヘキサン酸（６４ｍｇ、０．０６８６ｍｍｏｌ、実施例２、段階ｉにおいて製造するとおり）、ジイソプロピルカルボジイミド（１０．６μＬ、０．０６８ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（１６ｍｇ、０．１２９ｍｍｏｌ）と反応させた。反応混合物を濃縮し、そして残留物をＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物に溶解し、そしてＥｔ２Ｏ（３ｘ）で沈殿させた。濾過した固体をＴＦＡ（ＤＣＭ中５０％）でｒｔで６ｈ処理した。揮発性物質を真空中で除き、そして残留物をＭｅＯＨ／ＤＣＭ／Ｅｔ２Ｏから２回沈殿させて分析ＲＰ−ＨＰＬＣおよび１Ｈ  ＮＭＲにより確認した場合に純粋な表題化合物を白色の固体として生成せしめた。１Ｈ  ＮＭＲ（δ３．６２でＰＥＧ抑制を有する）（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．４４（ｓ，１Ｈ），８．０９−８．１１（ｍ，１Ｈ），７．９２（ｓ，１Ｈ），７．８２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．７３（ｍ，１Ｈ），７．６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．０３（ｓ，１Ｈ），３．６２（ｍ，ＰＥＧメチレン），３．０５−３．１２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），２．７５（ｓ，３Ｈ），２．１９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），２．０１（ｓ，１Ｈ），１．７０−１．９０（ｍ，２Ｈ），１．２４−１．６４（ｍ，１０Ｈ）。
【実施例１４】
【０２８３】
６−［３’−（５−カルバムイミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−４−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル］−ヘキサン酸ビス−トリフルオロアセテートのＰＥＧ４０Ｋアミド
【０２８４】
【化８９】
2007535474.tif 000091
【０２８５】
表題化合物は、ＤＣＭ（３ｍＬ）中の６−（３−｛３’−［５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−イミノ−メチル）−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル］−４−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イル｝−ウレイド）−ヘキサン酸（２５ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ、実施例２、段階ｉにおいて製造するとおり）、ジイソプロピルカルボジイミド（４．３μＬ、０．０２７ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（６．４ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）およびＹ−ＰＥＧ４０Ｋ−ＮＨ２（７００ｍｇ、０．０１７５ｍｍｏｌ、Ｓｕｎｂｉｏ、Ｓｏｕｔｈ  Ｋｏｒｅａ）を反応させることにより実施例７に記述する同じ方法を用いて合成した。同様のワークアップ、沈殿、ＴＦＡ処理および最終沈殿により表題化合物を白色の固体として生成せしめた。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）（δ３．６２でＰＥＧ抑制を有する）：δ８．４５（ｓ，１Ｈ），８．１１（ｍ，１Ｈ），７．９１（ｓ，１Ｈ），７．６６−７．８４（ｍ，２Ｈ），７．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．０４（ｓ，１Ｈ），３．６２（ｍ，ＰＥＧメチレン），２．７７（ｓ，３Ｈ），２．６０（ｍ，２Ｈ），２．２５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），２．０１（ｓ，３Ｈ），１．６０（ｍ，２Ｈ），１．４２（ｍ，２Ｈ），１．２５−１．３５（ｍ，２Ｈ）。
【実施例１５】
【０２８６】
Ｃ１ｓのインビトロ阻害
試薬：全てのバッファー塩は、Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から入手し、そして利用可能な最高純度のものであった。ＤＴＮＢは、Ｐｉｅｒｃｅ（Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）から購入した。Ｚ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｓ−Ｂｚｌは、Ｅｎｚｙｍｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（Ｌｉｖｅｒｍｏｒｅ，ＣＡ）から購入した。活性化ヒトＣ１ｓは、Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ（Ｌａ  Ｊｏｌｌａ，ＣＡ）から購入した。
【０２８７】
Ｋｉ決定：全てのアッセイは、５，５’−ジチオ−ビス（２−ニトロ安息香酸）（ＤＴＮＢ）との二次反応によって見られる、基質Ｚ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｓ−ＢｚｌのＣ１ｓにより触媒される加水分解を阻害する試験化合物の能力に基づく。典型的なＫｉ決定では、基質をＤＭＳＯにおいて調製し、そして５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、２００ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．５、０．０５％  ｎ−オクチル−β−Ｄ−グルコピラノシドからなるアッセイバッファー中に希釈する。基質溶液は、アッセイバッファーにおいて２００μＭの濃度でＤＴＮＢを有して４５μＭ（Ｋｍ＝７８μＭ）の濃度で調製した。試験化合物は、アッセイバッファーにおいて１０μＭの最終濃度として調製する。試験化合物の希釈物をアッセイバッファーにおいて調製し、７００倍の濃度範囲を含む少なくとも７つの最終濃度をもたらす。精製された活性化Ｃ１ｓは、５０ｎＭの作業濃度用にアッセイバッファー中に希釈した。
【０２８８】
典型的なＫｉ決定では、９６ウェルプレートの各ウェル中に２８０μＬの基質溶液、１０μＬの試験化合物溶液をピペットで取り、そしてプレートを３７℃で１０分間熱的に平衡化させる。反応は、酵素の１０μＬアリコートの添加により開始し、そして４０５ｎｍでの吸光度増加をＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓプレート読取機において１５分間連続して記録する。最終試薬濃度は：［Ｃ１ｓ］＝１．７ｎＭ、［Ｚ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｓ−Ｂｚｌ］＝４５μＭ、［ＤＴＮＢ］＝２００μＭであった。試験化合物を含有しないサンプルに対する速度（時間の関数としての吸光度の変化率）の比率を、試験化合物を含有するサンプルの速度で割り、そして試験化合物濃度の関数としてプロットする。データは線形回帰に適合し、そして直線の傾きの値を計算する。傾きの逆数は、実験的に決定された見掛けのＫｉ値（Ｋｉ  ａｐｐ）である。Ｋｉ  ａｐｐは、基質濃度［Ｓ］と基質Ｋｍとの間の関係から真のＫｉに補正され、ここで、Ｋｉ＝Ｋｉ  ａｐｐｘ（１／（１＋［Ｓ］／Ｋｍ））。
【実施例１６】
【０２８９】
ＭＡＳＰ−２のインビトロ阻害
試薬：全てのバッファー塩は、Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から入手し、そして利用可能な最高純度のものであった。ＤＴＮＢは、Ｐｉｅｒｃｅ（Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）から購入した。Ｚ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｓ−Ｂｚｌは、Ｅｎｚｙｍｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（Ｌｉｖｅｒｍｏｒｅ，ＣＡ）から購入した。自己活性化２鎖（２−ｃｈａｉｎ）ヒトＭＡＳＰ−２（Ｈｉｓ−タグ、Ｃｙｓ３００−Ｐｈｅ６８６）は、昆虫細胞におけるバキュロウイルス発現系から組織内で製造した。
【０２９０】
Ｋｉ決定：全てのアッセイは、５，５’−ジチオ−ビス（２−ニトロ安息香酸）（ＤＴＮＢ）との二次反応によって見られる、基質Ｚ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｓ−ＢｚｌのＭＡＳＰ−２により触媒される加水分解を阻害する試験化合物の能力に基づく。典型的なＫｉ決定では、基質をＤＭＳＯにおいて調製し、そして５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、２００ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．５、０．０５％  ｎ−オクチル−β−Ｄ−グルコピラノシドからなるアッセイバッファー中に希釈する。基質溶液は、アッセイバッファーにおいて２００μＭの濃度でＤＴＮＢを有して４５μＭ（Ｋｍ＝８．６μＭ）の濃度で調製した。試験化合物は、アッセイバッファーにおいて１０μＭの最終濃度として調製する。試験化合物の希釈物をアッセイバッファーにおいて調製し、７００倍の濃度範囲を含む少なくとも７つの最終濃度をもたらす。精製された活性化ＭＡＳＰ−２は、３０ｎＭの作業濃度用にアッセイバッファー中に希釈した。
【０２９１】
典型的なＫｉ決定では、９６ウェルプレートの各ウェルに２８０μＬの基質溶液、１０μＬの試験化合物溶液をピペットで取り、そしてプレートを３７℃で１０分間熱的に平衡化させる。反応は、酵素の１０μＬアリコートの添加により開始し、そして４０５ｎｍでの吸光度増加をＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓプレート読取機において１５分間連続して記録する。最終試薬濃度は：［ＭＡＳＰ−２］＝１．０ｎＭ、［Ｚ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｓ−Ｂｚｌ］＝４５μＭ、［ＤＴＮＢ］＝２００μＭであった。試験化合物を含有しないサンプルに対する速度（時間の関数としての吸光度の変化率）の比率を、試験化合物を含有するサンプルの速度で割り、そして試験化合物濃度の関数としてプロットする。データは線形回帰に適合し、そして直線の傾きの値を計算する。傾きの逆数は、実験的に決定された見掛けのＫｉ値（Ｋｉ  ａｐｐ）である。Ｋｉ  ａｐｐは、基質濃度［Ｓ］と基質Ｋｍとの間の関係から真のＫｉに補正され、ここで、Ｋｉ＝Ｋｉ  ａｐｐｘ（１／（１＋［Ｓ］／Ｋｍ））。
【実施例１７】
【０２９２】
補体阻害データ
表１に記載する個々の実施例により製造される以下の化合物は、実施例１５および１６に記述する方法に従って決定されるそれらのＫｉ値を有した。
【０２９３】
【表１】
2007535474.tif 000092
【０２９４】
これらの実施例は、Ｃ１ｓサブコンポーネントについて０．０１８〜０．４マイクロモル（μＭ）の範囲のＫｉ値を有する。表１は、実施例の代表組のＣ１ｓおよびＭＡＳＰ−２の阻害のＫｉ値を示す。結果は、本発明の化合物が補体のインヒビターであることを示す。
【０２９５】
本書類に引用するかもしくは記述する各特許、特許出願および公開の開示は、それらの全部が本明細書に引用することにより本明細書に組み込まれる。
【０２９６】
本明細書に使用する化学式および名称は、基礎をなす化学化合物を正しくそして正確に反映すると考えられる。しかしながら、本発明の性質および価値は、全部もしくは一部として、これらの式の理論的正確さに依存しない。従って、本明細書に使用する式、ならびに相応して示される化合物に属すると考えられる化学名称は、そのような立体化学が明らかに定義される場合を除いて、それを任意の特定の互変異性体にまたは任意の特定の光学；もしくは幾何異性体に限定することを包含する、本発明を限定することを決して意図するものではないと理解される。
【０２９７】
本明細書に記述するものに加えて、本発明の様々な改変は、前の記述から当業者に明らかである。そのような改変もまた、添付の請求項の範囲内に入るものとする。
【図面の簡単な説明】
【０２９８】
【図１】薬剤から薬剤−リンカーコンジュゲートを形成するための可能な反応経路の概略図である。
【図２】薬剤から薬剤−リンカーコンジュゲートを形成するための可能な反応経路の概略図である。
【図３】ポリマーに薬剤−リンカーコンジュゲートを結合するための可能な反応経路の概略図である。
【図４】ポリマーに複数の薬剤−リンカーコンジュゲートを結合するための可能な反応経路の概略図である。
【図５】薬剤から薬剤−リンカーコンジュゲートを形成するための可能な反応経路の概略図である。
【図６】ポリマーに薬剤−リンカーコンジュゲートを結合するための可能な反応経路の概略図である。
【図７】薬剤−ポリマーコンジュゲートを形成するための可能な反応経路の概略図である。
【図８】薬剤−リンカー−ポリマーコンジュゲートを形成するための合成経路の概略図である。
【図９】図８の代替合成経路の概略図である。
【図１０】増加した平均分子量を有する１価および多価の薬剤−ポリマーコンジュゲートを形成するための合成経路の概略図である。
【図１１】４価の薬剤−ポリマーコンジュゲートを形成するための合成経路の概略図である。
【図１】
2007535474.tif 000120
【図２】
2007535474.tif 000121
【図３】
2007535474.tif 000122
【図４】
2007535474.tif 000123
【図５】
2007535474.tif 000124
【図６】
2007535474.tif 000125
【図７】
2007535474.tif 000126
【図８】
2007535474.tif 000127
【図９】
2007535474.tif 000128
【図１０】
2007535474.tif 000129
【図１１】
2007535474.tif 000130
【手続補正書】
【提出日】平成19年6月6日(2007.6.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）もしくは式（ＩＶ）：
（Ｄ−Ｌ）n−Ｐ          Ｄ−Ｌn−Ｐn'
（Ｉ）                  （ＩＶ）
［式中：
Ｄは芳香族グアニジン、芳香族もしくは複素芳香族アミジン、式（ＩＩ）：
【化１】
2007535474.tif 000131
ここで：
Ｒ1、Ｒ2およびＲ3はＨ、Ｃ1〜4アルキル、アミノ、Ｃ1〜4アルコキシもしくはヒドロキシから独立して選択され；
Ｕはチオフェニル−Ｒ5、ベンジレン、フェニレン、ＮＨもしくは結合であり；
Ｒ5はＳＯ2、ＮＨもしくは結合であり；
Ｚはアリーレン、ヘテロアリーレン、アラルキレン、シクロアルキレン、シクロヘテロエンであり；
ＷはＣ（＝Ｏ）−Ｏ、ＨＣ（ＣＨ3）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）、Ｏ、ＮＨ、Ｓ、ＣＨ2、Ｃ（＝Ｏ）もしくは結合であり；
Ｔはアリーレン、ヘテロアリーレン、アラルキレン、シクロアルキレン、シクロヘテロエン、Ｃ1〜4アルキル、Ｏ、Ｓ、Ｃ1〜4アルコキシ、Ｃ1〜4アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノもしくはニトロであり；
Ｘはアミノ、カルボキシ、ヒドロキシル、チオール、ハロゲン、オレフィン、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、アミノアルキル、カルボキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、メルカプトアルキル、またはＬもしくはＰへの結合であり；
Ｖはメチル、エチルもしくはＣｌであり；そして
Ｒ4はＨ、Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4アルコキシ、アミジニル、アミノメチル、ＮＨ2、尿素もしくはグアニジニルである、
の化合物であり；
Ｌは各出現ごとに独立して選択される場合による（各出現ごとに）連結基であり；
ｎは１、２、３、４、５もしくは６であり；
ｎ'は１、２、３もしくは４であり；そして
ＰはＤの薬物動態学的特性を高める化合物から各出現ごとに独立して選択される］
を有する化合物。
【請求項２】
化合物が式（Ｉ）を有し、そしてｎが１、２、４もしくは６である請求項１の化合物。
【請求項３】
ＤをＰに連結する結合が生理的条件下で実質的に非加水分解性である請求項１の化合物。
【請求項４】
ＤがＣ１ｓサブコンポーネント、Ｃ１ｒサブコンポーネント、ＭＡＳＰ−２サブコンポーネントに結合するか、もしくはＣ５ａ受容体アンタゴニストである請求項１の化合物。
【請求項５】
Ｄが約１００分子量単位〜約２０００分子量単位の範囲内の分子量を有する小分子である請求項１の組成物。
【請求項６】
Ｄが群：
【化２】
2007535474.tif 000132
［ここで：
ＸはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨもしくはＣ（＝Ｏ）であり、
存在する場合、ＹはＤがＬもしくはＰに連結される場合にＮＨ、Ｃ（＝Ｏ）、グアニジニルもしくは尿素であり、
Ｖはメチル、エチルもしくはＣｌであり、そして
Ｒ6はＨ、Ｃ1〜4アルキル、ＯＨ、Ｃ1〜4アルコキシ、Ｃ1〜4アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノ、フェニル、ピラゾリルもしくはニトロである］
から選択される請求項１の化合物。
【請求項７】
下記式
【化３】
2007535474.tif 000133
［式中：
ＸはＣ又はＮであり；
Ｒ1は−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−ＰＥＧ−ＣＨ3又は−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ2）−ＰＥＧ−ＯＣＨ3であり；
Ｒ2はウレイドまたはグアニジノであり；
Ｒ3はＣ1-4アルキルであり；そして
ＰＥＧは２０〜４０Ｋの分子量を有するポリエチレングリコールである］
を有する請求項１の化合物およびその製薬学的に許容しうる塩。
【請求項８】
【化４】
2007535474.tif 000134
［式中：
ｎは約１７〜約１４００である］
である請求項７の化合物ならびにその製薬学的に許容しうる塩およびエステル。
【請求項９】
４−（２’−アミノ−４’−グアニジノ−６’−メチル−ビフェニル−３−スルホニル）−５−メチルスルファニル−チオフェン−２−カルボキシアミジンのｍＰＥＧ20K２’−ウレアである請求項８の化合物。
【請求項１０】
ビス−トリフルオロ酢酸塩である請求項８の化合物。
【請求項１１】
ビス−塩酸塩である請求項８の化合物。
【請求項１２】
下記式
【化５】
2007535474.tif 000135
を有する６−［３’−（５−カルバミミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−４−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル］ヘキサン酸のＰＥＧ40Kアミド、そのビス−トリフルオロ酢酸もしくはビス塩酸塩、またはその製薬学的に許容しうる塩およびエステルである請求項７の化合物。
【請求項１３】
【化６】
2007535474.tif 000136
［式中：
ｎは約１７〜約１４００である］
である請求項７の化合物。
【請求項１４】
下記式
【化７】
2007535474.tif 000137
を有する６−［３’−（５−カルバミミドイル−２−メチルスルファニル−チオフェン−３−スルホニル）−４−グアニジノ−６−メチル−ビフェニル−２−イルカルバモイル］ヘキサン酸のｍＰＥＧ20-30Kアミドならびにその製薬学的に許容しうる塩およびエステルである請求項７の化合物。
【請求項１５】
ＰＥＧが２０Ｋである請求項１４の化合物。
【請求項１６】
ビス−トリフルオロ酢酸塩である請求項１４の化合物。
【請求項１７】
ビス−塩酸塩である請求項１４の化合物。
【請求項１８】
Ｌが群：
【化８】
2007535474.tif 000138
【化９】
2007535474.tif 000139
【化１０】
2007535474.tif 000140
［ここで、ＡＡはアミノ酸であり、そしてｍは１〜１２である］、
【化１１】
2007535474.tif 000141
［ここで、ＡＡはアミノ酸であり、そしてｍは１〜１２である］、および
【化１２】
2007535474.tif 000142
から選択される請求項１の化合物。
【請求項１９】
Ｐがポリアルキレンオキシド、デキストラン、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、炭水化物に基づくポリマー、および活性化ポリマーよりなる群から選択されるポリマーである請求項１の化合物。
【請求項２０】
Ｐが約７５０式量単位（ｆｏｒｍｕｌａ  ｗｅｉｇｈｔ  ｕｎｉｔ）〜約６０，０００式量単位の分子量を有するモノメチル末端（ｍｏｎｏｍｅｔｈｙｌ−ｔｅｒｍｉｎａｔｅｄ）ポリエチレングリコールである請求項１９の化合物。
【請求項２１】
Ｄが式（ＩＩ）もしくは式（Ｖ）：
【化１３】
2007535474.tif 000143
［式中：
Ｒ1、Ｒ2およびＲ3はＨ、Ｃ1〜4アルキル、アミノ、Ｃ1〜4アルコキシもしくはヒドロキシから独立して選択され；
Ｕはチオフェニル−Ｒ5、ベンジレン、フェニレン、ＮＨもしくは結合であり；
Ｒ5はＳＯ2、ＮＨもしくは結合であり；
Ｚはアリーレン、ヘテロアリーレン、アラルキレン、シクロアルキレン、シクロヘテロエンであり；
ＷはＣ（＝Ｏ）−Ｏ、ＨＣ（ＣＨ3）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）、Ｏ、ＮＨ、Ｓ、ＣＨ2、Ｃ（＝Ｏ）もしくは結合であり；
Ｔはアリーレン、ヘテロアリーレン、アラルキレン、シクロアルキレン、シクロヘテロエン、Ｃ1〜4アルキル、Ｏ、Ｓ、Ｃ1〜4アルコキシ、Ｃ1〜4アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、アミノもしくはニトロであり；
Ｘはアミノ、カルボキシ、ヒドロキシル、チオール、ハロゲン、オレフィン、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、アミノアルキル、カルボキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、メルカプトアルキル、またはＬもしくはＰへの結合であり；
存在する場合、Ｙはアミノ、カルボキシ、ヒドロキシル、チオール、ハロゲン、オレフィン、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、アミノアルキル、カルボキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、メルカプトアルキル、尿素、グアニジニル、またはＬもしくはＰへの結合であり；そして
Ｖはメチル、エチルもしくはＣｌであり；そして
Ｒ4はＨ、Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4アルコキシ、アミジニル、アミノメチル、ＮＨ2、尿素もしくはグアニジニルである］
の化合物であり；
Ｌが群：
【化１４】
2007535474.tif 000144
【化１５】
2007535474.tif 000145
【化１６】
2007535474.tif 000146
［ここで、ＡＡはアミノ酸であり、そしてｍは１〜１２である］、
【化１７】
2007535474.tif 000147
［ここで、ＡＡはアミノ酸であり、そしてｍは１〜１２である］、および
【化１８】
2007535474.tif 000148
から独立して選択される場合による（各出現ごとに）連結基であり；そして
Ｐが式（ＩＩＩ）：
【化１９】
2007535474.tif 000149
［式中：
ＭはＣＨ3、ＨＣ＝ＣＨ−Ｃ（＝Ｏ）、Ｏ＝ＣＨ−ＣＨ2、Ｈ2Ｎ−ＣＨ2−ＣＨ2、Ｃｌ-Ｈ3Ｎ+−ＨＮ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ2、Ｏ＝Ｃ＝Ｎ−ＣＨ2ＣＨ2、ＨＳ−ＣＨ2ＣＨ2、Ｈ2Ｃ＝ＣＨ−Ｓ（＝Ｏ）2−ＣＨ2ＣＨ2、
【化２０】
2007535474.tif 000150
であり；
ｊは１７〜１４００であり；そして
ＡはＯ−ＣＨ2−ＣＨ（＝Ｏ）、Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ2＝ＣＨ2、Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−ＮＨ2、ＮＨ2、Ｏ−ＣＨ2−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ3+Ｃｌ-、ＳＨ、Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、Ｓ（＝Ｏ）2−ＣＨ＝ＣＨ2、
【化２１】
2007535474.tif 000151
である］
を有する活性化ポリマーである請求項１の化合物。
【請求項２２】
患者に請求項１の複合補体インヒビターを投与することを含んでなる、補体カスケードの活性化を抑制するために患者を処置する方法。
【請求項２３】
補体カスケード抑制を必要とする患者が遺伝性血管浮腫、敗血症性ショック、心肺バイパスにおけるポストポンプ（ｐｏｓｔ  ｐｕｍｐ）症候群、発作性夜間血色素尿症、臓器拒絶反応、創傷、脳損傷、喘息、橋本甲状腺炎、全身性エリテマトーデスの糸球体腎炎および皮膚病変、他の糸球体腎炎、水疱性類天疱瘡、疱疹状皮膚炎、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、重症筋無力症、インシュリン抵抗性、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性血小板減少性紫斑病、関節リウマチ、多発性硬化症、神経障害ギラン・バレー症候群、ミラー・フィッシャー症候群ならびにアルツハイマー病よりなる群から選択される疾患にかかっている請求項２２の方法。
【請求項２４】
請求項１の複合補体インヒビターの治療的に有効な量を処置を必要とする哺乳類に投与することを含んでなる、補体カスケードの古典経路もしくはＭＢＬ経路により媒介される急性もしくは慢性疾患の症状を処置する方法。
【請求項２５】
該急性もしくは慢性疾患が炎症、組織損傷もしくは自己免疫性疾患であるか、あるいは卒中、心筋梗塞、出血性ショックもしくは手術、またはその組み合わせの後に起こる請求項２４の方法。
【請求項２６】
該化合物をクローン病の腸炎、再狭窄もしくは乾癬の処置を必要とする哺乳類に、臓器もしくは移植片の移植の前、間もしくは後に、哺乳類によるそのような臓器もしくは移植片の拒絶を改善するために投与するか、または該化合物をＩＬ−２処置、骨髄移植もしくは膵炎の毒性および副作用を減らすために有効な量で、（１）ＩＬ−２での該哺乳類の処置、（２）該哺乳類における骨髄移植もしくは（３）該哺乳類における膵炎の発症の前、間もしくは後に哺乳類に投与する請求項２４の方法。
【請求項２７】
該化合物をアジソン病、Ｉ型糖尿病、橋本甲状腺炎、全身性エリテマトーデスの糸球体腎炎および皮膚病変、他の糸球体腎炎、水疱性類天疱瘡、疱疹状皮膚炎、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、重症筋無力症、インシュリン抵抗性、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性血小板減少性紫斑病、免疫複合体誘発性脈管炎糸球体腎炎、ＩＩ型コラーゲン誘発性関節炎、関節リウマチもしくはアレルギー性神経炎；重症筋無力症（ＭＧ）、関節リウマチもしくは全身性エリテマトーデス；または神経変性疾患と診断されている哺乳類に投与し、ここで該神経変性疾患が多発性硬化症（ＭＳ）、ギラン・バレー症候群（ＧＢＳ）、ミラー・フィッシャー症候群（ＭＦＳ）、アルツハイマー病（ＡＤ）もしくは変異型クロイツフェルト・ヤコブ病（ｖＣＪＤ）であり、または哺乳類が成人呼吸促進症候群の症状もしくは敗血症性ショックを患っている請求項２５の方法。
【請求項２８】
異物を請求項１の複合補体インヒビターと接触させることを含んでなる、個体への異物の挿入に応答する補体活性化を防ぐ方法。
【請求項２９】
異物が外科的インプラント、人工臓器もしくは人工関節である請求項２８の方法。
【国際調査報告】
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