(57)【要約】  本発明は、様々なカズパーゼに対する阻害剤であるイソキサゾール誘導体、当該誘導体の製造方法、および当該誘導体を含む炎症及びアポトーシスを治療する治療用組成物に関するものである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）の化合物、その塩、またはその立体異性体：
【化１】
2007503429.tif 000017
式中、
Ｉ）  Ｒは、Ｈ、単純アルキル鎖（−ＳＡＣ）、単純シクロアルキル鎖（−ＳＣＡＣ）、アリール基（−Ａｒ）、またはアリールで置換された単純アルキル鎖（−ＳＡＣ−Ａｒ）を表し、
ＩＩ）  Ｒ1は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒ、または全ての天然アミノ酸の側鎖残基を表し；式（１）の化合物は、Ｒ1が結合した炭素原子がＲ1によりステレオセンターになるときに、特異なジアステレオマー体、またはその混合物として存在していてもよく；または、Ｒ1がカルボキシル基部分を含むアミノ酸の側鎖残基であるときに、エステル体（−ＣＯ2Ｒ3；ここで、Ｒ3は−ＳＡＣ）、またはスルホンアミド体（−ＣＯＮＨＳＯ2Ｒ4；ここで、Ｒ4は−ＳＡＣ）の形で保護基を有していてもよく、或いは薬学上許容される塩の形で存在していてもよく；または、Ｒ1が塩基性部分を含むアミノ酸の側鎖残基であるときに、薬学上許容される塩形態の形で存在していてもよく、
ＩＩＩ）  Ｒ2は−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒ、または天然アミノ酸の側鎖残基を表し；式（１）の化合物は、Ｒ2が結合した炭素原子がＲ2によりステレオセンターになるときに、特異なジアステレオマ体、またはその混合物で存在していてもよく；Ｒ2がカルボキシル基部分を含むアミノ酸の側鎖残基であるときに、エステル体（−ＣＯ2Ｒ5；ここで、Ｒ5は−ＳＡＣである。）、またはスルホンアミド体（−ＣＯＮＨＳＯ2Ｒ6；ここで、Ｒ6は−ＳＡＣである。）の形で保護基を有していてもよく、或いは薬学上許容される塩の形で存在していてもよく；または、Ｒ2が塩基性部分を含むアミノ酸の側鎖残基であるときに、薬学上許容される塩形態の形で存在していてもよく、または
Ｒ2は、さらに、Ｈ；−（ＣＨ2）nＯＲ7（ここで、Ｒ7は−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒであり、ｎ＝１または２）；または−（ＣＨ2）nＯＣ（＝Ｏ）Ｒ8（ここで、Ｒ8は−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒであり、ｎ＝１または２）を表し、
ＩＶ）  Ａは、−（ＣＨ2）n−（ｎ＝０〜４）、−Ｏ−（ＣＨ２）n−（ｎ＝０〜４）、または−ＮＲ9−（ＣＨ2）n−（ｎ＝０〜４）（ここで、Ｒ9は−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒ）を表し、
Ｖ）  Ｂは、Ｈ、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒを表し、または、
ＶＩ）  Ｒ及びＲ1は、それらが結合した炭素原子と共に環を形成していてもよく、この場合、−Ｒ−Ｒ1−は、−（ＣＨ２）n−、−（ＣＨ2）n−Ｏ−（ＣＨ2）m−、または−（ＣＨ2）n−ＮＲ10−（ＣＨ2）m−（ここで、ｎ＋ｍ＜９であり、Ｒ10は−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒ、−Ｃ（=Ｏ）−ＳＡＣ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＳＣＡＣ、−Ｃ（=Ｏ）−Ａｒ、または−Ｃ（=Ｏ）−ＳＡＣ−Ａｒ）を表し、
ＶＩＩ）  Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2ＯＲ11（ここで、Ｒ11は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒ）；−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ12（ここで、Ｒ12は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒ）；−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯ2Ｒ13（ここで、Ｒ13は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒ）；−ＣＨ＝ＣＨ−ＳＯ2Ｒ14（ここで、Ｒ14は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒ）；−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ2；または−ＣＯＣＨ2−Ｗ（ここで、Ｗは、−Ｎ2、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＲ15Ｒ16（ここで、Ｒ15及びＲ16は、それぞれ−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒであるか、或いは共に結合して３〜６員の飽和または不飽和環状基を形成していてもよい）、−ＳＲ17（ここで、Ｒ17は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒである）、または下記式を表す：
【化２】
2007503429.tif 000018
式中、
Ｙは、Ｈ、−ＯＨ、−ＯＲ18（Ｒ18＝−ＳＡＣまたは−ＳＣＡＣ）、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ19（Ｒ19＝−Ｈ、−ＳＡＣ、または−ＳＣＡＣ）、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＣＮ、−ＮＣ、−Ｎ3、−ＣＯ2Ｈ、ＣＦ3、−ＣＯ2Ｒ20（Ｒ20＝−ＳＡＣまたは−ＳＣＡＣ）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ21（Ｒ21＝−ＳＡＣまたは−ＳＣＡＣ）、または−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ22Ｒ23（Ｒ22及びＲ23は、それぞれ−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または-ＳＡＣ−Ａｒである）であり、
Ｒ24は、Ｈ、−ＳＡＣ、−ＳＡＣ−Ａｒ、または−Ａｒである。
【請求項２】
ＲがＨを表す請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ1が、−ＣＨ2ＣＯＯＨ、−ＣＨ2ＣＯＯＲ3（Ｒ3＝ＳＡＣ）、または−ＣＨ2ＣＯＮＨＳＯ2Ｒ4（Ｒ4＝ＳＡＣ）を表す請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ2が、Ｈ、−ＳＡＣ、−Ａｒ、または−（ＣＨ2）nＯＲ7（Ｒ7＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒであり、ｎ＝１または２）を表す請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｘが、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2ＯＡｒ、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2ＯＣ（＝Ｏ）Ａｒ、または−ＣＯＣＨ2−Ｗ［ここで、Ｗは−Ｎ2、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＲ15Ｒ16（ここで、Ｒ15及びＲ16は、それぞれ−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒであるか、または共に結合して３〜６員の飽和または不飽和環状基を形成していてもよい）］、または−ＳＲ17（ここで、Ｒ17は−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒ）を表す請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｉ）  ＲがＨを表し、
ＩＩ）  Ｒ1が、−ＣＨ2ＣＯＯＨ、−ＣＨ2ＣＯＯＲ3（Ｒ3＝ＳＡＣ）、または−ＣＨ2ＣＯＮＨＳＯ2Ｒ4（Ｒ4＝ＳＡＣ）を表し、
ＩＩＩ）  Ｒ2が、Ｈ、−ＳＡＣ、−Ａｒ、または−（ＣＨ2）nＯＲ7（Ｒ7＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒ；ｎ＝１または２）を表し、
ＩＶ）  Ａが−（ＣＨ2）n−（ｎ＝０〜４）または−Ｏ−（ＣＨ2）n−（ｎ＝０〜４）を表し、
Ｖ）  Ｂが、Ｈ、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒを表し、
ＶＩ）  Ｘが−ＣＯＣＨ2Ｎ2、−ＣＯＣＨ2Ｆ、−ＣＯＣＨ2Ｃｌ、−ＣＯＣＨ2Ｂｒ、−ＣＯＣＨ2Ｉ、−ＣＯＣＨ2ＯＡｒ、−ＣＯＣＨ2ＯＣＯＡｒまたは−ＣＯＣＨ2ＳＲ17（ここで、Ｒ17は−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒ）を表す請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
下記群から選択される請求項１に記載の化合物：
（１）  （３Ｓ）−５−［（２，６−ジクロロベンゾイル）オキシ］−３−（｛［５−メチル−３−フェニル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ）;
（２）  （３Ｓ）−３−（｛［５−メチル−３−フェニル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−フェノキシペンタン酸（Ｉｂｂ）;
（３）  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−フェニル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｃｃ）;
（４）  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（１−ナフチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｄｄ）;
（５）  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（２−ナフチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｅｅ）;
（６）  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｆｆ）;
（７）  ３−（｛［５−エチル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｇｇ）;
（８）  エチル  ３−（｛［５−エチル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタノエート（Ｉｈｈ）;
（９）  ５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｉｉ）;
（１０）  ３−（｛［５−エチル−３−（４−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｊｊ）;
（１１）  ３−（｛［３−（ベンゾチオフェン−２−イル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｋｋ）;
（１２）  （３Ｓ）−３−（｛［３−（１，３−ジメチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｌｌ）;
（１３）  ３−（｛［３−（１，３−ジメチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｍｍ）;
（１４）  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（１−ナフチルメチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｎｎ）;
（１５）  （３Ｓ）−５−［（２，６−ジクロロベンゾイル）オキシ］−３−［（｛５−エチル−３−［２−（１−ナフチル）エチル］−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−４−オキソペンタン酸（Ｉｏｏ）;
（１６）  （３Ｓ）−３−［（｛５−エチル−３−［（１−ナフチルオキシ）メチル］−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｐｐ）;
（１７）  （３Ｓ）−３−｛［（３−｛［（４−クロロ−１−ナフチル）オキシ］メチル｝−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル）カルボニル］アミノ｝−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｑｑ）;
（１８）  （３Ｓ，４Ｅ）−６−エトキシ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−６−オキソ−４−ヘキセン酸（Ｉｒｒ）;
（１９）  （３Ｓ，４Ｅ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−（メチルスルホニル）−４−ペンテン酸（Ｉｓｓ）;
（２０）  ５−フルオロ−３−（｛［（５Ｓ）−３−（１−イソキノリニル）−５−プロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｔｔ）;
（２１）  ３−（｛［（５Ｓ）−５−エチル−３−（１−ナフチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｕｕ）;
（２２）  ３−（｛［（５Ｓ）−５−エチル−３−（２−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｖｖ）;
（２３）  ３−（｛［（５Ｒ）−５−エチル−３−（３−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｗｗ）;
（２４）  ３−（｛［５−エチル−３−（８−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｘｘ）;
（２５）  ３−（｛［５−エチル−３−（３−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｙｙ）;
（２６）  ５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（２−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｚｚ）;
（２７）  ３−（｛［５−エチル−３−（２−イソプロピルフェニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１）;
（２８）  ３−［（｛３−［３−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル］−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ２）;
（２９）  ３−［（｛３−［４−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル］−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ３）;
（３０）  ５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（２−イソプロピルフェニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ４）;
（３１）  ３−［（｛（５Ｒ）−３−［３−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル］−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ５）;
（３２）  ３−｛［（３−［１，１’−ビフェニル］−３−イル−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル）カルボニル］アミノ｝−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ６）;
（３３）  ３−（｛［５−エチル−３−（２−ピリジニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ７）;
（３４）  ３−［（｛３−［４−（ｔｅｒｔ−ブチル）−２−ピリジニル］−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ８）；
（３５）  ３−［（｛（５Ｒ）−３−［４−（ｔｅｒｔ−ブチル）−２−ピリジニル］−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル］アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ９）；
（３６）  ３−（｛［５−エチル−３−（４−イソブチル−２−ピリジニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１０）；
（３７）  ３−（｛［３−（４−アセチル−２−ピリジニル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１１）；
（３８）  ３−（｛［３−（４−シクロプロピル−２−ピリジニル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１２）；
（３９）  ３−（｛［３−（４−シクロペンチル−２−ピリジニル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１３）；
（４０）  ３−（｛［（５Ｒ）−３−（４−シクロペンチル−２−ピリジニル）−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１４）；
（４１）  ３−（｛［３−（４−シクロヘキシル−２−ピリジニル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１５）；
（４２）  ３−（｛［５−エチル−３−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１６）；
（４３）  ５−フルオロ−３−（｛［５−イソプロピル−３−（４−フェニル−２−ピリジニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１７）；
（４４）  （３Ｓ）−５−［（ジフェニルホスホリル）オキシ］−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１８）；
（４５）  （３Ｓ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−｛［１−フェニル−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］オキシ｝ペンタン酸（Ｉａａ１９）；
（４６）（３Ｓ）−５−［（４−ベンジル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−３−フラニル）オキシ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ２０）；
（４７）  （３Ｓ）−５−（イソブチリルオキシ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ２１）；
（４８）  （３Ｓ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−ヘキセン酸（Ｉａａ２２）；
（４９）  （３Ｓ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２−ピリジニルオキシ）ペンタン酸（Ｉａａ２３）；
（５０）  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（２−イソプロピルフェニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２−ピリジニルオキシ）ペンタン酸（Ｉａａ２４）；
（５１）  ２−｛［（３Ｓ）−４−カルボキシル−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−２−オキソブチル］オキシ｝−１−メチルピリジウム  トリフルオロメタンスルホネート（Ｉａａ２５）；
（５２）  ２−｛［（３Ｓ）−４−カルボキシ−３−（｛［５−エチル−３−（２−イソプロピルフェニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−２−オキソブチル］オキシ｝−１−メチルピリジウム  トリフルオロメタンスルホネート（Ｉａａ２６）；
（５３）  ３−（｛［３−（５−クロロ−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ２７）；
（５４）  ３−（｛［３−（１，５−ジメチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ２８）；及び
（５５）  （３Ｓ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｉｉ−１）。
【請求項８】
５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｉｉ）である請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
下記式（１ａ）の化合物：
【化３】
2007503429.tif 000019
式中、
Ａ、Ｂ、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、及びＸは請求項１と同義である。
【請求項１０】
（３Ｓ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｉｉ−１）である請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
請求項１０に記載で定義された化合物（Ｉｉｉ−１）を製造するための方法であって、
（３Ｓ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸、及び（３Ｒ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸の混合物を、メチル−ｔ−ブチルエーテルに溶解するステップ、
シード物質として（３Ｓ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸の結晶を少量添加して結晶を得るステップ、及び
この結晶を酢酸エチル／ｎ−ヘキサン混合溶媒から再結晶するステップ、
を含む方法。
【請求項１２】
薬学上許容される担体と共に、活性成分として請求項１で定義された式（１）のカスパーゼ阻害化合物、その塩、またはその立体異性体を含有する炎症及びアポトーシスを抑制するための治療用組成物。
【請求項１３】
認知症、脳卒中、ＡＩＤＳによる脳損傷、糖尿病、胃潰瘍、肝炎による脳損傷、肝炎による肝疾患、急性肝炎、劇症肝不全、肝硬変、敗血症、臓器移植拒絶反応、リウマチ性関節炎、または虚血性心臓疾患による心臓アポトシースに対する治療剤である請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
急性肝炎または肝硬変に対する治療剤である請求項１２に記載の組成物。
【請求項１５】
リウマチ性関節炎に対する治療剤である請求項１２に記載の組成物。
【請求項１６】
経口剤、注射剤、またはパッチ剤として製剤化されたものである請求項１２に記載の組成物。
【請求項１７】
請求項８に定義された化合物（Ｉｉｉ）を活性成分として含有する請求項１２に記載の組成物。
【請求項１８】
請求項１０に定義された化合物（Ｉｉｉ−１）を活性成分として含有する請求項１２に記載の組成物。
【請求項１９】
薬学上許容される担体に、請求項１に定義された式（１）のカスパーゼ阻害化合物、その塩、またはその立体異性体を混合することを含む、請求項１２に定義された炎症及びアポトーシスを抑制するための治療用組成物の製造方法。
【請求項２０】
消炎及びアポトーシスに罹患した患者に、請求項１に定義された式（１）のカスパーゼ阻害化合物、その塩、またはその立体異性体の有効量を投与することを含む消炎及びアポトーシスの抑制方法。
【請求項２１】
消炎及びアポトーシスの抑制のための、請求項１に定義された式（１）のカスパーゼ阻害化合物、その塩、またはその立体異性体の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カスパーゼ−１［インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）］及びカスパーゼ−３［アポパイン／ＣＰＰ−３２］を含む各種カスパーゼに対する阻害剤としてのイソキサゾリン誘導体、その製造方法、並びにそれを含有する炎症及びアポトーシスを抑制するための治療用組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
カスパーゼは、過去１０年間で発見されたα2β2形態をしている新しい種類のシステインプロテアーゼである。それらの約１４種類が、現在まで知られている。その中の１つであるカスパーゼ−１（ＩＣＥ）はサイトカインの一種であり、不活性プロインターロイキン−１βの活性インターロイキン−１βへの変換に関与する。インターロイキン−１はインターロイキン−１αとインターロイキン−１βとからなり、その両方は、３１ＫＤａの前駆体の形態に単核細胞で合成される。そのうち、プロインターロイキン−１βのみがＩＣＥにより活性化される。カスパーゼ−１により加水分解される位置は、Ａｓｐ27−Ｇｌｙ28とＡｓｐ116−Ａｌａ117である。後者位置における加水分解は、インターロイキン-１βを与える。インターロイキン−１βは、炎症を引き起こす重要な媒介体として作用することが報告れている（参考文献１，３）。カスパーゼ−１は１９８９年に初めて発見され、２つの独立した研究グループによって、その３次元的な構造がＸ−ｒａｙ結晶学的方法により決定された。
【０００３】
カスパーゼ−３（ＣＰＰ−３２）は、その役割や作用メカニズムが広く研究されており、その３次元的構造は１９９６年に決定された（参考文献２）。プロカスパーゼ−３から活性化されたカスパーゼ−３（アポパイン）は、（Ｐ４）Ａｓｐ−Ｘ−Ｘ−Ａｓｐ（Ｐ１）モチーフを加水分解し、その公知の基質としては、ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ、Ｕ１  ７０，０００  Ｍｒ小核リボ核酸タンパク質及び４６０，０００  ＭｒのＤＮＡ−依存性プロテインキナーゼの触媒的サブユニットなどが含まれる。カスパーゼ−７のＸ−ｒａｙ構造は、カスパーゼ−３のそれとかなり類似していることが報告されている（参考文献４）。
【０００４】
カスパーゼ−８と９はカスパーゼ−３、６、７の上流に存在し、これらカスパーゼは、アポトーシスカスケードに関与していることが知られている。カスパーゼ−８のＸ−ｒａｙ構造は、１９９９年に決定され（参考文献５）、特にその阻害剤は、を投与することでアポトーシスに関連する疾患を治療するために使用でき得る。
【０００５】
カスパーゼ阻害剤とは、カスパーゼ活性を阻害し、カスパーゼの活性により誘発される炎症やアポトーシスなどの症状をコントロールする化合物を意味する。当該阻害剤を投与することにより治療又は軽減できる疾患又は症状としては、下記が含まれる：リウマチ性関節炎、炎症性腸疾患、移植片対宿主疾患、敗血症、骨関節炎、骨粗鬆症、急性及び慢性骨髄白血病、脳膜炎、卵管炎、敗血性ショック、胆管炎、大腸炎、脳炎、心内膜炎、糸球体腎炎、肝炎、心筋炎、膵臓炎、１型糖尿病、多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、肝硬変（参考文献６）。
【０００６】
これまで知られているカスパーゼ阻害剤の中で、最も知られた非可逆的阻害剤は、以下通りである。
【０００７】
【化１】
2007503429.tif 000002
【０００８】
上記両阻害剤は、酵素を非可逆的に不活性化して細胞アポトーシスを抑制するという共通のメカニズムを示す（非可逆的、広範囲−スペクトル阻害剤）。非可逆的な阻害剤と可逆的な阻害剤を比較すると、非可逆的阻害剤は可逆的な阻害剤より極めて高い効果を有することが報告されている（参考文献７）。ＩＤＵＮ社のＩＤＮ−１９６５とＭａｘｉｍ社のＭＸ−１０１３は、何れも、肝損傷の細胞アポトーシスモデルで活性を示すと報告された（参考文献８，９）。これらの化合物は、現在、前臨床試験段階にある。最近に構造が報告された非可逆的阻害剤であるＩＤＮ−６５５６は、肝損傷抑制剤としての第２相臨床試験段階が進行中である（参考文献１０，１１）。
【０００９】
【化２】
2007503429.tif 000003
【００１０】
参考文献：
（１）Inflammation：Basic Principles and Clinical Correlates，2nd ed．，ed by Gallin，Goldstein and Snyderman．Raven Press Ltd．，New York．1992，pp211-232；Blood，1996，87(6)，2095-2147
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（４）Wei，Y．et al，Chemistry and Biology，2000，7，423
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糖尿病：Diabetes 2002 Jun；51(6)：1938-48，高血糖症により誘発されるマウス心筋におけるアポトーシス：ミトコンドリアシトクロームＣが媒介するカスパーゼ３の活性化経路。Cai L，Li W，Wang G，Guo L，Jiang Y，Kang YJ
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劇症肝不全（Fulminant hepatic failure）： Gastroenterology 2000 Aug；119(2)：446-60，ヒトおよびマウスの劇症肝不全の発病における腫瘍壊死因子。Streetz K，Leifeld L，Grundmann D，Ramakers J，Eckert K，Spengler U，Brenner D，Manns M，Trautwein C
敗血症：Nat Immunol 2000 Dec；1(6)：496-501，カスパーゼ阻害剤は、敗血症において生存率を改善する：リンパ球の臨床的な役割。Hotchkiss RS，Chang KC，Swanson PE，Tinsley KW，Hui JJ，Klender P，Xanthoudakis S，Roy S，Black C，Grimm E，Aspiotis R，Han Y，Nicholson DW，Karl IE
臓器移植拒絶反応：Xenotransplantation 2001 May；8(2)：115-24，In vitro prevention of cell-mediated ＣｒｍＡを形質導入したブタ腎臓におけるＦａｓ／ＦａｓＬ経路を経由するin vitro細胞媒介性の異種移植拒絶。Fujino M，Li XK，Suda T，Hashimoto M，Okabe K，Yaginuma H，Mikoshiba K，Guo L，Okuyama T，Enosawa S，Amemiya H，Amano T，Suzuki S
リウマチ性関節炎：Prog Med Chem 2002；39：1-72，抗炎症及び抗アポトーシス剤としてのカスパーゼ阻害剤。Graczyk PP
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抗炎症（Anti-inflammation）： J Immunol 2003 Mar 15；170(6)：3386-91，広いスペクトルを有するカスパーゼ阻害剤は、マウスの喘息モデルにおけるアレルギー気道の炎症を軽減する。Iwata A，Nishio K，Winn RK，Chi EY，Henderson WR Jr，Harlan JM
肝硬変：ｉ）J Pharmacol Exp Ther．2004 Mar；308(3)：1191-6，カスパーゼ阻害剤であるＩｄｎ−６５５６は、胆汁菅を結紮したマウスにおける肝障害と繊維症を軽減する。Canbay A.，Fledstein A.，Baskiｎ−Bey E.，Bronk FS． Gores GJ.；ｉｉ）Hepatology．2004 Feb；39(2)：273-8，アポトーシス：肝障害と繊維形成との関係。Canbay A，Friedman S，Gores GJ.；ｉｉｉ）Hepatology．2003 Nov；38(5)：1188-98，アポトーシス体のクッパー細胞の呑食は、デスリガンドとサイトカインの発現を刺激する。Canbay A，Feldstein AE，Higuchi H，Werneburg N，Grambihler A，Bronk SF，Gores GJ
（７）Wu J．et al，Methods：A Companion to Methods in Enzymology，1999，17，320
（８）Hoglen N．C．et al，J．of Pharmacoloy and Experimental Therapeutics，2001，297，811
（９）Jaeschke H．et al，Toxicology and Applied Pharmacology，2000，169，77
（１０）Hoglen N.C．et al，J．Pharmacol Exp．Ther．，2004，309(2)：634．ＩＤＮ−６５５６（３−［２−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニルアミノオギザリル）−アミノ］−プロピオニルアミノ］−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸）の特性：肝臓を標的とするカスパーゼ阻害剤；
（１１）Canbay A et al，J．Pharmacol．Exp．Ther.，2004，308(3)，1191．カスパーゼ阻害剤であるＩＤＮ−６５５６は、胆汁菅を結紮したマウスの肝障害と繊維症を軽減する。
【発明の開示】
【００１１】
本発明者らは、カスパーゼに対する効果的な阻害剤として使い得るものであり、特徴的な構造と類似な酵素に対する高い選択性を有する化合物を新たにデザインして合成し、それらのカスパーゼに対する結合能と阻害活性を測定した。その結果、本発明者らは、下記式（１）の化合物がその様な要求を満たすことを見出し、本発明を完成した。
【００１２】
【化３】
2007503429.tif 000004
式中、Ａ、Ｂ、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2及びＸは、下記と同義である。
【００１３】
即ち本発明は、カスパーゼに対する有効な阻害活性を有する式（１）の新規なイソキサゾリン誘導体、その塩、またはその立体異性体を提供するものである。
【００１４】
本発明のもう１つの目的は、式（１）の化合物、その塩、またはその立体異性体を製造するための方法を提供することにある。
【００１５】
また、本発明のもう１つの目的は、組成物、用途、又はカスパーゼの阻害方法、特に、薬学上許容される担体と共に、活性成分として式（１）の化合物、その塩、またはその立体異性体を含有する組成物、用途、又は炎症及びアポトーシスを抑制するための方法を提供することにある。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
本発明を詳細に説明する前に、下記重要用語を定義する：
【００１７】
ａ）単純アルキル鎖（Simple Alkyl Chain；以下、「ＳＡＣ」）は、直鎖状または分枝状の異性体の何れかに炭素原子１〜８を有する炭化水素を意味する。
【００１８】
ｂ）単純シクロアルキル鎖（Simple Cyclo Alkyl Chain；以下、「ＳＣＡＣ」）は、炭素数３〜１０を有する環状ラジカルを意味する。
【００１９】
ｃ）アリール基（以下、「Ａｒ」）は、芳香族基と複素芳香族基を両方含む。芳香族基は５〜１５員の単純または縮合不飽和環である。１以上の水素は、アシル、アミノ、カルボアルコキシ、カルボキシ、カルボキシアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、ニトロ、チオール、アルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アリールオキシ、スルホキシ、及びグアニド基から選択される基で置換されていてもよい。複素芳香族基は、酸素、硫黄、及び窒素よりなる群から選択された１〜５個のヘテロ原子を有する芳香族基である。同様に、１以上の水素は、アシル、アミノ、カルボアルコキシ、カルボキシ、カルボキシアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、ニトロ、チオール、アルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アリール、アリールオキシ、スルホキシ、グアニド基から選択される基で置換されていてもよい。または、例えばピリジルの場合、窒素原子にアルキル基を加え、ピリジル基を、窒素原子上に正の電荷を有するピリジニウム基に変換し得る。
【００２０】
アリール基には、フェニル、ビフェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、ピリジニル、Ｎ−アルキルピリジニウム、ピリミジニル、キノリニル、ベンゾチエニル、インドリル、ピラジニル、イソインドリル、イソキノリル、キナゾリニル、キノキサリニル、フタラジニル、イミダゾリニル、イソキサゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、インドリジニル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、チエニル、ピロリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾロピリジニル、イミダゾピリジニル、イソチアゾリル、シンノリニル、カルバゾリル、イソクロマニル、クロマニル、テトラヒドロイソキノリニル、イソインドリニル、イソベンゾテトラヒドロフラニル、イソベンゾテトラヒドロチエニル、イソベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、ピリドピリジニル、ベンゾテトラヒドロフラニル、ベンゾテトラヒドロチエニル、プリニル、ベンゾジオキソリル、トリアジニル、フェノキサジニイル、フェノチアジニイル、プテリジニル、ベンゾチアゾリル、イミダゾピリジニル、イミダゾチアゾリル、ジヒドロベンズイソキサジニル、ベンズイソキサジニル、ベンゾキサジニル、ジヒドロベンズイソチオピラニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、クマリニル、イソクマリニル、クロモニル、クロマノニル、ピリジニル−Ｎ−オキサイド、テトラヒドロキノリニル−Ｎ−オキサイド、ジヒドロキノリニル、ジヒドロキノリノニル、ジヒドロイソキノリノニル、ジヒドロクマリニル、ジヒドロイソクマリニル、イソインドリノニル、ベンゾジオキサニル、ベンゾキサゾリノニル、Ｎ−アルキル−ピリジウム、ピロリル−Ｎ−オキサイド、ピリミジニル−Ｎ−オキサイド、ピラジニル−Ｎ−オキサイド、キノリニル−Ｎ−オキサイド、インドリル−Ｎ−オキサイド、インドリニル−Ｎ−オキサイド、イソキノリル−Ｎ−オキサイド、キナゾリニル−Ｎ−オキサイド、キノキサリニル−Ｎ−オキサイド、フタラジニル−Ｎ−オキサイド、イミダゾリニル−Ｎ−オキサイド、イソキサゾリルＮ−オキサイド、オキサゾリル−Ｎ−オキサイド、チアゾリル−Ｎ−オキサイド、インドリジニル−Ｎ−オキサイド、インダゾリル−Ｎ−オキサイド、ベンゾチアゾリル−Ｎ−オキサイド、ベンズイミダゾリル−Ｎ−オキサイド、ピロリル−Ｎ−オキサイド、オキサジアゾリル−Ｎ−オキサイド、チアジアゾリル−Ｎ−オキサイド、トリアゾリル−Ｎ−オキサイド、テトラゾリル−Ｎ−オキサイドなどが含まれる。
【００２１】
ｄ）アリールで置換された単純アルキル鎖（以下、「ＳＡＣ−Ａｒ」）は、上述したアリール基で置換された炭素数１〜８の直鎖状または分枝状のアルキル基を意味する。
【００２２】
ｅ）天然アミノ酸には、グリシン、アラニン、バリン、ルイシン、イソルイシン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、プロリン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンが含まれる。
【００２３】
ｆ）単純エステルの保護基は、直鎖状または分枝状の異性体の何れかの炭素数１〜８個を有する炭化水素である。
【００２４】
また、本明細書は下記略語を含む：
Ｎ−クロロスクシンイミド：ＮＣＳ
Ｎ−メチルモルホリン：ＮＭＭ
Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェイト： ＨＡＴＵ
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド：ＤＭＦ
１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド：ＥＤＣ
１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物：ＨＯＢｔ
トリフルオロ酢酸：ＴＦＡ
ｔ−ブトキシカルボニル：Ｂｏｃ
ベンジルオキシカルボニル：Ｃｂｚ
メチル：Ｍｅ
エチル：Ｅｔ
当量：Ｅｑ
【００２５】
上記式（１）の置換基は、具体的には以下の通り定義される。
【００２６】
Ｉ）  Ｒは、Ｈ、単純アルキル鎖（−ＳＡＣ）、単純シクロアルキル鎖（−ＳＣＡＣ）、アリール基（−Ａｒ）、またはアリールで置換された単純アルキル鎖（−ＳＡＣ−Ａｒ）を表し、
ＩＩ）  Ｒ1は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒ、または全ての天然アミノ酸の側鎖残基を表し；式（１）の化合物は、Ｒ1が結合した炭素原子がＲ1によりステレオセンターになるときに、特異なジアステレオマー体、またはその混合物として存在していてもよく；または、Ｒ1がカルボキシル基部分を含むアミノ酸の側鎖残基であるときに、エステル体（−ＣＯ2Ｒ3；ここで、Ｒ3は−ＳＡＣ）、またはスルホンアミド体（−ＣＯＮＨＳＯ2Ｒ4；ここで、Ｒ4は−ＳＡＣ）の形で保護基を有していてもよく、或いは薬学上許容される塩の形で存在していてもよく；または、Ｒ1が塩基性部分を含むアミノ酸の側鎖残基であるときに、薬学上許容される塩形態の形で存在していてもよく、
ＩＩＩ）  Ｒ2は−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒ、または天然アミノ酸の側鎖残基を表し；式（１）の化合物は、Ｒ2が結合した炭素原子がＲ2によりステレオセンターになるときに、特異なジアステレオマ体、またはその混合物で存在していてもよく；Ｒ2がカルボキシル基部分を含むアミノ酸の側鎖残基であるときに、エステル体（−ＣＯ2Ｒ5；ここで、Ｒ5は−ＳＡＣである。）、またはスルホンアミド体（−ＣＯＮＨＳＯ2Ｒ6；ここで、Ｒ6は−ＳＡＣである。）の形で保護基を有していてもよく、或いは薬学上許容される塩の形で存在していてもよく；または、Ｒ2が塩基性部分を含むアミノ酸の側鎖残基であるときに、薬学上許容される塩形態の形で存在していてもよく、または
Ｒ2は、さらに、Ｈ；−（ＣＨ2）nＯＲ7（ここで、Ｒ7は−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒであり、ｎ＝１または２）；または−（ＣＨ2）nＯＣ（＝Ｏ）Ｒ8（ここで、Ｒ8は−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒであり、ｎ＝１または２）を表し、
ＩＶ）  Ａは、−（ＣＨ2）n−（ｎ＝０〜４）、−Ｏ−（ＣＨ２）n−（ｎ＝０〜４）、または−ＮＲ9−（ＣＨ2）n−（ｎ＝０〜４）（ここで、Ｒ9は−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒ）を表し、
Ｖ）  Ｂは、Ｈ、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒを表し、または、
ＶＩ）  Ｒ及びＲ1は、それらが結合した炭素原子と共に環を形成していてもよく、この場合、−Ｒ−Ｒ1−は、−（ＣＨ２）n−、−（ＣＨ2）n−Ｏ−（ＣＨ2）m−、または−（ＣＨ2）n−ＮＲ10−（ＣＨ2）m−（ここで、ｎ＋ｍ＜９であり、Ｒ10は−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒ、−Ｃ（=Ｏ）−ＳＡＣ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＳＣＡＣ、−Ｃ（=Ｏ）−Ａｒ、または−Ｃ（=Ｏ）−ＳＡＣ−Ａｒ）を表し、
ＶＩＩ）  Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2ＯＲ11（ここで、Ｒ11は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒ）；−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ12（ここで、Ｒ12は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒ）；−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯ2Ｒ13（ここで、Ｒ13は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒ）；−ＣＨ＝ＣＨ−ＳＯ2Ｒ14（ここで、Ｒ14は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒ）；−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ2；または−ＣＯＣＨ2−Ｗ（ここで、Ｗは、−Ｎ2、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＲ15Ｒ16（ここで、Ｒ15及びＲ16は、それぞれ−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒであるか、或いは共に結合して３〜６員の飽和または不飽和環状基を形成していてもよい）、−ＳＲ17（ここで、Ｒ17は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒである）、または下記式を表す：
【００２７】
【化４】
2007503429.tif 000005
【００２８】
式中、
Ｙは、Ｈ、−ＯＨ、−ＯＲ18（Ｒ18＝−ＳＡＣまたは−ＳＣＡＣ）、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ19（Ｒ19＝−Ｈ、−ＳＡＣ、または−ＳＣＡＣ）、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＣＮ、−ＮＣ、−Ｎ3、−ＣＯ2Ｈ、ＣＦ3、−ＣＯ2Ｒ20（Ｒ20＝−ＳＡＣまたは−ＳＣＡＣ）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ21（Ｒ21＝−ＳＡＣまたは−ＳＣＡＣ）、または−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ22Ｒ23（Ｒ22及びＲ23は、それぞれ−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または-ＳＡＣ−Ａｒである）であり、
Ｒ24は、Ｈ、−ＳＡＣ、−ＳＡＣ−Ａｒ、または−Ａｒである。
【００２９】
上記式（１）の化合物中でも好ましい化合物は、式中、
ＲはＨを表し；
Ｒ1は、−ＣＨ2ＣＯＯＨ、−ＣＨ2ＣＯＯＲ3（Ｒ3＝ＳＡＣ）、または−ＣＨ2ＣＯＮＨＳＯ2Ｒ4（Ｒ4＝ＳＡＣ）を表し；
Ｒ2は、Ｈ、−ＳＡＣ、−Ａｒ、または−（ＣＨ2）nＯＲ7（Ｒ7＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒ、ｎ＝１または２）を表し；または
Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2ＯＡｒ、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2ＯＣ（＝Ｏ）Ａｒ、または−ＣＯＣＨ2−Ｗ［ここで、Ｗは、−Ｎ2、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＲ15Ｒ16（ここで、Ｒ15及びＲ16はそれぞれ独立して−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒであるか、または共に結合して３〜６員の飽和若しくは不飽和環状基を形成していてもよい。）］、または−ＳＲ17（ここで、Ｒ17は−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒ）を表す。
【００３０】
上記式（１）の化合物中で、さらに好ましい化合物は、式中、
Ｉ）  ＲはＨを表し、
ＩＩ）  Ｒ1は、-ＣＨ2ＣＯＯＨ、−ＣＨ2ＣＯＯＲ3（Ｒ3＝ＳＡＣ）、または-ＣＨ2ＣＯＮＨＳＯ2Ｒ4（Ｒ4＝ＳＡＣ）を表し、
ＩＩＩ）  Ｒ2は、Ｈ、−ＳＡＣ、−Ａｒ、または−（ＣＨ2）nＯＲ7（Ｒ7＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒ；ｎ＝１または２）を表し、
ＩＶ）  Ａは、−（ＣＨ2）n−（ｎ＝０−４）または−Ｏ−（ＣＨ2）n−（ｎ＝０〜４）を表し、
Ｖ）  Ｂは、Ｈ、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、または−ＳＡＣ−Ａｒを表し、
ＶＩ）  Ｘは、−ＣＯＣＨ2Ｎ2、−ＣＯＣＨ2Ｆ、−ＣＯＣＨ2Ｃｌ、−ＣＯＣＨ2Ｂｒ、−ＣＯＣＨ2Ｉ、−ＣＯＣＨ2ＯＡｒ、−ＣＯＣＨ2ＯＣＯＡｒまたは−ＣＯＣＨ2ＳＲ17（ここで、Ｒ17は−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒ）を表す。
【００３１】
特に、好ましい化合物は下記群から選択される：
（１）  （３Ｓ）−５−［（２，６−ジクロロベンゾイル）オキシ］−３−（｛［５−メチル−３−フェニル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ）;
（２）  （３Ｓ）−３−（｛［５−メチル−３−フェニル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−フェノキシペンタン酸（Ｉｂｂ）;
（３）  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−フェニル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｃｃ）;
（４）  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（１−ナフチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｄｄ）;
（５）  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（２−ナフチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｅｅ）;
（６）  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｆｆ）;
（７）  ３−（｛［５−エチル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｇｇ）;
（８）  エチル  ３−（｛［５−エチル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタノエート（Ｉｈｈ）;
（９）  ５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｉｉ）;
（１０）  ３−（｛［５−エチル−３−（４−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｊｊ）;
（１１）  ３−（｛［３−（ベンゾチオフェン−２−イル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｋｋ）;
（１２）  （３Ｓ）−３−（｛［３−（１，３−ジメチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｌｌ）;
（１３）  ３−（｛［３−（１，３−ジメチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｍｍ）;
（１４）  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（１−ナフチルメチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｎｎ）;
（１５）  （３Ｓ）−５−［（２，６−ジクロロベンゾイル）オキシ］−３−［（｛５−エチル−３−［２−（１−ナフチル）エチル］−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−４−オキソペンタン酸（Ｉｏｏ）;
（１６）  （３Ｓ）−３−［（｛５−エチル−３−［（１−ナフチルオキシ）メチル］−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｐｐ）;
（１７）  （３Ｓ）−３−｛［（３−｛［（４−クロロ−１−ナフチル）オキシ］メチル｝−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル）カルボニル］アミノ｝−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｑｑ）;
（１８）  （３Ｓ，４Ｅ）−６−エトキシ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−６−オキソ−４−ヘキセン酸（Ｉｒｒ）;
（１９）  （３Ｓ，４Ｅ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−（メチルスルホニル）−４−ペンテン酸（Ｉｓｓ）;
（２０）  ５−フルオロ−３−（｛［（５Ｓ）−３−（１−イソキノリニル）−５−プロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｔｔ）;
（２１）  ３−（｛［（５Ｓ）−５−エチル−３−（１−ナフチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｕｕ）;
（２２）  ３−（｛［（５Ｓ）−５−エチル−３−（２−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｖｖ）;
（２３）  ３−（｛［（５Ｒ）−５−エチル−３−（３−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｗｗ）;
（２４）  ３−（｛［５−エチル−３−（８−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｘｘ）;
（２５）  ３−（｛［５−エチル−３−（３−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｙｙ）;
（２６）  ５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（２−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｚｚ）;
（２７）  ３−（｛［５−エチル−３−（２−イソプロピルフェニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１）;
（２８）  ３−［（｛３−［３−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル］−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ２）;
（２９）  ３−［（｛３−［４−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル］−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ３）;
（３０）  ５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（２−イソプロピルフェニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ４）;
（３１）  ３−［（｛（５Ｒ）−３−［３−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル］−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ５）;
（３２）  ３−｛［（３−［１，１’−ビフェニル］−３−イル−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル）カルボニル］アミノ｝−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ６）;
（３３）  ３−（｛［５−エチル−３−（２−ピリジニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ７）;
（３４）  ３−［（｛３−［４−（ｔｅｒｔ−ブチル）−２−ピリジニル］−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ８）；
（３５）  ３−［（｛（５Ｒ）−３−［４−（ｔｅｒｔ−ブチル）−２−ピリジニル］−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル］アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ９）；
（３６）  ３−（｛［５−エチル−３−（４−イソブチル−２−ピリジニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１０）；
（３７）  ３−（｛［３−（４−アセチル−２−ピリジニル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１１）；
（３８）  ３−（｛［３−（４−シクロプロピル−２−ピリジニル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１２）；
（３９）  ３−（｛［３−（４−シクロペンチル−２−ピリジニル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１３）；
（４０）  ３−（｛［（５Ｒ）−３−（４−シクロペンチル−２−ピリジニル）−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１４）；
（４１）  ３−（｛［３−（４−シクロヘキシル−２−ピリジニル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１５）；
（４２）  ３−（｛［５−エチル−３−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１６）；
（４３）  ５−フルオロ−３−（｛［５−イソプロピル−３−（４−フェニル−２−ピリジニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１７）；
（４４）  （３Ｓ）−５−［（ジフェニルホスホリル）オキシ］−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１８）；
（４５）  （３Ｓ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−｛［１−フェニル−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］オキシ｝ペンタン酸（Ｉａａ１９）；
（４６）（３Ｓ）−５−［（４−ベンジル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−３−フラニル）オキシ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ２０）；
（４７）  （３Ｓ）−５−（イソブチリルオキシ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ２１）；
（４８）  （３Ｓ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−ヘキセン酸（Ｉａａ２２）；
（４９）  （３Ｓ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２−ピリジニルオキシ）ペンタン酸（Ｉａａ２３）；
（５０）  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（２−イソプロピルフェニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２−ピリジニルオキシ）ペンタン酸（Ｉａａ２４）；
（５１）  ２−｛［（３Ｓ）−４−カルボキシル−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−２−オキソブチル］オキシ｝−１−メチルピリジウム  トリフルオロメタンスルホネート（Ｉａａ２５）；
（５２）  ２−｛［（３Ｓ）−４−カルボキシ−３−（｛［５−エチル−３−（２−イソプロピルフェニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−２−オキソブチル］オキシ｝−１−メチルピリジウム  トリフルオロメタンスルホネート（Ｉａａ２６）；
（５３）  ３−（｛［３−（５−クロロ−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ２７）；
（５４）  ３−（｛［３−（１，５−ジメチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ２８）；及び
（５５）  （３Ｓ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｉｉ−１）。
【００３２】
本発明に係る式（１）の化合物は２個の不斉炭素を有していることから、ジアステレオマーを含む立体異性体の形態で存在し得る。このような立体異性体中でも特に好ましい化合物は、式（１ａ）の化合物であり、
【００３３】
【化５】
2007503429.tif 000006
【００３４】
従って、本発明の他の目的は、立体異性体である式（１ａ）の化合物を提供することにある。
【００３５】
上記式（１ａ）の化合物中で、例えば、（３Ｓ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｉｉ−１）化合物は、（３Ｓ）及び（３Ｒ）の混合物を、メチル−ｔ−ブチルエーテルに溶解するステップ、シード物質として（３Ｓ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸の結晶を少量添加して結晶を得るステップ、及びこの結晶を酢酸エチル／ｎ−ヘキサン混合溶媒から再結晶するステップ、を含む方法により得られる。
【００３６】
式（１）の化合物及び式（１ａ）の化合物中で、最も好ましい化合物は、５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｉｉ）；及び、（３Ｓ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｉｉ−１）である。
【００３７】
カスパーゼの抑制効果を示す式（１）の新規なイソキサゾリン誘導体を製造する方法を、下記反応スキーム１〜５に示す。しかし、下記反応スキームに示す方法は、本発明で使われる単なる代表的なものである。操作順序は制限なしに変更できるので、方法は下記説明に制限されるものではない。
【００３８】
【化６】
2007503429.tif 000007
式中、Ａ、Ｂ、及びＲ2は上述したものと同義であり、
Ｐ1は単純アルキル鎖を表す。
【００３９】
上記反応スキーム１では、アルデヒド誘導体（ＩＩ）をアルコール−水の混合溶液中でヒドロキシルアミン塩酸塩及び炭酸ナトリウムと反応させて、オキシム誘導体（ＩＩＩ）（ｓｙｎ及びａｎｔｉオキシムの混合物）を得る。得られたオキシム誘導体（ＩＩＩ）を、ジメチルホルムアミド溶液中、ＮＣＳ（Ｎ−クロロスクシンイミド）で処理して、ヒドロキサモイルクロライド誘導体（ＩＶ）を得る。得られたヒドロキサモイルクロライド誘導体（ＩＶ）をアクリレート誘導体（Ｖ）と反応させて、イソキサゾリン誘導体（ＶＩ）を得る。このイソキサゾリン誘導体（ＶＩ）は、必要により加水分解して、脱保護されたイソキサゾリン誘導体（ＶＩＩ）を得る。場合によっては、オキシム誘導体（ＩＩＩ）、アクリレート誘導体（Ｖ）、及びＮａＯＣｌを反応容器内（in situ）で反応させて、直接イソキサゾリン誘導体（ＶＩ）を得てもよい（製造例１６、１７を参照）。
【００４０】
【化７】
2007503429.tif 000008
式中、Ａ、Ｂ、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ11、Ｒ12、及びＷ上述したものと同義である。
【００４１】
上記反応スキーム２で、カルボン酸誘導体（ＶＩＩ）をアスパラギン酸誘導体（ＶＩＩＩ）（下記反応スキーム３  参照）とカップリングして得た化合物（ＩＸ）に対し、デス−マーチン（Dess-Martin）ペルヨージナン酸化反応と、必要に応じて脱保護反応に付して、目的とする化合物（Ｉ）を得る。
【００４２】
反応スキーム２の化合物（Ｉ）で官能基Ｚは、左側のカルボン酸化合物（ＶＩＩ）をアスパラギン酸（β−ｔ−Ｂｕ）メチルエステルと結合させた後、下記製造例５及び７に例示されたように、数段階を経て形成することができる。一方、下記反応スキーム３に示されるように、先ず既に所望のＺを持つ化合物（ＶＩＩＩ）を合成し、これを化合物（ＶＩＩ）（参照：ＷＯ００／２３４２１）とカップリングする。また、ＷがＦの場合は、Tetrahedron Letters，1994，35(52)，9693-9696の公知方法によって、ラセミ化合物を製造することができる。
【００４３】
【化８】
2007503429.tif 000009
式中、Ｚは上述したものと同義である。
【００４４】
上記反応スキーム１で反応物として用イアクリレート誘導体（Ｖ）は、２つの経路を通じて製造することができる。即ち、化合物（ＸＶ）は、反応スキーム４に示すように公知化合物（ＸＩＶ）（Synthesis，1982，p924）から容易に製造することができるか、または、化合物（Ｖ）であるメチル（エチル）２−ｉ−プロピルアクリレートは、ジメチル（ジエチル）マロネート（J．Chemical Society Perkin Trans．1 1997，1559-1570）から製造することができる。
【００４５】
【化９】
2007503429.tif 000010
式中、Ｐ1及びＲ2は前述したものと同義である。
【００４６】
下記反応スキーム５は、Ｐ1部位にα，β−不飽和エステルやα，β−不飽和スルホンが導入された化合物の合成方法を示している。これによれば、反応スキーム１で得たカルボキシル酸誘導体（ＶＩＩ）をアミノアルコール誘導体（ＸＶＩＩ）と反応させて得た化合物（ＸＶＩ）を、デス−マーチン酸化反応とヴィッティッヒ反応に付して、化合物（Ｉ）を得る。
【００４７】
【化１０】
2007503429.tif 000011
式中、Ｒ、Ａ、Ｂ、Ｒ1、及びＲ2は上述したものと同義であり、
Ｑは−ＣＯ2Ｒ13またはＳＯ2Ｒ14（ここで、Ｒ13及びＲ14は上述したものと同義である）を表す。
【００４８】
本発明に係る式（１）の化合物は、下記実験例の結果から立証されるように、カスパーゼに対して広い阻害活性スペクトルを有しているので、消炎及びアポトーシスの抑制効果を有している。従って本発明は、カスパーゼを阻害するための組成物、特に、薬学上許容される担体と共に有効成分として式（１）の化合物を含有する、消炎及びアポトーシスを抑制するための治療用組成物を提供する。詳しくは、本発明に係る組成物は、認知症、脳卒中、ＡＩＤＳによる脳損傷、糖尿病、胃潰瘍、肝炎による脳損傷、肝炎により誘発される肝疾患、急性肝炎、劇症肝不全、肝硬変、敗血症、臓器移植拒絶反応、リウマチ性関節炎、または虚血性心臓疾患による心臓アポトシースに対する治療効果を有しており、特に、急性肝炎、肝硬変、またはリウマチ性関節炎に効果が高い。
【００４９】
カスパーゼ抑制剤、特に式（１）の化合物は、投与目的に応じて様々な薬剤形態に製剤化できる。本発明に係る薬学的組成物を製造するために、有効量のカスパーゼ抑制剤、特に式（１）の化合物またはその塩を、製造しようとする製剤によって、多様な形態を取る薬学上許容しうる担体と混合する。
【００５０】
カスパーゼ阻害化合物は、適用目的により注射用製剤、経皮用製剤または経口用製剤として製剤化できる。投与の容易性や投薬量の均一性から、単位投薬形態で組成物を製剤化することが特に有利である。
【００５１】
経口用製剤のために、通常の薬学的担体を使用することができる。例えば、懸濁液、シロップ剤、エリキシル及び溶液剤のような経口用液体製剤の場合には、水、グリコール、油、アルコールなどを用いてもよく；また、散剤、丸剤、カプセル剤及び錠剤のような固体製剤の場合、澱粉、砂糖、カオリン、潤滑剤、結合剤、崩壊剤などを用いてもよい。その投与が容易であることから、錠剤及びカプセル剤が最も有利な単位投薬形態である。また、錠剤及び丸剤は腸溶性コート製剤に製剤化することが好ましい。
【００５２】
非経口組成物の場合、溶解補助剤などの他の成分を用いてもよいが、担体としては、通常、滅菌水を用いる。注射剤、例えば注射用の滅菌水性懸濁液または油性懸濁液は、適切な分散剤、湿潤剤または懸濁剤を用いる公知方法により製造できる。注射剤を製造するための用いることができる溶剤としては、水、リンゲル液、等張ＮａＣｌ溶液などが挙げられ、また、滅菌固定オイルも溶剤または懸濁媒質として便利に用いることができる。モノグリセリドやジグリセリドを含む任意の非刺激性固定オイルが、このような目的で用いることができる。オレイン酸などの脂肪酸も、注射製剤に用いることができる。
【００５３】
経皮投与のために、担体としては浸透促進剤及び／または適切な湿潤剤があり、有意な皮膚刺激のない適切な添加剤を併用してもしてもよい。かかる添加剤は、皮膚への投与を促進することができ、及び／または所望の組成物を製造するのに役立ち得る。これらの経皮製剤は、例えば経皮パッチ、点滴剤（spot-on）または軟膏といった様々な方式で投与される。
【００５４】
カスパーゼ抑制剤、特に式（１）の化合物を臨床的な目的で使用するとき、１日に０．１ｍｇ／ｋｇ体重〜１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で被検者に投与することが好ましい。１日のトータル投薬量は、一回又は数回に分けて投与することができる。しかし、個々の患者に対する特定の投薬量は、使用される特定化合物、被検者の体重、性別、衛生状態、食事、薬剤の投与時間、投与方法、排泄率、薬剤の組み合わせ、及び疾患の重篤度などにより変更することができる。
【００５５】
下記実施例は、本発明をどのように実施するかを、当業者がより明確に理解できるようにしたものである。本発明を好ましい具体例で説明するが、下記は本発明の範囲を制限するものではない。本発明の他の側面は、本発明が属する技術分野の当業者に自明であろう。
【実施例】
【００５６】
本発明を以下の実施例によってさらに詳細に説明する。しかし、これらの実施例は発明を例示するものであって、本発明の範囲を何ら制限するものと解釈されるべきではない。
【００５７】
製造例１
ベンズアルデヒドオキシム
ベンズアルデヒド（５．３１ｇ、５０．０ｍｍｏｌ）をエタノール（６０ｍＬ）−水（３０ｍＬ）に溶解し、０℃でヒドロキシルアミン塩酸塩（５．２１ｇ、１．５当量）と無水炭酸ナトリウム（Ｎａ2ＣＯ3、３．９７ｇ、０．７５当量）を加えた。約１分後、大量の固体が生成したところで水−エタノール（１：１、６０ｍＬ）を加え、当該混合物を１時間攪拌した。飽和塩化ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）を加え、当該混合物を酢酸エチル（３００ｍＬ）で２回抽出した。抽出液を１．０Ｎ重炭酸ナトリウム水溶液（ＮａＨＣＯ3、１００ｍＬ×２）で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧濃縮して白色粉末状の標記化合物（６．０６ｇ、収率９９％）をシス及びトランス混合物として得た。
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ8.9（br，1H），8.1（s，1H），7.5（m，2H），7.3（m，3H）
【００５８】
製造例２
ベンズアルデヒドヒドロキサモイルクロライド
製造例１で得たオキシム（３．００ｇ、２４．８ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）に溶解し、Ｎ−クロロスクシンイミド（３．４７ｇ、１．０５当量）を加えた。得られた溶液を約４０℃の水浴で１時間攪拌した後、揮発性溶媒を減圧蒸留して除去した。残渣を酢酸エチル−ヘキサン（１：１、１５０ｍＬ）に溶解し、水（１００ｍＬ×３）で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧濃縮して標記化合物（３．８６ｇ、収率９９％）を得た。この化合物は、それ以上精製することなく次の反応で使用した。
【００５９】
製造例３
メチル  ５−メチル−３−フェニル−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボキシレート（ＶＩａ）
製造例２で得たヒドロキサモイルクロライド（３．８６ｇ、２４．８ｍｍｏｌ）とメタクリル酸メチル（４．０ｍＬ、３７．２ｍｍｏｌ、１．５当量）を、窒素雰囲気下で無水ジエチルエーテル（１２０ｍＬ）に溶解し、当該混合物を−７８℃に維持し、トリエチルアミン（６．９ｍＬ、２．０当量）を加えた。当該混合物をゆっくり室温まで暖めながら、一晩攪拌した。水（１００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出した後、水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（１５％酢酸エチル−ヘキサン）で精製して標記化合物（５．３４ｇ、収率９８％）を得た。これを1Ｈ−ＮＭＲで分析した結果、１：１ジアステレオマー混合物であった。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ6.7（m，2H,），6.5（m，3H），3.0（d，J=16.7Hz，1H），2.9（s，3H），2.3（d，J=16.7Hz，1H），0.8（s，3H）
【００６０】
製造例４
５−メチル−３−フェニル−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボン酸（ＶＩＩａ）
製造例３で得た化合物（ＶＩａ、５．３４ｇ）を蒸留したテトラヒドロフラン（１２０ｍＬ）に溶解し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（３６．５ｍＬ、１．５当量）を加えた。約４時間後に、当該混合物を１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で中和し、減圧蒸留して大部分のテトラヒドロフランを除去した。残渣を過量の酢酸エチル（＞７００ｍＬ）に溶解し、水で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧濃縮して白色粉末状の標記化合物（４．７７ｇ、収率９５％）を得た。この化合物は、それ以上精製することなく次反応に使用した。
【００６１】
製造例５
（３Ｓ）−３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−５−（ｔ−ブトキシ）−２−ヒドロキシ−５−オキソペンチル  ２，６−ジクロロベンゾエート（ＸＩＩａ）
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−β−ｔ−ブチルアスパラギン酸（５．０３ｇ、１５．６ｍｍｏｌ）及びＮＭＭ（１．９０ｍＬ、１７．１ｍｍｏｌ）に無水テトラヒドロフラン（６０ｍＬ）を窒素雰囲気下で加え、当該混合物を−１５℃に維持し、イソブチルクロロホルメート（２．１２ｍＬ、１６．３ｍｍｏｌ）を加えた。当該混合物を約２０分間攪拌した。０℃に維持した反応混合物へジアゾメタン−エーテル溶液（２．０当量の１−メチル−３−ニトロ−１−ニトロソ−グアニジンから合成、６０ｍＬ）を加え、ジアゾケトン誘導体（〜３０分）を調製した。ここに、３０％ＨＢｒ／ＡｃＯＨ（６．４２ｍＬ、２．０当量）を０℃で加えた。得られた混合物を攪拌（３０〜６０分）し、酢酸エチルで抽出し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で２回、塩化ナトリウム水溶液で１回洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧濃縮してブロモメチルケトン誘導体（Ｘ、６．４ｇ）を得た。
【００６２】
このようにして得られたブロモメチルケトン誘導体（Ｘ、４．３６ｇ）及び２，６−ジクロロ安息香酸（２．２８ｇ、１．１当量）をジメチルホルムアミド（１８ｍＬ）に溶解し、ＫＦ（１．５８ｇ、２．５当量）を加え、当該混合物を２時間攪拌して２，６−ジクロロベンゾイルオキシメチルケトン誘導体（ＸＩａ）を得た。この化合物をメタノール（２０ｍＬ）に溶解し、ＮａＢＨ4（４１２ｍｇ）−メタノール溶液（４０ｍＬ）を加えて反応させた（−１０℃〜常温、２時間）。酢酸で反応を中止し、反応溶液を減圧蒸留してメタノールを除去した。残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出し、水及び塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィーで分離精製（酢酸エチル−ヘキサン、１：５）して、標記化合物（４．８０ｇ、収率８６％）をジアステレオマー形態として得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ7.3-7.2（m，8H），5.9（m，1H），5.2（m，4H），4.7（m，1H），2.9（m，1H），2.7（m，1H），1.4（s，9H）
【００６３】
製造例６
（３Ｓ）−３−アミノ−５−（ｔ−ブトキシ）−２−ヒドロキシ−５−オキソペンチル  ２，６−ジクロロベンゾエート（ＶＩＩＩａ）
製造例５で得た化合物のベンジルオキシカルボニル基を、水素バルーン下で４０分間除去（Ｐｄ／Ｃ化）して、標記化合物（収率１００％）を得た。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ8.2（br，2H），7.6-7.5（m，3H），6.1（m，1H），4.4-3.9（m，3H），3.0-2.6（m，2H），1.4（s，9H）
【００６４】
実施例１
（３Ｓ）−５−（ｔ−ブトキシ）−３−｛［（５−メチル−３−フェニル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル）カルボニル］アミノ｝−２，５−ジオキソペンチル  ２，６−ジクロロベンゾエート（Ｉａ）
製造例４で得たカルボン酸誘導体（ＶＩＩａ、３００ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）、製造例６で得たアミノアルコール誘導体（ＶＩＩＩａ、６６７ｍｇ、１．１当量）及びＨＡＴＵ（７２２ｍｇ、１．３当量）の混合物を０℃に冷却し、ＤＭＦ（５ｍＬ）溶媒中でトリエチルアミン（０．８２ｍＬ、４．０当量）を加え、当該混合物を５時間反応した。溶媒を減圧蒸留し、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出し、水、重炭酸ナトリウム水溶液及び塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィーで精製して化合物（ＩＸａ）（８１０ｍｇ、収率９８％）を得た。この化合物とデス−マーチン試薬（Dess-Martin reagent）（１．７０ｇ、３．０当量）に無水ジクロロメタン（２５ｍＬ）を加え、当該混合物を室温で１時間攪拌した。イソプロピルアルコール（３ｍＬ）で反応を中止した。セライトを用いた減圧濾過で固体を除去し、濾液を酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出し、水、飽和重炭酸ナトリウム水溶液及び塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（３６％酢酸エチル−ヘキサン）で予備精製してジアステレオマー標記化合物（７８０ｍｇ）を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ7.8（m，NH，1H），7.6（m，2H），7.3（m，3H），7.2（m，3H），5.1-5.0（m，2H），4.8（m，1H），3.8（m，1H），3.2（m，1H），2.9-2.8（m，2H），1.7（s，3H），1.4（s，9H）
【００６５】
実施例２
（３Ｓ）−５−［（２，６−ジクロロベンゾイル）オキシ］−３−｛［（５−メチル−３−フェニル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル）カルボニル］アミノ｝−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ）
実施例１で合成した化合物（４４ｍｇ）をジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解し、０℃でトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を加えた。当該混合物を室温までゆっくり暖めながら混合物を２時間攪拌した後、減圧濃縮して標記化合物（Ｉａａ）を定量的に得た。
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ8.1（m，1H），7.5（（m，2H），7.3（m，3H），7.2（m，3H），5.1-4.9（m，2H），4.9-4.8（m，1H），3.8（m，1H），3.2（m，1H），1.7（m，3H）
【００６６】
製造例７
ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フェノキシペンタノエート（ＶＩＩＩｂ）
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−β−ｔ−ブチルアスパラギン酸（１０．０ｇ、３１．０ｍｍｏｌ）及びＮＭＭ（３．７５ｍＬ、１．１当量）に無水テトラヒドロフラン（１２０ｍＬ）を窒素雰囲気下で加え、当該混合物を−１５℃に維持した。イソブチルクロロホルメート（４．２２ｍＬ、１．０５当量）を加え、混合物を約２０分間攪拌した。反応物を０℃に維持した状態でジアゾメタン−エーテル溶液（２．０当量の１−メチル−３−ニトロ−１−ニトロソ−グアニジンから合成、６０ｍＬ）を加えて、ジアゾケトン誘導体を合成した（〜３０分）。ここへ、３０％ＨＢｒ／ＡｃＯＨ（１２．８３ｍＬ、２．０当量）を加えてブロモメチルケトン誘導体を合成した（３０〜６０分）。酢酸エチルで抽出し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液及び塩化ナトリウム水溶液で２回洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧濃縮してブロモメチルケトン誘導体（１２．９ｇ）を定量的に得た。
【００６７】
このようにして得られたブロモメチルケトン誘導体（Ｘ、１２．９ｇ、３１．０ｍｍｏｌ）及びフェノール（３．２３ｇ、１．２当量）をジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）に溶解し、ＫＦ（４．５３ｇ、２．５当量）を加え、当該混合物を２時間攪拌してフェノキシメチルケトン誘導体（ＸＩｂ）を得た。この化合物をメタノール（４０ｍＬ）−ＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解して、ＮａＢＨ4（２．３５ｇ）−メタノール溶液（４０ｍＬ）を加えて反応させた（−１０℃〜室温、２時間）。酢酸で反応を中止し、反応混合物を減圧蒸留してメタノールを除去した。残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出し、水及び塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（酢酸エチル−ヘキサン、１：７）で分離精製して、ベンジルオキシカルボニルによってアミノ基が保護されたジアステレオマー形態の化合物（ＸＩＩｂ、６．５０ｇ、収率５０％）を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ7.3-7.2（m，8H），5.9（m，1H），5.2（m，4H），4.7（m，1H），2.9（m，1H），2.7（m，1H），1.4（s，9H）
【００６８】
このようにして得られた化合物のベンジルオキシカルボニル基を水素バルーン下で除去（Ｐｄ／Ｃ）して標記化合物（４．１６ｇ、収率９５％）を得た。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ8.1（br，2H），7.3（m，5H），5.6（m，1H），4.1-4.0（m，3H），2.6（m，2H），1.4（s，9H）
【００６９】
実施例３
ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−｛［（５−メチル−３−フェニル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル）カルボニル］アミノ｝-４−オキソ−５−フェノキシペンタノエート（Ｉｂ）
製造例４で得たカルボン酸誘導体（ＶＩＩａ、２７３ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）、製造例７で得たアミノアルコール誘導体（ＶＩＩＩｂ、４１２ｍｇ、１．１当量）及びＨＡＴＵ（６５７ｍｇ、１．３当量）の混合物を０℃に冷却し、ＤＭＦ（５ｍＬ）溶媒中でトリエチルアミン（０．７４ｍＬ、４．０当量）を加え、反応混合物を５時間反応させた。溶媒を減圧蒸留し、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出し、水、重炭酸ナトリウム水溶液及び塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（３０−４０％ＥＡ／Ｈｅｘ）で精製して化合物（ＩＸｂ）（５４５ｍｇ、収率８８％）を得た。この化合物とデス−マーチン試薬（１．４３ｇ、３．０当量）へ無水ジクロロメタン（２５ｍＬ）を加え、当該混合物を常温で１時間攪拌した。イソプロピルアルコール（２ｍＬ）で反応を中止させた。セライトを用いた減圧濾過で固体を除去し、濾過物を酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出し、水、飽和重炭酸ナトリウム水溶液及び塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（溶離液：２５％酢酸エチル／ヘキサン）で予備精製してジアステレオマー標記化合物（５４０ｍｇ、収率９９％）を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ7.8（NH，1H），7.5（m，2H），7.3（m，3H），7.3（m，1H），7.1（m，1H），6.8（m，2H），6.7（m，1H），4.9（s，1H），4.7-4.6（m，2H），3.7（d，J=17Hz，1H），3.2（d，J=17Hz，1H），2.9（m，1H），2.8（m，1H），1.7（s，3H），1.4（s，9H）
【００７０】
実施例４
（３Ｓ）−３−｛［（５−メチル−３−フェニル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル）カルボニル］アミノ｝−４−オキソ−５−フェノキシペンタン酸（Ｉｂｂ）
実施例３で得た化合物（５３０ｍｇ、１．１３６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（６ｍＬ）に溶解し、０℃でトリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を加えた。当該混合物を室温までゆっくり暖めながら２時間攪拌し、減圧濃縮して標記化合物（Ｉｂｂ）（４６５ｍｇ）を定量的に得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ7.5（m，2H），7.3（m，3H），7.1（NH，1H），6.7（m，5H），5.0-4.6（m，2H），4.2（m，1H），3.8（m，1H），3.2（m，1H），3.0-2.7（m，2H），1.6（s，3H）
【００７１】
製造例８
エチル  ２−エチルアクリレート（ＸＶｂ）
ＣｕＣＮ（２６．９ｇ、真空下で予め乾燥）に、窒素雰囲気下で約５００ｍＬの無水テトラヒドロフランを加えた。当該混合物を−７８℃に維持し、機械的に攪拌しつつ、メチルマグネシウムブロミド（３．０Ｍジエチルエーテル溶液）１００ｍＬをゆっくり加えた。粘度の高い当該混合物を、−７８℃で約３０分間攪拌した。約３０ｍＬの無水テトラヒドロフランに溶解したエチル  ２−ブロモメチルアクリレート（２８．９ｇ、１５０ｍｍｏｌ、合成法：Villieras，J．及びRambaud，M．Synthesis，1982年，914）を、そこへゆっくり加えた。反応混合物の温度を、室温まで２時間かけてゆっくり上げた。飽和塩化アンモニウム溶液（〜５０ｍＬ）をゆっくり加え、反応を完結させた。当該反応混合物をセライトによってろ過して沈澱物を除去した後、ジエチルエーテルで洗浄した。有機層を水及び飽和炭酸水素ナトリウム溶液（３００ｍＬ×２）で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧濃縮して２６．７ｇ（収率定量的）の透明な液体を得た。この液体を1Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）で分析した結果、約７５％のｗ／ｗ純度を有する標記化合物であることが確認された。
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ6.12（1H，s），5.50（1H，s），4.20（2H，q，J=7.3Hz），2.31（2H，qt），1.28（3H，t，J=7.3 Hz），1.07（3H，t，J=7.8Hz）
【００７２】
製造例９
エチル  ５−エチル−３−フェニル−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボキシレート（ＶＩｂ）
製造例８で得た化合物（ＸＶａ）を製造例３と同じ方法によって反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ7.6（m，2H），7.4-7.3（m，3H），4.3-4.2（m，2H），4.0（d，J=17.2Hz，1H），3.4（d，J=17.2Hz，1H），2.1-2.0（m，2H），1.3（t，3H），1.0（t，3H）
【００７３】
製造例１０
ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタノエート（ＶＩＩＩｃ）
２，３，５，６−テトラフルオロフェノールを製造例５及び６と同じ方法によって反応させて、７２％の全体収率で標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ8.2（br，2H），7.6-7.5（m，1H），5.9（m，1H），4.3-4.1（m，3H），3.6（m，1H），2.7（m，1H），1.4（s，9H）
【００７４】
実施例５
ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−｛［（５−エチル−３−フェニル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル）カルボニル］アミノ｝−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタノエート（Ｉｃ）
製造例９及び１０の化合物を製造例４及び実施例１と同じ方法によって反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ7.6（dd，J=3.6，1.6Hz，1H），7.6（m，2H），7.4-7.3（m，3H），6.7（m，1H），5.1-4.9（m，2H），4.9-4.8（m，1H），3.7（dd，J=17.6，17.2Hz，1H），3.3（1H，d，J=17.2Hz），3.0-2.8（m，1H），2.8-2.7（m，1H），2.1（m，1H），1.9（m，1H），1.4-1.3（two s，9H,），1.0（m，3H）
【００７５】
実施例６
（３Ｓ）−３−｛［（５−エチル−３−フェニル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル）カルボニル］アミノ｝−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｃｃ）
実施例５の化合物を実施例２と同じ方法によって反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ7.6（br，1H），7.6-7.5（m，2H），7.4-7.3（m，3H），6.8-6.7（m，1H），4.9-4.8（m，1H），4.5（br，2H），3.7（d，J=16Hz，1H），3.3（d，J=16Hz，1H），3.3-3.0（m，1H），2.8-2.7（m，1H），2.1（m，1H），2.0-1.9（m，1H），1.0（m，3H）
MS［M+H］+497
【００７６】
製造例１１
エチル  ５−エチル−３−（１−ナフチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボキシレート（ＶＩｃ）
１−ナフトアルデヒドとエチル  ２−エチルアクリレートを製造例１、２及び３と同じ方法によって反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ8.9（d，J=8.8Hz，1H），7.9-7.8（m，2H），7.6-7.4（m，4H），4.3-4.2（m，2H），4.0（d，J=17.2Hz，1H），3.4（d，J=17.2Hz，1H），2.1-2.0（m，2H），1.3（t，3H），1.0（t，3H）
【００７７】
実施例７
ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（１−ナフチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタノエート（Ｉｄ）
製造例１１及び製造例１０の化合物を製造例４及び実施例１と同じ方法によって反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ8.9（m，1H），7.9-7.8（m，3H），7.6-7.4（m，4H），6.5-6.9（m，1H），5.1-4.9（m，2H），4.9（m，1H），3.9（dd，1H），3.5（d，J=17.2Hz，1H），3.0-2.9（m，1H），2.8（m，1H），2.2（m，1H），2.0（m，1H），1.4-1.3（two s，9H），1.1（m，3H）
【００７８】
実施例８
（３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（１−ナフチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｄｄ）
実施例７の化合物を実施例２と同じ方法によって反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ8.8（m，1H），7.9-7.7（m，3H），7.6-7.4（m，4H），6.7（m，1H），4.9（m，1H），4.5（br，2H），3.9（d，J=17.2Hz，1H），3.5（d，J=17.2Hz，1H），3.1-2.9（m，1H），2.8-2.7（m，1H），2.2（m，1H），2.0（m，1H），1.0（m，3H）
MS［M+MeOH+Na］+601
【００７９】
製造例１２
エチル  ５−エチル−３−（２−ナフチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボキシレート（ＶＩｄ）
２−ナフトアルデヒド及びエチル  ２−エチルアクリレートを製造例１、２及び３と同じ方法によって反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ8.7（d，J=8.8Hz，1H），7.8-7.7（m，2H），7.5-7.3（m，4H），4.3-4.2（m，2H），4.0（d，J=17.2Hz，1H），3.4（d，J=17.2Hz，1H），2.1-2.0（m，2H），1.3（t，3H），1.0（t，3H）
【００８０】
実施例９
ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（２−ナフチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタノエート（Ｉｅ）
製造例１２及び製造例１０の化合物を製造例４及び実施例１と同じ方法によって反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ7.8-7.7（m，6H），7.5（m，2H），6.7＆6.5（m，1H），5.1-4.9（m，2H），4.9-4.8（m，2H），3.8（dd，J=16Hz，1H），3.4（d，J=16Hz，1H），3.0（m，1H），2.8（m，1H），2.8-2.7（m，1H），2.2-2.1（m，1H），2.0（m，1H），1.4-1.3（two s，9H），1.1-1.0（m，3H）
【００８１】
実施例１０
（３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（２−ナフチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｅｅ）
実施例９の化合物を実施例２と同じ方法で脱保護し、Ｐｒｅｐ−ＴＬＣで異性体を分離して、２種類の化合物を得た。
低極性ジアステレオマー：
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ12.4（br，1H），8.7（br，1H），8.1（s，1H），7.9-8.0（m，3H），7.8-7.9（m，1H），7.5-7.6（m，3H），5.2（br，2H），4.7（br，1H），3.8（d，J=17.2Hz，1H），3.5（d，J=17.6Hz，1H），2.7（m，1H），2.5（m，1H），2.0（m，1H），1.9（m，1H），0.9-0.8（m，3H）
MS［M+H］+547
高極性ジアステレオマー：
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ8.6（br，1H），8.2（s，1H），8.0-7.9（m，3H），7.9（m，1H），7.6（m，2H），7.4（m，1H），5.0（br，2H），4.8（m，1H），3.9（d，J=17.6Hz，1H,），3.6（d，J=17.6Hz，1H,），2.9-2.7（m，2H），2.1-2.0（m，1H），2.0-1.9（m，1H），0.9（m，3H）
【００８２】
製造例１３
エチル  ５−エチル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボキシレート（ＶＩｅ）
１−イソキノリンアルデヒドとエチル  ２−エチルアクリレートを製造例１、２及び３と同じ方法によって反応させ、キラルＯＤ  ＨＰＬＣ（ダイセル化学工業、２．００ｃｍ×２５ｃｍ、ＯＤ００ＣＪ−１Ｃ００５、３％ｉ−ＰｒＯＨ  ｉｎ  Ｈｅｘａｎｅ、２２０ｎｍ）で活性キラル異性体形態の標記化合物を分離し、これを次の反応に利用した。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ9.25（m，1H），8.55（d，1H），7.85（d，1H），7.74- 7.65（m，3H），4.29（m，2H），4.13（d，1H），3.71（d，1H），2.11（m，2H），1.33（t，3H），1.06（t，3H）
【００８３】
実施例１１
ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタノエート（Ｉｆ）
製造例１３及び製造例１０の化合物を製造例４及び実施例１と同じ方法によって反応させて標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ9.14（m，1H），8.53（m，1H），7.91-7.85（m，2H），7.74-7.64（m，3H），6.73-6.62（m，1H），5.30-4.91（m，3H），4.09（two d，1H），3.72（two d，1H），3.04-2.76（m，2H），2.24（m，1H），2.04（m，1H），1.45＆1.35（two s，9H），1.08（two t，3H）
【００８４】
実施例１２
（３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｆｆ）
実施例１１の化合物を実施例２と同じ方法によって反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ9.02（m，1H），8.76（m，1H），8.59（m，1H），8.08-7.73（m，4H），7.61-7.32（m，1H），5.19-5.10（m，2H），4.93-4.65（m，1H），3.91（two d，1H），3.68（two d，1H），2.91-2.52（m，2H），2.10-1.94（m，2H），0.94（two t，3H）
Mass：M+H  548
【００８５】
実施例１３
ｔ−ブチル  ３−（｛［５−エチル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタノエート（Ｉｇ）
製造例１３の化合物及びｔ−ブチル  ３−アミノ−５−フルオロ−４−ヒドロキシペンタノエートを製造例４及び実施例１と同じ方法によって反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ9.15（m，1H），8.55（d，1H），7.87-7.66（m，5H），5.22-4.89（m，3H），4.12（two d，1H），3.72（two d，1H），3.05-2.75（m，2H），2.22 （m，1H），2.04（m，1H），1.45＆1.34（two s，9H），1.07（two t，3H）
【００８６】
実施例１４
３−（｛［５−エチル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｇｇ）
実施例１３の化合物を実施例２と同じ方法によって反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ9.03（m，1H），8.67-8.59（m，2H），8.08（d，1H），7.97-7.78（m，3H），5.26-5.07（m，2H），4.75（m，1H），3.94（two d，1H），3.67（two d，1H），2.88-2.58（m，2H），2.07-1.94（m，2H），0.96（two t，3H）
Mass：M+H  402
【００８７】
実施例１５
エチル  ３−（｛［５−エチル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタノエート（Ｉｈｈ）
実施例１４で得た化合物を、Tetrahedron Letters，1994年，35（52），9693-9696に記載の公知方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ9.15（m，1H），8.55（d，1H），7.89-7.67（m，5H），5.23-4.94（m，3H），4.18（m，2H），4.11（two d，1H），3.72（two d，1H），3.08-2.82（m，2H），2.22（m，1H），2.05（m，1H），1.29-1.04（m，6H）
【００８８】
製造例１４
メチル  ５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボキシレートと分割（ＶＩｆ）
１−イソキノリンアルデヒドとメチル  ２−イソプロピルアクリレートを、製造例１，２及び３と同様の方法により反応させて標記化合物を得た。得られた化合物から、キラルＯＤカラム（ダイセル化学工業、２．００ｃｍ×２５ｃｍ、ＯＤ００ＣＪ−１Ｃ００５、５％ｉ−ＰｒＯＨのヘキサン溶液、１４ｍＬ／分、２２０ｎｍ）を用いる分取ＨＰＬＣで （５Ｒ）−活性キラル異性体（９．７分〜１１．７分ｍｉｎ）を分離し（他の（５Ｓ）−異性体は１５．３〜２０．１分のリテンションタイムの間に溶出された）、これを次の反応に使用した（加水分解後の分割方法は製造例２３を参照）。
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ9.24（m，1H），8.55（d，1H），7.85（d，1H），7.72（t，3H），7.67（m，2H），4.11（d，1H），3.83（s，3H），3.74（d，1H），2.50（septet，1H），1.07（d，3H），1.02（d，3H）
【００８９】
実施例１６
ｔ−ブチル  ５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタノエート（Ｉｈ）
製造例１４の化合物及びｔ−ブチル  ３−アミノ−５−フルオロ−４−ヒドロキシペンタノエートを、製造例４及び実施例１と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ9.14（m，1H），8.55（d，1H），7.87-7.65（m，5H），5.23-4.93（m，2H），4.90（m，1H），4.05-4.00（two d，1H），3.84-3.79（two，1H），3.06-2.74（m，2H），2.40（m，1H），1.45 & 1.34（two s，9H），1.12-1.07（m，6H）
【００９０】
実施例１７
５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｉｉ）
実施例１６の化合物を実施例２と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た（（５Ｓ）−異性体であるＩｉｉ−ｕは、同様の方法で得た）。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ9.00（m，1H），8.63-8.48（m，2H），8.08（d，1H），7.97（m，1H）7.87-7.76（m，2H），5.31-4.82（br，2H），4.74（m，1H），3.91（two d，1H），3.73（two d，1H），2.88-2.61（m，2H），2.33（m，1H），0.98（m，6H）
Mass：M+H 416
【００９１】
製造例１５
エチル  ５−エチル−３−（４−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボキシレート（ＶＩｇ）
４−キノリンアルデヒドとエチル  ２−エチルアクリレートを、製造例１、２及び３と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ8.95（d，1H），8.89（m，1H），8.11（d，1H），7.83（m，1H），7.71（m，1H），7.65（d，1H），4.27（m，2H），4.01（d，1H），3.67（d，1H），2.10 （m，2H），1.31（t，3H），1.02（t，3H）
【００９２】
実施例１８
ｔ−ブチル  ３−（｛［５−エチル−３−（４−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタノエート（Ｉｉ）
製造例１５の化合物及びｔ−ブチル  ３−アミノ−５−フルオロ−４−ヒドロキシペンタノエートを、製造例４及び実施例１と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ8.97（d，1H），8.89（m，1H），8.17（d，1H），7.87-7.64（m，3H），7.36（d，1H），5.21-4.93（m，3H），3.93（two d，1H），3.48（two d，1H），3.05-2.78（m，2H），2.24（m，1H），2.03（m，1H），1.46＆1.33（two s，9H），1.06（two t，3H）
【００９３】
実施例１９
３−（｛［５−エチル−３−（４−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｊｊ）
実施例１８の化合物を実施例２と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ9.16-9.10（m，2H），8.25-7.86（m，5H），5.20（br，2H），4.75（m，1H），4.00-3.89（two d，1H），3.73（two d，1H），2.87-2.71（m，2H），2.26-2.05（m，2H），1.07（two t，3H）
Mass：M+H 402
【００９４】
製造例１６
エチル  ３−（ベンゾチオフェン−２−イル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボキシレート（ＶＩｈ）
製造例１と同様の方法で合成したベンゾチオフェン−２−アルデヒドのオキシム誘導体（４００ｍｇ、２．２６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２５ｍＬ）に溶解し、混合物を０℃に維持した。エチル  ２−エチルアクリレート（４３４ｍｇ、１．５当量）とトリエチルアミン（７滴）をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解し、得られた溶液をゆっくり加え、さらに次亜塩素酸ナトリウム溶液（６．０ｍＬ）を加えた。当該反応液を室温まで温め、４時間攪拌した。水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出し、塩化ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥、濾過し、減圧濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（２０％酢酸エチル−ヘキサン）で精製して、標記化合物（１２１ｍｇ、収率１８％）を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ7.82-7.75（m，2H），7.40-7.32（m，3H），4.28（m，2H），3.90（d，1H），3.31（d，1H），2.07（m，2H），1.33（t，3H），1.01（t，3H）
【００９５】
実施例２０
ｔ−ブチル  ３−（｛［３−（ベンゾチオフェン−２−イル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタノエート（Ｉｊ）
製造例１６の化合物及びｔ−ブチル  ３−アミノ−５−フルオロ−４−ヒドロキシペンタノエートを、製造例４及び実施例１と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ7.83-7.68（m，3H），7.42-7.35（m，3H），5.21-4.88 （m，3H），3.80（two d，1H），3.38（two d，1H），3.03-2.78（m，2H），2.17（m，1H），2.01（m，1H），1.46＆1.38（two s，9H），1.03（two t，3H）
【００９６】
実施例２１
３−（｛［３−（ベンゾチオフェン−２−イル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｋｋ）
実施例２０の化合物を実施例２と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ8.63（m，1H），8.11-7.79（m，3H），7.47-7.36（m，2H），5.24-5.06（m，2H），4.73（m，1H），3.79（two d，1H），3.53（two d，1H），2.83-2.58（m，2H），2.03-1.86（m，2H），0.91（two t，3H）
Mass：M+H 407
【００９７】
製造例１７
エチル  ３−（１，３−ジメチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボキシレート（ＶＩｉ）
１，３−ジメチル−１Ｈ−インドール−２−アルデヒドのオキシム誘導体（３５６ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解し、当該混合物を０℃に維持した。エチル  ２−エチルアクリレート（３４５ｍｇ、１．３当量）とトリエチルアミン（６滴）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解してゆっくり加え、さらに次亜塩素酸ナトリウム溶液（５．５ｍＬ）を加えた。当該反応液を室温まで温め、４時間攪拌した。水（２０ｍＬ）を加え、当該混合物をジクロロメタン（４０ｍＬ×２）で抽出し、塩化ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥、濾過し、減圧濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（１５％酢酸エチル−ヘキサン）で分離して、標記化合物（２３０ｍｇ、収率３５％）を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ7.60（d，1H），7.31（m，2H），7.12（m，1H），4.29（m，2H），3.98（d，1H），3.94（s，3H），3.40（d，1H），2.47（s，3H），2.08（m，2H），1.34（t，3H），1.04（t，3H）
Mass：M+H 315
【００９８】
実施例２２
ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−（｛［３−（１，３−ジメチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタノエート（Ｉｋ）
製造例１７及び１０の化合物を、製造例４及び実施例１と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ7.85-7.79（m，1H），7.57（m，1H），7.37-7.26（m，2H），7.13（m，1H），6.75-6.49（m，1H），5.12-4.90（m,3H），3.95（two d,1H），3.89（two s,3H），3.45（two d ,1H），3.03-2.79（m，2H），2.44（two s，3H），2.22（m，1H），2.01（m，1H），1.58＆1.37（two s，9H），1.05（two t，3H）
【００９９】
実施例２３
（３Ｓ）−３−（｛［３−（１，３−ジメチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｌｌ）
実施例２２の化合物を実施例２と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ8.67（br，1H），7.61-7.43（m，3H），7.27（m，1H），7.08（m，1H），5.20（br，2H），4.83（m，1H），3.84（two s,3H），3.76（two d，1H），3.59（two d ,1H），2.91-2.60（m，2H），2.50（two s，3H），2.07-1.91（m，2H），0.95（two t，3H）
【０１００】
実施例２４
ｔ−ブチル  ３−（｛［３−（１，３−ジメチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタノエート（Ｉｌ）
製造例１７の化合物及びｔ−ブチル  ３−アミノ−５−フルオロ−４−ヒドロキシペンタノエートを、製造例４及び実施例１と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ7.79（m，1H），7.60（m，1H），7.32（m，2H），7.13（m，1H），5.20-4.90（m,3H），3.97-3.89（m，4H），3.46（two d，1H），3.03-2.77（m，2H），2.21（m，1H），2.01（m，1H），1.46＆1.38（two s，9H），1.05（two t，3H）
【０１０１】
実施例２５
３−（｛［３−（１，３−ジメチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｍｍ）
実施例２４の化合物を実施例２と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ8.68（br，1H），7.60（m，1H），7.45（m，1H），7.26（m，1H），7.07（m，1H），5.20（br，2H），4.81（m，1H），3.84（two s，3H），3.76（two d，1H），3.59（two d，1H），2.94-2.59（m，2H），2.38（two s，3H），2.07-1.91（m，2H），0.95（two t，3H）
Mass：M+H 418
【０１０２】
製造例１８
エチル  ５−エチル−３−（１−ナフチルメチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボキシレート（ＶＩｊ）
１−ナフチルアセトアルデヒドとエチル  ２−エチルアクリレートを、製造例１、２及び３と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ8.1-8.0（d，J=8Hz，1H），7.8（d，J=7.6Hz，1H,），7.8-7.7（d，J=8Hz，1H），7.5-7.4（m，2H），7.4-7.3（m，2H），4.1-4.0（m，4H），3.1（d，J=17.6Hz，1H），2.6（d，J=17.6Hz，1H），1.8-1.7（m，2H），1.2（t，3H），0.7（t，3H）
【０１０３】
実施例２６
ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（１−ナフチルメチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタノエート（Ｉｍ）
製造例１８及び１０の化合物を、製造例４及び実施例１と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ8.0（m，1H），7.8（m，1H），7.8（m，1H），7.7（m，1H），7.5（m，2H），7.4-7.3（m，2H），6.7（m，1H），5.0-4.9（m，2H），4.9-4.8（m，1H），4.2-4.0（m，2H），3.1（dd，J=24.8Hz，1H），2.9-2.6（m，3H），1.9（m，1H），1.7（m，1H），1.4（two s，9H），0.8（m，3H）
【０１０４】
実施例２７
（３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（１−ナフチルメチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｎｎ）
実施例２６の化合物を実施例２と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ12.3（br，1H），8.4（br，1H），8.0（m，1H），7.9（m，1H），7.8（m，1H），7.5-7.4（m，5H），5.0（br，2H），4.7（m，1H），4.0（s，2H），3.3（m，1H），3.1（m，1H），2.8（m，2H），2.5（m，1H），1.8（m，1H），1.7（m，1H），0.8（m，3H）
MS［M+H］+  561
【０１０５】
実施例２８
（３Ｓ）−５−（ｔ−ブトキシ）−３−［（｛５−エチル−３−［２−（１−ナフチル）エチル］−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−２，５−ジオキソペンチル  ２，６−ジクロロベンゾエート（Ｉｎ）
１−ナフチルプロピオンアルデヒドと製造例６の化合物を、製造例１，２，３，４及び実施例１と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ8.00（d，1H），7.85（m，1H），7.76（m，2H），7.57-7.28（m，7H），7.34-7.27（m，3H），5.20-5.05（m，2H），4.94＆4.88（two m，1H），3.39-3.27（m，3H），2.97-2.72（m，5H），2.07（m，1H），1.86（m，1H），1.46＆1.45（two s，9H），1.00＆0.96（two t，3H）
【０１０６】
実施例２９
（３Ｓ）−５−［（２，６−ジクロロベンゾイル）オキシ］−３−［（｛５−エチル−３−［２−（１−ナフチル）エチル］−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−４−オキソペンタン酸（Ｉｏｏ）
実施例２８の化合物を実施例２と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ8.45（bd，1H），8.06（d，1H），7.90（d，1H），7.77（d，1H），7.60-7.37（m，7H），5.21-5.03（m，2H），4.73（m，1H），3.06（m，2H），2.65（bd，4H），1.91＆1.74（two m，2H），0.84（m，3H）
【０１０７】
製造例１９
エチル  ５−エチル−３−［（１−ナフチルオキシ）メチル］−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボキシレート（ＶＩｌ）
２-ニトロエタノールのピラニル誘導体（Synthesis，1993，12，1206-1208を参照）とエチル  ２−エチルアクリレートを反応させ、当該反応物を脱保護してエチル  ５−エチル−（３−ヒドロキシメチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボキシレート（２３％）を得た。この化合物を臭素化（ＣＢｒ4、ＰＰｈ3、９４％）した後、１−ナフトール（ＮａＨ、ＤＭＦ、８２％）と反応させて標記化合物を得た。
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ8.20（m，1H），7.81（d，1H），7.55-7.42（m，3H），7.36（m，1H），6.88（d，1H），5.01（dd，2H），4.22（m，2H），3.61（d，1H），3.07（d，1H），1.97（m，2H），1.27（t，3H），0.93（t，3H）
【０１０８】
実施例３０
（３Ｓ）−３−［（｛５−エチル−３−［（１−ナフチルオキシ）メチル］−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｐｐ）
製造例１９及び１０の化合物を、製造例４、実施例１及び２と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ8.51（br，1H），8.13（m，1H），7.87（m，1H），7.54-7.38（m，5H），7.02（m，1H），5.18-4.97（m，4H），4.71（m，1H），3.58（two d，1H），3.21（two d，1H），2.68（m，2H），1.97（m，1H），1.81（m，1H），0.86（two t，3H）
Mass：M+H 577
【０１０９】
実施例３１
（３Ｓ）−３−｛［（３−｛［（４−クロロ−１−ナフチル）オキシ］メチル｝−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル）カルボニル］アミノ｝−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（Ｉｑｑ）
製造例１９の中間体として得られたブロモ誘導体と４−クロロ−１−ナフトールを、製造例１９と同じ方法により反応させて、エチル  ５−エチル−３−［（４−クロロ−１−ナフチルオキシ）メチル］−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボキシレートを得、これを製造例４、実施例１及び２と同じ方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ8.65（m，1H），8.24-8.09（m，2H），7.78-7.35（m，4H），7.06（m，1H），5.17-5.07（m，4H），4.82-4.69（m，1H），3.45（two d，1H），3.23（two d，1H），2.83-2.52（m，2H），1.96-1.79（m，2H），0.86（two t，3H）
Mass：M+H 611
【０１１０】
製造例２０
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシブタノエート
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−β−ｔ−ブチルアスパラギン酸（３．０ｇ、９．２８ｍｍｏｌ）及びＮＭＭ（１．１２ｍＬ、１．１当量）へ、無水テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）を窒素雰囲気下で加えた。反応液を０℃に保持した。イソブチルクロロホルメート（１．２６ｍＬ、１．０５当量）を加え、当該混合物を約４０分間攪拌した。得られたスラリーを窒素下で濾過し、得られた溶液をＮａＢＨ4（７０２ｍｇ、２．０当量）溶液［メタノール（１０ｍＬ）−無水テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）］に−７８℃で加えた。得られた混合物を室温までゆっくり温めた（２時間）。酢酸（２．３ｍＬ）で反応を中止させ、反応溶液を減圧蒸留してメタノールを除去した。残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出し、水及び塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィで分離精製（酢酸エチル−ヘキサン、１：５）して、アルコール化合物（２．５２ｇ、収率８８％）を得た。
【０１１１】
得られた上記化合物のベンジルオキシカルボニル基を、水素バルーン下で１時間かけて除去（Ｐｄ／Ｃ）して、標記化合物（収率１００％）を得た。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ4.60（bs，1H），3.21（m，2H），2.96（m，1H），2.41（dd，1H），2.03（dd，1H），1.40（s，9H）
【０１１２】
製造例２１
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）ブタノエート（ＸＶＩ）
製造例１４の化合物を製造例４の方法により反応させて、活性カルボン酸誘導体（ＶＩＩｆ）を得た。当該活性カルボン酸誘導体（ＶＩＩｆ、２２４ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）、製造例２０で得たアミノアルコール誘導体（１６６ｍｇ、１．２当量）及びＨＡＴＵ（３９０ｍｇ、１．３当量）の混合物を０℃に冷却して、ＤＭＦ（５ｍＬ）溶媒中でトリエチルアミン（０．３３ｍＬ、３．０当量）を加え、得られた混合物を２時間反応させた。溶媒を減圧蒸留し、残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出し、水、重炭酸ナトリウム水溶液及び塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィ（６０〜７０％  ＥＡ／Ｈｅｘ）で精製して、標記化合物（３３０ｍｇ、収率９５％）を得た。
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ9.16（d，1H），8.55（d，1H），7.85（d，1H），7.73-7.70（m，3H），7.56（NH，d，1H），4.26（m，1H），4.12（d，1H），4.04（d，1H），3.79（d，1H），3.75（t，2H），2.94（bs，1H），2.57（m，2H），2.41（m，1H），1.10＆1.07（two d，6H）
【０１１３】
実施例３２  ６−（ｔｅｒｔ−ブチル）  １−エチル（２Ｅ，４Ｓ）−４−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−２−ヘキセンジオエート（Ｉｑ）
製造例２１で得た化合物（１０７ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）とデス−マーチン試薬（１５３ｍｇ、１．５当量）に無水ジクロロメタン（４ｍＬ）を加え、当該混合物を室温で１時間攪拌し、減圧濃縮した。残渣に無水ＴＨＦ（３ｍＬ）と（カルボエトキシメチレン）トリフェニルホスホラン（１０８ｍｇ、１．３当量）を加え、混合物を２時間加熱還流した。反応混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出し、水、飽和重炭酸ナトリウム水溶液及び塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧下で濃縮し、分取クロマトグラフィ（４０％酢酸エチル−ヘキサン）で予備精製して、標記化合物（９８ｍｇ、８０％）をジアステレオマーの３：１混合物で得た。
主異性体の1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ9.15（d，1H），8.54（d，1H），7.86（d，1H），7.74-7.62（m，4H），6.93（dd，1H），6.00（dd，1H），4.98（m，1H），4.19（qt，2H），4.02（d，1H），3.81（d，1H），2.58（m，2H），2.43（m，1H），1.36（s，9H），1.27（t，3H），1.07＆1.06（two d，6H）
【０１１４】
実施例３３
（３Ｓ，４Ｅ）−６−エトキシ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−６−オキソ−４−ヘキセン酸（Ｉｒｒ）
実施例３２で得た化合物を実施例２と同様の方法により反応させて、標記化合物を得た。
主異性体の1H-NMR（500MHz，MeOD-d3）δ9.04（d，1H），8.61（d，1H），8.52（d，1H），7.95（d，1H），7.81-7.68（m，3H），6.94（dd，1H），6.00（dd，1H），5.01（m，1H），4.17（qt，2H），3.90（d，1H），3.82（d，1H），2.71（d，2H），2.39（septet，1H），1.26（t，3H），1.07＆1.06（two d，6H）
MS：M+H 454
【０１１５】
実施例３４
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，４Ｅ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−（メチルスルホニル）−４−ペンテノエート（Ｉｒ）
製造例２１で得た化合物（１０９ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）とデス−マーチン試薬（１５７ｍｇ、１．５当量）に無水ジクロロメタン（４ｍＬ）を加え、当該混合物を室温で１時間攪拌し、減圧濃縮した。イソプロピルアルコール（０．５ｍＬ）で反応を中止させた。セライトを用いた減圧濾過で固体を除去した。濾液を酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出し、水、飽和重炭酸ナトリウム水溶液及び塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧下で濃縮してアルデヒド化合物（５４０ｍｇ、収率９９％）を得た。
【０１１６】
ジエチルメチルスルホノメタンホスホネート（１１３ｍｇ、２．０当量、Synthesis，1969，170を参照）をＴＨＦ（３ｍＬ）に溶解し、ＮａＨ（鉱油中６０％、２０ｍｇ、２．０当量）と上記で得られたアルデヒド化合物を加えて、得られた混合物を２時間還流した。酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した後、水、飽和重炭酸ナトリウム水溶液及び塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧下で濃縮し、分取クロマトグラフィ（６０％酢酸エチル−ヘキサン）で精製して、標記化合物（５２ｍｇ、４１％）をジアステレオマーの４：１混合物として得た。
主ジアステレオマーの1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ9.14（d，1H），8.55（d，1H），7.86（d，1H），7.76-7.65（m，4H），6.92（dd，1H），6.57（dd，1H），5.03（m，1H），4.02（d，1H），3.81（d，1H），2.94（s，3H），2.61（m，2H），2.41（septet，1H），1.36（s，9H），1.10＆1.08（two set of d，6H）
【０１１７】
実施例３５
（３Ｓ，４Ｅ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４,５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−（メチルスルホニル）−４−ペンテン酸（Ｉｓｓ）
実施例３４で得た化合物を実施例２と同様の方法により反応させて、標記化合物を得た。
主異性体の1H-NMR（500MHz，MeOD-d3）δ9.04（d，1H），8.52（d，1H），7.95（d，1H），7.82-7.69（m，3H），6.90（dd，1H），6.71（dd，1H），5.06（m，1H），3.86（m，2H），2.98（s，3H），2.76（d，2H），2.39（m，1H），1.08＆1.06（two set of d，6H）
MS：M+H  460
【０１１８】
実施例３６〜４２の製造方法
（イソ）キノリンアルデヒド（または１−または２−ナフトアルデヒド）とエチル  ２−エチルアクリレート（またはエチル  ２−プロピルアクリレート）を、製造例１、２及び３（または製造例１及び１６）と同じ方法により反応させて得られた化合物を、必要に応じてキラルＯＤカラムを用いる分取ＨＰＬＣを使用して、活性キラル異性体を単離するために精製した。単離された活性キラル異性体や不活性異性体を製造例４と同じ方法により加水分解し、得られた化合物とｔ−ブチル  ３−アミノ−５−フルオロ−４−ヒドロキシペンタノエートを、実施例１及び２と同じ方法により反応させて、下記実施例３６〜４２の標記化合物を得た。
【０１１９】
実施例３６
５−フルオロ−３−（｛［（５Ｓ）−３−（１−イソキノリニル）−５−プロピル-４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｔｔ）
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ9.02（t，1H），8.61（m，2H），8.08（d，1H），7.96（m，1H），7.85（t，1H），7.78（m，1H），5.05（bs，2H），4.73（m，1H），3.97-3.92（dd，1H），3.70-3.65（two d，1H），2.90-2.70（two m，2H），2.03（m，1H），1.91（m，1H），1.48（m，1H），1.32（m，1H），0.93（m，3H）
Mass：M+H 416
【０１２０】
実施例３７
３−（｛［（５Ｓ）−５−エチル−３−（１−ナフチル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｕｕ）
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ8.84（s，1H），8.59（bs，1H），8.02（m，2H），7.75（s，1H），7.60（m，3H），5.01（bs，2H），4.73（m，1H），3.87-3.82（dd，1H），3.70-3.65（two d，1H），2.82-2.73（two m，2H），2.05（m，1H），1.95（m，1H），0.96（m，3H）
Mass：M+H 401
【０１２１】
実施例３８
３−（｛［（５Ｓ）−５−エチル−３−（２−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｖｖ）
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ8.61（dd，1H），8.41（m，1H），8.02（m，3H），7.79（t，1H），7.65（t，1H），5.22-5.06（m，1H），4.72（m，1H），4.49-4.28（m，1H），3.84（m，1H），3.54（m，1H），2.99-2.54（two m，2H），2.01（m，1H），1.91（m，1H），0.91（m，3H）
Mass：M+H 402
【０１２２】
実施例３９
３−（｛［（５Ｒ）−５−エチル−３−（３−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｗｗ）
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ9.25＆9.16（two s，1H），8.08-7.64（m，5H），4.90-4.84（m，1H），4.79-4.54（m，2H），4.01-3.93（two d，1H），3.54（d，1H），3.03-2.87（m，2H），2.27-2.19＆2.10-2.01（two m，2H），1.10-1.06（m，3H）
Mass：M+H 402
【０１２３】
実施例４０
３−（｛［５−エチル−３−（８−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｘｘ）
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ8.98＆8.93（two m，1H），8.56-8.21（m，1H），8.03-7.94（m，2H），7.73（bs，1H），7.60（m，1H），7.53-7.48（two m，1H），4.94-4.64（m，3H），4.27-4.22（two d，1H），3.77（d，1H），3.07＆2.92（two m，2H），2.31-2.22（m，1H），2.12-2.05（m，1H），1.10（t，3H）
Mass：M+H 402
【０１２４】
実施例４１
３−（｛［５−エチル−３−（３−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉｙｙ）
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ9.32＆9.25（two d，1H），8.16-8.03（m，2H），7.83-7.73（m，3H），7.62-7.55（m，1H），4.95-4.76（m，3H），3.86（two d，1H），3.45-3.39（two d，1H），3.17-3.01（two m，1H），2.90-2.82（m，1H），2.27-2.20（m，1H），2.09-2.00（m，1H），1.10-1.05（m，3H）
Mass：M+H 402
【０１２５】
実施例４２
５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（２−キノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｚｚ）
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ8.24（m，1H），8.14（m，1H），8.04（d，1H），7.88（d，1H），7.79（m，1H），7.65（m，1H），7.51（bs，1H），5.13-4.35（m，3H），4.05-4.00（two d，1H），3.73（d，1H），3.05-2.82（m，2H），2.42（m，1H），1.10（m，6H）
Mass：M+H 416
【０１２６】
実施例４３〜４８の製造方法
芳香族アルデヒド（Bioorg．Med．Chem．Lett．，1996，6，p2173，J．Org．Chem．，1978，43，1372）とエチル  ２−エチルアクリレート（またはエチル  ２−イソプロピルアクリレート）を、製造例１、２及び３（または製造例１及び１６）と同様の方法により反応させて得られた化合物を、必要に応じてキラルＯＤカラムを用いる分取ＨＰＬＣを使用して、活性キラル異性体を単離するために精製した。単離された活性キラル異性体や不活性異性体を製造例４と同様の方法により加水分解し、得られた化合物とｔ−ブチル  ３−アミノ−５−フルオロ−４−ヒドロキシペンタノエートを実施例１及び２と同様の方法により反応させて、下記実施例４３〜４８の標記化合物を得た。
【０１２７】
実施例４３
３−（｛［５−エチル−３−（２−イソプロピルフェニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１）
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ8.53（bs，1H），7.40（m，2H），7.32（m，1H），7.25（m，1H），5.02（bs，2H），4.72（m，1H），3.60-3.54（two d，1H），3.46-3.43（two d，1H），3.40（m，1H），2.78-2.60（two m，2H），1.95（m，1H），1.85（m，1H），1.14（s，6H），0.88（m，3H）
Mass：M+H 393
【０１２８】
実施例４４
３−［（｛３−［３−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル］−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ２）
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ8.56（dd，1H），7.67（s，1H），7.48（m，1H），7.38（d，2H），5.24-5.12（q，1H），4.76-4.69（m，1H），4.59-4.26（m，1H），3.68（m，1H），3.49-3.43（two d，1H），2.96-2.56（two m，2H），1.98（m，1H），1.85（m，1H），1.29（s，9H），0.89（d，3H）
Mass：M+H 407
【０１２９】
実施例４５
３−［（｛３−［４−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル］−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ３）
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ8.52（bs，1H），7.58（m，2H），7.43（dd，2H），5.10（bs，2H），4.71-4.65（m，1H），3.65-3.59（two d，1H），3.40-3.35（two d，1H），2.86-2.60（two m，2H），1.94（m，1H），1.82（m，1H），1.24（s，9H），0.86（m，3H）
Mass：M+H 407
【０１３０】
実施例４６
５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（２−イソプロピルフェニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ４）
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ7.60-7.53（m，1H），7.41（m，2H），7.27-7.23（m，2H），5.20-4.91（m，1H），4.71（m，1H），4.54-4.42（m，1H），3.69-3.64（two d，1H），3.45-3.38（m，2H），3.12-2.77（m，2H），2.32（m，1H），1.22（d，6H），1.05（d，6H）
Mass：M+H 407
【０１３１】
実施例４７
３−［（｛（５Ｒ）−３−［３−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル］−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ５）
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ7.69（s，1H），7.48（d，1H），7.41（d，1H），7.35（t，1H），4.74-4.50（m，3H），3.69（d，1H），3.40（d，1H），3.06-2.77（m，2H），2.32（m，1H），1.33（s，9H），1.04（m，6H）
Mass：M+H 421
【０１３２】
実施例４８
３−｛［（３−［１，１’−ビフェニル］−３−イル−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル）カルボニル］アミノ｝−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ６）
３−ビフェニルカルボキシアルデヒド（Synthesis，2003，337を参照）を出発物質として使用して、標記化合物を得た。
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ8.42（bs，1H），7.87（d，1H），7.73-7.69（m，4H），7.52（m，1H），7.45（m，2H），7.38（m，1H），5.03（bs，2H），4.63（m，1H），3.73-3.57（m，2H），2.67-2.63（two m，2H），2.22（m，1H），0.89（m，6H）
Mass：M+H 441
【０１３３】
実施例４９〜５９の製造方法
４−置換ピリジン  ２−カルボキシアルデヒドを公知方法であるUS 6043248，JOC 1982，47，p4315）によって得、これらを製造例１、２及び３（または製造例１及び１６）と同様の方法により反応させた。得られた化合物を、必要に応じてキラルＯＤカラムを用いる分取ＨＰＬＣを使用して、活性キラル異性体を単離するために精製した。単離された活性キラル異性体や不活性異性体を製造例４と同様の方法により加水分解し、得られた化合物とｔ−ブチル  ３−アミノ−５−フルオロ−４−ヒドロキシペンタノエートを、実施例１及び２と同様の方法により反応させて、下記実施例４９〜５９の標記化合物を得た。
【０１３４】
実施例４９
３−（｛［５−エチル−３−（２−ピリジニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ７）
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ12.41（bs，1H），8.61（s，1H），8.59-8.53（dd，1H），7.87（m，1H），7.44（m，1H），5.19-5.04（two d，1H），4.70（m，1H），4.45-4.27（m，1H），3.67（m，1H），3.42（m，1H），2.95-2.53（two m，2H），1.96（m，1H），1.86（m，1H），0.85（m，3H）
Mass：M+H 352
【０１３５】
実施例５０
３−［（｛３−［４−（ｔｅｒｔ−ブチル）−２−ピリジニル］−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ８）
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ8.58（d，1H），7.90（s，1H），7.65（bs，1H），7.45-7.39（m，1H），4.98-4.68（m，3H），3.92＆3.88（two d，1H），3.52＆3.47（two d，1H），3.05-2.86（m，2H），2.23-2.18（m，1H），2.08-2.00（m，1H），1.38（s，9H），1.05（t，3H）
Mass：M+H 408
【０１３６】
実施例５１
３−［（｛（５Ｒ）−３−［４−（ｔｅｒｔ−ブチル）−２−ピリジニル］−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル｝カルボニル）アミノ］−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ９）
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ8.58（d，1H），7.88（d，1H），7.61（bs，1H），7.43（m，1H），4.84（m，1H），4.60（bs，2H），3.89-3.82（two d，1H），3.60-3.55（two d，1H），3.04-2.86（m，2H），2.38（m，1H），1.38（s，9H），1.07（m，6H）
Mass：M+H 422
【０１３７】
実施例５２
３−（｛［５−エチル−３−（４−イソブチル−２−ピリジニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１０）
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ8.58-8.52（dd，1H），8.49（s，1H），7.68（s，1H），7.27（s，1H），5.19-5.04（m，1H），4.69（m，1H），4.46-4.29（m，1H），3.68（m，1H），3.41-3.37（dd，1H），2.93-2.46（m，4H），1.95-1.85（two m，3H），0.86-0.82（m，9H）
Mass：M+H 408
【０１３８】
実施例５３
３−（｛［３−（４−アセチル−２−ピリジニル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１１）
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ8.79（d，1H），8.35（s，1H），7.76（d，1H），7.46（bs，1H），4.84-4.40（m，3H），3.90-3.85（two d，1H），3.51-3.46（two d，1H），3.04-2.84（m，2H），2.65（s，3H），HHHkdkdk2.16（m，1H），2.02（m，1H），1.03（m，3H）
Mass：M+H 394
【０１３９】
実施例５４
３−（｛［３−（４−シクロプロピル−２−ピリジニル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１２）
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ12.39（bs，1H），8.41（t，1H），7.56（d，1H），7.12（m，1H），5.19-5.04（m，1H），4.72-4.66（m，1H），4.46-4.27（m，1H），3.69-3.63（m，1H），3.39-3.35（two d，1H），2.80-2.74（m，1H），2.63-2.52（m，1H），2.00-1.80（m，3H），1.06（m，2H），0.86-0.80（m，5H）
Mass：M+H 392
【０１４０】
実施例５５
３−（｛［３−（４−シクロペンチル−２−ピリジニル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１３）
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ8.50（d，1H），7.67（m，2H），7.26（m，1H），4.88-4.82（m，1H），4.65（bs，2H），3.88-3.81（two d，1H），3.45-3.41（two d，1H），3.05（m，1H），2.96-2.80（m，2H），2.20-2.12（m，3H），2.02-1.96（m，1H），1.83（m，2H），1.72（m，2H），1.60（m，2H），1.01（t，3H）
Mass：M+H 420
【０１４１】
実施例５６
３−（｛［（５Ｒ）−３−（４−シクロペンチル−２−ピリジニル）−５-イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１４）
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ8.58（m，1H），7.74（d，1H），7.63（bs，1H），7.38-7.32（dd，1H），4.88-4.81（m，1H），4.53（bs，2H），3.87-3.79（two d，1H），3.56-3.53（two d，1H），3.12-3.04（m，1H），3.02-2.85（m，2H），2.38（m，1H），2.16（m，2H），1.88（m，2H），1.78（m，2H），1.65（m，2H），1.07（m，6H）
Mass：M+H 434
【０１４２】
実施例５７
３−（｛［３−（４−シクロヘキシル−２−ピリジニル）−５−エチル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１５）
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ8.61（m，1H），7.75（d，1H），7.64（bs，1H），7.39-7.33（dd，1H），4.86-4.53（two m，3H），3.87（t，1H），3.50-3.45（dd，1H），3.05-2.85（two m，2H），2.63（m，1H），2.22（m，1H），2.03（m，1H），1.93-1.80（two m，5H），1.44（m，5H），1.05（t，3H）
Mass：M+H 434
【０１４３】
実施例５８
３−（｛［５−エチル−３−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１６）
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ8.60-8.53（dd，1H），8.30（d，1H），7.15（d，1H），5.20-5.05（m，1H），4.74-4.66（m，1H），4.45-4.25（m，1H），3.75-3.68（m，1H），3.47-3.41（m，1H），2.94-2.88（m，2H），2.80-2.72（m，3H），2.62-2.53（m，1H），1.99-1.93（m，1H），1.88-1.80（m，1H），1.71-1.69（m，4H），0.88-0.84（m，3H）
Mass：M+H 406
【０１４４】
実施例５９
５−フルオロ−３−（｛［５−イソプロピル-３−（４−フェニル−２−ピリジニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１７）
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ8.68（d，1H），8.14（s，1H），7.68（m，1H），7.58（m，1H），7.54-7.43（m，5H），4.86-4.60（m，3H），3.92-3.87（two d，1H），3.62（d，1H），3.09-2.86（m，2H），2.39（m，1H），1.11-1.06（m，6H）
Mass：M+H 442
【０１４５】
実施例６０〜６３の製造方法
（２Ｓ）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−（｛［（５Ｒ）−5-イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソブタン酸［化合物（ＶＩＩｆ）とＡｓｐ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）−ＯＭｅのカップリング反応と加水分解により得られる）を、製造例５と同様の方法により反応させて、ブロモメチルケトン誘導体（ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ）−５−ブロモ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタノエート）を得た。このブロモメチルケトン誘導体をジフェニルホスフィン酸とＫＦ／ＤＭＦ（製造例５を参照）中で反応させて、ジフェニルホスホリルオキシメチルケトン誘導体を得、これを実施例２と同様の方法により反応させて、標記化合物（実施例６０の化合物）を得た。
【０１４６】
下記実施例６１〜６３の化合物は、１−フェニル−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−オール、３−ベンジル−４−ヒドロキシ−２（５Ｈ）−フラノン、またはイソ酪酸から、上記と同様にして得た。
【０１４７】
実施例６０
（３Ｓ）−５−［（ジフェニルホスホリル）オキシ］−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ１８）
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ8.92（m，1H），8.58（m，1H），8.05（m，1H），7.94（m，1H），7.81（m，1H），7.75-7.72（m，3H），7.57（m，3H），7.49（m，4H），7.35（m，2H），4.90-4.65（two m，3H），3.79-3.75（two d，1H），3.69-3.67（two d，1H），2.65（two m，2H），2.22（m，1H），0.84（m，6H）
Mass：M+H 614
【０１４８】
実施例６１
（３Ｓ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１-イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−｛［１−フェニル−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］オキシ｝ペンタン酸（Ｉａａ１９）
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ8.95（m，1H），8.83（d，1H），8.57（m，1H），8.03（d，1H），7.92（d，1H），7.80（m，1H），7.74（m，1H），7.65（d，1H），7.57（m，1H），7.51-7.34（m，3H），6.27（s，1H），5.29-5.15（m，2H），4.76（m，1H），3.92-3.88（m，1H），3.75-3.69（m，1H），2.84-2.60（m，2H），2.33（m，1H），0.96（m，6H）
Mass：M+H 624
【０１４９】
実施例６２
（３Ｓ）−５−［（４−ベンジル−５−オキソ-２，５−ジヒドロ−３−フラニル）オキシ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ２０）
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ8.97（t，1H），8.58（d，1H），8.04（d，1H），7.92（d，1H），7.81（m，1H），7.73（m，1H），7.23-7.07（m，6H），7.51（m，1H），4.79-4.65（m，3H），3.92-3.87（two d，1H），3.74-3.68（two d，1H），2.82-2.58（m，2H），2.31（m，1H），0.95（m，6H）
Mass：M+H 586
【０１５０】
実施例６３
（３Ｓ）−５−（イソブチリルオキシ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ２１）
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ12.39（bs，1H），8.96（t，1H），8.73（m，1H），8.58（dd，1H），8.04（d，1H），7.92（d，1H），7.81（t，1H），7.73（m，1H），4.78（m，2H），4.68（m，1H），3.87（t，1H），3.73-3.68（two d，1H），2.79-2.60（two m，2H），2.56（m，1H），2.31（m，1H），1.05（d，3H），0.95（m，9H）
Mass：M+H 484
【０１５１】
実施例６４
（３Ｓ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−ヘキセン酸（Ｉａａ２２）
（２Ｓ）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソブタン酸のＷｅｉｎｒｅｂアミド誘導体（Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミンと縮合した誘導体）と、ビニルマグネシウムブロマイドを反応させ、得られた化合物を実施例２と同様の方法により反応させて、標記化合物を得た。
1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ12.27（bs，1H），8.95（t，1H），8.74-8.67（two d，1H），8.58（m，1H），8.04（d，1H），7.92（d，1H），7.83-7.72（m，2H），6.47（m，1H），6.22-6.11（two dd，1H），5.71-5.62（two dd，1H），4.77（m，1H），3.90-3.79（m，1H），3.72-3.64（m，1H），2.82（m，1H），2.62-2.49（m，1H），2.30（m，1H），0.94（m，6H）
Mass：M+H 410
【０１５２】
製造例２２
ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−（２−ピリジニルオキシ）ペンタノエート（ＶＩＩＩｆ）
製造例５の中間体であるブロモメチルケトン誘導体Ｘ（３．２ｇ、７．９３ｍｍｏｌ）をベンゼン（３０ｍＬ）に溶解し、Ａｇ2ＣＯ3（２．６２ｇ、１．２当量）と２−ヒドロキシピリジン（０．９３ｇ、１．２当量）を加えた。当該混合物を８０℃で３日間還流しつつ攪拌した。当該反応物をセライトを通して濾過し、減圧濃縮し、カラムクロマトグラフィで精製して、２−ピリジニルオキシメチルケトン誘導体（ＸＩｆ）（４６６ｍｇ、収率１４％）を得た。
【０１５３】
得られた２−ピリジニルオキシメチルケトン誘導体（ＸＩｆ）（２２７ｍｇ、０．５４８ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン／メタノール（３：２ｖ／ｖ）混合溶媒（１０ｍＬ）に溶解し、ＮａＢＨ4（４３ｍｇ、２．０当量）を０℃で加え、当該混合物を室温で３０分間攪拌した。飽和塩化アンモニウム溶液で反応を終結させ、当該反応溶液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルで抽出し、水及び塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧濃縮して、ケトン基がヒドロキシルへ還元された化合物（ＸＩＩｆ）（２３０ｍｇ）を得た。
【０１５４】
上記で製造された化合物のベンジルオキシカルボニル基を水素バルーン下で４０分間除去（Ｐｄ／Ｃ）して、標記化合物（１５５ｍｇ、９９％）を得た。
【０１５５】
実施例６５〜６６の製造方法
化合物ＶＩＩｆ（またはＶＩＩｕ）とＶＩＩＩｆを実施例１及び２と同様の方法により反応させて、実施例６５〜６６の化合物を得た。ここで、ＶＩＩｕは５−エチル−３−（２−イソプロピルフェニル）−４,５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボン酸を表す。
【０１５６】
実施例６５
（３Ｓ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２−ピリジニルオキシ）ペンタン酸（Ｉａａ２３）
1H-NMR（500MHz，MeOH-d4）δ9.04（d，1H），8.50（d，1H），7.95（d，1H），7.81（d，1H），7.77（t，1H），7.69（t，1H），7.59（m，1H），6.85-6.80（m，2H），6.67（bs，1H），5.07（bs，1H），4.95（t，1H），4.84（m，1H），3.94-3.79（Abq，2H），2.92-2.80（m，2H），2.39（m，1H），1.09（m，6H）
Mass：M+H 491
【０１５７】
実施例６６
（３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（２−イソプロピルフェニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２−ピリジニルオキシ）ペンタン酸（Ｉａａ２４）
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ8.71（bs，1H），8.02-7.94（two bs，1H），7.71-7.64（m，1H），7.42-7.18（m，4H），6.96-6.90（two t，1H），6.85-6.80（two d，1H），4.99（bs，2H），4.86-4.78（m，1H），3.58（two d，1H），3.48（two d，1H），3.36（m，1H），2.81-2.61（m，2H），2.05-1.80（two m，2H），1.14-1.03（m，6H），0.93-0.88（m，3H）
Mass：M+H 468.21
【０１５８】
実施例６７
２−｛［（３Ｓ）−４−カルボキシル−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−２−オキソブチル］オキシ｝−１−メチルピリジニウム  トリフルオロメタンスルホネート（Ｉａａ２５）
実施例６５でデス−マーチン酸化反応後に得られた中間体である、ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４,５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２−ピリジニルオキシ）ペンタノエート（４９ｍｇ、９０μｍｏｌ）をジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解し、メチル  トリフルオロメタンスルホネート（１．１当量、１０．１μＬ）を加え、当該混合物を室温で１日間攪拌した。減圧濃縮した後、残渣を実施例２と同様の処理に付して標記化合物（６０ｍｇ）を得た。
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ9.00-8.91（m，2H），8.76-8.57（m，2H），8.42（m，1H），8.04（m，1H），7.93（m，1H），7.80（m，1H），7.75（m，1H），7.54（m，1H），5.77-5.48（m，2H），4.85-4.81（m，1H），4.00（s，3H），3.94-3.69（m，2H），2.87-2.60（m，2H），2.33（m，1H），0.98＆0.94（two d，6H）
Mass：M+ 505.20
【０１５９】
実施例６８
２−｛［（３Ｓ）−４−カルボキシル−３−（｛［５−エチル−３−（２−イソプロピルフェニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−２−オキソブチル］オキシ｝−１−メチルピリジニウム  トリフルオロメタンスルホネート（Ｉａａ２６）
実施例６６でデス−マーチン酸化反応後に得られた中間体である、ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−（｛［５−エチル−３−（２−イソプロピルフェニル）−４,５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソ−５−（２−ピリジニルオキシ）ペンタノエート（５５ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解し、メチル  トリフルオロメタンスルホネート（１．１当量、１３μＬ）を加え、当該混合物を室温で１日間攪拌した。減圧濃縮した後、残渣を実施例２と同様の処理に付して標記化合物を５９ｍｇ（９４％）得た。
1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ8.80-8.73（two d,1H），8.65（m，1H），8.45-8.38（m，1H），7.56-7.51（m，2H），7.43-7.31（m，3H），7.24-7.12（m，H），5.72-5.48（m，2H），4.91（m，1H），4.01＆3.99（two s，3H），3.64（two d，1H），3.48（two d，1H），3.42（m，1H），2.90-2.62（m，2H），2.05-1.80（two m，2H），1.15-1.03（m，6H），0.93-0.88（m,3H）
Mass：M+ 482.17
【０１６０】
実施例６９〜７０の製造方法：
５−クロロ−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−アルデヒドのオキシム誘導体または１，５−ジメチル−１Ｈ−インドール−２−アルデヒドのオキシム誘導体と、ｔ−ブチル  ３−アミノ−５−フルオロ−４−ヒドロキシペンタノエートを、製造例１、１７、４及び実施例１、２と同様の方法により反応させて、実施例６９〜７０の化合物を得た。
【０１６１】
実施例６９
３−（｛［３−（５−クロロ−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ２７）
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ7.59（s，1H），7.46-7.39（two d，1H），7.30-7.23（m，3H），5.01（m，1H），4.75-4.46（m，2H），4.02（d，1H），3.95（s，3H），3.71（d，1H），2.95（m，1H），2.77（m，1H），2.35（m，1H），1.04（m，6H）
Mass：M+H 452
【０１６２】
実施例７０
３−（｛［３−（１，５−ジメチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−５−イソプロピル−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−５−フルオロ−４−オキソペンタン酸（Ｉａａ２８）
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ7.48（bs，1H），7.39（d，1H），7.23-7.14（m，3H），4.76（m，1H），4.70-4.50（m，2H），4.07-4.02（two d，1H），3.99，3.94＆3.93（three s，3H），3.75-3.48（m，1H），2.94-2.82（two m，1H），2.46-2.43（two s，3H），2.34（m，1H），1.05（m，6H）
Mass：M+H 432
【０１６３】
製造例２３
（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボン酸の分割
５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボン酸を、６０℃に加熱してアセトン（１９０ｍＬ）に溶解し、（Ｓ）−α−メチル−ベンジルアミン（１４．５ｍＬ、１１２ｍｍｏｌ）を加えた。当該反応液を室温まで冷却し、４時間攪拌した。生成した沈澱物を濾過し、アセトン（４０ｍＬ）で３回洗浄した。
【０１６４】
得られた（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボン酸の（Ｓ）−α−メチル−ベンジルアミン塩を、９０℃に加熱してアセトンと水の４：１混合液（１５０ｍＬ）へ溶解し、室温まで冷却し、３時間攪拌した。生成した沈澱物を濾過し、アセトン（４０ｍＬ）で３回洗浄して、純粋な（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボン酸の（Ｓ）−α−メチル-ベンジルアミン塩（１２．８ｇ、２４．３％、９９．８％ｅｅ）を得た。
【０１６５】
（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾールカルボン酸の光学純度を、キラルセルＯＤカラム（４．６×２５０ｍｍ、５μｍ）を用いて測定した。移動相としてはｎ−ヘキサン／イソプロパノール／トリフルオロ酢酸（９２／８／０．１）を使用し、流速は１ｍＬ／分、カラム温度は４０℃、検出波長は２２５ｎｍとした。２つ光学異性体は、それぞれ７．８分（Ｒ異性体）と２１．１分（Ｓ異性体）のリテンションタイムで検出された。
【０１６６】
実施例７１
化合物（Ｉｉｉ−１）の分割
１）シード化合物の分離
実施例１６の２つのジアステレオマーは、分取用液体クロマトグラフィシリカカラム（直径４０ｍｍ、ＤＹＮＡＭＡＸ−１００Å）を使用して分離した。移動相としてはｎ−ヘキサン／エタノール／トリフルオロ酢酸（４０００／３２／２）を使用し、流速は５０ｍＬ／分とし、検出波長２２７ｎｍでリテンションタイム６２〜６６分で所望のジアステレオマーを９９：１の割合で得た（８６分まで継続的して比率が変わりつつ、２つのジアステレオマーがブロードに溶出した）。このようにして得られた９９：１比率のジアステレオマーを脱保護し、分割のためのシードとして用いた。
【０１６７】
光学純度は、アトランティスＣ18カラム（４．６×２５０ｍｍ、５μｍ）を使って測定した。移動相としては、アセトニトリル／水／トリフルオロ酢酸の混合物を、下記勾配で１ｍＬ／分の流量で用いた：
ｔ  ＝  ０分、  ０：１００：０．１
３分、  ２０：８０：０．１
５０分、  １００：０：０．１
【０１６８】
検出波長２２７ｎｍを使用したとき、２つ光学異性体は、それぞれ３６．６分（３Ｒ、５Ｒ異性体）と３７．１分（３Ｓ、５Ｒ異性体）のリテンションタイムで検出された。
【０１６９】
（３Ｓ、５Ｒ異性体）：ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタノエート
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ9.13（d，1H），8.55（d，1H），7.85（d，1H），7.78-7.65（m，4H），5.22-5.02（two m，2H），4.90（m，1H），4.02（d，1H），3.80（d，1H），2.92-2.88（dd，1H），2.79-2.75（dd，1H），2.41（m，1H），1.34（s，9H），1.09（m，6H）
Mass：M+H 472
【０１７０】
（３Ｒ、５Ｒ異性体）：ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｒ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタノエート
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ9.14（d，1H），8.56（d，1H），7.87（d，1H），7.77-7.64（m，4H），5.25-5.00（two q，2H），4.90（m，1H），4.03（d，1H），3.82（d，1H），2.93（dd，1H），2.77（dd，1H），2.42（m，1H），1.35（s，9H），1.11（m，6H）
Mass：M+H 472
【０１７１】
（３Ｓ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｉｉ−１）
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ9.07（d，1H），8.57（d，1H），7.89（d，1H），7.78-7.69（m，3H），7.69（d，1H），4.88-4.79（m，2H），4.67（bs，1H），4.07（d，1H），3.81（d，1H），3.08-2.93（m，1H），2.91-2.82（m，1H），2.43（m，1H），1.12（m，6H）
Mass：M+H 416
【０１７２】
（３Ｒ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｉｉ−２）
1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ9.07（d，1H），8.55（d，1H），7.87（d，1H），7.75-7.68（m，3H），7.52（bs，1H），5.20-4.35（m，3H），4.02（d，1H），3.80（d，1H），3.13-2.90（m，2H），2.39（m，1H），1.08（m，6H）
Mass：M+H 416
【０１７３】
２）再結晶
（３Ｓ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸（Ｉｉｉ−１）
粗ｔ−ブチル  ５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタノエート（３６６ｇ）を塩化メチレン（１．９ｋｇ）に溶解し、０℃まで冷却した。トリエチルシラン（２３５ｇ）とトリフルオロ酢酸（１．８８ｋｇ）を加えて、０℃で１時間攪拌した。当該反応混合物を減圧蒸留し、酢酸エチル（２．４ｋｇ）に再溶解し、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（３．１Ｌ）を加えてｐＨを５．２に調整した。有機層を分離して、水層を酢酸エチル（２．４ｋｇ）で一度抽出した。合わせた有機層を減圧蒸留して溶媒を除去し、得られた残渣をメチル−ｔ−ブチルエーテル（５３０ｇ）に溶解し、少量の（３Ｓ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸の結晶を添加した。室温で１６時間攪拌した後、生成した沈澱を濾過し、メチル−ｔ−ブチルエーテルとｎ−ヘキサンの９：１の混合液（２１０ｍＬ）で洗浄した。
【０１７４】
得られた（３Ｓ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソキサゾリル］カルボニル｝アミノ）−４−オキソペンタン酸を、５０℃に加熱して酢酸エチル（２４０ｍＬ）に溶解し、ｎ−ヘキサン（２４０ｍＬ）をゆっくり加え、室温まで徐々に冷却した。室温で２４時間攪拌した後、生成した沈澱を濾過し、酢酸エチルとｎ−ヘキサンの１：１混合液（３０ｍＬ）で洗浄して、標記化合物（Ｉｉｉ−１、４６．０ｇ、３Ｓ／３Ｒ＝９４／６．０）を得た。光学純度は、ルナカラム（４．６×２５０ｍｍ、５μｍ、Ｃ18）を用いて測定した。移動相はアセトニトリル／２０ｍＭ  ＮＨ4ＯＡｃ（ｐＨ＝６）（３０／７０）の混合物を使用し、流速は１ｍＬ/分とした。検出波長２２７ｎｍを使用したとき、２つの光学異性体は、それぞれ８．０分（３Ｒ異性体）と９．０分（３Ｓ異性体）で検出された。
【０１７５】
実験例１
カスパーゼ阻害効果の測定
α2β2体のシステインプロテアーゼとして知られているカスパーゼ−１とカスパーゼ−８を、公知の方法であるThornberry，N．A．et al，Nature，1992，356，768、Thornberry，N．A．Methods in Enzymology，1994，244，615、Walker，N．P．C．et al．Cell，1994，78，343）を変形した方法で、発現させ、精製し及び活性化し、また、同様にしてカスパーゼ−９を精製し、それらに対する阻害活性を試験した。簡略に記述すると、ｐ１０とｐ２０サブユニット（Thornberry，N．A．et al，Nature，1992，356，768）を大腸菌で発現させ、ニッケルカラムとアニオン交換クロマトグラフィで精製して、カスパーゼ−１、カスパーゼ−８及びカスパーゼ−９を得た。得られたカスパーゼ−１に対する蛍光基質であるＡｃＹＶＡＤ−ＡＦＣ、カスパーゼ−８に対するＡｃＤＥＶＤ−ＡＦＣ、カスパーゼ−９に対するＡｃＬＥＨＤ−ＡＦＣを、合成された阻害剤の特異的活性の測定ために使用した。酵素反応は、５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５０）、１０％（ｗ／ｖ）スクロース、０．１％（ｗ／ｖ）ＣＨＡＰＳ、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１０ｍＭ  ＤＴＴを含む緩衝液中で、１０ｎＭカスパーゼ−１のための５０μＭ  ＡｃＹＶＡＤ−ＡＦＣ、２．１ｎＭカスパーゼ−８のための５０μＭ  ＡｃＤＥＶＤ−ＡＦＣ、及び２００ｎＭカスパーゼ−９のための１５０μＭ  ＡｃＬＥＨＤ−ＡＦＣの存在下、多用な濃度の阻害剤と共に２５℃で遂行した。阻害剤の阻害定数であるＫi及びＫobs値は、蛍光分光器を使って経時的に反応速度を測定し、初期速度定数（initial rate  constant）を得ることによって決定した。Ｋiはラインウェーバー−バークプロットから、Ｋobsは下記数式１から求めた。
数式１
Ｋobs＝−ｌｎ（１−Ａt／Ａ00）／ｔ
上記式中、
Ａｔは時間ｔでの解離率（％）を表し、
Ａ00は解離率（％）を表す。
【０１７６】
蛍光分光器としてはＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅ社のＳｐｅｃｔｒａ  ＭＡＸ  ＧｅｍｉｎｉＸＳ  蛍光分光計を使用し、励起波長は４０５ｎｍ、放射波長は５０５ｎｍとした。
【０１７７】
阻害剤の細胞内阻害活性は、Ｊｕｒｋａｔ細胞（ＡＴＣＣ  ＴＩＢ−１５２）をＦａｓ抗体（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  ０５−２０１）を用いたアポトーシスに付し、Francoeur A．M．及びAssalian A．（1996）Biochemica 3，19-25に記載の公知方法であるＷＳＴ−１に従って色の変化を検出し、阻害剤により細胞を処理した際の生存Ｊｕｒｋａｔ細胞の量を観察することにより決定した。分光計としてはＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅ社のＳｐｅｃｔｒａ  ＭＡＸ３４０分光計を用い、吸光（Absorbance）波長は４４０ｎｍとした。
【０１７８】
【表１】
2007503429.tif 000012
【０１７９】
実験例２
マウスにおいてＬＰＳにより誘発された急性肝炎に対するの治療効果
ステップ１）  血液サンプルの調製
雌性Ｂａｌｂ／ｃマウス（６週齢、Charles River Laboratory、大阪、日本）を、２２℃、５５％の相対湿度下、１２時間の昼夜サイクルの条件下で飼育した。この時、飼料と水は自由に供給した。発熱物質が除去された食塩水に、ＬＰＳ（リポポリサッカライド）とＤ−ガラクトースアミンをそれぞれ０．４ｍｇ／ｍＬと２８０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解して、これらを１：１に混合した溶液を５ｍＬ／ｋｇの量で注射した。ＬＰＳとＤ−ガラクトースアミンを注射した直後に、試験化合物が溶解されているビヒクル（ＰＥＧ４００：エタノール：Ｔｗｅｅｎ８０＝１５：７．５：２．５の混合物を、食塩水で５倍に希釈したもの）またはビヒクル単独を、マウスに腹腔内注射した。薬剤注射から８時間後、心臓から血液サンプルを得た。
【０１８０】
ステップ２：血漿アミノトランスフェラーゼ活性の測定
ステップ１で得た血液サンプルについて、ＡＬＴアッセイキット（ASAN Pharm．Co．、ソウル、韓国）を使い、メーカーの使用説明書に従って、血漿ＡＬＴ活性を測定した。その結果、ＬＰＳとＤ−ガラクトースアミンの投与が血漿中のＡＬＴ活性を急激に上昇させ、試験物質が上昇した酵素活性を容量依存的に抑制することが確認された。これらの結果に基づいて、試験物質のＥＤ50値を、ＧｒａｐｈＰａｄ社のＰｒｉｓｍソフトウェアを用いて算出して、０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇとの値を得た。
【０１８１】
実験例３
ＳＤ系列ラットにおける肝繊維形成に対する阻害効果
ステップ１）  肝繊維形成の誘導と投薬
雄性Ｓｐａｒｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系列ラット（６週齢、Korea Biolink）を、２２℃、５５％の相対湿度下、１２時間の昼夜サイクルの条件下で飼育した。この時、飼料と水は自由に供給した。胆管の結紮のために、ラットをハロタン１％で麻酔して開腹し、胆管の末端部とその近接部を結紮し、結紮部位の間を切った後、２ｍＬ生理食塩水を注入した後、縫合した。
【０１８２】
試験化合物（Ｉｉｉ）を、３ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇの容量で１日２回経口投与した。即ち、化合物を共溶媒（ＰＥＧ４００：エタノール：Ｔｗｅｅｎ８０＝１５：７．５：２．５）に溶解し、リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で５倍に希釈して投与した。対照群には、試験化合物無しの溶液を投与した。投与は、胆管を結紮してから１週間後、１週間にわたり投薬した。
【０１８３】
ステップ２：組織切片の調製とシリウスレッド染色
投薬終了後、ラットを殺した。肝臓を１０％中性ホルマリンにより固定して５μｍ厚さのパラフィン切片を調製し、０．１％シリウスレッド（Direct red 80、Sigma）で染色した。組織切片は光学顕微鏡で調べ、赤色に染色されたコラーゲン繊維を観察した。その結果を図１に示す。
【０１８４】
実験例４
ＳＤラットにおける胆汁停滞中のアポトーシスに対する抑制効果
実験例３のステップ１の通り、胆管結紮したＳＤラットに試験化合物（Ｉｉｉ）を投薬した。手術から２週間後にラットを殺した。肝臓を１０％中性ホルマリンにより固定して５μｍ厚さのパラフィン切片を調製した。Ａｐｏｐタグペルオキシダーゼ  Ｉｎ  Ｓｉｔｕアポトーシス検出キット（Chemicon）を使い、メーカーの使用説明書に従って、ＴＵＮＥＬ染色を行なった。ＴＵＮＥＬ染色された肝組織を、２００倍の倍率で１０ヶ所以上重ならないように写真を撮って、図２に示した。各処理群でアポトーシスが起きた細胞の数を計算して、下記表２に示した。下記表で、擬似手術は胆管のみ露出して結紮しない場合を意味し、ＢＤＬ手術は胆管結紮手術後にビヒクルのみを投与した場合を意味する。
【０１８５】
【表２】
2007503429.tif 000013
【０１８６】
結論
胆汁停滞を通して肝繊維形成を誘導することにより確立したモデルをＴＵＮＥＬ染色することによって、化合物（Ｉｉｉ）によるアポトーシスの阻害効果（７５％抑制）を示した。また、肝組織切片をシリウスレッド染色すると、対照群では激しい繊維形成が生じたが、阻害剤化合物（Ｉｉｉ）投与群の場合、肝繊維形成はほとんど観察されなかった。この結果は、ラットにおける肝繊維形成に対する化合物（Ｉｉｉ）の阻害効果を示すので、化合物（Ｉｉｉ）は、臨床的にも肝細胞アポトーシスを抑制することにより肝硬変の進行を抑制できる薬理活性を発揮できるものと予測される。さらに、胆汁停滞性の肝硬変だけでなく、アポトーシスによる肝繊維化を含む様々な肝臓疾患にも広く使われる可能性がある。
【０１８７】
実験例５
ラットにおける消炎効果
雄性ＳＤラット（６週齢、オリエント）を、２２℃、５５％の相対湿度下、１２時間の昼夜サイクルの条件下で飼育した。この時、飼料と水は自由に供給した。浮腫を誘導する前に、各ラットの足の容量を足容積測定装置（plethysmometer）により測定した。浮腫を誘導する前に、試験化合物が溶解されているビヒクル（ＰＥＧ４００：エタノール：Ｔｗｅｅｎ８０＝１５：７．５：２．５の混合物をリン酸緩衝液で１０倍希釈したもの）またはビヒクル単独を、ラットに経口投与した。カラギーナン（gamma）を食塩水へ１％の濃度で溶解し、各ラットの右側後足に１００μＬずつ皮下注射した。３時間後、足容積測定装置で右足の容量を再度測定した。試験化合物の効果を、浮腫抑制（％）で示した（表３を参照）。浮腫抑制％は、下記数式２を用いて求めた。
数式２
浮腫抑制（％）＝１００×（ビヒクル投与群で増加した足の容量の平均−試験化合物投与群で増加した足の容量）／ビヒクル投与群で増加した足の容量の平均
【０１８８】
【表３】
2007503429.tif 000014
【０１８９】
実験例６
ラットにおけるリウマチ性関節炎の治療効果
雌性ルイスラット（７週齢、Charles River、日本）を、２２℃、５５％の相対湿度下、１２時間の昼夜サイクルの条件下で飼育した。この時、飼料と水は自由に供給した。ＩＩ型コラーゲン（bovine）を、０．０５Ｍ酢酸に２ｍｇ／ｍＬの濃度で４℃で溶解し、この溶液に同量の完全フロイト補助剤（Complete Freund's adjuvant）を加え、４℃で乳化させた。この乳液０．１ｍＬをルイスラットの尻尾に皮下注射した。７日後、この乳液を再度同じ方法で注射した。第２回目の乳液を注射した日から、試験化合物が溶解されているビヒクル（ＰＥＧ４００：エタノール：Ｔｗｅｅｎ８０＝１５：７．５：２．５の混合物をリン酸緩衝液で１０倍希釈したもの）またはビヒクル単独を、実験動物に毎日経口投与した。コラーゲン含有乳液の第１回目の投与から１４日後に、ラットの右側後足の容量を足容積測定装置で測定した（表４を参照）。浮腫抑制（％）は、下記数式３を用いて求めた。
数式３
浮腫抑制（％）＝１００×（１４日目のビヒクル投与群で増加した足の平均容量−１４日目の試験物質投与群で増加した足の容量）／１４日目のビヒクル投与群で増加した足の平均容量
【０１９０】
また、１４日目の増加した足の容量から、スチューデントｔ−テストによりｐ値を求め、有意性を確認した。
【０１９１】
【表４】
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【０１９２】
ラットでの足浮腫試験において、阻害剤化合物（Ｉｉｉ）は、３、３０、１００ｍｇ／ｋｇの容量で、容量依存的にそれぞれ約２、２１、２３％程度の浮腫抑制効果を示した。リウマチ性関節炎モデルでも、陰性対照群で最高の浮腫を示した時点である１４日目において、化合物（Ｉｉｉ）投与群では足の浮腫が有意に減少した（約７０％減少）。以上の結果から、化合物（Ｉｉｉ）は炎症性疾患モデルで炎症の進行を抑制する効果があるものと判断されるので、リウマチ性関節炎と同じ自己免疫性の炎症性疾患も治療可能と考えられる。
【０１９３】
実験例７
公知化合物との効果の比較
本発明に係る化合物（Ｉｉｉ）と、ＰＣＴ／ＫＲ００／０１０４７（ＷＯ０１／２１６００）で公知にされたＬＢ８４０６８ＭＰ（化合物６８）を試験紙、その結果を下記表５に示した。
【０１９４】
【表５】
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【０１９５】
上記表５の結果から分かるように、本発明に係る化合物（Ｉｉｉ）では、カスパーゼ−８とＪｕｒｋａｔ細胞に対する阻害効果がＬＢ８４０６８ＭＰに比べて１０倍以上増加しており、ＬＰＳで誘発した急性肝炎モデル（マウス）での治療効果も、１００倍程度増加していることを確認することができた。また、物理化学的な特性でも溶解度が向上しているので、注射剤として容易に使用することができる。従って、本発明に係る化合物は、ＬＢ８４０６８ＭＰと比較して活性と物理化学的性質で、より一層改善された効果を示している。
【図面の簡単な説明】
【０１９６】
【図１】図１は、胆汁停滞による肝繊維症に対する阻害剤化合物（Ｉｉｉ）の抑制効果を示す：図１で“ａ）”は擬似手術の場合を示し、“ｂ）”は、胆管結紮手術後、ビヒクルのみを投与したＢＤＬ手術の場合を示し、“ｃ）”は胆管結紮から一週間後、一週間の間、阻害剤化合物（Ｉｉｉ）を３ｍｇ／ｋｇずつ一日２回経口投与する場合を示し、“ｄ）”は胆管結紮から一週間後、一週間の間、阻害剤化合物（Ｉｉｉ）を１０ｍｇ／ｋｇずつ一日２回経口投与した場合を示す。
【図２】図２は、胆汁停滞による肝細胞アポトーシスに対する阻害剤化合物（Ｉｉｉ）の抑制効果を示す：図２で“ａ）”は擬似手術の場合を示し、“ｂ）”は、胆管結紮手術後、ビヒクルのみを投与したＢＤＬ手術の場合を示し、“ｃ）”は、胆管結紮から一週間後、一週間の間、阻害剤化合物（Ｉｉｉ）を３ｍｇ／ｋｇずつ一日２回経口投与する場合を示し、“ｄ）”は、胆管結紮から一週間後、一週間の間、阻害剤化合物（Ｉｉｉ）を１０ｍｇ／ｋｇずつ一日２回経口投与した場合を示し、“ｅ）”は、それぞれの処理群でアポトーシスした肝細胞の数を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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