(57)【要約】  本発明は第二世代脂肪酸コンジュゲート及びその医薬組成物に関する。第二世代脂肪酸コンジュゲートは癌の治療を要するヒトの癌の治療に有益である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
タキソイド及びオメガ-3脂肪酸を含むコンジュゲートにおいて、タキソイドが第二世代タキソイドであることを特徴とするコンジュゲート。
【請求項２】
第二世代タキソイドがSB-T-1214である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項３】
第二世代タキソイドがSB-T-1213である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項４】
第二世代タキソイドがSB-T-1216である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項５】
第二世代タキソイドがSB-T-1103である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項６】
第二世代タキソイドがオルタタキセルである、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項７】
第二世代タキソイドがSB-T-11033である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項８】
第二世代タキソイドがSB-T-1104である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項９】
第二世代タキソイドがSB-T-11043である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項１０】
第二世代タキソイドがSB-T-1107である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項１１】
第二世代タキソイドがSB-T-11073である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項１２】
第二世代タキソイドがSB-T-121303である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項１３】
第二世代タキソイドがSB-T-121403である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項１４】
第二世代タキソイドがSB-T-121603である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項１５】
第二世代タキソイドがSB-T-121703である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項１６】
第二世代タキソイドがSB-T-12821である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項１７】
第二世代タキソイドがSB-T-128221-3である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項１８】
オメガ-3脂肪酸がドコサヘキサン酸である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項１９】
オメガ-3脂肪酸がエイコサペンタエン酸である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項２０】
オメガ-3脂肪酸がα-リノレン酸である、請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項２１】
タキソイド及びオメガ3-脂肪酸を含むコンジュゲートを含む医薬組成物において、タキソイドが第二世代タキソイドであることを特徴とする医薬組成物。
【請求項２２】
第二世代タキソイドがオルタタキセルである、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２３】
第二世代タキソイドがSB-T-121303である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２４】
第二世代タキソイドがSB-T-1103である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２５】
第二世代タキソイドがSB-T-1214である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２６】
第二世代タキソイドがSB-T-1216である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２７】
第二世代タキソイドがSB-T-11033である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２８】
第二世代タキソイドがSB-T-1104である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２９】
第二世代タキソイドがSB-T-11043である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項３０】
第二世代タキソイドがSB-T-1107である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項３１】
第二世代タキソイドがSB-T-11073である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項３２】
第二世代タキソイドがSB-T-1213である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項３３】
第二世代タキソイドがSB-T-121403である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項３４】
第二世代タキソイドがSB-T-121603である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項３５】
第二世代タキソイドがSB-T-121703である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項３６】
第二世代タキソイドがSB-T-12821である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項３７】
第二世代タキソイドがSB-T-128221-3である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項３８】
オメガ-3脂肪酸がドコサヘキサン酸である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項３９】
オメガ-3脂肪酸がエイコサペンタエン酸である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項４０】
オメガ-3脂肪酸がα-リノレン酸である、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項４１】
癌の治療を要するヒトの癌の治療方法（その方法はタキソイド及びオメガ3-脂肪酸を含む有効量のコンジュゲートを投与することを含む）において、タキソイドが第二世代タキソイドであることを特徴とする治療方法。
【請求項４２】
第二世代タキソイドがオルタタキセルである、請求項４１記載の方法。
【請求項４３】
第二世代タキソイドがSB-T-121303である、請求項４１記載の方法。
【請求項４４】
第二世代タキソイドがSB-T-1103である、請求項４１記載の方法。
【請求項４５】
第二世代タキソイドがSB-T-1214である、請求項４１記載の方法。
【請求項４６】
第二世代タキソイドがSB-T-1216である、請求項４１記載の方法。
【請求項４７】
第二世代タキソイドがSB-T-11033である、請求項４１記載の方法。
【請求項４８】
第二世代タキソイドがSB-T-1104である、請求項４１記載の方法。
【請求項４９】
第二世代タキソイドがSB-T-11043である、請求項４１記載の方法。
【請求項５０】
第二世代タキソイドがSB-T-1107である、請求項４１記載の方法。
【請求項５１】
第二世代タキソイドがSB-T-11073である、請求項４１記載の方法。
【請求項５２】
第二世代タキソイドがSB-T-1213である、請求項４１記載の方法。
【請求項５３】
第二世代タキソイドがSB-T-121403である、請求項４１記載の方法。
【請求項５４】
第二世代タキソイドがSB-T-121603である、請求項４１記載の方法。
【請求項５５】
第二世代タキソイドがSB-T-121703である、請求項４１記載の方法。
【請求項５６】
第二世代タキソイドがSB-T-12821である、請求項４１記載の方法。
【請求項５７】
第二世代タキソイドがSB-T-128221-3である、請求項４１記載の方法。
【請求項５８】
オメガ-3脂肪酸がドコサヘキサン酸である、請求項４１記載の方法。
【請求項５９】
オメガ-3脂肪酸がエイコサペンタエン酸である、請求項４１記載の方法。
【請求項６０】
オメガ-3脂肪酸がα-リノレン酸である、請求項４１記載の方法。
【請求項６１】
癌が乳癌である、請求項４１記載の方法。
【請求項６２】
癌が卵巣癌である、請求項４１記載の方法。
【請求項６３】
癌が肺癌である、請求項４１記載の方法。
【請求項６４】
癌が頭部癌である、請求項４１記載の方法。
【請求項６５】
癌が首部癌である、請求項４１記載の方法。
【請求項６６】
癌が結腸癌である、請求項４１記載の方法。
【請求項６７】
癌が膵臓癌である、請求項４１記載の方法。
【請求項６８】
癌がメラノーマ癌である、請求項４１記載の方法。
【請求項６９】
癌が脳癌である、請求項４１記載の方法。
【請求項７０】
癌が腎臓癌である、請求項４１記載の方法。
【請求項７１】
癌が前立腺癌である、請求項４１記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この出願に記載された発明は国立健康協会からの基金、交付番号R01 GM427980及びR01 CA103314によりなされた。米国政府はこの発明に或る種の権利を有する。
この出願は2003年10月30日に出願された米国仮特許出願第60/515,783号の優先権を主張し、その明細書が参考としてそのまま含まれる。
【背景技術】
【０００２】
パクリタキセル（タキソール（登録商標））及びドセタキセル（タキソテール（登録商標））はヒトの腫瘍に対する化学療法における臨床使用について認可された最も重要な坑腫瘍薬のうちの二つである。パクリタキセルは天然産タキサンであり、これは初期に太平洋のイチイ属樹木である、タキサス・ブレビフォリア(Taxus Brevifolia)の樹皮から単離された。
ドセタキセルはパクリタキセルの半合成同族体である。ドセタキセルは臨床使用についてFDAにより認可された、最初の“タキソイド”、即ち、タキソールのような化合物である。
これらの２種の第一世代タキサン坑癌剤は転移性乳癌、進行卵巣癌、頭部及び首部の癌、非小細胞肺癌、並びにカポージ肉腫を含む、種々の腫瘍を治療するのに臨床上使用されていた。パクリタキセル及びドセタキセルの両方は或る種の腫瘍に対し強力な坑腫瘍活性を有するが、それらはその他の癌、例えば、結腸癌、膵臓癌、メラノーマ癌、及び腎臓癌に対し効力を示さない。
加えて、第一世代タキサンは望ましくない副作用だけでなく、治療後の多種薬物耐性(MDR)の傾向がある。MDRは通常P-糖タンパク質(Pgp)を過剰発現する細胞に起因する。Pgpはパクリタキセル及びドセタキセルを含む、疎水性坑癌剤を流出する有効なATP結合カセット(ABC)トランスポーターである。
【０００３】
現行の癌化学療法は迅速に増殖している腫瘍細胞がおそらく健康な細胞よりも細胞傷害性薬物により死滅されるという前提に基づいている。しかしながら、実際には、健康な組織と較べて腫瘍組織に対する現行の薬物の活性の差異は比較的小さい。
例えば、パクリタキセル、シスプラチン、ドキソルビシンのような代表的な細胞傷害性化学療法薬、及びその他の広く使用されている坑癌薬は癌細胞を正常な分裂細胞から区別することができないことが公知である。こうして、これらの薬物と関連する種々の望ましくない副作用が癌化学療法で生じる。
それ故、癌化学療法における絶え間ない挑戦は健康な細胞よりも腫瘍細胞について大きい選択性を有する新規細胞傷害性薬剤を開発することである。
特別な天然脂肪酸が生化学的前駆体及びエネルギー源としての使用のために腫瘍により強欲に吸収されることが示されていた。これらの脂肪酸として、オメガ-3脂肪酸、例えば、ドコサヘキサン酸(DHA)、エイコサペンタエン酸(EPA)、及びα-リノレン酸(LNA)が挙げられる。
DHAは細胞膜の成分であり、代謝経路及び生化学的経路のための前駆体として使用される。それはまたヒト母乳中に見られる脂肪酸であり、米国FDAにより栄養添加剤として分類される。
米国特許第5,795,909号、同第5,919,815号及び同第6,080,877号はパクリタキセル及びドセタキセルの如き第一世代タキサン坑癌剤に複合されたDHAを開示している。DHA-パクリタキセルコンジュゲートは動物研究で坑腫瘍活性を示した。望ましくない副作用を軽減する際のDHA-パクリタキセルコンジュゲートの能力は腫瘍細胞へのコンジュゲートのその選択的ターゲッティング並びに未複合パクリタキセルと較べて一層低い用量の使用に起因する。
例えば、120mg/kgの最適用量のDHA-パクリタキセルがマジソン109皮下肺腫瘍モデルで肺腫瘍異種移植体の完全回帰をもたらすことが報告されていた（Bradleyら, Clinical Cancer Research (2000) 7, 3229-3238）。その回帰は全てのマウスで60日にわたって持続された。マウスでは、DHA-パクリタキセルがパクリタキセルよりも74倍低い分布の容積及び94倍低いクレアランス速度を示す。DHA-パクリタキセルは血漿中で安定であり、高濃度が時間の長い期間にわたってマウス血漿中で維持される。対照的に、20mg/kgの最適用量のパクリタキセルはいずれのマウスでも腫瘍の完全回帰又は部分回帰を生じなかった。コンジュゲート薬物は腫瘍細胞により代謝されてパクリタキセルを放出するまで細胞傷害性薬剤として不活性であることが明らかである。
【０００４】
それ故、DHA-パクリタキセルはパクリタキセル単独よりも毒性ではない。結果として、一層高いモル用量のコンジュゲートが投与し得る。動物モデルで実証された効力に基づいて、DHA-パクリタキセルはヒト臨床試験に入り、現在フェーズIIIである。
提案された薬物送出メカニズムによれば、DHA-パクリタキセルが腫瘍細胞により吸収され、内在化され、癌細胞中でエステラーゼにより徐々に加水分解されて活性な細胞傷害性薬剤（例えば、パクリタキセル）を放出する。しかしながら、癌細胞が活性なトランスポーター（即ち、“外向きフラックスポンプ”）を過剰発現している場合、パクリタキセル分子は、たとえDHAから徐々に放出された場合であっても、外向きフラックスポンプにより捕捉され、癌細胞から排除されるであろう。こうして、DHA-パクリタキセルの効力は薬物耐性癌に対し充分に活性ではないようにされることがあり得る。
その発明者らの研究所で行なわれた構造-活性関係(SAR)研究はC-2位、C-3'位、及びC-3'N位にあるパクリタキセルのフェニル部分がその強力な細胞障害性及びチューブリン結合能力に必須ではないことを示した（Ojimaら, J. Med. Chem. (1996) 39, 3889-3896）。その発明者及び彼の共同研究者らはC-3'における簡単なアルキル置換基又はアルケニル置換基のとり込みが薬物感受性癌細胞系だけでなく、薬物耐性癌細胞系に対する活性をかなり増大することを見出した。更に重要なことに、C-10位及びC-3'位における適当な修飾が“第二世代”タキソイド坑癌剤の開発をもたらした。このシリーズのタキソイドによる最も有意な結果は薬物感受性ヒト癌細胞系に対するそれらのかなり増大された効力だけでなく、MDR表現型を発現する、薬物耐性細胞系に対する顕著な活性であった（例えば、ヒト乳癌細胞系MCF7-MDRに対しIC50＝2.1-9.1nM；パクリタキセルIC50＝300-800nM）。第二世代タキソイドとして、14-ヒドロキシバッカチンIIIから誘導された５環式ジテルペン骨格を有する一連のタキソイドがまた挙げられる。
こうして、パクリタキセル及びドセタキセルとは鮮明に対照的に、オルタタキセル（刊行物中のコードネームとして、Bay59-8862、IDN5109及びSB-T-101131が挙げられる）、SB-T-1213及びSB-T-121303を含む第二世代タキソイドは、MDR表現型を発現する薬物耐性癌細胞に対し優れた活性を示す。例えば、オルタタキセルはマウスでヒト結腸癌腫SW-620異種移植体に対し印象的な活性を示した（Vredenburgら, J. Nat'l Cancer Inst. (2001) 93, 1234-1245）。
しかしながら、これらの高度に強力な第二世代トキソイドは腫瘍特異性ではない。こうして、種々の望ましくない副作用が臨床上の使用中に生じるかもしれない。
それ故、副作用を減少しつつ、多薬物耐性腫瘍を含む、全ての型の癌を有効に治療するための改良された坑癌薬についての要望がある。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
上記要望が本発明により改良されたコンジュゲートを提供することにより満足された。改良されたコンジュゲートは第二世代タキソイド及びオメガ-3脂肪酸を含む。改良は第二世代タキソイドの使用に関する。
別の実施態様において、本発明はコンジュゲートを含む改良された医薬組成物を提供する。コンジュゲートは第二世代タキソイド及びオメガ3-脂肪酸を含む。改良は第二世代タキソイドの使用に関する。
更に別の実施態様において、本発明は癌の治療を要するヒトの癌の改良された治療方法を提供する。その方法は有効量のコンジュゲートを投与することを含む。コンジュゲートは第二世代タキソイド及びオメガ3-脂肪酸を含む。改良は第二世代タキソイドの使用に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】
本発明はタキソイド及びオメガ-3脂肪酸の改良されたコンジュゲートに関する。本発明に有益なタキソイドは一般式Ｉの第二世代タキソイドであり、式中、FAはオメガ-3脂肪酸残基である。
【０００７】
【化１】
2007510648.tif 000002
【０００８】
R1はC1-C6アルキルもしくはアルケニル、ジアルキルアミノ又はアルキルアミノ、或いはアルコキシを表し、
R2はC3-C5アルキルもしくはアルケニル又はトリフルオロメチルを表し、
R3はＨ、メチル、メトキシ、クロロ、フルオロ又はアジドを表し、
R4はC3-C6シクロアルキルもしくはシクロアルケニル又はアルコキシを表し、
R5及びR6は両方とも水素であり、又はR5及びR6は一緒になってオキシカルボニルを表し、それにより環状カーボネートを形成する（式IIを参照のこと）。
第二世代タキソイドの例として、オルタタキセル、SB-T-1103、SB-T-11033、SB-T-1104、SB-T-11043、SB-T-1107、SB-T-11073、SB-T-1213、SB-T-121303、SB-T-1214、SB-T-121403、SB-T-1216、SB-T-121603、SB-T-1217、SB-T-121703、SB-T-12821、及びSB-T-128221-3が挙げられ、これらの構造が以下に示される（式II及びIIIを参照のこと）。
【０００９】
【化２】
2007510648.tif 000003
【００１０】
【化３】
2007510648.tif 000004
【００１１】
SB-T-1103：R1=C2H5、R2=2-メチルプロピル、R3=H
SB-T-11033：R1=C2H5、R2=2-メチルプロピル、R3=CH3O
SB-T-1104：R1=シクロプロピル、R2=2-メチルプロピル、R3=H
SB-T-11043：R1=シクロプロピル、R2=2-メチルプロピル、R3=CH3O
SB-T-1107：R1=CH3O、R2=2-メチルプロピル、R3=H
SB-T-11073：R1=CH3O、R2=2-メチルプロピル、R3=CH3O
SB-T-1213：R1=C2H5、R2=2-メチル-1-プロペニル、R3=H
SB-T-121303：R1=C2H5、R2=2-メチル-1-プロペニル、R3=CH3O
SB-T-1214：R1=シクロプロピル、R2=2-メチル-1-プロペニル、R3=H
SB-T-121403：R1=シクロプロピル、R2=2-メチル-1-プロペニル、R3=CH3O
SB-T-1216：R1=(CH3)2N、R2=2-メチル-1-プロペニル、R3=H
SB-T-121603：R1=(CH3)2N、R2=2-メチル-1-プロペニル、R3=CH3O
SB-T-1217：R1=CH3O、R2=2-メチル-1-プロペニル、R3=H
SB-T-121703：R1=CH3O、R2=2-メチル-1-プロペニル、R3=CH3O
SB-T-12821：R1=(CH3)2N、R2=トリフルオロメチル、R3=H
SB-T-128221-3：R1=C2H5、R2=トリフルオロメチル、R3=CH3O
本発明に有益な第二世代タキソイドの合成及び構造がOjimaらにより彼らの刊行物（Bioorg. Med. Chem. Lett. (1999) 9, 3423-3428; J. Med. Chem. (1996) 39, 3889-3896; J. Med. Chem. (1997) 40, 267-278; Bioorg. Med. Chem. Lett., (1997) 7, 133-138）並びに米国特許第6,096,909号、同第6,100,411号、同第6,458,976号及び同第6,500,858号に開示されている。上記文献及び特許に開示された合成及び構造が参考として本明細書に含まれる。例えば、Ojimaらによる刊行物（Bioorg. Med. Chem. Lett. (1999) 9, 3423-3428）の表Ｉにリストされた化合物7a-7q；Ojimaらによる刊行物（J. Med. Chem. (1996) 39, 3889-3896）の表３にリストされた化合物5a-5e及び5s；Ojimaらによる刊行物（Bioorg. Med. Chem. Lett., (1997) 7, 133-138）の表２にリストされた化合物7a-7i、並びにOjimaらによる刊行物（J. Med. Chem. (1997) 40, 267-278）の表６にリストされた化合物17b-17g、22b、22d、及び22eの合成及び構造が参考として含まれる。
第二世代タキソイドはオメガ-3脂肪酸に複合される。あらゆるオメガ3-脂肪酸が本発明に従って使用し得る。オメガ-3脂肪酸の例として、ドコサヘキサエン酸(DHA)、エイコサペンタエン酸(EPA)、及びα-リノレン酸(LNA)が挙げられる。これらの脂肪酸の構造が以下に示される（式IV、Ｖ及びVIを参照のこと）。
【００１２】
【化４】
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【００１３】
DHAは、例えば、魚油から単離でき、又は化学合成し得る。DHAは生化学的合成、例えば、米国特許第5,374,657号、同第5,492,938号、同第5,407,957号及び同第5,397,591号（これらの明細書が参考として本明細書に含まれる）に開示された方法により製造されることが好ましい。DHAはまた、例えば、マーテク・バイオサイエンシズ・コーポレーション（コロンビア、MD）から購入し得る。
EPAは、例えば、海産油（即ち、魚及び貝）から単離し得る。海産油は太った魚の体、やせた魚の肝臓だけでなく、海洋哺乳類、例えば、鯨及びアザラシの脂肪から製造される。商用魚油として、とりわけ、アンチョビー（カタクチイワシ種）、カラフトシシャモ（アカメガシワ種）、タラ及びタラ肝臓（マダラ種）、ニシン（クペア(Cupea)種）、マアジ（サバ種）、マグロ（エウシナス(Euthynnus)種）、ニシン（ブレボオルチア(Brevoortia)種）、サケ（タイセイヨウサケ、syn.サケ種）、ニジマス（オンコルヒンカス・ミキス(Oncorhynchus mykiss)）、及びイワシ（イワシ種）の油が挙げられる。海産油は世界の食用油生産のかなりの比率（2-3％）を形成する。EPA及びDHAの相対量は脂肪酸の5-20％及び3-26％と変化する。
また、EPAは当業界で知られているあらゆる方法により合成し得る。例えば、EPAは食事LNAの脱飽和及び延長により合成し得る（A. Kamal-Eldin及びN. V. Yanishlieva, Eur. J. Lipid Sci. Technol. (2002), 104, 825-836）。EPAはまた、例えば、シグマ-アルドリッチ・ケミカル社（セントルイス、MO）から商業的に得られる。
LNAの主要な源として、アマ（リナム・ウシタチシマム(Linum usitatissimum)）、シソ（青シソ）、大豆（グリシン・マックス(Glycine max)）、ナタネ／カノラ（アブラナ種）、及びクルミ（ペルシャグルミ）の種及び油が挙げられる（R. A. Riemersma, Eur. J. Lipid Sci. Technol. (2001) 103, 372-373; A. Kamal-Eldin及びR. Andersson, J. Am. Oil Chem. Soc. (1997) 74, 375-380; G. P. Savage, P. C. Dutta及びD. L. McNeil, J. Am. Oil Chem. Soc. (1999) 76, 1059-1063）。その他のナッツ、エンドウ豆、豆、及び緑葉植物がまたかなりの量の食事LNAを与える（M. A. Allman, Food Australia (1995) 47, S14-S17; P. J. Ghafoorunissa, J. Agric. Food Chem. (1993) 47, 121-124）。LNAは、例えば、シグマ-アルドリッチ・ケミカルズ社から商業的に得られる。
【００１４】
第二世代タキソイド-オメガ-3脂肪酸コンジュゲートはオメガ-3-脂肪酸を当業者に知られているあらゆる方法により第二世代タキソイドにカップリングすることにより調製し得る。例えば、オメガ-3脂肪酸が第二世代タキソイドのC-2'ヒドロキシル基又はC-7ヒドロキシル基にカップリングし得る。オメガ-3脂肪酸は第二世代タキソイドのC-2'位にカップリングされることが好ましい。
カップリング反応は一つ以上の工程で起こり得る。例えば、第二世代タキソイドのC-2'ヒドロキシルへのオメガ-3脂肪酸の選択的カップリングが当業者に知られているあらゆる脱水剤を使用することにより単一工程で達成し得る。好適な脱水剤の例として、ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)及びジイソプロピルカルボジイミド(DIC)が挙げられる。脱水剤はアミン塩基、例えば、4-N,N-ジメチルアミノピリジン(DMAP)の存在下又は不在下で使用し得る。
オメガ-3脂肪酸-タキソイドコンジュゲートを調製するための一般スキームが以下に示される。このスキームにおいて、DHAがオメガ-3脂肪酸として使用される。その他のオメガ-3脂肪酸、例えば、上記されたものが、同じ様式でタキソイドのC-2'ヒドロキシル基にカップリングし得る。
【００１５】
【化５】
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【００１６】
オメガ-3脂肪酸は酸素の存在下で不安定であり得る。手段が第二世代タキソイド-脂肪酸コンジュゲートを安定化するために採用し得る。例えば、酸化防止剤が合成後のコンジュゲートに添加し得る。好適な酸化防止剤の例として、アスコルビン酸、アスコルビルパルミテート、ジラウリルアスコルベート、ヒドロキノン、ブチル化ヒドロキシアニソール、メタ重亜硫酸ナトリウム、t-β-カロテン及びα-トコフェロールが挙げられるが、これらに限定されない。重金属キレーター、例えば、エチレンジアミンテトラ酢酸(EDTA)がまた使用し得る。
本発明の第二世代タキソイド-脂肪酸コンジュゲートは癌の治療を要するヒトの癌を治療するのに有益である。癌は第二世代タキソイドに感受性である癌のあらゆる型であってもよい。癌の例として、乳癌、卵巣癌、肺癌、頭部及び首部の癌、結腸癌、膵臓癌、メラノーマ癌、脳癌、前立腺癌及び腎臓癌が挙げられる。
本発明の方法は有効量の第二世代タキソイド-脂肪酸コンジュゲートを投与することを含む。第二世代タキソイド-脂肪酸コンジュゲートの有効量は癌を治療するのに有効なあらゆる量である。
特定の癌についての第二世代タキソイド-脂肪酸コンジュゲートの実際の量は当業者に公知である種々の因子、例えば、癌の型、使用される特別な第二世代タキソイド-脂肪酸コンジュゲート、投与の様式、及び治療される特別な被験者に従って変化するであろう。有効量は医師及び臨床医に良く知られている方法により予備臨床試験及び臨床試験中に決められる。
ヒトに投与される第二世代タキソイド-脂肪酸コンジュゲートの最小量は癌を治療することができる最低量である。最大量は望ましくない副作用を生じない最高の有効量である。一般に、第二世代タキソイド-脂肪酸コンジュゲートの毎日の経口用量は毎日約0.01mg/kgから毎日1000mg/kgまでであってもよい。通常毎日約１〜1000mg/m2の範囲の全身用量が投与し得る。一層高い用量が癌を治療するために患者トレランスが許す程度まで使用されてもよい。
【００１７】
第二世代タキソイド-脂肪酸コンジュゲートは当業界で知られているあらゆる適切な方法により投与されてもよい。投与の様式の幾つかの例として、経口投与及び全身投与が挙げられる。典型的には、本発明のコンジュゲートは全身投与される。全身投与は腸又は非経口であってもよい。
第二世代タキソイド-脂肪酸コンジュゲートの非経口投与として、例えば、静脈内、筋肉内、及び皮下の注射又は注入が挙げられる。例えば、第二世代タキソイド-脂肪酸コンジュゲートは、当業界で知られているように、持続放出により患者に投与されてもよい。持続放出投与は時間の特別な期間にわたって或るレベルの薬物を得るための薬物送出の方法である。
その他の投与の経路として、経口投与、局所投与、気管支内投与、又は鼻内投与が挙げられる。経口投与について、液体製剤又は固体製剤が使用されてもよい。経口投与に適した製剤の幾つかの例として、錠剤、ゼラチンカプセル、ピル、トローチ、エリキシル剤、懸濁液、シロップ、及びオブラートが挙げられる。気管支内投与は吸入スプレーを含み得る。鼻内投与について、第二世代脂肪酸コンジュゲートの投与はネブライザー又は液体ミストにより達成し得る。
更に、本発明は好適な医薬担体中の第二世代脂肪酸コンジュゲートを含む。この明細書において、医薬担体は当業者により理解されているようにビヒクルと同義であると考えられる。担体の例として、ステアリン酸マグネシウムもしくはステアリン酸カルシウム、タルク、植物の脂肪又は油、ガム及びグリコールが挙げられる。
【００１８】
第二世代タキソイド-脂肪酸コンジュゲートはまた一種以上の安定剤、表面活性剤、好ましくはノニオン系表面活性剤、及び必要により塩及び／又は緩衝剤を含んでもよい。
安定剤は、例えば、アミノ酸、例えば、グリシン；又はオリゴ糖、例えば、蔗糖、テトラロース、ラクトースもしくはデキストランであってもよい。また、安定剤は糖アルコール、例えば、マンニトール；又はこれらの組み合わせであってもよい。安定剤又は安定剤の組み合わせは第二世代脂肪酸コンジュゲートの重量に対し約0.1重量％から約10重量％までを構成することが好ましい。
表面活性剤はノニオン系表面活性剤、例えば、ポリソルベートであることが好ましい。好適な表面活性剤の幾つかの例として、トゥイーン20、トゥイーン80；ポリエチレングリコール又はポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、例えば、約0.001％(w/v)から約10％(w/v)までのプルロニックF-68が挙げられる。
塩又は緩衝剤はあらゆる塩又は緩衝剤、例えば、塩化ナトリウム、又は夫々リン酸ナトリウム／カリウムであってもよい。緩衝剤は第二世代脂肪酸コンジュゲートのpHを約５から約８までの範囲に維持することが好ましい。塩及び／又は緩衝剤はまたオスモル濃度をヒトへの投与に適したレベルに維持するのに有益である。塩又は緩衝剤は約150mMから約300mMまでのおよその等張濃度で存在することが好ましい。
第二世代脂肪酸コンジュゲートは更に一種以上の通常の添加剤を含んでもよい。このような添加剤の幾つかの例として、可溶化剤、例えば、グリセロール；酸化防止剤、例えば、ベンザルコニウムクロリド（“クアート”として知られている、四級アンモニウム化合物の混合物）、ベンジルアルコール、クロレトン又はクロロブタノール；麻酔剤、例えば、モルヒネ誘導体；又は等張剤等、例えば、上記のものが挙げられる。酸化又はその他の損傷に対する更なる対策として、第二世代脂肪酸コンジュゲートは不透過性ストッパーでシールされたバイアル中で窒素ガスのもとに貯蔵されてもよい。
下記の非限定実施例は本発明の例示である。種々の変化が本発明の範囲から逸脱しないで上記実施例及び方法になされることが注目されるべきである。この理由のために、本件出願の例示の実施態様は例示であると解されるべきであり、如何なる意味でも限定ではないことが意図されている。
【実施例１】
【００１９】
2'-ドコサヘキサエノイル3'-デフェニル-3'-(2-メチル-2-プロピル)-10-(メトキシカルボニル)ドセタキセル（DHA-SB-T-1107）
アルゴン雰囲気下のジクロロメタン（3.5mL）中の3'-デフェニル-10-(メトキシカルボニル)-3'-(2-メチル-2-プロピル)-2'-ドコサヘキサエノイル-ドセタキセル（SB-T-1107）（63.9mg、75μモル）の溶液に、4-ジメチルアミノピリジン（9mg、75μモル）、1,3-ジシクロヘキシルカルボジイミド（19mg、150μモル）、及びDHA（27mg、83μモル）を添加した。その反応混合物を周囲温度で１時間撹拌した。ジクロロメタンによる希釈後に、反応混合物を５％の塩酸、水、及び食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空で濃縮した。粗生成物をシリカゲルによるクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝1/3→1/1）により精製してDHA-SB-T-1107 78.5mg（収率90％）を白色の固体として得た。m.p. 102-105 ℃, [α]D22 -45.0 (c 1.0, CHCl3);  1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.96 (m, 9 H), 1.14 (s, 3 H), 1.22 (s, 3 H), 1.30 (s, 9 H), 1.67 (m, 3 H), 1.69 (s, 3 H), 1.88 (m, 1 H), 1.96 (s, 3 H), 2.07(m, 2 H), 2.37 (s, 3 H), 2.47 (m, 6 H), 2.55 (m, 1 H), 2.85 (m, 10 H), 3.78 (d, J = 6.8 Hz, 1 H), 3.86 (s, 3 H), 4.19 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 4.29 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 4.37 (m, 1 H), 4.43 (m, 1 H), 4.60 (d, J = 9.3 Hz, 2 H), 4.91(s, 1 H), 4.97 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 5.25-5.50 (m, 12 H), 5.66 (d, J = 7.0 Hz, 1 H), 6.12 (s, 1 H), 6.20 (t, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.47 (t,  J = 8.0 Hz, 2 H), 7.59 (t, J = 8.0 Hz, 1 H), 8.11 (d, J = 8.0 Hz, 2 H);  13C NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 9.6. 14.3, 20.6, 21.9, 22.1, 22.5, 22.6, 23.2, 24.7, 25.6, 25.7, 25.7, 25.8, 26.6, 28.2, 33.7, 35.5, 35.6, 41.4, 43.1, 45.6, 48.9, 55.5, 58.5, 71.5, 72.0, 74.4, 75.1, 76.4, 76.9, 78.3, 79.2, 79.7, 80.9, 84.4, 126.9, 127.4, 127.7, 127.8, 127.9, 128.3, 128.3, 128.4, 128.5, 128.7, 129.2, 129.5, 130.1, 130.2, 130.2, 131.9, 133.4, 144.2, 155.1, 155.6, 166.8, 168.1, 169.4, 172.1, 203.9
実施例2-9
その他のDHA-タキソイドを実施例１にDHA-SB-T-1107の合成について記載されたのと同じ様式で合成した。これらのDHA-タキソイドに関する特性決定データを以下に示す。
【実施例２】
【００２０】
2'-ドコサヘキサエノイル-3'-デフェニル-3'-(2-メチルプロピル)-10-プロパノイルドセタキセル（DHA-SB-T-1103）
収率75％；白色の固体；m.p. 94-98 ℃, [α]D22 -37.9 (c 1.08, CHCl3); 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.97 (m, 9 H), 1.13 (s, 3 H), 1.22-1.27 (m, 6 H), 1.31 (s, 9 H), 1.56 (s, 3 H), 1.67 (s, 3 H), 1.90 (m, 1 H), 1.94 (s, 3 H), 2.08 (m, 2 H), 2.39 (s, 3 H), 2.40 (m, 2 H), 2.46-2.60 (m, 7 H), 2.85 (m, 10 H), 3.82 (d, J = 7.0 Hz, 1 H), 4.20 (d, J = 8.4 Hz, 1 H), 4.30 (d, J = 8.4 Hz, 1 H), 4.35 (m, 1 H), 4.46 (dd, J = 10.2, 6.7 Hz, 1 H), 4.60 (d, J = 10.4 Hz, 1 H), 4.92 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 4.98 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 5.40 (m, 12 H), 5.67 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 6.23 (m, 1 H), 6.31 (s, 1 H), 7.48 (t, J = 7.6 Hz, 2 H), 7.60 (t, J = 7.6 Hz, 1 H), 8.12 (d, J = 7.6 Hz, 2 H); 13C NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.0, 9.6, 14.1, 14.3, 14.8, 20.5, 21.9, 22.2, 22.4, 22.5, 22.6, 23.2, 24.5, 25.5, 25.6, 26.6, 27.5, 28.1, 28.3, 33.7, 35.5, 41.3, 43.2, 45.6, 48.9, 58.8, 71.5, 72.2, 74.4, 75.2, 75.5, 76.4, 77.3, 79.3, 79.8, 81.0, 84.4, 127.0, 127.5, 127.8, 127.9, 128.0, 128.3, 128.4, 128.5, 128.6, 129.3, 129.6, 130.2, 132.0, 132.4, 133.5, 143.4, 155.3, 167.0, 168.4, 169.6, 172.3, 174.6, 204.0
【実施例３】
【００２１】
2'-ドコサヘキサエノイル-3'-デフェニル-3'-(2-メチル-1-プロペニル)-10-シクロプロパンカルボニル-ドセタキセル（DHA-SB-T-1214）
収率69％；白色の固体；m.p. 64-67 ℃, [α]D22 -52.2 (c 1.8, CHCl3); 1H NMR (CDCl3) δ 0.99 (t, J = 7.5 Hz, 3 H), 1.15 (m, 4 H), 1.28 (s, 3 H), 1.36 (s, 9 H), 1.68 (s, 3 H), 1.75 (m, 1 H), 1.78 (s, 6 H), 1.93 (m, 1 H), 1.95 (s, 3 H), 2.09 (q, J = 7.5, 15.0 Hz, 2 H), 2.39 (s, 3 H), 2.48 (m, 2 H), 2.56 (m, 2 H), 2.65 (d, J = 3.9 Hz, 1 H), 2.87 (m, 10 H), 3.83 (d, J = 6.9 Hz, 1 H), 4.20 (d, J = 8.7 Hz, 1 H), 4.33 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 4.46 (m, 1 H), 4.82 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 4.95 (s, 1 H), 4.99 (d, J = 9.3 Hz, 1 H), 5.21 (d, J = 7.8 Hz, 1 H), 5.41 (m, 12 H), 5.69 (d, J = 7.2 Hz, 1 H), 6.21 (t, J = 8.8 Hz, 1 H), 6.32 (s, 1 H), 7.50 (t, J = 8.1 Hz, 2 H), 7.63 (t, J = 7.5 Hz, 1 H), 8.13 (d, J = 7.2 Hz, 2 H); 13C NMR (CDCl3) δ  9.14, 9.36, 9.47, 9.53, 12.98, 14.25, 14.76, 14.81, 18.48, 18.54, 20.52, 22.22, 22.39, 22.47, 25.59, 25.74, 26.67, 28.13, 28.18, 29.67, 33.62, 35.42, 43.12, 45.52, 45.58, 48.86, 58.42, 71.70, 72.17, 74.45, 74.57, 75.19, 75.38, 75.44, 76.35, 79.25, 79.86, 80.92, 84.40, 84.52, 119.95, 127.50, 127.84, 128.02, 128.26, 128.60, 129.21, 129.58, 130.14, 132.40, 133.59, 137.94, 143.48, 154.85, 166.96, 168.30, 169.61, 172.29, 175.12, 204.10
【実施例４】
【００２２】
2'-ドコサヘキサエノイル-3'-デフェニル-3'-(2-メチル-1-プロピル)-10-シクロプロパンカルボニルドセタキセル（DHA-SB-T-1104）
収率73％；白色の固体；m.p. 65-68 ℃; [α]D -53.4 (c 2.5, CHCl3); 1H NMR (CDCl3) δ 0.99 (m, 9 H), 1.15 (m, 6 H), 1.27 (s, 3 H), 1.33 (s, 9 H), 1.69 (s, 6 H), 1.78 (m, 1 H), 1.95 (s, 3 H), 2.09 (q, J = 7.2, 14.7 Hz, 2 H), 2.43 (s, 3 H), 2.48 (m, 2 H), 2.56 (m, 2 H), 2.65 (d, J = 3.6 Hz, 2 H), 2.87 (m, 10 H), 3.83 (d, J = 7.2 Hz, 1 H), 4.21 (d, J =8.1 Hz, 1 H), 4.32 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 4.46 (m, 1 H), 4.63 (d, J = 10.2 Hz, 1 H), 4.93 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 4.99 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 5.41 (m, 12 H), 5.68 (d, J = 6.9 Hz, 1 H), 6.23 (t, J = 8.7 Hz, 1 H), 6.31 (s, 1 H), 7.50 (t, J =8.1 Hz, 2 H), 7.63 (t, J = 7.5 Hz, 1 H), 8.13 (d, J = 7.2 Hz, 2 H); 13C NMR (CDCl3) δ 3.9, 4.1, 4.3, 7.8, 9.0, 9.6, 15.3, 16.6, 17.0, 17.1, 17.3, 17.5, 18.0, 19.4, 20.2, 20.3, 20.4, 21.4, 22.8, 22.9, 28.4, 36.0, 36.1, 37.9, 40.4, 43.6, 53.2, 67.0, 69.2, 70.0, 70.2, 70.9, 70.95, 71.1, 71.15, 71.2, 71.7, 72.2, 74.1, 74.6, 75.7, 79.2, 92.8, 121.8, 122.3, 122.6, 122.7, 122.8, 123.1, 123.15, 123.2, 123.4, 123.45, 124.1, 124.4, 125.0, 126.8, 127.2, 127.25, 128.3, 138.3, 150.1, 161.8, 163.2, 164.4, 167.1, 169.9,198.9.
【実施例５】
【００２３】
2'-ドコサヘキサエノイル-3'-デフェニル-3'-(2-メチル-1-プロペニル)-10-プロパノイルドセタキセル（DHA-SB-T-1213）
収率72％；白色の固体；m.p. 67-69 ℃; [α]D22 -72.7 (c 0.73, CHCl3);  1H NMR (CDCl3) δ 0.99 (t, J = 7.5, 3 H), 1.16 (s, 3 H), 1.27 (m, 8 H), 1.28 (s, 3 H), 1.36 (s, 9 H), 1.68 (s, 3 H), 1.75 (m, 1 H), 1.78 (s, 9 H), 1.93 (m, 1 H), 1.95 (s, 3 H), 2.09 (q, J =7.5, 15.0 Hz, 2 H), 2.40 (s, 3 H), 2.46 (m, 3 H), 2.53 (m, 2 H), 2.56 (m, 2 H), 2.65 (d, J = 3.9 Hz, 2 H), 2.87 (m, 10 H), 3.84 (d, J = 6.9 Hz, 1 H), 4.20 (d, J = 8.4 Hz, 1 H), 4.33 (d, J = 8.4 Hz, 1 H), 4.48 (m, 1 H), 4.82 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 4.93 (s, 1 H), 4.99 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 5.21 (d, J = 7.8 Hz, 1 H), 5.41 (m, 12 H), 5.69 (d, J = 6.9 Hz, 1 H), 6.21 (t, J = 8.8 Hz, 1 H), 6.33 (s, 1 H), 7.50 (t, J = 8.1 Hz, 2 H), 7.63 (t, J = 7.5 Hz, 1 H), 8.13 (d, J = 7.2 Hz, 2 H); 13C NMR (CDCl3) δ 9.28, 9.79, 9.86, 14.53, 15.00, 15.06, 18.76, 18.83, 20.81, 22.35, 22.68, 22.76, 25.87, 26.83, 27.80, 28.41, 28.47, 29.94, 33.91, 35.72, 43.42, 45.90, 49.15, 58.70, 71.98, 72.37, 74.74, 75.42, 75.68, 75.75, 76.64, 79.50, 80.16, 81.19, 84.67, 84.80, 127.78, 128.11, 128.30, 128.59, 128.90, 129.50, 129.86, 130.42, 132.71, 133.89, 138.24, 143.56, 155.17, 167.24, 168.60, 169.92, 172.60, 174.90, 204.28
【実施例６】
【００２４】
2'-ドコサヘキサエノイル-3'-デフェニル-3'-(2-メチルプロピル)-10-アセチルドセタキセル-1,14-カーボネート（DHA-オルタタキセル）
収率68％；白色の固体；m.p. 72-75 ℃; [α]D22 -40 (c 0.6, CHCl3); 1H NMR (CDCl3) δ 0.99 (t, 3 H), 1.00 (m, 3H), 1.25 (s, 3 H), 1.28 (s, 3 H), 1.36 (s, 9 H), 1.36-1.47 (m, 2 H), 1.63-1.70 (m, 2 H), 1.72 (s, 3 H), 1.90 (d, 3 H), 2.07(m, 2H), 2.25 (s, 3 H), 2.35 (s, 1 H), 2.47(m, 4H) 2.49 (s, 3 H), 2.50-2.62 (m, 2 H), 2.83 (m, 10 H), 3.71 (d, 1 H), 4.20-4.30 (m, 2 H), 4.38-4.44 (m, 2 H), 4.57-4.62 (d, 2H), 4.850 (d, 1 H), 4.951 (d, 1 H), 5.09 (d, 1 H), 5.40 (m, 12H), 6.11 (d, 1 H), 6.27 (s, 1 H), 6.44 (d,1 H), 7.49 (t, 2 H), 7.61 (t, 1 H), 8.03 (d,  2 H);  13C NMR (CDCl3) δ 9.68, 14.10, 14.20, 15.0, 20.5, 20.6, 22.0, 22.5,22.6,23.1, 23.4, 23.4, 24.7, 25.5, 25.6, 25.9, 28.2,28.2, 29.7, 33.9, 35.4, 41.7, 45.0, 58.7, 69.5, 71.7, 74.3, 74.4, 74.8, 75.9, 79.5, 80.1, 80.5, 84.2, 88.1, 127.0, 127.4, 127.8, 128.0, 128.3, 128.4, 128.6, 128.9,129.7, 129.9, 132.0, 133.3, 134.0, 140.5, 151.8, 155.1, 164.8, 167.8, 170.2, 170.8, 172.3, 202.3
【実施例７】
【００２５】
2'-ドコサヘキサエノイル-3'-デフェニル-3'-(2-メチル-2-プロピル)-2-デベンゾイル-2-(3-メトキシベンゾイル)-10-(メトキシカルボニル)ドセタキセル（SB-T-110703-DHA）
収率62％；白色の固体；1H-NMR (CDCl3, 300 MHz): δ 7.74 (d, 1H, J =7.5 Hz), 7.67 (d, 1H, J =1.2 Hz), 7.39 (dd, 1H, J =8.1 Hz), 7,16 (dd, 1H, J =2.7 Hz, J = 8.1 Hz), 6.24 (dd, 1H, J =8.7 Hz), 6.14 (s, 1H), 5.686 ( d, 1H, J = 7.2 Hz), 5.62-5.24 (m, 12 H), 5.03-4.98 (m, 1H), 4.93 (d, 1H, J =2.4 Hz), 4.63 (d, 1H, J = 10.5), 4.48-4.29 (m, 3H), 4.21 (d, 1H, J =8.1 Hz), 3.9 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.81 (d, 1H, J = 6.9 Hz), 2.91-2.78 (m, 10 H), 2.65-2.22 (m, 11 H), 2,19-2.06 (m 2H), 1.98 (s, 3H), 1.97-1.82 (m, 1H), 1.4-1.1 (m, 15 H), 1.02-0.94 (m, 9H); 13 C-NMR (CDCl3, 75.5 MHz): δ 9.8, 14.5, 15.1, 20.8, 21.9, 22.3, 22.8, 23.5, 23.7, 24.9, 25.8, 25.9, 26.8, 28.3, 33.9, 35.6, 35.8, 41.5, 43.3, 45.8, 49.0, 55.8, 58.7, 71.7, 72.3, 74.8, 75.4, 76.6, 78.6, 79.5, 80.1, 81.2, 84.7, 114.2, 120.9, 123.3, 127.3, 127.8, 128.1, 128.2, 128.3, 128.6, 128.7, 128.8, 129.9, 130.7, 132.3, 144.6, 155.5, 156.1, 159.9, 167.1, 168.6, 169.9, 172.6, 204.5
【実施例８】
【００２６】
2'-ドコサヘキサエノイル-3'-デフェニル-3'-(2-メチル-2-プロペニル)-2-デベンゾイル-2-(3-メトキシベンゾイル)-10-プロパノイルドセタキセル（DHA-SB-T-121303）
収率67％；白色の固体；1H NMR (CDCl3) δ 0.99 (t, J =7.5, 3 H), 1.14 (s, 3 H), 1.28 (m, 8 H), 1.33 (s, 9 H), 1.66 (m, 3 H), 1.73 (s, 3 H), 1.75 (s, 3 H), 1.89 (m, 5 H), 2.10 (m, 2 H), 2.37 (m, 6 H), 2.53 (m, 7 H), 2.87 (m, 10 H), 3.80 (d, J = 6.9 Hz, 1 H), 3.86 (s, 3 H), 4.12 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 4.31 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 4.40 (dd, J = 10.6, 6.8 Hz, 1 H), 4.72 (m, 2 H), 4.95 (m, 2 H), 5.30 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 5.41 (m, 12 H), 5.65 (d, J = 7.0 Hz, 1 H), 6.16 (t, J = 8.6 Hz, 1 H), 6.30 (s, 1 H), 7.13 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.33 (t, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.62 (s, 1 H), 7.69 (d, J = 7.6 Hz, 1 H)
【実施例９】
【００２７】
2'-ドコサヘキサエノイル-3'-デフェニル-3'-(2-メチル-2-プロピル)-2-デベンゾイル-2-(3-メトキシベンゾイル)-10-プロパノイルドセタキセル（DHA-SB-T-11033）
収率81％；m.p. 68-70℃; 1H NMR (CDCl3) δ1.00 (m, 9H) 1.28 (m, 9H), 1.36 (s, 9H), 1.73 (s, 3H), 1.91 (m, 1H), 1.99 (s, 3H), 2.15 (m, 2H), 2.40-2.70 (m, 12H), 2.91 (m, 10H) 3.89 (d, J=7Hz, 1H), 3.95 (s, 3H), 4.24 (d, J=8Hz, 1H), 4.40 (m, 2H), 4.52 (m, 1H), 4.66 (d, J=10Hz, 1H), 4.97 (bd, J=1.8Hz, 1H), 5.00 (bd, J=8Hz, 1H), 5.45 (m, 12H), 5.73 (d, J=7Hz, 1H), 6.28 (m, 1H), 6.37 (s, 1H), 7.20 (m, 1H), 7.40 (m, 1H), 7.70 (m, 1H), 7.80 (m, 1H); 13C NMR (CDCl3) δ 9.3, 9.9, 14.6, 15.0, 20.8, 22.0, 22.5, 22.8, 23.5, 24.9, 25.8, 25.9, 26.9, 27.8, 28.4, 33.9, 35.7, 41.6, 43.4, 45.8, 49.1, 55.6, 58.7, 71.7, 72.5, 74.8, 75.5, 75.7, 76.7, 79.5, 80.1, 81.4, 84.7, 127.3, 127.8, 128.1, 128.2, 128.3, 128.6, 128.7, 128.9, 129.9, 130.7, 132.3, 132.7, 143.6, 155.6, 167.1, 168.7, 169.9, 172.6, 174.9, 204.3
実施例10-12
α-リノレン酸-タキソイドを実施例１にDHA-SB-T-1107の合成について記載したのと同じ様式で合成した。これらのα-リノレン酸-タキソイドについての特性決定データを以下に示す。
【実施例１０】
【００２８】
2'-リノレノイル-3'-デフェニル-3'-(2-メチル-1-プロペニル)-10-プロパノイルドセタキセル（LNA-SB-T-1213）
収率42％；白色の固体；1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.99 (t, J = 7.65 Hz, 3 H), 1.15 (s, 3 H), 1.23 (s, 3 H), 1.25 (s, 3 H), 1.25-1.35 (m, 12 H), 1.34 (s, 9 H), 1.67 (s, 3 H), 1.76 (s, 6 H), 1.85 (m, 1 H) (H6a), 1.93 (s, 3 H), 2.04 (q, J = 6.4 Hz, 4 H), 2.36 (s, 3 H) (OAc), 2.45 (m, 8 H) 2.53 (m, 3 H) (H6b), 2.77 (t, J = 6.4 Hz, 2 H), 3.82 (m, 3 H), 4.17 (d, J = 8.4 Hz, 1 H) (H20a), 4.31 (d, J = 8.4 Hz, 1 H) (H20b), 4.46 (dd, J = 10.6, 6.6 Hz, 1 H), 4.77 (d, J = 8.8 Hz 1 H), 4.98 (m, 3 H) (H5), 5.18 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 5.36 (m, 6 H), 5.68 (d, J = 6.8 Hz, 1 H) (H2), 6.19 (t, J = 8.5 Hz, 1 H), 6.31 (s, 1 H) (H10), 7.48 (t, J = 7.6 Hz, 2 H), 7.60 (t, J = 7.6 Hz, 1 H), 8.12 (d, J = 7.6 Hz, 2 H)
【実施例１１】
【００２９】
2'-リノレノイル-3'-デフェニル-3'-(2-メチル-1-プロペニル)-2-デベンゾイル-2-(3-メトキシベンゾイル)-10-プロパノイルドセタキセル（LNA-SB-T-121303）
収率67％；白色の固体；1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.99 (t, J = 7.65 Hz, 3 H), 1.13 (s, 3 H), 1.16 (s, 3 H), 1.25 (s, 3 H), 1.25-1.35 (m, 8 H), 1.33 (s, 9 H), 1.66 (m, 3 H), 1.73 (s, 3 H), 1.75 (s, 3 H), 1.89 (m, 5 H), 2.10 (m, 4 H), 2.37 (m, 6 H), 2.52 (m, 4 H), 2.81 (m, 4 H), 3.80 (m, 3 H), 3.86 (s, 3 H), 4.19 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 4.35 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 4.40 (dd, J = 10.6, 6.8 Hz, 1 H), 4.75 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 4.96 (d, J = 8.3 Hz, 3 H), 5.19 (d, J = 8.4 Hz, 1 H), 5.36 (m, 6 H), 5.67 (d, J = 6.8 Hz, 1 H), 6.19 (t, J = 8.8 Hz, 1 H), 6.31 (s, 1 H), 7.14 (d, J = 6.0 Hz, 1 H), 7.38 (t, J = 7.6 Hz, 1 H), 7.67 (s, 1 H), 7.71 (d, J = 7.6 Hz, 1 H)
【実施例１２】
【００３０】
2'-リノレノイル-3'-デフェニル-3'-(2-メチル-1-プロピル)-10-プロパノイルドセタキセル（LNA-SB-T-1103）
収率70％；m.p. 67-70℃; 1H NMR, (CDCl3)  δ1.00 (m, 9H), 1.20-1.40 (m, 24H), 1.74 (m, 9H), 1.99 (s, 4H), 2.15 (m, 4H), 2.40-2.70 (m, 11H), 2.91 (m, 4H) 3.89 (d, J=7Hz, 1H), 4.24 (d, J=8.0Hz, 1H), 4.40 (m, 2H), 4.52 (m, 1H), 4.67 (d, 1H, J=10,Hz), 4.97 (bd, J=1.8Hz, 1H), 5.00 (bd, J=8Hz, 1H), 5.45 (m, 6H), 5.73 (d, J=7.0Hz, 1H), 6.28 (m, 1H), 6.37 (s, 1H), 7.54 (m, 2H), 7.66 (m, 1H), 8.19 (d, J=7.0Hz, 2H); 13C NMR (CDCl3) δ 9.3, 9.9, 14.6, 15.0, 20.8, 22.0, 22.5, 22.8, 23.5, 24.9, 25.0, 25.8, 25.9, 26.9, 27.4, 27.8, 28.4, 29.3, 29.4, 29.5, 29.9, 33.9, 35.7, 41.6, 43.4, 45.8, 49.1, 58.7, 71.8, 72.5, 74.6, 75.5, 75.7, 76.7, 79.5, 80.1, 81.2, 84.7, 127.3, 128.1, 128.5, 128.6, 128.9, 129.5, 130.5, 132.3, 132.6, 133.8, 143.7, 155.6, 167.3, 168.8, 169.9, 173.2, 174.9, 204.3
【実施例１３】
【００３１】
第二世代タキソイド-オメガ-3脂肪酸コンジュゲートの効力のin vivo評価
コンジュゲートの合成
異なるC-2部分、C-10部分、C-3'部分を有する第二世代タキソイドを10-デアセチルバッカチンIIIから出発して良好〜優れた収率で合成した。DHAとのタキソイドのカップリングを通常の条件（DIC、DMAP）下で行なって相当するコンジュゲートを良好な収率で得た。その反応（反応Ａ及び表Ａを参照のこと）はC-2'のOH基の位置で起こる。
【００３２】
【化６】
2007510648.tif 000007
【００３３】
【表１】
2007510648.tif 000008
【００３４】
動物及び腫瘍異種移植体
生後６〜８週の雌の重度の複合免疫不全(SCID)のマウスをロズウェル・パーク癌協会にある組織内の飼育設備又はタコニック（ジャーマンタウン、NY）から入手した。動物ケアーの全ての局面は協会の動物ケアー及び使用委員会指針に従った。ヒト卵巣腫瘍A121（これはMDRタンパク質pgpを発現しない）、又はヒト結腸腫瘍DLD-1（これはpgpを発現する）を使用した。腫瘍を12ゲージトロカー針を使用して右側腹部における非壊死性腫瘍断片約50mgの移植により開始した。腫瘍を触診可能な塊（約50-100mm3のサイズ）として樹立した時に、化学療法を開始した。療法は３日離れて、４回施された、尾部静脈中のi.v.注射からなった。夫々の薬物治療グループ又は無薬物ビヒクルはグループ当り4-5匹のマウスからなり、未治療対照はグループ当り10匹のマウスを含んでいた。
in vivo実験のための薬物調製
パクリタキセル及びDHA-パクリタキセルを等しい部数のクレモフォーELP（BASF、ルドビクシャーフェン、ドイツ）及び無水エタノール中の7.5mg/mLの原液として調製した。これらを比較目的のために使用した。DHA-タキソイド及びその他のオメガ-3脂肪酸-タキソイドを等しい部数のトゥイーン80（ポリオキシエチレン-ソルビタンモノオレエート；シグマ・ケミカル社から購入した）及び無水エタノール中の30mg/mLの原液として調製した。DHA-タキソイド及びその他のオメガ-3脂肪酸-タキソイドの製剤を安定化するために、酸化防止剤、L-アスコルビン酸（3.9mM）及びα-トコフェロール（2.0mM）を添加した。夫々の原液を0.9％のNaCl（食塩水）中で使用前に更に希釈し、その結果、適当な濃度の夫々の薬物を20gのマウスについて約0.4mLの容積で尾部静脈を介してi.v.注射することができた。夫々の薬物を５日目、８日目、及び11日目に１日１回投与した。
【００３５】
in vivo腫瘍増殖アッセイ
夫々の動物について、電気キャリパを使用して、腫瘍長さ(l)及び幅(w)（夫々mm）を測定し、3-4日毎に記録した。式：v=0.4(lxw2)を使用して、腫瘍体積(v)（mm3）を計算した。600mm3の前もって決めた標的腫瘍体積までの時間（日数）を体積の対数vs時間のプロットから線形内挿した。対照と薬物治療マウスの間の腫瘍体積の統計有意差をCox-Mantel試験により測定した。Cox-Mantel試験について、長期治癒（腫瘍が完全回帰した実験の結果として依然として生存したか、又は前もって定めた標的体積に達しなかった動物と定義される）のため、又は薬物毒性による早期死亡のために標的腫瘍体積に達しなかった動物についての時間対イベントデータを、センサドデータとして処理した。全ての統計試験は両側であった。
結果
第二世代タキソイド-脂肪酸コンジュゲートをSCIDマウスで薬物耐性ヒト結腸腫瘍異種移植体（pgp+）DLD-1及び薬物感受性ヒト卵巣腫瘍異種移植体（pgp-）A121に対するそれらの坑腫瘍活性について評価した（表１）。メジアン腫瘍サイズを図１に示す。
【００３６】
【表２】
2007510648.tif 000009
【００３７】
1DLD-1ヒト結腸腫瘍移植後の５日目、８日目及び11日目にSCIDマウスにi.v.で施された治療。クレモフォー：EtOH中で製剤化されたパクリタキセル及びDHA-パクリタキセル；トゥイーン：EtOH中で製剤化されたIND5109及びDHA-タキソイドコンジュゲート
2Cox-Mantle試験を使用する夫々のグループvs.対照の比較に基づく
3死亡したか、又は20％より多く体重を失った動物の数
4201日目に600mm3未満の腫瘍を有するSCIDマウス
表１が明らかに示すように、第二世代タキソイド-DHAコンジュゲート、DHA-SB-T-1214はSCIDマウスで薬物耐性ヒト結腸腫瘍異種移植体について顕著な坑腫瘍効果を示す。DHA-SB-T-1214について、全てのマウスが201日目に生存し、腫瘍の痕跡がDHA-SB-T-1214治療マウスで検出されなかった。DHA-SB-T-1213は腫瘍増殖に54日の遅延を生じた。これらの結果はDHA-第二世代タキソイドの格別の効力を明らかに実証する。
DHA-SB-T-1213はまたヒト卵巣腫瘍異種移植体（pgp-）A121に対し優れた結果を示した（図２及び表２を参照のこと）。90mg/kgの合計用量を適用した場合、コンジュゲートは４匹の生存マウス（５匹のうちの４匹）で腫瘍増殖の>186日の遅延を示した。加えて、DHA-SB-T-1216及びDHA-SB-T-1104がまた有効な腫瘍増殖遅延を示した。
【００３８】
【表３】
2007510648.tif 000010
【００３９】
1A121卵巣腫瘍移植後の５日目にSCIDマウスにi.v.で施された治療。クレモフォー：EtOH中で製剤化されたパクリタキセル及びDHA-パクリタキセル；トゥイーン：EtOH中で製剤化されたDHA-タキソイドコンジュゲート。
2Cox-Mantle試験を使用する夫々のグループvs.対照の比較に基づく
3死亡したか、又は20％より多く体重を失った動物の数
4197日目に触診可能な腫瘍を有しないSCIDマウス
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】ヒト結腸腫瘍異種移植体（pgp+）DLD-1に関するDHA-タキソイドコンジュゲートの効果を示す。
【図２】ヒト卵巣腫瘍外殖体（pgp-）A121に関するDHA-タキソイドコンジュゲートの効果を示す。
【図１】
2007510648.tif 000011
【図２】
2007510648.tif 000012
【国際調査報告】
2007510648.tif 000013