(57)【要約】本発明は神経保護的化合物に関するものである。さらに、本発明はパーキンソン病又はパーキンソン病の症状、アルツハイマー病における学習障害や記憶障害、コカイン、モルヒネ及びメタンフェタミン(methamphetamine)のような麻薬類に対する中毒及び又は依存症を含む多様な神経学的症状を治療することに用いられるモルヒナン化合物に関するものである。また、本発明は前記モルヒナン化合物の医薬剤形に関するものである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
神経保護のための有效な量の３−ヒドロキシモルヒナン又は３−ヒドロキシモルヒナンの３番及び１７番位置が置換されたモルヒナン誘導体又はその生理的に許容される塩を医薬担体又は賦形剤とともに封入することを特徴とする、組成物。
【請求項２】
前記組成物が徐放性製剤であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記３−ヒドロキシモルヒナン又はモルヒナン誘導体をパーキンソン病の症状治療のための有效な量を含むことを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記モルヒナン誘導体が３−アリルオキシ−１７−メチルモルヒナン（ＡＭ）、３−シクロプロピルメトキシ−１７−メチルモルヒナン（ＣＭ）、又は３−メチル−１７−メチルモルヒナン（ＤＦ）であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
３−ヒドロキシモルヒナン（ＨＭ）をさらに含むことを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
人体に経口投与されるようにデザインされた形態の前記請求項１の組成物又はその生理学的に許容される塩を含み、前記モルヒナン又はその塩がパーキンソン病の症状を実質的に軽減させる治療的に有效でありかつ許容されない副作用を誘発させない量で含まれていることを特徴とする抗パーキンソン用単位製剤。
【請求項７】
前記モルヒナン又はその生理学的に許容される塩を封入する消化可能なカプセルを含むことを特徴とする、請求項６に記載の単位製剤。
【請求項８】
前記モルヒナンの用量は約２５０ｍｇ／日以下であることを特徴とする請求項７に記載の単位製剤。
【請求項９】
治療を要する被検者又は動物に抗パーキンソンに有效な量の前記請求項１に記載の組成物を投与することを含むことを特徴とする、パーキンソン病の症状治療法。
【請求項１０】
前記組成物がモルヒナン誘導体の混合物を含む、請求項９に記載のパーキンソン病の症状治療法。
【請求項１１】
前記組成物が３−ヒドロキシモルヒナンを含む、請求項９に記載のパーキンソン病の症状治療法。
【請求項１２】
前記組成物が徐放性製剤であることを特徴とする、請求項９に記載のパーキンソン病の症状治療法。
【請求項１３】
前記組成物が神経保護剤をさらに含むことを特徴とする、請求項９に記載のパーキンソン病の症状治療法。
【請求項１４】
前記組成物がモルヒナン又はその生理学的に許容される塩を封入する消化可能なカプセルを含むことを特徴とする、請求項１２に記載のパーキンソン病の症状治療法。
【請求項１５】
前記組成物が約２５０ｍｇ／日以下の量で投与されることを特徴とする、請求項９に記載のパーキンソン病の症状治療法。
【請求項１６】
被検者に神経保護に有效な量の前記請求項１の組成物を投与することを含むことを被検者の黒質でのドーパミン生成の減少を抑制することを特徴とする、方法。
【請求項１７】
中毒治療に有效な量の前記請求項１の組成物を含むことを特徴とする、向精神薬中毒又は依存症治療用医薬組成物。
【請求項１８】
前記モルヒナン誘導体が３−アリルオキシ−１７−メチルモルヒナン（ＡＭ）、３−シクロプロピルメトキシ−１７−メチルモルヒナン（ＣＭ）、３−メチル−１７−メチルモルヒナン（ＤＦ）、又はその生理学的に許容される塩であって、医薬担体又は賦形剤とともに含むことを特徴とする、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
治療を要する被検者又は動物に中毒治療に有效な量の前記請求項１８の組成物を投与することを含むことを特徴とする、向精神薬中毒治療方法。
【請求項２０】
麻薬がコカイン、モルヒネ又はメタンフェタミンであることを特徴とする、請求項１９に記載の向精神薬中毒治療方法。
【請求項２１】
治療を要する被検者又は動物に依存症治療に有效な量の前記請求項１７の組成物を投与することを特徴とする、麻薬依存症治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、神経保護的化合物に関する。より詳細には、本発明は、パーキンソン病又はパーキンソン病の症状、アルツハイマー病における学習障害や記憶障害、コカイン、モルヒネ及びメタンフェタミン（methamphetamine）のような麻薬類に対する中毒及び又は依存症を含む多様な神経学的状態を治療するに用いられるモルヒナン化合物に関する。また本発明は、前記モルヒナン化合物の医薬剤形に関する。
【背景技術】
【０００２】
デキストロメトルファン（Dextromethorphan, ＤＭ；３−メトキシ−１７−メチルモルヒナン)はほぼ４０年間鎮咳薬として広く用いられて来た非麻薬性モルヒナン誘導体であって、その神経保護的特性によって注目されてきている（５，９，１７〜２０，２３，２４，２６，２７，３３，３４，４６，５０，５１）。しかし、子供における毒性報告（４３，４５）；及び高用量のＤＭ摂取と関連したフェンシクリジン(phencyclidine,ＰＣＰ)類の精神異常反応（８，１２４４，５３）はＤＭの主要代謝産物であるデキストロルファン(Dextrorphan，ＤＸ；３−ヒドロキシ(hydroxy)−１７−メチルモルヒナン)に起因するものと見られる（５０，５１）。神経保護に有効なＤＭの用量（１７−２０，５０，５１）が鎮咳薬の用量より非常に高い。臨床的に、高用量のＤＭは精神作用を誘発し得る（８，１２，１９，４３−４５，５３）。さらに、ＤＭはいくつかの国で薬物探索行動を誘発する物質として認識されて来ている（１９，４３，４５）。従来より、ＤＭがコカインによって誘発される精神作用を増強させ（１３，２５）、ＤＭそのものがマウスにおいて精神障害效果を誘発し得ることが示唆された（１２，１５，２０，２４，２７）。その上、長期間にわたるＤＭ投与は細胞性免疫反応を攪乱し（１６）、これはＰＣＰによって誘発される免疫抑制效果と類似しているということが証明された（１９）。過去１０年にわたって、ＤＭが神経保護と関連してＮ−メチル(methyl)−Ｄ−アスパラギン酸塩(aspartate)（ＮＭＤＡ）受容体に拮抗作用を有するということを多くの研究者が報告している（５，９，１９，２０，５０）。従って、生体内で（in vivo）ＤＸに変換することなく神経保護的活性を保有するＤＭ類似体は非常に有用であるとみなされている（７，２４，２７，４６，５０，５１）。
【０００３】
最近、ごくわずかな精神作用を有し、抗痙攣作用及び神経保護的特性を有する化合物を開発するために、モルヒナン環構造の３番及び１７番位置が置換された一連の化合物が合成された（２４）。抗痙攣効果及び神経保護的効果を保持する一方、ＰＣＰ−類似の行動的副作用（２４，３９，４６）を減少させるため、構造的にＤＭと類似するが、ＤＸに代謝されないか、またはＤＭに比べて低い比率でＤＸに代謝されると予想される一連の３番位置及び１７番位置が置換されたモルヒナンが製造された（２４）。
【０００４】
１−メチル−４−フェニル−１，２，５，６−テトラヒドロピリジン（ＭＰＴＰ）（３，４０）、リポ多糖類(lipopolysaccharide)（ＬＰＳ）（１０，２８，４０）及びメタンフェタミン(methamphetamine)（ＭＡ）（２１，２２，２９）のいずれもげっ歯類、霊長類及びその他の種において黒質線条体のドーパミン作動性ニューロン(nigrostriatal dopaminergic nueron)の変性及び線条体ドーパミン(striatal dopamine)の損失をもたらす（４０）。蓄積された証拠はＤＭが生体内（ｉｎ ｖｉｖｏ）（１４，４７）及び生体外（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）（３３）で抗パーキンソン病作用を発揮することを示している。また、ＤＭの低い治療指数及び精神作用のため臨床有用性が制限されているが、ＤＭはパーキンソン病における運動変動(motor fluctuation)及び運動障害(dyskinesia)と関連したレボドーパ(levodopa)を向上させる。
【０００５】
従って、神経生物学産業では実質的に許容されない副作用がなく、他の否定的な心理的效果も発生することなくパーキンソン病の症状を治療できる神経保護的効果を有する薬剤化合物が求められている実情である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は神経保護的化合物又は神経保護的化合物を含む組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の一態様によれば、抗パーキンソンに有效な量の３−ヒドロキシモルヒナン(hydoxymorphinan)（ＨＭ）、３−ヒドロキシモルヒナン（ＨＭ）誘導体又はその生理的に許容されるモルヒナン塩を医薬担体(carrier)又は賦形剤(excipient)とともに含む抗パーキンソン用医薬組成物が提供される。ここで、前記３−ヒドロキシモルヒナン誘導体は３番及び１７番位置が置換されたものであって、３−アリルオキシ−１７−メチルモルヒナン（ＡＭ）、３−シクロプロピルメトキシ−１７−メチルモルヒナン（ＣＭ）、及び３−メチル−１７−メチルモルヒナン（ＤＦ）を含むことができるが、これらに限定されない。前記組成物はモルヒナン化合物の混合物を含み得る。特に、本発明は３−ヒドロキシモルヒナンに関するものである。前記組成物は他の神経保護剤又は他の薬理学的に許容される化合物をさらに含むことができる。前記組成物は徐放性製剤(sustained release dosage form)であってもよい。
【０００８】
本発明の他の態様によれば、人体に経口投与されるようにデザインされた形態を有するものであって、前記モルヒナン又はその生理学的に許容されるモルヒナン塩を含み、前記モルヒナン又はその塩がパーキンソン病の症状を実質的に軽減させる治療的に有効な量であり、かつ許容されない副作用を誘発させないパーキンソン病治療用単位製剤(unit dosage formulation)が提供される。前記単位製剤はモルヒナン又は生理学的に許容されるモルヒナン塩を封入する消化可能なカプセルを含み得る。また、このような製剤においてモルヒナンの用量は約２５０ｍｇ／日以下であってもよい。
【０００９】
本発明のまた他の態様は、パーキンソン病被検者又は動物に抗パーキンソンに有効な量の前記組成物を投与するパーキンソン病又はパーキンソン病の症状治療法が提供される。このような治療法において、前記組成物はモルヒナン化合物の混合物を含む。特に、前記モルヒナン化合物は３−ヒドロキシモルヒナンであることができる。また、前記治療方法において、前記組成物は徐放性製剤であってもよい。さらに、前記組成物はモルヒナン又は生理学的に許容されるモルヒナン塩を封入する消化可能なカプセルを含み得る。また、前記組成物は約２５０ｍｇ／日以下に投与され得る。なお、前記組成物は神経保護剤をさらに含み得る。
【００１０】
本発明の別の態様によれば、本発明は被検者に神経保護に有效な量の前記組成物を投与する被検者の黒質(substantia nigra)でのドーパミン生成の減少を抑制する方法が提供される。
【００１１】
本発明のまた別の態様によれば、アルツハイマー病に有效な量の３−ヒドロキシモルヒナン（ＨＭ）又は３−ヒドロキシモルヒナン（ＨＭ）誘導体又はその生理学的に許容されるモルヒナン塩を医薬担体(carrier)又は賦形剤(excipient)とともに含むアルツハイマー病の症状治療又は予防用医薬組成物が提供される。ここで、前記３−ヒドロキシモルヒナン誘導体は３番及び１７番位置が置換されたものであって、３−アリルオキシ−１７−メチルモルヒナン（ＡＭ）、３−シクロプロピルメトキシ−１７−メチルモルヒナン（ＣＭ）及び３−メチル−１７−メチルモルヒナン（ＤＦ）モルヒナン誘導体を含むことができるが、これらに限定されない。前記組成物はモルヒナン化合物の混合物を含み得る。特に、本発明は３−ヒドロキシモルヒナンに関するものである。前記組成物は他の神経保護剤又は他の生理学的に許容される化合物をさらに含み得る。前記組成物は徐放性製剤であってもよい。特に、アルツハイマー病と関連した学習障害や記憶障害を治療し得る。この点において、本発明は治療を要する被検者又は動物にアルツハイマー病に有效な量の前記組成物を投与することを含む、アルツハイマー病と関連した学習障害及び記憶障害の治療又は予防方法を提供することである。
【００１２】
本発明のさらに別の態様は、中毒治療に有效な量の３−ヒドロキシモルヒナン（ＨＭ）又は３−ヒドロキシモルヒナン（ＨＭ）誘導体又はその生理学的に許容されるモルヒナン塩を医薬担体(carrier)又は賦形剤(excipient)とともに含む麻薬中毒症状又は向精神薬中毒症状又は依存症治療用医薬組成物に関するものである。ここで、前記３−ヒドロキシモルヒナン誘導体は３番及び１７番位置が置換されたものであって、３−アリルオキシ−１７−メチルモルヒナン（ＡＭ）、３−シクロプロピルメトキシ−１７−メチルモルヒナン（ＣＭ）、及び３−メチル−１７−メチルモルヒナン（ＤＦ）を含むことができるが、これらに限定されない。前記組成物はモルヒナン化合物の混合物を含み得る。特に、本発明は３−ヒドロキシモルヒナンに関するものである。前記組成物は他の神経保護剤又は他の薬理学的に許容される化合物をさらに含み得る。前記組成物は徐放性製剤であってもよい。この点において、本発明は治療を要する被検者又は動物に中毒治療に有效な量の前記組成物を投与することを特徴とする、麻薬中毒治療方法を提供することができる。特に、麻薬はコカイン、モルヒネ又はメタンフェタミンでああるが、これらに限定されない。
【００１３】
本発明のまた他の態様によれば、治療を要する被検者又は動物に麻薬依存症治療に有效な量の前記組成物を投与することを含む、麻薬依存症治療法が提供される。特に、麻薬依存症はコカイン、モルヒネ又はメタンフェタミンに対する依存症であるが、これらに限定されない。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
まず、本出願で用いられる用語は目的物の単数及び複数を全部含む。一つ以上の追加的な治療剤と「組み合せられた(in combination with)」投与とは、他の治療剤と同時に又は連続して投与されることを意味する。
【００１５】
また、「有效な量(effective amount)」とは、有益であるか要求される臨床学的又は生物学的結果を発揮するのに十分な量を意味する。有效な量(effective amount)は１回以上投与され得る。本発明の目的を達成するために、モルヒナン化合物の有效な量は病気の緩和、改善、安定、逆転又は進行を遅らせるのに十分な量を意味する。本発明の好適な実施形態で、「有效な量(effective amount)」とは黒質でのドーパミン生成の減少を抑制できる量、及びパーキンソン病の症状を実質的に軽減させる量と定義される。有效な量(effective amount)の他の形態はアルツハイマー病と関連した学習障害や記憶障害を治療又は予防し得る量を意味する。さらに他の形態での有效量(effective amount)は麻薬中毒症状を治療するのに有効な量であることができ、かかる症状は無痛覚症(analgesia)、多幸症(euphoria)、呼吸困難(respiratory depression)、縮瞳(miosis)、鎮静(sedation)、情動不安(dysphoria)、幻覚(hallucinations)、精神異常(psychosis)、脳卒中(seizure)などを含むが、これらに限定されない。また、有效な量(effective amount)は制限されないが、コカイン、モルヒネ又はメタンフェタミンのような麻薬類に対する依存症を実質的に緩和させるか軽減させるために用いられる量であると言える。また、他の実施形態で、「有效な量(effective amount)」は神経保護に有効なモルヒナン量と定義される。
【００１６】
ここで、一つ以上の追加的な治療剤と「組み合せられた(in combination with)」投与とは同時に又は連続して投与されることを意味する。
【００１７】
本発明で用いられる用語のうち、治療目的のための「哺乳動物(mammal)」又は「被検者(subject)」とはヒト、犬、猫、馬、羊、豚などのような家畜及び動物園動物、競技用動物、ペットを含む、哺乳類に分類される全ての動物を総称する。好ましくは哺乳動物(mammal)はヒトである。
【００１８】
本発明で用いられる用語のうち、「神経保護的（neuroprotective)」治療剤とは、局所貧血(ischemia)、脳卒中(stroke)、痙攣(convulsion)又は外傷(trauma)から脳又は脊髓損傷を防止するために用いられる薬剤又は化学剤を意味する。一部は事前に投与されるが、一部は一定の時間が経過した後でも效果的である。これらは多様なメカニズムにより作用するが、時々直接又は間接的に内因性の興奮性アミノ酸(endogenous excitatory amino acid)によって誘発された損傷を最小化させる。さらに、神経保護的効果は神経変性又は神経毒に対する保護をも含む。さらに、「神経保護的」とは、ニューロンの退行変性を遅らせるか、或いは停止させる介入の意味を含む。神経保護的効果はまた、発症前状態(presymptomatic state)における病気の進行を防ぐ意味で用いられ得る。
【００１９】
なお、「パーキンソン病」とは、主に晩年に発生する黒質でのドーパミンの生成減少と関連した慢性進行性神経疾患を意味する。その症状としては前屈姿勢(stooped posture)、静止時振戦(resting tremor)、静止筋肉の弱化、小股歩行(shuffling gait)、言語障害、動き困難及びその結果をもたらす精神機能の鈍化及び認知症(dementia)を含む。
【００２０】
モルヒナン類似体(morphinanan alogues)
本発明の神経保護的モルヒナン類似体又は誘導体は３−ヒドロキシモルヒナンの３番及び１７番位置が置換されたものであることができる。このような類似体は３番位置が置換された酸素（Ｏ）、置換された窒素（Ｎ）、ハロゲン、及びエチル、プロピルなどを含むアルキル置換体を含むが、これらに限定されない。それだけでなく１７番位置における窒素基(nitrogen group)は色々な基(groups)をもって置換され得る。神経保護用として用いられる本発明の化合物の例は本出願の製造実施例部分だけでなく下記に示す。
【００２１】
酸素（Ｏ）を保存する３−ヒドロキシモルヒナンからの誘導体の合成
【化１】
2007537241.tif 000002
３番位置の酸素（Ｏ）が置換された化合物
【化２】
2007537241.tif 000003
１）３−アミノモルヒナン誘導体の合成
【化３】
2007537241.tif 000004
２）３−ハロゲン−置換されたモルヒナン誘導体の合成
下記反応式３に示すように、３番位置にスズ(tin)誘導体を導入したハロゲン化合物とヒドロキシメチル誘導体との合成は非常に低い収率をもたすことにより、所望する化合物を制限された量の出発物質から得られなかった。
【化４】
2007537241.tif 000005
３）３−エチルモルヒナン誘導体の合成
３−ハロゲン−置換された化合物は前記２）から得られなかったので、類似の誘導体を得るためにビニル基を３番位置に直接導入した。ビニル基の導入は成功的であり、下記反応式４に示すように幾つかの誘導体が合成された。
【化５】
2007537241.tif 000006
【化６】
2007537241.tif 000007
【化７】
2007537241.tif 000008
【表１】
2007537241.tif 000009
【表２】
2007537241.tif 000010
【表３】
2007537241.tif 000011
【表４】
2007537241.tif 000012
【表５】
2007537241.tif 000013
【表６】
2007537241.tif 000014
【表７】
2007537241.tif 000015
【表８】
2007537241.tif 000016
【表９】
2007537241.tif 000017
【表１０】
2007537241.tif 000018
【表１１】
2007537241.tif 000019
【表１２】
2007537241.tif 000020
モルヒナンとパーキンソン病
蓄積された証拠はデキストロメトルファン（ＤＭ）が生体内（ｉｎ ｖｉｖｏ）及び生体外（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）で抗パーキンソン病作用を有することを示す。しかし、ＤＭにより誘発される精神作用が臨床適用を妨げ得ることがよく知られている。右旋性モルヒナンの３−ヒドロキシモルヒナン（ＨＭ）、３−アリルオキシ−１７−メチルモルヒナン（ＡＭ）、３−シクロプロピルメトキシ−１７−メチルモルヒナン（ＣＭ）及びジメモルファン（ＤＦ）は既に合成された(Bioorg Med Chem Lett 2001;11:1651-1654, Behav. Brain Res.2004;151:151:267-276,  Br. J. Pharmacol. 2005;144:908-918)。これらはＤＭ又はＤＭの主要代謝産物であるデキストロルファン（ＤＸ）で見られるようなごくわずかな行動的副作用を示した。本発明はパーキンソン病の症状治療やその治療における右旋性モルヒナンの利用に関するものである。ＤＭ、ＨＭ及びＣＭは１−メチル−４−フェニル−１，２，５，６−テトラヒドロピリジン（ＭＰＴＰ）、リポ多糖類（ＬＰＳ）、又はメタンフェタミン（ＭＡ）によって誘発される運動機能低下症(hypokinesia)、ドーパミン及びその代謝産物の線条体濃度の減少、及び黒質チロシンヒドロキシキナーゼ様免疫反応性（ＴＨ−ＩＲ）の減少を低減させた(attenuate)。ＡＭ及びＤＦはＭＰＴＰ又はＬＰＳにより誘発された毒性に対して有意的な影響は与えなかったが、ＭＡにより誘発された神経毒性（過温症、運動機能低下症、ドーパミン及びその代謝産物の線条体濃度及び黒質ＴＨ−ＩＲにおける減少）を低減させた。
【００２２】
マウスにおける右旋性モルヒナンの行動(behavioral)效果及び抗パーキンソン病作用が試験された。行動的副作用のパラメータ(parameter)として、ＰＣＰにより誘発された行動プロフィールが試験されたが、このような行動プロフィールは典型的に旋回行動(circling behavior)及び条件付け場所嗜好性(conditioned place preferenc，CPP）として特徴化される（１３，２７，３７）。興味深いことに、限界運動パターン（旋回行動）[marginal locomotor pattern(circling behavior)]は前述したＣＰＰのパターンと類似している（１３，２７）。ＤＸの作用はＰＣＰの場合と定性的に類似しており、これは従来の研究と一致している（２４，２７）。
【００２３】
ＤＭにより誘発された行動特性がＤＸに比べて目立たなかったが、ＤＭの精神作用が用量依存的な方法で観察された。より有意的に、モルヒナン環構造の３番（及び１７番）位置が置換されたＡＭ、ＣＭ、ＨＭ、及びＤＦは神経活性を保持するが、弱い行動的副作用を示した（７，２４，２７，４６）。従来の実験はＡＭ、ＣＭ又はＤＦの抗痙攣／神経保護的効果のメカニズムがＰＣＰ部位よりはかえってσ１受容体を介して調節される(mediated)ことを示した（７，２４，２７，４６）。ＰＣＰ部位に対するＡＭ、ＣＭ又はＤＦの非常に低い親和度がＰＣＰ部位における作用がモルヒナンの抗痙攣／神経保護的効果のための前提条件ではないかもしれないという証拠を提供する。ＤＭ、ＡＭ、ＣＭ及びＤＦが抗痙攣効果を示したが、ＨＭはカイニン酸塩(kainate)（２４）又は最大電撃（２７）に対する反応において何らの抗痙攣効果も示さなかった。つまり、これはＨＭの薬理学的作用がドーパミン作動系に特異的であるということを示唆する。ＤＭはＯ−脱メチル化によって急速にＰＣＰ−類似化合物であるＤＸに代謝される（５０，５１，５４）。なお、ＤＸはＮ−脱メチル化を経てＨＭとなる。ＤＸ及びＨＭの両方ともグルクロン酸化(glucuronidation)後に排出される。あるいは、ＤＭは最初にＮ−脱メチル化によって３−メトキシモルヒナンを産み出すように代謝され、それからＯ−脱メチル化を経てＨＭとなる（５４）。より多くの証拠が収集されなければならないが、このような代謝過程はドーパミン毒性(dopaminergic toxicity)を低減させるのに有用である。３−メトキシモルヒナン及びＨＭがＤＭやＤＸに比べて低いＣＮＳ活性を保有すると推測されるが、モルヒナン投与の特異的経路による效果、モルヒナン投薬量の影響、及び生体内におけるグルクロン酸化能が考慮されなければならない（５４）。
【００２４】
ＤＭ及びＤＸが様々な共通的作用を有しているが、これは受容体結合特性及び生体内薬理学において相異なっている（７，２７，３４，５０）。ＤＭは明確なＤＭ認識部位及びσ−受容体結合部位において高い結合力を示すが、ＤＸで標識された部位に相対的に低い親和度を有する。これに対し、ＤＸは脳でＤＸ及びＰＣＰ結合部位に高い親和度を示す反面、ＤＭ及びσ部位に対して中間より低い親和度を示す（５０）。従って、鎮咳薬勧奨用量より高いＤＭの用量がＤＸと関連したＰＣＰ−類似の效果を発生させる（１，２）。さらに、ＤＭは混合アゴニスト特性（１７，１９，２０，５０，５１）を有するが、これは低用量で非競争的ＮＭＤＡ受容体拮抗剤として作用し、高用量で部分的アゴニストとして作用する（２０，４８，４９）。従って、ＤＭはＰＣＰ−ＮＭＤＡ−σ受容体複合体と相互作用する（２０，４８，４９，５０）。
【００２５】
神経保護的効果を保持しながらＰＣＰ−類似の行動的副作用を減らすために（２４，３９）、用意されたＤＭと構造的に類似しており、ＤＸに代謝されるかＤＭと比べて低い比率でＤＸに代謝されると予想される一連の３番位置及び１７番位置が置換されたモルヒナンが製造された。エーテルの加水分解副作用及び加水分解速度が考慮された（２４）。
【００２６】
パーキンソン病において、線条体のドーパミン性脱神経(denervation)は主に無動(akinesia)、低血圧(hypotonia)、振戦(tremor)及び姿勢の不安定(postural instability)のような臨床症状を説明する主要な生化学的障害である（３５）。新しいドーパミン作用薬を開発しようとする幾つかの試みにも関わらず、特にドーパミンアゴニストであるレボドーパはパーキンソン病の治療において依然として業界標準(golden standard)として残っている（３５）。しかし、その長期間服用は異常動き(abnormal movement)、動揺(fluctuation)、幻覚(hallucination)及び精神異常(psychosis)のような幾つかの副作用を伴う（３５，３６）。よって、治療的観点で、新しい病態生理学的な接近に基づいた新しい戦略が求められている。従って、レボドーパに抵抗する症状に作用するか神経保護的な医薬が非常に有用である。
【００２７】
低親和度ＮＭＤＡ開口チャネル拮抗剤は抗パーキンソン薬剤として良い候補物質になることができるということが示唆されて来た。ＤＭはＮＭＤＡ受容体チャネルに対してマイクロモルの親和度を含む複合的な薬理学的プロフィールを有する。二回の非旨検(open-label)臨床試験で、ＤＭは小規模のパーキンソン病志願者に有意的な改善を提供することが発見された。それに、相当な動物間多様性に従属してはいるが、ＤＭ及びケタミン(ketamine)を注射することによってレセルピンが投与されたマウス(reserpinized mouse)で活性の適切な回復が観察された（４７）。
【００２８】
ヒトへのＮＭＤＡ受容体拮抗剤の投与に対する主な反対理由は、これらが許容されない副作用を引き起す恐れがあるためである。これは筋肉弛緩(muscle relaxation)及び運動失調(ataxia)だけでなく精神刺激作用(psychostimulation)と記憶障害(memory impairment)を含む。しかし、理論的観点において、ＮＭＤＡ受容体関連イオンチャネルに対する低い親和度を有する化合物が利用可能な様々なＮＭＤＡ受容体拮抗剤に最も效果的であり、最も毒性が少ない（３２）。ＮＭＤＡ受容体拮抗剤のうち、ＤＭはこのような理論的理想によく符合し、小グループの特発性パーキンソン病被検者に成功的にテストされてきた。
【００２９】
初期の報告書はＮＭＤＡ受容体遮断が霊長類（６）を除いたパーキンソン病にかかったマウス（４）及びラット（３０）の運動性を直接的に回復させ得ることを示した。しかし、すべての研究で上記と同じ結果が出ることはないため、この問題は多少論争の余地がある。
【００３０】
これに対し、本出願で開示されたＨＭ、ＡＭ、ＣＭ及びＤＦのようなデキストロメトルファン類似体はＰＣＰ部位と関連したＮＭＤＡ受容体に対して非常に低い親和度を有する（７，２７）。これはＰＣＰ部位と関連したＮＭＤＡが抗パーキンソン作用に対する前提条件でないことを示唆する。さらに、以前の報告書はＤＭ、ＤＸ、ＨＭ、ＡＭ、ＣＭ及びＤＦがσ１受容体に高い親和度を有するリガンドであることを報告している（７，２７，４６）。なお、σ１受容体はグルタミン塩ＮＭＤＡ受容体の機能及びドーパミンの放出を調節するものであると認識される（１１）。たとえまだ何も治療的利用に導入されていないが、選択的σ１受容体リガンドは神経退行性疾患に対する新種治療剤の提示のために提案されてきた（１１）。最近、σ１受容体アゴニストがラット及びモルモットの線条体，前頭前皮質(prefrontal cortex)及び側坐核(nucleus accumbens)のスライス(slice)からのＮＭＤＡによって刺激された［３Ｈ］ドーパミンの放出を抑制するということが証明された（２）。それに、σ１受容体はドーパミン伝達を促進させる重要な役割をする（３１，４２）。このような現象はドーパミン合成比の増加と部分的に関連している。理論的制限なしに、たとえＮＭＤＡ受容体の拮抗作用によるモルヒナンの寄与度が排除され得ないが、モルヒナンの主要メカニズムは少なくとも部分的にσ１受容体調節と関連している。
【００３１】
本研究の結果はたとえＤＭが行動的副作用を示すが、ＭＰＴＰ、ＬＰＳ、及びＭＡモデルで抗パーキンソン作用に優れた效果を奏するということを示す。もっと重要には、他のモルヒナンはＤＭ又はＤＸのＰＣＰ−類似の行動的副作用を起こさない。しかも、ＨＭ及びＣＭはＭＰＴＰ、ＬＰＳ及びＭＡに対応する有意的な抗パーキンソン病作用を有する。ＡＭ及びＤＦはＭＡ−誘発神経毒性に対して效果的である。ＭＡ−誘発ドーパミンの毒性は長い間パーキンソン病の最も重要な動物モデルの一つとして見なされて来た。
【００３２】
治療的剤形
モルヒナンとその混合物及び／又は生理学的に許容される塩は経口又は経皮投与されるか又は静脈内、筋肉内、皮下、髄腔内、硬膜外又は脳室内(intracerebro-ventricular)注射によって投与され得る。有効な投薬量は、例えば１日当たり約０．２５〜２５０ｍｇなどのように多様であるが、もちろん実際の量は治療を受ける被検者の状態や環境によって異なる。本技術分野における熟練者ならば周知の如く、活性物質の作用を修正する様々な要素、例えば、被検者の年齢、体重、性別、食餌療法及び患者の状態、投与時期、投与速度や経路などが主治医によって考慮され得る。与えられた状態下での最適な投薬量は本技術分野における当業者によってここに提供された実験データに照らして典型的な投薬量決定テストを用いて確認され得る。
【００３３】
モルヒナン、その混合物及び／又は生理学的に許容される塩を封入する治療組成物は一般的に周知かつ慣例によって、少なくとも一つの生理学的に許容される成分とともに剤形化され得る。よって、モルヒナン、その混合物及び／又は生理学的に許容される塩は液体、粉剤、エリキシル剤(elixir)、注射液剤などに剤形化され得る。経口用剤形化はモルヒナン、その混合物及び／又は生理学的に許容される塩が炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、カオリンのような非活性固体希釈剤と混合された硬質ゼラチンカプセル剤に剤形化されるか、或いはモルヒナン、その混合物及び／又は生理学的に許容される塩が液体パラフィンやオリーブ油のような油性媒体と混合された軟質ゼラチンカプセル剤に剤形化され得る。
【００３４】
水性懸濁液は生理学的に許容される賦形剤と混合されたモルヒナン、その混合物及び／又は生理学的に許容される塩を含み得る。このような賦形剤は例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴム及びアラビアゴムなどの懸濁剤；自然発生的なリン脂質のような（例えば、レシチン）分粉剤や湿潤剤、又はステアリン酸ポリオキシエチレンのような脂肪酸とアルカリ性オキシドとの縮合物、ヘプタデカエチレン−オキシセタノールのように長鎖脂肪族アルコールとエチレンオキシドとの縮合物、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートのようなヘキシトール及び脂肪酸から抽出された部分エステル(partial ester)とエチレンオキシドとの縮合物、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートのようなヘキシトール無水物及び脂肪酸から抽出された部分エステルとエチレンオキシドとの縮合物などであってもよい。また、このような水性懸濁液は少なくとも一つのエチル−ｏｒ−ｎ−プロピル−ｐ−ヒドロキシ安息香酸のような防腐剤、着色剤、香味料、及びスクロース、サッカリン、又はシクラミン酸ナトリウムやシクラミン酸カルシウムのような甘味料を各々少なくとも一つずつ含み得る。
【００３５】
水の添加による水性懸濁液の製剤に適宜な、分散可能な粉剤及び顆粒剤は分粉剤や湿潤剤、懸濁剤及び少なくとも一つの防腐剤と混合されたモルヒナン、その混合物及び／又は生理学的に許容される塩を提供する。適当な分粉剤や湿潤剤、懸濁剤は前述のように例示された。例えば、甘味料、香味料、着色剤のような追加的賦形剤も含まれ得る。シロップ剤及びエリキシル剤は甘味料、例えば、グリセロール、ソルビトール或いはスクロースと共に剤形化され得る。また、このような剤形は鎮痛剤、防腐剤及び香味料及び着色料をも含み得る。
【００３６】
モルヒナン、その混合物及び／又は生理学的に許容される塩は、例えば、本発明の参考文献に含まれている米国特許第４，７８８，０５５；４，８１６，２６４；４，８２８，８３６；４，８３４，９６５；４，８３４，９８５；４，９９６，０４７；５，０７１，６４６；及び５，１３３，９７４で開示されたように周知の様々な種類の徐放性製剤に有利に提供される。
【００３７】
モルヒナン、その混合物及び／又は生理学的に許容される塩をパーキンソン病の症状の治療や治療に有用な他の周知の薬理活性剤の投薬前或いは同時に、又は投薬後に投薬することも本発明の範囲に属する。このような薬理活性剤は他の神経保護剤を含み得るが、これに限定されない。
【００３８】
神経保護剤は不可逆的損傷から脳の虚血性ニューロン(ischemic neuron)を保存するために試みる。他の神経保護剤は潜在的に血流の戻りと関連した損傷を抑制する。たとえ脳への血流の戻りは一般的に向上した治療成績と関連するが、再かん流(reperfusion)は追加的な脳損傷の原因となる。戻る血液は小血管を閉塞し、毒性物質を放出する白血球を含んでいる。局所貧血は興奮性アミノ酸受容体の過多活性化、細胞内カルシウムの蓄積、及び細胞損傷を起こす他の毒性物質の放出を誘発する。神経保護剤は興奮性神経伝達物質の放出を抑制することによって、細胞に対する局所貧血の悪影響を減少させる。
【００３９】
最も一般的に研究された神経保護剤はＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸塩（ＮＭＤＡ）受容体を遮断する。他の非（ｎｏｎ）−ＮＭＤＡ受容体とチャネルを調節することも興奮性神経伝達物質の放出を減少させ得る。内皮における細胞間接着分子（ＩＣＡＭ）を遮断できる単クローン抗体のような抗接着抗体(antiadhesion antibody)は、血管壁に白血球の粘着を抑制するのに用いられる。抗−ＩＣＡＭ抗体が再かん流関連損傷の初期段階を遮断するように見られるので、神経機能を維持する有望なメカニズムを提供する。他の神経保護剤は細胞膜の安定化を誘発する。例えば、ＣＤＰ−コリンの外因性形態(exogenous form)は細胞膜の生合成に用いられ、遊離基の形成を減少させる。基本的な線維芽細胞増殖因子である神経治療剤も用いられることができる。
【００４０】
指針(instruction)
本発明はまたパーキンソン病やパーキンソン病の症状、アルツハイマー病の学習及び記憶障害、コカイン、モルヒネ、及びメタンフェタミンのような麻薬に対する中毒症状や依存症を含む多様な神経学的状態を治療する際に、本発明のモルヒナンを用いる指針に関するものである。かかる指針は永続的形態でも臨時的な書式でもよい。指針は書面形態となっているが、教科書、プロトコルブック、カタログ、インターネットウェブ部位など、その方式に制限されない。かかる指針はモルヒナンの販売及び使用に関連しているが、これらに制限されない。指針は肉眼で見られる限り、陰極線管、ＬＣＤ、ＬＥＤなどのコンピュータスクリーンを介して表示されることも可能である。指針はまた前述した多様な症状を治療するキットの一部や音響／映像媒体の形態でもよい。
【００４１】
次に、本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、これらは本発明を例示するためのものに過ぎず、本発明の範囲を制限しない。実際に、添付図面及び後術する説明により本発明の特許請求の範囲のカテゴリ内で当該分野における当業者にとって多様に修正を加えることができるのは明らかである。
【実施例】
【００４２】
実施例１：製造実施例
製造実施例１．１
３−ヒドロキシ−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナン（化２）及び３−Ｏ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナンの製造（化３）
【化８】
2007537241.tif 000021
３−ヒドロキシ−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナン（２００ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥（ｄｒｙ）ジクロロメタン（３．０ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（２５０μＬ、１．８３ｍｍｏｌ）とジブチルオキシカルボニルエーテル（Ｂｏｃ２Ｏ）（１９０ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を室温で攪拌した。２時間後減圧下で溶媒を除去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで残渣を精製して化合物２（１６８ｍｇ、７９％）と化合物３（４３ｍｇ、１６％）とを得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．０４〜７．０８（３Ｈ，ｍ）；３．７３（２Ｈ，ｍ）；３．６８（１Ｈ，ｍ）；３．０８（２Ｈ，ｍ）；２．１５（１Ｈ，ｍ）；１．８３（２Ｈ，ｍ）；１．５０〜１．７０（８Ｈ，ｍ）；１．４０（９Ｈ，ｓ）（化２），δ７．０５〜６．８３（３Ｈ，ｍ）；４．３０（０．５０Ｈ，ｂｒ）４．００（０．５０Ｈ，ｂｒ）；３．８５（０．５０Ｈ，ｍ）；３．６８（０．５０Ｈ，ｍ）；３．０５〜３．２５（１Ｈ，ｍ）；２．５０〜２．７０（２Ｈ，ｍ）；１．６５〜１．８０（５Ｈ，ｂｒ）；１．５７（９Ｈ，ｓ）；１．４９（９Ｈ，ｓ）；１．１５〜１．３０（６Ｈ，ｍ）（化３）．
【００４３】
製造実施例１．２
３−Ｏ−プロパルギル−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシルカルボニル）モルヒナンの製造（化４）
【化９】
2007537241.tif 000022
【００４４】
化２で表される化合物が含まれている乾燥（ｄｒｙ）ＤＭＦ溶液に炭酸カリウムと臭化プロパルギルとを順次添加した後、前記混合物を６０℃で還流させた。１８時間後、前記混合物に飽和塩化ナトリウム水溶液を添加した後、ＥｔＯＡｃ(３ｍＬ×３)で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して２０ｍｇ(収率８２％)の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．０４〜６．８９（３Ｈ，ｍ）；４．７０（２Ｈ，ｓ）；４．３３（０．５Ｈ，ｂｒ）；４．１８（０．５Ｈ，ｍ）；３．９０（０．５Ｈ，ｄ）；３．７３（０．５Ｈ，ｄ）；３．１５〜３．０７（１Ｈ，ｍ）；２．５９（１Ｈ，ｓ）；２．３０（１Ｈ，ｂｒ）；１．８３（２Ｈ，ｍ）；１．６０（２Ｈ，ｍ）；１．４４〜１．４７（９Ｈ，ｓ）；１．１５〜１．３０（８Ｈ，ｍ）．
製造実施例１．３
３−（２−プロピニル）オキシモルヒナン・塩酸の製造（化５）
【化１０】
2007537241.tif 000023
【００４５】
化４で表される化合物が含まれている乾燥（ｄｒｙ）ＤＣＭ溶液に１，４−ジオキサンの４Ｎ塩酸溶液を添加した後、前記混合物を室温で６時間攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を蒸発させた。１８ｍｇ(収率９６％)の白色固体が得られた。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ７．０４〜６．８９（３Ｈ，ｍ）；４．７５（２Ｈ，ｓ）；４．３３（０．５Ｈ，ｂｒ）；４．１８（０．５Ｈ，ｍ）；３．９０（０．５Ｈ，ｄ）；３．７３（０．５Ｈ，ｄ）；３．１５〜３．０７（１Ｈ，ｍ）；２．５９（１Ｈ，ｓ）；２．３０（１Ｈ，ｂｒ）；１．８３（２Ｈ，ｍ）；１．６０（２Ｈ，ｍ）；１．１５〜１．３０（８Ｈ，ｍ）．
【００４６】
製造実施例１．３
３−（２−プロピニル）オキシ−Ｎ−（１−シクロプロピル）メチルモルヒナンの製造（化６）
【化１１】
2007537241.tif 000024
【００４７】
化５で表される化合物（６ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＤＭＦ（０．５ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（６．６ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）と臭化シクロプロピルメチル（４．０μＬ、０．０４ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を６０℃で還流させた。６時間後、飽和塩化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を添加し、ＤＣＭ（３ｍＬ×２）で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して４．５ｍｇ（収率７９％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．００〜６．７６（３Ｈ，ｍ）；４．７０（２Ｈ，ｓ）；３．１８（２Ｈ，ｂｒ）；２．７５（２Ｈ，ｍ）；２．６８（１Ｈ，ｍ）；２．４８（１Ｈ，ｄ）；２．３５（２Ｈ，ｍ）；１．５６（２Ｈ，ｍ）；１．５３（１Ｈ，ｂｒ）；１．４４（２Ｈ，ｍ）；１．２５〜１．４０（６Ｈ，ｍ）；．０．９５（１Ｈ，ｍ）；０．５８（２Ｈ，ｓ）；０．２５（２Ｈ，ｍ）．
【００４８】
製造実施例１．４
３−（２−プロピニル）オキシ−Ｎ−アリルモルヒナンの製造（化７）
【化１２】
2007537241.tif 000025
【００４９】
化５で表される化合物（６ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥（ｄｒｙ）ＤＭＦ（０．５ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（６．６ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）と臭化アリル（３．１μＬ、０．０３６ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を室温で還流させた。２時間後、前記混合物に飽和塩化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を添加し、ＤＣＭ（２ｍＬ×２）で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して５．１ｍｇ（収率９１％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．７３〜７．０９（３Ｈ，ｍ）；５．９０（１Ｈ，ｍ）；５．１４〜５．２０（２Ｈ，ｍ）；４．６４（２Ｈ，ｍ）；３．１７（２Ｈ，ｍ）；２．９４（２Ｈ，ｍ）；２．８５（１Ｈ，ｍ）；２．５５（１Ｈ，ｄ）；２．５３（２Ｈ，ｍ）；２．００（２Ｈ，ｔ）；１．６３（２Ｈ，ｂｒ）；１．２０〜１．４８（６Ｈ，ｍ）．
【００５０】
製造実施例１．５
３−（２−プロピニル）オキシ−Ｎ−ベンジルモルヒナンの製造（化８）
【化１３】
2007537241.tif 000026
【００５１】
前記化５で表される化合物（６ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＤＭＦ（０．５０ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（６．６ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）と臭化ベンジル（５．８μＬ、０．０４８ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を６０℃で還流させた。３時間後、前記混合物に飽和塩化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を添加した後、ＥｔＯＡｃ（３ｍＬ×３）で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して５．０ｍｇ（収率８４％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．７３〜７．４９（８Ｈ，ｍ）；５．３０（２Ｈ，ｓ）；３．６８（２Ｈ，ｂｒ）；３．０５（２Ｈ，ｍ）；２．８３（１Ｈ，ｂｒ）；２．５５（１Ｈ，ｂｒ）；２．３５（１Ｈ，ｍ）；２．２３（１Ｈ，ｍ）；１．８０（１Ｈ，ｍ）；１．１３〜１．６０（１０Ｈ，ｍ）．
【００５２】
製造実施例１．６
３−メタンスルホニルオキシ−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシルカルボニル）モルヒナンの製造（化９）
【化１４】
2007537241.tif 000027
【００５３】
前記化２で表される化合物（２６ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＤＣＭ（３．０ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（３２μＬ、０．２３ｍｍｏｌ）と塩化メタンスルホニル（７．６μＬ、０．０９８ｍｍｏｌ）とを添加した後、前記混合物を６０℃で還流させた。３０分後、前記混合物を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して３０ｍｇ（収率９４％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．０４〜６．８９（３Ｈ，ｍ）；４．３３（０．５Ｈ，ｂｒ）；４．１８（０．５Ｈ，ｍ）；３．９０（０．５Ｈ，ｄ）；３．７３（０．５Ｈ，ｄ）；３．２０（３Ｈ，ｓ）；３．１５〜３．０７（１Ｈ，ｍ）；２．６０（１Ｈ，ｍ）；２．５５（１Ｈ，ｍ）；２．３０（１Ｈ，ｍ）；１．７３（２Ｈ，ｍ）；１．６０（２Ｈ，ｂｒ）；１．４４〜１．４７（９Ｈ，ｓ）；１．１５〜１．３０（８Ｈ，ｍ）．
【００５４】
製造実施例１．７
３−メタンスルホニルオキシモルヒナン・塩酸の製造（化１０）
【化１５】
2007537241.tif 000028
【００５５】
前記化９で表される化合物（２７ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に含４Ｎ塩酸１，４−ジオキサン溶液（２００μＬ）を添加した後、前記混合物を室温で１２時間攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を蒸発させて２５ｍｇ（収率９６％）の白色固体を得た。
【００５６】
製造実施例１．８
３−メタンスルホニルオキシ−Ｎ−（メタンスルホニル）モルヒナンの製造（化１１）
【化１６】
2007537241.tif 000029
【００５７】
前記化１０で表される化合物（７ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＤＣＭ（１．０ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（３２μＬ、０．２３ｍｍｏｌ）と塩化メタンスルホニル（７．６μＬ、０．０９８ｍｍｏｌ）とを添加した後、前記混合物を６０℃で還流させた。２時間後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して７．５ｍｇ（収率９４％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．２〜６．９０（３Ｈ，ｍ）；４．０３（１Ｈ，ｂｒ）；３．６８（１Ｈ，ｍ）；３．３０（２Ｈ，ｍ）；３．２３（３Ｈ，ｓ）；２．８２（３Ｈ，ｍ）；２．７５（３Ｈ，ｓ）；２．６０（１Ｈ，ｍ）；２．３５（１Ｈ，ｍ）；１．６８〜１．８０（４Ｈ，ｍ）；１．２５〜１．６０（６Ｈ，ｍ）；１．１５〜１．２０（２Ｈ，ｍ）．
【００５８】
製造実施例１．９
３−メタンスルホニルオキシ−Ｎ−アリルモルヒナンの製造（化１２）
【化１７】
2007537241.tif 000030
【００５９】
前記化１０で表される化合物（７ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＤＭＦ（０．５ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（６．６ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）と臭化アリル（３．０μＬ、０．０３６ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を室温で還流させた。６時間後、前記混合物に飽和塩化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を添加した後、ＤＣＭ（２ｍＬ×４）で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して５．０ｍｇ（収率７０％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．８５〜７．１９（３Ｈ，ｍ）；５．９０（１Ｈ，ｂｒ）；５．１４〜５．２０（２Ｈ，ｍ）；３．１４（２Ｈ，ｍ）；３．０７（３Ｈ，ｓ）；２．８０（２Ｈ，ｍ）；２．４０（２Ｈ，ｍ）；２．３５（１Ｈ，ｄ）；１．６０〜１．９０（４Ｈ，ｍ）；１．２０〜１．４８（８Ｈ，ｍ）．
【００６０】
製造実施例１．１０
３−メタンスルホニルオキシ−Ｎ−アリルモルヒナンの製造（化１３）
【化１８】
2007537241.tif 000031
【００６１】
前記化１０で表される化合物（７ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＤＭＦ（０．５ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（６．６ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）と臭化シクロプロピルメチル（４．０μＬ、０．０４ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を６０℃で還流させた。６時間後、前記混合物に飽和塩化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を添加した後、ＤＣＭ（３ｍＬ×２）で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して５．５ｍｇ（収率７８％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．８５〜７．１９（３Ｈ，ｍ）；３．０７（３Ｈ，ｓ）；２．８０（２Ｈ，ｍ）；２．４０〜２．６０（２Ｈ，ｍ）；２．２０（２Ｈ，ｍ）；２．１０（２Ｈ，ｓ）；１．７００（２Ｈ，ｂｒ）；１．２０〜１．４８（８Ｈ，ｍ）；０．８０（２Ｈ，ｍ）；０．４０（２Ｈ，ｍ）．
【００６２】
製造実施例１．１１
３−メタンスルホニルオキシ−Ｎ−ベンジルモルヒナンの製造（化１４）
【化１９】
2007537241.tif 000032
【００６３】
前記化５で表される化合物（７ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＤＭＦ（０．５０ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（６．６ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）と臭化ベンジル（５．８μＬ、０．０４８ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を６０℃で還流させた。１２時間後、前記混合物に飽和塩化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を添加した後、ＥｔＯＡｃ（３ｍＬ×３）で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して５．９ｍｇ（収率７４％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．７３〜７．４９（８Ｈ，ｍ）；３．６８（２Ｈ，ｍ）；３．０５（３Ｈ，ｓ）；２．８８（２Ｈ，ｍ）；２．６５（１Ｈ，ｍ）；２．３０（１Ｈ，ｍ）；２．１３（１Ｈ，ｍ）；２．００（２Ｈ，ｍ）；１．８０（１Ｈ，ｍ）；１．７３（２Ｈ，ｍ）；１．４０〜１．７０（６Ｈ，ｍ）；１．１５〜１．３３（２Ｈ，ｍ）．
【００６４】
製造実施例１．１２
３−ベンジルオキシ−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナンの製造（化１５）
【化２０】
2007537241.tif 000033
【００６５】
３−ヒドロキシ−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナン（２０ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＤＭＦ（０．３ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（１７ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）と臭化ベンジル（１０μＬ、０．０８７ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を６０℃で還流させた。５時間後、前記混合物に飽和塩化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を添加した後、ＥｔＯＡｃ（３ｍＬ×３）で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して２２ｍｇ（収率８８％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４６−７．３４（５Ｈ，ｍ）；７．００（１Ｈ，ｍ）；６．９１（１Ｈ，ｍ）；６．８０（１Ｈ，ｍ）；５．０４（２Ｈ，ｍ）；４．３７（０．５５Ｈ，ｂｒ）；４．１８（０．４５Ｈ，ｂｒ）；３．７３（１Ｈ，ｍ）；３．０６（１Ｈ，ｍ）；２．６５（２Ｈ，ｍ）；２．３２（１Ｈ，ｍ）；１．６３．１．０８（１９Ｈ，ｍ）．
【００６６】
製造実施例１．１３
３−ベンジルオキシモルヒナン・塩酸の製造（化１６）
【化２１】
2007537241.tif 000034
【００６７】
前記化１５で表される化合物（２２ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＴＨＦ（７０μＬ）溶液に含４Ｎ塩酸１，４−ジオキサン溶液（１１０μＬ）を添加した後、前記混合物を室温で２時間攪拌させた。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を蒸発させた。粗生成物を単純に粉砕して１８ｍｇ（収率９７％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４３−７．２８（５Ｈ，ｍ）；７．１２（１Ｈ，ｂｒ）；６．８８（２Ｈ，ｂｒ）；５．０４（２Ｈ，ｍ）；３．２９（２Ｈ，ｂｒ）；２．９０（１Ｈ，ｂｒ）；２．３３（２Ｈ，ｂｒ）；１．６７−１．１０（１１Ｈ，ｍ）．
【００６８】
製造実施例１．１４
３−ベンジルオキシ−Ｎ−（１−シクロプロピル）メチルモルヒナン（化１７）
【化２２】
2007537241.tif 000035
【００６９】
前記化１６で表される化合物（６ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＤＭＦ（０．１６ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（６．６ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）と臭化シクロプロピルメチル（２．３μＬ、０．０２４ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を５０℃で還流させた。３時間後、前記混合物に飽和塩化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を添加した後、ＥｔＯＡｃ（３ｍＬ×３）で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して４．５ｍｇ（収率７２％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４３−７．２６（５Ｈ，ｍ）；６．９９（１Ｈ，ｍ）；６．８６（１Ｈ，ｍ）；６．７５（１Ｈ，ｍ）；５．０１（２Ｈ，ｍ）；３．０７（１Ｈ，ｂｒ）；２．９０（１Ｈ，ｍ）；２．６７−２．４５（３Ｈ，ｍ）；２．３２−２．２８（２Ｈ，ｍ）；１．９８（１Ｈ，ｍ）；１．８１−１．２５（１０Ｈ，ｍ）；０．８６（１Ｈ，ｂｒ）；０．４９（２Ｈ，ｂｒ）；０．０９（２Ｈ，ｂｒ）．
【００７０】
製造実施例１．１５
３−ベンジルオキシ−Ｎ−アリルモルヒナンの製造（化１８）
【化２３】
2007537241.tif 000036
前記化１６で表される化合物（６ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＤＭＦ（０．１６ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（６．６ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）と臭化アリル（２．１μＬ、０．０２４ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を５０℃で還流させた。３時間後、前記混合物に飽和塩化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を添加した後、ＥｔＯＡｃ（３ｍＬ×３）で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して５．１ｍｇ（収率８５％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４６−７．３０（５Ｈ，ｍ）；７．０５（１Ｈ，ｍ）；６．８９（１Ｈ，ｍ）；６．８０（１Ｈ，ｍ）；５．８８（１Ｈ，ｂｒ）；５．２４−５．１５（２Ｈ，ｍ）；５．０３（２Ｈ，ｍ）；３．１９（２Ｈ，ｂｒ）；２．９４（２Ｈ，ｂｒ）；２．５９（２Ｈ，ｍ）；２．３０（１Ｈ，ｍ）；２．０４（２Ｈ，ｂｒ）；１．８３−１．１３（９Ｈ，ｍ）．
【００７１】
製造実施例１．１６
３−ベンジルオキシ−Ｎ−ベンジルモルヒナンの製造（化１９）
【化２４】
2007537241.tif 000037
【００７２】
前記化１６で表される化合物（６ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＤＭＦ（０．１６ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（６．６ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）と臭化ベンジル（２．９μＬ、０．０２４ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を５０℃で還流させた。３時間後、前記混合物に飽和塩化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を添加した後、ＥｔＯＡｃ（３ｍＬ×３）で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して６．２ｍｇ（収率９１％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４３−７．２３（１０Ｈ，ｍ）；６．８７（１Ｈ，ｍ）；６．８６（１Ｈ，ｍ）；６．７７（１Ｈ，ｍ）；５．０１（２Ｈ，ｍ）；３．７３−３．５８（２Ｈ，ｍ）；２．９９（１Ｈ，ｍ）；２．８３（１Ｈ，ｂｒ）；２．６２−２．５６（１Ｈ，ｍ）；２．４３（１Ｈ，ｍ）；２．２８（１Ｈ，ｍ）；２．１２（１Ｈ，ｍ）；１．８５−１．１４（１０Ｈ，ｍ）．
【００７３】
製造実施例１．１７
３−ベンジルオキシ−Ｎ−（メタンスルホニル）モルヒナンの製造（化２０）
【化２５】
2007537241.tif 000038
【００７４】
前記化１６で表される化合物（６ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ジクロロメタン（０．１６ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（６．７μＬ、０．０４８ｍｍｏｌ）と塩化メタンスルホニル（１．９μＬ、０．０２４ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を室温で２時間攪拌した。前記混合物に飽和塩化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を添加した後、ＥｔＯＡｃ（３ｍＬ×３）で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して５．７ｍｇ（収率８７％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４４−７．２５（５Ｈ，ｍ）；７．０４（１Ｈ，ｍ）；６．８９（１Ｈ，ｍ）；６．８３（１Ｈ，ｍ）；５．０５（２Ｈ，ｍ）；４．０９（１Ｈ，ｍ）；３．７０（１Ｈ，ｍ）；３．３８−２．７８（６Ｈ，ｍ）；２．２８（１Ｈ，ｍ）；１．８２−１．１２（１０Ｈ，ｍ）．
【００７５】
製造実施例１．１８
３−ベンジルオキシ−Ｎ−（ｐ−トルエンスルホニル）モルヒナンの製造（化２１）
【化２６】
2007537241.tif 000039
【００７６】
前記化１６で表される化合物（６ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ジクロロメタン（０．１６ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（６．７μＬ、０．０４８ｍｍｏｌ）とｐ−塩化トルエンスルホニル（４．６ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）とを順次混合した後、前記混合物を室温で２時間攪拌した。前記混合物に飽和塩化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を添加した後、ＥｔＯＡｃ（３ｍＬ×３）で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して７．２ｍｇ（収率９２％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．７１−７．６８（２Ｈ，ｍ）；７．４３−７．２６（７Ｈ，ｍ）；６．８４（２Ｈ，ｍ）；６．７５（１Ｈ，ｍ）；５．００（２Ｈ，ｍ）；４．１２（１Ｈ，ｍ）；３．５９（１Ｈ，ｍ）；２．８９（１Ｈ，ｍ）；２．６７（１Ｈ，ｍ）；２．４６（４Ｈ，ｍ）；２．２６（１Ｈ，ｍ）；１．７４−１．０９（１０Ｈ，ｍ）．
【００７７】
製造実施例１．１９
３−（４−ブロモベンジルオキシ）−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナンの製造（化２２）
【化２７】
2007537241.tif 000040
【００７８】
３−ヒドロキシ−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナン（２０ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＤＭＦ（０．３ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（１７ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）と臭化ｐ−ブロモベンジル（２２ｍｇ、０．０８７ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を６０℃で還流させた。５時間後、前記混合物に飽和塩化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を添加した後、ＥｔＯＡｃ（３ｍＬ×３）で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して２６ｍｇ（収率８６％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．５５−７．５０（２Ｈ，ｍ）；７．３６−７．２５（２Ｈ，ｍ）；７．００（１Ｈ，ｍ）；６．８７（１Ｈ，ｍ）；６．７７（１Ｈ，ｍ）；５．００（２Ｈ，ｍ）；４．３７（０．５９Ｈ，ｂｒ）；４．１８（０．４１Ｈ，ｂｒ）；３．７５−３．７２（１Ｈ，ｍ）；３．０６（１Ｈ，ｍ）；２．６７−２．６１（２Ｈ，ｍ）；２．３０（１Ｈ，ｍ）；１．６５．１．０７（１９Ｈ，ｍ）．
【００７９】
製造実施例１．２０
３−（４−ブロモベンジルオキシ）モルヒナン・塩酸の製造（化２３）
【化２８】
2007537241.tif 000041
【００８０】
前記化２２で表される化合物（２６ｍｇ、０．０５０ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＴＨＦ（９０μＬ）溶液に含４Ｎ塩酸１，４−ジオキサン溶液（１３０μＬ）を添加した後、室温で２時間攪拌させた。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、減圧下で溶媒を除去した。粗生成物を単純に粉砕して１８ｍｇ（収率９６％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ７．５７−７．５１（２Ｈ，ｍ）；７．４１−７．３５（２Ｈ，ｍ）；７．１７（１Ｈ，ｍ）；６．９２（２Ｈ，ｍ）；５．０７（２Ｈ，ｍ）；３．２６−３．１０（２Ｈ，ｍ）；２．９５−２．８１（１Ｈ，ｍ）；２．７８（１Ｈ，ｍ）；２．３６（１Ｈ，ｍ）；１．７３−１．１９（１１Ｈ，ｍ）．
【００８１】
製造実施例１．２１
３−（４−ブロモベンジルオキシ）−Ｎ−（１−シクロプロピル）メチルモルヒナンの製造（化２４）
【化２９】
2007537241.tif 000042
前記化２３で表される化合物２３（６ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＤＭＦ（０．１６ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（６．６ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）と臭化シクロプロピルメチル（２．３μＬ、０．０２４ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を５０℃で還流させた。３時間後、前記混合物に飽和塩化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を添加した後、ＥｔＯＡｃ（３ｍＬ×３）で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して５．７ｍｇ（収率７４％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．５１−７．３３（２Ｈ，ｍ）；７．３０−７．２６（２Ｈ，ｍ）；７．０１（１Ｈ，ｍ）；６．８４（１Ｈ，ｍ）；６．７３（１Ｈ，ｍ）；４．９８（２Ｈ，ｍ）；３．２１（１Ｈ，ｂｒ）；２．９５−２．８５（１Ｈ，ｍ）；２．７３−２．５１（３Ｈ，ｍ）；２．３２（２Ｈ，ｍ）；１．９８−１．２３（１１Ｈ，ｍ）；０．７５（１Ｈ，ｂｒ）；０．５２（２Ｈ，ｂｒ）；０．１２（２Ｈ，ｂｒ）．
【００８２】
製造実施例１．２２
３−（ｐ−ブロモベンジルオキシ）−Ｎ−アリルモルヒナンの製造（化２５）
【化３０】
2007537241.tif 000043
前記化２３で表される化合物（６ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ＤＭＦ（０．１６ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（６．６ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）と臭化アリル（２．１μＬ、０．０２４ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を５０℃で還流させた。３時間後、前記混合物に飽和塩化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を添加した後、ＥｔＯＡｃ（３ｍＬ×３）で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して６．３ｍｇ（収率８７％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．５４−７．３６（２Ｈ，ｍ）；７．３１−７．２５（２Ｈ，ｍ）；７．００（１Ｈ，ｍ）；６．８２（１Ｈ，ｍ）；６．７５（１Ｈ，ｍ）；５．７９（１Ｈ，ｂｒ）；５．２８−５．１３（２Ｈ，ｍ）；５．０１（２Ｈ，ｍ）；３．２１（２Ｈ，ｂｒ）；２．９０（２Ｈ，ｂｒ）；２．６２（２Ｈ，ｍ）；２．２７（１Ｈ，ｍ）；２．０６（２Ｈ，ｂｒ）；１．８５−１．２１（９Ｈ，ｍ）．
【００８３】
製造実施例１．２３
３−ヒドロキシ−Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）モルヒナンの製造（化２６）
【化３１】
2007537241.tif 000044
【００８４】
３−ヒドロキシモルヒナン（２０ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（２６μＬ、０．１８３ｍｍｏｌ）とが攪拌された乾燥ジクロロメタン（０．３ｍＬ）溶液にクロロギ酸ベンジル（１０．５μＬ、０．０７３ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。前記混合物を２時間攪拌し、前記混合物に飽和塩化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を添加した後、ＥｔＯＡｃ（３ｍＬ×３）で前記混合物を抽出した。結合有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、ろ過して濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して１２ｍｇ（収率５１％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３〜７．５（５Ｈ，ｍ）６．９（１Ｈ，ｔ）；６．８（１Ｈ，ｄ）；６．６（１Ｈ，ｔ）；５．１（２Ｈ，ｓ）；４．３（１Ｈ，ｄｄ）；３．９（１Ｈ，ｍ）；３．１（１Ｈ，ｍ）；２．７（２Ｈ，ｍ）；２．３（１Ｈ，ｄ）；１．０〜１．８（１０Ｈ，ｍ）．
【００８５】
製造実施例１．２４
３−ベンジルオキシカルボニルオキシ−Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）モルヒナンの製造（化２７）
【化３２】
2007537241.tif 000045
【００８６】
３−ヒドロキシモルヒナン（５ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（１３μＬ、０．０９１ｍｍｏｌ）とが攪拌された乾燥ジクロロメタン（０．３ｍＬ）溶液にクロロギ酸ベンジル（５．２μＬ、０．０３６ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。前記反応混合物を室温で２時間攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィーで精製して６．３ｍｇ（収率８０％）の標題化合物を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３〜７．６（１０Ｈ，ｍ）；７．０（２Ｈ，ｍ）；６．９（１Ｈ，ｍ）；５．３（２Ｈ，ｓ）；５．１（２Ｈ，ｓ）；４．３（１Ｈ，ｄｄ）；３．９（１Ｈ，ｍ）；３．１（１Ｈ，ｍ）；２．７（２Ｈ，ｄ）；２．３（１Ｈ，ｍ）；１．０〜１．８（１０Ｈ，ｍ）．
【００８７】
製造実施例１．２５
３−アニリノカルボニルオキシ−Ｎ−フェニルウリドモルヒナンの製造（化２８）
【化３３】
2007537241.tif 000046
【００８８】
３−ヒドロキシモルヒナン（５ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（８．３μＬ、０．０６０ｍｍｏｌ）とが攪拌された乾燥ジクロロメタン（０．３ｍＬ）溶液にイソシアン酸フェニル（５μＬ、０．０４６ｍｍｏｌ）を添加した後、前記混合物を０℃で１時間攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィーで精製して６．５ｍｇ（収率８８％）の標題化合物を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４（２Ｈ，ｄ）；７．２（６Ｈ，ｍ）；７．０（６Ｈ，ｍ）；６．３（１Ｈ，ｓ）；４．４（１Ｈ，ｓ）；３．５（１Ｈ，ｄ．ｄ．）；３．１（１Ｈ，ｄ．ｄ．）；２．８（２Ｈ，ｍ）；２．３（１Ｈ，ｍ）；１．０〜１．９（１０Ｈ，ｍ）．
【００８９】
製造実施例１．２６
３−アニリノカルボニルオキシ−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナンの製造（化２９）
【化３４】
2007537241.tif 000047
【００９０】
３−ヒドロキシ−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナン（９ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（１０μＬ、０．０４ｍｍｏｌ）とが攪拌された乾燥ジクロロメタン（０．３ｍＬ）溶液にイソシアン酸フェニル（４μＬ、０．０４５ｍｍｏｌ）を添加した後、前記混合物を１時間攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィーで精製して１１ｍｇ（収率９０％）の標題化合物を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４（２Ｈ，ｄ）；７．３（２Ｈ，ｔ）；７．１（３Ｈ，ｍ）；６．９（２Ｈ，ｍ）；４．３（１Ｈ，ｍ）；３．８（１Ｈ，ｍ）；３．１（１Ｈ，ｄ．ｄ．）；２．４〜２．８（２Ｈ，ｍ）；２．３（１Ｈ，ｍ）；１．３（９Ｈ，ｓ）；１．０〜１．７（１０Ｈ，ｍ）．
【００９１】
製造実施例１．２７
３−アニリノカルボニルオキシモルヒナン・塩酸の製造（化３０）
【化３５】
2007537241.tif 000048
【００９２】
３−Ｏ−フェニルカルバモイル−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナンＤ−４（１０ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ジクロロメタン（０．５ｍＬ）溶液に含４Ｎ塩酸１，４−ジオキサン溶液（１２０μＬ）を添加した後、前記混合物を室温で２時間攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を濃縮した。粗生成物を単純に粉砕して９ｍｇ（収率９６％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ７．５（２Ｈ，ｄ）；７．３（３Ｈ，ｍ）；７．１（１Ｈ，ｄ）；７．０（２Ｈ，ｍ）；３．９（１Ｈ，ｍ）；３．０〜３．４（３Ｈ，ｍ）；２．８（１Ｈ，ｍ）；２．５（１Ｈ，ｍ）；１．０〜１．９（１０Ｈ，ｍ）．
【００９３】
製造実施例１．２８
Ｎ−Ｂｏｃ−３−ピバロイルオキシモルヒナンの製造（化３１）
【化３６】
2007537241.tif 000049
【化３７】
2007537241.tif 000050
【００９４】
Ｎ−Ｂｏｃ−３−ヒドロキシモルヒナン（化２）（２０ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（９μＬ、０．０６４ｍｍｏｌ）とが含まれている乾燥ジクロロメタン（１ｍＬ）溶液に塩化ピバロイル（８μＬ、０．０６４ｍｍｏｌ）を０℃で徐々に添加した後、前記混合物を１時間攪拌させた。溶媒は減圧下で除去された。粗生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィー（５：１ ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）で精製し、無色のオイル（２３ｍｇ、収率９２％）を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）０．９〜１．７（ｍ，２９Ｈ）；２．３４（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ）；２．５２〜２．７３（ｍ，２Ｈ）；３．０９〜３．１７（ｍ，１Ｈ）；３．７３〜３．８４（ｍ，１Ｈ）；６．８３〜６．８７（ｍ，１Ｈ）；６．９５（ｓ，１Ｈ）；７．０９〜７．１２（ｍ，１Ｈ）．
【００９５】
製造実施例１．２９
Ｎ−（１−シクロプロピル）メチル−３−ピバロイルオキシモルヒナンの製造（化３３）
【化３８】
2007537241.tif 000051
【００９６】
Ｎ−Ｂｏｃ−３−ピバロイルオキシモルヒナン（５ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ジクロロメタン（０．２ｍＬ）溶液に４Ｍ塩酸ジオキサン溶液（０．５ｍｌ）を添加して０℃で２時間攪拌した。溶媒は減圧下で蒸発された。ＣＨ３ＣＮ（０．５ｍｌ）で３−ピバロイルオキシモルヒナンの粗製塩酸塩（化３２）を溶解した後、これに（ブロモメチル）シクロプロパン（２μＬ、０．０２０ｍｍｏｌ）とＴＥＡ（９μＬ、０．０６４ｍｍｏｌ）とを０℃で徐々に添加した。１０時間攪拌した後、前記反応混合物を減圧下で濃縮した。前記粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（９５：５  ジクロロメタン／メタノール）で精製し、無色のオイル（３ｍｇ、収率６５％）を得た：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）０．４３〜１．５８（ｍ，２４Ｈ）；２．３５〜２．５２（ｍ，２Ｈ）；２．６９〜２．７３（ｍ，１Ｈ）；２．９０〜２．９６（ｍ，２Ｈ）；３．１６〜３．３５（ｍ，２Ｈ）；３．９１（ｓ，１Ｈ）；６．９２〜６．９６（ｍ，１Ｈ）；６．９９（ｓ，１Ｈ）；７．１７（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）．
【００９７】
製造実施例１．３０
Ｎ−ベンジル−３−ピバロイルオキシモルヒナンの製造（化３４）
【化３９】
2007537241.tif 000052
【００９８】
前記化３１で表される化合物（５ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ジクロロメタン（０．２ｍＬ）溶液に４Ｍ塩酸ジオキサン溶液（０．５ｍｌ）を添加した後、前記混合物を０℃で２時間攪拌した。溶媒は減圧下で蒸発させた。ジクロロメタン（０．５ｍｌ）で前記アミン粗製塩（化３２）を溶解した後、これに臭化ベンジル（２μＬ、０．０２０ｍｍｏｌ）とＴＥＡ（９μＬ、０．０６４ｍｍｏｌ）とを０℃で徐々に添加した。４時間攪拌した後、前記反応混合物を減圧下で濃縮した。前記粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（３：１  ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）で精製し、無色のオイル（４ｍｇ、収率８０％）を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）０．９１〜１．７４（ｍ，１８Ｈ）；１．８９（ｍ，Ｊ＝１２．６Ｈｚ，１Ｈ）；２．０７〜２．２１（ｍ，１Ｈ），２．２９〜２．４８（ｍ，２Ｈ）；２．６３〜２．６９（ｍ，１Ｈ）；２．８７（ｓ，１Ｈ）；３．０９（ｄ，Ｊ＝１８．３Ｈｚ，１Ｈ）；３．６８（ｄｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，２Ｈ）；６．８２〜６．９３（ｍ，２Ｈ）；７．１５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．２５〜７．３８（ｍ，５Ｈ）．
【００９９】
製造実施例１．３１
Ｎ−（２−プロピニル）−３−ピバロイルオキシモルヒナンの製造（化３５）
【化４０】
2007537241.tif 000053
【０１００】
前記化３１で表される化合物（５ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ジクロロメタン（０．２ｍＬ）溶液に４Ｍ塩酸ジオキサン溶液（０．５ｍｌ）を添加した後、前記混合物を０℃で２時間攪拌した。溶媒は減圧下で蒸発させた。ジクロロメタン（０．５ｍｌ）で前記アミン粗製塩（化３２）を溶解した後、前記混合物に８０重量％の臭化プロパルギルが含まれたトルエン溶液（２μＬ、０．０２０ｍｍｏｌ）とＴＥＡ（９μＬ、０．０６４ｍｍｏｌ）とを０℃で徐々に添加した。４時間攪拌した後、前記反応混合物を減圧下で濃縮した。前記粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：１ ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）で精製し、無色のオイル（３ｍｇ、収率６８％）を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）１．１５〜１．８７（ｍ，２０Ｈ）；２．１４〜２．３１（ｍ，２Ｈ）；２．６７〜２．７４（ｍ，２Ｈ）；３．０２（ｄ，Ｊ＝１８．６Ｈｚ，１Ｈ）；３．１２〜３．１４（ｍ，１Ｈ）；３．３６〜３．３９（ｍ，２Ｈ）；６．８１〜６．９３（ｍ，２Ｈ）；７．１６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）．
【０１０１】
製造実施例１．３２
Ｎ−メタンスルホニル−３−ピバロイルオキシモルヒナンの製造（化３６）
【化４１】
2007537241.tif 000054
【０１０２】
前記化３１で表される化合物（５ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥ジクロロメタン（０．２ｍＬ）溶液に４Ｍ塩酸ジオキサン溶液（０．５ｍｌ）を添加して０℃で２時間攪拌した。溶媒は減圧下で蒸発させた。ジクロロメタン（０．５ｍｌ）で前記アミン粗製塩（化３２）を溶解した後、塩化メタンスルホニル（２μＬ、０．０３０ｍｍｏｌ）とＴＥＡ（９μＬ、０．０６４ｍｍｏｌ）とを０℃で徐々に添加した。１時間攪拌した後、前記反応混合物を減圧下で濃縮した。前記粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（３：１ ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）で精製し、無色のオイル（３ｍｇ、収率８２％）を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）１．０８〜１．８７（ｍ，２０Ｈ）；２．３６（ｄ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，１Ｈ）；２．７７〜２．９２（ｍ，５Ｈ）；３．５１〜３．５４（ｍ，１Ｈ）；４．１０〜４．１５（ｍ，１Ｈ）；６．８６〜６．９６（ｍ，２Ｈ）；７．１３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）．
【０１０３】
製造実施例１．３３
３−（トリフルオロメタンスルホニルオキシ）モルヒナンの製造（化３８）
【化４２】
2007537241.tif 000055
【０１０４】
前記化２で表される化合物（２００ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）とＴＥＡ（０．３２ｍｌ，２．３２ｍｍｏｌ）とが含まれている乾燥ジクロロメタン（５ｍＬ）溶液にＰｈＮＴｆ２（４１４ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）を０℃で徐々に添加した。前記反応混合物を室温まで昇温させて６時間攪拌した。前記溶液をジクロロメタンで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下でろ過して化３７の粗生成物を得た。化３７の粗製化合物が含まれている乾燥ジクロロメタン（１ｍＬ）溶液に４Ｍ塩酸ジオキサン溶液（５ｍｌ）を添加した後、前記混合物を室温で５時間攪拌した。溶媒は真空下で除去された。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（９０：５：５ ジクロロメタン／メタノール／ＴＥＡ）で粗アミン塩を精製し、淡黄色のオイル（１８４ｍｇ、収率８５％）を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）０．９６〜２．０４（ｍ，１２Ｈ）；２．２７〜３．１８（ｍ，４Ｈ）；３．４５（ｓ，１Ｈ）；７．０７〜７．１５（ｍ，２Ｈ）；７．２２（ｓ，１Ｈ）．
【０１０５】
製造実施例１．３４
Ｎ−ベンジル−３−（トリフルオロメタンスルホニルオキシ）モルヒナンの製造（化３９）
【化４３】
2007537241.tif 000056
【０１０６】
前記化３８で表される化合物（５０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）とＴＥＡ（７４μＬ、０．５３ｍｍｏｌ）とが含まれている乾燥ジクロロメタン（２ｍＬ）溶液に臭化ベンジル（３２μＬ、０．２７ｍｍｏｌ）を０℃で徐々に添加した後、５時間攪拌した。溶媒は減圧下で除去された。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（９０：５ ジクロロメタン／メタノール）で前記粗生成物を精製し、無色のオイル（５１ｍｇ、収率８４％）を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）１．０５〜１．７２（ｍ，９Ｈ）；１．７４〜１．８５（ｍ，１Ｈ）；１．９０〜１．９４（ｍ，１Ｈ）；１．９６〜２．０５（ｍ，１Ｈ）；２．３１（ｄ，Ｊ＝１３．０Ｈｚ，１Ｈ）；２．４８〜２．５２（ｍ，１Ｈ）；２．８８〜２．９１（ｍ，１Ｈ）；３．１２（ｄ，Ｊ＝１８．６Ｈｚ，１Ｈ）；３．６７（ｄｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，２Ｈ）；７．０３〜７．３８（ｍ，８Ｈ）．
【０１０７】
製造実施例１．３５
Ｎ−（１−シクロプロピル）メチル−３−（トリフルオロメタンスルホニルオキシ）モルヒナンの製造（化４０）
【化４４】
2007537241.tif 000057
【０１０８】
前記化３８で表される化合物（５０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）とＴＥＡ（７４μＬ、０．５３ｍｍｏｌ）とが含まれている乾燥ジクロロメタン（２ｍＬ）溶液に（ブロモメチル）シクロプロパン（２５μＬ、０．２６ｍｍｏｌ）を０℃で徐々に添加した後、前記混合物を５時間攪拌した。溶媒は減圧下で溶媒を除去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（９５：５ ジクロロメタン／メタノール）で前記粗生成物を精製し、白色固体（４３ｍｇ、収率７７％）を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）０．１９〜２．１０（ｍ，１７Ｈ）；２．３１（ｄ，Ｊ＝１３．８Ｈｚ，１Ｈ）；２．４７〜２．５９（ｍ，２Ｈ）；２．７８〜２．８８（ｍ，２Ｈ）；３．３０（ｓ，１Ｈ）；７．０２〜７．０６（ｍ，１Ｈ）；７．１３〜７．２０（ｍ，２Ｈ）．
【０１０９】
製造実施例１．３６
化４１で表される化合物の製造
【化４５】
2007537241.tif 000058
【０１１０】
丸底フラスコにＰｄ（ＯＡｃ）２（１ｍｇ、０．００４５ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−（−）−ＢＩＮＡＰ（３ｍｇ、０．００４５ｍｍｏｌ）とＣＳ２ＣＯ３（２２ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）とを満たし、アルゴンで洗い流した洗い流した（ｆｌｕｓｈ）。Ｎ−（１−シクロプロピル）メチル−３−（トリフルオロメタンスルホニルオキシ）モルヒナン（化４０）（２０ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）とＤＭＦ（１ｍｌ）との混合液にベンゾフェノンイミン（ｂｅｎｚｏｐｈｅｎｏｎｅ ｉｍｉｎｅ）（１３ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）を添加した。前記混合物を８０℃で１２時間加熱した後、室温で２時間２Ｎ塩酸溶液（３ｍｌ）で処理した。溶媒は減圧下で除去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（９５：５：５ ジクロロメタン／メタノール／ＴＥＡ）で前記粗生成物を精製し、白色固体（１０ｍｇ、収率７３％）を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）０．１５〜３．２４（ｍ，２５Ｈ）；６．６２〜６．６５（ｍ，１Ｈ）；６．７５（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．９４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）．
【０１１１】
製造実施例１．３７
化４２で表される化合物の製造
【化４６】
2007537241.tif 000059
【０１１２】
前記化４１で表される化合物（５ｍｇ、０．０１７ｍｏｌ）とＴＥＡ（７μＬ、０．０５１ｍｍｏｌ）とが含まれている乾燥ジクロロメタン（１ｍＬ）溶液に塩化４−ニトロベンゼンスルホニル（７ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）を０℃で徐々に添加した後、前記混合物を１時間攪拌した。溶媒は減圧下で除去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（９５：５ ジクロロメタン／メタノール）で前記粗生成物を精製し、無色のオイル（６ｍｇ、収率８３％）を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）０．１９〜０．６３（ｍ，８Ｈ）；０．９６〜２．１１（ｍ，１３Ｈ）；２．５５〜３．５３（ｍ，６Ｈ）；６．８３〜６．８７（ｍ，２Ｈ）；７．１０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）；８．１０（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ）；８．３８（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ）．
【０１１３】
製造実施例１．３８
化４３で表される化合物の製造
【化４７】
2007537241.tif 000060
【０１１４】
丸底フラスコにＰｄ（ＯＡｃ）２（１ｍｇ、０．００４５ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−（−）−ＢＩＮＡＰ（３ｍｇ、０．００４５ｍｍｏｌ）とＣＳ２ＣＯ３（２２ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）とを満たし、アルゴンで洗い流した（ｆｌｕｓｈ）。トリフラート（化３９）（２０ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）とＤＭＦ（１ｍｌ）との混合液にベンゾフェノンイミン（ｂｅｎｚｏｐｈｅｎｏｎｅｉｍｉｎｅ）（１３ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）を添加した。前記混合物を８０℃で１２時間加熱した後、室温で２時間２Ｎ塩酸水溶液（３ｍｌ）で処理した。溶媒は減圧下で除去した。前記粗生成物とＴＥＡ（１７μＬ、０．１２７ｍｍｏｌ）とが含まれている乾燥ジクロロメタン（１ｍＬ）溶液に塩化４−ニトロベンゼンスルホニル（８ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）を０℃で徐々に添加した後、１時間攪拌した。溶媒は減圧下で濃縮された。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（２：１ ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）で前記粗生成物を精製し、無色のオイル（６ｍｇ、収率８３％）を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）０．８９〜２．０６（ｍ，１２Ｈ）；２．４６〜２．７０１（ｍ，２Ｈ）；２．８７（ｓ，１Ｈ）；３．０６（ｄ，Ｊ＝１８．６Ｈｚ，１Ｈ）；３．５４〜４．１０（ｍ，２Ｈ）；６．７６（ｓ，１Ｈ）；６．８３〜６．８６（ｍ，１Ｈ）；７．１２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）；８．０４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ）．
【０１１５】
製造実施例１．３９
３−ビニル−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナンの製造（化４４）
【化４８】
2007537241.tif 000061
【０１１６】
３−Ｏ−（トリフルオロメタンスルホニル）−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナン（化３７）（１８ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ）とが攪拌された乾燥１，４−ジオキサン（０．８ｍＬ）溶液にトリブチル（ビニル）スズ（１７μＬ、０．０５９ｍｍｏｌ）、ＬｉＣｌ（１７．３μＬ、０．１１７ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１７．３μＬ、０．１７４ｍｍｏｌ）及び少量の２，６−ジ−ｔ−ブチル−４−メチルフェノール結晶を添加した。その結果得られた懸濁液は加熱還流した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を蒸発させ、残渣をカラムクロマトグラフィーで精製して８ｍｇ（収率５９％）の標題化合物を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．２５〜７．３２（２Ｈ，ｍ）７．０５（１Ｈ，ｄ）；６．６２（１Ｈ，ｄ．ｄ．）；５．７８（１Ｈ，ｄ）；５．２０（１Ｈ，ｄ）；４．３０（１Ｈ，ｍ）；３．５５〜４．８０（１Ｈ，ｍ）；３．１０（１Ｈ，ｍ）；２．３０〜２．６５（２Ｈ，ｍ）；２，０５（１Ｈ，ｍ）；１．２３（９Ｈ，ｓ）；１．００〜１．８０（１０Ｈ，ｍ）．
【０１１７】
製造実施例１．４０
３−エチル−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナンの製造（化４５）
【化４９】
2007537241.tif 000062
【０１１８】
３−ビニル−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナン（化４４）（１０ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）が含まれている乾燥メタノール（１ｍＬ）溶液にＰｄ／Ｃ（４ｍｇ）を添加し、バルーンに入っている水素ガスをフラスコに満たした。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を蒸発させ、残渣をカラムクロマトグラフィーで精製して７ｍｇ（収率７０％）の標題化合物を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．０６〜７．３６（３Ｈ，ｍ）；４．３７（０．５Ｈ，ｓ）；４．１９（０．５Ｈ，ｓ）；３．８８（１Ｈ，ｄｄ）；３．１１（１Ｈ，ｍ）；２．６３（２Ｈ，ｍ）；２．５９（２Ｈ，ｍ）；２．４４（１Ｈ，ｍ）；１．６０〜１．８０（４Ｈ，ｍ）；１．４０〜１．６０（９Ｈ，ｄ）；０．９０〜１．４０（９Ｈ，ｍ）．
【０１１９】
製造実施例１．４１
３−エチルモルヒナン・塩酸の製造（化４６）
【化５０】
2007537241.tif 000063
【０１２０】
３−エチル−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナン（化４５）（６ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）が攪拌された乾燥ＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に含４Ｎ塩酸１，４−ジオキサン溶液（３００μＬ）を添加した後、前記混合物を室温で４時間攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を蒸発させた。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．１３〜７．４６（３Ｈ，ｍ）；３．２７（２Ｈ，ｍ）；３．１９（２Ｈ，ｓ）；２．８８（１Ｈ，ｍ）；２．８１（１Ｈ，ｍ）；２．５８（２Ｈ，ｍ）；１．１０〜１．８０（１３Ｈ，ｍ）．
【０１２１】
製造実施例１．４２
３−エチル−Ｎ−アリルモルヒナンの製造（化４７）
【化５１】
2007537241.tif 000064
【０１２２】
３−エチルモルヒナン・塩酸（化４６）（３ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）が攪拌された乾燥ＤＭＦ（０．６ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（５ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）と臭化アリル（５．０μＬ、０．０６０ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を還流させた。２時間後、前記混合物を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過して濃縮した。生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して〜２ｍｇの白色固体を得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．８９〜７．１６（３Ｈ，ｍ）；５．８０（１Ｈ，ｄ）；５．１６〜５．３０（２Ｈ，ｍ）；４．００〜４．３０（１Ｈ，ｄｄ）；３．６８（２Ｈ，ｔ）；３．６６（１Ｈ，ｍ）；３．１５（１Ｈ，ｂｒ）；２．６８（２Ｈ，ｍ）；２．５０（２Ｈ，ｍ）；２．３８（１Ｈ，ｍ）；１．１０〜１．７０（１３Ｈ，ｍ）．
【０１２３】
製造実施例１．４３
３−（１’，２’−ジヒドロキシエチル）−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナンの製造（化４８）
【化５２】
2007537241.tif 000065
【０１２４】
３−ビニル−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナン（化４４）（１０．５ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）が攪拌されたアセトン：水＝２：１溶液（０．３ｍｌ）にＮ−メチルモルホリン−Ｎ−オキシド（１０μＬ、水中５０重量％）及び四酸化オスミウム（一滴）を順次添加した後、前記混合物を室温で２時間攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、前記混合物に酢酸エチル（２ｍｌ）と硫酸ナトリウム水溶液（２ｍｌ）を流れ込んだ後、有機層を分離した後、硫酸マグネシウムで乾燥して濃縮した。カラムクロマトグラフィーで精製して１０ｍｇ（収率８７％）の標題化合物を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．２９〜７．３６（１Ｈ，ｍ）；７．１７〜７．１０（２Ｈ，ｍ）；４．７９（１Ｈ，ｄ）；４．３７（０．５５Ｈ，ｂｒ）；４．１９（０．４５Ｈ，ｂｒ）；３．７７〜３．６６（３Ｈ，ｍ）；３．１１（１Ｈ，ｍ）；２．７２〜２．４１（４Ｈ，ｍ）；２．０３（１Ｈ，ｍ）；１．７１〜１．０４（１９Ｈ，ｍ）．
【０１２５】
製造実施例１．４４
３−フェニルカルバモイルオキシ−Ｎ−（３−クロロプロピル）モルヒナンの製造（化４９）
【化５３】
2007537241.tif 000066
【０１２６】
３−フェニルカルバモイルオキシモルヒナン・塩酸（化３０）（２．８ｍｇ、０．００７ｍｍｏｌ）が攪拌された乾燥ＤＭＦ（０．１５ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（５．４ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）と１−ブロモ−３−クロロプロパン（１．９μＬ、０．０４２ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を５０℃で攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を濃縮し、カラムクロマトグラフィーで精製して２．１ｍｇ（収率７０％）の標題化合物を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３５（４Ｈ，ｍ）；７．１０（２Ｈ，ｍ）；６．８５（１Ｈ，ｄ）；６．７５（１Ｈ，ｄ．ｄ．）；６．２８（１Ｈ，ｓ）；４．３８（１Ｈ，ｍ）；４．１０（２Ｈ，ｔ）；３．８０（２Ｈ，ｔ）；３．６５（１Ｈ，ｍ）；３．１４（１Ｈ，ｄ．ｄ．）；２．８３（２Ｈ，ｍ）；２．３７（１Ｈ，ｍ）；２．２５（２Ｈ，ｍ）；１．００〜１．８０（１０Ｈ，ｍ）．
【０１２７】
製造実施例１．４５
３−フェニルカルバモイルオキシ−Ｎ−（メタンスルホニル）モルヒナンの製造（化５０）
【化５４】
2007537241.tif 000067
【０１２８】
３−Ｏ−フェニルカルバモイルオキシモルヒナン・塩酸（化３０）（２．８ｍｇ、０．００７ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（５．４μＬ、０．０４２ｍｍｏｌ）とが攪拌された乾燥ジクロロメタン（０．３ｍＬ）溶液に塩化メタンスルホニル（１．５μＬ、０．０２１ｍｍｏｌ）を添加した後、前記混合物を室温で攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィーで精製して２．１ｍｇ（収率７０％）の標題化合物を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４８（２Ｈ，ｄ）；７．３１（２Ｈ，ｔ）；７．１５（３Ｈ，ｍ）；７．０４（１Ｈ，ｍ）；６．９０（１Ｈ，ｓ）；４．１１（１Ｈ，ｍ）；３．５５（１Ｈ，ｍ）；３．１８（１Ｈ，ｍ）；２．９３（３Ｈ，ｓ）；２．８４（２Ｈ，ｍ）；２．３０（１Ｈ，ｄ）；１．００〜１．８０（１０Ｈ，ｍ）．
【０１２９】
製造実施例１．４６
３−フェニルカルバモイルオキシ−Ｎ−アセチルモルヒナンの製造（化５１）
【化５５】
2007537241.tif 000068
【０１３０】
３−Ｏ−フェニルカルバモイルオキシモルヒナン・塩酸（化３０）（２．８ｍｇ、０．００７ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（５．４μＬ、０．０４２ｍｍｏｌ）とが攪拌された乾燥ジクロロメタン（０．３ｍＬ）溶液に塩化アセチル（１．４μＬ、０．０２１ｍｍｏｌ）を添加した後、前記混合物を室温で攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィーで精製して２ｍｇ（収率７０％）の標題化合物を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４５（２Ｈ，ｄ）；７．３０（２Ｈ，ｔ）；７．１５（３Ｈ，ｍ）；７．０３（２Ｈ，ｍ）；４．９５（１Ｈ，ｍ）；３．５５（１Ｈ，ｍ）；３．１５（１Ｈ，ｍ）；２．９０（１Ｈ，ｍ）；２．７５（１Ｈ，ｍ）；２．３０（１Ｈ，ｍ）；２．０５（３Ｈ，ｓ）；１．００〜１．８０（１０Ｈ，ｍ）．
【０１３１】
製造実施例１．４７
３−（３−クロロプロピルオキシ）−Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）モルヒナンの製造（化５２）
【化５６】
2007537241.tif 000069
【０１３２】
３−ヒドロキシ−Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）モルヒナン（化２６）（３．６ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ）が攪拌された乾燥ＤＭＦ（０．１６ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（４ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）と１−ブロモ−３−クロロプロパン（２．８μＬ、０．０２８ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を５０℃で攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィーで精製して３ｍｇ（収率７０％）の標題化合物を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３０（５Ｈ，ｍ）；７．００（１Ｈ，ｔ）；６．８３（１Ｈ，ｄ）；６．７０（１Ｈ，ｄ．ｄ．）；５．１０（２Ｈ，ｍ）；４．３０（１Ｈ，ｍ）；４．０５（２Ｈ，ｔ）；３．９０（１Ｈ，ｍ）；３．７９（２Ｈ，ｔ）；３．０５（１Ｈ，ｍ）；２．７５（２Ｈ，ｍ）；２．３０（１Ｈ，ｍ）；２．１５（２Ｈ，ｍ）；１．００〜１．８０（１０Ｈ，ｍ）．
【０１３３】
製造実施例１．４８
３−（３−クロロプロピルオキシ）−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナンの製造（化５３）
【化５７】
2007537241.tif 000070
【０１３４】
３−ヒドロキシ−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナン（２０ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）が攪拌された乾燥ＤＭＦ（０．３ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（２４ｍｇ、０．１７４ｍｍｏｌ）と１−ブロモ−３−クロロプロパン（１７．３μＬ、０．１７４ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を５０℃で攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィーで精製して１８ｍｇ（収率７４％）の標題化合物を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．０５（１Ｈ，ｍ）；６．８３（１Ｈ，ｄ）；６．７５（１Ｈ，ｄ．ｄ．）；４．２８（１Ｈ，ｄ）；４．０５（２Ｈ，ｔ）；３．９０（１Ｈ，ｍ）；３．８３（３Ｈ，ｔ）；３．１５（１Ｈ，ｍ）；２．６０（２Ｈ，ｍ）；２．３０（１Ｈ，ｍ）；２．１５（１Ｈ，ｍ）；１．３０（９Ｈ，ｓ）；１．００〜１．８０（１０Ｈ，ｍ）．
【０１３５】
製造実施例１．４９
３−（３−クロロプロピルオキシ）モルヒナン・塩酸の製造（化５４）
【化５８】
2007537241.tif 000071
【０１３６】
３−（３−クロロプロピルオキシ）−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）モルヒナン（化５３）（１７ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）が攪拌された乾燥ジクロロメタン（１．０ｍＬ）溶液に含４Ｎ塩酸１，４−ジオキサン溶液（２００μＬ）を添加した後、前記混合物を室温で２時間攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を濃縮した。粗生成物を単純に粉砕して１４ｍｇ（収率９７％）の白色固体を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ７．１５（１Ｈ，ｄ）；６．８０〜７．１０（２Ｈ，ｍ）；４．０５（２Ｈ，ｔ）；３．７８（２Ｈ，ｔ）；３．６５（２Ｈ，ｍ）；３．３０（１Ｈ，ｍ）；３．１０（２Ｈ，ｍ）；２．７８（１Ｈ，ｍ）；２．４５（１Ｈ，ｍ）；２．１８（２Ｈ，ｍ）；１．００〜２．００（１０Ｈ，ｍ）．
【０１３７】
製造実施例１．５０
３−（３−クロロプロピルオキシ）−Ｎ−（メタンスルホニル）モルヒナンの製造（化５５）
【化５９】
2007537241.tif 000072
【０１３８】
３−（３−クロロプロピルオキシ）モルヒナン・塩酸（化５４）（３ｍｇ、０．００８ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（７μＬ、０．０５０ｍｍｏｌ）とが攪拌された乾燥ジクロロメタン（０．３ｍＬ）溶液に塩化メタンスルホニル（２μＬ、０．０２５ｍｍｏｌ）を添加した後、前記混合物を室温で攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィーで精製して３ｍｇ（収率８８％）の標題化合物を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．０１（１Ｈ，ｍ）；６．８５（１Ｈ，ｄ）；６．７０（１Ｈ，ｄ．ｄ）；４．０５（３Ｈ，ｍ）；３．７８（２Ｈ，ｔ）；３．５６（１Ｈ，ｄ．ｄ．）；３．１５（１Ｈ，ｄ．ｄ．）；２．９０（３Ｈ，ｓ）；２．８３（２Ｈ，ｍ）；２．３２（１Ｈ，ｍ）；２．２０（２Ｈ，ｍ）；１．００〜１．９０（１０Ｈ，ｍ）．
【０１３９】
製造実施例１．５１
３−（３−クロロプロピルオキシ）−Ｎ−アセチルモルヒナンの製造（化５６）
【化６０】
2007537241.tif 000073
【０１４０】
３−（３−クロロプロピルオキシ）モルヒナン・塩酸（化５４）（３ｍｇ、０．００８ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（７μＬ、０．０５０ｍｍｏｌ）とが攪拌された乾燥ジクロロメタン（０．３ｍＬ）溶液に塩化アセチル（１．８μＬ、０．０２５ｍｍｏｌ）を添加した後、前記混合物を室温で攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を濃縮してカラムクロマトグラフィーで精製して２．５ｍｇ（収率８２％）の標題化合物を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．９６（１Ｈ，ｔ）；６．８３（１Ｈ，ｄ）；６．７５（１Ｈ，ｄ．ｄ．）；４．９２（１Ｈ，ｍ）；４．１５（２Ｈ，ｔ）；３．８１（２Ｈ，ｔ）；３．７５（１Ｈ，ｍ）；３．１２（１Ｈ，ｍ）；２．９５（１Ｈ，ｍ）；２．６２（１Ｈ，ｍ）；２．３０（１Ｈ，ｍ）；２．１８（２Ｈ，ｍ）；２．０５（３Ｈ，ｓ）；１．００〜１．８０（１０Ｈ，ｍ）．
【０１４１】
製造実施例１．５２
３−（３−クロロプロピルオキシ）−Ｎ−ベンジルモルヒナンの製造（化５７）
【化６１】
2007537241.tif 000074
３−（３−クロロプロピルオキシ）モルヒナン・塩酸（化５４）（３ｍｇ、０．００８ｍｍｏｌ）が攪拌された乾燥ＤＭＦ（０．１５ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（７ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）と臭化ベンジル（２μＬ、０．０３２ｍｍｏｌ）とを順次添加した後、前記混合物を５０℃で攪拌した。出発物質がＴＬＣ上で見えなくなった後、溶媒を濃縮し、カラムクロマトグラフィーで精製して３ｍｇ（収率８７％）の標題化合物を得た。：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．１５〜７．３５（５Ｈ，ｍ）；７．０５（１Ｈ，ｄ）；６．８０（１Ｈ，ｓ）；６．７３（１Ｈ，ｄ）；４．１０（２Ｈ，ｔ）；３．５５〜３．８５（４Ｈ，ｍ）；３．０５（１Ｈ，ｍ）；２．８０（１Ｈ，ｍ）；２．５６（１Ｈ，ｍ）；２．４０（１Ｈ，ｍ）；２．００〜２．３０（４Ｈ，ｍ）；１．００〜１．９０（１０Ｈ，ｍ）．
【０１４２】
実験例１：モルヒナンの神経保護的効果
実験例１．１
動物と薬物
すべての動物はヒト治療と実験用動物の使用に関するＮＩＨガイド（実験用動物の治療及び使用のためのＮＩＨガイド、ＮＩＨ公表番号８５−２３、１９８５）によって厳格に扱われた。約３０±３ｇ重量のＣ５７ＢＬ／６雄性マウス（Bio Genomics, Inc., Charles River Technology、韓国京畿道加平郡）を１２：１２時間の明暗サイクルで保持し、飼料及び水を自由に摂取するようにした。実験実施前に動物を前記条件下で２週間適応させた。本研究でドーパミン性神経毒としては１−メチル−４−フェニル−１，２，５，６−テトラヒドロピリジン(MPTP; Sigma, St. Louis, MO)、リポ多糖類(LPS; Sigma Chem., St.Louis, MO)及びメタンフェタミン(MA; NIDA/NIH, USA)を用いた。
【０１４３】
雄性マウスに７日間連続して毎日ＭＰＴＰ（２０ｍｇ遊離塩基／ｋｇ、皮下注射）を注射した。各々のモルヒナンは最後の３日間（４日目から７日目まで）毎度ＭＰＴＰ注射３０分前に投与された。動物を最後のＭＰＴＰ注射後２４時間内に犠牲にした。
【０１４４】
雄性マウスを抱水クロラール (chloral hydrate)（２００ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）で麻酔し、小動物用脳定位固定装置(stereotaxic apparatus)に置いた。ブレグマ(bregma)から測定された定位座標を用いて線条体領域(striatal region)にＬＰＳを注入した(FranklinとPaxinos、1997)：＋０．７ｍｍ後部、±１．０側部、−３．４腹部。ＬＰＳ（ＰＢＳ２μｌ用量中の２μｇ）を２分間にわたって線条体(striatum)の両側面に注射し、注射後２分間注射針をそのまま保持させた。対照群動物にはＰＢＳを線条体に注射した。ＬＰＳを線条体内(intrastriatal)に注射する前に、各々のモルヒナンを２回（４時間４０分前、４０分前）投与した（１０，２８）。
【０１４５】
薬物処理を行う間、ＭＡから誘発される過温症と神経毒は周囲温度を低めることによって遮断できるので、マウスを温度調節された（２２．０±０．５℃）コロニー室に置き、前記コロニー室は飼料と水を自由に摂取可能にし、１２時間／１２時間明暗サイクルを有して、ろ過された陽圧換気下で５０±５％湿度に調節された。２時間間隔でマウスにＭＡ塩酸塩（７．５ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射、遊離塩基）を４回注射した（２２，２９）。各々の処理後、６０分間直腸温度(colonic temperature)を記録した。直腸温度は温度計(Thermoscan製, San Diego, CA)を用いて測定された。直腸温度を最後に測定した後、動物を同一の生活空間に復帰させた。最後のＭＡ注射後３日目に、マウスは犠牲になった。最初のＭＡ処理前に４時間４０分、及び４０分に２回にわけて各々のモルヒナンを投与した。
【０１４６】
実験例１．２
モルヒナン
すべての溶液は脱イオン化された蒸留水又は生理食塩水を用いて新たに製造された。ＤＭ臭化水素酸塩(DM hydrobromide)はシグマケミカル社(St. Louis, MO)から入手した。デキストロルファン（ＤＸ）酒石酸塩(tartrate)、３−アリルオキシ−１７−メチルモルヒナン（ＡＭ）臭化水素酸塩、３−シクロプロピルメトキシ−１７−メチルモルヒナン（ＣＭ）臭化水素酸塩、３−ヒドロキシモルヒナン（ＨＭ）臭化水素酸塩（２４）、及びジメモルファン（ＤＦ）リン酸塩が合成された（３８，４１，４６）（図１）。各化合物は０．１ｍｌ／１０ｇ体積で腹腔内（ｉ．ｐ．）注射された。
【０１４７】
実験例１．３
自発運動(locomotor activity）と運動パターン(locomotor pattern)
７日間一日単回、各化合物（２０又は４０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射／日）をＣ５７ＢＬ／６マウスに投与した。各々の薬物の最後の投与後１０分から３０分間自発運動を測定した。自発運動を測定した後（即ち、最後の薬物注射後４０分）、運動パターンを試験するために自動化されたビデオトラッキングシステム(Noldus information Technology製、Wagenin、オランダ）を用いて３分間のモニタリング期間中に「絶対回転角」(absolute turn angular)を分析した。特に、テストボックスの端部における運動円滑化(locomotor faciliation)は限界活性（旋回行動）[marginal activity(circling behavior)]とそれぞれ定義された（１３，２５，２７）。８個のテストボックス（４０×４０×３０ｃｍ高さ）がＩＢＭコンピュータによって同時に作動された。動物が実験開始前１０分間適応させた各々のテストボックスで運動する間、個体別に研究した。各セッション別の出力物はテストボックスの移動パターンを示した。水平自発運動における動物のｃｍ単位移動距離が分析された（１３，２５，２７）。データは９００〜１７００時間の間収集及び分析された。
【０１４８】
実験例１．４
条件付け場所嗜好性（心理的依存）
対照群として、Ｃ５７ＢＬ／６マウスを白色又は黒色区画(white or black compartment)に送る直前に生理食塩水を腹腔内注射した。白色区画に入れる直前に生理食塩水（０．１ｍｌ／１０ｇ）に溶解された各化合物（２０又は４０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）をマウスに投与した。
【０１４９】
１日目に、マウスを５分間テスト装置に予め露出させた。マウスが二つの区画を自由に移動するようにギロチンドア(guillotine door)を上げた。２日目に、各々のマウスがそれぞれ区画で過ごした時間を１５分間記録した。３、５、７、９、１１及び１３日目に、マウスが好まない白色区画に４０分間閉じ込める前にそれぞれ薬物を注射した。４、６、８、１０及び１２日目にマウスが好む黒色区画に４０分間閉じ込める前に生理食塩水を注射した。１４日目にギロチンドアが上げられた。マウスは初期にトンネルに置かれ、二つの区画でマウスが過ごした時間を１５分間記録した。テスト及びテスト前段階における白色区画で過ごした時間の差を数値で計算した（１３，２７，３７）。データは９００〜１７００時間分析された。
【０１５０】
実験例１．５
ドーパミンとその代謝産物の決定
脳を迅速に摘出した後、氷上で冠状断面(coronal section)で１ｍｍカットした。精密パスツール・ピペットを用いて線条体をパンチング（ｐｕｎｃｈ）して（３，２１，２２）、−７０℃で保管した。ＤＡとその代謝産物である３，４−ジヒドロキシフェニル酢酸（ＤＯＰＡＣ）とホモバニリン酸（ＨＶＡ）とがＨＰＬＣ−電気化学検出で測定された（３，２１，２２）。要約すれば、線条体は内部標準（ｍｌ当り組織の湿重量１０ｍｇ）であり、３，４−ジヒドロキシベンジルアミンを含む０．２Ｍ過塩素酸(perchloric acid)で均質化された。
ホモジネート(homogenate)を遠心分離した後、上澄液の一定分量(aliquot)２０−μｌをＯＤＳ−Ｃ１８カラムが装着されたＨＰＬＣに注入した。移動相(mobile phase)はアセトニトリル(acetonitrile)２６ｍｌ、テトラヒドロフラン(tetrahydrofuran)２１ｍｌ及びＥＤＴＡ ５０ｍｇ／ｌ及びオクチル硫酸ナトリウム(sodium octyl sulfate)２００ｍｇ／ｌを含む０．１５Ｍモノクロロ酢酸(monochloroacetic acid)（ｐＨ３．０）９６０ｍｌで構成された。ＤＡ、ＤＯＰＡＣ及びＨＶＡの量は標準組織サンプルのピーク高さ比(peak height ratio)と比べて決定し、組織の湿重量(wet weight)１００ｍｇ当りナノグラム(nanogram)で表された。
【０１５１】
実験例１．６
免疫細胞化学(Immunocytochemistry)
海馬(hippocampus)を含む冠状断面(coronal section)はチロシンヒドロキシラーゼ(tyrosine hydroxylase)（ＴＨ）免疫細胞化学で処理された。１次抗体と一晩中培養する前に、冠状断面を１５分間０．２％トリトンＸ−１００で、それから４％ヤギ正常血清(goat serum)で２０分間下洗い(ｐｒｅｗａｓｈ)を行った。１次抗血清(antiserum)との２４時間培養後、冠状断面は１時間の間２次ビオチン化抗血清（１：８００希釈）で培養される。冠状断面は各々の培養段階間にＰＢＳ（ｐＨ７．４）でいつも３回洗浄される。色原体として３，３’−ジアミノベンジジンテトラ塩酸塩を有するアビジン−ビオチン複合法(avidin-biotin complex method)（ABCキット、Vector Laboratories、Inc.製)は免疫反応細胞を視覚化することに用いられた。ＴＨ（２４−２７，４９，６１）に対する抗体は２００倍希釈された。全ての神経集団はイメージ分析システム(Optimas version 6.2；ニューロルシダプログラム−コントラスト補正システムは背景シグナルで標準化することが含まれる）下でアバークロンビー（１）の方法によって補正された。（３，２２）
【０１５２】
実験例１．７
統計
前記データはフィッシャーＬＳＤテスト(Fisher LSD test)、ダンカン(Duncan)の多重テストと繰り返し測定で分散分析法によって分析された。統計的な意味はｐ＜０．０５と定義される。
【０１５３】
結果
実験例１．８
モルヒナン又はフェンシクリジン（ＰＣＰ）の反復投与による自発運動における変化
行動データは図２〜４に要約される。生理食塩水が注射された動物は基本的な自発運動を示した。ＤＸ又はＤＭ（２０又は４０ｍｇ／ｋｇ）の反復投与は自発運動を顕著に増加させた。このような效果はＤＭで処理した動物よりＤＸで処理した動物で一層著しいことと現われた。ＤＸにより誘発された行動プロフィールはＰＣＰのプロフィールとに匹敵する。ＡＭの処理は自発運動を多少増加させると現れたが、ＨＭ、ＣＭ又はＤＦ処理による自発運動は生理食塩水で処理したものに匹敵する（図２）。ＤＸは用量依存的方法で限界活性（旋回行動）で著しい増加を誘発させた（ＤＸ２０又は４０ｍｇ／ｋｇ ｖｓ．生理食塩水、ｐ＜０．０１）。ＤＸにより誘発された行動的影響はＰＣＰの效果と類似している（ＰＣＰ ２．５ｍｇ／ｋｇ ｖｓ．５．０ｍｇ／ｋｇ、ｐ＜０．０５）。これに対し、ＤＭはまた限界活性で著しい増加を誘発させた（ＤＭ２０又は４０ｍｇ／ｋｇ ｖｓ．生理食塩水、ｐ＜０．０１）。しかし、ＨＭ、ＡＭ、ＣＭ及びＤＦは生理食塩水グループに比べて限界活性に著しい影響を及ぼさなかった（図２Ｂ）。ＰＣＰは他のグループで示されたものより非常に強いステレオタイプ(sterotype)（即ち、旋回行動≒限界活性）を発生させた（図２Ａ及び図２Ｂ）。
【０１５４】
生理食塩水で処理された動物は何ら顕著な運動パターンも示さなかった。運動パターンはＰＣＰ、ＤＭ及びＤＸで処理した後、顕著に変化された。ＰＣＰ、ＤＭ及びＤＸは限界活性（旋回行動）を発生させた。その反面、ＨＭ、ＡＭ、ＣＭ及びＤＦは何ら運動パターンでも著しい限界活性を発生させなかった（図３）。
【０１５５】
実験例１．９
モルヒナン又はフェンシクリジン（ＰＣＰ）の反復投与による条件化場所嗜好性（ＣＰＰ）プロフィールの変化
生理食塩水で処理された動物は何らＣＰＰ效果も見せなかった。ＤＸ処理された動物は用量依存的方法でＣＰＰを発生させた（ＤＸ２０又は４０ｍｇ／ｋｇ ｖｓ．生理食塩水、ｐ＜０．０１；ＤＸ４０ｍｇ／ｋｇ ｖｓ．生理食塩水、ｐ＜０．０５）、ＤＸと同様にＤＭ処理はまたＣＰＰを発生させた（ＤＭ２０ｍｇ／ｋｇ ｖｓ．生理食塩水、ｐ＜０．０５；ＤＸ４０ｍｇ／ｋｇ ｖｓ．生理食塩水、ｐ＜０．０１）。最も著しいＣＰＰはＰＣＰに従う（ＰＣＰ５ｍｇ／ｋｇ ｖｓ．生理食塩水、ｐ＜０．００１；ＰＣＰ２．５ｍｇ／ｋｇ ｖｓ．５ｍｇ／ｋｇ、ｐ＜０．０１）。一方、ＨＭ、ＣＭ、ＡＭ及びＤＦ処理動物は生理食塩水で処理された動物に比べて何らＣＰＰ效果も見せなかった（図４）。
【０１５６】
実験例１．１０
ＭＰＴＰによって誘発された運動機能低下症(hypokinesia)（自発運動の減少）及びドーパミン損失に対するモルヒナンの效果
ＭＰＴＰの繰り返し処理（２０ｍｇ／ｋｇ／日×７）は自発運動を顕著に減少させた（生理食塩水＋生理食塩水 ｖｓ．生理食塩水＋ＭＰＴＰ、Ｐ＜０．０１）。ＣＭ（生理食塩水＋ＭＰＴＰ ｖｓ．ＣＭ２４ｍｇ／ｋｇ＋ＭＰＴＰ、Ｐ＜０．０５）、ＤＭ（生理食塩水＋ＭＰＴＰ ｖｓ．ＤＭ１２又は２４ｍｇ＋ＭＰＴＰ、Ｐ＜０．０１）又はＨＭ（生理食塩水＋ＭＰＴＰ ｖｓ．ＨＭ１２又は２４ｍｇ／ｋｇ＋ＭＰＴＰ、Ｐ＜０．０１）の前処理はＭＰＴＰによって誘発された自発運動の減少を顕著に防止する（図５Ａ）。これらの行動的影響は運動パターンと一致した（図５Ｂ）。しかし、ＡＭやＤＭはＭＰＴＰによって誘発された自発運動低下症(locomotor hypoactivity)に著しい影響は与えられなかった。
【０１５７】
ＭＰＴＰで処理されたマウスの線条体におけるＤＡ、ＤＯＰＡＣ及びＨＶＡ濃度を表１に示す。ＭＰＴＰが投与されなかった動物では何ら有意差も見つけられなかった。ＭＰＴＰ処理はＤＡ（Ｐ＜０．０１）、ＤＯＰＡＣ（Ｐ＜０．０１）及びＨＶＡ（Ｐ＜０．０１）を顕著に減少させた。このような減少はＤＭ（２４ｍｇ／ｋｇ；ＤＡ；Ｐ＜０．０５、ＤＯＰＡＣ；Ｐ＜０．０５、ＨＶＡ；Ｐ＜０．０５）、ＨＭ（２４ｍｇ／ｋｇ）（ＤＡ；Ｐ＜０．０１、ＤＯＰＡＣ；Ｐ＜０．０１、ＨＶＡ；Ｐ＜０．０１）又はＣＭ（ＤＡ；Ｐ＜０．０５、ＤＯＰＡＣ；Ｐ＜０．０５、ＨＶＡ；Ｐ＜０．０５）の前処理によって顕著に保護された。しかし、ＡＭとＤＦはＭＰＴＰによって誘発されたＤＡ、ＤＯＰＡＣ及びＨＶＡにおける減少を変化させなかった。
【表１３】
2007537241.tif 000075
７日連続に毎日ＭＰＴＰ注射（２０ｍｇ／ｋｇ、皮下注射）を受けた雄性マウス。各々のモルヒナンは最後の３日間ＭＰＴＰの毎注射前３０分に投与された。動物は最後のＭＰＴＰ注射後２４時間内に犠牲にした。各々の値は８匹動物の平均±Ｓ．Ｅ．Ｍである。ａＰ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、ｂＰ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＰＴＰ、ｃＰ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＰＴＰ（ＤＭＲテストによる分散分析法）。
【０１５８】
モルヒナンと結合したＭＰＴＰ処理によるＴＨ−免疫反応（ＴＨ−ＩＲ）が図６に示される。生理食塩水を投与した各動物は良好なＴＨ−ＩＲを示した。ＭＰＴＰの処理は相当数のＴＨ−陽性細胞を減少させた。ＨＭ（２４ｍｇ／ｋｇ）（Ｐ＜０．０５），ＤＭ（２４ｍｇ／ｋｇ）（Ｐ＜０．０５）又はＣＭ（２４ｍｇ／ｋｇ）（Ｐ＜０．０５）の前処理はＭＰＴＰによって誘発されたＴＨ−陽性細胞の減少を低減させた。このような結果は線条体におけるＤＡ濃度とＭＰＴＰ処理によるＳＮ（黒質）におけるＴＨ−ＩＲとが一致することを示す。
【０１５９】
実験例１．１１
リポ多糖類（ＬＰＳ）によって誘発された運動機能低下症(hypokinesia)（自発運動の減少）及びドーパミン損失に対するモルヒナンの效果
ＬＰＳ（２０μｇ×２）の両側の線条体注射は自発運動を顕著に減少させた（生理食塩水＋生理食塩水 ｖｓ．生理食塩水＋ＬＰＳ、Ｐ＜０．０１）。ＣＭ（生理食塩水＋ＬＰＳ ｖｓ．ＣＭ１２又は２４ｍｇ／ｋｇ＋ＬＰＳ、Ｐ＜０．０５）、ＤＭ（生理食塩水＋ＬＰＳ ｖｓ．ＤＭ１２又は２４ｍｇ／ｋｇ＋ＬＰＳ、Ｐ＜０．０５）、ＨＭ（生理食塩水＋ＬＰＳ ｖｓ．ＨＭ１２又は２４ｍｇ／ｋｇ＋ＬＰＳ、Ｐ＜０．０５又はＰ＜０．０１）の前処理はＬＰＳによって誘発された自発運動減少を顕著に防止した（図７Ａ）。このような行動的影響はこれらの運動パターンと類似している。しかし、ＡＭやＤＭはＬＰＳによって誘発された自発運動減少症を低減させるのに效果的でなかった。
【０１６０】
ＬＰＳで処理されたマウスの線条体におけるＤＡ、ＤＯＰＡＣ及びＨＶＡ濃度を表２に示す。ＬＰＳのない動物では何ら有意差も見つけられなかった。ＬＰＳの線条体内注射はＤＡ（Ｐ＜０．０１）、ＤＯＰＡＣ（Ｐ＜０．０１）及びＨＶＡ（Ｐ＜０．０１）を顕著に減少させた。このような減少はＤＭ（２４ｍｇ／ｋｇ；ＤＡ；Ｐ＜０．０１、ＤＯＰＡＣ；Ｐ＜０．０２、ＨＶＡ；Ｐ＜０．０２）、ＨＭ（２４ｍｇ／ｋｇ）（ＤＡ；Ｐ＜０．０１、ＤＯＰＡＣ；Ｐ＜０．０１、ＨＶＡ；Ｐ＜０．０２）又はＣＭ（ＤＡ；Ｐ＜０．０５、ＤＯＰＡＣ；Ｐ＜０．０５、ＨＶＡ；Ｐ＜０．０５）の前処理によって顕著に保護された。しかし、ＡＭとＤＦはＬＰＳによって誘発されたＤＡ、ＤＯＰＡＣ及びＨＶＡにおける減少を変化させなかった。
【表１４】
2007537241.tif 000076
線条体領域へのＬＰＳ注射はブレグマ（ｂｒｅｇｍａ）から測定された定位座標を用いて行われた：＋０．７ｍｍ後部、±１．０側部、−３．４腹部。ＬＰＳ（ＰＢＳ ２μｌで２μｇ）が線条体(striatum)両側面に注射された。各々のモルヒナンはＬＰＳ線条体注射４時間４０分前と４０分前に投与された。マウスはＬＰＳ処理後３日目に犠牲になった。各々の値は８匹動物の平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ（標準平均誤差）である。ａＰ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、ｂＰ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＰＴＰ、ｃＰ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＰＴＰ（ＤＭＲテストによる分散分析法）。
【０１６１】
モルヒナンと一緒に又はモルヒナンなしにＭＰＴＰ処理によるＴＨ−免疫反応（ＴＨ−ＩＲ）が図８に示される。生理食塩水又はモルヒナンを単独投与した各動物は良好なＴＨ−ＩＲを示した。ＬＰＳの処理はＴＨ−陽性細胞を相当に減少させた（Ｐ＜０．０１）。ＨＭ（２４ｍｇ／ｋｇ）（Ｐ＜０．０５）、ＤＭ（２４ｍｇ／ｋｇ）（Ｐ＜０．０５）又はＣＭ（２４ｍｇ／ｋｇ）（Ｐ＜０．０５）の前処理はＬＰＳによって誘発されたＴＨ−陽性細胞の減少を低減させた。このような結果は線条体におけるＤＡ濃度とＬＰＳ処理による黒質の（ｎｉｇｒａｌ）ＴＨ−ＩＲとが一致することを示す。
【０１６２】
実験例１．１２
メタンフェタミン（ＭＡ）によって誘発された過温症(hyperthermia)、運動機能低下症(hypokinesia)及びドーパミン損失に対するモルヒナンの效果
ＭＡ処理後ドーパミン性毒性（dopaminergic toxicity）がＭＡによって誘発された過温症と関連があるということはよく認識されている。ＭＡによって誘発された過温症は本研究で用いられたモルヒナンによって低減される（直腸の温度によって測定、生理食塩水 ｖｓ．ＭＡ、Ｐ＜０．０１）。ＨＭはＭＡによって誘発された過温症の低減において５種類のモルヒナン（単独ＭＡ ｖｓ．ＤＭ、ＡＭ、ＣＭ、ＤＦ２４ｍｇ／ｋｇ＋ＭＡ、Ｐ＜０．０５）の間に最も有効である（単独ＭＡ ｖｓ．２４ｍｇ／ｋｇＨＭ＋ＭＡ、Ｐ＜０．０１）（図１０）。
【０１６３】
ＭＡの最終処理後３日目に（７．５ｍｇ／ｋｇ×４、２時間間隔）顕著に減少された自発運動が観察された（生理食塩水＋生理食塩水 ｖｓ．生理食塩水＋ＭＰＴＰ、Ｐ＜０．０１）。モルヒナンの前処理はＭＡによって誘発された自発運動の減少を顕著に防止した（図１１Ａ）。これらの行動的影響は運動パターンと一致した（図１１Ｂ）。ＨＭがＭＡ処理（単独ＭＡ ｖｓ．ＤＭ１２及び２４ｍｇ／ｋｇ（Ｐ＜０．０５及びＰ＜０．０１）、ＨＭ（Ｐ＜０．０５及びＰ＜０．０１）、ＡＭ（Ｐ＜０．０５）、ＣＭ（Ｐ＜０．０５）、及びＤＦ（Ｐ＜０．０５））後に自発運動の減少を防止するのに最も效果的であると表された。ＤＭの薬理学的效果はＨＭに匹敵する。
【０１６４】
ＭＡで処理されたマウスの線条体におけるＤＡ、ＤＯＰＡＣ及びＨＶＡ濃度を表３に示す。ＭＡ水準に投与されなかった動物では何ら有意差も見つけられなかった。ＭＡ処理はＤＡ（Ｐ＜０．０１）、ＤＯＰＡＣ（Ｐ＜０．０１）及びＨＶＡ（Ｐ＜０．０１）を顕著に減少させた。このような減少はＤＭ（２４ｍｇ／ｋｇ；ＤＡ；Ｐ＜０．０２、ＤＯＰＡＣ；Ｐ＜０．０５、ＨＶＡ；Ｐ＜０．０５）、ＨＭ（２４ｍｇ／ｋｇ）（ＤＡ；Ｐ＜０．０１、ＤＯＰＡＣ；Ｐ＜０．０１、ＨＶＡ；Ｐ＜０．０２）、ＡＭ（２４ｍｇ／ｋｇ；ＤＡ；Ｐ＜０．０５、ＤＯＰＡＣ；Ｐ＜０．０５、ＨＶＡ；Ｐ＜０．０５）、ＣＭ（ＤＡ；Ｐ＜０．０２、ＤＯＰＡＣ；Ｐ＜０．０５、ＨＶＡ；Ｐ＜０．０５）又はＤＦ（２４ｍｇ／ｋｇ；ＤＡ；Ｐ＜０．０５、ＤＯＰＡＣ；Ｐ＜０．０５、ＨＶＡ；Ｐ＜０．０５）の前処理によって顕著に保護された。
【表１５】
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雄性マウスは２時間間隔でＭＡ・ＨＣｌ（７．５ｍｇ／ｋｇ、遊離塩基で腹腔内注射）を４回投与された。各々のモルヒナンは最初ＭＡ注射４時間４０分前、４０分前に２回投与された。マウスはＭＡ処理後３日目に犠牲になった。各々の値は８匹の動物の平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ（標準平均誤差）である。ａＰ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、ｂＰ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＡ、ｃＰ＜０．０２ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＡ、ｄＰ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＡ（ＤＭＲテストによる分散分析法）。
【０１６５】
モルヒナンと一緒に又はモルヒナンなしにＭＰＴＰ処理による黒質の（ｎｉｇｒａｌ）ＴＨ−免疫反応（ＴＨ−ＩＲ）が図１２に示される。生理食塩水又は各々のモルヒナン単独を投与した各動物は良好なＴＨ−ＩＲを示した。ＭＡの処理はＴＨ−陽性細胞を相当に減少させた（Ｐ＜０．０１）。ＨＭ（２４ｍｇ／ｋｇ）（Ｐ＜０．０５）、ＤＭ（２４ｍｇ／ｋｇ）（Ｐ＜０．０５）、ＡＭ（２４ｍｇ／ｋｇ）（Ｐ＜０．０５）、ＣＭ（２４ｍｇ／ｋｇ）（Ｐ＜０．０５）、及びＤＦ（２４ｍｇ／ｋｇ）（Ｐ＜０．０５）の前処理はＭＡによって誘発されたＴＨ−陽性細胞の減少を低減させた。一貫して、このような結果は線条体におけるＤＡ濃度がモルヒナンの存在又は不在下でＭＡ処理による黒質の（ｎｉｇｒａｌ）ＴＨ−ＩＲと一致することを示す。
【０１６６】
実験例２
カンナビノイド(cannabinoid)ＣＢ１受容体におけるモルヒナンの效果
実験例２．１
ＨＭはカンナビノイドＣＢ１部位に対して高い親和度を有しており、ＣＢ１受容体拮抗作用を有している。
最近の研究はカンナビノイドＣＢ１受容体の遮断がパーキンソン病モデルに対して有益な效果を奏することと提案されたので、実験された右旋性モルヒナンの中でドーパミン性損傷に最も有効なモルヒナンである３−ヒドロキシモルヒナン（ＨＭ）がカンナビノイドＣＢ１部位に対して高い親和度を示すか否かについて実験された。ＨＭはカンナビノイドＣＢ１部位に高い親和度（Ｋｉ＝１１．５ｎＭ）を有しており（図１３）、ＣＢ１受容体拮抗作用を有している。選択的ＣＢ１拮抗剤であるＣＰ５５,９４０（１α，２β−（Ｒ）−５α］−（−）−５−（１，１−ジメチル）−２−［５−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシプロピル）−シクロヘキシル−フェノール］１００ｎＭは約１２０％までＧＴＰγＳ結合を刺激する反面、選択的ＣＢ１ ＡＭ２５１ １００ｎＭはほぼ２０％まで結合を抑制した。ＣＰ５５,９４０によって誘発されたＧＴＰγＳ結合における刺激はＡＭ２５１［Ｎ−（ピペリジン−１−イル）−５−（４−ヨードフェニル）−（２，４−ジクロロフェニル）−４−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド］の存在下で低減された。ＨＭ１００ｎＭは約６０％までこのような結合を抑制した。ＣＰ５５，９４０誘発で増加された結合はＨＭの処理によって減少された。従って、ＨＭはＣＢ１拮抗剤であるだけでなくＣＢ１受容体の部分アゴニストである（図１４）。  
【０１６７】
実験例２．２
ＨＭはマウスの黒質におけるＭＰＴＰ誘発で減少されたチロシンヒドロキシラーゼ免疫反応（ＴＨ−ＩＲ）を低減させる。
ＭＰＴＰ（２０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射／日×７）の最終処理後１日目にＴＨ−ＩＲの顕著な減少が発見された。かかるＴＨ−ＩＲの減少はＡＭ２５１の処理によって低減された。ＡＭ−２５１（０．３ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）とＨＭ（２０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）との結合処理がＭＰＴＰによって誘発されたＴＨ−ＩＲ損失に対するＡＭ−２５１単独処理よりも一層效果的であった。このような結合效果はＭＰＴＰに対するＨＭ単独效果と同様である。しかし、ＡＣＥＡ（アラキドン酸−２−クロロエチルアミド）（２ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）は少なくとも部分的にＣＢ１受容体拮抗剤の役割を果たすＨＭの神経保護的効果に反対に作用した（図１５）。従って、ＨＭの神経保護的効果はＣＢ１アゴニストであるＡＣＥＡに反対に作用する。
【０１６８】
実験例２．３
ＨＭはＬＰＳで誘発される致死的な效果を抑制し、マウスの黒質におけるＬＰＳによって誘発されるチロシンヒドロキシラーゼ免疫反応（ＴＨ−ＩＲ）を低減させる。
いずれの動物もＬＰＳ不在下では死ななかった。マウス１０匹のうち６匹が両側の線条体内へのＬＰＳ注射の２週経過後に、死亡した（一側；２μｇ×２）。ＡＭ−２５１もＡＣＥＡもＬＰＳによって誘発された致死性を顕著に変化させなかった。ＨＭが前処理されＬＰＳが処理されたマウスにおいていずれの動物も死ななかった。ＡＣＥＡはＨＭによって誘発された保護（非致死的な）效果に反対に作用した。ＡＭ−２５１はＬＰＳによって誘発された致死性を遮断するように見える（図１６）。
【０１６９】
ＡＣＥＡはＬＰＳによって誘発されたＴＨ−ＩＲにおける減少を変化させなかったが、ＡＭ−２５１はこのような減少を低減させた。ＨＭとＡＭ−２５１との混合処理はＬＰＳによって誘発されたニューロンの損失を防止するのにより有効であった。このような神経保護的効果はＬＰＳによる損傷に対するＨＭ単独效果に匹敵する。ＡＣＥＡはＬＰＳによって誘発されたＴＨ−ＩＲにおける損傷に対するＨＭの保護效果に反対に作用した（図１７）。
【０１７０】
実験例２．４
ＨＭはマウスの黒質におけるメタンフェタミン（ＭＡ）によって誘発されたチロシンヒドロキシラーゼ免疫反応性（ＴＨ−ＩＲ）における損傷を抑制する。
上述した二つの神経毒と同様に、ＭＡによって誘発されたドーパミン性損傷が注目された。ＡＣＥＡはＭＡによって誘発されたＴＨ−ＩＲにおける減少を変化させなかったが、ＡＭ−２５１はこのような減少を低減させた。ＨＭとＡＭ−２５１との混合処理はＭＡによって誘発されたニューロンの損失を防止するのにより有効であった。このような神経保護的効果はＭＡ毒性に対するＨＭ単独效果に匹敵する。ＡＣＥＡはＭＡによって誘発されたＴＨ−ＩＲにおける損傷に対するＨＭの保護效果に反対に作用した（図１８）。
【０１７１】
実験例２．５
ＨＭはＭＰＴＰによって誘発されたマウスの自発運動及び黒質の（ｎｉｇｒａｌ）ＴＨ−ＩＲにおける減少を抑制することに当たって、レボドーパ、カルビドパ又はカルビドパ＋レボドーパよりも一層效果的である。
パーキンソン病被検者治療用処方薬はレボドーパ又はレボドーパ＋カルビドパである。従って、ＨＭの神経保護的効果はレボドーパ、カルビドパ又はレボドーパ＋カルビドパにおいて比較された。図１９に示したように、マウスは連続７日間一日単回でＭＰＴＰ（２０ｍｇ／ｋｇ、被膜注射）が投与された。自発運動はＭＰＴＰの最終処理後６０分間行われた。マウスは最終ＭＰＴＰ投与２４時間後に犠牲になった。ＨＭ（２４ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）、レボドーパ又はカルビドパ（２０ｍｇ／ｋｇ、経口投与）＋レボドーパ（２００ｍｇ／ｋｇ、経口投与）は最初のＭＰＴＰ投与前に２週間投与された。
【０１７２】
ＭＰＴＰは自発運動で相当な減少（Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水処理）を誘発させた。しかし、活性はレボドーパ、カルビドパ又はレボドーパ＋カルビドパで増加することと表れた。ＨＭはＭＰＴＰによって誘発された運動機能低下症を相当に増加させた（Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＰＴＰ）。一貫して、ＭＰＴＰによって誘発されたＴＨ−ＩＲにおける黒質の損失(nigral loss)（Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水処理）はレボドーパ＋カルビドパ（Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＰＴＰ）又はＨＭ（Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＰＴＰ）の存在下で相当に低減された。このような結果はレボドーパ又はレボドーパ＋カルビドパよりもＨＭがさらに效果的であるということを示唆する（図２１）。
【０１７３】
実験例２．６
ＨＭはマウスにおいてＬＰＳによって誘発された致死的效果、自発運動及び黒質の(nigral)ＴＨ−ＩＲにおける減少、及び小グリア細胞(microglial cell)における増殖を抑制することに当たって、レボドーパ、カルビドパ又はカルビドパ＋レボドーパよりも一層效果的である。
ＨＭの神経保護的効果がＬＰＳによって誘発されたドーパミン性損傷に対してレボドーパ又はカルビドパ＋レボドーパにおいて比較された。実験スケジュールは図２２に示されている。ＬＰＳ（２μｇ×４／頭）の線条体内注射は高い致死率を発生させた。（ＬＰＳ投与後２週内に１２匹のうち１０匹が死亡した。）カルビドパ単独、レボドーパ単独、又はカルビドパ＋レボドーパの前処理がＬＰＳによって誘発された致死率を減少させることと見えたが、ＨＭの保護效果はカルビドパ単独、レボドーパ単独、又はカルビドパ＋レボドーパよりも最も顕著であった（生理食塩水＋ＬＰＳ ｖｓ．ＨＭ＋ＬＰＳ、Ｐ＜０．０１、Ｃｈｉ−ｓｑｕａｒｅ ｔｅｓｔ）（図２３）。
【０１７４】
自発運動はＬＰＳ処理してから３週後６０分間実験された。ＬＰＳによって誘発された自発運動における有意的な減少（Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水処理）はレボドーパ（Ｐ＜０．０５）、カルビドパ＋レボドーパ（Ｐ＜０．０５）又はＨＭ（Ｐ＜０．０１）によって低減された（図２４、図２５）。
【０１７５】
黒質におけるＴＨ−ＩＲはＬＰＳの不在下で全く変わらなかった。ＬＰＳによって誘発されたＴＨ−ＩＲにおける損失はカルビドパ（Ｐ＜０．０５）、レボドーパ（Ｐ＜０．０５）、カルビドパ＋レボドーパ（Ｐ＜０．０５）、及びＨＭ（Ｐ＜０．０１）の処理によって有意的に低減された。ＨＭはＬＰＳによって誘発されたＴＨ−ＩＲにおける減少を低減させるのに最も效果的である（図２６、図２７）。
【０１７６】
Ｆ／８０様免疫反応度で標識された非常に少ない小グリア細胞の誘導がＬＰＳの不在下で観察された。しかし、生理食塩水で処理されたグループと比べてＬＰＳによって誘発された小グリア細胞増殖が有意的に増加した（Ｐ＜０．０１）。このようなＦ４／８０様免疫反応度はカルビドパ（Ｐ＜０．０５）、レボドーパ（Ｐ＜０．０５）、カルビドパ＋レボドーパ（Ｐ＜０．０５）、及びＨＭ（Ｐ＜０．０１）の処理によって有意的に低減された。ＨＭがＬＰＳによって誘発されるＦ４／８０様免疫反応度における増加を低減させるのに最も效果的である（図２８、図２９）。
【０１７７】
実験例２．７
ＨＭはマウスにおけるメタンフェタミン（ＭＡ）によって誘発される過温症、自発運動の減少、黒質のＴＨ−ＩＲを抑制するのにレボドーパ、カルビドパ又はカルビドパ＋レボドーパよりも一層效果的である。
化合物と共に又は化合物なしのＭＡの実験例は図３０に示す。ＭＡの処理（７．５ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射×２時間間隔で４回）は過温症（Ｐ＜０．０１）を発生させた。レボドーパ、カルビドパ又はカルビドパ＋レボドーパの前処理はＭＡによって誘発される過温症を有意的に低減させた（Ｐ＜０．０１）（図３１）。
【０１７８】
ＭＡ注射後３日目に自発運動における有意的な減少はカルビドパ、レボドーパ、カルビドパ＋レボドーパ又はＨＭの処理によって顕著に増加された。ＨＭの效果はレボドーパ又はカルビドパ＋レボドーパよりも一層效果的である（図３２）。
【０１７９】
ＭＡによって誘発されたＴＨ−ＩＲにおける黒質消失が有意的に観察された（生理食塩水で処理されたグループ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＡ、Ｐ＜０．０１）。このような減少はカルビドパ＋レボドーパの処理によって有意的に低減されたが、ＨＭの效果はカルビドパ＋レボドーパよりさらに顕著であった（図３３）。
【０１８０】
実験例３：
薬物依存症におけるモルヒナンの效果
薬物依存症における右旋性モルヒナンの有益な效果が決定された。また、コカイン又はメタンフェタミン（ＭＡ）によって誘発される行動的副作用に対するモルヒナンの效果が実験された。右旋性モルヒナン、特にデキストロメトルファン（ＤＭ）、３−メトキシモルヒナン（ＭＭ）、３−ヒドロキシモルヒナン（ＨＭ）、３−アリルオキシ−１７−メトキシモルヒナン（ＡＭ）、３−シクロプロピル−１７−メトキシモルヒナン（ＣＭ）及びジメモルファン（ＤＦ）の自発運動、条件付け場所嗜好性（ＣＰＰ）又はフォス関連抗原−免疫反応度（ＦＲＡ−ＩＲ）における変化に対する效果がコカイン又はＭＡの長期投与後に実験された。長期間のコカイン服用（５又は２０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射／日×７）は自発運動を顕著に増加させた。ＤＭ（１５又は３０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）との混合処理は高用量のコカイン（２０ｍｇ／ｋｇ）によって誘発された過自発運動(hyperlocomotor activity)を低減させた。しかし、ＤＭ（３０ｍｇ／ｋｇ）は低用量のコカイン（５ｍｇ／ｋｇ）によって誘発された自発運動を有意的に増加させた。同様に、ＭＭ（１５又は３０ｍｇ／ｋｇ）は高用量のコカイン変化によって誘発された自発運動を低減させたが、ＭＭはこのようなモルヒナンが用量反応曲線を左側に移動させることを示唆するとともに、低用量（５ｍｇ／ｋｇ）のコカインによって誘発された自発運動を変化させなかった。これに対し、他のモルヒナン（ＨＭ、ＡＭ、ＣＭ及びＤＦ）はたとえ高用量のコカインによって誘発された自発運動に対する反応は一定でないが、低用量のコカインによって誘発された自発運動は一貫して低減された。前記４種のモルヒナンは一貫して用量反応曲線を右側に移動させた。これらの行動的影響プロフィールは線条体のＦＲＡ−ＩＲの場合と一致する。モルヒナン（特に、ＨＭ）はカンナビノイドＣＢ１部位に対して比較的に高い親和度を有し、最近の研究はＣＢ１受容体遮断が薬物依存症の抑制に対する新しい接近を提供すると提案しているため、条件付け場所嗜好性（ＣＰＰ）及び行動感作を測定することによって、ＣＢ１受容体がコカインによって誘発された心理的な依存に対応したＨＭの薬理作用とどのような相関関係があるかについて実験された。コカインによって誘発されたＣＰＰが有意的に観察された。ＣＢ１受容体アゴニストであるＡＣＥＡ（２ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）はＣＰＰを発生させた。しかし、ＨＭ（２０ｍｇ／ｋｇ）又はＣＢ１受容体拮抗剤であるＡＭ２５１（０．３ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）はいずれもＣＰＰを見せなかった。ＡＣＥＡはコカインによって誘発されたＣＰＰを変化させなかったが、ＡＭ２５１又はＨＭはコカインによって誘発されたＣＰＰを低減させた。コカイン（１０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）の単回投与の一ヶ月前にコカイン（１０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射／日×７）で前処理されたマウスは、一回量のコカイン（１０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）を投与されたマウスに比べて自発運動が有意的に増加された。これはコカインで誘発される行動感作がこのような実験例で明確に誘導されることを示唆する。ＨＭはコカイン敏感性を有意的に低減させたが、ＡＣＥＡもＡＭ２５１もコカイン敏感性を有意的に変化させなかった。
【０１８１】
長期間のＭＡ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射／日×７）服用は自発運動を増加させた。ＤＭ（２０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）との混合服用はＭＡによって誘発された自発運動を変化させなかった。しかし、ＤＦ（２０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）、ＡＭ（２０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）又はＣＭ（２０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）はＭＡによって誘発された自発運動を有意的に低減させた（Ｐ＜０．０５）。このような行動的影響はマウスにおける線条体のＦＲＡ−ＩＲプロフィールと同一線上にある。ＭＡ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射×１）の単回投与前の７日間、ＭＡ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射／日×７）前処理は自発運動で有意的な増加を発生させた。これはＭＡによって行動感作が誘発されることを示す。
【０１８２】
たとえ、ＤＭはＭＡ敏感性に影響を与えなかったが、各々のモルヒナン（ＤＦ、ＡＭ、ＣＭ又はＨＭ）２０ｍｇ／ｋｇはＭＡ敏感性を有意的に低減させた（Ｐ＜０．０５）。ＡＣＥＡ（２ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）もＡＭ２５１（０．３ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）もＭＡ敏感性に影響を与えなかった。しかし、ＡＣＥＡはＭＡ敏感性に対するＨＭの薬理作用を有意的に低減させた反面、ＡＭ２５１はＨＭの效果に有意的な影響は与えなかった。
【０１８３】
ＭＡによって誘発されるＣＰＰが注目された。ＡＣＥＡ単独はその自体のＣＰＰを発生させた。（Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水で処理されたグループ）。これに対し、ＡＣＥＡはＭＡによって生成されたＣＰＰに影響を与えなかった。しかし、ＡＭ２５１又はＨＭはＭＡによって生成されたＣＰＰを有意的に抑制した。ＡＣＥＡはＭＡによって生成されたＣＰＰに対応したＨＭの薬理作用を逆転したが、ＡＭ２５１はＨＭの效果に有意的な影響を与えなかった。
【０１８４】
一緒に与えられたモルヒナン類似体、特にＤＦ、ＡＭ、ＣＭ及びＨＭはコカイン又はＭＡに対応する抗−向精神薬潜在力を有する。特に、ＨＭが調節された薬理作用は少なくとも部分的にＣＢ１受容体の遮断を介して行われる。
【０１８５】
実験例３．１
動物及び処理
すべての動物は実験室動物の人道的な保護のためＮＩＨ指針に従って扱われた。約２５ｇ重量のＣ５７ＢＬ／６雄性マウス（バイオジェノミックス社製、チャールズリバーテクノロジー、韓国京畿道加平郡）は１２：１２時間、明暗サイクルで保持され、飼料及び水を自由に摂取するようにした。実験実施前に動物を前記条件下で２週間適応させた。すべてのげっ歯類は実験前に薬物や脳卒中の経験がなかった。コカイン（ＮＩＤＡ／ＮＩＨ、ロックビル(Rockville)、ＭＤ）又はメタンフェタミン（ＭＡ；ＮＩＤＡ／ＮＩＨ、ロックビル、ＭＤ）は滅菌された生理食塩水で溶解された。
【０１８６】
実施例３．２
条件付け場所嗜好性（精神的依存症）
対照マウスを白色又は黒色区画(white or black compartment)に入れる前に生理食塩水を腹腔内注射した。マウスを白色区画に入れる前にマウスに生理食塩水に溶解されたコカイン又はＭＡを直ちに投与した。コカイン単独、ＭＡ単独又は前述したモルヒナン（ＤＭ、ＨＭ、ＡＭ、ＣＭ又はＤＦ）との結合の效果を試すため、それぞれモルヒナンをコカイン又は生理食塩水注入２時間前に投与した。
【０１８７】
１日目に、マウスを５分間テスト装置に予め露出させた。マウスが二つの区画を自由に移動するようにギロチンドア(guillotine door)を上げた。
【０１８８】
２日目に、各々のマウスがそれぞれ区画で過ごした時間を１５分間記録した。３、５、７、９、１１及び１３日目に、マウスが好まない白色区画に２０分間閉じ込める前に各々にコカインを注射した。４、６、８、１０及び１２日目にマウスが好む黒色区画に２０分間閉じ込める前に生理食塩水を注射した。１４日目にギロチンドアが上げられた。マウスは初期にトンネルに置かれ、二つの区画でマウスが過ごした時間を１５分間記録した。テスト及びテスト前の段階における白色区画で過ごした時間の差を数値で計算した。
【０１８９】
実施例３．３
自発運動
自動化されたビデオトラッキングシステム(Noldus information Technology社製、 Wagenin、 オランダ）を用いて自発運動を測定した。８個のテストボックス（４０×４０×３０ｃｍ高さ）がＩＢＭコンピュータによって同時に作動された。動物が実験開始前５分間適応させた各々のテストボックスで運動する間、個体別に研究した。各セッションに対する出力物はテストボックスの移動パターンを示した。水平自発運動における動物のｃｍ単位移動距離が分析された（１３，２５，２７）。データは９００時間〜１７００時間で収集及び分析された。
【０１９０】
実施例３．４
フォス関連抗体免疫反（ＦＲＡ−ＩＲ）
線条体内のＦＲＡ−ＩＲはコカイン／ＭＡ最終注入後１８時間で最大濃度に誘導された。従って、コカイン／ＭＡ最終注入後１８時間で脳を摘出して兔疫細胞化学的分析に用いた。線条体を含む冠状断面(coronal section)はＦＲＡ免疫細胞化学用として処理された。１次抗体と一晩中培養する前に、冠状断面を１５分間０．２％トリトンＸ−１００で、それから４％ヤギ正常血清(goat serum)で２０分間洗浄した。２４時間の１次抗血清(antiserum)と培養した後、冠状断面は１時間２次ビオチン化抗血清（１：８００希釈）で培養された。冠状断面は各々の培養段階の間にＰＢＳ（ｐＨ７．４）でいつも３回洗浄された。色原体として３，３’−ジアミノベンジジンテトラ塩酸塩を有するアビジン−ビオチン複合法(avidin-biotin complex method)（ABCキット、Vector Laboratories、Inc.)は免疫反応細胞を視覚化することに用いられた。ＦＲＡ抗体は最適希釈１：２，０００で用いられた。線条体でＦＲＡ−ＩＲはポラロイドデジタル顕微鏡カメラを装着したイメージ分析システム（オプチマスバージョン６．２）を用いて計算された。
【０１９１】
実施例３．５
統計学的分析
有意性は対データを通じたstudentのｔ−テスト(Student’s t-test)と繰り返し測定による分散分析検証法により分析された。０．０５以下の有意水準を比較対象として判定した。
【０１９２】
実施例３．６
マウスにおけるコカインによって誘発された過渡運動(hyperlocomotion)に対するモルヒナン（ＤＭ，ＭＭ，ＡＭ，ＣＭ，ＨＭ，なおＤＦ）の效果
生理食塩水単独は自発運動を有意的に変化させなかった。コカイン（５又は１０ｍｇ／ｋｇ）は経時によって自発運動を増加させた。自発運動の増加はコカイン最初投与よりは７番目投与で一層顕著であった。たとえ、ＤＭ又はＭＭ（１５又は３０ｍｇ／ｋｇ）（コカインの３０分前）を用いた処理が高用量のコカインによって誘発された活動亢進を低減させたが（ＤＭ又はＭＭの用量＋コカイン２０ｍｇ／ｋｇ ｖｓ．コカイン２０ｍｇ／ｋｇ、Ｐ＜０．０５）、ＤＭ３０ｍｇ／ｋｇは低用量のコカイン（５ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）によって誘発された自発運動を増加させた。同様に、ＭＭ用量は低用量のコカインによって誘発された自発運動に影響を与えなかった。これに対し、他のモルヒナンは一貫して低用量のコカインによって誘発された自発運動を低減させるのに效果的である。つまり、それらは用量反応曲線を右側に移動させるが、これはそれらが抗−精神異常作用を有することを示唆する（図３４、図３５）。
【０１９３】
実施例３．７
マウスの線条体におけるコカインによって誘発されたＦＲＡ−ＩＲに対するモルヒナン（ＤＭ、ＭＭ、ＡＭ、ＣＭ、ＨＭ及びＤＦ）の效果
向精神薬によって誘発されたニューロン適応／刺激で重要な転写因子の一つであるＦＲＡはコカイン不在下では殆ど発現されなかった。コカイン（５ｍｇ／ｋｇ）の長期服用は線条体でＦＲＡ−ＩＲを顕著に誘発させた。ＤＭもＭＭもコカインによって調節されたＦＲＡ−ＩＲの誘発に影響を与えなかった。これに対し、コカインによって誘発されたＦＲＡ−ＩＲはＤＦ、ＡＭ、ＣＭ又はＨＭの処理によって明白に低減された（図３６）。
【０１９４】
実施例３．８
コカインによって誘発されたＣＣＰに対応してＨＭが調節された薬理作用に対するカンナビノイドＣＢ１受容体アゴニスト（ＡＣＥＡ）又はＣＢ１受容体拮抗剤（ＡＭ２５１）の效果
生理食塩水処理、ＡＭ２５１（０．３ｍｇ／ｋｇ）処理、ＨＭ（２０ｍｇ／ｋｇ）処理された動物はいずれもＣＰＰ反応を示さなかった。これに対し、ＡＣＥＡ（２ｍｇ／ｋｇ）処理された動物はＣＰＰ效果を示した（Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水で処理された動物）。コカイン（１０ｍｇ／ｋｇ）は有意的なＣＰＰ效果を誘発させた（Ｐ＜０．０１）。ＡＣＥＡはコカインによるＣＰＰ效果を変化させなかった。しかし、ＡＭ２５１又はＨＭはコカインによって発生されたＣＰＰを有意的に減少させた（Ｐ＜０．０５）。ＡＭ２５１はコカインによって誘発されたＣＰＰに対応するＨＭの效果に影響を与えなかった。これに対し、ＡＣＥＡはコカインによって誘発されたＣＰＰに反対に作用するように見える（図３７）。
【０１９５】
実施例３．９
コカインによって誘発された行動感作に対応してＨＭが調節された薬理作用に対するカンナビノイドＣＢ１受容体アゴニスト（ＡＣＥＡ）又はＣＢ１受容体拮抗剤（ＡＭ２５１）の效果
生理食塩水処理、ＡＭ２５１（０．３ｍｇ／ｋｇ）処理、ＡＣＥＡ（２ｍｇ／ｋｇ）処理、ＨＭ（２０ｍｇ／ｋｇ）処理された動物はいずれも特異的行動的影響を見せなかった。コカインは有意的な行動感作を誘発させた［コカインが単回投与された動物の自発運動 ｖｓ．コカインの単回投与の一ヶ月前にコカイン（１０ｍｇ／ｋｇ／日、腹腔内注射×７）処理された動物の自発運動（Ｐ＜０．０１）］。ＡＭ２５１もＨＭもコカインによる行動感作を変化させなかった。しかし、ＨＭはコカインによる行動感作を有意的に減少させた（Ｐ＜０．０５）。ＡＣＥＡもＡＭ２５１もコカインによって誘発された敏感性に対応したＨＭの效果を有意的に変化させなかった（図３８）。
【０１９６】
実施例３．１０
メタンフェタミン（ＭＡ）によって誘発されたマウスの過度運動に対するモルヒナン（ＤＭ、ＤＦ、ＡＭ、又はＣＭ）の效果
生理食塩水単独は自発運動を有意的に変化させなかった。ＭＡ（１ｍｇ／ｋｇ）は経時によって自発運動を増加させた。ＤＭ（２０ｍｇ／ｋｇ）（毎ＭＡの３０分前）処理はＭＡ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射／日×７）によって誘発された活動亢進に影響を与えなかった。これに対し、ＤＦ、ＡＭ又はＣＭは一貫してＭＡによって誘発された過渡運動を低減させるのに效果的である。（図３９）
【０１９７】
実施例３．１１
マウスの線条体におけるメタンフェタミン（ＭＡ）によって誘発されたＦＲＡ−ＩＲに対するモルヒナン（ＤＭ、ＤＦ、ＡＭ及びＣＭ）の效果
ＭＡの不在下でＦＲＡ−ＩＲの誘発は殆ど観察されなかった。長期間のＭＡ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射／日×７）服用は線条体でＦＲＡ−ＩＲを顕著に誘発させた。ＤＭはＭＡによって介在されたＦＲＡ−ＩＲの誘発に影響を与えなかった。これに対し、ＭＡによって誘発されたＦＲＡ−ＩＲはＤＦ、ＡＭ、又はＣＭ処理によって明確に低減された（図４０）。
【０１９８】
実施例３．１２
メタンフェタミン（ＭＡ）によって誘発された行動感作に対応したＤＭ、ＤＦ、ＡＭ又はＣＭの效果
生理食塩水で処理された動物はビデオトラッキングシステム上で何ら特異的行動的影響も示さなかった。ＭＡは有意的な行動感作を誘発させた［ＭＡが単回投与された動物の自発運動 ｖｓ．ＭＡの単回投与の一週間前にＭＡ（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射／日×７）前処理された動物の自発運動（Ｐ＜０．０５）］。ＤＭ（２０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）はＭＡによる行動感作を変化させなかった。しかし、２０ｍｇ／ｋｇのＤＦ、ＡＭ又はＣＭの投薬量において、ＭＡによって生じた行動感作は相当に減少した（Ｐ＜０．０５）（図４１）。
【０１９９】
実施例３．１３
ＭＡによって誘発されたＣＰＰに対応してＨＭが調節された薬理作用に対するカンナビノイドＣＢ１受容体アゴニスト（ＡＣＥＡ）又はＣＢ１受容体拮抗剤（ＡＭ２５１）の效果
生理食塩水処理、ＡＭ２５１（０．３ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）処理、ＨＭ（２０ｍｇ／ｋｇ）処理された動物はいずれもＣＰＰ反応を示さなかった。これに対し、ＡＣＥＡ（２ｍｇ／ｋｇ、腹腔内注射）処理された動物はＣＰＰ效果を示した（Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水で処理された動物）。ＭＡは有意的なＣＰＰ效果を誘発させた（Ｐ＜０．０１）。ＡＣＥＡはＭＡによるＣＰＰ效果を変化させなかった。しかし、ＡＭ２５１（Ｐ＜０．０５）又はＨＭ（Ｐ＜０．０１）はＭＡによって発生されたＣＰＰを有意的に減少させた。ＡＭ２５１はＭＡによって誘発されたＣＰＰに対応するＨＭの效果に影響を与えなかった。これに対し、ＡＣＥＡはＭＡによって誘発されたＣＰＰに対するＨＭの效果に反対と作用するように見える（図４２）。
【０２００】
実施例３．１４
ＭＡによって誘発された行動感作に対応してＨＭが調節された薬理作用に対するカンナビノイドＣＢ１受容体アゴニスト（ＡＣＥＡ）又はＣＢ１受容体拮抗剤（ＡＭ２５１）の效果
生理食塩水処理、ＡＭ２５１（０．３ｍｇ／ｋｇ）処理、ＡＣＥＡ（２ｍｇ／ｋｇ）処理、ＨＭ（２０ｍｇ／ｋｇ）処理された動物はいずれも行動的影響を見せなかった。ＭＡは有意的な行動感作を誘発させた［ＭＡが単回投与された動物の自発運動 ｖｓ．ＭＡの単回投与の一ヶ月前にＭＡ（１ｍｇ／ｋｇ／日、腹腔内注射×７）処理された動物の自発運動（Ｐ＜０．０１）］。ＡＭ２５１もＨＭもコカインによる行動感作を変化させなかった。しかし、ＨＭはコカインによる行動感作を有意的に減少させた（Ｐ＜０．０５）。たとえ、ＡＣＥＡはＭＡによって誘発された行動感作に対するＨＭの效果に有意的に反転したが、ＡＭ２５１はＭＡ行動感作に影響を与えなかった（図４３）。
【０２０１】
ここに引用されたすべての資料は参照資料として開示されたものである。
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【図面の簡単な説明】
【０２０２】
【図１】例示的なＤ型モルヒナン類似体の化学構造式を例示する図である。
【図２】モルヒナン又はフェンシクリジン（ＰＣＰ）の反復投与による自発運動(locomotor activity)の変化を示す図である。ＤＭ＝デキストロメトルファン、ＤＸ＝デキストロルファン、ＨＭ＝３−ヒドロキシモルヒナン、ＡＭ＝３−アリルオキシ−１７−メチルモルヒナン、ＣＭ＝３−シクロプロピルメトキシ−１７−メチルモルヒナン、ＤＦ＝ジメモルファン。図２Ａにおける、水平自発運動における動物の「ｃｍ単位の総移動距離(total distance moved in cm)」は最終投与後３０分間測定された。図２Ｂにおいて、自発運動測定後、「絶対回転角(absolute turn angular)」パラメーターは限界活動（旋回行動）(marginal activity(circling behavior))を試すための自動化ビデオトラッキングシステム(automated video tracking system)を用いて３分間のモニタリング期間中に分析された。各々の値は動物１０匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。ａＰ＜０．０５、ｂＰ＜０．０１、ｃＰ＜０．００１ ｖｓ．生理食塩水（ｓａｌｉｎｅ）、ｄＰ＜０．０５ ｖｓ．ＰＣＰ２．５ｍｇ／ｋｇ（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。
【図３】代表的な運動パターン(locomotor pattern)を示す透写図である。Ａ．生理食塩水腹腔内（ｉ．ｐ）注射、Ｂ．フェンシクリジン（ＰＣＰ）５ｍｇ／ｋｇ、腹腔内（ｉ．ｐ）注射、Ｃ．デキストロメトルファン（ＤＭ）４０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内（ｉ．ｐ）注射、Ｄ．デキストロルファン（ＤＸ）４０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内（ｉ．ｐ）注射、Ｅ．３−ヒドロキシ−モルヒナン（ＨＭ）４０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内（ｉ．ｐ）注射、Ｆ．３−アリルオキシ−１７−メチルモルヒナン（ＡＭ）４０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内（ｉ．ｐ）注射、Ｇ．３−シクロプロピルメトキシ−１７−メチルモルヒナン（ＣＭ）４０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内（ｉ．ｐ）注射、Ｈ．ジメモルファン（ＤＦ）４０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内（ｉ．ｐ）注射。ＰＣＰ、ＤＸ又はＤＭを処理した後に限界活動（旋回行動）で有意的な増加があった。
【図４】モルヒナン又はフェンシクリジン（ＰＣＰ）の反復投与による条件付け場所嗜好性(conditioned place preference, CPP)プロフィール変化を示す図である。ＤＭ＝デキストロメトルファン、ＤＸ＝デキストロルファン、ＨＭ＝３−ヒドロキシモルヒナン、ＡＭ＝３−アリルオキシ−１７−メチルモルヒナン、ＣＭ＝３−シクロプロピルメトキシ−１７−メチルモルヒナン、ＤＦ＝ジメモルファン。各々の値は動物１０匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。ａＰ＜０．０５、ｂＰ＜０．０１、ｃＰ＜０．００１ ｖｓ．生理食塩水、ｄＰ＜０．０５ ｖｓ．ＤＭの対応量、ｅＰ＜０．０５、ｆＰ＜０．０１ ｖｓ．ＤＸの対応量、ｇＰ＜０．０５ ｖｓ．ＰＣＰ２．５ｍｇ／ｋｇ、ｈＰ＜０．０５ ｖｓ．ＤＸ２０ｍｇ／ｋｇ。（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。
【図５】マウスでＭＰＴＰによって誘発された自発運動(locomotor activity)（Ａ）と運動パターン(locomotor pattern)（Ｂ）上でモルヒナン類似体の效果を示す図である。各々の値は動物１０匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である（Ａ）。＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＰＴＰ。ＭＰＴＰで処理された動物において自発運動／運動パターンの有意な減少はＨＭ又はＤＭの存在下で有意な増加を示している。このような低減(attenuation)はＨＭで処理した動物でより目立つ。
【図６】図６ＡはＭＰＴＰで処理されたマウスから黒質（ＳＮ）ドーパミン作動性ニューロン内にチロシン−ヒドロキシラーゼ免疫反応（ＴＨ−ＩＲ）におけるモルヒナン類似体（２４ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）の效果を示す図である。倍率＝４０ｘ。図６Ｂで、各々の値は動物５匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。黒質緻密部(SN pars compacta)を通じたＴＨ−陽性ニューロンの総数が計数された。明確に染色された体細胞(soma)を有したＴＨ−陽性ニューロンが同定され(identified)、傾斜型接眼レンズ(graded eyepiece)が装着された顕微鏡を用いて計数された。全ての神経集団はイメージ分析システム（オプチマスバージョン６．２）下でアバークロンビー (Abercrombie)法（１）によってセクション厚さに応じて修正された。＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、＊Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＰＴＰ(Fischer LSD test)。
【図７】マウスにおけるＬＰＳによって誘発された自発運動(locomotor activity)（Ａ）と運動パターン(locomotor pattern)（Ｂ）上でモルヒナン類似体の效果を示す図である。各々の値は動物１０匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である（Ａ）。＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、＊Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＬＰＳ、＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋ＬＰＳ。ＬＰＳで処理された動物において自発運動／パターンの有意な減少はＨＭ又はＤＭの存在下で有意な増加を示している。このような低減(attenuation)はＨＭで処理した動物でより目立つ。
【図８】８ＡはＬＰＳで処理されたマウスから黒質（ＳＮ）ドーパミン作動性ニューロン内にチロシン−ヒドロキシラーゼのような免疫反応（ＴＨ−ＩＲ）におけるモルヒナン類似体（２４ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）の效果を示す図である。倍率＝４０ｘ。図８Ｂで、各々の値は動物５匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。黒質緻密部(SN pars compacta)を通じたＴＨ−陽性ニューロンの総数が計数された。明確に染色された体細胞(somata)を有したＴＨ−陽性ニューロンが同定され(identified)、傾斜型接眼レンズ(graded eyepiece)が装着された顕微鏡を用いて計数された。全ての神経集団はイメージ分析システム（オプチマスバージョン６．２）下でアバークロンビー (Abercrombie)法（１）によってセクション厚さ別に修正された。＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、＊Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＰＴＰ(Fischer LSD test)。
【図９】メタンフェタミン（ＭＡ）研究のための実験スケジュールを示す図である。２時間間隔で４回ＭＡ・ＨＣｌ（７．５ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．遊離塩基状態）がマウスに注射された。直腸温度(Rectal temperature)は各ＭＡ処理後４０分に記録された。各々のモルヒナンは最初にＭＡ注射する前に４時間４０分と４０分に２回投与された。マウスは最終ＭＡ注射後３日目に犠牲になった。
【図１０】メタンフェタミン（ＭＡ）によって誘発された過温症におけるモルヒナンの效果を示す図である。周囲温度２２．０±０．５℃で２時間間隔でＭＡ（それぞれ７．５ｍｇ／ｋｇずつ４回注射）をマウスの腹腔内に注射した。ＭＡ処理（矢印＝ＭＡ注射）後４０分で温度を記録した。ＨＭがＭＡによって誘発された過温症を減少させるのに最も效果的であった。各々の値は動物１２匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水、＊Ｐ＜０．０５ ｖｓ．ＭＡ単独、＊＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．ＭＡ単独（繰り返し測定による分散分析検証法）。
【図１１】マウスでメタンフェタミン（ＭＡ）によって誘発された自発運動(locomotor activity)（Ａ）と運動パターン(locomotor pattern)（Ｂ）上におけるモルヒナン類似体の效果を示す図である。各々の値は動物１０匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である（Ａ）。＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋ＬＰＳ。ＭＡで処理された動物において自発運動／パターンの有意な減少はＨＭ又はＤＭの存在下で有意な増加を示している。このような低減(attenuation)はＨＭで処理した動物においてより目立つ。
【図１２】１２ＡはＬＰＳで処理されたマウスから黒質（ＳＮ）ドーパミン作動性ニューロン内にチロシン−ヒドロキシラーゼのような免疫反応（ＴＨ−ＩＲ）におけるモルヒナン類似体（２４ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）の效果を示す図である。倍率＝４０ｘ。図１２Ｂで、各々の値は動物５匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。黒質緻密部(SN pars compacta)を通じたＴＨ−陽性ニューロンの総数が計数された。明確に染色された体細胞(somata)を有したＴＨ−陽性ニューロンが同定され(identified)、傾斜型接眼レンズ(graded eyepiece)が装着された顕微鏡を用いて計数された。全ての神経集団はイメージ分析システム（optimas version６．２）下でアバークロンビー (Abercrombie)法（１）によってセクション厚さに応じて修正された。＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、＊Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＰＴＰ(Fischer LSD test)。
【図１３】マウスの大脳皮質膜におけるＣＢ１受容体アゴニスト(receptor agonist)である［３Ｈ］ＣＰ５５，９４０の特異的結合の置換（displacement）を示す図である。各々の値は３回の独立実験の平均を示す。
【図１４】ＨＭ（３−ヒドロキシモルヒナン）のＣＢ１拮抗的特性を示す図である。ＣＰ＝ＣＰ５５，９４０、選択的ＣＢ１アゴニスト、ＡＭ−２５１＝選択的ＣＢ１アゴニスト。
【図１５】黒質にＭＰＴＰ最終投与後１週間チロシンヒドロキシラーゼで免疫染色(immunostain)された黒質の代表写真を示す図である。ＨＭの神経保護的効果はＣＢ１アゴニストであるＡＣＥＡと反対に作用した。ＣＢ１アゴニスト又は拮抗剤はすべてのＭＰＴＰの投与４５分前に投与された。反面、ＨＭはすべてのＭＰＴＰ（２０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．／日×７）投与３０分前に投与された。化合物は７日間最終ＭＰＴＰ処理後に投与された。倍率＝４０ｘ。
【図１６】リポ多糖類（ＬＰＳ）によって誘発された致死性に対応したＨＭの作用に対するＣＢ１受容体アゴニストであるＡＣＥＡ又はＣＢ１受容体拮抗剤であるＡＭ−２５１の效果を示す図である。致死性は両側部の線条体内への注射後に２週後に観察された（一側：２μｇ×２）。ＨＭ（２０ｍｇ／ｋｇ）結合処理はＬＰＳによって誘発された致死性を発生させなかったことが注目すべきである。ＡＣＥＡ（２ｍｇ／ｋｇ）／ＡＭ−２５１（０．３ｍｇ／ｋｇ）と共に又はなしにＨＭ（２０ｍｇ／ｋｇ）はＬＰＳ後２週間一日単回注射された。ＡＣＥＡ又はＡＭ−２５１の最初処理はＬＰＳ処理後４５分に行われ、ＨＭはＬＰＳ処理後３０分に行われた。
【図１７】黒質で最終ＬＰＳ投与後２週にチロキシンヒドロキシラーゼに免疫染色された黒質の代表写真を示す図である。ＨＭの神経保護的効果はＣＢ１アゴニストであるＡＣＥＡと反対に作用した。倍率＝４０ｘ。
【図１８】黒質で最終メタンフェタミン（ＭＡ）投与後３日にチロキシンヒドロキシラーゼに免疫染色された黒質の代表写真を示す図である。ＨＭの神経保護的効果はＣＢ１アゴニストであるＡＣＥＡと反対に作用した。化合物はＭＡ注射前後３日間投与された。すべてのＡＣＥＡ（２ｍｇ／ｋｇ）又はＡＭ−２５１（０．３ｍｇ／ｋｇ）処理はＨＭ（２０ｍｇ／ｋｇ）処理１５分前に行われた。薬物の最初前処理方法は次の通りである。；ＡＣＥＡ又はＡＭ−２５１はＭＡ前４５分で処理された反面、ＨＭはＭＡ前３０分で処理された。動物は最終ＭＡ処理後７２時間内に犠牲にした。倍率＝４０ｘ。
【図１９】ＭＰＴＰモデルにおけるカルビドパがあるかないレボドーパに対するＨＭ效果評価のための実験スケジュールを示す図である。
【図２０】マウスにおけるＭＰＴＰによって誘発された自発運動（Ａ）及び運動パターン（Ｂ）に対するカルビドパ、レボドーパ、カルビドパ＋レボドーパ及びＨＭの效果を示す。各々の値は動物１０匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。＊Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＰＴＰ、＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。
【図２１】ＭＰＴＰで処理されたマウスの黒質のチロシンヒドロキシラーゼ免疫反応（ＴＨ−ＩＲ）に対するカルビドパ、レボドーパ、カルビドパ＋レボドーパ及びＨＭの效果を示す図である。各々の値は動物５匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。黒質緻密部を通じるＴＨ−陽性ニューロンの総数が計数された。＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、＊Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＰＴＰ（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。倍率＝４０ｘ。
【図２２】ＬＰＳモデルにおけるカルビドパがあるかないレボドーパに対するＨＭ效果評価のための実験スケジュールを示す図である。
【図２３】ＬＰＳによって誘発された致死性に対するカルビドパ、レボドーパ、カルビドパ＋レボドーパ又はＨＭの效果を示す図である。致死性はＬＰＳ注射後２週に観察された。＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋ＬＰＳ（ｘ２−ｔｅｓｔ）。
【図２４】マウスにおけるＬＰＳによって誘発された自発運動の低下(hypolocomotion)に対するＨＭ、カルビドパ、レボドーパ、カルビドパ＋レボドーパの效果を示す図である。各々の値は動物１０匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、＊Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＬＰＳ、＊＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋ＬＰＳ（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。
【図２５】マウスにおけるＬＰＳに対するカルビドパ、レボドーパ、カルビドパ＋レボドーパ及びＨＭの效果に対する代表的運動パターンを示す図である。
【図２６】ＬＰＳによって誘発されたＴＨ−ＩＲの減少に対するカルビドパ、レボドーパ、カルビドパ＋レボドーパ又はＨＭの效果に対する代表顕微鏡写真を示す図である。倍率＝４０ｘ。
【図２７】ＬＰＳで処理されたマウスの黒質のチロシンヒドロキシラーゼ免疫反応（ＴＨ−ＩＲ）に対するカルビドパ、レボドーパ、カルビドパ＋レボドーパ及びＨＭの效果を示す図である。各々の値は動物１０匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、＊Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＬＰＳ、＊＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋ＬＰＳ（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。
【図２８】マウスの黒質におけるＦ４／８０で表された小グリア細胞の誘導に対する代表的顕微鏡写真を示す図である。倍率＝４０ｘ。
【図２９】ＬＰＳで処理されたマウスのＦ４／８０免疫反応における黒質の増加に対するカルビドパ、レボドーパ、カルビドパ＋レボドーパ及びＨＭの效果を示す図である。各々の値は動物６匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、＊Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＬＰＳ、＊＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋ＬＰＳ（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。
【図３０】メタンフェタミンモデルでカルビドパがあるかないレボドーパに対するＨＭ效果評価のための実験スケジュールを示す図である。
【図３１】ＭＡによって誘発された過温症に対する薬物效果を示す図である。マウスは周辺温度２２．０±０．５℃下で２時間間隔でＭＡ注射を投与された。各々の値は動物６匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水、＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．ＭＡ単独（繰り返し測定による分散分析検証法）。
【図３２】マウスにおけるＭＡによって誘発された自発運動の低下に対するＨＭ、カルビドパ、レボドーパ、カルビドパ＋レボドーパの效果を示す図である。各々の値は動物１０匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、＃Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＬＰＳ、＃＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋ＬＰＳ（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。
【図３３】ＭＡで処理されたマウスの黒質におけるチロシンヒドロキシラーゼ免疫反応（ＴＨ−ＩＲ）に対するカルビドパ、レボドーパ、カルビドパ＋レボドーパ及びＨＭの效果を示す図である。各々の値は動物５匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。黒質緻密部を通じたＴＨ−陽性ニューロンの総数が計数された。＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、＊Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＡ（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。倍率＝４０ｘ。
【図３４】マウスにおけるコカインによって誘発された活動亢進に対するモルヒナンの效果を示す図である。モルヒナン（１５及び３０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）はコカイン（５及び２０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）を投与する３０分前に投与された。中心活性(Central activity)とはボックスの中心における比較的非特異的自発運動を意味する。限界活性(Marginal activity)とは旋回行動(circling behaviors)を意味する。すべての処理は７日間行われた。各々の値は動物６匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。＊Ｐ＜０．０５及び生理食塩水、＊＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水、＃Ｐ＜０．０５又は＃＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋コカインの用量（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。
【図３５】マウスにおけるコカインによって誘発された活動亢進に対するジメモルファン（ＤＦ）の效果を示す図である。ＤＦ（２０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）はコカイン（５及び２０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）を投与する３０分前に投与された。すべての処理は７日間行われた。各々の値は動物６匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。＊Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水、＊＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水、＃Ｐ＜０．０５ ｖｓ．対応対照群、＃＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．対応対照群（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。
【図３６】マウス脳の背部の線条体(dorsolateral striatum)におけるフォス−関連抗原免疫反応的ニューロンを示す代表的な顕微鏡写真を示す図である。Ａ：生理食塩水、Ｂ：ＤＭ（２０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）＋コカイン（５ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）、Ｃ：コカイン（５ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）、Ｄ：ＤＦ（２０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）＋コカイン、Ｅ：ＡＭ（２０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）＋コカイン、Ｆ：ＣＭ（２０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）＋コカイン。倍率＝１００Ｘ。
【図３７】コカインによって誘発された条件付け場所嗜好性に対するＨＭ−介在作用に対するカンナビノイドＣＢ１受容体調節の效果を示す図である。各々の値は動物１０匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。＊Ｐ＜０．０５又は＊＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水で処理されたグループ、＃Ｐ＜０．０５ ｖｓ．コカイン、§Ｐ＜０．０５ ｖｓ．コカイン＋ＨＭ（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。
【図３８】コカインによって誘発された行動感作に対するＨＭ−介在作用に対するカンナビノイドＣＢ１受容体調節の效果を示す図である。各々の値は動物１０匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。＊Ｐ＜０．０５又は＊＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水、＃Ｐ＜０．０５ ｖｓ．コカイン単独（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。
【図３９】マウスにおけるＭＡによって誘発された活動亢進に対するモルヒナンの效果を示す図である。各々のモルヒナン（２０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）はＭＡ（１ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）の前３０分に投与された。すべての処理は７日間行われた。各々の値は動物６匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。＊Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水、＊＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水、§Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋ＭＡ（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。
【図４０】マウス脳の背部の線条体(dorsolateral striatum)におけるフォス−関連抗原免疫反応的ニューロンを示す代表的な顕微鏡写真を示す図である。Ａ：生理食塩水、Ｂ：ＭＡ（１ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）、Ｃ：ＤＭ（２０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）＋ＭＡ、Ｄ：ＤＦ（２０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）＋ＭＡ、Ｅ：ＡＭ（２０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）＋ＭＡ、Ｆ：ＣＭ（２０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）＋ＭＡ。倍率＝１００Ｘ。
【図４１】マウスにおけるＭＡによって誘発された感作に対するモルヒナンの效果を示す図である。モルヒナン（２０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）は洗浄期間の最後３日目に投与された。各々の値は動物６匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。＊Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、＊＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水＋生理食塩水、＃Ｐ＜０．０５ ｖｓ．生理食塩水の対応用量＋ＭＡ（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。
【図４２】ＭＡによって誘発された条件付け場所嗜好性に対するＨＭ−介在作用に対するカンナビノイドＣＢ１受容体調節の效果を示す図である。各々の値は動物１０匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。＊Ｐ＜０．０５又は＊＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水、＃Ｐ＜０．０１ ｖｓ．ＭＡ単独、§Ｐ＜０．０１ ｖｓ．ＭＡ＋ＨＭ（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。
【図４３】ＭＡによって誘発された行動感作に対するＨＭ−介在作用に対するカンナビノイドＣＢ１受容体調節の效果を示す図である。各々の値は動物１０匹の平均±標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。＊Ｐ＜０．０２、＊＊Ｐ＜０．０１ ｖｓ．生理食塩水、＃Ｐ＜０．０５ ｖｓ．ＭＡ単独、§Ｐ＜０．０１ ｖｓ．ＭＡ＋ＨＭ（ＤＭＲテストによる分散分析検証法）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【国際調査報告】
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