【手続補正書】
【提出日】平成27年10月15日(2015.10.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
近位にマーカーを沈着させることにより試料中の標的を検出するための組成物であって、
式
2015212700.tif 000001
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は独立して脂肪族、アリール、ハロゲン、ヘテロ原子含有部分及び水素より選択され；Ｒ１及び／又はＲ３はＲ２と結合して融合した芳香環系を形成してよく；Ｒ５はヘテロ原子含有部分であり；Ａは炭素、イオウを除くヘテロ原子又はそれらの任意の組合せであり；ｎは１〜５である］
を有するピリミジン及び／又はピリジン沈着エンハンサー；
第二の沈着エンハンサー；及び
酵素基質、を含む組成物。
【請求項２】
第二の沈着エンハンサーが式
2015212700.tif 000002
［Ａは炭素、イオウ以外のヘテロ原子又はそれらの任意の組み合わせであり；Ｂは酸素、炭素又は窒素であり；Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０及びＲ１１は独立して、脂肪族、アリール、ハロゲン、ヘテロ原子含有部分、水素又はそれらの任意の組合せである］
を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
ヘテロ原子含有部分が、ヒドロキシル、エーテル、シリルエーテル、エステル、カルボン酸、シリル、ホスホン酸、ホスフィン、アミド又はＮＲ６Ｒ７［Ｒ６及びＲ７は独立して水素、脂肪族、アリール、ヘテロ脂肪族、ヘテロアリール又はそれらの任意の組合せである］である、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
Ａは炭素であり、Ｂは窒素である、請求項２に記載の組成物。
【請求項５】
第二の沈着エンハンサーが、イミダゾール、Ｌ-ヒスチジン、チアゾール、オキサゾール又はそれらの任意の組合せから選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
第二の沈着エンハンサーが、式
2015212700.tif 000003
又は
2015212700.tif 000004
［Ａは炭素、窒素、酸素又はそれらの任意の組み合わせであり；Ｒ１２〜Ｒ２３は独立して脂肪族、アリール、ハロゲン、ヘテロ原子含有部分、水素又はそれらの任意の組合せである］
を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
ヘテロ原子含有部分が、ヒドロキシル、エーテル、シリルエーテル、エステル、カルボン酸、シリル、ホスホン酸、ホスフィン、アミド又はＮＲ６Ｒ７［Ｒ６及びＲ７は独立して水素、脂肪族、アリール、ヘテロ脂肪族、ヘテロアリール又はそれらの任意の組合せである］である、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
Ｒ２２が、[Ｏ]・又は[Ｏ]−である、請求項６に記載の組成物。
【請求項９】
第二の沈着エンハンサーが、ピリミジンＮ-オキシド、ピリジンＮ-オキシド、Ｎ-メチルモルホリン（ＮＭＯ）及び２,２,６,６-テトラメチルピペリジン-１-オキシル（ＴＥＭＰＯ）である、請求項６に記載の組成物。
【請求項１０】
第二の沈着エンハンサーが、有機又は無機ボロン酸である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
第二の沈着エンハンサーが、式
2015212700.tif 000005
［Ｒ２４、Ｒ２５及びＲ２６は独立して脂肪族、アリール、ヘテロ脂肪族、ヘテロアリール又はそれらの任意の組合せである］
を有する、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
Ｒ２４、Ｒ２５及びＲ２６の２以上はヒドロキシルであり、残りのＲ２４、Ｒ２５又はＲ２６は脂肪族、アリール、ヘテロ脂肪族又はヘテロアリールである、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
有機ボロン酸がホウ酸、フェニルボロン酸、４-ＡｃＨＮ-フェニルボロン酸又はそれらの任意の組合せである、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１４】
第二の沈着エンハンサーが、式
2015212700.tif 000006
［Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０及びＲ３１は独立して水素、脂肪族、アリール、ヘテロ原子含有部分、ハロゲン又はそれらの任意の組合せである］
を有するフェノール化合物である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１５】
ヘテロ原子含有部分がヒドロキシル、エーテル、シリルエーテル、エステル、カルボン酸、シリル、ホスホン酸、ホスフィン、アミド又はＮＲ６Ｒ７［Ｒ６及びＲ７は独立して水素、脂肪族、アリール、ヘテロ脂肪族、ヘテロアリール又はそれらの任意の組合せである］である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０及びＲ３１から選択される２つの隣接基が、融合した芳香又は非芳香環系を形成する、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１７】
Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０及びＲ３１の少なくとも１つがヒドロキシルである、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１８】
フェノール化合物がピロカテコールである、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１９】
第二の沈着エンハンサーが、式
2015212700.tif 000007
［Ａは炭素、イオウを除くヘテロ原子及びそれらの組合せであり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は脂肪族、アリール、ハロゲン、ヘテロ原子含有部分及び水素より選択され；Ｒ１及び／又はＲ３はＲ２と結合して融合した芳香環系を形成してよい］
を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項２０】
酵素基質が、１,３-ジアミノベンジジン、３-アミノ-９-エチルカルバゾール、テトラメチルベンジジン、フルオレセイン、ルミノフォア、クマリン、ボディパイ色素、レゾルフィン、ローダミン又はそれらの誘導体より選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項２１】
沈着エンハンサーが、ピリジン、２-ヒドロキシピリジン、ピリミジン又は２-ヒドロキシピリミジンから選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項２２】
近位にマーカーを沈着させることにより試料中の標的を検出するための方法であって、
試料を標的に特異的な特異的結合部分を含む識別液と接触させることと；
特異的結合部分を酵素で標識することと；
式
2015212700.tif 000008
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は独立して脂肪族、アリール、ハロゲン、ヘテロ原子含有部分及び水素より選択され；Ｒ１及び／又はＲ３はＲ２と結合して融合した芳香環系を形成してよく；Ｒ５はヘテロ原子含有部分であり；Ａは炭素、イオウを除くヘテロ原子又はそれらの任意の組合せであり；ｎは１〜５である］
を有する第一の沈着エンハンサーと、第二の沈着エンハンサーとの存在下で、標的の近位にマーカーが沈着するように、試料を酵素基質を含む検出液と接触させることと；
マーカーを検出することと、を含む方法。
【請求項２３】
第二の沈着エンハンサーが式
2015212700.tif 000009
［Ａは炭素、イオウ以外のヘテロ原子又はそれらの任意の組み合わせであり；Ｂは酸素、炭素又は窒素であり；Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０及びＲ１１は独立して、脂肪族、アリール、ハロゲン、ヘテロ原子含有部分、水素又はそれらの任意の組合せである］
を有する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
ヘテロ原子含有部分が、ヒドロキシル、エーテル、シリルエーテル、エステル、カルボン酸、シリル、ホスホン酸、ホスフィン、アミド又はＮＲ６Ｒ７［Ｒ６及びＲ７は独立して水素、脂肪族、アリール、ヘテロ脂肪族、ヘテロアリール又はそれらの任意の組合せである］である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
Ａは炭素であり、Ｂは窒素である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
第二の沈着エンハンサーが、イミダゾール、Ｌ-ヒスチジン、チアゾール、オキサゾール又はそれらの任意の組合せから選択される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２７】
第二の沈着エンハンサーが、式
2015212700.tif 000010
又は
2015212700.tif 000011
［Ａは炭素、窒素、酸素又はそれらの任意の組み合わせであり；Ｒ１２〜Ｒ２３は独立して脂肪族、アリール、ハロゲン、ヘテロ原子含有部分、水素又はそれらの任意の組合せである］
を有する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２８】
ヘテロ原子含有部分が、ヒドロキシル、エーテル、シリルエーテル、エステル、カルボン酸、シリル、ホスホン酸、ホスフィン、アミド又はＮＲ６Ｒ７［Ｒ６及びＲ７は独立して水素、脂肪族、アリール、ヘテロ脂肪族、ヘテロアリール又はそれらの任意の組合せである］である、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
Ｒ２２が、[Ｏ]・又は[Ｏ]−である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
第二の沈着エンハンサーが、ピリミジンＮ-オキシド、ピリジンＮ-オキシド、Ｎ-メチルモルホリン（ＮＭＯ）及び２,２,６,６-テトラメチルピペリジン-１-オキシル（ＴＥＭＰＯ）である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３１】
第二の沈着エンハンサーが、有機又は無機ボロン酸である、請求項２２に記載の方法。
【請求項３２】
第二の沈着エンハンサーが、式
2015212700.tif 000012
［Ｒ２４、Ｒ２５及びＲ２６は独立して脂肪族、アリール、ヘテロ脂肪族、ヘテロアリール又はそれらの任意の組合せである］
を有する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
Ｒ２４、Ｒ２５及びＲ２６の２以上はヒドロキシルであり、残りのＲ２４、Ｒ２５又はＲ２６は脂肪族、アリール、ヘテロ脂肪族又はヘテロアリールである、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
第二の沈着エンハンサーが、ホウ酸、フェニルボロン酸、４-ＡｃＨＮ-フェニルボロン酸又はそれらの任意の組合せである、請求項３１に記載の方法。
【請求項３５】
第二の沈着エンハンサーが、式
2015212700.tif 000013
［Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０及びＲ３１は独立して水素、脂肪族、アリール、ヘテロ原子含有部分、ハロゲン又はそれらの任意の組合せである］
を有するフェノール化合物である、請求項２２に記載の方法。
【請求項３６】
ヘテロ原子含有部分がヒドロキシル、エーテル、シリルエーテル、エステル、カルボン酸、シリル、ホスホン酸、ホスフィン、アミド又はＮＲ６Ｒ７［Ｒ６及びＲ７は独立して水素、脂肪族、アリール、ヘテロ脂肪族、ヘテロアリール又はそれらの任意の組合せである］である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
２つの隣接するＲ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０及びＲ３１基が、融合した芳香又は非芳香環系を形成する、請求項３５に記載の方法。
【請求項３８】
Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０及びＲ３１の少なくとも１つがヒドロキシルである、請求項３５に記載の方法。
【請求項３９】
第二の沈着エンハンサーがピロカテコールである、請求項３５に記載の方法。