(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）Ｚ−（Ｌ）n−Ｖの医薬品を含み、式中、Ｖはペプチドを表し、Ｌは任意要素としてのリンカーを表し、Ｚは、イメージング基Ｍを適宜有していてもよい基を表し、ｎは０又は１を表す。この医薬品は、心不全、心不整脈及び線維症が顕著な疾患、例えばＣＯＰＤ、肝線維症及びアテローム性動脈硬化症の治療用の治療薬として活性を有し、心不全及び線維症が顕著な疾患、例えばＣＯＰＤ、肝線維症及びアテローム性動脈硬化症の診断用の診断薬としても有用である。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式（Ｉ）で特徴付けられる医薬品。
Ｚ−（Ｌ）n−Ｖ  （Ｉ）
式中、
Ｖは、結合配列−Ｘ1−Ｘ2−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｘ3を有するペプチドを表し、
Ｌは任意要素としてのリンカーを表し、
Ｚはイメージング基Ｍを適宜有していてもよい基を表し、
ｎは０又は１であり、
Ｘ1はアミノ酸を表し、
Ｘ2はＡｒｇもしくはＮ−アルキル化Ａｒｇ又はＡｒｇ類似体を表し、
Ｘ3は、疎水性側鎖を含むアミノ酸を表し、
それぞれ３位及び５位のＶａｌ残基及びＩｌｅ残基は架橋形成し得るアミノ酸で適宜置き換えられていてもよく、
Ｚは適宜リンカーＬを介してアミノ酸Ｘ1と結合を形成し、
Ｍが存在する場合は画像診断法で直接又は間接的に検出し得る造影性基を表す。
【請求項２】
心不全、心不整脈その他の繊維化の顕著な疾患の治療、並びにＣＯＰＤ、肝線維症及びアテローム性動脈硬化症の治療に有用な、請求項１記載の医薬品。
【請求項３】
Ｍがインビボ造影性基である診断用の請求項１記載の医薬品。
【請求項４】
Ｚが次の式（ＶＩＩ）のキレート剤を表す、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の医薬品。
【化１】
2007510643.tif 000015
式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は各々独立にＨ又はＣ1〜10アルキル、Ｃ3〜10アルキルアリール、Ｃ2〜10アルコキシアルキル、Ｃ1〜10ヒドロキシアルキル、Ｃ1〜10アルキルアミン、Ｃ1〜10フルオロアルキルであるか、或いは２以上のＲ基がそれらに結合した原子と共に炭素環、複素環、飽和又は不飽和環を形成するものである。
【請求項５】
Ｚが次の式（ＸＩ）のキレート剤を表す、請求項１乃至請求項４のいずれか１項記載の医薬品。
【化２】
2007510643.tif 000016
式中、
Ｑ1〜Ｑ6は独立にＱ基であって、ＱはＨ、アルキル、アリール又はアミン保護基であり、
Ｗ1は、−ＮＲ−、−ＣＯ2−、−ＣＯ−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｓ）−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｏ）−、−ＣＯＮＲ−又はＱ基であり、
各Ｙは独立にＤ−もしくはＬ−アミノ酸、−ＣＨ2−、−ＣＨ2ＯＣＨ2−又は−ＯＣＨ2ＣＨ2Ｏ−、或いはＸ基であり、
ｐは１〜８の整数であり、
ｑは０〜３０の整数であり、
ＲはＨ、Ｃ1〜4アルキル、Ｃ2〜4アルコキシアルキル、Ｃ1〜4ヒドロキシアルキル又はＣ1〜4フルオロアルキルであり、
Ｑは次式の基であり、
【化３】
2007510643.tif 000017
Ａは対イオンである。
【請求項６】
Ｍが67Ｇａ、111Ｉｎ、123Ｉ、125Ｉ、131Ｉ、81mＫｒ、99Ｍｏ、99mＴｃ、201Ｔｌ及び133Ｘｅを含む、放射線又はＳＰＥＣＴイメージング用γ放射性部分を表す、請求項１及び請求項３乃至請求項５のいずれか１項記載の医薬品。
【請求項７】
以下の式（Ｘ）又は（ＸＩＩ）を有する治療用の、或いは以下の式（Ｘａ）又は（ＸＩＩａ）を有する診断薬として使用するための請求項１乃至請求項６のいずれか１項記載の医薬品、
【化４】
2007510643.tif 000018
【化５】
2007510643.tif 000019
【請求項８】
請求項１記載の式（Ｉ）の化合物を、薬学的に許容される１種以上の添加剤及び／又は賦形剤と共に含んでなる医薬組成物。
【請求項９】
心不全、心不整脈その他の繊維化の顕著な疾患、特にＣＯＰＤ、肝線維症及びアテローム性動脈硬化症の治療及び／又は診断のための請求項１の医薬品の使用。
【請求項１０】
被検体における心不全その他の繊維化の顕著な疾患、特にＣＯＰＤ、肝線維症及びアテローム性動脈硬化症のインビボ診断法であって、請求項１記載の式（Ｉ）の医薬品を投与し、次いで被検体の部分又は全体の画像を生成させることを含んでなる方法。
【請求項１１】
ペプチド−キレートコンジュゲート及び還元剤を含む、式（Ｉ）の放射性医薬組成物の調製用キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、心不全、心不整脈その他の繊維化の顕著な疾患の治療、並びに線維形成過程の顕著な疾患及び病態の診断に有用な新規医薬品を提供する。本発明はさらに、新規医薬組成物並びに診断薬調製用前駆体を提供する。本発明はさらに、治療のモニタリングに有用な新規医薬品並びに治療のモニタリング法を提供する。本発明のその他の目的は特許請求の範囲から自明である。
【０００２】
本新規医薬品は受容体に結合するターゲティング部分を含むが、受容体は、患部において上方制御及び／又は過剰発現されていてもいなくてもよい。ターゲティング部分に含まれる基は、造影剤としての用途には、診断用造影性基、任意要素としてのリンカー基及びペプチド部分を有する。
【０００３】
本新規医薬化合物は、アンジオテンシン受容体、特にアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）タイプ１（ＡＴ1）受容体に高い親和性をもつ。
【背景技術】
【０００４】
オクタペプチド（Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ）であるアンジオテンシンII（ＡｎｇＩＩ）は、２種類の異なる受容体：ＡｎｇＩＩタイプ１（ＡＴ1）及びタイプ２（ＡＴ2）受容体に結合する多面的な血管作用性ペプチドである。レニン−アンジオテンシン−アルドステロン系（ＲＡＡＳ）の活性化は、血管肥厚、血管収縮、塩分・水分の保持及び高血圧を生じる。これらの作用は主にＡＴ1受容体によって媒介される。逆に、細胞死、血管拡張及びナトリウム利尿を始めとするその他のＡｎｇＩＩ媒介作用はＡＴ2受容体の活性化によって媒介される。ＡｎｇＩＩ情報伝達メカニズムは未だ充分に解明されていない。ＡＴ1受容体の活性化は、チロシンキナーゼ誘導タンパク質リン酸化、アラキドン酸代謝物の産生、反応性酸化性種の活性変化及び細胞内Ｃａ2+の流動など様々な細胞内系を引き起こす。ＡＴ2受容体の活性化はブラジキニンの刺激、一酸化窒素産生及びプロスタグランジン代謝を促進するが、これらの大部分はＡＴ1受容体の作用とは逆である（Ｂｅｒｒｙ  Ｃ，  Ｔｏｕｙｚ  Ｒ，  Ｄｏｍｉｎｉｃｚａｋ  ＡＦ，  Ｗｅｂｂ  ＲＣ，  Ｊｏｈｎｓ  ＤＧ．：  Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｈｅａｒｔ  Ｃｉｒｃ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２００１  Ｄｅｃ；２８１（６）：Ｈ２３３７−６５．  Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：  ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ，  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，  ａｎｄ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｗｉｔｈ  ｃｅｒａｍｉｄｅ参照）。
【０００５】
ＡｎｇＩＩはレニン−アンジオテンシン−アルドステロン系（ＲＡＡＳ）の活性成分であり、血圧、血漿量、交感神経系及び口渇反応の調節に重要な生理学的役割を果たす。ＡｎｇＩＩは、心肥大、心筋梗塞、高血圧、慢性閉塞性肺疾患、肝線維症及びアテローム性動脈硬化症における病態生理学的役割も有する。ＡｎｇＩＩは、体系的には古典的ＲＡＡＳを介して産生され、局所的には組織ＲＡＡＳを介して産生される。古典的ＲＡＡＳでは、循環系中の腎由来のレニンが肝由来のアンジオテンシノーゲンを切断してデカペプチドであるアンジオテンシンＩ（ＡｎｇＩ）を生ずる。ＡｎｇＩは肺でアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）によって活性型ＡｎｇＩＩへと変換される。ＡｎｇＩは組織エンドペプチダーゼによってヘプタペプチドＡｎｇ−（１−７）へと分解されることもある。ＲＡＡＳ系を本明細書の図１に図解するが、この図はＦｏｏｔｅ他の報文Ａｎｎ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．  ２７：  １４９５−１５０３  （１９９３）の図１に基づくものである。
【０００６】
ＲＡＡＳが正常な心血管ホメオスタシスに重要な役割を果たすことに加えて、ＲＡＡＳの過剰活性は高血圧、鬱血性心不全、冠動脈虚血及び腎不全などの様々な循環器疾患の発症に関与している。心筋梗塞（ＭＩ）後、ＲＡＡＳは活性化される。具体的には、ＭＩ後及び左心室機能障害においてＡＴ1受容体の発現が増大するので、ＡＴ受容体は心筋梗塞後のリモデリングに重要な役割を果たしているらしい。したがって、ＡＣＥ阻害剤やＡＴ1受容体拮抗剤のようなＲＡＡＳを阻害する薬剤は、かかる循環器疾患の処置に多大な治療効果をもつことが示されている。
【０００７】
心臓、腎臓、肺及び肝臓などでは、線維症がそれらの臓器不全に共通した経路である。そこで、臓器の線維症に関与する病態生理学的メカニズムを理解することは、特に予防的薬理戦略の可能性を前提とすると、極めて重要である。組織修復には、組織修復の開始に不可欠な単球／マクロファージ系の細胞、コラーゲン代謝及び線維組織形成を担う筋線維芽細胞、表現型形質転換間質性線維芽細胞を始めとする炎症細胞が関与する。修復のミクロ環境下におけるこれらの細胞での各事象は、アンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）の新規産生を促す分子事象を伴う。このペプチドは、自己分泌／傍分泌により、アンジオテンシン（ＡＴ1）受容体−リガンド結合を介してＴＧＦ−β１の発現を調節する。線維芽細胞から筋線維芽細胞（ｍｙｏＦｂ）への表現型の変化に寄与し、筋線維芽細胞でのコラーゲン代謝を調節するのはこのサイトカインである。アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）の阻害又はＡＴ1受容体拮抗作用は各々、線維症を生ずるこれらの分子及び細胞応答の多くを阻害し、予防処置となることが判明している（Ｗｅｂｅｒ  ＫＴ．  Ｆｉｂｒｏｓｉｓ，  ａ  ｃｏｍｍｏｎ  ｐａｔｈｗａｙ  ｔｏ  ｏｒｇａｎ  ｆａｉｌｕｒｅ：  ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  ａｎｄ  ｔｉｓｓｕｅ  ｒｅｐａｉｒ．  Ｓｅｍｉｎ  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  １９９７  Ｓｅｐ；１７（５）：４６７−９１及びその引用文献参照）。
【０００８】
ＡｎｇＩＩは、間葉細胞の活性化により組織線維症を制御し得る。例えば、ＡｎｇＩＩは、ＡＴ1の活性化を介してインビトロで心線維芽細胞の増殖を刺激する。ＡＴ1受容体の存在はインビトロで心線維芽細胞でも示されている。ＡｎｇＩＩの線維化促進作用の多くはこの受容体で媒介されると思われるが、心線維芽細胞でのＡＴ2の発現増大がヒトの肥大心臓で検出されており、これらの２つのサブタイプの発現のバランスがＡｎｇＩＩに対する応答を決定する上で重要となろう（Ａｍ．  Ｊ．  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．，  Ｖｏｌｕｍｅ  １６１，  Ｎｕｍｂｅｒ  ６，  Ｊｕｎｅ  ２０００，  １９９９−２００４：  Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  Ｉｓ  Ｍｉｔｏｇｅｎｉｃ  ｆｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ｌｕｎｇ  Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ  ｖｉａ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｔｙｐｅ  １  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｒｉｃｈａｒｄ  Ｐ．  Ｍａｒｓｈａｌｌ，  Ｒｏｂｉｎ  Ｊ．  ＭｃＡｎｕｌｔｙ，  ａｎｄ  Ｇｅｏｆｆｒｅｙ  Ｊ．  Ｌａｕｒｅｎｔ及びその引用文献参照）。
【０００９】
ＡｎｇＩＩ受容体は、特異的な拮抗剤による阻害によって識別することができる。ＡＴ1受容体は、ロサルタンなどのビフェニルイミダゾールによる選択的な拮抗作用を受けるのに対して、テトラヒドロイミダゾピリジンはＡＴ2受容体を特異的に阻害する。また、ＡＴ2受容体はＣＧＰ−４２１１２Ａによって選択的に活性化し得る。これはＡｎｇＩＩのヘキサペプチドアナログであり、濃度に応じてＡＴ2受容体を阻害し得る。その他ＡＴ3及びＡＴ4サブタイプという２種類のアンジオテンシン受容体が報告されている。
【００１０】
齧歯類では、ＡＴ1受容体には機能的に異なる２つのサブタイプＡＴ1A及びＡＴ1Bがあり、これらは９５％を超えるアミノ酸配列相同性を有する。
【００１１】
アンジオテンシン受容体の第二の主要なアイソフォームはＡＴ2受容体である。これはＡＴ1A及びＡＴ1B受容体とのアミノ酸配列相同性が低い（約３４％）。ＡＴ2受容体の正確な情報伝達経路及び機能的役割は不明であるが、これらの受容体は生理的条件下で、細胞増殖を阻害し、アポトーシス及び血管拡張を誘発することによってＡＴ1媒介作用と拮抗し得る。循環器疾患におけるＡＴ2受容体の正確な役割については、未だ解明されていない。
【００１２】
ＡＴ1及びＡＴ2以外にも、ＡｎｇＩＩの受容体が知られており、一般にＡＴatypicalと呼ばれる（Ｋａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ．  Ｈｅａｒｔ  Ｊ．  １２７：  １３８８−１４０１  （１９９４））。
【００１３】
ＡｎｇＩＩの作用の抑制は、例えば高血圧及び心不全の管理などの治療に利用されている。これは、アンジオテンシノーゲンからアンジオテンシンＩ（ＡｎｇＩＩの前駆体）への変換を遮断するレニン阻害剤の使用、アンジオテンシンＩからＡｎｇＩＩへの変換を遮断するアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬（これはブラジキニン及びプロスタグランジンの生体変換も遮断する）の使用、抗ＡｎｇＩＩ抗体の使用、並びにＡｎｇＩＩ受容体拮抗剤の使用などの幾つかの方法で達成されている。
【００１４】
不整脈の治療にはβ遮断薬が最も一般的に用いられている。抗不整脈薬は全体として限られた成功しか得られておらず、カルシウムチャネル遮断薬は不整脈を誘発することがある。卓越した薬剤は一つとしてなく、唯一例外があるとすればアミオダロンであろう。抗不整脈薬の短期的効果は、薬剤の種類にもよるが、死亡率に対する中立的又は負の効果によって相殺されることが判明している（Ｓａｎｇｕｉｎｅｔｔｉ  ＭＣ  ａｎｄ  Ｂｅｎｎｅｔｔ，  ＰＢ：  Ａｎｔｉ−ａｒｒｈｙｔｈｍｉｃ  ｄｒｕｇ  ｔａｒｇｅｔ  ｃｈｏｉｃｅｓ  ａｎｄ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ．  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ２００３，  ９３（６）：  ４９１−９２５７−２６３）。優れた抗不整脈薬が必要とされていることは明らかである。
【００１５】
Ｌａｎｃｅｔの報文（Ｌｉｎｄｈｏｌｍ，  ＬＨ  ｅｔ  ａｌ．  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｌｏｓａｒｔａｎ  ｏｎ  ｓｕｄｄｅｎ  ｃａｒｄｉａｃ  ｄｅａｔｈ  ｉｎ  ｐｅｏｐｌｅ  ｗｉｔｈ  ｄｉａｂｅｔｅｓ：  ｄａｔａ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ＬＩＦＥ  ｓｔｕｄｙ．  Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ，  ２００３，  ３６２：  ６１９−６２０）では、ＡＴ1受容体拮抗剤が、ＣＨＦ罹患者に概して有効であるだけでなく、心臓突然死の発生率も低減することが明らかにされている。心筋梗塞に起因する不整脈又はＬＡＤ結紮後の再潅流における不整脈に関してＡＴ1拮抗剤が抗不整脈作用をもつことを示す研究が幾つか存在する（Ｈａｒａｄａ  Ｋ  ｅｔ  ａｌ．  Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  Ｔｙｐｅ  １ａ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｉｓ  ｉｎｖｏｌｖｅｄ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ  ｏｆ  ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ａｒｒｈｙｔｈｍｉａｓ．  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ．  １９９８，９７：  ３１５−３１７、Ｏｚｅｒ  ＭＫ  ｅｔ  ａｌ．  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｃａｐｔｏｐｒｉｌ  ａｎｄ  Ｌｏｓａｒｔａｎ  ｏｎ  ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｉｓｃｈｅｍｉａ−ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ａｒｒｈｙｔｈｍｉａｓ  ａｎｄ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｉｎ  ｒａｔｓ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｒｅｓｅａｒｃｈ，  ２００２，  ４５  （４），  ２５７−２６３、Ｌｙｎｃｈ  ＪＪ  ｅｔ  ａｌ．  ＥＸＰ３１７４，  ｔｈｅ  Ａｌｌ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ  ｈｕｍａｎ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ  ｏｆ  Ｌｏｓａｒｔａｎ，  ｂｕｔ  ｎｏｔ  Ｌｏｓａｒｔａｎ  ｎｏｒ  ｔｈｅ  Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ−ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ  ｅｎｚｙｍｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｃａｐｔｏｐｒｉｌ，  ｐｒｅｖｅｎｔｓ  ｔｈｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｌｅｔｈａｌ  ｉｓｃｈｅｍｉｃ  ａｒｒｈｙｔｈｍｉａｓ  ｉｎ  ａ  ｃａｎｉｎｅ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｒｅｃｅｎｔ  ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ．  ＪＡＣＣ，  １９９９，  ３４  ８７６−８８４）。
【００１６】
関連する従来技術
国際公開第９８／１８４９６号（Ｎｙｃｏｍｅｄ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ＡＳ）には、ベクター−リンカー−リポーター構造を含む造影剤が開示されており、該ベクターはアンジオテンシン又はペプチド系アンジオテンシン誘導体を含む。
【００１７】
米国特許第４４１１８８１号（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）には、放射性標識化合物の安定化が記載されている。放射性標識化合物の例として、例えばアンジオテンシンＩＩ（５−Ｌ−イソロイシン）［チロシル−125Ｉ］−（一ヨウ化物）が挙げられている。
【００１８】
ＡｎｇＩＩをそのアミノ酸組成の変更によって強力な拮抗薬又は部分拮抗薬に変えることができる。例えば８位のフェニルアラニンをイソロイシンで置換し、１位のアスパラギン酸をサルコシンで置換すると、ペプチドは強力な拮抗剤に変化する。
【００１９】
４位及び６位のアミノ酸の環化又は架橋によって、ＡＴ1受容体に対する特異性を高めることができる。同様に、１位にサルコシンを導入し、８位にグリシンを導入すると、ペプチドはＡＴ1選択的拮抗剤になる（ＲＣ  Ｓｐｅｔｈ．  Ｓａｒｃｏｓｉｎｅ１１，  ｇｌｙｃｉｎｅ８  ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  ｉｓ  ａｎ  ＡＴ1  ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｕｂｔｙｐｅ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ａｎａｔａｇｏｎｉｓｔ）．  Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  １１５  （２００３）  ２０３−２０９参照）。
【００２０】
前述の通り、ＡＴ1受容体の本来のリガンドは、オクタペプチドＡｎｇＩＩ（Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ）であり、ナノモル範囲でＡＴ1受容体に結合する
ある受容体の本来の結合リガンドを、ある基、特に比較的に大きく比較的嵩高い基の結合によって修飾すると、ペプチドベクターの親和性が損なわれることが多い。
【００２１】
今回、本発明者らは、オクタペプチドＡｎｇＩＩ（Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ）及びその誘導体をその特定の位置で置換すると、その結合能力を保持したまま、アンジオテンシンＩＩ受容体、特にＡＴ1受容体に対する親和性が増大するという予想外の知見を得た。
【特許文献１】国際公開第９８／１８４９６号パンフレット
【特許文献２】米国特許第４４１１８８１号明細書
【特許文献３】国際公開第０１／７７１４５号パンフレット
【特許文献４】国際公開第０３／００６４９１号パンフレット
【特許文献５】米国特許第４６４７４４７号明細書
【特許文献６】国際公開第８６／０２８４１号パンフレット
【特許文献７】国際公開第０３／００６０７０号パンフレット
【特許文献８】英国特許出願第０４１６０６２．８号明細書
【特許文献９】国際公開第０３／０８０５４４号パンフレット
【特許文献１０】英国特許出願第０３１７８１５．９号明細書
【特許文献１１】米国特許第６２３０７７７号明細書
【特許文献１２】国際公開第９８／１８５００号パンフレット
【特許文献１３】ノルウェー特許出願第２００３０３１１５号明細書
【特許文献１４】国際公開第２００３／００６４９号パンフレット
【非特許文献１】Ｂｅｒｒｙ  Ｃ，  Ｔｏｕｙｚ  Ｒ，  Ｄｏｍｉｎｉｃｚａｋ  ＡＦ，  Ｗｅｂｂ  ＲＣ，  Ｊｏｈｎｓ  ＤＧ．：  Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｈｅａｒｔ  Ｃｉｒｃ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２００１  Ｄｅｃ；  ２８１（６）：  Ｈ２３３７−６５、Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：  ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ，  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，  ａｎｄ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｗｉｔｈ  ｃｅｒａｍｉｄｅ
【非特許文献２】Ｆｏｏｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｎ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．  ２７：  １４９５−１５０３  （１９９３）２７：  １４９５−１５０３  （１９９３）
【非特許文献３】Ｗｅｂｅｒ  ＫＴ．  Ｆｉｂｒｏｓｉｓ，  ａ  ｃｏｍｍｏｎ  ｐａｔｈｗａｙ  ｔｏ  ｏｒｇａｎ  ｆａｉｌｕｒｅ：  ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  ａｎｄ  ｔｉｓｓｕｅ  ｒｅｐａｉｒ．  Ｓｅｍｉｎ  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  １９９７  Ｓｅｐ；  １７（５）：  ４６７−９１
【非特許文献４】Ａｍ．  Ｊ．  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．，  Ｖｏｌｕｍｅ  １６１，  Ｎｕｍｂｅｒ  ６，  Ｊｕｎｅ  ２０００，  １９９９−２００４  Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  Ｉｓ  Ｍｉｔｏｇｅｎｉｃ  ｆｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ｌｕｎｇ  Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ  ｖｉａ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｔｙｐｅ  １  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ＲＩＣＨＡＲＤ  Ｐ．  ＭＡＲＳＨＡＬＬ，  ＲＯＢＩＮ  Ｊ．  ＭＣＡＮＵＬＴＹ，  ａｎｄ  ＧＥＯＦＦＲＥＹ  Ｊ．  ＬＡＵＲＥＮＴ
【非特許文献５】Ｋａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ．  Ｈｅａｒｔ  Ｊ．  １２７：  １３８８−１４０１  （１９９４）
【非特許文献６】Ｓａｎｇｕｉｎｅｔｔｉ  ＭＣ  ａｎｄ  Ｂｅｎｎｅｔｔ，  ＰＢ：  Ａｎｔｉ−ａｒｒｈｙｔｈｍｉｃ  ｄｒｕｇ  ｔａｒｇｅｔ  ｃｈｏｉｃｅｓ  ａｎｄ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ．  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ２００３，  ９３（６）：  ４９１−９２５７−２６３
【非特許文献７】Ｌｉｎｄｈｏｌｍ，  ＬＨ  ｅｔ  ａｌ．  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｌｏｓａｒｔａｎ  ｏｎ  ｓｕｄｄｅｎ  ｃａｒｄｉａｃ  ｄｅａｔｈ  ｉｎ  ｐｅｏｐｌｅ  ｗｉｔｈ  ｄｉａｂｅｔｅｓ：  ｄａｔａ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ＬＩＦＥ  ｓｔｕｄｙ．  Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ，  ２００３，  ３６２：  ６１９−６２０
【非特許文献８】Ｈａｒａｄａ  Ｋ  ｅｔ  ａｌ．  Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  Ｔｙｐｅ  １ａ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｉｓ  ｉｎｖｏｌｖｅｄ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ  ｏｆ  ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ａｒｒｈｙｔｈｍｉａｓ．  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ．  １９９８，９７：  ３１５−３１７
【非特許文献９】Ｏｚｅｒ  ＭＫ  ｅｔ  ａｌ．  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｃａｐｔｏｐｒｉｌ  ａｎｄ  Ｌｏｓａｒｔａｎ  ｏｎ  ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｉｓｃｈｅｍｉａ−ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ａｒｒｈｙｔｈｍｉａｓ  ａｎｄ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｉｎ  ｒａｔｓ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｒｅｓｅａｒｃｈ，  ２００２，  ４５  （４），  ２５７−２６３
【非特許文献１０】Ｌｙｎｃｈ  ＪＪ  ｅｔ  ａｌ．  ＥＸＰ３１７４，  ｔｈｅ  Ａｌｌ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ  ｈｕｍａｎ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ  ｏｆ  Ｌｏｓａｒｔａｎ，  ｂｕｔ  ｎｏｔ  Ｌｏｓａｒｔａｎ  ｎｏｒ  ｔｈｅ  Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ−ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ  ｅｎｚｙｍｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｃａｐｔｏｐｒｉｌ，  ｐｒｅｖｅｎｔｓ  ｔｈｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｌｅｔｈａｌ  ｉｓｃｈｅｍｉｃ  ａｒｒｈｙｔｈｍｉａｓ  ｉｎ  ａ  ｃａｎｉｎｅ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｒｅｃｅｎｔ  ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ．  ＪＡＣＣ，  １９９９，  ３４  ８７６−８８４
【非特許文献１１】ＲＣ  Ｓｐｅｔｈ．  Ｓａｒｃｏｓｉｎｅ１１，  ｇｌｙｃｉｎｅ８  ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  ｉｓ  ａｎ  ＡＴ１  ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｕｂｔｙｐｅ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ａｎａｔａｇｏｎｉｓｔ．  Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  １１５  （２００３）  ２０３−２０９
【非特許文献１２】Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．，  ８５：  ２１４９  （１９６４）
【非特許文献１３】Ｅ．  Ａｔｈｅｒｔｏｎ  ＆  Ｒ．Ｃ．  Ｓｈｅｐｐａｒｄ，  ”Ｓｏｌｉｄ  ｐｈａｓｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：  ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ”，  １９８９，  ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｏｘｆｏｒｄ
【非特許文献１４】Ｇｒｅｅｎｅ，  Ｔ．Ｗ．  ＆  Ｗｕｔｓ，  Ｐ．Ｇ．Ｍ．  （１９９１）  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２２】
本発明の第一の目的は、心不全、心不整脈その他の繊維化の顕著な疾患、例えばＣＯＰＤ、肝線維症及びアテローム性動脈硬化症の治療に有用な医薬品であって、ＡＴ1受容体に対して天然オクタペプチドＡｎｇＩＩよりも高い結合親和性を示すターゲティング部分を含む医薬品を提供することである。この医薬品は拮抗活性を示すべきである。
【００２３】
本発明の第二の目的は、心不全その他の繊維化の顕著な疾患、例えばＣＯＰＤ、肝線維症及びアテローム性動脈硬化症の診断に有用な医薬品であって、造影性基を含むターゲティング部分を含む医薬品を提供することである。造影性基は、被検体に投与したときに被検体の少なくともその造影剤が分布した部分の画像を、例えば放射線イメージング、ＳＰＥＣＴ、ＰＥＴ、ＭＲＩ、Ｘ線、光学イメージング（ＯＩ）、超音波（ＵＳ）、電気インピーダンス又は磁気的画像モダリティで生成することができる造影性基であればよい。造影性基を含むターゲティング部分は、ＡＴ1受容体に対してＡｎｇＩＩよりも高い結合親和性を示すべきであり、好ましくは拮抗剤として作用すべきであるが、作用活性の弱いものでも許容し得る。
【００２４】
本新規医薬品は、画像診断用に適した造影性基を有しているときには、当該医薬品を治療薬として逐次又は同時に使用できる。
【００２５】
その他の目的としては、高血圧、線維症、ＣＯＰＤ及び関連疾患の治療法、心不全及び線維症のイメージング法、かかる疾患及び障害並びに関連血管疾患及び障害の治療の経過のモニタリング法の提供が挙げられる。本発明はさらに、新規医薬組成物及び診断薬調製用の前駆体を提供する。診断薬のキット、特に放射性医薬品診断薬の調製用キットも提供される。
【課題を解決するための手段】
【００２６】
本発明の医薬品は、ペプチドＶ、任意要素としてのリンカーＬ及び部分Ｚを含んでおり、次の式（Ｉ）で表すことができる。
【００２７】
Ｚ−（Ｌ）n−Ｖ  （Ｉ）
式中、
Ｖは、結合配列−Ｘ1−Ｘ2−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｘ3を有するペプチドを表し、
Ｌは任意要素としてのリンカーを表し、
Ｚはイメージング基Ｍを適宜有していてもよい基を表し、
ｎは０又は１であり、
Ｘ1はアミノ酸を表し、
Ｘ2はＡｒｇもしくはＮ−アルキル化Ａｒｇ又はＡｒｇ類似体を表し、
Ｘ3は、疎水性側鎖を含むアミノ酸を表し、
それぞれ３位及び５位のＶａｌ残基及びＩｌｅ残基は架橋形成し得るアミノ酸で適宜置き換えられていてもよく、
Ｚは、適宜リンカーＬを介してアミノ酸Ｘ1と結合を形成し、
Ｍが存在する場合は画像診断法で直接又は間接的に検出し得る造影性基を表す。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２８】
本発明は特許請求の範囲に記載されている。本発明の具体的な特徴については、以下の詳細な説明及び実施例で概説する。
【００２９】
式（Ｉ）のターゲティング部分において、Ｖはペプチド配列−Ｘ1−Ｘ2−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｘ3を表す。
【００３０】
式（Ｉ）のペプチドＶにおいて、特記しない限り、アミノ酸は天然ＡｎｇＩＩと同様にＬ−アミノ酸である。
【００３１】
アミノ酸について用いる３文字略号は以下の意味を有する。
Ａｒｇ＝アルギニン
Ａｓｐ＝アスパラギン酸
Ｃｙｓ＝システイン
Ｈｃｙ＝ホモシステイン
Ｇｌｙ＝グリシン
Ｓａｒ＝サルコシン
Ｖａｌ＝バリン
Ｔｙｒ＝チロシン
Ｉｌｅ＝イソロイシン
Ｈｉｓ＝ヒスチジン
Ｐｒｏ＝プロリン
Ｐｈｅ＝フェニルアラニン
Ａｂｕ＝２−アミノ酪酸
Ｎｖａ＝２−アミノペンタン酸
Ｎｌｅ＝２−アミノヘキサン酸
Ｐｈｇ＝２−アミノ−２−フェニル酢酸
Ｈｐｈ＝２−アミノ−４−フェニルブタン酸
Ｂｉｐ＝２−アミノ−３−ビフェニルプロピオン酸
Ｎａｌ＝２−アミノ−３−ナフチルプロピオン酸
Ｃｈａ＝２−アミノ−３−シクロヘキシルプロピオン酸。
【００３２】
Ｖのアミノ酸は好ましくは以下の通り独立に選択される。
Ｘ1は−ＮＹ1−（ＣＨ2）m−ＣＯ−を表し、ｍは１〜１０の整数であり、Ｙ1はＨ又はアルキルもしくはアリール含有置換基、最も好ましくはＧｌｙであり、
Ｘ2はＡｒｇ又はＮ−メチル−Ａｒｇ、或いはＡｒｇ類似体のＰｈｅ［４−グアニジノ］及びＧｌｙ−４−ピペリジル［Ｎ−アミジノ］を表し、
Ｘ3は、Ｐｈｅ、Ｄ−Ｐｈｅ、Ｉｌｅ、Ａｂｕ、Ｎｖａ、Ｎｌｅ、Ｐｈｇ、Ｈｐｈ、Ｂｉｐ、Ｎａｌ又はＣｈａを表し、最も好ましくはＤ−Ｐｈｅ、Ｂｉｐ、Ｉｌｅ又はＨｐｈである。
【００３３】
好ましいのは、Ｘ1がＧｌｙを表し、Ｘ2がＡｒｇ又はＮ−メチル−Ａｒｇを表し、Ｘ3がＤ−Ｐｈｅ、Ｂｉｐ、Ｉｌｅ又はＨｐｈを表す医薬品である。
【００３４】
さらに好ましいのは、Ｘ1がＧｌｙを表し、Ｘ2がＡｒｇを表し、Ｘ3がＩｌｅを表す医薬品である。
【００３５】
３位及び５位のアミノ酸が架橋単位を形成するように選択される場合、架橋は好ましくは−ＣＨ2−ＣＨ2−、−Ｓ−ＣＨ2−、−Ｓ−ＣＨ2−Ｓ−、ラクタム又は−Ｓ−Ｓ−単位を含む。さらに好ましくは、共有結合は２つのシステイン又はホモシステインの酸化によって形成されるジスルフィド結合である。
【００３６】
適当なリンカーＬの例は、国際公開第９８／１８４９６号及び国際公開第０１／７７１４５号（２３〜２７頁）に記載されており、その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。Ｌは、好ましくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）のようなポリアルキレングリコール単位、炭水化物、デキストラン又は１〜１０個のアミノ酸を表すものでもよい。リンカーは、例えば国際公開第０３／００６４９１号に記載されているようなバイオモディファイヤーとして作用するものでもよい。
【００３７】
リンカーＬはアルキルアミン又はアリールアミン、好ましくは式ＮＨ−（ＣＨ2）m−の化合物（適宜−ＣＯ−（ＣＨ2）m−ＣＯ−と組合せたあものでもよい）から誘導されるものであってもよい。式中、ｍは１〜１０の正の整数を表す。
【００３８】
リンカーは、後記の式ＩＶで定義される１以上のＰＥＧ単位を含んでもよい。式中、ｎは１〜１０の整数である。
【００３９】
最も好ましいのは、式（Ｖ）及び（ＶＩ）で定義されるリンカーである。
【００４０】
【化１】
2007510643.tif 000002
部分Ｚは、分子量５０Ｄ（ダルトン）超、さらに好ましくは１００〜１０００Ｄ、さらに一段と好ましくは３００〜７００Ｄの非ペプチド部分を含む。得られる式（Ｉ）のターゲティング部分がＡＴ1受容体に対して天然リガンドＡｎｇＩＩよりも高い結合親和性を示すものであれば、部分Ｚは薬学的に許容されるどんな化学種でもよい。具体的には、Ｚは、リンカーＬと又は直接ペプチドＶと反応して安定な共有結合を形成し得る適当な官能基を有する有機基を表す。
【００４１】
Ｚは直鎖又は枝分れヒドロカルビル基であってもよく、適宜１以上の二重結合又は三重結合を含んでいてもよいし、適宜ハロゲン、酸素、リン原子の硫黄で置換されていてもよいし、適宜酸素、窒素、硫黄などのヘテロ原子を含んでいてもよい。具体的には、ヒドロカルビル基は、分子量５０Ｄ以上の分子量の置換又は非置換アルキル、アルケニル、アルキニル基であってもよい。
【００４２】
Ｚは単環式、二環式又は三環式環系を含む１以上の結合炭素環基であってもよく、かかる環系は飽和、部分不飽和又は芳香環のいずれでもよいし、置換又は非置換のいずれでもよく、分子量は５０Ｄ以上である。かかる環系の例は、アリール、アラルキル、シクロヘキシル、アダマンチル及びナフチルである。
【００４３】
Ｚは五、六、七、八、九、十員環系のような１以上の結合複素環化合物であってもよく、かかる環系は単環式、二環式又は三環式環系のいずれでもよいし、１以上のＮ、Ｏ、Ｓ及びＰをヘテロ原子として含んでいてもよい。かかる環系はさらに、前記のヒドロカルビル基及び炭素環基と結合していてもよいし、炭素環基と縮合していてもよい。かかる基の例は、アクリジニル、ベンゾフラニル、インドリル、ピリジル、ピペリジニル、モルホリジニル及びチエニルである。
【００４４】
Ｚはさらに、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及びポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）のようなポリアルキレングリコール、単糖、多糖のような炭水化物であってもよく、これらはすべて５０Ｄ超の分子量を有する。ポリアルキレングリコールはバイオモディファイヤーとして作用するものでもよい。
【００４５】
具体的には、Ｚは、例えば米国特許第４６４７４４７号（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧ）及び国際公開第８６／０２８４１号（Ｎｙｃｏｍｅｄ  Ｓａｌｕｔａｒ，Ｉｎｃ．）に記載の非環式又は環式ポリアミノカルボキシレート（例えばＤＴＰＡ、ＤＴＰＡ−ＢＭＡ、ＤＯＴＡ及びＤＯ３Ａ）のようなキレート剤を表し、これらの開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。その他のキレート剤として、国際公開第０１／７７１４５号（この文献の表Ｉ参照）に記載のジアミンジチオールのようなアミンチオール、アミンオキシム、ヒドラジン及び関連試薬を含んでいてもよく、その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。式（ＶＩＩＩ）のキレート剤ｃＰＮ２１６が特に好ましい。
【００４６】
治療に有用な医薬品には、Ｚは前述の通りどんなものでもよい。
【００４７】
診断、特にインビボ診断に有用な医薬については、部分Ｚは、Ｍで表す造影性基を保有できるものでなければならない。保有とは、化学結合（例えば共有結合、電気原子価結合又はイオン結合）又は吸着その他の種類の会合など、成分ＺとＭとのあらゆる形態の結合を意味する。
【００４８】
Ｚはどのような造影性基であってもよい。Ｍが金属である場合、Ｙ1はキレート剤を表す。Ｚ及び／又はＹ1Ｍの性状は、診断に利用される画像モダリティに依存する。Ｚ及び／又はＹ1Ｍはインビボ画像診断で直接又は間接的に検出できるものでなければならず、例えば、検出可能な放射線を放射もしくは（放射性崩壊、蛍光励起、スピン共鳴励起などによって）放射し得る成分、局所的電磁場に影響を与える成分（例えば、常磁性、超常磁性、フェリ磁性もしくは強磁性種）、放射線エネルギーを吸収又は散乱する成分（例えば、発色団、粒子（気体又は液体含有ベシクルを含む）、重元素及びその化合物など）、並びに検出可能な物質を生成する成分（例えば、気体マイクロバブル発生剤）などである。
【００４９】
好ましい一実施形態では、Ｚ基はＸ1と直接に共有結合してＮ−アルキルグリシン単位を形成する。
【００５０】
後記の式（ＶＩＩ）及び（ＶＩＩＩ）のキレート剤も特に好ましい。
【００５１】
多種多様な適当な造影性基が知られており、例えば国際公開第９８／１８４９６号に記載されており、その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。
【００５２】
以下、画像モダリティ及び造影性基Ｚ及びＭに関してさらに詳しく説明する。
【００５３】
第一の実施形態では、式（Ｉ）の化合物が、放射線及びＳＰＥＣＴ画像モダリティに有用な１以上の造影性基Ｍを保有する部分Ｙ1を含む。好ましくは、Ｍはα線及びβ線をほとんど或いは全く放射しない半減期１時間以上のγ放射体である。好ましいＭ基は、放射性核種67Ｇａ、111Ｉｎ、123Ｉ、125Ｉ、131Ｉ、81mＫｒ、99Ｍｏ、99mＴｃ、201ＴＩ及び133Ｘｅである。最も好ましいのは99mＴｃである。
【００５４】
Ｍは、イメージング及び治療の両用途において、以下に挙げる同位体又は同位体対であってもよく、放射性標識法又はキレート剤を変更する必要はない：47Ｓｃ21、141Ｃｅ58、188Ｒｅ75、177Ｌｕ71、199Ａｕ79、47Ｓｃ21、131Ｉ53、67Ｃｕ29、131Ｉ53と123Ｉ53、188Ｒｅ75と99mＴｃ43、90Ｙ39と87Ｙ39、47Ｓｃ21と44Ｓｃ21、90Ｙ39と123Ｉ53、146Ｓｍ62と153Ｓｍ62、及び90Ｙ39と111Ｉｎ49。
【００５５】
Ｍが金属放射性核種を表す場合、Ｙ1は、Ｍとの安定キレートの形成に適したキレート剤を表す。かかるキレート剤は当技術分野で周知であり、かかるキレート剤の典型例は国際公開第０１／７７１４５号の表Ｉに記載されている。
【００５６】
特に好ましいのは、次の式（ＶＩＩ）のキレート剤である。
【００５７】
【化２】
2007510643.tif 000003
式中、
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は各々独立にＨ又はＣ1〜10アルキル、Ｃ3〜10アルキルアリール、Ｃ2〜10アルコキシアルキル、Ｃ1〜10ヒドロキシアルキル、Ｃ1〜10アルキルアミン、Ｃ1〜10フルオロアルキルであるか、或いは２以上のＲ基がそれらに結合した原子と共に炭素環、複素環、飽和又は不飽和環を形成するものである。
【００５８】
特に好ましいのは、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3が水素又はメチル基であり、Ｒ4がアルキルアミン基である式（ＶＩＩ）のキレート剤であり、特に次の式（ＶＩＩＩ）の化合物（本明細書ではｃＰＮ１２６という。）である。
【００５９】
【化３】
2007510643.tif 000004
Ｙ1についは最も好ましいのは、キレートがｃＰＮ２１６のとき造影性基Ｍは99mＴｃである。
【００６０】
式（ＶＩＩ）及び（ＶＩＩＩ）のキレート剤の合成は国際公開第０３／００６０７０号に記載されている。
【００６１】
他の好ましいキレート剤は次の式（ＸＩ）のキレート剤である。
【００６２】
【化４】
2007510643.tif 000005
式中、Ｑ1〜Ｑ6は独立にＱ基であって、ＱはＨ、アルキル、アリール又はアミン保護基である。
Ｗ1は、−ＮＲ−、−ＣＯ2−、−ＣＯ−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｓ）−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｏ）−、−ＣＯＮＲ−又はＱ基であり、
各Ｙは独立にＤ−もしくはＬ−アミノ酸、−ＣＨ2−、−ＣＨ2ＯＣＨ2−又は−ＯＣＨ2ＣＨ2Ｏ−、或いはＸ基であり、
ｐは１〜８の整数であり、
ｑは０〜３０の整数であり、
Ｒは、Ｈ、Ｃ1〜4アルキル、Ｃ2〜4アルコキシアルキル、Ｃ1〜4ヒドロキシアルキル又はＣ1〜4フルオロアルキルであり、
Ｑは次式の基であり、
【００６３】
【化５】
2007510643.tif 000006
Ａは対イオンである。
【００６４】
式（ＸＩ）のテトラアミンキレート剤の合成は、英国特許出願第０４１６０６２．８号に記載されている。
【００６５】
123Ｉ、125Ｉ及び131Ｉのような非金属放射性核種は、当技術分野で周知の置換又は付加反応によって、Ｌ基（存在する場合）又はＸ1に共有結合させることができる。
【００６６】
第二の実施形態では、式（Ｉ）の化合物が、ＰＥＴ画像モダリティに有用な部分Ｚを含む。この場合、Ｚは陽電子放出性をもつ放射体を表す。好ましい基Ｚは、放射性核種11Ｃ、18Ｆ、68Ｇａ、13Ｎ、15Ｏ及び82Ｒｂである。18Ｆが特に好ましい。キレート剤Ｙ1でキレート化された金属放射線放出体82Ｒｂ及び68Ｇａも好ましい。
【００６７】
チオール結合化学反応、18Ｆシントン及びチオール結合化学反応を用いて調製される標識ペプチドは、国際公開第０３／０８０５４４号に記載されており、その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。
【００６８】
チオール結合化学反応を用いた標識ペプチドの詳細は、英国特許出願第０３１７８１５．９号に記載されており、その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。
【００６９】
Ｍが金属放射性核種を表すとき、Ｙ1はＭとの安定キレートの形成に適したキレート剤を表す。かかるキレート剤は当技術分野で周知であり、かかるキレート剤の代表例は国際公開第０１／７７１４５号の表Ｉ、さらに上述の放射線及びＳＰＥＣＴイメージングに関する説明に記載されている。
【００７０】
別の好ましい実施形態では、Ｙ1はＤＯＴＡキレート剤であり、Ｍは68Ｇａであってマイクロ波化学で容易にキレート剤に導入し得る。
【００７１】
13Ｆのような非金属放射性核種は、当技術分野で周知の置換又は付加反応によってＬ基（存在する場合）又はＸ1に共有結合させることができ、例えば国際公開第０３／０８０５４４にも記載されており、その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。
【００７２】
第三の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、ＭＲ画像モダリティに有用な１以上の造影性基Ｍを保有した部分Ｙ1を含む。この場合、Ｍは米国特許第４６４７４４７号に記載されているような常磁性金属を表し、Ｇｄ3+、Ｄｙ3+、Ｆｅ3+及びＭｎ2+が特に好ましい。Ｙ1はキレート剤、特に米国特許第４６４７４４７号及び国際公開第８６／０２８４１号に記載されているような非環式又は環式ポリアミノカルボキシレートのようなキレート剤（例えばＤＴＰＡ、ＤＴＰＡ−ＢＭＡ、ＤＯＴＡ及びＤＯ３Ａ）を表す。また、Ｍは、超常磁性種、フェリ磁性種又は強磁性種のような金属酸化物であってもよく、これらは例えばＺが金属酸化物のコーティングとして機能するようにＺに吸着される。ＭＲ造影剤として用いられる金属酸化物は、例えば米国特許第６２３０７７７号に記載されており、その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。
【００７３】
第四の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、Ｘ線画像モダリティに有用な１以上の造影性基Ｍを保有する部分Ｙ1を含む。こ場合、ＭはＷ、Ａｕ及びＢｉのような重金属であり、好ましくは酸化物の形態であって、Ｚに吸着し得るものである。Ｚは、Ｘ線造影剤として周知のヨウ素化アリール誘導体、例えばＩｏｐａｍｉｒｏｎ（商標）及びＯｍｎｉｐａｑｕｅ（商標）であってもよい。これらの造影剤は、それらのアミド又はアミン官能基を介して式（Ｉ）のペプチドＶに結合させることができる。
【００７４】
他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物はガス充填マイクロベシクルの形態のＺを含む。かかる超音波造影剤は受容体のイメージングに利用することができ、例えば国際公開第９８／１８５００号のような従来技術に記載の通り、官能化してペプチドに結合させればよい。
【００７５】
本発明の第六の実施形態では、式（Ｉ）の部分Ｚは、光学イメージング法で直接又は間接的に検出し得る基であってもよい。検出性基は、光散乱体（例えば着色又は無着色粒子）、光吸収体又は光放射体とし得る。さらに好ましくは、Ｚは発色団又は蛍光化合物のような色素である。Ｚ基は紫外乃至近赤外域の波長を有する電磁スペクトルの光と相互作用する色素であればよい。最も好ましくはＺは蛍光特性を有する。
【００７６】
好ましい有機色素部分としては、広く非局在化した電子系を有する基、例えばシアニン、メロシアニン、インドシアニン、フタロシアニン、ナフタロシアニン、トリフェニルメチン、ポルフィリン、ピリリウム色素、チアピリリウム色素、スクアリリウム色素、クロコニウム色素、アズレニウム色素、インドアニリン、ベンゾフェノキサジニウム色素、ベンゾチアフェノチアジニウム色素、アントラキノン、ナフトキノン、インダスレン、フタロイルアクリドン、トリスフェノキノン、アゾ色素、分子内及び分子間電荷移動色素及び色素鎖体、トロポン、テトラジン、ビス（ジチオレン）鎖体、ビス（ベンゼン−ジチオレート）鎖体、ヨードアニリン色素、ビス（Ｓ，Ｏ−ジチオレン）鎖体が挙げられる。蛍光タンパク質、例えば緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）及び吸収／発光特性の異なるＧＦＰの修飾物も有用である。ある種の希土類金属（例えばユーロピウム、サマリウム、テルビウム又はジスプロシウム）の鎖体も、蛍光ナノ結晶（量子ドット）のような特定の状況で用いられる。
【００７７】
光学イメージング法に適した基の詳細は、ノルウェー特許出願第２００３０３１１５号に記載されており、その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。
【００７８】
式（Ｉ）の医薬品は、ポリアルキレングリコール単位、例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）などの１以上のバイオモディファイヤー基の結合によってさらに修飾し得る。バイオモディファイヤー基の具体例は、国際公開第０３／００６４９１号に記載されており、その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。目標とする受容体に結合する式（Ｉ）の化合物の能力に悪影響を与えない限り、バイオモディファイヤー基は、式（Ｉ）の化合物の任意の位置に結合させることができる。
【００７９】
バイオモディファイヤーは、好ましくは単分散ＰＥＧ構成ブロックを１〜１０単位含むもので、医薬品の薬物動態及び血液クリアランス速度を変化させる機能をもつ。本発明の好ましい一実施形態では、以下の式ＩＶの化合物は、単分散ＰＥＧ様構造の重合で得られるバイオモディファイヤー単位、１７−アミノ−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５−テトラオキサヘプタデカン酸を表す。
【００８０】
【化６】
2007510643.tif 000007
式中、ｎは１〜１０の整数に等しく、Ｃ末端の単位はアミド結合を形成する。
【００８１】
式（Ｉ）の医薬品の具体例としては以下のものが挙げられる。
【００８２】
次の式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の化合物：
Ｚ−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ2）m−Ｘ1−Ｘ2−Ｖａｌ−Ｔｙｒ-Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｘ3  （ＩＩ）
Ｚ−ＣＯ−（ＣＨ2）m−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ2）m−Ｘ1−Ｘ2−Ｖａｌ−Ｔｙｒ-Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｘ3  （ＩＩＩ）
式中、ｍは１〜５の整数であり、Ｚ、Ｘ1、Ｘ2及びＸ3は上記で定義した通りである。
【００８３】
式Ｖａ及びＶＩａによって定義される化合物：
【００８４】
【化７】
2007510643.tif 000008
式中、Ｚ及びＶは上記で定義した通りである。
【００８５】
式（ＩＸ）の化合物：
【００８６】
【化８】
2007510643.tif 000009
式中、Ｙ2はアルキル、アリール又は短鎖ＰＥＧ含有基であり、Ｙ2は好ましくは−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−であり、Ｘ3は上記で定義した通りである。
【００８７】
式（Ｉ）の医薬品の好ましい例は、以下の式で表される。
【００８８】
ｃＰＮ２１６−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−ＯＨ
ｃＰＮ２１６−Ｇｌｙ−ＭｅＡｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ
ｃＰＮ２１６−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｂｉｐ−ＯＨ
Ｎ−（（ＣＨ2）6−テトラアミン）−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−ＯＨ
前述の通り、インビボ診断用には、これらの化合物と99mＴｃ又は18Ｆとのキレートが特に好ましい。
【００８９】
特に好ましいのは、化合物ｃＰＮ２１６−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−ＯＨ（化学構造は式（Ｘ）で示す）及びこの化合物と99mＴｃとのキレートである。
【００９０】
【化９】
2007510643.tif 000010
特に好ましいのは、化合物Ｎ−（（ＣＨ2）6−テトラアミン）−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−ＯＨ（構造は式（ＸＩＩ）で示す）及びこの化合物と99mＴｃとのキレートである。
【００９１】
【化１０】
2007510643.tif 000011
式（Ｉ）の医薬品は、好ましくは、式（Ｉ）の化合物を、ヒトのような哺乳類への投与に適した形態で含む医薬組成物として投与される。
投与は、好適には水溶液の製剤の注射又は輸液によって実施される。製剤は、薬学的に許容される１種以上の添加剤及び／又は賦形剤、例えば緩衝液、可溶化剤（例えば、シクロデキストリン、又はＰｌｕｒｏｎｉｃ、Ｔｗｅｅｎ、リン脂質などの界面活性剤）を含んでいてもよい。さらに、安定剤又は酸化防止剤（アスコルビン酸、ゲンチシン酸、パラアミノ安息香酸など）、又は凍結乾燥用構造形成剤（塩化ナトリウムやマンニトール）を添加してもよい。
【００９２】
本発明の一態様では、式（Ｉ）の医薬品は治療及び治療のモニタリングに有用である。心不全その他の繊維化の顕著な疾患、具体的にはＣＯＰＤ、肝線維症及びアテローム性動脈硬化症の治療の経過のモニタリングでは、治療中の患者に式（Ｉ）の医薬品を投与し、次いで患者又はその一部の画像を生成する。
【００９３】
さらに別の態様では、ペプチド−キレートコンジュゲート及び還元剤を含む式（Ｉ）の放射性医薬組成物の調製用キットが提供される。好ましくは、キットの還元剤は第一スズ塩である。キットはさらに、１種以上の安定剤、抗酸化剤、凍結乾燥用構造形成剤及び可溶化剤を含んでいてもよい。
【００９４】
医薬品及びその前駆体の調製のための一般手順
用いる略号は以下の意味を有する。
Ｆｍｏｃ：９−フルオレニルメトキシカルボニル
Ｂｏｃ：ｔ−ブチロキシカルボニル
ｔＢｕ：ｔ−ブチル
Ｔｒｔ：トリチル
Ｐｍｃ：２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＨＢＴＵ：Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド
ＮＭＰ：Ｎ−メチルピロリドン
ＴＩＳ：トリイソプロピルシラン
ＮＨＳ：Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル
ＮＭＭ：Ｎ−メチルモルホリン
ＲＰ−ＨＰＬＣ：逆相高速液体クロマトグラフィー
Ｗａｎｇ樹脂：ｐ−ベンジルオキシベンジルアルコール樹脂。
【００９５】
Ｖの合成：
本発明のペプチドは、あらゆる公知の化学合成法で合成できるが、特に有用な方法は自動ペプチド合成装置を用いたＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄの固相法である（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８５：２１４９（１９６４））。典型的には、所望の配列を固相ペプチド合成で構築する。本発明の実施例で用いた合成法の標準的手順は、Ｅ．Ａｔｈｅｒｔｏｎ  ＆  Ｒ．Ｃ．Ｓｈｅｐｐａｒｄ，  “Ｓｏｌｉｄ  ｐｈａｓｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：  ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ，  １９８９，  ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｏｘｆｏｒｄに記載されている。
【００９６】
例えば、酸不安定リンカー基を有する樹脂を用いて、これに、所望のアミノ保護Ｃ末端アミノ酸残基をエステル化したものを結合させる。次いでアミノ保護基を除き、適当な縮合試薬を用いて配列の第２のアミノ酸をカップリングさせる。一時的なアミノ保護基と官能性側鎖のための永続的な保護基をもつアミノ酸を使用する。次にアミノ脱保護とカップリングのサイクルを目的配列が構築されられるまで交互に繰り返す。
【００９７】
別法として、ペプチドＶは、全体的な又は最小限の保護戦略を用いて、当技術分野で公知の溶液ペプチド合成法によって、カルボキシル末端から段階的に及び／又はセグメント縮合もしくはライゲーション法を用いて合成することもできる。溶液−固相セグメント縮合法の組合せを利用することもできる。
【００９８】
一般に、反応性側鎖基（例えばアミノ、ヒドロキシル、グアニジノ及びカルボキシル基）は、上述の通り合成の全期間にわたって保護される。アミノ酸に対する保護基については幅広い選択肢が知られている（例えばＧｒｅｅｎｅ，  Ｔ．Ｗ．  ＆  Ｗｕｔｓ，  Ｐ．Ｇ．Ｍ．  （１９９１）  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ参照）。使用し得るアミノ保護基としては、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）及びｔ−ブチロキシカルボニル（Ｂｏｃ）が挙げられる。使用し得る側鎖保護基としては、ｔ−ブチル（ｔＢｕ）、トリチル（Ｔｒｔ）、Ｂｏｃ及び２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル（Ｐｍｃ）が挙げられる。かかる保護基としてその他多種多様なものが当技術分野で公知である。
【００９９】
最後に、永続的な側鎖保護基を除去するとともにペプチドを樹脂から切断するが、通常は、例えばトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）のような適当な酸性試薬での処理によって同時に行われる。
【０１００】
ＬとＶのカップリング
Ｌは公知の化学合成法を用いてＶに結合させることができる。特に有用なものは、ペプチドＮ末端の脱離基をＬの求核基で置換する求核置換反応である。かかる脱離基は、α位でカルボニル基に結合した臭素とすることができ、求核基は窒素とすることができる。
【０１０１】
ＺとＶ又はＬとのカップリング
Ｚは、ＬとＶとの結合法と同様の方法を用いてＶに直接に結合させることができる。ＺがＬを介してＶに連結する場合、ＺとＬの結合にはあらゆる化学合成法を使用できる。特に有用なものはアミド結合の形成である。
【実施例】
【０１０２】
実施例１
光学イメージング用色素を有するＡｎｇＩＩアナログ
フルオレセイン−ＮＨ−（ＣＨ2）2−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−ＯＨ
０．１ｍｍｏｌ  Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｗａｎｇ樹脂から出発して、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ４３３Ａ型ペプチド合成装置でＡｎｇＩＩのペプチドアナログを合成した。Ａｒｇまでのカップリング段階には、（Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）を用いて）予め活性化したアミノ酸を過剰の１ｍｍｏｌを用いた。Ｎ末端を、ＤＭＦ中の０．５ｍｍｏｌ無水ブロモ酢酸を用いて３０分間ブロモアセチル化した。このブロモアセチル化樹脂を次いで、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）に溶解した０．５ｍｍｏｌ  Ｎ−Ｂｏｃ−エチレンジアミン溶液で３０分間処理した。トリイソポロピルシラン（ＴＩＳ）２．５％及び水２．５％を含むＴＦＡ５ｍＬ中で、側鎖保護基の除去と樹脂からのペプチドの切断を同時に２時間実施した。ＴＦＡを真空で除去し、残留物にジエチルエーテルを加え、沈殿したペプチドをジエチルエーテルで洗浄し、風乾した。
【０１０３】
粗ペプチド２３ｍｇ、フルオレセインＮＨＳエステル１６ｍｇ及びＮ−メチルモルホリン（ＮＭＭ）１２μＬをジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶解し、反応混合物を一晩撹拌した。調製用ＲＰ−ＨＰＬＣによる反応生成物の精製（条件：５〜５０％Ｂ（４０分）、Ａ＝Ｈ2Ｏ／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ3ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、流量１０ｍＬ／分、カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  Ｃ１８（２）２５０×２１．２０ｍｍ）で、純粋なフルオレセイン−ペプチドコンジュゲート１９ｍｇが得られた。このペプチドを分析ＨＰＬＣによって分析した（条件：勾配５〜５０％Ｂ（１０分）、Ａ＝Ｈ2Ｏ／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ3ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、流量１ｍＬ／分、カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）５０×４．６ｍｍ、検出ＵＶ２１４ｎｍ、生成物保持時間８．９１分）。エレクトロスプレー質量分析を用いて生成物のキャラクタリゼーションをさらに行った（計算値：ＭＨ+  １３５５．６、実測値：ＭＨ+  １３５５．２）。
【０１０４】
同様の方法で、Ｃｙ５．５  ＮＨＳエステル（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社から市販の色素）を用いて、色素−ペプチドコンジュゲートＣｙ５．５−ＮＨ−（ＣＨ2）2−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−ＯＨを合成することもできる。
【０１０５】
実施例２
ＰＥＴイメージング用の18Ｆを有するＡｎｇＩＩアナログ
18Ｆ−（ＣＨ2）3−Ｓ−ＣＨ2ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ2）2−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−ＯＨ
０．１ｍｍｏｌ  Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｗａｎｇ樹脂から出発して、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ４３３Ａ型ペプチド合成装置でＡＴＩＩのペプチドアナログを合成する。アルギニンまでのカップリング段階には、（ＨＢＴＵを用いて）予め活性化したアミノ酸を過剰の１ｍｍｏｌを用いる。Ｎ末端を、ＤＭＦ中の０．５ｍｍｏｌ無水ブロモ酢酸を用いて３０分間ブロモアセチル化する。このブロモアセチル化樹脂を次いで、ＮＭＰに溶解した０．５ｍｍｏｌ  Ｎ−Ｂｏｃ−エチレンジアミン溶液で３０分間処理する。
【０１０６】
ＴＩＳ２．５％及び水２．５％を含むＴＦＡ１０ｍＬ中で、側鎖保護基の除去と樹脂からのペプチドの切断を同時に２時間実施する。ＴＦＡを真空で除去し、残留物にジエチルエーテルを加え、沈殿したペプチドをジエチルエーテルで洗浄し、風乾する。
【０１０７】
この粗ペプチドを、ＤＭＦに溶解した無水クロロ酢酸１当量で３０分間処理する。このクロロアセチル化ペプチドを調製用ＲＰ−ＨＰＬＣを用いて精製する。純粋なクロロアセチル化ペプチドに18Ｆ−プロピルチオールを結合させて、18Ｆ標識ＰＥＴイメージング用ペプチドを得る。
【０１０８】
実施例３
99mＴｃ標識用のＡｎｇＩＩアナログ
ｃＰｎ２１６−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−ＯＨ
【０１０９】
【化１１】
2007510643.tif 000012
０．１ｍｍｏｌ  Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｗａｎｇ樹脂から出発して、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ４３３Ａ型ペプチド合成装置でＡｎｇＩＩのペプチドアナログを合成した。アルギニンまでのカップリング段階には、（ＨＢＴＵを用いて）予め活性化したアミノ酸を過剰の１ｍｍｏｌを用いた。Ｎ末端を、ＤＭＦ中の０．５ｍｍｏｌ無水ブロモ酢酸を用いて３０分間ブロモアセチル化した。このブロモアセチル化樹脂を次いで、ＤＭＦに溶解した０．２ｍｍｏｌ  ｃＰｎ２１６及び０．４ＮＭＭの溶液で１６時間処理した。
【０１１０】
ＴＩＳ５％、水５％及びフェノール２．５％を含むＴＦＡ５ｍＬ中で、側鎖保護基の除去と樹脂からのペプチドの切断を同時に２時間実施した。ＴＦＡを真空で除去し、残留物にジエチルエーテルを加え、沈殿した生成物をジエチルエーテルで洗浄し、風乾した。
【０１１１】
調製用ＲＰ−ＨＰＬＣによる生成物の精製（０〜３０％Ｂ（４０分）、Ａ＝Ｈ2Ｏ／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ3ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、流量１０ｍＬ／分、カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  Ｃ１８（２）２５０×２１．２０ｍｍカラム）で、純粋なキレート−ペプチドコンジュゲート１２ｍｇが得られた。この生成物を分析ＨＰＬＣによって分析した（条件：勾配５〜５０％Ｂ（１０分）、Ａ＝Ｈ2Ｏ／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ3ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、流量２ｍＬ／分、カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）５０×４．６ｍｍ、検出ＵＶ２１４ｎｍ、生成物保持時間７．０２分）。エレクトロスプレー質量分析を用いて生成物のキャラクタリゼーションをさらに行った（計算値：ＭＨ+  １２８０．８、実測値：ＭＨ+  １２８０．５）。
【０１１２】
実施例４
99mＴｃ標識用のＡｎｇＩＩアナログ
ｃＰｎ２１６−ＣＯ−（ＣＨ2）3ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ2）2−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−ＯＨ
０．１５ｍｍｏｌ  Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｗａｎｇ樹脂から出発して、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ４３３Ａ型ペプチド合成装置でＡｎｇＩＩのペプチドアナログを合成した。アルギニンまでのカップリング段階には、（ＨＢＴＵを用いて）予め活性化したアミノ酸を過剰の１ｍｍｏｌを用いた。Ｎ末端を、ＤＭＦ中の０．７５ｍｍｏｌ無水ブロモ酢酸を用いて３０分間ブロモアセチル化した。このブロモアセチル化樹脂を次いで、ＮＭＰに溶解した０．７５ｍｍｏｌ  Ｎ−Ｂｏｃ−エチレンジアミンの溶液で６０分間処理した。
【０１１３】
ＴＩＳ２．５％及び水２．５％を含むＴＦＡ１０ｍＬ中で、側鎖保護基の除去と樹脂からのペプチドの切断を同時に９０分間実施した。ＴＦＡを真空で除去し、残留物にジエチルエーテルを加え、沈殿した生成物をジエチルエーテルで洗浄し、風乾した。
【０１１４】
ペプチド５．５ｍｇ、ｃＰｎ２１６  テトラフルオロチオフェニルエステル２３ｍｇ及びＮＭＭ１０μＬをＤＭＦに溶解し、反応混合物を３時間撹拌した。調製用ＲＰ−ＨＰＬＣによる生成物の精製（条件：０〜３０％Ｂ（４０分）、Ａ＝Ｈ2Ｏ／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ3ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、流量１０ｍＬ／分、カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  Ｃ１８（２）２５０×２１．２０ｍｍ）で、純粋なキレート−リンカー−ペプチドコンジュゲート４．３ｍｇが得られた。この生成物を分析ＨＰＬＣによって分析した（条件：勾配５〜５０％Ｂ（１０分）、Ａ＝Ｈ2Ｏ／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ3ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、流量０．３ｍＬ／分、カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）５０×２ｍｍ、検出ＵＶ２１４ｎｍ、生成物保持時間６．５１分）。エレクトロスプレー質量分析を用いて生成物のキャラクタリゼーションをさらに行った（計算値：ＭＨ+  １４３６．９、実測値：ＭＨ+  １４３６．７）。
【０１１５】
実施例５
心筋梗塞（ＭＩ）後のブタモデルにおける抗不整脈薬効果
医薬品ｃＰｎ２１６−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−ＯＨ（Ｘ）を以下の手順で検討した。
【０１１６】
ブタに麻酔をかけ、陽圧式人工呼吸器をつけた。胸骨正中切開及び心膜の除去によって心臓へのアクセスを得た。第２枝の上方での結紮によってＬＡＤ動脈を閉塞し、側副動脈側枝の１つも閉塞した。これによって頻繁な心室性期外収縮が起きたが、これは、同じタイプの施術を行った従前の実験から数分以内に心室頻拍及び細動へと進行することが知られている。式（Ｘ）の化合物０．５ｍｇの静脈内注射後数分以内に、状態は完全に安定し、洞調律に復帰した。平均血圧の初期上昇が観察された。約１５分後に再び心室性期外収縮が徐々に現れ、式（Ｘ）の化合物０．５ｍｇを新たに注射した。再び状態は安定化し、正常洞調律に復帰した。次の１時間の間、安定した洞調律、若干低いが一定の十分な血圧が記録された。次いでブタに致死量の塩化カリウムを与えて、実験を終了した。１回目の化合物（Ｘ）の注射の前後のＥＣＧ記録の解析から、ＱＲＳ波の持続時間の短縮がみられ、抗不整脈作用が心筋伝導速度の増大と関係している可能性を示唆している。
【０１１７】
第２のブタ実験でも同様の結果が観察された。
【０１１８】
以上から、この施術において、式（Ｘ）の化合物が抗不整脈薬として作用することが明らかである。
【０１１９】
実施例６
Ｎ−（（ＣＨ2）6−テトラアミン）−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−ＯＨの合成
【０１２０】
【化１２】
2007510643.tif 000013
Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法を用いて、０．２５ｍｍｏｌ  Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｗａｎｇ樹脂から出発して、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ４３３Ａ型ペプチド合成装置でペプチド配列Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅを合成した。カップリング段階では、Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）を用いて予め活性化したアミノ酸を過剰の１ｍｍｏｌを用いた。遊離Ｎ末端を、ジメチルホルムアミド中の１ｍｍｏｌ無水ブロモ酢酸溶液を用いて３０分間ブロモアセチル化した。このブロモアセチル化樹脂（０．０５ｍｍｏｌ）を次いで、ジメチルホルムアミドに溶解した０．１５ｍｍｏｌテトラ−Ｂｏｃ−テトラアミンキレートの溶液で６０分間処理した。
【０１２１】
トリイソポロピルシラン２．５％及び水２．５％を含むトリフルオロ酢酸５ｍＬ中で、側鎖保護基の除去と樹脂（０．０２５ｍｍｏｌ）からのペプチドの切断を同時に９０分間実施した。トリフルオロ酢酸を真空で除去し、残留物にジエチルエーテルを加え、沈殿物をジエチルエーテルで洗浄し、風乾して、粗生成物２５ｍｇを得た。
【０１２２】
調製用ＲＰ−ＨＰＬＣによる粗生成物２５ｍｇの精製（０〜３０％Ｂ（４０分）、Ａ＝Ｈ2Ｏ／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ3ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、流量１０ｍＬ／分、カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  Ｃ１８（２）２５０×２１．２０ｍｍカラム）で、粗生成物６．５ｍｇが得られた。粗生成物の第２の精製段階（Ａ＝Ｈ2Ｏ／０．１％ＨＣＯＯＨ及びＢ＝ＣＨ3ＣＮ／０．１％ＨＣＯＯＨ、他は上記と同じ条件）で、純粋生成物３ｍｇが得られた。この生成物を分析ＨＰＬＣによって分析した（条件：勾配０〜３０％Ｂ（１０分）、Ａ＝Ｈ2Ｏ／０．１％ＨＣＯＯＨ及びＢ＝ＣＨ3ＣＮ／０．１％ＨＣＯＯＨ、流量０．３ｍＬ／分、カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）５０×２ｍｍ、検出ＵＶ２１４ｎｍ、生成物保持時間５．３４分）。エレクトロスプレー質量分析を用いて生成物のキャラクタリゼーションをさらに行った（計算値：ＭＨ+  １１９６．８、実測値：ＭＨ+  １１９６．７）。
【０１２３】
実施例７
Ｈｃｙ３−５；Ｎ−ｃＰｎ２１６−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｈｃｙ−Ｔｙｒ−Ｈｃｙ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−ＯＨの合成
【０１２４】
【化１３】
2007510643.tif 000014
Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法を用いて、０．２５ｍｍｏｌ  Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｗａｎｇ樹脂から出発して、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ４３３Ａ型ペプチド合成装置でペプチド配列Ａｒｇ−Ｈｃｙ−Ｔｙｒ−Ｈｃｙ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅを合成した。カップリング段階では、Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）を用いて予め活性化したアミノ酸を過剰の１ｍｍｏｌを用いた。遊離Ｎ末端を、ジメチルホルムアミド中の１ｍｍｏｌ無水ブロモ酢酸溶液を使用し３０分間ブロモアセチル化した。このブロモアセチル化樹脂（０．０５ｍｍｏｌ）を次いで、ジメチルホルムアミドに溶解した０．２５ｍｍｏｌ  ｃＰｎ２１６（99mＴｃ−キレート1）（1合成の詳細については国際公開第２００３／００６４９号参照）の溶液で６０分間処理した。
【０１２５】
トリイソポロピルシラン２．５％及び水２．５％を含むトリフルオロ酢酸１０ｍＬ中で、側鎖保護基の除去と樹脂からのペプチドの切断を同時に２時間２０分実施した。トリフルオロ酢酸を真空で除去し、残留物にジエチルエーテルを加え、沈殿物をジエチルエーテルで洗浄し、風乾して、線状粗生成物７０ｍｇを得た。
【０１２６】
調製用ＲＰ−ＨＰＬＣによる線状粗生成物の精製（５〜５０％Ｂ（４０分）、Ａ＝Ｈ2Ｏ／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ3ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、流量１０ｍＬ／分、カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  Ｃ１８（２）２５０×２１．２０ｍｍカラム）で、純粋な線状生成物２０ｍｇが得られた。この線状生成物を、ＤＭＳＯ２ｍＬ及び水２００ｍＬの溶液に溶解し、アンモニアを用いてこの溶液をｐＨ８に調整した。この溶液を２６時間撹拌し、次いでトリフルオロ酢酸を用いてｐＨ２に調整した。
【０１２７】
環状生成物の調製用ＲＰ−ＨＰＬＣによる精製（０〜３０％Ｂ、他は上記と同じ条件）で、純粋な環状生成物１２ｍｇが得られた。この生成物を分析ＨＰＬＣによって分析した（条件：勾配５〜５０％Ｂ（１０分）、Ａ＝Ｈ2Ｏ／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＣＨ3ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、流量０．３ｍＬ／分、カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）５０×２ｍｍ、検出ＵＶ２１４ｎｍ、生成物保持時間６．０１分）。エレクトロスプレー質量分析を用いて生成物のキャラクタリゼーションをさらに行った（計算値：ＭＨ+  １３００．７、実測値：ＭＨ+  １３００．６）。
【図面の簡単な説明】
【０１２８】
【図１】レニン−アンジオテンシン−アルドステロン系（ＲＡＡＳ）を示す図。
【図１】
2007510643.tif 000020
【配列表】
2007510643000001.app
【国際調査報告】
2007510643.tif 000021
2007510643.tif 000022
2007510643.tif 000023
2007510643.tif 000024
2007510643.tif 000025
2007510643.tif 000026
2007510643.tif 000027