(57)【要約】【課題】カルニチンアミド水溶液を保存する際に、凝集物や白濁を形成しないような保存方法を提供すること。【解決手段】  カルニチンアミド水溶液をｐＨ９以上に調整して保存することを特徴とする、カルニチンアミド水溶液の保存方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
カルニチンアミド水溶液をｐＨ９以上に調整して保存することを特徴とする、カルニチンアミド水溶液の保存方法。
【請求項２】
カルニチンアミドの濃度が０．２〜３０質量％である、請求項１記載の方法。
【請求項３】
ＮａＯＨ、ＫＯＨ、Ｃａ（ＯＨ）２、Ｎａ２ＣＯ３、ＮａＨＣＯ３、Ｋ２ＣＯ３、トリメチルアミン、トリエチルアミン及びアンモニアからなる群から選ばれる少なくとも１種を添加することによりｐＨを調整する、請求項１記載の方法。
【請求項４】
カルニチンアミド水溶液中に、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＣａＣｌ２、トリメチルアミン塩酸塩、トリエチルアミン塩酸塩、塩化アンモニウムの少なくとも一種の塩が存在する、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
塩濃度の合計がカルニチンアミド水溶液中０．０１〜２０質量％である、請求項４記載の方法。
【請求項６】
保存する際の温度が、反応液が凍らない温度〜４０℃である、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれかに記載の方法で保存したカルニチンアミドを加水分解することにより、カルニチンを得る方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カルニチンアミド水溶液の保存方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ベタインの一種であるＬ−カルニチンはビタミンＢＴとも呼ばれ、生体内で脂肪酸の代謝に関係している重要な化合物である。Ｌ−カルニチンは、心臓疾患治療剤（特許文献１）、過脂肪質血症治療剤（特許文献２）、静脈疾患治療剤等（特許文献３）としても注目されている。
これまでに報告されたカルニチンアミドを中間体とするカルニチンの製造方法について、以下のようなものがある。特許文献４には、カルニチンアミド塩化物を加温シュウ酸水溶液中で加水分解することによりカルニチンを得る方法、特許文献５には、カルニチンアミド塩化物を塩酸ガスの存在下で氷酢酸中で亜硝酸アルキルによりジアゾ化する方法でカルニチンを得る方法、特許文献６には、カルニチンアミドにアミダーゼを作用させて加水分解させ、カルニチンを得る方法、特許文献７には、カルニチンニトリルクロライドに塩基と水性過酸化水素を作用させてカルニチンアミド塩化物を得、引き続き塩基を作用させカルニチンを得る方法が記されている。
上記のように、カルニチンアミドはカルニチン製造における重要な中間体であるので、カルニチンを製造する前にカルニチンアミドの状態で保存することが多く、工程上水溶液の状態で保存する場合が特に多い。
カルニチンアミドは、水溶液の状態で保存しておくと、分解されたり、或いは何らかの作用で凝集物を形成したり、白濁したりする。凝集物や白濁は、カルニチンアミドをカルニチンに変換する際に、新たな不純物を生成する原因となったり、得られたカルニチンの結晶が着色したりするなどの問題を生じる。また、これらの凝集物や白濁を除去するためには、ろ過や遠心分離が必要で工程が煩雑になる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開昭５４−７６８３０号公報
【特許文献２】特開昭５４−１１３４０９号公報
【特許文献３】特開昭５８−８８３１２号公報
【特許文献４】特公昭４３−２６８４９号公報
【特許文献５】特公昭４３−２６８５０号公報
【特許文献６】特開昭６３−５６２９４号公報
【特許文献７】特開平０１−２８７０６５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、カルニチンの製造における重要な中間体であるカルニチンアミドについて、その水溶液が凝集物や白濁を形成しない保存方法について示した文献はない。
従って、本発明では、カルニチンアミド水溶液を保存する際に、凝集物や白濁を形成しないような保存方法を提供することを主な目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らが鋭意検討を重ねた結果、カルニチンアミド水溶液をｐＨ９以上に調整して保存することにより上記目的を達成できることを見出し、本発明を完成させるに至った。
【０００６】
すなわち、本発明は、カルニチンアミド水溶液をｐＨ９以上に調整して保存することを特徴とする、カルニチンアミド水溶液の保存方法に関する。
【０００７】
以下、本発明を詳細に説明する。
【０００８】
（１）カルニチンアミド
カルニチンアミドは、下記一般式で示されるように、分子がプラスの電荷を帯びており、通常固体状態ではハロゲン化物の状態で存在する。
【０００９】
【化１】
2011084529.tif 000002
ここで、Ｘはハロゲン原子を表す。ハロゲン原子としては、例えば、フッ素（Ｆ）、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）、ヨウ素（Ｉ）などが挙げられる。中でも、カルニチンアミドハロゲン化物の様々な前駆体の入手し易さの観点から、塩素であることが好ましい。
【００１０】
本発明で使用するカルニチンアミドハロゲン化物の製造方法としては、例えば、以下の方法を挙げることができる。
（i）カルニチンニトリルに塩基と過酸化水素とを作用させることにより、カルニチンアミドを得ることができる。この場合、前駆体のカルニチンニトリルは、４−ハロ−３−ヒドロキシブチロニトリルにトリメチルアミンを作用させることにより得ることができる（特開平１−２８７０６５号公報参照）。
（ii）Ｄ−樟脳酸−Ｌ−カルニチンアミドをイソプロピルアルコールに溶解させ、当該溶液に塩化水素ガスを通じることによってカルニチンアミドを得ることも可能である（特開昭５５−１３２９９号公報参照）。
（iii）ｐ−トルエンスルホン酸存在下、カルニチン塩酸塩をアルコール中で加熱することによりカルニチンエステルを合成し、続いてアンモニア水で処理することによって、カルニチンアミドを得ることも可能である。
（iv）４−ハロ−３−ヒドロキシブタンアミドにトリメチルアミンを作用させることにより、カルニチンアミドを得ることができる。この場合、前駆体の４−ハロ−３−ヒドロキシブタンアミドは、４−ハロ−３−ヒドロキシブチロニトリルを塩基触媒や酵素触媒を用いてアミド化することにより得ることができる。本発明では、当該方法で得られたカルニチンアミドハロゲン化物を使用するのが好ましい。当該方法によれば効率よくカルニチンアミドハロゲン化物が得られるからである。
【００１１】
本発明で使用するカルニチンアミドハロゲン化物は、上記のような製造方法で製造した反応終了液をそのまま用いても、精製したものを用いても、どちらでもよい。またカルニチンアミドハロゲン化物のＤ体またはＬ体のうちいずれか一方が他方よりも多く含まれている光学異性体でもよい。
一般に、カルニチンアミドハロゲン化物を製造するための出発化合物が光学純度を有していれば、光学活性体としてカルニチンアミドハロゲン化物を得ることができる。また、カルニチンアミドハロゲン化物のラセミ体から、光学分割剤を用いて光学活性体を得ることができる。その光学活性体をカルニチンアミドハロゲン化物のラセミ体に任意の量を混ぜることで、任意の光学純度を持った光学活性カルニチンアミドハロゲン化物を得ることもできる。
（２）カルニチンアミド水溶液
本発明の方法で保存するカルニチンアミド水溶液は、どのような方法で製造されたものでも使用することができる。
固体のカルニチンアミドハロゲン化物を水に溶解させて作ることもできるが、上述した方法により得られた水溶液となっているカルニチンアミドをそのまま使用するのが好ましく、その中でも（iv）の方法で得られたカルニチンアミド水溶液を使用するのがより好ましい。このとき、必要に応じて、不純物を除去するために精製を行ったり、カルニチンアミドを濃縮又は希釈したりしてもよい。
（２−１）ｐＨ
本発明においては、カルニチンアミド水溶液のｐＨは９以上に調整する。９以上に調整することにより、カルニチンアミド水溶液を保存した際に凝集物や白濁の形成を抑制することができるからである。好ましく９〜１１程度、より好ましくは９〜１０．５程度とすればよい。ｐＨの上限を１１以下とすることにより、カルニチンアミドの加水分解の進行を十分に後らせることができる。
本発明において、ｐＨを調整するために使用する塩基性物質としては、水溶液を塩基性にすることができれば限定されない。例えば、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、Ｃａ（ＯＨ）２、Ｎａ２ＣＯ３、ＮａＨＣＯ３、Ｋ２ＣＯ３、トリメチルアミン、トリエチルアミン及びアンモニアからなる群から選ばれる少なくとも１種である。添加量は、所望のｐＨが得られる限り限定されない。また、添加方法も限定されず、固体状態で添加してもよいし水溶液として添加することも可能である。さらに、必要に応じて当該水溶液を撹拌してもよい。
（２−２）濃度
カルニチンアミドの濃度は特に限定されない。例えば０．２〜３０質量％以下とすればよく、１〜２０質量％がより好ましい。０．２質量％とすることにより、保存すべき当該水溶液の量が多いために取り扱い性が悪くなることを防ぐことができる。また、３０質量％以下とすることにより、水溶液に粘性が生じて当該水溶液が取り扱い難くなることを避けることができるからである。
（２−３）保存温度
カルニチンアミド水溶液を保存する際の温度は特に限定されないが、４０℃以下とすればよい。４０℃以下とすることにより、凝集物や白濁の形成を抑制する効果が強くなるからである。反応液が凍らない温度〜４０℃程度で保存することが好ましく、反応液が凍らない温度〜３５℃程度がより好ましい。なお、カルニチンアミド水溶液は凝固点降下により０℃以下になっても凍らないが、カルニチンアミド水溶液の凝固点はカルニチンアミドの濃度によっても異なる。従って、保存するカルニチンアミド水溶液の濃度に応じて適宜選択すればよい。
（２−４）共存する塩
また、本発明で使用するカルニチンアミドは、上述したように製造の仕方によって様々な化合物と対塩を形成し、また様々な塩と共存する可能性が高い。共存する可能性のある塩は無限にあるが、その中でも、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＣａＣｌ２、トリメチルアミン塩酸塩、トリエチルアミン塩酸塩、塩化アンモニウム等がカルニチンアミドと共存する可能性が高い。
本発明においてはこれらの塩が共存していてもよく、その濃度はカルニチンアミドに対して３０〜６０質量％程度がよい。溶液に対する（カルニチン水溶液中の）濃度としては０．０１〜２０質量％以下が好ましく、０．０４〜１５質量％がより好ましい。０．０１質量％以上とするのは、凝集物や白濁の形成を抑制する効果があるからである。一方、２０質量％以下とするのは、カルニチンアミドが析出しやすくなるからである。
（３）カルニチンの製造
カルニチンアミドは、下記一般式（２）で示されるように、塩基触媒により加水分解されてカルニチンとなる。
【００１２】
【化２】
2011084529.tif 000003
ここで使用する塩基触媒としては、アルカリ金属水酸化物、アルカリ土類金属水酸化物、アルカリ金属の炭酸塩または重炭酸塩、第３級アミン、第４級アンモニウムヒドロキシド、塩基性陰イオン交換樹脂等であり、より詳細には、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、Ｃａ（ＯＨ）２、Ｎａ２ＣＯ３、ＮａＨＣＯ３、Ｋ２ＣＯ３、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ＮＨ４ＯＨ、陰イオン交換樹脂ＩＲＡ−４００などが挙げられる。これらは単独で用いても、２種類以上を組み合わせて用いてもよい。特に、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、Ｎａ２ＣＯ３、ＮａＨＣＯ３、Ｋ２ＣＯ３、トリメチルアミン水溶液及びアンモニア水溶液からなる群から選ばれる少なくとも一種を用いることが好ましい。比較的入手し易いからである。
カルニチンアミド水溶液を塩基性で保存すると、カルニチンへの加水分解反応はわずかながら進行する。カルニチンアミドはカルニチン製造における中間体であり、加水分解が進行してカルニチンが生成することは通常問題ない。カルニチンへの加水分解工程において副生するアンモニアは反応液を塩基性に保つ役割を果たすため、塩基性に保つことで加水分解が進行しても反応液が中性や酸性を呈することはなく、塩基性条件による水溶液の保存が可能である。また、ｐＨ９以上の塩基性下で保存した後に、さらに塩基性を強めて加水分解速度を速め、カルニチン水溶液を得ることができる。
塩基性水溶液中でカルニチンアミドを保存したのち、カルニチンアミドを加水分解してカルニチンを製造する際、溶媒としては特に制限はないが、カルニチンアミド水溶液を塩基性で保管した後、そのまま水溶液を塩基触媒で加水分解することが最も好ましい。
以上のようにして合成したカルニチンは、抽出、カラム分離、再結晶、電気透析、イオン交換法等の公知の方法により、単離精製することができる。また加水分解反応では、薄い褐色に着色することがある。また加水分解反応終了後の中和後にも着色することがある。この脱色のため、活性炭などによる脱色操作を行ってもよい。
【発明の効果】
【００１３】
本発明の方法によれば、長期にわたって、凝集物や白濁を形成させずにカルニチンアミド水溶液を保存することができる。また、本発明の方法によって保存されたカルニチンアミドを加水分解してカルニチンを製造する場合には、カルニチンの着色や精製過程での電気透析において膜が詰まる等の問題は生じない。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
＜実施例１＞
試験管にカルニチンアミドクロライド：１．７４ｇを入れ、水で薄めて全体を３０ｇにした。塩化物イオンを除いたカルニチンアミドの濃度は４．７５％となる。これに４％ＮａＯＨ水溶液を１ｍｌ加え、ｐＨ＝９．４とした。これを３０℃のインキュベーターに保管した。１４日後水溶液を顕微鏡で観察したところ、凝集物や白濁は観測されなかった。
＜実施例２＞
ＮａＣｌ：０．７５ｇを追加する他は、実施例１と同様にして３０℃のインキュベーターに保存した。ｐＨ＝９．３であった。１４日後水溶液を顕微鏡で観察したところ、凝集物や白濁は観測されなかった。
＜実施例３＞
トリメチルアミン塩酸塩：０．０３ｇを追加する他は、実施例２と同様にして３０℃のインキュベーターに保存した。このときの水溶液のｐＨは９．４であった。１４日後水溶液を顕微鏡で観察したところ、凝集物や白濁は観測されなかった。
＜実施例４＞
１０℃のインキュベーターに保存する以外は、実施例２と同様に実験を行った。１４日後水溶液を顕微鏡で観察したところ、凝集物や白濁は観測されなかった。
＜実施例５＞
４％ＮａＯＨ水溶液を２ｍｌ加え、ｐＨ＝１０．１とした以外は実施例１と同様にして、３０℃のインキュベーターに保存した。１４日後水溶液を顕微鏡で観察したところ、凝集物や白濁は観測されなかった。
＜実施例６＞
カルニチンアミドクロライド：３．５８ｇ（カルニチンアミド濃度）、４％ＮａＯＨ水溶液を１．５ｍｌ加え、ｐＨ＝９．６としたこと以外は実施例１と同様にして、３０℃のインキュベーターに保存した。１４日後水溶液を顕微鏡で観察したところ、凝集物や白濁は観測されなかった。
＜実施例７＞
５００ｍＬ三つ口フラスコにカルニチンアミドクロライド：１７．４ｇを入れ、水で薄めて全体を３００ｇにした。塩化物イオンを除いたカルニチンアミドの濃度は４．７５％となる。これに４％ＮａＯＨ水溶液を１０ｍｌ加え、ｐＨ＝９．４とした。これを３０℃のインキュベーターに保管した。１４日後水溶液を顕微鏡で観察したところ、凝集物や白濁は観測されなかった。
この水溶液に４８％ＮａＯＨ水溶液１４．７ｇを加え、４０℃に保って加水分解を行った。１４時間後、カルニチンアミドの転化率は１００％に達し、この時のカルニチンの収率は９８．２％、副生成物クロトノベタインの収率は０．９２％であることがわかった。
また、加水分解後の電気透析工程では膜が目詰まりを起こしたり、再結晶操作では取得した結晶が黄褐色に着色したりするという問題は生じなかった。
＜比較例１＞
ｐＨ＝６．５とする以外は実施例１と同様にして、３０℃のインキュベーターに保存した。３日後水溶液が白く濁っており、顕微鏡で観察したところ、凝集物と思われるものが観測された。
この水溶液に４８％ＮａＯＨ水溶液１．４７ｇを加え、４０℃に保って加水分解を行った。１５時間後、カルニチンアミドの転化率は１００％に達し、この時のカルニチンの収率は９７．２％、副生成物クロトノベタインの収率は０．８９％であることがわかった。
加水分解後の溶液は凝集物と思われるものはなくなり、水溶液はやや濁った透明になったが、その後の電気透析工程では膜が目詰まりを起こしたり、再結晶操作では取得した結晶が黄褐色に着色したりするなど、諸操作で問題が発生した。
実施例１〜７及び比較例１の結果を表１にまとめた。
【００１５】
【表１】
2011084529.tif 000004