(57)【要約】【課題】流路内を通流する試料を光学的に検出する技術において、解析方法の容易化および解析精度の向上が可能な技術を提供すること。【解決手段】本発明では、流路２を通流中の試料Ｓに対して光を照射する光照射手段１１と、該光照射手段１１による光照射によって、前記試料Ｓから発せられる光学的情報を検出する光検出手段１２と、該光検出手段１２により検出された光学的情報を音声情報に変換する音声変換手段１３と、が少なくとも備えられた光学的測定装置を提供する。【選択図】図１
2011095105.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
流路を通流中の試料に対して光を照射する光照射手段と、
該光照射手段による光照射によって、前記試料から発せられる光学的情報を検出する光検出手段と、
該光検出手段により検出された光学的情報を音声情報に変換する音声変換手段と、
が少なくとも備えられた光学的測定装置。
【請求項２】
前記光学的情報の検出時間長を所定の拡大率で拡大する時間軸変換手段が更に備えられた請求項１記載の光学的測定装置。
【請求項３】
複数の前記音声情報を、時間軸上で合成する音声情報合成手段が更に備えられた請求項１または２に記載の光学的測定装置。
【請求項４】
複数の前記音声情報を、音場内で合成する音場合成手段が更に備えられた請求項１から３のいずれか一項に記載の光学的測定装置。
【請求項５】
流路を通流中の試料に対して光を照射する光照射手段と、
該光照射手段による光照射によって、前記試料から発せられる光学的情報を検出する光検出手段と、
光検出手段により検出された光学的情報を音声情報に変換する音声変換手段と、
該音声変換手段により変換された音声情報に基づいて、前記試料を分取する分取手段と、
が少なくとも備えられたフローサイトメーター。
【請求項６】
流路に試料を通流させる通流工程と、
前記試料に対して光を照射する光照射工程と、
該光照射工程における光照射によって、前記試料から発せられる光学的情報を検出する光検出工程と、
該光検出工程において検出された光学的情報を音声情報に変換する音声変換工程と、
を少なくとも行う光学的測定方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、流路を用いて試料を光学的に検出するための光学的測定装置に関する。より詳しくは、流路内を通流する試料を光学的に検出するための光学的測定装置、並びに、該光学的測定装置を用いたフローサイトメーターおよび光学的測定方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、分析手法の発展に伴い、細胞や微生物等の生体微小粒子、マイクロビーズなどの微小粒子等を流路中に通流させ、通流させる工程において前記微小粒子を個々に測定したり、測定した微小粒子を解析し、分取したりする手法が開発されつつある。このような流路を用いた微小粒子の解析又は分取の手法の代表的な一例として、フローサイトメトリーと呼ばれる分析手法の技術改良が急速に進んでいる。
【０００３】
フローサイトメトリーとは、解析の対象となる微小粒子を流体中に整列させた状態で流し込み、該微小粒子にレーザー光等を照射することにより、各微小粒子から発せられた蛍光や散乱光を検出することで微小粒子の解析、分取を行う分析手法である。フローサイトメトリーのプロセスは、以下の（１）水流系、（２）光学系、（３）電気・解析系、（４）分取系、に大別することができる。
【０００４】
（１）水流系
水流系では、分析対象となる微小粒子をフローセル（流路）中で一列に整列させる。より具体的には、シース流を一定の流速でフローセル内に流入させ、その状態で微小粒子を含むサンプル流をフローセル中央部にゆっくりと注入する。この時、laminar flowの原理によりそれぞれの流れは互いに混合されず、層を成した流れ（層流）が形成される。そして、分析対象となる微小粒子の大きさ等に応じて、シース流とサンプル流の流入量を調節し、微小粒子を一つ一つが整列した状態で通流させる。
【０００５】
（２）光学系
光学系では、分析対象となる微小粒子にレーザーなどの光を照射し、微小粒子から発せられる蛍光や散乱光を検出する。微小粒子を、前記水流系（１）において、一つ一つが整列した状態でレーザー照射部を通流させ、一つ一つの微小粒子が通過する毎に、微小粒子から発せられる蛍光や散乱光を、パラメータ毎に光学検出器を用いて検出し、微小粒子一つ一つの特性を分析する。
【０００６】
（３）電気・解析系
電気・解析系では、光学系において検出した光学的情報を、電気的信号（電圧パルス）に変換する。変換された電気的信号はアナログ−デジタル変換され、このデータをもとに解析用コンピューターとソフトウェアでヒストグラムを抽出し、解析を行う。
【０００７】
（４）分取系
分取系では、測定を終えた微小粒子を分離し、回収する。代表的な分取方法としては、測定を終えた微小粒子にプラス又はマイナスの電荷を加え、フローセルを、電位差を有する２つの偏向板で挟み込み、帯電された微小粒子はその電荷に応じていずれかの偏向板に引き寄せられることにより、分取する方法がある。
【０００８】
このフローサイトメトリーのような流路中の微小粒子の解析及び分取技術は、医療分野、創薬分野、臨床検査分野、食品分野、農業分野、工学分野、法医学分野、犯罪鑑識分野等、様々な分野で広く利用されている。特に医療分野においては、病理学、腫瘍免疫学、移植学、遺伝学、再生医学、化学療法などで重要な役割を担っている。
【０００９】
このように、非常に広い分野で流路中の微小粒子を解析及び分取する技術が必要とされており、前記（１）から（４）のプロセスに関わる技術も、日々、開発が進められている。例えば、特許文献１では、分析対象の粒子に染色を施したものを含む粒子懸濁液を生成してその流れに光を照射し、粒子の特徴を反映した複数種類の光信号を得て、これらをそれぞれ電気信号に変換して出力することにより、信号処理用の回路基板を複数種類用意しなくても、種類の異なる分析を行うことが可能な粒子分析装置が提案されている。
【００１０】
特許文献２では、単一の光源から放射された蛍光を、複数の蛍光に分割し、これらの蛍光を検出することで、フローサイトメーターのダイナミックレンジを拡大する方法が提案されている。
【００１１】
特許文献３には、試料に指向性光を照射して流路内における試料の位置情報を得た後、この位置情報に基づいて指向性光を照射することにより、照射むらや、照射位置やフォーカス位置のずれを防止する方法が提案されている。
【００１２】
ところで、フローサイトメトリー法での解析方法では、前方散乱光（ＦＳＣ）や側方散乱光（ＳＳＣ）および測定対象の試料から発せられる蛍光を、「サイトグラム」「スキャッターグラム」「ドットプロット」「２変数ヒストグラム」などと称呼される２次元プロットによるグラフ表示を行うことが一般的である。この時、どの検出量をＸ軸とＹ軸に割り当てるかは、測定したい特徴量に応じた選択が行われる。
【００１３】
また、特定の分子に特異的に結合する物質と蛍光色素を結合させたプローブと呼ばれる物質が広く使われるほか、蛍光における励起波長と蛍光発光波長をそれぞれ複数用いる方法も使われている。そのため、検出光の種類も光源の波長や蛍光の波長と共に多くなっており、複数ある検出光信号の中から、何と何とを選択するかは、測定の精度を決める重要な要因である。
【００１４】
ところが、前方散乱光（ＦＳＣ）や側方散乱光（ＳＳＣ）および複数の蛍光が検出光として解析対象となると、２次元プロットによるグラフ表示を行った場合に、多数のグラフ表示が必要になる。例えば、ｎ種類の検出光を全て２次元プロットしようとした場合、その組み合わせとしては、数学的に最大で、ｎＣ２＝ｎ！／２×（ｎ−２）！個のグラフ表示が必要となる。
【００１５】
近年、蛍光物質の種類数や分光波長のバンド数を増やすなどにより、検出光の種類数を増したフローサイトメトリー法が、技術の高機能化の方向性として注目されている。しかしながら、前記ように、検出光の種類が増えるにつれ、２次元プロットによるグラフ表示の個数も階乗的に増えてしまうため、多数あるグラフ表示の中で、どのグラフを解析すればよいかを判断するには、ユーザー側の専門性や経験値を高める必要が生じている。
【００１６】
つまり、フローサイトメトリー法においては、検出光の種類数を増やすという高機能化によって、ユーザーが容易に解析できるという使い易さの機能面が低下してしまうという背反的な状況にあるのが実情である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１７】
【特許文献１】特開２００７−１０１３１４号公報
【特許文献２】特表２００７−５１８９９１号公報
【特許文献３】特開２００９−０６３３０５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１８】
前述のように、流路内を通流する試料を光学的に検出する技術においては、多種多様な検出ができるような技術が開発されている反面、解析方法の複雑化が生じている。
【００１９】
そこで、本発明では、流路内を通流する試料を光学的に検出する技術において、解析方法の容易化および解析精度の向上が可能な技術を提供することを主目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００２０】
本願発明者らは、前記の目的を解決するために鋭意研究を行った結果、検出された光情報を、光学的情報とは別の情報に変換させることに着目することにより、本発明を完成させるに至った。
【００２１】
即ち、本発明では、まず、流路を通流中の試料に対して光を照射する光照射手段と、
該光照射手段による光照射によって、前記試料から発せられる光学的情報を検出する光検出手段と、
該光検出手段により検出された光学的情報を音声情報に変換する音声変換手段と、
が少なくとも備えられた光学的測定装置を提供する。
本発明に係る光学的測定装置では、音声変換手段により光学的情報を音声情報に変換することにより、検出情報の把握が簡便となる。
本発明に係る光学的測定装置には、前記光学的情報の検出時間長を所定の拡大率で拡大する時間軸変換手段を更に備えることも可能である。
また、本発明に係る光学的測定装置には、複数の前記音声情報を、時間軸上で合成する音声情報合成手段を更に備えることも可能である。
更に、本発明に係る光学的測定装置には、複数の前記音声情報を、音場内で合成する音場合成手段を更に備えることも可能である。
【００２２】
本発明に係る光学的測定装置は、フローサイトメーターおよび光学的測定方法に好適に用いることができる。
より具体的には、本発明に係る光学的測定装置に、音声変換手段により変換された音声情報に基づいて、前記試料を分取する分取手段を加えることで、フローサイトメーターとして用いることが可能である。
【００２３】
ここで、本発明で用いる技術用語の定義付けを行う。本発明における「試料」とは、細胞や微生物、リポソーム、ＤＮＡ、タンパク質などの生体関連微小粒子、あるいはラテックス粒子やゲル粒子、工業用粒子などの合成粒子など、流路内を通流可能な物質であれば、全て包含する。
【発明の効果】
【００２４】
本発明によれば、流路内を通流する試料を光学的に検出する技術において、試料から得られた光学的情報を音声情報に変換して取得することができるため、得られた情報からの解析が容易であり、かつ、解析精度の向上を実現することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】本発明に係る光学的測定装置１の第１実施形態を模式的に示す模式概念図である。
【図２】本発明に係る光学的測定装置１の第２実施形態を模式的に示す模式概念図である。
【図３】音声変換手段１３が行うパルス形状の抽出方法を説明するための図面代用グラフである。
【図４】音声変換手段１３が行うパルス形状から音声波形への変換方法の一例を示す図面代用グラフである。
【図５】音声変換手段１３が行うパルス形状から音声波形への変換方法の図４とは異なる一例を示す図面代用グラフである。
【図６】楽器の音源の発音パラメータの一例を示す図面代用グラフである。
【図７】時間軸変換手段１４が行う、光学的情報の検出時間長を所定の拡大率で拡大する方法の一例を示す図面代用グラフである。
【図８】音声情報合成手段１５が行う、複数の音声情報の時間軸上での合成方法の一例を示す図面代用グラフである。
【図９】音声情報合成手段１５が行う、複数の音声情報の時間軸上での合成方法の図８とは異なる一例を示す図面代用グラフである。
【図１０】音場合成手段１６が行う、複数の音声情報の音場内での合成方法の一例を示す図面代用グラフおよび模式概念図である。
【図１１】各手段における各条件の設定方法の一例を示す模式概念図である。
【図１２】本発明に係るフローサイトメーター１０の一実施形態を模式的に示す模式概念図である。
【図１３】本発明に係る光学的測定方法のフロー図である。
【図１４】実施例において、光検出手段により検出された光学的情報の信号データを示す図面代用グラフである。
【図１５】実施例において、光検出手段により検出された光学的情報の8〜10msec区間を拡大した信号データを示す図面代用グラフである。
【図１６】実施例において、パルス形状の時間長さを拡大して音声信号の包絡線とした信号波形を示す図面代用グラフである。
【図１７】実施例において、パルス形状の時間長さを拡大して音声信号の包絡線とした信号波形の8〜10msec区間を拡大した部分を示す図面代用グラフである。
【図１８】実施例において、各検出光（ＦＳＣおよびＰＥ）を、異なる周波数の正弦波の音声情報に変換した音声波形を示す図面代用グラフである。
【図１９】実施例において、各検出光（ＦＳＣおよびＰＥ）を、異なる周波数の正弦波の音声情報に変換した音声波形の4〜5sec区間を拡大した部分を示す図面代用グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
以下、本発明を実施するための好適な形態について図面を参照しながら説明する。以下に説明する実施形態は、本発明の代表的な実施形態の一例を示したものであり、これにより本発明の範囲が狭く解釈されることはない。なお、説明は以下の順序で行う。
１．光学的測定装置１
（１）流路２
（２）光照射手段１１
（３）光検出手段１２
（４）音声変換手段１３
（５）時間軸変換手段１４
（６）音声情報合成手段１５
（７）音場合成手段１６
２．フローサイトメーター１０
（１）分取手段１７
３．光学的測定方法
（１）通流工程Ｉ
（２）光照射工程II
（３）光検出工程III
（４）音声変換工程IV
（５）時間軸変換工程Ｖ
（６）音声情報合成工程VI
（７）音場合成工程VII
（８）分取工程VIII
【００２７】
＜１．光学的測定装置＞
図１は、本発明に係る光学的測定装置１の第１実施形態を模式的に示す模式概念図である。
本発明に係る光学的測定装置１は、流路２内を通流する試料Ｓを光学的に検出する装置であって、大別すると、光照射手段１１、光検出手段１２、音声変換手段１３、を少なくとも備える。また、必要に応じて、図示しないが、時間軸変換手段１４、音声情報合成手段１５、音場合成手段１６、などを備えることも可能である。以下、各々について、詳細に説明する。
【００２８】
（１）流路２
本発明に係る光学的測定装置１は、流路２内を通流する試料Ｓを光学的に検出する装置である。流路２は、本発明に係る光学的測定装置１に予め備えていてもよいが、市販の流路２を、光学的測定装置１に設置して測定を行うことも可能である。
【００２９】
本発明に係る光学的測定装置１に用いることができる流路２の形態は特に限定されず、自由に設計することができる。例えば、図１に示すような２次元又は３次元のプラスチックやガラス等の基板Ｔ内に形成した流路２に限らず、図２の第２実施形態に示すように、従来のフローサイトメーターで用いられているような流路２も、本発明に係る光学的測定装置１に用いることができる。
【００３０】
また、前記流路２の流路幅、流路深さ、流路断面形状も、層流を形成し得る形態であれば特に限定されず、自由に設計することができる。例えば、流路幅１ｍｍ以下のマイクロ流路においても、本発明に係る光学的測定装置１に用いることが可能である。特に、流路幅１０μｍ以上１ｍｍ以下程度のマイクロ流路を用いれば、後述する本発明に係る光学的測定方法をより好適に行うことができる。
【００３１】
なお、基板Ｔ上に形成した流路２を採用する場合には、流路２の底面を透視性のある材料で形成することが好ましい。図１に示すように、後述の光検出手段１２を、後述の光照射手段１１と基板Ｔを挟んで逆側に配置し、流路２の底面側からの光学的情報を検出できるようにするためである。
【００３２】
（２）光照射手段１１
光照射手段１１は、流路２を通流中の試料Ｓに対して光Ｌを照射するための手段である。
【００３３】
光照射手段１１から照射される光の種類は特に限定されないが、試料Ｓから蛍光や散乱光を確実に発生させるためには、光方向、波長、光強度が一定の光が望ましい。一例としては、レーザー、ＬＥＤ等を挙げることができる。レーザーを用いる場合、その種類も特に限定されないが、アルゴンイオン（Ar）レーザー、ヘリウム−ネオン（He-Ne）レーザー、ダイ（dye）レーザー、クリプトン（Cr）レーザー、半導体レーザー、または、半導体レーザーと波長変換光学素子を組み合わせた固体レーザー等を、１種又は２種以上、自由に組み合わせて用いることができる。
【００３４】
（３）光検出手段１２
光検出手段１２は、光照射手段１１による光照射によって、試料Ｓから発せられた光学的情報を検出する手段である。
【００３５】
本発明に係る光学的測定装置１に用いることができる光検出手段１２は、光学的情報の検出ができれば、その種類は特に限定されず、公知の光検出器を自由に選択して採用することができる。例えば、蛍光測定器、散乱光測定器、透過光測定器、反射光測定器、回折光測定器、紫外分光測定器、赤外分光測定器、ラマン分光測定器、ＦＲＥＴ測定器、ＦＩＳＨ測定器その他各種スペクトラム測定器、複数の光検出器をアレイ状に並べた、いわゆるマルチチャンネル光検出器、などを１種又は２種以上自由に組み合わせて採用することができる。
【００３６】
また、本発明に係る光学的測定装置１における光検出手段１２の設置箇所は、試料Ｓから発せられた光学的情報が検出できれば特に限定されず、自由に設計することができる。例えば試料Ｓによる散乱光であって散乱角度の小さい光を検出する場合は、図１および図２に示すように、流路２を挟んで光照射手段１１と逆側に配置することが好ましい。光検出手段１２を、流路２を挟んで光照射手段１１と逆側に配置することで、光照射手段１１や光検出手段１２をより自由な構成で配置させることができるからである。また例えば試料Ｓからの蛍光のように照射光の入射方向とは異なる方向にも放射される光の場合は、流路２を基準に光照射手段１１と同じ側や９０度側面の側に配置してもかまわない。
【００３７】
（４）音声変換手段１３
音声変換手段１３は、光検出手段１２により検出された光学的情報を、音声情報に変換する手段である。従来の光学的測定装置においては、光学的情報をそのまま解析して試料Ｓの大きさや形態、物性などを測定していた。しかし、本発明に係る光学的測定装置では、この音声変換手段１３を備えることにより、光学的情報を音声情報に変換し、この音声情報に基づいて、試料Ｓの大きさや形態、物性などを測定することができる。このように、音声情報として測定結果を把握することにより、得られた情報からの解析が容易となり、かつ、解析精度の向上を実現することができる。以下、音声変換手段１３が行う具体的な音声変換方法を詳細に説明する。
【００３８】
Ａ．パルス形状の抽出
光検出手段１２により検出された光学的情報は、図３（ａ）に示すような２次元プロットによるグラフでパルスとして検出される。このパルスから、図３（ｂ）に示すように、粒子ごとのパルスを抽出する。例えば、粒子ごとのパルスに対して、検出光強度、または、検出光強度の積分回路出力に閾値を定めて、閾値以上のパルスおよびその前後の時間領域を１つのパルスとして抽出する。
【００３９】
次に、図３（ｃ）に示すように、抽出した各パルスについて、開始点と終了点を求める。開始点と終了点を求める方法としては、例えば、パルスが無い時間での検出光強度を取り出して測定値と標準偏差などを計算することで、いわゆるバックグランド・レベル信号値を測定し、そのバックグランド・レベルから有意な値の変化が有ったかどうかで、判定する方法が挙げられる。
なお、このパルスの有無判定については、「サイトグラム」「スキャッターグラム」「ドットプロット」「２変数ヒストグラム」などと称呼される２次元プロットにおける、１つ１つのドット（パルスの高さ、幅、面積などの測定値をヒストグラム化するカウント要素）の検出処理と同様の処理であるため、本実施例の方法に限らず、これらの検出パルスからのカウント方法によるものであっても良い。
【００４０】
次に、図３（ｄ）に示すように、各パルスについて、開始点と終了点との間のバックグランド・レベルを取り除いたパルス形状を抽出する。具体的な方法としては、例えば、形状を信号波形として抽出する他、立上り・立下りの傾斜勾配、パルスの高さ、幅、面積などの特徴値を抽出する方法が挙げられる。
【００４１】
Ｂ．パルス形状から音声波形への変換
次に、前記で抽出したパルス形状から、音声波形へ変換する。音声波形への変換方法は、特に限定されず、自由な方法を用いることができる。以下、音声波形への変換方法の一例を説明する。
【００４２】
（Ｂ−１）
図４は、パルス形状から音声波形への変換方法の一例を示す図面代用グラフである。この例では、パルス形状を音声の振幅を示す包絡線として、音声波形を決定している。より具体的には、例えば、検出光種別に対応する音色設定として８８０Ｈｚの正弦波を用い、パルス形状を４倍した包絡線で振幅変調したものを、パルス形状に対応した音色波形として設定する。なお、ここで音色設定として８８０Ｈｚの正弦波としたが、後述の（５）時間軸変換手段１４において、時間軸拡大を行う場合はその拡大率に合わせた周波数の調整をしておく。例えば、検出時間長を４０００倍の拡大率で拡大する設定であれば、４０００×８８０＝３５２０ｋＨｚの正弦波としてパルス形状に対応した音色波形を設定するか、または、ここでは、検出時間長内の包絡線の信号と８８０Ｈｚの正弦波という音色情報をパルス形状に対応した音色波形として設定しておく。
【００４３】
例えば、各検出光チャネルにそれぞれ異なる周波数の音色を対応させた場合、測定対象の試料から取得した音声変換結果から、高音の多さや低音の多さなどの特徴把握をすることで、試料の特徴を大雑把に把握することが可能である。そして、特徴ある検出光を詳細に検討することで、複数の検出信号から必要な信号のみを簡単にピックアップすることができる。その結果、解析時間の短縮や解析精度の向上を実現することができる。
【００４４】
（Ｂ−２）
図５は、パルス形状から音声波形への変換方法の図４とは異なる一例を示す図面代用グラフである。この例では、パルスの長さやピーク値や面積などのパルス形状の特徴値を抽出した上で、楽器などに代表される音源の発音パラメータへ対応付けて、音声波形を決定している。
【００４５】
より具体的には、例えば、図６に示すように、楽器の音源の発音パラメータとしては、アタック、ディケイ、サステイン、リリースなどの発音変化がある。測定したパルス形状からは、例えば、開始点と終了点のパルスの長さ、ピーク値、面積値、立上りや立下りの傾斜勾配として最大傾斜などの特徴値が得られる。そして例えば、検出光種別に対応する音色設定として楽器のピアノ音源を用い、パルスの開始点と終了点をそれぞれノートオンとノートオフに、ピーク値を音源の音量に、面積値をサステインに、立上り最大傾斜をアタックに、それぞれ対応付けたものを音色波形として設定する。
【００４６】
例えば、各検出光チャネルにそれぞれ異なる楽器音源（例えば、ピアノ、バイオリンなど）を対応させた場合、測定対象の試料から取得した音声変換結果から、どの楽器の音声が多いかなどを把握することで、試料の特徴を大雑把に把握することが可能である。そして、特徴ある検出光を詳細に検討することで、複数の検出信号から必要な信号のみを簡単にピックアップすることができる。その結果、解析時間の短縮や解析精度の向上を実現することができる。
【００４７】
（５）時間軸変換手段１４
時間軸変換手段１４は、光検出手段１２により検出された光学的情報の検出時間長を所定の拡大率で拡大する手段である。本発明に係る光学的測定装置１には、必須の手段ではないが、変換後の音声情報の分離取得を容易にするためには、設けることが好ましい。
【００４８】
光検出手段１２により検出された光学的情報は、例えば、図７（ａ）に示すように、８００μｓの検出時間中に、７つのイベント・パルスを有するなど、短時間の間に多数のイベント・パルスとして検出される。そのため、同一の時間軸のまま、音声波形へと変換した場合、特定の機器を用いれば問題なく個々の音声情報を取得することは可能であるが、ユーザーが個々の音声情報を分離取得することは不可能である。そこで、例えば、図７（ｂ）に示すように、検出時間長を所定の拡大率（この例では４０００倍）で拡大することで、得られる音声時間長は３２００ｍｓ（３．２ｓ）となり、例えば本実施例における検出時間中の７つのイベント・パルスで示されるような、個々の音声情報をユーザーが分離取得することが可能になる。
【００４９】
例えば、前記図４に示すパルス形状から音声波形への変換方法において、検出時間長を４０００倍の拡大率で拡大した場合、８μｓのパルス形状を持つ検出光は、相似形をした１２８ｍｓの音声信号となる。この音声信号は、前記（Ｂ−１）において示した検出光種別に対応する音色設定のように、８８０Ｈｚの正弦波がパルス形状の包絡線と相似形の波形によって振幅変調された音声信号である。
また、例えば、前記図５に示すパルス形状から音声波形への変換方法において、検出時間長を４０００倍の拡大率で拡大した場合、８μｓのパルス形状を持つ検出光は、ピアノ音源を用いた１７５ｍｓの音声信号となる。この音声信号は、前記（Ｂ−２）において示した検出光種別に対応する音色設定のように、楽器のピアノ音源を用い、パルスの開始点と終了点の時間間隔を４倍した１２８ｍｓの時間間隔でそれぞれをノートオンとノートオフに、ピーク値を音源の音量に、面積値をサステインに、立上り最大傾斜をアタックに、それぞれ対応付けられて、ノートオフ後に４７ｍｓ（４７＝１７５−１２８）のリリース長を持つ音声信号である。
【００５０】
（６）音声情報合成手段１５
音声情報合成手段１５は、音声変換手段１３により音声情報に変換された個々の情報を、時間軸上で合成する手段である。より具体的には、例えば、図８および９に示すように、測定時間である検出時間長、および、それを変換した音声時間長の内部において、個々のイベント・パルスがどのタイミングで発生しているかを対応付けて、音声波形を合成する。
【００５１】
なお、時間軸上で合成する音声波形データの先頭部分と末尾部分においては、音声のある部分が初期の音声時間長からはみ出したり、音声の無い部分が初期の音声時間長の中で長く続いたりする場合がある。これらの場合、音声時間長を適宜前後に動かすことも可能である。
【００５２】
また、例えば、ＭＩＤＩ（Musical Instrument Digital Interface）規格などを用いて、音源データを音声波形に変換することも可能である。
【００５３】
（７）音場合成手段１６
音場合成手段１６は、音声変換手段１３により音声情報に変換された個々の情報を、音場内で合成する手段である。なお、音場合成手段１６では、音声変換手段１３により音声情報に変換された個々の情報を、そのまま音場内で合成することもできるが、前記音声情報合成手段１５により合成された音声情報を、更に、音場内で合成することも可能である。
【００５４】
例えば、音声変換手段１３および音声情報合成手段１５により、図１０（ａ）に示すような音声情報が得られたとする。図１０（ａ）は、図８や図９のように音声波形に変換された音声情報が検出光の種類によって、少なくとも５種類の音声波形が得られた状態を示している。ここで検出光の種類とは、前方散乱光（ＦＳＣ）や側方散乱光（ＳＳＣ）および複数の蛍光の種類であっても良いし、光検出手段１２に関して赤外線、可視光線、紫外線などの検出光を波長領域ごとに分割した複数の光検出器のそれぞれの波長領域（スペクトラム）であっても良い。このように、複数の検出光に関する音声情報が得られた場合、これらの音声波形を、それぞれ音場内の音源として設定し、所定の音場環境の中で合成された複数の音声出力として出力する方法が挙げられる。より具体的には、図１０（ｂ）に示すように、前方散乱光（ＦＳＣ）は正面奥に、側方散乱光（ＳＳＣ）を右側前方に、蛍光第１検出光は左側前方に、などと音源配置して、音声出力を音場内で合成することができる。
【００５５】
例えば、各検出光チャネルに対して、それぞれ異なる位置に音源を配置することで、測定対象の試料から取得した音声変換結果から、どの位置からの音声が強いかなどを把握することで、試料の特徴を大雑把に把握することが可能である。そして、特徴ある検出光を詳細に検討することで、複数の検出信号から必要な信号のみを簡単にピックアップすることができる。その結果、解析時間の短縮や解析精度の向上を実現することができる。
【００５６】
このように音場合成手段１６を用いて音場合成することで、本発明に係る光学的測定装置１を用いるユーザーは、個々の検出光の音声波形を聞き分けやすくなると共に、互いの検出光の音声波形の相関を理解しやすくなる。その結果、得られた情報からの解析が容易となり、かつ、解析精度の向上を実現することができる。
【００５７】
なお、図１０の例では、音声出力が２つである、いわゆる２ｃｈステレオを用いているが、この他にも、図示しないが５．１ｃｈステレオや７．１ｃｈステレオ、または、発音部の少ないヘッドホンやスピーカで広がりのある音声を得るバーチャルサラウンド技術などを用いることも可能である。
【００５８】
以上説明した各手段における各条件設定については、予め各手段における各方法の条件を定めておくこともできるが、例えば、図１１に示すようなユーザーが操作を行うＧＵＩ（グラフィックユーザインターフェース）画面上から各手段における各条件を設定できるように設計することも可能である。
【００５９】
図１１の画面中の左上の表示領域１１１は、図１０（ａ）と同じく、複数の検出光に対応する音声波形に変換された音声情報が表示されている。
また、画面中の左下の操作領域１１２は、図１０（ｂ）と同様に、複数の音声波形を、それぞれ音場内の音源として設定し、表示されている音場環境の中で合成された複数の音声出力として出力するための操作領域である。操作領域１１２では、それぞれの音声波形に対応する音源の位置を「○」で示し、ユーザーによって選択中の音源の位置を「斜線付きの○」で示している。また、操作領域１１２では、音声出力を行うスピーカの位置を「スピーカのアイコン」で示している。
【００６０】
さらに、画面中の右上の設定領域１１３は、前記Ａ．パルス形状の抽出処理においてユーザーが設定値を指示する場合の設定値の１つであるパルス閾値を設定できるようになっている。また、画面中の右上の設定領域１１４は、前記Ｂ．パルス形状から音声波形への変換処理においてユーザーが設定値を指示する場合の設定値の１つである時間軸の拡大率を設定できるようになっている。画面中の右中の設定領域１１５は、前記Ｂ．パルス形状から音声波形への変換処理においてユーザーが設定値を指示する場合の設定値の１つである各検出光チャネルに対応して変換する音声波形の音色を設定できるようになっている。例えば、図１１の設定領域１１５では、前記（Ｂ−２）の実施例と同様に、検出光のチャネルに対して楽器音源の「ピアノ」を設定しており、それが操作領域１１２においてユーザーによって選択中の音源である「斜線付きの○」に対応する検出光のチャネルであることが表示されている。また、設定領域１１５はドロップダウンリスト表示方式によって表示が行われており、領域中右側の「▽」ボタンを押すことにより、各検出光チャネルおよびまたは楽器音源の種類が設定領域１１５の下方にリスト表示（ドロップダウン表示）されて、音色の設定を変更できるようになされている。
【００６１】
そして、画面中の中央下の操作ボタン１１６は、図１１の画面中の各種設定および各種操作を確定、すなわち、音声変換処理およびまたは音場処理の内容を確定するための設定確定ボタンである。また、画面中の中央下の操作ボタン１１７は、音声変換処理および音場処理を終えて、ユーザーに提示する音声信号を実際に発音（発声）する・しないをオン・オフするための操作ボタンである。最後に、画面中の右下の操作ボタン１１８は、図１１に示したＧＵＩ画面の操作や設定がユーザーによって終了したことを指示する終了ボタンである。
【００６２】
より具体的には、例えば、設定領域１１３のように音声変換手段１３によるパルス形状の抽出の際のパルス閾値や、設定領域１１４のように時間軸変換手段１４による拡大率などの前記Ａ．パルス形状の抽出処理や前記Ｂ．パルス形状から音声波形への変換処理への各種ユーザー設定を、測定対象の試料の種類などに応じて自由に設定できるように、上記数値入力以外にもスクロールバー操作部品やスライダーバー操作部品を使用するような設計にすることが可能である。また、設定領域１１５のように音声変換手段１３による音声変換の際の音色の設定を選択できるようにラジオボタン操作部品やリストボックス操作部品を使用するように設計したり、操作領域１１２のように音場合成手段１６による音場合成の際、個々の検出光に対応する音源の位置やスピーカの位置をマウス操作などで自由に移動できるように設計したりすることも可能である。ちなみに、図１１の操作領域１１２の表示状態の実施例においては、マウスカーソルが矢印付きの十字マークになっており、選択中の音源の位置およびまたはスピーカーの位置を移動中の状態を表示するマウスカーソルとなっている。
【００６３】
＜２．フローサイトメーター１０＞
本発明に係る光学的測定装置１は、その解析の容易性および精度の高さを利用してフローサイトメーター１０に好適に用いることができる。図１２は、本発明に係るフローサイトメーター１０の一実施形態を模式的に示す模式概念図である。
【００６４】
本発明に係るフローサイトメーター１０は、流路２内を通流する試料Ｓを光学的に検出し、その結果に応じて試料Ｓを分取可能な装置であって、大別すると、光照射手段１１、光検出手段１２、音声変換手段１３、分取手段１７を少なくとも備える。また、必要に応じて、時間軸変換手段１４、音声情報合成手段１５、音場合成手段１６、などを備えることも可能である。以下、各々について、詳細に説明する。なお、光照射手段１１、光検出手段１２、音声変換手段１３、時間軸変換手段１４、音声情報合成手段１５、音場合成手段１６については、前記光学的測定装置１と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
【００６５】
（１）分取手段１７
分取手段１７は、音声変換手段１３により変換された音声情報に基づいて、試料Ｓを分取する手段である。例えば、分取手段１７では、音声情報から解析された試料Ｓの大きさ、形態、内部構造等の解析結果に基づいて、流路２の下流において、試料Ｓの分取が行われる。
【００６６】
より具体的には、図１２に示すように、例えば、所定の振動数で振動する振動素子１７１などを用いて、流路２の全体若しくは一部に振動を加えることで、流路２の吐出口から液滴を発生させる。なお、この場合、用いる振動素子は特に限定されず、公知のものを自由に選択して用いることができる。一例としては、ピエゾ振動素子などを挙げることができる。また、流路２への送液量、吐出口の径、振動素子の振動数などを調整することにより、液滴の大きさを調整し、試料を一定量ずつ含む液滴を発生させることができる。
【００６７】
次に、発生した液滴に、音声情報から解析された試料Ｓの大きさ、形態、内部構造等の解析結果に基づいて、プラスまたはマイナスの電荷を荷電する（図１２中符号１７２参照）。そして、荷電された液滴は、電圧が印加された対向電極１７３によって、その進路が所望の方向へ変更され、分取される。
【００６８】
＜３．光学的測定方法＞
図１３は、本発明に係る光学的測定方法のフロー図である。
本発明に係る光学的測定方法は、大別して、通流工程Ｉ、光照射工程II、光検出工程III、音声変換工程IV、を少なくとも行う方法である。また、必要に応じて、時間軸変換工程Ｖ、音声情報合成工程VI、音場合成工程VII、分取工程VIII、をそれぞれ行うことも可能である。以下、各工程について、詳細に説明する。
【００６９】
（１）通流工程Ｉ
通流工程Ｉは、流路２に試料Ｓを通流させる工程である。
【００７０】
試料Ｓの流路２中への通流方法は特に限定されないが、例えば、図１２に示すように、整流を促す流体媒体（シース流Ｆ１０２）で、試料Ｓ含むサンプル流Ｆ１０１を挟み込みながら搬送する方法が挙げられる。このように搬送すれば、試料Ｓを含むサンプル流Ｆ１０１の層流を形成することができ、より好適である。前記流体媒体は試料Ｓを含むサンプル流の整流を促す機能を有すれば、その種類は特に限定されないが、例えば、試料Ｓが細胞である場合には、生理食塩水等を用いることができる。
【００７１】
試料Ｓには、後述する光検出工程IIIにおいて、光学的情報が検出できるように、蛍光色素等の蛍光物質、放射性物質、インターカレーター、またはマイクロビーズなどの標識物質で修飾しておくことが好ましい。例えば、蛍光色素を用いる場合、その種類は特に限定されず、公知のあらゆる蛍光色素を用いることができる。例えば、Cascade Blue、Pacific Blue、Fluorescein isothiocyanate(FITC)、Phycoerythrin(PE)、Propidium iodide(PI)、Texas red(TR)、Peridinin chlorophyll protein(PerCP)、Allophycocyanin(APC)、4’,6-Diamidino-2-phenylindole(DAPI)、 Cy3、Cy5、Cy7等を、１種又は２種以上自由に組み合わせて用いることができる。
【００７２】
なお、蛍光タンパク質のように、試料Ｓ自体が発光する場合には、標識物質で修飾する必要はない。また、流路２内で物質間相互作用を進行させることにより、ＦＲＥＴの原理のように、その物質の蛍光色等を変化させることができる物質等を試料Ｓとして用いる場合も、標識物質で試料Ｓを修飾する必要はない。
【００７３】
（２）光照射工程II
光照射工程IIは、流路２を通流中の試料Ｓに対して、光を照射する工程である。
【００７４】
光照射工程IIにおいて、照射する光の種類は特に限定されず、前記光学的測定装置１で例示した光を１種又は２種以上自由に組み合わせて用いることができる。
【００７５】
（３）光検出工程III
光検出工程IIIは、光照射工程IIで光Ｌを照射することにより、流路２を通流中の試料Ｓから発せられる光学的情報を、光検出手段１２を用いて検出する工程である。
【００７６】
光検出工程IIIでは、試料Ｓからの光学的情報が検出できれば、その取得方法は特に限定されず、前記光学的測定装置１で例示した方法を１種又は２種以上自由に組み合わせて採用することができる。
【００７７】
（４）音声変換工程IV
音声変換工程IVは、光検出工程IIIにおいて検出された光学的情報を、音声情報に変換する工程である。従来の光学的測定方法においては、光学的情報をそのまま解析して試料Ｓの大きさや形態、物性などを測定していた。しかし、本発明に係る光学的測定方法では、この音声変換工程IVを行うことにより、光学的情報を音声情報に変換し、この音声情報に基づいて、試料Ｓの大きさや形態、物性などを測定することができる。このように、音声情報として測定結果を把握することにより、得られた情報からの解析が容易となり、かつ、解析精度の向上を実現することができる。なお、音声変換工程IVで行う具体的な音声変換方法は、前記光学的測定装置１と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
【００７８】
（５）時間軸変換工程Ｖ
時間軸変換工程Ｖは、光検出工程IIIにおいて検出された光学的情報の検出時間長を所定の拡大率で拡大する工程である。本発明に係る光学的測定方法には、必須の工程ではないが、変換後の音声情報の分離取得を容易にするためには、この時間軸変換工程Ｖを行うことが好ましい。なお、時間軸変換工程Ｖで行う具体的な時間軸変換方法は、前記光学的測定装置１と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
【００７９】
（６）音声情報合成工程VI
音声情報合成工程VIは、音声変換工程IVにおいて音声情報に変換された個々の情報を、時間軸上で合成する工程である。なお、音声情報合成工程VIで行う具体的な合成方法は、前記光学的測定装置１と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
【００８０】
（７）音場合成工程VII
音場合成工程VIIは、音声変換工程IVにおいて音声情報に変換された個々の情報を、音場内で合成する工程である。なお、音場合成工程VIIでは、音声変換工程IVにおいて音声情報に変換された個々の情報を、そのまま音場内で合成することもできるが、前記音声情報合成工程VIにおいて合成された音声情報を、更に、音場内で合成することも可能である。なお、音場合成工程VIIで行う具体的な合成方法は、前記光学的測定装置１と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
【００８１】
（８）分取工程VIII
分取工程VIIIは、音声変換工程IVにおいて変換された音声情報に基づいて、試料Ｓを分取する工程である。本発明では必須の工程ではないが、分取工程VIIIを行うことで、本発明に係る光学的測定方法をフローサイトメトリーの一工程として行うことが可能である。例えば、分取工程VIIIでは、音声情報から解析された試料Ｓの大きさ、形態、内部構造等の解析結果に基づいて、流路２の下流において、試料Ｓの分取が行われる。なお、分取工程VIIIで行う具体的な分取方法は、前記光学的測定装置１と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
【実施例】
【００８２】
本実施例では、本発明に係るフローサイトメーターおよび光学的測定方法を用いて、実際に得られた光学的情報から音声情報への変換を行った。
なお、本実施例では、前方散乱光（Forward Scatter（ＦＳＣ））と蛍光（Phycoerythrin（ＰＥ））の２種類の検出光の測定信号波形から音声変換処理を行っているが、実際に本発明においては、前述した通り、複数の種類の検出光から音声変換処理を行うことが可能である。２種類の検出光の信号波形を音声変換した結果は、それぞれ音声波形の左チャンネルと右チャンネルに割り当てた。
【００８３】
（１）サンプルの通流
まず、本発明に係るフローサイトメーターの流路に、サンプルとして、蛍光色素（ＰＥ）で修飾したマイクロビーズを通流させた。
【００８４】
（２）光照射
次に、流路に通流中のマイクロビーズに、波長488nmのレーザー光照射を行った。
【００８５】
（３）光検出
光照射を行った後、マイクロビーズから発せられた前方散乱光（ＦＳＣ）および蛍光（ＰＥ）検出光強度の信号波形を、オシロスコープによって測定した。２種類の信号波形は、光検出手段の増幅器出力（アンプ出力）の電圧値を検出光強度の信号とした。信号波形は、50MHzのサンプリング周波数で、40msecの測定時間を測定し、2MSampleの信号データを得た。得られた信号データを図１４に示す。また、8〜10msec区間を拡大した信号データを図１５に示す。
【００８６】
図１４のグラフ上段の前方散乱光（Ｆｏｒｗａｒｄ、ＦＳＣ）の信号波形を目視して分かるように、40msecの測定時間に21個のパルスが出ており、21個のマイクロビーズが通過したことが目視で分かる。また、図１４のグラフ下段の蛍光（ＰＥ）の信号波形、および、図１５のグラフの信号波形を目視して分かるように、21個全てのマイクロビーズが蛍光色素で修飾されている状態ではなく、21個中10個のマイクロビーズが蛍光を発していることが目視で分かる。
【００８７】
（４）音声変換
Ａ．パルス形状の抽出
得られた光学的情報の信号データから、測定時間中のバックグランド・レベル信号値（無パルス時背景信号値）が一定であるとして、信号全体の平均値と標準偏差を用いてパルス形状の抽出を行った。
【００８８】
より具体的には、暫定パルス区間を除いた測定時間中の平均値をＭ、標準偏差をσとした時に、Ｍ＋６σ以上の電圧信号値となっている信号区間を新たな暫定パルス区間と計算した。そして、新たな暫定パルス区間を除いた測定時間中の平均値Ｍ、標準偏差σを再計算して、さらに新たな暫定パルス区間を計算する処理を反復した。なお、初期状態では、暫定パルス区間が無い状態、または、ユーザーが定めた電圧信号値の区間を暫定パルス区間として、反復処理を開始した。
【００８９】
このような処理を行うことで、測定時間中のバックグランド・レベル信号値とは異なる信号レベルを持つ暫定パルス区間は反復処理の中で次第に取り除かれ、測定時間内の信号はパルス区間と無パルス区間に分別される。そして、平均値Ｍと標準偏差σは、無パルス区間、すなわち、バックグランド・レベル信号値を表す平均値と標準偏差へとそれぞれ適切な値に収束する。反復計算の収束判定は、予め定めた平均値Ｍと標準偏差σの反復での変化が予め定めた精度の範囲内になったことで行うことができる。
【００９０】
以上で、求めた暫定パルス区間は、Ｍ＋６σ以上の電圧信号値を基準としているため、信号の先頭（立上り）と末尾（立下り）が短くなっていた。そこで、暫定パルス区間の先頭と末尾において、Ｍ＋３σ以上の電圧信号値となっている区間まで区間を拡大した。このようにして、暫定パルス区間からＭ＋３σ以上の電圧信号値を基準に拡大したパルス区間を、抽出されたパルス区間とした。
【００９１】
以上のパルス抽出処理で求められたパルス区間に対して、パルスの幅（長さ）、パルスの高さ（ピーク値）、面積値、立上りや立下りの傾斜勾配などの特徴値を計算した。なお、暫定パルス区間を除いた測定時間中のバックグランド・レベル信号値の平均値Ｍ、標準偏差σは以下の表１に示す通りであった。表２に、本実施例で抽出したパルスの開始点、ピーク点、終了点の情報を示す。上記の図１４のグラフを目視した結果と同様に、40msecの測定時間に21個のパルスが出ており、21個中10個のマイクロビーズが蛍光を発していることが抽出処理されている。また、計21個の前方散乱光（Ｆｏｒｗａｒｄ、ＦＳＣ）と蛍光（ＰＥ）のパルス信号区間のそれぞれについて、パルス開始時間、パルスピーク時間、パルス終了時間、パルス開始点での信号値、パルスピーク点での信号値、パルス終了点での信号値が特徴値として計算できた。
【００９２】
【表１】
2011095105.tif 000003
【００９３】
【表２】
2011095105.tif 000004
【００９４】
Ｂ．パルス形状から音声波形への変換
抽出したそれぞれのパルス形状の時間長さを拡大した信号波形を、音色波形の包絡線とした。より具体的には、まずバックグランド・レベル信号を取り除く処理として、光強度検出信号波形から平均値Ｍを減算した。そして、前述のパルスの開始点を基準にパルス形状の時間長さを１００倍に拡大した。
【００９５】
このデータ処理御しては、前記バックグランド・レベル信号を取り除いた信号波形に対して、一度パルス区間の信号を０にクリアして削除した後、パルス区間のデータサンプルを時間軸方向に１００倍に補間したデータサンプルを用意して、上記バックグランド・レベル信号を取り除いた信号波形に対して順次加算を行うことで可能である。
【００９６】
図１６に、パルス形状の時間長さを拡大して音声信号の包絡線とした信号波形（音声信号の包絡線）を示す。また、図１５と同じく8〜10msec区間を拡大した信号波形（音声信号の包絡線）を図１７に示す。パルス区間が時間軸方向に１００倍に拡大されたことにより、図１４および図１５のグラフ中において針状に細かったパルスの形状が、図１６のグラフ中においては幅を持ったパルス形状となり、さらに図１７のグラフ中においてはパルスの立上りから立下りまでのパルス形状の全てが目視できるような波形へと変換されている。
【００９７】
（５）時間軸変換
次に、測定時間全体を音声信号の長さに合わせて時間軸を拡大した。本実施例では、 40msecの測定時間を20secの音声信号へと、時間軸を５００倍へ拡大した。ここでは、光強度検出信号のサンプリング周波数が50MHzであったことから、音声信号のサンプリング周波数を５００分の１である100kHzと読み替えることで、2MSampleの信号データ数を変えないまま時間軸拡大した。なお必要に応じて、さらに音声信号のサンプリング周波数を変更するために、リサンプリングなどの処理を行っても良い。
【００９８】
そして、各検出光（ＦＳＣおよびＰＥ）を、前記（Ｂ−１）において示した検出光種別に対応する音色設定のように、異なる周波数の正弦波の音声情報とした。本実施例では、ＦＳＣに880Hzの正弦波、ＰＥに440Hzの正弦波を、基本の音色情報とした。そして、前記のパルス形状の時間長さを拡大し、かつ、測定時間全体の長さを拡大した音声信号の包絡線となる信号波形との乗算を行った。
【００９９】
これらの処理によって得られた音声波形を図１８に示す。また、図１５および図１７の8〜10msec区間に対応する4〜5sec区間を拡大した音声波形を図１９に示す。ここで、音声信号は0〜255の値を持つ8bit値として表示されており、8bit値中の値128が無音レベルを表している。そして、各検出光に対して異なる周波数の正弦波を基本の音色情報とし、図１６で示した信号波形を音声信号の包絡線として用いることで、図１８で示した音声波形が得られた。
【０１００】
以上行った実施例に示す通り、本発明に係るフローサイトメーターを用いて、サンプルからの検出光を、音声波形へと変換することができた。このまま、２種類の検出光の信号波形を音声変換した結果を、それぞれ音声波形の左チャンネルと右チャンネルに割り当てることもできるが、さらに、音量や音質、周波数成分と位相のバランス調整を行う、いわゆるミックスダウン処理を行うことで、音場合成処理を行うことも可能である。またこの音場合成処理においても、２ｃｈステレオへの音場合成に限らず、５．１ｃｈステレオや７．１ｃｈステレオ、または、発音部の少ないヘッドホンやスピーカで広がりのある音声を得るバーチャルサラウンド技術などを用いた音場合成処理技術を適用することが可能である。
【０１０１】
また本実施例では、前方散乱光（ＦＳＣ）と蛍光（ＰＥ）の２種類の検出光の測定信号波形を音声変換処理した。前方散乱光（ＦＳＣ）は、測定対象となる細胞やマイクロビーズなどの粒子が検出される度にパルス波形となる。
【０１０２】
本実施例の実験では、図１４に示すように、２１個の前方散乱光のパルスに対して、１０個の蛍光（ＰＥ）のパルスが検出された。本実験では、前方散乱光（ＦＳＣ）の信号波形から変換された音声波形を左チャンネル（左耳）に割り当て、蛍光（ＰＥ）の信号波形から変換された音声波形を右チャンネル（右耳）に割り当てて試聴した。そして、それぞれのパルスによる音声信号を順に試聴していくと、前方散乱光のパルスのみ聞こえるものと、両方のパルスが聞こえるものとを聞き取ることができた。
【０１０３】
さらに、１０個の蛍光（ＰＥ）の中でも、蛍光の強度に２種類があり、音声信号を試聴した結果においても、その蛍光の強弱を聞き取ることができた。
【０１０４】
以上より、さらに検出光を増やし、それぞれの信号波形を音声波形へと変換することで、複数の種類の検出光の違いや強弱を聞き取ることも、本発明の技術によって可能であることも分かった。
【産業上の利用可能性】
【０１０５】
本発明によれば、流路内を通流する試料を光学的に検出する技術において、試料から得られた光学的情報を音声情報に変換して取得することができるため、得られた情報からの解析が容易であり、かつ、解析精度の向上を実現することができる。この技術を用いることで、医療分野（病理学、腫瘍免疫学、移植学、遺伝学、再生医学、化学療法など）、創薬分野、臨床検査分野、食品分野、農業分野、工学分野、法医学分野、犯罪鑑識分野、など様々な分野における分析・解析技術の向上に貢献することができる。
【符号の説明】
【０１０６】
１  光学的測定装置
２  流路
１１  光照射手段
１２  光検出手段
１３  音声変換手段
１４  時間軸変換手段
１５  音声情報合成手段
１６  音場合成手段
１０  フローサイトメーター
１７  分取手段
１１１  画面中の表示領域
１１２  画面中の操作領域
１１３  画面中の設定領域「パルス閾値設定」
１１４  画面中の設定領域「時間軸設定」
１１５  画面中の設定領域「音色設定」
１１６  画面中の操作ボタン「音場設定」
１１７  画面中の操作ボタン「音声オン」
１１８  画面中の操作ボタン「終了」
１７１  振動素子
１７２  荷電手段
１７３  対向電極
Ｌ  光
Ｓ  試料
Ｔ  基板
Ｆ１０１  サンプル流
Ｆ１０２  シース流
I  通流工程
II  光照射工程
III  光検出工程
IV  音声変換工程
Ｖ  時間軸変換工程
VI  音声情報合成工程
VII  音場合成工程
VIII  分取工程
【図１】
2011095105.tif 000005
【図２】
2011095105.tif 000006
【図３】
2011095105.tif 000007
【図４】
2011095105.tif 000008
【図５】
2011095105.tif 000009
【図６】
2011095105.tif 000010
【図７】
2011095105.tif 000011
【図８】
2011095105.tif 000012
【図９】
2011095105.tif 000013
【図１０】
2011095105.tif 000014
【図１１】
2011095105.tif 000015
【図１２】
2011095105.tif 000016
【図１３】
2011095105.tif 000017
【図１４】
2011095105.tif 000018
【図１５】
2011095105.tif 000019
【図１６】
2011095105.tif 000020
【図１７】
2011095105.tif 000021
【図１８】
2011095105.tif 000022
【図１９】
2011095105.tif 000023