(57)【要約】【課題】従来よりも画像から精度良く標的微生物のみを検出することを目的とする。【解決手段】微生物検出方法が、試料の画像から蛍光染色した標的微生物を検出する微生物検出方法であって、試料中の夾雑物の蛍光色を標的微生物の蛍光と異なる色に変異させる夾雑物蛍光色変異工程と、試料に励起光を照射し、標的微生物の蛍光の退色前及び退色後の画像を撮影する画像撮影工程と、退色前の画像と退色後の画像とを比較し、色の差分領域を標的微生物として検出する検出工程とを具備する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料の画像から蛍光染色した標的微生物を検出する微生物検出方法であって、
前記試料中の夾雑物の蛍光色を前記標的微生物の蛍光と異なる色に変異させる夾雑物蛍光色変異工程と、
前記試料に励起光を照射し、前記標的微生物の蛍光の退色前及び退色後の画像を撮影する画像撮影工程と、
前記退色前の画像と前記退色後の画像とを比較し、色の差分領域を標的微生物として検出する検出工程と
を具備することを特徴とする微生物検出方法。
【請求項２】
夾雑物蛍光色変異工程において、前記試料中の夾雑物の蛍光色を変異させる夾雑物蛍光色変異液を添加することを特徴とする請求項１に記載の微生物検出方法。
【請求項３】
夾雑物蛍光色変異液は、親油性スチリル色素ＦＭ４‐６４（登録商標，Molecular Probes Inc.）を希釈した溶液であることを特徴とする請求項２に記載の微生物検出方法。
【請求項４】
前記夾雑物蛍光色変異液は、親油性スチリル色素ＦＭ４‐６４（登録商標，Molecular Probes Inc.）を５０〜５００ｎｇ／ｍｌに希釈した溶液であることを特徴とする請求項３に記載の微生物検出方法。
【請求項５】
前記検出工程は、前記標的微生物の形態的特徴の基準を満たさない前記差分領域を除外することを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の微生物検出方法。
【請求項６】
前記検出工程は、全ての差分領域のエッジ平均値を算出し、前記エッジ平均値を基準に設けられた上限値及び下限値の範囲外の前記差分領域を除外することを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の微生物検出方法。
【請求項７】
試料の画像から蛍光染色した標的微生物を検出する微生物検出装置であって、
前記標的微生物の蛍光の退色前画像と退色後画像とを比較し、色の差分領域の内、前記標的微生物の形態的特徴の基準を満たすものを標的微生物として検出する検出手段を具備することを特徴とする微生物検出装置。
【請求項８】
前記検出手段は、全ての差分領域のエッジ平均値を算出し、前記エッジ平均値を基準に設けられた上限値及び下限値の範囲外の前記差分領域を除外することを特徴とする請求項７に記載の微生物検出装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、試料の画像から微生物を検出する微生物検出方法及び微生物検出装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、顕微鏡による微生物の検出時には、蛍光染色法が用いられている。この蛍光染色法として、微生物の持つＤＮＡ（Deoxyribonucleic acid）やＲＮＡ（Ribonucleic acid）を蛍光染色することで生物のみを染色するＤＡＰＩ（4',6-Diamidine-2'-phenylindole dihydrochloride）染色法やアクリジンオレンジ染色法、核酸の配列から特定微生物を染め分けるＦＩＳＨ（fluorescence in situ hybridization）法、蛍光染色した抗体を用いる方法、蛍光染色したファージを用いる方法等の多くの方法が存在する。そして、観察者は、蛍光染色した標的微生物に対して蛍光顕微鏡に励起光を照射させ、標的微生物に蛍光を発光させることで、標的微生物を観察／検出することができる。しかしながら、当該標的微生物が含まれる試料中には、標的微生物に類似した色で自家蛍光するものが存在することが多く、経験値の高い熟練した技術者でないと、試料中から標的微生物とそれ以外のものとを判別することが難しい。
その為、標的微生物のみを検出する発明として、下記特許文献１には、励起光を当て続けると微生物の蛍光は退色（下記特許文献１には漂白と記載）するが、夾雑物の自家蛍光はあまり退色しない特性を利用して、微生物の退色前後の画像の差分を微生物として検出する方法が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特表２００８−５２９５０６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
ところで、上記特許文献１では、微生物の退色前後の画像の差分を微生物として検出しているが、微生物が常に強力な蛍光を発するわけではなく、また蛍光染色に用いる蛍光色素が試料に元々いる夾雑物の表面に付着し、当該蛍光色素が励起光に反応して蛍光を発するので、微生物のみを検出することが困難であった。
【０００５】
本発明は、上述した事情に鑑みてなされたものであり、従来よりも画像から精度良く標的微生物のみを検出することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記目的を達成するために、本発明では、微生物検出方法に係る第１の解決手段として、試料の画像から蛍光染色した標的微生物を検出する微生物検出方法であって、前記試料中の夾雑物の蛍光色を前記標的微生物の蛍光と異なる色に変異させる夾雑物蛍光色変異工程と、前記試料に励起光を照射し、前記標的微生物の蛍光の退色前及び退色後の画像を撮影する画像撮影工程と、前記退色前の画像と前記退色後の画像とを比較し、色の差分領域を標的微生物として検出する検出工程とを具備するという手段を採用する。
【０００７】
本発明では、微生物検出方法に係る第２の解決手段として、上記第１の解決手段において、夾雑物蛍光色変異工程において、前記試料中の夾雑物の蛍光色を変異させる夾雑物蛍光色変異液を添加するという手段を採用する。
【０００８】
本発明では、微生物検出方法に係る第３の解決手段として、上記第２の解決手段において、夾雑物蛍光色変異液は、親油性スチリル色素ＦＭ４‐６４（登録商標，Molecular Probes Inc.）を希釈した溶液であるという手段を採用する。
【０００９】
本発明では、微生物検出方法に係る第４の解決手段として、上記第３の解決手段において、前記夾雑物蛍光色変異液は、親油性スチリル色素ＦＭ４‐６４（登録商標，Molecular Probes Inc.）を５０〜５００ng/mlに希釈した溶液であるという手段を採用する。
【００１０】
本発明では、微生物検出方法に係る第５の解決手段として、上記第１〜４いずれかの解決手段において、前記検出工程は、前記標的微生物の形態的特徴の基準を満たさない前記差分領域を除外するという手段を採用する。
【００１１】
本発明では、微生物検出方法に係る第６の解決手段として、上記第１〜５いずれかの解決手段において、前記検出工程は、全ての差分領域のエッジ平均値を算出し、前記エッジ平均値を基準に設けられた上限値及び下限値の範囲外の前記差分領域を除外するという手段を採用する。
【００１２】
また、本発明では、微生物検出装置に係る第１の解決手段として、試料の画像から蛍光染色した標的微生物を検出する微生物検出装置であって、前記標的微生物の蛍光の退色前画像と退色後画像とを比較し、色の差分領域の内、前記標的微生物の形態的特徴の基準を満たすものを標的微生物として検出する検出手段を具備するという手段を採用する。
【００１３】
本発明では、微生物検出装置に係る第２の解決手段として、前記検出手段は、全ての差分領域のエッジ平均値を算出し、前記エッジ平均値を基準に設けられた上限値及び下限値の範囲外の前記差分領域を除外するという手段を採用する。
【発明の効果】
【００１４】
本発明では、夾雑物の色をレジオネラ菌の蛍光と異なる色に変異させ、試料中の標的微生物の蛍光を明瞭にした上で退色前画像及び退色後画像を撮影し、当該退色前画像及び退色後画像に基づいて標的微生物を検出する為、画像から精度良く標的微生物を検出することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】本発明の一実施形態に係る微生物検出方法の夾雑物蛍光色変異工程を示す模式図である。
【図２】本発明の一実施形態に係る微生物検出装置Ｓの概略構成図である。
【図３】本発明の一実施形態に係る微生物検出装置Ｓの演算装置Ｂの機能ブロック図である。
【図４】夾雑物蛍光色変異液が添加されていない試料の画像と、本実施形態に係る微生物検出方法において夾雑物蛍光色変異液が添加された試料の画像とを示す模式図である。
【図５】本発明の一実施形態に係る微生物検出方法の退色前画像と退色後画像を示す模式図である。
【図６】本発明の一実施形態に係る微生物検出装置Ｓの演算装置Ｂの動作を示すフローチャートである。
【図７】本発明の一実施形態に係る微生物検出装置Ｓの演算装置Ｂが作成した減算画像ｄｇの差分領域ａｒを示す模式図である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下、図面を参照して、本発明の一実施形態について説明する。
本実施形態に係る微生物検出方法は、ＦＩＳＨ法を用いて微生物を検出する方法であり、試料中の夾雑物の色を変異させる夾雑物蛍光色変異工程と、試料の画像を撮影する画像撮影工程と、本実施形形態に係る微生物検出装置Ｓで試料の画像からレジオネラ菌（標的微生物）を検出する検出工程とを備えている。
【００１７】
まず、微生物検出方法では、第１の工程において、レジオネラ菌を含む液体試料に、終濃度が４％になるようにパラホルムアルデヒド溶液を添加し、当該液体試料を４℃の温度の下で一晩保存することでレジオネラ菌の固定標本を作製する。
そして、上記第１の工程が終了すると、次に第２の工程において、上記固定標本を含む液体試料を、ろ過装置によってろ過することで、レジオネラ菌の固定標本をメンブレンフィルタ上に捕集する。
【００１８】
そして、上記第２の工程が終了すると、次に第３の工程において、ＦＩＴＣ（fluorescein isothiocyanate）で標識したプローブ（レジオネラ菌用ＤＮＡプローブ）と、ハイブリダイゼーションバッファとを「１：９」の割合で混合したプローブ溶液に、レジオネラ菌を捕集したメンブレンフィルタの一部を浸し、４６℃の温度下で約２時間保存することで、レジオネラ菌の固定標本にプローブを結合させる。
【００１９】
そして、上記第３の工程が終了すると、次に第４の工程において、プローブ溶液に反応させたメンブレンフィルタをウォッシングバッファに浸し、メンブレンフィルタ上の未反応のプローブを洗浄する。
【００２０】
そして、上記第４の工程が終了すると、次に第５の工程において、ウォッシングバッファによって洗浄されたメンブレンフィルタを、９９．５％のエタノールに１分間入れることで脱水し、その後に常温の空気中で乾燥させる。
【００２１】
そして、上記第５の工程が終了すると、次に夾雑物蛍光色変異工程において、親油性スチリル色素ＦＭ４−６４（登録商標，Molecular Probes Inc.）の原液（５ｍｇ/ｍｌ）を、ベクターシールドで５０〜５００ｎｇ／ｍｌに希釈した溶液である夾雑物蛍光色変異液を作製する。この夾雑物蛍光色変異液は、親油性スチリル色素ＦＭ４−６４（登録商標，Molecular Probes Inc.）を２５０〜５００ｎｇ／ｍｌの範囲に希釈したものが好ましい。さらに、親油性スチリル色素ＦＭ４−６４（登録商標，Molecular Probes Inc.）の原液を２５０ｎｇ／ｍｌに希釈したものがより好ましい。
【００２２】
そして、夾雑物蛍光色変異工程では、図１に示すように、第５の工程において乾燥させたメンブレンフィルタ１をスライドガラス２に載せ、マイクロピペット３によって、メンブレンフィルタ１のレジオネラ菌捕集部分１ａに夾雑物蛍光色変異液を滴下し、その上に気泡がはいらないようカバーガラスを載せて、密着させる。
【００２３】
そして、上記夾雑物蛍光色変異工程が終了すると、次に画像撮像工程において、本実施形態に係る微生物検出装置Ｓの蛍光顕微鏡Ａにスライドガラス２を取り付ける。
図２は、本実施形態に係る微生物検出装置Ｓの概略構成図である。
上記微生物検出装置Ｓは、ＦＩＳＨ法によって蛍光染色されたレジオネラ菌を含む試料の画像からレジオネラ菌を検出するものであり、図２に示すように、蛍光顕微鏡Ａ、演算装置Ｂ及びインタフェースケーブルＣから構成されている。なお、演算装置Ｂは、本実施形態における検出手段である。
【００２４】
蛍光顕微鏡Ａは、落射型の蛍光顕微鏡であり、ステージ上に取り付けられたスライドガラス２に対向して対物レンズが配置されている。また、蛍光顕微鏡Ａでは、対物レンズを介した観察光軸上には、三眼鏡筒ユニットを介して接眼レンズユニットが配置されると共に、結像レンズユニットを介して電子カメラが配置されている。そして、電子カメラは、インタフェースケーブルＣを介して演算装置Ｂに接続し、撮像した画像をインタフェースケーブルＣを介して演算装置Ｂへ出力する。さらに、蛍光顕微鏡Ａは、落射照明光学系が設けられており、当該落射照明光学系がスライドガラス２上の試料に励起光を照射する。
【００２５】
演算装置Ｂは、微生物検出プログラムを搭載したデスクトップ型またはノート型のパーソナルコンピュータであり、インタフェースケーブルＣを介して蛍光顕微鏡Ａに接続する。この演算装置Ｂは、上記微生物検出プログラムに基づいて、蛍光顕微鏡Ａが撮像した画像からレジオネラ菌を検出する。図３は、本実施形態に係る微生物検出装置Ｓの演算装置Ｂの機能ブロック図である。演算装置Ｂは、図３に示すように、表示部１１、操作部１２、顕微鏡接続Ｉ／Ｆ部１３、記憶部１４及び演算部１５を備えている。
【００２６】
表示部１１は、ＣＲＴ（Cathode Ray Tube）ディスプレイまたは液晶ディスプレイであり、演算部１５の制御の下、各種画面を表示する。
操作部１２は、マウス等のポインティングデバイス及びキーボードから構成され、ユーザから受け付けた操作指示を演算部１５へ出力する。
【００２７】
顕微鏡接続Ｉ／Ｆ部１３は、インタフェースケーブルＣを介して蛍光顕微鏡Ａに接続し、蛍光顕微鏡Ａとの間で各種信号の送受信を行う。
記憶部１４は、ＲＯＭ（Read Only Memory）及びＲＡＭ（Random Access Memory）から構成されており、演算装置Ｂの動作を制御する為に演算部１５によって実行される制御プログラムを記憶し、上記制御プログラムの１つとして微生物検出プログラムを記憶している。
【００２８】
演算部１５は、記憶部１４に記憶されている制御プログラム、操作部１２から入力される操作指示に基づいて演算装置Ｂの全体動作を制御する。なお、この演算部１５の制御処理の詳細については、以下に演算装置Ｂの動作として説明する。
【００２９】
そして、画像撮像工程において、波長４９５ｎｍの青色の励起光をスライドガラス２上のメンブレンフィルタ１に対して照射すると、レジオネラ菌に結合したプローブは波長５２０ｎｍの緑色の蛍光を発光し、プローブの蛍光が退色する前の試料画像（退色前画像）が蛍光顕微鏡Ａに撮影される。
【００３０】
撮影された試料では、夾雑物蛍光色変異液が添加されている為、レジオネラ菌の緑色の蛍光が明瞭となっている。
図４は、夾雑物蛍光色変異液が添加されていない試料の画像と、本実施形態に係る微生物検出方法において夾雑物蛍光色変異液が添加された試料の画像とを示す模式図である。なお、図４の（ａ）は、未添加の画像であり、図４の（ｂ）は、添加された画像である。
【００３１】
夾雑物蛍光色変異液が添加されていない試料と、夾雑物蛍光色変異液が添加された試料とを蛍光顕微鏡によって見ると、夾雑物蛍光色変異液が添加されていない試料では、図４の（ａ）に示すように、蛍光顕微鏡Ａの青色の励起光によってレジオネラ菌ｌｇが緑色の蛍光を発すると共に夾雑物ｉｐが緑色の自家蛍光を行う。しかし、夾雑物蛍光色変異液が添加された試料では、図４の（ｂ）に示すように、夾雑物ｉｐの蛍光が吸収されて、背景ｂｋの大部分が赤色の蛍光を発し、レジオネラ菌ｌｇの緑色の蛍光が明瞭となっている。この際、夾雑物ｉｐの表面に付着したプローブの蛍光も、同時に吸収される。
【００３２】
そして、画像撮像工程において、退色前画像を撮影した後、所定の時間励起光を照射し、プローブの蛍光が退色した試料の画像（退色後画像）を蛍光顕微鏡Ａに撮影させる。この際、励起光の波長が短いほど、早く退色する。図５は、本実施形態に係る微生物検出方法の退色前画像と退色後画像を示す模式図である。なお、図５の（ａ）は、退色前画像であり、図５の（ｂ）は、退色後画像である。図５の（ｂ）に示す退色後画像では、蛍光が弱まっている為に、夾雑物蛍光色変異液の影響でレジオネラ菌ｌｇに赤みがかっている。
【００３３】
そして、上記画像撮像工程が終了すると、次に検出工程において、ユーザから操作指示を受け付けると、演算装置Ｂは、微生物検出プログラムに基づいて退色前画像及び退色後画像からレジオネラ菌を検出する。
演算装置Ｂの動作ついて、図６を参照して説明する。図６は、本実施形態に係る微生物検出装置Ｓの演算装置Ｂの動作を示すフローチャートである。
【００３４】
演算部１５は、操作部１２からレジオネラ菌検出指示を受け付けると、退色前画像及び退色後画像にＲＧＢ分解処理（色彩分解処理）（Ｒ：レッド、Ｇ：グリーン、Ｂ：ブルー）を施し、退色前画像及び退色後画像のＧ画像を作成する（ステップＳ１）。Ｇ画像とは、カラー画像の緑色波長域を取り出した画像である。演算装置Ｂでは、レジオネラ菌に結合したプローブが緑色の蛍光を発するのでＧ画像を作成する。
【００３５】
演算部１５は、ステップＳ１の後に、退色前画像のＧ画像の各ドットの輝度値を、退色後画像のＧ画像の各ドットの輝度値で減算することで各ドットの減算値を算出し、各ドットの減算値に基づく減算画像を作成する（ステップＳ２）。
具体的に、演算部１５は、ステップＳ２において、退色前画像のＧ画像の（１，１）ドット目の輝度値を、退色後画像のＧ画像の（１，１）ドット目の輝度値で減算することで減算値を算出し、同様にその他のドットの減算値を算出し、各ドットの減算値に基づく減算画像を作成する。なお、演算部１５は、ステップＳ２において、必要に応じてオフセット調整を実行したり、または適切な係数を乗算してもよい。
【００３６】
演算部１５は、ステップＳ２の後に、減算画像のレジオネラ菌程度の大きさの差分領域を強調（背景を平滑化）する為に、メディアンフィルタ処理（Ｎ×Ｎの円形もしくは正方形領域の中央値を算出するフィルタ）で減算画像のノイズを除去する（ステップＳ３）。上記差分領域とは、退色前画像から退色後画像を減算した際に、輝度値の差分として残った領域である。すなわち、レジオネラ菌である可能性の高い領域である。例えば、図７に示すような差分領域ａｒが減算画像ｄｇに存在している。
【００３７】
なお、演算部１５は、ステップＳ３において、必要に応じてオフセット調整を実行したり、または適切な係数を乗算してもよい。また、ステップＳ３において、平滑化する前の減算画像にレジオネラ菌よりも細かいノイズが存在する場合に、当該画像にサイズの小さなメディアンフィルタ処理を施すことで、レジオネラ菌の菌体内の明度差を改善してもよい。
【００３８】
演算部１５は、ステップＳ３の後に、ＬＯＧ（Laplasian of Gaussian）フィルタ処理で、背景を平滑化した減算画像の差分領域のエッジを強調する（ステップＳ４）。なお、演算部１５は、ステップＳ４において、必要に応じてオフセット調整を実行したり、または適切な係数を乗算してもよい。
【００３９】
演算部１５は、ステップＳ４の後に、上記減算画像から、レジオネラ菌の蛍光の緑色に基づいて設けられたしきい値を満たす差分領域を取り出した画像を作成する（ステップＳ５）。なお、演算部１５が、上記ステップＳ５において、減算画像からレジオネラ菌を取り出す精度を向上させるために、複数のしきい値を設けることが好ましい。
【００４０】
演算部１５は、ステップＳ５の後に、取り出した各差分領域のエッジを１次微分エッジ検出法に基づいて検出し、各差分領域の個別のエッジ強度の平均値（個別エッジ強度平均値）を算出し、全ての個別エッジ強度平均値から全ての差分領域のエッジ強度の平均値（エッジ強度平均値）を算出し、当該エッジ強度平均値を基準にエッジ上限値及びエッジ下限値を設け、個別エッジ平均値がエッジ上限値及びエッジ下限値の範囲（エッジ基準値）内の差分領域のみを残す、すなわちエッジ上限値及びエッジ下限値の範囲外の差分領域を画像から除外する（ステップＳ６）。
これは、レジオネラ菌は、均一的に全体が蛍光する為、エッジの蛍光が強力または微弱である差分領域をレジオネラ菌でないとして除外するためである。
【００４１】
演算部１５は、ステップＳ６の後に、まれに試料中に存在する強力な緑色粒子を除外する為に、上記ステップＳ１において作成した退色後画像のＧ画像からレジオネラ菌の蛍光よりも強力な輝度値を有する領域を抽出し、当該領域と位置が一致する差分領域をステップＳ６において作成した画像から除外する（ステップＳ７）。
【００４２】
演算部１５は、ステップＳ７の後に、レジオネラ菌の形態的特徴の基準を満たさない差分領域を、ステップＳ７において作成した画像から除外する（ステップＳ８）。なお、レジオネラ菌の形態的特徴とは、略楕円形であるレジオネラ菌の長軸、短軸のサイズ等である。ステップＳ８によって、レジオネラ菌に似た蛍光特性を持つ夾雑物を除外することができる。
【００４３】
演算部１５は、ステップＳ８の後に、ステップＳ８において作成した画像に残った差分領域をレジオネラ菌として検出し、当該差分領域の数を計数することで、画像中のレジオネラ菌の数を割り出す（ステップＳ９）。
【００４４】
以上のように、本実施形態では、夾雑物蛍光色変異液を試料に添加することで、夾雑物の色が変異して、試料中のレジオネラ菌の緑色の蛍光が明瞭となる。そして、微生物検出装置Ｓが、上記試料の退色前画像及び退色後画像の差分に基づいて微生物を検出する。このように、本実施形態では、夾雑物の色をレジオネラ菌の蛍光と異なる色に変異させ、試料中のレジオネラ菌の緑色の蛍光を明瞭にした上で退色前画像及び退色後画像を撮影し、当該退色前画像及び退色後画像に基づいてレジオネラ菌を検出する為、画像から精度良くレジオネラ菌を検出することができる。
【００４５】
以上、本発明の一実施形態について説明したが、本発明は上記実施形態に限定されることなく、例えば以下のような変形が考えられる。
（１）上記実施形態では、ＦＩＳＨ法によって標的微生物であるレジオネラ菌を染色したが、本発明はこれに限定されない。
例えば、核酸染色法及び抗体染色法等のＦＩＳＨ法以外の蛍光染色法によってレジオネラ菌を染色するようにしてもよい。
【００４６】
（２）上記実施形態では、カラー画像にＲＧＢ分解処理を施すことで、Ｇ画像を作成したが、本発明はこれに限定されない。
例えば、観察者が、蛍光フィルタを使って試料を撮影することで、退色前及び退色後のＧ画像を作成することが考えられる。そして、演算装置Ｂが、このようなＧ画像を用いて上記処理を実行するようにしてもよい。
【００４７】
（３）上記実施形態では、退色前画像及び退色後画像のＧ画像を用いたが、本発明はこれに限定されない。
上記実施形態では、レジオネラ菌が緑色の蛍光を発する為、Ｇ画像を用いている。例えば、レジオネラ菌が、青色の蛍光を発する場合には、退色前画像及び退色後画像のＢ（ブルー）画像を用いるようにしてもよい。すなわち、本発明では、退色前画像及び退色後画像として標的微生物が発する蛍光の波長域と同じ画像を使用すればよい。
【００４８】
（４）上記実施形態では、差分領域のエッジの検出に１次微分エッジ検出法を用いたが、本発明はこれに限定されない。
例えば、１次微分エッジ検出法の代わりに２次微分エッジ検出法で差分領域のエッジを検出するようにしてもよい。
【符号の説明】
【００４９】
１…メンブレンフィルタ、１ａ…レジオネラ菌捕集部分、２…スライドガラス、３…マイクロピペット、Ｓ…微生物検出装置、Ａ…蛍光顕微鏡、Ｂ…演算装置、１１…表示部、１２…操作部、１３…顕微鏡接続Ｉ／Ｆ部、１４…記憶部、１５…演算部
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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