(57)【要約】【課題】新規な化学物質を資源として提供する。【解決手段】下記式で示されるコンブレチン酸Ａとする。2011178675.tif 000020【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式で示されるコンブレチン酸Ａ。
【化１】
2011178675.tif 000016
【請求項２】
下記式で示されるコンブレチン酸Ｂ。
【化２】
2011178675.tif 000017
【請求項３】
下記式で示されるコンブレチン酸Ａ及びその塩の少なくともいずれかを有効成分として含有する薬剤。
【化３】
2011178675.tif 000018
【請求項４】
下記式で示されるコンブレチン酸Ｂ及びその塩の少なくともいずれかを有効成分として含有する薬剤。
【化４】
2011178675.tif 000019
【請求項５】
癌の治療薬である請求項３又は４記載の薬剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規化合物であるコンブレチン酸Ａ及びＢに関し、更には、これらを用いた薬剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在の我々の生活において、天然の動植物、微生物等の体内に含まれる化学物質（以下「天然物」という。）として見出されたもののうち人体に有用な効果をもたらすものは生薬、医薬品の有効成分として使用されている。また、このようなものは更に有用な医薬品を開発するための研究材料としても様々な役割を有しており、非常に重要なものとなっている。
【０００３】
このように、人体に有益な効果をもたらす天然物の探索に関する報告としては、例えば下記非特許文献１に、変形菌からビスインドール化合物、ナフトキノン化合物、グリセリド化合物等を抽出した報告がある。
【０００４】
【非特許文献１】石橋正己、“未利用菌類の資源化：変形菌からの天然物探索”、有機合成化学協会誌、２００３年、第６１巻、第２号、１５２〜１６３頁
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら一方で、天然物の探索が多数の者によって行なわれているにもかかわらず、探索の材料として検討、調査されたものは、地球上の全生物種の中で１０％にも満たないといわれている。
【０００６】
本発明は、新規な化学物質を資源として提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の一手段に係るコンブレチン酸Ａは、下記式で示される。
【化５】
2011178675.tif 000002
【０００８】
また、本発明の他の一手段に係るコンブレチン酸Ｂは、下記式で示される。
【化６】
2011178675.tif 000003
【０００９】
また、本発明の他の一手段に係る薬剤は、下記式で示されるコンブレチン酸Ａ及びその塩の少なくともいずれかを有効成分として含有する。
【化７】
2011178675.tif 000004
【００１０】
また、本発明の他の一手段に係る薬剤は、下記式で示されるコンブレチン酸Ｂ及びその塩の少なくともいずれかを有効成分として含有する。
【化８】
2011178675.tif 000005
【００１１】
なお、上記の薬剤は、限定されるわけではないが、癌の治療薬として有用であることが期待される。
【発明の効果】
【００１２】
本発明により、新規な化学物質を資源として提供することができる。特に、本発明に係る化学物質は、癌細胞に対し細胞増殖抑制作用を発揮するため、例えば癌の治療薬として利用が期待される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
以下、本発明の実施形態について説明するが、本発明は多くの異なる形態による実施が可能であり、以下に示す実施形態についての記載にのみ狭く解釈されるものではない。
【００１４】
本発明の一形態に係るコンブレチン酸Ａ及びＢは、下記にそれぞれ示される。
【化９】
2011178675.tif 000006
【化１０】
2011178675.tif 000007
【００１５】
本実施形態に係るコンブレチン酸Ａ及びＢは、後述の実施例から明らかなように、シクンシ科植物Ｃｏｍｂｒｅｔｕｍ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｅから抽出することができるが、これに限定されず、合成することが可能である。
【００１６】
本実施形態に係るコンブレチン酸Ａ及びＢは、癌細胞に対し細胞増殖抑制作用を発揮するため、薬剤、例えば癌の治療薬として利用が期待される。なおコンブレチン酸Ａ及びＢを癌の治療薬として利用する場合、コンブレチン酸Ａ及びＢ並びにこれらの塩のうち少なくともいずれかを有効成分として含有しておくことが好ましい。
【００１７】
また、本実施形態に係る癌の治療薬は、上記コンブレチン酸Ａ及びＢ並びにこれらの塩のうち少なくともいずれかの他、薬学的に許容しうる通常の担体、結合剤、安定化剤、賦形剤、希釈剤（例えば蒸留水）、ｐＨ緩衝剤（例えばリン酸緩衝生理食塩水）、崩壊剤、可溶化剤、溶解補助剤、等張剤等の各種調剤用配合成分を含有させることができる。
【００１８】
またこの癌の治療薬は、患者の性別、体重、症状に見合った適切な投与量を経口的又は非経口的に投与することができる。経口的な投与としては、通常用いられる投与形態、例えば粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤、液剤、懸濁液、油剤、乳化剤等の投与形態を採用することができる。また、非経口的な投与としては、通常用いられる投与形態、例えば上記の液剤、懸濁液等にしたものを直接患部に投与する方法、注射等により投与する形態を採用することができる。
【実施例】
【００１９】
本実施例では、シクンシ科植物Ｃｏｍｂｒｅｔｕｍ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｅからコンブレチン酸Ａ及びＢを抽出し、検討した結果を示す。図１に、コンブレチン酸Ａ及びＢの単離についてのスキームの概略を示しておく。
【００２０】
Ｃｏｍｂｒｅｔｕｍ  ｑｕａｄｒａｎｇｕｌａｒｅ葉部のメタノール抽出物（３００ｇ）を、ダイヤイオンＨＰ２０を担体とするカラム（φ１０×２００ｍｍ）に付し、メタノ−ル／水＝１／１で溶出した画分１Ｂをヘキサン、酢酸エチル、ブタノールを用いて溶媒分配を行い、各可溶部を得た。このうち、ブタノール可溶部について、Ｓｉｌｉｃａ  ｇｅｌ  ＰＳＱ  １００Ｂを担体とするカラム（φ５０×２３０ｍｍ）に付し、クロロホルム、メタノールを用いて溶出し、溶出順に２Ａ−２Ｉの各画分を得た。このうちクロロホルム／メタノ−ル＝９５／５にて溶出した２Ｄを、さらにＯＤＳを担体とするカラム（φ３０×２５０ｍｍ）に付し、溶出順に３Ａ−３Ｅの各画分を得た。得られた３Ａを下記ＨＰＬＣ条件（１）による分取ＨＰＬＣ（ＯＤＳ）に付し、４Ａ−４Ｄの各画分を得た。このうち単一化合物に分離できた４Ｃをコンブレチン酸Ａ（１４．０  ｍｇ）と命名した。また、４Ｂをさらに下記ＨＰＬＣ条件（２）にて精製し、５Ａ−５Ｃを得た。このうち単一化合物に分離できた５Ｂをコンブレチン酸Ｂ（３．７ｍｇ）と命名した・
【表１】
2011178675.tif 000008
【表２】
2011178675.tif 000009
【００２１】
（コンブレチン酸Ａ）
コンブレチン酸Ａは、白色非結晶固体として得られた。またＨＲＥＳＩＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｉｅ）にてｍ／ｚ  ５５３．３５０４［Ｍ＋Ｎａ］＋が観測された。および１Ｈ  ＮＭＲ、１３Ｃ  ＮＭＲ、ＤＥＰＴ、ＨＭＱＣの解析より、分子式がＣ３２Ｈ５０Ｏ６であることが判明した。
【００２２】
また、コンブレチン酸Ａに対して赤外吸収測定（以下「ＩＲ測定」という。）を行い、赤外吸収スペクトル（以下「ＩＲスペクトル」という。）を得た。この結果、３３４６ｃｍ−１、２９７３ｃｍ−１、１７１６ｃｍ−１、１２４５ｃｍ−１、の吸収をそれぞれ観測した。
【００２３】
また、コンブレチン酸Ａに対し、比旋光度［α］Ｄの測定を行った。この結果、旋光角は＋８３．６度であり、光学活性を有することが確認できた。なお下記表３に、旋光角、ＨＲＥＳＩＭＳ、ＩＲ測定の結果を示しておく。
【表３】
2011178675.tif 000010
【００２４】
また、１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにおいて、１個のアセチル基を含む７個のメチル基由来のシグナル、２Ｈ分のオレフィンプロトンのシグナルおよび通常より高磁場側のメチンシグナル２個が観測された。また、１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルにおいては、７個のメチル基に由来する炭素シグナル、１個のアセチル基に由来するカルボニル炭素シグナル、オレフィン炭素シグナル２個、２個のオキシメチン炭素シグナルおよび酸素に結合した４級炭素シグナル１個が観測された。更に、ＣＯＳＹスペクトル、ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣスペクトルの解析より、各プロトンシグナルおよび各炭素シグナルを帰属した。また、ＨＭＢＣスペクトルの解析より、本化合物は下記式に示すシクロアルタン骨格を有する新規トリテルペンであると判明した。なお、２３位オレフィンの立体化学については、結合定数の文献値との比較によりトランスであると決定した。なお、下記に、１Ｈ  ＮＭＲ、１３Ｃ  ＮＭＲのデータについて示しておく。
【表４】
2011178675.tif 000011
【化１１】
2011178675.tif 000012
【００２５】
以上、コンブレチン酸Ａの構造を上記式で示すように決定した。
【００２６】
（コンブレチン酸Ｂ）         
コンブレチン酸Ｂは、白色非結晶固体として得られた。ＨＲＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｉｅ）にてｍ／ｚ  ５５３．３５００［Ｍ＋Ｎａ］＋が観測されたこと、更に１３Ｃ  ＮＭＲ及びＤＥＰＴの解析よりコンブレチン酸Ｂの分子式は、コンブレチン酸Ａのものと同じくＣ３２Ｈ５０Ｏ６であることが判明した。
【００２７】
また、コンブレチン酸Ｂに対してＩＲ測定を行い、ＩＲスペクトルを得た。この結果は非常に上記コンブレチン酸Ａに類似しており、３４２１ｃｍ−１、２９４９ｃｍ−１、１７１５ｃｍ−１、１２４７ｃｍ−１にそれぞれ吸収をそれぞれ観測した。
【００２８】
また、コンブレチン酸Ｂに対し、比旋光度［α］Ｄの測定を行った。この結果、旋光角は＋２５．６度であり、光学活性を有することが確認できた。なお下記表５に、比旋光度、ＨＲＥＳＩＭＳ、ＩＲ測定の結果を示しておく。
【表５】
2011178675.tif 000013
【００２９】
またコンブレチン酸Ｂの１Ｈ  ＮＭＲスペクトルおよび１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルにおいて、コンブレチン酸Ｂのデータは、コンブレチン酸Ａとよく類似していたことから、本化合物はコンブレチン酸Ａと同様にシクロアルタン型トリテルペン構造をもつことが示唆された。一方、コンブレチン酸Ｂでは、コンブレチン酸Ａと比較し、１Ｈ  ＮＭＲにおいてトランス二置換オレフィンシグナルに代わり末端オレフィン由来シグナルが、また、オキシメチンシグナルが１つ多く観測された。また１３Ｃ  ＮＭＲにおいては、オキシメチン炭素由来シグナルが１つ多く観測された。ＣＯＳＹスペクトル、ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣの詳細な解析の結果、本化合物は下記式に示すシクロアルタン骨格を有する新規トリテルペンであると判明した。なお、ＮＭＲスペクトルおよび１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルのデータについて下記表に示しておく。
【表６】
2011178675.tif 000014
【化１２】
2011178675.tif 000015
【産業上の利用可能性】
【００３０】
本発明は新規化合物を有効成分とし、薬剤として産業上の利用可能性を有する。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】実施例におけるコンブレチン酸Ａ及びＢの単離スキ−ムの概略を示す図である。
【図２】コンブレチン酸Ａの１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図３】コンブレチン酸Ａの１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図４】コンブレチン酸ＡのＣＯＳＹスペクトルを示す図である。
【図５】コンブレチン酸ＡのＨＭＱＣスペクトルを示す図である。
【図６】コンブレチン酸ＡのＨＭＢＣスペクトルを示す図である。
【図７】コンブレチン酸Ｂの１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図８】コンブレチン酸Ｂの１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図９】コンブレチン酸ＢのＣＯＳＹスペクトルを示す図である。
【図１０】コンブレチン酸ＢのＨＭＱＣスペクトルを示す図である。
【図１１】コンブレチン酸ＢのＨＭＢＣスペクトルを示す図である。
【図１】
2011178675.tif 000021
【図２】
2011178675.tif 000022
【図３】
2011178675.tif 000023
【図４】
2011178675.tif 000024
【図５】
2011178675.tif 000025
【図６】
2011178675.tif 000026
【図７】
2011178675.tif 000027
【図８】
2011178675.tif 000028
【図９】
2011178675.tif 000029
【図１０】
2011178675.tif 000030
【図１１】
2011178675.tif 000031