(57)【要約】      （修正有）【課題】複合生薬抽出物を有効成分とする糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物を提供する。【解決手段】ゴーヤ、冬虫夏草、地骨皮、桑白皮、鬼剪羽、葛根、黄精、白朮、麥門冬、山茱萸、高麗人参を含む複合生薬抽出物を有効成分とする血糖降下活性及び糖尿性合併症の抑制活性を有する糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物。前記組成物は、２型糖尿病モデル動物のインシュリン分泌を増加させて、インシュリン抵抗性を改善させて、強力な血糖降下活性及び糖尿性合併症抑制活性を示す。又、天然植物性成分であって、安全性が確保されているため、糖尿性疾患の予防または改善及び糖尿病合併症抑制に有用に使用できる。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ゴーヤエタノール抽出物、冬虫夏草抽出物、地骨皮１：桑白皮１〜１０：鬼剪羽１〜１０：葛根１〜１０：黄精１〜１０：白朮１〜５：麥門冬１〜５：山茱萸１〜５：高麗人参１〜５の重量組成比の熱水抽出物から構成される複合生薬抽出物、及びメドハギ抽出物の発酵物を有効成分とする糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物。
【請求項２】
前記複合生薬抽出物が、ゴーヤエタノール抽出物、冬虫夏草抽出物及び熱水抽出物の混合比率が４：１〜４：２〜５の重量比であることを特徴とする、請求項１に記載の糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物。
【請求項３】
前記複合生薬抽出物が、組成物の全重量に対して０．１〜５０重量％含まれることを特徴とする、請求項１に記載の糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物。
【請求項４】
前記ゴーヤ抽出物が、エタノール抽出物を減圧乾燥後、粉末として得られることを特徴とする、請求項２に記載の糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物。
【請求項５】
前記メドハギ抽出物の発酵物が、メドハギ抽出物２０〜４０重量％にアスペルギルス・オリゼー(Aspergillus oryzae)菌株を接種して固体発酵させたことを特徴とする、請求項１に記載の糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物。
【請求項６】
前記メドハギ抽出物の発酵物が、組成物の全重量に対して０．０１〜２０重量％含まれることを特徴とする、請求項１に記載の糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物。
【請求項７】
前記メドハギ抽出物が、水、エタノールまたはこれらの混合溶媒で抽出後、エタノール沸騰点(７８．３℃)以上に高温殺菌して得られることを特徴とする、請求項５に記載の糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物。
【請求項８】
前記糖尿病が、１型糖尿病または２型糖尿病であることを特徴とする、請求項１に記載の糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物。
【請求項９】
前記糖尿病合併症が、神経合併症、糖尿病網膜症、腎不全症、性機能障害、皮膚疾患、高血圧、動脈硬化症、脳卒中、心臓病または壊疽であることを特徴とする、請求項１に記載の糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、複合生薬抽出物を有効成分とする糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物に関し、より具体的には、ゴーヤ、冬虫夏草、地骨皮、桑白皮、鬼剪羽、葛根、黄精、白朮、麥門冬、山茱萸、高麗人参を含む複合生薬抽出物を有効成分とする血糖降下活性及び糖尿性合併症の抑制活性を有する糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖尿病は、２１世紀最大の疾病とされており、現在、世界的に患者は１億７０００万名おり、毎年３２０万名が糖尿病で命を失っている。国内でも糖尿病患者が過去２０年間で１２倍以上に増加して、２０２５年には、国民４人当たり１人が糖尿病患者になる可能性が高いため、国家的な次元の対策が切実に求められている。５０代以上男性の３０％、女性の２０％以上が糖尿病に進行する可能性がある‘糖尿病前段階(pre-diabetes)’という調査結果は、糖尿病の深刻性を意味する。
【０００３】
糖尿病は、遺伝的要因と共に、後天的要因である肥満、食生活、運動不足及びストレスなどにより影響を受ける疾病であって、膵臓細胞で分泌されるインシュリンの分泌障害及び作用不足により誘発された代謝障害と定義されており、ブドウ糖の過剰生産、体脂肪の分解及び蛋白質の浪費を伴い、グルカゴンの分泌が異常に亢進されて代謝上の混乱を引き起こす(Abrams, J.J., Ginsberg, H, et al., Metabolism of cholesterol and plasma triglyceride in nonketoticdiabetes mellitus. Diabetes, 31, pp903-910, 1982)。
【０００４】
したがって、糖尿病は、生体内代謝調節機能に異常をきたし、高血糖症が現れて、尿中に糖が排泄されて、適切な治療と管理が成されないと循環器系などの合併症を伴う慢性的な代謝性疾患である(Mandrup-Poulsen, T., British Medical Journal., 316, pp1221-1225, 1998; Wilson, P. W. F. et al., Am. J. Med., 80, pp3-9, 1986)。
【０００５】
糖尿病は、その発病原因及び症状の治療方法によって、大きくインシュリン依存型糖尿病(insulin dependent diabetes mellitus, IDDM)とインシュリン非依存型糖尿病(non-insulin dependent diabetes mellitus, NIDDM)とに分類できる。韓国の場合、糖尿病患者の９５％以上がインシュリン非依存型糖尿病患者である。糖尿病は、それ自体が大きい疾患というよりは、長期間この疾患にかかっていることにより発病する合併症、例えば、糖尿病性神経症(neuropathy)、網膜症(retinopathy)、白内障(cataract)、腎臓病(nephropathy)などにより、患者たちが正常な生を営めないだけではなく、致命的となる可能性があるため、社会的に大きい問題とされている。
【０００６】
糖尿病治療の最も重要な目標は、血糖値をなるべく正常数値に近く調節することであるが、空腹時血糖と共に食後血糖調節が、糖尿病症状の改善と合併症の予防及び治療において重要であり、治療方法として、薬物療法、食餌療法及び運動療法がある(Ref. Jenkins, D.J.A., Woever et.al., starchy food and glycemic index, Diabetes care, 11, pp149-159, 1988)。   
【０００７】
ところが、よく使用される薬物療法は、インシュリン及び化学的経口血糖降下剤などの化学物質を使用しており、薬物服用による副作用と患者の耐性が絶えず問題となっており、このため、天然物を利用した糖尿病治療剤の開発は、非常に重要な意味を有する。
【０００８】
ゴーヤ(Momordica charantia L.)は、ウリ科(cucurbitaceae)の蔓植物であって、学名は、momordica charantiaであり、キュウリのように長いものを‘ニガウリ(bitter melon)’とも呼ぶ。原産地は、確実には知られていないが、インドを始めとした熱帯アジア地域と推定される。
【０００９】
ゴーヤ成分の中、特に注目を浴びているものは、チャランチン(Charantin)と植物-インシュリン(plant-Insulin)であって、チャランチンは、インシュリンを分泌する膵臓の機能を活発にする脂溶性成分であり、植物-インシュリンは、体内でインシュリンと等しい作用をするペプチドの一種であって、ゴーヤの実と種に多く入っている(Ref. D. Sathishsekar and S. Subramanian, Biol. pharm. Bull. 28(6) pp978-983, 2005)。
【００１０】
冬虫夏草(Cordyceps sinensis SACC.)は、冬虫夏草菌の子実体とそこに寄生する昆虫のコウモリガ幼虫死体との複合体である。冬虫夏草の成分としては、水分１０．８４％、脂肪８．４％、蛋白質２５．３２％、組織維１８．５３％、炭水化物２８．９０％、灰分４．１０％を含有する。この他に、キナ酸(guinic acid)の異性体であるコルデーセプス酸(cordycepic acid)約７％を含有する。冬虫夏草は、強壮作用、免疫系に対する作用、血中コレステロール低下作用及びニコチンアミド(nicotinamide)とストレプトゾトシン(streptozotocin)で誘導した糖尿に対して血糖降下作用がある(Ref. Lo H.C., etal. Life sci., 74, pp2897-2908, 2004)。
【００１１】
一方、上記のような生薬を、１種または２種以上を原料として、それぞれ配合を変えて得られた抽出物を有効成分とする糖尿病予防及び改善効果がある複合抽出物が明かされている。
【００１２】
しかしながら、ゴーヤ、冬虫夏草、地骨皮、桑白皮、鬼剪羽、葛根、黄精、白朮、麥門冬、山茱萸、高麗人参から構成された複合生薬抽出物に対する糖尿病予防及び治療効果に対しては、何の開示や教示もされていない。
【００１３】
本発明は、血糖降下などの機能性効果があると既に知られているゴーヤ抽出物と冬虫夏草、地骨皮、桑白皮、鬼剪羽、葛根、黄精、白朮、麥門冬、山茱萸、高麗人参をもって、マウスの糖尿病誘発による体重変化、食餌効率、空腹時血糖及びグルコース負荷を実験し、生薬を単独使用するより、本発明の複合生薬抽出物を使用することが、抗糖尿効果にさらに優れていることを確認し、本発明を完成した。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】Abrams, J.J., Ginsberg, H, et al., Metabolism of cholesterol and plasma triglyceride in nonketoticdiabetes mellitus. Diabetes, 31, pp903-910, 1982
【非特許文献２】Mandrup-Poulsen, T., British Medical Journal., 316, pp1221-1225, 1998; Wilson, P. W. F. et al., Am. J. Med., 80, pp3-9, 1986
【非特許文献３】Jenkins, D.J.A., Woever et.al., starchy food and glycemic index, Diabetes care, 11, pp149-159, 1988
【非特許文献４】D. Sathishsekarand S. Subramanian, Biol. pharm. Bull. 28(6) pp978-983, 2005
【非特許文献５】Lo H.C., etal. Life sci., 74, pp2897-2908, 2004
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
本発明は、ゴーヤ、冬虫夏草、地骨皮、桑白皮、鬼剪羽、葛根、黄精、白朮、麥門冬、山茱萸、高麗人参を含む複合生薬抽出物、及びメドハギ抽出物の発酵物を有効成分とする血糖降下活性及び糖尿性合併症の抑制活性を有する糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明は、上記目的を達成するために、ゴーヤエタノール抽出物、冬虫夏草抽出物及び地骨皮、桑白皮、鬼剪羽、葛根、黄精、白朮、麥門冬、山茱萸、高麗人参を含む熱水抽出物で構成される複合生薬抽出物、及びメドハギ抽出物の発酵物を有効成分とする糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物を提供する。
【００１７】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００１８】
本発明において、血糖調節は、特に言及しない限り、血糖降下を意味する。
【００１９】
本発明は、ゴーヤエタノール抽出物、冬虫夏草抽出物及び地骨皮１：桑白皮１〜１０：鬼剪羽１〜１０：葛根１〜１０：黄精１〜１０：白朮１〜５：麥門冬１〜５：山茱萸１〜５：高麗人参１〜５の重量組成比の熱水抽出物から構成される複合生薬抽出物、及びメドハギ抽出物の発酵物を有効成分とする糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物を提供する。
【００２０】
本発明のゴーヤは、水溶性エタノール抽出物から減圧乾燥後、粉末として得られることを特徴とする。具体的な例として、ゴーヤの実と種を粉砕して粉末にした後、９５％エタノールに４８時間還流した後、抽出液を常温で減圧乾燥し、黄色粉末状活性成分を取得したものを使用する。
【００２１】
本発明の冬虫夏草は、白きょう菌冬虫夏草を利用するもので、白きょう菌冬虫夏草の白きょう菌菌糸体及び子実体から熱水抽出(hot-water extract)法で抽出して精製した後、凍結乾燥して冬虫夏草抽出物を取得したものを使用する。
【００２２】
前記ゴーヤエタノール抽出物、冬虫夏草抽出物の混合比率が４：１〜４であることが好ましく、本発明の血糖降下活性に重要な意味を有する。
【００２３】
前記地骨皮(Lycii Radicis cortex)は、クコの根皮であって、成分としては、ベタイン、ダウコステリン、アスコルビン酸がある。また、灰分では、Ｓｉ、Ｋ、Ｎａ、Ｃａ、Ｍｇ、Ｆｅ、Ｄ、Ｓ、Ｚｎなどが確認されて、解熱作用、血圧降下及び血糖降下作用がある(Ref. Funagama S. etal, Fetrahedron Lett. 21, pp1355-1356, 1980)。
【００２４】
前記桑白皮(Mori cortex Radicis)は、桑の木または桑の木科の根皮であって、成分としては、mulberrin(C25H26O6, 0.15%)、mulberrochromene(C25H24O6, 0.2%)、cyclomulberrin(C25H24O6, 0.02%)、cyclomulberrochromene(C25H22O6, 0.016%)などがあり、利尿、血圧降下作用、血糖降下作用がある(Ref. Hikino. H etal. plant Med. 159 pp 160(1985))。
【００２５】
前記鬼剪羽(EuonymiLignum Suberalatum)は、ニシキギ科のニシキギの幹に矢のように生えたコルクを切って干したもので、成分としては、コルクのタンニン質と、根皮にはグッタペルカに似たゴム質がある。これは、癌細胞の侵入と転移過程に活性を抑制して、アロキサン(alloxan)で誘導した糖尿(rabbit)に対して血糖や尿糖を下げて、体重を増加させる作用がある(Ref. Kitanaka S. etal. chem.pharm.Bull44, pp615-617, 1996)。
【００２６】
前記葛根(PuerariaeRadix)は、葛(豆科)の周皮を除去した根であって、成分としては、イソフラボン化合物である４，７−ジヒドロキシイソフラボン、アミドゼイン−７−グリコシドなどとクマリンを有しており、解熱鎮静作用、循環系に対する作用とブドウ糖の活性を増加させる血糖降下作用がある(Ref. Hsu H.H etal. planta Med. 68, pp999-1003 (2002))。
【００２７】
前記黄精(polygonati Rhizoma)は、シベリアアマドコロ、ナルコユリまたは眞黄精(ユリ科)の根茎の外皮をむいて蒸したもので、コンバラリン、コンバラマリンなど、少ない量のアルカロイド、アスパラギン、マンニトを始めとしたＭｎ、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｍｇ、Ｚｎ、Ｍｏを含んでいる。滋養強壮作用とストレプトゾトシン(streptozotocin)糖尿を誘発させたマウスの血糖を下げる作用がある(Ref. Kato A. Miura T., planta Med. 60 pp201-203 (1994))。
【００２８】
前記白朮(AtractylodisRhizoma Alba)は、オケラまたは唐白朮(キク科)の根茎または周皮を除去したものである。成分としては、根茎に約１．５％精油とカロリン、イヌリンゴム質、サポニン、クマリンなどを含んでおり、鎮胃、利尿、鎮静作用と血糖降下作用がある(Ref. Konno C. etal. planta Med. 51, pp102 (1985))
【００２９】
前記麥門冬(Liriopis Tuber)は、ユリ科の根の膨大部である。乾いた塊根の約７１％は、単糖(約10%)と分子量の少ない多糖類(粘液43%)である。また、β-シトステロール、ルスコゲニンなどを含有している。解熱鎮咳、抗炎症作用があり、水抽出物には、持続的な血糖降下作用がある(Ref. Lin YC etal. Am.J. Chin Med 31, pp354-579(2003))。
【００３０】
前記山茱萸(CorniFructus)は、ミズキ科に属するサンシュユの果肉であって、種を除去したものである。没食子酸、リンゴ酸、酒石酸とモルロニシドとサポニン成分のロガニンが主成分であって、利尿、血圧降下、滋養強壮及び血糖降下作用がある(Ref. Jeng H etal. Am.J. Chin Med. 25, pp301-306 (1997))
【００３１】
前記ウコギ科に属する高麗人参(GinseugRadix Alba)は、根であって、側根とコルク層を除去したものである。根には、配糖体、精油、アミノ酸、アルカロイド、炭水化物、樹脂、微量元素などが含まれ、滋養強壮作用、免疫増強作用、中枢神経系、心血管系作用、血糖降下作用、脂質代謝作用、抗癌作用、脳下垂体副腎皮質系などに作用をする(Ref. Yokozawa T. etal. Chem.pharm.Bull 33, pp869-872 (1985))。
【００３２】
本発明の組成物の場合、ゴーヤエタノール抽出物、冬虫夏草抽出物及び、前記地骨皮、桑白皮、鬼剪羽、葛根、黄精、白朮、麥門冬、山茱萸及び高麗人参の熱水抽出物から成り、前記熱水抽出物が地骨皮１：桑白皮１〜１０：鬼剪羽１〜１０：葛根１〜１０：黄精１〜１０：白朮１〜５：麥門冬１〜５：山茱萸１〜５：高麗人参１〜５の重量組成比で構成される、複合生薬抽出物を使用することを特徴とする。
【００３３】
具体的な例として、地骨皮２５０ｇ、桑白皮２８０ｇ、鬼剪羽２００ｇ、葛根２５０ｇ、黄精２３０ｇ、白朮１００ｇ、麥門冬１００ｇ、山茱萸１００ｇ、高麗人参１００ｇを細切した後、常温で２０ｌの水に２時間漬けておいてから、８０℃で３時間加熱し、２回目は、１５ｌの水で１．５時間加熱して、３回目は、水１５ｌで１時間加熱、このように３回繰り返して加熱して得た抽出液を、８０℃で減圧濃縮して熱水抽出物を得たものを使用した。
【００３４】
本発明による複合生薬抽出物は、ゴーヤエタノール抽出物、冬虫夏草抽出物及び熱水抽出物から構成されて、これらの混合比率が４：１〜４：２〜５の重量比であることを特徴とする。
【００３５】
本発明による前記メドハギ抽出物の発酵物は、メドハギ抽出物２０〜４０重量％にアスペルギルス・オリゼー(Aspergillus oryzae)菌株を接種して固体発酵させたことを特徴とし、また、前記メドハギ抽出物は、水、エタノールまたはこれらの混合溶媒で抽出後、エタノール沸騰点(７８．３℃)以上に高温殺菌して得られることを特徴とする。
【００３６】
前記メドハギは、根を含んだメドハギ植物全体をきれいに洗浄した後、細かく細切する。前記細切時、甘くて風味に優れた梨、リンゴ、柿、枸杞子からなる群から選択された１種以上の実または果物をさらに添加して製造することができ、前記実または果物は、味が苦くて辛いメドハギの嗜好性を増進させて、老若男女のだれもが飲用できるような飲料や茶を製造することができる。
【００３７】
前記細切されたメドハギ、枸杞子の実やリンゴなどの果物を粉末形態に粉砕した後、エタノールを添加して静置及び熟成させる段階を経る。特にメドハギは、機能性ウェルビーイング漢方薬として利用されているが、エタノールで熟成させた後に抽出しないと、その効能が低下する問題がある。したがって、一般茶や飲料を製造する方法と異なって、メドハギの効能を増加させるために、エタノールで５日〜１０日程度静置保管して、自然熟成させる過程が必要である。
【００３８】
前記回収されたメドハギ抽出物は、熟成過程でエタノールが蒸発して一部消滅するが、まだエタノール成分が含まれてアルコール気が残っているため、飲料として不適な側面があり、その味が苦い短所がある。したがって、本発明者らは、このような問題点を解決するために、残存エタノールを除去するために、エタノール沸騰点(７８．３℃)以上にて５時間程度高温殺菌して、前記残存アルコールを蒸留消滅させながら殺菌して、前記メドハギ抽出物を取得した。
【００３９】
具体的な例として、メドハギを細かく細切した後、９５％エタノールを添加して１０日間静置及び熟成させる。前記熟成されたメドハギ抽出液を、ふるいまたは網紗の布で、固形化された不純物を分離ろ過し、メドハギ抽出液を回収した後、エタノール沸騰点(７８．３℃)以上にて５時間高温殺菌して、残存アルコールを蒸留消滅させながら殺菌し、メドハギ抽出液を取得した。前記取得したメドハギ抽出物を２０ｇ量り取って均質に混合した後、種菌のコウジカビのアスペルギルス・オリゼー(Aspergillus oryzae)ＫＦＲＩ  ００８８８(ＡＴＣＣ  ２２８８７)菌株０．１％を接種させた後、温度３０〜３２℃、湿度７０〜８５％の培養室で３６〜４２時間固体培養して、本発明による組成物を製造した。この際、培養を促進するためにビオチン(biotin)０．００１％を添加して、メドハギ抽出物の発酵物を製造した。
【００４０】
前記メドハギ抽出物は、発酵工程を通じて、原料内の有効成分が多様な有用性成分に転移すると考えられており、特に発酵を通じて多様な酵素成分が生成され、蛋白質の低分子化が起こり、また、ビタミンが合成され、機能性成分が活性型に転移されるなど、その有用性が極大化される。血中ブドウ糖の代謝が円滑に成されなくて発生する糖尿病は、固体発酵産物内の転移された活性成分が体内エネルギー代謝を促進させて、酵素及び細胞機能を活性化させることにより、糖尿病改善及び予防に役立てる。
【００４１】
本発明における糖尿病とは、１型糖尿病または２型糖尿病であり、糖尿病合併症は、神経性合併症、糖尿病性網膜症、腎不全症、性機能障害、皮膚疾患、高血圧、動脈硬化症、脳卒中、心臓病、または壊疽である。即ち、本発明における糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物は、糖尿病哺乳動物の膵臓からインシュリン分泌を増加させて、膵臓インシュリン含量を増加させて、空腹時、血糖を上昇させて、耐糖能(glucose tolerance)を改善させることを特徴とする。
【００４２】
本発明は、ゴーヤエタノール抽出物、冬虫夏草抽出物及び地骨皮、桑白皮、鬼剪羽、葛根、黄精、白朮、麥門冬、山茱萸、高麗人参を含む熱水抽出物で構成される複合生薬抽出物を有効成分として含有する薬学組成物を提供する。
【００４３】
本発明の抽出物を含む薬学組成物は、薬学的組成物の製造に通常に使用する適切な担体、賦形剤及び希釈剤をさらに含むことができる。前記担体、賦形剤及び希釈剤としては、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、澱粉、アカシアゴム、アルギネート、ゼラチン、カルシウムホスフェート、カルシウムシリケート、セルロース、メチルセルロース、微晶質セルロース、ポリビニールピロリドン、水、メチルヒドロキシベンゾエート、プロピルヒドロキシベンゾエート、タルク、マグネシウムステアレート及び鉱物油が挙げられる。
【００４４】
本発明の抽出物を含む組成物は、それぞれ通常の方法により、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン、シロップ及びエアロゾルなどの経口型剤形、外用剤、坐剤及び滅菌注射溶液の形態に剤形化して使用できる。
【００４５】
詳細には、製剤化する場合は、普段使用する充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩解剤、界面活性剤などの希釈剤または賦形剤を使用して調製できる。経口投与のための固形製剤には、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤及びカプセル剤などが含まれて、このような固形製剤は、前記抽出物またはこれの粉末に少なくとも一つ以上の賦形剤、例えば、澱粉、カルシウムカーボネート(calcium carbonate)及びゼラチンなどを混ぜて調製できる。また、単純な賦形剤の他に、マグネシウムステアレート及びタルクのような潤滑剤も使用できる。経口のための液状製剤としては、懸濁剤、内溶液剤、油剤及びシロップ剤などが該当するが、よく使用される単純希釈剤の水及びリキードパラフィンの他に様々な賦形剤、例えば、湿潤剤、甘味剤、芳香剤及び保存剤などが含まれる。非経口投与のための製剤には、滅菌された水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、油剤、凍結乾燥製剤及び坐剤が含まれる。非水性溶剤、懸濁剤としては、プロピレングリコール(propylene glycol)、ポリエチレングリコール及びオリーブオイルのような植物性オイル及びエチルオレートのような注射可能なエステルなどが使用できる。坐剤の基剤としては、witepsol、マクロゴル、tween61、カカオジ、ラウリンジ及びグリセロゼラチンなどが使用できる。
【００４６】
本発明の抽出物の好ましい投与量は、患者の状態及び体重、疾病の程度、薬物形態、投与経路及び期間によって異なるが、当業者により適宜選択できる。しかし、好ましい効果のために、本発明の抽出物は、０．０１〜２０ｇ/ｋｇ、好ましくは０．０１〜１０ｇ/ｋｇの量を一日１回乃至数回に分けて投与できる。組成物において、本発明の抽出物または複合生薬粉末は、全体組成物の総重量に対して０．１〜５０重量％の含量で配合できる。
【００４７】
本発明の薬学組成物は、ラット、マウス、家畜、人間などの哺乳動物に多様な経路で投与できる。投与のあらゆる方式が予想できるが、例えば、経口、直腸または静脈、筋肉、皮下、子宮内硬膜及び脳血管内(Intracerebroventricular)注射により投与できる。
【００４８】
また、本発明は、ゴーヤエタノール抽出物、冬虫夏草抽出物及び地骨皮、桑白皮、鬼剪羽、葛根、黄精、白朮、麥門冬、山茱萸、高麗人参を含む熱水抽出物で構成される複合生薬抽出物を有効成分として含有する血糖降下用健康食品を提供する。
【００４９】
前記抽出物を食品に使用する場合は、それをそのまま使用するか、他の食品または食品成分と共に使用することができ、通常の方法によって適宜使用できる。有効成分の混合量は、その使用目的(予防、健康または治療的処置)によって適宜決定できる。一般に、食品または飲料の製造時には、前記ゴーヤエタノール抽出物、冬虫夏草抽出物及び地骨皮、桑白皮、鬼剪羽、葛根、黄精、白朮、麥門冬、山茱萸、高麗人参を含む熱水抽出物で構成される複合生薬抽出物が、原料に対して１０乃至９０重量％、好ましくは、３０乃至７０重量％の量で添加される。
【００５０】
しかしながら、健康増進、あるいは健康管理を目的とする長期間の摂取の場合は、前記範囲以下の量であってもよく、有効成分は、安全性面で何の問題もないため、前記範囲以上の量でも使用可能であることは確実である。前記食品の種類には特に制限がない。前記物質を添加できる食品の例としては、肉類、ソーセージ、チョコレート、キャンディー類、スナック類、お菓子類、ピザ、麺類、ガム類、アイスクリーム類を含む酪農製品、各種スープ、飲料、お茶、ドリンク剤、アルコール飲料及びビタミン複合剤などがあって、通常の意味での健康食品を全て含む。
【発明の効果】
【００５１】
本発明による糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物は、２型糖尿病モデル動物のインシュリン分泌を増加させて、インシュリン抵抗性を改善させて、強力な血糖降下活性及び糖尿病性合併症抑制活性を示し、また、天然植物性成分であって、安全性が確保されているため、糖尿病性疾患の予防または改善及び糖尿病合併症抑制に有用に使用できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００５２】
本発明を詳細に記述する前に、特定具体例の変形例が行われ得るが、添付の特許請求の範囲の範疇内に含まれるため、本発明は、以下記述する本発明の特定な具体例に限定されないことを理解すべきである。また、使用された用語は、特定具体例を説明するためのものであって、限定するものではない。その代わり、本発明の範囲は、添付した特許請求の範囲により確立される。
【００５３】
本明細書と添付の特許請求の範囲に使用する単数形態は、明確に指示しない限り、複数形態も含むことを理解すべきである。特に定義しない限り、本明細書に使用された全ての専門科学用語は、当業者が普遍的に理解しているものと同じ意味を有する。
【００５４】
(製造例)
(1)ゴーヤ抽出物の製造
ゴーヤの実(1kg)と種(1kg)を、不純物を除去して、水で土と埃を洗った後、１００乃至４００メッシュの大きさの粒子に粉砕して、粉末にした。これを２０ｌの９５％エタノールにて４８時間還流した後、抽出液を常温で減圧乾燥し、３０ｇの黄色粉末状活性成分を取得した。
【００５５】
(2)冬虫夏草抽出物の製造
白きょう菌冬虫夏草１ｋｇを、不純物を除去した後、水で土と埃を洗って細切した後、水２０ｌに常温で２時間漬けておいてから８０℃で３時間加熱して、２回目は、水１５ｌにて１．５時間加熱し、３回目は、水１５ｌにて１時間加熱した。
【００５６】
前記３回繰り返して加熱して得た抽出液を８０℃で減圧濃縮して精製した後、凍結乾燥して、冬虫夏草抽出物１０ｇを取得した。
【００５７】
(3)熱水抽出物の製造
地骨皮２５０ｇ、桑白皮２８０ｇ、鬼剪羽２００ｇ、葛根２５０ｇ、黄精２３０ｇ、白朮１００ｇ、麥門冬１００ｇ、山茱萸１００ｇ、高麗人参１００ｇから不純物を除去した後、水で土と埃を洗って細切した後、１６１０ｇを水２０ｌに常温で２時間漬けておいてから、８０℃で３時間加熱し、２回目は、１５ｌの水にて１．５時間加熱して、３回目は、水１５ｌにて１時間加熱した。
【００５８】
前記３回繰り返して加熱して得た抽出液を、８０℃で減圧濃縮して熱水抽出物２５０ｇを得た。
【００５９】
(4)メドハギ発酵物の製造
メドハギ１ｋｇをきれいに洗浄した後、細かく細切して、２０ｌの９５％エタノールを添加して１０日間静置及び熟成させる。前記熟成されたメドハギ抽出液を、２０〜５０メッシュのふるいまたは網紗の布で、固形化された不純物を分離し、メドハギ抽出液を回収した後、エタノール沸騰点(７８．３℃)以上にて５時間高温殺菌して、残存アルコールを蒸留消滅させながら殺菌し、メドハギ抽出液を取得した。
【００６０】
前記取得したメドハギ抽出物を２０ｇ量り取り均質に混合した後、種菌のコウジカビのアスペルギルス・オリゼー(Aspergillus oryzae)ＫＦＲＩ  ００８８８(ＡＴＣＣ  ２２８８７)菌株０．１％を接種させた後、温度３０〜３２℃、湿度７０〜８５％の培養室で３６〜４２時間固体培養して、本発明による組成物を製造した。この際、培養を促進するためにビオチン(biotin)０．００１％を添加した。
【００６１】
(実施例)糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物の製造
前記方法により抽出したゴーヤエタノール抽出物３０ｇ、冬虫夏草抽出物１０ｇ、熱水抽出物２５０ｇ及び発酵物１０ｇを４０℃以下で混合機で均質に混合して、３００ｇの糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物を製造した。
【００６２】
(試験例１)急性毒性試験
１．試験系
(１)種及び系統：特定病原菌不在(SPF)マウス
(２)供給源：吉林獣医大学研究センター実験動物肉腫育種課
(３)試験系の選択理由
マウスは、毒性試験に適した実験動物であって、急性毒性試験に広く使用されている。本系統のマウスは、豊富な試験基礎資料が蓄積されていて、試験結果の解釈及び評価時、このような資料を利用することが可能である。
(４)週齢及び体重範囲
【００６３】
【表１】
2011032272.tif 000003
【００６４】
(５)検疫及び馴化
動物入手後、外観を肉眼で検査し、７日間試験を施す動物室で馴化させた後、一般症状を観察して、健康な動物のみを試験に提供した。
【００６５】
２．飼育環境
(１)環境条件
本試験は、温度２３±３０℃、相対湿度５５±１５％、照明時間１２時間(午前８時〜午後８時)及び照度１５０〜３００Ｌｕｘに設定された韓国化学研究所安全性研究センター中動物洞の２号室で行われた。試験者らはみんな高圧蒸気滅菌(１２１℃、２０分)された作業服、頭巾、マスク及び手袋などを着用して作業を行った。
【００６６】
(２)飼育環境モニタリング
試験期間中、動物室の温湿度は、自動温湿度測定器により毎時間測定されて、照度などの環境条件は、定期的(3ヶ月に1回)に測定された。環境測定の結果、試験に影響を及ぼすと思われるような変動はなかった。
【００６７】
(３)飼育箱、飼育密度及び飼育箱の識別試験期間の間、ステンレス製網飼育箱(２２０ｗ×４２０Ｌ×２００Ｈ  ｍｍ)を利用して、馴化期間には４匹ずつ、投与と観察期間中は５匹ずつを収容した。試験期間中、飼育箱には、試験番号及び動物番号を記入した個体識別カード(媒体対照群：白色、Ｔ１：黄色)を付した。
【００６８】
(４)飼料及び飲水
i)飼料の給与方法
飼料は、実験動物用固形飼料(吉林飼料公司)を放射線(2.0Mrad)滅菌して、自由に摂取させた。また、当該研究所実験動物室と供給会社で微生物及び汚染物質確認試験を施したところ、本試験に影響を及ぼすような要因は発見されなかった。
ii)飲水の給与方法及び汚染物質の確認
飲水は、上水道水を紫外線殺菌器で消毒した後、自由に摂取させた。飲水に対しては、給与前に予め一般水質検査を行って、検査の結果、試験に影響を及ぼすような要因は発見されなかった。
【００６９】
３．投与量及び試験群の構成
(１)投与量設定
本試験物質は、植物抽出物製剤であって、予備試験の結果、限界容量である２０００ｍｇ/ｋｇの容量で死亡動物が観察されなかったため、限界容量試験の一環として最高容量を２０００ｍｇ/ｋｇにして、媒体のみを投与する媒体対照群をおいた。但し、中国衛生部の‘毒性試験条例’には、限界容量に対する基準がないため、日本厚生省の‘医薬品非臨床試験ガイドライン解説(1997)’を参考した。
(２)試験群の構成、投与濃度及び容量
【００７０】
【表２】
2011032272.tif 000004
【００７１】
(３)群分離及び動物識別
動物の群分離は、以下のように行った。まず、馴化期間中、健康だと判定された動物の体重を測定した後、５ｇ間隔で区分しておいた。そして、雌・雄それぞれの平均体重に近い個体を雌雄それぞれ１０匹ずつを選択した。５ｇ間隔で区分されて選択された雌雄それぞれ１０匹を雌・雄各群に５匹ずつ均等に入るように、体重を利用した無作為法を利用して分配した。動物の個体識別は、皮毛色素マーキング法及び個体識別カード表示法で行った。
【００７２】
４．試験物質の投与
(１)投与液の調製法
投与直前に、注射用生理食塩水を媒体として試験物質を２０００ｍｇ/２０ｍｌ/ｋｇに調製した。媒体対照群(vehicle control)の動物には、媒体の０．５％ＣＭＣのみを投与した。
【００７３】
(２)投与経路及び投与方法
投与前日一晩中絶食させた後、経口投与用ゾンデ(sonde)を装着した注射器を利用して、調製試験物質を強制経口投与した。
【００７４】
(３)投与経路の選択理由
臨床予定経路として経口投与を選択した。
【００７５】
(４)投与回数及び投与期間
投与当日午前に個体別に単回投与した。
【００７６】
(５)投与液量の計算
投与当日の測定された体重を基準にして投与液量(２０ｍｌ/ｋｇ)を計算した。
【００７７】
５．観察及び検査項目
(１)一般症状及び死亡動物の観察
投与当日は、投与後１時間から６時間までは毎時間、投与翌日から１４日までは毎日１回以上一般症状及び死亡動物の有無を観察した。
【００７８】
(２)体重測定
試験に使用された全ての動物に対して、投与開始前と投与後１、３、７及び１４日に体重を測定した。
【００７９】
(３)剖検所見
全体生存動物をＣＯ２ガスで麻酔して開腹して、放血致死させた後、肉眼で全ての内部臓器を観察した。
【００８０】
６．統計学的方法
吉林獣医大学毒性研究センターのＳＯＰによって統計処理を行った。
【００８１】
７．結果
一般症状を観察した結果、全ての試験群では観察期間の間、何の異常症状も観察されず、雌・雄の全ての試験群において、投与後、１、３、７及び１４日目、正常的な体重増加が観察された。
【００８２】
また、死亡率及びＬＤ５０値(動物の半数致死量)を調べた結果、雌・雄の媒体対照群及び２０００ｍｇ/ｋｇ投与群において、試験期間を通じて死亡動物は観察されず、雌・雄動物に対する本試験物質のＬＤ５０値は、それぞれ２０００ｍｇ/ｋｇを上回って、剖検結果も同様に、雌雄の全ての試験群において、肉眼で異常のある剖検所見は観察されなかった。
【００８３】
本発明による糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物に対する単回経口投与毒性試験を、雌雄ＳＤ系統のマウスを利用して行った結果、試験期間の間、死亡率、一般症状、体重変化及び剖検所見において、試験物質の投与に起因した変化は観察されなかった。
【００８４】
(試験例２)長期毒性試験
１．試験薬
本発明による試料は、糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物であって、粉末１ｇは、生薬１０．６ｇに該当し、蒸留水を溶剤として必要な濃度に製造して使用した。
【００８５】
２．実験動物
マウスは、体重が９５〜１０２ｇ、性別は、雌・雄同数の西安医科大学実験動物センター提供ＳＤ系マウス(批准番号０７−００５号)を利用した。
【００８６】
分類は、ＳＤ系マウス１６０匹を無作為に４群に分類、各群４０匹雌雄同数とした。高容量群は、試験薬３．０ｇを１５．０％濃度の懸濁液にして(臨床容量の５０倍)２０ｍｌ/ｋｇを経口投与して、中容量群は、試験薬１．５ｇを７．５％濃度の懸濁液にして、２０ｍｌ/ｋｇを経口投与して、低容量群は、試験薬０．３ｇを１．５％濃度の懸濁液にして、２０ｍｌ/ｋｇを経口投与した。対照群は、蒸留水のみを投与した。
【００８７】
飼育は、空調施設、飼育温度１８〜２４℃、相対湿度４５〜７０％にして、 換風機を利用して換気をして、１日１２時間ずつ照明を与えた。飼料は、西安医科大学実験動物センターで製造した標準固体飼料で飼育して、一般家庭用水で飲水を供給するが、性別を区分して飼育した。
【００８８】
飼育箱当たり５匹を飼育して、３日毎に飼育箱を掃除して、上記条件に１週間適応させた後、実験を行った。
【００８９】
マウスを試験動物に選定した理由は、この動物が毒性試験に適した実験動物であって、急性毒性試験に広く使用されており、特に、ＳＤ系は、試験基礎資料が十分確保され得るため、試験結果の解釈及び評価時、このような資料を利用することが可能であるためである。
【００９０】
３．実験方法(投与方法)
毎日１回経口投与して、投与３ヶ月後、試験動物に対して関連検査を行う。
【００９１】
４．試験項目
(１)一般的状況及び体重
試験に使用された全ての動物に対して神経状態、活動状態、分泌物、飲食習慣、排泄物、毛髪、皮膚などの状態を観察して、２週毎に体重を測定し、変化によって容量を調節した。
【００９２】
(２)血液学的検査
試験に使用された全ての動物に対して、投与３ヶ月後、各群別に大腿動脈から採血して、血蛋白(Hb)、赤血球(RBC)、白血球(WBC)及び血小板(Pt)を検査した。
【００９３】
(３)血液生化学的検査
試験に使用された全ての動物に対して、投与３ヶ月後、大腿動脈から採血して、血液内の各種物質の濃度(ALT, AST, ALP, TP, ALB, BUN, Crea, T-BIL, GLU)を検査した。
【００９４】
(４)尿検査
試験に使用された全ての動物に対して、検査期間にマウス代謝ケースを使用して尿を収集し、色相、尿糖、尿蛋白、赤血球、白血球などを検査した。
【００９５】
(５)心電図
試験に使用された全ての動物に対して、検査期間に標準心電図を検査した。
【００９６】
(６)解剖(主要臓器係数)
試験に使用された全ての動物に対して、検査期間に心臓、肝、脾臓、肺、腎臓、胸腺、副腎、睾丸、卵巣など、九つの臓器を測定した。
【００９７】
(７)組織病理学的検査
試験に使用された全ての動物に対して、心臓、肝、脾臓、肺、腎臓、胃頭部、十二指腸、空腸、結腸、膀胱、腸間膜リンパ節、睾丸、副睾丸、卵巣、子宮、胸骨(骨髄)、大脳、垂体、副腎、胸腺、甲状腺など、２１個組織を検査した。
【００９８】
５．結果
一般的な状態及び体重変化を観察した結果、投与１３週後、一般的な状態は良好であり、毛髪、神経状態、活動状態、目、鼻の分泌物も正常であった。２４時間の食餌習慣も正常であって、体重は段々増加したが、対照群と比較時、変化程度には有意差がなかった。
【００９９】
血液学的影響及び血液生化学的影響を調べるために、投与３ヶ月後、及び回復後、それぞれペントバルビタール(pentobarbital)を皮下注射して麻酔させた後、大腿動脈から採血して、血液検査及び生化学的検査を行った。その結果、血液学的影響は、下記表１から確認できるように、投与群の検査数値に特別な変化がなく、対照群と比較し著しい差はなかった。
【０１００】
【表３】
2011032272.tif 000005
【０１０１】
血液生化学的影響は、アミノトランスフェラーゼ(aminotransferase)、肝機能、腎機能、血糖を調査した結果、下記表２の結果からも確認できるように、高容量投与群の血糖は著しく降下して、対照群に比べて著しい差を確認して、その他の項目別生化学的検査値は正常であって、対照群と統計学的差はなかった。
【０１０２】
【表４】
2011032272.tif 000006
【０１０３】
尿に対する影響を調べた結果、下記表３の結果のように、各試験動物の尿状態は正常であって、尿糖、尿蛋白など、全て陰性であって、顕微鏡検査結果、赤血球と白血球も発見されなかった。これは、試験薬物がマウスの尿に対して何の影響もないことを確認したことである。
【０１０４】
【表５】
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【０１０５】
試験薬物投与３ヶ月後、心電図に対する影響を調べた結果、試験動物の心拍率、Ｓ−波、Ｔ−波など、各波は、対照群と差がなかった。また、試験薬物の投与後、試験動物を解剖して、肉眼で心臓、肝、脾臓、肺、腎臓、胃、空腸、結腸、膀胱、胆嚢、副腎、胸腺、睾丸、子宮、脳、垂体、腹腔、胸腔などの主要臓器及び体腔の色相、形態、病巣などを観察した結果、臓器及び体腔の色相と形態には異常がなく、病巣も観察されなかった。
【０１０６】
前記解剖された試験動物の心臓、肝、脾臓、肺、腎臓、副腎、胸腺、睾丸、卵巣などを採取して、臓器の大きさによって重量を測った後、臓器係数を測定した(ｇ/１００ｇ体重、またはｍｇ/１００ｇ体重)。
【０１０７】
その結果、下記表４の結果からも確認できるように、各臓器係数は、全て正常範囲内に含まれることを確認した。
【０１０８】
【表６】
2011032272.tif 000008
【０１０９】
組織病理学的検査のためにマウス臓器を採取して、その中、対照群及び高容量投与群は各６匹から、中容量群と低容量群も各６匹から採取した。
【０１１０】
臓器組織は、心臓、肝、脾臓、肺、腎臓、胃、十二指腸、空腸、結腸、腸間膜リンパ節、副腎、胸腺、甲状腺、睾丸、副睾丸、卵巣、子宮、胸骨(骨髄)、大脳、垂体と、さらに本試験薬物が血糖降下作用があるため、膵臓腺の組織を追加して、計２１個組織を採取した。
【０１１１】
前記組織は、１０％ホルムアルデヒド溶液で固定し、パラフィン切片を作って、ＨＥで染色した後、顕微鏡で試験群と対照群を比較しながら観察した結果、図１及び図２からも確認できるように、試験群の臓器組織は、構造上明確であり、試験薬物投与時の充血、浮腫、変性、怪死、細胞浸潤などの病理学的変化は観察されなかった。
【０１１２】
したがって、本試験薬物は、病理学的影響が現れなかったことを確認して、試験薬物は、マウスに対する１３週間の反復投与結果、特異な毒性反応はなく、安全な服用量は、体重で換算し、３．０ｇ/ｋｇ体重/ｄａｙであることを確認することができた。
【０１１３】
(試験例３)血糖降下効果の測定
前記実施例で製造された糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物(以下、試験薬物と称する)の血糖降下効果を測定するために、下記のような実験を行った。
【０１１４】
実験動物は、大韓実験動物センターから入手したマウスに、０．８５％食塩水(Saline)に溶解させたストレプトゾトシン(Streptozotoxin;STZ, Sigma.co.,USA)を５日間反復投与して、人為的に糖尿病を誘発した後、前記試験薬物を投与して、血糖の変化を比較観察して、本発明の組成物の治療効果を調べた。
【０１１５】
１．実験方法
実験動物は、大韓実験動物センターから入手して、清浄室内で温度２２±２℃、湿度５５±５％、照明１２Ｌ/１２Ｄの条件下で管理した。
【０１１６】
試験動物は、計４群に分けて、具体的に、第１対照群は、ストレプトゾトシンを投与しなかった対照群として、第２対照群は、ストレプトゾトシンを６０ｍｇ/ｋｇを３乃至５回腹腔投与して、第３対照群は、ストレプトゾトシンと共に、偽薬として０．８５％食塩水(Saline)を投与して、実験群は、前記第３対照群に投与した試料に、本発明による試験薬物を２６７ｍｇ/ｍｌ/ｋｇを投与した。
【０１１７】
試験薬物は、投与当日から２３日まで投与して、４日毎に血糖、尿糖、体重を測定した。
【０１１８】
血糖の測定は、マウスの尻尾静脈から採血して、血糖値を簡易血糖計(アキュトレンド、緑十字)で測定して、測定技術上、最高血中濃度５００ｍｇ/ｄｌまでのみ測定した。
【０１１９】
２．結果
本発明による糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物(以下、試験薬物と称する)に対するマウス個体別血糖値を測定した結果、下記表５で確認した結果、血糖値３００ｍｇ/ｄｌ以上を糖尿病マウスと判定する時、第２対照群では、試験の終わった１０匹の中９匹が、第３対照群では、１０匹の中８匹が糖尿病と判定されたが、試験薬物を投与した実験群では、ストレプトゾトシンマウスの糖尿病発病が抑制されたことを確認することができた。
【０１２０】
【表７】
2011032272.tif 000009
【０１２１】
(試験例４)インシュリン非依存型糖尿病(NIDD)に対する効果
２型(インシュリン依存型)糖尿病に対する試験薬の効果を測定するために、２００７年１２月〜２００８年９月の期間中、中国陝西省西安市と中国吉林省長春市一帯に居住する５１名のインシュリン非依存型(NIDD)糖尿病患者に対して、本試験薬を投与して、臨床治療効果を観察した。
【０１２２】
１．対象者選定
1)選定患者基準(１９９８年ＷＨＯ標準)：血糖を測定して、下記(１)乃至(３)の条件中の一つのみに符合すれば、糖尿病患者と診断する。
(１)空腹時血糖≧７．８ｍｍｏｌ/ｌ(１４０ｍｇ/１００ｍｌ)、または食後血糖≧１１．１ｍｍｏｌ/ｌ(２００ｍｇ/１００ｍｌ)
(２)空腹時血糖は、７．８ｍｍｏｌ/ｌより低いが、ブドウ糖７５ｇでＯＧＴＴを行った時、血糖が≧１１．１ｍｍｏｌ/ｌ(２００ｍｇ/１００ｍｌ)
(３)ＯＧＴＴ  １時間後血糖が≧１１．１ｍｍｏｌ/ｌであるか、または、ＯＧＴＴ２時間後血糖が≧１１．１ｍｍｏｌ/ｌ、または空腹時血糖が≧７．８ｍｍｏｌ/ｌ
【０１２３】
２)試験対象者選定基準
前記１)項の基準に適合する者でも、次の各号の一つに該当すれば、除外する。
(１)試験薬の投薬前より血糖は正常より高いが、食餌療法や運動療法などで空腹時血糖が７．８ｍｍｏｌ/ｌ(１４０ｍｇ/１００ｍｌ)より高いか、食後２時間後の血糖が１１．１ｍｍｏｌ/ｌ(２００ｍｇ/１００ｍｌ)より低い場合
(２)食餌療法規定や薬物服用規定を守らなくて、薬効に影響を与える者
(３)合併症が深刻な者、あるいは他の病歴者
(４)糖尿病が最近１ヶ月内に発病した者または酸中毒及び感染者
(５)治療を中断した者、薬効が判断できないか、資料が不完全な者
(６)インシュリン依存型糖尿病(IDD)患者
(７)１５歳以下であるか、妊婦あるいは産婦
【０１２４】
３)一般
【０１２５】
【表８】
2011032272.tif 000010
【０１２６】
２．試験方法
１)一般的観察
(１)一般的な身体検査
(２)血、糖尿検査及び血、尿ルチン検査
(３)一部患者に対して心臓、腎臓、肝、血中脂質検査
【０１２７】
２)薬効観察
(１)病歴を詳細に確認して、食餌、運動、心理、糖尿病に対する知識などを確認する。
(２)空腹及び食後２時間後、血糖検査(投薬後１０乃至１５日毎に観察する)
(３)耐糖能(glucose tolerance)実験(OGTT)
(４)インシュリン分泌(insulin release)実験(INSRT)
(５)アミノフルクトース(Amino Fructose)測定
【０１２８】
薬物投与期間は、基本６０日を単位とし、上記の(１)項の血糖検査及び(２)項の耐糖能(glucose tolerance)は必ず行って、その他の項目は、患者状況によって行うが、試験薬物の服用後、１０乃至１５日毎に空腹時血糖、尿糖、または食後２時間後、血糖と尿糖を測定した。
【０１２９】
薬物服用開始後、患者は、下記の基準により食餌療法を行って、投与６０日後に、治療前の記録と比較して評価した。
【０１３０】
【表９】
2011032272.tif 000011
【０１３１】
３)治療及び観察
(１)薬物投与方法：３回/日、４カプセル/回、食前３０分乃至食後３０分の間に経口で服用した。以後、血糖降下の程度によって容量を調節し、基本維持量は、３〜４カプセル/日として服用した。
(２)治療期間：６０日を治療周期として、１０乃至１５日間隔で空腹時及び食後２時間後の血糖及び尿糖を検査した。
【０１３２】
４)薬効判定標準
中国糖尿病会議標準及び中和人民共和国衛生部標準によって、
(１)著しい効果
○治療後、症状は基本的になくなって、
○空腹時血糖＜７．２ｍｍｏｌ/ｌ(１３０ｍｇ/１００ｍｌ)、
○食後２時間後の血糖＜８．３ｍｍｏｌ/ｌ(１５０ｍｇ/１００ｍｌ)
○２４時間内の尿糖量＜１０(ｇ)
○血糖値及び２４時間内の尿糖量が、治療前より３０％降下した場合、著しい効果と判定した。
【０１３３】
(２)有効：
○治療後、一般的な症状は改善されて、
○空腹時血糖＜８．３ｍｍｏｌ/ｌ(１５０ｍｇ/１００ｍｌ)、
○食後２時間後の血糖＜１０ｍｍｏｌ/ｌ(１８０ｍｇ/１００ｍｌ)
○２４時間内の尿糖量＜２５(ｇ)
○または、血糖量及び２４時間内の尿糖量が、治療前より１０％降下した場合、有効と判定した。
【０１３４】
(３)無効：
○治療後、症状は改善されず、血糖及び尿糖降下作用が上記の基準外である場合、無効と判定した。
【０１３５】
３．試験結果
投薬前・後の血糖変化を調べた結果を下記表６乃至７に示した。
【０１３６】
【表１０】
2011032272.tif 000012
【０１３７】
【表１１】
2011032272.tif 000013
【０１３８】
上記表６乃至７から確認できるように、治療後、血糖降下値(mmol/l)を見ると、３．１ｍｍｏｌ/ｌ以上降下した症例は、計５１名の中４９名であって、９６．０８％に血糖降下効果があることを確認した。
【０１３９】
【表１２】
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【０１４０】
【表１３】
2011032272.tif 000015
【０１４１】
また、被験者を対象に投薬前後の症状を確認した結果も、治療後、大部分は、治療前に比べて、典型的な症状である咽の渇き、食欲過多、過尿現象がなくなって、特に無力感などが著しく改善されたことを確認して、本発明による試験薬物は、２型糖尿病に明確な治療効果(血糖降下作用)と、糖尿による三多一無症状の改善効果があることを確認することができた。
【０１４２】
(健康補助食品組成物の剤形例１)ドリンク剤
実施例の糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物１００ｍｇ、液状オリゴ糖２５ｇを混合した後、精製水２００ｍｌを加えて、８０ｍｌずつビニールパックに充填し、１３０℃で４〜５秒間滅菌して液剤を製造する。
【０１４３】
(薬学組成物の剤形例１)錠剤
実施例の糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用組成物１００ｍｇ、玉蜀黍澱粉１００ｍｇ、乳糖５０ｍｇ、ステアリン酸マグネシウム２ｍｇを混合した後、通常の錠剤の製造方法によって打錠して錠剤を製造する。
【０１４４】
(薬学組成物剤形例２)カプセル剤
実施例の糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防用１００ｍｇ、結晶性セルロース３ｍｇ、ラクトース１４．８ｍｇ、マグネシウムステアレート０．２ｍｇを混合した後、通常のカプセル剤の製造方法によって上記の成分を混合して、ゼラチンカプセルに充填してカプセル剤を製造する。
【図面の簡単な説明】
【０１４５】
【図１】本発明による抽出物の長期投与に対する膵臓組織の毒性有無を確認した結果である。(Ａ：高容量群、Ｂ：中容量群、Ｃ：低容量群、Ｄ：対照群)
【図２】本発明による抽出物の長期投与に対する肝組織の毒性有無を確認した結果である。(Ａ：高容量群、Ｂ：中容量群、Ｃ：低容量群、Ｄ：対照群)
【図１】
2011032272.tif 000016
【図２】
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