(57)【要約】【課題】コラーゲンゲル収縮促進剤、皮膚のタルミ改善剤、および皮膚引き締め剤の提供。【解決手段】コウガタイゲキ及びタクシャから選ばれる植物又はその抽出物を有効成分とするコラーゲンゲル収縮促進剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
コウガタイゲキ及びタクシャから選ばれる植物又はその抽出物を有効成分とするコラーゲンゲル収縮促進剤。
【請求項２】
コウガタイゲキ及びタクシャから選ばれる植物又はその抽出物を有効成分とする皮膚のタルミ改善剤。
【請求項３】
コウガタイゲキ及びタクシャから選ばれる植物又はその抽出物を有効成分とする皮膚引き締め剤。
【請求項４】
コウガタイゲキ及びタクシャから選ばれる植物又はその抽出物を有効成分とする皮膚老化予防又は改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、コラーゲンゲル収縮促進剤、皮膚の弾力性、タルミ、ハリを改善するための皮膚のタルミ改善用組成物および皮膚の引き締め用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は表皮、真皮、皮下組織の３層に主に分けられ、それらのうち真皮は皮膚の構造の維持に極めて重要であり、コラーゲンやエラスチンといった線維により強固かつ柔軟に造られ、真皮結合組織を形成している。これらコラーゲンやエラスチンといった結合組織の線維を構成するタンパク質は、線維芽細胞により合成／分解されている。線維芽細胞はこれらコラーゲン等の線維と相互作用することにより結合組織の状態をコントロールしている。
【０００３】
通常の線維芽細胞培養条件下、線維芽細胞をコラーゲンゲル中に埋包培養するとコラーゲンゲルは収縮する（例えば、非特許文献１）。コラーゲンゲルの収縮は、細胞数によっても培地中の血清量によっても異なり、またゲル中の線維芽細胞数が多いほど、培地中の血清量が多いほど顕著となる。しかし、このような収縮は、線維芽細胞の存在しないコラーゲンのみのゲルや、リンパ球など浮遊性の細胞を埋包したゲルでは全く起こらない。
【０００４】
皮膚の老化に関しては、老齢者由来の線維芽細胞では若年者由来の細胞と比較してゲルの収縮が低下することが知られており、老化によりゲルの収縮能が低下することが明らかとなっている（例えば、非特許文献２）。コラーゲンゲルの収縮能が低下することは、真皮結合組織を以前の若い頃のように収縮させて、引き締まった状態で維持することが困難となることを示している。実際、例えば、老化するに従い、頬や首筋、腕、その他各部の皮膚に若い頃にはあまり認められなかったタルミが形成されることは周知の事実である。
【０００５】
このようなことから、皮膚の真皮結合組織が収縮力を失い、さらには強度、弾力性を失い、結果としてタルミに至ると考えられる。従って、線維芽細胞を埋包したコラーゲンゲルの収縮能を高め、さらにはゲルの形成強度を高めることができれば、真皮結合組織をより収縮させ、引き締め、強度を増加させることで以前の若い頃のような状態で維持することができると考えられる。また、老化により皮膚のタルミや、低下した皮膚の弾力性およびハリが改善され、皮膚を引き締めることができ、さらには真皮結合組織の破壊に起因する創傷の治癒を促進することもできると考えられる。このような事情からコラーゲンゲルの収縮促進剤の開発が望まれていた。
【０００６】
従来から、線維芽細胞埋包コラーゲンゲルの収縮を促進する物質としては、血清や、エンドセリン（例えば、非特許文献３）、トランスフォーミンググロースファクタβ（例えば、非特許文献４）、プレイトレットグロースファクタ等の成長促進因子、レチノイン酸等の化合物が知られているが、経皮吸収性や安定性、安全性、価格の問題があり、また効果も十分ではなかった。
【０００７】
一方、アカネ科の植物であるコウガタイゲキには、潟下作用、末梢血管拡張作用、アドレナリンによる昇圧作用抑制作用等があること、オモダカ科の植物であるタクシャには利尿作用、脂肪肝改善作用、脂血症軽減作用、動脈粥状硬化症における血中コレステロール低下作用、降圧作用、降血糖作用などがあることが知られている。
しかしながら、これらの植物にコラーゲンゲル収縮促進効果、さらには皮膚の弾力性、タルミの改善効果、および皮膚引き締め効果があることは全く知られていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Review: E. Bell et al. J. Invest. Dermatol.,81,2s(1983）
【非特許文献２】M. Yamato, et al. Mech. Ageing Dev.67,149(1993)
【非特許文献３】C. Guidry et al. J. Cell Biol.,115,873(1991)
【非特許文献４】R. Montesano et al. Pro. Natl, Acad. Sci. USA,85,4894(1988)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、コラーゲンゲル収縮促進剤、皮膚タルミ改善剤、皮膚引き締め剤及び皮膚老化予防又は改善剤を提供することに関する。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、ヒト皮膚線維芽細胞コラーゲン埋包培養系を用いてコラーゲンゲル収縮促進効果を有する物質について鋭意検討したところ、コウガタイゲキ及びタクシャの抽出物に優れたコラーゲンゲル収縮促進作用があり、これがコラーゲンゲル収縮促進剤、皮膚タルミ改善剤、皮膚引き締め剤、更には皮膚老化予防又は改善剤として使用できることを見出した。
【００１１】
すなわち、本発明は、以下の１）〜４）に係るものである。
１）コウガタイゲキ及びタクシャから選ばれる植物又はその抽出物を有効成分とするコラーゲンゲル収縮促進剤。
２）コウガタイゲキ及びタクシャから選ばれる植物又はその抽出物を有効成分とする皮膚タルミ改善剤。
３）コウガタイゲキ及びタクシャから選ばれる植物又はその抽出物を有効成分とする皮膚引き締め剤。
４）コウガタイゲキ及びタクシャから選ばれる植物又はその抽出物を有効成分とする皮膚老化予防又は改善剤。
【発明の効果】
【００１２】
本発明のコラーゲンゲル収縮促進剤等は、皮膚のタルミの改善、弾力性低下の抑制又は改善、及び皮膚の引き締め効果、ひいては皮膚老化予防又は改善効果を発揮し得る医薬品、医薬部外品、化粧品として、或いはこれらへ配合するための素材又は製剤として有用である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明において、コウガタイゲキとは、アカネ科の紅芽大戟(コウガタイゲキ、Knoxia valerianoides Thorel ex Pitard)を、タクシャとはオモダカ科の沢潟(タクシャ、Alisma plantago-aquatica L. var. orientale Samuels (= A. orientale (Sam.) juzep.)（サジオモダカ）)をそれぞれ意味する。
斯かる植物は、それらのいずれの部分（全草、葉、葉柄、茎、根、種子等）も使用することができるが、コウガタイゲキについては、根を用いるのが好ましく、タクシャについては、塊茎を使用するのが好ましい。斯かる植物は、通常、乾燥、粉砕して使用することができる。
【００１４】
本発明の植物抽出物を得るための抽出は、室温又は加熱した状態で溶剤に含浸させるか又はソックスレー抽出器等の抽出器具を用いて行われる溶剤抽出の他に、水蒸気蒸留等の蒸留法を用いて抽出する方法、炭酸ガスを超臨界状態にして行う超臨界抽出法、あるいは圧搾して抽出物を得る圧搾法等による抽出が挙げられる。
【００１５】
抽出溶剤としては、極性溶剤又は非極性溶剤のいずれをも使用することができる。抽出溶剤としては、例えば水；メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等のアルコール類；プロピレングリコール、ブチレングリコール等の多価アルコール類；アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類；酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類；テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等の鎖状及び環状エーテル類；ポリエチレングリコール等のポリエーテル類；スクワラン、ヘキサン、シクロヘキサン、石油エーテル等の炭化水素類；トルエン等の芳香族炭化水素類；ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素類；及び二酸化炭素等が挙げられる。あるいは、上記溶剤の２種以上を組み合わせた混合物、例えば２０〜９５％エタノール水溶液、ベンゼン：酢酸エチル(４：１)混合液、１，３−ブチレングリコール水溶液として利用することもできる。
このうち、水、アルコール水溶液が好ましく、２０〜９５％エタノール水溶液がより好ましい。
【００１６】
抽出物の分離精製手段としては、例えば、抽出物を活性炭処理、液液分配、カラムクロマトグラフィー、液体クロマトグラフィー、ゲル濾過、精密蒸留等を挙げることができる。
【００１７】
斯くして得られる植物抽出物は、抽出液や画分をそのまま用いてもよく、適宜な溶媒で希釈した希釈液として用いてもよく、或いは濃縮エキスや乾燥粉末としたり、ペースト状に調製したものでもよい。また、凍結乾燥し、用時に、通常抽出に用いられる溶剤、例えば水、エタノール、プロピレングリコール、ブチレングリコール、水・エタノール混液、水・プロピレングリコール混液、水・ブチレングリコール混液等の溶剤で希釈して用いることもできる。また、リポソーム等のベシクルやマイクロカプセル等に内包させて用いることもできる。
【００１８】
アルコール水溶液を用いて抽出物を調製する場合の具体例としては、例えば、原料植物の乾燥粉砕物１０００ｇに対して２０〜９５ｖ／ｖ％エタノール５０００ｍＬを加え、３〜７０℃で時々攪拌しながら３〜１０日間抽出を行い、得られた抽出液を濾過し、濾液を５℃で３日間静置後、再度濾過し、上澄みとして植物抽出物を得る方法が挙げられる。
【００１９】
後記実施例で示すとおり、本発明の植物又はその抽出物は、線維芽細胞を埋包したコラーゲンゲルの収縮促進作用を有するため、コラーゲンゲル収縮促進剤として用いることができる。また、コラーゲンゲル収縮促進剤を製造するために使用することができる。
前述したとおり、通常の線維芽細胞培養条件下、線維芽細胞をコラーゲンゲル中に埋包培養するとコラーゲンゲルは収縮する（例えば、非特許文献１）。そして、皮膚の老化に関しては、老齢者由来の線維芽細胞では若年者由来の細胞と比較してゲルの収縮が低下することが知られており、老化によりゲルの収縮能が低下することが明らかとなっている（例えば、非特許文献２）。線維芽細胞を埋包したコラーゲンゲルの収縮能を高め、さらにはゲルの形成強度を高めることができれば、老化による皮膚のタルミや、低下した皮膚の弾力性およびハリが改善され、皮膚を引き締めることができると考えられている。また、真皮結合組織の破壊に起因する創傷の治癒を促進することもできる。
従って、本発明の植物又はその抽出物は、コラーゲンゲルの収縮促進、皮膚のタルミの改善、低下した皮膚の弾力性及びハリの改善、ひいては皮膚老化予防又は改善をするための医薬品、医薬部外品、化粧品として、或いはこれらへ配合するための素材又は製剤として有用である。
【００２０】
本発明の植物又はその抽出物を含む医薬品、医薬部外品或いは化粧品の剤型は、固形製剤又は液体製剤の何れでもよく、医薬品の剤型としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等による経口投与又は注射剤、坐剤、吸入薬、経皮吸収剤、外用剤等による非経口投与が挙げられるが、外用投与が好ましく、皮膚外用剤の形態がより好ましい。
また、化粧品としては、クリーム、軟膏、ゲル、ローション、溶液、パック、ファンデーション等が好適に挙げられる。
【００２１】
上記製剤には、本発明の植物又はその抽出物に、薬学的に許容される担体を配合することができる。斯かる担体としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、希釈剤、浸透圧調整剤、流動性促進剤、吸収助剤、ｐＨ調整剤、乳化剤、防腐剤、安定化剤、酸化防止剤、着色剤、紫外線吸収剤、湿潤剤、増粘剤、光沢剤、活性増強剤、抗炎症剤、殺菌剤、矯味剤、矯臭剤、増量剤、界面活性剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、固着剤、香料、被膜剤等が挙げられる。また、当該製剤には公知の薬効成分を適宜配合することもできる。
【００２２】
特に皮膚外用剤や化粧品の形態とする場合には、植物又はその抽出物の他、通常使用される外用基材、他の薬効成分を配合できる。ここで用いられる外用基材としては、油性基剤をベースとするもの、油／水、水／油型の乳化系基剤をベースとするもの、水をベースとするもののいずれであってもよい。油性基剤としては、特に制限はなく、例えば植物油、動物油、合成油、シリコーン油、脂肪酸、天然または合成のグリセリド等が挙げられる。また、保湿剤、紫外線吸収剤、アルコール類、キレート類、pH調整剤、防腐剤、増粘剤、色素、香料等を任意に組み合わせて配合することができる。また、上記薬効成分としては特に制限はなく、例えば鎮痛消炎剤、殺菌消毒剤、ビタミン類、皮膚柔軟化剤等を必要に応じて適宜使用できる。
【００２３】
上記製剤における本発明植物又はその抽出物の配合量は、通常有効成分の乾燥固形分として０．００００１〜１０質量％が好ましく、０．０００１〜３質量％が特に好ましい。
【００２４】
本発明植物又はその抽出物を医薬品に配合して使用する場合、成人１人当たりの１日の投与量は、０.１〜５０００ｍｇ／６０ｋｇとすることが好ましく、特に１〜１０００ｍｇ／６０ｋｇとするのが好ましい。
【実施例】
【００２５】
製造例  植物抽出物の調製
（１）コウガタイゲキ水抽出物の調製
コウガタイゲキ(Knoxia valerianoides Thorel ex Pitard)の根（新和物産）を４０ｇとり、４００ｍＬの水を加え、７０℃で５時間抽出後、ろ過し、ろ液を濃縮して抽出物８．２０ｇを得た。
【００２６】
（２）コウガタイゲキ５０％エタノール抽出物の調製
コウガタイゲキ(Knoxia valerianoides Thorel ex Pitard)の根（新和物産）を４０ｇとり、４００ｍＬの５０％エタノールを加え、室温で２３日間時々攪拌しながら抽出した。抽出後、ろ過し、ろ液を濃縮して抽出物１２．２５ｇを得た。
【００２７】
（３）タクシャ水抽出物の調製
タクシャ（Alisma plantago-aquatica L. var. orientale Samuels）の根（新和物産）を４０ｇとり、４００ｍＬの水を加え、７０℃で５時間抽出後、ろ過し、ろ液を濃縮して抽出物４．６１ｇを得た。
【００２８】
（４）タクシャ５０％エタノール抽出物の調製
タクシャ（Alisma plantago-aquatica L. var. orientale Samuels）の根（新和物産）を４０ｇとり、４００ｍＬの５０％エタノールを加え、室温で２２日間時々攪拌しながら抽出した。抽出後、ろ過し、ろ液を濃縮して抽出物５．０４ｇを得た。
【００２９】
（５）タクシャ９５％エタノール抽出物の調製
タクシャ（Alisma plantago-aquatica L. var. orientale Samuels）の根（新和物産）を４０ｇとり、４００ｍＬの９５％エタノールを加え、室温で２２日間時々攪拌しながら抽出した。抽出後、ろ過し、ろ液を濃縮して抽出物２．１５ｇを得た。
【００３０】
試験例  コラーゲンゲル収縮促進効果
（１）コラーゲンゲルの作製
既報（J. Cell Science,102,315(1992)、J. Invest. Dermatol,93,792(1989)）に準じた方法でコラーゲンゲルを作製した。すなわち、コラーゲンゲルは氷冷下でコラーゲンゲル溶液（新田ゼラチンtype I-A（3.0mg/ml pH=3））にHEPES（250mM）、DMEM（GIBCO DMEM, low glucose）5倍濃縮溶液、FCS、および精製水を加え、充分に攪拌した後、終濃度が0.001あるいは0.0003（w/v）%（乾燥固形換算重量％）となるように、製造例で調製した各植物抽出物、あるいはコントロールとして等量の50%エタノールを加えた。続いてヒト線維芽細胞（cell system社）の懸濁液を細胞密度が2.5×104cells/wellとなるように上記混合溶液に加えた。このとき、コラーゲンは1.5mg/ml、HEPESは25mM、FCSは2.5%となっている。最後にこの線維芽細胞含有コラーゲンゲル溶液を48穴プレートに600μｌ/wellずつ分注し、37℃で培養することでゲル化させた。
【００３１】
（２）コラーゲンゲル収縮促進効果の評価
上記手法によりゲル化させた後、プレートよりゲルを剥離し、DMEM（2.5%FCS）中に浮遊させて培養し、1日あるいは2日後、ゲルの直径および重量を測定した。各エキスのゲル収縮促進効果は、各植物抽出物を添加したゲルの直径および重量のコントロールに対する減少率で評価した。結果を表１に示す。
【００３２】
【表１】
2011144131.tif 000002
【００３３】
表１に示すとおり、コウガタイゲキ及びタクシャにより、コラーゲンゲルの直径および体積が小さくなり、これら２種類のエキスによるコラーゲンゲル収縮促進効果が認められた。