(57)【要約】【課題】新規なエストロゲン様作用物質を天然物より見いだし、エストロゲン不足に伴う障害の防止と改善のための手段として提供する。【解決手段】イチョウ葉抽出物より分離されたギンゴライド類（特にギンゴライドＡおよびギンゴライドＢ）が有するエストロゲン様作用を皮膚化粧料に配合して利用する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
イチョウ葉抽出物より分離されたギンゴライドＡまたはギンゴライドＢを有効成分とするエストロゲン様作用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エストロゲン様作用剤および皮膚化粧料に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
エストロゲンは女性ホルモンの一種であって成人女性の健康維持に深くかかわっている。このホルモンの分泌不足は、種々の内科的疾患を招くほか、肌の過敏症、弾力性低下、潤いの低下など、好ましくない肌の変化の原因ともなることが知られている。
【０００３】
そこで、エストロゲンの分泌が減少する更年期以後の女性に対し、エストロゲンと同様の作用をする物質を経皮的に投与することによって上記好ましくない肌の変化を防止することが行われており、そのためのエストロゲン様作用剤としては、従来、ステロイド系エ
ストロゲン、非ステロイド系エストロゲン、フラボン系化合物を主とする植物性エストロゲン等が使われている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、新規なエストロゲン様作用物質を天然物より見いだし、前記エストロゲン不足に伴う障害の防止と改善のための手段として提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、イチョウ葉抽出物に含まれる生理活性物質の研究中に見いだされた新規な知見に基づくものであり、イチョウ葉抽出物から分離されたギンゴライドＡまたはＢを有効成分とするエストロゲン様作用剤、および、該エストロゲン様作用剤を配合してなる皮膚化粧料を提供するものである。
【０００６】
イチョウ葉抽出物は血管障害の治療や血流改善等のために、医薬品として、あるいは飲食品添加成分として、内外で利用されている。その場合の主たる有効成分は、量的にも最も多いフラボン配糖体であることが確認されている。フラボン配糖体と共にイチョウ葉抽
出物中に含まれているテルペンラクトンのギンゴライド類については、ＰＡＦ（血小板活性化因子）により誘発される疾患の処置に有効であることが確認されているが、この物質がエストロゲン様作用を有することは知られていなかった。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
ギンゴライド類のエストロゲン様作用は、通常のイチョウ葉抽出物のままでは確認することができない。これは、イチョウ葉抽出物には上記２成分のほかにもビロバライド（セスキテルペンラクトン）、アルキルフェノール類等、多種多様な成分が含まれていてギンゴライド類はその中で３〜５重量％程度しか含まれていない少量成分であるためかと思われるが、ギンゴライド類のエストロゲン様作用の発現を阻害する成分がイチョウ葉抽出物中に含まれている可能性もあり、したがって、いずれにせよ、ギンゴライド類のエストロゲン様作用を利用するにはギンゴライド類の含有率を高めるための精製処理をイチョウ葉抽出物に施すことが必要である。
【０００８】
イチョウ葉抽出物が含有するギンゴライド類にはギンゴライドＡ、同Ｂ、同Ｃ、同Ｊ等があるが、エストロゲン様作用が強いのは、ギンゴライドＡおよびギンゴライドＢである。したがって、イチョウ葉抽出物の精製は全ギンゴライド類の含有率が高くなるだけでなくギンゴライド類の中でのギンゴライドＡおよび（または）ギンゴライドＢの含有率が高くなるように行われることが望ましい。
【０００９】
通常、ギンゴライド類による有意義なレベルのエストロゲン様作用が確認できるのは、ギンゴライド類が約２５重量％以上になるまで精製されたものである。したがって、エストロゲン様作用剤とするのに適当なものはイチョウ葉抽出物を精製してギンゴライド類含
有率を約２５重量％以上、好ましくは約５０重量％以上に高めたものであり、特に好ましいのは、ギンゴライドＡおよびギンゴライドＢの合計量が全ギンゴライド類の約３０重量％以上になるまで精製したものである。
【００１０】
なお、イチョウ葉抽出物が含有するアルキルフェノール類は強いアレルギー原因物質であるから、ギンゴライド類含有率を上記のようにすることとは別に、エストロゲン様作用剤として利用するギンゴライド類がアルキルフェノール類を含まないように精製することは重要である。
【００１１】
イチョウ葉抽出物からギンゴライド類含有率の高い精製物を得る方法、中でもギンゴライドＡおよびギンゴライドＢを高率で含有しアルキルフェノール類は完全に除去されたものを得るための精製法の一例は、後記実施例１のように、吸着樹脂を用い含水脂肪族アル
コールを溶媒としたクロマトグラフィー的な分画と含水アルコールを用いた結晶化処理を繰り返す方法である。このとき用いる脂肪族アルコールとしては、たとえばメタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ブチレングリコール等、炭素数１〜４のものが適当であり、吸着樹脂としては、芳香族系または芳香族系修飾型のものが適当である。使用可能な吸着樹脂の具体例としては、ダイヤイオンＨＰ１０、同２０、同２１、同３０、同４０、同５０、セパビーズＳＰ２０７、同８２５、同８５０（以上、三菱化学社製品）、アンバーライトＸＡＤ２、同４、同７（以上、オルガノ社製品）等がある。
【００１２】
上述のようにして得られた精製物をさらにシリカゲルカラムクロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、結晶化処理等により分画すれば、ギンゴライドＡおよびギンゴライドＢの各単品を得ることもできる。
【００１３】
なお、ギンゴライド類を濃縮するための精製に付するイチョウ葉抽出物は、ギンゴライド類を含有するものであればいかなる抽出法によるものでもよく、またなんらかの精製処理を既に受けたものであっても差し支えない。
【００１４】
上述の方法によって精製されたギンゴライド類は、ほとんど無色かつ無臭であり、またイチョウ葉抽出物よりもアルコールによく溶ける。したがって、クリーム、乳液、ローション、パック、軟こう、浴用剤等、任意の皮膚化粧料に配合してそのエストロゲン様作用を活用することができる。皮膚化粧料に対する好適配合量は、ギンゴライド類として約０．００５〜１０重量％である。
【実施例】
【００１５】
実施例１（ギンゴライド類の精製例）
イチョウ葉１００ｋｇを８０重量％エタノール２０００リットルにて１時間還流抽出し、抽出残渣に８０重量％エタノール１５００リットルを加えて同様の抽出処理を行なった。得られた抽出液３２００リットルを減圧下に１８０リットルまで濃縮したのち不溶化した色素類を珪藻土濾過により濾別し、濾液２１０ｋｇを得た。
【００１６】
上記濾液を多孔性吸着樹脂（ダイヤイオンＨＰ−２１）１００リットルのカラムに通液し、３０重量％エタノール５００リットルで洗浄後、８０重量％エタノール５００リットルを用いて脱着処理を行なった。得られた脱着液を減圧下に濃縮し、凍結乾燥した。得られた乾燥物（収量２．４６ｋｇ；以下、精製物ａという）は、ギンゴライド類含有率１０．３重量％、その内２．１重量％がギンゴライドＡ、１．０重量％がギンゴライドＢであった。
【００１７】
加熱した２０重量％エタノール１５リットルに精製物ａを溶解し、溶液を多孔性吸着樹脂（セパビーズＳＰ−８５０）５０リットルのカラムに通液し、２０重量％エタノール２００リットルで洗浄後、６０重量％エタノール２５０リットルを用いて脱着処理を行なった。得られた脱着液を減圧下に濃縮し、凍結乾燥した。得られた乾燥物（収量１．５４ｋｇ；以下、精製物ｂという）は、ギンゴライド類含有率１５．８重量％、その内３．３重量％がギンゴライドＡ、１．４８重量％がギンゴライドＢであった。
【００１８】
加熱した１０重量％エタノール１０リットルに精製物ｂを溶解し、室温に冷却後、５℃の冷蔵庫内に１週間静置した。生じた沈殿物をデカンテーションで回収し、減圧下に乾燥して得られた乾燥物（収量２２６ｇ；以下、精製物ｃという）は、ギンゴライド類含有率
７９．８重量％、その内５１．２重量％がギンゴライドＡ、２５．６重量％がギンゴライドＢであった。
【００１９】
加熱した８０重量％エタノール１．５リットルに精製物ｃを溶解し、活性炭を加えて還流下に１時間加熱し、室温に冷却後、濾過し、濾液を減圧下に濃縮、乾燥した。得られた乾燥物（収量２１１ｇ；以下、精製物ｄという）は、ギンゴライド類含有率８５．１重量％、その内５４．６重量％がギンゴライドＡ、２６．９重量％がギンゴライドＢであった。
【００２０】
加熱した２０重量％エタノール８リットルに精製物ｄを溶解し、室温に冷却後、生じた結晶を濾別し減圧下に乾燥した。乾燥物（収量９８ｇ；以下、精製物ｅという）は、ギンゴライド類含有率９３．６重量％、その内３８．１重量％がギンゴライドＡ、５２．０重量％がギンゴライドＢであった。
【００２１】
精製物ｅについてさらに含水アルコール溶液から結晶化させる処理を繰り返すことによりギンゴライドＡとギンゴライドＢを分離し、いずれも純度９５％以上のギンゴライドＡおよびギンゴライドＢを得た。
【００２２】
実施例２（エストロゲン様作用の試験）
実施例１で得られた精製物ａ〜ｅおよびギンゴライドＡ，Ｂについて、エストロゲン依存性細胞の増殖に対する影響を調べるＴｈｏｍａｓらの方法（Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｃｅｌｌ．Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．２８Ａ，５９５−６０２，１９９２）によりエストロゲン様作用の試験を行なった。結果を表１に示す（コントロール値を１００とする）。
【００２３】
【表１】
2011032289.tif 000002
【００２４】
実施例３（皮膚化粧料への配合例）
実施例１による精製物ａ、精製物ｃ、精製物ｄまたは精製物ｅを配合して下記組成のローションを常法により製造した。
実施例１によるギンゴライド精製物    ０．５ｇ
グリセリン                          ４ｇ
１，３−ブチレングリコール          ４ｇ
エタノール                          ７ｇ
メチルパラベン                      ０．０５ｇ
クエン酸                            ０．０１ｇ
クエン酸ソーダ                      ０．１ｇ
香料                                ０．０５ｇ
精製水                              残部（全量を１００ｍｌとする）
【００２５】
対照品として、ギンゴライド精製物を配合しないほかは同様組成のローションを製造した。
【００２６】
得られたローションについて、下記の方法による使用試験を行なった。
試験法：２５歳から４２歳の女性４０名を無作為に４群に分け、ギンゴライド精製物配合ローションを右の二の腕に、対照品を左の二の腕に、それぞれ朝夕２回、２週間塗布させる。その後、使用結果について回答させる。
【００２７】
試験結果は表２〜表５のとおりで、ギンゴライド類配合化粧料の使用感および使用効果が優れていることを確認した。
【００２８】
【表２】
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【００２９】
【表３】
2011032289.tif 000004
【００３０】
【表４】
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【００３１】
【表５】
2011032289.tif 000006
【００３２】
実施例４
下記組成の乳液を常法により製造した。
ギンゴライドＡ（実施例１）              ０．２ｇ
セチルアルコール                        ０．５ｇ
ミツロウ                                ２ｇ
ＰＯＥ（１０）モノオレイン酸エステル    １ｇ
グリセリンモノステアリン酸エステル      １ｇ
ヒアルロン酸ナトリウム                  ０．１ｇ
プロピレングリコール                    ５ｇ
エタノール                              ３ｇ
エチルバラベン                          ０．３ｇ
香料                                    ０．０３ｇ
精製水                                  残部（全量を１００ｍｌとする）
【００３３】
実施例５
下記組成のパックを常法により製造した。
ギンゴライドＢ（実施例１）              ０．３ｇ
ポリビニルアルコール                  １５ｇ
ポリエチレングリコール                  ３ｇ
プロピレングリコール                    ７ｇ
エタノール                            １０ｇ
メチルパラベン                          ０．０５ｇ
香料                                    ０．０５ｇ
精製水                                  残部（全量を１００ｍｌとする）
【００３４】
実施例６
下記組成のクリームを常法により製造した。
ギンゴライド精製物ｂ（実施例１）        ０．８ｇ
セトステアリルアルコール                ３．５ｇ
スクワラン                            ４０ｇ
ミツロウ                                ３ｇ
還元ラノリン                            ５ｇ
エチルバラベン                          ０．３ｇ
ポリオキシエチレン                      ２ｇ
ステアリン酸モノグリセリド              ２ｇ
１，３−ブチレングリコール              ５ｇ
香料                                    ０．０３ｇ
グリセリン                              ５ｇ