(57)【要約】【課題】治療的有用性を有する12,13-デスオキシエポチロンの付加的な類似体、さらに現存するエポチロン、デスオキシエポチロンおよびその類似体ならびにそれらの新規類似体を大量に提供しうる方法論を開発することを目的とする。【解決手段】新規の9,10-トランス-12,13-シス-エポチロン化合物を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式：
【化１】
2011195589.tif 000106
[上式中、
R1は、水素または低級アルキルであり;
R2は、置換または非置換のアリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル基であり;
R5およびR6はそれぞれ独立に、水素または保護基であり;
Xは、O、S、C(R7)2またはNR7であり、ここで、R7はそれぞれ独立に、水素または低級アルキルであり;
RBはそれぞれ独立に、水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-CY3、-CHY2、-CH2Y(ここで、Yは、F、Br、Cl、I、ORB'、NHRB'、N(RB')2またはSRB'である);-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;あるいは、1個または複数の水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;または環式もしくは非環式の、直鎖もしくは分枝鎖の、置換もしくは非置換の脂肪族、複素脂肪族、アリールもしくはへテロアリール基で置換されていてもよい環式または非環式の、直鎖または分枝鎖の脂肪族、複素脂肪族、アリールまたはへテロアリールであり、ここで、RB'はそれぞれ独立に、水素;保護基;直鎖または分枝鎖の、置換または非置換の、環式または非環式脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニルまたはへテロアリールアルキニル基であり;
mは、1、2、3または4である] の化合物。
【請求項２】
次式:
【化２】
2011195589.tif 000107
[上式中、
Xは、O、S、C(R7)2またはNR7（ここで、R7はそれぞれ独立に、水素または低級アルキルである）であり;
R5およびR6はそれぞれ独立に、水素または保護基であり;
RBは、水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-CY3、-CHY2、-CH2Y(ここで、Yは、F、Br、Cl、I、ORB'、NHRB'、N(RB')2またはSRB'である);-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;あるいは、1個または複数の水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;または環式もしくは非環式の、直鎖もしくは分枝鎖の、置換もしくは非置換の脂肪族、複素脂肪族、アリールもしくはへテロアリール基で置換されていてもよい環式または非環式の、直鎖または分枝鎖の脂肪族、複素脂肪族、アリールまたはへテロアリールであり、ここで、RB'はそれぞれ独立に、水素;保護基;直鎖または分枝鎖の、置換または非置換の、環式または非環式脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニルまたはへテロアリールアルキニル基であり;
R8は独立に、水素、ハロゲン、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-CY3、-CHY2、-CH2Y(ここで、Yは、F、Br、Cl、I、ORB'、NHRB'、N(RB')2またはSRB'である);-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C=O)R9、-O(C=O)R9、-(C=O)OR9、-O(C=O)OR9;-NH(C=O)R9、-NH(C=O)OR9、-(C=O)NHR9、あるいは、1個または複数のハロゲン、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C=O)R9、-O(C=O)R9、-(C=O)OR9、-O(C=O)OR9;-NH(C=O)R9、-NH(C=O)OR9、-(C=O)NHR9または環式もしくは非環式の、直鎖もしくは分枝鎖の、置換もしくは非置換の脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルもしくはへテロアリールアルキル基で置換されていてもよい環式または非環式の、直鎖または分枝鎖の脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル基であり;
R9はそれぞれ独立に、水素;保護基;環式または非環式の、直鎖または分枝鎖の、置換または非置換の脂肪族、複素脂肪族、アリールまたはへテロアリール基であり;
Vはそれぞれ独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、チオ、アミノ、アルキルアミノあるいは保護されているヒドロキシ、チオまたはアミノであり;tはそれぞれ独立に、0、1または2であり;nはそれぞれ独立に、0〜10である] の化合物。
【請求項３】
RBは、メチルである、請求項2に記載の化合物。
【請求項４】
RBは、-CF3である、請求項2に記載の化合物。
【請求項５】
R8は、メチルである、請求項2から4のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
R8は、-CH2OHである、請求項2から4のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
R8は、-CH2NH2である、請求項2から4のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
次式:
【化３】
2011195589.tif 000108
[上式中、
Xは、O、S、C(R7)2またはNR7（ここで、R7はそれぞれ独立に、水素または低級アルキルである）であり;
R5およびR6はそれぞれ独立に、水素または保護基であり;
RBは、水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-CY3、-CHY2、-CH2Y(ここで、Yは、F、Br、Cl、I、ORB'、NHRB'、N(RB')2またはSRB'である);-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;あるいは、1個または複数の水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;または環式もしくは非環式の、直鎖もしくは分枝鎖の、置換もしくは非置換の脂肪族、複素脂肪族、アリールまたはへテロアリール基で置換されていてもよい環式または非環式の、直鎖または分枝鎖の脂肪族、複素脂肪族、アリールまたはへテロアリールであり、ここで、RB'はそれぞれ独立に、水素;保護基;直鎖または分枝鎖の、置換または非置換の、環式または非環式脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニルまたはへテロアリールアルキニル基であり;
R8は独立に、水素、ハロゲン、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-CY3、-CHY2、-CH2Y(ここで、Yは、F、Br、Cl、I、ORB'、NHRB'、N(RB')2またはSRB'である);-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C=O)R9、-O(C=O)R9、-(C=O)OR9、-O(C=O)OR9;-NH(C=O)R9、-NH(C=O)OR9、-(C=O)NHR9、あるいは、1個または複数のハロゲン、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C=O)R9、-O(C=O)R9、-(C=O)OR9、-O(C=O)OR9;-NH(C=O)R9、-NH(C=O)OR9、-(C=O)NHR9または環式もしくは非環式の、直鎖もしくは分枝鎖の、置換もしくは非置換の脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルもしくはへテロアリールアルキル基で置換されていてもよい環式または非環式の、直鎖または分枝鎖の脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル基であり;
R9はそれぞれ独立に、水素;保護基;環式または非環式の、直鎖または分枝鎖の、置換または非置換の脂肪族、複素脂肪族、アリールまたはへテロアリール基であり;
Vはそれぞれ独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、チオ、アミノ、アルキルアミノあるいは保護されているヒドロキシ、チオまたはアミノであり;tはそれぞれ独立に、0、1または2であり;nはそれぞれ独立に、0〜10である] の化合物。
【請求項９】
RBは、メチルである、請求項8に記載の化合物。
【請求項１０】
RBは、-CF3である、請求項8に記載の化合物。
【請求項１１】
R8は、メチルである、請求項8から10のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
R8は、-CH2OHである、請求項8から10のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
R8は、-CH2NH2である、請求項8から10のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
次式:
【化４】
2011195589.tif 000109
[上式中、
R5およびR6はそれぞれ独立に、水素または保護基であり;
R8は独立に、水素、ハロゲン、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-CY3、-CHY2、-CH2Y(ここで、Yは、F、Br、Cl、I、ORB'、NHRB'、N(RB')2またはSRB'である);-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C=O)R9、-O(C=O)R9、-(C=O)OR9、-O(C=O)OR9;-NH(C=O)R9、-NH(C=O)OR9、-(C=O)NHR9、あるいは、1個または複数のハロゲン、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C=O)R9、-O(C=O)R9、-(C=O)OR9、-O(C=O)OR9;-NH(C=O)R9、-NH(C=O)OR9、-(C=O)NHR9または環式もしくは非環式の、直鎖もしくは分枝鎖の、置換もしくは非置換の脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルもしくはへテロアリールアルキル基で置換されていてもよい環式または非環式の、直鎖または分枝鎖の脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル基であり;
R9はそれぞれ独立に、水素;保護基;環式または非環式の、直鎖または分枝鎖の、置換または非置換の脂肪族、複素脂肪族、アリールまたはへテロアリール基であり;
Vはそれぞれ独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、チオ、アミノ、アルキルアミノあるいは保護されているヒドロキシ、チオまたはアミノであり;
Xは、O、S、C(R7)2またはNR7（ここで、R7はそれぞれ独立に、水素または低級アルキルである）であり;
RBはそれぞれ独立に、水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-CY3、-CHY2、-CH2Y(ここで、Yは、F、Br、Cl、I、ORB'、NHRB'、N(RB')2またはSRB'である);-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;あるいは、1個または複数の水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;または環式もしくは非環式の、直鎖もしくは分枝鎖の、置換もしくは非置換の脂肪族、複素脂肪族、アリールもしくはへテロアリール基で置換されていてもよい環式または非環式の、直鎖または分枝鎖の脂肪族、複素脂肪族、アリールまたはへテロアリールであり、ここで、RB'はそれぞれ独立に、水素;保護基;直鎖または分枝鎖の、置換または非置換の、環式または非環式脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニルまたはへテロアリールアルキニル基である] の化合物。
【請求項１５】
RBは、メチルである、請求項14に記載の化合物。
【請求項１６】
RBは、-CF3である、請求項14に記載の化合物。
【請求項１７】
R8は、メチルである、請求項14から16のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８】
R8は、-CH2OHである、請求項14から16のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９】
R8は、-CH2NH2である、請求項14から16のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０】
以下： 
【化５】
2011195589.tif 000110
から選択される式の化合物。
【請求項２１】
トランス-9,10-デヒドロ-シス-12,13-デヒドロエポチロン化合物。
【請求項２２】
CCRF-CEM細胞系においてIC50が0.01未満であることを特徴とする、トランス-9,10-デヒドロ-シス-12,13-デヒドロエポチロン化合物。
【請求項２３】
CCRF-CEM細胞系においてIC50が0.05未満であることを特徴とする、トランス-9,10-デヒドロ-シス-12,13-デヒドロエポチロン化合物。
【請求項２４】
タキソール耐性CCRF-CEM細胞系においてIC50が0.01未満であることを特徴とする、トランス-9,10-デヒドロ-シス-12,13-デヒドロエポチロン化合物。
【請求項２５】
タキソール耐性CCRF-CEM細胞系においてIC50が0.05未満であることを特徴とする、トランス-9,10-デヒドロ-シス-12,13-デヒドロエポチロン化合物。
【請求項２６】
トランス-9,10-デヒドロ-シス-12,13-デヒドロエポチロン化合物および薬学的に許容できる賦形剤を含有する医薬組成物。
【請求項２７】
請求項1から20までのいずれか一項に記載の化合物および薬学的に許容できる賦形剤を含有する癌を治療するための医薬組成物。
【請求項２８】
クレモフォールをさらに含有する、請求項26または27に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
クレモフォールおよびエタノールをさらに含有する、請求項26または27に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
前記化合物が、1:1のクレモフォール/EtOHに懸濁している、請求項26または27に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
追加の細胞毒剤をさらに含有する、請求項26または27に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
治療有効量の請求項1から25のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容できる塩;および、薬学的に許容できる担体または希釈剤を含有する、癌を治療するための医薬組成物であって、
前記化合物の治療有効量が、患者の体重1kg当り0.001から40mgの化合物を送達するのに十分な量である医薬組成物。
【請求項３３】
治療有効量の請求項1から20のいずれか一項に記載の化合物を含有する癌を治療するための医薬組成物。
【請求項３４】
前記化合物の治療有効量が、体重1kg当り0.001mgから40mgの化合物を送達するのに十分な量である、請求項33に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記化合物の治療有効量が、患者の体重1kg当り0.1mgから25mgの化合物を送達するのに十分な量である、請求項33に医薬組成物。
【請求項３６】
次式:
【化６】
2011195589.tif 000111
[上式中、
R1は、水素または低級アルキルであり;
R2は、置換または非置換のアリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル基であり;
R5およびR6はそれぞれ独立に、水素または保護基であり;
Xは、O、S、C(R7)2またはNR7（ここで、R7はそれぞれ独立に、水素または低級アルキルである）であり;
RBはそれぞれ独立に、水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-CY3、-CHY2、-CH2Y(ここで、Yは、F、Br、Cl、I、ORB'、NHRB'、N(RB')2またはSRB'である);-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;あるいは、1個または複数の水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;または環式もしくは非環式の、直鎖もしくは分枝鎖の、置換もしくは非置換の脂肪族、複素脂肪族、アリールもしくはへテロアリール基で置換されていてもよい環式または非環式の、直鎖または分枝鎖の脂肪族、複素脂肪族、アリールまたはへテロアリールであり、ここで、RB'はそれぞれ独立に、水素;保護基;直鎖または分枝鎖の、置換または非置換の、環式または非環式脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニルまたはへテロアリールアルキニル基であり;
mは、1、2、3または4である] の化合物を調製する方法であって、
前記方法が、
次式:
【化７】
2011195589.tif 000112
の化合物を閉環複分解反応の条件に供する工程を含む方法。
【請求項３７】
次式:
【化８】
2011195589.tif 000113
[上式中、
R1は、水素または低級アルキルであり;
R2は、置換または非置換のアリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル基であり;
R5およびR6はそれぞれ独立に、水素または保護基であり;
Xは、O、S、C(R7)2またはNR7（ここで、R7はそれぞれ独立に、水素または低級アルキルである）であり;
RBはそれぞれ独立に、水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-CY3、-CHY2、-CH2Y(ここで、Yは、F、Br、Cl、I、ORB'、NHRB'、N(RB')2またはSRB'である);-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;あるいは、1個または複数の水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;または環式もしくは非環式の、直鎖もしくは分枝鎖の、置換もしくは非置換の脂肪族、複素脂肪族、アリールもしくはへテロアリール基で置換されていてもよい環式または非環式の、直鎖または分枝鎖の脂肪族、複素脂肪族、アリールまたはへテロアリールであり、ここで、RB'はそれぞれ独立に、水素;保護基;直鎖または分枝鎖の、置換または非置換の、環式または非環式脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニルまたはへテロアリールアルキニル基であり;
mは、1、2、3または4である] の化合物を調製する方法であって、
次式:
【化９】
2011195589.tif 000114
の化合物を閉環複分解反応の条件に供する工程を含む方法。
【請求項３８】
前記閉環複分解反応の条件が、Grubbs触媒を含む、請求項36に記載の方法。
【請求項３９】
前記Grubbs触媒が、塩化トリシクロヘキシルホスフィン[1,3-ビス(2,4,6-トリメチルフェニル)-4,5-ジヒドロイミダゾール-2-イリデン][ベンジリデン]ルテニウム(IV)である、請求項38に記載の方法。
【請求項４０】
次式:
【化１０】
2011195589.tif 000115
[上式中、
R1は、水素または低級アルキルであり;
R2は、置換または非置換のアリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル基であり;
R5およびR6はそれぞれ独立に、水素または保護基であり;
Xは、O、S、C(R7)2またはNR7（ここで、R7はそれぞれ独立に、水素または低級アルキルである）であり;
RBはそれぞれ独立に、水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-CY3、-CHY2、-CH2Y(ここで、Yは、F、Br、Cl、I、ORB'、NHRB'、N(RB')2またはSRB'である);-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;あるいは、1個または複数の水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;または環式もしくは非環式の、直鎖もしくは分枝鎖の、置換もしくは非置換の脂肪族、複素脂肪族、アリールもしくはへテロアリール基で置換されていてもよい環式または非環式の、直鎖または分枝鎖の脂肪族、複素脂肪族、アリールまたはへテロアリールであり、ここで、RB'はそれぞれ独立に、水素;保護基;直鎖または分枝鎖の、置換または非置換の、環式または非環式脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニルまたはへテロアリールアルキニル基であり;
mは、1、2、3または4である] の化合物を調製する方法であって、
次式:
【化１１】
2011195589.tif 000116
の化合物を還元する工程を含む方法。
【請求項４１】
次式:
【化１２】
2011195589.tif 000117
[上式中、
R1は、水素または低級アルキルであり;
R2は、置換または非置換のアリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル基であり;
R5およびR6はそれぞれ独立に、水素または保護基であり;
Xは、O、S、C(R7)2またはNR7（ここで、R7はそれぞれ独立に、水素または低級アルキルである）であり;
RBはそれぞれ独立に、水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-CY3、-CHY2、-CH2Y(ここで、Yは、F、Br、Cl、I、ORB'、NHRB'、N(RB')2またはSRB'である);-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;あるいは、1個または複数の水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;または環式もしくは非環式の、直鎖もしくは分枝鎖の、置換もしくは非置換の脂肪族、複素脂肪族、アリールまたはへテロアリール基で置換されていてもよい環式または非環式の、直鎖または分枝鎖の脂肪族、複素脂肪族、アリールまたはへテロアリールであり、ここで、RB'はそれぞれ独立に、水素;保護基;直鎖または分枝鎖の、置換または非置換の、環式または非環式脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニルまたはへテロアリールアルキニル基であり;
mは、1、2、3または4である] の化合物を調製する方法であって、
次式:
【化１３】
2011195589.tif 000118
[上式中、
R'およびR’’は独立に、C1〜C8直鎖または分枝鎖アルキルあるいは置換または非置換のフェニル、アリール、アルコキシまたはアリールオキシであり;
Xは、クロリドまたはブロミドなどの対アニオンである]
の構造を有するホスフィンオキサイドまたはウィッティヒ試薬と、次式:
【化１４】
2011195589.tif 000119
の構造を有するケトンとを縮合する工程を含む方法。
【請求項４２】
次式：
【化１５】
2011195589.tif 000120
［上式中、
R2は、置換または非置換のアリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル基であり;
R5およびR6はそれぞれ独立に、水素または保護基であり;
RBは-CF3である］の化合物。
【請求項４３】
R2が、置換または非置換のヘテロアリール基である、請求項42に記載の化合物。
【請求項４４】
前記へテロアリール基が、置換または非置換のイソオキサゾリルである、請求項43に記載の化合物。
【請求項４５】
R5およびR6のそれぞれが、水素である、請求項44に記載の化合物。
【請求項４６】
前記へテロアリール基が、置換イソオキサゾリルである、請求項44または45に記載の化合物。
【請求項４７】
前記へテロアリール基が、非置換イソオキサゾリルである、請求項44または45に記載の化合物。
【請求項４８】
前記イソオキサゾリル基が、51脂肪族基で置換されている、請求項46に記載の化合物。
【請求項４９】
前記イソオキサゾリル基が、C1-4アルキル基で置換されている、請求項48に記載の化合物。
【請求項５０】
前記イソオキサゾリル基が、メチル基で置換されている、請求項49に記載の化合物。
【請求項５１】
請求項42から50のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容できる塩；および、薬学的に許容できる担体または希釈剤を含有する医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
新規で有効な癌治療を開発する必要を認識して、本発明は、幅広い生物学的および薬理学的活性を有する大環状化合物を入手可能にする新規の合成方法論、さらにそのような活性を有する新規化合物、新規の治療組成物ならびにこれらの化合物および組成物を使用する方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
エポチロンAおよびB(スキーム1の2aおよび2b)は天然に生じる細胞毒マクロライドであり、これは、セルロース分解マイコバクテリウムSorangium cellulosumから単離された(Hoefleら、Angew.Chem.,Int.Ed.Engl.1996,35,1567頁およびJ.Antibiot.1996,49,560頁;これらはそれぞれ、参照により本願明細書に援用される)。その非常に異なる構造にもかかわらず、エポチロンAおよびBは、チューブリンの重合および微小管アセンブリの安定化による腫瘍細胞の成長阻害を伴うパクリタクセル(タキソール(登録商標))と同じ作用メカニズムを共有している(Bollagら、Cancer Res.1995,55,2325頁;参照により援用される)。最先端の化学療法薬として疑う余地のない臨床的価値にもかかわらず、タキソール(登録商標)は、理想的な薬物には程遠い。かなり低い水溶性は、それ自体が危険性および管理の問題をもたらすクレモフォール(Cremophor)などの処方賦形剤に頼ることを必要とする(Essayanら、J.Allergy Clin.Immunol.1996,97,42頁;参照により本願明細書に援用される)。さらに、タキソール(登録商標)は、多剤耐性(MDR)による失活を受けやすい(Giannakakouら、J.Biol.Chem.1997,272,17118頁;参照により本願明細書に援用される)。しかしながら、エポチロンAおよびBは、MDR腫瘍細胞に対して顕著な効力を保持していることが、証明されている(Kowalskiら、Mol.Biol.Cell 1995,6,2137頁;参照により本願明細書に援用される)。加えて、パクリタクセルに比較して高い水溶性は、エポチロンの処方性に有用である。天然に生じる化合物エポチロンB(2b、EpoB、スキーム1)が、天然産物のエポチロン群の優勢なメンバーであるが、残念ながらこれは、少なくとも異種移植マウスでは、気になる狭い治療指数を示す(Suら、Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1997,36,1093頁;Harrisら、J.Org.Chem.1999,64,8434頁;これらはそれぞれ、参照により本願明細書に援用される)。
【化１】
2011195589.tif 000002
【０００３】
EpoBの治療指数は限られているので、他のエポチロン類似体、特に、12,13-デスオキシエポチロン(desoxyepothilone)が、改善された治療プロファイルをもたらしうるか調査された(米国特許第6242469号、米国特許第6284781号、米国特許第6300355号、米国特許第6369234号、米国特許第6204388号、米国特許第6316630号参照;それぞれ参照により本願明細書に援用される)。様々なマウスモデルで行われたin vivo実験により、12,13-デスオキシエポチロンB(3b、dEpoB、スキーム2)は、マウス異種移植片中の様々な感受性および耐性ヒト腫瘍に対して治療ポテンシャルを有することが証明された(Chouら、Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1998,95,9642頁および15798頁;参照により本願明細書に援用)。最近では、徹底的な比較研究により、これらのデスオキシエポチロンは、他の抗癌剤よりも治療的に優れていることが決定的に証明された(Chouら、Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.2001,98,8113頁;参照により本願明細書に援用)。そのすばらしいin vivoプロファイルにより、dEpoBは、イヌでの毒性評価を通過して、現在では、抗癌剤としてヒト試験に掛けられている。
【化２】
2011195589.tif 000003
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】米国特許第6242469号
【特許文献２】米国特許第6284781号
【特許文献３】米国特許第6300355号
【特許文献４】米国特許第6369234号
【特許文献５】米国特許第6204388号
【特許文献６】米国特許第6316630号
【特許文献７】米国特許出願公開第09/797027号
【特許文献８】米国特許出願公開第09/796959号
【特許文献９】米国特許出願公開第10/236135号
【特許文献１０】国際公開第99/01124号
【特許文献１１】国際公開第99/43653号
【特許文献１２】国際公開第01/64650号
【特許文献１３】米国特許第5977163号
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Hoefleら、Angew.Chem.,Int.Ed.Engl.1996,35,1567頁
【非特許文献２】J.Antibiot.1996,49,560頁
【非特許文献３】Bollagら、Cancer Res.1995,55,2325頁
【非特許文献４】Essayanら、J.Allergy Clin.Immunol.1996,97,42頁
【非特許文献５】Giannakakouら、J.Biol.Chem.1997,272,17118頁
【非特許文献６】Kowalskiら、Mol.Biol.Cell 1995,6,2137頁
【非特許文献７】Suら、Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1997,36,1093頁
【非特許文献８】Harrisら、J.Org.Chem.1999,64,8434頁
【非特許文献９】Chouら、Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1998,95,9642頁および15798頁
【非特許文献１０】Chouら、Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.2001,98,8113頁
【非特許文献１１】Scudieroら、Cancer Res.46:4827-4833,1988
【非特許文献１２】Chouら、Proc.Natl.Sci.USA95:15798-15802,1998
【非特許文献１３】Chouら、Adv.Enzyme Regul.22:27-55,1984
【非特許文献１４】Chouら、CalcuSyn for Windows(Biosoft,Cambridge,UK),1997
【非特許文献１５】Su,D.-S.ら,Angew.Chem.Int.Ed.1997,36,2093
【非特許文献１６】Handbook of Chemistry and Physics,75thEd.
【非特許文献１７】「Organic Chemistry」,Thomas Sorrell,University Science Books,Sausalito:1999
【非特許文献１８】「Protective Groups in Organic Synthesis」Third Ed.Greene,T.W.and Wuts,P.G.,Eds.,John Wiley & Sons,New York:1999
【非特許文献１９】Bayley,H.,Photogenerated Reagents in Biochemistry and Molecular Biology(1983),Elsevier,Amsterdam
【非特許文献２０】S.M.Bergeら、J.Pharmaceutical Sciences,66:1-19(1977)
【非特許文献２１】T.Higuchi and V.Stella,Pro-drugs as Novel Delivery Systems,Vol.14 of the A.C.S.Symposium Series
【非特許文献２２】Edward B.Roche,ed.,Bioreversible Carriers in Drug Design,American Pharmaceutical Association and Pergamon Press,1987
【非特許文献２３】Remington's Pharmaceutical Sciences,Fifteenth Edition,E.W.Martin(Mack Publishing Co.,Easton,Pa.,1975)
【非特許文献２４】http://www.nci.nih.gov/
【非特許文献２５】http://www.fda.gov/cder/cancer/druglistframe.htmのFDA承認腫瘍薬リスト
【非特許文献２６】The Merck Manual,Seventeenth Ed.1999
【非特許文献２７】Ojima,I;Inoue,T.;Chakravarty,S.;J.Fluorine Chem.1999,97
【非特許文献２８】Newman,R.A.;Yang,J.;Finlay,M.R.V.;Cabral,F.,Vourloumis,D.;Stephens,L.C.;Troncoso,P.;Wu,X.;Logothetis,C.J.;Nicolaou,K.C.;Navone,N.M.Cancer Chemother.Pharmacol.2001,48,319-326
【非特許文献２９】Biswas,K.;Lin,H.;Njardarson,J.T.;Chappell,M.D.,Chou,T.C.,Guan,Y.;Tong,W.P.,He,L.;Horwitz,S.B.,Danishefsky,S.J.J.Am.Chem.Soc.2002,124(33);9825-9832
【非特許文献３０】Rivkin,A.;Njardarson,J.T.;Viswas,K;Chou,T.C.;Danishefsky.S.J.J.Org.Chem.2002,67,7737-7740
【非特許文献３１】Chappell,M.D.;Stachel,S.J.;Lee,C.B.;Danishefsky,S.J.Org.Lett.2000,2(11),1633-1636
【非特許文献３２】Biswas,K.;Lin,H.;Njardarson,J.T.;Chappell,M.D.,Chou,T.C.,Guan,Y.;Tong,W.P.,He,L.;Horwitz,S.B.,Danishefsky,S.J.j.Am.Chem.Soc.2002,124(33);9825-9832
【非特許文献３３】Rivkin,A.;Njardarson,J.t.;Biswas,K;Chou,T.C.;Danishefsky,S.J.J.Org.Chem.2002,67,7737-7740
【非特許文献３４】Grubbs,R.h.;Miller,S.J.;Fu,G.C.Acc.Chem.Res.1995,28,446
【非特許文献３５】Trnka,T.M.;Grubbs,R.H.Acc.Chem.Res.2001,34,18
【非特許文献３６】Alkene metathesis in Organic Chemistry Ed.;Fuerstner,A.;Springer,Berlin,1998
【非特許文献３７】Fuerstner,A.Angew.Chem.Int.Ed.Engl.2000,39,3012
【非特許文献３８】Schrock,R.R.Top.Organomet.Chem.1998,1,1
【非特許文献３９】Keck,G.E.;Yates,J.B.J.Am.Chem.Soc.1982,104,5829
【非特許文献４０】Curran,D.P.Synthesis 1988,Part1.pp417-439;Part 2,pp.489
【非特許文献４１】Prie,G.;Thibonnet,J.;Abarbri,m.;Duchene,A.;Parrain,J.Synlett1998,839
【非特許文献４２】Meng,D.;Bertinato,P.;Balog,A.;Su,D.-S.;Kamenecka,T.;Sorensen,E.J.;Danishefsky,S.J.J.Am.Chem.Soc.1997,119,10073
【非特許文献４３】A.Rivkinら、J.Am.Chem.Soc.2003,125,2899
【非特許文献４４】Smart,B.E.J.Fluorine Chem.2001,109,3
【非特許文献４５】Chou,T.C.ら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA.1998、95、15798
【非特許文献４６】Chou,T.C.ら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA.2001、98、8113
【非特許文献４７】Whiteら、J.Am.Chem.Soc.2001,123,5407
【非特許文献４８】ヨシムラら、Angew.Chem.2003,42,2518
【非特許文献４９】Rivkinら、J.Org.Chem.2002,124,7737
【非特許文献５０】ノヨリら、J.Am.Chem.Soc.1987,109,5856
【非特許文献５１】P.Skehanら、J.Natl.Cancer.Inst.1990,82,1107-1112
【非特許文献５２】D.A.Scudieroら、Cancer Res.1988,48,4827-4833
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
12,13-デスオキシエポチロンの有望な治療的有用性を考慮すると、付加的な類似体、さらに現存するエポチロン、デスオキシエポチロンおよびその類似体ならびにそれらの新規類似体を合成するための付加的な合成方法論を調査することが望ましい。特に、この群の化合物の治療的有用性を考慮すると、臨床試験および大規模調製のために、前記のエポチロンまたはデスオキシエポチロンもしくは本願明細書に記載されているものを大量に提供しうる方法論を開発することが望ましい。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】CCRF-CEM、CCRF-CEM/VBLおよびCCRF-CEM/タキソール細胞成長に対するエポチロンのIC50値を示す表である。細胞成長阻害は、前記のように細胞成長のための72時間インキュベーションの後にXTTテトラゾニウムアッセイにより測定した(Scudieroら、Cancer Res.46:4827-4833,1988;参照により本願明細書に援用)。IC50値は、前記のように(Chouら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA95:15798-15802,1998;;参照により本願明細書に援用)、コンピュータープログラム(Chouら、Adv.Enzyme Regul.22:27-55,1984;Chouら、CalcuSyn for Windows(Biosoft,Cambridge,UK),1997;それぞれ、参照により本願明細書に援用される)を使用して、6または7種の各薬物濃度で用量効果関係から決定した。
【図２】トランス-9,10-デヒドロ-12,13-デオキシEpoBの1H NMRスペクトルを示すグラフである。
【図３】トランス-9,10-デヒドロ-12,13-デオキシEpoBの13C NMRスペクトルを示すグラフである。
【図４】LACDAC-閉環オレフィン複分解を使用して、11-Rおよび14-Rエポチロンを合成するためのスキームを示し、9,10-デヒドロエポチロンを介する合成ストラテジーで利用可能ないくつかの置換を詳述する図である。
【図５Ａ】様々なエポチロン化合物およびいくつかの9,10-デヒドロ化合物(化合物7)を含む誘導体に関する、in vitroでのヒト白血病細胞に対する相対細胞毒性データを示す図である。
【図５Ｂ】様々なエポチロン化合物およびいくつかの9,10-デヒドロ化合物(化合物88および89)を含む誘導体に関する、in vitroでのヒト白血病細胞に対する相対細胞毒性データを示す図である。
【図６Ａ】9,10-デヒドロエポチロン類似体を調製するための他の合成ストラテジーを示すグラフである。図6Aは、Macro-Stilleストラテジー、sp3-sp3カップリングストラテジーおよびβ-スズキストラテジーを示している。
【図６Ｂ】9,10-デヒドロエポチロン類似体を調製するための他の合成ストラテジーを示すグラフである。図6Bは、Juliaオレフィン化ストラテジー、Wadsworth-EmmonsストラテジーおよびMacro-Reformatoskyストラテジーを示している。
【図６Ｃ】9,10-デヒドロエポチロン類似体を調製するための他の合成ストラテジーを示すグラフである。図6Cは、McMurryカップリングストラテジーおよびラクタム類似体合成を示している。
【図７】9,10-デヒドロ-12,13-デオキシEpoBの様々な類似体を示している。
【図８】ヒト乳癌MX-1異種移植片を有するヌードマウスでの9,10-デヒドロ-dEpoBおよびdEpoBの治療効果(iv注入、Q2D×3)を示すグラフである。
【図９】ネズミ血漿中でのエポチロンの安定性を示すグラフである。Epo1は、12,13-デオキシEpoBであり、Epo2は、26-F3-12,13-デオキシEpoBであり、Epo3は、(E)-9,10-デヒドロ-12,13-デオキシEpoBであり、Epo4は、26-F3-(E)-9,10-デヒドロ-12,13-デオキシEpoBである。
【図１０】HCT-116異種移植片を有するヌードマウスでのエポチロン類似体の治療効果(iv注入、Q2D×7、n=3)を示すグラフである。矢印は、薬物投与を示している。Epo3は、(E)-9,10-デヒドロ-12,13-デオキシEpoBである。
【図１１】パクリタクセルおよびビンブラスチンに比較しての、in vitroでの腫瘍細胞成長に対する様々なエポチロン類似体の効力および治療指数を示すグラフである。
【図１２】ヌードマウス中のMX-1異種移植片に対するdEpoB、タキソールおよび26-トリF-9,10-deH-dEpoBの効果をまとめた表である。
【図１３】MX-1異種移植片を有するヌードマウスでの腫瘍サイズに対する26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBおよび9,10-デヒドロ-EpoB(6時間のiv注入、それぞれQ2D×6およびQ2D×9)の治療効果を示すグラフである。
【図１４】26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBおよび9,10-デヒドロ-EpoB(6時間の注入、それぞれQ2D×6およびQ2D×9)で治療した後の、ヒト乳癌腫瘍MX-1異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図１５】MX-1を有するヌードマウスでの腫瘍サイズに対する26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBおよび9,10-デヒドロ-EpoB(6時間のiv注入、それぞれQ2D×6およびQ2D×9)の治療効果を示すグラフである。
【図１６】26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBおよび9,10-デヒドロ-EpoB(6時間のiv注入、それぞれQ2D×6およびQ2D×9)で治療した後の、ヒト乳癌腫瘍MX-1異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図１７】HCT-116異種移植片を有するヌードマウスでの腫瘍サイズに対する9,10-デヒドロ-dEpoB(iv注入、Q2D×7)の治療効果を示すグラフである。
【図１８】ヒト大腸癌HCT-116異種移植片を有するヌードマウスの腫瘍サイズに対する9,10-デヒドロ-dEpoB(iv注入、Q3D×5)の効果を示すグラフである。
【図１９】A549/タキソール異種移植片を有するヌードマウスの腫瘍サイズに対する9,10-デヒドロ-dEpoB(6時間のiv注入、Q3D×7)の効果を示すグラフである。
【図２０】26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBおよび9,10-デヒドロ-dEpoB(6時間のiv注入、Q3D×7)で治療されたA549/タキソール異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図２１】A549/タキソール異種移植片を有するヌードマウスの腫瘍サイズに対する26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBおよび9,10-デヒドロ-dEpoB(6時間のiv注入、Q2D×7)の効果を示すグラフである。
【図２２】26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBおよび9,10-デヒドロ-EpoB(6時間のiv注入、Q2D×7)で治療されたA549/タキソール異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフ。
【図２３】ヒであるト大腸癌fHCT-116異種移植片を有するヌードマウスの腫瘍サイズに対する9,10-デヒドロ-EpoB(6時間のiv注入)の効果を示すグラフである。
【図２４】9,10-デヒドロ-EpoB(6時間のiv注入)で治療されたヒト大腸癌HCT-116異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図２５】37℃、様々なエポチロン類似体の存在下での、チューブリンからの微小管形成を示すグラフである。
【図２６】4℃、様々なエポチロン類似体の存在下での、チューブリンからの微小管形成を示すグラフである。
【図２７】HCT-116異種移植片を有するヌードマウスの腫瘍サイズに対する9,10-デヒドロ-dEpoBおよびdEpoB(iv注入、Q2D×6)の効果を示すグラフである。
【図２８】9,10-デヒドロ-dEpoBおよびdEpoB(iv注入、Q2D×6)で治療した後の、HCT-116異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図２９】ヒト大腸癌HCT-116異種移植片を有するヌードマウスの腫瘍サイズに対する9,10-デヒドロ-dEpoB(iv注入、Q3D×4)の効果を示すグラフである。
【図３０】9,10-デヒドロ-dEpoB(5mg/kg、iv注入、X3D×4)で治療された後の、ヒト大腸癌腫瘍HCT-116異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図３１】CCRF-CEM細胞成長に対するエポチロン類似体のIC50値を示す表である。
【図３２】in vitroでのエポチロン類似体の代謝安定性を示す表である。
【図３３】6時間のiv注入での、マウス内のヒト腫瘍異種移植片に対する様々なエポチロン類似体の治療効果を詳述する表である。
【図３４】ヒト大腸癌HCT-116異種移植片を有するヌードマウスの腫瘍サイズに対する9,10-デヒドロ-EpoB(6時間iv注入、Q2D×7)の効果を示すグラフである。
【図３５】9,10-デヒドロ-dEpoBおよびオキサゾール-EpoD(6時間注入、Q2D×7)で治療した後の、ヒト大腸癌腫瘍HCT-116異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図３６】A549/タキソール異種移植片を有するヌードマウスの腫瘍サイズに対する26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBおよび9,10-デヒドロ-dEpoB(6時間iv注入、Q2D×4)の効果を示すグラフである。
【図３７】A549/タキソール異種移植片を有するヌードマウスの腫瘍サイズに対する9,10-デヒドロ-dEpoB(6時間iv注入、Q3D×3)の効果を示すグラフである。
【図３８】20%マウス血漿/PBS中でのエポチロン類似体の安定性を示すグラフである。
【図３９】10%Men Liver S9/PBS中でのエポチロン類似体の安定性を示すグラフである。
【図４０】10%Men Liver S9/PBS中でのEpoD安定性クロマトグラムである。
【図４１】37℃、GTP(A)不在下でのin vitro微小管重合に対する様々なエポチロン類似体の効果およびヒト肺細胞系A549(B)中での様々なエポチロン類似体の細胞毒性を示す表である。
【図４２】35℃または4℃での、エポチロンによる微小管形成の安定化を示すグラフである。
【図４３】Tヒト乳癌(MX-1)異種移植片を有するヌードマウスでの9,10-デヒドロ-dEpoB(6時間注入、Q2D×5)の治療効果を示すグラフである。
【図４４】9,10-デヒドロ-dEpoB(6時間注入、Q2D×8)で治療した後の、ヒト乳癌(MX-1)異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図４５】9,10-デヒドロ-dEpoB(iv注入、Q2D×7)で治療した後の、HCT-116異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図４６】ヒト乳癌(MX-1)腫瘍異種移植片を有するヌードマウスでの腫瘍サイズに対する9,10-デヒドロ-dEpoF、dEpoBおよびタキソール(6時間iv注入、Q2D×6)の治療効果を示すグラフである。
【図４７】9,10-デヒドロ-dEpoF、dEpoBおよびタキソール(6時間注入、Q2D×6)で治療した後の、ヒト乳癌(MX-1)腫瘍異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図４８】ヒト大腸癌HCT-116異種移植片を有するヌードマスでの9,10-デヒドロ-dEpoFおよびdEpoB(6時間注入、Q2D×8)の治療効果を示すグラフである。
【図４９】9,10-デヒドロ-dEpoFおよびdEpoB(6時間注入、Q2D×8)で治療した後の、HCT-116異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図５０】タキソール耐性ヒト肺癌(A549/タキソール)異種移植片を有するヌードマスでの9,10-デヒドロ-dEpoFおよびdEpoB(6時間注入、Q2D×5)の治療効果を示すグラフである。
【図５１】9,10-デヒドロ-dEpoFおよびdEpoB(6時間注入、Q2D×5)で治療した後の、タキソール耐性ヒト肺癌(A549/タキソール)異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図５２】in vitroでの腫瘍成長の阻害および相対治療指数に関する様々なエポチロン類似体の効力を比較する表である。
【図５３】MX-1異種移植片を有するヌードマウスでの9,10-デヒドロ-dEpoB(Q3D×9、6時間注入)の治療効果を示すグラフである。
【図５４】9,10-デヒドロ-dEpoB(Q3D×9、6時間iv注入)で治療した後の、MX-1異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図５５】MX-1異種移植片を有するヌードマウスでの9,10-デヒドロ-エポチロンB(Q3D×9、6時間注入)の治療効果を示すグラフである。
【図５６】9,10-デヒドロ-エポチロンB(Q3D×9、6時間iv注入)で治療した後の、MX-1異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図５７】MX-1異種移植片を有するヌードマウスでの低用量26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoB(6時間iv注入、Q2D×12)の治療効果を示すグラフである。
【図５８】低用量26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoB(6時間iv注入、Q2D×12)で治療した後の、MX-1異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図５９】ヌードマウス内のヒト腫瘍異種移植片に対するエポチロン類似体の化学療法効果を示すグラフである。腫瘍組織(40〜50mg)を0日目に、皮下に移植した。示されているように、腫瘍サイズが約100mm3またはそれ以上に達したら、治療を開始した。既に記載されているようなミニカテーテルおよびプログラム制御可能なポンプを使用して(Su,D.-S.ら,Angew.Chem.Int.Ed.1997,36,2093;Chou,T.C.ら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA.1998,95,15798;それぞれ、参照により本願明細書に援用される)、矢印で示されている全ての治療を6時間i.v.注入で、尾の静脈を介して実施した。各用量群は、4匹以上のマウスから構成された。腫瘍1mm3は腫瘍組織1mgに等しいと仮定して、全体重から腫瘍重量をマイナスしたものを、体重と称した。A.  表1のもの(20mg/kgおよび30mg/kg)と比較しての、低用量の25-トリフルオロ-(E)-9,10-デヒドロ-12,13-デオキシEpoB(10mg/kg)で治療された乳癌MX-1異種移植片。B.  MX-1大異種移植片(500mm3)を、25-トリフルオロ-(E)-9,10-デヒドロ-12,13-デオキシEpoB(25mg/kg)およびdEpoB(30mg/kg)で治療した。C.  25-トリフルオロ-(E)-9,10-デヒドロ-12,13-デオキシEpoB(25mg/kg)およびdEpoB(30mg/kg)で治療された成長の遅いA549肺癌異種移植片。D.  25-トリフルオロ-(E)-9,10-デヒドロ-12,13-デオキシEpoB(20mg/kg)および(E)-9,10-デヒドロ-12,13-デオキシEpoB(4mg/kg)で治療されたA549/タキソール(in vitroでパクリタクセルに対して44倍の耐性)異種移植片。28日目のdeH-dEpoBでの治療は、顕著で迅速な体重低下により飛ばした。
【図６０Ａ】C-21改質9,10-(E)-デヒドロ-エポチロンの合成を示す図である。図60Aは、26-トリフルオロ-21-メチルアミノ-9,10-(E)-デヒドロ-12,13-デスオキシエポチロンBの合成を示している。
【図６０Ｂ】C-21改質9,10-(E)-デヒドロ-エポチロンの合成を示す図である。図60Bは、26-トリフルオロ-21-ジメチルアミノ-9,10-(E)-デヒドロ-12,13-デスオキシエポチロンBを合成する際の中間体としての26-トリフルオロ-21-アミノ-9,10-(E)-デヒドロ-12,13-デスオキシエポチロンBを調製するための合成スキームである。
【図６１】腫瘍細胞系CCRF-CEMおよびその薬剤耐性亜系に対するC-21改質エポチロンのIC50値の表である。
【図６２】ヒトT-細胞リンパ芽球性白血病CCRF-CEM異種移植片を有するヌードマウスでの26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBおよびタキソール(6時間iv注入、Q2D×8)の治療効果を示すグラフである。
【図６３】25-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBおよびタキソール(6時間iv注入、Q2D×8)で治療した後の、ヒトT-細胞リンパ芽球性白血病CCRF-CEM異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図６４】ヒトT-細胞リンパ芽球性白血病CCRF-CEM/タキソール異種移植片(タキソール耐性)を有するヌードマウスでの26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBおよびタキソール(6時間iv注入、Q2D×7、×5)の治療効果を示すグラフである。
【図６５】26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBおよびタキソール(6時間iv注入、Q2D×7、×5)で治療した後の、ヒトT-細胞リンパ芽球性白血病CCRF-CEM/タキソール異種移植片(タキソール耐性)を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図６６】ヒト大腸癌HCT-116異種移植片を有するヌードマウスでの26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBおよびタキソール(Q2D×4、×2、6時間iv注入)の治療効果を示すグラフである。
【図６７】26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBおよびタキソール(Q2D×4、×2、6時間iv注入)で治療した後の、ヒト大腸癌HCT-116異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図６８】MX-1異種移植片を有するヌードマウスでの9,10-デヒドロ-EpoB(6時間iv注入)の治療効果を示すグラフである。
【図６９】9,10-デヒドロ-dEpoB(6時間iv注入)で治療した後の、ヒト乳癌MX-1異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図７０】ヒトT-細胞リンパ芽球性白血病CCRF-CEM/タキソール異種移植片(タキソール耐性)を有するヌードマウスでの9,10-デヒドロ-EpoB(6時間iv注入、Q3D×5、×2)の治療効果を示すグラフである。
【図７１】9,10-デヒドロ-EpoB(6時間iv注入、Q3D×5、×2)で治療した後の、ヒトT-細胞リンパ芽球性白血病CCRF-CEM/タキソール異種移植片(タキソール耐性)を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図７２】ヒト乳癌MX-1異種移植片を有するヌードマウスでの26-トリフルオロ-dEpoBおよび26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoF(Q2D×11、iv注射)の治療効果を示すグラフである。
【図７３】26-トリフルオロ-dEpoBおよび26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoF(Q2D×11、iv注射)で治療した後の、ヒト乳癌MX-1異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図７４】ヒト乳癌MX-1異種移植片を有するヌードマウスでの9,10-デヒドロ-dEpoB(Q3D×9、6時間iv注入)の治療効果を示すグラフである。
【図７５】9,10-デヒドロ-dEpoB(Q3D×9、6時間iv注入)で治療した後の、ヒト乳癌MX-1異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【図７６】ヒト肺癌(MX-1)異種移植片を有するヌードマウスでの26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoF(6時間iv注入およびiv注射)の治療効果を示すグラフである。
【図７７】26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoF(6時間iv注入およびiv注射)で治療した後の、MX-1異種移植片を有するヌードマウスの体重変化を示すグラフである。
【０００８】
定義
本発明のいくつかの化合物および特定の官能基の定義を、下記でさらに詳述する。本発明では、化学元素を、元素周期表CAS版、Handbook of Chemistry and Physics,75thEd.の内表紙に従い同定し、特定の官能基は通常、本願明細書に記載されているように定義する。加えて、有機化学の一般的な原則、さらに、特定の官能基および反応性は、「Organic Chemistry」,Thomas Sorrell,University Science Books,Sausalito:1999に記載されており、この内容を全て、参照により本願明細書に援用する。さらに、本願明細書に記載されている合成方法は、様々な保護基を利用することは、当技術分野の専門家であれば認めるであろう。本願明細書で使用する場合、「保護基」との用語は、特定の官能基、例えば、O、SまたはNが一時的にブロックされて、多官能可能化合物中のその他の反応部分での選択的に反応を実施することができることを意味する。好ましい実施形態では、保護基は、良好な収率で選択的に反応して、予定されている反応に対して安定な保護基質をもたらし;保護基は、他の官能基を攻撃しない容易に入手可能で、好ましくは非毒性の試薬により良好な収率で選択的に除去できなければならず;保護基は、容易に分離可能な誘導体を形成し(さらに好ましくは、新たな立体中心を生じることなく);保護基は、さらなる部位の反応を回避するために最低限の付加的官能性を有する。本願明細書で詳述するように、酸素、イオウ、窒素および炭素保護基を利用することができる。保護基の例を本願明細書で詳述するが、本願明細書は、これらの保護基に限定することを意図してなく;むしろ、前記の基準を使用して、様々な他の同等の保護基を容易に同定し、本発明の方法で利用することができることは認められるであろう。加えて、様々な保護基が「Protective Groups in Organic Synthesis」Third Ed.Greene,T.W.and Wuts,P.G.,Eds.,John Wiley & Sons,New York:1999に記載されており、その内容の全てを、参照により本願明細書に援用する。
本願明細書に記載されているように、化合物は、いくつかの置換基または官能基で置換されていてもよいことは認められるであろう。通常、「されていてもよい」との用語が先にあるかないかにかかわらず、また、置換基が本発明の式に含まれているかどうかにかかわらず、「置換されている」との用語は、特定の置換基の基での所定の構造中の水素基の置換に関する。所定の構造中の複数の位置が、記載の基から選択される複数の置換基で置換されていてもよい場合には、置換基は、各位置で同じか、異なってよい。本願明細書で使用する場合、「置換(されている)」との用語は、有機化合物の許容可能な置換基全てを含むと考えられる。広い態様では、許容可能な置換基には、有機化合物の非環式および環式、分枝鎖および非分枝鎖、炭素環および複素環、芳香族および非芳香族置換基が含まれる。本発明では、窒素などのヘテロ原子は、水素置換基および/またはヘテロ原子の原子価を満たす本願明細書に記載の有機化合物の許容可能な置換基を有してもよい。さらに、本発明は、有機化合物の許容可能な置換基により何ら限定されるものではない。本発明により構想される置換基および変数の組合せは好ましくは、例えば、これに限られないが癌を含む増殖性疾患を治療する際に有用な安定な化合物の形成をもたらすものである。本願明細書で使用する場合、「安定な」との用語は好ましくは、製造が可能であるような十分な安定性を有し、検出されるに十分な期間にわたって、好ましくは、本願明細書に詳述される目的に有用であるに十分な期間にわたって、化合物の完全性を維持する化合物に関する。
【０００９】
本願明細書で使用する場合、「脂肪族」との用語には、1個または複数の官能基で置換されていてもよい飽和および不飽和の、直鎖(即ち、非分枝鎖)、分枝鎖、環式または多環式脂肪族炭化水素が含まれる。当技術分野の専門家であれば認めるように、「脂肪族」には、これらに限られないが、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニルおよびシクロアルキニル基が含まれるものとする。したがって、本願明細書で使用する場合、「アルキル」との用語には、直鎖、分枝鎖および環式アルキル基が含まれる。同様の慣習が、「アルケニル」、「アルキニル」などの他の一般名にも当てはまる。さらに、本願明細書で使用する場合、「アルキル」、「アルケニル」、「アルキニル」などには、置換または非置換の基が包含される。いくつかの実施形態では、本願明細書で使用する場合、「低級アルキル」が、1〜6個の炭素原子を有するアルキル基(環式、非環式、置換、非置換、分枝鎖または非分枝鎖)を指すために使用される。
【００１０】
いくつかの実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニルおよびアルキニル基は、1〜20個の脂肪族炭素原子を含有する。いくつかの他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニルおよびアルキニル基は、1〜10個の脂肪族炭素原子を含有する。さらに他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニルおよびアルキニル基は1〜8個の脂肪族炭素原子を含有する。さらに他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニルおよびアルキニル基は、1〜6個の脂肪族炭素原子を含有する。さらに他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニルおよびアルキニル基は、1〜4個の炭素原子を含有する。したがって、脂肪族基の例には、これらに限られないが例えば、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、-CH2-シクロプロピル、アリル、n-ブチル、s-ブチル、イソブチル、t-ブチル、シクロブチル、-CH2-シクロブチル、n-ペンチル、s-ペンチル、イソペンチル、t-ペンチル、シクロペンチル、-CH2-シクロペンチル、n-ヘキシル、s-ヘキシル、シクロヘキシル、-CH2-シクロヘキシル基などであり、これらはさらに、1個または複数の置換基を有してもよい。アルケニル基には、これらに限られないが例えば、エテニル、プロペニル、ブテニル、1-メチル-2-ブテン-1-イルなどが含まれる。アルキニル基の例には、これらに限られないが、エチニル、2-プロピニル(プロパルギル)、1-プロピニルなどが含まれる。
【００１１】
本願明細書で使用される「アルコキシ」または「チオアルキル」との用語は、酸素原子を介して、またはイオウ原子を介して親分子基に結合している前記で定義したようなアルキル基である。いくつかの実施形態では、アルキル基は、1〜20個の脂肪族炭素原子を含有する。いくつかの他の実施形態では、アルキル基は、1〜10個の脂肪族炭素原子を含有する。さらに他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニルおよびアルキニル基は、1〜8個の脂肪族炭素原子を含有する。さらに他の実施形態では、アルキル基は、1〜6個の脂肪族炭素原子を含有する。さらに他の実施形態では、アルキル基は、1〜4個の脂肪族炭素原子を含有する。アルコキシの例には、これらに限られないが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、n-ブトキシ、t-ブトキシ、ネオペントキシおよびn-ヘキソキシが含まれる。チオアルキルの例には、これらに限られないが、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、イソプロピルチオ、n-ブチルチオなどが含まれる。
【００１２】
「アルキルアミノ」との用語は、構造-NHR'を有する基(R'は前記で定義されたアルキルである)である。いくつかの実施形態では、アルキル基は、1〜20個の脂肪族炭素原子を含有する。いくつかの他の実施形態では、アルキル基は、1〜10個の脂肪族炭素原子を含有する。さらに他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニルおよびアルキニル基は、1〜8個の脂肪族炭素原子を含有する。さらに他の実施形態では、アルキル基は、1〜6個の脂肪族炭素原子を含有する。さらに他の実施形態では、アルキル基は、1〜4個の脂肪族炭素原子を含有する。アルキルアミノの例には、これらに限られないが、メチルアミノ、エチルアミノ、イソ-プロピルアミノなどが含まれる。
【００１３】
本発明の化合物の前記の脂肪族(および他の)基の置換基のいくつかの例には、これらに限られないが、脂肪族;複素脂肪族;アリール;ヘテロアリール;アリールアルキル;ヘテロアリールアルキル;アルコキシ;アリールオキシ;ヘテロアルコキシ;ヘテロアリールオキシ;アルキルチオ;アリールチオ;ヘテロアルキルチオ;ヘテロアリールチオ;F;Cl;Br;I;-OH;-NO2;-CN;-CF3;-CH2CF3;-CHCl2;-CH2OH;-CH2CH2OH;-CH2NH2;-CH2SO2CH3;-C(O)Rx;-CO2(Rx);-CON(Rx)2;-OC(O)Rx;-OCO2Rx;-OCON(Rx)2;-N(Rx)2;-S(O)2Rx;-NRx(CO)Rx;-NRx(CO)Rxが含まれ、ここで、Rxはそれぞれ独立に、これらに限られないが、脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキルが含まれ、これらの前記または本願明細書に記載の脂肪族、複素脂肪族、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル置換基は、置換または非置換、分枝鎖または非分枝鎖、環式または非環式であってよく、前記または本願明細書に記載のアリールまたはへテロアリール置換基は、置換または非置換であってよい。通常適用される置換基の付加的な例を、本願明細書に記載の実施例中に示されている特定の実施形態により詳述する。
【００１４】
通常、本願明細書で使用する場合、「アリール」および「ヘテロアリール」との用語は、好ましくは3〜14個の炭素原子を有する安定な単環式または多環式、複素環式、多環式および多複素環式不飽和基に関し、これらはそれぞれ、置換または非置換であってよい。置換基には、これらに限られないが、安定な化合物の形成をもたらす前記の置換基のいずれか、即ち、脂肪族基または本願明細書に開示されている他の基に関して列挙された置換基が含まれる。本発明のいくつかの実施形態では、「アリール」は、1個または2個の芳香環を有する単環式または二環式炭素環系に関し、これらに限られないが、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、インデニルなどが含まれる。本発明のいくつかの実施形態では、本願明細書で使用する場合、「ヘテロアリール」との用語は、5〜10個の環原子を有し、そのうちの1個の環原子は、S、OおよびNから選択され;0、1または2個の環原子はS、OおよびNから独立に選択される付加的なヘテロ原子であり;残りの環原子は炭素である環式芳香族基に関し、この基は、環原子のいずれかを介して分子の他の部分に結合し、例えば、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、チオフェニル、フラニル、キノリニル、イソキノリニルなどである。
【００１５】
アリールおよびへテロアリール基(二環式アリール基を含む)は、非置換または置換であってよく、ここで、置換には、1、2または3個の水素原子が独立に、これらに限られないが、脂肪族;複素脂肪族;アリール;ヘテロアリール;アリールアルキル;ヘテロアリールアルキル;アルコキシ;アリールオキシ;ヘテロアルコキシ;ヘテロアリールオキシ;アルキルチオ;アリールチオ;ヘテロアルキルチオ;ヘテロアリールチオ;F;Cl;Br;I;-OH;-NO2;-CN;-CF3;-CH2CF3;-CHCl2;-CH2OH;-CH2CH2OH;-CH2NH2;-CH2SO2CH3;-C(O)Rx;-CO2(Rx);-CON(Rx)2;-OC(O)Rx;-OCO2Rx;-OCON(Rx)2;-N(Rx)2;-S(O)2Rx;-NRx(CO)Rx;ここで、Rxはそれぞれ独立に、これらに限られないが、脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキルが含まれ、これらの前記または本願明細書に記載の脂肪族、複素脂肪族、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル置換基は、置換または非置換、分枝鎖または非分枝鎖、環式または非環式であってよく、前記または本願明細書に記載のアリールまたはへテロアリールは、置換または非置換であってよい)を含む1個または複数の次の基で置換されていることを含むことは理解されるであろう。通常適用される置換基の付加的な例を、本願明細書に記載の実施例中に示されている特定の実施形態により詳述する。
【００１６】
本願明細書で使用する場合、「シクロアルキル」との用語は特に、3から7個、好ましくは3〜10個の炭素原子を有する基に関する。適切なシクロアルキルには、これらに限られないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルなどが含まれ、これらは、他の脂肪族、複素脂肪族または複素環基の場合と同様に、場合によって、脂肪族;複素脂肪族;アリール;ヘテロアリール;アリールアルキル;ヘテロアリールアルキル;アルコキシ;アリールオキシ;ヘテロアルコキシ;ヘテロアリールオキシ;アルキルチオ;アリールチオ;ヘテロアルキルチオ;ヘテロアリールチオ;F;Cl;Br;I;-OH;-NO2;-CN;-CF3;-CH2CF3;-CHCl2;-CH2OH;-CH2CH2OH;-CH2NH2;-CH2SO2CH3;-C(O)Rx;-CO2(Rx);-CON(Rx)2;-OC(O)Rx;-OCO2Rx;-OCON(Rx)2;-N(Rx)2;-S(O)2Rx;-NRx(CO)Rx;を含む置換基で置換されていてもよく、ここで、Rxの各存在はそれぞれ独立に、これらに限られないが、脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキルが含まれ、これらの前記または本願明細書に記載の脂肪族、複素脂肪族、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル置換基は、置換または非置換、分枝鎖または非分枝鎖、環式または非環式であってよく、前記または本願明細書に記載のアリールまたはへテロアリールは、置換または非置換であってよい。通常適用される置換基の付加的な例を、本願明細書に記載の実施例中に示されている特定の実施形態により詳述する。
【００１７】
本願明細書で使用される場合、「複素脂肪族」との用語は、例えば炭素原子の代わりに、1個または複数の酸素、イオウ、窒素、リンまたはケイ素原子を含有する脂肪族基に関する。複素脂肪族基は、分枝鎖、非分枝鎖、環式または非環式であってよく、モルホリノ、ピロリジニルなどの飽和および不飽和複素環が含まれうる。いくつかの実施形態では、複素脂肪族基は、その1個または複数の水素原子が、脂肪族;複素脂肪族;アリール;ヘテロアリール;アリールアルキル;ヘテロアリールアルキル;アルコキシ;アリールオキシ;ヘテロアルコキシ;ヘテロアリールオキシ;アルキルチオ;アリールチオ;ヘテロアルキルチオ;ヘテロアリールチオ;F;Cl;Br;I;-OH;-NO2;-CN;-CF3;-CH2CF3;-CHCl2;-CH2OH;-CH2CH2OH;-CH2NH2;-CH2SO2CH3;-C(O)Rx;-CO2(Rx);-CON(Rx)2;-OC(O)Rx;-OCO2Rx;-OCON(Rx)2;-N(Rx)2;-S(O)2Rx;-NRx(CO)Rxを含む1個または複数の基で独立に置換されていることにより、置換されており、ここで、存在するRxはそれぞれ独立に、これらに限られないが、脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキルが含まれ、これらの前記または本願明細書に記載の脂肪族、複素脂肪族、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル置換基は、置換または非置換、分枝鎖または非分枝鎖、環式または非環式であってよく、前記または本願明細書に記載のアリールまたはへテロアリール置換基は、置換または非置換であってよい。通常適用される置換基の付加的な例を、本願明細書に記載の実施例中に示されている特定の実施形態により詳述する。
【００１８】
本願明細書で使用する場合、「ハロ」および「ハロゲン」との用語は、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素から選択される原子に関する。「ハロアルキル」との用語は、1、2または3個のハロゲン原子が結合している前記で定義されたアルキル基を意味しており、クロロメチル、ブロモエチル、トリフルオロメチルなどの基が例示される。
【００１９】
本願明細書で使用する場合、「ヘテロシクロアルキル」または「ヘテロシクル」との用語は、これらに限られないが、酸素、イオウおよび窒素から独立に選択される1から3個のヘテロ原子を有する縮合6員環を有する二環式または三環式基を含む非芳香族5員、6員または7員環または多環式基に関し、ここで、(i)各5員環は、0から1個の二重結合を有し、各6員環は、0から2個の二重結合を有し、(ii)窒素およびイオウへテロ原子は、場合によって酸化されていてもよく、(iii)窒素へテロ原子は場合によって、4級化されていてもよく;(iv)前記の複素環は、ベンゼン環に縮合していてもよい。代表的なヘテロシクルには、これらに限られないが、ピロリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリジニル、モルホリニル、チアゾリジニル、イソチアゾリジニルおよびテトラヒドロフリルが含まれる。いくつかの実施形態では、「置換へテロシクロアルキルまたはへテロシクル」基を使用し、本願明細書で使用する場合、これは、その1、2または3個の水素原子が、これらに限られないが、脂肪族;複素脂肪族;アリール;ヘテロアリール;アリールアルキル;ヘテロアリールアルキル;アルコキシ;アリールオキシ;ヘテロアルコキシ;ヘテロアリールオキシ;アルキルチオ;アリールチオ;ヘテロアルキルチオ;ヘテロアリールチオ;F;Cl;Br;I;-OH;-NO2;-CN;-CF3;-CH2CF3;-CHCl2;-CH2OH;-CH2CH2OH;-CH2NH2;-CH2SO2CH3;-C(O)Rx;-CO2(Rx);-CON(Rx)2;-OC(O)Rx;-OCO2Rx;-OCON(Rx)2;-N(Rx)2;-S(O)2Rx;-NRx(CO)Rxで置換されている前記で定義されたヘテロシクロアルキルまたはへテロシクル基に関し、ここで、Rxはそれぞれ独立に、これらに限られないが、脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキルが含まれ、これらの前記または本願明細書に記載の脂肪族、複素脂肪族、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル置換基は、置換または非置換、分枝鎖または非分枝鎖、環式または非環式であってよく、前記または本願明細書に記載のア
リールまたはへテロアリールは、置換または非置換であってよい。通常適用される置換基の付加的な例を、本願明細書に記載の実施例中に示されている特定の実施形態により詳述する。
【００２０】
「標識(された)」:本願明細書で使用する場合、「標識(された)」との用語は、化合物が、化合物の検出を可能にするために結合された少なくとも1個の元素、同位体または化学化合物を有することを意味するものである。通常、標識には、3種の群が該当する:a)これらに限られないが、2H、3H、32P、35S、67Ga、99mTc(Tc-99m)、111In、123I、125I、169Ybおよび186Reを含む放射性または重同位体であってよい同位体標識;b)抗体または抗原であってよい免疫標識;c)着色または蛍光染料。検出されるべき化合物の生物学的活性または特性を妨げない位置で、標識を化合物に導入することができることは、認められるであろう。本発明のいくつかの実施形態では、生物系での分子間相互作用を直接的に解明するために(例えば、チューブリンダイマー中でのエポチロン結合部位を調べるために)、光アフィニティー標識を利用する。ニトレンまたはカルベンへのジアゾ化合物、アジ化物またはジアジリンの光変換に多くは応じて、様々な既知のフォトフォアを使用することができる(その内容が参照により本願明細書に援用されるBayley,H.,Photogenerated Reagents in Biochemistry and Molecular Biology(1983),Elsevier,Amsterdam参照)。本発明のいくつかの実施形態では、使用される光アフィニティー標識は、1個または複数のハロゲン成分で置換されているo-、m-およびp-アジドベンゾイルであり、これらに限られないが、4-アジド-2,3,5,6-テトラフルオロ安息香酸が含まれる。
【００２１】
「ポリマー」:本願明細書で使用する場合、「ポリマー」との用語は、同じか異なってよい繰り返し単位(モノマー)からなる開いているか、閉じているか、直鎖か、分枝鎖かまたは架橋であってよい鎖を含む構成体に関する。いくつかの実施形態では、ポリマーとの用語は、バイオポリマーに関し、これは、本願明細書で使用する場合、天然に見られるか、天然に存在する物質をベースとするポリマー材料に関し、これらに限られないが、核酸、ペプチドおよびこれらの模倣物質を含むことは認められるであろう。いくつかの他の実施形態では、ポリマーとの用語は、生分解性ポリマーまたは他のポリマー材料などの合成ポリマーに関する。ポリマー固体支持体も、本発明のポリマーに包含されることは認められるであろう。本発明の化合物を、ポリマー支持体に結合させて、この固体相上で、一定の合成改質を行うことができる。本願明細書で使用する場合、「固体支持体」との用語は、これらに限られないが、ペレット、ディスク、毛細管、中空繊維、針、ピン、固体繊維、セルロースビーズ、細孔ガラスビーズ、シリカゲル、ジビニルベンゼンと場合によって架橋しているポリスチレンビーズ、グラフト化コポリビーズ、ポリアクリルアミドビーズ、ラテックスビーズ、N,N'-ビス-アクリロイルエチレンジアミンと場合によって架橋しているジメチルアクリルアミドビーズおよび疎水性ポリマーでコーティングされているガラス粒子を含むことを意味する。当技術分野の専門家であれば、特定の固体支持体を選択することにより、支持体と利用される反応化学との相容性を限定しうることを理解するであろう。固体支持体の例は、Tentagelアミノ樹脂、1)ジビニルベンゼンと架橋しているポリスチレンビーズおよび2)PEG(ポリエチレングリコール)との複合材料である。Tentagelは、特に有用な固体支持体である。それというのも、これは、on-beadまたはoff-beadアッセイで使用するための多目的支持体をもたらし、さらに、トルエンから水にいたる溶剤で優れた膨潤を示すためである。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
新規で有効な癌治療を開発する必要を認識して、本発明は、幅広い生物学的および薬理学的活性を有する大環状化合物を入手可能にする新規の合成方法論、さらにそのような活性を有する新規化合物、新規の治療組成物ならびにこれらの化合物および組成物を使用する方法を提供する。
【００２３】
いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、癌の治療で使用することができる。本発明のいくつかの化合物は、癌細胞系に対して細胞毒および成長阻害効果を示し、チューブリンを重合化し、微小管アセンブリを安定化する能力を示し、および/または癌細胞異種移植片での腫瘍の縮小または消失をもたらす。いくつかの実施形態では、本化合物は、生体臓器への毒性、悪心、嘔吐、下痢、脱毛、体重低下、体重増加、肝臓毒性、皮膚障害などを含む副作用を減らすか、最小限にすることができる。本化合物はさらに、高い水溶性、低い毒性、高い治療幅、高い効力などにより、処方するのが容易である。
【００２４】
本発明の化合物の一般的な記載
本発明の化合物には、下記でさらに詳述する一般式(0)および(0')およびその薬学的に許容できる誘導体が含まれる:
【００２５】
【化３】
2011195589.tif 000004
【００２６】
[上式中、
R0は、置換または非置換のアリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニルまたはへテロアリールアルキニル基であり;いくつかの実施形態では、R0は、アリールアルキル、アリールアルケニル、ヘテロアリールアルキルまたはへテロアリールアルケニル基であり;他の実施形態では、R0は、ヘテロアリールアルケニル基であり;いくつかの実施形態では、R0は、ヘテロアリールアルキル基であり;他の実施形態では、R0は、5〜7員のアリールまたはへテロアリール基であり;さらに他の実施形態では、R0は、8〜12員の二環式アリールまたはへテロアリール基であり;さらに他の実施形態では、R0は、フェニル環がヘテロアリールまたはアリール基に縮合している二環式基であり;他の実施形態では、R0は、フェニル環がチアゾール、オキサゾールまたはイミダゾール基に縮合している二環式基であり;さらに他の実施形態では、R0は、置換または非置換のフェニル基であり;
R3およびR4はそれぞれ独立に、水素であるか;1個または複数のヒドロキシ、保護されているヒドロキシ、アルコキシ、カルボキシ、カルボキシアルデヒド、直鎖もしくは分枝鎖アルキルもしくは環式アセタール、フッ素、アミノ、保護されているアミノ、1個もしくは2個のアルキルもしくはアリール基で置換されているアミノ、N-ヒドロキシイミノまたはN-アルコキシイミノで置換されていてもよい置換または非置換の、直鎖または分枝鎖の、環式または非環式脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル基であり;いくつかの実施形態では、R3およびR4はそれぞれ独立に、水素、フッ素または低級アルキルであり;他の実施形態では、R3およびR4はそれぞれ独立に、水素またはメチルであり;さらに他の実施形態では、R3はメチルであり、R4は水素であり;
R5およびR6はそれぞれ独立に、水素または保護基であり;いくつかの実施形態では、R5およびR6は両方とも水素であり;
Xは、O、S、C(R7)2またはNR7であり、ここで、R7はそれぞれ独立に、水素または低級アルキルであり;いくつかの実施形態では、XはOであり;他の実施形態では、XはNHであり;
Yは、O、S、NH、C(R7)2、CH2、N(R7)またはNHであり、ここで、R7はそれぞれ独立に、水素または低級アルキルであり;いくつかの実施形態では、YはOであり;他の実施形態では、YはNHであり;さらに他の実施形態では、YはCH2であり;
R8はそれぞれ独立に、水素;ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、ジアルキルアミノ、アルキルアミノ、フルオロ、シアノあるいは1個または複数のヒドロキシ、保護されているヒドロキシ、アルコキシ、カルボキシ、カルボキシアルデヒド、直鎖もしくは分枝鎖アルキルもしくは環式アセタール、フッ素、アミノ、保護されているアミノ、1個もしくは2個のアルキルもしくはアリール基で置換されているアミノ、N-ヒドロキシイミノまたはN-アルコキシイミノで置換されていてもよい置換または非置換の、直鎖または分枝鎖の、環式または非環式脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニルまたはへテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニル、ヘテロアリールアルキニル基であり;いくつかの実施形態では、R8は水素であり;他の実施形態では、R8はヒドロキシであり;さらに他の実施形態では、R8はフッ素であり;さらに他の実施形態では、R8はメチルなどの低級アルキルであり;他の実施形態では、R8は、-CF3、-CF2Hまたは-CFH2であり;他の実施形態では、R8は過フッ化またはフッ化アルキル基であり;さらに他の実施形態では、R8はハロゲン化または過ハロゲン化アルキル基であり;
R9およびR10はそれぞれ独立に、水素;または1個または複数のヒドロキシ、保護されているヒドロキシ、アルコキシ、カルボキシ、カルボキシアルデヒド、直鎖もしくは分枝鎖アルキルもしくは環式アセタール、フッ素、アミノ、保護されているアミノ、1個もしくは2個のアルキルもしくはアリール基で置換されているアミノ、N-ヒドロキシイミノまたはN-アルコキシイミノで置換されていてもよい置換または非置換の、直鎖または分枝鎖の、環式または非環式脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニルまたはへテロアリールアルキニル基であり;いくつかの実施形態では、R9およびR10の一方は、メチルであり;他の実施形態では、R9およびR10は両方ともメチルであり;さらに他の実施形態では、R9およびR10の一方は、メチルであり、他方は水素であり;他の実施形態では、R9およびR10は両方とも水素であり;
RBは、それぞれ独立に、水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;あるいは1個または複数の水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;または環式もしくは非環式の、直鎖もしくは分枝鎖の、置換もしくは非置換の脂肪族、複素脂肪族、アリールもしくはへテロアリール基で置換されていてもよい環式または非環式の、直鎖または分枝鎖の脂肪族、複素脂肪族、アリールまたはへテロアリールであるか;あるいはエポチロン、デスオキシエポチロンまたはこれらの類似体であるか;あるいはポリマー;炭水化物;光親和性標識;または放射標識であり;いくつかの実施形態では、RBは、それぞれ非置換か、1個または複数のハロゲン、-OH、-ORB'、NH2またはN(RB')2またはこれらの組合せで置換されていてもよい水素、
【００２７】
【化４】
2011195589.tif 000005
【００２８】
メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシルであり、ここで、RB'はそれぞれ独立に、水素、アルキル、アリールまたは保護基であり、他の実施形態では、RBは水素、メチルまたはエチルであり、さらに他の実施形態では、RBはメチルであり、他の実施形態では、-CY3、-CHY2、-CH2Yであり、ここで、Yは、F、Br、Cl、I、ORB'、NHRB'、N(RB')2またはSRB'であり;さらに他の実施形態では、RBは、-CF3、-CH2FまたはCHF2であり;他の実施形態では、RBは過フッ化またはフッ化アルキル基であり、さらに他の実施形態では、RBは、ハロゲン化または過ハロゲン化アルキル基であり;
RB'はそれぞれ独立に、水素;保護基;直鎖または分枝鎖の、置換または非置換の、環式または非環式脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニルまたはへテロアリールアルキニル基であり;
mは、1、2、3または4であり、いくつかの実施形態では、mは1または2であり、他の実施形態では、mは1である]。
【００２９】
本発明の化合物には、下記でさらに詳述する一般式(I)および(I')の化合物ならびにその薬学的に許容できる誘導体が含まれる:
【００３０】
【化５】
2011195589.tif 000006
【００３１】
[上式中、
R1は、水素または低級アルキルであり;いくつかの実施形態では、R1は、メチルであり;いくつかの実施形態では、R1は、-CF3、-CF2HまたはCH2Fであり;他の実施形態では、R1は、過フッ化またはフッ化アルキル基であり;さらに他の実施形態では、R1は、ハロゲン化または過ハロゲン化アルキル基であり;
R2は置換または非置換のアリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル基であり;いくつかの実施形態では、R2は置換または非置換のオキサゾールであり;他の実施形態では、R2は置換または非置換のチアゾールであり;
R3およびR4はそれぞれ独立に、水素であるか;1個または複数のヒドロキシ、保護されているヒドロキシ、アルコキシ、カルボキシ、カルボキシアルデヒド、直鎖もしくは分枝鎖アルキルもしくは環式アセタール、フッ素、アミノ、保護されているアミノ、1個もしくは2個のアルキルもしくはアリール基で置換されているアミノ、N-ヒドロキシイミノまたはN-アルコキシイミノで置換されていてもよい置換または非置換の、直鎖または分枝鎖の、環式または非環式脂肪族、複素脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはへテロアリールアルキル基であり;いくつかの実施形態では、R3およびR4はそれぞれ独立に、水素、フッ素または低級アルキルであり;他の実施形態では、R3およびR4はそれぞれ独立に、水素またはメチルであり;さらに他の実施形態では、R3はメチルであり、R4は水素であり;
R5およびR6はそれぞれ独立に、水素または保護基であり;いくつかの実施形態では、R5およびR6は両方とも水素であり;
Xは、O、S、C(R7)2またはNR7であり、ここで、R7はそれぞれ独立に、水素または低級アルキルであり;いくつかの実施形態では、XはOであり;他の実施形態では、XはNHであり;
RBは、それぞれ独立に、水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;あるいは1個または複数の水素;ハロゲン;-ORB';-SRB';-N(RB')2;-C(O)ORB';-C(O)RB';-CONHRB';-O(C=O)RB';-O(C=O)ORB';-NRB'(C=O)RB';N3;N2RB';環式アセタール;または環式もしくは非環式の、直鎖もしくは分枝鎖の、置換または非置換の脂肪族、複素脂肪族、アリールまたはへテロアリール基で置換されていてもよい環式または非環式の、直鎖または分枝鎖の脂肪族、複素脂肪族、アリールまたはへテロアリールであるか;あるいはエポチロン、デスオキシエポチロンまたはこれらの類似体であるか;あるいはポリマー;炭水化物;光親和性標識;または放射標識であり;いくつかの実施形態では、RBは、それぞれ非置換か、1個または複数のハロゲン、-OH、-ORB'、NH2またはN(RB')2またはこれらの組合せで置換されていてもよい水素、
【００３２】
【化６】
2011195589.tif 000007
【００３３】
メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシルであり、ここで、RB'はそれぞれ独立に、水素、アルキル、アリールまたは保護基であり、他の実施形態では、RBは水素、メチルまたはエチルであり、さらに他の実施形態では、RBはメチルであり、他の実施形態では、RBは、-CF3、-CH2Fまたは-CHF2である]。
【００３４】
いくつかの実施形態では、本発明の化合物には、次式のように定義される立体化学を有する一般式(II)または(II')の化合物が含まれる。
【００３５】
【化７】
2011195589.tif 000008
【００３６】
[上式中、X、R1、R2、R3、R4、R5、R6、RBおよびXは前記と同様に定義される]。
【００３７】
いくつかの実施形態では、Xは、Oである。他の実施形態では、Xは、NHである。他の実施形態では、Xは、CH2である。
【００３８】
いくつかの実施形態では、R2は、置換または非置換のチアゾールである。いくつかの実施形態では、R2は、2-メチル-チアゾ-4-イルである。他の実施形態では、R2は、2-ヒドロキシメチル-チアゾ-4-イルである。さらに他の実施形態では、R2は、2-アミノメチル-チアゾ-4-イルである。他の実施形態では、R2は、2-チオールメチル-チアゾ-4-イルである。
【００３９】
いくつかの実施形態では、R2は、置換または非置換のオキサゾールである。いくつかの実施形態では、R2は、2-メチル-オキサゾ-4-イルである。他の実施形態では、R2は2-ヒドロキシルメチル-オキサゾ-4-イルである。さらに他の実施形態では、R2は、2-アミノメチル-オキサゾ-4-イルである。他の実施形態では、R2は、2-チオールメチル-オキサゾ-4-イルである。
【００４０】
いくつかの実施形態では、RBは、水素、メチル、エチル、-CF3、-CH2Fまたは-CF2Hである。いくつかの実施形態では、RBは、メチルである。さらに他の実施形態では、RBは、-CF3である。いくつかの実施形態では、RBは、水素である。他の実施形態では、RBは、エチルである。
【００４１】
いくつかの好ましい化合物には、例えば、以下のものが含まれる:
【００４２】
【化８】
2011195589.tif 000009
2011195589.tif 000010
2011195589.tif 000011
2011195589.tif 000012
【００４３】
本発明の化合物には、特に前記したものおよび本願明細書に記載されているものが含まれ、これらを、本願明細書中のいずれかで開示されている様々な群、亜群および種により個別に詳述する。
【００４４】
本発明の化合物には、不斉中心が存在しうることは、当技術分野の専門家であれば認めるであろう。したがって、本発明の化合物およびその医薬組成物は、個々の鏡像異性体、ジアステレオ異性体または幾何異性体の形態であってもよいし、立体異性体の混合物の形態であってもよい。いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、鏡像純粋な化合物である。いくつかの他の実施形態では、立体異性体またはジアステレオ異性体の混合物を提供する。
【００４５】
化合物の前記の群および亜群のうちのいくつかは、様々な異性体形で存在しうることは認められるであろう。本発明は、他の異性体を実質的に含まない個々の異性体として、もしくは、様々な異性体の混合物、例えば、立体異性体のラセミ混合物としての化合物を包含する。加えて、本発明は、特に指示がなければ、(Z)および(E)2重結合異性体の両方を包含する。したがって、構造(0)、(0')、(I)、(I')、(II)および(II')で通常は示される本発明の化合物は、二重結合が(Z)または(E)である構造を包含する。いくつかの好ましい実施形態では、C12-C13位の二重結合は、シスまたはZ配置である。いくつかの実施形態では、C9-C10位の二重結合は、トランスまたはE配置である。さらに他の実施形態では、C12-C13位の二重結合は、シスまたはZ配置であり、C9-C10位の二重結合は、トランスまたはE配置である。さらに本発明は、前記の特定の化合物の互変異性体も包含する。
【００４６】
加えて、本発明は、本発明の化合物の薬学的に許容できる誘導体を、およびこれらの化合物、その医薬組成物もしくは1種または複数の追加の治療薬と組み合わされたこれらのいずれかを使用して、患者を治療する方法を提供する。本願明細書で使用する場合、「薬学的に許容できる誘導体」との語句は、このような化合物の薬学的に許容できる塩、エステル、そのようなエステルの塩もしくは患者に投与されると、本願明細書に記載の化合物またはその代謝産物または残留物を(直接または間接に)もたらしうる他の付加生成物または誘導体を意味する。薬学的に許容できる誘導体には特に、プロドラッグが含まれる。プロドラッグは、付加的な基を有し、これがin vivoで除去されると、薬理活性種としての親分子をもたらす、通常は、かなり低い薬理活性を有する化合物の誘導体である。プロドラッグの例は、in vivoで分離されて、該当する化合物をもたらすエステルである。様々な化合物のプロドラッグおよびプロドラッグを生じさせるために親化合物を誘導体化する材料および方法は、知られていて、本発明に適用することができる。医薬組成物および薬学的に許容できる誘導体のいくつかの例を、下記でさらに詳細に検討する。
【００４７】
特に重要な本発明の化合物には、
・科学的に許容できる癌細胞異種移植片モデルを使用するin vitroまたは動物研究で保持されている癌細胞系に対して、細胞毒または成長阻害効果を示し;
・チューブリンを重合させ、微小管アセンブリを安定化する能力を示し;
・生体臓器に対して、最低レベルの毒性を示し;
・科学的に許容できる癌細胞異種移植片モデルで、腫瘍消失をもたらし;
・科学的に許容できる癌細胞異種移植片モデルで、腫瘍縮小をもたらし;
・科学的に許容できる癌細胞異種移植片モデルで、腫瘍消失をもたらし、治療を止めた後にも、腫瘍の再発を遅らせるか、再発をもたらさず;
・一時的および可逆的体重低下を示し、科学的に許容できる癌細胞異種移植片モデルで治療効果を示し;
・エポチロンA、B、CまたはDもしくはパクリタクセルを上回る高い水溶性を示すか、それに加えて、またはその代わりに、低い割合のクレモフォールを使用すれば、水性媒体に処方するに十分な可溶性を示し;かつ/または
・エポチロンB、エポチロンDまたはパクリタクセルの治療プロファイルよりも優れた治療プロファイル(例えば、最適な安全および治療効果)を示す
ものが含まれる。本願明細書に例示されているように、前記の様々なエポチロン類似体が、調製、同定および試験されている。9,10-デヒドロ-エポチロン類似体は、癌の治療で有用であることが判明しており、特に、それらの化合物は調製されていて、前記の1つまたは複数の望ましい特性を有することが判明している。
【００４８】
合成方法論
いくつかのエポチロン、デスオキシエポチロンおよびこれらの類似体の合成は、既に記載されている(米国特許第6242469号、米国特許第6284781号、米国特許第6300355号、米国特許第6204388号、米国特許第6316630号、米国特許第6369234号、米国特許出願公開第09/797027号、米国特許出願公開第09/796959号、米国特許出願公開第10/236135号;および国際公開第99/01124号、国際公開第99/43653号および国際公開第01/64650号参照;これらの内容は全て、参照により本願明細書に援用される)。エポチロン、デスオキシエポチロンおよびその類似体を大量に効率的に生じさせるために、改善合成方法論または付加的合成方法論が必要であることを認識して、本発明は、エポチロン、デスオキシエポチロンおよびその類似体を合成するための効率的な組み立て経路を提供する。いくつかの化合物例の合成を、本願明細書の実施例に記載するが、この方法論を、本願明細書に記載の各群および亜群に関して前記で検討した類似体および結合体を生じさせるために一般に適用することができることは、認められるであろう。
【００４９】
特に、本発明の9,10-デヒドロエポチロン化合物は、エポチロンの合成で使用することができる合成方法論を使用して、様々に調製することができる。いくつかの実施形態では、集束合成経路を使用して、この化合物を調製する。例えば、2種または3種の中間体を調製し、これらを一緒にして、所望の化合物を得ることにより、エポチロンを合成することができる。1実施形態では、中間体のうちの1種は、1〜9個の炭素を含有するアシル部であり、他の中間体は、10〜15個の炭素を有し、さらに、チアゾール側鎖を有してもよい。C-1とC-15からの酸素とのエステル化反応とを使用して、エポチロンのこれら2つのほぼ同じ部分を初めて一緒にすることができる。次いで、スズキカップリングまたは閉環複分解反応などの炭素-炭素カップリング反応を使用して、この大環状化合物を閉環することができる。1実施形態では、閉環複分解反応を使用して、9,10-二重結合を生じさせ、大環状化合物を閉じることにより、最終閉環工程を行う。下記のスキーム8に示されているようなGrubbs触媒などの有機金属触媒を使用して、閉環複分解反応を行う。いくつかの実施形態では、9,10-二重結合を還元または酸化するか、9,10-二重結合をさらに官能化して、付加的なエポチロン誘導体を調製することができる。
【００５０】
他の実施形態では、閉環複分解反応を使用して、12,13の二重結合を生じさせ、大環状化合物を閉じることにより、最終的な閉環工程を行う。いくつかの実施形態では、12,13-二重結合を還元または酸化させる。他の実施形態では、マクロアルドール化(macroaldolization)またはマクロラクトン化(macrolactonization)反応を使用して、大環状化合物を生じさせることができる。
【００５１】
本発明の化合物のいくつかの合成例を、図面および実施例で示す。当技術分野の専門家であれば認めるように、本願明細書に記載の合成手順を使用して、様々な類似体および誘導体を調製することができる。例えば、16員環で様々な保護基または様々な置換基を用いて、多くの合成工程を達成することができる。
【００５２】
医薬組成物
本発明はさらに、癌細胞の成長を阻害するか、それを死滅させうるか、特に重要ないくつかの実施形態では、多剤耐性癌細胞の成長を阻害するか、それを死滅させうる前記および本願明細書に記載の少なくとも1種の化合物またはその薬学的に許容できる誘導体を含有する医薬品を提供する。いくつかの実施形態では、この医薬品はさらに、クレモフォール(ポリオキシル35ヒマシ油)またはソルトール(ポリエチレングリコール660 12-ヒドロキシステアレート)などの可溶化剤または乳化剤を含有する。
【００５３】
前記で検討したように、本発明は、抗腫瘍活性および抗増殖活性を有する新規の化合物を提供し、したがって、本発明の化合物は、癌の治療で使用することができる。したがって、本発明の他の態様では、医薬組成物を提供するが、この際、これらの組成物は、本願明細書に記載の化合物いずれか1種を含有し、場合によって、薬学的に許容できる担体を含有する。いくつかの実施形態では、これらの組成物は場合によって、1種または複数の付加的な治療剤をさらに含有する。いくつかの他の実施形態では、付加的な治療剤は、本願明細書でさらに検討される抗癌剤である。
【００５４】
本発明の化合物のうちのいくつかは、治療のための遊離形態で存在してよいか、または適切な場合には、その薬学的に許容できる誘導体として存在してよい。本発明では、薬学的に許容できる誘導体には、これらに限られないが、薬学的に許容できる塩、エステル、このエステルの塩または、それを必要とする患者に投与されると、本願明細書に記載の化合物またはその代謝産物または残留物を直接または間接にもたらしうる他の付加生成物または誘導体、例えばプロドラッグが含まれる。
【００５５】
本願明細書で使用される場合、「薬学的に許容できる塩」との用語は、確実な医学的判定の範囲内で、不当な毒性、刺激、アレルギー応答などを伴うことなく、ヒトおよび下級動物の組織と接触させて使用するために適していて、合理的な損益比に見合う塩に関する。薬学的に許容できる塩は、当技術分野でよく知られている。例えば、S.M.Bergeらは、参照により本願明細書に援用されるJ.Pharmaceutical Sciences,66:1-19(1977)に、薬学的に許容できる塩を詳細に記載している。これらの塩は、本発明の化合物を最終的に単離および精製する際にその場で、または遊離塩基官能基と適切な有機酸とを反応させることにより別に調製することができる。薬学的に許容できる非毒性酸付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸および過塩素酸などの無機酸と、または酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸またはマロン酸と生じるか、イオン交換などの当技術分野で使用される他の方法によるアミノ基の塩である。他の薬学的に許容できる塩には、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル流酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプト酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘルニ硫酸(hernisulfate)、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、2-ヒドロキシ-エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、2-ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、3-フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが含まれる。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩には、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどが含まれる。他の薬学的に許容できる塩には、適切ならば、ハリド、ヒドロキシド、カルボキシレート、スルフェート、ホスフェート、ニトレート、低級アルキルスルホネートおよびアリールスルホネートなどの対イオンを使用すると生じる非毒性アンモニウム、4級アンモニウムおよびアミンカチオンが含まれる。
【００５６】
加えて、本願明細書で使用する場合、「薬学的に許容できるエステル」とは、in vivoで加水分解されるエステルに関し、これには、ヒトの体内で容易に分解して、親化合物またはその塩を放出するものが含まれる。適切なエステル基には例えば、各アルキルまたはアルケニル基が有利には、6個以下の炭素原子を有する薬学的に許容できる脂肪族カルボン酸、特に、アルカノール酸、アルケノン酸、シクロアルカノン酸およびアルカンジオン酸に由来するものが含まれる。特定のエステルの例には、ギ酸エステル、酢酸エステル、プロピオン酸エステル、酪酸エステル、アクリル酸エステルおよびエチルコハク酸エステルが含まれる。
【００５７】
さらに、「薬学的に許容できるプロドラッグ」との用語は本願明細書で使用する場合、確実な医学的判定の範囲内で、不当な毒性、刺激、アレルギー応答などを伴うことなく、ヒトおよび下級動物の組織と接触させて使用するために適していて、合理的な損益比に見合い、所定の使用に有効な本発明の化合物のプロドラッグ、さらに、可能ならば、本発明の化合物の両性イオン形態に関する。「プロドラッグ」との用語は、例えば、血中での加水分解により、in vivoで迅速に変換されて、前記の式の親化合物をもたらす化合物のことである。いずれも参照により本願明細書に援用されるT.Higuchi and V.Stella,Pro-drugs as Novel Delivery Systems,Vol.14 of the A.C.S.Symposium SeriesおよびEdward B.Roche,ed.,Bioreversible Carriers in Drug Design,American Pharmaceutical Association and Pergamon Press,1987に徹底的な検討が示されている。
【００５８】
前記のように、本発明の医薬組成物は、本願明細書で使用する場合には、所望の特定の剤形に合わせてあらゆる溶剤、希釈剤または他の液体賦形剤、分散剤または懸濁剤、界面活性剤、等張剤、増粘剤または乳化剤、防腐剤、固体結合剤、滑剤などを含む薬学的に許容できる担体を付加的に含有する。Remington's Pharmaceutical Sciences,Fifteenth Edition,E.W.Martin(Mack Publishing Co.,Easton,Pa.,1975)は、医薬組成物を処方する際に使用される様々な担体および調製に関して知られている技術を開示している。望ましくない生物学的効果が生じたり、さもなければ、医薬組成物の他の成分と有害に相互作用するなど、慣用の担体媒体が本発明の抗癌化合物と非相容性である場合を除いて、その使用は、本発明の範囲内であると考えられる。薬学的に許容できる担体として役立つ物質のいくつかの例には、これらに限られないが、ラクトース、グルコースおよびスクロースなどの糖;トウモロコシデンプンおよび馬鈴薯デンプンなどのデンプン;カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロースなどのセルロースおよびその誘導体;粉末トラガカント;麦芽;ゼラチン;タルク;クレモフォール;ソルトール;カカオバターおよび座薬用ろうなどの賦形剤;落花生油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油および大豆油などの油;プロピレングリコールなどのグリコール;オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなどのエステル;寒天;水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤;アルギン酸;発熱物質不含水;等張性食塩水;リンガー液;エチルアルコールおよびリン酸緩衝液が含まれ、さらに、ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムなどの他の非毒性相容性滑剤、さらに、着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、香料および着香剤、防腐剤および酸化防止剤が、処方者の判断によって組成物中に存在してもよい。
【００５９】
化合物および医薬組成物の使用
本発明はさらに、腫瘍成長および/または腫瘍転移を阻害する方法を提供する。該当するいくつかの実施形態では、本発明は、腫瘍の多剤耐性癌細胞で、腫瘍成長および/または腫瘍転移を阻害することにより、癌を治療する方法を提供する。この方法は、治療有効量の化合物またはその薬学的に許容できる誘導体を、それを必要とする患者(これらに限られないが、ヒトまたは動物を含む)に投与することを含む。いくつかの実施形態では、特に多剤耐性癌細胞を含む癌を治療するためには、治療有効量は、多剤耐性癌細胞系を死滅またはその成長を阻害するに十分な量である。いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、充実性腫瘍を治療するためにも役立つ。
【００６０】
本発明の化合物および医薬組成物は、増殖性疾患(例えば、癌)、自己免疫疾患(例えば、慢性関節リウマチ)および感染症(例えば、細菌、真菌など)を含む疾患または状態を治療または予防する際に使用することができる。化合物および医薬組成物は、動物、好ましくは哺乳動物(例えば、家畜、ネコ、イヌ、マウス、ラット)、さらに好ましくはヒトに投与することができる。どのような投与方法を使用しても、医薬組成物の化合物を動物に輸送することができる。いくつかの実施形態では、化合物または医薬組成物を、非経口的に投与する。
【００６１】
さらに他の態様では、本発明の治療方法により、本願明細書に記載されているように腫瘍細胞と本発明の化合物または組成物とを接触させることにより、腫瘍細胞を死滅させるか、その成長を阻害する。したがって、本発明のさらに他の態様では、癌を治療する方法を提供するが、これは、治療有効量の本発明の化合物または本発明の化合物を含有する医薬組成物を、所望の結果を達成するに必要な量および期間にわたって、それを必要とする患者に投与することを含む。本発明のいくつかの実施形態では、本発明の化合物または医薬組成物の「治療有効量」は、腫瘍細胞を死滅させるか、その成長を阻害するに有効な量である。本発明の方法による化合物および組成物は、腫瘍細胞を死滅させるかまたはその成長を阻害するに有効な投与量および投与経路を使用して、投与することができる。したがって、「腫瘍細胞を死滅させるか、その成長を阻害するに有効な量」との表現は、本願明細書で使用する場合には、腫瘍細胞を死滅させるか、その成長を阻害するに十分な薬剤量のことである。必要な正確な量は、種、年齢および患者の全身状態、感染の重度、特定の抗癌剤、投与方法などに応じて、患者によって変動する。本発明の抗癌化合物は好ましくは、投与の簡便さおよび用量の均一性のために、単位剤形で処方される。本願明細書で使用される場合、「単位剤形」との表現は、治療される患者に適した抗癌剤の物理的に別々な単位に関する。しかしながら、本発明の化合物および組成物の全1日用量は、的確な医学的判断の範囲内で担当医師により決定されることは理解されるであろう。特定の患者または臓器に対する個々の治療有効用量レベルは、治療される疾患および疾患の重度;使用される個々の化合物の活性;使用される個々の組成物;患者の年齢、体重、全身健康、性別および食事;使用される特定の化合物の投与時間、投与経路排出速度;治療期間;使用される個々の化合物と組み合わせて、または同時に使用される薬物;および医学分野でよく知られている同様の因子を含む様々な因子に左右される。
【００６２】
さらに、所望の用量に適切な薬学的に許容できる担体を処方した後に、本発明の医薬組成物をヒトおよび他の動物に、治療される感染症の重度に応じて、経口で、直腸で、非経口で、槽内で、膣内で、腹腔内で、局所で(粉末、軟膏またはドロップとして)、経口または鼻腔スプレーとして頬内で投与することができる。本発明のいくつかの実施形態では、本願明細書に記載の本発明の化合物を、その全ての内容が参照により本願明細書に援用される米国特許第5977163号に記載されているような水溶性キレート化剤またはポリエチレングリコールなど、ポリ(1-グルタミン酸)またはポリ(1-アスパラギン酸)などの水溶性ポリマーと組み合わせて処方する。いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、経口または非経口で、1日当たり患者の体重1kg当たり約0.001mg/kgから約100mg/kg、約0.01mg/kgから約50mg/kg、好ましくは約0.1mg/kgから約40mg/kg、好ましくは約0.5mg/kgから約30mg/kg、約0.01mg/kgから約10mg/kg、約0.1mg/kgから約10mg/kg、さらに好ましくは約1mg/kgから約25mg/kg輸送するに十分な用量レベルで、1日1回から複数回投与して、望ましい治療効果を得ることができる。所望の用量を、1日おきに、3日おきに、1週間おきに、2週間おきに、3週間おきに、4週間おきに輸送することができる。いくつかの実施形態では、望ましい用量を、複数回投与を使用して輸送することができる(例えば、2回、3回、4回、5回、6回、7回、8回、9回または10回投与)。
【００６３】
経口投与のための液体剤形には、これらに限られないが、薬学的に許容できるエマルジョン、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシルが含まれる。活性化合物に加えて、液体剤形は、例えば、水または他の溶剤などの当技術分野で通常使用される不活性な希釈剤、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、1,3-ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、オイル(特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油)、グリセリン、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステルおよびこれらの混合物などの可溶化剤および乳化剤を含有する。不活性希釈剤の他に、経口組成物はさらに、湿潤剤、乳化および懸濁剤、甘味剤、着香剤、香料などの補助剤を含有してもよい。
【００６４】
適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を使用して、既知の技術により、注射可能な製剤、例えば、注射可能な無菌水性または疎水性懸濁液を処方することができる。注射可能な無菌製剤はさらに、例えば、1,3-ブタンジオール中の溶液などの、非経口許容できる非毒性の希釈剤または溶剤中の注射可能な無菌溶液、懸濁液またはエマルジョンであってよい。使用することができる許容できる賦形剤および溶剤は特に、水、リンガー液、U.S.P.および等張性塩化ナトリウム溶液である。加えて、無菌の不揮発性油が、溶剤または懸濁媒体として慣用的に使用される。このためには、合成モノ-またはジグリセリドを含む無菌の不揮発性油を使用することができる。加えて、オレイン酸などの脂肪酸を、注射可能な製剤中で使用することができる。
【００６５】
例えば、細菌保持フィルターで濾過するか、使用前に無菌水または他の注射可能な無菌媒体に溶解または分散させることができる無菌固体組成物の形態に、滅菌剤を加えることにより、注射可能な処方物を滅菌することができる。
【００６６】
薬物の効果を延長するために、皮下または筋肉内注射からの薬物の吸収を遅くすることが往々にして望ましい。このことは、水溶性の低い結晶または非晶質物質の液体懸濁液を使用することにより達成することができる。薬物の吸収速度は、その溶解速度に左右され、翻ってこのことは、結晶サイズおよび結晶形態に左右されうる。もしくは、油賦形剤中に薬物を溶解または懸濁させることにより、非経口投与される薬物形態の遅い吸収を達成することができる。ポリラクチド-ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中で薬物のマイクロカプセルマトリックスを生じさせることにより、注射可能なデポー形態を製造する。薬物対ポリマーの比および使用される特定のポリマーの性質に応じて、薬物放出速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例には、ポリ(オルトエステル)およびポリ(無水物)が含まれる。さらに、体の組織と相容性なリポソームまたはマイクロエマルジョン中に薬物を封入することにより、注射可能なデポー処方物を調製する。
【００６７】
直腸または膣内投与のための組成物は好ましくは、本発明の化合物と、周囲温度では固体であるが、体温では液体であるので、直腸または膣腔内で溶けて、活性化合物を放出するカカオバター、ポリエチレングリコールまたは座薬用ろうなどの適切な非刺激性賦形剤または担体とを混合することにより調製することができる座薬である。
【００６８】
経口投与のための固体剤形には、カプセル、錠剤、丸薬、粉末および顆粒が含まれる。このような固体剤形中では、活性化合物は、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムおよび/またはa)デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよびケイ酸などの充填剤または増量剤、b)例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよびアラビアゴムなどの結合剤、c)グリセリンなどの湿潤剤、d)寒天、炭酸カルシウム、馬鈴薯またはタピオカデンプン、アルギン酸、一定のケイ酸塩および炭酸ナトリウムなどの崩壊剤、e)パラフィンなどの溶解遅延剤、f)4級アンモニウム化合物などの吸収促進剤、g)例えば、セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセリンなどの湿潤剤、h)カオリンおよびベントナイト粘土などの吸収剤およびi)タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムなどの滑剤およびこれらの混合物などの少なくとも1種の薬学的に許容できる不活性な賦形剤または担体と混合されている。カプセル、錠剤および丸薬の場合には、剤形はさらに、緩衝剤を含有してもよい。
【００６９】
ラクトースまたは乳糖、さらに高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤を使用して、同様のタイプの固体組成物を、軟質および硬質充填ゼラチンカプセル中の充填剤として使用することもできる。薬剤処方分野でよく知られている腸溶コーティングおよび他のコーティングなどのコーティングおよび殻を用いて、錠剤、糖衣丸、カプセル、丸薬および顆粒の固体剤形を調製することができる。これらは場合によって、乳白剤を含有してもよく、さらに、一定の腸管部分でのみ、またはそこで優先的に、活性成分を、場合によって遅延して放出する組成物であってもよい。使用することができる包埋組成物の例には、ポリマー物質およびろうが含まれる。ラクトースまたは乳糖、さらに高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤を使用して、同様のタイプの固体組成物を、軟質および硬質充填ゼラチンカプセル中の充填剤として使用することもできる。
【００７０】
前記の1種または複数の賦形剤を用いて、活性化合物をマイクロカプセル封入形態にすることもできる。薬剤処方分野でよく知られている腸溶コーティング、放出制御コーティングおよび他のコーティングなどのコーティングおよび殻を用いて、錠剤、糖衣丸、カプセル、丸薬および顆粒の固体剤形を調製することができる。このような固体剤形では、活性化合物を、スクロース、ラクトースまたはデンプンなどの少なくとも1種の不活性希釈剤と混合していてもよい。このような剤形はさらに、通常の実施と同様に、不活性希釈剤以外の付加的な物質、例えば、ステアリン酸マグネシウムおよび微結晶性セルロースなどの錠剤化滑剤および他の錠剤化助剤を含有してもよい。カプセル、錠剤および丸薬の場合には、剤形はさらに、緩衝剤を含有してもよい。これらは場合によって、乳白剤を含有してもよく、さらに、一定の腸管部分でのみ、またはそこで優先的に、活性成分を場合によって遅延して放出する組成物であってもよい。使用することができる包埋組成物の例には、ポリマー物質およびろうが含まれる。
【００７１】
本発明の化合物の局所または経皮投与のための剤形には、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、粉末、溶液、スプレー、吸入剤またはパッチが含まれる。無菌条件下に、活性成分を、薬学的に許容できる担体および必要な防腐剤または必要ならば緩衝剤と混合する。眼科用処方物、点耳薬および点眼薬も、本発明の範囲内と考える。加えて、本発明は、体への化合物の制御輸送をもたらすという付加的な利点を有する経皮パッチを使用することも考えている。適切な媒体に化合物を溶解または分散させることにより、このような剤形を製造することができる。吸収増強剤を使用して、皮膚を介しての化合物の流入を高めることもできる。速度制御膜を用意するか、化合物をポリマーマトリックスまたはゲルに分散させることにより、この速度を制御することができる。
【００７２】
前記で検討したように、本発明の化合物は、抗癌剤として有用であるので、腫瘍細胞を殺し、腫瘍細胞の成長を阻害することにより、癌の治療で使用することができる。通常、本発明の抗癌剤は、これらに限られないが、幾つか挙げると、乳癌、脳癌、皮膚癌、子宮頚癌、大腸および直腸癌、白血病、肺癌、黒色腫、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、卵巣癌、すい臓癌、前立腺癌および胃癌を含む癌および他の増殖性障害の治療で使用することができる。いくつかの実施形態では、本発明の抗癌剤は、白血病細胞および黒色腫細胞に対して活性であるので、白血病(例えば、球性または慢性形態の骨髄性、リンパ性、前骨髄球性、骨髄急性およびリンパ芽球性白血病)および悪性黒色腫の治療で使用することができる。さらに他の実施形態では、本発明の抗癌剤は、充実性腫瘍に対して活性であり、さらに、多剤耐性細胞(MDR細胞)を死滅させるか、かつ/またはその成長を阻害する。いくつかの実施形態では、本発明の抗癌剤は、他の知られている抗新生物剤に対して耐性があるか、他の知られている抗新生物剤に臨床的に応答しないことが判明している癌に治して活性である。他の実施形態では、本発明の抗癌剤は、他の抗新生物微小管安定化剤(例えば、パクリタクセル)に耐性がある癌に対して活性である。
【００７３】
本発明の化合物および医薬組成物は、併用療法で使用することができる、即ち、本化合物および医薬組成物を、1種または複数の他の望ましい療法または医学的手順と同時に、その前に、それに続いて投与することができることは、認められるであろう。組合せ法で使用するための治療(療法または手順)の特定の組合せは、望ましい療法および/または手順の相容性および達成される望ましい治療効果を考慮する。使用される複数の治療が、同じ障害に関して望ましい効果を達成してもよいし(例えば、本発明の化合物を、他の抗癌剤と同時に投与することができる)、異なる効果を達成してもよい(例えば、副作用の制御)ことは、認められるであろう。
【００７４】
例えば、本発明の本発明による抗癌剤と組み合わせて使用することができる他の治療または抗癌剤には、手術、放射線(いくつか挙げると、少ない例ではあるが、γ線、中性子ビーム放射線療法、電子線療法、プロトン療法、密封小線源療法および全身放射線同位元素)、内分泌療法、生体応答調節(いくつか挙げると、インターフェロン、インターロイキンおよび腫瘍壊死因子(TNF))、過高熱および凍結療法、副作用を和らげる薬剤(例えば、制吐薬)および、これらに限られないが、いくつか挙げると、アルキル化剤(メクロレタミン、クロラムブシル、シクロホスファミド、メルファラン、イフォスファミド)、代謝拮抗物質(メトトレキセート)、プリンアンタゴニストおよびピリミジンアンタゴニスト(6-メルカプトプリン、5-フルオロウラシル、シタラビン、ゲムシタビン)、紡錘体阻害剤(ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、パクリタクセル、ドセタキセル)、ポドフィロトキシン(エトポシド、イリノテカン、トポテカン)、抗生物質(ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシン)、ニトロソウレア(カルムスチン、ロムスチン)、無機イオン(シスプラチン、カルボプラチン)、酵素(アスパラギナーゼ)およびホルモン(タモキシフェン、ロイプロリド、フルタミドおよびメゲストロール)を含む他の認められている化学療法薬が含まれる。最新の癌治療に関するさらに包括的な検討に関しては、その内容が全て、参照により本願明細書に援用されるhttp://www.nci.nih.gov/、http://www.fda.gov/cder/cancer/druglistframe.htmのFDA承認腫瘍薬リストおよびThe Merck Manual,Seventeenth Ed.1999参照。
【００７５】
さらに他の態様では、本発明はさらに、本発明の医薬組成物の1種または複数の成分を充填された1個または複数個の容器を備えた薬剤パックまたはキットを提供し、いくつかの実施形態では、これは、併用療法として使用するための付加的に認められる治療剤を含む。場合によって、このような容器には、医薬品の製造、使用または販売を規制する政府機関により規定された形態の注意書きが備えられており、この注意書きは、人に投与するための製造、使用または販売に関する政府機関による承認を反映している。
【００７６】
以下の代表的な実施例は、本発明を詳述することを意図したものであって、本発明の範囲を限定することを意図したものではなく、そのように解釈されるべきものでもない。実際に、本願明細書に示され、記載されているものに加えて、本発明の様々な変更および多くの他の実施形態が、以下の実施例を含む本文献の内容全ておよび本願明細書で引用された科学および特許文献の参照から、当技術分野の専門家には明らかであろう。さらに、先行技術を詳述するために、引用されている参照文献の内容を、参照により援用することは、認められるべきである。次の実施例は、様々なその実施形態およびその同等の形態で本発明を実施する際に適用することができる重要な付加的情報、例示および指針を含んでいる。
【実施例】
【００７７】
(実施例1)
9,10-デヒドロ-12,13-デスオキシエポチロンの合成
この実施例では、トランス-9,10-デヒドロ-12,13-デスオキシエポチロンB、26-トリフルオロ-トランス-9,10-デヒドロ-12,13-デスオキシエポチロンB、26-トリフルオロ-12,13-デスオキシエポチロンBおよび12,13-デスオキシエポチロンBの合成およびこれらの化合物の生物学的試験を記載する。
【００７８】
フッ素置換を伴う他の医薬品の高い薬物動力学および化学療法係数を想定して、エポチロンのフッ素化誘導体が調製され、試験されている(Ojima,I;Inoue,T.;Chakravarty,S.;J.Fluorine Chem.1999,97;Newman,R.A.;Yang,J.;Finlay,M.R.V.;Cabral,F.,Vourloumis,D.;Stephens,L.C.;Troncoso,P.;Wu,X.;Logothetis,C.J.;Nicolaou,K.C.;Navone,N.M.Cancer Chemother.Pharmacol.2001,48,319-326;これらはそれぞれ、参照により本願明細書に援用される)。
【００７９】
【化９】
2011195589.tif 000013
【００８０】
化合物2を得るために、我々は、dEpoBへの経路で、エポチロン490(6、デヒドロデオキシEpoB)を合成するために我々の実験室から最近報告されたかなり集束的な経路を利用することを求めた(1、スキーム3)(Biswas,K.;Lin,H.;Njardarson,J.T.;Chappell,M.D.,Chou,T.C.,Guan,Y.;Tong,W.P.,He,L.;Horwitz,S.B.,Danishefsky,S.J.J.Am.Chem.Soc.2002,124(33);9825-9832;Rivkin,A.;Njardarson,J.T.;Biswas,K;Chou,T.C.;Danishefsky.S.J.J.Org.Chem.2002,67,7737-7740;これらはそれぞれ、参照により本願明細書に援用される)。この合成では、我々は、ビニルヨウ化物前駆体3とトリ-n-ブチルビニルスタンナンとの立体特異的Stilleカップリングを介して、化合物4に、側部ビニル基を導入した。脱保護の後の閉環複分解反応により、6が生じ、次いでこれを、レギオ選択的ジイミド還元を介して、dEpoB(1)に変換した。
【００８１】
【化１０】
2011195589.tif 000014
【００８２】
初めに、15の合成に注意を向けた(スキーム4)。ヨウ化物8(塩化メチレン中のTMSIを使用して、既知のアルコール16から合成)を用いて、先に報告されていた7のエノール酸リチウム(Chappell,M.D.;Stachel,S.J.;Lee,C.B.;Danishefsky,S.J.Org.Lett.2000,2(11),1633-1636;参照により本願明細書に援用される)をアルキル化すると、収率78%および高いジアステレオ選択性(>25:1de)で9が得られた。化合物9を、示されているように3工程で、10にした。10のWeinrebアミド結合への臭化メチルマグネシウムの付加を達成する試みは、失敗した。この反応の失敗は、ヨードアルケン結合の存在によるものであった。しかしながら、我々は、これら2つのC-C結合形成工程の順番を変えることにより、我々の目的を達成することができた。したがって、メチルグリニャール試薬を加えることにより、Stille条件下で10とビニルトリブチルスズとの反応を続けて、所望のケトン11を得ることができた。ケトン11とホスフィンオキサイド12との縮合、それに続くトリエチルシリルエーテルの脱保護により、良好な収率で、フラグメント13が得られた。生じた13をC1-C10酸フラグメント14でエステル化すると(Biswas,K.;Lin,H.;Njardarson,J.T.;Chappell,M.D.,Chou,T.C.,Guan,Y.;Tong,W.P.,He,L.;Horwitz,S.B.,Danishefsky,S.J.J.Am.Chem.Soc.2002,124(33);9825-9832;Rivkin,A.;Njardarson,J.T.;Biswas,K;Chou,T.C.;Danishefsky,S.J.J.Org.Chem.2002,67,7737-7740;参照により本願明細書に援用される)、所望の15が収率75%で得られた(スキーム4)。
【００８３】
【化１１】
2011195589.tif 000015
【００８４】
残念ながら、塩化メチレン中で、第2世代Grubbs触媒(概要:Grubbs,R.H.;Miller,S.J.;Fu,G.C.Acc.Chem.Res.1995,28,446;Trnka,T.M.;Grubbs,R.H.Acc.Chem.Res.2001,34,18;Alkene Metathesis in Organic Chemistry Ed.;Fuerstner,A.;Springer,Berlin,1998;Fuerstner,A.Angew.Chem.Int.Ed.Engl.2000,39,3012;Schrock,R.R.Top.Organomet.Chem.1998,1,1:これらはそれぞれ、参照により本願明細書に援用される)を使用して、15の閉環副分解反応を実施する試みは、出発物質の明らかな二量化を主にもたらした(式1)。RCMは5→6の類似条件で全く良好に作用するという事実により、我々は当然に、15の場合での失敗を、C12の位置にトリフルオロメチル基が存在することに帰した。
【００８５】
【化１２】
2011195589.tif 000016
【００８６】
所望の反応に対する固有の26-トリフルオロ置換基の有害な影響は、RCM反応中心とトリフルオロメチル基との間に炭素スペーサーを加えることにより緩和されると、推測された。したがって、積載されている(1,4)-ジエンを含有する17員環では、トリフルオロメチル基を提供する18の閉環複分解を介して、19の合成(式2)を行った。
【００８７】
【化１３】
2011195589.tif 000017
【００８８】
19への合成プログラムを、化合物21の調製で始めたが、これは、我々が提案するRCM基質のO-アルキル部分に対応する(スキーム5)。示されているように、ラジカル反応条件下のこの時点で、我々は、10をアリル化し始めた(Keck,G.E.;Yates,J.B.J.Am.Chem.Soc.1982,104,5829;概観:Curran,D.P.Synthesis 1988,Part1.pp417-439;Part 2,pp.489;これらはそれぞれ、参照により本願明細書に援用される)。この変換に、アルキル化生成物と臭化メチルマグネシウムとの反応を続けると、必要なケトン20が得られた。この化合物とホスフィンオキサイド12とを縮合させ、続いて、トリエチルシリルエーテル官能基を脱保護すると、良好な収率で21が得られた。
【００８９】
【化１４】
2011195589.tif 000018
【００９０】
C1-C10酸断片14で21をエステル化すると、提案したRCM前駆体18が収率75%で得られた(スキーム6)。この場合には幸いに、塩化メチレン中で第2世代Grubbs触媒を使用して、18の閉環複分解反応を達成することができた。5→6の変換の場合のように、この反応により、専らトランス異性体22のみが収率57%で得られた。最後に、亜鉛および酢酸を用いて、トリクロロエトキシカルボニル保護基を還元的に分離し、続いて、HFピリジンを用いてTESエーテルを脱保護すると、17員環系であるにもかかわらず、C12の位置にトリフルオロメチル官能基を含有する所望の19が得られた。
【００９１】
【化１５】
2011195589.tif 000019
【００９２】
合成物19を、その細胞毒活性に関して評価した。下記の表1-1に示されているように、予め報告された[17]ddEpoB(23)と27-F3-[17]ddEpoB(19)とを直接的に比較すると、この新規化合物は、比較的高い細胞毒能を有することが判明した。
【００９３】
【表Ａ】
2011195589.tif 000020
【００９４】
トリフルオロメチル異性体(isoteric)置換は、細胞毒活性全般に対して僅かな効果しか示さないにもかかわらず、マウス血漿での代謝分解からの予備データは、19が親23よりもかなり安定であることを示した。ヌードマウスおよびヒト血漿にエポチロン19および23を暴露すると、30分以内に23の分解が生じたが、エポチロン19は、大部分無傷なままであった。薬物動態問題は、薬剤としてエポチロン剤を実際に使用する際には重要であるので、我々は、この所見にかなり期待をもった。
【００９５】
26-F3-dEpoB(2)の合成を、27-F3-[17]ddEpoB(19)を合成する際に使用された手法と同様のかなり集束的な手法を介して達成した。したがって、同様の複雑体の断片が、かぎとなる構成単位として役立つであろう(スキーム7)。アシル部分25を、ポリプロピオネート領域として役立て、アルキル部分21または24を、冒頭部で予め記載したように調製することを、我々は構想した。エステル化を介して、2つの断片21(24)および25の結合を開始し、後続の閉環複分解により仕上げた。最後に、保護基の分離により、所望の類似体28および29が得られた。28および29の9,10-オレフィンの化学選択的還元により、dEpoB(1)および所望の26-F3-12,13-デオキシEpoB(2)が得られるであろう。
【００９６】
【化１６】
2011195589.tif 000021
【００９７】
1および2の合成は、アシル部分25の調製ではじめた。既に報告されているケトン30を、容易に入手することができるアルデヒド31を用いてアルドール反応に掛けた。脱保護し、「リチオ」30を31と反応させると、順調な縮合により、アルドール生成物32と33との5.3:1混合物が生じた。フラッシュクロマトグラフィーにより、主なジアステレオ異性体32を容易に分離して、TBSシリルエーテルとして保護した。酸性触媒下に、ジイソプロピルアセタール基を加水分解すると、ケトアルデヒド34が得られ、これを、第2のアルドール反応段階のために準備した。カップリング成分としての新規のアルデヒド34を用いる前記で実施した[チタノ」t-ブチルエステル法の後に、所望のアルドール生成物35が高いジアステレオ選択性(dr〉20:1)および収率(86%)で得られた。35のC3アルコールをTESシリル基で保護し、続いて、ベンジルエーテルを脱保護した。生じた1級ヒドロキシを酸化すると、対応するアルデヒドが得られ、次いでこれを、ウィッティヒ反応を介して末端オレフィンに変えると、36が高い収率で得られた。最後に、TESOTfで36のt-ブチルエステルを加水分解すると、アシル部分25(82%)が副産物37(14%)と共に得られ、これを、アシル部分38に高い収率で変換した。38のスペクトルおよびクロマトグラフィー特性は、Dr.Sinhaの実験室(Scripps)で他のプログラムにより以前に得られた物質と同じであった。
【００９８】
【化１７】
2011195589.tif 000022
【００９９】
C1-C9酸フラグメント25を用いてのアリルアルコール21および24のエステル化により、それぞれ対応するRCM環化前駆体26および27が得られた(スキーム9)。
【０１００】
【化１８】
2011195589.tif 000023
【０１０１】
次いで、トルエン中で第2世代Grubbs触媒を使用して、閉環複分解反応26、27および54を実施すると、我々の初期の研究と同様に、専らトランス異性体39a、40aおよび55が、対応する副産物39b、40bおよび56と共に得られた。最後に、HF-ピリジンを用いてシリルエーテルを脱保護すると、所望の化合物28、29および57が得られた。28のスペクトルおよびクロマトグラフィー特性は、Dr.JamesD.White実験室(Oregon State University)でエポチロンプログラムからすでに得られていた物質と同じではなかった。Dr.James D.Whiteは、28を合成したと考えていたが、偶然にも、彼は、代わりに12、13E異性体41を製造したのであって、このことが、彼によって観察された低い生物学的活性を説明する。したがって、我々が初めて、28を合成し、この化合物をその抗腫瘍活性に関して試験した。
【０１０２】
様々な細胞タイプに対して、十分に合成された28、29および2を評価して、その抗腫瘍能を決定した。表1-2に示されているように、これら3種の化合物は全て、様々な感受性および腫瘍耐性細胞系に対して高い細胞毒活性を示した。28と予め報告されていたdEpoB(1)とを直接比較すると、この新規の化合物は、ほぼ3倍高い能力を有することが判明した。
【０１０３】
【表Ｂ】
2011195589.tif 000024
【０１０４】
28、29および2の我々の合成の全体収率を改善するために、我々は、チアゾール置換オレフィンの不在下にRCM反応を実施して、望ましくない副産物39bおよび40bの形成を回避しようと決めた。予め報告された42および20のシリルエーテルを脱保護することにより、ヒドロキシケトン43および44が得られた。生じたヒドロキシケトン43および44をC1-C9酸フラグメント25でエステル化すると、それぞれ対応するRCM環化前駆体45および46が得られた(スキーム10)。次いで、トルエン中で第2世代Grubbs触媒を使用して、45および46の閉環複分解反応を実施すると、我々の初期の研究と同様に、専らトランス異性体47および48が高い収率で得られた。チアゾール成分を導入すると、39a、40aおよび55が高い収率で得られた。HFピリジンでこれら2種のシリルエーテルを脱保護すると、28および29が得られた。最後に、C9-C10オレフィンを選択的に還元すると、対応するエポチロン1および2が得られた。1へのその高い柔軟な変換により、28の構造は、厳密に実証された。1の合成全体が、先に実施した経路に比較してかなり簡略化された。したがって、その合成には介在キラル助剤が必要な(S)-2-メチル-4-ペンテナールを頼るよりも、キラルプールから得られる容易に入手可能な31を使用することは、明らかにかなりの改善である。
【０１０５】
【化１９】
2011195589.tif 000025
【０１０６】
厳密に証明された構造の化合物28で、我々は意外にも、そのスペクトル特性は、同じ存在であると推定されていた化合物で予め報告された特性と一致しないことを発見した。しかしながら、考え直すと、28は、以前は調製されていなかったことは明らかであり、事実、本願明細書で報告される(E)-9,10-デヒドロエポチロンの群は全て、新規の化合物群である。
【０１０７】
細胞培養条件下での合成類似体(2、28および29)の試験により、我々の臨床エントリーdEpoB(1)により示されるよりも強い阻害効果が、様々な感受性およびMDR腫瘍細胞系に対して明らかになった。(表1-3)。Epo3(28)は、dEpoBの細胞毒性よりもかなり改善された細胞毒性を有する第1の12,13-デスオキシエポチロン化合物であることを特記する。
【０１０８】
【表Ｃ】
2011195589.tif 000026
【０１０９】
エポチロン2、28および29(Epo2〜4)により示された幅広い様々な薬剤耐性腫瘍に対する強い細胞成長阻害により、これら新規の(E)-9,10同族体の血漿安定性を決定することとした。例えば、最近記載された(E)-10,11-デヒドロ-dEpoB(C-12にCH3基を有するケース1)は、ラクトン開環により非常に低い血漿安定性を示す。この血漿不安定性が、(E)-10,11-デヒドロ-dEpoBの利点を抑えている。対照的に、ネズミ血漿に2、28および29をさらすと(Epo2〜4)、我々は、dEpoB(1)に比較して7倍遅い薬物分解を観察した。この安定性は、dEpoBに比較して、薬物利用能の観点からかなり利点である(図9参照)。
【０１１０】
細胞毒性および血漿安定性データの組合せにより我々は、大量に28(Epo3)を合成して、ヒト腫瘍異種移植片を有するヌードマウスでそのin vivo効力を決定するよう促された。エポチロン28(Epo3)は、dEpoBに比較して、移植された腫瘍の成長を阻害する際に顕著に改善された効力を証明した(図10参照)。改善された効力および血漿安定性により、28の異種移植片では、薬物用量のかなりの低減(一桁)が可能である(Epo3)。
【０１１１】
我々の初期の研究で、エポチロンBは、12,13エポキシドでは、その12,13-デオキシ類似体(dEpoB)よりもかなり高い細胞毒性を有することが判明した。しかしながら、治療指数を見ると、デオキシ化合物が、かなり有望であるように我々には思われた。さらに最近になって、我々は、立体選択的閉環複分解を使用する(E)-9,10-デヒドロ-12,13-デスオキシエポチロンB(28)の全合成を報告した。我々は、通常のZ-12,13オレフィンでE-9,10不飽和を導入すると(化合物1参照)、in vitro効力のかなりの増大が生じることを示した。より適切には、これは、異種移植片マウスでのin vivo条件に移すことができる。さらに、化合物28は、dEpoB(1)に比較して、主な薬学的利点を享受している。このことにより、異種移植片実験において、1に比較して28の用量レベルを低減して、ひと桁減らすことができる。
【０１１２】
したがって、我々は、エポチロンにC9-C10オレフィンを導入すると(51、EpoB)、同じ方向に生物学的プロファイルが変更されるのではないかと考えた。
【０１１３】
【化２０】
2011195589.tif 000027
【０１１４】
2,2'-ジメチルジオキシラン(DMDO)での28のエポキシ化を、高い化学選択性でさらに置換されたC12-C13オレフィン位置で実施すると、(E)-9,10-デヒドロエポチロンB(49)およびそのジアステレオマー(50)が1:2.6の比で収率87%で得られた。C9-C10二重結合の選択的ジイミド還元により、エポキシドの立体化学を決定した。これらの生成物のスペクトル特性の試験により、少量生成物(49)がdEpoBであることが判明した。28の場合でのα-エポキシ化の利点は、dEpoBの高度な立体選択的エポキシ化に対する著しい対比にあり、これは、β面から生じて、EpoBをもたらす(Meng,D.;Bertinato,P.;Balog,A.;Su,D.-S.;Kamenecka,T.;Sorensen,E.J.;Danishefsky,S.J.J.Am.Chem.Soc.1997,119,10073;参照により本願明細書に援用)。
【０１１５】
【化２１】
2011195589.tif 000028
【０１１６】
(E)-9,10-デヒドロエポチロンB(51)を、様々な細胞種に対して評価して、その抗腫瘍能を決定した。表1-4に示したように、E-9,10-デヒドロエポチロンB(49)は、様々な感受性および耐性腫瘍細胞系に対して高い細胞毒活性を示す。49とEpoB(51)との直接的な比較により、この新規の類似体は、EpoB(51)よりもほぼ3倍高い効力を有し、今日報告されているもっとも強力なエポチロン類似体の1種となっている。重要なことに、α-エポキシドシリーズ(50、52)は、EpoB(51)よりもかなり低い活性を示した。下記のグラフは、化合物49のin vivo研究での所見を示している。
【０１１７】
【表Ｄ】
2011195589.tif 000029
【０１１８】
【表Ｅ】
2011195589.tif 000030
【０１１９】
まとめると、前記では、28(Epo3)の強力な立体選択的全合成および、位置選択的ジイミド還元の後に、dEpoB(1)自体を詳述した。本願明細書に記載の手法は、対応するトリフルオロ類似体2および29(Epo4)を調製するためにそのまま適用することができた。
【０１２０】
さらに、28のエポキシ化により、49および50が得られ、これを、位置選択的にジイミド還元すると、エポチロンB(51)および52が得られた。前記で報告されたデータは、ヒト臨床条件に進みうる途上で、さらなる評価に適した最も有望な新規の抗癌剤の群の出現を示している。さらに、新たな合成の手法は、dEpoBおよびエポチロンBの全合成におけるかなり実際的な改善を含んでいる。
【０１２１】
実施例
一般的方法:特に記載のない限り、さらに精製することなく、市場供給者から得た試薬を使用した。次の溶剤を、無水溶剤系から得て(アルミナの予備充填カラムを通した)、さらに乾燥させること無く使用した:テトラヒドロフラン、塩化メチレン、ジエチルエーテル、ベンゼンおよびトルエン。空気および水過敏性反応は全て、予め精製されたアルゴンガスの正圧下に火炎乾燥させたガラス製品中で行った。NMR(1Hおよび13C)スペクトルは、CDCl3を参照して、それぞれ記載されているようにBruker AMX-400MHzまたはBruker Advance DRX-500MHzで記録した(1Hでは7.27ppmおよび13Cでは77.0ppm)。赤外スペクトルは、Perkin-Elmer FT-IRモデル1600分光計で得た。旋光性は、JASCOモデルDIP-370デジタル偏光計で22±2℃で得た。分析薄層クロマトグラフィーを、E.Merckシリカゲル60F254プレート上で行った。プレートを、モリブデン酸セリウムアンモニウムまたはパラ-アニスアルデヒド溶液に浸漬させ、加熱することにより、UV活性でない化合物を可視化した。Davisil(登録商標)(1740グレード、60A型、170〜400メッシュ)シリカゲル上で記載の溶剤を使用して、シリカゲルクロマトグラフィーを行った。
【０１２２】
頭辞語および略語
TESはトリエチルシリル;TBSはジメチルt-ブチルシリル;EDCIは1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド;HF-PYはピリジン中のフッ化水素;DMAPは4-N,N-ジメチルアミノピリジン;DCMはジクロロメタン;DMFはN,N-ジメチルホルムアミド;THFはテトラヒドロフランである。
【０１２３】
【化２２】
2011195589.tif 000031
【０１２４】
化合物32: -78℃で、新たに調製されたLDC(11.6mmol)のTHF(25mmol)溶液に、THF(6.8ml)中のケトン30(2.40g、10.4mmol)の溶液を滴加した。-40℃で0.5時間攪拌した後に、混合物を-90℃まで冷却した。アルデヒド31(1.38g、7.72mmol)のTHF(6.8mL)溶液を滴加した。-90℃で35分間攪拌した後に、反応を飽和NH4Cl水溶液(15mL)でクエンチし、EtOAc(50mL×3)で抽出した。合わせた有機抽出物をNa2SO4上で乾燥させ、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製すると(SiO2、ヘキサン/EtOAc=15:1から12:1)、32(2.09g、66%)および異性体33(0.39g、12%)が両方とも黄色のオイルとして得られた。
32: [α]D25 13.1 (c 1.22, CHCl3); IR (フィルム) ν3494、2972、2932、1708、1454、1380、1329、1120、1038、998、734cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.98 (3H, d, J=6.9Hz)、1.06 (3H, d, J=6.9Hz)、1.10 (3H, d, J=6.1Hz)、1.14 (3H, d, J=6.9Hz)、1.15 (3H, s)、1.17 (3H, d, J=6.2Hz)、1.18 (3H, s)、1.20 (3H, d, J=6.2Hz)、1.81〜1.92 (1H, m)、3.33 (1H, qd, J=7.0, 2.2.Hz)、3.51 (1H, dd, J=8.9, 6.3Hz)、3.64 (1H, d, J=1.8Hz)、3.66〜3.71 (2H, m)、3.78〜3.86 (2H, m)、4.51 (1H, d, J=12.0Hz)、4.54 (1H, d, J=12.0Hz)、4.58 (1H, s)、7.25〜7.35 (5H, m); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ10.0、14.3、20.5、21.3、21.9、22.5、23.5、23.6、36.4、42.1、54.1、69.8、71.2、72.8、73.3、73.4、103.8、127.6、127.7 (2C)、128.5 (2C)、138.9、221.6; LRMS (ESI) C24H40O5Na [M+Na+]の計算値431.3、実測値431.4。
【０１２５】
【化２３】
2011195589.tif 000032
【０１２６】
化合物32a(図示せず): アルコール32(1.01g、2.47mmol)および2,6-ルチジン(691μL、5.93mmol)の冷却(-40℃)溶液に、TBSOTf(681μL、3.00mmol)を加え、この混合物を-20℃まで3.5時間かけて加温した。反応を飽和NaHCO3水溶液(10mL)でクエンチした。ヘキサン(50mL×3)で抽出した後に、合わせた有機抽出物をNa2SO4上で乾燥させ、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/EtOAc=50:1)による精製により、32a(1.25g、2.39mmol、97%)が無色のオイルとして得られた;
[α]D25 -19.7 (c 0.58, CHCl3); IR (フィルム) ν2966、2931、1696、1455、1378、1320、1255、1091、1044、991、873、838、773cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.08 (6H, s)、0.89 (9H, s)、0.99 (3H, d, J=7.0Hz)、1.04 (3H, d, J=7.0Hz)、1.07 (3H, d, J=7.0Hz)、1.07 (3H, s)、1.14 (3H, d, J=6.1Hz)、1.17 (3H, s)、1.17 (3H, d, J=6.0Hz)、1.20 (3H, d, J=6.2Hz)、1.76〜1.85 (1H, m)、3.21 (1H, dd, J=9.2, 7.3Hz)、3.32 (1H, 五重線, J=7.4Hz)、3.62 (1H, dd, J=9.2, 5.7Hz)、3.78〜3.85 (2H, m)、3.87 (1H, dd, J=7.7, 2.0Hz)、4.46 (1H, d, J=12.1Hz)、4.50 (1H, d, J=12.1Hz)、4.73 (1H, s)、7.24〜7.37 (5H, m); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ-3.6、-3.3、15.6、16.8、18.7、18.8、21.8、22.1、22.5、23.5、23.7、26.4 (3C)、39.0、46.2、54.0、69.7、70.9、72.1、73.4、76.7、103.1、127.6、127.8 (2C)、128.5 (2C)、139.0、218.9; LRMS (ESI) C30H54O5SiNa [M+Na+]の計算値545.4、実測値545.4。
【０１２７】
【化２４】
2011195589.tif 000033
【０１２８】
化合物34: THF(64mL、THF/H2O=4:1)水溶液中の32a(3.03g、5.79mmol)およびp-TsOH・H2O(286mg)の混合物を還流下に6.5時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、飽和NaHCO3水溶液(25mL)に注いだ。EtOAc(100mL+50mL×2)で抽出した後に、合わせた有機層を生理食塩水で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/EtOAc=50:1から30:1)により精製すると、34(2.37g、5.64mmol、98%)が無色のオイルとして得られた:
[α]D25 -25.8 (c 0.515, CHCl3); IR (フィルム) ν2955、2931、1731、1696、1455、1360、1255、1091、1026、873、826、767cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.06 (3H, s)、0.07 (3H, s)、0.90 (9H, s)、0.95 (3H, d, J=7.1Hz)、1.03 (3H, d, J=7.0Hz)、1.28 (3H, s)、1.33 (3H, s)、1.73〜1.82 (1H, m)、3.16 (1H, dd, J=9.2, 6.1Hz)、3.28 (1H, 五重線, J=7.3Hz)、3.55 (1H, dd, J=9.2, 6.7Hz)、3.91 (1H, dd, J=7.8, 2.1Hz)、4.46 (2H, s)、7.27〜7.36 (5H, m)、9.58 (1H, s);13C NMR (100MHz, CDCl3) δ-3.6、-3.5、15.7、16.3、18.6、19.8、20.1、26.3 (3C)、39.1、47.0、61.1、71.9、73.4、75.8、127.7、128.0 (2C)、128.5 (2C)、138.6、201.3、213.3; LRMS (ESI) C24H40O4SiNa [M+Na+]の計算値443.3、実測値443.2。
【０１２９】
【化２５】
2011195589.tif 000034
【０１３０】
化合物35: 新たに調製されたLDA(Et2O中0.5Mの溶液18mL、9.0mmol)のEt2O(20mL)溶液に、-78℃で酢酸t-ブチル(1.16mL、8.61mmol)を加えた。50分間攪拌させた後に、CpTiCl(OR)2(Et2O中0.1Mの溶液100mL、10.0mmol)を、シリンジポンプを介して65分かけて滴加した。20分間攪拌した後に、反応混合物を-30℃まで加温し、50分間攪拌し、-78℃に再冷却した。34(2.42g、5.75mmol)のEt2O(9mL)溶液を10分かけて滴加し、生じた混合物を-78℃で攪拌した。2時間攪拌した後に、反応をTHF水溶液(H2O中5M、37mL)でクエンチし、室温で2時間攪拌した。水(40mL)を加えた後に、混合物をさらに1時間攪拌した。生じた沈殿物をセライト(Et2Oですすぐ)で濾過し、濾液を水(40mL)で洗浄した。水性層をEt2O(100mL×2)で抽出し、合わせた有機層を生理食塩水(40mL)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/EtOAc=10:1)により精製すると、35(2.65g、4.94mmol、86%)が淡黄色のオイルとして得られた;
[α]D25 -20.3 (c 1.0, CHCl3); IR (フィルム) ν3523、2957、2930、2856、1732、1700、1472、1368、1252、1152、1091、1042、986、834、774cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.07 (3H, s)、0.07 (3H, s)、0.90 (9H, s)、0.99 (3H, d, J=7.0Hz)、1.07 (3H, d, J=7.0Hz)、1.10 (3H, s)、1.14 (3H, s)、1.47 (9H, s)、1.77〜1.83 (1H, m)、2.26 (1H, dd, J=16.0, 10.0Hz)、2.34 (1H, dd, J=15.9, 2.7Hz)、3.23 (1H, dd, J=9.2, 7.1Hz)、3.35 (1H, d, J=2.7Hz, -OH)、3.36 (1H, 五重線, J=7.0Hz)、3.61 (1H, dd, J=9.2, 5.9Hz)、3.88 (1H, dd, J=7.6, 2.0Hz)、4.17 (1H, dt, J=10.0, 2.7Hz)、4.48 (2H, s)、7.27〜7.36 (5H, m); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ-3.5、-3.4、16.3、16.7、18.7、20.1、21.6、26.4 (3C)、28.3 (3C)、38.0、39.1、45.8、51.8、72.2、72.9、73.5、76.7、81.4、127.7、128.0 (2C)、128.5 (2C)、138.8、172.7、219.6; LRMS (ESI) C30H52O6SiNa [M+Na+]の計算値559.3、実測値559.4。
【０１３１】
【化２６】
2011195589.tif 000035
【０１３２】
化合物35a(図示せず):DMF(25mL)中のアルコール35(10.2g、18.9mmol)およびイミダゾール(2.70g、39.7mmol)の混合物に、TESCl(3.3mL、19.8mmol)を0℃で加え、この混合物を室温で2時間攪拌した。反応を、飽和NaHCO3水溶液(50mL)でクエンチした。ヘキサン(500mL+120ml×2)で抽出した後に、合わせた有機抽出物を順次、水(30mL×2)および生理食塩水(30ml)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濃縮させた。フラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/EtOAc=40:1)により精製すると、35a(12.1g、18.5mmol、98%)が無色のオイルとして得られた:
[α]D25 -38.0 (c 0.46, CHCl3); IR (フィルム) ν2955、2877、1733、1697、1456、1367、1298、1251、1155、1099、988、835、742cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.05 (6H, s)、0.57〜0.68 (6H, m)、0.89 (9H, s)、0.95 (9H, t, J=7.9Hz)、0.99 (3H, d, J=7.0Hz)、1.02 (3H, d, J=6.8Hz)、1.04 (3H, s)、1.18 (3H, s)、1.45 (9H, s)、1.70〜1.79 (1H, m)、2.16 (1H, dd, J=17.0, 7.0Hz)、2.40 (1H, dd, J=17.0, 3.1Hz)、3.22 (1H, dd, J=9.1, 7.5Hz)、3.31 (1H, 五重線, J=6.9Hz)、3.61 (1H, dd, J=9.1, 5.4Hz)、3.83 (1H, dd, J=7.3, 2.3Hz)、4.30 (1H, dd, J=6.9, 3.1Hz)、4.48 (2H, s)、7.27〜7.36 (5H, m); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ-3.5、-3.4、5.3 (3C)、7.3 (3C)、15.3、16.9、18.7、20.1、23.4、26.4 (3C)、28.3 (3C)、39.1、41.1、46.2、53.4、72.2、73.4、74.3、76.7、80.6、127.6、127.9 (2C)、128.5 (2C)、138.9、171.5、218.4; LRMS (ESI) C36H66O6Si2Na [M+Na+]の計算値673.4、実測値673.5。
【０１３３】
【化２７】
2011195589.tif 000036
【０１３４】
化合物35b(図示せず): 35a(4.37g、6.72mmol)のTHF(67mL)攪拌溶液に、Pd/C(Acrosから購入、10重量%、437mg)を加え、混合物をH2雰囲気下に攪拌した。2.2時間攪拌した後に、混合物をセライトパッドで濾過し、これを、THF(120mL)ですすいだ。濾液を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/EtOAc=30:1から10:1)により精製すると、35b(3.53g、6.28mmol、94%)が無色のオイルとして得られた;
[α]D25 -16.1 (c 0.62, CHCl3); IR (フィルム) ν3543、2956、1732、1696、1472、1368、1299、1252、1155、1100、988、837、775、742cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.10 (3H, s)、0.12 (3H, s)、0.60〜0.68 (6H, m)、0.93 (9H, s)、0.96 (9H, t, J=8.0Hz)、0.99 (3H, d, J=7.1Hz)、1.10 (3H, d, J=6.9Hz)、1.14 (3H, s)、1.20 (3H, s)、1.45 (9H, s)、1.46〜1.55 (1H, m)、2.21 (1H, dd, J=17.2, 7.1Hz)、2.39 (1H, dd, J=17.2, 2.8Hz)、2.54 (1H, t, J=5.8Hz, -OH)、3.30 (1H, 五重線, J=6.9Hz)、3.58 (1H, dt, J=11.5, 5.5Hz)、3.66 (1H, dt, J=11.3, 5.4Hz)、3.92 (1H, dd, J=8.0, 2.1Hz)、4.32 (1H, dd, J=7.1, 2.9Hz); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ-3.6、-3.5、5.3 (3C)、7.2 (3C)、16.0、16.1、18.6、20.0、23.4、26.4 (3C)、28.3 (3C)、40.0、40.9、46.9、53.7、64.8、73.3、78.1、80.9、171.7、218.5; LRMS (ESI) C29H60O6Si2Na [M+Na+]の計算値583.4、実測値583.5。
【０１３５】
【化２８】
2011195589.tif 000037
【０１３６】
化合物35c(図示せず): CH2Cl2(32mL)中のアルコール35b(3.53mg、6.28mmol)および粉末MS4A(新たに活性化、2.50g)の攪拌混合物に、NMO(1.17g、10.0mmol)を、続いてTPAP(132mg、0.377mmol)を加えた。室温で35分間攪拌した後に、混合物をシリカゲルカラム(ヘキサン/Et2O=8:1)で濾過すると、35c(3.34g、5.98mmol、95%)が無色のオイルとして得られた:
[α]D25 -69.6 (c 0.25, CHCl3); IR (フィルム) ν2955、2878、1732、1696、1472、1368、1253、1155、1097、989、837cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.09 (3H, s)、0.10 (3H, s)、0.59〜0.68 (6H, m)、0.89 (9H, s)、0.95 (9H, t, J=8.0Hz)、1.08 (3H, s)、1.11 (3H, d, J=6.9Hz)、1.14 (3H, d, J=7.1Hz)、1.24 (3H, s)、1.45 (9H, s)、2.19 (1H, dd, J=17.0, 6.7Hz)、2.33 (1H, qt, J=7.1, 2.2Hz)、2.41 (1H, dd, J=17.0, 3.3Hz)、3.28 (1H, 五重線, J=7.5Hz)、4.07 (1H, dd, J=7.9, 2.2Hz)、4.32 (1H, dd, J=6.7, 3.2Hz)、9.74 (1H, d, J=2.0Hz); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ-3.8、-3.5、5.3 (3C)、7.2 (3C)、12.6、15.6、18.5、20.5、23.3、26.2 (3C)、28.3 (3C)、41.1、46.9、51.1、53.5、74.0、76.5、80.7、171.1、204.3、218.0; LRMS (ESI) C29H58O6Si2Na [M+Na+]の計算値581.3、実測値581.3。
【０１３７】
【化２９】
2011195589.tif 000038
【０１３８】
化合物36:THF(40.0mL)中のMePPh3I(2.56g、7.18mmol)を、0℃でt-BuOK(THF中1.0Mの溶液6.57mL、6.57mmol)で処理した。0℃で20分間攪拌した後に、生じた懸濁液を-78℃に冷却し、アルデヒド35c(3.34g、5.98mmol)のTHF(14mL)溶液を加えた。-78℃で15分間攪拌した後に、混合物を0℃で15分間および室温で15分間攪拌した。反応を飽和NH4Cl水溶液(20ml)でクエンチし、Et2O(120mL+50mL×2)で抽出した。合わせた有機抽出物を生理食塩水(20mL)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濃縮させた。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2〜80g、ヘキサン/Et2O=40:1)により精製すると、36(125.3mg、0.225mmol、78%)が無色のオイルとして得られた;
[α]D25 -33.6 (c 0.250, CHCl3); IR (フィルム) ν2956、2878、1733、1696、1472、1367、1299、1253、1156、1100、988、837、774cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.08 (3H, s)、0.08 (3H, s)、0.60〜0.68 (6H, m)、0.93 (9H, s)、0.96 (9H, t, J=8.0Hz)、1.04 (6H, d, J=7.0Hz)、1.09 (3H, s)、1.20 (3H, s)、1.45 (9H, s)、2.08〜2.15 (1H, m)、2.29 (1H, dd, J=17.0, 7.0Hz)、2.41 (1H, dd, J=17.0, 3.1Hz)、3.08 (1H, 五重線, J=7.0Hz)、3.84 (1H, dd, J=7.0, 2.1Hz)、4.32 (1H, dd, J=7.0, 3.1Hz)、5.02 (1H, dd, J=17.9, 1.0Hz)、5.06 (1H, dd, J=10.5, 1.0Hz)、5.93 (1H, ddd, J=17.9, 10.5, 7.7Hz); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ-3.6、-3.3、5.4 (3C)、7.2 (3C)、15.2、18.7、19.0、20.2、23.6、26.4 (3C)、28.3 (3C)、41.1、43.8、46.4、53.5、73.9、76.6、80.6、115.5、140.2、171.5、218.5; LRMS (ESI) C30H60O5Si2Na [M+Na+]の計算値579.4、実測値579.4。
【０１３９】
【化３０】
2011195589.tif 000039
【０１４０】
化合物25: t-ブチルエステル36(4.87g、8.74mmol)および2,6-ルチジン(新たに蒸留、4.1mL、35.0mmol)からなるCH2Cl2(58mL)溶液に、TESOTf(4.0mL、17.5mmol)を0℃で加えた。0℃で25分間攪拌した後に、混合物を室温で3.2時間攪拌した。混合物をEt2O(600mL)で希釈し、5%KHSO4水溶液(60mL×2)および生理食塩水(60mL)で順次洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濃縮した。残留物を高真空下に1.5時間乾燥させると、粗製の酸25(6.30g、TESOHで汚染)が得られた。この粗製生成物(6.30g)をTHF水溶液(87.5mL、THF/H2O=6:1)に溶かし、飽和NaHCO3水溶液(12.5mL)で処理した。室温で20分間攪拌した後に、生じた懸濁液をEt2O(500mL)で希釈し、5%KHSO4水溶液(55mL)で酸性化した。層を分離した後に、水性層をEt2O(100mL×2)で抽出し、合わせた有機層を生理食塩水(50mL×2)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濃縮した。残留物を高真空下に一晩乾燥させると、粗製の酸(5.60g、TESOHで汚染)が無色のオイルとして得られ、これを、さらに精製することなく次の反応で使用した。ヘキサン/EtOAc=4/1で溶離するシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによる同定のために精製した。
[α]D25 -30.7 (c 0.985, CHCl3); IR (フィルム) ν2956、2936、2879、1712、1472、1417、1303、1253、1107、1046、1003、988、872、837、775、741cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.08 (3H, s)、0.09 (3H, s)、0.59〜0.67 (6H, m)、0.93 (9H, s)、0.96 (9H, t, J=8.1Hz)、1.05 (3H, d, J=7.0Hz)、1.05 (3H, d, J=7.0Hz)、1.20 (3H, s)、1.21 (3H, s)、2.06〜2.13 (1H, m)、2.34 (1H, dd, J=16.4, 7.4Hz)、2.50 (1H, dd, J=16.4, 3.0Hz)、3.06 (1H, 五重線, J=7.3Hz)、3.87 (1H, dd, J=7.5, 1.8Hz)、4.40 (1H, dd, J=7.3, 2.9Hz)、5.01 (1H, dd, J=18.0, 0.9Hz)、5.07 (1H, dd, J=10.4, 1.2Hz)、5.93 (1H, ddd, J=18.0, 10.4, 7.8Hz); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ-3.6、-3.3、5.3 (3C)、7.1 (3C)、15.6、18.7、19.1、19.2、24.1、26.4 (3C)、39.8、43.6、46.4、53.5、73.7、76.6、115.6、140.0、177.9、218.7; LRMS (ESI) C26H52O5Si2Na [M+Na+]の計算値523.3、実測値522.9。
【０１４１】
【化３１】
2011195589.tif 000040
【０１４２】
化合物45: 3-O-TES-6-O-TBS保護された酸25を、ベンゼンからの共沸蒸留により乾燥させた。新たに乾燥させたアルコール43(200mg、1.19mmol)をDCM(10mL)に溶かし、0℃に冷却し、この温度で、固体DMAP(167mg、1.37mmol)および固体EDCl(261mg、1.37mmol)を加えた。反応混合物を0℃で15分間攪拌した後に、酸25(425mg、0.85mmol)のDCM(2mL)溶液を滴加した。冷却浴を外し、攪拌をさらに2時間続けた。粗製反応混合物をDCM(10ml)で希釈し、溶離剤として10%EtOAC/ヘキサンを使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製するとエステル45(380mg、収率81%、2工程、36から出発)が澄明なオイルとして得られた:
[α]D -15.1 (c 1.2, CDCl3); IR (ニート) 2955、2932、2877、1743、1732、1694、1474、1461、1417、1380、1360、1295、1252、1169、1094、1043、988.3、912.9、871.4、836.5、774.8、741.6cm-1; 1H NMR (500MHz, CDCl3) 0.08 (3H, s)、0.08 (3H, s)、0.60〜0.68 (6H, m)、0.93 (9H, s)、0.95 (9H, t, J=8.0Hz)、1.04 (3H, d, J=6.9Hz)、1.05 (3H, d, J=6.9Hz)、1.10 (3H, s)、1.25 (3H, s)、1.69 (3H, s)、2.08〜2.15 (2H, m)、2.16 (3H, s)、2.38 (1H, dd, J=17.0, 7.0Hz)、2.48 (2H, t, J=6.5Hz)、2.57 (1H, dd, J=17.0, 2.7Hz)、2.71〜2.76 (2H, m)、3.07 (1H, 五重線, J=7.0Hz)、3.83 (1H, d, J=7.2Hz)、4.36 (1H, dd, J=7.0, 2.7Hz)、4.97〜5.07 (4H, m)、5.19 (1H, t, J=7.0)、5.73 (1H, td, J=15.4, 5.9Hz)、5.92 (1H, dd, J=15.7, 8.0Hz); 13C NMR (500MHz, CDCl3) δ218.4、205.4、172.1、140.1、137.4、135.4、119.1、115.8、115.6、78.7、76.5、73.9、53.3、46.3、43.7、39.6、36.6、29.2、26.7、26.4、23.8、23.7、19.9、18.9、18.7、15.4、7.06、5.30、-3.29、-3.62; LRMS (ESI) C36H66O6Si2Na [M+Na+]の計算値673.4、実測値673.5。
【０１４３】
【化３２】
2011195589.tif 000041
【０１４４】
化合物47: 還流で、化合物45(20mg、0.031mmol)の無水トルエン(60mL)溶液に、トリシクロヘキシルホスフィン[1,3-ビス(2,4,6-トリメチルフェニル)-4,5-ジヒドロイミダゾール-2-イリデン][ベンジリデン]ルテニウム(IV)二塩化物(5.2mg、0.0061mmol)の無水トルエン(2mL)溶液を一回で加え、この混合物を10分間加熱した。反応混合物を氷浴で直ちに冷却し、シリカ上でストリッピングし、溶離剤として4〜10%EtOAc/ペンタン勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーを使用して精製すると、化合物47(15mg、収率78%)がオイルとして得られた:
[α] -28.6 (c 1.2, CHCl3); IR (ニート) 2955、2933、2878、1745、1731、1695、1471、1462、1380、1361、1251、1159、1104、1080、1019、985.0、876.1、835.5、774.7、743.1、670.1cm-1; 1H NMR (500MHz, CDCl3) 0.07 (3H, s)、0.10 (3H, s)、0.59〜0.68 (6H, m)、0.91 (9H, t, J=8.0Hz)、0.93 (9H, s)、1.04 (3H, d, J=7.0Hz)、1.10 (3H, s)、1.11 (3H, d, J=7.0Hz)、1.17 (3H, s)、1.71 (3H, s)、2.21 (3H, s)、2.27〜2.32 (1H)、2.38 (1H, dd, J=14.6, 6.8Hz)、2.51〜2.61 (2H, m)、2.57 (1H, dd, J=15.5, 3.3Hz)、2.93〜3.1 (3H, m)、3.94 (1H, d, J=8.5Hz)、4.28 (1H, dd, J=8.6, 3.0Hz)、5.04 (1H, dd, J=8.7, 2.4)、5.16 (1H, t, J=7.5)、5.73 (1H, tdd, J=12.8, 9.94, 6.9Hz)、5.92 (1H, ddd, J=18.0, 10.3, 7.8Hz); 13C NMR (125MHz, CDCl3) δ215.9、204.8、171.3、140.0、132.7、129.2、118.6、79.1、78.2、75.4、54.0、48.2、41.7、40.3、35.0、29.2、26.6、26.5、23.5、22.8、20.6、18.8、17.5、14.3、7.19、5.53、-3.36; LRMS (ESI) C34H62O6Si2の計算値645.4、実測値645.4 (M+Na+)。
【０１４５】
【化３３】
2011195589.tif 000042
【０１４６】
化合物39a: ウィッティヒ試薬(19.1mg、54.7μmol)のTHF(0.4mL)溶液に、KHMDS(トルエン中0.5Mの溶液109μL、54.7μmol)を0℃で加えた。混合物を0℃で0.5時間攪拌し、次いで、-78℃に冷却した。混合物に、ケトン47(5.7mg、9.12μmol)のTHF(0.3mL)溶液を滴加し、生じた混合物を放置して1.5時間かけて-20℃まで加温した。反応を、飽和NH4Cl水溶液(2mL)でクエンチし、EtOAc(7mL×3)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4上で乾燥させ、濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/Et2O=10:1)により精製すると、E/Zオレフィンの分離不可能な混合物5.6mg(E/Z=9:1)が得られた。分取TLC(ヘキサン/Et2O=4:1)により混合物を精製すると、純粋な39a(5.0mg、6.96μmol、76%)が無色のオイルとして得られた:
[α]D25 -41.5 (c 0.715, CHCl3); IR (フィルム) ν2955、2884、1737、1690、1467、1378、1249、1179、1102、1014、979、879、826、773cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.08 (3H, s)、0.12 (3H, s)、0.57 (6H, q, J=7.8Hz)、0.89 (9H, t, J=8.0Hz)、0.93 (9H, s)、1.04 (3H, s)、1.06 (3H, d, J=7.1Hz)、1.12 (3H, s)、1.17 (3H, d, J=7.1Hz)、1.68 (3H, s)、2.15 (3H, d, J=0.8Hz)、2.14〜2.27 (2H, m)、2.45 (1H, dd, J=14.0, 4. 8Hz)、2.50 (1H, dd, J=14.9, 3.2Hz)、2.64〜2.74 (2H, m)、2.72 (3H, s)、3.02 (1H, 五重線, J=7.0Hz)、3.10 (1H, dd, J=14.4, 7.3Hz)、3.96 (1H, d, J=8.7Hz)、4.43 (1H, dd, J=8.3, 2.9Hz)、5.22 (1H, dd, J=9.8, 5.7Hz)、5.33〜5.42 (2H, m)、5.69 (1H, dd, J=15.8, 8.2Hz)、6.57 (1H, s)、6.96 (1H, s); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ-3.3、-3.2、5.6 (3C)、7.1 (3C)、15.0、17.2、18.8、19.4、21.4、21.7、23.8、24.3、26.5 (3C)、33.2、35.6、41.3、41.8、48.2、54.0、74.4、77.4、79.3、116.4、120.5、121.0、129.3、132.1、137.8、138.0、152.7、164.8、170.7、216.8; LRMS (ESI) C39H68NO5SSi2 [M+H+]の計算値718.4、実測値718.3。
【０１４７】
【化３４】
2011195589.tif 000043
【０１４８】
化合物28(Epo3): 39a(298.8mg、0.416mmol)のTHF(6.5mL)溶液に、HP・ピリジン(3.2mL)を0℃で加え、混合物を室温で3時間攪拌した。0℃で、TMSOMe(30mL)を滴加することにより、反応をクエンチした。濃縮し、高真空下に乾燥させた後に、残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/EtOAc=1:1)により精製すると、28(196.6mg、0.402mmol、97%)が白色の固体として得られた;
[α]D25 -96.6 (c 0.235, CHCl3); IR (フィルム) ν3502、2970、2927、1733、1685、1506、1456、1375、1251、1152、1040、977cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.06 (3H, s)、1.11 (3H, d, J=7.0Hz)、1.22 (3H, d, J=6.8Hz)、1.28 (3H, s)、1.72 (3H, s)、2.10 (3H, s)、2.31〜2.40 (2H, m)、2.43 (1H, dd, J=16.0, 3.7Hz)、2.49 (1H, dd, J=16.0, 9.2Hz)、2.55〜2.68 (2H, m)、2.71 (3H, s)、2.98 (1H, dd, J=14.4, 6.4Hz)、3.16 (1H, 五重線, J=6.2Hz)、3.76 (1H, dd, J=5.9, 3.2Hz)、4.30 (1H, dd, J=9.2, 3.7Hz)、5.18 (1H, brt, J=7.3Hz)、5.32 (1H, dd, J=8.4, 2.5Hz)、5.63 (1H, dd, J=15.7, 6.4Hz)、5.60 (1H, ddd, J=15.7, 6.9, 5.1Hz)、6.60 (1H, s)、6.98 (1H, s); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ15.1、16.0、17.7、19.2、19.5、22.5、23.6、32.0、35.0、39.6、40.3、44.8、53.3、71.8、75.6、78.3、116.1、119.6、120.5、129.9、131.3、137.5、138.2、152.2、165.0、170.7、218.8; LRMS (ESI) C27H40NO5S [M+H+]の計算値490.3、実測値490.2。
【０１４９】
【化３５】
2011195589.tif 000044
【０１５０】
dEpoB(1、Epo1): 28(1.2mg、2.5μmol)およびトリスNHNH2(29.3mg、98μmol)からなるClCH2CH2Cl(0.7ml)溶液に50℃で、Et3N(13.7μL、98μmol)を加えた。反応をHPTLC(ヘキサン/EtOAC/CH2Cl2=1/1/2)により監視した。7時間攪拌した後に、混合物を室温に冷却し、EtOAcで希釈し、シリカゲルパッドで濾過し、このパッドをEtOAcですすいだ。濃縮した後に、残留物を分取TLC(ヘキサン/EtOAC/CH2Cl2=1/1/2)により精製すると、1(1.1mg、2.2μmol、91%)が白色の固体として得られた。1のスペクトルデータは、dEpoBの報告されたデータと同じであった。
【０１５１】
【化３６】
2011195589.tif 000045
【０１５２】
化合物27: 酸25およびアルコール24を無水ベンゼン(5mL×2)と共に共沸蒸留し、反応の前に高真空下に乾燥させた。アルコール24(639mg、2.63mmol)のCH2Cl2(13mL)溶液に、EDCI(576mg、3.09mmol)およびDMAP(366mg、3.09mmol)を0℃で加えた。混合物に、酸25(1.11g、1.88mmol)のCH2Cl2(5mL+すすぎ2mL)溶液を16分かけて0℃で滴加した。0℃で1.5時間攪拌した後に、混合物を室温で3.5時間攪拌した。濃縮した後に、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/EtOAC=30:1から20:1)により精製すると、27(1.20g、1.61mmol、t-ブチルエステルから86%)が無色のオイルとして得られた;
[α]D24 -25.1 (c 1.30, CHCl3); IR (フィルム) ν2955、2925、2872、1732、1696、1461、1378、1290、1243、1173、1091、985、873、773cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.06 (3H, s)、0.06 (3H, s)、0.58〜0.66 (6H, m)、0.92 (9H, s)、0.95 (9H, t, J=8.0Hz)、1.02 (3H, d, J=6.5Hz)、1.03 (3H, d, J=6.5Hz)、1.07 (3H, s)、1.21(3H, s)、1.67 (3H, s)、2.07 (3H, s)、2.05〜2.12 (1H, m)、2.30 (1H, dd, J=16.9, 7.5Hz)、2.39 (1H, dt, J=14.8, 6.7Hz)、2.49 (1H, dd, J=17.0, 3.0Hz)、2.50 (1H, dt, J=14.8, 6.7Hz)、2.70 (3H, s)、2.74〜2.30 (2H, m)、3.07 (1H, dd, J=7.0Hz)、3.83 (1H, dd, J=7.1, 2.0Hz)、4.35 (1H, dd, J=7.4, 2.8Hz)、4.98〜5.07 (4H, m)、5.16 (1H, brt, J=7.0Hz)、5.23 (1H, t, J=6.9Hz)、5.74 (1H, ddt, J=16.7, 10.2, 6.5Hz)、5.91 (1H, ddd, J=17.8, 10.5, 7.8Hz)、6.50 (1H, s)、6.95 (1H, s); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ-3.7、-3.3、5.3 (3C)、7.2 (3C)、14.8、15.2、18.7、18.9、19.4、20.3、23.6、23.7、26.4 (3C)、31.7、36.7、40.1、43.8、46.4、53.3、74.2、76.5、79.6、115.5、115.6、116.5、120.5、121.3、135.8、136.1、137.4、140.2、152.9、164.7、171.5、218.4; LRMS (ESI) C41H71NO5SSi2 [M+Na+]の計算値768.5、実測値768.5。
【０１５３】
【化３７】
2011195589.tif 000046
【０１５４】
化合物39a: 27(26.9mg、36.1μmol)のトルエン(70mL)溶液を還流まで加熱し、Grubbs触媒(3.1mg、3.61μmol)のトルエン(2mL)溶液で処理した。この混合物を25分間攪拌し、0℃まで冷却し、シリカゲルパッドで濾過し、このパッドをヘキサン/EtOAc=2/1ですすいだ。合わせた濾液を濃縮した後に、フラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/Et2O=40:1から5:1)により精製すると、39a(9.9mg、13.8μmol、38%)が無色のオイルとして得られた。
[α]D25 -41.5 (c 0.715, CHCl3); IR (フィルム) ν2955、2884、1737、1690、1467、1378、1249、1179、1102、1014、979、879、826、773cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.08 (3H, s)、0.12 (3H, s)、0.57 (6H, q, J=7.8Hz)、0.89 (9H, t, J=8.0Hz)、0.93 (9H, s)、1.04 (3H, s)、1.06 (3H, d, J=7.1Hz)、1.12 (3H, s)、1.17 (3H, d, J=7.1Hz)、1.68 (3H, s)、2.15 (3H, d, J=0.8Hz)、2.14〜2.27 (2H, m)、2.45 (1H, dd, J=14.0, 4.8Hz)、2.50 (1H, dd, J=14.9, 3.2Hz)、2.64〜2.74 (2H, m)、2.72 (3H, s)、3.02 (1H, 五重線, J=7.0Hz)、3.10 (1H, dd, J=14.4, 7.3Hz)、3.96 (1H, d, J=8.7Hz)、4.43 (1H, dd, J=8.3, 2.9Hz)、5.22 (1H, dd, J=9.8, 5.7Hz)、5.33〜5.42 (2H, m)、5.69 (1H, dd, J=15.8, 8.2Hz)、6.57 (1H, s)、6.96 (1H, s); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ-3.3、-3.2、5.6 (3C)、7.1 (3C)、15.0、17.2、18.8、19.4、21.4、21.7、23.8、24.3、26.5 (3C)、33.2、35.6、41.3、41.8、48.2、54.0、74.4、77.4、79.3、116.4、120.5、121.0、129.3、132.1、137.8、138.0、152.7、164.8、170.7、216.8; LRMS (ESI) C39H68NO5SSi2 [M+H+]の計算値718.4、実測値718.3。
【０１５５】
【化３８】
2011195589.tif 000047
【０１５６】
化合物28: 39a(298.8mg、0.416mmol)のTHF(6.5mL)溶液に、HF・ピリジン(3.2mL)を0℃で加え、この混合物を室温で3時間攪拌した。反応を、TMSOMe(30mL)を0℃で滴加することによりクエンチし、混合物を室温で3時間攪拌した。濃縮し、高真空下に乾燥させた後に、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/EtOAc=1:1)により精製すると、28(196.6mg、0.402mmol、97%)が白色の固体として得られた。
[α]D25 -96.6 (c 0.235, CHCl3); IR (フィルム) ν3502、2970、2927、1733、1685、1506、1456、1375、1251、1152、1040、977cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.06 (3H, s)、1.11 (3H, d, J=7.0Hz)、1.22 (3H, d, J=6.8Hz)、1.28 (3H, s)、1.72 (3H, s)、2.10 (3H, s)、2.31〜2.40 (2H, m)、2.43 (1H, dd, J=16.0, 3.7Hz)、2.49 (1H, dd, J=16.0, 9.2Hz)、2.55〜2.68 (2H, m)、2.71 (3H, s)、2.98 (1H, dd, J=14.4, 6.4Hz)、3.16 (1H, 五重線, J=6.2Hz)、3.76 (1H, dd, J=5.9, 3.2Hz)、4.30 (1H, dd, J=9.2, 3.7Hz)、5.18 (1H, brt, J=7.3Hz)、5.32 (1H, dd, J=8.4, 2.5Hz)、5.63 (1H, dd, J=15.7, 6.4Hz)、5.60 (1H, ddd, J=15.7, 6.9, 5.1Hz)、6.60 (1H, s)、6.98 (1H, s); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ15.1、16.0、17.7、19.2、19.5、22.5、23.6、32.0、35.0、39.6、40.3、44.8、53.3、71.8、75.6、78.3、116.1、119.6、120.5、129.9、131.3、137.5、138.2、152.2、165.0、170.7、218.8; LRMS (ESI) C27H40NO5S [M+H+]の計算値490.3、実測値490.2。
【０１５７】
【化３９】
2011195589.tif 000048
【０１５８】
化合物26: 酸25およびアルコール21を無水ベンゼン(5mL×2)で共沸蒸留し、反応前に高真空下に乾燥させた。アルコール21(240mg、0.756mmol)のCH2Cl2(5mL)溶液に、EDCI(192.7mg、1.01mmol)およびDMAP(122.8mg、1.01mmol)を0℃で加えた。この混合物に、酸25(314.6mg、0.628mmol)のCH2Cl2(2mL+すすぎ1mL)の溶液を0℃で15分かけて滴加した。0℃で2時間攪拌した後に、混合物を室温で2時間攪拌した。濃縮した後に、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/EtOAc=20:1から15:1)により精製すると、26(340.1mg、0.425mmol、酸に対して68%)が無色のオイルとして得られた;
[α]D24 -27.5 (c 0.28, CHCl3); IR (フィルム) ν2956、2878、1740、1692、1472、1378、1317、1253、1174、1118、988、915、872、837、775cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.06 (6H, s)、0.57〜0.65 (6H, m)、0.92 (9H, s)、0.94 (9H, t, J=7.9Hz)、1.02 (3H, d, J=6.9Hz)、1.03 (3H, d, J=6.8Hz)、1.07 (3H, s)、1.22 (3H, s)、2.07〜2.10 (1H, m)、2.09 (3H, s)、2.31 (1H, dd, J=16.9, 7.3Hz)、2.51 (1H, dd, J=16.8, 3.0Hz)、2.49〜2.65 (2H, m)、2.71 (3H, s)、2.96〜2.99 (2H, m)、3.06 (1H, 五重線, J=7.1Hz)、3.83 (1H, dd, J=7.3, 2.1Hz)、4.35 (1H, dd, J=7.2, 3.0Hz)、4.98〜5.12 (4H, m)、5.30 (1H, t, J=6.7Hz)、5.76 (1H, ddt, J=16.7, 10.2, 6.2Hz)、5.92 (1H, ddd, J=17.8, 9.9, 7.8Hz)、6.19 (1H, t, J=7.0Hz)、6.51 (1H, s)、6.97 (1H, s); LRMS (ESI) C41H68F3NO5SSi2Na [M+Na+]の計算値822.4、実測値822.4。
【０１５９】
【化４０】
2011195589.tif 000049
【０１６０】
化合物40a(26のRCMを介して):26(57.6mg、72.0μmol)のトルエン(142mL)溶液を還流まで加熱し、Grubbs'触媒(6.1mg、7.20μmol)のトルエン(2mL)溶液で処理した。混合物を28分間攪拌し、0℃に冷却し、シリカゲルパッドで濾過し、このパッドをヘキサン/EtOAc=2/1(300mL)ですすいだ。合わせた濾液を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/Et2O=40:1から15:2)により精製すると、40a(12.0mg、15.5μmol、22%)が無色のオイルとして得られた;
IR (フィルム) ν2955、2884、1743、1690、1472、1320、1173、1114、1038、1008、873、832、773cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.09 (3H, s)、0.12 (3H, s)、0.55 (6H, q, J=7.7Hz)、0.88 (9H, t, J=8.0Hz)、0.96 (9H, s)、1.01 (3H, s)、1.06 (3H, d, J=7.1Hz)、1.12 (3H, s)、1.20 (3H, d, J=7.1Hz)、2.07〜2.17 (1H, m)、2.19 (3H, s)、2.38 (1H, dd, J=14.3, 3.5Hz)、2.39〜2.49 (1H, m)、2.50 (1H, dd, J=14.3, 7.3Hz)、2.73 (3H, s)、2.77〜2.91 (2H, m)、2.96〜3.09 (2H, m)、3.98 (1H, dd, J=8.9Hz)、4.54 (1H, dd, J=7.3, 3.4Hz)、5.28〜5.38 (1H, m)、5.63 (1H, dd, J=9.6, 2.3Hz)、5.77 (1H, dd, J=15.9, 8.5Hz)、6.21〜6.28 (1H, m)、6.60 (1H, s)、6.99 (1H, s); LRMS (ESI) C39H65F3NO5SSi2 [M+H+]の計算値772.4、実測値772.4。
【０１６１】
【化４１】
2011195589.tif 000050
【０１６２】
化合物29: 40a(1.78g、2.31mmol)のTHF(25mL)溶液に徐々に、HF・ピリジン(12.5mL)を0℃で加え、この混合物を室温で4時間攪拌した。反応を、TMSOMe(80mL)を10分かけて0℃で滴加することでクエンチした。混合物を室温で2.5時間激しく攪拌した。濃縮し、高真空下に2時間乾燥させた後に、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2〜50g、ヘキサン/EtOAc=1:1)により精製すると、29(1.20g、2.21mmol、96%)が無色の粉末として得られた。
[α]D25 -54.6 (c 0.28, CHCl3); IR (フィルム) ν3478、2974、2929、1736、1689、1449、1381、1318、1247、1169、1113、1039、983、867、736cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.05 (3H, s)、1.12 (3H, d, J=7.0Hz)、1.23 (3H, d, J=6.8Hz)、1.37 (3H, s)、2.04 (1H, brd, J=3.8Hz, -OH)、2.12 (3H, s)、2.25〜2.33 (1H, m)、2.38 (1H, dd, J=15.3, 3.0Hz)、2.48 (1H, dd, J=15.4, 9.8Hz)、2.54〜2.61 (1H, m)、2.66〜2.76 (1H, m)、2.71 (3H, s)、2.96 (1H, dd, J=16.5, 4.5Hz)、3.02 (1H, dd, J=16.3, 6.5Hz)、3.11 (1H, 五重線, J=6.7Hz)、3.19 (1H, brs, =OH)、3.74 (1H, brs)、4.35 (1H, brd, J=9.5Hz)、5.42 (1H, dd, J=6.2, 4.1Hz)、5.60 (1H, ddd, J=15.8, 5.6, 4.5Hz)、5.66 (1H, dd, J=15.8, 5.8Hz)、6.24 (1H, t, J=7.2Hz)、6.64 (1H, s)、7.00 (1H, s); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ15.1、16.1、17.7、18.5、19.3、22.5、28.8、31.1、39.6、39.7、45.0、53.7、71.4、75.3、76.8、116.7、120.2、124.3 [q, 1J (C, F)=273.4Hz]、127.9、130.2 [q, 3J (C, F)=6.0Hz]、130.6 [q, 2J (C, F)=28.4Hz]、132.5、136.7、152.0、165.4、170.2、218.4; LRMS (ESI) C27H37F3NO5S [M+H+]の計算値544.2、実測値544.1。
【０１６３】
【化４２】
2011195589.tif 000051
【０１６４】
化合物2: 29(1.22mg、2.24μmol)およびトリスNHNH2(26.7mg、89.6μmol)からなるClCH2CH2Cl(1mL)溶液に50℃で、Et3N(12.5μL、89.6μmol)を加えた。反応を、HPTLC(ヘキサン/EtOAc/CH2Cl2=1/1/2)により監視した。6.5時間攪拌した後に、さらにトリスNHNH2(26.7mg、89.6μmol)およびEt3N(12.5μL、89.6μmol)を混合物に加えた。14時間攪拌した後に、混合物を室温まで冷却し、EtOAcで希釈し、シリカゲルパッドで濾過し、これをEtOAcですすいだ。濃縮した後に、残留物を分取TLC(ヘキサン/EtOAc/CH2Cl2=1/1/2)により精製すると、2(1.16mg、2.13μmol、94%)が白色の固体として得られた;
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.03 (3H, d, J=7.0Hz)、1.08 (3H, s)、1.19 (3H, d, J=6.8Hz)、1.25〜1.35 (2H, m)、1.37 (3H, s)、1.42〜1.55 (2H, m)、1.65〜1.82 (2H, m)、2.10 (3H, d, J=0.8Hz)、2.21〜2.47 (2H, m)、2.27 (1H, dd, J=14.2, 2.6Hz)、2.48 (1H, dd, J=14.3, 10.8Hz)、2.70 (3H, s)、2.70〜2.28 (1H, m)、3.02 (1H, d, J=2.0Hz, -OH)、3.19 (1H, qd, J=6.9, 2.2Hz)、3.65 (1H, d, J=6.2Hz, -OH)、3.69〜3.72 (1H, m)、4.34 (1H, ddd, J=10.8, 6.2, 2.6Hz)、5.28 (1H, dd, J=10.2, 2.2Hz)、6.12 (1H, dd, J=10.2, 5.2Hz)、6.61 (1H, s)、6.98 (1H, s) ; LRMS (ESI) C27H39F3NO5S [M+H+]の計算値546.3、実測値546.2。
【０１６５】
【化４３】
2011195589.tif 000052
【０１６６】
化合物54: 酸25およびアルコール酸53を無水ベンゼン(3mL×2)で共沸蒸留し、反応前に高真空下に乾燥させた。アルコール53(68.0mg、0.173mmol)のCH2Cl2(1.3mL)溶液に、EDCI(37.8mg、0.197mmol)およびDMAP(24.1mg、0.197mmol)を0℃で加えた。この混合物に、酸25(72.6mg、0.123mmol)のCH2Cl2(0.7)の溶液を0℃で5分かけて滴加した。0℃で1時間攪拌した後に、混合物を室温で2.5時間攪拌した。濃縮した後に、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/EtOAc=30:1)により精製すると、54(99.5mg、0.114mmol、t-ブチルエステルから92%)が無色のオイルとして得られた;
[α]D25 -23.4 (c 0.56, CHCl3); IR (フィルム) ν2955、2931、2880、1735、1696、1506、1472、1386、1362、1294、1254、1174、1104、988、878、776、742cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.06 (3H, s)、0.06 (3H, s)、0.14 (6H, s)、0.63 (6H, q, J=8.0Hz)、0.92 (9H, s)、0.94 (9H, t, J=8.0Hz)、0.97 (9H, s)、1.02 (3H, d, J=6.6Hz)、1.05 (3H, d, J=6.5Hz)、1.07 (3H, s)、1.21 (3H, s)、1.67 (3H, s)、2.06 (3H, d, J=0.8Hz)、2.05〜2.14 (1H, m)、2.30 (1H, dd, J=16.9, 7.5Hz)、2.33〜2.53 (2H, m)、2.50 (1H, dd, J=16.9, 2.7Hz)、2.76〜2.80 (2H, m)、3.07 (1H, 五重線, J=7.0Hz)、3.83 (1H, dd, J=7.0, 2.2Hz)、4.35 (1H, dd, J=7.4, 2.8Hz)、4.97 (2H, s)、4.97〜5.07 (4H, m)、5.16 (1H, t, J=7.2Hz)、5.24 (1H, t, J=6.9Hz)、5.74 (1H, ddt, J=16.6, 10.0, 6.5Hz)、5.91 (1H, ddd, J=17.6, 9.9, 7.7Hz)、6.50 (1H, s)、7.06 (1H, s); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ-5.2 (2C)、-3.7、-3.3、5.3 (3C)、7.2 (3C)、14.7、15.2、18.5、18.7、18.9、20.3、23.6、23.7、26.0 (3C)、26.4 (3C)、31.7、36.7、40.1、43.8、46.4、53.3、63.4、74.2、76.5、79.6、115.5、115.6、116.6、120.5、121.3、135.8、136.1、137.4、140.1、153.0、171.5、172.2、218.4; LRMS (ESI) C47H86NO6SSi3 [M+H+]の計算値876.6、実測値876.5。
【０１６７】
【化４４】
2011195589.tif 000053
【０１６８】
化合物55:54(69.7mg、79.5μmol)のトルエン(158mL)溶液を還流まで加熱し、Grubbs'触媒(6.7mg、7.95μmol)のトルエン(2mL)溶液で処理した。混合物を11分間攪拌し、0℃に冷却し、シリカゲルパッドで濾過し、このパッドをヘキサン/EtOAc=3/1(280mL)ですすいだ。合わせた濾液を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/Et2O=20:1から15:1)により精製すると、55(18.4mg、21.7μmol、27%)が無色のオイルとして得られた;
[α]D24 -40.4 (c 0.26, CHCl3); IR (フィルム) ν2955、2930、2879、1740、1694、1472、1387、1362、1253、1200、1107、1007、838、776、742cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.08 (3H, s)、0.12 (3H, s)、0.15 (6H, s)、0.57 (6H, q, J=7.9Hz)、0.88 (9H, t, J=8.0Hz)、0.95 (9H, s)、0.97 (9H, s)、1.04 (3H, s)、1.06 (3H, d, J=7.1Hz)、1.12 (3H, s)、1.17 (3H, d, J=7.0Hz)、1.69 (3H, s)、2.06〜2.30 (2H, m)、2.14 (3H, s)、2.45 (1H, dd, J=15.6, 3.6Hz)、2.50 (1H, dd, J=14.9, 3.1Hz)、2.63〜2.75 (2H, m)、2.97〜3.06 (1H, m)、3.10 (1H, dd, J=14.6, 7.7Hz)、3.97 (1H, d, J=8.5Hz)、4.44 (1H, dd, J=8.4, 2.9Hz)、4.97 (2H, s)、5.22 (1H, dd, J=8.7, 5.2Hz)、5.33〜5.44 (2H, m)、5.70 (1H, dd, J=15.6, 8.1Hz)、6.57 (1H, s)、7.07 (1H, s); LRMS (ESI) C45H82NO6SSi3 [M+H+]の計算値848.5、実測値848.5。
【０１６９】
【化４５】
2011195589.tif 000054
【０１７０】
化合物57: 55(61.8mg、72.8μmol)のTHF(2mL)溶液に、HF・ピリジン(1mL)を0℃で加え、この混合物を室温で3.2時間攪拌した。反応を、TMSOMe(15mL)を0℃で滴加することでクエンチした。混合物を室温で2時間攪拌した。濃縮し、高真空下に乾燥させた後に、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/EtOAc=1:3)により精製すると、57(32.4mg、64.1μmol、88%)が白色の固体として得られた。
[α]D25 -108.4 (c 0.285, CHCl3); IR (フィルム) ν3422、2968、2919、2729、1689、1449、1377、1252、1152、1064、978cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.05 (3H, s)、1.12 (3H, d, J=6.9Hz)、1.22 (3H, d, J=6.8Hz)、1.32 (3H, s)、1.72 (3H, s)、2.08 (3H, s)、2.31〜2.40 (3H, m)、2.43 (1H, dd, J=15.5, 3.5Hz)、2.49 (1H, dd, J=15.5, 9.5Hz)、2.55〜2.67 (2H, m)、2.95 (1H, dd, J=14.6, 6.3Hz)、3.13 (1H, 五重線, J=6.6Hz)、3.34 (1H, brs, -OH)、3.75 (1H, dd, J=6.6, 2.4Hz)、4.06 (1H, brs, -OH)、4.33 (1H, dd, J=9.4, 3.0Hz)、4.92 (2H, s)、5.18 (1H, t, J=6.9Hz)、5.33 (1H, dd, J=8.0, 2.5Hz)、5.52 (1H, dd, J=15.8, 6.4Hz)、5.59 (1H, ddd, J=15.8, 6.6, 5.0Hz)、6.63 (1H, s)、7.13 (1H, s); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ15.3、16.3、17.8、19.2、22.8、23.7、31.9、35.1、39.7、40.2、45.0、53.4、61.8、71.7、75.8、78.1、116.7、119.0、120.5、130.0、131.2、137.6、138.9、152.5、170.0、170.7、218.7; LRMS (ESI) C27H39NO6SNa [M+Na+]の計算値528.2、実測値528.0。
【０１７１】
【化４６】
2011195589.tif 000055
【０１７２】
化合物46: 粗製の酸25(4.65g、7.27mmol)およびアルコール44(2.18g、9.84mmol)を無水ベンゼンで共沸蒸留し、反応前に高真空下に乾燥させた。アルコール44(2.18mg、9.84mmol)のCH2Cl2(65mL)溶液に、EDCI(2.09g、10.9mmol)およびDMAP(1.33g、10.9mmol)を0℃で加えた。この混合物に、粗製の酸25(4.65g、7.27mmol)のCH2Cl2(20mL+すすぎ5mL)溶液を0℃で20分かけて滴加した。0℃で40分間攪拌した後に、混合物を室温で4時間攪拌した。濃縮した後に、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2〜160g、ヘキサン/EtOAc=20:1)により精製すると、46(4.85g、6.87mmol、t-ブチルエステルから94%)が無色のオイルとして得られた;
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.08 (3H, s)、0.08 (3H, s)、0.60 (6H, q, J=7.8Hz)、0.93 (9H, s)、0.94 (9H, t, J=8.0Hz)、1.04 (3H, d, J=7.0Hz)、1.04 (3H, d, J=7.0Hz)、1.11 (3H, s)、1.23 (3H, s)、2.05〜2.14 (1H, m)、2.17 (3H, s)、2.40 (1H, dd, J=16.9, 7.0Hz)、2.59 (1H, dd, J=17.0, 3.6Hz)、2.56〜2.64 (2H, m)、2.90〜3.01 (2H, m)、3.06 (1H, 五重線, J=7.0Hz)、3.85 (1H, dd, J=7.3, 2.0Hz)、4.38 (1H, d, J=7.0, 3.4Hz)、4.97〜5.14 (5H, m)、5.75 (1H, ddt, J=16.0, 9.9, 6.2Hz)、5.92 (1H, ddd, J=17.8, 10.5, 7.8Hz)、6.21 (1H, td, J=7.2, 1.5Hz); LRMS (ESI) C36H63F3O6Si2Na [M+Na+]の計算値727.4、実測値727.3。
【０１７３】
【化４７】
2011195589.tif 000056
【０１７４】
化合物48: 46(510.0mg、0.723mmol)のトルエン(500mL)溶液を還流まで加熱し、Grubbs'触媒(92.1mg、0.109mmol)のトルエン(10mL)溶液で処理した。混合物を還流下に17分間攪拌し、直ちに0℃に冷却し、0℃を維持して、その後、シリカゲルパッドで濾過した。ジエン(510.0mg、0.723mmol)の第2のバッチを、同様に処理した。合わせた反応混合物をシリカゲルパッド(100g)で濾過し、このパッドをヘキサン/EtOAc=3/1(1.4L)ですすいだ。合わせた濾液を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2〜65g、ヘキサン/Et2O=10:1から5:1)により精製すると、48(742.4mg、1.10mmol、76%)が無色のオイルとして得られた;
1H NMR (400MHz CDCl3) δ0.08 (3H)、0.10 (3H, s)、0.60 (6H, q, J=7.8Hz)、0.93 (9H, s)、0.94 (9H, t, J=7.8Hz)、1.03 (3H, d, J=7.1Hz)、1.08 (3H, s)、1.13 (3H, d, J=7.0Hz)、1.17 (3H, s)、2.26 (3 H, s)、2.25〜2.34 (1H, m)、2.64 (1H, dd, J=15.5, 5.0Hz)、2.68〜2.75 (2H, m)、2.76 (1H, dd, J=15.6, 6.4Hz)、2.85 (1H, dd, J=15.6, 5.7Hz)、2.97 (1H, dq, J=8.3, 6.9Hz)、3.04 (1H, dd, J=15.6, 6.3Hz)、3.92 (1H, dd, J=8.3, 1.2Hz)、4.36 (1H, t, J=5.3Hz)、5.30〜5.39 (2H, m)、5.58 (1H, dd, J=15.5, 8.0Hz)、6.13 (1H, brt, J=7.2Hz); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ-3.6、-3.6、5.4 (3C)、7.0 (3C)、17.5、18.5、19.0、21.6、23.5、26.3 (3C)、26.5、28.6、29.1、41.0、42.3、47.3、54.1、74.2、76.8、77.7、124.0 [1J (C, F)=273.7Hz]、126.0、128.7 [3J (C, F)=5.9Hz]、132.2 [2J (C, F)=28.1Hz]、133.8、170.5、204.1、216.1; LRMS (ESI) C34H59F3O6Si2Na [M+Na+]の計算値699.4、実測値699.4。
【０１７５】
【化４８】
2011195589.tif 000057
【０１７６】
化合物40a(ケトン48のウィッティヒ反応を介して):
ケトン48をベンゼン(5mL×2)で共沸蒸留し、ついで、高真空下に0.5時間乾燥させた。ウィッティヒ塩(907mg、2.59mmol)のTHF(19mL)溶液に、t-BuOK(THF中1.0Mの溶液2.4mL、2.43mmol)を0℃で5分間掛けて滴加した。混合物を0℃で0.5時間攪拌し、次いで、-78℃に冷却した。この混合物に、ケトン48(1.10g、1.62mmol)のTHF(13mL)溶液を10分間かけて滴加し、生じた混合物を放置して、2時間かけて-20℃まで加温した。反応を飽和NH4Cl(15mL)水溶液でクエンチし、EtOAc(50mL×3)で抽出した。合わせた有機層を生理食塩水(20mL)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濃縮した。残留物を、フラッシュクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/Et2O=20:1から10:1)により精製すると、所望の16(E)-イソマー40a(940mg、1.22mmol、75%)が望ましくない16(Z)-異性体40b(140.9mg、0.182mmol、11%)と共に、両方とも無色のオイルとして得られた;
【０１７７】
【化４９】
2011195589.tif 000058
【０１７８】
[α]D26 -17.1 (c 0.14, CHCl3); 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.09 (3H, s)、0.12 (3H, s)、0.55 (6H, q, J=7.7Hz)、0.88 (9H, t, J=8.0Hz)、0.96 (9H, s)、1.01 (3H, s)、1.06 (3H, d, J=7.1Hz)、1.12 (3H, s)、1.20 (3H, d, J=7.1Hz)、2.07〜2.17 (1H, m)、2.19 (3H, s)、2.38 (1H, dd, J=14.3, 3.5Hz)、2.39〜2.49 (1H, m)、2.50 (1H, dd, J=14.3, 7.3Hz)、2.73 (3H, s)、2.77〜2.91 (2H, m)、2.96〜3.09 (2H, m)、3.98 (1H, dd, J=8.9Hz)、4.54 (1H, dd, J=7.3, 3.4Hz)、5.28〜5.38 (1H, m)、5.63 (1H, dd, J=9.6, 2.3Hz)、5.77 (1H, dd, J=15.9, 8.5Hz)、6.21〜6.28 (1H, m)、6.60 (1H, s)、6.99 (1H, s); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ-3.4、-3.3、5.5 (3C)、7.0 (3C)、14.6、17.1、18.7、19.4、19.9、21.3、24.8、26.4 (3C)、29.6、32.8、42.0、42.1、48.2、54.1、73.4、76.9、77.8、117.0、121.6、124.3 [1J (C, F)=273.5Hz]、127.2、130.6 [2J (C, F)=28.2Hz]、130.8 [3J (C, F)=6.1Hz]、133.2、136.5、152.3、165.0、170.1、217.1; HRMS (ESI) C39H65F3NO5SSi2 [M+H+]の計算値772.4074、実測値772.4102。
【０１７９】
【化５０】
2011195589.tif 000059
【０１８０】
[α]D25 62.7 (c 0.33, CHCl3); 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.09 (3H, s)、0.13 (3H, s)、0.49 (6H, q, J=7.8Hz)、0.85 (9H, t, J=7.8Hz)、0.97 (9H, s)、0.99 (3H, s)、1.06 (3H, d, J=7.1Hz)、1.11 (3H, s)、1.20 (3H, d, J=7.1Hz)、2.00 (3H, s)、2.03〜2.13 (1H, m)、2.35 (1H, dd, J=14.3, 3.0Hz)、2.46(1H, dd, J=14.3, 7.8Hz)、2.41〜2.50 (1H, m)、2.73 (3H, s)、2.71〜2.90 (2H, m) 2.98〜3.12 (2H, m)、3.99 (1H, d, J=9.2Hz)、4.56 (1H, dd, J=7.7, 2.8Hz)、5.33 (1H, ddd, J=15.6, 8.9, 4.1Hz)、5.82 (1H, dd, J=15.6, 8.4Hz)、6.29 (1H, s)、6.33〜6.40 (1H, m)、6.94 (1H, m)、7.09 (1H, brd, J=8.4Hz); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ-3.2、-3.2、5.5 (3C)、7.0 (3C)、17.2、18.7、19.3、19.6、20.0、22.3、24.9、26.4 (3C)、29.7、32.9、41.9、42.0、48.6、54.0、72.2、73.3、77.0、116.7、120.7、124.5 [1J (C, F)=273.3Hz]、127.9、129.7 [2J (C, F)=28.0Hz]、131.9 [3J (C, F)=6.1Hz]、132.9、136.6、152.1、165.4、170.2、217.4; LRMS (ESI) C39H65F3NO5SSi2 [M+H+]の計算値772.4、実測値772.4
【０１８１】
【化５１】
2011195589.tif 000060
【０１８２】
化合物58(ケトン48のウィッティヒ反応を介して):
ケトン48をベンゼン(5mL×2)で共沸蒸留し、ついで、高真空下に0.5時間乾燥させた。ウィッティヒ塩(1.19g、2.27mmol)のTHF(18mL)溶液に、t-BuOK(THF中1.0Mの溶液2.2mL、2.20mmol)を0℃で5分間かけて滴加した。混合物を0℃で20分間攪拌し、次いで、-78℃に冷却した。この混合物に、ケトン(1.06g、1.51mmol)のTHF(10mL+すすぎ2mL)溶液を10分間かけて滴加し、生じた混合物を放置して、2時間かけて-20℃まで加温した。反応を飽和NH4Cl(15mL)水溶液でクエンチし、EtOAc(50mL×3)で抽出した。合わせた有機層を生理食塩水(20mL)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濃縮した。残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2〜65g、ヘキサン/Et2O=30:1から20:1)により精製すると、所望の16(E)-異性体58(1.01g、1.11mmol、74%)が望ましくない16(Z)-異性体58a(154.5mg、0.182mmol、11%)と共に、両方とも無色のオイルとして得られた;
【０１８３】
【化５２】
2011195589.tif 000061
【０１８４】
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.09 (3H, s)、0.12 (3H, s)、0.15 (6H, s)、0.55 (6H, q, J=7.8Hz)、0.87 (9H, t, J=8.0Hz)、0.96 (9H, s)、0.97 (9H, s)、1.01 (3H, s)、1.06 (3H, d, J=7.1Hz)、1.12 (3H, s)、1.20 (3H, d, J=7.1Hz)、2.07〜2.16 (1H, m)、2.18 (3H, d, J=1.0Hz)、2.38 (1H, dd, J=14.4, 3.3Hz)、2.34〜2.46 (1H, m)、2.49 (1H, dd, J=14.4, 7.4Hz)、2.78〜2.90 (2H, m)、2.97〜3.09 (2H, m)、3.98 (1H, d, J=8.9Hz)、4.54 (1H, dd, J=7.3, 3.3Hz)、4.97 (2H, s)、5.33 (1H, ddd, J=15.8, 8.6, 4.9Hz)、5.63 (1H, dd, J=9.6, 2.4Hz)、5.78 (1H, dd, J=15.8, 8.2Hz)、6.22〜6.27 (1H, m)、6.60 (1H, s)、7.09 (1H, s); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ-5.3 (2C)、-3.4、-3.3、5.5 (3C)、7.0 (3C)、14.6、17.1、18.4、18.7、19.8、21.3、24.8、25.9 (3C)、26.4 (3C)、29.6、32.9、42.0、42.1、48.2、54.1、63.4、73.4、76.9、77.8、117.2、121.7、124.3 [q, 1J (C, F)=273.6Hz]、127.2、130.7 [q, 2J (C, F)=27.5Hz]、130.8 [q, 3J (C, F)=6.2Hz]、133.2、136.4、152.6、170.1、172.4、217.1; LRMS (ESI) C45H78F3NO6SSi3Na [M+Na+]の計算値924.5、実測値924.5。
【０１８５】
【化５３】
2011195589.tif 000062
【０１８６】
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.07 (3H, s)、0.13 (3H, s)、0.16 (6H, s)、0.48 (6H, q, J=7.8Hz)、0.84 (9H, t, J=7.9Hz)、0.97 (18H, s)、0.98 (3H, s)、1.06 (3H, d, J=7.1Hz)、1.11 (3H, s)、1.20 (3H, d, J=7.2Hz)、2.00 (3H, s)、2.03〜2.11 (1H, m)、2.33 (1H, dd, J=14.1, 2.8Hz)、2.43 (1H, dd, J=14.0, 7.8Hz)、2.40〜2.48 (1H, m)、2.76〜2.89 (2H, m)、2.97〜3.10 (2H, m)、3.99 (1H, d, J=9.3Hz)、4.57 (1H, dd, J=7.8, 2.6Hz)、4.95 (1H, d, J=14.6Hz)、5.00 (1H, d, J=14.6Hz)、5.33 (1H, ddd, J=15.6, 9.1, 3.8Hz)、5.82 (1H, dd, J=15.6, 8.3Hz)、6.30 (1H, s)、6.32〜6.38 (1H, m)、7.04 (1H, s)、7.11 (1H, dd, J=11.0, 2.3Hz); LRMS (ESI) C45H78F3NO6SNa [M+Na+]の計算値924.5、実測値924.5。
【０１８７】
【化５４】
2011195589.tif 000063
【０１８８】
化合物59:
58(1.04g、2.25mmol)のTHF(22mL)溶液に、0℃でHF・ピリジン(11mL)を徐々に加え、この混合物を、室温で4.3時間攪拌した。反応を、10分かけて0℃でTMSOMe(75mL)を滴加することによりクエンチした。この混合物を室温で4.2時間激しく攪拌した。濃縮し、高真空下に1時間乾燥させた後に、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2〜25g、ヘキサン/EtOAc=3:4から1:2)により精製すると、59(615.7mg、1.00mmol、96%)が無色の粉末として得られた;
[α]D25 -57.7 (c 1.20, CHCl3); 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.04 (3H, s)、1.12 (3H, d, J=6.9Hz)、1.25 (3H, d, J=6.8Hz)、1.36 (3H, s)、1.90 (1H, d, J=6.6Hz, OH)、2.08 (3H, s)、2.23〜2.32 (1H, m)、2.34 (1H, dd, J=15.7, 2.4Hz)、2.49 (1H, dd, J=15.7, 10.1Hz)、2.59〜2.69 (2H, m)、2.95〜3.01 (2H, m)、3.04 (1H, 五重線, J=6.8Hz)、3.72 (1H, td, J=7.0, 3.0Hz)、3.78 (1H, d, J=5.7Hz, OH)、4.38 (1H, ddd, J=10.1, 5.7, 2.4Hz)、4.90 (2H, d, J=6.1Hz)、5.10 (1H, t, J=6.1Hz, OH)、5.44 (1H, t, J=4.7Hz)、5.60 (1H, dd, J=15.9, 4.4Hz)、5.66 (1H, dd, J=15.9, 5.0Hz)、6.28 (1H, t, J=6.7Hz)、6.73 (1H, s)、7.16 (1H, s); LRMS (ESI) C27H37F3NO6SNa [M+H+]の計算値560.2、実測値560.1。
【０１８９】
【化５５】
2011195589.tif 000064
【０１９０】
化合物49および50: 28(12.2mg、24.9μmol)のCH2Cl2(1.25mL)溶液を-78℃に冷却し、DMDOの冷却溶液(-78℃、アセトン中0.06M、914μL、54.8μmol)で処理した。この混合物を放置して-50℃まで加温し、-50℃で2.7時間攪拌した。-50℃で、ジメチルスルフィド(117μL)を加えることにより、過剰のDMDOをクエンチし、この混合物をこの温度で0.5時間攪拌した。真空中で溶剤を除去した。分取薄層クロマトグラフィー(ヘキサン/EtOAc=1/2)により精製すると、β-エポキシド49(3.0mg、5.93μmol、24%)およびα-エポキシド50(7.9mg、15.6μmol、63%)が両方とも無色の固体として得られた。
【０１９１】
【化５６】
2011195589.tif 000065
【０１９２】
化合物49:
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.03 (3H, s)、1.11 (3H, d, J=7.0Hz)、1.14 (3H, d, J=6.9Hz)、1.34 (3H, s)、1.36 (3H, s)、2.00 (1H, ddd, J=15.1, 7.3, 4.0Hz)、2.14 (1H, dt, J=15.1, 5.2Hz)、2.14 (3H, s)、2.21 (1H, dd, J=14.6, 8.0Hz)、2.33 (1H, dd, J=14.7, 4.8Hz)、2.47 (1H, dd, J=13.8, 3.3Hz)、2.59 (1H, dd, J=13.8, 9.4Hz)、2.73 (3H, s)、2.77 (1H, brs, OH)、2.93 (1H, dd, J=7.3, 4.8Hz)、3.34 (1H, qd, J=6.9, 3.7Hz)、3.75〜3.82 (1H, m)、4.12〜4.24 (2H, m, OHを含む)、5.54 (1H, ddd, J=15.7, 7.4, 5.0Hz)、5.54〜5.60 (1H, m)、5.64 (1H, dd, J=15.7, 5.6Hz)、6.94 (1H, s)、7.01 (1H, s); LRMS (ESI) C27H40NO6S [M+H+]の計算値506.3、実測値506.3。
【０１９３】
【化５７】
2011195589.tif 000066
【０１９４】
化合物50:
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.00 (3H, s)、1.04 (3H, d, J=6.9Hz)、1.12 (3H, d, J=7.0Hz)、1.35 (3H, s)、1.35 (3H, s)、1.87 (1H, dt, J=15.0, 9.2Hz)、2.03 (1H, dd, J=13.9, 9.2Hz)、2.13 (3H, s)、2.13〜2.19 (1H, m)、2.36 (1H, dd, J=13.9, 3.4Hz)、2.39 (1H, dd, J=12.2, 2.1Hz)、2.42〜2.51 (1H, m)、2.49 (1H, dd, J=12.4, 10.9Hz)、2.69 (1H, d, J=2.7Hz)、2.72 (3H, s)、3.06 (1H, dd, J=9.7, 3.1Hz)、3.54 (1H, qd, J=7.0, 2.0Hz)、3.76〜3.80 (1H, m)、4.07〜4.14 (1H, m)、4.31 (1H, d, J=4.1Hz)、5.52 (1H, dd, J=15.5, 8.7Hz)、5.60(1H, ddd, J=15.1, 9.4, 3.4Hz)、5.71 (1H, d, J=8.4Hz)、6.63 (1H, s)、6.99 (1H, s); LRMS (ESI) C27H39NO6SNa [M+Na+]の計算値528.2、実測値528.2。
【０１９５】
【化５８】
2011195589.tif 000067
【０１９６】
化合物52: 50(1.7mg、3.4μmol)およびトリスNHNH2(40.1mg、0.134mmol)からなるClCH2CH2Cl(0.8mL)溶液に50℃で、Et3N(18.7μL、0.134mmol)を加えた。反応をHPTLC(ヘキサン/EtOAc=1/2)により監視した。4時間攪拌した後に、混合物を室温まで冷却し、EtOAcで希釈し、シリカゲルパッドで濾過し、これを、EtOAcですすいだ。濃縮した後に、残留物を分取TLC(ヘキサン/EtOAc=1/2)により精製すると、52(1.2mg、2.4μmol、70%)が白色の固体として得られた。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.95 (3H, d, J=7.1Hz)、1.04 (3H, s)、1.11 (3H, d, J=7.0Hz)、1.28 (3H, s)、1.37 (3H, s)、1.35〜1.44 (1H, m)、1.45〜1.59 (4H, m)、1.71〜1.82 (2H, m)、1.86 (1H, dt, J=15.3, 9.5Hz)、2.10 (1H, dd, J=15.3, 3.6Hz)、2.13 (3H, s)、2.40 (1H, dd, J=12.5, 2.5Hz)、2.49 (1H, dd, J=12.5, 11.0Hz)、2.74 (3H, s)、2.80 (1H, brs, OH)、3.07 (1H, dd, J=10.3, 3.3Hz)、3.34 (1H, qd, J=7.0, 1.0Hz)、3.89 (1H, brs, OH)、4.03〜4.09 (1H, m)、4.12〜4.17 (1H, m)、5.69 (1H, d, J=9.1Hz)、6.63 (1H, s)、7.00 (1H, s); LRMS (ESI) C27H41NO6SNa [M+Na+]の計算値530.3、実測値530.2。
【０１９７】
【化５９】
2011195589.tif 000068
【０１９８】
化合物51: 49(0.7mg、1.38μmol)およびトリスNHNH2(20.6mg、69μmol)からなるClCH2CH2Cl(0.4mL)溶液に50℃で、Et3N(9.6μL、69μmol)を加えた。反応をHPTLC(ヘキサン/EtOAc=1/2)により監視した。6時間攪拌した後に、混合物を室温まで冷却し、EtOAcで希釈し、シリカゲルパッドで濾過し、これを、EtOAcですすいだ。濃縮した後に、残留物を分取TLC(ヘキサン/EtOAc=1/2)により精製すると、51(0.5mg、0.985μmol、71%)が白色の固体として得られた。51のスペクトルデータは、EpoBの報告されているデータと同一であった。
【０１９９】
(実施例2)
エポチロンの中間体を合成するための別の合成手法
次の実施例では、エポチロン類似体の合成での様々な中間体を調製する方法を提案する。
【０２００】
9,10-デヒドロエポチロン合成の最適化
例1:
【０２０１】
【化６０】
2011195589.tif 000069
【０２０２】
例2:ノヨリ還元
【０２０３】
【化６１】
2011195589.tif 000070
【０２０４】
例3: ノヨリ還元
【０２０５】
【化６２】
2011195589.tif 000071
【０２０６】
例4: 鍵となるジケトンの別の合成
【０２０７】
【化６３】
2011195589.tif 000072
【０２０８】
例5:
【０２０９】
【化６４】
2011195589.tif 000073
【０２１０】
例6: 2-ヒドロキシケトンを合成するためのEvans補助的手法
【０２１１】
【化６５】
2011195589.tif 000074
【０２１２】
例7: 2-ヒドロキシケトンを合成するためのKowalsky-Sharpless手法
【０２１３】
【化６６】
2011195589.tif 000075
【０２１４】
実施例
【０２１５】
【化６７】
2011195589.tif 000076
【０２１６】
7-ベンジルオキシ-5-ヒドロキシ-1,1-ジイソプロポキシ-2,2,4,6-テトラメチル-ヘプタン-3-オン32(1.0g、2.4mmol)およびピリジン(0.8mL、7.3mmol)からなるCH2Cl2(10.0mL)中の溶液に0℃で、クロロギ酸2,2,2-トリクロロエチル(668.0μL、4.9mmol)を加え、次いで、この混合物を放置して、室温まで加温した。1時間後に、反応混合物を生理食塩水でクエンチし、次いで、CH2Cl2で抽出した。合わせた有機層をMgSO4上で乾燥させ、減圧下に濃縮した。粗製生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(ヘキサンからヘキサン/EtOAc93:7への勾配)により精製すると、32a(1.285g、92%)が澄明なオイルとして得られた:
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.03〜1.09 (m, 12H)、1.15 (d, J=1.8Hz, 3H)、1.17 (d, J=1.9Hz, 3H)、1.19〜1.21 (m, 6H)、1.97〜2.11 (m, 1H)、3.2 (dd, J=6.2および9.0Hz, 1H)、3.54 (dd, J=4.8および9.1Hz, 1H)、3.57〜3.60 (m, 1H)、3.82 (qd, J=3.6および5.9Hz, 2H)、4.47 (s, 2H)、4.57 (s, 1H)、4.72 (d, J=11.9Hz, 1H)、4.81 (d, J=11.9Hz, 1H)、5.08 (t, J=6.0Hz, 1H)、7.29〜7.35 (m, 5H); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ11.9、15.0、18.8、21.4、21.7、22.3、23.2、23.4、35.7、42.5、53.4、53.9、69.4、70.9、71.4、73.3、81.3、94.7、103.4、127.5、127.6、128.2、138.2、154.0、215.6; IR (フィルム, NaCl, cm-1) 2966、1760、1698、1247; LRMS (ESI) C27H41O7Cl3Na [M+Na+]の計算値605.2、実測値605.2; [α]23D=-20.4 (c=1.0, CHCl3。
【０２１７】
【化６８】
2011195589.tif 000077
【０２１８】
32a(1.28g、2.25mmol)の4:1THF/H2O(25mL)溶液に、p-TsOH(111.0mg、0.6mmol)を加えた。70℃に5時間加熱した後に、反応混合物を、冷(0℃)飽和NaHCO3水溶液(12mL)に注ぎ、次いで、EtOAcで抽出した。合わせた有機層を生理食塩水で洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、減圧下に濃縮した。粗製生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(ヘキサンからヘキサン/EtOAc84:16への勾配)により精製すると、67(793.2mg、76%)が澄明なオイルとして得られた:
1H NMR (400MHz, CDCl3) □0.90 (d, J=5.8Hz, 3H)、1.0 (d, J=6.9Hz, 3H)、1.24 (s, 6H)、1.97〜2.04 (m, 1H)、3.24 (dd, J=4.8および9.2Hz, 1H)、3.34 (m, 1H)、3.42 (dd, J=5.8および9.2Hz, 1H)、4.35 (d, J=11.9Hz, 1H)、4.39 (d, J=11.9Hz, 1H)、4.64 (d, J=11.9Hz, 1H)、4.69 (d, J=11.9Hz, 1H)、4.96 (t, J=6.0Hz, 1H)、7.19〜7.28 (m, 5H)、9.49 (s, 1H); 13C NMR (100MHz, CDCl3) -12.0、14.8、19.5、19.6、35.4、43.3、60.9、71.1、73.3、80.37、94.5、127.7、127.8、128.3、137.9、154.1、201.0、210.1; IR (フィルム, NaCl, cm-1) 2973、2880、1758、1701、1453、1380、1248; LRMS (ESI) C21H27O6Cl3Na [M+Na+]の計算値503.0、実測値503.0; [α]23D=-18.5 (c=0.8, CHCl3)。
【０２１９】
【化６９】
2011195589.tif 000078
【０２２０】
LDAの溶液(1.17mmol、Et2O中0.3M)に-78℃で、酢酸t-ブチル(1.0mmol、135.0μL)を加えた。30分後に、67(464.0mg、1mmol)のEt2O(2mL)溶液を15分かけて徐々に加えた。1時間攪拌した後に、反応を飽和NH4Cl水溶液でクエンチし、次いで、EtOAcで抽出した。合わせた有機層を生理食塩水で洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、減圧下に濃縮した。粗製生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(ヘキサンからヘキサン/EtOAc86:14への勾配)により精製すると、68(1:1エピマー混合物、461.4mg、80%)が澄明なオイルとして得られた:
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.87 (d, J=5.3Hz, 3H)、0.89 (d, J=5.5Hz, 3H)、1.02〜1.10 (m, 18H)、1.38 (s, 18H)、1.97〜2.2 (m, 2H)、2.27〜2.31 (m, 2H)、3.22〜3.27 (m, 3H)、3.39〜3.48 (m, 5H)、4.03〜4.06 (m, 1H)、4.11〜4.14 (m, 1H)、4.38〜4.45 (m, 4H)、4.58〜4.73 (m, 4H)、4.97 (t, J=5.8Hz, 1H)、5.02 (t, J=5.8Hz, 1H)、7.18〜7.27 (m, 10H); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ11.9、12.7、14.9、15.2、18.7、19.3、21.4、21.6、28.0、35.6、37.4、41.7、42.0、51.8、51.9、71.3、71.3、72.5、73.0、73.3、73.3、80.6、81.2、81.3、94.6、127.5、127.7、127.8、128.3、138.0、138.1、154.0、154.1、172.3、172.4、216.0、216.3; IR (フィルム, NaCl, cm-1) 3509、2975、1759、1707、1368、1248、1152; LRMS (ESI) C27H39O8Cl3Na [M+Na+]の計算値619.1、実測値619.2。
【０２２１】
68(350.0mg、0.6mmol)の0℃のCH2Cl2(10.0mL)溶液に、Dess-Martinぺリオジナン(398.0mg、0.9mmol)を加え、次いで、この混合物を室温で1時間攪拌し、次いで、1:1の飽和Na2S2O3/飽和NaHCO3のよく攪拌されている混合物に注いだ。30分後に、層を分離した。水性層を、Et2Oで3回抽出した。合わせた有機抽出物を、飽和NaHCO3、生理食塩水で洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、減圧下に濃縮した。粗製生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(ヘキサンからヘキサン/EtOAc91:9への勾配)により精製すると、69(258.4mg、74%)が澄明なオイルとして得られた:
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.80 (d, J=6.9Hz, 3H)、0.87 (d, J=6.9Hz, 3H)、1.13 (s, 3H)、1.19 (s, 3H)、1.23 (s, 9H)、2.04〜2.12 (m, 1H)、3.09〜3.28 (m, 5H)、4.23 (s, 2H)、4.48 (d, J=11.9Hz, 1H)、4.55 (d, J=11.9Hz, 1H)、4.79 (dd, J=4.6および7.3Hz, 1H)、7.04〜7.13 (m, 5H); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ11.7、14.6、20.7、21.5、27.9、35.5、42.2、43.4、63.3、71.3、73.3、79.9、81.5、90.5、94.5、127.6、127.7、128.2、138.0、154.0、166.2、202.9、210.0; IR (フィルム, NaCl, cm-1) 2977、1758、1697、1368、1248、1154; LRMS (ESI) C27H37O8Cl3Na [M+Na+]の計算値617.1、実測値617.1; [α]23D=-49.1 (c=0.9, CHCl3。
【０２２２】
【化７０】
2011195589.tif 000079
【０２２３】
ボンベライナーに、(R)のRuBINAP触媒(16.8mg、10.0μmol)を充填した。HCl(555μL、MeOH中0.2N)を加え、次いで、この混合物15秒間音波処理した。次いで、69(59.4mg、0.1mmol)のMeOH(555μL)溶液を加え、この混合物を、Parr装置に移した。溶液を、H2で5分間パージし、次いで、1200psiまで加圧した。17時間後に、反応を大気圧に戻し、飽和NaHCO3溶液に注いだ。水性層をEtOAcで3回抽出した。合わせた有機抽出物をMgSO4上で乾燥させ、減圧下に濃縮した。粗製生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(ヘキサンからヘキサン/EtOAc88:12への勾配)により精製すると、70(1H NMR分析により判定するとdr>20:1)(47.6mg、80%)が澄明なオイルとして得られた:
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.06 (d, J=6.9Hz, 3H)、1.11 (d, J=6.8Hz, 3H)、1.14 (s, 3H)、1.18 (s, 3H)、1.47 (s, 9H)、2.05〜2.12 (m, 1H)、2.35〜2.40 (m, 1H)、3.31〜3.37 (m, 2H)、3.51〜3.54 (m, 2H)、4.11〜4.14 (m, 1H)、4.46 (s, 2H)、4.72 (d, J=11.9Hz, 1H)、4.80 (d, J=11.9Hz, 1H)、5.05 (dd, J=5.0および6.7Hz, 1H)、7.27〜7.35 (m, 5H); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ12.0、15.0、19.3、21.7、28.0、35.6、37.5、41.7、51.8、71.3、73.0、73.3、80.6、81.3、94.7、127.5、127.7、128.3、138.2、154.1、172.4、216; IR (フィルム, NaCl, cm-1) 3849、2974、2879、1758、1701、1454、1368、1248、1152、926、734; LRMS (ESI) C27H39O8Cl3Na [M+Na+]の計算値619.1、実測値619.2; [α]23D=-13.0 (c=0.4, CHCl3)。
【０２２４】
【化７１】
2011195589.tif 000080
【０２２５】
70(37.6mg、6.3μmol)およびイミダゾール(9.4mg、13.8μmol)からなるDMF(0.4mL)溶液に0℃で、TESCl(11.6μL、69.3μmol)を加えた。3時間後に、混合物を飽和NaHCO3水溶液で希釈した。水性層をヘキサンで3回抽出した。合わせた有機抽出物を生理食塩水で洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、減圧下に濃縮した。粗製生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(ヘキサンからヘキサン/EtOAc93:7への勾配)により精製すると、溶離の順に、71(22.9mg、51%)が得られ、70(12.9mg、34%)が澄明なオイルとして得られた:
7: 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.66 (q, J=7.9Hz, 6H)、0.96 (t, J=7.9Hz, 9H)、1.01 (s, 3H)、1.05 (d, J=5.2Hz, 3H)、1.07 (d, J=5.3Hz, 3H)、1.35 (s, 3H)。1.44 (s, 9H)、2.05〜2.11 (m, 2H)、2.50 (dd, J=3.5および17.2Hz, 1H)、3.35 (dd, J=5.9および9.0Hz, 1H)、3.49 (dd, J=4.0および9.0Hz, 1H)、3.53 (dd, J=3.8および6.7Hz, 1H)、4.18 (dd, J=3.5および6.5Hz, 1H)、4.45 (s, 2H)、4.65 (d, J=11.9Hz, 1H)、4.79 (d, J=11.9Hz, 1H)、4.97 (dd, J=3.7および8.1Hz, 1H)、7.29〜7.52 (m, 5H); 13C NMR (125MHz, CDCl3) δ5.3、7.3、10.9、14.9、21.3、22.6、28.4、35.9、41.1、42.7、53.7、71.9、73.7、75.7、80.1、80.9、95.1、127.9、128.0、128.7、138.6、154.3、171.7、215.7; IR (フィルム, NaCl, cm-1) 2956、2876、1732、1694、1456、1366、1257、1154、1098、988、835、774、741; LRMS (ESI) C33H53O8SiCl3Na [M+Na+]の計算値733.2、実測値733.3。[α]23D=-16.1 (c=0.1, CHCl3)。
【０２２６】
【化７２】
2011195589.tif 000081
【０２２７】
71(22.9mg、3.2μmol)の1:1THF/AcOH(1.4mL)溶液に、Zn(5.0mg、7.8μmol、ナノサイズ)を加えた。この混合物を15分間音波処理した。さらなるZn(5.0mg、7.8μmol、ナノサイズ)を加え、続いてさらに15分間音波処理した。懸濁液をセライトパッドで濾過し、EtOAcで複数回洗浄した。濾液を飽和NaHCO3、生理食塩水で洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、真空下に濃縮した。粗製生成物を、ヘキサン/EtOAc4:1で溶離してシリカゲルでの短いプラグに通過させると、71a 17.1mg(収率99%)が無色のオイルとして得られた:
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ(m, 6H)、0.96 (t, J=7.9Hz, 9H)、0.97 (d, J=6.8Hz, 3H)、1.05 (d, J=6.8Hz, 3H)、1.11 (s, 3H)、1.26 (s, 3H)、1.44 (s, 9H)、1.84〜1.90 (m, 1H)、2.21 (dd, J=6.7および17.0Hz, 1H)、2.36 (dd, J=6.7および17.0Hz, 1H)、3.24〜3.29 (m, 1H)、3.44〜3.52 (m, 2H)、3.67 (dd, J=3.9および8.9Hz, 1H)、4.36 (dd, J=3.5および6.5Hz, 1H)、4.50 (d, J=12.0Hz, 1H)、4.54 (d, J=12.0Hz, 1H)、7.32〜7.36 (m, 5H); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ5.0、6.9、9.7、13.9、20.2、21.8、28.0、36.3、40.8、41.5、53.7、72.5、72.9、73.2、73.6、80.7、127.4、127.5、128.2、138.6、171.0、221.4; IR (フィルム, NaCl, cm-1) 3502、2959、2875、1731、1683、1456、1366、1154、1098、996、739; LRMS (ESI) C30H52O6SiCl3Na [M+Na+]の計算値559.3、実測値559.3; [α]23D=-41.0 (c=0.4, CHCl3)。
【０２２８】
【化７３】
2011195589.tif 000082
【０２２９】
71a(4.1mg、7.6μmol)および2,6-ルチジン(10.0μL、43.5mmol)からなるCH2Cl2(0.2mL)溶液に-78℃でTBSOTf(10.0μL、85.8mmol)を加えた。2時間後に、さらなる6-ルチジン(10.0μL、43.5mmol)およびTBSOTf(10.0μL、85.8mmol)を加えた。6時間後に、混合物を飽和NaHCO3水溶液で希釈した。水性層をEtOAcで3回抽出した。合わせた有機抽出物を生理食塩水で洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、減圧下に濃縮した。粗製生成物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサンからヘキサン/EtOAc91:9への勾配)により精製すると、36(5.4mg、82%)が澄明なオイルとして得られた。分光データは、報告されていたデータとよく一致した。
【０２３０】
【化７４】
2011195589.tif 000083
【０２３１】
アルコール83: 4,4,4-トリフルオロアセト酢酸エチル(24.0mL、0.164mol)のTHF-水(3:1=V:V、320mL)溶液に室温で、臭化アリル(20.0mL、1.4当量)およびインジウム(粉末、-100メッシュ、25g、1.3当量)を加え、生じた混合物を48℃で15時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却し、2NのHCl(400mL)水溶液でクエンチし、CH2Cl2(400mL、2×200mL)で抽出した。合わせた有機物を乾燥させ(MgSO4)、濾過し、真空中で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン→ヘキサン-エーテル10:1→8:1→6:1→4:1)により、アルコール83が澄明なオイル(31.64g、収率85%)として得られた:
IR (フィルム) 3426 (br m)、2986 (m)、1713 (s)、1377 (m)、1345 (m)、1301 (m)、1232 (m)、1173 (s)、1095 (m)、1023 (m)、927 (m) cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ5.82 (m, 1H)、5.15 (m, 3H)、4.17 (m, 2H)、2.59 (m, 1H)、2.58 (d, J=3.4Hz, 2H)、2.29 (dd, J=14.2, 8.6Hz, 1H)、1.24 (t, J=7.2Hz, 3H); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ172.08、130.89、125.65 (q, J=280Hz)、120.27、73.79 (q, J=28Hz)、61.55、38.97、35.65、13.82; 高解像度質量スペクトル m/z 227.0895 [(M+H)+; C9H14O3F3の計算値: 227.0895]。
【０２３２】
【化７５】
2011195589.tif 000084
【０２３３】
エステル84.アルコール83(16.71g、0.07386mol)およびピリジン(15.0mL、2.5当量)の混合物を-10℃に冷却し、塩化チオニル(11.3mL、2.1当量)でゆっくりと11分かけて処理した。生じた混合物を55℃まで加温し、12時間攪拌した。反応混合物を-5℃に冷却し、水(200mL)でクエンチし、CH2Cl2(2×200mL、2×150mL)で抽出した。合わせた有機物を飽和NaHCO3(2×200mL)および生理食塩水(200mL)で洗浄し、乾燥させ(MgSO4)、真空中で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー(ペンタン:エーテル 15:1)により、エステル84(11.90g、収率77%)が黄色のオイルとして得られた:
IR (フィルム) 2986 (w)、1731(s)、1308 (s)、1265 (w)、1227 (m)、1197 (s)、1133 (s)、1025 (m)、920 (w)、896 (w)cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ6.36 (s, 1H)、5.79 (ddt, J=16.9, 10.2, 6.6Hz, 1H)、5.15 (dd, J=17.1, 1.5Hz, 1H)、5.08 (dd, J=10.0, 1.4Hz, 1H)、4.22 (q, J=7.1Hz, 2H)、3.44 (d, J=6.5Hz, 2H)、1.29 (t, J=7.1Hz, 3H); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ164.22、143.37 (q, J=29Hz)、132.71、123.21 (q, J=274Hz)、122.60 (q, J=6Hz)、117.32、60.85、30.54、13.85; 高解像度質量スペクトル m/z 209.0788 [(M+H)+; C9H12O2F3の計算値: 209.0789]。
【０２３４】
【化７６】
2011195589.tif 000085
【０２３５】
アルコール85: エステル84(7.12g、0.0342mol)の冷(-75℃)CH2Cl2(120mL)溶液に、DIBAL-H(75mL、2.2当量)のCH2Cl2(1.0M)溶液を加え、生じた混合物を室温で3時間加温した。反応混合物を0℃に冷却し、飽和NH4Cl(12mL)でクエンチし、室温で20分間攪拌した。反応混合物をエーテル(200mL)で希釈し、乾燥させ(MgSO4)、濾過し、真空中で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー(ペンタン:エーテル3:1→1:1)により、アルコール85(5.68g、99%)が澄明なオイルとして得られた:
IR (フィルム) 3331 (br s)、2929 (m)、1642 (m)、1445 (m)、1417 (w)、1348 (s)、1316 (s)、1217 (s)、1175 (s)、1119 (s)、1045 (m)、985 (s)、921 (m)、831 (w) cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ6.33 (td, J=6.1, 1.6Hz, 1H)、5.75 (ddt, J=17.2, 10.0, 6.2Hz, 1H)、5.07 (m, 2H)、4.29 (ddd, J=6.3, 4.3, 2.1Hz, 2H)、2.95 (d, J=6.2Hz, 2H); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ134.45 (q, J=6Hz)、133.38、127.97 (q, J=29Hz)、123.76 (q, J=271Hz)、116.25、57.87、29.79
【０２３６】
【化７７】
2011195589.tif 000086
【０２３７】
ヨウ化物86. アルコール85(5.97g、0.0358mol)の冷(0℃)CH2Cl2(50mL)溶液を、PPh3(11.17g、1.2当量)、イミダゾール(3.55g、1.5当量)およびI2(9.10g、1.1当量)で処理し、生じた混合物を0℃で10分間攪拌した。反応混合物を飽和Na2S2O3-飽和NaHCO3(1:1、V:V,200mL)でクエンチし、ペンタン(3×200mL)で抽出した。合わせた有機物を飽和Na2S2O3-飽和NaHCO3(1:1、V:V,200mL)および生理食塩水(100mL)で洗浄し、乾燥させ(MgSO4)、真空中で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー(ペンタン)により、ヨウ化物86(6.69g、68%)が淡赤色のオイルとして得られた:
(IR Iフィルム) 3083 (w)、2982 (w)、1636 (w)、1558 (w)、1456 (w)、1367 (w)、1317 (s)、1216 (m)、1181 (s)、1151(s)、1120 (s)、989 (m)、921 (m)、896 (m) cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ6.45 (td, J=8.9, 1.5Hz, 1H)、5.79 (ddt, J=16.8, 10.3, 6.2Hz, 1H)、5.12 (m, 2H)、3.85 (ddd, J=8.9, 2.9, 1.4Hz, 2H)、3.00 (dt, J=6.1, 1.4Hz, 2H); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ132.42、131.64 (q, J=6Hz)、129.63 (q, J=29Hz)、123.64 (q, J=272Hz)、117.00、29.32、-4.27; low resolution mass spectrum m/z 298.7 [(M+Na)+; C7H8F3INaの計算値: 299.0]。
【０２３８】
【化７８】
2011195589.tif 000087
【０２３９】
α-ヒドロキシオキサゾリジノン88: TES保護されている4-ベンジル-3-ヒドロキシアセチル-オキサゾリジン-2-オン7(16.28g、1.92当量)の冷(-78℃)THF(160mL)溶液に、LHMDS(42.0mL、1.73当量)のTHF(1.0M)溶液を51分かけて滴加し、生じた混合物を-78℃で35分攪拌した。反応混合物をヨウ化物86(6.69g、24.2mmol)のTHF(10mL)溶液で処理し、生じた混合物を放置して、一晩かけてゆっくりと室温まで加温した。反応混合物を飽和NaHCO3(200mL)でクエンチし、EtOAc(3×200mL)で抽出した。合わせた有機物を飽和NH4Cl(150mL)、生理食塩水(150mL)で洗浄し、乾燥させ(MgSO4)、真空濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン-EtOAc6:1→3:1)により、アルキル化生成物(13.6g)の混合物が得られ、これを、さらに精製することなく、次の反応に使用した。このアルキル化生成物のHOAc-水-THF(3:1:1=V:V:V、200mL)溶液を室温で4時間攪拌した。反応混合物を真空中で濃縮してHOAcを除去し、飽和NaHCO3(400mL)でクエンチし、EtOAc(3×200mL)で抽出した。合わせた有機物を乾燥させ(MgSO4)、真空濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン:EtOAc3:1→2:1)により、α-ヒドロキシオキサゾリジノン88(7.55g、2工程で収率81%)が澄明なオイルとして得られた:
[α]D25 -48.2 (c 1.08, CHCl3); IR (フィルム) 3486 (br s)、3030 (m)、2983 (s)、2925 (m)、1790 (s)、1682 (s)、1481 (m)、1393 (m)、1360 (m)、1217 (m)、1171 (m)、1113 (m)、992 (m)、919 (m)、847 (w) cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ7.32 (m, 3H)、7.17 (m, 2H)、6.33 (td, J=7.2, 1.5Hz, 1H)、5.77 (ddt, J=16.6, 10.1, 6.2Hz, 1H)、5.08 (m, 3H)、4.74 (ddt, J=4.8, 3.7, 4.4Hz, 1H)、4.33 (dd, J=8.6, 8.6Hz, 1H)、4.26 (dd, J=9.2, 3.4Hz, 1H)、3.42 (br d, J=6.4Hz, 1H)、3.24 (dd, J=13.5, 3.4Hz, 1H)、2.99 (m, 2H)、2.79 (dd, J=13.5, 9.4Hz, 1H)、2.70 (m, 1H)、2.50 (m, 1H); 13C NMR (125MHz, CDCl3) δ173.93、153.05、134.43、133.64、129.98 (q, J=6Hz)、129.82 (q, J=28Hz)、129.29、120.01、127.58、124.00 (q, J=272Hz)、116.34、69.60、67.31、54.95、37.78、32.29、29.84; 高解像度質量スペクトル m/z 384.1421 [(M+H)+; C19H21NO4F3の計算値: 384.1423]。
【０２４０】
【化７９】
2011195589.tif 000088
【０２４１】
α-ヒドロキシアミド89. (MeO)NHMe・HCl(10.1g、5.25当量)のTHF(100mL)懸濁液を0℃で、AlMe3(50mL、5.1当量)のトルエン(2.0M)溶液で滴加処理し、生じた澄明な溶液を室温で34分攪拌し、次いで、α-ヒドロキシオキサゾリジノン88(7.55g、19.7mmol)の冷(0℃)THF(70mL)溶液を加えた。生じた混合物を室温まで加温し、12時間攪拌した。反応混合物を0℃に冷却し、1Nの酒石酸(100mL)を徐々に加えることによりクエンチし、室温で25分攪拌し、EtOAc(3×200mL)で抽出した。合わせた有機物を乾燥させ(MgSO4)、真空中で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン:EtOAc2:1→1:1)により、α-ヒドロキシアミド89(5.12g、収率97%)が澄明なオイルとして得られた:
[α]D25 -57.2 (c 1.03, CHCl3); IR (フィルム) 3432 (br s)、3084 (w)、2980 (m)、2943 (m)、1652 (s)、1464 (m)、1373 (m)、1318 (m)、1214 (m)、1171 (m)、1112 (m)、991 (m)、919 (m)、818 (w) cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ6.32 (td, J=7.3, 1.5Hz, 1H)、5.74 (ddt, J=16.9, 10.3, 6.1Hz, 1H)、5.05 (m, 2H)、4.43 (dd, J=7.6, 3.5Hz, 1H)、3.70 (s, 3H)、3.35 (br s, 1H)、3.24 (s, 3H)、2.94 (d, J=6.1Hz, 2H)、2.59 (m, 1H)、2.36 (m, 1H); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ173.43、133.68、130.59 (q, J=6Hz)、129.25 (q, J=28Hz)、124.05 (q, J=271Hz)、116.17、67.57、61.44、32.56、32.38、29.75; 高解像度質量スペクトル m/z 268.1161 [(M+H)+; C11H17NO3F3の計算値: 268.1161]。
【０２４２】
【化８０】
2011195589.tif 000089
【０２４３】
α-ヒドロキシケトン90:α-ヒドロキシアミド89(4.87g、18.2mmol)の冷(0℃)THF(150mL)溶液に、MeMgBr(75mL、12当量)のエーテル(3.0M)溶液を加えた。5分後に、反応混合物を飽和NH4Cl(250ml)でクエンチし、EtOAc(5×200mL)で抽出した。合わせた有機物を乾燥させ(MgSO4)、真空中で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン:EtOAc4:1→2:1→1:2)により、α-ヒドロキシケトン90(2.16g、収率53%、回収された出発物質に基づくと収率73%)が澄明なオイルとして、および出発物質α-ヒドロキシアミド89(1.30g、収率27%)が得られた:
[α]D25 +58.5 (c 1.30, CHCl3); IR (フィルム) 3460 (br s)、3085 (w)、2984 (m)、2926 (m)、1716 (s)、1679 (m)、1641 (m)、1417 (m)、1361 (m)、1319 (s)、1247 (m)、1216 (s)、1172 (s)、1113 (s)、1020 (m)、994 (m)、968 (w)、919 (m) cm-1; 1H NMR. (500MHz, CDCl3) δ6.21 (t, J=7.0Hz, 1H)、5.75 (ddt, J=16.7, 10.4, 6.2Hz, 1H)、5.07 (m, 2H)、4.26 (dt, J=7.1, 4.5Hz, 1H)、3.51 (d, J=4.7Hz, 1H)、2.96 (d, J=6.1Hz, 2H)、2.66 (m, 1H)、2.42 (m, 1H)、2.19 (s, 3H); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ208.53、133.43、129.80 (q, J=28Hz)、129.76 (q, J=6Hz)、123.85 (q, J=271Hz)、116.32、75.36、31.22、29.81、25.11; 高解像度質量スペクトル m/z 223.0945 [(M+H)+; C10H14NO2F3の計算値: 223.0946]。
【０２４４】
(実施例8)
触媒による不斉酸化手法
【０２４５】
【化８１】
2011195589.tif 000090
【０２４６】
(実施例9)
21-アミノ-トリフルオロ-(E)-9,10-デヒドロ-dEpoBの合成
【０２４７】
【化８２】
2011195589.tif 000091
【０２４８】
化合物98:
59(50.4mg、90.1μmol)のTHF(1mL)溶液に、(PhO)2PON3(27.2μL、126μmol)を0℃で加えた。0℃で5分間攪拌した後に、DBU(16.2μL、108μmol)を加えた。0℃で2時間攪拌した後に、混合物を室温で20.5時間攪拌した。反応混合物をEtOAcで希釈し、水(2mL)を加えてクエンチした。層を分離した後に、水性層をEtOAcで抽出し(3回)、合わせた有機層をNa2SO4上で乾燥させた。濃縮した後に、残留物を高真空下に10分間乾燥させ、DBUを除去した。フラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘキサン/EtOAc=3:2)により精製すると、アジ化物98(45.6mg、78.0μmol、87%)が無色の固体として得られた;
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.05 (3H, s)、1.12 (3H, d, J=7.0Hz)、1.23 (3H, d, J=6.8Hz)、1.33 (3H, s)、2.01 (1H, d, J=5.5Hz, OH)、2.17 (3H, s)、2.25〜2.35 (1H, m)、2.41 (1H, dd, J=15.5, 3.2Hz)、2.49 (1H, dd, J=15.5, 9.5Hz)、2.54〜2.60 (1H, m)、2.66 (1H, d, J=6.0Hz)、2.65〜2.76 (1H, m)、2.96 (1H, dd, J=16.0, 4.2Hz)、3.03 (1H, dd, J=16.1, 6.7Hz)、3.11 (1H, 五重線, J=6.8Hz)、3.71〜3.76 (1H, m)、4.31 (1H, ddd, J=9.2, 5.9, 3.2Hz)、4.65 (2H, s)、5.43 (1H, dd, J=6.0, 4.3Hz)、5.58 (1H, ddd, J=15.8, 6.4, 4.6Hz)、5.66 (1H, dd, J=15.8, 6.1Hz)、6.23 (1H, t, J=7.3Hz)、6.63 (1H, s)、7.18 (1H, s); LRMS (ESI) C27H35F3N4O5SNa [M+Na+]の計算値607.2、実測値607.2。
【０２４９】
【化８３】
2011195589.tif 000092
【０２５０】
化合物96:
アジ化物98(21.0mg、35.9μmol)のTHF(0.6mL)溶液に、PMe3(THF中1.0M、43.1μL、43.1μmol)を加えた。室温で2分間攪拌した後に、水(0.1ML)を加え、混合物を室温で3時間攪拌した。PMe3(THF中1.0M、7.2μL、7.2μmol)を加え、この混合物を室温で1.5時間攪拌した。この混合物に、28%のNH4OH(水性)(54.5μL)を加えた。1時間攪拌した後に、混合物をそのまま、分取TLC(CH2Cl2/MeOH=100:7.5)により精製すると、アミン96(15.9mg、28.5μmol、79%)が無色の固体として得られた:
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.05 (3H, s)、1.12 (3H, d, J=7.0Hz)、1.23 (3H, d, J=6.8Hz)、1.34 (3H, s)、2.12 (3H, d, J=0.7Hz)、2.24〜2.35 (1H, m)、2.39 (1H, dd, J=15.4, 3.0Hz)、2.49 (1H, dd, J=15.4, 9.8Hz)、2.54〜2.63 (1H, m)、2.66〜2.76 (1H, m)、2.97 (1H, dd, J=16.2, 4.2Hz)、3.03 (1H, dd, J=16.3, 6.5Hz)、3.10 (1H, 五重線, J=6.8Hz)、3.74 (1H, dd, J=6.7, 3.5Hz)、4.18 (2H, s)、4.34 (1H, dd, J=9.8, 2.9Hz)、5.43 (1H, dd, J=6.0, 4.3Hz)、5.55〜5.64 (1H, m)、5.67 (1H, dd, J=15.9, 5.8Hz)、6.24 (1H, brt, J=7.3Hz)、6.66 (1H, s)、7.10 (1H, s); LRMS (ESI) C27H38F3N2O5S [M+H+]の計算値559.2、実測値559.2。
【０２５１】
【化８４】
2011195589.tif 000093
【０２５２】
化合物97:
アミン96(15.9mg、28.5μmol)のCH3CN(0.78mL)溶液に、37%HCHO(水性)(31.4μL、0.143mmol)を、続いてNaBH3CN(THF中1.0M、85.5μL、85.5μmol)を加え、この混合物を室温で20分間攪拌した。AcOH(1滴)を加え、この混合物を室温で40分間攪拌した。混合物をそのまま、分取TLC(CH2Cl2/MeOH=100:8)により精製すると、生成物97(15.6mg、26.6μmol、93%)が無色の固体として得られた:
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.05 (3H, s)、1.12 (3H, d, J=6.9Hz)、1.23 (3H, d, J=6.8Hz)、1.33 (3H, s)、2.17 (3H, s)、2.24〜2.35 (1H, m)、2.43 (1H, dd, J=15.7, 3.6Hz)、2.49 (1H, dd, J=15.6, 9.1Hz)、2.55〜2.64 (2H, m, OHを含む)、2.68〜2.77 (1H, m)、2.80 (3H, s)、2.81 (3H, s)、2.92〜3.06 (2H, m)、3.10 (1H, 五重線, J=6.8Hz)、3.69〜3.76 (1H, m)、4.25〜4.34 (1H, m)、4.33 (2H, s)、5.42 (1H, t, J=5.5Hz)、5.57 (1H, dt, J=15.8, 6.3Hz)、5.66 (1H, dd, J=15.7, 6.4Hz)、6.22 (1H, brt, J=7.2Hz)、6.64 (1H, s)、7.30 (1H, s); LRMS (ESI) C29H42F3N2O5S [M+H+]の計算値580.2、実測値580.2。
【０２５３】
【化８５】
2011195589.tif 000094
【０２５４】
化合物94および95:
CH2Cl2(1mL)中の59(18.9mg、33.8μmol)およびEt3N(18.8μL、0.135mmol)の混合物に、TsCl(12.9mg、67.5μmol)およびDMAP(2.1mg、16.9μmol)を0℃で加えた。室温で1.5時間攪拌した後に、混合物をEtOAcで希釈し、シリカゲルパッドで濾過した(EtOAcですすぎ)。濃縮した後に、残留物を分取TLC(ヘキサン/EtOAc=1:1)により精製すると、トシレート94(8.5mg、11.9μmol、35%)および塩化物95(4.3mg、7.44μmol、22%)が両方とも無色の固体として得られた:
【０２５５】
【化８６】
2011195589.tif 000095
【０２５６】
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.06 (3H, s)、1.12 (3H, d, J=7.0Hz)、1.23 (3H, d, J=6.7Hz)、1.33 (3H, s)、1.99 (1H, d, J=5.5Hz)、2.10 (3H, s)、2.25〜2.34 (1H, m) 2.41 (1H, dd, J=15.5, 3.3Hz)、2.47 (3H, s)、2.48 (1H, dd, J=15.7, 9.4Hz)、2.51〜2.63 (1H, m)、2.63 (1H, d, J=6.1Hz, OH)、2.64〜2.75 (1H, m)、2.91〜3.05 (2H, m)、3.10 (1H, 五重線, J=6.8Hz)、3.70〜3.75 (1H, m)、4.30 (1H, ddd, J=9.3, 6.1, 3.2Hz)、5.32 (2H, s)、5.41 (1H, dd, J=5.8, 4.5Hz)、5.57 (1H, ddd, J=15.8, 6.4, 4.6Hz)、5.65 (1H, dd, J=15.8, 6.0Hz)、6.21 (1H, t, J=7.1Hz)、6.59 (1H, s)、7.18 (1H, s)、7.37 (2H, d, J=8.1Hz)、7.84 (2H, d, J=8.3Hz); LRMS (ESI) C34H42F3NO8S2Na [M+Na+]の計算値736.2、実測値736.3。
【０２５７】
【化８７】
2011195589.tif 000096
【０２５８】
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.06 (3H, s)、1.12 (3H, d, J=6.9Hz)、1.23 (3H, d, J=6.7Hz)、1.34 (3H, s)、2.00 (1H, d, J=5.6Hz, OH)、2.15 (3H, s)、2.25〜2.35 (1H, m)、2.41 (1H, dd, J=15.5, 3.2Hz)、2.49 (1H, dd, J=15.5, 9.4Hz)、2.53〜2.62 (1H, m)、2.69 (1H, d, J=6.1Hz, OH)、2.66〜2.76 (1H, m)、2.92〜3.05 (2H, m)、3.11 (1H, 五重線, J=6.4Hz)、3.70〜3.76 (1H, m)、4.32 (1H, ddd, J=9.2, 5.9, 3.1Hz)、4.85 (2H, s)、5.43 (1H, dd, J=6.0, 4.4Hz)、5.59 (1H, ddd, J=15.9, 6.4, 4.5Hz)、5.66 (1H, dd, J=15.9, 6.1Hz)、6.23 (1H, t, J=6.8Hz)、6.63 (1H, s)、7.20 (1H, s); LRMS (ESI) C27H35ClF3NO5SNa [M+Na+]の計算値600.2、実測値600.2。
【０２５９】
【化８８】
2011195589.tif 000097
【０２６０】
化合物99:
59(6.9mg、12.3μmol)のCH2Cl2(0.4mL)溶液に、活性化MnO2(Acrosから購入、26.8mg、0.308mmol)を加えた。室温で4時間激しく攪拌した後に、混合物をセライトパッドで濾過し、これを、EtOAcですすいだ。濃縮した後に、残留物を分取TLC(ヘキサン/EtOAc=1:1)により精製すると、アルデヒド99(2.7mg、4.84μmol、39%)が無色の固体として得られた;
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.06 (3H, s)、1.13 (3H, d, J=7.2Hz)、1.24 (3H, d, J=6.9Hz)、1.35 (3H, s)、1.96 (1H, d, J=5.6Hz, OH)、2.22 (3H, d, J=0.7Hz)、2.25〜2.35 (1H, m)、2.44 (1H, dd, J=15.4, 3.5Hz)、2.46 (1H, d, J=5.9Hz, OH)、2.51 (1H, dd, J=15.7, 9.3Hz)、2.57〜28 (1H, m)、2.68〜2.79 (1H, m)、2.96〜3.03 (2H, m)、3.10 (1H, 五重線, J=6.8Hz)、3.71〜3.76 (1H, m)、4.31 (1H, ddd, J=9.4, 6.3, 3.5Hz)、5.45 (1H, t, J=5.0Hz)、5.53〜5.63 (1H, m)、5.67 (1H, dd, J=15.7, 6.2Hz)、6.24 (1H, t, J=6.6Hz)、6.72 (1H, s)、7.57 (1H, d, J=0.9Hz)、10.01 (1H, d, J=1.2Hz)。
【０２６１】
【化８９】
2011195589.tif 000098
【０２６２】
化合物100:
アルデヒド99(4.6mg、8.25μmol)のCH3CN(0.5mL)溶液に0℃で、MeNH2(THF中2.0M、41.3μL、41.3μmol)を加えた。0℃で15分間攪拌した後に、NaBH3CN(THF中1.0M、25μL、25μmol)を加えた。0℃で0.5時間攪拌した後に、AcOH(3滴)を加えた。0℃で2時間攪拌した後に、28%のNH4OH(水性)(40μL)を加え、この混合物を室温で10分間攪拌した。混合物をそのまま分取TLC(CH2Cl2/MeOH=100:9)により精製すると、100(2.4mg、4.19μmol、51%)が無色の固体として得られた;
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.05 (3H, s)、1.12 (3H, d, J=7.0Hz)、1.23 (3H, d, J=6.8Hz)、1.34 (3H, s)、2.13 (3H, s)、2.25〜2.34 (1H, m)、2.39 (1H, dd, J=15.3, 3.0Hz)、2.49 (1H, dd, J=15.3, 9.7Hz)、2.56 (3H, s)、2.54〜2.64 (1H, m)、2.66〜2.75 (1H, m)、2.89 (1H, d, J=5.1Hz)、2.94〜3.05 (2H, m)、3.11 (1H, 五重線, J=6.8Hz)、3.74 (1H, dd, J=6.6, 3.5Hz)、4.08 (2H, s)、4.34 (1H, dd, J=9.6, 2.9Hz)、5.43 (1H, dd, J=6.2, 4.1Hz)、5.56〜5.63 (1H, m)、5.66 (1H, dd, J=15.9, 5.7Hz)、6.24 (1H, t, J=7.3Hz)、6.66 (1H, s)、7.11 (1H, s); LRMS (ESI) C28H40F3N2O5S [M+H+]の計算値573.3、実測値573.3。
【０２６３】
(実施例10)
異種移植片腫瘍を除去して非再発状態にするエポチロン類似体
化学合成、分子モデリングおよび分光分析を組み合わせることにより、我々は、E-9,10-二重結合(下記の化合物28参照)の導入により、薬物耐性MX-1腫瘍での異種移植片実験で、薬物効力の約10倍の増大が達成されることを発見した(A.Rivkinら,J.Am.Chem.Soc.2003,125,2899;参照により本願明細書に援用される)。MX-1腫瘍タイプを対象とするin vitroおよびin vivo実験を相関させた後に、28は、2bよりもかなり細胞毒性が強いことが明らかであった。しかしながら、他の寄与因子は、9,10-デヒドロシリーズ中のラクトン基が、9,10-デヒドロ同族体の場合よりもマウスおよびヒト血漿中でかなり安定であることである。これら2つの相補的効果を合わせると、1での30mg/kg手法に反して、様々な異種移植片で3mg/kgで、28に腫瘍の完全な抑制を達成させることができる。
【０２６４】
【化９０】
2011195589.tif 000099
【０２６５】
治療を停止すると、触診可能な腫瘍が、動物の幾つかのフラクションで再発する。したがって、少なくとも現在では、十分に合成された28は、高度に有利な治療指数および腫瘍を除去して非再発状態にする厳格な基準を十分にはかなえていない。
【０２６６】
これらの所見により、28の26-メチル基の3個の水素を3個のフッ素原子で置換する結果へと、我々の注意が向いた。この位置にフッ素原子を導入することにより、酸化に対する12,13-二重結合の改善された安定性がもたらされた(Smart,B.E.J.Fluorine Chem.2001,109,3;参照により本願明細書に援用される)。前記の実験は、C12-C13二重結合の位置にある極性基を置換することにより、細胞毒性を多少緩和することを対象としていた(A.Rivkinら、j.Am.Chem.Soc.2003,125,2899;参照により本願明細書に援用される)。この開示で、我々は、親構造29の独特な生物学的特性に特に焦点を当てて、全化学合成により、9,10-デヒドロ-26-トリフルオロエポチロンの発見を報告している。
【０２６７】
腫瘍消失および再発に関する、ヒト乳癌MX-1異種移植片に対するdEpoB(30mg/kg)、パクリタクセル(20mg/kg)およびF3-deH-dEpoB(29、20および30mg/kg)の治療効力を綿密に研究し、結果を表10-1に示す。各用量群は、4匹以上のヌードマウスからなる。体重は、全重量-腫瘍重量に関する。3種の化合物は全て、腫瘍消失を達成した。治療を停止して10日目に、5/10(dEpoB)、2/7(パクリタクセル)および0/4(化合物29)のマウスが再発した。29の20mg/kg用量での治療を停止した後にさらに観察すると、4匹のマウスのうちの2匹のマウス腫瘍が再発する27日目まで、腫瘍は長期間にわたって存在しなかった。特に、29の30mg/kg用量での治療は、完全な腫瘍消失をもたらし、治療を止めたあと2ヶ月以上にわたって、再発は存在しなかった。
【０２６８】
【表Ｆ】
2011195589.tif 000100
【０２６９】
薬物29の用量を10mg/kg(Q2D)に減らしても、MX-1腫瘍は消失したが、9匹のマウスが、この結果を達成するためには必要であった(図57、58および59A)。さらなる攻撃として、化学療法を、腫瘍サイズが0.5g(体重の〜2.3%)になるまで遅らせた。29の25mg/kg(Q2D×7)用量での治療により、マウス腫瘍の4/4が消失した。dEpoBとは異なり、30mg/kg用量(Q2D×8)が、4匹のうちの3匹のマウスで腫瘍の消失を誘発するために必要であった。しかしながら、29の場合とは異なり、dEpoBでの治療の後に生じる明らかな消失は、時間と共に再発した。(図59B)。
【０２７０】
薬剤29は完全に、ヒト乳癌MX-1異種移植片の成長を抑制し、腫瘍を縮小させ、これを、64日間にわたって消失させたという事実は、印象的である。さらに、29により達成された治癒の後(20mg/kgまたは30mg/kg、Q2D×6、iv6時間注入、前記の表1)、異種移植片の体重は、治療をやめた後12〜18日以内に、治療前の対照レベルまで戻った。この所見は、生体臓器ダメージが存在しないことを示している。10mg/kg、Q2DX12の治癒低用量(図59B)では、最大体重低下は、12%のみであり、最後の3回の用量の間に、6%の体重増加を伴った。体重は、治療をやめた後にわずか3日間で、治療前対照レベルまで回復した。前記の表1は、動物が、27%の体重低下を乗り切りうることを示している。本願明細書で分かった治療安全性マージンは、治癒的癌治療剤ではかなり幅広い。
【０２７１】
ヒト肺癌異種移植片(A549)およびパクリタクセル耐性ヒト肺癌A549/タキソール異種移植片に対する29の治療効果も評価した(図59Cおよび59D)。成長の遅い肺癌異種移植片A549を、29で治療すると(25mg/kg、Q2DX6、2回、8日ごと)、99.5%の腫瘍が抑制され、2回を上回る用量の後では、4個の腫瘍のうちの4個が結局完全に根絶された(図59C)。重要なことに、死に到ることなく、マウスの体重は35%低下し、治療の停止により、治療前対照レベル近くまで、迅速に体重は回復した(図59C)。対照的に、dEpoB(30mg/kg、Q2D×6)での平行研究により、腫瘍は97.6%抑制されたが、腫瘍根絶はもたらさなかった。A549/タキソール耐性異種移植片に対する29の付加的研究(20mg/kg用量)(図59D)では、腫瘍成長は全て抑制され、腫瘍は最終的に、治療前対照の24.4%ほど低減した。この研究の間に、最大体重は、24%低下したが、薬物治療を停止すると、体重は、治療前対照の90%まで回復した。(E)-9,10-デヒドロ-dEpoB(28、4mg/kg群)の比較研究では、腫瘍成長は、41.6%抑制された。
【０２７２】
どの因子が、化合物29にその顕著な治療指数を与えるかを分析するための適切なデータを、かなり類似した同族体に関する匹敵するデータと共に、表10-2に示す。固有の細胞毒性に関して、EpoB(2b)からdEpoB(1)へと移行すると、一桁減ったことを特記する。この低下の約60%は、9,10-デヒドロ-dEpoB(28)の場合に回復された。この固有細胞毒性は、29では多少失われ、これは、少なくとも細胞中では、水準点化合物dEpoBの細胞毒性の約1.8倍である。
【０２７３】
12,13-デヒドロエポチロンでは、29が、マウス血漿中で最も良好な安定性を示し、さらに、ヒト肝臓S9血漿でも最も安定であることを特記する。さらに、2セットの12,13-デヒドロ異性体では、26-トリフルオロパターンは、低いリポ親和性および多少高い水溶性を伴うことを特記する(表10-2、下記)。現時点では、29の大きな利点は、血清安定性および生物学的利用能の改善から生じていることが明らかである。
【０２７４】
【表Ｇ】
2011195589.tif 000101
【０２７５】
薬剤の全て1〜2および28〜29は、全合成を介して初めて発見された。1の実際の合成は、既に記載されていた(Rivkinら、J.Am.Chem.Soc.2003,125,2899;Whiteら、J.Am.Chem.Soc.2001,123,5407;ヨシムラら、Angew.Chem.2003,42,2518;Rivkinら、J.Org.Chem.2002,124,7737;これらはそれぞれ参照により本願明細書に援用される)。28および29への最初の生成発見レベル経路も記載されている。29の9,10-二重結合の選択的還元により、2が生じた。現在最も有望な化合物29での前記の異種移植片研究から得られた注目すべき結果は明らかに、より高度な動物での詳細な毒物学および薬物動態研究へのその進展、さらに適していれば、ヒト臨床試験への進展を促している。このような見通しにより、合成チャレンジの性質は、プローブ試料の調製から、これらの新規エポチロンをマルチグラム量で製造することに変化した。我々の以前の経路の主な改善は、発見条件で当初予想され、証明されたように、達成された。特に、我々の新規プロトコルは、炭素3および26の立体特異的加工でかなりの簡略化を達成した(Rivkinら、J.Am.Chem.Soc.2003,125,2899;参照により本願明細書に援用される)。新規の合成では、立体中心6、7および8は、簡単に入手可能なケトン30およびアルデヒド31に由来することを特記する。アルコール保護およびアセタール加水分解により、対応するアルデヒドを酢酸t-ブチルと縮合させて、アルドール生成物を得た。この縮合は、ジアステレオマー制御されないので、補強的基準が必要で、達成された。C3エピマーの1:1混合物の酸化により、ケトン69が得られた。示されている条件下での高成功率のノヨリ還元(ノヨリら、J.Am.Chem.Soc.1987,109,5856;参照により本願明細書に援用)の後に、アルコール70が入手された。次いで、示されているように酸25の調製を、いくつかの付加的な簡単な工程で達成した。
【０２７６】
スキーム12. アシル部分25の合成
【０２７７】
【化９１】
2011195589.tif 000102
【０２７８】
試薬および条件:(a)(i)TrocCl,pyr.,92%、(ii)p-TsOH/H2O/76%;(iii)LDA、酢酸t-ブチル、THF、80%;(iv)Dess-Martinぺリオジナン、74%;(b)ノヨリ触媒(10mol%)、MeOH/HCl、H2、1200psi、80%。(c)(i)TESCl、イミダゾール、77%;(ii)Zn、AcOH、THF、99%;(iii)TBSOTf、2,6-ルチジン、82%;残りの工程に関しては、Rivkinら、J.Am.Chem.Soc.2003,125,2899参照。
【０２７９】
簡単で、容易に計ることができる新規の合成も、90のために開発されている(スキーム13)。この合成は、市販のトリフルオロケトエステル82と臭化アリルインジウムとの反応で開始する。この合成での鍵となる工程は、生じた3級アルコールを位置特異的および立体特異的に脱水して、84(2工程での全収率65%)を生じさせることである。この反応の立体制御は、「双極性効果」から生じ、この際、電子吸引性の強いCF3およびCO2Et基は、生じる二重結合に関して、多くはトランスで存在する。必要なヨウ化物86は、84から2工程で得られた。THF中、ヨウ化物86での7の以前に報告されたエノール酸リチウムのアルキル化により、収率81%および高いジアステレオ選択性(>25:1de)で88が得られた。2級アルコールの脱保護の後に、示されているように、化合物88は3工程で、90に進む。
【０２８０】
スキーム13. アルキル部分17の合成
【０２８１】
【化９２】
2011195589.tif 000103
【０２８２】
試薬および条件:(a)(i)臭化アリル、In、THF-水(3:1)48℃、85%;SOCl2、pyr55℃、77%;(b)(i)DIBAL-H、CH2Cl2、-78℃から室温まで、99%;(ii)I2、PPh3、イミダゾール、CH2Cl2、74%;(c)(i)LHMDS、THF、-78℃から室温まで;(ii)HOAc-THF-H2O(3:1:1)、2工程で81%;(d)(i)AlMe3、MeONHMe、THF、0℃から室温まで、97%;(ii)MeMgBr、THF、0℃、53%(73%borsm)
【０２８３】
容易に加工可能な化学で入手される25および90を用いると、我々の発見相で初めて開発されたプロトコルにより、29への経路は明らかであった(Rivkinら、J.Am.Chem.Soc.2003,125,2899;参照により本願明細書に援用される)。25の鍵となる閉環複分解反応を、第2世代Grubbs触媒を使用してトルエン中で実施した(Grubbs,R.H.;Miller,S.J.;Fu,G.C.Acc.Chem.Res.1995,28,446;Trnka,T.M.;Grubbs,R.H.Acc.Chem.Res.2001,34,18;Alkene Metathesis in Organic Chemistry Ed.;Fuerstner,A.;Springer,Berlin,1998;Fuerstner,A.Angew.Chem.Int.Ed.Engl.2000,39,3012;Schrock,R.R.Top.Organomet.Chem.1998,1,1:これらはそれぞれ、参照により本願明細書に援用される)。反応により、専らトランス異性体48が収率71%で得られた。スキーム14に示されているプロトコルを介してチアゾール基を導入した後に、HF-ピリジンで2個のシリル保護基を除去して、29を得て、次いでこれを、9,10-オレフィンの還元を介して、2に高収率で変換した。構造的に新規なエポチロンのグラム量を、大学規模の実験室条件で全合成により調製した。
【０２８４】
スキーム14. 26-CF3-(E)-9,10-デヒドロ-dEpoB(29)の合成の最終工程
【０２８５】
【化９３】
2011195589.tif 000104
【０２８６】
試薬および条件:(a)EDCI、DMAP、CH2Cl2、25、0℃から室温まで、t-ブチルエステルから86%;(b)Grubbs触媒、トルエン、110℃、20分、71%;(c)(i)KHMDS、101、THF、-78℃から-20℃、70%;(ii)HF-ピリジン、THF、98%。
【０２８７】
実験
一般的方法: 特に記載のない限り、さらに精製することなく、市場供給者から得た試薬を使用した。塩化メチレンを、無水溶剤系(予め充填されたアルミナカラムを通過させた)から得て、さらに乾燥させることなく使用した。。空気および水過敏性反応は全て、予め精製されたアルゴンガスの正圧下に火炎乾燥させたガラス製品中で行った。NMR(1Hおよび13C)スペクトルは、CDCl3(1Hでは7.27ppmおよび13Cでは77.0ppm)またはCD2Cl2(1Hでは5.32ppmおよび13Cでは53.5ppm)を参照して、それぞれ記載されているようにBruker AMX-400MHzまたはBruker Advance DRX-500MHzで記録した。赤外スペクトルは、Perkin-Elmer FT-IRモデル1600分光計で得た。旋光性は、JASCOモデルDIP-370デジタル偏光計で得た。分析薄層クロマトグラフィーを、E.Merckシリカゲル60F254プレート上で行った。プレートをパラ-アニスアルデヒド溶液に浸漬させ、加熱することにより、UV活性でない化合物を可視化した。Whatman(登録商標)(LK6Fシリカゲル60A)TLCプレート上で記載の溶剤を使用して、分取薄層クロマトグラフィーを行った。
【０２８８】
化学.全てのエポチロンを組織内で合成した(C.R.Harris,S.J.Danishefsky,J.Org.Chem.1999,64,8434;D.-S.Suら、Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1997,36,2093;Smart,B.E.J.Fluorine Chem.2001,109,3;F.ヨシムラら、Angew.Chem.2003,42,2518;Rivkinら,J.Org.Chem.2002,124,7737;これらはそれぞれ、参照により本願明細書に援用される)。パクリタクセル(タキソール(登録商標))および硫酸ビンブラスチン(VBL)は、Sigmaから購入した。これらの化合物を全て、in vitroアッセイのためにジメチルスルホキシドに溶かした(サリンに溶かしたVBLを除く)。in vivo研究のために、全てのエポチロンおよびパクリタクセルを、クレモフォール/エタノール(1:1)賦形剤に溶かし、次いで、生理食塩水で希釈して、カスタムデザインのミニカテーテルを使用して尾静脈を介して6時間iv注入した(T.-C.Chouら、Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.2001,98,8113-8118;T.C.Chouら、Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1998,95,15798-15802;それぞれ、参照により本願明細書に援用される)。
【０２８９】
腫瘍および細胞系.CCRF-CEMヒトリンパ芽球性白血病細胞を、Illinois大学(Chicago)のDr.William Beckから得た。ヒト乳癌(MX-1)およびヒト肺癌細胞(A549)は、American Type Culture Collection(ATCC,Rockville,MD)から得た。パクリタクセル耐性A549/タキソール細胞(44倍耐性)は、前記の方法で開発した(T.-C.Chouら、Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.2001,98,8113-8118;参照により本願明細書に援用)。
【０２９０】
動物.  nu/nu遺伝子を有する無胸腺マウスを、NCI,Frederick,MDから得て、全てのヒト腫瘍異種移植片のために使用した。20〜22g重量以上、6週齢以上のオスのヌードマウスを使用した。薬物は、手作りの注入ミニカテーテルおよび保持管を使用して、尾静脈を介してiv注入により6時間で投与した(T.-C.Chouら、Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.2001,98,8113-8118;;参照により本願明細書に援用される)。マルチトラックを備えたプログラム可能なHarvard  PHD2000シリンジポンプをiv注入のために使用した。クレモフォール/エタノール(1:1)中の各薬物での通常の6時間注入容量は、生理食塩水2.0mL中100mlであった。キャリパーを使用して、長さ×幅×高さ(または幅)を測定することにより、腫瘍容量を評価した。実験の間の腫瘍保持ヌードマウスでは、体重とは、全重量-腫瘍重量のことである。National Institute of Health Guide for the Care and Use of Animalsに関するガイドラインおよびMemorial Sloan-Kettering Cancer Center's Institutional Animal Care and Use Committeeにより承認されたプロトコルに従い、全ての動物実験を行った。
【０２９１】
細胞毒アッセイ.  in vitro細胞毒アッセイを調製する際に、細胞を1ミリリットル当り2〜5×104細胞の当初密度で培養した。これらを、5%CO2-加湿大気中、37℃で、ペニシリン(100単位/mL)、ストレプトマイシン(100μg/mL、GIBCO/BRL)および5%熱不活性化FBSを含有するRPMI培地1640(GIBCO/BRL)に保持した。単層で成長する充実性腫瘍細胞では(A549など)、スルホロダミンB法を使用することにより、96ウェルマイクロタイタープレート中で、薬物の細胞毒性を決定した(P.Skehanら、J.Natl.Cancer.Inst.1990,82,1107-1112;参照により本願明細書に援用される)。懸濁液中で成長させた細胞では(CCRF-CEMおよびその亜系など)、2,3-ビス-(2-メトキシ-4-ニトロ-5-スルホフェニル)-5-カルボキサニリド)-2H-テラゾジウムヒドロキシド(XTT)微小培養法(D.A.Scudieroら、Cancer Res.1988,48,4827-4833;参照により本願明細書に援用される)を使用して、96ウェルマイクロタイタープレート中で、細胞毒性を二重に測定した。いずれの方法でも、各ウェルの吸収率を、マイクロプレートリーダーで測定した(Power Wave XS,Bio-Tek,Winooski,VT)。各薬物の6から7種の濃度からの用量効果関係データを、コンピュータープログラムを使用することにより50%有効プロットで二重に分析した(T.-C.Chou,M.Hayball.CalcuSyn for Windows,Multiple-drug dose effect analyzer and manual.Biosoft,Cambridge Place,Cambridge,UK(1997);参照により本願明細書に援用される)。
【０２９２】
マウスおよびヒト肝臓S9断片でのエポチロンの安定性.  十分に自動化されたHPLCシステムを用いて安定性研究を実施したが、これは、Prospekt-2(Spark Holland,オランダ)試料調製システムおよびAgilent 1100 HPLCシステムから構成された。簡単には、Prospekt2は、C8抽出カートリッジを出し、これをアセトニトリルおよび水で洗浄する。37℃に設定されたAgilentオートサンプラーは、サンプル20μlを取り出し、これを、カートリッジに載せ、水で洗浄し、次いでProspekt-2は、移動相流を抽出カートリッジを介して、ガードカラムを備えた分析カラムReliance Stable Bond C8 4×80mm(MacMod,Chadds Ford,PA)の上に移し、溶離剤を250nmで監視した。移動相は、0.4ml/分で53または65%のアセトニトリル/0.1%のギ酸からなるので、該当する化合物の保持時間は、約6分間であった。試料調製は、全容量300〜400μlで等容量の血漿をPBSに加え、濾過し、基質(20mM)の0.5〜2μLを加えて、HPLC分析中250nmで約30〜50mAUを達成することを必要とした。貯留したヒト肝臓ミクロソームS9フラクション(Xeno Tech,Lenex,KS)では、S9フラクション20μl(400μg)をPBS280μlと混合し、次いで、前記のように処理した。サンプリング期間を、オートサンプラーにより制御し、ピーク面積データを、親化合物の消失速度と比較して補正した。
【０２９３】
オクタノール-水分配(POW)数の決定.  HPLC法を使用して、オクタノール-水分配を推定した。遮光XDB C18カラム4.6×250mmを備えたAgilent 1100 HPLCシステムを、60%アセトニトリル/40%25mMのリン酸カリウム緩衝液(pH7.4)の移動相を用いて、流速1分当り0.8mLで使用し、溶離液を、250nmで監視する。使用される標準は、1.1、1.7、3.2、4.2および4.8の知られているPOWをそれぞれ有するベンジルアルコール、アセトフェノン、ベンゾフェノン、ナフタレン、ジフェニルエーテルおよびジベンジルである。重クロム酸ナトリウムを使用して、2.5分である0時点を評価し、標準での保持時間はそれぞれ、3.9、5.4、10.6、14、18.7および19.8分である。k値を、式:k=(trt-t0)/t0により算出する。log k対logPOWの線形回帰により、r2=0.966で直線が得られる。このグラフを使用して、エポチロン類似体のPOW価を評価する。
【０２９４】
29(26-トリフルオロ-(E)-9,10-デヒドロ-dEpoB)での分光データ:
[α]D25 -54.6 (c 0.28, CHCl3); IR (フィルム) ν3478、2974、2929、1736、1689、1449、1381、1318、1247、1169、1113、1039、983、867、736cm-1; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ1.05 (3H, s)、1.12 (3H, d, J=7.0Hz)、1.23 (3H, d, J=6.8Hz)、1.37 (3H, s)、2.04 (1H, brd, J=3.8Hz, -OH)、2.12 (3H, s)、2.25〜2.33 (1H, m)、2.38 (1H, dd, J=15.3および3.0Hz)、2.48 (1H, dd, J=15.4および9.8Hz)、2.54〜2.61 (1H, m)、2.66〜2.76 (1H, m)、2.71 (3H, s)、2.96 (1H, dd, J=16.5および4.5Hz)、3.02 (1H, dd, J=16.3および6.5Hz)、3.11 (1H, 五重線, J=6.7Hz)、3.19 (1H, brs, =OH)、3.74 (1H, brs)、4.35 (1F1, brd, J=9.5Hz)、5.42 (1H, dd, J=6.2および4.1Hz)、5.60 (1H, ddd, J=15.8, 5.6,および4.5Hz)、5.66 (1H, dd, J=15.8および5.8Hz)、6.24 (1H, t, J=7.2Hz)、6.64 (1H, s)、7.00 (1H, s); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ15.1、16.1、17.7、18.5、19.3、22.5、28.8、31.1、39.6、39.7、45.0、53.7、71.4、75.3、76.8、116.7、120.2、124.3 [q, 1J (C, F)=273.4Hz]、127.9、130.2 [q, 3J (C, F)=6.0Hz]、130.6 [q, 2J (C, F)=28.4Hz]、132.5、136.7、152.0、165.4、170.2、218.4; LRMS (ESI) C27H37F3NO5S [M+H+]の計算値544.2、実測値544.1。
【０２９５】
(実施例11)
in vitro研究
通常の実験は、1ml当り2〜5×104細胞の当初密度で細胞(例えばCCRF-CEM)を培養することを必要とする。これらを、5%CO2-加湿大気中、37℃で、ペニシリン(100単位/mL)、ストレプトマイシン(100μg/mL)(GIBCO/BRL)および5%熱不活性化FBSを含有するRPMI培地1640(GIBCO/BRL)に保持した。懸濁液中で成長させた細胞では(CCRF-CEMおよびその亜系など)、2,3-ビス-(2-メトキシ-4-ニトロ-5-スルホフェニル)-5-カルボキサニリド)-2H-テラゾジウムヒドロキシド(XTT)微小培養テトラゾニウム法を使用して、96ウェルマイクロタイタープレート中で、二重に細胞毒性を測定した。いずれの方法でも、各ウェルの吸収率を、マイクロプレートリーダーで測定した(EL-340,Bio-Tek,Burlington,VT)。各操作は、試験される薬物の6または7種の濃度を用いる。用量効果関係データを、50%有効プロットで分析した。
【０２９６】
CCRF-CEMヒトT細胞急性リンパ芽球性白血病細胞、そのテニポシド耐性亜系(CCRF-CEM/VM1)およびビンブラスチン耐性亜系(CCRF-CEM/VBL100)は、W.T.Beck(Illinois大学、シカゴ、Il)から得られる。
【０２９７】
通常の実験では、前記で概観したように、いくつかの本発明の化合物(例えば、9,10-デヒドロ-EpoD)は、CCRF-CEM細胞系およびタキソール耐性CCRF-CEM細胞系で活性を証明した。いくつかのこれらの化合物は、CCRF-CEM細胞系に関して0.0015から約0.120の範囲のIC50を示す。他のいくつかの化合物は、0.0015から約10.5の範囲のIC50を示す。さらにいくつかのこれらの化合物は、タキソール耐性CCRF-CEM細胞系で0.011から約0.80の範囲のIC50を示し、いくつかの他の化合物は、約0.011から約13.0μMの範囲のIC50を示す。いくつかの実施形態では、26F-EpoDは、CCRF-CEM細胞系では0.0015μMの範囲、およびタキソール耐性CCRF-CEM細胞系では0.011μMの範囲の活性を示す(図11)。
【０２９８】
(実施例12)
in vivo研究
nu/nu遺伝子を有する無胸腺ヌードマウスを通常は、腫瘍異種移植片のために使用した。非近交系のSwissバックグラウンドマウスをCharles River Laboratoriesから得た。22g重量以上、8週齢以上のオスのマウスをほとんどの実験で使用した。薬物は、尾静脈を介して、6時間iv注入で投与した。個々のマウスを、薬物投与のために穴の空いたFalconポリプロピレン管抑制機に閉じ込めた。キャリパーを使用して、長さ×幅×高さ(または幅)を測定することにより、腫瘍容量を評価した。マルチトラックを備えたプログラム可能なHarvard PHD2000シリンジポンプ(Harvard Apparatus)をiv注入のために使用した。National Institute of Healthのガイドライン「Guide for the Care and Use of Animals」およびMemorial Sloan-Kettering Cancer Center's Institutional Animal Care and Use Committeeにより承認されたプロトコルに従い、全ての動物実験を行った。腫瘍保持動物のヒト治療のためのこの委員会のポリシーを堅持して、腫瘍が、その全体重の≧10%に達したら、マウスを安楽死させた。
【０２９９】
図8に示されているように、9,10-デヒドロ-EpoBを、ヒト乳癌MX-1を有するヌードマウスで試験した。通常、9,10-デヒドロ-EpoBを次のように処方した:9,10-デヒドロ-EpoBをエタノールに溶かし、クレモフォールを20mg/mlの濃度で加えた(1:1)。この溶液をiv注入のために生理食塩水で希釈した。希釈溶液を、1時間以内にiv注入のために使用した。ついで、10mg/kg、20mg/kgおよび30mg/kgの用量を使用して、腫瘍サイズおよび体重を15日間にわたって測定した。さらに、Q3D×2  0.4mg/kg、Q3D×2  0.5mg/kgおよびQ3D×5  0.6mg/kgの用量レジームを使用して、腫瘍サイズおよび体重を測定した(図33、34、55および56参照)。3日毎の用量レジームを用いて、毒性を低減した。9,10-デヒドロ-EpoBでの他の治療研究を図70および71(CCRF-CEM/タキソールQ3D×5)および図23および24(HCT-116、Q2D×7)に示した。
【０３００】
化合物9,10-デヒドロ-12,13-デスオキシエポチロンB(イソ-490エポチロン)は、dEpoBよりも3倍高い有効性を有する。9,10-デヒドロ-12,13-デスオキシエポチロンDは、10mg/kgまたは20mg/kg(それぞれ、1日おきに投与した)の2回または3回注入の後に、腫瘍成長を止めることが判明した。1日おき2回の6時間iv注入を使用して、9,10-デヒドロ-12,13-デスオキシエポチロンB30mg/kg用量を使用すると、より良好な結果がマウスで得られた。5mg/kg、Q3D×9、6時間iv注入での9,10-デヒドロ-dEpoBも、MX-1異種移植片を有するヌードマウスで腫瘍消失を達成することが判明し、この際、マウスが死ぬことなく、また体重の低下も僅かであった(図74および75)。このことは、エポチロン類似体を3日置きに投与して、毒性を低減することにより達成されるようである(図53および54参照)。まとめると、9,10-デヒドロ-12,13-デスオキシエポチロンBは、他のエポチロンに比較して低い毒性、腫瘍成長の停止においてより高い効力および高い血清安定性を示す。他の治療件中を、図17および18(HCT-116,Q2D×5およびQ3D×5);図19および20(A549/タキソール、Q3D×7);および図21および22(A549/タキソール、Q2D×7)に示す。
【０３０１】
3日おきに9〜11回、6時間iv注入で、0.4〜0.6mg/kgで9,10-デヒドロ-EpoBを投与すると、ヒト乳癌MX-1異種移植片を移植されているヌードマウスの腫瘍の縮小および消失が生じた(図68および69)。1日おきに8回用量で投与すると、腫瘍成長は抑制されたが、腫瘍の縮小はなかった。1日おきに9回用量で9,10-デヒドロ-EpoBを投与すると、移植された腫瘍は、2日目から8日目まで徐々に縮小し続けるが、体重は、同じ期間、対照の76%から82%まで非常にゆっくりと回復した。10日目には、1/4の腫瘍が無くなった。9,10-デヒドロ-EpoBの0.6mg/kg用量をQ2W×6、6時間注入でHCT-116異種移植片を有するヌードマウスに投与すると、6回目用量の後3日以内に、4匹のマウスのうちの4匹が毒性によって死亡した。0.6mg/kg、Q3D×5、×2スケジュールを使用すると、9,10-デヒドロ-EpoBは、CCRF-CEM/タキソールに対して腫瘍成長を止めた(図70および71)。
【０３０２】
図に示されているように、26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-12、13-デスオキシエポチロンB(F3-deH-dEpoB)は、20mg/kgおよび30mg/kg、Q2D×6、6時間注入で、ヒト乳癌MX-1異種移植片を移植されているヌードマウスで治療効果がある。さらにデータは、30mg/kgQ2D×6は、ほぼ最大許容用量であることを示している。20mg/kg、Q2D×6、6時間注入では、26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-12、13-デスオキシエポチロンBは、ヒト乳癌MX-1異種移植片を有する4匹のヌードマウスのうちの4匹で腫瘍の縮小および消失をもたらした。これらは、治療を止めた後20日目に、腫瘍の再発を示さなかった。治療を止めた後27日目に、2/4匹で再発した。治療を止めた後28日目〜64日目の間に、さらなる腫瘍の再発は無かった。これに対して、dEpoBは30mg/kgで、同じマウスモデルで、7匹のマウスのうちの7匹で腫瘍の消失を達成し;しかしながら、腫瘍は、治療を止めた後8日目に5匹のマウスの内の2匹で再発した。20mg/kg、Q2D×6、6時間iv注入での26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-12、13-デスオキシエポチロンBの投与は、26%までのマウスの体重の一時的低下をもたらした。この体重低下は、死をもたらさず、このことは、生体臓器に対して深刻な毒性がないことを示している。最後の治療の後2日目に、体重が回復しだした。治療後の16日目に、体重は、治療前対照に対して109%まで回復し、このことは、毒性は、あったとしても全く可逆的であることを示している。これに対して、30mg/kgで投与されたdEpoBは、死亡はないが体重の31%低下をもたらした。
【０３０３】
26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-12、13-デスオキシエポチロンBを30mg/kg、Q2D×6、6時間iv注入で投与すると、腫瘍消失は、20mg/kg用量よりも2〜3日速かった。このより高い用量では体重は27%低下し、死ぬことなく4日間生き延び、これにより、生体臓器に対して深刻な毒性が無いことが確認された。30mg/kgでの最後の治療の後4日目に、体重が回復しだした。治療の後16日目に、体重は、治療前対照に対して98%まで回復し、再び、毒性の可逆性が確認された。20mg/kgおよび30mg/kgでの26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBでの治療は、腫瘍全体の消失をもたらし、30mg/kg用量では、62日後にも再発は観察されなかった。所定の3回の付加的用量を伴う9回用量を投与することにより、腫瘍消失は10mg/kgでも達成された(図57)。26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoB10mg/kgでは、わずかな体重低下のみが観察された(図58)。治療を続けても、さらなる体重低下は観察されなかった。
【０３０４】
図59は、MX-1異種移植片に対する26-F3-9,10-deH-dEpoB(および他のエポチロン)の効果をまとめている;A.低用量;B.大腫瘍に対して;A549肺癌異種移植片に対して、C;タキソール耐性肺癌A549/タキソール異種移植片に対して、D。
【０３０５】
図61は、CCRF-CEM、CCRF-CEM/VBLおよびCCRF-CEM/タキソールに対するC-21改質エポチロンのin vitro効力を挙げている。
【０３０６】
図62は、ヒトT細胞リンパ芽球性白血病CCRF-CEM異種移植片に対する26-F3-9,10-deH-dEpoB(15mg/kgおよび30mg/kg)およびタキソール(20mg/kg)Q2D×8、6時間iv注入の治療効果を示している。同様の体重低下が、3種の治療群全てで観察された(図63)。
【０３０７】
26-F3-9,10-deH-dEpoB、15mg/kgでのCCRF-CEM/タキソール異種移植片(タキソール耐性)の治療は、1/3の腫瘍消失を達成し、30mg/kgは3/4の腫瘍消失を達成した。タキソール、20mg/kgでの同じ治療は、腫瘍成長の部分的抑制のみをもたらし、腫瘍縮小には失敗した(図64)。この実験の間の体重変化は、図65に示した。
【０３０８】
26-F3-9,10-deH-dEpoB(20mg/kg)でのヒト大腸癌HCT-116異種移植片の治療は、タキソール(20mg/kg)と同様の効力を達成した。しかしながら、30mg/kgでのF3-deH-dEpoBは、5回用量の後に2/4の腫瘍消失というより良好な治療効果をもたらした(図66)。この実験の間の体重変化は、図67に示した。
【０３０９】
6時間iv注入およびiv注射での、MX-1異種移植片に対する様々な用量(5〜30mg/kg)でのF3-9,10-デヒドロ-dEpoFの治療効果は、図76および77に示した。
【０３１０】
結論.  dEpoBに対する9,10-デヒドロ、26-トリフルオロまたはこれら両方の改質は、in vitroで細胞毒性の1.5から5倍の増加およびin vitroでマウス血漿中半減期の2から5倍の増加をもたらす。ヌードマウスでヒト充実性腫瘍異種移植片モデルを使用し、最大許容用量で尾静脈を介してのQ2D×5〜9、6時間iv注入を使用して、9,10-デヒドロ-エポチロンの抗腫瘍効力および毒性を評価した。完全な腫瘍成長抑制、腫瘍縮小および消失を達成するための能力により、治療を止めた後の再発速度および治癒率を決定するためのさらなる研究が可能であった。in vitroで知られている最も強力で、高度に有効なエポチロンである9,10-デヒドロ-EpoBは、in vivoで狭い治療安全性マージンを示した。4mg/kgでの9,10-デヒドロ-dEpoB、0.4mg/kgでの9,10-デヒドロ-EpoBおよび3mg/kgでの21-ヒドロキシ-9,10-デヒドロ-dEpoBは全て、長期間にわたって腫瘍成長を強力に抑制し、多少の腫瘍縮小を達成し、腫瘍消失を多少達成した。30mg/kgでのdEpoB、20mg/kgでの26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBおよび20mg/kgでのパクリタクセルは全て、腫瘍成長の強力な抑制を示し、試験された全てのマウスでのヒト乳癌MX-1異種移植片の腫瘍縮小および消失を達成した。26-トリフルオロ-9,10-デヒドロ-dEpoBは、dEpoBまたはパクリタクセルと比較すると、腫瘍再発を伴うことなく長期の治癒を達成し、治療前対照レベルに等しい迅速な体重回復を示した。
【０３１１】
(実施例13)
シクロプロピル-エポチロン類似体の合成
【０３１２】
【化９４】
2011195589.tif 000105
【図１】
2011195589.tif 000121
【図２】
2011195589.tif 000122
【図３】
2011195589.tif 000123
【図４】
2011195589.tif 000124
【図５Ａ】
2011195589.tif 000125
【図５Ｂ】
2011195589.tif 000126
【図６Ａ】
2011195589.tif 000127
【図６Ｂ】
2011195589.tif 000128
【図６Ｃ】
2011195589.tif 000129
【図７】
2011195589.tif 000130
【図８】
2011195589.tif 000131
【図９】
2011195589.tif 000132
【図１０】
2011195589.tif 000133
【図１１】
2011195589.tif 000134
【図１２】
2011195589.tif 000135
【図１３】
2011195589.tif 000136
【図１４】
2011195589.tif 000137
【図１５】
2011195589.tif 000138
【図１６】
2011195589.tif 000139
【図１７】
2011195589.tif 000140
【図１８】
2011195589.tif 000141
【図１９】
2011195589.tif 000142
【図２０】
2011195589.tif 000143
【図２１】
2011195589.tif 000144
【図２２】
2011195589.tif 000145
【図２３】
2011195589.tif 000146
【図２４】
2011195589.tif 000147
【図２５】
2011195589.tif 000148
【図２６】
2011195589.tif 000149
【図２７】
2011195589.tif 000150
【図２８】
2011195589.tif 000151
【図２９】
2011195589.tif 000152
【図３０】
2011195589.tif 000153
【図３１】
2011195589.tif 000154
【図３２】
2011195589.tif 000155
【図３３】
2011195589.tif 000156
【図３４】
2011195589.tif 000157
【図３５】
2011195589.tif 000158
【図３６】
2011195589.tif 000159
【図３７】
2011195589.tif 000160
【図３８】
2011195589.tif 000161
【図３９】
2011195589.tif 000162
【図４０】
2011195589.tif 000163
【図４１】
2011195589.tif 000164
【図４２】
2011195589.tif 000165
【図４３】
2011195589.tif 000166
【図４４】
2011195589.tif 000167
【図４５】
2011195589.tif 000168
【図４６】
2011195589.tif 000169
【図４７】
2011195589.tif 000170
【図４８】
2011195589.tif 000171
【図４９】
2011195589.tif 000172
【図５０】
2011195589.tif 000173
【図５１】
2011195589.tif 000174
【図５２】
2011195589.tif 000175
【図５３】
2011195589.tif 000176
【図５４】
2011195589.tif 000177
【図５５】
2011195589.tif 000178
【図５６】
2011195589.tif 000179
【図５７】
2011195589.tif 000180
【図５８】
2011195589.tif 000181
【図５９】
2011195589.tif 000182
【図６０Ａ】
2011195589.tif 000183
【図６０Ｂ】
2011195589.tif 000184
【図６１】
2011195589.tif 000185
【図６２】
2011195589.tif 000186
【図６３】
2011195589.tif 000187
【図６４】
2011195589.tif 000188
【図６５】
2011195589.tif 000189
【図６６】
2011195589.tif 000190
【図６７】
2011195589.tif 000191
【図６８】
2011195589.tif 000192
【図６９】
2011195589.tif 000193
【図７０】
2011195589.tif 000194
【図７１】
2011195589.tif 000195
【図７２】
2011195589.tif 000196
【図７３】
2011195589.tif 000197
【図７４】
2011195589.tif 000198
【図７５】
2011195589.tif 000199
【図７６】
2011195589.tif 000200
【図７７】
2011195589.tif 000201