(57)【要約】【課題】発芽玄米に含有されるステロール配糖体に着目し、その新しい作用機序について、明らかにする。【解決手段】発芽玄米由来のステロール配糖体を有効成分とする抗老化剤。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
発芽玄米由来のステロール配糖体を有効成分とする抗老化剤。
【請求項２】
発芽玄米由来のステロール配糖体が、発芽玄米糠由来のステロールであることを特徴とする請求項１記載の抗老化剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載された抗老化剤を含有する飲食品。
【請求項４】
請求項１又は２に記載された抗老化剤を含有するペットフード。
【請求項５】
発芽玄米由来のステロール配糖体を有効成分とする持久力向上剤。
【請求項６】
発芽玄米由来のステロール配糖体が、発芽玄米糠由来のステロールであることを特徴とする請求項５記載の持久力向上剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、安全な抗老化経口剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
戦前、戦後の貧しい食事パターンの時代の主要な死因は感染症や脳卒中であったが、経済の高度成長期を境に食が豊かになると、総摂取エネルギーに対する脂質エネルギー比率が高くなり、動物性脂質摂取やリノール酸の摂取増加、身体活動量の低下を背景として、内臓脂肪型肥満を基礎とした代謝障害が増加し、主要な死因は悪性新生物、心血管疾患や脳血管疾患が上位を占める構造に変化した。特に内臓脂肪に起因する炎症反応と、それによってもたらされる代謝障害が問題視され、健康寿命を延ばすための研究が多く実施されている。
【０００３】
ＩＧＦ−１は中枢神経疾患（アルツハイマー病などの認知症など）、心血管系疾患（心筋梗塞、脳梗塞、高血圧など）、代謝異常疾患（肥満、糖尿病、脂質異常症など）、消化器・内臓疾患（潰瘍、肝機能低下など）、運動器疾患（関節リウマチ、関節炎など）、皮膚化領域疾患（皮膚老化、脱毛など）、免疫賦活作用（NK細胞活性化など）など、多岐に渡り関与することが知られている。例えば、インスリン様成長因子（ＩＧＦ−1）のレベル上昇による内臓脂肪の低下方法のようにＩＧＦ−１のレベルを高める技術（特許文献１）をはじめ、抗老化や疾病予防、治療などへの応用としてのＩＧＦ−１の利用が注目されている。
【０００４】
ヒトや動物（ウシや豚など）由来や人工的に合成されたＩＧＦ−１そのものを投与することは、ポリペプチドであるＩＧＦ−１の特性上、経口的に投与することは困難であり、注射剤として使用されている。しかしながら、注射剤の場合は、医師の監視下で行われるため、汎用性のある手段とはいえず、製剤に混入する不純物によっては副作用をきたす可能性もあり、一般的に利用するには問題があった。
【０００５】
安全性を重視して、生体が本来もっている機能を賦活化してＩＧＦ−１レベルを高める技術が公開されている。具体的なＩＧＦ−１の有用性に関連した先行技術は、例えば、糖尿病に有効な組成物として食品たんぱく質を利用し、生体内でＩＧＦ−１を誘導する技術（特許文献２）、同じく食品たんぱく質を利用するものとして、加齢に伴う諸症状（肌荒れ、肌艶、肌の張りの低下、しみ、そばかすの増加、気力の低下など）の緩和としてサケの卵巣膜をプロテアーゼ処理し抽出したＩＧＦ−１値上昇剤（特許文献３）、肌荒れ改良剤（特許文献４）、末梢血液循環を改善する加速度脈波加齢指数上昇剤（特許文献５）がある。また、カルシトニン遺伝子関連ペプチドを介してＩＧＦ−１を誘導するカルシトニン遺伝子関連ペプチド産生及び放出促進作用を有する胃粘膜傷害予防・治療用可食性組成物および育毛用可食性組成物（特許文献６）、育毛や美容効果を持った植物由来の苦味配糖体ゲンチオピクリンを含んだＩＧＦ−１産生促進剤（特許文献７）、老化による皮膚のしわ、たるみを軽減するα-Ｄ-グルコピラノシルグリセロールを含有するＩＧＦ−１産生促進剤（特許文献８）が公知となっている。
【０００６】
しかしながら、食品たんぱく質をベースとしたものや苦味配糖体、イソフラボノイド類、カプサイシンなどＩＧＦ−１産生を促進する従来技術は、におい、苦味、辛味、渋みなどの特徴から利用を継続するにはなお課題を残していた。
また、ＩＧＦ−１を産生促進するために多量の炭酸ガスナノバブルを発生させる技術として、血流量およびインスリン様成長因子増加装置、並びに血流量およびインスリン様成長因子増加方法（特許文献９）が公知となっているが、コストの面から、汎用性に問題がある。
【０００７】
本出願人、本発明者等は、発芽玄米に着目して、研究開発を続けており、発芽玄米そのものの開発及び発芽玄米に含まれている成分の機能に関する発明など多数の提案をしている。
機能成分に着目した提案として、例えば、特許文献１０（特開２００８−２６６３２６号公報）は、発芽玄米全脂質画分を有効成分とする神経障害若しくは糖尿病性神経障害予防若しくは改善剤を提案している。
特許文献１１（特開２００６−３１６０１８号公報）は、発芽玄米の糠から抽出したアリラトースBを含有するグルココルチコイド受容体拮抗剤、アドレナリンβ３受容体作動剤が提案されている。
特許文献１２（特開２００６−３１６０１６号公報）は、発芽玄米の糠から抽出した特定の化学構造のリゾホスファチジルコリンを含有するインスリン受容体作動剤が提案されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特表２００７−５０２８３４号公報
【特許文献２】特許３１３７２７３号公報
【特許文献３】特許３９４６２３８号公報
【特許文献４】特許３８９９１１６号公報
【特許文献５】特許３９４６２３９号公報
【特許文献６】特許４２１３６１７号公報
【特許文献７】特開２００９−１９６９８９号公報
【特許文献８】特開２００９−１６１４７５号公報
【特許文献９】特開２００８−２１４２０７号公報
【特許文献１０】特開２００８−２６６３２６号公報
【特許文献１１】特開２００６−３１６０１８号公報
【特許文献１２】特開２００６−３１６０１６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明者は、発芽玄米に含有されるステロール配糖体画分に着目し、その新しい作用機序について、明らかにすることを本発明の課題とする。特に、安全な抗老化経口剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
すなわち、本発明の主な構成は、次のとおりである。
１．発芽玄米由来のステロール配糖体を有効成分とする抗老化経口剤。
２．発芽玄米由来のステロール配糖体が、発芽玄米糠由来のステロールであることを特徴とする１．記載の抗老化経口剤。
３．１．又は２．に記載された抗老化経口剤を含有する飲食品。
４．１．又は２．に記載された抗老化経口剤を含有するペットフード。
５．発芽玄米由来のステロール配糖体を有効成分とする持久力向上剤。
６．発芽玄米由来のステロール配糖体が、発芽玄米糠由来のステロールであることを特徴とする５．記載の持久力向上剤。
【発明の効果】
【００１１】
本発明は、発芽玄米由来のステロール配糖体にＩＧＦ−１を増加させ、寿命延長効果があることを明らかにした。特に、発芽玄米由来のステロール配糖体は、発芽玄米の糠の部分より抽出して利用することができる。
この発芽玄米由来のステロール配糖体を医薬、飲食品等の形態で摂取することにより、老化を抑制し、寿命の延長を図ることができる。これは、ペット用としても活用できる。また、発芽玄米由来であるので、安全性が高く、風味にも問題ないことから、ＩＧＦ−１増加作用を奏することで抗老化作用を高め、健康寿命延長に効果を発揮できる。
発芽玄米由来のステロール配糖体を摂取することにより持久力が改善することが確認できた。特に、老化が進んだ状態での持久力が向上・維持できる。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】寿命延長を示すグラフ。
【図２】遊泳時間を示すグラフ
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明に使用する発芽玄米から抽出されたステロール配糖体画分（以下「ＡＳＧ画分」と称する場合がある）は、発芽玄米から得た糠をヘキサンで中性脂質を除去し、得られた残渣をさらに有機溶媒にて抽出した総脂質画分に含まれ、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）で分離・濃縮することが出来る。
本発明は、このＡＳＧ画分を有効成分とする安全な抗老化剤である。投与方法は、経口、皮内、皮下、静脈内、筋肉内により行うことができ、医薬、飲食品、食品添加剤、ペット用の医薬剤、ペット用飼料の添加剤として活用することができる。通常食用にしている発芽玄米由来の成分であるので、安全性が高い。
ＡＳＧ画分は、発芽玄米の糠成分から極微量抽出される成分であるので、ＡＳＧ画分を医薬あるいは飲食品、ペット用医薬や飼料に応用する場合は、抽出されたＡＳＧ画分そのものを使用するのであって、発芽玄米そのものあるいは発芽玄米の粉末などＡＳＧ画分を抽出する前の状態で使用することは想定されていない。
【００１４】
本発明は、抗老化剤、食品添加物、食品およびペットフード、動物用医薬として利用することができる。剤型は、公知の方法により助剤とともに任意の形態に製剤化して、経口投与することができる。カプセル剤又は錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、液状として投与できる。
投与量は、投与方法と、患者の年齢、病状や一般状態等によって変化し得るが、動物試験の結果より成人では体重１kg当たり通常、１日当たりの有効成分として0.4〜600mgが妥当である。
【００１５】
本発明の抗老化剤は、一般食品や健康食品に配合することができ、また、食品添加物の成分とすることもできる。配合する食品は特に限定されず、例えば食パン、菓子パン、パイ、デニッシュ、ドーナツ、ケーキ等のベーカリー食品、うどん、そば、中華麺、焼きそば、パスタ等の麺類、天ぷら、コロッケ等のフライ類、カレー、シチュー、ドレッシング等のソース類、ふりかけ類、かまぼこ等の練り製品、ジュース等の飲料、スナック菓子、米菓、飴、ガム等の菓子類を挙げることができる。
ペットには、犬、猫、ハムスター、リス等の哺乳類の飼料として適している。本発明のペットフードの形態は特に限定されるものではなく、例えばドライタイプ、ウェットタイプ、セミモイストタイプ、ビスケットタイプ、ソーセージタイプ、ジャーキータイプ、粉末、顆粒、カプセルなどが挙げられる。
【００１６】
＜発芽玄米由来のステロール配糖体画分＞
１．糠成分を採取する発芽玄米は、公知の方法により調製することができる。本出願人は、発芽玄米について多数の提案をしており、例えば、特許第３４２３９２７号公報、特許第３６１１８０４号公報、特許第３７３８０２５号公報等に開示された発芽玄米の製法によって得ることができる。
試験に用いたＡＳＧ画分の抽出は発芽玄米約2,000kgを搗精して得られた糠200kg（搗精度10％）を用いて行った。
【００１７】
２．本出願人は、先に、発芽玄米から抽出したステロール配糖体を国際公開（WO2009/110612）として提案した。本願発明で使用するＡＳＧ画分は、このステロール配糖体を含んでいることが判明している。このステロール配糖体をＡＳＧと略称する。このＡＳＧは、抗老化作用があることを解明した。
【００１８】
[老化促進マウス（ＳＡＭＰ−８）を用いた評価]
発芽玄米に含有されるステロール配糖体画分を老化促進マウス（ＳＡＭＰ−８）に投与し、生存率、抗老化因子のＩＧＦ−１レベルを評価し、抗老化作用への影響について検討した。
【００１９】
＜ＡＳＧ画分の調製例＞
玄米糠及び発芽玄米糠をヘキサンで脂質成分中の中性脂質を除去後、それぞれの残渣につき、ヘキサン、クロロホルム及びメタノールを用いてＡＳＧ画分の粗抽出液を調製した。このＡＳＧ抽出液からクロロホルム：メタノール（２：１）混合液で抽出し、シリカゲル担体カラムクロマトグラフィーによって、ＡＳＧ画分の調製を行った。試験に用いたＡＳＧ画分の抽出は発芽玄米約2,000kgを搗精して得られた糠200kg（搗精度10％）を用いて行った。
米糠（500g）が浸る量のヘキサンを加え十分に撹拌した後ガーゼでろ過を行い、脱脂糠を得た。その後、ヘキサンを揮発させた脱脂糠を1.5 kgに対してクロロホルム:メタノール２：１を（3L）加えて総脂質画分(TL)を抽出し、抽出液をエバポレーターで乾固させ乾固物を得た。
【００２０】
乾固物は300mlのクロロホルム：ヘキサン＝１：１に溶解し、クロロホルムで膨潤させた直径 10cm×長さ 100cm (メルク社製シリカゲル60を80cm充填)のカラムに全溶解液をアプライした。溶液がイアトロビーズに全てしみ込んだ後、クロロホルム：ヘキサン＝１：１(7,840ml)、クロロホルム(20,160ml)、クロロホルム:メタノール=９：１(10,080ml)の順でそれぞれを通液した。クロロホルム:メタノール=９：１の通液により分離した暗緑色の溶液だけを全て採取した。
採取した暗緑色の溶液はエバポレーターで乾固させ試験に供した。以下に各ポイントでの収量を示す。
【００２１】
【表１】
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【００２２】
［ＡＳＧ分析］
抽出したＡＳＧ画分の分析は以下の条件で行った。この分析の結果、最終乾固物には、ＡＳＧが72.6％含まれていることが判明した。
分析条件
検出器    ：Crona（TM）  CAD（TM）  Charged  Aerosol  Detector
カラム    ：LiChrospher Si 60（5μm，125×4mm  i.d.,Merck）
カラム温度：40度
流  速    ：1ｍL/min.
注入量    ：10μL
サンプル溶媒：クロロホルム：メタノール（２：１，vol/vol）
検量線濃度  ：10，20，40，60及び80μg/mL
移動相、グラジェント条件(表２参照)
【００２３】
【表２】
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【００２４】
＜動物試験（１）＞
［試験動物・飼料］
試験には８週齢の雄性老化促進マウス（ＳＡＭＰ−８）を用いた。被験飼料は、上述の方法で分取したＡＳＧ画分をAIN93G食に0.079％及び0.794％を添加し、重量調整はいずれもコーンスターチで行った。被験飼料の組成を表３に示す。なお、AIN93G食は、米国国立栄養研究所（ＡＩＮ）から１９９３年に発表されたマウス・ラットを用いた標準精製飼料をさす。
【００２５】
【表３】
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【００２６】
［投与・試料採取］
群分けは、一般状態が良好な個体を各群の平均体重に差がないよう無作為に３群（白米飼料群、低ＡＳＧ飼料群及び高ＡＳＧ飼料群）に振り分け実施した。飼料は粉末給餌とし、群分け後から、それぞれの被験飼料を105日間自由摂取させた。また、分取したＡＳＧ画分は、AIN93Gをベースとした７％脂肪食に0.079％及び0.794％を添加して給餌した。なお、ＡＳＧ画分の影響を比較検討するために、白米飼料で飼育したマウスを対照とした。
【００２７】
［測定］
一般状態の観察は群分け日から投与終了翌日の採血・解剖日までの105日間毎日行い、死亡した個体については記録を行い、生存率を算出した。投与終了翌日には４時間以上絶食を行い、エーテル麻酔下で採血を実施した。採血した血液は血漿を分離し、各種項目血液成分の測定用とした。
【００２８】
〔統計解析〕
各評価項目は、一元配置分散分析後、有意差があった場合には、多重比較検定としてTukey検定を実施した。各群間の有意水準はP<0.05とした。 
【００２９】
［測定結果］
白米飼料群では105日間飼育後には、試験開始時に比較して生存率が約６割になっていたのに対して、低ＡＳＧ飼料、高ＡＳＧ飼料を摂取していた群では試験期間中に死亡する個体は見られなかった（図１）。
【００３０】
〔測定結果〕
屠殺時の血中ＩＧＦ−１濃度は白米飼料摂取群と比較して、低ＡＳＧ飼料群、高ＡＳＧ飼料群では有意に上昇していた
【００３１】
【表４】
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【００３２】
＜動物試験（２）＞
順化期間３週間を経た８週齢の雄性老化促進マウス（ＳＡＭＰ−８）を用いて、ＡＳＧ画分が、老齢マウスの持久力に及ぼす作用機序を検討した。飼料は表３に示す３種類を用いたほかの飼育条件は先に記載した動物試験（１）と同様とした。
［持久力評価試験］
運動量測定試験は、試験終了(屠殺実施)1週間前に実施した。具体的には半径25cmの円筒形の筒の中に25℃の水を水深14cmとなるように満たし、その中でマウスを5分間遊泳させた。マウスの遊泳時間(動時間)を測定することにより運動時間とした。
【００３３】
試験結果はKruskal-Wallis検定を行い、各群間に有意差が認められた場合には多重比較検定としてSteel-Dwass検定を実施した。*<0.05, **<0.01として試験結果を図２に示す。
試験結果は、白米飼料群に比べて、低ＡＳＧ飼料群及び高ＡＳＧ飼料群は有意に遊泳時間が長いことが示された。
したがって、強制的な運動環境設定した本試験において、遊泳時間が延びたことは、それぞれの個体の持久力を示しているものである。一般食にあたる白米飼料に比べて、発芽玄米糠から抽出したＡＳＧ飼料を投与した個体は持久力が向上していることを示していることとなる。
【００３４】
以下に本発明のＡＳＧ画分を用いた処方例を示す。
処方例１
[カプセル剤]
組成
ＡＳＧ乾固物                                …１００ｍｇ
ミツロウ                                    …１０ｍｇ
ぶどう種子オイル                            …１１０ｍｇ
上記成分を混合し、ゼラチンおよびグリセリンを混合したカプセル基剤中に充填し、軟カプセルを得た。
【００３５】
処方例２
[錠剤]
組成
ＡＳＧ乾固物                                …１５０ｍｇ
セルロース                                  …８０ｍｇ
デンプン                                    …２０ｍｇ
ショ糖脂肪酸エステル                         …２ｍｇ
上記成分を混合、打錠し、錠剤を得た。
【００３６】
処方例３
[飲料]
（組      成）                                  （配合；質量％）
果糖ブトウ糖液糖                                      ５．００
クエン酸                                            １０．４
Ｌ−アスコルビン酸                                    ０．２０
香料                                                  ０．０２
色素                                                  ０．１０
ＡＳＧ乾固物                                          １．００
乳化剤                                                ０．３０
水                                                  ８１．９８
【図２】
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【図１】
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