(57)【要約】【課題】  本発明の目的は、（微）粒子の損失を低減し、かつ表面の活性基の失活を低減することができる粒子保存容器および粒子の保存方法を提供することにある。【解決手段】  本発明の粒子保存容器は、先端側に先細り形状をなす突出部、基端側に基端開口部をそれぞれ有し、内部に粒子を保存する筒状の容器本体と、前記基端開口部を封止する封止部材と、前記容器本体の内部に配置され、かつ前記突出部の突出開口部を封止する棒状体と、を有することを特徴とする。また、本発明の粒子の保存方法は、先端側に先細り形状をなす突出部、基端側に基端開口部をそれぞれ有し、内部に粒子を保存する筒状の容器本体の内部に、棒状体を挿入して前記突出部の突出開口部を封止した容器に、粒子を充填する充填工程と、前記粒子を充填後に、前記基端開口部を封止する封止工程と、を有することを特徴とする。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
先端側に先細り形状をなす突出部、基端側に基端開口部をそれぞれ有し、内部に粒子を保存する筒状の容器本体と、
前記基端開口部を封止する封止部材と、
前記容器本体の内部に配置され、かつ前記突出部の突出開口部を封止する棒状体と、を有することを特徴とする粒子保存容器。
【請求項２】
前記棒状体は、本体部と、先端側に縮径部とを有しているものである請求項１に記載の粒子保存容器。
【請求項３】
前記棒状体の基端部が、封止部材に着脱可能に固定されている請求項１または２に記載の粒子保存容器。
【請求項４】
前記封止部材が、前記容器本体に着脱可能な蓋体である請求項１ないし３のいずれかに記載の粒子保存容器。
【請求項５】
前記突出部の基端側に、保存する粒子は通過しないが保存液が通過可能なフィルターが設けられているものである請求項１ないし４のいずれかに記載の粒子保存容器。
【請求項６】
前記フィルターは、ほぼ円形状であり、その中心部に前記棒状体を貫通可能な貫通穴を有しているものである請求項５に記載の粒子保存容器。
【請求項７】
先端側に先細り形状をなす突出部、基端側に基端開口部をそれぞれ有し、内部に粒子を保存する筒状の容器本体の内部に、棒状体を挿入して前記突出部の突出開口部を封止した容器に、粒子を充填する充填工程と、
前記粒子を充填後に、前記基端開口部を封止する封止工程と、を有することを特徴とする粒子の保存方法。
【請求項８】
前記充填工程と、前記封止工程との間に、保存する粒子は通過しないが保存液が通過可能なフィルターを、粒子が容器本体の基端側に移行しないように配置する工程を有するものである請求項７に記載の粒子の保存方法。
【請求項９】
請求項１ないし６のいずれかに記載の粒子保存容器を用いることを特徴とする生化学試料の検査方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、粒子保存容器、粒子の保存方法および生化学試料の検査方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
抗体ビーズ、レクチンビーズ、アビジンビーズ、ビオチンビーズ、ヒドラジドビーズなど表面を活性化させた微粒子が多数市販されている（例えば、非特許文献１参照）。しかし、それらの大半は水溶液あるいは有機溶媒の分散液として保存し、使用時に必要量分取するという使用方法である（例えば、特許文献１参照）。しかし、微粒子のような固体を液体中に均一に分散させるのは困難であり、使用毎に分取量が変化してしまう。また、処理する検体数が多い場合、分散液を反応容器に移すのに手間がかかるという欠点があった。
【０００３】
この様な背景から、あらかじめ一定量の微粒子が反応容器に保存された状態での提供が求められる。カラムにあらかじめ微粒子が封入された状態で販売されている例もあるが、分散液での保存、乾燥状態での保存ともに容器の表面等に付着してしまうことで一部の微粒子を損失してしまう場合があった。また、微粒子を封入している容器から他の別の容器に移したい場合、微粒子を完全に回収するのに手間がかかる上、一部の微粒子を損失する場合があった。特に、少量の微粒子を反応に用いるような系の場合、そのことが原因で結果にばらつきが生じやすくなってしまう。
【０００４】
そこで、微粒子の損失を低減し、且つ、表面の活性基を失活させることなく保存する方法が必要とされる。また、保存した微粒子を容易に他の反応容器に持ち込むことが可能な方法が必要である。さらに、ハイスループット処理を可能にするためには、多検体処理に向いている使用法であったり、自動化に対応可能な使用法であったりすることが必要となる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】ナノアフィニティビーズのすべて  半田宏、川口春馬  著  中山書店
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特表２００８−５３６８２１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、（微）粒子の損失を低減し、かつ表面の活性基の失活を低減することができる粒子保存容器および粒子の保存方法を提供することにある。
また、本発明の別の目的は、上述の保存容器を用いた効率の良い生化学試料の検査方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
このような目的は、下記（１）〜（９）に記載の本発明により達成される。
（１）先端側に先細り形状をなす突出部、基端側に基端開口部をそれぞれ有し、内部に粒子を保存する筒状の容器本体と、前記基端開口部を封止する封止部材と、前記容器本体の内部に配置され、かつ前記突出部の突出開口部を封止する棒状体と、を有することを特徴とする粒子保存容器。
（２）前記棒状体は、本体部と、先端側に縮径部とを有しているものである上記（１）に記載の粒子保存容器。
（３）前記棒状体の基端部が、封止部材に着脱可能に固定されている上記（１）または（２）に記載の粒子保存容器。
（４）前記封止部材が、前記容器本体に着脱可能な蓋体である上記（１）ないし（３）のいずれかに記載の粒子保存容器。
（５）前記突出部の基端側に、保存する粒子は通過しないが保存液が通過可能なフィルターが設けられているものである上記（１）ないし（４）のいずれかに記載の粒子保存容器。
（６）前記フィルターは、ほぼ円形状であり、その中心部に前記棒状体を貫通可能な貫通穴を有しているものである上記（５）に記載の粒子保存容器。
（７）先端側に先細り形状をなす突出部、基端側に基端開口部をそれぞれ有し、内部に粒子を保存する筒状の容器本体の内部に、棒状体を挿入して前記突出部の突出開口部を封止した容器に、粒子を充填する充填工程と、前記粒子を充填後に、前記基端開口部を封止する封止工程と、を有することを特徴とする粒子の保存方法。
（８）前記充填工程と、前記封止工程との間に、保存する粒子は通過しないが保存液が通過可能なフィルターを、粒子が容器本体の基端側に移行しないように配置する工程を有するものである上記（７）に記載の粒子の保存方法。
（９）上記（１）ないし（６）のいずれかに記載の粒子保存容器を用いることを特徴とする生化学試料の検査方法。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、（微）粒子の損失を低減し、かつ表面の活性基の失活を低減することができる粒子保存容器および粒子の保存方法を得ることができる。
また、本発明によれば、上述の保存容器を用いた効率の良い生化学試料の検査方法を得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】本発明の粒子保存容器の断面図である。
【図２】本発明の粒子保存容器を説明するための説明図である。
【図３】蓋体を説明する断面図である。
【図４】本発明の粒子保存容器の断面図である。
【図５】本発明の粒子の保存方法を説明する説明図である。
【図６】本発明の粒子保存容器の断面図である。
【図７】実施例１の保存容器内に保存をしたビーズを用いて作製した、２−ＡＢ標識ウシ由来ＩｇＧ糖鎖を高速液体クロマトグラフィにより測定した結果を示すチャート図である。
【図８】実施例１で用いたヒドラジドビーズを、上述した粒子保存容器内で保存することなく、直ぐに標識化糖鎖の検出を行った結果を示すチャート図である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、粒子保存容器、粒子の保存方法および生化学試料の検査方法について詳細に説明する。
本発明の粒子保存容器は、先端側に先細り形状をなす突出部、基端側に基端開口部をそれぞれ有し、内部に粒子を保存する筒状の容器本体と、前記基端開口部を封止する封止部材と、
前記容器本体の内部に配置され、かつ前記突出部の突出開口部を封止する棒状体と、を有することを特徴とする。
また、本発明の粒子の保存方法は、先端側に先細り形状をなす突出部、基端側に基端開口部をそれぞれ有し、内部に粒子を保存する筒状の容器本体の内部に、棒状体を挿入して前記突出部の突出開口部を封止した容器に、粒子を充填する充填工程と、前記粒子を充填後に、前記基端開口部を封止する封止工程と、を有することを特徴とする。
また、本発明の生化学試料の検査方法は、上記に記載の粒子保存容器を用いることを特徴とする。
【００１２】
（粒子保存容器）
＜第１実施形態＞
まず、粒子保存容器について、図１〜３に示す好適な実施形態に基づいて詳細に説明する。なお、図中の上側を基端側、下側を先端側として説明する。
【００１３】
図１に示すように粒子保存容器１００は、筒状の容器本体１と、封止部材としての蓋体２と、棒状体３とで構成されている。
図２に示すように、筒状の容器本体１は、突出開口部１１１を有する先細り形状をなす突出部１１と、基端が開口した基端開口部１２とを有している（図２ａ）。これにより、粒子を基端開口部１２から充填し、突出部１１の突出開口部１１１より排出するのが容易となる。容器本体１は、円筒状であり（図２ｂ）、容器本体１の基端側の内径は、基端開口部１２とほぼ同じ内径で、先端側まで連続している。また、容器本体１の先端側の内径は、漏斗状に縮径しており、細い基端開口部１２の内径よりも小さくなっている（図２ａ）。
【００１４】
容器本体１の形状は、図１に示す実施形態では円筒状であるが、これに限定されず角筒状でも良いが、円筒状（より具体的にはチューブ状）であることが好ましい。このような容器本体１の幅は、特に限定されないが、幅０．５ｍｍ〜５０ｍｍが好ましく、より好ましくは１ｍｍ〜２０ｍｍであり、さらに好ましくは１．５ｍｍ〜１０ｍｍである。
また、長さ（突出部１１を含む全体の長さ）は、特に限定されないが、２．５ｍｍ〜２００ｍｍが好ましく、より好ましくは５ｍｍ〜１００ｍｍである。容器本体１のサイズが前記範囲内であると、特に生体試料由来のサンプルのように少量のサンプルを扱う際のサンプル損失を最小限に抑えることができる。
【００１５】
突出部１１の突出開口部１１１の内径は、保存する粒子の大きさに依存して特に限定されないが、０．１〜１０ｍｍが好ましく、特に０．２〜５ｍｍが好ましく、最も０．５〜３ｍｍが好ましい。突出開口部１１１の内径が前記範囲内であると、特に粒子の排出を効率良く実施することができる。
また、突出部１１の長さも特に限定されないが、１〜５０ｍｍが好ましく、特に２〜２５ｍｍが好ましく、最も３〜１５ｍｍが好ましい。突出部１１の長さが前記範囲内であると、微粒子の損失を最小限に抑えることができる。
【００１６】
容器本体１を構成する材料としては、例えばポリプロピレン、塩化ビニル、ポリカーボネート、ポリスチレン等の熱可塑性樹脂が挙げられる。これらの中でもポリプロピレンが好ましい。これにより、耐溶剤性を向上することができる。
【００１７】
容器本体１は、透明、半透明、不透明でも構わないが、透明または半透明であることが好ましい。これにより、容器内の状態の確認を容易にすることができる。
【００１８】
このような容器本体１は、例えば射出成形、切削加工等の方法により得ることができる。
【００１９】
蓋体２は、容器本体１に充填した粒子にゴミ等の不純物が混在するのを防止する機能、後述する棒状体３と一体化している場合には棒状体３を抜くのを容易にする機能等を有している。
図１および２に示す実施形態で蓋体２は、容器本体１に着脱可能となっている。
蓋体２は、円形状の天板２１と、天板２１の外周部に立設された円筒状の外周壁２２と、天板２１の内面の外周壁２２の内側に立設された円筒状の突起部２３とが、突起部２３のさらに内側に棒状体を固定するために立設された円筒状の固定部２４とを有している。外周壁２２と、突起部２３と、固定部２４とは、同心的に形成されている。突起部２３の高さは、外周壁２２よりも高くなっている。
外周壁２２と突起部２３との間の間隙２２１には、容器本体１の基端側の縁部が液密に嵌合するようになっている。
【００２０】
外周壁２２の外径は、特に限定されないが、容器本体１の外径の５０〜１５０％が好ましく、特に８０〜１２０％が好ましい。すなわち、蓋体２の外周壁２２が容器本体１の基端開口部１２内に嵌合するようなものであっても良い。
外周壁２２の高さも特に限定されないが１〜２０ｍｍが好ましく、特に５〜１０ｍｍであることが好ましい。
【００２１】
また、突起部２３の外径は、基端開口部１２の外径により異なるが基端開口部１２の７０〜９９．９％が好ましく、特に８０〜９９．５％が好ましい。突起部２３の外径が前記範囲内であると、特に粒子の保存性に優れる。
【００２２】
突起部２３の高さも外周壁２２の高さにより異なるが、１〜２０ｍｍが好ましく、特に２〜１０ｍｍであることが好ましい。
【００２３】
このような蓋体２は、例えばポリプロピレン、ポリエチレン等の熱可塑性の材料を用いて射出成形、切削加工等の方法で得ることができる
【００２４】
棒状体３は、容器本体１の内部に配置され、突出部１１の突出開口部１１１を封止する機能を有している。これにより、容器本体１に粒子を容易に保存することができる。
本実施形態で棒状体３は、円柱状であり、本体部３１と、先端側に縮径部３２とを有している。縮径部３２は、容器本体１の突出部１１の突出開口部１１１と嵌合するようになっている。したがって、縮径部３２の外径と突出開口部１１１の内径とが、ほぼ等しくなっている。具体的には、縮径部３２の外径は、突出部１１の突出開口部１１１の内径の７０〜１００％であることが好ましく、特に８０〜９９％であることが好ましい。縮径部３２の外径が前記範囲内であると、粒子の保存性と、着脱のし易さとのバランスに優れる。
また、縮径部３２により、粒子が突出開口部１１１より損失するのを抑制する効果を向上することができる。さらに、縮径部３２により、突出開口部１１１の基端側で位置決めがなされ、それによって棒状体３の設置安定性を向上することもできる。
【００２５】
棒状体３の本体部３１の基端部は、蓋体２の固定部２４と嵌合可能になっており、蓋体２と棒状体３とが、着脱可能に固定されている。これにより、粒子の充填と排出とを簡易に実施できるようになる。
【００２６】
棒状体３の長さは、容器本体１の長さに依存して異なるが、容器本体１の長さの５０〜１５０％が好ましく、特に７０〜１２０％が好ましい。棒状体３の長さが前記範囲内であると、特に棒状体３の取り外しに優れる。
【００２７】
棒状体３の本体部３１の外径は、特に限定されないが、容器本体１の内径の１〜５０％が好ましく、特に１０〜４０％が好ましい。外径が前記範囲内であると、特に棒状体３の取り外しに優れる。
【００２８】
このような棒状体３は、例えば金属、樹脂（プラスティック）等の材料を、成形、切削加工等の製法で得ることができる。
【００２９】
本発明の粒子保存容器１００は、上述したような容器本体１、蓋体２、棒状体３で構成されているが、これに限定されない。
例えば、基端部が角筒状であり、突出部１１のみが筒状であっても良い。
また、封止部材としては、シールテープ、綿栓等を用いても良い。
また、棒状体３としては、縮径部を有するものについて説明したが、これに限定されない。
【００３０】
また、本発明の粒子保存容器１００に保存する（微）粒子には、シリカ（微）粒子、高分子（微）粒子、金（微）粒子、セファロース（微）粒子、アガロース（微）粒子、セルロース（微）粒子等が挙げられる。これらの（微）粒子の中でも、表面に活性基としてアビジン、ビオチン、抗体、レクチン、カルボニル基、アミノ基、アミノオキシ基、ヒドラジド基、エステル基、マレイミド基およびチオール基のいずれか１種以上の活性基を有するものが好ましい。
また、本発明の粒子保存容器１００に保存する（微）粒子としては、生体由来物質を固定するために用いるようなものが好ましい。この粒子保存容器１００を用いることによって、（微）粒子を生体由来物質との反応に効率よく持ち込むことができる。より具体的には、アミノオキシ基およびヒドラジド基の少なくとも一方の活性基を有する（微）粒子を保存することが好ましい。
【００３１】
前記（微）粒子の平均粒子径は、特に限定されないが、０．１〜５００μｍが好ましく、特に１０〜１５０μｍであることが好ましい。平均粒子径が前記範囲内であると、（微）粒子の分散性に優れ、取り扱いが容易となる。
前記平均粒子径は、例えば粒度分布測定装置を用いて測定することができる。
【００３２】
＜第２実施形態＞
次に、図４を用いて第２実施形態について説明するが、前述した第１実施形態との相違点を中心に説明する。
図４に示すように第２実施形態における容器本体１では、突出部１１近傍に保存する粒子は通過しないが保存液が通過可能なフィルター４が設けられている。これにより、保存する粒子が基端開口部１２へ飛散する（蓋体２等へ付着する）のを防止することができる。
また、フィルター４は、棒状体３を引き抜いて（微）粒子を排出する際に棒状体３に付着する（微）粒子を除去する機能をも有している。
フィルター４は、その中央部に棒状体３が貫通可能な貫通穴（不図示）を有している。これにより、棒状体３を容器本体１の中心部で固定することが可能となり、蓋体２との着脱等を容易にすることができる。すなわち、フィルター４が中央部に貫通穴を有していることにより、棒状体３が容器本体１の中央部に固定されるようになり、蓋体２に設けられている棒状体３を固定する固定部２４と棒状体３との勘合を容易にできる。したがって、蓋体２を容器本体１に設置するだけで、蓋体２と棒状体３とを嵌合することができ、それによって次に蓋体２を着脱すると、棒状体３を容器本体１から引き抜くことができるようになる。
また、フィルター４の配置位置は、保存する粒子を収納可能な領域を確保できる位置であれば、特に限定されない。
【００３３】
フィルター４としては、粒子が通過できないものであることが好ましいので、前記平均粒子径を有する（微）粒子が通過しないものが好ましい。
具体的にフィルター４としては、例えば濾紙、綿、不織布、等が挙げられる。
【００３４】
第１実施形態および第２実施形態で説明した粒子保存容器１００は、例えば９６穴型マイクロプレートに適用可能なものであることが好ましい。これにより、作業性を特に向上することができる。
また、上述した粒子保存容器１００を、９６個（８個×１２個）連結して一体化したものであっても良い（図６）。図６は、粒子保存容器１００が容器本体１の側部で１２個連結されている状態を示すものである。このように、粒子保存容器１００を一体化（連結）させた場合、作業を効率良く進めるために個々の粒子保存容器１００間の間隔が既存のディスペンサーに対応していることが好ましい。
【００３５】
（粒子の保存方法）
次に、粒子の保存方法について、詳細に説明する。
まず、第１実施形態で説明した容器本体１を用いる場合について説明する。
容器本体１の突出開口部１１１に、棒状体３の先端部３１を挿入して、突出開口部１１１を（液密に）封止する（図５（ａ））。
【００３６】
次に、容器本体１の基端開口部１２より（微）粒子５を充填する（図５（ｂ））。充填する（微）粒子の充填量は、容器本体１のサイズに依存して特に限定されないが、容器本体１の容積の０．０１〜５０％程度とするのが好ましく、特に０．１〜２５％とするのが好ましい。これにより、生化学試料の検査を精度良く実施することができる。（微）粒子５のみを先に充填する場合、続いて保存液６を充填する。
なお、（微）粒子５は、予め保存液６に分散した状態で容器本体１に充填しても良いし、乾燥粒子の状態で充填しても良い。
【００３７】
前記保存液としては、例えば水、エタノール、メタノール等が挙げられる。これらの中でも水が好ましい。これにより、容器を構成する材料に対して耐溶剤性を考慮する必要が無くなり、容器選択の範囲を広げることができる。
【００３８】
そして、容器本体１の基端開口部１２を蓋体２で（機密に）封止する（図５（ｃ））。この際に、蓋体２の凹部（不図示）に棒状体３の基端部が挿入されて、棒状体３が蓋体２に固定される。
これにより、（微）粒子５が粒子保存容器１００の内部に保存されている状態になっている。
【００３９】
そして、この（微）粒子５を使用する際には、蓋体２を容器本体１より着脱することにより、蓋体２に固定されている棒状体３も共に、突出開口部１１１より引き抜かれることになる（図５（ｄ））。そのため、突出開口部１１１の封止が解かれ、開口することになる。したがって、この突出開口部１１１より粒子を排出することが可能となる。なお、突出開口部１１１の開口だけでは、（微）粒子５が容器本体１の内部に残存する場合は、さらに基端開口部１２より水等の溶液を流すことにより、（微）粒子５の排出を促進することができる。
【００４０】
これにより、上述した粒子保存容器１００を用いた本発明の粒子の保存方法により、（微）粒子５を粒子保存容器１００内に保存し、必要時に容易に使用することが可能となる。したがってハイスループット処理が可能な方式で、（微）粒子５を保存する方法を提供することができる。
さらに、上述した粒子保存容器１００を用いた本発明の粒子の保存方法により一定量の（微）粒子を反応容器に容易に導入することが可能となる。この際、従来問題となっていた（微）粒子の損失を低減することが可能である。また、微粒子を封入する部分を複数個連結させることで、作業の効率化も図れる。
【００４１】
また、粒子の保存方法において、第２実施形態で説明したフィルター４を有する粒子保存容器１００を用いる場合には、前述の（微）粒子５を充填した（図５（ｂ））後、蓋体２で基端開口部１２を封止する（図５（ｃ））前に、容器本体１の内部の突出部の基端側にフィルター４を、（微）粒子５が基端側に移行しないように配置する。これにより、保存する（微）粒子５が基端開口部１２へ飛散する（蓋体２等へ付着する）のを防止することができる。また、棒状体３を引き抜いて（微）粒子５を排出する際に棒状体３に付着する（微）粒子５を除去することもできる。
【００４２】
上述のように粒子の保存方法について、（微）粒子５と保存液６とが共存する状態での保存方法について説明したが、本発明はこれに限定されず、（微）粒子５が単独で粒子保存容器１００の内部に保存されても良い。
また、棒状体３と蓋体２とが固定されている実施形態について説明したが、これに限定されず、例えば棒状体３が単独で配置されており、封止部材としてシールテープ等を用いるものであっても良い。
【００４３】
（生化学試料の検査方法）
本発明の生化学試料の検査方法は、上述したような粒子保存容器１００を用いることを特徴とするものである。
例えば、粒子保存容器１００を用いた上述の粒子の保存方法で保存した後、回収された（微）粒子５を、生体試料と反応させて、（微）粒子５に特定の生物由来物質等を固定する。次に、この特定の生物由来物質が固定された（微）粒子５に、標識化工程、余剰試薬除去工程等を実施し、固定化された生物由来物質を検査する。
本発明の生化学試料の検査方法では、上述したような粒子保存容器１００を用いるので、（微）粒子５の損失を低減することができる。それによって、検査結果のバラツキを低減することができる。
さらに、棒状体３を引き抜くだけで（微）粒子５を回収することができるので、検査の作業効率を向上することもできる。
このような生化学試料の検査方法を実施する場合、（微）粒子５としてはポリマー粒子、金属粒子等を用いることが好ましい。
また、生体由来物質としては糖鎖、タンパク質、ＤＮＡ、ＲＮＡ、脂質等を挙げることができる。
【実施例】
【００４４】
以下、本発明を実施例および比較例に基づいて詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【００４５】
（実施例１）
（１）粒子保存容器の作製
容器本体の長さ３８ｍｍ、幅８．２ｍｍ、突出部の長さ２０ｍｍ、突出部の突出開口部の内径２．２ｍｍである容器本体を、原材料としてポリプロピレン（（株）プライムポリマー社製、品番Ｊ２３５Ｔ）を用いて射出成形で製造した。次に、突出部の突出開口部を封止する棒状体として、先端部の外径が２．２ｍｍのポリプロピレン製のピペットチップを準備した。そして、このピペットチップを、容器本体の突出部の突出開口部に挿入して、封止した。
【００４６】
（２）微粒子の封入・保存
上述の粒子保存容器１０個の内部に、ヒドラジドビーズ分散液（ポリマー粒子、球状、０．５ｍｇ／μＬ、ヒドラジド基保有、住友ベークライト社製、ＢＳ−４５６０３）５０μＬを分注した。そのうちの５個は分散液での保存確認用として使用し、残りの５個は凍結乾燥させ、乾燥微粒子の保存確認用として使用した。分散液保存、乾燥保存ともに、微粒子の上から少量の綿（フィルター）を配置してポリマー粒子が容器本体の外部に飛散するのを抑制した。基端開口部は、プレートシールを用いて封止して、冷蔵庫で１ヶ月間、保存した。
【００４７】
（３）微粒子の回収
次に、充填した微粒子の反応に使用する新たな反応容器（フィルターカラム、住友ベークライト社製、ＢＳ−４５６０３）を準備した。粒子保存容器の突出部の真下にフィルターカラムが来るように設置した。そして、粒子保存容器の棒状体（ピペットチップ）を引き抜いて、突出部の突出開口部を開放させ（突出開口部の封止を解除し）、粒子保存容器内の微粒子をフィルターカラムに排出した。さらに、粒子保存容器の内部に水２００μＬを加え、残った微粒子をフィルターカラムに排出した。保存容器内に微粒子が残っていないことを目視で確認した。分散液保存、乾燥保存ともに同様の処理を行った。最後に、フィルターカラムを遠心させフィルターカラム内に溜まった水を完全に排出させた。
これらのことより、本発明の粒子保存溶液を用いることにより、（微）粒子の損失を容易に低減することができることが分かった。
【００４８】
（４）微粒子の性能確認
（Ａ）試料の作製
ウシ免疫グロブリンＧ（ウシＩｇＧ）１ｍｇを１００ｍＭ（ミリモーラー）の重炭酸アンモニウム５０μＬに溶解させた後、１２０ｍＭ（ミリモーラー）のＤＴＴ（ジチオスレイトール）を５μＬ加え、６０℃で３０分間反応させた。反応終了後、１２３ｍＭ（ミリモーラー）のＩＡＡ（ヨードアセトアミド）１０μＬを加えて遮光下、室温で１時間反応させた。続いて４００Ｕのトリプシンによってプロテアーゼ処理をし、タンパク質部分をペプチド断片化した。反応溶液を９０℃で５分処理した後、５ＵのグリコシダーゼＦによる処理を行って糖鎖をペプチドから遊離させ、予備処理済の生体試料を得た。
【００４９】
（Ｂ）微粒子と生体試料の反応
微粒子が入ったフィルターカラムに、予備処理済の生体試料の懸濁物２０μＬおよび１８０μＬの２％酢酸／アセトニトリル溶液を加え、８０℃で１時間反応させ微粒子上のヒドラジド基に糖を固定させた。反応は開放系で行い、溶媒が完全に蒸発し微粒子が乾固した状態であることを目視で確認した。続いて、グアニジン溶液、水、メタノール、トリエチルアミン溶液にて微粒子を洗浄後、１０％無水酢酸／メタノールを添加し、室温で３０分間反応させ、未反応のヒドラジド基をキャッピングした。キャッピング後、メタノール、塩酸水溶液、水にて微粒子を洗浄した。微粒子の入ったフィルターカラムに、超純水２０μＬおよび２％酢酸／アセトニトリル溶液１８０μＬを加え、７０℃で１時間反応させ微粒子上の糖鎖を切り出した。反応は開放系で行い、溶媒が完全に蒸発し微粒子が乾固した状態であることを目視で確認した。
【００５０】
（Ｃ）標識化工程
微粒子および切り出した糖鎖の入ったフィルターカラムに、２−アミノベンズアミド（２−ＡＢ）およびシアノ水素化ホウ素ナトリウムの終濃度がそれぞれ０．３５Ｍ、１Ｍになるように３０％酢酸／ＤＭＳＯ混合溶媒に溶解させて調整した溶液５０μＬを添加し、６０℃で２時間反応させて、切り出した糖鎖を２−ＡＢで標識化した。
【００５１】
（Ｄ）余剰試薬除去工程
上述の溶液５０μＬを回収し、アセトニトリルで１０倍に希釈した後、標識化した糖鎖を付属のクリーンアップカラムに吸着させた。アセトニトリル、アセトニトリル／水混合溶液（９５：５）にてカラムを洗浄後、超純水５０μＬにて標識化した糖鎖を回収した。
【００５２】
（Ｅ）標識化した糖鎖の検出
得られた標識化した糖鎖をＨＰＬＣにて測定した。アミドカラム（ＴＳＫ−ＧＥＬ  Ａｍｉｄｅ−８０  ４．６＊２５０）を用いて励起波長３３０ｎｍ、蛍光波長４２０ｎｍにて測定した。溶媒Ａは５０ｍＭギ酸、２５％アンモニア水にてｐＨ４．４に調整したものを使用し、溶媒Ｂとしてアセトニトリルを使用し、溶媒Ａ液２０％（０ｍｉｎ）→Ａ液５８％（１５８ｍｉｎ）で送液した。カラム温度は３０℃で流速は０．４ｍＬ／ｍｉｎとした。図７に示すように、ウシＩｇＧ糖鎖由来ピークが観察された。
これより、本発明の粒子保存容器を用いることにより、微粒子が損失せずに容器内に保存可能であることが示された。
【００５３】
（参考例）
実施例１で用いたヒドラジドビーズを、上述した粒子保存容器内で保存することなく、直ぐに標識化糖鎖の検出を行った。得られた結果を、図８に示す。実線は、ウシＩｇＧ糖鎖由来ピークであった。
【００５４】
参考例の結果で得られたウシＩｇＧ糖鎖由来ピークと、実施例１で得られたウシＩｇＧ糖鎖由来ピークに大きな相違は無かった。
これより、本発明の粒子保存容器を用いて粒子を保存しても粒子表面の活性基の失活及び（微）粒子の損失がほとんどないことが分かった。
【００５５】
以上の結果より、本発明の粒子保存容器および粒子保存方法は、（微）粒子の損失を低減し、かつ表面の活性基の失活を低減することができることが示された。
また、本発明の生化学試料の検査方法によれば、上述したような粒子保存容器を用いるので、棒状体を着脱するだけで粒子の排出が可能となり、効率の良い生化学試料の検査方法を得ることができた。
【産業上の利用可能性】
【００５６】
本発明の粒子保存容器は、抗体ビーズ、レクチンビーズ、アビジンビーズ、ビオチンビーズ、ヒドラジドビーズ等の微粒子を一定量任意の容器に保存するのに使用できる。また、他の反応容器に微粒子の移し替えも容易に可能であり、例えば、９６穴型マイクロプレートに対応した保存容器形状とすることで、ハイスループットに微粒子の移し替えが可能となる。保存容器から微粒子を排出させる方法が単純なため、ロボットによる自動処理にも対抗が可能である。また、一連の操作により微粒子の有する活性基等を破壊することもない。使用毎に量り取る手間や、ロスを心配することなく微粒子を保存するのに適している。
【符号の説明】
【００５７】
１      容器本体
１１    突出部
１１１  突出開口部
１２    基端開口部
２      蓋体
２１    天板
２２    外周壁
２２１  間隙
２３    突起部
２４    固定部
３      棒状体
３１    本体部
３２    縮径部
４      フィルター
５      （微）粒子
６      保存液
１００  粒子保存容器
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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