(57)【要約】      （修正有）【課題】癌及びウイルス感染を治療するためのＩＬ−２１、そのアナログ及び誘導体を用いる併用療法を提供する。【解決手段】治療有効量のＩＬ−２１、そのアナログ及び誘導体を、（Ｉ）腫瘍細胞死又はウイルス感染細胞の死を誘導する物質、（ＩＩ）腫瘍細胞又はウイルス感染細胞に対する免疫応答を増強する物質、（ＩＩＩ）腫瘍細胞、転移又はウイルス感染細胞の蔓延を妨害する物質、（ＩＶ）内部予防物質、（Ｖ）組織因子アンタゴニスト及び凝固カケードに影響を及ぼす他の因子、及び（ＶＩ）免疫抑制剤／免疫調節剤からなる群から選択される１つ以上の化合物と一緒に用いて治療する方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体と、下記に列記するもののうちの１以上との組合せ：
Ｉ．  腫瘍細胞死またはウイルス感染細胞の死を誘導する物質：
ａ）一般的な化学療法；
ｂ）放射線治療；
ｃ）モノクローナル抗体；
ｄ）細胞周期制御／アポトーシスレギュレーター；
ｅ）増殖因子及びシグナル伝達モジュレーター；
ｆ）腫瘍血管新生阻害剤（血管形成阻害剤、抗血管形成薬）；
ｇ）ウイルスターゲティング（腫瘍細胞を死滅させるための組換えウイルスの使用）；
ｈ）抗ウイルス剤；
ｉ）ホルモン物質、
或いは
ＩＩ．  腫瘍細胞またはウイルス感染細胞に対する免疫応答を増強する物質：
ｊ）免疫系活性剤；
ｋ）抗アネルギー剤を含めた免疫系阻害剤（例えば、免疫応答を下方制御する免疫シグナルを阻害する物質）；
ｌ）治療用ワクチン、
或いは
ＩＩＩ．  腫瘍増殖、転移またはウイルス感染細胞の蔓延を妨害する物質：
ｍ）インテグリン、細胞接着分子調節剤；
ｎ）転移抑制剤；
ｏ）内皮細胞モジュレーター、
或いは
ＩＶ．  内部予防接種、
Ｖ．  組織因子アンタゴニスト及び凝固カスケードに影響を及ぼす他の因子：
ｐ）抗因子Ｘａ阻害剤、抗因子ＩＩａ阻害剤、抗線維素生成剤；
ｑ）五糖類等、
ＶＩ．  免疫抑制剤／免疫調節剤：
ｒ）Ｔリンパ球ホーミングに影響を及ぼす物質（例えば、ＦＴＹ−７２０）；
ｓ）カルシニューリン阻害剤；
ｔ）ＴＯＲ阻害剤。
【請求項２】
ヒトＩＬ−２１を含む請求項１に記載の組合せ。
【請求項３】
ＩＬ−２１のアナログを含む請求項１に記載の組合せ。
【請求項４】
ＩＬ−２１の誘導体を含む請求項１に記載の組合せ。
【請求項５】
組合せがデカルバジン（ＤＴＩＣ）を含む請求項１〜４の何れかに記載の組合せ。
【請求項６】
組合せが放射線治療を含む請求項１〜４の何れかに記載の組合せ。
【請求項７】
組合せが抗体、例えばリツキシマブ、アレムツズマブ、トラスツズマブ、ゲムツズマブ、ゲムツズマブ・オゾガミシン（マイロターグ（登録商標），Ｗｙｅｔｈ）、セツキシマブ（エルビタック（商標））、ベバシズマブ、ＨｕＭａｘ−ＣＤ２０、ＨｕＭａｘ−ＥＧＦｒ、ザミル、ペルツズマブ、組織因子に対する抗体、キラーＩｇ様受容体（ＫＩＲ）及びラミニン−５を含む請求項１〜４の何れかに記載の組合せ。
【請求項８】
組合せがリツキシマブを含む請求項７に記載の組合せ。
【請求項９】
組合せがセツキシマブを含む請求項７に記載の配合剤。
【請求項１０】
治療用抗体が更に、追加のＡＤＣＣ増強化合物（例えば、遮断抗ＫＩＲ抗体または活性化ＮＫＧ２Ａ抗体）またはＩＬ−２と組み合わされる請求項７に記載の組合せ。
【請求項１１】
組合せがウイルス抗原に対する抗体を含む請求項１〜４の何れかに記載の組合せ。
【請求項１２】
組合せが１つ以上の細胞周期レギュレーター及び／またはアポトーシス誘導剤を含む請求項１〜４の何れかに記載の組合せ。
【請求項１３】
組合せがｃｄｃ−２５、ＮＳＣ  ６６３２８４、フラボピリドール、７−ヒドロキシスタウロスポリン、ロスコビチン、ＢＩＢＲ１５３２  ＳＯＴ−０９５、ＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）／アポトーシス−２リガンド（Ａｐｏ−２Ｌ）、ＴＲＡＩＬ受容体を活性化する抗体、ＩＦＮα及びアンチセンスＢｃｌ−２からなる群から選択される化合物を含む請求項１２に記載の組合せ。
【請求項１４】
組合せが増殖因子阻害剤を含む請求項１〜４の何れかに記載の組合せ。
【請求項１５】
増殖因子阻害剤がハーセプチン（モノクローナル抗体）、セツキシマブ（モノクローナル抗体）、タルセバ（低分子量阻害剤）及びイレッサ（低分子量阻害剤）からなる群から選択される請求項１４に記載の組合せ。
【請求項１６】
組合せがハーセプチンを含む請求項１４または１５に記載の組合せ。
【請求項１７】
組合せが抗血管形成薬を含む請求項１〜４の何れかに記載の組合せ。
【請求項１８】
抗血管形成薬がアバスチン、ネオバスタット、サリドマイド、ＰＴＫ７８７、ＺＫ２２２５８４、ＺＤ−６４７４、ＳＵ６６６８、ＰＤ５４７，６３２、ＶＥＧＦ−Ｔｒａｐ、ＣＥＰ−７０５５、Ｍ−３、ＳＵ１１２４８からなる群から選択される請求項１７に記載の組合せ。
【請求項１９】
組合せがウイルスターゲティングを含む請求項１〜４の何れかに記載の組合せ。
【請求項２０】
組合せがホルモン療法を含む請求項１〜４の何れかに記載の組合せ。
【請求項２１】
組合せが１つ以上のアジュバントを含む請求項１〜４の何れかに記載の組合せ。
【請求項２２】
アジュバントがＱＳ２１、ＧＭ−ＣＳＦ及びＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド、リポ多糖及びポリイノシン酸：ポリシチジル酸からなる群から選択される請求項２１に記載の組合せ。
【請求項２３】
組合せが１つ以上のサイトカインを含む請求項１〜４の何れかに記載の組合せ。
【請求項２４】
サイトカインがＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−２、ＰＥＧ−ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８ａ、ＩＬ−２８ｂ、ＩＬ−２９、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｆｌｔ３リガンドまたは幹細胞因子からなる群から選択される１つ以上の化合物である請求項２３に記載の組合せ。
【請求項２５】
サイトカインがＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＰＥＧ−ＩＬ−２、ＩＬ−１８、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８ａ、ＩＬ−２８ｂ及びＩＬ−２９からなる群から選択される１つ以上の化合物である請求項２３または２４に記載の組合せ。
【請求項２６】
組合せがＩＬ−２、ＰＥＧ−ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５及びＩＦＮ−αからなる群から選択される１つ以上の化合物を含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項２７】
組合せがＩＬ−１２を含む請求項１〜４及び２３〜２４の何れかに記載の組合せ。
【請求項２８】
組合せがＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３〜２６の何れかに記載の組合せ。
【請求項２９】
組合せがＰＥＧ−ＩＬ−２を含む請求項１〜４及び２３〜２６の何れかに記載の組合せ。
【請求項３０】
組合せがＩＬ−２、ＰＥＧ−ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５及びＩＦＮ−αの少なくとも２つを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項３１】
組合せがＩＬ−２、ＰＥＧ−ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５及びＩＦＮ−αの少なくとも１つ及び１つの追加活性成分を含む請求項１〜４及び２３〜２４の何れかに記載の組合せ。
【請求項３２】
組合せがＩＬ−２、ＰＥＧ−ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５及びＩＦＮ−αの少なくとも１つ及び１つの追加サイトカインを含む請求項１〜４及び２３〜２４の何れかに記載の組合せ。
【請求項３３】
組合せがＩＦＮ−α及びＧＭ−ＣＳＦを含む請求項１〜４及び２３〜２４の何れかに記載の組合せ。
【請求項３４】
組合せがＩＦＮ−α及びチモペンチンを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項３５】
組合せがＩＦＮ−γを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項３６】
組合せが自己ＴＩＬ及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項３７】
組合せがＩＦＮ−α及びＩＬ−１２を含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項３８】
組合せがシスプラチン及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項３９】
組合せがシスプラチン、タモキシフェン及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項４０】
組合せがシスプラチン、ＤＴＩＣ、タモキシフェン及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項４１】
組合せがシスプラチン、ＤＴＩＣ、タモキシフェン及びＧＭ−ＣＳＦを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項４２】
組合せがシスプラチン、カルムスチン、ＤＴＩＣ及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項４３】
組合せがシスプラチン、カルムスチン、ＤＴＩＣ、タモキシフェン及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項４４】
組合せがシスプラチン、カルムスチン、ＤＴＩＣ、カルボプラチン、タモキシフェン及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項４５】
組合せがシスプラチン、ＤＴＩＣ、ビンブラスチン、タモキシフェン及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項４６】
組合せがシスプラチン、ビンブラスチン、テモゾロミド及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項４７】
組合せがシスプラチン、カルムスチン、ＤＴＩＣ、ビンデシン、タモキシフェン及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項４８】
組合せがシスプラチン、タモキシフェン及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項４９】
組合せがシスプラチン、ビンブラスチン、ＤＴＩＣ及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の配合剤。
【請求項５０】
組合せがＤＴＩＣ及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項５１】
組合せがＤＴＩＣ、ＧＭ−ＣＳＦ及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項５２】
組合せがＤＴＩＣ、チモシン−α及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項５３】
組合せがビンブラスチン及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項５４】
組合せが５−フルオロウラシル及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項５５】
組合せがフォテムスチン及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２６〜２７の何れかに記載の組合せ。
【請求項５６】
組合せがゲムシタビン及びＩＦＮ−αを含む請求項１〜４及び２３の何れかに記載の組合せ。
【請求項５７】
組合せが更にＩＬ−２を含む請求項に記載の組合せ。
【請求項５８】
組合せが受動免疫療法を含む請求項６〜１０の何れかに記載の組合せ。
【請求項５９】
組合せが細胞養子療法を含む請求項６〜１０の何れかに記載の組合せ。
【請求項６０】
細胞養子療法が腫瘍特異抗原または腫瘍関連抗原を認識するＣＤ４＋またはＣＤ８＋  Ｔ細胞である請求項５９に記載の組合せ。
【請求項６１】
細胞養子療法が腫瘍特異抗原または腫瘍関連抗原に特異的な抗体を発現するＢ細胞である請求項５９に記載の組合せ。
【請求項６２】
細胞養子療法が腫瘍細胞を死滅させることができるＮＫ細胞である請求項５９に記載の配合剤。
【請求項６３】
細胞養子療法が樹状細胞（ＤＣ）である請求項５９に記載の組合せ。
【請求項６４】
樹状細胞をインビボでＤＣ増殖剤（例えば、ＧＭ−ＣＳＦまたはＦｌｔ３−Ｌ）と培養し、腫瘍特異抗原または腫瘍関連抗原を加え、インビボで再導入する請求項６３に記載の組合せ。
【請求項６５】
組合せが癌、腫瘍またはウイルス抗原に対する寛容を壊す物質を１つ以上含む請求項１〜４の何れかに記載の組合せ。
【請求項６６】
物質がＭＤＸ−０１０である請求項６５に記載の組合せ。
【請求項６７】
物質がＣＴＬＡ−４に対する抗体である請求項６５に記載の配合剤。
【請求項６８】
組合せが１つ以上の治療用ワクチンを場合によりアジュバント、サイトカイン、ＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド、樹状細胞、ＧＭ−ＣＳＦまたは熱ショックタンパク質と一緒に含む請求項１〜４の何れかに記載の組合せ。
【請求項６９】
組合せが１つ以上の転移抑制剤、例えばメタロプロテイナーゼ阻害剤を含む請求項１〜４の何れかに記載の組合せ。
【請求項７０】
配合剤が内部予防接種治療を含む請求項１〜４の何れかに記載の組合せ。
【請求項７１】
癌またはウイルス感染の治療用薬剤を製造するための請求項１〜７０の何れかに記載の組合せの使用。
【請求項７２】
請求項１〜７０の何れかに記載の組合せを医薬的に許容され得る添加剤と一緒に含む医薬組成物。
【請求項７３】
請求項１〜７０の何れかに記載の組合せを有効量投与することによる治療を要する患者における癌またはウイルス感染の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＩＬ−２１、アナログまたは誘導体、並びに癌及びウイルス感染の治療における他の医薬化合物とのその併用に関する。
【背景技術】
【０００２】
サイトカインは通常、造血系列の細胞の増殖または分化を刺激し、または身体の免疫及び炎症応答メカニズムに関与する。インターロイキンはサイトカインのファミリーであり、これは多くのサイトカインを産生することにより免疫応答を媒介し、抗原に対する適応免疫を発揮する。成熟Ｔ細胞は抗原または他の刺激により活性化されて、例えばサイトカイン、生化学的シグナル分子、またはＴ細胞集団の運命に更に影響を与える受容体を産生することができる。
【０００３】
Ｔ細胞により産生されるサイトカインはタイプ１及び２に分類されている（A.Kelso, Immun. Cell Biol., 76:300-317(1998)）。タイプ１サイトカインはＩＬ−２、ＩＦＮ−γ、ＬＴ−αを含み、炎症応答、ウイルス免疫、細胞内寄生虫免疫及び同種移植片拒絶反応に関与している。タイプ２サイトカインはＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−１０及びＩＬ−１３を含み、体液性応答、蠕虫免疫及びアレルギー応答に関与している。タイプ１及び２間で共有のサイトカインにはＩＬ−３、ＧＭ−ＣＳＦ及びＴＮＦ−αが含まれる。Ｔ細胞集団を産生するタイプ１及びタイプ２は優先的に異なるタイプの炎症組織に移動することを示唆する証拠も幾つかある。
【０００４】
成熟Ｔ細胞は抗原または他の刺激により活性化されて、例えばサイトカイン、生化学的シグナル分子、またはＴ細胞集団の運命に更に影響を与える受容体を産生し得る。
【０００５】
Ｂ細胞は、Ｂ細胞受容体を含めた細胞表面上の受容体及び他のアクセサリー分子を介して活性化されて、アクセサリー細胞機能（例えば、サイトカイン及び抗体の産生）を実施し得る。
【０００６】
ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞はＴ細胞及びＢ細胞と共通の始原細胞を有し、免疫監視において役割を果たす。血液リンパ球の最高１５％を占めるＮＫ細胞は抗原受容体を発現せず、よって標的細胞への結合のための要件としてＭＨＣ認識を用いない。ＮＫ細胞は特定の腫瘍細胞及びウイルス感染細胞の認識及び死滅に関与している。インビボでＮＫ細胞は活性化を獲得すると考えられているが、インビトロでＮＫ細胞はＫＩＲリガンド依存性活性化を介して幾つかのタイプの腫瘍細胞を死滅させることが判明している。
【０００７】
癌疾患に関与する免疫は免疫系から誘導される多種の細胞を含む。腫瘍治療に対する応答を改善するために前記応答を刺激する化合物が組み合わせて使用され得る。
【０００８】
ＩＬ−２１は免疫系の多数の各種細胞に影響を与えることが判明している。特に興味深いのは、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）及びＮＫ細胞の活性化が見られることである。いずれの細胞型も腫瘍の撲滅に決定的に関与することが公知である。よって、腫瘍内Ｔリンパ球の存在は多数の各種癌に対する改善された臨床結果と相関している（Zhangら, 2003）。しかしながら、腫瘍組織浸潤リンパ球（ＴＩＬ）は必ずしも腫瘍増殖を制御するのに十分に活性化されない（Dunnら, 2002；Katakiら, 2002；Blohmら, 2002；Khong及びRestifo, 2002）。従って、癌の治療、管理及び予防のための改善された治療法が要望されている。ＩＬ−２１の免疫系に対する効果の別の重要な面は、腫瘍細胞及びウイルス感染細胞に対して改善された抗体応答を導き得るＢ細胞に対する効果である。本発明は、癌及びウイルス感染の治療及び管理のためのＩＬ−２１と他のモダリティーの併用に関する。
【０００９】
１個またはほんの数個の特定抗原からなる合成治療用ワクチンが癌治療において少し有用であることが判明しているが、改善が強く要望されている。本発明はまた、（ｉ）上記した腫瘍抗原に対する免疫応答を導く腫瘍抗原の放出及び（ｉｉ）持続的な細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）応答を誘導するＩＬ−２１の独自の能力の適時な組合せに関する。腫瘍抗原は多数の各種アプローチで放出され得る。前記アプローチの非限定例には、（ｉ）一般的な化学療法、（ｉｉ）アポトーシスの誘導、（ｉｉ）腫瘍への血液供給を妨害することによる腫瘍細胞死の誘導、（ｉｖ）増殖因子刺激及びシグナル伝達の妨害が含まれる。
【発明の概要】
【００１０】
［発明の開示］
本発明は、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体と、下記に列記するもののうちの１以上との組合せを提供する：
Ｉ．  腫瘍細胞死またはウイルス感染細胞の死を誘導する物質：
ａ）一般的な化学療法；
ｂ）放射線治療；
ｃ）モノクローナル抗体；
ｄ）細胞周期制御／アポトーシスレギュレーター；
ｅ）増殖因子及びシグナル伝達モジュレーター；
ｆ）腫瘍血管新生阻害剤（血管形成阻害剤、抗血管形成薬）；
ｇ）ウイルスターゲティング（腫瘍細胞を死滅させるための組換えウイルスの使用）；
ｈ）抗ウイルス剤；
ｉ）ホルモン物質、
ＩＩ．  腫瘍細胞またはウイルス感染細胞に対する免疫応答を増強する物質：
ｊ）免疫系活性剤；
ｋ）抗アネルギー剤を含めた免疫系阻害剤（例えば、免疫応答を下方制御する免疫シグナルを阻害する物質）；
ｌ）治療用ワクチン、
ＩＩＩ．  腫瘍増殖、転移またはウイルス感染細胞の蔓延を妨害する物質：
ｍ）インテグリン、細胞接着分子モジュレーター；
ｎ）転移抑制剤；
ｏ）内皮細胞モジュレーター、
ＩＶ．  内部予防接種、
Ｖ．  組織因子アンタゴニスト及び凝固カスケードに影響を及ぼす他の因子：
ｐ）抗因子Ｘａ阻害剤、抗因子ＩＩａ阻害剤、抗線維素生成剤；
ｑ）五糖類等、
ＶＩ．  免疫抑制剤／免疫調節剤：
ｒ）Ｔリンパ球ホーミングに影響を及ぼす物質（例えば、ＦＴＹ−７２０）；
ｓ）カルシニューリン阻害剤；
ｔ）ＴＯＲ阻害剤。
【００１１】
本発明は、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を上記したリストＩ〜ＶＩ及びａ）〜ｔ）に従う１つ以上の化合物と組み合わせて含む医薬組成物を提供する。
【００１２】
本発明は、癌またはウイルス感染の治療用薬剤を製造するためのＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体及び上記したＩ〜ＶＩ及びａ）〜ｔ）からなる群から選択される１つ以上の化合物の併用を提供する。
【００１３】
本発明は、治療を要する患者を治療有効量のＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を上記したＩ〜ＶＩ及びａ）〜ｔ）からなる群から選択される１つ以上の化合物と一緒に用いて治療する方法を提供する。
【００１４】
本発明の実施態様では、治療対象の疾患は腫瘍性疾患、例えば転移性悪性メラノーマ、腎細胞癌、卵巣癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、乳癌、結腸直腸癌、前立腺癌、膵臓癌、膀胱癌、食道癌、子宮頸癌、子宮内膜癌、リンパ腫及び白血病である。
【００１５】
本発明のより具体的な態様では、用語「腫瘍性疾患」、「癌」または「腫瘍増殖」は、のう胞精及び充実性腫瘍の両方を含めた、骨及び軟組織腫瘍の両方を含めた、良性及び悪性腫瘍を含めた、肛門組織、胆管、膀胱、血球、骨、骨（続発性）、腸（結腸及び直腸）、脳、脳（続発性）、乳房、乳房（続発性）、カルチノイド、頸部、小児癌、眼、食道、頭及び首、カポジ肉腫、腎臓、喉頭、白血病（急性リンパ芽球性）、白血病（急性骨髄性）、白血病（慢性リンパ球性）、白血病（慢性骨髄性）、白血病（その他）、肝、肝（続発性）、肺、肺（続発性）、リンパ節（続発性）、リンパ腫（ホジキン）、リンパ腫（非ホジキン）、メラノーマ、中皮腫、骨髄腫、卵巣、膵臓、陰茎、前立腺、皮膚、軟組織肉腫、胃、精巣、甲状腺、未知の原発性腫瘍、膣、外陰、子宮の腫瘍を含めたあらゆる形態の腫瘍性細胞増殖を指すと理解されたい。
【００１６】
軟組織腫瘍には、良性単一染色体性神経線維腫、類腱腫、脂肪芽細胞腫、脂肪腫、子宮平滑筋腫、明細胞肉腫、皮膚線維肉腫、ユーイング肉腫、骨外性粘液様軟骨肉腫、粘液様脂肪肉腫、分化型脂肪肉腫、胞巣型黄紋筋肉腫及び滑膜肉腫が含まれる。
【００１７】
具体的な骨腫瘍には、非骨化性線維腫、単房性骨のう胞、肉軟骨腫、動脈瘤性骨のう胞、骨芽細胞腫、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液線維種、骨化性線維腫及びアダマンチノーマ、巨細胞腫、線維性骨形成異常、ユーイング肉腫、好酸性肉芽腫、骨肉腫、軟骨腫、軟骨肉腫、悪性線維性組織球腫及び転移性癌腫が含まれる。
【００１８】
白血病は骨髄が産生する白血球の癌を指す。白血病には、４つの主なタイプの白血病、すなわち急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄芽球性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）及び慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）が含まれるが、これらに限定されない。
【００１９】
本発明の別の態様では、治療対象疾患はウイルス感染、例えばＢ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、エプスタイン−バーウイルス、インフルエンザウイルス、サイトメガロウイルス、ヘルペスウイルス及び重症急性呼吸症候群である。
【００２０】
［定義］
本発明の詳細な実施態様を検討する前に、本発明の主態様に関連する特定用語の定義を示す。
【００２１】
本発明において、ＩＬ−２１は、国際特許出願公開第００／５３７６１号に配列番号２として開示されている配列と定義される。本発明は、配列番号１のペプチドをコードするＤＮＡ配列、その機能誘導体及び断片をも包含する。本出願はＩＬ−２１のアナログ及びその誘導体も記載している。従って、本発明において用語「ＩＬ−２１」は国際特許出願公開第００／５３７６１号に記載されているＩＬ−２１を意味し、「ＩＬ−２１及びその誘導体」は変異体、アナログ及び誘導体としてのＩＬ−２１をも含む。
【００２２】
本発明によれば、当業者で慣用の分子生物学、微生物学及び組換えＤＮＡ技術が用いられ得る。これらの技術は文献に詳しく説明されている。例えば、Sambrook, Fritsch及びManiatis, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 第2版,ニューヨークのコールドスプリングハーバーに所在のCold Spring Harbor Laboratory Press(1989年)発行(本明細書中“Sambrookら, 1989”)；DNA Cloning: A Practical Approach, I巻及びII巻, D.N. Glove編(1985年)発行；Oligonucleotides Synthesis, M.J. Gait編(1984年)発行；Nucleic Acid Hybridization, B.D.Hames及びS.J.Higgins編(1985年)発行；Transcription And Translation, B.D.Hames及びS.J.Higgins編(1984)年)発行；Animal Cell Culture, R.I.Freshney編(1986年)発行；Immobilized Cells And Enzymes, IRL Press(1986年)発行；B.Perbal, A Practical Guide To Molecular Cloning(1984年)発行を参照されたい。
【００２３】
「有効量」は、臨床効果を与えるのに十分な量を意味する。その量は、投与手段、標的部位、患者の状態、治療が患者内または単離された細胞に対して実施されるか、治療頻度等に依存する。用量範囲は通常０．１〜３０００μｇ／ｋｇ体重／日と予想されている。薬物処方及び用量範囲を十分に検討するためには、Remington's Pharmaceutical Sciences, 第18版，ペンシルバニア州イーストンに所在のMack Publishing Co.(1996年)発行を参照されたい。
【００２４】
本発明は本明細書に記載されている特定の方法、プロトコル及び試薬に限定されず、これらの方法、プロトコル及び試薬は変更可能であると理解されるべきである。本明細書で使用される技術は具体的実施態様のみを説明するためであり、本発明の範囲を限定するものと意図されないと理解される。
【００２５】
当業者には自明のように、用量レベルは特定化合物、症状の重篤度及び患者の副作用に対する感受性により異なり得る。所与の化合物の好ましい用量は各種手段を用いて当業者により容易に決定され得る。好ましい手段は所与の化合物の生理学的効力を測定することである。
【００２６】
本発明において、「投与」、「併用投与」または「併用療法」は、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体と一緒に細胞死を誘導する物質またはその組合せ及び／または免疫応答を増強する物質またはその組合せ及び／または腫瘍増殖、転移、或いは癌またはウイルス感染細胞の蔓延を妨げる物質またはその組合せを投与することによる癌またはウイルス感染の治療を指す。併用療法は、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を前記した物質またはその組合せを投与する前に投与することにより、及び／またはＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を前記した物質またはその組合せと同時に投与することにより、及び／またはＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を前記した物質またはその組合せを投与した後に投与することにより実施され得る。
【００２７】
本発明において、「治療」または「治療する」は疾患を予防、軽減、管理、治癒または縮小することを指す。
【００２８】
本発明において、「癌」は、細胞性疾患を含めた腫瘍性疾患、例えば肉腫、癌腫、メラノーマ、白血病、リンパ腫；及び乳房、頭及び首、卵巣、膀胱、肺、咽頭、喉頭、食道、胃、小腸、肝臓、膵臓、結腸、女性生殖器、男性生殖器、前立腺、腎臓及び中枢神経系の癌を指す。
【００２９】
本発明において、組合せはＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体、或いは組合せに適用される「有効量」を与え、混合物の各成分の宿主の生存のために有効な量を指す。
【００３０】
相乗効果は、用量、生存、進行までの時間、病気のない期間、腫瘍の縮小または疾患に適当な他のパラメーターの点で調べられ得る。
【発明の詳細な説明】
【００３１】
「ＩＬ−２１」は、援用により本明細書に含まれるとする２０００年９月１４日に公開された国際特許出願公開第００／５３７６１号に記載されており、ここには配列番号２としてＩＬ−２１（「Ｚａｌｐｈａ１１リガンド」として）、その作成方法、それに対する抗体及び上記出願において配列番号１としてのＩＬ−２１をコードするポリヌクレオチド配列が開示している。本発明は、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または９５％以上の配列同一性を有するそのオルソログを含む。本発明はまた、配列番号２のアミノ酸残基１〜１６２、残基４１（Ｇｌｎ）〜１４８（Ｉｌｅ）の配列と少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または９５％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドの使用を包含する。同一％の測定方法は下記する。本発明のＩＬ−２１ポリペプチドはＩＬ−２１の生物学的活性の全てまたは幾つかを保持しているので、ＩＬ−２１は例えば感染及び癌を治療するために有用となる。幾つかのポリペプチドはＩＬ−２１の生物学的活性よりも高い生物学活性を有していることもある。
【００３２】
本発明は、他の種由来の対応タンパク質及びポリヌクレオチド(「オルソログ」)を包含する。特に興味深いものは、げっ歯類、ブタ、ヒツジ、ウシ、イヌ、ネコ、ウマ及び他の霊長類を含めた他の哺乳動物種由来のＩＬ−２１ポリペプチドである。ヒトＩＬ−２１タンパク質の種オルソログは、本発明により提供される情報及び組成物と一緒に慣用のクローニング技術を用いてクローン化され得る。本明細書中で使用される用語「配列番号２で規定される、ポリペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド」にはこのポリペプチドの全ての対立遺伝子変異体及び種オルソログが含まれる。
【００３３】
本発明は、配列番号２のタンパク質ポリペプチドと実質的に同一な単離タンパク質またはその種オルソログを提供する。「単離」は自然環境以外の状態で、例えば血液及び動物組織から離れた状態で存在するタンパク質またはポリペプチドを意味する。好ましい形態では、単離ポリペプチドは実質的に他のポリペプチド、特に動物起源の他のポリペプチドを含まない。高精製形態、すなわち９５％以上の純度、より好ましくは９９％以上の純度のポリペプチドを提供することが好ましい。本明細書中で使用される用語「実質的に同一」は、国際特許出願公開第００／５３７６１号の配列番号２に示す配列と５０％以上、好ましくは６０％以上、７０％以上、またはより好ましくは少なくとも８０％の配列同一性を有するポリペプチドまたは種オルソログを指す。前記ポリペプチドは、より好ましくはＩＬ−２１またはその種オルソログと少なくとも９０％、最も好ましくは少なくとも９５％、またはそれ以上同一である。配列同一％は慣用の方法により測定される。例えば、Altschulら, Bull. Math. Bio., 48:603-616(1986)；Henikoff及びHenikoff, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:10915-10919(1992)を参照されたい。ポリヌクレオチド分子の配列同一性は上記したような比を用いて類似方法により測定される。
【００３４】
変異体ＩＬ−２１ポリペプチドまたは本発明で使用されるＩＬ−２１アナログは実質的に同一のタンパク質及びポリペプチドであり、１つ以上のアミノ酸置換、欠失または付加を有することを特徴とする。これらの変化は好ましくはマイナーであり、保存的なアミノ酸置換（表１参照）及びタンパク質またはポリペプチドのフォールディングまたは活性に有意な影響を与えない他の置換、すなわち典型的には１〜約３０アミノ酸の小さい欠失；及び小さいアミノ−またはカルボキシ−末端延長、例えばアミノ末端メチオニン残基、最高約２０〜２５残基の小リンカーペプチドまたは精製を促進する小さな延長(アフィニティータグ)、例えばポリヒスチジン路、タンパク質Ａ（Nilssonら, EMBO J., 4:1075(1985)；Nilssonら, Methods Enzymol., 198:3(1991)）、グルタチオンＳトランスフェラーゼ（Smith及びJohnson, Gene, 67:31(1988)）、或いは他の抗原性エピートープまたは結合ドメインである。概説的に、Fordら, Protein Expression and Purification, 2:95-107(1991)を参照されたい。アフィニティータグをコードするＤＮＡは市販業者（例えば、ニュージャージ州ピスカタウェーに所在のPharmacia Biotech）から入手可能である。
【００３５】
＜表１：保存的なアミノ酸置換＞
塩基性：    アルギニン
リシン
ヒスチジン
酸性：      グルタミン酸
アスパラギン酸
極性：      グルタミン
アスパラギン
疎水性：    ロイシン
イソロイシン
バリン
芳香族：    フェニルアラニン
トリプトファン
チロシン
小さい：    グリシン
アラニン
セリン
スレオニン
メチオニン
本発明のタンパク質は非天然アミノ酸残基をも含み得る。非天然アミノ酸には、ｔｒａｎｓ−３−メチルプロリン、２，４−メタンプロリン、ｃｉｓ−４−ヒドロキシプロリン、ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシプロリン、Ｎ−メチルグリシン、ａｄｄｏ−スレオニン、メチルスレオニン、ヒドロキシエチルシステイン、ヒドロキシエチルホモシステイン、ニトログルタミン、ホモグルタミン、ピペコリン酸、チアゾリジンカルボン酸、デヒドロプロリン、３−及び４−メチルプロリン、３，３−ジメチルプロリン、ｔｅｒｔ−ロイシン、ノルバリン、２−アザフェニルアラニン、３−アザフェニルアラニン、４−アザフェニルアラニン及び４−フルオロフェニルアラニンが含まれるが、これらに限定されない。タンパク質に非天然アミノ酸残基を導入するために幾つかの方法が当業界で公知である。例えば、ナンセンス突然変異を化学的にアミノアシル化したサプレッサーｔＲＮＡを用いて抑えるインビトロ系が使用され得る。アミノ酸及びアミノアシル化ｔＲＮＡの合成方法は当業界で公知である。本発明のポリペプチド中の必須アミノ酸は当業界で公知の手順、例えば部位特異的突然変異またはアラニンスキャニング突然変異（Cunningham及びWells, Science, 244:1081-1085(1989)；Bassら, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88:4498-4502(1991)）に従って同定され得る。後者の技術では、１つのアラニン突然変異を分子の残基毎に導入し、生じた突然変異分子を生物学的活性（例えば、リガンド結合及びシグナル伝達）について試験して、分子の活性に必要なアミノ酸残基を同定する。リガンド−タンパク質相互作用の部位は核磁気共鳴、結晶学または光親和性標識のような技術により測定される結晶構造の分析によっても測定され得る。
【００３６】
複数のアミノ酸置換は、Reidhaar-Olson及びSauer, Science, 241:53-57(1988)；Bowie及びSauer, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 86:2152-2156(1989)に開示されているような公知の突然変異及びスクリーニング方法を用いてなされ、試験される。簡単に説明すると、上記著者らは、ポリペプチド中の２カ所以上を同時に無作為化し、機能性ポリペプチドについて選択し、その後突然変異したポリペプチドを配列決定して、各位置での許容され得る置換のスペクトルを調べる方法を記載している。使用可能な他の方法には、ファージディスプレー（例えば、Lowmanら, Biochem., 30:10832-10837(1991)；Ladnerらの米国特許第５，２２３，４０９号；Huseの国際特許出願公開第９２／０６２０４号)及び位置指定突然変異(Derbyshireら, Gene, 46:145(1986)；Nerら, DNA, 7:127(1988)）が含まれる。
【００３７】
ＩＬ−２１の変異体の例は、Ｎ末端配列を含まない上記したＩＬ−２１ペプチドである。Ｎ末端配列は最初の１〜２８アミノ酸を含み得る。変異体の更なる例または代替例は、細菌宿主での発現からしばしば含まれているＮ末端Ｍｅｔを含まないＩＬ−２１またはＩＬ−２１変異体である。
【００３８】
宿主細胞においてクローン化突然変異タンパク質の活性を検出するために、上記した突然変異方法をハイスループットスクリーニング方法と組み合わせてもよい。この点で好ましいアッセイには、下記する細胞増殖アッセイ及びバイオセンサーベースのリガンド結合アッセイが含まれる。活性タンパク質またはその一部（例えば、リガンド結合断片）をコードする突然変異ＤＮＡ分子は宿主細胞から回収され、最新の装置を用いて迅速に配列決定され得る。これらの方法により当該ポリペプチド中の各アミノ酸残基の重要度が容易に判明し、これらの方法は未知の構造を有するポリペプチドに適用され得る。
【００３９】
本発明は更に、１つ以上のポリペプチド融合物を含む各種の他のポリペプチド融合物及び関連多量体タンパク質を提供する。例えば、ＩＬ−２１ポリペプチドは、米国特許第５，１５５，０２７号及び同第５，５６７，５８４号に記載されているように二量体化タンパク質への融合物として作成され得る。この点で好ましい二量体化タンパク質は免疫グロブリン定常部ドメインを含む。免疫グロブリン−ＩＬ−２１ポリペプチド融合物は遺伝子工学的に操作した細胞で発現され得る。補助ドメインは特定の細胞、組織または巨大分子（例えば、コラーゲン）に標的化させるべくＩＬ−２１ポリペプチドに融合され得る。例えば、ＩＬ−２１ポリペプチドまたはタンパク質は、標的細胞の表面上の受容体に特異的に結合するリガンドにポリペプチドを融合することにより所定細胞型に標的化され得る。このようにして、ポリペプチド及びタンパク質は治療または診断目的で標的化され得る。ＩＬ−２１ポリペプチドは２つ以上の部分、例えば精製のためのアフィニティータグ及びターゲティングドメインに融合され得る。ポリペプチド融合物は１つ以上の開裂部位を、特にドメイン間に含み得る。Tuanら, Connective Tissue Research, 34:1-9(1996)を参照されたい。
【００４０】
「ＩＬ−２１誘導体」は、別の機能分子への誘導体化または連結を含む。連結は、他の分子部分（例えば、抗体、毒素、放射性同位元素、細胞傷害性または細胞増殖停止性物質、ポリマー分子または親油性基）への化学的カップリング、遺伝的融合、非共有会合等であり得る。非限定例はポリマー基、例えば国際特許出願第ＤＫ２００４／０００５３１号に開示されているデンドリマー、ポリアルキレンオキシド（ＰＡＯ）、ポリアルキレングリコール（ＰＡＧ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、分枝状ＰＥＧ、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリカルボキシレート、ポリビニルピロリドン、ポリエチレン−ｃｏ−無水マレイン酸、ポリスチレン−ｃｏ−無水マレイン酸、デキストラン、カルボキシメチルデキストラン；血清タンパク質結合リガンド、例えばアルブミン、同類脂肪酸、Ｃ５−Ｃ２４脂肪酸、脂肪族二酸（例えば、Ｃ５−Ｃ２４）に結合する化合物を含む。アルブミン結合剤はデンマーク国の国際特許出願第ＤＫ０４／０００６２５号に記載されている。アルブミン結合剤は下記式を有する化合物でもある。
【化１】
2011137008.tif 000002
【００４１】
保護基の他の例には、生理的条件下で帯電性を変化させる部分を含む小さい有機分子、例えばカルボン酸またはアミン；またはグリカン特異的認識を防ぐ中性置換基、例えばより小さいアルキル置換基（例えば、Ｃ１−Ｃ５アルキル）が含まれる。
【００４２】
用語「ポリマー分子」、「ポリマー基」、「ポリマー部分」または「高分子」には、２個以上のモノマー（ただし、モノマーのいずれもがアミノ酸残基でない）を共有結合させて形成される分子が包含される。好ましいポリマーは、国際特許出願第ＤＫ２００４／０００５３１号に開示されているデンドリマー、ポリアルキレンオキシド（ＰＡＯ）、例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）やポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）のようなポリアルキレングリコール（ＰＡＧ）、分枝状ＰＥＧ、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリカルボキシレート、ポリビニルピロリドン、ポリエチレン−ｃｏ−無水マレイン酸、ポリスチレン−ｃｏ−無水マレイン酸、及びカルボキシメチルデキストランを含めたデキストランからなる群から選択されるポリマー分子である。ＰＥＧが特に好ましい。
【００４３】
用語「ＰＥＧ化ＩＬ−２１」は、ヒトＩＬ−２１ポリペプチドにコンジュゲートして１つ以上のＰＥＧ分子を含むＩＬ−２１を意味する。ＰＥＧ分子はＩＬ−２１ポリペプチドのアミノ酸残基または炭水化物部分を含めたＩＬ−２１ポリペプチドの任意の部分に結合され得ると理解されたい。用語「システイン−ＰＥＧ化ＩＬ−２１」は、ＩＬ−２１中に導入されたシステインのスルフヒドリル基にコンジュゲートしたＰＥＧ分子を有するＩＬ−２１を意味する。用語「ポリエチレングリコール」または「ＰＥＧ」は、場合によりカップリング剤、或いはカップリングまたは活性化部分（例えば、チオール、トリフレート、トレシレート、アジリジン、オキシラン、または好ましくはマレイミド部分）を有するポリエチレングリコール化合物またはその誘導体を意味する。本発明の活性化ＰＥＧ化合物の例として、マレイミドモノメトキシＰＥＧのような化合物が挙げられる。用語「ＰＥＧ」は、分子量が５００〜１５０，０００Ｄａのポリエチレングリコール及びそのアナログ（例えば、ｍＰＥＧと称される末端ＯＨ基がメトキシ基で置換されているもの）を指すと解される。
【００４４】
ＰＥＧは、デキストランのような多糖と比較して架橋できる反応基が非常に少ないので適当なポリマー分子である。特に、単官能性ＰＥＧ、例えばメトキシポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）は、そのカップリング化学が比較的単純（ポリペプチド上の結合基とコンジュゲートするために利用可能な反応基がたった１個である）なので興味深い。従って、架橋のリスクが解消され、生じたポリペプチドコンジュゲートはより均質であり、ポリマー分子とポリペプチドの反応のコントロールがより容易である。
【００４５】
ポリペプチドにポリマー分子を共有結合させるためには、ポリマー分子のヒドロキシ末端基は活性化形態、すなわち反応性官能基を有する形態を有する。適当な活性化ポリマー分子は市販されており、例えば米国アラバマ州ハンツビルに所在のShearwater Corp.または英国のPolyMASC Pharmaceuticals plcから市販されている。或いは、ポリマー分子は、例えば国際特許出願公開第９０／１３５４０号に記載されているように当業界で公知の慣用方法により活性化され得る。本発明で使用するための活性化線状または分枝状ポリマー分子の具体例は、援用により本明細書に含まれるとするShearwater Corp.の１９９７年及び２０００年のカタログ（Functionalized Biocompatible Polymers for Research and pharmaceuticals, Polyethylene Glycol and Derivatives）に記載されている。活性化ＰＥＧポリマーの具体例には、線状ＰＥＧ類、例えばＮＨＳ−ＰＥＧ（例えば、ＳＰＡ−ＰＥＧ、ＳＳＰＡ−ＰＥＧ、ＳＢＡ−ＰＥＧ、ＳＳ−ＰＥＧ、ＳＳＡ−ＰＥＧ、ＳＣ−ＰＥＧ、ＳＧ−ＰＥＧ及びＳＣＭ−ＰＥＧ）及びＮＯＲ−ＰＥＧ）、ＢＴＣ−ＰＥＧ、ＥＰＯＸ−ＰＥＧ、ＮＣＯ−ＰＥＧ、ＮＰＣ−ＰＥＧ、ＣＤＩ−ＰＥＧ、ＡＬＤ−ＰＥＧ、ＴＲＥＳ−ＰＥＧ、ＶＳ−ＰＥＧ、ＩＯＤＯ−ＰＥＧ及びＭＡＬ−ＰＥＧ、並びに分枝状ＰＥＧ類、例えばＰＥＧ２−ＮＨＳ及びいずれも援用により本明細書に含まれるとする米国特許第５，９３２，４６２号及び米国特許第５，６４３，５７５号に記載されているものが含まれる。更に、援用により本明細書に含まれるとする以下の文献は有用なポリマー分子及び／またはＰＥＧ化化学を開示している。米国特許第５，８２４，７７８号、米国特許第５，４７６，６５３号、欧州特許出願公開第９７／３２６０７号、欧州特許出願公開第２２９，１０８号、欧州特許出願公開第４０２，３７８号、米国特許第４，９０２，５０２号、米国特許第５，２８１，６９８号、米国特許第５，１２２，６１４号、米国特許第５，２１９，５６４号、欧州特許出願公開第９２／１６５５５号、欧州特許出願公開第９４／０４１９３号、欧州特許出願公開第９４／１４７５８号、欧州特許出願公開第９４／１７０３９号、欧州特許出願公開第９４／１８２４７号、国際特許出願公開第９４／２８０２４号、国際特許出願公開第９５／００１６２号、国際特許出願公開第９５／１１９２４号、国際特許出願公開第９５／１３０９０号、国際特許出願公開第９５／３３４９０号、国際特許出願公開第９６／０００８０号、国際特許出願公開第９７／１８８３２号、国際特許出願公開第９８／４１５６２号、国際特許出願公開第９８／４８８３７号、国際特許出願公開第９９／３２１３４号、国際特許出願公開第９９／３２１３９号、国際特許出願公開第９９／３２１４０号、国際特許出願公開第９６／４０７９１号、国際特許出願公開第９８／３２４６６号、国際特許出願公開第９５／０６０５８号、欧州特許出願公開第４３９  ５０８号、国際特許出願公開第９７／０３１０６号、国際特許出願公開第９６／２１４６９号、国際特許出願公開第９５／１３３１２号、欧州特許出願公開第９２１１３１号、米国特許第５，７３６，６２５号、国際特許出願公開第９８／０５３６３号、欧州特許出願公開第８０９  ９９６号、米国特許第５，６２９，３８４号、国際特許出願公開第９６／４１８１３号、国際特許出願公開第９６／０７６７０号、米国特許第５，４７３，０３４号、米国特許第５，５１６，６７３号、欧州特許出願公開第６０５９６３号、米国特許第５，３８２，６５７号、欧州特許出願公開第５１０３５６号、欧州特許出願公開第４００４７２号、欧州特許出願公開第１８３５０３号及び欧州特許出願公開第１５４３１６号。
【００４６】
ポリペプチドと活性化ポリマー分子のコンジュゲーションは、例えば（ポリマー分子の活性化のための適当な方法も記載している）R.F.Taylor, “Protein immobilisation. Fundamental and applications”, ニューヨークに所在のMarcel Dekker(1991年)出版；S.S.Wong, “Chemistry of Protein Conjugation and Crosslinking”, ボカラトンに所在のCRC Press(1992年)出版；G.T.Hermansonら， “Immobilized Affinity Ligand Techniques”,ニューヨークに所在のAcademic Press(1993年)出版に記載されているような慣用方法を用いて実施される。当業者は、使用する活性化方法及び／またはコンジュゲーション化学はポリペプチドの組合せ（この例は上記されている）の結合基及びポリマーの官能基（例えば、アミン、ヒドロキシ、カルボキシル、アルデヒド、スルフヒドリル、スクシンイミジル、マレイミド、ビニルスルホンまたはハロアセテート）に依存することを認識している。ＰＥＧ化は、ポリペプチド上の全ての利用可能な結合基（すなわち、ポリペプチドの表面で露出している結合基）に対するコンジュゲーションに向けられても、１つ以上の特定結合基、例えばＮ末端アミノ基（米国特許第５，９８５，２６５号）に対して向けられてもよい。更に、コンジュゲーションは１ステップでも、または（例えば、国際特許出願公開第９９／５５３７７号に記載されているように）段階的にも達成され得る。
【００４７】
ＰＥＧ化は、結合するＰＥＧ分子の数、前記分子のサイズ及び形（例えば、線状または分枝状）、ポリペプチド中で分子が結合している場所に関して最適分子が生ずるように設計されると理解されたい。使用しようとするポリマーの分子量は達成しようとする所望効果を考慮して選択される。例えば、コンジュゲーションの主目的が高い分子量及び大きいサイズを有するコンジュゲートを得ることならば（例えば、腎クリアランスを減らすために）、所望効果を得るために１個または少数の高分子量ポリマー分子または多数のより小さい分子量を有するポリマー分子をコンジュゲートするように選択され得る。しかしながら、低分子量を有するポリマー分子を数個使用することが好ましい。これは、高度のエピトープ保護が望ましい場合にも当てはまる。そのような場合、例えば約５，０００Ｄａの分子量を有するポリマーを２〜８個、例えば３〜６個使用し得る。下記実施例に記載するように、結合させるポリマー分子の総分子量が同一または同等であっても、少数の高分子量を有するポリマー分子（例えば、１２，０００〜２０，０００の分子量を有するポリマーを１〜３個）よりも低分子量を有するポリマー分子を多数（例えば、５０００の分子量を有するポリマーを４〜６個）用いることがポリペプチドコンジュゲートのインビボ半減期における機能の改善の点で有利であり得る。少なくともポリマー分子がポリペプチド表面上に比較的均一に分布しているときには、小さいポリマー分子を多数存在させると例えば単一の大きなポリマー分子よりもより大きな直径または見かけサイズを有するポリペプチドが得られる。更に、本発明のコンジュゲートの少なくとも大部分の見かけサイズ（「見かけ分子量」または「見かけ質量」とも呼ぶ）が少なくとも約５０ｋＤａ、例えば少なくとも約５５ｋＤａ、例えば少なくとも約６０ｋＤａ（例：少なくとも約６６ｋＤａ）であるときに有利な結果が得られることも知見された。これは、十分に大きい見かけサイズを有するコンジュゲートの場合腎クリアランスが実質的に解消されると言う事実があるためであると考えられる。本明細書中、ＩＬ−２１コンジュゲートまたはＩＬ−２１ポリペプチドの「見かけサイズ」はＳＤＳ−ＰＡＧＥ方法により測定される。
【００４８】
本発明の実施態様では、本発明に従ってペプチドにコンジュゲートされるＰＥＧは任意の分子量を有し得る。特に、分子量は５００〜１００，０００Ｄａ、例えば５００〜６０，０００Ｄａ、例えば１０００〜４０，０００Ｄａ、例えば５，０００〜４０，０００Ｄａであり得る。特に、１０，０００Ｄａ、２０，０００Ｄａまたは４０，０００ＫＤａの分子量を有するＰＥＧが本発明において使用され得る。いずれの場合も、ＰＥＧは線状または分枝状であり得る。本発明の実施態様では、ＰＥＧ基は５ｋＤａ、１０ｋＤａ、２０ｋＤａ、３０ｋＤａ、４０ｋＤａまたは６０ｋＤａである。
【００４９】
本発明の実施態様では、１つ以上のポリマー分子をＩＬ−２１またはそのアナログに付加される。
【００５０】
用語「親油性基」は、４〜４０個の炭素原子を含み、２０℃の水１００ｍｌあたり約０．１〜約２５０ｍｇ、例えば約０．３〜約７５ｍｇの溶解度を有することを特徴とする。例えば、オクタン酸（Ｃ８）は２０℃の水１００ｍｌあたり６８ｍｇの溶解度を有し、デカン酸（Ｃ１０）は２０℃の水１００ｍｌあたり１５ｍｇの溶解度を有し、オクタデカン酸（Ｃ１８）は２０℃の水１００ｍｌあたり０．３ｍｇの溶解度を有する。
【００５１】
ＩＬ−２１誘導体の作用プロフィールを満足に延ばすためには、ＩＬ−２１部分に結合させる親油性置換基は例えば４〜４０個の炭素原子、例えば８〜２５個の炭素原子を含む。親油性置換基は、結合しているアミノ酸のアミノ基とアミド結合を形成する親油性置換基のカルボキシル基によりＩＬ−２１部分のアミノ基に結合され得る。或いは、親油性置換基は、該親油性置換基のアミノ基がアミノ酸のカルボキシル基とアミド結合を形成するようにアミノ酸と結合され得る。別のオプションとして、親油性置換基は、エステル結合を介してＩＬ−２１部分に連結され得る。形式的に、エステルはＩＬ−２１部分のカルボキシル基と予定置換基のヒドロキシ基の反応により、またはＩＬ−２１部分のヒドロキシ基と予定置換基のカルボキシル基の反応により形成され得る。或いは、親油性置換基はＩＬ−２１部分の第１級アミノ基に導入されるアルキル基であり得る。
【００５２】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１誘導体はＩＬ−２１ペプチドに結合する親油性置換基を１個しか有さない。
【００５３】
本発明の１実施態様では、親油性置換基は４〜４０個の炭素原子を含む。
【００５４】
本発明の１実施態様では、親油性置換基は８〜２５個の炭素原子を含む。
【００５５】
本発明の１実施態様では、親油性置換基は１２〜２０個の炭素原子を含む。
【００５６】
本発明の１実施態様では、親油性置換は、該親油性置換基のカルボキシル基がアミノ酸残基のアミノ基とアミド結合を形成するようにアミノ酸残基に結合する。
【００５７】
他の好ましい実施態様では、追加のリシンが置換され、配列に挿入されるか、またはＮ末端またはＣ末端に付加され、その後場合により誘導体化される。挿入の好ましい領域は、タンパク質の全活性が悪影響を受けない場所である。
【００５８】
本発明の１実施態様では、親油性置換基は、該親油性置換基のアミノ基がアミノ酸残基のカルボキシル基とアミド結合を形成するようにアミノ酸残基に結合する。
【００５９】
本発明の１実施態様では、親油性置換基はＩＬ−２１ペプチドにスペーサーを用いて結合される。
【００６０】
本発明の１実施態様では、スペーサーは１〜７個のメチレン基（例えば、２個のメチレン基）を有する線状アルカンα，ω−ジカルボン酸基であり、このスペーサーはＩＬ−２１ペプチドのアミノ基と親油性置換基のアミノ基の間で架橋を形成する。
【００６１】
本発明の１実施態様では、スペーサーはＣｙｓ残基を除くアミノ酸残基またはジペプチドである。適当なスペーサーの例には、β−アラニン、γ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、γ−グルタミン酸、コハク酸、Ｌｙｓ、ＧｌｕまたはＡｓｐ、或いはジペプチド（例えば、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ）が含まれる。スペーサーがコハク酸の場合、その１つのカルボキシル基はアミノ酸残基のアミノ基とアミド結合を形成し得、その他のカルボキシル基は親油性置換基のアミノ基とアミド結合を形成し得る。スペーサーがＬｙｓ、ＧｌｕまたはＡｓｐの場合、そのカルボキシル基はアミノ酸残基のアミノ基とアミド基を形成し得、そのアミノ基は親油性置換基のカルボキシル基とアミド結合を形成し得る。Ｌｙｓをスペーサーとして使用する場合、場合により別のスペーサーをＬｙｓのε−アミノ基と親油性置換基の間に挿入させてもよい。１実施態様では、前記した更なるスペーサーはＬｙｓのε−アミノ基及び親油性置換基中に存在するアミノ基とアミド結合を形成するコハク酸である。別の実施態様では、更なるスペーサーはＬｙｓのε−アミノ基とアミド結合を形成し、親油性置換基（親油性置換基はＮε−アシル化リシン残基である）中に存在するカルボキシル基と別のアミド結合を形成するＧｌｕまたはＡｓｐである。
【００６２】
本発明の１実施態様では、スペーサーはβ−アラニン、γ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、γ−グルタミン酸、Ｌｙｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ含有ジペプチド、Ｇｌｕ含有ジペプチドまたはＬｙｓ含有ジペプチドからなる群から選択される。本発明の１実施態様では、スペーサーはβ−アラニンである。本発明の１実施態様では、スペーサーはγ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）である。本発明の１実施態様では、スペーサーはγ−グルタミン酸である。
【００６３】
本発明の１実施態様では、親ＩＬ−２１ペプチドのカルボキシル基はスペーサーのアミノ基とアミド結合を形成し、アミノ酸またはジペプチドスペーサーのカルボキシル基は親油性置換基のアミノ基とアミド結合を形成する。
【００６４】
本発明の１実施態様では、親ＩＬ−２１ペプチドのアミノ基はスペーサーのカルボキシル基とアミド結合を形成し、スペーサー基のアミノ基は親油性置換基のカルボキシル基とアミド結合を形成する。
【００６５】
本発明の１実施態様では、親油性置換基は部分的または完全に水素化したシクロペンタノフェナントレン骨格を含む。
【００６６】
本発明の１実施態様では、親油性置換基は線状または分枝状アルキル基である。本発明の１実施態様では、親油性置換基は線状または分枝状脂肪酸のアシル基である。
【００６７】
本発明の１実施態様では、親油性置換基のアシル基はＣＨ３（ＣＨ２）ｎＣＯ−（ここで、ｎは４〜３８である）、例えばＣＨ３（ＣＨ２）６ＣＯ−、ＣＨ３（ＣＨ２）８ＣＯ−、ＣＨ３（ＣＨ２）１０ＣＯ−、ＣＨ３（ＣＨ２）１２ＣＯ−、ＣＨ３（ＣＨ２）１４ＣＯ−、ＣＨ３（ＣＨ２）１６ＣＯ−、ＣＨ３（ＣＨ２）１８ＣＯ−、ＣＨ３（ＣＨ２）２０ＣＯ−及びＣＨ３（ＣＨ２）２２ＣＯ−からなる群から選択される。
【００６８】
本発明の１実施態様では、親油性置換は線状または分枝状アルカンα，ω−ジカルボン酸のアシル基である。
【００６９】
本発明の１実施態様では、親油性置換基のアシル基はＨＯＯＣ（ＣＨ２）ｍＣＯ−（ここで、ｍは４〜３８である）、例えばＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ−、ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−、ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１８ＣＯ−、ＨＯＯＣ（ＣＨ２）２０ＣＯ−及びＨＯＯＣ（ＣＨ２）２２ＣＯ−からなる群から選択される。
【００７０】
本発明の１実施態様では、親油性置換基は式ＣＨ３（ＣＨ２）ｐ（（ＣＨ２）ｑＣＯＯＨ）ＣＨＮＨ−ＣＯ（ＣＨ２）２ＣＯ−（ここで、ｐ及びｑは整数であり、ｐ＋ｑは８〜４０の整数、例えば１２〜３５の整数である）を有する基である。
【００７１】
本発明の１実施態様では、親油性置換基は式ＣＨ３（ＣＨ２）ｒＣＯ−ＮＨＣＨ（ＣＯＯＨ）（ＣＨ２）２ＣＯ−（ここで、ｒは１０〜２４の整数である）を有する基である。
【００７２】
本発明の１実施態様では、親油性置換基は式ＣＨ３（ＣＨ２）ｓＣＯ−ＮＨＣＨ（（ＣＨ２）２ＣＯＯＨ）ＣＯ−（ここで、ｓは８〜２４の整数である）を有する基である。
【００７３】
本発明の１実施態様では、親油性置換基は式−ＣＯＯＨ（ＣＨ２）ｔＣＯ−（ここで、ｔは８〜２４の整数である）を有する基である。
【００７４】
本発明の１実施態様では、親油性置換は式−ＮＨＣＨ（ＣＯＯＨ）（ＣＨ２）４ＮＨ−ＣＯ（ＣＨ２）ｕＣＨ３（ここで、ｕは８〜１８の整数である）を有する基である。
【００７５】
本発明の１実施態様では、親油性置換基は式−ＮＨＣＨ（ＣＯＯＨ）（ＣＨ２）４ＮＨ−ＣＯＣＨ（（ＣＨ２）２ＣＯＯＨ）ＮＨ−ＣＯ（ＣＨ２）ｗＣＨ３（ここで、ｗは１０〜１６の整数である）を有する基である。
【００７６】
本発明の１実施態様では、親油性置換基は式−ＮＨＣＨ（ＣＯＯＨ）（ＣＨ２）４ＮＨ−ＣＯ（ＣＨ２）２ＣＨ（ＣＯＯＨ）ＮＨ−ＣＯ（ＣＨ２）ｘＣＨ３（ここで、ｘは１０〜１６の整数である）を有する基である。
【００７７】
本発明の１実施態様では、親油性置換基は式−ＮＨＣＨ（ＣＯＯＨ）（ＣＨ２）４ＮＨ−ＣＯ（ＣＨ２）２ＣＨ（ＣＯＯＨ）ＮＨＣＯ（ＣＨ２）ｙＣＨ３（ここで、ｙは０または１〜２２の整数である）を有する基である。
【００７８】
本発明の１実施態様では、親油性置換基はＮ−リトコリルである。
【００７９】
本発明の１実施態様では、親油性置換基はＮ−コリルである。
【００８０】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１誘導体は１個の親油性置換基を有する。本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１誘導体は２個の親油性置換基を有する。本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１誘導体は３個の親油性置換基を有する。本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１誘導体は４個の親油性置換基を有する。
【００８１】
本明細書中、用語「ペプチド」、「ポリペプチド」及び「タンパク質」は互換可能に使用され、同じものを指すと解される。
【００８２】
ＩＬ−２１及びその変異体は国際特許出願公開第０４／５５１６８号に記載されているように大腸菌において発現され得る。場合により、ＩＬ−２１変異体は他の生物において組換えＤＮＡ技術により産生され得る。この目的で、ヒトＩＬ−２１関連ポリペプチドまたはＩＬ−２１変異体をコードするＤＮＡ配列は、ゲノムまたはｃＤＮＡライブラリーを作成し、標準の技術に従って合成オリゴヌクレオチドプローブを用いるハイブリダイゼーションによりタンパク質の全部またはその一部をコードするＤＮＡ配列についてスクリーニングすることにより単離され得る。本発明の目的のために、タンパク質をコードするＤＮＡ配列は好ましくはヒト起源のもの、すなわちヒトゲノムＤＮＡまたはｃＤＮＡライブラリー由来である。完全長タンパク質、タンパク質断片（例えば、リガンド結合断片）や融合ポリペプチドを含めた本発明のタンパク質ポリペプチドは慣用の技術に従って遺伝子工学操作した宿主細胞において産生され得る。適当な宿主細胞は、外因性ＤＮＡで形質転換またはトランスフェクトされ、培養で増殖され得る細胞型であり、この中には細菌、真菌細胞及び培養高級真核細胞が含まれる。真核細胞、特に多細胞生物の培養生物が好ましい。クローン化ＤＮＡ分子を操作し、外因性ＤＮＡを各種宿主細胞に導入する技術はSambrookら, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 第2版,ニューヨークのコールドスプリングハーバー所在のCold Spring Harbor Laboratory Press(1989年)発行及び上掲したAusubelらに開示されている。
【００８３】
本発明によれば、ｃＤＮＡを上記したように請求するとき請求されているものはセンス鎖及びアンチセンス鎖の両方、及び各水素結合により一緒にアニーリングされるセンス及びアンチセンス鎖の両方を有する二本鎖としてのＤＮＡであると理解される。また、本発明のポリペプチドをコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）も請求されており、このｍＲＮＡは上記ｃＤＮＡによりコードされる。メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）は、各チミンヌクレオチド（Ｔ）がウラシルヌクレオチド（Ｕ）で置換されていることを除いて上記と同一のコドンを用いてポリペプチドをコードする。
【００８４】
ＩＬ−２１ポリペプチドを宿主細胞分泌経路に向けると、分泌シグナル経路（リーダー配列、プレプロ配列またはプロ配列としても公知）が発現ベクターで得られる。分泌シグナル経路は、タンパク質のものであっても、別の分泌タンパク質（例えば）から誘導されても、デノボ合成されてもよい。分泌シグナル経路は正しい読み枠のＩＬ−２１  ＤＮＡ配列に接合させる。分泌シグナル経路は通常当該ポリペプチドをコードするＤＮＡ配列に対して５’に置かれるが、あるシグナル配列を当該ＤＮＡ配列中の他の場所に置いてもよい（例えば、Welchらの米国特許第５，０３７，７４３号；Hollandらの米国特許第５，１４３，８３０号参照)。
【００８５】
２つのアミノ酸配列の配列同一％は、タンパク質及びＤＮＡアラインメントのために有用なＮｅｅｄｅｌｍａｎ−Ｗｕｎｓｃｈアラインメントにより測定される。タンパク質アラインメントに対して使用されるデフォールトスコアリングマトリックスはＢＬＯＳＵＭ５０であり、ギャップ中の第１残基に対するペナルティーは−１２であるが、ギャップ中の追加残基に対するペナルティーは−２である。アラインメントは、ＦＡＳＴＡパッケージ，バージョンｖ２０ｕ６のアラインソフトウェア（W.R.Pearson及びD.J. Lipman, “Improved Tools for Biological Sequence Analysis”, PNAS, 85:2444-2448(1988)；W.R.Pearson, “Rapid and Sensitive Sequence Comparison with FASTP and FASTA”, Methods in Enzymology, 183:63-98(1990)）を用いて実施され得る。
【００８６】
１実施態様では、本発明において使用されるポリペプチドは単離ポリペプチドである。別の実施態様では、本発明において使用されるポリヌクレオチドは単離ポリヌクレオチドである。
【００８７】
本発明のポリペプチドを汚染高分子、特に他のタンパク質及び核酸に関して純度＞８０％、より好ましくは純度＞９０％、更に好ましくは純度＞９５％に、感染及び発熱性物質を含まないように精製することが好ましい。汚染高分子、特に他のタンパク質及び核酸に関して純度９８％以上、好ましくは純度９９．９％以上であり且つ感染及び発熱性物質を含まない医薬的に純粋な状態であることが特に好ましい。精製ポリペプチドが他のポリペプチド、特に動物起源の他のポリペプチドを実質的に含まないことが好ましい。
【００８８】
癌及びウイルス感染の併用療法においてＩＬ−２１、ＩＬ−２１アナログまたはその誘導体と一緒に使用され得る化合物または物質の下記リストは本発明の範囲を限定するものと決して解されない。
【００８９】
＜Ｉ＞．
ａ）  一般的な化学療法剤
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体及び一般的な化学療法剤を投与することにより併用療法は実施される。化学療法剤は、例えばａ）ＤＮＡレベルまたはｂ）ＲＮＡレベルに影響を与えることにより異なる作用モードを有する。
【００９０】
ＤＮＡレベルまたはＲＮＡレベルでの慣用の化学療法剤の非限定例は、代謝拮抗物質（例えば、アザチンプリン、シタラビン、リン酸フルダラビン、フルダラビン、ゲムシタビン、シタラビン、クラドリビン、カペシタビン、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、メトトレキサート、５−フルオロウラシル及びヒドロキシ尿素）、アルキル化剤（例えば、メルファラン、ブスルファン、シスプラチン、カルボプラチン、シクロホスファミド、イホスファミド、デカルバジン、プロカルバジン、クロラムブシル、チオテパ、ロムスチン、テモゾラミド）、有糸分裂阻害剤（例えば、ビノレルビン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ドセタキセル、パクリタキセル）、トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、ドキソルビシン、アムサクリン、イリノテカン、ダウノルビシン、エピルビシン、マイトマイシン、ミトキサントロン、イダルビシン、テニポシド、エトポシド、トポテカン）、抗生物質（例えば、アクチノマイシン及びブレオマイシン）、アスパラギナーゼ、或いはアントラサイクリンまたはタキサンである。
【００９１】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体及びダカルバジン（ＤＴＩＣ）を投与することにより併用療法を実施する。
【００９２】
ｂ）  放射線治療
特定の腫瘍は放射線または放射性医薬品で治療可能である。放射線源は治療対象の患者の内部または外部に置かれ得る。放射線源が患者の外部にあるとき、治療は外ビーム放射線治療（ＥＢＲＴ）として公知である。放射線源が患者の内部にあるとき、治療はブラキセラピー（ＢＴ）と呼ばれる。使用されてきた典型的な放射性原子には、ラジウム、セシウム−１３７、イリジウム−１９２、アメリシウム−２４１、金−１９８、コバルト−５７、銅−６７、テクネチウム−９９、ヨウ素−１２３、ヨウ素−１３１及びインジウム−１１１が含まれる。
【００９３】
放射線治療は、切除不可能または手術不可能な腫瘍及び／または腫瘍転移を抑制するための標準治療である。放射線治療を他の治療と組合せたときに改善された結果を得た。
【００９４】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を放射線治療と組み合わせて投与する。
【００９５】
ＭＡｂは白血病やリンパ腫及び充実性腫瘍の治療のために開発され、この原理はますます興味を引いている。これらの抗体は、腫瘍細胞の生存に不可欠な機能を阻害することにより、毒性ペイロードをデリバリーすることにより、重要なシグナル伝達事象を中断することにより、または腫瘍細胞に対する抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）または補体特異性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘導することにより働く。その後、腫瘍細胞死により、免疫系を「予防接種し」、免疫系を刺激して、腫瘍細胞を標的とする第２応答を生じさせる腫瘍抗原が放出される（以下に記載する「内部予防接種」）。過剰発現した癌遺伝子及び腫瘍特異抗原は現在開発中の多くのＭＡｂの主要標的である。
【００９６】
腫瘍抗原は、例えばH. Stauss, Y. Kawakami及びG. Parmiani: Tumor angigen recognized by T cells and antibody, Taylor and Frances(2003年)発行に記載されている。本発明は上記標的に対する抗体も包含する。本発明はウイルス抗原に対する抗体も包含する。
【００９７】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を抗体、例えばリツキシマブ、アレムツズマブ、トラスツズマブ、ゲムツズマブ、ゲムツズマブ・オゾガミシン（マイロターグ（登録商標），Ｗｙｅｔｈ）、セツキシマブ（エルビタック（商標））、ベバシズマブ、ＨｕＭａｘ−ＣＤ２０、ＨｕＭａｘ−ＥＧＦγ、ザミル及びペルツズマブと組み合わせる。
【００９８】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をリツキシマブと組み合わせる。
【００９９】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をセツキシマブと組み合わせる。
【０１００】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を組織因子に対する抗体、キラーＩｇ様受容体（ＫＩＲ）、ラミニン−５、ＥＧＦ−Ｒ、ＶＥＧＦ−Ｒ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ＨＥＲ−２／ｎｅｕまたは腫瘍抗原に対する抗体（例えば、ＰＳＡ、ＰＳＣＡ、ＣＥＡ、ＣＡ１２５、ＫＳＡ等）と組み合わせる。
【０１０１】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を治療用抗体、例えば上記した抗体と一緒に投与し、更に追加のＡＤＣＣ増強化合物（例えば、遮断抗ＫＩＲ抗体、ＮＫＧ２Ｄアゴニスト、ＮＫＧ２Ａアンタゴニスト、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５またはＩＬ−２１）と組み合わせる。
【０１０２】
本発明の別の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をウイルス抗原に対する抗体との組合せとして投与する。
【０１０３】
ｄ）細胞周期制御／アポトーシスレギュレーター
一連のレギュレーターが正常細胞周期の維持に関与している。レギュレーターを標的する化合物、例えば（ｉ）ｃｄｃ−２５［非限定例はＮＳＣ  ６６３２８４である（Puら, J. Biol. Chem., 278:46877(2003)］；（ｉｉ）細胞周期を過剰刺激するサイクリン依存性キナーゼ［非限定例はフラボピリドール（Ｌ８６８２７５，ＨＭＲ１２７５；Ａｖｅｎｔｉｓ）、７−ヒドロキシスタウロスポリン（ＵＣＮ−０１，ＫＷ−２４０１；協和発酵工業）及びロスコビチン（Ｒ−ロスコビチン，ＣＹＣ２０２；Ｃｙｃｌａｃｅｌ）であり、これらはFischer及びGianella-Borradori, Exp. Op. Invest Drugs: 12:955-970(2003)により検討されている］；及び（ｉｉｉ）癌細胞がそのテロマーを再構築するのを助ける酵素であるテロメラーゼ［非限定例はＢＩＢＲ１５３２（Dammら, EMBO J., 20:6958-6968(2001)）及びＳＯＴ−０９５（Tauchiら, Oncogene, 22:5338-5347(2003)）である］が本発明の範囲内である。更に、アポトーシス経路を妨害する薬物が本発明の範囲内であり、その非限定例はＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）／アポトーシス−２リガンド（Ａｐｏ−２Ｌ）、ＴＲＡＩＬ受容体を活性化する抗体、ＩＦＮα及びアンチセンスＢｃｌ−２（Igney及びKrammer, Nature Rev. Cancer， 2:277-288(2002)；Makin及びDive, Trends Mol. Med., 9:2519(2003)；Smythら, Immunity, 18:1-6(2003)；Panaretakisら, Oncogene, 22：4543-4556(2003)及びここに掲載されている文献を参照）である。
【０１０４】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を１つ以上の細胞周期レギュレーター及び／またはアポトーシス誘導剤と組み合わせる。
【０１０５】
本発明の実施態様では、化合物はｃｄｃ−２５、ＮＳＣ  ６６３２８４、フラボピリドール、７−ヒドロキシスタウロスポリン、ロスコビチン、ＢＩＢＲ１５３２  ＳＯＴ−０９５、ＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）／アポトーシス−２リガンド（Ａｐｏ−２Ｌ）、ＴＲＡＩＬ受容体を活性化する抗体、ＩＦＮα及びアンチセンスＢｃｌ−２からなる群から選択される。
【０１０６】
ｅ）  増殖因子阻害剤
増殖因子及び増殖因子受容体に対する多数のＭａｂが癌を治療するために開発されている。従って、非限定例として、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）ファミリーのメンバーは多くの上皮腫瘍において異常に活性化され、これはしばしばより攻撃的な臨床経過に相関している。前記受容体及びチロシンキナーゼドメインを阻害する低分子量分子の細胞外リガンド結合ドメインに対する抗体は、癌治療のために単一物質としてまたは他の抗癌薬と組み合わせて最終臨床開発段階にあるかまたは承認されている。非限定例として、ハーセプチン（モノクローナル抗体）、セツキシマブ（モノクローナル抗体）、タルセバ（低分子量阻害剤）及びイレッサ（低分子量阻害剤）が挙げられる。加えて、リガンドは受容体に結合させる前に中和され得る。
【０１０７】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を増殖因子阻害剤と組み合わせる。
【０１０８】
本発明の実施態様では、増殖因子阻害剤はハーセプチン（モノクローナル抗体）、セツキシマブ（モノクローナル抗体）、タルセバ（低分子量阻害剤）及びイレッサ（低分子量阻害剤）からなる群から選択される。
【０１０９】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をハーセプチンと組み合わせる。
【０１１０】
ｆ）  腫瘍血管新生抑制剤（抗血管形成薬及び転移抑制剤）
腫瘍増殖は十分な血液供給、よって新しい血管の発生に依存する。充実性腫瘍のこの一般的な要件が治療の観点から魅力的と見られる。すなわち、癌患者を抗血管形成薬で治療すると腫瘍増殖が抑えられ、腫瘍が退縮すると予想される。現在、天然エンドスタチン及びアンギオスタチンを含めた６０以上の抗血管形成薬が臨床試験中である（Marx, Science, 301:452-454(2003)中で精査）。従来の化学療法薬に加えて、他の薬剤及び放射線治療が抗血管形成効果を有している。本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体及び１つ以上の抗血管形成薬の併用療法である。前記抗血管形成薬の非限定例は、エンドスタチン、アンギオスタチン、血管形成を開始する因子をブロックする抗体（例えば、抗ＶＥＧＦ−アバスチン）、関連シグナル伝達経路中の主要要素を阻害することにより血管形成を抑制する低分子量化合物である。
【０１１１】
腫瘍の血管系及び細胞外基質を攻撃することに認識が高まっている。今までに、内皮細胞の遮断、アンギオスタチン及びエンドスタチンの投与、ＶＥＧＦターゲティング及び細胞外基質の基本方針が開発されてきた。
【０１１２】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を抗血管形成薬と組み合わせる。
【０１１３】
本発明の実施態様では、抗血管形成薬はアバスチン、ネオバスタット、サリドマイド、ＰＴＫ７８７、ＺＫ２２２５８４、ＺＤ−６４７４、ＳＵ６６６８、ＰＤ５４７，６３２、ＶＥＧＦ−Ｔｒａｐ、ＣＥＰ−７０５５、ＮＭ−３、ＳＵ１１２４８からなる群から選択される。
【０１１４】
ｇ）  ウイルスターゲティング
腫瘍を直接壊すために、ウイルスターゲティングは組換えウイルス、通常複製不全の組換えウイルスを用いる。原則として、ウイルスを無能にする前に少なくとも１ラウンドの複製が生ずる。よって、腫瘍が溶解し、それによりしばしば全身免疫化して保護が生ずる。このアプローチは更に免疫応答を増強するための遺伝的修飾を用いて改良された。例えば、ヒトＧＭ−ＣＳＦ遺伝子の単純ヘルペスウイルスタイプ２ベクターへの遺伝的挿入を用いると、ワクチンの効果が向上した。本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体及びウイルスターゲティングを投与することにより併用療法を実施する。
【０１１５】
ｈ）  ホルモン物質
抗アンドロゲン及び抗エステロゲン治療のようなホルモン物質は主にホルモン依存性癌（例えば、卵巣癌、乳癌及び前立腺癌）の治療において公知である。ホルモン及び抗ホルモンは、エストラムスチンリン酸、リン酸ポリエストラジオール、エストラジオール、アナストロゾール、エクセメスタン、レトロゾール、タモキシフェン、酢酸メゲストロール、酢酸メドロキシプロゲステロン、オクトレオチド、酢酸シプロテロン、ビカルタミド、フルタミド、トリトレリン、ロイプロレリン、ブセレリンまたはゴセレリンのような化合物である。
【０１１６】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をホルモン療法と組み合わせる。
【０１１７】
＜ＩＩ＞．  腫瘍細胞またはウイルス感染細胞に対する免疫応答を増強する物質
ｊ）  免疫系の効力を増強することによる癌及びウイルス感染の併用療法においてＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体と一緒に使用され得る成分または物質の以下のリストは本発明の範囲を限定すると決して意図されない。
【０１１８】
アジュバント：
免疫療法は特異的及び非特異的モダリティーからなる。非特異的免疫療法の例として、主に免疫応答の開始のための触媒として作用するアジュバントが挙げられる。ワクチンアジュバントの非限定例は、ＱＳ２１、ＧＭ−ＣＳＦ及びＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド、リポ多糖及びポリイノシン酸：ポリシチジル酸である。
【０１１９】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を１つ以上のアジュバントと組み合わせる。
【０１２０】
本発明の実施態様では、アジュバントはＱＳ２１、ＧＭ−ＣＳＦ及びＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド、リポ多糖及びポリイノシン酸：ポリシチジル酸、α−ガラクトシルセラミドまたはそのアナログ、ヒスタミン二塩酸塩または水酸化アルミニウムからなる群から選択される。
【０１２１】
サイトカイン：
サイトカインの非限定例は、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−２、ＰＥＧ−ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、ＩＬ−２１、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８ａ、ＩＬ−２８ｂ、ＩＬ−２９、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｆｌｔ３リガンドまたは幹細胞因子である。
【０１２２】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を１つ以上のサイトカインと組み合わせる。
【０１２３】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１をＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−２、ＰＥＧ−ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、ＩＬ−２１、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８ａ、ＩＬ−２８ｂ、ＩＬ−２９、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｆｌｔ３リガンドまたは幹細胞因子、或いはそのアナログまたは誘導体からなる群から選択される１つ以上の化合物と組み合わせる。
【０１２４】
本発明の実施態様では、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＰＥＧ−ＩＬ−２、ＩＬ−１８、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８ａ、ＩＬ−２８ｂ、ＩＬ−２９からなる群から選択される化合物と組み合わせる。
【０１２５】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＩＬ−２、ＰＥＧ−ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５及びＩＦＮ−αの１つと組み合わせる。
【０１２６】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＩＬ−１２と組み合わせる。
【０１２７】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１２８】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＰＥＧ−ＩＬ−２と組み合わせる。
【０１２９】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＩＬ−２、ＰＥＧ−ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５及びＩＦＮ−αの１つ以上と組み合わせる。
【０１３０】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＩＬ−２、ＰＥＧ−ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５及びＩＦＮ−αの少なくとも１つ及び１つの追加活性成分と組み合わせる。
【０１３１】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＩＬ−２、ＰＥＧ−ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５及びＩＦＮ−αの少なくとも１つ及び上記リストからの１つの追加サイトカインと組み合わせる。
【０１３２】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＩＦＮ−α及びＧＭ−ＣＳＦと組み合わせる。
【０１３３】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＩＦＮ−α及びチモペンチンと組み合わせる。
【０１３４】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＩＦＮ−γと組み合わせる。
【０１３５】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を自己ＴＩＬ及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１３６】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＩＦＮ−α及びＩＬ−１２と組み合わせる。
【０１３７】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をシスプラチン及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１３８】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をシスプラチン、タモキシフェン及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１３９】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をシスプラチン、ＤＴＩＣ、タモキシフェン及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１４０】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をシスプラチン、ＤＴＩＣ、タモキシフェン及びＧＭ−ＣＳＦと組み合わせる。
【０１４１】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をシスプラチン、カルムスチン、ＤＴＩＣ及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１４２】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をシスプラチン、カルムスチン、ＤＴＩＣ、タモキシフェン及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１４３】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をシスプラチン、カルムスチン、ＤＴＩＣ、カルボプラチン、タモキシフェン及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１４４】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をシスプラチン、ＤＴＩＣ、ビンブラスチン、タモキシフェン及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１４５】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をシスプラチン、ビンブラスチン、テモゾロミド及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１４６】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をシスプラチン、カルムスチン、ＤＴＩＣ、ビンデシン、タモキシフェン及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１４７】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をシスプラチン、タモキシフェン及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１４８】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をシスプラチン、ビンブラスチン、ＤＴＩＣ及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１４９】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＤＴＩＣ及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１５０】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＤＴＩＣ、ＧＭ−ＣＳＦ及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１５１】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＤＴＩＣ、チモシン−α及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１５２】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をビンブラスチン及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１５３】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を５−フルオロウラシル及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１５４】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をフォテムスチン及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１５５】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＤＴＩＣ及び自己ＬＡＫ細胞と組み合わせる。
【０１５６】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をゲムシタビン及びＩＦＮ−αと組み合わせる。
【０１５７】
上記した組合せに更にＩＬ−２を組み合わせてもよい。
【０１５８】
細胞免疫療法：
細胞免疫療法（または、養子免疫療法）の例には、エキソビボ増殖させた腫瘍組織浸潤Ｔ細胞または遺伝的に修飾させたＴ細胞の再注入が含まれる。
【０１５９】
本発明の１実施態様では、併用療法はＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体の投与及び細胞免疫療法の組合せである。
【０１６０】
細胞免疫療法には、患者からの抗癌応答を刺激または発揮し得る細胞を単離し、前記細胞を多数に増殖させ、同一または別の患者に再導入することが含まれ得る。１態様で、これは腫瘍特異抗原または腫瘍関連抗原を認識するＣＤ４＋またはＣＤ８＋  Ｔ細胞であり得る。別の態様で、これは腫瘍特異抗原または腫瘍関連抗原に特異的な抗体を発現するＢ細胞であり得る。別の態様で、これは腫瘍細胞を死滅させることができるＮＫ細胞であり得る。好ましい態様では、これはＤＣ増殖剤（例えば、ＧＭ−ＣＳＦまたはＦｌｔ３−Ｌ）とエキソビボで培養し、腫瘍特異抗原または腫瘍関連抗原を加え、治療を要する患者に再注入される樹状細胞（ＤＣ）であり得る。
【０１６１】
本発明の１実施態様では、併用療法はＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体の投与及び細胞免疫療法または養子療法の組合せである。
【０１６２】
本発明の実施態様では、細胞養子療法は腫瘍特異抗原または腫瘍関連抗原を認識するＣＤ４＋またはＣＤ８＋  Ｔ細胞を含む。
【０１６３】
本発明の実施態様では、細胞養子療法は腫瘍特異抗原または腫瘍関連抗原に特異的な抗体を発現するＢ細胞を含む。
【０１６４】
本発明の実施態様では、細胞養子療法は腫瘍細胞を死滅させることができるＮＫ細胞を含む。
【０１６５】
本発明の実施態様では、細胞養子療法は樹状細胞（ＤＣ）を含む。
【０１６６】
上記した実施態様では、樹状細胞をインビボでＤＣ増殖剤（例えば、ＧＭ−ＣＳＦまたはＦｌｔ３−Ｌ）と培養し、腫瘍特異抗原または腫瘍関連抗原を加え、インビボで再導入する。
【０１６７】
ｋ）  免疫系における抑制性シグナル伝達を遮断する物質
抗腫瘍及び抗ウイルス応答を含めた免疫応答は免疫系の細胞中の刺激及び抑制受容体を介するシグナル伝達のバランスにより調節される。活性化受容体を介して豊富なシグナル伝達に対してシフトすると有効な免疫応答が生じ得、抑制受容体を介する高いシグナル伝達により産生応答が少なくなり得るか、または免疫性が損なわれ得る。抗腫瘍または抗ウイルス応答を増強させるためには、活性化に対するバランスをシフトさせるべく抑制性受容体を介するシグナル伝達を治療上遮断することが有用である。従って、抑制性受容体または抑制性シグナル伝達経路を遮断する物質がＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体との併用療法のための好ましい物質である。抑制性受容体を遮断する物質の非限定例は、ＣＴＬＡ−４に対して特異的なｍＡｂ（抗ＣＴＬＡ−４）、ＫＩＲに対して特異的なｍＡｂ（抗ＫＩＲ）、ＬＩＲに対して特異的なｍＡｂ（抗ＬＩＲ）、ＣＤ９４に対して特異的なｍＡｂ（抗ＣＤ９４）またはＮＫＧ２Ａに対して特異的なｍＡｂ（抗ＮＫＧ２Ａ）である。
【０１６８】
抗アネルギー剤は、腫瘍及び癌抗原に対する寛容を壊し得る小化合物、タンパク質、糖タンパク質または抗体である。
【０１６９】
多種多様な癌形態において腫瘍組織浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の存在は改善された臨床結果に関連しているが、腫瘍抗原に対するアネルギーまたは寛容のためにはＴＩＬの活性を改善する必要が明らかにある。多くの症例で、アネルギー状態はＣＴＬＡ−４−誘導アネルギーまたは寛容を防止するモノクローナル抗体により中和され得る。動物モデル及びヒト癌患者において癌治療の有効性を改善するためにＣＴＬＡ−４を遮断することが判明しており、ＣＴＬＡ−４遮断が癌及び腫瘍抗原に対する寛容を壊すために使用され得ることが示唆されている。ＴＩＬの活性を誘導するために使用され得るモノクローナル抗体の非限定例はＭＤＸ−０１０（Phanら, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 100:8372(2003)）である。本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体及び１つ以上の癌、腫瘍またはウイルス抗原に対する寛容を壊す１つ以上の物質を投与することにより併用療法が実施される。
【０１７０】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＭＤＸ−０１０と組み合わせる。
【０１７１】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＣＴＬＡ−４に対する抗体と組み合わせる。
【０１７２】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＫＩＲに対する抗体と組み合わせる。
【０１７３】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＣＤ９４に対する抗体と組み合わせる。
【０１７４】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＮＫＧ２Ａに対する抗体と組み合わせる。
【０１７５】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体をＮＫ細胞、Ｔ細胞またはＮＫＴ細胞上で発現する抑制性受容体に対する抗体と組み合わせる。
【０１７６】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を抑制性受容体のアンタゴニストと組み合わせる。
【０１７７】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を抑制性シグナルの伝達に関与するシグナルタンパク質のアンタゴニストと組み合わせる。
【０１７８】
ｌ）  治療用ワクチン
殆ど全てのヒト癌の発生は遺伝子改変を含み、これにより腫瘍細胞中の改変分子が発現し、正常分子が過剰発現し得る。原則として、これらの変化は宿主からの免疫応答を招かなければならない（免疫監視）。明らかに、この免疫系の理論的活性化だけで非常に少数の例外症例で自然退縮が生じる。これは、他の因子の中で、興味が増している現象である「危険シグナル」の不足に起因し得る。
【０１７９】
腫瘍特異抗原は同定されており、前記抗原を予防接種すると免疫系を刺激して、腫瘍を根絶させ得る。腫瘍特異抗原（ＴＳＡ）は精巣癌抗原を例とする比較的少数の抗原である。前記遺伝子は正常組織中ではサイレントであるが、癌細胞により発現する。前記遺伝子は疾患の非常に特異的なマーカーであり、メラノーマ中に存在するＭＡＧＥ（ロラノーマ抗原遺伝子）が含まれる。
【０１８０】
腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）は、通常正常細胞により発現される分化抗原であるが、癌組織においては塊状で過剰発現する。最初特定の癌に対して特異的であると考えられている標的（例えば、ガングリオシド及びムチン抗原）は実際多くの腫瘍においてかなり共通である。一般的な分化抗原は、ＭＡＲＴ−１（Ｔ細胞により認識されるメラノーマ抗原）及びｇｐ  １００が含まれ、これらはメラノーマ、チロシナーゼ、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）及びｇｐ７５由来である。
【０１８１】
突然変異抗原：点突然変異は多くの癌で一般的であり、多くの場合Ｐ５３またはｒａｓ腫瘍遺伝子の一般的な突然変異のような類似の場所で生ずる。突然変異及び野生型ｐ５３のペプチドに対するヒト細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）応答がインビトロで誘導されることが報告されている。マウスモデルで、突然変異ｐ５３パルス樹状細胞はｐ５３特異的ＣＴＬを誘導し、確立された腫瘍の増殖を抑制し得た。
【０１８２】
ウイルス抗原：特定のウイルスは腫瘍原性であり、これらのウイルスによりコードされる遺伝子産物は免疫応答を誘発でき、よって癌抗原として働き得る。インビトロで細胞傷害性Ｔリンパ球応答を誘導することが判明しているヒトパピローマウイルスタイプ１６由来のＥ６及びＥ７タンパク質が例示される。
【０１８３】
腫瘍特異抗原、腫瘍関連抗原及び／または突然変異抗原及びウイルス抗原がペプチド、組換え精製一抗原、組換え精製抗原の組合せ及び／または抗腫瘍免疫応答を誘発させるためのワクチンとして癌細胞または腫瘍細胞から単離した精製抗原または抗原のプールとして使用され得る。また、ウイルス感染細胞に対する応答を誘発させるためのワクチン中にペプチド、組換え精製一抗原、組換え抗原の組合せ及び／またはウイルス感染細胞から単離した精製抗原または抗原のプールが使用され得る。治療用ワクチンは、自己腫瘍細胞ライゼートまたは抽出物、或いは同種異系腫瘍細胞系のライゼートまたは抽出物の形態でもあり得る。治療用ワクチンは、癌及びウイルス感染細胞に対する免疫応答を誘発するためのＤＮＡワクチンの形態でもあり得る。ＤＮＡワクチンは、抗原のみをコードする発現ベクターまたは抗原と癌及びウイルス感染細胞に対する免疫応答を増強し得るサイトカイン（例えば、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−１２またはＩＬ−２１）の両方をコードする発現ベクターから構成され得る。ＤＮＡワクチンは、抗原のみをコードするＤＮＡ配列または抗原とサイトカインの両方をコードするＤＮＡ配列を含む修飾ウイルス（例えば、鶏痘ウイルス、牛痘ウイルスまたはアデノウイルス）から構成され得る。治療用ワクチンは、癌及びウイルス感染細胞に対する免疫応答を誘発するために抗イディオタイプ抗体の形態でもあり得る。治療用ワクチンは、ＤＣ修飾剤（例えば、サイトカイン、トール様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト、ＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド、ＧＭ−ＣＳＦまたは熱ショックタンパク質）と一緒に前記抗原または該抗原から誘導されるペプチドを負荷した自己樹状細胞の形態でもあり得る。
【０１８４】
抗腫瘍応答またはウイルス感染細胞に対する応答のワクチン媒介誘発は、アジュバント、サイトカイン、トール様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト、ＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド、樹状細胞、ＧＭ−ＣＳＦまたは熱ショックタンパク質を投与することにより増強され得る。
【０１８５】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を１つ以上の治療用ワクチンと場合によりアジュバント、サイトカイン、トール様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト、ＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド、樹状細胞、ＧＭ−ＣＳＦまたは熱ショックタンパク質と一緒に投与することにより併用療法は実施される。
【０１８６】
＜ＩＩＩ＞．  腫瘍増殖、転移またはウイルス感染細胞の蔓延を妨害する物質
ｎ）  転移性癌細胞は血管の細胞外基質（ＥＣＭ）及び基底膜に侵入して、標的臓器（異所性部位）に転移する。ＥＭＣは炭水化物複合体（ヘパラン硫酸ペプチドグリカン）中に埋没されているタンパク質から構成され、腫瘍の周りのプロテイナーゼは宿主組織を分解する際に活性である。抗転移剤は前記プロテアーゼ（例えば、メタロプロテイナーゼ阻害剤）の効果を相殺する（Coussensら, Science, 295:2387-2392(2002)）。本発明の実施態様は、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体及び１つ以上の転移抑制剤（例えば、メタロプロテイナーゼ阻害剤）の併用療法である。
【０１８７】
＜ＩＶ＞．  内部予防接種
「内部予防接種」及び「内部予防接種治療」は、（ｉ）腫瘍細胞の全体に対する、または（ｉｉ）（ａ）分泌タンパク質、糖タンパク質または他の産物、（ｂ）膜関連タンパク質または糖タンパク質、或いは膜に関連するかまたは膜に挿入される他の成分及び（ｃ）細胞内タンパク質または他の細胞内成分を含めた腫瘍細胞の一部に対する免疫応答を誘発する腫瘍細胞の薬物−または放射線誘発細胞死を指す。免疫応答は体液性（すなわち、抗体−補体媒介）または細胞媒介性であり得、後者には腫瘍細胞またはその一部を認識する細胞傷害性Ｔリンパ球の発生が含まれるが、これに限定されない。内部予防接種は他の予防接種手順と多くの類似を有し、免疫原または抗原成分が内因性であり、よって腫瘍細胞の抗原性レパートリーの代表であるという作用効果を有する造血及び免疫系の同一細胞成分の多くまたはすべてが関与している。よって、内部予防接種は、腫瘍細胞死を導く癌治療のための一般的手順の使用により引き出される個人化予防接種とみなされ得る。放射線治療に加えて、腫瘍細胞死及び内部予防接種を誘導するために使用され得る薬物及び物質の非限定例は一般的な化学療法剤、細胞周期阻害剤、抗血管形成薬、モノクローナル抗体、アポトーシス誘導剤及びシグナル伝達遮断剤である。
【０１８８】
「ＩＬ−２１と内部予防接種の併用療法」は、内部予防接種の治療を受けている癌患者に対してＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を投与する併用療法を指す。ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を内部予防接種を実施する前、それと同時またはその後に投与してもよい。
【０１８９】
本発明の実施態様では、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を内部予防接種治療に含める。
【０１９０】
遺伝子治療には、細胞表現型を一時的または永久に変化させるための細胞への遺伝物質の移入が含まれる。サイトカイン、腫瘍抗原及び追加の刺激分子のデリバリーについて各種方法を調べる。本発明において、ＩＬ−２１はデリバリーされ得るかまたは同時投与され得る。本発明の実施態様では、ＩＬ−２１をポリヌクレオチドとして投与し得る。このポリヌクレオチドは国際特許出願公開第００／５３７６１号に記載されている。
【０１９１】
＜ＶＩ＞．  免疫抑制剤／免疫調節剤
ｒ）  Ｔ−リンパ球ホーミングに影響を及ぼす物質、例えばＦＴＹ−７２０。
【０１９２】
ｓ）  カルシニューリン阻害剤（例えば、バルスポダール、ＰＳＣ  ８３３）は、ＭＤＲ−１及びｐ−糖タンパク質に対する阻害効果のために細胞傷害剤に対する耐性発現を防止するのに活性である。
【０１９３】
ｔ）  ＴＯＲ阻害剤は、セリン−スレオニンキナーゼ哺乳動物ＴＯＲ（ｍＴＯＲ）をブロックすることにより作用する。シロリムス、エベロリムス及びラパマイシンのような化合物が抗増殖剤である。これらの化合物は下流シグナル伝達カスケードに関与し、よってすべての腫瘍タイプ（例えば、抗血管形成性）の治療に適切である。
【０１９４】
＜医薬組成物＞
ＩＬ−２１または他のＩＬ−２１ポリペプチドと場合により本発明に従って癌を治療する際に使用するための配合物質は、単独でまたは医薬的に許容され得る担体または賦形剤と組み合わせて１回または複数回投与され得る。上記組合せは化合物を混合した１回量単位として調製されるか、または別々に調製され得る。ＩＬ−２１または他のＩＬ−２１ポリペプチドを場合により本発明に従って癌を治療する際に使用するための配合物質と一緒に含む医薬組成物は、Gennaro編, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 第１９版, ペンシルバニア州イーストンに所在のMack Publishing Co.(1995年)出版に記載されているような慣用技術に従って医薬的に許容され得る担体または希釈剤及び他の公知のアジュバント及び賦形剤と一緒に調製され得る。組成物は、カプセル剤、錠剤、エアゾール剤、溶液剤または懸濁液剤のような慣用の形態で存在し得る。
【０１９５】
医薬組成物は適当なルート、例えば経口、経腸、経鼻、経肺、局所（バッカルまたは舌下を含む）、経皮、槽内、腹腔内、経膣及び非経口（皮下、筋肉内、腫瘍内、クモ膜下、静脈内及び皮内を含む）ルートで投与するために特別に調製され得る。好ましいルートが治療しようとする患者の全身状態及び年齢、治療対象の状態の種類及び選択する活性成分に依存することは認められている。投与ルートは、適当なまたは所望の作用部位に活性化合物を効果的に運ぶ任意のルートであり得る。
【０１９６】
経口投与用医薬組成物には固体剤形、例えば硬カプセル、軟カプセル、錠剤、トローチ剤、糖衣錠、ピル剤、口内錠剤、散剤及び顆粒剤が含まれる。適当ならば、腸溶性コーティングのようなコーティングを被せても、または当業界で公知の方法に従って活性成分の制御放出（例えば、徐放または長期放出）を与えるように調製され得る。
【０１９７】
経口投与用液体剤形には、溶液剤、エマルジョン剤、水性または油性懸濁液剤、シロップ剤及びエリキシル剤が含まれる。
【０１９８】
非経口投与用医薬組成物には、滅菌水性及び非水性注射用溶液、分散液、懸濁液またはエマルジョン、並びに使用前に滅菌注射用溶液または懸濁液で再構成される滅菌粉末が含まれる。デポ注射剤も本発明の範囲に入ると考えられる。
【０１９９】
他の適当な投与形態には、座剤、スプレー剤、軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤、吸入剤、皮膚パッチ、インプラント等が含まれる。
【０２００】
典型的な経口１日用量は体重１ｋｇあたり約０．００１〜約１００ｍｇ／ｋｇ、例えば約０．０１〜約５０ｍｇ（例：約０．０５〜約１０ｍｇ）であり、１回以上に（例えば、１〜３回）に分けて投与される。正確な用量は、ＩＬ−２１またはＩＬ−２１模擬体の種類；選択する配合物質の種類；投与頻度及びモード；治療される患者の性別、年齢、体重及び全身状態；治療する状態及び治療しようとする併発疾患の種類及び重篤度；及び当業者に自明の他の要因に依存する。
【０２０１】
組成物を当業者に公知の方法により１回量剤形で提供することが便利であり得る。１日１回以上（例えば、１〜３回）経口投与するための典型的な１回量剤形は０．０５〜約１０００ｍｇ、例えば約０．１〜約５００ｍｇ（例：約０．５〜約２００ｍｇ）を含有し得る。
【０２０２】
静脈内、槽内、筋肉内、皮下や類似の投与のように非経口投与する場合、典型的な用量は経口投与のために使用される用量の約半分くらいである。
【０２０３】
ＩＬ−２１ポリペプチドの塩は、タンパク質が固体または結晶形態のときに特に適切である。
【０２０４】
非経口投与の場合、滅菌水溶液、水性プロピレングリコール、ゴマ油または落花生油中にＩＬ−２１またはＩＬ−２１模擬体を場合により配合物質と一緒に含む溶液が使用され得る。必要ならば、前記水溶液は適当に緩衝され得、液体希釈剤により十分な食塩液またはグルコースと等張性となる。水溶液は静脈内、皮下及び腹腔内投与のために特に適している。使用される滅菌水性媒体は当業者に公知の一般技術により容易に入手することができる。
【０２０５】
適当な医薬用担体には、不活性固体希釈剤または増量剤、滅菌水溶液及び各種の有機溶媒が含まれる。固体担体の例はラクトース、白土、スクロース、シクロデキストリン、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸及びセルロースの低級アルキルエーテルである。液体担体の例はシロップ、落花生油、オリーブ油、リン脂質、脂肪酸、脂肪酸アミン、ポリオキシエチレン及び水である。また、担体または希釈剤は当業者に公知の徐放性材料、例えばモノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルを単独でまたは蝋と混合して含み得る。ＩＬ−２１またはＩＬ−２１模擬体を場合により本発明に従って癌を治療する際に使用するための配合物質と一緒に医薬的に許容され得る担体を組み合わせて形成される医薬組成物は開示されている投与ルートに適した各種剤形で容易に投与される。組成物は、有利には製薬業界で公知の方法により１回量剤形で提供され得る。
【０２０６】
経鼻投与の場合、組成物はＩＬ−２１ポリペプチドまたはＩＬ−２１模擬体をエアゾール投与用の液体担体、特に水性担体中に溶解乃至懸濁させて含み得る。この担体は添加剤、例えば可溶化剤（例えば、プロピレングリコール）、界面活性剤、吸収促進剤（例えば、レシチン（ホスファチジルコリン）、シクロデキストリン、または保存剤（例えば、パラベン）を含み得る。
【０２０７】
ＩＬ−２１またはＩＬ−２１模擬体を場合により本発明に従って癌を治療する際に使用するための配合物質と一緒に含む経口投与に適した組成物はカプセル剤や錠剤のようなばらばらの単位で提供され得、前記した各単位は所定量の活性成分を含有し、適当な賦形剤を含み得る。更に、経口的に利用され得る組成物は散剤または顆粒剤、水性または非水性液体中の溶液または懸濁液、或いは水中油型または油中水型エマルジョンの形態であり得る。
【０２０８】
経口用に意図された組成物は公知の方法に従って調製され得、前記組成物は医薬的に上品で味のよい製剤を与えるべく甘味料、矯臭剤、着色剤及び保存剤からなる群から選択される物質を１つ以上含み得る。錠剤は、錠剤の製造に適した非毒性の医薬的に許容され得る賦形剤と混合して活性成分を含有し得る。前記賦形剤の例は不活性希釈剤、例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウム；顆粒化剤及び崩壊剤、例えばコーンスターチまたはアルギン酸；結合剤、例えばデンプン、ゼラチンまたはアカシア；及び滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクであり得る。錠剤はコーティングされていなくても、胃腸管での崩壊及び吸収を遅らせて長期間に亘り持続作用を与えるように公知技術によりコーティングされていてもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルのようなタイムディレイ材料が使用され得る。援用により本明細書に含まれるとする米国特許第４，３５６，１０８号、同第４，１６６，４５２号及び同第４，２６５，８７４号に記載されている技術により錠剤をコーティングして、制御放出のための浸透性治療用錠剤を形成してもよい。
【０２０９】
経口用組成物は、活性成分と不活性固体希釈剤（例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリン）が混合されてなる硬カプセル、または活性成分と水または油媒体（例えば、落花生油、流動パラフィンまたはオリーブ油）が混合されてなる軟カプセルとしても提供され得る。
【０２１０】
水性懸濁液は、ＩＬ−２１またはＩＬ−２１模擬体を場合により配合物質と一緒に水性懸濁液を製造するのに適した賦形剤と混合して含み得る。前記賦形剤は懸濁剤、例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガム及びアカシアガムである。分散または湿潤剤は天然ホスファチド（例えば、レシチン）、アルキレンオキシドと脂肪酸の縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンステアレート）、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールの縮合生成物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、脂肪酸及びヘキシトールから誘導される部分エステルとエチレンオキシドの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート）、または脂肪酸と無水ヘキシトールから誘導される部分エステルとエチレンオキシドの縮合生成物（例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレエート）であり得る。水性懸濁液は、１つ以上の着色剤、１つ以上の矯臭剤及び１つ以上の甘味剤（例えば、スクロースまたはサッカリン）をも含み得る。
【０２１１】
油性懸濁液は、活性成分を植物油（例えば、落花生油、オリーブ油、ゴマ油またはヤシ油）または鉱油（例えば、流動パラフィン）中に懸濁させることにより調製され得る。油性懸濁液は、増粘剤（例えば、蜜ろう、硬パラフィンまたはセチルアルコール）を含み得る。味のよい経口製剤を得るために上記したような甘味剤及び矯臭剤を添加してもよい。前記組成物は酸化防止剤（例えば、アスコルビン酸）を添加することにより保存され得る。
【０２１２】
水を添加することにより水性懸濁液を調製するのに適した分散性粉末及び顆粒は活性化合物を分散または湿潤剤、懸濁剤及び１つ以上の保存剤と混合して含む。適当な分散または湿潤剤及び懸濁剤の例は既に上記されている。追加の賦形剤、例えば甘味剤、矯臭剤及び着色剤を存在させてもよい。
【０２１３】
ＩＬ−２１またはＩＬ−２１模擬体を場合により本発明に従って癌を治療する際に使用するための配合物質と一緒に含む医薬組成物は水中油型エマルジョンの形態であり得る。油性相は植物油（例えば、オリーブ油、落花生油）、鉱油（例えば、流動パラフィン）またはその混合物であり得る。適当な乳化剤は天然ガム（例えば、アカシアガムまたはトラガカントガム）、天然ホスファチド（例えば、大豆、レシチン）、脂肪酸と無水ヘキシトールから誘導されるエステルまたは部分エステル（例えば、ソルビタンモノオレエート）及び前記部分エステルとエチレンオキシドの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート）であり得る。エマルジョンは甘味剤及び矯臭剤を含み得る。
【０２１４】
シロップ及びエリキシル剤は甘味剤（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトールまたはスクロース）を用いて調製され得る。前記組成物は保護薬、保存剤、矯臭剤及び着色剤をも含み得る。医薬組成物は、滅菌注射用水性または油性懸濁液の形態であり得る。この懸濁液は上記した適当な分散または湿潤剤及び懸濁剤を用いて公知の方法に従って調製され得る。滅菌注射剤はまた、非毒性の非経口的に許容され得る希釈剤または溶媒中の滅菌注射用溶液または懸濁液、例えば１，３−ブタンジオール溶液であり得る。許容され得るビヒクル及び溶媒の中で、水、リンガー液及び等張性塩化ナトリウム溶液が使用され得る。加えて、滅菌固定油を溶媒または懸濁媒体として使用するのが便利である。このため、任意の無刺激性固定油が合成モノ−またはジ−グリセリドと併用され得る。加えて、脂肪酸（例えば、オレイン酸）が注射剤の調製で使用される。
【０２１５】
組成物は、本発明の化合物を直腸投与するための座剤の形態であり得る。この組成物は、周囲温度で固体であるが直腸で溶融して薬物を放出するように直腸温度で液体である適当な非刺激性賦形剤と薬物を混合して調製され得る。前記材料の例には、カカオ脂及びポリエチレングリコールが含まれる。
【０２１６】
局所使用する場合、本発明の化合物を含有するクリーム剤、軟膏剤、ジェル剤、溶液剤、懸濁液等が考えられる。本発明では、局所投与はマウスウオッシュ及びうがい薬を含む。
【０２１７】
ＩＬ−２１またはＩＬ−２１模擬体は、場合により本発明に従って癌を治療する際に使用するための配合物質と一緒にリポソームデリバリーシステム（例えば、単ラメラ小胞、大単ラメラ小胞及び多重ラメラ小胞）の形態で投与され得る。リポソームは各種リン脂質（例えば、コレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリン）から形成され得る。
【０２１８】
加えて、幾つかのＩＬ−２１またはＩＬ−２１模擬体は、場合により本発明に従って癌を治療する際に使用するための配合物質と一緒に水または一般的な有機溶媒と溶媒和を形成し得る。前記溶媒和も本発明の範囲に包含される。
【０２１９】
経口投与用に固体担体を使用する場合、調製物を錠剤化したり、粉末またはペレットの形で硬カプセル中に充填しても、またはトローチ剤または口内錠剤の形態としてもよい。固体担体の量は広範囲で変更可能であるが、通常約２５ｍｇ〜約１ｇであり得る。液体担体を使用する場合、製剤はシロップ剤、エマルジョン剤、軟カプセル剤または滅菌注射液剤（例えば、水性または非水性液体懸濁液剤または溶液剤）の形態であり得る。
【０２２０】
ＩＬ−２１またはＩＬ−２１模擬体は、場合により本発明に従って癌を治療する際に使用するための配合物質と一緒に治療を要する哺乳動物、特にヒトに対して投与され得る。哺乳動物には家畜（例えば、愛玩動物）及び非家畜動物（例えば、野生生物）の両方の動物が含まれ得る。
【０２２１】
本発明の化合物を含有する医薬組成物は１日または１週間に１回以上投与され得、食事時間に投与するのが便利である。医薬組成物の有効量は臨床的に有意な効果を与える量である。前記量は、治療しようとする特定状態；患者の年齢、体重及び全身健康状態；及び当業者に自明の他の要因に部分的に依存する。
【０２２２】
本発明は具体的特定実施態様で以下を提供する。
【０２２３】
本発明の別の目的は、ＩＬ−２１、そのアナログまたは誘導体を場合によっては０．１〜１００ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する本明細書中に記載されている他の化合物と一緒に含み、２．０〜１０．０のｐＨを有する医薬組成物を提供することである。前記組成物は更に、緩衝系、保存剤、等張剤、キレート化剤、安定化剤及び界面活性剤を含み得る。本発明の１実施態様では、医薬組成物は水性組成物、すなわち水を含む組成物である。前記組成物は典型的には溶液または懸濁液である。本発明の更なる実施態様では、医薬組成物は水溶液である。用語「水性組成物」は少なくとも５０％ｗ／ｗの水を含む組成物と定義される。また、用語「水溶液」は少なくとも５０％ｗ／ｗの水を含む溶液と定義され、用語「水性懸濁液」は少なくとも５０％ｗ／ｗの水を含む懸濁液と定義される。
【０２２４】
別の実施態様では、医薬組成物は、医師または患者が使用前に溶媒及び／または希釈剤を添加する凍結乾燥組成物である。
【０２２５】
別の実施態様では、医薬組成物は、予め溶解することなく直ぐに使用できる乾燥（例えば、凍結乾燥または噴霧乾燥）組成物である。
【０２２６】
更なる態様で、本発明はＩＬ−２１または上記した他の化合物と一緒に緩衝剤を含む医薬組成物に関し、前記化合物は上記したように０．１ｍｇ／ｍｌ〜、好ましくは０．５〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在し、前記組成物は約２．０〜約１０．０のｐＨを有する。好ましいｐＨは３．０〜約８．０である。特に好ましい範囲は４．０〜６．０、例えば４．０〜４．５、４．５〜５．０、５．０〜５．５及び５．５〜６．０である。
【０２２７】
本発明の別の実施態様では、組成物のｐＨは２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、８．０、８．１、８．２、８．３、８．４、８．５、８．６、８．７、８．８、８．９、９．０、９．１、９．２、９．３、９．４、９．５、９．６、９．７、９．８、９．９及び１０．０からなる群から選択される。
【０２２８】
本発明の更なる実施態様では、緩衝剤は酢酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、サイトレート、グリシルグリシン、ヒスチジン、グリシン、リシン、アルギニン、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸ナトリウム、トリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン、ビシン、トリシン、リンゴ酸、スクシネート、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、アスパラギン酸またはその混合物からなる群から選択される。これらの特定緩衝剤の各々が本発明の代替実施態様を構成する。
【０２２９】
本発明の更なる実施態様では、組成物は更に医薬的に許容され得る抗菌性保存剤を含む。本発明の更なる実施態様では、保存剤はフェノール、ｏ−クレゾール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル、２−フェノキシエタノール、ｐ−ヒドロキシ安息香酸ブチル、２−フェニルエタノール、ベンジルアルコール、クロロブタノール、チメロサール、ブロノポール、安息香酸、イミド尿素、クロロヘキシジン、デヒドロ酢酸ナトリウム、クロロクレゾール、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル、塩化ベンゼトニウム、クロロフェネシン（３ｐ−クロロフェノキシプロパン−１，２−ジオール）またはその混合物からなる群から選択される。本発明の更なる実施態様では、保存剤は０．１〜２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。本発明の更なる実施態様では、保存剤は０．１〜５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。本発明の更なる実施態様では、保存剤は５〜１０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。本発明の更なる実施態様では、保存剤は１０〜２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。これらの特定保存剤の各々が本発明の代替実施態様を構成する。医薬組成物中に保存剤を使用することは当業者に公知である。便宜上、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 第１９版（1995年）発行を参照されたい。
【０２３０】
本発明の更なる実施態様では、組成物は更に等張剤を含む。本発明の更なる実施態様では、等張剤は塩（例えば、塩化ナトリウム）、糖または糖アルコール、アミノ酸（例えば、Ｌ−グリシン、Ｌ−ヒスチジン、アルギニン、リシン、イソロイシン、アスパラギン酸、トリプトファン、スレオニン）、アルジトール（例えば、グリセロール（グリセリン）、１，２−プロパンジオール（プロピレングリコール）、１，３−プロパンジオール、１，３−ブタンジオール）、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ４００）またはその混合物からなる群から選択される。単糖、二糖または多糖のような糖または水溶性グルカン、例えばフルクトース、グルコース、マンノース、ソルボース、キシロース、マルトース、ラクトース、スクロース、トレハロース、デキストラン、プルラン、デキストリン、シクロデキストリン、可溶性デンプン、ヒドロキシエチルデンプン及びカルボキシメチルセルロース−Ｎａが使用され得る。１実施態様では、糖添加剤はスクロースである。糖アルコールは少なくとも１個の−ＯＨ基を有するＣ４−Ｃ８炭化水素と定義され、その例にはマンニトール、ソルビトール、イノシトール、ガラクシトール、ズルシトール、キシリトール及びアラビトールが含まれる。１実施態様では、糖アルコー添加剤はマンニトールである。上記した糖または糖アルコールは個別にまたは組み合わせて使用され得る。糖または糖アルコールが液体製剤中に可溶性であり、本発明の方法により達成される安定化効果に悪影響を与えない限り使用する量の限界は固定されない。１実施態様では、糖または糖アルコール濃度は約１〜約１５０ｍｇ／ｍｌである。本発明の更なる実施態様では、等張剤は１〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。本発明の更なる実施態様では、等張剤は１〜７ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。本発明の更なる実施態様では、等張剤は８〜２４ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。本発明の更なる実施態様では、等張剤は２５〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。これらの特定等張剤の各々が本発明の代替実施態様を構成する。医薬組成物中に等張剤を使用することは当業者に公知である。便宜上、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 第１９版（1995年）発行を参照されたい。
【０２３１】
本発明の更なる実施態様では、組成物は更にキレート化剤を含む。本発明の更なる実施態様では、キレート化剤はエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、クエン酸、アスパラギン酸及びその混合物からなる群から選択される。本発明の更なる実施態様では、キレート化剤は０．１〜５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。本発明の更なる実施態様では、キレート化剤は０．１〜２ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。本発明の更なる実施態様では、キレート化剤は２〜５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。これらの特定キレート化剤の各々が本発明の代替実施態様を構成する。医薬組成物中にキレート化剤を使用することは当業者に公知である。便宜上、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 第１９版（1995年）発行を参照されたい。
【０２３２】
本発明の更なる実施態様では、組成物は更に安定化剤を含む。医薬組成物中に安定化剤を使用することは当業者に公知である。便宜上、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 第１９版（1995年）発行を参照されたい。
【０２３３】
より具体的には、本発明の組成物は安定化液体医薬組成物であり、その治療活性成分には多分液体医薬での保存中に凝集物を形成するであろうポリペプチドが含まれる。「凝集物形成」は、ペプチド分子間の物理的相互作用により、溶解状態を維持し得るオリゴマー、または溶液から沈殿する目にみえる大きな凝集物が形成されることを意図する。「保存中」は、調製された液体医薬組成物または調製物が患者に直ちに投与されないことを意図する。むしろ、調製後保存のために液体形態、凍結状態、または後に患者に投与するのに適した液体形態または他の形態に再構成するための乾燥粉末の形態で包装される。「乾燥形態」は、液体医薬組成物または調製物が凍結乾燥（例えば、Williams及びPolli, J. Parenteral Sci. Technol., 38:48-59(1984)参照）、噴霧乾燥（Masters, Spray-Drying Handbook, 第5版, pp. 491-676, 英国Essezに所在のLongman Scientific and Technical(1991年)発行；Broadheadら, Drug Devel. Ind. Pharm., 18:1169-1206(1992)；Mumenthalerら，Pharm. Res., 11:12-20(1994)参照））、または風乾（Carpenter及びCrowe, Cryobiology, 25:459-470(1988)；Roser, Biopharm., 4:47-53(1991)）により乾燥されることを意図する。液体医薬組成物の保存中にそのポリペプチドが凝集物を形成すると、ポリペプチドの生物学的活性が悪影響を受け、医薬組成物の治療効果が低下する恐れがある。更に、凝集物形成は、ポリペプチド含有医薬組成物を注入システムを用いて投与するときに管、膜またはポンプの閉塞のような他の問題を引き起こすことがある。
【０２３４】
本発明の医薬組成物は更に、組成物の保存中のポリペプチドによる凝集物の形成を低下させるのに十分な量のアミノ酸塩基を含み得る。「アミノ酸塩基」は、所与のアミノ酸が遊離塩基または塩の形態で存在するアミノ酸またはその組合せを意図する。アミノ酸の組合せを使用するとき、すべてのアミノ酸が遊離塩基状態で存在していても、すべてが塩の形態で存在していても、一部が遊離塩基の形態で他が塩の形態で存在していてもよい。１実施態様では、本発明の組成物を製造する際に使用されるアミノ酸は帯電側鎖を有するもの、例えばアルギニン、リシン、アスパラギン酸及びグルタミン酸である。特定アミノ酸（例えば、グリシン、メチオニン、ヒスチジン、イミダゾール、アルギニン、リシン、イソロイシン、アスパラギン酸、トリプトファン、スレオニン及びその混合物）が遊離塩基または塩の形態で存在している限り、本発明の医薬組成物中に特定アミノ酸の立体異性体（すなわち、Ｌ、ＤまたはＤＬ異性体）及び前記異性体の組合せが存在していてもよい。１実施態様では、Ｌ−立体異性体が使用される。本発明の組成物は前記アミノ酸のアナログを用いても調製され得る。「アミノ酸アナログ」は、本発明の液体医薬組成物の保存中にポリペプチドによる凝集物形成を低下させる所望効果をもたらす天然アミノ酸の誘導体を意図する。適当なアルギニンアナログの例にはアミノグアニジン、オルニチン及びＮ−モノエチル−Ｌ−アルギニンが含まれ、適当なメチオニンアナログにはエチオニン及びブチオニンが含まれ、適当なシステインアナログにはＳ−メチル−Ｌ−システインが含まれる。他のアミノ酸も、アミノ酸アナログを遊離塩基または塩の形態で組成物中に配合する。本発明の更なる実施態様では、アミノ酸またはアミノ酸アナログはタンパク質の凝集を防止または遅延させるのに十分な濃度で使用される。
【０２３５】
本発明の更なる態様では、治療薬として作用するポリペプチドがメチオニンスルホキシドへの酸化を受けやすいメチオニン残基を少なくとも１個含むポリペプチドの場合には、前記したメチオニン残基のメチオニンスルホキシドへの酸化を抑制するためにメチオニン（または、他の硫黄含有アミノ酸またはアミノ酸アナログ）を添加してもよい。「抑制」は、メチオニン酸化種が経時的に最小にしか蓄積されないことを意図する。メチオニン酸化を抑制すると、ポリペプチドが適切な分子形態でかなり保持される。メチオニンの立体異性体（Ｌ、ＤまたはＤＬ異性体）またはその組合せが使用され得る。添加量は、メチオニンスルホキシドの量が調節作用を受けやすいようにメチオニン残基の酸化を抑制するのに十分な量でなければならない。典型的には、これは、組成物が約１０％以下〜約３０％のメチオニンスルホキシドしか含まないことを意味する。通常、これは、添加するメチオニン：メチオニン残基の比が約１：１〜約１０００：１（例えば、１０：１〜約１００：１）であるようにメチオニンを添加することにより達成され得る。
【０２３６】
本発明の更なる態様では、組成物は更に高分子量ポリマーまたは低分子量化合物からなる群から選択される安定化剤を含む。本発明の更なる態様では、安定化剤はポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ３３５０）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルピロリドン、カルボキシ／ヒドロキシセルロースまたはその誘導体（例えば、ＨＰＣ、ＨＰＣ−ＳＬ、ＨＰＣ−Ｌ及びＨＰＭＣ）、シクロデキストリン、硫黄含有物質（例えば、モノチオグリセロール、チオグリコール酸及び２−メチルチオエタノール）及び別の塩（例えば、塩化ナトリウム）から選択される。これらの特定安定化剤の各々が本発明の代替実施態様を構成する。
【０２３７】
医薬組成物は、治療活性なポリペプチドの安定性を更に高める追加安定化剤をも含み得る。本発明にとって特に興味深い安定化剤には、ポリペプチドをメチオニン酸化から保護するメチオニン及びＥＤＴＡ、並びにポリペプチドを凍結融解または機械的剪断に関連する凝集から保護するノニオン性界面活性剤が含まれるが、これらに限定されない。
【０２３８】
本発明の更なる実施態様では、組成物は更に界面活性剤を含む。本発明の更なる実施態様では、界面活性は洗剤、エトキシル化ヒマシ油、ポリグリコール化グリセリド、アセチル化モノグリセリド、ソルビタン脂肪酸エステル；ポリオキシプロピレン−ポリオキシエチレンブロックポリマー（例えば、プルロニック（登録商標）Ｆ６８、ポロキサマー１８８及び４０７、トリトンＸ−１００のようなポロキサマー）；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル；ポリオキシエチレン及びポリエチレン誘導体（例えば、アルキル化及びアルコキシル化誘導体（例：ツイーン−２０、ツイーン−４０、ツイーン−８０及びＢｒｉｊ−３５のようなツイーン）；モノグリセリドまたはそのエトキシル化誘導体；ジグリセリドまたはそのポリオキシエチレン誘導体；アルコール、グリセロール、レクチン及びリン脂質（例えば、ホスファチジルセリン，ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ジホスファチジルグリセロール及びスフィングミエリン）；リン脂質誘導体（例えば、ジパルミトイルホスファチジン酸）及びリソホスホ脂質誘導体（例えば、パルミトイルリソホスファチジル−Ｌ−セリン及びエタノールアミン、コリン、セリンまたはスレオニンの１−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェートエストル）；リソホスファチジル及びホスファチジルコリンのアルキル、アルコキシ（アルキルエーテル）、アルコキシ（アルキルエーテル）誘導体（例えば、リソファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、並びにコリン、エタノールアミン、ホスファチジン酸、セリン、スレオニン、グリセロール、イノシトールである極性頭基の修飾物、正帯電したＤＯＤＡＣ、ＤＯＴＭＡ、ＤＣＰ、ＢＩＳＨＯＰ、リソファチジルセリン及びリソファチジルスレオニンのラウロイル及びミリストイル誘導体）；グリセロリン脂質（例えば、セファリン）；グリセロ糖脂質（例えば、ガラクトピラノシド）、スフィンゴ糖脂質（例えば、セラミド、ガングリオシド）；ドデシルホスホコリン；ニワトリ卵リソレシチン；フシジン酸誘導体（例えば、タウロ−ジヒドロフシジン酸ナトリウム等）；長鎖脂肪酸及びその塩Ｃ６−Ｃ１２（例えば、オレイン酸及びカプリル酸）；アシルカルニチン及び誘導体；リシン、アルギニンまたはヒスチジンのＮα−アシル化誘導体、リシンまたはアルギニンの側鎖アシル化誘導体；リシン、アルギニンまたはヒスチジン及び中性または酸性アミノ酸の組合せからなるジペプチドのＮα−アシル化誘導体；中性アミノ酸と２つの帯電アミノ酸の組合せからなるトリペプチドのＮα−アシル化誘導体；ＤＳＳ（ドクサートナトリウム、ＣＡＳ登録番号［５７７−１１−７］）、ドクサートカルシウム（ＣＡＳ登録番号［１２８−４９−４］）、ドクサートカリウム（ＣＡＳ登録番号［７４９１−０９−０］）；ＳＤＳ（ドデシル硫酸ナトリウムまたはラウリル硫酸ナトリウム）；カプリル酸ナトリウム；コール酸またはその誘導体；胆汁酸及びその塩；並びにグリシンまたはタウリンコンジュゲート；ウルソデオキシコール酸、コール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム、グリココール酸ナトリウム、Ｎ−ヘキサデシル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アンモニオ−１−プロパンスルホネート；アニオン性（アルキル−アリール−スルホネート）１価界面活性剤；双イオン性界面活性剤（例えば、Ｎ−アルキル−Ｎ，Ｎ−ジメルアンモニオ−１−プロパンスルホンネート、３−コールアミド−１−プロピルジメチルアンモニオ−１−プロパンスルホネート）；カチオン性界面活性剤（例えば、臭化セチルトリメチルアンモニウム、塩化セチルピリジニウムのような第４級アンモニウム塩基）；ノニオン性界面活性剤（例えば、ドデシルβ−Ｄ−グルコピラノシド）；プロピレンオキシド及びエチレンオキシドをエチレンジアミンに順次添加することにより誘導される四官能性ブロックコポリマーであるポロキサマー（例えば、Ｔｅｔｒｏｎｉｃ’ｓ）；イミダゾリン誘導体類から選択される界面活性剤；またはその混合物から選択される。これらの特定界面活性剤の各々が本発明の代替実施態様を構成する。医薬組成物中に界面活性剤を使用することは当業者に公知である。便宜上、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 第１９版（1995年）発行を参照されたい。
【０２３９】
本発明のペプチド医薬組成物中に他の成分を存在させることができる。前記した追加成分には、湿潤剤、乳化剤、酸化防止剤、増量剤、張性調節剤、キレート化剤、金属イオン、油性ビヒクル、タンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン、ゼラチンまたはタンパク質）及び双イオン物質（例えば、ベタイン、チウリン、アルギニン、グリシン、リシン及びヒスチジンのようなアミノ酸）が含まれ得る。勿論、追加成分は本発明の医薬組成物の全安定性に悪影響を及ぼしてはならない。
【０２４０】
本発明に従ってＩＬ−２１または上記した他の化合物を含有する医薬組成物は治療を要する患者に対して複数の部位に、例えば局所部位（例：皮膚及び粘膜部位）、吸収を迂回する部位（例えば動脈内、静脈内、心臓内）及び吸収を伴う部位（例えば、皮膚内、皮膚下、筋肉内または腹部内）に投与され得る。
【０２４１】
本発明の医薬組成物の治療を要する患者に対する投与は、複数の投与ルートを介して、例えば舌、舌下、バッカル、口内、経口、胃及び腸内、鼻、肺（例えば、細気管支及び肺胞を介して）またはその組合せ、表皮、真皮、経皮、経膣、直腸、眼（例えば、結膜を介して）、尿管及び非経口を介してなされ得る。
【０２４２】
本発明の組成物は複数の剤形で、例えば溶液剤、懸濁液剤、エマルジョン剤、マイクロエマルジョン剤、複合エマルジョン剤、泡剤、軟膏剤、ペースト剤、硬膏剤、軟膏剤、錠剤、コーティング錠剤、リンス剤、カプセル剤（例えば、硬カプセル剤及び軟カプセル剤）、座剤、直腸カプセル剤、滴剤、ゲル剤、スプレー剤、散剤、エアゾル剤、吸入剤、点眼剤、眼軟膏剤、眼リンス剤、膣ペッサリー、膣リング、膣軟膏、注射用液剤、現場変換溶液（例えば、現場ゲル化、現場硬化、現場沈殿、現場結晶化）、注入溶液及びインプラントとして投与され得る。
【０２４３】
本発明の組成物は、ＩＬ−２１または上記した他の化合物の安定性を更に高めるため、バイオアベイラビリティーを向上させるため、溶解度を増加させるため、副作用を減らすため、当業者に公知の時間療法を達成するため、及び患者のコンプライアンスを高めるためまたはその組合せのために、例えば共有、疎水性及び静電的相互作用を介して薬物担体、ドラッグデリバリーシステム及び高度ドラッグデリバリーシステムに混合させるかまたは結合させてもよい。担体、ドラッグデリバリーシステム及び高度ドラッグデリバリーシステムの例には、ポリマー（例えば、セルロース及び誘導体）、多糖（例えば、デキストラン及び誘導体、デンプン及び誘導体）、ポリ（ビニルアルコール）、アクリレート及びメタクリレートポリマー、ポリ乳酸及びポリグリコール酸及びそのブロックコポリマー、ポリエチレングリコール、担体タンパク質（例えば、アルブミン）、ゲル（例えば、当業者に公知のブロックコポリマー系のような熱ゲル化系）、ミセル、リポソーム、ミクロスフェア、ナノ粒子、液晶及びその分散液、脂質−水系における相挙動の当業者に公知のＬ２相及びその分散液、ポリマーミセル、複合エマルジョン、自己乳化・自己微乳化シクロデキストリン及びその誘導体、並びにデンドリマーが含まれるが、これらに限定されない。
【０２４４】
本発明の組成物は、ＩＬ−２１または上記した他の化合物を例えばいずれも当業者に公知のデバイスである計量吸入器、乾燥粉末吸入器及びネブライザーを用いて肺投与するための固体、半固体、粉末及び液体製剤中で使用される。
【０２４５】
本発明の組成物は、特に制御放出、徐放、遅延放出、遅滞放出及び緩慢放出ドラッグデリバリーシステムの製剤中で使用される。より具体的には、組成物は非経口の制御放出及び徐放システムの製剤において使用されるが、これらに限定されない。これらのシステムは当業者に公知であり、投与回数を何分の１に減らすことができる。より好ましくは、制御放出及び徐放システムは皮下投与される。本発明の範囲を限定しないが、有用な制御放出システム及び組成物の例はヒドロゲル、油性ゲル、液晶、ポリマーミセル、ミクロスフェア、ナノ粒子である。
【０２４６】
本発明の組成物にとって有用な制御放出系の作成方法には、結晶化、凝縮、共結晶化、沈殿、共沈殿、乳化、分散、高圧均質化、カプセル化、噴霧乾燥、マイクロカプセル化、コアセルベーション、相分離、ミクロスフェアを生成するための溶媒蒸発、押し出し及び超臨界流動プロセスが含まれるが、これらに限定されない。概略的には、Handbook of Pharmaceutical Controlled Release，D.L.Wise編, ニューヨークに所在のMarcel Dekker(2000年)出版及びDrug and the Pharmaceutical Sciences, 99巻: Protein Formulation and Delivery, E.J.MacNally編，ニューヨークに所在のMarcel Dekker(2000年)出版を参照されたい。
【０２４７】
非経口投与は注射器、場合によってはペン様注射器を用いて皮下、筋肉内、腹腔内または静脈内投与により実施され得る。或いは、非経口投与は注入ポンプを用いて実施され得る。更なるオプションは、ＩＬ−２１または上記した他の化合物を投与するための溶液または懸濁液であり得る鼻または肺スプレーの形態の組成物である。更なるオプションは、ＩＬ−２１または上記した他の化合物を含有する医薬組成物は、例えば無針注射によるかまたはパッチ（場合により、イオン泳動パッチ）からの経皮投与または経粘膜投与（例えば、バッカル投与）に適している。
【０２４８】
用語「安定化組成物」は、高い物理的安定性、高い化学的安定性または高い物理的／化学的安定性を有する組成物を指す。
【０２４９】
本明細書中で使用される用語タンパク質組成物の「物理的安定性」は、タンパク質を熱−機械的ストレス及び／または脱安定化している界面及び表面（例えば、疎水性表面及び界面）に曝した結果としてタンパク質がタンパク質の生物学的に不活性な及び／または不溶性な凝集物を形成する傾向を指す。水性タンパク質組成物の物理的安定性は、適当な容器（例えば、カートリッジまたはバイアル）に充填した組成物を異なる温度で異なる期間機械的／物理的ストレス（例えば、撹拌）にかけた後に目視検査及び／または濁度の測定により評価される。組成物の目視検査は、暗背景ではっきりと焦点を合わせた光を用いて実施する。組成物の濁度は、濁度を例えば０〜３のスケールでランク付ける視覚スコアにより特徴づけられる（濁度を示さない組成物は視覚スコア０に相当し、昼間光下で濁りが見える組成物は視覚スコア３に相当する）。組成物を昼間光下で濁りが見えるとき組成物はタンパク質凝集に関して物理的に不安定と分類される。或いは、当業者に公知の簡単な濁度測定により組成物の濁度を評価することができる。水性タンパク質組成物の物理的安定性はタンパク質の立体配座状態の分光物質またはプローブを用いても評価され得る。好ましいプローブはタンパク質の非天然コンフォーマーに優先的に結合する小分子である。タンパク質立体配置の小分子分光プローブの１例がチオフラビンＴである。チオフラビンＴは、アミロイドフィブリルを検出するために広く使用されている蛍光染料である。フィブリル及び多分タンパク質構造をも存在する場合、チオフラビンＴは約４５０ｎｍで新しい励起最大を生じ、フィブリルタンパク質形態に結合しているときには約４８２ｎｍで高い発光を生ずる。非結合チオフラビンＴは前記波長で本質的に非蛍光である。
【０２５０】
タンパク質構造の天然状態から非天然状態への変化のプローブとして他の小分子が使用され得る。例えば、「疎水性パッチ」プローブはタンパク質の露出疎水性パッチに優先的に結合する。この疎水性パッチは、通常天然状態のタンパク質の３次元構造内に埋まっているが、タンパク質がアンフォールデイングまたは変性し始めると露出されるようになる。小分子の分光プローブの例は芳香族疎水性染料（例えば、アントラセン、アクリジン、フェナントロリン等）であり得る。他の分光プローブは金属−アミノ酸複合体（例えば、疎水性アミノ酸（例：フェニルアラニン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、バリン等）のコバルト金属複合体）である。
【０２５１】
本明細書中で使用される用語タンパク質組成物の「化学的安定性」はタンパク質構造における化学的共有結合の変化を指し、この変化により天然タンパク質構造に比して潜在的に低い生物学的力価及び／または潜在的に高い免疫原性を有する化学的分解産物が形成される。天然タンパク質のタイプ及び種類並びにタンパク質が曝される環境に応じて各種の化学的分解産物が形成され得る。化学的分解の解消は多分完全には避けることができず、当業者に公知のようにタンパク質組成物の保存及び使用中に大量の化学分解産物がしばしば見られる。多くのタンパク質は、グルタミニルまたはアスパラギニル残基中の側鎖アミド基が加水分解されて遊離カルボン酸を形成するプロセスである脱アミド化を受けやすい。他の分解経路は、２つ以上のタンパク質分子がトランスアミド化及び／またはジスルフィド相互作用により相互に共有結合して、共有結合したダイマー、オリゴマー及びポリマー分解産物が形成される高分子量形質転換産物の形成を含む（Stability of Protein Pharmaceuticals, T.J.Ahern及びM.C.Manning, ニューヨークに所在のPlenum Press(1992年）出版）。別の化学分解例として、（例えば、メチオニン残基の）酸化が挙げられ得る。タンパク質組成物の化学安定性は、異なる環境条件に曝した後の異なる時点で化学分解産物の量を測定することにより評価され得る（多くの場合、分解産物の形成は例えば温度を上昇させることにより加速され得る）。各分解産物の量はしばしば、分子サイズ及び／または電荷に応じて分解産物を各種クロマトグラフィー技術（例えば、ＳＥＣ−ＨＰＬＣ及び／またはＲＰ−ＨＰＬＣ）を用いて分離することにより調べる。
【０２５２】
従って、上に概説したように、「安定化組成物」は高い物理的安定性、高い化学的安定性または高い物理的／化学的安定性を有する組成物を指す。通常、組成物は有効期限が切れるまで使用及び保存中（推奨される使用及び保存条件に合致して）安定でなければならない。
【０２５３】
本発明の１実施態様では、ＩＬ−２１または上記した他の化合物を含む医薬組成物は６週間以上の使用中及び３年間以上の保存中安定である。
【０２５４】
本発明の別の態様では、ＩＬ−２１または上記した他の化合物を含む医薬組成物は４週間以上の使用中及び３年間以上の保存中安定である。
【０２５５】
本発明の更なる態様では、ＩＬ−２１または上記した他の化合物を含む医薬組成物は４週間以上の使用中及び２年間以上の保存中安定である。
【０２５６】
本発明の更なる態様では、ＩＬ−２１または上記した他の化合物を含む医薬組成物は２週間以上の使用中及び２年間以上の保存中安定である。
【０２５７】
本発明の更なる態様では、ＩＬ−２１または上記した他の化合物を含む医薬組成物は１週間以上の使用中及び１８月間以上の保存中安定である。
【０２５８】
本発明の更なる態様では、ＩＬ−２１または上記した他の化合物を含む医薬組成物は１日間の使用中及び１８月間以上の保存中安定である。
【実施例】
【０２５９】
＜薬理学的方法＞
以下のインビトロ方法をＡＤＣＣの増強を調べるために用いる。
【０２６０】
標的抗原を発現する標的細胞を該標的抗原に対する抗体及び効果細胞としての末梢血液単核細胞、ＮＫ細胞、好中球、マクロファージ、単球またはＤＣとインキュベートする。効果細胞をＩＬ−２１と１〜１０日間プレインキュベートしても、またはＩＬ−２１を効果細胞及び標的細胞を含む培養物に添加してもよい。ＡＤＣＣを増強させることができる他の化合物を培養物またはプレインキュベーション培養物に含めてもよい。ＡＤＣＣの効率は、標的細胞からの特異的５１Ｃｒの放出として、または文献（Golayら, Haematologica, 88:1002-1012(2003)；Liuら, Cancer Immun., 2:13(2002)；Watanabeら, Breast Cancer Res. Treat., 53:199-207(1999)）に記載されているＬＤＨ活性として測定される。
【０２６１】
ＡＤＣＣは、文献（Fliegerら, J. Immunother., 23:480-486(2000)；Fliegerら, J. Immunol. Methods, 180:1-13(1995)；Fliegerら, Hybridoma, 18:63-68(1999)）に記載されているフローサイトメトリーに基づくアッセイを用いて測定。
【０２６２】
ＡＤＣＰは、Watanabeら, Breast Cancer Res. Treat., 53:199-207(1999)またはAkewanlopら, Cancer Res., 61:4061-4065(2001)に記載されている２色蛍光アッセイを用いて測定。
【０２６３】
ＡＤＣＣの増強のインビボ測定方法を以下に概説する：
白血病細胞または形質転換細胞を同系動物にｉ．ｖ．、ｉ．ｐ．またはｓ．ｃ．注射した後、白血病細胞または形質転換細胞が発現する抗原を認識する治療用抗体を場合によりＩＬ−２１治療と一緒に用いて治療する。終点は腫瘍があり、生存である。ＡＤＣＣの関与は、ＦｃγＲＩ遮断抗体を用いるかまたはＦｃγＲＩ−欠乏マウスを用いて確認され得る。
【０２６４】
ヒト起源の標的細胞に対するＡＤＣＣの増強を調べるためのインビボ方法は、既にZhangら, Blood, 102:284-288(2003)またはFlavellら, Cancer Res., 58:5787-5794(1998)に記載されている。これらの方法に従って、ヒト白血病細胞または形質転換細胞をＳＣＩＤマウスにｉ．ｖ．、ｉ．ｐ．またはｓ．ｃ．注射した後、白血病細胞または形質転換細胞が発現する抗原を認識する治療用抗体を場合によりＩＬ−２１治療と一緒に用いて治療する。
【０２６５】
腫瘍細胞系、例えばＬｅｗｉｓ肺癌（ＬＬＣ）細胞、Ｂ１６−Ｆ１０メラノーマ細胞、ｒｅｎｃａ腎細胞癌細胞または４Ｔ１乳癌細胞を同系マウスにｓ．ｃ．移植する。腫瘍が触診可能になり始めたき、ＩＬ−２１を本明細書に記載されている他の抗癌剤と一緒に用いてマウスを治療する。この方法は、Palumboら, Cancer Res., 62:6966-6972(2002)；Boveら, Biochem. Biophys. Res. Commun., 291:1001-1005(2002)；Wiggintonら, J. Immunol., 169:4467-4474(2002)に記載されている。
【０２６６】
腫瘍細胞系、例えばＬｅｗｉｓ肺癌（ＬＬＣ）細胞またはＢ１６−Ｆ１０メラノーマ細胞を同系マウスにｓ．ｃ．移植する。１〜４週間後一次腫瘍を除去し、ＩＬ−２１を本明細書に記載されている他の抗癌剤と一緒に用いてマウスを治療する。この方法は、Palumboら， Cancer Res., 62:6966-6972(2002)に記載されている。
【０２６７】
腫瘍細胞系、例えばＬｅｗｉｓ肺癌（ＬＬＣ）細胞、Ｂ１６−Ｆ１０メラノーマ細胞またはｒｅｎｃａ腎細胞癌細胞を同系マウスにｉ．ｖ．注入し、ＩＬ−２１を本明細書に記載されている他の抗癌剤と一緒に用いてマウスを治療する。この方法は、Amirkhosraviら, Thromb. Haemost., 87:930-936(2002)；Hosakaら, Cancer Lett., 161:231-240(2000)；Mainiら, In vivo, 17:119-123(2003)に記載されている。
【０２６８】
ｒｅｎｃａ腎細胞癌細胞を同系マウスの１つの腎臓に腎内に注入する。１〜４週間後一次腫瘍を除去し、ＩＬ−２１を本明細書に記載されている他の抗癌剤と一緒に用いてマウスを治療する。この方法は、Murphyら, J. Immunol., 170:2727-2733(2003)に記載されている。
【手続補正書】
【提出日】平成23年3月7日(2011.3.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）ヒトＩＬ−２１、（ｂ）ＩＬ−２１のアナログおよび（ｃ）ＩＬ−２１の誘導体から成る群から選択される第１の成分と、
ラジウム、セシウム−１３７、イリジウム−１９２、アメリシウム−２４１、金−１９８、コバルト−５７、銅−６７、テクネチウム−９９、ヨウ素−１２３、ヨウ素−１３１およびインジウム−１１１から成る群から選択される放射性医薬品から成る群から選択される第２の成分と
の組合せ。
【請求項２】
（ａ）ヒトＩＬ−２１、（ｂ）ＩＬ−２１のアナログおよび（ｃ）ＩＬ−２１の誘導体から成る群から選択される第１の成分と、
細胞周期レギュレーターまたはアポトーシス誘導剤を含む第２の成分であって、ｃｄｃ−２５、ＮＳＣ  ６６３２８４、フラボピリドール、７−ヒドロキシスタウロスポリン、ロスコビチンおよびＢＩＢＲ１５３２  ＳＯＴ−０９５から成る群から選択される第２の成分と
の組合せ。
【請求項３】
（ａ）ヒトＩＬ−２１、（ｂ）ＩＬ−２１のアナログおよび（ｃ）ＩＬ−２１の誘導体から成る群から選択される第１の成分と、
アバスチン、ネオバスタット、サリドマイド、ＰＴＫ７８７、ＺＫ２２２５８４、ＺＤ−６４７４、ＳＵ６６６８、ＰＤ５４７，６３２、ＶＥＧＦ−Ｔｒａｐ、ＣＥＰ−７０５５、ＮＭ−３およびＳＵ１１２４８から成る群から選択される抗血管形成薬を含む第２の成分と
の組合せ。
【請求項４】
（ａ）ヒトＩＬ−２１、（ｂ）ＩＬ−２１のアナログおよび（ｃ）ＩＬ−２１の誘導体から成る群から選択される第１の成分と、
ＩＦＮ−αを含む第２の成分と、
チモペンチンを含む第３の成分と
の組合せ。
【請求項５】
（ａ）ヒトＩＬ−２１、（ｂ）ＩＬ−２１のアナログおよび（ｃ）ＩＬ−２１の誘導体から成る群から選択される第１の成分と、
シスプラチンを含む第２の成分と、
ＩＦＮ−αを含む第３の成分と
の組合せ。
【請求項６】
タモキシフェン成分をさらに含む請求項５に記載の組合せ。
【請求項７】
ダカルバジン（ＤＴＩＣ）成分をさらに含む請求項６に記載の組合せ。
【請求項８】
ＧＭ−ＣＳＦ成分をさらに含む請求項７に記載の組合せ。
【請求項９】
カルムスチン成分をさらに含む請求項７に記載の組合せ。
【請求項１０】
カルボプラチン成分をさらに含む請求項９に記載の組合せ。
【請求項１１】
ビンブラスチン成分をさらに含む請求項７に記載の組合せ。
【請求項１２】
カルムスチン成分をさらに含む請求項１１に記載の組合せ。
【請求項１３】
ビンブラスチン成分およびＤＴＩＣ成分をさらに含む請求項５に記載の組合せ。
【請求項１４】
（ａ）ヒトＩＬ−２１、（ｂ）ＩＬ−２１のアナログおよび（ｃ）ＩＬ−２１の誘導体から成る群から選択される第１の成分と、
ビンブラスチンを含む第２の成分と、
ＩＦＮ−αを含む第３の成分と
の組合せ。
【請求項１５】
（ａ）ヒトＩＬ−２１、（ｂ）ＩＬ−２１のアナログおよび（ｃ）ＩＬ−２１の誘導体から成る群から選択される第１の成分と、
ＤＴＩＣを含む第２の成分と、
ＩＦＮ−αを含む第３の成分と
の組合せ。
【請求項１６】
ＧＭ−ＣＳＦをさらに含む請求項１５に記載の組合せ。
【請求項１７】
チモシン−αをさらに含む請求項１５に記載の組合せ。
【請求項１８】
（ａ）ヒトＩＬ−２１、（ｂ）ＩＬ−２１のアナログおよび（ｃ）ＩＬ−２１の誘導体から成る群から選択される第１の成分と、
フォテムスチンを含む第２の成分と、
ＩＦＮ−αを含む第３の成分と
の組合せ。
【請求項１９】
（ａ）ヒトＩＬ−２１、（ｂ）ＩＬ−２１のアナログおよび（ｃ）ＩＬ−２１の誘導体から成る群から選択される第１の成分と、
ゲムシタビンを含む第２の成分と、
ＩＦＮ−αを含む第３の成分と
の組合せ。
【請求項２０】
癌またはウイルス感染の治療のための薬剤を医薬的に許容され得る添加剤と一緒に製造するための、請求項１から１９の何れか１項に記載の組合せの使用。
【外国語明細書】
2011137008000001.pdf