(57)【要約】      （修正有）【課題】葉酸を高濃度に含有する食用植物体及びその製造法を提供する。【解決手段】10〜25℃の範囲の温度において、葉酸を0.1〜1質量％の濃度で含有し、pHが5.8〜6.3である水溶液に、食用植物体の一部を常時または断続的に浸漬し、食用植物体の残部は、食用植物体が蒸散作用し得るように葉酸含有水溶液の外に常時または断続的に維持して、葉酸を200μg／100gフレッシュウェィト（FW）以上含有する食用植物体を得る。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
葉酸を含有する食用植物体を製造する方法であって、
10〜25℃の範囲の温度において、葉酸を0.1〜1質量％の濃度で含有し、pHが5.8〜6.3である水溶液に、前記食用植物体の一部を常時または断続的に浸漬し、前記食用植物体の残部は、前記食用植物体が蒸散作用し得るように前記葉酸含有水溶液の外に常時または断続的に維持して、葉酸を200μg／100gフレッシュウェィト（FW）以上含有する食用植物体を得ることを特徴とする前記方法。
【請求項２】
前記食用植物体を、静置した容器内で葉酸含有水溶液と接触させる請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記食用植物体の葉酸含有水溶液への浸漬は、６〜２４時間行う請求項１〜２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４】
前記食用植物体がスプラウトである請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記スプラウトがベビーリーフである請求項４に記載の方法。
【請求項６】
葉酸を200μg/100gFW以上含有するスプラウト。
【請求項７】
葉酸含有量が、400μg/100gFW以上である請求項６に記載のスプラウト。
【請求項８】
スプラウトがベビーリーフである請求項６〜７のいずれか１項に記載のスプラウト。
【請求項９】
スプラウトがカイワレダイコンのスプラウトであり、葉酸含有量が、1000〜3500μg/100gFWの範囲である請求項６〜８のいずれか１項に記載のスプラウト。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、葉酸含有食用植物体の製造方法および葉酸含有スプラウトに関する。特に本発明は、葉酸を高濃度に含有する食用植物体の製造方法、およびこの方法で製造できる葉酸含有スプラウトに関する。
【背景技術】
【０００２】
葉酸（ようさん）はビタミンM、ビタミンB9、プテロイルグルタミン酸とも呼ばれ、水溶性ビタミンに分類される生理活性物質である。葉酸は体内で還元を受け、ジヒドロ葉酸を経てテトラヒドロ葉酸に変換された後に補酵素としてはたらく。葉酸の栄養所要量は、推定平均必要量が200μg、推奨量が240μg、上限量が1,000μg（いずれも成人男女）とされている。ただし、妊娠期および授乳期にはさらに推定平均必要量として+170μg、+80μgを、推奨量として+200μg、+100μgを付加するようにされている。また、妊娠を計画している、あるいは妊娠の可能性のある女性は、一日あたり400μgの摂取が望ましいとされる。葉酸を多く含む食品は、レバー、緑黄色野菜、果物であるが、調理や長期間保存による酸化によって葉酸は壊れるため、新鮮な生野菜や果物が良い供給源となる。葉酸を高濃度含有する食用の植物体としてエダマメでも240μg/100gFW程度である。そのため、これらの物質を一定量摂取するためには、「いわゆるサプリメントや薬品として摂取する」か「大量に生野菜をとる」以外の方法は存在しないのが現状である。しかし、日本の食文化は、米国などサプリメント先進国のそれと異なり、機能性物質を「普段の食事によって摂取する」ことに価値を置いている。そのため、いわゆるサプリメントや薬品ではなく、ベビーリーフなどの生きた野菜から機能性物質を摂取することには大きな意義がある。
【０００３】
このような背景から、葉酸を高含有する植物体が簡易に製造できれば、その社会的ニーズは大きいと考えられる。しかしながら、上記のように葉酸を高濃度含有する栽培植物体は現在栽培されておらず、その生産に関する研究もほとんど行われていないのが現状である。
【０００４】
植物のアミノ酸類、ペプチド類、ビタミン類の吸収に関する従来技術としては、特開平6-57288号公報（特許文献１）、特開2003-9666号公報（特許文献２）がある。前者はアミノ酸誘導体等を植物に吸収させ芳香を増強した植物体を製造することを、後者は、含硫アミノ酸等を施用することによって植物の発根を促進することを目的としており、いずれの特許も植物中の特定のアミノ酸類、ペプチド類、ビタミン類の含量の増強に関して何ら言及しておらず、アミノ酸類、ペプチド類、ビタミン類の吸収によって植物体内の濃度がどの程度変動するのかについては何らデータを示していない。
【０００５】
また、植物等に、ビタミンＢ12を吸収させることが特開2004-065240号公報（特許文献３）に開示されているが、処理する物質をビタミンB12に限定しており、植物中の葉酸の増強に関して何ら言及しておらず、葉酸の吸収によって植物体内の蓄積含量がどの程度変動するのかについては何らデータを示していない。
【０００６】
植物にアミノ酸などを蓄積させることが特開2002-305998号公報（特許文献４）に開示されているが、処理によって食味を変化させることを目的としており、葉酸についてはなんら言及していない。また、吸収処理の条件設定や、植物体内の蓄積含量がどの程度変動するのかについては何らデータを示していない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開平6-57288号公報
【特許文献２】特開2003-9666号公報
【特許文献３】特開2004-065240号公報
【特許文献４】特開2002-305998号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
このような状況から、従来技術には葉酸を高濃度に含有する食用の植物体及びこれらの食用の植物体の製造法に相当する技術はなく、そのような植物体も存在しないのが現状である。そのため、自然な形で葉酸を高濃度に含有する食用の植物体の開発は非常に有意義であると考えられる。
【０００９】
そこで本発明の目的は、葉酸を含有する食用植物体の製造方法、及びこの製造方法を利用した葉酸を含有するスプラウトを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
このような状況の中で、本発明者らは、上記従来技術に鑑みて、葉酸を高濃度含有する植物体を簡易に製造する技術の開発について鋭意研究を積み重ねた。その結果、一定濃度以上の特定の葉酸溶液に植物体を一定時間以上、特別な条件の下で浸漬処理することによってこれらの物質を高濃度で含有する植物体を製造できることを見出し、更に研究を重ねて、本発明を完成するに至った。
【００１１】
本発明は以下の通りである。
［１］
葉酸を含有する食用植物体を製造する方法であって、
10〜25℃の範囲の温度において、葉酸を0.1〜1質量％の濃度で含有し、pHが5.8〜6.3である水溶液に、前記食用植物体の一部を常時または断続的に浸漬し、前記食用植物体の残部は、前記食用植物体が蒸散作用し得るように前記葉酸含有水溶液の外に常時または断続的に維持して、葉酸を200μg／100gフレッシュウェィト（FW）以上含有する食用植物体を得ることを特徴とする前記方法。
［２］
前記食用植物体を、静置した容器内で葉酸含有水溶液と接触させる［１］に記載の方法。
［３］
前記食用植物体の葉酸含有水溶液への浸漬は、６〜２４時間行う［１］〜［２］のいずれか１項に記載の方法。
［４］
前記食用植物体がスプラウトである［１］〜［３］のいずれか１項に記載の方法。
［５］
前記スプラウトがベビーリーフである［４］に記載の方法。
［６］
葉酸を200μg/100gFW以上含有するスプラウト。
［７］
葉酸含有量が、400μμg/100gFW以上である［６］に記載のスプラウト。
［８］
スプラウトがベビーリーフである［６］〜［７］のいずれか１項に記載のスプラウト。
［９］
スプラウトがカイワレダイコンのスプラウトであり、葉酸含有量が、1000〜3500μg/100gFWの範囲である［６］〜［８］のいずれか１項に記載のスプラウト。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の製造方法によれば、200μg/100gFW以上の高濃度の葉酸を含有する食用植物体の製造することができる。さらに、本発明によれば、通常の状態では、葉酸含有量が少ないスプラウトについても、200μg/100gFW以上の高濃度の葉酸を含有するスプラウトを得ることができる。本発明により提供される葉酸を高濃度に含有する食用の植物体は、自然な形で葉酸を高濃度に含有するものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明は、葉酸を200mg/100gFW以上含有する食用植物体を製造する方法である。本発明の製造方法では、葉酸を含有する水溶液に食用植物体を浸漬し、葉酸を食用植物体に蓄積含有させて、葉酸を含有する食用植物体を製造する。本発明の製造方法においては、食用植物体を、その一部を葉酸含有水溶液に常時または断続的に浸漬し、残部は蒸散作用し得るように葉酸含有水溶液の外に常時または断続的に維持する。さらに、食用植物体及び葉酸含有水溶液は10〜25℃に維持される。
【００１４】
従来も、例えば、漬け物等の食用植物体について、特定のアミノ酸を添加する方法は知られている。しかし、通常は、アミノ酸を添加する食用植物体全体を、特定のアミノ酸を含有する溶液に浸漬することで行われる。それに対して、本発明の製造方法では、食用植物体の一部は、葉酸含有水溶液に常時または断続的に浸漬し、残部は蒸散作用し得るように葉酸含有水溶液の外に常時または断続的に維持する。さらに、漬け物等の食用植物体について、特定のアミノ酸を添加する方法では、食用植物体は、植物体の鮮度を維持するという観点から比較的低温(例えば、5℃前後)に維持される。それに対して、本発明の製造方法では、10〜25℃の範囲の温度に維持される。本発明者らの実験によれば、蒸散作用を利用する本発明の製造方法においては、5℃未満の温度では、上記物質の食用植物体への移行が極めて遅く、上記物質を200μg/100gFW以上含有する食用植物体を製造することは実質的にできなかった。
【００１５】
本発明の製造方法において食用植物体は、例えば、スプラウトであることができる。スプラウトは、芽出し野菜とも呼ばれ、発芽させた種子及びそこから生育する幼植物体である。さらに、食用植物体は、ベビーリーフであることができる。ベビーリーフは、スプラウトの中でも20日前後で収穫されるものであり、本葉３枚程度展開した幼植物体である。本発明の製造方法では、植物の種類にもよるが、発芽後3〜30日程度の食用植物体を用いることが適当である。本発明では、スプラウトになり得る植物体は特に制限はないが、例えば、キャベツ、ブロッコリー、みずな、クレソン、ルッコラ、かいわれ大根、普通ソバ、ダッタンそば、ねぎ、にら、シソ、ミント、バジル、ほうれん草、アルファルファ、あずき、みつば、パセリ、セロリ、コムギ、オオムギ、稲等が適当である。さらに、ベビーリーフになり得る植物体は、例えば、ほうれん草、スイスチャード、ビート、ルッコラ、ターサイ、みずな、マスタード、ケール、チコリー、エンダイブ、レタス、みつば、キャベツ、セロリ、クレソン、パクチョイ、ブロッコリー、サントウサイ、バジル、シソ、コマツナであることもできる。
【００１６】
本発明の製造方法において食用植物体としてスプラウトを用いる場合、スプラウトの根を葉酸含有水溶液に常時または断続的に浸漬し、根以外を葉酸含有水溶液の外に常時または断続的に維持する。具体的には、スプラウトの25%以上、95%以下の部分が水溶液の外に常時または断続的に維持さることが、良好な蒸散作用が見られ、葉酸の植物体への吸収が良好に進むことから好ましい。
【００１７】
本発明の製造方法において食用植物体としてベビーリーフを用いる場合、閉鎖型容器に培用土を入れてベビーリーフを栽培し、葉酸の施用は、播種後２０日前後に葉酸含有水溶液を直接培用土に施用し、栽培用土のpHを5.8〜6.5に維持することが葉酸の吸収が良好に進むことから好ましい。栽培用土のpHを5.8〜6.5に維持するには、pHを5.8〜6.5に調整した葉酸含有水溶液を用いるとともに、栽培用土のpHをベビーリーフの栽培前に5.8〜6.5に調整しておくことが好ましい。栽培用土のpHを事前に5.8〜6.5に調整するには、例えば、pHが高い場合は硫酸第一鉄を添加することで下げ、低い場合は消石灰を添加することで上げる等を実施することができる。
【００１８】
また、スプラウトを、静置した容器内で葉酸含有水溶液と接触させることもできる。その場合は、スプラウトの根は葉酸含有水溶液に常時に浸漬し、根以外は葉酸溶液の外に常時維持することで、スプラウトへの葉酸含有水溶液の吸収を促進することができる。
【００１９】
植物体及び葉酸含有水溶液は、10℃〜25℃の温度に維持する。この温度は、好ましくは20℃から25℃である。温度が10℃を下回ると十分な吸収が行われない。また、25℃を超えると、十分な吸収量が得られないだけでなく、褐変、萎れなどが生じるため好ましくない。特に20℃から25℃の温度であれば、葉酸の吸収が速やかであり、かつ植物体の褐変や萎れなども生じることがなく、良好な葉酸含有植物体が得られる。また、葉酸含有水溶液への浸漬は、暗黒下よりも、光照射下で行うことが、蒸散作用を促進して、物質吸収を促進するという観点から好ましい。光条件を制御することで、植物体の溶液の吸収性が一層よくなる。
【００２０】
食用植物体の水溶液への浸漬は、6時間以上24時間以下とすることが適当である。好ましくは6〜12時間接触させる。この場合、接触時間が6時間に満たない場合は、十分な吸収が行われない場合があり、また、24時間を超えると、処理効率が悪いばかりか、吸収量が同じで接触処理で植物体等を傷める場合がある。大まかな接触時間の目安としては６〜12時間である。浸漬時間は、設定温度及び食用植物体への前記物質の所望含有量を考慮して、適宜設定される。
【００２１】
葉酸含有水溶液の葉酸濃度は、0.1〜1％濃度（質量濃度）の範囲とし、好ましくは0.2〜1%の範囲、より好ましくは0.5〜1％の範囲、さらに好ましくは約0.75％である。上記範囲とすることで、所望含有量の葉酸を含有する植物体を比較的短時間で得ることができる。葉酸濃度が0.1%未満では、所望含有量の葉酸を含有する植物体を得るのに長時間を要し、一方、１％を超えると、植物体自体の萎れや枯れを引き起こし生育不良となる。
【００２２】
葉酸含有水溶液のpHは、5.8〜6.5の範囲とする。実施例で示すように、pHが5.8未満では、葉酸の溶解度が低く、所望の濃度の葉酸を含有する植物体を得るのに適さない。一方、pHが6.5を超えると植物体に対してダメージを与えることがある。従って、本発明では、葉酸含有水溶液のpHは、5.8〜6.5の範囲とする。
【００２３】
植物体に葉酸を吸収させる時期は特に限定はないが、吸収処理後栽培時間が長くなると葉酸の蓄積含量が低下する傾向があるため、植物体の栽培の最終段階で処理を行うのが好適である。植物体への詳細な吸収方法の一例を以下に説明する。まず、濃度0.1〜1％の葉酸含有水溶液を調製する。具体的には、葉酸を通常の水に上記の濃度となるように溶し込めばよい。なお葉酸の溶解をスムーズに行うために葉酸を0.1Nの水酸化ナトリウムに溶解し、1Nの塩酸でpHを5.8〜6.5にしたものを使用すると、葉酸吸収効率が良く好ましい。葉酸吸収効率を向上させる目的等で溶液には葉酸にミネラル活性液のような液肥やキトサン等の殺菌剤、アスコルビン酸等の酸化防止剤、組織の褐変を促進する酵素の阻害剤などを加えてもよい。例えば、溶液にキトサン、カテキン、アスコルビン酸、クエン酸、コハク酸、酒石酸、エチルアルコール、ヒノキチオール、ミネラル、カルシウム塩などを加えれば、より安定的に吸収効率を高めて葉酸を吸収させることが可能である。
【００２４】
具体的には、カイワレダイコンの場合には、播種後6〜10日後のカイワレダイコンのスプラウトの底部の根の部分を葉酸含有水溶液に一定時間浸漬すればよい。また、ロロロッサ、スイスチャード、ターサイ、ミズナ、ルッコラ、チコリーなどのベビーリーフでは、播種後10〜30日後のベビーリーフの栽培用土に直接、葉酸含有水溶液を施用すればよい。このとき葉酸含有水溶液が培用土から流出しないように閉鎖型容器で栽培するか、あるいは穴の空いた容器で栽培した場合は、葉酸含有水溶液施用時に穴を塞いで施用することが適当である。これらの場合、カイワレダイコンやベビーリーフは蒸散の水ポテンシャル差を利用し道管を介して葉酸を吸収する。そのため効率的に蒸散をさせるため、光条件下で10〜25℃での葉酸施用が重要である。光条件下とは、自然光、蛍光灯、陽光ランプ等、植物が光合成可能な光源下で、継続あるいは断続して光を浴びることができる条件下のことである。このように各種形態の植物体を上記のように葉酸含有水溶液に浸漬させることにより、葉酸を高濃度で含有する植物体を簡易、効率的に製造することができる。
【００２５】
本発明によれば、葉酸含有量が、200μg/100gFW以上、好ましくは400μg/100gFW以上である食用植物体が得られる。葉酸含有量の上限については、食用植物体の種類により、実質的に含有させることができる上限量は変化するが、通常、500μg/100gFW程度である。但し、例えば、カイワレダイコンの場合は、3500μg/100gFW程度までであれば、葉酸を含有させることができる。
【００２６】
本発明によれば、種々の食用植物体について、葉酸含有量を高めた食用植物体を容易に製造できる。本発明では、通常、葉酸をほとんど含有しないスプラウトであっても、また、葉酸をほとんど含有しないベビーリーフであっても、葉酸含有量が、200μg/100gFW以上であるものを提供できる。また、通常の状態(葉酸含有水溶液ではなく、水で栽培した場合)でも葉酸を含有する植物体については、本発明の製造方法で、葉酸含有量を高めたものとすることができる。
【００２７】
本発明の植物体を一定量食することにより、通常では植物体からの自然な形での摂取量が少ない葉酸を簡易に摂取することが可能になる。一般に、植物体の葉酸の含量は、例えば、同種類の植物であっても、その栽培方法、栽培条件、個体差などにより種々異なり、葉酸についてはほとんどそれを含有していない植物体もある。本発明によれば、それらの差異にかかわらず、植物体を葉酸、溶液で処理し、植物体内のその蓄積含量を天然のものに対して飛躍的に上昇させることが可能である。
【実施例】
【００２８】
次に、実施例に基づいて本発明を具体的に説明するが、以下の実施例は本発明の好適な例を示すものであり、本発明は当該実施例によって何ら限定されるものではない。
【００２９】
例１
葉酸を0.1Nの水酸化ナトリウム溶液に1.0％になるように完全に溶解させ、その後0.1Nの塩酸でpHを調整し、一般的に使用される水耕栽培用水耕液のpH領域pH5.5〜6.5を含むpH3.0〜8.0となるようにした。このとき、葉酸が溶けずに沈殿する領域と完全に溶解する領域を確認した。またこの葉酸溶液を15000rpm（TOMY  MRX-150）で遠心分離して不溶葉酸を沈殿させ、上清を0.45μmフィルターでろ過後分析試料とした。葉酸の測定は高速液体クロマトグラフィー（島津）を用い、溶離液は20mMのH2PO4：メタノールの混合液（80：20v/v）およびメタノールのグラジエントを行った。カラムはODS（Intakt、Cadenza  CD-C18）、カラム温度37℃、検出波長290nmの条件で分析した。溶液の葉酸含量は濃度（％）で示した。その結果を表１に示す。これより、pH5.5〜5.7では葉酸は溶解しにくく、pH5.8から6.5では十分溶解することがわかる。葉酸を吸収処理するための葉酸溶液のpHは5.8〜6.5にすれば効率的に葉酸高含有食用植物体、例えばベビーリーフを生産できることが判る。
【００３０】
【表１】
2011182672.tif 000002
【００３１】
例２
6種類のベビーリーフを生産し、収穫直前のベビーリーフに以下の条件で葉酸を吸収させ、葉酸高含有ベビーリーフを製造した。ベビーリーフは一般市販されている6品種のベビーリーフ用種子、アカザ科1品種‘スイスチャード’、‘アブラナ科3品種‘ターサイ’、‘早生ミズナ’、‘ルッコラ’キク科2品種‘チコリー（イタリアンレッド）’、‘ロロロッサ’を用いた。
【００３２】
プラスチック容器（Ziplocコンテナー：旭化成製）の底に穴をあけ、園芸培土300mlと蒸留水150mlを入れ、各種子25粒ずつ播種し（3反復）、温室で自然日長25℃で栽培した。播種後5日目からハイポネックス1000倍液（窒素：リン酸：カリ＝0.1：0.2：0.1％）50mlを適宜施用し、潅水は適宜行った。播種後20日目（本葉3枚展開程度）に、葉酸0.2％溶液を150ml施用した(実施例1)．比較例1のベビーリーフは葉酸溶液の代わりに水150mlを施用した．播種後21日目に地上部のみ収穫した。
【００３３】
ベビーリーフの葉酸の定量は、生産直後のベビーリーフを用い、高速液体クロマトグラフィーを用いて測定した。すなわち、葉茎は非可食部分の根を取り除いて水洗し、その10gを採り40mlの80％エタノールを加えホモジナイザーで粉砕した。粉砕サンプルはろ紙で吸引ろ過後にエバポレーターで濃縮乾固した。濃縮物は0.1Mリン酸緩衝液（pH6.1）で溶出させて10mlに定容して総葉酸（ToFA）測定用とした。ToFA測定は3mgのパンクレアチンを入れ37℃で24時間処理し、100℃10min煮沸して反応を停止させた。これを0.45μmフィルターでろ過後分析試料とした。葉酸の測定は高速液体クロマトグラフィー（島津）を用い、溶離液は20mMのH2PO4：メタノールの混合液（80：20v/v）およびメタノールのグラジエントを行った。カラムはODS（Intakt、Cadenza  CD-C18）、カラム温度37℃、検出波長290nmの条件で分析した。葉酸含量は新鮮重量（ＦＷ）当たりの含量で示した。含量はＦＷ重量当たりの含量で示した。その結果を表２に示す。これより、すべての実施例１のベビーリーフでは、比較例１のベビーリーフよりも高い葉酸を含有しており、本発明により、簡易、効率的に葉酸高含有ベビーリーフを生産できることが判る。
【００３４】
【表２】
2011182672.tif 000003
【００３５】
例３
カイワレダイコンの縦型スプラウトを生産し、収穫直前のスプラウトに以下の条件で葉酸を吸収させ、葉酸高含有スプラウトを製造した。カイワレダイコンは通常の縦型スプラウト製造方法に準じて行った。すなわちウレタンマット上に適量の種子を播き、温室で自然日長25℃で栽培した。6時間ごとに2分の潅水を行い、適度に生育した段階で収穫した。吸収処理は、以下の方法で行った。1.0％葉酸溶液を調製し、上記の方法で得られたカイワレダイコンの根の部分を上記溶液に25℃で24時間、光条件下で浸漬させ葉酸を吸収させた(実施例2)。比較例2のカイワレダイコンは溶液の代わりに水を用い同条件で処理した。
【００３６】
カイワレダイコンの葉酸の生産直後のカイワレダイコンを用い定量は、実施例１と同条件で、高速液体クロマトグラフィーを用いで行った。葉酸含量は新鮮重量（FW）当たりの含量で示した。その結果を表３に示す。比較例２のカイワレダイコンは、比較例１のベビーリーフより高い葉酸含量を示したが濃度のより高い葉酸液（1.0％）を施用することで実施例２のようにさらに高含有なカイワレダイコンを生産することができ、本発明により葉酸含量の異なる食用植物体でも葉酸濃度を変えることで容易に葉酸含量を高めることができることがわかる。
【００３７】
【表３】
2011182672.tif 000004
【００３８】
例４
葉酸を吸収させる場合の葉酸の濃度の影響を見るため、葉酸濃度を変えた溶液を用いて、実施例１と同条件で葉酸高含有ベビーリーフ（ロロロッサ）を作成し、実施例２と同条件で葉酸高含有カイワレダイコンを作成して、それぞれの吸収効率等に対する濃度の影響を評価した。ロロロッサおよびカイワレダイコンの葉酸の定量は、生産直後の植物体を用い実施例１と同条件で高速液体クロマトグラフィーを用いて測定した。葉酸含量は新鮮重量（ＦＷ）当たりの含量で示した。その結果を表４に示す。これより、ロロロッサおよびカイワレダイコンでは葉酸溶液0.75％の溶液を用いると効率よく吸収されることが判った。
【００３９】
【表４】
2011182672.tif 000005
【００４０】
例５
葉酸を蓄積させた植物体の、保存時における葉酸蓄積含量の安定性を調べるため、実施例１と同様の方法でプラスチック容器（Ziplocコンテナー：旭化成製）の底に穴をあけ、園芸培土300mlと蒸留水150mlを入れ、各種子25粒ずつ播種し（3反復）、温室で自然日長25℃で栽培した。播種後5日目からハイポネックス1000倍液（窒素：リン酸：カリ＝0.1：0.2：0.1％）50mlを適宜施用し、潅水は適宜行った。播種後20日目（本葉3枚展開程度）に、葉酸0.75％溶液を150ml施用した。播種後21日目に地上部のみ収穫した。調製した葉酸を蓄積させたロロロッサを用い、4℃、湿度95%、暗黒条件での葉酸含量の安定性評価（貯蔵試験）を行った。
【００４１】
ベビーリーフの葉酸の定量は、貯蔵試験終了後に実施例１と同条件で高速液体クロマトグラフィーを用いて測定した。葉酸含量は新鮮重量（FW）当たりの含量で示した。その結果を表５に示す。これより、ロロロッサは保存中に葉酸の濃度の低下がほとんどなく、安定的にそれぞれ葉酸を含有していることが判った。これより、本発明の方法によって作成された葉酸、高含有のベビーリーフ中の葉酸は保存中に分解等受けずに非常に安定的に保持されることが判る。
【００４２】
【表５】
2011182672.tif 000006
【００４３】
例６
葉酸を吸収させる場合の吸収処理時間の影響を見るため、葉酸の浸漬時間を変えて、実施例２と同条件で葉酸高含有カイワレダイコンを作成し、吸収効率等に対する浸漬時間の影響を評価した。カイワレダイコンの葉酸の定量は、生産直後のカイワレダイコンを用い実施例１と同条件で高速液体クロマトグラフィーを用いて測定した。葉酸含量は新鮮重量（FW）当たりの含量で示した。その結果を表６に示す。これより、葉酸溶液6時間以上の浸漬処理を行うと効率よく吸収されることが明らかになった。但し、浸漬時間を24時間に延ばしても6時間の場合と大差無いことが判る。
【００４４】
【表６】
2011182672.tif 000007
【００４５】
例７
葉酸を吸収させる場合の温度の影響を見るため、葉酸の吸収処理時の温度条件を変えて、実施例１と同条件でベビーリーフ（ロロロッサ）を作成し、播種後20日目（本葉3枚展開程度）に、葉酸0.75％溶液を150ml施用し、グロースチャンバーを温度5℃、10℃、15℃、20℃、25℃および30℃に設定して。24時間吸収処理した。播種後21日目に地上部のみ収穫し、葉酸吸収に及ぼす温度の影響を評価した。ロロロッサの葉酸の定量は、生産直後のロロロッサを用い実施例１と同条件で高速液体クロマトグラフィーを用いて測定した。葉酸含量は新鮮重量（ＦＷ）当たりの含量で示した。その結果を表７に示す。これより、ロロロッサでは葉酸吸収は10℃〜25℃で効率よく吸収することがわかる。特に15℃での吸収が最も高く、30℃になると植物体のしおれが見られた。
【００４６】
【表７】
2011182672.tif 000008
【産業上の利用可能性】
【００４７】
本発明は、野菜製造等の農業、食品分野に有用である。