(57)【要約】【課題】柿葉、ビワ葉、桑葉、茶葉、ヨモギ葉、ドクダミ地上部、それぞれの材料を水蒸気蒸留に供して安価な芳香蒸留水を得ることができれば産業上の意義は大きい。それらの材料を得るための植物は、すでに日本各地で栽培され、ないしは自生しており、栽培に関わる生産コストは大幅に軽減できる。また、回収した植物材料の前処理法を工夫し、それによって機能性のより高い芳香蒸留水を得ることができれば、付加価値の高い製品の実用化に結びつく。【解決手段】柿葉、ビワ葉、桑葉、茶葉、ヨモギ葉、ドクダミ地上部、各材料をあらかじめ乾燥し、それらを水蒸気蒸留に供することよって、揮発成分を多く含み、安価で、機能性のより高い芳香蒸留水を得ることができる。本発明の芳香蒸留水は、いずれもカンジダに対する菌糸形阻害活性、および抗酸化活性を発揮する。具体的な応用例としては、カンジダに対する予防効果を期待した口腔洗浄剤および腟洗浄剤、抗酸化活性によるアンチエイジング効果を期待した化粧水があげられる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
柿葉、ビワ葉、桑葉、茶葉、ヨモギ葉、ドクダミ地上部それぞれから得られる芳香蒸留水であって、それらの植物材料をあらかじめ乾燥した後、水蒸気蒸留に供して得られることを特徴とする芳香蒸留水
【請求項２】
生の植物材料から得られる芳香蒸留水よりも強い抗カンジダ活性を発揮することを特徴とする、茶葉からのものを除く請求項１記載の芳香蒸留水
【請求項３】
生の植物材料から得られる芳香蒸留水よりも強い抗酸化活性を発揮することを特徴とする請求項１記載の芳香蒸留水
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、柿葉、ビワ葉、桑葉、茶葉、ヨモギ葉、ドクダミ地上部それぞれから得られる芳香蒸留水であって、それらの植物材料をあらかじめ乾燥した後、水蒸気蒸留に供して得られる芳香蒸留水およびその用途に関する。
【背景技術】
【０００２】  一般的に芳香蒸留水は、芳香性ハーブを水蒸気蒸留して精油と同時に分別して得られる水層部分を指し、水溶性の揮発成分を含んでいる。これまではラベンダー、ローズ、カモミールなどの有名ハーブから得られる芳香蒸留水がよく知られていて、化粧水などに用いられてきた。しかしながら日本各地で栽培され、ないしは自生している柿、ビワ、桑、茶、ヨモギ、またはドクダミについては、昔から民間療法で用いられてきた歴史はあるものの、それらの乾燥材料に由来する芳香蒸留水についての知見は全く知られていなかった。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】  芳香性ハーブから芳香蒸留水を得るためには、新たに広大な面積でのハーブの栽培が必要であって、そのためには多額の投資が必要となる。しかしながら、すでに日本各地で栽培され、ないしは自生している柿、ビワ、桑、緑茶、ヨモギ、ドクダミといった材料を利用することができれば、栽培に関わる生産コストは大幅に軽減できる。そこで本発明者らは、これら植物の葉または地上部について水蒸気蒸留を試みたところ、予想よりもはるかに多くの揮発成分を含む芳香蒸留水を製造し得ることを見出した。
【課題を解決するための手段】
【０００４】  さらに本発明者らは、同じ植物材料を用いて、機能性のより高い芳香蒸留水を得るための方法を種々検討した。その結果、それぞれの材料を予め乾燥し、その後水蒸気蒸留に供すれば、得られる芳香蒸留水は生の材料から得られる芳香蒸留水と成分組成を大きく異にし、より強い機能性を発揮することを見出して本発明を完成させた。従来、芳香蒸留水の調製には、乾燥工程の必要性をとくに意識せず、生の材料をそのまま用いてきた。また芳香性ハーブから得られる芳香蒸留水については、同じ材料を生のまま、または乾燥して得られるものの間で、成分組成が大きく異なるとの情報は報告されていない。したがって本発明者らが得た知見は新規である。
本発明に使用される植物は、日本中いたるところで栽培され、ないしは自生していて、容易に原料が確保できる。したがって特別に新たな栽培をおこなう必要は一切ない。回収した植物の乾燥も、必ずしも特別な装置は必要とせず、室内において２週間程度の風乾で十分である。
柿  Ｄｉｏｓｐｙｒｏｓ  ｋａｋｉ（カキノキ科）は、中国が原産地で、果実用に日本各地で栽培されている。柿葉は、昔から民間で高血圧予防や美肌を目的に用いられてきた。柿葉の成分としては、フラボノイド、トリテルペン、ビタミンＣ、タンニンなどが知られているが、芳香蒸留水にはこれらの成分は見いだせず、代わりにこれまで存在が報告されていなかったモノテルペン、有機酸、アルコールなどが認められた。具体的には、生葉からの芳香蒸留水には、３−ヘキセノール、リナロール、サリチル酸メチルが、乾燥葉からの芳香蒸留水には、カルボン、カプロン酸、オイゲノールが、それぞれ主成分として含まれていた。
カルボンは抗菌、去痰といった作用をもつモノテルペンで、従来、スペアミントやキャラウェイといった芳香性ハーブに含まれていることが知られていた。乾燥した柿葉からの芳香蒸留水に、芳香性ハーブ由来の芳香蒸留水以上のカルボンが含まれていることは産業的な視点からみて極めて興味深い。
ビワ  Ｅｒｉｏｂｏｔｒｙａ  ｊａｐｏｎｉｃａ（バラ科）は、果実用に日本各地、とりわけ南部に多く栽培されている。ビワ葉は、昔から民間で強壮、疲労回復、湿疹やあせもの改善などに用いられてきた。成分としては、アミグダリン、トリテルペン、タンニン、ペクチン、クエン酸などが知られている。しかし、これらの成分は芳香蒸留水には見いだせず、代わりに、生葉からのものには３−ヘキセノールやリナロールが、乾燥葉からのものにはカルボンやフェニルアセトアルデヒドが、それぞれ主成分として含まれていた。
ビワ葉や柿葉の芳香蒸留水は、材料を乾燥することによって、その中に含まれる主要成分濃度が大幅に上昇し、その含有量は有名ハーブの芳香蒸留水に匹敵した。
桑  Ｍｏｒｕｓ  ｓｐ．（クワ科）は、養蚕用に日本各地で栽培されている。桑葉は、昔から民間で血糖上昇抑制、血清中の中性脂肪やコレステロールの減少、血圧低下などに用いられてきた。成分としては、デオキシノジリマイシン、ガンマ・アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、フラボノイド、シトステロールなどが知られている。しかし、これらの成分は芳香蒸留水には見いだせず、代わりに、生葉からのものには３−ヘキサナールや３−ヘキセノールが、乾燥葉からのものには３−ヘキサナールやサリチル酸メチルが、それぞれ主成分として含まれていた。
茶  Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（ツバキ科）は、茶葉の採取を目的に日本各地で栽培されている。緑茶葉には、発汗、利尿、収斂、殺菌などの作用が知られており、成分としては、カフェイン、カテキンなどのフラボノイド、タンニンなどが知られている。しかし、これらの成分は芳香蒸留水には見いだせず、代わりに、生葉からのものには３−ヘキセノールやベンチルアルコールが、乾燥葉からのものにはベンチルアルコールやフェネチルアルコールが、それぞれ主成分として含まれていた。緑茶葉に多く含まれるカフェインは、芳香蒸留水には全く見いだせなかった。
ヨモギ  Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｐｒｉｎｃｅｐｓ（キク科）は、日本各地に自生する雑草の仲間で、その若葉は食用に供される。またヨモギ葉は、民間療法で血液循環の改善、冷え症、止血、虫さされ、抗アレルギーなどに用いられてきた。葉の裏面の毛だけを集めたのがモグサで、お灸に使われる。成分としては、モノテルペン（１，８−シネオールなど）、セスキテルペン、フラボノイドなどが知られている。しかし、これらの成分は乾燥葉からの芳香蒸留水には見いだせず、代わりに、ボルネオールや１，８−シネオールが、それぞれ主成分として含まれていた。生葉からのものには、１，８−シネオール、カンファー、ボルネオールが、それぞれ主成分として含まれていた。
ドクダミ  Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａ  ｃｏｒｄａｔａ（ドクダミ科）は、日本各地に自生する雑草の仲間で、その地上部が民間療法で頻用される。期待される効果としては、高血圧予防、利尿、疲労回復、強壮、アトピー性皮膚炎の改善などがあげられる。成分としては、フラボノイド、２−ウンデカノン、カプラルアルデヒドなどが知られている。しかし、これらの成分は芳香蒸留水には見いだせず、代わりに、生葉からのものには３−ヘキセノールやテルピネン−４−オールが、乾燥葉からのものにはカプリン酸やノニルアルコールが、それぞれ主成分として含まれていた。
各植物材料の生または乾燥品から得られたそれぞれの芳香蒸留水に含まれる各成分の含量は、表１にまとめて示す。
【発明の効果】
【０００５】  本発明の芳香蒸留水のカンジダに対する菌糸形発育阻害効果を調べると、表２に示すように、柿葉、ビワ葉、ヨモギ、ドクダミ、各乾燥品由来の芳香蒸留水の活性は強く、いずれも５倍希釈液で９０％以上の阻害活性を示した。桑葉、茶葉、それぞれ乾燥品由来の芳香蒸留水は、いずれも５倍希釈液で７０％前後の阻害活性を示した。生と乾燥材料由来の芳香蒸留水の活性を比較すると、茶葉を除き、いずれも乾燥材料由来のものの方が高い活性を示した。
カンジダ  Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓは、健常人にも見いだせる常在性真菌ではあるが、ときによって病原性を示し、口腔や腟、皮膚のカンジダ症の原因となる。口腔カンジダ症はとくに高齢者に発症頻度が高く、老人ホームにおいてはその治療や予防が重要な課題となっている。女性の腟カンジダ症も発症頻度が大変高く、再発を繰り返しやすい。カンジダ症の効果的な治療法や手軽な予防法が強く求められている所以である。カンジダは、酵母形と菌糸形の２形性を示し、このうち菌糸形が病原性に直接関わっている。したがって菌糸形発育の阻害は、カンジダの感染予防に結びつくとされる。本発明の芳香蒸留水は、いずれもカンジダの菌糸形発育を阻害するところから、カンジダ症に対する予防効果が期待される。応用の具体例としては、うがい剤に用いることによる口腔カンジダ症の予防、腟洗浄剤に用いることによる腟カンジダ症の予防、などがあげられる。
ジフェニルピクリルヒドラチル（ＤＰＰＨ）ラジカルに対する捕捉試験では、表３に示すように、乾燥した柿葉からの芳香蒸留水が最も高い活性を示し、既存の芳香蒸留水の中で強い活性を示すことが知られているクローブウォーターに匹敵した。次いでヨモギ乾燥葉からの芳香蒸留水の活性が高く、その他の乾燥材料から芳香蒸留水の活性は、いずれも中程度であった。しかしながら、いずれも生よりも乾燥材料由来のものの方が高い活性を示した。
ジフェニルピクリルヒドラチル（ＤＰＰＨ）ラジカルに対する捕捉活性は、活性酸素の消去能力を意味する抗酸化活性と相関することが知られている。活性酸素は皮膚の老化を促進する要因の一つとされ、それを消去することは皮膚の老化予防に結びつくことが期待される。本発明の芳香蒸留水の具体的な応用例の一つが、アンチエイジング効果を期待した化粧水である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】  本発明により、すでに日本各地で栽培され、ないしは自生している、柿、ビワ、桑、茶、ヨモギ、ドクダミといった植物から、材料を回収、乾燥して水蒸気蒸留に供することにより、これまで知られていなかった芳香蒸留水を安価に製造することができる。それらの芳香蒸留水は、いずれも予想よりはるかに多くの揮発成分を含んでいて、カンジダの菌糸形発育阻害、抗酸化といった有用な活性を示す。
有望な応用の具体例としては、カンジダの菌糸形発育阻害活性を活用したものとしては、口腔カンジダ症予防のためのうがい剤、腟カンジダ症予防のための腟洗浄剤、などがあげられる。抗酸化活性を活用したものとしては、アンチエイジング効果を期待した化粧水などがあげられる。
【実施例】
【０００７】  本発明を以下の実施例によりさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
実施例１．柿葉の芳香蒸留水【０００８】  神奈川県横浜市青葉区において栽培されている柿の葉を６月に採取し、新鮮な生葉を小型のガラス製水蒸気蒸留装置（東京製作所、東京）に充填し（２，０００ｍＬ）、２時間かけて１００ｍＬの芳香蒸留水を得た。また採取した生葉を室内で２週間乾燥後、同じ方法によって芳香蒸留水１００ｍＬを得た。いずれの葉からも、精油画分は全く回収されなかった。得られたそれぞれの芳香蒸留水２０ｍＬに食塩６ｇを加えて飽和させた後、酢酸エチル１０ｍＬを加えて抽出した。抽出液をそのままガスクロマトグラフィーに供し、含まれている揮発成分を定量分析した。分析条件は以下の通り。ガスクロマト装置：Ｍｏｄｅｌ３５３Ｂ（ＧＬＳｃｉｅｎｃｅ社、東京）、カラム：ＴＣ−５（０．５ｍｍ×３０ｍ）、キャリアー：ヘリウムガス、６０℃から２００℃まで５℃／分の昇温分析、検出：水素炎検出器。分析結果は表１に示す。
実施例２．ビワ葉の芳香蒸留水【０００９】  神奈川県横浜市青葉区において栽培されているビワの葉を６月に採取し、新鮮な生葉から実施例１と同じ方法にしたがって芳香蒸留水１００ｍＬを得た。また採取した生葉を室内で３週間乾燥後、実施例１と同じ方法にしたがって芳香蒸留水１００ｍＬを得た。いずれの葉からも、揮発画分は全く回収されなかった。それぞれの芳香蒸留水に含まれている精油成分を実施例１と同じ方法によって分析した。分析結果は表１に示す。
実施例３．桑葉の芳香蒸留水【００１０】  神奈川県横浜市青葉区において栽培されている桑の葉を６月に採取し、新鮮な生葉から実施例１と同じ方法にしたがって芳香蒸留水１００ｍＬを得た。また採取した生葉を室内で２週間乾燥後、実施例１と同じ方法にしたがって芳香蒸留水１００ｍＬを得た。いずれの葉の水蒸気蒸留からも、精油は全く回収されなかった。それぞれの芳香蒸留水に含まれている揮発成分を実施例１と同じ方法によって分析した。分析結果は表１に示す。
実施例４．茶葉の芳香蒸留水【００１１】  埼玉県秩父郡長瀞町において栽培されている茶の葉を６月に採取し、新鮮な生葉から実施例１と同じ方法にしたがって芳香蒸留水１００ｍＬを得た。また採取した生葉を室内で３週間乾燥後、実施例１と同じ方法にしたがって芳香蒸留水１００ｍＬを得た。いずれの葉の水蒸気蒸留からも、精油は全く回収されなかった。それぞれの芳香蒸留水に含まれている揮発成分を実施例１と同じ方法によって分析した。分析結果は表１に示す。
実施例５．ヨモギの芳香蒸留水【００１２】  埼玉県秩父郡長瀞町に自生しているヨモギの葉を６月に採取し、新鮮な生葉から実施例１と同じ方法にしたがって芳香蒸留水１００ｍＬを得た。また採取した生菓を室内で２週間乾燥後、実施例１と同じ方法にしたがって芳香蒸留水１００ｍＬを得た。それぞれの芳香蒸留水に含まれている揮発成分を実施例１と同じ方法によって分析した。分析結果は表１に示す。
実施例６．ドクダミの芳香蒸留水【００１３】  神奈川県横浜市青葉区に自生しているドクダミの地上部を６月に採取し、新鮮な材料から実施例１と同じ方法にしたがって芳香蒸留水１００ｍＬを得た。また採取した材料を室内で２週間乾燥後、実施例１と同じ方法にしたがって芳香蒸留水１００ｍＬを得た。それぞれの芳香蒸留水に含まれている揮発成分を実施例１と同じ方法によって分析した。分析結果は表１に示す。
実施例７．各芳香蒸留水のカンジダ菌糸形に対する発育阻害活性【００１３】  カンジダは帝京大学医真菌研究センター保存の臨床分離株、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ  ＴＩＭＭ１６７８を用い、サブロー・デキストロース寒天培地平板で３７℃、２０時間培養し、増殖した菌体を回収して２％子牛血清を含むＲＰＭＩ１６４０培地液に分散させ、菌数を５×１０３／ｍＬに調整して菌液とした。９６穴マイクロプレートに、菌液と芳香蒸留水それぞれ１００μＬを入れて混合し、５％炭酸ガスの存在下、３７℃、１６時間培養した。
生育した菌糸の形成状態を４０倍の立体顕微鏡で観察し、さらに以下の方法で菌糸形カンジダを定量して菌糸形阻害率を計算した。マイクロプレートの培養液に浮遊している酵母形力カンジダを蒸留水で洗浄除去し、７０％エタノールを加えて殺菌した後、生理食塩水で洗浄した。マイクロプレート壁面に付着した菌糸形カンジダを、０．０２％クリスタルバイオレット液１０μＬを加えて室温、１５分間染色し、過剰の染色液を蒸留水で洗浄除去した。次いで、０．２５％ドデシル硫酸ナトリウムと０．０４Ｎ塩酸を含むイソプロパノール５０μＬを加えてカンジダを染色した色素を遊離させ、マルチスキャナー（大日本製薬）を用いて６２０ｎｍの吸光度（ＯＤ）を測定した。菌糸形阻害率は以下の式にしたがって算出した。式中のサンプルは芳香蒸留水を、コントロールは対照として用いた蒸留水を意味する。測定結果は表２にまとめて示す。
菌糸形阻害率（％）＝（１−ＯＤサンプル／ＯＤコントロール）×１００
実施例８．各芳香蒸留水のジフェニルピクリルヒドラチル（ＤＰＰＨ）ラジカルに対する捕捉活性【００１２】  芳香蒸留水７５μＬと、１００ｍＭトリス塩酸５０％エタノール溶液（ｐＨ６．５）１５０ｕＬをマイクロプレートに入れ、ＤＰＰＨラジカル０．１５ｍｇ／ｍＬエタノール溶液７５μＬを加えた。マイクロプレートをプラスチックシール（Ｓｕｍｉｌｏｎ  Ｒ、住友ベークライト、大阪）で密閉してミキサー（Ｔａｉｙｏｕ  Ｍｉｃｒｏ  Ｍｉｘｅｒ、大洋科学工業、東京）上で３０秒間撹拌し、室温、暗所に静置した。
６時間後にマルチスキャナーを用いて５４０ｎｍの吸光度を測定し、以下の式にしたがってＤＰＰＨラジカルに対する捕捉率を算出した。式中のサンプルは芳香蒸留水を、コントロールは対照として用いた蒸留水を意味する。測定結果は表３にまとめて示す。
ラジカル捕捉率（％）＝（１−ＯＤサンプル／ＯＤコントロール）×１００【００１３】
【表１】
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【００１４】
【表２】
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【００１５】
【表３】
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