(57)【要約】      （修正有）【課題】壊死性全腸炎の発生を減少させるための方法及び組成物の提供。【解決手段】実質的にコレステロールを含まない長鎖多不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）、例えばアラキドン酸（ＡＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を含む経腸処方物、及びこのような経腸組成物は、ｎ−６及びｎ−３長鎖ＰＵＦＡ、リン脂質及び／又はコリンを供給する組成物を投与することによって壊死性全腸炎の発生を減少させることができる。ｎ−６及びｎ−３長鎖ＰＵＦＡを含んでおり、かつこれらが優勢的にホスフチジルコリン形態にあるから、卵黄脂質から得られる組成物が好ましい。これは相乗作用を生じると考えられる。また、改良された感覚器官受容性及び安定性を与えるこのような組成物の製造方法も開示する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つのｎ−６多不飽和脂肪酸の有効量を壊死性全腸炎に罹りやすい乳児に投与することを含む乳児における壊死性全腸炎の発生を減少させる方法。
【請求項２】
前記少なくとも１つのｎ−６多不飽和脂肪酸がアラキドン酸を含んでいる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記投与が経腸で実施される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記投与が非経腸で実施される、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記少なくとも１つのｎ−６多不飽和脂肪酸が、少なくとも１つのｎ−３多不飽和脂肪酸と組合わされて投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記ｎ−３多不飽和脂肪酸がドコサヘキサエン酸を含んでいる、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記ｎ−６多不飽和脂肪酸がアラキドン酸を含んでおり、前記ｎ−３多不飽和脂肪酸がドコサヘキサエン酸を含んでいる、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記投与が、1日につき１ｋｇあたりアラキドン酸約１．０から約６０ｍｇ、及び1日につき１ｋｇあたりドコサヘキサエン酸約０．２５から約３５ｍｇを前記乳児に供給するのに十分な量の、アラキドン酸とドコサヘキサエン酸とを含む経腸組成物を供給することにより実施される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ドコサヘキサエン酸に対するアラキドン酸の重量比が、約２から約４の範囲である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記ｎ−６多不飽和脂肪酸及び前記ｎ−３多不飽和脂肪酸が、卵レシチン、真菌油、藻油、及び海洋油から成る群から選ばれる１つ又はそれ以上の源から独立して選ばれる長鎖脂肪酸である、請求項５に記載の方法。
【請求項１１】
前記ｎ−６多不飽和脂肪酸及び前記ｎ−３多不飽和脂肪酸が、リン脂質形態である、請求項５に記載の方法。
【請求項１２】
前記非経腸溶液が、１リットルあたり少なくとも２０ｍｇのアラキドン酸と、１リットルあたり少なくとも１０ｍｇのドコサヘキサエン酸とを含む、請求項４に記載の方法。
【請求項１３】
前記非経腸溶液が、１リットルあたり約２０から２００ｍｇのアラキドン酸と、約１０から５０ｍｇのドコサヘキサエン酸とを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
１日につき１ｋｇあたり少なくとも２．０ｍｇのｎ−６多不飽和脂肪酸を供給するように、十分な量の、タンパク質、炭水化物及びリン脂質を含む経腸栄養組成物を前記乳児に与えることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記栄養供給がさらに、１日につき１ｋｇあたり少なくとも０．５ｍｇのｎ−３多不飽和脂肪酸をも供給する、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記栄養供給が、１日につき１ｋｇあたり少なくとも２．０ｍｇのアラキドン酸と少なくとも０．５ｍｇのドコサヘキサエン酸とを供給する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記経腸組成物が卵リン脂質を含んでいる、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
壊死性全腸炎に罹りやすい乳児に１日あたりの有効量のリン脂質を投与することを含む、乳児における壊死性全腸炎の発生を減少させる方法。
【請求項１９】
１日につき１ｋｇあたり約６０から約２４００μモルのリン脂質を供給するのに十分な量の前記栄養組成物を投与することを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
１日につき１ｋｇあたり約２００から約１５００μモルのリン脂質を供給するのに十分な量の前記栄養組成物を投与することを含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記リン脂質が卵レシチンに由来するものである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記リン脂質が、アラキドン酸とドコサヘキサエン酸とから成る群から選ばれる１つ又はそれ以上の多不飽和脂肪酸と組合わせて投与される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
前記リン脂質が、１日につき１ｋｇあたり約２００から約１５００μモルのリン脂質、約５．０ｍｇから約４０ｍｇのアラキドン酸、及び約１．５ｍｇから約２０ｍｇのドコサヘキサエン酸を与えるために、アラキドン酸及びドコサヘキサエン酸と組合わせて投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
壊死性全腸炎に罹りやすい乳児に１日あたりの有効量のコリンを投与することを含む、乳児における壊死性全腸炎の発生を減少させる方法。
【請求項２５】
１日につき１ｋｇあたり約６０から約１８００μモルのコリンを供給するのに十分な量の、前記コリンを含む栄養組成物を投与することを含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
１日につき１ｋｇあたり約１５０から約１２００μモルのコリンを供給するのに十分な量の前記栄養組成物を投与することを含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記コリンがホスファチジルコリンの形態である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
前記ホスファチジルコリンが卵レシチンに由来するものである、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記コリンが、アラキドン酸とドコサヘキサエン酸とから成る群から選ばれる１つ又はそれ以上の多不飽和脂肪酸と組合わせて投与される、請求項２５に記載の方法。
【請求項３０】
３０．前記コリンが、１日につき１ｋｇあたり約１５０から約１２００μモルのコリン、約５．０ｍｇから約４０ｍｇのアラキドン酸、及び約１．５ｍｇから約２０ｍｇのドコサヘキサエン酸を供給するために、アラキドン酸及びドコサヘキサエン酸と組合わせて投与される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
（ａ）実質的にコレステロールを含まない乾燥卵ホスファチド粉末を提供する工程；
（ｂ）前記リン脂質フラクションを水相中に分散させて、リン脂質分散液を形成する工程；及び
（ｃ）前記リン脂質分散液と、前記経腸処方物の他の成分のスラリーとを組合わせる工程
を含む、卵黄リン脂質を含む経腸処方物の製造方法。
【請求項３２】
水相中への前記分散が、約２から約１５重量％で卵ホスファチドを提供する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
水相中への前記分散が、約２０から５０℃で卵ホスファチド粉末を水に添加することを含んでいる、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
アラキドン酸とドコサヘキサエン酸とを含む改良経腸処方物であって、前記アラキドン酸及びドコサヘキサエン酸が、リン脂質の形態にあり、
（ａ）２から１５重量％の前記リン脂質の水性分散液を形成する工程；
（ｂ）前記分散液を脱気に付す工程；
（ｃ）前記脱気分散液と、タンパク質、炭水化物、ビタミン、及びミネラルの群から選ばれる少なくとも１員とを組合わせて、前記経腸処方物を形成する工程；及び
（ｄ）前記経腸処方物を均質化する工程
を含む方法によって製造されることを特徴とする処方物。
【請求項３５】
タンパク質、炭水化物及び脂質を含む、乳児に栄養供給するのに適した処方物であって、改良が、中鎖トリグリセリドと卵リン脂質とを含む脂質ブレンドを特徴とし、前記卵リン脂質はこの脂質ブレンドの約１から約４０重量％のレベルで存在し、前記卵リン脂質は実質的にコレステロールを含まない、前記処方物。
【請求項３６】
卵リン脂質が、脂質ブレンドの５から３０重量％のレベルで存在している、請求項３５に記載の処方物。
【請求項３７】
さらに、１００ｋｃａｌあたり約１０から約３１ｍｇの濃度でアラキドン酸を含んでいる、請求項３５に記載の処方物。
【請求項３８】
さらに、１００ｋｃａｌあたり約３から約１６ｍｇの濃度でドコサヘキサエン酸を含んでいる、請求項３７に記載の処方物。
【請求項３９】
前記アラキドン酸及びドコサヘキサエン酸が、約４：１から約２：１の比で存在している、請求項３８に記載の処方物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は全般に、長鎖多不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）を含む経腸処方物、及びこのような経腸組成物の製造方法、及び壊死性全腸炎の発生を減少させるための方法に関する。より詳しくは、本発明は、実質的にコレステロールを含まない、卵黄脂質から由来し得る、長鎖ＰＵＦＡ、アラキドン酸（ＡＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を供給する経腸組成物に関する。卵黄から生じる長鎖ＰＵＦＡは、リン脂質形態が主要素である。このような組成物の製造方法は、改良された感覚器官受容性及び安定性を提供する。このような組成物の経腸投与は、壊死性全腸炎の発生を減少させうる。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
経腸処方物又は組成物における長鎖ＰＵＦＡは、様々な文献の主題になっている。例えば米国特許第４，６７０，２８５号（Ｃｌａｎｄｉｎｉｎ）は、乳児処方物への使用に適した特殊な脂肪ブレンドを開示している。より特定すれば、Ｃｌａｎｄｉｎｉｎ脂肪ブレンドは、少なくとも１つのＣ２０又はＣ２２ｎ−６脂肪酸とＣ２０又はＣ２２ｎ−３脂肪酸とを含んでいる。これらの脂肪酸は、脂肪ブレンドが与えられる乳児に有害な作用を引起こすことを防ぐような、ある規定量のものとして開示されている。Ｃ２０又はＣ２２ｎ−６脂肪酸は、この製品中のすべての脂肪酸の総量の約０．１３〜５．６重量％で存在している。Ｃ２０又はＣ２２ｎ−３脂肪酸は、存在している場合、製品中のすべての脂肪酸の総量の約０．０１から３．３３重量％で含まれている。Ｃｌａｎｄｉｎｉｎは、ｎ−６及びｎ−３脂肪酸を供給するために、卵脂質の使用を開示している。しかしながらＣｌａｎｄｉｎｉｎによって用いられている卵脂質はまた、高いレベルのコレステロールも含んでいる。さらにはこの文献は、卵黄脂質７５〜９５重量部の使用を教示しており、油の残りの部分はココヤシ油又は大豆油である。脂肪酸に関してＣｌａｎｄｉｎｉｎが用いている命名法をここでも使用する。
【０００３】
第ＷＯ９３／２０７１７号は、少刺激性量以下の量の遊離長鎖（Ｃ１６〜Ｃ２２）脂肪酸とトリグリセリドとを含む乳児処方物を開示している。この出願はまた、乳児処方物におけるこのような脂肪酸の低級アルキルエステル、例えばエチルエステルを提供することによって、遊離脂肪酸が乳児の腸上皮に損傷を与える性向を実質的に排除するが、この脂肪酸部分の吸収及び処理が可能であることを開示している。
【０００４】
Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒの米国特許第４，９１８，０６３号は、潰瘍及び炎症性腸疾患の予防又は治療用のリン脂質と中性脂質との独特の混合物を含む組成物を開示している。この特許は、飽和又は不飽和リン脂質と、飽和又は不飽和トリグリセリド及び／又はステロールとの混合物を、実験動物モデルにおいて潰瘍保護効果を与えるものとして開示している。この特許はまた、活性を高めるために、この脂質混合物に多価カチオン又は酸化防止剤を含めることも教示している。
【０００５】
Ｋｏｈｎらの国際公開第ＷＯ９６／１０９２２号は、アラキドン酸とドコサヘキサエン酸がリン脂質の形態で脂肪混合物中に存在していることを特徴とする乳児処方用脂肪混合物を開示している。
【０００６】
Ｔｏｍａｒｅｌｌｉの欧州特許出願第０３７６６２８Ｂ１号は、唯一のパルミチン酸油源としてランダム化パーム油又はランダム化パームオレイン油を利用している全植物油脂肪組成物を開示している。この全植物油脂肪組成物は未熟児（ｐｒｅ−ｔｅｒｍ）（又は低出生体重児）用の乳児処方用への使用に特に適しているということも開示されている。このＴｏｍａｒｅｌｌｉ出願の未熟児用脂肪組成物は、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）を、ランダム化パルミチン酸油、ラウリン酸油、オレイン酸油、及びリノール酸油と共に含んでいる。
【０００７】
前記文献は大きな貢献をなしたが、栄養補給に適した濃度での長鎖ＰＵＦＡ源としての卵リン脂質を含む乳児処方物に対するニーズが存在する。このような処方物が許容しうる感覚器官受容性を有するように、卵リン脂質を含む経腸処方物を調製する方法のためのもう１つのニーズも存在する。このような組成物は、成熟児及び／又は未熟児用の乳児処方物における特別な用途を有する。このような長鎖ＰＵＦＡのニーズは、適切な神経の発達及び視力の発達のために必要なものとして確立されている。さらには消化管に対する保護作用もありうる。
【０００８】
壊死性全腸炎（ＮＥＣ）は、出生体重が約１５００グラムより低い乳児の場合は重大な問題である。約３０年間の研究にもかかわらず、ＮＥＣの正確な病因及び病態生理学はいまだに不明である。ＮＥＣは、関係する消化管構造及び腸壁嚢状気腫の虚血壊死を特徴とする命に関わる病気である。これは腸穿孔を生じる結果になることが多い。ＮＥＣを有する未熟児は、熱不安定性、嗜眠、胃停留、嘔吐、腹部膨満、大便中のひどい血又は潜血、及び腸壁嚢状気腫のラジオグラフによる証拠、門脈中の空気又は気腹といった臨床図を示す。無呼吸発作、ショック、及び皮膚硬化が急激に現れ、死亡も普通に発生する。
【０００９】
数多くの研究者が様々な観察研究を行ない、この疾病に影響を与える要因を仮定している。（Ｎｕｅ、“Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｃｌｉｎ．Ｎｏｒｔｈ．Ａｍ．”１９９６年４月、４３（２）：４０９−３２）。次の観察事項及び要因を例として挙げる。
【００１０】
・Ｆｌａｇｅｏｌｅらの“Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｅｗｂｏｒｎ，Ｒｅｖｉｅｗ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｃｌｉｎｉｃｉａｎ”，Ｕｎｉｏｎ−Ｍｅｄ−Ｃａｎ．１９９１年９月−０９月；１２０（５）：３３４−８では、ＮＥＣの病因には、腸間膜虚血、胃腸未熟、経腸栄養補給が含まれ、感染でさえ可能性があると考えられている。
【００１１】
・Ｃａｐｌａｎらの“Ｒｏｌｅ  ｏｆ  Ｐｌａｔｅｌｅｔ  Ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  Ｆａｃｔｏｒ  ａｎｄ  Ｔｕｍｏｒ  Ｎｅｃｒｏｓｉｓ  Ｆａｃｔｏｒ−Ａｌｐｈａ  Ｎｅｏｎａｔａｌ  Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ、１９９０年６月、９６０−９６４は、血小板活性化因子及び腫瘍壊死因子アルファがＮＥＣ患者の場合上昇していることを報告している。
【００１２】
・Ｋｌｉｅｇｍａｎらの“Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ  ａｓ  Ｐａｔｈｏｇｅｎｓ  ｉｎ  Ｎｅｏｎａｔａｌ  Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ”，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ、１９７９年８月、２８７−２８９は、新生児ＮＥＣの子供からのＣｌｏｓｔｒｉｄｉａ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓの単離を報告している。
【００１３】
・Ｏｓｔｅｒｔａｇらの“Ｅａｒｌｙ  Ｅｎｔｅｒａｌ  Ｆｅｅｄｉｎｇ  Ｄｏｅｓ  Ｎｏｔ  Ａｆｆｅｃｔ  ｔｈｅ  Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ”，Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ、第７７巻、第３号、１９８６年３月、２７５−２８０は、希釈された初期の経腸カロリーは、ＮＥＣの発生に有害な作用を及ぼさないことを報告している。
【００１４】
・Ｂｅｌｌらの“Ｎｅｏｎａｔａｌ  Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ”，Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｓｕｒｇｅｒｙ、第１８７巻、１９７８年１月、第１号、１−７は、ＮＥＣ児の治療への組合わせ抗菌治療の使用を示唆している。
【００１５】
・Ｅｙａｌらの“Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｖｅｒｙ  Ｌｏｗ  Ｂｉｒｔｈ  Ｗｅｉｇｈｔ  Ｉｎｆａｎｔ：Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  Ｂｒｅａｓｔ  Ｍｉｌｋ  Ｆｅｅｄｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｒｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｆｅｅｄｉｎｇ”，Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ｉｎ  Ｃｈｉｌｄｈｏｏｄ、１９８２年、５７、２７４−２７６は、低出生体重児におけるＮＥＣの発生は、経腸栄養補給の開始を遅らせることによって減少したことを報告している。
【００１６】
・Ｆｉｎｅｒらの“Ｖｉｔａｍｉｎ  Ｅ  ａｎｄ  Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ”，Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ、第７３巻、第３号、１９８４年３月、は、水晶体後部線維増殖症から生じる重い後遺症の発生を減少させるためのビタミンＥの投与は、ＮＥＣの発生の増加を伴うことがありうることを示唆している。
【００１７】
・Ｂｒｏｗｎらの“Ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ  Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ  ｉｎ  Ｎｅｏｎａｔｅｓ”，ＪＡＭＡ、１９７８年１１月２４日、第２４０巻、第２２号、２４５２−２４５４は、緩やかな漸増栄養補給療法の使用によってＮＥＣが事実上排除されうることを報告している。
【００１８】
・Ｋｏｓｌｏｓｋｅの“Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ：Ａ  Ｈｙｐｏｔｈｅｓｉｓ  Ｂａｓｅｄ  ｏｎ  Ｐｅｒｓｏｎａｌ  Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ａ  Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ”，Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ、第７４巻、第６号、１９８４年１２月、１０８６−１０９２は、次の３つのうち２つの病理学的事象の一致によってＮＥＣが発生するという仮説を立てている。すなわち（１）腸虚血；（２）病原菌の住みつき；及び（３）腸管腔内の過剰なタンパク基質である。
【００１９】
上記Ｋｏｓｌｏｓｋｅはまた、母乳のみの栄養供給を受けている乳児にはＮＥＣはまれであることをも報告している。ヒトの場合、母乳は、新生児の腸の受動免疫においてある役割を果たしており、腸内細菌叢におけるＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍの成長を促進する因子を含んでいる。ヒトの母乳の有益な内容物は、冷凍、低温殺菌、又は貯蔵によって有害な作用を受けることもあるということも報告されている。
【００２０】
従ってＮＥＣの病因及び治療については多くの論争があり、このひどい多くは致命的な症状の発生をよりよく治療しうるか、及び／又は減少させうる組成物及び方法に対するニーズが依然として存在する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２１】
【特許文献１】米国特許第４，６７０，２８５号明細書
【特許文献２】国際公開第９３／２０７１７号
【特許文献３】米国特許第４，９１８，０６３号
【特許文献４】国際公開第９６／１０９２２号
【特許文献５】欧州特許第０３７６６２８号明細書
【非特許文献】
【００２２】
【非特許文献１】Ｎｕｅ“Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｃｌｉｎ．Ｎｏｒｔｈ．Ａｍ．”１９９６年４月、４３（２）：４０９−３２
【非特許文献２】Ｆｌａｇｅｏｌｅら“Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｅｗｂｏｒｎ，Ｒｅｖｉｅｗ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｃｌｉｎｉｃｉａｎ”，Ｕｎｉｏｎ−Ｍｅｄ−Ｃａｎ．１９９１年９月−０９月；１２０（５）：３３４−８
【非特許文献３】Ｃａｐｌａｎら“Ｒｏｌｅ  ｏｆ  Ｐｌａｔｅｌｅｔ  Ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  Ｆａｃｔｏｒ  ａｎｄ  Ｔｕｍｏｒ  Ｎｅｃｒｏｓｉｓ  Ｆａｃｔｏｒ−Ａｌｐｈａ  Ｎｅｏｎａｔａｌ  Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ、１９９０年６月、９６０−９６４
【非特許文献４】Ｋｌｉｅｇｍａｎら“Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ  ａｓ  Ｐａｔｈｏｇｅｎｓ  ｉｎ  Ｎｅｏｎａｔａｌ  Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ”，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ、１９７９年８月、２８７−２８９
【非特許文献５】Ｏｓｔｅｒｔａｇら“Ｅａｒｌｙ  Ｅｎｔｅｒａｌ  Ｆｅｅｄｉｎｇ  Ｄｏｅｓ  Ｎｏｔ  Ａｆｆｅｃｔ  ｔｈｅ  Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ”，Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ、第７７巻、第３号、１９８６年３月、２７５−２８０
【非特許文献６】Ｂｅｌｌら“Ｎｅｏｎａｔａｌ  Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ”，Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｓｕｒｇｅｒｙ、第１８７巻、１９７８年１月、第１号、１−７
【非特許文献７】Ｅｙａｌら“Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｖｅｒｙ  Ｌｏｗ  Ｂｉｒｔｈ  Ｗｅｉｇｈｔ  Ｉｎｆａｎｔ：Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  Ｂｒｅａｓｔ  Ｍｉｌｋ  Ｆｅｅｄｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｒｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｆｅｅｄｉｎｇ”，Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ｉｎ  Ｃｈｉｌｄｈｏｏｄ、１９８２年、５７、２７４−２７６
【非特許文献８】Ｆｉｎｅｒら“Ｖｉｔａｍｉｎ  Ｅ  ａｎｄ  Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ”，Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ、第７３巻、第３号、１９８４年３月
【非特許文献９】Ｂｒｏｗｎら“Ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ  Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ  ｉｎ  Ｎｅｏｎａｔｅｓ”，ＪＡＭＡ、１９７８年１１月２４日、第２４０巻、第２２号、２４５２−２４５４
【非特許文献１０】Ｋｏｓｌｏｓｋｅ“Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎｅｃｒｏｔｉｚｉｎｇ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ：Ａ  Ｈｙｐｏｔｈｅｓｉｓ  Ｂａｓｅｄ  ｏｎ  Ｐｅｒｓｏｎａｌ  Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ａ  Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ”，Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ、第７４巻、第６号、１９８４年１２月、１０８６−１０９２
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００２３】
本発明は多くの側面を有する。第一の側面において、本発明は壊死性全腸炎に罹りやすい乳児における壊死性全腸炎の発生を減少させる方法であって、前記方法が、Ｃ２０ｎ−６脂肪酸、Ｃ２２ｎ−６脂肪酸、Ｃ２０ｎ−３脂肪酸、及びＣ２２ω−３脂肪酸の群から選ばれる少なくとも１つの長鎖ＰＵＦＡを有効量投与することを含む方法を企図している。例えばｎ−６脂肪酸であるアラキドン酸の投与は有効であることが分かった。投与は経腸（経口）又は非経腸であってもよい。より好ましくはｎ−６脂肪酸とｎ−３脂肪酸との組合わせ、例えばアラキドン酸及びドコサヘキサエン酸、が共に用いられる。経腸投与は、１日につき乳児体重１ｋｇあたり少なくともｎ−６脂肪酸１．０ｍｇのレベルで行なう。より好ましい実施態様では、重量比約２：１〜約４：１でｎ−６脂肪酸とｎ−３脂肪酸との組合わせを用い、１日あたり少なくとも５．０ｍｇの長鎖ｎ−６脂肪酸を投与する。
【００２４】
この方法は、１日につき１ｋｇあたりアラキドン酸約１．０から約６０ｍｇ及び１日につき１ｋｇあたりドコサヘキサエン酸約０．２５から約３５ｍｇを前記乳児にもたらすのに十分な量の、アラキドン酸とドコサヘキサエン酸とを含んでいる経腸組成物を供給することによって実施することができる。より典型的な量の、１日につき１ｋｇあたり約５．０から約４０ｍｇのアラキドン酸及び約１．５から約２０ｍｇのドコサヘキサエン酸である。好ましくはドコサヘキサエン酸に対するアラキドン酸の重量比は、約２から約４である。好ましくは長鎖多不飽和脂肪酸は、リン脂質、特にホスファチジルコリンの形態である。このようなリン脂質は、卵レシチンと卵ホスファチド中に高濃度で存在する。
【００２５】
従ってもう１つの側面において、本発明は、乳児における壊死性全腸炎の発生を減少させる方法を提供し、前記方法は１日あたり少なくとも１．０ｍｇのｎ−６長鎖多不飽和脂肪酸を供給するように、タンパク質、炭水化物、及びリン脂質を含む十分な量の経腸栄養組成物を前記乳児に供給することを含む。好ましくは、前記供給によって、さらに、おのおのアラキドン酸及びドコサヘキサエン酸の形態で、１日あたり少なくとも０．５ｍｇのｎ−３長鎖多不飽和脂肪酸を供給する。
【００２６】
もう１つの側面において、本発明は、ヒトの乳児における壊死性全腸炎の発生を減少させる方法を提供し、前記方法は壊死性全腸炎の発生を減少させるのに有効な量でリン脂質を乳児に投与することを含む。
【００２７】
一般的には、前記リン脂質は、１日につき１ｋｇあたりリン脂質を約６０から約２４００μモル、好ましくは約２００から約１５００μモル、最も好ましくは約４００から約１０００μモル供給するように投与される。リン脂質源は決定的なものではなく、卵レシチンに由来するリン脂質がこの発明には適している。リン脂質はまた、乳脂肪小球膜を含む動物膜からも容易に得られる。リン脂質に富むその他の源には、大豆油及びその他の種子油が含まれる。卵レシチンリン脂質が用いられる場合、経腸投与に好ましい量は、１日あたり少なくとも長鎖ｎ−６脂肪酸１．０ｍｇとなるのに十分な量である。好ましくは、卵リン脂質は、ｎ−６脂肪酸の有意な部分としてアラキドン酸を供給し、また、好ましくはドコヘキサエン酸及び／又はその他の長鎖ｎ−３脂肪酸も前記比で供給する。これは相乗作用を有しうる。しかしながら、この発明の「リン脂質」という観点において、グリセロール骨格に結合した脂肪酸の長さ及び飽和度は決定的なものではなく、ＬＣＰＵＦＡ以外の脂肪酸もここで用いることができることが注目される。
【００２８】
さらにもう１つの側面において、本発明はヒトの乳児における壊死性全腸炎の発生を減少させる方法を提供し、前記方法は壊死性全腸炎の発生を減少させるのに有効な量でコリンを乳児に投与することを含む。一般的には、前記コリンは、１日につき１ｋｇあたりコリンを約６０から約１８００μモル、より好ましくは約１５０から約１２００μモル供給するように投与される。コリン源は決定的なものではなく、ホスファチジルコリンが好ましく、卵レシチンに由来するホスファチジルコリンがこの発明には適している。コリン又はホスファチジルコリンに富むその他の源には、大豆油及びその他の種子油が含まれる。卵レシチンコリンが用いられる場合、１日あたり少なくとも長鎖ｎ−６脂肪酸１．０ｍｇとなるように、ｎ−６及び／又はｎ−３脂肪酸と組合わせて投与することが好ましい。好ましくは、卵レシチンは、ｎ−６脂肪酸の有意部分としてアラキドン酸を供給し、また、好ましくは、へドコヘキサエン酸及び／又はその他の長鎖ｎ−３脂肪酸をも前記比で供給する。これは相乗作用を有しうる。しかしながら、この「リン脂質」という観点において、本発明に用いられるホスファチジルコリンのグリセロール骨格に結合した脂肪酸の長さ及び飽和度は決定的なものではなく、ＬＣＰＵＦＡ以外の脂肪酸もここで用いることができる。あるいはまた非リン脂質源から生じるコリンを用いてもよい。
【００２９】
さらには、全腸炎に罹りやすい乳児に有益な作用が見られるので、有益な作用が成人にも見られることは十分ありうることである。従って本発明のもう１つの側面は、成人における潰瘍性大腸炎及び関連する腸の症状の治療又は予防における前記組成物のいずれかの使用である。当然ながら用量決定は、成人患者の重い体重に基づいて、及びこの技術で知られているその他の要因に基づいて調節するものとする。
【００３０】
経腸配合物及びこれらの製造方法を含む本発明のその他の側面は、この出願全体に記載されている。例えば本発明のさらにもう１つの側面において、卵黄リン脂質を含む経腸処方物の製造方法は、
（ａ）実質的にコレステロールを含まない乾燥卵ホスファチド粉末を提供する工程；
（ｂ）前記リン脂質フラクションを水相に分散させてリン脂質分散液を形成する工程；及び
（ｃ）前記リン脂質分散液と、前記経腸処方物のその他の成分のスラリーとを組合わせる工程を含んでいる。
【００３１】
好ましくは、この方法によれば、水相中への分散により約２から約１５重量％の卵ホスファチドを提供する。好ましくはこの卵ホスファチド粉末は、約２０から５０℃で水に添加される。この側面は、リン脂質の形態でアラキドン酸とドコサヘキサエン酸とを含む乳児用処方物を製造するために用いることができ、前記経腸処方はこの方法によって製造される。
【００３２】
さらにもう１つの側面において、本発明は、タンパク質、炭水化物、及び脂質を含む乳児への栄養供給に適した処方物を提供し、ここで改良は、中鎖トリグリセリドと卵リン脂質とを含む脂質ブレンドを特徴としており、ここにおいて、前記卵リン脂質はこの脂質ブレンドの約１重量％から約４０重量％のレベルで存在し、前記卵リン脂質は実質的にコレステロールを含まないものである。一般的にはこの卵リン脂質は、この脂質ブレンドの５から３０重量％のレベルで存在し、この処方物は、アラキドン酸を１００ｋｃａｌあたり約１０から約３１ｍｇの濃度で含んでいる。より好ましくはこの処方物はまた、ドコサヘキサエン酸を１００ｋｃａｌあたり約３から約１６ｍｇの濃度で含んでおり、アラキドン酸とドコサヘキサエン酸とは、約４：１から約２：１の比で存在する。
【００３３】
発明の詳細な説明
一般的な用語説明
脂肪酸は、様々な長さの炭化水素鎖であり、１つの端部にカルボン酸を有し、従ってこれらはこの位置において幾分極性かつ親水性にされるが、一方で、あるいは炭化水素鎖の長さに依っては様々な程度まで疎水性である。脂肪酸は炭化水素鎖の長さによってカテゴリーに分けられる。例えば約６個より少ない炭素鎖は、「短鎖」と考えられ、約６から１８個の炭素鎖は「中鎖」であり、２０個又はそれ以上の、炭素鎖は「長鎖」と考えられる。脂肪酸は、また１つ又はそれ以上の炭化水素鎖において「不飽和」の点である二重結合を有していてもよい。ここで用いられている「長鎖ＰＵＦＡ」という用語は、少なくとも２つの炭素−炭素二重結合（多不飽和）を有する２０個又はそれ以上の炭素原子の脂肪酸を意味する。脂肪酸における二重結合の数及び位置は、命名法の申し合わせによって示される。例えばアラキドン酸（「ＡＡ」又は「ＡＲＡ」）は、２０個の炭素鎖長と、メチル末端から６番目の炭素から始まる４つの二重結合とを有する。その結果、これは「Ｃ２０：４ｎ−６」と呼ばれる。同様にドコサヘキサエン酸（「ＤＨＡ」）は、２２個の炭素鎖長を有し、６つの二重結合がメチル末端から３番目の炭素から始まり、これは「Ｃ２２：６ｎ−３」と呼ばれる。あまり一般的ではない長鎖ＰＵＦＡも知られており、いくつかが表Ｉ及びＩＶに挙げられている（実線の分割線の下）。
【００３４】
「グリセリド」は、脂肪酸にエステル化されたグリセロール骨格を有する複合脂質である。「トリグリセリド」（すなわち「トリアシルグリセロール」）は、グリセロール骨格上の各ヒドロキシル部位に１つずつ、３つのエステル化脂肪酸を有している。ジ−及びモノ−グリセリドは、おのおの、２つ及び１つのエステル化脂肪酸を有している。ホスホグリセリド（すなわち「リン脂質」又は「ホスファチド」−すべて相互交換可能に用いられている）は、次の点でトリグリセリドとは異なる。すなわち最大２つのエステル化脂肪酸を有する一方、グリセロール骨格の３番目の位置はリン酸がエステル化され、ホスファチジン酸になるという点である。天然では、ホスファチジン酸は、通常は非常に極性なヘッドを与えるアルコールと結合している。通常天然に見られる２つのこのようなアルコールはコリンとエタノールアミンである。「レシチン」は、アミノアルコール、「コリン」と結合したホスファチジン酸であり、「ホスファチジルコリン」としても知られている。レシチンは、脂肪酸成分の含有量が様々であり、例えば卵及び大豆から由来してもよい。セファリン（ホスファチジルエタノールアミン）、ホスファチジルセリン、及びホスファチジリノシトールは、別のホスホグリセリドである。
【００３５】
リン脂質は、すべての生物系の膜中に通常見られるものである。リン脂質の従来の源は卵黄及び大豆油である。リン脂質はまた、哺乳類の大脳、腎臓、心臓、及び肺から得ることができ、あるいは乳脂肪小球膜から得ることができる。さらには、特にリン脂質のＡＡ及びＤＨＡ脂肪酸成分として、微生物起源の源（単細胞油）、例えば藻油及び真菌油も用いることができる。
【００３６】
鶏卵は比較的豊富な脂質源である。鶏卵の卵黄の約３３％が脂質であり、このうち約６７％はトリグリセリドであり、２８％がリン脂質であり、残りの部分は大部分がコレステロールである（パーセントは重量％である）。これらの数字はおよそのものであり、雌鳥の食餌、品種、及び状態に依ってある程度異なるであろう。リン脂質画分のうち約７５％がホスファチジルコリンであり、ほかのおよそ２０％がホスファチジルエタノールアミンである。コリン部分は、これに結合した特定の脂肪酸に応じて、各リン脂質分子の約１５から３０％である。従って卵リン脂質のコリン含有量は、約１０から約２５重量％の様々なものであってもよく、あるいは総卵脂質に対し、約３から約７重量％であってもよい。
【００３７】
組成物
この発明に有用な組成物は、ｎ−６及び／又はｎ−３長鎖ＰＵＦＡを含んでいる。長鎖ＰＵＦＡ源は決定的なものではない。長鎖ＰＵＦＡの既知源には、魚油又は海洋油、卵黄脂質及びリン脂質、単細胞油（例えば藻油及び真菌油）が含まれ、特定の長鎖ＰＵＦＡをより多量に得るには、あるいくつかの源は他の源よりも良好であるということがこの分野では理解されている。その他の長鎖ＰＵＦＡの食用の半精製又は精製源は、当業者には明らかであろう。新しい長鎖ＰＵＦＡ源は、野菜及び油を含む植物の遺伝子操作によって開発することができ、このような組換え物質の使用もまた、本発明において企図されている。
【００３８】
長鎖ＰＵＦＡは遊離脂肪酸のエステル、すなわちモノ−、ジ−、及びトリ−グリセリド、レシチンを含むホスホグリセリド、及び／又はこれらの混合物の形態で組成物に提供され得る。リン脂質、特にホスファチジルコリンの形態で長鎖ＰＵＦＡを提供するのが好ましいであろう。現在好ましい源は、少なくとも感覚器官受容性及びコレステロールレベルが許容しうるものであるように加工処理されている場合、卵由来のＰＵＦＡに伴う高いリン脂質及び／又はホスファチジルコリン含有量により、卵黄リン脂質であるようである。
【００３９】
ｎ−６及び／又はｎ−３脂肪長鎖ＰＵＦＡは、例えばコリン及びホスファチジルコリンがそうであるように、静脈内（すなわち非経腸）溶液の形態で投与されてもよい。静脈内溶液は好ましくは、非経腸溶液の毎日の適量摂取として、ＰＵＦＡ、リン脂質、及び／又はコリンの有効量を含むであろう。従って、正確な濃度は、予期される摂取容量に応じて非常に様々なものであり、水和又は栄養ベースの非経腸物においてよりも、ボーラス又は少容量の非経腸投与においての方が有意に、より濃縮されている。非経腸組成物は一般に、製薬的に許容しうる担体及び賦形剤、例えば緩衝剤、保存料等を含む。
【００４０】
ｎ−６及び／又はｎ−３脂肪長鎖ＰＵＦＡ及びコリン及びリン脂質は、あるいは経腸組成物の形態で投与されてもよい。長鎖ＰＵＦＡ、コリン、又はリン脂質を含む経腸組成物は、活性成分の溶液又はエマルジョンの形態であってもよく、あるいはタンパク質、炭水化物、その他の脂肪、ミネラル、及びビタミンを含む栄養マトリックスの形態であってもよい。活性成分を含む経腸組成物は、補足的あるいは完全な栄養補助物も供給しうる。経腸組成物における長鎖ＰＵＦＡの濃度は、投与方法及び意図された目的に応じて、この組成物のほぼ１００重量％（ボーラスエマルジョンの場合）から０．５重量％（栄養的に完全な処方物の場合）であってもよい。完全な栄養処方物において、この濃度は、有効量の長鎖ＰＵＦＡをもたらすのに十分な処方物が投与されるならば、これより低くてもよい。
【００４１】
この発明の特に好ましい実施態様は、未熟児を含む乳児に栄養供給を行なうのに適した栄養的に完全な改良処方物に関する。このような好ましい組成物は、タンパク質、炭水化物、及び脂質を含んでいる。ここにおいて総脂質の約６から約４０重量％が、実質的にコレステロールを含まない卵リン脂質である。「実質的に含まない」という用語は、卵リン脂質のコレステロール含有量が総脂質の０．１重量％より少なく、好ましくは０．０５重量％より少ないことを意味する。
【００４２】
当業者なら、乳児処方物が意味するものを容易に理解するであろう。当初濃縮物又は粉末形態にあり、すぐに供給しうる状態まで希釈又は再構成される場合、典型的な乳児処方物は、この処方物１リットルあたり約１０から３５グラムのタンパク質、処方物１リットルあたり約２０から５０グラムの脂質、処方物１リットルあたり約６０から１１０グラムの炭水化物、及びその他の様々な成分、例えばビタミン、ミネラル、繊維、乳化剤等を含んでいる。乳児処方物の成分及びその製造方法を理解することを目的として、次の米国特許が参照してここに組込まれる：１）Ｍａｓｏｒらの米国特許第５，４９２，８９９号；２）Ｂｏｒｓｃｈｅｌらの米国特許第５，０２１，２４５号；３）Ｋａｔｚらの米国特許第５，２３４，７０２号；及び４）Ｍａｓｏｒらの米国特許第５，６０２，１０９号、及び５）Ｍａｈｍｏｕｄの米国特許第４，６７０，２６８号である。より特定すれば、本発明のこの実施態様は、処方物１リットルあたり脂質約４０から５０グラムを含む乳児処方物であって、この脂質は中鎖トリグリセリドと実質的にコレステロールを含まない卵リン脂質とのブレンドを含んでいる。一般的にはこの脂質ブレンドは、卵リン脂質約１から４０重量％、より好ましくは約５から約３０重量％を含んでいる。この実施態様は特に、ｎ−３脂肪酸及びｎ−６脂肪酸、リン脂質、及び／又はコリンから選ばれる長鎖ＰＵＦＡを乳児に有益な量で供給するように設計されている。
【００４３】
製造方法
鶏の卵黄はトリグリセリドとホスファチドとの両方を含んでいるので、ホスファチドをトリグリセリド、ステロール（例えばコレステロール）及びその他の成分から分離するように、有機溶媒を用いて卵黄を加工処理することが好ましいであろう。少なくとも実験室規模では、様々な文献の方法がこの分離に適している。あるいはまた実質的にコレステロールを含まないこのような卵ホスファチドは、ファンスティール社（Ｐｆａｎｓｔｉｅｈｌ，Ｉｎｃ．）（イリノイ州ウオーケガン（Ｗａｕｋｅｇａｎ，ＩＬ））からカタログ番号Ｐ−１２３として乾燥粉末形態の商品として入手しうる。
【００４４】
ついで卵ホスファチドは本発明の経腸組成物に組込まれる。脂質含有量のために、卵ホスファチドの経腸処方物への組込みは油相では容易であると予測された。しかしながら、驚くべきことに、これらの脂質−脂質分散液は受容しうるものではなく、かつ卵ホスファチドの水性分散液の調製により改良された物産をもたらすことが発見された。最良の結果を生じるには、約２から１５重量％、好ましくは約３から約８重量％の水性分散液を、冷ないし室温水（約２０〜２５℃）において作るのがよい。これより高い温度の水は、あまり許容しえない感覚器官受容性を生じた。
【００４５】
これとは別に、炭水化物、タンパク質、及び巨大分子栄養源を含む脂質スラリーを、この分野で知られているように調製し、これらのスラリーを約１３０から１４０℃で混合する。ホモゲナイズの直前に、ホスファチド分散液をこの処方物の残りのものと混合する。
【００４６】
特に好ましい変形例において、最終生成物ミックスにホスファチド分散液を添加する前に（均質化の直前に）、ホスファチド分散液を中程度の真空下で脱気する。脱気は、どのメカニズムで実施してもよいが、約１５インチＨｇでの微粉砕脱気器が満足すべき結果をもたらした。この追加工程は、最終生成物の感覚器官受容性及び嗅覚特性を、活性炭濾過又はこれら２つの組合わせよりも一層改良することが証明された。（実施例ＩＩＩ参照）。
【００４７】
この発明において用いうる非経腸組成物を製造するために、通常の滅菌非経腸組成物製造技術を用いることができる。この場合、卵ホスファチドを避け、その代りに、組換え又は単細胞油源に見られるようなトリグリセリド油又は脂肪酸エステルを用いるのが好ましいであろう。
【００４８】
工業的有用性
本発明の組成物は、乳児及び／又は成人の栄養補助において有用である。長鎖ＰＵＦＡ、特にｎ−６及びｎ−３脂肪酸、最も特定すればＡＡ及びＤＨＡの追加は、乳児の神経の発達及び視力に有益であると一般に考えられてきた。但し相反する報告も文献には見られる。
【００４９】
本発明に有用な組成物は、
（ａ）一般的にはリン脂質又はホスファチジルコリン形態にあるｎ−６及びｎ−３脂肪酸から選ばれる長鎖ＰＵＦＡ、
（ｂ）結合している脂肪酸の種類又は長さとは無関係に、極性リン脂質、および
（ｃ）コリン、好ましくはホスファチジルコリンのどれか又は全部を含んでいる。
【００５０】
例えば実施例に詳細に記載されている卵リン脂質強化処方物は、より高いレベルの特定の成分の各々を供給し、驚くべきことには、ＮＥＣに罹りやすい乳児集団におけるＮＥＣの発生を実質的に減少させることが分かった。より特定の実施態様において、ＮＥＣの発生を減少させる方法は、アラキドン酸（ＡＡ、２０：４ｎ−６）、あるいはより好ましくはドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ、２２：６ｎ−３）と組合わせたＡＡの投与によって得られる。
【００５１】
より広義には、本発明のこの側面は、壊死性全腸炎に罹りやすい乳児における壊死性全腸炎の発生を減少させる方法であって、前記方法はＣ２０ｎ−６脂肪酸、Ｃ２２ｎ−６脂肪酸、Ｃ２０ｎ−３脂肪酸、及びＣ２２ｎ−３脂肪酸の群から選ばれる少なくとも１つの長鎖ＰＵＦＡの有効量の投与を含む方法を企図している。この投与は、１日につき乳児の体重１ｋｇあたり少なくとも１．０ｍｇのｎ−３脂肪酸のレベルで行なわれる。より好ましい実施態様は、重量比約２：１から約４：１におけるｎ−６脂肪酸とｎ−３脂肪酸との組合わせを用いる。
【００５２】
さらに、ヒトの乳児における壊死性全腸炎の発生を減少させる方法が開示されていて、前記方法は、１日あたり長鎖ｎ−６脂肪酸少なくとも１．０ｍｇとなる量で、卵リン脂質を乳児に投与することを含んでいる。好ましくは、卵リン脂質は、ｎ−６脂肪酸の有意な部分としてＡＡを供給し、好ましくはまた、前記比においてＤＨＡ及び／又はその他の長鎖ｎ−３脂肪酸を供給する。
【００５３】
この発明の追加の側面は、リン脂質の、特にＡＡ及び／又はＤＨＡのトリグリセリドを有する組成物に比較して、ヒトにおける脂肪酸ＡＡ及びＤＨＡの血液血清レベルを容易に増加させるＡＡ及び／又はＤＨＡを含むリン脂質の、ヒトへの経腸投与に関する。
【００５４】
本発明による組成物の投与のより適切な目安は、乳児の体重１ｋｇあたりの毎日の摂取（ｍｇ）としてである。次の表Ａは、本発明において用いうる組成物の各々について、最小限、好ましい、及び理想的目標の範囲についてのガイドラインを示す。
【００５５】
【表１】
2011137015.tif 000002
【００５６】
主に、この発明から利益を受けそうな乳児のすべてが同じ容量の処方物を消費するわけではないという事実から、範囲は幅広く分散している。消費が少ない者は各々の成分を少ししか与えられない。理想的目標範囲は、約１００ｋｃａｌが消費されることを想定している。また、コリンの含有量を評価する方法については論争がある。
【００５７】
表Ａからわかるように、最も好ましくは、ＡＡはＤＨＡよりも２〜４倍多い。また、リン脂質及びコリンの最小レベルは同一であることも観察される。これは、すべてのリン脂質をホスファチジルコリンとして供給することによって達成することができる。コリンはほかの窒素含有アルコール（例えばエタノールアミン、セリン、又はイノシトール）に替えることができるので、総リン脂質に対するコリンの相対量は減少する。
【００５８】
ＡＡ及び／又はＤＨＡが別々の成分として個別に投与されるか、あるいはその他の成分、例えばタンパク質、脂質、炭水化物、ビタミン、及びミネラル、と共に、又はこれらと組合わせて投与することもできる。低出生体重児のための栄養補給は、非経腸（静脈栄養供給）又は経腸のどちらかである。従って長鎖ＰＵＦＡの適切なレベルは、非経腸栄養溶液に組込まれるか、あるいは通常の低出生体重用経腸処方物に添加されてもよい。最も好ましくは、本発明の方法は、ＡＡ及びＤＨＡを含む低出生体重乳児のために設計された乳児処方物の経腸投与によって実施される。このような乳児処方物はさらに、適切なレベルの炭水化物及びタンパク質、ならびにミネラルとビタミンとの適切な組合わせを含んでいる。本発明の方法に用いるための乳児処方物の例は、修正シミラック・スペシャル・ケア（Ｓｉｍｉｌａｃ  Ｓｐｅｃｉａｌ  Ｃａｒｅ（Ｒ））（オハイオ州コロンバス、ロス・プロダクツ・ディビジョン・オブ・アボット・ラボラトリーズ（Ｒｏｓｓ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｄｉｖｉｓｉｏｎ  ｏｆ  Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｃｏｌｕｍｂｕｓ，Ｏｈｉｏ））であり、これは実施例ＩＩにおいてより詳細に考察される。
【００５９】
この発明のもう１つの側面は、ヒト血液の血清におけるアラキドン酸とドコサヘキサエン酸との血液血清レベルを高める方法であって、前記方法はリン脂質の形態においてＡＡ及びＤＨＡを含む経腸処方物を前記ヒトに投与するステップを含む。
【００６０】
本出願人による最近の研究では、ＮＥＣに罹りやすい乳児への長鎖ＰＵＦＡの投与が、ＮＥＣの発生を減少させ、またＮＥＣのレベル又は重症度をも低下させるうることを示している。本出願人らはまた、動物又は植物源からのリン脂質の投与は、ＮＥＣに罹りやすい乳児集団におけるＮＥＣの発生を減少させる上でも効果があることをも発見した。
【実施例】
【００６１】
実施例１
卵黄ホスファチドをファンスティール社（Ｐｆａｎｓｔｉｅｈｌ，Ｉｎｃ．）（イリノイ州ウオーケガン（Ｗａｕｋｅｇａｎ，ＩＬ）−カタログ番号Ｐ−１２３）から入手し、次の実施例において使用した。この卵ホスファチドの脂肪酸及びコレステロールプロフィルを表１に示す。すべてのｎ−３及びすべてのｎ−６「長鎖」ＰＵＦＡの合計も示す。
【００６２】
【表２】
2011137015.tif 000003
【００６３】
当業者なら、卵黄脂質中に含まれている様々な脂肪酸の特定のレベルは、雌鳥の品種、食餌、及び年齢によって様々であることを認識するであろう。さらに、実施例において用いられているホスファチドを調製するためのファンスティール社が用いた抽出手順は、栄養分野において非常に有用な脂肪酸プロフィルを有しつつも、極度に低いレベルのコレステロールしか含まない産物をもたらす。
【００６４】
実施例ＩＩ
この実施例において、各々実施例Ｉの卵ホスファチドを用いて又は用いずに、「実験用」及び「対照用」乳児処方物を調製した。対照組成物は、修正シミラック・スペシャル・ケア（Ｓｉｍｉｌａｃ  Ｓｐｅｃｉａｌ  Ｃａｒｅ（Ｒ））（オハイオ州コロンバス、ロス・プロダクツ・ディビジョン・オブ・アボット・ラボラトリーズ（Ｒｏｓｓ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｄｉｖｉｓｉｏｎ  ｏｆ  Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｃｏｌｕｍｂｕｓ，Ｏｈｉｏ））であり、次の成分表を用いて調製した。その結果、下記表ＩＩ〜ＩＶに示されている組成を有する処方物が調製された。
【００６５】
水（Ｋｏｓｈｅｒ）、無脂肪牛乳、加水分解コーンスターチ、ラクトース、分別ココヤシ油（中鎖トリグリセリド）、乳清タンパク濃縮物、大豆油、ココヤシ油、三塩基リン酸カルシウム、クエン酸カリウム、クエン酸ナトリウム、塩化マグネシウム、アスコルビン酸、モノ−及びジグリセリド、大豆レシチン、炭酸カルシウム、カラゲーナン、塩化コリン、硫酸鉄（ＩＩ）、ｍ−イノシトール、タウリン、ナイアシンアミド、Ｌ−カルニチン、酢酸アルファ−トコフェロール、硫酸亜鉛、パントテン酸カルシウム、塩化カリウム、硫酸銅（ＩＩ）、パルミチン酸リボフラビン及びビタミンＡ、塩化チアミン塩酸塩、塩酸ピリドキシン、ビオチン、葉酸、硫酸マンガン、フィロキノン、ビタミンＤ３、亜セレン酸ナトリウム、及びシアノコバラミン。
【００６６】
一般にタンパク質、炭水化物、脂質、ビタミン、及びミネラルスラリーは、別々に調製され、ついでこれらはホモゲナイズの前に混合される。混合は一般に、乳児処方物の製造に関して既にここに組込まれている米国特許に教示されているように行なわれる。
【００６７】
実験用処方物において、実施例Ｉの卵ホスファチドは、製造中にこの処方物中に組込まれた。先ず、卵ホスファチドは、２５℃で水中に分散され、８％分散液が得られる。ホスファチド分散液は、均質化の直前にタンパク質、炭水化物、ビタミン、ミネラル、及びその他の脂質スラリーと組み合わされ、下記表ＩＩ〜ＩＶに示されている組成を有する「実験用」処方物を与える。各成分の量は、あるいは低いカロリー密度を有する乳児処方物を調製することがこの技術でよく知られているので、「１リットルあたり」を基準とするものと、「ｋｃａｌあたり」を基準とするものの両方で示されている。１液体オンスあたりの標準２０ｋｃａｌより高い。
【００６８】
【表３】
2011137015.tif 000004
【００６９】
下記表ＩＩＩは、対照用及び実験用産物において用いられる脂質含有量（唯一の変数）を示す。これらの２つの処方物は同じ総脂質量を有するが、卵リン脂質を中鎖トリグリセリドの一部と交換していることが主として異なる。この置換は、有意に、より高いレベルのリン脂質とコリン、並びに追加の長鎖ＰＵＦＡをもたらす。
【００７０】
【表４】
2011137015.tif 000005
【００７１】
表ＩＶは、対照用及び実験用処方物についての複合脂肪酸プロフィルを示す。これは、卵レシチンの脂肪酸成分とシミラック・スペシャル・ケア（Ｒ）処方物との合計を表わす。
【００７２】
【表５】
2011137015.tif 000006
【００７３】
卵ホスファチドを含めることによって、長鎖ｎ−３脂肪酸として総脂質ブレンドの０．２１重量％と、長鎖ｎ−６脂肪酸として総脂質ブレンドの０．４８重量％とになった。より特定すれば、総脂肪ブレンドの０．１４重量％はＤＨＡであり、総脂質ブレンドの０．４１重量％はＡＡであった。１ｋｇの乳児に対して１００ｋｃａｌ／ｋｇ／日の投与を基準とすると、この処方物は１日あたり約２２ｍｇのＡＡと約７ｍｇのＤＨＡを供給する。当然ながらこれは、本発明の範囲内の比の単に１つの可能な実施態様である。
【００７４】
実施例ＩＩＩ
この実験において、卵リン脂質の使用に伴う感覚器官受容性の欠点を減少させるために、プロセス変数を評価した。本発明に有用な卵リン脂質の単離により、多くの場合乳児処方における使用にとって幾分異論のある感覚器官受容性を有する卵ホスファチドをもたらす。乳児又は介護者のどちらにも異論のない産物を提供するために、これらはさらにまだ改良することができる。最終産物を改良するためのこの方法は次に記載される。
【００７５】
脂肪ブレンドの６重量％が様々な手順を用いて予備処理された卵リン脂質であるという点を除いて、実施例ＩＩと同様ないくつかの栄養処方物を調製した。卵リン脂質を、実施例ＩＩに記載されている油ブレンドの一部中又は水の一部中に分散した。油分散液は許容しえないものであり、約９５℃までの加熱後でさえ用いることはできなかった。室温から温かい温度までの水中へのリン脂質の分散は容易に実施され、これは水分散液を形成する好ましい手段である。
【００７６】
９０℃の水中にリン脂質を約１時間ブレンドすることによって、卵リン脂質分散液３重量％のマスターバッチを調製した。この分散液の一部を、（１）脱気器のみ、（２）カーボン濾過装置のみ、（３）脱気器とカーボン濾過装置との組合わせ、又は（４）処理なし、に通した。
【００７７】
活性炭濾過装置は、活性炭８０ｇを含んでおり、脱気装置は中程度の真空（１５ｉｎ．Ｈｇ）で操作された。バッチ部分は濾過装置を３回、脱気器を１回通過させた。両方の技術が用いられた場合、この部分はまずフィルターに通され、ついで脱気器に通された。ついで均質化及びサンプル包装の直前に、処理済み部分が各栄養処方物に加えられた。
【００７８】
ついでサンプルは、先ず、訓練を受けた評価者パネルによって「風味特徴」（感覚器官受容性）について評価された。このパネルの結果を表Ｖに示す。
【００７９】
【表６】
2011137015.tif 000007
【００８０】
驚くべきことに、最も芳香が少ないサンプルは、脱気器のみを通過した分散液を含むものであった。脱気器とカーボンフィルターを通過した分散液は、対照（リン脂質分散液の処理がないもの）以外では最も評価が低かった。
【００８１】
実施例ＩＶ
実施例ＩＩ及びＩＩＩに従って調製された処方物が、テネシー大学新生児センターの新生児室（Ｎｅｏｎａｔａｌ  Ｎｕｒｓｅｒｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｔｅｎｎｅｓｓｅｅ  Ｎｅｗｂｏｒｎ  Ｃｅｎｔｅｒ）で実施された調査において乳児に与えられた。この調査は、Ｄｒ．Ｓｕｓａｎ  Ｅ．Ｃａｒｌｓｏｎの指揮のもとでロス・プロダクツ・ディビジョン・オブ・アボット・ラボラトリーズ（Ｒｏｓｓ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｄｉｖｉｓｉｏｎ  ｏｆ  Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）（調査ＡＥ７８）、ＮＩＣＨＤ助成金ＲＯ１−ＨＤ３１３２９、及びナショナル・アイ・インスティテュート（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｅｙｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）助成金ＲＯ１−ＥＹ０８７７０からの財政援助を受けたものである。研究パラメーターは、成長、神経の発達、及び視力を含むものであった。長鎖ＰＵＦＡは、大脳と目の発達に生理学的に重要であると考えられており、これらは妊娠の最後の３ヶ月間に胎児組織に急速に蓄積される。従って未熟児は成熟児に比べて長鎖ＰＵＦＡの正常なレベルまで累積されていない。
【００８２】
組込み基準：この臨床調査へ入れるかどうかは、心臓、呼吸器、胃腸、又はその他の全身疾患のない１５００グラム（７５０〜１３７５グラム）より小さい「低」出生体重に基づくものであった。この乳児はまた、仮死分娩も血液型不適合の臨床的合併症の病歴もなかった。この調査に登録された乳児の母親は、胎児に対する悪い作用が証明されているような出生前感染症の病歴はなかった。妊産婦用物質の濫用は除外基準とされた。乳児はすべて、出生後７日目から経口栄養供給が開始された。
【００８３】
臨床調査の間、１２０人の乳児全員が、出生後最初の７日目以内にこの調査に登録された。登録後まもなく別の病院に移された1人の乳児（対照）を除き、その他のすべての乳児（ｎ−１１９）が同じ病院で看護を受けた。乳児は３つのグループのうちの１つに入れられた（ランダム、ブラインド）。これらのグループの２つは、入院中に対照用処方物が与えられ、これらのグループのうちの１つは実験用処方物が与えられた（実施例ＩＩ参照）。入院中に死亡した乳児は、同じ処理グループに割当てられている別の乳児と代えた。この調査の設計によって、より多くの乳児に対照用処方物が与えられた。対照用処方物が与えられた者の総数は、実験用処方物が与えられた者の数の２倍以上であった。
【００８４】
発見事項：予期せぬ発見事項としては、実験グループよりも対照グループにおいて壊死性全腸炎（ＮＥＣ）のより高い発生が見られたことである。表ＶＩは、治療による新生児の総数（対照対実験）を分類したものであり、ＮＥＣの症状が現われた各グループにおける新生児数を示している。この病気と一致する臨床的徴候及び症状、例えば腹部膨満、胃残留、胆汁嘔吐、ヘム陽性大便、大便中の粘質物の存在、及び≧０．５ｍｇ／ｄＬにおけるＣ反応性タンパク質の存在などの場合、ＮＥＣが存在するか又はその疑いがあると考えられた（Ｐｏｕｒｃｙｒｏｕｓら、“Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ  ｏｆ  Ｓｅｒｉａｌ  Ｃ−ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｉｎ  Ｎｅｏｎａｔａｌ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｏｔｈｅｒ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ”、Ｐｅｄｉａｔｒ．，１９９３年、９２、４３１−４３５）。ＮＥＣは、対照乳児では１５人に、実験グループでは一人のみに確認された。
【００８５】
【表７】
2011137015.tif 000008
【００８６】
フィッシャーの精密検定（２テイル）を用いたこのデータの統計学的分析では、対照治療グループにおいてＮＥＣが確認された乳児数は、実験治療グループにおけるＮＥＣを有する乳児数より有意に多かった（ｐ＝０．０３９）ことを示している。
【００８７】
実施例Ｖ
この実験において、ＡＡ及びＤＨＡを栄養の非経腸（静脈内供給）投与に含めたものを評価する。この非経腸溶液は、この分野で知られている様々な成分を含んでいてもよく、ＡＡ及びＤＨＡは、リン脂質、トリグリセリド、又はメチルエステルの形態で供給される。ＡＡ及びＤＨＡは、通常の非経腸組成物の担体及び賦形剤と混合された単一の活性成分であってもよい。あるいはより好ましくはＡＡ及びＤＨＡは、乳児の総栄養補給物を補うため又は供給するための非経腸処方物に含まれている。典型的な非経腸栄養溶液は、約２ｇ／ｋｇ／日となる脂質レベルを含んでいる。脂質ブレンド中のＡＡ及びＤＨＡのレベルは、好ましくはＡＡについては１０から３０ｍｇ／ｋｇ／日、及びＤＨＡについては３から１５ｍｇ／ｋｇ／日の投与となるものであるべきである。
【００８８】
実施例ＶＩ
この実験において、実施例ＩＩの実験用処方物の卵レシチンを、対照用処方物中のものよりほぼ１０倍高いレベルで大豆レシチンに替える。大豆レシチンは、植物源に由来するその他のリン脂質のように、長鎖多不飽和酸を含まない。しかしながらリン脂質の極性及びこれらが胃腸粘膜中に容易に組込まれうる能力は、胃腸ライニングに保護作用を与えることができ、これによって、実施例ＩＩの実験用処方物の結果に匹敵しうる結果を生じる。さらには、大豆レシチンは、リノール酸（１８：２ｎ−６−ＡＡへの食餌必須脂肪酸先駆物質）とリノレン酸（１８：３ｎ−３−ＤＨＡへの食餌必須脂肪酸先駆物質）とを含んでいる。
【００８９】
実施例ＶＩＩ
この実験において、乳児用処方物におけるＡＡ及びＤＨＡを含むリン脂質の使用が、ＡＡ及びＤＨＡを含むトリグリセリドの使用と比較される。実施例ＩＩの処方物が、卵リン脂質が匹敵しうるレベルのＡＡ及びＤＨＡを含む単細胞微生物トリグリセリドの混合物と替えられている同様な乳児処方物と比較される。
【００９０】
ＡＡ及びＤＨＡの血液血清レベルを経腸投与後に測定するために、健康な成熟児を臨床評価に登録する。リン脂質処方物が与えられている乳児は、ＡＡ及びＤＨＡをトリグリセリド形態で含む対照用処方物よりも、母乳栄養乳児のレベルと非常に似ている、ＡＡ及びＤＨＡの血液血清レベルに達するものと予測される。この実験は、ＡＡ及びＤＨＡを含むリン脂質が、ＡＡ及びＤＨＡを含むトリグリセリドよりも好ましい投与形態であることを証明するであろう。従ってＡＡ及びＤＨＡ血液血清レベルを高めるための改良された経腸処方物及び方法が、ここでは企図される。
【００９１】
本発明の組成物及び方法の修正及び代替実施態様は、前記記載を見れば当業者には明白であろう。従ってこの明細書は例証的なものとしてのみ考えられ、当業者にこれの実施方法を教示する目的のためのものである。保護が求められている本発明の範囲全体は、添付クレームに規定されている。
【外国語明細書】
2011137015000001.pdf