(57)【要約】【課題】二枚貝飼育剤または二枚貝飼育法の提供。【解決手段】分子量５４０以下であり、かつ貯蔵糖あるいは貯蔵糖を構成している糖またはセロビオースを有効成分とする二枚貝飼育剤を提供し、該二枚貝飼育剤を有効成分である糖が１０ｍｇ／Ｌ以上３０，０００ｍｇ／Ｌ未満となるように溶解して用いる二枚貝飼育法を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
分子量５４０以下であり、かつ貯蔵糖あるいは貯蔵糖を構成している糖またはセロビオースを有効成分とする二枚貝飼育剤。
【請求項２】
糖がグルコース、マルトース、マルトトリオース、トレハロース、ラミナリビオース、ラミナリトリオース、セロビオース、スクロース、フルクトース、ガラクトース、グリセロールガラクトシドまたはマンニトールのいずれか１以上である請求項１に記載の二枚貝飼育剤。
【請求項３】
請求項１または２に記載の二枚貝飼育剤を用いる二枚貝飼育法。
【請求項４】
二枚貝飼育剤の有効成分である糖が、二枚貝の飼育環境中に１０ｍｇ／Ｌ以上３０，０００ｍｇ／Ｌ未満となるように溶解して二枚貝飼育剤を用いる請求項３に記載の二枚貝飼育法。
【請求項５】
請求項３または４に記載の二枚貝飼育法により飼育された成長促進または呈味成分が増大された二枚貝。
【請求項６】
アサリ、牡蠣、アコヤガイ、ホタテガイ、ハマグリ、ホッキガイ、ムラサキイガイ、シジミ、岩ガキ、マテガイである請求項５に記載の二枚貝。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、二枚貝飼育剤及び該剤を用いた二枚貝飼育法に関する。更に詳しくは、二枚貝の成長促進、呈味成分の増大等に有効な二枚貝飼育剤及び該剤を用いた二枚貝飼育法に関する。
【背景技術】
【０００２】
水産業において魚類、甲殻類、貝類等の魚介類の飼育や、その餌料となる動物プランクトンの培養には、餌飼料を投与する養殖飼育が行われている。餌飼料には、大きく分けて天然餌料および人工飼料の二種類があるが、天然餌料はコストがかかり、また、安定生産が難しいことから、人工飼料に置き換える研究が半世紀もの間続けられてきている。
その結果、魚類、甲殻類、巻き貝類に関しては、各種の固形飼料が開発・販売され、養殖分野において実用的に利用されている。しかし、二枚貝類向けの飼料については、実用化レベルに達したものは、日本配合飼料社による一製品のみであり、これについても必ずしも満足いく飼料効果は得られていない。
【０００３】
近年、様々な二枚貝餌料の開発がなされており、懸濁粒子（特許文献１〜４参照）や液体資材の二枚貝飼料（特許文献５参照）が開発されている。このうち液体資材の二枚貝飼料では、飼育水中にα、α―トレハロース及びその糖質誘導体を共存せしめることにより、二枚貝の水管の伸張が促進し、貝類体内の有機酸含量が増大するなど好ましい効果が得られることが示されている。
しかし、二枚貝の飼育試験期間が１６時間と短期であり、成長促進に関する言及はされておらず、高い濃度の糖液を添加した場合に、二枚貝の水管を出す行動が増加するとの観察をもって、貝の生命力が強化されたと解釈している。
本願発明者らが、追試したところ、水管を出す個体が増加することが確かめられたが、３％以上の糖液に浸漬した場合、本発明の試験例に示すように７２時間でアサリが全滅することが示された。そこで、さらに詳しく解析した結果、水管を出すという行動が、直ちに貝の生命力が強化されたことを示すのではなく、外液に対して浸透圧バランスをとるためのストレス行動であることが確認された。従ってこの液体資材の二枚貝飼料によっても十分な飼料効果が得られるとはいえず、二枚貝の成長促進に有効な二枚貝飼料の提供が望まれている。
【０００４】
海洋生物のうち二枚貝類は魚類や甲殻類と異なり、直接海水中の有機物を栄養分として取り込むことができることが知られている（非特許文献１参照）。また、糖質の取り込みも確認されてはいるが（非特許文献２参照）、窒素を含まず、たんぱく質の合成に寄与できないと考えられることから、その有効性についてはほとんど注目されてこなかった。
また、これらの研究においては、海水中の有機物等を直接“取り込めるか否か”に焦点が絞られており、低濃度かつ短時間内での投与実験が行われただけであり、“成長が促進されるか否か“についての検討はされてこなかった。例えば、非特許文献２の試験では、糖濃度が０．１８ｍｇ／Ｌ（１μＭ）に設定されており、人工海水中に添加した糖が減少することを４時間に渡って観察しているが、殻長が大きくなるとか、体重が増加するといったレベルで成長が促進されるということは証明されていない。
本発明者らの追試では、このような低濃度では、二枚貝の成長促進や呈味成分の増大等の産業上有益な飼料効果を示すとは考えられない。そこで、高い飼料効果を示す二枚貝飼育剤と該剤を用いて有効な効果を示す二枚貝飼育法の提供が望まれている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特願平０６−２３７７０６号公報
【特許文献２】特願平０８−１４０５８８号公報
【特許文献３】特願平０８−３２２４２０号公報
【特許文献４】特願２００６−２７１２０９号公報
【特許文献５】特開２００５−６８１３３号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｃ．Ｂ．  Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ  （１９８３）  Ｐａｔｔｅｒｎｓ  ｏｆ  Ｕｐｔａｋｅ  ｏｆ  ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄｓ  ｉｎ  Ｍｕｓｓｅｌｓ  （Ｍｙｔｉｌｕｓ  ｅｄｕｌｉｓ）．  Ｍａｒｉｎｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，  ７３：１７７−１８２．
【非特許文献２】Ｊ．Ｒ．Ｗｅｌｂｏｒｎ  ａｎｄ  Ｄ．Ｔ．Ｍａｎａｈａｎ  （１９９０）  Ｄｉｒｅｃｔ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ  ｏｆ  ｓｕｇａｒ  ｕｐｔａｋｅ  ｆｒｏｍ  ｓｅａｗａｔｅｒ  ｉｎｔｏ  ｍｏｌｌｕｓｃａｎ  ｌａｒｖａｅ．  Ｍａｒｉｎｅ  Ｅｃｏｌｏｇｙ  ｐｒｏｇｒｅｓｓ  Ｓｅｒｉｅｓ，  ６５：２３３−２３９．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、二枚貝飼育剤及び該剤を用いた二枚貝飼育法の提供を課題とする。更に詳しくは、二枚貝の成長促進、呈味成分の増大等に有効な二枚貝飼育剤及び該剤を用いた二枚貝飼育法の提供を課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を行った結果、分子量５４０以下であり、かつ貯蔵糖あるいは貯蔵糖を構成している糖またはセロビオースを有効成分とする二枚貝飼育剤を得て、これを二枚貝の飼育環境中に１０ｍｇ／Ｌ以上３０，０００ｍｇ／Ｌ未満となるように溶解して用いることで、成長が促進され、呈味成分が増大した二枚貝を飼育できることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、本発明は次の（１）〜（６）の二枚貝飼育剤、該剤を用いた二枚貝飼育法等に関する。
（１）分子量５４０以下であり、かつ貯蔵糖あるいは貯蔵糖を構成している糖またはセロビオースを有効成分とする二枚貝飼育剤。
（２）糖がグルコース、マルトース、マルトトリオース、トレハロース、ラミナリビオース、ラミナリトリオース、セロビオース、スクロース、フルクトース、ガラクトース、グリセロールガラクトシドまたはマンニトールのいずれか１以上である上記（１）に記載の二枚貝飼育剤。
（３）上記（１）または（２）に記載の二枚貝飼育剤を用いる二枚貝飼育法。
（４）二枚貝飼育剤の有効成分である糖が、二枚貝の飼育環境中に１０ｍｇ／Ｌ以上３０，０００ｍｇ／Ｌ未満となるように溶解して二枚貝飼育剤を用いる上記（３）に記載の二枚貝飼育法。
（５）上記（３）または（４）に記載の二枚貝飼育法により飼育された成長促進または呈味成分が増大された二枚貝。
（６）アサリ、牡蠣、アコヤガイ、ホタテガイ、ハマグリ、ホッキガイ、ムラサキイガイ、シジミ、岩ガキ、マテガイである上記（５）に記載の二枚貝。
【発明の効果】
【００１０】
本発明により、飼料効果の高い二枚貝飼育剤および該剤を用いた二枚貝飼育法を用いることにより、二枚貝の成長促進や呈味成分の増大を行うことができる。本発明の二枚貝飼育剤および該剤を用いた二枚貝飼育法は、アサリ、牡蠣、アコヤガイ、シジミ等の二枚貝の幼生飼育、初期稚貝の種苗生産、成貝養殖に適用することができ、よく肥育した活性の高い貝類の生産に寄与できる。また本発明の二枚貝飼育剤を砂抜きの時など、成貝の蓄養時に適用することで、身痩せの防止とともに、クエン酸やコハク酸など呈味性の有機酸含量の増加したおいしい二枚貝を得ることにも役立つ。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】糖濃度と総有機酸量の関係を示した図である（実施例）。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明の「二枚貝飼育剤」とは、二枚貝の飼育において、二枚貝の飼育環境に用いることで、二枚貝の成長を促進し、呈味成分を増大し得る剤のことをいう。本発明の「二枚貝飼育剤」は、二枚貝の餌料の本体として用いるものではなく、餌料を投与する際の栄養補助効果を期待して与えるものであることから、ヒトが食品とは別に栄養補助効果を期待して摂取するサプリメントと同様であり、二枚貝のための「海水サプリメント」等として用いることもできる。
本発明の「二枚貝飼育剤」は、分子量５４０以下であり、かつ貯蔵糖あるいは貯蔵糖を構成している糖またはセロビオースを有効成分とする剤であればいずれの剤も含まれる。有効成分である分子量５４０以下であり、かつ貯蔵糖あるいは貯蔵糖を構成している糖またはセロビオースのみからなる剤であってもよく、その他二枚貝の飼育に有用な成分や、剤の保形性や安定性を維持するための成分等を含んでいても良い。
【００１３】
ここで、「分子量５４０以下」とは、糖の分子量が、二枚貝が鰓もしくはベーラムの上皮細胞等から取り込める大きさである、分子量５４０以下であることを指す。このような糖として、例えばデンプンやグリコーゲンの構成糖であるＤ−グルコース、マルトース（２糖）、マルトトリオース（３糖）は、「分子量５４０以下」であり、二枚貝の飼育において有効である。
また、海藻の仲間である褐藻類が生産する貯蔵糖あるいは貯蔵糖を構成している糖であるラミナランや、これから得られるラミナリビオース（２糖）、ラミナリトリオース（３糖）も「分子量５４０以下」であり、二枚貝の飼育において有効である。さらに、紅藻類（海藻）は、トレハロース（グルコース２糖）、グリセロールガラクトシドの他、ガラクトースも有効成分として含めることができる。その他、褐藻類の貯蔵糖であるマンニトール、緑藻類の貯蔵糖であるスクロース（２糖）やその構成糖であるフルクトースも有効である。
さらに、貯蔵糖あるいは貯蔵糖を構成している糖ではないが、グルコースを構成糖としているセロビオース（２糖）も直接吸収され得ることから、本発明の「二枚貝飼育剤」の有効成分となり得る場合もある。
なお、アミノ酸系の物質やＮ−アセチルグルコサミンはＮを含むため、貝類のタンパク合成に寄与し、成長促進に有効であるというメリットを有するが、一方で、飼育水中で、細菌が増殖し易くなり、水質管理が難しくなるという致命的な欠点を有する。これに対し、本発明の「二枚貝飼育剤」は糖を有効成分とするため、大量に飼育水に投与しても細菌の過度な生育がおこらず、水質が悪化しにくいという特徴を有する。
【００１４】
また、「貯蔵糖あるいは貯蔵糖を構成している糖」とは、動植物が生産する糖質成分のことを言う。たとえば、Ｄ−グルコースがα１，４−結合した物質であり、トウモロコシ等の多くの陸上植物や海藻（緑藻類、紅藻類）に含まれるデンプンおよび動物に含まれるグリコーゲン等が挙げられる。なお、ラムノース、グルクロン酸、キシロースなど海藻藻体を構成する成分である構造多糖系の糖では、殻の成長を抑制することから、本発明の「二枚貝飼育剤」の有効成分として用いるのは好ましくない。
【００１５】
このような「分子量５４０以下であり、かつ貯蔵糖あるいは貯蔵糖を構成している糖またはセロビオース」として、セロビオース以外に、貯蔵糖として、デンプン、ラミナラン、マンニトール、トレハロース、グリセロールガラクトシドまたはスクロース、貯蔵糖を構成している糖として、グルコース、マルトース、マルトトリオース、ラミナリビオース、ラミナリトリオース、フルクトースまたはガラクトース等が挙げられる。本発明の「二枚貝飼育剤」には、これらの糖をいずれか１以上含んでいれば良く、例えばグルコースとトレハロースを共に含むなど、２以上の糖を組み合わせて含んでいても良い。
【００１６】
本発明の「二枚貝飼育法」とは、本発明の「二枚貝飼育剤」を用いて二枚貝を飼育することを言う。本発明の「二枚貝飼育法」では、本発明の「二枚貝飼育剤」によって、二枚貝の成長促進および呈味成分の増大の効果が得られるように使用することが好ましく、二枚貝の飼育環境中に本発明の二枚貝飼育剤を１０ｍｇ／Ｌ以上３０，０００ｍｇ／Ｌ未満となるように溶解して用いることが好ましい。
二枚貝は孵化すると速やかに鰓もしくはベーラムの上皮細胞から有機物を取り込む能力を獲得する。従って、本発明の「二枚貝飼育剤」を用いる「二枚貝飼育法」は、孵化した後、幼生、稚貝、成貝のいずれの二枚貝においても行うことができ、これらの飼育環境中に溶解した二枚貝飼育剤の有効成分を、これらの二枚貝が取り込み、成長が促進され、呈味成分が増大されることになる。さらに、出荷前の砂抜きのための蓄養期間や海水とともにパック詰めされた状態の流通過程や飲食店の生簀に陳列された状態の流通過程においても、本発明の「二枚貝飼育法」を行うことができる。
ここで、「二枚貝の飼育環境」とは、二枚貝が海水や一定の塩濃度の水等の飼育水中に存在し、調理される直前までの飼育されている環境のことをいう。
【００１７】
本発明の「二枚貝飼育法」において、本発明の「二枚貝飼育剤」を用いるにあたり、「二枚貝飼育剤」の有効成分である糖が、二枚貝の飼育環境中に１０ｍｇ／Ｌ以上３０，０００ｍｇ／Ｌ未満の濃度となるように溶解させて用いられることが望ましい。
糖の濃度は目的に応じて調整することができ、二枚貝の成長促進や実入りをよくすることを目的とする場合には、１０ｍｇ／Ｌ以上１０００ｍｇ／Ｌ以下で二枚貝にストレスがかからない低濃度で２週間以上の長期間投与すること等が好ましい。また、短期間で二枚貝体内のクエン酸やコハク酸などの有機酸含量を増やし、旨み成分含量を上げておいしい二枚貝を得ることを目的とする場合には、１００ｍｇ／Ｌ以上３０，０００ｍｇ／Ｌ未満で６時間〜１週間以内の短時間、浸漬処理することもできる。
【００１８】
二枚貝としてアサリを対象とした場合には、糖が１００ｍｇ／Ｌとなるように、二枚貝飼育剤を用いて２４時間処理しただけで、アサリ体内の有機酸含量が二枚貝飼育剤を用いない場合の約１．５倍となる傾向が見られた。同様に糖が１０，０００ｍｇ／Ｌとなるように二枚貝飼育剤を用いた場合でも、アサリ体内の有機酸含量が増加したが、糖が１００ｍｇ／Ｌとなるように用いた場合と比べて、有機酸の増加量が１割程度しか違わなかったことから、コストを勘案して、適切な糖濃度となるように、本発明の二枚貝飼育剤を用いること好ましい。
【００１９】
本発明の「二枚貝飼育剤」または「二枚貝飼育法」の対象となる二枚貝としては、生物学的に二枚貝として分類されるいずれの貝も含まれるが、食用の二枚貝であることが好ましく、例えば、アサリ、牡蠣、アコヤガイ、ホタテガイ、ハマグリ、ホッキガイ、ムラサキイガイ、シジミ、岩ガキ、マテガイなどの二枚貝類が挙げられる。
【００２０】
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００２１】
＜二枚貝飼育剤による二枚貝の成長促進の確認＞
１．試料
１）アサリ
独立行政法人水産総合研究センター  瀬戸内海区水産研究所  伯方島栽培技術開発センターにおいて採卵後、人工飼育されたアサリ稚貝（３６５日齢、殻長７．５ｍｍ〜９．５ｍｍ、肥満度１５．９）を平均殻長が８．４９ｍｍになるように１５個体選別し、１群として水槽に収容した。
飼育は５Ｌ容積の円柱型ポリスチレン水槽を用い、ろ過自然海水を使用してエアレーションをしながら２２日間飼育した（平均水温２４．７℃、平均塩分３３．０‰、平均ｐＨ８．１、平均溶存酸素量６．７ｍｇＯ2／Ｌ）。給餌条件は、朝９時に市販の珪藻餌料であるキートセロス  カルシトランス（日清サイエンス、商品名サンカルチャー）を８万細胞／ｍＬ濃度になるように１回投与し、止水で１６時まで７時間摂餌させた後、夜間１７時間は海水かけ流し（１Ｌ／ｍｉｎ）に切り替えて飼育することを基本条件（対照区）とした。週のうち平日５日間は、給餌し、土日の２日間は、非給餌・非糖質投与でかけ流しで飼育した。
【００２２】
２）二枚貝飼育剤
Ｄ−グルコース（分子量１８０の単糖、純度９８％以上）、マルトース（分子量３６０のグルコース２糖、純度９７％以上）またはマルトトリオース（分子量５０４のグルコース３糖、純度９８％以上）を有効成分とする二枚貝飼育剤を用いた。
【００２３】
３）比較組成物
比較として、マルトペンタオース（分子量８２９のグルコース５糖、純度９８％以上）またはプルラン（平均分子量１０万のグルコース多糖、純度９７％以上）を有効成分とする組成物を用いた。
【００２４】
２．成長促進確認試験
上記アサリ稚貝の飼育において、珪藻餌料であるキートセロス  カルシトランス（日清サイエンス、商品名サンカルチャー）を投与する際に、二枚貝飼育剤または比較組成物を有効成分である糖質が１ｍｇ／Ｌ（１ｍｇ／Ｌ区）、１０ｍｇ／Ｌ（１０ｍｇ／Ｌ区）または１００ｍｇ／Ｌ（１００ｍｇ／Ｌ区）となるように添加して飼育した。また、対照として餌を与えない無給餌区と珪藻餌料のみを加えた試験区（珪藻飼料給餌区）を設け飼育した。
各試験区とも水槽を３個ずつ用意して飼育を行い、飼育後の生残率を計算するとともに、平均殻成長率（μｍ／ｄａｙ）を調べた。またアサリ稚貝を１群（１５個体）ごとまとめて凍結乾燥し、まず全重量（乾物）を測定した。さらに貝を３０％次亜塩素酸溶液に１晩浸漬して可食部を完全に分解して除去したのち、殻部分を回収し、蒸留水で洗浄・乾燥後、殻の重量を測定した。全重量から殻の重量を差し引いて、可食部重量（乾物）を算出した。試験終了時の平均可食部重量から試験開始時の平均可食部重量を差し引き飼育日数２２日で割って可食部増重率（μｇ／ｄａｙ）を求めた。また肥満度（＝可食部重量／殻重量ｘ１００）を計算して平均値を比較した。結果を表１に示した。
【００２５】
【表１】
2011010637.tif 000002
【００２６】
その結果、表１に示したように、グルコースを有効成分とする二枚貝飼育剤は、１０ｍｇ／Ｌ区、１００ｍｇ／区で有意にアサリの可食部増重率（μｇ  ／ｄａｙ）が促進され、殻成長率も促進されることが認められた。マルトースまたはマルトトリオースを有効成分とする二枚貝飼育剤においても濃度が高いほど、殻成長率（μｍ／ｄａｙ）と可食部増重率が増大する傾向が認められた。そして、グルコースまたはマルトースを有効成分とする二枚貝飼育剤において、濃度が高いほど肥満度が高くなる傾向も認められ、身の太り具合も良好であることが示された。
これに対し、マルトペンタオースまたはプルランを含む比較組成物では、このような成長促進効果は認められなかった。これは、マルトペンタオース及びプルランの分子サイズが大きく、貝が上皮細胞から直接吸収できないことによると考えられた。
なお、生残率（％）は、飼育期間が短期間であったため、無給餌区も含めてどの試験区も差がなかった。また、比較組成物に含まれるマルトペンタオースまたはプルランは、飼育水とともに非特異的に二枚貝の消化管に取り込まれ、消化管内で消化酵素の働きにより低分子化されて、消化吸収されると推察されたが、このような消化吸収のかたちでは、二枚貝の成長にほとんど貢献しないと考えられた。
【実施例２】
【００２７】
＜二枚貝飼育剤の有効成分による二枚貝へ影響の確認＞
１．試料
１）アサリ
広島県浜毛保漁業において蓄養水槽に収容されていたアサリ成貝（平均殻長３５．０ｍｍ）を購入した。自然海水をかけ流した水槽に一晩入れて馴致し、殻を開いた正常な個体を選別して飼育実験に使用した。
２）二枚貝飼育剤
Ｄ−グルコース（分子量１８０の単糖、純度９８％以上）を有効成分とする二枚貝飼育剤を用いた。
【００２８】
２．浸透圧耐性の確認試験
５Ｌ容積のプラスチック製円柱型水槽に自然海水（塩分濃度３．０％）を注入し、これに二枚貝飼育剤を、有効成分であるＤ−グルコースが０．０１ｗ／ｖ％（１００ｍｇ／Ｌ）、０．１ｗ／ｖ％（１，０００ｍｇ／Ｌ）、０．５ｗ／ｖ％（５，０００ｍｇ／Ｌ）、１ｗ／ｖ％（１０，０００ｍｇ／Ｌ）、３ｗ／ｖ％（３０，０００ｍｇ／Ｌ）、５ｗ／ｖ％（５０，０００ｍｇ／Ｌ）となるようにそれぞれ添加して溶解させた。また、対照として二枚貝飼育剤を添加しない試験区を設けた。
各試験区とも水槽を３個ずつ用意して、アサリを１０個体ずつ各水槽に収容し、エアレーションを行いながら、水温１４．２℃下において静置し、飼育開始後５時間後、８時間後、２４時間後の３回、水管を伸張している個体の数を数えて記録した。
各試験区について、３個の水槽から得たデータから、水管を出した個体の割合（％）の平均値を算出し、表２に示した。また、３個の水槽のうち１個の水槽は、そのまま放置し、１６８時間後（７日後）まで生残率％を観察して結果を表３に示した。これらの結果より、二枚貝飼育剤の有効成分となる糖の添加濃度によって、アサリに与える影響を調べた。
【００２９】
【表２】
2011010637.tif 000003
【００３０】
【表３】
2011010637.tif 000004
【００３１】
表２に示したように、水管を出しているアサリの割合（％）はグルコース添加濃度が高いほど高かった。しかし、表３に示した通り、糖濃度３０，０００ｍｇ／Ｌ区と５０，０００ｍｇ／Ｌ区では、７２時間経過した時点で、アサリが全滅したことから、高濃度で糖質を添加した場合において、水管を出すという行動は、アサリにとって浸透圧調節の必要性に迫られて嫌がおうなく示す行動であると示唆された。
特に表２に示された、糖質１０，０００ｍｇ／Ｌ区では、５時間後、８時間後においては水管を出している個体割合％がそれぞれ９３．３％、７３．３％と高いのに対し、２４時間後には急激に２０．０％へと低下したことから、アサリが水管を出して海水中のグルコースを積極的に体内に取り込んだ結果、２４時間後には、浸透圧調節が完了したことを示しているものと考えられた。
従って、高濃度の糖質の添加によってアサリが水管を出したからといって、先行技術文献である特許文献５のように、アサリの生命力が強化されたとはいえず、二枚貝の飼育法においては、適切な糖濃度となるように、本発明の二枚貝飼育剤を使用する必要があることが示唆された。
【００３２】
３．可食部重量・呈味変化の確認
上記２．浸透圧耐性の確認試験において使用した３個の水槽のアサリのうち、１個の水槽から、アサリを１０個体回収し、貝殻表面を手早く水道水で洗浄した後、開殻し、取り出した可食部の可食部湿重量を測定し、二枚貝飼育剤の有効成分となる糖の添加濃度によって、アサリの可食部重量の変化に与える影響を調べた（表４）。
その後、この可食部を用いて、アサリ体内中の有機酸含量を測定し、二枚貝飼育剤の有効成分となる糖の添加濃度によって、アサリの呈味成分の変化に与える影響を調べた。
即ち、可食部湿重量を測定した後のアサリを、予め氷冷しておいた３％  ｗ／ｖ濃度過塩素酸溶液３０ｍＬに投入し、ポリトロン型ホモジナイザー（ＫＩＮＥＭＡＴＩＣＡ社製，  型式ＰＴ１０−３５）でパワー６で９０秒間ホモジナイズした後、中層を１．５ｍＬ分取し、遠心分離により上清を回収した。上清は０．２μｍのメンブランフィルターでろ過した後、高速液体クロマトグラフによる有機酸分析システム（日本分光、ポンプＰＵ−２０８０ＰＬＵＳｘ２台、検出器ＵＶ−２０７０ＰＬＵＳ、カラムＳｈｏｄｅｘ  ＲＳｐａｋ  ＫＣ−Ｇ＋ＫＣ−８１１ｘ２本）により分析した（移動相４．８ｍＭ  ＨＣｌＯ4、１．０ｍＬ／ｍｉｎ，反応液０．２ｍＭ  ＢＴＢ＋２２ｍＭ  Ｎａ2ＨＰＯ4・Ｈ2Ｏ、１．５ｍＬ／ｍｉｎ、カラム温度６０℃、検出波長４４５ｎｍ注入量１００μｍ）。分析結果を表５に示し、得られた結果データから糖濃度と総有機酸量の関係をグラフにしたものを図１に示した。
また、残りの１水槽のアサリをフライパンに蓋をして蒸し焼き調理をして賞味することで呈味試験を行い、二枚貝飼育剤の有効成分となる糖の添加濃度によって、アサリの呈味変化に与える影響を調べた。
【００３３】
【表４】
2011010637.tif 000005
【００３４】
【表５】
2011010637.tif 000006
【００３５】
表４に示したように、２４時間後の試験区ごとの平均可食部重量を比較すると糖濃度３０，０００ｍｇ／Ｌ区と５０，０００ｍｇ／Ｌ区で、アサリの可食部重量が１割程度、減少している傾向が見られた。これは、高浸透圧のためにアサリ可食部が脱水症状を起こしていることによると示唆された。また、呈味試験において、各試験区のアサリを蒸して賞味した結果、糖濃度３０，０００ｍｇ／Ｌ区と５０，０００ｍｇ／Ｌ区の２４時間浸漬処理したアサリは、身が若干収縮して、少し硬くなった食感を有していた。他の試験区のアサリでは、テクスチャーの面で大きな違いは感じられなかった。
以上の結果より、二枚貝飼育剤の有効成分である糖は、飼育環境中に３０，０００ｍｇ／Ｌ  未満で添加されることが好ましいことが確認された。なお、２４時間後の飼育水のｐＨ値、溶存酸素量、水温、塩分濃度も計測したが、水槽間に有意な差はなく、二枚貝飼育剤の有効成分とされるグルコースなどの糖質は、アミノ酸などに比べ、水質に対する影響が極めて少ないと考えられた。
【００３６】
また、表５に示したように、二枚貝飼育剤を用いてアサリを飼育することにより、アサリ体内の総有機酸含量が著しく増加することが確認された。
即ち、糖質非添加区で１３０４．４μｇ／Ｌであるのに対し、糖質添加区では、クエン酸やコハク酸など呈味成分が１９３１．３μｇ／Ｌ（１．５倍）から３０７２．２μｇ／Ｌ（２．４倍）まで向上していることが確認された。また、二枚貝飼育剤の有効成分である糖を飼育環境中に高濃度添加するほど、総有機酸含量が増大する傾向があることが示された。有機酸の種類ごとにみると、呈味性の有機酸が軒並み増大し、最大でクエン酸で２．１倍（５０，０００ｍｇ／Ｌ濃度区）、ピルビン酸で８．８倍（３０，０００ｍｇ／Ｌ濃度区）、コハク酸で６．６倍（５０，０００ｍｇ／Ｌ濃度区）であった。
この結果より、本発明の二枚貝飼育剤を用いて二枚貝を飼育することにより、成長促進効果だけでなく、呈味成分の向上が期待できることが確認された。
【００３７】
なお、二枚貝飼育剤の有効成分である糖を飼育環境中に３０，０００ｍｇ／Ｌまたは５０，０００ｍｇ／Ｌとなるように添加した区では、生体にとって好ましくない有機酸とみなされるギ酸が産生されており、アサリの体内が正常でない状態にあることが示唆された。
また、図１のグラフに示したように、１００ｍｇ／Ｌとなるように、糖を添加した場合には総有機酸含量が１．５倍に増加しており、その後、５，０００ｍｇ／Ｌまでは、総有機酸含量はほぼ一定であることが示された。
二枚貝飼育剤の有効成分である糖を飼育環境中に１０，０００ｍｇ／Ｌ以上となるように添加すると、糖の添加濃度に応じてアサリ体内の総有機酸含量が上昇する傾向が見られたが、上記の浸透圧耐性の確認試験の結果も含めて考察すると、飼育環境中に含まれる糖濃度が１０，０００ｍｇ／Ｌを超えると、アサリが体内の浸透圧を調製するために、水管を出して海水中のグルコースを積極的に体内に取り込み、その結果として、体内の有機酸含量が急激に上昇するものと考えられた。
【００３８】
［比較例］
構造多糖系の糖を有効成分とする剤を用いた二枚貝飼育における影響
実施例１のアサリを用い、構造多糖系の糖として、ラムノース、グルクロン酸（ともにラムナン硫酸の主要構成糖）、キシロース（褐藻類、紅藻類、緑藻類、微細藻類に構造多糖として広く含まれる糖質）を有効成分とする剤を用い、各糖が４μＭ（約０．７ｍｇ／Ｌ）または４０μＭ（約７ｍｇ／Ｌ）となるように、アサリの試験環境中に添加して、実施例１と同様の方法でアサリ稚貝（平均殻長７．１ｍｍ）を飼育し、その飼育における影響を調べた。
【００３９】
【表６】
2011010637.tif 000007
【００４０】
その結果、表６に示したように、ラムノース、グルクロン酸については、加食部増重率に対しては、促進効果があったり、なかったりとまちまちであったが、殻成長率を有意に低下させることが確認された。キシロースについては４μＭとなるように添加した場合に、同様に殻成長率が低下する傾向が認められた。ラムノースとグルクロン酸では、顕著に肥満度が大きくなったが、殻の成長を抑制するため、稚貝の種苗生産での使用には適さないと考えられた。従って、これらの構造多糖系の糖は、本発明の二枚貝飼育剤の有効成分として使用できないことが示された。
【００４１】
さらに、糖とステアリン酸（脂肪酸の一種）がエステル結合した有機物であるショ糖脂肪酸エステル（三菱瓦斯化学社製、商品名Ｓ−１６７０）またはフィトール（クロロフィルの部分分解物でテルペン類の一種）を有効成分とする剤を用い、アサリの試験環境中に添加して、実施例１と同様の方法でアサリ稚貝（平均殻長４．７ｍｍ）を飼育し、その飼育における影響を調べた。
【００４２】
【表７】
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【００４３】
その結果、表７に示したように、ショ糖脂肪酸エステルまたはフィトールともに１ｍｇ／Ｌとなるように添加した場合に、アサリの可食部と殻の成長を阻害することが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００４４】
本発明の二枚貝飼育剤は、二枚貝の成長促進や呈味成分の増大を行うことができる飼料として販売することができる。そして、本発明の二枚貝飼育剤および該剤を用いた二枚貝飼育法を用いることにより、成長が促進され、呈味成分が増大した二枚貝は、おいしい二枚貝として消費者に提供することができる。
【図１】
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