(57)【要約】【課題】低温外科手術において脳などの臓器に効率的且つ安定的に酸素を運搬し得る輸液（または、補液）の提供。動脈硬化をきたした毛細血管の末端まで酸素を運搬し得る輸液の提供。【解決手段】超微細状態の酸素ナノバブルを含有する輸液。前記ナノバブルの直径は１〜１０００ｎｍの範囲にある。前記輸液は塩分を０．０１〜３．５重量％で含む。前記輸液は、脳の選択的冷却法による脳外科手術や脳低温療法、及び末梢循環不全症の治療等に用いることができる【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
酸素ナノバブルを含んでなる、輸液。
【請求項２】
前記酸素ナノバブルの気泡径が１〜１０００ｎｍである、請求項１に記載された輸液。
【請求項３】
前記酸素ナノバブルの気泡径が５０〜５００ｎｍである、請求項１に記載された輸液。
【請求項４】
塩分を０．０１〜３．５重量％で含む、請求項１〜３いずれか１つに記載された輸液。
【請求項５】
生理食塩水、リンゲル液、１号〜４号液、酢酸リンゲル液または乳酸リンゲル液から選ばれた少なくとも１つである、請求項１〜４のいずれか１つに記載された輸液。
【請求項６】
全身および局所超低体温法による外科手術用である、請求項１〜５のいずれか１つに記載された輸液。
【請求項７】
脳の選択的冷却法による脳外科手術用である、請求項１〜５のいずれか１つに記載された輸液。
【請求項８】
脳の選択的冷却法による脳低温療法用である、請求項１〜５のいずれか１つに記載された輸液。
【請求項９】
脳低温療法が脳卒中、特に脳梗塞および外傷性脳損傷の治療である、請求項８に記載された輸液。
【請求項１０】
ヘパリンを含有する、請求項６〜９のいずれか１つに記載された輸液。
【請求項１１】
末梢循環不全症の治療用である、請求項１〜５のいずれか１つに記載された輸液。
【請求項１２】
末梢血管拡張剤を含有する、請求項１１に記載された輸液。
【請求項１３】
酸素ナノバブルを含有する水に輸液成分を添加する工程を含む、請求項１〜１２のいずれか１つに記載された輸液を製造する方法。
【請求項１４】
輸液成分を含有している水に酸素ナノバブルを発生させる工程を含む、請求項１〜１２のいずれか１つに記載された輸液を製造する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ナノバブル状態にある酸素（以後、「酸素ナノバブル」と称する。）を含んでなる輸液（または補液）、該輸液の製造方法、該輸液の脳の「選択的冷却法」による脳卒中および脳外傷に対する「脳低温療法」への使用、該輸液の脳の「選択的冷却法」による脳外科手術、即ち「無血手術」（したがって無輸血手術）への使用、ならびに該輸液の末梢循環不全症の治療への使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
血液中の酸素には、赤血球と結合している「結合型酸素」と、血液中に溶解している「溶解型酸素」とがある。赤血球の直径は約７〜８μｍと大きく、動脈硬化をきたした毛細血管の全領域を容易に通過することはできない。一方、溶解型酸素は毛細血管を通って先端にまで運ばれて、末梢細胞に酸素を供給することができるが、溶解型酸素の割合は、血液中の全酸素の約３％程度に過ぎない。
【０００３】
一方、末梢血管の動脈硬化または閉塞に伴う慢性及び急性の低酸素状態の治療において、輸血で対処する場合、酸素運搬体としての赤血球は毛細血管を通って末端にまで十分に到達することは難しい。また、輸液で対処する場合であっても、輸液中の酸素含量を飽和溶解度以上に高めることは難しい（例えば、大気圧下での溶存酸素量は、０℃で約１４ｐｐｍ、１５℃で約１０ｐｐｍ、４０℃で、８ｐｐｍであり、酸素圧下での溶存酸素量は、０℃で約７０ｐｐｍである）。
【０００４】
また、脳卒中および外傷性脳損傷などの脳障害の治療法として、従来から脳を選択的に冷却して行う「脳低温療法」が行われている（特開２００２−１１９５８６号公報参照）。この治療法では、損傷脳組織の新陳代謝率を低下させ、二次的脳損傷を極力抑制し、脳損傷予防に対する好ましい治療効果を得るものである。
【０００５】
更に、外科的処置において、処置対象（例えば脳）の状態を維持する点から、対象臓器ないし組織を低温に維持して、代謝を抑制し、二次損傷を抑制しようという「超低体温法」がある。１９６０年にウッドホール（Woodhall）が、開頭術時の止血困難な出血を防止し、かつ脳を保護する目的で、開心術で使用される全身超低体温下に心停止する方法を用いることを提唱して以来、「全身超低体温法」は多くの手術で用いられている。しかし、この方法では、人工心肺を用いるので、その操作の煩雑さ、諸臓器への血液潅流が不全となること、抗凝固剤であるヘパリン量が多く必要であることから生じる、脳内での後出血などの問題が生じている。
【０００６】
これらの問題点に鑑み、これまでと同様に人工心肺を用いるが、脳を選択的に所定温度に冷却する方法（「選択的冷却法」）が開発され、これを開頭術等に応用されてきた（J．Neurosurg；第２４巻，第９９４〜１００１頁，１９６６年，参照）。この選択的冷却法によって安全に脳の低血圧状態が得られるようになったが、まだ多量のヘパリンを使用せざるを得ないため、術中・術後の出血の危険があるという問題点が依然として未解決のままで残っていた。
【０００７】
この問題点に対して、更に、補液としての乳酸リンゲル液を冷却して脳動脈に注入する方法が見出され、これによって脳のみを選択的に冷却し、また、人口心肺装置を用いないので、へパリン使用量を減らすことができ、出血の危険を低減させることができる（Neurosurgery；第３１巻，第１０４９〜１０５５頁，１９９２年）参照）。この方法では、酸素欠乏を起こさずに、可逆的に極低血圧状態を作り出すことができ、また、低温に冷やした補液を用いることによってヘパリン使用量を激減することができ、その量は、通常の血管造影を行う時と大差ない量となった。具体的には、脳動脈瘤クリッピング時の一時的血流遮断の外科的処置の場合、対象としての脳の温度を３３±１℃程度の低温に維持して手術が行なわれる。
【０００８】
これらの外科的処置において、出血量を最小限にする装置（以下、「無血処置装置」とも呼ぶ）も提案されている（ＷＯ００／０４７２５１号）。例えば脳のような対象に対して可及的に対象のみに補液を供給することにより、大量出血による臓器の損傷、壊死等のような課題を解決できる。この方法は、動脈内を血液の代わりに冷却晶質液（晶質液：電解質補液と同義。）が循環するシステムである。この補液は、外科的処置および対象に対して悪影響を及ぼさない液体であれば特に限定されず、例えば、通常水を主成分とするものであり、電解質、栄養分、安定剤などを含んでいてもよい。特に好ましい補液は、５〜１０℃において安定なものであり、例えばリンゲル液、乳酸リンゲル液、低分子デキストリン含有リンゲル液（例えば５％含有）、特にＬ体タイプのものなどを補液として使用するのが特に好ましい。冷却用補液温度は上記の通り５〜１０℃であるが、脳の温度は３０〜３５℃程度に維持される。補液は、ある程度の時間体内に滞留し、その後、体液が大過剰となることを防ぐため、透析装置を用い、体内から徐々に導出除去される。
【０００９】
これらの外科的処置において、補液を体内に供給する前に酸素ガスをバブリングして、ここを通過する補液を酸素化し、酸素を飽和溶解度近くにする方法も行なわれているが、対象組織の酸素化を更に効率よく行なうことが求められている。
【００１０】
また、末梢循環不全症は、手足の冷え症・しびれ等のみならず、酸素利用障害やエネルギー代謝不全による臓器、細胞の虚血・低酸素に起因する臓器機能不全を招き得て、末梢細胞・組織の壊死・機能不全に至る可能性もある。末梢循環不全症に対する一つの対症療法としては、晶質液の応用が示唆される。晶質液としては、従来からの生理食塩水（食塩濃度０．９％）、1号液〜4号液、リンゲル液、乳酸リンゲル液、酢酸リンゲル液等の輸液が知られている。これらの輸液においても、より効率的に末梢組織の酸素利用を促進し得る輸液の開発が求められている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】特開２００２−１１９５８６号公報
【特許文献２】ＷＯ００/０４７２５１号公報
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】太田富雄他、J．Neurosurg；第２４巻，第９９４〜１００１頁，１９６６年
【非特許文献２】太田富雄他、J．Neurosurg；第３１巻，第１０４９〜１０５５頁，１９９２年。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明は、上記課題を解決する輸液を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明者らは、前記問題を解決すべく鋭意検討を進めた結果、驚くべきことに、超微細化気泡の状態にある酸素ナノバブルを含有する輸液が、これらの問題点を解決し得る事を発見し、本発明に到達した。
即ち、本発明は、酸素ナノバブルを含んでなる、輸液を提供するものである。前記ナノバブルの気泡径（直径）は１〜１０００ｎｍの範囲にあり、好ましくは５０〜５００ｎｍの範囲にある。
前記輸液は塩分を０．０１〜３．５重量％で含むことが好ましい。
前記輸液は生理食塩水、リンゲル液、１号〜４号液、酢酸リンゲル液または乳酸リンゲル液から選ばれた少なくとも１つであってよい。
本発明は、前記輸液を製造する方法を提供するものである。
本発明は、全身および局所超低体温法による外科手術用としての前記輸液、及びそれを用いる全身および局所超低体温法による外科手術方法を提供するものである。ここで、局所超低体温法とは、処置すべき対象臓器部位を超低体温に保ってする外科手術をいう。
本発明は、脳の選択的冷却法による脳外科手術用としての前記輸液、及びそれを用いる脳の選択的冷却法による脳外科手術方法を提供するものである。
本発明は、脳の選択的冷却法による脳低温療法用としての前記輸液、及びそれを用いる脳低温療法、特に、脳卒中および外傷性脳損傷の治療法を提供するものである。
本発明は、末梢循環不全症の治療用としての前記輸液、及びそれを用いる末梢循環不全症の治療方法を提供するものである。
本発明は、前記ナノバブル酸素を含有する輸液の製造方法を提供するものである。
【発明の効果】
【００１５】
本発明の輸液は、例えば、脳の選択的冷却法による脳外科手術において、低酸素状態を回避するため、低温状態で超微細な酸素ナノバブル状態を安定に保持し、手術中の脳へ酸素供給を効率的に行なうことができる。本発明の輸液は、動脈硬化をきたした毛細血管を通して末梢細胞・組織へ効率的に酸素を運搬することができるため、例えば、脳の選択的冷却法による脳低温療法、例えば、脳卒中および外傷性脳損傷の治療や、末梢循環不全症の治療に安全に用いることがでる。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下、本発明の実施態様を詳細に説明する。
本発明で用いる酸素ナノバブルは、輸液中における気泡径（直径）がナノサイズ（１〜１０００ｎｍの範囲）にある酸素をいう。好ましくは、前記気泡径は２００ｎｍ以下である。特に、ナノバブルの安定性の点からは、前記気泡径は１００ｎｍ以下であることが好ましい。一般的に、前記気泡径が小さいほど、保存安定性に優れる。
前記ナノバブルの気泡径は、例えば、逆浸透膜などを利用して所望のサイズに調整できることが知られており（例えば、ＷＯ２００８／７２３７０号、[００１６]）、これを利用してナノバブルの気泡径分布を狭くすることができる。ナノバブルの気泡径は、平均値として上記範囲に入ればよい。気泡径分布は、後に述べるナノバブルの製造条件（電解質の種類、イオン濃度、物理的撹拌・刺激付与条件、温度等）に依存するが、これらの条件は、当業者が適宜制御し得る。酸素ナノバブルの気泡径分布は、動的光散乱光度計で測定することができる。
【００１７】
本発明の輸液（または、補液）には、塩分を０．０１〜３．５重量％で含むことが好ましい。塩分は、生理活性的観点から、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｃａ２＋等の陽イオンが２００ｍＥｑ／Ｌ以下の濃度で含まれ、Ｃｌ−、ＣＨ３ＣＯ２−，ＣＨ３ＣＨ（ＯＨ）ＣＯ２−等の陰イオンが陽イオンと当量含まれる。例えば、生理食塩水の場合には、ＮａＣｌとして０．９重量％含まれる。生理食塩水とブドウ糖液との所定の混合物である１号液〜４号液の場合には、ブドウ糖が所定量含まれる。リンゲル液は、生理食塩水に対して、緩衝剤としての酢酸や乳酸陰イオンが含まれる。
【００１８】
本発明の輸液には、上記イオンや電解質の他に、またはそれに代えて治療や外科処置目的に沿って必要とされる他の成分を含んでよい。例えば脳の選択的冷却法による脳低温療法、例えば脳卒中や外傷性脳障害の治療、または脳の選択的冷却法による脳外科手術に用いる場合には、血液凝固防止剤としてのヘパリンを更に含有していてよく、また末梢循環不全症の治療に用いる場合には末梢血管拡張剤を更に含有していてよい。
本発明の輸液は、更に治療剤成分を含んでいてよい。
【００１９】
本発明の酸素ナノバブルを含有する輸液は、酸素ナノバブルを含有するナノバブル水を製造後に、輸液成分（Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｃａ２＋等の陽イオン、Ｃｌ−、ＣＨ３ＣＯ２−，ＣＨ３ＣＨ（ＯＨ）ＣＯ２−等の陰イオン、および糖など）を添加して製造することができる。また、輸液成分を添加後に、酸素ナノバブルを発生させて輸液を製造することができる。酸素ナノバブルは、Ｎａ＋等の電解質の存在下に安定的に発生し得ることから、前記輸液成分を添加後に、酸素ナノバブルを発生させて輸液を製造することが好ましい。
【００２０】
酸素ナノバブルを発生させる方法としては特に制限は無く、既存の方法が使用できる。例えば、特開２００５−２４５８１７号公報及び特開２００５−２６４２９４号公報等に記載の製造方法に従って製造することができる。例えば、生理食塩水中に加圧溶解した酸素を、減圧して再気泡化することによって気泡径が５０μｍ以上の酸素マイクロバブルを発生させ、続いて、前記酸素マイクロバブルを含む生理食塩水に、水中放電衝撃波、超音波、またはパンチング板の狭い穴部分を強制的に通過させる等の物理的刺激を加えてマイクロバブルを破砕し急激に縮小させると、気泡径が１〜１０００ｎｍ、好ましくは５０〜５００ｎｍの酸素ナノバブルを安定的に製造することができる。このようにして得られた酸素ナノバブル含有生理食塩水は、１月以上安定に存在する。
【００２１】
本発明の輸液の医療での使用方法は、通常の医療現場で使用する方法に従ってよい。例えば、外科的処置、例えば、脳の選択的冷却法による脳治療および開頭手術における無血手術の場合には、体外に設置した温度制御の可能な輸液循環装置を用いて本発明輸液を循環使用することができる。また、末梢循環不全症の治療に用いる場合には、注射による投与、カテーテルによる局所投与等の方法をとることができる。
以下、本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【実施例】
【００２２】
実施例１
引用文献２（特開２００５−２４６２９４号）の実施例に従って、以下の様に酸素ナノバブル含有生理食塩水を製造することができる。即ち、気泡径（直径）が１０〜５０μｍの酸素マイクロバブルを含有する水に食塩を０．９重量％添加して、生理食塩水とする。次いで、水中放電による衝撃波を加えることにより、酸素ナノバブルを含有する生理食塩水を得ることができる。
次に、酸素分析計を用いて、この酸素ナノバブルを含有する生理食塩水の酸素含有量を測定すると、酸素ナノバブルを含有しない生理食塩水の酸素含有量に比較して、高い濃度の酸素を検出することができる。
【００２３】
実施例２
低体温外科手術における酸素ナノバブル含有輸液の使用モデル実験を以下に示す。
輸液として乳酸リンゲル液を用い、実施例１に準じて、１０℃において酸素ナノバブル含有リンゲル液を製造する。この酸素ナノバブル含有乳酸リンゲル液の温度を、撹拌下、１時間かけて徐々に４０℃まで昇温する。このリンゲル液中の酸素ナノバブルの気泡分布を、動的光散乱光度計を用いて測定すると、昇温前後で酸素ナノバブルの気泡径分布は殆ど変化していないことが判る。
【００２４】
実施例３
ラットを用いて、脳の選択的冷却法適用する。
輸液として乳酸リンゲル液を用い、実施例２と同様に、１０℃において酸素ナノバブル含有リンゲル液を製造する。このリンゲル液をラットの脳動脈に注入し、脳を選択的に３３℃の低温に1時間保持する。この状態での脳の酸素分圧を測定すると、酸素ナノバブルを含有しないリンゲル液を用いて３３℃に保持した場合に比べて、高い酸素分圧を観測することができる。
【産業上の利用可能性】
【００２５】
本発明の、酸素ナノバブル含有輸液は、全身または局所超低体温法による外科手術、脳の選択的冷却法による開頭手術、脳の選択的冷却法による脳低温療法、例えば脳卒中（特に脳梗塞）および外傷性脳損傷の治療、末梢循環不全症の治療、及び末梢循環不全により活性の低下した末梢細胞・組織の活性化などに用いることができる。