(57)【要約】【課題】優れた口腔バイオフィルム抑制効果及びジンジパイン阻害効果を有し、かつ苦味のない良好な使用感、及び優れた保存安定性を有し、口腔内での滞留性の高いゲル状口腔用組成物を得る。【解決手段】（Ａ）銅濃度として０．００５〜０．１５質量％の水溶性銅化合物、（Ｂ）フェノール系殺菌剤、（Ｃ）クエン酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩から選ばれる１種以上の有機酸塩、（Ｄ）キシリトール及び／又はエリスリトール、（Ｅ）水溶性高分子化合物、及び（Ｆ）界面活性剤及び／又は１〜３価のアルコールを配合する。更に、２０℃における粘度を５〜１００Ｐａ・ｓとする。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）銅濃度として０．００５〜０．１３質量％の水溶性銅化合物、
（Ｂ）フェノール系殺菌剤、
（Ｃ）クエン酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩から選ばれる１種以上の有機酸塩、
（Ｄ）キシリトール及び／又はエリスリトール、
（Ｅ）水溶性高分子化合物、及び
（Ｆ）界面活性剤及び／又は１〜３価のアルコール
を含有してなることを特徴とするゲル状口腔用組成物。
【請求項２】
（Ｂ）成分が、イソプロピルメチルフェノール、チモール、オイゲノールから選ばれる１種以上である請求項１記載のゲル状口腔用組成物。
【請求項３】
（Ｃ）成分の有機酸塩の有機酸量／（Ａ）成分の水溶性銅化合物の銅量が、質量比で２〜８０である請求項１又は２記載のゲル状口腔用組成物。
【請求項４】
（Ｂ）成分を０．０３〜０．３質量％含有する請求項１、２又は３記載のゲル状口腔用組成物。
【請求項５】
２５℃における粘度が５〜１００Ｐａ・ｓである請求項１乃至４のいずれか１項記載のゲル状口腔用組成物。
【請求項６】
歯茎又は歯肉に塗布して適用されるものである請求項１乃至５のいずれか１項記載のゲル状口腔用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、歯周病の病巣部位である歯茎や歯肉への滞留性が高く、かつ使用感及び保存安定性が良好で、歯周病の原因物質を効果的に抑制する歯周病改善及び抑制効果に優れたゲル状口腔用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
歯周病の改善及び予防を目的に、歯周病の病巣部位である歯茎及び歯周ポケットへ直接適用できるゲル状の口腔用組成物が用いられてきた。ゲル状の口腔用組成物は、歯茎や歯肉へマッサージするように塗布することができ、更に、歯磨剤や洗口剤などのペースト状、液状、液体等の他の形態の口腔用組成物よりも滞留性に優れるという利点を有する。
【０００３】
歯周病は、宿主への病原菌による感染症と考えられ、歯周病の予防及び治療には感染した病原菌を排除することが重要である。そのため、歯周病の予防及び治療に各種殺菌剤や抗生剤が用いられているが、成人の半数は歯周炎という調査結果もあり、その効果は十分とはいえない。その背景として、歯周病の原因となる病原菌は、口腔内でバイオフィルムという形態で生息していることが考えられる。バイオフィルムを形成した病原菌は、殺菌剤や抗生剤に抵抗性を示すことが知られている。そこで、歯周病を効果的に改善及び予防するために高い口腔バイオフィルム抑制効果を発揮する技術の開発が望まれている。
【０００４】
また、歯周病菌であるポルフィロモナス  ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）は、ジンジパインと呼ばれる組織破壊酵素を菌体外へ放出し、歯茎を構成するコラーゲンや細胞に傷害を与え、歯周病の惹起、進行に関与すると考えられている。ジンジパインは病原菌が殺菌されても活性を有するため、歯周病の改善や予防には、高いバイオフィルム抑制効果に加えて、ジンジパイン阻害効果も発揮されることが有効であると考えられ、これら効果を兼ね備える技術の開発が望まれる。
【０００５】
一方、銅化合物は、抗菌作用及び消臭作用を有することから、う蝕、歯周病、口臭予防を目的として銅化合物を配合した口腔用組成物が提案されているが、銅化合物の殺菌効果は殺菌剤に比べて弱い。銅化合物の殺菌効果を高める方法として、殺菌剤との併用による相乗的殺菌効果の向上技術（特許文献１参照）が提案されているが、その殺菌効果は満足し得るものではなかった。
【０００６】
また、従来から銅化合物は金属特有の苦味を有すること、保存安定性に劣ることが知られており、メントール誘導体による苦味抑制技術（特許文献２参照）や多塩基酸との併用による銅化合物の安定化技術（特許文献３，４参照）が提案されている。しかし、その効果は十分ではなく、銅化合物をゲル状口腔用組成物に配合した場合は、多塩基酸を配合することにより銅自体の安定化は可能であるが、銅由来の青色が退色するという問題が生じた。
【０００７】
液体口腔用組成物では、製剤の色が目立たず、製剤を直接見ることもないため、退変色はあまり問題にならないが、口腔内に塗布するなどして適用される製剤では外観がよいものが好まれることから退変色しないものが望ましい。歯磨剤では、色素とパラオキシ安息香酸アルキルエステルによる変退色抑制技術が提案されている（特許文献５参照）が、その効果は十分ではなく、また、一般に防腐剤として使用されるパラオキシ安息香酸アルキルエステルは、科学的には安全性が立証されているものの、生活者の安全性に対する不安が強く、パラオキシ安息香酸アルキルエステルを使用せずに退変色を抑制できる技術が望まれる。
【０００８】
特許文献２の実施例３０には、銅の配合量が銅濃度として０．１４質量％のグルコン酸銅、香料、キシリトール、及び非イオン性界面活性剤を組み合わせたタブレットが開示されているが、滞留性がないため、ジンジパイン活性阻害効果及びバイオフィルム抑制効果は得られない。特許文献６の実施例８には、銅の配合量が銅濃度として０．００１４質量％のグルコン酸銅、香料、リンゴ酸ナトリウム、キシリトール、及び非イオン性界面活性剤とグリセリンとを組み合わせた洗口剤が、特許文献７の実施例７には、銅の配合量が銅濃度として０．００１４質量％のグルコン酸銅、香料、リンゴ酸ナトリウム、キシリトール、及び、非イオン性界面活性剤とエタノールとを組み合わせた水はみがきが開示されているが、どちらも滞留性が小さく、更に、銅濃度が低いため、ジンジパイン活性阻害効果及びバイオフィルム抑制効果は得られない。
【０００９】
歯周病の改善及び予防を目的に、歯周病の病巣部位である歯茎や歯肉へ適用できるゲル状の口腔用組成物では、優れた口腔バイオフィルム抑制効果とジンジパイン阻害効果とを兼ね備え、かつ使用感及び保存安定性も良好で、口腔内滞留性も良好な製剤が求められるが、従来の技術はこれらを全て満たしていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特開平０１−１５３６２０号公報
【特許文献２】特開２００３−１３７７５５号公報
【特許文献３】特開平０１−１６８６１１号公報
【特許文献４】特開平０５−０００９２９号公報
【特許文献５】特開平０８−３１０９２８号公報
【特許文献６】特開２０００―２９７０２２号公報
【特許文献７】特開２０００−１９１４８５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は上記事情に鑑みなされたもので、上記の種々の問題を解決しつつ、優れた口腔バイオフィルム抑制効果及びジンジパイン阻害効果を有し、かつ苦味のない良好な使用感、及び優れた保存安定性を有し、口腔内での滞留性の高いゲル状口腔用組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、上記目的を達成するためジンジパイン阻害効果とバイオフィルム抑制効果とを同時に達成する手段について鋭意検討を重ねた結果、（Ａ）特定量の水溶性銅化合物と（Ｂ）フェノール系殺菌剤とを併用し、かつ（Ｃ）特定の有機酸塩、（Ｄ）キシリトール又はエリスリトール、（Ｅ）水溶性高分子、及び（Ｆ）界面活性剤及び／又は１〜３価のアルコールを組み合わせてゲル状口腔用組成物に配合することにより、ジンジパイン阻害効果とバイオフィルム抑制効果が相乗的に向上し、高いジンジパイン活性阻害効果とバイオフィルム抑制効果とを兼ね備え、かつ使用感及び外観安定性が良好で、経時での銅化合物の安定性にも優れ、口腔内での滞留性も高いことを知見し、本発明をなすに至った。
【００１３】
歯周病原因菌ポルフィロモナス  ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）は、浮遊菌とは違い殺菌剤などに抵抗性を示すバイオフィルムを形成し感染している。更に、ジンジパインと呼ばれるプロテアーゼを産生して、歯周病の惹起、進行に関与している。そのため、歯周病の治療及び予防には、バイオフィルム抑制効果だけでなくジンジパイン阻害効果に優れた技術が有効である。
【００１４】
出願人は、銅化合物にジンジパイン阻害作用があることを見出し、特願２００９−５６１５０号公報に特定の銅化合物にアミノ酸又はその塩などを併用して配合した、歯周病の抑制効果に優れた口腔用組成物を提案した。
本発明者らは、銅化合物のジンジパイン阻害作用に注目し、更に検討を進めた結果、水溶性銅化合物、特にグルコン酸銅もしくは硫酸銅又はその水和物が、歯周病変部位の歯肉溝浸出液（ＧＣＦ）中のジンジパイン活性阻害効果を有し、かかる銅化合物にフェノール系の殺菌剤、クエン酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩から選ばれる少なくとも１つの有機酸塩、キシリトール及び／又はエリスリトール、界面活性剤及び／又は１〜３価のアルコール、及び水溶性高分子化合物を組み合せて配合し、ゲル状の口腔用組成物を調製することで、これら成分が相乗的に作用して、銅化合物由来のジンジパイン活性阻害効果とフェノール系殺菌剤由来の歯周病原因菌、特にポルフィロモナス  ジンジバリス菌が形成する口腔バイオフィルムへの浸透殺菌効果とが極めて有効に発揮され、歯周病を効果的に抑制できること、しかも、製剤の口腔内での滞留性が高く、かつ、銅化合物に由来する苦味等が改善され、刺激やべたつき感もなく、使用感が向上する上、銅化合物の経時保存安定性が良好で、長期保存後の変退色がほとんどなく製剤の外観安定性も改善し、これら特性を全て満たすことを見出したものである。
【００１５】
従って、本発明は、下記のゲル状口腔用組成物を提供する。
請求項１：
（Ａ）銅濃度として０．００５〜０．１３質量％の水溶性銅化合物、
（Ｂ）フェノール系殺菌剤、
（Ｃ）クエン酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩から選ばれる１種以上の有機酸塩、
（Ｄ）キシリトール及び／又はエリスリトール、
（Ｅ）水溶性高分子化合物、及び
（Ｆ）界面活性剤及び／又は１〜３価のアルコール
を含有してなることを特徴とするゲル状口腔用組成物。
請求項２：
（Ｂ）成分が、イソプロピルメチルフェノール、チモール、オイゲノールから選ばれる１種以上である請求項１記載のゲル状口腔用組成物。
請求項３：
（Ｃ）成分の有機酸塩の有機酸量／（Ａ）成分の水溶性銅化合物の銅量が、質量比で２〜８０である請求項１又は２記載のゲル状口腔用組成物。
請求項４：
（Ｂ）成分を０．０３〜０．３質量％含有する請求項１、２又は３記載のゲル状口腔用組成物。
請求項５：
２５℃における粘度が５〜１００Ｐａ・ｓである請求項１乃至４のいずれか１項記載のゲル状口腔用組成物。
請求項６：
歯茎又は歯肉に塗布して適用されるものである請求項１乃至５のいずれか１項記載のゲル状口腔用組成物。
【発明の効果】
【００１６】
本発明のゲル状口腔用組成物は、口腔内滞留性が高く、ジンジパイン阻害効果及び口腔バイオフィルム抑制効果に優れ、かつ銅化合物の経時保存安定性、使用感及び外観安定性に優れ、歯茎や歯肉へ直接適用でき、歯周病の改善及び予防に有効である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、本発明につき更に詳細に説明する。本発明のゲル状口腔用組成物は、（Ａ）水溶性銅化合物、（Ｂ）フェノール系殺菌剤、（Ｃ）クエン酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩から選ばれる有機酸塩、（Ｄ）キシリトール及び／又はエリスリトール、（Ｅ）水溶性高分子化合物、及び（Ｆ）界面活性剤及び／又は１〜３価のアルコールを含有する。
【００１８】
Ａ成分の水溶性銅化合物としては、歯周病変部位の歯肉溝浸出液（ＧＣＦ）中のジンジパイン活性抑制効果を有するものであれば特に限定されず、例えばグルコン酸銅、硫酸銅、塩化銅などが用いられ、１種単独でも２種以上を併用してもよい。これらの中でもグルコン酸銅又は硫酸銅、特に硫酸銅が好ましい。銅化合物は、それぞれ無水物であっても、水和物であってもよく、例えば硫酸銅５水和物などの結晶水を含む水和物を用いることもできる。
【００１９】
水溶性銅化合物の配合量は、銅濃度が組成全体の０．００５〜０．１３％（質量％、以下同様）、特に０．０１〜０．１％、とりわけ０．０２５〜０．１％となる範囲が好ましい。配合量が０．００５％未満ではジンジパイン阻害効果及びバイオフィルム抑制効果が満足に発揮されず、０．１３％を超えると苦味による使用感や外観安定性に劣る。
【００２０】
Ｂ成分のフェノール系殺菌剤としては、例えばイソプロピルメチルフェノール、チモール、オイゲノール、トリクロサン、クレゾール、フェノール、クロロクレゾール、パラクロロメタクレゾール、パラクロロメタキシレノール、オルソフェニルフェノール、パラオキシ安息香酸アルキルエステル、サリチル酸又はその塩類などが挙げられ、これらの１種又は２種以上が用いられるが、中でもイソプロピルメチルフェノール、チモール、オイゲノールが好ましい。
【００２１】
フェノール系殺菌剤の配合量は、組成全体の０．０３〜０．３％、特に０．０５〜０．２％が好ましい。配合量が０．０３％未満ではバイオフィルム殺菌効果が十分発揮されず、更に満足なジンジパイン阻害効果が発揮されないことがあり、０．３％を超えると使用感が満足できない場合がある。
また、組成中のＡ成分に対するＢ成分の配合割合は特に限定されないが、Ｂ成分とＡ成分の銅濃度との割合（（Ｂ）／（Ａ））の質量比で０．４〜２４、特に０．５〜２．０が好ましい。０．４未満では使用感及び外観安定性に劣り、２４を超えると使用感やジンジパイン活性阻害効果に劣る場合がある。
【００２２】
Ｃ成分の有機酸塩としては、クエン酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩から選ばれる１種又は２種以上が用いられ、これら有機酸塩を配合することで、銅化合物を安定配合でき良好な保存安定性が得られる。塩としては、特に限定されるものではなく、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属塩、亜鉛、鉄、コバルト、マンガンなどの遷移金属塩、及びこれら金属塩の結晶水を含む水和物を用いることができる。
具体的には、クエン酸２ナトリウム３／２水塩、クエン酸３ナトリウム２水塩、クエン酸カルシウム、クエン酸亜鉛、クエン酸鉄、クエン酸鉄アンモニウム、酒石酸ナトリウムカリウム４水塩、酒石酸２ナトリウム２水塩、リンゴ酸２ナトリウム１／２水塩などが挙げられ、特にクエン酸３ナトリウム２水塩、酒石酸２ナトリウム２水塩、リンゴ酸２ナトリウム１／２水塩が好ましい。
【００２３】
Ｃ成分の配合量は、有機酸濃度が組成全体の０．０３〜０．９％、特に０．１〜０．７％、とりわけ０．１〜０．４％となる範囲が好ましい。０．０３％未満では銅化合物の安定化作用に劣る場合があり、０．９％を超えると外観安定性、ジンジパイン活性阻害効果、バイオフィルム抑制効果のいずれかに劣る場合がある。
【００２４】
また、組成中のＡ成分に対するＣ成分の配合割合は、Ｃ成分の有機酸濃度とＡ成分の銅濃度との割合（（Ｃ）／（Ａ））の質量比で２〜８０、特に６〜５０、とりわけ６〜２６が好ましい。２未満では銅化合物の安定化作用に劣り、８０を超えると外観安定性、ジンジパイン活性阻害効果、バイオフィルム抑制効果のいずれかに劣る場合がある。
【００２５】
Ｄ成分のキシリトール及びエリスリトールは、非発酵性であることから口腔用組成物に汎用される糖アルコールであるが、本発明ではキシリトール及び／又はエリスリトールを配合することにより、銅化合物由来の苦味をマスキングでき満足な使用感が得られ、外観安定性も高まる。Ｄ成分としては特にキシリトールが好ましい。
キシリトール及び／又はエリスリトールの総配合量は、組成全体の１０〜４０％、特に１５〜３０％が好ましい。配合量が１０％未満では外観安定性に劣り、更に満足な使用感が得られない場合があり、４０％を超えると糖アルコールの変化により外観安定性に劣る場合がある。
【００２６】
本発明のゲル状口腔用組成物は、Ｅ成分として水溶性高分子化合物を含有するもので、Ｅ成分の配合により保形性を持たせた水溶性の粘性組成物である。
【００２７】
水溶性高分子化合物としては、組成物に保形性を持たせることができれば特に定めるものではなく、例えばキサンタンガム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カラゲニン、アルギン酸ナトリウム、カルボキシビニルポリマー、ポリアクリル酸塩、ヒドロキシエチルセルロースなどの１種又は２種以上が挙げられ、中でも塩に対して保形性が高く安定性も高いポリアクリル酸塩及び／又はカルボキシビニルポリマーが好適であり、とりわけカルボキシビニルポリマーが高粘性で、かつ本発明の目的を達成するためにより好適である。
【００２８】
ポリアクリル酸塩としては、例えば、ポリアクリル酸ナトリウム、ポリアクリル酸カリウム等のポリアクリル酸のアルカリ金属塩、ポリアクリル酸モノエタノールアミン、ポリアクリル酸ジエタノールアミン、ポリアクリル酸トリエタノールアミン等のポリアクリル酸のアミン塩、ポリアクリル酸のアンモニウム塩などの１種又は２種以上が使用できる。
【００２９】
ポリアクリル酸塩としては、０．５％水溶液の粘度（２５℃）が、ＢＨ型粘度計（東機産業（株）製、ローターＮｏ．４〜５、回転数２０ｒｐｍ、測定時間２分）で測定した時に７〜１３Ｐａ・ｓであるものが好ましい。このようなポリアクリル酸ナトリウムとしては、日本純薬社製のレオジック２５０Ｈ（粘度７〜１３Ｐａ・ｓ）などが挙げられ、市販品を使用できる。
【００３０】
カルボキシビニルポリマーは、アクリル酸を主とし、これに少量のポリアリルシュクロースなどの架橋剤で架橋した水溶性の共重合体で、塩基性物質で中和することでゲル性状を発現する。中和に使用する物質としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどの無機塩基やトリエタノールアミン、ジエタノールアミン、モノエタノールアミン、イソプロパノールアミンなどを用いることができる。
【００３１】
カルボキシビニルポリマーとしては、０．２％水溶液の粘度（２５℃）が、ＢＨ型粘度計（東機産業（株）製、ローターＮｏ．３〜７、回転数２０ｒｐｍ、測定時間２分）で測定した時に２〜７０Ｐａ・ｓ、特に１６〜２８Ｐａ・ｓであるものが好ましい。なお、上記カルボキシビニルポリマーの粘度は、０．１ｍｏｌ／ｍＬの水酸化ナトリウムでｐＨ６．０に調整したときの値である。
【００３２】
このようなカルボキシビニルポリマーとしては、Ｂ．Ｆ．Ｇｏｏｄｒｉｃｈ社製のカーボポール９８０（粘度１６〜２８Ｐａ・ｓ）、９８１（粘度４〜７．５Ｐａ・ｓ）、２９８４（粘度２．５〜６．５Ｐａ・ｓ）、５９８４（粘度１２〜２２Ｐａ・ｓ）、１３８２（粘度１４〜３２Ｐａ・ｓ）、ＥＤＴ２０２０（粘度１４〜３２Ｐａ・ｓ）、ＥＤＴ２０５０（粘度６〜１４Ｐａ・ｓ）、Ｕｌｔｒｅｚ１０（粘度１２〜２９Ｐａ・ｓ）、Ｕｌｔｒｅｚ２０（粘度４７〜６７Ｐａ・ｓ）、Ｕｌｔｒｅｚ２１（粘度４５〜６５Ｐａ・ｓ）、住友精化社製のアクペックＨＶ−５０１Ｅ（粘度２．５〜６．４Ｐａ・ｓ）、ＨＶ−５０４Ｅ（粘度２〜５．５Ｐａ・ｓ）、ＨＶ−５０５Ｅ（粘度１５〜３０Ｐａ・ｓ）等の市販品を使用できる。中でも、Ｂ．Ｆ．Ｇｏｏｄｒｉｃｈ社製のカーボポール９８０（粘度１６〜２８Ｐａ・ｓ）、住友精化社製のアスペックＨＶ−５０５Ｅ（粘度１５〜３０Ｐａ・ｓ）が好ましい。なお、括弧内の粘度は、上記と同様の方法で測定した２５℃における粘度である。
また、ローターは、測定粘度が下記粘度範囲内に相当するものを使用した。
ローターＮｏ．１：粘度が０Ｐａ・ｓ以上０．４Ｐａ・ｓ未満
ローターＮｏ．２：粘度が０．４Ｐａ・ｓ以上１．６Ｐａ・ｓ未満
ローターＮｏ．３：粘度が１．６Ｐａ・ｓ以上４Ｐａ・ｓ未満
ローターＮｏ．４：粘度が４Ｐａ・ｓ以上８Ｐａ・ｓ未満
ローターＮｏ．５：粘度が８Ｐａ・ｓ以上１６Ｐａ・ｓ未満
ローターＮｏ．６：粘度が１６Ｐａ・ｓ以上４０Ｐａ・ｓ未満
ローターＮｏ．７：粘度が４０Ｐａ・ｓ以上２００Ｐａ・ｓ以下
【００３３】
水溶性高分子化合物の配合量は、組成物中１〜５％、特に１〜３％が好ましい。配合量が１％未満ではゲルが柔らかすぎて口腔内での滞留性に劣り本発明の目的が達成できない場合があり、５％を超えるとべたつき感が強くなることで使用感が損なわれる場合がある。
【００３４】
更に、本発明組成物には、Ｂ成分のフェノール系殺菌剤を可溶化することを目的の一つとして、Ｆ成分として界面活性剤及び／又は１〜３価のアルコールを配合する。
【００３５】
界面活性剤としては特に定めるものではなく、アニオン性界面活性剤、ノニオン性界面活性剤、両性界面活性剤、カチオン性界面活性剤の１種又は２種以上を用いることができるが、特に口腔内への刺激が少なく、使用感改善作用が期待できる非イオン性界面活性剤が好ましい。
【００３６】
アニオン性界面活性剤としては、ラウリル硫酸ナトリウム、ミリスチル硫酸ナトリウム等のアルキル硫酸塩、Ｎ−ラウロイルサルコシンナトリウム、Ｎ−ミリストイルサルコシンナトリウム等のＮ−アシルサルコシンナトリウム、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム、水素添加ココナッツ脂肪酸モノグリセリドモノ硫酸ナトリウム、ラウリルスルホ酢酸ナトリウム、Ｎ−パルミトイルグルタミン酸ナトリウム等のＮ−アシルグルタミン酸塩、Ｎ−メチル−Ｎ−アシルタウリンナトリウム、Ｎ−メチル−Ｎ−アシルアラニンナトリウム、α−オレフィンスルフォン酸ナトリウムなどが挙げられる。これらの中でも特に、ラウリル硫酸ナトリウムなどのアルキル硫酸ナトリウム、Ｎ−ラウロイルサルコシン酸ナトリウムなどのＮ−アシルザルコシン酸ナトリウムがバイオフィルム殺菌効果発現の観点からより好適に使用することができる。
【００３７】
カチオン性界面活性剤としては、アルキルアンモニウム、アルキルベンジルアンモニウム塩等が用いられる。
両性界面活性剤としては、酢酸ベタイン、イミダゾリニウムベタイン、レシチンなどが用いられる。
【００３８】
非イオン性界面活性剤としては、多価アルコールと脂肪酸がエステル結合でつながっている多価アルコール型、高級アルコールやアルキルフェノール等の水酸基を持つ疎水性原料に主として酸化エチレン（エチレンオキサイド）が付加したタイプ、脂肪酸や多価アルコール脂肪酸エステルに酸化エチレンを付加したタイプのポリエチレングリコール型のものが好適である。
【００３９】
多価アルコール型としては、多価アルコールとしてはショ糖、ソルビタン、又はポリグリセリンが好適であり、例えばショ糖脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステルなどが挙げられ、中でもショ糖脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステルが使用感並びにバイオフィルム殺菌効果発現の観点からより好適に使用することができる。
ショ糖脂肪酸エステルは、脂肪酸炭素数が１０〜２２、特に１２〜１８のものが好ましい。エステル化可能な脂肪酸の数は、最大６つあるが、１つの脂肪酸をエステル化したモノエステルの割合が５０％以上、特に７０％以上のものが好ましい。このようなショ糖脂肪酸エステルは市販品を用いることができ、例えば三菱化学フーズ社製のサーフホープＪ−１８１１、Ｊ−１８１５、Ｊ−１８１６、Ｊ−１２１６、Ｊ−１４１６などがある。
【００４０】
ポリグリセリン脂肪酸エステルとしては、グリセリンの平均重合度が４〜２０、特に６〜１０のものが好ましい。脂肪酸の炭素数は８〜２２、特に１０〜１８で、脂肪酸のモノエステルが好ましい。
このようなポリグリセリン脂肪酸エステルとしては、日光ケミカルズ社製のＮＩＫＫＯＬ  Ｈｅｘａｇｌｙｎ  １−ＳＶ、Ｄｅｃａｇｌｙｎ  １−Ｌ、Ｄｅｃａｇｌｙｎ  １−ＳＶ、阪本薬品工業社製のＭＬ−７５０、ＭＬ−５００、ＭＯ−７Ｓ、ＭＳＷ−７Ｓ、ＳＹグリスターＤＭＬ−３などが挙げられる。
【００４１】
ポリエチレングリコール型としては、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビット脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン共重合体、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンヒマシ油などが挙げられ、中でも、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルが使用感並びにバイオフィルム殺菌効果発現の観点から好適に使用することができる。
【００４２】
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油としては、エチレンオキサイドの平均付加モル数が５〜１００、特に２０〜１００のものが好適である。
このようなポリオキシエチレン硬化ヒマシ油としては市販のものを用いることができ、例えば日光ケミカルズ社製のＨＣＯ−５、ＨＣＯ−１０、ＨＣＯ−２０、ＨＣＯ−３０、ＨＣＯ−４０、ＨＣＯ−５０、ＨＣＯ−６０、ＨＣＯ−８０、ＨＣＯ−１００などが挙げられる。
【００４３】
ポリオキシエチレンアルキルエーテルとしては、エチレンオキサイドの平均付加モル数が２〜５０、特に６〜４０で、アルキル基の炭素数が１２〜２２、特に１２〜１８のものを用いることができる。
このようなポリオキシエチレンアルキルエーテルとしては、日光ケミカルズ社製のＢＬ−２、ＢＬ−２１、ＢＣ−２、ＢＣ−７、ＢＣ−１５、ＢＣ−２５、ＢＳ−２０、ＢＯ−１０Ｖ、ＢＢ−１０、日本エマルジョン社製の、ＥＭＡＬＥＸ１１５、５２０、６２５、７３０、７５０、ＢＨＡ−３０などがある。
【００４４】
ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルとしては、エチレンオキサイドの平均付加モル数が５〜３０、特に１０〜２０であり、脂肪酸の炭素数が１２〜２２、特に１４〜１８のものが好ましく、脂肪酸のモノエステルが好ましい。
このようなポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルとしては、日光ケミカルズ社製のＴＳ−１０ＭＶ、ＴＳ−３０Ｖ、ＴＯ−１０ＭＶなどが挙げられる。
【００４５】
界面活性剤は、１種又は２種以上を使用でき、その配合量は、組成全体の０〜３％、特に０．１〜３％、とりわけ０．５〜２％が好ましい。配合量が０．１％未満では、Ｂ成分の可溶化が不十分となり、満足な外観安定性や使用感及びバイオフィルム抑制効果が発揮されない場合があり、３％を超えると界面活性剤自体の苦味が顕著になり使用感に劣り、更にフェノール系殺菌剤が不活性化することで十分なバイオフィルム抑制効果が発揮されない場合がある。
【００４６】
１〜３価のアルコールとしては、エタノール、イソプロパノール、ブタノール、プロパノール等の炭素数２〜４の１価アルコール、エチレングリコール、ジエチレングリコール、ヘキシレングリコール、ブチレングリコール、ペンタンジオール、プロピレングリコール、平均分子量１９０〜２５０００のポリエチレングリコール、平均分子量４００〜３０００のポリプロピレングリコール等の２価アルコール、グリセリン等の３価アルコールなどを挙げることができ、特にエタノール、グリセリン、プロピレングリコール、平均分子量３８０〜３８００のポリエチレングリコールがフェノール系抗菌剤の可溶化能に優れ、バイオフィルム殺菌効果発現の観点から好ましく使用される。なお、これらアルコールは１種又は２種以上を配合することができる。また、上記平均分子量は医薬部外品原料規格２００６記載の平均分子量を示し、具体的には、ポリエチレングリコール２００（平均分子量１９０〜２１０）、ポリエチレングリコール４００（平均分子量３８０〜４２０）、ポリエチレングリコール６００（平均分子量５７０〜６３０）、ポリエチレングリコール４０００（平均分子量２６００〜３８００）が例示できる。
【００４７】
１〜３価のアルコールの総配合量は、純分換算で好ましくは組成物全体の０〜４０％、特に５〜４０％、とりわけ１０〜３０％が好ましい。配合量が５％未満の場合は、Ｂ成分を可溶化が不十分となり、十分な外観安定性や使用感及びバイオフィルム抑制効果が得られない場合があり、４０％を超えると刺激が強くなり使用感に劣る場合がある。
１〜３価のアルコールの配合方法は、香料中に配合してもよいし、別添加してもよく、もしくは両方（香料中及び別添加の両方）に配合してもよい。
【００４８】
本発明においては、界面活性剤又は１〜３価のアルコールを単独配合（界面活性剤のみを配合、又は１〜３価のアルコール類のみを配合）してもよいし、又は界面活性剤及び１〜３価のアルコールを併用して配合してもよいが、界面活性剤と１〜３価のアルコールとを併用して配合することが好ましい。なお、界面活性剤及び１〜３価のアルコールの総配合量は、組成物全体の０．１〜４０％、特に０．５〜３０％が好ましい。
【００４９】
本発明のゲル状口腔用組成物は、上記必須成分に加えて、必要によりその他の公知成分を本発明の効果を損ねない範囲で配合することができ、通常の方法で調製することができる。任意成分としては、研磨剤、甘味料、香料、着色剤、ｐＨ調整剤、油性成分、有効成分などを配合できる。
【００５０】
研磨剤としては、沈降性シリカ、シリカゲル、アルミノシリケート、ゼオライト、ジルコノシリケート、第２リン酸カルシウム・２水和物及び無水物、ピロリン酸カルシウム、炭酸カルシウム、水酸化アルミニウム、アルミナ、炭酸マグネシウム、第３リン酸マグネシウム、不溶性メタリン酸ナトリウム、不溶性メタリン酸カリウム、酸化チタン、ハイドロキシアパタイト、合成樹脂系研磨剤等が挙げられる。研磨剤を配合する場合、その配合量は通常５〜５０％である。
【００５１】
甘味料としては、サッカリンナトリウム、ステビオサイド、ステビアエキス、パラメトキシシンナミックアルデヒド、ネオヘスペリジルジヒドロカルコン、ペリラルチン等が挙げられる。着色剤としては、青色１号、黄色４号、二酸化チタン等が挙げられる。
香料としては、ｌ−メントール等のテルペン類又はその誘導体やペパーミント油等が挙げられる。
【００５２】
ｐＨ調整剤としては、上記（Ｃ）成分の有機酸塩以外のもの、例えばリン酸、フマル酸、乳酸、酢酸及びそれらの塩などが挙げられ、ｐＨ５．５〜８．０に調整することが好ましい。
【００５３】
油性成分としては、流動パラフィン、軽質流動パラフィン、パラフィンワックス、セレシン、マイクロクリスタリンワックス、スクワラン、スクワレン等の炭化水素油、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ラウロレイン酸、オレイン酸、アラキドン酸、リノール酸、リノレン酸、リシノール酸等の脂肪酸、アマニ油、ゴマ油、サフラワー油、大豆油、トウモロコシ油、ナタネ油、綿実油、オリーブ油、椿油、ひまし油、カカオ脂、パーム油、ヤシ油等の植物油、牛脂、豚脂、馬脂、羊脂の動物油等が挙げられる。この中でも、滞留性の点から炭化水素油が好ましく、より好ましくは流動パラフィン、軽質流動パラフィンである。油性成分を配合する場合、その配合量は、通常０．１〜１０％である。
【００５４】
有効成分としては、上記銅化合物とフェノール系殺菌剤に加えて、その他の有効成分、例えばアスコルビン酸塩、トコフェロールエステル等のビタミン類、デキストラナーゼ、ムタナーゼ、リゾチーム等の酵素、オウバクエキス、オウゴンエキス、チョウジエキス等の生薬成分、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化デカリニウム、塩酸クロルヘキシジン、グルコン酸クロルヘキシジン、ヒノキチオール等のカチオン性殺菌成分や天然の殺菌成分、塩化ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム、オルソリン酸ナトリウム、トリポリリン酸ナトリウム、乳酸アルミニウム、キトサン等の無機塩類や有機塩類などを配合してもよい。これら有効成分の配合量は、本発明の効果を妨げない範囲で有効量とすることができる。
【００５５】
組成物の粘度は、Ｂ型粘度計、特にＢＨ型粘度計（東機産業（株）製、ローターＮｏ．４〜７、回転数２０ｒｐｍ、測定温度２５℃、測定時間２分）で計測した時、５〜１００Ｐａ・ｓの粘度、特に２０〜７０Ｐａ・ｓの粘度を有することが望ましい。粘度が５Ｐａ・ｓ未満ではゲル剤の特徴である滞留性が損なわれる場合があり、１００Ｐａ・ｓを超えると、べたつき感が強くなり使用感が損なわれる場合がある。
【００５６】
本発明組成物は、ゲル状で粘性を有するので、口腔内の歯茎や歯肉に指や歯ブラシなどで直接塗布したり、塗布しながらマッサージするように適用してもよい。
【実施例】
【００５７】
以下、実施例及び比較例を示して本発明を具体的に説明するが、本発明は下記実施例に制限されるものではない。なお、以下の例において配合量はいずれも質量％であり、純分換算値である。
【００５８】
また、各例で用いた成分の詳細を下記に示す。
硫酸銅・５水和物：関東化学社製
グルコン酸銅：富田製薬社製
イソプロピルメチルフェノール：大阪化成社製
塩化セチルピリジウム：和光純薬工業社製
チモール：高砂香料工業社製
オイゲノール：高砂香料工業社製
アネトール：高砂香料工業社製
クエン酸ナトリウム（クエン酸３ナトリウム２水塩）：和光純薬工業社製
リンゴ酸ナトリウム（ｄｌ−リンゴ酸２ナトリウム１／２水塩）：扶桑化学工業社製
酒石酸ナトリウム（ｌ−酒石酸２ナトリウム２水塩）：扶桑化学工業社製
キシリトール：東和化成社製
エリスリトール：三菱化学フーズ社製
カルボキシビニルポリマー〈１〉：Ｂ．Ｆ．Ｇｏｏｄｒｉｃｈ社製、カーボポール９８０（粘度１７Ｐａ・ｓ、０．２％水溶液、２５℃、ローターＮｏ．６、水酸化ナトリウムでｐＨ６．０に調整）
カルボキシビニルポリマー〈２〉：Ｂ．Ｆ．Ｇｏｏｄｒｉｃｈ社製、カーボポール９８０（粘度２３Ｐａ・ｓ、０．２％水溶液、２５℃、ローターＮｏ．６、水酸化ナトリウムでｐＨ６．０に調整）
カルボキシビニルポリマー〈３〉：Ｂ．Ｆ．Ｇｏｏｄｒｉｃｈ社製、カーボポール９８１（粘度５Ｐａ・ｓ、０．２％水溶液、２５℃、ローターＮｏ．４、水酸化ナトリウムでｐＨ６．０に調整）
ポリアクリル酸ナトリウム：日本純薬社製、レオジック２５０Ｈ（粘度９Ｐａ・ｓ、０．５％水溶液、２５℃、ローターＮｏ．５）
キサンタンガム：モナートガムＤＡ、ケルコ社製（粘度２００ｍＰａ・ｓ、０．２％水溶液、２５℃、ローターＮｏ．１）
ヒドロキシエチルセルロース：ＨＥＣダイセルＳＥ８５０、ダイセル化学工業社製（粘度２３ｍＰａ・ｓ、０．２％水溶液、２５℃、ローターＮｏ．１）
ポリオキシエチレン（６０）硬化ヒマシ油：日光ケミカルズ社製、ＨＣＯ−６０  エチレンオキサイドの平均付加モル数６０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンステアリン酸エステル：日光ケミカルズ社製、ＴＳ−１０ＭＶ  エチレンオキサイドの平均付加モル数２０
モノラウリン酸デカグリセリル：日光ケミカルズ社製  Ｄｅｃａｇｌｙｎ  １−Ｌ
ショ糖ステアリン酸エステル：三菱化学フーズ社製、サーフホープＪ−１８１６
ポリオキシエチレン（９）ラウリルエーテル：日光ケミカルズ社製、ＢＬ−９ＥＸ  エチレンオキサイドの平均付加モル数９
グリセリン（純分８５％）：ライオンオレオケミカル社製
エタノール：和光純薬工業社製、日局エタノール
プロピレングリコール：旭硝子社製
ポリエチレングリコール４００：第一工業製薬社製
【００５９】
〔実施例、比較例〕
表１〜３に示す組成のゲル剤（ゲル状口腔用組成物）を常法により調製し、容量４０ｇのアルミチューブに充填し、使用感、滞留性、ジンジパイン阻害効果、バイオフィルム抑制効果、外観安定性、銅の経時保存安定性を下記方法により評価した。結果を表１〜３に示す。
ゲル剤の粘度は、ゲル剤をガラス製容器に入れ、２５℃の水浴中で３０分間放置した後、ＢＨ型粘度計（東機産業（株）製、回転数２０ｒｐｍ、測定時間２分）で計測した。なお、下記に示すように粘度範囲に応じて使用するローターを変えた。
【００６０】
ローターＮｏ．１：粘度が０Ｐａ・ｓ以上０．４Ｐａ・ｓ未満
ローターＮｏ．２：粘度が０．４Ｐａ・ｓ以上１．６Ｐａ・ｓ未満
ローターＮｏ．３：粘度が１．６Ｐａ・ｓ以上４Ｐａ・ｓ未満
ローターＮｏ．４：粘度が４Ｐａ・ｓ以上８Ｐａ・ｓ未満
ローターＮｏ．５：粘度が８Ｐａ・ｓ以上１６Ｐａ・ｓ未満
ローターＮｏ．６：粘度が１６Ｐａ・ｓ以上４０Ｐａ・ｓ未満
ローターＮｏ．７：粘度が４０Ｐａ・ｓ以上２００Ｐａ・ｓ以下
【００６１】
１．使用感の評価
使用感の評価は、専門家１０名により行い、ゲル剤約０．３ｇを指にとり、下顎歯肉へ塗布した１分後の苦み、刺激、べたつき感といった使用感を下記評価基準により評価し、その平均値により下記判定基準により判定をした。
＜使用感の評価基準＞
４点：非常によい。
３点：よい。
２点：ややよい。
１点：悪い。
０点：非常に悪い。
＜使用感の判定基準＞
◎：平均値が３点以上
○：平均値が２点以上３点未満
△：平均値が１点以上２点未満
×：平均値が０点以上１点未満
【００６２】
２．ジンジパイン活性阻害効果
ジンジパイン活性阻害効果は、ビーグル犬を用い、歯周病変部位の歯肉溝浸出液（ＧＣＦ）中のジンジパイン活性により評価した。具体的評価法としては、固形飼料（商品名、ＤＳ−１Ａ、オリエンタル酵母社製）を水で、飼料：水が質量比で７：５の割合で練状にした飼料で飼育することで歯周病を誘発したビーグル犬（６歳齢、雌）を用いた。下顎３歯（Ｐ３、Ｐ４、Ｍ１）を被検部位とし、ゲル剤を処置した（ｎ＝３）。処置は、３時間毎に３回、各被験部位にゲル剤約０．３ｇを指で塗布することで行った。処置前及び全処置終了３時間後のＧＣＦ中のジンジパイン活性を測定し*1)、活性阻害効果を下記式により求め、その平均値から下記の判定基準により判定した。
なお、ＧＣＦ採取量は、ＧＣＦ採取前後のＧＣＦコレクション  ストリップス（ぺリオペーパー（登録商標）、ヨシダ社製）の質量差から求めた。
【００６３】
ジンジパイン活性阻害効果（％）＝｛（Ａ−Ｂ）／Ａ｝×１００
Ａ＝（薬剤処置前の活性）／（薬剤処置前の採取ＧＣＦ質量）
Ｂ＝（薬剤処置後の活性）／（薬剤処置後の採取ＧＣＦ質量）
＜有効性の判定基準＞
◎：平均値が９０％以上
○：平均値が５０％以上９０％未満
△：平均値が１０％以上５０％未満
×：平均値が１０％未満
【００６４】
*1)ジンジパイン活性測定法
５ｍｍｏｌ／Ｌシステインを含む２０ｍｍｏｌ／Ｌのリン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ７．５）を反応バッファー*2)とし、ＧＣＦ抽出液*3)１０μＬと、反応バッファーにより１０μｍｏｌ／Ｌに調製した基質（Ｂｚ−Ａｒｇ−ＭＣＡ：カルボベンゾキシ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−アルギニン−４−メチルクマリル−７−アミド、ペプチド研究所製）１４０μＬを混合し、３７℃で６０分間反応させた。反応により生成したＡＭＣ（７−アミノ−４−メチルクマリン）の蛍光強度を励起波長３９０ｎｍ、測定波長４６０ｎｍで測定し（フルオロスキャン  アセント、大日本製薬社製）、その反応速度をＧＣＦ中のジンジパイン活性とした。
*2)反応バッファー：１００ｍＬ中の質量
Ｌ−システイン塩酸塩（和光純薬工業社製）：            ０．０８７８ｇ
リン酸二水素ナトリウム二水和物（和光純薬工業社製）：  ０．３１２ｇ
１Ｎ  水酸化ナトリウム（和光純薬工業社製）：          適量（ｐＨ７．５に調整）
蒸留水：                                              残
（全量を１００ｍＬにメスアップ）
*3)ＧＣＦ抽出液
ＧＣＦコレクション  ストリップスを各被験部位の歯周ポケットに３０秒間挿入することで、ＧＣＦを採取し、１０ｍｍｏｌ／Ｌリン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ６．０）１００μＬに浸漬し、十分に撹拌することで、ＧＣＦを抽出した。
【００６５】
３．バイオフィルムに対する浸透殺菌効果（バイオフィルム抑制効果）の評価
（１）バイオフィルムの作製方法
バイオフィルムを作製する担体として、直径７ｍｍ×厚さ３．５ｍｍのハイドロキシアパタイト（ＨＡ）板（旭光学社製）を用い、唾液コートするため、０．４５μｍのフィルターで濾過したヒト無刺激唾液により、室温で４時間処理した。培養液は、トリプチケースソイブロス（Ｄｉｆｃｏ社製）３０ｇを１Ｌの精製水に溶解した液に、ヘミン（シグマ社製）５ｍｇ、メナジオン（シグマ社製）０．５ｍｇを添加したものを用いた。また、バイオフィルムを形成させる菌種として、口腔常在細菌であるストレプトコッカス  ゴルドニアイ  ＡＴＣＣ５１６５６株及びアクチノマイセス  ナエスランディ  ＡＴＣＣ５１６５５株、病原性細菌であるポルフィロモナス  ジンジバリス  ＡＴＣＣ３３２７７株を用いた。これら３菌種をそれぞれ２×１０7ｃｆｕ／ｍＬ（ｃｆｕ：ｃｏｌｏｎｙ  ｆｏｒｍｉｎｇ  ｕｎｉｔｓ）になるように上述の培養液に接種し、唾液コートしたＨＡ担体と共に３７℃，嫌気条件下（５ｖｏｌ％炭酸ガス、９５ｖｏｌ％窒素）で２週間連続培養（培養液の置換率は１０ｖｏｌ％とした）を行い、ＨＡ表面に３菌種混合のモデルバイオフィルムを形成させた。
【００６６】
（２）バイオフィルムに対する浸透殺菌効果
ゲル剤を５倍質量の滅菌蒸留水に溶解しサンプルとした。サンプル処置は、上記方法で形成させたバイオフィルムをサンプル２ｍＬに３分間浸漬することで行い、その後、滅菌生理食塩水１ｍＬで６回洗浄した。サンプル処置したバイオフィルムは、滅菌生理食塩水４ｍＬ中に、超音波処理（２００μＡ、１０秒間）により分散し、１０％綿羊脱繊維血含有トリプチケースソイ寒天平板（Ｄｉｆｃｏ社製）に５０μＬ塗沫し、３７℃，嫌気条件下（５ｖｏｌ％炭酸ガス、９５ｖｏｌ％窒素）で１０日間培養した。生育したポルフィロモナス  ジンジバリス菌の黒色コロニー数を計測し、バイオフィルム菌数（ｃｆｕ／ｍＬ）を求め、サンプル（ゲル剤）処置による菌数の低下を下記式により求め、下記の判定基準により判定した。
【００６７】
バイオフィルム抑制効果＝
（サンプル無処置のバイオフィルム菌数）／（サンプル処置のバイオフィルム菌数）
判定基準
◎：バイオフィルム抑制効果が５００以上
○：バイオフィルム抑制効果が１０以上５００未満
△：バイオフィルム抑制効果が３以上１０未満
×：バイオフィルム抑制効果が３未満
【００６８】
４．外観安定性
ゲル剤を６０℃の恒温層に１ヶ月保存し、室温に戻したあと、チューブから白色の紙上に約２ｃｍゲル剤を押出し、４℃保存のゲル剤をコントロールとして、色の変化を下記判定基準により目視判定した。
外観安定性判定基準
◎：変色、退色がほとんど認められない。
○：変色、退色がわずかに認められるが、問題ないレベルである。
△：変色、退色がやや認められる。
×：変色、退色が認められる。
【００６９】
５．銅の安定性
ゲル剤を６０℃の恒温層で１ヶ月保存し、室温に戻したゲル剤０．１ｇを遠心管に採取し、蒸留水５０ｍＬに分散した。遠心分離（１０，０００ｒｐｍ、１０分間）した後、上清２．５ｍＬに硝酸２．５ｍＬを混合し、原子吸光度法により（偏光ゼーマン原子吸光分光光度計、日立製作所製）により銅イオンを定量した。なお、銅イオンの量は、銅標準溶液（湘南和光社製）により作製した検量線から求めた。また、４℃保存のゲル剤をコントロールとして、下記式により銅残存率を算出し、下記判定基準により銅の経時保存安定性を判定した。
【００７０】
銅残存率（％）＝（Ｂ／Ａ）×１００
Ａ：４℃保存のゲル剤の銅イオン定量値
Ｂ：６０℃保存のゲル剤の銅イオン定量値
銅の安定性の判定基準
◎：銅残存率が９５％以上
○：銅残存率が９０％以上９５％未満
△：銅残存率が７０％以上９０％未満
×：銅残存率が７０％未満
【００７１】
６．滞留性
ゲル剤の口腔内滞留性の評価は、専門家１０名により行い、ゲル剤約０．３ｇを指にとり、口腔内の下顎歯肉へ塗布したのち、１時間後の製剤の口腔内滞留性について下記評価基準により官能評価を行い、その平均値により下記判定基準により判定した。
＜滞留性の評価基準＞
０点：滞留性を感じない。
１点：滞留性を殆ど感じない。
２点：滞留性をわずかに感じる。
３点：滞留性を感じる。
４点：滞留性を強く感じる。
＜滞留性の判定基準＞
◎：平均値が３．５点以上
○：平均値が２点以上３．５点未満
△：平均値が１点以上２点未満
×：平均値が０点以上１点未満
【００７２】
【表１−１】
2011105650.tif 000002
【００７３】
【表１−２】
2011105650.tif 000003
【００７４】
【表２−１】
2011105650.tif 000004
【００７５】
【表２−２】
2011105650.tif 000005
【００７６】
【表３】
2011105650.tif 000006