(57)【要約】【課    題】優れた筋肉萎縮防止効果を有するホエータンパク質加水分解物からなる筋肉萎縮防止剤の提供。【解決手段】分子量分布が１０ｋＤａ以下でメインピーク２００Ｄａ〜３ｋＤａ、ＡＰＬ（平均ペプチド鎖長）が２〜８、全ての構成成分に対する遊離アミノ酸含量が２０％以下、分岐鎖アミノ酸含量が２０％以上、抗原性はβ-ラクトグロブリンの抗原性の１／１００，０００以下であるホエータンパク質加水分解物を用いた筋肉萎縮防止剤を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の特徴を有するホエータンパク質加水分解物を有効成分とする筋肉萎縮防止剤。
１．分子量分布が１０ｋＤａ以下でメインピーク２００Ｄａ〜３ｋＤａ
２．ＡＰＬ（平均ペプチド鎖長）は２〜８
３．遊離アミノ酸含量２０％以下
４．分岐鎖アミノ酸含量２０％以上
５．抗原性が、β-ラクトグロブリンの１／１００，０００以下
【請求項２】
前記ホエータンパク質加水分解物が、
ホエータンパク質をｐＨ６〜１０、５０〜７０℃において耐熱性のタンパク質加水分解酵素を用いて熱変性させながら分解する分解工程と、
前記分解工程を経た後、加熱して酵素を失活させる失活工程と、
を経て得られるものであることを特徴とする請求項１に記載の筋肉萎縮防止剤。
【請求項３】
前記ホエータンパク質加水分解物が、
ホエータンパク質をｐＨ６〜１０、２０〜５５℃においてタンパク質加水分解酵素を用いて分解する前分解工程と、
前記前分解工程を経た後、５０〜７０℃に昇温させ、ｐＨ６〜１０、５０〜７０℃において耐熱性のタンパク質加水分解酵素を用いて未分解のホエータンパク質を熱変性させながら分解する分解工程と、
前記分解工程を経た後に、加熱して酵素を失活させる失活工程と、
を経て得られるものである請求項１に記載の筋肉萎縮防止剤。
【請求項４】
前記ホエータンパク質加水分解物が、
ホエータンパク質をｐＨ６〜１０、２０〜５５℃においてタンパク質加水分解酵素を用いて分解する前分解工程と、
前記前分解工程を経た後に５０〜７０℃に昇温させ、ｐＨ６〜１０、５０〜７０℃において耐熱性のタンパク質加水分解酵素を用いて未分解のホエータンパク質を熱変性させながら分解する分解工程と、
前記分解工程を経た後に加熱して酵素を失活させる酵素失活工程と、
前記酵素失活工程を経た後に、分画分子量１〜２０ｋＤａの限外ろ過膜処理する限外ろ過工程と、
前記限外ろ過工程を経て得られた透過液を、分画分子量１００〜５００Ｄａの精密ろ過膜処理し、未透過物を得る精密ろ過工程と、
を経ることによって得られるものである請求項１に記載の筋肉萎縮防止剤。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれかに記載の筋肉萎縮防止剤を含むことを特徴とする筋肉萎縮防止用飲食品、栄養組成物又は飼料。
【請求項６】
ホエータンパク質をｐＨ６〜１０、５０〜７０℃において耐熱性のタンパク質加水分解酵素を用いて熱変性させながら分解する分解工程と、
前記分解工程を経た後、加熱して酵素を失活させる失活工程と、
を有する筋肉萎縮防止剤の製造方法。
【請求項７】
前記分解工程の前工程として、ホエータンパク質をｐＨ６〜１０、２０〜５５℃においてタンパク質加水分解酵素を用いて分解する前分解工程を有する請求項６記載の筋肉萎縮防止剤の製造方法。
【請求項８】
前記失活工程の後工程として、分画分子量１〜２０ｋＤａの限外ろ過膜処理する限外ろ過工程と、
前記限外ろ過工程を経て得られた透過液を、分画分子量１００〜５００Ｄａの精密ろ過膜処理し、未透過物を得る精密ろ過工程と、
を有する請求項６又は７記載の筋肉萎縮防止剤の製造方法。
【請求項９】
以下の特徴を有するホエータンパク質加水分解物を１０ｇ/日以上摂取することによる筋肉萎縮防止方法。
１．分子量分布が１０ｋＤａ以下でメインピーク２００Ｄａ〜３ｋＤａ
２．ＡＰＬ（平均ペプチド鎖長）は２〜８
３．遊離アミノ酸含量２０％以下
４．分岐鎖アミノ酸含量２０％以上
５．抗原性が、β-ラクトグロブリンの１／１００，０００以下
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、苦味が少なく、安定性及び安全性に優れたホエータンパク質加水分解物を有効成分とする筋肉萎縮防止剤に関するものである。
本発明はまた、苦味が少なく、安定性及び安全性に優れたホエータンパク質加水分解物を有効成分として含有した筋肉萎縮防止用飲食品、筋肉萎縮防止用栄養組成物、又は筋肉萎縮防止用飼料に関する。
本発明の筋肉萎縮防止剤は、高齢化や老化によって筋肉重量が低下し筋肉が萎縮することの防止に有効で、且つ苦味が少なく、安定性及び安全性に優れたものである。
【背景技術】
【０００２】
高齢化、長期の不活動や無重力状態は、生物の身体に様々な生理学的変調（骨格筋の萎縮、体重の低下、骨の脱灰など）を起こすことが知られている。例えば骨折などによる長期間のギプス固定や長期間の寝たきり状態は、健康な人に比べて著しい筋肉量の減少を引き起こす。また、宇宙飛行士が長期の宇宙滞在後に地球へ帰還すると、筋肉量が減少しているために立つことさえも出来なくなることが知られている。また、高齢化が進むと運動量の低下や栄養摂取の低下が筋肉量の減少をもたらし、結果的に骨格筋が萎縮していくことも知られている。このため、摂取する食餌成分、特にタンパク質やアミノ酸栄養による骨格筋萎縮の予防と早期回復に関する検討がなされている。例えば、非特許文献１では、食餌タンパク質源として大豆タンパク質を用いて、長期の無重力状態によって引き起こされる骨格筋の萎縮に対する軽減効果について検討しており、大豆タンパク質の摂取によって腹筋の筋重量低下の抑制効果が示されている。
また、非特許文献２では、老化による筋萎縮の進行を防止するために摂取すべきタンパク質量、タンパク質の質に関して言及をしている。
【０００３】
牛乳や乳製品は、食物アレルギーの原因として挙げられることが多いが、なかでも、ヒトの母乳中には含まれないホエータンパク質がアレルゲンとなっていると考えられている。このため、ホエータンパク質を酵素で加水分解することでアレルゲン性を低下させる方法が知られており、特許文献２等の方法が報告されている。
特に、特許文献３の方法で製造されたホエータンパク質加水分解物は、Inhibition ELISA法（非特許文献３）での測定により、抗原性がβ-ラクトグロブリンに比べて１／１０,０００以下、ホエータンパク質に比べて１／１０,０００以下になることが確認されている。
一方で、このホエータンパク質加水分解物は、経口摂取により、脂肪蓄積抑制効果があることが明らかになっており、低アレルゲン性と機能性を併せ持つ素材として注目されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平2-002319号広報
【特許文献２】特開平2-138991号広報
【特許文献３】国際公開番号ＷＯ２００８／１１１５６２
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】多田ら、大豆たん白質研究  Vol.2 pp112-117 (1999)
【非特許文献２】Paddon-Jonesら、Am J. Clin. Nutr. 87 pp1562S-6S (2008)
【非特許文献３】日本小児アレルギー学会誌、１、36（1987）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
現在知られている大豆ペプチドの摂取による筋肉萎縮の防止方法は、確かに効果が認められるものではあるが、大豆ペプチド特有の苦味があり、また水に分散させた際に白濁するため、飲食品等に使用するには制限があり、特に透明性を求める製品には使用できないという問題がある。一方、牛乳中に含まれるホエータンパク質は大豆タンパク質と比較すると筋肉の合成に関わる分岐鎖アミノ酸含量が高く、またNPU（Net Protein Utilization；正味タンパク質利用率）も高いことが知られている。このことから、ホエータンパク質にも大豆タンパク質と同様あるいはそれ以上に筋萎縮の進行を防止する機能が備わっていることが期待される。しかしながら、実際にホエータンパク質あるいはその加水分解物であるホエーペプチドの摂取が筋萎縮の防止に与える影響について体系的にまとめた報告はない。牛乳中のホエータンパク質の加水分解によって得られるホエータンパク質加水分解物は、抗原性も低く、苦味や沈殿も生じないことから、飲食品への添加に適しているが、筋肉の萎縮防止効果に関する報告は無い。
【０００７】
そこで、本発明は、上記の課題に鑑み、苦味や白濁、沈殿を生じることなく、かつ筋肉萎縮防止効果を有する筋肉萎縮防止剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、鋭意研究の結果、牛乳中のホエータンパク質の加水分解によって得られるホエータンパク質加水分解物に高い筋肉萎縮防止効果があることを見出し、この知見に基づいて本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、以下の筋肉萎縮防止剤及び、該筋肉萎縮防止剤を含有させてなる筋肉萎縮防止用飲食品、飼料を提供するものである。
【０００９】
（１）以下の特徴を有するホエータンパク質加水分解物を有効成分とする筋肉萎縮防止剤、
１．分子量分布が１０ｋＤａ以下でメインピーク２００Ｄａ〜３ｋＤａ
２．ＡＰＬ（平均ペプチド鎖長）は２〜８
３．遊離アミノ酸含量２０％以下
４．分岐鎖アミノ酸含量２０％以上
５．抗原性が、β-ラクトグロブリンの１／１００，０００以下
（２）前記ホエータンパク質加水分解物が、ホエータンパク質をｐＨ６〜１０、５０〜７０℃において耐熱性のタンパク質加水分解酵素を用いて熱変性させながら分解する分解工程と、前記分解工程を経た後、加熱して酵素を失活させる失活工程と、を経て得られるものであることを特徴とする（１）に記載の筋肉萎縮防止剤、
（３）前記ホエータンパク質加水分解物が、ホエータンパク質をｐＨ６〜１０、２０〜５５℃においてタンパク質加水分解酵素を用いて分解する前分解工程と、前記前分解工程を経た後、５０〜７０℃に昇温させ、ｐＨ６〜１０、５０〜７０℃において耐熱性のタンパク質加水分解酵素を用いて未分解のホエータンパク質を熱変性させながら分解する分解工程と、前記分解工程を経た後に、加熱して酵素を失活させる失活工程と、を経て得られるものである（１）に記載の筋肉萎縮防止剤、
（４）前記ホエータンパク質加水分解物が、ホエータンパク質をｐＨ６〜１０、２０〜５５℃においてタンパク質加水分解酵素を用いて分解する前分解工程と、前記前分解工程を経た後に５０〜７０℃に昇温させ、ｐＨ６〜１０、５０〜７０℃において耐熱性のタンパク質加水分解酵素を用いて未分解のホエータンパク質を熱変性させながら分解する分解工程と、前記分解工程を経た後に加熱して酵素を失活させる酵素失活工程と、分画分子量1〜20kDaの限外ろ過膜処理する限外ろ過工程と、前記限外ろ過工程を経て得られた透過液を、分画分子量１００〜５００ｋＤａの精密ろ過膜処理し、未透過物を得る精密ろ過工程と、を経ることによって得られるものである（１）に記載の筋肉萎縮防止剤、
（５）（１）〜（４）のいずれかに記載の筋肉萎縮防止剤を含むことを特徴とする筋肉萎縮防止用飲食品、栄養組成物又は飼料、
（６）ホエータンパク質をｐＨ６〜１０、５０〜７０℃において耐熱性のタンパク質加水分解酵素を用いて熱変性させながら分解する分解工程と、前記分解工程を経た後、加熱して酵素を失活させる失活工程と、を有する筋肉萎縮防止剤の製造方法、
（７）前記分解工程の前工程として、ホエータンパク質をｐＨ６〜１０、２０〜５５℃においてタンパク質加水分解酵素を用いて分解する前分解工程を有する（６）記載の筋肉萎縮防止剤の製造方法、
（８）前記失活工程の後工程として、分画分子量１〜２０ｋＤａの限外ろ過膜処理する限外ろ過工程と、前記限外ろ過工程を経て得られた透過液を、分画分子量１００〜５００Ｄａの精密ろ過膜処理し、未透過物を得る精密ろ過工程と、
を有する（６）又は（７）記載の筋肉萎縮防止剤の製造方法、または、
（９）以下の特徴を有するホエータンパク質加水分解物を１０ｇ／日以上摂取することによる筋肉萎縮防止方法。
１．分子量分布が１０ｋＤａ以下でメインピーク２００Ｄａ〜３ｋＤａ
２．ＡＰＬ（平均ペプチド鎖長）は２〜８
３．遊離アミノ酸含量２０％以下
４．分岐鎖アミノ酸含量２０％以上
５．抗原性が、β-ラクトグロブリンの１／１００，０００以下
【発明の効果】
【００１０】
本発明の筋肉萎縮防止剤は、顕著な筋肉萎縮防止効果を有するものである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、本発明を詳細に説明する。
[有効成分]
この筋肉萎縮防止剤の有効成分として用いるホエータンパク質加水分解物は、以下の性質を有するものである。
（１）分子量分布が１０ｋＤａ以下でメインピーク２００Ｄａ〜3ｋＤａ
（２）ＡＰＬ（平均ペプチド鎖長）は２〜８
（３）遊離アミノ酸含量２０％以下
（４）分岐鎖アミノ酸含量２０％以上
（５）抗原性がβ-ラクトグロブリンの１／１００，０００以下
すなわち、本願発明の有効成分であるホエータンパク質加水分解物は、抗原性がβ-ラクトグロブリンに比べて１／１００，０００以下、ホエータンパク質に比べて１／１００，０００以下であることから、食物アレルギーの抑制という観点から極めて安全である。
また、その水溶液は透明で、苦味度も２程度であることから、筋肉萎縮防止剤として使用する際に味や外観の面での制限がなく、特に、透明性を求める脂肪蓄積抑制剤に対しても高配合が可能である。また、ホエータンパク質加水分解物を限外ろ過（ＵＦ）膜や精密ろ過（ＭＦ）膜処理することにより、水への溶解能を向上させることができる。
さらに、上記筋肉萎縮防止剤を有効成分として含有する筋肉萎縮防止能を有し、安全性に優れた筋肉萎縮防止用飲食品、筋肉萎縮防止用栄養組成物や筋肉萎縮防止用飼料を提供できる。
なお、本発明の筋肉萎縮防止剤は、ホエータンパク質を原料としているため、簡便且つ経済的に容易に製造することができる。
【００１２】
[製造方法]
本発明の筋肉萎縮防止剤に含有されるホエータンパク質加水分解物は、ホエータンパク質をｐＨ６〜１０、５０〜７０℃とし、これに耐熱性のタンパク質加水分解酵素を加えて熱変性させながら分解した後、加熱して酵素を失活させることにより得られる。また、上記酵素分解を行う前に、ホエータンパク質をｐＨ６〜１０、２０〜５５℃においてタンパク質加水分解酵素を用いて分解し、これを冷却することなくただちに上記条件で酵素分解することによって収率を一層高めることができる。
なお、上記のように調製したホエータンパク質加水分解物を、さらに分画分子量１ｋＤａ〜２０ｋＤａ、好ましくは２ｋＤａ〜１０ｋＤａの限外ろ過（ＵＦ）膜及び/又は分画分子量１００Ｄａ〜５００Ｄａ、好ましくは１５０Ｄａ〜３００Ｄａの精密ろ過（ＭＦ）膜から選択される方法で濃縮することにより、一層筋肉萎縮防止作用を高めることができる。また、さらに苦味を低減し、透明性を高めることができる。
本発明におけるホエータンパク質は、牛、水牛、山羊、ヒト等の哺乳動物のホエー、その凝集物、粉末、あるいは精製タンパク質をいい、これを酵素反応させるときは水溶液の状態で使用する。
この溶液をｐＨ６〜１０に調整するが、通常ホエータンパク質はこの範囲のｐＨになっているので格別ｐＨの調整を行う必要はないが、必要な場合は塩酸、クエン酸及び乳酸等の酸溶液あるいは苛性ソーダ、水酸化カルシウム及びリン酸ソーダ等のアルカリ溶液を用いてｐＨ６〜１０とする。また、加熱によって５０〜７０℃まで昇温するが、耐熱性のタンパク質加水分解酵素は、昇温後に添加するよりも、加熱前に添加し、加温中も酵素分解を行っていた方が収率の面からは好ましい。
一般的なタンパク質加水分解酵素であるProtease（プロテアーゼ）の至適温度は４０℃以下であるが、耐熱性のタンパク質加水分解酵素は４５℃以上であり、耐熱性のタンパク質加水分解酵素としては、このような至適温度を有する耐熱性のタンパク質加水分解酵素であれば特に制限無く用いることができる。このような耐熱性のタンパク質加水分解酵素として、例えば、パパイン、プロテアーゼS（商品名）、プロレザー（商品名）、サモアーゼ（商品名）、アルカラーゼ（商品名）、プロチンＡ（商品名）等を例示することができる。耐熱性のタンパク質加水分解酵素は８０℃で３０分加熱して残存活性が１０％あるいはそれ以上になるものが望ましい。また、単独よりも複数の酵素を併用するとより効果的である。反応は３０分〜１０時間程度行うことが好ましい。
最後に反応液を加熱して酵素を失活させる。酵素の失活は反応液を１００℃以上で１０秒間以上加熱することにより行うことができる。
酵素を失活させた後、反応液を遠心分離して上清を回収し、上清を乾燥して粉末製品とする。なお、遠心分離した時に生じる沈殿物は上清に比べて低アレルゲン化の程度が小さいので、除去した方が好ましいが、抗原性の問題がなければ、反応液をそのまま乾燥して使用しても差し支えない。
この方法により得られるホエータンパク質加水分解物は、Inhibition ELISA法で測定して、抗原性がβ-ラクトグロブリンに比べて１／１００，０００以下、ホエータンパク質に比べて１／１００，０００以下になることが確認されているため、極めて安全である。また、その水溶液は透明で、苦味度も２程度であることから、製品に使用する際に色及び風味の点で課題が少ない。なお、透明性及び苦味の評価は下記の方法により評価した。
透明性評価法：１％ホエータンパク質加水分解物溶液を調製し、６５０ｎｍにおける吸光度を測定した。
苦味評価法：１０％ホエータンパク質加水分解物溶液を調製し、苦味物質である塩酸キニーネを添加して、苦味を評価する。表１に示すように、苦味点数が2点以下であれば、飲食品などに利用可能である。
また、得られたホエータンパク質のＡＰＬについては、ＨＰＬＣ等の方法によって測定することができる。
【００１３】
【表１】
2011184314.tif 000002
【００１４】
[使用方法]
本発明のホエータンパク質加水分解物は、そのまま筋肉萎縮防止剤として使用することが可能であるが、常法に従い、粉末剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、ドリンク剤等に製剤化して用いることも出来る。また、さらに限外ろ過（ＵＦ）膜や精密ろ過（ＭＦ）膜処理により得られたホエータンパク質加水分解物についても、そのまま筋肉萎縮防止剤として使用することも可能であり、そのまま乾燥しても使用できる。また、常法に従い、製剤化して用いることもできる。
さらに、これらを製剤化した後、栄養剤やヨーグルト、飲料、乳飲料、ウエハース等の飲食品、飼料及びサプリメント等に配合することも可能である。
筋肉萎縮防止用飲食品、筋肉萎縮防止用栄養組成物、筋肉萎縮防止用飼料におけるタンパク質分解物の配合量は、特に制限はないが、成人一人一日あたりホエータンパク質加水分解物を１０ｇ以上、好ましくは２０ｇ以上摂取できるように商品設計を行うことが好ましい。
本発明の筋肉萎縮防止剤は、上記の有効成分に適当な助剤を添加して任意の形態に製剤化して、経口投与が可能な筋肉萎縮防止剤とすることができる。
【００１５】
以下に、実施例および比較例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらの実施例等に何ら限定されるものではない。
【００１６】
［実施例１］
ホエータンパク質１０％水溶液１Lに、パパイン５０Ｕ／ｇ・ホエータンパク質、及びプロレザー（Proleather : 天野エンザイム社製）１５０Ｕ／ｇ・ホエータンパク質となるように加え、ｐＨ８に調整し、５５℃において６時間ホエータンパク質を変性させながら酵素分解を行った。反応液を１００℃で１５秒間以上加熱して酵素を失活させ、遠心分離して上清を回収し、これを乾燥してホエータンパク質加水分解物（実施例品１）を得た。
得られたホエータンパク質加水分解物（実施例品１）の分子量分布は１０ｋＤａ以下、メインピークは１．３ｋＤａ、ＡＰＬは７．２、全ての構成成分に対する遊離アミノ酸含量は１８．９％であった。
Inhibition ELISA法によってβ-ラクトグロブリンに対する抗原性の低下を測定したところ、１／１００，０００以下で収率（酵素反応液を遠心分離し、仕込み量の乾燥重量に対する上清の乾燥重量の比率(％)）８０．３％、苦味度は２であった。
このようにして得られたホエータンパク質加水分解物（実施例品１）は、そのまま発明の筋肉萎縮防止剤として使用可能である。
【００１７】
［実施例２］
ホエータンパク質１０％水溶液１Lに、パパイン５０Ｕ／ｇ・ホエータンパク質、及びプロレザー１５０Ｕ/ｇ・ホエータンパク質を加え、ｐＨ８、５０℃で３時間酵素分解を行った。これを５５℃に昇温させ、この温度で３時間維持し、タンパク質を変性させるとともに、タンパク質の酵素分解を行い、１００℃で１５秒間以上加熱して酵素を失活させた。この反応液を分画分子量１０ｋＤａのＵＦ膜（ＳＴＣ社製）及び分画分子量３００ＤａのＭＦ膜（ＳＴＣ社製）処理を行い、濃縮液画分を回収し、これを乾燥してホエータンパク質加水分解物（実施例品２）を得た。
得られたホエータンパク質加水分解物（実施例品２）の分子量分布は１０ｋＤａ以下、メインピークは５００Ｄａ、ＡＰＬは３．０、全ての構成成分に対する遊離アミノ酸含量は１５．２％であった。
Inhibition ELISA法によってβ-ラクトグロブリンに対する抗原性の低下を測定したところ、１／１００，０００以下となっており、収率６５．４％、苦味度は２であった。このようにして得られたホエータンパク質加水分解物（実施例品２）は、そのまま本発明の筋肉萎縮防止剤として使用可能である。
【００１８】
［比較例１］
ホエータンパク質１２０ｇを精製水１，８００ｍｌに溶解し、１Ｍ苛性ソーダ溶液でｐＨを７．０に調整した。次いで、６０℃で１０分間加熱して殺菌し、４５℃に保持してアマノＡ（天野エンザイム社製）２０ｇを添加し、２時間反応させた。８０℃で１０分間加熱して酵素を失活させ、凍結乾燥し、ホエータンパク質加水分解物（比較例品１）を得た。得られたホエータンパク質加水分解物の分解率は１８％、収率は８０．６％であった。
【００１９】
［比較例２］
ホエータンパク質１２０ｇを精製水１，８００ｍｌに溶解し、１Ｍ苛性ソーダ溶液でｐＨを７．０に調整した。次いで、６０℃で１０分間加熱して殺菌し、４５℃に保持してアマノＡ（天野エンザイム社性）２０ｇを添加し、８時間反応させた。８０℃で１０分間加熱して酵素を失活させ、凍結乾燥し、ホエータンパク質加水分解物を得た。得られたホエータンパク質加水分解物の分解率３０％、収率８０．６％であった。
【００２０】
［試験例１］
（透明性試験）
実施例１，２及び比較例１，２の各タンパク質加水分解物の１％水溶液を調製し、６５０ｎｍにおける吸光度を測定した。その結果を表２に示す。
【００２１】
【表２】
2011184314.tif 000003
【００２２】
実施例品１、実施例品２のホエータンパク質加水分解物は吸光度が低いことからわかるように、透明性が高い。一方、比較試料においては、実施例１，２のホエータンパク質加水分解物に比べて吸光度が高く透明性が低いことがわかった。また、膜処理をした実施例品２の吸光度は、実施例品１のより低く、透明性に優れていた。
【００２３】
[試験例２]
（筋肉萎縮防止試験）
実験動物として、日本ＳＬＣより購入した２０週齢のＳＡＭ−Ｐ系雌ラットを体重が等しくなるように５群に分類した（各群n=６〜10、144±6.8g）。
餌はＡＩＮ９３標準試料と、ＡＩＮ９３標準試料をベースにカゼインタンパク質を加水分解前のホエータンパク質、実施例品１、実施例品２、比較例品１で置き換えたものを与えた。各群とも摂取量は自由としたが、２〜３日毎に摂食量の測定を行った。
各群のラットは４５週齢まで飼育した後、ペントバルビタールナトリウム（５０ｍｇ/ｋｇ）による麻酔下で、長指伸筋（ＥＤＬ）、前頚骨筋（ＴＡ）、ヒラメ筋（ＳＯＬ）、被腹筋（ＧＡＳ）を摘出し、それぞれの筋重量の測定に供した。摘出した各筋種の体重あたりの相対重量を測定した結果を表３に示す。
【００２４】
【表３】
2011184314.tif 000004
【００２５】
体重あたりの相対筋重量は前頚骨筋において標準飼料群およびホエータンパク質群が有意にHW群に比べて低かった。また長指伸筋、ヒラメ筋、被腹筋については、標準飼料群およびホエータンパク質群がHW群に比べて低くなる傾向が認められた。体重あたりの相対筋重量は、標準飼料群、ホエータンパク質群、比較例１群では、実施例１群、実施例２群に比べて優位に低い値を示した。これは、また長指伸筋、ヒラメ筋、被腹筋については、標準飼料群、ホエータンパク質群、比較例１群では、実施例１群、実施例２群に比べて低くなる傾向が認められた。すなわち、ＳＡＭ−Ｐ系雌ラットは老化促進マウスであることから、標準飼料では老化に伴って筋肉の萎縮が生じ、筋重量が低下しているのに対し、実施例１群や実施例２群では、その筋肉の萎縮を抑制し、筋重量の低下を防止していることを示している。以上の結果から、本願発明の筋肉萎縮防止剤は、優れた筋肉萎縮防止効果を有していることが示された。
【００２６】
［実施例３］
（筋肉萎縮防止用錠剤の製造）
表４に示す配合で原材料を混合後、常法により１ｇに成型、打錠して本発明の筋肉萎縮防止用錠剤を製造した。
【００２７】
【表４】
2011184314.tif 000005
【００２８】
［実施例４］
（筋肉萎縮防止用栄養組成物の製造）
５００ｇの実施例品２を４５００ｇの脱イオン水に溶解し、５０℃まで加熱後、ＴＫホモミクサー（ＴＫ  ＲＯＢＯ  ＭＩＣＳ；特殊機化工業社製）にて、６０００ｒｐｍで３０分間攪拌混合して、溶液Ａを得た。この溶液Ａ５．０ｋｇに、カゼイン５．０ｋｇ、大豆タンパク質５．０ｋｇ、魚油１．０ｋｇ、シソ油３．０ｋｇ、デキストリン１８．０ｋｇ、ミネラル混合物６．０ｋｇ、ビタミン混合物１．９５ｋｇ、乳化剤２．０ｋｇ、安定剤４．０ｋｇ、香料０．０５ｋｇを配合し、２００ｍｌのレトルトパウチに充填し、レトルト殺菌機（第１種圧力容器、ＴＹＰＥ：ＲＣＳ-４ＣＲＴＧＮ、日阪製作所製）で１２１℃、２０分間殺菌して、本発明の筋肉萎縮防止用栄養素生物５０ｋｇを製造した。
【００２９】
［実施例５］
（筋肉萎縮防止用飲料の調製）
脱脂粉乳３０ｇを６７０ｇの脱イオン水に溶解した後、実施例品１を１０ｇ溶解し、５０℃まで加熱後、ウルトラディスパーサー（ＵＬＴＲＡ−ＴＵＲＲＡＸ  Ｔ−２５；ＩＫＡジャパン社製）にて、９５００ｒｐｍで３０分間攪拌混合した。マルチトール１００ｇ、酸味料２ｇ、還元水飴２０ｇ、香料２ｇ、脱イオン水１６６ｇを添加した後、１００ｍｌのガラス瓶に充填し、９０℃、１５分間殺菌後、密栓し、本発明の筋肉萎縮防止用飲料１０本（１００ｍｌ入り）を調製した。