(57)【要約】【課題】有用なＳ位置換システイン誘導体｛S-アリル-L-システイン、S-プロピル-L-システイン、S-(3-ヒドロキシヘキシル)-L-システイン、あるいはS-(3-ヒドロキシ-1,1-ジメチルプロピル)-L-システイン｝およびＳ位置換ホモシステイン誘導体｛S-アリル-L-ホモシステイン、S-プロピル-L-ホモシステイン、S-(3-ヒドロキシヘキシル)-L-ホモシステイン、あるいはS-(3-ヒドロキシ-1,1-ジメチルプロピル)-L-ホモシステイン｝の経済的に有利な製造法を提供することを課題とする。【解決手段】発酵培地に微生物を培養するに際して、培地にメルカプト基を有する有機化合物を添加して培養することによって、発酵物および発酵液中に著量の添加したメルカプト基を有する有機化合物に対応する有用なＳ位置換システイン誘導体および/またはＳ位置換ホモシステイン誘導体を蓄積させ、これを採取する発酵法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
炭素源、窒素源、硫黄源その他微生物の生育に必要な栄養素を含む発酵培地に微生物を培養するに際して、発酵培地にメルカプト基（-ＳＨ基）を有する有機化合物として、アリルメルカプタン、プロピルメルカプタン、3-メルカプト-1-ヘキサノール、あるいは3-メルカプト-3-メチルブタノールを添加することにより、添加したメルカプト基を有する有機化合物に対応するＳ位置換システイン誘導体｛S-アリル-L-システイン、S-プロピル-L-システイン、S-(3-ヒドロキシヘキシル)-L-システイン、あるいはS-(3-ヒドロキシ-1,1-ジメチルプロピル)-L-システイン｝および/あるいはＳ位置換ホモシステイン誘導体｛S-アリル-L-ホモシステイン、S-プロピル-L-ホモシステイン、S-(3-ヒドロキシヘキシル)-L-ホモシステイン、あるいはS-(3-ヒドロキシ-1,1-ジメチルプロピル)-L-ホモシステイン｝を発酵物および発酵液中に生成・蓄積せしめ、発酵物および発酵液からそれらのＳ位置換システイン誘導体および/あるいはＳ位置換ホモシステイン誘導体を採取することを特徴とする発酵法によるこれらのＳ位置換システイン誘導体および/あるいはＳ位置換ホモシステイン誘導体の製造法
【請求項２】
使用微生物が大腸菌であることを特徴とする、請求項１記載の製造法
【請求項３】
使用微生物が、生育因子として少なくともメチオニンを要求する変異株であることを特徴とする請求項１記載の製造法
【請求項４】
使用微生物が、シスタチオニン・ベ-タ・リア-ゼ欠損性変異株である請求項１記載の製造法
【請求項５】
生成するＳ位置換システイン誘導体がS-アリル-L-システイン、S-プロピル-L-システイン、S-(3-ヒドロキシヘキシル)-L-システイン、あるいはS-(3-ヒドロキシ-1,1-ジメチルプロピル)-L-システインのうちの一つあるいはその組合せである請求項１記載の製造法
【請求項６】
生成するＳ位置換ホモシステイン誘導体がS-アリル-L-ホモシステイン、S-プロピル-L-ホモシステイン、S-(3-ヒドロキシヘキシル)-L-ホモシステイン、あるいはS-(3-ヒドロキシ-1,1-ジメチルプロピル)-L-ホモシステインのうちの一つあるいはその組合せである請求項１記載の製造法
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、発酵法によるＳ位置換システイン誘導体および/あるいはＳ位置ホモシステイン誘導体の製造法に関する。これらは医薬、健康保健薬あるいは食品添加物として用途の期待される物質である。
【背景技術】
【０００２】
発酵法によるS位置換システイン誘導体および/あるいはS位置換ホモシステイン誘導体の製造方法としては、炭素源、窒素源、硫黄源その他微生物の生育に必要な栄養素を含む発酵培地に少なくともＬ-メチオニンを生育に必要とする微生物を培養し、発酵の当初または途中で発酵培地にメルカプト基（-SH基）を有する有機化合物を添加することにより、添加したメルカプト基を有する有機化合物に対応するS位置換システイン誘導体/あるいはS位置換ホモシステイン誘導体を発酵物および発酵液中に生成・蓄積せしめる、本発明者らの発明にかかる方法が知られていた（特許文献１）。 
【０００３】
しかし、メルカプト基を有する有機化合物として、アリルメルカプタン、プロピルメルカプタン、3-メルカプト-1-ヘキサノール、あるいは3-メルカプト-3-メチルブタノールを発酵培地に添加してそれらに対応するS位置換システイン誘導体｛S-アリル-L-システイン、S-プロピル-L-システイン、S-(3-ヒドロキシヘキシル)-L-システイン、あるいはS-(3-ヒドロキシ-1,1-ジメチルプロピル)-L-システイン｝および/あるいはS位置換ホモシステイン誘導体｛S-アリル-L-ホモシステイン、S-プロピル-L-ホモシステイン、S-(3-ヒドロキシヘキシル)-L-ホモシステイン、あるいはS-(3-ヒドロキシ-1,1-ジメチルプロピル)-L-ホモシステイン｝を発酵物および発酵液中に生成・蓄積せしめ方法についてはこれまで知られていなかった。これらの生成物質のうち前三者のS置換システイン誘導体は、ニンニク、タマネギ、ラッキョウ、ニラ等のネギ属植物に含まれる生理活性物質と考えられる物質であり、最後者のそれはフェリニンと呼ばれ、猫の性誘引物質として知られており、いずれも医薬、健康保健薬あるいは
食品添加物としての特に用途が期待される物質である。
【特許文献１】特開２００４-２２２５１８
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
医薬、健康保健薬あるいは食品添加物としての用途が期待される、アリルメルカプタン、プロピルメルカプタン、3-メルカプト-1-ヘキサノールあるいは3-メルカプト-3-メチルブタノールに対応するS位置換システイン誘導体｛S-アリル-L-システイン、S-プロピル-L-システイン、S-(3-ヒドロキシヘキシル)-L-システイン、あるいはS-(3-ヒドロキシ-1,1-ジメチルプロピル)-L-システイン｝および/あるいはS位置換ホモシステイン誘導体｛S-アリル-L-ホモシステイン、S-プロピル-L-ホモシステイン、S-(3-ヒドロキシヘキシル)-L-ホモシステイン、あるいはS-(3-ヒドロキシ-1,1-ジメチルプロピル)-L-ホモシステイン｝の経済
的に有利な製造法を提供することを課題とする。                        
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明では、安価な糖源、窒素源、硫黄源、その他微量の栄養源を含む通常の発酵培地に好適な微生物を常法により培養するに際して、発酵の最初からあるいはその途中で培地に、アリルメルカプタン、プロピルメルカプタン、3-メルカプト-1-ヘキサノールあるいは3-メルカプト-3-メチルブタノール等のメルカプト基を有する有機化合物を添加し、発酵物および発酵培地に、それぞれのメルカプト基を有する有機化合物に対応するＳ位置換システイン誘導体｛S-アリル-L-システイン、S-プロピル-L-システイン、S-(3-ヒドロキシヘキシル)-L-システイン、あるいはS-(3-ヒドロキシ-1,1-ジメチルプロピル)-L-システイン｝および/またはＳ位置換ホモシステイン誘導体｛S-アリル-L-ホモシステイン、S-プロピル-L-ホモシステイン、S-(3-ヒドロキシヘキシル)-L-ホモシステイン、あるいはS-(3-ヒドロキシ-1,1-ジメチルプロピル)-L-ホモシステイン｝を著量蓄積させる。そして、発酵物および発酵培地からそれらのＳ位置換システイン誘導体および/またはＳ位置換ホモシステイン誘導体を採取する発酵法である。
高価なＬ-アミノ酸類や有機酸類その他は主原料としては使用しない。
【発明の効果】
【０００６】
発酵法によって、アリルメルカプタン、プロピルメルカプタン、3-メルカプト-1-ヘキサノールあるいは3-メルカプト-3-メチルブタノール等のメルカプト基を有する有機化合物に対応する、上記のＳ位置換Ｌ-システイン誘導体およびＳ位置換Ｌ-ホモシステイン誘導体を経済的に有利に生産できる。
さらに、培養条件の検討や菌株の選択によって、選択的に上記のＳ位置換Ｌ-システイン誘導体またはＳ位置換Ｌ-ホモシステイン誘導体を経済的に有利に生産できる可能性がある。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
本発明の方法によれば安価な糖源、窒素源、硫黄源、その他微量の栄養源をほどよく含む通常の発酵培地に好適な微生物を培養するに際して、培地にアリルメルカプタン、プロピルメルカプタン、3-メルカプト-1-ヘキサノールあるいは3-メルカプト-3-メチルブタノール等のメルカプト基を有する有機化合物を添加すると、発酵物あるいは発酵培地にそれぞれに対応する上記のＳ位置換システイン誘導体およびＳ位置換ホモシステイン誘導体が著量生成・蓄積する。
【０００８】
添加するメルカプト基を有する有機化合物の一般化学式をＲＳＨと表した場合、発酵物および発酵液に生成・蓄積するＳ位置換システイン誘導体の一般化学式はＨＯＯＣＣＨ（ＮＨ２）ＣＨ２ＳＲで、Ｓ位置換ホモシステイン誘導体の一般化学式はＨＯＯＣＣＨ（ＮＨ２）ＣＨ２ＣＨ２ＳＲで表される。ここに、ＲＳＨはアリルメルカプタン、プロピルメルカプタン、3-メルカプト-1-ヘキサノールあるいは3-メルカプト-3-メチルブタノールである。
【０００９】
本発明で使用する微生物としては、上記の条件で上記のＳ位置換システイン誘導体および/またはＳ位置換ホモシステイン誘導体を生成・蓄積するものであれば細菌類、始原菌類、真菌類のいずれの微生物も利用できる。また、それらは野生株、変異株のいずれでも良く、代表例として大腸菌、コリネバクテリウム・グルタミクム、バチルス属細菌、サッカロミセス・セレビシエ-、アスペルギルス属菌類等に属する微生物があげられる。
【００１０】
使用微生物としては例えば大腸菌の変異株が好適である。変異株としては、例えば生育に少なくもＬ-メチオニンを要求する変異株が好適である。このＬ-メチオニン要求性はＤＬ-メチオニン、Ｄ-メチオニンによっても満たされことがある。また、これらのメチオニン類の他に、Ｌ-ホモシステイン、ＤＬ-ホモシステイン、Ｌ-ホモシスチン、ＤＬ-ホモシスチン、ホモシステインチオラクトンのどれかによっても満たされることがある。また、その要求性が上記のメチオニン類では満たされるがホモシステイン類やホモシスチン類では満たされないこともある。また、この要求性は漏出型（リ-キ-型）であってもよい。
【００１１】
さらに、本発明に使用する微生物変異株としては、各種の薬剤（例えばアミノ酸の構造類似体、アミノ酸生合成や核酸生合成の中間体の構造類似体、ビタミン類の構造類似体）に耐性または感受性の性質を持つものが使用される。そして、これらの薬剤耐性と薬剤感受性の性質と上記の栄養要求性の性質の両方を合わせてもつ変異株であっても良い。
【００１２】
さらに、本発明に使用する微生物変異株としては、セリン-Ｏ-アセチル転移酵素やＯ-アセチルセリンスルフヒドラ-ゼ等のシステイン生合成経路の酵素類がＬ-システインのフィ-ドバック調節に対して耐性になった変異株あるいはホモセリンサクシニル転移酵素やシスタチオニン・ガンマ・シンタ-ゼのようなメチオニン合成酵素類がＬ-メチオニンあるいはその誘導体のフィ-ドバック調節に対して耐性になった変異株、あるいはその両方の性質の変異株が使用できる。そして、これらのフィ-ドバック調節に対する耐性の性質と、上述の栄養要求性、薬剤耐性あるいは薬剤感受性の性質とを合わせてもつ変異株であっても良い。
【００１３】
さらに、これらの酵素類が遺伝子工学的手法で増強あるいは欠損せしめた組換え株であってもよい。
【００１４】
本発明に使用する微生物の代表例として大腸菌に属し、生育に少なくともＬ-メチオニンまたはＬ-ホモシステイン（またはＬ-ホモシスチン）を要求する変異株ＦＥＲＭＰ-１８８９１をあげることができる。
【００１５】
ＦＥＲＭＰ-１８８９１は、次の実験例のように、Ｌ-メチオニン、ＤＬ-メチオニン、Ｄ-メチオニンまたはＤＬ-ホモシステインまたはＬ-ホモシステインのうちのどれか一つを生育に必要とする変異株であり、独立行政法人産業技術総合研究所に保管されて公知である。
【００１６】
大腸菌変異株ＦＥＲＭＰ-１８８９１と大腸菌野生株Ｋ-１２を、ブイヨン寒天培地にそれぞれ接種し３７℃で一夜培養した。生育した菌体の一部を採取して、殺菌水２ｍｌに懸濁し、１ｍｌあたり約１０８個の細胞を含む細胞懸濁液をそれぞれ調製した。これらの細胞懸濁液０．１ｍｌずつを、それぞれの菌株について４枚づつの最少寒天培地｛グルコ-ス １％、硫酸アンモニウム ０．２％、 ＫＨ２ＰＯ４ ０．１５％、 Ｋ２ＨＰＯ４０．０５％、 ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ０．０５％、 ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ０．０１％、 ＭｎＳＯ４・４Ｈ２Ｏ ０．００７％、 ＮａＣｌ ０．０１％、 無機塩類混液（１Ｌ中にＣａＣｌ２・Ｈ２Ｏ ５．３ｇ、 ＣｏＣｌ２ ４０ｍｇ、 ＣｕＳＯ４・５Ｈ２Ｏ ４０ｍｇ、 Ｈ３Ｂｏ３３０ｍｇ、Ｎａ２ＭｏＯ４ ４７ｍｇ、 ＺｎＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ２００ｍｇを含む）を１ｍｌ/Ｌおよび寒天２％を含む培地、ｐＨ７｝３０ｍｌを含む平板培地の片隅に、シリンダ-カップを置き、それぞれのカップの中にＬ-メチオニン（２．５ｍｇ/ｍｌ）溶液、Ｄ-メチオニン（２．５ｍｇ/ｍｌ）溶液、ＤＬ-ホモシステイン（２．５ｍｇ/ｍｌ）溶液または殺菌水（対照）をそれぞれ０．０２ｍｌづつ注入して、３０℃で４８時間静置培養した。その結果は表１に示すように、野生株では４つのどの条件でも平板の表面全体に良好な生育が認められた。
【００１７】
一方変異株では、Ｌ-メチオニン、Ｄ-メチオニンまたはＤＬ-ホモシステインを与えたシリンダ-カップの周辺にのみ生育ゾ-ンが認められ、殺菌水（対照）を与えたカップの周辺またはカップから離れた領域ではまったく生育が認められなかった。
【００１８】
【表１】
2011024454.tif 000002
＊＋印は試薬を注入したシリンダ-カップの周辺に生育が認められたことを示
し、-印は生育が認められなかったことを示す。
【００１９】
本発明に使用する発酵培地としては、炭素源、窒素源、硫黄源、無機塩類その他の栄養物を程良く含有しかつメルカプト基を有する有機化合物を含む培地ならば合成培地、天然培地のいずれでも使用できる。
【００２０】
炭素源としては、使用菌の利用可能なものであればいずれを用いてもよい。例えば、グルコ-ス、フラクト-ス、しょ糖、乳糖、マンノ-ス、マルト-ス、廃糖蜜、でんぷん加水分解物等の炭水化物、グリセリン、ソルビト-ル、マンニト-ル、キシリト-ル等の糖アルコ-ル、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、シスチン、システイン、アラニン、プロリン、グリシン、トリプトファン、セリン、ホモセリン、スレオニン等のアミノ酸類、乳酸、ピルビン酸、酢酸、リンゴ酸、ギ酸、コハク酸、フマ-ル酸、クエン酸、各種脂肪酸等の有機酸類、エタノ-ル、プロパノ-ル、ブタノ-ル、メタノ-ル等のアルコ-ル類を単独あるいは組み合わせて使用できる。
【００２１】
窒素源としては、硫酸アンモニウム、亜硫酸アンモニウム、硫化アンモニウム、チオ硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム、燐酸アンモニウム、炭酸アンモニウム等の無機アンモニウム塩、各種の有機酸アンモニウム塩、各種の硝酸塩類、アンモニア水、尿素等が単独あるいは組み合わせて使用できる。
【００２２】
硫黄源としては、硫酸アンモニウム、硫酸カリウム、硫酸ナトリウム等の硫酸塩、亜硫酸アンモニウム、亜硫酸カリウム、亜硫酸ナトリウム等の亜硫酸塩、硫化アンモニウム、硫化カリウム、硫化ナトリウム、硫化水素等の硫化物、チオ硫酸塩類、メルカプタン、シテイン（シスチン）等のメルカプト化合物、その他の有機無機硫黄化合物が使用できる。
【００２３】
要求物質であるメチオニンおよびホモシステインは、Ｌ-型、Ｄ-型、ＤＬ-型のいずれでも、使用菌の利用できるものであれば単独あるいは組み合わせて利用できる。またこれらを含む天然または合成物質や、容易にこれらに変化しうる物質たとえばメチオニンのヒダントイン、ホモシスチン、ホモシステインチオラクトン等も使用できる。これらの要求物質の使用量は、培地の組成やその他の培養条件によって異なるが、用いた培養条件下で、それらを充分量添加した場合の最大生育量に対して、５０-９０％程度の生育量が得られるように制限して供給することが望ましい。
以上の物質は、培養の初期、あるいは培養の途中で分割あるいは一括して添加する事が出来る。
【００２４】
培養は振とう培養や通気撹拌培養等の好気的条件下で行われる。培養中培養液のｐＨは５-９に維持されるのが好適である。中和剤としては、アンモニア水、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、炭酸カルシウム、燐酸マグネシウム、水酸化カリウム、尿素等が用いられる。
【００２５】
培養期間は通常３-７日間で、主として培養液中に著量のＳ位置換システイン誘導体および/またはＳ位置換ホモシステイン誘導体が蓄積する。
【００２６】
生成・蓄積する上記のＳ位置換システイン誘導体および/またはＳ位置換ホモシステイン誘導体は、培地に添加するメルカプト基を有する有機化合物の種類によって異なるが、添加するメルカプト基を有する有機化合物の一般化学式をＲＳＨと表した場合に生成・蓄積する上記のＳ位置換システイン誘導体はＨＯＯＣＣＨ（ＮＨ２）ＣＨ２ＳＲ、Ｓ位置換ホモシステイン誘導体はＨＯＯＣＣＨ（ＮＨ２）ＣＨ２ＣＨ２ＳＲで表すことが出来る。
【００２７】
培地に添加するメルカプト基を有する有機化合物の種類によっては、各種の界面活性剤あるいは溶剤を各種の濃度で培地に併用して添加することによって、上記のＳ位置換システイン誘導体および/あるいはＳ位置換ホモシステイン誘導体の生成量が増加する場合がある。
【００２８】
培地に添加するメルカプト基を有する有機化合物と生成・蓄積するＳ位置換システイン誘導体およびＳ位置換ホモシステイン誘導体の例は表２に示すとおりである。
【００２９】
【表２】
2011024454.tif 000003
【００３０】
培養液からの上記のシステイン誘導体及び/またはホモシステイン誘導体の単離は常法により溶媒抽出、各種クロマトグラフィ-によって行われる。
【００３１】
以下にメルカプト基を有する有機化合物としてアリルメルカプタンを培地に添加し、Ｓ位置換システイン誘導体としてS-アリル-L-システインが、Ｓ位置換ホモシステイン誘導体としてS-アリル-L-ホモシステインが同時に蓄積した場合の実施例を示す。
【実施例】
【００３２】
実施例 １として、グルコ-ス１０ｇ/ｌ、ポリペプトン１０ｇ/ｌ、酵母エキス５ｇ/ｌ、尿素３ｇ/ｌの組成からなるｐＨ７の種培地１０ｍｌを３００ｍｌ容三角フラスコに入れて１２０℃で１０分間オ-トクレ-ブ殺菌する。これに大腸菌変異株ＦＥＲＭＰ-１８８９１を接種し、往復振とう培養機上で１３０ｒｐｍの振とう速度で３０℃の温度下で２４時間振とう培養する。得られた培養液を下記の基本組成の殺菌した発酵培地７ｍｌを含む３００ｍｌ容三角フラスコに０．７ｍｌ宛接種し、さらに別に殺菌したＬ-メチオニンの培地中の最終濃度が表３のようになるように０-５００μｇ/ｍｌに変えて各フラスコに添加し、種培養と同様に振とう培養した。
【００３３】
発酵培地の基本組成（培地１Ｌあたり）は次のとおりであった。フラクト-ス ３０ｇ、（ＮＨ４）２ＳＯ４１０ｇ、ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ０．０１ｇ、ＭｎＳＯ４・４Ｈ２Ｏ ０．００７ｇ、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ０．５ｇ、ＫＨ２ＰＯ４ １．５ｇ、Ｋ２ＨＰＯ４ ０．５ｇ、ＮａＣｌ ０．１ｇ、酵母エキス１ｇ、ウラシル ０．１ｇ、ＣａＣＯ３ ２０ｇ。ただし、（ＮＨ４）２ＳＯ４ とＣａＣＯ３は他の培地組成とは別に殺菌して加えた。また、培地のｐＨをアンモニア水で７に補正した後、１２０℃で１０分間オ-トクレ-ブ殺菌した。
【００３４】
培養１８時間目に殺菌した１８％フラクト-ス溶液を０．７ｍｌづつ各フラスコ添加し、同時にフィルタ-除菌した２０ｍｇ/ｍｌのアリルメルカプタンを０．７ｍｌづつ添加して培養を続行して合計４０時間培養した。その結果、各培養条件下の菌の生育量と培養液中のS-アリル-L-システインおよびS-アリル-L-ホモシステインの蓄積量は表３のとおりであった。
【００３５】
【表３】
2011024454.tif 000004
※）生育度は東京光電社製光電比色計モデルＡＮＡ-７Ａで、光路径２ｃｍの比色セルを用いて測定した。
【００３６】
別に、Ｌ-メチオニン１２５μｇ/ｍｌ添加の条件で上記と同様の培養を繰り返して発酵液を集めて４５０ｍｌとし、-２０℃で凍結し、それを解凍後８，０００ｒｐｍ、４℃の条件で遠心分離して得た上澄液の中には、S-アリル-L-システインおよびS-アリル-L-ホモシステインがそれぞれ７６０ｍｇおよび１１２０ｍｇ含まれていた。この液を内径２．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのＨ＋タイプの陽イオン交換樹脂ダイアイオンＳＫ＃１Ｂのカラムに、１時間当たり１５３ｍｌの速度で通塔して、S-アリル-L-システインおよびS-アリル-L-ホモシステインを吸着させた。
【００３７】
カラムに２５９ｍｌの水を同様に通塔して水洗後、順次おのおの２９５ｍｌづつの０．５Ｎ、１Ｎ、２Ｎ ＮＨ４ＯＨで同様に溶出し、７７ｍｌづつのフラクションを集めた。
そそれぞれのフラクションを薄層クロマトグラフィ-で試験した結果、０．５Ｎ ＮＨ４ＯＨで溶出した３番目と４番目のフラクションにS-アリル-L-ホモシステインが１ＮＮＨ４ＯＨで溶出した１番目と２番目のフラクションにS-アリル-L-ホモシステインが主として含まれることが分かった。
【００３８】
それぞれのフラクションを集めて減圧下で濃縮し、デシケ-タの中で乾燥させ、S-アリル-L-システインおよびS-アリル-L-ホモシステインの粗製品をそれぞれ５２０ｍｇおよび２６０ｍｇ得た。それぞれの製品の一部を５ｍｇ/ｍｌになるように溶解し、ＤｅｖｅｌｏｓｉｌＣ３０-ＵＧ５（野村化学社製品）の分取用カラムを用いて高速液体クロマトグラフィ-を行い、S-アリル-L-システインおよびS-アリル-L-ホモシステインそれぞれを分取し、減圧下で濃縮後デシケ-タ中で乾燥して、それぞれの純製品を得た。
それらを、ＮＭＲで解析した結果、それぞれのデ-タはS-アリル-L-システインおよびS-アリル-L-ホモシステインと一致した。また、ＬＣ-ＭＳ解析の結果、分子量はそれぞれの理論量と一致した。
【００３９】
実施例 ２として、メルカプト基を有する有機化合物として、アリルメルカプタンに代えてプロピルメルカプタン、3-メルカプト-1-ヘキサノールまたは3-メルカプト-3-メチルブタノール、をおのおの２５ｍＭの最終濃度になるように培地に添加した他は実施例１と同様に実施した結果、表４に示すＳ位置換システイン誘導体とＳ位置換ホモシステイン誘導体が同時に蓄積した。
【００４０】
【表４】
2011024454.tif 000005
【産業上の利用可能性】
【００４１】
発酵法によって、Ｓ位置換Ｌ-システイン誘導体｛S-アリル-L-システイン、S-プロピル-L-システイン、S-(3-ヒドロキシヘキシル)-L-システイン、あるいはS-(3-ヒドロキシ-1,1-ジメチルプロピル)-L-システイン｝およびＳ位置換Ｌ-ホモシステイン誘導体｛S-アリル-L-ホモシステイン、S-プロピル-L-ホモシステイン、S-(3-ヒドロキシヘキシル)-L-ホモシステイン、あるいはS-(3-ヒドロキシ-1,1-ジメチルプロピル)-L-ホモシステイン｝を経済的に有利に生産できる。