(57)【要約】【課題】皮膚のたるみを改善する。【解決手段】ペラルゴニジンはコラーゲンゲル収縮促進作用及びインテグリン産生促進作用を有するため、皮膚のたるみ改善剤として有用である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ペラルゴニジンを有効成分とする皮膚のたるみ改善剤。
【請求項２】
ペラルゴニジンを有効成分とするコラーゲンゲル収縮促進剤。
【請求項３】
ペラルゴニジンを有効成分とするインテグリン産生促進剤。
【請求項４】
ナス抽出物を有効成分とするコラーゲンゲル収縮促進剤。
【請求項５】
ナス抽出物を有効成分とするインテグリン産生促進剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚のたるみ改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚（肌）は、外側から表皮、真皮及び皮下組織の順に形成されている。真皮は主としてコラーゲン（Ｉ型）で構成されており、真皮中の線維芽細胞はインテグリンなどの接着因子を介してコラーゲンと結合している。健康な張りのある肌では、線維芽細胞がコラーゲンを束ねてしっかりと引っ張るため、コラーゲンの繊維束が認められる。一方、加齢等により張りのなくなった肌では、線維芽細胞がコラーゲンを引っ張ることができず、コラーゲン繊維はバラバラの状態になっている。
【０００３】
したがって、線維芽細胞がコラーゲンを引っ張る力を高めることができる物質やインテグリンの産生を高めることができる物質は、皮膚のたるみを改善し美しい肌を取り戻すことが期待でき、既にそのような物質が報告されている（例えば、特許文献１〜５）
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平１０−７２３３６号公報
【特許文献２】特開平１１−２６３７１８号公報
【特許文献３】特開２００１−２７８７６９号公報
【特許文献４】特開２００３−１７６２０８号公報
【特許文献５】特開２００１−３９８５０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、既知物質のコラーゲンゲル収縮促進作用やインテグリン産生促進作用は必ずしも十分ではなく、新たな皮膚のたるみ改善剤が求められていた。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者は、上記課題を解決するため鋭意努力を重ねた結果、ペラルゴニジンは優れたコラーゲンゲル収縮促進作用及びインテグリン産生促進作用を有することを見出した。また、ペラルゴニジンを豊富に含むナス抽出物も同様の作用を有することを見出した。
【０００７】
すなわち、本発明は以下の（１）〜（５）を提供する。
（１）ペラルゴニジンを有効成分とする皮膚のたるみ改善剤。
（２）ペラルゴニジンを有効成分とするコラーゲンゲル収縮促進剤。
（３）ペラルゴニジンを有効成分とするインテグリン産生促進剤。
（４）ナス抽出物を有効成分とするコラーゲンゲル収縮促進剤。
（５）ナス抽出物を有効成分とするインテグリン産生促進剤。
【発明の効果】
【０００８】
ペラルゴニジンはコラーゲンゲル収縮促進作用及びインテグリン産生促進作用を有するため、皮膚のたるみ改善剤として有用である。また、ナス抽出物も同様の作用を有するため、皮膚のたるみ改善剤として有用である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
ペラルゴニジンは下記構造式で表されるアントシアニジンの一種であり、抗酸化作用があることが既に知られていた。本発明者は、ペラルゴニジンにコラーゲンゲル収縮促進作用及びインテグリン産生促進作用があり、この作用によってペラルゴニジンは皮膚のたるみを改善するのに有効であることを見出した。
【００１０】
【化１】
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【００１１】
また、本発明者は、ナス抽出物は、ペラルゴニジンを豊富に含んでおり、コラーゲンゲル収縮促進作用及びインテグリン産生促進作用があり、ペラルゴニジンが皮膚のたるみを改善するのに有効であることを見出した。
【００１２】
ペラルゴニジンは化学合成してもよく植物から抽出・精製してもよい。また、ペラルゴニジンはフナコシ株式会社等から購入することもできる。
【００１３】
ナス抽出物は、一般的な植物の抽出方法により調製することが可能である。すなわち、植物体の全部又は一部を水、有機溶媒又はそれらの混合物を用いて抽出する。有機溶媒の例としては、メタノール、エタノール及びｎ−プロパノールなどのアルコール、ギ酸、酢酸及びトリフルオロ酢酸などの有機酸、アセトン、酢酸エチル、ジエチルエーテル、塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素、ベンゼン、石油エーテルなどが挙げられる。特に、水及び有機酸の混合溶媒が好ましく、ギ酸、酢酸又はトリフルオロ酢酸の０．１〜１０％（ｖ／ｖ）水溶液などが挙げられる。抽出温度は４℃〜加熱還流でよい。溶媒抽出後、必要に応じて、ろ過又は遠心分離等の処理を行い、さらに濃縮、希釈又は乾燥等の処理を行っても良い。ペラルゴニジンが豊富に含まれているため、ナス抽出物は果実部分、特に果皮部分を抽出することが好ましい。
【００１４】
本発明の皮膚のたるみ改善剤、コラーゲンゲル収縮促進剤及びインテグリン産生促進剤は皮膚外用組成物、特に化粧料組成物として使用され得る。化粧料組成物の形態として、洗顔料、化粧水、美容液、乳液、ファンデーション等が挙げられる。化粧料組成物として使用する場合、ペラルゴニジンとして０．００００１重量％〜０．１重量％、好ましくは０．０００３重量％〜０．０３重量％配合し、ナス抽出物として０．００００１重量％〜１０重量％、好ましくは０．００１重量％〜１重量％配合する。本発明の皮膚のたるみ改善剤、コラーゲンゲル収縮促進剤及びインテグリン産生促進剤が化粧料組成物として使用される場合、化粧料の調製に通常用いられる成分が用いられ得る。このような成分として、油分、界面活性剤、保湿剤、増粘剤、防腐剤、香料、着色料、精製水等が挙げられる。これらの成分を必要に応じて１または２以上含むことができる。
【００１５】
化粧料組成物をたるんだ皮膚に適用することで、皮膚のたるみを改善し美しく張りのある皮膚とすることができ、また、美しく張りのある皮膚に適用することで、皮膚のたるみを予防し、美しく張りのある皮膚を維持することができる。化粧料組成物を適用する皮膚は体のどの部分であっても良いが、特に顔面の皮膚への適用が効果的である。
【実施例】
【００１６】
製造例１：水茄子抽出物の調製
水茄子から果皮を剥ぎ取り、凍結乾燥によってミズナス乾燥果皮を得た。その５ｇの果皮を５％（ｖ／ｖ）ギ酸水溶液１００ｍＬに浸漬し、４℃で２４時間静置することによって抽出を行った。ろ紙でろ過したものを凍結乾燥することによって、水茄子抽出物を得た。
【００１７】
試験例１：コラーゲンゲル収縮促進活性の測定
正常ヒト皮膚繊維芽細胞株（ＮＨＤＦ）を１×１０５／ｗｅｌｌの濃度で６−ｗｅｌｌプレートに播種し、１０％牛胎児血清を含むＤＭＥＭ培地（ＧＩＢＣＯ）で９０％コンフルーエントまで培養した（５％ＣＯ２、３７℃）。Ｉ型コラーゲンゲル（新田ゼラチン）を２８ｍｌ、５×ＤＭＥＭ（ニッスイ）を８ｍｌ、牛胎児血清０．０４ｍｌ、更に２．２％ＮａＨＣＯ３を含む０．０５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を４ｍｌ加え、そこにトリプシン処理で剥がしたＮＨＤＦを１×１０５／ｍｌの濃度になるように懸濁した。６−ｗｅｌｌプレートに３ｍｌずつ分注し、３７℃インキュベータで３０分間放置し、ＮＨＤＦを含有したコラーゲンゲルを作成した。次に、そのコラーゲンゲルに、披験物質［ペラルゴニジン（フナコシ）：１０μＭ、水茄子抽出物：５０μｇ／ｍＬ；０．１％の牛胎児血清を含むＤＭＥＭ培地に溶解］を４ｍＬずつ添加した。対照群には、被験物質を含有しない０．１％の牛胎児血清を含むＤＭＥＭ培地を使用した。２４時間培養した後、プレートに密着しているコラーゲンゲルをプレートから剥離して浮遊させ、コラーゲンゲル収縮を開始させた。２４時間後、披験物質を含む新しい培地に交換した。更に４８時間培養した後、コラーゲンゲルの面積を画像解析ソフトによって測定した。対照群のコラーゲンゲルの面積を１００％としたときの被験物質添加群のコラーゲンゲルの面積％を表１に示す。表１から明らかなように、ペラルゴニジン及び水茄子抽出物にコラーゲンゲル収縮促進作用が認められた。
【００１８】
【表１】
2011020951.tif 000003
【００１９】
試験例２：インテグリン産生促進活性の測定
ＮＨＤＦを１×１０５／ｗｅｌｌの濃度で６−ｗｅｌｌプレートに播種し、１０％牛胎児血清を含むＤＭＥＭ培地で９０％コンフルーエントまで培養した（５％ＣＯ２、３７℃）。その後、披験物質［ペラルゴニジン：１０μＭ、水茄子抽出物：１０μｇ／ｍＬ；０．１％の牛胎児血清を含むＤＭＥＭ培地に溶解］を細胞に添加し２４時間培養した。対照群には、被験物質を含有しない０．１％の牛胎児血清を含むＤＭＥＭ培地を使用した。２４時間後、Ｔｒｉｚｏｌｅ（登録商標；インビトロジェン）により細胞を溶解し、ＲＮＡを抽出した後、ＴａｋａｒａＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ（登録商標）  ＲＴ  ｒｅａｇｅｎｔ  Ｋｉｔ（タカラバイオ）によりｃＤＮＡを合成した。得られたｃＤＮＡサンプルは各遺伝子のプライマーとＴａｋａｒａ  ＳＹＢＲ（登録商標）  Ｐｒｅｍｉｘ  ＥＸ  ＴａｑＴＭ（タカラバイオ）を使用し、リアルタイム定量性ＰＣＲ装置Ｃｈｒｏｍｏ４（バイオラッド）によって遺伝子発現量を定量した。ＰＣＲは９４℃  ３０秒の最初のステップ後、９４℃  １２秒、５８℃  １２秒、７２℃  １２秒の条件で４０サイクル行った。各遺伝子のプライマーは以下の通りとした。
ヒト  インテグリンα２フォワードプライマー：５’ＧＡＴＴＴＧＣＧＴＧＴＧＧＡＣＡＴＣＡＧ３’
ヒト  インテグリンα２リバースプライマー：５’ＴＧＡＧＣＡＧＣＴＧＧＴＡＴＴＴＧＴＣＧ３’
ヒト  シクロフィリンＡフォワードプライマー：５’ＡＴＣＣＴＡＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＴＴ３’
ヒト  シクロフィリンＡリバースプライマー：５’ＣＡＣＴＣＡＧＧＴＣＴＧＡＧＣＣＡＣＡＡ３’
対照群の遺伝子発現量を１００％としたときの被験物質添加群の遺伝子発現量％を表２に示す。表２から明らかなように、ペラルゴニジン及び水茄子抽出物にインテグリン産生促進作用が認められた。
【００２０】
【表２】
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【００２１】
実施例１：洗顔クリームの製造
成分Ａ、成分Ｂ及び成分Ｃの合計が１００重量％となるように、各成分Ａ〜Ｃを以下の割合で処方した。まず、成分Ａの混合物を加熱溶解して８０℃に保持した。次いで、別途８０℃で加熱溶解した成分Ｂの混合物を成分Ａの混合物に添加して充分撹拌した。その後、撹拌しながら冷却を行い、５０℃にて成分Ｃの混合物を加え、洗顔クリームを得た。
【００２２】
【表３】
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【００２３】
【表４】
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【００２４】
【表５】
2011020951.tif 000007
【００２５】
実施例２：化粧水の製造
合計が１００重量％となるように以下の成分を処方した。全ての成分を室温にて混合及び撹拌して均一な溶液とし、ｐＨを５．５に調整して、化粧水を得た。
【００２６】
【表６】
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【００２７】
実施例３：乳液の製造
成分Ｄ、成分Ｅ及び成分Ｆの合計が１００重量％となるように、各成分Ｄ〜Ｆを以下の割合で処方した。まず、成分Ｄの混合物を加熱溶解して８０℃に保持した。次いで、別途８０℃で加熱溶解した成分Ｅの混合物を成分Ｄの混合物に添加して充分撹拌した。その後、撹拌しながら冷却を行い、５０℃にて成分Ｆの混合物を加え、乳液を得た。
【００２８】
【表７】
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【００２９】
【表８】
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【００３０】
【表９】
2011020951.tif 000011
【配列表】
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