(57)【要約】【課題】長期間摂取可能なＰＹＹ分泌促進剤を提供。【解決手段】重量平均分子量１万〜１０万のアルギン酸又はその塩を有効成分とするペプチドＹＹ分泌促進剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
重量平均分子量１万〜１０万のアルギン酸又はその塩を有効成分とするペプチドＹＹ分泌促進剤。
【請求項２】
重量平均分子量１．５万〜６万のアルギン酸又はその塩を有効成分とするペプチドＹＹ分泌促進剤。
【請求項３】
形態が経口用液体製剤である、請求項１又は２記載のペプチドＹＹ分泌促進剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＰＹＹ分泌促進剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ペプチドＹＹ（ＰＹＹ）は１９６８年にブタの小腸より単離されたペプチドで、ニューロペプチドＹ（ＮＰＹ）、膵ポリペプチド（ＰＰ）とともに一つのペプチドファミリーを形成している。ＰＹＹは、おもに下部消化管（回腸および結腸）の粘膜層内細胞から食後分泌される。ＰＹＹの末梢投与は膵外分泌および腸運動を抑制させることが知られている（非特許文献１、２）。これまでの研究によって、ＰＹＹの分泌を促進するものとして、レジスタントスターチ、ラクチトール及びβ−グルカンが知られている（非特許文献３、４）。
しかしながら、これらの物質のＰＹＹ分泌促進作用は十分なものとはいえない。
【０００３】
一方、アルギン酸又はその塩は、食品の増粘剤や歯科印象剤のゲル化剤として広く使用されており、また、アルギン酸塩の１種類であるアルギン酸カリウムを用いた動物実験で、ナトリウムイオンの吸着能が他の多糖類よりも高いことを見いだし、実際にアルギン酸カリウムを摂取させることで体内のナトリウムが排出され、その結果高血圧の抑制に効果があることが報告されている（非特許文献５）。また、アルギン酸塩のうち、アルギン酸カリウムが消化管ホルモンの１種であるＧＩＰ分泌抑制作用を有することが知られている（特許文献１）。
また、促進された満腹効果を有する食品組成物として、タンパク質とバイオポリマー増粘剤を配合した食品組成物が知られており、バイオポリマー増粘剤としてアルギナート（アルギン酸塩）が例示され、分子量範囲が２０万〜４０万であることが好ましい旨の記載がある（特許文献２及び３）。
【０００４】
しかしながら、アルギン酸又はその塩が、ヒトのＰＹＹ分泌に対してどのような作用を及ぼすかについては全く知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００９−１４９６２１号公報
【特許文献２】特表２００７−５０３８２２号公報
【特許文献３】特表２００７−５０３８２３号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｐａｐｐａｓ，  Ｄｅｂａｓら, Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ９１：  １３８６−１３８９，１９８６
【非特許文献２】Ｓａｖａｇｅ，  Ａｄｒｉａｎら，Ｇｕｔ  ２８：  １６６−１７０，  １９８７
【非特許文献３】Ｚｈｏｕら、Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ  ２９５：Ｅ１１６０−１１６６，２００８
【非特許文献４】Ｋｅｅｎａｎら、Ｏｂｅｓｉｔｙ  １４：１５２３−１５３４，２００６
【非特許文献５】辻啓介ら、日本家政学会誌  ３９：１８７−１９５，１９８８
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の課題は、長期間摂取可能で医薬又は食品として使用可能なＰＹＹ分泌促進剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
そこで本発明者は、種々の成分を対象としてヒトの食後ＰＹＹ分泌に対する作用を検討したところ、アルギン酸又はその塩の中でも、重量平均分子量が１万〜１０万という比較的小さなアルギン酸又はその塩に、特に優れた食後のＰＹＹ分泌促進作用があることを見出した。
【０００９】
すなわち、本発明は、重量平均分子量１万〜１０万のアルギン酸又はその塩を有効成分とするＰＹＹ分泌促進剤を提供するものである。
【発明の効果】
【００１０】
本発明のＰＹＹ分泌促進剤を用いれば、食後のＰＹＹを増加させ、消化管運動の調節及び膵外分泌の制御を図ることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】アルギン酸カリウム摂取による食後ＰＹＹ分泌量の経時変化を示す図である。
【図２】アルギン酸カリウム摂取による食後ＰＹＹ分泌量の曲線下面積を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明ＰＹＹ分泌促進剤の有効成分は重量平均分子量１万〜１０万のアルギン酸又はその塩（以下、アルギン酸（塩）とも記す）である。
【００１３】
本発明に用いるアルギン酸（塩）はβ−Ｄ−マンヌロン酸とα−Ｌ−グルロン酸の割合や配列順序は特に制限されない。したがって、β−Ｄ−マンヌロン酸のみからなるブロック、α−Ｌ−グルロン酸のみからなるブロック、両者が混合しているブロックの全てを有するアルギン酸（塩）を使用してもよいし、そのいずれか１種又は２種からなるアルギン酸（塩）を使用してもよい。
【００１４】
本発明において用いられるアルギン酸（塩）は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）法で測定した重量平均分子量が、１万〜１０万、より好ましくは１．５万〜６万、さらに好ましくは２万〜５万の低分子アルギン酸（塩）である。特に、本発明のＰＹＹ分泌促進剤を経口用液体製剤の形態で用いる場合には、製造面、及び飲用時の喉ごし、ぬるつき、嚥下のしやすさなどから、その粘度が低い方が好ましく、斯かる場合には、重量平均分子量が好ましくは１万〜６万、より好ましくは１万〜５万、さらに１万〜４万の低粘度のアルギン酸（塩）を用いるのが好ましい。
【００１５】
また、アルギン酸又はその塩としては、アルギン酸又はそのアルカリ金属塩が好ましく、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸カリウムがより好ましく、ＰＹＹ分泌促進効果、ナトリウム摂取量抑制の点から、アルギン酸カリウムが特に好ましい。
【００１６】
本発明のアルギン酸（塩）は、加圧加熱分解（特開平６−７０９３号公報）、または酵素分解（特開平２−３０３４６８号公報、特開平３−９４６７５号公報、特開平４−１６９１８９号公報、特開平６−２４５７６７号公報、特開平６−２１７７７４号公報）などの方法により製造することができる。すなわち、例えば、原料となる高分子量アルギン酸カリウムや高分子量アルギン酸を、加圧加熱分解、常圧加熱分解、酵素分解等によって所望の分子量に低分子化し、必要に応じて中和、脱水、凍結乾燥することにより得ることができる。分子量の調整は、例えば、加熱分解では、反応ｐＨ、反応温度、反応時間等を制御することにより行うことができる。
【００１７】
アルギン酸（塩）は、後記実施例に示すように、糖質、脂質、蛋白質等を同時摂取した後の血中ＰＹＹを上昇させるという優れたＰＹＹ分泌促進効果を有する。
従って、アルギン酸（塩）は、食後のＰＹＹを増加させ、膵外分泌を抑制させるなどの効果を発揮し得る、有用な食後ＰＹＹ分泌促進剤となり得、食後ＰＹＹ分泌促進剤を製造するために使用することができる。
【００１８】
本発明の食後ＰＹＹ分泌促進剤は、食品や医薬品等としてアルギン酸（塩）を単体でヒト及び動物に投与できる他、各種食品、医薬品、ペットフード等に配合して摂取することができる。食品としては、膵外分泌抑制、消化促進、腸運動等の改善のために用いられるものである旨の表示を付した美容食品、疾病者用食品、特定保健用食品等の食品に応用できる。医薬品として使用する場合は、例えば、錠剤、顆粒剤等の経口用固形製剤や、内服液剤、シロップ剤等の経口用液体製剤とすることができる。
【００１９】
尚、経口用固形製剤を調製する場合には、アルギン酸（塩）に、賦形剤、必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を加えた後、常法により錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等を製造することができる。また、経口用液体製剤を調製する場合は、緩衝剤、安定化剤、矯味剤等を加えて常法により内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等を製造することができる。
【００２０】
上記各製剤中のアルギン酸（塩）の含有量は、通常０．０１〜１００質量％、好ましくは０．１〜８０質量％とすることができるが、固形製剤とする場合には、１〜５０質量％とするのがより好ましく、２〜４０質量％とするのがさらに好ましく、液体製剤とする場合には、０．１〜２０質量％とするのがより好ましく、０．２〜１０質量％とするのがさらに好ましい。
【００２１】
本発明の食後ＰＹＹ分泌促進剤又は食品の投与量（有効摂取量）は、アルギン酸（塩）として、一日当り０．００１ｇ／ｋｇ体重以上とするのが好ましい。特に、０．０１〜１．０ｇ／ｋｇ体重とするのがより好ましい。
【実施例】
【００２２】
製造例（１）重量平均分子量１．８万程度のアルギン酸カリウムの調製
アルギン酸Ｋ（キミカアルギン  Ｋ−ＵＬＶ  Ｌｏｔ．６Ｋ１７００１：株式会社キミカ）を２％溶液に調整し、塩酸を加えてｐＨ４に調整し、１２０℃、２５分間加圧加熱分解した。その後、水酸化カリウムを加えてｐＨ７になるように中和した。そして、８０％エタノール溶液になるように、エタノールを加えて沈殿させた。その後、遠心分離（３０００ｒｐｍ，１０ｍｉｎ）により、沈殿物を回収後、乾燥して調製した。後述の方法にて重量平均分子量の計測を行ったところ、１７，９５１であった。
【００２３】
製造例（２）重量平均分子量５万程度のアルギン酸カリウムの調製
アルギン酸（ダックアシッドＡ  Ｌｏｔ．Ｘ−２７０２：株式会社紀文フードケミファ）を５％溶液に調整し、１００℃、４５分間加熱分解した。その後、水酸化カリウムを加えてｐＨ７になるように中和した。その後、８０％エタノール溶液になるように、エタノールを加えて沈殿させた。その後、遠心分離（３０００ｒｐｍ，１０ｍｉｎ）により、沈殿物を回収後、乾燥して調製した。後述の方法にて重量平均分子量の計測を行ったところ、５２，１６３であった。
【００２４】
製造例（３）重量平均分子量２．５万程度のアルギン酸カリウムの調製
アルギン酸（ダックアシッドＡ、Ｌｏｔ．Ｘ−２７０２：株式会社紀文フードケミファ）を５％溶液に調整し、１００℃、１２０分間加熱分解した。その後、水酸化カリウムを加えてｐＨ７になるように中和した。その後、８０％エタノール溶液になるように、エタノールを加えて沈殿させた。その後、遠心分離（３０００ｒｐｍ，１０ｍｉｎ）により、沈殿物を回収後、乾燥して調製した。後述の方法にて重量平均分子量の計測を行ったところ、２５，８０１であった。
【００２５】
製造例（４）重量平均分子量１．２万程度のアルギン酸カリウムの調製
アルギン酸（ダックアシッドＡ、Ｌｏｔ．Ｘ−２７０２：株式会社紀文フードケミファ）を５％溶液に調整し、１００℃、１２０分間加熱分解した。その後、水酸化カリウムを加えてｐＨ４に調整し、１００℃、５４０分間加熱分解をした。その後、水酸化カリウムを加えてｐＨ７になるように中和した。その後、８０％エタノール溶液になるように、エタノールを加えて沈殿させた。その後、遠心分離（３０００ｒｐｍ，１０ｍｉｎ）により、沈殿物を回収後、乾燥して調製した。後述の方法にて重量平均分子量の計測を行ったところ、１２，４７１であった。
【００２６】
アルギン酸の平均分子量の測定（重量平均分子量測定法）
アルギン酸の重量平均分子量は高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）にて測定する。アルギン酸（塩）を０．１ｇ取り、蒸留水で０．１％溶液になるように定容して得られたものをＨＰＬＣ用分析試料とする。
ＨＰＬＣ操作条件は以下の通りである。分子量算出用の検量線には、標準プルラン（昭和電工（株）製Ｓｈｏｄｅｘ  ＳＴＡＮＤＡＲＤ  Ｐ−８２）を用いる。ＨＰＬＣ用分析試料をＨＰＬＣに１００μＬ注入し、得られたクロマトチャートより、試料中のアルギン酸の重量平均分子量を算出する。
＜ＨＰＬＣ操作条件＞
カラム：（１）Ｓｕｐｅｒ  ＡＷ−Ｌ（ガードカラム）：東ソー（株）製
（２）ＴＳＫ−ＧＥＬ  Ｓｕｐｅｒ  ＡＷ４０００（ＧＰＣ用カラム）：排除限界分子量４×１０5ＰＥＯ／ＤＭＦ、長さ１５ｃｍ，内径６ｍｍ、東ソー（株）製
（３）ＴＳＫ−ＧＥＬ  Ｓｕｐｅｒ  ＡＷ２５００（ＧＰＣ用カラム）：排除限界分子量２×１０3ＰＥＯ／ＤＭＦ、長さ１５ｃｍ，内径６ｍｍ、東ソー（株）製
上記カラムはＡＷ−Ｌ，ＡＷ４０００，ＡＷ２５００の順で連結する。
カラム温度：４０℃
検出器：示差屈折計
移動相：０．２ｍｏｌ／Ｌ硝酸ナトリウム水溶液
流速：０．６ｍＬ／ｍｉｎ
注入量：１００μＬ
【００２７】
試験例  アルギン酸カリウムのＰＹＹ分泌促進効果
１−１  試験試料
アルギン酸カリウム（アルギン酸Ｋ）として、重量平均分子量４５，０００（ＳＫＡＴ−Ｋ−ＵＬＶ：株式会社キミカ）の試料を用いた。
【００２８】
１−２  被験者
健常男性９名とした。
【００２９】
１−３  試験飲料と負荷食
被験飲料は３５０ｍＬのミネラルウォーターにアルギン酸Ｋを３ｇ、または６ｇ含む飲料とし、対照飲料としてはアルギン酸Ｋを全く含まないミネラルウォーターとした。負荷食としては、市販のコーンクリームポタージュスープ２００ｇ（名古屋製酪(株)製）、無塩バター１９ｇ（雪印乳業(株)）、ラード１５ｇ（雪印(株)）を混合して調製した液体試験食（脂肪含有量４０ｇ、４３４ｋｃａｌ）を用いた。
【００３０】
１−４  食事負荷試験
試験は被験飲料あるいは対照飲料を負荷食と同時に摂取させ、１週間の回復期間を設けた交叉試験法で行った。採血は試験食摂取前と摂取１、２、３、及び４時間後に静脈から行い、血液はＥＤＴＡ−２Ｋ添加チューブに採取後、３，０００ｒｐｍにて１５分間遠心し、血漿を得た。得られた血漿からＨＵＭＡＮ  ＰＹＹ（Ｔｏｔａｌ）ＥＬＩＳＡ  キット（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  ｃｏ．製）を用いて血中ＰＹＹ濃度を測定した。
【００３１】
１−５  結果
試験食負荷後の血中ＰＹＹ濃度について、初期値との差（Δ値）を算出し、図１に示した。また、食後ＰＹＹ分泌量の曲線下面積（４時間）を図２に示した。
なお、群間の統計学的有意差については、分散分析による検定を行うとともに、各採血ポイントでの対応のあるｔ検定を実施した。いずれも危険率５％未満を有意差ありと判断した。
【００３２】
図１及び図２の結果から、重量平均分子量１万〜１０万のアルギン酸（塩）を含む飲料はアルギン酸（塩）を含まない対照飲料と比べて、食後ＰＹＹ濃度が有意に高く、アルギン酸（塩）に食後ＰＹＹ分泌促進効果があることがわかった。
【図１】
2011121885.tif 000002
【図２】
2011121885.tif 000003