(57)【要約】      （修正有）【課題】向精神性薬物により誘導される副作用を軽減し、その向精神性薬物の治療活性を高めるように、および／または、抗増殖活性を発揮するように選択された新規な化学的コンジュゲートの提供。【解決手段】第２の化学的成分に共有結合的に連結された第１の化学的成分を含む化学的コンジュゲートであって、前記第１の化学的成分は向精神性薬物残基であり、前記第２の化学的成分は、前記向精神性薬物がそれ自体で投与されたときに前記向精神性薬物により誘導される副作用を軽減するように、および／または、前記向精神性薬物の治療活性を強化するように、および／または、抗増殖活性を発揮させるように選択される有機酸残基であり、ただし前記向精神性薬物は抗精神病薬ではなく、前記有機酸は脂肪酸または脂質酸ではない化学的コンジュゲート。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
第２の化学的成分に共有結合的に連結された第１の化学的成分を含む化学的コンジュゲートであって、前記第１の化学的成分は向精神性薬物残基であり、前記第２の化学的成分は、前記向精神性薬物がそれ自体で投与されたときに前記向精神性薬物により誘導される副作用を軽減するように、および／または、前記向精神性薬物の治療活性を強化するように、および／または、抗増殖活性を発揮させるように選択される有機酸残基であり、ただし前記向精神性薬物は抗精神病薬ではなく、前記有機酸は脂肪酸または脂質酸ではない化学的コンジュゲート。
【請求項２】
前記第２の化学的成分は、ＧＡＢＡアゴニスト残基、鎮痛剤残基および抗増殖剤残基からなる群から選択される請求項１に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項３】
前記第２の化学的成分は、カルボン酸エステル結合、アルキルオキシカルボン酸エステル結合、アミド結合、イミン結合およびチオエステル結合からなる群から選択される結合を介して前記第１の化学的成分に共有結合的に連結される請求項１に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項４】
前記向精神性薬物は抗痙攣剤である請求項１に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項５】
前記向精神性薬物残基は、不安緩解薬残基、抗うつ剤残基、抗痙攣薬残基、抗パーキンソン症候群薬残基、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤残基、ＭＡＯ阻害剤残基、三環向精神性薬物残基、二環向精神性薬物残基、単環向精神性薬物残基およびベンゾジアゼピン残基からなる群から選択される請求項１に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項６】
前記向精神性薬物残基は抗うつ剤残基である請求項１に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項７】
前記抗うつ剤残基はノルトリプチリン残基またはその誘導体からなる群から選択される請求項６に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項８】
前記向精神性薬物残基は抗パーキンソン病薬残基である請求項１に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項９】
前記向精神性薬物残基は、フルオキセチン残基、フルボキサミン残基、デシプラミン残基、パロキセチン残基、セルトラリン残基、バルプロ酸残基およびフェニトイン残基以外である請求項１に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項１０】
前記抗増殖剤残基は、酪酸残基および４−フェニル酪酸残基からなる群から選択される請求項２に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項１１】
前記有機酸残基は一般式−Ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−を有し、
式中、Ｒは、１個〜２０個の炭素原子を有する置換または非置換の炭化水素残基、１個〜２０個の炭素原子と、酸素、窒素およびイオウからなる群から選択される少なくとも１つのヘテロ原子とを有する置換または非置換の炭化水素残基、ならびに、Ｒ１からなる群から選択され、
ただし、Ｒ１は一般式−Ｚ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−ＣＨＲ２−Ｒ３の残基であり、
式中、Ｚは、単結合、１個〜２０個の炭素原子を有する置換または非置換の炭化水素残基、ならびに、１個〜２０個の炭素原子と、酸素、窒素およびイオウからなる群から選択される少なくとも１つのヘテロ原子とを有する置換または非置換の炭化水素残基からなる群から選択される；
Ｒ２は、水素、および、１個〜１０個の炭素原子を有するアルキルからなる群から選択される；かつ、
Ｒ３は、水素、１個〜２０個の炭素原子を有する置換または非置換の炭化水素残基、ならびに、１個〜２０個の炭素原子と、酸素、窒素およびイオウからなる群から選択される少なくとも１つのヘテロ原子とを有する置換または非置換のアルキルからなる群から選択される請求項１に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項１２】
前記Ｒは、３個〜５個の炭素原子を有する置換または非置換のアルキルである請求項１１に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項１３】
前記有機酸残基は、酪酸残基、吉草酸残基、４−フェニル酪酸残基、４−アミノ酪酸残基、レチノイン酸残基、スリンダク酸残基、アセチルサリチル酸残基、イブプロフェン残基、マロン酸残基、コハク酸残基、グルタル酸残基、フマル酸残基およびフタル酸残基からなる群から選択される請求項１に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化学的コンジュゲートを有効成分として含み、かつ、医薬的に許容され得るキャリアを含む医薬組成物。
【請求項１５】
ＣＮＳの障害または疾患の治療において使用するために、包装物に包装され、かつ、包装物上または包装物内において活字で特定される請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
増殖性の障害または疾患の治療において使用するために、包装物に包装され、かつ、包装物上または包装物内において活字で特定される請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
化学療法剤との組み合わせで、および／または、化学感作が有益である医学的状態で、化学感作において使用するために、包装物に包装され、かつ、包装物上または包装物内において活字で特定される請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
ＣＮＳの障害または疾患および増殖性の障害または疾患からなる群から選択される医学的状態を治療または防止するための医薬の製造における、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化学的コンジュゲートの使用方法。
【請求項１９】
前記ＣＮＳの障害または疾患は、不安障害、解離型障害、人格障害、気分障害、情動障害、神経変性性の疾患または障害、痙攣性障害、境界性障害、および、精神的な疾患または障害からなる群から選択される請求項１８に記載の使用方法。
【請求項２０】
前記増殖性の障害または疾患は、脳腫瘍、脳転移物および末梢腫瘍からなる群から選択される請求項１８に記載の使用方法。
【請求項２１】
化学感化のための医薬の製造のための請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化学的コンジュゲートの使用方法であって、前記化学的コンジュゲートは化学療法剤との組み合わせで使用するためのものである使用方法。
【請求項２２】
有機酸および向精神性薬物を反応して、その結果、前記向精神性薬物の残基に共有結合的に連結された前記有機酸の残基を得るようにすることを含む請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化学的コンジュゲートを合成する方法。
【請求項２３】
前記有機酸は抗増殖剤であり、前記有機酸の前記残基はカルボン酸エステル結合を介して前記向精神性薬物の前記残基に共有結合的に連結され、前記方法は、前記反応の前に、前記有機酸をそのアシルクロリド誘導体に変換することをさらに含む請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記有機酸は抗増殖剤であり、前記有機酸の前記残基はチオエステル結合を介して前記向精神性薬物の前記残基に共有結合的に連結され、前記方法は、前記反応の前に、前記向精神性薬物をそのチオール誘導体に変換すること、および、前記有機酸をそのアシルクロリド誘導体に変換することをさらに含む請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記有機酸は抗増殖剤であり、前記有機酸の前記残基はアミド結合を介して前記向精神性薬物の前記残基に共有結合的に連結され、前記方法は、前記反応の前に、前記有機酸をそのアシルクロリド誘導体に変換すること、および、前記向精神性薬物をそのアミン誘導体に変換することをさらに含む請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
前記有機酸は抗増殖剤であり、前記有機酸の前記残基はアルキルオキシカルボン酸エステル結合を介して前記向精神性薬物の前記残基に共有結合的に連結され、前記方法は、前記反応の前に、前記向精神性薬物をそのクロロアルキルエステル誘導体に変換することをさらに含む請求項２２に記載の方法。
【請求項２７】
前記有機酸が、遊離アミノ基を含むＧＡＢＡアゴニストであり、前記方法が以下のことをさらに含む請求項２２に記載の方法：
前記アミノ基を前記反応の前に保護基で保護し、その結果、前記反応によって、前記向精神性薬物の前記残基に共有結合的に連結された前記有機酸のアミノ保護残基を得るようにすること；および
前記向精神性薬物の前記残基に共有結合的に連結された前記有機酸の前記アミノ保護残基を得た後、前記保護基を除くこと。
【請求項２８】
前記保護の後、および、前記反応の前に、前記有機酸をそのアシルイミダゾール誘導体に変換することをさらに含む請求項２３に記載の方法。
【請求項２９】
第２の化学的成分に共有結合的に連結された第１の化学的成分を含む化学的コンジュゲートであって、前記第１の化学的成分は向精神性薬物残基であり、前記第２の化学的成分は、前記向精神性薬物がそれ自体で投与されたときに前記向精神性薬物により誘導される副作用を軽減するように、および／または、前記向精神性薬物の活性を強化するように、および／または、抗増殖活性を発揮させるように選択される鎮痛剤残基である有機酸残基である化学的コンジュゲート。
【請求項３０】
前記第２の化学的成分は、カルボン酸エステル結合、アルキルオキシカルボン酸エステル結合、アミド結合、イミン結合およびチオエステル結合からなる群から選択される結合を介して前記第１の化学的成分に共有結合的に連結される請求項２９に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項３１】
前記向精神性薬物残基は抗増殖活性を有する請求項２９に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項３２】
前記向精神性薬物残基は化学感作活性を有する請求項２９に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項３３】
前記向精神性薬物残基は、フェノチアジン残基、フェノチアジン誘導体残基およびバルプロ酸残基からなる群から選択される請求項３１に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項３４】
前記向精神性薬物残基は抗精神病薬残基である請求項２９に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項３５】
前記向精神性薬物残基は、不安緩解薬残基、抗うつ剤残基、抗痙攣薬残基、抗パーキンソン症候群薬残基、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤残基、ＭＡＯ阻害剤残基、三環向精神性薬物残基、二環向精神性薬物残基、単環向精神性薬物残基、フェノチアジン残基、ベンゾジアゼピン残基およびブチロフェノン残基からなる群から選択される請求項２９に記載の化学的コンジュゲート。
【請求項３６】
請求項２９〜３５のいずれか一項に記載の化学的コンジュゲートを有効成分として含み、かつ、医薬的に許容され得るキャリアを含む医薬組成物。
【請求項３７】
ＣＮＳの障害または疾患の治療において使用するために、包装物に包装され、かつ、包装物上または包装物内において活字で特定される請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
増殖性の障害または疾患の治療において使用するために、包装物に包装され、かつ、包装物上または包装物内において活字で特定される請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
化学療法剤との組み合わせで、および／または、化学感作が有益である医学的状態で、化学感作において使用するために、包装物に包装され、かつ、包装物上または包装物内において活字で特定される請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
ＣＮＳの障害または疾患および増殖性の障害または疾患からなる群から選択される医学的状態を治療または防止するための医薬の製造における、請求項２９に記載の化学的コンジュゲートの使用方法。
【請求項４１】
前記向精神性の障害または疾患は、精神病的な障害または疾患、不安障害、解離型障害、人格障害、気分障害、情動障害、神経変性性の疾患または障害、痙攣性障害、境界性障害、および、精神的な疾患または障害からなる群から選択される請求項４０に記載の使用方法。
【請求項４２】
化学感化のための医薬の製造における請求項２９〜３５のいずれか一項に記載の化学的コンジュゲートの使用方法であって、前記化学的コンジュゲートは化学療法剤との組み合わせで使用するためのものである使用方法。
【請求項４３】
鎮痛剤および向精神性薬物を反応させて、その結果、前記向精神性薬物の残基に共有結合的に連結された前記鎮痛剤の残基を得るようにすることを含む請求項２９〜３５のいずれか一項に記載の化学的コンジュゲートを合成する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は向精神性薬物と有機酸との新規な化学的コンジュゲートおよびその使用に関連する。より具体的には、本発明は、向精神性薬物（これはまた、抗増殖活性および／または化学感作活性を有し得る）と、その向精神性薬物により誘導される副作用を軽減し、その向精神性薬物の治療活性を高めるように、および／または、抗増殖活性を発揮するように選択された有機酸との新規な化学的コンジュゲート、ならびに、向精神性および／または増殖性の障害および疾患の治療におけるその使用、ならびに、化学感作におけるその使用に関連する。本発明の新規な化学的コンジュゲートは、先行技術の向精神性薬物と比較した場合、より大きい治療活性と、さらに最小限に抑えられた有害な副作用とによって特徴づけられる。
【背景技術】
【０００２】
向精神性薬物は、ニューロンのシグナル伝達を調節することによって主に中枢神経系（ＣＮＳ）において作用する薬理学的作用剤である。従って、向精神性薬物は、ＣＮＳにおいて活性を発揮し、それによりＣＮＳ関連の障害を治療する薬理学的作用剤として知られており、本明細書中では、そのような薬理学的作用剤として示され、向精神性薬物には、例えば、抗精神病薬、抗うつ剤、抗痙攣剤、不安緩解剤、および、脳由来酵素の阻害剤などが含まれる。
【０００３】
残念なことに、向精神性薬物の投与には、典型的には、様々な有害な副作用（例えば、発作、頭痛、疲労、活動過多およびめまいなど）が伴い、これらはその使用をひどく制限している。そのような副作用の広範囲にわたる列挙が、例えば、「Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ」（Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．Ｉｎｃ．）に見出され得る。
【０００４】
神経遮断性薬物（これは、例えば、神経遮断性薬剤または神経遮断剤としても知られている）は、中枢神経系の精神病的な疾患および障害（例えば、統合失調症など）の治療において広く使用されている古典的な抗精神病薬である。神経遮断剤の抗精神病効力は、中枢神経のドーパミン受容体を中和／阻止するその能力に起因すると考えられる。神経遮断性薬物は定型抗精神病薬として知られており、これには、例えば、フェノチアジン系（脂肪族系（例えば、クロルプロマジン）、ピペリジン系（例えば、チオリダジン）およびピペラジン系（例えば、フルフェナジン）が含まれる）；ブチロフェノン系（例えば、ハロペリドール）；チオキサンテン系（例えば、フルペンチキソール）；オキソインドール系（例えば、モリンドン）；ジベンゾキサゼピン系（例えば、ロキサピン）およびジフェニルピペリジン系（例えば、ピモジド）が含まれる。
【０００５】
しかしながら、現在利用可能な神経遮断性薬物の投与には、様々な有害な副作用がしばしば伴う。神経遮断性薬物は、固縮、震え、運動緩慢（遅い動き）および発話緩慢（遅い思考）、ならびに、遅発性ジスキネシア、急性ジストニー反応および静座不能を含む錐体外路症状を誘導することがこの分野では広く知られている。実際、１年以上にわたる神経遮断性薬物の長期療法により治療されている患者の約５％が遅発性ジスキネシアの病状を発症する。
【０００６】
異なる種類の抗精神病薬には、非定型抗精神病剤が含まれる。非定型抗精神病薬は、ドーパミンＤ２受容体に加えて中枢神経のセロトニン２受容体（５−ＨＴ２）に結合することを含む受容体結合プロフィルを有する。非定型抗精神病薬には、例えば、クロザピン、オランザピンおよびリスペリドンが含まれ、非定型抗精神病薬は一般には、大きい抗セロトニン活性と、ドーパミンＤ２受容体に対する比較的低い親和性とによって特徴づけられる。いくつかの非定型抗精神病薬（例えば、クロザピンなど）は、アドレナリン作動性受容体、コリン作動性受容体およびヒスタミン作動性受容体をさらに中和することが知られている。
【０００７】
神経遮断剤とは異なり、非定型抗精神病剤は最小限の錐体外路症状を引き起こし、従って、遅発性ジスキネシア、静座不能または急性ジストニー反応をまれにしか引き起こさない。しかしながら、その投与は他の副作用（例えば、体重の増大、気分障害、性的機能不全、鎮静、起立性低血圧、唾液分泌亢進、低下した発作閾値、および、特に、無顆粒球症など）を伴う。
【０００８】
定型抗精神病薬および非定型抗精神病薬の両方（これらはまた、本明細書中では抗精神病剤として示される）に関連づけられる重篤な副作用がそれらの使用に対する大きな制限となっており、広範囲の努力が、これらの副作用を有しない抗精神病薬を開発するために行われている。
【０００９】
米国特許第６１９７７６４号は、クロザピン（非定型抗精神病薬）と、１２個〜２６個の炭素原子（好ましくは、１６個〜２２個の炭素原子）を有する脂肪酸との化学的コンジュゲートを開示する。このコンジュゲートは、抗精神病治療効果をもたらすためのそのより低い用量の投与を可能にし、かつ、それにより、重大な副作用を発症する可能性を低下させる長期間にわたる治療的有効性によって特徴づけられる。従って、このコンジュゲートは、コンジュゲート化されていない非定型抗精神病薬よりも有益かつ好都合である。しかしながら、米国特許第６１９７７６４号は、他の抗精神病薬剤を含むそのような好都合なコンジュゲートを開示しておらず、また、さらに、長鎖脂肪酸を含むコンジュゲートに限定されている。他の抗精神病剤（主として、神経遮断剤）と長鎖脂肪酸とのエステルコンジュゲートがこの分野では広く知られていることを述べておかなければならない。それにもかかわらず、そのようなコンジュゲートは、脳内への浸透を容易にすること、ならびに、体内における薬物の存続時間を延ばすことを主に目指しており、副作用を積極的に軽減または防止するためには設計されていない。
【００１０】
米国特許第３９６６９３０号は、顕著な神経遮断特性と、比較的低い程度の望ましくない副作用とを有するフルオロ置換されたフェノチアジン誘導体を開示する。しかしながら、米国特許第３９６６９３０号の特許請求されているフルオロ置換されたフェノチアジン誘導体のいくつかは、１個〜１７個の炭素原子をその鎖に有するアシル基を含むが、実験データは、シュウ酸またはマレイン酸（すなわち、２個の炭素原子および４個の炭素原子をそれぞれ含む有機酸）のいずれかに由来するアシル基のみを含むフェノチアジン誘導体に限定されている。開示されたフェノチアジン誘導体は、他の知られている神経遮断剤と比較した場合、より長い治療効果を有しており、従って、比較的低い程度の誘導された副作用によって特徴づけられる。これらの化合物の長くなった治療効果は、主としてフェノチアジン置換基（例えば、フルオロおよびトリフルオロメチル）に起因すると考えられ、その一方で、有機酸とのそのそれらのコンジュゲート化は、それらの医薬配合を容易にすることを主に目指している。
【００１１】
向精神性薬物（主として、神経遮断剤）による治療の結果としての錐体外路症状の発症に関する近年の研究では、脳におけるγ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）系の低下した活性がさらに伴う、ドーパミン作動性受容体のＤ１およびＤ２における不均衡を伴う機構が示唆されている。
【００１２】
ＧＡＢＡは脳における重要な阻害性の神経伝達物質であり、これは、精神安定化活性、不安緩解活性および筋肉弛緩活性に影響を及ぼすことが知られており、また、中枢神経系のいくつかの障害および疾患に関連づけられることがさらに知られている。錐体外路症状に関する近年の研究では、ＧＡＢＡアゴニストが、神経遮断剤により誘導される副作用を軽減するためにさらに使用することができ、従って、さらなる治療的可能性を有し得ることが示唆される。
【００１３】
以前の研究では、ＧＡＢＡアゴニストが、脳の他の神経伝達物質を、特に、ドーパミン系を妨げ得ることが既に示唆されている。従って、ＧＡＢＡアゴニストはドーパミン受容体の感受性の神経遮断剤誘導による増大を中和することができ、従って、神経遮断剤により誘導されるジスキネシアを改善することができることが見出されていた［１］。さらに、いくつかの知られている直接的なＧＡＢＡアゴニスト（例えば、ムスシモールおよびＳＬ７６００２）は、低用量のアゴニストが常同的なカタレプシー行動を阻害する一方で、高用量のアゴニストがハロペリドール誘導のカタレプシーを強めるように、ハロペリドール誘導のカタレプシーに対する二相性作用を引き起こすことが見出されていた。他の研究では、ＧＡＢＡアゴニストが抗痙攣活性をさらに誘導することが報告されている［２］。
【００１４】
ＧＡＢＡアゴニストの使用は、ＧＡＢＡアゴニストが親水性の官能基（例えば、遊離カルボン酸基および遊離アミノ基）を含み、従って、血液脳関門（ＢＢＢ）を容易に越えないので制限される。しかしながら、脂肪アミノ酸またはペプチドとのそのような化合物の化学的コンジュゲート化は血液脳関門（ＢＢＢ）のその通過を実質的に容易にし得ることが見出されていた［３］。
【００１５】
実際、米国特許第３９４７５７９号、同第３９７８２１６号、同第４０８４０００号、同第４１２９６５２号および同第４１３８４８４号は、血液脳関門を越えることが知られているＧＡＢＡ様化合物（ＧＡＢＡに薬理学的に関連づけられる化合物）、例えば、γ−ヒドロキシブチロラクトン、γ−ヒドロキシブチラート、アミノオキシ酢酸、５−エチル−５−フェニル−２−ピロリドン、１−ヒドロキシ−３−アミノ−２−ピロリドンおよびβ−（４−クロロフェニル）−γ−アミノ酪酸などは、神経遮断薬と同時投与されたとき、若干低い用量の神経遮断薬の使用により、これらのＧＡＢＡ様化合物を投与することなく、より高用量の神経遮断薬を用いて得られるのと同じ抗精神病効果が得られ、かつ、同時に、錐体外路副作用がいくらか軽減されることを可能にすることを開示する。ＧＡＢＡ様化合物は、同時投与された抗精神病薬の抗精神病活性を強めると言われるので、より低い用量の神経遮断薬が使用されるが、同じ抗精神病効果が得られると言われる。
【００１６】
近年の研究は、いくつかの向精神性薬物（特に、フェノチアジン系）がさらに、強力な抗増殖活性を、種々の細胞株において、例えば、ニューロン細胞、グリア細胞、メラノーマ細胞、乳細胞、結腸細胞、前立腺細胞、リンパ腫および白血病などにおいて、同様にまた、初代ヒト角膜実質細胞において発揮することを明らかにした［４］。「新しいハーフマスタード型フェノチアジン系」（これは、カルモジュリンに対する特異的な阻害作用を発揮することが知られている）が、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＮＣＩ）によって調べられた。このフェノチアジン系の抗増殖活性が、６０の異なるヒトガン細胞株のインビトロスクリーニングにおいて観測された。いくつかのフェノチジン系はさらに、動物モデルにおいて腫瘍成長の著しい阻害を示した。これらの発見は、一般的な集団と比較した場合、神経遮断剤の薬物療法での統合失調症患者における低いガン発生頻度と一致している。
【００１７】
国際特許出願公開ＷＯ０２／４３６５２（これは、全体が本明細書中に示されるかのように参考として組み込まれる）は増殖性疾患の治療における様々な定型向精神性薬剤および非定型向精神性薬剤の使用を教示する。具体的には、国際特許出願公開ＷＯ０２／４３６５２は、環状の向精神性薬剤（例えば、三環、二環および単環の薬剤）が、神経膠腫、メラノーマ、神経芽細胞腫、結腸ガン、肺ガンおよび前立腺ガンをはじめとする数多くの腫瘍の治療、ならびに、多剤耐性（ＭＤＲ）ガン細胞（例えば、Ｂ１６メラノーマ細胞（これはドキソルビシンおよびコルヒチンに対して抵抗性であることが知られている）および神経芽細胞腫（ＳＨ−ＳＹ５Ｔ、これは５−ＦＵおよびドキソルビシンに対して抵抗性である）など）の治療において効果的な薬剤として役立ち得ることを教示する。そのうえ、ＭＤＲガンの治療における向精神性薬剤の活性を教示することのほかに、国際特許出願公開ＷＯ０２／４３６５２はさらに、化学感作剤としての、すなわち、ガン細胞（特に、ＭＤＲガン細胞）を細胞毒性薬物に対して効果的に感受性にする化合物としての向精神性薬物の使用を教示する。
【００１８】
しかしながら、国際特許出願公開ＷＯ０２／４３６５２の教示は、特に、ＭＤＲガンの治療における向精神性薬剤の抗増殖活性および化学感作活性に関しては、非常に好都合であるが、このような向精神性薬剤の使用は、それにより誘導される有害な副作用によって非常に制限される。
【００１９】
バルプロ酸は、抗痙攣活性を有し、従って、現在、てんかんのための承認薬物として知られ、かつ使用されている向精神性薬物である。近年、バルプロ酸が抗増殖作用をいくつかの細胞株に対してインビトロおよびインビボの両方で発揮することが見出され、また、予備的な報告では、ヒトの血液学的腫瘍および充実性腫瘍を治療するためのその使用が提案されている。様々な研究により、バルプロ酸の抗増殖活性はそのヒストンデアセチラーゼ阻害（ＨＤＡＣＩ）活性に由来することが示唆されている［１６〜２２］。しかしながら、さらなる研究では、抗てんかん薬（例えば、抗痙攣剤）と抗ガン活性との間での一般的な関係性が示される。
【００２０】
酪酸（ＢＡ）および４−フェニル酪酸（ＰＢＡ）（ＧＡＢＡはそれらの誘導体である）もまた、広範囲の様々な新生物細胞における分化剤および抗増殖剤としてインビトロで作用することが知られている［５］。酪酸および４−フェニル酪酸はともに、多形質発現性の薬剤として知られており、それらの最も注目すべき活性な１つが、クロマチンの弛緩および転写活性の変化をもたらす、核ヒストンにおけるアセチル化レベルの可逆的な増大である［６］。この作用機構は酪酸および４−フェニル酪酸の抗ガン活性にさらに関連づけられることが主張されている。
【００２１】
従って、先行技術では、中枢神経系の障害および疾患の治療、ならびに、増殖性の障害および疾患（例えば、悪性および良性の腫瘍ならびにＭＤＲガンなど）の治療における向精神性薬物の使用、また、抗増殖剤および化学感作剤としての向精神性薬物の使用が教示される。先行技術ではさらに、神経遮断剤により誘導される副作用を軽減するための潜在的な薬剤としてのＧＡＢＡアゴニスト（ＧＡＢＡそのものを含む）の使用、ならびに、抗増殖剤としての酪酸およびその誘導体の使用が教示される。
【００２２】
それにもかかわらず、依然として、抗増殖性薬物および化学感作剤としてもまた役立ち得る、改善された治療活性およびさらに軽減された副作用によって特徴づけられる向精神性薬物が必要であることが広く認められており、従って、そのような向精神性薬物を有することは非常に好都合である。
【発明の概要】
【００２３】
本発明によれば、（ｉ）向精神性薬物と、その向精神性薬物により誘導される副作用を軽減するために、および／または、その向精神性薬物の治療活性を強化するために、および／または、抗増殖活性を発揮させるために選択された有機酸との化学的コンジュゲート；（ｉｉ）向精神性薬物と、ＧＡＢＡアゴニスト（ＧＡＢＡそのものを含む）との化学的コンジュゲート；（ｉｉｉ）向精神性薬物と抗増殖剤との化学的コンジュゲート；（ｉｖ）向精神性薬物と鎮痛剤との化学的コンジュゲート；（ｖ）それらを合成するための方法；（ｖｉ）従来の向精神性薬物に特徴的な副作用を軽減し、および／または、その向精神性効力を高めながら、向精神性の障害および疾患を治療および／または防止することにおけるその使用；（ｖｉｉ）増殖性の障害および疾患を治療および／または防止することにおけるその使用；および（ｖｉｉｉ）化学感作性薬剤としてのその使用を提供する。
【００２４】
向精神性薬物のそのような化学的コンジュゲートは、最小限に抑えられた有害な副作用、強化された向精神的治療活性および抗増殖活性、ならびに、化学感作活性によって特徴づけられることが本明細書中に示される。そのような化学的コンジュゲートは、予想外にも、その治療効果および副作用の最小化の両方に関してその母体化合物と比較した場合、相乗作用をもたらすことがさらに本明細書中に示される。
【００２５】
従って、本発明の１つの局面によれば、第２の化学的成分に共有結合的に連結された第１の化学的成分を含む化学的コンジュゲートが提供される。この場合、第１の化学的成分は向精神性薬物残基であり、さらに、第２の化学的成分は、その向精神性薬物がそれ自体で投与されたときに向精神性薬物により誘導される副作用を軽減するように、および／または、向精神性薬物の治療活性を強化するように、および／または、抗増殖活性を発揮させるように選択される有機酸残基である。
【００２６】
本発明の１つの実施形態において、向精神性薬物残基には、抗精神病薬を除いて向精神性薬物の任意の残基が含まれる。
【００２７】
本発明の別の実施形態において、第２の化学的成分は鎮痛剤残基であり、かつ、向精神性薬物は本明細書中下記で定義される通りである。
【００２８】
本発明の別の局面によれば、本発明の化学的コンジュゲートを有効成分として含み、かつ、医薬的に許容され得るキャリアを含む医薬組成物が提供される。
【００２９】
本発明の医薬組成物は好ましくは、化学療法剤との組合せで、および／または、化学感作が有益である医学的状態で、中枢神経系（ＣＮＳ）の障害または疾患の治療において使用するために、および／または、増殖性の障害または疾患の治療において使用するために、および／または、化学感作において使用するために、包装物に包装され、かつ、包装物上または包装物内において活字で特定される。
【００３０】
本発明のさらに別の局面によれば、対象におけるＣＮＳの障害または疾患を治療または防止する方法が提供され、この場合、この方法は、対象に治療有効量の本発明の化学的コンジュゲートを投与することを含む。
【００３１】
下記に記載される本発明の好ましい実施形態におけるさらなる特徴によれば、ＣＮＳの障害または疾患は、精神病的な障害または疾患、不安障害、解離型障害、人格障害、気分障害、情動障害、神経変性性の疾患または障害、痙攣性障害、境界性障害、および、精神的な疾患または障害からなる群から選択される。
【００３２】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、ＣＮＳの障害または疾患は、統合失調症、偏執症、児童精神病、ハンチングトン病、ジル・ド・ラ・トゥレット症候群、うつ病、躁うつ病、不安、パーキンソン病、アルツハイマー病およびてんかんからなる群から選択される。
【００３３】
本発明のさらに別の局面によれば、対象における増殖性の障害または疾患を治療または防止する方法が提供され、この場合、この方法は、対象に治療有効量の本発明の化学的コンジュゲートを投与することを含む。
【００３４】
下記に記載される本発明の好ましい実施形態におけるさらなる特徴によれば、増殖性の障害または疾患は、脳腫瘍、脳転移物および末梢腫瘍からなる群から選択される。
【００３５】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、増殖性障害はガン（例えば、多剤耐性ガンなど）である。
【００３６】
本発明のさらなる局面によれば、化学感作の方法が提供される。この方法は、その必要性のある対象に化学療法有効量の１つまたは複数の化学療法剤および化学感作有効量の本発明の化学的コンジュゲートを投与することを含む。
【００３７】
下記に記載される本発明の好ましい実施形態におけるさらなる特徴によれば、対象はガン（例えば、多剤耐性ガンなど）を有する。
【００３８】
下記に記載される本発明の好ましい実施形態におけるさらなる特徴によれば、第２の化学的成分は、カルボン酸エステル結合、アルキルオキシカルボン酸エステル結合、アミド結合、イミン結合およびチオエステル結合からなる群から選択される結合を介して第１の化学的成分に共有結合的に連結される。
【００３９】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、第２の化学的成分は、抗増殖剤残基、鎮痛剤残基およびＧＡＢＡアゴニスト残基からなる群から選択される。
【００４０】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、向精神性薬物は抗増殖活性を有する。
【００４１】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、向精神性薬物は化学感作活性を有する。
【００４２】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、向精神性薬物残基は、フェノチアジン残基、フェノチアジン誘導体残基およびバルプロ酸残基からなる群から選択される。
【００４３】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、向精神性薬物残基は抗精神病薬残基である。
【００４４】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、抗精神病薬残基は、定型抗精神病薬残基および非定型抗精神病薬残基からなる群から選択される。
【００４５】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、向精神性薬物残基は抗うつ剤残基であり、例えば、フルオキセチン残基およびノルトリプチリン残基などである。
【００４６】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、向精神性薬物残基は、不安緩解薬残基、抗うつ剤残基、抗痙攣薬残基、抗パーキンソン症候群薬残基、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤残基、ＭＡＯ阻害剤残基、三環向精神性薬物残基、二環向精神性薬物残基、単環向精神性薬物残基、フェノチアジン系残基、ベンゾジアゼピン系残基およびブチロフェノン系残基からなる群から選択される。
【００４７】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、向精神性薬物残基は、クロルプロマジン残基、ペルフェナジン残基、フルフェナジン残基、ズクロペンチキソール残基、チオプロパザート残基、ハロペリドール残基、ベンペリドール残基、ブロムペリドール残基、ドロペリドール残基、スピペロン残基、ピモジド残基、ピペラセタジン残基、アミルスルプリド残基、スルピリド残基、クロチアピン残基、ジプラシドン残基、レモキシプリド残基、スルトプリド残基、アリザプリド残基、ネモナプリド残基、クロザピン残基、オランザピン残基、ジプラシドン残基、セルチンドール残基、クエチアピン残基、フルオキセチン残基、フルボキサミン残基、デシプラミン残基、パロキセチン残基、セルトラリン残基、バルプロ酸残基、テマザゼパム残基、フルテマゼパム残基、ドキセファゼパム残基、オキサゼパム残基、ロラゼパム残基、ロルメタゼパム残基、シノラゼパム残基、フルタゾラム残基、ロピラゼパム残基、メプロバマート残基、カリソプロドール残基、アセトフェナジン残基、カルフェナジン残基、ジキシラジン残基、プリシアジン残基、ピポチアジン残基、ホモフェナジン残基、ペリメタジン残基、ペルチペンチル残基、フルペンチキソール残基、ピフルチキソール残基、テフルチキソール残基、オキシペテピン残基、トリフルペリドール残基、ペンフルリドール残基、メクロベミド残基、ノルクロミプラミン残基、アモキサピン残基、ノルトリプチリン残基、プロトリプチリン残基、レボキセチン残基、タクリン残基、ラサギリン残基、アマンチジン残基、ズロキセチン残基、フェノバルビタール残基およびフェニトイン残基からなる群から選択される。
【００４８】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、ＧＡＢＡアゴニスト残基は、（±）−バクロフェン残基、γ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）残基、γ−ヒドロキシ酪酸残基、アミノオキシ酢酸残基、β−（４−クロロフェニル）−γ−アミノ酪酸残基、イソニペコチン酸残基、ピペリジン−４−スルホン酸残基、３−アミノプロピル亜ホスホン酸残基、３−アミノプロピルホスフィン酸残基、３−（アミノプロピル）メチルホスフィン酸残基、１−（アミノメチル）シクロヘキサン酢酸残基（ガバペンチン）、４−アミノ−５−ヘキセン酸（γ−ビニルＧＡＢＡ、ビガバトリン）残基、および３−（２−イミダゾリル）−４−アミノブタン酸残基からなる群から選択される。
【００４９】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、抗増殖剤残基は、酪酸残基および４−フェニル酪酸残基からなる群から選択される。
【００５０】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、鎮痛剤残基は非ステロイド系抗炎症薬残基である。
【００５１】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、有機酸残基は一般式−Ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−を有し、この場合、Ｒは、１個〜２０個の炭素原子を有する置換または非置換の炭化水素残基、１個〜２０個の炭素原子と、酸素、窒素およびイオウからなる群から選択される少なくとも１つのヘテロ原子とを有する置換または非置換の炭化水素残基、ならびに、Ｒ１からなる群から選択され、ただし、Ｒ１は一般式−Ｚ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−ＣＨＲ２−Ｒ３の残基であり、式中、Ｚは、単結合、１個〜２０個の炭素原子を有する置換または非置換の炭化水素残基、ならびに、１個〜２０個の炭素原子と、酸素、窒素およびイオウからなる群から選択される少なくとも１つのヘテロ原子とを有する置換または非置換の炭化水素残基からなる群から選択される；Ｒ２は、水素、および、１個〜１０個の炭素原子を有するアルキルからなる群から選択される；かつ、Ｒ３は、水素、１個〜２０個の炭素原子を有する置換または非置換の炭化水素残基、ならびに、１個〜２０個の炭素原子と、酸素、窒素およびイオウからなる群から選択される少なくとも１つのヘテロ原子とを有する置換または非置換のアルキルからなる群から選択される。
【００５２】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、Ｒは、３個〜５個の炭素原子を有する置換または非置換のアルキルである。
【００５３】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、有機酸残基は、酪酸残基、吉草酸残基、４−フェニル酪酸残基、４−アミノ酪酸残基、レチノイン酸残基、スリンダク酸残基、アセチルサリチル酸残基、イブプロフェン残基、マロン酸残基、コハク酸残基、グルタル酸残基、フマル酸残基およびフタル酸残基からなる群から選択される。
【００５４】
本発明のさらなる局面によれば、本発明の化学的コンジュゲートを合成する方法が提供される。この方法は、有機酸および向精神性薬物を反応して、その結果、向精神性薬物の残基に共有結合的に連結された有機酸の残基を得るようにすることを含む。
【００５５】
下記に記載される本発明の好ましい実施形態におけるさらなる特徴によれば、有機酸の残基はカルボン酸エステル結合を介して向精神性薬物の残基に共有結合的に連結され、この場合、本発明の方法はさらに、反応の前に、有機酸をそのアシルクロリド誘導体に変換することを含む。
【００５６】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、有機酸の残基はチオエステル結合を介して向精神性薬物の残基に共有結合的に連結され、この場合、本発明の方法はさらに、反応の前に、有機酸をそのアシルクロリド誘導体に変換すること、および、向精神性薬物をそのチオール誘導体に変換することを含む。
【００５７】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、有機酸の残基はアミド結合を介して向精神性薬物の残基に共有結合的に連結され、この場合、本発明の方法はさらに、反応の前に、有機酸をそのアシルクロリド誘導体に変換すること、および、向精神性薬物をそのアミン誘導体に変換することを含む。
【００５８】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、有機酸の残基はアルキルオキシカルボン酸エステル結合を介して向精神性薬物の残基に共有結合的に連結され、この場合、本発明の方法はさらに、反応の前に、向精神性薬物をそのクロロアルキルエステル誘導体に変換することを含む。
【００５９】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、有機酸の残基はイミン結合を介して向精神性薬物の残基に共有結合的に連結され、この場合、本発明の方法はさらに、反応の前に、有機酸をそのアルデヒド誘導体に変換すること、および、向精神性薬物をそのアミン誘導体に変換することを含む。この方法で使用される有機酸および向精神性薬物は、好ましくは、本明細書中上記で記載された本発明の有機酸残基および向精神性薬物残基に由来する。
【００６０】
有機酸が、遊離アミノ基を含むＧＡＢＡアゴニストである場合、本発明の方法はさらに、遊離アミノ基を反応の前に保護基で保護し、その結果、その反応によって、向精神性薬物の残基に共有結合的に連結された有機酸のアミノ保護残基を得るようにすること、および、向精神性薬物の残基に共有結合的に連結された有機酸のアミノ保護残基を得た後、保護基を除くことを含む。好ましくは、本発明の方法はさらに、保護の後、および、反応の前に、有機酸をそのアシルイミダゾール誘導体に変換することを含む。
【００６１】
本発明は、最小限に抑えられた有害な副作用を誘導し、かつ、より大きい治療活性を発揮する、向精神性薬物の新規かつ強力な化学的コンジュゲートを、向精神性および／または増殖性の障害および疾患を治療および防止するために、また、化学感作剤として使用するために提供することによって、現在知られている形態の欠点に対処することに成功している。
【図面の簡単な説明】
【００６２】
本明細書では本発明を単に例示し図面を参照して説明する。特に詳細に図面を参照して、示されている詳細が例示として本発明の好ましい実施態様を例示考察することだけを目的としており、本発明の原理や概念の側面の最も有用でかつ容易に理解される説明であると考えられるものを提供するために提示していることを強調するものである。この点について、本発明を基本的に理解するのに必要である以上に詳細に本発明の構造の詳細は示さないが、図面について行う説明によって本発明のいくつもの形態を実施する方法は当業者には明らかになるであろう。
【図１】図１は、５ｍｇ／ｋｇ体重のペルフェナジンおよび等モル用量のその化学的コンジュゲートが腹腔内注射されたラットにおける総カタレプシー（図１ａ）およびプロラクチン血中レベル（図１ｂ）に対するペルフェナジンおよび本発明によるその化学的コンジュゲート（ＡＮ１６７、ＡＮ１６８およびＡＮ１３０）の影響を明らかにする、構造活性相関（ＳＡＲ）研究により得られた棒グラフおよびプロットを示す。
【図２】図２は、５ｍｇ／ｋｇのペルフェナジンおよび等モル用量の本発明によるその化学的コンジュゲートによる治療の後でのラットにおける総カタレプシーを明らかにする棒グラフである（ＳＡＲ研究）。
【図３ａ】図３ａは、ラットにおける総カタレプシーに対するペルフェナジン（５ｍｇ／Ｋｇ）、フルフェナジン（７．５ｍｇ／Ｋｇ）および本発明によるそれらの化学的コンジュゲート（ＡＮ１６７、ＡＮ１６８、ＡＮ１８０およびＡＮ１８７）の影響を明らかにする棒グラフおよびプロットを示す。
【図３ｂ】図３ｂは、ラットにおけるプロラクチン血中レベルに対する、ペルフェナジン、フルフェナジンおよびそれらのＧＡＢＡ化学的コンジュゲート（ＡＮ１６８およびＡＮ１８７）の影響を明らかにする棒グラフおよびプロットを示す。
【図４】図４は、ペルフェナジンおよび本発明によるその化学的コンジュゲート（図４ａ）、ならびに、フルフェナジンおよび本発明によるその化学的コンジュゲート（図４ｂ）により誘導された、ラットにおけるカタレプシーの経時変化を明らかにする比較プロットである。
【図５】図５ａおよび図５ｂは、ラットにおけるカタレプシーに対する、ペルフェナジンとＧＡＢＡとの本発明の化学的コンジュゲート（化合物ＡＮ１６８）、および、等モル用量の、ペルフェナジンとＧＡＢＡとの混合物の影響を明らかにする棒グラフおよび比較プロットを示す。
【図６】図６は、ラットにおける総カタレプシーに対する本発明の化学的コンジュゲート（ＡＮ１６７およびＡＮ１６８）の影響を明らかにする棒グラフである（４つの独立した実験の平均）。
【図７ａ】図７ａは、２分以内に目標に到達する動物の割合に関して測定された、マウスにおけるカタレプシーに対する、化学的コンジュゲートＡＮ１６８、等モル用量のペルフェナジン、および、等モル用量の、ペルフェナジンとＧＡＢＡとの混合物の影響を明らかにする棒グラフを示す。
【図７ｂ】図７ｂは、動物が目標に到達するために要した時間に関して測定された、マウスにおけるカタレプシーに対する、化学的コンジュゲートＡＮ１６８、等モル用量のペルフェナジン、および、等モル用量の、ペルフェナジンとＧＡＢＡとの混合物の影響を明らかにする棒グラフを示す。
【図８】図８は、「ピアノ」試験によって測定されたときの、ラットにおけるカタレプシーに対する、経口投与されたペルフェナジンおよびその化学的コンジュゲートＡＮ１６８の影響を明らかにする比較プロットを示す（図８ｂは、図８ａに示される実験の３ヶ月後に行われた実験で得られたデータを示す）。
【図９】図９は、「ピアノ」試験によって測定されたときの、経口投与されたペルフェナジンおよびその化学的コンジュゲートＡＮ１６８によって様々な濃度でラットにおいて誘導された総カタレプシーを明らかにする棒グラフを示す（図９ｂは、図９ａに示される実験の３ヶ月後に行われた実験で得られたデータを示す）。
【図１０ａ】図１０ａは、２４時間の期間中に「ピアノ」試験によって測定されたときの、ラットにおけるカタレプシーの経時変化に対する、様々な濃度の経口投与されたペルフェナジンおよびその化学的コンジュゲートＡＮ１６８の影響を明らかにする比較プロットおよび棒グラフである。
【図１０ｂ】図１０ｂは、２４時間の期間中に「ピアノ」試験によって測定されたときの、ラットにおける総カタレプシーに対する、様々な濃度の経口投与されたペルフェナジンおよびその化学的コンジュゲートＡＮ１６８の影響を明らかにする比較プロットおよび棒グラフである。
【図１１】図１１は、「壁」試験よって測定されたときの、ラットにおける総カタレプシーに対する、様々な濃度で経口投与されたペルフェナジンおよびＡＮ１６８の影響を明らかにする棒グラフである。
【図１２】図１２は、ラットにおけるプロラクチン血中レベルに対する経口投与されたペルフェナジンおよびＡＮ１６８の影響を明らかにする比較プロットを示す。
【図１３】図１３は、Ｂ１６マウスメラノーマ細胞の増殖に対するペルフェナジンおよび本発明のその化学的コンジュゲート（ＡＮ１３０、ＡＮ１６７およびＡＮ１６８）の影響を明らかにする比較プロットを示す。
【図１４】図１４は、Ｃ６ラット神経膠腫細胞の生存性に対する、増大する濃度のペルフェナジン、ＡＮ１６８、ＧＡＢＡ、ビンクリスチンおよびシスプラチンの影響を明らかにする比較プロットを示す。
【図１５】図１５は、ＪｕｒｋａｔＴリンパ腫細胞の生存性に対する、増大する濃度のペルフェナジン、ＡＮ１６８およびデキサメタゾンの影響を明らかにする比較プロットを示す。
【図１６】図１６は、３０μＭのビンクリスチンにより治療されたＣ６ラット神経膠腫細胞の生存性に対する様々な濃度のペルフェナジンおよびＡＮ１６８の影響を明らかにする棒グラフである。
【図１７】図１７は、Ｃ６ラット神経膠腫細胞の生存性に対するシスプラチン（５μＭ〜５０μＭ）およびシスプラチン（５μＭ〜５０μＭ）とＡＮ１６８（１０μＭおよび１５μＭ）との組合せの影響を明らかにする棒グラフである。
【図１８】図１８は、Ｃ６ラット神経膠腫細胞におけるＤＮＡ断片化に対する、ペルフェナジン、ＡＮ１６８およびシスプラチンの影響を明らかにする棒グラフである。
【図１９】図１９は、正常な脳細胞に対するペルフェナジンおよびその化学的コンジュゲート（ＡＮ１３０、ＡＮ１６７およびＡＮ１６８）の影響（ＩＣ５０値）を明らかにする棒グラフである。
【図２０】図２０は、ラット筋細胞の生存性に対する等モル用量のペルフェナジンおよびＡＮ１６８の影響を明らかにする棒グラフである。
【図２１】図２１は、ペルフェナジン（ｐｅｒ）および本発明の化合物ＡＮ１６７が腹腔内注射されたラットにおける死亡数の経時変化を明らかにする比較プロットを示す。
【図２２】図２２は、各試験群において２時間の期間中に記録されたよじ登り試みの総数による、ラットにおけるＤ−アンフェタミン誘導のよじ登り行動に対する様々な濃度のペルフェナジンおよび／またはＧＡＢＡならびに等モル用量の化学的コンジュゲートＡＮ−１６８の腹腔内投与の影響を明らかにする棒グラフである（各点は平均＋／−ＳＥＭおよび治療動物数を表す）。
【図２３】図２３は、２時間の期間中でのラットにおけるＤ−アンフェタミン誘導のよじ登り行動に対する様々な濃度のペルフェナジンおよび／またはＧＡＢＡならびに等モル用量の化学的コンジュゲートＡＮ−１６８の腹腔内投与の影響の経時変化を明らかにする比較プロットを示す。
【図２４】図２４は、各試験群において２時間の期間中に記録された、ラットにおけるＤ−アンフェタミン誘導の頭部運動に対する様々な濃度のペルフェナジンおよび等モル用量の化学的コンジュゲートＡＮ−１６８の腹腔内投与の影響を明らかにする棒グラフである（各点は平均＋／−ＳＥＭおよび治療動物数を表す）。
【図２５】図２５は、２時間の期間中でのラットにおけるＤ−アンフェタミン誘導の頭部運動に対する様々な濃度のペルフェナジンおよび等モル用量の化学的コンジュゲートＡＮ−１６８の腹腔内投与の影響の経時変化を明らかにする比較プロットを示す。
【図２６】図２６は、２時間の期間中に各試験群において記録されたよじ登り試みの総数による、ラットにおけるＤ−アンフェタミン誘導のよじ登り行動に対する２．５ｍｇ／ｋｇのペルフェナジン（５ｍｇ／ｋｇのＧＡＢＡとともに、または、ＧＡＢＡを伴わずに）および等モル用量の化学的コンジュゲートＡＮ−１６８の経口投与の影響を明らかにする棒グラフである（各点は平均＋／−ＳＥＭおよび治療動物数を表す）。
【図２７】図２７は、２時間の期間中の各試験群でのラットにおけるＤ−アンフェタミン誘導の頭部運動に対する２．５ｍｇ／ｋｇのペルフェナジン（５ｍｇ／ｋｇのＧＡＢＡとともに、または、ＧＡＢＡを伴わずに）および等モル用量の化学的コンジュゲートＡＮ−１６８の経口投与の影響を明らかにする棒グラフである（各点は平均＋／−ＳＥＭを表す）。
【図２８】図２８は、２時間の期間中のラットにおけるＤ−アンフェタミン誘導の頭部運動に対する２．５ｍｇ／ｋｇのペルフェナジン（５ｍｇ／ｋｇのＧＡＢＡとともに、または、ＧＡＢＡを伴わずに）および等モル用量の化学的コンジュゲートＡＮ−１６８の経口投与の影響の経時変化を明らかにする比較プロットを示す。
【図２９】図２９は、ラットにおけるＤ−アンフェタミン誘導のよじ登り行動に対する様々な濃度のオランザピンの経口投与の影響を明らかにする棒グラフである。
【図３０】図３０は、ラットにおけるＤ−アンフェタミン誘導のよじ登り行動に対する様々な濃度のオランザピンの経口投与の影響の経時変化を明らかにする比較プロットを示す。
【図３１】図３１は、ラットにおけるＤ−アンフェタミン誘導の頭部運動に対する様々な濃度のオランザピンの経口投与の影響を明らかにする棒グラフである。
【図３２】図３２は、ヒトＵ−２５１神経膠芽細胞腫細胞の生存性に対する、増大する濃度のＡＮ−２１６の影響を明らかにするプロット（図３２ａ）、ならびに、増大する濃度のＡＮ−２１６、ＧＡＢＡ、バルプロ酸、および、ＧＡＢＡとバルプロ酸との１：１の等モル混合物の影響を明らかにする比較プロット（図３２ｂ）を示す。
【図３３】図３３は、ヒトＵ−２５１神経膠芽細胞腫細胞の生存性に対するその影響を測定しながら、ＡＮ−２１６、ＡＮ−１３８、ＡＮ−２２３、バルプロ酸（バルプロエートとして示される）、および、ＧＡＢＡとバルプロ酸との等モル混合物について得られたＩＣ５０値を明らかにする棒グラフである。
【図３４】図３４は、ヒトＵ−８７神経膠腫細胞の生存性に対する、増大する濃度のＡＮ−２１６、ＡＮ−１３８、ＡＮ−１４８およびＡＮ−２２３の影響を明らかにする比較プロットを示す。
【図３５】図３５は、ヒトＵ−２５１神経膠腫細胞の生存性に対する、増大する濃度のＡＮ−２１６、ＡＮ−１３８、ＡＮ−１４８およびＡＮ−２２３の影響を明らかにする比較プロットを示す。
【図３６】図３６は、ヒトのＵ−２５１神経膠腫細胞およびＵ−８７神経膠腫細胞の生存性に対するその影響を測定しながら、ＡＮ−２１６、ＡＮ−１３８、ＡＮ−１４８およびＡＮ−２２３について得られたＩＣ５０値を明らかにする棒グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００６３】
本発明は、有機酸に共有結合的に連結された向精神性薬物の化学的コンジュゲート、その調製方法、ＣＮＳの障害および疾患、ならびに、増殖性の障害および疾患（例えば、脳腫瘍、脳転移物、末梢腫瘍、ＭＤＲガンおよび他の増殖性疾患など、これらに限定されない）の治療におけるその使用、また、化学感作剤としてのその使用に関する。
【００６４】
本発明による化学的コンジュゲートの原理および操作は、図面および添付された説明を参照してより良く理解することができる。
【００６５】
本発明の少なくとも１つの実施形態を詳細に説明する前に、本発明は、その適用において、下記の説明に示されるまたは実施例によって例示される構成要素の配置および構造の細部に限定されないことを理解しなければならない。本発明は、他の実施形態が可能であり、または様々な方法で実施することができ、または様々な方法で実施される。また、本明細書中で用いられる表現および用語は説明のためであり、従って限定として見なされるべきではないことを理解しなければならない。
【００６６】
本発明を着想しているとき、向精神性薬物（これはまた、抗増殖活性および／または化学感作活性を有し得る）と、ＧＡＢＡアゴニスト、鎮痛剤または抗増殖剤とを共有結合的にカップリングする化学的コンジュゲートは、大きい向精神性および／または抗増殖性の治療活性、ならびに、化学感作活性を、最小限に抑えられた有害な副作用を伴って発揮し得ることが仮定された。
【００６７】
この仮説に対する基礎となる根拠は下記の通りである：ＣＮＳの障害または疾患は数タイプの向精神性薬物によって治療可能である。しかしながら、そのような向精神性薬物の投与は、典型的には、短期間および長期間の有害な副作用が伴い、また、さらには、不良な薬物動態学によってしばしば制限される。これらの有害な副作用の発症は、多くの場合、脳内のドーパミン作動性のＤ１受容体およびＤ２受容体における誘導された不均衡、ならびに、脳におけるＧＡＢＡ系の低下した活性に起因すると考えられる。
【００６８】
従って、向精神性薬物をＧＡＢＡアゴニストと共有結合的にカップリングすることにより、最小限に抑えられた副作用とともに、改善された向精神活性を発揮する化学的コンジュゲートがもたらされることが仮定された。
【００６９】
具体的には、向精神性薬物とＧＡＢＡアゴニストとのそのようなカップリングは、向精神活性およびＧＡＢＡにより増大した活性を同時に発揮する化合物をもたらすので、この点で非常に有益であることが推定された。
【００７０】
ＧＡＢＡ系活性の増大は、現在、鎮痛剤、ＧＡＢＡアゴニストまたはＧＡＢＡ様化合物の投与によって達成されるが、向精神性薬物により誘導される副作用を軽減し、かつ、ＧＡＢＡ系に関連づけられる他の治療的利益（例えば、精神安定化および緩和）をさらに提供することが知られている。ＧＡＢＡアゴニストはさらに、向精神性薬物により誘導されるドーパミン作動性受容体の増大した感受性を中和することが知られている。しかしながら、ある種のＧＡＢＡアゴニストおよび鎮痛剤の投与はそれらの親水性的性質によって制限される。
【００７１】
従って、向精神性薬物およびＧＡＢＡアゴニストを共有結合的にカップリングすることによって得られる化学的コンジュゲートは、（ｉ）向精神性薬物成分およびＧＡＢＡアゴニスト成分の両方によって誘導される相乗的な向精神活性およびＧＡＢＡにより増大する活性；（ｉｉ）低下した向精神剤誘導の副作用；（ｉｉｉ）その母体化合物と比較した場合、カップリングされた向精神性薬物およびＧＡＢＡアゴニストの血液脳関門を越えることに関して改善された薬物動態学；および（ｉｖ）改善された向精神活性をもたらす、脳における神経伝達物質の改善されたバランスによって特徴づけられることがさらに仮定された。
【００７２】
そのうえ、いくつかの向精神性薬物、特に、神経遮断薬（例えば、フェノチアジン系など）および抗痙攣剤（例えば、バルプロ酸など）は強力な抗増殖剤であることがこの分野では知られている。加えて、いくつかの向精神性薬物はさらに、化学療法薬物との組合せで使用されたとき、化学感作剤として役立ち得る。従って、向精神性薬物と、抗増殖活性を有する化学的成分とを共有結合的にカップリングする化学的コンジュゲートは、一層より大きい抗増殖活性および／または化学感作活性を発揮することがなおさらに仮定された。そのような化学的コンジュゲートは、脳内受容体に対する向精神性残基の親和性およびその改善された脳内薬物動態学のために、特に脳における増殖性の障害および疾患の治療において非常に有益であり得る。
【００７３】
本発明を実施に移しているとき、下記の実施例の節においてさらに例示されるように、向精神性薬物と、その向精神性薬物により誘導される副作用を軽減し、および／または、強化された治療活性もしくは他の加わった価値をその向精神性薬物に提供するように選択された化学的成分（例えば、ＧＡＢＡアゴニスト）、あるいは、抗増殖活性を発揮するように選択された化学的成分とを共有結合的にカプリングすることは、（ｉ）最小限に抑えられた有害な副作用；（ｉｉ）高い向精神活性；（ｉｉｉ）高い抗増殖活性；（ｖｉ）高い化学感作活性；および（ｖ）低下した毒性（これらはすべてが、知られている向精神性薬物と比較した場合である）によって相乗的に特徴づけられる化学的コンジュゲートをもたらすことが見出された。ＧＡＢＡアゴニストを含む本発明の化学的コンジュゲートはさらに、相乗的な向精神活性およびＧＡＢＡ誘導による活性によって特徴づけられた。
【００７４】
従って、本発明の化学的コンジュゲートは、抗増殖剤および／または化学感作剤として、ＣＮＳの障害および疾患ならびに増殖性の障害および疾患を治療するために本発明に従って使用される。ＣＮＳおよび／または増殖性の障害および疾患を本発明に従って治療するために使用される化学的コンジュゲートのそれぞれが、第２の化学的成分に共有結合的に連結される第１の化学的成分を含む。第１の化学的成分は向精神性薬物残基であり、これに対して、第２の化学的成分は、向精神性薬物がそれ自体で投与されたときの向精神性薬物により誘導される副作用を軽減し、および／または、向精神性薬物の治療活性を増強し、および／または、抗増殖活性を発揮するように選択される有機酸である。
【００７５】
本明細書中で使用される用語「化学的成分」は、化学的化合物に由来する残基で、その機能性を保持する残基を示す。
【００７６】
用語「残基」は、本明細書中では、この分野で広く受け入れられているように、別の分子に共有結合的に連結される分子の主要な部分を示す。
【００７７】
従って、表現「向精神性薬物残基」は、別の化学的成分（この用語は本明細書中上記で定義される通りである）に共有結合的に連結される向精神性薬物の主要な部分を示す。
【００７８】
本明細書中上記で記載されるように、表現「向精神性薬物」は、中枢神経系において活性を発揮し、かつ、それにより、中枢神経系の様々な疾患または障害の治療において使用することができる任意の作用剤または薬物を包含する。
【００７９】
第２の成分がＧＡＢＡアゴニストまたは抗増殖剤である場合、本明細書中で使用される表現「向精神性薬物」は、抗精神病薬を除いて、本明細書中に記載されるような作用剤または薬物のいずれをも包含する。
【００８０】
第２の成分が鎮痛剤残基である場合、表現「向精神性薬物」は、本明細書中で定義されるような作用剤または薬物のいずれをも包含する。
【００８１】
従って、向精神性薬物残基には、本発明によれば、例えば、不安緩解薬（例えば、ベンゾジアゼピン系など、これに限定されない）に由来する残基、抗精神病薬（例えば、フェノチアジン系およびブチロフェノン系、ＭＡＯ阻害剤、抗うつ剤、抗痙攣性薬物（これはまた本明細書中およびこの分野では抗痙攣剤と呼ばれる）、抗パーキンソン症候群薬、ならびに、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤など、これらに限定されない）に由来する残基が含まれる。向精神性薬物は、三環性、二環性または単環性であり得る。
【００８２】
特に好ましい向精神性薬物は、本発明によれば、有機酸またはその反応性誘導体と反応することができるアミン基、チオール基またはヒドロキシル基（これらの用語は本明細書中下記で定義される通りである）を有するものである。そのような基は、遊離官能基または別の官能基（例えば、アミド基およびカルボン酸基など）の一部（これらの用語は本明細書中下記で定義される通りである）のいずれかとして向精神性薬物に存在させることができる。
【００８３】
そのような向精神性薬物残基の残基の代表的な例には、限定されないが、定型抗精神病剤および非定型抗精神病剤の残基、例えば、クロルプロマジン残基、ペルフェナジン残基、フルフェナジン残基、ズクロペンチキソール残基、チオプロパザート残基、ハロペリドール残基、ベンペリドール残基、ブロムペリドール残基、ドロペリドール残基、スピペロン残基、ピモジド残基、ピペラセタジン残基、アミルスルプリド残基、スルピリド残基、クロチアピン残基、ジプラシドン残基、レモキシプリド残基、スルトプリド残基、アリザプリド残基、ネモナプリド残基、クロザピン残基、オランザピン残基、ジプラシドン残基、セルチンドール残基、クエチアピン残基、アセトフェナジン残基、カルフェナジン残基、ジキシラジン残基、ピリシアジン残基、ピポチアジン残基、ホモフェナジン残基、ペリメタジン残基、ペルチペンチル残基、フルペンチキソール残基、ピフルチキソール残基、テフルチキソール残基、オキシペテピン残基、トリフルペリドール残基およびペンフルリドール残基などが含まれる。
【００８４】
そのような向精神性薬物残基のさらなる代表的な例には、限定されないが、抗うつ剤の残基、例えば、フルオキセチン残基、フルボキサミン残基、デシプラミン残基、パロキセチン残基、セルトラリン残基、メクロベミド残基、ノルクロミプラミン残基、アモキサピン残基、ノルトリプチリン残基、プロトリプチリン残基、レボキセチン残基およびズロキセチン残基など；抗痙攣剤の残基、例えば、バルプロ酸残基、フェノバルビタール残基およびフェニトイン残基など；不安緩解剤の残基、例えば、テマザゼパム残基、フルテマゼパム残基、ドキセファゼパム残基、オキサゼパム残基、ロラゼパム残基、ロルメタゼパム残基、シノラゼパム残基、フルタゾラム残基、ロピラゼパム残基、メプロバマート残基、カリソプロドール残基など；抗パーキンソン症候群剤の残基、例えば、ラサギリン残基およびアマンタジン残基など；および、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤の残基、例えば、タクリン残基などが含まれる。
【００８５】
本発明の好ましい実施形態によれば、向精神性薬物残基はさらに抗増殖活性を発揮する。そのような二重活性の向精神性薬物には、例えば、フェノチアジン系およびその誘導体、ならびに、抗痙攣剤、例えば、バルプロ酸およびその誘導体などが含まれる。
【００８６】
本発明の別の好ましい実施形態によれば、向精神性薬物残基はさらに化学感作活性を発揮する。そのような二重活性の向精神性薬物には、例えば、フェノチアジン系およびその誘導体、チオキサンテン系およびその誘導体、クロザピン、クロミプラミンおよびパロキセチンが含まれる。
【００８７】
本明細書中で使用される用語「化学感作」は、化学感作作用剤の非存在下で化学療法剤により発揮される細胞毒性のレベルと比較されるとき、化学感作作用剤の存在下でのガン細胞（特に、多剤耐性ガン細胞）に対する化学療法剤の測定された細胞毒性の増大または強化を意味する。
【００８８】
用語「化学感作作用剤」および用語「化学感作剤」（これらは本明細書中では交換可能に使用される）は、ガン細胞を化学療法に対してより感受性にする化合物を記載する。
【００８９】
本明細書中上記で述べられたように、向精神性薬物残基は、本発明によれば、有機酸残基である第２の化学的成分に共有結合的にカップリングされる。
【００９０】
表現「有機酸残基」は、遊離カルボン酸基を含む、有機酸に由来する本明細書中で定義されるような残基を示す。
【００９１】
用語「遊離カルボン酸基」は、そのまま、そのプロトン化状態、または、そのイオン化状態もしくは塩状態のいずれかで「−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ」基を包含する。
【００９２】
有機酸残基は、本発明によれば、向精神性薬物が単独で投与されたならば、向精神性薬物により誘導され得る副作用を軽減するように、および／または、向精神性薬物の治療活性を強化するように、および／または、さらなる加わった価値を向精神性薬物に提供する（例えば、ＧＡＢＡ活性を増大する）ように、および／または、抗増殖活性を発揮するように選択される。有機酸残基は、本発明によれば、一般式−Ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−（式中、Ｒは、例えば、１個〜２０個の炭素原子を有する炭化水素残基であり得る）を有する残基であり得る。
【００９３】
本明細書中で使用される用語「炭化水素」は、共有結合的に連結される炭素原子および水素原子からなる鎖をその基本骨格として含む有機化合物を示す。
【００９４】
従って、本発明による炭化水素残基はアルキルまたはシクロアルキルであり得る。
【００９５】
本明細書中で使用される用語「アルキル」は、直鎖基および分枝鎖基を含む飽和した脂肪族炭化水素を示す。好ましくは、アルキル基は１個〜２０個の炭素原子を有する。
【００９６】
数値範囲、例えば「１個〜２０個」が本明細書で述べられる場合は常に、それは基（この場合はアルキル基）が１個の炭素原子、２個の炭素原子、３個の炭素原子などの２０個までの炭素原子を含むということを意味する。さらに好ましくは、アルキル基は、１個〜１０個の炭素原子を有する中程度のサイズのアルキルである。最も好ましくは、アルキルは３個〜５個の炭素原子を有する。
【００９７】
本明細書中で使用される用語「シクロアルキル」基は、環の１つまたは複数が完全共役のπ電子系を有しない、すべて炭素からなる単環基または縮合環（すなわち、隣接炭素原子対を共有する環）基を含む。シクロアルキル基の非限定な例は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロペンテン、シクロヘキサン、シクロヘキサジエン、シクロヘプタン、シクロヘプタトリエンおよびアダマンタンを含む。
【００９８】
本発明によれば、炭化水素残基は直鎖構造または枝分かれ構造であり得る。炭化水素残基はさらに飽和または非飽和であり得る。非飽和であるとき、炭化水素残基はその炭素鎖に二重結合または三重結合を含むことができる。非飽和の炭化水素残基はアリールをさらに含むことができる。
【００９９】
本明細書中で使用されるように、「アリール」基は、完全共役のπ電子系を有する、すべて炭素からなる単環基または縮合多環（すなわち、隣接炭素原子対を共有する環）基を示す。アリール基の非限定的な例は、フェニル、ナフタレニルおよびアントラセニルを含む。
【０１００】
炭化水素残基はさらに置換または非置換であり得る。置換されるとき、置換基は、例えばアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロ脂環式、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、シアノ、ハロ、オキソ、アミドおよびアミノであり得る。
【０１０１】
「ヘテロアリール」基は、例えば、窒素、酸素およびイオウなどの１個または複数個の原子を環（１つまたは複数）に有し、さらには完全共役のπ電子系を有する単環基または縮合環（すなわち、隣接炭素原子対を共有する環）基を示す。ヘテロアリール基の非限定的な例には、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピリミジン、キノリン、イソキノリンおよびプリンが含まれる。ヘテロアルキル基は置換または非置換であり得る。置換されるとき、置換基は、例えばアルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、シアノ、ハロ、オキソ、アミドおよびアミノであり得る。
【０１０２】
「複素脂環」基は、例えば、窒素、酸素およびイオウなどの１個または複数個の原子を環（１つまたは複数）に有する単環基または縮合環基を示す。環はまた、１つまたは複数の二重結合を有することができる。しかしながら、環は完全共役のπ電子系を有しない。複素脂環基は、置換または非置換であり得る。置換されるとき、置換基は、例えばアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、シアノ、オキソ、アミドおよびアミノであり得る。
【０１０３】
「ヒドロキシ」基は−ＯＨ基を示す。
【０１０４】
「アルコキシ」基は、本明細書中で定義されるように、−Ｏ−アルキル基および−Ｏ−シクロアルキル基の両方を示す。
【０１０５】
「アリールオキシ」基は、本明細書中で定義されるように、−Ｏ−アリール基および−Ｏ−ヘテロアリール基の両方を示す。
【０１０６】
「オキソ」基は−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ′基を示し、ここでＲ′は例えば、アルキル、シクロアルキル、またはアリールであり得る。
【０１０７】
「ハロ」基は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を示す。
【０１０８】
「トリハロメチル」基は、本明細書中で定義されるように、−ＣＸ３−基を示し、ここでＸはハロ基である。
【０１０９】
「アミノ」または「アミン」基は−ＮＨ２基を示す。
【０１１０】
「アミド」基は−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲａＲｂ基を示し、ここでＲａおよびＲｂは、例えば、水素、アルキル、シクロアルキルおよびアリールであり得る。
【０１１１】
有機酸残基は、本発明によれば、その鎖の内部に点在させた１つまたは複数のヘテロ原子をさらに含むことができる。ヘテロ原子は、例えば、酸素、窒素および／またはイオウが可能である。
【０１１２】
炭化水素残基はさらに、一般式−Ｚ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−ＣＨＲ２−Ｒ３−（式中、Ｚは、例えば、単結合、あるいは、本明細書中上記で記載されたような置換または非置換の炭化水素残基であり得る；Ｒ２は、例えば、水素、または、１個〜１０個の炭素原子を有するアルキル基であり得る；Ｒ３は、例えば、水素、または、本明細書中上記で定義されるような炭化水素残基であり得る）を有する残基が可能である。
【０１１３】
従って、本発明による有機酸残基が由来し得る有機酸の代表的な例には、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、マレイン酸、フマル酸、フタル酸、イソフタル酸、テレフタル酸、酪酸、４−フェニル酪酸、４−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、吉草酸、プロピオン酸、レチノイン酸、アセチルサリチル酸およびイブプロフェンが含まれる。
【０１１４】
本発明の現時点で最も好ましい実施形態によれば、化学的コンジュゲートの第２の化学的成分はＧＡＢＡアゴニスト残基である。
【０１１５】
本明細書中で使用される表現「ＧＡＢＡアゴニスト残基」は、ＧＡＢＡアゴニストの、（この用語が本明細書中上記で定義されるような）残基を示し、一方、用語「ＧＡＢＡアゴニスト」は、脳におけるＧＡＢＡ系を活性化することができ、従って、ＧＡＢＡに薬理学的に関連づけられる化合物を記載する。用語「ＧＡＢＡアゴニスト」は、従って、ＧＡＢＡ自体を包含することが理解され、これに対して、用語「ＧＡＢＡアゴニスト残基」は、従って、ＧＡＢＡアゴニスト自体の残基を包含することが理解される。
【０１１６】
従って、ＧＡＢＡアゴニスト残基には、本発明によれば、ＧＡＢＡ（γ−アミノ酪酸）残基自体に加えて、向精神性薬物に対して共有結合的にカップリングすることができる他のＧＡＢＡアゴニストの残基が含まれる。
【０１１７】
そのようなＧＡＢＡアゴニスト残基の例には、（±）バクロフェン残基、イソニペコチン酸残基、γ−ヒドロキシ酪酸残基、アミノオキシ酢酸残基、β−（４−クロロフェニル）−γ−アミノ酪酸残基、ピペリジン−４−スルホン酸残基、３−アミノプロピル亜ホスホン酸残基、３−アミノプロピルホスフィン酸残基、３−（アミノプロピル）メチルホスフィン酸残基、１−（アミノメチル）シクロヘキサン酢酸残基（ガバペンチン）、４−アミノ−５−ヘキセン酸（γ−ビニルＧＡＢＡ、ビガバトリン）残基、および３−（２−イミダゾリル）−４−アミノブタン酸残基が含まれる。
【０１１８】
本発明の別の現在好ましい実施形態によれば、本発明の化学的コンジュゲートにおける第２の化学的成分は抗増殖剤残基である。
【０１１９】
本明細書中で使用される用語「抗増殖剤残基」は、抗増殖活性によって特徴づけられる化合物の本明細書中で定義されるような残基を示す。
【０１２０】
本発明の好ましい実施形態によれば、抗増殖剤は酪酸または４−フェニル酪酸である。これらの化合物は、抗ガン活性を発揮することが知られており、また、ＧＡＢＡがその誘導体である化合物としてさらに特徴づけられ、従って、ＧＡＢＡミメティック剤としてさらに作用し得る。
【０１２１】
本発明の別の好ましい実施形態によれば、本発明の化学的コンジュゲートにおける第２の化学的成分は鎮痛剤である。
【０１２２】
鎮痛剤を本発明の化学的コンジュゲートに取り込むことによりまた、二重の薬理学的活性、すなわち、向精神活性および痛み緩和が提供され得る。さらに、現在知られている鎮痛剤は、典型的には、その全身投与にしばしば伴う多くの欠点、例えば、不良な薬物動態学および有害な副作用（例えば、著しい痙攣作用）などを受ける。従って、鎮痛剤と向精神性薬剤とのコンジュゲート化はそれらの薬物動態学を改善し、かつ、これらの副作用を軽減する。そのうえ、いくつかの鎮痛剤がＧＡＢＡ活性を伴うことがこの分野では広く受け入れている。
【０１２３】
本発明の関連での使用のために好適である鎮痛剤の代表的な例には、限定されないが、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、例えば、アスピリン、イブプロフェン、フェンプロフェン、インドメタシン、ナプロキセン、ジクロフェナク、ジフルニサール、スリンダク、および、遊離カルボン酸基またはカルボン酸誘導体を有する任意の他のＮＳＡＩＤが含まれる。好適な鎮痛剤のさらなる例には、そのような遊離カルボン酸基またはカルボン酸誘導体を有する他の非麻薬性鎮痛剤が含まれる。
【０１２４】
従って、本発明の化学的コンジュゲートの第２の化学的成分には、有機酸残基（これは好ましくはＧＡＢＡアゴニスト残基である）、鎮痛剤残基および／または抗増殖剤残基が含まれる（これらの用語は本明細書中上記で定義および例示される通りである）。
【０１２５】
本発明の化学的コンジュゲートにおける第２の化学的成分は、好ましくはエステル結合を介して第１の化学的成分に共有結合的に連結される。エステル結合は、カルボン酸エステル結合、オキシアルキルカルボン酸エステル結合、アミド結合またはチオエステル結合が可能である。
【０１２６】
本明細書中で使用される表現「カルボン酸エステル結合」は「−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−」結合を含む。
【０１２７】
本明細書中で使用される表現「オキシアルキルカルボン酸エステル結合」は「Ｏ−Ｒ−−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−」結合（式中、Ｒは本明細書中上記で定義されるようなアルキルである）を含む。好ましくは、Ｒはメチルである。
【０１２８】
表現「アミド結合」は「−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−」結合を含む。
【０１２９】
表現「チオエステル結合」は「−ＳＨ−Ｃ（＝Ｏ）−」結合を含む。
【０１３０】
そのようなエステル結合は、脳由来酵素（例えば、エステラーゼおよびアミダーゼなど）により加水分解可能であることが知られており、従って、本発明の化学的コンジュゲートが、脳において代謝され、かつ、それにより、向精神性薬物および有機酸を同時に放出し、従って、向精神性薬物および有機酸についての好都合な同時薬物動態学を提供するプロドラッグとして作用することが推定され、また、本明細書中に記載される実験結果（例えば、図５ａ〜図５ｂを参照のこと）によってさらに明らかにされる。
【０１３１】
このプロセスは、（ｉ）向精神性薬物および有機酸の同時作用、これは、薬物により誘導される低下した副作用、および、両方の成分の二重の活性を相乗的にもたらす；（ｉｉ）ドーパミン作動性受容体に対するプロドラッグのより高い親和性、これは、相乗的により高い向精神活性、および、脳の増殖性障害に対する相乗的により高い抗増殖活性をもたらす；および（ｉｉｉ）両方の化学的成分の改善された脳透過性をもたらすので、非常に好都合である。
【０１３２】
あるいは、本発明の化学的コンジュゲートにおける第２の化学的成分は、イミン結合を介して第１の化学的成分に共有結合的に連結される。
【０１３３】
本明細書中で使用される用語「イミン結合」は−Ｃ＝ＮＨ−結合を記載する。イミン結合はまた、「シッフ塩基」としてこの分野では知られている。
【０１３４】
別の局面において、本発明はさらに、本明細書中上記で記載された化学的コンジュゲートを合成する方法を提供する。この方法は、一般には、向精神性薬物の残基に共有結合的に連結された有機酸の残基を得るように、有機酸を向精神性薬物と反応することによって行われる。
【０１３５】
本明細書中、用語「有機酸の残基」および用語「向精神性薬物の残基」は用語「有機酸残基」および用語「向精神性薬物残基」とそれぞれ等価である（これらの用語は本明細書中上記で定義される通りである）。有機酸および向精神性薬物を反応させ、それにより、それらの間に共有結合による連結を形成することによって、有機酸および向精神性薬物の残基を含む最終的な生成物が作製されることが当業者には明らかであるはずである。
【０１３６】
本明細書中、本発明のこの局面の方法に従って反応させられる有機酸には、本明細書中上記で記載された有機酸残基に対応する任意の化合物が含まれ、従って、本明細書中上記で記載された有機酸残基が由来する有機酸のすべてが含まれ得る。
【０１３７】
例えば、本発明のこの局面に関連して使用可能である有機酸には、本明細書中上記で記載された好ましいＧＡＢＡアゴニスト残基に対応するＧＡＢＡアゴニストが含まれる。同様に、有機酸には、本明細書中上記で記載された抗増殖剤に対応する、酪酸および４−フェニル酪酸などの抗増殖剤が含まれ得る。
【０１３８】
同じように、本発明のこの局面による方法において反応させられる向精神性薬物は、本明細書中上記で記載された向精神性薬物残基のいずれかに対応する。
【０１３９】
本発明の化学的コンジュゲートを合成する本明細書中上記で記載された方法は、使用された有機酸のタイプ、および／または、有機酸残基と向精神性薬物残基との間での共有結合による連結のタイプに従ってさらに操作することができる。
【０１４０】
本明細書中上記で詳しく議論されるように、本発明による好ましい有機酸には、例えば、抗増殖剤（例えば、酪酸およびその誘導体など）、一般式Ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨ（これは有機酸残基Ｒ−Ｃ（Ｃ＝Ｏ）−Ｏに対応する）を有する有機酸などが含まれる。これらの好ましい有機酸のほとんどが遊離アミノ基を含まず、従って、それらは、さらなる操作を用いることなく、本発明の合成において使用することができる。
【０１４１】
本明細書中上記で詳しくさらに議論されるように、本発明の化学的コンジュゲートにおいて、有機酸残基および向精神性薬物残基は、カルボン酸エステル結合、アルキルオキシカルボン酸エステル結合、チオエステル結合、イミン結合またはアミド結合（これらの用語は本明細書中上記で定義される通りである）のいずれかであり得る結合によって共有結合的に連結される。
【０１４２】
残基がカルボン酸エステル結合を介して共有結合的に連結される場合、本発明の化学的コンジュゲートを合成する方法は、好ましくは、最初に、有機酸を活性化するように、有機酸をその対応するアシルクロリド誘導体または任意の他のアシルハリド誘導体に変換することによって行われる。アシルクロリド誘導体は、その後、カルボン酸エステル結合を介して向精神性薬物残基に共有結合的に連結された有機酸残基を有する所望の化学的コンジュゲートを得るように、広く知られている求核付加反応で、遊離ヒドロキシル基を典型的には含む向精神性薬物と反応させられる。この反応は、好ましくは、向精神性薬物を活性化し、および／または、その塩酸塩として存在する化合物を中和するように塩基性条件下で行われる。しかしながら、有機酸および／または向精神性薬物は他の任意の知られている方法によって活性化することができる。
【０１４３】
残基がチオエステル結合を介して共有結合的に連結される場合、本発明の化学的コンジュゲートを合成する方法は、好ましくは、向精神性薬物をその対応するチオール誘導体に変換すること、および、有機酸をその対応するアシルクロリド誘導体またはその任意の他の活性化された誘導体に変換することによって行われる。チオール誘導体は、その後、チオエステル結合を介して向精神性薬物残基に共有結合的に連結された有機酸残基を有する所望の化学的コンジュゲートを得るように、広く知られている手順によって、活性化された有機酸と反応させられる。現在知られている向精神性薬物のいくつかは遊離チオール基を含み、従って、そのような薬物は有機酸のアシルクロリド誘導体と直接に反応させることができることに留意しなければならない。遊離チオール基を含まない向精神性薬物は、この分野で広く知られている方法によって、そのチオール誘導体を得るように容易に反応することができる。
【０１４４】
残基がアミド結合を介して共有結合的に連結される場合、本発明の化学的コンジュゲートを合成する方法は、好ましくは、最初に、有機酸を活性化するように、有機酸をその対応するアシルクロリド誘導体に変換すること、および、さらに、向精神性薬物をそのアミン誘導体に変換することによって行われる。アシルクロリド誘導体は、その後、アミド結合を介して向精神性薬物残基に共有結合的に連結された有機酸残基を有する所望の化学的コンジュゲートを得るように、広く知られている求核付加反応で、または、アミド結合を生じさせるための知られている手順の任意の他の手順によって向精神性薬物のアミノ基と反応させられる。現在知られている向精神性薬物のいくつかは遊離アミン基を含み、従って、そのような薬物は有機酸のアシルクロリド誘導体と直接に反応させることができることに留意しなければならない。遊離アミン基を含まない向精神性薬物は、この分野で広く知られている方法によって、そのアミン誘導体を得るように容易に反応することができる。
【０１４５】
残基がイミン結合を介して共有結合的に連結される場合、本発明の化学的コンジュゲートを合成する方法は、好ましくは、最初に、有機酸を活性化するように、有機酸をその対応するアルデヒド誘導体に変換すること、および、さらに、向精神性薬物をそのアミン誘導体に変換することによって行われる。アルデヒド誘導体は、その後、イミン結合を介して向精神性薬物残基に共有結合的に連結された有機酸残基を有する所望の化学的コンジュゲートを得るように、広く知られている付加−脱離反応で、または、イミン結合を生じさせるための知られている手順の任意の他の手順によって向精神性薬物のアミノ基と反応させられる。現在知られている向精神性薬物のいくつかは遊離アミン基を含み、従って、そのような薬物は有機酸のアルデヒド誘導体と直接に反応させることができることに留意しなければならない。遊離アミン基を含まない向精神性薬物は、この分野で広く知られている方法によって、そのアミン誘導体を得るように容易に反応することができる。
【０１４６】
残基がアルキルオキシカルボン酸エステル結合を介して共有結合的に連結される場合、本発明の化学的コンジュゲートを合成する方法は、好ましくは、向精神性薬物をそのクロロアルキルエステル誘導体（好ましくは、そのクロロメチルエステル誘導体）に変換することによって行われる。クロロメチルエステル誘導体は、その後、アルキルオキシカルボン酸エステル結合を介して向精神性薬物残基に共有結合的に連結された有機酸残基を有する所望の化学的コンジュゲートを得るように、広く知られている求核付加反応で、または、アルキルオキシカルボン酸エステル結合を生じさせるための知られている手順の任意の他の手順によって有機酸と反応させられる。有機酸および向精神性薬物を、アルキルオキシカルボン酸エステル結合を介して共有結合的に連結することは、典型的に不安定な無水物コンジュゲートの形成が避けられるので、向精神性薬物が遊離カルボン酸基を含む場合には特に好ましいことに留意しなければならない。
【０１４７】
上記で記載された方法は、典型的には、有機酸が遊離アミノ基を有しないときに効果的である。しかしながら、有機酸が遊離アミノ基を含む場合、例えば、ＧＡＢＡアゴニストの場合はそうであるように、アミノ基を、向精神性薬物との記載された反応の期間中において保護しなければならない。遊離アミノ基は比較的化学的に活性な基であり、従って、反応に望ましくないほどに加わり得るので、遊離アミノ基を保護することが要求される。
【０１４８】
従って、遊離アミノ基を有するＧＡＢＡアゴニスト残基を含む化学的コンジュゲートを合成する好ましい方法は、好ましくは、最初に遊離アミノ基を保護することによって行われる。そのようなアミノ基を保護することは、有機酸を知られている保護基（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）およびベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）など）と反応することによって行うことができる。アミノ保護された有機酸が、その後、向精神性薬物残基に共有結合的に連結されたアミノ保護の有機酸を得るように、向精神性薬物と反応させられる。その後、保護基が除かれる。さらに好ましくは、アミノ保護された有機酸は、有機酸を向精神性薬物との反応の前に活性化するように、そのアシルイミダゾール誘導体に変換される。
【０１４９】
さらに、本発明によれば、本発明の化学的コンジュゲートを有効成分として含む医薬組成物が提供される。
【０１５０】
本明細書中で使用される「医薬組成物」は、本明細書中に記載される化学的コンジュゲートの１つまたは複数と、他の化学的成分（例えば、医薬的に好適なキャリアおよび賦形剤）との調製物を示す。医薬組成物の目的は、対象に対する化合物の投与を容易にすることである。
【０１５１】
以降、用語「医薬的に許容され得るキャリア」は、対象に対する著しい刺激を生じさせず、かつ、投与された調合物の生物学的活性および生物学的性質を阻害しないキャリアまたは希釈剤を示す。キャリアの非限定的な例には、プロピレングリコール、生理食塩水、有機溶媒と水の混合物およびエマルジョンがある。
【０１５２】
本明細書中において、用語「賦形剤」は、化合物の投与をさらに容易にするために医薬組成物に添加される不活性な物質を示す。賦形剤の非限定的な例には、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖およびタイプのデンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油およびポリエチレングリコールが含まれる。
【０１５３】
本発明の好ましい実施形態によれば、医薬用キャリアは乳酸の水溶液である。
【０１５４】
この関連において、本発明の化学的コンジュゲートのいくつかは、好ましい実施形態によれば、水性媒体において容易に可溶性であり、従って、容易に配合されることを指摘しなければならない。そのような好都合な配合は、長鎖脂肪酸を典型的には含み、従って、水性媒体に不溶性であり、油状の配合物として投与される、向精神性薬物の知られているエステルコンジュゲートを上回る、本発明の化学的コンジュゲートのさらなる利点を提供する。
【０１５５】
薬物の配合および投与のための様々な技術が“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ”（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ、最新版）（これは参考として本明細書中に組み込まれる）に見出され得る。
【０１５６】
好適な投与経路には、例えば、経口送達、直腸送達、経粘膜送達、経皮送達、腸管送達または非経口送達（これには、筋肉内注射、皮下注射および髄内注射、ならびに、クモ膜下注射、直接的な脳室内注射、静脈内注射、腹腔内注射、鼻内注射または眼内注射が含まれる）が含まれ得る。本発明の医薬組成物は、この分野で十分に知られている様々なプロセスによって、例えば、混合、溶解、造粒、糖衣錠作製、研和、乳化、カプセル化、包括化または凍結乾燥の従来のプロセスによって製造することができる。
【０１５７】
本発明に従って使用するための医薬組成物は活性な化合物を医薬として使用可能な製剤にする加工を容易にする賦形剤及び補助剤を含む一つ以上の医薬的に許容され得るキャリアを使用して従来のように配合されてもよい。適切な配合は選択された投与経路に依存する。
【０１５８】
注射の場合、本発明の化学的コンジュゲートは、水溶液において、好ましくは生理学的に適合し得る、緩衝液（例えば、ハンクス溶液、リンゲル溶液、または生理学的な食塩水緩衝液など）であって、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールの如き有機溶媒を含むまたは含まない緩衝液において配合することができる。経粘膜投与の場合、浸透剤が配合において使用される。そのような浸透剤はこの分野では一般に知られている。
【０１５９】
経口投与の場合、化学的コンジュゲートは、活性な化合物を、この分野で十分に知られている薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせることによって容易に配合することができる。そのようなキャリアにより、本発明のコンジュゲートは、患者によって経口摂取される錠剤、ピル、糖衣錠、カプセル、液剤、ゲル、シロップ、スラリー剤、懸濁物などとして配合することが可能になる。経口使用される薬学的調製物は、錠剤または糖衣錠コアを得るために、固体の賦形剤を使用し、得られた混合物を場合により粉砕し、そして所望する場合には好適な補助剤を添加した後、顆粒の混合物を加工して作製することができる。好適な賦形剤は、具体的には、ラクトース、スクロース、マンニトールまたはソルビトールを含む糖などの充填剤；セルロース調製物、例えば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ナトリウムカルボメチルセルロースなど；および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）などの生理学的に受容可能なポリマーである。所望する場合には、架橋型ポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸もしくはその塩（アルギン酸ナトリウムなど）などの崩壊剤を加えることができる。
【０１６０】
糖衣錠コアには、好適なコーティングが施される。この目的のために、高濃度の糖溶液を使用することができ、この場合、糖溶液は、場合により、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコール、二酸化チタン、ラッカー溶液および好適な有機溶媒または溶媒混合物を含有し得る。色素または顔料が、活性な化合物の量を明らかにするために、または活性な化合物の量の種々の組合せを特徴づけるために、錠剤または糖衣錠コーティングに添加され得る。
【０１６１】
経口使用され得る医薬組成物には、ゼラチンから作製されたプッシュ・フィット型カプセル、ならびにゼラチンおよび可塑剤（グリセロールまたはソルビトールなど）から作製された軟密閉カプセルが含まれる。プッシュ・フィット型カプセルは、充填剤（ラクトースなど）、結合剤（デンプンなど）、滑剤（タルクまたはステアリン酸マグネシウムなど）および場合により安定化剤と混合された有効成分を含有し得る。軟カプセルでは、活性な化合物を好適な液体（脂肪油、流動パラフィンまたは液状のポリエチレングリコールなど）に溶解または懸濁させることができる。さらに、安定化剤を加えることができる。経口投与される配合物はすべて、選ばれた投与経路に好適な投薬形態でなければならない。
【０１６２】
口内投与の場合、組成物は、従来の様式で配合された錠剤またはトローチの形態を取ることができる。
【０１６３】
鼻腔吸入による投与の場合、本発明に従って使用される化学的コンジュゲートは、好適な噴射剤（例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタンまたは二酸化炭素）の使用により加圧パックまたはネブライザーからのエアロゾルスプレー提示物の形態で都合よく送達される。加圧されたエアロゾルの場合、投薬量単位は、計量された量を送達するためのバルブを提供することによって決定され得る。吸入器または吹き入れ器で使用される、例えば、ゼラチン製のカプセルおよびカートリッジで、化合物と好適な粉末基剤（ラクトースまたはデンプンなど）との粉末混合物を含有するカプセルおよびカートリッジを配合することができる。
【０１６４】
本明細書で記述される化学的コンジュゲートは非経口投与、例えばボーラス注射または連続点滴のために配合されることができる。注射のための配合は、単位用量形態（例えばアンプルまたは多用量コンテナ）で提供されることができ、これらには所望により保存剤が添加されている。組成物は懸濁物、溶液または油性もしくは水性ビヒクル中のエマルションであることができ、懸濁剤、安定化剤および／または分散剤の如き配合剤を含むことができる。
【０１６５】
非経口投与される医薬組成物には、水溶性形態における活性な化合物の水溶液が含まれる。さらに、活性な化合物の懸濁物を、適切なオイル状のまたは水ベースの注射用懸濁物として調製することができる。好適な親油性の溶媒またはビヒクルには、脂肪油（ゴマ油など）、または合成脂肪酸エステル（オレイン酸エチルなど）、トリグリセリドまたはリポソームが含まれる。水性の注射用懸濁物は、懸濁物の粘度を増大させる物質、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトールまたはデキストランなどを含有し得る。場合により、懸濁物はまた、高濃度の溶液の調製を可能にするためにコンジュゲートの溶解性を増大させる好適な安定化剤または薬剤を含有し得る。
【０１６６】
あるいは、有効成分は、使用前に好適なビヒクル（例えば、滅菌されたパイロジェン非含有水）を用いて構成される粉末形態にする。
【０１６７】
本発明の化学的コンジュゲートはまた、例えば、カカオ脂または他のグリセリドなどの従来の座薬基剤を使用して、座薬または停留浣腸剤などの直腸用組成物に配合することができる。
【０１６８】
本明細書中に記載される医薬組成物はまた、固相またはゲル相の好適なキャリアまたは賦形剤を含むことができる。そのようなキャリアまたは賦形剤の例には、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチンおよびポリマー（例えば、ポリエチレングリコールなど）が含まれるが、これらに限定されない。
【０１６９】
本発明に関連した使用のために好適な医薬組成物には、有効成分が、意図された目的を達成するために効果的な量で含有される組成物が含まれる。より具体的には、治療効果がある量は、処置されている対象の疾患の症状を防止、軽減または改善するために、あるいは、処置されている対象の生存を延ばすために効果的な化学的コンジュゲートの量を意味する。
【０１７０】
治療効果がある量の決定は十分に当業者の範囲内であり、特に本願明細書で与えられる詳細な開示に鑑みればそうである。
【０１７１】
本発明の方法に使用される化学的コンジュゲートに対して、治療的に有効な量又は用量は最初に細胞培養および／または動物における活性アッセイから推定されることができる。例えば、活性アッセイによって測定されるようなＩＣ５０を含む循環濃度範囲（例えば増殖活性の半最大阻害を達成する試験化合物の濃度）を達成するために、用量は動物モデルで配合されることができ、かかる情報は人間に有用な用量をより正確に決定するために使用されることができる。
【０１７２】
本明細書中に記載される化学的コンジュゲートの毒性および治療効力は、実験動物における標準的な薬学的手法によって、例えば対象化合物についてＩＣ５０およびＬＤ５０（試験された動物の５０％の死を生ずる致死量）を測定することによって明らかにすることができる。これらの活性アッセイおよび細胞培養アッセイならびに動物研究から得られたデータは、ヒトへの使用のための投薬量範囲を定める際に使用することができる。
【０１７３】
投薬量は、用いられる投薬形態物および利用される投与経路に依存して変化し得る。正確な配合、投与経路および投薬量は、患者の状態を考慮して個々の医師によって選ぶことができる（例えば、Ｆｉｎｇｌ他、１９７５、“Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ”（第１章、１頁）を参照のこと）。
【０１７４】
投薬量および投薬間隔を、向精神作用および／または抗増殖作用を維持するために十分である活性な成分の血漿中レベル（これは最小有効濃度（ＭＥＣ）と呼ばれる）を提供するために個々に調節することができる。ＭＥＣはそれぞれの調製物について変化するが、インビトロデータおよび／またはインビボデータから推定することができ、例えば、特定の細胞の増殖の５０％〜９０％の阻害を達成するために必要な濃度を、本明細書中に記載されるアッセイを使用して求めることができる。ＭＥＣを達成するために必要な投薬量は個々の特性および投与経路に依存する。ＨＰＬＣアッセイまたはバイオアッセイを使用して、血漿中濃度を求めることができる。
【０１７５】
投薬間隔もまた、ＭＥＣ値を使用して決定することができる。調製物は、時間の１０％〜９０％について、好ましくは３０％〜９０％の間、最も好ましくは５０％〜９０％の間、ＭＥＣを越える血漿中レベルを維持する治療法を使用して投与されなければならない。
【０１７６】
処置される状態の重篤度および応答性に依存して、投薬は上述の徐放性組成物の単回投与であることも可能であり、処置の経過が、数日から数週間まで、あるいは、治癒が達成されるまで、または、疾患状態の縮小が達成されるまで続く。
【０１７７】
投与される組成物の量は、当然のことではあるが、処置されている対象、苦痛の重篤度、投与様式、主治医の判断などに依存する。
【０１７８】
本発明の組成物は、所望される場合には、有効成分を含有する１つまたは複数の単位投薬形態物を含有し得るパックまたはディスペンサーデバイス（例えば、ＦＤＡ承認キットなど）で提供され得る。パックは、例えば、金属箔またはプラスチック箔を含むことができ、例えば、ブリスターパックなどである。パックまたはディスペンサーデバイスには、投与のための説明書が添付され得る。パックまたはディスペンサーにはまた、医薬品の製造、使用または販売を規制する政府当局により定められた形式で容器に付けられた通知が伴うことがあり、この場合、そのような通知は、組成物の形態またはヒトもしくは動物への投与の当局による承認を反映する。そのような通知は、例えば、処方薬物についての米国食品医薬品局により承認されたラベル書きであり得るか、または承認された製品添付文書であり得る。適合し得る医薬用キャリアに配合された本発明の化学的コンジュゲートを含む組成物はまた、適応される状態を治療するために、調製され、適切な容器に入れられ、かつ表示され得る。ラベルに示される好適な状態には、例えば、向精神性の疾患または障害（例えば、統合失調症、偏執症、児童精神病、ハンチングトン病、ジル・ド・ラ・トゥレット症候群、うつ病、躁うつ病、不安、パーキンソン病、アルツハイマー病およびてんかん、脳の増殖性障害およびＭＤＲガンなど）、および、化学感作（この用語は本明細書中上記で定義される通りである）を含まれ得る。
【０１７９】
従って、本発明の好ましい実施形態によれば、医薬組成物は包装物に包装され、下記の使用の１つまたは複数のために包装物上または包装物内において活字で特定される：ＣＮＳの障害または疾患の治療における使用のために、脳または末梢の増殖性障害または増殖性疾患の治療における使用のために、ガン（ＭＤＲガンなど）の治療における使用のために、また、化学療法剤との組合せでの、および／または、化学感作が有益である医学的状態での化学感作における使用のために。
【０１８０】
さらに、本発明によれば、対象（例えば、ヒト）におけるＣＮＳの障害または疾患を治療または防止するための方法が提供される。この方法は、治療有効量の本発明の化学的コンジュゲートの１つまたは複数を治療される対象に投与することによって行われる。
【０１８１】
本明細書中で使用される用語「方法」は、所与の課題を達成するための様式、手段、技術および手順を示し、これには、化学、薬理学、生物学、生化学および医学の技術分野の実施者に知られているそのような様式、手段、技術および手順、または、知られている様式、手段、技術および手順から、化学、薬理学、生物学、生化学および医学の技術分野の実施者によって容易に開発されるそのような様式、手段、技術および手順が含まれるが、それらに限定されない。
【０１８２】
従って、用語「治療する」は、疾患の進行を妨げること、実質的に阻害すること、遅くすること、または逆戻りさせること、あるいは、疾患の臨床的症状を実質的に緩和すること、あるいは、疾患の臨床的症状の出現を実質的に防止することを包含する。
【０１８３】
本明細書中で使用される表現「ＣＮＳの障害または疾患」は、中枢神経系（ＣＮＳ）における障害（例えば、神経学的障害）によって特徴づけられる障害または疾患を示す。本発明の化学的コンジュゲートを使用して治療可能であるＣＮＳの障害および疾患の例には、限定されないが、精神病的な障害または疾患、不安障害、解離型障害、人格障害、気分障害、情動障害、神経変性性の疾患または障害、痙攣性障害、境界性障害、および、精神的な疾患または障害が含まれる。
【０１８４】
ＣＮＳのそのような障害または疾患の代表的な例には、限定されないが、統合失調症、偏執症、児童精神病、ハンチングトン病、ジル・ド・ラ・トゥレット症候群、うつ病、躁うつ病、不安、パーキンソン病、アルツハイマー病およびてんかんが含まれる。
【０１８５】
本明細書中で使用される用語「投与する」は、本発明の化学的コンジュゲートを、向精神性の障害または疾患により冒されている脳内の領域または部位にもたらすための方法を示す。
【０１８６】
本発明の化学的コンジュゲートは腹腔内投与することができる。より好ましくは、本発明の化学的コンジュゲートは経口投与される。
【０１８７】
用語「対象」は、ヒトを含む、血液脳関門を有する動物（典型的には、哺乳動物）を示す。
【０１８８】
用語「治療有効量」は、治療されているＣＮＳの障害または疾患の症状の１つまたは複数をある程度緩和する投与されている化学的コンジュゲートのそのような量を示す。
【０１８９】
本発明のこの方法による治療有効量は、好ましくは、０．５ｍｇ／ｋｇ体重〜５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲であり、より好ましくは、０．５ｍｇ／ｋｇ体重〜３０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲であり、より好ましくは、０．５ｍｇ／ｋｇ体重〜２０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲であり、最も好ましくは、１ｍｇ／ｋｇ体重〜１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲である。
【０１９０】
このように、本発明は、向精神活性を発揮する化学的コンジュゲートに関する。本発明の化学的コンジュゲートは、強化された治療活性を発揮し、かつ、最小限に抑えられた、それにより誘導される有害な副作用によってさらに特徴づけられるので非常に好都合である。
【０１９１】
本明細書中で使用される表現「副作用」は、ある種の薬物、具体的には、向精神性薬物を対象に投与することの結果として発症し得る有害な症状を示す。
【０１９２】
本明細書中で使用される表現「強化された治療活性」は、コンジュゲートを形成する向精神性薬剤および／または有機酸の、それ自体で投与されたときの向精神活性または抗増殖活性よりも大きい、本発明のコンジュゲートの向精神活性または抗増殖活性（これらの表現は本明細書中で定義される通りである）を記載する。下記の実施例の節において明らかにされるように、そのような強化された治療活性は、典型的には、コンジュゲート化されていない向精神性薬剤および／または有機酸の効果的な濃度と比較した場合、特定の治療活性を達成するために要求される薬物の低下した効果的な濃度によって特徴づけられる。
【０１９３】
本明細書中で使用される表現「強化された治療活性」はさらに、さらなる治療活性、従って、付加された治療的価値、例えば、ＧＡＢＡ活性の増大、痛みの緩和などが伴う、本発明のコンジュゲートによって発揮される向精神活性および／または抗増殖活性を記載する。何らかの特定の理論に拘束されることはないが、本発明の化学的コンジュゲートの強化された治療活性は、少なくとも部分的には、脳における神経伝達物質の改善されたバランスから生じることが推定される。
【０１９４】
本明細書中で使用される表現「向精神活性」は、ＣＮＳに関連した障害を治療することを目指す、ＣＮＳにおいて発揮される薬理学的活性を記載する。そのような薬理学的活性には、典型的には、ニューロンのシグナル伝達の調節が含まれる。
【０１９５】
さらに、本発明によれば、対象（例えば、ヒト）における増殖性の障害または疾患を治療または防止するための方法が提供される。この方法は、治療有効量の本発明の化学的コンジュゲートの１つまたは複数を治療される対象に投与することによって行われる。
【０１９６】
本明細書中で使用される用語「増殖性の障害または疾患」は、細胞増殖によって特徴づけられる障害または疾患を示す。本発明によって防止または治療され得る細胞増殖状態には、例えば、悪性の腫瘍（例えば、ガンなど）および良性の腫瘍が含まれる。
【０１９７】
本明細書中で使用される用語「ガン」は、Ｓｔｅｄｍａｎ’ｓ  ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ（第２５版）（Ｈｅｎｓｙｌ編、１９９０）によって定義されるように様々なタイプの悪性の新生物（そのほとんどが周りの組織に侵入することができ、また、異なる部位に転移し得る）を示す。本発明の化学的コンジュゲートによって治療され得るガンの例には、脳および皮膚のガンが含まれるが、これらに限定されない。これらのガンはさらに分類することができる。例えば、脳のガンには、多形性神経膠芽細胞腫、未分化星状膠細胞腫、星状膠細胞腫、上衣細胞腫、乏突起膠腫、髄芽細胞腫、髄膜腫、肉腫、血管芽細胞腫および松果体実質が含まれる。同様に、皮膚のガンには、メラノーマおよびカポジ肉腫が含まれる。本発明の化学的コンジュゲートを使用して治療可能な他のガン性疾患には、乳頭腫、ブラストグリオーマ、卵巣ガン、前立腺ガン、扁平上皮ガン、星状膠細胞腫、頭部ガン、頸部ガン、膀胱ガン、乳ガン、肺ガン、結腸直腸ガン、甲状腺ガン、膵臓ガン、胃ガン、肝細胞ガン、白血病、リンパ腫、ホジキンリンパ腫およびバーキットリンパ腫が含まれる。
【０１９８】
他の非ガン性増殖性障害もまた、本発明の化学的コンジュゲートを使用して治療可能である。そのような非ガン性増殖性障害には、例えば、狭窄症、再狭窄、ステント内狭窄、血管移植片再狭窄、関節炎、リウマチ様関節炎、糖尿病網膜症、血管形成、肺線維症、肝硬変、アテローム性動脈硬化、糸球体腎炎、糖尿病性腎症、血栓性細小血管障害症候群および移植拒絶が含まれる。
【０１９９】
下記の実施例の節において明らかにされるように、本発明の化学的コンジュゲートは、ＭＤＲガン細胞を含む広範囲の様々なガン細胞に対する大きく、かつ、強力な抗増殖活性を発揮する。
【０２００】
下記の実施例の節においてさらに明らかにされるように、本発明の化学的コンジュゲートは、様々な化学療法薬物との組合せで使用されたとき、化学感作活性をさらに発揮する。
【０２０１】
従って、さらに、本発明によれば、化学感作の方法が提供される（この用語は本明細書中上記で定義される通りである）。この方法は、治療有効量の１つまたは複数の化学療法剤と、化学感作有効量の本発明の化学的コンジュゲートとを対象に投与することによって行われる。
【０２０２】
本明細書中で使用される表現「化学感作有効量」は、治療量の化学療法剤の存在下での測定可能な化学感作のために十分な量を記載する。
【０２０３】
この方法は、対象がＭＤＲガン（例えば、白血病、リンパ腫、ガン腫または肉腫など、これらに限定されない）を有する場合に特に有用である。本発明によれば、化学療法剤は、例えば、下記のいずれかであり得る：アルキル化剤、例えば、ナイトロジェンマスタード系、エチレンイミン系およびメチルメラミン系、アルキルスルホナート系、ニトロソウレア系、ならびにトリアゼン系など；代謝拮抗剤、例えば、葉酸アナログ、ピリミジンアナログおよびプリンアナログなど；天然物、例えば、ビンカアルカロイド、エピポドフィロトキオシン系、抗生物質、酵素、タキサン系、および生物学的応答修飾剤など；その他の薬剤、例えば、白金配位錯体、アントラセンジオン系、アントラサイクリン系、置換ウレア、メチルヒドラジン誘導体または副腎皮質抑制剤など；あるいは、ホルモンまたはアンタゴニスト、例えば、副腎皮質ステロイド、プロゲスチン系、エストロゲン系、抗エストロゲン剤、アンドロゲン系、抗アンドロゲン剤、または、性腺刺激ホルモン放出ホルモンアナログなど。好ましくは、化学療法剤は、ナイトロジェンマスタード系、エピポドフィロトキオシン系、抗生物質または白金配位錯体である。より好ましい化学療法剤はシスプラチンまたはビンクリスチンである。
【０２０４】
従って、本発明は、対応するコンジュゲート化されていない向精神性薬物よりも大きい向精神活性、実質的に低い副作用および低い毒性を発揮する、向精神性薬物の新規な化学的コンジュゲートを教示する。このような新規なコンジュゲートは、抗増殖活性および化学感作活性をさらに発揮し、従って、低下した副作用、低い毒性、および、脳細胞に対する大きい親和性によって特徴づけられるプロドラッグとして、または、化学療法薬物との組合せで使用される化学感作剤としてのいずれかで、増殖性障害の治療において有益に使用することができる。
【０２０５】
本発明の追加の目的、利点及び新規な特徴は、下記実施例を考察すれば、当業技術者には明らかになるであろう。なおこれら実施例は本発明を限定するものではない。さらに、先に詳述されかつ本願の特許請求の範囲の項に特許請求されている本発明の各種実施態様と側面は各々、下記実施例の実験によって支持されている。
【実施例】
【０２０６】
上記説明とともに、以下の実施例を参照して本発明を例示する。なおこれら実施例によって本発明は限定されない。
【０２０７】
化学合成および分析
本発明の例示的な化学的コンジュゲートを、向精神性薬剤のペルフェナジン、フルフェナジンおよびバルプロ酸を、短鎖脂肪酸のプロピオン酸、酪酸および吉草酸、ならびに／または、４−フェニル酪酸およびγ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）と反応することによって合成した。化合物は高収率で合成され、１％乳酸水溶液に可溶性である結晶性固体として単離された。
【０２０８】
ペルフェナジンまたはフルフェナジンおよび有機酸から調製される化学的コンジュゲートの合成−一般的手順：５ｍｌ〜１０ｍｌのジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）における、神経遮断性薬剤のペルフェナジンまたはフルフェナジン（１当量）と、短鎖脂肪酸のアシルクロリド誘導体（１．１当量）と、場合により、Ｅｔ３Ｎ（２当量）（これは、そのＨＣｌ塩として見出される出発物質を遊離状態にするために使用される）との混合物を窒素雰囲気下において室温で２４時間撹拌した。その後、混合物を酢酸エチルと水との間で分配した。その後、有機層を５％ＮａＨＣＯ３およびブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過し、エバポレーションして、所望する生成物を得た。
【０２０９】
４−フェニル酪酸ペルフェナジン（ＡＮ１３０）の合成：ペルフェナジンおよび４−フェニルブチルリルクロリド（４−フェニル酪酸のアシルクロリド誘導体）を上記のように反応させた。得られた粗残渣を、１：１０のメタノール：酢酸エチルの混合物を溶出液として使用してシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。生成物を黄色のオイルとして得た（７８％の収率）。
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【０２１０】
酪酸ペルフェナジン（ＡＮ１６７）の合成：ペルフェナジンおよびブチルリルクロリド（酪酸のアシルクロリド誘導体）を上記のように反応させた。生成物が黄色のオイルとして得られ（７４％の収率）、これを、さらに精製することなく使用した。
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【０２１１】
プロピオン酸ペルフェナジン（ＡＮ１７７）の合成：ペルフェナジンおよびプロピオニルクロリド（プロピオン酸のアシルクロリド誘導体）を上記のように反応させた。生成物が黄色のオイルとして得られ（８５％の収率）、これを、さらに精製することなく使用した。
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【０２１２】
吉草酸ペルフェナジン（ＡＮ１７８）の合成：ペルフェナジンおよびバレリルクロリド（吉草酸のアシルクロリド誘導体）を上記のように反応させた。得られた粗残渣を、７：４の酢酸エチル：ヘキサンの混合物を溶出液として使用してシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。生成物を黄色がかったオイルとして得た（７５％の収率）。
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【０２１３】
プロピオン酸フルフェナジン（ＡＮ１７９）の合成：フルフェナジンおよびプロピオニルクロリド（プロピオン酸のアシルクロリド誘導体）を上記のように反応させた。生成物が黄色がかったオイルとして得られ（９５％の収率）、これを、さらに精製することなく使用した。
2011121971.tif 000006
【０２１４】
酪酸フルフェナジン（ＡＮ１８０）の合成：フルフェナジンおよびブチルリルクロリドを上記のように反応させた。生成物が黄色がかったオイルとして得られ（９７％の収率）、これを、さらに精製することなく使用した。
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【０２１５】
吉草酸フルフェナジン（ＡＮ１８１）の合成：フルフェナジンおよびバレリルクロリド（吉草酸のアシルクロリド誘導体）を上記のように反応させた。得られた粗残渣を、７：４の酢酸エチル：ヘキサンの混合物を溶出液として使用してシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。生成物を黄色がかったオイルとして得た（７５％の収率）。
2011121971.tif 000008
【０２１６】
ペルフェナジンまたはフルフェナジンおよびアミノ有機酸から調製される化学的コンジュゲートの合成−一般的手順：５ｍｌ〜１０ｍｌのＤＭＦにおける、Ｎ−保護のアミノ酸（１当量）と、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）（１．１当量）との混合物を窒素雰囲気下において１時間撹拌した。その後、ペルフェナジンまたはフルフェナジン（１当量）を加え、混合物を窒素雰囲気下において９０℃で２４時間撹拌した。得られたスラリーをエバポレーションし、酢酸エチルと水との間で分配した。水相を酢酸エチルで２回抽出し、有機層を一緒にしてＮａＨＣＯ３により２回洗浄し、次いで、ブラインにより２回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過し、エバポレーションした。Ｎ−保護の生成物を黄色がかったオイルとして得た。
【０２１７】
Ｎ−保護基を生成物から下記のように除いた：Ｎ−保護の生成物を含む酢酸エチルにおける溶液に、４ＮのＨＣｌを含む酢酸エチルにおける溶液を滴下して加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。その後、溶媒をエバポレーションし、残渣を高真空下でさらに乾燥した。得られた生成物（三塩酸塩として）をメタノール／エーテルの混合物から再結晶し、ろ過し、乾燥した。
【０２１８】
Ｎ−ｂｏｃ−４−アミノ酪酸ペルフェナジンの合成：ペルフェナジンおよびＮ−ｔ−ｂｏｃ−ＧＡＢＡ（Ｎ−ｔ−ｂｏｃにより保護された４−アミノ酪酸）を上記のように反応させた。粗残渣を、２０：１の酢酸エチル：エタノールの混合物を溶出液として使用してシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。生成物を黄色がかったオイルとして得た（６３％の収率）。
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【０２１９】
Ｎ−ｂｏｃ−４−アミノ酪酸フルフェナジンの合成：フルフェナジンおよびＮ−ｔ−ｂｏｃ−ＧＡＢＡ（Ｎ−ｔ−ｂｏｃにより保護された４−アミノ酪酸）を上記のように反応させた。粗残渣を、２０：１の酢酸エチル：エタノールの混合物を溶出液として使用してシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。生成物を黄色がかったオイルとして得た（７５％の収率）。
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【０２２０】
４−アミノ酪酸ペルフェナジン三塩酸塩（ＡＮ１６８）の合成：上記のように調製されたＮ−ｂｏｃ−４−アミノ酪酸ペルフェナジンを、上記のようにＨＣｌと反応させた。三塩酸塩生成物が粘性の半固体オイルとして得られた（定量的収率）。
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【０２２１】
４−アミノ酪酸フルフェナジン三塩酸塩（ＡＮ１８７）の合成：Ｎ−ｂｏｃ−４−アミノ酪酸フルフェナジンを、上記のようにＨＣｌと反応させた。生成物が白色の固体として得られた（７５％の収率）
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【０２２２】
バルプロ酸および有機酸またはアミノ有機酸から調製される化学的コンジュゲートの合成−一般的手順：
バルプロ酸を、ＮａＨＣＯ３、Ｂｕ４Ｎ＋ＨＳＯ４−、水およびＣＨ２Ｃｌ２の存在下、室温でクロロメチル＝クロロスルファート（１．２当量）と反応させる。その後、水相を分離し、ＣＨ２Ｃｌ２により洗浄する。有機相をＮａＨＣＯ３の飽和水溶液およびブラインにより洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、エバポレーションして、バルプロ酸のクロロメチルエステルを残渣オイルとして得る。オイルを蒸留によって精製する。その後、バルプロ酸クロロメチルエステルを、上記の一般的手順と同様に、有機酸またはＮ−保護のアミノ有機酸と反応させて、それにより、所望する生成物を得る。
【０２２３】
２−プロピルペンタン酸（バルプロ酸）クロロメチルエステル（ＡＮ−２１５）の合成：バルプロ酸（２．７６グラム、１９ｍｍｏｌ）、ＮａＨＣＯ３（５．７５グラム、６８．４ｍｍｏｌ）、Ｂｕ４Ｎ＋ＨＳＯ４−（０．５グラム）、水（２５ｍｌ）およびＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）の混合物に、クロロメチル＝クロロスルファート（３．７９グラム、２３ｍｍｏｌ、１．２当量）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。その後、水層を分離し、ＣＨ２Ｃｌ２により洗浄した。有機層をＮａＨＣＯ３の飽和水溶液およびブラインにより順次洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、エバポレーションして、残渣オイルとして得た。オイルを蒸留（沸点、７０℃／４ｍｍＨｇ）によって精製して、２．０５グラム（５６％の収率）のＡＮ−２１５を得た。
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【０２２４】
２−プロピルペンタン酸（バルプロ酸）Ｎ−ｂｏｃ−４−アミノブチリルオキシメチルエステル（ＡＮ−２１７）の合成：乾燥エチルメチルケトンにおけるＮ−ｔ−ｂｏｃ−ＧＡＢＡ（Ｎ−ｔ−ｂｏｃにより保護された４−アミノ酪酸）（１．７８グラム、８．８ｍｍｏｌ）および２−プロピルペンタン酸クロロメチルエステル（１．８グラム、８．２７ｍｍｏｌ）の混合物を窒素雰囲気下において撹拌した。Ｅｔ３Ｎ（１グラム、９．５ｍｍｏｌ）を滴下して加え、反応混合物を６０時間加熱した。得られた白色沈殿物をろ過し、ろ液をエバポレーションした。残渣を酢酸エチルに溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液およびブラインにより順次洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、ろ過し、エバポレーションし、さらに高真空下で乾燥して、生成物をオイルとして得た（１．７グラム、５７％の収率）。これを、さらに精製することなく続いて使用した。
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【０２２５】
２−プロピルペンタン酸（バルプロ酸）４−アミノブチリルオキシメチルエステル塩酸塩（ＡＮ−２１６）の合成：２−プロピルペンタン酸Ｎ−ｔ−ｂｏｃ−４−アミノブチリルオキシメチルエステル（ＡＮ−２１７、これは本明細書中上記のように調製される）（１．７グラム、４．７ｍｍｏｌ）を含む酢酸エチルにおける溶液に、４ＮのＨＣｌを含む酢酸エチルの溶液を加えた。得られた混合物を室温で４時間撹拌し、その後、溶媒をエバポレーションし、残渣を高真空下でさらに乾燥した。残渣をエーテルに溶解し、ヘキサンを加えて、所望する生成物ＡＮ−２１６（０．７５グラム、６２％）を、３５〜３７℃の融点を有する非晶質固体として沈殿させた。
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【０２２６】
抗うつ剤（例えば、フルオキセチンまたはノルトリプチリン）および有機酸またはアミノ有機酸から調製される化学的コンジュゲートの合成−一般的手順：
遊離アミノ基を有する抗うつ剤を、塩化メチレン（ＣＨ２Ｃｌ２）中で、トリエチルアミンおよび１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）の存在下、有機酸またはＮ−保護のアミノ有機酸（１．２ｍｏｌ当量〜１．３ｍｏｌ当量）と反応させる。その後、溶媒をエバポレーションし、残渣をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、ＨＣｌ（１Ｎ）、飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインにより洗浄し、有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、エバポレーションして、生成物を得る。生成物は、場合により、必要ならば、カラムクロマトグラフィーによって精製することができる。Ｎ−保護の有機酸が使用される場合、脱保護がＥｔＯＡｃ溶液においてＨＣｌの存在下で定量的に行われる。
【０２２７】
３−（Ｎ−（３−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）−３−フェニルプロピル）−Ｎ−メチルカルバモイル）プロピルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＡＮ−２２９）の合成：
ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍｌ）における、フルオキセチン（０．９ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）（１．２ｍｍｏｌ）の乾燥混合物に、４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ酪酸（Ｎ−Ｂｏｃ−ＧＡＢＡ）（１．２ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を２４時間撹拌し、その後、溶媒をエバポレーションした。残渣をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、得られた溶液を、ＨＣｌ（１Ｎ）、飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインにより洗浄し、有機相をＭｇＳＯ４で乾燥した。その後、溶液をろ過し、溶媒をエバポレーションし、残渣を、ＥｔＯＡｃ：ヘキサン（４：１）の混合物を溶出液として使用してシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、生成物を３４％の収率で無色のオイルとして２つの回転異性体（主成分および微量成分）の形態で得た。
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【０２２８】
Ｎ−（３−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）−３−フェニルプロピル）−４−アミノ−Ｎ−メチルブタンアミド塩酸塩（ＡＮ−２２７）の合成：
ＡＮ−２２９（０．５ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（３５ｍｌ）におけるＨＣｌの溶液に加え、得られた混合物を３時間撹拌した。その後、溶媒をエバポレーションし、生成物ＡＮ−２２７を定量的収率で得た。
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【０２２９】
３−（１０，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプタン−５−イリデン−Ｎ−メチル−１−プロパンアミン−３−メチルカルバモイル）プロピルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＡＮ−２３０）の合成：
ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍｌ）における、ノルトリプチリン（１ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．２ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）（１．３ｍｍｏｌ）およびＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍｌ）の乾燥混合物に、４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ酪酸（Ｎ−Ｂｏｃ−ＧＡＢＡ）（１．３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で４８時間撹拌し、その後、溶媒をエバポレーションした。残渣をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、得られた溶液を、ＨＣｌ（１Ｎ）、飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインにより抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、溶液をろ過し、エバポレーションし、生成物を３４％の収率で固体として分離した。
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【０２３０】
１０，１１−ジヒドロ−５−（３−メチルアミノプロビリデン）−５Ｈ−ジベンゾ［ａ，ｄ］［１,４］シクロヘプテン−４−アミノ−Ｎ−ブタンアミド塩酸塩（ＡＮ−２２８）の合成：
ＡＮ−２３０（０．５ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（３５ｍｌ）におけるＨＣｌの溶液に加え、得られた混合物を３時間撹拌した。その後、溶媒をエバポレーションし、生成物を２つの回転異性体の形態で定量的収率で得た。
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【０２３１】
下記の表１は、本明細書中上記で記載された方法によって合成される化学的コンジュゲートを示す。
【表１】
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【０２３２】
活性アッセイ
材料および実験方法
細胞株：ヒト前立腺ガン腫（ＰＣ−３）、ヒト結腸ガン腫（ＨＴ−２９）、マウスメラノーマ（Ｂ−１６）およびその薬物耐性サブクローン（Ｂ−１６ＭＤＲ）、マウス繊維芽細胞（３Ｔ３）、骨髄性白血病（ＨＬ６０）およびその薬物耐性サブクローン（ＨＬ６０ＭＸ２）、子宮内膜細胞株（ＭＥＳ  ＳＡ）およびその薬物耐性サブクローン（ＭＥＳ  ＤＸ５）、ＪｕｒｋａｔＴリンパ腫、単球白血病（Ｕ−９３７）、ならびに神経膠腫細胞株のＵ８７ＭＧおよびＵ２５１ＭＧをこの研究では使用した。
【０２３３】
ラット繊維芽細胞の初代培養物を、知られている手順［７］を使用して新生児ラットから得た。
【０２３４】
ニューロン細胞およびグリア細胞を妊娠（１４日目〜１５日目）ＩＣＲマウスの胎児の脳から調製した。脳を解剖し、Ｌｅｉｂｏｗｉｔｃｈ  Ｌ−１５培地（Ｂｅｔｈ  Ａｅｍｅｋ）、７５μｇ／ｍｌのゲンタマイシンおよび０．２ｍＭのグルタミンの混合物においてホモジネートした。細胞（３００Ｋ／ウエル〜５００Ｋ／ウエル）をポリ−Ｄ−リシン処理された９６ウエルマイクロプレートに播種した。選択されたニューロン培養物を、その４８時間後に５−フルオロデオキシウリジン（ＦＵＤＲ）およびウリジンをプレートの半分に加えることによって得た。非処理の培養物はニューロン細胞およびグリア細胞の混合物を含んでいた。細胞を、１０％のＦＣＳ（ウシ胎児血清）および２ｍＭグルタミンが補充されたＲＰＭＩ培地またはＤＭＥＭ培地において成長させ、加湿された５％ＣＯ２インキュベーターにおいて３７℃でインキュベーションした。
【０２３５】
ラット筋細胞培養物を１日齢〜２日齢のＷｉｓｔａｒ新生児ラット（Ｈａｒｌａｎ）から調製した。３０匹の新生児ラットを、約２５百万個〜３０百万個の細胞を得るために使用した。この目的のために、心臓を解剖し、ＲＤＢ（商標）（イチジクの木の抽出物から単離されたプロテアーゼ）を使用して室温で酵素により組織解離した。このプロトコルを、細胞が完全に分散されるまで５回繰り返した。分散された細胞を、４５分間、組織培養フラスコ（ＤＭＥＭ培地において３×１０６個／ｍｌ）に予備的に置床し、その後、筋細胞以外の細胞を減少させるために、ゼラチン被覆されたマイクロタイタープレートに２４時間移した。その後、細胞毒性剤ＡＲＯ−Ｃを培養物に加えて、それにより、分裂中の細胞を除き、分裂中でない筋細胞のみを培養物に残した。細胞を４日間インキュベーションし、その後、顕微鏡検査を行った。
【０２３６】
神経膠腫細胞株（Ｕ８７ＭＧ、Ｕ２５１ＭＧ）を、１０％のウシ胎児血清（Ｂｅｔｈ  Ａｅｍｅｋ）およびペニシリン（１００ユニット／ｍｌ）−ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）が補充されたダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）で、３７℃および８％ＣＯ２での加湿インキュベーターにおいて成長させた。
【０２３７】
ガン細胞および正常細胞の増殖：増殖を、ニュートラルレッドアッセイ［８］によって、または、ＤＮＡ含有量を定量する蛍光光度法アッセイ［９］によって測定した。ニュートラルレッドアッセイでは、ニュートラルレッドがリソソームによって吸収され、従って、これにより、生細胞の着色が生じる。定量分析を比色測定アッセイ（５５０ｎｍにおけるＥＬＩＳＡ読み取り装置）によって行う。蛍光測定アッセイでは、アラマーブルーがレドックス指示薬として使用される。アラマーブルーの蛍光を５４４ｎｍの励起波長および５９０ｎｍの放射波長で測定した（ＦＬＵＯｓｔａｒ  ＢＭＧ  Ｌａｂ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｏｆｆｅｎｂｕｒｇ、ドイツ）。
【０２３８】
アポトーシスおよびＤＮＡ断片化：細胞核の断片化をヨウ化プロピジウム染色された細胞のフローサイトメトリー分析によって調べた。この分析を、４８０ｎｍの励起波長に調節されたアルゴンイオンレーザーと、Ｄｏｕｂｌｅｔ  Ｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｔｉｏｎ  Ｍｏｄｕｌｅ（ＤＤＭ）とを備えるＦＡＣＳｃａｎ（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ、ＣＡ）を使用して行った。ＬｙｓｉｓＩＩ（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）ソフトウエアをデータ取得のために使用した。アポトーシスの核変化をＮｉｃｏｌｌｅｔｔｉ他［１３］の基準に従って評価した。
【０２３９】
化学感作：ペルフェナジンおよびその化学的コンジュゲートＡＮ１６８の化学感作作用をインビトロで測定した。様々な濃度のペルフェナジンまたはＡＮ１６８をＣ６ラット神経膠腫細胞またはＪｕｒｋａｔＴリンパ腫細胞のいずれかに化学療法剤と一緒に同時投与した。化学療法剤、ペルフェナジン、ＡＮ１６８、化学療法剤とペルフェナジンとの組合せ、または、化学療法剤とＡＮ１６８との組合せのいずれかによる治療の後における細胞生存性および／またはＤＮＡ断片化を本明細書中上記に記載されるように測定した。
【０２４０】
動物：若い成体オスラット（１５０グラム〜２３０グラム）をＨａｒｌａｎ（イスラエル）から購入した。動物をケージあたり２匹〜５匹で分け、制御された条件で、実験前の１週間、動物室において飼育した。実験を、実験未使用の動物を用いて二重盲検手順で行った。各実験において、様々な治療群（それぞれ約５匹〜１０匹の動物）が試験された。
【０２４１】
若い成体のオスマウスおよびメスマウスをＨａｒｌａｎ（イスラエル）から購入した。動物を、実験の前に、制御された条件のもとで４日間〜７日間飼育した。実験を二重盲検手順で行った。各実験において、様々な治療群（それぞれ約１０匹の動物）が試験された。
【０２４２】
ラットにおけるカタレプシー：定型神経遮断剤により誘導される錐体外路の有害な作用の発現を神経遮断治療後のラットにおける常同的なカタレプシー行動の出現によって評価した。カタレプシーを２つの方法によって決定した：（ｉ）動物がケージの壁にしがみついてその後肢を動かし、平坦な表面に到達するために要した時間を測定すること「壁」試験）によって、および、（ｉｉ）ラットを、その前肢を平坦な棒（５．５ｃｍの高さ）にもたれさせながら平坦な表面に置いた（これはピアノ演奏姿勢に類似する）。カタレプシーを、動物が降りて、平坦な表面に到達するために要した時間によって決定した（「ピアノ」試験）。最大追跡時間は２分であり、これらの測定を各動物について１時間毎に個々に行った。これらの試験は中枢神経ドーパミン（ＤＡ）遮断活性の評価をもたらし、抗精神病薬により誘導される錐体外路症状についての許容され得る基準である［１０］。全体的な誘導されたカタレプシーおよびその経時変化を、ペルフェナジン、フルフェナジン、ならびに、ＡＮ１６７、ＡＮ１６８、ＡＮ１７７、ＡＮ１７８、ＡＮ１８０およびＡＮ１８７の化合物（本明細書中上記の表１を参照のこと）について測定し、これにより、種々の一組の化合物および種々の条件を比較した。一般には、５ｍｇ／Ｋｇの母体薬物（ペルフェナジン）および７．５ｍｇ／Ｋｇのフルフェナジンおよび等モル用量の本発明のそれらの関連した化学的コンジュゲートを１％の乳酸に溶解して、動物に腹腔内注射した。異なる一組の測定では、ＡＮ１６８およびペルフェナジンを１％の乳酸に溶解して、動物に経口投与した。
【０２４３】
マウスにおけるカタレプシー：神経遮断剤治療後のマウスにおける常同的なカタレプシー行動の出現を２つの異なる実験組で測定した。
【０２４４】
第１の一組では、成体のオスを群に分け、各群を、ペルフェナジン（１．５ｍｇ／ｋｇ、９匹）、ペルフェナジンおよび等モル用量のＧＡＢＡの混合物（７匹）、等モル用量のＡＮ−１６８（８匹）、または治療なし（コントロール群、６匹）のいずれかによって治療した。カタレプシーを、２つのケージおよびそれらの間の棒からなる系を使用して決定した。マウスを棒の中央部にしがみつかせ、２分以内に目標に到達する動物の割合を、治療後の１時間、２時間および３時間でモニターした。
【０２４５】
第２の一組では、若いメスを群に分け、各群を、２．５ｍｇ／ｋｇのペルフェナジン（６匹）、ペルフェナジンおよび等モル用量のＧＡＢＡの混合物（６匹）、等モル用量のＡＮ−１６８（７匹）、または治療なし（コントロール群、７匹）のいずれかによって治療した。カタレプシーを、本明細書中上記で記載された系を使用して決定した。マウスを棒の中央部にしがみつかせ、動物が目標に到達するために要した時間を測定した。
【０２４６】
プロラクチン分泌：定型神経遮断剤は、乳汁漏出ならびに損なわれた生殖腺機能および性機能にしばしば関連づけられる過プロラクチン血症を誘導する［１１］。従って、循環している血漿中プロラクチンレベルの測定を、既知の神経遮断剤および本発明の化学的コンジュゲートの、その腹腔内投与後または経口投与後の向精神活性についての高感度な生化学的マーカーとして使用した。従って、血液をエーテル麻酔下のラットの穿刺された眼窩から集め、アッセイを、Ｍｉｌｌｅｎｎｉａラットプロラクチン酵素免疫測定アッセイキット（ＤＰＣ、米国）を使用して行った。
【０２４７】
行動基準：本発明の化学的コンジュゲートによって治療された動物の鎮静を観察し、下記に記載されようにスコア化した（表２）。様々な治療群における動物の鎮静および可動性の程度を、０〜３のスコアを使用して評価した。０のスコアは活発かつ可動性の動物を表し、１のスコアは、落ち着き、かつ、可動性の動物を表し、２のスコアは、落ち着き、かつ、動かない動物を表し、３のスコアは、完全に運動失調性で、かつ、無警戒な動物を表す。治療された動物の行動により、試験された既知の神経遮断剤および化学的コンジュゲートの神経遮断効力、ならびに、それに誘導される錐体外路症状の重篤度が推定された。
【０２４８】
毒性：インビトロ毒性を、新生児マウスの脳から得られたニューロンの初代培養物、ならびに、全脳のニューロン細胞およびグリア細胞の初代培養物に対する試験された化合物（既知の神経遮断剤および本発明の化学的コンジュゲートのいずれか）の影響を測定することによって明らかにした。ペルフェナジンおよびその化学的コンジュゲートＡＮ１６８のインビトロ毒性はまた、ラット筋細胞を用いて明らかにされた。ＬＤ５０により明らかにされるようなインビボでの急性毒性を、２ヶ月齢のＩＣＲマウスに対して、単回腹腔内ボーラス用量の薬物の投与の後で評価した。
【０２４９】
ラットにおけるＤ−アンフェタミン誘導による活動過多：本発明の化学的コンジュゲートの効力を、統合失調症についての最も確立された動物モデルの１つ［１４］として知られている、Ｄ−アンフェタミン誘導による活動過多および可動性のモデルを使用して調べた。
【０２５０】
実験未使用のＷｉｓｔａｒオスラットを個々の箱に入れた。各実験において、４匹のラットを調べた。ペルフェナジンまたは等モル用量のその化学的コンジュゲートＡＮ−１６８を、アンフェタミン（２．５ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内投与の３０分前に、または、アンフェタミン（２．５ｍｇ／ｋｇ）の経口投与の９０分前にラットに腹腔内（ｉｐ）投与した。動物の運動活性を、（樽の壁における動物のよじ登り試み（大きな運動として）、および、動物の頭部運動（小さい運動として）の２つのパラメーターを使用して評価した。評価を２時間にわたって１５分毎に記録した。各動物を各時点で１２０秒間調べた。
【０２５１】
神経膠腫細胞に対する抗増殖活性：本発明によるバルプロ酸の様々なコンジュゲート（ＡＮ−１３８、ＡＮ−１４８、ＡＮ−２１６およびＡＮ−２２３）の抗増殖活性を、下記のように、Ｈｏｅｃｈｓｔアッセイをわずかに改変して使用して細胞成長を測定することによって調べた：１．５×１０４細胞／ｍｌの密度での細胞を組織培養用の９６ウエルプレートに２４時間播種し、その後、異なる濃度の試験された化合物またはコンジュゲートに７２時間さらした。その後、治療された細胞をＰＢＳにより洗浄し、エタノール（７０％）により３０分間固定処理した。その後、エタノールを捨て、ＰＢＳに可溶化された１０ｍｇ／ｍｌの蛍光性プローブのビス−ベンズイミド（Ｈｏｅｃｈｓｔ試薬、Ｂ２２６１、Ｓｉｇｍａｍ、米国）の２００ｍｌを加えた。蛍光を、ＦｌｕｏＳｔａｒ蛍光計を用いて３９０ｎｍ〜４６０ｎｍで測定した。各実験を少なくとも３回行い、各用量を四連で調べた。化合物の力価測定の後でのＩＣ５０値を生存割合の線形回帰によって求めた。
【０２５２】
実験結果
ペルフェナジン、および、ペルフェナジンを含有する化学的コンジュゲートの誘導されたカタレプシーおよび精神医学的活性：
５ｍｇ／ｋｇのペルフェナジンおよび等モル用量のその化学的コンジュゲート（ＡＮ１３０、ＡＮ１６７およびＡＮ１６８（本明細書中上記の表１を参照のこと））の誘導されたカタレプシーおよび精神医学的活性を、ケージあたり５匹で分けられた若い成体Ｗｉｓｔａｒオスラット（１５０グラム〜２００グラムの体重）にこれらの化合物を１％乳酸に溶解して腹腔内投与することによって測定し、本明細書中上記に記載される「壁」によって求めた。コントロールの動物群はビヒクル（乳酸）のみにより治療された。カタレプシーおよびプロラクチン分泌の両方に対する治療の影響を２時間の期間にわたって追跡した。その結果を図１ａおよび図１ｂに示す。
【０２５３】
図１ａは、治療後０分、６０分および１２０分で二連で行われた３回の測定の結果としての、誘導されたカタレプシーについて得られたデータを示す。各柱は５匹の動物の平均を表す。総時間をペルフェナジン（例えば、１００％）に対して正規化した。得られたデータは、カタレプシーがペルフェナジンおよびＡＮ１３０の治療によって誘導され、その一方で、ＡＮ１６７およびＡＮ１６８では、カタレプシーが全く誘導されなかったことを示している。
【０２５４】
図１ｂは、治療後０分、６０分および１２０分で測定されたプロラクチン血中レベルを示し、それぞれの示された時間での３回の測定の和を表す。プロラクチン血中レベルは化合物の向精神活性についての生化学的マーカーとして役立つ。得られたデータは、動物におけるプロラクチン血中レベルのプロフィルが、ペルフェナジン、ＡＮ１３０、ＡＮ１６７またはＡＮ１６８により治療されたとき、６０分でピークに達し、その後は低下して、類似することを示している。プロラクチン血中レベルは、ＡＮ１３０、ＡＮ１６７およびＡＮ１６８の化学的コンジュゲートにより治療された動物において、各時点で、ペルフェナジンの場合と類似していた。このことは、化学的コンジュゲートの向精神活性が母体薬物の向精神活性と類似することを示している。ビヒクル（１％乳酸）のみにより治療されたコントロール動物では、プロラクチンのレベルは変化していなかった。
【０２５５】
ＳＡＲ（構造活性相関）研究：ＳＡＲ研究を、ペルフェナジン、および、ペルフェナジンを含む化学的コンジュゲートについて行った。誘導されたカタレプシーを本明細書中上記に記載されるように測定し、「壁」試験によって求めた。結果が図２に示される。ペルフェナジンとＧＡＢＡとのコンジュゲートであるＡＮ１６８が最も効果的であり、誘導されたカタレプシーのほぼ最大の低下をもたらし、吉草酸含有コンジュゲートＡＮ１７８、プロピオン酸含有コンジュゲートＡＮ１７７、および、酪酸含有コンジュゲートＡＮ１６７がそれに続くことが見出された。この実験は、ペルフェナジンそれ自体による治療によって誘導されるカタレプシーと比較した場合、化学的コンジュゲートによる治療の後における誘導されたカタレプシーの著しい低下を示している。
【０２５６】
ペルフェナジン、フルフェナジン、および、それらを含有する化学的コンジュゲートにより誘導されるカタレプシーおよび動物行動：ペルフェナジン、フルフェナジン、ならびに、その酪酸含有化学的コンジュゲートおよびＧＡＢＡ含有化学的コンジュゲート（ＡＮ１６７、ＡＮ１６８、ＡＮ１８０およびＡＮ１８７、表１を参照のこと）を、それらにより誘導される総カタレプシー、その投与後における誘導されたカタレプシーの経時変化および動物行動について調べた。測定を、５ｍｇ／Ｋｇのペルフェナジン、等モル濃度のＡＮ１６７およびＡＮ１６８、７．５ｍｇ／Ｋｇのフルフェナジン、ならびに、等モル濃度のＡＮ１８０およびＡＮ１８７の腹腔内注射後に行った。カタレプシーを「壁」試験によって求めた。
【０２５７】
図３ａは、試験された化合物により誘導された総カタレプシーを明らかにする。得られたデータは、ペルフェナジンおよびフルフェナジン（＝１００％）に対する総時間の正規化による、投与後０分、３０分、６０分、９０分、１２０分、１８０分、２４０分および４２０分で行われた測定の和である。酪酸含有化学的コンジュゲートのＡＮ１６７およびＡＮ１８０はともにカタレプシーを著しく低下させた。ペルフェナジンのＧＡＢＡ含有コンジュゲートＡＮ１６８はカタレプシーを止め、一方、フルフェナジンのＧＡＢＡ含有コンジュゲートＡＮ１６８はカタレプシーをかなり低下させた。
【０２５８】
図３ｂは、ペルフェナジン、そのＧＡＢＡコンジュゲートＡＮ１６８、フルフェナジンおよびそのＧＡＢＡコンジュゲートＡＮ１８７による治療の後の０分、６０分および１２０分で測定されたプロラクチン血中レベルを示す。得られたデータは、動物におけるプロラクチン血中レベルのプロフィルが、ペルフェナジン、フルフェナジンまたはそれらのＧＡＢＡ化学的コンジュゲートにより治療されたとき、６０分でピークに達し、その後は低下して、類似することを示している。プロラクチン血中レベルは、ＡＮ１６８およびＡＮ１８７により治療された動物において、各時点で、ペルフェナジンおよびフルフェナジンの場合とそれぞれ類似していた。
【０２５９】
図４ａは、ペルフェナジン、および、ペルフェナジンを含有する化学的コンジュゲートにより誘導されるカタレプシーの、７時間の期間にわたる経時変化を明らかにする。ペルフェナジンにより誘導されるカタレプシーは２時間後にピークに達し、その後は低下した。酪酸含有コンジュゲートＡＮ１６７は、ペルフェナジンとして比較して、低下したカタレプシーを誘導し、その一方で、ＧＡＢＡ含有コンジュゲートＡＮ１６８により治療された動物はこの研究の全７時間の期間を通してカタレプシーを有しなかった。
【０２６０】
図４ｂは、フルフェナジン、および、ペルフェナジンを含有する化学的コンジュゲートにより誘導されるカタレプシーの、７時間の期間にわたる経時変化を明らかにする。フルフェナジンにより治療された動物は、測定された７時間の期間中にカタレプシーを示し、その一方で、ＡＮ１８０およびＡＮ１８７により治療された動物はより低いカタレプシーを示した。ＡＮ１８０により治療されたカタレプシーは測定期間中変動しており、その一方で、ＡＮ１８７により治療されたカタレプシーは７時間の期間の終了時にはなくなっていた。この研究における動物はどれも２４時間後にカタレプシーを有していなかった。
【０２６１】
動物の行動に対する試験化合物の投与の影響を、本明細書中上記に記載される治療の後における動物の鎮静および可動性の程度を、０〜３のスコアを使用して評価することによって測定した。０のスコアは活発かつ可動性の動物を表し、１は、落ち着き、かつ、可動性の動物を表し、２は、落ち着き、かつ、動かない動物を表し、３は、完全に運動失調性で、かつ、無警戒な動物を表す。得られたスコアが下記の表２にまとめられる。得られたスコアは、既知の薬物の動物行動と比較されるような動物行動に対する化学的コンジュゲートの低下した影響を明らかにしている。
【表２】
2011121971.tif 000023
【０２６２】
ＡＮ１６８と、ペルフェナジンおよびＧＡＢＡの混合物とによるラットにおける誘導されたカタレプシー：ラットにおいて誘導されたカタレプシーに対するＡＮ１６８（ペルフェナジンのＧＡＢＡコンジュゲート）の影響を、その母体薬物（すなわち、コンジュゲート化されていないペルフェナジンおよびＧＡＢＡ）の混合物により誘導されるカタレプシーと比較した。カタレプシーを、コンジュゲートまたは記載された混合物の腹腔内投与の後６０分、９０分および１２０分で測定し、「壁」試験によって求めた。
【０２６３】
図５ａは、様々な治療により誘導された総カタレプシーについて得られたデータを示す。ＡＮ１６８により治療された群における動物は非常に低いカタレプシーを示し、その一方で、ペルフェナジンおよびＧＡＢＡの混合物により治療された群におけるカタレプシーは高かった。
【０２６４】
図５ｂは両方の治療の後におけるカタレプシーの経時変化を示しており、カタレプシーが、ＡＮ１６８により治療された動物では低下し、１２０分後にはなくなっていることを明らかにしている。
【０２６５】
ＡＮ１６７およびＡＮ１６８によりラットにおいて誘導されるカタレプシー：４つの独立した実験でＡＮ１６７およびＡＮ１６８により誘導される総カタレプシーを調べ、同じ実験条件のもとでのペルフェナジンにより誘導されるカタレプシーと比較した。
【０２６６】
等モル用量のＡＮ１６７およびＡＮ１６８の後での総カタレプシーの平均が、ペルフェナジンにより誘導されるカタレプシーの百分率として、図６に示される。ＡＮ１６７は、ペルフェナジンと比較した場合、より低いカタレプシーを誘導したが、ＡＮ１６８は、誘導されたカタレプシーをほぼ０の値に低下させた。
【０２６７】
ペルフェナジン、ペルフェナジンとＧＡＢＡとの混合物、およびＡＮ１６８によるマウスにおける誘導されたカタレプシー：マウスにおいて誘導されるカタレプシーに対するＡＮ１６８（ペルフェナジンのＧＡＢＡコンジュゲート）の影響を、ペルフェナジン単独により誘導されるカタレプシーと比較し、また、母体薬物（すなわち、コンジュゲート化されていないペルフェナジンおよびＧＡＢＡ）の混合物により誘導されるカタレプシーと比較した。カタレプシーを、治療の腹腔内注射の後６０分、９０分および１２０分で測定し、本明細書中上記に記載されるように求めた。
【０２６８】
図７ａは、２分以内に目標に到達する動物の百分率に関して、様々な治療により誘導されたカタレプシーについて得られたデータを示す。ＡＮ１６８により治療された群における動物は実質的により低い能力障害を示し、その一方で、ペルフェナジン単独により治療された群、および、ペルフェナジンとＧＡＢＡとの混合物により治療された群における動物はより大きいカタレプシーを示した。
【０２６９】
図７ｂは、動物が目標に到達するために要した時間に関して、上記治療の２時間後および３時間後での、様々な治療により誘導されたカタレプシーについて得られたデータを示す。Ｎ１６８により治療された群における動物は、ペルフェナジン単独により治療された動物、および、ペルフェナジンとＧＡＢＡとの混合物により治療された動物よりもはるかに俊敏であった。
【０２７０】
経口投与されたペルフェナジンおよびそのＧＡＢＡコンジュゲートＡＮ１６８の誘導されたカタレプシー、誘導された動物行動、および向精神活性：ＡＮ１６８（ペルフェナジンおよびＧＡＢＡの化学的コンジュゲート）は、腹腔内投与されたとき、現在最も効果的な化学的コンジュゲートであることが見出されたので、さらなる比較実験を、ペルフェナジンと比較して、この化学的コンジュゲートの経口効力を明らかにするために行った。この目的のために、誘導されたカタレプシー、プロラクチン血中レベルおよび動物行動を、ラットへのＡＮ１６８またはペルフェナジン単独の経口投与の後、本明細書中上記に記載されるように測定した。動物をケージあたり５匹で分け、１％の乳酸に溶解されたペルフェナジンまたはＡＮ−１６８を経口投与によって治療した。コントロール動物には、ビヒクル（乳酸）のみが与えられた。
【０２７１】
様々な濃度のＡＮ１６８およびペルフェナジンの経口投与により誘導されるカタレプシーを、本明細書中上記に記載される「壁」試験および「ピアノ」試験によって測定した。カタレプシーの経時変化を、２．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇおよび２０ｍｇ／ｋｇのペルフェナジン、ならびに、それぞれの等モル用量の３．５ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇおよび２８ｍｇ／ｋｇのＡＮ−１６８の経口投与の４時間後〜２４時間後で測定した。総カタレプシーは４時間〜２４時間の追跡期間中における治療群あたりの平均カタレプシーの和を表す。
【０２７２】
図８ａは、４時間〜６時間の期間中における「ピアノ」試験により測定されたときの、様々な治療の後でのカタレプシーの経時変化を示しており、ＡＮ１６８のすべての濃度でのカタレプシー行動における一貫した低下を明らかにしている。統計学的分析により、低下が、ＡＮ１６８の低い用量および中間の用量（７ｍｇ／ｋｇおよび１４ｍｇ／ｋｇ）で、それらのそれぞれの等モル用量のペルフェナジンと比較して、より著しかったこと（ｐ＜０．０５）が明らかにされた。より高用量の化学的コンジュゲート（１４ｍｇ／ｋｇおよび２８ｍｇ／ｋｇ）では、検出されたカタレプシー症状が、違いはそれほど実質的ではなかったが、ペルフェナジンのカタレプシー症状よりも一貫して低かった。より大きい用量で薬物および化学的コンジュゲートにより誘導されるカタレプシーの間でのこれらのより小さい違いは評価手法から生じていることが推定される。実際的な検討のために、測定された最大カタレプシーシグナルは１２０秒に制限された。しかしながら、実際には、ペルフェナジンにより誘導される最大のカタレプシーシグナルの方が、化学的コンジュゲートにより誘発される最大のカタレプシーシグナルよりも大きいことが推定される。この推定は、ＡＮ−１６８とペルフェナジンとの間でのより大きく、かつ実質的な違いが、「壁」試験および鎮静スコア（これらは本明細書中上記に記載される）によって求められるカタレプシーの両方について、大きい用量において観測されたことによってさらに裏付けられる。そのうえ、行われた実験では、筋肉固縮および頻呼吸が、中間の用量および高い用量のペルフェナジン（１０ｍｇ／ｋｇおよび２０ｍｇ／ｋｇ）により治療された動物においてだけ観測され、それぞれの等モル用量の化学的コンジュゲートにより治療された動物では観測されなかったことが示された。
【０２７３】
図８ｂは、図８ａに示される実験の３ヶ月後に行われた別個の実験で、４時間〜６時間の期間中における「ピアノ」試験により測定されたときの、様々な治療の後でのカタレプシーの経時変化を示す。得られたデータは、高用量のＡＮ１６８（１４ｍｇ／ｋｇおよび２８ｍｇ／ｋｇ）で、より大きいカタレプシーが、前回の実験と比較して誘導されたことを示している。ＮＭＲ分光学では、遅い分解（これはおそらくは加水分解のためである）が生じ、従って、化学的コンジュゲートの特有な性質が影響を受けたことが明らかにされた。これらの発見は、この化合物は密封バイアルに保存し、かつ、使用前にだけ暴露されなければならないことを示唆する。この点において、フルフェナジンの類似する化学的コンジュゲートＡＮ１８７は吸湿性がないようであり、従って、長期間の貯蔵を行ったとき、分解する傾向がないことに留意しなければならない。
【０２７４】
図９ａおよび図９ｂは、４時間〜６時間の期間中に観測された、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇおよび２０ｍｇ／ｋｇのペルフェナジン、ならびに、それぞれの等モル用量の７ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇおよび２８ｍｇ／ｋｇのＡＮ−１６８の経口投与により誘導される総カタレプシーを示す。図９ｂは、図９ａに示される実験の３ヶ月後に行われた実験で得られたデータを示す。ＡＮ１６８により誘導されるカタレプシー行動における低下が、ペルフェナジンと比較した場合、図９ｂに示されるデータではあまり著しくないが、ＡＮ１６８により誘導されるカタレプシーは、ペルフェナジンにより誘導されるカタレプシーよりも一貫して低いことが明瞭に示される。
【０２７５】
図１０ａおよび図１０ｂは、様々な治療の後の２４時間の期間中に「ピアノ」試験によって測定されたときのカタレプシーの経時変化（図１０ａ）および総カタレプシー（図１０ｂ）を示す。得られたデータは、ペルフェナジンおよびＡＮ−１６８の両方の最大カタレプシー作用が治療後５時間〜６時間で達成されたこと、および、治療後２４時間で、カタレプシーがすべての治療群において低下したことを明らかにしている。これらのデータは、患者に（１日に１回）投与されたペルフェナジンについて観測された臨床的な経時変化と一致している。
【０２７６】
図１１は、「壁」試験によって測定されたときの様々な治療の後での総カタレプシーを示しており、カタレプシー症状がＡＮ１６８の治療された用量のすべてによる治療の後ではほとんどなくなったことを明瞭に明らかにしている。
【０２７７】
動物行動に対する化学的コンジュゲートＡＮ１６８の経口投与の影響を、本明細書中上記に記載されるように、０〜３のスコアを使用して、様々な濃度のＡＮ１６８およびペルフェナジンによる経口治療の後４時間〜６時間で動物の鎮静および可動性の程度を評価することによって測定した。得られたスコアが下記の表３にまとめられる。得られたスコアは、ペルフェナジン治療と比較した場合、動物行動に対する化学的コンジュゲートの低下した影響を明らかにしている。
【表３】
2011121971.tif 000024
【０２７８】
経口投与された化合物のドーパミン作動活性についてのマーカーとして、プロラクチン血中レベルを、本明細書中上記に記載される様々な治療の後０分、９０分および１８０分で測定した。得られたデータが図１２にまとめられ、得られたデータは、ペルフェナジンおよびＡＮ１６８により治療された動物におけるプロラクチン血中レベルのプロフィルが類似することを明らかにする。プロラクチン血中レベルは、ＡＮ１６８により治療された動物において、各時点で、低い用量および中間の用量でペルフェナジンの場合と類似しており、一方、より大きい用量では、ＡＮ１６８により治療された動物におけるプロラクチン血中レベルは、ペルフェナジンにより治療された動物と比較してはるかに高かった。
【０２７９】
これらの結果は、ＡＮ１６８が、経口投与されるとき、低い用量（例えば、３．５ｍｇ／ｋｇおよび７ｍｇ／ｋｇ）で、非常に有効であり、従って、診療的使用に適切であることを明らかにしている。これらの低い用量で、ＡＮ１６８は最小限の錐体外路症状を引き起こし、従って、黒質−線条体経路でのアンタゴニスト活性をほとんど有しないことがこの例ではさらに示される。
【０２８０】
抗増殖活性：ペルフェナジン、その化学的コンジュゲート（ＡＮ１６７、ＡＮ１６８およびＡＮ１７７）、フルフェナジン、その化学的コンジュゲート（ＡＮ１７９、ＡＮ１８０、ＡＮ１８１およびＡＮ１８７）、ならびに、酪酸（ＢＡ）、４−フェニル酪酸（ＰＢＡ）およびＧＡＢＡの抗増殖活性を、正常な細胞および形質転換された細胞を用いて（通常、２つ以上の独立した実験で）行われた増殖試験によって測定した。細胞を継代培養し、試験化合物を増大する濃度でそれに加えた。ＩＣ５０値を細胞の生存割合の線形回帰によって求めた。様々な試験された細胞株を用いて試験化合物について得られたＩＣ５０値が下記の表４および表５にまとめられる。
【表４】
2011121971.tif 000025
【表５】
2011121971.tif 000026
【０２８１】
これらの結果は、ＧＡＢＡはそれ自身では著しい抗増殖活性を明らかにすることができず（ＩＣ５０が２０ｍＭを越える）、また、ＢＡ（１ｍＭ〜８ｍＭのＩＣ５０範囲）およびＰＢＡ（２ｍＭ〜１２ｍＭのＩＣ５０範囲、データは示されず）は、顕著ではあるが、比較的低い抗増殖活性を示したが、それらのそれぞれのペルフェナジンコンジュゲートおよびフルフェナジンコンジュゲートは著しくより大きい活性（８μＭ〜６０μＭのＩＣ５０範囲）を有したことを示している。
【０２８２】
これらの結果はさらに、多剤耐性（ＭＤＲ）細胞（例えば、ＨＬ６０ＭＸ２、Ｂ１６ＭＤＲサブクローンおよびＭＥＳ  ＳＡ  ＤＸ５など）を含む広範囲の様々な細胞株における本発明の化学的コンジュゲートの万能的な抗増殖活性を明らかにする。
【０２８３】
図１３は、Ｂ１６マウスメラノーマ細胞の増殖に対するペルフェナジンおよびその化学的コンジュゲートの影響が測定された代表的な実験で得られた結果を示す。ＡＮ１６７およびＡＮ１６８が抗増殖性薬物として比較的活性であることが見出された。
【０２８４】
ペルフェナジン、ＧＡＢＡおよびその化学的コンジュゲートＡＮ１６８の細胞毒性作用をＣ６ラット神経膠腫細胞に対して測定し、知られている化学療法薬物（シスプラチンおよびビンクリスチン）のＣ６ラット神経膠腫細胞に対する細胞毒性作用と比較した。細胞を継代培養し、試験化合物を１００μＭまでの増大する濃度でそれに加えた。これらの治療の後（２４時間後）での細胞の生存性を、本明細書中上記に記載されるニュートラルレッド法によって求めた。結果が図１４に示される。ペルフェナジンおよびＡＮ１６８のＩＣ５０値が本明細書中上記のように求められ、それぞれ１９．２μＭおよび２４．２μＭであることが見出された。
【０２８５】
図１４に示されるように、得られたデータは、本発明の化学的コンジュゲートの抗増殖活性が、代表的な知られている化学療法薬物と比較して優れていることを明らかにする。Ｃ６神経膠腫細胞はＭＤＲ細胞として知られており、実際、これらの知られている化学療法薬物の抗増殖活性が実質的に低いことが見出された。対照的に、ＡＮ１６８は、大きい抗増殖活性を発揮し、これにより、実質的な細胞死を比較的低い濃度（約２０μＭ）で生じさせていることが見出された。
【０２８６】
図１５は、増大する濃度のペルフェナジン、ＡＮ１６８およびデキサメタゾンを用いたＪｕｒｋａｔＴリンパ腫細胞の治療の後で得られたデータを示す。結果が、アラマーブルー法によって求められた細胞生存性に関して示され、デキサメタゾンと比較して、ＡＮ１６８およびペルフェナジンの優れた細胞毒性作用を明らかにしている。ペルフェナジンおよびＡＮ１６８のＩＣ５０値はそれぞれ１６μＭおよび１９μＭであった。
【０２８７】
ペルフェナジン、フルフェナジンおよびそれらの化学的コンジュゲートはほぼ同じ程度に抗増殖活性を発揮しているが、化学的コンジュゲートの投与は有害な副作用をほぼ完全に有していないので、本発明の化学的コンジュゲートの臨床的使用はこれらの神経遮断性薬物の臨床的使用よりも非常に優れていることはさらに留意しなければならない。
【０２８８】
ペルフェナジンまたはＡＮ１６８と化学療法薬物との同時投与による化学感作作用：５μＭ、１０μＭおよび１５μＭのペルフェナジンならびに等モル用量のその化学コンジュゲートＡＮ１６８の化学感作作用を、これらの化合物を様々な濃度の知られている化学療法薬物（例えば、ビンクリスチン、シスプラチンおよびデキサメタゾンなど）と同時投与することによって測定した。これらの混合治療の後での細胞生存性および／またはＤＮＡ断片化（これらは、本明細書中上記で方法の節に記載されるように求められた）を、化学療法薬物単独による治療の後で得られた結果と比較した。
【０２８９】
図１６は、ビンクリスチン（３０μＭ）、ペルフェナジン、ＡＮ１６８、および、それらの組合せによるラットＣ６神経膠腫細胞株（ＭＤＲ細胞）の２４時間の治療の後で得られたデータを示す。結果は、化学療法薬物と同時投与されたときには、単独で投与されたときの薬物の細胞毒性作用と比較して、化学的コンジュゲートの低い濃度（例えば、５μＭ）でさえ、その細胞毒性作用を実質的に高めるＡＮ１６８の化学感作作用を明瞭に明らかにしている。
【０２９０】
図１７は、５μＭ〜５０μＭの範囲にある様々な濃度でのシスプラチン、ならびに、シスプラチンと、１０μＭおよび１５μＭのＡＮ１６８との組合せによるラットＣ６神経膠腫細胞株（ＭＤＲ細胞）の治療の後で得られたデータを示す。結果が、ニュートラルレッド法によって測定された細胞生存性に関して示され、細胞が、すべての試験された濃度でシスプラチンに対して完全に抵抗性であったが、シスプラチンおよびＡＮ１６８の混合治療は細胞を化学療法薬物に対して感受性にしたことを明瞭に明らかにしている。
【０２９１】
図１８は、シスプラチン（３０μＭ）、ペルフェナジン（２５μＭおよび５０μＭ）、ＡＮ１６８（２５μＭ、５０μＭ）、シスプラチン（３０μＭ）とＡＮ１６８（５０μＭ）との組合せを用いたラットＣ６神経膠腫細胞の治療の後で得られたＤＮＡ断片化のデータを、治療されていない細胞と比較して示す。ＤＮＡ断片化を、本明細書中上記に記載されるヨウ化プロピジウムフローサイトメトリー法によって求めた。結果は、シスプラチンは単独ではＤＮＡ断片化の作用を全く有しないが、ペルフェナジンおよびＡＮ１６８はともにＤＮＡ断片化の劇的な増大を誘導したことを明らかにしている。これらの結果は、本発明の化学的コンジュゲートの化学感作作用がそのこの活性から生じていることを示唆している。
【０２９２】
毒性：ペルフェナジン、ＡＮ１６７およびＡＮ１６８のインビトロ毒性を、新生児マウスの脳から得られたニューロン細胞の初代培養物、ならびに、ニューロン細胞およびグリア細胞の混合物の初代培養物に対して測定した。細胞培養物を試験化合物で２４時間治療し、その後、その生存性をニュートラルレッド比色測定法試験によって求めた。これらの試験で得られたＩＣ５０値は、図１９に示されるように、ペルフェナジンおよびＡＮ１６７が類似する毒性を有し、その一方で、ＡＮ１６８は正常な脳細胞に対して著しいより低い毒性を示したことを明らかにしている。ペルフェナジンおよびＡＮ１６８のインビトロ毒性をさらに、培養されたラット筋細胞に対して測定した。図２０は、様々な濃度のペルフェナジンまたはＡＮ１６８による治療の後での本明細書中上記のように求められた細胞生存性を示す。得られたデータは、ＡＮ１６８はすべての濃度で細胞生存性における低下を何ら生じさせず、その一方で、ペルフェナジンは高い濃度で細胞生存性における２０％の低下を生じさせたことを示している。
【０２９３】
ペルフェナジンおよびＡＮ１６７のインビボ毒性をマウスへのその単回用量の腹腔内投与の後で評価した。ＬＤ５０値が、治療後２週間で測定されたとき、ペルフェナジンについては１０９ｍｇ／ｋｇであり、ＡＮ１６７については１２０ｍｇ／ｋｇであった。ＡＮ１６７の毒性がペルフェナジン（ｐｅｒ）と比較してより低いことに加えて、コンジュゲート化されている化合物によって引き起こされる死亡が、図２１に示されるように遅くなった。
【０２９４】
ラットにおけるＤ−アンフェタミン誘導による活動過多：本発明の化学的コンジュゲートの効力を、Ｄ−アンフェタミン誘導による活動過多および可動性のモデルを使用して調べた。このモデルは、アンフェタミンに関連づけられる障害（例えば、統合失調症など）において抗精神病活性を有する化合物を選択するための予測可能かつ再現可能なモデルであるという利点を有する［１４］。このモデルを使用して、ペルフェナジンとＧＡＢＡとの化学的コンジュゲートＡＮ−１６８の効力を調べ、単独で投与された母体化合物（ペルフェナジンおよびＧＡＢＡ）の効力と比較した。
【０２９５】
例えば、実験未使用のＷｉｓｔａｒオスラットを数群に分け、各群を、２．５ｍｇ／ｋｇのアンフェタミンの腹腔内投与の９０分前に、特定濃度のペルフェナジン（０．５ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇまたは３ｍｇ／ｋｇ）、特定濃度のＡＮ−１６８（０．５ｍｇ／ｋｇまたは１．５ｍｇ／ｋｇ）、５ｍｇ／ｋｇのＧＡＢＡ、または、１．５ｍｇ／ｋｇのペルフェナジンおよび５ｍｇ／ｋｇのＧＡＢＡの腹腔内投与によって治療した。各群におけるラットのよじ登り行動を本明細書中上記に記載されるように測定した。
【０２９６】
図２２および図２３に示されるように、ＡＮ−１６８は、低い用量でさえ、アンフェタミンにより誘導されるよじ登り行動を完全に打ち消しており、それにより、その母体薬物のペルフェナジンおよびＧＡＢＡと比較して、その高く、かつ、優れた向精神性効力を明らかにした。
【０２９７】
しかしながら、図２４および図２５に示されるように、頭部運動および他の小さい身体運動を低下させることにおけるＡＮ−１６８の効果はペルフェナジンの効果よりも劣っていた。この劣った作用は、母体のペルフェナジンと比較した場合、コンジュゲートＡＮ−１６８により誘導される低下した錐体外路副作用（すなわち、カタレプシー症状および鎮静）から生じていることが考えられる。図２２〜図２５においてさらに示されるように、ＧＡＢＡの単独での投与はアンフェタミンの作用を変化させず、また、ペルフェナジンの作用を変化させなかった。従って、高まった効力および低下した有害な副作用はコンジュゲートＡＮ−１６８の投与から生じていることが示唆される。
【０２９８】
図２６〜図２８に示されるように、類似する結果が、２．５ｍｇ／ｋｇのペルフェナジン（単独で、または、５ｍｇ／ｋｇのＧＡＢＡとの組合せで）、および、３．５ｍｇ／ｋｇのＡＮ−１６８をアンフェタミンの腹腔内投与の９０分前にラットに経口投与したときに得られ、様々な投与経路におけるコンジュゲートの優れた効力を明らかにしていた。
【０２９９】
ＡＮ−１６８の効力をオランザピン（知られている非定型抗精神病薬）の効力とさらに比較した。様々な濃度のオランザピン（２．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇ）をラットに経口投与し、その後、アンフェタミンを腹腔内投与した。図２９〜図３１に示されるように、オランザピンはアンフェタミン誘導によるよじ登り行動を高い用量（１０ｍｇ／ｋｇ）でのみ実質的に打ち消すことができたが、その効果は頭部運動に関してはほとんど観測されなかった。
【０３００】
これらの結果は、アンフェタミンモデルにおけるオランザピンの以前に報告されたより低い効力［１５］と一致している。しかしながら、これらの研究で得られたデータはさらに、本発明の化学的コンジュゲートが、神経遮断性薬物と比較した場合、より低い抗ドーパミン作動活性を発揮し、従って、非定型薬物との類似点をいくつか示し得ることを示唆している。
【０３０１】
このモデルで得られたデータはさらに、母体の向精神性薬物により誘導される有害な副作用を軽減しながら、向精神活性を発揮することにおける本発明コンジュゲートの高い効力を裏付けている。
【０３０２】
本明細書中上記に示された全体的な実験結果は、向精神活性、抗増殖活性および化学感作活性を、正常な細胞に対する最小限に抑えられた毒性、および、最小限に抑えられた有害副作用とともに発揮することにおける本発明の新規な化学的コンジュゲートの大きく、かつ、好都合な効力を明らかにしている。
【０３０３】
神経膠腫細胞に対する抗増殖活性：神経膠腫細胞株（Ｕ８７およびＵ２５１）の増殖に対する本発明によるバルプロ酸の様々なコンジュゲートの影響を、本明細書中上記に記載されるようなＨｏｅｃｈｓｔ増殖アッセイを使用して調べた。
【０３０４】
最初に、神経膠芽細胞腫細胞（Ｕ２５１）の生存性に対する様々な濃度のバルプロ酸−ＧＡＢＡコンジュゲート（ＡＮ−２１６）の影響を調べ、その母体化合物（ＧＡＢＡおよびバルプロ酸）およびその１：１等モル混合物の影響と比較した。得られた結果を図３２ａ〜図３２ｂおよび図３３に示す。
【０３０５】
図３２ａは、ＡＮ−２１６を用いて得られたデータを示し、神経膠腫細胞に対するその強力な抗増殖活性を明瞭に示している。図３２ｂは、ＡＮ−２１６を用いて得られたデータを、その母体化合物を用いて得られたデータと比較して示しており、そのより高い効力を明瞭に明らかにしている。図３２ｂにおいて明瞭に認められるように、ＧＡＢＡは単独では神経膠腫細胞の生存性に対する作用を全く有していないが、バルプロ酸、ならびに、ＧＡＢＡおよびバルプロ酸の等モル混合物はこの細胞の生存性に対する作用を有する。しかしながら、図３２ａにおいてさらに認められるように、ＡＮ−２１６の効果的な濃度は、バルプロ酸の効果的な濃度、および、ＧＡＢＡとのその混合物の効果的な濃度と比較した場合、約１／１００である。従って、このことは神経膠腫細胞に対するその高い抗増殖効力を明らかにしている。
【０３０６】
図３３は、本発明によるさらなるバルプロ酸コンジュゲートのＡＮ−１３８およびＡＮ−２２３を用いて得られた値と比較されるこの研究で得られたＩＣ５０値を示しており、ＧＡＢＡの存在下および非存在下でのバルプロ酸の効力と比較した場合、本発明のコンジュゲートの効力がより高いことを明瞭にさらに明らかにしている。
【０３０７】
バルプロ酸の様々なコンジュゲートの抗増殖効力を評価および比較するために行われた構造活性相関研究では、２つの神経膠腫細胞株（Ｕ−８７およびＵ−２５１）の生存性に対するバルプロ酸−ＧＡＢＡコンジュゲートＡＮ−２１６の影響を調べ、バルプロ酸−カルボン酸コンジュゲートのＡＮ−１３８、ＡＮ−１４８およびＡＮ−２２３（上記の表１を参照のこと）の効力と比較した。
【０３０８】
得られたデータが図３４〜図３６にまとめら、示される。得られたデータは、驚くべきことに、ＡＮ−２１６がこれまでにないほど活性な化合物であったことを示している。何らかの特定の理論にとらわれないが、神経膠腫細胞に対するこのバルプロ酸−ＧＡＢＡコンジュゲートの優れた抗増殖活性は、細胞内への化合物の効率的な送達を高めるＧＡＢＡ成分に起因することが示唆される。
【０３０９】
明確にするため別個の実施態様で説明されている本発明の特定の特徴は単一の実施態様に組み合わせて提供することもできることは分かるであろう。逆に、簡潔にするため単一の実施態様で説明されている本発明の各種の特徴は別個にまたは適切なサブコンビネーションで提供することもできる。
【０３１０】
本発明はその特定の実施態様によって説明してきたが、多くの別法、変更及び変形があることは当業者には明らかであることは明白である。従って、本発明は、本願の請求項の精神と広い範囲の中に入るこのような別法、変更及び変形すべてを包含するものである。本願で挙げた刊行物、特許及び特許願はすべて、個々の刊行物、特許及び特許願が各々あたかも具体的にかつ個々に引用提示されているのと同程度に、全体を本明細書に援用するものである。さらに、本願で引用又は確認したことは本発明の先行技術として利用できるという自白とみなすべきではない。
【０３１１】
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【図１】
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【図２】
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【図３ａ】
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【図３ｂ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７ａ】
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【図７ｂ】
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【図８】
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【図９】
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【図１０ａ】
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【図１０ｂ】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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