(57)【要約】【課題】炭酸飲料用抗酵母剤、該炭酸飲料用抗酵母剤を含有する炭酸飲料、及び炭酸飲料に静菌作用を付与する方法を提供すること。【解決手段】本発明の炭酸飲料用抗酵母剤は、ユッカ抽出物を有効成分として含有することを特徴とし、本発明の炭酸飲料は、該炭酸飲料用抗酵母剤を、炭酸耐性酵母に対する静菌作用有効量含有することを特徴とする。そして、本発明の方法は、炭酸飲料中に、ユッカ抽出物を炭酸耐性酵母に対する静菌作用有効量添加することにより、炭酸飲料に静菌作用を付与することを特徴とする。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ユッカ抽出物を有効成分として含有する炭酸飲料用抗酵母剤。
【請求項２】
前記ユッカ抽出物は、該ユッカ抽出物の乾燥物換算でサポニンを０．５〜６．０質量％含有する請求項１に記載の炭酸飲料用抗酵母剤。
【請求項３】
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属、Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属、Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属、Ｃａｎｄｉｄａ属、Ｂｒｅｔｔａｎｏｍｙｃｅｓ属、Ｄｅｋｋｅｒａ属、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ属、Ｈａｎｓｅｎｉａｓｐｏｒａ属、Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａ属、Ｉｓｓａｔｃｈｅｎｋｉａ属、Ｐｉｃｈｉａ属、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｐｓｉｓ属、及びＹａｒｒｏｗｉａ属から選ばれる酵母の少なくとも１種に対して静菌作用を有する請求項１又は２に記載の炭酸飲料用抗酵母剤。
【請求項４】
請求項１から３いずれかに記載の炭酸飲料用抗酵母剤を、炭酸耐性酵母に対する静菌作用有効量含有する炭酸飲料。
【請求項５】
炭酸ガス量が１．６〜４．０ｖｏｌ％である炭酸飲料であって、
請求項１から３いずれかに記載の炭酸飲料用抗酵母剤を２００〜５００ｐｐｍ含有する請求項４に記載の炭酸飲料。
【請求項６】
さらに糖分を含有する請求項４又は５に記載の炭酸飲料。
【請求項７】
さらに果汁を含有する請求項４から６いずれかに記載の炭酸飲料。
【請求項８】
炭酸飲料中に、ユッカ抽出物を炭酸耐性酵母に対する静菌作用有効量添加することにより、炭酸飲料に静菌作用を付与する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、有効成分としてユッカ抽出物を含有する炭酸飲料用抗酵母剤、該炭酸飲料用抗酵母剤を含有する炭酸飲料、及び炭酸飲料に静菌作用を付与する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
炭酸飲料は、動植物組織成分を含まず、且つ１ｋｇｆ／ｃｍ２以上の炭酸ガスを含む場合には、食品衛生法による加熱殺菌処理の義務は課されない。細菌の栄養源である果汁や乳等を含まないこと、そして、炭酸ガスによって低ｐＨ・嫌気環境になることで、細菌の生育・増殖が抑制できると考えられるからである。
【０００３】
しかしながら、細菌の中には、炭酸ガスの存在する環境に耐性を示すものがあり、このような細菌が飲料中で生育・増殖すると、飲料に濁りや異臭等の変敗が生じる。また、このような細菌の中でも、特に酵母は、炭酸飲料に含まれる糖分や果汁を利用することで生育し、その際に多量の二酸化炭素を発生する。近年、酵母の発生する二酸化炭素によって、飲料を充填した密閉容器の内圧が上昇し、容器が破裂する事故が多発している。そのため、低ｐＨ・嫌気環境でも生育することができる酵母を殺菌若しくは抗菌する方法の開発が望まれていた。
【０００４】
一般に、飲料の細菌汚染を防止する方法としては、加熱殺菌処理が挙げられる。しかし、加熱殺菌処理は煩雑な工程を要し、加熱によって飲料本来の風味が損なわれる場合がある。加熱殺菌処理以外の方法としては、抗菌剤添加が挙げられる。近年、天然物由来の抗菌剤が、安全性の観点から広く飲料に用いられている。例えば、ブドウ種子抽出物（特許文献１参照）やパパイア種子抽出物（特許文献２参照）を有効成分とする抗菌剤が報告されている。しかしながら、このような天然物由来の抗菌剤は、酵母以外の特定の菌類に対して強い抗菌活性を示すものがほとんどであり、低ｐＨ・嫌気環境でも生育することができる酵母を対象とするものはない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特許第３４５７６１８号公報
【特許文献２】特許第３１７４８１２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、かかる事情に鑑みてなされたものであり、その目的は、加熱殺菌処理等の煩雑な工程を要することなく、炭酸ガスの存在する環境に耐性を示す酵母の生育・増殖を抑制することができる、炭酸飲料に好適な天然物由来の抗酵母剤、該抗酵母剤を含有する炭酸飲料、及び炭酸飲料に静菌作用を付与する方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者は、以上のような課題を解決するために、鋭意研究を重ねていたところ、リュウゼツラン科の植物であるユッカの抽出物が、炭酸ガスの存在する環境に対する耐性を示す酵母の生育・増殖の抑制に有効であることを初めて見出した。また、本発明者は、かかるユッカの抽出物に対する耐性が弱い酵母が、炭酸ガスの存在する環境に対して耐性を有するという知見を得て、本発明に至った。
【０００８】
すなわち、本発明の炭酸飲料用抗酵母剤は、ユッカ抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。また、本発明の炭酸飲料は、該炭酸飲料用抗酵母剤を、炭酸耐性酵母に対する静菌作用有効量含有することを特徴とする。さらに、本発明の方法は、炭酸飲料中に、ユッカ抽出物を炭酸耐性酵母に対する静菌作用有効量添加することにより、炭酸飲料に静菌作用を付与することを特徴とする。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の炭酸飲料用抗酵母剤によれば、ユッカ抽出物を有効成分として含有するので、炭酸飲料に添加することで、炭酸飲料中でも生育する炭酸耐性酵母の増殖を抑制することができる。また、本発明の炭酸飲料によれば、該炭酸飲料用抗酵母剤を炭酸耐性酵母に対する静菌作用有効量含有するので、炭酸耐性酵母の増殖を抑制することができる。さらに、本発明の方法によれば、炭酸飲料中に、ユッカ抽出物を炭酸耐性酵母に対する静菌作用有効量添加することで、炭酸飲料に対して、酵母に対する静菌作用を付与することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】みかん果汁入り炭酸飲料における本発明の炭酸飲料用抗酵母剤の静菌効果を示す図である。
【図２】ぶどう果汁入り炭酸飲料における本発明の炭酸飲料用抗酵母剤の静菌効果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、本発明について具体的に説明する。
【００１２】
本発明の炭酸飲料用抗酵母剤は、ユッカ抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。
【００１３】
本発明の炭酸飲料用抗酵母剤では、炭酸耐性酵母のユッカ抽出物に対する耐性が弱いことから、炭酸飲料における炭酸耐性酵母の増殖抑制のために、ユッカ抽出物を有効成分として含有する。
【００１４】
ここで、「抗酵母剤」とは、それ自体は酵母を死滅させる作用までは有しないが、酵母の生育・増殖を抑制する能力を有し、炭酸飲料に添加した場合には、炭酸飲料の本来の風味を損なうことなく、酵母に対して抗菌作用を発揮できるものを意味する。「炭酸耐性酵母」とは、炭酸ガスの存在する環境下、すなわち低ｐＨ・嫌気環境下で死滅することなく、生残する酵母を意味する。「炭酸飲料」とは、炭酸ガスが含まれている飲料をいい、通常、炭酸ガス量が１．０〜４．５ｖｏｌ％の飲料を意味する。
【００１５】
ユッカ抽出物の原料としては、ユッカ属植物のＹｕｃｃａ  ｓｃｈｉｄｉｇｅｒａを使用する。ユッカ抽出物は、ユッカの花、種子、果実、葉、茎、根等の全ての部分を抽出原料とすることができる。抽出方法としては、特に限定されるものではないが、例えば、沸騰水による煮沸、水や有機溶媒による抽出、圧搾等が挙げられる。有機溶媒としては、親水性有機溶媒であれば、特に限定されないが、例えば、メタノール、エタノール、アセトン等が挙げられる。上記方法により得られたユッカ抽出物は、簡単な精製を行ってもよいし、そのまま用いてもよい。具体的には、ユッカの葉、茎等を圧搾し、得られた圧搾液をろ過後、樹脂処理及び活性炭処理することで得ることができる。なお、本発明では、サラキープＤＳ５０（丸善製薬社製）の商品名で市販されているものを好適に使用することができる。
【００１６】
本発明の炭酸飲料用抗酵母剤に含有されるユッカ抽出物には、有効成分であるサポニンが数種類含まれている。その含有量は、ユッカ抽出物の乾燥物換算で０．５〜６．０質量％であることが好ましく、１．０〜６．０質量％であることがより好ましく、１．０〜５．０質量％であることがさらにより好ましい。上記範囲であれば、炭酸飲料が本来有する風味を損なうことなく、炭酸耐性酵母の生育・増殖を抑制することができる。なお、本発明における代表的なサポニンを下記化学式（１）に表す。
【００１７】
【化１】
2011142864.tif 000002
【００１８】
本発明の炭酸飲料用抗酵母剤は、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属、Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属、Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属、Ｃａｎｄｉｄａ属、Ｂｒｅｔｔａｎｏｍｙｃｅｓ属、Ｄｅｋｋｅｒａ属、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ属、Ｈａｎｓｅｎｉａｓｐｏｒａ属、Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａ属、Ｉｓｓａｔｃｈｅｎｋｉａ属、Ｐｉｃｈｉａ属、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｐｓｉｓ属、及びＹａｒｒｏｗｉａ属から選ばれる酵母の少なくとも１種に対して静菌作用を有することが好ましい。酵母の中には、炭酸ガスの存在する環境に対して耐性を示し、増殖するものが存在する。上記属の酵母は、炭酸ガス耐性を示し、且つ、ユッカ抽出物に対する耐性を示さないものが多く存在し、本発明の抗酵母効果が顕著に発揮されることから好ましい。炭酸ガス耐性を示し、且つ、ユッカ抽出物に対する耐性を示さない酵母としては、具体的には、例えばＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ（ＮＢＲＣ１０２１７，ＡＴＣＣ３６８９９，ＩＦＯ５６５，ＩＦＯ２１０，ＩＦＯ１０４６，ＮＢＲＣ２３７７，ＮＢＲＣ２３４７，ＡＴＣＣ３８５５５，ＡＴＣＣ３８５５４）、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｂａｙａｎｕｓ（ＩＦＯ５７３，ＮＢＲＣ１１０２２）、Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｂａｉｌｉｉ（ＮＢＲＣ１１３７，ＮＢＲＣ１６１１）、Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｐｏｍｂｅ（ＮＢＲＣ１６２８，ＩＦＯ３４２）、Ｂｒｅｔｔａｎｏｍｙｃｅｓ  ｂｒｕｘｅｌｌｅｎｓｉｓ（ＩＦＯ６７７）、Ｂｒｅｔｔａｎｏｍｙｃｅｓ  ｎａａｒｄｅｎｅｎｓｉｓ（ＩＦＯ１５８８）、Ｄｅｋｋｅｒａ  ｎａａｒｄｅｎｅｎｓｉｓ（ＩＦＯ１５９０）、Ｃａｎｄｉｄａ  ｋｒｕｓｅｉ（ＮＢＲＣ１３９５）、Ｃａｎｄｉｄａ  ｇｌａｂｒａｔａ（ＡＴＣＣ１５１２６）、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ  ｍａｒｘｉａｎｕｓ（ＮＢＲＣ１０００５）、Ｈａｎｓｅｎｉａｓｐｏｒａ  ｇｕｉｌｌｉｅｒｍｏｎｄｉｉ（ＮＢＲＣ１４１１）、Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａ  ｇｌｏｂｏｓａ（ＮＢＲＣ１１６０）、Ｉｓｓａｔｃｈｅｎｋｉａ  ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ（ＮＢＲＣ１２７９）、Ｉｓｓａｔｃｈｅｎｋｉａ  ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ（ＮＢＲＣ１９０４）が挙げられる。
【００１９】
本発明の炭酸飲料用抗酵母剤では、ユッカ抽出物を単独で使用して炭酸飲料用抗酵母剤としてもよいし、また、該ユッカ抽出物にアルコール、糖類、有機酸、酸化防止剤、ｐＨ調整剤、乳化剤等を混合して炭酸飲料用抗酵母剤としてもよい。
【００２０】
本発明の炭酸飲料用抗酵母剤は、粉末、溶液等、用途に応じて種々の形態で用いることができる。また、本発明の炭酸飲料用抗酵母剤を炭酸飲料に使用する場合には、その飲料の製造原料として添加してもよいし、製造工程の任意の段階で添加してもよい。
【００２１】
本発明の炭酸飲料は、本発明の炭酸飲料用抗酵母剤を、炭酸耐性酵母に対する静菌作用有効量含有することを特徴とする。
【００２２】
本発明の炭酸飲料では、炭酸飲料中に生残する炭酸耐性酵母の生育・増殖を抑制するために、炭酸飲料用抗酵母剤を含有する。ここで、「静菌作用」とは、酵母を死滅させる作用までは有しないが、酵母の生育・増殖を抑制することで、酵母による炭酸飲料の変質、二酸化炭素の発生等を抑制することができる作用を意味する。「静菌作用有効量」とは、かかる作用を発揮し得る量の範囲を意味する。
【００２３】
炭酸飲料に含まれる炭酸ガス量は、１．０〜４．５ｖｏｌ％であることが好ましく、１．５〜４．５ｖｏｌ％であることがより好ましく、２．３〜４．５ｖｏｌ％であることがさらにより好ましい。炭酸ガスの存在する環境に耐性を示す酵母は、ユッカ抽出物に対して耐性が弱いという知見を、本発明者によって今回、明らかとなった。上記範囲であれば、ユッカ抽出物に耐性を示す酵母であっても、炭酸ガスにより、その生育・増殖を抑制することができる。また、本発明の炭酸飲料では、本発明の炭酸飲料用抗酵母剤を１００〜５００ｐｐｍ含有することが好ましく、２００〜５００ｐｐｍ含有することがより好ましく、３００〜５００ｐｐｍ含有することがさらにより好ましい。上記範囲であれば、炭酸飲料が本来有する風味を損なうことなく、炭酸耐性酵母の生育・増殖を抑制することができる。したがって、炭酸ガス量と本発明の炭酸飲料用抗酵母剤とが、上記範囲であれば、炭酸飲料中で酵母が増殖しない。
【００２４】
本発明の炭酸飲料は、さらに糖分を含有してもよい。酵母は、炭酸飲料に含まれる糖分を利用して生育する。酵母の栄養源である糖分を含んでいても、本発明の炭酸飲料用抗酵母剤は、酵母の増殖を抑制することができる。ここで、糖分とは、ショ糖、ブドウ糖、果糖、乳糖、麦芽糖、果糖ブドウ糖液糖等の糖類が挙げられる。
【００２５】
また、本発明の炭酸飲料は、さらに果汁を含有してもよい。酵母は、炭酸飲料に含まれる果汁も利用して生育する。酵母の栄養源である果汁を含んでいても、本発明の炭酸飲料用抗酵母剤は、酵母の増殖を抑制することができる。ここで、果汁とは、果実を粉砕して搾汁、裏ごし等をし、皮、種子等を除去したものだけでなく、果実を粉砕しただけのピューレ状の果肉も含む。果実の種類としては、特に限定されるものではないが、例えば、マスカットや巨峰等のぶどう類、みかん、オレンジ、レモン、グレープフルーツ等の柑橘類、モモ、りんご、パイナップル、イチゴ、ブルーベリー、マンゴー等が挙げられる。
【００２６】
その他、本発明の効果を損なわない範囲において、目的に応じて、各種栄養成分、酸味料、甘味料、香料、着色剤、希釈剤、酸化防止剤等の食品添加物を添加してもよい。
【００２７】
本発明の方法は、炭酸飲料中に、ユッカ抽出物を炭酸耐性酵母に対する静菌作用有効量添加することにより、炭酸飲料に静菌作用を付与することを特徴とする。本発明によれば、煩雑な工程を経ることなく、炭酸飲料中にユッカ抽出物を添加するだけで、炭酸飲料に炭酸耐性酵母に対する静菌作用を付与することができる。
【実施例】
【００２８】
以下、実施例により、本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの記載に何ら制限を受けるものではない。
【００２９】
以下の試験では、炭酸飲料用抗酵母剤として、丸善製薬社製の「サラキープＤＳ５０」を使用した。「サラキープＤＳ５０」の組成を表１に示す。「サラキープＤＳ５０」は、ユッカ抽出物にエタノールを加えて溶解し、これにショ糖脂肪酸エステル、還元澱粉糖化物及び水を加えて混合することで、調製されるものである。なお、「サラキープＤＳ５０」に含まれるサポニンの含有量は、１．０〜２．０質量％である。
【００３０】
【表１】
2011142864.tif 000003
【００３１】
［試験例１］炭酸飲料中での酵母の増殖能
各酵母の炭酸ガスに対する耐性の有無を調べた。表２に示す組成の液体培地（ＹＭブロス：ｐＨ３．５）を調製し、オートクレーブにて１２１℃で１５分間殺菌した。この殺菌後の液体培地を２５０ｍｌのガラス瓶に充填し、さらに、炭酸水（ＣＯ２圧０．５ＭＰａ，充填温度２．０〜３．０℃）をディスペンサー（ニットク社製）にて添加し、密閉した。添加した液体培地の量及び炭酸水の量を表３に示す。次いで、パストライザー（ヒラサワ社製）にて６０℃で１０分間殺菌し、冷却後にクリーンベンチ内で、酵母の懸濁液（約１０６ｃｆｕ／ｍｌとなるように滅菌水で調製したもの）を１００μｌ添加した。この酵母の懸濁液は、ＰＤＡ（ポテトデキストロース寒天）培地に画線し、２５℃で７２〜１２０時間培養した酵母を滅菌水に懸濁したものである。再栓後、２５℃の培養器（東京理化器械社製）にて４週間培養し、４週間後における各炭酸ガス圧の培養液の濁りを目視にて比較した。そして、炭酸ガス圧の上昇に伴う培養液の濁度の変化を符号により３段階（「−」は変化なし、「＋」は濁度がやや上昇した、「＋＋」は濁度が上昇した）で評価した。また、濁度の上昇が高いほど、酵母が増殖していると判断した。その結果を表４に示す。なお、炭酸ガス圧０．１ＭＰａ、０．２ＭＰａ、０．３ＭＰａをそれぞれ炭酸ガス量で表すと、２０℃の測定温度条件下では１．７４５ｖｏｌ％、２．６１１ｖｏｌ％、３．４７７ｖｏｌ％である（「最新・ソフトドリンクス」（株式会社光琳）参照）。
【００３２】
【表２】
2011142864.tif 000004
【００３３】
【表３】
2011142864.tif 000005
【００３４】
【表４】
2011142864.tif 000006
【００３５】
表４に示すように、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属、Ｂｒｅｔｔａｎｏｍｙｃｅｓ属、及びＤｅｋｋｅｒａ属は、炭酸ガス圧０．３ＭＰａであっても増殖が確認された。Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属の一部、Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属、Ｃａｎｄｉｄａ属の一部、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ属、Ｈａｎｓｅｎｉａｓｐｏｒａ属の一部、Ｉｓｓａｔｃｈｅｎｋｉａ属、及びＴｏｒｕｌａｓｐｏｒａ属については、炭酸ガス圧０．１ＭＰａで増殖が確認された。これに対し、いわゆる担子菌酵母といわれるＣｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ属の酵母は、炭酸ガス圧０．１ＭＰａで増殖が抑制された。したがって、微炭酸飲料であっても増殖が抑制される酵母であると考えられる。同じく担子菌酵母のＳｐｏｒｏｂｏｌｏｍｙｃｅｓ属、Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏｎ属については、炭酸ガスが存在しない環境下においても生育しなかった。
【００３６】
［試験例２］ユッカ抽出物の抗酵母効果
炭酸飲料用抗酵母剤の各酵母に対する静菌効果を調べた。表２に示す組成の液体培地（ＹＭブロス：ｐＨ３．５）１０ｍｌに炭酸飲料用抗酵母剤を、最終的に液体培地中にユッカ抽出物が０、１００、２００、３００、４００、５００ｐｐｍ含まれるように、０、２、４、６、８、１０μｌ添加した。次いで、試験管に１０ｍｌずつ分注し、オートクレーブにて１２１℃で１５分間殺菌した。冷却後、クリーンベンチ内で、約１０４ｃｆｕ／ｍｌとなるように滅菌水で希釈した酵母の懸濁液を１００μｌ添加した。この酵母の懸濁液は、ＰＤＡ（ポテトデキストロース寒天）培地に画線し、２５℃で７２〜１２０時間培養した酵母を滅菌水に懸濁したものである。２５℃の培養器（東京理化器械社製）にて４週間培養した。そして、４週間後における各炭酸ガス圧の培養液の濁りを目視にて比較した。そして、炭酸ガス圧の上昇に伴う培養液の濁度の変化を符号により３段階（「−」は変化なし、「＋」は濁度がやや上昇した、「＋＋」は濁度が上昇した、「＋＋＋」は濁度がかなり上昇した）で評価した。なお、濁度の上昇が高いほど、酵母が増殖していると判断した。その結果を表５に示す。
【００３７】
【表５】
2011142864.tif 000007
【００３８】
炭酸飲料中で顕著に増殖したＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属は最大３００ｐｐｍで、Ｂｒｅｔｔａｎｏｍｙｃｅｓ属は２００ｐｐｍで増殖の抑制が認められた。Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属は、低濃度のユッカ抽出物で増殖の抑制が認められた。Ｃａｎｄｉｄａ属は、最大４００ｐｐｍで増殖の抑制が認められた。担子菌酵母であるＣｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ属やＲｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ属ではユッカ抽出物による効果が５００ｐｐｍでは認められなかった。これらの結果より、炭酸ガスの存在する環境下で増殖する菌種であっても、ユッカ抽出物を添加することでその増殖を抑制することができることが確認された。
【００３９】
［試験例３］酵母の生育挙動確認（１）
ユッカ抽出物を含有したみかん果汁入り炭酸飲料における酵母の生育挙動を確認した。
【００４０】
＜実施例１＞
表６に示す組成のみかん果汁入り炭酸飲料を調製後、表１に示す炭酸飲料用抗酵母剤を、最終濃度として炭酸飲料中にユッカ抽出物が４００ｐｐｍ含まれるように０．８ｍｌ添加した。次いで、プレート式熱交換器（日阪製作所製）にて９５℃で２秒間殺菌し、最終的な炭酸ガス量が２．０ｖｏｌ．（微炭酸飲料の規格下限炭酸ガス量）となるように、カーボネーター（日本香料株式会社製）で炭酸ガスを付与した後、５００ｍｌの耐熱圧ＰＥＴ（東洋製罐社製）に充填し、キャップ（ＡＰ−３ＢＴ，ＮＣＣ社製）を閉めて密封した。そして、パストライザー（ヒラサワ社製）にて６０℃で１０分間殺菌後、冷蔵（４℃）保存した。
上記方法により調製した飲料は、保管庫（４℃）に１日以上静置し、安定化させた。その後、クリーンベンチ内で静かにキャップを開封し、１０６〜１０４ｃｆｕ／ｍｌとなるように滅菌水で希釈したＺｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｂａｉｌｉｉ  ＮＢＲＣ１１３７株の懸濁液を１００μｌ添加し、再栓した。酵母菌接種後の飲料を２５℃で保管し、経時的に開栓してメンブレンフィルターにてろ過を行い、ポテトデキストロース培地（ｐＨ３．５）に貼り付けて２５℃で培養し、生育菌数を測定した。その結果を図１に示す。
【００４１】
【表６】
2011142864.tif 000008
【００４２】
＜実施例２＞
最終的な炭酸ガス量が３．０ｖｏｌ．となるように調整する以外は、実施例１と同様とした。
【００４３】
＜比較例１＞
表６に示す組成のみかん果汁入り炭酸飲料を調製後、表１に示す炭酸飲料用抗酵母剤を、最終濃度として炭酸飲料中にユッカ抽出物が４００ｐｐｍ含まれるように０．８ｍｌ添加した。次いで、プレート式熱交換器（日阪製作所製）にて９５℃で２秒間殺菌し、最終的な炭酸ガス量が２．０ｖｏｌ．（微炭酸飲料の規格下限炭酸ガス量）となるように、カーボネーター（日本香料株式会社製）で炭酸ガスを付与した後、５００ｍｌの耐熱圧ＰＥＴ（東洋製罐社製）に充填し、キャップ（ＡＰ−３ＢＴ，ＮＣＣ社製）を閉めて密封した。そして、パストライザー（ヒラサワ社製）にて６０℃で１０分間殺菌後、冷蔵（４℃）保存した。
上記方法により調製した飲料は、保管庫（４℃）に１日以上静置し、安定化させた。その後、クリーンベンチ内で静かにキャップを開封し、１０６〜１０４ｃｆｕ／ｍｌとなるように滅菌水で希釈したＣａｎｄｉｄａ  ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ  ＮＢＲＣ１４００株の懸濁液を１００μｌ添加し、再栓した。酵母菌接種後の飲料を２５℃で保管し、経時的に開栓してメンブレンフィルターにてろ過を行い、ポテトデキストロース培地（ｐＨ３．５）に貼り付けて２５℃で培養し、生育菌数を測定した。その結果を図１に示す。
【００４４】
＜比較例２＞
最終的な炭酸ガス量が３．０ｖｏｌ．となるように調整する以外は、比較例１と同様とした。
【００４５】
＜比較例３＞
表６に示す組成のみかん果汁入り炭酸飲料を調製後、プレート式熱交換器（日阪製作所製）にて９５℃で２秒間殺菌した。次いで、最終的な炭酸ガス量が２．０ｖｏｌ．（微炭酸飲料の規格下限炭酸ガス量）となるように、カーボネーター（日本香料株式会社製）で炭酸ガスを付与した後、５００ｍｌの耐熱圧ＰＥＴ（東洋製罐社製）に充填し、キャップ（ＡＰ−３ＢＴ，ＮＣＣ社製）を閉めて密封した。そして、パストライザー（ヒラサワ社製）にて６０℃で１０分間殺菌後、冷蔵（４℃）保存した。
上記方法により調製した飲料は、保管庫（４℃）に１日以上静置し、安定化させた。その後、クリーンベンチ内で静かにキャップを開封し、１０６〜１０４ｃｆｕ／ｍｌとなるように滅菌水で希釈したＺｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｂａｉｌｉｉ  ＮＢＲＣ１１３７株の懸濁液を１００μｌ添加し、再栓した。酵母菌接種後の飲料を２５℃で保管し、経時的に開栓してメンブレンフィルターにてろ過を行い、ポテトデキストロース培地（ｐＨ３．５）に貼り付けて２５℃で培養し、生育菌数を測定した。その結果を図１に示す。
【００４６】
＜比較例４＞
最終的な炭酸ガス量が３．０ｖｏｌ．となるように調整する以外は、比較例３と同様とした。
【００４７】
＜比較例５＞
酵母として、Ｃａｎｄｉｄａ  ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ  ＮＢＲＣ１４００株を使用した以外は、比較例３と同様とした。
【００４８】
＜比較例６＞
酵母として、Ｃａｎｄｉｄａ  ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ  ＮＢＲＣ１４００株を使用した以外は、比較例４と同様とした。
【００４９】
本発明の炭酸飲料用抗酵母剤を添加していないみかん果汁入り炭酸飲料では、Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｂａｉｌｉｉ  ＮＢＲＣ１１３７株は経時的に増殖した（比較例３，４）。これに対して、本発明の炭酸飲料用抗酵母剤を添加したみかん果汁入り炭酸飲料では、Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｂａｉｌｉｉ  ＮＢＲＣ１１３７株が炭酸ガス量にかかわらず、経時的にその菌数が減少し、最終的には死滅した（実施例１，２）。これに対して、Ｃａｎｄｉｄａ  ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ  ＮＢＲＣ１４００株は、本発明の炭酸飲料用抗酵母剤の添加の有無にかかわらず、経時的にその菌数が減少し、最終的には死滅した（比較例１，２，５，６）ことから、炭酸ガスに起因するものであると考えられる。
【００５０】
［試験例４］酵母の生育挙動確認（２）
ユッカ抽出物を含有したぶどう果汁入り炭酸飲料における酵母の生育挙動を確認した。
【００５１】
＜実施例３＞ぶどう果汁入り炭酸飲料＋炭酸飲料用抗酵母剤
表７に示す組成のぶどう果汁入り炭酸飲料を調製後、表１に示す炭酸飲料用抗酵母剤を、最終濃度として炭酸飲料中にユッカ抽出物が４００ｐｐｍ含まれるように０．８ｍｌ添加した。次いで、プレート式熱交換器（日阪製作所製）にて９５℃で２秒間殺菌し、最終的な炭酸ガス量が２．７ｖｏｌ．となるように、カーボネーター（日本香料株式会社製）で炭酸ガスを付与した後、５００ｍｌの耐熱圧ＰＥＴ（東洋製罐社製）に充填し、キャップ（ＡＰ−３ＢＴ，ＮＣＣ社製）を閉めて密封した。そして、パストライザー（ヒラサワ社製）にて６０℃で１０分間殺菌後、冷蔵（４℃）保存した。
上記方法により調製した飲料は、保管庫（４℃）に１日以上静置し、安定化させた。その後、クリーンベンチ内で静かにキャップを開封し、１０６〜１０４ｃｆｕ／ｍｌとなるように滅菌水で希釈したＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  ＮＢＲＣ１０２１７の懸濁液を１００μｌ添加し、再栓した。酵母菌接種後の飲料を２５℃で保管し、経時的に開封してメンブレンフィルターにてろ過を行い、ポテトデキストロース培地（ｐＨ３．５）に貼り付けて２５℃で培養し、生育菌数を測定した。その結果を図２に示す。
【００５２】
【表７】
2011142864.tif 000009
【００５３】
＜実施例４＞
酵母として、Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｂａｉｌｉｉ  ＮＢＲＣ１１３７株を使用した以外は、実施例３と同様とした。
【００５４】
＜比較例７＞
酵母として、Ｃａｎｄｉｄａ  ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ  ＮＢＲＣ１４００株を使用した以外は、実施例３と同様とした。
【００５５】
＜比較例８＞
表７に示す組成のぶどう果汁入り炭酸飲料を調製後、プレート式熱交換器（日阪製作所製）にて９５℃で２秒間殺菌した。次いで、最終的な炭酸ガス量が２．７ｖｏｌ．となるように、カーボネーター（日本香料株式会社製）で炭酸ガスを付与した後、５００ｍｌの耐熱圧ＰＥＴ（東洋製罐社製）に充填し、キャップ（ＡＰ−３ＢＴ，ＮＣＣ社製）を閉めて密封した。そして、パストライザー（ヒラサワ社製）にて６０℃で１０分間殺菌後、冷蔵（４℃）保存した。
上記方法により調製した飲料は、保管庫（４℃）に１日以上静置し、安定化させた。その後、クリーンベンチ内で静かにキャップを開封し、１０６〜１０４ｃｆｕ／ｍｌとなるように滅菌水で希釈したＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  ＮＢＲＣ１０２１７の懸濁液を１００μｌ添加し、再栓した。酵母菌接種後の飲料を２５℃で保管し、経時的に開栓してメンブレンフィルターにてろ過を行い、ポテトデキストロース培地（ｐＨ３．５）に貼り付けて２５℃で培養し、生育菌数を測定した。その結果を図２に示す。
【００５６】
＜比較例９＞
酵母として、Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｂａｉｌｉｉ  ＮＢＲＣ１１３７株を使用した以外は、比較例８と同様とした。
【００５７】
＜比較例１０＞
酵母として、Ｃａｎｄｉｄａ  ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ  ＮＢＲＣ１４００株を使用した以外は、比較例８と同様とした。
【００５８】
本発明の炭酸飲料用抗酵母剤を添加していないぶどう果汁入り炭酸飲料では、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  ＮＢＲＣ１０２１７（比較例８）及びＺｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｂａｉｌｉｉ  ＮＢＲＣ１１３７株（比較例９）は経時的に増殖した。これに対して、本発明の炭酸飲料用抗酵母剤を添加したみかん果汁入り炭酸飲料では、経時的にＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  ＮＢＲＣ１０２１７（実施例３）及びＺｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｂａｉｌｉｉ  ＮＢＲＣ１１３７株（実施例４）の菌数が減少し、最終的には死滅した。これに対して、Ｃａｎｄｉｄａ  ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓは、本発明の炭酸飲料用抗酵母剤の添加の有無にかかわらず、経時的にその菌数が減少し、最終的には死滅した（比較例７，１０）ことから、炭酸ガスに起因するものであると考えられる。
【図１】
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【図２】
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