(57)【要約】【課題】ラセミ体カラノライドＡ及びカラノライドＢの混合物からのラセミ体カラノライドＢジアステレオマーの除去方法の提供。【解決手段】１）カラノライドＢがカラノライドＡよりも低い溶解度を有する溶媒からラセミ体カラノライドＡ及びカラノライドＢの混合物を繰り返し結晶化し；２）カラノライドＡが富化され、かつカラノライドＢが貧化された、合した母液を回収して濃縮し；そして３）溶媒から、合した母液の残渣を再結晶させて、残留カラノライドＢを除去し且つ精製ラセミ体カラノライドＡを単離する前記混合物からのラセミ体カラノライドＢジアステレオマーの除去方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
１）カラノライドＢがカラノライドＡよりも低い溶解度を有する溶媒からラセミ体カラノライドＡ及びカラノライドＢの混合物を繰り返し結晶化し；
２）カラノライドＡが富化され、かつカラノライドＢが貧化された、合した母液を回収して濃縮し；そして
３）溶媒から、合した母液の残渣を再結晶させて、残留カラノライドＢを除去し且つ精製ラセミ体カラノライドＡを単離する
工程を含んでなる前記混合物からのラセミ体カラノライドＢジアステレオマーの除去方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、トランス−カラノライドケトン中間体の合成方法及びラセミ体カラノライドＡを得る生成物アルコールの２つのジアステレオマーを互いに分離方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
（＋）−カラノライドＡはＡＩＤＳ治療のために研究中のＨＩＶ−１特異的逆転写酵素阻害剤（ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｒｅｖｅｒｓｅ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）である（特許文献１）。（＋）−カラノライドＡ合成の最新技術は、以下の合成経路に示す通りである（特許文献１及び２並びに非特許文献１）。
【０００３】
【化１】
2011026353.tif 000002
【０００４】
この経路において、中間体５は、酢酸ビニルと共に当重量のリパーゼＡＫを用いる、時間のかかる、酵素触媒による速度論的分割によって分割される。所望の（＋）−５から（−）−５の酢酸エステルを分離するには、クロマトグラフィー分離が必要である。最新技術によれば、トランス−カラノライドケトン中間体（＋）−６は、Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応条件下でジエチルアゾジカルボキシレート（ＤＥＡＤ）及びトリフェニルホスフィンで（＋）−５を処理することによって生成する。所望のトランス−カラノライドケトンから副生ジエチルヒドラジノジカルボキシレート及びトリフェニルホスフィンオキシドを除去するには、第二の、より難しいクロマトグラフィー精製が必要である。塩化セリウムと共に水素化硼素ナトリウムを用いる、ケトン官能基のアルコールへの還元［Ｌｕｃｈｅ条件（非特許文献２）］により、Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応からの副生物を依然として含む粗製（＋）−カラノライドＡが生成する。Ｌｕｃｈｅ還元の生成物は、ジアステレオマー（＋）−カラノライドＢも含む。粗製（＋）−カラノライドＡは、Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応の副生物及び（＋）−カラノライドＢを除去するために分取用クロマトグラフィーによって精製して、クロメン中間体４から１７％の単離収率で得られる。
【０００５】
【化２】
2011026353.tif 000003
【０００６】
【化３】
2011026353.tif 000004
【０００７】
セミ分取用キラルＨＰＬＣによるラセミ体からの（＋）−カラノライドＡの分離を予め用いて、少量の純粋な立体異性体が生成する（特許文献２、非特許文献１及び非特許文献３）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】米国特許第６，２７７，８７９号（Ｚ．Ｑ．Ｘｕ，Ｍ．Ｔ．Ｆｌａｖｉｎ及びＤ．Ｚｅｍｂｏｗｅｒ；２００１年８月２１日）
【特許文献２】米国特許第５，４８９，６９７号（Ｗ．Ａ．Ｂｏｕｌａｎｇｅｒ，Ｍ．Ｔ．Ｆｌａｖｉｎ，Ａ．Ｋｕｃｈｅｒｅｎｋｏ，Ａ．Ｋ．Ｓｈｅｙｎｋｍａｎ；１９９６年２月６日）
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｍ．Ｔ．Ｆｌａｖｉｎら；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３９，１３０３（１９９６）
【非特許文献２】Ａ．Ｌ．Ｇｅｍａｌ及びＪ．Ｌ．Ｌｕｃｈｅ；Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１０３，５４５４（１９８１）
【非特許文献３】Ｊ．Ｈ．Ｃａｒｄｅｌｌｉｎａ  ＩＩ，Ｈ．Ｒ，Ｂｏｋｅｓｈ，Ｔ．Ｃ．ＭｃＫｅｅ，Ｍ．Ｒ．Ｂｏｙｄ；Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．５，１０１１（１９９５）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
長時間の酵素分割工程を回避するための代替製造方法として、より大規模の分離が提案されている。このために、ラセミ体カラノライドＡの実際的製造方法が望まれている。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明の方法は、トランス−カラノライドＡケトン中間体を合成するための新しい拡張性のある（ｓｃａｌｅａｂｌｅ）合成方法を含む。この方法は、１）塩化メチレン溶液中のクロメン中間体を四塩化チタンと、次いでジイソプロピルエチルアミンと、次いでアセトアルデヒドと段階的に反応させ；２）生成物を低温の塩化アンモニウム水溶液中に浸漬することによって急冷し；３）有機相を酸性化水洗浄液で洗浄し；４）有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ；５）濾過し；６）溶媒を蒸発させ；７）得られたアルドール中間体を、テトラヒドロフラン中のジメチルホルムアミドジメチルアセタールで処理し；８）飽和ブライン及び水で処理し；９）水相及び溶媒を除去し；１０）トリエチルアミン含有ｔ−アミルアルコールで平衡化し、そして１１）結晶ケトンを濾過によって除去する工程を含む。
本発明の好ましい態様によれば、１）塩化メチレン溶液中のクロメン中間体を、四塩化チタンと、次いでジイソプロピルエチルアミンと、次いでアセトアルデヒドと段階的に反応させ；
２）生成したアルドール中間体を、テトラヒドロフラン中でジメチルホルムアミドジメチルアセタールのような脱水試薬で処理して、シス及びトランス環状ケトンの混合物を生成せしめ；
３）シス及びトランス環状ケトンを、ｔ−アミルアルコールのような溶媒中でトリエチルアミンのような塩基を用いて平衡化させて、トランス型の沈殿を生成せしめ；そして
４）結晶ケトンを濾過によって単離する
工程を含んでなるトランス−カラノライドＡケトン中間体の合成方法が提供され、更に
１）カラノライドＢがカラノライドＡよりも低い溶解度を有するトルエンのような溶媒からラセミ体カラノライドＡ及びカラノライドＢの混合物を繰り返し結晶化し；
２）カラノライドＡが富化され、かつカラノライドＢが貧化された、合した母液を回収して濃縮し；そして
３）水性２−プロパノールのような溶媒から、合した母液の残渣を再結晶させて、残留カラノライドＢを除去し且つ精製ラセミ体カラノライドＡを単離する
工程を含んでなる前記混合物からのラセミ体カラノライドＢジアステレオマーの除去方法が提供される。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の方法は、現状方法において必要とされている長時間の酵素分割工程と難しいクロマトグラフィー精製工程をなくす。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明の合成方法によれば、ラセミ体トランス−カラノライドケトンは、アルドール中間体をジメチルホルムアミドジメチルアセタール（ＤＭＦＤＭＡ）で処理し、次いでｔ−アミルアルコール中トリエチルアミンを用いて平衡化させることによって製造できる。所望のトランス−カラノライドケトンは、溶液から晶出し、濾過によって単離できる。中間体は、この方法に関しては単離を必要とせず、先行技術の方法によって生成される副生物は存在しない。従って、本発明の方法は、副生物の除去のためのクロマトグラフィー精製を必要とせず、同様な単離収率を示す。
【００１４】
本発明は、カラノライドＡの合成の最終工程において形成されるカラノライドＡジアステレオマーとカラノライドＢジアステレオマーとの混合物からのラセミ体カラノライドＢジアステレオマーの除去方法を更に含む。この方法は、１）混合物中のカラノライドＢをトルエンから繰り返し再結晶させ、そして２）合した母液を濃縮し、水性２−プロパノールから残渣を再結晶させて、精製ラセミ体カラノライドＡを単離する工程を含む。
【００１５】
本発明の方法は、ラセミ体トランス−カラノライドＡの合成において使用されるトランス−カラノライドＡケトン中間体を合成するための新しい拡張性のある方法を含む。この方法は、１）塩化メチレン溶液中のクロメン中間体を四塩化チタンと、次いでジイソプロピルエチルアミンと、次いでアセトアルデヒドと段階的に反応させ；２）生成物を低温の塩化アンモニウム水溶液中に浸漬することによって急冷し；３）有機相を酸性化水洗浄液で洗浄し；４）有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ；５）濾過し；６）溶媒を蒸発させ；７）得られたアルドール中間体を、テトラヒドロフラン中ジメチルホルムアミドジメチルアセタールで処理し；８）飽和ブライン及び水で処理し；９）水相及び溶媒を除去し；１０）トリエチルアミン含有ｔ−アミルアルコールで平衡化し、そして１１）結晶ケトンを濾過によって除去する工程を含む。本発明の方法は、現在の方法において必要とされている長時間の酵素分割工程と難しいクロマトグラフィー精製工程を不要にする。
【００１６】
先行技術は、アルドール型中間体の塩基触媒縮合を同様な環構造の製造に使用できることを教示している（Ｔ．Ｉｓｈｉｋａｗａ，Ｙ．Ｏｋｕ，Ｙ．Ｋ．Ｉ．Ｋｏｔａｋｅ，Ｈ．Ｉｓｈｉｉ；Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６１，６４８４（１９９６））。しかし、フッ化セシウム又はトリエチルアミンをアルドール縮合生成物５と共に使用すると、部分転化のみがなされ、同時に分解生成物が生成した。脱水剤の使用によってアルケン９が生成し、次いで環化され、以下に示す通り、所望の環構造が形成された（アルドール中間体の脱水及び環化参照）。
【００１７】
【化４】
2011026353.tif 000005
【００１８】
本発明の合成方法によれば、ラセミ体トランス−カラノライドケトン６は、アルドール中間体５をジメチルホルムアミドジメチルアセタール（ＤＭＦＤＭＡ）で処理してから、ｔ−アミルアルコール中のトリエチルアミンを用いて平衡化することによって生成できる。所望のトランス−カラノライドケトンは溶液から晶出する。これは、濾過によって単離できる。所望のトランス−カラノライドケトンは、トリエチルアミン及びｔ−アミルアルコールのような溶媒中への溶解度が低いので、溶液から結晶化する。さらに、トランス−カラノライドケトンへの環化反応において同様に形成されたシス−カラノライドケトン異性体１０の平衡化は、塩基性溶液中で容易に起こる。結晶化によって溶液からトランス−カラノライド型を除去することによって、全体的平衡が、所望のトランス−カラノライド型を生成するように促進される。先行技術の方法によって生成する副生物は、この方法には存在しない。従って、本発明の方法は、副生物を除去するクロマトグラフィー精製を必要とせず、同様な単離収率を示す。
【００１９】
塩化メチレン中の四塩化チタン及びジイソプロピルエチルアミンの存在下におけるアセトアルデヒドによる４のアルドール縮合により、以下の反応式に示すように５が得られる。この反応は、四塩化チタンによる生成物の初期錯化によって媒介される。四塩化チタン又はジイソプロピルエチルアミン単位比が減少すると、転化率が低くなる。転化率が低い反応混合物では、追加量の四塩化チタン、ジイソプロピルエチルアミン又はアセトアルデヒドを用いても完了させることができなかった。転化率は約９０％であると報告したが、単離収率はわずか４７％であった。これは処理の間に出発原料を再生するための、予め観察されたレトロ−アルドール反応及びクロマトグラフィー精製によるものと思われる。
【００２０】
【化５】
2011026353.tif 000006
【００２１】
この反応は、０〜１０℃の反応温度において４の塩化メチレン溶液に四塩化炭素、次いでジイソプロピルエチルアミン、次いでアセトアルデヒドを添加することによって実施した。反応混合物を冷（０〜１０℃）塩化アンモニウム水溶液中に浸漬して急冷した。塩化メチレン溶液の水洗を用いて、残留四塩化チタン／ジイソプロピルエチル−アミン錯体を除去したが、出発原料のレベルも増加することが判明した。しかし、洗浄液の酸性化により、一夜放置に対して安定である混合物が得られた。塩化メチレン相を、硫酸マグネシウムで乾燥させてから、周囲温度における蒸発によって溶媒を除去した。
【００２２】
反応転化率は四塩化チタン、ジイソプロピルエチルアミン及び塩化メチレンの単位比に影響されやすいようであり、四塩化チタンの必要量は、４のバッチ間で異なるようであった。４の６個の異なるバッチ（ＳＭＡ〜ＳＭＦ）を評価した。反応装填量を、各試薬の添加の間に到達した最高温度と共に、表Ｉに記載する。
【００２３】
【表１】
2011026353.tif 000007
【００２４】
このデータから、比較的高い反応濃度は転化には不利であるようである（評価Ａ）。塩化メチレン単位比２５では一貫して良好な結果が得られた。１．６７の四塩化チタン単位比は、ＳＭＡ及びＳＭＣからの場合には５面積％未満の４を生じ、ＳＭＦ（評価Ｎ及びＯ）からの場合には約１５％の出発原料が残っていた。２のより高い四塩化チタン比は、この材料との完全な反応をもたらした（評価Ｐ）。ジイソプロピルエチルアミン単位比の増加は、より高レベルの他の不純物を生じた（評価Ｍ）。また、反応温度が高いほど転化率が低くなるようであった（評価Ｆ）。
【００２５】
５を、ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（ＤＭＤＭＡ）のような脱水剤で処理すると、アルケン９が生成する（前記アルドール中間体の脱水及び環化参照）。周囲温度において一夜撹拌後、９は環化してラセミ体６と１０の混合物が生成した。所望のトランス−ケトン６はトリエチルアミン又はｔ−アミルアルコール中への溶解度が低いこと並びに塩基性溶液中では１０の６への平衡化が容易に起こること（平衡状態で６／１０比は約３／１である）が判明した。
【００２６】
残留ＤＭＤＭＡの急冷による分解を最小限に留めるために、ＴＨＦ反応混合物をブラインで洗浄した。次いで、ＴＨＦをトリエチルアミンと交換した。トリエチルアミンへの反応混合物油の溶解を助けるために、少量のｔ−アミルアルコールを添加した。トリエチルアミン中に６及び１０を含む反応混合物を４０〜４５℃において撹拌することによって、６が溶液から晶出するにつれて、１０が６に平衡化された。
【００２７】
反応の進捗状況は、表ＩＩに示す通りである。４が９５〜９８面積％である材料から出発して、塩化アンモニウム急冷後には一般に、約９０面積％のアルドール生成物５が検出された。最良の結果は、ＤＭＤＭＡを添加してから数時間後に最小量の５が検出された場合に得られた（評価Ｑ）。この反応混合物を２０℃において一夜撹拌して、６と１０との約５０／５０の混合物が得られた。０℃において、エノン９の転化率は不充分であった（評価Ｊ）。ケトン６と１０との混合物をトリエチルアミン中で一夜加熱して、６０〜８０面積％の６を含むスラリーが得られた。
【００２８】
【表２】
2011026353.tif 000008
【００２９】
反応混合物を周囲温度まで冷却してから、真空濾過によって６を単離し；濾過ケークを少量のｔ−アミルアルコールで洗浄し、それによって色の大部分を除去する。生成物は一般に、還流させながらエタノール中に温浸するか又はエタノール中で再結晶することによって精製する。単離収率は２４〜４７％であった。これを表ＩＩＩにまとめる。最も低い収率（評価Ｎ）は、アルドール反応からの転化が不十分なバッチから得られた。アルドール反応生成物は残渣４を約２０％含んでいたが、材料を繰り越した際に次の反応がうまくいかないということはなく、トリエチルアミン反応混合物から６がうまく結晶化された。
【００３０】
【表３】
2011026353.tif 000009
【００３１】
エタノール中水素化硼素ナトリウムによって６を還元すると、カラノライドＡとカラノライドＢとの混合物が得られる（以下のカラノライドＡへの還元反応式参照）。−１０℃〜−４０℃において塩化セリウムを使用すると（Ｌｕｃｈｅ条件）、カラノライドＡがカラノライドＢを上回って９０％得られる。Ｄａｉｃｅｌ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤカラム及びペンタン中の２．５％メタノールを用いるキラルＨＰＬＣを、カラノライド異性体比を求めるのに使用した。この系を使用すると、カラノライドＢ異性体の一方は一般に第一のカラノライドＡ異性体と同時溶出されるが、時折、ピークの分離が観察された。カラノライドＢのレベルは、第二の、常に分離されるカラノライドＢピークの面積％を２倍することによって求めた。
【００３２】
【化６】
2011026353.tif 000010
【００３３】
本発明は、カラノライドＡの合成の最終工程において形成されたカラノライドＡジアステレオマーとカラノライドＢジアステレオマーとの混合物からのラセミ体カラノライドＢジアステレオマーの除去方法を更に含む。この方法は、１）トルエンから混合物中のカラノライドＢを繰り返し再結晶し、２）合した母液を濃縮し、水性２−プロパノールから残渣を再結晶して、精製されたラセミ体カラノライドＡを単離する工程を含む。
【００３４】
先行技術は、カラノライドＡからのカラノライドＢの分離にクロマトグラフィー精製を用いた（米国特許第６，２７７，８７９号（Ｚ．Ｑ．Ｘｕ，Ｍ．Ｔ．Ｆｌａｖｉｎ及びＤ．Ｚｅｍｂｏｗｅｒ，２００１年８月２１日））。次いで、所望の（＋）−カラノライドＡから（−）−カラノライドＡを分離するには、キラル固定相を用いた更なるクロマトグラフィー分離が必要である。従って、Ｌｕｃｈｅ還元の生成物から所望の（＋）−カラノライドＡを単離するには、２つのクロマトグラフィー精製が必要である。大規模クロマトグラフィー精製は、典型的には、結晶化による分離よりも長時間を要し、経済的ではない。
【００３５】
本発明の方法による単離固体の繰り返し再結晶は、カラノライドＡとカラノライドＢとの５０／５０混合物までを生成し、カラノライドＢ中の母液を激減させた。単離固体中のカラノライドＢのレベルを激減させるが単独分離法として有用なレベルではないことがわかっている水性２−プロパノールを用いて、母液から精製ラセミ体カラノライドＡを単離した。この方法を用いて、カラノライドＢを１０．６％含む供給材料から、純度９８．２％のラセミ体カラノライドＡが６６％の回収率で得られた。
【００３６】
ケトン６は、エタノール反応溶媒中への溶解度が低いので、反応混合物は還元反応全体を通してスラリーのままであった。トルエンの添加により、ケトンの初期溶液が得られたが、反応は−２０℃の反応温度では不完全であり；周囲温度まで加温することにより、数時間で完全な還元が達成され、１５〜２０％のカラノライドＢが生成した。−６０〜−７０℃における反応は、補助溶媒としてＴＨＦを用いても用いなくても、周囲温度に加温されるまでは不完全な還元を生じた。カラノライドＢレベルは、これらの条件下で約１０％であった。
【００３７】
粉末水素化硼素ナトリウムを用いたエタノール中の還元反応は、−２０℃において一夜撹拌した後には完全であった。アセトンを用いた過剰の水素化硼素ナトリウムの急冷後、反応混合物を塩化アンモニウム水溶液中に注ぎ、生成物をトルエン中に抽出した。溶液を硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、溶媒を除去して、オイルを得た。ヘプタンの添加により、固体が得られた。反応混合物に関するカラノライドＢのレベルを表ＩＶに示す。
【００３８】
ラセミ体カラノライドＡは、種々の溶媒を用いて生成オイルから結晶化できた。結果を表ＩＶに示す。アセトン及びメチルエチルケトンのようなケトン溶媒を使用すると、生成物が分解された。これは、溶液の暗色化及びＨＰＬＣ分析によって観察された不純物レベルの増加によって証明された。分解はまた、メタノール中でも観察され、不純物レベルの増加が母液中で認められた。
【００３９】
【表４】
2011026353.tif 000011
【００４０】
結晶化は、単離固体中のカラノライドＢレベルを増加させ、従って、母液中のレベルを減少させることがわかった。ＭＴＢＥ結晶化母液の第二収得物からは、カラノライドＢを２．２％含むラセミ体カラノライドＡを収率３５％で得た。ヘプタンは良好な回収率を示したが、カラノライドＢレベルには大きな効果はなかった。
【００４１】
メタノール、トルエン及びメチルｔ−ブチルエーテルからのラセミ体カラノライドＡの結晶化は、単離固体中のカラノライドＢの比を高め、それによって母液中の比を減少させることがわかった。カラノライドＢを少なくとも１０％含むラセミ体カラノライドＡは、カラノライドＢ量の増加につれて、最大約５０％までトルエンから結晶化することがわかった。得られたＡ：Ｂの比は、ＨＰＬＣ分析によってλ＝３１２ｎｍにおいて測定した。さらに、ジアステレオマー比を、プロトンスペクトルの積分によって測定した；アルコール含有炭素上の水素のピークは、カラノライドＡ及びカラノライドＢのぞれぞれについて３．９２ｐｐｍ及び４．２５ｐｐｍである。ＨＰＬＣ分析及びＮＭＲ分析は共に同じジアステレオマー比を示し、これはモル比及びカラノライドＡ及びカラノライドＢに関して等しいＵＶレスポンス・ファクターを確認した。トルエン結晶化からの結果を表ＩＶにまとめる。
【００４２】
【表５】
2011026353.tif 000012
【００４３】
単離温度を低下させるか又は濃度を増加させることによって、母液中のカラノライドＢレベルが２％に向かって低下するにつれて、単離固体へのカラノライドＡの損失が増加した。例えば、実験「評価Ｙ」と「評価Ｚ」とを比較すると、評価Ｚにおいて固体フラクションとして約２０％多く単離することによって、単離固体中のカラノライドレベルが５５．１％から６０．３％に増加し、母液中に残るカラノライドＢが２％未満となった。出発原料がカラノライドＢを８．８％含む場合（評価Ｘ）には、カラノライドＢが激減した単離固体が低回収率で得られた。
【００４４】
装填及び単離された量及びジアステレオマー比から計算した、表ＶＩのトルエン結晶化母液中のカラノライドＡ及びＢの濃度は、温度によってはそれほど変化しないようであった。溶液中のカラノライドＢの濃度は、温度の低下に伴って約２％から約０．５％未満に低下した。ラセミ体カラノライドＡ及びジアステレオマー混合物に関して、２４．５℃における溶解度はそれぞれ、１３．３重量％及び３．３重量％、５℃における溶解度はそれぞれ、５．１重量％及び１．６重量％であった。純粋なラセミ体は、混合物の溶解度の約４倍の溶解度を示した。
【００４５】
トルエンから得られた単離固形分の融点は、カラノライドＢのレベルによって影響された（表ＶＩ）。最も高い融点は、カラノライドＢレベルが最高の材料の場合に検出された。
【００４６】
【表６】
2011026353.tif 000013
【００４７】
ラセミ体カラノライドＡは、水性２−プロパノールから結晶化するのがわかった。評価した他の溶媒とは異なり、水性２−プロパノールからの固体は、単離固体中のカラノライドＢレベルが激減し、母液中のレベルが増加した。
【００４８】
水性２−プロパノールから得られた固体の顕微鏡検査は、結晶が細長い棒状であることを示した。綿毛状の白色湿潤ケークは、４０℃において真空乾燥する間に部分的に液化及び固化して硬化塊を形成するから、周囲温度で乾燥するのが最良であった。乾燥されたサンプルは１１３〜１１７℃の融点範囲を有し、Ｋａｒｌ  Ｆｉｓｈｅｒ分析によって４．３重量％の水を含んでいた。これは、材料が水和物を形成する可能性があることを示唆する。モル比１：１の水和物は、水を４．６重量％含む。
【００４９】
２０〜５０℃の温度における、水性２−プロパノールへのラセミ体カラノライドＡの溶解度を測定した（表ＶＩＩ）。カラノライドＡの溶解度は、５０％の水性２−プロパノールでは０．５重量％未満までスムーズに低下した。比較的低い温度及び比較的高い水濃度において認められる低い溶解度は、水性２−プロパノールからの高い回収率を可能にした。
【００５０】
【表７】
2011026353.tif 000014
【００５１】
緩慢で選択的な結晶成長を実現するために、温度の低下及び水濃度の増加を共に使用して、過飽和点にゆっくり到達した。しかし、得られた選択性は、この方法単独でカラノライドＡからカラノライドＢを分離するためのベースを形成するには充分でなかった。カラノライドＢの濃度は母液中で高められたが、単離固形分中のレベルの減少はごくわずかしか観察されなかった。結果を表ＶＩＩＩに示す。
【００５２】
【表８】
2011026353.tif 000015
【００５３】
カラノライドＢからラセミ体カラノライドＡを除去する分離方法全体を以下に経路として示した。
【００５４】
【化７】
2011026353.tif 000016
【００５５】
固体をトルエンから３回再結晶して、最終的にはカラノライドＢを２９％含む材料を得た。上記経路には、各流れのカラノライドＡ／カラノライドＢ比から計算した、各フラクションに関する出発原料の総量（％）を含めた。母液中に回収される量は、再結晶１回毎に２倍減少し、母液中のカラノライドＢレベルは再結晶化毎に増加した。トルエンからの単離固体の全回収率は２４％であった。
【００５６】
カラノライドＢ１．９４％を含む、合した母液を、４０％水性２−プロパノールから結晶化して、カラノライドＢを１．７７％含むラセミ体カラノライドＡを６５．６％の回収率で得た。４０℃以下で真空乾燥することによって、Ｋａｒｌ  Ｆｉｓｈｅｒ分析によって水を４．２６重量％含む固体を得た。
【００５７】
ジアステレオマー混合物の結晶化特性に基づき、トルエンは、カラノライドＡ対カラノライドＢ比が約１／１までの混合物中においてカラノライドＢを結晶固体として除去するのに有効であることが判明した。これは、母液中のカラノライドＢレベルを、場合によっては１％未満まで激減させた。トルエンからの繰り替え再結晶及び母液の回収によって、カラノライドＢを１０．６％含む供給材料から、純度９８．２％のラセミ体カラノライドＡを回収率６６％で得た。単離固体中のカラノライドＢレベルを激減させるが単独の分離法としては有用なレベルではないことがわかっている水性２−プロパノールを用いて、合した母液から精製ラセミ体カラノライドＡを単離した。
【００５８】
２つのクロマトグラフィー精製を必要とせずに元の方法と同様な収率でラセミ体カラノライドＡを生成する、拡張性のある２段法を開発した。中間体アルドール生成物は単離する必要がなく、従って、精製を必要としない。この方法はまた、Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応を必要とせず、従って、Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ副生物を除去するクロマトグラフィーの必要がない。ケトンの硼水素化物還元から得られたラセミ体カラノライドＡの結晶化は、単離固体中のカラノライドＢレベルを増加させ、従って母液中のカラノライドＢレベルを低下させた。
【実施例】
【００５９】
原料及び溶媒は、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ、Ａｌｆａ又はＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから入手した。融点は、Ｔｈｏｍａｓ  Ｈｏｏｖｅｒ毛細管融点測定装置を用いて測定し、補正はしなかった。ＨＰＬＣ分析は、移動相に溶解されたサンプル２〜１０μＬを２５ｃｍ×４．６ｍｍのＤｉａｚｅｍ  Ｐｈｅｎｙｌ  ＩＩカラム（燐酸でｐＨ２．５〜３．５に調整した水３２％、アセトニトリル６８％で１ｍＬ／分で溶離）上に注入することによって、λ＝３１２ｎｍにおいて実施した（系Ａ）。別法として、燐酸でｐＨ２．５〜３．５に調整した水３０％、アセトニトリル７０％の１．５ｍＬ／分の流れを用いる２５ｃｍ×４．６ｍｍのＺｏｒｂａｘ  ＳＢ−Ｐｈｅｎｙｌカラムを用いた（系Ｂ）。両系に関するおおよその保持時間を表ＩＸに記載する。
【００６０】
【表９】
2011026353.tif 000017
【００６１】
キラルＨＰＬＣ分析は、移動相に溶解されたサンプル１０μＬを２５ｃｍ×４．６ｍｍのＤａｉｃｅｌ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤカラム上に注入し且つペンタン中２．５容量％メタノールを用いて１ｍＬ／分で溶離することによって、λ＝３１２ｎｍで実施した。これらの条件下において、カラノライドＡ異性体は１７．７分と２０．６分に溶出し、カラノライドＢ異性体は１７．７分と２４．７分に溶出した（おおよその保持時間）。
【００６２】
実施例１
ケトン６の製造
１Ｌのジャケット付きボトムドレン反応器に窒素下で、クロメン４（以下、出発原料Ｄ又は「ＳＭＤ」と称する）４４．４ｇ（０．１３０モル）及び塩化メチレン８３５ｍＬを装入した。ジャケットを−１５〜−２０℃に冷却した。内部温度−１８℃において、四塩化チタン５１ｍＬ（０．４７モル）を５０分にわたって滴加した。この添加中に到達した最高温度は−１５℃であった。ジイソプロピルエチルアミン（６０ｍＬ，０．３４モル）を１時間にわたって滴加した。到達した最高温度は−５℃であった。黒色溶液を約−１７℃において３０分間撹拌してから、アセトアルデヒド４５ｍＬ（０．８０モル）を約１０分間にわたって１５ｍＬずつ３回に分けて添加した。この添加中に到達した最高温度は−５℃であった。暗色溶液を−１７℃において１時間撹拌した。溶液を、塩化アンモニウム１８０ｇを含む水６００ｍＬに添加した。下層の有機相を、３７％塩酸を１１ｍＬ含む水１４０ｍＬで洗浄した。ＨＰＬＣ分析によって、５が９５．８面積％及び４が１．４面積％検出された。暗色溶液を、硫酸マグネシウム４４ｇを用いて乾燥させ、溶液を濾過した。ロータリー・エバポレーターを用いて浴温度２５℃で溶媒を除去した。ＴＨＦ（７０ｇ）を添加し、溶媒を除去して残留オイル９１．３ｇを得た。このオイルを、１Ｌ丸底フラスコ中でＴＨＦ  ６２０ｇ中に溶解させ、この溶液を、ジメチルホルムアミドジメチルアセタール４５ｇ（０．３８モル）の添加のために氷浴中で冷却した。周囲温度で一夜撹拌後、ＨＰＬＣ分析によって、９が３．０面積％、１０が３９．６面積％及び６が４７．６面積％検出された。この混合物を氷浴中で冷却し、飽和ブライン６０ｍＬ及び水９０ｍＬを添加した。下層の水相を排出し、ロータリー・エバポレーターを用いて浴温度２５℃で有機相から溶媒を除去して、残渣１０７．８ｇを得た。この残渣をトリエチルアミン５４ｇで処理し、溶媒を除去して残渣９９ｇを得た。この暗赤色の半固体残渣を、ｔ−アミルアルコール１２ｇを含むトリエチルアミン１３０ｇ中に溶解させ、混合物を、１Ｌのジャケット付きボトムドレン反応器に移した。ＨＰＬＣ分析によって、１０が２５．２面積％及び６が５９．３面積％検出された。スラリーを４０℃に加温し且つ８時間撹拌した後、ＨＰＬＣ分析によって、１０が１１．５面積％及び６が７７．０面積％検出された。上清のＨＰＬＣ分析によって、１０が２６．９面積％及び６が５５．８面積％検出された。スラリーを２０℃に冷却し且つ３時間撹拌してから、固体を真空濾過によって単離し、ｔ−アミルアルコール１０ｇで洗浄した。単離固体のＨＰＬＣ分析によって６が９３．２面積％及び１０が５．６面積％検出され；母液は１０を１９．４面積％及び６を３１．５面積％含んでいた。湿潤ケーク（２４．７ｇ）を、エタノール２Ｂを７５．８ｇ含む２５０ｍＬ丸底フラスコに装入し、スラリーを還流するまで加温し、次いで氷浴中で冷却した。固体を、真空濾過によって単離し、１０ｇのエタノール２Ｂですすいで、６（６が９５．９面積％及び１０が３．４面積％）を２２．５１ｇ得た。エタノール母液は、１０を５５．1面積％及び６を３３．1面積％含んでいた。固体を還流させながらエタノールＢ  ７８ｇで２回処理して、６［０．０５８２モル（収率４５％）；６が９７．２面積％及び１０が２．２面積％］を２１．４５ｇ生成した。エタノール母液は１０を４３．３面積％及び６を４８．６面積％含んでいた。
【００６３】
実施例２
ラセミ体カラノライドＡの製造
オーバーヘッド撹拌機及び窒素バブラーを装着した１Ｌボトムドレン反応器に、前記の製造した６（０．０５７８モル；６が９７．２面積％及び１０が２．２面積％）を２１．４ｇ、塩化セリウム七水和物を３４．４ｇ（０．０９２モル）及びエタノール２Ｂを２０６ｇ装入した。スラリーを内部温度−１８℃まで冷却し、粉末水素化硼素ナトリウム３．３８ｇ（０．０８９３モル）を約３０分間にわたって、概ね等量ずつ３回に分けて添加した。この添加中に到達した最高温度は−１６℃であった。添加３０分後のＨＰＬＣ分析によって、カラノライドが７２．７面積％及び６が２６．４面積％検出された。−１８℃で４時間後に、これらのレベルはそれぞれ、９６．５面積％及び２．３面積％であった。スラリーを同温度で一夜撹拌し、次いでアセトン１０ｍＬの添加によって急冷した。反応混合物を、塩化アンモニウム３５ｇを含む水３５０ｍＬに添加し、生成物をトルエン３５０ｍＬ中に抽出した。キラルＨＰＬＣ分析によって、カラノライドＡ及びＢ（１ピーク）４８．６面積％、カラノライドＡ  ４４．０面積％、及びカラノライドＢ  ５．６面積％が検出された。トルエン溶液を、硫酸マグネシウム２０ｇを用いて乾燥させ、混合物を濾過し、溶媒を回転蒸発によって除去して、黄色油を２２．８９ｇ得た。メチルｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）６０ｍＬの添加によって、周囲温度においてスラリーが得られた。スラリーを氷浴中で冷却し、生成物を真空濾過によって単離し、ＭＴＢＥ  １０ｍＬですすいで、（＋／−）−カラノライドＡ［逆相ＨＰＬＣ：９９．０面積％；キラルＨＰＬＣ：カラノライドＡ及びカラノライドＢ（１ピーク）４８．９面積％、カラノライドＡ  ４１．７面積％及びカラノライドＢ  ９．３５面積％］を８．２７ｇ（０．０２２２モル，収率３８％）生成した。母液を約１／２容量に濃縮して、（＋／−）−カラノライドＡのセカンドクロップ［逆相ＨＰＬＣ：９９．８面積％；キラルＨＰＬＣ：カラノライドＡ及びカラノライドＢ（１ピーク）４９．１面積％、カラノライドＡ  ４９．１面積％及びカラノライドＢ  １．１％］７．５４ｇ（０．０２０２モル，収率３５％）を生成した。最終母液残渣は、重量が３．０ｇであった［逆相ＨＰＬＣ：カラノライドＡ  ８８．４面積％；キラルＨＰＬＣ：カラノライドＡ及びカラノライドＢ（１ピーク）３３．７面積％、カラノライドＡ  ２８．０面積％及びカラノライドＢ  ４．２面積％］。
【００６４】
実施例３
結晶化によるカラノライドＡからのカラノライドＢの除去
１Ｌジャケット付きボトムドレン反応器にオーバーヘッド撹拌しながら、ラセミ体カラノライドＡ（カラノライドＡ  ８９．３６面積％，カラノライドＢ  １０．６４面積％）４９．４ｇ及びトルエン１５０ｇを装入した。混合物を５０℃に加熱して溶液を生成し、次いで０．１℃／分の速度で−８℃まで冷却し、同温度に５時間保持した。上清のＨＰＬＣ分析は、１００面積％のカラノライドＡを検出した。固体を、真空濾過によって単離し、トルエン１４ｇで洗浄して、湿潤ケーク（カラノライドＡ  ８２．３１面積％，カラノライドＢ  １７．６９面積％）２６．９６ｇを得た。母液（カラノライドＡ  ９９．９０面積％）を蒸発させて、残渣２０．８ｇを得た。トルエン湿潤ケーク２６．９６ｇをトルエン７６ｇと共に１Ｌ反応器中に装入し、５０℃に加熱して、溶液を得た。この溶液を１℃／分の速度で２５℃に冷却した。約３３℃において結晶化が始まった。スラリーを０．５℃／分で−８℃に冷却し、同温度に約１時間保持した。上清のＨＰＬＣ分析によって、カラノライドＡが９８．２７面積％及びカラノライドＢが１．６９面積％検出された。固体を、真空濾過によって単離し、トルエン７ｇで洗浄して、湿潤ケーク（カラノライドＡ  ７５．７４面積％，カラノライドＢ  ２４．２６面積％）２２．８１ｇを得た。母液（カラノライドＡ  ９７．９５面積％，カラノライドＢ  ２．０１面積％）を、前の母液と合し、蒸発させて、３２．１ｇの残渣を得た。２２．８１ｇの湿潤ケークをトルエン７５ｇと共に１Ｌ反応器中に装入し、５０℃に加熱して溶液を生成し、次いで２５℃に冷却してスラリーを得た。このスラリーを０．１℃／分の速度で−９℃に冷却し、同温度に９時間保持した。上清のＨＰＬＣ分析によって、カラノライドＡが９５．８４面積％及びカラノライドＢが４．１７面積％検出された。固体を真空濾過によって単離し、トルエン７ｇで洗浄し、真空下で４０℃において乾燥させて、１１．９６ｇ（回収率２４重量％；カラノライドＡ  ７１．００面積％及びカラノライドＢ  ２９．００面積％）を得た。母液（カラノライドＡ  ９３．８９面積％及びカラノライドＢ  ６．１１面積％）を、前の母液と合し、蒸発させて、残渣（カラノライドＡ  ９８．０２面積％及びカラノライドＢ  １．９４面積％）３９．０ｇを得た。５００ｍＬ丸底フラスコ中のこの固体にオーバーヘッド撹拌しながら、２−プロパノール２００ｇを添加し、混合物を５０℃まで加温して、淡色のスラリーを得た。水（１３０ｍＬ）を３０分間かけて滴加して、白色スラリーを得た。このスラリーを氷浴中で冷却し、固体を真空濾過によって採取し、６０％水性２−プロパノール２０ｇで洗浄し、真空下において最初は周囲温度で、次いで４０℃において乾燥させて、３３．８９ｇのラセミ体カラノライドＡ（Ｋａｒｌ  Ｆｉｓｈｅｒによって水４．２６重量％，含水量に関して補正された回収率６５．６％，カラノライドＡ  ９８．２３面積％及びカラノライドＢ  １．７７面積％，ｍｐ  １１３〜７℃）を得た。母液及び洗液（カラノライドＡ  ９１．００面積％及びカラノライドＢ  ６．５８面積％）を蒸発させて、１．５ｇの残渣を得た。