(57)【要約】      （修正有）【課題】アレルギーの中で特に発症頻度が高いＩ型アレルギー（例えば、気管支喘息、花粉症、食物アレルギー、アレルギー性鼻炎、アレルギー性皮膚炎）用剤、特にヒスタミンの遊離を抑制し、これを介してＩ型アレルギーを抑制することを可能とする化合物であり、飲食品の素材としても使用可能で、日常的に摂取することが可能な抗Ｉ型アレルギー剤を提供する。【解決手段】ホップ苦味成分（例えば、一般式（１）の化合物。）を有効成分として含有する抗Ｉ型アレルギー剤。2011074062.tif 000026［式中、Ｒ１はＣ１−６アルキル基を表す。］【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ホップ苦味成分を有効成分として含有する抗Ｉ型アレルギー剤。
【請求項２】
一般式（１）〜（７）で表される化合物の少なくとも１種を有効成分として含有する抗Ｉ型アレルギー剤。
【化１】
2011074062.tif 000019
［式中、Ｒ１はＣ１−６アルキル基を表す。］
【化２】
2011074062.tif 000020
［式中、Ｒ２はＣ１−６アルキル基を表す。］
【化３】
2011074062.tif 000021
［式中、Ｒ３はＣ１−６アルキル基を表す。］
【化４】
2011074062.tif 000022
［式中、Ｒ４はＣ１−６アルキル基を表す。］
【化５】
2011074062.tif 000023
［式中、Ｒ５はＣ１−６アルキル基を表す。］
【化６】
2011074062.tif 000024
［式中、Ｒ６はＣ１−６アルキル基を表す。］
【化７】
2011074062.tif 000025
［式中、Ｒ７はＣ１−６アルキル基を表す。］
【請求項３】
Ｒ１〜Ｒ７が各々、２−メチルプロピル基、１−メチルプロピル基、１−メチルエチル基、エチル基及び３−メチルブチル基から選ばれる、請求項２に記載の抗Ｉ型アレルギー剤。
【請求項４】
一般式（１）〜（４）の化合物の少なくとも１種を有効成分として含有する、請求項２に記載の抗Ｉ型アレルギー剤。
【請求項５】
Ｒ１〜Ｒ４が各々、２−メチルプロピル基、１−メチルプロピル基、１−メチルエチル基、エチル基及び３−メチルブチル基から選ばれる、請求項４に記載の抗Ｉ型アレルギー剤。
【請求項６】
ヒスタミン遊離抑制剤である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗Ｉ型アレルギー剤。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の抗Ｉ型アレルギー剤を含有する医薬品。
【請求項８】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の抗Ｉ型アレルギー剤を含有する飲食品。
【請求項９】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の抗Ｉ型アレルギー剤を含有する飲食品添加物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗Ｉ型アレルギー剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒトは、外来の異物（細菌、花粉、ダニ等）から生体を防御する免疫系を備えている。ところが、免疫系は、時に、特定の異物に対して過剰な生体防御反応を引き起こし、かえって生体に有害な作用を及ぼす。そのような反応はアレルギーと呼ばれる。
【０００３】
アレルギーの中で特に発症頻度が高いのは、いわゆるＩ型アレルギーである。抗Ｉ型アレルギー剤は種々知られているが、Ｉ型アレルギーの高い発症頻度を考慮すると、抗Ｉ型アレルギー剤は、飲食品の素材としても使用可能で、日常的に摂取可能なものが望ましいといえる。
【０００４】
そのような抗Ｉ型アレルギー剤としては、例えば、茶に含まれるカテキンを有効成分とするものが知られている（非特許文献１参照）。また、ホップ水抽出物に含まれるフラボノイド配糖体を有効成分とするものが知られている（特許文献１参照）。また、ホップ水抽出物に含まれるフロロアシルフェノン配糖体を有効成分とするものが知られている（特許文献２参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２００６／０９３１９４号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２００６／０９３２０２号パンフレット
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】日本補完代替医療学会誌  第３巻  第２号  ２００６年６月  ５３−６０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
飲食品の素材として使用可能な抗Ｉ型アレルギー剤に関しては、上述のような例が挙げられるものの、未だ、多様な需要を満たすのに十分な選択肢が存在するとはいえないのが実情である。そこで、本発明は、飲食品の素材としても使用可能な新規の抗Ｉ型アレルギー剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、ホップ苦味成分を有効成分として含有する抗Ｉ型アレルギー剤を提供する。
【０００９】
本発明において、「ホップ苦味成分」とは、ホップ又はその抽出物に含有される苦味物質をいう。必ずしも天然のホップに含有されるものでなくてもよく、例えば、加熱処理、酸化還元処理、酵素処理等が施されたホップ抽出物に含有されるものであってもよい。
【００１０】
Ｉ型アレルギーでは、主としてＩｇＥ（免疫グロブリンＥ）抗体が抗原（アレルゲン）と共に肥満細胞や好塩基球に作用して、これらの細胞から種々のケミカルメディエーター（例えば、ヒスタミン、セロトニン）を遊離させる。本発明の抗Ｉ型アレルギー剤は、特にヒスタミンの遊離を抑制し、これを介して、Ｉ型アレルギーないしこれに伴う種々の症状・疾患（例えば、気管支喘息、花粉症、食物アレルギー、アレルギー性鼻炎、アレルギー性皮膚炎）を抑制（治療、緩和又は予防）することを可能とする。
【００１１】
本発明の抗Ｉ型アレルギー剤において、ホップ苦味成分としては、例えば、一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表される化合物、一般式（３）で表される化合物、一般式（４）で表される化合物、一般式（５）で表される化合物、一般式（６）で表される化合物及び一般式（７）で表される化合物が挙げられる（一般式（１）〜（７）は下記の通り）。すなわち、本発明はまた、一般式（１）〜（７）で表される化合物の少なくとも１種を有効成分として含有する抗Ｉ型アレルギー剤を提供する。
【００１２】
【化１】
2011074062.tif 000002
［式中、Ｒ１はＣ１−６アルキル基を表す。］
【００１３】
【化２】
2011074062.tif 000003
［式中、Ｒ２はＣ１−６アルキル基を表す。］
【００１４】
【化３】
2011074062.tif 000004
［式中、Ｒ３はＣ１−６アルキル基を表す。］
【００１５】
【化４】
2011074062.tif 000005
［式中、Ｒ４はＣ１−６アルキル基を表す。］
【００１６】
【化５】
2011074062.tif 000006
［式中、Ｒ５はＣ１−６アルキル基を表す。］
【００１７】
【化６】
2011074062.tif 000007
［式中、Ｒ６はＣ１−６アルキル基を表す。］
【００１８】
【化７】
2011074062.tif 000008
［式中、Ｒ７はＣ１−６アルキル基を表す。］
【００１９】
本発明の抗Ｉ型アレルギー剤は、より高い抗アレルギー効果が得られる点で、一般式（１）〜（４）の化合物の少なくとも１種を有効成分として含有するのが好ましく、一般式（１）及び（２）の化合物の少なくとも１種を有効成分として含有するのがより好ましく、一般式（１）の化合物の少なくとも１種を有効成分として含有するのが特に好ましい。
【００２０】
一般式（１）〜（７）において、Ｒ１〜Ｒ７で表されるＣ１−６アルキル基の例としては、メチル基、エチル基、１−メチルエチル基（イソプロピル基）、１，１−ジメチルエチル基（ｔｅｒｔ−ブチル基）、プロピル基、１−メチルプロピル基（ｓｅｃ−ブチル基）、２−メチルプロピル基（イソブチル基）、２，２−ジメチルプロピル基（ネオペンチル基）、ブチル基、３−メチルブチル基、ペンチル基及びヘキシル基が挙げられる。
【００２１】
Ｒ１〜Ｒ７は、好ましくはＣ２−５アルキル基であり、より好ましくはＣ３−４アルキル基である。Ｃ２−５アルキル基の例としては、２−メチルプロピル基、１−メチルプロピル基、１−メチルエチル基、エチル基及び３−メチルブチル基が挙げられ、Ｃ３−４アルキル基の例としては、２−メチルプロピル基、１−メチルプロピル基及び１−メチルエチル基が挙げられる。
【００２２】
本発明の抗Ｉ型アレルギー剤は、ヒスタミンの遊離を抑制する作用を有することから、特にヒスタミン遊離抑制のために使用することもできる。また、種々のＩ型アレルギー性疾患（例えば、気管支喘息、花粉症、食物アレルギー、アレルギー性鼻炎、アレルギー性皮膚炎）の改善（治療、緩和）又は予防のために使用することもできる。
【００２３】
ホップ苦味成分は、長年に渡ってビール系飲料で利用されてきたものであり、その安全性は確立されている。本発明の抗Ｉ型アレルギー剤は、生体に対する安全性が高く、日常的かつ継続的に摂取可能であり、それ故、医薬品成分としてのみならず、飲食品、飲食品添加物、飼料、飼料添加物等の素材としても使用することができる。
【発明の効果】
【００２４】
本発明によれば、飲食品の素材としても使用可能な新規の抗Ｉ型アレルギー剤が提供される。また、そのような抗Ｉ型アレルギー剤を含有する医薬品、飲食品、飲食品添加物、飼料、飼料添加物等が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】イソアルファ酸のヒスタミン遊離抑制活性を示すグラフである。
【図２】テトラヒドロイソアルファ酸のヒスタミン遊離抑制活性を示すグラフである。
【図３】アルファ酸のヒスタミン遊離抑制活性を示すグラフである。
【図４】受動皮膚アナフィラキシー試験におけるイソアルファ酸投与マウスの漏出色素量を示すグラフである。
【図５】受動皮膚アナフィラキシー試験におけるイソアルファ酸投与、テトラヒドロイソアルファ酸投与及びβ酸投与マウスの漏出色素量を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
以下、本発明の実施形態について説明する。
【００２７】
本発明の抗Ｉ型アレルギー剤は、ホップ苦味成分を有効成分として含有する。
【００２８】
ホップ苦味成分としては、例えば、一般式（１）の化合物、一般式（２）の化合物、一般式（３）の化合物、一般式（４）の化合物、一般式（５）の化合物、一般式（６）の化合物及び一般式（７）の化合物が挙げられる。すなわち、本発明の抗Ｉ型アレルギー剤は、例えば、一般式（１）の化合物、一般式（２）の化合物、一般式（３）の化合物、一般式（４）の化合物、一般式（５）の化合物、一般式（６）の化合物又は一般式（７）の化合物を有効成分として含有する。
【００２９】
一般式（１）〜（７）において、Ｒ１〜Ｒ７で表されるＣ１−６アルキル基は、直鎖状でも分岐鎖状でもよい。Ｃ１−６アルキル基の例としては、メチル基、エチル基、１−メチルエチル基（イソプロピル基）、１，１−ジメチルエチル基（ｔｅｒｔ−ブチル基）、プロピル基、１−メチルプロピル基（ｓｅｃ−ブチル基）、２−メチルプロピル基（イソブチル基）、２，２−ジメチルプロピル基（ネオペンチル基）、ブチル基、３−メチルブチル基、ペンチル基及びヘキシル基が挙げられる。
【００３０】
一般式（１）の化合物（イソアルファ酸）の中では、Ｒ１がＣ２−５アルキル基である化合物が好ましく、Ｒ１がＣ３−４アルキル基である化合物がより好ましい。
Ｒ１がＣ２−５アルキル基である化合物の例としては、
イソフムロン（Ｒ１＝２−メチルプロピル基）、
イソアドフムロン（Ｒ１＝１−メチルプロピル基）、
イソコフムロン（Ｒ１＝１−メチルエチル基）、
イソポストフムロン（Ｒ１＝エチル基）、及び
イソプレフムロン（Ｒ１＝３−メチルブチル基）が挙げられる。
Ｒ１がＣ３−４アルキル基である化合物の例としては、
イソフムロン（Ｒ１＝２−メチルプロピル基）、
イソアドフムロン（Ｒ１＝１−メチルプロピル基）、及び
イソコフムロン（Ｒ１＝１−メチルエチル基）が挙げられる。
【００３１】
一般式（２）の化合物（テトラヒドロイソアルファ酸）の中では、Ｒ２がＣ２−５アルキル基である化合物が好ましく、Ｒ２がＣ３−４アルキル基である化合物がより好ましい。
Ｒ２がＣ２−５アルキル基である化合物の例としては、
テトラヒドロイソフムロン（Ｒ２＝２−メチルプロピル基）、
テトラヒドロイソアドフムロン（Ｒ２＝１−メチルプロピル基）、
テトラヒドロイソコフムロン（Ｒ２＝１−メチルエチル基）、
テトラヒドロイソポストフムロン（Ｒ２＝エチル基）、及び
テトラヒドロイソプレフムロン（Ｒ２＝３−メチルブチル基）が挙げられる。
Ｒ２がＣ３−４アルキル基である化合物の例としては、
テトラヒドロイソフムロン（Ｒ２＝２−メチルプロピル基）、
テトラヒドロイソアドフムロン（Ｒ２＝１−メチルプロピル基）、及び
テトラヒドロイソコフムロン（Ｒ２＝１−メチルエチル基）が挙げられる。
【００３２】
一般式（３）の化合物（ローイソアルファ酸）の中では、Ｒ３がＣ２−５アルキル基である化合物が好ましく、Ｒ３がＣ３−４アルキル基である化合物がより好ましい。
Ｒ３がＣ２−５アルキル基である化合物の例としては、
ローイソフムロン（Ｒ３＝２−メチルプロピル基）、
ローイソアドフムロン（Ｒ３＝１−メチルプロピル基）、
ローイソコフムロン（Ｒ３＝１−メチルエチル基）、
ローイソポストフムロン（Ｒ３＝エチル基）、及び
ローイソプレフムロン（Ｒ３＝３−メチルブチル基）が挙げられる。
Ｒ３がＣ３−４アルキル基である化合物の例としては、
ローイソフムロン（Ｒ３＝２−メチルプロピル基）、
ローイソアドフムロン（Ｒ３＝１−メチルプロピル基）、及び
ローイソコフムロン（Ｒ３＝１−メチルエチル基）が挙げられる。
【００３３】
一般式（４）の化合物（ヘキサヒドロイソアルファ酸）の中では、Ｒ４がＣ２−５アルキル基である化合物が好ましく、Ｒ４がＣ３−４アルキル基である化合物がより好ましい。
Ｒ４がＣ２−５アルキル基である化合物の例としては、
ヘキサヒドロイソフムロン（Ｒ４＝２−メチルプロピル基）、
ヘキサヒドロイソアドフムロン（Ｒ４＝１−メチルプロピル基）、
ヘキサヒドロイソコフムロン（Ｒ４＝１−メチルエチル基）、
ヘキサヒドロイソポストフムロン（Ｒ４＝エチル基）、及び
ヘキサヒドロイソプレフムロン（Ｒ４＝３−メチルブチル基）が挙げられる。
Ｒ４がＣ３−４アルキル基である化合物の例としては、
ヘキサヒドロイソフムロン（Ｒ４＝２−メチルプロピル基）、
ヘキサヒドロイソアドフムロン（Ｒ４＝１−メチルプロピル基）、及び
ヘキサヒドロイソコフムロン（Ｒ４＝１−メチルエチル基）が挙げられる。
【００３４】
一般式（５）の化合物（アルファ酸）の中では、Ｒ５がＣ２−５アルキル基である化合物が好ましく、Ｒ５がＣ３−４アルキル基である化合物がより好ましい。
Ｒ５がＣ２−５アルキル基である化合物の例としては、
フムロン（Ｒ５＝２−メチルプロピル基）、
アドフムロン（Ｒ５＝１−メチルプロピル基）、
コフムロン（Ｒ５＝１−メチルエチル基）、
ポストフムロン（Ｒ５＝エチル基）、及び
プレフムロン（Ｒ５＝３−メチルブチル基）が挙げられる。
Ｒ５がＣ３−４アルキル基である化合物の例としては、
フムロン（Ｒ５＝２−メチルプロピル基）、
アドフムロン（Ｒ５＝１−メチルプロピル基）、及び
コフムロン（Ｒ５＝１−メチルエチル基）が挙げられる。
【００３５】
一般式（６）の化合物（ベータ酸）の中では、Ｒ６がＣ２−５アルキル基である化合物が好ましく、Ｒ６がＣ３−４アルキル基である化合物がより好ましい。
Ｒ６がＣ２−５アルキル基である化合物の例としては、
ルプロン（Ｒ６＝２−メチルプロピル基）、
アドルプロン（Ｒ６＝１−メチルプロピル基）、
コルプロン（Ｒ６＝１−メチルエチル基）、
ポストルプロン（Ｒ６＝エチル基）、及び
プレルプロン（Ｒ６＝３−メチルブチル基）が挙げられる。
Ｒ６がＣ３−４アルキル基である化合物の例としては、
ルプロン（Ｒ６＝２−メチルプロピル基）、
アドルプロン（Ｒ６＝１−メチルプロピル基）、及び
コルプロン（Ｒ６＝１−メチルエチル基）が挙げられる。
【００３６】
一般式（７）の化合物の中では、Ｒ７がＣ２−５アルキル基である化合物が好ましく、Ｒ７がＣ３−４アルキル基である化合物がより好ましい。
Ｒ７がＣ２−５アルキル基である化合物の例としては、
フルポン（Ｒ７＝２−メチルプロピル基）、
アドフルポン（Ｒ７＝１−メチルプロピル基）、
コフルポン（Ｒ７＝１−メチルエチル基）、
ポストフルポン（Ｒ７＝エチル基）、及び
プレフルポン（Ｒ７＝３−メチルブチル基）が挙げられる。
Ｒ７がＣ３−４アルキル基である化合物の例としては、
フルポン（Ｒ７＝２−メチルプロピル基）、
アドフルポン（Ｒ７＝１−メチルプロピル基）、及び
コフルポン（Ｒ７＝１−メチルエチル基）が挙げられる。
【００３７】
本発明の抗Ｉ型アレルギー剤において、ホップ苦味成分は、天然物（植物、微生物等）に由来するものであっても、人為的に合成したものであってもよい。また、市販のものがあれば、それを使用してもよい。
【００３８】
ホップ苦味成分は、例えば、ホップ抽出物を分画・精製することによって得ることができる。ホップ抽出物としては、例えば、市販のホップエキス又はイソ化ホップエキスを使用してもよい。
【００３９】
ホップからの抽出を行う場合、抽出に供するホップ組織としては、毬花、茎又は葉が好ましい。ホップは、乾燥、凍結、加工、粉砕、選別等の処理が施されたものであってもよく、例えば、ホップペレットを使用してもよい。
【００４０】
ホップの品種は特に制限されず、既存の品種（例えば、チェコ産ザーツ種、ドイツ産ハラタウ・マグナム種、ドイツ産ハラタウ・トラディション種、ドイツ産ペルレ種）のいずれであってもよい。１種を単独で使用しても、２種以上を組み合わせて使用してもよい。
【００４１】
ホップからの抽出は、例えば、ホップを溶媒に浸漬し、これを濾過することによって行うことができる。溶媒としては、例えば、エタノール、メタノールが好適である。溶媒は、１種を単独で使用しても、２種以上を組み合わせて使用してもよい。浸漬の際には超音波処理を行ってもよい。抽出は、超臨界流体（例えば、二酸化炭素）を用いて行うこともできる。得られた抽出物に対しては、公知の方法（例えば、減圧濃縮、凍結乾燥）により濃縮又は乾燥を行ってもよく、更に粉砕等の処理を行ってもよい。
【００４２】
ホップ抽出物からのホップ苦味成分の分画・精製は、公知の方法（例えば、シリカゲルカラムクロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、フラッシュクロマトグラフィー、ＨＰＬＣ、フィルター濾過、遠心分離）により行うことができる。
【００４３】
得られた化合物が所望の化合物かどうかは、公知の方法（例えば、質量分析、元素分析、核磁気共鳴分光法、紫外分光法、赤外分光法）により確認することができる。
【００４４】
また、一般式（１）〜（４）の化合物は、例えば、下記反応式に示される方法によって得ることができる。
【００４５】
【化８】
2011074062.tif 000009
［式中、Ｒ１〜Ｒ５は各々、Ｃ１−６アルキル基を表す。］
【００４６】
このように、一般式（１）の化合物は、一般式（５）の化合物をアルカリ条件下で加熱することによって得ることができる。また、一般式（２）の化合物は、一般式（１）の化合物をパラジウム付活性炭の存在下、水素ガスで接触還元することによって得ることができる。また、一般式（３）の化合物は、一般式（１）の化合物を水素化ホウ素ナトリウムと反応させることによって得ることができる。また、一般式（４）の化合物は、一般式（２）の化合物を水素化ホウ素ナトリウムと反応させることによって得ることができる。
【００４７】
また、一般式（７）の化合物は、一般式（６）の化合物を酸化することによって得ることができる。例えば、フルポンは、次のようにして得ることができる。すなわち、まず、ルプロンをメタノール／水混合液に添加して、酸素存在下、十分に振とうする。次に、溶媒を除去し、残留物をヘキサンで抽出する。そして、抽出物をメタノールに懸濁し、これを２Ｎ塩酸で酸性にし、更に水で希釈する。最後に、これをヘキサンで抽出し、抽出物を留出すれば、フルポンが得られる。
【００４８】
本発明の抗Ｉ型アレルギー剤は、１種のホップ苦味成分のみを含有しても、２種以上のホップ苦味成分を含有してもよい。また、抗Ｉ型アレルギー作用を有する他の物質を更に含有してもよい。
【００４９】
本発明の抗Ｉ型アレルギー剤は、ホップ苦味成分からなるものであってもよい。また、本質的にホップ苦味成分からなるものであってもよい。
【００５０】
本発明の抗Ｉ型アレルギー剤は、固体（例えば、凍結乾燥させて得られる粉末）、液体（水溶性又は脂溶性の溶液又は懸濁液）、ペースト等のいずれの形状でもよく、また、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳剤、軟膏剤、硬膏剤等のいずれの剤形をとってもよい。
【００５１】
上述の各種製剤は、ホップ苦味成分と、薬学的に許容される添加剤（賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、乳化剤、界面活性剤、基剤、溶解補助剤、懸濁化剤等）と、を混和することによって調製することができる。
【００５２】
例えば、賦形剤としては、ラクトース、スクロース、デンプン、デキストリン等が挙げられる。結合剤としては、ポリビニルアルコール、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。滑沢剤としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク等が挙げられる。崩壊剤としては、結晶セルロース、寒天、ゼラチン、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、デキストリン等が挙げられる。乳化剤又は界面活性剤としては、Ｔｗｅｅｎ６０、Ｔｗｅｅｎ８０、Ｓｐａｎ８０、モノステアリン酸グリセリン等が挙げられる。基剤としては、セトステアリルアルコール、ラノリン、ポリエチレングリコール、米糠油、魚油（ＤＨＡ、ＥＰＡ等）、オリーブ油等が挙げられる。溶解補助剤としては、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、Ｔｗｅｅｎ８０等が挙げられる。懸濁化剤としては、Ｔｗｅｅｎ６０、Ｔｗｅｅｎ８０、Ｓｐａｎ８０、モノステアリン酸グリセリン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム等が挙げられる。
【００５３】
本発明の抗Ｉ型アレルギー剤は、医薬品、飲食品（飲料、食品）、飲食品添加物、飼料、飼料添加物等の成分として使用することができる。例えば、飲料としては、水、清涼飲料水、果汁飲料、乳飲料、アルコール飲料、スポーツドリンク、栄養ドリンク等が挙げられる。食品としては、パン類、麺類、米類、豆腐、乳製品、醤油、味噌、菓子類等が挙げられる。本発明の抗Ｉ型アレルギー剤はまた、特定保健用食品、特別用途食品、栄養補助食品、健康食品、機能性食品、病者用食品等の成分として使用することもできる。
【００５４】
飲料、食品、飼料等は、当該分野で通常使用される添加物を更に含有してもよい。そのような添加物としては、例えば、苦味料、香料、リンゴファイバー、大豆ファイバー、肉エキス、黒酢エキス、ゼラチン、コーンスターチ、蜂蜜、動植物油脂；グルテン等のタンパク質；大豆、エンドウ等の豆類；グルコース、フルクトース等の単糖類；スクロース等の二糖類；デキストロース、デンプン等の多糖類；エリスリトール、キシリトール、ソルビトール、マンニトール等の糖アルコール類；ビタミンＣ等のビタミン類；亜鉛、銅、マグネシウム等のミネラル類；ＣｏＱ１０、α−リポ酸、カルニチン、カプサイシン等の機能性素材、が挙げられる。これらの添加物は、１種を単独で使用しても、２種以上を組み合わせて使用してもよい。
【００５５】
本発明の抗Ｉ型アレルギー剤は、ヒトに摂取されても、非ヒト哺乳動物に摂取されてもよい。摂取量及び摂取方法は、個体の状態、年齢等に応じて適宜決定することができる。好適な摂取方法としては、例えば、経口摂取が挙げられる。
【実施例】
【００５６】
以下、実施例に基づいて本発明をより具体的に説明する。但し、本発明は、以下の実施例により何ら限定されるものではない。
【００５７】
［実施例１］
（試験サンプルの調製）
イソアルファ酸（一般式（１）の化合物）［主として、イソフムロン（Ｒ１＝２−メチルプロピル基）、イソアドフムロン（Ｒ１＝１−メチルプロピル基）、イソコフムロン（Ｒ１＝１−メチルエチル基）］を含有するイソ化ホップエキス（ＩＳＯＨＯＰ，Ｂａｒｔｈ）を２０％ＤＭＳＯ溶液で段階希釈して、所定濃度の試験サンプルを得た。
【００５８】
（ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイ）
ヒト好塩基球細胞株ＫＵ８１２を、１０％ＦＢＳ（ウシ胎児血清）含有ＲＰＭＩ１６４０培地（ＧＩＢＣＯ）［ＦＢＳは、５６℃で３０分間不活性化］を用いて、５％ＣＯ２雰囲気下、３７℃で培養した。細胞をＴｙｒｏｄｅ液で２回洗浄した後、２×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍＬとなるようにＴｙｒｏｄｅ液に懸濁した。細胞懸濁液を１．５ｍＬ容チューブに５００μＬずつ分注し、これを用いて、表１に示す３種の溶液を調製した。Ａ２３１８７はＣａイオノフォアである。
【００５９】
【表１】
2011074062.tif 000010
【００６０】
各溶液を３７℃で２０分間インキュベートし、次いで氷中に５分間静置した。その後、４℃、３０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、上清を回収した。得られた上清をＨＰＬＣで分析して、各溶液の遊離ヒスタミンを定量した。ＨＰＬＣは下記条件で行った。遊離ヒスタミン量は、測定された蛍光強度から検量線により求めた。
ＨＰＬＣ条件：
カラム：ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８  Ｃｏｌｕｍｎ，３．５μｍ，２．１×１５０ｍｍ（Ｗａｔｅｒｓ）［プレカラムフィルター（Ｓｕｐｅｌｃｏ）を使用］
カラムオーブン温度：４０℃
溶出法：４０ｍＭリン酸緩衝液（Ａ液）／９０％ＣＨ３ＯＨ（Ｂ液）によるグラジエント溶出［０分：Ａ液６０％／Ｂ液４０％  →  ２０分：Ｂ液１００％  →  ３０分：Ｂ液１００％  →  ３５分：Ａ液６０％／Ｂ液４０％  →  ４３分：Ａ液６０％／Ｂ液４０％］
検出器：蛍光検出器（Ｅｘ  ３４０ｎｍ，Ｅｍ  ４５０ｎｍ）
サンプルクーラー温度：５℃
【００６１】
イソアルファ酸のヒスタミン遊離抑制率（％）を下記式により算出した。
ヒスタミン遊離抑制率（％）＝［１−｛（Ｘ−ＸＢ）／（ＸＡ−ＸＢ）｝］×１００［式中、Ｘは試験溶液の遊離ヒスタミン量、ＸＡはコントロール溶液Ａの遊離ヒスタミン量、ＸＢはコントロール溶液Ｂの遊離ヒスタミン量を表す。］
【００６２】
（結果）
イソアルファ酸のヒスタミン遊離抑制率（％）は、表２及び図１に示す通りであった。表２及び図１において、イソアルファ酸濃度（μｇ／ｍＬ）は試験溶液中の濃度である。
【００６３】
【表２】
2011074062.tif 000011
【００６４】
表２及び図１から明らかなように、イソアルファ酸はヒスタミンの遊離を顕著に抑制した。
【００６５】
［実施例２］
（試験サンプルの調製）
テトラヒドロイソアルファ酸（一般式（２）の化合物）［主として、テトラヒドロイソフムロン（Ｒ２＝２−メチルプロピル基）、テトラヒドロイソアドフムロン（Ｒ２＝１−メチルプロピル基）、テトラヒドロイソコフムロン（Ｒ２＝１−メチルエチル基）］を含有する試薬（Ｔｅｔｒａ（ＩＣＳ−Ｔ２），Ｌａｂｏｒ  Ｖｅｒｉｔａｓ，純度９９．４％）を２０％ＤＭＳＯ溶液で段階希釈して、所定濃度の試験サンプルを得た。
【００６６】
（ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイ）
得られた試験サンプルについて、実施例１と同様にしてｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを行った。
【００６７】
（結果）
テトラヒドロイソアルファ酸のヒスタミン遊離抑制率（％）は、表３及び図２に示す通りであった。表３及び図２において、テトラヒドロイソアルファ酸濃度（μｇ／ｍＬ）は試験溶液中の濃度である。
【００６８】
【表３】
2011074062.tif 000012
【００６９】
表３及び図２から明らかなように、テトラヒドロイソアルファ酸はヒスタミンの遊離を顕著に抑制した。
【００７０】
［実施例３］
（試験サンプルの調製）
アルファ酸（一般式（５）の化合物）［主として、フムロン（Ｒ５＝２−メチルプロピル基）、アドフムロン（Ｒ５＝１−メチルプロピル基）、コフムロン（Ｒ５＝１−メチルエチル基）］及びベータ酸（一般式（６）の化合物）の混合物（ＨＰＬＣ用標準品，ＩＣＥ−２，Ｌａｂｏｒ  Ｖｅｒｉｔａｓ）を８５％ＣＨ３ＯＨ／４．５％ＣＨ３ＣＯＯＨで５ｍｇ／ｍＬの濃度に調整し、この溶液を遠心分離及びフィルター濾過にかけた後、ＨＰＬＣによりベータ酸を除去してアルファ酸画分を得た。そして、アルファ酸画分から、減圧濃縮及び凍結乾燥により水分を除去し、２０％ＤＭＳＯ溶液で段階希釈して、所定濃度の試験サンプルを得た。ＨＰＬＣは下記条件で行った。
ＨＰＬＣ条件：
カラム：ＣＡＰＣＥＬＬ  ＰＡＫ  Ｃ１８（φ１ｃｍ，１０×２５０ｍｍ）（資生堂）
移動層：８５％ＣＨ３ＯＨ／４．５％ＣＨ３ＣＯＯＨ
流速：３ｍＬ／分
【００７１】
（ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイ）
得られた試験サンプルについて、実施例１と同様にしてｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを行った。
【００７２】
（結果）
アルファ酸のヒスタミン遊離抑制率（％）は、表４及び図３に示す通りであった。表４及び図３において、アルファ酸濃度（μｇ／ｍＬ）は試験溶液中の濃度である。
【００７３】
【表４】
2011074062.tif 000013
【００７４】
表４及び図３から明らかなように、アルファ酸はヒスタミンの遊離を顕著に抑制した。
【００７５】
［実施例４］
（試験サンプルの調製）
ベータ酸（一般式（６）の化合物）［主として、ルプロン（Ｒ６＝２−メチルプロピル基）、アドルプロン（Ｒ６＝１−メチルプロピル基）、コルプロン（Ｒ６＝１−メチルエチル基）］及びアルファ酸（一般式（５）の化合物）の混合物（ＨＰＬＣ用標準品，ＩＣＥ−２，Ｌａｂｏｒ  Ｖｅｒｉｔａｓ）を８５％ＣＨ３ＯＨ／４．５％ＣＨ３ＣＯＯＨで５ｍｇ／ｍＬの濃度に調整し、この溶液を遠心分離及びフィルター濾過にかけた後、ＨＰＬＣによりアルファ酸を除去してベータ酸画分を得た。そして、ベータ酸画分から、減圧濃縮及び凍結乾燥により水分を除去し、２０％ＤＭＳＯ溶液で段階希釈して、所定濃度の試験サンプルを得た。ＨＰＬＣは下記条件で行った。
ＨＰＬＣ条件：
カラム：ＣＡＰＣＥＬＬ  ＰＡＫ  Ｃ１８（φ１ｃｍ，１０×２５０ｍｍ）（資生堂）
移動層：８５％ＣＨ３ＯＨ／４．５％ＣＨ３ＣＯＯＨ
流速：３ｍＬ／分
【００７６】
（ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイ）
得られた試験サンプルについて、実施例１と同様にしてｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを行った。
【００７７】
（結果）
ベータ酸のヒスタミン遊離抑制率（％）は、表５に示す通りであった。表５において、ベータ酸濃度（μｇ／ｍＬ）は試験溶液中の濃度である。
【００７８】
【表５】
2011074062.tif 000014
【００７９】
表５から明らかなように、ベータ酸はヒスタミンの遊離を顕著に抑制した。
【００８０】
［実施例５］
（試験サンプルの調製）
ベータ酸を５０．３％含有するホップエキス（Ｚｅｕｓ  Ｂｅｔａ  Ａｒｏｍａ  Ｅｘｔｒａｃｔ，Ｈｏｐｓｔｅｉｎｅｒ）を１００％メタノールに溶解し、更に水を加えて６０％メタノールの溶液とし、常温で４日間振とうした。次いで、この溶液をジクロロメタンで分配し、得られたジクロロメタン層に対して下記条件でＨＰＬＣを行って、フルポン溶出画分を分取した（溶出時間：１２〜１７分）。そして、ＹＭＣ＊Ｇｅｌ  ＯＤＳ−Ａ（細孔径１２ｎｍ，粒子径５０μｍ）を充填したカートリッジを用いて脱塩を行った後、フルポン溶出画分から減圧濃縮及び凍結乾燥により溶媒を除去した。最後に、２０％ＤＭＳＯ溶液で段階希釈して、所定濃度の試験サンプルを得た。
ＨＰＬＣ条件：
カラム：ＣＡＰＣＥＬＬ  ＰＡＫ  Ｃ１８（φ１ｃｍ，１０×２５０ｍｍ）（資生堂）
カラムオーブン温度：５０℃
移動層：７７．５％ＣＨ３ＯＨ／１．４％リン酸／１５０ｍＭ  過塩素酸ナトリウム
流速：３ｍＬ／分
【００８１】
（ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイ）
得られた試験サンプルについて、実施例１と同様にしてｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを行った。
【００８２】
（結果）
フルポンのヒスタミン遊離抑制率（％）は、表６に示す通りであった。表６において、フルポン濃度（μｇ／ｍＬ）は試験溶液中の濃度である。
【００８３】
【表６】
2011074062.tif 000015
【００８４】
表６から明らかなように、フルポンはヒスタミンの遊離を顕著に抑制した。
【００８５】
［実施例６］
（試験飼料の調製）
イソアルファ酸（一般式（１）の化合物）［主として、イソフムロン（Ｒ１＝２−メチルプロピル基）、イソアドフムロン（Ｒ１＝１−メチルプロピル基）、イソコフムロン（Ｒ１＝１−メチルエチル基）］を３０％含有するイソ化ホップエキス（ＩＳＯＨＯＰ，Ｂａｒｔｈ）を粉末飼料ＡＩＮ９３Ｇに混合して、イソアルファ酸を０．５重量％含有するイソアルファ酸含有飼料を調製した。ＡＩＮ９３Ｇ及びイソアルファ酸含有試料の組成は、表７（各成分量の単位はｇ／ｋｇ飼料）に示す通りである。
【００８６】
【表７】
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【００８７】
（受動皮膚アナフィラキシー試験）
４週齢の雌性ＢＡＬＢ／ｃマウスを用いて、以下のように受動皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）試験を行った。試験期間中、マウスは、ＳＰＦ環境下、温度２３±１℃、湿度６０±５％の条件で集団飼育した（４〜５匹／ケージ）。
【００８８】
マウスの感作：
マウスを１週間馴化飼育した後、卵白アルブミン（ＯＶＡ）５０μｇをＡｌ（ＯＨ）３
２ｍｇと共に腹腔内投与し、更に２週間後、同様にしてＯＶＡをＡｌ（ＯＨ）３と共に投与した。２回目のＯＶＡ投与から１週間後、血中抗ＯＶＡ  ＩｇＥ抗体濃度をＥＬＩＳＡ法により測定し、この値が群間でバラつかないように２群［コントロール群（８匹）、イソアルファ酸投与群（９匹）］に分けた。馴化飼育の開始からマウスの群分けまでの期間（４週間）は、すべてのマウスにＡＩＮ９３Ｇ及び水道水を自由摂取させた。
【００８９】
試験飼料の投与：
群分け後、イソアルファ酸投与群のマウスには、イソアルファ酸含有飼料及び水道水を１週間自由摂取させた。他方、コントロール群のマウスには、引き続きＡＩＮ９３Ｇ及び水道水を１週間自由摂取させた。
【００９０】
抗原チャレンジ：
群分けから１週間後、１％エバンスブルー溶液５ｍＬ／ｋｇ体重を尾静脈投与し、更に、ＯＶＡ１００μｇを背部皮内に投与した。イソアルファ酸投与群のマウスには、ＯＶＡ投与の１時間前にイソ化ホップエキス（ＩＳＯＨＯＰ，Ｂａｒｔｈ）１００ｍｇ／ｋｇ体重を胃ゾンデにより強制的に経口投与した。
【００９１】
漏出色素量の測定：
ＯＶＡ投与から３０分後、各マウスをエーテル麻酔下、脱血屠殺し、色素漏出が観察された背部皮膚を鋏で切り出した。切り出した皮膚を９等分した後、６Ｎ水酸化カリウム水溶液１ｍＬに浸漬し、４５℃で６時間インキュベートした。そして、６Ｎ塩酸で中和し、アセトン２ｍＬを加えた後、遠心分離、フィルター濾過を行い、得られた溶液の吸光度（５９５ｎｍ）を測定した。測定された吸光度は、検量線に基づいて溶液１ｍＬ当たりの漏出色素量（μｇ）に変換した。なお、漏出色素量は、ＰＣＡ反応の過程で遊離したヒスタミン量に比例する。
【００９２】
（結果）
各群のマウスの漏出色素量（平均±標準誤差）（μｇ／ｍＬ）は表８及び図４に示す通りであった。
【００９３】
【表８】
2011074062.tif 000017
【００９４】
表８及び図４から明らかなように、イソアルファ酸投与群において、漏出色素量は顕著に少なく、ヒスタミンの遊離は顕著に抑制された。
【００９５】
［実施例７］
（試験飼料の調製）
イソアルファ酸（ＩＡＡ）を３０％含有するイソ化ホップエキス（ＩＳＯＨＯＰ，Ｂａｒｔｈ社）、テトラヒドロイソアルファ酸（ＴＨＩＡＡ）を９％含有するＴｅｔｒａ  ｈｙｄｒｏｉｓｏｈｏｐ（Ｂａｒｔｈ社）、β酸を１０％含有するＢｅｔａ  ｓｔａｂ  １０Ａ（Ｂａｒｔｈ社）、及び抗アレルギー剤のケトチフェン（Ｓｉｇｍａ社）を粉末飼料ＡＩＮ９３Ｇに混合して、０．５重量％のイソアルファ酸、０．５重量％のテトラヒドロイソアルファ酸、０．５重量％のβ酸、及び０．０１重量％のケトチフェンをそれぞれ含有する飼料を調製した。
【００９６】
（受動皮膚アナフィラキシー試験）
４週齢の雌性ＢＡＬＢ／ｃマウスを用いて、実施例６と同様に血中抗ＯＶＡ  ＩｇＥ抗体濃度が群間でバラつかないように５群（１０匹／群）：コントロール群（ＡＩＮ９３Ｇのみ）、イソアルファ酸（ＩＡＡ）群、テトラヒドロイソアルファ酸（ＴＨＩＡＡ）群、β酸群及びケトチフェン群に分け、受動皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）試験を行った。
【００９７】
（結果）
各群のマウスの漏出色素量（平均±標準誤差）（μｇ／ｍＬ）は表９及び図５に示す通りであった。
【００９８】
【表９】
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【００９９】
表９及び図５から明らかなように、イソアルファ酸群、テトラヒドロイソアルファ酸群及びβ酸群において、漏出色素量は顕著に少なく、ヒスタミンの遊離は顕著に抑制された。
【０１００】
以上の実施例により、本発明の抗Ｉ型アレルギー剤は、ヒスタミンの遊離を抑制し、これを介してＩ型アレルギーを抑制することが可能であることが確認された。
【産業上の利用可能性】
【０１０１】
本発明の抗Ｉ型アレルギー剤は、Ｉ型アレルギー性疾患（気管支喘息、花粉症等）の改善・予防に利用可能である。
【図１】
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【図２】
2011074062.tif 000028
【図３】
2011074062.tif 000029
【図４】
2011074062.tif 000030
【図５】
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