(57)【要約】【課題】界面活性剤組成物中に微量含まれるアルコールを高感度かつ定量的に、しかも効率的に検出することが可能なアルコールの定量方法を提供すること。【解決手段】下記工程（１）〜（３）を有する液体クロマトグラフ法による界面活性剤組成物中のアルコールの定量方法である。工程（１）：順相の無機吸着剤と、次工程（２）で用いられるラベル化剤と反応しない溶離液とを用いた固相抽出により、界面活性剤組成物からアルコールを抽出する工程工程（２）：前記工程（１）で抽出したアルコールを、ＵＶラベル化剤及び蛍光ラベル化剤の少なくともいずれかでラベル化する工程工程（３）：前記工程（２）でラベル化したアルコールを高速液体クロマトグラフ法にて定量する工程【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記工程（１）〜（３）を有する液体クロマトグラフ法による界面活性剤組成物中のアルコールの定量方法。
工程（１）：順相の無機吸着剤と、次工程（２）で用いられるラベル化剤と反応しない溶離液とを用いた固相抽出により、界面活性剤組成物からアルコールを抽出する工程
工程（２）：前記工程（１）で抽出したアルコールを、ＵＶラベル化剤及び蛍光ラベル化剤の少なくともいずれかでラベル化する工程
工程（３）：前記工程（２）でラベル化したアルコールを高速液体クロマトグラフ法にて定量する工程
【請求項２】
前記アルコールが、炭素数６〜１８の一価アルコールである請求項１に記載のアルコールの定量方法。
【請求項３】
前記工程（２）におけるラベル化反応が、脱水剤の存在下で行われる請求項１または２に記載のアルコールの定量方法。
【請求項４】
前記界面活性剤組成物が、糖系界面活性剤である請求項１〜３のいずれかに記載のアルコールの定量方法。
【請求項５】
前記糖系界面活性剤が、炭素数６〜１８のアルキル基を有するアルキルガラクトシドである請求項４に記載のアルコールの定量方法。
【請求項６】
前記順相の無機吸着剤が、シリカゲルである請求項１〜５のいずれかに記載のアルコールの定量方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、界面活性剤組成物中に含まれるアルコールの定量方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
界面活性剤は、洗浄、乳化、分散、凝集等の多種多様な機能を有する両親媒性化合物であり、トイレタリー、紙・パルプ、食品、医薬品、土木・建築、情報材料、エレクトロニクス等、幅広い産業分野に使用されている。
【０００３】
界面活性剤として使用される化合物は非常に多岐にわたっており、その合成法も様々である。最も一般的な合成法でありかつ各種界面活性剤の合成に応用可能な方法の一つとして、アルキル基等の疎水基にアニオン性基やカチオン性基等の親水基を結合させる方法が広く用いられている。疎水基の原料として中鎖乃至長鎖を有するアルコールがしばしば用いられている。
【０００４】
しかしながら、中鎖乃至長鎖を有する原料アルコールが界面活性剤製品中に残存すると、洗浄性や乳化性等の界面活性剤本来の性質に悪影響を与える可能性が懸念される。また、原料アルコールの鎖長や構造によっては好ましくない臭気を有するものもあり、特に界面活性剤製品のにおい品質については数十〜数百ｐｐｍといった極微量の残存アルコールも大きく影響し、その利用分野が限られてしまうケースも少なからずある。
したがって、これらの界面活性剤製品の品質を管理するためには、製品中の未反応アルコールを高感度かつ定量的に検出する方法が不可欠である。
【０００５】
一方、化合物の定量方法としては、ガスクロマトグラフ法や高速液体クロマトグラフ法（以下、各々「ＧＣ」、「ＨＰＬＣ」という場合がある）等のクロマトグラフ法による分離・定量が一般的である。特に、微量成分の定量の場合には、ＵＶラベル化剤や蛍光ラベル化剤を用いてラベル化して感度を向上させた後、高速液体クロマトグラフ法を用いて分離・定量する方法も知られている（例えば、非特許文献１及び２参照）。
【０００６】
微量成分の定量を行う場合、上記のようなラベル化剤を用いた測定においても、目的の微量成分とその他多量に存在する成分との十分な分離が必要である。分離が十分でない場合には、目的とする微量成分のクロマトグラム上のシグナルは、多量に存在する成分のシグナルの裾野に埋没してしまうためである。
しかしながら、界面活性剤製品中に含まれる微量のアルコールを定量する場合には、極性の差を利用して分離を行う液体クロマトグラフ法では、類似した極性を有し、かつ多量に存在する界面活性剤と微量アルコールとを、当該アルコールを定量できるほど十分に分離することは困難である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】"Journal of Liquid Chromatography ＆ Related Technologies", Vol.6, p.1977-1985 (1983)
【非特許文献２】"Journal of Chromatography A", Vol.362, p.61-70 (1986)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、界面活性剤組成物中に微量含まれるアルコールを高感度かつ定量的に、検出することが可能なアルコール定量方法を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、無機吸着剤を用いた固相抽出、アルコールのラベル化、及び高速液体クロマトグラフ法の３つを組み合わせることにより、上記課題を解決しうることを見出した。
すなわち本発明は、下記工程（１）〜（３）を有する液体クロマトグラフ法による界面活性剤組成物中のアルコールの定量方法である。
工程（１）：順相の無機吸着剤と、次工程（２）で用いられるラベル化剤と反応しない溶離液とを用いた固相抽出により、界面活性剤組成物からアルコールを抽出する工程
工程（２）：前記工程（１）で抽出したアルコールを、ＵＶラベル化剤及び蛍光ラベル化剤の少なくともいずれかでラベル化する工程
工程（３）：前記工程（２）でラベル化したアルコールを高速液体クロマトグラフ法にて定量する工程
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、界面活性剤組成物中に微量含まれるアルコールを高感度かつ定量的に、検出することが可能になる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】ラベル化イソデカノールのＨＰＬＣ分析におけるピーク面積とサンプル中のイソデカノール濃度の関係を示す図（検量線）である。
【図２】実施例１のＨＰＬＣ分析におけるクロマトグラムである。
【図３】比較例１のＧＣ分析におけるクロマトグラムである。
【図４】比較例２のＨＰＬＣ分析におけるクロマトグラムである。
【図５】比較例３のＨＰＬＣ分析におけるクロマトグラムである。
【図６】比較例４のＨＰＬＣ分析におけるクロマトグラムである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明のアルコールの定量方法は、以下の工程（１）〜（３）を有するものである。
工程（１）：順相の無機吸着剤と、次工程（２）で用いられるラベル化剤と反応しない溶離液とを用いた固相抽出により、界面活性剤組成物からアルコールを抽出する工程
工程（２）：前記工程（１）で抽出したアルコールを、ＵＶラベル化剤及び蛍光ラベル化剤の少なくともいずれかでラベル化する工程
工程（３）：前記工程（２）でラベル化したアルコールを液体クロマトグラフ法にて定量する工程
【００１３】
本発明において分析対象となる界面活性剤組成物（以下、単に「界面活性剤」という場合がある）は、アルコールを含むものであればいかなる構造の界面活性剤からなる組成物でもよく、例えば陰イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤、両性界面活性剤及び非イオン性界面活性剤から選ばれる１種以上の組成物が挙げられる。
【００１４】
前記陰イオン性界面活性剤としては、例えば、アルキル硫酸エステル塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸エステル塩等の硫酸エステル塩；アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルカンスルホン酸塩等のスルホン酸塩；脂肪酸塩；アルケニルコハク酸塩；アルキルエーテルカルボン酸塩；高分子ポリカルボン酸塩等のカルボン酸塩が挙げられる。
【００１５】
前記陽イオン性界面活性剤としては、例えば、第三級アミン塩酸塩、アルキルアミンアセテート等のアルキルアミン塩；アルキルトリメチルアンモニウム塩、ジアルキルジメチルアンモニウム塩、アルキルベンジルジメチルアンモニウム塩等の第四級アンモニウム塩が挙げられる。
【００１６】
前記両性界面活性剤としては、例えば、アルキルベタイン、アルキルアミドプロピルベタイン、２−アルキル−Ｎ−カルボキシメチル−Ｎ−ヒドロキシエチルイミダゾリニウムベタイン等のベタイン；アルキルジメチルアミンオキサイド等のアルキルアミンオキサイドが挙げられる。
【００１７】
前記非イオン性界面活性剤としては、例えば、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシプロピレンアルキルエーテル等のポリオキシアルキレン誘導体；アルキルグルコシド、アルキルガラクトシド等のアルキルグリコシドや脂肪酸ショ糖エステル、脂肪酸ソルビタンエステルなどの脂肪酸糖エステルといった糖系界面活性剤が挙げられる。
【００１８】
上述の界面活性剤中、陰イオン性界面活性剤及び非イオン性界面活性剤は、それら自体が後述するアルコールをラベル化可能なラベル化剤と反応してラベル化されてしまい、既存の「ラベル化とそれに続くクロマトグラフ法によるアルコール定量方法」では含有アルコールの定量が困難である。したがって、これら界面活性剤中のアルコールの定量には、本発明のアルコールの定量方法の適用が好適である。
中でも口腔用品等の香味に厳しい用途に用いられ、微量な残存アルコールの管理が必要になるアルキルグリコシド組成物に適用することが更に好ましく、炭素数６〜１８のアルキル基を有するアルキルガラクトシド組成物に適用することが特に好ましい。なお、上記炭素数は６〜１４であることがより好ましい。
【００１９】
また、界面活性剤自体がラベル化されない界面活性剤組成物にあっても、アルコール以外のラベル化されうる共存物が、分析対象であるアルコールに比べ大過剰に存在する場合があり、本発明のアルコールの定量方法はこれら界面活性剤組成物中のアルコールの定量にも好適である。
【００２０】
本発明のアルコールの定量方法は、界面活性剤中に不純物として含まれ、その存在が界面活性剤の匂いや、洗浄性等の品質に悪影響を与えるアルコールの定量に好適に用いることができる。
上記アルコールとしては、例えば、ｎ−ヘキサノール、ｎ−オクタノール、ｎ−デカノール、ｎ−ドデカノール、ｎ−テトラデカノール、ｎ−ヘキサデカノール、ｎ−オクタデカノール等の飽和直鎖アルコール；２−エチルヘキサノール、３，７−ジメチルオクタノール、イソノナノール、イソデカノール、イソトリデカノール、２−ブチルオクタノール等の飽和分岐鎖アルコール；オレイルアルコール、ゲラニオール等の不飽和アルコール；及びこれらの２種類以上の混合物が挙げられる。
【００２１】
特に匂い品質への影響を考えると、その閾値の低さから炭素数６〜１８で水酸基を一つ有するアルコールは微量での残存量管理が求められており、本発明のアルコールの定量方法の適用が好適である。さらに上記炭素数は６〜１４であることが好ましい。
中でもイソノナノール、イソデカノール及びイソトリデカノールは多様な構造異性体の混合物であり、各々の構造異性体の残存量は極微量でも匂い品質に影響を与える。このため、極微量での残存量管理が必要なことから、本発明のアルコールの定量方法の適用が特に好適である。
【００２２】
＜工程（１）：アルコール抽出工程＞
本発明における工程（１）は、順相の無機吸着剤を用いた固相抽出により、界面活性剤組成物中のアルコールを抽出する工程である。具体的には、分析対象の界面活性剤組成物を前記無機吸着剤に吸着させ、溶離液を用いてアルコールを溶出させる。
【００２３】
前記順相の無機吸着剤とは、表面に極性部位を有し、この極性部位と対象となる物質の極性部位との間で起こる相互作用を利用して吸着等を行なう無機物質をいう。前記固相抽出では、界面活性剤組成物を無機吸着剤に吸着させ、これに低極性な溶離液を加えてアルコールを脱着、溶出させる。逆相の吸着剤（表面の疎水部位と対象となる物質の疎水部の間の相互作用を利用して吸着を行なう物質）を用いた場合には、抽出される順序が水、界面活性剤、アルコールの順となるため、分離操作が必要となり工程が煩雑となる。また、逆相の吸着剤を用いる場合、溶離液として水が必要になることが多く、この水は後述するラベル化工程におけるラベル化剤と反応するため、この観点からも逆相の吸着剤は使用できない。
一方、順相の無機吸着剤を用いた場合には、溶離液の極性を上げていくにつれ、アルコール、界面活性剤、水の順で抽出されるため、特にアルコールのみしか抽出されない溶媒を選択すれば、容易にアルコールのみを抽出することができる。
また一般に、界面活性剤組成物中及び溶離液中には、意図的に水を加えられていない場合であっても微量の水が存在し、これらは後述するラベル化工程におけるラベル化剤と反応する。この反応は特に微量のアルコールについて、ラベル化剤によるラベル化を伴う定量を行なう場合、定量の精度に大きな影響を与えるが、順相の無機吸着剤を用いて水を分離、低減する事により、定量精度が高い分析が可能になる。
【００２４】
前記順相の無機吸着剤となり得る無機吸着剤としては、例えば、シリカゲル、珪藻土等の二酸化ケイ素；アルミナ、ゼオライト等の金属ケイ酸塩；が挙げられる。ここで金属ケイ酸塩の金属としては、ナトリウムやカリウム等のアルカリ金属；マグネシウムやカルシウム等のアルカリ土類金属；の他、アルミニウムを挙げることができる。これら無機吸着剤を用いることで、次工程（２）のラベル化の際に反応を阻害する水を含まない非水溶媒を用いてアルコールを溶出させることができ、また界面活性剤組成物中の水を吸着することで水分量を低減させることができる。
【００２５】
上記無機吸着剤は、充填装置、例えばカラムまたはカートリッジ等のリザーバーに充填して用いることができる。充填量は無機吸着剤のかさ密度、抽出に用いる溶液濃度等によっても異なるが、通常、１ｍＬの容積に対して０．１ｇ〜１０ｇ程度である。
【００２６】
固相抽出で使用する溶離液には、各種の極性溶媒や非極性溶媒を用いることができるが、固相抽出によりアルコールを抽出する工程（１）と次工程（２）のラベル化工程との間では、アルコールの定量性の観点から抽出に用いた溶離液の除去や低減等の操作を行わないことが好ましい。このため、ラベル化工程に抽出に用いた溶離液が残留することから、アルコールのラベル化に用いるラベル化剤と反応しない溶離液を用いる。
ここで、上記ラベル化剤と反応しないとは、少なくともラベル化工程において、共存するアルコールのラベル化剤との反応効率を低下させないことを意味する。
【００２７】
上記観点から、好ましい極性溶媒としては、例えば、アセトン、メチルエチルケトン、シクロヘキサノン等のケトン類；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル類；酢酸エチル等のエステル類；アセトニトリル等のニトリル類；が挙げられる。中でもジエチルエーテル、テトラヒドロフラン及びジオキサン等のエーテル類を用いた場合は、これら溶媒の極性が高く少量でアルコールを抽出可能であるため、高感度でのアルコールの定量が可能になる点、及び、次に挙げる非極性溶媒と混合可能なことから、混合による抽出溶媒の極性の制御が容易であり、界面活性剤とアルコールとの分離を容易に行える点から好ましい。
【００２８】
非極性溶媒としては、ヘキサン、石油エーテル、デカリン、シクロヘキサン等の脂肪族炭化水素類；ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類；塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素等のハロゲン化炭素類；等が挙げられる。これらのうち、近可視波長領域に吸収を持たず、ラベル化したアルコールの検出を妨害する可能性の無い脂肪族炭化水素類およびハロゲン化炭素類が好ましい。
これらの溶媒は、単独で、または２種以上を組み合わせて用いることができる。これらの溶媒の中から、無機吸着剤、界面活性剤及びアルコールの種類に応じて、適宜選択、または組み合わせて、界面活性剤とアルコールとの十分な分離ができるようにすれば良いが、上記分離の制御の容易さの面から、極性溶媒と非極性溶媒を組み合わせて用いることが好ましい。
【００２９】
＜工程（２）：ラベル化工程＞
本発明における工程（２）は、工程（１）で抽出したアルコールをラベル化剤でラベル化する工程である。該ラベル化は、工程（１）で抽出したアルコールの、高速液体クロマトグラフ法における定量時の検出感度の向上を目的として行う。具体的にはアルコールに対してラベル化剤を反応させ、紫外光及び可視光の少なくともいずれかを吸収し得る官能基、または紫外光及び可視光の少なくともいずれかを吸収して蛍光を発する官能基を導入する。
【００３０】
前記ラベル化剤としては、アルコールに対して紫外光及び可視光の少なくともいずれかを吸収し得る官能基を導入するＵＶラベル化剤、及び、紫外光及び可視光の少なくともいずれかを吸収して蛍光を発する官能基を導入する蛍光ラベル化剤の少なくともいずれかを用いる。
【００３１】
前記ＵＶラベル化剤としては、例えば、ベンゾイルクロライド、トリフェニルメチルクロライド、トリフェニルシリルクロライド等が挙げられる。
また、前記蛍光ラベル化剤としては、例えば、１−アンスロイルシアニド、９−アンスロイルシアニド、ピレン−１−カルボニルシアニド、３−クロロカルボニル−６，７−ジメトキシ−１−メチル−２（１Ｈ）−キノキサリノン（ＤＭＥＱ−ＣＯＣｌ）、２−（５−クロロカルボニル−２−オキサゾリル）−５，６−メチレンジオキシベンゾフラン（ＯＭＢ−ＣＯＣｌ）、ダンシルクロライド、４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノスルフォニル）−７−（Ｎ−クロロホルミルメチル−Ｎ−メチルアミノ）−２，１，３−ベンゾキサジアゾール（ＤＢＤ−ＣＯＣｌ）等を挙げることができる。
【００３２】
上記のうちでは、高速液体クロマトグラフィにおける検出感度の点から、蛍光ラベル化剤が好ましく、１−アンスロイルシアニド、９−アンスロイルシアニド、ピレン−１−カルボニルシアニドがより好ましく、ラベル化反応の反応効率の観点から１−アンスロイルシアニド、ピレン−１−カルボニルシアニドが特に好ましい。
【００３３】
ラベル化剤の使用量は、アルコールの定量性の点から、アルコールに対して大過剰使用することが好ましい。使用するラベル化剤やアルコールの反応性により異なるため一概には言えないが、通常アルコールに対して２モル倍以上、好ましくは１０モル倍以上、特に好ましくは１００モル倍以上、更に好ましくは５００モル倍以上であり、高速液体クロマトグラフィにおけるベースラインの安定性の観点から、１０００００モル倍以下が好ましく、１００００モル倍以下がより好ましく、５０００モル倍以下が特に好ましい。
分析対象となる界面活性剤中のアルコール含量が予想できない場合、一旦暫定的に決めた量のラベル化剤を用いて、本発明の分析法によりアルコール含量を定量し、得られたアルコール含量の分析結果と用いたラベル化剤の量が、上記の好ましい範囲から外れる場合は、ラベル化剤の量を調整して再度分析を行なうことが好ましい。
【００３４】
反応溶媒としては、水酸基、アミノ基、カルボキシル基その他のラベル化反応に影響を与える官能基を有する化合物以外であれば一般的なものを使用することができるが、本発明では、アルコールの定量性の観点から、固相抽出で使用した溶離液を除去せず、そのままラベル化反応の溶媒として用いる。
【００３５】
ラベル化反応の温度は、使用する溶媒の沸点やラベル化剤の反応性に応じて設定すればよいが、通常０〜１２０℃の範囲であり、反応選択率の点から好ましくは室温〜８０℃程度が好ましい。
ラベル化反応の反応時間は、使用するラベル化剤の反応性や反応温度によって異なるので一概には言えないが、通常１分〜１０時間の範囲であり、反応率の点から好ましくは３０分〜３時間程度が好ましい。
【００３６】
ラベル化反応は、適当な脱水剤の存在下で行うこともできる。脱水剤としては、ラベル化反応に直接影響しないものであればいかなるものでも使用することができるが、例えば、無水硫酸ナトリウム、無水硫酸マグネシウム、無水硫酸カルシウム、モレキュラーシーブ、シリカゲル等が挙げられる。これらの中では、脱水可能温度範囲の広さの点から、モレキュラーシーブが好ましい。
なお、上記脱水剤による脱水は、ラベル化反応の前に行ってもよい。脱水剤による脱水を予め行っておくことで、ラベル化の効率を上げ、アルコール定量性をさらに向上させることができる。
【００３７】
また、ラベル化反応は、塩基の存在下で行うのが好ましい。塩基としては、ラベル化剤と反応しない３級アミン及びピリジンが好ましい。３級アミンとしては例えば、トリメチルアミン、トリエチルアミン、トリイソプロピルアミン、トリ−ｎ−ブチルアミン、トリ−ｉ−ブチルアミン、トリフェニルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等が挙げられる。ラベル化後の除去の容易さと扱いやすさの観点からトリエチルアミン、ピリジンが特に好ましい。
ラベル化後は、分子量の増大によりアルコールの蒸散の可能性がほとんどなくなるため、溶媒除去を行ってもよい。
【００３８】
＜工程（３）：アルコール定量工程＞
本発明における工程（３）は、ＨＰＬＣによる分析工程であり、前記工程（２）でラベル化したアルコールをＵＶ検出器もしくは蛍光検出器を用いて検出し定量する目的で行う。ラベル化したアルコールを、余剰のラベル化剤やその他の夾雑物から分離できる条件で分析することが重要である。
【００３９】
ＨＰＬＣに用いるカラムは、ラベル化アルコールの性質に応じて適宜選択すればよい。例えば、順相、逆相、イオン交換、疎水、サイズ排除、アフィニティー等、通常のＨＰＬＣ分析に用いるカラムが使用できる。
【００４０】
工程（３）における溶離液は、ラベル化アルコールの性質や使用するカラムに応じて適宜選択すればよい。例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類；アセトン、メチルエチルケトン、シクロヘキサノン等のケトン類；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル類；酢酸エチル等のエステル類；アセトニトリル等のニトリル類；ヘキサン、石油エーテル、デカリン、シクロヘキサン等の脂肪族炭化水素類；ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類；塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素等のハロゲン化炭素類；及びこれらの混合液といった、通常のＨＰＬＣ分析に用いる溶離液が使用できる。さらに、上記各種溶媒と水との混合液も用いることができる。
【００４１】
分析をする際の溶離液の流速は、好ましくは０．５ｍＬ／ｍｉｎ〜２ｍＬ／ｍｉｎ、試料の注入量は、好ましくは１０μＬ〜２００μＬである。
定量方法としては、内部標準添加法や絶対検量線法等、通常の定量方法を用いることができるが、簡便性から絶対検量線法が好ましい。
【００４２】
本発明のアルコール定量方法は、以上説明した工程（１）、工程（２）及び工程（３）を含むものであるが、必要により他の工程を含んでもよい。
【実施例】
【００４３】
以下の実施例、比較例における分析条件は、以下の通りである。
＜高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）分析＞
（比較例２以外の分析条件）
・装置：ＨＰＬＣシステムＬＣ−８０２０（東ソー株式会社製）
・カラム：ＴＳＫ−Ｇｅｌ  ＯＤＳ−１００Ｓ（東ソー株式会社製）
・カラム温度：４０℃
・溶離液：ＣＨ3ＣＮ／Ｈ2Ｏ＝９／１（体積比）
・フローレート：１ｍＬ／ｍｉｎ
・注入量：１００μＬ
・検出器：ＵＶ（２５４ｎｍ）
【００４４】
（比較例２の分析条件）
・装置：ＨＰＬＣシステムＬＣ−８０２０（東ソー株式会社製）
・カラム：ＴＳＫ−Ｇｅｌ  ＯＤＳ−１００Ｓ（東ソー株式会社製）
・カラム温度：４０℃
・溶離液：ＣＨ3ＣＮ／Ｈ2Ｏ＝６／４（体積比）
・フローレート：１ｍＬ／ｍｉｎ
・注入量：１０μＬ
・検出器：ＲＩ
【００４５】
＜ガスクロマトグラフィ（ＧＣ）分析（比較例１）＞
・装置：ＨＰ６８５０  Ｓｅｒｉｅｓ  ＧＣ  Ｓｙｓｔｅｍ（ＨＥＷＬＥＴＴ  ＰＡＣＫＡＲＤ社製）
・カラム：ＨＰ−５（ＨＥＷＬＥＴＴ  ＰＡＣＫＡＲＤ社製、長さ３０ｍ、内径０．２５ｍｍ、膜厚０．２５μｍ）
・インレット温度：２２０℃  ・検出温度：３００℃
・注入温度：５０℃  ・注入時間：２ｍｉｎ
・昇温速度：１０℃／ｍｉｎ  ・フロー温度：３００℃  ・フロー時間：５ｍｉｎ
・注入量：１μＬ
【００４６】
製造例（界面活性剤組成物の製造）
２Ｌの４ツ口フラスコに、パラトルエンスルホン酸一水和物０．４２ｇ（２．２ｍｍｏｌ）、ガラクトース８０ｇ（０．４４ｍｏｌ）、イソデカノール（各種構造異性体の混合物、協和発酵ケミカル東ソー株式会社製、商品名：デカノール）１０５４ｇ（６．７ｍｏｌ、ガラクトースの１５．２倍モル）を秤量し、窒素吹き込み口とリービッヒ冷却管を取り付け、１１５℃まで昇温した。昇温後、系内圧力を５．３ｋＰａ（４０ｍｍＨｇ）にして脱水反応を開始した。この際、反応混合物中に窒素を１００ｍｌ／ｍｉｎで吹き込み、生成する水を効率よく除去するようにして、４時間反応させた。反応終了後常圧に戻し、反応混合物が８０℃程度になった状態で、４８質量％水酸化ナトリウム水溶液０．１９ｇ（２．２ｍｍｏｌ）を加えて触媒を中和した。中和後、不溶分をメンブランフィルターでろ別し、ろ液から過剰に用いたアルコールを減圧下で留去することによりイソデシルガラクトシドを得た（１１９ｇ、収率９１％）。得られたイソデシルガラクトシドにはごく僅かにイソデカノール臭があった。
【００４７】
実施例１
（検量線の作成）
１ｍＬ中に前記製造例で用いたイソデカノールを１０．０７μｇ含む１，４−ジオキサン（１０．０７μｇ／ｍＬ液）を正確に１ｍＬとり、１，４−ジオキサン９ｍＬを正確に加えて１０倍に希釈し、１．００７μｇ／ｍＬ液とした。得られた希釈液から再び正確に１ｍＬとり、同様に１０倍に希釈して、０．１００７μｇ／ｍＬ液を得た。
これらの１０．０７μｇ／ｍＬ液、１．００７μｇ／ｍＬ液及び０．１００７μｇ／ｍＬ液の各溶液をそれぞれ１ｍＬずつとり、各々に１−アンスロイルシアニド（和光純薬工業社製）の１０ｍｇ／ｍＬジオキサン溶液２００μＬ及びトリエチルアミン１０滴を加えてホットプレート上にて６０℃で加熱した。この際、ラベル化剤の分解を防ぐためアルミホイルで遮光した。１時間後、そのまま加温しながら窒素気流下で全ての液体を蒸散させた。液体を完全に蒸散させた後、アセトニトリル／水＝９／１（体積比）の混合溶媒１ｍＬを正確に加えて溶解し、ＨＰＬＣで分析した。得られた分析結果から、ラベル化イソデカノールの面積に対してサンプル中のイソデカノール濃度をプロットし、検量線を作成した。結果を図１に示した。
【００４８】
（アルキルガラクトシド中のイソデカノールの定量）
５ｍＬスクリュー管に、上記製造例で得られたイソデシルガラクトシド４０．５ｍｇ及び１，４−ジオキサン１１３．７ｍｇをそれぞれ精秤し、均一に混合した。この溶液１２８．４ｍｇを、Ｖａｒｉａｎ社製固相抽出カートリッジＢｏｎｄ  Ｅｌｕｔ  ｊｒ（シリカゲル，１０００ｍｇ）にチャージした。次いで、５ｍＬのガラスシリンジを装着してヘキサン／１，４−ジオキサン＝８／２（体積比）の溶液５ｍＬを通液し、溶出液を１０ｍＬスクリュー管に集めた（工程（１））。
【００４９】
上記溶出液にモレキュラーシーブ３Ａ（粉末）０．２ｇ、１−アンスロイルシアニドの１０ｍｇ／ｍＬジオキサン溶液６００μＬ及びトリエチルアミン３０滴を加えてホットプレート上にて６０℃で加熱した。この際、ラベル化剤の分解を防ぐためアルミホイルで遮光した。１時間後、そのまま加温しながら窒素を吹き付けて全ての液体を蒸散させた（工程（２））。
【００５０】
液体を完全に蒸散後、アセトニトリル１ｍＬを正確に加えて溶解し、シリンジフィルターでモレキュラーシーブをろ別した後、ろ液を前記条件にしたがってＨＰＬＣで分析した。ブランク実験として、カートリッジに何もチャージせずにヘキサン／１，４−ジオキサン＝８／２の溶液５ｍＬを通液して同様の実験を行った（工程（３））。
【００５１】
図２に、上記ＨＰＬＣ分析におけるクロマトグラムを、前記検量線作成時の１０．０７μｇ／ｍＬ液のクロマトグラムと共に示すが、図２に示すように、溶出時間２０〜２３ｍｉｎ付近にラベル化イソデカノールのピークが他のピークと重なることなく得られた。太実線で示される前記抽出されたラベル化イソデカノールのピーク面積は１８２６８であり、図１の検量線を用いて定量した結果、アルキルガラクトシド中のイソデカノールの含有量は１５０ｐｐｍであった。
【００５２】
（本法の妥当性に関する検証（含水サンプル中のイソデカノールの定量））
１ｇ当たり６．８７μｇのイソデカノールを含む３７％含水１，４−ジオキサン溶液０．１６４４ｇ（イソデカノール１．１２９μｇ含有）を、前記同様の固相抽出カートリッジにチャージし、これにヘキサン／１，４−ジオキサン＝８／２（体積比）の混合液５ｍＬを通液した。溶出液にモレキュラーシーブ３Ａ（粉末）０．２ｇ、１−アンスロイルシアニドの１０ｍｇ／ｍＬジオキサン溶液６００μＬ、トリエチルアミン３０滴を加えてホットプレート上にて６０℃で加熱した。この際、ラベル化剤の分解を防ぐためアルミホイルで遮光した。１時間後、そのまま加温しながら窒素を吹き付けて全ての液体を蒸散させた。
全ての液体の蒸散後、アセトニトリル１ｍＬを正確に加えて溶解し、シリンジフィルターでモレキュラーシーブをろ別した後、前記分析条件にてろ液をＨＰＬＣで分析した。クロマトグラムにおけるラベル化イソデカノールのピーク面積は３１７９であり、図１の検量線を用いて定量した結果、デカノール１．０６μｇという値が得られた。これは実際に固相抽出カートリッジにチャージしたイソデカノールの９４％に相当し、本実施例のアルコール定量方法の定量性が確認できた。
【００５３】
実施例２
ラベル化反応をモレキュラーシーブ３Ａ（粉末）の添加なしに行う以外は、実施例１（本法の妥当性に関する検証）と同様の方法でイソデカノールの分析を行った。その結果、クロマトグラムにおけるラベル化イソデカノールのピーク面積は２４２９であり、図１の検量線を用いて定量した結果、デカノール０．８１μｇという値が得られた。これは実際に固相抽出カートリッジにチャージしたイソデカノールの７２％に相当する。
【００５４】
比較例１
前記製造例で得られたイソデシルガラクトシド０．２０８ｇ及び標準物質としてテトラデカン２８．９ｍｇをピリジン１ｍＬに溶解した。得られた均一溶液をＧＣにより分析した。得られたクロマトグラムを図３に示した。一般的なＧＣ分析に用いるサンプル濃度よりかなり高濃度のサンプルを注入しているにもかかわらず、図３の円印で示した位置と予想されるイソデカノールのピークを検出することはできず、したがってイソデカノールの定量もできなかった。
【００５５】
比較例２
前記製造例で得られたイソデシルガラクトシド０．１ｇをアセトニトリル／水＝６／４の混合溶媒１ｍＬに溶解した。得られた均一溶液を、前記分析条件にしたがってＨＰＬＣにより分析した。得られたクロマトグラムを図４に示した。一般的なＨＰＬＣ分析に用いるサンプル濃度よりかなり高濃度のサンプルを注入しているにもかかわらず、図４の円印で示した位置と予想されるイソデカノールのピークを検出することはできず、したがってイソデカノールの定量もできなかった。
【００５６】
比較例３
前記製造例で得られたイソデシルガラクトシド１ｍｇを、トリエチルアミン０．２質量％を含有した１，４−ジオキサン１ｍＬに溶解し、１−アンスロイルシアニド１ｍｇを添加した。ブロックヒーターで５０℃に加熱し１時間ラベル化反応を行った。得られた１，４−ジオキサン溶液を、前記分析条件にしたがってＨＰＬＣにより分析した。また比較のため製造例で用いたイソデカノール１ｍｇを同様にラベル化し、同様にＨＰＬＣ分析を行った。得られたクロマトグラムを図５に示した。
図５に示すように、点線で示すラベル化イソデカノールのピーク位置において、実線で示されるラベル化イソデシルガラクトシド由来のピークの裾が重なっており、この結果から、イソデシルガラクトシドとイソデカノールとが混在するサンプルを分析した場合、ピークが重なるため正確な定量値が得られないことが予想された。
【００５７】
比較例４
前記製造例で得られたイソデシルガラクトシド１ｍｇを、トリエチルアミン０．２質量％を含有した１，４−ジオキサン１ｍＬに溶解し、ピレン−１−カルボニルシアニド１ｍｇを添加した。ブロックヒーターで５０℃に加熱し１時間ラベル化反応を行った。得られた１，４−ジオキサン溶液を、前記分析条件にしたがってＨＰＬＣにより分析した。比較のため製造例で用いたイソデカノール１ｍｇを同様にラベル化し、同様にＨＰＬＣ分析を行った。得られたクロマトグラムを図６に示した。
図６に示すように、点線で示すラベル化イソデカノールのピーク位置において、実線で示されるラベル化イソデシルガラクトシド由来のピークの裾が重なっており、この結果から、イソデシルガラクトシドとデカノールが混在するサンプルを分析した場合、ピークが重なるため正確な定量値が得られないことが予想された。
【００５８】
比較例５
１ｍＬ当たり１０１μｇのイソデカノールを含むアセトニトリル溶液１００μＬ（イソデカノール１０．１μｇ含有）と、イオン交換水３００μＬを混合した。これを逆相の吸着剤であるＯＤＳ修飾シリカゲルが充填されたＶａｒｉａｎ社製固相抽出カートリッジＢｏｎｄ  Ｅｌｕｔ  ｊｒ（Ｃ１８，１０００ｍｇ）にチャージし、これにアセトニトリル／水＝３／７（体積比）の混合液５０ｍＬを通液してイソデシルガラクトシドを溶出させた。続いてアセトニトリル１０ｍＬを通液して、イソデカノールを溶出させた。アセトニトリル溶出液にモレキュラーシーブ３Ａ（ペレット）２ｇを加えて脱水を行った後、ろ過によりモレキュラーシーブを除き、アセトニトリルでよくろ過物を洗浄した。得られたろ液に１−アンスロイルシアニド２ｍｇ、トリエチルアミン５滴を加えてホットプレート上にて６０℃で加熱した。この際、ラベル化剤の分解を防ぐためアルミホイルで遮光した。１時間後、そのまま加温しながら窒素を吹き付けて全ての液体を蒸散させた。乾燥後、アセトニトリル／水＝９／１（体積比）の混合液１ｍＬを正確に加えて溶解し、前記分析条件にてＨＰＬＣ分析を行った。溶出曲線におけるラベル化イソデカノールのピーク面積は３９であり、図１の検量線を用いて定量した結果、デカノール０．０１３μｇという値が得られた。これは実際に固相抽出カートリッジにチャージしたイソデカノールの０．１３％であった。
【産業上の利用可能性】
【００５９】
本発明のアルコール定量方法により、界面活性剤組成物中に微量含まれるアルコールを高感度かつ定量的に検出することができ、トイレタリー、紙・パルプ、食品、医薬品、土木・建築、情報材料、エレクトロニクス等、幅広い産業分野に利用することができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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