【誤訳訂正書】
【提出日】平成26年11月21日(2014.11.21)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）少なくとも５０個のプロリン（Ｐｒｏ）およびアラニン（Ａｌａ）アミノ酸残基からなる、プロリンおよびアラニンアミノ酸残基からなるアミノ酸配列を含む生合成ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントと、
（ｉｉ）（ａ）生物学的に活性なタンパク質、または生物活性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくは生物活性を有するアミノ酸配列であるポリペプチドおよび（ｂ）小分子薬からなる群から選択される薬物と
を含む薬物コンジュゲート。
【請求項２】
前記ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントが、約５０個〜約３０００個のアミノ酸残基からなるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の薬物コンジュゲート。
【請求項３】
前記プロリン残基が、アミノ酸配列の約１０％超かつ約７５％未満を構成する、請求項１または２に記載の薬物コンジュゲート。
【請求項４】
前記ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントが、複数のアミノ酸リピートを含み、前記リピートが、プロリンおよびアラニン残基からなり、６個以下の連続したアミノ酸残基が同一である、請求項１から３のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート。
【請求項５】
前記ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントが、
【化７】
2013531480.tif 000001
またはこれらの配列全体もしくはこれらの配列の部分の円順列変異体もしくは多量体（単数または複数）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート。
【請求項６】
前記生物活性を有するポリペプチド、前記生物学的に活性なタンパク質、または前記生物活性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくは生物活性を有するアミノ酸配列であるポリペプチドが、結合タンパク質、抗体断片、サイトカイン、増殖因子、ホルモンまたは酵素からなる群から選択される、請求項１から５のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート。
【請求項７】
前記生物活性を有するポリペプチドが、結合タンパク質であり、前記結合分子が、抗体、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、ＣＤＲ由来ペプチドミメティック、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、ドメイン抗体、レクチン、免疫グロブリンドメイン、フィブロネクチンドメイン、プロテインＡドメイン、ＳＨ３ドメイン、アンキリンリピートドメインおよびリポカリンからなる群から選択される、請求項６に記載の薬物コンジュゲート。
【請求項８】
前記生物学的に活性なタンパク質が、顆粒球コロニー刺激因子、ヒト成長ホルモン、α−インターフェロン、β−インターフェロン、γ−インターフェロン、腫瘍壊死因子、エリスロポエチン、凝固因子ＶＩＩＩ、ｇｐ１２０／ｇｐ１６０、可溶性腫瘍壊死因子ＩおよびＩＩ受容体、レテプラーゼ、エキセンディン−４、アナキンラ、インターロイキン−２、好中球ゼラチナーゼ関連リポカリン、卵胞刺激ホルモン、グルコセレブロシダーゼ、チモシンα１、グルカゴン、ソマトスタチン、アデノシンデアミナーゼ、インターロイキン１１、凝固因子ＶＩＩａ、凝固因子ＩＸ、ヘマタイド、λ−インターフェロン、レプチン、インターロイキン−２２受容体サブユニットα（ＩＬ−２２ｒａ）、インターロイキン−２２、ヒアルロニダーゼ、線維芽細胞増殖因子１８、線維芽細胞増殖因子２１、グルカゴン様ペプチド１、オステオプロテジュリン、ＩＬ−１８結合タンパク質、成長ホルモン放出因子、可溶性ＴＡＣＩ受容体、トロンボスポンジン−１、可溶性ＶＥＧＦ受容体Ｆｌｔ−１およびＩＬ−４ムテインからなる群から選択される、請求項１から７のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート。
【請求項９】
前記生合成ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドが、前記薬物コンジュゲートの増大したｉｎ  ｖｉｖｏおよび／またはｉｎ  ｖｉｔｒｏ安定性を媒介する、請求項１から８のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート。
【請求項１０】
前記増大したｉｎ  ｖｉｖｏ安定性が、少なくとも５０個のプロリン（Ｐｒｏ）およびアラニン（Ａｌａ）アミノ酸残基からなる、プロリンおよびアラニンアミノ酸残基からなるアミノ酸配列を含む前記生合成ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントを含む前記薬物コンジュゲートの、前記ランダムコイルランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントを欠く対照ポリペプチドまたは対照コンジュゲートの安定性と比較した場合における、延長された血漿半減期である、請求項９に記載の薬物コンジュゲート。
【請求項１１】
前記小分子が、ジゴキシゲニン、フルオレセイン、ドキソルビシン、カリケアマイシン、カンプトテシン、フマギリン、デキサメタゾン、ゲルダナマイシン、パクリタキセル、ドセタキセル、イリノテカン、シクロスポリン、ブプレノルフィン、ナルトレキソン、ナロキソン、ビンデシン、バンコマイシン、リスペリドン、アリピプラゾール、パロノセトロン、グラニセトロン、シタラビンＮＸ１８３８、ロイプロリド、ゴセレリン、ブセレリン、オクトレオチド、テデュグルチド（teduglutide）、シレンジチド（cilengitide）、アバレリックス、エンフビルチド、グレリン、α４インテグリン阻害剤、アンチセンス核酸、短鎖干渉ＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ステロイド、ＤＮＡまたはＲＮＡアプタマーならびにペプチドおよび／またはペプチドミメティックからなる群から選択される、請求項１から１０のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート。
【請求項１２】
請求項１から１１のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲートを含む組成物。
【請求項１３】
１または複数の薬学的に許容される担体を場合によりさらに含む医薬組成物である、または診断用組成物において許容される１または複数の担体を場合によりさらに含む診断用組成物である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
請求項１から１１のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート中に含まれるランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントをコードする核酸分子、または請求項６から８のいずれか一項に記載の生物学的に活性なタンパク質を含み、少なくとも５０個のプロリン（Ｐｒｏ）およびアラニン（Ａｌａ）アミノ酸残基からなる、プロリンおよびアラニンアミノ酸残基からなるアミノ酸配列を含む生合成ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントを含むタンパク質コンジュゲートをコードする核酸分子。
【請求項１５】
（ｉ）翻訳されるアミノ酸および／またはリーダー配列をコードする核酸配列と；
（ｉｉ）少なくとも５０個のプロリン（Ｐｒｏ）およびアラニン（Ａｌａ）アミノ酸残基からなる、プロリンおよびアラニンアミノ酸残基からなるアミノ酸配列を含む生合成ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントをコードする核酸配列と；
（ｉｉｉ）生物学的に活性なタンパク質、または生物学的活性および／もしくは治療活性を有するアミノ酸配列を含むか、または生物学的活性および／もしくは治療活性を有するアミノ酸配列である前記ポリペプチドをコードする核酸配列と；
（ｉｖ）翻訳停止コドンを表すか、または翻訳停止コドンである核酸配列と
を含む、請求項１から１０のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲートをコードする核酸分子。
【請求項１６】
（ｉｉ）に記載および（ｉｉｉ）に記載の核酸分子部分またはセグメントが、薬物コンジュゲートをコードする前記核酸分子上でそれらの位置が交換されている、請求項１５に記載の核酸分子。
【請求項１７】
（ｉ）に記載および（ｉｉ）に記載の部分もしくはセグメントの間、ならびに／または（ｉｉ）および（ｉｉｉ）に記載の部分もしくはセグメントの間に、プロテアーゼおよび／または化学的切断部位および／または認識部位を場合により含む、請求項１５または１６に記載の核酸分子。
【請求項１８】
少なくとも５０個のプロリン（Ｐｒｏ）およびアラニン（Ａｌａ）アミノ酸残基からなる、プロリンおよびアラニンアミノ酸残基からなるアミノ酸配列を含む生合成ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントをコードする核酸であって、前記核酸分子が、
（ｉ）翻訳されるアミノ酸および／またはリーダー配列をコードする核酸配列と；
（ｉｉ）プロリンおよびアラニンアミノ酸残基からなるアミノ酸配列を含む前記生合成ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントをコードする核酸配列と；
（ｉｉｉ）翻訳停止コドンを表すか、または翻訳停止コドンである核酸配列と
を含む核酸。
【請求項１９】
（ｉ）および（ｉｉ）の間に、プロテアーゼおよび／または化学的切断部位および／または認識を場合により含む、請求項１８に記載の核酸分子。
【請求項２０】
請求項１４から１９のいずれか一項に記載の核酸を含むベクター。
【請求項２１】
請求項１４から１９のいずれか一項に記載の核酸または請求項２０に記載のベクターを含む宿主細胞。
【請求項２２】
真核宿主細胞である、請求項２１に記載の宿主細胞。
【請求項２３】
前記真核宿主細胞が、真菌または動物細胞である、請求項２２に記載の宿主細胞。
【請求項２４】
請求項１から１１のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート中に含まれるランダムコイルポリペプチドもしくはランダムコイルポリペプチドセグメントを調製する方法、前記ランダムコイルポリペプチドもしくは前記ランダムコイルポリペプチドセグメントを含む生物学的に活性なタンパク質もしくは薬物もしくは食品コンジュゲートを調製する方法、および／または請求項１から８のいずれか一項に記載の生物活性を有するアミノ酸配列を含むか、または生物活性を有するアミノ酸配列であり、前記ランダムコイルポリペプチドもしくはランダムコイルポリペプチドセグメントをさらに含むポリペプチドを調製する方法であって、
請求項２１から２３のいずれか一項に記載の細胞を培養することと、前記ランダムコイルポリペプチドもしくは生物学的に活性なタンパク質および／または前記生物学的に活性なタンパク質もしくは前記ポリペプチドを、培養物から、または前記細胞から単離することとを含む方法。
【請求項２５】
ホルモン欠乏症関連障害、自己免疫疾患、増殖性障害、癌、貧血、血管新生疾患、感染／炎症性疾患、アレルギー性障害、血栓症、心筋梗塞、再狭窄（restinosis）、糖尿病、不妊症、ゴーシェ病、慢性Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、低血糖、先端巨大症、アデノシンデアミナーゼ欠乏症、血小板減少症、血友病、貧血、肥満症、アルツハイマー病、リポジストロフィー（lipodistrophy）、乾癬、転移性黒色腫、変形性関節症、脂質代謝異常、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス（systemic lupus erythromatosis）、多発性硬化症、喘息、骨粗鬆症および再灌流傷害またはその他の腎臓疾患の治療のための、請求項１から１１のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート、請求項１２または１３に記載の組成物、請求項１４から１９のいずれか一項に記載の核酸、請求項２０に記載のベクター、請求項２１から２３のいずれか一項に記載の細胞、または請求項２４に記載の方法によって調製された、前記ランダムコイルポリペプチドもしくはランダムコイルポリペプチドセグメントを含む生物学的に活性なタンパク質もしくはポリペプチド。
【請求項２６】
前記ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメント、生物学的に活性なタンパク質または薬物コンジュゲートの、ｉｎ  ｖｉｖｏおよび／またはｉｎ  ｖｉｔｒｏ安定性が増大した医薬として使用するための、請求項１から１１のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート、請求項１２または１３に記載の組成物、請求項１４から１９のいずれか一項に記載の核酸、請求項２０に記載のベクターまたは請求項２１から２４のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項２７】
請求項１から１１のいずれか一項に記載のコンジュゲート、化粧品、美容的処置において使用される化合物、食品もしくは飲料または産業において所望のコンジュゲートを製造する方法であって、
請求項２１から２３のいずれか一項に記載の細胞を培養することと、前記ランダムコイルポリペプチド、前記生物学的に活性なタンパク質および／または生物活性もしくは所望の活性を有するアミノ酸配列を有するか、もしくは生物学的に活性なタンパク質および／または生物活性もしくは所望の活性を有するアミノ酸配列であり、前記ランダムコイルポリペプチドもしくはランダムコイルポリペプチドセグメントをさらに含む前記生物学的に活性なタンパク質もしくは前記ポリペプチドを培養物から、または前記細胞から単離することとを含む方法。
【請求項２８】
前記前記ランダムコイルポリペプチド、前記生物学的に活性なタンパク質および／または生物活性もしくは所望の活性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくは生物活性もしくは所望の活性を有するアミノ酸配列であり、前記ランダムコイルポリペプチドもしくはランダムコイルポリペプチドセグメントをさらに含む前記生物学的に活性なタンパク質もしくは前記ポリペプチドが、増殖培地または培養培地、細胞溶解物、細胞膜画分、前記（宿主）細胞の周辺質から単離される、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記ランダムコイルポリペプチドが、所望の分子に連結および／またはカップリングされている、請求項２７または２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記連結または前記カップリングが、化学的連結またはカップリングである、請求項２９に記載の方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４９】
本明細書において与えられる教示に基づいて、当業者は、例えば、水性条件下または生
理学的条件下でランダムコイルコンホメーションを形成し、本明細書において定義される
ように、主にプロリンおよびアラニンから構成される、さらなるアミノ酸配列／ポリペプ
チドを容易に作製することができる。本明細書において定義されるランダムコイルポリペ
プチド（またはそのセグメント）のビルディングブロックまたはモジュールとして使用さ
れる、ランダムコイルコンホメーションを形成するアミノ酸配列／ポリペプチドのさらな
る例は、とりわけ、上記で示される特定の「ビルディングブロック」「ポリマーカセット
」または「ポリマーリピート」の組合せおよび／もしくは断片または円順列変異体を含み得る。したがって、ランダムコイルポリペプチド／アミノ酸配列の例示されたモジュール／配列ユニット／ポリマーリピート／ポリマーカセットはまた、本発明に従うさらなるモジュール／配列ユニット／ポリマーリピート／ポリマーカセットを形成するよう新規に組合され得る個々の断片を提供し得る。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６１】
本発明はまた、ＡＡＰＡＡＰＡＰＡＡＰＡＡＰＡＰＡＡＰＡ（配列番号１）；ＡＡＰＡ
ＡＡＰＡＰＡＡＰＡＡＰＡＰＡＡＰ（配列番号２）；ＡＡＡＰＡＡＡＰＡＡＡＰＡＡＡＰ
ＡＡＡＰ（例えば、［Ｐｒｏ１Ａｌａ３］５である配列番号３）；ＡＡＰＡＡＰＡＡＰＡ
ＡＰＡＡＰＡＡＰＡＡＰＡＡＰ（配列番号４）；ＡＰＡＡＡＰＡＰＡＡＡＰＡＰＡＡＡＰ
ＡＰＡＡＡＰ（配列番号５）；ＡＡＡＰＡＡＰＡＡＰＰＡＡＡＡＰＡＡＰＡＡＰＰＡ（配
列番号６）およびＡＰＡＰＡＰＡＰＡＰＡＰＡＰＡＰＡＰＡＰ（例えば、［Ｐｒｏ１Ａｌ
ａ１］１０である配列番号５１）またはこれらの配列の全体または一部としてのこれらの
配列の円順列変異体または多量体（単数または複数）からなる群から選択されるアミノ酸ストレッチを含むランダムコイルポリペプチド（ポリペプチドセグメント（単数または複数））／アミノ酸配列に関する。したがって、ランダムコイルポリペプチド（そのポリペプチドセグメント（単数または複数））／アミノ酸配列は、得られる生合成ランダムコイルポリペプチドが、もっぱら、プロリンおよびアラニンアミノ酸残基からなり、前記アミノ酸配列が、少なくとも５０個のプロリン（Ｐｒｏ）およびアラニン（Ａｌａ）アミノ酸残基からなる限り、アミノ酸ストレッチＡＡＰＡＡＰＡＰＡＡＰＡＡＰＡＰＡＡＰＡ（配列番号１）、ＡＡＰＡＡＰＡＰＡＡＰＡＡＰＡＰＡＡＰＡ（配列番号１）；ＡＡＰＡＡＡＰＡＰＡＡＰＡＡＰＡＰＡＡＰ（配列番号２）；ＡＡＡＰＡＡＡＰＡＡＡＰＡＡＡＰＡＡＡＰ（配列番号３）；ＡＡＰＡＡＰＡＡＰＡＡＰＡＡＰＡＡＰＡＡＰＡＡＰ（配列番号４）；ＡＰＡＡＡＰＡＰＡＡＡＰＡＰＡＡＡＰＡＰＡＡＡＰ（配列番号５）；ＡＡＡＰＡＡＰＡＡＰＰＡＡＡＡＰＡＡＰＡＡＰＰＡ（配列番号６）およびＡＰＡＰＡＰＡＰＡＰＡＰＡＰＡＰＡＰＡＰ（配列番号５１）、ならびにこれらのモチーフの組合せまたはこのモチーフの断片および部分の組合せを含み得る。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６２】
また、上記のアミノ酸配列の円順列変異体も、本発明において使用され得る。例えば、ＡＡＰＡＡＰＡＰＡＡＰＡＡＰＡＰＡＡＰＡ（配列番号１）の例示的な円順列変異体は、第１のアラニンを除去することおよび上記の配列の末端に別のアラニンを付加することによって容易に作製され得る。配列番号１のこのような円順列変異体は、ＡＰＡＡＰＡＰＡＡＰＡＡＰＡＰＡＡＰＡＡ（配列番号７）となる。さらに、配列番号１の環状に順序を変えられたものの限定されない例として、以下：
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６３】
【化１】
2013531480.tif 000002
などがある。本発明の教示に基づいて、当業者ならば、配列番号２、配列番号３、配列番
号４、配列番号５、配列番号６および配列番号５１に示されるアミノ酸ストレッチの対応
する円順列変異体を容易に作製することができる（前記配列番号５１は「ＡＰ」リピートに完全に基づいており、円順列変異体は、「ＰＡ」または「ＡＰ」リピート／ビルディングブロックに完全に基づいたものであり得る）。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６４】
このような円順列変異体はまた、本明細書に従って使用され得る、本明細書において提供されたポリペプチド／アミノ酸配列のさらなる「モジュール／「ビルディングブロック」などの例と考えられ得る。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６５】
当業者には、本明細書において提供されたアミノ酸ストレッチの「モジュール」および
（より短い）断片または円順列変異体は、本明細書において定義されるランダムコイルポリペプチド（またはそのセグメント）／アミノ酸配列の「モジュール」、「リピート」および／またはビルディングブロックとして使用され得るということは明らかである。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６６】
上記に従って、ランダムコイルコンホメーションを形成するランダムコイルポリペプチ
ド／アミノ酸配列は、上記のアミノ酸ストレッチ（またはその円順列変異体もしくはその断片）、好ましくは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６および配列番号５１に示されるもののいずれかの多量体を含み得る。これらの配列は、本発明との関連で、決して制限的ではないということは注目すべきことである。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６７】
やはり、上記のアミノ酸ストレッチ（またはその断片）、円順列変異体（またはその断片）を含むポリペプチド／アミノ酸配列は、好ましくは、本明細書において上記で定義され、説明された全長および／またはプロリン／アラニン含量を有する、すなわち、約５０個、約１００個、約１５０個、約２００個、約２５０個、約３００個、約３５０個、約４００〜約３０００個のアミノ酸からなり、および／または約１０％超および約７５％未満のプロリン残基を含むはずである。これに関連して上記の本明細書において与えられるすべての定義はまた、ここで準用する。また、用語「断片」は、上記に定義されている。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２２５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２２５】
配列番号１は、ＰＡ番号１のアミノ酸配列を示す。
配列番号２は、ＰＡ番号２のアミノ酸配列を示す。
配列番号３は、ＰＡ番号３のアミノ酸配列を示す。
配列番号４は、ＰＡ番号４のアミノ酸配列を示す。
配列番号５は、ＰＡ番号５のアミノ酸配列を示す。
配列番号６は、ＰＡ番号６のアミノ酸配列を示す。
配列番号７は、配列番号１の円順列変異体のアミノ酸配列を示す。
配列番号８は、配列番号１の円順列変異体のアミノ酸配列を示す。
配列番号９は、配列番号１の円順列変異体のアミノ酸配列を示す。
配列番号１０は、配列番号１の円順列変異体のアミノ酸配列を示す。
配列番号１１は、配列番号１の円順列変異体のアミノ酸配列を示す。
配列番号１２は、配列番号１の円順列変異体のアミノ酸配列を示す。
配列番号１３は、配列番号１の円順列変異体のアミノ酸配列を示す。
配列番号１４は、配列番号１の円順列変異体のアミノ酸配列を示す。
配列番号１５は、配列番号１の円順列変異体のアミノ酸配列を示す。
配列番号１６は、配列番号１の円順列変異体のアミノ酸配列を示す。
配列番号１７は、ビルディングブロックＰＡ番号１の作製に使用される上部／コーディ
ング鎖オリゴデオキシヌクレオチドの核酸配列を示す。
配列番号１８は、ビルディングブロックＰＡ番号１の作製に使用される下部／非コーデ
ィング鎖オリゴデオキシヌクレオチドの核酸配列を示す。
配列番号１９は、ｐＡＳＫ８８−Ｆａｂ−２ｘＳａｐＩ上にコードされる、抗体Ｆａｂ
断片の免疫グロブリン軽鎖のＣ末端の周囲の、核酸配列ストレッチ（上部／コーディング
鎖）を示す。
配列番号２０は、ｐＡＳＫ８８−Ｆａｂ−２ｘＳａｐＩ上にコードされる、抗体Ｆａｂ
断片の免疫グロブリン軽鎖のＣ末端の周囲の、核酸配列ストレッチ（下部／非コーディン
グ鎖）を示す。
配列番号２１は、ｐＡＳＫ８８−Ｆａｂ−２ｘＳａｐＩ上にコードされる、Ｆａｂ断片
の軽鎖のＣ末端のアミノ酸配列を示す。
配列番号２２は、ｐＡＳＫ８８−Ｆａｂ−２ｘＳａｐＩの核酸配列を示す。
配列番号２３は、１つのＰＡ番号１（２０）ポリマーの挿入後の、Ｆａｂ軽鎖のＣ末端
のアミノ酸配列をコードする核酸配列ストレッチ（上部／コーディング鎖）を示す。
配列番号２４は、１つのＰＡ番号１（２０）ポリマーの挿入後の、Ｆａｂ軽鎖のＣ末端
のアミノ酸ストレッチのための核酸配列（下部／非コーディング鎖）を示す。
配列番号２５は、１つのＰＡ番号１（２０）ポリマーの挿入後の、Ｆａｂ軽鎖のＣ末端
のアミノ酸配列ストレッチを示す。
配列番号２６は、ｐＦａｂ−ＰＡ番号１（２００）上にコードされるＦａｂ重鎖のアミ
ノ酸配列を示す。
配列番号２７は、ｐＦａｂ−ＰＡ番号１（２００）上にコードされるＰＡ番号１（２０
０）ポリマーと融合しているＦａｂ軽鎖のアミノ酸配列を示す。
配列番号２８は、ｐＦａｂ−ＰＡ番号１（２００）の核酸配列を示す。
配列番号２９は、ＩＮＦａ２ｂのＮ末端およびＳｔｒｅｐ−タグＩＩ（最後の２個のア
ミノ酸のみ）のアミノ酸配列をコードする核酸配列（上部／コーディング鎖）を示す。
配列番号３０は、ＩＮＦａ２ｂのＮ末端およびＳｔｒｅｐ−タグＩＩ（最後の２個のア
ミノ酸のみ）のアミノ酸配列をコードする核酸配列（下部／非コーディング鎖）を示す。
配列番号３１は、Ｓｔｒｅｐ−タグＩＩのＣ末端およびＩＮＦａ２ｂのＮ末端のアミノ
酸配列を示す。
配列番号３２は、ｐＡＳＫ−ＩＦＮａ２ｂの核酸配列を示す。
配列番号３３は、１つのＰＡ番号１ポリマー配列カセットの挿入後の、Ｓｔｒｅｐ−タ
グＩＩのＣ末端およびＩＦＮａ２ｂのＮ末端をコードする核酸配列ストレッチ（上部／コ
ーディング鎖）を示す。
配列番号３４は、１つのＰＡ番号１ポリマー配列カセットの挿入後の、Ｓｔｒｅｐ−タ
グＩＩのＣ末端およびＩＦＮａ２ｂのＮ末端の核酸配列ストレッチ（下部／非コーディン
グ鎖）を示す。
配列番号３５は、１つのＰＡ番号１ポリマーカセットとの融合後の、Ｓｔｒｅｐ−タグ
ＩＩのＣ末端およびＩＦＮａ２ｂのＮ末端のアミノ酸配列ストレッチを示す。
配列番号３６は、ｐＰＡ番号１（２００）−ＩＦＮａ２ｂ上にコードされるＰＡ番号１
（２００）ポリマーと融合している、ＩＦＮａ２ｂおよびＳｔｒｅｐ−タグＩＩのアミノ
酸配列を示す。
配列番号３７は、ｐＰＡ番号１（２００）−ＩＦＮａ２ｂの核酸配列を示す。
配列番号３８は、Ｈｉｓ６−ｈＧＨのＮ末端の周囲のアミノ酸配列をコードするｐＡＳ
Ｋ７５−Ｈｉｓ６−ｈＧＨ上の核酸配列ストレッチ（上部／コーディング鎖）を示す。
配列番号３９は、ｈＧＨのＮ末端の周囲のアミノ酸配列をコードするｐＡＳＫ７５−Ｈ
ｉｓ６−ｈＧＨ上の核酸配列ストレッチ（下部／非コーディング鎖）を示す。
配列番号４０は、ｐＡＳＫ７５−Ｈｉｓ６−ｈＧＨ上にコードされるＨｉｓ６−ｈＧＨ
のＮ末端のアミノ酸配列ストレッチを示す。
配列番号４１は、ｐＡＳＫ７５−Ｈｉｓ６−ｈＧＨの核酸配列を示す。
配列番号４２は、ＰＡ番号１（２０）ポリマーの挿入後のＨｉｓ６−ｈＧＨのＮ末端の
アミノ酸配列をコードする核酸配列（上部／コーディング鎖）ストレッチを示す。
配列番号４３は、１つのＰＡ番号１ポリマー配列カセットの挿入後のｈＧＨのＮ末端を
コードする核酸配列（下部／非コーディング鎖）を示す。
配列番号４４は、ＰＡ番号１（２０）ポリマーの挿入後のＨｉｓ６−ｈＧＨのＮ末端の
アミノ酸配列を示す。
配列番号４５は、ｐＡＳＫ７５−Ｈｉｓ６−ＰＡ番号１（２００）−ｈＧＨ上にコード
される成熟したＨｉｓ６−ＰＡ番号１（２００）−ｈＧＨのアミノ酸配列を示す。
配列番号４６は、ｐＡＳＫ７５−Ｈｉｓ６−ＰＡ番号１（２００）−ｈＧＨの核酸配列
を示す。
配列番号４７は、ｐＣＨＯ−ＰＡ番号１（２００）−ｈＧＨ上にコードされるＨｉｓ６
−ＰＡ番号１（２００）−ｈＧＨのアミノ酸配列を示す。
配列番号４８は、ｐＣＨＯ−ＰＡ番号１（２００）−ｈＧＨの核酸配列を示す。
配列番号４９は、ｐＣＨＯ−ｈＧＨの核酸配列を示す。
配列番号５０は、ｐＣＨＯの核酸配列を示す。
配列番号５１は、Ｐ１Ａ１のアミノ酸配列を示す。
配列番号５２は、Ｐ１Ａ１のビルディングブロックの作製に使用される上部／コーディ
ング鎖オリゴデオキシヌクレオチド（oligodesoxynucleotide）の核酸配列を示す。
配列番号５３は、Ｐ１Ａ１のビルディングブロックの作製に使用される下部／非コーデ
ィング鎖オリゴデオキシヌクレオチド（oligodesoxynucleotide）の核酸配列を示す。
配列番号５４は、Ｐ１Ａ３のビルディングブロックの作製に使用される上部／コーディ
ング鎖オリゴデオキシヌクレオチド（oligodesoxynucleotide）の核酸配列を示す。
配列番号５５は、Ｐ１Ａ３のビルディングブロックの作製に使用される下部／非コーデ
ィング鎖オリゴデオキシヌクレオチド（oligodesoxynucleotide）の核酸配列を示す。
配列番号５６は、ｐＦａｂ−Ｐ１Ａ１（２００）上にコードされるＰ１Ａ１（２００）
ポリマーと融合しているＦａｂ軽鎖のアミノ酸配列を示す。
配列番号５７は、ｐＦａｂ−Ｐ１Ａ３（２００）上にコードされるＰ１Ａ３（２００）
ポリマーと融合しているＦａｂ軽鎖のアミノ酸配列を示す。
配列番号５８は、ｐＦａｂ−Ｐ１Ａ１（２００）の核酸配列を示す。
配列番号５９は、ｐＦａｂ−Ｐ１Ａ３（２００）の酸配列を示す。
配列番号６０は、ｐＳＵＭＯ−ＰＡ番号１（２００）の核酸配列を示す。
配列番号６１は、薬物コンジュゲート（１０の遺伝子カセットをコードする２０マーの
ライゲーションによって作製され、下流ライゲーション部位に起因する１個の追加のＣ末
端Ａｌａ残基を含む）の調製に使用されるＰＡ番号１（２００）ポリペプチド／ポリマー
を示す。
本願発明は以下の態様を含み得る。
［１］
（ｉ）少なくとも５０個のプロリン（Ｐｒｏ）およびアラニン（Ａｌａ）アミノ酸残基
からなる、もっぱら、プロリンおよびアラニンアミノ酸残基からなるアミノ酸配列を含む
生合成ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントと、
（ｉｉ）（ａ）生物学的に活性なタンパク質、または生物活性を有する、もしくは媒介
するアミノ酸配列を含むか、もしくは生物活性を有する、もしくは媒介するアミノ酸配列
であるポリペプチドおよび（ｂ）小分子薬からなる群から選択される薬物と
を含む薬物コンジュゲート。
［２］
前記ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントが、約５０個〜約３０
００個のアミノ酸残基からなるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の薬物コンジュゲー
ト。
［３］
前記プロリン残基が、アミノ酸配列の約１０％超かつ約７５％未満を構成する、請求項
１または２に記載の薬物コンジュゲート。
［４］
前記ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントが、複数のアミノ酸リ
ピートを含み、前記リピートが、プロリンおよびアラニン残基からなり、６個以下の連続
したアミノ酸残基が同一である、請求項１から３のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲ
ート。
［５］
前記ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントが、
【化７】
2013531480.tif 000003
またはこれらの配列全体もしくはこれらの配列の部分の環状パーミューテッドバージョン
もしくは多量体（単数または複数）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求
項１から４のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート。
［６］
前記生物活性を有するポリペプチド、前記生物学的に活性なタンパク質、または前記生
物活性を有するか、もしくは媒介するアミノ酸配列を含むか、もしくは生物活性を有する
、もしくは媒介するアミノ酸配列であるポリペプチドが、結合タンパク質、抗体断片、サ
イトカイン、増殖因子、ホルモンまたは酵素からなる群から選択される、請求項１から５
のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート。
［７］
前記生物活性を有するポリペプチドが、結合タンパク質であり、前記結合分子が、抗体
、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、ＣＤＲ由来ペプチドミメティック、一本鎖可変断片
（ｓｃＦｖ）、ドメイン抗体、レクチン、免疫グロブリンドメイン、フィブロネクチンド
メイン、プロテインＡドメイン、ＳＨ３ドメイン、アンキリンリピートドメインおよびリ
ポカリンからなる群から選択される、請求項６に記載の薬物コンジュゲート。
［８］
前記生物学的に活性なタンパク質が、顆粒球コロニー刺激因子、ヒト成長ホルモン、α
−インターフェロン、β−インターフェロン、γ−インターフェロン、腫瘍壊死因子、エ
リスロポエチン、凝固因子ＶＩＩＩ、ｇｐ１２０／ｇｐ１６０、可溶性腫瘍壊死因子Ｉお
よびＩＩ受容体、レテプラーゼ、エキセンディン−４、アナキンラ、インターロイキン−
２、好中球ゼラチナーゼ関連リポカリン、卵胞刺激ホルモン、グルコセレブロシダーゼ、
チモシンα１、グルカゴン、ソマトスタチン、アデノシンデアミナーゼ、インターロイキ
ン１１、凝固因子ＶＩＩａ、凝固因子ＩＸ、ヘマタイド、λ−インターフェロン、レプチ
ン、インターロイキン−２２受容体サブユニットα（ＩＬ−２２ｒａ）、インターロイキ
ン−２２、ヒアルロニダーゼ、線維芽細胞増殖因子１８、線維芽細胞増殖因子２１、グル
カゴン様ペプチド１、オステオプロテジュリン、ＩＬ−１８結合タンパク質、成長ホルモ
ン放出因子、可溶性ＴＡＣＩ受容体、トロンボスポンジン−１、可溶性ＶＥＧＦ受容体Ｆ
ｌｔ−１およびＩＬ−４ムテインからなる群から選択される、請求項１から７のいずれか
一項に記載の薬物コンジュゲート。
［９］
前記生合成ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドが、前記薬物コンジュゲー
トの増大したｉｎ  ｖｉｖｏおよび／またはｉｎ  ｖｉｔｒｏ安定性を媒介する、請求項
１から８のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート。
［１０］
前記増大したｉｎ  ｖｉｖｏ安定性が、少なくとも５０個のプロリン（Ｐｒｏ）および
アラニン（Ａｌａ）アミノ酸残基からなる、もっぱら、プロリンおよびアラニンアミノ酸
残基からなるアミノ酸配列を含む前記生合成ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプ
チドセグメントを含む前記薬物コンジュゲートの、前記ランダムコイルランダムコイルポ
リペプチドまたはポリペプチドセグメントを欠く対照ポリペプチドまたは対照コンジュゲ
ートの安定性と比較した場合における、延長された血漿半減期である、請求項９に記載の
薬物コンジュゲート。
［１１］
前記小分子が、ジゴキシゲニン、フルオレセイン、ドキソルビシン、カリケアマイシン
、カンプトテシン、フマギリン、デキサメタゾン、ゲルダナマイシン、パクリタキセル、
ドセタキセル、イリノテカン、シクロスポリン、ブプレノルフィン、ナルトレキソン、ナ
ロキソン、ビンデシン、バンコマイシン、リスペリドン、アリピプラゾール、パロノセト
ロン、グラニセトロン、シタラビンＮＸ１８３８、ロイプロリド、ゴセレリン、ブセレリ
ン、オクトレオチド、テデュグルチド（teduglutide）、シレンジチド（cilengitide）、
アバレリックス、エンフビルチド、グレリン、α４インテグリン阻害剤、アンチセンス核
酸、短鎖干渉ＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ステロイド、ＤＮＡまたはＲＮＡアプタマーなら
びにペプチドおよび／またはペプチドミメティックからなる群から選択される、請求項１
から１０のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート。
［１２］
請求項１から１１のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲートを含む組成物。
［１３］
１または複数の薬学的に許容される担体を場合によりさらに含む医薬組成物である、ま
たは診断用組成物において許容される１または複数の担体を場合によりさらに含む診断用
組成物である、請求項１２に記載の組成物。
［１４］
請求項１から１１のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート中に含まれるランダムコ
イルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントをコードする核酸分子、または請求項６
から８のいずれか一項に記載の生物学的に活性なタンパク質を含み、少なくとも５０個の
プロリン（Ｐｒｏ）およびアラニン（Ａｌａ）アミノ酸残基からなる、もっぱら、プロリ
ンおよびアラニンアミノ酸残基からなるアミノ酸配列を含む生合成ランダムコイルポリペ
プチドまたはポリペプチドセグメントを含むタンパク質コンジュゲートをコードする核酸
分子。
［１５］
（ｉ）翻訳されるアミノ酸および／またはリーダー配列をコードする核酸配列と；
（ｉｉ）少なくとも５０個のプロリン（Ｐｒｏ）およびアラニン（Ａｌａ）アミノ酸残
基からなる、もっぱら、プロリンおよびアラニンアミノ酸残基からなるアミノ酸配列を含
む生合成ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントをコードする核酸配
列と；
（ｉｉｉ）生物学的に活性なタンパク質、または生物学的活性および／もしくは治療活
性を有する、もしくは媒介するアミノ酸配列を含むか、または生物学的活性および／もし
くは治療活性を有する、もしくは媒介するアミノ酸配列である前記ポリペプチドをコード
する核酸配列と；
（ｉｖ）翻訳停止コドンを表すか、または翻訳停止コドンである核酸配列と
を含む、請求項１から１０のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲートをコードする核酸
分子。
［１６］
（ｉｉ）に記載および（ｉｉｉ）に記載の核酸分子部分またはセグメントが、薬物コン
ジュゲートをコードする前記核酸分子上でそれらの位置が交換されている、請求項１５に
記載の核酸分子。
［１７］
（ｉ）に記載および（ｉｉ）に記載の部分もしくはセグメントの間、ならびに／または
（ｉｉ）および（ｉｉｉ）に記載の部分もしくはセグメントの間に、プロテアーゼおよび
／または化学的切断部位および／または認識部位を場合により含む、請求項１５または１
６に記載の核酸分子。
［１８］
少なくとも５０個のプロリン（Ｐｒｏ）およびアラニン（Ａｌａ）アミノ酸残基からな
る、もっぱら、プロリンおよびアラニンアミノ酸残基からなるアミノ酸配列を含む生合成
ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントをコードする核酸であって、
前記核酸分子が、
（ｉ）翻訳されるアミノ酸および／またはリーダー配列をコードする核酸配列と；
（ｉｉ）もっぱら、プロリンおよびアラニンアミノ酸残基からなるアミノ酸配列を含む
前記生合成ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメントをコードする核酸
配列と；
（ｉｉｉ）翻訳停止コドンを表すか、または翻訳停止コドンである核酸配列と
を含む核酸。
［１９］
（ｉ）および（ｉｉ）の間に、プロテアーゼおよび／または化学的切断部位および／ま
たは認識を場合により含む、請求項１８に記載の核酸分子。
［２０］
請求項１４から１９のいずれか一項に記載の核酸を含むベクター。
［２１］
請求項１４から１９のいずれか一項に記載の核酸または請求項２０に記載のベクターを
含む宿主細胞。
［２２］
真核宿主細胞である、請求項２１に記載の宿主細胞。
［２３］
前記真核宿主細胞が、真菌または動物細胞である、請求項２２に記載の宿主細胞。
［２４］
請求項１から１１のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート中に含まれるランダムコ
イルポリペプチドもしくはランダムコイルポリペプチドセグメントを調製する方法、前記
ランダムコイルポリペプチドもしくは前記ランダムコイルポリペプチドセグメントを含む
生物学的に活性なタンパク質もしくは薬物もしくは食品コンジュゲートを調製する方法、
および／または請求項１から８のいずれか一項に記載の生物活性を有する、もしくは媒介
するアミノ酸配列を含むか、または生物活性を有する、もしくは媒介するアミノ酸配列で
あり、前記ランダムコイルポリペプチドもしくはランダムコイルポリペプチドセグメント
をさらに含むポリペプチドを調製する方法であって、
請求項２１から２３のいずれか一項に記載の細胞を培養することと、前記ランダムコイ
ルポリペプチドもしくは生物学的に活性なタンパク質および／または前記生物学的に活性
なタンパク質もしくは前記ポリペプチドを、培養物から、または前記細胞から単離するこ
ととを含む方法。
［２５］
ホルモン欠乏症関連障害、自己免疫疾患、増殖性障害、癌、貧血、血管新生疾患、感染
／炎症性疾患、アレルギー性障害、血栓症、心筋梗塞、再狭窄（restinosis）、糖尿病、
不妊症、ゴーシェ病、慢性Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、低血糖、先端巨大症、アデノシンデアミ
ナーゼ欠乏症、血小板減少症、血友病、貧血、肥満症、アルツハイマー病、リポジストロ
フィー（lipodistrophy）、乾癬、転移性黒色腫、変形性関節症、脂質代謝異常、関節リ
ウマチ、全身性エリテマトーデス（systemic lupus erythromatosis）、多発性硬化症、
喘息、骨粗鬆症および再灌流傷害またはその他の腎臓疾患の治療のための、請求項１から
１１のいずれか一項に記載の薬物コンジュゲート、請求項１２または１３に記載の組成物
、請求項１４から１９のいずれか一項に記載の核酸、請求項２０に記載のベクター、請求
項２１から２３のいずれか一項に記載の細胞、または請求項２４に記載の方法によって調
製された、前記ランダムコイルポリペプチドもしくはランダムコイルポリペプチドセグメ
ントを含む生物学的に活性なタンパク質もしくはポリペプチド。
［２６］
前記ランダムコイルポリペプチドまたはポリペプチドセグメント、生物学的に活性なタ
ンパク質または薬物コンジュゲートの、ｉｎ  ｖｉｖｏおよび／またはｉｎ  ｖｉｔｒｏ
安定性が増大した医薬として使用するための、請求項１から１１のいずれか一項に記載の
薬物コンジュゲート、請求項１２または１３に記載の組成物、請求項１４から１９のいず
れか一項に記載の核酸、請求項２０に記載のベクターまたは請求項２１から２４のいずれ
か一項に記載の細胞。
［２７］
化粧品における、美容的処置における、栄養における、または食品技術における、また
は製紙業における、請求項１から５のいずれか一項に記載、または請求項１４から１９の
いずれか一項に記載の核酸分子もしくはその一部によってコードされるランダムコイルポ
リペプチドまたはランダムコイルポリペプチドセグメントの使用。
［２８］
請求項１から１１のいずれか一項に記載のコンジュゲート、化粧品、美容的処置におい
て使用される化合物、食品もしくは飲料または産業において注目されるコンジュゲートを
製造する方法であって、
請求項２１から２３のいずれか一項に記載の細胞を培養することと、前記ランダムコイ
ルポリペプチド、前記生物学的に活性なタンパク質および／または生物活性もしくは注目
される活性を有する、もしくは媒介するアミノ酸配列を有するか、もしくは生物学的に活
性なタンパク質および／または生物活性もしくは注目される活性を有する、もしくは媒介
するアミノ酸配列であり、前記ランダムコイルポリペプチドもしくはランダムコイルポリ
ペプチドセグメントをさらに含む前記生物学的に活性なタンパク質もしくは前記ポリペプ
チドを培養物から、または前記細胞から単離することとを含む方法。
［２９］
前記前記ランダムコイルポリペプチド、前記生物学的に活性なタンパク質および／また
は生物活性もしくは注目される活性を有する、もしくは媒介するアミノ酸配列を含むか、
もしくは生物活性もしくは注目される活性を有する、もしくは媒介するアミノ酸配列であ
り、前記ランダムコイルポリペプチドもしくはランダムコイルポリペプチドセグメントを
さらに含む前記生物学的に活性なタンパク質もしくは前記ポリペプチドが、増殖培地また
は培養培地、細胞溶解物、細胞膜画分、前記（宿主）細胞の周辺質から単離される、請求
項２８に記載の方法。
［３０］
前記ランダムコイルポリペプチドが、注目される分子に連結および／またはカップリン
グされている、請求項２８または２９に記載の方法。
［３１］
前記連結または前記カップリングが、化学的連結またはカップリングである、請求項３
０に記載の方法。