【手続補正書】
【提出日】平成27年7月3日(2015.7.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
油コアおよびカチオン性脂質を含むエマルジョン粒子ならびに該エマルジョン粒子と複合体形成される核酸分子を含む免疫原性カチオン性水中油型エマルジョンであって、該エマルジョン粒子の平均直径が約８０ｎｍ〜約１８０ｎｍであり、該エマルジョンのＮ／Ｐが少なくとも４：１であり、但し、該核酸分子が分泌型アルカリホスファターゼをコードしないことを条件とし、但し、該核酸分子がプラスミドＡ３１７によってコードされるＲＮＡではなく、該プラスミドＡ３１７の配列が米国特許出願第６１／３６１，８９２号の図７Ａに示されていることをさらに条件とする、免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項２】
前記核酸分子が抗原をコードする、請求項１に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項３】
前記核酸分子がＲＮＡである、請求項１または２に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項４】
前記ＲＮＡが自己複製ＲＮＡである、請求項３に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項５】
前記免疫原性カチオン性水中油型エマルジョンが緩衝化されており、約６．０〜約８．０のｐＨを有する、請求項１〜４のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項６】
前記免疫原性カチオン性水中油型エマルジョンが、クエン酸バッファー、コハク酸バッファー、酢酸バッファー、およびそれらの組み合わせからなる群より選択されるバッファーを含む、請求項５に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項７】
前記バッファーがクエン酸バッファーであり、前記ｐＨが約６．５である、請求項５または６に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項８】
無機塩をさらに含む、請求項１〜６のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項９】
前記無機塩の濃度が３０ｍＭ以下である、請求項８に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項１０】
非イオン性張度調整剤をさらに含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項１１】
前記非イオン性張度調整剤が糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせである、請求項１０に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項１２】
前記非イオン性張度調整剤が、スクロース、トレハロース、ソルビトール、デキストロース、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項１１に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項１３】
水相中にポリマーをさらに含む、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項１４】
前記ポリマーがポロキサマーである、請求項１３に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項１５】
前記ポリマーがＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ１２７である、請求項１３または１４に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項１６】
前記エマルジョンが約０．０５％〜約２０％（ｗ／ｖ）のポリマーを含む、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項１７】
前記エマルジョン粒子の平均直径が約８０ｎｍ〜約１３０ｎｍである、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項１８】
前記エマルジョンのＮ／Ｐが４：１〜約２０：１である、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項１９】
前記エマルジョンのＮ／Ｐが４：１〜約１５：１である、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項２０】
前記カチオン性水中油型エマルジョンが等張性である、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項２１】
前記油コアが、ヒマシ油、ヤシ油、トウモロコシ油、綿実油、月見草油、魚油、ホホバ油、ラード油、亜麻仁油、オリーブ油、ラッカセイ油、サフラワー油、ゴマ油、ダイズ油、スクアレン、スクアラン、ヒマワリ油、コムギ胚芽油、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される油を含む、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項２２】
前記油がスクアレンである、請求項２１に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項２３】
前記カチオン性脂質が、１，２−ジオレオイルオキシ−３−（トリメチルアンモニオ）プロパン（ＤＯＴＡＰ）、３β−［Ｎ−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアミノエタン）−カルバモイル］コレステロール（ＤＣコレステロール）、ジメチルジオクタデシルアンモニウム（ＤＤＡ）、１，２−ジミリストイル−３−トリメチルアンモニウムプロパン（ＤＭＴＡＰ）、ジパルミトイル（Ｃ１６：０）トリメチルアンモニウムプロパン（ＤＰＴＡＰ）、ジステアロイルトリメチルアンモニウムプロパン（ＤＳＴＡＰ）、Ｎ−［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）、Ｎ，Ｎ−ジオレオイル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＤＡＣ）、１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−エチルホスホコリン（ＤＯＥＰＣ）、１，２−ジオレオイル−３−ジメチルアンモニウム−プロパン（ＤＯＤＡＰ）、１，２−ジリノレイルオキシ−３−ジメチルアミノプロパン（ＤＬｉｎＤＭＡ）、脂質Ｅ０００１〜Ｅ０１１８、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項２４】
前記カチオン性脂質が４級アミンを含む、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項２５】
前記カチオン性脂質がＤＯＴＡＰである、請求項２３に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項２６】
前記粒子が界面活性剤をさらに含む、請求項１〜２５のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項２７】
前記界面活性剤が非イオン性界面活性剤である、請求項２６に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項２８】
前記界面活性剤がＳＰＡＮ８５（ソルビタントリオレエート）、Ｔｗｅｅｎ８０（ポリソルベート８０）、またはそれらの組み合わせである、請求項２７に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項２９】
前記エマルジョンが抗酸化剤をさらに含む、請求項１〜２８のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
【請求項３０】
請求項１〜２９のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョンの作製方法であって、
（ｉ）油コアおよびカチオン性脂質を含むエマルジョン粒子を含むカチオン性水中油型エマルジョン、ならびに（ｉｉ）核酸を含む水性溶液を提供するステップと、
（ｉ）と（ｉｉ）とを合わせ、それにより、前記免疫原性カチオン性水中油型エマルジョンを作製するステップと
を含む、方法。
【請求項３１】
被験体に免疫応答を生じさせるための組成物であって、有効量の請求項１〜２９のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョンを含む、組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２８】
本発明はまた、被験体に免疫応答を生じさせる方法であって、有効量の本明細書に記載
される免疫原性カチオン性水中油型エマルジョンを該被験体に投与するステップを含む、
方法に関する。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される： 
（項目１）
油コアおよびカチオン性脂質を含むエマルジョン粒子ならびに該エマルジョン粒子と複合体形成される核酸分子を含む免疫原性カチオン性水中油型エマルジョンであって、該エマルジョン粒子の平均直径が約８０ｎｍ〜約１８０ｎｍであり、該エマルジョンのＮ／Ｐが少なくとも４：１であり、但し、該核酸分子が分泌型アルカリホスファターゼをコードしないことを条件とし、但し、該核酸分子がプラスミドＡ３１７によってコードされるＲＮＡではなく、該プラスミドＡ３１７の配列が米国特許出願第６１／３６１，８９２号の図７Ａに示されていることをさらに条件とする、免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目２）
前記核酸分子が抗原をコードする、項目１に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目３）
前記核酸分子がＲＮＡである、項目１または２に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目４）
前記ＲＮＡが自己複製ＲＮＡである、項目３に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目５）
前記免疫原性カチオン性水中油型エマルジョンが緩衝化されており、約６．０〜約８．０のｐＨを有する、前記項目のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目６）
前記免疫原性カチオン性水中油型エマルジョンが、クエン酸バッファー、コハク酸バッファー、酢酸バッファー、およびそれらの組み合わせからなる群より選択されるバッファーを含む、項目５に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目７）
前記バッファーがクエン酸バッファーであり、前記ｐＨが約６．５である、項目５または６に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目８）
無機塩をさらに含む、項目１〜６のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目９）
前記無機塩の濃度が３０ｍＭ以下である、項目８に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目１０）
非イオン性張度調整剤をさらに含む、項目１〜９のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目１１）
前記非イオン性張度調整剤が糖、糖アルコール、またはそれらの組み合わせである、項目１０に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目１２）
前記非イオン性張度調整剤が、スクロース、トレハロース、ソルビトール、デキストロース、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される、項目１１に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目１３）
水相中にポリマーをさらに含む、項目１〜１２のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目１４）
前記ポリマーがポロキサマーである、項目１３に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目１５）
前記ポリマーがＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ１２７である、項目１３または１４に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目１６）
前記エマルジョンが約０．０５％〜約２０％（ｗ／ｖ）のポリマーを含む、項目１３〜１５のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目１７）
前記エマルジョン粒子の平均直径が約８０ｎｍ〜約１３０ｎｍである、項目１〜１６のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目１８）
前記エマルジョンのＮ／Ｐが４：１〜約２０：１である、項目１〜１７のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目１９）
前記エマルジョンのＮ／Ｐが４：１〜約１５：１である、項目１〜１８のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目２０）
前記カチオン性水中油型エマルジョンが等張性である、項目１〜１９のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目２１）
前記油コアが、ヒマシ油、ヤシ油、トウモロコシ油、綿実油、月見草油、魚油、ホホバ油、ラード油、亜麻仁油、オリーブ油、ラッカセイ油、サフラワー油、ゴマ油、ダイズ油、スクアレン、スクアラン、ヒマワリ油、コムギ胚芽油、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される油を含む、項目１〜２０のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目２２）
前記油がスクアレンである、項目２１に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目２３）
前記カチオン性脂質が、１，２−ジオレオイルオキシ−３−（トリメチルアンモニオ）プロパン（ＤＯＴＡＰ）、３β−［Ｎ−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアミノエタン）−カルバモイル］コレステロール（ＤＣコレステロール）、ジメチルジオクタデシルアンモニウム（ＤＤＡ）、１，２−ジミリストイル−３−トリメチルアンモニウムプロパン（ＤＭＴＡＰ）、ジパルミトイル（Ｃ１６：０）トリメチルアンモニウムプロパン（ＤＰＴＡＰ）、ジステアロイルトリメチルアンモニウムプロパン（ＤＳＴＡＰ）、Ｎ−［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）、Ｎ，Ｎ−ジオレオイル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＤＡＣ）、１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−エチルホスホコリン（ＤＯＥＰＣ）、１，２−ジオレオイル−３−ジメチルアンモニウム−プロパン（ＤＯＤＡＰ）、１，２−ジリノレイルオキシ−３−ジメチルアミノプロパン（ＤＬｉｎＤＭＡ）、脂質Ｅ０００１〜Ｅ０１１８、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される、項目１〜２２のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目２４）
前記カチオン性脂質が４級アミンを含む、項目１〜２２のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目２５）
前記カチオン性脂質がＤＯＴＡＰである、項目２３に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目２６）
前記粒子が界面活性剤をさらに含む、項目１〜２５のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目２７）
前記界面活性剤が非イオン性界面活性剤である、項目２６に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目２８）
前記界面活性剤がＳＰＡＮ８５（ソルビタントリオレエート）、Ｔｗｅｅｎ８０（ポリソルベート８０）、またはそれらの組み合わせである、項目２７に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目２９）
前記エマルジョンが抗酸化剤をさらに含む、前記項目のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョン。
（項目３０）
項目１〜２９のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョンの作製方法であって、
（ｉ）油コアおよびカチオン性脂質を含むエマルジョン粒子を含むカチオン性水中油型エマルジョン、ならびに（ｉｉ）核酸を含む水性溶液を提供するステップと、
（ｉ）と（ｉｉ）とを合わせ、それにより、前記免疫原性カチオン性水中油型エマルジョンを作製するステップと
を含む、方法。
（項目３１）
被験体に免疫応答を生じさせる方法であって、有効量の項目１〜２９のいずれか１項に記載の免疫原性カチオン性水中油型エマルジョンを該被験体に投与するステップを含む、方法。