【事件の表示】
　特願２００７−５０１２３９「連続的灌流および交互接線流による細胞培養の方法」拒絶査定不服審判事件〔平成１７年１０月１３日国際公開、ＷＯ２００５／０９５５７８、平成１９年　９月１３日国内公表、特表２００７−５２５９８４〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
１　手続の経緯・本願発明
　本願は、平成１７年３月４日（パリ条約による優先権主張外国庁受理　平成１６年３月５日　平成１６年９月２７日　欧州特許庁）を国際出願日とする出願であって、その請求項１ないし９に係る発明は、平成２３年２月２２日付け誤訳訂正書により補正された特許請求の範囲の請求項１ないし９に記載された事項により特定されるとおりのものと認められ、その請求項１に係る発明は次のとおりのものである。
　
 「細胞培養物中の、凝集細胞の凝集度合いを減少させる方法であって、
　細胞培養培地及び凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞の懸濁液を含む細胞培養物が、連続的灌流培養システム内に維持され、
　前記細胞培養培地が前記細胞培養物に添加され、
　前記細胞培養物が、中空繊維を含むフィルタモジュールにわたって循環され、結果として前記細胞培養物よりも低い細胞密度を有する液体の流出が生じ、
　前記フィルタモジュール内の流れが、フィルタモジュールの膜表面に対して接線方向の流れ及び前記膜表面に対して垂直方向の、中空繊維の内側と中空繊維の外側との間の流れである、交互接線流であり、
　培養を所望の細胞密度に達するまで継続する、方法。」（以下、「本願発明」という。）
　
２　引用刊行物とその記載事項
　原査定の拒絶の理由に引用され、本願優先日前に頒布された刊行物１（原査定の引用文献１）、刊行物２（原査定の引用文献２）、及び刊行物３（原査定の引用文献５）には、以下の事項がそれぞれ記載されている。
　      
（１）刊行物１：米国特許第６５４４４２４号明細書
（１ａ）要約として
「
流体、特に生物学的流体の濾過システム
濾過システムは、一端で貯蔵容器へ、もう一端で隔膜ポンプに接続された、フィルタを含んだコンパートメントを含む
フィルタは中空繊維モジュール
ダイヤフラムポンプ
中空繊維
フィルタを通った、高速、交互、低剪断の接線流を生成するための手段
流体からの老廃物の容易な分離および、濾過された流体を補充するために新鮮な流体を追加する
　
（１ｂ）背景技術として
「濾過は、典型的には流体溶液、混合物または懸濁液を分離し、精製し、変性させ、および／または濃縮するために実施される。バイオテクノロジーおよび製薬産業では、濾過は新規な薬剤、診断法、および他の生物学的物質を首尾よく生産、加工、試験するために不可欠である。例えば、
生物学的薬剤を製造する過程において、濾過は培養培地からある種の構成成分を精製し、選択的に除去
濾過は、灌流培養において高い細胞濃度を維持することにより生産性を向上させるためにも用いられ得る
　
「
懸濁液又は他の生物学的流体を濾過
フィルタは死んだ細胞、細胞残屑、凝集体及び他の流体成分で目詰まりする傾向にある
　
「現在知られている、細胞から培地を分離するのに用いられる灌流方法は、しばしば細胞を損傷する。・・・結果として生じた、スクリーン又は
フィルタにおける、積み重なった死んだ細胞と凝集体
　
「しかし、スピン−バスケット法と同様に、
中空繊維フィルタは膜表面上における微粒子およびゼラチンの蓄積によって詰まりやすい
中空繊維カートリッジを通した一方向での再循環は、典型的には管腔入口で詰まった凝集体による中空繊維管腔の閉塞を引き起こす
　したがって、廃媒質または流体が連続的に除去されるとともに、流体が連続的に新しい媒質で満たされるような濾過システムを作り出すことが要求されている。また、
交互接線流を発生させるような濾過システム
それは、たとえば生体液などの流体について、細胞への損傷または特定のプロセスの他の構成要素への損傷を最小限にするように連続的な濾過を行い、閉塞を最小限
　本発明は、これらの課題の解決策を提供するものである。」（第３欄第３５〜５５行）
　
（１ｃ）「本発明は、流体濾過システムに関し、概略、少なくとも一つの
流体貯蔵容器
フィルタを含むコンパートメント
流体をフィルタを含むコンパートメントを通して交互方向に流す少なくとも一つのダイヤフラムポンプ
高速、低せん断、接線流濾過を実施するのに有用
システムは、培養された動物細胞の灌流に
適用される
　
（１ｄ）「図１を参照すると、この発明による流体濾過システムが示されている。プロセス容器２は、流体コネクターにより、フィルタコンパートメント４に接続している。
容器２は、濾過される流体に適した容器である。例えば、バイオリアクター
　
（１ｅ）「除去フィルタエレメントは、
最も好適には、中空繊維
　
（１ｆ）「
ダイアフラムポンプ２４
フィルタ１８を通る交互接線流が形成
　
（１ｇ）「図１は、交互接線流のコントローラを示す。コントローラは、圧力変換器のような圧力測定装置で構成され、圧力チャンバー２８、３０中の圧力を、プロセス容器２に関連して、モニターし制御する。・・・これらは、示したような
交互接線流（ＡＴＦ）コントローラ
動物細胞で実施
　
（１ｈ）「フィルタを含むコンパートメント４はまた、好ましくは流体回収ポートに適した少なくとも一つの開口４４を有する。
流体回収ポート４４は
濾過流体を除去する
　
（１ｉ）「図３は、この発明の他の実施態様を示す。ある応用では、プロセス容器２は、前述とは異なる開口を通して貫通される。プロセス容器２の上蓋９０を通る上部貫通ポート６が図示される。・・・濾過収穫物は、コンパートメント７から、流路５０を通って集められる。除去された流体は、レベル制御機構により、添加ポンプ４７を作動させ、
流路５１を通して容器中に流体が補充される
　
（１ｊ）「本発明による灌流によって達成される細胞密度は、
バッチプロセスで　達成される細胞密度の約１倍から約２０倍
　
（１ｋ）「容器２とチャンバー３０との間の
脈流は、中空繊維の内腔
への凝集体の接着を大幅に阻止する
容器とポンプの間を行き来するパルス流は、障害物の、繊維の両端部への接着と成長の両方を防止する
　
（１ｌ）「加えて、フィルタの閉塞は、
フィルタの壁を横切って形成される圧力差の変化
フィルタ壁を横切る正か負の圧力差となる。このような、フィルタ流を瞬間的に内腔に戻す反転
　
（１ｍ）「１．
流体濾過システム
ａ）少なくとも一つの
流体貯蔵容器
ｂ）少なくとも一つの
フィルタを含むコンパートメント
ｃ）前記貯蔵容器およびフィルタを含むコンパートメントの入口端部に連結された流体コネクタであって、流体を前記貯蔵容器からフィルタ含有コンパートメントの入口端部へ案内可能である
流体コネクタ
ｄ）フィルタを含むコンパートメントの膜不通過物（ｒｅｔｅｎｔａｔｅ）出口端部に接続された少なくとも一つの
ダイヤフラムポンプ
ｅ）フィルタを含むコンパートメントに接続されるとともに、フィルタを含むコンパートメントから濾過流体を除去するための少なくとも一つの
流体回収ポート
・・・
３．流体回収ポートに接続された少なくとも一つの濾過ポンプをさらに備える請求項１に記載の流体濾過システム。
・・・
１３．取り外し可能な
フィルタ要素が中空繊維
・・・
２２．
流体を濾過する方法
ａ）少なくとも一つの流体貯蔵容器；
少なくとも一つのフィルタを含むコンパートメント；フィルタを含むコンパートメントの入口端部に連結されるとともに、流体を容器からフィルタ含有コンパートメントの入口端部へ案内可能な流体コネクタ；
少なくとも一つのフィルタを含むコンパートメントの膜不通過物出口端部に接続された少なくとも一つのダイヤフラムポンプであって、フィルタを含むコンパートメントの膜不通過物出口端部から流体を受容し、続いて流体をフィルタを含むコンパートメントの膜不通過物出口端部へ押し戻すことが交互に可能であるダイヤフラムポンプ；フィルタ含有コンパートメントに接続されるとともに、濾過流体をフィルタを含むコンパートメントから除去するための少なくとも一つの流体回収ポート；
で構成される
流体濾過システムを提供する工程
ｂ）
流体を容器からフィルタを含むコンパートメントに通し、続いてダイヤフラムポンプまで流すことによって流体を濾過する工程
ｃ）
流体の少なくとも一部分を、ダイヤフラムポンプからフィルタを含むコンパートメントに通して、再濾過する工程
ｄ）
任意に工程ｂおよびｃを反復する工程
ｅ）
濾過流体を濾過システムから除去する工程
２３．
ダイヤフラムポンプが貯蔵容器とダイヤフラムポンプとの間に流体の交互接線流を発生させる
２４．
流体が培養生育培地を含む
２５．
濾過流体に新しい流体を添加する工程をさらに有する
・・・
２９．流体を濾過する方法であって、
ａ）少なくとも一つのフィルタ含有コンパートメントと、フィルタを含むコンパートメントの入口端部に連結されるとともに、流体を容器からフィルタを含むコンパートメントの入口端部へ案内可能な流体コネクタと、フィルタを含むコンパートメントの膜不通過物出口端部に接続された少なくとも一つのダイヤフラムポンプであって、フィルタを含むコンパートメントの膜不通過物出口端部から流体を受容し、続いて流体をフィルタを含むコンパートメントの膜不通過物出口端部へ押し戻すことが交互に可能であるダイヤフラムポンプと、フィルタを含むコンパートメントに接続されるとともに、濾過流体をフィルタを含むコンパートメントから除去するための少なくとも一つの流体回収ポートとを有する流体濾過システムを提供する工程、
ｂ）流体を容器からフィルタを含むコンパートメントに通し、続いてダイヤフラムポンプまで流すことによって流体を濾過する工程、
ｃ）流体の少なくとも一部分を、ダイヤフラムポンプからフィルタを含むコンパートメントに通して流す工程、
ｄ）任意に工程ｂおよびｃを反復する工程、および
ｅ）濾過流体を濾過システムから除去する工程を有する方法。」（第１５欄〜第１８欄ｃｌａｉｍ）
　
（２）刊行物２：ＧＥＮＥＴＩＣ　ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ　ＮＥＷＳ，Ｖｏｌ．２０，Ｎｏ．１０，２０００，Ｐ．５２−５３
（２ａ）「このような状況下では、細胞は壊れやすくなり、剪断条件で、結果的にダメージを受け死ぬ。
　つまり、細胞の死及び溶解の最終生産物は細胞残屑及び凝集体である。このような細胞物は、培養物の生きている部分と組み合わさって次第に目詰まりとなり、灌流デバイスが損なわれる。」（第５２頁右欄第８〜１４行）
　
（２ｂ）「中空繊維システムは粒子及びゼラチンの凝集により、膜表面上が目詰まりしやすい。中空繊維膜を通ずる一方向への再循環は、中空繊維内腔の入り口を凝集体で詰まらせる。このような凝集体はサイズが大きくなり、中空繊維がブロックされるにつれ、濾過能力が低下する。」（第５３頁左欄第５〜１４行）
　
（２ｃ）「ＡＴＦシステム
　
ＡＴＦシステムシステム
ＴＭ
は、リファイン　テクノロジー（Edison,NJ）
　ダイヤフラムポンプとコントロールシステムは、中空繊維を通る交互接線流（ＡＴＦ）を作りだす。ＡＴＦは、バイオリアクターとポンプ間を行き来する流体の脈動する可逆流である。」（第５３頁左欄下から２０行〜中央欄３行）
　
（２ｄ）「このシステムはの構成とポンプ動作は、多くの利点がある。
・
低剪断
・
高い速流
・
より長い作動時間
高速な逆転流によって、中空繊維入り口に凝集体が接着するのを防ぐ
ポンプのサイクルの間の、フィルター膜を横切る圧力差の変化
この圧力差は、バックフラッシュ要素を有し、中空繊維の内壁上へのゼラチン形成を防止
　
（２ｅ）「応用
　このシステムは、
懸濁細胞（図３
高生存率を伴う高細胞濃度で培養物を保持する能力を示す
　
足場依存性の、マイクロキャリアベースの培養物
　
（２ｆ）「図３．１４リットル撹拌タンクバイオリアクター中での
ヒト化ＭＡｂの生産
　
（３）刊行物３：ＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ　ＡＮＤ　ＢＩＯＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ，ＶＯＬ．８２、Ｎｏ．７，２００３，Ｐ．７５１−７６５
（３ａ）「他の会社は、
交互接線流のオリジナル技術（ＡＴＦ、リファイン　テクノロジー、Edison，NJ,USA
　
３　対比・判断
（１）刊行物１には、流体の濾過システム（上記(1m)の１．）、及びこの濾過システムを用いた流体の濾過方法（上記(1m)の２２．〜２５．）について記載されている。
　そして、要約の欄（上記(1a)）に、流体濾過システムが、特に生物学的流体の濾過システムであり、「一端で貯蔵容器へ、もう一端でダイヤフラムポンプに接続された、フィルタを含むコンパートメントを含む」こと、「フィルタは中空繊維モジュール」であり、「ダイヤフラムポンプは、容器とポンプの間の、また、中空繊維・・・を通った、高速、交互、低剪断の接線流を生成するための手段を提供する」こと、「システムは、流体からの老廃物の容易な分離および、濾過された流体を補充するために新鮮な流体を追加することを許す」ことが記載されている。
　さらに、刊行物１には、流体濾過システムを、培養動物細胞の灌流培養に適用できることが記載され（上記(1c)、動物細胞で実施する場合、細胞が損傷しないようなダイヤフラムポンプの仕様について（上記(1g)）記載されている。
　そして、刊行物１の背景技術の欄（上記(1b)）には、「生物学的薬剤を製造する過程において、濾過は培養培地からある種の構成成分を精製し、選択的に除去し、および濃縮するために・・・実施される。また、濾過は、灌流培養において高い細胞濃度を維持することにより生産性を向上させるためにも用いられ得る。」と記載されていることから、流体濾過システムを培養動物細胞の灌流培養に適用することは、動物細胞を培養培地とともに灌流培養し、培養培地から生物学的薬剤等を分離することを意図しているといえる。そして、動物細胞を培養培地で灌流培養し、培養培地から生物学的薬剤を分離する場合、容器(2)は、バイオリアクターであることは、刊行物１（上記(1d)）に、容器(2)として、バイオリアクターが例示されていることからも明らかである。
　以上のことを総合すると、刊行物１には、以下の発明（以下、「刊行物１発明」という。）が記載されていると認められる。
　
「培養培地を含む培養動物細胞の流体の灌流培養方法であって、
　ａ）一端がバイオリアクターへ、もう一端がダイヤフラムポンプに接続された、中空繊維フィルタを含むコンパートメントを含み、ダイヤフラムポンプは、バイオリアクターとポンプの間の中空繊維フィルタを通る、高速、低剪断の交互接線流を形成し、培養動物細胞から濾過流体を分離し、濾過流体を補充するために新鮮な培養培地を追加することができる、流体濾過システムを提供する工程、
　ｂ）前記流体をバイオリアクターからフィルタを含むコンパートメントに通し、続いてダイヤフラムポンプまで流すことによって流体を濾過する工程、
　ｃ）前記流体の少なくとも一部分を、ダイヤフラムポンプからフィルタを含むコンパートメント通して流して戻す工程、
　ｄ）任意にｂ）及びｃ）工程を反復する工程、
　ｅ）濾過流体を濾過システムから除去する工程、及び
　ｆ）濾過流体を補充するために新鮮な培養培地を追加する工程
を有する方法。」
　
（２）そこで、本願発明と刊行物１発明とを比較する。
　ア　刊行物１発明の「中空繊維フィルタを含むコンパートメント」は、その構造及び機能からみて、本願発明の「中空繊維を含むフィルターモジュール」に相当する。
　
　イ　刊行物１発明の「流体濾過システム」は、「一端がバイオリアクターへ、もう一端がダイヤフラムポンプに接続された、中空繊維フィルターを含むコンパートメントを含み、ダイヤフラムポンプは、バイオリアクターとポンプの間の中空繊維フィルターを通る、高速、低剪断の交互接線流を形成し、培養動物細胞から濾過流体を分離し、濾過流体を補充するために新鮮な培養増殖培地を追加することができる、流体濾過システム」であり、このような交互接線流が形成されることにより、刊行物１（上記(1l)）には、フィルタ壁を横切る正か負の圧力差が生じ、フィルタ流を瞬間的に内腔に戻す反転が生じることが記載されていることから、中空繊維フィルタの壁、つまり膜表面に対して垂直方向の、中空繊維の内側と中空繊維の外側との間の流れが形成されることは明らかである。
  一方、本願発明の「連続的灌流培養システム」は、「中空繊維を含むフィルターモジュール」を有し、この「フィルタモジュール内の流れが、フィルタモジュールの膜表面に対して接線方向の流れ及び前記膜表面に対して垂直方向の、中空繊維の内側と中空繊維の外側との間の流れである、交互接線流」である。
　そうすると、刊行物１発明の「濾過システム」は、本願発明の「連続的灌流培養システム」と、中空繊維フィルタに対して流体の同じ流れを形成するものであり、両者は相当関係にある。
　
　ウ　刊行物１発明の「培養動物細胞」と、本願発明の「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」とは、細胞である点で共通する。
　
　エ　刊行物１発明の「培養培地」は細胞を培養するものであるから、本願発明の「細胞培養培地」に相当する。そして、刊行物１発明で灌流される、培養培地を含む培養動物細胞の流体は、培養培地に培養動物細胞が懸濁した懸濁液で、「細胞培養物」といえるものであり、灌流培養のために、流体濾過システム内に維持されることは明らかである。
　
　オ　刊行物１発明の「濾過流体」は、培養培地を含む培養動物細胞の流体が、中空繊維フィルタを含むコンパートメントに流入し、フィルタを通して流出されたものであり、フィルタを用いる目的が濾過であることから、フィルタに流入した培養培地を含む培養動物細胞よりも低い細胞密度を有することは明らかである。
　
　カ　刊行物１発明は、濾過工程を繰り返し行うものであり、また、灌流によって達成される細胞密度が、バッチプロセスで達成される細胞密度の約１倍から約２０倍であることが記載され（上記(1j)）ていること、及び濾過流体として生物学的薬剤等を得ることを意図し、「濾過は、灌流培養において高い細胞濃度を維持することにより生産性を向上させるためにも用いられ得る。」（上記(1b)）からみて、その生産性等を考えて、培養を所望の細胞密度に達するまで継続することは、技術常識から明らかである。
　
　キ　刊行物１発明は、「ｆ）濾過流体を補充するために新鮮な培養培地を追加する工程」が、各工程の最後にあるが、灌流培養は、培養培地の濾過による除去と、新しい培地の補充が、灌流中に連続して繰り返し行われるものであるから、フィルタモジュールに細胞培養物を循環させる前に行うことを規定した本願発明と異なるものではない。
　
　ク　本願発明の「細胞培養物中の、凝集細胞の凝集度合いを減少させる方法」は、「連続的灌流培養システム」により灌流培養を行いながらなされる方法である。
　そうすると、刊行物１発明の「培養培地を含む培養動物細胞の灌流培養方法」と、本願発明の「細胞培養物中の、凝集細胞の凝集度合いを減少させる方法」とは、細胞の灌流培養方法である点で共通する。
　
　したがって、両者の間には、以下の一致点及び相違点がある。
（一致点）
　細胞の灌流培養方法であって、
　細胞培養培地及び細胞の懸濁液を含む細胞培養物が、連続的灌流培養システム内に維持され、
　前記細胞培養培地が前記細胞培養物に添加され、
　前記細胞培養物が、中空繊維を含むフィルタモジュールにわたって循環され、結果として前記細胞培養物よりも低い細胞密度を有する液体の流出が生じ、
　前記フィルタモジュール内の流れが、フィルタモジュールの膜表面に対して接線方向の流れ及び前記膜表面に対して垂直方向の、中空繊維の内側と中空繊維の外側との間の流れである、交互接線流であり、
　培養を所望の細胞密度に達するまで継続する方法である点。
　
（相違点１）
　細胞が、本願発明では「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」であるのに対して、刊行物１発明では「培養動物細胞」である点。
　
（相違点２）
　細胞の灌流培養方法が、本願発明では、「細胞培養物中の、凝集細胞の凝集度合いを減少させる方法」であるのに対して、刊行物１発明では、「培養培地を含む培養動物細胞の灌流培養方法」である点。
　
（３）そこで、上記各相違点について検討する。
　ア　相違点１について
　（ア）本願発明の「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」について、本願明細書には、
・「培養時、特に灌流培養時に凝集体（いわゆる凝集細胞）を容易にかつ本質的に形成する細胞」、「灌流培養方法時の細胞の凝集、凝集体を形成する本質的な傾向を有する細胞」（本願に対応する特表２００７−５２５９８４号公報の段落【００１９】）、
・「哺乳類細胞の例としては、ＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣）細胞、ハイブリドーマ、ＢＨＫ（ベイビーハムスター腎）細胞、骨髄腫細胞、ヒト細胞、例えば、ＨＥＫ−２９３細胞、ヒトリンパ球様細胞、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞、マウス細胞、例えば、ＮＳＯ細胞が挙げられる。」（同じく段落【００２１】）、
・「好ましくは、哺乳類細胞、より好ましくは、ＣＨＯ、ＮＳＯ、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞が使用される。好ましくは、その培養（凝集細胞）時の凝集反応について周知の細胞も使用される。最も好ましくは、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞が使用される。」（同じく段落【００２２】）、
・実施例では、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）を用い、「細胞の凝集が観察されなかったと結論付けることができる。」（同じく段落【００５１】）と記載されている。
　
　ところで、「ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞」について、特表２００３−５１６７３３号公報（【０００５】）に、「以下の特徴によりＰＥＲ．Ｃ６または誘導体はウイルス産生の宿主として特に有用である：・・・規定された無血清培地（全てのヒトまたは動物血清タンパク質を欠く）中で浮遊培養物として増殖することができる・・・回転ボトル、震盪フラスコ、回転フラスコ、および生物反応器と適合していること。」と記載されていることからみて、「ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞」は、培養容器壁等の足場に付着しないと生存し増殖できない、いわゆる足場依存性細胞あるいは付着依存性細胞といわれるものとはいえない。
　また、ＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣）細胞、ハイブリドーマについては、足場依存性細胞だけでなく浮遊性細胞としても増殖可能であることは、以下のとおり本願優先日前に広く知られていたことである。
・特開平８−３０８５６０号公報（【００１３】）に、「動物細胞としては、遺伝子導入により顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）生産能を付与したチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞）（中外製薬社製）を用いた。この動物細胞は、足場依存性細胞としても浮遊性細胞としても増殖することが知られている。」と記載され、
・特表２００２−５３４９９９号公報（【請求項３】）に、「【請求項３】  前記チャイニーズハムスター卵巣細胞が、固定依存性培養物および懸濁培養物である、請求項２に記載の方法。」と記載され、
・特開平５−４１９８４号公報の（【００３０】）に、「そのような細胞は足場依存性哺乳類細胞及びゆるい付着性のハイブリドーマ細胞を包含する。付着性ハイブリドーマ細胞は、中空繊維表面に結合し又は付着するハイブリドーマ細胞である。」と記載され、
・特開平２−１１３８９６号公報（第４頁右上欄１２行）に、マウスヒトハイブリドーマであって、表面付着性が、「培養器に弱く付着する性質を有す」と記載されている。
　
　そうすると、本願発明の「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」は、培養容器壁等の足場に付着しないと生存し増殖できない、いわゆる、足場依存性細胞あるいは付着依存性細胞といわれるものに限らず、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞や浮遊性のＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣）細胞等の動物細胞が有する程度の凝集する傾向を有しているものであると解される。
　
　（イ）ところで、刊行物２（上記(2c)〜(2f)）には、刊行物１に記載されたものと同様のＡＴＦシステムを用いた応用例として、懸濁細胞を利用してヒト化ＭＡｂを製造したことが記載されている。ＭＡｂ（モノクローナル抗体）は、哺乳類細胞を融合したものであるハイブリドーマにより産生するものであるが、ハイブリドーマは、付着性のもの、ゆるい付着性のもの、付着性の殆どないものと様々であることが知られていることは、上記（ア）に記載したとおりである。
　そして、刊行物２（上記(2e)）には、「足場依存性の、マイクロキャリアベースの培養物中では、ＡＴＦシステムのモジュール性は、スクリーンモジュール（ＳＭ）で中空繊維モジュール（ＨＦＭ）を置換する」と記載されているが、足場依存性細胞の場合、付着しないと生存できないため、マイクロキャリアに付着させる必要があるが、この記載は、ＰＥＲ．Ｃ６等のように足場依存性ではなく凝集傾向を有する細胞についてまで、マイクロキャリアと、スクリーンモジュールを用いることを教示しているとはいえない。
　
　（ウ）そして、刊行物１の背景技術の欄（上記(1b)）には、「生物学的薬剤を製造する過程において、濾過は培養培地からある種の構成成分を精製し、選択的に除去し、および濃縮するために、または培地をさらなる加工の前に変性させるために実施される。また、濾過は、灌流培養において高い細胞濃度を維持することにより生産性を向上させるためにも用いられ得る。」と記載されていることから、流体濾過システムを培養動物細胞の灌流培養に適用することは、動物細胞を培養培地とともに灌流培養し、培養培地から生物学的薬剤等を分離することを意図しているといえる。
　そして、生物学的薬剤を製造するのに用いる細胞として、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞、ＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣）細胞といった、凝集傾向のある細胞は、以下のとおり、本願優先日前より広く用いられていたものである。
・特表２００３−５１６７３３号公報（【請求項１】【請求項１３】）には、ワクチン生成にＰＥＲ．Ｃ６を使用することが記載され、
・特表２００３−５２１８７７号公報（【０１８３】〜【０１８７】）には、ＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣）を用いてＭ−ＣＳＦを生成することが記載されている。
　
　（エ）そうすると、培養培地から生物学的薬剤等を分離することを意図しているといえる刊行物１発明において、培養動物細胞として、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞やＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣）細胞といった、生物学的薬剤を製造するのに良く用いられるものであり、「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」であることが知られているものを用いることは、当業者が自然に行うことといえ、格別の困難性があるとはいえいない。
　
　イ　相違点２について
　刊行物１発明の、交互接線流は、中空繊維の内腔を行き来する流れであるが、細胞を取り扱う際に、細胞凝集塊を分散させるために、ピペットで、細胞浮遊液の吸引と吐出を繰り返しおこなう、いわゆるピペッティングは、本願優先日前の慣用技術であり（例えば、特開２００３−２１９８７３号公報【００２５】の「細胞凝集塊の分散のため、液を５、６回ピペッティングする。」、特開２００１−１４９０９９号公報【０００４】の、「凝集した細胞塊を解離するために必ずピペッティング操作を行う必要がある。」との記載参照。）、細胞培養物が、ピペットの先端の細い流路を行き来することで、細凝集胞塊が分散されることは、当業者がよく知るところである。
　このようなピペッティングをよく知る当業者であれば、刊行物１発明の中空繊維の内腔を行き来する交互接線流により、凝集した細胞をばらばらに分散できることは、予測することであり、刊行物１発明の培養動物細胞として、上記のとおり、生物学的薬剤を製造するのに用いる細胞として知られた、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞やＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣）細胞とっいた、凝集傾向のある細胞を用いて、刊行物１発明の灌流培養方法を行うことにより、細胞培養物中の凝集細胞の凝集度合いを減少させる方法を実現することに格別の困難性があるとはいえない。
　
　ウ　また、刊行物３の「交互接線流のオリジナル技術（ＡＴＦ、リファイン　テクノロジー、Edison，NJ,USA）」について、「細胞培養のデータで公開されたものは、この技術の真の可能性を評価するには不足している（2002年2月）」とする記載は、２００２年２月時点での、公開データの不足を指摘したものであり、公開データの不足をもって、刊行物１及び２に記載された発明から、本願発明を容易とすることが阻害されるとすることはできない。
　
　エ　本願発明の効果につて
　本願発明の、高い細胞密度、高い細胞生存率、及び細胞の凝集が観察されないという効果は、刊行物１及び２の記載事項及び周知技術から予測し得たものであり、格別顕著なものとはいえない。
　
４　むすび
　以上のとおり、本願請求項１に係る発明は、刊行物１及び２に記載された発明、及び周知技術に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。
　したがって、その他の請求項に係る発明についての判断を示すまでもなく本願は拒絶すべきものである。
　よって、結論のとおり審決する。