【事件の表示】
　特願２００６−１０４３１２「毛乳頭細胞培養方法」拒絶査定不服審判事件〔平成１９年１０月２５日出願公開、特開２００７−２７４９４９〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
　
第１　手続の経緯 
　本願は、平成１８年４月５日の出願であって、以降の手続の経緯は以下のとおりのものである。 
 　 
　平成２３年１０月２７日付け　拒絶理由通知書 
　平成２４年　１月　４日　　　意見書・手続補正書
　平成２４年　５月　２日付け　拒絶査定 
　平成２４年　７月２０日　　　審判請求書
　
　
第２　本願発明の認定 
　本願の請求項１〜４に係る発明は、平成２４年１月４日付け手続補正書の特許請求の範囲の請求項１〜４に記載されたとおりのものと認められるところ、その請求項１に記載された発明（以下、「本願発明」という。）は、次のとおりである。
　
【請求項１】
　毛乳頭細胞の培養方法であって、
　毛乳頭細胞を塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）の存在下で培養し、継代する、及び
　毛乳頭細胞をスフェア化させる、
　ことを特徴とする、毛乳頭細胞培養方法。
　
　
第３　引用刊行物とその記載事項 
　原査定の拒絶の理由に引用された本願の出願前に頒布された刊行物１（原査定の引用文献１）、刊行物２（原査定の引用文献２）、刊行物３（原査定の引用文献３）、刊行物４（原査定の引用文献４）、刊行物５（原査定の引用文献５）、刊行物６（原査定の引用文献６）には、以下の事項が記載されている。
　また、刊行物２および３の訳文は当審によるものであり、下線は当審が付した。
 　 
　刊行物１：国際公開第２００５／０５３７６３号
　刊行物２：Wound Repair and Regeneration, 1998, Vol.6, pp.524-530
　刊行物３：Journal of Cellular Physiology, 1992, Vol.151, pp.41-49
　刊行物４：特開２００３−７０４６６号公報
　刊行物５：特開平１０−１１８１０３号公報
　刊行物６：特開平９−１４０３７７号公報
　
１　刊行物１の記載事項
（刊１ａ）「この出願の発明者らは、
ラット頬髭より分離培養された毛乳頭細胞は、繊維芽細胞増殖因子２（ＦＧＦ２）やラット足裏表皮細胞初代培養上清を培地に添加することで長期継代培養することができること、そしてこの継代培養した毛乳頭細胞初代培養が数十代の継代数を通じて毛包誘導能を保持していることを足裏の表皮と真皮間に継代毛乳頭細胞を移植することで明らかにし、既に特許出願している
　
（刊１ｂ）「実施例３
１　方法
１−１　ラット頬髭毛乳頭および真皮毛根鞘の単離培養
　６週齢の雄Fischerラットは、ジエチルエーテル麻酔により犠牲死させ、頬を切除した。切除頬はイソジン（明治製菓）と７０％エタノールで滅菌した後に、生理食塩水で洗浄した。摘出した毛包から、細密なピンセットを用いて注意深く
毛乳頭を単離し、３５mm培養ディッシュ（ベクトンディッキンソン社製）に播種した。ＦＧＦ２添加１０％牛胎児血清含有ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ１０）で２−３週間初代培養を行い、５日に１度の培地交換を行った。初代培養後、７−１０日ごとに継代培養を行った。移植には、継代数６、３９代の細胞を移植に用いた
　
（刊１ｃ）「２　結果と考察
　ラット頬髭毛乳頭細胞の発毛能に関して、グラフト・チャンバーを用いた解析を行った。継代数６（図８）または継代数３９（図９）の培養頬髭毛乳頭細胞を、ラット新生仔表皮細胞、およびラット足裏真皮由来繊維芽細胞と混合し移植した。
細胞移植１週間後、移植細胞由来の皮膚が形成されていた。細胞移植３週間後、６継代の培養頬髭毛乳頭細胞を移植した部位で発毛が確認されたが（図８−ａ）、３９継代の細胞では発毛が観察されなかった（図９−ａ）。しかし、両組織のＨＥ染色像の観察から、毛包が確認され（図８−ｂ、図９−ｂ）、３９継代の細胞に発毛能はないが毛包誘導能はあることが確認された
　
２．刊行物２の記載事項
（刊２ａ）「ROLE OF DERMAL PAPILLAE IN HAIR FORMATION
・・・
　Fibroblast growth factors (FGFs) also stimulated the growth of dermal papilla cells. Papilla cells cultured in medium containing FGF-1 or FGF-2, as well as those cultured with keratinocyte conditioned medium, did not lose the hair-forming activity after longterm cultivation (Inamatsu et al., unpublished results). As the dermal papilla cells do not actively proliferate in vivo, the roles of the keratinocyte-derived factor(s) and FGFs in vivo are mainly maintaining the hair-forming capability rather than stimulating growth of dermal papilla cells.」（５２６頁左欄下から７行〜５２７頁左欄４２行） 
（訳文）「毛髪形成における毛乳頭の役割
・・・
　繊維芽細胞増殖因子（FGFs）も毛乳頭細胞の増殖を刺激した。角化細胞調整培地で培養したものと同様に、FGF-1あるいは
FGF-2を含む培地で培養された乳頭細胞は、長期間培養した後でも毛髪形成活性を失わなかった
　
３．刊行物３の記載事項
（刊３ａ）「To understand better the molecular nature of the epithelial-mesenchymal interactions that govern folliculogenesis and hair growth, we have studied the behavior of cultured rat dermal papilla cells (rDP), the mesenchymal component of the hair follicle. Basic fibroblast growth factor (bFGF) and platelet-derived growth factor (PDGF) both potentiated the growth of rDP in culture, and transforming growth factor-β(TGF-β) inhibited rDP proliferation.」（４１頁要約１〜６行）
（訳文）「濾胞形成と育毛を管理する上皮−間葉系相互作用の分子特性をより良く理解するために、我々は培養されたラット毛乳頭細胞（rDP）の行動、毛包の間葉系成分を調査した。
塩基性繊維芽細胞増殖因子（bFGF）と血小板由来増殖因子（PDGF）が共に培地におけるrDPの増殖を増強し
　
４．刊行物４の記載事項
（刊４ａ）「【０００８】そこで、本発明が解決すべき課題は、可能な限り、実際の毛包や毛球部の状態を反映し得る、育毛剤の新たな評価手段を提供し得る細胞培養素材を提供し、かかる培養素材を用いた育毛剤の評価手段を提供することにある。
【０００９】
【課題を解決するための手段】本発明者は、発毛機序を念頭に置きつつ、育毛剤の新たな評価手段や、新たな毛髪関連薬剤のスクリーニング手段を提供し得る新たな細胞培養素材について鋭意検討を重ねた。その結果、
毛包間葉系細胞の細胞集塊の周りに、細胞選別によって上皮系細胞が細胞接着した状態の二層構造を持つ細胞集塊を形成させることができれば、ヒトの毛球部様構造が再構築された状態で、育毛や発毛効果を検討可能な細胞培養素材を提供可能であることを見出し、本発明を完成した
【００１０】すなわち、本発明は、毛包間葉系細胞の細胞集塊の外側に、上皮系細胞が細胞接着している、人工毛球部（以下、本人工毛球部ともいう）を提供すると共に、本人工毛球部を用いて、養毛作用等を有する、毛髪に作用する薬剤を評価する方法をも提供する発明である。」
　
（刊４ｂ）「【００１３】上皮系細胞としては、典型的には、外毛根鞘細胞（以下、ＯＲＳｃということもある）を挙げることができるが、毛芽細胞、マトリックス細胞、ジャーミネイティブ細胞、表皮角化細胞等であってもよい。また、
毛包間葉系細胞としては、典型的には毛乳頭細胞（以下、ＤＰｃということもある）である
　
（刊４ｃ）「【００３０】まず、本製造方法において用いられる培養器は、特に限定されないが、静置あるいは旋回培養された細胞が、自ら細胞集塊を作りやすい形態および材質のものを選択することが好ましい。一般的には、自然重力によって、細胞が一か所に集中しやすい形状の底面、具体的には、例えば、丸底型又はすり鉢型等の形状の底面を有するウエルを培養部として有する培養器が好適である。また、かかる培養部のウエル面に細胞接着防止用のコーティング処理が施されていることが、特に、好適である。培養部の材質は、通常の細胞培養を行う培養部に用いられる材質、例えば、プラスチックやガラス等を用いることが可能であり、特に、限定されるものではない。現在、
細胞集塊の調製に適した培養プレート〔例えば、スミロンセルタイト  スフェロイド９６Ｕプレート（Sumitomo Bakelit co., 製）等が、本製造方法を行うのに好適な培養器として挙げられる〕
　
（刊４ｄ）「【００５９】
本人工毛球部の製造
上記により得られた初代毛乳頭培養細胞を、Type I collagen コートした７５cm2培養フラスコ中、１０％ＦＢＳ添加ＤＭＥＭ(GibcoBRL:11965-092)培地で３回継代培養（３７℃、５％ＣＯ2）し、セルバンカーII（ダイアヤトロン社：ZCB-201(100)）を用いて、液体窒素中で凍結保存を行った。
【００６０】また、上記により得られた初代外毛根鞘細胞を、Type I collagen コートした７５cm2培養フラスコ中、Keratinocyte-SFM (GibcoBRL:11965-011) 培地で３回継代培養（３７℃、５％ＣＯ2）し、セルバンカーII（ダイアヤトロン社：ZCB-201(100)）を用いて、液体窒素中で凍結保存を行った。
【００６１】次に、凍結保存したＤＰｃを解凍し、氷冷したKeratinocyte-SFM培地で洗浄後、同培地の中に再分散させ、血球計算板を用いて細胞密度を計測した。次いで、
細胞の細胞密度を、５×１０
4
Cells/ml に調整し、得られたＤＰｃ懸濁 Keratinocyte SFM(+)培地を40μl（2 X 10
3
cells/well）を、スミロンセルタイト スフェロイド９６Ｕプレート（Sumitomo Bakelit co., 製）の各ウエルに播種し、１日間培養した（３７℃、５％ＣＯ
2
）。ＤＰc の細胞集塊が形成されていることを確認し
　
（刊４ｅ）「【００９０】
【発明の効果】本発明により、可能な限り、実際の毛包や毛球部の状態を反映し得る、育毛剤の新たな評価手段を提供し得る細胞培養素材と、この培養素材を用いた育毛剤の評価手段が提供される。」
　
５．刊行物５の記載事項
（刊５ａ）「【請求項７】  人工皮膚の真皮層を構成する支持体の中またはその上に、皮膚付属器官を構成する細胞の凝集塊を置き、必要により培養し、さらにその表面に表皮角化細胞を播種し、次いで培養することを特徴とする皮膚付属器官様構造体を含む人工皮膚の製造方法。
・・・
【請求項１０】  皮膚付属器官を構成する細胞の凝集塊が、多細胞性球状凝集塊（スフェロド）である請求項７項記載の人工皮膚の製造方法。
【請求項１１】  皮膚付属器官を構成する細胞が毛乳頭細胞、乳腺細胞または汗腺細胞である請求項１０記載の人工皮膚の製造方法。
【請求項１２】  皮膚付属器官様構造体が毛包様構造体である請項７記載の人工皮膚の製造方法。」
　
（刊５ｂ）「【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、このような従来の問題点を解消すべく皮膚付属器官様構造体を含む人工皮膚を提供することを課題とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者は、上記課題を解決するため鋭意検討を行った結果、表皮角化細胞からなる表皮層を構成要素として有する人工皮膚に、細胞凝集塊を組み込むことにより皮膚付属器官様構造体を形成させた新規な人工皮膚を見出し、本発明を完成するに至った。」
　
（刊５ｃ）「【００１８】
【実施例】次に、本発明を具体的に実施例にて説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
参考例１
実体顕微鏡下でラット頬髭毛包より毛乳頭を分離し、コラーゲンでコート処理した３５ｍｍプラスチックシャーレ（コースター社製）を用い、１０％牛血清含有ダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）にて毛乳頭細胞の分離培養を行った。細胞がコンフレントに達したところで継代し、７〜８継代目のものについて、同培地にて細胞を回収し、毛乳頭細胞懸濁液を得た。
毛乳頭細胞懸濁液をスフェロイド培養用９６穴プレート（住友ベークライト社製）に細胞が０．５〜２ｘ１０
4
個／穴になるよう播種し、３７℃、５％ＣＯ
2
下で３〜５日間培養し、毛乳頭細胞スフェロイドを作製した
　
（刊５ｄ）「【００２０】
実施例１
トランスウェルから培地を抜き取った後、作製した毛乳頭細胞スフェロイドを約１０個ずつ、該コラーゲンゲル上に播種した。これを３７℃、５％ＣＯ2下で約１時間静置させることにより、スフェロイドをコラーゲンゲルに接着させた。次いで表皮角化細胞の播種、培養はベルらの方法（Parenteau,N.L.,etal.,J.Cellular Biochem.,45,245-,1991）に従い、行った。すなわち、オルガノジェネシス社から購入したヒト表皮角化細胞をＣａ無添加ＤＭＥＭ：ハムＦ１２培地＝３：１を基礎とする培地、エピダーマリゼイション用培地（東洋紡社製）に懸濁して細胞懸濁液を得た。上記スフェロイドを接着させたコラーゲンゲル上に該細胞懸濁液を、細胞が０．５〜１×１０5個／ｃｍ2になるように添加した。次いで、同培地をトランスウェルに静かに添加し、３７℃、１０％ＣＯ2下で３〜５日間培養し、表皮角化細胞を充分、伸展させた。次に、Ｃａ無添加ＤＭＥＭ：ハムＦ１２培地＝１：１を基礎とする培地、メインテナンス用培地（東洋紡社製）を、真皮層が培養液下で、かつ、表皮角化細胞が空気中に出るよう添加し、３７℃、１０％ＣＯ2下で１０〜１５日間培養した。その結果、毛包様構造体を含む人工皮膚が得られた。」
　
（刊５ｅ）「【００２２】
【発明の効果】本発明の人工皮膚は、生体組織と形態的におよび／あるいは生化学的に類似した皮膚付属器官様構造体を含む。したがって、これを動物実験代替のモデル系として利用することにより、より生体に近い様態で、薬効試験、安全性試験を行うことができる。さらに、移植用の生体材料としても好適に用いることができる。」
　
６．刊行物６の記載事項
（刊６ａ）「【請求項１】（Ａ）
ヒト毛乳頭細胞を培養してスフエロイドを作製する工程
（Ｂ）前記スフエロイドをラツト由来のフツトパツドの表皮と真皮との間に挿入する工程、
（Ｃ）工程（Ｂ）で調製したフツトパツド片をヌードマウスの腎臓とその被膜との間に移植する工程、ならびに
（Ｄ）工程（Ｃ）による移植動物を飼育して、前記移植フツトパツド片内で毛包を形成させる工程、を含んでなるヒト毛乳頭培養細胞からの毛包の誘導方法。」
　
（刊６ｂ）「【０００６】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、ヒトの頭髪の発毛成長を検討するには、現実のヒト頭髪のヘアサイクルにより近似した試験系を入手することが必要であろう。従つて、本発明の目的は、前記試験系として使用できる手段を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、ヒト毛乳頭培養細胞は、それらをヌードマウスに移植した場合に、その培養状態により毛包の誘導能に差異を確認できることを見い出した。換言すれば、このような差異を利用すれば、ヒト頭髪の発毛に重要な役割を担つている毛乳頭細胞に対する各種環境の影響を調べることが可能になり、延いてはヒト頭髪の発毛や育毛に影響を及ぼす要因を検討できる可能性がある。」
　
（刊６ｃ）「【００１０】また、別の態様の本発明としては、ヒト毛乳頭細胞から毛包を誘導するためのヒト毛乳頭培養細胞であつて、ヒトの頭皮に由来する単離毛乳頭を栄養培地で培養して得ることのできる細胞またはスフエロイド（丸い細胞塊）を形成した細胞が提供される。かかる培養細胞は、各種環境、例えば特定の薬物等にさらした後、上記毛包の誘導方法に供することにより、それらの環境が毛包の誘導を促進または阻害するかを検出するのに使用できるであろう。」
　
（刊６ｄ）「【００２７】（スフエロイド作製）毛包誘導能を調べたい
毛乳頭細胞
丸い細胞塊を形成した。本発明では、これをスフエロイドと称している
・・・
【００２９】（スフエロイドのフツトパツドへの挿入）エーテル処理したラツト（wister タイプ）から、イソジンで殺菌したフツトパツドを解剖ばさみで切り出した。これを消毒用エタノールで２回洗い、ＰＢＳで３回洗つた後、ＤＭＥＭに浸した培養皿に取り、実体顕微鏡下で筋組織、余分な結合組織を除いた。その後、２ｍｍ×３ｍｍほどの大きさに切り分けた。小さく切つたフツトパツド片を、ＤＭＥＭに溶かした５００Ｕ／ｍｌのデイスパーゼ（三光純薬）溶液に３７℃で３分間処理した後に、先の尖つたピンセツトで表皮層と真皮層との間に穴をあけ、スフエロイドを挿入した。」
　
（刊６ｅ）「【００３６】
【発明の効果】本発明によれば、ヒトの頭髪の発毛または育毛試験に利用可能な、ヒト毛乳頭培養細胞からの毛包の誘導方法、かかる毛包の誘導に用いるための前記培養細胞およびヒト毛乳頭に由来する毛包を誘導することのできるヌードマウスが提供できる。」
　
　
第４　当審の判断 
１．刊行物１に記載された発明 
　刊行物１には、「ラット頬髭より分離培養された毛乳頭細胞は、繊維芽細胞増殖因子２（ＦＧＦ２）やラット足裏表皮細胞初代培養上清を培地に添加することで長期継代培養することができること、そしてこの継代培養した毛乳頭細胞初代培養が数十代の継代数を通じて毛包誘導能を保持していることを足裏の表皮と真皮間に継代毛乳頭細胞を移植することで明らかにし、既に特許出願している」（刊１ａ）と記載されており、
具体的に、「
毛乳頭を単離し、３５mm培養ディッシュ（ベクトンディッキンソン社製）に播種した。ＦＧＦ２添加１０％牛胎児血清含有ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ１０）で２−３週間初代培養を行い、５日に１度の培地交換を行った。初代培養後、７−１０日ごとに継代培養行った
「細胞移植１週間後、移植細胞由来の皮膚が形成されていた。細胞移植３週間後、６継代の培養頬髭毛乳頭細胞を移植した部位で発毛が確認されたが（図８−ａ）、３９継代の細胞では発毛が観察されなかった（図９−ａ）。しかし、両組織のＨＥ染色像の観察から、毛包が確認され（図８−ｂ、図９−ｂ）、３９継代の細胞に発毛能はないが毛包誘導能はあることが確認された」（刊１ｃ）ことが記載されている。
　
　してみると、刊行物１には、「毛乳頭を単離し、培養ディッシュに播種し、ＦＧＦ２を含む培地で初代培養を行い、初代培養後、７−１０日ごとに継代することを特徴とする、毛乳頭細胞培養方法。」に係る発明（以下、「刊行物１発明」という。）が記載されている。
　
２．本願発明と刊行物１発明の対比
　繊維芽細胞増殖因子２（ＦＧＦ２）が本願発明の「塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）」であることは当業者に明かである（必要であれば、例えば、「免疫学辞典（第２版）」（2001年12月3日、株式会社東京化学同人発行）３７５頁右欄「繊維芽細胞増殖因子」の項目を参照）。
　
　したがって、本願発明と刊行物１発明を対比すると、
「毛乳頭細胞の培養方法であって、毛乳頭細胞を塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）の存在下で培養し、継代することを特徴とする、毛乳頭細胞培養方法」という点で一致し、以下の相違点を有する。 
 　
（相違点） 
　本願発明では「毛乳頭細胞をスフェア化させる」のに対して、刊行物１発明ではそのような記載がない点。
　 
３．相違点に対する判断
（１）本願明細書の記載に基づく本願発明の解釈
　本願明細書には、本願発明の毛乳頭細胞培養方法について、
「【００１６】
　
本発明の培養方法は、上記培養をｂＦＧＦの存在下で行なうことを特徴とする
【００１７】
　
これらの培地での単離毛乳頭細胞の培養は
たとえば10回以上の継代、所望量が多い場合は好ましくは15回以上、さらに好ましくは20回以上まで継代を行なうことができる
【００１８】
　スフェア形成は、飽和状態になるまで細胞を増殖させ、細胞を剥離した後、培地で懸濁させ、この細胞懸濁物を非接着処理した培養皿中の培地上に捲き、数日放置することにより丸い細胞塊(スフェロイド)の細胞集合体を形成することで行う。好ましくは、スフェア形成はｂＦＧＦの非存在下で行うが、ｂＦＧＦ存在下でも十分にスフェア形成は達成される。なお、
スフェア形成を行う時期は特に制限されるものではなく、最後の継代を終えた培養細胞に対し行ってよい
と記載されており、
段落【００１６】【００１７】から、本願発明の毛乳頭細胞培養方法において、ｂＦＧＦを培地に添加することにより20回以上の継代が可能になることが理解できる。
　このことは、刊行物１発明においてｂＦＧＦの存在下で３９代の継代が行われたこと、並びに刊行物２（刊２ａ）の「FGF-2を含む培地で培養された乳頭細胞は、長期間培養した後でも毛髪形成活性を失わなかった」および刊行物３（刊３ａ）の「塩基性繊維芽細胞増殖因子（bFGF）と血小板由来増殖因子（PDGF）が共に培地におけるrDPの増殖を増強し」たとの記載とも整合しているから、当業者であれば、段落【００１６】【００１７】の記載はここで完結したものとして理解できる。
　
　一方、段落【００１８】の「スフェア形成」については、「最後の継代を終えた培養細胞に対し行ってよい」との記載から、本願発明において、「毛乳頭細胞を塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）の存在下で培養し、継代する」と「毛乳頭細胞をスフェア化させる」とはそれぞれ独立した工程であって、継代する前の毛乳頭細胞がスフェア化されていなくともよいと理解できる。
　換言すると、本願発明は、「毛乳頭細胞を塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）の存在下で培養し、継代する」工程と「毛乳頭細胞をスフェア化させる」工程が時系列的に前後となる独立した一連の工程である場合を含んでいると解釈できる。
　こうした解釈は、下記「６．」で後述するように、段落【００２４】に記載された「スフェア化」に係る唯一の実施例とも整合している。
　
（２）刊行物４〜６に記載された発明
　刊行物４には、毛包間葉系細胞（典型的には毛乳頭細胞（ＤＰｃ））（刊４ｂ）を細胞接着防止用のコーティング処理が施されたスミロンセルタイト  スフェロイド９６Ｕプレート（Sumitomo Bakelit co., 製）（刊４ｃ）で培養することによって細胞集塊（スフェロイド）を形成し（刊４ｄ）、毛包間葉系細胞の細胞集塊（スフェロイド）の周りに、上皮系細胞が細胞接着した状態の二層構造を持つ細胞集塊を形成させて育毛や発毛効果の検討可能な細胞培養素材を提供したこと（刊４ａ、刊４ｅ）が記載されている。
　
　また、刊行物５には、「毛乳頭細胞懸濁液をスフェロイド培養用９６穴プレート（住友ベークライト社製）に細胞が０．５〜２ｘ１０4個／穴になるよう播種し、３７℃、５％ＣＯ2下で３〜５日間培養し、毛乳頭細胞スフェロイドを作製し」（刊５ｃ）、表皮角化細胞を添加して培養することにより「毛包様構造体を含む人工皮膚が得られた」（刊５ｄ）（刊５ｅ）ことが記載されている。
　
　さらに、刊行物６には、毛乳頭細胞を飽和状態になるまで細胞を増殖させて細胞を剥離させ、これを５〜１０回メスピペツトで懸濁させたのち、この懸濁液を２ｍｌほどずつアガロースコートデイツシユに入れ、２日間放置し、スフエロイドと称する丸い細胞塊を形成したこと（刊６ｄ）、このスフエロイドをラットのフットパッド片を表皮層と真皮層との間に挿入しヌードマウスに移植したところ毛包様構造物が得られたこと（刊６ｅ）が記載されている。
　
　してみると、毛乳頭細胞を用いて毛包様構造物を製造するために、毛乳頭細胞の細胞集塊（スフェロイド）を形成することは、刊行物４〜６にも記載されているように、本出願前の公知技術であったと認められる。
　
（３）容易想到性
　したがって、刊行物４〜６と同じように毛乳頭細胞を用いて毛包を誘導することを目的とした刊行物１発明において、刊行物４〜６に記載された毛乳頭細胞の細胞集塊（スフェロイド）を形成する公知技術を適用することは、当業者であれば容易に想到し得たことである。
　
４．本願発明の効果について 
　刊行物１〜３には、繊維芽細胞増殖因子２（ＦＧＦ２）／塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）を含む培地で毛乳頭細胞を培養すれば、増殖能が失われず継代できることが記載されており、刊行物４〜６には、毛乳頭細胞を細胞集塊（スフェロイド）とする、すなわち本願発明の「スフェア化」したのちに、毛包を製造することが記載されている。
　したがって、本願発明の効果は、本願明細書の記載を参酌しても、刊行物１〜６の記載から予測される範囲内のものであり、格別顕著なものではない。
　
５．小括
　よって、本願発明は、刊行物１〜６に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものである。 
　
６．請求人の主張について 
　請求人は、審判請求書において、
「引例４〜６にはスフェア化と毛乳頭細胞の継代数との関係については何ら記載されていないし、またスフェア化が毛乳頭細胞の継代数の増大を可能にすることの示唆さえない。
　まず、引例４（特開2003-70466）と引例５（特開平10-118103）には毛乳頭細胞の培養によりスフェア化技術を利用したことしか開示しておらず、毛乳頭細胞が継代を重ねるごとにその誘導能やその他の性質が変化することすら記載されていない。
　引例６（特開平9-140377）は毛乳頭細胞の継代を重ねるごとにその誘導能が低下することが記載され、問題提起されている。しかしながら、毛乳頭細胞をスフェア化により継代数の増大が可能になる、あるいは細胞分裂時間が短縮されることを示すデータは何ら示されておらず、また記載もない。」
と主張しているので、念のため、以下に検討する。
　
　まず、「スフェア化と毛乳頭細胞の継代数との関係については何ら記載されていないし、またスフェア化が毛乳頭細胞の継代数の増大を可能にすることの示唆さえない」との指摘に関して、本願発明において、「毛乳頭細胞をスフェア化させる」との発明特定事項と「継代する」との発明特定事項を関連づけた記載はなく、かつ請求人が主張する「スフェア化」した状態で「継代」することは記載されていないので、特許請求の範囲には請求人の主張の根拠となる記載がない。
　
　ここで、上記「３．（１）」で述べたように、本願明細書には、ｂＦＧＦを添加した培地で「20回以上まで継代を行なうことができる」（段落【００１７】）と記載されている一方で、「スフェア形成を行う時期は特に制限されるものではなく、最後の継代を終えた培養細胞に対し行ってよい」（段落【００１８】）と記載されており、本願発明の「毛乳頭細胞をスフェア化させる」との発明特定事項は、「継代する」との発明特定事項とは独立した工程と解釈される。
　そして、上記「３．（１）」で述べたように、本願明細書（段落【００１６】【００１７】）においては、ｂＦＧＦを培地に添加することで20回以上の継代が既に達成できており、請求人が主張するように「スフェア化」が長期の「継代」に必須であるように、本願明細書の記載を読み取ることは困難である。
　また、本願明細書中の実施例においても、「培養期間中、増殖した毛乳頭細胞は0.25％trypsin-EDTA処理を行い、細胞を回収した後、２×105cells/100mm培養皿の条件で継代し更に培養を継続した。培地交換は４日に１回行い、ｂＦＧＦ添加は培地交換・継代の時に行った。培養皿に細胞がコンフルエント状態になる前に細胞を回収して、培養皿あたりの総細胞数を計測した。
最終的に培養後回収した細胞を１×10
5
個/ml濃度に分散し、スフェア形成のために本細胞分散液0.1mlを低細胞接着性の丸底96穴プレート(Nunc社)に播種・静置培養した
　したがって、新たに「スフェア化」した状態で「継代」することを特許請求の範囲に追加することもできない。
　
　「スフェア化」の技術的意義に関しては、むしろ、段落【００２７】の【表１】によれば、平板培養による最後の継代を終えた培養細胞に対して、スフェア形成を行った場合（「移植細胞」が「スフェア」と表示）とスフェア形成を行わなかった場合（「移植細胞」が「平板」と表示）との比較において、スフェア形成を行った場合に「毛包誘導」が認められたとの効果が記載されるだけであって、請求人が主張するような、「スフェア化」することにより長期「継代」が可能となることを示唆する実験結果は本願明細書中に存在しない。
　なお、スフェア形成を行った場合に「毛包誘導」が認められることは、上記「３．（２）」に述べたように、刊行物４〜６に記載された事項と技術的に相違はない。
　
　以上、請求人の主張は、本願の特許請求の範囲および明細書に根拠となる記載がないので、考慮することができない。
　
　
第５　むすび 
　以上のとおりであるから、本願発明は、刊行物１〜６に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものであるので、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。 
　したがって、他の請求項について検討するまでもなく、本願は拒絶すべきものである。
　よって、結論のとおり審決する。