【手続補正書】
【提出日】平成27年4月24日(2015.4.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｍｉＲ−２１（配列番号１）と相補的である修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であって、前記修飾オリゴヌクレオチドは：
ａ）１６〜２２個連結したヌクレオシドからなり、且つ前記修飾オリゴヌクレオチドは５’から３’方向に以下のヌクレオシドパターンＩで少なくとも１６個連続するヌクレオシドを含み：
（Ｒ）Ｘ−ＮＢ−ＮＱ−ＮＱ−ＮＢ−（ＮＱ−ＮＱ−ＮＱ−ＮＢ）３−ＮＱ−ＮＺ 
式中、Ｒは各々独立に非二環式ヌクレオシドであり；Ｘは１〜４であり；
ＮＢは各々独立に二環式ヌクレオシドであり；
ＮＱは各々独立に非二環式ヌクレオシドであり；かつ
ＮＺは修飾ヌクレオシドであり、且つ
ｉ）二環式ヌクレオシドは各々、非メチル化核酸塩基を含む、若しくは
ｉｉ）２個以下の非二環式ヌクレオシドは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり、且つ非二環式ヌクレオシドは互いにβ−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドである、又は
ｂ）１６〜１９個連結したヌクレオシドからなり、かつ前記修飾オリゴヌクレオチドは５’から３’方向に以下のヌクレオシドパターンＩＩで少なくとも１６個連続するヌクレオシドを含み：
ＮＭ−ＮＢ−ＮＱ−ＮＱ−ＮＢ−（ＮＱ−ＮＱ−ＮＱ−ＮＢ）３−ＮＱ−ＮＺ
式中、ＮＭは独立に、二環式ヌクレオシドではない修飾ヌクレオシドであり；
ＮＢは各々独立に二環式ヌクレオシドであり；
ＮＱは各々独立に非二環式ヌクレオシドであり；かつ
ＮＺは修飾ヌクレオシドであり、且つ
ｉ）二環式ヌクレオシドは各々、非メチル化核酸塩基を含む、若しくは
ｉｉ）２個以下の非二環式ヌクレオシドは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり、且つ非二環式ヌクレオシドは互いにβ−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドである、又は
ｃ）１６〜１９個連結したヌクレオシドからなり、かつ前記修飾オリゴヌクレオチドは５’から３’方向に以下のヌクレオシドパターンＩＩＩで少なくとも１６個連続するヌクレオシドを含み：
（Ｒ）Ｘ−ＮＢ−ＮＱ−ＮＱ−ＮＢ−（ＮＱ−ＮＱ−ＮＱ−ＮＢ）３−ＮＹ−ＮＺ
式中、Ｒは各々、非二環式ヌクレオシドであり；Ｘは１〜４であり；
ＮＢは各々、二環式ヌクレオシドであり；
ＮＱは各々、非二環式ヌクレオシドであり；
ＮＹは修飾ヌクレオシドまたは非修飾ヌクレオシドであり；かつ
ＮＺは、修飾ヌクレオシドであり、且つ
ｉ）二環式ヌクレオシドは各々、非メチル化核酸塩基を含む、若しくは
ｉｉ）２個以下の非二環式ヌクレオシドは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり、且つ非二環式ヌクレオシドは互いにβ−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドである、又は
ｄ）１６〜１９個連結したヌクレオシドからなり、かつ前記修飾オリゴヌクレオチドは５’から３’方向に以下のヌクレオシドパターンＩＶで少なくとも１６個連続するヌクレオシドを含み：
ＮＭ−ＮＢ−ＮＱ−ＮＱ−ＮＢ−（ＮＱ−ＮＱ−ＮＱ−ＮＢ）３−ＮＹ−ＮＺ
式中、ＮＭは二環式ヌクレオシドではない修飾ヌクレオシドであり；
ＮＢは各々、二環式ヌクレオシドであり；
ＮＱは各々、非二環式ヌクレオシドであり；
ＮＹは修飾ヌクレオシドまたは非修飾ヌクレオシドであり；かつ
ＮＺは修飾ヌクレオシドであり、且つ
ｉ）二環式ヌクレオシドは各々、非メチル化核酸塩基を含む、若しくは
ｉｉ）２個以下の非二環式ヌクレオシドは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり、且つ非二環式ヌクレオシドは互いにβ−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドである、又は
ｅ）１６〜１９個連結したヌクレオシドからなり、かつ前記修飾オリゴヌクレオチドは５’から３’方向に以下のヌクレオシドパターンＶで少なくとも１６個連続するヌクレオシドを含み：
ＮＭ−ＮＢ−（ＮＱ−ＮＱ−ＮＢ−ＮＢ）４−ＮＺ
式中、ＮＭは二環式ヌクレオシドではない修飾ヌクレオシドであり；
ＮＢは各々、二環式ヌクレオシドであり；
ＮＱは各々、非二環式ヌクレオシドであり；かつ
ＮＺは修飾ヌクレオシドである
、化合物。
【請求項２】
前記修飾オリゴヌクレオチドはヌクレオシドパターンＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶまたはＶの少なくとも１７個、少なくとも１８個、少なくとも１９個、少なくとも２０個、少なくとも２１個または２２個の連続するヌクレオシドを含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記修飾オリゴヌクレオチドの前記核酸塩基配列は、ｍｉＲ−２１（配列番号１）の核酸塩基配列と少なくとも９０％相補的、少なくとも９５％相補的、または１００％相補的である、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
二環式ヌクレオシドは各々ＬＮＡヌクレオシド、ｃＥｔヌクレオシド及びＥＮＡヌクレオシドから独立に選択される、請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物。
【請求項５】
二環式ヌクレオシドは各々Ｓ−ｃＥｔヌクレオシドである、請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物。
【請求項６】
二環式ヌクレオシドは各々ＬＮＡヌクレオシドである、請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物。
【請求項７】
非二環式ヌクレオシドは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシド及び２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドから独立に選択される、請求項１〜６の何れか１項に記載の化合物。
【請求項８】
非二環式ヌクレオシドは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドである、請求項１〜６の何れか１項に記載の化合物。
【請求項９】
非二環式ヌクレオシドは各々２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドである、請求項１〜６の何れか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
前記修飾オリゴヌクレオチドはヌクレオシドパターンＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶまたはＶの１６個、１７個、１８個、１９個、２０個、２１個または２２個連結したヌクレオシドからなる、請求項１〜９の何れか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
少なくとも１つのシトシンは５−メチルシトシンであるか、または、シトシンは各々５−メチルシトシンである、請求項１〜１０の何れか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
ａ）前記修飾オリゴヌクレオチドがクレーム１（ａ）に記載の修飾オリゴヌクレオチドであって、
ｉ）Ｒは４個連結したヌクレオシドＮＲ１−ＮＲ２−ＮＲ３−ＮＲ４からなり、式中、ＮＲ１は２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり、かつＮＲ２−ＮＲ３−ＮＲ４は各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；
ＮＢは各々Ｓ−ｃＥｔヌクレオシドであり；
ＮＱは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；かつ
ＮＺは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドである；
ｉｉ）Ｒは各々２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；Ｘは１であり；
ＮＢは各々Ｓ−ｃＥｔヌクレオシドであり；
ＮＱは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；かつ
ＮＺは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドである；
ｉｉｉ）Ｒは各々２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；Ｘは１であり；
ＮＢは各々Ｓ−ｃＥｔヌクレオシドであり；
ＮＱは各々２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；かつ
ＮＺは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドである；
ｉｖ）Ｒは各々２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；Ｘは１であり；
ＮＢは各々Ｓ−ｃＥｔヌクレオシドであり；
ＮＱは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；かつ
ＮＺはＳ−ｃＥｔヌクレオシドである；
ｖ）Ｒは各々２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；Ｘは１であり；
ＮＢは各々ＬＮＡヌクレオシドであり；
ＮＱは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；かつ
ＮＺは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドである；或いは
ｖｉ）Ｒは各々２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；Ｘは１であり；
ＮＢは各々ＬＮＡヌクレオシドであり；
ＮＱは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；かつ
ＮＺはＬＮＡヌクレオシドである、又は
ｂ）前記修飾オリゴヌクレオチドがクレーム１（ｂ）に記載の修飾オリゴヌクレオチドであって、
ｉ）ＮＭは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；
ＮＢは各々Ｓ−ｃＥｔヌクレオシドであり；
ＮＱは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；かつ
ＮＺは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドである；
ｉｉ）ＮＭは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；
ＮＢは各々Ｓ−ｃＥｔヌクレオシドであり；
ＮＱは各々２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；かつ
ＮＺは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドである；
ｉｉｉ）ＮＭは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；
ＮＢは各々Ｓ−ｃＥｔヌクレオシドであり；
ＮＱは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；
Ｎは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；かつ
ＮＺはＳ−ｃＥｔヌクレオシドである；
ｉｖ）ＮＭは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；
ＮＢは各々ＬＮＡヌクレオシドであり；
ＮＱは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；かつ
ＮＺは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドである；或いは
ｖ）ＮＭは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；
ＮＢは各々ＬＮＡヌクレオシドであり；
ＮＱは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；かつ
ＮＺはＬＮＡヌクレオシドである、又は
ｃ）前記修飾オリゴヌクレオチドがクレーム１（ｃ）に記載の修飾オリゴヌクレオチドであって、
ｉ）Ｒは各々２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；Ｘは１であり；
ＮＢは各々Ｓ−ｃＥｔヌクレオシドであり；
ＮＱは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；
ＮＹはβ−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；かつ
ＮＺは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドである；
ｉｉ）Ｒは各々２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；Ｘは１であり；
ＮＢは各々Ｓ−ｃＥｔヌクレオシドであり；
ＮＱは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；
ＮＹはβ−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；かつ
ＮＺはＳ−ｃＥｔヌクレオシドである；或いは
ｉｉｉ）Ｒは各々２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；Ｘは１であり；
ＮＢは各々Ｓ−ｃＥｔヌクレオシドであり；
ＮＱは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；
ＮＹはＳ−ｃＥｔヌクレオシドであり；かつ
ＮＺはＳ−ｃＥｔヌクレオシドである、又は
ｄ）前記修飾オリゴヌクレオチドがクレーム１（ｄ）に記載の修飾オリゴヌクレオチドであって、
ｉ）ＮＭは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；
ＮＢは各々Ｓ−ｃＥｔヌクレオシドであり；
ＮＱは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；
ＮＹはβ−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；
ＮＺは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドである；かつ
ｉｉ）ＮＭは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；
ＮＢは各々Ｓ−ｃＥｔヌクレオシドであり；
ＮＱは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；
ＮＹはβ−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；かつ
ＮＺはＳ−ｃＥｔヌクレオシドである；
ｉｉｉ）ＮＭは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；
ＮＢは各々Ｓ−ｃＥｔヌクレオシドであり；
ＮＱは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；
ＮＹはＳ−ｃＥｔヌクレオシドであり；かつ
ＮＺはＳ−ｃＥｔヌクレオシドである、又は
ｅ）前記修飾オリゴヌクレオチドがクレーム１（ｅ）に記載の修飾オリゴヌクレオチドであって、
ＮＭは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドであり；
ＮＢは各々Ｓ−ｃＥｔヌクレオシドであり；
ＮＱは各々β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドであり；かつ
ＮＺは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
ａ）前記修飾オリゴヌクレオチドがクレーム１（ａ）に記載の修飾オリゴヌクレオチドであり、且つ前記修飾オリゴヌクレオチドが、以下の（ａ１）若しくは（ａ２）；
ａ１）ＴＥＭｅＣＥＡＥＡＥＣＳＡＥＴＥＣＳＡＥＧＥＴＥＣＳＴＥＧＥＡＥＵＳＡＥＡＥＧＥＣＳＴＥＡＥ、若しくは
ａ２）ＴＥＭｅＣＡＡＣＳＡＴＣＳＡＧＴＣＳＴＧＡＵＳＡＡＧＣＳＴＡＥ
の構造を有する、又は
ｂ）前記修飾オリゴヌクレオチドがクレーム１（ｂ）に記載の修飾オリゴヌクレオチドであり、且つ前記修飾オリゴヌクレオチドが、以下の（ｂ１）〜（ｂ５）のいずれか；
ｂ１）ＡＥＣＳＡＴＣＳＡＧＴＣＳＴＧＡＵＳＡＡＧＣＳＴＡＥ、
ｂ２）ＡＥＣＳＡＥＴＥＣＳＡＥＧＥＴＥＣＳＴＥＧＥＡＥＵＳＡＥＡＥＧＥＣＳＴＥＡＥ、
ｂ３）ＡＥＭｅＣＳＡＴＭｅＣＳＡＧＴＭｅＣＳＴＧＡＴＳＡＡＧＭｅＣＳＴＡＥ、
ｂ４）ＡＥＣＳＡＴＣＳＡＧＴＣＳＴＧＡＵＳＡＡＧＣＳＴＡＳ、若しくは
ｂ５）ＡＥＭｅＣＳＡＴＭｅＣＳＡＧＴＭｅＣＳＴＧＡＴＳＡＡＧＭｅＣＳＴＡＳ；
の構造を有する、
（上記ａ及びｂ中、後に下付き文字がないヌクレオシドはβ−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドを示し；後に下付き文字「Ｅ」があるヌクレオシドは２’−ＭＯＥヌクレオシドを示し；後に下付き文字「Ｓ」があるヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドを示し、上付き文字「Ｍｅ」はヌクレオシド塩基の５−メチル基を示す。）
請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
前記修飾オリゴヌクレオチドが、以下；
ｂ１）ＡＥＣＳＡＴＣＳＡＧＴＣＳＴＧＡＵＳＡＡＧＣＳＴＡＥ；
の構造を有する、
（上記ｂ１中、後に下付き文字がないヌクレオシドはβ−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドを示し；後に下付き文字「Ｅ」があるヌクレオシドは２’−ＭＯＥヌクレオシドを示し；後に下付き文字「Ｓ」があるヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドを示す。）
請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
前記修飾オリゴヌクレオチドは配列番号３の核酸塩基配列を有するか、または前記修飾オリゴヌクレオチドは配列番号４の核酸塩基配列を有し、前記配列中のＴは各々Ｔ及びＵから独立に選択される、請求項１〜１４の何れか１項に記載の化合物。
【請求項１６】
少なくとも１つのヌクレオシド間結合は修飾ヌクレオシド間結合であるか、又はヌクレオシド間結合は各々、修飾ヌクレオシド間結合であり、且つ修飾ヌクレオシド間結合は任意にホスホロチオエートヌクレオシド間結合である、請求項１〜１５の何れか１項に記載の化合物。
【請求項１７】
以下；
ＡＥＣＳＡＴＣＳＡＧＴＣＳＴＧＡＵＳＡＡＧＣＳＴＡＥ；
の構造を有する、
（後に下付き文字がないヌクレオシドはβ−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドを示し；後に下付き文字「Ｅ」があるヌクレオシドは２’−ＭＯＥヌクレオシドを示し；後に下付き文字「Ｓ」があるヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドを示し、ヌクレオシド間結合は各々、ホスホロチオエート結合である。）
修飾オリゴヌクレオチド。
【請求項１８】
請求項１７に記載の修飾オリゴヌクレオチド及び薬学的に許容されるキャリアを含有する、医薬組成物。
【請求項１９】
細胞におけるコラーゲンの発現を低下させるための組成物であって、請求項１〜１６の何れか１項に記載の化合物、或いは請求項１７に記載の修飾オリゴヌクレオチドを含む組成物。
【請求項２０】
線維症の発症を処置、予防または遅延させるための医薬組成物であって、請求項１〜１６の何れか１項に記載の化合物、或いは請求項１７に記載の修飾オリゴヌクレオチドを含む医薬組成物。
【請求項２１】
前記線維症は腎線維症、肺線維症、肝線維症、心線維症、皮膚線維症、加齢に伴う線維症、脾線維症、強皮症及び移植後の線維症から選択される、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記線維症が腎線維症である、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
ａ）前記腎線維症は糸球体硬化症、尿細管間質線維症、ＩｇＡ腎症、間質線維症／尿細管萎縮；慢性腎障害、糸球体疾患、糸球体腎炎、糖尿病、特発性巣状分節性糸球体硬化症、膜性腎症、虚脱性糸球体症、慢性再発性腎感染症及び末期腎臓病から選択される疾患を有する被検体に現れ；又は
ｂ）前記腎線維症は腎臓の急性または反復性外傷に起因する；
請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
１つまたは複数の組織においてｍｉＲ−２１の発現が増加した被検体用である、請求項２０〜２３の何れか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
抗炎症薬、免疫抑制薬、抗糖尿病薬、ジゴキシン、血管拡張薬、アンジオテンシンＩＩ変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシンＩＩ受容体遮断薬（ＡＲＢ）、カルシウムチャネル遮断薬、二硝酸イソソルビド、ヒドララジン、ニトレート、ヒドララジン、β遮断薬、ナトリウム利尿ペプチド、ヘパリノイド及び結合組織増殖因子阻害剤から選択される少なくとも１つの治療薬と併用投与されるように用いられる、請求項２０〜２３の何れか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
少なくとも１種のＡＣＥ阻害剤と併用投与されるように用いられる、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記ＡＣＥ阻害剤が、カプトプリル、エナラプリル、リシノプリル、ベナゼプリル、キナプリル、ホシノプリル及びラミプリルから選択される、請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
少なくとも１種のＡＲＢと併用投与されるように用いられる、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記ＡＲＢが、カンデサルタン、イルベサルタン、オルメサルタン、ロサルタン、バルサルタン、テルミサルタン及びエプロサルタンから選択される、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
ヒト用である、請求項２０〜２９の何れか１項に記載の医薬組成物。