【手続補正書】
【提出日】平成27年7月24日(2015.7.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
昆虫を昆虫抵抗性ダイズ植物に曝露させて、それにより昆虫を防除するステップを含む、昆虫を防除する方法であって、前記ダイズ植物が配列番号１のｂｐ１３８５〜１４１５；配列番号１のｂｐ１３５０〜１４５０；配列番号１のｂｐ１３００〜１５００；配列番号１のｂｐ１２００〜１６００；配列番号２のｂｐ１３７〜１６８；配列番号２のｂｐ１０３〜２０３；および配列番号２のｂｐ３〜３０３からなる群から選択される第１の配列；ならびに配列番号１５のｂｐ２６８０〜２７８０；配列番号１５のｂｐ２６３０〜２８３０；配列番号１５のｂｐ２５３０〜２９３０；配列番号１５のｂｐ９０７１〜９１７１；配列番号１５のｂｐ９０２１〜９２２１；および配列番号１５のｂｐ８９２１〜９３２１からなる群から選択される第２の配列を含むＤＮＡを含み、前記第１の配列および第２の配列が、ダイズイベントｐＤＡＢ９５８２．８１４．１９．１：：ｐＤＡＢ４４６８．０４．１６．１の存在に特徴的である、方法。
【請求項２】
前記昆虫がスポドプテラ・フルギペルダ（Spodoptera frugiperda）（ツマジロクサヨトウ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ダイズ作物において雑草を防除する方法であって、グルホシネート除草剤、フェノキシ酢酸除草剤、ピリジルオキシ酢酸除草剤、またはそれらの組合せを、ダイズ作物を含む地域に施用するステップを含み、前記ダイズ作物が配列番号１のｂｐ１３８５〜１４１５；配列番号１のｂｐ１３５０〜１４５０；配列番号１のｂｐ１３００〜１５００；配列番号１のｂｐ１２００〜１６００；配列番号２のｂｐ１３７〜１６８；配列番号２のｂｐ１０３〜２０３；および配列番号２のｂｐ３〜３０３からなる群から選択される第１の配列を有し、かつ配列番号１５のｂｐ２６８０〜２７８０；配列番号１５のｂｐ２６３０〜２８３０；配列番号１５のｂｐ２５３０〜２９３０；配列番号１５のｂｐ９０７１〜９１７１；配列番号１５のｂｐ９０２１〜９２２１；および配列番号１５のｂｐ８９２１〜９３２１からなる群から選択される第２の配列を有するＤＮＡを含むダイズ植物を含み、前記配列がダイズイベントｐＤＡＢ９５８２．８１４．１９．１：：ｐＤＡＢ４４６８．０４．１６．１の存在に特徴的である、方法。
【請求項４】
ダイズ植物を育種する方法であって、
第１の植物と第２のダイズ植物を交雑させて第３のダイズ植物を作出するステップであり、前記第１の植物が配列番号１の１３８５〜１４１５；配列番号１のｂｐ１３５０〜１４５０；配列番号１のｂｐ１３００〜１５００；配列番号１のｂｐ１２００〜１６００；配列番号２のｂｐ１３７〜１６８；配列番号２のｂｐ１０３〜２０３；および配列番号２のｂｐ３〜３０３からなる群から選択される１つまたは複数の配列、ならびにその相補物を含み、かつ配列番号１５のｂｐ２６８０〜２７８０；配列番号１５のｂｐ２６３０〜２８３０；配列番号１５のｂｐ２５３０〜２９３０；配列番号１５のｂｐ９０７１〜９１７１；配列番号１５のｂｐ９０２１〜９２２１；および配列番号１５のｂｐ８９２１〜９３２１からなる群から選択される１つまたは複数の配列、ならびにその相補物を含むＤＮＡを含む、ステップと、前記第３のダイズ植物を、配列番号１のｂｐ１３８５〜１４１５；配列番号１のｂｐ１３５０〜１４５０；配列番号１のｂｐ１３００〜１５００；配列番号１のｂｐ１２００〜１６００；配列番号２のｂｐ１３７〜１６８；配列番号２のｂｐ１０３〜２０３；および配列番号２のｂｐ３〜３０３からなる群から選択される１つまたは複数の配列およびその相補物；ならびに配列番号１５のｂｐ２６８０〜２７８０；配列番号１５のｂｐ２６３０〜２８３０；配列番号１５のｂｐ２５３０〜２９３０；配列番号１５のｂｐ９０７１〜９１７１；配列番号１５のｂｐ９０２１〜９２２１；および配列番号１５のｂｐ８９２１〜９３２１からなる群から選択される１つまたは複数の配列およびその相補物を含むＤＮＡの存在についてアッセイするステップとを含む方法。
【請求項５】
シュードプルシア・インクルデンス（Pseudoplusia includens）（ダイズシャクトリムシ）に対して抵抗性であり、配列番号１のｂｐ１３８５〜１４１５；配列番号１のｂｐ１３５０〜１４５０；配列番号１のｂｐ１３００〜１５００；配列番号１のｂｐ１２００〜１６００；配列番号２のｂｐ１３７〜１６８；配列番号２のｂｐ１０３〜２０３；および配列番号２のｂｐ３〜３０３からなる群から選択される少なくとも１つのヌクレオチド配列およびその相補物を有し、かつ配列番号１５のｂｐ２６８０〜２７８０；配列番号１５のｂｐ２６３０〜２８３０；配列番号１５のｂｐ２５３０〜２９３０；配列番号１５のｂｐ９０７１〜９１７１；配列番号１５のｂｐ９０２１〜９２２１；および配列番号１５のｂｐ８９２１〜９３２１からなる群から選択される少なくとも１つのヌクレオチド配列およびその相補物を有するＤＮＡを含む、ダイズ植物またはその部位。
【請求項６】
請求項５に記載の植物の種子。
【請求項７】
ダイズミール、ダイズ粉（soy flour）、ダイズタンパク質濃縮物、およびダイズ油（soy oil）からなる群から選択される生産品である、請求項３に記載のダイズ植物またはその部位に由来する組成物。
【請求項８】
ダイズの粒、種子、ミール、または粉において害虫を防除する方法であって、前記粒、種子、ミール、または粉が配列番号１のｂｐ１３８５〜１４１５；配列番号１のｂｐ１３５０〜１４５０；配列番号１のｂｐ１３００〜１５００；配列番号１のｂｐ１２００〜１６００；配列番号２のｂｐ１３７〜１６８；配列番号２のｂｐ１０３〜２０３；および配列番号２のｂｐ３〜３０３からなる群から選択される１つまたは複数の配列およびその相補物；ならびに配列番号１５のｂｐ２６８０〜２７８０；配列番号１５のｂｐ２６３０〜２８３０；配列番号１５のｂｐ２５３０〜２９３０；配列番号１５のｂｐ９０７１〜９１７１；配列番号１５のｂｐ９０２１〜９２２１；および配列番号１５のｂｐ８９２１〜９３２１からなる群から選択される１つまたは複数の配列およびその相補物を含むＤＮＡを含むことによって実証される、前記粒、種子、ミール、または粉にダイズイベントｐＤＡＢ９５８２．８１４．１９．１：：ｐＤＡＢ４４６８．０４．１６．１を含めるステップを含む方法。
【請求項９】
ゲノム内に、配列番号１のｂｐ１３８５〜１４１５；配列番号１のｂｐ１３５０〜１４５０；配列番号１のｂｐ１３００〜１５００；配列番号１のｂｐ１２００〜１６００；配列番号２のｂｐ１３７〜１６８；配列番号２のｂｐ１０３〜２０３；配列番号２のｂｐ３〜３０３からなる群から選択される第１のＤＮＡ配列；ならびに配列番号１５のｂｐ２６８０〜２７８０；配列番号１５のｂｐ２６３０〜２８３０；配列番号１５のｂｐ２５３０〜２９３０；配列番号１５のｂｐ９０７１〜９１７１；配列番号１５のｂｐ９０２１〜９２２１；および配列番号１５のｂｐ８９２１〜９３２１からなる群から選択される第２のＤＮＡ配列、ならびにその相補物を含むダイズ種子。
【請求項１０】
請求項９に記載のダイズ種子から生長させたダイズ植物。
【請求項１１】
花粉、胚珠、花、苗条、根、および葉からなる群から選択され、前記ダイズイベントｐＤＡＢ９５８２．８１４．１９．１：：ｐＤＡＢ４４６８．０４．１６．１を含む、請求項１０に記載のダイズ植物の部位。
【請求項１２】
ダイズミール、ダイズ粉（soybean flour）、およびダイズ油（soybean oil）からなる群から選択される生産品である、請求項１０に記載のダイズ植物またはその部位に由来する組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
本発明は、以下を提供する。
［１］昆虫を昆虫抵抗性ダイズ植物に曝露させて、それにより昆虫を防除するステップを含む、昆虫を防除する方法であって、上記ダイズ植物が配列番号１のｂｐ１３８５〜１４１５；配列番号１のｂｐ１３５０〜１４５０；配列番号１のｂｐ１３００〜１５００；配列番号１のｂｐ１２００〜１６００；配列番号２のｂｐ１３７〜１６８；配列番号２のｂｐ１０３〜２０３；および配列番号２のｂｐ３〜３０３からなる群から選択される第１の配列；ならびに配列番号１５のｂｐ２６８０〜２７８０；配列番号１５のｂｐ２６３０〜２８３０；配列番号１５のｂｐ２５３０〜２９３０；配列番号１５のｂｐ９０７１〜９１７１；配列番号１５のｂｐ９０２１〜９２２１；および配列番号１５のｂｐ８９２１〜９３２１からなる群から選択される第２の配列を含むＤＮＡを含み、上記第１の配列および第２の配列が、ダイズイベントｐＤＡＢ９５８２．８１４．１９．１：：ｐＤＡＢ４４６８．０４．１６．１の存在に特徴的である、方法。
［２］上記昆虫がシュードプルシア・インクルデンス（Pseudoplusia includens）（ダイズシャクトリムシ）である、上記［１］に記載の方法。
［３］上記昆虫がアンチカルシア・ゲムマタリス（Anticarsia gemmatalis）（ハッショウマメイモムシ）である、上記［１］に記載の方法。
［４］上記昆虫がスポドプテラ・フルギペルダ（Spodoptera frugiperda）（ツマジロクサヨトウ）である、上記［１］に記載の方法。
［５］ダイズ作物において雑草を防除する方法であって、グルホシネート除草剤、フェノキシ酢酸除草剤、ピリジルオキシ酢酸除草剤、またはそれらの組合せを、ダイズ作物を含む地域に施用するステップを含み、上記ダイズ作物が配列番号１のｂｐ１３８５〜１４１５；配列番号１のｂｐ１３５０〜１４５０；配列番号１のｂｐ１３００〜１５００；配列番号１のｂｐ１２００〜１６００；配列番号２のｂｐ１３７〜１６８；配列番号２のｂｐ１０３〜２０３；および配列番号２のｂｐ３〜３０３からなる群から選択される第１の配列を有し、かつ配列番号１５のｂｐ２６８０〜２７８０；配列番号１５のｂｐ２６３０〜２８３０；配列番号１５のｂｐ２５３０〜２９３０；配列番号１５のｂｐ９０７１〜９１７１；配列番号１５のｂｐ９０２１〜９２２１；および配列番号１５のｂｐ８９２１〜９３２１からなる群から選択される第２の配列を有するＤＮＡを含むダイズ植物を含み、上記配列がダイズイベントｐＤＡＢ９５８２．８１４．１９．１：：ｐＤＡＢ４４６８．０４．１６．１の存在に特徴的である、方法。
［６］配列番号１のｂｐ１３８５〜１４１５；配列番号１のｂｐ１３５０〜１４５０；配列番号１のｂｐ１３００〜１５００；配列番号１のｂｐ１２００〜１６００；配列番号２のｂｐ１３７〜１６８；配列番号２のｂｐ１０３〜２０３；および配列番号２のｂｐ３〜３０３からなる群から選択される１つまたは複数の配列；ならびに配列番号１５のｂｐ２６８０〜２７８０；配列番号１５のｂｐ２６３０〜２８３０；配列番号１５のｂｐ２５３０〜２９３０；配列番号１５のｂｐ９０７１〜９１７１；配列番号１５のｂｐ９０２１〜９２２１；および配列番号１５のｂｐ８９２１〜９３２１からなる群から選択される１つまたは複数の配列を含む単離されたＤＮＡ配列。
［７］ダイズ植物を育種する方法であって、
第１の植物と第２のダイズ植物を交雑させて第３のダイズ植物を作出するステップであり、上記第１の植物が配列番号１の１３８５〜１４１５；配列番号１のｂｐ１３５０〜１４５０；配列番号１のｂｐ１３００〜１５００；配列番号１のｂｐ１２００〜１６００；配列番号２のｂｐ１３７〜１６８；配列番号２のｂｐ１０３〜２０３；および配列番号２のｂｐ３〜３０３からなる群から選択される１つまたは複数の配列、ならびにその相補物を含み、かつ配列番号１５のｂｐ２６８０〜２７８０；配列番号１５のｂｐ２６３０〜２８３０；配列番号１５のｂｐ２５３０〜２９３０；配列番号１５のｂｐ９０７１〜９１７１；配列番号１５のｂｐ９０２１〜９２２１；および配列番号１５のｂｐ８９２１〜９３２１からなる群から選択される１つまたは複数の配列、ならびにその相補物を含むＤＮＡを含む、ステップと、上記第３のダイズ植物を、配列番号１のｂｐ１３８５〜１４１５；配列番号１のｂｐ１３５０〜１４５０；配列番号１のｂｐ１３００〜１５００；配列番号１のｂｐ１２００〜１６００；配列番号２のｂｐ１３７〜１６８；配列番号２のｂｐ１０３〜２０３；および配列番号２のｂｐ３〜３０３からなる群から選択される１つまたは複数の配列およびその相補物；ならびに配列番号１５のｂｐ２６８０〜２７８０；配列番号１５のｂｐ２６３０〜２８３０；配列番号１５のｂｐ２５３０〜２９３０；配列番号１５のｂｐ９０７１〜９１７１；配列番号１５のｂｐ９０２１〜９２２１；および配列番号１５のｂｐ８９２１〜９３２１からなる群から選択される１つまたは複数の配列およびその相補物を含むＤＮＡの存在についてアッセイするステップとを含む方法。
［８］配列番号１のｂｐ１３８５〜１４１５；配列番号１のｂｐ１３５０〜１４５０；配列番号１のｂｐ１３００〜１５００；配列番号１のｂｐ１２００〜１６００；配列番号２のｂｐ１３７〜１６８；配列番号２のｂｐ１０３〜２０３；および配列番号２のｂｐ３〜３０３からなる群から選択される少なくとも１つの配列およびその相補物を含み、かつ配列番号１５のｂｐ２６８０〜２７８０；配列番号１５のｂｐ２６３０〜２８３０；配列番号１５のｂｐ２５３０〜２９３０；配列番号１５のｂｐ９０７１〜９１７１；配列番号１５のｂｐ９０２１〜９２２１；および配列番号１５のｂｐ８９２１〜９３２１からなる群から選択される少なくとも１つの配列およびその相補物を含む接合部配列を含む単離されたＤＮＡ分子。
［９］シュードプルシア・インクルデンス（Pseudoplusia includens）（ダイズシャクトリムシ）に対して抵抗性であり、配列番号１のｂｐ１３８５〜１４１５；配列番号１のｂｐ１３５０〜１４５０；配列番号１のｂｐ１３００〜１５００；配列番号１のｂｐ１２００〜１６００；配列番号２のｂｐ１３７〜１６８；配列番号２のｂｐ１０３〜２０３；および配列番号２のｂｐ３〜３０３からなる群から選択される少なくとも１つのヌクレオチド配列およびその相補物を有し、かつ配列番号１５のｂｐ２６８０〜２７８０；配列番号１５のｂｐ２６３０〜２８３０；配列番号１５のｂｐ２５３０〜２９３０；配列番号１５のｂｐ９０７１〜９１７１；配列番号１５のｂｐ９０２１〜９２２１；および配列番号１５のｂｐ８９２１〜９３２１からなる群から選択される少なくとも１つのヌクレオチド配列およびその相補物を有するＤＮＡを含む、ダイズ植物またはその部位。
［１０］上記［９］に記載の植物の種子。
［１１］ダイズミール、ダイズ粉（soy flour）、ダイズタンパク質濃縮物、およびダイズ油（soy oil）からなる群から選択される生産品である、上記［５］に記載のダイズ植物またはその部位に由来する組成物。
［１２］ダイズの粒、種子、ミール、または粉において害虫を防除する方法であって、上記粒、種子、ミール、または粉が配列番号１のｂｐ１３８５〜１４１５；配列番号１のｂｐ１３５０〜１４５０；配列番号１のｂｐ１３００〜１５００；配列番号１のｂｐ１２００〜１６００；配列番号２のｂｐ１３７〜１６８；配列番号２のｂｐ１０３〜２０３；および配列番号２のｂｐ３〜３０３からなる群から選択される１つまたは複数の配列およびその相補物；ならびに配列番号１５のｂｐ２６８０〜２７８０；配列番号１５のｂｐ２６３０〜２８３０；配列番号１５のｂｐ２５３０〜２９３０；配列番号１５のｂｐ９０７１〜９１７１；配列番号１５のｂｐ９０２１〜９２２１；および配列番号１５のｂｐ８９２１〜９３２１からなる群から選択される１つまたは複数の配列およびその相補物を含むＤＮＡを含むことによって実証される、上記粒、種子、ミール、または粉にダイズイベントｐＤＡＢ９５８２．８１４．１９．１：：ｐＤＡＢ４４６８．０４．１６．１を含めるステップを含む方法。
［１３］ゲノム内に、配列番号１のｂｐ１３８５〜１４１５；配列番号１のｂｐ１３５０〜１４５０；配列番号１のｂｐ１３００〜１５００；配列番号１のｂｐ１２００〜１６００；配列番号２のｂｐ１３７〜１６８；配列番号２のｂｐ１０３〜２０３；配列番号２のｂｐ３〜３０３からなる群から選択される第１のＤＮＡ配列；ならびに配列番号１５のｂｐ２６８０〜２７８０；配列番号１５のｂｐ２６３０〜２８３０；配列番号１５のｂｐ２５３０〜２９３０；配列番号１５のｂｐ９０７１〜９１７１；配列番号１５のｂｐ９０２１〜９２２１；および配列番号１５のｂｐ８９２１〜９３２１からなる群から選択される第２のＤＮＡ配列、ならびにその相補物を含むダイズ種子。
［１４］上記［１３］に記載のダイズ種子から生長させたダイズ植物。
［１５］花粉、胚珠、花、苗条、根、および葉からなる群から選択され、上記ダイズイベントｐＤＡＢ９５８２．８１４．１９．１：：ｐＤＡＢ４４６８．０４．１６．１を含む、上記［１４］に記載のダイズ植物の部位。
［１６］ダイズミール、ダイズ粉（soybean flour）、およびダイズ油（soybean oil）からなる群から選択される生産品である、上記［１４］に記載のダイズ植物またはその部位に由来する組成物。
本発明は、ダイズイベントｐＤＡＢ９５８２．８１４．１９．１：：ｐＤＡＢ４４６８．０４．１６．１と称される、新しい昆虫抵抗性かつ除草剤耐性のトランスジェニックダイズ育種スタックイベントに関する。この育種スタックは、ダイズの細胞のゲノム内の特定の部位に挿入されている、本明細書に記載のｃｒｙ１Ｆ、ｃｒｙ１Ａｃおよびｐａｔ、ならびに本明細書および国際特許出願第ＷＯ／２０１２／０７５４２６号に記載のａａｄ−１２およびｐａｔを含む。代表的なダイズ種子は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）に、パラグラフ［００２１］において識別される受託番号で寄託されている。このイベントを含有するダイズ植物のＤＮＡは、ダイズゲノム内の挿入ＤＮＡの位置を特徴付ける本明細書に記載の接合部／隣接配列を含む。配列番号１、配列番号２、および配列番号１５は、ダイズイベントｐＤＡＢ９５８２．８１４．１９．１：：ｐＤＡＢ４４６８．０４．１６．１に特徴的である。より詳細には、配列番号１のｂｐ１４００／１４０１、ｂｐ１５３６／１５３７、配列番号２のｂｐ１５２／１５３、配列番号１５のｂｐ２７３０／２７３１、および配列番号１５のｂｐ９１２１／９１２２にある接合部を取り囲む配列が、ダイズイベントｐＤＡＢ９５８２．８１４．１９．１：：ｐＤＡＢ４４６８．０４．１６．１に特徴的である。下のパラグラフ［０００１２］には、ダイズイベントｐＤＡＢ９５８２．８１４．１９．１：：ｐＤＡＢ４４６８．０４．１６．１を含有するダイズのＤＮＡの特性であるこれらの接合部を含む配列の例が記載されている。