【手続補正書】
【提出日】平成26年12月9日(2014.12.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４５５】
【表３７】
2014506250.tif 000001
この実施例は、エナメル質の表面で過酢酸の形成を触媒することによって歯を白くするために表面結合ペルヒドロラーゼが使用され得ることを実証する。ウシエナメル質を用いるこの実施例における漂白性能は、ヒドロキシアパタイト上で観察される各酵素の保持と相関する。非標的化ＥＺ−１（Ｃ２７７Ｓ）は、ヒドロキシアパタイトおよびエナメル質における弱い保持を示し、従って、２段階プロセスで適切なホワイトニングを達成する可能性は低い。酵素をエナメル質上に保持するために有効な標的配列を付加すると、２段階適用プロセスにおける過酢酸の生成が可能になる。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４５６】
以上、本発明を要約すると下記のとおりである。
１．１）ａ）ｉ）構造
［Ｘ］ｍＲ５
（式中、Ｘ＝式Ｒ６Ｃ（Ｏ）Ｏのエステル基であり、
Ｒ６＝場合によりヒドロキシル基またはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７線状、分枝状または環状ヒドロカルビル部分であり、ここで、Ｒ６
＝Ｃ２〜Ｃ７の場合には、Ｒ６は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
Ｒ５＝場合によりヒドロキシル基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ６線状、分枝状、もしくは環状ヒドロカルビル部分または５員環状ヘテロ芳香族部分または６員環状芳香族もしくはヘテロ芳香族部分であり、ここで、Ｒ５中の各炭素原子は個々に、１個以下のヒドロキシル基または１個以下のエステル基もしくはカルボン酸基を含み、Ｒ５は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
ｍは、１からＲ５中の炭素原子の数までの範囲の整数である）
を有し、２５℃において少なくとも５ｐｐｍの水中溶解度を有するエステル、
ｉｉ）構造
【化１７】
2014506250.tif 000002
（式中、Ｒ１＝場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ３およびＲ４は個々に、ＨまたはＲ１Ｃ（Ｏ）である）
を有するグリセリド、
ｉｉｉ）式
【化１８】
2014506250.tif 000003
（式中、Ｒ１は、場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ１０直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリール、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ、または（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ）ｎＨであり、ｎは１〜１０である）
の１つまたはそれより多いエステル、および
ｉｖ）アセチル化単糖類、アセチル化二糖類、およびアセチル化多糖類からなる群から選択されるアセチル化糖類
からなる群から選択される少なくとも１つの基質と、
ｂ）過酸素源と、
ｃ）ペルヒドロリシス活性を有する酵素触媒であって、該酵素触媒が、ＣＬＵＳＴＡＬＷを用いたときに参照配列の配列番号２とアラインするＣＥ−７シグネチャーモチーフを有する酵素を含み、該シグネチャーモチーフが、
ｉ）配列番号２の位置１１８〜１２０に対応する位置のＲＧＱモチーフと、
ｉｉ）配列番号２の位置１７９〜１８３に対応する位置のＧＸＳＱＧモチーフと、
ｉｉｉ）配列番号２の位置２９８〜２９９に対応する位置のＨＥモチーフと
を含む酵素触媒と
を含む反応成分のセットを備え付けるステップと、
２）（１）の反応成分を適切な反応条件下で組み合わせるステップで、それにより、少なくとも１つの過酸が酵素的に生成される、該ステップと、
３）口腔表面を少なくとも１つの過酸と接触させる工程で、それにより、口腔表面が、漂白、歯のホワイトニング、消毒、脱染、脱臭、バイオフィルムの低減または除去、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される過酸ベースの利益を受けるステップと
を含む方法。
２．反応成分が口腔内で組み合わせられる、上記１に記載の方法。
３．反応成分が口腔表面との接触の前に口腔の外側で組み合わせられる、上記１に記載の方法。
４．ペルヒドロリシス活性を有する酵素が過酸有益剤の生成よりも前に口腔内に存在する、上記１に記載の方法。
５．１）ａ）ｉ）構造
［Ｘ］ｍＲ５
（式中、Ｘ＝式Ｒ６Ｃ（Ｏ）Ｏのエステル基であり、
Ｒ６＝場合によりヒドロキシル基またはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７線状、分枝状または環状ヒドロカルビル部分であり、ここで、Ｒ６＝Ｃ２〜Ｃ７の場合には、Ｒ６は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
Ｒ５＝場合によりヒドロキシル基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ６線状、分枝状、もしくは環状ヒドロカルビル部分または５員環状ヘテロ芳香族部分または６員環状芳香族もしくはヘテロ芳香族部分であり、ここで、Ｒ５中の各炭素原子は個々に、１個以下のヒドロキシル基または１個以下のエステル基もしくはカルボン酸基を含み、Ｒ５は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
ｍは、１からＲ５中の炭素原子の数までの範囲の整数である）
を有し、２５℃において少なくとも５ｐｐｍの水中溶解度を有するエステル、
ｉｉ）構造
【化１９】
2014506250.tif 000004
（式中、Ｒ１＝場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ３およびＲ４は個々に、ＨまたはＲ１Ｃ（Ｏ）である）
を有するグリセリド、
ｉｉｉ）式
【化２０】
2014506250.tif 000005
（式中、Ｒ１は、場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ１０直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリール、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ、または（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ）ｎＨであり、ｎは１〜１０である）、
の１つまたはそれより多いエステル、および
ｉｖ）アセチル化単糖類、アセチル化二糖類、およびアセチル化多糖類からなる群から選択されるアセチル化糖類
からなる群から選択される少なくとも１つの基質と、
ｂ）過酸素源と、
ｃ）ペルヒドロリシス活性を有する酵素触媒であって、以下の一般構造：
ＰＡＨ−［Ｌ］ｙ−ＯＣＢＤ
または
ＯＣＢＤ−［Ｌ］ｙ−ＰＡＨ
（式中、ＰＡＨは、ペルヒドロリシス活性を有する酵素であり、
ＯＣＢＤは、口腔表面に対する親和性を有するペプチド成分であり、
Ｌは、１〜１００の範囲のアミノ酸長さの任意選択的なペプチドリンカーであり、
ｙは０または１である）
を有する融合タンパク質を含む酵素触媒と
を含む反応成分のセットを備え付けるステップと、
２）（１）の反応成分を適切な反応条件下で組み合わせ、それにより、少なくとも１つの過酸が酵素的に生成されるステップと、
３）口腔表面を少なくとも１つの過酸と接触させ、それにより、口腔表面が、漂白、歯のホワイトニング、消毒、脱染、脱臭、バイオフィルムの低減または除去、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される過酸ベースの利益を受けるステップと
を含む方法。
６．ペルヒドロリシス活性を有する酵素が、リパーゼ、プロテアーゼ、エステラーゼ、アシルトランスフェラーゼ、アリールエステラーゼ、炭水化物エステラーゼ、およびこれらの組み合わせの群から選択される、上記５に記載の方法。
７．炭水化物エステラーゼが、ＣＬＵＳＴＡＬＷを用いたときに参照配列の配列番号２とアラインするＣＥ−７シグネチャーモチーフを有するＣＥ−７炭水化物エステラーゼであり、該シグネチャーモチーフが、
１）配列番号２の位置１１８〜１２０に対応する位置のＲＧＱモチーフと、
２）配列番号２の位置１７９〜１８３に対応する位置のＧＸＳＱＧモチーフと、
３）配列番号２の位置２９８〜２９９に対応する位置のＨＥモチーフと
を含む、上記６に記載の方法。
８．口腔表面に対する親和性を有するペプチド成分が、抗体、Ｆａｂ抗体断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）抗体、ラクダ科抗体、スカフォールドディスプレイタンパク質または免疫グロブリンの折り畳みを欠いた単鎖ポリペプチドである、上記５〜７のいずれかに記載の方法。
９．口腔表面に対する親和性を有するペプチド成分が免疫グロブリンの折り畳みを欠いた単鎖ポリペプチドである、上記６に記載の方法。
１０．単鎖ポリペプチドが、５〜６０の範囲のアミノ酸長さであり、口腔表面に対して１０−５Ｍ以下のＫＤ値またはＭＢ５０値を有する少なくとも１つの口腔表面結合ペプチドを含む、上記９に記載の方法。
１１．単鎖ポリペプチドが２〜５０の口腔表面結合ペプチドを含み、口腔表面結合ペプチドが、独立してそして場合により、１〜１００の範囲のアミノ酸長さのポリペプチドスペーサーによって分離されていてもよい、上記１０に記載の方法。
１２．口腔表面が歯の表面である、上記１または５に記載の方法。
１３．歯の表面が、歯のエナメル質、歯のペリクルまたはこれらの組み合わせを含む、上記１２に記載の方法。
１４．口腔表面結合ペプチドが歯エナメル質結合ペプチドである、上記１０に記載の方法。
１５．口腔表面結合ペプチドが歯ペリクル結合ペプチドである、上記１０に記載の方法。１６．口腔表面結合ペプチドが皮膚結合ペプチドである、上記１０に記載の方法。
１７．反応成分のセットを組み合わせてから５分以内に、過酸が５００ｐｐｂ〜１０，０００ｐｐｍの濃度で生成される、上記１または５に記載の方法。
１８．過酸を１時間未満の間、口腔ケア表面と接触させる、上記１７に記載の方法。
１９．過酸が過酢酸である、上記１または５に記載の方法。
２０．反応成分を組み合わせてから５分以内に、有効濃度の過酢酸を酵素的に生成させて口腔表面と接触させる、上記１９に記載の方法。
２１．基質がトリアセチンを含む、上記１または５に記載の方法。
２２．以下の一般構造：
ＰＡＨ−［Ｌ］ｙ−ＯＣＢＤ
または
ＯＣＢＤ−［Ｌ］ｙ−ＰＡＨ
（式中、
１）ＰＡＨは、ペルヒドロリシス活性を有する酵素であり、
２）ＯＣＢＤは、口腔表面に対する親和性を有するペプチド成分であり、
３）Ｌは、１〜１００の範囲のアミノ酸長さのペプチドリンカーであり、
４）ｙは０または１である）
を含む融合タンパク質。
２３．ペルヒドロリシス活性を有する酵素が、リパーゼ、プロテアーゼ、エステラーゼ、アシルトランスフェラーゼ、アリールエステラーゼ、炭水化物エステラーゼ、およびこれらの組み合わせの群から選択される、上記２２に記載の融合タンパク質。
２４．酵素が、ペルヒドロリシス活性を有するＣＥ−７炭水化物エステラーゼであり、ＰＡＨが、ＣＬＵＳＴＡＬＷを用いたときに参照配列の配列番号２とアラインするＣＥ−７シグネチャーモチーフを有し、該シグネチャーモチーフが、
１）配列番号２の位置１１８〜１２０に対応する位置のＲＧＱモチーフと、
２）配列番号２の位置１７９〜１８３に対応する位置のＧＸＳＱＧモチーフと、
３）配列番号２の位置２９８〜２９９に対応する位置のＨＥモチーフと
を含む、上記２３に記載の融合タンパク質。
２５．ペルヒドロリシス活性を有する酵素がマイコバクテリウム・スメグマチス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｍｅｇｍａｔｉｓ）からのアリールエステラーゼである、上記２３に記載の融合タンパク質。
２６．口腔表面に対する親和性を有するペプチド成分が免疫グロブリンの折り畳みを欠いた単鎖ポリペプチドである、上記２３〜２５のいずれかに記載の融合タンパク質。
２７．単鎖ポリペプチドが５〜６０の範囲のアミノ酸長さの少なくとも１つの口腔表面結合ペプチドを含む、上記２６に記載の融合タンパク質。
２８．少なくとも１つの口腔表面結合ペプチドが１０−５Ｍ以下のＫＤ値またはＭＢ５０値を有する、上記２７に記載の融合タンパク質。
２９．単鎖ポリペプチドが、２〜５０の口腔表面結合ペプチドを含み、口腔表面結合ペプチドが、独立してそして場合により、１〜１００の範囲のアミノ酸長さのポリペプチドスペーサーによって分離されていてもよい、上記２６に記載の融合タンパク質。
３０．口腔表面に対する親和性を有するペプチド成分が２００以下のアミノ酸長さを含む、上記２２〜２５のいずれかに記載の融合タンパク質。
３１．１）上記２３に記載の融合タンパク質を含む酵素触媒と、
２）ａ）構造
［Ｘ］ｍＲ５
（式中、Ｘ＝式Ｒ６Ｃ（Ｏ）Ｏのエステル基であり、
Ｒ６＝場合によりヒドロキシル基またはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７線状、分枝状または環状ヒドロカルビル部分であり、ここで、Ｒ６＝Ｃ２〜Ｃ７の場合には、Ｒ６は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
Ｒ５＝場合によりヒドロキシル基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ６線状、分枝状、もしくは環状ヒドロカルビル部分または５員環状ヘテロ芳香族部分または６員環状芳香族もしくはヘテロ芳香族部分であり、ここで、Ｒ５中の各炭素原子は個々に、１個以下のヒドロキシル基または１個以下のエステル基もしくはカルボン酸基を含み、Ｒ５は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
Ｍは、１からＲ５中の炭素原子の数までの範囲の整数である）
を有し、２５℃において少なくとも５ｐｐｍの水中溶解度を有するエステル、
ｂ）構造
【化２１】
2014506250.tif 000006
（式中、Ｒ１＝場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ３およびＲ４は個々に、ＨまたはＲ１Ｃ（Ｏ）である）
を有するグリセリド、
ｃ）式
【化２２】
2014506250.tif 000007
（式中、Ｒ１は、場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ１０直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリール、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ、または（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ）ｎＨであり、ｎは１〜１０である）
の１つまたはそれより多いエステル、および
ｃ）アセチル化単糖類、アセチル化二糖類、およびアセチル化多糖類からなる群から選択されるアセチル化糖類
からなる群から選択される少なくとも１つの基質と、
３）過酸素源と、
４）経口的に許容可能なキャリア媒体と
を含む口腔ケア製品。
３２．１）ペルヒドロリシス活性を有する酵素触媒であって、該酵素触媒が、ＣＬＵＳＴＡＬＷを用いたときに参照配列の配列番号２とアラインするＣＥ−７シグネチャーモチーフを有する酵素を含み、該シグネチャーモチーフが、
ａ）配列番号２の位置１１８〜１２０に対応する位置のＲＧＱモチーフと、
ｂ）配列番号２の位置１７９〜１８３に対応する位置のＧＸＳＱＧモチーフと、
ｃ）配列番号２の位置２９８〜２９９に対応する位置のＨＥモチーフと
を含む酵素触媒と、
２）ａ）構造
［Ｘ］ｍＲ５
（式中、Ｘ＝式Ｒ６Ｃ（Ｏ）Ｏのエステル基であり、
Ｒ６＝場合によりヒドロキシル基またはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７線状、分枝状または環状ヒドロカルビル部分であり、ここで、Ｒ６＝Ｃ２〜Ｃ７の場合には、Ｒ６は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
Ｒ５＝場合によりヒドロキシル基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ６線状、分枝状、もしくは環状ヒドロカルビル部分または５員環状ヘテロ芳香族部分または６員環状芳香族もしくはヘテロ芳香族部分であり、ここで、Ｒ５中の各炭素原子は個々に、１個以下のヒドロキシル基または１個以下のエステル基もしくはカルボン酸基を含み、Ｒ５は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
Ｍは、１からＲ５中の炭素原子の数までの範囲の整数である）
を有し、２５℃において少なくとも５ｐｐｍの水中溶解度を有するエステル、
ｂ）構造
【化２３】
2014506250.tif 000008
（式中、Ｒ１＝場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ３およびＲ４は個々に、ＨまたはＲ１Ｃ（Ｏ）である）
を有するグリセリド、
ｃ）式
【化２４】
2014506250.tif 000009
（式中、Ｒ１は、場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ１０直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリール、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ、または（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ）ｎＨであり、ｎは１〜１０である）
の１つまたはそれより多いエステル、および
ｄ）アセチル化単糖類、アセチル化二糖類、およびアセチル化多糖類からなる群から選択されるアセチル化糖類
からなる群から選択される少なくとも１つの基質と、
３）過酸素源と、
４）経口的に許容可能なキャリア媒体と
を含む口腔ケア製品。
３３．ペルヒドロリシス活性を有する酵素が上記２２に記載の融合タンパク質である、上記３２に記載の口腔ケア製品。
３４．第２の部分が、少なくとも１つの歯エナメル質結合ペプチドまたは歯ペリクル結合ペプチドを含む単鎖ペプチドである、上記３３に記載の口腔ケア製品。
３５．少なくとも１つの歯エナメル質結合ペプチドまたは歯ペリクル結合ペプチドが５〜６０の範囲のアミノ酸長さである、上記３４に記載の口腔ケア製品。
３６．口腔ケア製品が、粉末剤、ペースト剤、ゲル剤、液剤、軟膏剤、錠剤、リンス剤またはこれらの任意の組み合わせの形態である、上記３１〜３５のいずれかに記載の口腔ケア製品。
３７．口腔ケア製品が、歯磨きペースト、練歯磨、歯磨きゲル、歯磨き粉、マウスウォッシュ、口臭清涼剤、ストリップまたはデンタルフロスである、上記３６に記載の口腔ケア製品。
３８．口腔ケア製品がホワイトニングストリップまたはデンタルトレイの形態である、上記３６に記載の口腔ケア製品。
３９．口腔ケア製品の使用前は、酵素触媒が、基質、過酸素源または基質および過酸素源の両方から分離されたままである、上記３１または３２に記載の口腔ケア製品。
４０．配列番号３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４
０７、４０８、４０９、４１０、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、および４２２からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する、口腔表面に対する親和性を有する単離ポリペプチド。
４１．口腔ケア製品において、有効濃度の少なくとも１つの過酸を生成して、口腔表面を漂白、ホワイトニング、消毒、脱染、脱臭する、あるいは口腔表面からバイオフィルムを除去するための、ペルヒドロリシス活性を有するＣＥ−７炭水化物エステラーゼの使用。４２．１）ペルヒドロリシス活性を有する酵素触媒であって、該酵素触媒が、ＣＬＵＳＴＡＬＷを用いたときに参照配列の配列番号２とアラインするＣＥ−７シグネチャーモチーフを有する酵素を含み、該シグネチャーモチーフが、
ａ）配列番号２の位置１１８〜１２０に対応する位置のＲＧＱモチーフと、
ｂ）配列番号２の位置１７９〜１８３に対応する位置のＧＸＳＱＧモチーフと、
ｃ）配列番号２の位置２９８〜２９９に対応する位置のＨＥモチーフと
を含む酵素触媒と、
２）ａ）構造
［Ｘ］ｍＲ５
（式中、Ｘ＝式Ｒ６Ｃ（Ｏ）Ｏのエステル基であり、
Ｒ６＝場合によりヒドロキシル基またはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７線状、分枝状または環状ヒドロカルビル部分であり、ここで、Ｒ６＝Ｃ２〜Ｃ７の場合には、Ｒ６は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
Ｒ５＝場合によりヒドロキシル基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ６線状、分枝状、もしくは環状ヒドロカルビル部分または５員環状ヘテロ芳香族部分または６員環状芳香族もしくはヘテロ芳香族部分であり、ここで、Ｒ５中の各炭素原子は個々に、１個以下のヒドロキシル基または１個以下のエステル基もしくはカルボン酸基を含み、Ｒ５は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
Ｍは、１からＲ５中の炭素原子の数までの範囲の整数である）
を有し、２５℃において少なくとも５ｐｐｍの水中溶解度を有するエステル、
ｂ）構造
【化２５】
2014506250.tif 000010
（式中、Ｒ１＝場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ３およびＲ４は個々に、ＨまたはＲ１Ｃ（Ｏ）である）
を有するグリセリド、
ｃ）式
【化２６】
2014506250.tif 000011
（式中、Ｒ１は、場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ１０直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリール、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ、または（ＣＨ２ＣＨ（Ｃ
Ｈ３）−Ｏ）ｎＨであり、ｎは１〜１０である）
の１つまたはそれより多いエステル、および
ｄ）アセチル化単糖類、アセチル化二糖類、およびアセチル化多糖類からなる群から選択されるアセチル化糖類
からなる群から選択される少なくとも１つの基質と、
３）過酸素源と
を含み、（１）、（２）、および（３）を混合したときに過酸が形成される過酸発生組成物の、う歯、歯肉炎、口腔カンジダ症、または歯周炎の処置または予防のための使用。
４３．ペルヒドロリシス活性を有する酵素が、口腔表面に対する親和性を有する少なくとも１つの部分を含む融合タンパク質の形態である、上記４１に記載の使用。
４４．以下の一般構造：
ＰＡＨ−［Ｌ］ｙ−ＯＣＢＤ
または
ＯＣＢＤ−［Ｌ］ｙ−ＰＡＨ
（式中、
１）ＰＡＨは、配列番号４６０に対して少なくとも９５％のアミノ酸同一性を有するアミノ酸配列を有する、ペルヒドロリシス活性を有する酵素であり、
２）ＯＣＢＤは、口腔表面に対する親和性を有するペプチド成分であり、
３）Ｌは、１〜１００の範囲のアミノ酸長さのペプチドリンカーであり、
４）ｙは０または１である）
を含む融合タンパク質の口腔製品における使用。
【手続補正３】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１）ａ）ｉ）構造
［Ｘ］ｍＲ５
（式中、Ｘ＝式Ｒ６Ｃ（Ｏ）Ｏのエステル基であり、
Ｒ６＝場合によりヒドロキシル基またはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７線状、分枝状または環状ヒドロカルビル部分であり、ここで、Ｒ６＝Ｃ２〜Ｃ７の場合には、Ｒ６は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
Ｒ５＝場合によりヒドロキシル基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ６線状、分枝状、もしくは環状ヒドロカルビル部分または５員環状ヘテロ芳香族部分または６員環状芳香族もしくはヘテロ芳香族部分であり、ここで、Ｒ５中の各炭素原子は個々に、１個以下のヒドロキシル基または１個以下のエステル基もしくはカルボン酸基を含み、Ｒ５は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
ｍは、１からＲ５中の炭素原子の数までの範囲の整数である）
を有し、２５℃において少なくとも５ｐｐｍの水中溶解度を有するエステル、
ｉｉ）構造
【化１】
2014506250.tif 000012
（式中、Ｒ１＝場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ３およびＲ４は個々に、ＨまたはＲ１Ｃ（Ｏ）である）
を有するグリセリド、
ｉｉｉ）式
【化２】
2014506250.tif 000013
（式中、Ｒ１は、場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ１０直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリール、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ、または（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ）ｎＨであり、ｎは１〜１０である）
の１つまたはそれより多いエステル、および
ｉｖ）アセチル化単糖類、アセチル化二糖類、およびアセチル化多糖類からなる群から選択されるアセチル化糖類
からなる群から選択される少なくとも１つの基質と、
ｂ）過酸素源と、
ｃ）ペルヒドロリシス活性を有する酵素触媒であって、該酵素触媒が、ＣＬＵＳＴＡＬＷを用いたときに参照配列の配列番号２とアラインするＣＥ−７シグネチャーモチーフを有する酵素を含み、該シグネチャーモチーフが、
ｉ）配列番号２の位置１１８〜１２０に対応する位置のＲＧＱモチーフと、
ｉｉ）配列番号２の位置１７９〜１８３に対応する位置のＧＸＳＱＧモチーフと、
ｉｉｉ）配列番号２の位置２９８〜２９９に対応する位置のＨＥモチーフと
を含む酵素触媒と
を含む反応成分のセットを備え付けるステップと、
２）（１）の反応成分を適切な反応条件下で組み合わせるステップで、それにより、少なくとも１つの過酸が酵素的に生成される、該ステップと、
３）口腔表面を少なくとも１つの過酸と接触させる工程で、それにより、口腔表面が、漂白、歯のホワイトニング、消毒、脱染、脱臭、バイオフィルムの低減または除去、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される過酸ベースの利益を受けるステップと
を含む方法。
【請求項２】
１）ａ）ｉ）構造
［Ｘ］ｍＲ５
（式中、Ｘ＝式Ｒ６Ｃ（Ｏ）Ｏのエステル基であり、
Ｒ６＝場合によりヒドロキシル基またはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７線状、分枝状または環状ヒドロカルビル部分であり、ここで、Ｒ６＝Ｃ２〜Ｃ７の場合には、Ｒ６は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
Ｒ５＝場合によりヒドロキシル基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ６線状、分枝状、もしくは環状ヒドロカルビル部分または５員環状ヘテロ芳香族部分または６員環状芳香族もしくはヘテロ芳香族部分であり、ここで、Ｒ５中の各炭素原子は個々に、１個以下のヒドロキシル基または１個以下のエステル基もしくはカルボン酸基を含み、Ｒ５は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
ｍは、１からＲ５中の炭素原子の数までの範囲の整数である）
を有し、２５℃において少なくとも５ｐｐｍの水中溶解度を有するエステル、
ｉｉ）構造
【化３】
2014506250.tif 000014
（式中、Ｒ１＝場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ３およびＲ４は個々に、ＨまたはＲ１Ｃ（Ｏ）である）
を有するグリセリド、
ｉｉｉ）式
【化４】
2014506250.tif 000015
（式中、Ｒ１は、場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ１０直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリール、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ、または（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ）ｎＨであり、ｎは１〜１０である）、
の１つまたはそれより多いエステル、および
ｉｖ）アセチル化単糖類、アセチル化二糖類、およびアセチル化多糖類からなる群から選択されるアセチル化糖類
からなる群から選択される少なくとも１つの基質と、
ｂ）過酸素源と、
ｃ）ペルヒドロリシス活性を有する酵素触媒であって、以下の一般構造：
ＰＡＨ−［Ｌ］ｙ−ＯＣＢＤ
または
ＯＣＢＤ−［Ｌ］ｙ−ＰＡＨ
（式中、ＰＡＨは、ペルヒドロリシス活性を有する酵素であり、
ＯＣＢＤは、口腔表面に対する親和性を有するペプチド成分であり、
Ｌは、１〜１００の範囲のアミノ酸長さの任意選択的なペプチドリンカーであり、
ｙは０または１である）
を有する融合タンパク質を含む酵素触媒と
を含む反応成分のセットを備え付けるステップと、
２）（１）の反応成分を適切な反応条件下で組み合わせ、それにより、少なくとも１つの過酸が酵素的に生成されるステップと、
３）口腔表面を少なくとも１つの過酸と接触させ、それにより、口腔表面が、漂白、歯のホワイトニング、消毒、脱染、脱臭、バイオフィルムの低減または除去、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される過酸ベースの利益を受けるステップと
を含む方法。
【請求項３】
以下の一般構造：
ＰＡＨ−［Ｌ］ｙ−ＯＣＢＤ
または
ＯＣＢＤ−［Ｌ］ｙ−ＰＡＨ
（式中、
１）ＰＡＨは、ペルヒドロリシス活性を有する酵素であり、
２）ＯＣＢＤは、口腔表面に対する親和性を有するペプチド成分であり、
３）Ｌは、１〜１００の範囲のアミノ酸長さのペプチドリンカーであり、
４）ｙは０または１である）
を含む融合タンパク質。
【請求項４】
１）請求項３に記載の融合タンパク質を含む酵素触媒と、
２）ａ）構造
［Ｘ］ｍＲ５
（式中、Ｘ＝式Ｒ６Ｃ（Ｏ）Ｏのエステル基であり、
Ｒ６＝場合によりヒドロキシル基またはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７線状、分枝状または環状ヒドロカルビル部分であり、ここで、Ｒ６＝Ｃ２〜Ｃ７の場合には、Ｒ６は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
Ｒ５＝場合によりヒドロキシル基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ６線状、分枝状、もしくは環状ヒドロカルビル部分または５員環状ヘテロ芳香族部分または６員環状芳香族もしくはヘテロ芳香族部分であり、ここで、Ｒ５中の各炭素原子は個々に、１個以下のヒドロキシル基または１個以下のエステル基もしくはカルボン酸基を含み、Ｒ５は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
Ｍは、１からＲ５中の炭素原子の数までの範囲の整数である）
を有し、２５℃において少なくとも５ｐｐｍの水中溶解度を有するエステル、
ｂ）構造
【化５】
2014506250.tif 000016
（式中、Ｒ１＝場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ３およびＲ４は個々に、ＨまたはＲ１Ｃ（Ｏ）である）
を有するグリセリド、
ｃ）式
【化６】
2014506250.tif 000017
（式中、Ｒ１は、場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ１０直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリール、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ、または（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ）ｎＨであり、ｎは１〜１０である）
の１つまたはそれより多いエステル、および
ｃ）アセチル化単糖類、アセチル化二糖類、およびアセチル化多糖類からなる群から選択されるアセチル化糖類
からなる群から選択される少なくとも１つの基質と、
３）過酸素源と、
４）経口的に許容可能なキャリア媒体と
を含む口腔ケア製品。
【請求項５】
１）ペルヒドロリシス活性を有する酵素触媒であって、該酵素触媒が、ＣＬＵＳＴＡＬＷを用いたときに参照配列の配列番号２とアラインするＣＥ−７シグネチャーモチーフを有する酵素を含み、該シグネチャーモチーフが、
ａ）配列番号２の位置１１８〜１２０に対応する位置のＲＧＱモチーフと、
ｂ）配列番号２の位置１７９〜１８３に対応する位置のＧＸＳＱＧモチーフと、
ｃ）配列番号２の位置２９８〜２９９に対応する位置のＨＥモチーフと
を含む酵素触媒と、
２）ａ）構造
［Ｘ］ｍＲ５
（式中、Ｘ＝式Ｒ６Ｃ（Ｏ）Ｏのエステル基であり、
Ｒ６＝場合によりヒドロキシル基またはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７線状、分枝状または環状ヒドロカルビル部分であり、ここで、Ｒ６＝Ｃ２〜Ｃ７の場合には、Ｒ６は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
Ｒ５＝場合によりヒドロキシル基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ６線状、分枝状、もしくは環状ヒドロカルビル部分または５員環状ヘテロ芳香族部分または６員環状芳香族もしくはヘテロ芳香族部分であり、ここで、Ｒ５中の各炭素原子は個々に、１個以下のヒドロキシル基または１個以下のエステル基もしくはカルボン酸基を含み、Ｒ５は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
Ｍは、１からＲ５中の炭素原子の数までの範囲の整数である）
を有し、２５℃において少なくとも５ｐｐｍの水中溶解度を有するエステル、
ｂ）構造
【化７】
2014506250.tif 000018
（式中、Ｒ１＝場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ３およびＲ４は個々に、ＨまたはＲ１Ｃ（Ｏ）である）
を有するグリセリド、
ｃ）式
【化８】
2014506250.tif 000019
（式中、Ｒ１は、場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ１０直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリール、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ、または（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ）ｎＨであり、ｎは１〜１０である）
の１つまたはそれより多いエステル、および
ｄ）アセチル化単糖類、アセチル化二糖類、およびアセチル化多糖類からなる群から選
択されるアセチル化糖類
からなる群から選択される少なくとも１つの基質と、
３）過酸素源と、
４）経口的に許容可能なキャリア媒体と
を含む口腔ケア製品。
【請求項６】
配列番号３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、および４２２からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する、口腔表面に対する親和性を有する単離ポリペプチド。
【請求項７】
口腔ケア製品において、有効濃度の少なくとも１つの過酸を生成して、口腔表面を漂白、ホワイトニング、消毒、脱染、脱臭する、あるいは口腔表面からバイオフィルムを除去するための、ペルヒドロリシス活性を有するＣＥ−７炭水化物エステラーゼの使用。
【請求項８】
１）ペルヒドロリシス活性を有する酵素触媒であって、該酵素触媒が、ＣＬＵＳＴＡＬＷを用いたときに参照配列の配列番号２とアラインするＣＥ−７シグネチャーモチーフを有する酵素を含み、該シグネチャーモチーフが、
ａ）配列番号２の位置１１８〜１２０に対応する位置のＲＧＱモチーフと、
ｂ）配列番号２の位置１７９〜１８３に対応する位置のＧＸＳＱＧモチーフと、
ｃ）配列番号２の位置２９８〜２９９に対応する位置のＨＥモチーフと
を含む酵素触媒と、
２）ａ）構造
［Ｘ］ｍＲ５
（式中、Ｘ＝式Ｒ６Ｃ（Ｏ）Ｏのエステル基であり、
Ｒ６＝場合によりヒドロキシル基またはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７線状、分枝状または環状ヒドロカルビル部分であり、ここで、Ｒ６＝Ｃ２〜Ｃ７の場合には、Ｒ６は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
Ｒ５＝場合によりヒドロキシル基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ６線状、分枝状、もしくは環状ヒドロカルビル部分または５員環状ヘテロ芳香族部分または６員環状芳香族もしくはヘテロ芳香族部分であり、ここで、Ｒ５中の各炭素原子は個々に、１個以下のヒドロキシル基または１個以下のエステル基もしくはカルボン酸基を含み、Ｒ５は場合により１つまたはそれより多いエーテル結合を含んでいてもよく、
Ｍは、１からＲ５中の炭素原子の数までの範囲の整数である）
を有し、２５℃において少なくとも５ｐｐｍの水中溶解度を有するエステル、
ｂ）構造
【化９】
2014506250.tif 000020
（式中、Ｒ１＝場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ３およびＲ４は個々に、ＨまたはＲ１Ｃ（Ｏ）である）
を有するグリセリド、
ｃ）式
【化１０】
2014506250.tif 000021
（式中、Ｒ１は、場合によりヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基によって置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分枝鎖アルキルであり、Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ１０直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリール、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ、または（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ）ｎＨであり、ｎは１〜１０である）
の１つまたはそれより多いエステル、および
ｄ）アセチル化単糖類、アセチル化二糖類、およびアセチル化多糖類からなる群から選択されるアセチル化糖類
からなる群から選択される少なくとも１つの基質と、
３）過酸素源と
を含み、（１）、（２）、および（３）を混合したときに過酸が形成される過酸発生組成物の、う歯、歯肉炎、口腔カンジダ症、または歯周炎の処置または予防のための使用。
【請求項９】
以下の一般構造：
ＰＡＨ−［Ｌ］ｙ−ＯＣＢＤ
または
ＯＣＢＤ−［Ｌ］ｙ−ＰＡＨ
（式中、
１）ＰＡＨは、配列番号４６０に対して少なくとも９５％のアミノ酸同一性を有するアミノ酸配列を有する、ペルヒドロリシス活性を有する酵素であり、
２）ＯＣＢＤは、口腔表面に対する親和性を有するペプチド成分であり、
３）Ｌは、１〜１００の範囲のアミノ酸長さのペプチドリンカーであり、
４）ｙは０または１である）
を含む融合タンパク質の口腔製品における使用。