【手続補正書】
【提出日】平成27年7月9日(2015.7.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
(i)第1の血液サンプル中の水の一連の磁気共鳴緩和率測定値を得るステップと;
(ii)前記第1の血液サンプル中の二つ以上の別個の水集団を識別するアルゴリズムを使用して前記測定値を変換するステップであって、各別個の水集団は一つ以上の値を有する一つ以上の磁気共鳴パラメータにより特徴づけられるステップと;
(iii)ステップ(ii)の結果に基づいて、第1の血液サンプル中の凝固又は溶解プロセスをモニタリングするステップと
を含む、第1の血液サンプル中の凝固又は溶解プロセスをモニタリングする方法。
【請求項２】
前記第1の血液サンプルが、血漿サンプル、乏血小板血漿サンプル、多血小板血漿サンプル、全血サンプル、凝固血サンプルであるか、又は単離及び洗浄した血小板を含む、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
ステップ(i)の前に、フィブリノーゲンが前記第1の血液サンプルに添加される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
ステップ(i)の前に、凝固開始因子又は凝固阻害因子;場合によりRF、AA、ADP、CK、TRAP及びトロンビンから選択される凝固開始因子;血小板凝集阻害因子もしくは組織プラスミノーゲン活性化因子(TPA);又は場合によりコラーゲン、エピネフリン、リストセチン、カルシウム、組織因子、トロンボプラスチン、セロトニン、血小板活性化因子(PAF)、トロンボキサンA2(TXA2)、フィブリノーゲン、フォンヴィルブランド因子(VFW)、エラスチン、フィブリノネクチン、ラミニン、ビトロネクチン、トロンボスポンジン、ランタノイドイオン及びヘパリナーゼから選択される凝固活性化因子;又は場合により2-チオメチルAMP、ヘパリン及びクエン酸塩から選択される凝固阻害因子が前記第1の血液サンプルに添加される、請求項1から3のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
(iv)対象からの第2の血液サンプル中の水の一連の第2の緩和率測定値を得るステップと;
(v)第2の血液サンプル中の二つ以上の別個の水集団を識別するアルゴリズムを使用して前記第2の緩和率測定値を変換するステップであって、各別個の水集団は各々が一つ以上の値を有する一つ以上の磁気共鳴パラメータにより特徴づけられるステップと;
(vi)ステップ(ii)及び(v)の結果に基づいて、前記プロセスをモニタリングするステップと
をさらに含む、請求項1から4のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
(a)前記第1の血液サンプルが血漿サンプルであり、前記第2の血液サンプルが全血サンプルであるか;又は(b)前記第1の血液サンプルが多血小板血漿サンプルであり、前記第2の血液サンプルが全血サンプルであるか;又は(c)前記第1の血液サンプルが乏血小板血漿サンプルであり、前記第2の血液サンプルが全血サンプルであるか;又は(d)前記第1の血液サンプルが単離及び洗浄した血小板を含み、前記第2の血液サンプルが全血サンプルであるか;又は(e)ステップ(i)の前に、血小板阻害因子が前記第1の血液サンプルに添加され、血小板阻害因子が前記第2の血液サンプルに添加されないか;又は(f)ステップ(i)の前に、血小板活性化因子が前記第1の血液サンプルに添加され、血小板活性化因子が前記第2の血液サンプルに添加されないか;又は(g)ステップ(i)の前に、RF、AA及びCKから選択される凝固開始因子が前記第1の血液サンプルに添加され、ステップ(iv)の前に、ADP及びトロンビンから選択される凝固開始因子が前記第2の血液サンプルに添加されるか;又は(h)ステップ(i)の前に、フィブリノーゲンが前記第1の血液サンプルに添加され、ステップ(iv)の前に、フィブリノーゲンが前記第2の血液サンプルに添加される、請求項5に記載の方法。
【請求項７】
前記磁気共鳴パラメータ値が前記血液サンプル中の機能性フィブリノーゲン関連水分子特有のものであるか;又は前記二つ以上の別個の水集団の少なくとも一つが血小板活性化、血小板阻害、凝固時間、血小板関連血餅強度、ヘマトクリット又はフィブリノーゲン関連血餅強度と正に相関するか;又は前記磁気共鳴パラメータ値が低い血小板活性、高い血小板活性、高い機能性フィブリノーゲン活性又は低い機能性フィブリノーゲン活性を示すか;又は前記アルゴリズムが多指数関数アルゴリズム、双指数関数アルゴリズム、三指数関数アルゴリズム、減衰指数関数アルゴリズム、ラプラス変換、適合度アルゴリズム、SSEアルゴリズム、最小二乗アルゴリズム、及び非負最小二乗アルゴリズムからなる群から選択されるアルゴリズムを含むか;又は前記緩和率がT1、T2、T1/T2ハイブリッド、T1rho、T2rho及びT2*からなる群から選択される、請求項1から6のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記緩和率測定値がT2測定値を含み、前記測定値が減衰曲線をもたらし、またここで前記二つ以上の水集団が血清関連T2シグナルを有する水集団及び血餅関連T2シグナルを有する水集団を含む、請求項1から7のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
(a1)赤血球を含む血液サンプル中で血餅形成を開始する前に血清関連水についてのT2値を計算し、前記T2値に基づいて、前記血液サンプルのヘマトクリットを決定するステップ;又は(a2)凝固プロセスを生じている血液サンプルについての前記血清関連T2シグナルと前記血餅関連T2シグナルの差を計算し;さらに前記差に基づいて、前記血液サンプル中に形成された血餅の強度を決定するステップ;又は(a3)血小板を含み、凝固プロセスを生じている血液サンプルについての前記血清関連T2シグナルと前記血餅関連T2シグナルの差を計算し;さらに前記差に基づいて、前記血液サンプル中の血小板の活性を決定するステップ;又は(a4)血液サンプル中での凝固プロセスの開始後に、前記血餅関連T2シグナルの初期検出前の期間を測定し;さらに前記期間に基づいて、前記血液サンプルについての凝固時間を決定するステップ;又は(a5)血液サンプル中での凝固プロセスの開始後に、前記血清関連T2シグナルについてのT2時間曲線を計算し、T2時間曲線の二次導関数の最大値を計算し、さらに凝固時間特有の値を計算するステップ;又は(a6)血液サンプル中での凝固プロセスの開始後に、前記血清関連T2シグナル及び前記血餅関連T2シグナルに基づいて、前記血液サンプルが凝固亢進、凝固低下又は正常であるかどうかを決定するステップをさらに含む、請求項8に記載の方法。
【請求項１０】
血液サンプル中の凝固又は溶解プロセスの開始後に、(a)前記プロセス中前記血液サンプルについて複数の緩和率測定を行って複数の減衰曲線を得るステップと、(b)前記複数の減衰曲線から、複数のT2緩和スペクトルを計算するステップをさらに含む、請求項1から9のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記複数のT2緩和スペクトルから、前記血液サンプル中の凝固又は溶解プロセスの開始後の時間の関数として前記血液サンプル中の二つ以上の水集団について(a)T2緩和時間の変化及び(b)T2シグナル強度の変化、を示す三次元データセットを計算し、場合により、前記三次元データセットを安定データ及び移行データに分割し、さらに前記安定データ及び前記移行データに基づいて、前記血液サンプルが凝固亢進、凝固低下若しくは正常であるかどうかを決定するステップ;又は
前記血液サンプルが低い血小板活性、高い血小板活性、高い機能性フィブリノーゲン活性若しくは低い機能性フィブリノーゲン活性を示すかどうかを決定するステップ;又は
三次元データセットから、前記プロセス中所定の期間にわたって前記血液サンプル中の二つ以上の水集団の各々について観察されるシグナルの相対ボリュームを計算し、さらにシグナルの前記相対ボリュームに基づいて、前記血液サンプルが凝固亢進、凝固低下若しくは正常であるかどうかを決定するステップ;又は
前記血液サンプルが低い血小板活性、高い血小板活性、高い機能性フィブリノーゲン活性若しくは低い機能性フィブリノーゲン活性を示すかどうかを決定するステップをさらに含む、請求項10に記載の方法。
【請求項１２】
前記方法が、
(ai)単離及び洗浄した血小板を用意するステップと;(aii)前記単離及び洗浄した血小板を、所定の最小レベルのフィブリノーゲンを含む乏血小板血漿と組み合わせて試験サンプルを形成するステップと;(aiii)凝固開始因子を前記試験サンプルに添加することにより凝固プロセスを開始するステップと;(aiv)前記試験サンプル中の水の一連の磁気共鳴緩和率測定値を得るステップと;(av)前記試験サンプル中の二つ以上の別個の水集団を識別するアルゴリズムを使用して前記測定値を変換するステップであって、各別個の水集団は一つ以上の値を有する一つ以上の磁気共鳴パラメータにより特徴づけられるステップと;さらに(avi)ステップ(av)の結果に基づいて、前記血小板活性を評価するステップを含む、血小板活性の評価において使用するための方法;又は
(bi)全血サンプルを用意するステップと;(bii)凝固開始因子を前記試験サンプルに添加することにより凝固プロセスを開始するステップと;(biii)前記試験サンプル中の水の一連の磁気共鳴緩和率測定値を得るステップと;(biv)前記試験サンプル中の二つ以上の別個の水集団を識別するアルゴリズムを使用して前記測定値を変換するステップであって、各別個の水集団は一つ以上の値を有する一つ以上の磁気共鳴パラメータにより特徴づけられるステップと;さらに(bv)ステップ(biv)の結果に基づいて、前記血小板活性を評価するステップを含む、全血サンプル中の血小板活性の評価において使用するための方法;又は
(ci)第1の血液サンプルを用意するステップと;(cii)凝固開始因子を前記試験サンプルに添加することにより凝固プロセスを開始するステップと;(ciii)血餅中の水のT2緩和率測定値を得るステップであって、前記測定値により減衰曲線が得られるステップと;(civ)前記減衰曲線に数学的変換を適用して前記血餅中の水集団のシグナル強度を同定するステップであって、前記水集団は血清水環境又は退縮した血餅水環境にあるステップと;さらに(cv)前記シグナル強度に基づいて、前記血餅の強度を評価するステップを含む、凝固プロセスを受けている第1の血液サンプル中の血餅の強度の評価において使用するための方法
である、請求項10に記載の方法。
【請求項１３】
(i)対象から採取した血液を用意して血液サンプルを得るステップと;
(ii)前記血液サンプル中の水の一連の磁気共鳴緩和率測定値を得るステップと;
(iii)前記血液サンプル中の二つ以上の別個の水集団を識別するアルゴリズムを使用して前記測定値を変換して請求項1から10のいずれか一項に記載の一つ以上の磁気共鳴パラメータ値を得るステップと;
(iv)ステップ(iii)の結果に基づいて、前記対象が正常である、出血状態にある又は血栓形成促進状態にあるかどうかを決定するステップと
を含む、対象の止血状態を評価する方法。
【請求項１４】
ステップ(i)の前に、凝固開始因子が前記第1の血液サンプルに添加され、前記凝固開始因子が接触活性化経路又は組織因子活性化経路を介した凝固活性化を誘導する、請求項4に記載の方法。
【請求項１５】
前記凝固開始因子が組織因子である、請求項14に記載の方法。
【請求項１６】
(i)単離及び洗浄した血小板を用意するステップと;
(ii)前記単離及び洗浄した血小板を、所定の最小レベルのフィブリノーゲンを含む乏血小板血漿と組み合わせて試験サンプルを形成するステップと;
(iii)凝固開始因子を前記試験サンプルに添加することにより凝固プロセスを開始するステップと;
(iv)前記試験サンプル中の水の一連の磁気共鳴緩和率測定値を得るステップと;
(v)前記試験サンプル中の二つ以上の別個の水集団を識別するアルゴリズムを使用して前記測定値を変換するステップであって、各別個の水集団は一つ以上の値を有する一つ以上の磁気共鳴パラメータにより特徴づけられるステップと;
(vi)ステップ(v)の結果に基づいて、前記血小板活性を評価するステップと
を含む、血小板活性を評価する方法。
【請求項１７】
(i)血餅中の水のT2緩和率測定値を得るステップであって、前記測定値により減衰曲線が得られるステップと;
(ii)前記減衰曲線に数学的変換を適用して前記血餅中の水集団のシグナル強度を同定するステップであって、前記水集団は血清水環境又は退縮した血餅水環境にあるステップと;
(iii)前記シグナル強度に基づいて、前記血餅の強度を評価するステップと
を含む、血餅の強度を評価する方法。
【請求項１８】
(i)血餅中の水のT2緩和率測定値を得るステップであって、前記測定値により減衰曲線が得られるステップと;
(ii)前記減衰曲線に数学的変換を適用して前記血餅中の水集団のシグナル強度を同定するステップであって、前記水集団は血清水環境又は退縮した血餅水環境にあるステップと;
(iii)前記シグナル強度に基づいて、前記血餅の血小板活性を評価するステップと
を含む、血餅の血小板活性を評価する方法。
【請求項１９】
血液凝固プロセスをモニタリングするための磁気共鳴装置であって、血液サンプル中の二つ以上の別個の水集団を識別するアルゴリズムを有するマイクロプロセッサを含み、各別個の水集団は磁気共鳴パラメータ値又は値のセットにより特徴づけられる、磁気共鳴装置。
【請求項２０】
前記アルゴリズムが多指数関数アルゴリズム、双指数関数アルゴリズム、三指数関数アルゴリズム、減衰指数関数アルゴリズム、ラプラス変換、適合度アルゴリズム、SSEアルゴリズム、最小二乗アルゴリズム、及び非負最小二乗アルゴリズムからなる群から選択される、請求項19に記載の装置。
【請求項２１】
請求項1から18のいずれか一項に記載の方法を実施するための、請求項19又は20に記載の装置。