【手続補正書】
【提出日】平成27年8月21日(2015.8.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
がんを有するか有することが疑われる対象のための治療を選択するための方法であって、
（ａ）少なくとも２つの受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）の二量体化のレベルの測定であって、
（ｉ）細胞抽出物を捕捉抗体の１つ又は複数の希釈系列と共にインキュベートして複数の捕捉された分析物を形成することであって、細胞抽出物ががんを有する対象から抗がん剤の投与後に単離されるか、細胞抽出物を抗がん剤と接触させることと、
（ｉｉ）複数の捕捉された分析物を、二量体化された分析物の対の第１のメンバー及び第２のメンバーにそれぞれ特異的な、第１の又は複数の第１の活性化状態非依存性抗体及び第２の又は複数の第２の活性化状態非依存性抗体を含む検出抗体と共にインキュベートして、複数の検出可能な捕捉された二量体化分析物を形成することであり、第１の活性化状態非依存性抗体は促進部分で標識され、第２の活性化状態非依存性抗体はシグナル増幅対の第１のメンバーで標識され、促進部分はシグナル増幅対の第１のメンバーへ導かれてそれと反応する酸化剤を生成することと、
（ｉｉｉ）複数の検出可能な捕捉された二量体化分析物をシグナル増幅対の第２のメンバーと共にインキュベートして増幅されたシグナルを生成することと、
（ｉｖ）シグナル増幅対の第１及び第２のメンバーから生成される増幅されたシグナルを検出することとを含む測定と、
（ｂ）少なくとも２つのＲＴＫの二量体化を同じ２つのＲＴＫの参照二量体化プロファイルと比較することによる抗がん剤の選択であって、参照二量体化プロファイルが抗がん剤の非存在下で生成される選択とを含む方法。
【請求項２】
少なくとも２つのＲＴＫの二量体化のレベルを、前記少なくとも２つのＲＴＫについて生成される標準曲線に対して較正することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
抗がん剤が、ＰＩ３Ｋをモジュレートする化合物、ＲＴＫをモジュレートする化合物及びその組合せからなる群から選択される、請求項１〜２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４】
前記少なくとも２つのＲＴＫが、ＨＥＲ１／ＨＥＲ２二量体、ＨＥＲ１／ＨＥＲ３二量体、ＨＥＲ２／ＨＥＲ３二量体、ＨＥＲ２／ＨＥＲ２二量体、ＨＥＲ２／ＨＥＲ４二量体、ｐ９５ＨＥＲ２／ＨＥＲ３二量体及びｐ９５ＨＥＲ２／ＨＥＲ２二量体からなる群から選択されるメンバーである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
細胞抽出物が、乳房がん、肺がん、すい臓がん、結腸直腸がん及び胃がんからなる群から選択されるがんを有するか有することが疑われる対象から単離される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
ｉ）第１の活性化状態非依存性抗体が促進部分で直接標識され、かつｉｉ）第２の活性化状態非依存性抗体がシグナル増幅対の第１のメンバーで直接標識される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
ｉ）第２の活性化状態非依存性抗体が、活性化状態非依存性抗体にコンジュゲートされる結合対の第１のメンバーと、シグナル増幅対の第１のメンバーにコンジュゲートされる結合対の第２のメンバーの間の結合を介してシグナル増幅対の第１のメンバーで標識され、かつｉｉ）結合対の第１のメンバーがビオチンであり、及び／又は結合対の第２のメンバーがストレプトアビジンである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
促進部分がグルコースオキシダーゼである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
シグナル増幅対の第１のメンバーがペルオキシダーゼである、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
がんを有するか有することが疑われる対象のための治療を選択するための方法であって、
（ａ）ＰＩ３Ｋ複合体の活性化レベルの測定であって、前記ＰＩ３Ｋ複合体が、
ｉ）少なくとも２つの受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）の二量体化、並びに
ｉｉ）ＰＩ３Ｋ  ｐ８５サブユニット及びＰＩ３Ｋ  ｐ１１０サブユニットを含み、
前記測定が、
（ｉ）細胞抽出物を捕捉抗体の１つ又は複数の希釈系列と共にインキュベートして複数の捕捉された分析物を形成することであって、細胞抽出物ががんを有する対象から抗がん剤の投与後に単離されるか、細胞抽出物を抗がん剤と接触させることと、
（ｉｉａ）複数の捕捉された分析物を、二量体化受容体チロシンキナーゼ対の１つのメンバーに特異的な第１の又は複数の第１の活性化状態非依存性抗体を含む第１の検出抗体、並びに、ａ）二量体化受容体チロシンキナーゼ対の他のメンバー、ＰＩ３Ｋ  ｐ８５若しくはＰＩ３Ｋ  ｐ１１０サブユニットに特異的な第２の若しくは複数の第２の活性化状態非依存性抗体、又はｂ）ＰＩ３Ｋ  ｐ８５サブユニット及び／若しくはＰＩ３Ｋ  ｐ１１０サブユニットに特異的な活性化状態依存性抗体のいずれかを含む第２の検出抗体と共にインキュベートして、複数の検出可能な捕捉された二量体化複合型分析物を形成することか、
（ｉｉｂ）複数の捕捉された分析物を、ＰＩ３Ｋ  ｐ１１０サブユニットに特異的な第１の又は複数の第１の活性化状態非依存性抗体を含む第１の検出抗体、並びに、ａ）二量体化受容体チロシンキナーゼ対の１つのメンバー若しくはＰＩ３Ｋ  ｐ８５に特異的な第２の若しくは複数の第２の活性化状態非依存性抗体、又はｂ）ＰＩ３Ｋ  ｐ８５サブユニットに特異的な活性化状態依存性抗体のいずれかを含む第２の検出抗体と共にインキュベートして、複数の検出可能な捕捉された二量体化複合型分析物を形成することであり、
第１の検出抗体が促進部分で標識され、第２の検出抗体がシグナル増幅対の第１のメンバーで標識され、促進部分が、シグナル増幅対の第１のメンバーへ導かれてそれと反応する酸化剤を生成することと、
（ｉｉｉ）複数の検出可能な捕捉された二量体化分析物をシグナル増幅対の第２のメンバーと共にインキュベートして増幅されたシグナルを生成することと、
（ｉｖ）シグナル増幅対の第１及び第２のメンバーから生成される増幅されたシグナルを検出することとを含む測定と、
（ｂ）ＰＩ３Ｋ複合体の活性化のレベルを参照ＰＩ３Ｋ複合体の活性化プロファイルと比較することによる抗がん剤の選択であって、参照二量体化プロファイルが抗がん剤の非存在下で生成される選択
とを含む方法。
【請求項１１】
ＰＩ３Ｋ複合体のレベルを、ｉ）少なくとも２つの受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）の二量体化、ｉｉ）ＰＩ３Ｋｐ８５サブユニット及びＰＩ３Ｋｐ１１０サブユニットを含む前記ＰＩ３Ｋ複合体のために生成される標準曲線に対して較正することをさらに含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記少なくとも２つのＲＴＫが、ＨＥＲ１／ＨＥＲ２二量体、ＨＥＲ１／ＨＥＲ３二量体、ＨＥＲ２／ＨＥＲ３二量体、ＨＥＲ２／ＨＥＲ２二量体、ＨＥＲ２／ＨＥＲ４二量体、ｐ９５ＨＥＲ２／ＨＥＲ３二量体及びｐ９５ＨＥＲ２／ＨＥＲ２二量体からなる群から選択されるメンバーである、請求項１０〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
細胞抽出物が、乳房がん、肺がん、すい臓がん、結腸直腸がん及び胃がんからなる群から選択されるがんを有するか有することが疑われる対象から単離される、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
第１の検出抗体が促進部分で直接標識される、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
第２の検出抗体がシグナル増幅対の第１のメンバーで直接標識される、請求項１０〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
第２の検出抗体が、第２の検出抗体にコンジュゲートされる結合対の第１のメンバーと、シグナル増幅対の第１のメンバーにコンジュゲートされる結合対の第２のメンバーの間の結合を介して、シグナル増幅対の第１のメンバーで標識される、請求項１０〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
結合対の第１のメンバーがビオチンであり、及び／又は結合対の第２のメンバーがストレプトアビジンである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
促進部分がグルコースオキシダーゼである、請求項１４に記載の方法。