【手続補正書】
【提出日】平成27年4月23日(2015.4.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第1のヌクレアーゼドメインと改変Fcドメインとを含むポリペプチドであって、
該第1のヌクレアーゼドメインがリンカーを伴ってまたは伴わずに該Fcドメインと機能的に接続されており、かつ該Fcドメインが、非改変Fcドメインを有するハイブリッド型ヌクレアーゼ分子と比べて低下した細胞傷害作用を該ポリペプチドが有するように改変されている、
前記ポリペプチド。
【請求項２】
SEQ ID NO：62、64、78、80、92、もしくは96に記載のアミノ酸配列を含むポリペプチド、またはSEQ ID NO：62、64、78、80、92、もしくは96に記載のアミノ酸配列と少なくとも90％同一のアミノ酸配列を含むポリペプチド。
【請求項３】
SEQ ID NO：96に記載のアミノ酸配列を含むポリペプチド。
【請求項４】
SEQ ID NO：66、68、70、82、84、86、94、もしくは98に記載のアミノ酸配列を含むポリペプチド、またはSEQ ID NO：66、68、70、82、84、86、94、もしくは98に記載のアミノ酸配列と少なくとも90％同一のアミノ酸配列を含むポリペプチド。
【請求項５】
SEQ ID NO：98に記載のアミノ酸配列を含むポリペプチド。
【請求項６】
Fcドメインが、Fcγ受容体、補体タンパク質、またはその両方との結合性が低下するように改変されている、請求項1記載のポリペプチド。
【請求項７】
少なくとも1分の1に、2分の1に、3分の1に、4分の1に、または5分の1に低下した細胞傷害作用を有する、請求項1記載のポリペプチド。
【請求項８】
リンカーを伴ってまたは伴わずにFcドメインと機能的に接続された第2のヌクレアーゼドメインをさらに含む、請求項1記載のポリペプチド。
【請求項９】
FcドメインがヒトIgG1 Fcドメインなどのヒト免疫グロブリンFcドメインを含む、請求項1記載のポリペプチド。
【請求項１０】
Fcドメインが、ヒンジドメイン、CH2ドメイン、およびCH3ドメインを含む、請求項9記載のポリペプチド。
【請求項１１】
Fcドメインが、突然変異P238S、P331S、SCC、SSS（残基220、226、および229）、G236R、L328R、L234A、およびL235Aのうちの1つまたは複数を有するアミノ酸配列を含む、請求項9記載のポリペプチド。
【請求項１２】
改変Fcドメインが、突然変異SCCまたはSSS、P238S、およびP331Sを有するアミノ酸配列を含む、請求項9記載のポリペプチド。
【請求項１３】
第1のヌクレアーゼドメイン単独と比べて長い血清中半減期を有する、請求項1記載のポリペプチド。
【請求項１４】
第1のヌクレアーゼドメインが第1のリンカードメインを介してFcドメインと機能的に接続されている、請求項1記載のポリペプチド。
【請求項１５】
第1のリンカードメインがgly-serリンカーなどのポリペプチドリンカーである、請求項14記載のポリペプチド。
【請求項１６】
第2のヌクレアーゼドメインが第2のリンカードメインを介してFcドメインと機能的に接続されている、請求項8記載のポリペプチド。
【請求項１７】
第2のリンカードメインがNLGペプチドなどのポリペプチドリンカーである、請求項16記載のポリペプチド。
【請求項１８】
第1のヌクレアーゼドメインがRNaseまたはDNaseを含む、前記請求項のいずれか一項記載のポリペプチド。
【請求項１９】
RNaseがヒト膵臓RNase AなどのヒトRNaseである、請求項18記載のポリペプチド。
【請求項２０】
循環血中のRNAおよび免疫複合体中のRNAを分解するか、またはインターフェロン-α産生を阻害するか、またはその両方である、請求項19記載のポリペプチド。
【請求項２１】
RNaseの活性が対照RNase分子の活性の約9分の1以上である、請求項19記載のポリペプチド。
【請求項２２】
RNaseの活性が対照RNase分子の活性とほぼ等しい、請求項19記載のポリペプチド。
【請求項２３】
第2のヌクレアーゼドメインがDNaseまたはRNaseを含む、請求項8記載のポリペプチド。
【請求項２４】
DNaseが、I型ヒトDNase、ヒトDNase 1L3、またはヒトTREX1からなる群より選択される、請求項23記載のポリペプチド。
【請求項２５】
DNaseの活性が対照DNase分子の活性の約9分の1以上である、請求項24記載のポリペプチド。
【請求項２６】
DNaseの活性が対照DNase分子の活性とほぼ等しい、請求項24記載のポリペプチド。
【請求項２７】
請求項1〜26のいずれか一項記載のポリペプチドと、薬学的に許容される担体とを含む、組成物。
【請求項２８】
請求項1記載のポリペプチドをコードする、核酸分子。
【請求項２９】
請求項28記載の核酸分子を含む、組換え発現ベクター。
【請求項３０】
請求項29記載の組換え発現ベクターによって形質転換された、宿主細胞。
【請求項３１】
以下の段階を含む、請求項1記載のポリペプチドを作製する方法：
該ポリペプチドをコードする核酸配列を含む宿主細胞を用意する段階；および
該ポリペプチドが発現される条件下で該宿主細胞を維持する段階。
【請求項３２】
請求項1記載のポリペプチドの有効量を含む、異常な免疫応答と関連のある病状を治療または予防するための薬学的組成物。
【請求項３３】
病状が自己免疫疾患である、請求項32記載の薬学的組成物。
【請求項３４】
自己免疫疾患が、インスリン依存性真性糖尿病、多発性硬化症、実験的自己免疫性脳脊髄炎、関節リウマチ、実験的自己免疫性関節炎、重症筋無力症、甲状腺炎、実験型ブドウ膜網膜炎、橋本甲状腺炎、原発性粘液水腫、甲状腺中毒症、悪性貧血、自己免疫性萎縮性胃炎、アジソン病、早発閉経、男性不妊症、若年型糖尿病、グッドパスチャー症候群、尋常性天疱瘡、類天疱瘡、交感性眼炎、水晶体起因性ブドウ膜炎、自己免疫性溶血性貧血、特発性白血球減少症、原発性胆汁性肝硬変、活動性慢性肝炎Hbs-ve、特発性肝硬変、潰瘍性大腸炎、シェーグレン症候群、強皮症、ヴェーゲナー肉芽腫症、多発性筋炎、皮膚筋炎、円板状エリテマトーデス、全身性エリテマトーデス（SLE）、および結合組織病からなる群より選択される、請求項33記載の薬学的組成物。
【請求項３５】
自己免疫疾患がSLEである、請求項34記載の薬学的組成物。
【請求項３６】
ヌクレアーゼを含有する組成物を、RNA、DNA、またはRNAとDNAの両方を含有する免疫複合体を分解するのに有効な量で含む、SLEを治療するための薬学的組成物であって、
該組成物が、薬学的に許容される担体と、SEQ ID NO：62、64、66、68、70、78、80、82、84、86、92、94、96、または98に記載のアミノ酸配列を含むポリペプチドとを含む、
前記薬学的組成物。
【請求項３７】
請求項1〜26のいずれか一項記載のポリペプチドを含む、二量体。
【請求項３８】
請求項37記載の二量体と、薬学的に許容される担体とを含む、組成物。
【請求項３９】
SLEを治療するための、請求項2記載のポリペプチド。
【請求項４０】
SLEを治療するための、請求項4記載のポリペプチド。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３３】
同じく本明細書において開示されるのは、SLEを治療する方法であって、ヌクレアーゼを含有する組成物を、RNA、DNA、またはRNAおよびDNAの両方を含有する免疫複合体を分解するのに有効な量で対象に投与する段階を含む方法である。いくつかの局面において、組成物は、薬学的に許容される担体、および本明細書に記載したようなハイブリッド型ヌクレアーゼ分子を含む。他の局面において、組成物は、SEQ ID NO：62、64、66、68、70、78、80、82、84、86、92、94、96、または98に記載のアミノ酸配列を含むハイブリッド型ヌクレアーゼ分子を含む。
[本発明1001]
第1のヌクレアーゼドメインと改変Fcドメインとを含むハイブリッド型ヌクレアーゼ分子であって、
該第1のヌクレアーゼドメインが該Fcドメインと機能的に接続されており、かつ該Fcドメインが、非改変Fcドメインを有するハイブリッド型ヌクレアーゼ分子と比べて低下した細胞傷害作用を分子が有するように改変されている、
前記ハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1002]
SEQ ID NO：62、64、78、80、92、もしくは96に記載のアミノ酸配列を含むハイブリッド型ヌクレアーゼ分子、またはSEQ ID NO：62、64、78、80、92、もしくは96に記載のアミノ酸配列と少なくとも90％同一のアミノ酸配列を含むハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1003]
SEQ ID NO：96に記載のアミノ酸配列を含むハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1004]
SEQ ID NO：66、68、70、82、84、86、94、もしくは98に記載のアミノ酸配列を含むハイブリッド型ヌクレアーゼ分子、またはSEQ ID NO：66、68、70、82、84、86、94、もしくは98に記載のアミノ酸配列と少なくとも90％同一のアミノ酸配列を含むハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1005]
SEQ ID NO：98に記載のアミノ酸配列を含むハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1006]
Fcドメインが、Fcγ受容体、補体タンパク質、またはその両方との結合性が低下するように改変されている、本発明1001のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1007]
少なくとも1分の1に、2分の1に、3分の1に、4分の1に、または5分の1に低下した細胞傷害作用を有する、本発明1001のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1008]
Fcドメインと機能的に接続された第2のヌクレアーゼドメインをさらに含む、本発明1001のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1009]
FcドメインがヒトIgG1 Fcドメインなどのヒト免疫グロブリンFcドメインを含む、本発明1001のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1010]
Fcドメインが、ヒンジドメイン、CH2ドメイン、およびCH3ドメインを含む、本発明1009のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1011]
Fcドメインが、突然変異P238S、P331S、SCC、SSS（残基220、226、および229）、G236R、L328R、L234A、およびL235Aのうちの1つまたは複数を有するアミノ酸配列を含む、本発明1009のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1012]
改変Fcドメインが、突然変異SCCまたはSSS、P238S、およびP331Sを有するアミノ酸配列を含む、本発明1009のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1013]
第1のヌクレアーゼドメイン単独と比べて長い血清中半減期を有する、本発明1001のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1014]
第1のヌクレアーゼドメインが第1のリンカードメインを介してFcドメインと機能的に接続されている、本発明1001のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1015]
第1のリンカードメインがgly-serリンカーなどのポリペプチドリンカーである、本発明1014のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1016]
第2のヌクレアーゼドメインが第2のリンカードメインを介してFcドメインと機能的に接続されている、本発明1008のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1017]
第2のリンカードメインがNLGペプチドなどのポリペプチドリンカーである、本発明1016のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1018]
第1のヌクレアーゼドメインがRNaseまたはDNaseを含む、前記本発明のいずれかのハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1019]
RNaseがヒト膵臓RNase AなどのヒトRNaseである、本発明1018のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1020]
循環血中のRNAおよび免疫複合体中のRNAを分解するか、またはインターフェロン-α産生を阻害するか、またはその両方である、本発明1019のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1021]
RNaseの活性が対照RNase分子の活性の約9分の1以上である、本発明1019のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1022]
RNaseの活性が対照RNase分子の活性とほぼ等しい、本発明1019のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1023]
第2のヌクレアーゼドメインがDNaseまたはRNaseを含む、本発明1008のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1024]
DNaseが、I型ヒトDNase、ヒトDNase 1L3、またはヒトTREX1からなる群より選択される、本発明1023のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1025]
DNaseの活性が対照DNase分子の活性の約9分の1以上である、本発明1024のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1026]
DNaseの活性が対照DNase分子の活性とほぼ等しい、本発明1024のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子。
[本発明1027]
前記本発明のいずれかのハイブリッド型ヌクレアーゼ分子と、薬学的に許容される担体とを含む、組成物。
[本発明1028]
本発明1001のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子をコードする、核酸分子。
[本発明1029]
本発明1028の核酸分子を含む、組換え発現ベクター。
[本発明1030]
本発明1029の組換え発現ベクターによって形質転換された、宿主細胞。
[本発明1031]
以下の段階を含む、本発明1001のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子を作製する方法：
ハイブリッド型ヌクレアーゼ分子をコードする核酸配列を含む宿主細胞を用意する段階；および
ハイブリッド型ヌクレアーゼ分子が発現される条件下で該宿主細胞を維持する段階。
[本発明1032]
本発明1001のハイブリッド型ヌクレアーゼ分子の有効量を対象に投与する段階を含む、異常な免疫応答と関連のある病状を治療または予防するための方法。
[本発明1033]
病状が自己免疫疾患である、本発明1032の方法。
[本発明1034]
自己免疫疾患が、インスリン依存性真性糖尿病、多発性硬化症、実験的自己免疫性脳脊髄炎、関節リウマチ、実験的自己免疫性関節炎、重症筋無力症、甲状腺炎、実験型ブドウ膜網膜炎、橋本甲状腺炎、原発性粘液水腫、甲状腺中毒症、悪性貧血、自己免疫性萎縮性胃炎、アジソン病、早発閉経、男性不妊症、若年型糖尿病、グッドパスチャー症候群、尋常性天疱瘡、類天疱瘡、交感性眼炎、水晶体起因性ブドウ膜炎、自己免疫性溶血性貧血、特発性白血球減少症、原発性胆汁性肝硬変、活動性慢性肝炎Hbs-ve、特発性肝硬変、潰瘍性大腸炎、シェーグレン症候群、強皮症、ヴェーゲナー肉芽腫症、多発性筋炎、皮膚筋炎、円板状エリテマトーデス、全身性エリテマトーデス（SLE）、および結合組織病からなる群より選択される、本発明1033の方法。
[本発明1035]
自己免疫疾患がSLEである、本発明1034の方法。
[本発明1036]
ヌクレアーゼを含有する組成物を対象に、RNA、DNA、またはRNAとDNAの両方を含有する免疫複合体を分解するのに有効な量で投与する段階を含む、SLEを治療する方法であって、
該組成物が、薬学的に許容される担体と、SEQ ID NO：62、64、66、68、70、78、80、82、84、86、92、94、96、または98に記載のアミノ酸配列を含むハイブリッド型ヌクレアーゼ分子とを含む、
前記方法。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７６】
【表１】
2014519809.tif 000001
2014519809.tif 000002
2014519809.tif 000003
2014519809.tif 000004
2014519809.tif 000005
2014519809.tif 000006
2014519809.tif 000007
2014519809.tif 000008
2014519809.tif 000009
2014519809.tif 000010
2014519809.tif 000011
2014519809.tif 000012
2014519809.tif 000013
2014519809.tif 000014
2014519809.tif 000015
2014519809.tif 000016
2014519809.tif 000017
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】変更
【補正の内容】
【配列表】
2014519809000001.app