【手続補正書】
【提出日】平成27年9月18日(2015.9.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗体遺伝子セグメントレパートリーのセクター化における非ヒト脊椎動物(場合により、マウスまたはラット)の使用であって、脊椎動物のゲノムが、
i)それぞれの遺伝子座が1つまたは複数の重鎖定常領域の上流に動作可能に連結された1つまたは複数のヒトV遺伝子セグメント、1つまたは複数のヒトD遺伝子セグメントおよび1つまたは複数のヒトJ遺伝子セグメントを含み、重鎖定常領域がCガンマ遺伝子セグメントを含む、1つまたは複数のトランスジェニック免疫グロブリン重鎖遺伝子座;ならびに
ii)それぞれの遺伝子座が1つまたは複数の軽鎖定常領域の上流に動作可能に連結されたヒトVλ遺伝子セグメントレパートリーおよび1つまたは複数のヒトJλ遺伝子セグメントを含む、1つまたは複数のトランスジェニック免疫グロブリン軽鎖遺伝子座
を含み;
再配置後に、軽鎖遺伝子座が、ヒトVλ遺伝子セグメントから誘導された可変領域配列を含む軽鎖配列(ヒトラムダ軽鎖配列)を発現し;
カッパ(および場合により、内因性ラムダ)軽鎖発現が実質的に不活化されており、脊椎動物がカッパ軽鎖配列(Vκ遺伝子セグメントから誘導された可変領域配列を含む軽鎖の配列)より多くのヒトラムダ軽鎖配列を発現し;
内因性重鎖発現が実質的に不活化されており;
それぞれの前記トランスジェニック軽鎖遺伝子座が実質的に完全なヒトの機能的Vλ遺伝子セグメントレパートリーを含み、
前記非ヒト脊椎動物が、免疫によりヒトラムダ軽鎖配列を発現し、抗体のレパートリーを提供する、使用。
【請求項２】
それぞれの前記トランスジェニック軽鎖遺伝子座が、V3-1、V2-8、V3-9、V3-10、V2-11、V3-12、V3-16、V2-18、V3-19、V3-21、V3-22、V2-23、V3-25、V3-27、V1-36、V5-37、V5-39、V1-40、V7-43、V1-44、V5-45、V7-46、V1-74、V9-49、V1-51、V5-52、V6-57、V4-60、V8-61およびV4-69からなる群から選択される少なくとも20、25、26、27、28もしくは29個のヒトVλ遺伝子セグメント;場合により、前記群の遺伝子セグメントの全部を含む、請求項1に記載の使用。
【請求項３】
それぞれの前記トランスジェニック軽鎖遺伝子座が実質的に完全なヒトの機能的Jλ遺伝子セグメントレパートリーを含む、請求項1または2に記載の使用。
【請求項４】
それぞれの前記トランスジェニック軽鎖遺伝子座が、J1、J2、J3、J6およびJ7からなる群から選択される少なくとも3個または4個のヒトJλ遺伝子セグメント;場合により、前記群の遺伝子セグメントの全部を含む、請求項1から3のいずれか一項に記載の使用。
【請求項５】
それぞれの前記トランスジェニック重鎖遺伝子座が実質的に完全なヒトの機能的VH遺伝子セグメントレパートリーを含む、請求項1から4のいずれか一項に記載の使用。
【請求項６】
それぞれの前記トランスジェニック重鎖遺伝子座が、V6-1、V1-2、V1-3、V4-4、V7-41、V2-5、V3-7、V1-8、V3-9、V3-11、V3-15、V1-18、V3-20、V3-21、V3-23、V1-24、V2-26、V4-28、V3-30、V4-31、V3-33、V4-34、V4-39、V3-43、V1-45、V1-46、V3-48、V3-49、V5-51、V3-53、V1-58、V4-59、V4-61、V3-64、V3-66、V1-69、V2-70、V3-72、V3-73およびV3-74からなる群から選択される少なくとも30、35、36、37、38または39個のヒトVH遺伝子セグメント;場合により、前記群の遺伝子セグメントの全部を含む、請求項5に記載の使用。
【請求項７】
それぞれの前記トランスジェニック重鎖遺伝子座が、J1、J2、J3、J4、J5、J6からなる群から選択される少なくとも4個または5個のヒトJH遺伝子セグメント;場合により、前記群の遺伝子セグメントの全部を含む、請求項1から6のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８】
それぞれの前記トランスジェニック重鎖遺伝子座が、D1-1、D2-2、D3-3、D4-4、D5-5、D6-6、D1-7、D2-8、D3-9、D3-10、D4-11、D5-12、D6-13、D1-14、D2-15、D3-16、D4-17、D5-18、D6-19、D1-20、D2-21、D3-22、D4-23、D5-24、D1-26、D6-25およびD7-27からなる群から選択される少なくとも15、20、21、22、23、24、25または26個のヒトD遺伝子セグメント;場合により、前記群の遺伝子セグメントの全部を含む、請求項1から7のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９】
非ヒト脊椎動物が10%未満のカッパ抗体を発現する、請求項1から8のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１０】
重鎖定常領域が非ヒト脊椎動物重鎖定常領域であり、および/または、軽鎖定常領域が非ヒト脊椎動物軽鎖定常領域である、請求項1から9のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１１】
非ヒト脊椎動物定常領域がげっ歯類、場合により、マウスまたはラットに由来する、請求項10に記載の使用。
【請求項１２】
定常領域が内因性である、請求項11に記載の使用。
【請求項１３】
脊椎動物が、非ヒト脊椎動物の集団の一部であり、前記集団は、
軽鎖遺伝子座が1つまたは複数のヒトVκ遺伝子セグメントを含む第2の脊椎動物型(カッパ脊椎動物)であって、再配置後に、遺伝子座がヒトVκ遺伝子セグメントから誘導された可変領域配列を含む軽鎖配列(ヒトカッパ軽鎖配列)を発現し、それぞれのカッパ脊椎動物がラムダ軽鎖配列(Vλ遺伝子セグメントから誘導された可変領域配列を含む軽鎖の配列)よりも多くのヒトカッパ軽鎖配列を発現する第2の脊椎動物型(カッパ脊椎動物)
を更に含み;
ヒトラムダ軽鎖配列を発現する第1の脊椎動物型は、カッパ脊椎動物と共通のヒト軽鎖遺伝子セグメントを共有せず、前記集団の脊椎動物を同じ抗原で免疫化して、ヒト重鎖および軽鎖可変領域を含む抗体のレパートリーを生成することができ、前記レパートリーが第1の型の脊椎動物により生成されたヒトラムダ抗体のサブレパートリー(ラムダサブレパートリー)および第2の型の脊椎動物により生成されたヒトカッパ抗体のサブレパートリー(カッパサブレパートリー)を含む、
請求項1から12のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１４】
抗体遺伝子セグメントレパートリーのセクター化における非ヒト脊椎動物(場合により、マウスまたはラット)の集団の使用であって、それぞれの脊椎動物のゲノムが、
(a)それぞれの遺伝子座が1つまたは複数の重鎖定常領域の上流に動作可能に連結された1つまたは複数のヒトV遺伝子セグメント、1つまたは複数のヒトD遺伝子セグメントおよび1つまたは複数のJ遺伝子セグメントを含み、重鎖定常領域がCガンマ遺伝子セグメントを含む、1つまたは複数のトランスジェニック免疫グロブリン重鎖遺伝子座;ならびに
(b)それぞれの遺伝子座が1つまたは複数の軽鎖定常領域の上流に動作可能に連結されたヒトVλ遺伝子セグメントレパートリーおよび1つまたは複数のヒトJλ遺伝子セグメントを含む、1つまたは複数のトランスジェニック免疫グロブリン軽鎖遺伝子座
を含み;
再配置後に、軽鎖遺伝子座がヒトVλ遺伝子セグメントから誘導された可変領域配列を含む軽鎖配列(ヒトラムダ軽鎖配列)を発現し;
カッパおよび内因性ラムダ軽鎖発現が実質的に不活性であり、それぞれの脊椎動物がカッパ軽鎖配列(Vκ遺伝子セグメントから誘導された可変領域配列を含む軽鎖の配列)よりも多くのヒトラムダ軽鎖配列を発現し;
内因性重鎖発現が実質的に不活化されており;
ヒトVλ遺伝子セグメントレパートリーが脊椎動物ゲノムにわたって分割されるものであり、ゲノムが抗体ラムダ鎖配列の異なるレパートリーを発現することができ、
集団のそれぞれの脊椎動物が同じ抗原で免疫化され、そして、重鎖および軽鎖可変領域がそれぞれヒトVHおよびVλ遺伝子セグメントから誘導される、抗原に結合する1つまたは複数の抗体(ラムダ型抗体)が単離される、使用。
【請求項１５】
Vλ遺伝子セグメントレパートリーが、実質的に完全な機能的Vλ遺伝子セグメントレパートリーであり、場合により、脊椎動物が以下のヒトVλ遺伝子セグメントV3-1、V2-8、V3-9、V3-10、V2-11、V3-12、V3-16、V2-18、V3-19、V3-21、V3-22、V2-23、V3-25、V3-27、V1-36、V5-37、V5-39、V1-40、V7-43、V1-44、V5-45、V7-46、V1-74、V9-49、V1-51、V5-52、V6-57、V4-60、V8-61およびV4-69を含む、請求項14に記載の使用。