【手続補正書】
【提出日】平成27年9月16日(2015.9.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）チロシンヒドロキシラーゼ（ＴＨ）をコードするヌクレオチド配列、（ｉｉ）ＧＴＰ−シクロヒドロラーゼＩ（ＣＨ１）をコードするヌクレオチド配列、および（ｉｉｉ）芳香族アミノ酸ドーパデカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）をコードするヌクレオチド配列を含む構築物であって、融合タンパク質ＴＨ−ＣＨ１をコードするように、ＴＨをコードする前記ヌクレオチド配列が、ＣＨ１をコードする前記ヌクレオチド配列に対して連結されている、構築物。
【請求項２】
以下：
ＴＨ−Ｌ−ＣＨ１−ＩＲＥＳ−ＡＡＤＣ、
ＡＡＤＣ−Ｌ−ＴＨ−Ｌ−ＣＨ１、
ＴＨ−Ｌ−ＣＨ１−Ｌ−ＡＡＤＣ、および
ＴＨ−Ｌ−ＣＨ１−Ｐ−ＡＡＤＣ
から選択される、請求項１に記載の構築物であって、ここで、
Ｌは、リンカーコード配列であり、
ＩＲＥＳは、配列内リボソーム進入部位であり、
Ｐは、プロモーターである、構築物。
【請求項３】
ＴＨ−Ｌ−ＣＨ１−ＩＲＥＳ−ＡＡＤＣである、請求項２に記載の構築物。
【請求項４】
ヒトの使用頻度についてコドン最適化されていないリンカーを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の構築物。
【請求項５】
配列番号１として示される配列を含むリンカーを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の構築物。
【請求項６】
配列ＡＡＤＣ−Ｌ１−ＴＨ−Ｌ２−ＣＨ１またはＴＨ−Ｌ１−ＣＨ１−Ｌ２−ＡＡＤＣを有し、Ｌ１およびＬ２が、２つの異なるリンカー配列である、請求項１または２に記載の構築物。
【請求項７】
Ｌ１およびＬ２の核酸配列は異なるが、Ｌ１およびＬ２のアミノ酸配列は同じである、請求項６に記載の構築物。
【請求項８】
Ｌ１およびＬ２の核酸配列が異なり、そして配列番号１および配列番号３から選択される、請求項７に記載の構築物。
【請求項９】
配列ＴＨ−Ｌ−ＣＨ１−Ｐ−ＡＡＤＣを有し、前記プロモーターが、構成的プロモーターまたは組織特異的プロモーターである、請求項２に記載の構築物。
【請求項１０】
前記プロモーターが、ＣＭＶプロモーター、ホスホグリセレートキナーゼプロモーター、またはチミジンキナーゼプロモーターである構成的プロモーターである、請求項９に記載の構築物。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の構築物を含むウイルスベクターゲノム。
【請求項１２】
レンチウイルスベクターゲノムまたはアデノ随伴ウイルスベクターゲノムである、請求項１１に記載のウイルスベクターゲノム。
【請求項１３】
請求項１１または１２に記載のゲノムを含むウイルスベクター系。
【請求項１４】
レンチウイルスベクター系またはアデノ随伴ウイルスベクター系である、請求項１３に記載のウイルスベクター系。
【請求項１５】
以下：
（ｉ）請求項１１に記載のゲノム、
（ｉｉ）ｇａｇタンパク質およびｐｏｌタンパク質をコードする１つまたは複数のヌクレオチド配列、
（ｉｉｉ）（ｉｉ）のヌクレオチド配列によってコードされない、他の不可欠なウイルスパッケージング構成成分をコードするヌクレオチド配列
を含む、請求項１４に記載のレンチウイルスベクター系。
【請求項１６】
レンチウイルスベクター粒子を産生するための方法であって、前記方法は、産生細胞の中に、以下：
ｉ）請求項１１に記載のゲノム、
ｉｉ）ｇａｇタンパク質およびｐｏｌタンパク質をコードする１つまたは複数のヌクレオチド配列、ならびに
ｉｉｉ）ｉｉ）のヌクレオチド配列のうちの１つまたはそれより多くによってコードされない、他の不可欠なウイルスパッケージング構成成分をコードするヌクレオチド配列
を導入するステップを包含する、方法。
【請求項１７】
請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の系または請求項１６に記載の方法によって産生されるウイルス粒子であって、前記ウイルス粒子は、ドーパミン合成酵素ＧＴＰ−シクロヒドロラーゼＩ（ＣＨ１）、チロシンヒドロキシラーゼ（ＴＨ）、および芳香族アミノ酸ドーパデカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）を含み、ここでＴＨおよびＣＨ１が、ＴＨ−ＣＨ１融合タンパク質として存在する、ウイルス粒子。
【請求項１８】
ＥＩＡＶベクター粒子であり、ＶＳＶ−Ｇによりシュードタイプされた、請求項１７に記載のウイルスベクター粒子。
【請求項１９】
薬学的に許容され得るキャリアまたは希釈剤と一緒に、請求項１７または１８に記載のウイルス粒子を含む、薬学的組成物。
【請求項２０】
インビボにおいてドーパミンを産生するための組成物であって、前記組成物は、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の構築物を含み、前記構築物は、被験体においてドーパミン合成酵素ＧＴＰ−シクロヒドロラーゼＩ（ＣＨ１）、チロシンヒドロキシラーゼ（ＴＨ）、および芳香族アミノ酸ドーパデカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）を発現する、組成物。
【請求項２１】
被験体における神経変性疾患を治療するおよび／または予防するための薬学的組成物であって、前記薬学的組成物は、請求項１７もしくは１８に記載のウイルス粒子または請求項１９に記載の薬学的組成物を含み、前記薬学的組成物は、前記被験体に対して投与されることを特徴とする、薬学的組成物。
【請求項２２】
インビボにおけるドーパミン合成を誘発することによって、被験体における神経変性疾患を治療するおよび／または予防するのに使用するための薬学的組成物であって、請求項１７もしくは１８に記載のウイルス粒子または請求項１９に記載の薬学的組成物を含む、薬学的組成物。
【請求項２３】
前記神経変性疾患が、パーキンソン病である、請求項２１または２２に記載の薬学的組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３５】
ヌクレオチド配列は、配列番号１として示される配列を含んでいてもよい。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
（ｉ）チロシンヒドロキシラーゼ（ＴＨ）をコードするヌクレオチド配列、（ｉｉ）ＧＴＰ−シクロヒドロラーゼＩ（ＣＨ１）をコードするヌクレオチド配列、および（ｉｉｉ）芳香族アミノ酸ドーパデカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）をコードするヌクレオチド配列を含む構築物であって、融合タンパク質ＴＨ−ＣＨ１をコードするように、ＴＨをコードする前記ヌクレオチド配列が、ＣＨ１をコードする前記ヌクレオチド配列に対して連結されている、構築物。
（項目２）
以下：
ＴＨ−Ｌ−ＣＨ１−ＩＲＥＳ−ＡＡＤＣ、
ＡＡＤＣ−Ｌ−ＴＨ−Ｌ−ＣＨ１、
ＴＨ−Ｌ−ＣＨ１−Ｌ−ＡＡＤＣ、および
ＴＨ−Ｌ−ＣＨ１−Ｐ−ＡＡＤＣ
から選択される、項目１に記載の構築物であって、ここで、
Ｌは、リンカーコード配列であり、
ＩＲＥＳは、配列内リボソーム進入部位であり、
Ｐは、プロモーターである、構築物。
（項目３）
ＴＨ−Ｌ−ＣＨ１−ＩＲＥＳ−ＡＡＤＣである、項目２に記載の構築物。
（項目４）
ヒトの使用頻度についてコドン最適化されていないリンカーを含む、前述の項目のいずれか一項に記載の構築物。
（項目５）
配列番号１として示される配列を含むリンカーを含む、項目１〜３のいずれか一項に記載の構築物。
（項目６）
配列ＡＡＤＣ−Ｌ１−ＴＨ−Ｌ２−ＣＨ１またはＴＨ−Ｌ１−ＣＨ１−Ｌ２−ＡＡＤＣを有し、Ｌ１およびＬ２が、２つの異なるリンカー配列である、項目１または２に記載の構築物。
（項目７）
Ｌ１およびＬ２の核酸配列は異なるが、Ｌ１およびＬ２のアミノ酸配列は同じである、項目６に記載の構築物。
（項目８）
Ｌ１およびＬ２の核酸配列が異なり、そして配列番号１および配列番号３から選択される、項目７に記載の構築物。
（項目９）
配列ＴＨ−Ｌ−ＣＨ１−Ｐ−ＡＡＤＣを有し、前記プロモーターが、構成的プロモーターまたは組織特異的プロモーターである、項目２に記載の構築物。
（項目１０）
前記プロモーターが、ＣＭＶプロモーター、ホスホグリセレートキナーゼプロモーター、またはチミジンキナーゼプロモーターである構成的プロモーターである、項目９に記載の構築物。
（項目１１）
前述の項目のいずれか一項に記載の構築物を含むウイルスベクターゲノム。
（項目１２）
レンチウイルスベクターゲノムまたはアデノ随伴ウイルスベクターゲノムである、項目１１に記載のウイルスベクターゲノム。
（項目１３）
項目１１または１２に記載のゲノムを含むウイルスベクター系。
（項目１４）
レンチウイルスベクター系またはアデノ随伴ウイルスベクター系である、項目１３に記載のウイルスベクター系。
（項目１５）
以下：
（ｉ）項目１１に記載のゲノム、
（ｉｉ）ｇａｇタンパク質およびｐｏｌタンパク質をコードする１つまたは複数のヌクレオチド配列、
（ｉｉｉ）（ｉｉ）のヌクレオチド配列によってコードされない、他の不可欠なウイルスパッケージング構成成分をコードするヌクレオチド配列
を含む、項目１４に記載のレンチウイルスベクター系。
（項目１６）
レンチウイルスベクター粒子を産生するための方法であって、前記方法は、産生細胞の中に、以下：
ｉ）項目１１に記載のゲノム、
ｉｉ）ｇａｇタンパク質およびｐｏｌタンパク質をコードする１つまたは複数のヌクレオチド配列、ならびに
ｉｉｉ）ｉｉ）のヌクレオチド配列のうちの１つまたはそれより多くによってコードされない、他の不可欠なウイルスパッケージング構成成分をコードするヌクレオチド配列
を導入するステップを包含する、方法。
（項目１７）
項目１３〜１５のいずれか一項に記載の系または項目１６に記載の方法によって産生されるウイルス粒子であって、前記ウイルス粒子は、ドーパミン合成酵素ＧＴＰ−シクロヒドロラーゼＩ（ＣＨ１）、チロシンヒドロキシラーゼ（ＴＨ）、および芳香族アミノ酸ドーパデカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）を含み、ここでＴＨおよびＣＨ１が、ＴＨ−ＣＨ１融合タンパク質として存在する、ウイルス粒子。
（項目１８）
ＥＩＡＶベクター粒子であり、ＶＳＶ−Ｇによりシュードタイプされた、項目１７に記載のウイルスベクター粒子。
（項目１９）
薬学的に許容され得るキャリアまたは希釈剤と一緒に、項目１７または１８に記載のウイルス粒子を含む、薬学的組成物。
（項目２０）
インビボにおいてドーパミンを産生するための方法であって、項目１〜１０のいずれか一項に記載の構築物から、被験体においてドーパミン合成酵素ＧＴＰ−シクロヒドロラーゼＩ（ＣＨ１）、チロシンヒドロキシラーゼ（ＴＨ）、および芳香族アミノ酸ドーパデカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）を発現させるステップを包含する、方法。
（項目２１）
被験体における神経変性疾患を治療するおよび／または予防するための方法であって、項目１７もしくは１８に記載のウイルス粒子または項目１８に記載の薬学的組成物を、前記被験体に対して投与するステップを包含する、方法。
（項目２２）
インビボにおけるドーパミン合成を誘発することによって、被験体における神経変性疾患を治療するおよび／または予防するのに使用するための、項目１７もしくは１８に記載のウイルス粒子または項目１９に記載の薬学的組成物。
（項目２３）
前記神経変性疾患が、パーキンソン病である、項目２１または２２に記載の方法、ウイルス粒子、または薬学的組成物。