【手続補正書】
【提出日】平成27年9月24日(2015.9.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＴＮＦ−αに結合する第１の抗体単一ドメイン又はその抗原結合断片と、ＴＮＦ−αに結合する第２の抗体単一ドメイン又はその抗原結合断片とを含むポリペプチドであって、
前記第１の抗体単一ドメインが、第１の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含み、
前記第２の抗体単一ドメインが、第２の軽鎖可変ドメインを含み、
前記第１の軽鎖可変ドメインが、配列番号１（ＶＬ１８）〜１８からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列又はそのＴＮＦ−α結合断片若しくは誘導体を含み、かつ
前記第１及び第２の抗体単一ドメインが、一緒になって二量体を形成する、
前記ポリペプチド。
【請求項２】
第１の軽鎖可変ドメインが、配列番号１（ＶＬ１８）又はそのＴＮＦ−α結合断片若しくは誘導体を含み、及び／又は、
第２の軽鎖可変ドメインが、配列番号１〜１８からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列又はそのＴＮＦ−α結合断片若しくは誘導体を含み；及び／又は
第２の軽鎖可変ドメインが、配列番号２（ＶＬ１１）に対応する配列又はそのＴＮＦ−α結合断片若しくは誘導体を含み；又は
二量体が、配列番号３２（ＶＬ１８−３Ｌ−ＶＬ１１）に対応する配列又はそのＴＮＦ−α結合断片若しくは誘導体含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
第１及び／又は第２の軽鎖可変ドメインが、ヒトＴＮＦ−αのＴＮＦ−α受容体への結合に拮抗し、及び／又は
第１及び／又は第２の軽鎖可変ドメインが、少なくとも１種の他の哺乳動物ＴＮＦ−αとさらに交差反応し、前記哺乳動物が霊長類ではない、請求項１又は２に記載のポリペプチド。
【請求項４】
哺乳動物がラット又はマウスであり、及び／又は、
第１及び／又は第２の軽鎖可変ドメインが少なくとも２種の他の哺乳動物のＴＮＦ−αと交差反応し、前記少なくとも２種の他の哺乳動物がげっ歯類及び非げっ歯類種である、請求項３に記載のポリペプチド。
【請求項５】
第１及び／又は第２の軽鎖可変ドメインが、
（ｉ）第１及び／又は第２の軽鎖可変ドメインの少なくとも１つのＴＨエピトープを除くことによって脱免疫化されており、
（ii）配列番号１（ＶＬ１８）に対応する配列を含み、Ｔ７Ｑ、Ｖ１５Ｐ、（Ａ５１Ｖ−Ｌ５４Ｒ／Ａ５１Ｖ−Ｌ５４Ｅ）、Ｋ６３Ｓ、Ｅ７９Ｋ、（Ｃ８０Ｓ）、Ｔ９１Ａ及びＬ１１１Ｋからなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸置換によって脱免疫化されており、前記置換が配列番号１におけるアミノ酸位置を参照し、
（iii）配列番号２（ＶＬ１１）に対応する配列を含み、Ｔ７Ｑ、Ｖ１５Ｐ、Ｒ３１Ｓ、（Ａ５１Ｖ−Ｌ５４Ｒ／Ａ５１Ｖ−Ｌ５４Ｅ）、Ｋ６３Ｓ、Ｅ７９Ｋ、（Ｃ８０Ｓ）、Ｔ９１Ａ、Ａ１００Ｓ及びＥ１０６Ｋからなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸置換によって脱免疫化されており、前記置換が配列番号２におけるアミノ酸位置を参照し、及び／又は
（iv）配列番号１９〜２３（ＶＬ１８バリアント５個）、配列番号２４〜２８（ＶＬ１１バリアント５個）、及びそのＴＮＦ−α結合断片又は誘導体からなる群から選択される少なくとも１つの配列を含む、請求項１〜４のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項６】
二量体が、配列番号３５〜３９（ＶＬ１８−３Ｌ−ＶＬ１１バリアント）からなる群から選択される少なくとも１つの配列又はそのＴＮＦ−α結合断片若しくは誘導体を含む、請求項５に記載のポリペプチド。
【請求項７】
第１又は第２の軽鎖可変ドメインの少なくとも１つに連結しているアルブミン結合ドメインをさらに含むか、
第１又は第２の軽鎖可変ドメインの少なくとも１つに融合物として連結しているアルブミン結合ドメインをさらに含むか、
第１又は第２の軽鎖可変ドメインの少なくとも１つに融合物としてリンカーを介して連結しているアルブミン結合ドメインをさらに含むか、或いは
第１又は第２の軽鎖可変ドメインの少なくとも１つに融合物として、配列番号２９（３Ｌ）に対応するアミノ酸配列を含むペプチドリンカーを介して連結しているアルブミン結合ドメインをさらに含む、請求項１〜６のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項８】
アルブミン結合ドメインが、下記(i)〜（vi）の少なくとも１つによってさらに特徴づけられる、請求項７に記載のポリペプチド。
（ｉ）アルブミン結合ドメインが、前記ポリペプチドの半減期を５倍向上させる；
（ii）アルブミン結合ドメインが、Ｓ．ズーエピデミカス（S. zooepidemicus）Ｚ５から単離されたアルブミン結合ドメインに対応する；
（iii）アルブミン結合ドメインが、配列番号３０（ＰＥＰ）に対応する配列又はそのアルブミン結合断片若しくは誘導体を含む；
（iv）アルブミン結合ドメインが、アルブミン結合ドメイン中の少なくとも１つのＴＨエピトープを除くことによって脱免疫化されている；
（ｖ）アルブミン結合ドメインが、Ｅ１２Ｄ、Ｔ２９Ｈ−Ｋ３５Ｄ及びＡ４５Ｄからなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸置換によって脱免疫化されており、前記置換が配列番号３０におけるアミノ酸位置を参照する；
及び
（iv）アルブミン結合ドメインが、配列番号３１に対応するアミノ酸配列を含む；
【請求項９】
配列番号３３（ＶＬ１８−３Ｌ−ＶＬ１１−ＰＥＰ）に対応する配列又はそのＴＮＦ−α結合断片若しくは誘導体を含む、請求項８に記載のポリペプチド。
【請求項１０】
第１及び／又は第２の軽鎖可変ドメインの少なくとも１つ中及び／又はアルブミン結合ドメイン中の少なくとも１つのＴＨエピトープを除くことによって脱免疫化されているか、或いは
配列番号３４及び４０〜４４（ＶＬ１８−３Ｌ−ＶＬ１１−ＰＥＰバリアント）からなる群から選択される少なくとも１つの配列又はそのＴＮＦ−α結合断片若しくは誘導体を含む、請求項７〜９のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１１】
ＴＮＦ−αに結合する抗体単一ドメイン又はその抗原結合断片を含むポリペプチドであって、前記抗体単一ドメインが、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含み、前記軽鎖可変ドメインが、配列番号１〜１８からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列又はそのＴＮＦ−α結合断片若しくは誘導体を含む、前記ポリペプチド。
【請求項１２】
軽鎖可変ドメインが、配列番号１（ＶＬ１８）又は配列番号２（ＶＬ１１）を含み、及び／又は
軽鎖可変ドメインが、ヒトＴＮＦ−αのＴＮＦ−α受容体への結合に拮抗し、及び／又は
軽鎖可変ドメインが、少なくとも１種の他の哺乳動物ＴＮＦ−αとさらに交差反応し、前記哺乳動物が霊長類ではない、請求項１１に記載のポリペプチド。
【請求項１３】
哺乳動物がラット又はマウスであり、及び／又は
軽鎖可変ドメインが、少なくとも２種の他の哺乳動物のＴＮＦ−αと交差反応し、前記少なくとも２種の他の哺乳動物がげっ歯類及び非げっ歯類種である、請求項１２に記載のポリペプチド。
【請求項１４】
軽鎖可変ドメインが、
（ｉ）軽鎖可変ドメインの少なくとも１つのＴＨエピトープを除くことによって脱免疫化されており、
（ii）配列番号１（ＶＬ１８）に対応する配列を含み、Ｔ７Ｑ、Ｖ１５Ｐ、（Ａ５１Ｖ−Ｌ５４Ｒ／Ａ５１Ｖ−Ｌ５４Ｅ）、Ｋ６３Ｓ、Ｅ７９Ｋ、（Ｃ８０Ｓ）、Ｔ９１Ａ及びＬ１１１Ｋからなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸置換によって脱免疫化されており、前記置換が配列番号１におけるアミノ酸位置を参照し、
（iii）配列番号２（ＶＬ１１）に対応する配列を含み、Ｔ７Ｑ、Ｖ１５Ｐ、Ｒ３１Ｓ、（Ａ５１Ｖ−Ｌ５４Ｒ／Ａ５１Ｖ−Ｌ５４Ｅ）、Ｋ６３Ｓ、Ｅ７９Ｋ、（Ｃ８０Ｓ）、Ｔ９１Ａ、Ａ１００Ｓ及びＥ１０６Ｋからなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸置換によって脱免疫化されており、前記置換が配列番号２におけるアミノ酸位置を参照し、又は
（iv）配列番号１９〜２３（ＶＬ１８バリアント５個）、配列番号２４〜２８（ＶＬ１１バリアント５個）、及びそのＴＮＦ−α結合断片又は誘導体からなる群から選択される少なくとも１つの配列を含む、請求項１１〜１３のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１５】
ポリペプチドに連結しているアルブミン結合ドメインをさらに含むか、
ポリペプチドに融合物として連結しているアルブミン結合ドメインをさらに含むか、
ポリペプチドに融合物としてリンカーを介して連結しているアルブミン結合ドメインをさらに含むか、或いは
ポリペプチドに融合物として、配列番号２９（３Ｌ）に対応するアミノ酸配列を含むペプチドリンカーを介して連結しているアルブミン結合ドメインをさらに含む、請求項１１〜１４のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１６】
軽鎖可変ドメイン中及び／又はアルブミン結合ドメイン中の少なくとも１つのＴＨエピトープを除くことによって脱免疫化されているか、又は
アルブミン結合ドメインが、下記(ｉ)〜（ｖ）の少なくとも１つによってさらに特徴づけられる、請求項１５に記載のポリペプチド。
（ｉ）アルブミン結合ドメインが、前記ポリペプチドの半減期を５倍向上させる；
（ii）アルブミン結合ドメインが、Ｓ．ズーエピデミカス（S. zooepidemicus）Ｚ５から単離されたアルブミン結合ドメインに対応する；
（iii）アルブミン結合ドメインが、配列番号３０（ＰＥＰ）に対応する配列又はそのアルブミン結合断片若しくは誘導体を含む；
（iv）アルブミン結合ドメインが、Ｅ１２Ｄ、Ｔ２９Ｈ−Ｋ３５Ｄ及びＡ４５Ｄからなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸置換によって脱免疫化されており、前記置換が配列番号３０におけるアミノ酸位置を参照する；
及び
（ｖ）アルブミン結合ドメインが、配列番号３１に対応するアミノ酸配列を含む；
【請求項１７】
ＴＮＦ−α関連状態に罹患している及び／又はその素因を有する対象においてそれを治療する及び／又は遅延させるための医薬の調製のための、請求項１〜１６のいずれかに記載のポリペプチドの有効量の使用、又は
ＴＮＦ−α関連炎症性障害に罹患している及び／又はその素因を有する対象においてそれを治療する及び／又は遅延させるための医薬の調製のための、請求項１〜１６のいずれかに記載のポリペプチドの有効量の使用、又は
関節リウマチに罹患している及び／又はその素因を有する対象においてそれを治療する及び／又は遅延させるための医薬の調製のための、請求項１〜１６のいずれかに記載のポリペプチドの有効量の使用。
【請求項１８】
医薬が１カ月に２回以下で投与されるか、或いは
医薬が１カ月に１回以下で投与される、請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
請求項１〜１６のいずれかに記載のポリペプチドの有効量及び薬学的に許容される担体を含む、ＴＮＦ−α関連状態に罹患している及び／又はその素因を有する対象においてそれを治療する及び／又は遅延させるための医薬組成物。
【請求項２０】
請求項１〜１６のいずれかに記載のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸；又は
前記核酸を含むベクター；又は
前記ベクター
を含む宿主細胞。
【請求項２１】
請求項１〜１６のいずれかに記載のポリペプチドの作製方法であって、
（ｉ）前記ポリペプチドをコードするベクターを含む宿主細胞を用意するステップ；
（ii）前記ポリペプチドの発現を可能にする条件下で前記細胞を培養するステップ；及び
（iii）前記培養物から前記ポリペプチドを回収するステップ
を含む、前記方法。
【請求項２２】
配列番号３３（ＶＬ１８−３Ｌ−ＶＬ１１−ＰＥＰ）に対応する配列を含む、請求項９に記載のポリペプチド。
【請求項２３】
請求項２２に記載のポリペプチドの有効量と、薬学的に許容される担体とを含む、ＴＮＦ−α関連状態に罹患している及び／又はその素因を有する対象においてそれを治療する及び／又は遅延させるための医薬組成物。