【手続補正書】
【提出日】平成26年12月16日(2014.12.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞におけるｈＣＥ−２及び／又はｈＣＥ−３の量とは無関係に独立し、細胞におけるｈＣＥ−１の量に比例して細胞内イメージングシグナルを作り出す、細胞のための造影剤であって、
上記造影剤は、（ａ）造影剤及び（ｂ）アルファモノ−又はジ−置換されたアミノ酸エステルの共有結合性の複合体であり、
（ａ）は（ｂ）に直接的に結合しているか、或いは（ａ）は（ｂ）にリンカーラジカルにより間接的に結合し、上記の直接的な結合又は間接的な結合は（ｂ）のアミノ基を介し、
当該アミノ基は、カルボニル基に直接結合せず、且つ
上記アルファモノ−又はジ−置換されたアミノ酸エステル部分は、細胞内酵素ｈＣＥ−２又はｈＣＥ−３に比べて、細胞内カルボキシルエステラーゼ酵素ｈＣＥ−１により対応するカルボン酸部分に選択的に加水分解可能である、造影剤。
【請求項２】
アルファモノ−又はジ−置換されたアミノ酸エステルが、式（ＩＡ）又は式（ＩＢ）：
【化１】
2013545795.tif 000001
［式中、
Ｒ１は、１以上の細胞内カルボキシルエステラーゼ酵素によりカルボン酸基に加水分解可能なエステル基であり；
Ｒ２は、天然又は非天然のアルファアミノ酸の側鎖であり；
Ｒ３は、Ｈ又はＲ２であり；
Ｙは、結合、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＲ４−、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＲ４−、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲ４−又は−ＮＲ４−Ｃ（＝Ｏ）（式中、Ｒ４は、水素又は置換されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキルである。）であり；
Ｌは、式−（Ａｌｋ１）ｍ（Ｑ）ｎ（Ａｌｋ２）ｐ−の二価のラジカル（式中、
ｍ、ｎ及びｐは、独立して、０又は１であり、
Ｑは、（ｉ）置換されていてもよい二価の単環式又は二環式の５〜１３員環の炭素環又はヘテロ環のラジカル、又は（ｉｉ）ｍ及びｐが同時に０の場合、式−Ｘ２−Ｑ１−又は式−Ｑ１−Ｘ２−の二価のラジカル（式中、Ｘ２は、−Ｏ−、−Ｓ−又はＮＲＡ−（式中、ＲＡは、水素又は置換されていてもよいＣ１−Ｃ３アルキルである。）であり、且つＱ１は、置換されていてもよい二価の単環式又は二環式の５〜１３員環の炭素環又はヘテロ環のラジカルである。）であり；
Ａｌｋ１及びＡｌｋ２は、独立して、置換されていてもよい二価のＣ３−Ｃ７シクロアルキルラジカル、又は置換されていてもよい直鎖又は分枝鎖の、Ｃ１−Ｃ６アルキレンラジカル、Ｃ２−Ｃ６アルケニレンラジカル又はＣ２−Ｃ６アルキニレンラジカル（それらは、エーテル（−Ｏ−）、チオエーテル（−Ｓ−）又はアミノ（−ＮＲＡ−）（式中、ＲＡは、水素又は置換されていてもよいＣ１−Ｃ３アルキルである。）のリンクを含んでいてもよく、或いは末端に有していてもよい。）である。）であり；
Ｘは、結合、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲ４Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ４−、−ＮＲ４Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ５−、−ＮＲ４Ｓ（＝Ｏ）２−又は−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲ４−（式中、Ｒ４及びＲ５は、独立して、水素又は置換されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキルである。）であり；
ｚは、０又は１であり；且つ
環Ｄは、置換されていてもよい３ないし７員のヘテロシクリル基であり、ここで、Ｒ１は、示された環窒素に隣接している環炭素に結合しており；且つ環Ｄは、フェニル基、５ないし６員のヘテロアリール基、Ｃ３−７カルボシクリル基又は５ないし６員のヘテロシクリル基を含む第二の環と縮合していてもよく、環Ｄが、フェニル基、５ないし６員のヘテロアリール基、Ｃ３−７カルボシクリル基又は５ないし６員のヘテロシクリル基を含む第二の環と縮合している場合、リンカー基−Ｙ−Ｌ−Ｘ−（ＣＨ２）ｚが、環Ｄ又は当該第二の環の環原子の基である。］
のラジカルによって造影剤に間接的に結合している、請求項１に記載の造影剤。
【請求項３】
Ｒ３がＨである、請求項２に記載の造影剤。
【請求項４】
アルファモノ−又はジ−置換されたアミノ酸エステルが、式（ＩＡ）のラジカルによって造影剤に間接的に結合しており、ここで、
Ｒ１が、式−（Ｃ＝Ｏ）ＯＲ１４のエステル基（式中、Ｒ１４は、
Ｒ８Ｒ９Ｒ１０Ｃ−（式中、
（ｉ）  Ｒ８が、水素、置換されていてもよい（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−（Ｚ１）ａ−［（Ｃ１−Ｃ３）アルキル］ｂ−又は置換されていてもよい（Ｃ２−Ｃ３）アルケニル−（Ｚ１）ａ−［（Ｃ１−Ｃ３）アルキル］ｂ−（式中、ａ及びｂは、独立して、０又は１であり、且つＺ１は、−Ｏ−、−Ｓ−又は−ＮＲ１１−（式中、Ｒ１１は、水素又は（Ｃ１−Ｃ３）アルキルである。）である。）であり；且つＲ９及びＲ１０が、独立して、水素又は（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−であるか；
（ｉｉ）  Ｒ８が、水素又は置換されていてもよいＲ１２Ｒ１３Ｎ−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−（式中、Ｒ１２は水素又は（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり、且つＲ１３は水素又は（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであるか；或いはＲ１２及びＲ１３は、それらが結合する窒素とともに、置換されていてもよい、単環式の５又は６個の環原子のヘテロ環又は二環式の８ないし１０個の環原子のヘテロ環系を形成している。）であり、且つＲ９及びＲ１０が、独立して、水素又は（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−であるか；或いは
（ｉｉｉ）  Ｒ８及びＲ９が、それらが結合する炭素とともに、置換されていてもよい、単環式若しくは架橋単環式の３ないし７個の環原子の炭素環又は二環式若しくは架橋単環式の８ないし１０個の環原子の炭素環系を形成し、且つＲ１０が水素であり、
ただし、上記の（ｉ）、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）の場合の「アルキル」はフルオロアルキルを含む。）である。）であり；
Ｒ２が、
Ｃ１−Ｃ６アルキル基、フェニル基、２−、３−又は４−ヒドロキシフェニル基、２−、３−又は４−メトキシフェニル基、２−、３−又は４−ピリジルメチル基、ベンジル基、フェニルエチル基、２−、３−又は４−ヒドロキシベンジル基、２−、３−又は４−ベンジルオキシベンジル基、２−、３−又は４−Ｃ１−Ｃ６アルコキシベンジル基及びベンジルオキシ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）−基；
任意の官能基が保護されていてもよい天然のαアミノ酸の特徴的な基；
基−［Ａｌｋ］ｎＲ６（式中、Ａｌｋは、１以上の−Ｏ−原子、−Ｓ−原子又は−Ｎ（Ｒ７）−基［式中、Ｒ７は、水素原子又は（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基である。］が割り込んでいてもよい、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基又は（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル基であり、ｎは０又は１であり、且つＲ６は、置換されていてもよいシクロアルキル基又は置換されていてもよいシクロアルケニル基である。）；
式−ＯＣＨ２ＣＯＲ８の基でフェニル環が置換されたベンジル基（式中、Ｒ８は、ヒドロキシル、アミノ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、フェニル（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ジ（（Ｃ１−Ｃ６）アルキル）アミノ、フェニル（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、アミノ酸の残基、又はその酸ハロゲン化物、そのエステル若しくはそのアミド誘導体の残基であり、当該残基は、アミド結合を介して結合し、当該アミノ酸は、グリシン、α又はβアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、セリン、トレオニン、システイン、メチオニン、アスパラギン、グルタミン、リシン、ヒスチジン、アルギニン、グルタミン酸及びアスパラギン酸から選ばれる。）；
ヘテロ環（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基（ここで、ヘテロ環が、置換されていないか、或いはハロ、ニトロ、カルボキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、シアノ、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、トリフルオロメチル（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ヒドロキシ、ホルミル、アミノ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ジ−（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、メルカプト、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、メルカプト（Ｃ１−Ｃ６）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルフェニルメチルでモノ−又はジ−置換されている。）；及び
基−ＣＲａＲｂＲｃ（式中：
Ｒａ、Ｒｂ及びＲｃが、それぞれ独立して水素、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル、フェニル（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキルであるか；或いは
Ｒｃが、水素であり、且つＲａ及びＲｂが、独立して、フェニル又はヘテロアリール（例、ピリジル）であるか；或いは
Ｒｃが、水素、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル、フェニル（Ｃ１−Ｃ６）アルキル又は（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキルであり、且つＲａ及びＲｂが、それらが結合する炭素原子とともに、３ないし８員のシクロアルキル環又は５ないし６員のヘテロ環を形成するか；或いは
Ｒａ、Ｒｂ及びＲｃが、それらが結合する炭素原子とともに、三環式の環（例えばアダマンチル）を形成するか；或いは
Ｒａ及びＲｂが、それぞれ独立して、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル、フェニル（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、又は以下でＲｃとして定義された水素以外の基であるか、或いはＲａ及びＲｂが、それらが結合する炭素原子とともに、シクロアルキル環又はヘテロ環を形成し、且つＲｃが、水素、−ＯＨ、−ＳＨ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＣＯ２Ｈ、（Ｃ１−Ｃ４）ペルフルオロアルキル、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｏ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｏ（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、−Ｓ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＳＯ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＳＯ２（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｓ（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、−ＳＯ（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、−ＳＯ２（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル又は基−Ｑ−Ｗ（式中、Ｑは、結合又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−又は−ＳＯ２−であり、且つＷは、フェニル基、フェニルアルキル基、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル基、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキルアルキル基、（Ｃ４−Ｃ８）シクロアルケニル基、（Ｃ４−Ｃ８）シクロアルケニルアルキル基、ヘテロアリール基又はヘテロアリールアルキル基であり、ここで、基Ｗは、ヒドロキシル、ハロゲン、−ＣＮ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）２、−ＣＨＯ、−ＣＨ２ＯＨ、（Ｃ１−Ｃ４）ペルフルオロアルキル、−Ｏ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｓ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＳＯ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＳＯ２（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｎ（（Ｃ１−Ｃ６）アルキル）２、−ＮＨＣＯ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、（Ｃ４−Ｃ８）シクロアルケニル、フェニル又はベンジルから独立して選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよい。）である。）から選ばれ；
Ｒ３が、Ｈ又はＲ２であり；
Ｙが、結合であり；
Ｌが、式−（Ａｌｋ１）ｍ（Ｑ）ｎ（Ａｌｋ２）ｐ−の二価のラジカル（式中、
ｍ、ｎ及びｐが、独立して０又は１であり、
Ｑが、１，４−フェニレンであり；
Ａｌｋ１及びＡｌｋ２が、独立して、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ−、ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ≡ＣＣＨ２−、ＣＨ２Ｃ≡Ｃ−、ＣＨ２Ｃ≡ＣＣＨ２、−ＣＨ２Ｗ−、−ＣＨ２ＣＨ２Ｗ−、−ＷＣＨ２ＣＨ２Ｗ−、−ＣＨ２ＣＨ２ＷＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＷＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ２ＷＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＷＣＨ２ＣＨ２ＷＣＨ２−又は−ＷＣＨ２ＣＨ２−（式中、Ｗは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−Ｎ（ＣＨ３）−又は−ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）ＣＨ２−である。）であるか、或いはＡｌｋ１及びＡｌｋ２が、独立して、シクロプロピルラジカル、シクロペンチルラジカル又はシクロヘキシルラジカルであってもよい。）であり；
Ｘが、結合、−Ｏ−又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）−であり；且つ
ｚが、０又は１である、請求項２又は３に記載の造影剤。
【請求項５】
アルファモノ−又はジ−置換されたアミノ酸エステルが、式（ＩＡ）のラジカルによって造影剤に間接的に結合しており、ここで、
Ｒ１が、エステル基ＣＯＯＲ１４（式中、Ｒ１４が、メチル、トリフルオロメチル、エチル、ｎ−若しくはイソ−プロピル、ｎ−、ｓｅｃ−若しくはｔｅｒｔ−ブチル、ネオペンチル、シクロヘキシル、シクロペンチル、ノルボルニル、アリル、フェニル、ベンジル、２−、３−若しくは４−ピリジルメチル、Ｎ−メチルピペリジン−４−イル、テトラヒドロフラン−３−イル又はメトキシエチルから選ばれる。）であり；
Ｒ２が、ベンジル、フェニル、シクロヘキシルメチル、ピリジン−３−イルメチル、ｔｅｒｔ−ブトキシメチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、１−ベンジルチオ−１−メチルエチル、１−メチルチオ−１−メチルエチル、１−メルカプト−１−メチルエチル、フェニルエチルから選ばれ；
Ｒ３が、Ｈ又はＲ２であり；
ラジカル−Ｙ−Ｌ−Ｘ−（ＣＨ２）ｚが、−（ＣＨ２）ｖ−、−（ＣＨ２）ｖＯ−、（ＣＨ２）ｗＯ−、
【化２】
2013545795.tif 000002
（式中、ｖは、１、２、３又は４であり、且つｗは、１、２又は３である。）、並びに−（ＣＨ２）ｘ−Ｈｅｔ２−、−ＣＨ２−Ｐｈ−（Ｈｅｔ１）ｙｙ−（ＣＨ２）ｘ−（Ｈｅｔ２）ｙ−及び−ＣＨ２−Ｐｈ−ＣＨ＝ＣＨ−（式中、Ｐｈは、１，４−フェニレン基であり、Ｈｅｔ１は、−Ｏ−又は−ＮＨ−であり、Ｈｅｔ２は、−Ｏ−、−ＮＨ−又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）−であり、ｘは、０、１又は２であり、ｙは、０又は１であり、且つｙｙは、０又は１である。）から選ばれる、
請求項２ないし４の何れか１項に記載の造影剤。
【請求項６】
アルファモノ−又はジ−置換されたアミノ酸エステルが、式（ＩＢ）のラジカルによって造影剤に間接的に結合しており、ここで、
環Ｄが、環Ｄに示される窒素原子に加えて、Ｎ、Ｏ及びＳから選ばれる０、１又は２個のヘテロ原子を含む飽和した非縮合の５ないし６員のヘテロシクリル基であり、当該環は、基Ｒ１で置換され、且つ基Ｒ２で置換されていてもよく、ここでＲ１は、示された環窒素原子に隣接した環炭素原子に結合し、且つＲ２は、基Ｒ１を有する同一の炭素原子上にあり、且つ環Ｄは、さらに置換されていないか、或いはハロゲン原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−４アルコキシ基及びヒドロキシル基から選ばれる１又は２個の基でさらに置換されており；
Ｒ１が、式−（Ｃ＝Ｏ）ＯＲ１４のエステル基（式中、Ｒ１４は、
Ｒ８Ｒ９Ｒ１０Ｃ−（式中、
（ｉ）  Ｒ８が、水素、置換されていてもよい（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−（Ｚ１）ａ−［（Ｃ１−Ｃ３）アルキル］ｂ−又は置換されていてもよい（Ｃ２−Ｃ３）アルケニル−（Ｚ１）ａ−［（Ｃ１−Ｃ３）アルキル］ｂ−（式中、ａ及びｂは、独立して、０又は１であり、且つＺ１は、−Ｏ−、−Ｓ−又は−ＮＲ１１−（式中、Ｒ１１は、水素又は（Ｃ１−Ｃ３）アルキルである。）である。）であり；且つＲ９及びＲ１０が、独立して、水素又は（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−であるか；
（ｉｉ）  Ｒ８が、水素又は置換されていてもよいＲ１２Ｒ１３Ｎ−（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−（式中、Ｒ１２は水素又は（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり、且つＲ１３は水素又は（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであるか；或いはＲ１２及びＲ１３は、それらが結合する窒素とともに、置換されていてもよい、単環式の５又は６個の環原子のヘテロ環又は二環式の８ないし１０個の環原子のヘテロ環系を形成している。）であり、且つＲ９及びＲ１０が、独立して、水素又は（Ｃ１−Ｃ３）アルキル−であるか；或いは
（ｉｉｉ）  Ｒ８及びＲ９が、それらが結合する炭素とともに、置換されていてもよい、単環式若しくは架橋単環式の３ないし７個の環原子の炭素環又は二環式若しくは架橋単環式の８ないし１０個の環原子の炭素環系を形成し、且つＲ１０が水素であり、
ただし、上記の（ｉ）、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）の場合の「アルキル」はフルオロアルキルを含む。）である。）であり；
Ｒ２が、存在する場合、
Ｃ１−Ｃ６アルキル基、フェニル基、２−、３−又は４−ヒドロキシフェニル基、２−、３−又は４−メトキシフェニル基、２−、３−又は４−ピリジルメチル基、ベンジル基、フェニルエチル基、２−、３−又は４−ヒドロキシベンジル基、２−、３−又は４−ベンジルオキシベンジル基、２−、３−又は４−Ｃ１−Ｃ６アルコキシベンジル基及びベンジルオキシ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）−基；
任意の官能基が保護されていてもよい天然のαアミノ酸の特徴的な基；
基−［Ａｌｋ］ｎＲ６（式中、Ａｌｋは、１以上の−Ｏ−原子、−Ｓ−原子又は−Ｎ（Ｒ７）−基［式中、Ｒ７は、水素原子又は（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基である。］が割り込んでいてもよい、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基又は（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル基であり、ｎは０又は１であり、且つＲ６は、置換されていてもよいシクロアルキル基又は置換されていてもよいシクロアルケニル基である。）；
式−ＯＣＨ２ＣＯＲ８の基でフェニル環が置換されたベンジル基（式中、Ｒ８は、ヒドロキシル、アミノ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、フェニル（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ジ（（Ｃ１−Ｃ６）アルキル）アミノ、フェニル（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、アミノ酸の残基、又はその酸ハロゲン化物、そのエステル若しくはそのアミド誘導体の残基であり、当該残基は、アミド結合を介して結合し、当該アミノ酸は、グリシン、α又はβアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、セリン、トレオニン、システイン、メチオニン、アスパラギン、グルタミン、リシン、ヒスチジン、アルギニン、グルタミン酸及びアスパラギン酸から選ばれる。）；
ヘテロ環（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基（ここで、ヘテロ環が、置換されていないか、或いはハロ、ニトロ、カルボキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、シアノ、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、トリフルオロメチル（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ヒドロキシ、ホルミル、アミノ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ジ−（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、メルカプト、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、メルカプト（Ｃ１−Ｃ６）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルフェニルメチルでモノ−又はジ−置換されている。）；及び
基−ＣＲａＲｂＲｃ（式中：
Ｒａ、Ｒｂ及びＲｃが、それぞれ独立して、水素、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル、フェニル（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキルであるか；或いは
Ｒｃが、水素であり、且つＲａ及びＲｂが、独立して、フェニル又はヘテロアリール（例、ピリジル）であるか；或いは
Ｒｃが、水素、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル、フェニル（Ｃ１−Ｃ６）アルキル又は（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキルであり、且つＲａ及びＲｂが、それらが結合する炭素原子とともに、３ないし８員のシクロアルキル環又は５ないし６員のヘテロ環を形成するか；或いは
Ｒａ、Ｒｂ及びＲｃが、それらが結合する炭素原子とともに、三環式の環（例えばアダマンチル）を形成するか；或いは
Ｒａ及びＲｂが、それぞれ独立して、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル、フェニル（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、又は以下でＲｃとして定義された水素以外の基であるか、或いはＲａ及びＲｂが、それらが結合する炭素原子とともに、シクロアルキル環又はヘテロ環を形成し、且つＲｃが、水素、−ＯＨ、−ＳＨ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＣＯ２Ｈ、（Ｃ１−Ｃ４）ペルフルオロアルキル、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｏ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｏ（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、−Ｓ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＳＯ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＳＯ２（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｓ（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、−ＳＯ（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、−ＳＯ２（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル又は基−Ｑ−Ｗ（式中、Ｑは、結合又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−又は−ＳＯ２−であり、且つＷは、フェニル基、フェニルアルキル基、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル基、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキルアルキル基、（Ｃ４−Ｃ８）シクロアルケニル基、（Ｃ４−Ｃ８）シクロアルケニルアルキル基、ヘテロアリール基又はヘテロアリールアルキル基であり、ここで、基Ｗは、ヒドロキシル、ハロゲン、−ＣＮ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）２、−ＣＨＯ、−ＣＨ２ＯＨ、（Ｃ１−Ｃ４）ペルフルオロアルキル、−Ｏ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｓ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＳＯ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＳＯ２（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｎ（（Ｃ１−Ｃ６）アルキル）２、−ＮＨＣＯ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、（Ｃ４−Ｃ８）シクロアルケニル、フェニル又はベンジルから独立して選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよい。）である。）から選ばれ、
Ｙが、結合であり；
Ｌが、式−（Ａｌｋ１）ｍ（Ｑ）ｎ（Ａｌｋ２）ｐ−の二価のラジカル（式中、
ｍ、ｎ及びｐが、独立して０又は１であり、
Ｑが、１，４−フェニレンであり；
Ａｌｋ１及びＡｌｋ２が、独立して、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ−、ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ≡ＣＣＨ２−、ＣＨ２Ｃ≡Ｃ−、ＣＨ２Ｃ≡ＣＣＨ２、−ＣＨ２Ｗ−、−ＣＨ２ＣＨ２Ｗ−、−ＷＣＨ２ＣＨ２Ｗ−、−ＣＨ２ＣＨ２ＷＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＷＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ２ＷＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＷＣＨ２ＣＨ２ＷＣＨ２−又は−ＷＣＨ２ＣＨ２−（式中、Ｗは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−Ｎ（ＣＨ３）−又は−ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）ＣＨ２−である。）であるか、或いはＡｌｋ１及びＡｌｋ２が、独立して、シクロプロピルラジカル、シクロペンチルラジカル又はシクロヘキシルラジカルであってもよい。）であり；
Ｘが、結合、−Ｏ−又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）−であり；且つ
ｚが、０又は１である、
請求項２に記載の造影剤。
【請求項７】
アルファモノ−又はジ−置換されたアミノ酸エステルが、式（ＩＢ）のラジカルによって造影剤に間接的に結合しており、ここで、
環Ｄが、
【化３】
2013545795.tif 000003
から選ばれる基であり、
Ｒ１が、エステル基ＣＯＯＲ１４（式中、Ｒ１４が、メチル、トリフルオロメチル、エチル、ｎ−若しくはイソ−プロピル、ｎ−、ｓｅｃ−若しくはｔｅｒｔ−ブチル、ネオペンチル、シクロヘキシル、シクロペンチル、ノルボルニル、アリル、フェニル、ベンジル、２−、３−若しくは４−ピリジルメチル、Ｎ−メチルピペリジン−４−イル、テトラヒドロフラン−３−イル又はメトキシエチルから選ばれる。）であり；
ラジカル−Ｙ−Ｌ−Ｘ−（ＣＨ２）ｚが、−（ＣＨ２）ｖ−、−（ＣＨ２）ｖＯ−、（ＣＨ２）ｗＯ−、
【化４】
2013545795.tif 000004
（式中、ｖは、１、２、３又は４であり、且つｗは、１、２又は３である。）、並びに
−（ＣＨ２）ｘ−Ｈｅｔ２−、−ＣＨ２−Ｐｈ−（Ｈｅｔ１）ｙｙ−（ＣＨ２）ｘ−（Ｈｅｔ２）ｙ−及び−ＣＨ２−Ｐｈ−ＣＨ＝ＣＨ−（式中、Ｐｈは１，４−フェニレン基であり、Ｈｅｔ１は−Ｏ−又は−ＮＨ−であり、Ｈｅｔ２は、−Ｏ−、−ＮＨ−又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）−であり、ｘは、０、１又は２であり、ｙは、０又は１であり、且つｙｙは、０又は１である。）から選ばれる、
請求項２又は６に記載の造影剤。
【請求項８】
式：
【化５】
2013545795.tif 000005
を有する化合物並びにそれらの塩から選ばれる、請求項１に記載の造影剤。
【請求項９】
請求項１ないし８の何れか１項に記載の造影剤を含むマクロファージ細胞をイメージングするための薬剤。
【請求項１０】
マクロファージ細胞をイメージングするための薬剤の製造における、請求項１ないし８の何れか１項に記載の造影剤の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３１】
市販の試薬及び溶媒（ＨＰＬＣグレード）をさらに精製することなく用いた。溶媒はＢｕｃｈｉロータリーエバポレーターを用いて除去した。マイクロウェーブ照射はＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ（登録商標）Ｅｉｇｈｔマイクロウェーブ合成装置を用いて行った。フラッシュクロマトグラフィーカラムによる化合物の精製は、Ｆｌｕｏｒｏｃｈｅｍから入手した、粒径４０−６３μｍ（２３０−４００メッシュ）のシリカゲルを用いて実行した。逆相カラムクロマトグラフィーは、Ｍｅｒｃｋ  ｌｉＣｈｒｏｐｒｅｐ  ＲＰ−１８  （４０−６０μｍ）のプレカラムを用いた後、ＲｅｄｉＳｅｐ  Ｒｆ  Ｃ１８カラム（Ｐｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｂａｓｉｎｇｓｔｏｋｅ、ＵＫ）を用いたＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（Ｔｅｌｅｄｙｎｅ  Ｉｓｃｏ、Ｎｅｂｒａｓｋａ、ＵＳＡ）で精製して実行した。分取ＨＰＬＣによる化合物の精製は、ｒｅｖｅｒｓｅ  ｐｈａｓｅ  Ａｘｉａ（登録商標）ｐｒｅｐ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（１０μｍｕ、１００ｘ２１．２ｍｍ）（グラジエント０−１００％Ｂ（Ａ＝水／０．０５％ＴＦＡ、Ｂ＝アセトニトリル／０．０５％ＴＦＡ）（１０分に渡る）、流速＝２５ｍｌ／分、２５４ｎｍでのＵＶ検出）を使用したＧｉｌｓｏｎ  ｓｙｓｔｅｍｓで行った。
１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、重水素化溶媒中にてＢｒｕｋｅｒ  ３００  ＭＨｚ  ＡＶ  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒで記録した。化学シフト（δ）は、百万分率とした。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）分析は、Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ  ６０  Ｆ２５４  （Ｍｅｒｃｋ）プレートを用いて実行し及びＵＶ光を用いて可視化した。分析ＨＰＬＣ／ＭＳを、逆相ＬｕｎａＣ１８カラム（３μｍ、５０ｘ４．６ｍｍ）（グラジエント５−９５％Ｂ（Ａ＝水／０．１％ギ酸、Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ギ酸）（２．２５分に渡る）、流速＝２．２５ｍｌ／分）を用いたＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰ１１００  ＬＣ  ｓｙｓｔｅｍで実行した。ＵＶスペクトルは、Ｇ１３１５Ｂ  ＤＡＤ  検出器を用いて２２０及び２５４ｎｍにて記録した。質量スペクトルは、ＬＣ／ＭＳＤ  ＳＬ  Ｇ１９５６Ｂ検出器で範囲ｍ／ｚ１５０〜８００にて得た。データは、ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎ及びＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎ  Ｄａｔｅ  Ｂｒｏｗｓｅｒ  ｓｏｆｔｗａｒｅを用いて集積し報告した。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４２】
[4-(3-アミノプロポキシ)フェニル]メタノール トリフルオロアセテート(135 mg, 0.47 mmol)のEtOH(2 mL)撹拌溶液に、炭酸カリウム(126 mg, 0.91 mmol)を加えた。この溶液に、4-クロロ-7-ニトロ-2,1,3-ベンゾオキサジアゾール(91 mg, 0.47 mmol)のEtOH(3 mL)溶液を室温で2時間滴下した。溶媒を留去し、残渣を分取TLC(シリカゲル, 50% 酢酸エチル／ヘプタン)で精製し、鮮黄色固体として(4-{3-[(7-ニトロ-2,1,3-ベンゾオキサジアゾール-4-イル)アミノ]プロポキシ}フェニル)メタノール(20 mg)を得た。LCMS: m/z 345 [M+H]+.
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８９】
ここで記載されたように、通常、カルボキシエステラーゼが、遊離アミノ酸エステル(例、遊離環状アミノ酸エステル)を親酸に加水分解する場合、リンカーラジカル−Ｙ−Ｌ−Ｘ−（ＣＨ２）ｚを介して造影剤に結合した場合に、同じエステルモチーフも加水分解する。従って、ここで記載された破壊細胞アッセイは、アミノ酸エステルが細胞内カルボキシエステラーゼ酵素により加水分解可能であるかどうかを決定するための遊離アミノ酸エステルの試験のために用いることができ、この試験の結果は、接続した分子の性質に関する良好な指標を与える。次いで、そのようにして選ばれたエステルモチーフは、それぞれのリンカーラジカルを介して阻害剤に接続している場合に、同じカルボキシエステラーゼアッセイで再アッセイし、それに基づき、さらにカルボキシエステラーゼ基質であることを確認する。