【手続補正書】
【提出日】平成27年1月19日(2015.1.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
直接給与微生物（ＤＦＭ）を、シトロバクター（Citrobacter）菌種に由来するフィターゼと組み合わせて含むとともに、前記フィターゼが、配列番号１又は配列番号２の配列のアミノ酸２３〜４３３と少なくとも９９．１％同一であるアミノ酸配列を含むポリペプチドを含むものである、飼料添加用組成物。
【請求項２】
対象とする動物の性能の向上、又は飼料中の原材料の消化性（例えば、アミノ酸の可消化性などの栄養素消化性）の向上、又は窒素保持の向上、又は壊死性腸炎の悪影響回避、又は飼料要求率（ＦＣＲ）の向上、又は対象とする動物の体重増加の向上、又は対象とする動物の飼料効率の向上、又は対象とする動物の免疫応答性の調節（例えば、改善させる）、又は対象とする動物の胃腸管における有益微生物の増殖促進、又は対象とする動物の胃腸管における病原菌数の減少、又は糞尿への栄養素の排出の減少、のための方法であって、請求項１に記載の飼料添加用組成物を、対象とする動物に投与する工程を含む、方法。
【請求項３】
対象とする動物の性能の向上、又は飼料中の原材料の消化性（例えば、アミノ酸の可消化性などの栄養素消化性）の向上、又は窒素保持の向上、又は壊死性腸炎の悪影響回避、又は飼料要求率（ＦＣＲ）の向上、又は対象とする動物の体重増加の向上、又は対象とする動物の飼料効率の向上、又は対象とする動物の免疫応答性の調節（例えば、改善させる）、又は対象とする動物の胃腸管における有益微生物の増殖促進、又は対象とする動物の胃腸管における病原菌数の減少、又は糞尿への栄養素の排出の減少、に使用するための、シトロバクター（Citrobacter）菌種に由来するフィターゼと組み合わされた直接給与微生物（ＤＦＭ）であって、
前記フィターゼが、配列番号１又は配列番号２の配列のアミノ酸２３〜４３３と少なくとも９９．１％同一であるアミノ酸配列を含むポリペプチドを含むものである、直接給与微生物（ＤＦＭ）。
【請求項４】
直接給与微生物（ＤＦＭ）、シトロバクター（Citrobacter spp.）菌種に由来するフィターゼ、場合により少なくとも１種のビタミン、場合により少なくとも１種のミネラル、及び投与用の指示書を含む、キットであって、
前記フィターゼが、配列番号１又は配列番号２の配列のアミノ酸２３〜４３３と少なくとも９９．１％同一であるアミノ酸配列を含むポリペプチドを含むものである、キット、
又は前記キットが、請求項１に記載の飼料添加用組成物を含む、キット。
【請求項５】
請求項１に記載の飼料添加用組成物、又は請求項２に記載の方法、又は請求項３に記載の直接給与微生物、又は請求項４に記載のキットであって、
前記フィターゼが：シトロバクター・ブラアキイ（Citrobacter braakii）、シトロバクター・フレウンディイ（Citrobacter freundii）、シトロバクター・アマロナティカス（Citrobacter amalonaticus）、シトロバクター・ギレニイ（Citrobacter gillenii）、シトロバクター中間種（Citrobacter intermedius）、シトロバクター・コセリ（Citrobacter koseri）、シトロバクター・ムルリニアエ（Citrobacter murliniae）、シトロバクター・ロデンティウム（Citrobacter rodentium）、シトロバクター・セドラキイ（Citrobacter sedlakii）、シトロバクター・ベルクマニイ（Citrobacter werkmanii）、及びシトロバクター・ヤンガエ（Citrobacter youngae）からなる群から選択されるシトロバクター（Citrobacter）細菌に由来するものであり；
好ましくは前記フィターゼがシトロバクター・ブラアキイ（Citrobacter braakii）に由来するものであり、及び／又は；
前記フィターゼがシトロバクター・ブラアキイ（Citrobacter braakii）ＡＴＣＣ  ５１１１３に由来するものであり、及び／又は；
前記フィターゼが６−フィターゼ（Ｅ．Ｃ．３．１．３．２６）であり、及び／又は；
前記フィターゼが：（ａ）（ｉ）配列番号１又は配列番号２の配列のアミノ酸２３〜４３３、及び／又は（ｉｉ）配列番号１又は配列番号２の成熟ポリペプチド部分、及び／又は（ｉｉｉ）配列番号７、及び／又は（ｉｖ）配列番号５、及び／又は（ｖ）配列番号９、及び／又は（ｖｉ）配列番号１０と、少なくとも７０％、好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％、更により好ましくは少なくとも９８．６％同一であるアミノ酸配列を有する、ポリペプチド；（ｂ）（ｉ）配列番号１又は配列番号２の配列のアミノ酸２３〜４３３、及び／又は（ｉｉ）配列番号１又は配列番号２の成熟ポリペプチド部分、及び／又は（ｉｉｉ）配列番号７、及び／又は（ｉｖ）配列番号５、及び／又は（ｖ）配列番号９、及び／又は（ｖｉ）配列番号１０、に１つ以上のアミノ酸の欠失、挿入、及び／又は保存的置換を含む、変異体；並びに／あるいは（ｃ）（ｉ）配列番号１又は配列番号２の配列のアミノ酸２３〜４３３、及び／又は（ｉｉ）配列番号１又は配列番号２の成熟ポリペプチド部分、及び／又は（ｉｉｉ）配列番号７、及び／又は（ｉｖ）配列番号５、及び／又は（ｖ）配列番号９、及び／又は（ｖｉ）配列番号１０、の断片、からなる群から選択される、ポリペプチドを含むものであり、及び／又は；
前記フィターゼが、配列番号１又は配列番号２と比較して少なくとも１つ以上４つ以下の変更を含み、前記１〜４つの変更のうち、少なくとも１つは、次の：４Ｐ、４６Ｅ、１０７Ｇ、１１１Ｐ、１１９Ｋ、１６２Ｃ、２２３Ｅ、２４１Ｑ、２７３Ｌ、２７６Ｋ、３７９Ｋ、３８５Ｄ、９１Ｃ／４６Ｃ、５２Ｃ／９９Ｃ、３１Ｃ／１７６Ｃ、３１Ｃ／１７７Ｃ、５９Ｃ／１００Ｃ、１４１Ｃ／１９９Ｃ、１６２Ｃ／２４７Ｃ、１１１Ｐ／２４１Ｑ、３１Ｃ、１１９Ｋ、２０２Ｎ、２８６Ｑ、及び３６２Ｋ、Ｒ、から選択されるものであり；
好ましくは前記フィターゼが、配列番号１又は配列番号２と比較して少なくとも１つ以上４つ以下の変更を含み、前記１〜４つの変更のうち、少なくとも１つは、次の：９１Ｃ／４６Ｃ、５２Ｃ／９９Ｃ、３１Ｃ／１７６Ｃ、３１Ｃ／１７７Ｃ、５９Ｃ／１００Ｃ、１４１Ｃ／１９９Ｃ、１６２Ｃ／２４７Ｃ、１１１Ｐ／２４１Ｑ、から選択されるものであり、及び／又は；
前記フィターゼの至適ｐＨがｐＨ  ３〜ｐＨ  ４．５の範囲であり；
好ましくは前記フィターゼの至適ｐＨがｐＨ  ３〜ｐＨ  ３．５の範囲であり、及び／又は；
前記直接給与微生物が、抗病原性直接給与微生物であり、及び／又は；
前記直接給与微生物が生細菌であり、及び／又は；
前記直接給与微生物が、次の属：ラクトバチルス（Lactobacillus）、ラクトコッカス（Lactococcus）、ストレプトコッカス（Streptococcus）、バチルス（Bacillus）、ペディオコッカス（Pediococcus）、エンテロコッカス（Enterococcus）、ロイコノストック（Leuconostoc）、カルノバクテリウム（Carnobacterium）、プロピオニバクテリウム（Propionibacterium）、ビフィドバクテリウム（Bifidobacterium）、クロストリジウム（Clostridium）、及びメガスフェラ（Megasphaera）、並びにこれらの組み合わせのうちの１種以上の細菌を含むものであり、及び／又は；
前記直接給与微生物が、次の種：枯草菌（Bacillus subtilis）、バチルス・リケニフォルミス（Bacillus licheniformis）、バチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus  amyloliquefaciens）、エンテロコッカス・フェシウム（Enterococcus faecium）、エンテロコッカス菌種（Enterococcus spp）、及びペディオコッカス菌種（Pediococcus spp）、ラクトバチルス菌種（Lactobacillus spp）、ビフィドバクテリウム菌種（Bifidobacterium spp）、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）、ペディオコッカス・アシディラクティシ（Pediococsus acidilactici）、ラクトコッカス・ラクティス（Lactococcus lactis）、ビフィドバクテリウム・ビフィドゥム（Bifidobacterium bifidum）、プロピオニバクテリウム・ソエニイ（Propionibacterium thoenii）、ラクトバチルス・ファルシミナス（Lactobacillus farciminus）、ラクトバチルス・ラムノサス（lactobacillus rhamnosus）、酪酸菌（Clostridium butyricum）、ビフィドバクテリウム・アニマリス菌種アニマリス（Bifidobacterium animalis ssp．animalis）、ラクトバチルス・ロイテリ（Lactobacillus reuteri）、バチルス・セレウス（Bacillus cereus）、ラクトバチルス・サリバリウス菌種サリバリウス（Lactobacillus salivarius ssp. salivarius）、メガスファエラ・エルスデニイ（Megasphaera elsdenii）、プロピオニバクテリア（Propionibacteria sp）、及びこれらの組み合わせのうちの１種以上の細菌を含むものであり、及び／又は；
前記直接給与微生物が、次の：枯草菌（Bacillus subtilis）株３Ａ−Ｐ４（ＰＴＡ−６５０６）；１５Ａ−Ｐ４（ＰＴＡ−６５０７）；２２Ｃ−Ｐ１（ＰＴＡ−６５０８）；２０８４（ＮＲＲＬ  Ｂ−５００１３０）；ＬＳＳＡ０１（ＮＲＲＬ−Ｂ−５０１０４）；ＢＳ２７（ＮＲＲＬ  Ｂ−５０１０５）；ＢＳ１８（ＮＲＲＬ  Ｂ−５０６３３）；及びＢＳ  ２７８（ＮＲＲＬ  Ｂ−５０６３４）のうちの１種以上であり、及び／又は；
前記直接給与微生物が芽胞の形態である、
請求項１に記載の飼料添加用組成物、又は請求項２に記載の方法、又は請求項３に記載の直接給与微生物、又は請求項４に記載のキット。
【請求項６】
前記フィターゼが、２００ＦＴＵ／飼料添加用組成物（ｇ）〜１００００ＦＴＵ／飼料添加用組成物（ｇ）の投与量で存在し、及び／又は；
前記プロテアーゼが、１０００ＰＵ／飼料添加用組成物（ｇ）〜６００００ＰＵ／飼料添加用組成物（ｇ）の投与量で存在し、及び／又は；
前記ＤＦＭが、３．７５×１０７ＣＦＵ／飼料添加用組成物（ｇ）〜１×１０１１ＣＦＵ／飼料添加用組成物（ｇ）の投与量で存在する、
請求項１又は５に記載の飼料添加用組成物。
【請求項７】
直接給与微生物（ＤＦＭ）を、シトロバクター（Citrobacter spp.）菌種に由来するフィターゼと混合する工程、及び（所望により）パッケージングする工程、を含むとともに、
前記フィターゼが、配列番号１又は配列番号２の配列のアミノ酸２３〜４３３と少なくとも９９．１％同一であるアミノ酸配列を含むポリペプチドを含むものである、飼料添加用組成物の製造法。
【請求項８】
請求項１、５、６のいずれか一項に記載の飼料添加用組成物を含む飼料。
【請求項９】
前記フィターゼが、４００ＦＴＵ／飼料（ｋｇ）〜１０００ＦＴＵ／飼料（ｋｇ）の投与量で存在し、及び／又は；
前記ＤＦＭが、７．５×１０４ＣＦＵ／飼料（ｋｇ）〜１×１０７ＣＦＵ／飼料（ｋｇ）の投与量で存在する、
請求項８に記載の飼料。
【請求項１０】
飼料成分を請求項１、５、６のいずれか一項に記載の飼料添加用組成物と混合する工程を含む、家畜飼料の製造法。
【請求項１１】
直接給与微生物を、シトロバクター（Citrobacter）フィターゼ、並びに少なくとも１種のミネラル及び／又は少なくとも１種のビタミンと組み合わせて含む飼料添加用組成物を含むとともに、
前記フィターゼが、配列番号１又は配列番号２の配列のアミノ酸２３〜４３３と少なくとも９９．１％同一であるアミノ酸配列を含むポリペプチドを含むものである、
プレミックス。
【請求項１２】
請求項１、５、６のいずれか一項に記載の飼料添加用組成物を、少なくとも１種のミネラル及び／又は少なくとも１種のビタミンと組み合わせて含む、プレミックス。
【請求項１３】
コクシジウム症及び／又は壊死性腸炎を予防及び／又は処置するのに使用するための、請求項１、５、６のいずれか一項に記載の飼料添加用組成物。