【手続補正書】
【提出日】平成27年10月23日(2015.10.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
別の実施態様では、本発明は、（ａ）関心のある被検体を含むサンプルを、関心のある該被検体に結合する第１の結合領域を含む、それに固定された第１の結合試薬を含む固体表面と接触させること、ここで該第１の結合試薬は第１のオリゴヌクレオチド配列を含む第１の連結剤に連結され；（ｂ）工程（ａ）で形成された混合物を関心のある上記被検体に結合する第２の結合領域を含む第２の結合試薬と接触させること、ここで該第２の結合試薬は第２のオリゴヌクレオチド配列を含む第２の連結剤に連結され、ここで該第２のオリゴヌクレオチド配列は上記第１のオリゴヌクレオチド配列の少なくとも一部分に相補的な配列を含み；ここで該接触工程（ｂ）は、上記第１及び第２の結合領域が上記被検体に結合し、そして上記第１のオリゴヌクレオチド配列が上記第２のオリゴヌクレオチド配列にハイブリダイズする条件下で実施され；及び（ｃ）前記固体支持体に結合された上記被検体の量を測定すること：を含む結合アッセイを実施する方法を企図する。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）関心のある被検体を含むサンプルを、（ｉ）関心のある該被検体に結合する第１の結合領域を含む、それに固定された第１の結合試薬を含む固体表面、ここで該第１の結合試薬は第１のオリゴヌクレオチ配列を含む第１の連結剤に連結される及び（ｉｉ）関心のある上記被検体に結合する第２の結合領域を含む第２の結合試薬、ここで該第２の結合試薬は第２のオリゴヌクレオチド配列を含む第２の連結剤に連結され、ここで該第２のオリゴヌクレオチド配列は該第１のオリゴヌクレオチド配列の少なくとも一部分に相補的な配列を含む、と接触させること；ここで該接触工程は、該第１及び第２の結合領域が上記被検体に結合し、そして上記第１のオリゴヌクレオチド配列が上記第２のオリゴヌクレオチド配列にハイブリダイズする条件下で実施される；及び
（ｂ）該固体支持体に結合された上記被検体の量を測定すること：
を含んでなる結合アッセイを実施する方法。
【請求項２】
（ａ）関心のある被検体を含むサンプルを、関心のある該被検体に結合する第１の結合領域を含む、それに固定された第１の結合試薬を含む固体表面と接触させること、ここで該第１の結合試薬は第１のオリゴヌクレオチド配列を含む第１の連結剤に連結され；
（ｂ）工程（ａ）で形成された混合物を、関心のある上記被検体に結合する第２の結合領域を含む第２の結合試薬と接触させること、ここで該第２の結合試薬は第２のオリゴヌクレオチド配列を含む第２の連結剤に連結され、ここで該第２のオリゴヌクレオチド配列は上記第１のオリゴヌクレオチド配列の少なくとも一部分に相補的な配列を含み；ここで該接触工程（ｂ）は、上記第１及び第２の結合領域が上記被検体に結合し、そして上記第１のオリゴヌクレオチド配列が上記第２のオリゴヌクレオチド配列にハイブリダイズする条件下で実施され；及び
（ｃ）前記固体支持体に結合された上記被検体の量を測定すること：
を含んでなる結合アッセイを実施する方法。
【請求項３】
（ａ）関心のある被検体を含むサンプルを、（ｉ）関心のある該被検体に結合する第１の結合領域を含む、それに固定された第１の結合試薬を含む固体表面、ここで該第１の結合試薬は第１のオリゴヌクレオチド配列を含む第１の連結剤に連結される；（ｉｉ）関心のある上記被検体に結合する第２の結合領域を含む第２の結合試薬、ここで該第２の結合試薬は第２のオリゴヌクレオチド配列を含む第２の連結剤に連結される、そして（ｉｉｉ）該第１のオリゴヌクレオチド配列及び該第２のオリゴヌクレオチド配列の少なくとも一部分に相補的な配列を含む架橋オリゴヌクレオチド配列、と接触させること；ここで該接触工程は、該第１及び第２の結合領域が上記被検体に結合し、そして該架橋オリゴヌクレオチド配列が上記第１のオリゴヌクレオチド配列及び上記第２のオリゴヌクレオチド配列にハイブリダイズする条件下で実施され；及び
（ｂ）前記固体支持体に結合された上記被検体の量を測定すること：
を含んでなる結合アッセイを実施する方法。
【請求項４】
（ａ）関心のある被検体を含むサンプルを、（ｉ）関心のある該被検体に結合する第１の結合領域を含む、それに固定された第１の結合試薬を含む固体表面、ここで該第１の結合試薬は第１のオリゴヌクレオチド配列を含む第１の連結剤に連結される；そして（ｉｉ）関心のある上記被検体に結合する第２の結合領域を含む第２の結合試薬、ここで該第２の結合試薬は第２のオリゴヌクレオチド配列を含む第２の連結剤に連結される、と接触させること、ここで該接触工程（ａ）は上記第１及び第２の結合領域が上記被検体に結合する条件下で実施され；
（ｂ）工程（ｂ）で形成された混合物を、該第１のオリゴヌクレオチ配列及び該第２のオリゴヌクレオチド配列の少なくとも一部分に相補的な配列を含む架橋オリゴヌクレオチド配列と接触させること；ここで該接触工程（ｂ）は、該架橋オリゴヌクレオチド配列が上記第１のオリゴヌクレオチド配列及び上記第２のオリゴヌクレオチド配列にハイブリダイズする条件下で実施され；及び
（ｃ）前記固体支持体に結合された上記被検体の量を測定すること：
を含んでなる結合アッセイを実施する方法。
【請求項５】
（ａ）関心のある被検体を含むサンプルを、関心のある該被検体に結合する第１の結合領域を含む、それに固定された第１の結合試薬を含む固体表面と接触させること、ここで該第１の結合試薬は第１のオリゴヌクレオチド配列を含む第１の連結剤に連結され、ここで該接触工程（ａ）は該第１の結合領域が上記被検体に結合する条件下で実施され；
（ｂ）工程（ａ）で形成された混合物を、関心のある上記被検体に結合する第２の結合領域を含む第２の結合試薬と接触させること、ここで該第２の結合試薬は第２のオリゴヌ
クレオチド配列を含む第２の連結剤に連結され、ここで該接触工程（ｂ）は該第２の結合領域が上記被検体に結合する条件下で実施され；
（ｃ）工程（ｂ）で形成された混合物を、該第１のオリゴヌクレオチド配列及び該第２のオリゴヌクレオチド配列の少なくとも一部分に相補的な配列を含む架橋オリゴヌクレオチド配列と接触させること；ここで該接触工程（ｃ）は、該架橋オリゴヌクレオチド配列が上記第１のオリゴヌクレオチド配列及び上記第２のオリゴヌクレオチド配列にハイブリダイズする条件下で実施され；及び
（ｄ）前記固体支持体に結合された上記被検体の量を測定すること：
を含んでなる結合アッセイを実施する方法。
【請求項６】
（ａ）複数の被検体を含むサンプルを、（ｉ）それに固定された１つ又はそれ以上の第１の結合試薬を含む固体表面、ここで１つ又はそれ以上の該第１の結合試薬は各々、該被検体の１つ又はそれ以上に結合する第１の結合領域を含み、そして１つ又はそれ以上の上記第１の結合試薬の各々は、第１のオリゴヌクレオチド配列を含む１つ又はそれ以上の第１の連結剤各々に連結される；そして（ｉｉ）上記被検体の１つ又はそれ以上に結合する第２の結合領域を含む１つ又はそれ以上の第２の結合試薬各々、ここで１つ又はそれ以上の該第２の結合試薬の各々は、第２のオリゴヌクレオチド配列を含む１つ又はそれ以上の第２の連結剤各々に連結され、ここで該第２のオリゴヌクレオチド配列は該第１のオリゴヌクレオチド配列の少なくとも一部分に相補的な配列を含む、と接触させること；ここで該接触工程は、該第１及び第２の結合領域が上記被検体に結合し、そして上記第１のオリゴヌクレオチド配列が上記第２のオリゴヌクレオチド配列にハイブリダイズする条件下で実施され；及び
（ｂ）前記固体支持体に結合された上記被検体の量を測定すること：
を含んでなる複数の被検体の結合アッセイを実施する方法。
【請求項７】
（ａ）複数の被検体を含むサンプルを、それに固定された１つ又はそれ以上の第１の結合試薬を含む固体表面、ここで１つ又はそれ以上の該第１の結合試薬は各々、該被検体の１つ又はそれ以上に結合する第１の結合領域を含み、そして１つ又はそれ以上の上記第１の結合試薬の各々は第１のオリゴヌクレオチド配列を含む１つ又はそれ以上の第１の連結剤各々に連結される、と接触させること；
（ｂ）工程（ａ）で形成された混合物を、上記被検体の１つ又はそれ以上に結合する第２の結合領域を含む１つ又はそれ以上の第２の結合試薬各々と接触させること、ここで１つ又はそれ以上の該第２の結合試薬の各々は、第２のオリゴヌクレオチド配列を含む１つ又はそれ以上の第２の連結剤各々に連結され、ここで該第２のオリゴヌクレオチド配列は該第１のオリゴヌクレオチド配列の少なくとも一部分に相補的な配列を含む；ここで該接触工程（ｂ）は、該第１及び第２の結合領域が上記被検体に結合し、そして上記第１のオリゴヌクレオチド配列が上記第２のオリゴヌクレオチド配列にハイブリダイズする条件下で実施され；及び
（ｃ）前記固体支持体に結合された上記被検体の量を測定すること：
を含んでなる複数の被検体の結合アッセイを実施する方法。
【請求項８】
（ａ）複数の被検体を含むサンプルを、（ｉ）それに固定された１つ又はそれ以上の第１の結合試薬を含む固体表面、ここで１つ又はそれ以上の該第１の結合試薬は各々該被検体に結合する第１の結合領域を含み、そして１つ又はそれ以上の上記第１の結合試薬の各々は第１のオリゴヌクレオチド配列を含む第１の連結剤に連結され；（ｉｉ）関心のある上記被検体に結合する第２の結合領域を含む１つ又はそれ以上の第２の結合試薬各々、ここで該第２の結合試薬は第２のオリゴヌクレオチド配列を含む第２の連結剤に連結される、そして（ｉｉｉ）上記第１のオリゴヌクレオチド配列及び上記第２のオリゴヌクレオチド配列の少なくとも一部分に相補的な配列を含む１つ又はそれ以上の架橋オリゴヌクレオチド配列各々、と接触させること；ここで該接触工程は、該第１及び第２の結合領域が上
記被検体に結合し、そして該架橋オリゴヌクレオチド配列が該第１のオリゴヌクレオチド配列及び該第２のオリゴヌクレオチド配列にハイブリダイズする条件下で実施され；及び
（ｂ）前記固体支持体に結合された上記被検体の量を測定すること：
を含んでなる複数の被検体の結合アッセイを実施する方法。
【請求項９】
（ａ）複数の被検体を含むサンプルを、（ｉ）それに固定された１つ又はそれ以上の第１の結合試薬を含む固体表面、ここで１つ又はそれ以上の第１の該結合試薬は各々該被検体に結合する第１の結合領域を含み、ここで上記第１の結合試薬の各々は第１のオリゴヌクレオチド配列を含む第１の連結剤に連結される；そして（ｉｉ）関心のある上記被検体に結合する第２の結合領域を含む１つ又はそれ以上の第２の結合試薬各々と接触させること、ここで１つ又はそれ以上の該第２の結合試薬の各々は第２のオリゴヌクレオチド配列を含む第２の連結剤に連結され、ここで該接触工程（ａ）は該第１及び第２の結合領域が上記被検体に結合する条件下で実施され；
（ｂ）工程（ｂ）で形成された混合物を、該第１のオリゴヌクレオチド配列及び該第２のオリゴヌクレオチド配列の少なくとも一部分に相補的な配列を含む１つ又はそれ以上の架橋オリゴヌクレオチド配列各々と接触させること；ここで該接触工程（ｂ）は、該架橋オリゴヌクレオチド配列が上記第１のオリゴヌクレオチド配列及び上記第２のオリゴヌクレオチド配列にハイブリダイズする条件下で実施され；及び
（ｃ）前記固体支持体に結合された上記被検体の量を測定すること：
を含んでなる複数の被検体の結合アッセイを実施する方法。
【請求項１０】
（ａ）複数の被検体を含むサンプルを、それに固定された１つ又はそれ以上の第１の結合試薬を含む固体表面と接触させること、ここで１つ又はそれ以上の第１の該結合試薬は各々、該被検体に結合する第１の結合領域を含み、ここで該第１の結合試薬の各々は第１のオリゴヌクレオチド配列を含む第１の連結剤に連結され、ここで該接触工程（ａ）は該第１の結合領域が上記被検体に結合する条件下で実施される；
（ｂ）工程（ａ）で形成された混合物を、上記被検体に結合する第２の結合領域を含む１つ又はそれ以上の第２の結合試薬各々と接触させること、ここで１つ又はそれ以上の該第２の結合試薬の該各々は第２のオリゴヌクレオチド配列を含む第２の連結剤に連結され、ここで該接触工程（ｂ）は該第２の結合領域が上記被検体に結合する条件下で実施される；
（ｃ）工程（ｂ）で形成された混合物を、該第１のオリゴヌクレオチド配列及び該第２のオリゴヌクレオチド配列の少なくとも一部分に相補的な配列を含む１つ又はそれ以上の架橋オリゴヌクレオチド配列と接触させること、ここで該接触工程（ｃ）は、１つ又はそれ以上の該架橋オリゴヌクレオチド配列が上記第１のオリゴヌクレオチド配列及び上記第２のオリゴヌクレオチド配列にハイブリダイズする条件下で実施される；及び
（ｄ）前記固体支持体に結合された上記被検体の量を測定すること：
を含んでなる複数の被検体の結合アッセイを実施する方法。
【請求項１１】
前記方法は前記接触工程（ｂ）に先立って工程（ａ）で形成された前記混合物を洗浄することを更に含む、請求項２、４、５、７、９、及び１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記方法は前記接触工程（ｃ）に先立って工程（ｂ）で形成された前記混合物を洗浄することを更に含む、請求項５又は１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記第１の結合領域及び／又は前記第２の結合領域は関心のある前記被検体に対して特異的である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記第１の連結剤及び／又は前記第２の連結試薬は更に高分子ユニットを含む、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記高分子ユニットはエチレングリコールを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記第１の結合試薬及び／又は前記第２の結合試薬は抗体である、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記測定工程は、吸光度、蛍光、リン光、化学ルミネセンス、光散乱又は磁気を測定することを含む、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記第２の結合試薬は検出可能標識を含む、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記架橋オリゴヌクレオチド配列は検出可能標識を含む、請求項３〜５及び８〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記検出可能標識はＥＣＬ標識であり、そして前記測定工程はＥＣＬシグナルを測定すること及び該シグナルを前記サンプル中の被検体の量と相関させることを含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記固体支持体は電極であり、そして前記測定工程は更にＥＣＬを生成するために電圧波形を該電極に印加することを含む、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記第１のオリゴヌクレオチド配列は約５〜１５塩基、又は約６〜１２塩基、又は約６〜８塩基を含み、
前記第２のオリゴヌクレオチド配列は約５〜１５塩基、又は約６〜１２塩基、又は約６〜８塩基を含む、
請求項１〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記第１のオリゴヌクレオチド配列及び前記第２のオリゴヌクレオチド配列は各々約４〜８塩基長の相補的結合配列を含む、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
（ｉ）関心のある前記被検体に結合する第１の結合領域を含む、それに固定された第１の結合試薬を含む固体表面、ここで該第１の結合試薬は第１のオリゴヌクレオチド配列を含む第１の連結剤に連結される；及び
（ｉｉ）関心のある前記被検体に結合する第２の結合領域を含む第２の結合試薬、ここで該第２の結合試薬は第２のオリゴヌクレオチド配列を含む第２の連結剤に連結され、ここで該第２のオリゴヌクレオチド配列は該第１のオリゴヌクレオチド配列の少なくとも一部分に相補的な配列を含む、
を含んでなる結合アッセイの実施のためのキット。
【請求項２５】
（ｉ）関心のある前記被検体に結合する第１の結合領域を含む、それに固定された第１の結合試薬、ここで該第１の結合試薬は第１のオリゴヌクレオチド配列を含む第１の連結剤に連結され；
（ｉｉ）関心のある上記被検体に結合する第２の結合領域を含む第２の結合試薬、ここで該第２の結合試薬は第２のオリゴヌクレオチド配列を含む第２の連結剤に連結され、及び
（ｉｉｉ）該第１のオリゴヌクレオチド配列及び該第２のオリゴヌクレオチド配列の少なくとも一部分に相補的な配列を含む架橋オリゴヌクレオチド配列、
を含む固体表面を含んでなる結合アッセイを実施するキット。
【請求項２６】
（ｉ）それに固定された１つ又はそれ以上の第１の結合試薬を含む固体表面、ここで１つ又はそれ以上の該第１の結合試薬は各々、前記被検体の１つ又はそれ以上に結合する第１の結合領域を含み、そして１つ又はそれ以上の上記第１の結合試薬の各々は第１のオリゴヌクレオチド配列を含む１つ又はそれ以上の第１の連結剤各々に連結される；及び
（ｉｉ）前記被検体の１つ又はそれ以上に結合する第２の結合領域を含む１つ又はそれ以上の第２の結合試薬各々、ここで１つ又はそれ以上の該第２の結合試薬の各々は第２のオリゴヌクレオチド配列を含む１つ又はそれ以上の第２の連結剤各々に連結され、ここで該第２のオリゴヌクレオチド配列は該第１のオリゴヌクレオチド配列の少なくとも一部分に相補的な配列を含む、
を含んでなる複数の被検体の結合アッセイを実施するキット。
【請求項２７】
（ｉ）それに固定された１つ又はそれ以上の第１の結合試薬を含む固体表面、ここで１つ又はそれ以上の該第１の結合試薬は各々、前記被検体に結合する第１の結合領域を含み、そして１つ又はそれ以上の上記第１の結合試薬の各々は第１のオリゴヌクレオチド配列を含む第１の連結剤に連結され；
（ｉｉ）関心のある前記被検体に結合する第２の結合領域を含む１つ又はそれ以上の第２の結合試薬各々、ここで該第２の結合試薬は第２のオリゴヌクレオチド配列を含む第２の連結剤に連結され、及び
（ｉｉｉ）該第１のオリゴヌクレオチド配列及び該第２のオリゴヌクレオチド配列の少なくとも一部分に相補的な配列を含む１つ又はそれ以上の架橋オリゴヌクレオチド配列各々、
を含んでなる複数の被検体の結合アッセイを実施するキット。
【請求項２８】
前記第１の結合領域及び／又は前記第２の結合領域は関心のある前記被検体に特異的である、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載のキット。
【請求項２９】
前記第１の連結剤及び／又は前記第２の連結試薬は更に高分子ユニットを含む、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載のキット。
【請求項３０】
前記高分子ユニットはエチレングリコールを含む、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載のキット。
【請求項３１】
前記第１の結合試薬及び／又は前記第２の結合試薬は抗体である、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載のキット。
【請求項３２】
前記第２の結合試薬は検出可能標識を含む、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載のキット。
【請求項３３】
前記架橋オリゴヌクレオチド配列は検出可能標識を含む、請求項２５又は２７に記載のキット。
【請求項３４】
前記検出可能標識はＥＣＬ標識であり、そして前記測定工程はＥＣＬシグナルを測定すること及び該シグナルを前記サンプル中の被検体の量と相関させることを含む、請求項３３に記載のキット。
【請求項３５】
前記固体支持体は電極であり、そして前記測定工程は更に、ＥＣＬを生成するために電圧波形を上記電極に印加することを含む、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載のキット。
【請求項３６】
前記第１のオリゴヌクレオチド配列は約５〜２０塩基長、又は約８〜１５塩基長、又は
約８〜１２塩基長であり
前記第２のオリゴヌクレオチド配列は約５〜２０塩基長、又は約８〜１５塩基長、又は約８〜１２塩基長である、
請求項２４〜２７のいずれか１項に記載のキット。
【請求項３７】
前記第１のオリゴヌクレオチド配列及び前記第２のオリゴヌクレオチド配列は各々約４〜８塩基長の相補的結合配列を含む、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載のキット。
【請求項３８】
前記第１の連結剤及び／又は前記第２の連結試薬は更に高分子ユニットを含む、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載のキット。