【手続補正書】
【提出日】平成27年6月3日(2015.6.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
デュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニストがフレキシブルリンカーを介してＰＥＧ分子と結合されてなるデュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニスト逆ＰＥＧ結合体。
【請求項２】
前記フレキシブルリンカーが、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）または２−スルホ−９−フルオレニルメトキシカルボニル（ＦＭＳ）を含むことを特徴とする請求項１に記載の結合体。
【請求項３】
前記フレキシブルリンカーが、ＦｍｏｃまたはＦＭＳと連結されかつＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−またはＭＡＬ−ＦＭＳからなる群から選択される式を有するＭＡＬ部分をさらに含むことを特徴とする請求項２に記載の結合体。
【請求項４】
前記デュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニストが、配列番号１のアミノ酸配列を有するヒトオキシントモジュリンまたはその変異体であることを特徴とする請求項１に記載の結合体。
【請求項５】
前記ＰＥＧ分子が、ＰＥＧ３０−Ｓ−またはＰＥＧ４０Ｓ−から選択されることを特徴とする請求項１に記載の結合体。
【請求項６】
式：（Ｘ）ｎ−Ｙで表される化合物、およびその薬学的に許容可能な塩であることを特徴とする請求項１に記載の結合体。
（式中、ＹはデュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニストであり、
Ｘは次式（ｉ）〜（ｉｖ）
2014516993.tif 000001
から選択されるラジカルであり、
式中、Ｒ１はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分を含むラジカルであり、
Ｒ２は、水素、アルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロゲン、ニトロ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２ＮＨＲ、アミノ、アンモニウム、カルボキシル、ＰＯ３Ｈ２およびＯＰＯ３Ｈ２からなる群から選択され、
Ｒは、水素、アルキルおよびアリールからなる群から選択され、
Ａは、前記ラジカルがＹのカルボキシル基、リン酸基またはメルカプト基と結合される場合には共有結合であり、前記ラジカルがＹのアミノ基またはヒドロキシル基と結合される場合にはＯＣ（Ｏ）−であり、
ｎは、少なくとも１である整数である。）
【請求項７】
Ｘは前記式（ｉ）のラジカルであり、式中のＲ２、Ｒ３およびＲ４は各々水素であり、かつＡは−ＯＣ（Ｏ）−であるか、または
Ｘは前記式（ｉ）のラジカルであり、式中のＲ２はフルオレン環の２位で−ＳＯ３Ｈであり、Ｒ３およびＲ４は各々水素であり、かつＡは−ＯＣ（Ｏ）−であることを特徴とする請求項６に記載の結合体。
【請求項８】
Ｒ１は、式−Ｒ５−Ｒ６−ＰＥＧのラジカルであり、
式中、Ｒ５は、−ＮＨ−、−Ｓ−、−ＣＯ−、−ＣＯＯ−、−ＣＨ２−、−ＳＯ２−、−ＳＯ３−、−ＰＯ２−および−ＰＯ３−からなる群から選択され、
Ｒ６は、前記ＰＥＧ部分をＲ５に共有結合させる結合またはラジカルであることを特徴とする請求項６に記載の結合体。
【請求項９】
Ｒ５は、−ＮＨ−であり、
Ｒ６は、−ＣＯ−、−ＣＯＯ−、−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−、ＣＯ−ＮＨ−、−ＣＳ−ＮＨ、−ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＯ−、−ＣＯ−ＣＨ（ＣＨ３）−ＮＨ−ＣＯ−、ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ、
2014516993.tif 000002
および
2014516993.tif 000003
からなる群から選択され、
Ｚは、Ｏ、ＳまたはＮＨであり、かつ
Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ１８の直鎖状または分岐鎖状アルキレン、フェニレン、骨格に３〜１８炭素原子を有するオキシアルキレンラジカル、２〜１０アミノ酸残基を含むペプチドの残基、および１〜１０単糖類残基を含む糖の残基からなる群から選択されることを特徴とする請求項８に記載の結合体。
【請求項１０】
次の構造式によって表されることを特徴とする請求項６に記載の結合体。
2014516993.tif 000004
（式中、Ｒ２は、Ｈ、またはフルオレン環の２位で−ＳＯ３Ｈであり、
Ｙはオキシントモジュリンであり、
Ｒ２がＨである場合には前記結合体は指定されたＰＥＧ−Ｆｍｏｃ−Ｙ結合体であり、Ｒ２がフルオレン環の２位で−ＳＯ３Ｈである場合には前記結合体は指定されたＰＥＧ−ＦＭＳ−Ｙ結合体である。）
【請求項１１】
次の構造式よって表されることを特徴とする請求項６に記載の結合体。
2014516993.tif 000005
（前記結合体がＰＥＧ−Ｆｍｏｃ−Ｙ結合体の場合にはＲ２はＨであり、ＰＥＧ−ＦＭＳ−Ｙ結合体の場合にはＲ２は−ＳＯ３Ｈであり、Ｙはオキシントモジュリンである。）
【請求項１２】
当該結合体が、
（ａ）ＰＥＧ−ＳＨを（ｉ）ＭＡＬ−ＦＭＳ−ＮＨＳ
2014516993.tif 000006
または（ｉｉ）ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＮＨＳ
2014516993.tif 000007
と反応させることによってＰＥＧ化中間体を形成するステップと、
（ｂ）前記中間体をオキシントモジュリンのＮ末端アミンまたはリシン残基と反応させることによって前記オキシントモジュリン逆ＰＥＧ化結合体を形成するステップとを含む方法によって調製されたものであることを特徴とする請求項１１に記載の結合体。
【請求項１３】
当該結合体が、
（ａ）（ｉ）ＭＡＬ−ＦＭＳ−ＯＸＭまたは（ｉｉ）ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭを（ｂ）ＰＥＧ−ＳＨと反応させることによって前記オキシントモジュリン逆ＰＥＧ化結合体を形成するステップを含む方法によって調製されたものであることを特徴とする請求項１１に記載の結合体。
【請求項１４】
当該結合体が、ワンステップの反応によって調製されたものであり、
前記反応において、反応物の比率が約１：１：１のモル比を含み、前記反応物が、ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＮＨＳ、ＰＥＧ−ＳＨおよびオキシントモジュリンからなる群またはＭＡＬ−ＦＭＳ−ＮＨＳ、ＰＥＧ−ＳＨおよびオキシントモジュリンから選択されることを特徴とする請求項１１に記載の結合体。
【請求項１５】
薬学的組成物であって、
（ｉ）デュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニストがフレキシブルリンカーを介してＰＥＧ分子と結合されてなるデュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニスト逆ＰＥＧ結合体と、
（ｉｉ）薬学的に許容可能な担体および賦形剤とを含むことを特徴とする薬学的組成物。
【請求項１６】
前記デュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニストが、オキシントモジュリンを含むことを特徴とする請求項１５に記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
前記フレキシブルリンカーが、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）または２−スルホ−９−フルオレニルメトキシカルボニル（ＦＭＳ）を含むことを特徴とする請求項１５に記載の薬学的組成物。
【請求項１８】
前記フレキシブルリンカーが、ＦｍｏｃまたはＦＭＳと連結されたＭＡＬ部分をさらに含むことを特徴とする請求項１７に記載の薬学的組成物。
【請求項１９】
オキシントモジュリン逆ＰＥＧ化結合体を製造する方法であって、
オキシントモジュリンと、ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＮＨＳまたはＭＡＬ−ＦＭＳ−ＮＨＳと、ＰＥＧ−ＳＨとを反応させることによって前記結合体を形成するステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項２０】
ＰＥＧ−ＳＨと、オキシントモジュリンと、ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＮＨＳまたはＭＡＬ−ＦＭＳ−ＮＨＳのモル比が、約１：１：１であることを特徴とする請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
（ｉ）オキシントモジュリンをＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＮＨＳまたはＭＡＬ−ＦＭＳ−ＮＨＳと反応させることによってＭＡＬ−ＦＭＳ−ＯＸＭまたはＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭを生じさせるステップと、
（ｉｉ）前記ＭＡＬ−ＦＭＳ−ＯＸＭまたはＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭをＰＥＧ−ＳＨと反応させることによってＰＥＧ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭまたはＰＥＧ−ＦＭＳ−ＯＸＭ結合体を形成するステップとを含むことを特徴とする請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
（ｉ）ＰＥＧ−ＳＨをＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＮＨＳまたはＭＡＬ−ＦＭＳ−ＮＨＳと反応させることによって中間体を形成するステップと、その後に、
（ｉｉ）前記中間体をオキシントモジュリンと反応させることによってＰＥＧ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭまたはＰＥＧ−ＦＭＳ−ＯＸＭ結合体を形成するステップとを含むことを特徴とする請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
ＰＥＧ−ＳＨをＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＮＨＳおよびＯＸＭに１：１：１のモル比で反応させることによって前記ＰＥＧ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ結合体を形成するステップを含むワンステップの工程を含むことを特徴とする請求項１９に記載の方法。
【請求項２４】
オキシントモジュリンと比べて長い半減期を有することを特徴とする請求項１ないし請求項５のいずれか一項に記載の結合体。
【請求項２５】
式ＭＡＬ−ＦＭＳ−ＯＸＭで表される中間結合体であって、
前記ＯＸＭが、該ＯＸＭのアミン基を介してＦｍｏｃに結合されていることを特徴とする中間結合体。
【請求項２６】
前記ＯＸＭが、ヒトオキシントモジュリンであることを特徴とする請求項２５に記載の中間結合体。
【請求項２７】
前記ＯＸＭの前記アミン基が、末端アミン基であることを特徴とする請求項２５に記載の中間結合体。
【請求項２８】
式ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭの中間結合体であって、
前記ＯＸＭが、該ＯＸＭのアミン基を介してＦｍｏｃに結合されていることを特徴とする中間結合体。
【請求項２９】
前記ＯＸＭが、ヒトオキシントモジュリンであることを特徴とする請求項２８に記載の中間結合体。
【請求項３０】
前記ＯＸＭの前記アミン基が、Ｎ末端アミン基、またはリシン残基のアミンであることを特徴とする請求項２８に記載の中間結合体。
【請求項３１】
肥満を治療する医薬剤を調整するための、有効量の、デュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニストがフレキシブルリンカーを介してＰＥＧ分子と結合されてなるデュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニスト逆ＰＥＧ結合体の使用。
【請求項３２】
対象において食物摂取を低減する医薬剤を調整するための、有効量の、デュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニストがフレキシブルリンカーを介してＰＥＧ分子と結合されてなるデュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニスト逆ＰＥＧ結合体の使用。
【請求項３３】
対象において体重を低減する医薬剤を調整するための、有効量の、デュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニストがフレキシブルリンカーを介してＰＥＧ分子と結合されてなるデュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニスト逆ＰＥＧ結合体の使用。
【請求項３４】
対象においてグルコース耐容性を誘導する医薬剤を調整するための、有効量の、デュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニストがフレキシブルリンカーを介してＰＥＧ分子と結合されてなるデュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニスト逆ＰＥＧ結合体の使用。
【請求項３５】
対象において血糖制御を改善する医薬剤を調整するための、有効量の、デュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニストがフレキシブルリンカーを介してＰＥＧ分子と結合されてなるデュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニスト逆ＰＥＧ結合体の使用。
【請求項３６】
対象においてインシュリン抵抗性を低減する医薬剤を調整するための、有効量の、デュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニストがフレキシブルリンカーを介してＰＥＧ分子と結合されてなるデュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニスト逆ＰＥＧ結合体の使用。
【請求項３７】
対象においてインスリン感受性を増大させる医薬剤を調整するための、有効量の、デュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニストがフレキシブルリンカーを介してＰＥＧ分子と結合されてなるデュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニスト逆ＰＥＧ結合体の使用。
【請求項３８】
前記デュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体アゴニストが、オキシントモジュリンであることを特徴とする請求項３１ないし請求項３７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３９】
前記フレキシブルリンカーが、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）または２−スルホ−９−フルオレニルメトキシカルボニル（ＦＭＳ）を含むことを特徴とする請求項３１ないし請求項３７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項４０】
前記フレキシブルリンカーが、ＦｍｏｃまたはＦＭＳと連結されたＭＡＬ部分をさらに含むことを特徴とする請求項３９に記載の使用。
【請求項４１】
治療を必要とする対象におけるオキシントモジュリン化合物の投薬回数を減らす医薬剤を調整するための、オキシントモジュリンと、ＰＥＧと、前記オキシントモジュリンおよび前記ＰＥＧ間のフレキシブルリンカーとしてのＦｍｏｃまたはＦＭＳとを含む結合体の使用。
【請求項４２】
治療を必要とする対象における生物学的活性を、オキシントモジュリン単独での投与と比較して改善する医薬剤を調整するための、オキシントモジュリンと、ＰＥＧと、前記オキシントモジュリンおよび前記ＰＥＧ間のフレキシブルリンカーとしてのＦｍｏｃまたはＦＭＳとを含む結合体の使用。