【手続補正書】
【提出日】平成26年12月15日(2014.12.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
水溶性リンカーに結合した脂肪酸または脂肪酸エステルを含み、治療用タンパク質と安定に結合した、水溶性脂肪酸誘導体であって、ここで前記水溶性リンカーが、水溶性ポリマーと、前記治療用タンパク質に結合した少なくとも１つの官能基とを含み、前記官能基がアミノオキシ基である、水溶性脂肪酸誘導体。
【請求項２】
インビトロまたはインビボでヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）と結合し、天然の治療用タンパク質と比較して増加した半減期を有する、請求項１に記載の脂肪酸誘導体であって、前記脂肪酸が飽和脂肪酸または不飽和脂肪酸である、脂肪酸誘導体。
【請求項３】
前記脂肪酸が分岐鎖脂肪酸である、請求項２に記載の脂肪酸誘導体。
【請求項４】
前記脂肪酸がＣ１０、Ｃ１２、Ｃ１４、Ｃ１６、Ｃ１８、Ｃ２０、Ｃ２２、およびＣ２４からなる群から選択される鎖長を含む、請求項１〜３のいずれかに記載の脂肪酸誘導体。
【請求項５】
前記脂肪酸が、末端カルボキシル基およびω基からなる群から選択される前記脂肪酸上の基で前記水溶性リンカーに結合しており、前記ω基が、ヒドロキシル、アミノ、チオ、およびカルボキシルからなる群から選択される、請求項１〜４のいずれかに記載の脂肪酸誘導体。
【請求項６】
前記脂肪酸が１６−ヒドロキシヘキサデカン酸であるか、または前記脂肪酸エステルが１６−ヒドロキシヘキサデカン酸メチルエステルである、請求項１または２に記載の脂肪酸誘導体。
【請求項７】
前記脂肪酸エステルが、メチルエステルおよびエチルエステルからなる群から選択される、請求項１または２に記載の脂肪酸誘導体。
【請求項８】
前記脂肪酸誘導体が、オキシム連結により前記治療用タンパク質と安定に結合しており、前記オキシム連結が、前記水溶性リンカー上のアミノオキシ基と前記治療用タンパク質上の酸化炭水化物のアルデヒド基との間に形成される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の脂肪酸誘導体。
【請求項９】
前記脂肪酸誘導体が、
ａ）式：
【化４６】
2014501262.tif 000001
の１６−（２−（２−（２−（２−アミノオキシエトキシ）−エトキシ）−エトキシ）−エトキシイミノ）−ヘキサデカン酸ナトリウム塩、および
ｂ）１６−（２−（２−（２−（２−アミノオキシエトキシ）−エトキシ）−エトキシ）−エトキシアミノ）−ヘキサデカン酸メチルエステル
【化４７】
2014501262.tif 000002
からなる群から選択される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の脂肪酸誘導体。
【請求項１０】
ａ）脂肪酸上のω−ヒドロキシ基を酸化させて、前記脂肪酸上にアルデヒド基を生成することと、
ｂ）活性アミノオキシ基を含む水溶性リンカーを前記アルデヒド基とカップリングさせて、安定なオキシム連結を形成することと、
を含む、請求項１に記載の脂肪酸誘導体を調製する方法であって、前記脂肪酸誘導体が水溶性であり、前記ω−ヒドロキシ基が、デス・マーチン・ペルヨージナン試薬、Ｔｅｍｐｏ試薬、塩化オキサリル／ＤＭＳＯ、過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム（ＴＰＡＰ）、および６価クロム試薬（コリンズ試薬、クロロクロム酸ピリジニウム（ＰＣＣ）、および重クロム酸ピリジニウム）からなる群から選択される酸化試薬により酸化され、前記脂肪酸が飽和脂肪酸または不飽和脂肪酸である、方法。
【請求項１１】
ａ）脂肪酸上のカルボキシル基をエステル化して、前記脂肪酸上にエステルを生成することと、
ｂ）脂肪酸上のω−ヒドロキシ基を活性化して、ステップａ）の脂肪酸上にメシル基を生成することと、
ｃ）ステップｂ）のメシル基を置換することによって、活性アミノオキシ基を含む水溶性リンカーをカップリングさせ、それにより安定なオキシイミン−メチレン結合を形成することと、
を含む、請求項１に記載の脂肪酸誘導体を調製する方法であって、前記脂肪酸誘導体が水溶性であり、前記カルボキシル基が、塩化アセチル、酸存在下でのメタノール、酸存在下でのエタノール、ジアゾメタン、およびヨウ化メチルからなる群から選択されるエステル化剤によりエステル化され、前記ω−ヒドロキシ基が、塩化メシル、塩化トシル、および塩化ノシルからなる群から選択される活性化剤により活性化され、かつ前記脂肪酸が飽和脂肪酸または不飽和脂肪酸である、方法。
【請求項１２】
前記脂肪酸が分岐鎖脂肪酸である、請求項１０または１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記脂肪酸が、Ｃ１０、Ｃ１２、Ｃ１４、Ｃ１６、Ｃ１８、Ｃ２０、Ｃ２２、およびＣ２４からなる群から選択される鎖長を含み、必要に応じて、前記脂肪酸が１６−ヒドロキシヘキサデカン酸である、請求項１０または１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記水溶性ポリマーが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、分岐ＰＥＧ、ポリシアル酸（ＰＳＡ）、ヒドロキシアルキルデンプン（ＨＡＳ）、ヒドロキシエチルデンプン（ＨＥＳ）、炭水化物、多糖類、プルラン、キトサン、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸塩、デルマタン硫酸塩、デンプン、デキストラン、カルボキシメチル−デキストラン、ポリアルキレンオキサイド（ＰＡＯ）、ポリアルキレングリコール（ＰＡＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ポリオキサゾリン、ポリアクリロイルモルホリン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリカルボキシレート、ポリビニルピロリドン、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリエチレン−コ−無水マレイン酸、ポリスチレン−コ−無水マレイン酸、ポリ（１−ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチルホルマール）（ＰＨＦ）、および２−メタクリロイルオキシ−２’−エチルトリメチルアンモニウムホスフェート（ＭＰＣ）からなる群から選択される、請求項１に記載の脂肪酸誘導体あるいは請求項１０または１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記水溶性ポリマーがＰＥＧであり、かつＯ３、Ｏ５、Ｏ７、Ｏ９、Ｏ１１、Ｏ１３、およびＯ１５からなる群から選択される鎖長を含む、請求項１４に記載の脂肪酸誘導体あるいは方法。
【請求項１６】
前記水溶性リンカーが、
ａ）式：
【化５４】
2014501262.tif 000003
の３−オキサペンタン−１，５−ジオキシアミン、
ｂ）式：
【化５５】
2014501262.tif 000004
の３，６，９−トリアオキサウンデカン−１，１１−ジオキシアミン、
ｃ）式：
【化５６】
2014501262.tif 000005
の３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカン−１，１７−ジオキシアミン、および
ｄ）式：
【化５７】
2014501262.tif 000006
の３，６，９，１２，１５，１８，２１−ヘプタオキサトリコサン−１，２３−ジオキシアミンからなる群から選択される、請求項１５に記載の脂肪酸誘導体あるいは方法。
【請求項１７】
抱合を可能にする条件下で、前記治療用タンパク質上の酸化炭水化物部分と請求項１に記載の脂肪酸誘導体とを接触させることを含む、治療用複合タンパク質を調製する方法であって、
前記炭水化物部分は、過ヨウ素酸ナトリウム（ＮａＩＯ４）、四酢酸鉛（Ｐｂ（ＯＡｃ）４）、および過ルテニウム酸カリウム（ＫＲｕＯ４）からなる群から選択される酸化剤を含む緩衝剤とのインキュベーションによって酸化され、
前記酸化炭水化物部分と前記脂肪酸誘導体上の活性アミノオキシ基との間にオキシム連結が形成され、
前記オキシム連結形成が、アニリン、ｏ−アミノ安息香酸、ｍ−アミノ安息香酸、ｐ−アミノ安息香酸、スルファニル酸、ｏ−アミノベンザミド、ｏ−トルイジン、ｍ−トルイジン、ｐ−トルイジン、ｏ−アニシジン、ｍ−アニシジン、およびｐ−アニシジンからなる群から選択される求核触媒により触媒される、方法。
【請求項１８】
前記治療用タンパク質が、第ＩＸ因子（ＦＩＸ）、第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）、第ＶＩＩａ因子（ＦＶＩＩａ）、フォンヴィレブランド因子（ＶＷＦ）、第ＦＶ因子（ＦＶ）、第Ｘ因子（ＦＸ）、第ＸＩ因子（ＦＸＩ）、第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩ）、トロンビン（ＦＩＩ）、プロテインＣ、プロテインＳ、ｔＰＡ、ＰＡＩ−１、組織因子（ＴＦ）、ＡＤＡＭＴＳ１３プロテアーゼ、ＩＬ−１アルファ、ＩＬ−１ベータ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−１１、コロニー刺激因子−１（ＣＳＦ−１）、Ｍ−ＣＳＦ、ＳＣＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、ＥＰＯ、インターフェロン−アルファ（ＩＦＮ−アルファ）、コンセンサスインターフェロン、ＩＦＮ−ベータ、ＩＦＮ−ガンマ、ＩＦＮ−オメガ、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＬ−３１、ＩＬ−３２アルファ、ＩＬ−３３、トロンボポエチン（ＴＰＯ）、Ａｎｇ−１、Ａｎｇ−２、Ａｎｇ−４、Ａｎｇ−Ｙ、アンジオポエチン様ポリペプチド１（ＡＮＧＰＴＬ１）、アンジオポエチン様ポリペプチド２（ＡＮＧＰＴＬ２）、アンジオポエチン様ポリペプチド３（ＡＮＧＰＴＬ３）、アンジオポエチン様ポリペプチド４（ＡＮＧＰＴＬ４）、アンジオポエチン様ポリペプチド５（ＡＮＧＰＴＬ５）、アンジオポエチン様ポリペプチド６（ＡＮＧＰＴＬ６）、アンジオポエチン様ポリペプチド７（ＡＮＧＰＴＬ７）、ビトロネクチン、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、アンジオゲニン、アクチビンＡ、アクチビンＢ、アクチビンＣ、骨形態形成タンパク質−１、骨形態形成タンパク質−２、骨形態形成タンパク質−３、骨形態形成タンパク質−４、骨形態形成タンパク質−５、骨形態形成タンパク質−６、骨形態形成タンパク質−７、骨形態形成タンパク質−８、骨形態形成タンパク質−９、骨形態形成タンパク質−１０、骨形態形成タンパク質−１１、骨形態形成タンパク質−１２、骨形態形成タンパク質−１３、骨形態形成タンパク質−１４、骨形態形成タンパク質−１５、骨形態形成タンパク質受容体ＩＡ、骨形態形成タンパク質受容体ＩＢ、骨形態形成タンパク質受容体ＩＩ、脳由来神経栄養因子、カルジオトロフィン−１、毛様体神経栄養因子、毛様体神経栄養因子受容体、クリプト（ｃｒｉｐｔｏ）、クリプティック（ｃｒｙｐｔｉｃ）、サイトカイン誘導性好中球走化性因子１、サイトカイン誘導性好中球走化性因子２α、サイトカイン誘導性好中球走化性因子２β、β内皮細胞成長因子、エンドセリン１、上皮成長因子、エピゲン（ｅｐｉｇｅｎ）、エピレギュリン、上皮由来好中球誘引物質、線維芽細胞成長因子４、線維芽細胞成長因子５、線維芽細胞成長因子６、線維芽細胞成長因子７、線維芽細胞成長因子８、線維芽細胞成長因子８ｂ、線維芽細胞成長因子８ｃ、線維芽細胞成長因子９、線維芽細胞成長因子１０、線維芽細胞成長因子１１、線維芽細胞成長因子１２、線維芽細胞成長因子１３、線維芽細胞成長因子１６、線維芽細胞成長因子１７、線維芽細胞成長因子１９、線維芽細胞成長因子２０、線維芽細胞成長因子２１、酸性線維芽細胞成長因子、塩基性線維芽細胞成長因子、グリア細胞株由来神経栄養因子受容体α１、グリア細胞株由来神経栄養因子受容体α２、成長関連タンパク質、成長関連タンパク質α、成長関連タンパク質β、成長関連タンパク質γ、ヘパリン結合上皮成長因子、肝細胞成長因子、肝細胞成長因子受容体、肝細胞癌由来成長因子、インスリン様成長因子Ｉ、インスリン様成長因子受容体、インスリン様成長因子ＩＩ、インスリン様成長因子結合タンパク質、ケラチノサイト成長因子、白血病抑制因子、白血病抑制因子受容体α、神経成長因子神経成長因子受容体、ニューロポエチン、ニューロトロフィン−３、ニューロトロフィン−４、オンコスタチンＭ（ＯＳＭ）、胎盤成長因子、胎盤成長因子２、血小板由来内皮細胞成長因子、血小板由来成長因子、血小板由来成長因子Ａ鎖、血小板由来成長因子ＡＡ、血小板由来成長因子ＡＢ、血小板由来成長因子Ｂ鎖、血小板由来成長因子ＢＢ、血小板由来成長因子受容体α、血小板由来成長因子受容体β、プレＢ細胞成長刺激因子、幹細胞因子（ＳＣＦ）、幹細胞因子受容体、ＴＮＦ、ＴＮＦ０、ＴＮＦ１、ＴＮＦ２、形質転換成長因子α、形質転換成長因子β、形質転換成長因子β１、形質転換成長因子β１．２、形質転換成長因子β２、形質転換成長因子β３、形質転換成長因子β５、潜在型形質転換成長因子β１、形質転換成長因子β結合タンパク質Ｉ、形質転換成長因子β結合タンパク質ＩＩ、形質転換成長因子β結合タンパク質ＩＩＩ、胸腺間質性リンパ球新生因子（ＴＳＬＰ）、腫瘍壊死因子受容体Ｉ型、腫瘍壊死因子受容体ＩＩ型、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子受容体、ホスホリパーゼ活性化タンパク質（ＰＵＰ）、インスリン、レクチンリシン、プロラクチン、絨毛性ゴナドトロピン、卵胞刺激ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、組織プラスミノーゲン活性化因子、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、およびＩｇＤ、α−ガラクトシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、ＤＮアーゼ、フェチュイン、黄体形成ホルモン、エストロゲン、インスリン、アルブミン、リポタンパク質、胎児性タンパク質、トランスフェリン、トロンボポエチン、ウロキナーゼ、インテグリン、トロンビン、レプチン、ヒュミラ（アダリムマブ）、プロリア（デノスマブ）、エンブレル（エタネルセプト）、表１のタンパク質、またはそれらの生物活性断片、誘導体、もしくは変異体からなる群から選択される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の脂肪酸誘導体あるいは請求項１７に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４９】
また別の実施形態において、ａ）脂肪酸上のカルボキシル基をエステル化して、脂肪酸エステルを生成することと、ｂ）ステップａ）によって生じた脂肪酸をアジド試薬と反応させることによって、対応する脂肪酸アジドを生成することと、ｃ）ステップｂ）の脂肪酸アジドを水素化して、対応する脂肪酸アミンを生成することと、ｄ）活性ＮＨＳ基を含む水溶性リンカーを遊離アミン基とカップリングさせることによって、安定な結合を形成することと、を含み、脂肪酸誘導体が水溶性である、前述の脂肪酸誘導体を調製する方法が提供される。
例えば、本発明は、以下の項目を提供する：
（項目１）
水溶性リンカーに結合した脂肪酸または脂肪酸エステルを含み、治療用タンパク質と安定に結合した、水溶性脂肪酸誘導体。
（項目２）
インビトロまたはインビボでヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）と結合する、項目１に記載の脂肪酸誘導体。
（項目３）
天然の治療用タンパク質と比較して増加した半減期を有する、項目１〜２のいずれかに記載の脂肪酸誘導体。
（項目４）
上記脂肪酸が飽和脂肪酸または不飽和脂肪酸である、項目１〜３のいずれかに記載の脂肪酸誘導体。
（項目５）
上記脂肪酸が飽和脂肪酸である、項目４に記載の脂肪酸誘導体。
（項目６）
上記脂肪酸が分岐鎖脂肪酸である、項目４に記載の脂肪酸誘導体。
（項目７）
上記脂肪酸がＣ１０、Ｃ１２、Ｃ１４、Ｃ１６、Ｃ１８、Ｃ２０、Ｃ２２、およびＣ２４からなる群から選択される鎖長を含む、項目１〜６のいずれかに記載の脂肪酸誘導体。
（項目８）
上記脂肪酸がＣ１４、Ｃ１６、およびＣ１８からなる群から選択される鎖長を有する、項目７に記載の脂肪酸誘導体。
（項目９）
上記脂肪酸が、末端カルボキシル基およびω基からなる群から選択される上記脂肪酸上の基で上記水溶性リンカーに結合している、項目１〜８のいずれかに記載の脂肪酸誘導体。
（項目１０）
上記脂肪酸が上記ω基で上記水溶性リンカーと結合している、項目９に記載の脂肪酸誘導体。
（項目１１）
上記ω基が、ヒドロキシル、アミノ、チオ、およびカルボキシルからなる群から選択される、項目１０に記載の脂肪酸誘導体。
（項目１２）
上記脂肪酸が１６−ヒドロキシヘキサデカン酸である、項目１〜３のいずれかに記載の脂肪酸誘導体。
（項目１３）
上記脂肪酸エステルが、メチルエステルおよびエチルエステルからなる群から選択される、項目１〜３のいずれかに記載の脂肪酸誘導体。
（項目１４）
上記脂肪酸エステルが１６−ヒドロキシヘキサデカン酸メチルエステルである、項目１３に記載の脂肪酸誘導体。
（項目１５）
上記水溶性リンカーが、水溶性ポリマーと、上記治療用タンパク質に結合した少なくとも１つの官能基とを含む、項目１〜１４のいずれかに記載の脂肪酸誘導体。
（項目１６）
上記官能基が、スルホ基、カルボキシル基、水酸基、アミノ基、アミド基、マレイミド基、アミノオキシ基、およびヒドラジド基からなる群から選択される、項目１５に記載の脂肪酸誘導体。
（項目１７）
上記官能基がアミノオキシ基である、項目１６に記載の脂肪酸誘導体。
（項目１８）
上記水溶性ポリマーが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、分岐ＰＥＧ、ポリシアル酸（ＰＳＡ）、ヒドロキシアルキルデンプン（ＨＡＳ）、ヒドロキシエチルデンプン（ＨＥＳ）、炭水化物、多糖類、プルラン、キトサン、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸塩、デルマタン硫酸塩、デンプン、デキストラン、カルボキシメチル−デキストラン、ポリアルキレンオキサイド（ＰＡＯ）、ポリアルキレングリコール（ＰＡＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ポリオキサゾリン、ポリアクリロイルモルホリン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリカルボキシレート、ポリビニルピロリドン、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリエチレン−コ−無水マレイン酸、ポリスチレン−コ−無水マレイン酸、ポリ（１−ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチルホルマール）（ＰＨＦ）、および２−メタクリロイルオキシ−２’−エチルトリメチルアンモニウムホスフェート（ＭＰＣ）からなる群から選択される、項目１５〜１７のいずれか１項に記載の脂肪酸誘導体。
（項目１９）
上記水溶性ポリマーがＰＥＧである、項目１８に記載の脂肪酸誘導体。
（項目２０）
上記水溶性ポリマーが、Ｏ３、Ｏ５、Ｏ７、Ｏ９、Ｏ１１、Ｏ１３、およびＯ１５からなる群から選択される鎖長を含む、項目１５〜１７および１９のいずれか１項に記載の脂肪酸誘導体。
（項目２１）
上記水溶性リンカーが、
ａ）式：
【化４０】
2014501262.tif 000007
の３−オキサペンタン−１，５−ジオキシアミン、
ｂ）式：
【化４１】
2014501262.tif 000008
の３，６，９−トリアオキサウンデカン（ｔｒｉａｏｘａｕｎｄｅｃａｎｅ）−１，１１−ジオキシアミン、
ｃ）式：
【化４２】
2014501262.tif 000009
の３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカン−１，１７−ジオキシアミン、および
ｄ）式：
【化４３】
2014501262.tif 000010
の３，６，９，１２，１５，１８，２１−ヘプタオキサトリコサン−１，２３−ジオキシアミンからなる群から選択される、項目１７に記載の脂肪酸誘導体。
（項目２２）
上記水溶性リンカーが、式：
【化４４】
2014501262.tif 000011
の３，６，９−トリアオキサウンデカン−１，１１−ジオキシアミンである、項目２１に記載の脂肪酸誘導体。
（項目２３）
上記水溶性リンカーが、式：
【化４５】
2014501262.tif 000012
の３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカン−１，１７−ジオキシアミンである、項目２１に記載の脂肪酸誘導体。
（項目２４）
上記脂肪酸誘導体が、オキシム連結により上記治療用タンパク質と安定に結合している、項目１〜３のいずれか１項に記載の脂肪酸誘導体。
（項目２５）
上記オキシム連結が、上記水溶性リンカー上のオキシム基と上記治療用タンパク質上の酸化炭水化物のアルデヒド基との間に形成される、項目２４に記載の脂肪酸誘導体。
（項目２６）
上記水溶性リンカー上のマレイミド基が上記治療用タンパク質上の遊離スルフヒドリル基に結合することにより、上記脂肪酸誘導体が上記治療用タンパク質と安定に結合している、項目１〜３のいずれか１項に記載の脂肪酸誘導体。
（項目２７）
上記水溶性リンカー上のＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルが上記治療用タンパク質上の遊離アミノ基に結合することにより、上記脂肪酸誘導体が上記治療用タンパク質と安定に結合している、項目１〜３のいずれか１項に記載の脂肪酸誘導体。
（項目２８）
上記脂肪酸誘導体が、
ａ）式：
【化４６】
2014501262.tif 000013
の１６−（２−（２−（２−（２−アミノオキシエトキシ）−エトキシ）−エトキシ）−エトキシイミノ）−ヘキサデカン酸ナトリウム塩、および
ｂ）１６−（２−（２−（２−（２−アミノオキシエトキシ）−エトキシ）−エトキシ）−エトキシアミノ）−ヘキサデカン酸メチルエステル
【化４７】
2014501262.tif 000014
からなる群から選択される、項目１〜３のいずれか１項に記載の脂肪酸誘導体。
（項目２９）
上記治療用タンパク質が、第ＩＸ因子（ＦＩＸ）、第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）、第ＶＩＩａ因子（ＦＶＩＩａ）、フォンヴィレブランド因子（ＶＷＦ）、第ＦＶ因子（ＦＶ）、第Ｘ因子（ＦＸ）、第ＸＩ因子（ＦＸＩ）、第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩ）、トロンビン（ＦＩＩ）、プロテインＣ、プロテインＳ、ｔＰＡ、ＰＡＩ−１、組織因子（ＴＦ）、ＡＤＡＭＴＳ１３プロテアーゼ、ＩＬ−１アルファ、ＩＬ−１ベータ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−１１、コロニー刺激因子−１（ＣＳＦ−１）、Ｍ−ＣＳＦ、ＳＣＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、ＥＰＯ、インターフェロン−アルファ（ＩＦＮ−アルファ）、コンセンサスインターフェロン、ＩＦＮ−ベータ、ＩＦＮ−ガンマ、ＩＦＮ−オメガ、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＬ−３１、ＩＬ−３２アルファ、ＩＬ−３３、トロンボポエチン（ＴＰＯ）、Ａｎｇ−１、Ａｎｇ−２、Ａｎｇ−４、Ａｎｇ−Ｙ、アンジオポエチン様ポリペプチド１（ＡＮＧＰＴＬ１）、アンジオポエチン様ポリペプチド２（ＡＮＧＰＴＬ２）、アンジオポエチン様ポリペプチド３（ＡＮＧＰＴＬ３）、アンジオポエチン様ポリペプチド４（ＡＮＧＰＴＬ４）、アンジオポエチン様ポリペプチド５（ＡＮＧＰＴＬ５）、アンジオポエチン様ポリペプチド６（ＡＮＧＰＴＬ６）、アンジオポエチン様ポリペプチド７（ＡＮＧＰＴＬ７）、ビトロネクチン、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、アンジオゲニン、アクチビンＡ、アクチビンＢ、アクチビンＣ、骨形態形成タンパク質−１、骨形態形成タンパク質−２、骨形態形成タンパク質−３、骨形態形成タンパク質−４、骨形態形成タンパク質−５、骨形態形成タンパク質−６、骨形態形成タンパク質−７、骨形態形成タンパク質−８、骨形態形成タンパク質−９、骨形態形成タンパク質−１０、骨形態形成タンパク質−１１、骨形態形成タンパク質−１２、骨形態形成タンパク質−１３、骨形態形成タンパク質−１４、骨形態形成タンパク質−１５、骨形態形成タンパク質受容体ＩＡ、骨形態形成タンパク質受容体ＩＢ、骨形態形成タンパク質受容体ＩＩ、脳由来神経栄養因子、カルジオトロフィン−１、毛様体神経栄養因子、毛様体神経栄養因子受容体、クリプト（ｃｒｉｐｔｏ）、クリプティック（ｃｒｙｐｔｉｃ）、サイトカイン誘導性好中球走化性因子１、サイトカイン誘導性好中球走化性因子２α、サイトカイン誘導性好中球走化性因子２β、β内皮細胞成長因子、エンドセリン１、上皮成長因子、エピゲン（ｅｐｉｇｅｎ）、エピレギュリン、上皮由来好中球誘引物質、線維芽細胞成長因子４、線維芽細胞成長因子５、線維芽細胞成長因子６、線維芽細胞成長因子７、線維芽細胞成長因子８、線維芽細胞成長因子８ｂ、線維芽細胞成長因子８ｃ、線維芽細胞成長因子９、線維芽細胞成長因子１０、線維芽細胞成長因子１１、線維芽細胞成長因子１２、線維芽細胞成長因子１３、線維芽細胞成長因子１６、線維芽細胞成長因子１７、線維芽細胞成長因子１９、線維芽細胞成長因子２０、線維芽細胞成長因子２１、酸性線維芽細胞成長因子、塩基性線維芽細胞成長因子、グリア細胞株由来神経栄養因子受容体α１、グリア細胞株由来神経栄養因子受容体α２、成長関連タンパク質、成長関連タンパク質α、成長関連タンパク質β、成長関連タンパク質γ、ヘパリン結合上皮成長因子、肝細胞成長因子、肝細胞成長因子受容体、肝細胞癌由来成長因子、インスリン様成長因子Ｉ、インスリン様成長因子受容体、インスリン様成長因子ＩＩ、インスリン様成長因子結合タンパク質、ケラチノサイト成長因子、白血病抑制因子、白血病抑制因子受容体α、神経成長因子神経成長因子受容体、ニューロポエチン、ニューロトロフィン−３、ニューロトロフィン−４、オンコスタチンＭ（ＯＳＭ）、胎盤成長因子、胎盤成長因子２、血小板由来内皮細胞成長因子、血小板由来成長因子、血小板由来成長因子Ａ鎖、血小板由来成長因子ＡＡ、血小板由来成長因子ＡＢ、血小板由来成長因子Ｂ鎖、血小板由来成長因子ＢＢ、血小板由来成長因子受容体α、血小板由来成長因子受容体β、プレＢ細胞成長刺激因子、幹細胞因子（ＳＣＦ）、幹細胞因子受容体、ＴＮＦ、ＴＮＦ０、ＴＮＦ１、ＴＮＦ２、形質転換成長因子α、形質転換成長因子β、形質転換成長因子β１、形質転換成長因子β１．２、形質転換成長因子β２、形質転換成長因子β３、形質転換成長因子β５、潜在型形質転換成長因子β１、形質転換成長因子β結合タンパク質Ｉ、形質転換成長因子β結合タンパク質ＩＩ、形質転換成長因子β結合タンパク質ＩＩＩ、胸腺間質性リンパ球新生因子（ＴＳＬＰ）、腫瘍壊死因子受容体Ｉ型、腫瘍壊死因子受容体ＩＩ型、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子受容体、ホスホリパーゼ活性化タンパク質（ＰＵＰ）、インスリン、レクチンリシン、プロラクチン、絨毛性ゴナドトロピン、卵胞刺激ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、組織プラスミノーゲン活性化因子、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、およびＩｇＤ、α−ガラクトシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、ＤＮアーゼ、フェチュイン、黄体形成ホルモン、エストロゲン、インスリン、アルブミン、リポタンパク質、胎児性タンパク質、トランスフェリン、トロンボポエチン、ウロキナーゼ、インテグリン、トロンビン、レプチン、ヒュミラ（アダリムマブ）、プロリア（デノスマブ）、エンブレル（エタネルセプト）、表１のタンパク質、またはそれらの生物活性断片、誘導体、もしくは変異体からなる群から選択される、項目１〜２８のいずれか１項に記載の脂肪酸誘導体。
（項目３０）
上記治療用タンパク質がＦＶＩＩａである、項目２９に記載の脂肪酸誘導体。
（項目３１）
上記治療用タンパク質がＦＶＩＩＩである、項目２９に記載の脂肪酸誘導体。
（項目３２）
上記治療用タンパク質がＦＩＸである、項目２９に記載の脂肪酸誘導体。
（項目３３）
ａ）脂肪酸上のω−ヒドロキシ基を酸化させて、上記脂肪酸上にアルデヒド基を生成することと、
ｂ）活性アミノオキシ基を含む水溶性リンカーを上記アルデヒド基とカップリングさせて、安定なオキシム連結を形成することと、
を含み、上記脂肪酸誘導体が水溶性である、項目１に記載の脂肪酸誘導体を調製する方法。
（項目３４）
上記ω−ヒドロキシ基が、デス・マーチン・ペルヨージナン試薬、Ｔｅｍｐｏ試薬、塩化オキサリル／ＤＭＳＯ、過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム（ＴＰＡＰ）、および６価クロム試薬（コリンズ試薬、クロロクロム酸ピリジニウム（ＰＣＣ）、および重クロム酸ピリジニウム）からなる群から選択される酸化試薬により酸化される、項目３３に記載の方法。
（項目３５）
上記酸化試薬がデス・マーチン・ペルヨージナンである、項目３４に記載の方法。
（項目３６）
上記脂肪酸が飽和脂肪酸または不飽和脂肪酸である、項目３３〜３５のいずれか１項に記載の方法。
（項目３７）
上記脂肪酸が飽和脂肪酸である、項目３６に記載の方法。
（項目３８）
上記脂肪酸が分岐鎖脂肪酸である、項目３６に記載の方法。
（項目３９）
上記脂肪酸がＣ１０、Ｃ１２、Ｃ１４、Ｃ１６、Ｃ１８、Ｃ２０、Ｃ２２、およびＣ２４からなる群から選択される鎖長を含む、項目３３〜３７のいずれかに記載の方法。
（項目４０）
上記脂肪酸がＣ１４、Ｃ１６、およびＣ１８からなる群から選択される鎖長を有する、項目３９に記載の方法。
（項目４１）
上記脂肪酸が１６−ヒドロキシヘキサデカン酸である、項目４０に記載の方法。
（項目４２）
上記水溶性リンカーが水溶性ポリマーおよび少なくとも１つのアミノオキシ基を含む、項目３３〜４１のいずれか１項に記載の方法。
（項目４３）
上記水溶性ポリマーが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、分岐ＰＥＧ、ポリシアル酸（ＰＳＡ）、ヒドロキシアルキルデンプン（ＨＡＳ）、ヒドロキシエチルデンプン（ＨＥＳ）、炭水化物、多糖類、プルラン、キトサン、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸塩、デルマタン硫酸塩、デンプン、デキストラン、カルボキシメチル−デキストラン、ポリアルキレンオキサイド（ＰＡＯ）、ポリアルキレングリコール（ＰＡＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ポリオキサゾリン、ポリアクリロイルモルホリン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリカルボキシレート、ポリビニルピロリドン、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリエチレン−コ−無水マレイン酸、ポリスチレン−コ−無水マレイン酸、ポリ（１−ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチルホルマール）（ＰＨＦ）、および２−メタクリロイルオキシ−２’−エチルトリメチルアンモニウムホスフェート（ＭＰＣ）からなる群から選択される、項目４２に記載の方法。
（項目４４）
上記水溶性ポリマーがＰＥＧである、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
上記水溶性ポリマーが、Ｏ５、Ｏ７、Ｏ９、Ｏ１１、Ｏ１３、およびＯ１５からなる群から選択される鎖長を含む、項目４２または４４のいずれか１項に記載の方法。
（項目４６）
上記水溶性リンカーが、
ａ）式：
【化４８】
2014501262.tif 000015
の３−オキサペンタン−１，５−ジオキシアミン、
ｂ）式：
【化４９】
2014501262.tif 000016
の３，６，９−トリアオキサウンデカン−１，１１−ジオキシアミン、
ｃ）式：
【化５０】
2014501262.tif 000017
の３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカン−１，１７−ジオキシアミン、および
ｄ）式：
【化５１】
2014501262.tif 000018
の３，６，９，１２，１５，１８，２１−ヘプタオキサトリコサン−１，２３−ジオキシアミンからなる群から選択される、項目４５に記載の方法。
（項目４７）
上記水溶性リンカーが、式：
【化５２】
2014501262.tif 000019
の３，６，９−トリアオキサウンデカン−１，１１−ジオキシアミンである、項目４６に記載の脂肪酸誘導体。
（項目４８）
上記水溶性リンカーが、式：
【化５３】
2014501262.tif 000020
の３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカン−１，１７−ジオキシアミンである、項目４６に記載の脂肪酸誘導体。
（項目４９）
ａ）脂肪酸上のカルボキシル基をエステル化して、上記脂肪酸上にエステルを生成することと、
ｂ）脂肪酸上のω−ヒドロキシ基を活性化して、ステップａ）の脂肪酸上にメシル基を生成することと、
ｃ）ステップｂ）のメシル基を置換することによって、活性アミノオキシ基を含む水溶性リンカーをカップリングさせ、それにより安定なオキシイミン−メチレン結合を形成することと、
を含み、上記脂肪酸誘導体が水溶性である、項目１に記載の脂肪酸誘導体を調製する方法。
（項目５０）
上記カルボキシル基が、塩化アセチル、酸存在下でのメタノール、酸存在下でのエタノール、ジアゾメタン、およびヨウ化メチルからなる群から選択されるエステル化剤によりエステル化される、項目４９に記載の方法。
（項目５１）
上記エステル化剤が塩化アセチルである、項目５０に記載の方法。
（項目５２）
上記ω−ヒドロキシ基が、塩化メシル、塩化トシル、および塩化ノシルからなる群から選択される活性化剤により活性化される、項目４９〜５１のいずれか１項に記載の方法。
（項目５３）
上記活性化剤が塩化メシルである、項目５２に記載の方法。
（項目５４）
上記脂肪酸が飽和脂肪酸または不飽和脂肪酸である、項目４９〜５３のいずれか１項に記載の方法。
（項目５５）
上記脂肪酸が飽和脂肪酸である、項目５４に記載の方法。
（項目５６）
上記脂肪酸が分岐鎖脂肪酸である、項目５４に記載の方法。
（項目５７）
上記脂肪酸が、Ｃ１０、Ｃ１２、Ｃ１４、Ｃ１６、Ｃ１８、Ｃ２０、Ｃ２２、およびＣ２４からなる群から選択される鎖長を含む、項目４９〜５４のいずれかに記載の方法。
（項目５８）
上記脂肪酸が、Ｃ１４、Ｃ１６、およびＣ１８からなる群から選択される鎖長を有する、項目５７に記載の方法。
（項目５９）
上記脂肪酸が１６−ヒドロキシヘキサデカン酸である、項目５８に記載の方法。
（項目６０）
上記水溶性リンカーが水溶性ポリマーおよび少なくとも１つのアミノオキシ基を含む、項目４９〜５９のいずれか１項に記載の方法。
（項目６１）
上記水溶性ポリマーが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、分岐ＰＥＧ、ポリシアル酸（ＰＳＡ）、ヒドロキシアルキルデンプン（ＨＡＳ）、ヒドロキシエチルデンプン（ＨＥＳ）、炭水化物、多糖類、プルラン、キトサン、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸塩、デルマタン硫酸塩、デンプン、デキストラン、カルボキシメチル−デキストラン、ポリアルキレンオキサイド（ＰＡＯ）、ポリアルキレングリコール（ＰＡＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ポリオキサゾリン、ポリアクリロイルモルホリン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリカルボキシレート、ポリビニルピロリドン、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリエチレン−コ−無水マレイン酸、ポリスチレン−コ−無水マレイン酸、ポリ（１−ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチルホルマール）（ＰＨＦ）、および２−メタクリロイルオキシ−２’−エチルトリメチルアンモニウムホスフェート（ＭＰＣ）からなる群から選択される、項目６０に記載の方法。
（項目６２）
上記水溶性ポリマーがＰＥＧである、項目６１に記載の方法。
（項目６３）
上記水溶性ポリマーが、Ｏ３、Ｏ５、Ｏ７、Ｏ９、Ｏ１１、Ｏ１３、およびＯ１５からなる群から選択される鎖長を含む、項目６０または６２のいずれか１項に記載の方法。
（項目６４）
上記水溶性リンカーが、
ａ）式：
【化５４】
2014501262.tif 000021
の３−オキサペンタン−１，５−ジオキシアミン、
ｂ）式：
【化５５】
2014501262.tif 000022
の３，６，９−トリアオキサウンデカン−１，１１−ジオキシアミン、
ｃ）式：
【化５６】
2014501262.tif 000023
の３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカン−１，１７−ジオキシアミン、および
ｄ）式：
【化５７】
2014501262.tif 000024
の３，６，９，１２，１５，１８，２１−ヘプタオキサトリコサン−１，２３−ジオキシアミンからなる群から選択される、項目６３に記載の方法。
（項目６５）
上記水溶性リンカー、式：
【化５８】
2014501262.tif 000025
の３，６，９−トリアオキサウンデカン−１，１１−ジオキシアミンである、項目６４に記載の脂肪酸誘導体。
（項目６６）
上記水溶性リンカーが、式：
【化５９】
2014501262.tif 000026
の３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカン−１，１７−ジオキシアミンである、項目６４に記載の脂肪酸誘導体。
（項目６７）
抱合を可能にする条件下で、上記治療用タンパク質上の酸化炭水化物部分と項目１に記載の脂肪酸誘導体とを接触させることを含む、治療用複合タンパク質を調製する方法であって、
上記炭水化物部分は、過ヨウ素酸ナトリウム（ＮａＩＯ４）、四酢酸鉛（Ｐｂ（ＯＡｃ）４）、および過ルテニウム酸カリウム（ＫＲｕＯ４）からなる群から選択される酸化剤を含む緩衝剤とのインキュベーションによって酸化され、
上記酸化炭水化物部分と上記脂肪酸誘導体上の活性アミノオキシ基との間にオキシム連結が形成され、
上記オキシム連結形成が、アニリン、ｏ−アミノ安息香酸、ｍ−アミノ安息香酸、ｐ−アミノ安息香酸、スルファニル酸、ｏ−アミノベンザミド、ｏ−トルイジン、ｍ−トルイジン、ｐ−トルイジン、ｏ−アニシジン、ｍ−アニシジン、およびｐ−アニシジンからなる群から選択される求核触媒により触媒される、方法。
（項目６８）
上記治療用タンパク質が、第ＩＸ因子（ＦＩＸ）、第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）、第ＶＩＩａ因子（ＦＶＩＩａ）、フォンヴィレブランド因子（ＶＷＦ）、第ＦＶ因子（ＦＶ）、第Ｘ因子（ＦＸ）、第ＸＩ因子（ＦＸＩ）、第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩ）、トロンビン（ＦＩＩ）、プロテインＣ、プロテインＳ、ｔＰＡ、ＰＡＩ−１、組織因子（ＴＦ）、ＡＤＡＭＴＳ１３プロテアーゼ、ＩＬ−１アルファ、ＩＬ−１ベータ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−１１、コロニー刺激因子−１（ＣＳＦ−１）、Ｍ−ＣＳＦ、ＳＣＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、ＥＰＯ、インターフェロン−アルファ（ＩＦＮ−アルファ）、コンセンサスインターフェロン、ＩＦＮ−ベータ、ＩＦＮ−ガンマ、ＩＦＮ−オメガ、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＬ−３１、ＩＬ−３２アルファ、ＩＬ−３３、トロンボポエチン（ＴＰＯ）、Ａｎｇ−１、Ａｎｇ−２、Ａｎｇ−４、Ａｎｇ−Ｙ、アンジオポエチン様ポリペプチド１（ＡＮＧＰＴＬ１）、アンジオポエチン様ポリペプチド２（ＡＮＧＰＴＬ２）、アンジオポエチン様ポリペプチド３（ＡＮＧＰＴＬ３）、アンジオポエチン様ポリペプチド４（ＡＮＧＰＴＬ４）、アンジオポエチン様ポリペプチド５（ＡＮＧＰＴＬ５）、アンジオポエチン様ポリペプチド６（ＡＮＧＰＴＬ６）、アンジオポエチン様ポリペプチド７（ＡＮＧＰＴＬ７）、ビトロネクチン、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、アンジオゲニン、アクチビンＡ、アクチビンＢ、アクチビンＣ、骨形態形成タンパク質−１、骨形態形成タンパク質−２、骨形態形成タンパク質−３、骨形態形成タンパク質−４、骨形態形成タンパク質−５、骨形態形成タンパク質−６、骨形態形成タンパク質−７、骨形態形成タンパク質−８、骨形態形成タンパク質−９、骨形態形成タンパク質−１０、骨形態形成タンパク質−１１、骨形態形成タンパク質−１２、骨形態形成タンパク質−１３、骨形態形成タンパク質−１４、骨形態形成タンパク質−１５、骨形態形成タンパク質受容体ＩＡ、骨形態形成タンパク質受容体ＩＢ、骨形態形成タンパク質受容体ＩＩ、脳由来神経栄養因子、カルジオトロフィン−１、毛様体神経栄養因子、毛様体神経栄養因子受容体、クリプト（ｃｒｉｐｔｏ）、クリプティック（ｃｒｙｐｔｉｃ）、サイトカイン誘導性好中球走化性因子１、サイトカイン誘導性好中球走化性因子２α、サイトカイン誘導性好中球走化性因子２β、β内皮細胞成長因子、エンドセリン１、上皮成長因子、エピゲン（ｅｐｉｇｅｎ）、エピレギュリン、上皮由来好中球誘引物質、線維芽細胞成長因子４、線維芽細胞成長因子５、線維芽細胞成長因子６、線維芽細胞成長因子７、線維芽細胞成長因子８、線維芽細胞成長因子８ｂ、線維芽細胞成長因子８ｃ、線維芽細胞成長因子９、線維芽細胞成長因子１０、線維芽細胞成長因子１１、線維芽細胞成長因子１２、線維芽細胞成長因子１３、線維芽細胞成長因子１６、線維芽細胞成長因子１７、線維芽細胞成長因子１９、線維芽細胞成長因子２０、線維芽細胞成長因子２１、酸性線維芽細胞成長因子、塩基性線維芽細胞成長因子、グリア細胞株由来神経栄養因子受容体α１、グリア細胞株由来神経栄養因子受容体α２、成長関連タンパク質、成長関連タンパク質α、成長関連タンパク質β、成長関連タンパク質γ、ヘパリン結合上皮成長因子、肝細胞成長因子、肝細胞成長因子受容体、肝細胞癌由来成長因子、インスリン様成長因子Ｉ、インスリン様成長因子受容体、インスリン様成長因子ＩＩ、インスリン様成長因子結合タンパク質、ケラチノサイト成長因子、白血病抑制因子、白血病抑制因子受容体α、神経成長因子神経成長因子受容体、ニューロポエチン、ニューロトロフィン−３、ニューロトロフィン−４、オンコスタチンＭ（ＯＳＭ）、胎盤成長因子、胎盤成長因子２、血小板由来内皮細胞成長因子、血小板由来成長因子、血小板由来成長因子Ａ鎖、血小板由来成長因子ＡＡ、血小板由来成長因子ＡＢ、血小板由来成長因子Ｂ鎖、血小板由来成長因子ＢＢ、血小板由来成長因子受容体α、血小板由来成長因子受容体β、プレＢ細胞成長刺激因子、幹細胞因子（ＳＣＦ）、幹細胞因子受容体、ＴＮＦ、ＴＮＦ０、ＴＮＦ１、ＴＮＦ２、形質転換成長因子α、形質転換成長因子β、形質転換成長因子β１、形質転換成長因子β１．２、形質転換成長因子β２、形質転換成長因子β３、形質転換成長因子β５、潜在型形質転換成長因子β１、形質転換成長因子β結合タンパク質Ｉ、形質転換成長因子β結合タンパク質ＩＩ、形質転換成長因子β結合タンパク質ＩＩＩ、胸腺間質性リンパ球新生因子（ＴＳＬＰ）、腫瘍壊死因子受容体Ｉ型、腫瘍壊死因子受容体ＩＩ型、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子受容体、ホスホリパーゼ活性化タンパク質（ＰＵＰ）、インスリン、レクチンリシン、プロラクチン、絨毛性ゴナドトロピン、卵胞刺激ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、組織プラスミノーゲン活性化因子、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、およびＩｇＤ、α−ガラクトシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、ＤＮアーゼ、フェチュイン、黄体形成ホルモン、エストロゲン、インスリン、アルブミン、リポタンパク質、胎児性タンパク質、トランスフェリン、トロンボポエチン、ウロキナーゼ、インテグリン、トロンビン、レプチン、ヒュミラ（アダリムマブ）、プロリア（デノスマブ）、エンブレル（エタネルセプト）、表１のタンパク質、またはそれらの生物活性断片、誘導体、もしくは変異体からなる群から選択される、項目６７に記載の方法。
（項目６９）
項目６７〜６８のいずれか１項に記載の方法。
（項目７０）
上記治療用タンパク質がＦＶＩＩａである、項目６７〜６９のいずれか１項に記載の方法。
（項目７１）
上記治療用タンパク質がＦＶＩＩＩである、項目６７〜６９のいずれか１項に記載の方法。
（項目７２）
上記治療用タンパク質がＦＩＸである、項目６７〜６９のいずれか１項に記載の方法。
（項目７３）
上記酸化剤が過ヨウ素酸ナトリウム（ＮａＩＯ４）である、項目６７〜７２のいずれか１項に記載の方法。
（項目７４）
上記求核触媒がｍ−トルイジンである、項目６７〜７３のいずれか１項に記載の方法。
（項目７５）
上記治療用複合タンパク質を精製することをさらに含む、項目６７〜７４のいずれか１項に記載の方法。
（項目７６）
上記脂肪酸誘導体が項目３３〜４７のいずれか１項に記載の方法により調製される、項目６７〜７５のいずれか１項に記載の方法。
（項目７７）
上記脂肪酸誘導体が項目４９〜６６のいずれか１項に記載の方法により調製される、項目６７〜７５のいずれか１項に記載の方法。
（項目７８）
ａ）脂肪酸上のカルボキシル基をエステル化して、上記脂肪酸上にエステルを生成することと、
ｂ）活性マレイミド基を含む水溶性リンカーを遊離スルフヒドリル（ＳＨ）基とカップリングさせることによって、安定なチオエーテル結合を形成することと、
を含み、上記脂肪酸誘導体が水溶性である、項目１に記載の脂肪酸誘導体を調製する方法。
（項目７９）
ａ）脂肪酸上のカルボキシル基をエステル化して、脂肪酸エステルを生成することと、
ｂ）ステップａ）によって生じた上記脂肪酸をアジド試薬と反応させることによって、対応する脂肪酸アジドを生成することと、
ｃ）ステップｂ）の脂肪酸アジドを水素化して、対応する脂肪酸アミンを生成することと、
ｄ）活性ＮＨＳ基を含む水溶性リンカーを遊離アミン基とカップリングさせることによって、安定な結合を形成することと、
を含み、上記脂肪酸誘導体が水溶性である、項目１に記載の脂肪酸誘導体を調製する方法。