【手続補正書】
【提出日】平成27年10月29日(2015.10.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下を含む微小滴封入体：
・疎水性媒体の液滴、
・液滴の表面の周りの非重合性両親媒性分子の周辺層、および
・周辺層内の１個または複数の微小水滴、該微小水滴は(a)水性媒体および(b)水性媒体の表面の周りの非重合性両親媒性分子の外層を含む；
微小滴封入体は、前記非重合性両親媒性分子の二重層を含み:
(i)微小水滴は、液滴の端に位置し、微小水滴の外層の一部は前記周辺層に接触し、それにより微小水滴および周辺層の間の界面に前記非重合性両親媒性分子の二重層を形成している;または
(ii)第１の前記微小水滴の外層の一部は第２の前記微小水滴の外層の一部に接触し、それにより第１および第２の微小滴の間の界面に非重合性両親媒性分子の前記二重層を形成している。
【請求項２】
前記二重層がさらに膜タンパク質を含む請求項１に記載の微小滴封入体。
【請求項３】
膜タンパク質がポア、チャネル又はポンプである請求項２に記載の微小滴封入体。
【請求項４】
周辺層内に複数の前記微小水滴を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の微小滴封入体であって、
各微小水滴が、(a)水性媒体および(b)水性媒体の表面周囲に非重合性両親媒性分子の外層を含む、微小滴封入体。
【請求項５】
第１の前記微小水滴の外層の一部が第２の前記微小水滴の外層の一部に接触し、それにより第１および第２の微小滴の間の界面に非重合性両親媒性分子の二重層を形成する微小滴封入体であって、前記第１および第２の微小滴の間の界面にある二重層が、さらに膜タンパク質を含んでもよい請求項４に記載の微小滴封入体。
【請求項６】
少なくとも１つの前記微小水滴が液滴の端に位置し、微小水滴の外層の一部が周辺層に接触し、それにより微小水滴と周辺層の間の界面に前記非重合性両親媒性分子の二重層を形成する微小滴封入体であって、前記微小水滴と周辺層の間の界面での二重層がさらに膜タンパク質を含んでもよい請求項５に記載の微小滴封入体。
【請求項７】
前記複数の微小水滴が、チェーンまたはネットワーク中で互いに接触している２個より多くの微小水滴を含有し、チェーンまたはネットワーク中の各微小滴の外層の一部が、チェーンまたはネットワーク中の別の微小滴の外層の一部に接触し、それによりチェーンまたはネットワーク中の微小滴の間の界面に非重合性両親媒性分子の二重層を形成する微小滴封入体であって、前記チェーンまたはネットワーク中の微小滴の間の界面の各二重層が、さらに膜タンパク質を含んでもよく、チェーンまたはネットワーク中の少なくとも1個の微小水滴が液滴の端に位置し、液滴の端に位置する微小水滴の外層の一部が周辺層に接触し、それにより前記微小水滴と周辺層の間の界面に前記非重合性両親媒性分子の二重層を形成していてもよく、液滴の端に位置する微小水滴と周辺層の間の界面の二重層がさらに膜タンパク質を含んでもよい、請求項４に記載の微小滴封入体。
【請求項８】
前記微小水滴または少なくとも１個の前記微小水滴がさらにセンサー分子を含み、センサー分子は、標的分析物または光感受性分子の存在にたいして感受性である分子であってもよく、および／または
微小滴封入体がさらに治療薬、プロドラッグまたは診断用薬を含み、
該治療薬、診断用薬またはプロドラッグは微小水滴の親水性媒体中または疎水性媒体中に存在する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の微小滴封入体。
【請求項９】
該封入体の別々の部分に第１剤および第２剤をさらに含有し、第１剤は少なくとも１個の微小水滴の中にあり、第２剤は疎水性媒体中に存在する、または第１剤および第２剤は該封入体の異なる微小水滴中にある微小滴封入体であって、
（ｉ）第１剤および第２剤が、治療薬、診断用薬、併用療法に一緒に使用する薬物、プロドラッグおよびそれらが対応する活性化因子、活性薬剤および対応する不活性化因子化合物ならびに薬の生体内分布をモニタリングする造影剤から選択される；
（ｉｉ）第１および第２剤が併用療法に一緒に使用するのに適した薬物;または
第１剤が活性化因子により活性化しうる薬物の不活性形であり、第２剤は前記活性化因子;または
第１剤が不活性化因子化合物により不活性化しうる薬物であり、第２剤が前記不活性化因子化合物;または
第１剤が薬物であり第２剤が該薬物の生体内分布をモニタリングするのに適した造影剤である；
（ｉｉｉ）微小滴封入体はさらに第３剤を含有し、第３剤は、該封入体の第１および第２剤と異なる部分に存在し、異なる微小水滴中または疎水性媒体中のいずれかにあり、第３剤は治療薬、診断用薬、第１剤または第２剤との併用療法に一緒に使用するための薬物、プロドラッグ、プロドラッグのための活性化因子、活性薬剤のための不活性化因子化合物または薬の生体内分布をモニタリングするための造影剤であってもよい；
（ｉｖ）前記活性剤が予め定められた投薬量割合で微小滴封入体中に存在する；および／または
（ｖ）第１および第２剤、および存在する時第３剤が、化学反応で一緒に反応するための反応化合物；
であってもよい、請求項１〜８のいずれか１項に記載の微小滴封入体。
【請求項１０】
非重合性両親媒性分子の前記二重層または１以上の前記二重層の安定性が刺激感受性である微小滴封入体であって、
（ａ）刺激がpHの変化、温度の変化、超音波、機械的刺激、せん断流、種の臨界濃度、磁場、電場および電磁波から選択される；
（ｂ）刺激がpHの変化であり、１または複数の前記二重層はpH7.5以下にさらされた時に破裂または漏出しえてもよい；
（ｃ）１または複数の前記二重層の非重合性両親媒性分子がpH感受性脂質を含み、さらなるpHに感受性でない脂質を含んでもよく、さらなる前記脂質がリン脂質およびpH感受性脂質が約８以下のpKaを有する脂肪酸であってもよい； 
（ｄ）１または複数の前記二重層の非重合性両親媒性分子が1,2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン(DOPE)およびオレイン酸を含む；
（ｅ）１または複数の前記二重層が温度感受性であって、１または複数の前記二重層は約４０℃以上の温度にさらされた時に破裂または漏出しえてもよい；
（ｆ）１または複数の前記二重層の非重合性両親媒性分子は温度感受性脂質を含み、さらなるリン脂質を含んでもよく、温度感受性脂質が、４０℃〜７０℃の融解転移温度Ｔｍを有するリン脂質であってもよく、温度感受性脂質が、1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DSPC)または1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DPPC)であってもよい；
（ｇ）１または複数の前記二重層の非重合性両親媒性分子が、1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DSPC)および1,2-ジフィタノイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DPhPC)の混合物または1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DPPC)および1,2-ジフィタノイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DPhPC)の混合物を含む； 
（ｈ）１または複数の前記二重層の非重合性両親媒性分子が、1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DSPC)および1,2-ジフィタノイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DPhPC)をモル比1:1〜5:1で含む；および／または、
（ｉ）１または複数の前記二重層の非重合性両親媒性分子が、標的細胞上の表面種を認識する分子を含有し、その認識反応はその二重層の不安定化を含む；
であってもよい、請求項１〜８のいずれか１項に記載の微小滴封入体。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか１項に定義された１個の微小滴封入体または複数の前記微小滴封入体、および親水性の担体を含む組成物であって、
親水性の担体が、
水性媒体またはイオン液体；
水または水性バッファー液；または
薬学的に許容しうる担体；
を含んでもよい組成物。
【請求項１２】
（ａ）請求項１〜１０のいずれか１項に定義された微小滴封入体、
（ｂ）薬学的に許容しうる親水性の担体、および
（ｃ）活性成分として、治療薬、プロドラッグ、診断用薬または造影剤、
を含む医薬組成物。
【請求項１３】
請求項１〜１０のいずれか１項に定義された微小滴封入体、または請求項１１に定義された組成物の、合成生物学における使用。
【請求項１４】
以下の工程を含む原細胞または原型組織（prototissue）を調製する方法：
請求項１〜１０のいずれか１項に定義された微小滴封入体を提供する工程;および
１個または複数の前記微小水滴の１または複数の外層が前記非重合性両親媒性分子の周辺層に接触することを可能にするか、または１個または複数の前記微小水滴の１または複数の外層を前記非重合性両親媒性分子の周辺層に接触させ、それにより１個または複数の微小水滴の表面の少なくとも一部の周辺に非重合性両親媒性分子の二重層を形成する工程；であって、該方法は
さらに前記非重合性両親媒性分子の周辺層が１個または複数の前記微小水滴の１または複数の外層に付着するように、微小滴封入体から一部または全部の疎水性媒体を除去し、それにより１個のまたは複数の微小水滴の表面の少なくとも一部の周辺に非重合性両親媒性分子の二重層を形成する工程を含んでもよい。
【請求項１５】
膜タンパク質を含む、請求項２〜７のいずれか１項に定義された微小滴封入体の使用であって、
封入体中の液滴の間の分子の輸送および／または封入体中の液滴から外部環境への分子の送達；
膜タンパク質または膜タンパク質と相互作用する分析物の調査および／またはスクリーニング；または
非重合性両親媒性分子の二重層の調査および／またはスクリーニングのための使用。
【請求項１６】
請求項１〜１０のいずれか１項に定義された微小滴封入体を含むセンサー、バッテリーまたは電気的デバイス。