【手続補正書】
【提出日】平成27年8月28日(2015.8.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ａ−Ｂにより表されるプロテアソーム阻害剤の線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）活性化プロドラッグ、またはその薬学的に許容される塩であって、
ＡはＦＡＰの基質を表し；
Ｂは、ＦＡＰによる開裂の産物として前記プロドラッグから遊離形態で放出されたときに、５００ｎＭ以下のＫｉを有する、プロテアソームのタンパク質分解活性を阻害するプロテアソーム阻害剤部分を表し；
ＡおよびＢは、ＦＡＰにより酵素的に開裂されてＢをその遊離形態で放出する結合により共有結合しており；
該プロドラッグが、プロリルエンドペプチダーゼＥＣ３．４．２１．２６（ＰＲＥＰ）に関するよりも、少なくとも１０倍大きい、ＡおよびＢを連結する前記結合のＦＡＰ開裂に関するｋcat／Ｋmを有する、プロドラッグ。
【請求項２】
前記プロテアソーム阻害剤部分の遊離形態が、該プロドラッグと比較して、少なくとも１０倍低い、インビトロで細胞のプロテアソーム活性を阻害することに関するＩＣ50を有する、請求項１記載のプロドラッグ。
【請求項３】
前記プロテアソーム阻害剤部分の遊離形態が、該プロドラッグより少なくとも５倍高い、ヒトの細胞への細胞透過性を有する、請求項１記載のプロドラッグ。
【請求項４】
Ａが、ＦＡＰの基質であるペプチドまたはペプチド類似体を表し、該ペプチドまたはペプチド類似体がＮ末端封鎖基を含む、請求項１記載のプロドラッグ。
【請求項５】
前記ペプチドまたはペプチド類似体の少なくとも１つのアミノ酸残基が、天然に生じないアミノ酸類似体である、請求項４記載のプロドラッグ。
【請求項６】
前記Ｎ末端封鎖基が、生理学的ｐＨで、前記プロテアソーム阻害剤の遊離形態と比較して該プロドラッグの細胞透過性を減少させる部分である、請求項４記載のプロドラッグ。
【請求項７】
前記Ｎ末端封鎖基が、式−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）1-10−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨにより表される、請求項６記載のプロドラッグ。
【請求項８】
前記Ｎ末端封鎖基がスクシニルである、請求項６記載のプロドラッグ。
【請求項９】
Ｂが共有結合プロテアソーム阻害剤である、請求項１記載のプロドラッグ。
【請求項１０】
Ｂが、プロテアソームの活性部位にアミノ酸残基を有する共有結合付加物を形成できる求電子官能基をカルボキシ末端に有するジペプチジル部分である、請求項９記載のプロドラッグ。
【請求項１１】
前記求電子官能基が、アルデヒド、ボロン酸、ボロン酸エステル、エポキシケトン、ベータ−ラクトン、ビニルスルホン、またはα，β−不飽和カルボニルである、請求項１０記載のプロドラッグ。
【請求項１２】
Ｂが、下記からなる群より選択される、請求項１記載のプロドラッグ。
【化１−１】
2014527070.tif 000001
【化１−２】
2014527070.tif 000002
【請求項１３】
Ｂが、下記からなる群より選択される、請求項１記載のプロドラッグ。
【化２】
2014527070.tif 000003
【請求項１４】
Ｂが、下記からなる群より選択される、請求項１記載のプロドラッグ。
【化３】
2014527070.tif 000004
【請求項１５】
下記式により表される化合物、またはその薬学的に許容される塩：
Ｒ−Ｘａａ1−Ｘａａ2−Ｙ
式中、
Ｒはアシル基であり；
Ｘａａ1は、Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｐｒｏ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、およびＴｙｒからなる群より選択され；
Ｘａａ2は、Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｐｒｏ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、およびＴｙｒからなる群より選択され；
Ｙは、
【化４】
2014527070.tif 000005
である。
【請求項１６】
Ｘａａ2のカルボキシル末端との化学結合およびＹとの化学結合を有する自己脱離性リンカーをさらに含む、請求項１５記載の化合物。
【請求項１７】
前記自己離脱性リンカーが、ｐ−アミノベンジルオキソカルボニル（ＰＡＢＣ）または２，４−ビス（ヒドロキシメチル）アニリンである、請求項１６記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒが、ホルミル、アセチル、ベンゾイル、トリフルオロアセチル、スクシニル、およびメトキシスクシニルからなる群より選択される、請求項１５記載の化合物。
【請求項１９】
Ｘａａ1が、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、ＳｅｒまたはＴｈｒである、請求項１５記載の化合物。
【請求項２０】
Ｘａａ2が、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、ＬｅｕまたはＶａｌである、請求項１５記載の化合物。
【請求項２１】
Ｘａａ2が（Ｄ）−Ａｌａである、請求項１５記載の化合物。
【請求項２２】
Ｙが、
【化５】
2014527070.tif 000006
である、請求項１５記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒがスクシニルであり、Ｘａａ1がＳｅｒであり、Ｘａａ2が（Ｄ）−Ａｌａであり、Ｙが、
【化６】
2014527070.tif 000007
である、請求項１５記載の化合物。
【請求項２４】
下記式により表される化合物またはその薬学的に許容される塩。
【化７】
2014527070.tif 000008
【請求項２５】
下記式Ｉにより表される線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）活性化プロテアソーム阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【化８】
2014527070.tif 000009
式中、
Ｘ−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ11−Ｒ’5−はＦＡＰ基質配列を表し；
ＸはＮ−アシルペプチジル基であり；
−ＮＲ11−Ｒ’5は、ＦＡＰのＰ’1特異的サブサイトと結合するアミノ酸残基またはその類似体であり；
前記ＦＡＰ基質配列はＦＡＰにより開裂されてＮＨＲ11−Ｒ’5−Ｒを放出し；
Ｒ11はＨまたは低級アルキルを表し；および
ＮＨＲ11−Ｒ’5−Ｒはプロテアソーム阻害剤である。
【請求項２６】
下記式ＩＩにより表される、請求項２５記載のＦＡＰ活性化プロテアソーム阻害剤：
【化９】
2014527070.tif 000010
式中、
Ｒ1−（Ｃ＝Ｏ）−はアシルＮ末端封鎖基を表し；
Ｒ2は、Ｈ、低級アルキル、もしくはモノ−またはジ−ヒドロキシ置換低級アルキルを表し；
Ｒ3は、Ｈ、ハロゲン、または低級アルキルを表し；
Ｒ4は、存在しないか、もしくは低級アルキル、−ＯＨ、−ＮＨ2またはハロゲンを表し；
Ｒ5は、大きい疎水性アミノ酸側鎖を表し；
Ｒ11は、Ｈまたは低級アルキルを表し；および
該ＦＡＰ活性化プロテアソーム阻害剤は、ＦＡＰにより開裂されて、
【化１０】
2014527070.tif 000011
により表されるプロテアソーム阻害剤を放出する。
【請求項２７】
【化１１】
2014527070.tif 000012
が、
【化１２】
2014527070.tif 000013
からなる群より選択される、請求項２６記載のＦＡＰ活性化プロテアソーム阻害剤。
【請求項２８】
下記式ＩＩＩにより表される、請求項２６記載のＦＡＰ活性化プロテアソーム阻害剤：
【化１３】
2014527070.tif 000014
式中、
Ｒ1−（Ｃ＝Ｏ）−はアシルＮ末端封鎖基を表し；
Ｒ2は、Ｈ、低級アルキル、もしくはモノ−またはジ−ヒドロキシ置換低級アルキルを表し；
Ｒ3は、Ｈ、ハロゲン、または低級アルキルを表し；
Ｒ4は、存在しないか、もしくは低級アルキル、−ＯＨ、−ＮＨ2またはハロゲンを表し；
Ｒ5は、大きい疎水性アミノ酸側鎖を表し；
Ｒ6は、アルキル、シクロアルキル、アリール、複素環または−（ＣＨ2）n−Ｒ7を表し；
Ｒ7は、アリール、アラルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アルキルチオ、−ＯＨまたは−ＳＨを表し；
Ｒ11は、Ｈまたは低級アルキルを表し；
Ｗは、−ＣＮ、エポキシケトン、−ＣＨ＝ＮＲ8、
【化１４】
2014527070.tif 000015
を表し；
Ｒ8は、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、−Ｃ（Ｘ1）（Ｘ2）Ｘ3、−（ＣＨ2）m−Ｒ9、−（ＣＨ2）n−ＯＨ、−（ＣＨ2）n−Ｏ−アルキル、−（ＣＨ2）n−Ｏ−アルケニル、−（ＣＨ2）n−Ｏ−アルキニル、−（ＣＨ2）n−Ｏ−（ＣＨ2）m−Ｒ9、−（ＣＨ2）n−ＳＨ、−（ＣＨ2）n−Ｓ−アルキル、−（ＣＨ2）n−Ｓ−アルケニル、−（ＣＨ2）n−Ｓ−アルキニル、−（ＣＨ2）n−Ｓ−（ＣＨ2）m−Ｒ9、−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ2、−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ10を表し；
Ｒ9は、各存在について独立して、置換または未置換のアリール、アラルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、または複素環を表し；
Ｒ10は、各存在について独立して、水素、もしくは置換または未置換のアルキル、アルケニル、アリール、アラルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、または複素環を表し；
Ｙ1およびＹ2は、独立してまたは共に、ＯＨ、もしくはＹ1とＹ2が、環構造に５から８の原子を有する環を介して接続されている環状誘導体を含む、ヒドロキシル基に加水分解されることのできる基であり得；
Ｒ50は、ＯまたはＳを表し；
Ｒ51は、Ｎ3、ＳＨ2、ＮＨ2、ＮＯ2または−ＯＲ10を表し；
Ｒ52は、水素、低級アルキル、アミン、−ＯＲ10、または薬学的に許容される塩を表すか、もしくはＲ51とＲ52は、それらが結合したリン原子と一緒に、環構造に５から８の原子を有する複素環を完成し；
Ｘ1はハロゲンであり；
Ｘ2およびＸ3の各々はＨまたはハロゲンを表し；および
ｍは、ゼロまたは１から８の範囲の整数であり、ｎは１から８の範囲の整数である。
【請求項２９】
下記式により表される、請求項２８記載のＦＡＰ活性化プロテアソーム阻害剤。
【化１５】
2014527070.tif 000016
【請求項３０】
請求項１から１４いずれか１項記載のＦＡＰ活性化プロドラッグ、および薬学的に許容される賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項３１】
効果量の請求項１から１４いずれか１項記載のＦＡＰ活性化プロドラッグを含む、細胞におけるプロテアソーム機能を阻害するための組成物。
【請求項３２】
効果量の請求項１から１４いずれか１項記載のＦＡＰ活性化プロドラッグを含む、細胞における抗原提示を阻害するための組成物。
【請求項３３】
治療的効果量の請求項１から１４いずれか１項記載のＦＡＰ活性化プロドラッグを含む、癌、乾癬、再狭窄、または他の細胞増殖性疾患を治療するための医薬組成物。
【請求項３４】
治療的効果量の化学療法薬と同時投与される、請求項３３記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記化学療法薬が、ドセタキセル、パクリタキセル、メシル酸イマチニブ、ゲムシタビン、シスプラチン、カルボプラチン、５−フルオロウラシル、ペメトレキセド、メトトレキサート、ドキソルビシン、レナリドミド、デキサメタゾン、またはモノメチルオーリスタチンである、請求項３４記載の医薬組成物。
【請求項３６】
前記化学療法薬が、ドセタキセル、ゲムシタビン、カルボプラチン、またはドキソルビシンである、請求項３４記載の医薬組成物。
【請求項３７】
前記化学療法薬が、ＭＧ−１３２、ＰＳＩ、フェルタミドＢ、ボルテゾミブ、ＣＥＰ−１８７７０、ＭＬＮ−２２３８、ＭＬＮ−９７０８、エポキソミシン、カルフィルゾミブ（ＰＲ−１７１）、ＮＣ−００５、ＹＵ−１０１、ＬＵ−００５、ＹＵ−１０２、ＮＣ−００１、ＬＵ−００１、ＮＣ−０２２、ＰＲ−９５７（ＬＭＰ７）、ＣＰＳＩ（β５）、ＬＭＰ２−ｓｐ−ｅｋ、ＢＯＤＩＰＹ−ＮＣ−００１、アジド−ＮＣ−００２、ＯＮＸ−０９１２、オムラリド、ＰＳ−５１９、マリゾミブ、ベラクトシンＡ、125Ｉ−ＮＩＰ−Ｌ3ＶＳ、ＮＣ−００５−ＶＳまたはＭＶ１５１である、請求項３４記載の医薬組成物。
【請求項３８】
治療的効果量の請求項１から１４いずれか１項記載のＦＡＰ活性化プロドラッグを含む、哺乳類におけるＨＩＶ感染を阻害するための医薬組成物。
【請求項３９】
腫瘍生検サンプルにより発現される線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）の量を定量化する方法であって、
前記腫瘍生検サンプルを、効果量の下記式ＩＶにより表される化合物と混合して、混合物を形成する工程：
【化１６】
2014527070.tif 000017
（式中、Ｒ12は蛍光団または発色団である）；
前記混合物を照射する工程；および
該混合物中の蛍光の量を測定する工程；
を有してなる方法。
【請求項４０】
線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）＋間質細胞により媒介される局所免疫抑制および／または腫瘍サポート活性を低減するための医薬組成物であって、治療的効果量の活性薬のプロドラッグを含み、該活性薬は、細胞毒性薬であるか、または前記ＦＡＰ＋間質細胞に対するタンパク質発現または分泌を阻害し、前記プロドラッグよりも該ＦＡＰ＋間質細胞に対して少なくとも２倍毒性であり、該プロドラッグは、（ｉ）ＦＡＰ基質配列を含み、（ｉｉ）ＦＡＰによる該ＦＡＰ基質配列の開裂により前記活性薬に転化され、ここで、該ＦＡＰ基質配列は、プロリルエンドペプチダーゼＥＣ３．４．２１．２６（ＰＲＥＰ）により開裂に関するよりも、少なくとも１０倍大きい、ＦＡＰによる開裂に関するｋcat／Ｋmを有するものであり、（ｉｉｉ）前記ＦＡＰ＋間質細胞によりインビボで選択的に前記活性薬に転化される、医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
本発明の１つの態様は、Ａ−Ｂにより表されるプロテアソーム阻害剤のＦＡＰ活性化プロドラッグ、またはその薬学的に許容される塩に関し、式中、
Ａは線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）の基質を表し；
Ｂは、ＦＡＰによる開裂の産物としてプロドラッグから遊離形態で放出されたときに、５００ｎＭ以下のＫｉを有する、プロテアソームのタンパク質分解活性を阻害するプロテアソーム阻害剤部分を表し；
ＡおよびＢは、ＦＡＰにより酵素的に開裂されて、Ｂをその遊離形態で放出する結合により共有結合しており；
プロドラッグが、プロリルエンドペプチダーゼＥＣ３．４．２１．２６（ＰＲＥＰ）に関するよりも、少なくとも１０倍大きい、ＡおよびＢを連結する結合のＦＡＰ開裂に関するｋcat／Ｋmを有する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
本発明の１つの態様は、Ａ−Ｂにより表されるプロテアソーム阻害剤のＦＡＰ活性化プロドラッグ、またはその薬剤的に許容される塩であり、式中、
Ａは線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）の基質を表し；
Ｂは、ＦＡＰによる開裂の産物としてプロドラッグから遊離形態で放出されたときに、５００ｎＭ以下のＫｉを有する、プロテアソームのタンパク質分解活性を阻害するプロテアソーム阻害剤部分を表し；
ＡおよびＢは、ＦＡＰにより酵素的に開裂されて、Ｂをその遊離形態で放出する結合により共有結合しており；
プロドラッグが、プロリルエンドペプチダーゼＥＣ３．４．２１．２６（ＰＲＥＰ）に関するよりも、少なくとも１０倍大きい、ＡおよびＢを連結する結合のＦＡＰ開裂に関するｋcat／Ｋmを有する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６４】
本発明の別の態様は、ＦＡＰ＋間質細胞により媒介される局所免疫抑制および／または腫瘍サポート活性を低減する方法において、その必要のある患者に、治療に効果的な量の活性薬のプロドラッグを投与する工程を有してなり、その活性薬は、細胞毒性薬であるか、またはそのＦＡＰ＋間質細胞に対するタンパク質発現または分泌を阻害し、前記プロドラッグよりもＦＡＰ＋間質細胞に対して少なくとも２倍毒性であり、そのプロドラッグは、（ｉ）ＦＡＰ基質配列を含み、（ｉｉ）ＦＡＰによるＦＡＰ基質配列の開裂により前記活性薬に転化され（そのＦＡＰ基質配列は、プロリルエンドペプチダーゼＥＣ３．４．２１．２６（ＰＲＥＰ）により開裂に関するよりも、少なくとも１０倍大きい、ＦＡＰによる開裂に関するｋcat／Ｋmを有する）、（ｉｉｉ）ＦＡＰ＋間質細胞によりインビボで選択的に活性薬に転化される、方法に関する。