【手続補正書】
【提出日】平成27年3月19日(2015.3.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
乳癌の予後診断のための、以下の組み合わせ：
ａ）ＣＤ４４、ＡＢＣＣ４、Ｐカドヘリン、およびβカテニンからなる生物学的マーカー；または
ｂ）ＣＤ４４、ＡＢＣＧ２、ＣＤ１３３およびＰカドヘリン、および任意にＯｃｔ−４からなる生物学的マーカー；または
ｃ）ＣＤ４４、ＡＢＣＧ２およびＣＤ１３３からなる生物学的マーカー；または
ｄ）ＣＤ４４、ＣＤ１３３およびＰカドヘリンからなる生物学的マーカー。
【請求項２】
ＣＤ４４、ＡＢＣＣ４、Ｐカドヘリン、およびβカテニンからなる生物学的マーカーの組み合わせが、エストロゲン受容体またはプロゲステロン受容体またはその両方を発現する細胞を有する対象における、乳癌の予後を診断し；
ＣＤ４４、ＡＢＣＧ２、ＣＤ１３３およびＰカドヘリン、および任意にＯｃｔ−４からなる生物学的マーカーの組み合わせが、エストロゲン受容体およびプロゲステロン受容体を発現しない細胞を有する対象における、乳癌の予後を診断し；
ＣＤ４４、ＡＢＣＧ２、およびＣＤ１３３からなる生物学的マーカーの組み合わせが、ヒト上皮細胞成長因子受容体２、エストロゲン受容体およびプロゲステロン受容体を発現しない細胞を有する対象における、乳癌の予後を診断し；および
ＣＤ４４、ＣＤ１３３およびＰカドヘリンからなる生物学的マーカーの組み合わせが、ヒト上皮細胞成長因子受容体２を発現し、エストロゲン受容体およびプロゲステロン受容体を発現しない細胞を有する対象における、乳癌の予後を診断する、請求項１に記載の組み合わせ。
【請求項３】
マーカーが、細胞膜、細胞質、核、および核膜またはこれらの任意の組み合わせを含む群から選択される位置における、対象の腫瘍細胞上に位置する、請求項１に記載の組み合わせ。
【請求項４】
乳癌を有するかまたは乳癌を有することが疑われる対象の予後診断のためのキットであって、以下の組み合わせ：
ａ）ＣＤ４４、ＡＢＣＣ４、Ｐカドヘリン、およびβカテニンからなる生物学的マーカー；または
ｂ）ＣＤ４４、ＡＢＣＧ２、ＣＤ１３３およびＰカドヘリン、および任意にＯｃｔ−４からなる生物学的マーカー；または
ｃ）ＣＤ４４、ＡＢＣＧ２、およびＣＤ１３３からなる生物学的マーカー；または
ｄ）ＣＤ４４、ＣＤ１３３およびＰカドヘリンからなる生物学的マーカー、
に対する抗体を、任意に、有機溶媒、試薬、二次抗体、免疫組織化学の実施用の酵素、および取扱説明書と共に含む、前記キット。
【請求項５】
乳癌を有するかまたは有することが疑われる対象の生物学的試料中の細胞上の生物学的マーカーを同定する方法であって、以下の行為：
ａ）生物学的試料を、収集し、固定し、切片化し、有機溶媒を用いて処理すること、次いで、所定の試料希釈液を用いて、以下の組み合わせ：
ｉ．ＣＤ４４、ＡＢＣＣ４、Ｐカドヘリン、およびβカテニンからなる生物学的マーカー；または
ｉｉ．ＣＤ４４、ＡＢＣＧ２、ＣＤ１３３およびＰカドヘリン、および任意にＯｃｔ−４からなる生物学的マーカー；または
ｉｉｉ．ＣＤ４４、ＡＢＣＧ２、およびＣＤ１３３からなる生物学的マーカー；または
ｉｖ．ＣＤ４４、ＣＤ１３３およびＰカドヘリンからなる生物学的マーカー、
に対する一次抗体を加えることにより、抗原回復すること；および
ｂ）生物学的マーカーを同定するために、酵素と結合した二次抗体および着色反応物または蛍光を得るための試薬を加えること、
を含む、前記方法。
【請求項６】
有機溶媒が、アルコールおよびキシレンまたはこれらの任意の組み合わせを含む群から選択される、請求項４に記載のキットまたは請求項５に記載の方法。
【請求項７】
ＣＤ４４、ＡＢＣＣ４、Ｐカドヘリン、およびβカテニンからなる生物学的マーカーの組み合わせが、エストロゲン受容体またはプロゲステロン受容体またはその両方を発現する細胞を有する対象における、乳癌の予後を診断し；
ＣＤ４４、ＡＢＣＧ２、ＣＤ１３３およびＰカドヘリン、および任意にＯｃｔ−４からなる生物学的マーカーの組み合わせが、エストロゲン受容体およびプロゲステロン受容体を発現しない細胞を有する対象における、乳癌の予後を診断し；
ＣＤ４４、ＡＢＣＧ２、およびＣＤ１３３からなる生物学的マーカーの組み合わせが、ヒト上皮細胞成長因子受容体２、エストロゲン受容体およびプロゲステロン受容体を発現しない細胞を有する対象における、乳癌の予後を診断し；および
ＣＤ４４、ＣＤ１３３およびＰカドヘリンからなる生物学的マーカーの組み合わせが、ヒト上皮細胞成長因子受容体２を発現し、エストロゲン受容体およびプロゲステロン受容体を発現しない細胞を有する対象における、乳癌の予後を診断する、請求項４に記載のキットまたは請求項５に記載の方法。
【請求項８】
収集、固定、切片化および処理を、所定の条件下で従来の免疫組織化学的技術により実施する、請求項５に記載の方法。
【請求項９】
乳癌を有するかまたは乳癌を有することが疑われる対象の予後診断のためのキットであって、
ａ）ＣＤ４４、ＡＢＣＣ４、Ｐカドヘリン、βカテニン、ＡＢＣＧ２およびＣＤ１３３、および任意にＯｃｔ−４からなる群から選択される少なくとも３つの生物学的マーカーの組み合わせに対する抗体；および
ｂ）任意に、有機溶媒、試薬、二次抗体、免疫組織化学の実施用の酵素、および取扱説明書を含む、前記キット。
【請求項１０】
乳癌を有するかまたは乳癌を有することが疑われる対象の予後診断の方法であって、以下の行為：
ａ）対象から生物学的試料を収集し、試料の細胞における、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、およびヒト上皮細胞成長因子受容体２受容体またはこれらの任意の組み合わせを含む群から選択される受容体の、発現または不在を同定して、発現が同定された細胞を得ること；
ｂ）ステップ（ａ）の細胞上で、ＣＤ４４、ＡＢＣＧ２、ＡＢＣＣ４、ＣＤ１３３、Ｏｃｔ−４、Ｐカドヘリンおよびβカテニンからなる群から選択される生物学的マーカーに対する抗体を用いて、免疫組織化学分析を実施すること；および
ｃ）試料の細胞における受容体および生物学的マーカーの発現または不在を同定し、該マーカーの同定を、以下にそれぞれ示す予測転帰参照表Ｎｏ．１１、１２、１３、１４、１５および１６に基づく対応する転帰と相関させて、対象の予後を予測すること：
【表１１】
2014515821.tif 000001
【表１２】
2014515821.tif 000002
【表１３】
2014515821.tif 000003
【表１４】
2014515821.tif 000004
【表１５】
2014515821.tif 000005
【表１６】
2014515821.tif 000006
表中、低発現は、０〜４０％の間の細胞染色強度パーセントを、および高発現は、４０％を超えて１００％までの細胞染色強度パーセントを表す、
を含む、前記方法。
【請求項１１】
乳癌を有するかまたは乳癌を有することが疑われる対象の予後診断の方法であって、以下の行為：
ａ）対象から生物学的試料を収集し、試料の細胞における、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、およびヒト上皮細胞成長因子受容体２受容体またはこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される受容体の、発現または不在を同定して、発現が同定された細胞を得ること；
ｂ）ステップ（ａ）の細胞上で、以下の組み合わせ：
ｉ．ＣＤ４４、ＡＢＣＣ４、Ｐカドヘリン、およびβカテニンからなる生物学的マーカー；または
ｉｉ．ＣＤ４４、ＡＢＣＧ２、ＣＤ１３３およびＰカドヘリン、および任意にＯｃｔ−４からなる生物学的マーカー；または
ｉｉｉ．ＣＤ４４、ＡＢＣＧ２、およびＣＤ１３３からなる生物学的マーカー；または
ｉｖ．ＣＤ４４、ＣＤ１３３およびＰカドヘリンからなる生物学的マーカー、
に対する抗体を用いて、免疫組織化学分析を実施すること；および
ｃ）試料の細胞における受容体および生物学的マーカーの発現または不在を同定し、該マーカーの同定を、予測転帰参照表Ｎｏ．１１、１２、１３、１４、１５および１６の組合せに基づく対応する転帰と相関させて、対象の予後を予測すること、
を含む、前記方法。
【請求項１２】
免疫組織化学分析が従来法により実施され、マーカーの同定が、試料からの細胞の染色によって該方法の完了時に得られる着色反応物または蛍光を視覚化することにより行われる、請求項１０または１１に記載の方法。
【請求項１３】
相関させることが、染色のパーセント、染色強度および染色位置またはこれらの任意の組み合わせを含む群から選択されるパラメータに基づき；および、前記染色の位置が、細胞膜、細胞質、核および核膜またはこれらの任意の組み合わせを含む群から選択される、請求項１０または１１に記載の方法。
【請求項１４】
相関させることが、染色のパーセントを染色強度に乗じて予測スコアを算出することを含むか、または、相関させることが、染色された細胞のパーセントに基づいて実施され、こうして生物学的マーカーの発現の位置に応じて予後が良いか悪いかを予測する、請求項１０または１１に記載の方法。
【請求項１５】
乳癌を処置する方法であって、以下の行為：
ａ）生物学的試料中の腫瘍細胞上の生物学的マーカーの組み合わせを同定し、乳癌を有するかまたは乳癌を有することが疑われる対象の予後を予測すること；および
ｂ）この予測に基づき、乳癌の抑制のための癌治療を設計すること；
ここで、生物学的マーカーの組み合わせは：
ｉ．ＣＤ４４、ＡＢＣＣ４、Ｐカドヘリン、およびβカテニン；または
ｉｉ．ＣＤ４４、ＡＢＣＧ２、ＣＤ１３３およびＰカドヘリン、および任意にＯｃｔ−４；または
ｉｉｉ．ＣＤ４４、ＡＢＣＧ２、およびＣＤ１３３；または
ｉｖ．ＣＤ４４、ＣＤ１３３、およびＰカドヘリン、である、
を含む、前記方法。