【手続補正書】
【提出日】平成27年1月19日(2015.1.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
直接給与生菌を、プロテアーゼ、キシラナーゼ、アミラーゼ、及びフィターゼと組み合わせて含み、前記直接給与生菌が抗病原体用直接給与生菌であり、前記直接給与生菌が、
ｉ）各試験管に、代表的なクラスターの代表的な病原体を接種する工程；
ｉｉ）可能性の高いＤＦＭの好気的又は嫌気的増殖物の上清を試験管に接種し、インキュベートする工程；および
ｉｉｉ）インキュベート後、各病原体について、対照処理及び上清処理を行った試験管の吸光度（ＯＤ）を測定する工程、からなる「ＤＦＭアッセイ」に従って決定されたＯＤが、対照と比較して低いことを特徴とする抗病原体である、飼料添加用組成物。
【請求項２】
プロテアーゼ、キシラナーゼ、アミラーゼ、及びフィターゼと組み合わせて含み対象とする動物の性能の向上に用いる直接給与生菌において、前記性能が飼料効率の向上、及び／又は体重増加の向上、及び／又は飼料要求率の減少、及び／又は飼料に含まれる栄養分若しくはエネルギーの可消化性の向上、及び／又は窒素保持の向上、及び／又は壊死性腸炎による悪影響を回避する能力の向上、及び／又は対象とする動物の免疫応答性の向上、又は飼料中の原材料の可消化性（例えば、アミノ酸可消化性などの栄養素可消化性）の向上、又は窒素保持の向上、又は壊死性腸炎に対する対象とする動物の耐性の向上、又は飼料要求率（ＦＣＲ）の向上、又は対象とする動物における体重増加性の向上、又は対象とする動物の飼料効率の向上、又は対象とする動物の免疫応答性の調節（例えば、改善させる）、又は対象とする動物の胃腸管における有益微生物の増殖性の向上、又は対象とする動物の胃腸管における病原菌集団の減少、又は糞尿への栄養素の排出の減少であり、前記直接給与生菌が抗病原体用直接給与生菌であり、前記直接給与生菌が、
ｉ）各試験管に、代表的なクラスターの代表的な病原体を接種する工程；
ｉｉ）可能性の高いＤＦＭの好気的又は嫌気的増殖物の上清を試験管に接種し、インキュベートする工程；および
ｉｉｉ）インキュベート後、各病原体について、対照処理及び上清処理を行った試験管の吸光度（ＯＤ）を測定する工程、からなる「ＤＦＭアッセイ」に従って決定されたＯＤが、対照と比較して低いことを特徴とする抗病原体である、直接給与生菌。
【請求項３】
直接給与生菌を、プロテアーゼ、キシラナーゼ、アミラーゼ、及びフィターゼと組み合わせて含み、請求項２に記載の使用のために用いる直接給与生菌であって、請求項１、５、または６のいずれか一項に記載の組成物に使用される、直接給与生菌。
【請求項４】
直接給与生菌、プロテアーゼ、キシラナーゼ、アミラーゼ、フィターゼ、及び投与についての指示書を含むキットであって、前記直接給与生菌が抗病原体用直接給与生菌であり、前記直接給与生菌が、
ｉ）各試験管に、代表的なクラスターの代表的な病原体を接種する工程；
ｉｉ）可能性の高いＤＦＭの好気的又は嫌気的増殖物の上清を試験管に接種し、インキュベートする工程；および
ｉｉｉ）インキュベート後、各病原体について、対照処理及び上清処理を行った試験管の吸光度（ＯＤ）を測定する工程、からなる「ＤＦＭアッセイ」に従って決定されたＯＤが、対照と比較して低いことを特徴とする抗病原体であり、任意で請求項１、５、または６のいずれか一項に記載の飼料添加用組成物を含む、キット。
【請求項５】
請求項１に記載の飼料添加用組成物、あるいは請求項２または３に記載のプロテアーゼ、キシラナーゼ、アミラーゼ、及びフィターゼと組み合わせて含む直接給与生菌、あるいは請求項４に記載のキットであって、
（ａ）前記直接給与生菌が生菌である、及び／又は
（ｂ）前記直接給与生菌が、次の属：乳酸菌（Lactobacillus）、乳酸球菌（Lactococcus）、連鎖球菌（Streptococcus）、桿菌（Bacillus）、ペディオコッカス（Pediococcus）、腸球菌（Enterococcus）、ロイコノストック（Leuconostoc）、カルノバクテリウム（Carnobacterium）、プロピオニバクテリウム（Propionibacterium）、ビフィズス菌（Bifidobacterium）、クロストリジウム（Clostridium）、及びメガスフェラ（Megasphaera）、並びにこれらの組み合わせのうちの１種以上の細菌を含む、及び／又は
（ｃ）前記直接給与生菌が、次の種：枯草菌（Bacillus subtilis）、バチルス・リケニフォルミス（Bacillus licheniformis）、バチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）、腸球菌（Enterococcus）、腸球菌種（Enterococcus spp）、及びペディオコッカス菌種（Pediococcus spp）、乳酸桿菌種（Lactobacillus spp）、ビフィズス菌種（Bifidobacterium spp）、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）、ペディオコッカス・アシディラクティシ（Pediococsus acidilactici）、ラクトコッカス・ラクティス（Lactococcus lactis）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）、プロピオニバクテリウム・ソエニイ（Propionibacterium thoenii）、ラクトバチルス・ファルシミナス（Lactobacillus farciminus）、ラクトバチルス・ラムノサス（Lactobacillus rhamnosus）、酪酸菌（Clostridium butyricum）、ビフィドバクテリウム・アニマリス菌種アニマリス（Bifidobacterium animalis ssp. animalis）、ラクトバチルス・ロイテリ（Lactobacillus reuteri）、バチルス・セレウス（Bacillus cereus）、ラクトバチルス・サリバリウス菌種サリバリウス（Lactobacillus salivarius ssp. salivarius）、メガスファエラ・エルスデニイ（Megasphaera elsdenii）、プロピオニバクテリア（Propionibacteria sp）、及びこれらの組み合わせのうちの１種以上の細菌を含む、及び／又は
（ｄ）前記直接給与生菌が、次の株：枯草菌（Bacillus subtilis）株３Ａ−Ｐ４（ＰＴＡ−６５０６）；１５Ａ−Ｐ４（ＰＴＡ−６５０７）；２２Ｃ−Ｐ１（ＰＴＡ−６５０８）；２０８４（ＮＲＲＬ  Ｂ−５００１３０）；ＬＳＳＡ０１（ＮＲＲＬ−Ｂ−５０１０４）；ＢＳ２７（ＮＲＲＬ  Ｂ−５０１０５）；ＢＳ  １８（ＮＲＲＬ  Ｂ−５０６３３）；及びＢＳ  ２７８（ＮＲＲＬ  Ｂ−５０６３４）のうちの１種以上を含む、請求項１に記載の飼料添加用組成物、あるいは請求項２または３に記載のプロテアーゼ、キシラナーゼ、アミラーゼ、及びフィターゼと組み合わせて含む直接給与生菌、あるいは請求項４に記載のキット。
【請求項６】
請求項１または５に記載の飼料添加用組成物、あるいは請求項２、３、または５に記載のプロテアーゼ、キシラナーゼ、アミラーゼ、及びフィターゼと組み合わせて含む直接給与生菌、あるいは請求項４または５に記載のキットであって、
（ａ）前記キシラナーゼがエンド−１，４−β−ｄ−キシラナーゼ又は１，４  β−キシロシダーゼであり、好ましくはエンド−１，４−β−ｄ−キシラナーゼであり、及び／又は
（ｂ）前記キシラナーゼが、桿菌（Bacillus）、トリコデルマ（Trichoderma）、サーモマイセス（Thermomyces）、アスペルギルス（Aspergillus）、アオカビ属（Penicillium）、及びヒュミコラ（Humicola）に由来するものである、及び／又は
（ｃ）前記プロテアーゼが、サブチリジン、バチロリジン、アルカリ性セリンプロテアーゼ、ケラチナーゼ、又はノカルジオプシス（Nocardiopsis）プロテアーゼである、及び／又は
（ｄ）前記フィターゼが６−フィターゼ又は３−フィターゼである、好ましくは６−フィターゼである、及び／又は
（ｅ）前記フィターゼが、大腸菌（E. coli）フィターゼ又はブティアウクセラ（Buttiauxella）フィターゼ又はハフニア（Hafnia）フィターゼ又はシトロバクター（Citrobacter）フィターゼ又はアスペルギルス（Aspergillus）フィターゼ又はペニシリウム（Penicillium）フィターゼ又はトリコデルマ（Trichoderma）フィターゼ又はハンゼヌラ（Hansenula）フィターゼである、及び／又は
（ｆ）前記アミラーゼが、α−アミラーゼ、Ｇ４−形成アミラーゼ、β−アミラーゼ、及びγ−アミラーゼからなる群のうち１種以上から選択される、好ましくは前記アミラーゼがα−アミラーゼである、及び／又は
（ｇ）前記アミラーゼが、バチルス・リケニフォルミス（Bacillus licheniformis）、バチルス・アミロリケファシエンス（B. amyloliquefaciens）、トリコデルマ菌種（Trichoderma spp）、又はアスペルギルス菌種（Aspergillus spp）由来のものである、請求項１または５に記載の飼料添加用組成物、あるいは請求項２、３、または５に記載のプロテアーゼ、キシラナーゼ、アミラーゼ、及びフィターゼと組み合わせて含む直接給与生菌、あるいは請求項４または５に記載のキット。
【請求項７】
請求項１、５、または６のいずれか一項に記載の飼料添加用組成物であって、前記フィターゼが、２００ＦＴＵ／飼料添加用組成物（ｇ）〜１００００ＦＴＵ／飼料添加用組成物（ｇ）の投与量で存在する、及び／又は、
前記アミラーゼが、５０ＡＵ／飼料添加用組成物（ｇ）〜２００００ＡＵ／飼料添加用組成物（ｇ）の投与量で存在する、及び／又は、
前記キシラナーゼが、５００ＸＵ／ｇ飼料添加用組成物（ｇ）〜４００００ＸＵ／飼料添加用組成物（ｇ）の投与量で存在する、及び／又は、
前記プロテアーゼが、１０００ＰＵ／飼料添加用組成物（ｇ）及び６００００ＰＵ／飼料添加用組成物（ｇ）の投与量で存在する、及び／又は、
前記ＤＦＭが、３．７５×１０７ＣＦＵ／飼料添加用組成物（ｇ）及び１×１０１１ＣＦＵ／飼料添加用組成物（ｇ）の投与量で存在する、飼料添加用組成物。
【請求項８】
直接給与生菌を、プロテアーゼ、キシラナーゼ、アミラーゼ、及びフィターゼと混合する工程、並びに（所望により）パッケージングする工程、を含む、飼料添加用組成物の製造法において、前記直接給与生菌が抗病原体用直接給与生菌であり、前記直接給与生菌が、
ｉ）各試験管に、代表的なクラスターの代表的な病原体を接種する工程；
ｉｉ）可能性の高いＤＦＭの好気的又は嫌気的増殖物の上清を試験管に接種し、インキュベートする工程；および
ｉｉｉ）インキュベート後、各病原体について、対照処理及び上清処理を行った試験管の吸光度（ＯＤ）を測定する工程、からなる「ＤＦＭアッセイ」に従って決定されたＯＤが、対照と比較して低いことを特徴とする抗病原体である、製造法。
【請求項９】
請求項１、５、または６のいずれか一項に記載の飼料添加用組成物を含む飼料。
【請求項１０】
前記フィターゼが、４００ＦＴＵ／飼料（ｋｇ）〜１０００ＦＴＵ／飼料（ｋｇ）の投与量で存在する、及び／又は、
前記アミラーゼが、１００ＡＵ／飼料（ｋｇ）〜２０００ＡＵ／飼料（ｋｇ）の投与量で存在する、及び／又は、
前記キシラナーゼが、１０００ＸＵ／飼料（ｋｇ）〜４０００ＸＵ／飼料（ｋｇ）の投与量で存在する、及び／又は、
前記プロテアーゼが、２０００ＰＵ／飼料（ｋｇ）〜６０００ＰＵ／飼料（ｋｇ）の投与量で存在する、及び／又は、
前記ＤＦＭが、７．５×１０４ＣＦＵ／飼料（ｋｇ）及び１×１０７ＣＦＵ／飼料（ｋｇ）の投与量で存在する、請求項９に記載の飼料。
【請求項１１】
飼料成分を請求項１、５、または６のいずれか一項に記載の飼料添加用組成物と混合する工程を含む、動物用飼料の製造法。
【請求項１２】
直接給与生菌を、プロテアーゼ、キシラナーゼ、アミラーゼ、及びフィターゼ、並びに少なくとも１種のミネラル及び／又は少なくとも１種のビタミンと組み合わせて含む飼料添加用組成物において、前記直接給与生菌が抗病原体用直接給与生菌であり、前記直接給与生菌が、
ｉ）各試験管に、代表的なクラスターの代表的な病原体を接種する工程；
ｉｉ）可能性の高いＤＦＭの好気的又は嫌気的増殖物の上清を試験管に接種し、インキュベートする工程；および
ｉｉｉ）インキュベート後、各病原体について、対照処理及び上清処理を行った試験管の吸光度（ＯＤ）を測定する工程、からなる「ＤＦＭアッセイ」に従って決定されたＯＤが、対照と比較して低いことを特徴とする抗病原体を含むプレミックス。
【請求項１３】
請求項１、５、または６のいずれか一項に記載の飼料添加用組成物を、少なくとも１種のミネラル及び／又は少なくとも１種のビタミンと組み合わせて含む、プレミックス。
【請求項１４】
対象とする動物においてコクシジウム症及び／又は壊死性腸炎を予防及び／又は処置するための、及び／又は壊死性腸炎及び／又はコクシジウム症の予防及び／又は処置法に使用する、請求項１、５、または６のいずれか一項に記載の飼料添加用組成物。