【手続補正書】
【提出日】平成26年12月4日(2014.12.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
タンパク質分析物を電気化学的に検出するための検出システムであって、該検出システムは、
表面にリンカーを含む電極であって、ここで該リンカーは、タンパク質分析物を結合し得る抗体もしくはそのフラグメントに結合させられている、電極；および
レドックスレポーター
を含む、検出システム。
【請求項２】
前記リンカーは、前記抗体もしくはそのフラグメントに直接的にもしくは間接的に連結し得る官能基を含む、請求項１に記載のシステム。
【請求項３】
前記リンカーは、第２のリンカーを介して前記抗体もしくはそのフラグメントに結合させられている、請求項１または請求項２に記載のシステム。
【請求項４】
前記リンカーは、抗体もしくはそのフラグメントの複数のコピーと結合させられている、請求項１〜３のいずれかに記載のシステム。
【請求項５】
前記レドックスレポーターは、電位が印加される場合に、前記電極で電気化学的シグナルを生成し得る、請求項１〜４のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項６】
前記レドックスレポーターは、界面電子移動する能力がある、請求項１〜５のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項７】
前記電極は、ナノ構造の微小電極である、請求項１〜６のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項８】
前記電極は、約１５０ミクロン未満である、請求項１〜７のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項９】
タンパク質分析物の電気化学的検出のための方法であって、該方法は、
リンカーを表面に含む第１の電極と、サンプルおよびレドックスレポーターとを接触させる工程であって、ここで該リンカーは、第１のタンパク質分析物を結合し得る第１の抗体もしくはそのフラグメントに結合させられている、工程；
電位が印加される場合に、該第１の抗体標識された電極および該レドックスレポーターによって生成される第１の電気化学的シグナルを測定する工程；ならびに
該第１の電気化学的シグナルと、タンパク質分析物を含まないコントロールサンプルのシグナルとを比較する工程；
を包含し、ここでタンパク質分析物を含まないコントロールサンプルの第１のシグナルと比較して検出した該第１の電気化学的シグナルの変化は、該サンプル中の該第１のタンパク質分析物の存在を示す、方法。
【請求項１０】
前記リンカーは、前記抗体もしくはそのフラグメントに直接的にもしくは間接的に連結し得る官能基を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記電極は、抗体もしくはそのフラグメントの複数のコピーで標識されている、請求項９または請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記レドックスレポーターは、界面電子移動する能力がある、請求項９〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記電極は、ナノ構造の微小電極である、請求項９〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記電極は、約１００ミクロン未満である、請求項９〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記測定する工程は、ボルタンメトリーを介する、請求項９〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
第２のリンカーを表面に含む第２の電極と、前記サンプルおよびレドックスレポーターとを接触させる工程であって、ここで該第２のリンカーは、第２のタンパク質分析物を結合し得る第２の抗体もしくはそのフラグメントに結合させられている、工程；
電位が印加される場合に、該第２の抗体標識された電極および該レドックスレポーターによって生成される第２の電気化学的シグナルを測定する工程；ならびに
該第２の電気化学的シグナルと、タンパク質分析物を含まないコントロールサンプルにおいて該第２の抗体標識された電極によって生成される第２のシグナルとを比較する工程；
をさらに包含し、ここでタンパク質分析物を含まない該コントロールサンプルのシグナルと比較して検出された該第２の電気化学的シグナルの変化は、該サンプル中の該第２のタンパク質分析物の存在を示す、請求項９に記載の方法。
【請求項１７】
前記第１および前記第２の電極はともに、微小作製チップ上にある、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記第２の抗体標識された電極は、前記第１の抗体標識された電極に対する参照コントロールである、請求項１６または１７に記載の方法。
【請求項１９】
がんを有する被験体における進行もしくは応答をモニターするための方法であって、該方法は、
該被験体からの生物学的サンプルを提供する工程；
リンカーを表面に含む電極と、該サンプルおよびレドックスレポーターとを接触させる工程であって、ここで該リンカーは、タンパク質分析物を結合し得る抗体もしくはそのフラグメントに結合させられており、ここで該抗体もしくはそのフラグメントは、タンパク質分析物に結合する、工程；
電位が印加される場合に、該抗体標識された電極および該レドックスレポーターによって生成される電気化学的シグナルを測定する工程；ならびに
該電気化学的シグナルと、タンパク質分析物を含まないコントロールサンプルのシグナルとを比較する工程；
を包含し、ここでタンパク質分析物を含まないコントロールサンプルのシグナルと比較して検出される該シグナルの変化は、該サンプル中の該タンパク質分析物の存在を示す、方法。
【請求項２０】
タンパク質分析物を電気化学的に検出するためのキットであって、該キットは、
リンカーを表面に含む電極であって、ここで該リンカーは、タンパク質分析物を結合し得る抗体もしくはそのフラグメントに結合させられている、電極；および
電位が印加される場合に、該電極で電気化学的シグナルを生成し得るレドックスレポーター
を含む、キット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
タンパク質分析物の電気化学的検出のためのキットもまた、本明細書で提供される。一局面において、上記キットは、リンカーを表面に含む電極であって、ここで上記リンカーは、タンパク質分析物を結合し得る抗体もしくはそのフラグメントに結合させられている、電極；および電位が印加される場合に、上記電極で電気化学的シグナルを生成し得るレドックスレポーターを含む。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
タンパク質分析物を電気化学的に検出するための検出システムであって、該検出システムは、
表面にリンカーを含む電極であって、ここで該リンカーは、タンパク質分析物を結合し得る抗体もしくはそのフラグメントに結合させられている、電極；および
レドックスレポーター
を含む、検出システム。
（項目２）
前記リンカーは、前記抗体もしくはそのフラグメントに直接的にもしくは間接的に連結し得る官能基を含む、項目１に記載のシステム。
（項目３）
前記リンカーは、官能性アミン基を含む、項目１に記載のシステム。
（項目４）
前記リンカーは、官能性カルボン酸基を含む、項目１に記載のシステム。
（項目５）
前記リンカーは、シスタミン、システアミン、メルカプトプロピオン酸もしくは４−アミノチオフェノールである、項目１に記載のシステム。
（項目６）
前記リンカーは、第２のリンカーを介して前記抗体もしくはそのフラグメントに結合させられている、項目１に記載のシステム。
（項目７）
前記第２のリンカーは、グルタルアルデヒドもしくはホルムアルデヒドである、項目６に記載のシステム。
（項目８）
前記リンカーは、抗体もしくはそのフラグメントの複数のコピーと結合させられている、項目１に記載のシステム。
（項目９）
前記抗体もしくはそのフラグメントは、ポリクローナル抗血清、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、Ｆｖフラグメント、一本鎖抗体、ＣＤＲペプチドおよびダイアボディーからなる群より選択される、項目１〜８のいずれか１項に記載のシステム。
（項目１０）
前記レドックスレポーターは、電位が印加される場合に、前記電極で電気化学的シグナルを生成し得る、項目１〜９のいずれか１項に記載のシステム。
（項目１１）
前記レドックスレポーターは、ファラデー電流を生成する、項目１〜９のいずれか１項に記載のシステム。
（項目１２）
前記レドックスレポーターは、界面電子移動する能力がある、項目１〜９のいずれか１項に記載のシステム。
（項目１３）
前記レドックスレポーターは、フェリシアニド／フェロシアニドもしくはフェロセンである、項目１〜９のいずれか１項に記載のシステム。
（項目１４）
前記レドックスレポーターは、ヘキサクロロイリデート（ＩＶ）／ヘキサクロロイリデート（ＩＩＩ）である、項目１〜９のいずれか１項に記載のシステム。
（項目１５）
前記電極は、貴金属である、項目１〜１４のいずれか１項に記載のシステム。
（項目１６）
前記電極は、炭素である、項目１〜１４のいずれか１項に記載のシステム。
（項目１７）
前記電極は、酸化インジウムスズである、項目１〜１４のいずれか１項に記載のシステム。
（項目１８）
前記電極は、金、パラジウムもしくは白金である、項目１〜１４のいずれか１項に記載のシステム。
（項目１９）
前記電極は、ナノ構造の微小電極である、項目１〜１４のいずれか１項に記載のシステム。
（項目２０）
前記電極は、約１５０ミクロン未満である、項目１〜１４のいずれか１項に記載のシステム。
（項目２１）
前記電極は、約５〜約５０ミクロンである、項目１〜１４のいずれか１項に記載のシステム。
（項目２２）
前記電極は、約１０ミクロン未満である、項目１〜１４のいずれか１項に記載のシステム。
（項目２３）
前記電極は、微小作製チップ上にある、項目１〜１４のいずれか１項に記載のシステム。
（項目２４）
前記タンパク質分析物は、疾患、障害もしくは状態のバイオマーカーである、項目１〜２３のいずれか１項に記載のシステム。
（項目２５）
前記バイオマーカーは、がんバイオマーカーである、項目１〜２４のいずれか１項に記載のシステム。
（項目２６）
前記バイオマーカーは、ＢＲＣＡ１、ＢＲＣＡ１、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、α−フェトプロテイン、β−２ミクログロブリン、膀胱腫瘍抗原、がん抗原１５−３、がん抗原１９−９、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、がん抗原７２−４、がん抗原１２５（ＣＡ−１２５）、カルシトニン、がん胎児性抗原、ＥＧＦＲ、エストロゲンレセプター、プロゲステロンレセプター、モノクローナル免疫グロブリン、神経特異的エノラーゼ、ＮＭＰ２２、サイログロブリン、プロゲステロンレセプター、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）、前立腺特異的膜抗原、前立腺酸性ホスファターゼ、Ｓ−１００、およびＴＡ−９０、またはこれらの一部、バリエーションもしくはフラグメントからなる群より選択される、項目１〜２４のいずれか１項に記載のシステム。
（項目２７）
前記バイオマーカーは、ＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓもしくはＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ細菌感染のバイオマーカーである、項目１〜２４のいずれか１項に記載のシステム。
（項目２８）
タンパク質分析物の電気化学的検出のための方法であって、該方法は、
リンカーを表面に含む電極と、サンプルおよびレドックスレポーターとを接触させる工程であって、ここで該リンカーは、タンパク質分析物を結合し得る抗体もしくはそのフラグメントに結合させられている、工程；
電位が印加される場合に、該抗体標識された電極および該レドックスレポーターによって生成される電気化学的シグナルを測定する工程；ならびに
該電気化学的シグナルと、タンパク質分析物を含まないコントロールサンプルのシグナルとを比較する工程；
を包含し、ここでタンパク質分析物を含まないコントロールサンプルのシグナルと比較して検出した該シグナルの変化は、該サンプル中の該タンパク質分析物の存在を示す、方法。
（項目２９）
前記リンカーは、前記抗体もしくはそのフラグメントに直接的にもしくは間接的に連結し得る官能基を含む、項目２８に記載の方法。
（項目３０）
前記リンカーは、官能性アミン基を含む、項目２８に記載の方法。
（項目３１）
前記リンカーは、官能性カルボン酸基を含む、項目２８に記載の方法。
（項目３２）
前記リンカーは、シスタミン、システアミン、メルカプトプロピオン酸もしくは４−アミノチオフェノールである、項目２８に記載の方法。
（項目３３）
前記リンカーは、第２のリンカーを介して前記抗体もしくはそのフラグメントに結合させられている、項目２８に記載の方法。
（項目３４）
前記第２のリンカーは、グルタルアルデヒドもしくはホルムアルデヒドである、項目３３に記載の方法。
（項目３５）
前記電極は、抗体もしくはそのフラグメントの複数のコピーで標識されている、項目２８〜３４のいずれか１項に記載の方法。
（項目３６）
前記抗体もしくはそのフラグメントは、ポリクローナル抗血清、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、Ｆｖフラグメント、一本鎖抗体、ＣＤＲペプチドおよびダイアボディーからなる群より選択される、項目２８〜３５のいずれか１項に記載の方法。
（項目３７）
前記レドックスレポーターは、ファラデー電流を生成する、項目２８〜３６のいずれか１項に記載の方法。
（項目３８）
前記レドックスレポーターは、界面電子移動する能力がある、項目２８〜３６のいずれか１項に記載の方法。
（項目３９）
前記レドックスレポーターは、フェリシアニド／フェロシアニドもしくはフェロセンである、項目２８〜３６のいずれか１項に記載の方法。
（項目４０）
前記レドックスレポーターは、ヘキサクロロイリデート（ＩＶ）／ヘキサクロロイリデート（ＩＩＩ）である、項目２８〜３６のいずれか１項に記載の方法。
（項目４１）
前記電極は、貴金属である、項目２８〜４０のいずれか１項に記載の方法。
（項目４２）
前記電極は、炭素である、項目２８〜４０のいずれか１項に記載の方法。
（項目４３）
前記電極は、酸化インジウムスズである、項目２８〜４０のいずれか１項に記載の方法。
（項目４４）
前記電極は、金、パラジウムもしくは白金である、項目２８〜４０のいずれか１項に記載の方法。
（項目４５）
前記電極は、ナノ構造の微小電極である、項目２８〜４０のいずれか１項に記載の方法。
（項目４６）
前記電極は、約１００ミクロン未満である、項目２８〜４０のいずれか１項に記載の方法。
（項目４７）
前記電極は、約５〜約５０ミクロンである、項目２８〜４０のいずれか１項に記載の方法。
（項目４８）
前記電極は、約１０ミクロン未満である、項目２８〜４０のいずれか１項に記載の方法。
（項目４９）
前記電極は、微小作製チップ上にある、項目２８〜４８のいずれか１項に記載の方法。
（項目５０）
前記タンパク質分析物は、疾患、障害もしくは状態のバイオマーカーである、項目２８〜４９のいずれか１項に記載の方法。
（項目５１）
前記バイオマーカーは、がんバイオマーカーである、項目２８〜５０のいずれか１項に記載の方法。
（項目５２）
前記バイオマーカーは、ＢＲＣＡ１、ＢＲＣＡ１、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、α−フェトプロテイン、β−２ミクログロブリン、膀胱腫瘍抗原、がん抗原１５−３、がん抗原１９−９、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、がん抗原７２−４、がん抗原１２５（ＣＡ−１２５）、カルシトニン、がん胎児性抗原、ＥＧＦＲ、エストロゲンレセプター、プロゲステロンレセプター、モノクローナル免疫グロブリン、神経特異的エノラーゼ、ＮＭＰ２２、サイログロブリン、プロゲステロンレセプター、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）、前立腺特異的膜抗原、前立腺酸性ホスファターゼ、Ｓ−１００、およびＴＡ−９０、またはこれらの一部、バリエーションもしくはフラグメントからなる群より選択される、項目２８〜５０のいずれか１項に記載の方法。
（項目５３）
前記バイオマーカーは、ＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓもしくはＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ細菌感染のバイオマーカーである、項目２８〜５０のいずれか１項に記載の方法。
（項目５４）
前記測定する工程は、ボルタンメトリーを介する、項目２８〜５３のいずれか１項に記載の方法。
（項目５５）
ボルタンメトリーは、サイクリックボルタンメトリーもしくは微分パルスボルタンメトリーである、項目５４に記載の方法。
（項目５６）
複数のタンパク質分析物の多重化電気化学的検出のための方法であって、該方法は、
リンカーを表面に含む第１の電極と、サンプルおよびレドックスレポーターとを接触させる工程であって、ここで該リンカーは、タンパク質分析物を結合し得る第１の抗体もしくはそのフラグメントに結合させられている、工程；
電位が印加される場合に、該第１の抗体標識された電極および該レドックスレポーターによって生成される第１の電気化学的シグナルを測定する工程；
リンカーを表面に含む第２の電極と、サンプルおよびレドックスレポーターとを接触させる工程であって、ここで該リンカーは、タンパク質分析物を結合し得る第２の抗体もしくはそのフラグメントに結合させられている、工程；
電位が印加される場合に、該第２の抗体標識された電極および該レドックスレポーターによって生成される第２の電気化学的シグナルを測定する工程；ならびに
該第１および該第２の電気化学的シグナルと、タンパク質分析物を含まないコントロールサンプルにおいて該第１のおよび該第２の抗体標識された電極によって生成されるそれぞれのシグナルとを比較する工程；
を包含し、ここでタンパク質分析物を含まないコントロールサンプルのそれぞれのシグナルと比較して検出された該第１および該第２の電気化学的シグナルの変化は、該サンプル中の該タンパク質分析物の存在を示す、方法。
（項目５７）
前記第１および前記第２の電極はともに、微小作製チップ上にある、項目５６に記載の方法。
（項目５８）
前記第１および前記第２の電極は、異なる微小作製チップ上にある、項目５６に記載の方法。
（項目５９）
前記第２の抗体標識された電極は、前記第１の抗体標識された電極に対する参照コントロールである、項目５６〜５８のいずれか１項に記載の方法。
（項目６０）
前記第２の抗体標識された電極は、豊富な血清タンパク質を検出する、項目５６〜５９のいずれか１項に記載の方法。
（項目６１）
がんを有する被験体における進行もしくは応答をモニターするための方法であって、該方法は、
該被験体から生物学的サンプルを得る工程；
リンカーを表面に含む電極と、該サンプルおよびレドックスレポーターとを接触させる工程であって、ここで該リンカーは、タンパク質分析物を結合し得る抗体もしくはそのフラグメントに結合させられており、ここで該抗体もしくはそのフラグメントは、タンパク質分析物に結合する、工程；
電位が印加される場合に、該抗体標識された電極および該レドックスレポーターによって生成される電気化学的シグナルを測定する工程；ならびに
該電気化学的シグナルと、タンパク質分析物を含まないコントロールサンプルのシグナルとを比較する工程；
を包含し、ここでタンパク質分析物を含まないコントロールサンプルのシグナルと比較して検出される該シグナルの変化は、該サンプル中の該タンパク質分析物の存在を示す、方法。
（項目６２）
前記タンパク質分析物は、がんバイオマーカーである、項目６１に記載の方法。
（項目６３）
前記タンパク質分析物は、ＢＲＣＡ１、ＢＲＣＡ１、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、α−フェトプロテイン、β−２ミクログロブリン、膀胱腫瘍抗原、がん抗原１５−３、がん抗原１９−９、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、がん抗原７２−４、がん抗原１２５（ＣＡ−１２５）、カルシトニン、がん胎児性抗原、ＥＧＦＲ、エストロゲンレセプター、プロゲステロンレセプター、モノクローナル免疫グロブリン、神経特異的エノラーゼ、ＮＭＰ２２、サイログロブリン、プロゲステロンレセプター、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）、前立腺特異的膜抗原、前立腺酸性ホスファターゼ、Ｓ−１００、およびＴＡ−９０、またはその一部、バリエーションもしくはフラグメントからなる群より選択されるバイオマーカーである、項目６１に記載の方法。
（項目６４）
タンパク質分析物を電気化学的に検出するためのキットであって、該キットは、
リンカーを表面に含む電極であって、ここで該リンカーは、タンパク質分析物を結合し得る抗体もしくはそのフラグメントに結合させられている、電極；および
電位が印加される場合に、該電極で電気化学的シグナルを生成し得るレドックスレポーター
を含む、キット。