【手続補正書】
【提出日】平成27年4月20日(2015.4.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象におけるｐｒｅ−ＭＣＩまたはＭＣＩの検出を補助する方法であって、該方法は、
ａ．前記対象から採取した体液サンプル中のシナプスまたは神経突起のｍｉＲＮＡのレベルを測定すること、
ｂ．前記の対象から採取した同一体液サンプル中のノーマライザーｍｉＲＮＡのレベルを測定すること、
ｃ．ステップ（ａ）および（ｂ）で測定したｍｉＲＮＡのレベルの比を計算すること、
ｄ．ステップ（ｃ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比を、対応する同年齢コントロール比と比較すること、および
ｅ．（ｉ）ステップ（ｃ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比が、前記の対応する同年齢コントロール比より高い場合、前記対象がｐｒｅ−ＭＣＩもしくはＭＣＩに罹患していると特定すること、または（ｉｉ）ステップ（ｃ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比が、前記の対応する同年齢コントロール比より高くない場合、前記対象がｐｒｅ−ＭＣＩもしくはＭＣＩに罹患していないと特定すること
を含む、前記方法。
【請求項２】
対象においてｐｒｅ−ＭＣＩからＭＣＩへ進行する可能性を予測する方法であって、該方法は、
ａ．前記対象から採取した２つまたは３つ以上の体液サンプル中のシナプスまたは神経突起のｍｉＲＮＡのレベルを測定すること、ここで該サンプルは時間的な間隔を介して得られたものである、
ｂ．前記の対象から採取した各同一体液サンプル中のノーマライザーｍｉＲＮＡのレベルを測定すること、
ｃ．前記の対象から採取した各体液サンプルについて、ステップ（ａ）および（ｂ）で測定したｍｉＲＮＡのレベルの比を計算すること、
ｄ．前記の対象から採取した各体液サンプルについて、ステップ（ｃ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比を、対応する同年齢コントロール比と比較すること、および
ｅ．前記対象から採取した２つまたは３つ以上の連続して得た体液サンプルにおいて、ステップ（ｃ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比が、前記の対応する同年齢コントロール比より高い場合、前記対象における疾患がｐｒｅ−ＭＣＩからＭＣＩ進行するであろうと予測すること
を含む、前記方法。
【請求項３】
対象における脳老化の検出を補助する方法であって、該方法は、
ａ．前記対象から採取した体液サンプル中のシナプスまたは神経突起のｍｉＲＮＡのレベルを測定すること、
ｂ．前記対象から採取した同一体液サンプル中のノーマライザーｍｉＲＮＡのレベルを測定すること、
ｃ．ステップ（ａ）および（ｂ）で測定したｍｉＲＮＡのレベルの比を計算すること、
ｄ．ステップ（ｃ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比を、（ｉ）過去に同一対象から得た対応するコントロール比か、または（ｉｉ）所定の若年スタンダード比と比較すること、および
ｅ．ステップ（ｃ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比が、前記の対応するコントロール比（ｉ）または前記所定の若年スタンダード比（ｉｉ）と比較してより高い場合、前記対象が脳老化を受けやすいと特定すること
を含む、前記方法。
【請求項４】
対象におけるｐｒｅ−ＭＣＩまたはＭＣＩの処置の有効性を決定する方法であって、該方法は、
ａ．前記処置を開始する前に得た、前記対象から採取した１つまたは２つ以上の体液サンプル中の少なくとも１つのシナプスまたは神経突起のｍｉＲＮＡのレベルを測定すること、
ｂ．前記処置を開始する前に得た、前記対象からの同一体液サンプル中のノーマライザーｍｉＲＮＡのレベルを測定すること、
ｃ．前記処置を開始する前に得た、前記対象から採取した各体液サンプルについて、ステップ（ａ）および（ｂ）で測定したｍｉＲＮＡのレベルの比を計算すること、
ｄ．前記の処置中または処置後に得た、前記対象から採取した１つまたは２つ以上の体液サンプル中の同一のシナプスまたは神経突起のｍｉＲＮＡのレベルを測定すること、
ｅ．前記の処置中または処置後に得た、前記対象からの同一体液サンプル中のノーマライザーｍｉＲＮＡのレベルを測定すること、
ｆ．前記の処置中または処置後に得た、前記対象から採取した各体液サンプルについて、ステップ（ｄ）および（ｅ）で測定したｍｉＲＮＡのレベルの比を計算すること、
ｇ．ステップ（ｃ）および（ｆ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比を比較すること、および
ｈ．（ｉ）ステップ（ｆ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比がステップ（ｃ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比より低い場合、前記処置が有効であると決定すること、（ｉｉ）ステップ（ｆ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比がステップ（ｃ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比より低くない場合、前記処置が有効でないと決定すること
を含む、前記方法。
【請求項５】
ｐｒｅ−ＭＣＩもしくはＭＣＩの進行を遅らせるか、または処置することに有用な化合物を特定する方法であって、該方法は、
ａ．ｐｒｅ−ＭＣＩまたはＭＣＩを有する対象から採取した１つまたは２つ以上の体液サンプル中の少なくとも１つのシナプスまたは神経突起のｍｉＲＮＡのレベルを測定すること、ここで該体液サンプルはテスト化合物投与前に得られたものである、
ｂ．テスト化合物投与前に得た、前記の対象からの同一体液サンプル中のノーマライザーｍｉＲＮＡのレベルを測定すること、
ｃ．テスト化合物投与前に得た、前記の対象から採取した各体液サンプルについて、ステップ（ａ）および（ｂ）で測定したｍｉＲＮＡのレベルの比を計算すること、
ｄ．テスト化合物の投与の後に得た、前記対象から採取した１つまたは２つ以上の体液サンプル中の同一のシナプスまたは神経突起のｍｉＲＮＡのレベルを測定すること、
ｅ．前記テスト化合物の投与の後に得た、前記の対象からの同一体液サンプル中のノーマライザーｍｉＲＮＡのレベルを測定すること、
ｆ．前記テスト化合物の投与の後に得た、前記の対象から採取した各体液サンプルについて、ステップ（ｄ）および（ｅ）で測定したｍｉＲＮＡのレベルの比を計算すること、
ｇ．ステップ（ｃ）および（ｆ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比を比較すること、および
ｈ．（ｉ）ステップ（ｆ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比が、ステップ（ｃ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比より低い場合、前記テスト化合物がｐｒｅ−ＭＣＩもしくはＭＣＩの進行を遅らせるか、または処置することに有用であると特定すること、（ｉｉ）ステップ（ｆ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比が、ステップ（ｃ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比より低くない場合、テスト化合物がｐｒｅ−ＭＣＩもしくはＭＣＩの進行を遅らせるか、または処置することに有用でないと特定する
ことを含む、前記方法。
【請求項６】
シナプスまたは神経突起のｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ−１２８、ｍｉＲ−１３２およびｍｉＲ−８７４からなる「ｍｉＲ−１３２ファミリー」から選択され、ノーマライザーｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ−４９１−５ｐであるか、あるいは
シナプスまたは神経突起のｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ−１３４、ｍｉＲ−３２３−３ｐおよびｍｉＲ−３８２からなる「ｍｉＲ−１３４ファミリー」から選択され、ノーマライザーｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ−３７０である、
請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
ＭＣＩと診断された対象において、ＭＣＩからＡＤの認知症段階への進行を予測またはモニタリングする方法であって、該方法は、
ａ．前記対象から採取した体液サンプル中のｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−７、ｍｉＲ−１２５ｂおよびｍｉＲ−１６の少なくとも１つのレベルを測定すること、
ｂ．前記同一体液サンプル中の少なくとも１つのシナプスまたは神経突起のｍｉＲＮＡのレベルを測定すること、
ｃ．ステップ（ａ）および（ｂ）で測定したｍｉＲＮＡのレベルの比を計算すること、
ｄ．ステップ（ｃ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比を、対応する同年齢コントロール比と比較すること、および
ｅ．ステップ（ｃ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの少なくとも１つの比が、前記の対応する同年齢コントロール比より高い場合、前記対象における疾患がＭＣＩからＡＤの認知症段階へ進行するであろうと決定すること
を含む、前記方法。
【請求項８】
ａ．前記対象から採取した体液サンプル中のｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−７、ｍｉＲ−１２５ｂおよびｍｉＲ−１６の少なくとも１つのレベルを測定すること、
ｂ．前記同一体液サンプル中のノーマライザーｍｉＲＮＡのレベルを測定すること、
ｃ．ステップ（ａ）および（ｂ）で測定したｍｉＲＮＡのレベルの比を計算すること、
ｄ．ステップ（ｃ）で計算したｍｉＲＮＡのレベルの比を、対応する同年齢コントロール比と比較すること、および
ｅ．ステップ（ｃ）で計算した少なくとも１つの比が、前記の対応する同年齢コントロール比より高い場合、前記対象における疾患がＭＣＩからＡＤの認知症段階へ進行するであろうと決定すること
を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ノーマライザーｍｉＲＮＡが、脳に濃縮されたノーマライザーｍｉＲＮＡであるか、または、ｍｉＲ−４９１−５ｐ、ｍｉＲ−９、ｍｉＲ−１８１ａ、ｍｉＲ−１２７、ｍｉＲ−３７０、ｍｉＲ−１０ｂおよびｍｉＲ−１４１からなる群から選択される、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
（１）  （ｉ）ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−７、ｍｉＲ−１２５ｂおよびｍｉＲ−１６からなる群から選択される少なくとも１つのｍｉＲＮＡに特異的なプライマーまたはプローブを含み、任意に（ｉｉ）ｍｉＲ−４９１−５ｐ、ｍｉＲ−９、ｍｉＲ−１２７、ｍｉＲ−１８１ａ、ｍｉＲ−１０ｂ、ｍｉＲ−１４１およびｍｉＲ−３７０からなる群から選択される少なくとも１つのｍｉＲＮＡに特異的なプライマーまたはプローブを更に含むか、あるいは
（２）  （ｉ）ｍｉＲ−７、ｍｉＲ−２５、ｍｉＲ−２６ａ、ｍｉＲ−２６ｂ、ｍｉＲ−９８、ｍｉＲ−１２４、ｍｉＲ−１２５ａ、ｍｉＲ−１２５ｂ、ｍｉＲ−１２８、ｍｉＲ−１３２、ｍｉＲ−１３４、ｍｉＲ−１３７、ｍｉＲ−１３８、ｍｉＲ−１４６、ｍｉＲ−１５４、ｍｉＲ−１８２、ｍｉＲ−１８３、ｍｉＲ−２００ｂ、ｍｉＲ−２００ｃ、ｍｉＲ−２１８、ｍｉＲ−２９２−５ｐ、ｍｉＲ−２９７、ｍｉＲ−３２２、ｍｉＲ−３２３−３ｐ、ｍｉＲ−３２９、ｍｉＲ−３２５、ｍｉＲ−３３７、ｍｉＲ−３３９、ｍｉＲ−３４５、ｍｉＲ−３５０、ｍｉＲ−３５１、ｍｉＲ−３６９−３、ｍｉＲ−３６９−５ｐ、ｍｉＲ−３８１、ｍｉＲ−３８２、ｍｉＲ−４０９−３ｐ、ｍｉＲ−４２５、ｍｉＲ−４２９、ｍｉＲ−４３３−５ｐ、ｍｉＲ−４４６、ｍｉＲ−４６７、ｍｉＲ−４８３−３ｐ、ｍｉＲ−４８５−５ｐ、ｍｉＲ−４８７ｂ、ｍｉＲ−４９４、ｍｉＲ−４９５、ｍｉＲ−４９６、ｍｉＲ−５４１、ｍｉＲ−５４３、ｍｉＲ−６５６、ｍｉＲ−６６８、ｍｉＲ−８７４、ｍｉＲ−８８９、ｍｉＲ−９３５およびｍｉＲ−９３９からなる群から選択される少なくとも１つのｍｉＲＮＡに特異的なプライマーまたはプローブを含み、任意に（ｉｉ）ｍｉＲ−１０ｂ、ｍｉＲ−１４１、ｍｉＲ−９、ｍｉＲ−１２７、ｍｉＲ−１８１ａ、ｍｉＲ−３７０およびｍｉＲ−４９１−５ｐからなる群から選択される少なくとも１つのｍｉＲＮＡに特異的なプライマーまたはプローブを更に含むか、あるいは
（３）  （ｉ）ｍｉＲ−１２８、ｍｉＲ−１３２、ｍｉＲ−８７４、ｍｉＲ−１３４、ｍｉＲ−３２３−３ｐ、ｍｉＲ−３８２、ｍｉＲ−７およびｍｉＲ−１２５ｂからなる群から選択される少なくとも１つのｍｉＲＮＡに特異的なプライマーまたはプローブを含み、任意に（ｉｉ）ｍｉＲ−１０ｂ、ｍｉＲ−１４１、ｍｉＲ−９、ｍｉＲ−１２７、ｍｉＲ−１８１ａ、ｍｉＲ−３７０およびｍｉＲ−４９１−５ｐからなる群から選択される少なくとも１つのｍｉＲＮＡに特異的なプライマーまたはプローブを更に含むか、あるいは
（４）  （ｉ）ｍｉＲ−１２８、ｍｉＲ−１３２およびｍｉＲ−８７４からなる群から選択される少なくとも１つのｍｉＲＮＡに特異的なプライマーまたはプローブを含み、任意に（ｉｉ）ｍｉＲ−４９１−５ｐ、ｍｉＲ−９、ｍｉＲ−１８１ａおよびｍｉＲ−１４１からなる群から選択される少なくとも１つのｍｉＲＮＡに特異的なプライマーまたはプローブを更に含むか、あるいは
（５）  （ｉ）ｍｉＲ−１３４、ｍｉＲ−３２３−３ｐおよびｍｉＲ−３８２からなる群から選択される少なくとも１つのｍｉＲＮＡに特異的なプライマーまたはプローブを含み、任意に（ｉｉ）ｍｉＲ−３７０またはｍｉＲ−１２７の少なくとも１つに特異的なプライマーまたはプローブを更に含むか、あるいは
（６）  （ｉ）ｍｉＲ−７に特異的なプライマーまたはプローブを含み、任意に（ｉｉ）ｍｉＲ−９、ｍｉＲ−２７、ｍｉＲ−１８１ａ、ｍｉＲ−３７０およびｍｉＲ−４９１−５ｐからなる群から選択される少なくとも１つのｍｉＲＮＡに特異的なプライマーまたはプローブを更に含むか、あるいは
（７）  （ｉ）ｍｉＲ−１２５ｂに特異的なプライマーまたはプローブを含み、任意に（ｉｉ）ｍｉＲ−９、ｍｉＲ−１８１ａ、ｍｉＲ−３７０およびｍｉＲ−４９１−５ｐからなる群から選択される少なくとも１つのｍｉＲＮＡに特異的なプライマーまたはプローブを更に含む、
キット。