【事件の表示】
　特許第３０２１３８０号「全血の一工程アッセイ方法および装置」の請求項１ないし１６に係る特許に対する特許異議の申立てについて、次のとおり決定する。
【結　論】
　訂正を認める。
　特許第３０２１３８０号の請求項１ないし１６に係る特許を維持する。
【理　由】
Ｉ．手続の経緯
　特許第３０２１３８０号の請求項１ないし１６に係る発明の出願は、平成９年３月３日（パリ条約による優先権主張、１９９６年５月９日、米国）に出願され、平成１２年１月１４日にその発明について特許の設定登録がされた。
　その後、その特許について、申立人熊澤一より特許異議の申立てがなされ、請求項１ないし１６に係る発明に対して取消理由通知（起案日平成１２年１１月１７日）及び審尋がなされ、その指定期間内である平成１３年６月５日に訂正請求（後日取下げ）がなされた後、前記訂正請求に対しての訂正拒絶理由および再度の取消理由通知（起案日平成１３年７月１７日）がなされ、その指定期間内である平成１４年１月３１日に訂正請求がなされたものである。
　
II．訂正の適否について
　平成１４年１月３１日付訂正請求書による訂正（以下、「本件訂正」という）の適否について以下検討する。
１．訂正の内容
　本件訂正は、つぎの訂正事項からなる。
　（ａ）　訂正事項ａ：
　特許請求の範囲の請求項１の「親水性細胞トラップ」を「厚さ０．１ｍｍ〜３ｍｍの親水性細胞トラップ」と訂正する。
　（ｂ）　訂正事項ｂ：
　特許請求の範囲の「可溶染料標識リガンド」を「可溶標識リガンド」と訂正する。
　（ｃ）　訂正事項ｃ：
　段落【００１６】の「重複する横断面に配向した多層繊維（繊維６ａおよび６ｂで表す）」を「横断面方向に配置された重複する繊維（繊維６ａおよび６ｂで表す）の複数の層」と訂正し、「幻影で示す」を「図示されていない」と訂正する。
  （ｄ）  訂正事項ｄ
　段落【００１７】の「細胞トラップ１の各孔（孔７によって表す）の有効サイズは、捕獲される細胞の大きさ（図３で細胞１０によって表す）より幾分小さい。」を「細胞トラップ１の各孔の有効サイズは、捕獲される細胞の大きさより幾分小さい。」と訂正する。
  （ｅ）  訂正事項ｅ
　段落【００１７】の「導入膜３に入ことができない」を「導入膜３に入ることができない」と訂正する。
  （ｆ）  訂正事項ｆ
　段落【００２０】の「細胞トラップ１として」を「細胞トラップ１の材料として」と訂正する。
　
２．訂正の目的の適否、新規事項の有無、及び特許請求の範囲の拡張・変更の存否
（１）訂正事項ａについて
　訂正事項ａは、「親水性細胞トラップ」を「厚さ０．１ｍｍ〜３ｍｍの親水性細胞トラップ」に限定するものであり、この厚さは、本件明細書段落【００１９】に記載されている。
　そうすると、訂正事項ａは、特許請求の範囲の減縮を目的とするものであり、そして、訂正事項ａは、本件明細書又は図面に記載した事項の範囲内の訂正であり、実質上特許請求の範囲を拡張し又は変更するものではない。
（２）訂正事項ｂについて
  訂正事項ｂは、明りょうでない記載の釈明を目的とするものと認められる。用語「染料」と用語「標識」とは、本件明細書において互換的に用いられているものであるから、「可溶標識リガンド」は、本件明細書又は図面に記載した事項の範囲内のものであり、実質上特許請求の範囲を拡張し又は変更するものではない。
（３）訂正事項ｃについて
　訂正事項ｃは、明りょうでない記載の釈明を目的とするものと認められ、本件明細書又は図面に記載した事項の範囲内のものであり、実質上特許請求の範囲を拡張し又は変更するものではない。
（４）訂正事項ｄについて
　訂正事項ｄは、図示されていない要素に対応する明細書の記載を削除するものであり、明りょうでない記載の釈明を目的とするものと認められ、本件明細書又は図面に記載した事項の範囲内のものであり、実質上特許請求の範囲を拡張し又は変更するものではない。
（５）訂正事項ｅについて
　訂正事項ｅは、誤記の訂正を目的とするものと認められ、本件明細書又は図面に記載した事項の範囲内のものであり、実質上特許請求の範囲を拡張し又は変更するものではない。
（６）訂正事項ｆについて
　訂正事項ｆは、明りょうでない記載の釈明を目的とするものと認められ、本件明細書又は図面に記載した事項の範囲内のものであり、実質上特許請求の範囲を拡張し又は変更するものではない。
　
３．訂正事項についての検討結果
　以上のとおりであるから、本件訂正は、特許法第１２０条の４第２項及び同条第３項において準用する特許法第１２６条第２項から第４項までの規定に適合するので、本件訂正を認める。
　
III．異議申立てについて
１．申立ての理由の概要
　異議申立人熊澤一は、下記の刊行物１〜４を甲第１〜４号証として提出し、本件の請求項１に係る発明は甲第１号証ないし甲第３号証に記載された発明に基づいて、また請求項２ないし１６に係る発明は、甲第１号証ないし甲第４号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明できたものであって、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができないものである旨主張している。
　刊行物１：　特表平７−５０１４０３号公報
　刊行物２：　特開平４−２１２０６０号公報
　刊行物３：　特開平１−２４４３７０号公報
　刊行物４：　特開平７−３２５０８５号公報
　
２．本件発明
  特許第３０２１３８０号の請求項１ないし１６に係る発明は、本件訂正明細書の特許請求の範囲の請求項１ないし１６に記載された次のとおりの事項により特定されるものである。
（以下、「本件発明１」、・・・「本件発明１６」という。）
「【請求項１】　繊維から繊維までの孔の有効サイズが試験サンプル中の全ての細胞の予想される最小直径より小であって、細胞および細胞成分より小さい物質の通過を可能とする少なくとも３層の重複する、繊維ガラス以外の繊維から成る、厚さ０．１ｍｍ〜３ｍｍの親水性細胞トラップ；細胞トラップと流体連絡する親水性のサンプル導入膜；サンプル導入膜と流体連絡する染料含浸膜；対照ゾーンおよび少なくとも１つの試験ゾーンを有する、染料含浸膜と流体連絡する試薬含浸膜；被分析物に結合することができるか、または試験ゾーンでの固定化リガンドへの結合を被分析物と競合することができる、染料含浸膜における少なくとも１つの可溶標識リガンド；被分析物または標識リガンドに結合することができる、試験ゾーンにおける固定化リガンド；標識リガンドの少なくとも１つに結合することができる、対照ゾーンにおける固定化リガンド；を含み、サンプル導入膜、染料含浸膜および試薬含浸膜の各々が疎水性基板上に位置する、細胞および細胞成分を含み、対象の被分析物を含む疑いのある流体試験サンプルのアッセイ装置。
　【請求項２】　少なくとも１つの層における繊維から繊維までの孔の有効サイズが８μを超えないことを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項３】　少なくとも１つの層における繊維から繊維までの孔の有効サイズが２μを超えないことを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項４】　細胞トラップがサンプル導入膜の上に位置することを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項５】　サンプル導入膜の孔の有効サイズが細胞トラップのものと等しいか、それより大きいことを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項６】　細胞トラップが、セルロース誘導体、ナイロンおよびそれらの組み合わせから成る群から選択される親水性材料で構成されることを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項７】　サンプル導入膜が、セルロース誘導体、ナイロンおよびそれらの組み合わせから成る群から選択される親水性材料で構成されることを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項８】　さらに、前記装置の細胞トラップおよび膜を覆う疎水性カバーを含み、該カバーが細胞トラップの上に位置する窓を有することを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項９】　基板が細片であることを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項１０】　基板およびカバーが生体適合性の固体で形成され、該基板およびカバーが前記装置の細胞トラップおよび膜を囲むハウジングを形成することを特徴とする請求項８に記載の装置。
　【請求項１１】　さらに、試薬含浸膜と流体連絡するように位置する吸収性材料を含むことを特徴とする請求項１０に記載の装置。
　【請求項１２】　前記装置の細胞トラップおよび膜が、試験サンプルが細胞トラップからサンプル導入膜、染料含浸膜および試薬含浸膜を通って流動するように細片に配置されることを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項１３】　染料含浸膜の標識が、酵素、リポソーム、赤血球ゴースト、ポリマーマイクロカプセル、着色ポリマー粒子（ラテックス）から成る群から選択され、好ましくは、金属含有化合物のゾルを含むことを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項１４】　標識がコロイド状の金であることを特徴とする請求項１３に記載の装置。
　【請求項１５】　リガンドが、抗原、抗体、ホルモン、酵素、ペプチド、タンパク質、核酸、オリゴヌクレオチド、糖タンパク質、炭水化物、多糖およびそれらの組み合わせから成る群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項１６】　請求項１に記載の装置の細胞トラップに試験サンプルを適用し；対照ゾーンのパターンを検出し；そして、試験ゾーンのパターンを検出する；ことを含み、その際、対照ゾーンにおける検出可能なパターンが適正なアッセイが行われたことを示し、試験ゾーンにおける検出可能なパターンが試験サンプル中の被分析物の有無を示す、細胞および細胞成分を含み、対象の被分析物を含む疑いのある流体試験サンプルのアッセイ方法。」
　
３．引用刊行物の記載事項
　当審が平成１２年１１月１７日付けの取消理由通知において引用した上記刊行物１〜刊行物４，および刊行物５（特開昭６１−１４５４５９号公報）並びに刊行物６（特表平１−５０３１７４号公報）には、それぞれ、次の事項が記載されている。
（１）刊行物１（特表平７−５０１４０３号公報）
　刊行物１には、生物学的試料中の特定の検出対象物の存在を検出するイムノクロマトグラフイーアッセイ装置の発明について、下記の事項が記載されている。
（１ａ）発明の背景と概要（３頁右上欄９行〜右下欄１２行）
　一段階イムノクロマトグラフイーアッセイ装置では、毛細管材料を介する試料からの流れが速すぎると検出可能な分子は取り残され、アッセイにより正確に検出されない。アッセイ材料の選択およびその寸法いよりアッセイを介する液体の流速が決定され、流れの均一性等にも影響を及ぼす。また、毛管材料の表面化に貯まっている液体から生じるウオーター・マークの存在により信頼性が損なわれるし、一段階アッセイにおける過剰の液体は、陽性のシグナルと誤解されるウォーター・マークの原因となるだけでなく、１段階装置から溢れ、誤った陰性のシグナルを発生しうる。
　この発明は、より短いアッセイ時間で装置を介する試料のより均一な流れを与え、さらに流体の溢れおよびウォーター・マークの出現を制限する。
（１ｂ）イムノクロマトグラフイーアッセイ装置
　図１〜図４に、上部ケーシング２４と下部ケーシング２６とを有するハウジング装置１０を備えたイムノクロマトグラフイーアッセイ装置が図示されている。
　上部ケーシング２４には、尿、血液、血清等を含む試料が導入される試料導入くぼみ１２、アッセイ終了窓１６とくぼみ１２との間に位置決めされる結果窓１４が設けられている（４頁右下欄２３行〜５頁左上欄５行）。
　下部ケーシング２６の表面２８には、多層支持体棚３０が形成され、かかる多層支持体棚３０に沿ってクロマトグラフィーアセンブリが位置決めされている（図４、５頁左上欄１５行〜２３行）。
　装置に使用するクロマトグラフィーアセンブリは、次のようなものである（図４、５頁左上欄２３行〜左下欄１３行）。
　第１の液体透過性材料３２は、第２の液体透過性材料３４の頂部上に組み立てられ、第３の液体透過性材料３６は、第２の液体透過性材料３４の頂部にて付加的に位置決めされている。第１の液体透過性材料３２と第３の液体透過性材料３６とは、その間に位置決めされた疎水性材料３８を介して、液体流通が断たれている。
　第１の液体透過性材料３２と第３の液体透過性材料３６からなるユニットは、第２の液体透過性材料３４と共に、支持体棚３０の第１層４０上に置かれている。
　また、吸収性パッド４４が、支持体棚３０の第２の支持体層４６上に位置決めされ、第３の支持体層５０上に置かれる毛細管材料４８は、第３の支持体層５０よりも大きく、第３の液体透過性材料３６及び吸収性パッド４４の双方に重なって接触している。
　上部ケーシング２４は、その試料導入くぼみ１２が第１の液体透過性材料３２と直接挿通するように下部ケーシング２６に位置決めされ、また、毛細管材料４８は、結果窓１４及びアッセイ終了窓１６の双方の下に延在する。
（１ｃ）液体流通状態
　生物学的試料が試料導入くぼみ１２に添加された場合には、流体は第１の液体透過性材料３２を介して下へ流れて第２の液体透過性材料３４へと流れ、更に、液体は、第２の液体透過性材料３４を横切って移動して、第３の液体透過性材料３６上へと進み、毛細管材料４８上へ流れる。このとき、第１及び第３の液体透過性材料の間に位置決めされた疎水性材料３８は、両者間における直接的な流体の通過に対するバリアとなる（図３，図４、５頁左下欄２１行〜５頁右下欄１３行、８頁左上欄９行〜１１行）。
　そして流体は、毛細管作用によって毛細管材料を横切って（図３では左に）移動する。
（１ｄ）液体透過材料の孔径（５頁右下欄１７行〜６頁左上欄２行）
　試料のクロマトグラフィーアセンブリを流れる状況と液体透過材料の孔径との関係について、次のように記載されている。
「当業者は、液体透過材料３２，３４，３６の孔径が流速を決定する際の重要なファクタであることを理解するであろう。
  第１の液体透過性材料３２の孔径は、試料中に存在し得る所望されない微粒子を濾過除去し、且つ、保持するのに十分小さく、所望される速度で液体が流れることを可能にするのに十分大きく、所望される速度で流体が流れることを可能にするのに十分大きい。
  第２の液体透過性材料３４の孔径は、検定されるべき検出対象物との結合が最小の状態で、試料流体及び溶解されたパッド緩衝液（液体透過性材料中で既に固定化されているもの）の流れを可能にしなければならない。」
（１ｅ）第１および第３の液体透過性材料
  第１および第３の液体透過性材料について、次の記載がある。
（６頁左上欄１０行〜右上欄７行）
「この発明の好ましい実施例において、第１および第３の液体透過性材料は、高密度ポリエチレンのような非吸着性、非反応性の多孔性材料から調製される。・・・さまざまな孔径のＰＯＲＥＸは濾過装置として機能するように選択され試料の流速を変えるか、または異なった試料サイズに適合する。小さい孔径は試料から粒子を濾過して取除き、一方。中位の孔径は装置を介する流速を向上させる。したがって、この発明の一実施例において、第１の液体透過性材料は好ましくは小さい孔径の高密度ポリエチレン材料から調製され、第３の液体透過性材料は中くらいの孔径の高密度ポリエチレン材料から調製される。適切なサイズ範囲は以下のとおりである。つまり、小さな孔径−−７０ミクロン±２０ミクロン、中くらいの孔径−−１５０ミクロン±３０ミクロン、大きな孔径−−３００±５０ミクロンの範囲である。」
（８頁右上欄９行〜１２行）
「この発明の好ましい実施例において、第１の液体透過性材料は、イムノクロマトグラフィーアッセイの精度に影響を及ぼしうる微粒子をトラップするのに十分小さい孔径（たとえば５０から９０ミクロン）を有する。」
（１ｆ）第２の液体透過性材料３４（６頁右上欄８行〜左下欄１２行）
  第２の液体透過性材料は、好ましくは吸収性材料であり、ワットマン・ペーパーＮｏ．１〜５、アルストロム９３９−３９（７０％綿、３０％木質、厚さ０．７９ｍｍ）、アルストロム９２５９−Ｒ（厚さ１．１２ｍｍ）、シュライヒャー・アンド・シュエル９３０（１００％綿）、または、ゲルマン・ウルトラシック・グラスファイバー＃６６０７８等のようなガラス繊維パッドなどの商品がその例である。
　ガラス繊維パッドは血球をパッドに保持するために全血の検定で有用であり、血清またはプラズマ材料がその間を流れる。
  第２の液体透過性材料として、使用することが考えられる他の吸収体材料は不織ポリエステル繊維パッド、シートのようなポリエステル材料を含むが、それに限定されない。
（１ｇ）検出試薬（７頁左上欄２１行〜左下欄３行）
　試料中の特定の検出対象物を検出するために、検出対象物に特異な適切な抗原または抗体は、ラテックス、セレニウム、コロイド状の金などのような発色性微粒子で標識される。
　抗体と結合された発色性のラテックス微粒子が、第３の液体透過性材料３６に適用（塗布）される。
（１ｈ）試料中の検出対象物の検出、検出窓１４（８頁左下欄２１行〜９頁左下欄２４行）
　生物学的試料中に存在する検定対象物は第１の透過性材料、つまり試料受取ゾーンを通過し、第２の液体透過性材料、つまり試料輸送ゾーンへと流れ、試料により溶解された乾燥保持されていた緩衝液とともに試料は第３の液体透過性材料へと移動し、そこでラテックス結合検出試薬と接触する。ラテックスは緩衝試料中で流動化され、その液面に従って毛細管材料上に移動する。試料中に存在する検定対象物はラテックス結合試薬に結合し、複合体は液体とともに毛細管材料の上に流れる。
　実施例においては、結果窓１４に対応する区域内の毛細管材料に目に見える水平または横向きのバー５２と、試料を導入する前に装置を目で見て検査した場合に水平バーのみが見えて陰性の検査結果として解釈されるように好ましくは無色の垂直バー５４が設けられ、垂直バーには検出対象物に結合可能な抗体が含まれる。試料が第３の液体透過材料から毛細管材料へと流れる際に、検出試薬に結合された発色性微粒子が生物学的試料中の検出対象物と化合し、この化合物が垂直バーを横切る際に、それに固定された抗体が検出対象物を結合し、発色性微粒子を垂直バーに沿って集め、生物学的試料中の検出対象物の存在は、ハッチングまたは「プラス」記号を生じるようになった垂直バーを目で見ることによって検出される。
（１ｉ）検定終了窓１６（９頁右下欄３行〜１０行）
　加えて、この検定には好ましくは検定終了窓１６を介して目に見えるインジケータを含み、例えば発色性微粒子が結合された一般的な抗原に対して生成された抗体が、検出終了窓１６に対応する場所の検査終了インジケーター５８として毛細管材料に適用され、検査終了を目で見える形で表示する。
　
（２）刊行物２（特開平４−２１２０６０号公報）
　刊行物２には、下記の事項が記載されている。
（２ａ）全血の分離及び検定（８欄【００２１】〜【００２２】）
　全血の血球成分と血漿又は血清との全体的な分離を達成するために、試薬含浸試験パッド２６と剥離可能に接触する濾過パッド２４を用いることによって、特定の可溶成分に関する全血又はその他の生体液試料の、安全で、正確で経済的な検定を可能にすることが記載されている。
　全血試料を濾過パッド及び試験パッドに浸透させた後、装置から濾過パッドを剥離し、引裂き、又は折り取ることによって、血液の血球成分を保持する濾過パッドを試験具から物理的に分断し、装置の試験パッドを露出し、標準乾燥化学試験ストリップ操作によって特定の血漿又は血清成分に対する反応に関して調べられる。
（２ｂ）濾過パッド２４、その担体マトリックス（１４欄【００４８】〜１５欄【００５１】）
　濾過パッドは、全血試料から血球成分と血漿又は血清を濾過し得る適当な担体マトリックスを含む。担体マトリックスは、一般に、全血の血球成分と血漿又は血清とを分離できる親水性担体マトリックスである。
　血球成分は、血漿又は血清と分離されて担体マトリックスに保持され、また、血漿又は血清は、担体マトリックスを通って濾過パッドと剥離可能に接触する試験パッドに接触して浸透する。
　担体マトリックスを構成する親水性担体物質として各種の材料が適用可能であることが記載され、濾紙のようなセルロース物質、ガラス繊維マトリックス、ナイロン等の繊維質マトリックスが挙げられている。
（２ｃ）担体マトリックスの細孔サイズ（１５欄【００５２】）
　担体マトリックスは、血球成分の能率的分離を達成し、そして、血清又は血漿を濾過パッドを通過させるためには、約０．１μｍ〜約５０μｍ、好ましくは約０．３μｍ〜約１０μｍの細孔サイズを有し得る。更に、刊行物２記載発明の利益を十分に達成するためには、担体マトリックスは、約０．５μｍ〜約８μｍの範囲の細孔サイズを有する。
（２ｄ）複数の担体マトリックス（９頁第１５欄【００５３】）
　濾過パッドは、１つ以上の担体マトリックスを包含し得る。担体マトリックスは、異なる物理的特性を有し、異なる化学的組成又は化学的組成物の混合物であり得る。
　濾過パッドの１つ又は複数の担体マトリックスは、平滑性及び粗さに関しては、硬度及び柔軟性と結びついて変化しうる。
  １つ又は複数の担体マトリックスの正確な組成にかかわらず、主に考慮すべきことは、全血の血球成分の分離、収集及び保持と、そして実質的に未変化、未希釈の血漿又は血清の送達である。
　
（３）刊行物３（特開平１−２４４３７０号公報、同甲第３号証）
　刊行物３には、クロマトグラフ結合アッセイ装置及び方法の発明に関し、下記の事項が記載されている。
（３ａ）装置（特許請求の範囲請求項（１））
「（１）試験試料中の分析対象物の存在および量を決定するための分析装置であって、
（ａ）近端および遠端を有するクロマトグラフ物質；試験試料は毛管作用により該近端から該遠端に移動することができ、該クロマトグラフ物質は捕捉部位に固定化された捕捉試薬を含み、該捕捉試薬は分析対象物、補助特異的結合ペアーの一方および指示試薬よりなる群から選ばれたものと結合することができる、および
（ｂ）該クロマトグラフ物質の該近端と流体接触した適用パッド；該適用パッドには試験試料が加えられ、該適用パッドから該クロマトグラフ物質へ移動することのできる拡散性指示試薬を含み、分析対象物、補助特異的結合ペアーの一方および指示試薬よりなる群から選ばれたものと結合することができ、該指示試薬の結合により該捕捉部位において検出可能なシグナルが得られ、そのことにより試験試料中の分析対象物の存在または量を示すことができる、
からなることを特徴とする装置。」
（３ｂ）捕捉試薬、指示試薬（特許請求の範囲請求項（５）、（９）〜（１１）、５頁左下欄１０行〜右下欄４行、６頁右下欄１０行〜１９行）
　捕捉試薬は、抗原および抗体特異的結合ペアや、相補的ヌクレオチド配列、相補的ペフチド配列、酵素補助因子と酵素、酵素インヒビターと酵素等の特異的結合ペアの一方でありえる。指示試薬は、上記特異的結合ペアーの一方に、色素原、触媒、蛍光化合物、化学発光化合物、放射性標識、コロイド状金属および非金属粒子を含む直接視覚標識、染料粒子、酵素または基質、有機ポリマーラテックス粒子、リボン一ム等の標識が付着したものでありえる。
（３ｃ） 適用パッドの機能、材質（４頁右下欄１９行〜５頁左上欄１行、８頁左上欄１８行〜右下欄９行、）
　適用パッドはクロマトグラフ物質への試験試料流を制御し、試験試料を濾過し、アッセイ試薬を混合するもので、適用パッドに用いるのに好ましい物質には、ニトロセルロース、多孔質ポリエチレンフィルムまたはパッドおよびガラス繊維フィルター紙がある。
　適用パッドには試験試料が加えられ、適用パッドを試料で湿らせることは少なくとも２つの働き、第一に、そのことにより適用パッドに含まれていた量の試薬を溶解または再構成するであろうし、第二に、試験試料および新たに溶解した試薬の両者がクロマトグラフ物質の方へ移動するのを開始させるであろうし、ある場合においては、適用パッドは、最初の混合部位および試験試料と試薬との反応部位として第三の働きをするであろうことが記載されている。
（３ｄ）濾過手段（９頁左上欄６行〜右上欄１行）
　濾過手段について、「さらに好ましい態様において、本発明は、さらに濾過手段を加えることにより変更を加えることができる。濾過手段は適用パッドの上部かまたは適用パッドとクロマトグラフ物質との間に置かれた別の物質であることもできるし、また適用パッド自身の物質を濾過能を有するように選択することもできる。濾過手段は、試験試料よりサイズがいくらか大きい粒子を除くのに用いることができるあらゆるフィルタまたはトラップ装置を含んでいることができる。たとえば、濾過手段は、全血の試料から赤血球を除去するために用い、適用パッドに加えられるクロマトグラフ物質が血漿になるようにすることができる。そのような濾過手段は、米国特許第４４７７５７５号およびＷＯ出願第８６／０２１９２号（１９８７年４月２３日公開）各明細書に記載されている。」と記載されている。
（３ｅ）図１のアッセイ装置１０（１３頁左下欄３行〜右下欄４行及び図１）
　図１には刊行物３の発明のアッセイ装置１０が、近端１１および遠端１２を有するものとして上部非反応性囲い５ａと下部非反応性囲い５ｂとともに示されている。上部および下部囲い５ａ、５ｂは、適用パッド１およびクロマトグラフ物質２を覆っており、適用パッド１はクロマトグラフ物質２の近端１１に位置している。上部囲い５ａは、透明窓４ａおよび任意の窓４ｂを有しており、かかる窓４ａは、クロマトグラフ物質２およびその上にシグナル生成システムにより生成したシグナルの観察を容易にしており、また、窓４ｂは、試験溶液または他のアッセイ試薬がアッセイ完了領域と接触するときに生成される色の観察を可能にしている。上部非反応性囲い５ａの近端１１に設けられた適用ポート３は、試験試料および毛管運搬用溶液を適用パッド１に添加することを可能にする。また、クロマトグラフ物質２に形成され捕捉試薬を含有する捕捉部位７は、クロマトグラフ物質２の幅を横切る平行な一連の棒として分布状に設けられている。
　
（４）刊行物４（特開平７−３２５０８５号公報）
　刊行物４には、分析対象物ハプテンを含む尿、血清、血漿、血液等の生体試料について半定量を行う免疫学的方法および装置（【０００１】、【００２３】）について、試料添加部（Ａ）、標識物質存在部（Ｂ）、複数の検出部（Ｃ１〜Ｃ６）及び吸収部（Ｄ）を有し、それらが長方形のプラスチック、ガラス、フィルム等からなる支持体（ｅ）に固定されているスティック形式のクロマト型免疫化学的分析装置が記載されている（【００４６】〜【００４８】及び図１）。
　
（５）刊行物５（特公平６１−１４５４５９号公報）
　刊行物５には、イムノクロマトグラフィーによるアッセイ装置である「シート状診断デバイス」が記載されていて、試料をデバイスのクロマトグラフイ・セクションに直接適用する必要はないく、試料を、デバイス上に位置しそして試料から血液細胞を除去する機能を有する吸収性材料に適用することもでき、試料はろ過をうけた後デバイスに達すること（４頁右下欄１行〜６行）が記載されている。
　
（６）刊行物６（特表平１−５０３１７４号公報）
　刊行物６には、液体試料が毛管現象によりその中を移動し、１段階イムノアッセイがなされるケーシングに収納された多孔質キャリヤからなる分析装置について記載されている。
　
４．本件発明１と刊行物１記載の発明との対比
　ここで、本件発明１と刊行物１に記載された発明とを対比する。
（１）対応関係
（イ）親水性細胞トラップ
  刊行物１記載の「アッセイ装置」の「第１の液体透過性材料３２」は、試料中に存在し得る所望されない微粒子を濾過除去するものであり（前記（１ｄ）参照）、トラップ層といえるが、記載されている材料は高密度ポリエチレンであって、親水性であるとはいえない。
（ロ）サンプル導入膜
　刊行物１記載の「アッセイ装置」の「第２の液体透過性材料３４」は、「第１の液体透過性材料３２」と流体連絡する親水性のサンプル導入膜に相当する（前記（１ｆ）参照）。
（ハ）染料含浸膜
　刊行物１記載の「アッセイ装置」の「第３の液体透過性材料３６」は、可溶性標識リガンドに相当する「検出試薬」が塗布されるものである（前記（１ｇ）参照）から、染料含浸膜に相当する。この「第３の液体透過性材料３６」は、「第２の液体透過性材料３４」と流体連絡する（前記（１ｃ）参照）。
（ニ）試薬含浸膜
  刊行物１記載の「アッセイ装置」の「毛細管材料４８」は、試薬の固定化により試料中の検出対象物の検出を可能にするもので（前記（１ｈ）参照）、少なくとも１つの試験ゾーンを有する、試薬含浸膜に相当する。また、この「毛細管材料４８」には、検定終了窓を介して目に見える「インジケータ５８」を有するものであり（前記（１ｉ）参照）、この「インジケータ５８」の適用されている領域は、「対照領域」に相当する。そして、この「毛細管材料４８」は、「第３の液体透過性材料３６」と流体連絡する（前記（１ｂ）、（１ｃ）参照）。
（ホ）可溶標識リガンド
　刊行物１記載の「アッセイ装置」の「検出試薬」は、可溶標識リガンドに相当し、被分析物に結合することができるか、または試験ゾーンでの固定化リガンドへの結合を被分析物と競合することができるものであり、「第３の液体透過性材料３６」に塗布される（前記（１ｇ）参照）。
（ヘ）試験ゾーンにおける固定化リガンド
  刊行物１記載の「アッセイ装置」の「毛細管材料４８」に固定化された抗原または抗体のような「捕捉分子」は、被分析物または標識リガンドに結合することができるものであり（前記（１ｈ）参照）、試験ゾーンにおける固定化リガンドに相当する。
（ト）対照ゾーンにおける固定化リガンド
  刊行物１記載の「アッセイ装置」の「毛細管材料４８」の検定終了窓を介して見える領域に適用された、インジケータ５８としての、例えば発色性微粒子が結合された一般的な抗原に対して生成された抗体は、「対象ゾーンにおける固定化リガンド」に相当する（前記（１ｉ）参照）。
（チ）疎水性基板上に位置
  刊行物１記載の「アッセイ装置」の「第１の液体透過性材料３２」と「第３の液体透過性材料３６」が「疎水性材料３８」を挟んで隣り合わせにその上に載置している「第２の液体透過性材料３４」と「毛細管材料４８」がその上に位置する、刊行物１の図１〜図４に示されている「多層支持体棚３０」は、疎水性基板に相当する。
（リ）流体試験サンプル
  刊行物１記載の「アッセイ装置」に導入される試料は、「尿、血液、血清等を含む試料」であり（前記（１ｂ）参照）、このうちの「血液」は、細胞および細胞成分を含み、対象の被分析物を含む疑いのある流体試験サンプルに相当する。
　
（２）一致点、相違点
　そうすると、本件発明１は、刊行物１記載の発明と、「繊維ガラス以外の繊維から成るトラップ；トラップと流体連絡する親水性のサンプル導入膜；サンプル導入膜と流体連絡する染料含浸膜；対照ゾーンおよび少なくとも１つの試験ゾーンを有する、染料含浸膜と流体連絡する試薬含浸膜；被分析物に結合することができるか、または試験ゾーンでの固定化リガンドへの結合を被分析物と競合することができる、染料含浸膜における少なくとも１つの可溶標識リガンド；被分析物または標識リガンドに結合することができる、試験ゾーンにおける固定化リガンド；標識リガンドの少なくとも１つに結合することができる、対照ゾーンにおける固定化リガンド；を含み、サンプル導入膜および試薬含浸膜の各々が疎水性基板上に位置する、細胞および細胞成分を含み、対象の被分析物を含む疑いのある流体試験サンプルのアッセイ装置」である点で一致するが、両者は、次の点で相違する。
（相違点１）
　繊維ガラス以外の繊維から成るトラップについて、本件発明１のトラップは、「繊維から繊維までの孔の有効サイズが試験サンプル中の全ての細胞の予想される最小直径より小であって、細胞および細胞成分より小さい物質の通過を可能とする少なくとも３層の重複する、繊維ガラス以外の繊維から成る、厚さ０．１ｍｍ〜３ｍｍの親水性細胞トラップ」であるのに対し、刊行物１発明の「第１の液体透過性材料３２」は、その孔径が、試料中に存在し得る所望されない微粒子を濾過除去し、且つ、保持するのに十分小さいものであるが（前記（１ｄ）参照）、細胞を濾過するものであることは記載されておらず、その孔径は好ましいとされる小さな孔径でも「７０ミクロン±２０ミクロン」であって（前記（１ｄ）参照）、全血試料中の細胞である血球を濾過、トラップできる孔径ではないし、試料が全血である場合に試料に含まれる細胞である血球は、繊維から繊維までの孔の有効サイズについては具体的な記載のないガラス繊維である「第２の液体透過性材料３４」に保持されることしか記載されていない（前記（１ｆ）参照）上、該材料の層を重複することも、その厚さがどの程度とするかも記載されていない点。
（相違点２）
　本件発明１では、サンプル導入膜、染料含浸膜および試薬含浸膜の各々が疎水性基板上に位置するのに対し、刊行物１記載の発明では、染料含浸膜に相当する「第３の液体透過性材料３６」が、「第２の液体透過性材料３４」の上に位置し、サンプル導入膜に相当する「第２の液体透過性材料３４」および固定化リガンドを含む「毛細管材料４８」とは異なり、疎水性基板上に位置しない点。
　
５．相違点１，２についての検討
  そこで、前記の相違点について検討する。
（１）刊行物２には、全血試料から血球成分と血漿又は血清を濾過し分離できる親水性担体マトリックスである濾過パッドが、複数の担体マトリックスを包含し得ると記載されている（前記（２ｂ）〜（２ｄ）参照）ものの、刊行物２に記載の濾過パッドは、全血試料を濾過パッド及び試験パッドに浸透させた後、装置から濾過パッドを剥離し、引裂き、又は折り取ることによって、血液の血球成分を保持する濾過パッドを試験具から物理的に分断し、装置の試験パッドを露出し、標準乾燥化学試験ストリップ操作によって特定の血漿又は血清成分に対する反応に関して調べられる装置の一部として使用されるものであって（前記（２ａ）参照）、本件発明１や刊行物１記載の装置のように、全血試料から細胞である血球をトラップする濾過材料層と、血球成分を分離された血漿又は血清が毛細管現象でクロマトグラフ的に移動していく親水性層等が、試料がアッセイされる間ずっと流体連絡する接触状態にあるものではない。そして、「複数の担体マトリックスを包含し得る」という記載の具体的な態様も記載されていない。
　また、刊行物３には、全血試料から細胞である赤血球をトラップする濾過手段を適用パッドの上に重ねて置いて、適用パッドに導入される試料を血漿となるようにし、アッセイ中に該濾過手段は適用パッドと流体連絡されているアッセイ装置が記載されている（前記（３ｄ）参照）ものの、そのような濾過手段として、具体的に記載された特許文献に記載された材料は、本件発明１において、除外されている繊維ガラスおよび疎水性材料に他ならないし、繊維ガラス以外の親水性繊維材料を使用することやそれを少なくとも３層重複させ、特定の厚さとすることなど、その構成を具体的にどのようにするかは、何ら記載されていない。
　さらに、クロマトグラフ式のシート状診断デバイスにおける全血試料からの血液細胞をろ過除去する吸収性材料について記載されている刊行物５にも、単に「デバイス上に位置し」、「試料はろ過をうけた後デバイスに達する」とあるだけで、該デバイスの各種ゾーンとろ過手段の具体的配置関係や使用材料、寸法等については、何ら記載されていない。
　
（２）しかも、刊行物１記載の装置は、装置を介して流れる試料流体により均一な流れを与え、さらに流体の溢れおよびウォーター・マークの出現を制限するために、第１の液体透過性材料から第２の液体透過性材料へ、次いで第３の液体透過性材料へ、さらに毛細管材料へと流れる試料流体の流れを、第１の液体透過性材料から第２の液体透過性材料へは下向きに、第２の液体透過性材料から第３の液体透過性材料へは上向きにと、流れの方向が上下に変わるように、３種の液体透過性材料が「疎水性材料３８」をも介在させて特定の形に配置されているものであるし、３種の液体透過性材料の孔径も、濾過能力だけでなく、流れる液体の流速をも考慮し、選択されるものであることが記載されている（前記（１ａ）〜（１ｅ）参照）から、血球などの細胞および細胞成分を含み、対象の被分析物を含む疑いのある流体試験サンプルである全血試料を対象試料とする刊行物１記載の装置において、そのような特定の上下に変化する流れを生じるように、疎水性材料を介在させて第１の液体透過性材料と第３の液体透過性材料がその上に配置された、ガラス繊維製の第２の液体透過性材料によって血球が保持されることが記載されているとしても、血球が濾過、トラップされる孔径の材料ではなく、親水性材料を使用するも記載されていない第１の液体透過性材料を、血球などの試験サンプル中の細胞を濾過、トラップできる繊維ガラス以外の繊維から成る親水性細胞トラップ材料に変えることはもとより、第３の液体透過性材料を、第２の液体透過性材料の上から、第２の液体透過性材料および下流の毛細管材料と同様に、疎水性基板の上に配置換えして、刊行物１記載の装置の特徴的な試料流体の流れ方を変更する動機付けは全く存在しない。
　
（３）そうすると、試料アッセイ中には既にアッセイが行われる試験パッドとは流体連絡が切り離されている別形式のアッセイ装置において試験サンプル中の血球細胞をトラップ可能な親水性繊維質マトリックスで構成された濾過パッドについての刊行物２の記載や、ガラス繊維あるいは疎水性材料製血球細胞トラップ手段についての刊行物３の記載等があっても、刊行物１記載装置の第１の液体透過性材料を、繊維から繊維までの孔の有効サイズが試験サンプル中の全ての細胞の予想される最小直径より小であって、細胞および細胞成分より小さい物質の通過を可能とする少なくとも３層の重複する、繊維ガラス以外の繊維から成る、厚さ０．１ｍｍ〜３ｍｍの親水性細胞トラップに変更し、かつ親水性の第２の液体透過性材料の上に載置されていた可溶性標識試薬を含浸する第３の液体透過性材料を、親水性のサンプル導入膜および固定化リガンドを含む対照ゾーンおよび少なくとも１つの試験ゾーンを有する試薬含浸膜と同じく疎水性基板上に配置換えして、本件発明１のように構成することは、当業者が容易に想到し得たものということが出来ない。
　全血試料等からの細胞の濾過について言及されていることのない刊行物４，６の記載を勘案しても、同様である。
　
（４）従って、本件発明１は、上記刊行物１〜刊行物３、あるいは刊行物１〜刊行物６に記載の発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものとすることはできない。
６．本件発明２〜本件発明１６について
　本件発明２〜本件発明１６は、いずれも本件発明１を引用しているアッセイ装置およびアッセイ方法の発明であるから、本件発明１についての検討したところと同様の理由で、上記刊行物１〜刊行物４、あるいは刊行物１〜刊行物６に記載の発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものとすることはできない。
　
７．また、当審が平成１３年７月１７日付けで通知した明細書および図面の記載不備についての取消理由は、上記訂正請求による訂正により、解消した。
　
IV．むすび
  以上のとおりであるから、本件特許異議の申立ての理由及び証拠によっては、本件請求項１ないし１６に係る発明の特許を取り消すことができない。
　また、他に本件請求項１ないし１６に係る発明の特許を取り消すべき理由を発見しない。
　よって、結論のとおり決定する。
【異議決定日】
平成１４年８月２９日（２００２．８．２９）
【訂正の要旨】
訂正の要旨
＜訂正事項ａ＞
　特許請求の範囲の請求項１の「親水性細胞トラップ」を、「厚さ０．１ｍｍ〜３ｍｍの親水性細胞トラップ」と、訂正する。
＜訂正事項ｂ＞
　特許請求の範囲の「可溶染料標識リガンド」を「可溶標識リガンド」と訂正する。
＜訂正事項ｃ＞
　段落【００１６】の「重複する横断面に配向した多層繊維（繊維６ａおよび６ｂで表す）」を「横断面方向に配置された重複する繊維（繊維６ａおよび６ｂで表す）の複数の層」と訂正し、「幻影で示す」を「図示されていない」と訂正する。
＜訂正事項ｄ＞
　段落【００１７】の「細胞トラップ１の各孔（孔７によって表す）の有効サイズは、捕獲される細胞の大きさ（図３で細胞１０によって表す）より幾分小さい。」を「細胞トラップ１の各孔の有効サイズは、捕獲される細胞の大きさより幾分小さい。」と訂正する。
＜訂正事項ｅ＞
　段落【００１７】の「導入膜３に入ことができない」を「導入膜３に入ることができない」と訂正する。
＜訂正事項ｆ＞
　段落【００２０】の「細胞トラップ１として」を「細胞トラップ１の材料として」と訂正する。
（５４）【発明の名称】
全血の一工程アッセイ方法および装置
（５７）【特許請求の範囲】
　【請求項１】　繊維から繊維までの孔の有効サイズが試験サンプル中の全ての細胞の予想される最小直径より小であって、細胞および細胞成分より小さい物質の通過を可能とする少なくとも３層の重複する、繊維ガラス以外の繊維から成る、
厚さ０．１ｍｍ〜３ｍｍの
可溶標識リガンド
　【請求項２】　少なくとも１つの層における繊維から繊維までの孔の有効サイズが８μを超えないことを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項３】　少なくとも１つの層における繊維から繊維までの孔の有効サイズが２μを超えないことを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項４】　細胞トラップがサンプル導入膜の上に位置することを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項５】　サンプル導入膜の孔の有効サイズが細胞トラップのものと等しいか、それより大きいことを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項６】　細胞トラップが、セルロース誘導体、ナイロンおよびそれらの組み合わせから成る群から選択される親水性材料で構成されることを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項７】　サンプル導入膜が、セルロース誘導体、ナイロンおよびそれらの組み合わせから成る群から選択される親水性材料で構成されることを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項８】　さらに、前記装置の細胞トラップおよび膜を覆う疎水性カバーを含み、該カバーが細胞トラップの上に位置する窓を有することを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項９】　基板が細片であることを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項１０】　基板およびカバーが生体適合性の固体で形成され、該基板およびカバーが前記装置の細胞トラップおよび膜を囲むハウジングを形成することを特徴とする請求項８に記載の装置。
　【請求項１１】　さらに、試薬含浸膜と流体連絡するように位置する吸収性材料を含むことを特徴とする請求項１０に記載の装置。
　【請求項１２】　前記装置の細胞トラップおよび膜が、試験サンプルが細胞トラップからサンプル導入膜、染料含浸膜および試薬含浸膜を通って流動するように細片に配置されることを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項１３】　染料含浸膜の標識が、酵素、リポソーム、赤血球ゴースト、ポリマーマイクロカプセル、着色ポリマー粒子（ラテックス）から成る群から選択され、好ましくは、金属含有化合物のゾルを含むことを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項１４】　標識がコロイド状の金であることを特徴とする請求項１３に記載の装置。
　【請求項１５】　リガンドが、抗原、抗体、ホルモン、酵素、ペプチド、タンパク質、核酸、オリゴヌクレオチド、糖タンパク質、炭水化物、多糖およびそれらの組み合わせから成る群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の装置。
　【請求項１６】　請求項１に記載の装置の細胞トラップに試験サンプルを適用し；対照ゾーンのパターンを検出し；そして、試験ゾーンのパターンを検出する；ことを含み、その際、対照ゾーンにおける検出可能なパターンが適正なアッセイが行われたことを示し、試験ゾーンにおける検出可能なパターンが試験サンプル中の被分析物の有無を示す、細胞および細胞成分を含み、対象の被分析物を含む疑いのある流体試験サンプルのアッセイ方法。
【発明の詳細な説明】
　【０００１】
　【発明の属する技術分野】
本発明は、生物学的流体サンプルをアッセイするための方法および装置に関する。特に、本発明は、アッセイを行う前にサンプルから細胞画分を分離する必要のない、全血サンプル中の被分析物を検出するための方法および装置に関する。
　【０００２】
　【従来の技術】
種々の体液のアッセイで使用するための、試薬を含浸させた毛管膜の開発により、使用が簡単で、比較的迅速に（例えば、１０分以内に）結果が得られる試験装置を生産することが可能になった。おそらく、そのような装置の最も一般的な応用は、ヒトの妊娠指示薬としてのヒト絨毛性ゴナドトロピンの検出にある。そのような装置の例は、本出願人による米国特許Ｎｏ．５，３８４，２６４ならびにＥＰＯ公開公報Ｎｏ．０５６０４１１Ａ２、ＰＣＴ出願Ｎｏ．ＰＣＴ／ＧＢ／００３２２および米国特許Ｎｏ．４，３６６，２４１に記載されている。それらの最も簡単な形態では、そのような装置により、アッセイおよび結果の読み取りを一工程で行うことができる。例えば、液体サンプル（尿など）を吸収性の膜に載せると、その中にある対象の被分析物が対応するリガンドに結合し、結果（すなわち、特定の複合体の生成）が、サンプル装填ゾーンから分離した検出ゾーンにおいて視覚的に示される。
　【０００３】
そのような装置は、典型的には比較的大きい細胞を含まない（従って、毛管作用などにより試薬含浸膜を容易に通過する）体液のアッセイに対しては十分機能するが、全血などの大きい細胞を含む体液における被分析物のアッセイに対しては適応できていない。その代わりに、全血に存在する被分析物のアッセイは、典型的には、実質的に細胞を含まない血漿または血清画分に対して行われ、従って、サンプルは、アッセイを行う前に赤血球および他の細胞を除く必要がある。
　【０００４】
米国特許Ｎｏ．５，３０４，４６８に記載の装置は、表向きは、被分析物、特にグルコースをアッセイする前に全血から血漿または血清画分を単離する必要を回避するものである。記載された装置（試験片）は、向かい合うサンプル導入表面および試験表面を含み、後者に試薬を含浸させる。陽性または陰性の結果は、光学的に検出される試験表面での反射率の変化によって示される。開示によれば、反射率の変化の検出は、試験サンプル中の赤血球の存在の影響を受けないので、全血サンプルは、サンプル導入表面に適用してもよい。しかし、結果は反射率の変化で測定されるので、開示された装置を使用してアッセイを行うためには、光学測定装置が必要である。
　【０００５】
　【発明が解決しようとする課題】
本発明は、アッセイを行う前にサンプル中の細胞から非細胞液体画分を分離する必要なく、細胞含有流体サンプル中の被分析物の一工程アッセイを行うための装置および方法から成る。さらに、本発明は、サンプル中の細胞成分を除くための疎水性フィルムの使用または、それに続く除いた成分をアッセイ装置から除去するための洗浄工程を必要としない。さらに、本発明に従って行われたアッセイの結果は、別の測定装置を使用することなく、また、試験サンプルの反射率に関係なく、視覚的に読み取ることができる。すなわち、本発明によるアッセイを行うには、必要量の試験サンプル（好ましくは、全血）を本発明の装置に導入し、次いで、短時間に装置の検出ゾーンに現れる色の変化などを観察するだけでよい。
　【０００６】
このために、本発明の装置は、試験サンプルを親水性サンプル導入膜に導入する箇所に細胞トラップを含む。該トラップは、好ましくは被分析物サンプル中の細胞の予想される直径より小さい有効直径の孔を有する層状の親水性メッシュであり、これを、サンプル導入膜と流体連絡するように配置する。すなわち、使用に際しては、試験サンプルの流体画分のみが細胞トラップを通過してサンプル導入膜に入る。次いで、サンプル導入膜に入った流体は、その膜を通って試薬含浸染料ゾーンに入った後、試験および対照ゾーンに入る。本発明の装置の最も好ましい態様では、陽性または陰性の試験結果を誘導するために、視覚的に検出できる特定の染料（金属含有無機化合物のゾルなど）を使用する。
　【０００７】
本発明の装置は、装置の種々の成分を含む試験片およびカセットなど、適切などんな形状であってもよい。本発明の方法によれば、少量の試験サンプル（好ましくは、全血）をピペットにより、または滴下もしくは他の方法（例えば、指に針を刺して直接接触させる）により、細胞トラップに入れる。サンプルに存在する（分離した細胞成分の膜に結合していない）被分析物と１種以上の特異的リガンドとの結合により、試験結果を示す特定の視覚的パターンが形成される。
　【０００８】
本発明を使用すると、少なくとも１種類の特異的リガンド（結合相手）が公知である（例えば、ポリクローナルまたはモノクローナル抗体）、流体サンプルに存在するどんな被分析物（例えば、全血中の可溶抗原）も検出することができる。本発明は、特に、感染性および非感染性病原体と関連した、モノエピトープおよびポリエピトープ抗原および抗体ならびに生理学的化合物および薬物の検出に有用である。本発明の装置は、全血サンプルのアッセイで特に使用することができるが、他の液体サンプル、特に、細胞またはそれに匹敵する大きさの他の妨害粒子が存在することが知られているサンプルのアッセイに使用することもできる。
　【０００９】
　【課題を解決するための手段】
１．定義理解を容易にするために、本明細書全体にわたって下記の定義を適用する。
ａ）被分析物１個以上の結合部位（例えば、エピトープ）、すなわち、別の分子または化合物が結合する箇所を含む分子または化合物。
ｂ）リガンドおよび結合対被分析物上の特定の結合部位に結合して「結合対」を形成する分子または化合物。対象のどの被分析物／リガンド結合対も本発明に使用することができる。構造的には、リガンドとして、タンパク質、ペプチド、炭水化物、多糖、核酸、オリゴヌクレオチド、ハプテンおよびそれらの組み合わせが挙げられる。機能的には、リガンドとして、抗体、抗原（例えば、微生物抗原、前立腺特異抗原）、ホルモン（例えば、甲状腺刺激ホルモン）、薬物、酵素、アレルゲンならびにそれらの断片、変異体および組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。当業者であれば、そのようなリガンドおよび対応する結合対には精通しており、または容易に特定することができる。
　【００１０】
ｃ）試験サンプル特定のアッセイが特異的である、対象の被分析物を含む疑いのある流体。
ｄ）標識試験サンプル中の対象の被分析物の有無または濃度範囲を示すためのアッセイで使用される、信号（色の変化など）の形成を直接的または間接的に媒介する分子または化合物。標識としては、酵素、蛍光体、リポゾーム、赤血球ゴースト、ポリマーマイクロカプセル、着色ポリマー粒子（ラテックス）が挙げられ、好ましくは、金属含有化合物のゾルが挙げられる。
　【００１１】
ｅ）金属標識金属含有ゾル、すなわちポリマーと混合した、もしくはポリマー核上に被覆した酸化金属、水酸化金属、金属塩、金属もしくは金属含有化合物などの金属または金属化合物の標識。これらの金属標識は、上述した金属または金属化合物ゾルの脱水形態を含むことができ、好ましくは、コロイド状の金の脱水形態を含む。
ｆ）複合体使用されている文脈に応じて、「複合体」は、被分析物および１種以上のリガンドによって形成される、または標識リガンドおよび固定化リガンドによって形成されるいずれかの多重分子複合体を意味する。サンドイッチ型イムノアッセイでは、例えば次の複合体：アッセイで最初に生成する被分析物／標識リガンド二重型（「第一複合体」）およびアッセイで二番目に生成する被分析物／標識リガンド／固定化リガンド三重型（「第二複合体」）が生じる。
　【００１２】
ｇ）細胞成分細胞膜ならびにミトコンドリアおよび核などの細胞内構造を意味する。
ｈ）非細胞画分その中に存在する被分析物および本発明の装置の細胞トラップに捕獲されなかった細胞成分を含む、試験サンプルの液相を意味する。
　【００１３】
２．本発明の装置の好ましい態様本発明の装置は、本発明の材料要素を含むどんな形状または立体配置もとることができるが、装置の好ましい立体配置は、本発明の装置の内部成分を含む試験片およびカセットである。すなわち、本発明の装置は、本明細書では、試験片およびカセット型装置として記載するが、本発明は、これらの特定の立体配置に限定するものと理解されるものではない。
　【００１４】
本発明に従って構成される試験片を図１に示す。図の左側に、細胞トラップ１を、サンプル導入膜３の上にある層状メッシュとして示す。試験サンプルを入れるための細胞トラップ１への通路は、カバー５にある窓４によって得られる。カバー５は、試験片の上部表面全部または一部にわたって延びた疎水性材料の薄層またはフィルムである。カバー５は試験片から省くことができるが、窓４によりサンプルを正確に入れるのを助け、細胞トラップ１を汚染から保護し、細胞トラップ１のサンプル導入膜３からの分離を防ぐ役目がある。すなわち、本発明の試験片にカバー５を含めるのが好ましい。
　【００１５】
カバー５に向かい合うのは、薄い疎水性の基板６である。基板６は、下記の試験片の全ての機能成分の硬質支持体として、また、流体が試験片から出て装置の底表面を通過するためのバリヤとして作用する。カバー５および基板６として使用するのに適した材料としては、セルロース誘導体、ポリビニル化合物およびポリアクリル化合物ならびに他の固体ポリマーが挙げられ、それらはカバー５および基板６を形成するために使用することができ、または、カバーもしくは基板が異なる材料（紙など）で構成される場合の被覆材として使用することができる。カバー５および基板６の試験片における好ましい位置を図２に示す。
　【００１６】
細胞トラップ１の構造は、図３にさらに詳細に示す。図３に示すように、細胞トラップ１は横断面方向に配置された重複する繊維（繊維６ａおよび６ｂで表す）の複数の層から成り、メッシュを形成している（重複する繊維の下にある層は図示されていない）。重複する繊維によって形成される孔は、試験サンプル中の赤血球または他の細胞の予想される直径を越えてはならず、好ましくは該直径未満である。濾過を容易にするために、細胞トラップの上部繊維層の孔の大きさは、下部繊維層における孔の大きさと異なっていてもよい。本明細書では、細胞トラップのある層における最も小さい孔の大きさを、細胞トラップの有効な孔の大きさとする。ヒトの赤血球の場合、平均直径は７．７μであり、平均の厚さは約２μである。理解を容易にするために、細胞トラップ１で分離すべき細胞は、本明細書では赤血球とするが、理解されるように、本発明は、赤血球を含む試験サンプルでの使用に限定されない。
　【００１７】
図３（他の図とはスケールが異なる）に示すように、細胞トラップ１の各孔の有効サイズは、捕獲される細胞の大きさより幾分小さい。各孔の境界を形成する繊維は、試験サンプルに触れても変形しないように、すなわち孔の大きさが拡大しないように堅く編んである。細胞を効率的に分離するために、一般的には、細胞トラップ１の有効な孔の大きさが、捕獲すべき細胞の予想される直径より少なくとも１０％小さいのが好ましい。本発明の範囲内では、試験サンプルは、異質の細胞集団を含んでいてもよい。そのような場合、有効な孔の大きさは、試験サンプル中の最も小さい細胞の直径より少なくとも１０％小さいのが好ましい。また、より小さい孔を使用すると、本発明装置の細胞成分および全細胞の捕獲能を高めることができる。全ての場合において、孔の大きさは、試験サンプルの非細胞流体画分の通過が妨げられて、孔を通ってサンプル導入膜３に入ることができないほど小さくあるべきではない。
　【００１８】
当業者であれば理解されるように、試験サンプル中に存在する赤血球または他の細胞は、予想される大きさでない可能性があり、予想よりも小さい場合は、細胞トラップ１の孔を通過することができるだろう。すなわち、細胞トラップ１の捕獲能を高めるためには、少なくとも２層、好ましくは３層より多くの重複する繊維が一層ごとに横切る方向に積み重なって細胞トラップ１を形成する。
　【００１９】
さらに、図３には均一に重複する繊維を示すが、当業者であれば理解されるように、よりランダムに配向した繊維を細胞トラップ１に使用してもよい。そのような構造では、孔の全てが均一の大きさとはならない。従って、細胞トラップ１に載せた被分析物サンプル中の赤血球が重複した繊維の１層以上を通過する可能性がある。細胞トラップ１の重複した繊維の各層は、表面層で捕獲されない細胞がトラップのより深い層で捕獲されるよう、横断するように配向させるべきである。そのためには、細胞トラップ１は、少なくとも３層の重複する繊維を含むことが好ましい。試験サンプルの非細胞流体画分がより容易に細胞トラップ１を通ってサンプル導入膜３にしみ込むようにするために、細胞トラップ１は、好ましくは、全厚が０．１ｍｍ〜３ｍｍである。細胞トラップ１の窓４（図１）から試験サンプルを入れるために利用できる表面積は、試験サンプルの体積および入れる方法に応じて変わり、本発明によるほとんどの全血サンプルの試験の場合、約３ｍｍ２〜２５ｍｍ２の表面積が適切であると予想される。
　【００２０】
細胞トラップ１の繊維は、赤血球を捕獲するための特定の電荷または個々の厚さを有する必要はない。しかし、被分析物サンプルの非細胞画分が細胞トラップ１を通ってサンプル導入膜３に入るのを助けるために、細胞トラップ１は、流体がトラップの孔をしみ通るのを妨げられないように、幾分か親水性であるのが望ましい。記載した特徴を有する繊維材料であればいずれも細胞トラップ１の材料として使用することができる。層状のナイロンまたはセルロースフィルター材料（ニトロセルロースなど）の完成したパッドまたは細片を使用すると便利である。
　【００２１】
図１に戻ると、サンプル導入膜３は細胞トラップ１の下に位置し、細胞トラップ１と流体連絡している。本明細書において、「流体連絡」は、互いに接触しているが、必ずしも固定している必要はない構造を意味する。好ましくは、サンプル導入膜３は細胞トラップ１よりも多孔性であり、また、細胞トラップ１からの流体の一方向の流動を容易にするために幾分かはより親水性である。あるいは、細胞トラップ１を形成するために使用される材料によってサンプル導入膜３を形成してもよい。
　【００２２】
図１に示すように、サンプル導入膜３は完全に細胞トラップ１のすぐ下に置く。しかし、図１の試験片の構造全体が記載されていると、当業者であれば、サンプル導入膜３は、細胞トラップ１のすぐ下に、試薬含浸膜２０に向かう流動方向に対して斜めに置き得ることが認識される。本発明装置の全ての態様において、サンプル導入膜３および細胞トラップ１は、流体連絡の状態にあるべきである。
　【００２３】
サンプル導入膜３が細胞トラップ１よりも高度な多孔性を有する別の材料である場合は、吸収性、多孔性、吸湿性または他のどんな親水性材料も膜の形成に使用することかできる。そのような材料の例は周知であり、堅く織った紙、ニトロセルロース、繊維ガラスおよび多孔性プラスチック（高分子量ポリプロピレンおよびアクリロニトリルなど）が挙げられる。好ましくは、選択される材料の多孔性が、２、３秒で約２０〜４０μｌの血液の流体成分を吸収するのに十分であるようにする。本発明の試験片を使用する方法に関して後にさらに記載するように、好ましくは、アッセイ中にサンプル導入膜３の近接端に緩衝液を載せて、比較的少量の被分析物サンプルが試験片の種々の膜を進むのを助ける。このために、緩衝液ゾーン１３を図１に幻影で示す。
　【００２４】
理解されるように、緩衝液は、本発明の装置を使用して行うことができる全てのアッセイの実施に重要というわけではない。すなわち、全ての流体流動を、試験サンプルから得られる液体によって付与することもできる。しかし、緩衝液を使用すると、一般に、必要な試験サンプルの量が最少になり、アッセイをより速く完了することができる。
　【００２５】
サンプル導入膜３は、染料含浸膜１５と流体連絡している。特に、１種以上の標識リガンド（例えば、抗体または抗原）は、可溶アミノシランまたは当業者に周知の他の適する結合手段の使用によって、多孔性、吸収性または吸湿性膜に結合する。好ましい膜材料は、例えばＬｙｄａｌｌ，Ｉｎｃ．から”ＭＡＮＮＩＷＥＢ”または”ＭＡＮＮＩＧＬＡＳ”の商品名で市販されているような繊維ガラスである。他の適する材料としては、ポリエチレンまたはニトロセルロースのパッドおよび細片が挙げられ、これらの材料にリガンドを結合させる手段は周知である。あるいは、染料含浸膜１５が、サンプル導入膜３の一部であってもよい。しかし、標識したリガンドのサンプル導入膜３への逆流を最少にするために、染料含浸膜１５は別個の構造体であるのが好ましく、最も好ましくは、一般に、下記に記載する試薬含浸膜の方向に配向した繊維を含む繊維材料（上述した繊維ガラスなど）である。
　【００２６】
標識したリガンドは、周知の手段に従って調製される。視覚的に明らかな反応を生じるために、金属含有ゾルの標識が好ましく、コロイド状の金またはセレンの標識が最も好ましい。適する製品の例としては、Ｊａｎｓｓｅｎ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓから市販されているコロイド状の金がある。これらのコロイド状金属は、さらに試薬を添加することなく、視覚的に特徴的なパターンを生じる。しかし、蛍光体（フルオレセインなど）および酵素（米国特許Ｎｏ．４，２７５，１４９（参考文献として本明細書に含まれている）で特定される酵素など）を使用することもできる。試験サンプルと標識したリガンドとの接触を最大にするために、後者の占める領域（試験ゾーン２１および対照ゾーン２２）は、その膜の一方の側から他方の側に伸びるのが好ましい。
　【００２７】
第一の固定化リガンドは、試験ゾーン２１（染料含浸膜１５に近接して置かれる）の試薬含浸膜２０上で固定化される。これが、サンプル試験領域の位置となる。試薬含浸膜２０は好ましくは、試験片の寿命および試験で生じる視覚的反応の明確さを高めるためにゼラチンで被覆した多孔性細片である。第一の固定化リガンドは、周知の手段、例えば共有結合または不溶タンパク質被覆表面への付着など（例えば、米国特許Ｎｏ．４，２００，６９０（参考文献として本明細書に含まれている）参照）によって試薬含浸膜２０に固定して結合させることができる。
　【００２８】
好ましくは、第一の固定化リガンドが占める領域は、試験ゾーン２１において試薬含浸膜２０の端から端に伸びた棒または楕円形の形を有する。棒などの単純で、一方向の配置を使用することにより、より複雑な形（「＋」または「−」など）が特定の結果を示すために十分形成されているかどうかを調べる必要性が回避される。さらに、簡単な形状を使用することにより、立ち上がり縁効果の影響が克服され、結果の視覚的解釈がより容易になる。
　【００２９】
第二の固定化リガンドは、染料含浸膜１５に遠い対照ゾーン２２に位置する。第二の固定化リガンドは、標識したリガンドの少なくとも一つに対して特異的な親和性を有するべきである。第二の固定化リガンドの固定化は、上記の第一の固定化リガンドに関して記載した方法と同様にして行うことができる。比較を容易にするために、対照ゾーン２２の形状および向きは、試験ゾーンの形状および向きと同様にすべきである。当業者であれば理解されるように、試薬含浸膜２０上の試験ゾーン２１および対照ゾーン２２の位置を逆にして、前者が染料含浸膜１５に遠く、後者が近接するようにしてもよい。
　【００３０】
吸収性パッド２３は、試薬含浸膜２０と流体連絡し、過剰の流体の貯臓器として、および試薬含浸膜２０に沿った一方向流体流を付与するためのポンプとして作用する。後者のためには、吸収性パッド２３が好ましくは、試薬含浸膜２０とその対照ゾーン２２に遠い端で重複する。。当業者であれば理解されるように、本発明のいくつかの態様は、吸収性パッドを含まなくてもよい。その機能は、例えば、試薬含浸膜２０の末端を延ばすことにより満たすことができる。しかし、最適に行うためには、吸収性パッドを含む態様が好ましい。
　【００３１】
試験片の使用に対する指示は、試験片のカバーまたはパッケージに印刷することができ、および／または印刷物に印刷して試験片とともにパッケージする。好ましくは、試験片は、試験片、使用説明書、乾燥剤の包み、試験サンプルを計量するための毛管装置、緩衝液、緩衝液を計量するためのピペットならびに被分析物サンプルを試験片に載せた後に緩衝液および試験片の緩衝液導入ゾーンを入れるカップなどの反応チャンバーで構成されるキットの一部である。アッセイ法を行う際に使用するそのようなキットの構成物品（例えば、印刷された使用説明書は除く）は、好ましくは、１つ以上の密閉したパッケージ（ホイルの包みなど）に入れて密封すべきである。
　【００３２】
３．別の態様：容器の装置あるいは、本発明の試験片に関して記載した成分は全て（カバー５および基板６を除く）、図４に示すように、固体プラスチックのベース２６にしっかり適合する固体プラスチックカバー２５で構成される流体を通さないハウジングに入れることができる。試験サンプルを細胞トラップ１に入れるための穴２７は、カバー２５に置く。好ましい態様では、緩衝液を装置に入れるための穴２８もカバー２５に置く。しかし、試験サンプルおよび緩衝液を同じ穴を通して入れる他の態様も本発明の範囲内である。試薬含浸膜２０を見るための表示穴２９もカバー２５に置く。
　【００３３】
本発明で使用するための特に好ましいカセット設計は、米国特許Ｎｏ．５，３８４，２６４に開示されており、該特許の明細書はその範囲で参考文献として本明細書に含まれている。Ｎｏ．５，３８４，２６４特許および本明細書により構成されるカセット装置を図５の分解図で簡単に示す。これを見ると、ベース２６は明瞭に２つの領域に分かれることが分かる。第一は底面３１、側壁３２およびスロープ３３によって定義される窪み３０である。好ましい態様では、垂直のバー３４（図示していない）がカバー２５から窪み３０にスロープ３３とちょうど隣接して下方に伸びており、染料含浸膜１５がスロープ３３に沿って正しい位置に保持される。
　【００３４】
基板２６の第二の領域は、スロープ３３の上部で始まり、窪み３０に平行に離れて伸びた台３６を形成する拡張表面から成る。好ましくは、流体の溝４０を、過剰の液体用の別の貯臓器として、台３６の近接端に含む。台３６は、スロープ３３から基板２６の長さだけ張り出してもよいし、または、基板２６から離れた端の少し手前で止まって、過剰の液体を集めるための流体の第二の溝４１のための場所を残してもよい。試薬含浸膜は、ほぼ台３６（表示穴２９の向かい合う位置の下）の長さに沿って配置し、吸収性パッド２３は、台３６の離れた端に位置して、流体の溝４１の上に張り出してもよい。乾燥剤の錠剤は流体の溝４１に入れることができる。乾燥剤は、装置の貯蔵期間中の試薬の保存に必要な低い湿度条件を提供する。あるいは、乾燥剤の錠剤または包みを密閉した保護ポーチに入れて装置に含めることもできる。
　【００３５】
４．本発明装置の使用方法試験サンプルは、胎児、新生児、少年少女または成人から得た血液、尿、リンパ液、腹腔内液、粗組織抽出物またはホモジネートなどのいずれかの体液を表すが、好ましくは全毛細血管血または静脈血である。ほとんどの適用に対して、本発明での使用には、約５μｌ〜５０μｌの試験サンプルで十分であり、好ましくは２０μｌ〜３０μｌである。
　【００３６】
本発明の方法は、試験サンプルを本発明に従って構成した装置（試験片またはカセット）の細胞トラップに適用することにより行う。細胞成分を含む（または含む疑いのある）試験サンプルに対しては、細胞画分と非細胞画分との分離に十分な時間、通常は約６０〜１２０秒を与える。上記工程が完了した後、緩衝液を装置の緩衝液ゾーンまたは穴を通して添加する。
　【００３７】
添加する緩衝液の量は、試験サンプルが洗い流されるのを避けるように制限しなければならない。一般に、試験サンプルを試験装置の膜に沿って進めるための使用には、５滴未満（好ましくはたっぷり３滴）の緩衝液で十分である。適する緩衝液としては、試験サンプルまたはその成分と反応しない、薬剤的に許容されうる水性緩衝液が挙げられる。当業者であれば、そのような緩衝液に精通しているだろうし、または容易に確認することができ、例えば、生理的食塩水、リンゲル溶液などが挙げられる。緩衝液は、緩衝液用の穴に滴下することができ（カセット型装置の場合）、または必要体積の緩衝液を反応容器（カップ）に入れた後、試験片の緩衝液ゾーンをその中に漬浸することにより添加する（本発明の試験片の態様の場合）。試験サンプルおよび緩衝液は共に、装置に添加するときは、室温（約１５〜３０℃）にすべきである。
　【００３８】
試験サンプルおよび緩衝液を添加すると、約１０分でに結果を読み取ることができる。緩衝液の使用を必要としない態様では、結果は、試験サンプルの非細胞画分が試験装置の膜を通る流速に応じてよりゆっくり展開すると考えられる。緩衝液を使用しない場合、結果は、バンドが対照ゾーンに現れるのとほぼ同時に読み取られる。バンドが現れない場合、または対照のバンドが明確でないか、完全には形成されない場合、そのアッセイは、試験サンプル中の被分析物の有無を示すことができないとみなし、再び行うべきである。
　【００３９】
特に、サンドイッチ型アッセイでは、試験サンプル中に対象の被分析物があるならば、染料ゾーンで標識リガンドに結合して、第一の複合体を形成する。第一の複合体および未結合の標識リガンドは試験サンプルと混合され、毛管作用（”Ｗｉｃｋｉｎｇ”）によって染料含浸膜（染料ゾーン）から装置の試薬含浸膜に一緒に運ばれる。
　【００４０】
サンプルは試薬含浸膜を通過し、第一の複合体があるならば、試薬含浸膜上に固定化された未標識リガンドと接触して共に結合し、標識リガンド−被分析物−固定化リガンドの第二の複合体を形成する。第二の複合体が形成されると、目に見える色パターンが試験ゾーンに現れる。試験サンプル中の被分析物に結合していない標識リガンドは、ｗｉｃｋｉｎｇによって対照ゾーンに移動し続け、そこで固定化されたリガンドと接触する。標識リガンドは、対照ゾーンで固定化リガンドに結合して第三の複合体を形成し、こうして対照ゾーンに捕獲される。本発明の範囲内では、対照ゾーンで複合体を形成する標識リガンドが第一および第二の複合体を形成する標識リガンドと同じであってもよく、または、異なる標識リガンドであッてもよい。対照ゾーンで固定化されたリガンドは、第三の複合体を形成するための標識リガンドに対して特異的な親和性を有するべきである。第三の複合体の生成は、対照ゾーンでの目に見えるパターンによって示される。
　【００４１】
サンドイッチイムノアッセイ法の他に、他のアッセイ法を本発明の装置で実行することができる。これらの方法としては、競合および阻害アッセイが挙げられる。競合アッセイでは、被分析物および標識リガンドが同じ親和特性を有し、固定化リガンドとの結合に対して競合する。すなわち、被分析物の不在下では、試験ゾーンにおけるパターン（例えば、バンド）の強度が最大である。存在する場合は、被分析物が固定化リガンドに結合し、従って標識リガンドが試験ゾーンに捕獲されるのを防ぐ。すなわち、試験バンドの強度は、試験サンプル中の被分析物の濃度に応じて低下する。
　【００４２】
阻害アッセイでは、試験ゾーンにおける被分析物および固定化リガンドが標識リガンドに対して親和性を有する。被分析物の不在下では、標識リガンドが固定化リガンドによって捕獲され、目に見えるパターンが試験ゾーンに生じる。存在する場合は、被分析物が標識リガンドに結合し、従って、試験ゾーンでの固定化リガンドへの結合が防止される。その結果得られる試験バンドの強度は、試験サンプル中の被分析物の濃度に応じて低下する。
　【００４３】
本発明の範囲内の全てのアッセイ法は、試験結果が２つの様式、すなわち視覚的確認様式および比較様式のうちの一つで読み取れるように設計することができる。視覚的確認様式では、陽性または陰性の結果（ある濃度以上の被分析物の有無）を、試験ゾーンにおけるある種のパターンまたは色の可視性によって求める。対照ゾーンでのパターンは、装置の機能性の内部コントロールとしてのみの役割を果たす。比較様式では、陽性または陰性の結果が、試験ゾーンおよび対照ゾーンで生じたパターンの強度を視覚的に比較することにより得られる。すなわち、後者の場合、対照ゾーンのパターンは、内部定性コントロールとして、および比較様式で結果を読み取るための参照標準としての両方の役割を果たす。
　【００４４】
視覚的確認様式での試験結果の例を図６および図７に示す。この場合、図６に示すように、陽性の結果は、試験ゾーン２１および対照ゾーン２２において同じ水平のバーが生成することにより示される。これに対して、陰性の結果は、図７に示すように、対照ゾーン２２にのみ現れる区別可能な水平バーによって示される。
　【００４５】
他の対照または比較の結果の信号を与えることもでき、例えば、無効結果が得られたかどうかを当業者に周知の同様の手段によって示す信号がある（例えば、欧州特許出願Ｎｏ．８６１１３６７．０（公開公報Ｎｏ．０２１７４０３Ａ２）記載の信号系参照）。本発明は、広範囲の被分析物の検出に用いる装置および方法に適用できる。被分析物の種類の例として、次のものが挙げられる。すなわち、タンパク質およびタンパク質誘導体（抗体、免疫グロブリン、ホルモン、酵素およびペプチドなど）；感染性物質（細菌、ウイルス、真菌類、マイコプラズマ、寄生虫ならびにそれらの産物および成分など）；薬物（治療薬および乱用薬物など）；および腫瘍マーカーである。特定の例としては、ＨＩＶに対する抗体、Ｈ．Ｐｙｌｏｒｉに対する抗体、Ｃ型肝炎ウイルスに対する抗体、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、エストラジオール、甲状腺刺激ホルモン、前立腺特異抗原、Ｂ型肝炎表面抗原、ミオグロビンおよび免疫グロブリンＥが挙げられる。
　【００４６】
　【実施例】
本発明を説明する実施例を以下に示すが、以下の実施例は本発明の範囲を制限するものではなく、本発明は特許請求の範囲によって定義される。実施例では、標準的略号（例えば、時間は「ｈ」）および測定単位（例えば、ミリリットルは「ｍｌ」）を使用する。
　【００４７】
実施例１
ヒト血液中の抗−細菌抗体の検出
全毛細血管血の試験サンプルを、指先に針を刺すことによる従来の試料収集法を使用してヒト成人から得た。約２０μｌの血液を、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉに対するヒト抗体の全てのイソタイプと反応性のある（Ｈ．ｐｙｌｏｒｉの）ポリエピトープ微生物抗原試薬を含むように本発明に従って構成した試験片の細胞トラップの表面と直接接触させることにより添加した。９０秒後、たっぷり３滴の緩衝液（生理的食塩水）を、３滴の緩衝液を含むカップに試験片を浸すことにより、試験片の緩衝液ゾーンに添加した。試験片に添加した試験サンプルおよび緩衝液の添加時の温度は共に、約１５〜３０℃であった。
　【００４８】
緩衝液を添加した後、試験片を、緩衝液のカップに１０分間、室温で放置した。
着色した２つのバンドが試験片の検出ゾーンおよび対照ゾーンに認められた。これは、試験サンプル中の抗−Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ抗体に対して陽性（検出ゾーンにおける着色バンドの出現によって示される）であることを示す適正な試験（対照ゾーンにおける対照バンドの出現によって示される）である。次いで、試験片および未使用の試験サンプルを、従来の生物学的廃棄物処理法に従って処分した。
　【００４９】
実施例２
全血中の前立腺特異抗原の検出
全静脈血の試験サンプルを、従来の血液試料収集法、すなわち脈管内注射器を使用して、ヒト成人から得た。約２０μｌの試験サンプルを、ヒト前立腺特異抗原に対して特異的なモノクローナル抗体試薬を含むように本発明に従って構成した容器装置の細胞トラップ上にピペットで添加した。９０秒後、たっぷり３滴の緩衝液（生理的食塩水）を、ピペットによって細胞トラップに滴下した。試験片に添加した試験サンプルおよび緩衝液の添加時の温度は共に、約１５〜３０℃であった。
　【００５０】
緩衝液を添加した後、装置を、平らで水平な表面上に１０分間、室温で放置した。着色した２つのバンドが試験片の検出ゾーンおよび対照ゾーンに認められた。これは、試験サンプル中のヒト前立腺特異抗原に対して陽性（検出ゾーンにおける着色バンドの出現によって示される）であることを示す適正な試験（対照ゾーンにおける対照バンドの出現によって示される）である。次いで、装置および未使用の試験サンプルを、従来の生物学的廃棄物処理法に従って処分した。
　【００５１】
本発明を十分に記載したが、記載した態様に対する改変は、当業者にとって明らかになるであろう。そのような改変は全て、本発明の一部であり、特許請求の範囲内であるとみなされる。
【図面の簡単な説明】
　【図１】
本発明の試験片の分解図である。
　【図２】
本発明の試験片の斜視図である。
　【図３】
細胞トラップ１を含む層を通る図１の３−３で切断した拡大断面図である。
　【図４】
本発明のカセット装置の斜視図である。
　【図５】
本発明のカセット装置の分解図である。
　【図６】
サンプル中の被分析物の存在に対して試験ゾーンに視覚的結果を示す、本発明の試験片（カバーはない）の斜視図である。
　【図７】
サンプル中の被分析物の存在に対して試験ゾーンに別の視覚的結果を示す、本発明の試験片（カバーはない）の斜視図である。図において、同じ番号は同じ要素を示す。
　【符号の説明】
　１　細胞トラップ
　３　サンプル導入膜
　４　窓
　５　カバー
　６　基板
　１５　染料含浸膜
　２０　試薬含浸膜
　２１　試験ゾーン
　２２　対照ゾーン
　２３　吸収性パッド
　４０　流体の溝