【事件の表示】
　特願２００２−１０９１２６「カッサバのプロトプラストを生産し形質転換させる方法」拒絶査定不服審判事件〔平成１５年　４月　２日出願公開、特開２００３−　９２９３８〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
第１　手続の経緯
　本願は、平成１４年（２００２年）４月１１日を国際出願日（パリ条約による優先権主張外国庁受理２００１年４月１１日　米国）とする出願であって、その請求項１に係る発明は、平成２２年４月１３日付け手続補正書により補正された明細書の記載からみて、その特許請求の範囲の請求項１に記載された以下のとおりのものである。
　
「【請求項１】　少なくとも９０（質量）％のアミロペクチン含有量を有する、天然のアミロペクチンカッサバ澱粉。」（以下、「本願発明」という。）
　
第２　引用例
１．原査定の拒絶の理由で引用例３として引用された本願優先日前に頒布された刊行物であるPlant Mol. Biol. (1993) vol. 23, p. 947-962（以下、「引用例３」という。）には、以下の事項が記載されている（下線は当審において付与した。）。
　
ア．「カッサバの塊茎特異的cDNAライブラリーが構築され、貯蔵澱粉中のアミロースの合成を担う酵素である顆粒結合型澱粉合成酵素（ワキシータンパク質としても知られているGBSS）の完全長cDNAがクローニングされた。・・・馬鈴薯GBSSプロモーターとノパリンシンターゼターミネーターの間にアンチセンス方向に結合されたカッサバGBSS cDNAで馬鈴薯植物は形質転換された。これらの形質転換された馬鈴薯植物中の内生のGBSS遺伝子の発現は、部分的または完全に阻害された。
カッサバアンチセンス遺伝子によるGBSS活性の完全な阻害は、ほぼ完全にアミロースを含まない馬鈴薯澱粉を生じさせる、GBSS蛋白とアミロースの不存在をもたらした
　
イ．「イントロダクション
　澱粉顆粒は通常、α−グルコース単位がα（１−４）結合した直鎖（アミロース）及びα（１−６）結合により架橋されたアミロースの分岐型（アミロペクチン）から構成されている。」（948頁1行〜8行）
　
ウ．「図１　カッサバ顆粒結合型澱粉合成酵素（GBSS）cDNAクローンG61の制限酵素地図及びセンス及びアンチセンスGBSS遺伝子の構築。
　まず、G61の0.6kb Sph I-Bam HI3'フラグメントを馬鈴薯GBSSプロモーター及びノパリンシンターゼターミネーターの間にクローニングした。残るG61の1.5kbの5'フラグメントのスタートコドンにわたって、Sph I部位が創出され、その後、センス及びアンチセンス方向にSph I部位を適合させて、それぞれpG61及びpAG61を作製した。」（950頁図１の説明）
　
エ．「カッサバにおいて、有効な再生方法が使用可能であり、形質転換方法の開発が当研究室で進行中である。
したがって、異種（馬鈴薯）の背景でのこれらの結果を得たことにより、カッサバにおいて同様の結果を得るための全ての本質的な要件が満たされている
　
オ．図３には、カッサバGBSS　cDNA　G61の核酸配列が記載されている。
　
　上記引用例３の記載からみて、引用例３には、「カッサバのアンチセンスGBSS遺伝子により形質転換された馬鈴薯から得られた、ほぼ完全にアミロースを含まない馬鈴薯澱粉」の発明が記載されている。（以下、「引用発明３」という。）
　
２．原査定の拒絶の理由で引用例２として引用された本願優先日前に頒布された刊行物であるEuphytica (1997) vol. 96, p. 65-75（以下、「引用例２」という。）には、以下の事項が記載されている（下線は当審において付与した。）。
　
ア．「カッサバ澱粉の生合成に関与する主要酵素をコードする遺伝子がクローニングされて特徴付けられた。これらの遺伝子の分子解析は、澱粉を形成する植物種からの他のクローニングされた遺伝子との高いアミノ酸配列ホモロジーを示した。カッサバにおける澱粉生合成の経路を変更するためにこれらの遺伝子を使用することは、
カッサバのための再現し得る形質転換および再生プロトコルの出現で可能になった。これは、異なる物理化学的特性及び用途を持つ澱粉を作り得る新しいカッサバ変種植物の開発を可能にするであろう
　
イ．「カッサバ澱粉構造の改良
　カッサバにおいて、澱粉構造の変化は、関与する酵素、特にBE及びGBSSの活性を低減させることによってもたらすことができる。これは、澱粉における分枝度と同様にアミロース／アミロペクチンの比をかなり変えるであろう。・・・澱粉構造における遺伝的な変更は澱粉蓄積性の他の植物において報告されている。
カッサバGBSSI遺伝子が、野生型の馬鈴薯中にアンチセンスで導入されると、低下したレベルで澱粉及び、場合によっては完全にアミロースを含まない馬鈴薯澱粉の産生に至った
カッサバでは、アミロースを含まないの変種または突然変異体は今のところ利用可能ではない
それ故に、GBSSIIと同様にGBSSIが、カッサバにおいてそのような植物を製造するのに理想的であるだろう
ある範囲のアミロースを有する植物は、アンチセンス法を用いて製造されているようである
クローニングされ、特徴付けられたカッサバ澱粉遺伝子が利用可能となったことは、カッサバ澱粉の組成及び構造を変更するための新しい道筋を開いた。ある範囲の物理化学的特性および用途を有する澱粉を持つ新しいカッサバ栽培変種の開発は、再現性のある形質転換および再生方法が利用可能となったことでさらに促進される
　
３．原査定の拒絶の理由で引用例１として引用された本願優先日前の２０００年８月２２日に頒布された刊行物である特表２０００−５１０７０７号公報（以下、「引用例１」という。）には、以下の事項が記載されている（下線は当審において付与した。）。
　
ア．「1.  カッサバ又は極関連した種の、植物に再生可能のプロトプラストを生産するための方法であって、
  カッサバ又は極関連した種の移植片からフライアブル胚形成カルスを生産すること、及び
  前記フライアブル胚形成カルスからプロトプラストを分離すること、
を含む方法。・・・
7.  請求項1から6のいずれか1の方法により得られるプロトプラスト。
8.  カッサバ又は極関連した種のプロトプラストを形質転換するための方法であって、
  アグロバクテリウム・ツメファシエンスのような付加的な遺伝子情報を含むバクテリウムによる感染を介するか、前記付加的な遺伝子情報を含むベクターを与える電気穿孔法又は化学的穿孔法によるか、又は、粒子が前記付加的な遺伝子情報をコーティングされる粒子射突法により、前記付加的な遺伝子情報をもつ前記プロトプラストを与える工程、
を含み、
  請求項7のプロトプラストが形質転換される、ところの方法。
9.  請求項8の方法により得られる形質転換したプロトプラスト。・・・
11．付加的な遺伝子情報がアンチセンス構造を含む、請求項9の形質転換したプロトプラスト。
12．アンチセンス構造が、アミローゼ合成経路を示すことができる、請求項11の形質転換したプロトプラスト。・・・
14．請求項13の方法によって得られる、カッサバ植物又はその極関連した種。
15．
その塊茎が本質的にアミローゼを全く含まない、請求項12のプロトプラストから得られる請求項14の植物
　
イ．「プロトプラストからの植物の再生
プロトプラストの分離
  プロトプラストの分離のために、固体ＧＤ2又は液体ＳＨ6のどちらで培養したＦＥＣでも使用することができる。しかし、プロトプラストの最高収率は、液体ＳＨ6で1〜3週間培養したＦＥＣより得ることができた。
  2グラムのＦＥＣが、細胞壁消化溶液10ｍｌを入れたペトリ皿（Φ9ｃｍ）に置かれた。細胞壁消化溶液は、細胞壁分解酵素；10ｍｇ/ｌペクトリアーゼ、10g/lのセルラーゼ、200ｍｇ/ｌのマクロ酵素(machroenzyme)、成長調節物質（ＮＡＡ 1ｍｇ/ｌ）2,4-Ｄ 1ｍｇ/ｌ）ゼアチン1ｍｇ/ｌ）；メジャーソルト(major salts)（368ｍｇ/ｌ ＣａＣｌ2、34ｍｇ/ｌのＫＨ2ＰＯ4、740ｍｇ/ｌのＫＮＯ3、492ｍｇ/ｌのＭｇＳＯ4.7Ｈ2Ｏ）；マイナーソルト(minor salts)（19.2ｍｇ/ｌのＮＡ-ＥＤＴＡ、14ｍｇ/ｌのＦｅＳＯ4.7Ｈ2Ｏ）及びオスモチカム（91g/lのＤ-マンニトール）、並びに0.5g/lのＭＥＳの混合物を含む。細胞壁分解酵素セルラーゼ（1-10g/l）にマセロザイム（200ｍｇ/ｌ）を加えたものが、プロトプラストの分離に成功した。ペクトリアーゼ（0.001-0.011g/l）及び／又はドリセラーゼ（0.02g/l）をさらに添加すると、プロトプラストの収率が高くなった。18時間のインキュベーション後、溶液に10ｍｌの洗浄媒体（washing medium）が添加された。0.530ｍＯｓｍ/ｇのオスモル濃度である洗浄媒体は、メジャーソルト（細胞壁消化溶液参照）、45.5g/lのマンニトール及び7.3g/lのＮａＣｌを含む。消化された組織は、73μＭ孔径のフィルター（ＰＡ55/34Nybolt-Switzerland）を通して、250ｍｌビーカーガラスの中にろ過された。ろ液は等しく２つの12ｍｌ円すいスクリューに分けられ、600ｒｐｍで3分間遠心された（Mistral2000）。洗浄手順は、上澄みの除去後、もう一度繰り返された。プロトプラスト溶液は、メジャー及びマイナーソルト（細胞壁消化溶液参照）及び105g/lスクロースを含む9.5ｍｌの溶液に浮かべられて再懸濁された。ｐＨは5.8であり、オスモル濃度は0.650ｍＯｓｍであった。プロトプラストを含んだ溶液は、0.5ｍｌの洗浄媒体を静かに頂部に添加する前に、5分間平衡をとることができた。700ｒｐｍで15分間遠心すると（Mistral2000）、プロトプラストは、スクロースと洗浄媒体の間のバンドに集められた。プロトプラストの層を、パスツール・ピペットで回収し、収率は、標準的なヘモサイトメーター・チェンバ(haemocytometer chamber)で計算された。
　
プロトプラスト培養
  プロトプラストは、アガロース0.2％w/v（0.1-10ｍｇ/ｌ）（Dons en Bouwer,1986）で凝固され、10ｍｌの同様の液体培地を含む媒体で、ペトリ皿において培養された。次の媒体が、微小なカルスを形成した：
  ＴＭ2Ｇ培地（Wolters et al.,1991）は、オーキシン（0.1-10ｍｇ/ｌのＮＡＡ若しくは0.1-10ｍｇ/ｌのピクロラム、又は0.1-10ｍｇ/ｌのＩＡＡ、又は0.1-10ｍｇ/ｌの2,4-Ｄ)又は0.1-10ｍｇ/ｌのダイカンバ（dicamba）又は0.1-10ｍｇ/ｌ、又は0.1-10ｍｇ/ｌ）のみを補充するか、又はオーキシンにサイトカイニン（0.01-1ｍｇ/ｌゼアチン、0.01-1ｍｇ/ｌの2-iP、0.01-1ｍｇ/ｌＢＡ、0.01-1ｍｇ/ｌ ＴＤＺ、0.01-1ｍｇ/ｌカイネチン）を加えたものを補充したものである。
  培地Ａ（Murashige and Skoog(1962)ソルト及びビタミン、4.5g/lミオ・イノシトール、4.55g/lマンニトール、3.8g/lキシリトール、4.55g/lソルシトール、0.098g/l ＭＥＳ、40ｍｇ/ｌアデニン硫酸塩及び150ｍｇ/ｌカゼイン加水分解塩（caseinhydrolysate）、0.5ｍｇ/ｌ d-カルシウム-パントテナート（d-calcium-panthotcnate）、0.1ｍｇ/ｌ塩化コリン、0.5ｍｇ/ｌアスコルビン酸、2.5ｍｇ/ｌニコチン酸、1ｍｇ/ｌピリドキシン-ＨＣｌ、10ｍｇ/ｌチアミン-ＨＣｌ、0.5ｍｇ/ｌ葉酸、0.05ｍｇ/ｌビオチン、0.5ｍｇ/ｌグリシン、0.1ｍｇ/ｌ Ｌ-システイン及び0.25ｍｇ/ｌリボフラビン及び59.40g/lグルコース）は、オーキシン（0.1-10ｍｇ/ｌ ＮＡＡ若しくは0.1-10ｍｇ/ｌピクロラム、又は0.1-10ｍｇ/ｌ ＩＡＡ、又は0.1-10ｍｇ/ｌ 2,4-Ｄ、又は0.1-10ｍｇ/ｌダイカンバ（dicamba））のみを補充するか、又はオーキシンにサイトカイニン（0.01-1ｍｇ/ｌゼアチン、0.01-1ｍｇ/ｌ 2-iP、0.01-1ｍｇ/ｌ ＢＡ、0.01-1ｍｇ/ｌ ＴＤＺ、0.01-1ｍｇ/ｌカイネチン）を加えたものを補充したものである。
  媒体は10日毎に、9ｍｌの新しい培地と交換することにより、新しくされた。最初の培地における培養から2ヶ月後、高品質のＦＥＣが選択され、さらなる増殖のためか、又は成熟のために培養された。増殖のために、ＦＥＣは、40g/lのスクロース、7g/lのダイシン-アガー（Daichin-agar）及び2ｍｇ/ｌのピクロラムが補われたGresshoff and Doy（1974）の培地（ＧＤ4）に移された。3週間後、ＦＥＣは、20g/lのスクロース、7g/lのアガー及び10ｍｇ/ｌのピクロラムが補われたGresshoff and Doy（1974）の培地（ＧＤ2）に移された。1.0gのＦＥＣを、10ｍｇ/ｌのピクロラムが補われた液体ＳＨ6％培地に移すことにより、浮遊培養が開始された。2週間後、最初のパックされた細胞の量（packed cell volume）を1.0ｍｌにして、懸濁液が新しいフラスコに分けられた。
  培養2ヶ月後、106/ｍｌの密度で培養されたプロトプラストは、64ミクロ−カリ（micro-calli）のみを生成するにすぎないが、0.5ｍｇ/ｌのＮＡＡ及び1ｍｇ/ｌのゼアチンを補われた105/ｍｌの密度のＴＭ2Ｇで培養された104プロトプラストは、1058ミクロ-カリ（micro-calli）を生成した。ＴＭ2Ｇ培地を培地Ａと置き換えると、どちらの密度においても、ミクロ-カリ（micro-calli）の数は著しく減少した。この段階において、少なくとも3タイプのカリを識別することができた。1つの型は、密度106で培養されたプロトプラストに、最も多く観察される、球状胚から成った。それらのいくつかは、明るい緑色の、構造（structures）のように発達した子葉であった。しかし、これらの胚は、正しく発芽することができなかった。もう１つの型は、早く生長し、大きく密集したカルスであり、このカルスは、どちらの密度で培養したプロトプラストにも観察された。第３の型は、どちらの密度でも観察された非常にもろいカルスであった。密度2-5×105（ＴＭ2Ｇ培地）において、約60％のカリがもろく、胚が形成された。ＦＥＣは、さらなる増殖のためか、又は成熟のために継代培養された。
　
プロトプラストに由来したＦＥＣの増殖
  次のＦＥＣの選択で、2ｍｇ/ｌピクトラムを加えたＧＤ4上で培養された0.1gのＦＥＣは、３週間後、0.7gの組織へと増殖した。組織の95％以上が、高品質のＦＥＣから成った。次にこの組織は、10ｍｇ/ｌピクトラムを加えたＧＤ2上での継代培養により、３週間維持された。浮遊培養を開始するために、ＦＥＣが液体培地へと移された。この物質のパックされた細胞量（ＰＣＶ）の増加は、元の物質のＰＣＶ（データは示していない）よりも、やや高かった。
　
プロトプラストに由来したＦＥＣの成熟
  胚の成熟を誘導する試みでは、ＴＭ2Ｇで２ヶ月培養した後に分離されたＦＥＣが、成熟培地で培養された。成熟培地は、Murashige and Skoog(1962)ソルト及びビタミン、0.1g/lのミオ・イノシトール、20g/lのスクロース、18.2g/lのマンニトール、0.48g/lのＭＥＳ、0.1ｍｇ/ｌのカゼイン加水分解塩（caseinhydrolysate）、0.08g/lのアデニン硫酸塩、0.5ｍｇ/ｌのd-カルシウム−パントテナート（d-calcium-panthotenate）、0.１ｍｇ/ｌの塩化コリン、０.5ｍｇ/ｌのアスコルビン酸、2.ｍｇ/ｌのニコチン酸、１ｍｇ/ｌのピリドキシン-ＨＣｌ、10ｍｇ/ｌのチアミン-ＨＣｌ、0.5ｍｇ/ｌの葉酸、0.05ｍｇ/ｌのビオチン、0.5ｍｇ/ｌのグリシン、0.1ｍｇ/ｌのＬ-システイン、0.25ｍｇ/ｌのリボフラビン及び1ｍｇ/ｌのピクロラムを含んだ。この成熟培地は３週間毎に新しい培地と交換された。
  この培地上で、増殖から成熟へのゆるやかなシフトがあった。結果として、パックされた細胞量は、液体成熟培地において２週間培養した後、ファクター４（factor4）と共に増加した。固体成熟培地移した後も、増殖はある。固体培地上で２週間後、ほとんどの胚は球状型に達し、これらの球状胚のわずかなものだけが、さらに発達した。固体成熟培地で１月培養すると、一次魚雷型胚が見られるようになった。成熟胚及び魚雷型胚の数は、コロニー形成率に関連していないが、最初に培養されたプロトプラストの密度と関連していた。このような胚は、プロトプラストが成長調節物質なしにＴＭ2Ｇ上で培養されたならば、得ることができなかった。成熟胚及び魚雷型胚の最大数は、0.5ｍｇ/ｌのＮＡＡ及び1ｍｇ/ｌのゼアチンを補ったＴＭ2Ｇ上で培養したプロトプラストから形成された。ＮＡＡをピクロラムで置き換えると、魚雷型胚と成熟胚の数は、著しく低くなった（表２）。テストされたピクロラム濃度2ｍｇ/ｌのものから、最良の結果が得られた。培養３ヶ月後、アガロース１滴当たり60から200の間の魚雷型胚及び成熟胚が分離された。魚雷型胚は、新しい成熟培地、又は0.1ｍｇ/ｌのＢＡＰを加えたＭＳ2で培養されると、高頻度で成熟胚になった。
　
二次胚不定胚形成及びプロトプラストに由来した成熟胚の再生
  10ｍｇ/ｌのＮＡＡ又は8ｍｇ/ｌの2,4-Ｄを補った液体又は固体ＭＳ2培地で培養すると、わずかな魚雷型胚のみが、二次胚を形成した（データは示していない）。成熟胚は、二次胚形成によりよく移植された。液体及び固体培地の両方において、二次胚の誘導のためには、ＮＡＡと比較して、2,4-Ｄが優れていた。成熟胚が第一に2,4-Ｄで培養され、次に液体ＮＡＡで培養されると、応答は2,4-Ｄ単独の培養と比較することができる。第一に2,4-Ｄを含む培地において二次胚形成のサイクルを経ている胚もまた、10ｍｇ/ｌのＮＡＡを補ったＭＳ20において、高い効率で二次胚を生成する。
  液体培地において、オーキシン2,4-Ｄジクロロフェノキシ酢酸（2,4-Ｄ）又はナフタレン酢酸（ＮＡＡ）により誘導された循環的（cyclic）又は二次胚の発芽が比較された。すべての遺伝子型において、乾燥は、胚に誘導されたＮＡＡの正常な発芽を刺激する。しかし、乾燥された胚では、高頻度の発芽のために、ベンジルアミノプリン（ＢＡＰ）のようなサイトカイニンを補った培地が必要とされた。結果としてできた実生の形態は、ＢＡＰの濃度に依存した。1ｍｇ/ｌのＢＡＰでは、厚く短い主根及び短い節間をもつ枝分かれした苗条が生長した。0.1ｍｇ/ｌのＢＡＰでは、主根は薄くて細く、苗条は１つ又は２つのみの先端分裂組織を有していた。胚が部分最適に（sub-optimally）乾燥されると、胚が発芽を刺激されるように最適に乾燥された場合よりも、より高い濃度のＢＡＰが必要とされた。暗室で培養された、乾燥された胚は、より低い濃度のＢＡＰを必要とし、さらに、これらの胚は、明室で培養された胚よりも早く発芽した。不定胚誘導の開始から４週間後に、完全な植物体が得られた。」（13頁14行〜18頁13行）
　
ウ．「4.0遺伝子移植システム
  過去何年もの間、シリコンファイバー法（Kaepplerら（1990））、ミクロ注入法（DeLaat及びBlaas（1987））及び電気泳動法（Griesbach及びHammond（1993））といった、ＤＮＡを植物プロトプラストヘ導入する様々な技術が開発されてきた。最も共通的に使用され且つ潜在的に応用可能なものは、アグロバクテリウム培養遺伝子導入法、ミクロ射出／粒子射突法及びプロトプラスト電気穿孔法である。・・・粒子射突法又はバイオリスチック（biolistic）を外来ＤＮＡの導入に使用すると、カッサバ形質転換の変形的な方法を与える。」（18頁18行〜19頁下から8行）
　
第３　対比
　本願発明と引用発明３を対比する。
　引用例３の記載事項イによれば、澱粉はアミロースとアミロペクチンから構成されるものであるところ、引用発明３の澱粉はほぼ完全にアミロースを含まないものであるから、高含有量でアミロペクチンを含有するアミロペクチン澱粉であるといえる。
　また、本願発明における「天然の」という記載は、本願明細書の段落【００８８】の「したがって本発明はさらに、天然および誘導体化されたアミロペクチンカッサバ（タピオカ）澱粉、ならびにかかる澱粉を含有する組成物を含むことを意図するものである。」及び、段落【００９３】の「このような天然澱粉は、化学的修飾をすることなく所望の機能性を達成できるという追加の利点を持っている。」という記載からみて、澱粉が化学的修飾されていないことを意味すると解することができる。そうすると、引用発明３の澱粉は化学的修飾されていないものであり、「天然の」澱粉であるといえる。
　よって、両者は、高含有量でアミロペクチンを含有する、天然のアミロペクチン澱粉である点で一致し、本願発明はカッサバ澱粉であって、少なくとも９０（質量）％のアミロペクチン含有量を有するものであるのに対し、引用発明３は馬鈴薯澱粉であって、アミロペクチン含有量は特定されていない点で相違する。
　
　ここで、本願明細書の段落【００６０】〜【００６８】の記載からみて、本願発明は、カッサバのアンチセンスGBSS遺伝子により形質転換されたカッサバから得られた澱粉であるところ、引用発明３は、カッサバのアンチセンスGBSS遺伝子により形質転換された馬鈴薯から得られた澱粉であることから、上記相違点は、澱粉の由来の形質転換植物が異なることに起因するものであるといえる。
　
第４　当審の判断
１．判断
　引用例１の記載事項ア、引用例２の記載事項イ及び、引用例３の記載事項エに示されるように、カッサバにおいて、アミロースを含まないアミロペクチン澱粉を産生させることは、本願優先日前既に周知の課題であって、引用例２の記載事項イ及び引用例３の記載事項エには、アンチセンスGBSS遺伝子で形質転換することにより、GBSS活性が阻害されたカッサバに、アミロース含有量が低下したアミロペクチン澱粉を産生させることが可能となったことが記載されている。
　このような記載に接した当業者であれば、引用発明３の、ほぼ完全にアミロースを含まないアミロペクチン馬鈴薯澱粉に代えて、アンチセンスGBSS遺伝子で形質転換する植物として、カッサバを用いて、アミロペクチンカッサバ澱粉を得ることは、自然な発想である。
　一方、引用例１には、アンチセンス構造を含む遺伝子を用いて形質転換された、その塊茎がアミロースを含まないカッサバ植物を作出するにあたり、カッサバのプロトプラストの分離、培養、増殖、成熟、植物体への再生における手順や培地などの詳細な条件が記載されており（記載事項イ）、DNAをプロトプラストに導入する方法が記載されている（記載事項ウ）。さらに、本願優先日前、カッサバの形質転換植物を作出し、異種由来の遺伝子を発現させることは、周知技術であった（拒絶査定において周知技術を示すために引用された刊行物１「Mol. Breed. (1996) vol. 2, p. 339-349」、刊行物２「Euphytica (1997) vol. 96, p. 153-161」及び刊行物３「Plant Sci. (1998) vol. 135, p. 87-101」参照）。
　このような本願優先日前の技術水準の下、カッサバのアンチセンスGBSS遺伝子を用いて、GBSS活性が阻害された形質転換カッサバを作出し、当該カッサバから、ほぼ完全にアミロースを含まない天然のアミロペクチンカッサバ澱粉を取得することは、当業者が容易になし得ることであり、そのようにして得られたアミロペクチンカッサバ澱粉は、少なくとも９０質量％のアミロペクチン含有量を有するものである。
　
　そして、本願発明において奏される効果が、引用例１〜３の記載から予測できない程の格別なものとはいえない。
　以上のとおりであるから、本願発明は、引用例１〜３に記載された発明に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものである。
　
２．審判請求人の主張
（１）審判請求人は、平成２３年３月２日付け審判請求書及び同年８月２４日付け上申書において、以下の点を主張する。
主張ア：引用例１〜３には、高いレベルのアミロペクチンを有するカッサバ澱粉を含む形質転換されたカッサバ植物を得たことが具体的に記載されておらず、また、当業者が実施するのに必要な詳細な情報が開示されていないため、引用例１〜３の記載に基づいて、当業者が、高レベルのアミロペクチンを有するカッサバ澱粉を含むカッサバ植物を得ることは困難である。
　
主張イ：参考資料１（Plant Science. 98 (1994) p. 53-62）において「その培養されたカッサバ植物の異なる組織、および温室で生長した植物の塊根における澱粉中のアミロース含有量が、13.0〜14.3%であった」（59頁Table 1参照）旨の記載があるように、GBSSの分離程度では、高レベルのアミロペクチンを有するカッサバ澱粉を含む形質転換カッサバ植物を作製することが困難であると本願優先日前に当業者に理解されていた。
　
主張ウ：拒絶査定において、周知技術を示すために引用された刊行物１〜３には、本願発明のようにアミロペクチン澱粉をもたらすGBSS遺伝子を用いることが記載されておらず、形質転換カッサバを得るための方法論が記載されているに過ぎない。当業者には、単に方法論を持つだけでは不十分であって、その方法論が対象の遺伝子に応じて異なるように使用され得るものでなければならない。具体的には、本願ではアミロペクチン澱粉をもたらすGBSS遺伝子自体と共に、GBSS遺伝子を運ぶプラスミドもユニークなものであるのに対して、刊行物１〜３には、形質転換をGBSS遺伝子の使用が可能なものにするのに必要な遺伝子のコピーの数やプロモーターのタイプなどのパラメータ等に関する詳細な情報の記載もない。
　
（２）上記主張について検討する。
主張アについて
　上記１．で述べたように、引用例１には、アンチセンス構造を含む遺伝子を用いて形質転換された、その塊茎がアミロースを含まないカッサバ植物を作出するにあたり、カッサバのプロトプラストの分離、培養、増殖、成熟、植物体への再生における手順や培地などの詳細な条件が記載されており（記載事項イ）、DNAをプロトプラストに導入する方法が記載されている（記載事項ウ）。さらに、本願優先日前、カッサバの形質転換植物を作出し、異種由来の遺伝子を発現させることは周知技術であったことを考慮すれば（刊行物１〜３参照）、アンチセンスGBSS遺伝子を用いてカッサバを形質転換し、高レベルのアミロペクチンを有するカッサバ澱粉を含むカッサバ植物を作出することは、当業者が容易になし得たことである。
　よって、審判請求人の当該主張は採用できない。
　
主張イについて
　参考資料１において、請求人が指摘した表１の記載は、インビトロ培養したカッサバの異なった器官及び温室栽培したカッサバの塊根におけるアミロース含有量を示したものであって（表１の説明参照）、これらのカッサバは、形質転換されたものではない。
　よって、参考資料１は、高レベルのアミロペクチンを有するカッサバ澱粉を含む形質転換カッサバ植物を作製することが困難であることを示すものではないから、審判請求人の当該主張は採用できない。
　
主張ウについて
　本願明細書の段落【００６０】及び【００６１】の記載によれば、本願において形質転換に用いたプラスミドは、カッサバGBSS遺伝子を馬鈴薯GBSSプロモーター及びノパリンシンターゼターミネーターの間にアンチセンス方向に挿入したプラスミドであるpAG61に、レポーター遺伝子であるルシフェラーゼ遺伝子を挿入したものであるところ、pAG61は引用例３に記載されており（引用例３の記載事項ウ）、また、レポーター遺伝子を用いて植物を形質転換することは、刊行物１〜３に記載されるように、本願優先日前における周知の手段であるから、本願において用いたプラスミドは、当業者が容易に作製し得るものであって、審判請求人が主張するようにユニークなものとは認められない。
　また、刊行物１〜３には、形質転換カッサバを作製するための詳細な情報が記載されていることから、このような周知技術を参酌して、高レベルのアミロペクチンを有するカッサバ澱粉を含む形質転換カッサバ植物を作出するための詳細な条件を決定することは、当業者が適宜なし得ることである。
　そして、本願明細書をみても、高レベルのアミロペクチンを有するカッサバ澱粉を含む形質転換カッサバ植物を作出するために、格別な工夫を要したものとも認められない。
　
第５　むすび
　以上のとおりであるから、本願の請求項１に係る発明は、引用例１〜３に記載された発明に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。
　したがって、本願は、他の請求項に係る発明については検討するまでもなく、拒絶をすべきものである。
　
　よって、結論のとおり審決する。