【事件の表示】
　特許第３４１１４７０号「タンパク質の固定化方法」の請求項１及び２に係る特許に対する特許異議の申立てについて、次のとおり決定する。
【結　論】
　訂正を認める。
　特許第３４１１４７０号の請求項１及び２に係る特許を維持する。
【理　由】
I．手続の経緯
　本件特許第３４１１４７０号の請求項１、２に係る発明は、平成９年４月１８日に特許出願され、平成１５年３月２０日にその発明について特許権の設定登録がなされ、その後、馬島希美子より特許異議の申立てがあり、取消理由通知がなされ、その指定期間内である平成１６年５月２４日付けで訂正請求がなされたものである。
　
II．訂正の適否の判断
ア．訂正事項
　本件訂正請求は、本件特許明細書を訂正請求書に添付した訂正明細書のとおりに訂正しようとするものであって、つぎの訂正事項からなる。
(1)訂正事項Ａ
　特許請求の範囲請求項１の「シート状多孔質担体上に、タンパク質溶液を滴下または転写した後、風乾または凍結乾燥させることのみからなるタンパク質の固定化方法であって、前記シート状多孔質担体が、ガラス繊維、綿およびパルプからなる群より選ばれた少なくとも１つであることを特徴とするタンパク質の固定化方法。」との記載を、
　「シート状多孔質担体上に、タンパク質溶液を滴下または転写した後、凍結乾燥させることのみからなる検体を固定化するためのタンパク質の固定化方法であって、前記シート状多孔質担体が、ガラス繊維、綿およびパルプからなる群より選ばれた少なくとも１つであることを特徴とするタンパク質の固定化方法。」と訂正する。　
　
(2)訂正事項Ｂ
　段落番号【０００４】の
　「【課題を解決するための手段】
　上記課題に鑑み、本発明は、シート状多孔質担体上に、タンパク質溶液を滴下または転写した後、風乾または凍結乾燥させることのみからなるタンパク質の固定化方法であって、前記シート状多孔質担体が、ガラス繊維、綿およびパルプからなる群より選ばれた少なくとも１つであることを特徴とするタンパク質の固定化方法に関する。これにより、タンパク質を、安全、容易にシート状多孔質担体上に強固に固定することができる。」との記載を、
　「【課題を解決するための手段】
　上記課題に鑑み、本発明は、シート状多孔質担体上に、タンパク質溶液を滴下または転写した後、凍結乾燥させることのみからなる検体を固定化するためのタンパク質の固定化方法であって、前記シート状多孔質担体が、ガラス繊維、綿およびパルプからなる群より選ばれた少なくとも１つであることを特徴とするタンパク質の固定化方法に関する。これにより、タンパク質を、安全、容易にシート状多孔質担体上に強固に固定することができる。」と訂正する。
　
(3)訂正事項Ｃ
　段落番号【０００５】の第３行における「タンパク質」との記載を「検体を固定化するためのタンパク質」と訂正する。
　
イ．訂正の目的の適否、新規事項の有無及び拡張・変更の存否
(1)訂正事項Ａについて
　訂正事項Ａは、訂正前の特許請求の範囲請求項１において択一的に記載された「風乾」を削除するものであるから、特許請求の範囲の減縮を目的とするものであり、かつ「タンパク質」が「検体を固定化するためのタンパク質」であることを明らかにするものであるから明りょうでない記載の釈明を目的とするものである。またこれらの訂正は特許明細書、段落番号【０００５】〜【０００７】の記載により支持されており、新規事項の追加には該当せず、また実質上特許請求の範囲を拡張し又は変更するものでもない。
　
(2)訂正事項Ｂ、Ｃについて
　訂正事項Ｂ、Ｃは特許請求の範囲の訂正に伴い、特許請求の範囲の記載と発明の詳細な説明の記載との整合をとるための訂正であるから、明りょうでない記載の釈明を目的とするものである。また、これらの訂正は新規事項の追加には該当せず、実質上特許請求の範囲を拡張又は変更するものでもない。
　
ウ．むすび
　以上のとおりであるから、上記訂正は、特許法第１２０条の４第２項及び同条第３項で準用する特許法第１２６条第２項から第４項までの規定に適合するので、当該訂正を認める。
　
III．特許異議申立てについて
１．本件発明
　上記のとおり訂正が認められるので、訂正後の本件請求項１及び２に係る発明（以下「本件発明１」及び「本件発明２」という）は訂正後の明細書の特許請求の範囲請求項１及び２に記載された事項により特定される以下のとおりである。　
　
　「【請求項１】　シート状多孔質担体上に、タンパク質溶液を滴下または転写した後、凍結乾燥させることのみからなる検体を固定化するためのタンパク質の固定化方法であって、前記シート状多孔質担体が、ガラス繊維、綿およびパルプからなる群より選ばれた少なくとも１つであることを特徴とするタンパク質の固定化方法。
　【請求項２】　前記タンパク質が、酵素、抗原、抗体、からなる群より選ばれた少なくとも１つである請求項１記載のタンパク質の固定化方法。」
　
２．特許異議申立ての理由及び当審における取消理由の概要
(1)特許異議申立人馬島希実子は、本件請求項１及び２に係る発明は、本件出願前に頒布されたことが明らかな刊行物である下記甲第１号証に記載されていた発明と同一であるか、又は当該発明から容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第１項又は第２項の規定により、特許を受けることができないものであり、これらの発明の特許を取り消すべきと主張している。
　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　記
　　甲第１号証：特開平７−２１８４３８号公報
　
(2)当審において通知した取消しの理由の趣旨は以下のとおりである。
［理由１］
　訂正前の本件請求項１ないし２に係る発明は、下記の刊行物１、２に記載された発明とそれぞれ同一であるか、あるいは、刊行物１、２に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものである。
　したがって、請求項１、２に係る特許は、特許法第２９条第１項又は第２項の規定に違反してされたものである。
　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　記
　　刊行物１：特開平７−２１８４３８号公報（甲第１号証と同じ）
　　刊行物２：特開平５−５７４３号公報
　　
［理由２］
　本件明細書の発明の詳細な説明において、「保持」及び「タンパク質の固定化」という記載の意味するところが明りょうでない。
　したがって、本件請求項１ないし２に係る特許は、特許法第３６条第４項又は第６項の規定を満たしていない特許出願に対してされたものである。
　
３．刊行物に記載された事項
（イ）刊行物１
　刊行物１には、液体不透過性容器に収納された吸収層を備える多孔性膜の調製方法として、ポリエチレンを成形して得た液体不透過性容器に、ガラスフィルターおよび酢酸セルロース製の吸収プラグを収納して作製した反応容器の試薬導入用開口部から抗ＡＦＰモノクローナル抗体を含む溶液、および１％ＢＳＡを含む緩衝化生理食塩水を順次適用した後、この反応容器を完全に乾燥するまで室温下に放置したことが記載されている（【００３６】実施例３　参照）。
　
（ロ）刊行物２
　刊行物２には、多孔性担体を有する免疫測定装置において、抗体溶液をガラス繊維濾紙上に塗布し、２５℃で１８時間乾燥させた後、各種薬剤で処理したものを陰圧乾燥機で乾燥させる方法が記載されている（【００６２】ｃ）多孔性担体の調製　参照）。
　
４．本件発明と引用刊行物記載の発明との対比・検討
・特許法第２９条第１項について
（１）本件発明１について
　本件発明１と上記刊行物１あるいは２に記載された発明とを対比すると、刊行物１記載の発明における「ガラスフィルター」、刊行物２記載の発明における「多孔性担体」はいずれも本件発明１における「シート状多孔質担体」に相当するものであり、かつ用いられている抗体が「検体を固定化するタンパク質」であることは明らかであることから、これらは「シート状多孔質担体上に、タンパク質溶液を滴下または転写した後、乾燥させることのみからなる検体を固定化するためのタンパク質の固定化方法であって、前記シート状多孔質担体が、ガラス繊維、綿およびパルプからなる群より選ばれた少なくとも１つであることを特徴とするタンパク質の固定化方法」である点で共通している。しかし、本件発明１では、検体を固定化するためのタンパク質を凍結乾燥によって固定化しているのに対し、刊行物１に記載の発明では、「完全に乾燥するまで室温下に放置」、すなわち風乾によって固定化している点において相違している。また、上記刊行物２においても同様に、検体を固定化するためのタンパク質である抗体溶液をガラス繊維濾紙上に固定化するさいに、「２５℃で１８時間乾燥」すなわち風乾させている点において相違している。なお、刊行物２には陰圧乾燥や凍結乾燥に関する記載があるが、これらはいずれも検体を固定化するためのタンパク質の固定に用いられているものではない。
　したがって、本件発明１と、上記刊行物１、２記載の発明とは、検体を固定化するためのタンパク質を、多孔性担体に固定化するさいの方法において相違するものであり、本件発明１は刊行物１、２に記載された発明であるとすることはできない。
　
（２）本件発明２について
　本件発明２も、本件発明１と同様に「検体を固定化するためのタンパク質を凍結乾燥によって固定化している」ものであるから、本件発明１について前記（２）で検討したのと同様の理由により、本件発明２は刊行物１、２に記載された発明であるとすることはできない。
　
・特許法第２９条２項について
（１）本件発明１について
　本件発明１と刊行物１記載の発明とを対比すると、両者は「シート状多孔質担体上に、タンパク質溶液を滴下または転写した後、乾燥させることのみからなる検体を固定化するためのタンパク質の固定化方法であって、前記シート状多孔質担体が、ガラス繊維、綿およびパルプからなる群より選ばれた少なくとも１つであることを特徴とするタンパク質の固定化方法」である点で一致しているが、本件発明１では、「検体を固定化するためのタンパク質」を凍結乾燥によって固定化しているのに対し、刊行物１記載の発明では「完全に乾燥するまで室温下に放置」、すなわち風乾によって固定化している点において相違している。
　上記相違点について検討する。本件発明１は、「検体を固定化するためのタンパク質」を担体に固定化するさいに、凍結乾燥を用いることによってタンパク質の活性を低下させることなくより強固な固定化を実現するものである（本件明細書段落【０００４】【０００５】参照）。タンパク質の乾燥方法として風乾も凍結乾燥も非常によく知られた技術であるが、凍結乾燥によってタンパク質と多孔性担体との結合が改善されるとの知見は刊行物１記載の発明には記載も示唆もなく、また周知慣用技術であるということもいえない。
　一方、刊行物２には、検体を固定化するためのタンパク質である抗体溶液をガラス繊維濾紙上に固定化するさいに、「ガラス繊維濾紙上にこの抗体溶液を直線上に塗布した。・・・この多孔性担体を２５℃で１８時間乾燥した。次に１％ゼラチン液に１時間、浸した後10mM燐酸緩衝液（pH7.2）で３回洗浄した。」後に、陰圧乾燥機で乾燥する工程が記載されている（【００６２】ｃ）多孔性担体の調製）が、これはタンパク質ではなくその後の緩衝液を乾燥させるための構成であり、タンパク質の固定化方法としては、「２５℃で１８時間乾燥」すなわち風乾にほかならず、そもそも凍結乾燥と陰圧乾燥は、乾燥方法としては異なった構成を持つものである。また刊行物２記載の発明において、【００６３】、【００６４】において凍結乾燥を行う旨の記載があるが、これらはそれぞれ標識化試薬、緩衝液を乾燥させるためのものであり、「検体を固定化するためのタンパク質」を固定するために凍結乾燥させるものではない。そして、刊行物２記載の発明においても、凍結乾燥を用いることによって、タンパク質と担体との結合性が改善されることについては記載も示唆もされていない。
　したがって、刊行物１及び２の記載を併せて参照しても上記相違点にあげられた「検体を固定化するためのタンパク質」を凍結乾燥によって固定化するという構成を導くことはできない。そして、本件発明１は、上記の構成を備えることにより、タンパク質を安全、容易に固定化できるという明細書記載の効果（本件明細書段落【０００８】参照）を奏するものであると認められる。
　したがって、本件発明１は、引用刊行物１、２記載の発明に基づいて、当業者が容易に発明できたものであるとすることはできない。
　
（２）本件発明２について
　本件発明２も、本件発明１と同様に「検体を固定化するためのタンパク質を凍結乾燥によって固定化している」ものであるから、本件発明１について前記（２）で検討したのと同様の理由により、本件発明２は引用刊行物１、２記載の発明に基づいて、当業者が容易に発明できたものであるとすることはできない。
　
・３６条について
　本件明細書において、標識付き抗体を多孔性担体に保持させる方法については特に限定はされていないため、従来公知の任意の方法が選択しうるものと認められる。一方、今回の訂正によって請求項１、２における「タンパク質の固定化」が「検体を固定化するためのタンパク質の固定化」である点が明らかになり、これは実施例の標識付き抗体の「保持」とは異なったものであることは明白である。
　したがって、本件発明１ないし２に係る特許は、特許法第３６条第４項又は第６項の規定を満たしていないということはできない。
　
IV．むすび
　したがって、特許異議申立ての理由及び証拠によっては、本件請求項１ないし２に係る発明の特許を取り消すことはできない。
　また、他に本件請求項１ないし２に係る発明の特許を取り消すべき理由を発見しない。
　よって、結論のとおり決定する。
【異議決定日】
平成１６年９月１７日（２００４．９．１７）
【訂正の要旨】
審決（決定）の【理由】欄参照。
（５４）【発明の名称】
タンパク質の固定化方法
（５７）【特許請求の範囲】
　【請求項１】　シート状多孔質担体上に、タンパク質溶液を滴下または転写した後
、凍
検体を固定化するための
　【請求項２】　前記タンパク質が、酵素、抗原、抗体からなる群より選ばれた少なくとも１つである請求項１記載のタンパク質の固定化方法。
【発明の詳細な説明】
　【０００１】
　【発明の属する技術分野】
　本発明は、各種医療診断に利用される免疫クロマトグラフィー装置に収納されるシート状多孔質担体に、タンパク質を固定化する方法に関するものである。
　【０００２】
　【従来の技術】
　各種医療機関で使用されている免疫クロマトグラフィー装置は、免疫学的抗原抗体反応を利用して、試料液中に含まれる検体の検出を行うものであり、その結果は、医療診断に活用されている。免疫クロマトグラフィー装置は、シート状多孔質担体とこれを収納するケーシングから構成される。ケーシングは、扁平な直方体であり、その一方の端部には試料液を導入する開口部が設けられ、もう一方の端部近くの上面には判定確認窓が設けられている。ケーシング中に収納されているシート状多孔質担体には、試料液を導入する開口部の近くに検体を標識する抗体が保持され、判定確認窓の位置に検体を固定化する抗体が固定されている。従来、免疫クロマトグラフィー装置において、検体を固定化する抗体をシート状多孔質担体に固定する場合、臭化シアンのような有毒試薬を用いて多段階で前処理することが必要であった。
　【０００３】
　【発明が解決しようとする課題】
　この多段階を要する前処理には、危険な劇薬を扱ったり、洗浄を施したりしなければならず、安全性と操作性に大きな問題があった。本発明は、シート状多孔質担体に、抗体などのタンパク質を安全かつ容易に固定化する方法を提供することを目的とする。
　【０００４】
　【課題を解決するための手段】
　上記課題に鑑み、本発明は、シート状多孔質担体上に、タンパク質溶液を滴下または転写した後
、凍
検体を固定化するための
　【０００５】
　【発明の実施の形態】
　風乾または凍結乾燥の２つの乾燥方法の中でも、凍結乾燥は、タンパク質の活性を低下させることが少なく、特に好適に用いられる。
検体を固定化するための
　【０００６】
　【実施例】
　図１は、免疫クロマトグラフィー装置内部に収納されるシート状多孔質担体の一実施例における斜視図である。シート状多孔質担体１に、標識付き抗体２を保持する部分、検体を固定化する抗体３を固定した部分およびシート状多孔質担体の一部を厚くしたシンク４が設けられている。シンク４は、流れてきた試料液を吸収する役割がある。５は、試料液添加部である。図２は、他の実施例におけるシート状多孔質担体の側面図である。検体を固定化する抗体３を固定したシート状多孔質担体８を、２つの基板６、標識付き抗体２を保持するシート状多孔質担体７、およびシンク４を有するシート状多孔質担体９で挟むようにして組み込んである。
　【０００７】
　検体を固定化する抗体である抗ｈＣＧ抗体の溶液にペンを浸し、この溶液をペン先からガラス繊維濾紙に滴下した後、ガラス繊維濾紙を冷却して抗ｈＣＧ抗体を凍結乾燥させた。さらに、抗ｈＣＧ抗体を金コロイドで標識した標識付き抗体を、別のガラス繊維濾紙に保持させた。これらを図２に示すように組み込んだ。図２における試料液添加部分５に尿をピペットで添加した。尿は、ガラス繊維濾紙中を浸透し、尿中に含まれている抗原（ｈＣＧ）により、検体を固定化する抗体を固定する部分３が赤紫色に変わった。このように、検体を固定化する抗体は、ガラス繊維濾紙に、非常に強固に保持されており、試料液によって、移動するようなことはなかった。
　【０００８】
　【発明の効果】
　以上のように、本発明によれば、タンパク質を安全、容易に固定化できる。またクロマトグラフィー材料を選ばないことから、短時間、高精度の測定が可能で、低コストのクロマトグラフィー装置を構成することができる。
【図面の簡単な説明】
　【図１】　本発明の一実施例における免疫クロマトグラフィ−装置内に収納されたシート状多孔質担体の斜視図である。
　【図２】　本発明の他の実施例における免疫クロマトグラフィ−装置内に収納されたシート状多孔質担体の側面図である。
　【符号の説明】
　１　シート状多孔質担体
　２　標識付き抗体の保持部
　３　固定化抗体の固定部
　４　シンク
　５　試料液添加部
　６　基板
　７　標識付き抗体を保持するシート状多孔質担体
　８　検体を固定化する抗体を固定したシート状多孔質担体
　９　シンクを有するシート状多孔質担体