【手続補正書】
【提出日】平成27年2月20日(2015.2.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６２】
本発明の１種以上の脂質を産生する例示の真菌細胞としては、豪州全国計測協会（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ａｕｓｔｒａｌｉａ）（ＮＭＩＡ）に登録番号Ｎｏ．  Ｖ０８／０２５８５５で寄託された、２００８年１０月１４日寄託のビューベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖａｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）株Ｋ４Ｂ３、又は、その特定的特徴を有する培養物、又は、ビューベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖａｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）株ＡＭ２、ビューベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖａｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）株Ｆ４８０、トリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）単離物１３２８を含むトリコデルマ種、及び、メタルヒジウム（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ）種、又は、それらのいずれかの特定的特徴を有する株が挙げられる。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８０】
特定の実施形態において、組成物は真菌の単一株を含む。１つの例示の実施形態において、真菌はビューベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）株Ｋ４Ｂ３  （ＮＭＩＡ  Ｎｏ．  Ｖ０８／０２５８５５、２００８年１０月１４日寄託）である。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５１】
ビューベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）は、例えば、バッタ（ｇｒａｓｓｈｏｐｐｅｒｓ）、アブラムシ（ａｐｈｉｄｓ）、アザミウマ（ｔｈｒｉｐｓ）、蛾（ｍｏｔｈｓ）及び幾つかの他の種を含む、幼体及び成体昆虫を攻撃する土壌で生まれる真菌である。通常、ビューベリア・バシアナ（Ｂ．  ｂａｓｓｉａｎａ）はアブラムシ（ａｐｈｉｄｓ）、せん孔性害虫（ｂｏｒｅｒｓ）及びアザミウマ（ｔｈｒｉｐｓ）などの昆虫の死体から単離することができ、また、土壌から単離することができる。例示の昆虫病原性ビューベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）株Ｋ４Ｂ３は本発明の特定の実施形態において使用でき、そして特許手続きの目的でブタペスト条約により、豪州全国計測協会（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ａｕｓｔｒａｌｉａ）（ＮＭＩＡ、以前の豪州政府分析実験室（Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ  Ｇｏｖｅｒｎｍｅｎｔ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  （ＡＧＡＬ））、１  Ｓｕａｋｉｎ  Ｓｔｒｅｅｔ，  Ｐｙｍｂｌｅ，  Ｎｅｗ  Ｓｏｕｔｈ  Ｗａｌｅｓ，  Ａｕｓｔｒａｌｉａに２００８年１０月１４日に寄託された。その単離物には寄託番号Ｖ０８／０２５８５５が与えられている。
【手続補正４】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
子嚢菌門（ｐｈｙｌｕｍ  Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ）の真菌の菌糸体から単離された、精製された又は実質的に純粋な、１種以上の殺虫性脂質又は脂質画分。
【請求項２】
酸性脂質を実質的に含まない、又は遊離脂肪酸を実質的に含まない、又は酸性脂質及び遊離脂肪酸を実質的に含まない、請求項１に記載の脂質画分。
【請求項３】
以下、
ａ．本明細書の図４中に示され、又は例２に記載される、画分１、画分５又は画分６、
ｂ．本明細書の図７中に示され、又は例２に記載される、画分２、画分４又は画分５、
ｃ．本明細書の図８中に示され、又は例２に記載される、画分２、画分３、画分４、画分５又は画分９、
ｄ．本明細書の図８中に示され、又は例２に記載される、画分２、画分３、画分４、画分５又は画分９、
ｅ．本明細書の図１０中に示され、又は例２に記載される、画分２、画分３、画分４ｂ、画分５ａ、画分５ｂ又は画分６、
のいずれか１つ以上の脂質画分、又はそれらの１つ以上の特定的特徴を有し、画分２、画分３、画分４ｂ、画分５ａ、画分５ｂ又は画分６の特定的特徴が、図１２ａ〜１２ｆのいずれか１つに示されるＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析  （ＭＳ）プロファイルである、請求項１又は２のいずれかに記載の脂質画分。
【請求項４】
本明細書の図１０中に示され、又は例２に記載される画分３であるか又はその特定的特徴を有し、又は前記特定的特徴が、図１３に示すＮＭＲスペクトルである、請求項１〜３のいずれか１項記載の脂質画分。
【請求項５】
以下、
ａ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ８６のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｂ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  １４７のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｃ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ４４５のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｄ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ６５６のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｅ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ４５４のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｆ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ７５１のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｇ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ３９３のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｈ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ７５１のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｉ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ６９３のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｊ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ６９５のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｋ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ７１７のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｌ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ５３１のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｍ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ８６．０２の質量を有する脂質、又は、
ｎ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  １４６．９７の質量を有する脂質、又は、
ｏ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ４４４．８２の質量を有する脂質、又は、
ｐ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ６５５．９４の質量を有する脂質、又は、
ｑ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ４５４．１９の質量を有する脂質、又は、
ｒ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ７５０．６６の質量を有する脂質、又は、
ｓ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ３９３．３９の質量を有する脂質、又は、
ｔ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ７５０．６７の質量を有する脂質、又は、
ｕ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ６９２．６９の質量を有する脂質、又は、
ｖ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ６９４．７２の質量を有する脂質、又は、
ｗ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ７１６．７１の質量を有する脂質、又は、
ｘ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ５３１．３４の質量を有する脂質、
のいずれか１つである又はいずれか１つを含む、請求項１〜４のいずれか１項記載の脂質画分。
【請求項６】
前記子嚢菌門（ｐｈｙｌｕｍ  Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ）の真菌が、豪州全国計測協会（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ａｕｓｔｒａｌｉａ）（ＮＭＩＡ）に登録番号Ｎｏ．  Ｖ０８／０２５８５５で寄託された、２００８年１０月１４日寄託のビューベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖａｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）株Ｋ４Ｂ３又はその特定的特徴を有する株、ビューベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖａｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）株ＡＭ２又はその特定的特徴を有する株、ビューベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖａｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）株Ｆ４８０又はその特定的特徴を有する株、トリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）単離物１３２８を含む１種以上のトリコデルマ種又はその特定的特徴を有する株、及び、１種以上のメタルヒジウム（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ）種を含む群から選ばれる、請求項１〜５のいずれか１項記載の脂質又は脂質画分。
【請求項７】
子嚢菌門（ｐｈｙｌｕｍ  Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ）の真菌の菌糸体からの１種以上の殺虫性脂質又は１種以上の殺虫性脂質画分を少なくとも１種のキャリアとともに含む組成物。
【請求項８】
子嚢菌門（ｐｈｙｌｕｍ  Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ）の真菌の菌糸体からの１種以上の殺虫性脂質又は１種以上の殺虫性脂質画分を添加した、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
子嚢菌門（ｐｈｙｌｕｍ  Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ）の真菌の菌糸体培養物からの、培養物、細胞抽出物、細胞懸濁液、細胞ホモジネート、細胞溶解物、細胞上清、細胞ろ液、細胞ペレット、又は、成長培地である、又は、それらを含む、請求項７又は８のいずれかに記載の組成物。
【請求項１０】
子嚢菌門（ｐｈｙｌｕｍ  Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ）の真菌から得ることができる胞子をさらに含む、請求項７〜９のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１１】
豪州全国計測協会（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ａｕｓｔｒａｌｉａ）（ＮＭＩＡ）に登録番号Ｎｏ．  Ｖ０８／０２５８５５で寄託された、２００８年１０月１４日寄託のビューベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖａｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）株Ｋ４Ｂ３又はその特定的特徴を有する株、又は、ビューベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖａｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）株ＡＭ２又はその特定的特徴を有する株、ビューベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖａｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）株Ｆ４８０又はその特定的特徴を有する株、トリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）単離物１３２８を含む１種以上のトリコデルマ種又はその特定的特徴を有する株、及び、１種以上のメタルヒジウム（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ）種を含む群から選ばれる真菌から得ることができる胞子を含む、請求項１０記載の組成物。
【請求項１２】
豪州全国計測協会（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ａｕｓｔｒａｌｉａ）（ＮＭＩＡ）に登録番号Ｎｏ．  Ｖ０８／０２５８５５で寄託された、２００８年１０月１４日寄託のビューベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖａｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）株Ｋ４Ｂ３又はその特定的特徴を有する株、ビューベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖａｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）株ＡＭ２又はその特定的特徴を有する株、ビューベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖａｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）株Ｆ４８０又はその特定的特徴を有する株、トリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）単離物１３２８を含む１種以上のトリコデルマ種又はその特定的特徴を有する株、及び、１種以上のメタルヒジウム（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ）種を含む群から選ばれる真菌からの１種以上の脂質又は脂質画分を含む、請求項７〜１１のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１３】
非酸脂質が濃縮されている、請求項５〜７のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１４】
以下、
ａ．本明細書の図４中に示され、又は例２に記載される、画分１、画分５又は画分６、
ｂ．本明細書の図７中に示され、又は例２に記載される、画分２、画分４又は画分５、
ｃ．本明細書の図８中に示され、又は例２に記載される、画分２、画分３、画分４、画分５又は画分９、
ｄ．本明細書の図８中に示され、又は例２に記載される、画分２、画分３、画分４、画分５又は画分９、
ｅ．本明細書の図１０中に示され、又は例２に記載される、画分２、画分３、画分４ｂ、画分５ａ、画分５ｂ又は画分６、
のいずれか１つ以上の脂質画分、又はそれらの１つ以上の特定的特徴を有する１つ以上の脂質画分中に存在する１つ以上の脂質が濃縮されており、画分２、画分３、画分４ｂ、画分５ａ、画分５ｂ又は画分６の特定的特徴が、図１２ａ〜１２ｆのいずれか１つに示されるＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析  （ＭＳ）プロファイルである、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
以下、
ａ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ８６のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｂ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  １４７のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｃ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ４４５のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｄ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ６５６のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｅ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ４５４のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｆ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ７５１のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｇ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ３９３のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｈ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ７５１のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｉ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ６９３のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｊ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ６９５のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｋ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ７１７のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｌ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ５３１のおおよその質量を有する脂質、又は、
ｍ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ８６．０２の質量を有する脂質、又は、
ｎ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  １４６．９７の質量を有する脂質、又は、
ｏ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ４４４．８２の質量を有する脂質、又は、
ｐ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ６５５．９４の質量を有する脂質、又は、
ｑ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ４５４．１９の質量を有する脂質、又は、
ｒ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ７５０．６６の質量を有する脂質、又は、
ｓ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ３９３．３９の質量を有する脂質、又は、
ｔ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ７５０．６７の質量を有する脂質、又は、
ｕ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ６９２．６９の質量を有する脂質、又は、
ｖ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ６９４．７２の質量を有する脂質、又は、
ｗ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ７１６．７１の質量を有する脂質、又は、
ｘ．  ＭＳ／ＭＳによりｍ／ｚ  ５３１．３４の質量を有する脂質、
の１つ以上が濃縮されている、請求項１３又は１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項１６】
１種以上の昆虫を、請求項１〜６のいずれか１項記載の脂質又は脂質画分、又は、請求項７〜１５のいずれか１項記載の組成物と接触させることを含む、１種以上の昆虫の防除方法。
【請求項１７】
植物又はその周囲に、請求項１〜６のいずれか１項記載の脂質又は脂質画分、又は、請求項７〜１５のいずれか１項記載の組成物を施用することを含む、１種以上の昆虫の防除方法。
【請求項１８】
子嚢菌門（ｐｈｙｌｕｍ  Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ）の１種以上の真菌の培養物の有機溶媒抽出物を提供すること、
少なくとも部分的に１種以上の非酸性脂質を１種以上の酸性脂質から分離すること、又は少なくとも部分的に１種以上の極性脂質を１種以上の非極性脂質から分離すること、及び、
前記１種以上の非酸性脂質若しくは脂質画分、又は１種以上の極性脂質又は極性脂質画分を回収すること、
を含む、殺虫性脂質又は脂質画分の調製方法。
【請求項１９】
前記有機溶媒が、短鎖アルキルアルコールを含むアルカノール、メタノール、エタノール、プロパノール、イソ−プロパノール又はブタノールであるか、又は、クロロホルムである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
１種以上の殺虫剤又は１種以上の昆虫病原性剤に対する昆虫の耐性を完全に又は部分的に反転させる方法であって、昆虫を請求項１〜６のいずれか１項記載の脂質又は脂質画分、又は、請求項７〜１５のいずれか１項記載の組成物に接触させることを含み、任意で、当該昆虫を、１種以上の殺虫剤もしくは昆虫病原性剤又はそれらの任意の組み合わせと接触させることを含む方法。
【請求項２１】
投与された前記１種以上の殺虫剤又は１種以上の昆虫病原性剤が、前記昆虫が耐性であるか、又は、耐性であることが予測されもしくは耐性となることが予測されるものと同一である、請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
請求項１〜６のいずれか１項記載の脂質又は脂質画分、又は、請求項７〜１５のいずれか１項記載の組成物と接触した１種以上の昆虫を防除する方法であって、前記脂質若しくは脂質画分又は組成物に既に接触した前記１種以上の昆虫を、該１種以上の昆虫を防除するのに有効な量の殺虫剤又は昆虫病原性剤と接触させることを含む方法。
【請求項２３】
前記１種以上の殺虫剤又は１種以上の昆虫病原性剤が、前記脂質又は脂質画分の投与の前に、その投与と同時に、又は、その投与の後に投与される、請求項２２記載の方法。