【手続補正書】
【提出日】平成27年1月16日(2015.1.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
α-葉酸受容体(FRα)結合ドメインをコードする核酸配列、細胞内シグナル伝達ドメインをコードする核酸配列、および4-1BB(CD137)共刺激ドメインをコードする核酸配列を含む、キメラ抗原受容体(CAR)をコードする単離された核酸配列。
【請求項２】
細胞内シグナル伝達ドメインがCD3ζシグナル伝達ドメインを含む、請求項1記載の単離された核酸配列。
【請求項３】
CARが、SEQ ID NO: 13もしくはSEQ ID NO: 22のアミノ酸配列を含むか、またはSEQ ID NO: 1もしくはSEQ ID NO: 20の核酸配列によってコードされる、請求項1記載の単離された核酸配列。
【請求項４】
FRα結合ドメインが抗体もしくはそのFRα結合断片であるか、またはFRα結合ドメインが腫瘍抗原に結合し、腫瘍抗原がFRαである、請求項1記載の単離された核酸配列。
【請求項５】
FRα結合断片がFabまたはscFvである、請求項4記載の単離された核酸配列。
【請求項６】
腫瘍抗原が上皮性悪性腫瘍または固形腫瘍と関連している、請求項4記載の単離された核酸配列。
【請求項７】
SEQ ID NO: 3もしくはSEQ ID NO: 21を含むFRα結合ドメイン核酸配列、またはSEQ ID NO: 15もしくはSEQ ID NO: 23を含むFRα結合ドメインアミノ酸配列をコードする核酸配列；SEQ ID NO: 6を含む4-1BB共刺激ドメイン核酸配列、またはSEQ ID NO: 18の4-1BB共刺激ドメインアミノ酸配列をコードする核酸配列；およびSEQ ID NO: 7を含むCD3ζシグナル伝達ドメイン核酸配列、またはSEQ ID NO: 19のCD3ζシグナル伝達ドメインアミノ酸配列をコードする核酸配列の少なくとも1つを含む、請求項1記載の単離された核酸配列。
【請求項８】
膜貫通ドメインの核酸配列をさらに含む、請求項1記載の単離された核酸配列。
【請求項９】
FRα結合ドメイン、細胞内シグナル伝達ドメイン、および4-1BB共刺激ドメインを含む、単離されたキメラ抗原受容体(CAR)。
【請求項１０】
細胞内シグナル伝達ドメインがCD3ζシグナル伝達ドメインを含む、請求項9記載の単離されたCAR。
【請求項１１】
SEQ ID NO: 13またはSEQ ID NO: 22のアミノ酸配列を含む、請求項9記載の単離されたCAR。
【請求項１２】
FRα結合ドメインが抗体もしくはそのFRα結合断片であるか、またはFRα結合ドメインが腫瘍抗原に結合し、腫瘍抗原がFRαである、請求項9記載の単離されたCAR。
【請求項１３】
FRα結合断片がFabまたはscFvである、請求項12記載の単離されたCAR。
【請求項１４】
腫瘍抗原が上皮性悪性腫瘍または固形腫瘍と関連している、請求項12記載の単離されたCAR。
【請求項１５】
SEQ ID NO: 15またはSEQ ID NO: 23のアミノ酸配列を含むFRα結合ドメイン、SEQ ID NO: 18のアミノ酸配列を含む4-1BB共刺激ドメイン、およびSEQ ID NO: 19のアミノ酸配列を含むCD3ζシグナル伝達ドメインの少なくとも1つを含む、請求項9記載の単離されたCAR。
【請求項１６】
膜貫通ドメインをさらに含む、請求項9記載の単離されたCAR。
【請求項１７】
キメラ抗原受容体(CAR)をコードする単離された核酸配列を含む遺伝子改変T細胞であって、該単離された核酸配列が、FRα結合ドメインをコードする核酸配列、細胞内シグナル伝達ドメインをコードする核酸配列、および4-1BB共刺激ドメインをコードする核酸配列を含む、遺伝子改変T細胞。
【請求項１８】
キメラ抗原受容体(CAR)をコードする単離された核酸配列を含むベクターであって、該単離された核酸配列が、FRα結合ドメインをコードする核酸配列、細胞内シグナル伝達ドメインをコードする核酸配列、および4-1BB共刺激ドメインをコードする核酸配列を含む、ベクター。
【請求項１９】
対象において抗腫瘍免疫を提供するための医薬の製造における、キメラ抗原受容体(CAR)をコードする単離された核酸配列を含む遺伝子改変T細胞の使用であって、ここで、該単離された核酸配列が、FRα結合ドメインをコードする核酸配列、細胞内シグナル伝達ドメインをコードする核酸配列、および4-1BB共刺激ドメインをコードする核酸配列を含む、使用。
【請求項２０】
細胞内シグナル伝達ドメインがCD3ζシグナル伝達ドメインを含む、請求項19記載の使用。
【請求項２１】
共刺激ドメインが存在することで、T細胞生存が増強されるか、または対象における抗腫瘍免疫の有効性が増加する、請求項19記載の使用。
【請求項２２】
対象が哺乳動物またはヒトである、請求項19記載の使用。
【請求項２３】
対象においてT細胞媒介性免疫応答を刺激するため、卵巣癌を治療するため、または癌を治療するための医薬の製造における、キメラ抗原受容体(CAR)をコードする単離された核酸配列を含む遺伝子改変T細胞の使用であって、ここで、該単離された核酸配列が、FRα結合ドメインをコードする核酸配列、細胞内シグナル伝達ドメインをコードする核酸配列、および4-1BB共刺激ドメインをコードする核酸配列を含む、使用。
【請求項２４】
卵巣癌を有する診断された対象において持続する遺伝子操作T細胞の集団を生成するための医薬の製造における、キメラ抗原受容体(CAR)をコードする単離された核酸配列を含む遺伝子改変T細胞の使用であって、ここで、該単離された核酸配列が、FRα結合ドメインをコードする核酸配列、細胞内シグナル伝達ドメインをコードする核酸配列、および4-1BB共刺激ドメインをコードする核酸配列を含む、使用。
【請求項２５】
遺伝子操作T細胞の持続的集団が、ヒトにおいて投与後少なくとも3ヵ月間持続する、請求項24記載の使用。
【請求項２６】
固形腫瘍が卵巣癌である、請求項6記載の単離された核酸配列。
【請求項２７】
固形腫瘍が卵巣癌である、請求項14記載の単離されたCAR。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３０】
本発明はまた、卵巣癌と診断された対象において、遺伝子操作T細胞の持続的集団を生成する方法を提供する、1つの態様において、本方法は、FRα結合ドメインの核酸配列および4-1BB共刺激ドメインの核酸配列を含む、CARをコードする単離された核酸配列を含む遺伝子改変T細胞の有効量を対象に投与する段階を含み、遺伝子操作T細胞の持続的集団が、対象において投与後少なくとも1ヵ月間持続する方法を提供する。1つの態様において、遺伝子操作T細胞の持続的集団は、投与後少なくとも3ヵ月間持続する。
[本発明1001]
α-葉酸受容体(FRα)結合ドメインの核酸配列および4-1BB(CD137)共刺激ドメインの核酸配列を含む、キメラ抗原受容体(CAR)をコードする単離された核酸配列。
[本発明1002]
CD3ζシグナル伝達ドメインの核酸配列をさらに含む、本発明1001の単離された核酸配列。
[本発明1003]
CARがSEQ ID NO: 13またはSEQ ID NO: 22のアミノ酸配列を含む、本発明1001の単離された核酸配列。
[本発明1004]
SEQ ID NO: 1またはSEQ ID NO: 20の核酸配列を含む、本発明1001の単離された核酸配列。
[本発明1005]
FRα結合ドメインが抗体またはそのFRα結合断片である、本発明1001の単離された核酸配列。
[本発明1006]
FRα結合断片がFabまたはscFvである、本発明1005の単離された核酸配列。
[本発明1007]
FRα結合ドメインが腫瘍抗原に結合し、腫瘍抗原がFRαである、本発明1001の単離された核酸配列。
[本発明1008]
腫瘍抗原が上皮性悪性腫瘍と関連している、本発明1007の単離された核酸配列。
[本発明1009]
腫瘍抗原が固形腫瘍と関連している、本発明1007の単離された核酸配列。
[本発明1010]
FRα結合ドメインがSEQ ID NO: 15またはSEQ ID NO: 23のアミノ酸配列を含む、本発明1001の単離された核酸配列。
[本発明1011]
FRα結合ドメインがSEQ ID NO: 3またはSEQ ID NO: 21の核酸配列によってコードされる、本発明1001の単離された核酸配列。
[本発明1012]
4-1BB共刺激ドメインがSEQ ID NO: 18のアミノ酸配列を含む、本発明1001の単離された核酸配列。
[本発明1013]
4-1BB共刺激ドメインがSEQ ID NO: 6の核酸配列によってコードされる、本発明1001の単離された核酸配列。
[本発明1014]
CD3ζシグナル伝達ドメインがSEQ ID NO: 19のアミノ酸配列を含む、本発明1002の単離された核酸配列。
[本発明1015]
CD3ζシグナル伝達ドメインがSEQ ID NO: 7の核酸配列によってコードされる、本発明1002の単離された核酸配列。
[本発明1016]
膜貫通ドメインの核酸配列をさらに含む、本発明1001の単離された核酸配列。
[本発明1017]
FRα結合ドメインおよび4-1BB共刺激ドメインを含む、単離されたキメラ抗原受容体(CAR)。
[本発明1018]
CD3ζシグナル伝達ドメインをさらに含む、本発明1017の単離されたCAR。
[本発明1019]
SEQ ID NO: 13またはSEQ ID NO: 22のアミノ酸配列を含む、本発明1017の単離されたCAR。
[本発明1020]
FRα結合ドメインが抗体またはそのFRα結合断片である、本発明1017の単離されたCAR。
[本発明1021]
FRα結合断片がFabまたはscFvである、本発明1020の単離されたCAR。
[本発明1022]
FRα結合ドメインが腫瘍抗原に結合し、腫瘍抗原がFRαである、本発明1017の単離されたCAR。
[本発明1023]
腫瘍抗原が上皮性悪性腫瘍と関連している、本発明1022の単離されたCAR。
[本発明1024]
腫瘍抗原が固形腫瘍と関連している、本発明1022の単離されたCAR。
[本発明1025]
FRα結合ドメインがSEQ ID NO: 15またはSEQ ID NO: 23のアミノ酸配列を含む、本発明1017の単離されたCAR。
[本発明1026]
4-1BB共刺激ドメインがSEQ ID NO: 18のアミノ酸配列を含む、本発明1017の単離されたCAR。
[本発明1027]
CD3ζシグナル伝達ドメインがSEQ ID NO: 19のアミノ酸配列を含む、本発明1018の単離されたCAR。
[本発明1028]
膜貫通ドメインをさらに含む、本発明1017の単離されたCAR。
[本発明1029]
キメラ抗原受容体(CAR)をコードする単離された核酸配列を含む遺伝子改変T細胞であって、該単離された核酸配列が、FRα結合ドメインの核酸配列および4-1BB共刺激ドメインの核酸配列を含む、遺伝子改変T細胞。
[本発明1030]
キメラ抗原受容体(CAR)をコードする単離された核酸配列を含むベクターであって、該単離された核酸配列が、FRα結合ドメインの核酸配列および4-1BB共刺激ドメインの核酸配列を含む、ベクター。
[本発明1031]
以下の段階を含む、対象において抗腫瘍免疫を提供するための方法：キメラ抗原受容体(CAR)をコードする単離された核酸配列を含む遺伝子改変T細胞の有効量を対象に投与する段階であって、ここで、該単離された核酸配列が、FRα結合ドメインの核酸配列および4-1BB共刺激ドメインの核酸配列を含み、それによって対象において抗腫瘍免疫を提供する、段階。
[本発明1032]
単離された核酸配列がCD3ζシグナル伝達ドメインの核酸配列をさらに含む、本発明1031の方法。
[本発明1033]
共刺激ドメインが存在することでT細胞生存が増強される、本発明1031の方法。
[本発明1034]
共刺激ドメインが存在することで対象における抗腫瘍免疫の有効性が増加する、本発明1031の方法。
[本発明1035]
対象が哺乳動物である、本発明1031の方法。
[本発明1036]
対象がヒトである、本発明1031の方法。
[本発明1037]
以下の段階を含む、対象において細胞集団または組織に対するT細胞媒介性免疫応答を刺激するための方法：キメラ抗原受容体(CAR)をコードする単離された核酸配列を含む遺伝子改変T細胞の有効量を対象に投与する段階であって、ここで、該単離された核酸配列が、FRα結合ドメインの核酸配列および4-1BB共刺激ドメインの核酸配列を含み、それによって対象においてT細胞媒介性免疫応答を刺激する、段階。
[本発明1038]
以下の段階を含む、対象において卵巣癌を治療するための方法：キメラ抗原受容体(CAR)をコードする単離された核酸配列を含む遺伝子改変T細胞の有効量を対象に投与する段階であって、ここで、該単離された核酸配列が、FRα結合ドメインの核酸配列および4-1BB共刺激ドメインの核酸配列を含み、それによって対象において卵巣癌を治療する、段階。
[本発明1039]
以下の段階を含む、対象において癌を治療するための方法：キメラ抗原受容体(CAR)をコードする単離された核酸配列を含む遺伝子改変T細胞の有効量を対象に投与する段階であって、ここで、該単離された核酸配列が、FRα結合ドメインの核酸配列および4-1BB共刺激ドメインの核酸配列を含み、それによって対象において癌を治療する、段階。
[本発明1040]
以下の段階を含む、卵巣癌と診断された対象において遺伝子操作T細胞の持続的集団を生成する方法：キメラ抗原受容体(CAR)をコードする単離された核酸配列を含む遺伝子改変T細胞の有効量を対象に投与する段階であって、ここで、該単離された核酸配列が、FRα結合ドメインの核酸配列および4-1BB共刺激ドメインの核酸配列を含み、遺伝子操作T細胞の持続的集団が、対象において投与後少なくとも1ヵ月間持続する、段階。
[本発明1041]
遺伝子操作T細胞の持続的集団が、ヒトにおいて投与後少なくとも3ヵ月間持続する、本発明1040の方法。