【手続補正書】
【提出日】平成27年1月29日(2015.1.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
インフルエンザＡヘッドレスヘマグルチニン（ｈｌＨＡ）ポリペプチドに挿入された少なくとも１つのインフルエンザＡ  Ｍ２細胞外ドメイン（Ｍ２ｅ）ポリペプチドを含む融合タンパク質をコードする遺伝子カセットを含む、組換えワクシニアウイルス。
【請求項２】
インフルエンザＡマトリックスタンパク質１（Ｍ１）をコードする遺伝子カセットと、インフルエンザＡ核タンパク質（ＮＰ）をコードする遺伝子カセットと、を更に含む、請求項１に記載の組換えワクシニアウイルス。
【請求項３】
請求項１に記載の組換えワクシニアウイルスを含む、薬学的組成物。
【請求項４】
個人におけるンフルエンザＡウイルスに対するヘテロサブタイプ免疫応答を誘導するための薬学的組成物であって、請求項１に記載の組換えワクシニアウイルスを含む、薬学的組成物。
【請求項５】
インフルエンザＡヘッドレスヘマグルチニン（ｈｌＨＡ）ポリペプチドに挿入された少なくとも１つのインフルエンザＡ  Ｍ２細胞外ドメイン（Ｍ２ｅ）ポリペプチドを含む融合タンパク質をコードする第１の遺伝子カセットと、インフルエンザＡ核タンパク質（ＮＰ）をコードする第２の遺伝子カセットと、を含む、組換えワクシニアウイルス。
【請求項６】
請求項５に記載の組換えワクシニアウイルスを含む、薬学的組成物。
【請求項７】
個人におけるインフルエンザＡウイルスに対するヘテロサブタイプ免疫応答を誘導するための薬学的組成物であって、請求項５に記載の組換えワクシニアウイルスを含む薬学的組成物。
【請求項８】
インフルエンザＡヘッドレスヘマグルチニン（ｈｌＨＡ）ポリペプチドをコードする第１の遺伝子カセットと、インフルエンザＡ核タンパク質（ＮＰ）をコードする第２の遺伝子カセットと、を含む、組換えワクシニアウイルス。
【請求項９】
前記ｈｌＨＡポリペプチドが、配列番号１５に示されるアミノ酸配列を含む、請求項８に記載の組換えワクシニアウイルス。
【請求項１０】
請求項８または９に記載の組換えワクシニアウイルスを含む、薬学的組成物。
【請求項１１】
個人におけるインフルエンザＡウイルスに対するヘテロサブタイプ免疫応答を誘導するための薬学的組成物であって、請求項８に記載の組換えワクシニアウイルスを含む薬学的組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３１】
ベロ細胞は、世界保健機構に従ったウイルスワクチンの生成に許容された細胞系である。幾つかの実施形態において、本発明の組換え複製ワクシニアウイルスは、ベロ細胞において生成される。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
インフルエンザＡヘッドレスヘマグルチニン（ｈｌＨＡ）ポリペプチドに挿入された少なくとも１つのインフルエンザＡ  Ｍ２細胞外ドメイン（Ｍ２ｅ）ポリペプチドを含む融合タンパク質をコードする遺伝子カセットを含む、組換えワクシニアウイルス。
（項目２）
前記融合タンパク質が、配列番号２に示されるｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質アミノ酸配列を含む、項目１に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目３）
前記融合タンパク質が、配列番号３に示されるＶＮ／１２０３ＨＡアミノ酸配列のアミノ酸を含む、項目１に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目４）
前記融合タンパク質は、配列番号３のＨＡ１アミノ酸１７〜５８と、ペプチドリンカーと、少なくとも１つのＭ２ｅポリペプチドと、ペプチドリンカーと、配列番号３のＨＡ１アミノ酸２９０〜３４３と、配列番号３のＨＡ２アミノ酸３４４〜５６８と、を含む、項目３に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目５）
ＨＡアミノ酸とＭ２ｅアミノ酸を連結するペプチドリンカーが、配列番号４に示されるアミノ酸ＧＧＧを含む、項目４に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目６）
前記Ｍ２ｅポリペプチドが、配列番号５に示されるＨ５Ｎ１  Ｍ２ｅアミノ酸配列を含む、項目１に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目７）
前記Ｍ２ｅポリペプチドが、配列番号６に示されるＨ１Ｎ１  Ｍ２ｅアミノ酸配列を含む、項目１に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目８）
前記Ｍ２ｅポリペプチドが、配列番号７に示されるＨ９Ｎ２  Ｍ２ｅアミノ酸配列を含む、項目１に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目９）
前記Ｍ２ｅポリペプチドが、配列番号８に示されるＨ７Ｎ２  Ｍ２ｅアミノ酸配列を含む、項目１に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目１０）
前記融合タンパク質が、２つ以上のＭ２ｅポリペプチドを含み、前記Ｍ２ｅポリペプチドは、ペプチドリンカーによって連結される、項目１、３、４、５、６、７、８、または９に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目１１）
前記Ｍ２ｅポリペプチドを連結する前記ペプチドリンカーが、配列番号９に示されるアミノ酸ＧＳＡＧＳＡを含む、項目１０に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目１２）
前記遺伝子カセットからの前記ｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質の発現が、ｍＨ５プロモーターの制御下にある、項目１〜１１のいずれか一項に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目１３）
前記遺伝子カセットからの前記ｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質の発現が、ｓｅｌＰプロモーターの制御下にある、項目１〜１１のいずれか一項に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目１４）
配列番号１に示される遺伝子カセットを含む、組換えワクシニアウイルス。
（項目１５）
インフルエンザＡマトリックスタンパク質１（Ｍ１）をコードする遺伝子カセットと、イ
ンフルエンザＡ核タンパク質（ＮＰ）をコードする遺伝子カセットと、を更に含む、項目１〜１４のいずれか一項に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目１６）
前記Ｍ１タンパク質が、配列番号１１に示されるアミノ酸配列を含む、項目１５に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目１７）
前記Ｍ１タンパク質が、配列番号１０に示されるヌクレオチド配列によってコードされる、項目１６に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目１８）
前記ＮＰが、配列番号１３に示されるアミノ酸配列を含む、項目１５に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目１９）
前記ＮＰが、配列番号１２に示されるヌクレオチド配列によってコードされる、項目１８に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目２０）
前記ワクシニアウイルスが、修飾ワクシニアウイルスアンカラ（ＭＶＡ）、欠損ワクシニアリスター（ｄＶＶ）、ＭＶＡ−５７５、ＭＶＡ−ＢＮ、ＭＶＡ−Ｆ６、またはＭＶＡ−Ｍ４である、項目１〜１９のいずれか一項に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目２１）
前記ワクシニアウイルスがＭＶＡである、項目１〜１９のいずれか一項に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目２２）
前記ｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質遺伝子カセットが、欠失Ｉ領域、欠失ＩＩ領域、欠失ＩＩＩ領域、欠失ＩＶ領域、チミジンキナーゼ遺伝子座、Ｄ４／５遺伝子間領域、またはＨＡ遺伝子座中の前記ＭＶＡに挿入される、項目２１に記載の組換えＭＶＡ。
（項目２３）
前記ｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質遺伝子カセットが、Ｄ４／５遺伝子間領域中の前記ＭＶＡに挿入される、項目２１または２２に記載の組換えＭＶＡ。
（項目２４）
項目１〜２３のいずれか一項に記載の組換えＭＶＡを含む、薬学的組成物。
（項目２５）
配列番号２に示されるｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質アミノ酸配列をコードする遺伝子カセットを含む組換えＭＶＡを含む、薬学的組成物。
（項目２６）
配列番号１に示される遺伝子カセットを含む組換えＭＶＡを含む、薬学的組成物。
（項目２７）
個人におけるンフルエンザＡウイルスに対するヘテロサブタイプ免疫応答を誘導する方法であって、項目１〜２３のいずれか一項に記載の組換えＭＶＡを含む薬学的組成物を前記個人に投与することを含む、方法。
（項目２８）
個人におけるインフルエンザＡウイルスに対するヘテロサブタイプ免疫応答を誘導する際に用いる薬学的組成物であって、項目１〜２３のいずれか一項に記載の組換えＭＶＡを含む薬学的組成物を前記個人に投与するステップを含む、方法。
（項目２９）
配列番号１に示されるｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質遺伝子カセットを発現する組換えＭＶＡを生成する方法であって、
ａ）  初代ニワトリ胚細胞または永久細胞株をＭＶＡに感染させるステップと、
ｂ）  前記感染させた細胞を、配列番号１に示されるｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質遺伝子カセットを含み、かつＭＶＡゲノムの非必須領域と相同である遺伝子カセットに隣接するＤＮＡを含むプラスミドでトランスフェクトするステップと、
ｃ）  前記細胞を増殖させ、前記感染させた細胞内でのＭＶＡの複製中に、前記プラスミドの前記ＭＶＡゲノムとの組換えを可能にし、それによって、前記ｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質遺伝子カセットを前記非必須領域内の前記ＭＶＡゲノムに挿入するステップと、
ｄ）  生成された前記組換えＭＶＡを得るステップと、
を含む、方法。
（項目３０）
前記非必須ＭＶＡ領域が、前記欠失Ｉ領域、前記欠失ＩＩ領域、前記欠失ＩＩＩ領域、前記欠失ＩＶ領域、前記チミジンキナーゼ遺伝子座、前記Ｄ４／５遺伝子間領域、または前記ＨＡ遺伝子座である、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
前記非必須ＭＶＡ領域が、前記Ｄ４／５遺伝子間領域である、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
インフルエンザＡヘッドレスヘマグルチニン（ｈｌＨＡ）ポリペプチドに挿入された少なくとも１つのインフルエンザＡ  Ｍ２細胞外ドメイン（Ｍ２ｅ）ポリペプチドを含む融合タンパク質をコードする第１の遺伝子カセットと、インフルエンザＡ核タンパク質（ＮＰ）をコードする第２の遺伝子カセットと、を含む、組換えワクシニアウイルス。
（項目３３）
前記融合タンパク質が、配列番号２に示される前記ｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質アミノ酸配列を含む、項目３２に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目３４）
前記融合タンパク質が、配列番号３に示される前記ＶＮ／１２０３ＨＡアミノ酸配列のアミノ酸を含む、項目３２に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目３５）
前記融合タンパク質が、配列番号３のＨＡ１アミノ酸１７〜５８と、ペプチドリンカーと、少なくとも１つのＭ２ｅポリペプチドと、ペプチドリンカーと、配列番号３のＨＡ１アミノ酸２９０〜３４３と、配列番号３のＨＡ２アミノ酸３４４〜５６８と、を含む、項目３４に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目３６）
前記ＨＡアミノ酸とＭ２ｅアミノ酸を連結するペプチドリンカーが、配列番号４に示される前記アミノ酸ＧＧＧを含む、項目３５に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目３７）
前記Ｍ２ｅポリペプチドが、配列番号５に示される前記Ｈ５Ｎ１  Ｍ２ｅアミノ酸配列を含む、項目３２に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目３８）
前記Ｍ２ｅポリペプチドが、配列番号６に示される前記Ｈ１Ｎ１  Ｍ２ｅアミノ酸配列を含む、項目３２に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目３９）
前記Ｍ２ｅポリペプチドが、配列番号７に示される前記Ｈ９Ｎ２  Ｍ２ｅアミノ酸配列を含む、項目３２に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目４０）
前記Ｍ２ｅポリペプチドが、配列番号８に示される前記Ｈ７Ｎ２  Ｍ２ｅアミノ酸配列を含む、項目３２に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目４１）
前記融合タンパク質が、２つ以上のＭ２ｅポリペプチドを含み、前記Ｍ２ｅポリペプチドが、ペプチドリンカーによって連結される、項目３２、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目４２）
前記Ｍ２ｅポリペプチドを連結する前期ペプチドリンカーが、配列番号９に示される前記アミノ酸配列ＧＳＡＧＳＡを含む、項目４１に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目４３）
前記ＮＰが、配列番号１３に示される前記アミノ酸配列を含む、項目３２に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目４４）
前記第１の遺伝子カセットからの前記ｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質の発現が、ｍＨ５プロモーターまたはｓｅｌＰプロモーターの制御下にある、項目３２〜４３のいずれか一項に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目４５）
前記第１の遺伝子カセットからの前記ｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質の発現が、ｍＨ５プロモーターの制御下にある、項目４４に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目４６）
前記第１の遺伝子カセットからの前記ｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質の発現が、ｓｅｌＰプロモーターの制御下にある、項目４４に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目４７）
前記第２の遺伝子カセットからのＮＰの発現が、ｍＨ５プロモーターまたはｓｅｌＰプロモーターの制御下にある、項目３２〜４３のいずれか一項に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目４８）
前記第２の遺伝子カセットからのＮＰの発現が、ｍＨ５プロモーターの制御下にある、項目４７に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目４９）
前記第２の遺伝子カセットからのＮＰの発現が、ｓｅｌＰプロモーターの制御下にある、項目４７に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目５０）
前記第１の遺伝子カセットからの前記ｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質の発現および前記第２の遺伝子カセットからのＮＰの発現が、ｍＨ５プロモーターの制御下にある、項目３２〜４３のいずれか一項に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目５１）
配列番号１に示される第１の遺伝子カセットと、配列番号１２に示される第２の遺伝子カセットと、を含む、組換えワクシニアウイルス。
（項目５２）
前記ワクシニアウイルスが、修飾ワクシニアウイルスアンカラ（ＭＶＡ）、欠損ワクシニアリスター（ｄＶＶ）、ＭＶＡ−５７５、ＭＶＡ−ＢＮ、ＭＶＡ−Ｆ６、またはＭＶＡ−Ｍ４である、項目３２〜５１のいずれか一項に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目５３）
前記ワクシニアウイルスがＭＶＡである、項目３２〜５１のいずれか一項に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目５４）
前記第１の遺伝子カセットが、前記欠失Ｉ領域、前記欠失ＩＩ領域、前記欠失ＩＩＩ領域、前記欠失ＩＶ領域、前記チミジンキナーゼ遺伝子座、前記Ｄ４／５遺伝子間領域、または前記ＨＡ遺伝子座中の前記ＭＶＡに挿入される、項目５３に記載の組換えＭＶＡ。
（項目５５）
前記第２の遺伝子カセットが、前記欠失Ｉ領域、前記欠失ＩＩ領域、前記欠失ＩＩＩ領域、前記欠失ＩＶ領域、前記チミジンキナーゼ遺伝子座、前記Ｄ４／５遺伝子間領域、または前記ＨＡ遺伝子座中の前記ＭＶＡに挿入される、項目５３に記載の組換えＭＶＡ。
（項目５６）
前記第１の遺伝子カセットが、前記Ｄ４／５遺伝子間領域中の前記ＭＶＡに挿入される、項目３２〜５３のいずれか一項に記載の組換えＭＶＡ。
（項目５７）
前記第２の遺伝子カセットが、前記欠失ＩＩＩ領域中の前記ＭＶＡに挿入される、項目
３２〜５３のいずれか一項に記載の組換えＭＶＡ。
（項目５９）
前記第１の遺伝子カセットが、前記Ｄ４／５遺伝子間領域中の前記ＭＶＡに挿入され、前記第２の遺伝子カセットが、前記欠失ＩＩＩ領域中の前記ＭＶＡに挿入される、項目３２〜５３のいずれか一項に記載の組換えＭＶＡ。
（項目６０）
項目３２〜５９のいずれか一項に記載の組換えＭＶＡを含む、薬学的組成物。
（項目６１）
配列番号２に示されるｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質アミノ酸配列をコードする第１の遺伝子カセットと、配列番号１３に示されるインフルエンザＡ核タンパク質（ＮＰ）をコードする第２の遺伝子カセットと、を含む組換えＭＶＡを含む、薬学的組成物。
（項目６２）
配列番号１に示される第１のｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質遺伝子カセットと、配列番号１２に示される第２のＮＰ遺伝子カセットと、を含む組換えＭＶＡを含む、薬学的組成物。
（項目６３）
個人におけるインフルエンザＡウイルスに対するヘテロサブタイプ免疫応答を誘導する方法であって、前記個人に、項目３２〜５９のいずれか一項に記載の組換えＭＶＡを含む薬学的組成物を投与することを含む、方法。
（項目６４）
個人におけるインフルエンザＡウイルスに対するヘテロサブタイプ免疫応答の誘導における使用のための薬学的組成物であって、前記方法は、前記個人に、項目３２〜５９のいずれか一項に記載の組換えＭＶＡを含む薬学的組成物を投与するステップを含む、薬学的組成物。
（項目６５）
配列番号１に示されるｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質第１遺伝子カセットおよび配列番号１２に示されるＮＰ第２遺伝子カセットを発現する組換えＭＶＡを生成する方法であって、
ａ）  初代ニワトリ胚細胞または永久細胞株をＭＶＡに感染させるステップと、
ｂ）  前記感染させた細胞を、配列番号１に示されるｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質遺伝子カセットを含み、かつＭＶＡゲノムの第１の非必須領域と相同である遺伝子カセットに隣接するＤＮＡを含むプラスミドでトランスフェクトするステップと、
ｃ）  前記細胞を増殖させ、前記感染させた細胞内でのＭＶＡの複製中に、前記プラスミドの前記ＭＶＡゲノムとの組み換えを可能にし、それによって、前記ｈｌＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質遺伝子カセットを前記第１の非必須領域内の前記ＭＶＡゲノムに挿入するステップと、
ｄ）  生成された前記組換えＭＶＡを得るステップと、
ｅ）  初代ニワトリ胚細胞または永久鳥類細胞株を、ステップｄ）のＭＶＡに感染させるステップと、
ｆ）  ステップｅ）の感染させた細胞を、配列番号１２に示されるＮＰ遺伝子カセットを含み、かつＭＶＡゲノムの第２の非必須領域と相同である遺伝子カセットに隣接するＤＮＡを含むプラスミドでトランスフェクトするステップと、
ｇ）  前記細胞を増殖させ、前記感染させた細胞内でのＭＶＡの複製中に、前記プラスミドの前記ＭＶＡゲノムとの組み換えを可能にし、それによって、前記ＮＰ遺伝子カセットを前記第２の非必須領域内の前記ＭＶＡゲノムに挿入するステップと、
ｈ）  生成された前記組換えＭＶＡを得るステップと、
を含む、方法。
（項目６６）
前記非必須ＭＶＡ領域が、前記欠失Ｉ領域、前記欠失ＩＩ領域、前記欠失ＩＩＩ領域前記、欠失ＩＶ領域、前記チミジンキナーゼ遺伝子座、前記Ｄ４／５遺伝子間領域、または前
記ＨＡ遺伝子座である、項目６５に記載の方法。
（項目６７）
前記第１の非必須ＭＶＡ領域が、前記Ｄ４／５遺伝子間領域である、項目６５に記載の方法。
（項目６８）
前記第２の非必須ＭＶＡ領域が、前記欠失ＩＩＩ領域である、項目６５に記載の方法。
（項目６９）
前記第１の非必須ＭＶＡ領域が、前記Ｄ４／５遺伝子間領域であり、前記第２の非必須ＭＶＡ領域が、前記欠失ＩＩＩ領域である、項目６５に記載の方法。
（項目７０）
インフルエンザＡヘッドレスヘマグルチニン（ｈｌＨＡ）ポリペプチドをコードする第１の遺伝子カセットと、インフルエンザＡ核タンパク質（ＮＰ）をコードする第２の遺伝子カセットと、を含む、組換えワクシニアウイルス。
（項目７１）
前記ｈｌＨＡポリペプチドが、配列番号１５に示されるアミノ酸配列を含む、項目６０に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目７２）
前記ＮＰが、配列番号１３に示されるアミノ酸配列を含む、項目６０に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目７３）
前記第１の遺伝子カセットからの前記ｈｌＨＡポリペプチドの発現が、ｍＨ５プロモーターまたはｓｅｌＰプロモーターの制御下にある、項目７０〜７２のいずれか一項に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目７４）
前記第１の遺伝子カセットからの前記ｈｌＨＡポリペプチドの発現が、ｍＨ５プロモーターの制御下にある、項目７３に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目７５）
前記第１の遺伝子カセットからの前記ｈｌＨＡポリペプチドの発現が、ｓｅｌＰプロモーターの制御下にある、項目７３に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目７６）
前記第２の遺伝子カセットからのＮＰの発現が、ｍＨ５プロモーターまたはｓｅｌＰプロモーターの制御下にある、項目７０〜７２のいずれか一項に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目７７）
前記第２の遺伝子カセットからのＮＰの発現が、ｍＨ５プロモーターの制御下にある、項目７６に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目７８）
前記第２の遺伝子カセットからのＮＰの発現が、ｓｅｌＰプロモーターの制御下にある、項目７６に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目７９）
前記第１の遺伝子カセットからの前記ｈｌＨＡポリペプチドの発現および前記第２の遺伝子カセットからのＮＰの発現が、ｍＨ５プロモーターの制御下にある、項目７０〜７２のいずれか一項に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目８０）
配列番号１４に示されるｈｌＨＡ遺伝子第１カセットと、配列番号１２に示されるＮＰ第２遺伝子カセットと、を含む、組換えワクシニアウイルス。
（項目８１）
インフルエンザＡ  Ｍ１をコードする第３の遺伝子カセットを更に含む、項目７０〜８０のいずれか一項に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目８２）
前記Ｍ１タンパク質が、配列番号１１に示される前記アミノ酸配列を含む、項目１５に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目８３）
前記Ｍ１タンパク質が、配列番号１０に示される前記ヌクレオチド配列によってコードされる、項目８２に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目８４）
前記ワクシニアウイルスが、修飾ワクシニアウイルスアンカラ（ＭＶＡ）、欠損ワクシニアリスター（ｄＶＶ）、ＭＶＡ−５７５、ＭＶＡ−ＢＮ、ＭＶＡ−Ｆ６、またはＭＶＡ−Ｍ４である、項目７０〜８３のいずれか一項に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目８５）
前記ワクシニアウイルスがＭＶＡである、項目７０〜８３のいずれか一項に記載の組換えワクシニアウイルス。
（項目８６）
前記第１の遺伝子カセットが、前記欠失Ｉ領域、前記欠失ＩＩ領域、前記欠失ＩＩＩ領域、前記欠失ＩＶ領域、前記チミジンキナーゼ遺伝子座、前記Ｄ４／５遺伝子間領域、または前記ＨＡ遺伝子中の前記ＭＶＡに挿入される、項目８５に記載の組換えＭＶＡ。
（項目８７）
前記第２の遺伝子カセットが、前記欠失Ｉ領域、前記欠失ＩＩ領域、前記欠失ＩＩＩ領域、前記欠失ＩＶ領域、前記チミジンキナーゼ遺伝子座、前記Ｄ４／５遺伝子間領域、または前記ＨＡ遺伝子座中の前記ＭＶＡに挿入される、項目８５または８６に記載の組換えＭＶＡ。
（項目８８）
前記第１の遺伝子カセットが、前記Ｄ４／５遺伝子間領域中の前記ＭＶＡに挿入される、項目８５に記載の組換えＭＶＡ。
（項目８９）
前記第２の遺伝子カセットが、前記欠失ＩＩＩ領域中の前記ＭＶＡに挿入される、項目８５に記載の組換えＭＶＡ。
（項目９０）
前記第１および第３の遺伝子カセットが、前記Ｄ４／５遺伝子間領域中の前記ＭＶＡに挿入され、前記第２の遺伝子カセットが、前記欠失ＩＩＩ領域中の前記ＭＶＡに挿入される、項目８５に記載の組換えＭＶＡ。
（項目９１）
項目７０〜９０のいずれか一項に記載の組換えＭＶＡを含む、薬学的組成物。
（項目９２）
配列番号１５に示されるヘッドレスＨＡ（ｈｌＨＡ）アミノ酸配列をコードする第１の遺伝子カセットと、配列番号１３に示されるインフルエンザＡ核タンパク質（ＮＰ）をコードする第２の遺伝子カセットとを含む組換えＭＶＡを含む、薬学的組成物。
（項目９３）
配列番号１４に示されるｈｌＨＡ第１遺伝子カセットと、配列番号１２に示されるＮＰ第２遺伝子カセットとを含む組換えＭＶＡを含む、薬学的組成物。
（項目９４）
配列番号１４に示されるｈｌＨＡ第１遺伝子カセットと、配列番号１０に示されるＭ１第２遺伝子カセットと、配列番号１２に示されるＮＰ第３遺伝子カセットとを含む組換えＭＶＡを含む、薬学的組成物。
（項目９５）
個人におけるインフルエンザＡウイルスに対するヘテロサブタイプ免疫応答を誘導する方法であって、前記個人に、項目７０〜９０のいずれか一項に記載の組換えＭＶＡを含む薬学的組成物を投与することを含む、方法。
（項目９６）
個人におけるインフルエンザＡウイルスに対するヘテロサブタイプ免疫応答の誘導におけ
る使用のための薬学的組成物であって、前記方法は、前記個人に、項目７０〜９０のいずれか一項に記載の組換えＭＶＡを含む薬学的組成物を投与するステップを含む、薬学的組成物。
（項目９７）
配列番号１４に示されるｈｌＨＡ第１遺伝子カセットおよび配列番号１２に示されるＮＰ第２遺伝子カセットを発現する組換えＭＶＡを生成する方法であって、
ａ）  初代ニワトリ胚細胞または永久鳥類細胞株をＭＶＡに感染させるステップと、
ｂ）  前記感染させた細胞を、配列番号１４に示されるヘッドレスＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質遺伝子カセットを含み、かつＭＶＡゲノムの第１の非必須領域と相同である遺伝子カセットに隣接するＤＮＡを含むプラスミドでトランスフェクトするステップと、
ｃ）  前記細胞を増殖させ、前記感染させた細胞内でのＭＶＡの複製中に、前記プラスミドの前記ＭＶＡゲノムとの組み換えを可能にし、それによって、前記ヘッドレスＨＡ／Ｍ２ｅ融合タンパク質遺伝子カセットを前記第１の非必須領域内の前記ＭＶＡゲノムに挿入するステップと、
ｄ）  生成された前記組換えＭＶＡを得るステップと、
ｅ）  初代ニワトリ胚細胞または永久鳥類細胞株を、ステップｄ）のＭＶＡに感染させるステップと、
ｆ）  ステップｅ）の感染させた細胞を、配列番号１２に示されるＮＰ遺伝子カセットを含み、かつＭＶＡゲノムの第２の非必須領域と相同である遺伝子カセットに隣接するＤＮＡを含むプラスミドで、トランスフェクトするステップと、
ｇ）  前記細胞を増殖させ、前記感染させた細胞内でのＭＶＡの複製中に、前記プラスミドの前記ＭＶＡゲノムとの組み換えを可能にし、それによって、前記ＮＰ遺伝子カセットを前記第２の非必須領域内の前記ＭＶＡゲノムに挿入するステップと、
ｈ）  生成された前記組換えＭＶＡを得るステップと
を含む、方法。
（項目９８）
前記非必須ＭＶＡ領域が、前記欠失Ｉ領域、前記欠失ＩＩ領域、前記欠失ＩＩＩ領域前記、欠失ＩＶ領域、前記チミジンキナーゼ遺伝子座、前記Ｄ４／５遺伝子間領域、または前記ＨＡ遺伝子座である、項目９７に記載の方法。
（項目９９）
前記第１の非必須ＭＶＡ領域が、前記Ｄ４／５遺伝子間領域である、項目９７に記載の方法。
（項目１００）
前記第２の非必須ＭＶＡ領域が、前記欠失ＩＩＩ領域である、項目９７に記載の方法。
（項目１０１）
前記第１の非必須ＭＶＡ領域が、前記Ｄ４／５遺伝子間領域であり、前記第２の必須ＭＶＡ領域は、前記欠失ＩＩＩ領域である、項目９７に記載の方法。