【手続補正書】
【提出日】平成27年3月2日(2015.3.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号２と≧８０％同一であるアミノ酸配列を有する、１〜８４アミノ酸の長さの副甲状腺ホルモンペプチドであって、残基Ｘ１、Ｘ７、Ｘ８、Ｘ１６、Ｘ１８、Ｘ２１、Ｘ２２、Ｘ２６、Ｘ３５、Ｘ３６、Ｘ３９、Ｘ４０、Ｘ４１、Ｘ４２、Ｘ４３、Ｘ４５、Ｘ４６、Ｘ４７、Ｘ４８、Ｘ５２、Ｘ５６、Ｘ５８、Ｘ５９、Ｘ６０、Ｘ６１、Ｘ６２、Ｘ６３、Ｘ６４、Ｘ７０、Ｘ７４、Ｘ７６、Ｘ７９、Ｘ８１またはＸ８３に対応する１つまたは複数の位置に非天然アミノ酸を含む、副甲状腺ホルモンペプチド。
【請求項２】
少なくとも１つのノルロイシン（Ｎｌｅ）および／またはメトキシニン（Ｍｏｘ）残基を含む、請求項１に記載の副甲状腺ホルモンペプチド。
【請求項３】
残基８、残基１８およびそれらの組み合わせに対応する位置にノルロイシン残基および／またはメトキシニン残基を含む、請求項１に記載の副甲状腺ホルモンペプチド。
【請求項４】
配列番号３、配列番号４および配列番号５の少なくとも１つを含む、請求項１に記載の副甲状腺ホルモンペプチド。
【請求項５】
以下のうちの少なくとも１つが当てはまる、請求項３に記載の副甲状腺ホルモンペプチド：
Ｘ１が、Ｓ、Ａ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ７がＦ、Ｌ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ１６がＮ、Ｓ、Ａ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ１８がＭ、Ｌ、Ｖ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ２１がＶ、Ｍ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、および
Ｘ２２がＥ、Ｑ、ＮｌｅまたはＭｏｘである。
【請求項６】
以下のうちの少なくとも１つが当てはまる、請求項４に記載の副甲状腺ホルモンペプチド：
Ｘ３６がＡ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ３９がＡ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ４５がＤ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ４８がＳ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ５６がＤ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ５８がＶ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ６０がＶ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ６１がＥ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ６２がＥ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ７０がＡ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ７４がＤ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、および
Ｘ８１がＡ、ＮｌｅまたはＭｏｘである。
【請求項７】
少なくとも１つのグリカン基でグリコシル化されている、請求項１に記載の副甲状腺ホルモンペプチド。
【請求項８】
セリン残基またはトレオニン残基においてグリコシル化されている、請求項７に記載の副甲状腺ホルモンペプチド。
【請求項９】
前記少なくとも１つのグリカン基が、
【化８６】
2014508765.tif 000001
から選択される、請求項８に記載のペプチド。
【請求項１０】
前記少なくとも１つのグリカン基が、
【化８７】
2014508765.tif 000002
である、請求項８に記載のペプチド。
【請求項１１】
前記少なくとも１つのグリカン基が、
【化８８】
2014508765.tif 000003
である、請求項８に記載のペプチド。
【請求項１２】
アスパラギン残基またはグルタミン残基においてグリコシル化されている、請求項７に記載のペプチド。
【請求項１３】
前記少なくとも１つのグリカン基が、
【化８９】
2014508765.tif 000004
から選択される、請求項１２に記載のペプチド。
【請求項１４】
前記少なくとも１つのグリカン基が、
【化９０】
2014508765.tif 000005
である、請求項１３に記載のペプチド。
【請求項１５】
前記少なくとも１つのグリカン基が、
【化９１】
2014508765.tif 000006
である、請求項１３に記載のペプチド。
【請求項１６】
前記少なくとも１つのグリカン基が、
【化９２】
2014508765.tif 000007
である、請求項１３に記載のペプチド。
【請求項１７】
前記少なくとも１つのグリカン基が、
【化９３】
2014508765.tif 000008
である、請求項１３に記載のペプチド。
【請求項１８】
配列番号１５と≧８０％同一であるアミノ酸配列を有する、１〜３７アミノ酸の長さの副甲状腺ホルモンペプチドであって、残基８、残基１８およびそれらの組み合わせに対応する位置にノルロイシン残基および／またはメトキシニン残基を含む、副甲状腺ホルモンペプチド。
【請求項１９】
配列番号１４と≧８０％同一である要素を含むアミノ酸配列を有する副甲状腺ホルモンペプチドであって、残基８、残基１８およびそれらの組み合わせに対応する位置にノルロイシン残基および／またはメトキシニン残基を含む、副甲状腺ホルモンペプチド。
【請求項２０】
配列番号８と≧８０％同一であるアミノ酸配列を有する、１〜１４１アミノ酸の長さの副甲状腺ホルモン関連ペプチド。
【請求項２１】
請求項２に記載の副甲状腺ホルモンペプチド、請求項７に記載のグリコシル化された副甲状腺ホルモン断片、または請求項１８に記載の副甲状腺ホルモン関連タンパク質と、薬学的に許容される賦形剤とを含む薬学的組成物。
【請求項２２】
生物学的に活性なホルモンまたはグリコペプチドを調製する方法であって、システインまたはメチオニン以外のアミノ酸残基における少なくとも１回のネイティブケミカルライゲーションによるカップリングを含む方法。
【請求項２３】
前記ネイティブケミカルライゲーションによるカップリングが、アラニン、バリン、トレオニン、ロイシンおよびプロリンから選択される残基において起こる、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記生物学的に活性なホルモンが、副甲状腺ホルモン（１−３４）、副甲状腺ホルモン（１−３７）、副甲状腺ホルモン（１−３９）、副甲状腺ホルモン（１−８４）、Ｎ−グリコシル化副甲状腺ホルモン、Ｏ−グリコシル化副甲状腺ホルモン、副甲状腺ホルモン関連タンパク質（１−１３９）、副甲状腺ホルモン関連タンパク質（１−１４１）、副甲状腺ホルモン関連タンパク質（１−１７３）から選択される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記生物学的に活性なホルモンが副甲状腺ホルモン（１−３４）である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
（ｉ）断片ＩとＩＩのネイティブケミカルライゲーションによって断片Ｖを調製するステップ：
【化９４】
2014508765.tif 000009
（ｉｉ）断片ＩＩＩとＩＶのネイティブケミカルライゲーションによって断片ＶＩを調製するステップ：
【化９５】
2014508765.tif 000010
（ｉｉｉ）断片ＶＩを脱保護して断片ＶＩＩを生成するステップ：
【化９６】
2014508765.tif 000011
（ｉｖ）断片ＶとＶＩＩをネイティブケミカルライゲーションによってカップリングして断片ＶＩＩＩを生成するステップ：
【化９７】
2014508765.tif 000012
および
（ｖ）断片ＶＩＩＩを還元してｈＰＴＨペプチドを生成するステップ：
【化９８】
2014508765.tif 000013
を含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記生物学的に活性なホルモンが副甲状腺ホルモン関連タンパク質（１−１４１）である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
断片ＸＸＸ、ＸＸＸＩ、ＸＸＸＩＩおよびＸＸＸＩＩＩのネイティブケミカルライゲーションによるカップリングを含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、ＸＩＶ、ＸＶ、ＸＶＩ、ＸＶＩＩ、ＸＶＩＩＩ、ＸＩＸ、ＸＸ、ＸＸＩ、ＸＸＩＩ、ＸＸＩＩＩ、ＸＸＩＶ、ＸＸＶ、ＸＸＶＩ、ＸＸＶＩＩ、ＸＸＶＩＩＩ、ＸＸＩＸ、ＸＸＸ、ＸＸＸＩ、ＸＸＸＩＩ、ＸＸＸＩＩＩ、ＸＸＸＩＶ、ＸＸＸＶ、ＸＸＸＶＩまたはＸＸＸＶＩＩからなる群から選択されるネイティブケミカルライゲーション断片。
【請求項３０】
副甲状腺機能低下症に関連する疾患、障害および／または症状を処置するための組成物であって、治療有効量のｈＰＴＨまたはｈＰＴＨｒＰペプチドおよび／または類似体を含む組成物。
【請求項３１】
前記疾患、障害および／または症状が、骨粗鬆症、低カルシウム血症および低カルシウム尿症から選択される、請求項３０に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
本明細書に記載の通り提供されるネイティブケミカルライゲーション技術としては、例えば、ケミカルライゲーションによって作用物質（ａｇｅｎｔ）を調製する方法、ケミカルライゲーション反応に関与する試薬、および／またはケミカルライゲーションによる合成において開発および／または 利用される中間体が挙げられる。
本発明は、例えば、以下の項目も提供する。
（項目１）
配列番号２と≧８０％同一であるアミノ酸配列を有する、１〜８４アミノ酸の長さの副甲状腺ホルモンペプチドであって、残基Ｘ１、Ｘ７、Ｘ８、Ｘ１６、Ｘ１８、Ｘ２１、Ｘ２２、Ｘ２６、Ｘ３５、Ｘ３６、Ｘ３９、Ｘ４０、Ｘ４１、Ｘ４２、Ｘ４３、Ｘ４５、Ｘ４６、Ｘ４７、Ｘ４８、Ｘ５２、Ｘ５６、Ｘ５８、Ｘ５９、Ｘ６０、Ｘ６１、Ｘ６２、Ｘ６３、Ｘ６４、Ｘ７０、Ｘ７４、Ｘ７６、Ｘ７９、Ｘ８１またはＸ８３に対応する１つまたは複数の位置に非天然アミノ酸を含む、副甲状腺ホルモンペプチド。
（項目２）
少なくとも１つのノルロイシン（Ｎｌｅ）および／またはメトキシニン（Ｍｏｘ）残基を含む、項目１に記載の副甲状腺ホルモンペプチド。
（項目３）
残基８、残基１８およびそれらの組み合わせに対応する位置にノルロイシン残基および／またはメトキシニン残基を含む、項目１に記載の副甲状腺ホルモンペプチド。
（項目４）
配列番号３、配列番号４および配列番号５の少なくとも１つを含む、項目１に記載の副甲状腺ホルモンペプチド。
（項目５）
以下のうちの少なくとも１つが当てはまる、項目３に記載の副甲状腺ホルモンペプチド：
Ｘ１が、Ｓ、Ａ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ７がＦ、Ｌ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ１６がＮ、Ｓ、Ａ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ１８がＭ、Ｌ、Ｖ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ２１がＶ、Ｍ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、および
Ｘ２２がＥ、Ｑ、ＮｌｅまたはＭｏｘである。
（項目６）
以下のうちの少なくとも１つが当てはまる、項目４に記載の副甲状腺ホルモンペプチド：
Ｘ３６がＡ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ３９がＡ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ４５がＤ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ４８がＳ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ５６がＤ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ５８がＶ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ６０がＶ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ６１がＥ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ６２がＥ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ７０がＡ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、
Ｘ７４がＤ、ＮｌｅまたはＭｏｘである、および
Ｘ８１がＡ、ＮｌｅまたはＭｏｘである。
（項目７）
少なくとも１つのグリカン基でグリコシル化されている、項目１に記載の副甲状腺ホルモンペプチド。
（項目８）
セリン残基またはトレオニン残基においてグリコシル化されている、項目７に記載の副甲状腺ホルモンペプチド。
（項目９）
前記少なくとも１つのグリカン基が、
【化８６】
2014508765.tif 000014
から選択される、項目８に記載のペプチド。
（項目１０）
前記少なくとも１つのグリカン基が、
【化８７】
2014508765.tif 000015
である、項目８に記載のペプチド。
（項目１１）
前記少なくとも１つのグリカン基が、
【化８８】
2014508765.tif 000016
である、項目８に記載のペプチド。
（項目１２）
アスパラギン残基またはグルタミン残基においてグリコシル化されている、項目７に記載のペプチド。
（項目１３）
前記少なくとも１つのグリカン基が、
【化８９】
2014508765.tif 000017
から選択される、項目１２に記載のペプチド。
（項目１４）
前記少なくとも１つのグリカン基が、
【化９０】
2014508765.tif 000018
である、項目１３に記載のペプチド。
（項目１５）
前記少なくとも１つのグリカン基が、
【化９１】
2014508765.tif 000019
である、項目１３に記載のペプチド。
（項目１６）
前記少なくとも１つのグリカン基が、
【化９２】
2014508765.tif 000020
である、項目１３に記載のペプチド。
（項目１７）
前記少なくとも１つのグリカン基が、
【化９３】
2014508765.tif 000021
である、項目１３に記載のペプチド。
（項目１８）
配列番号１５と≧８０％同一であるアミノ酸配列を有する、１〜３７アミノ酸の長さの副甲状腺ホルモンペプチドであって、残基８、残基１８およびそれらの組み合わせに対応する位置にノルロイシン残基および／またはメトキシニン残基を含む、副甲状腺ホルモンペプチド。
（項目１９）
配列番号１４と≧８０％同一である要素を含むアミノ酸配列を有する副甲状腺ホルモンペプチドであって、残基８、残基１８およびそれらの組み合わせに対応する位置にノルロイシン残基および／またはメトキシニン残基を含む、副甲状腺ホルモンペプチド。
（項目２０）
配列番号８と≧８０％同一であるアミノ酸配列を有する、１〜１４１アミノ酸の長さの副甲状腺ホルモン関連ペプチド。
（項目２１）
項目２に記載の副甲状腺ホルモンペプチド、項目７に記載のグリコシル化された副甲状腺ホルモン断片、または項目１８に記載の副甲状腺ホルモン関連タンパク質と、薬学的に許容される賦形剤とを含む薬学的組成物。
（項目２２）
生物学的に活性なホルモンまたはグリコペプチドを調製する方法であって、システインまたはメチオニン以外のアミノ酸残基における少なくとも１回のネイティブケミカルライゲーションによるカップリングを含む方法。
（項目２３）
前記ネイティブケミカルライゲーションによるカップリングが、アラニン、バリン、トレオニン、ロイシンおよびプロリンから選択される残基において起こる、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
前記生物学的に活性なホルモンが、副甲状腺ホルモン（１−３４）、副甲状腺ホルモン（１−３７）、副甲状腺ホルモン（１−３９）、副甲状腺ホルモン（１−８４）、Ｎ−グリコシル化副甲状腺ホルモン、Ｏ−グリコシル化副甲状腺ホルモン、副甲状腺ホルモン関連タンパク質（１−１３９）、副甲状腺ホルモン関連タンパク質（１−１４１）、副甲状腺ホルモン関連タンパク質（１−１７３）から選択される、項目２２に記載の方法。
（項目２５）
前記生物学的に活性なホルモンが副甲状腺ホルモン（１−３４）である、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
（ｉ）断片ＩとＩＩのネイティブケミカルライゲーションによって断片Ｖを調製するステップ：
【化９４】
2014508765.tif 000022
（ｉｉ）断片ＩＩＩとＩＶのネイティブケミカルライゲーションによって断片ＶＩを調製するステップ：
【化９５】
2014508765.tif 000023
（ｉｉｉ）断片ＶＩを脱保護して断片ＶＩＩを生成するステップ：
【化９６】
2014508765.tif 000024
（ｉｖ）断片ＶとＶＩＩをネイティブケミカルライゲーションによってカップリングして断片ＶＩＩＩを生成するステップ：
【化９７】
2014508765.tif 000025
および
（ｖ）断片ＶＩＩＩを還元してｈＰＴＨペプチドを生成するステップ：
【化９８】
2014508765.tif 000026
を含む、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
前記生物学的に活性なホルモンが副甲状腺ホルモン関連タンパク質（１−１４１）である、項目２４に記載の方法。
（項目２８）
断片ＸＸＸ、ＸＸＸＩ、ＸＸＸＩＩおよびＸＸＸＩＩＩのネイティブケミカルライゲーションによるカップリングを含む、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、ＸＩＶ、ＸＶ、ＸＶＩ、ＸＶＩＩ、ＸＶＩＩＩ、ＸＩＸ、ＸＸ、ＸＸＩ、ＸＸＩＩ、ＸＸＩＩＩ、ＸＸＩＶ、ＸＸＶ、ＸＸＶＩ、ＸＸＶＩＩ、ＸＸＶＩＩＩ、ＸＸＩＸ、ＸＸＸ、ＸＸＸＩ、ＸＸＸＩＩ、ＸＸＸＩＩＩ、ＸＸＸＩＶ、ＸＸＸＶ、ＸＸＸＶＩまたはＸＸＸＶＩＩからなる群から選択されるネイティブケミカルライゲーション断片。
（項目３０）
副甲状腺機能低下症に関連する疾患、障害および／または症状を処置する方法であって、治療有効量のｈＰＴＨまたはｈＰＴＨｒＰペプチドおよび／または類似体を投与するステップを含む方法。
（項目３１）
前記疾患、障害および／または症状が、骨粗鬆症、低カルシウム血症および低カルシウム尿症から選択される、項目３０に記載の方法。