(57)【要約】【課題】流動性物質の拡散状態を、所定の領域において短時間で効率よく定量評価することができる流動性物質の拡散状態評価用流動液及び拡散状態評価用流動液を用いた流動性物質の拡散状態評価方法を提供する。【解決手段】アデノシン５’−三リン酸及びその誘導体からなる群より選択される化合物と、水溶性セルロース系増粘剤から選択される増粘剤の少なくとも１種と、水と、を含む、拡散状態評価用流動液及びその応用。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アデノシン５’−三リン酸及びその誘導体からなる群より選択される化合物と、水溶性セルロース系増粘剤から選択される増粘剤の少なくとも１種と、水と、を含む、拡散状態評価用流動液。
【請求項２】
さらに、アデノシン５’−三リン酸の分析精度に影響を与えない着色剤を含有する請求項１に記載の拡散状態評価用流動液。
【請求項３】
評価対象領域に液体不透過性の受容シートを配置する工程と、
前記評価対象領域にて、請求項１又は請求項２に記載の拡散状態評価用流動液を用いて、作業者が評価対象作業を行う工程と、
評価対象作業の終了後に、前記液体不透過性の受容シートに付着した前記拡散状態評価用流動液を回収し、拡散状態評価用流動液に含まれるアデノシン三リン酸を定量する工程と、を含む
流動性物質の拡散状態評価方法。
【請求項４】
評価対象領域に多孔質領域を含む受容シートを配置する工程と、
前記評価対象領域にて、請求項１又は請求項２に記載の拡散状態評価用流動液を用いて、作業者が評価対象作業を行う工程と、
評価対象作業の終了後に、前記受容シートに付着した前記拡散状態評価用流動液を、水に溶解させて回収し、拡散状態評価用流動液に含まれるアデノシン三リン酸を定量する工程と、を含む
流動性物質の拡散状態評価方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、拡散状態評価用流動液、及び流動性物質の拡散状態評価方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
飛散しやすい流動性物質、特に、流動性物質として、人体に対して影響を及ぼす可能性のある物質、例えば、生理活性物質、細胞の培養液、感染症患者の血液、排泄物などを取り扱う場合には、作業者への曝露リスクを低減させ、流動性物質の作業領域外への拡散を防止するため、流動性物質の拡散状態を正確に把握することが重要である。
流動性物質は、流動性、粘度などに依存して拡散状態が異なり、例えば、細胞の培養液、感染症患者の血液等のより粘度の低い流動液では、流動液を取り扱う際に、微細な流動液粒子が拡散すると、気流による影響を受けて所望されない領域まで拡散する可能性がある。
一方、感染症患者の排泄物等は、より粘度が高い流動液となるため、拡散の挙動が血液などとは異なることがある。
【０００３】
具体的には、微生物の培養を行う実験設備、生理活性物質を製造する製造設備などにおいて、使用する機器、装置、作業室、実験室等の所定の領域内における流動性物質の拡散状況及び適切に流動性物質が必要な領域内に封じ込められているか否かを知るために、通常の作業における流動性物質の挙動を正確に検知することが重要といえる。
また、病院などの施設においては、感染症患者の血液、排泄物の拡散状態を正確に知ることで、有効で効率のよい感染拡大の抑制手段をとることできる。
いずれの場合も、作業者の安全性を考慮すれば、拡散状態を把握するための流動性物質自体を用いて評価を行うことは現実的ではない。
【０００４】
従って、流動性物質の拡散性評価、封じ込め等の拡散防止方法の評価等を行う場合、作業者の皮膚への付着、吸引などにより人体へ影響を与えることを防止するため、通常、取り扱う流動性物質自体を用いず、代替物を使用して評価を行っている。
例えば、ノロウイルスなどの拡散状態を確認する場合、より安全性の高い代替ウイルスの懸濁液を用いてネブライザにより数μｍの粒子として拡散させ、インパクタで捕集してウイルス量を測定する方法(例えば、非特許文献１参照）、着色した模擬嘔吐物を用いて汚染範囲を確認する方法(例えば、非特許文献２参照）などが提案されている。
しかし、非特許文献１に記載の方法では、代替ウイルス、即ち微生物を用いるため、取り扱い性が困難である。また、非特許文献２に記載の方法では、目視による拡散状態の確認には有効であるが、定量は困難である。
【０００５】
本発明者は、粉末物質の拡散状態を確認する有効な方法として、アデノシン５’−三リン酸及びその誘導体からなる群より選択される化合物の粉末を用いる方法を提案した（特許文献１参照）。しかし、特許文献１では、流動性物質の拡散状態の確認については考慮されていない。
さらに、本発明者は、流動性物質の拡散状態を確認する目的で、アデノシン５’−三リン酸の水溶液を用いた拡散状態の確認方法を提案した（例えば、非特許文献３参照）。
評価に用いられるアデノシン５’−三リン酸は、水に溶けやすく、生体適合性及び安定性が良好であり、分析を短時間に容易に行いうるという特徴を有している。
しかし、非特許文献３に記載の方法では、アデノシン５’−三リン酸の水溶液を用いており、評価対象の流動性物質の物性によっては、正確な拡散状態の確認という観点から、なお改良の余地があった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特許５３２５０２４号
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】東京都感染情報センター、ノロウイルスによる胃腸炎の感染経路に関する検討（２００８年）
【非特許文献２】東京都多摩府中保健所、社会福祉施設におけるノロウイルス予防対策 〜汚染経路の分析とその対策〜（２００８年）
【非特許文献３】「模擬液体を用いた液状バイオハザード物質の飛散状況の評価」（第２８回空気清浄とコンタミネーションコントロール研究大会  ２０１１年７月６日）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の一実施形態が解決しようとする課題は、流動性物質の拡散状態を、所定の領域において短時間で効率よく定量評価することができる流動性物質の拡散状態評価用流動液を提供することである。
また、本発明の別の実施形態が解決しようとする課題は、既述の拡散状態評価用流動液を用いた、所定の領域における流動性物質の拡散状態を簡易に高感度で評価することができる流動性物質の拡散状態評価方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
課題を解決するための手段は、以下の実施形態を含む。
＜１＞  アデノシン５’−三リン酸及びその誘導体からなる群より選択される化合物と、水溶性セルロース系増粘剤から選択される増粘剤の少なくとも１種と、水と、を含む、拡散状態評価用流動液。
＜２＞  さらに、アデノシン５’−三リン酸の分析精度に影響を与えない着色剤を含有する＜１＞に記載の拡散状態評価用流動液。
【００１０】
＜３＞  評価対象領域に液体不透過性の受容シートを配置する工程と、前記評価対象領域にて、＜１＞又は＜２＞に記載の拡散状態評価用流動液を用いて、作業者が評価対象作業を行う工程と、評価対象作業の終了後に、前記液体不透過性の受容シートに付着した前記拡散状態評価用流動液を回収し、拡散状態評価用流動液に含まれるアデノシン三リン酸を定量する工程と、を含む流動性物質の拡散状態評価方法。
【００１１】
＜４＞  評価対象領域に多孔質領域を含む受容シートを配置する工程と、前記評価対象領域にて、＜１＞又は＜２＞に記載の拡散状態評価用流動液を用いて、作業者が評価対象作業を行う工程と、評価対象作業の終了後に、前記受容シートに付着した前記拡散状態評価用流動液を、水に溶解させて回収し、拡散状態評価用流動液に含まれるアデノシン三リン酸を定量する工程と、を含む流動性物質の拡散状態評価方法。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の一実施形態によれば、流動性物質の拡散状態を、所定の領域において短時間で効率よく定量評価することができる流動性物質の拡散状態評価用流動液を提供することができる。
また、本発明の別の実施形態によれば、既述の拡散状態評価用流動液を用いた、所定の領域における流動性物質の拡散状態を簡易に高感度で評価することができる流動性物質の拡散状態評価方法を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】バイオハザード対策用安全キャビネットにおける作業の一例を示す概略図である。
【図２】図１に示すバイオハザード対策用安全キャビネット内において、細菌の培地をピペットにて補充する作業の一例を示す概略図である。
【図３】図１に示すバイオハザード対策用安全キャビネット内における拡散状態評価用流動液のサンプリング領域の一例を示す概略図である。
【図４】アデノシン５’−三リン酸の水溶液と、実施例１の拡散状態評価用流動液との定量分析結果を示すグラフである。
【図５】微生物の管理が必要なバイオクリーンルーム内において、風速３０ｃｍ／ｈの条件下における床上に落下した拡散状態評価用流動液の拡散状態を検討した実施例２におけるアデノシン５’−三リン酸の拡散状態を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本開示の拡散状態評価用流動液及び流動性物質の拡散状態評価方法について種々の具体例を挙げてより詳細に説明するが、本開示は以下の具体的な説明に限定されない。
まず、本開示の拡散状態評価用流動液について説明する。
【００１５】
＜拡散状態評価用流動液＞
本開示の拡散状態評価用流動液（以下、流動液と称することがある）は、アデノシン５’−三リン酸及びその誘導体からなる群より選択される化合物と、水溶性セルロース系増粘剤から選択される増粘剤（以下、特定増粘剤と称することがある）の少なくとも１種と、水と、を含む。
本開示の流動液を用いることで、種々の流動性物質の拡散状態を正確に評価することができる。
【００１６】
流動液は、流動液に含まれる特定増粘剤の種類と量及び水の量を調整することで、評価対象である流動性物質に類似した物性を与えることができる。流動液が評価対象である流動性物質に類似した物性を有することで、流動性物質の拡散状態の評価をより正確に行うことができる。
本明細書では、以下、アデノシン５’−三リン酸をＡＴＰと称することがある。また、なお、以下、アデノシン５’−三リン酸及びその誘導体からなる群より選択される化合物を、ＡＴＰ類と総称することがある。
【００１７】
以下、本開示の流動液に含まれる各成分及び流動液の調製方法について説明する。
【００１８】
（アデノシン５’−三リン酸及びその誘導体からなる群より選択される化合物：ＡＴＰ類）
アデノシン５’−三リン酸は、生体内に含まれるヌクレオチドの一種であり、人体には無害の物質である。
本開示の流動液に用いうるアデノシン５’−三リン酸及びその誘導体からなる群より選択される化合物には、アデノシン５’−三リン酸（ＡＴＰ）、ＡＴＰの塩、ＡＴＰ水和物、及び、ＡＴＰの塩の水和物などが包含され、アデノシン５’−三リン酸の基本構造を有する、即ち、プリン塩基であるアデニンに糖のリボースがＮ−グリコシド結合により結合したアデノシンに、リボースの５’−ヒドロキシ基にリン酸エステル結合によりリン酸基が結合し、さらにリン酸がもう２分子連続してリン酸無水結合により結合した構造を有する化合物であれば、特に制限されない。
【００１９】
ＡＴＰ類の粉末としては、アデノシン５’−三リン酸（Ｃ１０Ｈ１６Ｎ５Ｏ１３Ｐ３、ＣＡＳ  Ｎｏ．５６−６５−５）の水溶液を凍結乾燥してなる粉末、アデノシン５’−三リン酸の２つの水素原子がナトリウム（Ｎａ）に置き換わったアデノシン５’−三リン酸２ナトリウム塩（Ｃ１０Ｈ１４Ｎ５Ｎａ２Ｏ１３Ｐ３、ＣＡＳ  Ｎｏ．９８７−６５−５）の粉末、ＡＴＰやＡＴＰの塩の水和物、例えば、アデノシン５’−三リン酸２ナトリウム塩に水分子が３個付加した水和物（Ｃ１０Ｈ１４Ｎ５Ｎａ２Ｏ１３Ｐ３・３Ｈ２Ｏ）など、水分子がｎ個ついた水和物（ＣＡＳ  Ｎｏ．５１９６３−６１−２）等の粉末が挙げられる。
また、ＡＴＰの各種試薬は、市販品として入手可能であり、例えば、関東化学（株）製のアデノシン５｀−三リン酸二ナトリウム水和物、アデノシン５｀−三リン酸二ナトリウム三水和物、ナカライテスク（株）製のアデノシン５｀−三リン酸二ナトリウムなどが挙げられる。これらの粉末は、市販品も含め、本開示の流動液に適用することができる。これらの粉末をＡＴＰ類粉末と称すことがあり、ＡＴＰ単独の粉末もＡＴＰ類粉末に包含される。
【００２０】
ＡＴＰ類粉末は、柱状の結晶形状を有する粒子であり、製造方法に起因して粒子サイズは、一般に、柱状の短径で５μｍ〜２０μｍ程度、長径で１０μｍから１００μｍの範囲でばらつきがある。
通常、試薬として入手可能な粉体では、平均粒子径、例えば、柱状粉体の場合には短径と長径との平均値は、一般に１０μｍ〜３０μｍである。
これらＡＴＰ類粉末を水に溶解又は分散することで流動液を調製することができる。流動液の調製方法については、後述する。
流動液におけるＡＴＰ類の含有量は、目的とする分析精度に応じて適宜選択される。一般的な定量分析の場合、分析精度の観点からは、流動液全量に対しＡＴＰ類が０．１質量％以上含まれていることが好ましく、１質量％〜３０質量％であることがより好ましく、５質量％〜１５質量％がさらに好ましい。ただし、ＡＴＰ類は、極めて微量でも検出できるため、評価時に検出さえできれば、既述のこのましい範囲である０．１質量％の千分の１量でも使用して、定量することも可能である。
【００２１】
（水溶性セルロース系増粘剤：特定増粘剤）
本開示の流動液は、水溶性セルロース系増粘剤を含む。
流動液に用いうる特定増粘剤としては、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ヒドロキシメチルセルロース（ＨＭＭＣ）、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＭＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、メチルセルロース（ＭＣ）などが挙げられる。
流動液に使用される上記の特定増粘剤は、いずれも非イオン性であり、ｐＨ安定性が良好であり、水溶性が良好である。従って、流動液に含まれる特定増粘剤の種類、及び含有量を選択することで、流動液に所望の粘度、即ち、流動性を与えることができる。
さらに、上記特定増粘剤は、ＡＴＰの分析精度に影響を与えない増粘剤である。このため、粘度の調整を目的として特定増粘剤の含有量を任意に選択することができる。
従って、特定増粘剤を含有させることで、流動液に、血液、排泄物などの粘度に応じた流動性を任意に付与することができる。
【００２２】
ＡＴＰは、既述のように生体に含まれる化合物であり、従って、公知の増粘剤であって、生物由来の増粘剤、例えば、カラギーナン、キサンタンガム、グアーガム、ペクチン、ゼラチンなどを用いると、これら生物由来の増粘剤にＡＴＰが含まれている場合があり、ＡＴＰの分析精度に影響を及ぼすため好ましくない。
【００２３】
流動液は、特定増粘剤を１種のみ含有してもよく、２種以上含有してもよい。
流動液における特定増粘剤の含有量には特に制限はなく、既述のように、目的とする粘度に応じて適宜選択することができる。
【００２４】
（水）
流動液は、水を含有する。水は流動液の媒体として機能する。
流動液に用いられる水には特に制限はなく、水道水、イオン交換水、蒸留水、純水等が挙げられる。高精度の分析を要求されないレベルの流動液においては、水道水を用いてもよい。水道水は無機成分を含むが、有機成分を含有しないため、ＡＴＰの分析精度に殆ど影響を及ぼさない。また、分析精度の観点からは、不純物がより少ない水として、イオン交換水、蒸留水、純水等が好ましい。
【００２５】
（その他の成分）
流動液は、ＡＴＰ、特定増粘剤及び水に加え、目的に応じてその他の成分を含むことができる。
【００２６】
（着色剤）
本開示の流動液は、着色剤を含むことができる。本開示の流動液が含むことができる着色剤は、ＡＴＰの分析精度に影響を与えない着色剤である。
ＡＴＰの分析精度に影響を与えない着色剤としては、無機顔料、ｐＨ指示薬としての染料などが挙げられる。
流動性及びＡＴＰの分析精度に影響を与え難いという観点からは、ｐＨ指示薬であるフェノールレッド、ブロムチモールブルー、フェノールフタレイン等が挙げられる。
着色剤としての無機顔料は耐久性が良好であるという利点を有する。また、無機顔料は固形粒子であるために、着色の機能に加え、流動液に、固形分を含む排泄物、嘔吐物などに近い物性を与える目的で添加することもできる。
流動液が着色剤を含むことで、流動液の拡散の状態を目視で確認しやすくなり、現場における流動液の拡散状態を目視で簡易に定性的に評価することができる。
流動液が着色剤を含有する場合の含有率は、目的に応じて適宜選択される。
【００２７】
（流動液の調製）
流動液の調製方法には制限はない。
例えば、まず、水にＡＴＰを溶解した水溶液を調製し、その後、調製された水溶液に増粘剤を添加する方法、水と特定増粘剤とを混合して混合物を調製し、その後、混合物を撹拌しながら、分析精度に応じた含有量のＡＴＰ濃度とするために必要な量のＡＴＰ粉末を徐々に添加して流動液を調製する方法、等が挙げられる。いずれの方法でも調製は可能であるが、ＡＴＰの含有量に対し、増粘剤の含有量がより多い、粘度の比較的高い流動液を調製する場合には、前者の方法がより好ましい。
流動液が、着色剤等の他の成分を含む場合、他の成分は、その物性に応じて適切な工程で流動液に含有させればよい。
撹拌は、通常使用される撹拌装置を用いて行なえばよい。例えば、撹拌翼を備えた混合装置で撹拌混合する方法等が挙げられる。
調製は常温（２５℃、以下、同様）にて行なってもよく、１５℃〜３５℃に冷却又は加温して行ってもよい。
調製後の流動液の粘度は、常温にて測定する。本明細書における粘度は、流動液の粘度に応じて選択される汎用の粘度計を用いて、２５℃にて測定した値を用いている。
【００２８】
＜流動性物質の拡散状態評価方法：第１の実施形態＞
既述の本開示の流動液は、流動性物質の拡散状態評価方法に好適に使用される。
以下、本開示の流動液を用いた流動性物質の拡散状態評価方法について説明する。以下、本開示の流動性物質の拡散状態評価方法を、単に「評価方法」と称することがある。
【００２９】
本開示の流動性物質の拡散状態評価方法の一実施形態（第１の実施形態）は、評価対象領域に液体不透過性の受容シートを配置する工程（工程（Ｉ））と、前記評価対象領域にて、既述の本開示の拡散状態評価用流動液を用いて、作業者が評価対象作業を行う工程（工程（ＩＩ））と、評価対象作業の終了後に、前記液体不透過性の受容シートに付着した前記拡散状態評価用流動液を回収し、拡散状態評価用流動液に含まれるアデノシン三リン酸を定量する工程（工程（ＩＩＩ））と、を含み、他の任意の工程を含んでもよい。
【００３０】
（工程（Ｉ））
本工程では、評価対象領域に液体不透過性の受容シートを配置する。受容シートは、評価対象領域の全領域に配置してもよく、評価したい箇所に部分的に配置してもよい。
本実施形態の流動性物質の拡散状態評価方法では、流動液の受容シートとして、液体不透過性の受容シートを用いる。
液体不透過性の受容シートは、流動液を保持することができ、受容シートの裏面に流動液を浸透させないシートであれば特に制限はない。液不透過性の受容シートとしては、各種合成樹脂シート、アルミ箔などの金属箔、合成紙、紙基材に合成樹脂又は金属をラミネートした複合シート等が挙げられる。
液体不透過性の受容シートは任意の箇所に簡易に配置することができる。液体不透過性の受容シートを用いることで、液体不透過性の受容シート表面に付着した流動液を、スワブなどを用いて、効率よく簡易に回収することができる。
【００３１】
本開示の流動液は安全性が高いために、例えば、拡散量を確認したい領域のみに受容シートを配置して、流動液を拡散させ、受容シート上の流動液のみを回収して定量し、それ以外の領域に付着した流動液は、例えば、洗浄、拭き掃除などにより除去する、といった対応をとることができる。
【００３２】
（工程（ＩＩ））
本工程では、工程（Ｉ）にて受容シートを配置した評価対象領域にて、既述の本開示の拡散状態評価用流動液を用いて、作業者が評価対象作業を行う工程である。
実験設備、作業室等の評価対象領域において、作業者が通常作業、例えば、細胞培養に用いる細胞を含む培養液を、培養用のシャーレにピペットを用いて供給する等の作業を行う。
【００３３】
実験設備の評価対象領域には既に、流動液の回収を容易にするために、評価対象領域である実験設備の作業台等の評価対象領域の全面又は一部に液不透過性の受容シートが配置されている。
ピペット操作を行う場合、微細な流動液の液滴が周辺に飛散することがある。飛散した流動液は受容シートに付着する。
【００３４】
上記作業例を、図を参照して説明する。
図１は、実験設備であるバイオハザード対策用安全キャビネットにおける作業の一例を示す概略図である。
バイオハザード対策用安全キャビネット１０内の作業領域１２と、作業者１４とは、エアカーテン（図１中、矢印でエアを表示）により隔離されている。作業者１４は、エアカーテン内部に腕を挿入して作業を行う。
図２は、図１に示すバイオハザード対策用安全キャビネット１０内において、細菌の培地をピペット１６にてシャーレ１８補充する作業の一例を示す概略図である。
図３は、図１に示すバイオハザード対策用安全キャビネット１０内の作業領域１２等における拡散状態評価用流動液のサンプリング領域の一例を示す概略図である。図３中のＡ、Ｂ、Ｃ及びＤは、サンプリング領域、即ち、受容シートの配置位置を示す。さらに、作業者の着衣に受容シートを貼り付けてある（図３中、Ｅで示す）。
受容シートの配置箇所は図３に示す領域に限定されず、任意の位置、即ち、流動液の挙動を確認するために必要な位置に、任意に配置することができる。また、作業領域１２全域に亘り、受容シートを配置してもよい。
【００３５】
（工程（ＩＩＩ））
工程（ＩＩＩ）では、評価対象作業の終了後に、前記液体不透過性の受容シートに付着した前記拡散状態評価用流動液を回収し、拡散状態評価用流動液に含まれるアデノシン三リン酸を定量する。
【００３６】
即ち、評価対象領域の少なくとも一部に存在する受容シートに付着した流動液を回収して、流動液中のＡＴＰを定量分析することで、拡散した流動液の量を正確に検知することができる。
定量分析に際しては、まず、ＡＴＰの定量分析における定量限界を検知するため、標準水溶液を用いて検量線を作成する。
検量線の作成方法、ＡＴＰの定量分析方法は、特開２０１０−２７６４６８号公報に詳細に記載され、本実施形態においても同様に行なうことができる。公知のＡＴＰ分析方法によれば、少なくとも定量限界：０．１ｎｇとした場合でも、正確な定量が可能なことが知られている。
ＡＴＰ分析に用いられる装置は小型、軽量であり、測定領域に持参して、採取したサンプルをその場で直ちに測定できるという利点をも有する。なお、本発明の方法に用いうるＡＴＰ分析装置としては、キッコーマン社製のルミテスターＰＤ−１０Ｎ、オルガノ東京株式会社製のユニライト  ＮＧ、住友３Ｍ社製のルミノメーター  ＵＮＧ３等が挙げられるが、例えば、キッコーマン社製のＡＴＰ測定器、ルミテスターＰＤ−１０Ｎのサイズは、縦２０ｃｍ程度、横８ｃｍ程度、厚み５ｃｍ程度、重さは３５０ｇ以下である。
【００３７】
流動液の回収方法としては、評価対象領域における受容のシートに付着した流動液を回収する方法が挙げられる。受容シートは、既述の実験設備の作業台以外にも、実験室の床上、壁面上などの評価対象領域に配置して、付着した流動液を回収することもできる。
受容シートは、既述のように液不透過性であり、流動液が付着した箇所に留まり、浸透して流失することがない。
【００３８】
受容シートに付着した流動液を回収し、定量分析するに際し、流動液の回収は常法により行うことができる。
例えば、ワイパースワブ（市販品としては、日本製紙クレシア（株）製のキムワイプ、旭化成せんい（株）製のＢＥＭＣＯＴ（ベンコット）、Ｔｅｘｗｉｐｅ（テックスワイプ）社製のＴＸ７６１スワブがある。）、直径が２５ｍｍ〜４７ｍｍ程度のグラスファイバー製フィルター、工業用綿棒（市販品としては、例えば日本綿棒（株）製の綿棒）などにより表面をぬぐってサンプリングすることができる。回収の確実性の観点からは、ＡＴＰ測定器の専用の綿棒でぬぐってサンプリングすることが好ましい。
【００３９】
受容シート表面から採取されたサンプルは、反応試薬を一定量の水に溶解して調製されたＡＴＰ測定器の専用の液体に溶解される。ルシフェラーゼとマグネシウムイオンとの存在下、反応試薬が溶解された液体に、ＡＴＰが溶解うると、ＡＴＰとルシフェリンとが反応した結果、発光する。ここで生じる光の発光強度をＡＴＰ測定器にて測定すること、及び測定された数値を前記のようにして作成された検量線に当てはめることで、反応試薬を含む液体中に含まれるＡＴＰ類の定量分析が行われる。
反応試薬を含む液体の調製に用いられる水は、測定精度の観点から、イオン交換水、純水などであることが好ましいが、前もってＡＴＰの含有量を測定し、評価に支障をきたさない程度の不純物含有量であることがわかれば、水道水を用いても構わない。
【００４０】
本開示の評価方法によれば、定量分析の対象が流動液中におけるＡＴＰのみであり、共存する増粘剤がＡＴＰの分析精度に影響を与えないため、短時間で簡易に精度の高い測定が実施される。
【００４１】
また、任意成分としての着色剤を既述の流動液が含有することで、流動液が目視しやすくなり、現場にて、流動液の拡散状態を目視により、定性的に確認することができる。
着色剤を含む流動液を用いることで、簡易に流動液の拡散状態の概要は確認することができるため、目視による拡散状態の評価結果を受けて、迅速に作業手順などを変更したり、拡散防止手段を実施したりすることができる。
【００４２】
＜流動性物質の拡散状態評価方法：第２の実施形態＞
本開示の流動性物質の拡散状態評価方法の別の実施形態（第２の実施形態）は、評価対象領域に多孔質領域を含む受容シートを配置する工程（工程（ＩＶ））と、前記評価対象領域にて、既述の本開示の拡散状態評価用流動液を用いて、作業者が評価対象作業を行う工程（工程（ＩＩ））と、評価対象作業の終了後に、前記受容シートに付着した前記拡散状態評価用流動液を、水に溶解させて回収し、拡散状態評価用流動液に含まれるアデノシン三リン酸を定量する工程（工程（Ｖ））と、を含み、他の任意の工程を含んでもよい。
【００４３】
第２の実施形態では、受容シートとして、多孔質領域を含む受容シートを用いている。多孔質領域を含む受容シートとは、受容シートの少なくとも一部に多孔領域を含み、全体が多孔質領域であるしーとでもよい。
多孔質領域を含む受容シートとしては、具体的には、不織布、布、ろ紙、ガラスファイバーフィルタ、繊維塊状体などが挙げられる。また、液不透過性のシートの一部に不織布、繊維塊状体を固定した複合シートであっても、多孔質領域を有すれば第２の実施形態に使用することができる。
【００４４】
受容シートが多孔質領域を含むことにより、受容シートが微細な空隙を有し、流動液が拡散して付着した場合、空隙内に保持されて付着した場所に留まりやすくなり、流動液の受容を正確に行うことができる。
【００４５】
不織布、繊維塊状体は、非親水性の繊維を含むものであってもよく、親水性の繊維を含むものであってもよい。
ろ紙やガラスファイバーフィルタは、不織布と同様に微細な空隙があり、流動液が拡散により付着した場所に留まりやすい。また、ろ紙の如く親水性のある受容シートは、非親水性の受容シートに深くして、流動液が付着した場所に留まりやすいことが記載され、目視で流動液の付着状態が確認できない程度の微量な流動液の液滴を確実に保持することができる。
なお、第１の実施形態で記載した図３のモデルにおいて、例えば、作業者の着衣に添付する受容シートのみ、不織布などの多孔質領域を含む受容シートを用いることもできる。
【００４６】
また、多孔質領域を含む受容シートとして、作業者の着用する着衣、マスク、ゴーグルなどを適用することができる。さらに、液不透過性の防護服、着衣等の表面に不織布を貼り付け受容シートとしてもよい。これらの受容シートの使用態様によれば、任意の領域において拡散した流動液を確実に保持することができ、平面ではない領域を評価対象領域とする場合に有効である。
着衣などに付着した流動液の量を定量し、その結果を考慮することで、より安全で効率のよい作業環境を設計することができる。
また、例えば、既述の図３におけるＥで示す位置に、ポンプを備えた吸排気装置の吸引口に受容シートとしての不織布をかぶせたものを取り付け、作業者の呼吸様の吸排気を行う。この方法によれば、不織布に付着した流動液におけるＡＴＰの量を定量することで、作業対象物質が作業者の呼吸により体内に取り込まれるリスクの有無、取り込まれる量などを簡易に確認することができる。
【００４７】
（工程（ＩＩ））
本開示の別の実施形態に係る評価方法では、工程（ＩＩ）は、既述の第１の実施形態と同様の工程である。
【００４８】
（工程（Ｖ））
本工程では、評価対象作業の終了後に、前記多孔質領域を含む受容シートに付着した前記拡散状態評価用流動液を、水に溶解させて回収し、定量分析に供する。
ＡＴＰは水溶性であるため、受容シートを水に浸漬して溶解させ、受容シートに付着したＡＴＰを効率よく回収することができる。ＡＴＰを溶解させた水は、ＡＴＰ水溶液であり、そのまま定量分析に供するか、もしくは適宜、定量可能な濃度に希釈して定量分析に供することができる。
なお、工程（Ｖ）においても、着色剤を含む流動液を用いることで、目視にて流動液の拡散状態も概要を評価することができる。
なお、ＡＴＰの定量分析の方法は、工程（ＩＩＩ）と同様である。
【００４９】
いずれの態様においても、ＡＴＰを含む流動液の拡散状態を簡易に、定量的に評価することができ、評価結果を活用し、詳細な拡散状態、拡散量を検知できる。従って、評価結果を、製造設備、実験設備の設計や条件設定にフィードバックすることができる。
本開示の流動性物質の拡散状態評価方法によれば、効率よく短時間で精度の高い評価を実施しうるため、その応用範囲は広い。
【実施例】
【００５０】
以下、本発明を、実施例を挙げてさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの記載に制限されるものではない。
【００５１】
〔実施例１〕
＜流動液の調製＞
まず、純水に、ＡＴＰ粉末として、アデノシン５’−三リン酸２ナトリウム３水和物粉末を秤量し、含有量が０．１ｍｇ／ｍｌ（ミリリットル）となる量で添加して撹拌し、ＡＴＰ水溶液を調製した。
その後、予め調製したカルボキシメチルセルロース０．０８質量％水溶液を、調製したＡＴＰ水溶液に加えて、カルボキシメチルセルロースを０．００８質量％含み、２５℃における粘度が２００Ｐａ・ｓの実施例１の流動液を得た。
実施例１の流動液に含まれるＡＴＰの含有量を既述の方法で測定した。結果を図４にグラフで示す。
対照例として、ＡＴＰの含有量０．１ｍｇ／ｍｌの水溶液を調整し、同様にＡＴＰの含有量を既述の方法で分析を行ったグラフを図４に併記した。
図４に示すように、両グラフは、同様の傾きを有する直線状のグラフであり、特定増粘剤を含有する実施例１の流動液において、特定増粘剤を含有することが、ＡＴＰの分析精度に影響を与えないことがわかる。
【００５２】
〔実施例２〕
＜流動液を用いた流動性物質の拡散状態評価＞
図５は、部屋の容積が約４４ｍ３、換気回数が約３５回／ｈの、微生物の管理が必要なバイオクリーンルームで、その部屋の床に、誤って病原菌を含む流動性物質を床にこぼした時にどのように飛び散るか評価した実施例である。
図５に記載の領域で、流動性物質を床に落とした位置を原点として、Ｘ軸とＹ軸とを記載した。床面には３０ｃｍ格子状に５ｃｍ四方の採取ポイントを設けておき、原点の位置で高さ８０ｃｍの位置からＡＴＰを１０ｍｇ／ｍｌ含む流動液１０ｍｌを落下させ、５分後に、各採取ポイントで、流動液サンプルを工業用綿棒でぬぐうことで採取し、流動液に含まれるＡＴＰの含有量を既述の方法により定量した。
なお、図５における円状の印は、３０ｃｍ間隔の格子状に設けた測定ポイントを示している。
図５において、向かって右側から左側へ室内換気の風が流れるようにしており、換気の有り無しで床に落とした流動性物質の飛び散り方に影響があるか調べた。
実験に用いたＡＴＰ１０ｍｇ／ｍｌの濃度の流動液が１０９個／ｍｌの濃度の菌懸濁液であると仮定して、検出されたＡＴＰ量から飛び散った菌数（個／１００ｃｍ２）を求めて、平面上に示した。
図５に記載のバイオクリーンルームでは、室内換気がある、即ち、送風がある時の床面の流動性物質の飛び散り方を示しているが、これによると、落下した地点から必ずしも同心円状に広がるのではなく、粒の大きい液滴として不均等に飛び散ったことが考えられる。
なお、別途、送風がない場合の評価を行ない、その結果を図５に示す結果と対比したところ、送風がない時と比べて明確な差は認められず、液滴としての飛び散り方に送風はあまり影響しないことが明らかになった。
【符号の説明】
【００５３】
１０   バイオハザード対策用安全キャビネット
１２   作業領域
１４   作業者
１６   ピペット
１８   シャーレ
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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