【手続補正書】
【提出日】平成27年7月24日(2015.7.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下：
ａ)配列番号１及び配列番号３で示され、ヘパリン-グルコサミン 3-O-スルホトランスフェラーゼ２及び４をそれぞれコードするヌクレオチド配列からなる群より選択される遺伝子の少なくとも１つ、及び/又は
ｂ)配列番号１及び配列番号３で示され、ヘパリン-グルコサミン 3-O-スルホトランスフェラーゼ２及び４をそれぞれコードするヌクレオチド配列からなる群より選択される遺伝子の転写産物の少なくとも１つ、及び/又は
ｃ)それぞれ配列番号２及び４で示される前記遺伝子の翻訳産物の少なくとも１つ、及び/又は
ｄ)前記遺伝子又は前記転写産物又は前記翻訳産物のフラグメント又は誘導体又は変異型、及び/又は
ｅ)ヘパラン硫酸、特に3-O-硫酸化ヘパラン硫酸、とりわけ3-O-硫酸化ヘパラン硫酸二糖、
ｆ)タウタンパク質の異常リン酸化及び/又は総タウタンパク質
の活性及び/又はレベルに直接又は間接に影響する少なくとも１つの剤を含んでなり、前記剤が以下：
ヘパラン硫酸、又は
タウタンパク質の異常リン酸化及び/又は総タウタンパク質
の活性及び/又はレベルに直接又は間接に影響するとき、ヘパラン硫酸の活性及び/又はレベルとタウタンパク質の異常リン酸化及び/又は総タウタンパク質の活性及び/又はレベルとの両方が前記剤により影響されるか、
又は、前記遺伝子、前記遺伝子の前記転写産物、前記遺伝子の前記翻訳産物又は前記遺伝子若しくは前記転写産物若しくは前記翻訳産物の前記フラグメント若しくは誘導体若しくは変異型から選択される少なくとも１つの他の要素の活性及び/又はレベルもまた影響される、神経変性疾患、有利にはタウオパチー、特にアルツハイマー病(但し、前記神経変性疾患はプリオン病とは異なる)の治療又は予防に使用するための組成物。
【請求項２】
前記少なくとも１つの剤が以下：
ａ)約2000ダルトン〜約20,000ダルトン、好ましくは約20,000ダルトンの分子量を有する多糖又はオリゴ糖、特にヘパラン硫酸模擬体、例えばF6分子、CR36、HM 100若しくはHM 2602、又は特にペンタサッカリド、例えばArixtra(登録商標)(フォンダパリヌクス)、フコイダン若しくはペントサンポリ硫酸、及び/又は低分子量ヘパリン、例えばエノキサパリン(Lovenox(登録商標))、及び/又は超低分子量ヘパリン、及び/又は
ｂ)オリゴヌクレオチド、特にsiRNA、例えば配列番号71で示されるセンスsiRNA及び配列番号72で示されるアンチセンスsiRNA、配列番号73で示されるセンスsiRNA及び配列番号74で示されるアンチセンスsiRNA、配列番号75で示されるセンスsiRNA及び配列番号76で示されるアンチセンスsiRNA、配列番号77で示されるセンスsiRNA及び配列番号78で示されるアンチセンスsiRNAからなるリストから選択されるsiRNA、又はモルホリノアンチセンスオリゴヌクレオチド、特に配列番号５及び配列番号６からなる群より選択されるモルホリノアンチセンスオリゴヌクレオチド、及び/又は
ｃ)小分子、ヘパリン及びヘパラン硫酸作用のインヒビター、例えばプロタミン又は硫酸プロタミン
からなる群より選択される、請求項１に記載の神経変性疾患の治療又は予防に使用する組成物。
【請求項３】
以下：
ａ)配列番号１及び配列番号３で示され、ヘパリン-グルコサミン 3-O-スルホトランスフェラーゼ２及び４をそれぞれコードするヌクレオチド配列からなる群より選択される遺伝子の少なくとも１つ、及び/又は
ｂ)配列番号１及び配列番号３で示され、ヘパリン-グルコサミン 3-O-スルホトランスフェラーゼ２及び４をそれぞれコードするヌクレオチド配列からなる群より選択される遺伝子の転写産物の少なくとも１つ、及び/又は
ｃ)それぞれ配列番号２及び４で示される前記遺伝子の翻訳産物の少なくとも１つ、及び/又は
ｄ)前記遺伝子又は前記転写産物又は前記翻訳産物のフラグメント又は誘導体又は変異型、及び/又は
ｅ)ヘパラン硫酸、特に3-O-硫酸化ヘパラン硫酸、とりわけ3-O-硫酸化ヘパラン硫酸二糖、及び/又は
ｆ)タウタンパク質の異常リン酸化及び/又は総タウタンパク質
のレベル及び/又は活性を、対象者から事前に得た生物学的流体サンプルにおいて測定し、前記レベル及び/又は前記活性を、既知の疾患又は健康状態を表すそれぞれの参照値と比較することを含んでなり、
但し、測定された活性及び/又はレベルが以下：
ヘパラン硫酸、又は
タウタンパク質の異常リン酸化及び/又は総タウタンパク質
のものであるとき、ヘパラン硫酸の活性及び/又はレベルとタウタンパク質の異常リン酸化及び/又は総タウタンパク質の活性及び/又はレベルとの両方が測定されるか、又は
前記遺伝子、前記遺伝子の前記転写産物、前記遺伝子の前記翻訳産物又は前記遺伝子若しくは前記転写産物若しくは前記翻訳産物の前記フラグメント若しくは誘導体若しくは変異型から選択される少なくとも１つの他の要素の活性及び/又はレベルもまた測定され、
前記遺伝子及び/又は前記転写産物及び/又は前記翻訳産物及び/又は前記ヘパラン硫酸、特に前記3-O-硫酸化ヘパラン硫酸及び/又は前記タウタンパク質の異常リン酸化及び/又は総タウタンパク質の少なくとも１つのレベル及び/又は活性が対象者サンプル中で上昇していることが神経変性疾患、有利にはタウオパチー、特にアルツハイマー病(但し、前記神経変性疾患はプリオン病とは異なる)を示すか又は前記神経変性疾患を発症するリスクを示す、対象者における神経変性疾患の診断若しくは予後予測若しくは経過観察又は対象者が前記神経変性疾患を発症する増大したリスクにあるかどうかの決定を補助するためのデータの取得方法。
【請求項４】
前記神経変性疾患がタウオパチーである請求項３に記載の方法。
【請求項５】
タウタンパク質の異常リン酸化及び/又は総タウタンパク質のレベルがそれぞれの参照値に比べて少なくとも10％上昇している、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記生物学的流体がCSFであり、対象者における以下：
ａ)配列番号１及び配列番号３で示され、ヘパリン-グルコサミン 3-O-スルホトランスフェラーゼ２及び４をそれぞれコードするヌクレオチド配列からなる群より選択される前記遺伝子、及び
ｂ)配列番号１及び配列番号３で示され、ヘパリン-グルコサミン 3-O-スルホトランスフェラーゼをコードするヌクレオチド配列からなる群より選択される遺伝子の前記転写産物、及び
ｃ)配列番号２及び４でそれぞれ示される前記遺伝子の前記翻訳産物、及び
ｄ)前記遺伝子又は前記転写産物又は前記翻訳産物のフラグメント又は誘導体又は変異型、及び
ｅ)ヘパラン硫酸、特に3-O-硫酸化ヘパラン硫酸、とりわけ3-O-硫酸化ヘパラン硫酸二糖
の活性及び/又はレベルがそれぞれの参照値と実質的に同じであり、タウタンパク質の異常リン酸化及び/又は総タウタンパク質の活性及び/又はレベルが対象者においてそれぞれの参照値と比較して上昇しており、特に少なくとも10％上昇している、請求項４又は５に記載の方法。
【請求項７】
前記神経変性疾患がアルツハイマー病である請求項３に記載の方法。
【請求項８】
配列番号１で示される遺伝子の転写産物のレベルがリアルタイムPCRで測定するとき少なくとも100％上昇している、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
配列番号３で示される遺伝子の転写産物のレベルがリアルタイムPCRで測定するとき少なくとも100％上昇している、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
リアルタイムPCRで測定するとき、配列番号１で示される遺伝子の転写産物のレベルが少なくとも100％上昇しており、配列番号３で示される遺伝子の転写産物のレベルが少なくとも100％上昇している、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
配列番号２で示される前記遺伝子の前記翻訳産物のレベルがウェスタンブロット、ELISA、質量分析法又は免疫組織化学法で測定するとき少なくとも50％上昇している、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
配列番号４で示される前記遺伝子の前記翻訳産物のレベルがウェスタンブロット、ELISA、質量分析法又は免疫組織化学法で測定するとき少なくとも50％上昇している、請求項７に記載の方法。
【請求項１３】
配列番号２で示される前記遺伝子の前記翻訳産物のレベルがELISA又はウェスタンブロットで測定するとき少なくとも50％上昇しており、配列番号４で示される前記遺伝子の前記翻訳産物のレベルがウェスタンブロット、ELISA、質量分析法又は免疫組織化学法で測定するとき少なくとも50％上昇している、請求項７に記載の方法。
【請求項１４】
ヘパラン硫酸のレベル及び/又は活性を測定することを更に含んでなり、前記レベル及び/又は活性が参照値と比較して少なくとも50％上昇していることがアルツハイマー病を示す、請求項８〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
タウタンパク質の異常リン酸化及び/又は総タウタンパク質のレベル及び/又は活性を測定することを更に含んでなり、それぞれの参照値と比較して少なくとも10％の上昇がアルツハイマー病を示す、請求項８〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記生物学的流体がCSFであり、以下：
ａ)配列番号１及び配列番号３で示され、ヘパリン-グルコサミン 3-O-スルホトランスフェラーゼ２及び４をそれぞれコードするヌクレオチド配列からなる群より選択される遺伝子の少なくとも１つ、及び
ｂ)配列番号１及び配列番号３で示され、ヘパリン-グルコサミン 3-O-スルホトランスフェラーゼをコードするヌクレオチド配列からなる群より選択される遺伝子の転写産物の少なくとも１つ、及び
ｃ)それぞれ配列番号２及び４で示される前記遺伝子の翻訳産物、及び
ｄ)ヘパラン硫酸、特に3-O-硫酸化ヘパラン硫酸、とりわけ3-O-硫酸化ヘパラン硫酸二糖
の活性及び/又はレベル、及び
タウタンパク質の異常リン酸化及び/又は総タウタンパク質の活性及び/又はレベルが対象者においてそれぞれの参照値と比較して上昇している、請求項７〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
以下：
配列番号１及び配列番号３で示され、ヘパリン-グルコサミン 3-O-スルホトランスフェラーゼをコードするヌクレオチド配列からなる群より選択される遺伝子の転写産物の少なくとも１つ、及び/又は
それぞれ配列番号２及び４で示される前記遺伝子の翻訳産物の少なくとも１つ、
のレベル及び/又は活性を、対象者から得た生物学的流体サンプルにおいて検出し、前記サンプルで得られた前記レベル及び/又は活性を、既知の疾患又は健康状態を表すコントロールで得られたものと比較する手段からなる、対象者における神経変性疾患、有利にはタウオパチー、特にアルツハイマー病(但し、前記神経変性疾患はプリオン病とは異なる)の診断若しくは予後予測若しくは経過観察のため又は前記疾患を発症する対象者の性向若しくは素因を決定するためのキット。
【請求項１８】
タウタンパク質のリン酸化のレベルを前記対象者から得たサンプルにおいて測定し、
前記サンプルで得られた前記レベルを、既知の疾患又は健康状態を表すコントロールで得られたものと比較し、
異常リン酸化タウレベル及び/又は総タウレベル並びに配列番号２及び配列番号４の翻訳産物のレベルを既知の疾患又は健康状態を表すコントロールと比較する手段
を更に含んでなる、請求項１７に記載のキット。
【請求項１９】
以下：
ａ)神経変性疾患に罹患した動物、特に哺乳動物から事前に採集した生物学的流体サンプルを、試験化合物と接触させ、
ｂ)
i．配列番号１及び配列番号３で示され、ヘパリン-グルコサミン 3-O-スルホトランスフェラーゼをコードするヌクレオチド配列からなる群より選択される遺伝子の少なくとも１つ、及び/又は
ii．配列番号１及び配列番号３で示され、ヘパリン-グルコサミン 3-O-スルホトランスフェラーゼをコードするヌクレオチド配列からなる群より選択される遺伝子の転写産物の少なくとも１つ、及び/又は
iii．それぞれ配列番号２及び４で示される前記遺伝子の翻訳産物の少なくとも１つ、及び/又は
iv．前記遺伝子又は転写若しくは翻訳産物のフラグメント又は誘導体又は変異型、及び/又は
v．ヘパラン硫酸、特に3-O-硫酸化ヘパラン硫酸、とりわけ3-O-硫酸化ヘパラン硫酸二糖
vi．タウタンパク質の異常リン酸化及び/又は総タウタンパク質
の活性及び/又はレベルを測定し、
ｃ)神経変性疾患を有する哺乳動物から事前に採集した、前記化合物に接触させていないコントロールの生物学的流体サンプル中の活性及び/又はレベルを測定し、
ｄ)接触させた生物学的流体サンプル中の前記活性及び/又はレベルの差と、非接触の生物学的流体サンプル中のものとを比較することを含んでなり、
接触させた細胞の前記活性及び/又はレベルの変化が、試験化合物が前記疾患のモジュレーターであることを示し、
但し、工程ｂ)で測定された活性及び/又はレベルが、以下：
ヘパラン硫酸、又は
タウタンパク質の異常リン酸化及び/又は総タウタンパク質
のものであるとき、ヘパラン硫酸の活性及び/又はレベルとタウタンパク質の異常リン酸化及び/又は総タウタンパク質の活性及び/又はレベルとの両方が測定されるか、又は
前記遺伝子、前記遺伝子の前記転写産物、前記遺伝子の前記翻訳産物又は前記遺伝子若しくは前記転写産物若しくは前記翻訳産物の前記フラグメント若しくは誘導体若しくは変異型から選択される少なくとも１つの他の要素の活性及び/又はレベルもまた測定される、
神経変性疾患、有利にはタウオパチー、特にアルツハイマー病(但し、前記神経変性疾患はプリオン病とは異なる)のモジュレーターについてのインビトロスクリーニング方法。
【請求項２０】
前記哺乳動物がヒト又はマウス、例えばSAMP8マウス及び/又はADの3xTg-ADマウスモデルであるか、或いは前記動物がゼブラフィッシュである、請求項１９に記載の方法。