【手続補正書】
【提出日】平成27年10月23日(2015.10.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
非ヒトＴ細胞受容体（ＴＣＲ）α定常遺伝子配列に作動可能に連結した、少なくとも１つのヒトＶαセグメントおよび少なくとも１つのヒトＪαセグメントを含む再配列されていないＴＣＲα可変遺伝子座、ならび／または
非ヒトＴＣＲβ定常遺伝子配列に作動可能に連結した、少なくとも１つのヒトＶβセグメント、少なくとも１つのヒトＤβセグメントおよび少なくとも１つのヒトＪβセグメントを含む再配列されていないＴＣＲβ可変遺伝子座
を、ゲノム中に含む遺伝子改変非ヒト動物。
【請求項２】
前記再配列されていないＴＣＲα可変遺伝子座が、内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座と置き換わっている、かつ／または
前記再配列されていないＴＣＲβ可変遺伝子座が、内在性非ヒトＴＣＲβ可変遺伝子座と置き換わっている、請求項１に記載の動物。
【請求項３】
内在性非ヒトＶαセグメントおよび内在性非ヒトＪαセグメントが、再配列によって再配列Ｖα／Ｊα配列を形成することができない、かつ／または
内在性非ヒトＶβセグメント、内在性非ヒトＤβセグメントおよび内在性非ヒトＪβセグメントが、再配列によって再配列Ｖβ／Ｄβ／Ｊβ配列を形成することができない、請求項１および２のいずれかに記載の動物。
【請求項４】
（ｉ）機能性内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座を欠如している、かつ／または
（ｉｉ）機能性内在性非ヒトＴＣＲβ可変遺伝子座を欠如している、請求項１〜３のいずれかに記載の動物。
【請求項５】
（ｉ）前記機能性内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座の前記欠如が、（ａ）全ての内在性Ｖα遺伝子セグメントの欠失、（ｂ）全ての内在性Ｊα遺伝子セグメントの欠失および（ｃ）それらの組合せからなる群より選択される欠失を含む、かつ／または
（ｉｉ）前記機能性内在性齧歯動物ＴＣＲβ可変遺伝子座の前記欠如が、（ａ）全ての内在性Ｖβ遺伝子セグメントの欠失、（ｂ）全ての内在性Ｄβ遺伝子セグメントの欠失、（ｃ）全ての内在性Ｊβ遺伝子セグメントの欠失および（ｄ）それらの組合せからなる群より選択される欠失を含む、請求項４に記載の動物。
【請求項６】
前記ヒトＶαセグメントおよび前記ヒトＪαセグメントが再配列されて、再配列ヒトＶα／Ｊα配列を形成する、かつ／または
前記ヒトＶβセグメント、前記ヒトＤβセグメントおよび前記ヒトＪβセグメントが再配列されて、再配列ヒトＶβ／Ｄβ／Ｊβ配列を形成する、請求項１〜５のいずれかに記載の動物。
【請求項７】
Ｔ細胞の表面においてヒトＴＣＲα可変領域および／またはＴ細胞の表面においてヒトＴＣＲβ可変領域を含むＴ細胞受容体を発現する、請求項６に記載の動物。
【請求項８】
前記動物のＴ細胞が、胸腺Ｔ細胞の発生を経て、ＣＤ４シングルポジティブＴ細胞およびＣＤ８シングルポジティブＴ細胞を生成する、請求項１〜７のいずれかに記載の動物。
【請求項９】
脾臓ＣＤ３＋Ｔ細胞対総脾細胞の正常な比率を含む、請求項１〜８のいずれかに記載の動物。
【請求項１０】
目的の抗原に対してセントラルメモリーＴ細胞およびエフェクターメモリーＴ細胞を産生する、請求項１〜９のいずれかに記載の動物。
【請求項１１】
前記再配列されていないＴＣＲα可変遺伝子座が、ヒトＶαセグメントの完全なレパートリーおよびヒトＪαセグメントの完全なレパートリーを含む、かつ／または
前記再配列されていないＴＣＲβ可変遺伝子座が、ヒトＶβセグメントの完全なレパートリー、ヒトＤβセグメントの完全なレパートリーおよびヒトＪβセグメントの完全なレパートリーを含む、請求項１〜１０のいずれかに記載の動物。
【請求項１２】
前記動物が内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座および／または内在性非ヒトＴＣＲβ可変遺伝子座を保持し、前記遺伝子座が非機能性遺伝子座である、請求項１〜１１のいずれかに記載の動物。
【請求項１３】
Ｔ細胞の表面においてヒト可変領域および非ヒト定常領域を含むＴ細胞受容体を発現する、請求項１〜１２のいずれかに記載の動物。
【請求項１４】
ヒトＶδセグメントのヌクレオチド配列をさらに含む、請求項１〜１３のいずれかに記載の動物。
【請求項１５】
ヒトＶδセグメントの完全なレパートリー、ヒトＤδセグメントの完全なレパートリーおよびヒトＪδセグメントの完全なレパートリーをさらに含む、請求項１４に記載の動物。
【請求項１６】
齧歯動物である、請求項１〜１５のいずれかに記載の動物。
【請求項１７】
前記齧歯動物がマウスである、請求項１６に記載の動物。
【請求項１８】
Ｔ細胞の表面においてヒト可変領域および非ヒト定常領域を含むＴ細胞受容体を発現する遺伝子改変非ヒト動物を作製するための方法であって、前記方法は：
第１の非ヒト動物において、内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座を、少なくとも１つのヒトＶαセグメントおよび少なくとも１つのヒトＪαセグメントを含む再配列されていないヒト化ＴＣＲα可変遺伝子座と置き換えて、ヒト化ＴＣＲα可変遺伝子座を作成するステップであって、前記ヒト化ＴＣＲα可変遺伝子座が内在性非ヒトＴＣＲα定常領域に作動可能に連結している、ステップと、
第２の非ヒト動物において、内在性非ヒトＴＣＲβ可変遺伝子座を、少なくとも１つのヒトＶβセグメント、少なくとも１つのヒトＤβセグメントおよび少なくとも１つのヒトＪβセグメントを含む再配列されていないヒト化ＴＣＲβ可変遺伝子座と置き換えて、ヒト化ＴＣＲβ可変遺伝子座を作成するステップであって、前記ヒト化ＴＣＲβ可変遺伝子座が内在性非ヒトＴＣＲβ定常領域に作動可能に連結している、ステップと、
前記第１の動物および前記第２の動物を交配して、ヒト可変領域および非ヒト定常領域を含むＴ細胞受容体を発現する非ヒト動物を得るステップと
を含む、方法。
【請求項１９】
内在性非ヒトＶαセグメントおよび内在性非ヒトＪαセグメントが、再配列によって再配列Ｖα／Ｊα配列を形成することができず、かつ内在性非ヒトＶβセグメント、内在性非ヒトＤβセグメントおよび内在性非ヒトＪβセグメントが、再配列によって再配列Ｖβ／Ｄβ／Ｊβ配列を形成することができない、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記遺伝子改変動物は、機能性内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座を欠如し、かつ機能性内在性非ヒトＴＣＲβ可変遺伝子座を欠如している、請求項１８〜１９のいずれかに記載の方法。
【請求項２１】
前記機能性内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座の前記欠如が、（ａ）全ての内在性Ｖα遺伝子セグメントの欠失、（ｂ）全ての内在性Ｊα遺伝子セグメントの欠失および（ｃ）それらの組合せからなる群より選択される欠失を含み、かつ
前記機能性内在性非ヒトＴＣＲβ可変遺伝子座の前記欠如が、（ａ）全ての内在性Ｖβ遺伝子セグメントの欠失、（ｂ）全ての内在性Ｄβ遺伝子セグメントの欠失、（ｃ）全ての内在性Ｊβ遺伝子セグメントの欠失および（ｄ）それらの組合せからなる群より選択される欠失を含む、請求項１８〜２０のいずれかに記載の方法。
【請求項２２】
前記ヒトＶαセグメントおよび前記ヒトＪαセグメントが再配列されて、再配列ヒトＶα／Ｊα配列を形成し、かつ前記ヒトＶβセグメント、前記ヒトＤβセグメントおよび前記ヒトＪβセグメントが再配列されて、再配列ヒトＶβ／Ｄβ／Ｊβ配列を形成する、請求項１８〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
前記齧歯動物のＴ細胞が、胸腺Ｔ細胞の発生を経て、ＣＤ４シングルポジティブＴ細胞およびＣＤ８シングルポジティブＴ細胞を生成する、請求項１８〜２２のいずれかに記載の方法。
【請求項２４】
前記動物が、脾臓ＣＤ３＋Ｔ細胞対総脾細胞の正常な比率を含む、請求項１８〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２５】
前記動物が、目的の抗原に対してセントラルメモリーＴ細胞およびエフェクターメモリーＴ細胞を産生する、請求項１８〜２４のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】
前記再配列されていないヒト化ＴＣＲα可変遺伝子座が６１のヒトＪαセグメントおよび８つのヒトＶαセグメントを含み、かつ前記再配列されていないヒト化ＴＣＲβ可変遺伝子座が１４のヒトＪβセグメント、２つのヒトＤβセグメントおよび１４のヒトＶβセグメントを含む、請求項１８〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
前記再配列されていないヒト化ＴＣＲα可変遺伝子座がヒトＶαセグメントの完全なレパートリーおよびヒトＪαセグメントの完全なレパートリーを含み、かつ前記再配列されていないヒト化ＴＣＲβ可変遺伝子座がヒトＶβセグメントの完全なレパートリー、ヒトＤβセグメントの完全なレパートリーおよびヒトＪβセグメントの完全なレパートリーを含む、請求項１８〜２６のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】
前記非ヒト動物が齧歯動物である、請求項１８〜２７のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
前記齧歯動物がマウスである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
目的の抗原に対してヒトＴ細胞受容体を生成する方法であって、前記方法は：
請求項１に記載の非ヒト動物を前記目的の抗原で免疫化するステップと、
前記動物に免疫応答を開始させるステップと、
前記目的の抗原に反応性のＴ細胞を前記動物から単離するステップと、
前記Ｔ細胞によって発現されたヒトＴＣＲ可変領域の核酸配列を決定するステップと、
ヒトＴＣＲ定常領域の核酸配列を含むヌクレオチド構築物に前記ヒトＴＣＲ可変領域をクローニングするステップであって、前記ヒトＴＣＲ可変領域が前記ヒトＴＣＲ定常領域に作動可能に連結している、ステップと、
ヒトＴ細胞受容体を細胞中で発現させるステップと
を含む、方法。
【請求項３１】
非ヒトＴＣＲα定常遺伝子配列に作動可能に連結した、少なくとも１つの再配列されていないヒトＶαセグメントおよび少なくとも１つの再配列されていないヒトＪαセグメントを含むＴＣＲα可変遺伝子座をコードする配列、ならび／または
非ヒトＴＣＲβ定常遺伝子配列に作動可能に連結した、少なくとも１つの再配列されていないヒトＶβセグメント、少なくとも１つの再配列されていないヒトＤβセグメントおよび少なくとも１つの再配列されていないヒトＪβセグメントを含むＴＣＲβ可変遺伝子座をコードする配列
を含む核酸。
【請求項３２】
目的の抗原に対して特異性を有するＴ細胞を同定する方法であって、請求項１〜１７のいずれかに記載の非ヒト動物を前記目的の抗原で免疫化するステップと、前記動物に免疫応答を開始させるステップと、前記抗原に対して特異性を有するＴ細胞を前記非ヒト動物から単離するステップとを含む、方法。
【請求項３３】
前記目的の抗原が、腫瘍関連抗原、ウイルス抗原または細菌抗原である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
非ヒトＴＣＲα定常領域遺伝子配列に作動可能に連結した、少なくとも１つの再配列されていないヒトＶαセグメントおよび少なくとも１つの再配列されていないヒトＪαセグメントを含むＴＣＲα可変遺伝子座をコードするヌクレオチド配列、ならび／または
非ヒトＴＣＲβ定常領域遺伝子配列に作動可能に連結した、少なくとも１つの再配列されていないヒトＶβセグメント、少なくとも１つの再配列されていないヒトＤβセグメントおよび少なくとも１つの再配列されていないヒトＪβセグメントを含むＴＣＲβ可変遺伝子座をコードするヌクレオチド配列
を含む単離された胚性幹細胞。
【請求項３５】
請求項１〜１７のいずれか一項に記載の非ヒト動物由来の組織であって、前記組織がヒト化ＴＣＲポリペプチドを発現する、組織。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３７】
本明細書中に記載した実施形態および態様はいずれも、特に指示がない限りまたは文脈から明らかでない限り、互いに関連して使用できる。他の実施形態は、後述する詳細な説明を検討することによって、当業者には明らかとなるであろう。以下の詳細な説明は、本発明の種々の実施形態を例示的に表すものであり、特許請求の範囲に記載する本発明を限定するものではない。添付図は、本明細書の一部を構成し、説明と一緒になって、実施形態を専ら例示する役割をし、本発明を限定する役割をしない。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
非ヒトＴ細胞受容体（ＴＣＲ）α定常遺伝子配列に作動可能に連結した、少なくとも１つのヒトＶαセグメントおよび少なくとも１つのヒトＪαセグメントを含む再配列されていないＴＣＲα可変遺伝子座を、ゲノム中に含む遺伝子改変非ヒト動物。
（項目２）
前記再配列されていないＴＣＲα可変遺伝子座が、内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座と置き換わっている、項目１に記載の動物。
（項目３）
内在性非ヒトＶαセグメントおよび内在性非ヒトＪαセグメントが、再配列によって再配列Ｖα／Ｊα配列を形成することができない、項目１に記載の動物。
（項目４）
機能性内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座を欠如している、項目１に記載の動物。
（項目５）
前記機能性内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座の前記欠如が、（ａ）全ての内在性Ｖα遺伝子セグメントの欠失、（ｂ）全ての内在性Ｊα遺伝子セグメントの欠失および（ｃ）それらの組合せからなる群より選択される欠失を含む、項目４に記載の動物。
（項目６）
前記ヒトＶαセグメントおよび前記ヒトＪαセグメントが再配列されて、再配列ヒトＶα／Ｊα配列を形成する、項目１に記載の動物。
（項目７）
Ｔ細胞の表面においてヒトＴＣＲα可変領域を含むＴ細胞受容体を発現する、項目６に記載の動物。
（項目８）
前記動物のＴ細胞が、胸腺Ｔ細胞の発生を経て、ＣＤ４シングルポジティブＴ細胞およびＣＤ８シングルポジティブＴ細胞を生成する、項目１に記載の動物。
（項目９）
脾臓ＣＤ３＋Ｔ細胞対総脾細胞の正常な比率を含む、項目１に記載の動物。
（項目１０）
目的の抗原に対してセントラルメモリーＴ細胞およびエフェクターメモリーＴ細胞の集団を産生する、項目１に記載の動物。
（項目１１）
前記再配列されていないＴＣＲα可変遺伝子座が、ヒトＪαセグメントの完全なレパートリーおよびヒトＶαセグメントの完全なレパートリーを含む、項目１に記載の動物。
（項目１２）
前記動物が内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座を保持し、前記遺伝子座が非機能性遺伝子座である、項目１に記載の動物。
（項目１３）
齧歯動物である、項目１に記載の動物。
（項目１４）
前記齧歯動物がマウスである、項目１３に記載の動物。
（項目１５）
非ヒトＴＣＲβ定常遺伝子配列に作動可能に連結した、少なくとも１つのヒトＶβセグメント、少なくとも１つのヒトＤβセグメントおよび少なくとも１つのヒトＪβセグメントを含む再配列されていないＴＣＲβ可変遺伝子座を、ゲノム中に含む遺伝子改変非ヒト動物。
（項目１６）
前記再配列されていないＴＣＲβ可変遺伝子座が、内在性非ヒトＴＣＲβ可変遺伝子座と置き換わっている、項目１５に記載の動物。
（項目１７）
内在性齧歯動物Ｖβセグメント、内在性齧歯動物Ｄβセグメントおよび内在性齧歯動物Ｊβセグメントが、再配列によって再配列Ｖβ／Ｄβ／Ｊβ配列を形成することができない、項目１５に記載の動物。
（項目１８）
機能性内在性非ヒトＴＣＲβ可変遺伝子座を欠如している、項目１５に記載の動物。
（項目１９）
前記機能性内在性齧歯動物ＴＣＲβ可変遺伝子座の前記欠如が、（ａ）全ての内在性Ｖβ遺伝子セグメントの欠失、（ｂ）全ての内在性Ｄβ遺伝子セグメントの欠失、（ｃ）全ての内在性Ｊβ遺伝子セグメントの欠失および（ｄ）それらの組合せからなる群より選択される欠失を含む、項目１８に記載の動物。
（項目２０）
前記ヒトＶβセグメント、前記ヒトＤβセグメントおよび前記ヒトＪβセグメントが再配列されて、再配列ヒトＶβ／Ｄβ／Ｊβ配列を形成する、項目１５に記載の動物。
（項目２１）
Ｔ細胞の表面においてヒトＴＣＲβ可変領域を含むＴ細胞受容体を発現する、項目２０に記載の動物。
（項目２２）
前記動物のＴ細胞が、胸腺Ｔ細胞の発生を経て、ＣＤ４シングルポジティブＴ細胞およびＣＤ８シングルポジティブＴ細胞を生成する、項目１５に記載の動物。
（項目２３）
脾臓ＣＤ３＋Ｔ細胞対総脾細胞の正常な比率を含む、項目１５に記載の動物。
（項目２４）
目的の抗原に対してセントラルメモリーＴ細胞およびエフェクターメモリーＴ細胞の集団を産生する、項目１５に記載の動物。
（項目２５）
前記再配列されていないＴＣＲβ可変遺伝子座が、ヒトＪβセグメントの完全なレパートリー、ヒトＤβセグメントの完全なレパートリーおよびヒトＶβセグメントの完全なレパートリーを含む、項目１５に記載の動物。
（項目２６）
前記動物が内在性非ヒトＴＣＲβ可変遺伝子座を保持し、前記遺伝子座が非機能性遺伝子座である、項目１５に記載の動物。
（項目２７）
齧歯動物である、項目１５に記載の動物。
（項目２８）
前記齧歯動物がマウスである、項目２７に記載の動物。
（項目２９）
非ヒトＴ細胞受容体（ＴＣＲ）α定常遺伝子配列に作動可能に連結した、少なくとも１つのヒトＶαセグメントおよび少なくとも１つのヒトＪαセグメントを含む再配列されていないＴＣＲα可変遺伝子座と、
非ヒトＴＣＲβ定常遺伝子配列に作動可能に連結した、少なくとも１つのヒトＶβセグメント、少なくとも１つのヒトＤβセグメントおよび少なくとも１つのヒトＪβセグメントを含む再配列されていないＴＣＲβ可変遺伝子座と
を、ゲノム中に含む遺伝子改変非ヒト動物。
（項目３０）
前記再配列されていないＴＣＲα可変遺伝子座が、内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座と置き換わっており、かつ前記再配列されていないＴＣＲβ可変遺伝子座が、内在性非ヒトＴＣＲβ可変遺伝子座と置き換わっている、項目２９に記載の動物。
（項目３１）
内在性非ヒトＶαセグメントおよび内在性非ヒトＪαセグメントが、再配列によって再配列Ｖα／Ｊα配列を形成することができず、かつ内在性非ヒトＶβセグメント、内在性
非ヒトＤβセグメントおよび内在性非ヒトＪβセグメントが、再配列によって再配列Ｖβ／Ｄβ／Ｊβ配列を形成することができない、項目２９に記載の動物。
（項目３２）
機能性内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座を欠如し、かつ機能性内在性非ヒトＴＣＲβ可変遺伝子座を欠如している、項目２９に記載の動物。
（項目３３）
前記機能性内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座の前記欠如が、（ａ）全ての内在性Ｖα遺伝子セグメントの欠失、（ｂ）全ての内在性Ｊα遺伝子セグメントの欠失および（ｃ）それらの組合せからなる群より選択される欠失を含み、かつ
前記機能性内在性非ヒトＴＣＲβ可変遺伝子座の前記欠如が、（ａ）全ての内在性Ｖβ遺伝子セグメントの欠失、（ｂ）全ての内在性Ｄβ遺伝子セグメントの欠失、（ｃ）全ての内在性Ｊβ遺伝子セグメントの欠失および（ｄ）それらの組合せからなる群より選択される欠失を含む、項目３２に記載の動物。
（項目３４）
前記ヒトＶαセグメントおよび前記ヒトＪαセグメントが再配列されて、再配列ヒトＶα／Ｊα配列を形成し、かつ前記ヒトＶβセグメント、前記ヒトＤβセグメントおよび前記ヒトＪβセグメントが再配列されて、再配列ヒトＶβ／Ｄβ／Ｊβ配列を形成する、項目２９に記載の動物。
（項目３５）
Ｔ細胞の表面においてヒト可変領域および非ヒト定常領域を含むＴ細胞受容体を発現する、項目３４に記載の動物。
（項目３６）
前記動物のＴ細胞が、胸腺Ｔ細胞の発生を経て、ＣＤ４シングルポジティブＴ細胞およびＣＤ８シングルポジティブＴ細胞を生成する、項目２９に記載の動物。
（項目３７）
脾臓ＣＤ３＋Ｔ細胞対総脾細胞の正常な比率を含む、項目２９に記載の動物。
（項目３８）
目的の抗原に対してセントラルメモリーＴ細胞およびエフェクターメモリーＴ細胞の集団を産生する、項目２９に記載の動物。
（項目３９）
前記再配列されていないＴＣＲα可変遺伝子座が６１のヒトＪαセグメントおよび８つのヒトＶαセグメントを含み、かつ前記再配列されていないＴＣＲβ可変遺伝子座が１４のヒトＪβセグメント、２つのヒトＤβセグメントおよび１４のヒトＶβセグメントを含む、項目２９に記載の動物。
（項目４０）
前記再配列されていないＴＣＲα可変遺伝子座がヒトＪαセグメントの完全なレパートリーおよびヒトＶαセグメントの完全なレパートリーを含み、かつ前記再配列されていないＴＣＲβ可変遺伝子座がヒトＪβセグメントの完全なレパートリー、ヒトＤβセグメントの完全なレパートリーおよびヒトＶβセグメントの完全なレパートリーを含む、項目２９に記載の動物。
（項目４１）
前記動物が内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座および内在性非ヒトＴＣＲβ可変遺伝子座を保持し、前記遺伝子座が非機能性遺伝子座である、項目２９に記載の動物。
（項目４２）
ヒト化ＴＣＲα遺伝子座にヒトＶδセグメントのヌクレオチド配列をさらに含む、項目２９に記載の動物。
（項目４３）
前記ヒト化ＴＣＲα遺伝子座にヒトＶδセグメントの完全なレパートリー、ヒトＤδセグメントの完全なレパートリーおよびヒトＪδセグメントの完全なレパートリーをさらに含む、項目４２に記載の動物。
（項目４４）
齧歯動物である、項目２９に記載の動物。
（項目４５）
前記齧歯動物がマウスである、項目４４に記載の動物。
（項目４６）
Ｔ細胞の表面においてヒト可変領域および非ヒト定常領域を含むＴ細胞受容体を発現する遺伝子改変非ヒト動物を作製するための方法であって、前記方法は：
第１の非ヒト動物において、内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座を、少なくとも１つのヒトＶαセグメントおよび少なくとも１つのヒトＪαセグメントを含む再配列されていないヒト化ＴＣＲα可変遺伝子座と置き換えて、ヒト化ＴＣＲα可変遺伝子座を作成するステップであって、前記ヒト化ＴＣＲα可変遺伝子座が内在性非ヒトＴＣＲα定常領域に作動可能に連結している、ステップと、
第２の非ヒト動物において、内在性非ヒトＴＣＲβ可変遺伝子座を、少なくとも１つのヒトＶβセグメント、少なくとも１つのヒトＤβセグメントおよび少なくとも１つのヒトＪβセグメントを含む再配列されていないヒト化ＴＣＲβ可変遺伝子座と置き換えて、ヒト化ＴＣＲβ可変遺伝子座を作成するステップであって、前記ヒト化ＴＣＲβ可変遺伝子座が内在性非ヒトＴＣＲβ定常領域に作動可能に連結している、ステップと、
前記第１の動物および前記第２の動物を交配して、ヒト可変領域および非ヒト定常領域を含むＴ細胞受容体を発現する非ヒト動物を得るステップと
を含む、方法。
（項目４７）
内在性非ヒトＶαセグメントおよび内在性非ヒトＪαセグメントが、再配列によって再配列Ｖα／Ｊα配列を形成することができず、かつ内在性非ヒトＶβセグメント、内在性非ヒトＤβセグメントおよび内在性非ヒトＪβセグメントが、再配列によって再配列Ｖβ／Ｄβ／Ｊβ配列を形成することができない、項目４６に記載の方法。
（項目４８）
前記遺伝子改変動物は、機能性内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座を欠如し、かつ機能性内在性非ヒトＴＣＲβ可変遺伝子座を欠如している、項目４６に記載の方法。
（項目４９）
前記機能性内在性非ヒトＴＣＲα可変遺伝子座の前記欠如が、（ａ）全ての内在性Ｖα遺伝子セグメントの欠失、（ｂ）全ての内在性Ｊα遺伝子セグメントの欠失および（ｃ）それらの組合せからなる群より選択される欠失を含み、かつ
前記機能性内在性非ヒトＴＣＲβ可変遺伝子座の前記欠如が、（ａ）全ての内在性Ｖβ遺伝子セグメントの欠失、（ｂ）全ての内在性Ｄβ遺伝子セグメントの欠失、（ｃ）全ての内在性Ｊβ遺伝子セグメントの欠失および（ｄ）それらの組合せからなる群より選択される欠失を含む、項目４８に記載の方法。
（項目５０）
前記ヒトＶαセグメントおよび前記ヒトＪαセグメントが再配列されて、再配列ヒトＶα／Ｊα配列を形成し、かつ前記ヒトＶβセグメント、前記ヒトＤβセグメントおよび前記ヒトＪβセグメントが再配列されて、再配列ヒトＶβ／Ｄβ／Ｊβ配列を形成する、項目４６に記載の方法。
（項目５１）
前記齧歯動物のＴ細胞が、胸腺Ｔ細胞の発生を経て、ＣＤ４シングルポジティブＴ細胞およびＣＤ８シングルポジティブＴ細胞を生成する、項目４６に記載の方法。
（項目５２）
前記動物が、脾臓ＣＤ３＋Ｔ細胞対総脾細胞の正常な比率を含む、項目４６に記載の方法。
（項目５３）
前記動物が、目的の抗原に対してセントラルメモリーＴ細胞およびエフェクターメモリーＴ細胞の集団を産生する、項目４６に記載の方法。
（項目５４）
前記再配列されていないヒト化ＴＣＲα可変遺伝子座が６１のヒトＪαセグメントおよび８つのヒトＶαセグメントを含み、かつ前記再配列されていないヒト化ＴＣＲβ可変遺伝子座が１４のヒトＪβセグメント、２つのヒトＤβセグメントおよび１４のヒトＶβセグメントを含む、項目４６に記載の方法。
（項目５５）
前記再配列されていないヒト化ＴＣＲα可変遺伝子座がヒトＪαセグメントの完全なレパートリーおよびヒトＶαセグメントの完全なレパートリーを含み、かつ前記再配列されていないヒト化ＴＣＲβ可変遺伝子座がヒトＪβセグメントの完全なレパートリー、ヒトＤβセグメントの完全なレパートリーおよびヒトＶβセグメントの完全なレパートリーを含む、項目４６に記載の方法。
（項目５６）
前記非ヒト動物が齧歯動物である、項目４６に記載の方法。
（項目５７）
前記齧歯動物がマウスである、項目５６に記載の方法。
（項目５８）
マウスＴ細胞受容体（ＴＣＲ）α定常遺伝子配列に作動可能に連結した、ヒトＪαセグメントの完全なレパートリーおよびヒトＶαセグメントの完全なレパートリーを含む再配列されていないＴＣＲα可変遺伝子座と、
マウスＴＣＲβ定常遺伝子配列に作動可能に連結した、ヒトＪβセグメントの完全なレパートリー、ヒトＤβセグメントの完全なレパートリーおよびヒトＶβセグメントの完全なレパートリーを含む再配列されていないＴＣＲβ可変遺伝子座と
を、ゲノム中に含む遺伝子改変マウス。
（項目５９）
前記再配列されていないＴＣＲα可変遺伝子座が、内在性マウスＴＣＲα可変遺伝子座と置き換わっており、かつ前記再配列されていないＴＣＲβ可変遺伝子座が、内在性マウスＴＣＲβ可変遺伝子座と置き換わっている、項目５８に記載のマウス。
（項目６０）
内在性マウスＶαセグメントおよび内在性マウスＪαセグメントが、再配列によって再配列Ｖα／Ｊα配列を形成することができず、かつ内在性マウスＶβセグメント、内在性マウスＤβセグメントおよび内在性マウスＪβセグメントが、再配列によって再配列Ｖβ／Ｄβ／Ｊβ配列を形成することができない、項目５８に記載のマウス。
（項目６１）
前記ヒトＶαセグメントおよび前記ヒトＪαセグメントが再配列されて、再配列ヒトＶα／Ｊα配列を形成し、かつ前記ヒトＶβセグメント、前記ヒトＤβセグメントおよび前記ヒトＪβセグメントが再配列されて、再配列ヒトＶβ／Ｄβ／Ｊβ配列を形成する、項目５８に記載のマウス。
（項目６２）
Ｔ細胞の表面においてヒト可変領域およびマウス定常領域を含むＴ細胞受容体を発現する、項目６１に記載のマウス。
（項目６３）
前記マウスのＴ細胞が、胸腺Ｔ細胞の発生を経て、ＣＤ４シングルポジティブＴ細胞およびＣＤ８シングルポジティブＴ細胞を生成する、項目５８に記載のマウス。
（項目６４）
脾臓ＣＤ３＋Ｔ細胞対総脾細胞の正常な比率を含む、項目５８に記載のマウス。
（項目６５）
目的の抗原に対してセントラルメモリーＴ細胞およびエフェクターメモリーＴ細胞の集団を産生する、項目５８に記載のマウス。
（項目６６）
ヒト化ＴＣＲα遺伝子座にＶδセグメントの完全なレパートリー、Ｄδセグメントの完
全なレパートリーおよびＪδセグメントの完全なレパートリーをさらに含む、項目５８に記載のマウス。
（項目６７）
前記マウスが内在性マウスＴＣＲα可変遺伝子座および内在性マウスＴＣＲβ可変遺伝子座を保持し、前記遺伝子座が非機能性遺伝子座である、項目５８に記載のマウス。
（項目６８）
目的の抗原に対してヒトＴ細胞受容体を生成する方法であって、前記方法は：
項目１に記載の非ヒト動物を前記目的の抗原で免疫化するステップと、
前記動物に免疫応答を開始させるステップと、
前記目的の抗原に反応性のＴ細胞を前記動物から単離するステップと、
前記Ｔ細胞によって発現されたヒトＴＣＲ可変領域の核酸配列を決定するステップと、
ヒトＴＣＲ定常領域の核酸配列を含むヌクレオチド構築物に前記ヒトＴＣＲ可変領域をクローニングするステップであって、前記ヒトＴＣＲ可変領域が前記ヒトＴＣＲ定常領域に作動可能に連結している、ステップと、
ヒトＴ細胞受容体を細胞中で発現させるステップと
を含む、方法。