【手続補正書】
【提出日】平成27年4月13日(2015.4.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
糖尿病の発症抑制および治療のうち少なくともいずれかを行うための候補化合物を同定する方法であって、
ａ．インスリン分泌細胞の第１集団を、１つ以上の試験化合物の存在下において、Ｃａｖ１チャネルの密度および導電率のうち少なくともいずれかを増大させるのに有効な量のアポリポタンパク質ＣＩＩＩ（ＡｐｏＣＩＩＩ）と接触させるステップと；
ｂ．インスリン分泌細胞の第１集団のＣａｖ１チャネルの密度および導電率のうち少なくともいずれかにおけるＡｐｏＣＩＩＩ誘導性の増大を対照と比較して阻害する、陽性の試験化合物を同定するステップであって、陽性の試験化合物は、糖尿病の発症抑制および治療のうち少なくともいずれかを行うための候補化合物である、ステップと
を含む方法。
【請求項２】
対照は、インスリン分泌細胞の第２集団を、１つ以上の試験化合物の非存在下において、Ｃａｖ１チャネルの密度および導電率のうち少なくともいずれかを増大させるのに有効な量のアポリポタンパク質ＣＩＩＩ（ＡｐｏＣＩＩＩ）と接触させるステップを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
対照は、インスリン分泌細胞の対照集団を、１つ以上の試験化合物の存在下において、Ｃａｖ１チャネルの密度および導電率のうち少なくともいずれかを増大させるのに有効な量のＡｐｏＣＩＩＩと接触させるステップと、インスリン分泌細胞の対照集団を、Ｃａｖ２チャネルおよびＣａｖ３チャネルのうち少なくともいずれかの遮断薬とさらに接触させるステップとを含み、Ｃａｖ２チャネルおよびＣａｖ３チャネルのうち少なくともいずれかの遮断薬のインスリン分泌細胞の対照集団においてＣａｖ１チャネルの密度および導電率のうち少なくともいずれかにおけるＡｐｏＣＩＩＩ誘導性の増大をインスリン分泌細胞の第１集団と比較して強く阻害する陽性の試験化合物は、糖尿病の発症抑制および治療のうち少なくともいずれかを行うための候補化合物である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
対照は、インスリン分泌細胞の対照集団を、１つ以上の試験化合物の存在下において、Ｃａｖ１チャネルの密度および導電率のうち少なくともいずれかを増大させるのに有効な量のＡｐｏＣＩＩＩと接触させるステップと、インスリン分泌細胞の対照集団を、Ｓｒｃキナーゼ阻害剤およびプロテインキナーゼＡ（ＰＫＡ）阻害剤のうち少なくともいずれかとさらに接触させるステップとを含み、インスリン分泌細胞の第１集団においてＣａｖ１チャネルの密度および導電率のうち少なくともいずれかにおけるＡｐｏＣＩＩＩ誘導性の増大を、Ｓｒｃキナーゼ阻害剤およびプロテインキナーゼＡ（ＰＫＡ）阻害剤のうち少なくともいずれかのインスリン分泌細胞の対照集団と比較して強く阻害する陽性の試験化合物は、糖尿病の発症抑制および治療のうち少なくともいずれかを行うための候補化合物である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
対照は、インスリン分泌細胞の対照集団を、１つ以上の試験化合物の存在下において、Ｃａｖ１チャネルの密度および導電率のうち少なくともいずれかに対して有効な量のＡｐｏＣＩＩＩと接触させるステップと、インスリン分泌細胞の第２集団を、β１インテグリンの発現または活性を阻害する分子とさらに接触させるステップとを含み、インスリン分泌細胞の第１集団においてＣａｖ１チャネルの密度および導電率のうち少なくともいずれかにおけるＡｐｏＣＩＩＩ誘導性の増大をβ１インテグリン阻害剤のインスリン分泌細胞の対照集団と比較して強く阻害する陽性の試験化合物は、糖尿病の発症抑制および治療のうち少なくともいずれかを行うための候補化合物である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
糖尿病の発症抑制および治療のうち少なくともいずれかを行うための候補化合物を同定する方法であって、
ａ．インスリン分泌細胞の第１集団を、１つ以上の試験化合物の存在下において、Ｃａｖ１チャネルの密度および導電率のうち少なくともいずれかを増大させるのに有効な量のＡｐｏＣＩＩＩと接触させるステップと；
ｂ．インスリン分泌細胞の第１集団におけるβ１インテグリンの発現または活性を対照と比較して阻害する陽性の試験化合物を同定するステップであって、陽性の試験化合物は、糖尿病の発症抑制および治療のうち少なくともいずれかを行うための候補化合物である、ステップと
を含む方法。
【請求項７】
対照は、インスリン分泌細胞の第２集団を、試験化合物の非存在下において、Ｃａｖ１チャネルの密度および導電率のうち少なくともいずれかを増大させるのに有効な量のＡｐｏＣＩＩＩと接触させるステップを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
糖尿病の発症抑制および治療のうち少なくともいずれかを行うための候補化合物を同定する方法であって、
ａ．インスリン分泌細胞の第１集団を、１つ以上の試験化合物の存在下において、Ｃａｖ１チャネルの密度および導電率のうち少なくともいずれかを増大させるのに有効な量のＡｐｏＣＩＩＩと接触させるステップと；
ｂ．インスリン分泌細胞の第１集団におけるＰＫＡおよびＳｒｃキナーゼのうち少なくともいずれかの活性化を対照と比較して阻害する陽性の試験化合物を同定するステップであって、陽性の試験化合物は、糖尿病の発症抑制および治療のうち少なくともいずれかを行うための候補化合物である、ステップと
を含む方法。
【請求項９】
対照は、インスリン分泌細胞の第２集団を、試験化合物の非存在下において、Ｃａｖ１チャネルの密度および導電率のうち少なくともいずれかを増大させるのに有効な量のＡｐｏＣＩＩＩと接触させるステップを含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
インスリン分泌細胞は膵臓β細胞である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
細胞をＡｐｏＣＩＩＩと少なくとも６時間接触させることを含む、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
候補化合物は、１型糖尿病の発症抑制および治療のうち少なくともいずれかを行うための候補化合物である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
候補化合物は、２型糖尿病の発症抑制および治療のうち少なくともいずれかを行うための候補化合物である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
糖尿病の治療または発症抑制を行うための医薬製剤の製造における、ＰＫＡまたはＳｒｃキナーゼの阻害剤の使用方法であって、前記糖尿病の治療または発症抑制は、投与を必要とする対象者に、有効な量のＰＫＡまたはＳｒｃキナーゼの阻害剤を投与することにより行われる使用方法。
【請求項１５】
糖尿病の治療または発症抑制を行うための医薬製剤の製造における、β１インテグリンの発現および活性のうち少なくともいずれかの阻害剤の使用方法であって、前記糖尿病の治療または発症抑制は、投与を必要とする対象者に、有効な量の、β１インテグリンの発現および活性のうち少なくともいずれかの阻害剤を投与することにより行われる使用方法。
【請求項１６】
阻害剤は、抗β１インテグリン抗体、抗β１インテグリンアプタマー、β１インテグリンｓｉＲＮＡ、β１インテグリンｓｈＲＮＡ、およびβ１インテグリンのアンチセンスオリゴヌクレオチドのうちから選択される、請求項１５に記載の使用方法。
【請求項１７】
糖尿病の治療または発症抑制を行うための医薬製剤の製造における、ＡｐｏＣＩＩＩによる膵臓β細胞への結合の阻害剤の使用方法であって、前記糖尿病の治療または発症抑制は、投与を必要とする対象者に、有効な量の、ＡｐｏＣＩＩＩによる膵臓β細胞への結合の阻害剤を投与することにより行われる使用方法。
【請求項１８】
阻害剤は、ＡｐｏＣＩＩＩに結合するアプタマーおよびＡｐｏＣＩＩＩに対する抗体のうちから選択される、請求項１７に記載の使用方法。
【請求項１９】
前記医薬製剤は糖尿病を治療するための医薬製剤である、請求項１４〜１８のいずれか１項に記載の使用方法。
【請求項２０】
前記医薬製剤は糖尿病の発症抑制を行うための医薬製剤である、請求項１４〜１８のいずれか１項に記載の使用方法。
【請求項２１】
対象者は１型糖尿病であるかまたは１型糖尿病を発症するリスクを有する、請求項１４〜２０のいずれか１項に記載の使用方法。
【請求項２２】
対象者は２型糖尿病であるかまたは２型糖尿病を発症するリスクを有する、請求項１４〜２０のいずれか１項に記載の使用方法。
【請求項２３】
対象者は２型糖尿病である、請求項１９に記載の使用方法。
【請求項２４】
阻害剤は、ＡｐｏＣＩＩＩに結合するアプタマーおよびＡｐｏＣＩＩＩに対する抗体のうちから選択される、請求項２３に記載の使用方法。
【請求項２５】
前記糖尿病の治療または発症抑制は、対照と比較してａｐｏＣＩＩＩを過剰発現する対象者にａｐｏＣＩＩＩ阻害剤を投与することにより行われる、請求項１７〜２４のいずれか１項に記載の使用方法。