【手続補正書】
【提出日】平成27年10月19日(2015.10.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
グルカゴンに結合することが可能なＬ−核酸分子であって、Ａ型のＬ−核酸分子、Ｂ型のＬ−核酸分子およびＣ型のＬ−核酸分子からなる群から選択され、
前記Ａ型のＬ−核酸分子が中央のヌクレオチドストレッチを含み、前記中央のヌクレオチドストレッチが、
５’Ｂｎ１ＡＡＡＴＧｎ２ＧＡｎ３ｎ４ＧＣＴＡＫＧｎ５ＧＧｎ６ｎ７ＧＧＡＡＴＣＴＲＲＲ３’［配列番号１７３］のヌクレオチド配列を含み、
式中、ｎ１はＧまたはｒＧであり、ｎ２はＧまたはｒＧであり、ｎ３はＧまたはｒＧであり、ｎ４はＧまたはｒＧであり、ｎ５はＹまたはｒＴであり、ｎ６はＡまたはｒＡであり、ｎ７はＡまたはｒＡであり、
Ｇ、Ａ、Ｔ、Ｃ、Ｂ、Ｋ、ＹおよびＲのいずれかは２’−デオキシリボヌクレオチドであり、
ｒＧ、ｒＡおよびｒＴのいずれかはリボヌクレオチドであり、
前記Ｂ型のＬ−核酸分子が中央のひと続きの２９〜３２ヌクレオチドを含み、前記中央のヌクレオチドストレッチが、
５’−ＡＫＧＡＲｎ１ＫＧＴＴＧＳＹＡＷＡｎ２ＲＴＴＣＧｎ３ＴＴＧＧＡｎ４ＴＣｎ５−‘３［配列番号１９７］、
５’−ＡＧＡＡＧＧＴＴＧＧＴＡＡＧＴＴＴＣＧＧＴＴＧＧＡＴＣＴＧ−‘３［配列番号１９８］、
５’−ＡＧＡＡＧＧＴＣＧＧＴＡＡＧＴＴＴＣＧＧＴＡＧＧＡＴＣＴＧ−‘３［配列番号１９９］、
５’−ＡＧＧＡＡＧＧＴＴＧＧＴＡＡＡＧＧＴＴＣＧＧＴＴＧＧＡＴＴＣＡ−‘３［配列番号２００］、
５’−ＡＧＧＡＡＡＧＧＴＴＧＧＴＡＡＧＧＴＴＣＧＧＴＴＧＧＡＴＴＣＡ−‘３［配列番号２０１］および
５’−ＡＧＧＡＡＧＧＴＴＧＧＴＡＡＧＧＴＴＣＧＧＴＴＧＧＡＴＴＣＡ−‘３［配列番号２０２］
の群から選択されるヌクレオチド配列を含み、
式中、ｎ１はＡまたはｒＡであり、ｎ２はＧまたはｒＧであり、ｎ３はＧまたはｒＧであり、ｎ４はＴまたはｒＵであり、ｎ５はＡまたはｒＡであり、
Ｇ、Ａ、Ｔ、Ｃ、Ｋ、Ｙ、Ｓ、ＷおよびＲのいずれかは２’−デオキシリボヌクレオチドであり、
ｒＧ、ｒＡおよびｒＵのいずれかはリボヌクレオチドであり、
前記Ｃ型のＬ−核酸分子は、配列番号８３、配列番号８４、配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号９７および配列番号１０２の群から選択されるヌクレオチド配列を含むか、または
前記Ｃ型のＬ−核酸分子は、配列番号８３、配列番号８４、配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号９７および配列番号１０２の群から選択されるヌクレオチド配列を含むＬ−核酸分子と少なくとも８５％の同一性を有するか、または
前記Ｃ型のＬ−核酸分子は、配列番号８３、配列番号８４、配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号９７および配列番号１０２の群から選択されるヌクレオチド配列を含むＬ−核酸分子と相同的であり、相同性は少なくとも８５％である、Ｌ−核酸分子。
【請求項２】
前記Ａ型のＬ−核酸分子の前記中央のヌクレオチドストレッチが、２’−デオキシリボヌクレオチドおよびリボヌクレオチドからなる、請求項１に記載の核酸分子。
【請求項３】
前記Ａ型のＬ−核酸分子の前記中央のヌクレオチドストレッチが、
５’ＧｒＧＡＡＡＴＧＧＧＡＧＧＧＣＴＡＧＧＴＧＧＡＡＧＧＡＡＴＣＴＧＡＧ３’［配列番号１７９］、
５’ＧＧＡＡＡＴＧｒＧＧＡＧＧＣＴＡＧＧＴＧＧＡＡＧＧＡＡＴＣＴＧＡＧ３’［配列番号１８０］、
５’ＧＧＡＡＡＴＧＧＧＡｒＧＧＧＣＴＡＧＧＴＧＧＡＡＧＧＡＡＴＣＴＧＡＧ３’［配列番号１８１］、
５’ＧＧＡＡＡＴＧＧＧＡＧｒＧＧＣＴＡＧＧＴＧＧＡＡＧＧＡＡＴＣＴＧＡＧ３’［配列番号１８２］、
５’ＧＧＡＡＡＴＧＧＧＡＧＧＧＣＴＡＧＧＴＧＧｒＡＡＧＧＡＡＴＣＴＧＡＧ３’［配列番号１８３］、
５’ＧＧＡＡＡＴＧＧＧＡＧＧＧＣＴＡＧＧＴＧＧＡｒＡＧＧＡＡＴＣＴＧＡＧ３’［配列番号１８４］；
５’ＧＧＡＡＡＴＧｒＧＧＡＧＧＧＣＴＡＧＧＴＧＧｒＡＡＧＧＡＡＴＣＴＧＡＧ３’［配列番号１８５］、
５’ＧＧＡＡＡＴＧＧＧＡＧＧＧＣＴＡＧＧＴＧＧｒＡｒＡＧＧＡＡＴＣＴＧＡＧ３’［配列番号１８６］、
５’ＧＧＡＡＡＴＧｒＧＧＡＧＧＧＣＴＡＧＧＴＧＧｒＡｒＡＧＧＡＡＴＣＴＧＡＧ３’［配列番号１８７］、
５’ＧＧＡＡＡＴＧＧＧＡｒＧＧＧＣＴＡＧＧＴＧＧｒＡｒＡＧＧＡＡＴＣＴＧＡＧ３’［配列番号１８８］、
５’ＧｒＧＡＡＡＴＧｒＧＧＡｒＧＧＧＣＴＡＧＧＴＧＧｒＡｒＡＧＧＡＡＴＣＴＧＡＧ３’［配列番号１８９］、
５’ＧｒＧＡＡＡＴＧｒＧＧＡｒＧｒＧＧＣＴＡＧＧＴＧＧｒＡｒＡＧＧＡＡＴＣＴＧＡＧ３’［配列番号１９０］および
５’ＧｒＧＡＡＡＴＧｒＧＧＡｒＧｒＧＧＣＴＡＧＧｒＴＧＧｒＡｒＡＧＧＡＡＴＣＴＧＡＧ３’［配列番号１９１］
の群から選択されるヌクレオチド配列を含み、式中、
Ｇ、Ａ、ＴおよびＣのいずれかは２’−デオキシリボヌクレオチドであり、
ｒＧ、ｒＡおよびｒＴのいずれかはリボヌクレオチドである、請求項１または２に記載の核酸分子。
【請求項４】
前記Ａ型のＬ−核酸分子の前記中央のヌクレオチドストレッチが、２’−デオキシリボヌクレオチドからなる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の核酸分子。
【請求項５】
前記Ａ型のＬ−核酸分子が、５’→３’方向に、
ａ）第１の末端のヌクレオチドストレッチ、前記中央のヌクレオチドストレッチおよび第２の末端のヌクレオチドストレッチ、または、
ｂ）第２の末端のヌクレオチドストレッチ、前記中央のヌクレオチドストレッチおよび第１の末端のヌクレオチドストレッチを含み、
前記第１の末端のヌクレオチドストレッチは１〜７ヌクレオチドを含み、
前記第２の末端のヌクレオチドストレッチは１〜７ヌクレオチドを含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載のＬ−核酸分子。
【請求項６】
前記Ａ型のＬ−核酸分子の前記第１の末端のヌクレオチドストレッチが５’Ｚ１Ｚ２Ｚ３Ｚ４Ｚ５Ｚ６Ｖ３’のヌクレオチド配列を含み、前記Ａ型のＬ−核酸分子の前記第２の末端のヌクレオチドストレッチが５’ＢＺ７Ｚ８Ｚ９Ｚ１０Ｚ１１Ｚ１２３’のヌクレオチド配列を含み、
式中、
Ｚ１はＧであるかまたは存在せず、Ｚ２はＳであるかまたは存在せず、Ｚ３はＶであるかまたは存在せず、Ｚ４はＢであるかまたは存在せず、Ｚ５はＢであるかまたは存在せず、Ｚ６はＶであるかまたは存在せず、Ｚ７はＢであるかまたは存在せず、Ｚ８はＶであるかまたは存在せず、Ｚ９はＶであるかまたは存在せず、Ｚ１０はＢであるかまたは存在せず、Ｚ１１はＳであるかまたは存在せず、Ｚ１２はＣであるかまたは存在しない、請求項５に記載のＬ−核酸分子。
【請求項７】
前記Ａ型のＬ−核酸分子が、配列番号６および配列番号７の群から選択されるヌクレオチド配列を含むか、または
前記Ａ型のＬ−核酸分子が、配列番号６および配列番号７の群から選択されるヌクレオチド配列を含むＬ−核酸分子と少なくとも８５％の同一性を有するか、または
前記Ａ型のＬ−核酸分子が、配列番号６および配列番号７の群から選択されるヌクレオチド配列を含むＬ−核酸分子と相同的であり、相同性は少なくとも８５％である、請求項１および４〜６のいずれか１項に記載のＬ−核酸分子。
【請求項８】
前記Ａ型のＬ−核酸分子が、配列番号２３、配列番号４３、配列番号４７、配列番号４８、配列番号９１、配列番号９２、配列番号１５８および配列番号１５９の群から選択されるヌクレオチド配列を含むか、または
前記Ａ型のＬ−核酸分子が、配列番号２３、配列番号４３、配列番号４７、配列番号４８、配列番号９１、配列番号９２、配列番号１５８および配列番号１５９の群から選択されるヌクレオチド配列を含むＬ−核酸分子と少なくとも８５％の同一性を有するか、または
前記Ａ型のＬ−核酸分子が、配列番号４３、配列番号４７、配列番号４８、配列番号９１、配列番号９２、配列番号１５８および配列番号１５９の群から選択されるヌクレオチド配列を含むＬ−核酸分子と相同的であり、相同性は少なくとも８５％である、請求項１および３〜５のいずれか１項に記載のＬ−核酸分子。
【請求項９】
前記Ｂ型のＬ−核酸分子の前記中央のヌクレオチドストレッチが、２’−デオキシリボヌクレオチドおよびリボヌクレオチドからなる、請求項１に記載のＬ−核酸分子。
【請求項１０】
前記Ｂ型のＬ−核酸分子の前記中央のヌクレオチドストレッチが、
５’ＡＧＧＡＡｒＡＧＧＴＴＧＧＴＡＡＡＧＧＴＴＣＧＧＴＴＧＧＡＴＴＣＡ３’［配列番号２０４］、
５’ＡＧＧＡＡＡＧＧＴＴＧＧＴＡＡＡｒＧＧＴＴＣＧＧＴＴＧＧＡＴＴＣＡ３’［配列番号２０５］、
５’ＡＧＧＡＡＡＧＧＴＴＧＧＴＡＡＡＧＧＴＴＣＧＧＴＴＧＧＡｒＵＴＣＡ３’［配列番号２０６］、
５’ＡＧＧＡＡｒＡＧＧＴＴＧＧＴＡＡＡｒＧＧＴＴＣＧＧＴＴＧＧＡＴＴＣＡ３’［配列番号２０７］、
５’ＡＧＧＡＡｒＡＧＧＴＴＧＧＴＡＡＡＧＧＴＴＣＧＧＴＴＧＧＡｒＵＴＣＧ３’［配列番号２０８］、
５’ＡＧＧＡＡｒＡＧＧＴＴＧＧＴＡＡＡＧＧＴＴＣＧＧＴＴＧＧＡｒＵＴＣＡ３’［配列番号２０９］、
５’ＡＧＧＡＡｒＡＧＧＴＴＧＧＴＡＡＡｒＧＧＴＴＣＧＧＴＴＧＧＡｒＵＴＣＡ３’［配列番号２１０］および
５’ＡＧＧＡＡｒＡＧＧＴＴＧＧＴＡＡＡｒＧＧＴＴＣＧｒＧＴＴＧＧＡｒＵＴＣｒＡ３’［配列番号２１１］、
の群から選択されるヌクレオチド配列を含み、式中、
Ｇ、Ａ、ＴおよびＣのいずれかは２’−デオキシリボヌクレオチドであり、
ｒＧ、ｒＡおよびｒＵのいずれかはリボヌクレオチドである、請求項１〜９のいずれか１項に記載のＬ−核酸分子。
【請求項１１】
前記Ｂ型のＬ−核酸分子の前記中央のヌクレオチドストレッチが、２’−デオキシリボヌクレオチドからなる、請求項１に記載のＬ−核酸分子。
【請求項１２】
前記Ｂ型のＬ−核酸分子の前記Ｌ−核酸分子が、５’→３’方向に、
ａ）第１の末端のヌクレオチドストレッチ、前記中央のヌクレオチドストレッチおよび第２の末端のヌクレオチドストレッチ、または、
ｂ）第２の末端のヌクレオチドストレッチ、前記中央のヌクレオチドストレッチおよび第１の末端のヌクレオチドストレッチを含み、
前記第１の末端のヌクレオチドストレッチは３〜９ヌクレオチドを含み、
前記第２の末端のヌクレオチドストレッチは３〜１０ヌクレオチドを含む、請求項１および９〜１１のいずれか１項に記載のＬ−核酸分子。
【請求項１３】
前記Ｂ型のＬ−核酸分子の前記第１の末端のヌクレオチドストレッチが５’Ｚ１Ｚ２Ｚ３Ｚ４Ｚ５Ｚ６ＳＡＫ３’のヌクレオチド配列を含み、前記Ｂ型のＬ−核酸分子の前記第２の末端のヌクレオチドストレッチが５’ＣＫＶＺ７Ｚ８Ｚ９Ｚ１０Ｚ１１Ｚ１２３’のヌクレオチド配列を含み、
式中、
Ｚ１はＣであるかまたは存在せず、Ｚ２はＧであるかまたは存在せず、Ｚ３はＲであるかまたは存在せず、Ｚ４はＢであるかまたは存在せず、Ｚ５はＢであるかまたは存在せず、  Ｚ６はＳであるかまたは存在せず、Ｚ７はＳであるかまたは存在せず、Ｚ８はＶであるかまたは存在せず、Ｚ９はＶであるかまたは存在せず、Ｚ１０はＫであるかまたは存在せず、Ｚ１１はＭであるかまたは存在せず、Ｚ１２はＳであるかまたは存在しない、請求項１２に記載のＬ−核酸分子。
【請求項１４】
前記Ｂ型のＬ−核酸分子が、配列番号５０、配列番号５４、配列番号５８、配列番号５９、配列番号８８および配列番号１５５の群から選択されるヌクレオチド配列を含むか、または
前記Ｂ型のＬ−核酸分子が、配列番号５０、配列番号５４、配列番号５８、配列番号５９、配列番号８８および配列番号１５５の群から選択されるヌクレオチド配列を含むＬ−核酸分子と少なくとも８５％の同一性を有するか、または
前記Ｂ型のＬ−核酸分子が、配列番号５０、配列番号５４、配列番号５８、配列番号５９、配列番号８８および配列番号１５５の群から選択されるヌクレオチド配列を含むＬ−核酸分子と相同的であり、相同性は少なくとも８５％である、請求項１、９、１１、１２および１３のいずれか１項に記載のＬ−核酸分子。
【請求項１５】
前記Ｂ型のＬ−核酸分子が、配列番号７１、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８９、配列番号９０、配列番号１５６および配列番号１５７の群から選択されるヌクレオチド配列を含むか、または
前記Ｂ型のＬ−核酸分子が、配列番号７１、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８９、配列番号９０、配列番号１５６および配列番号１５７の群から選択されるヌクレオチド配列を含むＬ−核酸分子と少なくとも８５％の同一性を有するか、または
前記Ｂ型のＬ−核酸分子が、配列番号７１、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８９、配列番号９０、配列番号１５６および配列番号１５７の群から選択されるヌクレオチド配列を含むＬ−核酸分子と相同的であり、相同性は少なくとも８５％である、請求項１、９、１０、１２および１３のいずれか１項に記載のＬ−核酸分子。
【請求項１６】
前記核酸分子がグルカゴンによって仲介される活性のアンタゴニストである、請求項１〜１５のいずれか１項に記載のＬ−核酸分子。
【請求項１７】
前記Ｌ−核酸分子が修飾基を含み、前記修飾基を含む前記Ｌ−核酸分子の動物またはヒト生体からの排泄速度は、前記修飾基を含まないＬ−核酸分子と比較して低減される、請求項１〜１６のいずれか１項に記載のＬ−核酸分子。
【請求項１８】
前記Ｌ−核酸分子が修飾基を含み、前記修飾基を含む前記Ｌ−核酸分子が、前記修飾基を含まないＬ−核酸分子と比較して動物またはヒト生体内において増加した保持時間を有する、請求項１〜１６のいずれか１項に記載のＬ−核酸分子。
【請求項１９】
前記修飾基が生分解性および非生分解性修飾を含む群から選択され、好ましくは、前記修飾基が、ポリエチレングリコール、直鎖ポリエチレングリコール、分枝ポリエチレングリコール、ヒドロキシエチルデンプン、ペプチド、タンパク質、多糖、ステロール、ポリオキシプロピレン、ポリオキシアミデートおよびポリ（２−ヒドロキシエチル）−Ｌ−グルタミンを含む群から選択される、請求項１７または１８に記載のＬ−核酸分子。
【請求項２０】
好ましくは糖尿病、糖尿病合併症および糖尿病状態を含む群から選択される疾患もしくは障害もしくは高グルカゴン血症の処置および／または予防のための方法に使用される、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の核酸分子。
【請求項２１】
請求項１〜１９のいずれか１項に記載の核酸分子および任意選択でさらなる構成要素を含み、前記さらなる構成要素は、薬学的に許容される添加剤、薬学的に許容される担体および薬学的に活性な薬剤を含む群から選択される、医薬組成物。
【請求項２２】
医薬の製造のための、請求項１〜１９のいずれか１項に記載のＬ−核酸分子の使用であって、前記医薬が、好ましくは糖尿病、糖尿病合併症および糖尿病状態を含む群から選択される疾患もしくは障害もしくは高グルカゴン血症の処置および／または予防のためものである、使用。
【請求項２３】
診断手段の製造のための、請求項１〜１９のいずれか１項に記載のＬ−核酸分子の使用。
【請求項２４】
請求項１〜１９のいずれか１項に記載の核酸分子およびグルカゴンおよび／またはＧＩＰを含み、好ましくは結晶性複合体である複合体。
【請求項２５】
グルカゴンおよび／またはＧＩＰの検出のための、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の核酸分子の使用。
【請求項２６】
グルカゴンおよび／またはＧＩＰによって仲介される活性のアンタゴニストのスクリーニング方法であって、
−グルカゴンおよび／またはＧＩＰによって仲介される活性の候補アンタゴニストを用意するステップと、
−請求項１〜１９のいずれか１項に記載の核酸分子を用意するステップと、
−グルカゴンおよび／またはＧＩＰによって仲介される活性のアンタゴニストの存在下でシグナルを提供する試験系を用意するステップと、
−グルカゴンおよび／またはＧＩＰによって仲介される前記活性の前記候補アンタゴニストがグルカゴンおよび／またはＧＩＰによって仲介される活性のアンタゴニストであるかどうか判定するステップと
を含む方法。
【請求項２７】
請求項１〜１９のいずれか１項に記載の核酸分子を含む、グルカゴンの検出のためのキット。
【請求項２８】
試料中の請求項１〜１９のいずれか１項に記載の核酸の検出方法であって、
ａ）請求項１〜１９のいずれか１項に記載の核酸分子の第１の部分と少なくとも部分的に相補的である捕捉プローブ、および請求項１〜１９のいずれか１項に記載の核酸分子の第２の部分と少なくとも部分的に相補的である検出プローブ、あるいは、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の核酸分子の第２の部分と少なくとも部分的に相補的である捕捉プローブ、および請求項１〜１９のいずれか１項に記載の核酸分子の第１の部分と少なくとも部分的に相補的である検出プローブを用意するステップと；
ｂ）前記捕捉プローブおよび前記検出プローブを、別々にまたは一緒に、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の核酸分子を含有する試料に加えるか、または請求項１〜１９のいずれか１項に記載の核酸分子を含有すると推定される試料に加えるステップと；
ｃ）前記捕捉プローブおよび前記検出プローブを、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の核酸分子またはその一部と同時に、または任意の順序で逐次的に反応させるステップと；
ｄ）任意選択で、前記捕捉プローブが、ステップａ）で提供される請求項１〜１９のいずれか１項に記載の核酸分子とハイブリダイズするかどうか検出するステップと；
ｅ）請求項１〜１９のいずれか１項に記載の核酸分子および前記捕捉プローブおよび前記検出プローブからなる、ステップｃ）で形成される複合体を検出するステップと
を含む方法。