(57)【要約】【課題】リパーゼ阻害活性に優れ、澱が少なくかつ色が薄いウーロン茶抽出物およびその製造方法を提供することを目的とする。【解決手段】ウーロン茶葉を原料とし、抽出溶媒に水を用いて、温度１６０〜２１０℃、飽和蒸気圧以上の圧力で亜臨界処理して得られるウーロン茶抽出物およびその製造方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ウーロン茶葉を原料とし、抽出溶媒に水を用いて、温度１６０〜２１０℃、飽和蒸気圧以上の圧力で亜臨界処理して得られるウーロン茶抽出物。
【請求項２】
固形分濃度を２．５ｍｇ／ｍｌに調整した際の、
５３０ｎｍにおける吸光度が０．３０以下であり、
６６０ｎｍにおける吸光度が０．１０以下である請求項１記載のウーロン茶抽出物。
【請求項３】
前記亜臨界処理の処理時間が５〜６０分である請求項１または２記載のウーロン茶抽出物。
【請求項４】
ウーロン茶葉を原料とし、抽出溶媒に水を用いて、温度１６０〜２１０℃、飽和蒸気圧以上の圧力で亜臨界処理する抽出工程を含むウーロン茶抽出物の製造方法。
【請求項５】
前記亜臨界処理の処理時間が５〜６０分である請求項４記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はウーロン茶抽出物およびその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ウーロン茶葉の抽出物中には重合ポリフェノールが含まれ、リパーゼ阻害活性を有することが知られている。従来、ウーロン茶抽出物は熱水などの水性抽出により製造することが一般的である。
【０００３】
特許文献１には、重合カテキンを非重合カテキンよりも多く含有するウーロン茶抽出物などが記載されているが、熱水抽出以外の抽出方法については記載されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０１２−９７０８５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
熱水抽出液は色が濃い茶色であり、澱も多く見栄えが悪く、ウーロン茶以外の用途が無いという問題がある。特にウーロン茶を水抽出すると、フロック状、浮遊物状もしくは白濁状の懸濁・沈澱物、いわゆる澱が発生する。この澱は苦味がありその味特性を損なう一方、カビと誤認されることもあり、ペットボトル等の透明容器に密封充填されたウーロン茶を含む一般的な茶系飲料には致命的な存在となる。したがってその視覚特性上も澱の制御は商品価値的に相当重要な品質管理項目となるが、従来は遠心分離や限外ろ過、微細ろ過などの特殊な固液分離工程が必要であり、冷却析出工程など複雑な温度プロファイル制御が必要な場合もある。
【０００６】
本発明は、リパーゼ阻害活性に優れ、澱が少なくかつ色が薄いウーロン茶抽出物およびその製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、ウーロン茶葉を原料とし、抽出溶媒に水を用いて、温度１６０〜２１０℃、飽和蒸気圧以上の圧力で亜臨界処理して得られるウーロン茶抽出物に関する。
【０００８】
固形分濃度を２．５ｍｇ／ｍｌに調整した際の、５３０ｎｍにおける吸光度が０．３０以下であり、６６０ｎｍにおける吸光度が０．１０以下であることが好ましい。
【０００９】
また、本発明は、ウーロン茶葉を原料とし、抽出溶媒に水を用いて、温度１６０〜２１０℃、飽和蒸気圧以上の圧力で亜臨界処理する抽出工程を含むウーロン茶抽出物の製造方法に関する。
【００１０】
前記亜臨界処理の処理時間が１０〜６０分であることが好ましい。
【発明の効果】
【００１１】
本発明のウーロン茶抽出物、および本発明のウーロン茶抽出物の製造方法により得られたウーロン茶抽出物は、リパーゼ阻害活性に優れ、澱が少なくかつ色が薄いウーロン茶抽出物である。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】リパーゼ阻害活性試験の結果を示すグラフである。
【図２】５３０ｎｍにおける吸光度の測定結果（色）を示すグラフである。
【図３】６６０ｎｍにおける吸光度の測定結果（澱）を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明のウーロン茶抽出物は亜臨界処理により得られたことを特徴とするウーロン茶抽出物である。
【００１４】
原料
本発明のウーロン茶抽出物の原料となるウーロン茶葉としては、特に限定されず、一般的にウーロン茶として市販されているものを使用することができる。また、ウーロン茶葉原料としては、葉だけでなく茎部などを含んでもよい。
【００１５】
製造方法
本発明のウーロン茶抽出物は、抽出溶媒に水を用いた亜臨界処理により得られるウーロン茶抽出物である。ウーロン茶抽出物の製造方法の一例として、水を用いて亜臨界処理する抽出工程、抽出液と原料残渣とを分離して抽出液を得る固液分離工程を説明する。
【００１６】
抽出工程
抽出工程は、ウーロン茶葉原料を抽出処理することで抽出処理物を得る工程であり、本明細書においては、亜臨界処理による抽出工程を指す。抽出に用いる抽出溶媒としては、水溶性成分の抽出効率や安全性の観点から水を用いることが最も好ましい。亜臨界処理は短時間、高抽出率という点で優れることから、少ない原料から効率的にリパーゼ阻害活性を有する重合ポリフェノールを多く含有するウーロン茶抽出物を得ることができる。
【００１７】
亜臨界処理とは、所定温度および圧力の条件下で亜臨界状態にした抽出溶媒としての亜臨界流体と抽出対象の原料（本発明ではウーロン茶葉）とを接触させることにより、抽出原料から所定の成分を抽出するものである。例えば、水は、圧力２２．１２ＭＰａ、温度３７４．１５℃まで上げると液体でも気体でもない状態を示す。この点を水の臨界点といい、臨界点より低い温度および圧力の熱水を亜臨界水という。この亜臨界水は、誘電率低下とイオン積の向上により、優れた成分抽出作用と加水分解作用を有する。
【００１８】
亜臨界処理に用いる抽出溶媒として水を用いる場合、高温の水処理であれば液体状態でも気体状態でも利用することができる。即ち、亜臨界処理の処理槽へは、水蒸気を供給してもよく、水を供給してもよく、あるいはその両者を供給してもよい。水または水蒸気の温度は望ましくは１００℃以上であり、望まれる反応場としては気体よりも液体状態の方が反応は進みやすいので、密閉容器で強制的に液体の状態にした、いわゆる亜臨界の状態の水の使用が好ましい。より具体的には、金属やセラミックスなどの耐圧容器に原料と抽出溶媒である水を入れて、密閉状態にし、水の亜臨界状態で、両者の接触を一定時間以上行うことで得られる抽出物を亜臨界処理物とすることができる。
【００１９】
亜臨界処理に用いる抽出溶媒は、水以外に、例えばエチレン、エタン、プロパン、二酸化炭素、メタノール、エタノールおよびそれらの混合物が挙げられる。これらの中で、安全性の観点から水を用いるのが最も好ましい。抽出溶媒が水の場合の処理条件について次に説明する。
【００２０】
亜臨界処理温度は、抽出率を高めるという理由から１６０〜２１０℃の間が好ましく、１８０〜２００℃の間がより好ましい。亜臨界処理の温度が１６０℃未満の場合は、澱および色の低減効果が悪化する傾向がある。また、亜臨界処理の温度が２１０℃を超える場合は、リパーゼ阻害活性が低下する。
【００２１】
亜臨界処理圧力は、各温度の飽和蒸気圧以上で行うことが好ましい。各温度での飽和蒸気圧は、日本機械学会蒸気表（１９６８年）を参照するなどして決定することができる。１４０〜２３０℃間の１０℃間隔における飽和蒸気圧を例示すると、１６０℃：０．６２ＭＰａ（６．３０ａｔ）、１７０℃：０．７９ＭＰａ（８．０８ａｔ）、１８０℃：１．００ＭＰａ（１０．２２ａｔ）、１９０℃：１．２５ＭＰａ（１２．８０ａｔ）、２００℃：１．５５ＭＰａ（１５．６８ａｔ）、２１０℃：１．９０ＭＰａ（１９．４５ａｔ）である。この圧力にすることにより、重合ポリフェノールが効率的に得られやすくなる。なお、亜臨界処理の圧力の上限は特に定められないが、高圧装置の仕様上、２０〜３０ＭＰａあたりに抑えることが好ましい。
【００２２】
亜臨界処理時間は、５〜１５０分の間で行うことが好ましく、５〜６０分の間で行うことがより好ましい。この処理時間の範囲にすることにより、ウーロン茶の機能性成分が効率的に得られやすくなる。亜臨界処理時間が５分未満の場合は、得られる抽出物が不十分となる傾向がある。また、亜臨界処理時間が１５０分を超える場合は、過分解してしまい、リパーゼ阻害活性が低下する傾向がある。
【００２３】
すなわち、抽出溶媒を水とした場合におけるウーロン茶葉の亜臨界処理による抽出条件としては、処理温度は１６０〜２１０℃、処理圧力は各温度の飽和蒸気圧以上、処理時間は５〜１５０分で行うことが好ましい。この条件で行うことにより、リパーゼ阻害活性に優れ、澱が少なくかつ色が薄いウーロン茶抽出物を抽出することができる。
【００２４】
固液分離工程
固液分離工程は、亜臨界処理物をウーロン茶抽出液と原料残渣（固体物）とに分離する工程である。具体的な固液分離工程としては、ろ紙を用いたろ過、遠心分離、デカンテーション、スクリュープレス、ローラープレス、ロータリードラムスクリーン、ベルトスクリーン、振動スクリーン、多重板振動フィルター、真空脱水、加圧脱水、ベルトプレス、遠心濃縮脱水、多重円板脱水などが挙げられる。なかでも、操作が簡便であり、分離効率に優れるという理由から、ろ過が好ましい。
【００２５】
さらに、澱の原因となる物質を効率的に析出させるために、原料残渣と分離した亜臨界処理液を、一度凍結させた後、融解させる凍結融解工程を行うことが好ましい。凍結させる温度は特に限定されず、一般的な冷凍庫を用いることができる。
【００２６】
上記凍結融解工程の結果、澱が析出した場合は、さらに固液分離工程により、澱を除去することを目的とした固液分離工程を行うことが好ましい。当該固液分離工程としては前述の方法が挙げられる。なかでも、操作が簡便であり、分離効率に優れるという理由から、ろ過が好ましい。
【００２７】
固液分離工程により得られたウーロン茶抽出液をそのまま、もしくは濃縮された状態で用いることができる。また、使用方法に応じて乾燥させることもできる。抽出液を乾燥させることにより固形状のウーロン茶抽出物が得られる。乾燥方法としては一般的な乾燥方法を用いることができ、自然放置はもちろんのこと、加熱系である箱型乾燥や噴霧乾燥などの伝熱乾燥、マイクロ波乾燥などの内部発熱乾燥、非加熱系である凍結乾燥、真空乾燥、吸引乾燥、加圧乾燥、超音波乾燥等が可能である。一般的で簡便なオーブン、恒温槽を用いて乾燥することももちろん許容される。また、適宜、活性炭、イオン交換樹脂等の吸着剤を用いた脱色を乾燥工程の前に行ってもよい。
【００２８】
より機能性（リパーゼ阻害活性）の高い成分を選択的に得るために固液分離工程および乾燥工程を経た抽出物に対し有機溶剤（アルコール類、ケトン類、アセトン類等）による抽出を行ってもよい。なかでも、人体への影響が少なく、食品および化粧品への使用が容易であるという理由からエタノールが好ましい。
【００２９】
ウーロン茶抽出物
本発明のウーロン茶抽出物は、リパーゼ阻害活性に優れ、澱が少なくかつ色が薄いという特徴を有する。
【００３０】
ウーロン茶抽出物のリパーゼ阻害活性は、ＤＳファーマ社製のリパーゼキットＳなど、市販のリパーゼ阻害活性測定キットにより測定することができる。
【００３１】
ウーロン茶抽出物における澱の量は、ウーロン茶抽出物の固形分濃度を２．５ｍｇ／ｍｌに調整した際の、５３０ｎｍにおける吸光度を指標とする。５３０ｎｍにおける吸光度は、０．３０以下が好ましく、０．２５以下がより好ましい。また、当該吸光度は低い程澱が少ないことを示し、下限は特に限定されない。
【００３２】
ウーロン茶抽出物における色は、ウーロン茶抽出物の固形分濃度を２．５ｍｇ／ｍｌに調整した際の、６６０ｎｍにおける吸光度を指標とする。６６０ｎｍにおける吸光度は、０．１０以下が好ましく、０．０８以下がより好ましい。また、当該吸光度は低い程色が薄いことを示し、下限は特に限定されない。
【００３３】
本発明のウーロン茶抽出物は、リパーゼ阻害活性に優れ、澱が少なくかつ色が薄いという特徴を有することから、そのまま飲用としてもよいし、健康食品やサプリメントなどの食品、化粧料などに好適に用いることができる。
【実施例】
【００３４】
本発明を実施例に基づいて説明するが、本発明は実施例のみに限定されるものではない。
【００３５】
＜ウーロン茶抽出物の調製＞
実施例および比較例のウーロン茶抽出物の調製工程を説明する。
【００３６】
実施例１（亜臨界処理１７５℃、１０分）
容積２ｌの耐圧容器に、市販のウーロン茶葉粉末を４０ｇ、蒸留水３００ｇを入れ、処理温度１７５℃、処理圧力０．９ＭＰａ、処理時間１０分で亜臨界処理を行った。亜臨界処理の終了後、処理缶内の処理物（亜臨界残渣＋亜臨界処理液）を１ｌ容器に回収し、セルロース製ろ紙（孔径：７μｍ、Ａｄｖａｎｔｅｃ製の５Ａ）で吸引ろ過し、ろ液（亜臨界抽出液）を得た。得られた亜臨界抽出液を−２５℃で凍結させた後、室温で融解させた。そして、析出した亜臨界抽出液中の澱をセルロース製ろ紙（孔径：１μｍ、Ａｄｖａｎｔｅｃ製の５Ｃ）で吸引ろ過することで除去した。得られた亜臨界処理液の固形分濃度を測定し、固形分濃度が２．５ｍｇ／ｍｌの亜臨界処理液を調製した。
【００３７】
実施例２（亜臨界処理１７５℃、３０分）
亜臨界処理時間を３０分としたこと以外は、実施例１と同様に亜臨界処理、固液分離工程（凍結融解、澱除去含む）を行い、粉末状の亜臨界抽出物を得た。
【００３８】
実施例３（亜臨界処理１９５℃、５分）
亜臨界処理温度を１９５℃、処理圧力を１．６ＭＰａ、亜臨界処理時間を５分としたこと以外は、実施例１と同様に亜臨界処理、固液分離工程（凍結融解、澱除去含む）を行い、亜臨界処理液を調製した。
【００３９】
実施例４（亜臨界処理１９５℃、１０分）
亜臨界処理温度を１９５℃、処理圧力を１．６ＭＰａ、亜臨界処理時間を１０分としたこと以外は、実施例１と同様に亜臨界処理、固液分離工程（凍結融解、澱除去含む）を行い、亜臨界処理液を調製した。
【００４０】
実施例５（亜臨界処理１９５℃、２０分）
亜臨界処理温度を１９５℃、処理圧力を１．６ＭＰａ、亜臨界処理時間を２０分としたこと以外は、実施例１と同様に亜臨界処理、固液分離工程（凍結融解、澱除去含む）を行い、亜臨界処理液を調製した。
【００４１】
実施例６（亜臨界処理１９５℃、３０分）
亜臨界処理温度を１９５℃、処理圧力を１．６ＭＰａ、亜臨界処理時間を３０分としたこと以外は、実施例１と同様に亜臨界処理、固液分離工程（凍結融解、澱除去含む）を行い、亜臨界処理液を調製した。
【００４２】
比較例１（熱水処理）
１０００ｍｌ容のビーカーに、市販のウーロン茶葉粉末を２０ｇ、蒸留水５００ｇを入れ、処理温度９５℃、大気圧下、処理時間３０分で熱水処理を行い、熱水処理物を得た。
熱水処理物をセルロース製ろ紙（孔径：７μｍ、Ａｄｖａｎｔｅｃ製の５Ａ）で吸引ろ過し、ろ液（熱水抽出液）を得た。得られた熱水抽出液を−２５℃で凍結させた後、室温で融解させた。そして、熱水抽出液をセルロース製ろ紙（孔径：１μｍ、Ａｄｖａｎｔｅｃ製の５Ｃ）で吸引ろ過した。得られた熱水抽出液の固形分濃度を測定し、固形分濃度を２．５ｍｇ／ｍｌに調整し、熱水抽出液を得た。
【００４３】
比較例２（亜臨界処理１５５℃、１０分）
亜臨界処理温度を１５５℃、処理圧力を０．５ＭＰａ、亜臨界処理時間を１０分としたこと以外は、実施例１と同様に亜臨界処理、固液分離工程（凍結融解、澱除去含む）を行い、亜臨界処理液を調製した。
【００４４】
固形分濃度測定
亜臨界処理液および熱水抽出液を定量し、１０５℃のオーブン（ＹＡＭＡＴＯ製のＳＴＥＲＩＬＩＺＥＲ  ＳＩ４０１）により乾燥させ、得られた固形物の質量を亜臨界処理液および熱水抽出液の量で除することで測定した。
【００４５】
＜評価＞
各実施例および比較例で調製した亜臨界処理液および熱水抽出液を下記試験で評価した。
【００４６】
リパーゼ阻害活性
２５μｌの各亜臨界抽出物または熱水抽出物（試料溶液）に、リパーゼキットＳ（ＤＳファーマ社製）付属の発色試薬８５μｌ、および基質溶液１０μｌおよび酵素溶液（０．１ｍｇ／ｍｌ豚膵臓リパーゼ（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ社製）／０．１Ｍクエン酸緩衝液）１０μｌを混合し、３０℃にて３０分間反応させた。その後、その反応液にリパーゼキットＳ付属の停止液を１７０μｌ添加して反応を停止させ、波長４１３ｎｍでの吸光度を測定し、下記の式よりリパーゼ阻害率（％）算出し、リパーゼ活性を５０％阻害する試料濃度（ＩＣ５０値）を算出した。なお、ブランクとして試料溶液に替えて蒸留水を用いたものを使用した。
リパーゼ阻害活性（％）＝１−（試料溶液の酵素反応後の吸光度−酵素反応前の試料溶液の吸光度）／（ブランクの酵素反応後の吸光度−酵素反応前のブランクの吸光度）×１００
【００４７】
澱および色の測定
各亜臨界処理物および熱水抽出液の５３０ｎｍにおける吸光度および６６０ｎｍにおける吸光度を、分光光度計（株式会社日立製作所製のＵ−５１００）により測定した。５３０ｎｍの吸光度は澱の量の指標に、６６０ｎｍの吸光度は色の指標に用いた。
【００４８】
重合ポリフェノール濃度
各亜臨界処理物および熱水抽出液の重合ポリフェノール濃度を、下記条件の高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により測定した。
測定装置：株式会社島津製作所製のＬＣ−２０１０ＨＴ
カラム：東ソー株式会社製のＴＳＫＧＥＬ  ＯＤＳ−８０ＴＳ  ＱＡ
移動相Ａ：０．０５％（ｗ／ｖ）ＴＦＡ含アセトニトリル／水＝１０／９０
移動相Ｂ：０．０５％（ｗ／ｖ）ＴＦＡ含アセトニトリル／水＝８０／２０
0min-5min; A:B=100:0
5min-11min; A:B=100:0→92:8
11min-21min; A:B=92:8→90:10
21min-22min; A:B=90:10→0:100
22min-30min; A:B=0:100
30min-31min; A:B=0:100→100:0
カラム温度：４０℃
検出波長：２８０ｎｍ
導入量：１０μｌ
流量：１．０ｍｌ／ｍｉｎ
分析時間：３０ｍｉｎ
【００４９】
【表１】
2018027898.tif 000002
【００５０】
表１に示す結果より、所定の亜臨界処理により得られるウーロン茶抽出物は、リパーゼ阻害活性に優れ、澱が少なくかつ色が薄いことがわかる。
【図１】
2018027898.tif 000003
【図２】
2018027898.tif 000004
【図３】
2018027898.tif 000005