(57)【要約】【課題】本発明は，様々な機能性部位の導入が容易な含窒素９員環アルキンを提供することを目的とする．【解決手段】含窒素９員環アルキンの環内窒素上を無保護にすること，あるいは環上にヒドロキシ基，チオール基，チオエステル基，システイン基，あるいはメタクリル基を導入することにより，機能性部位の導入を容易にする．【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）
【化１】
2018039773.tif 000024
（式中，
Ｙはメチル基，エチル基，ベンジル基，パラトルエンスルホニル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，および９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基からなる群から選ばれる）
で示される含窒素９員環アルキン．
【請求項２】
一般式（２）
【化２】
2018039773.tif 000025
（式中，
ＸおよびＹのそれぞれは水素，メチル基，エチル基，ベンジル基，パラトルエンスルホニル基，２‐ニトロベンゼンスルホニル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，および９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基からなる群から選ばれ，
ｍは０，１，２，および３からなる群から選ばれ，
Ｒは水素，クロロアセチル基，Ｓ‐アセチルチオグリコイル基，チオグリコイル基，２‐メルカプトエチル基，３‐メルカプトプロピル基，メタクリロイル基，２‐メタクリロイルエチル基，および３‐メタクリロイルプロピル基からなる群から選ばれる）
で示される含窒素９員環アルキン．
【請求項３】
一般式（３）
【化３】
2018039773.tif 000026
（式中，
Ｙはメチル基，エチル基，ベンジル基，パラトルエンスルホニル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，および９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基からなる群から選ばれる）
で示される含窒素９員環アルキン．
【請求項４】
一般式（４）
【化４】
2018039773.tif 000027
（式中，
Ｙはメチル基，エチル基，ベンジル基，パラトルエンスルホニル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，および９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基からなる群から選ばれる）
で示される含窒素９員環アルキン．
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は，アジドと無触媒条件で速やかに反応する新規含窒素９員環アルキンに関する．
【背景技術】
【０００２】  アルキンとアジドのＨｕｉｓｇｅｎ反応は優れた分子連結法であり，代表的なクリック反応として広く用いられている．しかしながら，一般的に用いられる末端アルキンのクリック反応を迅速に進行させるためには銅触媒が必須であった．そのために，銅触媒の高い細胞毒性が問題となる生化学研究や，銅触媒残渣が材料の性能を低減する材料開発研究ではその使用に難があった．【０００３】  この問題を解決する手法の一つとして，近年，８員環アルキンとアジドの無触媒条件でのＨｕｉｓｇｅｎ反応が無触媒クリック反応として様々な分野で利用されるようになった（特許文献１参照）．しかしながら，従来の８員環アルキンは高度に歪んでいるために不安定であることや官能基化が困難であることが問題となっていた．より具体的には，８員環アルキンには，その合成が困難である，保存や実験操作の過程での熱分解や，Ｈｕｉｓｇｅｎ反応での副反応が進行してしまう，また，機能性部位を一つしか導入することができないなどの欠点があった．【０００４】  これに対して，最近，安定であるにも関わらず，高いＨｕｉｓｇｅｎ反応性を示す含窒素９員環アルキンが報告された（非特許文献１参照）．しかしながら，それら従来の含窒素９員環アルキンには，窒素上の保護基を除去することが困難である，環上にさらなる官能基を導入することが困難であるなどの欠点があり，それ故に，機能性部位の導入が著しく制限され，応用範囲がごく限られていた．
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２００６／０５０２６２号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】友岡克彦（Ｋａｔｓｕｈｉｋｏ  Ｔｏｍｏｏｋａ）他，アンゲヴァンテ  ヒェミー  インターナツィオナール  発行（Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｅｄｉｔｉｏｎ），２０１５年，５４巻，４号，ｐ．１１９０−１１９４．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】  解決しようとする問題点は，従来の含窒素９員環アルキンへの機能性部位導入が困難である点にある．
【課題を解決するための手段】
【０００８】  本発明は，含窒素９員環アルキンの環内窒素上を無保護にする，あるいは環上にヒドロキシ基を導入する，あるいはチオール基を導入する，あるいはチオエステル基を導入する，あるいはシステイン基を導入する，あるいはメタクリル基を導入することにより，機能性部位の導入を容易にすることを最も主要な特徴とする．【０００９】  本発明の第１の実施形態は，一般式（１）
【化１】
2018039773.tif 000002
（式中，
Ｙはメチル基，エチル基，ベンジル基，パラトルエンスルホニル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，および９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基からなる群から選ばれる）
で示される含窒素９員環アルキンである．【００１０】  本発明の第２の実施形態は，一般式（２）
【化２】
2018039773.tif 000003
（式中，
ＸおよびＹのそれぞれは水素，メチル基，エチル基，ベンジル基，パラトルエンスルホニル基，２‐ニトロベンゼンスルホニル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，および９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基からなる群から選ばれ，  ｍは０，１，２，および３からなる群から選ばれ，
Ｒは水素，クロロアセチル基，チオグリコイル基，Ｓ‐アセチルチオグリコイル基，２‐メルカプトエチル基，３‐メルカプトプロピル基，メタクリロイル基，２‐メタクリロイルエチル基，３‐メタクリロイルプロピル基から選ばれる）
で示される含窒素９員環アルキンである．【００１１】  本発明の第３の実施形態は，一般式（３）
【化３】
2018039773.tif 000004
（式中，
Ｙはメチル基，エチル基，ベンジル基，パラトルエンスルホニル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，および９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基からなる群から選ばれる）
で示される含窒素９員環アルキンである．【００１２】  本発明の第４の実施形態は，一般式（４）
【化４】
2018039773.tif 000005
（式中，
Ｙはメチル基，エチル基，ベンジル基，パラトルエンスルホニル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，および９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基からなる群から選ばれる）
で示される含窒素９員環アルキンである．
【発明の効果】
【００１３】  本発明の新規含窒素９員環アルキンは，環内無保護窒素とカルボン酸誘導体とのアミド化や，環上のヒドロキシ基とカルボン酸誘導体とのエステル化により様々な機能性部位の導入が可能であるという利点がある．また，本発明の新規含窒素９員環アルキンは，チオール基によるタンパクとの結合形成や，金表面への配列が可能であるという利点がある．また，本発明の新規含窒素９員環アルキンは，チオエステル基，あるいはシステイン基でのペプチド鎖の導入が可能であるという利点がある．また，本発明の新規含窒素９員環アルキンは，メタクリル基での重合反応で高分子鎖への導入が可能であるという利点がある．以上のように，本発明の新規含窒素９員環アルキンを応用すると，様々なカルボン酸誘導体やタンパク，ペプチド，金表面，高分子などに無触媒クリック反応部位を導入することが可能である．【００１４】  さらに，一般式（１）〜（４）の新規含窒素９員環アルキンは，アルキンとアジドとの反応で多様な機能性部位を導入できる．よって，本発明の新規含窒素９員環アルキンは，医薬品研究における標的タンパクの同定や，疾患部位の標識化，金表面・高分子材料表面の改質や機能導入などの応用が考えられる．
【発明を実施するための形態】
【００１５】  本発明の第１の実施形態の含窒素９員環アルキンは，一般式（１）
【化５】
2018039773.tif 000006
（式中，Ｙはメチル基，エチル基，ベンジル基，パラトルエンスルホニル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基，メタクリル基からなる群から選ばれる）で示される９員環アルキンである．
【００１６】本発明の含窒素９員環アルキン（１ａ）は，
【化６】
2018039773.tif 000007
Ｎ‐パラトルエンスルホニル‐Ｎ’‐２‐ニトロベンゼンスルホニル‐４，８‐ジアザシクロノニンに，パラトルエンチオールおよび炭酸セシウムを反応させて合成する．
【００１７】  一般式（１）で表わされる本発明の含窒素９員環アルキン（Ｙはメチル基，エチル基，ベンジル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基からなる群から選ばれる）は，一般式（５）
【化７】
2018039773.tif 000008
（式中，Ｙはメチル基，エチル基，ベンジル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基からなる群から選ばれる）で示される９員環アルキンを合成中間体とする．
【００１８】  一般式（１）で表わされる本発明の含窒素９員環アルキン（Ｙはメチル基，エチル基，ベンジル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基からなる群から選ばれる）は，
【化８】
2018039773.tif 000009
（ａ）塩基の存在下，９員環アルキン（１ａ）を，Ｙ‐Ｚ（式中，Ｚは塩素，臭素，ヨウ素，トリフルオロメタンスルホニルオキシ基からなる群から選ばれる）と反応させて，一般式（５）の化合物を形成する工程と，
（ｂ）一般式（５）の化合物とカリウムジフェニルホスフィドを反応させる工程と
を含む方法により合成できる．
【００１９】  一般式（１）で表わされる本発明の新規含窒素９員環アルキンは，環内無保護窒素とカルボン酸誘導体とのアミド化により，様々な機能性部位の導入が可能であるという利点がある．
【００２０】  本発明の第２の実施形態の含窒素９員環アルキンは，一般式（２）
【００２１】
【化９】
2018039773.tif 000010
（式中，ＸおよびＹのそれぞれは水素，メチル基，エチル基，ベンジル基，パラトルエンスルホニル基，２‐ニトロベンゼンスルホニル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基から選ばれ，ｍは０，１，２，３から選ばれ，Ｒは水素，クロロアセチル基，チオグリコイル基，Ｓ‐アセチルチオグリコイル基，２‐メルカプトエチル基，３‐メルカプトプロピル基，メタクリロイル基，２‐メタクリロイルエチル基，３‐メタクリロイルプロピル基からなる群から選ばれる）で示される９員環アルキンである．
【００２２】  一般式（２）の含窒素９員環アルキンは，一般式（６）
【化１０】
2018039773.tif 000011
（式中，ＸおよびＹのそれぞれは水素，メチル基，エチル基，ベンジル基，パラトルエンスルホニル基，２‐ニトロベンゼンスルホニル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基から選ばれ，ｍは０，１，２，３から選ばれ，Ｒは水素，クロロアセチル基，チオグリコイル基，Ｓ‐アセチルチオグリコイル基，２‐メルカプトエチル基，３‐メルカプトプロピル基，メタクリロイル基，１‐メタクリロイルエチル基，１‐メタクリロイルプロピル基からなる群から選ばれる）で示されるジアミン誘導体を用いて合成することができる．
【００２３】  一般式（２）の含窒素９員環アルキンは，コバルト錯体（７）
【化１１】
2018039773.tif 000012
を中間体として合成することができる．
【００２４】  一般式（２）の含窒素９員環アルキンは，一般式（８）
【化１２】
2018039773.tif 000013
（式中，ＸおよびＹのそれぞれは水素，メチル基，エチル基，ベンジル基，パラトルエンスルホニル基，２‐ニトロベンゼンスルホニル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基から選ばれ，ｍは０，１，２，３から選ばれ，Ｒは水素，クロロアセチル基，チオグリコイル基，Ｓ‐アセチルチオグリコイル基，２‐メルカプトエチル基，３‐メルカプトプロピル基，メタクリロイル基，１‐メタクリロイルエチル基，１‐メタクリロイルプロピル基からなる群から選ばれる）で示されるコバルト錯体を中間体として合成することができる．
【００２５】  一般式（２）で表わされる本発明の含窒素９員環アルキンは，
【化１３】
2018039773.tif 000014
（ｃ）  １，４‐ブチンジオールにＣｏ２（ＣＯ）８を反応させて，コバルト錯体（７）を形成する工程と，
（ｄ）  ＢＦ３・ＯＥｔ２の存在下，コバルト錯体（７）と，一般式（６）の化合物を反応させて，一般式（８）の化合物を形成する工程と，
（ｅ）  一般式（８）の化合物と，硝酸セリウム（ＩＶ）アンモニウムを反応させる工程とを含む方法によって合成できる．
【００２６】  Ｒが水素である場合，一般式（２）で表わされる本発明の新規含窒素９員環アルキン（Ｒ＝Ｈ）は，環上のヒドロキシ基とカルボン酸誘導体とのエステル化により様々な機能性部位の導入が可能であるという利点がある．また，Ｒがチオグリコイル基，２‐メルカプトエチル基，３‐メルカプトプロピル基である場合，一般式（２）で表わされる本発明の新規含窒素９員環アルキンは，チオール基によるタンパクとの結合形成，金表面への配列が可能であるという利点がある．さらに，Ｒが２‐メタクリロイルエチル基，３‐メタクリロイルプロピル基である場合，一般式（２）で表わされる本発明の新規含窒素９員環アルキンは，メタクリル基での重合反応で高分子鎖への導入が可能であるという利点がある．
【００２７】  本発明の第３の実施形態の含窒素９員環アルキンは，一般式（３）
【００２８】
【化１４】
2018039773.tif 000015
（式中，Ｙはメチル基，エチル基，ベンジル基，パラトルエンスルホニル基，２‐ニトロベンゼンスルホニル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基からなる群から選ばれる）で示される９員環アルキンである．
【００２９】  一般式（３）の含窒素９員環アルキンは，一般式（９）
【化１５】
2018039773.tif 000016
（式中，Ｙはメチル基，エチル基，ベンジル基，パラトルエンスルホニル基，２‐ニトロベンゼンスルホニル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基からなる群から選ばれる）で示される９員環アルキンを中間体として合成することができる．
【００３０】  一般式（３）で表わされる本発明の含窒素９員環アルキンは，
【化１６】
2018039773.tif 000017
（ｆ）  一般式（１）の化合物と，縮合剤およびＮ‐ｔ‐ブトキシカルボニル‐Ｓ‐トリチルシステインを反応させて，一般式（９）の化合物を形成する工程と，
（ｇ）  一般式（９）の化合物と，トリフルオロ酢酸を反応させる工程と，
を含む方法によって合成できる．
【００３１】  一般式（３）で表わされる本発明の新規含窒素９員環アルキンは，チオール基によるタンパクとの結合形成，金表面への配列が可能であるという利点がある．また，一般式（３）で表わされる本発明の新規含窒素９員環アルキンは，システイン基部位とペプチド鎖の連結を行うことが可能であるという利点がある．
【００３２】  本発明の第４の実施形態の含窒素９員環アルキンは，一般式（４）
【００３３】
【化１７】
2018039773.tif 000018
（式中，Ｙはメチル基，エチル基，ベンジル基，パラトルエンスルホニル基，２‐ニトロベンゼンスルホニル基，アセチル基，トリフルオロアセチル基，トリクロロアセチル基，９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル基からなる群から選ばれる）で示される９員環アルキンである．
【００３４】  一般式（４）で表わされる本発明の含窒素９員環アルキンは，
【化１８】
2018039773.tif 000019
一般式（１）で表わされる含窒素９員環アルキンにＳ‐メチル‐ブロモチオ酢酸および塩基を反応させて合成できる．
【００３５】  一般式（４）で表わされる本発明の新規含窒素９員環アルキンは，チオエステル基でのペプチド鎖の導入が可能であるという利点がある．
【００３６】  さらに，一般式（１）〜（４）の新規含窒素９員環アルキンは，アルキンとアジドとの反応で多様な機能性部位を導入できる．よって，本発明の新規含窒素９員環アルキンは，医薬品研究における標的タンパクの同定や，疾患部位の標識化，金表面・高分子材料表面の改質や機能導入などの応用が考えられる．
【００３７】  なお，本発明の含窒素９員環アルキンの効果は，上述のＸ，Ｙ，Ｚ，Ｒとして挙げられた官能基以外の官能基やｍ以外のメチレン炭素数においては発現しないことを意味しているのではない．概ねどのような場合に本願発明の効果が発現しないかについては，当業者は後述の説明から判断可能である．
【実施例】
【００３８】  具体的な実施例について試験結果を含めてさらに詳細に説明する．
【実施例１】
【００３９】含窒素９員環アルキン（１ａ）の合成
【化１９】
2018039773.tif 000020
【００４０】  Ｎ‐パラトルエンスルホニル‐Ｎ′‐２‐ニトロベンゼンスルホニル‐４，８‐ジアザシクロノニン（１．５０ｇ，３．２３ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（５０ｍＬ）に溶かして，炭酸セシウム（２．２３ｇ，６．８８ｍｍｏｌ），パラトルエンチオール（８５４ｍｇ，６．８８ｍｍｏｌ）を加えて，室温で１時間撹拌した．反応終了後，ジエチルエーテルを加えて，１Ｍ塩酸で抽出した．まとめた水相に１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を加えて，液性をｐＨ＝１４程度に調節した後に，ジクロロメタンで抽出した．有機相を食塩水で洗浄後，無水硫酸ナトリウムで乾燥した．濾過で固体を除いた後に，溶媒を減圧留去して，含窒素９員環アルキン（１ａ）を薄黄色固体（７２９ｍｇ，収率８１％）として得た．含窒素９員環アルキン１ａの物性データは以下のとおりであった．１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．６８（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．１  Ｈｚ，２Ｈ），３．８６（ｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，２Ｈ），３．３８（ｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，２Ｈ），３．３１（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．９７（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ），２．４４（ｓ，３Ｈ），１．８９（ｔｔ，Ｊ＝６．０，５．７Ｈｚ，２Ｈ）．
【実施例２】
【００４１】含窒素９員環アルキン（２ａ）の合成
【化２０】
2018039773.tif 000021
【００４２】  １，４‐ブチンジオール（２５．８ｍｇ，０．３００ｍｍｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶かして，二コバルトオクタカルボニル（１０７ｍｇ，０．３１３ｍｍｏｌ）を加えて，３０℃で１時間攪拌することでコバルト錯体（７）を調製した．その後，ジクロロメタン（２０ｍＬ），ジアミン誘導体（６ａ）（９９．６ｍｇ，０．２５０ｍｍｍｏｌ），ボロントリフルオリド‐ジエチルエーテル錯体（０．１３０ｍＬ，１．００ｍｍｏｌ）を加えて，３０℃で３０分撹拌した．反応終了後，シリカゲル（中性，球状）（７．０ｇ），硝酸セリウム（ＩＶ）アンモニウム（１．３４ｇ，２．５０ｍｍｏｌ）を加えて，３０℃で１時間半撹拌した．その後，ピリジン（０．０８ｍＬ，１．００ｍｍｏｌ），アミノプロピル化されたシリカゲル（２．５ｇ）を加えて，３０分撹拌した．濾過で固体を除去した後に，溶媒を減圧留去して，得られた９員環コバルト錯体（８ａ）を精製することなくジクロロメタン（３０ｍＬ）に溶かして，シリカゲル（中性，球状）（０．３ｇ），アミノプロピル化されたシリカゲル（０．３ｇ）を加えて，３０分撹拌した．濾過で固体を除いた後に，溶媒を減圧留去し，得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：クロロホルム）で精製して，９員環アルキン（２ａ）を白色固体（８１．１ｍｇ，収率７２％）として得た．９員環アルキン（２ａ）の物性データは以下のとおりであった．１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．６９（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，４Ｈ），７．３６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，４Ｈ），４．１８‐４．５０（ｍ，１Ｈ），３．９４（ｄ，Ｊ＝４．５Ｈｚ，１Ｈ），３．８３（ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ，２Ｈ），３．７８（ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ，２Ｈ），３．４３‐３．３０（ｍ，４Ｈ），２．４５（ｓ，６Ｈ）．
【実施例３】
【００４３】含窒素９員環アルキン（１ａ）へのメタクリル基の導入
【化２１】
2018039773.tif 000022
【００４４】  含窒素９員環アルキン（１ａ）（１００ｍｇ，０．３５９ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（５ｍＬ）に溶かして，０℃でトリエチルアミン（０．０９５ｍＬ，０．７１８ｍｍｏｌ），メタクリロイルクロリド（０．０７０ｍＬ，０．７１８ｍｍｏｌ）を加え，室温で１時間撹拌した．反応終了後，水を加えて酢酸エチルで抽出した．有機相を食塩水で洗浄後，無水硫酸ナトリウムで乾燥した．濾過で固体を除いた後に，溶媒を減圧留去して，得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン：酢酸エチル＝３：２）で精製し，環内窒素上にメタクリル基を導入した含窒素９員環アルキン（１０）を透明な液体（１１８ｍｇ，収率９５％）として得た．含窒素９員環アルキン（１０）の物性データは以下のとおりであった．１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．６７（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），５．１９（ｓ，１Ｈ），５．０３（ｓ，１Ｈ），４．１６（ｂｒ，２Ｈ），３．８７（ｂｒ，２Ｈ），３．６０（ｂｒ，２Ｈ），３．２０（ｂｒ，２Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），２．１９（ｂｒ，２Ｈ），１．９２（ｓ，３Ｈ）．
【実施例４】
【００４５】含窒素９員環アルキン（２ａ）へのチオグリコイル基の導入
【化２２】
2018039773.tif 000023
【００４６】  含窒素９員環アルキン（２ａ）（４７４ｍｇ，１．０６ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶かして，０℃でピリジン（０．１７０ｍＬ，２．１２ｍｍｏｌ），クロロアセチルクロリド（０．１７０ｍＬ，２．１２ｍｍｏｌ）を加えて，室温で２時間撹拌した．反応終了後，水を加えて酢酸エチルで抽出した．有機相を食塩水で洗浄後，無水硫酸ナトリウムで乾燥した．濾過で固体を除いた後に，溶媒を減圧留去して，含窒素９員環アルキン（２ｂ）を粗生成物として得た．それをＮ，Ｎ‐ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶かして，０℃でチオ酢酸カリウム（３０２ｍｇ，２．６４ｍｍｏｌ）を加えて，室温で２時間撹拌した．反応終了後，水を加え酢酸エチルで抽出した．有機相を食塩水で洗浄後，無水硫酸ナトリウムで乾燥した．濾過で固体を除いた後に，溶媒を減圧留去して，得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）で精製し含窒素９員環アルキン（２ｃ）を薄黄色固体（４８７ｍｇ，収率８２％）として得た．含窒素９員環アルキン（２ｃ）（２７９ｍｇ，０．４９３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ），メタノール（５ｍＬ）に溶かして，０℃でナトリウムメタンチオラート（約５０％）（１０５ｍｇ，０．７４０ｍｍｏｌ）を加えて，１５分撹拌した．反応終了後，飽和塩化アンモニウム水溶液を加えジクロロメタンで抽出した．有機相を食塩水で洗浄後，無水硫酸ナトリウムで乾燥した．濾過で固体を除いた後に，溶媒を減圧留去し，得られた粗生成物をジクロロメタン（１０ｍＬ），ジエチルエーテル（５ｍＬ）に溶かして，ヘキサンを加え生じた沈殿を濾取し，含窒素９員環アルキン（２ｄ）の白色固体（２２７ｍｇ，収率８８％）を得た．含窒素９員環アルキン（２ｄ）の物性データは以下のとおりであった．１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．６４（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，４Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，４Ｈ），５．２１（ｔｔ，Ｊ＝６．９，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．８２（ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ，２Ｈ），３．７７（ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ，２Ｈ），３．６５（ｄｄ，Ｊ＝１５．４，６．９Ｈｚ，２Ｈ），３．４１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），３．２８（ｄｄ，Ｊ＝１５．４，３．０Ｈｚ，２Ｈ），２．４４（ｓ，６Ｈ），２．０８（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）．