(57)【要約】【課題】ポイント・オブ・ケア検査や血糖自己測定に用いることができる、ＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体およびこれを備えたＨｂＡ１ｃ測定装置を提供する。【解決手段】ＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体１００は、第１の基材１０１Ａと第２の基材１０１Ｂとを張り合わせてなり、両基材間に、第１〜第３の流路１０２〜１０４および第１〜第３の流路１０２〜１０４のそれぞれと直接繋がる混合処理槽１０５が形成されている。第１および第２の流路１０２および１０３から供給された第１および第２の展開液が混合処理槽１０５で混合された後に第３の流路１０４に供給可能に構成されている。第３の流路１０４には多孔質シリカモノリスカラム１１１が内包されており、多孔質シリカモノリスカラム１１１の表面は、ポア（メソポア、ミクロポア、マクロポア）が存在せず、ポリマーによって表面修飾され陰イオン性を示す。【選択図】図１
2018059832.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも第１の基材と第２の基材とを張り合わせてなり、
前記第１の基材と前記第２の基材との間に、第１〜第３の流路および前記第１〜第３の流路のそれぞれと直接繋がる混合処理槽が形成されており、
前記第１および第２の流路から供給された第１および第２の展開液が前記混合処理槽で混合された後に前記第３の流路に供給可能に構成されており、
前記第３の流路には多孔質シリカモノリスカラムが内包されており、
前記多孔質シリカモノリスカラムの表面は、ポアが存在せず、ポリマーによって表面修飾され陰イオン性を示すことを特徴とするＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体。
【請求項２】
前記多孔質シリカモノリスカラムは、長さＬが１０〜１４ｍｍであり、内径Ｒが１．５〜２．５ｍｍである請求項１に記載のＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体。
【請求項３】
前記多孔質シリカモノリスの体積は５０ｍｍ３以下である、請求項１または２に記載の流路構造体。
【請求項４】
前記流路構造体は第１および第２の展開液槽を備えており、
前記第１および第２の流路のそれぞれが、前記第１および第２の展開液層にそれぞれ接続されており、
前記第１および第２の展開液槽のそれぞれが、前記流路構造体の外側に設けられている第１および第２の接続部にそれぞれ連通されており、
前記第１および第２の接続部から気体を注入することにより、前記第１および第２の流路に第１および第２の展開液が供給される、
請求項１、２または３のいずか１項に記載のＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体。
【請求項５】
請求項１〜４のいずか１項に記載のＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体を備えることを特徴とするＨｂＡ１ｃ測定装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ポイント・オブ・ケア検査（Point-of-Care Testing，ＰＯＣＴ）や、血糖自己測定（Self-Monitoring of Blood Glucose，ＳＭＢＧ）に対応しうる血液中のグリコヘモグロビン（ＨｂＡ１ｃ）測定用流路構造体およびこれを備えるＨｂＡ１ｃ測定装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、診療・看護現場で医療スタッフが実施する簡易、迅速検査などを意味するＰＯＣＴや、医師の指導の下で糖尿病患者が自宅等で実施するＳＭＢＧによって血液中のＨｂＡ１ｃを測定することが求められている。
【０００３】
ＰＯＣＴに関し、特許文献１には、多孔性シリカを主成分とする多孔性シリカカラムであって、第１の性質と第１の平均細孔径とを有する第１の多孔性シリカ部と、前記第１の性質とは異なる第２の性質と第１の平均細孔径とは異なる第２の平均細孔径とを有する第２の多孔性シリカ部とを含む、多孔性シリカカラムが記載されており、その多孔性シリカカラムを用いた高速液体クロマトグラフィー（High Performance Liquid Chromatography，ＨＰＬＣ）装置が示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第２００８／０２３５３４号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかし、特許文献１に記載されているＨｂＡ１ｃの検査に用いられるＨＰＬＣ装置は、分離カラムや他の要素に液体を供給する配管の構成が複雑である。このため、この構造のままでは、診察・看護の現場や患者の自宅等において、ポイント・オブ・ケア検査や血糖自己測定に用いることが困難である。
本発明は、ポイント・オブ・ケア検査や血糖自己測定に用いることができる、ＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体およびこれを備えるＨｂＡ１ｃ測定装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明のＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体は、少なくとも第１の基材と第２の基材とを張り合わせてなり、前記第１の基材と前記第２の基材との間に、第１〜第３の流路および前記第１〜第３の流路のそれぞれと直接繋がる混合処理槽が形成されており、前記第１および第２の流路から供給された第１および第２の展開液が前記混合処理槽で混合された後に前記第３の流路に供給可能に構成されており、前記第３の流路には多孔質シリカモノリスカラムが内包されており、前記多孔質シリカモノリスカラムの表面は、ポアが存在せず、ポリマーによって表面修飾され陰イオン性を示すことを特徴とする。
【０００７】
第１および第２の展開液を混合し、多孔質シリカモノリスカラムを内包する第３の流路に供給可能な混合処理層を備えていることにより、ＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体の構成を簡素化することができる。上記シリカモノリスカラムを用いることにより、分離性能が良好になる。
【０００８】
前記多孔質シリカモノリスカラムは、長さＬが１０〜１４ｍｍであり、内径Ｒが１．５〜２．５ｍｍであり、体積が５０ｍｍ３以下であることが好ましい。
多孔質シリカモノリスカラムは、従来よりも小さいサイズとすることができるから、ＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体の小型化に有効である。
【０００９】
前記流路構造体は第１および第２の展開液槽を備えており、前記第１および第２の流路のそれぞれが、前記第１および第２の展開液層にそれぞれ接続されており、前記第１および第２の展開液槽のそれぞれが、前記流路構造体の外側に設けられている第１および第２の接続部にそれぞれ連通されており、前記第１および第２の接続部から気体を注入することにより、前記第１および第２の流路に第１および第２の展開液が供給される構成としてもよい。
【００１０】
本発明のＨｂＡ１ｃ測定装置は、本発明のＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体を備えることを特徴とする。簡素化された構成のＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体を用いることにより、ＨｂＡ１ｃ測定装置としても小型化することができる。
２つの展開液槽を備えたＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体は、ＨｂＡ１ｃのさらなる小型化に有益である。
【発明の効果】
【００１１】
本発明のＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体は、構成が簡素であるから小型化が容易である。このため、ＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体を用いて、ポイント・オブ・ケア検査や血糖自己測定に適したＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】（Ａ）流路構造体１００を平面視した場合の構造を模式的に表す図、（Ｂ）図１（Ａ）の流路構造体１００をＡ−Ａ線に沿って切断し、矢印方向に見た場合の断面を模式的に表す図
【図２】（Ａ）図１（Ａ）の流路構造体１００の変形例を平面視した場合の構造を模式的に表す図、（Ｂ）図２（Ａ）の流路構造体１００をＡ−Ａ線に沿って切断し、矢印方向に見た場合の断面を模式的に表す図
【図３】流路構造体１００を備える測定装置２００の構造を模式的に表すブロック図
【図４】多孔質シリカモノリスカラム１１１の概略構成を表す斜視図
【図５】多孔質シリカモノリスカラム１２１の概略構成を表す斜視図
【図６】ＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体およびＨｂＡ１ｃ測定装置を用いて測定した、実施例１のＨｂＡ１ｃ標準試料（Ｍ，Ｈ，ＨＨ試料）のクロマトグラム
【図７】標準試料（Ｍ，Ｈ，ＨＨ試料）のＮＧＳＰ値（国際標準値）と、ＨｂＡ１ｃ測定装置の測定により得られたＨｂＡ１ｃの濃度との相関を示すグラフ
【図８】実施例２のグルコース添加試料のクロマトグラム
【図９】（Ａ）実施例３−１の試料のクロマトグラム、（Ｂ）実施例３−２の試料のクロマトグラム、（Ｃ）実施例３−３の試料のクロマトグラム
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、本発明の実施形態を図面に基づいて説明する。なお、以下の説明では、同一の部材には同一の符号を付し、一度説明した部材の説明については適宜省略する。
【００１４】
＜流路構造体＞
図１（Ａ）は、本実施形態の流路構造体１００を平面視した場合の構造を模式的に表す図であり、図１（Ｂ）は、図１（Ａ）の流路構造体１００をＡ−Ａ線に沿って切断し、矢印方向に見た場合の断面を模式的に表す図である。
【００１５】
図１（Ｂ）に示すように、流路構造体１００は、それぞれの接合表面に溝が形成されている第１の基材１０１Ａと第２の基材１０１Ｂとが膜厚方向に重ねられて張り合わせられたものである。第１の基材１０１Ａと第２の基材１０１Ｂとの間に、第１の流路１０２、第２の流路１０３および第３の流路１０４、ならびに第１〜第３の流路１０２〜１０４それぞれと直接繋がる混合処理槽１０５が形成されている。
【００１６】
混合処理槽１０５は、第１の流路１０２から供給される第１の展開液と、第２の流路１０３から供給される第２の展開液と、を混合して第３の流路１０４に供給する。混合処理槽１０５には平面視三角形の形状に沿って、展開液混合用のシリカモノリスが配置されている。この構成によって、流路構造体１００の構成を簡素化しつつ、展開液の混合処理を高精度に行うことができる。
【００１７】
流路構造体１００は、第１の展開液槽１０６および第２の展開液槽１０７を備えている。第１の流路１０２および第２の流路１０３はそれぞれ、第１の展開液槽１０６および第２の展開液槽１０７に接続されている。そして、第１の展開液槽１０６および第２の展開液槽１０７はそれぞれ、流路構造体１００の側面に設けられている第１の接続部１０８および第２の接続部１０９と連通されている。
【００１８】
第１の接続部１０８および第２の接続部１０９から気体を注入することにより、第１の展開液槽１０６および第２の展開液槽１０７から第１の流路１０２および第２の流路１０３に、それぞれ第１の展開液および第２の展開液が供給される。第１の接続部１０８および第２の接続部１０９の圧力比率を変化させることにより、第１の展開液と第２の展開液との混合比の異なる混合液を第３の流路１０４に供給することができる。
【００１９】
第３の流路１０４の分離素子収納部１１０内には多孔質シリカモノリスカラム１１１が内包されている。多孔質シリカモノリスカラム１１１を用いることにより、カラムサイズが小さく、展開液の量が小さく、短時間での測定が可能な、サイズの小さい流路構造体１００とすることができる。
【００２０】
分離素子収納部１１０の上流側には、測定対象である血液を第３の流路１０４内に導入する導入部１１２が設けられている。導入部１１２から導入された血液は、分離素子収納部１１０内の多孔質シリカモノリスカラム１１１によって成分が分離される。分離された血液の成分は排出部１１３から排出され、後述する検出部によって検出される。
【００２１】
第１の基材１０１Ａおよび第２の基材１０１Ｂは、同じ合成樹脂材料で形成されている。好ましい合成樹脂材料として、耐薬品性が高く蛍光性が低い環状ポリオレフィン樹脂（シクロオレフィンポリマー；ＣＯＰ）が挙げられる。
図１（Ａ）および図１（Ｂ）に示した流路構造体１００は、２枚の基材（プレート）を用いて構成したものであるが、３枚以上の基材を用いて構成することもできる。
【００２２】
図２（Ａ）は、図１（Ａ）の流路構造体の変形例を平面視した場合の構造を模式的に表す図であり、図２（Ｂ）は図２（Ａ）の流路構造体をＡ−Ａ線に沿って切断し、矢印方向に見た場合の断面を模式的に表す図である。同図に示すように、流路構造体１００は、第１の展開液槽１０６および第２の展開液槽１０７（図１（Ａ）参照）を備えない構成とすることもできる。この場合、第１の接続部１０８および第２の接続部１０９から第１および第２の展開液を注入することにより、第１の流路１０２および第２の流路１０３にそれぞれ第１の展開液および第２の展開液が供給される。
【００２３】
＜測定装置＞
多孔質シリカモノリスカラムを備える測定装置として本発明を実施する態様について、以下に説明する。
図３は、本実施形態に係る流路構造体を備える測定装置を表すブロック図である。同図に表すように、本実施形態に係る測定装置２００は、上述した流路構造体１００と、送液部１２０と、検出部１３０と、を備えている。 
【００２４】
送液部１２０は、加圧した気体を送るポンプを備えており、例えば、空気などの気体を第１の接続部１０８および第２の接続部１０９に注入することにより、第１の展開液槽１０６および第２の展開液槽１０７から、第１の流路１０２および第２の流路１０３にそれぞれ第１の展開液および第２の展開液を供給する。第１の接続部１０８および第２の接続部１０９に供給する気体の比率を変化させることにより、第１の展開液と第２の展開液との混合比の異なる混合液を第３の流路１０４に供給する（図１（Ａ）参照）。
【００２５】
流路構造体１００が第１の展開液槽１０６および第２の展開液槽１０７を備えていない場合（図２（Ａ）および図２（Ｂ）参照）、送液部１２０は、第１の貯液部および第２の貯液部（図示せず）から、第１の展開液および第２の展開液を吸い上げて、第１の接続部１０８および第２の接続部１０９に展開液を注入する。第１の展開液および第２の展開液の比率を変化させることで、混合比の異なる混合液が第３の流路１０４に供給される。
【００２６】
検出部１３０は、排出部１１３から排出された血液中の成分を検出する。血液は、多孔質シリカモノリスカラム１１１によって成分が分離された後に排出部１１３から排出されるから、検出部１３０により血液中のＨｂＡ１ｃを検出して定量することができる。検出部１３０は、分離後の成分を検出するために、例えば約２５０ｎｍ以上４５０ｎｍ以下程度の光を用いる。但し、検出に用いられる光の波長はこれに限定されない。 
【００２７】
＜多孔質シリカモノリスカラム＞
上述した流路構造体１００に内包されている多孔質シリカモノリスカラム１１１について、以下に説明する。
図４は、本実施形態の多孔質シリカモノリスカラム１１１の概略構成を表す斜視図である。同図に示すように多孔質シリカモノリスカラム１１１は、多孔質シリカモノリス１１が被覆チューブ１２で被覆されたものである。
【００２８】
多孔質シリカモノリス１１は、多孔性のシリカからなる連続体であり、水溶性高分子および熱分解性化合物を含むシリカを主成分とする反応溶液を用いて相分離を伴うゾル−ゲル反応によりゲルを調製し、ゲル中の熱分解性化合物を熱分解し、乾燥し、加熱して製造することができる。
【００２９】
ゾル−ゲル反応において、ゲルを形成する網目成分の前駆体としては、金属アルコキシド、錯体、金属塩、有機修飾金属アルコキシド、有機架橋金属アルコキシド、およびこれらの部分加水分解生成物、部分重合生成物である多量体を用いることができる。また、水ガラスほかケイ酸塩水溶液のｐＨを変化させるゾル−ゲル転移を利用することもできる。
【００３０】
反応溶液にあらかじめ添加しておく水溶性高分子は、加水分解性の官能基を有する金属化合物によって生成するアルコールを含む反応系中に均一に溶解し得るものであれば良い。例えば、ポリスチレンスルホン酸のナトリウム塩またはカリウム塩、ポリアクリル酸、ポリアリルアミン、ポリエチレンイミン、ポリエチレンオキシド、ポリビニルピロリドン、ホルムアミド、グリセリン、ポリオキシエチレンアルキルエーテル類などが挙げられる。
【００３１】
反応溶液にあらかじめ添加しておく熱分解性化合物は、熱分解後に溶媒を塩基性にする化合物であり、例えば、尿素、ヘキサメチレンテトラミン、ホルムアミド、Ｎ−メチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトアミド、Ｎ−メチルアセトアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド等の有機アミド類が挙げられる。
【００３２】
熱分解性化合物は、化合物の種類にもよるが、例えば尿素の場合には、反応溶液１０ｇに対して、０．０５〜０．８ｇ、好ましくは０．１〜０．７ｇの配合量とする。また、反応溶液の加熱温度は、例えば尿素の場合には４０〜２００℃で、加熱後の溶媒のｐＨ値は６．０〜１２．０が好ましい。また、熱分解によってシリカを溶解する性質を有する化合物を生じるフッ化水素酸等も、熱分解性化合物として利用することができる。
【００３３】
反応溶液の相分離を伴うゾル−ゲル反応の条件は、例えば、４０〜８０℃の雰囲気において０．５〜２４時間とすればよい。相分離を伴うゾル−ゲル反応では、当初透明であった反応溶液が白濁してシリカ相と水相との相分離を生じる過程を経て、ゲル化する。このゾル−ゲル反応の過程において、水溶性高分子は反応溶液（ゲル）中に分散した状態にあり、沈殿を実質的に生じることはない。
【００３４】
多孔質シリカモノリス１１は、表面にポア（メソポア、ミクロポア、マクロポア）が存在せず、かつ表面がポリマーにより陰イオン修飾されている。本実施形態において、「メソポア」とは直径２〜５０ｎｍの孔をいい、液体窒素温度での窒素ガス吸着を測定した結果、直径２〜５０ｎｍのメソ細孔が検出されないことが確認されている。また、５０ｎｍ以上の孔（ミクロポア、マクロポア）も存在しないことが望ましい。
【００３５】
ゾル−ゲル反応により調製されたゲル中の熱分解性化合物を熱分解し、乾燥し、加熱して製造された多孔質シリカモノリス１１を焼成することにより、表面のポア（メソポア、ミクロポア、マクロポア）を消失させることができる。焼成温度は、例えば６００〜１２００℃であり、多孔質シリカモノリス１１の比表面積、メソポア細孔径および細孔容積をそれぞれ小さくし、機械的強度を大きくするためには、９５０〜１０５０℃で焼成することが好ましい。
【００３６】
多孔質シリカモノリス１１の表面は、シランカップリング剤（スペーサー）を介して重合により結合された陰イオンポリマー（オリゴマー）により修飾されカチオン交換能を有している。
【００３７】
修飾されていない多孔質シリカモノリス１１の表面にシランカップリング剤を導入した後、陰イオン性のイオン交換基を有するモノマーを重合することにより、陰イオンポリマーを多孔質シリカモノリス１１の表面に連結する。イオン交換基を有するモノマーは、スルホ基や、カルボキシル基など、カチオン交換性を有する陰イオン性官能基を含むモノマー、例を挙げれば、メタクリル酸３−スルホプロピルカリウム、ビニルスルホン酸ナトリウム、メタクリル酸メチルアクリル酸メチルであり、これら例示モノマーに限られるモノではない。シランカップリング剤としては、例えば、３−メタクリロイルプロピルトリメトキシシラン（トリエトキシ可）を用いることができる。
【００３８】
被覆チューブ１２は円柱状の多孔質シリカモノリス１１の側面に接して覆う円筒であり、多孔質シリカモノリスカラム１１１により分析する測定対象液体の流れをその内部に規定する。被覆チューブ１２は、例えば、ポリエーテルエーテルケトン樹脂（ＰＥＥＫ）のチューブを用いることができる。
【００３９】
図４では多孔質シリカモノリス１１が一つの柱状体として構成されている。この場合、多孔質シリカモノリス１１の内径ｒおよび長さｌは、多孔質シリカモノリスカラム１１１の内径Ｒおよび長さＬと等しくなる。
【００４０】
図５は、複数の多孔質シリカモノリスからなる多孔質シリカモノリスカラム１２１の概略構成を示す斜視図である。同図に示すように、多孔質シリカモノリス１１は、多孔質シリカモノリス１１Ａと１１Ｂによって構成されている。この場合、多孔質シリカモノリス１１Ａおよび１１Ｂの長さｌＡおよびｌＢの合計が多孔質シリカモノリス１１の長さＬとなる。多孔質シリカモノリス１１Ａと１１Ｂとは、同じ表面修飾がなされたものを組み合わせても、異なる表面修飾がなされたものを組み合わせても良い。
【００４１】
ただし、多孔質シリカモノリス１１Ａと１１Ｂとの連結部１３は、多孔質シリカモノリスカラム１２１の分析性能低下の原因となるため、多孔質シリカモノリス１１を複数の柱状体で構成する場合、多孔質シリカモノリスカラム１２１の分析性能を良好にする観点から、連結部１３を少なくすることが好ましい。また、分析性能を高くする観点から、図４に示した一つの柱状体からなる多孔質シリカモノリス１１のほうが、同じ表面修飾がなされたものを複数組み合わせたものよりも好ましい。
【００４２】
図４および図５に示す多孔質シリカモノリスカラム１１１および１２１は、分析性能を良好にする観点から、内径Ｒが１．５〜２．５ｍｍであることが好ましく、長さＬが１０〜１４ｍｍであることが好ましく、体積が５０ｍｍ３以下であることが好ましい。なお、多孔質シリカモノリスのマクロ構造は相分離（スピノーダル分解）により形成され、シリカ骨格とマクロポアが互いに連続し絡み合った構造を持つ。
【００４３】
以上説明した実施形態は、本発明の理解を容易にするために記載されたものであって、本発明を限定するために記載されたものではない。したがって、上記実施形態に開示された各要素は、本発明の技術的範囲に属する全ての設計変更や均等物をも含む趣旨である。
【実施例】
【００４４】
以下の条件で、本発明の多孔質シリカモノリスカラムを内包しているＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体およびＨｂＡ１ｃ測定装置を用いて、以下の測定を行った。
【００４５】
（実施例１）
（測定条件）
多孔質シリカモノリスカラム
表面修飾：メタクリル酸３−スルホプロピルカリウムを重合したポリマー
多孔質シリカモノリスのサイズ：Ｒ２．０ｍｍ×Ｌ１２ｍｍ
マクロポアサイズ：１．０μｍ
検出部の発光部：ＵＶ（波長４１５ｎｍ）
測定試料：ＨｂＡ１ｃ標準試料、ＪＣＣＲＭ  ４２３−１０（Ｍ），（Ｈ），（ＨＨ）の凍結乾燥品を０．２ｍｌの希釈用液（２ｍｍｏｌ／Ｌ  ＨＥＰＥＳ，０．０１％  ０．０１％ＮａＮ３（ｐＨ７．２））で溶解し、さらに同希釈液で２００倍希釈したものを用いた。
試料注入量：５μＬ
測定温度：４０℃
流動相；ＫＯ５００法に記載される分離用緩衝溶液を用い、グラジエント条件は必要により適宜微修正した。具体的には、下記のＸ液とＹ液とを所定の割合で混合したＡ液とＢ液とを流動相として用いた。
Ａ：下記のＸ液とＹ液とをＸ／Ｙ＝３／７の比で混合した。
Ｂ：下記のＸ液とＹ液とをＸ／Ｙ＝２／８の比で混合した。
Ｘ：２０ｍＭ  ＭＥＳ，２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ５．２）＋０．０１％ＮａＮ３
Ｙ：２０ｍＭ  ＭＥＳ，２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）＋１００ｍＭＮａＣｌ＋０．０１％ＮａＮ３
グラジエント条件：４０％−３０％Ｂ（０−３ｍｉｎ），１００％Ｂ（３−４．５ｍｉｎ），４０％Ｂ（４．５ｍｉｎ−５．５ｍｉｎ）
移動相の流速：０．２ｍＬ／分
【００４６】
（測定結果）
測定結果を図６および図７に示す。
図６は、ＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体およびＨｂＡ１ｃ測定装置を用いて測定した、ＨｂＡ１ｃ標準試料（Ｍ，Ｈ，ＨＨ試料）のクロマトグラムである。図７は、標準試料（Ｍ，Ｈ，ＨＨ試料）のＮＧＳＰ値（国際標準値）と、ＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体およびＨｂＡ１ｃ測定装置で測定したＨｂＡ１ｃとの相関性を示すグラフである。
【００４７】
図６に示すように、ＨｂＡ１ｃ標準試料のＨｂＡ１ｃ濃度が高くなるに伴って、ＨｂＡ１ｃが検出されたことを示すクロマトグラムのピークも大きくなった。また、図７に示すように、標準試料（Ｍ，Ｈ，ＨＨ試料）のＮＧＳＰ値とＨｂＡ１ｃのピーク面積比（ピーク全体に対する比率、％）とをプロットすると直線状になった（相関係数０．９９９９９）。
この結果より、本発明の多孔質シリカモノリスカラムを内包しているＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体およびＨｂＡ１ｃ測定装置を用いて、血液中のＨｂＡ１ｃを正確に測定できることが分かった。
【００４８】
（実施例２）
（測定条件）
多孔質シリカモノリスカラム
表面修飾：メタクリル酸３−スルホプロピルカリウムを重合したポリマー
多孔質シリカモノリスのサイズ：Ｒ２．０ｍｍ×Ｌ１２ｍｍ
マクロポアサイズ：１．０μｍ
発光部：ＵＶ（波長４１５ｎｍ）
測定試料：グルコース添加試料，１００２ｍｇ／ｄｌ（５５．６ｍＭ）４．３２（ＨｂＡ１Ｃ値：ＫＯ３２法測定値）
試料注入量：５μＬ
測定温度：４０℃
流動相：ＫＯ５００法に記載される分離用緩衝溶液を用い、グラジェント条件は必要により適宜微修正した。具体的には、下記のＸ液とＹ液とを所定の割合で混合したＡ液とＢ液とを流動相として用いた。
Ａ：下記のＸ液とＹ液とをＸ／Ｙ＝８／２の比で混合した。
Ｂ：下記のＸ液とＹ液とをＸ／Ｙ＝２／８の比で混合した。
Ｘ：２０ｍＭ  ＭＥＳ，２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ５．０）＋０．０１％ＮａＮ３
Ｙ：２０ｍＭ  ＭＥＳ，２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）＋１００ｍＭＮａＣｌ＋０．０１％ＮａＮ３
グラジエント条件：Ｉｎｔ．４０％，５５％（０．０１ｍｉｎ），５５％（３．５ｍｉｎ），１００％（３．５１ｍｉｎ），１００％（５．０ｍｉｎ），４０％（５．０１ｍｉｎ），４０％（６．０ｍｉｎ），ｓｔｏｐ（６．０１ｍｉｎ）
移動相の流速：０．２ｍＬ／分
【００４９】
（測定結果）
図８は、ＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体およびＨｂＡ１ｃ測定装置を用いて測定した、実施例２のグルコース添加試料のクロマトグラムである。同図に示すように、本発明のＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体およびＨｂＡ１ｃ測定装置によって、ＨｂＡ１ｃの安定型と不安定型のＡ１ｃを分離できることが分かった。
【００５０】
（実施例３）
以下の実施例３−１〜３−３に共通な測定条件を説明した後、実施例ごとに相違する測定条件について説明する。
（測定条件）
多孔質シリカモノリスカラム
表面修飾：メタクリル酸３−スルホプロピルカリウムを重合したポリマー
多孔質シリカモノリスのサイズ：Ｒ２．０ｍｍ×Ｌ１２ｍｍ
マクロポアサイズ：１．０μｍ
発光部：ＵＶ（波長４１５ｎｍ）
測定試料：ＨｂＡ１ｃ標準試料、ＪＣＣＲＭ  ４２３−１０（Ｈ）
試料注入量：５μＬ
測定温度：４０℃
流動相：Ｘ：２０ｍＭ  ＭＥＳ，２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ５．２）＋０．０１％ＮａＮ３
Ｙ：２０ｍＭ  ＭＥＳ，２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）＋４００ｍＭＮａＣｌ＋０．０１％ＮａＮ３
【００５１】
（実施例３−１：分析時間０．５分間）
負荷圧：４．４ＭＰａ
グラジエント条件：２０％−２２％Ｂ（０−０．０２ｍｉｎ），３４−３５％Ｂ（０．０２−０．３ｍｉｎ），３５−８０％Ｂ（０．３−０．３５ｍｉｎ）
移動相の流速：０．９ｍＬ／分
【００５２】
（実施例３−２：分析時間１分間）
負荷圧：２．９ＭＰａ
グラジエント条件：２０％−２２％Ｂ（０−０．１ｍｉｎ），３０−３２％Ｂ（０．１−０．８ｍｉｎ），３２−８０％Ｂ（０．８−０．９ｍｉｎ）
移動相の流速：０．６ｍＬ／分
【００５３】
（実施例３−３：分析時間２分間）
負荷圧：１．４ＭＰａ
グラジエント条件：２０％−２８％Ｂ（０−０．１ｍｉｎ），３０−３２％Ｂ（０．１−１．５ｍｉｎ），３２−８０％Ｂ（１．５−１．８ｍｉｎ）
移動相の流速：０．３ｍＬ／分
【００５４】
（測定結果）
実施例３−１〜３−３の測定結果を、図９（Ａ）〜図９（Ｃ）に示す。図９（Ａ）〜図９（Ｃ）に示すように、本発明のＨｂＡ１ｃ測定用流路構造体およびＨｂＡ１ｃ測定装置により、ＨｂＡ１ｃを短時間で測定することができた。
なお、図９（Ａ）〜図９（Ｃ）では、デッドボリュームによって開始時間にずれが生じている。例えば、実験（３−１）はグラジエント（分離）時間が０．３５分間（１８秒）であるが、図９（Ａ）では、０．８分間付近で分離終了となっている。
【符号の説明】
【００５５】
１１、１１Ａ、１１Ｂ  多孔質シリカモノリス
１２  被覆チューブ
１３  連結部
Ｒ：多孔質シリカモノリスカラムの内径
Ｌ：多孔質シリカモノリスカラムの長さ
ｒ、ｒＡ、ｒＢ：多孔質シリカモノリスの内径
ｌ、ｌＡ、ｌＢ：多孔質シリカモノリスの長さ
１００  流路構造体
１０１Ａ、１０１Ｂ  第１の基材、第２の基材
１０２  第１の流路
１０３  第２の流路
１０４  第３の流路
１０５  混合処理槽
１０６  第１の展開液槽
１０７  第２の展開液槽
１０８  第１の接続部
１０９  第２の接続部
１１０  分離素子収納部 
１１１、１２１  多孔質シリカモノリスカラム 
１１２  導入部
１１３  排出部
１２０  送液部 
１３０  検出部 
２００  測定装置
【産業上の利用可能性】
【００５６】
本発明に係る流路構造体は、多孔質シリカモノリスカラムを内包しているから、少量の展開液を用いて短時間でＨｂＡ１ｃを測定でき、かつサイズを小さくすることができる、このため、ＨｂＡ１ｃを測定対象とするＰＯＣＴやＳＭＢＧ用の測定装置に組み込まれる流路構造体として好適である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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