(57)【要約】【課題】生体中の糖化反応は複雑かつ多経路に渡るため、１経路の反応を阻害してもＡＧＥｓの生成を抑制することができないが、本発明は、生体中の糖化反応を多経路に渡って阻害するような抗糖化用組成物を提供する。【解決手段】ヤーコン（Smallanthus sonchifolius）の加工物を有効成分として含有することを特徴とする抗糖化用組成物を提供する。【選択図】図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヤーコン（Smallanthus sonchifolius）の加工物を有効成分として含有することを特徴とする抗糖化用組成物。
【請求項２】
前記加工物はヤーコンの塊根皮の加工物である、請求項１に記載の抗糖化用組成物。
【請求項３】
前記加工物はヤーコンの抽出物である、請求項１に記載の抗糖化用組成物。
【請求項４】
前記加工物はヤーコンの塊根皮の抽出物である、請求項２に記載の抗糖化用組成物。
【請求項５】
前記ヤーコンの抽出物は水による抽出物である、請求項３又は４に記載の抗糖化用組成物。
【請求項６】
前記ヤーコンの抽出物は含水エタノールによる抽出物である、請求項３又は４に記載の抗糖化用組成物。
【請求項７】
前記加工物はヤーコンの搾汁液である、請求項１に記載の抗糖化用組成物。
【請求項８】
前記加工物はヤーコンの塊根皮搾汁液である、請求項２に記載の抗糖化用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヤーコン（Smallanthus sonchifolius）の加工物を有効成分として含有することを特徴とする抗糖化用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ブドウ糖などの還元糖とタンパク質から終末糖化産物（ＡＧＥｓ：Advanced Glycation End Products）ができる反応を糖化という。タンパク代謝によって血中に遊離したＡＧＥｓは、通常は腎臓で体外へ排出されるが、生体内の組織タンパク、特に寿命の長いタンパク質が糖化を受けるとＡＧＥｓが長期に渡り体内にとどまることになる。このため加齢や生活習慣病によりＡＧＥｓが生体内に蓄積されると、肌の弾力の低下、動脈硬化、骨粗しょう症、白内障、認知症の原因になるとも考えられている。そのため、ＡＧＥｓやその中間体の産生を抑制することにより各疾病リスク軽減や老化の抑制につながることが期待されている。
【０００３】
一方、南米アンデス高地原産の多年草植物として、ヤーコン（Smallanthus sonchifolius）が知られている。ヤーコンはキク科キク亜科メナモミ属に属する植物であり、その塊根には機能性成分として知られるフラクトオリゴ糖やポリフェノール化合物が多く含まれている（非特許文献１，２）。下記特許文献１には、ヤーコンの抽出物であって、抗酸化活性を有する２，４−ヘキサジエナール誘導体を含むことを特徴とする抗酸化剤が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開第２００８−３０８６３０号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】日本調理学会会誌、Ｖｏｌ．４５、Ｎｏ．４、３１３−３１５（２０１２）
【非特許文献２】日本食品科学工学会誌、第５８巻、第１１号、２０１１年１１月
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
図１に示すように、生体中の糖化反応は複雑かつ多経路であるため、１経路の反応を阻害してもＡＧＥｓの生成を抑制することができないことから、多経路の反応を阻害することが有効になる。
【０００７】
よって、本発明の目的は、生体中の糖化反応を多経路に渡って阻害するような抗糖化用組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記目的を達成するため、本発明は、ヤーコン（Smallanthus sonchifolius）の加工物を有効成分として含有することを特徴とする抗糖化用組成物を提供するものである。
【０００９】
本発明によれば、ヤーコンの加工物を有効成分とすることにより、生体内のタンパク質の糖化を抑制して、生体内におけるＡＧＥｓの生成を抑制することができる。また、本発明の抗糖化用組成物は、食用として用いられている天然由来の成分であることから、安全に使用することができる。
【００１０】
本発明の抗糖化用組成物におけるヤーコン加工物は、ヤーコンの塊根皮の加工物であることが好ましい。ＡＧＥｓの生成を抑制する成分は、ヤーコンの塊根皮に多く含まれているからである。
【００１１】
本発明の抗糖化用組成物におけるヤーコン加工物は、ヤーコンの抽出物であることが好ましい。
【００１２】
本発明の抗糖化用組成物におけるヤーコン加工物は、ヤーコンの塊根皮の抽出物であることが好ましい。
【００１３】
本発明の抗糖化用組成物におけるヤーコンの抽出物は、水による抽出物であるであることが好ましい。
【００１４】
本発明の抗糖化用組成物におけるヤーコンの抽出物は、含水エタノールによる抽出物であることが好ましい。
【００１５】
本発明の抗糖化用組成物におけるヤーコンの加工物は、ヤーコンの搾汁液であることが好ましい。
【００１６】
本発明の抗糖化用組成物におけるヤーコンの加工物は、ヤーコンの塊根皮の搾汁液であることが好ましい。
【発明の効果】
【００１７】
本発明によれば、ヤーコンの加工物を有効成分とすることにより、生体内のタンパク質の糖化を抑制して、生体内におけるＡＧＥｓの生成を抑制することができる。また、本発明の抗糖化用組成物は、食用として用いられている天然由来の成分であることから、安全に使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図１は、糖化反応経路を示す概略図である。
【図２】図２は、試験例１において検証したヤーコンの水による抽出物の蛍光性ＡＧＥｓ生成阻害率を示す図である。
【図３】図３は、試験例２において検証したヤーコンの含水エタノールによる抽出物の蛍光性ＡＧＥｓ生成阻害率を示す図である。
【図４】図４は、試験例３において検証したヤーコンの搾汁液の蛍光性ＡＧＥｓ生成阻害率を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明に用いるヤーコン（Smallanthus sonchifolius）は、南米アンデス高地原産であり、キク科キク亜科メナモミ属に属する多年草植物である。１９８５年、ペルー原産の系統がニュージーランドを経由して日本へ導入されて後、育種が進み、様々な品種・系統が得られている。本発明に用いるヤーコンは通常入手可能なものであれば、品種・系統は特に限定されない。食用としては、ヤーコンの地下の塊根が利用されているが、塊根の皮を剥いて内部を食することもある。
【００２０】
本発明の抗糖化用組成物の原料としては、ヤーコンが含まれていればよく、塊根、塊根内部、塊根皮、塊茎、茎、葉、花、幹枝、幹、枝葉、樹皮、種子、果皮、果肉、果実、地上部、地下部等のいずれの部位であってもよいし、全草であってもよい。ただし、本発明においては、ヤーコンの塊根皮を含む部分を原料とすることが好ましく、ヤーコンの塊根皮を原料とすることがより好ましい。前述したように、ＡＧＥｓの生成を抑制する成分は、ヤーコンの塊根皮に多く含まれているからである。
【００２１】
本発明におけるヤーコンの加工物とは、ヤーコンに乾燥処理、粉砕処理、抽出処理、搾汁処理等の処理を施すことにより加工されたもののことを意味し、これらの処理は組み合わせて施してもよい。
【００２２】
ヤーコンの抽出処理の方法としては、特に限定されないが、食品、化粧品等に使用可能な溶媒を用いて常法によって抽出すれば良く、例えば、ヤーコンの塊根皮に乾燥・粉砕処理をした後、その全質量に対して１〜５０倍、好ましくは１０〜３０倍量の水又は下記に説明する含水有機溶媒を加え、１〜２４時間程度、室温〜使用溶媒の沸点の範囲で浸漬・加熱抽出処理を行うことができる。必要に応じて、加圧下に抽出処理を行ってもよい。また、これらの抽出処理は、１回のみ行っても良いし、２回以上行っても良い。含水有機溶媒に用いる有機溶媒としては、例えば、低級アルコール（メタノール、エタノール等）、酢酸エチル、アセトン、クロロホルム、ｎ−ヘキサン等が挙げられる。特に好ましくは、エタノールである。
【００２３】
ヤーコンの水による抽出は、ヤーコンの加工物に水を加え、必要により加温して所定の温度下で行うことができる。水を加えて抽出を行う場合、抽出温度は５〜１００℃が好ましく、３０〜１００℃がより好ましい。これは、温度が低すぎるとヤーコンの有効成分が抽出されにくく、高すぎると有効成分が分解する可能性があるためである。
【００２４】
また、ヤーコンの含水有機溶媒による抽出は、ヤーコンの加工物に含水有機溶媒を加え、必要により加温して所定の温度下で行うことができる。抽出温度は、有機溶媒の種類によって異なるが、例えば含水エタノールを用いる場合には、５〜７０℃が好ましく、３０〜７０℃がより好ましい。これは、温度が低すぎるとヤーコンの有効成分が抽出されにくく、高すぎると有効成分が分解する可能性があるためである。
【００２５】
ヤーコンの抽出処理に用いられる含水有機溶媒の溶媒含量としては、１００％（ｖ／ｖ）以下であることが好ましく、５〜７０％（ｖ／ｖ）であることがより好ましく、２０〜５０％（ｖ／ｖ）が最も好ましい。特に、エタノール濃度が、好ましくは５〜７０％（ｖ／ｖ）、より好ましくは２０〜５０％（ｖ／ｖ）の含水エタノールを用いて抽出を行うことがより好ましい。
【００２６】
ヤーコンの搾汁処理の方法としては、ヤーコン又はヤーコンの加工物をそのまま圧搾するか、又はヤーコン又はヤーコンの加工物を破砕したのち、その破砕物を圧搾することによって行うことができる。
【００２７】
上記のように溶媒中にヤーコンの有効成分を抽出させた後、ろ過して抽出残渣を除くことによって、抽出物を得る。又は、ヤーコンの有効成分を圧搾させた後、ろ過して圧搾残渣を除くことによって、搾汁液を得る。その後、高濃度のヤーコンの有効成分を含有する抽出物又は搾汁液を得るため、当業者が通常用いる方法により、濃縮しても良いし、分画しても良いし、精製しても良い。更に、得られた抽出液を、凍結乾燥、減圧乾燥、噴霧乾燥などの手段によって、乾燥粉末化してもよい。
【００２８】
本発明の抗糖化用組成物は、ＡＧＥｓの産生を効果的に抑制するため、肌の弾力の低下、動脈硬化、骨粗しょう症、白内障、認知症、メタボリックシンドローム、血管の老化、皮膚の老化等を効果的に予防することができる。
【００２９】
本発明の抗糖化用組成物は、各種飲食品に機能性素材として含有させることができる。飲食品としては、例えば、指定医薬部外品・健康食品（錠剤、カプセル、粉末、栄養ドリンク等）、飲料（水、アルコール、酢、ジュース、コーヒー、紅茶、茶、炭酸飲料、スポーツ飲料等）、調味料（ジャム、はちみつ、酢、味噌、醤油等）、スープ類、加工食品類、菓子類、麺類、食用油が挙げられる。これらの飲食品に本発明の抗糖化用組成物を適宜配合するとよい。
【００３０】
また、本発明の抗糖化用組成物は、薬品（医薬品および医薬部外品を含む。）の成分として含有させることができる。すなわち、薬品製造用の原料に、本発明の抗糖化用組成物を適宜配合して製造することができる。
【００３１】
本発明の抗糖化用組成物を、特に健康食品、薬品に含有させる場合には、例えば、錠剤、丸剤、軟・硬カプセル剤、細粒剤、散剤、顆粒剤、液剤等の形態とすることができる。
【００３２】
本発明の抗糖化用組成物は、食品、医薬品のように経口投与されるものであってもよく、化粧品のヨウに非経口で投与されるものであってもよい。非経口として投与する場合は、溶液の状態や、分散剤、懸濁剤、安定剤などを添加した状態や、ハップ剤、ローション剤、軟膏剤、チンキ剤、クリーム剤などの剤形で適用することができる。
【００３３】
本発明の抗糖化用組成物は、皮膚外用材の素材として使用することができる。形態としては、例えば、乳液、石鹸、洗顔料、入浴剤、クリーム、乳液、化粧水、日焼け・日焼け止めローション、パック、シャンプー、リンス、トリートメント、洗浄料等が挙げられる。
【００３４】
本発明の抗糖化用組成物の投与量は、投与方法、病状、患者の年齢等によって変化し得るが、経口によるものの場合は、大人では、通常、１日当たり有効成分として１ｍｇ〜３００ｇ、子供では通常０．５ｍｇ〜１５０ｇ程度投与することが好ましい。皮膚外用剤のような非経口によるものの場合は、製品中に０．００１〜９９質量％含有させることが好ましく、０．０１〜７０質量％含有させることがより好ましい。
【実施例】
【００３５】
以下に試験例を挙げて本発明について更に具体的に説明するが、これらの試験例は本発明の範囲を限定するものではない。
【００３６】
＜試験例１：ヤーコンの水抽出物によるＡＧＥｓ生成阻害率（１）＞
ＡＧＥｓは糖化反応における最終生成物（終末糖化産物）の総称であり、その特徴の一つとして蛍光性を有する。蛍光性を有するＡＧＥｓにはペントシジン、クロスリン、ピロピリジンなどがある。ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）−グルコース糖化反応系にサンプルを添加した時に発生する蛍光を測定し、サンプルの代わりに蒸留水を添加したものと比較して、ヤーコンの水抽出物による蛍光性ＡＧＥｓ生成阻害率を調べた。
【００３７】
１．ヤーコンの水抽出物の調整
ヤーコンの塊根内部及び塊根皮をそれぞれ風乾させた後、ミルで粉砕して、それぞれの乾燥粉末を得た。これらの乾燥粉末２ｇに４０ｍｌの蒸留水を加え、８０℃で７５分加温した後、ろ過して、それぞれの水抽出物サンプルを得た。
【００３８】
２．in vitro 糖化反応系（ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）−グルコース糖化反応系）による処理
0.05mol/L NaH2PO4-Na2HPO4 リン酸緩衝液（pH7.4）、8mg/mL ＨＳＡ、0.2mol/L グルコース糖化反応液中に、サンプルを各１／１０濃度になるように添加し、６０℃で４０時間インキュベートした。
【００３９】
コントロールとしては蒸留水を、糖化反応阻害作用のポジティブコントロールとしてはアミノグアニジン（0.1mg/mL）を添加したものを用いた。
【００４０】
３．蛍光性ＡＧＥｓ測定
糖化反応終了後、励起波長 370nm、蛍光波長 440nmにて、反応液中に生成した蛍光性ＡＧＥｓによる蛍光強度をマイクロプレートリーダーで測定した。
【００４１】
４．蛍光性ＡＧＥｓ生成阻害率の算出
蛍光性ＡＧＥｓの生成阻害率（％）は、糖化反応系にサンプル溶液を添加した反応液における測定値をＡとし、その反応液においてグルコース水溶液の代わりに蒸留水を添加したものにおける測定値をＢとし、その反応液においてサンプル溶液の代わりに蒸留水を添加したコントロールにおける測定値をＣとし、そのコントロールにおいてグルコース水溶液の代わりに蒸留水を添加したものにおける測定値をＤとして、下記の式に従って算出した。
蛍光性ＡＧＥｓの生成阻害率（％）＝｛１−（Ａ−Ｂ）／（Ｃ−Ｄ）｝×１００
【００４２】
５．結果
上記試験結果を図２に示す。実施例１〜４は、ロットが違うヤーコンの塊根内部を原料とした場合の試験結果である。試験例５〜８は、ロットが違うヤーコンの塊根皮を原料とした場合の試験結果である。それぞれの値は、３回行った実験の平均を示す（以下の試験例においても同様である）。アスタリスクはコントロール群（蒸留水）とのDunnettの多重比較検定による有意差、つまり、*：p<0.05、**：p<0.01を表す。
【００４３】
図２に示されるように、実施例１〜８のいずれのサンプルでも、蒸留水をサンプルとしたものと比較して、有意に蛍光性ＡＧＥｓ生成阻害率が高かった。ただし、ヤーコンの塊根皮を原料とした実施例５〜８の方が、より蛍光性ＡＧＥｓ生成阻害率が高かった。
【００４４】
＜試験例２：ヤーコンの含水エタノール抽出物によるＡＧＥｓ生成阻害率＞
１．ヤーコンの含水エタノール抽出物の調整
ヤーコンの塊根内部又は塊根皮を風乾させた後、ミルで粉砕したものを乾燥粉末とした。この乾燥粉末２ｇに７０％エタノール水溶液４０ｍｌを加え、４９℃で４時間加温した後、ろ過してエタノール抽出物を得た。
【００４５】
２．蛍光性ＡＧＥｓ生成阻害率の算出
上記試験例１の２〜４の方法と同様に、蛍光性ＡＧＥｓ生成阻害率を算出した。
【００４６】
３．結果
ヤーコンの含水エタノール抽出物による結果を図３に示す。
【００４７】
図３において、実施例９はヤーコン塊根内部の含水エタノール抽出物、実施例１０はヤーコン塊根皮の含水エタノール抽出物をサンプルとして用いたものである。いずれのサンプルでも、蒸留水をサンプルとしたものと比較して、有意に蛍光性ＡＧＥｓ生成阻害率が高かった。ただし、ヤーコン塊根皮を原料とした実施例１０の方が、より蛍光性ＡＧＥｓ生成阻害率が高かった。
【００４８】
＜試験例３：ヤーコンの搾汁液によるＡＧＥｓ生成阻害率＞
１．ヤーコンの搾汁液の調整
ヤーコン（塊根内部と塊根皮）又は塊根皮を除いたヤーコン１００ｇをプラスチック製のおろし器ですりおろした後にガーゼで搾り、搾汁液を得た。搾汁液を更にろ過し、ヤーコンを用いたものからは５３．７ｍＬ、塊根皮を除いたヤーコンを用いたものからは５５．０ｍＬの搾汁液を得た。
【００４９】
２．蛍光性ＡＧＥｓ生成阻害率の算出
上記試験例１の２〜４の方法と同様に、蛍光性ＡＧＥｓ生成阻害率を算出した。
【００５０】
３．結果
ヤーコンの搾汁液による結果を図４に示す。
【００５１】
図４において、実施例１１はヤーコン（塊根内部と塊根皮）の搾汁液、実施例１２は塊根皮を除いたヤーコンの搾汁液をサンプルとして用いたものである。いずれのサンプルでも、蒸留水をサンプルとしたものと比較して、有意に蛍光性ＡＧＥｓ生成阻害率が高かった。ただし、ヤーコン（塊根内部と塊根皮）の搾汁液を用いた実施例１１の方が、より蛍光性ＡＧＥｓ生成阻害率が高かった。
【００５２】
＜実験例４：ヤーコンの水抽出物によるＡＧＥｓ生成阻害率（２）＞
ＡＧＥｓは糖化反応における最終生成物の総称であり、異なる種類のＡＧＥs生成物は異なる経路で生成される（図１参照）。そこで、異なるＡＧＥs生成物の中間体である３ＤＧ（3-deoxy-D-erythro-hexos-2-ulose）、及びＧＯ（Glyoxal）、ＭＧＯ（Methylglyoxal）の生成阻害率を測定し調べた。さらに、ＣＭＬ（Nε-carboxymethyl lysine）の生成阻害率を測定し調べた。
【００５３】
１．ヤーコンの水抽出物の調整
ヤーコンの塊根皮を風乾させた後、ミルで粉砕したものを乾燥粉末とした。この乾燥粉末２ｇに４０ｍｌの蒸留水を加え、８０℃で７５分加温した後、ろ過して水抽出物サンプルを得た。
【００５４】
２．in vitro 糖化反応系
２−１．in vitro 糖化反応系（ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）−グルコース糖化反応系）
0.05mol/L NaH2PO4-Na2HPO4 リン酸緩衝液（pH7.4）、8 mg/mL ＨＳＡ、0.2mol/L グルコース糖化反応液中に、サンプルを各１／１０濃度になるように添加し、６０℃で４０時間インキュベートした。
【００５５】
２−２．in vitro 糖化反応系（Ｉ型コラーゲン反応系）
0.05mol/L NaH2PO4-Na2HPO4 リン酸緩衝液（pH7.4）、0.6mg/mL TypeＩ型コラーゲン（Col Ｉ）、0.4mol/L フルクトース糖化反応液中に、サンプルを各１／１０濃
度になるように添加し、６０℃で２４時間インキュベートした。
【００５６】
２−３．in vitro 糖化反応系（ＩＩ型コラーゲン反応系）
0.05mol/L NaH2PO4-Na2HPO4 リン酸緩衝液（pH7.4）、0.6mg/mL type ＩＩ型コ
ラーゲン（Col ＩＩ）、0.4mol/L フルクトース糖化反応液中に、サンプルを各１／１０濃
度になるように添加し、６０℃で２４時間インキュベートした。
【００５７】
２−４．in vitro 糖化反応系（エラスチン反応系）
0. mol/L NaH2PO4-Na2HPO4リン酸緩衝液（pH7.4）、6mg/mL豚由来エラスチン（Ela）、0.2mol/L グルコース糖化反応液中に、サンプルを各１／１０濃度になるように添加し、６０℃で１０日間インキュベートした。
【００５８】
３．蛍光性ＡＧＥｓ、３ＤＧ、ＧＯ、ＭＧＯ、ＣＭＬ測定
それぞれの糖化反応終了後、試験例１と同様にして、蛍光性ＡＧＥｓを測定した。また、反応液中に生成した３ＤＧ、ＧＯ、及びＭＧＯを、2.3-diaminonaphthalen （DAN）プレラベル化逆相ＨＰＬＣ法により定量した。更に、ＨＳＡについては、反応液中に生成したＣＭＬをＥＬＩＳＡ法（CircuLex CML / Nε-(carboxymethyl)lysine), サイクレックス)で測定した。それぞれの測定結果から、試験例１の４と同様にして阻害率を算出した。
【００５９】
３．結果
結果を表１に示す。なお、表中「ＨＳＡ」は「ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）−グルコース糖化反応」を示す。いずれの糖化反応系においても、蛍光性ＡＧＥｓの生成阻害率だけでなく、中間体である３ＤＧ、ＧＯ、及びＭＧＯの生成阻害率が高かった。また、ＣＭＬの生成阻害率も高かった。
【００６０】
【表１】
2018123102.tif 000003
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
2018123102.tif 000007