(57)【要約】      （修正有）【課題】多発性硬化症（ＭＳ）を治療する新規方法の提供。【解決手段】ＰＰＡＲγアゴニスト、特に、ＩＮＴ１３１として知られる式（Ｉ）で表される化合物又は医薬として許容される塩、プロドラッグ或いは異性体を含む医薬組成物の使用。2018039817.tif 000010【選択図】図３
2018039817.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
多発性硬化症の治療を必要とする患者において多発性硬化症を治療する方法であって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物
【化１】
2018039817.tif 000006
または該化合物の医薬として許容される塩、プロドラッグもしくは異性体を含む医薬組成物を一定の投与間隔で前記患者に投与することを含む、方法。
【請求項２】
多発性硬化症の症状を治療する方法であって、多発性硬化症の症状の治療を必要とする患者に式（Ｉ）の化合物
【化２】
2018039817.tif 000007
または該化合物の医薬として許容される塩、プロドラッグもしくは異性体を投与することを含む、方法。
【請求項３】
神経保護を必要とする患者に神経保護を提供する方法であって、
式（Ｉ）の化合物
【化３】
2018039817.tif 000008
または該化合物の医薬として許容される塩、プロドラッグもしくは異性体を投与することを含む、方法。
【請求項４】
神経炎症の症状を治療する方法であって、神経炎症の症状の治療を必要とする患者に式（Ｉ）の化合物
【化４】
2018039817.tif 000009
または該化合物の医薬として許容される塩、プロドラッグもしくは異性体を投与することを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２０１３年１月３０日に出願された米国特許仮出願第６１／７５８，６４１号の優先権を主張し、この開示は、参照により本明細書中に援用される。
【０００２】
本発明は、多発性硬化症（「ＭＳ」）を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
多発性硬化症またはＭＳは、筋肉制御、視覚、平衡感覚、感覚（例えば、しびれ）または思考能力の低下をもたらす、脳および脊髄に発症する疾患である。
【０００４】
ＭＳでは、中枢神経系またはＣＮＳを共に形成する脳および脊髄の一部が、他者であると認識され、自身の免疫系によって攻撃される。細胞レベルにおいて、ＣＮＳは、神経系の「思考する細胞」であるニューロンおよびグリア細胞で構成されており、多種多様の生体機能を行っている。ニューロンの細胞体は、軸索によって互いに接続されており、共に神経回路網をつないでいるワイヤのように機能する。ＣＮＳには、数十億の軸索が存在し、この軸索は、シグナル伝達の低下を防ぐため、シグナル伝達の速度を押し上げるためおよびシグナル干渉を防ぐために、銅線のように絶縁される必要がある。ミエリンと呼ばれるＣＮＳの絶縁体は、軸索の周りにミエリンを巻きつける、グリア細胞の特殊化された細胞小器官である。ＭＳでは、ミエリンのエレメントは、他者として認識され、個体自身の免疫系によって攻撃される。これらの免疫攻撃の結果として、ミエリンは、破壊され、しばしば、付随する軸索もまた損傷されて死に至る。これは、再ミエリン化の期間によって中断される反復性の過程である。しかしながら、ミエリンは再形成し得るが、最終的には、ミエリンを産生できる細胞のプールが枯渇し、斑としても知られる瘢痕を最終的に形成する慢性ＣＮＳ脱髄の領域が生じ、こうした瘢痕の形成は、硬化症として知られる。硬化症のこの過程が反復性であるとき、結果として生じるＭＳの形態は、再発／寛解型ＭＳと呼ばれる。寛解が起きない、一次性進行型ＭＳと呼ばれる、別のより珍しいＭＳの形態も存在する。いずれの場合においても、ミエリンがないと、脳および脊髄を通って伝達される電気シグナルは、混乱するかまたは停止する。この結果、脳の患部は、メッセージを適切に送ることおよび受け取ることができなくなる。この情報伝達の破綻こそが、ＭＳの症状を引き起こす。
【０００５】
ＭＳを有する一部の人においてＭＳ症状の頻度および重症度を低下させ得る、利用可能な種々の薬剤が存在する。症状は、３つのカテゴリー：一次、二次および三次に分けられ得る。一次症状は、脱髄過程の直接的な結果である。これにより、筋肉への電気シグナル（筋肉が適切に動かせるようにする電気シグナル）および身体の器官への電気シグナル（身体の器官が正常な機能を発揮できるようにする電気シグナル）の伝達が損なわれる。症状としては：脱力、振戦、刺痛、しびれ、平衡感覚の喪失、視力が損なわれること、麻痺ならびに膀胱および腸の問題が挙げられる。
【０００６】
二次症状は、一次症状に起因する。例えば、麻痺（一次症状）が、床ずれ（褥瘡）をもたらし得、膀胱または尿失禁の問題が、高頻度の再発性尿路感染症を引き起こし得る。これらの症状は、治療することができるが、理想的な目標は、一次症状を治療することによって、これらの症状に対抗できることである。
【０００７】
三次症状は、一次症状および二次症状に関連する社会的、心理学的および職業的な合併症である。例えば、うつは、ＭＳを有する人の間でよくある問題である。
【０００８】
多発性硬化症の経過は、非常に変化しやすい。特に、この疾患の最初期の段階は、いくらか予測不可能であり得る。この不確かさを理由に、医師は、患者が「おそらく」または「たぶん」ＭＳを有していると患者に伝えることが多い。診断は、磁気共鳴画像法（「ＭＲＩ」）および他の試験における知見である臨床像の組み合わせならびに再発のパターンに基づく。現在、各人の疾患がどのように進行するかを予測する方法はない。ＭＳの確定診断がなされ得るまで、長い期間を要することが多い。ＭＳがとる主な経過は、３つある：
再発寛解型ＭＳ（「ＲＲＭＳ」）：「増悪」と呼ばれる予測不可能な急性の発作によって特徴付けられ、症状の悪化の後、いくらかの機能が完全に回復するか、部分的に回復するかまたは回復しない。これらの発作は、数日間から数週間にわたって展開すると見られる。発作からの回復には、数週間、時折、数ヶ月間を要する。この疾患は、発作の間の期間は悪化しない。このパターンは、通常、ほとんどの人において、ＭＳの経過の初期に起きる。
【０００９】
一次性進行型ＭＳ：いかなる明らかな再発および寛解もない、障害の一定の進行によって特徴付けられる。この疾患の形態は、ＭＳを有するすべての人のちょうど１５％に生じるが、４０歳を過ぎてこの疾患を発症する人においてより一般的である。
【００１０】
二次性進行型ＭＳ：最初は再発寛解型の経過から始まるが、後に、進行性疾患に発展する。この疾患の進行性の部分は、ＭＳ発病の直後に始まることもあるし、数年後または数十年後に生じることもある。
【００１１】
ＭＳの真の増悪は、脳脊髄系の神経における炎症の領域（即ち腫脹）によって引き起こされ、ミエリンの破壊である脱髄と呼ばれるものが続く。ミエリンは、神経線維を取り巻いて保護する脂肪の鞘である。ＭＳの増悪は、軽度であって、機能の顕著な機能障害を引き起こさないこともあるし、人の日常生活を著しく干渉することもある。治療されないと、増悪は、数日間から数週間続くことがあるが、数ヶ月間にまで延長することもある。
【００１２】
ＭＳの進行を遅くすることを意図した現行の治療は、多くの難点を有する。幾つかの薬物は、一部の人においてＭＳの進行を遅くすると示された。これらの薬物は、身体の免疫系の活性を抑制するかまたは変化させることによって、働く。従って、これらの治療は、ＭＳが、少なくとも部分的に、身体の免疫系が神経を取り巻くミエリンを攻撃するようにするこの免疫系の異常な応答の結果であるという理論に基づく。これらの疾患修飾治療は、多くの患者においてＲＲＭＳの自然史を変化させたが、これらの疾患修飾治療は、治癒的でなく、全身免疫抑制の続発症ならびに発熱、身体疼痛、倦怠感、関節痛、筋痛、インフルエンザ様症状、肝機能検査値（ＬＦＴ）の上昇、しばしば致死性である進行性多巣性白質脳症（ＰＭＬ）に至るＪｏｈｎ  Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ（ＪＣ）ウイルスを含む潜伏ウイルスの活性化などを含む有意な有害作用を有する。結果として、これらの治療は、治療用量で投与されたとき、かなりの数の患者による許容が不十分であり、破綻的な疾患活動性は、実質的に当然のことである。非応答性であるかもしくは部分的な薬物応答しか有しない（約１９％）患者の３０％または治療投与量の別途有効な薬物を許容しない患者に対しては、非常に限られた選択肢しかない。例としては、Ａｖｏｎｅｘ（Ｒ）（インターフェロンベータ−１ａ；Ａｖｏｎｅｘは、Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ  ＭＡ  Ｉｎｃ．の登録商標である。）、Ｂｅｔａｓｅｒｏｎ（Ｒ）（インターフェロンベータ−１ｂ；Ｂｅｔａｓｅｒｏｎは、Ｂａｙｅｒ  Ｐｈａｒｍａの登録商標である。）、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（Ｒ）（酢酸グラチラマー；Ｃｏｐａｘｏｎｅは、Ｔｅｖａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓの登録商標である。）、Ｎｏｖａｎｔｒｏｎｅ（Ｒ）（ミトキサントロン；Ｎｏｖａｎｔｒｏｎｅは、Ｉｍｍｕｎｅｘ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎの登録商標である。）、Ｒｅｂｉｆ（Ｒ）（インターフェロンベータ−１ａ；Ｒｅｂｉｆは、Ａｒｅｓ  Ｔｒａｄｉｎｇの登録商標である。）、Ｔｙｓａｂｒｉ（Ｒ）（ナタリズマブ；Ｔｙｓａｂｒｉは、Ｅｌａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓの登録商標である。）、Ｔｅｃｆｉｄｅｒａ（Ｒ）（ＢＧ１２；Ｔｅｃｆｉｄｅｒａは、Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃの登録商標である。）、ＬａｑｕｉｎｉｍｏｄＴＭ（Ｌａｑｕｉｎｉｍｏｄは、Ｔｅｖａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓの登録商標である。）およびＡｕｂａｇｉｏ（Ｒ）（テリフルノミド；Ａｕｂａｇｉｏは、Ｓａｎｏｆｉの登録商標である。）が挙げられる。
【００１３】
これらの薬物治療の他の望ましくない特徴としては、不快感、注射に伴う疼痛および不快、白血球減少、日和見感染、悪心、嘔吐、下痢、脱毛症、潮紅、高コストならびに薬物の不安定性が挙げられる。従って、ＭＳの進行を遅らせるため、ＭＳの治療のためおよびＭＳの症状を軽減するための安全で有効な方法が、当該分野でなおも必要とされている。
【００１４】
これらの身体機能および認知機能の悪化もまた、ＭＳの神経病理学的過程の一部である神経炎症と灰白質喪失の両方の結果であり得る。免疫調節および疾患修飾は、現行の第一選択薬を用いて部分的に達成されるが、これらは、治療の、困難な探求の対象物であると考えられ得る全体的な神経保護を提供しない。
【発明の概要】
【００１５】
ＰＰＡＲγアゴニストがＭＳに有効であることがここに発見された。これらの化合物は、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γ（ＰＰＡＲγ）のアゴニストである。ＰＰＡＲγは、ステロイド／甲状腺／レチノイド受容体スーパーファミリーに属する転写因子である。現在までのところ、ＰＰＡＲγアゴニストは、肥満症、糖尿病および異脂肪血症などの障害に対する治療薬である。
【００１６】
１つの態様において、本発明は、ＭＳの再発を治療するかまたは予防する方法を提供する。この方法は、典型的には、ＭＳの再発の治療または予防を必要とする被験体に、治療有効量の米国特許第７，６０１，８４１号明細書に主に記載されている化合物、詳細には、本明細書の下記でＩＮＴ１３１と称される化合物を投与することを含む。ＩＮＴ１３１は、非常に限られた数のＰＰＡＲγ経路の選択的な活性化因子であるという点において、ＰＰＡＲγアゴニストの中でユニークである。これらのＩＮＴ１３１感受性経路の中には、抗炎症性遺伝子活性化カスケードおよび神経保護遺伝子活性化カスケードがある。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】浸潤しているＣＤ４５陽性白血球を特定している矢印を伴う、ＩＮＴ１３１で治療されたマウスおよび未治療マウスの脳幹断面の写真である。
【図２】ＩＮＴ１３１で治療されたマウスおよび未治療マウスの脳幹に見られた浸潤しているＣＤ４５陽性白血球の数のグラフ表示である。
【図３】脳、脊髄およびＣＳＦにおけるＩＮＴ１３１のバイオアベイラビリティの、血液中のバイオアベイラビリティと比較したグラフ表示である。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
特に、化合物（Ｉ）
【００１９】
【化１】
2018039817.tif 000003
は、予想外にも、ＭＳに有効であることが見出された。この化合物は、ＩＮＴ１３１としても知られる。
【００２０】
省略形および定義
本明細書中で使用される省略形は、別段定義されない限り、従来のものである。
【００２１】
用語「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」および「治療」とは、疾患および／または疾患の付随症状を軽減するかまたは抑止する方法のことを指す。
【００２２】
用語「予防する（ｐｒｅｖｅｎｔ）」、「予防する（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」および「予防」とは、ある疾患に罹る確率を低下させるかまたはある疾患に罹る可能性を排除する方法のことを指す。
【００２３】
用語「治療有効量」とは、治療されている状態もしくは障害の症状のうちの１つ以上の発生を予防するかまたは治療されている状態もしくは障害の症状のうちの１つ以上をある程度軽減するのに十分な、投与される化合物の量のことを指す。
【００２４】
用語「被験体」は、霊長類（例えば、ヒト）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウスなどを含むがこれらに限定されない哺乳動物などの動物を含むと本明細書中で定義される。好ましい実施形態において、被験体は、ヒトである。
【００２５】
用語「医薬として許容される塩」は、本明細書中に記載される化合物上に見られる特定の置換基に応じて、比較的無毒性の酸または塩基を用いて調製される活性な化合物の塩を含むと意味される。本発明の化合物が、相対的に酸性の官能基を含むとき、係る化合物の中性の形態を十分量の所望の塩基と、ネットで（ｎｅｔ）または好適な不活性溶媒中で接触させることによって、塩基付加塩を得ることができる。医薬として許容される塩基付加塩の例としては、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、アンモニウム塩、有機アミノ塩もしくはマグネシウム塩または類似の塩が挙げられる。本発明の化合物が、相対的に塩基性の官能基を含むとき、係る化合物の中性の形態を十分量の所望の酸と、ネットでまたは好適な不活性溶媒中で接触させることによって、酸付加塩を得ることができる。医薬として許容される酸付加塩の例としては、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、モノヒドロゲン炭酸、リン酸、モノヒドロゲンリン酸、ジヒドロゲンリン酸、硫酸、モノヒドロゲン硫酸、ヨウ化水素酸または亜リン酸などのような無機酸から得られる塩ならびに酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸（ｉｓｂｕｔｙｒｉｃ）、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸（ｆｕｍｅｒｉｃ）マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トリルスルホン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸などのような相対的に無毒性の有機酸から得られる塩が挙げられる。アルギネートなどのようなアミノ酸の塩およびグルクロン酸またはガラクツロン酸（ｇａｌａｃｔｕｎｏｒｉｃ  ａｃｉｄｓ）などのような有機酸の塩もまた含められる（例えば、Ｂｅｒｇｅ，Ｓ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９７７，６６，１−１９を参照のこと）。本発明のある特定の化合物は、この化合物が塩基付加塩または酸付加塩に変換されるのを可能にする、塩基性の官能基と酸性の官能基の両方を含む。
【００２６】
上記化合物の中性の形態は、塩を塩基または酸と接触させ、親化合物を従来の様式で単離することによって、得てもよい。上記化合物の親の形態は、ある物理的特性、例えば、極性溶媒における溶解性が様々な塩の形態と異なるが、他の点では、これらの塩は、本発明の目的のために、この化合物の親の形態と等価である。
【００２７】
塩の形態に加えて、本発明は、プロドラッグの形態である化合物を提供する。本明細書中に記載される化合物のプロドラッグは、生理学的条件下で容易に化学変化を起こして本発明の化合物を提供する化合物である。さらに、プロドラッグは、エキソビボの環境において、化学的または生化学的な方法によって本発明の化合物に変換され得る。例えば、プロドラッグは、好適な酵素または化学的試薬とともに経皮パッチレザバーに配置されたとき、ゆっくりと本発明の化合物に変換され得る。プロドラッグは、場合によっては、親薬物よりも投与しやすいことがあるので、有用であることが多い。プロドラッグは、経口投与によって生物学的に利用可能であり得るのに対し、親薬物は、そうではない。また、プロドラッグは、親薬物と比べて、薬理学的組成物における改善された溶解性を有し得る。多種多様のプロドラッグ誘導体、例えば、プロドラッグの加水分解性の切断または酸化的な活性化に依存するものが、当該分野で公知である。限定ではないが、プロドラッグの例は、エステル（「プロドラッグ」）として投与されるが、次いで、活性な実体であるカルボン酸に代謝的に加水分解される、本発明の化合物であり得る。さらなる例としては、本発明の化合物のペプチジル誘導体が挙げられる。
【００２８】
本発明のある化合物は、非溶媒和の形態ならびに水和された形態を含む溶媒和の形態で存在し得る。通常、溶媒和の形態は、非溶媒和の形態と等価であり、本発明の範囲内に包含されると意図される。本発明のある化合物は、複数の結晶性または非晶質の形態で存在し得る。通常、すべての物理的形態が、本発明によって企図される用途に対して等価であり、本発明の範囲内であると意図される。
【００２９】
本発明のある化合物は、不斉炭素原子（光学中心）または二重結合を有し；ラセミ体、ジアステレオマー、幾何異性体および個々の異性体はすべて、本発明の範囲内に包含されると意図される。
【００３０】
本発明の化合物は、係る化合物を構成する原子の１つ以上に、非天然の比率の原子同位体も含み得る。例えば、これらの化合物は、放射性同位体、例えば、トリチウム（３Ｈ）、ヨウ素−１２５（１２５Ｉ）または炭素−１４（１４Ｃ）で放射標識され得る。本発明の化合物の同位体的バリエーションのすべてが、放射性であるかまたは放射性でないかに関係なく、本発明の範囲内に包含されると意図される。
【００３１】
発明の実施形態
ＰＰＡＲγを調節する公知の化合物の新しい用途がここに発見された。
【００３２】
実験的自己免疫性脳脊髄炎（「ＥＡＥ」）モデルは、ヒトのＭＳに対する、治療パラダイムの化合物の効果の妥当で正確な予測因子であると示された。下記から理解されるように、ＥＡＥを有する動物をＩＮＴ１３１で治療すると、これらの被験体は、症状が無くなり、ほぼ症状が無くなったままになる。従って、ＩＮＴ１３１は、ＭＳの治療にとって有効であるだろうと考えられる。
【００３３】
特に、化合物（Ｉ）
【００３４】
【化２】
2018039817.tif 000004
は、予想外にも、ＭＳに有効であることが見出された。
【００３５】
この化合物は、ＩＮＴ１３１としても知られる。
【００３６】
本発明者らは、１から３ｍｇ／日が、所望の応答を誘発するのに十分な用量である可能性があると予想する。
【実施例】
【００３７】
［実施例１］
ＩＮＴ１３１は、ＥＡＥの進行の強力な阻害剤である
ＩＮＴ１３１は、マウスモデルにおいて再発を減少させる
ＥＡＥは、十分に特徴付けられ、広く使用されているＭＳのモデルである。ＥＡＥは、このモデルにおける薬物治療活性が、ヒトの疾患における薬物の作用をしばしば模倣し、予想する数少ない動物モデルのうちの１つである。このモデルでは、中枢神経系ミエリンの詳細に明らかにされた抗原性フラグメント、例えば、プロテオリピドタンパク質（ＰＬＰ）のフラグメントでマウスを免疫する。２から３週間の間に、免疫された動物は、再発／寛解型ＭＳ（ＲＲＭＳ）に非常によく似ている、Ｔ細胞媒介性の脳自己免疫の臨床的および病理組織学的な症候群を発症する。ＥＡＥとＲＲＭＳとの間の類似点としては、浸潤された脳の炎症応答および両方の疾患を惹起するミエリンＰＬＰペプチドに対する付随するＴｈ１／Ｔｈ１７応答ならびに疾患の再発において見られるこの後のエピトープ拡大が挙げられる。
【００３８】
上記動物を、ミエリンペプチド（ＰＬＰ１３９−１５１）および疾患を再発させる拡大エピトープペプチド（ＰＬＰ１７８−１９１）で免疫した。研究は、３つの実験集団からなり、マウスにビヒクルまたは１もしくは３ｍｇ／ｋｇ／ｄのＩＮＴ１３１を毎日ｉｐ注射した。免疫の後、これらの動物は、経験豊富な研究者による神経の評価を毎日受けた。これらの研究において、治療は、最初の寛解時に開始した。
【００３９】
ＩＮＴ１３１治療は、再発を実質的に阻止する。免疫の約２週間後の予想された臨床疾患ピークの後、動物が寛解に入ると、症状は弱まり始めた。上記動物のすべてが、２０日目にＩＮＴ１３１で治療された。しかしながら、ビヒクルで治療された動物だけにおいて、予想どおりに、免疫の後の２２日目までに再発が始まった。対照的に、ＩＮＴ１３１で治療されたマウスは、わずかに改善し続けた（１ｍｇ／ｋｇ）かまたは安定したままだった（３ｍｇ／ｋｇ）。
【００４０】
免疫の後の２５日目における再発率の比較から、ビヒクルで治療された被験体と比べて、両方のＩＮＴ１３１治療パラダイムにおいて、再発が非常に有意に減少することが証明された。ビヒクルで治療されたマウスの７２パーセントと比べて、ＩＮＴ１３１で治療された動物の９パーセント（１ｍｇ／ｋｇ／ｄ）から１６パーセント（３ｍｇ／ｋｇ／ｄ）しか再発しなかった。ＩＮＴ１３１で治療された再発する動物の間では、疾患の負荷は、ビヒクルで治療されたマウスと比べて、極めて軽度である。
【００４１】
ＩＮＴ１３１は、ＣＮＳからの白血球クリアランスを媒介する
寛解中にＩＮＴ１３１治療を開始すると、ビヒクル／プラセボ治療と比べて、被験体が再発しないままである時間が延長される。しかしながら、寛解中は活発な神経炎症が少ないので、このパラダイムは、急性神経炎症に対するＩＮＴ１３１の効果に関して情報価値がない。急性炎症反応に対するＩＮＴ１３１の効果をより理解するために、本発明者らは、ＥＡＥを有するマウスをこの臨床疾患の最盛期に治療した。上で論じたように、これにより、臨床症状が迅速に改善される。疾患のピーク時にＩＮＴ１３１で治療されたマウス由来の神経組織の検査から、ビヒクルで治療された動物由来の神経組織において観察される豊富な白血球浸潤と比べて、ＩＮＴ１３１で治療された組織における、浸潤しているＣＤ４５陽性白血球の欠乏が証明される（図１および２）。
【００４２】
ＩＮＴ１３１治療は、疾患のピーク時（２０日目）に開始され、脳幹を３２日目に回収し、αＣＤ４５で染色して、浸潤している白血球を識別した。ＣＤ４５（白血球共通抗原としても知られる。）は、赤血球および血小板を除くすべての造血細胞上で発現され、Ｂ細胞受容体媒介性およびＴ細胞受容体媒介性の活性化に必要である。従って、ＣＤ４５は、炎症過程の媒介において不可欠である。図１に見られるように、ビヒクルで治療された被験体由来の組織には、数多くのＣＤ４５発現細胞が存在し（矢印）、一方、いずれかの濃度のＩＮＴ１３１で治療された組織では、わずかしか存在しない。疾患のピーク時にＩＮＴ１３１で治療された動物の脳幹におけるＣＤ４５陽性白血球の数の定量化から、薬物治療によって、治療開始の１２日後に、浸潤している白血球細胞が欠乏することが示される（図２）。これらの知見は、ＩＮＴ１３１が、このＲＲＭＳのモデルにおいて急性神経炎症の強力で有効な治療であるという臨床的および組織学的な知見をひとつにまとめる。
【００４３】
［実施例２］
中枢神経系におけるバイオアベイラビリティ
背景
血液脳関門（「ＢＢＢ」）は、ほとんどの高分子および血液由来細胞の流入が脳に入るのを妨げる拡散バリアおよび物理的な篩として作用する物理的／生化学的な障害物である。ＢＢＢは、内皮細胞、アストロサイトエンドフィートおよび周皮細胞を含む、ＢＢＢを構成する３つの異なる細胞成分の物理的相互作用によって形成される。ＢＢＢの拡散バリア機能は、脳内皮細胞の間に形成しているタイトジャンクションに依存し、ほとんどの血液由来物質が脳に入るのを選択的に遮断する。Ｂａｌｌａｂｈ，Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  ｂｌｏｏｄ−ｂｒａｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ：ａｎ  ｏｖｅｒｖｉｅｗ：ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ  Ｄｉｓ，２００４，Ｊｕｎｅ，１６（１），１−１３。ＭＳの再発中に起きる急性炎症の状況では、病変の近くのＢＢＢは分解し、免疫調節性高分子と白血球の両方が病変部位に流入し、炎症過程がさらに推進される。Ｍｉｎａｇａｒ  Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ−ｂｒａｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ  ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ  ｉｎ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，Ｍｕｌｔｉ  Ｓｃｌｅｒ，２００３，Ｄｅｃ．，９（６），５４０−５４９。
【００４４】
ＭＳにおける急性炎症性病変は、コントラスト増強（ｃｏｎｔｒａｓｔ−ｅｎｈａｎｃｅｄ）ＭＲＩを使用して、リアルタイムで検出され得る。正常な恒常性の条件下では、ＢＢＢは、ガドリニウムベースの造影剤が脳および脊髄を通過するのを妨げる。しかしながら、急性炎症の部位では、ＢＢＢは損なわれ、ガドリニウムが病変に容易に入り、ＭＲ像において明るい領域として見られる。Ｔｏｕｒｄｉａｓ  Ｔ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ：ｒｅｌｅｖａｎｃｅ  ｔｏ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｔｈｅｒａｐｙ，Ｎｅｕｒｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，２０１３，Ｊａｎ．，１０（１），１１１−１２３。しかしながら、この過程は、一時的であり、局所的なＢＢＢの再形成に起因して、３０日以内に病変の約７０％がガドリニウムを排除する。Ｂａｓｔｉａｎｅｌｌｏ  Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｒｉａｌ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ−ＤＴＰＡ  ＭＲＩ  ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ  ｉｎ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，１９９０，Ａｐｒ．，４０（４），５９１−５９５；Ｓｍｉｔｈ  ＭＥ，  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｗｏｒｓｅｎｉｎｇ  ｉｎ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ｉｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ  ａｎｄ  ａｒｅａ  ｏｆ  ｇａｄｏｐｅｎｔｅｔａｔｅ  ｄｉｍｅｇｌｕｍｉｎｅ−ｅｎｈａｎｃｉｎｇ  ｍａｇｎｅｔｉｃ  ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｌｅｓｉｏｎｓ，Ａｎｎ  Ｎｅｕｒｏｌ，１９９３，Ｍａｙ，３３（５），４８０−４８９。ゆえに、治療的化合物が、延長された寛解期間を含むＲＲＭＳの経過全体にわたって有効である場合、化合物が、寛解中に回復されるインタクトなＢＢＢを横断できることが不可欠である。Ｃｏｒｒｅａｌｅ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  ｂｌｏｏｄ−ｂｒａｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ  ｉｎ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ：ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｒｏｌｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ．Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ，２００７，Ｍａｒ．，４０（２），１４８−１６０。
【００４５】
手順
ＩＮＴ１３１が、インタクトなＢＢＢを貫通することができるかを試験するために、ＩＮＴ１３１をトリチウムで放射標識した後（「［３Ｈ］ＩＮＴ１３１」）、成体のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに腹腔内注射した。放射標識されたＩＮＴ１３１の純度を、注射の前および実験の終了時に再度、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分画によって測定した。両方の時点において、放射標識された材料の実質的にすべてが、単一のピークで見られたことから、この研究の経過にわたる［３Ｈ］ＩＮＴ１３１の安定性が証明された。５０ｍｇ／ｋｇのＩＮＴ１３１の注射によって、１０００μＣｉ／ｋｇの標識された薬物が各動物に投与されるように、試験動物に注射するときに、標識されたＩＮＴ１３１を、標識されていないＩＮＴ１３１と混合した。これらの試験動物を、注射の１、６および２４時間後に屠殺し、液体シンチグラフィー（ｓｃｉｎｔｉｌｌｏｇｒａｐｈｙ）による［３Ｈ］ＩＮＴ１３１含有量の測定のために、血液、脳、脳脊髄液（「ＣＳＦ」）、脊髄、腎臓、肝臓および小腸を回収した。
【００４６】
結果
表１には、解析されたすべての組織におけるＩＮＴ１３１の濃度が列挙されている。約５０ｍｇ／ｋｇの［３Ｈ］ＩＮＴ１３１の単回投与の１時間後、神経コンパートメントにおけるＩＮＴ１３１の平均量は、脳組織１グラムあたり０．５μｇ未満であり、これは、循環中に見られる量よりもおよそ１０倍少なかった。対照的に、６および２４時間後、神経組織におけるＩＮＴ１３１の量は、およそ１０倍増加した。この神経組織における薬物蓄積の遅延は、ＢＢＢを横断する薬物の能動輸送と矛盾がない。
【００４７】
脳および脊髄におけるＩＮＴ１３１のバイオアベイラビリティは、２４時間の経過にわたって高まり、このバイオアベイラビリティは、注射の６時間後では、血液中で見られるレベルの約１０％であったのに対し、神経組織におけるＩＮＴ１３１のレベルは、２４時間後までに、循環中に見られるレベルの２５％に増加した（図３）。注射の１日後の脳および脊髄におけるＩＮＴ１３１の絶対量は、神経組織の湿重量１グラムあたり４μｇを超えた（表１を参照のこと）。これは、利用可能なＰＰＡＲγ受容体を飽和させるのに十分な量を超える薬物の量である。Ｌｅｅ  ＤＨ，ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ＰＰＡＲγ  ｍｏｄｕｌａｔｏｒ  ＩＮＴ１３１  ｎｏｒｍａｌｉｚｅｓ  ｉｎｓｕｌｉｎ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｄｅｆｅｃｔｓ  ａｎｄ  ｉｍｐｒｏｖｅｓ  ｂｏｎｅ  ｍａｓｓ  ｉｎ  ｄｉｅｔ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｏｂｅｓｅ  ｍｉｃｅ，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ，２０１２，Ｍａｒ．１，３０２（５），Ｅ５５２−５６０。中枢神経系を共に形成する脳および脊髄の別個の解析は、解析された各時点において、標識されたＩＮＴ１３１の同様の蓄積を示し、これにより、アッセイと薬物の真の分布の両方に対する内部標準として機能する。肝臓および腸で見られる化合物のタイミングおよび高レベルは、おそらく、ＩＮＴ１３１の代謝および排出の公知の経路の結果である。
【００４８】
図３および表１に示されるように、脳および脊髄に比べて、ＣＳＦにおける薬物の蓄積に６から２４時間のずれがある。この知見は、ＢＢＢの公知の生物学と矛盾がない。ＣＳＦに存在する溶質は、相対的に遅い過程である、脈絡叢からＣＳＦへの薬物の能動輸送を通じて蓄積する。脳および脊髄と比べて、ＣＳＦにおけるＩＮＴ１３１蓄積の遅延は、ＩＮＴ１３１の血液脳関門透過の結論をさらに支持する。
【００４９】
【表１】
2018039817.tif 000005
【００５０】
［実施例３］
神経保護
皮質および皮質下の灰白質の萎縮が、ＭＳの全ステージにおいて見られるが、しかしながら、最近になって、ＭＳの初期段階におけるこの疾患の進行の高感度で信頼できるマーカーとして、視床の減少が登場した。１または３ｍｇのＩＮＴ１３１の添加により、さらなる萎縮から視床が残ると予想される。この結果、ＩＮＴ１３１は、ＭＳにおける灰白質萎縮に対して臨床的に証明された最初の薬物になるだろう。
【００５１】
この説明は、例示的な実施形態を参照して行われているが、様々な変更が行われることがあり、範囲から逸脱することなく、本発明の要素の代わりに等価物が用いられることがあることが、当業者によって理解されるだろう。さらに、本質的な範囲から逸脱することなく本発明の教示に対して特定の状況または材料を適応させるように多くの改変が行われることがある。また、この説明において、例示的な実施形態が開示され、特定の用語が、使用されてきた可能性があるが、これらの用語は、別段述べられない限り、一般的で説明的な意味でのみ使用され、限定の目的で使用されているわけではなく、ゆえに、特許請求の範囲の範囲は、これに限定されない。さらに、当業者は、本明細書中で論じられた方法のある工程が別の順序で並べられることがあることまたは工程が組み合わされることがあることを認識するだろう。ゆえに、添付の特許請求の範囲は、本明細書中に開示される特定の実施形態に限定されないことが意図される。
【図１】
2018039817.tif 000011
【図２】
2018039817.tif 000012
【図３】
2018039817.tif 000013
【手続補正書】
【提出日】平成29年11月1日(2017.11.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療有効量の式（Ｉ）の化合物
【化１】
2018039817.tif 000014
または該化合物の医薬として許容される塩、もしくは異性体を含む、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）を治療するための医薬組成物であって、前記治療有効量が、１から３ミリグラムである、医薬組成物。
【請求項２】
前記治療有効量が、１日当たり１から３ミリグラムである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記治療有効量が、１日当たり３ミリグラムである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
治療有効量の式（Ｉ）の化合物
【化２】
2018039817.tif 000015
または該化合物の医薬として許容される塩、もしくは異性体を含む、ＲＲＭＳの症状を治療するための医薬組成物であって、前記治療有効量が、１から３ミリグラムである、医薬組成物。
【請求項５】
前記治療有効量が、１日当たり３ミリグラムである、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記治療有効量が、１日当たり３ミリグラムである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
多発性硬化症を患う患者に神経保護を提供するための医薬組成物であって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物
【化３】
2018039817.tif 000016

または該化合物の医薬として許容される塩、もしくは異性体を含み、前記治療有効量が、１から３ミリグラムである、医薬組成物。
【請求項８】
前記治療有効量が、１日当たり１から３ミリグラムである、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記治療有効量が、１日当たり３ミリグラムである、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
神経炎症の症状を治療するための医薬組成物であって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物
【化４】
2018039817.tif 000017

または該化合物の医薬として許容される塩、もしくは異性体を含み、前記治療有効量が、１から３ミリグラムである、医薬組成物。
【請求項１１】
前記治療有効量が、１日当たり１から３ミリグラムである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記治療有効量が、１日当たり３ミリグラムである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【手続補正書】
【提出日】平成29年11月16日(2017.11.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療有効量の式（Ｉ）の化合物
【化１】
2018039817.tif 000018
または該化合物の医薬として許容される塩、もしくは異性体を含む、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）を治療するための医薬組成物であって、前記治療有効量が、１から３ミリグラムである、医薬組成物。
【請求項２】
前記治療有効量が、１日当たり１から３ミリグラムである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記治療有効量が、１日当たり３ミリグラムである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
治療有効量の式（Ｉ）の化合物
【化２】
2018039817.tif 000019
または該化合物の医薬として許容される塩、もしくは異性体を含む、ＲＲＭＳの症状を治療するための医薬組成物であって、前記治療有効量が、１から３ミリグラムである、医薬組成物。
【請求項５】
前記治療有効量が、１日当たり１から３ミリグラムである、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記治療有効量が、１日当たり３ミリグラムである、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項７】
多発性硬化症を患う患者に神経保護を提供するための医薬組成物であって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物
【化３】
2018039817.tif 000020
または該化合物の医薬として許容される塩、もしくは異性体を含み、前記治療有効量が、１から３ミリグラムである、医薬組成物。
【請求項８】
前記治療有効量が、１日当たり１から３ミリグラムである、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記治療有効量が、１日当たり３ミリグラムである、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
神経炎症の症状を治療するための医薬組成物であって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物
【化４】
2018039817.tif 000021
または該化合物の医薬として許容される塩、もしくは異性体を含み、前記治療有効量が、１から３ミリグラムである、医薬組成物。
【請求項１１】
前記治療有効量が、１日当たり１から３ミリグラムである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記治療有効量が、１日当たり３ミリグラムである、請求項１０に記載の医薬組成物。