(57)【要約】      （修正有）【課題】改善されたインビボ抗腫瘍活性を示すデュオカルマイシン抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）の提供。【解決手段】ＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍および造血器腫瘍、特に乳癌、胃癌、膀胱癌、卵巣癌、肺癌、前立腺癌、膵臓癌、大腸癌、頭頸部扁平上皮癌または骨肉腫、および急性リンパ芽球性白血病の治療において使用するためのデュオカルマイシン含有抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）に関する。特に、ＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋または１＋およびＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陰性の組織状態を有するヒト固形腫瘍の治療において使用するためのデュオカルマイシン含有ＡＤＣに関する。有利には、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）の治療において使用するためのデュオカルマイシン含有ＡＤＣ。前記化合物と、治療的抗体及び／又は化学療法剤の組み合わせ。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍および造血器腫瘍の治療において使用するための、式（Ｉ）
【化１】
2018039809.tif 000012
（式中、
抗ＨＥＲ２  Ａｂは抗ＨＥＲ２抗体または抗体断片であり、
ｎは０〜３であり、
ｍは１から４の平均ＤＡＲを表し、
Ｒ1は
【化２】
2018039809.tif 000013
（ｙは１〜１６である）から選択され、
Ｒ2は
【化３】
2018039809.tif 000014
から選択される）の化合物。
【請求項２】
抗ＨＥＲ２  Ａｂは抗ＨＥＲ２抗体または抗体断片であり、
ｎは０〜１であり、
ｍは１から４の平均ＤＡＲを表し、
Ｒ1は
【化４】
2018039809.tif 000015
（ｙは１〜１６である）から選択され、
Ｒ2は
【化５】
2018039809.tif 000016
から選択される、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項３】
式（ＩＩ）
【化６】
2018039809.tif 000017
の、請求項１または２に記載の使用のための化合物。
【請求項４】
ヒト固形腫瘍の治療において使用するための、請求項１から３のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項５】
ＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍が乳癌、胃癌、膀胱癌、卵巣癌、肺癌、前立腺癌、膵臓癌、大腸癌、頭頸部扁平上皮癌または骨肉腫であり、造血器腫瘍が急性リンパ芽球性白血病である、請求項１から４のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項６】
ＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍が乳癌または胃癌である、請求項１から５のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項７】
乳癌がホルモン受容体陽性または陰性である、請求項１から６のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項８】
ヒト固形腫瘍がＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋または１＋である、請求項１から７のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項９】
ヒト固形腫瘍がＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陰性である、請求項１から８のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１０】
ヒト固形腫瘍がトリプルネガティブ乳癌である、請求項１から９のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１１】
ＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍および造血器腫瘍の治療において使用するための、請求項１から１０のいずれか一項に記載の使用のための化合物と治療的抗体および／または化学療法剤との組合せ。
【請求項１２】
乳癌、特にトリプルネガティブ乳癌の治療において使用するための、請求項１１に記載の使用のための組合せ。
【請求項１３】
治療的抗体がペルツズマブであり、化学療法剤がタキサン、特にドセタキセルもしくはパクリタキセル、またはアントラサイクリンであり、特にドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシンもしくはバルルビシンである、請求項１１または１２に記載の使用のための組合せ。
【請求項１４】
請求項１から１０のいずれか一項に記載の使用のための化合物、または請求項１１から１３のいずれか一項に記載の使用のための組合せ、および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１５】
凍結乾燥粉末または凍結溶液の形態の、請求項１４に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【発明の分野】
【０００１】
本発明は、ヒト上皮成長因子受容体２（ＨＥＲ２）を発現するヒト固形腫瘍および造血器腫瘍、特に乳癌、胃癌、膀胱癌、卵巣癌、肺癌、前立腺癌、膵臓癌、大腸癌、頭頸部扁平上皮癌、骨肉腫、および急性リンパ芽球性白血病の治療において使用するためのデュオカルマイシン含有抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）に関する。
【発明の背景】
【０００２】
抗体は、ＤＮＡをアルキル化もしくは架橋する（たとえばそれぞれ、デュオカルマイシンおよびカリケアマイシンまたはピロロベンゾジアゼピン二量体）、または微小管を破壊する（たとえばマイタンシノイドおよびオーリスタチン）、またはＤＮＡを結合させる（たとえばアントラサイクリン）小分子を含む、さまざまな細胞毒性薬にコンジュゲートされている。カリケアマイシンにコンジュゲートされたヒト化抗ＣＤ３３抗体を含む１つのこのようなＡＤＣ−Ｍｙｌｏｔａｒｇ（商標）（ゲムツズマブオゾガマイシン、Ｗｙｅｔｈ）−は、急性骨髄性白血病に対して２０００年に承認された。２０１１年には、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）が、ホジキンリンパ腫および未分化大細胞リンパ腫の治療に対して、モノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）にコンジュゲートされたＣＤ３０に対するキメラ抗体を含むＡＤＣ、Ａｄｃｅｔｒｉｓ（商標）（ブレンツキシマブベドチン、Ｓｅａｔｔｌｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）を承認した。
【０００３】
デュオカルマイシンは、ストレプトミセス属種の培養液から初めて単離されたものであり、デュオカルマイシンＡ、デュオカルマイシンＳＡ、およびＣＣ−１０６５を含む抗腫瘍抗生物質のファミリーのメンバーである。これらの極めて強い薬剤は、副溝においてアデニンのＮ３位でＤＮＡを配列選択的にアルキル化し、これが腫瘍細胞死に至るイベントのカスケードを開始する能力から、その生物活性を得ているとされる。
【０００４】
ＷＯ２０１１／１３３０３９Ａは、ＤＮＡアルキル化剤ＣＣ−１０６５およびこのＨＥＲ２標的ＡＤＣの一連の新規類似体を開示している。例１５において、幾つかのトラスツズマブ−デュオカルマイシンコンジュゲートが、ヌードマウスでＮ８７（すなわちＨＥＲ２  ＩＨＣ（免疫組織化学）３＋胃腫瘍）異種移植片に対してテストされた。結果は図４Ａ、４Ｂおよび４Ｃに示されている。１２ｍｇ／ｋｇ静注の単回投与で治療後、抗体トラスツズマブ自体および対照ビヒクルと比べて全ての６つのＡＤＣは、体重に悪影響を与えることなく腫瘍体積を低減し、生存を改善した。比較的短いリンカーを含有するコンジュゲートは、比較的長いリンカーを有する対応するコンジュゲートより良好な（抗腫瘍）有効性を有すること、およびリンカーの性質と薬物の性質の両方も同様に有効性に対する効果を有することが示されたことが結論付けられた。
【０００５】
乳癌は依然として世界的に女性に最も多い悪性腫瘍である。乳癌は異質性疾患であり、幅広い臨床的挙動および予後を示す。乳癌は、乳腺小葉または乳腺管の上皮の異常な悪性増殖である。該癌組織は発生の場所に限局する場合もあれば（上皮内癌）、基底膜を通って周囲組織に浸潤している場合もある（浸潤癌）。転移癌は、癌細胞がリンパ管および血管を経由して他の臓器に広がるとすぐに生じる。乳癌細胞の組織学的鑑別および特徴付けは、バイオマーカーを用いて行われる。
【０００６】
治療決定のための乳癌の分子的分類は、主にエストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰＲ）、およびヒト上皮成長因子受容体２（ＨＥＲ２）発現状態の評価からなる。これは、全体的に３つのタイプの乳癌、すなわち、（１）ＨＥＲ２の過剰発現がなく、ホルモン受容体（ＥＲまたはＰＲ）の発現がある乳癌組織、（２）ホルモン受容体（ＨＲ）発現または非発現であり、ＨＥＲ２が過剰発現している乳癌組織、および（３）治療的に関連のあるホルモン受容体発現またはＨＥＲ２受容体発現がない乳癌組織、いわゆるトリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）が識別され得ることを意味している。
【０００７】
ホルモン受容体（ＨＲ）陽性癌組織状態を有する乳癌患者（全乳癌患者の約６０〜７０％）は、最小限のホルモン受容体状態を持たない者または最小限のホルモン受容体状態を有する者より良好な予後を有する。対照的に、腫瘍がＩＨＣ３＋またはＩＨＣ２＋／ＦＩＳＨ（蛍光インサイチューハイブリダイゼーション）陽性状態（全乳癌症例の約２０％に生じる）を有する患者は、腫瘍がより低グレードのＨＥＲ２膜発現またはＦＩＳＨ陰性増幅率を有する乳癌患者と比較して、予後がより悪い。ホルモン受容体陽性およびＨＥＲ２過剰発現乳癌組織を有する患者は今や標的化療法の選択肢を有するため、腫瘍がＥＲ、ＰＲおよびＨＥＲ２陰性であるこれらの患者にとって有効性が限られる化学療法しか利用できないことから、トリプルネガティブ乳癌は最悪の予後を意味する。
【０００８】
ＨＥＲ２に対する組換えヒト化ＩｇＧ１モノクローナル抗体、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（商標）（トラスツズマブ）は、ＨＥＲ２過剰発現乳癌のアジュバント治療、ならびに転移性ＨＥＲ２過剰発現乳癌および胃癌、すなわちＨＥＲ２  ＩＨＣ３＋またはＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋／ＦＩＳＨ陽性の治療に対して、１９９８年にＦＤＡにより米国で承認された。該薬物は、２０００年にＥＭＡにより欧州で承認された。
【０００９】
転移性乳癌疾患を有する患者での臨床試験は、患者がＨＥＲ２  ＩＨＣ過剰発現腫瘍またはＦＩＳＨ陽性遺伝子増幅腫瘍を有するならば、トラスツズマブ治療の唯一臨床的な意義のある有効性があることを示した。このため、現在のＨＥＲ２検査アルゴリズムは、ＨＥＲ２標的化から有意な利益を得る可能性が最も高い患者を特定することを目的としている。ＨＥＲ２膜発現は低過剰発現から高過剰発現の生物学的に連続体であるのに対し、承認されたＩＨＣ検査、たとえばＨｅｒｃｅｐＴｅｓｔ（商標）（Ｄａｋｏ、グロストルプ、デンマーク）は、０から３＋の範囲の半定量的スケールでＨＥＲ２状態を分類する。３＋のＩＨＣスコアは、癌細胞の＞１０％に強い周囲膜染色がある場合に割り当てられる。ＦＩＳＨ陽性遺伝子増幅は、セントロメアと比べて増幅率が≧２．０である場合に割り当てられる。ＦＩＳＨ陽性遺伝子増幅は、トラスツズマブまたは他のＨＥＲ２標的化剤による治療の利益を有し得る患者を特定する。６，５５６例の乳癌のレビューは、ＨＥＲ２スコアが３＋の腫瘍の約９２％がＦＩＳＨ陽性遺伝子増幅を有することを明らかにした。反対に、ＨＥＲ２増幅は、スコアが２＋（２３．３％）、１＋（７．４％）、および０（４．１％）の腫瘍においてより低い割合で観察された。ＨＥＲ２標的化剤に対する反応の確立された予測因子としてＨＥＲ２増幅を用いるには、現在のアルゴリズムはＨＥＲ２  ＩＨＣスコアが２＋の腫瘍のＦＩＳＨ検査を必要とする。
【００１０】
アドトラスツズマブエムタンシンまたはトラスツズマブエムタンシン（Ｋａｄｃｙｌａ（商標）、Ｔ−ＤＭ１）は、トラスツズマブが細胞毒性メイタンシン抗チューブリン剤ＤＭ１にコンジュゲートされたＡＤＣである。Ｔ−ＤＭ１は、単剤としてのトラスツズマブ療法に反応しない腫瘍異種移植片モデルにおいて抗腫瘍活性を有する。第３相ＥＭＩＬＩＡ試験では、トラスツズマブおよびタキサンで以前に治療されたＨＥＲ２陽性進行乳癌患者が、Ｔ−ＤＭ１またはラパチニブ＋カペシタビンを受け取るように無作為に割り付けられた。Ｔ−ＤＭ１治療は、対照群の治療と比較して有意により長い無増悪生存期間および全生存期間をもたらした。
【００１１】
Ｋａｄｃｙｌａ（商標）（Ｔ−ＤＭ１）は、トラスツズマブおよびタキサンによる前治療を受けたＨＥＲ２陽性転移性乳癌患者の治療に対して、２０１３年２月にＦＤＡにより米国で承認された。該薬物は、２０１３年９月にＭＨＬＷ（厚生労働省）により日本で、および２０１３年１１月にＥＭＡにより欧州で承認された。現在承認されているレジメンは、３．６ｍｇ／ｋｇ体重、静注、３週間ごとの投薬を含む。２．４ｍｇ／ｋｇ体重、静注、週１回の投薬が、乳癌または胃癌患者の第二選択治療としてのＴ−ＤＭ１とカペシタビンの併用による進行中の第ＩＩ相試験、ならびに胃癌患者の第二選択治療としてのタキサンに対してＴ−ＤＭ１を調査する進行中の第ＩＩＩ試験において調査されている。第ＩＩＩ試験はまた、ＨＥＲ２陽性、局所進行性または転移性乳癌患者を治療するためのＴ−ＤＭ１とペルツズマブとの併用についても進行している。
【００１２】
臨床診療へのＴ−ＤＭ１の導入が、ＨＥＲ２陽性転移性乳癌の治療のためのトラスツズマブにもたらした改善にもかかわらず、Ｔ−ＤＭ１の使用は幾つかの深刻な副作用、最も重要には血小板減少症、肝毒性、およびニューロパチー（不可逆性の軸索変性）を伴う。
さらに、トラスツズマブもＴ−ＤＭ１も、中等度または低いＨＥＲ２発現、すなわち癌組織のＩＨＣ２＋または１＋および／もしくはＦＩＳＨ陰性ＨＥＲ２増幅状態を有するヒト固形腫瘍および造血器腫瘍の治療に対して認可されていない。
【００１３】
乳癌との類似性において、ＨＥＲ２発現は卵巣癌患者の不良な予後を示す（Ａ．Ｂｅｒｃｈｕｃｋら、１９９０、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、５０、４０８７〜４０９１；Ｈ．ＭｅｄｅｎおよびＷ．Ｋｕｈｎ、１９９７、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｂｓｔｅｔ．＆Ｇｙｎｅｃｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｂｉｏｌ．、７１、１７３〜１７９）。ＳＫＯＶ３細胞は、卵巣腺癌患者の腹水に由来する。この細胞株は過剰発現しているＨＥＲ２であり、ＨＥＲ２標的化剤のインビトロおよびインビボでの探索的調査に頻繁に使用される。トラスツズマブおよびペルツズマブは、この細胞株において幾つかの抗癌効果を有する（Ｎ．Ｇａｂｏｒｉｔら、２０１１、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２８６、１３、１１３３７〜１１３４５）。抗ＨＥＲ２抗体トラスツズマブおよびペルツズマブによる単剤療法は、これまで適度の有効性を示した（Ｇ．Ｍ．Ｍａｎｔｉａ−Ｓｍａｌｄｏｎｅら、２０１１、Ｃａｎｃｅｒ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  Ｒｅｓ．３、２５〜３８；Ｓ．Ｐ．Ｌａｎｇｄｏｎら、２０１０、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．１０：７、１１１３〜１１２０）。ＨＥＲ２標的化抗体が化学療法と併用されると、抗腫瘍効果は著しく増加する（Ｓ．Ｍａｋｈｉｊａら、２０１０、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．、２８：７、１２１５〜１２２３；Ｉ．Ｒａｙ−Ｃｏｑｕａｒｄら、２００８、Ｃｌｉｎ．Ｏｖａｒｉａｎ  Ｃａｎｃｅｒ、１：１、５４〜５９）。
【００１４】
さらに、高い医学的ニーズが末期膀胱癌疾患の治療に関して存在する。化学療法、たとえば進行膀胱癌または転移性膀胱癌に対するシスプラチンとゲムシタビンの併用は、平均で５０％未満の奏効率をもたらすため有効性が限られる一方で、患者は６から１２ヶ月の全生存期間を有する。化学療法に耐性の場合、標準的な治療選択肢は全くない。ＨＥＲ２陽性は、化学放射線療法後の完全奏効率の低下（５０％対８１％、ｐ＝０．０２６）と有意に関連した（Ａ．Ｃｈａｋｒａｖａｒｔｉら、２００５、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｂｉｏｌ．Ｐｈｙｓ．、６２：２、３０９〜３１７）。ＨＥＲ２陽性進行膀胱癌の第一選択療法としてパクリタキセルおよびカルボプラチンのレジメンにトラスツズマブを追加することは、第ＩＩ相試験において７０％の全奏効率および１４．１ヶ月の全生存期間を示した（Ｍ．Ｈ．Ａ．Ｈｕｓｓａｉｎら、２００７、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．、２５：１６、２２１８〜２４）。症例研究に基づく適用において標準的化学療法後の腫瘍再発患者は、トラスツズマブ、パクリタキセルおよびカルボプラチンの併用に反応した（Ｄ．Ａｍｓｅｌｌｅｍ−Ｏｕａｚａｎａら、２００４、Ａｎｎ．Ｏｎｃｏｌ．、１５、３、５３８）。
【００１５】
浸潤性非小細胞肺癌腺癌の場合、ＨＥＲ２変異および増幅は望ましくない転帰と関連する（Ｍ．Ｓｕｚｕｋｉら、２０１４、Ｌｕｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ、ｈｔｔｐ：／／ｄｘ．ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｌｕｎｇｃａ．２０１４．１０．０１４）。ＨＥＲ２変異を有する肺癌患者において、９３％の病勢コントロール率がトラスツズマブベースの療法で達成することができた（Ｊ．Ｍａｚｉｅｒｅｓら、２０１３、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．、３１：１６、１９９７〜２００４）。肺癌の化学耐性はしばしばＨＥＲ２発現の増大を伴い（Ｃ．−Ｍ．Ｔｓａｉら、１９９３、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．、８５：１１、８９７〜９０１；Ｚ．Ｃａｌｉｋｕｓｕら、２００９、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、２８：９７）、チロシンキナーゼ阻害剤に対する耐性は、ＨＥＲ２増幅の増大と関連する（Ｋ．Ｔａｋｅｚａｗａら、２０１２、Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖ．２（１０）、９２２〜３３）。
【００１６】
早期または進行前立腺癌患者は、ほとんどがアンドロゲン受容体標的化療法を受ける。
アンドロゲン受容体およびＨＥＲ２のシグナル伝達機能におけるクロストークがある（Ｆ．−Ｎ．Ｈｓｕら、２０１１、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．、３００：Ｅ９０２〜Ｅ９０８；Ｌ．Ｃｈｅｎら、２０１１、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、１７（１９）、６２１８〜２８）。ＨＥＲ２活性化はアンドロゲン受容体の発現を抑制し（Ｃ．Ｃａｉら、２００９、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、６９（１２）、５２０２〜５２０９）、ＨＥＲ２発現の増加は、ＰＳＡ進行、急速な増殖および不良な予後と関連している（Ｓ．Ｍｉｎｎｅｒら、２０１０、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、１６（５）、１５５３〜６０；Ｓ．Ｆ．Ｓｈａｒｉａｔら、２００７、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、１３（１８）、５３７７〜８４）。ＨＥＲ２の発現の増加は、前立腺癌症例の約４分の１でアンドロゲン非依存性への進行に関与するように思われる（Ｊ．Ｍ．Ｓ．Ｂａｒｔｌｅｔｔら、２００５、Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．、２０５、５２２〜５２９）。
【００１７】
膵臓癌は、その潜行性発症および療法への耐性により最も致死的なヒト固形腫瘍の１つである。ゲムシタビンまたは５−ＦＵ、ロイコボリン、イリノテカンおよびオキサリプラチンの併用は、進行疾患患者の延命に役立つ場合がある（Ｈ．ＢｕｒｒｉｓおよびＡ．Ｍ．Ｓｔｏｒｎｉｏｌｏ、１９９７、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ３３（１）：Ｓ１８〜Ｓ２２；Ｔ．Ｃｏｎｒｏｙら、２０１１、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３６４（１９）：１８１７〜２５）。より最近には、ＨＥＲ２発現が、ＨＥＲ２  ２＋および３＋に指定された膵臓癌でも１０％の同じ割合で見られることが報告された。この事実に基づき、トラスツズマブを含むＨＥＲ２標的治療は、前臨床モデルで観察された効果に基づきこの患者集団における実行可能な選択肢と見なされている［Ｃ．Ｌａｒｂｏｕｒｅｔら、２０１２、Ｎｅｏｐｌａｓｉａ  １４（２）、１２１〜１３０）。
【００１８】
一般に認められた染色および採点方法を用いて、ＨＥＲ２の過剰発現が大腸癌（ＣＲＣ）患者の約６％で観察された（Ａ．Ｎ．Ｓｅｏら、２０１４、ＰＬｏＳ  ＯＮＥ、９（５）：ｅ９８５２８）。  これに基づきＨＥＲ２標的治療は、ＣＲＣ患者のサブセットにおいて有効となり得る。２つの臨床試験が、トラスツズマブ含有併用療法の利益を進行または転移性ＣＲＣで調査しており、治療有効性の証拠を示す臨床反応がこれらの試験で観察された（Ｒ．Ｋ．Ｒａｍａｎａｔｈａｎら、２００４、Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｖｅｓｔ．２２（６）：８５８〜８６５；Ｊ．Ｃｌａｒｋら、２００３、Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２２：ａｂｓｔｒ３５８４）。さらに、１つの試験が、（抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体）セツキシマブ耐性ＣＲＣ患者に対する治療レジメンの一部としてトラスツズマブ療法を含めることを示唆した（Ａ．Ｂｅｒｔｏｔｔｉら、２０１１、Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖ．１（６）：５０８〜５２３）。
【００１９】
頭頸部扁平上皮癌または癌腫（ＨＮＳＣＣ）の管理は、外科手術、放射線、および化学療法による多種物理療法からなる。Ｂｅｃｋｈａｒｄｔらは、細胞株試料の１６％で高いＨＥＲ２過剰発現、ならびに試料の３１％および３５％でそれぞれ中等度および低いＨＥＲ２発現を報告した（Ｒ．Ｎ．Ｂｅｃｋｈａｒｄｔら、１９９５、Ａｒｃｈ．Ｏｔｏｌａｒｙｎｇｏｌ．Ｈｅａｄ  Ｎｅｃｋ  Ｓｕｒｇ．１２１：１２６５〜１２７０）。これは、ＨＮＳＣＣにおけるトラスツズマブ治療の潜在的治療可能性を例証している。
【００２０】
１９９９年、Ｇｏｒｌｉｃｋらは４７個の骨肉腫試料のうち２０個でＨＥＲ２の過剰発現を報告し、これらの患者は療法への反応が乏しく、腫瘍がこの抗原を過剰発現していない患者と比べて生存率が低下することを示した（Ｒ．Ｇｏｒｌｉｃｋら、１９９９、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１７：２７８１〜８）。それ故ＨＥＲ２は、この適応における標的生物学的療法の有望な候補として浮上した。トラスツズマブを用いた臨床研究からの最近の知見は、抗ＨＥＲ２治療が、アントラサイクリンベースの化学療法およびデクスラゾキサンとの併用で安全に行えることを示している（Ｄ．Ｅｂｂら、２０１２、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．３０（２０）、２５４５〜２５５１）。
【００２１】
さらに、ＨＥＲ２過剰発現は、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）患者の約３分の１で見られ、フィラデルフィア転座の存在下でさらにより頻繁である。ＨＥＲ２の阻害は、インビトロで白血病細胞のアポトーシスを誘発する（Ｍ．Ｅ．Ｉｒｗｉｎら、２０１３、ＰＬｏＳ  ＯＮＥ、８：８、ｅ７０６０８）。第ＩＩ相試験では、悪性Ｂ細胞にＨＥＲ２過剰発現を有する不応性または再発性成人Ｂ−ＡＬＬ患者のトラスツズマブ治療が、１３％の全奏効率をもたらすことが示された。これは、ＨＥＲ２標的化剤へのこの疾患の反応を示している（Ｐ．Ｃｈｅｖａｌｉｅｒら、Ｂｌｏｏｄ、２０１２、ＤＯＩ  １０．１１８２／ｂｌｏｏｄ−２０１１−１１−３９０７８１）。
【００２２】
それ故、特に、癌組織の（ｉ）中等度または低いＩＨＣ状態、および／または（ｉｉ）陰性ＦＩＳＨ状態、および／または（ｉｉｉ）ホルモン受容体（ＨＲ）陰性状態を有する腫瘍および悪性腫瘍患者を治療するための新たなＨＥＲ２標的療法が必要である、特に、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）の標的治療のための新たな規制当局承認療法が必要とされる。
【本発明の簡単な説明】
【００２３】
本発明は、ＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍および造血器腫瘍、特に乳癌、胃癌、膀胱癌、卵巣癌、肺癌、前立腺癌、膵臓癌、大腸癌、頭頸部扁平上皮癌、骨肉腫、および急性リンパ芽球性白血病の治療において使用するためのデュオカルマイシン含有抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）に関する。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】ＭＡＸＦ−１１６２  ＰＤＸモデル（乳癌、腺癌、ＨＥＲ２  ＩＨＣ３＋、ＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陽性）（ＣＲＯ：Ｏｎｃｏｔｅｓｔ）におけるＴ−ＤＭ１と比べたＳＹＤ９８５の抗腫瘍活性。
【図２】ＨＢＣｘ−３４  ＰＤＸモデル（乳癌、乳管癌、ＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋、ＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陰性、ＥＲおよびＰＲ陽性）（ＣＲＯ：ＸｅｎＴｅｃｈ）におけるＴ−ＤＭ１と比べたＳＹＤ９８５の抗腫瘍活性。
【図３】ＭＡＸＦ  ４４９  ＰＤＸモデル（乳癌、浸潤性乳管癌、ＨＥＲ２  ＩＨＣ１＋、ＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陰性、ＥＲおよびＰＲ陰性、すなわちトリプルネガティブ乳癌）（ＣＲＯ：Ｏｎｃｏｔｅｓｔ）におけるＴ−ＤＭ１と比べたＳＹＤ９８５の抗腫瘍活性。
【図４】ＨＢＣｘ−１０  ＰＤＸモデル（乳癌、管状腺癌、ＨＥＲ２  ＩＨＣ１＋、ＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陰性、ＥＲおよびＰＲ陰性、すなわちトリプルネガティブ乳癌）（ＣＲＯ：ＸｅｎＴｅｃｈ）におけるＴ−ＤＭ１と比べたＳＹＤ９８５の抗腫瘍活性。
【図５】ＭＡＸＦ−ＭＸ１  ＰＤＸモデル（乳癌、浸潤性乳管癌、ＨＥＲ２  ＩＨＣ１＋、ＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陰性、ＥＲおよびＰＲ陰性、すなわちトリプルネガティブ乳癌）（ＣＲＯ：Ｏｎｃｏｔｅｓｔ）におけるＴ−ＤＭ１と比べたＳＹＤ９８５の抗腫瘍活性。
【図６】ＳＴ３１３  ＰＤＸモデル（乳癌、ＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋、ＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陰性、ＥＲおよびＰＲ陽性）（ＣＲＯ：Ｓｔａｒｔ）におけるＴ−ＤＭ１と比べたＳＹＤ９８５の抗腫瘍活性。
【図７】ＧＸＡ３０５７  ＰＤＸモデル（胃癌、ＨＥＲ２  ＩＨＣ１＋、ＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陰性）（ＣＲＯ：Ｏｎｃｏｔｅｓｔ）におけるＴ−ＤＭ１と比べたＳＹＤ９８５の抗腫瘍活性。
【図８】ＧＸＡ３０６７  ＰＤＸモデル（胃癌、ＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋、ＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陽性）（ＣＲＯ：Ｏｎｃｏｔｅｓｔ）におけるＴ−ＤＭ１と比べたＳＹＤ９８５の抗腫瘍活性。
【図９】ＧＸＡ３０５４  ＰＤＸモデル（胃癌、ＨＥＲ２  ＩＨＣ３＋、ＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陽性）（ＣＲＯ：Ｏｎｃｏｔｅｓｔ）におけるＴ−ＤＭ１と比べたＳＹＤ９８５の抗腫瘍活性。
【図１０】ＧＸＡ３０３８  ＰＤＸモデル（胃癌、ＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋、ＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陰性）（ＣＲＯ：Ｏｎｃｏｔｅｓｔ）におけるＴ−ＤＭ１と比べたＳＹＤ９８５の抗腫瘍活性。
【図１１】ＢＸＦ４３９  ＰＤＸモデル（膀胱癌、ＨＥＲ２  ＩＨＣ３＋、ＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陽性）（ＣＲＯ：Ｏｎｃｏｔｅｓｔ）におけるＳＹＤ９８５の抗腫瘍活性。
【図１２】ＳＫＯＶ３細胞株由来異種移植片モデル（卵巣癌、ＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋、ＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陽性）（ＣＲＯ：Ｐｉｅｄｍｏｎｔ）におけるＳＹＤ９８３の抗腫瘍活性。
【本発明の詳細な説明】
【００２５】
本発明は、ＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍および造血器腫瘍の治療において使用するためのデュオカルマイシン含有ＡＤＣに関する。
【００２６】
１つの態様において、本発明は、ＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍および造血器腫瘍の治療において使用するための、特にヒト固形腫瘍の治療において使用するための、式（Ｉ）
【００２７】
【化１】
2018039809.tif 000002
【００２８】
（式中、
抗ＨＥＲ２  Ａｂは抗ＨＥＲ２抗体または抗体断片であり、
ｎは０〜３、好ましくは０〜１であり、
ｍは１から４の平均ＤＡＲ（薬物対抗体比）を表し、
Ｒ1は
【００２９】
【化２】
2018039809.tif 000003
【００３０】
（ｙは１〜１６である）から選択され、
Ｒ2は
【００３１】
【化３】
2018039809.tif 000004
【００３２】
から選択される）の化合物を提供する。
【００３３】
別の態様において、本発明は式（Ｉ）の化合物に関し、式中、抗ＨＥＲ２  Ａｂは抗ＨＥＲ２抗体または抗体断片であり、ｎは０〜１であり、ｍは１から４、好ましくは２から３の平均ＤＡＲを表し、Ｒ1は
【００３４】
【化４】
2018039809.tif 000005
【００３５】
（ｙは１〜１６、好ましくは１〜４である）から選択され、Ｒ2は
【００３６】
【化５】
2018039809.tif 000006
【００３７】
から選択される。
【００３８】
さらなる態様において、本発明は式（Ｉ）の化合物に関し、式中、抗ＨＥＲ２  Ａｂは抗ＨＥＲ２モノクローナル抗体であり、ｎは０〜１であり、ｍは２から３、好ましくは２．５から２．９の平均ＤＡＲを表し、Ｒ1は
【００３９】
【化６】
2018039809.tif 000007
【００４０】
（ｙは１〜４である）から選択され、Ｒ2は
【００４１】
【化７】
2018039809.tif 000008
【００４２】
から選択される。
【００４３】
さらなる態様において、本発明は式（Ｉ）の化合物に関し、式中、抗ＨＥＲ２  Ａｂはトラスツズマブまたはこのバイオ後続品であり、ｎは０〜１であり、ｍは２から３、好ましくは２．５から２．９の平均ＤＡＲを表し、Ｒ1は
【００４４】
【化８】
2018039809.tif 000009
【００４５】
（ｙは１〜４である）から選択され、Ｒ2は
【００４６】
【化９】
2018039809.tif 000010
【００４７】
から選択される。
【００４８】
好ましい態様において、本発明は、トラスツズマブまたはこのバイオ後続品を含む式（ＩＩ）
【００４９】
【化１０】
2018039809.tif 000011
【００５０】
の化合に関する。
【００５１】
本明細書においてＳＹＤ９８５と呼ばれる式（ＩＩ）の化合物は、２．６から２．９の平均ＤＡＲを有する。式（ＩＩ）のＳＹＤ９８３は２．０の平均ＤＡＲを有する。
【００５２】
本明細書に示された構造式において、ｎは０から３の整数を表すが、ｍは１から４の平均薬物対抗体比（ＤＡＲ）を表す。当技術分野でよく知られているように、ＤＡＲおよび薬物負荷分布（ｄｒｕｇ  ｌｏａｄ  ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ）は、たとえば、疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）または逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）を用いて決定することができる。ＨＩＣは平均ＤＡＲを決定するのに特に適切である。
【００５３】
本発明により治療され得るヒト固形腫瘍の例は、乳癌、胃癌、膀胱癌、卵巣癌、肺癌、前立腺癌、膵臓癌、大腸癌、頭頸部扁平上皮癌、および骨肉腫、特に乳癌、胃癌、膀胱癌、卵巣癌、肺癌、および前立腺癌、より具体的には乳癌、胃癌、および膀胱癌である（Ｓ．Ｓｃｈｏｌｌら、２００１、Ａｎｎ．Ｏｎｃｏｌ．、１２（１）：Ｓ８１〜Ｓ８７も参照のこと）。本発明により治療され得る造血器腫瘍の例は、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）である。しかし、本発明の範囲は、これらの特定の例に限定されない。
【００５４】
１つの態様において、本発明は、乳癌、胃癌または膀胱癌、特に乳癌または胃癌、特に乳癌の治療において使用するための式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物を提供する。前記乳癌は、ホルモン受容体（ＥＲおよび／またはＰＲ）陽性または陰性のいずれか、有利にはＥＲおよびＰＲ陰性である。
【００５５】
別の態様において、本発明は、ＨＥＲ２の中等度または低い発現（すなわちＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋または１＋）を示すヒト固形腫瘍の治療において使用するための、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物を提供する。
【００５６】
さらなる態様において、本発明は、ＨＥＲ２遺伝子増幅がない（すなわちＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陰性）ヒト固形腫瘍の治療において使用するための、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物を提供する。
【００５７】
意外にも、本発明者らは、本発明のデュオカルマイシン含有ＡＤＣ化合物が、ＨＥＲ２の中等度もしくは低い発現（すなわちＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋または１＋）を有する、および／またはＨＥＲ２遺伝子増幅がない（すなわちＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陰性）ヒト固形腫瘍、特に乳癌および胃癌の治療に特に使用できることを見出した。トラスツズマブもＴ−ＤＭ１も、このような腫瘍を有する患者の治療に対する販売承認を得なかった。さらに、ここで以下に実施例および図に示されているように、Ｔ−ＤＭ１はこのような腫瘍において有効性を欠く。それ故、本発明のデュオカルマイシン含有ＡＤＣ化合物は、利用可能な現在のＨＥＲ２標的療法がない患者群の治療に使用され得る。ＷＯ２０１１／１３３０３９Ａの例１５においてＮ８７（すなわちＨＥＲ２  ＩＨＣ３＋胃腫瘍）異種移植片を有するマウスでテストされたデュオカルマイシン含有ＡＤＣ化合物は、１２ｍｇ／ｋｇの単回静注投与後に有効性を実際に示した。しかし、この文献では、３ｍｇ／ｋｇもの用量でも、より低グレードのＨＥＲ２発現腫瘍（すなわちＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋または１＋）および／またはＨＥＲ２遺伝子増幅がない（すなわちＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陰性）腫瘍でテストすることを当業者に示唆するものは何もなく、ましてやその有効性を見出すことも示唆されていない。
【００５８】
本発明者らは驚くべきことに、式（Ｉ）または（ＩＩ）のデュオカルマイシン含有ＡＤＣ化合物が、同じ用量で投与された場合のＴ−ＤＭ１（実施例および図を参照のこと）およびトラスツズマブと比較して、動物腫瘍モデルにおいて改善されたインビボ抗腫瘍活性を示すことをさらに見出した。特に、改善は、最も低いグレードのＨＥＲ２発現（すなわちＩＨＣ  ＨＥＲ２  １＋）を有する腫瘍モデル、特に（トリプル陰性）乳癌および胃癌で最も高いことが見出された。
【００５９】
本発明の有利な態様においてヒト固形腫瘍は、ＨＥＲ２遺伝子増幅がない（すなわちＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陰性）、中等度または低いＨＥＲ２発現（すなわちＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋または１＋）を示す乳癌または胃癌である。
【００６０】
本発明の特に有利な態様においてヒト固形腫瘍は、トリプルネガティブ乳癌（すなわちＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋または１＋、ＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陰性、およびＥＲおよびＰＲ陰性）である。
【００６１】
典型的には抗腫瘍活性は、（ヒト）腫瘍細胞株でインビトロで最初に評価され、この後にインビボでの評価が行われる。本発明の範囲内にあるＡＤＣの抗腫瘍活性は、動物モデル、典型的には、皮下異種移植片を有する免疫不全マウスで評価されることが有利である。異種移植片は、（ヒト）腫瘍細胞株または患者由来（原発）腫瘍のいずれかであってもよい。好ましくは動物モデルは、患者由来腫瘍異種移植片（ＰＤＸ）モデルである。
【００６２】
ＰＤＸモデルにおけるヒト腫瘍は、顕微鏡検査により評価された原発腫瘍の生物学的特性を保持する。ＰＤＸモデルは多くの学術機関で現在日常的に使用され、Ｊａｃｋｓｏｎ
Ｌａｂ（米国）、Ｏｎｃｏｔｅｓｔ（ドイツ）、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ（米国）、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ（米国）、Ｏｎｃｏｄｅｓｉｇｎ（フランス）、ＸｅｎＴｅｃｈ（フランス）、Ｃｈａｍｐｉｏｎｓ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ（米国）、およびＳｔａｒｔ（米国）を含む多数の医薬品開発業務受託機関（ＣＲＯ）により商業的に提供されている。多くは、異種移植片における原発ヒト腫瘍の特徴的な形態学的および免疫組織化学的特徴の保持を示した。生物学的特徴に関する密接な関係以外に、ＰＤＸモデルは治療的臨床転帰の極めて優れた予測値を有する。一般に、種々のソースからの報告は、療法への腫瘍の感受性と耐性の両方に関して、患者と比べてＰＤＸにおいて療法への反応の少なくとも９０％正しい再現を示すと言うことができると予想される（ウェブサイトＣｈａｍｐｉｏｎｓ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｈａｍｐｉｏｎｓｏｎｃｏｌｏｇｙ．ｃｏｍ／ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ−ｏｎｃｏｌｏｇｙ−ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ／ｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅ−ｖａｌｕｅ；Ｆｉｅｂｉｇら、１９８４、Ｂｅｈｒｉｎｇ  Ｉｎｓｔ．Ｍｉｔｔ．７４：３４３〜３５２；Ｈｉｄａｌｇｏら、２０１１、Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．１０：１３１１〜１３１６）。
【００６３】
本発明によれば、抗ＨＥＲ２抗体または抗体断片は、ＨＥＲ２を結合することができる任意の抗体または抗体断片、たとえば、トラスツズマブの相補性決定領域（ＣＤＲ）を有するＩｇＧ１抗体、またはトラスツズマブとの競合的結合を示す抗体であってもよい。好ましい抗体は、モノクローナル抗ＨＥＲ２抗体である。特に好ましいモノクローナル抗体は、トラスツズマブまたはこのバイオ後続品である。
【００６４】
本発明による式（Ｉ）および（ＩＩ）の抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）化合物は、システイン残基のＳ原子を通じて抗体にコンジュゲートされたリンカー−薬物を有する。すなわち該化合物は、システイン結合抗体−薬物コンジュゲートである。システイン残基は、抗体（Ａｂ）の重鎖および／もしくは軽鎖に存在し、鎖間ジスルフィド結合を形成する天然のシステイン残基、または重鎖および／もしくは軽鎖の１つ以上の適切な位置でＡｂに導入される操作されたシステイン残基のいずれかであってもよい。本発明は特に、リンカー−薬物がＡｂ、より具体的にはモノクローナルＡｂ（ｍＡｂ）の鎖間ジスルフィド結合を通じてコンジュゲートされるＡＤＣ化合物に惹かれる。異なる抗体クラスの抗体は、異なる数の鎖間ジスルフィド結合を含有する。たとえば、ＩｇＧ１抗体は典型的には４個の鎖間ジスルフィド結合を有し、４個全てがヒンジ領域に位置し、ジスルフィド結合の（部分的）還元後にリンカー−薬物が遊離チオール基にランダムに結合される。
【００６５】
本発明により使用するための式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物は、当業者によく知られた方法および手順に従って得ることができる。鎖間ジスルフィド結合を通じたコンジュゲーションは、前記ジスルフィド結合の完全または部分的還元後に生じ得る。このような化合物を調製するのに適した方法は、本出願人のＷＯ２０１１／１３３０３９Ａの説明および例に見出すことができる。特に、ＷＯ２０１１／１３３０３９Ａの例１５は、ｍＡｂ１個あたり２個の遊離チオール基を生成させるためのトラスツズマブの部分的還元、および約２の平均ＤＡＲを有するＡＤＣへの幾つかのリンカー−薬物とのコンジュゲーションを記載する。１から４の平均ＤＡＲを有するＡＤＣを得る方法は、当業者により容易に理解される。ＷＯ２００５／０８４３９０Ａの例７および８は、抗体にリンカー−薬物ｖｃＭＭＡＥを（部分的に）ローディングするための部分的還元、部分的還元／部分的再酸化、および完全還元戦略を記載する。
【００６６】
腫瘍組織のＩＨＣおよびＦＩＳＨ状態は、既知の検査、手順および装置を用いて決定される。本発明によればＨＥＲ２遺伝子増幅は、蛍光（ＦＩＳＨ）もしくは発色（ＣＩＳＨ）または任意の他のインサイチューハイブリダイゼーション検査のいずれかを用いて測定することができる。腫瘍組織のＨＥＲ２膜発現状態を決定するための適切な検査、たとえばＨｅｒｃｅｐＴｅｓｔ（商標）（Ｄａｋｏ  Ｄｅｎｍａｒｋ）が市販されている。さらにＨＥＲ２  ＩＨＣ検査は、Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（ＰＡＴＨＷＡＹ抗ＨＥＲ２／ｎｅｕ）、Ｂｉｏｇｅｎｅｘ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（ＩｎＳｉｔｅ（商標）ＨＥＲ２／ｎｅｕ）、およびＬｅｉｃａ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（Ｂｏｎｄ  Ｏｒａｃｌｅ（商標）ＨＥＲ２  ＩＨＣ）により販売されている。ＦＩＳＨ／ＣＩＳＨ検査は、Ａｂｂｏｔｔ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ（ＰａｔｈＶｙｓｉｏｎ  ＨＥＲ２  ＤＮＡ  Ｐｒｏｂｅ  Ｋｉｔ）、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（ＳＰＯＴ−Ｌｉｇｈｔ（登録商標）ＨＥＲ２  ＣＩＳＨ  Ｋｉｔ）、Ｄａｋｏ  Ｄｅｎｍａｒｋ（ＨＥＲ２  ＣＩＳＨ  ＰｈａｒｍＤｘ（商標）Ｋｉｔ）、Ｄａｋｏ  Ｄｅｎｍａｒｋ（ＨＥＲ２  ＦＩＳＨ  ＰｈａｒｍＤｘ（商標）Ｋｉｔ）、およびＶｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（ＩＮＦＯＲＭ  ＨＥＲ２  Ｄｕａｌ  ＩＳＨ  ＤＮＡ  Ｐｒｏｂｅ  Ｃｏｃｋｔａｉｌ）から入手することができる。ＦＩＳＨ陽性は、ＦＩＳＨ増幅比≧２．０を意味する（たとえばＤａｋｏ  ＨＥＲ２  ＦＩＳＨ  ＰｈａｒｍＤＸ（商標）検査キットを用いて）。ＦＩＳＨ陰性は、ＦＩＳＨ増幅比＜２．０を意味する。
【００６７】
本発明により有利に治療することができるＨＥＲ２発現腫瘍は、乳癌および胃癌、特に乳癌、最も具体的にはトリプルネガティブ乳癌である。意外にも本発明者らは、ここで以下に実施例および図に示されているように、本発明によるＡＤＣ化合物が、ＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋または１＋およびＦＩＳＨ陰性である乳癌ＰＤＸモデル、トリプルネガティブ乳癌ＰＤＸモデル、ＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋または１＋およびＦＩＳＨ陰性である胃癌ＰＤＸモデルにおいて特に有効であることを見出した。ＰＤＸモデルが、治療的臨床転帰の極めて優れた予測値を有する事実から見て、これらの知見は、現在、利用可能なこのような承認された治療選択肢がない乳癌および胃癌に、新たなＨＥＲ２標的治療選択肢を特に提供する。
【００６８】
本発明はまた、ＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍または造血器腫瘍を有する患者、特に、ここで上記に記載されたＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋または１＋および／またはＨＥＲ２
ＦＩＳＨ陰性であるヒト固形腫瘍を治療するための、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物の使用にも関する。
【００６９】
本発明はさらに、ＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍および造血器腫瘍、特にヒト固形腫瘍の治療、最も具体的にはトリプルネガティブ乳癌の治療のための、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物と治療的抗体および／または化学療法剤との組合せの使用に関する。
【００７０】
本発明の１つの態様において、治療的抗体は、ペルツズマブ、ベバシズマブ、ラムシルマブまたはトラスツズマブであり、化学療法剤は、ｉ）タキサン、特にドセタキセル、パクリタキセル、ナブパクリタキセル、もしくはカバジタキセル、ｉｉ）有糸分裂阻害剤、特にエリブリン、ビノレルビンまたはビンブラスチン、ｉｉｉ）ＤＮＡ傷害剤、特に５−フルオロ−ウラシル、カペシタビン、ゲムシタビン、テモゾロミド、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、シクロホスファミドまたはイホスファミド、ｉｖ）抗葉酸剤、特にペメトレキセドもしくはメトトレキサート、ｖ）アントラサイクリン、特にミトキサントロン、ドキソルビシン、リポソーマルドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシンまたはバルルビシン、より具体的にはドキソルビシン、ｖｉ）ｍＴＯＲ（ラパマイシンの哺乳類標的）阻害剤、特にテムシロリムスまたはエベロリムス、ｖｉｉ）トポイソメラーゼ阻害剤、特にイリノテカンまたはトポテカン、ｖｉｉｉ）チロシンキナーゼ阻害剤、特にゲフィチニブ、エルロチニブ、パゾパニブ、クリゾチニブ、ラパチニブもしくはアファチニブ、ｉｘ）アンドロゲン受容体調節剤、特にエンザルタミドまたは酢酸アビラテロン、ｘ）ステロイドホルモン、特にプレドニゾン、ｘｉ）ホルモン療法剤、特にタモキシフェン、ｘｉｉ）アロマターゼ阻害剤もしくはステロイド改変剤（ｓｔｅｒｏｉｄ
ｍｏｄｉｆｙｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、特にアナストロゾール、レトロゾール、フルベストラントもしくはエキセメスタン、またはｘｉｉｉ）ＰＡＲＰ阻害剤、特にオラパリブである。当業者は、ＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍および造血器腫瘍の治療において使用するための適切な併用療法を選択するのに何の困難もないと予想される。
【００７１】
本発明別の態様において、治療的抗体はペルツズマブであり、化学療法剤はタキサン、特にドセタキセルもしくはパクリタキセル、またはアントラサイクリンであり、特にドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシンもしくはバルルビシン、より具体的にはドキソルビシンである。
【００７２】
本発明はさらに、ＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍および造血器腫瘍、特にＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍を治療するための、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物と別のＡＤＣ、たとえばＴ−ＤＭ１との組合せの使用に関する。
【００７３】
本発明はさらに、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）の化合物、またはここで上記に記載された治療的抗体および／もしくはこの化学療法剤との組合せ、ならびに１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物に関する。
【００７４】
治療的タンパク質、たとえばモノクローナル抗体および（モノクローナル）抗体−薬物コンジュゲートの典型的な医薬製剤は、静脈内注入前に（水性）溶解（すなわち再構成）を必要とする凍結乾燥粉末またはケーキ、または使用前に解凍を必要とする凍結（水性）溶液の形態をとる。特に、本発明によれば医薬組成物は、凍結乾燥ケーキの形態で提供される。
【００７５】
本発明により（凍結乾燥前の）医薬組成物へ含めるための適切な薬学的に許容される賦形剤には、緩衝溶液（たとえば水中の塩を含有するクエン酸、ヒスチジンまたはコハク酸）、凍結保護剤（たとえばスクロース、トレハロース）、張度調節剤（たとえば塩化ナトリウム）、界面活性剤（たとえばポリソルベート）、および充填剤（たとえばマンニトール、グリシン）が含まれる。凍結乾燥タンパク質製剤に使用される賦形剤は、凍結乾燥プロセス中および保管中のタンパク質変性を防ぐ能力に関して選択される。
【００７６】
Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（商標）の滅菌凍結乾燥粉末複数回投与製剤は、４４０ｍｇトラスツズマブ、４００ｍｇ  α，α−トレハロース二水和物、９．９ｍｇ  Ｌ−ヒスチジンＨＣｌ、６．４ｍｇ  Ｌ−ヒスチジン、および１．８ｍｇポリソルベート２０、ＵＳＰを含有する。２０ｍｌの注射用静菌水または滅菌水（ＢＷＦＩまたはＳＷＦＩ）による再構成は、約６のｐＨで２１ｍｇ／ｍｌトラスツズマブを含有する複数回投与溶液をもたらす。
Ｋａｄｃｙｌａ（商標）の滅菌凍結乾燥粉末単回使用製剤は、再構成すると５．０のｐＨで２０ｍｇ／ｍｌアドトラスツズマブエムタンシン、０．０２％ｗ／ｖポリソルベート２０、１０ｍＭコハク酸ナトリウム、および６％ｗ／ｖスクロースを含有する。
【００７７】
本発明により使用するための式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物の治療的に有効な量は、約０．０１から約１５ｍｇ／ｋｇ体重の範囲、特に約０．１から約１０ｍｇ／ｋｇの範囲、より具体的には約０．３から約１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲にある。この後者の範囲は、ＡＤＣ化合物の２０から８００ｍｇの範囲の一定用量（ｆｌａｔ  ｄｏｓｅ）に大体相当する。本発明の化合物は、週１回、週２回、週３回または月１回、たとえば最初の１２週間は週１回、次いで疾患進行まで３週間ごとに投与される。代替治療レジメンは、疾患の重症度、患者の年齢、投与されている化合物、および治療医師により適当と見なされると予想される他の要因に応じて使用されていてもよい。
【００７８】
［実施例］
ＰＤＸ  ＨＥＲ２遺伝子増幅検査
ＨＥＲ２遺伝子の増幅は、Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（ＩＮＦＯＲＭ  ＨＥＲ２  Ｄｕａｌ  ＩＳＨ  ＤＮＡ  Ｐｒｏｂｅ  Ｃｏｃｋｔａｉｌ）またはＡｂｂｏｔｔ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ（ＰａｔｈＶｙｓｉｏｎ  ＨＥＲ２  ＤＮＡ  Ｐｒｏｂｅ  Ｋｉｔ）からのＦＤＡ承認検査を用いて、ホルマリン固定、パラフィン包埋ヒト乳癌組織標本でインサイチューハイブリダイゼーション（ＩＳＨ）により決定した。使用したプロトコルは、検査の供給者により詳述されている通りであった。
ＰＤＸ  ＨＥＲ２  ＩＨＣ染色
ホルマリン固定、パラフィン包埋腫瘍異種移植片試料の組織切片を調製した。ＨＥＲ２は適切なＡｂ、たとえばポリクローナルウサギ抗ヒトＨＥＲ２（ＤＡＫＯ  カタログ番号Ａ０４８５）抗体を用いて結合し、適切な二次Ａｂ、たとえばビオチニル化ヤギ抗ウサギＩｇＧ（ＪａｃｋｓｏｎＩｍｍｕｎｏ  ｒｅｓｅａｒｃｈ、カタログ番号１１１−０６５−０４）およびＢｉｏｚｏｌ（カタログ番号ＶＥＣ−ＰＫ−４０００）ＡＢＣキットにより検出した。染色を適切な顕微鏡で、たとえばＺｅｉｓｓ  Ａｘｉｏｖｅｒｔ  ３５顕微鏡を用いて半定量的に評価した。染色は、染色腫瘍細胞の数ならびに膜染色の完全性および強度に基づき、免疫反応性として解釈した。
０：腫瘍細胞の＜１０％が膜染色を示す。
１：腫瘍細胞の＞１０％が膜染色を示すが、表面の不完全染色。
２：腫瘍細胞の＞１０％が表面全体にわたって分布した弱いまたは中等度の膜染色を示す。
３：腫瘍細胞の＞３０％が表面全体にわたって分布した強い膜染色を示す。
【００７９】
既知のＨＥＲ２陽性（ＩＨＣ３＋）およびＨＥＲ２陰性（ＩＨＣ０）対照腫瘍スライドを、全てのＨＥＲ２染色手順に含めた。
ＰＤＸおよび細胞株由来異種移植動物試験
全ての動物試験は、地元の動物倫理委員会により承認され、動物実験の地元の倫理ガイドラインに従って行われた。専門的動物ブリーダー、たとえばＨａｒｌａｎまたはＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒからのメス免疫不全ｎｕ／ｎｕマウス（４〜６週齢）またはＳＣＩＤマウスを使用し、無作為化は、たとえばＣａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ＆Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  ４：１９７〜２１０、１９９７にＦｉｅｂｉｇらにより記載されているように、それぞれのＣＲＯの詳細なプロトコルに従って行った。
【００８０】
全ての乳房および胃ＰＤＸ試験は、ＳＹＤ９８５をＴ−ＤＭ１と付き合わせて検査しながら行った。この理由は、後者のＡＤＣはＨＥＲ２陽性転移性乳癌患者の治療に対して承認されており、ＨＥＲ２陽性胃癌でのＴ−ＤＭ１の承認は現在続行中のためである。他の適応症（膀胱および卵巣）での試験は、Ｔ−ＤＭ１がそれらの適応症における承認薬物でないため、ＳＹＤ９８５のみを用いて行った。マウスを、全ての乳房ＰＤＸモデル（図１〜６）においてビヒクル、３ｍｇ／ｋｇ  ＳＹＤ９８５または３ｍｇ／ｋｇ  Ｔ−ＤＭ１のいずれか、および全ての胃ＰＤＸモデル（図７〜１０）においてビヒクル、１０ｍｇ／ｋｇ  ＳＹＤ９８５または１０ｍｇ／ｋｇ  Ｔ−ＤＭ１のいずれかで治療した。マウスを、膀胱ＰＤＸモデル（図１１）においてビヒクルまたは１０ｍｇ／ｋｇ  ＳＹＤ９８５、および細胞株由来卵巣異種移植片モデル（図１２）においてビヒクルまたは１５ｍｇ／ｋｇ  ＳＹＤ９８３で治療した。全ての治療は、尾静脈への単回投与を静脈注射により０日目に行った。平均腫瘍体積±Ｓ．Ｄ．として示されたデータは、１実験群あたり６〜８匹からなる。体重および腫瘍サイズは週２回測定した。腫瘍体積は、カリパスで二次元測定により決定した。終了基準は、特に腫瘍体積＞２０００ｍｍ3または体重減少＞３０％を含んだ。個々の動物の腫瘍サイズは、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍを用いて処理した。
結果を図１から１２に示す。
ファーストインヒューマン臨床試験
抗体−薬物コンジュゲートＳＹＤ９８５（トラスツズマブｖｃ−ｓｅｃｏ−ＤＵＢＡ）を用いた２部のファーストインヒューマン第Ｉ相試験（拡大コホートによる）が、局所進行または転移性固形腫瘍患者における安全性、薬物動態および有効性を評価するために行われている（すなわちＮＣＴ０２２７７７１７）。第Ｉ部は、低用量のＳＹＤ９８５が３名の癌患者（任意の起源の固形腫瘍を有する女性または男性）に与えられる用量漸増パートである。これが良好な忍容性を示すならば、より高用量のＳＹＤ９８５が３名の他の癌患者に与えられる。これは、用量をさらに増加することがもはや安全でなくなるまで継続する。試験の第ＩＩ部では、特定のタイプの癌（乳房および胃腫瘍を含む）を有する幾つかの患者群がさらなる開発のために選択されたＳＹＤ９８５用量を受け取る。試験の両方のパートからの全ての患者（合計７６名の患者が登録されると推定されている）は、癌の進行までまたは許容できない毒性が発生するまで、３週間ごとにＳＹＤ９８５（静脈内）注入を受ける。
【図１】
2018039809.tif 000018
【図２】
2018039809.tif 000019
【図３】
2018039809.tif 000020
【図４】
2018039809.tif 000021
【図５】
2018039809.tif 000022
【図６】
2018039809.tif 000023
【図７】
2018039809.tif 000024
【図８】
2018039809.tif 000025
【図９】
2018039809.tif 000026
【図１０】
2018039809.tif 000027
【図１１】
2018039809.tif 000028
【図１２】
2018039809.tif 000029
【手続補正書】
【提出日】平成29年11月30日(2017.11.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2018039809.tif 000030
の化合物と１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む、ＨＥＲ２を発現しているヒト膀胱癌を治療するための医薬組成物。
（式中、
抗ＨＥＲ２  Ａｂは抗ＨＥＲ２抗体または抗体断片であり、
ｎは０〜３であり、
ｍは１から４の平均ＤＡＲを表し、
Ｒ1は
【化２】
2018039809.tif 000031
（ｙは１〜１６である）から選択され、
Ｒ2は
【化３】
2018039809.tif 000032
から選択される）。
【請求項２】
抗ＨＥＲ２  Ａｂは抗ＨＥＲ２抗体または抗体断片であり、
ｎは０〜１であり、
ｍは１から４の平均ＤＡＲを表し、
Ｒ1は
【化４】
2018039809.tif 000033
（ｙは１〜１６である）から選択され、
Ｒ2は
【化５】
2018039809.tif 000034
から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
式（ＩＩ）
【化６】
2018039809.tif 000035
の化合物を含む、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
式（ＩＩ）の化合物が２．６〜２．９の平均ＤＡＲを有する、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
膀胱癌がＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋または１＋である、請求項１から４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
膀胱癌がＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陰性である、請求項１から５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
治療的抗体および／または化学療法剤と組合せて使用するための、請求項１から６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
治療的抗体がペルツズマブであり、化学療法剤がタキサン、アントラサイクリン、またはチロシンキナーゼ阻害剤である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
凍結乾燥粉末または凍結溶液の形態の、請求項１から８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８０】
全ての乳房および胃ＰＤＸ試験は、ＳＹＤ９８５をＴ−ＤＭ１と付き合わせて検査しながら行った。この理由は、後者のＡＤＣはＨＥＲ２陽性転移性乳癌患者の治療に対して承認されており、ＨＥＲ２陽性胃癌でのＴ−ＤＭ１の承認は現在続行中のためである。他の適応症（膀胱および卵巣）での試験は、Ｔ−ＤＭ１がそれらの適応症における承認薬物でないため、ＳＹＤ９８５のみを用いて行った。マウスを、全ての乳房ＰＤＸモデル（図１〜６）においてビヒクル、３ｍｇ／ｋｇ  ＳＹＤ９８５または３ｍｇ／ｋｇ  Ｔ−ＤＭ１のいずれか、および全ての胃ＰＤＸモデル（図７〜１０）においてビヒクル、１０ｍｇ／ｋｇ  ＳＹＤ９８５または１０ｍｇ／ｋｇ  Ｔ−ＤＭ１のいずれかで治療した。マウスを、膀胱ＰＤＸモデル（図１１）においてビヒクルまたは１０ｍｇ／ｋｇ  ＳＹＤ９８５、および細胞株由来卵巣異種移植片モデル（図１２）においてビヒクルまたは１５ｍｇ／ｋｇ  ＳＹＤ９８３で治療した。全ての治療は、尾静脈への単回投与を静脈注射により０日目に行った。平均腫瘍体積±Ｓ．Ｄ．として示されたデータは、１実験群あたり６〜８匹からなる。体重および腫瘍サイズは週２回測定した。腫瘍体積は、カリパスで二次元測定により決定した。終了基準は、特に腫瘍体積＞２０００ｍｍ3または体重減少＞３０％を含んだ。個々の動物の腫瘍サイズは、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍを用いて処理した。
結果を図１から１２に示す。
ファーストインヒューマン臨床試験
抗体−薬物コンジュゲートＳＹＤ９８５（トラスツズマブｖｃ−ｓｅｃｏ−ＤＵＢＡ）を用いた２部のファーストインヒューマン第Ｉ相試験（拡大コホートによる）が、局所進行または転移性固形腫瘍患者における安全性、薬物動態および有効性を評価するために行われている（すなわちＮＣＴ０２２７７７１７）。第Ｉ部は、低用量のＳＹＤ９８５が３名の癌患者（任意の起源の固形腫瘍を有する女性または男性）に与えられる用量漸増パートである。これが良好な忍容性を示すならば、より高用量のＳＹＤ９８５が３名の他の癌患者に与えられる。これは、用量をさらに増加することがもはや安全でなくなるまで継続する。試験の第ＩＩ部では、特定のタイプの癌（乳房および胃腫瘍を含む）を有する幾つかの患者群がさらなる開発のために選択されたＳＹＤ９８５用量を受け取る。試験の両方のパートからの全ての患者（合計７６名の患者が登録されると推定されている）は、癌の進行までまたは許容できない毒性が発生するまで、３週間ごとにＳＹＤ９８５（静脈内）注入を受ける。
以下に、当初の特許請求の範囲に記載していた発明を付記する。
［１］
ＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍および造血器腫瘍の治療において使用するための、式（Ｉ）
【化１１】
2018039809.tif 000036
（式中、
抗ＨＥＲ２  Ａｂは抗ＨＥＲ２抗体または抗体断片であり、
ｎは０〜３であり、
ｍは１から４の平均ＤＡＲを表し、
Ｒ1は
【化１２】
2018039809.tif 000037
（ｙは１〜１６である）から選択され、
Ｒ2は
【化１３】
2018039809.tif 000038
から選択される）の化合物。
［２］
抗ＨＥＲ２  Ａｂは抗ＨＥＲ２抗体または抗体断片であり、
ｎは０〜１であり、
ｍは１から４の平均ＤＡＲを表し、
Ｒ1は
【化１４】
2018039809.tif 000039
（ｙは１〜１６である）から選択され、
Ｒ2は
【化１５】
2018039809.tif 000040
から選択される、［１］に記載の使用のための化合物。
［３］
式（ＩＩ）
【化１６】
2018039809.tif 000041
の、［１］または［２］に記載の使用のための化合物。
［４］
ヒト固形腫瘍の治療において使用するための、［１］から［３］のいずれか一に記載の使用のための化合物。
［５］
ＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍が乳癌、胃癌、膀胱癌、卵巣癌、肺癌、前立腺癌、膵臓癌、大腸癌、頭頸部扁平上皮癌または骨肉腫であり、造血器腫瘍が急性リンパ芽球性白血病である、［１］から［４］のいずれか一に記載の使用のための化合物。
［６］
ＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍が乳癌または胃癌である、［１］から［５］のいずれか一に記載の使用のための化合物。
［７］
乳癌がホルモン受容体陽性または陰性である、［１］から［６］のいずれか一に記載の使用のための化合物。
［８］
ヒト固形腫瘍がＨＥＲ２  ＩＨＣ２＋または１＋である、［１］から［７］のいずれか一に記載の使用のための化合物。
［９］
ヒト固形腫瘍がＨＥＲ２  ＦＩＳＨ陰性である、［１］から［８］のいずれか一に記載の使用のための化合物。
［１０］
ヒト固形腫瘍がトリプルネガティブ乳癌である、［１］から［９］のいずれか一に記載の使用のための化合物。
［１１］
ＨＥＲ２を発現しているヒト固形腫瘍および造血器腫瘍の治療において使用するための、［１］から［１０］のいずれか一に記載の使用のための化合物と治療的抗体および／または化学療法剤との組合せ。
［１２］
乳癌、特にトリプルネガティブ乳癌の治療において使用するための、［１１］に記載の使用のための組合せ。
［１３］
治療的抗体がペルツズマブであり、化学療法剤がタキサン、特にドセタキセルもしくはパクリタキセル、またはアントラサイクリンであり、特にドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシンもしくはバルルビシンである、［１１］または［１２］に記載の使用のための組合せ。
［１４］
［１］から［１０］のいずれか一に記載の使用のための化合物、または［１１］から［１３］のいずれか一に記載の使用のための組合せ、および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
［１５］
凍結乾燥粉末または凍結溶液の形態の、［１４］に記載の医薬組成物。
【外国語明細書】
2018039809000001.pdf