(57)【要約】【課題】新規なコレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌促進用組成物を提供する。【解決手段】本発明は、ホップ酸化反応産物を含む、コレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌促進用組成物を提供する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ホップ酸化反応産物を含んでなる、コレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌促進用組成物。
【請求項２】
前記ホップ酸化反応産物が熟成ホップ苦味酸（ＭＨＢＡ）を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記ホップ酸化反応産物における熟成ホップ苦味酸（ＭＨＢＡ）の含有量が０．１〜９８質量％である、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記ホップ酸化反応産物が、酸化処理に付したホップの抽出物の形態である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記組成物が飲食品である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記組成物がビールテイスト飲料である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
食欲調節のための、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
インスリン分泌促進のための、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
糖尿病改善のための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
ホップ酸化反応産物を組成物中に配合することを含んでなる、コレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌促進用組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なコレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌促進用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＧＬＰ−１（グルカゴン様ペプチド−１：Glucagon-like peptide-1）は、消化管粘膜上皮の内分泌細胞（Ｌ細胞）で産生されるホルモンである。ＧＬＰ−１は様々な生理活性を有することが知られている。例えば、ＧＬＰ−１は満腹感の増強、食欲や摂食量の抑制等の作用を有することが知られている。さらに、ＧＬＰ−１は、糖代謝に重要な役割を果たしているインクレチン（incretin: Intestine Secretion Insulin）作用を備えており、インスリン分泌を促進させることが知られている（非特許文献１）。
【０００３】
コレシストキニン（以下、ＣＣＫともいう）は、十二指腸や空腸のＩ細胞で産生されるホルモンである。コレシストキニンもまた、満腹感の増強、食欲の調節や摂食量の抑制等の作用を有することが知られている（非特許文献１）。
【０００４】
一方、ビール中の苦味成分の起源であるホップは、古くから民間薬として用いられており、鎮静効果等の様々な作用が知られている。さらに、上記ホップ由来成分の強烈な苦味を低減また抑制するために、ホップを酸化処理して反応産物を得ることが知られている（特許文献１）。
【０００５】
しかしながら、ホップ酸化反応産物と、コレシストキニンまたはＧＬＰ−１の分泌促進との関係については何ら報告されていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Chaudhri O. et al., Gastrointestinal hormones regulating appetite, Phil. Trans. R. Soc. B (2006) 361, p.1187-1209
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特許第５９８０６８７号公報
【発明の概要】
【０００８】
本発明は、コレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌を効果的に促進させる新たな技術的手段を提供することを目的とする。
【０００９】
本発明者らは、今般、ホップ酸化反応産物が、コレシストキニンおよびＧＬＰ−１の分泌を効果的に促進しうることを見出した。本発明は、かかる知見に基づくものである。
【００１０】
本発明によれば、以下の発明が提供される。
（１）  ホップ酸化反応産物を含んでなる、コレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌促進用組成物。
（２）  前記ホップ酸化反応産物が熟成ホップ苦味酸（ＭＨＢＡ）を含む、（１）に記載の組成物。
（３）  前記ホップ酸化反応産物における熟成ホップ苦味酸（ＭＨＢＡ）の含有量が０．１〜９８質量％である、（１）または（２）に記載の組成物。
（４）前記ホップ酸化反応産物が、酸化処理に付したホップの抽出物の形態である、（１）〜（３）のいずれか一項に記載の組成物。
（５）  前記組成物が飲食品である、（１）〜（４）のいずれかに記載の組成物。
（６）  前記組成物がビールテイスト飲料である、（１）〜（５）のいずれかに記載の組成物。
（７）  食欲調節のための、（１）〜（６）のいずれかに記載の組成物。
（８）  インスリン分泌促進のための、（１）〜（６）のいずれかに記載の組成物。
（９）  糖尿病改善のための、（１）〜（８）のいずれかに記載の組成物。
（１０）  ホップ酸化反応産物を組成物中に配合することを含んでなる、コレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌促進用組成物の製造方法。
【００１１】
本発明によれば、コレシストキニンまたはＧＬＰ−１の分泌を効果的に促進させることができる。したがって、本発明の組成物は、食欲の調節において有利に利用することができる。また、本発明の組成物は、インスリン分泌の促進、または糖尿病の改善において有利に利用できる。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】試験サンプル（抽出物）添加群および対照試薬添加群における、ＳＴＣ−１細胞のコレシストキニンの分泌量およびＧＬＰ−１の分泌量の測定結果を示すグラフである。
【発明の具体的説明】
【００１３】
ホップ酸化反応産物
本発明において、ホップ酸化反応産物とは、ホップまたはその加工物（ホップペレット等）を酸化処理して得られるものをいう。本発明のホップ酸化反応産物は、ホップを空気中の酸素に接触させて酸化することにより得ることができる。本発明における酸化処理方法は、特に限定されるものではないが、ホップを空気中で加熱することが好ましい。
【００１４】
本発明の酸化処理方法における加熱温度は、特に限定されないが、好ましい上限は１００℃であり、より好ましい上限は８０℃である。加熱温度を１００℃以下とする場合には異性化よりも酸化を優先的に進行させる上で有利である。また、好ましい加熱温度の下限は４０℃であるが、室温および低温で酸化させてもよい。より好ましい加熱温度の下限は６０℃である。加熱温度を６０℃以上とする場合には酸化反応を効率的に進行させる上で有利である。また、反応時間も特に限定されるものではなく、ホップの品種や反応温度により適宜決定することができる。本発明の酸化処理方法は、例えば、６０〜８０℃、８〜１２０時間の条件下で行うことができ、６０℃であれば４８〜１２０時間、８０℃であれば８〜２４時間が好ましい。さらにホップの形態は空気中の酸素と接触できれば特に限定されるものではないが、好ましくは粉末状にすることにより、反応時間を短縮できる。また、高湿の環境下で保管してもよい。
【００１５】
また、本発明においてホップ（Humulus lupulus L.）は、ルプリン部を含有するものであれば任意の形態のものでよく、収穫して乾燥させる前のもの、収穫して乾燥したもの、圧縮したもの、粉砕したもの、またはペレット状に加工したもの等用いてもよいが、好ましくはホップペレットの形態である。ホップペレットは、市販品を使用してもよく、例えば、ホップ毬花を圧縮しペレット状にしたもの（Type90ペレット）、ルプリン部分が選択的に濃縮されたペレット（Type45ペレット）、または異性化処理したホップペレット（例えば、Isomerized Pellets (hopsteiner社)）等が挙げられる。
【００１６】
ホップの品種は、特に限定されるものではないが、例えば、ギャラクシー（Galaxy）、ザーツ（Saaz）、カスケード（Cascade）、ハラタウトラディッション（Hallertau Tradition）、ブリオン（Bullion）、ブリューワーズゴールド（Brewers Gold）、チヌーク（Chinook）、クラスター（Cluster）、イーストケントゴールディング（East Kent Golding）、ファグルス（Fuggles）、ハラタウ（Hallertau）、マウントフッド（Mount Hood）、ノーザンブリューワー（Northan Brewer）、ペルレ（Perle）、スティリアン（Styrian）、ターゲット（Target）、テットナンガー（Tettnanger）、ウィラメット（Willamette）、ヘルスブルッカー（Hersbrucker）、ブラボー（Bravo）、コロンブス（Columbus）、ヘラクレス（Herkules）、マグナム（Magnum）、ミレニアム（Millennium）、ナゲット（Nugget）、サミット（Summit）、トマホーク（Tomahawk）、ウォリアー（Warrior）、ゼウス（Zeus）、ハラタウペルレ（Hallertau Perle）等が挙げられ、原料の安定供給の観点からは、比較的安価なビター品種であることが好ましく、具体的な例としては、ブラボー（Bravo）、コロンブス（Columbus）、ヘラクレス（Herkules）、マグナム（Magnum）、ミレニアム（Millennium）、ナゲット（Nugget）、サミット（Summit）、トマホーク（Tomahawk）、ウォリアー（Warrior）、ゼウス（Zeus）等が挙げられる。
【００１７】
ホップには、α酸（フムロン類）、β酸（ルプロン類）、イソα酸（イソフムロン類）等の樹脂由来の苦味成分が含まれている。本発明において「α酸（フムロン類）」は、フムロン、アドフムロン、コフムロン、ポストフムロン、およびプレフムロンを含む意味で用いられる。また、本発明において「β酸（ルプロン類）」はルプロン、アドルプロン、コルプロン、ポストルプロン及びプレルプロンを含む意味で用いられる。さらに、本発明において「イソα酸（イソフムロン類）」は、イソフムロン、イソアドフムロン、イソコフムロン、イソポストフムロン、イソプレフムロン、Rho-イソフムロン、Rho-イソアドフムロン、Rho-イソコフムロン、Rho-イソポストフムロン、Rho-イソプレフムロン、テトラハイドロイソフムロン、テトラハイドロイソアドフムロン、テトラハイドロイソコフムロン、テトラハイドロイソプレフムロン、テトラハイドロイソポストフムロン、ヘキサハイドロイソフムロン、ヘキサハイドロイソアドフムロン、ヘキサハイドロイソコフムロン、ヘキサハイドロイソポストフムロン、ヘキサハイドロイソプレフムロンを含む意味で用いられる。なお、イソα酸にはシスおよびトランス立体異性体が存在するが、特に断りがない限りその両者を含む意味で用いられる。
【００１８】
また、本発明のホップ酸化反応産物は、α酸、β酸、イソα酸等の苦味成分の酸化物である熟成ホップ苦味酸（matured hop bitter acids；ＭＨＢＡ）を高レベルで含有することが好ましい。ＭＨＢＡはα酸、β酸、イソα酸等に比較し、非常に苦味が低くかつ健康機能性効果を有しており（特許第５９８０６８７号公報、Biosci. Biotech. Biochem. 2015;79:1684-1694.）、ホップ酸化反応産物に健康機能を付与する上で有利である。かかるＭＨＢＡを構成する成分の好適な例としては、以下の式（１a-c）〜（8a-c）に記載の化合物を挙げることができる。したがって、本発明のホップ酸化反応産物は、以下の式（１a-c）〜（8a-c）から選択される少なくとも一つまたは全部の化合物を含むことが好ましい。ＭＨＢＡの定量は、後述する試験例１に記載の方法に従い実施することができる。
【００１９】
【化１】
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【００２０】
本発明のホップ酸化反応産物におけるＭＨＢＡの含有量について、ホップ酸化反応産物全体の乾燥質量に対して、好適な下限は、０．１質量％、０．５質量％または１質量％とすることができ、好適な上限は、１５質量％、２０質量％、３０質量％、５０質量％、７０質量％、９０質量％、９６質量％または９８質量％とすることができる。また、本発明のホップ酸化反応産物におけるＭＨＢＡの含有量の範囲は、例えば、０．１〜９８質量％であり、より好ましくは０．１〜９０質量％であり、さらに好ましくは０．１〜７０質量％であり、さらに好ましくは０．１〜３０質量％であり、さらに好ましくは１〜２０質量％である。
【００２１】
また、本発明のホップ酸化反応産物においては、ホップを酸化処理に付すことにより、α酸、β酸、イソα酸の含有量が低減される。本発明のホップ酸化反応産物の苦味成分の含有量の範囲は、ホップ全体の乾燥質量に対するα酸、β酸およびイソα酸の合計含有量に換算する場合、好適な下限は、０．０１質量％、０．０２質量％、０．０５質量％、または０．１質量％とすることができ、好適な上限は、０．５質量％、１質量％、５質量％、または１０質量％とすることができる。本発明のホップ酸化反応産物の苦味成分の含有量の範囲は、上記換算値として、例えば、０．０１〜５質量％であり、好ましくは０．０５〜５質量％であり、より好ましくは０．１〜１質量％である。かかる苦味成分の含有量は、後述する試験例１に記載の手法に従い、α酸、β酸およびイソα酸の合計含有量に換算して決定することができる。
【００２２】
また、苦味の低減と健康機能付与の両立の観点からは、ホップ酸化反応産物におけるＭＨＢＡの含有量は、苦味成分（α酸、β酸およびイソα酸の合計量）に対して、好ましくは等量以上であり、より好ましくは４倍以上であり、さらに好ましくは５０倍以上であり、さらに好ましくは９０倍以上であり、さらに好ましくは１００倍以上である。
【００２３】
本発明のホップ酸化反応産物は水あるいは各種有機媒体等を含む溶媒による抽出や、超臨界二酸化炭素等を用いる超臨界抽出に供して得られる抽出物として利用することが可能であり、本発明は、かかる態様も包含する。上記抽出は当該ホップ酸化反応産物の不快臭をさらに低減する臭気除去の観点から好ましい。したがって、本発明のホップ酸化反応産物は、好ましくは酸化処理に付したホップの抽出物の形態とされる。
有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロパノール、およびブタノール等の炭素数１〜４の低級アルコ−ル；酢酸エチルエステル等の低級アルキルエステル；エチレングリコール、ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等のグリコール類；その他アセトン、酢酸等の極性溶媒；ベンゼンやヘキサン等の炭化水素；エチルエーテルや石油エーテル等のエーテル類等の非極性溶媒等が挙げられる。臭気除去を勘案すれば、好ましくは水性媒体であり、より好ましくは、水、極性有機溶媒またはそれらの混合物等の含水性有機溶媒であり、さらに好ましくは水である。抽出温度は特に限定されないが、臭気除去の場合、好ましくは６０℃以下であり、抽出効率を勘案すれば、５０〜６０℃がより好ましい。抽出されたホップの酸化反応産物は、さらに不溶性成分をろ紙等で除去し、濃縮してもよい。また、上記抽出物は、ＭＨＢＡの濃度を高めるために、上記溶媒抽出および／または超臨界抽出と併せて、または、上記溶媒抽出および／または超臨界抽出とは別に、抽出時および／または抽出後の抽出物に対し、吸着剤、ろ過助剤またはそれらの組み合わせによる接触処理を行ってもよい。ここで、吸着剤としては、合成吸着剤、活性炭、ゼオライトが挙げられ、好ましくは、活性炭である。また、ろ過助剤としては、ポリビニルポリピロリドン、珪藻土、シリカゲル、セルロースパウダーが挙げられ、好ましくは、ポリビニルポリピロリドンである。上記接触処理の後、さらに、ジクロロメタン等の有機溶媒による抽出を行ってもよい。抽出物とすることにより本発明のホップ酸化反応産物が高濃度で利用可能となるほか、保存時の安定性が増すこと等から有利である。
【００２４】
また、本発明の組成物は、上記ホップ酸化反応産物と共に、所望により経口上許容可能な添加剤を配合した組成物として提供することができる。経口上許容可能な添加剤として、水等の水性媒体、溶剤、溶解補助剤、滑沢剤、乳化剤、等張化剤、安定化剤、保存剤、防腐剤、界面活性剤、調整剤、キレート剤、ｐＨ調整剤、緩衝剤、賦形剤、増粘剤、酸化防止剤、酸味料、強化剤、製造用剤、着色剤、芳香剤、香料等が挙げられる。
【００２５】
また、本発明の組成物の形態は、本発明の効果を妨げない限り、特に制限されず、固形状、半固形状または液状であってもよいが、液状であることが好ましい。
【００２６】
本発明の組成物中のホップ酸化反応産物の含有量は、特に限定されず、組成物における他の成分や、供給源の種類および性質に応じて当業者が適宜決定することができる。例えば、組成物全量に対して、ホップ酸化反応産物の乾燥重量基準で、０．０１〜０．１５質量％である。
【００２７】
本発明の組成物中のＭＨＢＡの含有量は、特に限定されず、組成物における他の成分や、供給源の種類および性質に応じて当業者が適宜決定することができる。例えば、ホップ酸化反応産物と他の成分を１：１００の割合で混合した場合、本発明の組成物におけるＭＨＢＡの含有量は、組成物全量に対して、ＭＨＢＡの乾燥重量基準で、例えば、０．００１〜０．９８質量％であり、好ましくは０．００１〜０．３質量％であり、より好ましくは０．０１〜０．２質量％である。また、本発明の組成物における苦味成分（α酸、β酸およびイソα酸）の含有量は、組成物全量に対して、α酸、β酸およびイソα酸の乾燥重量基準で、例えば、０．０００１〜０．０５質量％であり、好ましくは０．０００５〜０．０５質量％であり、より好ましくは０．００１〜０．０１質量％である。
【００２８】
本発明の組成物は、上記のホップ酸化反応産物を含む各成分を混合、溶解、分散、懸濁する等の公知の手法により、調製することができる。また、本発明の組成物の調製においては、本発明の効果を妨げない限り、上記の各成分の混合物、溶解物、分散物、懸濁物等に、均質化処理や殺菌処理を施してもよい。
【００２９】
本発明のホップ酸化反応産物を組成物に配合させる工程では、ホップ酸化反応産物を製造工程中のいずれの段階で配合しても良い。具体的には、ホップ酸化反応産物を、最終的に混合して組成物としても、組成物の製造工程前および製造工程中に混合しても、製造工程中で酸化処理に付したホップを直接抽出してもよく、組成物の製造工程には加熱工程（例えば、煮込み工程）を含んでいてもよい。また、本発明のホップ酸化反応産物は、摂食時直前に他の成分と混合してもよい。さらに、本発明のホップ酸化反応産物を２回以上に分けて、他の成分と混合してもよい。
【００３０】
また、ホップ酸化反応産物を組成物に配合させる手法としては、本発明のホップ酸化反応産物を他の成分に加えてもよいし、他の成分を本発明のホップ酸化反応産物に加えてもよく、または、本発明のホップ酸化反応産物とその他の成分とを混合して用いてもよい。他の成分を本発明のホップ酸化反応産物に加えるとは、例えば、本発明のホップ酸化反応産物が既に存在する容器等に、他の成分を加える態様も含まれる。
【００３１】
本発明の組成物としては、食品もしくは飲料等の飲食品、飲食品添加物、飼料、医薬品、医薬部外品、サプリメント、または化粧料の提供が挙げられ、摂取の簡便性、風味の観点から飲料が好ましい。ここで、本発明における飲食品は、特定保健用食品または機能性表示食品を含む機能性食品、健康食品、病者用食品を含む。
【００３２】
本発明の飲食品は、本発明の組成物をそのまま飲食品として調製したもの、各種タンパク質、糖類、脂肪、微量元素、ビタミン類等を更に配合したもの、液状、半液体状若しくは固体状にしたもの、カリウム塩、ナトリウム塩等の水溶液状にしたもの、一般の飲食品へ添加したものであってもよい。本発明の酸化反応産物はフムロン類やイソフムロン類のような強烈な苦味を有さないことから、苦味をマスキングするための手段を講じずに、あるいは既存のマスキング手段を用いて苦味を十分にマスキングした状態で所定の生理作用が期待される飲食品とすることができる点で有利である。
【００３３】
かかる飲食品として具体的には、飯類、麺類、パン類およびパスタ類等炭水化物含有飲食品；クッキーやケーキ等の洋菓子類、饅頭や羊羹等の和菓子類、キャンディー類、ガム類、ヨーグルトやプリン等の冷菓や氷菓等の各種菓子類；ウイスキー、バーボン、スピリッツ、リキュール、ワイン、果実酒、日本酒、中国酒、焼酎、ビール、アルコール度数１％以下のノンアルコールビール、発泡酒、その他雑酒、酎ハイ等のアルコール飲料；ビールテイスト飲料；果汁入り飲料、野菜汁入り飲料、果汁および野菜汁入り飲料、サイダー、ラムネ飲料、コーラ飲料等の炭酸飲料、清涼飲料水、牛乳、豆乳、乳飲料、ドリンクタイプのヨーグルト、ドリンクタイプのゼリー、コーヒー、ココア、茶飲料、栄養ドリンク、スポーツ飲料、ミネラルウォーター等の非アルコール飲料；卵を用いた加工品、魚介類（イカ、タコ、貝、ウナギ等）や畜肉（レバー等の臓物を含む）の加工品（珍味を含む）等を例示することができるが、これらに限定されるものではない。本発明の好ましい態様としては、かかる飲食品はビールテイスト飲料とされ、例えば、ビール、発泡酒、その他雑酒、アルコール度数１％以下のノンアルコールビールであり、より好ましくは、アルコール度数１％以下のノンアルコールビールである。
【００３４】
本発明の組成物の摂取量または投与量は、対象、対象の年齢および体重、症状、摂取または投与時間、組成物の形態、摂取または投与方法、他の薬剤の組み合わせ等に依存して決定できる。また、本発明の組成物は、コレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌促進のための有効量となるように、１日の経口摂取量単位の形態から構成されることが好ましい。例えば、本発明の組成物を経口摂取する場合、体重６０ｋｇの成人１人１日当たりＭＨＢＡが１０〜６００ｍｇ、好ましくは２０〜２００ｍｇの範囲の摂取量となるよう本発明の酸化反応産物を組成物に配合することができる。本発明の酸化反応産物と組み合わせて用いる他の作用機序を有する薬剤も、それぞれ臨床上用いられる用量を基準として適宜決定できる。
【００３５】
また、本発明の組成物は、包装形態で提供することが好ましい。包装形態としては、特に限定されず、パックや容器等が挙げられる。この場合、使用される容器は、例えば、ポリエチレンテレフタレートを主成分とする成形容器や金属缶、瓶等の通常の形態で提供することができる。ここで、本発明の組成物が液状の場合、容器詰とすることにより、例えば、希釈せずに飲用できる。また、包装の表面には、成分の表示、用量や用法の表示等を付していてもよいし、コレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌を促進させる、食欲または摂食量を調節する等の具体的な機能の表示等を付していてもよい。ここで、表示は、本発明の組成物自体に付したものであってもよいし、本発明の組成物を含有する容器、包装材または添付文書に付したものであってもよい。また、表示は、本発明の組成物の関連する情報として、チラシ、パンフレット、ポップ、カタログ、ポスター、書籍、ＤＶＤ等の記憶媒体、電子掲示板やインターネット等での広告等で、本発明の組成物が効果的であることを表示・広告するものであってもよい。
【００３６】
本発明のコレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌促進用組成物は、満腹感の増強、食欲または摂食量の抑制等の、食欲または摂食量の調節ができる。したがって、本発明の好ましい態様によれば、食欲もしくは摂食量の調節用組成物、または、満腹感の増強用もしくは、食欲もしくは摂食量の抑制用組成物が提供される。
【００３７】
また、本発明の組成物は、インスリン分泌を促進することができ、または糖尿病を改善させることができる。したがって、本発明の好ましい別の態様によれば、本発明の組成物は、インスリン分泌促進用組成物または糖尿病改善用組成物として提供される。本明細書において、「改善」とは、確立された病態の改善という「治療」の意味を含むだけでなく、想定される悪化に対して事前に備え、疾患の発生を未然に防ぐ「予防」の意味も含む。また、好ましい別の態様によれば、本発明の組成物は、血糖値低下用組成物として提供される。
【００３８】
また、本発明の別の態様によれば、コレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌の促進方法であって、それを必要とする対象にホップ酸化反応産物の有効量を服用（好ましくは、摂取）させることを含んでなる方法が提供される。ここで、「有効量」とは、１日の経口摂取量の単位における、ＭＨＢＡの含有量等と同様に設定することができる。また、本発明の好ましい別の態様によれば、上記消化管ホルモンの分泌の促進方法は、食欲もしくは摂食量の調節方法、または、満腹感の増強方法もしくは、食欲もしくは摂食量の抑制方法である。また、本発明の好ましい別の態様によれば、上記消化管ホルモンの分泌の促進方法は、インスリン分泌の促進方法、または糖尿病の改善方法である。また、好ましい別の態様によれば、上記消化管ホルモンの分泌の促進方法は血糖値の低下方法である。さらに、一つの態様によれば、本発明の方法は、ヒトに対する医療行為を除くものである。ここで、ヒトに対する医療行為とは、医師等の処方を必要として、ヒトに対して医薬品を摂取させる（投与する）行為等を意味する。
【００３９】
本発明の摂取の方法は、本発明の効果を妨げない限り、特に限定されないが、好ましくは、経口摂取、経管摂取（経鼻摂取、胃ろう等）等の非経口摂取が挙げられ、より好ましくは、経口摂取である。
【００４０】
本発明の摂取の用法は、本発明の効果を妨げない限り、対象の種類、年齢、性別、症状に応じて、当業者が適宜設定することができる。また、本発明の１日の摂取量は、１回で対象に摂取させてもよく、複数回で対象に摂取させてもよいが、好ましくは、１回で対象に摂取させることである。したがって、本発明の１日の摂取回数は、１日に１〜５回であり、好ましくは、１日に１〜３回であり、より好ましくは、１日に１回である。
【００４１】
本発明の対象は、本発明の効果を妨げない限り、特に限定されないが、哺乳動物（例えば、ヒト、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ブタ、サル等）であり、好ましくはヒトであり、さらに好ましくは、健常者である。本発明の組成物は、人類が飲食品として長年摂取してきたホップを原料とするものであり、毒性も低く、それを必要とする哺乳動物に対し安全に用いることができる。
【００４２】
また、本発明の別の態様によれば、コレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌促進用組成物の製造における、ホップ酸化反応産物の使用が提供される。また、本発明の好ましい態様によれば、食欲もしくは摂食量の調節用組成物、または、満腹感の増強用もしくは、食欲もしくは摂食量の抑制用組成物の製造における、ホップ酸化反応産物の使用が提供される。また、本発明の好ましい別の態様によれば、インスリン分泌の促進用組成物または糖尿病改善用組成物の製造における、ホップ酸化反応産物の使用が提供される。また、好ましい別の態様によれば、血糖値低下用組成物の製造における、ホップ酸化反応産物の使用が提供される。特に好ましい態様によれば、上記ホップ酸化反応産物は飲食品と共に摂取されることを特徴とする。
【００４３】
また、本発明の別の態様によれば、コレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌促進用組成物としての、ホップ酸化反応産物の使用が提供される。また、本発明の好ましい態様によれば、食欲もしくは摂食量の調節用組成物、または、満腹感の増強用もしくは、食欲もしくは摂食量の抑制用組成物としての、ホップ酸化反応産物の使用が提供される。また、本発明の好ましい別の態様によれば、インスリン分泌促進用組成物または糖尿病改善用組成物としての、ホップ酸化反応産物の使用が提供される。また、好ましい別の態様によれば、血糖値低下用組成物としての、ホップ酸化反応産物の使用が提供される。好ましい態様によれば、上記使用は非治療的使用である。
【００４４】
また、本発明の別の態様によれば、コレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌促進のための、ホップ酸化反応産物が提供される。また、本発明の好ましい態様によれば、食欲もしくは摂食量の調節、または、満腹感の増強のためもしくは、食欲もしくは摂食量の抑制のための、ホップ酸化反応産物が提供される。また、本発明の好ましい別の態様によれば、インスリン分泌促進または糖尿病改善のための、ホップ酸化反応産物が提供される。また、好ましい別の態様によれば、血糖値低下のための、ホップ酸化反応産物が提供される。特に好ましい態様によれば、上記ホップ酸化反応産物は飲食品と共に摂取されることを特徴とする。
【００４５】
また、本発明の別の態様によれば、ホップ酸化反応産物を組成物中に配合することを特徴とする、コレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌促進用組成物の製造方法が提供される。また、本発明の好ましい態様によれば、ホップ酸化反応産物を組成物中に配合することを特徴とする、食欲もしくは摂食量の調節用組成物、または、満腹感の増強用もしくは、食欲もしくは摂食量の抑制用組成物の製造方法が提供される。また、本発明の好ましい別の態様によれば、ホップ酸化反応産物を組成物中に配合することを特徴とする、インスリン分泌促進用組成物または糖尿病改善用組成物の製造方法が提供される。また、好ましい別の態様によれば、ホップ酸化反応産物を組成物中に配合することを特徴とする、血糖値低下用組成物の製造方法が提供される。
【００４６】
上記の使用、方法の態様はいずれも、本発明の組成物に関する記載に準じて実施することができる。
【実施例】
【００４７】
以下、実施例により、本発明をより具体的に説明するが、本発明は、これらの例示に限定されるものではない。なお、特に記載しない限り、本発明で用いられる全部のパーセンテージや比率は質量による。また、特に記載しない限り、本明細書に記載の単位や測定方法は日本工業規格（ＪＩＳ）による。
【００４８】
試験例１
ホップペレット（hopsteiner, Mainburg, Germany）はビター品種を用いた。ホップペレットをミルで粉砕し、ホップ粉砕物を大気下、60℃で120時間加熱し、ホップ酸化反応産物を得た。
【００４９】
その後、上記ホップ酸化反応産物に含まれるα酸、β酸およびイソα酸、それらの酸化物であるＭＨＢＡの濃度を測定した。
【００５０】
α酸、β酸、イソα酸、ＭＨＢＡの定量
ホップ酸化反応産物1.0 gに10 mLのエタノールを加え、室温で1時間抽出処理した。得られた抽出液を2000 rpmで10 min遠心後、上清をエタノールで10倍希釈し、0.22 μmフィルターにかけ、ＨＰＬＣ分析試料とした。なお、ＨＰＬＣでのα酸、β酸、イソα酸の定量は、J. Agric. Food. Chem. 2013;61:3121-3130.に記載の方法に準じ、ＭＨＢＡの定量はBiosci. Biotech. Biochem. 2015;79:1684-1694に記載の方法に準じて実施された。なお、α酸、β酸、イソα酸、およびＭＨＢＡのＨＰＬＣ測定条件は以下の通りであった。ここで、ＭＨＢＡは、Biosci. Biotech. Biochem. 2015;79:1684-1694に記載の通り以下のＨＰＬＣ測定条件において、カフェインとtrans-イソコフムロンの保持時間の間（測定開始からおよそ３分〜２５分の間）に存在するピークに対応している。
【００５１】
[ＨＰＬＣ条件]
カラム： C18 2.1mm I.D. x 100mm 粒子径3μm (Alltima)
流速：0.6mL/min
移動相A：水/リン酸、1000/0.2, (v/v)  + EDTA(free) 0.02%(w/v)
移動相B：アセトニトリル
移動相C：水
注入量：3μL
カラム温度：40℃
フォトダイオードアレー検出器(SPD-M20A:SHIMADZU）
検出波長： 270nm（α酸、β酸、イソα酸、ＭＨＢＡ）
波形解析ソフトウェア(LCSolution:SHIMADZU）
グラジエントプログラム： 
【００５２】
【表１】
2018199639.tif 000004
【００５３】
【表２】
2018199639.tif 000005
【００５４】
なお、ＭＨＢＡの構成成分については、上記ＨＰＬＣ測定により、上記式（１a-c）〜（8a-c）の化合物が含まれていることを確認した。
【００５５】
試験例２
本発明によるホップ酸化反応産物のコレシストキニンおよびＧＬＰ−１から選択される一種以上の消化管ホルモンの分泌促進効果を評価するために、Biosci. Biotech. Biochem. 2015;79:1684-1694に記載の方法により試験サンプルの調製を行った。具体的な方法を以下に示す。
【００５６】
試験例１のホップ酸化反応産物１００ｇに５０℃の温水を１Ｌとなるように添加し、５０℃で１時間攪拌し、水抽出物を得た。次いで、ろ過により抽出残渣を除去し、活性炭およびポリビニルポリピロリドン(polyvinylpolypyrrolidone：PVPP)を添加し、室温で２時間撹拌し、再度ろ過により残渣を除去した。上記の残渣除去後液を９０℃、４時間で加熱し、室温まで冷却することで１２６ｇの薄茶色粉末を得た。
【００５７】
上記粉末のうち６３ｇを３Ｌの水で溶解し、３００ｍＬの１Ｎ ＨＣｌによる酸性条件下で６Ｌのジクロロメタン（ＣＨ２Ｃｌ２）で抽出した。ＣＨ２Ｃｌ２抽出液を無水Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥し、エバポレーションにより１２．６ｇの薄茶色非晶体を得た。試験例３において、上記薄茶色非晶体を試験サンプル（酸化処理に付したホップの抽出物）として用いた。
上記試験サンプル中のα酸、β酸、イソα酸、およびＭＨＢＡの含有量を試験例１と同様の方法により測定した。その結果、ＭＨＢＡの含有量は９５８ｇ／ｋｇであった。
【００５８】
試験例３
マウス消化管内分泌細胞株であるＳＴＣ−１細胞を５ x １０５ 細胞／ウェルとなるように24 ウェルプレートに播種し37℃で一晩培養した。
翌日、bath solution（１４０ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＫＣｌ、２ｍＭ ＣａＣｌ２、２ｍＭ ＭｇＣｌ２、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳおよび１０ｍＭ グルコース、ｐＨ７．４）で細胞を２回洗浄した。その後、細胞に対して対照試薬(0.3% DMSO含有bath solution)または200μg/mLの試験例２で得られた試験サンプル(0.3% DMSO含有bath solutionで溶解したもの)を添加し37℃で60分間培養した。培養後、各ウェルの上清を採取し125 x gで4℃、5分間遠心分離した。遠心分離した上清を‐20℃で保存した。その後、上清中のコレシストキニンおよびGLP-1濃度を市販のELISAキット(Phoenix Pharmaceuticals社)を用いて測定した（ｎ＝３〜４）。
その結果を図１に示す。
【００５９】
図１に示される通り、試験例２の試験サンプル添加群では、コレシストキニンの分泌量およびＧＬＰ−１の分泌量（平均±標準誤差）は対照試薬添加群と比較して有意に上昇していた（Studentの t検定、**:p<0.01 vs 対照試薬添加群）。
【図１】
2018199639.tif 000006