(57)【要約】【課題】口腔環境を改善する効果が高く、且つ、手軽に使用できる口腔用組成物を提供する。【解決手段】口腔用組成物は、貝殻由来、魚骨由来等のハイドロキシアパタイトと、殺菌作用又は静菌作用を有する可食性の薬効成分（例；カキタンニン、月桂樹抽出物、マスティック抽出物等）と、を含有し、歯周病予防、う蝕予防、口臭予防等の用途に用いられる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ハイドロキシアパタイトと、殺菌作用又は静菌作用を有する可食性の薬効成分と、を含有する口腔用組成物。
【請求項２】
前記ハイドロキシアパタイトが、貝殻由来又は魚骨由来である請求項１に記載の口腔用組成物。
【請求項３】
前記薬効成分が、カキタンニン、月桂樹抽出物、及び、マスティック抽出物からなる群より選択される１種以上である請求項１又は請求項２に記載の口腔用組成物。
【請求項４】
歯周病予防用、う蝕予防用、又は、口臭予防用である請求項１から請求項３のいずれか一項に記載の口腔用組成物。
【請求項５】
請求項１から請求項４のいずれか一項に記載の口腔用組成物を含有する食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、歯周病予防、う蝕予防、口臭予防等に有効な口腔用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
歯周病は、細菌が歯の表面に歯垢（プラーク）を形成し、それらの細菌が毒素を産生する等して進行する。歯周病の原因菌としては、ポルフィロモナス・ジンジバリス（Prophyromonas gingivalis）、タンネレラ・フォーサイセンシス（Tannerella forsythensis）、トレポネーマ・デンティコラ（Treponema denticola）等が知られており、これらを含めた種々の口腔菌が歯周病の進行に関与している。
【０００３】
歯周病は、歯肉炎や歯周炎を生じるだけでなく、口臭のほか、種々の全身影響の一因ともなっている。近年では、歯周病と全身の健康との関連が明らかにされつつあり、歯周病になると、脳血管疾患、心血管疾患、糖尿病、肺炎、肥満等のリスクが高くなることが報告されている。歯周病の予防には、プラークコントロールが重要であるとされており、一般には、歯磨きによる歯垢や歯石の除去が一次予防として推奨されている。
【０００４】
従来、口腔用組成物としては、歯周病の予防について訴求した歯磨剤や洗口液等も上市されている。歯磨剤、洗口液等には、歯周病やう蝕の病原菌を殺菌するため、チモール、イソプロピルメチルフェノール等のノニオン性界面活性剤、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム等のカチオン性界面活性剤、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウロイルメチルタウリンナトリウム等のアニオン性界面活性剤をはじめ、界面活性剤や殺菌剤が配合されているものが多い。
【０００５】
また、歯磨剤には、ハイドロキシアパタイトを配合したものもある。ハイドロキシアパタイトは、化学式：Ｃａ１０（ＰＯ４）６（ＯＨ）２で表されるイオン結晶であり、比較的大きい粒子が基材や研磨剤として配合されている。また、ナノ粒子化されることにより、歯の再石灰化を促進するための薬効成分として用いられることもある。
【０００６】
ハイドロキシアパタイトは、天然物としては、歯、骨等の主成分として存在している他、リン灰石に属する鉱物等として存在している。非特許文献１に記載されるように、歯のエナメル質の約９７％、象牙質の約７０％、セメント質の約６０％は、ハイドロキシアパタイトで構成されている。ハイドロキシアパタイトは、生体親和性が高い物質であるが、その組成は、組織や部位毎に異なっており、微量に含まれるイオンの種類や含有量に違いがあることが知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】青木秀希、「驚異の生体物質アパタイト」、医師薬出版株式会社、１９９９年９月、ｐ．１８−２０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
歯磨剤や洗口液をはじめとする口腔用組成物は、比較的、殺菌作用が強い薬効成分を含有していることが多い。こうした従来一般的な口腔用組成物は、健康影響への配慮から、飲み込まない用法で用いることを前提としており、通常、口に含んで使用された後、吐き出されている。そのため、従来一般的な口腔用組成物を使用する場所は、水回り等に限られている。
【０００９】
しかし、歯周病等の予防は日常的ないし継続的に行うことが望ましいため、口腔用組成物としては、使用する場所が制約されないものが、より有効である。配合されている薬効成分が、穏和な殺菌作用を有し、十分な食経験があり、口に含んだ後に嚥下可能な場合には、口腔用組成物を使用する場所が大きく制約されないため、手軽に利用することができる。但し、口腔環境を十分に改善できる有効性も兼ね備える必要がある。
【００１０】
そこで、本発明は、口腔環境を改善する効果が高く、且つ、手軽に使用できる口腔用組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
前記課題を解決するために本発明に係る口腔用組成物は、ハイドロキシアパタイトと、殺菌作用又は静菌作用を有する可食性の薬効成分と、を含有する。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、口腔環境を改善する効果が高く、且つ、手軽に使用できる口腔用組成物や、これを含有する飲食品を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】ハイドロキシアパタイトを含む試料の吸着画分のコロニー数を示す図である。
【図２】ハイドロキシアパタイトを含む試料の上清のコロニー数を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明の一実施形態に係る口腔用組成物、及び、これを含有する飲食品について説明する。
【００１５】
本実施形態に係る口腔用組成物は、微粒子状のハイドロキシアパタイトと、歯周病やう蝕の原因菌、食中毒菌、カンジダ菌、ピロリ菌等に対する殺菌作用又は静菌作用を有する可食性の薬効成分と、を少なくとも含有する。ハイドロキシアパタイトによる歯周病やう蝕の原因菌等を吸着する作用と、ハイドロキシアパタイトによる歯の再石灰化を促進する作用と、可食性の薬効成分による殺菌作用ないし静菌作用とにより、相乗的且つ相補的に口腔環境を改善することができる。
【００１６】
本実施形態に係る口腔用組成物は、その形態に応じて、口腔内に含み咀嚼する用法、口腔内で溶解又は崩壊させる用法、口腔内に含み洗口する用法、歯磨剤としての使用等、配合された成分を口腔内に滞留させる各種の用法で用いることが可能である。薬効成分が可食性であるため、使用後に飲み込むことも可能であり、場所を問わず手軽に利用することができる。歯周病やう蝕の原因菌等を吸着したハイドロキシアパタイトを、そのまま嚥下したり、吐き出したりすることにより、可食性の薬効成分による作用と相俟って、口腔内を効率的に除菌することが可能である。
【００１７】
ハイドロキシアパタイトとしては、貝殻を原料とする貝殻由来のハイドロキシアパタイト、魚骨を原料とする魚骨由来のハイドロキシアパタイト、家禽等の卵殻を原料とする卵殻由来のハイドロキシアパタイト、及び、鉱物を原料とする鉱物由来のハイドロキシアパタイトのうち、１種以上を配合することができる。
【００１８】
ハイドロキシアパタイトは、貝殻、魚骨、卵殻等の原料を適宜粉砕及び洗浄して調製することができる。原料は、ハイドロキシアパタイトを調製する過程で、焼成されてもよいし、焼成されなくてもよい。また、焼成は、粉砕より前に行ってもよいし、粉砕より後に行ってもよい。原料の洗浄は、主として、付着しているタンパク質、脂質等の異物や、硫酸イオン等の不純物を除去するために行う。原料の洗浄は、例えば、水や、エタノール等のアルコールや、水酸化ナトリウム等のアルカリ溶液や、炭酸、重炭酸塩等の酸溶液や、各種の分解酵素等を使用して、１回又は複数回、行うことができる。また、原料の焼成は、有機物等の不純物が燃焼する温度、例えば、８００℃以上で行うことができる。
【００１９】
ハイドロキシアパタイトは、固相法、溶液法、水熱法、アルコキシド法、フラックス法等の各種の合成法を利用して調製することもできる。例えば、固相法は、適宜粉砕及び洗浄した原料と、適切なＣａ／Ｐ比（約１．６７）となるように秤量した五酸化二リン、リン酸カルシウム等のリン化合物とを混合し、例えば、１０００℃以上で焼成して行うことができる。
【００２０】
また、溶液法は、原料に含まれているカルシウムを必要に応じて炭酸カルシウムや水酸化カルシウムに変換し、得られた中間原料を中性又はアルカリ性の下でリン酸と反応させた後、洗浄及び乾燥させて行うことができる。或いは、原料を硝酸溶液に溶解して硝酸塩に変換し、得られた中間原料をリン酸アンモニウム、リン酸水素アンモニウム等のリン酸塩と反応させた後、洗浄及び乾燥させて行うことができる。
【００２１】
貝殻由来のハイドロキシアパタイトは、任意の種類の貝から得た貝殻を原料として調製することができる。貝の具体例としては、例えば、ホタテガイ、カキ、シジミ、アコヤガイ、ヒオウギガイ、アカザラガイ、ハマグリ、アサリ等が挙げられるが、これらの種類に限定されるものではない。
【００２２】
魚骨由来のハイドロキシアパタイトは、任意の種類の魚から得た中骨、頭骨等を原料として調製することができる。魚の具体例としては、例えば、サケ、マス、アユ、ブリ、カンパチ、マアジ、シマアジ、マダイ、ヒラメ、フグ、クロマグロ等が挙げられるが、これらの種類に限定されるものではない。
【００２３】
卵殻由来のハイドロキシアパタイトは、任意の種類の家禽等の卵殻を原料として調製することができる。卵殻由来のハイドロキシアパタイトは、例えば、卵黄や卵白を取り出した鶏卵、アヒル、ダチョウ等の卵の卵殻を、卵殻膜を取り除いて、又は、卵殻膜を取り除くこと無く、原料として使用することができる。
【００２４】
鉱物由来のハイドロキシアパタイトは、カルシウムやリンを含む鉱物を原料として調製する。鉱物由来のハイドロキシアパタイトは、例えば、リン灰石、石灰、生石灰、消石灰等を原料とし、固相法、溶液法等の各種の合成法や精製法を用いて調製することができる。
【００２５】
ハイドロキシアパタイトとしては、貝殻由来又は魚骨由来のハイドロキシアパタイトがより好ましく用いられる。貝殻由来のハイドロキシアパタイトとしては、特に、ホタテ由来のものが好ましい。また、魚骨由来のハイドロキシアパタイトとしては、特に、サケ由来のものが好ましい。
【００２６】
貝殻由来のハイドロキシアパタイトは、低結晶型であるため、一般的な化学合成品と比較して比表面積が大きく、吸着力が高い特徴を有している。一方、魚骨由来のハイドロキシアパタイトは、高結晶型であるため、安定性が高い特徴を有している。そのため、貝殻由来又は魚骨由来のハイドロキシアパタイトを用いることにより、高い吸着力で口腔環境を効果的に改善できる口腔用組成物や、種々の条件下で安定的に使用又は保存可能な口腔用組成物を得ることができる。
【００２７】
また、貝殻由来のハイドロキシアパタイトや魚骨由来のハイドロキシアパタイトは、化学合成品と比較して、飲食に供する抵抗が小さく、食用適性が高い素材である。そのため、貝殻由来又は魚骨由来のハイドロキシアパタイトを用いることにより、口腔用組成物を飲み込む用法に一層適したものにすることができる。
【００２８】
ハイドロキシアパタイトは、平均粒子径が１０μｍ以下であることが好ましく、５μｍ以下であることがより好ましい。ハイドロキシアパタイトの平均粒子径は、小さいほど好ましく、例えば、気流式粉砕機を用いる場合、２μｍ以上５μｍ以下の平均粒子径にすることができる。平均粒子径がこのような範囲であると、粒子の取り扱い性を損なわず、高い吸着力が得られる。そのため、口腔用組成物を口に含むことにより、口腔内に付着している口腔菌等や、消化管に定着している病原菌等を効率的に吸着して除菌することができる。
【００２９】
ハイドロキシアパタイトは、原料を焼成し、焼成物を溶液法に供して調製することがより好ましい。具体的には、適宜粉砕及び洗浄した原料を、１０００℃以上で１０〜１００時間にわたり焼成して脱炭酸し、粉砕及び焼成された状態の焼成物を水に分散させる。そして、得られた分散液に、約４０℃、弱アルカリ性の下で、攪拌しながらリン酸水溶液を滴下して反応させる。反応は、攪拌速度を１０ｒｐｍ程度の緩速とし、ｐＨを８．５〜８．８以上に維持し、最終ｐＨが９．０程度となるように行うことが好ましい。その後、必要に応じて静置による熟成（安定化）を行い、乾燥させることにより、微粒子状のハイドロキシアパタイトを得ることができる。
【００３０】
殺菌作用又は静菌作用を有する可食性の薬効成分としては、殺菌作用又は静菌作用を少なくとも有し、一般に食経験があり、食品添加物等と同程度の食用適性を有する成分を配合することができる。薬効成分としては、一種の成分が配合されてもよいし、複数種の成分が配合されてもよい。
【００３１】
薬効成分の具体例としては、乳酸、クエン酸、グルコン酸、コハク酸、フマル酸、リンゴ酸等の有機酸類や、フラボノイド、カテキン、タンニン、カルノソール、クルクミン、クマリン等のポリフェノール類や、ペリルアルデヒド、ピネン、ヒノキチオール等のモノテルペン、ジンギビレン等のセスキテルペン、ジテルペン等のテルペン類や、アリルイソチオシアネート等のイソチオシアネート類や、アリシン等の硫化アリル類や、ロニセリン等のサポニン類等が挙げられる。
【００３２】
また、薬効成分の他の具体例としては、カプサイシン、メントール、ピぺリン、シンナムアルデヒド、安息香酸、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、ソルビン酸カルシウム、プロピオン酸、プロピオン酸ナトリウム、プロピオン酸カルシウム、次亜塩素酸カルシウム、パラオキシ安息香酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、デヒドロ酢酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、グリセリン脂肪酸エステル、キトサン、ペクチン分解物、グリシン、ε−ポリリジン、アルギン酸、キシリトール、カゼイン、ラクトフェリン、プロタミン、リゾチーム、ナイシン等が挙げられる。
【００３３】
また、薬効成分の他の具体例としては、柿抽出物、月桂樹抽出物、マスティック抽出物、茶抽出物、ワサビ抽出物、カラシ抽出物、ショウガ抽出物、コショウ抽出物、ミョウガ抽出物、トウガラシ抽出物、柑橘類抽出物、グレープフルーツ種子抽出物、キウイ抽出物、リンゴ抽出物、オオバ抽出物、エゴノキ抽出物、カワラヨモギ抽出物、ホオノキ抽出物、レンギョウ抽出物、スイカズラ抽出物、ニンニク抽出物、ネギ抽出物、ウコン抽出物、クミン抽出物、クローブ抽出物、コリアンダー抽出物、ローズマリー抽出物、シナモン抽出物、モウソウチク抽出物、クマザサ抽出物、マッシュルーム抽出物、レンコン抽出物、ホップ抽出物、マツ抽出物、高麗人参抽出物、ニーム抽出物、ベイ油、オレガノ油、アニス油、タイム油、レモングラス油、ガーリック油、ウイキョウ油、ケイヒ油、ペパーミント油、スペアミント油、ユーカリ油、プロポリス、乳酸菌等が挙げられる。
【００３４】
薬効成分を抽出するための溶媒としては、例えば、水、エタノール、プロピレングリコール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、アセトン、シクロヘキサン、酢酸エチル、酢酸メチル、グリセリン、ジエチルエーテル等の各種の溶媒を用いることができる。溶媒により抽出された抽出物は、各種のクロマトグラフィや、溶媒を使用した分配により、更に分画又は精製されてもよい。
【００３５】
薬効成分としては、柿由来のタンニン（カキタンニン）、月桂樹エキス（月桂樹抽出物）、及び、マスティック（マスティック抽出物）からなる群より選択される１種以上を含有することが特に好ましい。月桂樹エキスとしては、セスキテルペン、デアセチルラウレノビオリド、ミルセン等を含む葉の抽出物が好ましく、ブタノール等のアルコールや、酢酸エチル等のエステルや、水等による抽出物が好ましい。マスティックとしては、マスティックの樹木から採取される樹液、樹液の熟成物や乾燥物、精油成分、樹脂成分等が好ましい。
【００３６】
柿由来のタンニンは、歯周病菌、虫歯菌、大腸菌、緑膿菌等に対する殺菌活性やバイオフィルムの形成を抑制する活性に加えて、硫化水素、メチルメルカプタン等の揮発性硫黄化合物や、アンモニア、トリメチルアミン等の揮発性窒素化合物に対する消臭活性を有している。また、月桂樹エキスは、各種口腔菌に対する殺菌活性に加えて、硫化水素、ジメチルサルファイド等の揮発性硫黄化合物等に対する消臭活性や、マスキングによる消臭作用を有している。また、マスティックは、各種細菌や真菌に対する殺菌活性に加えて、ピロリ菌に対する強い抗菌活性や芳香を有している。そのため、柿由来のタンニンや月桂樹エキスやマスティックを用いると、歯周病やう蝕の原因菌等の除去と口臭成分の除去とにより、根治的に口腔環境を改善することができる。
【００３７】
本実施形態に係る口腔用組成物は、飲食品、医薬部外品等として提供することができる。口腔用組成物の形態は、固形状、粉状、顆粒状、液状、ペースト状、ガム状、クリーム状、ゼリー状、フォーム状等の適宜の形態とすることが可能である。飲食品の具体例としては、例えば、加工食品、健康食品、調味料等の食品や、清涼飲料水、茶飲料、乳飲料、コーヒー、ココア等の飲料が挙げられる。また、医薬部外品の具体例としては、例えば、練歯磨剤、粉歯磨剤、液体歯磨剤、洗口液、口中清涼剤、ビタミン剤等が挙げられる。
【００３８】
本実施形態に係る口腔用組成物は、その形態に応じて、適宜の基剤、添加剤や、炭水化物、タンパク質、脂質、ビタミン、無機質等の栄養成分や、骨形成に関わる作用又は歯周病の改善の作用がある成分や、口臭を消臭するための成分等を含有していてもよい。
【００３９】
添加剤としては、例えば、賦形剤、滑沢剤、甘味料、酸味料、酸化防止剤、結合剤、乳化剤、光沢剤、ｐＨ調整剤、保存料、防腐剤、増粘剤、粘着剤、発泡剤、安定剤、軟化剤、吸湿防止剤、固結防止剤、苦味料、調味料、着色料、香料等が挙げられる。
【００４０】
骨形成に関わる作用又は歯周病の改善の作用がある成分としては、例えば、コエンザイムＱ１０、β−クリプトキサンチン、大豆イソフラボン、プロテオグリカン、コンドロイチン硫酸、サケ卵巣膜抽出物、ポリリン酸ナトリウム等が挙げられる。口臭を消臭するための成分としては、例えば、カテキン等の各種のポリフェノール類、各種のテルペン類、葉酸、タンニン酸、クエン酸、ミョウバン等の化学的な消臭作用を有する成分が挙げられる。
【００４１】
本実施形態に係る口腔用組成物は、食品として提供されることが特に好ましい。好ましい食品の形態としては、例えば、錠菓（タブレット、チュアブル錠）、トローチ、ドロップ、チューインガム、ゼリー、グミ、サプリメント等が挙げられるが、咀嚼されるチュアブル錠、口腔内で徐々に溶解又は崩壊させて使用されるトローチ、又は、口腔内で徐々に溶解させて使用されるドロップが特に好ましい。このような食品であれば、口腔用組成物が口腔内に滞留し易いため、口腔内に定着している口腔菌等を確実に吸着して除菌することができる。また、このような食品であれば、水無しで服用できるし、携帯が容易であるため、場所を問わず、より手軽に使用することができる。
【００４２】
本実施形態に係る口腔用組成物は、チュアブル錠や、トローチや、ドロップの形態において、特に、糖質、滑沢剤、甘味料、酸味料、酸化防止剤を含むことができる。糖質の具体例としては、例えば、水飴、還元麦芽糖水飴、デンプン、デキストリン、デキストロース、コーンスターチ、コーンシロップ、結晶セルロース、転化糖、異性化糖、乳糖、白糖、ぶどう糖、果糖、麦芽糖、砂糖、オリゴ糖等が挙げられる。滑沢剤の具体例としては、例えば、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ショ糖脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル等が挙げられる。甘味料の具体例としては、トレハロース、ソルビトール、マルチトール、マンニトール、エリスリトール、キシリトール、アスパルテーム、スクラロース、サッカリンナトリウム、アセスルファムカリウム、ステビア、甘草等が挙げられる。酸味料の具体例としては、例えば、クエン酸、クエン酸ナトリウム、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、グルコン酸等が挙げられる。酸化防止剤の具体例としては、例えば、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ポリフェノール等が挙げられる。
【００４３】
本実施形態に係る口腔用組成物は、ハイドロキシアパタイトの含有量や、可食性の薬効成分の含有量について、特に制限されるものではない。但し、チュアブル錠や、トローチや、ドロップの形態は、適切な矯味や成形を妨げない観点等から、ハイドロキシアパタイトの含有量が、１質量％以上５０質量％以下であることが好ましく、２質量％以上２０質量％以下であることがより好ましい。
【００４４】
本実施形態に係る口腔用組成物の用量は、特に制限されるものではない。例えば、口腔用組成物は、適宜の量を適宜の一日回数や時間間隔で使用することができる。口腔用組成物を口腔内に滞留させる時間は、例えば、３〜１０分、５分程度等とすることができる。
【００４５】
本実施形態に係る口腔用組成物や、これを含有する飲食品は、口腔環境を改善する用途に使用することができる。具体的には、歯周病予防、う蝕予防、及び、口臭予防のうち、１以上の用途で用いることができる。例えば、口腔用組成物を食事後に服用することにより、歯周病や、う蝕の発症や悪化を抑制することができる。また、歯周病や、う蝕が抑制されることにより、或いは、消臭作用を有する薬効成分の作用により、口臭を抑制することができる。
【００４６】
次に、ハイドロキシアパタイトの吸着能の評価結果について説明する。
ハイドロキシアパタイトの吸着能は、ハイドロキシアパタイトを口腔菌の菌液中に滞留させて、ハイドロキシアパタイトに吸着した菌数を計算することにより評価した。菌数の測定は、ハイドロキシアパタイトを含む試料と、ハイドロキシアパタイトを含まないブランクについて行った。
【００４７】
ハイドロキシアパタイトとしては、体積基準の平均粒子径が約２．８２μｍ、表面積が４．２９ｍ２／ｇのホタテ貝殻由来のハイドロキシアパタイトを使用した。また、菌液としては、ストレプトコッカス・ミュータンス（Streptococcus mutans）を培養し、その一晩培養液から２．５ｍＬを分取して遠心分離により集菌し、２．０ｍＬのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄した後、１．０ｍＬのＰＢＳに菌体を懸濁させた懸濁液を用いた。
【００４８】
はじめに、１．５ｍＬのマイクロチューブに４５０ｍｇのハイドロキシアパタイトを入れ、１．０ｍＬのＰＢＳを加えた後、１００℃で３０分間、滅菌処理を行った。次いで、室温に戻してから、ボルテックスミキサで攪拌し、遠心分離して上清を除いた。そして、ハイドロキシアパタイトに９００μＬのＰＢＳを加え、ボルテックスミキサで再び攪拌した後、１００μＬの菌液を加えて、ハイドロキシアパタイトを含む試料を得た。
【００４９】
続いて、ハイドロキシアパタイトを含む試料を懸濁した後、室温で５分間、静置した。そして、上清を希釈した希釈系列を作成し、希釈液を８μＬずつ採り、希釈系列毎に各３枚の寒天平板を用いて、３７℃、ｐＨ７．４で４０時間、それぞれ培養した。また、上清を除いた後、１．０ｍＬのＰＢＳを加えて懸濁し、その懸濁液（吸着画分）を希釈した希釈系列を作成し、希釈液を８μＬずつ採り、希釈系列毎に各３枚の寒天平板を用いて、同様に培養した。
【００５０】
また、マイクロチューブに９００μＬのＰＢＳを加え、１００μＬの菌液を加えて混和し、ハイドロキシアパタイトを含まないブランクを得た。そして、同様に、希釈系列を作成し、希釈液を８μＬずつ採り、希釈系列毎に各３枚の寒天平板を用いて、同様に培養した。
【００５１】
培養後、ハイドロキシアパタイトを含む試料の上清の希釈系列、上清を除いた後の懸濁液（吸着画分）の希釈系列、ハイドロキシアパタイトを含まないブランクの希釈系列のそれぞれについてコロニー数を計数した。コロニー数は、数が数十〜数百の妥当な希釈系列について、３枚の平均値として求めた。
【００５２】
図１は、ハイドロキシアパタイトを含む試料の吸着画分のコロニー数を示す図である。また、図２は、ハイドロキシアパタイトを含む試料の上清のコロニー数を示す図である。
図１及び図２においては、試料を１０４倍希釈した希釈系列のコロニー数を、同倍率で希釈したブランクのコロニー数と共に示している。
【００５３】
図１及び図２に示すように、ハイドロキシアパタイトを含まないブランクでは、ストレプトコッカス・ミュータンスのコロニー数の平均が約１６であった。これに対し、ハイドロキシアパタイトを含む試料の吸着画分では、ストレプトコッカス・ミュータンスのコロニー数の平均が約２６．３３と高くなった（図１参照）。また、ハイドロキシアパタイトを含む試料の上清では、ストレプトコッカス・ミュータンスのコロニー数の平均が１．００に減少した（図２参照）。
【００５４】
この結果は、ハイドロキシアパタイトを口腔菌等の存在下に滞留させると、口腔菌等がハイドロキシアパタイトに吸着して集められる一方、上清中には存在しなくなることを示している。この吸着試験では、菌数に計算して約２×１０７ｃｆｕのストレプトコッカス・ミュータンスがハイドロキシアパタイトに吸着して捕集された。したがって、口腔用組成物に配合されたハイドロキシアパタイトは、口腔用組成物を口腔内に滞留させた後、嚥下する、又は、吐き出す用法により、口腔内を効率的に除菌する効果を示し、可食性の薬効成分と共に相補的に働いて口腔環境の改善に寄与するといえる。
【図１】
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【図２】
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