(57)【要約】【課題】ＦＯＬＲ１に結合する免疫複合体の投与方法を提供すること。【解決手段】この方法には、抗ＦＯＬＲ１免疫複合体をその必要のあるヒト、例えば、癌患者に、副作用を最小限に抑える治療的に有効な投与計画で、投与することを含む。したがって、本明細書では、患者に有効量の、ＦＯＬＲ１と結合する免疫複合体を投与することを含み、免疫複合体は、約３．０ｍｇ／ｋｇ〜約６ｍｇ／ｋｇの投与量で投与される、癌を有するヒト患者を対象とした治療方法が記載されている。抗ＦＯＬＲ１免疫複合体は、荷電リンカーを含むことができる。いくつかの実施形態では、抗ＦＯＬＲ１免疫複合体は、抗体ｈｕＭｏｖ１９、リンカースルホ−ＳＰＤＢ、及びメイタンシノイドＤＭ４を含む。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
本明細書に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の分野は、一般的に、疾患、例えば癌の治療のための、抗ＦＯＬＲ１免疫複合体
の投与方法に関する。この方法では、不要な副作用を最小限に抑える投与計画を提供する
。
【背景技術】
【０００２】
癌は、先進国における主要死因の１つであり、米国だけで、１００万人を超える人が癌
であると診断され、年間５０万人が死亡している。総じて、３人に１人を超える人におい
て、生涯の間に何らかの癌の形態が発現していると推定される。２００を超える異なる種
類の癌があり、そのうちの４種は、乳癌、肺癌、結腸癌、前立腺癌であり、すべての新規
症例の半数を超えている（Ｊｅｍａｌ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ．Ｃ
ｌｉｎ．５３：５−２６）。
【０００３】
葉酸受容体−αまたは葉酸結合タンパク質としても周知である葉酸受容体１（ＦＯＬＲ
１）は、細胞の原形質膜に発現するＮ−グリコシル化タンパク質である。ＦＯＬＲ１は、
葉酸及びいくつかの還元葉酸誘導体に対して高親和性を有する。ＦＯＬＲ１は、５−メチ
ルテトラヒドロ葉酸の細胞内部への送達を媒介する。
ＦＯＬＲ１は、大部分の卵巣癌、並びに多くの子宮癌、子宮内膜癌、膵癌、腎癌、肺癌
及び乳癌に過剰発現し、正常組織でのＦＯＬＲ１の発現は、腎臓近位尿細管、肺の肺胞肺
細胞、膀胱、精巣、脈絡叢及び甲状腺中の上皮細胞の頂端膜に限局される。（Ｗｅｉｔｍ
ａｎ  ＳＤ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ５２：３３９６−３４０１（１
９９２）；ＡｎｔｏｎｙＡＣ，Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｎｕｔｒ１６：５０１−５２１（１９
９６）；Ｋａｌｌｉ  ＫＲ，ｅｔ  ａｌ．Ｇｙｎｅｃｏｌ  Ｏｎｃｏｌ  １０８：６１９
−６２６（２００８））。  ＦＯＬＲ１のこの発現パターンにより、ＦＯＬＲ１は、ＦＯ
ＬＲ１指向性癌療法の所望の標的となる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｊｅｍａｌ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ．Ｃｌｉｎ．５３：５−２６
【非特許文献２】Ｗｅｉｔｍａｎ  ＳＤ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ５２：３３９６−３４０１（１９９２）
【非特許文献３】ＡｎｔｏｎｙＡＣ，Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｎｕｔｒ１６：５０１−５２１（１９９６）
【非特許文献４】Ｋａｌｌｉ  ＫＲ，ｅｔ  ａｌ．Ｇｙｎｅｃｏｌ  Ｏｎｃｏｌ  １０８：６１９−６２６（２００８）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
卵巣癌は、典型的には、進行ステージまで無症候性であるため、多くの場合、後期ステ
ージで診断され、現在利用可能な手法、典型的には、減量手術後の化学療法薬で治療され
た場合、予後不良である（ｖｏｎ  Ｇｒｕｅｎｉｇｅｎ  Ｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅ
ｒ  １１２：２２２１−２２２７（２００８）；Ａｙｈａｎ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  
Ｊ  Ｏｂｓｔｅｔ  Ｇｙｎｅｃｏｌ  １９６：８１  ｅ８１−８６（２００７）；Ｈａｒ
ｒｙ  ＶＮ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｂｓｔｅｔ  Ｇｙｎｅｃｏｌ  Ｓｕｒｖ  ６４：５４８−
５６０（２００９））。したがって、明らかに、更に効果的な卵巣癌治療のニーズに対応
していない。
【０００６】
抗体は、こうした癌の有望な治療方法として、出現している。また、例えば、細胞毒な
ど、別の化合物に共役される抗体を含む、免疫複合体も、治療薬候補として調査されてい
る。特に、メイタンシノイド（植物誘導抗真菌及び抗癌剤）を含む免疫複合体は、有益な
活性を若干、有することがわかる。Ｍａｙｔｅｎｕｓ  ｏｖａｔｕｓ及びＭａｙｔｅｎｕ
ｓ  ｂｕｃｈａｎａｎｉｉエタノール抽出物の３つのアンサマクロライドの単離は、Ｓ．
Ｍ．Ｋｕｐｃｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．によって最初に報告され、米国特許第３，８９６，１
１１号の主題であり、また、これらの抗白血病性効果（投与範囲単位マイクログラム／ｋ
ｇ）を示している。しかし、メイタンシノイドは、中枢神経障害及び末梢神経障害をいず
れも引き起こす許容できない毒性及び副作用：特に、悪心、嘔吐、下痢、肝機能検査結果
の上昇及び一般的ではないが、衰弱及び昏睡など、を有する。抗体コンジュゲートは、抗
原陽性細胞に比較して、抗原陰性細胞では数桁低い毒性を有するため、このような毒性全
体が、抗体に対するメイタンシノイドの共役によって、ある範囲まで低下する。しかし、
メイタンシノイドを含む免疫複合体は、依然として、許容できないレベルの副作用を伴う
。例えば、メイタンシノイドを含む高用量の抗ＦＯＬＲ１免疫複合体を投与された動物は
、眼毒性を示した。この毒性の原因、例えば、ＣｍａｘまたはＡＵＣに関連し得るか否か
は、公知ではなかった。その結果、ヒトにおいて治療的に有効であるが副作用を避ける、
抗ＦＯＬＲ１免疫複合体の特定の投与計画を確定することが依然として必要である。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本明細書においては、不要な副作用を最小限に抑える治療的有効な投与計画での抗ＦＯ
ＬＲ１免疫複合体の投与方法が提供される。したがって、本明細書では、患者に有効量の
、ＦＯＬＲ１と結合する免疫複合体を投与することを含み、免疫複合体は、約３．０ｍｇ
／ｋｇ〜約６ｍｇ／ｋｇの投与量で投与される、癌を有するヒト患者を対象とした治療方
法が記載されている。抗ＦＯＬＲ１免疫複合体は、荷電リンカーを含むことができる。い
くつかの実施形態では、抗ＦＯＬＲ１免疫複合体は、抗体ｈｕＭｏｖ１９、リンカースル
ホ−ＳＰＤＢ、及びメイタンシノイドＤＭ４を含む。
【０００８】
いくつかの実施形態では、免疫複合体は、または配列番号３及び配列番号５の抗体とＦ
ＯＬＲ１との結合を競合的に阻害するこれらの抗体または抗原−結合断片を含む。いくつ
かの実施形態では、抗体またはこれらの断片は、ｈｕＭｏｖ１９のＣＤＲ（即ち、配列番
号６〜１０及び１２または、配列番号６〜９、１１及び１２）を含む。いくつかの実施形
態では、抗体またはこれらの断片は、マウスＭｏｖ１９の６つのＣＤＲ（即ち、配列番号
６〜９、１６及び１２）を含まない。いくつかの実施形態では、抗体はｈｕＭｏｖ１９で
ある。いくつかの実施形態では、免疫複合体は、マイタンシノイドを含む。いくつかの実
施形態では、マイタンシノイドはＤＭ４である。いくつかの実施形態では、免疫複合体は
、ｓｕｌｆｏ−ＳＰＤＢであるリンカーを含む。いくつかの実施形態では、免疫複合体は
ＩＭＧＮ８５３（ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−ＳＰＤＢ−ＤＭ４）である。
【０００９】
いくつかの実施形態では、抗ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−
ＳＰＤＢ−ＤＭ４）は、投与量約３．０ｍｇ／ｋｇで投与される。いくつかの実施形態で
は、抗ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−ＳＰＤＢ−ＤＭ４）は、
投与量約３．３ｍｇ／ｋｇで投与される。いくつかの実施形態では、抗ＦＯＬＲ１−結合
剤（例えば、ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−ＳＰＤＢ−ＤＭ４）は、投与量約４．０ｍｇ／ｋ
ｇで投与される。いくつかの実施形態では、抗ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ｈｕＭｏｖ
１９−スルホ−ＳＰＤＢ−ＤＭ４）は、投与量約５ｍｇ／ｋｇで投与される。いくつかの
実施形態では、抗ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−ＳＰＤＢ−Ｄ
Ｍ４）は、投与量約５．５ｍｇ／ｋｇで投与される。いくつかの実施形態では、抗ＦＯＬ
Ｒ１−結合剤（例えば、ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−ＳＰＤＢ−ＤＭ４）は、投与量約６ｍ
ｇ／ｋｇで投与される。
【００１０】
本明細書記載の方法に従って、抗ＦＯＬＲ１結合剤（例えば、ｈｕＭｏｖ１９−スルホ
−ＳＰＤＢ−ＤＭ４）は、約４週に１回投与され得る。いくつかの実施形態では、抗ＦＯ
ＬＲ１−結合剤（例えば、ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−ＳＰＤＢ−ＤＭ４）は、約３週に１
回投与される。いくつかの実施形態では、抗ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ｈｕＭｏｖ１
９−スルホ−ＳＰＤＢ−ＤＭ４）は、約１回／２週に投与される。いくつかの実施形態で
は、抗ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−ＳＰＤＢ−ＤＭ４）は、
約１回／週に投与される。いくつかの実施形態では、抗ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ｈ
ｕＭｏｖ１９−スルホ−ＳＰＤＢ−ＤＭ４）は、約２回／週に投与される。
【００１１】
いくつかの実施形態では、抗ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−
ＳＰＤＢ−ＤＭ４）は、静脈内注射により２１日ごとに投与される。
【００１２】
本明細書記載の方法に従って、こうした投与により、ＡＵＣ（０−ｉｎｆ）約１０，０
００〜１８，０００ｈｒ・μｇ／ｍＬ、約１０，０００〜１７，５００ｈｒ・μｇ／ｍＬ
、約１０，０００〜１７，０００ｈｒ・μｇ／ｍＬまたは約１０，０００〜１６，０００
ｈｒ・μｇ／ｍＬとなる。いくつかの実施形態では、ＡＵＣ（０−ｉｎｆ）は、約１２，
０００ｈｒ・μｇ／ｍＬ〜約１３，５００ｈｒ・μｇ／ｍＬである。いくつかの実施形態
では、ＡＵＣ（０−ｉｎｆ）は、約１２，７０８ｈｒ・μｇ／ｍＬである。いくつかの実
施形態では、ＡＵＣ（０−ｉｎｆ）は、実施例１で得られ、かつ、図１に示すＡＵＣ（０
−ｉｎｆ）である。
【００１３】
本明細書記載の方法に従って、こうした投与により、ＡＵＣ（０−１６８）は約７，５
００〜１２，５００ｈｒ・μｇ／ｍＬ、約７，５００〜１２，０００ｈｒ・μｇ／ｍＬ、
約７，５００〜１０，０００ｈｒ・μｇ／ｍＬまたは約８，０００〜１０，０００ｈｒ・
μｇ／ｍＬとなる。いくつかの実施形態では、ＡＵＣ（０−１６８）は、約８，０００ｈ
ｒ・μｇ／ｍＬ〜約８，５００ｈｒ・μｇ／ｍＬである。いくつかの実施形態では、ＡＵ
Ｃ（０−１６８）は、約８，２５４ｈｒ・μｇ／ｍＬである。いくつかの実施形態では、
ＡＵＣ（０−１６８）は、実施例１で得られ、かつ、図１に示すＡＵＣ（０−１６８）で
ある。
【００１４】
本明細書記載の方法に従って、投与することにより、Ｃｍａｘが約５０〜２５０μｇ／
ｍＬ、約５０〜２００μｇ／ｍＬ、約５０〜１７５μｇ／ｍＬ、約５０〜１５０μｇ／ｍ
Ｌ、約５０〜１２５μｇ／ｍＬ、約７５〜２５０μｇ／ｍＬ、７５〜２００μｇ／ｍＬ、
７５〜１７５μｇ／ｍＬ、約７５〜１５０μｇ／ｍＬ、または約７５〜１２５μｇ／ｍＬ
となる。いくつかの実施形態では、Ｃｍａｘは、約１００μｇ／ｍＬ〜約１５０μｇ／ｍ
Ｌである。いくつかの実施形態では、Ｃｍａｘは、約１００μｇ／ｍＬ〜約１２０μｇ／
ｍＬである。いくつかの実施形態では、Ｃｍａｘは、約１０８μｇ／ｍＬである。いくつ
かの実施形態では、Ｃｍａｘは、実施例１で得られ、かつ、図１に示すＣｍａｘである。
【００１５】
本明細書記載の方法に従って、抗ＦＯＬＲ１結合剤（例えば、ｈｕＭｏｖ１９−スルホ
−ＳＰＤＢ−ＤＭ４）のクリアランスは、１．０ｍＬ／ｈｒ／ｋｇ未満であり得る。いく
つかの実施形態では、抗ＦＯＬＲ１結合剤（例えば、ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−ＳＰＤＢ
−ＤＭ４）のクリアランスは、０．６ｍＬ／ｈｒ／ｋｇ未満である。いくつかの実施形態
では、抗ＦＯＬＲ１結合剤（例えば、ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−ＳＰＤＢ−ＤＭ４）のク
リアランスは、約０．２ｍＬ／ｈｒ／ｋｇ〜約０．６ｍＬ／ｈｒ／ｋｇ未満である。いく
つかの実施形態では、抗ＦＯＬＲ１結合剤（ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−ＳＰＤＢ−ＤＭ４
）のクリアランスは、約０．３ｍＬ／ｈｒ／ｋｇ〜約０．４ｍＬ／ｈｒ／ｋｇである。い
くつかの実施形態では、抗ＦＯＬＲ１結合剤（ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−ＳＰＤＢ−ＤＭ
４）のクリアランスは、約０．３ｍＬ／ｈｒ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、抗
ＦＯＬＲ１結合剤（ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−ＳＰＤＢ−ＤＭ４）のクリアランスは、約
０．４ｍＬ／ｈｒ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、クリアランス、実施例１で得
られ、かつ、図１に示すクリアランスである。
【００１６】
本明細書記載の方法に従って、抗ＦＯＬＲ１結合剤（例えば、ｈｕＭｏｖ１９−スルホ
−ＳＰＤＢ−ＤＭ４）の半減期は、少なくとも約４日であり得る。いくつかの実施形態で
は、抗ＦＯＬＲ１結合剤（ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−ＳＰＤＢ−ＤＭ４）の半減期は、約
３日〜約５日、または、約４日〜約４．５日である。いくつかの実施形態では、半減期は
、約４．４日である。いくつかの実施形態では、半減期は、実施例１で得られ、かつ、図
１に示す半減期である。
【００１７】
抗ＦＯＬＲ１結合剤（例えば、ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−ＳＰＤＢ−ＤＭ４）定常状態
での明かな分布量（Ｖｓｓ）は、約２５〜約１００ｍＬ／ｋｇ、約２５〜約７５ｍＬ／ｋ
ｇ、約３０〜約７５ｍＬ／ｋｇまたは約３５〜約７０ｍＬ／ｋｇであってもよい。いくつ
かの実施形態では、Ｖｓｓは、約５５ｍＬ／ｋｇ〜約６５ｍＬ／ｋｇである。いくつかの
実施形態では、Ｖｓｓは、約６１ｍＬ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、Ｖｓｓは
、実施例１で得られ、かつ、図１に示すＶｓｓである。
【００１８】
いくつかの実施形態では、抗ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ｈｕＭｏｖ１９−スルホ−
ＳＰＤＢ−ＤＭ４）は、静脈内投与される。
【００１９】
本明細書に記載した方法は、癌治療に使用することができる。いくつかの実施形態では
、癌は、卵巣癌、脳腫瘍、乳癌、子宮癌、子宮内膜癌、膵癌、腎癌（例えば、腎細胞癌）
及び肺癌（非小細胞肺癌）または細気管支−肺胞癌（ＢＡＣ）からなる群から選択される
。いくつかの実施形態では、癌は、卵巣癌または肺癌である。いくつかの実施形態では、
癌は、神経膠腫である。
【００２０】
いくつかの実施形態では、癌は、ＦＯＬＲ１プロペプチドまたは核酸を発現させる。い
くつかの実施形態では、免疫組織化学（ＩＨＣ）により測定したとき、癌は、ＦＯＬＲ１
ポリペプチド発現レベルの増加を有する。例えば、いくつかの実施形態では、癌は、ＩＨ
Ｃによって、ヘテロ２以上のレベルでＦＯＬＲ１ポリペプチドを発現する癌である。いく
つかの実施形態では、癌は、ＩＨＣによって、ホモ２以上のレベルでＦＯＬＲ１ポリペプ
チドを発現する癌である。いくつかの実施形態では、癌は、ＩＨＣによって、ヘテロ３以
上のレベルでＦＯＬＲ１ポリペプチドを発現する癌である。いくつかの実施形態では、癌
は、ＩＨＣによって、ホモ３以上のレベルでＦＯＬＲ１ポリペプチドを発現する癌である
。いくつかの実施形態では、癌は、ＩＨＣによって、ヘテロ２以上のレベルでＦＯＬＲ１
ポリペプチドを発現する肺癌である。いくつかの実施形態では、癌は、ＩＨＣによって、
ヘテロ３以上のレベルでＦＯＬＲ１ポリペプチドを発現する肺癌である。いくつかの実施
形態では、癌は、ヘテロ３以上のレベルでＦＯＬＲ１ポリペプチドを発現する上皮性卵巣
癌（例えば、白金耐性または再発または難治性）である。
【００２１】
いくつかの実施形態では、この方法は、患者にステロイドを投与することを更に含む。
ステロイドは、即ち、抗ＦＯＬＲ１結合剤を投与する前に、前処理として投与され得る。
ステロイドは、デキサメタゾンであり得る。
【発明の効果】
【００２２】
本明細書に記載される方法により、腫瘍径が減少し得る。本明細書に記載される方法に
より、卵巣癌患者におけるＣＡ１２５レベルが低下し得る。一実施例では、ＣＡ１２５レ
ベルが、治療前、次いで、処置後１回以上、卵巣癌患者のサンプルで測定され、時間の経
過とともにＣＡ１２５レベルが低下することにより、治療的有効性が示される。本明細書
に記載される方法により、腫瘍処置間の時間が延長し得る。本明細書に記載される方法に
より、無進行生存（ＰＦＳ）が延長し得る。本明細書に記載される方法により、無病生存
（ＤＦＳ）が延長し得る。本明細書に記載される方法により、全生存（ＯＳ）が延長し得
る。本明細書に記載される方法により、完全奏功（ＣＲ）が延長し得る。本明細書に記載
される方法により、部分奏功（ＰＲ）が延長し得る。本明細書に記載される方法により、
安定疾患（ＳＤ）が増加し得る。本明細書に記載される方法により、進行性疾患（ＰＤ）
が増加し得る。本明細書に記載される方法により、無増悪期間（ＴＴＰ）が短縮し得る。
【００２３】
また、本明細書に記載される方法により、副作用が減少し得る。
【００２４】
特に、本明細書で提供される投与計画により、例えば、実施例１及び２並びに図１に示
すように、有効性（例えば、ＰＲ）と毒性の低下との間に最適なバランスが得られる。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
患者に有効量の、ＦＯＬＲ１ポリペプチドと結合する免疫複合体を投与することを含む
、癌を有するヒト患者の治療方法であって、前記投与により、Ｃｍａｘが約１００〜１５
０μｇ／ｍＬとなる、前記方法。
（項目２）
前記免疫複合体は、投与量約３ｍｇ／ｋｇ〜約６ｍｇ／ｋｇで投与される、項目１に記
載の方法。
（項目３）
前記免疫複合体は、投与量約３．０ｍｇ／ｋｇで投与される、項目２に記載の方法。
（項目４）
前記免疫複合体は、投与量約３．３ｍｇ／ｋｇで投与される、項目２に記載の方法。
（項目５）
前記免疫複合体は、投与量約５．０ｍｇ／ｋｇで投与される、項目２に記載の方法。
（項目６）
前記免疫複合体は、投与量約５．５ｍｇ／ｋｇで投与される、項目２に記載の方法。
（項目７）
前記免疫複合体は、投与量約６．０ｍｇ／ｋｇで投与される、項目２に記載の方法。
（項目８）
前記免疫複合体は、投与量約６．５ｍｇ／ｋｇで投与される、項目１に記載の方法。
（項目９）
前記免疫複合体は、約１回／週投与される、項目１〜８のいずれか一項に記載の方法。
（項目１０）
前記患者に有効量の、ＦＯＬＲ１ポリペプチドと結合する免疫複合体を投与することを
含む、癌を有するヒト患者の治療方法であって、前記免疫複合体は、約６ｍｇ／ｋｇの投
与量で、約１回／週投与される、前記方法。
（項目１１）
前記患者に有効量の、ＦＯＬＲ１ポリペプチドと結合する免疫複合体を投与することを
含む、癌を有するヒト患者を対象にした治療方法であって、前記免疫複合体は、約６．５
ｍｇ／ｋｇの投与量で、約１回／週投与される、前記方法。
（項目１２）
前記免疫複合体は、配列番号６を含む軽鎖ＣＤＲ１、配列番号７を含む軽鎖ＣＤＲ２、
配列番号８を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号９を含む重鎖ＣＤＲ１、配列番号１０または１
１を含む重鎖ＣＤＲ２、及び配列番号１２を含む重鎖ＣＤＲ３を含有する抗体を含む、項
目１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３）
前記免疫複合体は、配列番号５を含む可変軽鎖及び配列番号３を含む可変重鎖含有抗体
を含む、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
前記免疫複合体はＩＭＧＮ８５３である、項目１３に記載の方法。
（項目１５）
前記免疫複合体は、静脈内投与される、項目１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６）
癌は、卵巣癌、脳腫瘍、乳癌、子宮癌、子宮内膜癌、膵癌、腎癌及び肺癌からなる群か
ら選択される、項目１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
（項目１７）
前記肺癌は非小細胞肺癌または細気管支−肺胞癌である、項目１６に記載の方法。
（項目１８）
前記卵巣癌は上皮性卵巣癌である、項目１６に記載の方法。
（項目１９）
前記卵巣癌は白金耐性、再発性または難治性である、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
前記癌は、ＦＯＬＲ１プロペプチドまたは核酸を発現させる、項目１〜１９のいずれか
一項に記載の方法。
（項目２１）
前記ＦＯＬＲ１発現レベルは、免疫組織化学（ＩＨＣ）によって測定される、項目２０
に記載の方法。
（項目２２）
前記患者にステロイドを投与することを更に含む、項目１〜２１のいずれか一項に記載
の方法。
（項目２３）
前記ステロイドはデキサメタゾンである、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
前記投与により、腫瘍径が減少する、項目１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
（項目２５）
前記癌は卵巣癌であり、前記投与によりＣＡ１２５が減少する、項目１〜１６及び項目
１８〜２５のいずれか一項に記載の方法。
（項目２６）
前記投与により、副作用が減少する、項目１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】実施例１に記載されているように、ＩＭＧＮ８５３の投与（０．１５ｍｇ／ｋｇ〜７．０ｍｇ／ｋｇ）による薬物動態学データを提供する。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
本発明は、ＦＯＬＲ１結合免疫複合体の新規投与計画を提供する。
Ｉ．定義
【００２７】
本発明を容易に理解するために、多数の用語及び語句を以下に定義する。
【００２８】
用語「ヒト葉酸受容体１」、「ＦＯＬＲ１」または「葉酸受容体α（ＦＲーα）」は、
本明細書で使用するとき、別段の指定がない限り、任意の天然ヒトＦＯＬＲ１を意味する
。したがって、これらの用語は、すべて、本明細書で指示されるとおり、タンパク質また
は核酸配列を意味する。用語「ＦＯＬＲ１」は、「全長」、未処理ＦＯＬＲ１、並びに細
胞内で処理により得られる任意の形のＦＯＬＲ１を包括する。また、この用語は、自然発
生突然変異型ＦＯＬＲ１、例えば、スプライス変異体、対立遺伝子変異体及びアイソフォ
ームを包含する。本明細書に記載されるＦＯＬＲ１ポリペプチドは、種々の、例えば、ヒ
ト組織タイプなどの源または別の源から、若しくは、組換え方法または合成方法によって
単離され得る。ＦＯＬＲ１配列の例としては、これらに限定されないが、ＮＣＢＩ参照数
字Ｐ１５３２８、ＮＰ＿００１０９２２４２．１、ＡＡＸ２９２６８．１、ＡＡＸ３７１
１９．１、ＮＰ＿０５７９３７．１及びＮＰ＿０５７９３６．１が挙げられる。
【００２９】
用語「抗体」は、免疫グロブリン分子の可変領域内で、少なくとも１つの抗原認識部位
を介して、標的、例えばタンパク質、ポリペプチド、ペプチド、炭水化物、ポリヌクレオ
チド、脂質によってまたは前述の組み合わせたものを認識し、特異的に結合する免疫グロ
ブリン分子を意味する。本明細書で使用するとき、用語「抗体」は、未処置多クローン性
抗体、未処置モノクローナル抗体、抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）
２及びＦｖ断片）、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）突然変異体、少なくとも２個の未処置抗体か
ら産生される二重特異性抗体などの多特異性抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、
抗体の抗原決定部分を含む融合タンパク質、及び抗体が所望の生物活性を示す限り抗原認
識部分を含む任意の他の修飾された免疫グロブリン分子を包含する。抗体は、任意の５つ
の主要部類の免疫グロブリンのいずれかであってよい：そのＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、Ｉ
ｇＧ及びＩｇＭまたはサブクラス（イソ型）（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、
ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）は、これらの重鎖定常ドメインの同一性に基づいて、
それぞれ、α、β、ε、γ及びνと称される。免疫グロブリンの異なる分類は、異なる公
知のサブユニット構造体を有し、かつ、三次元形状を有する。抗体は、例えば、毒素、ラ
ジオアイソトープなど他の分子に対して、非コンジュゲートまたはコンジュゲートであっ
てもよい。
【００３０】
「ブロッキング」抗体または「アンタゴニスト」抗体は、ＦＯＬＲ１など、結合する抗
原の生物活性を阻害するか、または低下させる抗体である。いくつかの実施形態では、ブ
ロッキング抗体またはアンタゴニスト抗体は、実質的にまたは抗原の生物活性を完全に阻
害する。生物活性は、１０％、２０％、３０％、５０％、７０％、８０％、９０％、９５
％または更に１００％低下し得る。
【００３１】
用語「抗ＦＯＬＲ１抗体」またはＦＯＬＲ１に結合する「抗体」は、抗体が、ＦＯＬＲ
１を標的とする診断薬及び／または治療薬として有用であるように、十分な親和性を有す
るＦＯＬＲ１と結合することができる抗体を指す。例えば、ラジオイムノアッセイ（「Ｒ
ＩＡ」）によって測定したとき、抗ＦＯＬＲ１抗体と関連のない非ＦＯＬＲ１タンパク質
との結合範囲は、抗体とＦＯＬＲ１との結合の約１０％未満であり得る。ある種の実施形
態にて、ＦＯＬＲ１に結合する抗体は、解離定数（Ｋｄ）≦１μｍマイクロメートル、≦
１００ｎｍナノメートル、≦１０ｎｍナノメートル、≦１ｎｍまたは≦０．１ｎｍナノメ
ートルを有する。
【００３２】
用語「抗体断片」とは、未処置抗体の一部を意味し、未処置抗体上の抗原決定可変領域
を意味する。抗体断片の例としては、これらに限定されないが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（
ａｂ’）２及びＦｖ断片、線状抗体、一本鎖抗体、及び抗体断片から形成される多特異性
抗体が挙げられる。
【００３３】
「モノクローナル抗体」は、単一の抗原決定基、即ちエピトープの非常に特異的な認識
及び結合に関与する均一抗体集団を意味する。これは、典型的には、異なる抗原決定基に
対して指向される異なる抗体を含む多クローン抗体とは対照的である。用語「モノクロー
ナル抗体」は、未処置及び全長モノクロール抗体並びに抗体断片（Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ
（ａｂ’）２及びＦｖなど）、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）変異体、抗体部分を含む融合タン
パク質及び抗原認識部位を含む任意の他の修飾免疫グロブリン分子を包含する。更に、「
モノクローナル抗体」とは、これに限定するものではないが、ハイブリドーマ、ファージ
選択、組換え発現及びトランスジェニック動物など、任意の数の方法で作製されるこうし
た抗体を指す。
【００３４】
用語「ヒト化抗体」とは、特異的免疫グロブリン鎖、キメラ免疫グロブリン、または最
小限の非ヒト（例えば、マウス）配列を含むこれらの断片である非ヒト（例えば、マウス
）抗体の形態を指す。典型的には、ヒト化抗体は、相補性決定領域（ＣＤＲ）の残基は、
所望の特異性、親和性、及び能力を有する非ヒト種（例えば、マウス、ラット、ウサギ、
ハムスター）のＣＤＲ残基によって置き換えられているヒト免疫グロブリンである（Ｊｏ
ｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２−５２５；Ｒｉｅｃｈ
ｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３−３２７；Ｖｅｒｈ
ｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３９：１５３４−１５３６）
。場合によっては、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）残基は、所望
の特異性、親和性及び能力を有する非ヒト種の抗体において、対応する残基に置き換えら
れる。ヒト化抗体は、Ｆｖフレームワーク領域及び／または置換非ヒト残基内のいずれか
において、追加の残基の置換によって更に修飾し、抗体の特異性、親和性及び／または能
力を洗練させ、最適化することができる。ヒト化抗体は非ヒト免疫グロブリンに対応する
すべてのまたはほぼすべてのＣＤＲ領域を含み、すべてのまたはほぼすべてのＦＲ領域は
、ヒト免疫グロブリンコンセンサス配列の領域である、少なくとも１つの、かつ、典型的
には２つまたは３つの可変ドメイン含むことになる。また、ヒト化抗体は、少なくとも一
部分の免疫グロブリン定数領域またはドメイン（Ｆｃ）、典型的には、ヒト免疫グロブリ
ンの定数領域またはドメインを含むこともできる。ヒト化抗体を発生させるために使用さ
れる方法の例は、米国特許明細書第５，２２５，５３９号に記載されている。いくつかの
実施形態では、「ヒト化抗体」は、再表面化抗体である。
【００３５】
抗体の「可変領域」は、抗体軽鎖の可変領域または抗体重鎖の可変領域を意味し、いず
れか一方または組み合わせたものである。重鎖及び軽鎖の可変領域は、３つの相補的決定
領域（ＣＤＲ）によって連結されるそれぞれ４つのフレームワーク領域（ＦＲ）からなり
、高頻度可変領域としても公知である。各鎖において、ＣＤＲは、他の鎖のＦＲ及びＣＤ
Ｒにごく近接して共に保持され、抗体の抗原−結合部位形成に貢献する。ＣＤＲの決定に
は少なくとも２つの技術がある：（１）異種間配列可変性をベースにした方法（即ち、Ｋ
ａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕ
ｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，（５ｔｈ  ｅｄ．，１９９１，Ｎａｔｉｏｎａ
ｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，  Ｂｅｔｈｅｓｄａ  Ｍｄ．））；及
び（２）抗原−抗体錯体の結晶学的試験をベースにした方法（Ａｌ−ｌａｚｉｋａｎｉ  
ｅｔ  ａｌ（１９９７）Ｊ．Ｍｏｌｅｃ．  Ｂｉｏｌ．２７３：９２７−９４８）。更に
、これらの２つの方法を組み合わせて、ＣＤＲの決定に使用される。
【００３６】
Ｋａｂａｔナンバリングシステムは、一般に、可変ドメイン内の残基（軽鎖残基約１〜
１０７及び重鎖残基１〜１１３）を参照するとき、使用される。（例えば、Ｋａｂａｔ  
ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅ
ｓｔ．５ｔｈ  Ｅｄ．  Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，  Ｎａｔｉｏｎ
ａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９
１））。
【００３７】
Ｋａｂａｔの様なアミノ酸位置のナンバリングとは、抗体を組み合わせたものの重鎖可
変ドメインまたは軽鎖可変ドメインに使用されるナンバリングシステムを意味する（Ｋａ
ｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕ
ｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  
Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅ
ｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）。このナンバリングシステムを使用し、実際の直鎖ア
ミノ酸配列は、可変ドメインのＦＲまたはＣＤＲの短絡若しくは可変ドメインのＦＲまた
はＣＤＲへの挿入に対応するアミノ酸をほとんど含まないか、または更に含有することが
できる。例えば、重鎖可変ドメインとしては、Ｈ２の残基５２後の単鎖アミノ酸挿入（Ｋ
ａｂａｔによる残基５２ａ）及び重鎖ＦＲ残基８２後の挿入残基（例えば、Ｋａｂａｔに
よる残基８２ａ、８２ｂ及び８２ｃなど）を挙げることができる。「標準的」Ｋａｂａｔ
によりナンバリングされた配列を有する抗体の配列の相同性の領域でアライメントによっ
て、所与の抗体に対して、アライメントによって残基のＫａｂａｔナンバリングを決定す
ることができる。その代わりに、Ｃｈｏｔｈｉａは、構造ループの場所を称する（Ｃｈｏ
ｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８
７））。Ｋａｂａｔナンバリング慣習を用いてナンバリングを行うとき、Ｃｈｏｔｈｉａ
ＣＤＲ−Ｈ１ループ末端部は、ループの長さに依存して、Ｈ３２とＨ３４との間で変化す
る（これは、Ｋａｂａｔナンバリングスキームでは、Ｈ３５Ａ及びＨ３５Ｂに挿入を配置
し；３５Ａまたは３５Ｂのいずれも存在しない場合は、ループ末端部は３２であり；３５
Ａのみ存在する場合には、ループ末端部は３３であり；３５Ａ及び３５Ｂがいずれも存在
する場合には、ループ末端部３４であるためである）。ＡｂＭ高頻度可変領域は、Ｋａｂ
ａｔ  ＣＤＲとＣｈｏｔｈｉａ構造ループ間の妥協を表し、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｍｏｌｅｃｕ
ｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアにより使用される。
【表Ａ】
2018197249.tif 000002
【００３８】
用語「ヒト抗体」とは、ヒトにより産生された抗体または当該技術分野において公知の
任意の技術を用いて作製されたヒトによって産生された抗体に対応するアミノ酸配列を有
する抗体を意味する。このようなヒト抗体の定義としては、未処置または全長の抗体、そ
れらの断片及び／または少なくとも１つのヒト重鎖及び／または軽鎖ポリペプチド、例え
ば、マウス軽鎖及びヒト重鎖ポリペプチドを含む抗体など、を含む抗体が挙げられる。
【００３９】
用語「キメラ抗体」とは、免疫グロブリン分子のアミノ酸配列は、２つまたはそれ以上
の種から誘導される抗体を意味する。典型的には、軽鎖及び重鎖のいずれもの可変領域も
、所望の特異性，親和性及び能力を有する１種の哺乳類（例えば、マウス、ラット、ウサ
ギ、など）から誘導される抗体の可変領域に対応し、定数領域は、その種における免疫応
答が引き起こされるのを避けるために、別の哺乳類（通常、ヒト）に誘導される抗体内の
配列に対して相同である。
【００４０】
用語「エピトープ」または「抗原決定基」は、本明細書では同じ意味で用いられ、特定
の抗体によって認識し、特異的に結合することができる抗原部分を示す。抗原はポリペプ
チドである場合、エピトープは、タンパク質の三次折畳みによって並置される近接のアミ
ノ酸及び近接していないアミノ酸のいずれからも形成され得る。近接のアミノ酸から形成
されたエピトープは、典型的には、タンパク質の変性時に保持され、三次折畳みによって
形成されるエピトープは、典型的には、タンパク質変性時に消失する。エピトープは、典
型的には、独自の空間コンフォーメーション中に少なくとも３個以上、通常、少なくとも
、５個、または８〜１０個のアミノ酸を含む。
【００４１】
「結合親和性」は、一般に、分子の単一結合部位（例えば、抗体）とその結合パートナ
ー（例えば、抗原）との間の合計非共有結合的相互作用の強度を示す。特に指示がない限
り、本明細書で使用するとき、「結合親和性」とは、結合対（例えば、抗体と抗原）のメ
ンバー間での１対１の相互作用を反映する固有の結合親和性を意味する。分子Ｘのそのパ
ートナーＹに対する親和性は、一般に、解離定数（Ｋｄ）で表され得る。親和性は、本明
細書で記載されるものを含み、当該技術分野において公知の共通の方法により測定され得
る。低親和性抗体は、一般に、抗原にゆっくりと結合し、かつ、速やかに解離する傾向に
あり、高親和性抗体は、一般に、迅速に抗原に結合し、結合がより長い状態を維持する傾
向にある。結合親和性を測定する種々の方法が、当技術分野において既知であり、そのう
ちのいずれも、本発明の目的のために使用可能である。図示した特定の実施形態は、以下
に示す。
【００４２】
本明細書で使用するとき、「または更に良好である」とは、分子とその結合パートナー
との間における更に強い結合親和性を意味する。本明細書で使用するとき、「または更に
良好である」とは、更に小さいＫｄ値によって表される更に強い結合を指す。例えば、０
．６ｎＭまたは更に良好である抗原の親和性を有する抗体では、抗原に対する抗体の親和
性は、０．６ｎＭ未満、即ち．０．５９ｎＭ、０．５８ｎＭ、０．５７ｎＭなど、または
０．６ｎＭ未満の任意の値である。
【００４３】
「特異的に結合する」ことによって、一般に、抗体がその抗原結合ドメインを介して、
エピトープに結合し、抗原結合ドメインとエピトープとの間に若干の相補性を必要とする
ことを意味する。この定義に従って、その抗原結合を介してエピトープに結合するとき、
関連のないランダムなエピトープに結合するよりも迅速に、抗体は、エピトープに「特異
的に結合する」と言われる。用語「特異性」は、本明細書で、特定の抗体が特定のエピト
ープと結合することによって、相対的親和性を限定するために使用される。例えば、抗体
「Ａ」は、所与のエピトープに対して、抗体「Ｂ」よりも更に高い特異性を有していても
よく、または抗体「Ａ」は、関連エピトープ「Ｄ」に対して有するよりも、更に高い特異
性を有するエピトープ「Ｃ」に結合すると言ってもよい。
【００４４】
「優先的に結合する」は、関連する同様の、相同のまたは類似のエピトープに結合する
よりも更に速やかに、抗体がエピトープに特異的に結合することを指す。したがって、所
与のエピトープに「優先的に結合する」抗体は、このような抗体は、関連エピトープと交
差反応することができても、同様に、関連エピトープに結合するよりも、そのエピトープ
に結合する。
【００４５】
ある程度まで標準抗体のエピトープへの結合をブロックするような程度にまで優先的に
そのエピトープに結合する場合、抗体は、標準抗体の所与のエピトープへの結合を競合的
に阻害すると言われている。競合的阻害は、当該技術分野で周知の任意の方法、例えば、
競合ＥＬＩＳＡ法で測定され得る。抗体は、所与のエピトープへの標準抗体の結合を、少
なくとも９０％、少なくとも８０％、少なくとも７０％、少なくとも６０％または少なく
とも５０％、競合的阻害すると言われていてもよい。
【００４６】
語句「ほぼ類似した」または「ほぼ同一である」は、本明細書で使用するとき、上記値
（（例えば、Ｋｄ値）によって測定された生物学的特性の文脈中において、当業者は、生
物学的及び／または統計的有意性がほとんどまたはまったくない、２つの値の差を考慮に
入れるように、２つの数値間での十分に高い程度の類似性を示す（一般に、１つの値は、
本発明の抗体に伴い、もう１つの値は、標準／比較抗体に伴う）。上記２つの値間の差は
、標準／比較抗体の値の関数として、５０％未満、４０％未満、３０％未満、２０％未満
または１０％未満であってもよい。
【００４７】
ポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチド、ベクター、細胞または「単離された」組成物
は、ポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチド、ベクター、細胞、または、本質的に明らか
になっていない形態である組成物である。単離したポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、ベクター、細胞または組成物類としては、本質的に明らかにされる形態にない程度ま
で精製されたものが挙げられる。いくつかの実施形態では、単離された抗体、ポリヌクレ
オチド、ベクター、細胞または組成物は、実質的に純粋である。
【００４８】
本明細書で使用するとき、「実質的に純粋である」とは、少なくとも、５０％純粋であ
る（即ち、汚染物質を含まない）、少なくとも９０％純粋である、少なくとも９５％純粋
である、少なくとも９８％純粋である、または少なくとも９９％純粋である材料を意味す
る。
【００４９】
用語「免疫複合体」または「複合体」は、本明細書で使用するとき、細胞結合剤（即ち
、抗ＦＯＬＲ１抗体またはこれらの断片）と連結し、かつ、以下の一般式で定義される化
合物またはその誘導体を意味する：Ｃ−Ｌ−Ａ（式中、Ｃ＝細胞毒、Ｌ＝リンカー、及び
Ａ＝抗ＦＯＬＲ１抗体または抗体断片）。また、免疫複合体は、逆の順序の以下の一般式
によって定義され得る：Ａ−Ｌ−Ｃ。
【００５０】
用語「ＩＭＧＮ８５３」とは、本明細書に記載された、ｈｕＭｏｖ１９抗体、スルホ−
ＳＰＤＢリンカー及びＤＭ４マイタンシノイドを含有する免疫複合体を意味する。
【００５１】
「リンカー」は、通常、薬剤、例えばメイタンシノイドなどの化合物を安定した共有結
合方法で、抗ＦＯＬＲ１抗体またはこれらの断片などの細胞結合剤に連結することができ
る任意の化学的部分である。リンカーは、化合物または抗体が活性のままである条件下で
、酸誘導開裂、光誘導開裂、ペプチダーゼ誘導開裂、エステラーゼ誘導開裂、及びジスル
フィド結合開裂を受けやすいか、または耐性があり得る。好適なリンカーは、当該技術分
野において公知であり、例えば、ジスルフィド基、チオエーテル基、酸に不安定な基、光
解離性基、ペプチダーゼに不安定な基及びエステラーゼに不安定な基が挙げられる。また
、リンカーとしては、荷電リンカー及び本明細書に記載されているように、及び当該技術
分野において既知である、これらの親水性形態が挙げられる。
【００５２】
用語「癌」及び「癌性」とは、細胞集団が制御されていない細胞増殖によって特徴付け
られている哺乳類の生理学的状態を示すかまたは記述する。例としては、これに限定され
るものではないが、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫及び白血病が挙げられる。こうした
癌の更なる特定例としては、扁平上皮癌、小細胞型肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌、肺の
扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞性癌、胃腸癌、膵癌、グリア芽細胞腫、子宮頸癌、卵巣癌、
肝癌、膀胱癌、肝癌、乳癌、大腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌腫、
腎臓癌、肝癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌及び、種々の頭頸部癌が挙げられる。
癌は、ＦＯＬＲ１を発現する癌であってもよい。
【００５３】
「腫瘍」及び「新生物」とは、過度の細胞成長または増殖に起因する任意の組織の腫瘤
、良性（非癌性）または前癌性病変などの悪性（癌性）を示す。
【００５４】
用語「癌細胞」「腫瘍細胞」及び文法的等価物は、腫瘍または非腫瘍化細胞などの前癌
病変由来の総細胞集団を意味し、腫瘍細胞集団のバルク及び腫瘍化幹細胞（癌幹細胞）を
含む。本明細書で使用するとき、用語「腫瘍細胞」は、再生し、分化し、これらの腫瘍細
胞を癌幹細胞から区別する能力を欠くこれらの腫瘍細胞を指すとき、用語「非腫瘍化」で
修飾されることもある。
【００５５】
用語「対象」とは、ヒト、非ヒト霊長類、げっ歯類などが挙げられるが、これらに限定
されない任意の動物（例えば、哺乳類）を意味し、特定の治療を受けるものである。典型
的には、用語「対象」及び「患者」は、本明細書では、ヒト対象に対して、同じ意味で用
いられる。
【００５６】
１つ以上の更なる治療薬「と併用した」投与は、同時（併用）投与及び任意の順序での
逐次的投与が挙げられる。
【００５７】
用語「医薬製剤」とは、活性成分の生物活性が効果的となるような形態であり、かつ、
製剤を投与する対象に対して許容できない毒性である追加成分を含有しない製剤を意味す
る。製剤は、無菌であってもよい。
【００５８】
本明細書にて開示したように、抗体または免疫複合体の「有効量」とは、具体的に明記
した目的を遂行するのに十分な量である。「有効量」は、実験により、かつルーチンの方
法で、明記された目的に対して、決定することができる。
【００５９】
用語「治療的有効量」とは、対象または哺乳類の病気または障害を「治療」するために
効果的な抗体または他の薬剤の量を意味する。癌の場合、治療有効量の薬剤により、癌細
胞数の低減、腫瘍径の低減、癌細胞の周辺器官への浸潤の阻害（即ち、ある程度まで緩徐
になり、ある実施形態では停止する）、腫瘍転移の阻害（即ち、ある程度まで緩徐になり
、ある実施形態では停止する）、ある程度までの腫瘍成長の阻害、癌に関連する１つ以上
の症状がある程度までの軽減、かつ／または、無進行生存（ＰＦＳ）、無再発生存（ＤＦ
Ｓ）の増加または全生存（ＯＳ）、完全奏功（ＣＲ）、部分奏功（ＰＲ）、若しくは、い
くつかの症例では、安定疾患（ＳＤ）の増加が可能になり、、進行性疾患（ＰＤ）の減少
、無増悪期間（ＴＴＰ）の短縮、卵巣癌の場合、ＣＡ１２５の低下またはこれらの任意の
組み合わせなど、好ましい応答となる。
【００６０】
本明細書の定義「治療すること」を参照されたい。薬剤によって既存の癌細胞の増殖を
予防する及び／または既存の癌細胞を殺すことができる範囲までは、細胞増殖抑制性及び
／または細胞毒性であり得る。ある種の実施形態において、ＦＯＬＲ１レベルの上昇を識
別することにより、ＦＯＬＲ１標的治療の量を減少させて投与し、高用量で見られたもの
と同じ治療的効果を達成することができる。「予防的有効量」は、所望の予防的結果を達
成する投与量で、かつ必要な期間、有効な量を指す。必須ではないが、典型的には、予防
的投与量は対象にて疾患の早期ステージ前にまたは早期ステージで使用されるため、予防
的有効量は、治療的有効量未満となる。
【００６１】
用語「有利に応答する」とは、一般に、対象において、有益な状態を引き起こすことを
指す。癌治療に関する用語は、対象に治療的効果をもたらすことを指す。癌における陽性
治療的効果は、様々な方法で測定され得る（Ｗ．Ａ．Ｗｅｂｅｒ，Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ
．５０：１Ｓ−１０Ｓ（２００９）を参照されたい）。例えば、腫瘍増殖阻害、分子マー
カーの発現、血清マーカーの発現及び分子画像技術は、抗癌治療の治療用有効性を評価す
るためにいずれも使用され得る。腫瘍成長阻害については、ＮＣＩ標準に従って、Ｔ／Ｃ
≦４２％は、抗癌活性の最低レベルである。Ｔ／Ｃ＜１０％未満は、高抗癌活性レベルで
あるとみなされる。Ｔ／Ｃ（％）＝治療対象の中央値腫瘍容積／対照の中央値腫瘍容積ｘ
１００。好ましい応答は、例えば、無進行生存（ＰＦＳ）、無再発生存（ＤＦＳ）の増加
または全生存（ＯＳ）、完全奏功（ＣＲ）、部分奏功（ＰＲ）、若しくは、いくつかの症
例では、安定疾患（ＳＤ）の増加が可能になり、進行性疾患（ＰＤ）の減少、無増悪期間
（ＴＴＰ）の短縮、卵巣癌の場合、ＣＡ１２５の低下またはこれらの任意の組み合わせな
どにより評価され得る。
【００６２】
ＰＦＳ、ＤＦＳ及びＯＳは、新規薬剤の承認のためにＮａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ
Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ及び米国食品医薬品局によって制定されている標準法によって測定
することができる。Ｊｏｈｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，（２００３）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏ
ｌ．２１（７）：１４０４−１４１１を参照されたい。
【００６３】
「無進行生存」（ＰＦＳ）は、登録から疾患の進行または死亡までの時間を指す。ＰＦ
Ｓは、一般に、Ｋａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒ法及びＲＥＣＩＳＴ基準（Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  
Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ）１．１を
用いて測定される。一般に、無進行生存とは、癌の悪化なく、依然として患者が生存して
いる状況を示す。
【００６４】
「腫瘍進行期間」（ＴＴＰ）は、登録から疾患が進行するまでの時間として定義されて
いる。ＴＴＰは、一般に、ＲＥＣＩＳＴ１．１基準を用いて測定される。
【００６５】
「完全奏功」または「完全寛解」または「ＣＲ」は、治療に応答したすべての腫瘍また
は癌の症候の消失を示す。これは、必ず癌が治癒したことを意味するものではない。
【００６６】
「部分奏功」または「ＰＲ」は、１つ以上の腫瘍または病変のサイズまたは容積、若し
くは、治療に応答する身体中での癌の範囲の減少を意味する。
【００６７】
「安定疾患」とは、進行または再発のない疾患を意味する。安定疾患では、部分奏功と
認められる十分な腫瘍の縮小も、進行性疾患と認められる十分な腫瘍の増大もない。
【００６８】
「進行性疾患」とは、新規病変または腫瘍及び／または現存の非標的病変の明白な進行
の出現を示す。また、進行性疾患は、治療の開始以降、質量の増加または腫瘍の拡大の増
加のいずれかを原因として、２０％超の腫瘍成長を指すこともある。
【００６９】
「無進行生存率」（ＤＦＳ）は、患者が疾病のない状態を維持している治療中及び治療
後の時間の長さを示す。
【００７０】
「全生存」（ＯＳ）は、患者が登録してから死亡するまでまたは生存したことが既知の
最後の日で、中途打切られた時間を示す。ＯＳとしては、未処置未治療の個人または患者
と比較して、平均寿命の延長が上げられる。全生存は、診断または治療期間から、規定し
た期間、例えば、１年、５年など、患者が依然として生存している状況を指す。
【００７１】
「ＣＡ１２５レベルの低下」は、Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｔｅｒ
ｇｒｏｕｐ（ＧＣＩＧ）ガイドラインによって評価され得る。例えば、ＣＡ１２５レベル
は、治療前に測定し、ベースラインＣＡ１２５レベルを制定することができる。ＣＡ１２
５レベルは、治療中または治療後、１回以上測定することができ、ベースラインレベルと
比較して、時間の経過に伴うＣＡ１２５レベルの低下は、ＣＡ１２５レベルの低下と考え
られる。
【００７２】
「治療している」または「治療」または「治療すること」若しくは「軽減している」ま
たは「軽減すること」などの用語は、症状の治癒、緩徐、低減及び／または診断を受けた
病理学状態または障害の進行の停止が行われる治療的手段を意味する。したがって、治療
の必要があるものとしては、すでに診断されているまたは疾患を有している疑いのあるも
のが挙げられる。ある種の実施形態において、患者が以下のうちの１つ以上を示す場合、
対象において、本発明の方法に従った癌の治療が「奏功」している。癌細胞の数の減少ま
たは癌細胞の完全な消失；腫瘍径の減少；周辺臓器、例えば、軟組織及び骨などへの癌の
拡散など癌細胞湿潤の阻害または消失；腫瘍転移の阻害または消失；腫瘍成長の阻害また
は消失；特定の癌に伴う１つ以上の症状の軽減；罹患率及び死亡率の低下；ｑｕａｌｉｔ
ｙ  ｏｆ  ｌｉｆｅの改善；腫瘍の腫瘍形成性、腫瘍形成頻度または腫瘍形成能の低減；
腫瘍中の癌幹細胞数または頻度の低減；腫瘍形成性細胞の非腫瘍形成性状態への分化；無
進行生存率（ＰＦＳ）、無病生存率（ＤＦＳ）、全生存（ＯＳ）または完全奏功（ＣＲ）
、部分奏功（ＰＲ）、安定疾患  （ＳＤ）の増加；減少進行性疾患（ＰＤ）、無増悪期間
（ＴＴＰ）の減少卵巣癌ではＣＡ１２５の減少、これらの任意の組み合わせ。
【００７３】
予防的措置または防止的措置とは、標的病理学状態または疾患の発症を防止及び／また
は緩徐にする治療用措置を指す。予防的措置または防止的措置を必要とする人とは、疾患
にかかりやすい人または疾患を予防すべき人を含む。
【００７４】
用語「前治療する」及び「前治療」とは、抗ＦＯＬＲ１治療薬の投与前に行う治療的手
段を指す。本明細書に更に詳細に記載されているように、例えば、抗ＦＯＬＲ１治療薬を
投与する前の約１週間、約５日、約３日、約２日、または約１日または２４時間以内にス
テロイドなどの予防薬を投与し得る。また、予防薬は、抗ＦＯＬＲ１治療薬と同じ日に抗
ＦＯＬＲ１治療薬の前に投与し得る。
【００７５】
「化学療法剤」は、作用のメカニズムに関係なく、癌治療に有用な化合物である。化学
療法剤としては、例えば、リツキシマブ及びシクロホスファミドなどのＣＤ２０拮抗薬、
ドキソルビシン、ビンクリスチン、プレドニゾン（ｐｒｅｄｉｎｉｓｏｎｅ）、フルダラ
ビン、エトポシド、メトトレキサート、レナリドミド、クロラムブシル、ｂｅｎｔａｍｕ
ｓｔｉｎｅ及び／またはこのような化学療法薬の改良薬が挙げられる。
【００７６】
用語「ポリペプチド」、「ペプチド」及び「タンパク質」は、本明細書では、同義的に
使用され、任意の長さのアミノ酸のポリマーを指す。ポリマーは、直鎖状または分枝鎖状
であってよく、修飾アミノ酸を含み、非アミノ酸によって中断され得る。また、この用語
には、自然によりまたは例えば、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化、アセチ
ル化、リン酸化または標識化成分とのコンジュゲーションなど、任意のその他の操作また
は変性による介入によって変性されたアミノ酸ポリマーを包含する。また、この定義に含
まれるものとしては、例えば、１つ以上のアミノ酸類似体（例えば、非天然アミノ酸など
）を含有するポリペプチド並びに当該技術分野において公知の他の変更形態が挙げられる
。本発明のポリペプチドは、抗体をベースとするため、ある種の実施形態において、ポリ
ペプチドは、一本鎖または付随する鎖として発生し得ると理解されている。
【００７７】
２種またはそれ以上の核酸またはポリペプチドの関係においては、用語「一致している
」または「一致率」は、配列同定の一環として、いかなる保存的アミノ酸置換も考慮せず
に、最大の一致について比較し、配置した時に（必要に応じてｇａｐを導入）、同じであ
るか、若しくは、明記された割合の同じヌクレオチドまたはアミノ酸残基を有する２つま
たはそれ以上の配列またはサブ配列を指す。一致率は、配列比較ソフトウェアまたはアル
ゴリズムを用いて、若しくは目視検査により測定され得る。種々のアルゴリズム及びソフ
トウェアは、アミノ酸またはヌクレオチド配列のアライメントを得るために使用され得る
当技術分野において既知である。こうした配列アライメントアルゴリズムの１つの非限定
例は、Ｋａｒｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ，１９９０，Ｐｒｏｃ，Ｎａｔｌ，Ａｃａｄ，Ｓｃｉ．
，８７：２２６４−２２６８，に記載されているアルゴリズムであり、Ｋａｒｌｉｎ  ｅ
ｔ  ａｌ．，１９９３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，９０：５８７３−５
８７７にて改訂が行われ、ＮＢＬＡＳＴプログラム及びＸＢＬＡＳＴプログラム（Ａｌｔ
ｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，２５：
３３８９−３４０２）に組み込まれる。ある種の実施形態においては、Ａｌｔｓｃｈｕｌ
ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：３３８９−３
４０２に記載されているように、Ｇａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴを使用することができる。Ｂ
ＬＡＳＴ−２、ＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２（Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｍ
ｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０）、ＡＬＩＧＮ、
ＡＬＩＧＮ−２（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，  Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃ
ａｌｉｆｏｒｎｉａ）またはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）は、配列の配置に使用
可能であり、公的に入手可能な更なるソフトウェアプログラムである。ある種の実施形態
では、２つのヌクレオチド配列間の一致率は、ＧＣＧソフトウェア中のＧＡＰプログラム
である（例えば、ＮＷＳｇａｐｄｎａ．ＣＭＰマトリックスを使用し、ｇａｐ  ｗｅｉｇ
ｈｔは、４０、５０、６０、７０または９０であり、ｌｅｎｇｔｈ  ｗｅｉｇｈｔは１、
２、３、４、５または６である）。ある代替実施形態では、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ及びＷｕ
ｎｓｃｈ（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（４８）：４４４−４５３（１９７０））のアルゴリ
ズムを組み込んでいる、ＧＣＧソフトウェアパッケージのＧＡＰプログラムを使用して、
２つのアミノ酸配列間の同一率を測定することができる（例えば、Ｂｌｏｓｓｕｍ  ６２
ｍａｔｒｉｘまたはＰＡＭ２５０  ｍａｔｒｉｘのいずれかを使用し、ｇａｐ  ｗｅｉ
ｇｈｔは、１６、１４、１２、１０、８、６または４であり、ｌｅｎｇｔｈ  ｗｅｉｇｈ
ｔは１、２、３、４、５である）。あるいは、ある種の実施形態では、２つのヌクレオチ
ド配列間の一致率は、Ｍｙｅｒｓ及びＭｉｌｌｅｒのアルゴリズムを用いて測定される（
ＣＡＢＩＯＳ，４：１１−１７（１９８９））。例えば、一致率は、残基表と共に、ｇａ
ｐ  ｌｅｎｇｔｈ  ｐｅｎａｌｔｙが１２及びｇａｐ  ｐｅｎａｌｔｙが４であるＡＬＩ
ＧＮアルゴリズム（バージョン２．０）を用いて、及びＰＡＭ１２０を用いて測定するこ
とができる。特定のアライメントソフトウェアによって、最大のアライメントの適切なパ
ラメーターは、当該技術分野によって決定することができる。ある種の実施形態において
、アライメントソフトウェアのデフォルトパラメーターを使用する。ある実施形態におい
て、第１のアミノ酸配列対第２のアミノ酸配列の一致率「Ｘ」は、１００ｘ（Ｙ／Ｚ）と
して算出し、Ｙは、第１の配列及び第２の配列のアライメントの完全一致として評点され
るアミノ酸残基数であり（目視検査または特定の配列アライメントプログラムによって配
置されるとき）、かつ、Ｚは第２配列中の残基合計数である。第１の配列の長さが第２の
配列よりも長い場合、第１の配列対第２の配列の一致率は、第２の配列対第１の配列の一
致率より更に長くなる。
【００７８】
非限定例としては、任意の特定のポリヌクレオチドは、標準配列に対して、ある配列一
致率を有するか否かにかかわらず（例えば、少なくとも、８０％、８５％、９０％一致し
ており、いくつかの実施例では、少なくとも、９５％、９６％、９７％、９８％または９
９％一致している）、ある実施例では、Ｂｅｓｔｆｉｔ  ｐｒｏｇｒａｍ  （Ｗｉｓｃｏ
ｎｓｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｐａｃｋａｇｅ，  Ｖｅｒｓｉｏｎ  
８  ｆｏｒ  Ｕｎｉｘ，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅ
ｒｓｉｔｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐａｒｋ，５７５  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｄｒｉｖｅ，Ｍａ
ｄｉｓｏｎ，ＷＩ  ５３７１１）を用いて測定され得る。Ｂｅｓｔｆｉｔでは、Ｓｍｉｔ
ｈ  ａｎｄ  Ｗａｔｅｒｍａｎのローカル相同性アルゴリズム（Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ
Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｍａｔｈｅｍａｔｉｃｓ  ２：４８２  ４８９（１９８１））を使用
して、２つの配列間の最適の相同セグメントを見出す。Ｂｅｓｔｆｉｔまたはその他の任
意の配列アライメントプログラムを使用して、特定の配列が、例えば、本発明による標準
配列と９５％一致するか否かを測定する場合、標準ヌクレオチド配列の全長の一致率を算
出し、かつ、相同性が標準配列内のヌクレオチド合計数の５％以下のそのｇａｐが許容さ
れるように、パラメーターを設定する。
【００７９】
いくつかの実施形態では、本発明の２つの核酸またはポリペプチドは、実質的に同一で
あり、これはヌクレオチドまたはアミノ酸残基の同一性が少なくとも７０％、少なくとも
７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％であることを意味し、
いくつかの実施形態では、最大の対応に対して、比較し、配置したとき、配列比較アルゴ
リズムまたは目視検査を用いて計測したとおり、少なくとも、９５％、９６％、９７％、
９８％、９９％である。長さ少なくとも、約１０、約２０、約４０〜６０残基、またはこ
れらの間の任意の整数値である配列の領域にわたって、同一性が存在することができ、ま
た、領域は６０〜８０残基を超える長さ、例えば、少なくとも約９０〜１００残基あって
もよく、また、いくつかの実施形態では、配列は、例えば、ヌクレオチド配列のコード化
領域など、比較する配列の全長にわたって、実質的に一致する。
【００８０】
「保存的アミノ酸置換」は、アミノ酸残基は、類似の側鎖を有する別のアミノ酸残基で
置換されているものである。塩基性側鎖（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、
酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（例えば、グリシ
ン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン）、無極性
側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニ
ン、メチオニン、トリプトファン）、β分枝側鎖（例えば、スレオニン、バリン、イソロ
イシン）及び芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒス
チジン）など、類似側鎖を有するアミノ酸残基ファミリーは、当該技術において定義され
ている。例えば、チロシンのためのフェニルアラニンの置換は、保存的置換である。いく
つかの実施形態では、ポリペプチド配列及び本発明の抗体内の保存的置換により、抗原（
複数可）、即ち、ポリペプチドまたは抗体が結合するＦＯＬＲ１などへのアミノ酸配列を
含有するポリペプチドまたは抗体の結合が取り消されることはない。抗原結合を除去する
ことのないヌクレオチド及びアミノ酸保存的置換の同定方法は、当業者に周知である（例
えば、Ｂｒｕｍｍｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｈｅｍ．３２：１１８０−１  １８
７  （１９９３）；  Ｋｏｂａｙａｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．１２
（１０）：８７９−８８４  （１９９９）；及びＢｕｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎ
ａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９４：．４１２−４１７（１９９７））を参照され
たい。
【００８１】
本開示及び請求項で使用するとき、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈が
別途明らかに指示しない限り、複数の形態を包含する。
【００８２】
本明細書において、実施形態が、言語「を含む」に記述されている場合は、別の面では
、用語「からなる」及び／または「本質的にからなる」を用いて記述されている、類似の
実施形態も提供されることは理解されている。
【００８３】
本明細書において「Ａ及び／またはＢ」などの用語「及び／または」は、両者を「Ａ及
びＢ」、「ＡまたはＢ」、「Ａ」及び「Ｂ」をいずれも含むように意図されている。同様
に、「Ａ、Ｂ及び／またはＣ」などの語句に使用される「及び／または」は、以下の実施
形態をいずれも包含するように意図されている。Ａ、Ｂ、及びＣ；Ａ、ＢまたはＣ；Ａま
たはＣ；ＡまたはＢ；ＢまたはＣ；Ａ及びＣ；Ａ及びＢ；Ｂ及びＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単
独）；及びＣ（単独）。
ＩＩ．ＦＯＬＲ１結合剤
【００８４】
本明細書に記載の方法は、特異的にＦＯＬＲ１と結合する（「ＦＯＬＲ１結合剤」）配
列の投与方法を提供する。ある種の実施形態において、ＦＯＬＲ１結合剤は、抗体、免疫
複合体またはポリペプチドである。ヒトＦＯＬＲ１のアミノ酸及びヌクレオチド配列は、
当技術分野において既知であり、配列番号１及び配列番号２で示されるように、本明細書
に提供される。したがって、いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１結合剤は、配列番号１
のエピトープに結合することができる。
【００８５】
治療的に有効な抗ＦＯＬＲ１抗体の例は、本明細書に参考として組み込まれ、米国特許
公開第２０１２／０００９１８１号に見出すことができる。治療的に有効な抗ＦＯＬＲ１
抗体の一例としては、ｈｕＭｏｖ１９（Ｍ９３４６Ａ）が挙げられる。配列番号３〜５の
ポリペプチドは、それぞれ、ｈｕＭｏｖ１９（Ｍ９３４６Ａ）の可変重鎖ドメイン及び可
変軽鎖ドメイン１．００、ｈｕＭｏｖ１９の可変軽鎖ドメイン１．６０を含む。ある種の
実施形態において、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−１０７７２及びＰＴＡ−１０７７３または
１０７７４を有するｈｕＭｏｖ１９（Ｍ９３４６Ａ）抗体は、ブダペスト条約下において
、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）（
１０８０１  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｂｏｕｌｅｖａｒｄ，  Ｍａｎａｓｓａｓ，  ＶＡ
２０１１０  ２０１０年４月７日）で寄託されたプラスミドによってコードされる。本
発明の治療方法において有用なＦＯＬＲ１免疫複合体の実施例は、以下に提供する。
【００８６】
いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１結合剤は、ヒト化抗体またはその抗原結合断片で
ある。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体は、再表面化抗体またはその抗原結合断片で
ある。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１結合剤は、完全ヒト抗体またはその抗原結合
断片である。
【００８７】
ある種の実施形態において、ＦＯＬＲ１−結合剤は、１つ以上の以下の影響を有する：
安定疾患を引き起こす、腫瘍細胞増殖を阻害する、腫瘍中の癌幹細胞頻度を減少させるこ
とによって腫瘍の腫瘍形成能を低下させる、腫瘍成長を阻害する、生存率を高める、腫瘍
細胞の細胞死を引き起こす、腫瘍形成性細胞の非腫瘍形成性状態へ分化する、腫瘍細胞の
転移を防止する。
【００８８】
ある種の実施形態にて、ＦＯＬＲ１−結合剤は、抗体依存性細胞障害（ＡＤＣＣ）活性
を有する抗体である。
【００８９】
いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、腫瘍容積を減少させることができる
。腫瘍容積を減少させるＦＯＬＲ１結合剤の能力は、例えば、治療対象の腫瘍容積中央値
を対照対象の腫瘍容積中央値で割った比Ｔ／Ｃ値を測定することによって評価することが
できる。ある種の実施形態において、免疫複合体またはヒトＦＯＬＲ１に特異的に結合す
る他の薬剤は、細胞毒性剤を介して、細胞死を引き起こす。例えば、ある種の実施形態に
て、ヒトＦＯＬＲ１抗体に対する抗体は、タンパク質内在化によって、ＦＯＬＲ１を発現
させる腫瘍細胞中で活性化されるメイタンシノイドに共役される。ある種の実施形態では
、ＦＯＬＲ１−結合剤は、腫瘍成長を阻害することができる。ある種の実施形態では、イ
ンビボで（例えば、マウス異種移植片モデル及び／または癌を有するヒトにおいて）ＦＯ
ＬＲ１−結合剤は、腫瘍成長を阻害することができる。
【００９０】
ＦＯＬＲ１結合分子は、抗体またはＣＤＲ当たり保存的アミノ酸置換４個以下（即ち、
０、１、２、３または４）を有するｈｕＭｏｖ１９（Ｍ９３４６Ａ）のＣＤＲを含むＦＯ
ＬＲ１に特異的に結合する抗原結合断片であってよく、例えば、抗体または断片は、６つ
のマウスＭｏｖ１９のＣＤＲを含むことはない（即ち、配列番号６〜９、１６及び１２）
。ポリペプチドは、本明細書に記載された各可変軽鎖または可変重鎖のうち１つを含むこ
とができる。また、抗体及びポリペプチドは、可変軽鎖及び可変重鎖をいずれも含むこと
ができる。
【００９１】
いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１結合分子は、抗体または配列番号６〜１０及び配
列番号１２を含む抗原結合断片である。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１結合分子は
、抗体または配列番号６〜９及び配列番号１１及び１２を含む抗原結合断片である。
【００９２】
また、少なくとも、配列番号３、配列番号４または配列番号５に対して、約９０％の配
列同一性を有するポリペプチドを含むポリペプチドも提供する。ある種の実施形態におい
ては、ポリペプチドは、配列番号３、配列番号４または配列番号５に対して、少なくとも
約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％または少なく
とも約９９％の配列同一性を有するポリペプチドを含む。したがって、ある種の実施形態
においては、ポリペプチドは、（ａ）配列番号３に対して、少なくとも約９５％の配列同
一性を有するポリペプチド及び／または（ｂ）配列番号４または配列番号５に対して、少
なくとも約９５％の配列同一性を有するポリペプチドを含む。ある種の実施形態において
は、ポリペプチドは、（ａ）アミノ酸配列番号３を有するポリペプチド及び／または（ｂ
）配列番号４または配列番号５を有するポリペプチドを含む。ある種の実施形態において
、ポリペプチドは、ＦＯＬＲ１に特異的結合する抗体及び／またはポリペプチドである。
ある種の実施形態において、ポリペプチドは、ＦＯＬＲ１に特異的結合するマウス抗体、
キメラ抗体またはヒト化抗体である。ある種の実施形態では、配列番号３、配列番号４ま
たは配列番号５と特定の配列一致率を有するポリペプチドは、保存的アミノ酸置換のみが
配列番号３、配列番号４または配列番号５とは異なる。
【００９３】
ポリペプチドは、本明細書に記載された各軽鎖または重鎖のものを含む。また、抗体及
びポリペプチドは、軽鎖及び重鎖をいずれも含むことができる。
【００９４】
モノクローナル抗体は、例えばＫｏｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５）
Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５によって記載されている方法など、ハイブリドーマ方法
を使用して調製可能である。ハイブリドーマ方法を使用し、マウス、ハムスター、または
他の適切な宿主動物は、上述のように免疫化され、免疫抗原に特異的に結合する抗体のリ
ンパ球によって産生が誘発される。リンパ球は、インビトロでも免疫化され得る。免疫付
与後、リンパ球は、例えば、ポリエチレングリコールを使用して、好適な骨髄腫細胞株で
単離し、融合して、次に未融合リンパ球及び骨髄腫細胞から選択され得るハイブリドーマ
細胞を形成する。免疫沈降またはイムノブロッティングによって若しくはインビトロ結合
アッセイ（例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）；酵素結合免疫アッセイ（ＥＬＩＳ
Ａ））によって測定されるように、選択された抗原に対して特異的に指向されたモノクロ
ーナル抗体を産生するハイブリドーマは、動物において、腹水腫瘍として、標準法（Ｇｏ
ｄｉｎｇ，  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａ
ｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８６）を用いて、イン
ビトロ培養またはインビボ培養のいずれかを伝播され得る。次に、上記多クローン性抗体
に関して記載されているように、モノクローナル抗体は、培養培地または腹水から精製す
ることができる。
【００９５】
あるいは、モノクローナル抗体は、米国特許第４，８１６，５６７号に記載されている
ように、組換えＤＮＡ方法を用いて産生してもよい。モノクローナル抗体をコードするポ
リヌクレオチドは、例えばＲＴ−ＰＣＲによって、抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝
子を特異的に増幅させるオリゴヌクレオチドプライマーを使用して、成熟Ｂ細胞またはハ
イブリドーマ細胞から単離され、それらの配列は、従来の方法を用いて、決定される。重
鎖及び軽鎖をコードする単離ポリヌクレオチドは、その後、好適な発現ベクターにクロー
ン化し、さもなければ、免疫グロブリンタンパク質を産生することのない大腸菌細胞、サ
ルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、骨髄腫細胞などの宿主細胞
にトランスフェクトし、モノクローナル抗体は、宿主細胞によって産生される。また、所
望の種の組換え型モノクローナル抗体またはこれらの断片は、記載されているように（Ｍ
ｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，  Ｎａｔｕｒｅ，３４８：５５２−５５
４；Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２
８；及びＭａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８
１−５９７）所望の種のＣＤＲが発現するファージディスプレイライブラリから単離され
得る。
【００９６】
モノクローナル抗体をコードするポリヌクレオチド（複数可）は、いくつかの異なる方
法で組換えＤＮＡ技術を使用して、更に修飾して、代替抗体を産生させることができる。
いくつかの実施形態では、軽鎖及び重鎖の定常ドメイン、例えば、マウスモノクローナル
抗体は、例えば、１）キメラ抗体を産生するためのヒト抗体などのこれらの領域、または
２）融合抗体を産生するための非免疫グロブリンポリペプチドに置換され得る。いくつか
の実施形態では、定常領域は、切断されるか、または取り除かれ、モノクローナル抗体の
所望の抗体断片を産生する。可変領域の部位−指向または高密度突然変異誘発物質を使用
して、モノクローナル抗体の特異性、親和性など、を最適化することができる。
【００９７】
いくつかの実施形態では、ヒトＦＯＬＲ１に対するモノクローナル抗体は、ヒト化抗体
である。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体は、再表面化抗体である。ある種の実施形
態において、こうした抗体が治療的に使用され、ヒト対象に投与されると、抗原性及びＨ
ＡＭＡ（ヒト抗マウス抗体）応答を低減させる。ヒト化抗体は、当該技術分野において公
知の各種技術を使用して産生することができる。ある種の代替実施形態にて、ＦＯＬＲ１
への抗体はヒト抗体である。
【００９８】
ヒト抗体は、当該技術分野において公知の各種技術を使用して、直接、調製され得る。
インビトロで免疫化されるか、または標的抗原に対して指向された抗体を産生する、免疫
化された個々から単離された不死化ヒトＢリンパ球が産生され得る（例えば、Ｃｏｌｅ  
ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  
Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，ｐ．  ７７（１９８５）；Ｂｏｅｍｅｒ  ｅ
ｔ  ａｌ．，  １９９１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７（１）：８６−９５；及び米国
特許第５，７５０，３７３号を参照されたい）。また、ヒト抗体は、ファージライブラリ
から選択することができ、ファージライブラリでは、例えば、Ｖａｕｇｈａｎ  ｅｔ  ａ
ｌ．，１９９６，Ｎａｔ．  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，１４：３０９−３１４，Ｓｈｅｅｔｓ  
ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔ’ｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．，９５：６
１５７−６１６２，Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，１９９１，Ｊ．  Ｍ
ｏｌ．  Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１，及びＭａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｊ．
Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１）に記載されているように、ヒト抗体を発現させ
ている。また、抗体ファージライブラリの作製技術及び使用技術については、また、米国
特許第５，９６９，１０８号、同第６，１７２，１９７号、同第５，８８５，７９３号、
同第６，５２１，４０４号；同第６，５４４，７３１号；同第６，５５５，３１３号；同
第６，５８２，９１５号；同第６，５９３，０８１号；同第６，３００，０６４号；同第
６，６５３，０６８号；同第６，７０６，４８４号；及び同第７，２６４，９６３号；及
びＲｏｔｈｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｊ．Ｍｏｌ、Ｂｉｏ．，ｄｏｉ：１０．１０１
６／ｊ．ｊｍｂ．２００７．１２．０１８（それぞれが、参照によって、その全体に組み
込まれる）にも記載されている。親和性成熟戦略及び鎖シャッフリング戦略（Ｍａｒｋｓ
ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９−７８３，（
参考としてその全体に組み込まれる））は、当技術分野において既知であり、また、これ
らの戦略を用いて、高親和性ヒト抗体を産生することができる。
【００９９】
また、ヒト化抗体は、内因性免疫グロブリン生成物の不存在下でヒト抗体の完全レパー
トリーを作製する免疫付与時に可能なヒト免疫グロブリン遺伝子座を含有するトランスジ
ェニックマウスにおいて作製され得る。この方法は、例えば、米国特許第５，５４５，８
０７号；同第５，５４５，８０６号；同第５，５６９，８２５号；同第５，６２５，１２
６号；同第５，６３３，４２５号；及び同第５，６６１，０１６号に記載されている。
【０１００】
また、本発明は、特異的にＦＯＬＲ１を認識する二重特異性抗体を包含する。二重特異
性抗体は、特異的に認識し、少なくとも２個の異なるエピトープに結合することが可能な
抗体である。異なるエピトープは、例えば、いずれの抗体も同様に、ＦＯＬＲ１並びに例
えば、１）Ｔ細胞受容体（例えば、ＣＤ３）またはＦｃ受容体（例えば、ＣＤ６４、ＣＤ
３２またはＣＤ１６）などの白血球上のエフェクター分子、または２）以下に詳細に記載
されているような細胞毒性剤を特異的に認識し、結合することができるように、いずれか
一方が同一分子（例えば、同一ＦＯＬＲ１）内または異なる分子上にあってもよい。
【０１０１】
本発明のポリペプチドは、抗体またはヒトＦＯＬＲ１に対するこれらの断片を含む、遺
伝子組換え型ポリペプチド、天然ポリペプチドまたは合成ポリペプチドであってもよい。
【０１０２】
ポリペプチド及び類似体は、更に改変して、通常、タンパク質の一部ではない、追加の
化学的部分を含むことができる。これらの誘導体化部分により、溶解度、生物学的半減期
またはタンパク質の吸収が改善され得る。また、この部分により、タンパク質類の任意の
所望の副作用を消失させることができる。これらの部分の概要は、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’
Ｓ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ，２０ｔｈ  ｅｄ．，Ｍａｃｋ  
Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ（２０００）に見出すことができる
。
【０１０３】
本明細書に記載の単離ポリペプチドは、当該技術分野において公知の任意の好適な方法
により、作製され得る。このような方法の範囲は、直接タンパク質合成方法から単離ポリ
ペプチド配列をコードするＤＮＡ配列の構築及び好適な形質転換宿主中でのこれらの配列
の発現にまで及ぶ。いくつかの実施形態では、ＤＮＡ配列は、組換え技術を用いて、目的
の野生型タンパク質をコードするＤＮＡ配列の単離または合成により、構築する。任意に
より、この配列では、部位特異的突然変異誘発物質により突然変異が誘発され、その機能
的類似体が提供され得る。例えば、Ｚｏｅｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’
ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８１：５６６２−５０６６（１９８４）及び米国特許第
４，５８８，５８５号を参照されたい。
【０１０４】
いくつかの実施形態では、目的のポリペプチドをコードするＤＮＡ配列は、オリゴヌク
レオチドシンセサイザーを用いて、化学的合成によって構築される。このようなオリゴヌ
クレオチドは、所望のポリペプチドのアミノ酸配列及び目的の組換え型ポリペプチドが作
製される宿主細胞において好まれるこれらのコドンの選択をベースにしてデザインされ得
る。目的の単離ポリペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列を合成するためには
、標準方法を適用することができる。例えば、完全アミノ酸配列を使用して、逆翻訳遺伝
子を構築することができる。更に、特定の単離ポリペプチドをコードするヌクレオチド配
列を含有するＤＮＡオリゴマーを合成することができる。例えば、いくつかの所望のポリ
ペプチドをコードする小オリゴヌクレオチドを合成し、その後、ライゲートすることがで
きる。個々のオリゴヌクレオチドは、典型的には、補体アセンブリに対して張り出してい
る５’または３’を含む。
【０１０５】
一旦組み込まれると（合成、部位指向突然変異誘発または他の方法によって）、目的の
特定単離ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列は、発現ベクター内に挿入され
、所望の宿主において、タンパク質の発現に適している発現制御配列に操作可能に連結さ
れる。適切なアセンブリは、好適な宿主におけるヌクレオチド配列、制限マッピング及び
生物学的活性ポリペプチドの発現によって確認され得る。当該技術分野において周知であ
るように、宿主内で高発現レベルのトランスフェクトされた遺伝子を得るためには、遺伝
子は、選択された発現宿主において機能的である、転写及び翻訳発現制御配列に操作的に
連結する必要がある。
【０１０６】
ある種の実施形態においては、組換え発現ベクターを使用して、ＤＮＡコード化抗体ま
たはこれらの断片をヒトＦＯＬＲ１に対して増幅及び発現させる。組換え発現ベクターは
、抗ＦＯＬＲ１抗体またはこれらの断片のポリペプチド鎖をコードする合成またはｃＤＮ
Ａ誘導ＤＮＡ断片を有するか、または操作的に哺乳類、微生物、ウイルスまたは昆虫遺伝
子由来の、好適な転写または翻訳調節エレメントに連結させる複製ＤＮＡ構造体である。
転写ユニットは、以下に詳細に記載されているように、一般には、（１）遺伝子発現にお
いて調節する役割を有する遺伝学的要素（複数可）、例えば、転写プロモーターまたはエ
ンハンサー、（２）ｍＲＮＡに転写され、タンパク質に翻訳された構造配列またはコード
配列及び（３）適切な転写及び翻訳の開始及び停止配列を組み合わせたものを含む。この
ような調節要素としては、転写を制御するためのオペレーター配列を挙げることができる
。宿主での複製能力は、通常、複製源によって付与され、及び形質転換体の認知を促進す
るための選択遺伝子を追加的に組み込むことができる。ＤＮＡ領域は、互いに機能上関連
しているとき、操作可能に連結される。例えば、シグナルペプチド（分泌リーダー）のＤ
ＮＡは、ポリペプチドの分泌に関与する前駆体として発現する場合、ポリペプチドのＤＮ
Ａに操作可能に連結され、配列の転写を制御する場合、プロモーターは、コード配列に操
作可能に連結され、若しくは、翻訳できるように配置される場合、リボソーム結合部位は
、コード配列に操作可能に連結される。酵母発現系に使用するための構造要素としては、
宿主細胞によって翻訳タンパク質の細胞外分泌が可能になるリーダー配列が挙げられる。
あるいは、組換えタンパク質は、リーダー配列も輸送配列もなく、発現する場合、Ｎ末端
メチオニン残基を含み得る。残基は、その後、任意により、発現した組換えタンパク質か
ら切断され、最終生成物がもたらされる。
【０１０７】
発現制御配列及び発現ベクターの選択圧は、宿主の選択に依存することになる。発現宿
主／ベクターの様々な組み合わせを適用し得る。真核宿主細胞の有用な発現ベクターとし
ては、例えば、ＳＶ４０、ウシパピローマウイルス、アデノウイルス及びサイトメガロウ
イルスの発現制御配列を含むベクターが挙げられる。細菌性宿主の有用な発現ベクターと
しては、ｐＣＲ１、ｐＢＲ３２２、ｐＭＢ９及びこれらの誘導体類などの大腸菌プラスミ
ド、Ｍ１３など、更に広い宿主範囲のプラスミド、及び繊維状一本鎖ＤＮＡファージなど
、既知の細菌性プラスミドが挙げられる。
【０１０８】
適切なプロモーターの制御下において、ＦＯＬＲ１結合ポリペプチドまたは抗体（また
は抗原として使用するためのＦＯＬＲ１タンパク質）を発現させるための好適な宿主細胞
としては、原核生物、酵母、昆虫類または高級真核細胞が挙げられる。原核生物としては
、グラム陰性またはグラム陽性有機体、例えば、大腸菌または桿菌が挙げられる。高級真
核細胞としては、以下の記載のように、哺乳類源の樹立細胞株が挙げられる。無細胞翻訳
系を使用することも可能である。細菌宿主、真菌宿主、酵母宿主及び哺乳類細胞宿主と共
に使用するための適切なクローニング及び発現ベクターは、Ｐｏｕｗｅｌｓら（Ｃｌｏｎ
ｉｎｇ  Ｖｅｃｔｏｒｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ
，Ｎ．Ｙ．，１９８５）によって記述されており、この関連する開示が参照によって組み
込まれている。抗体産生を含む、タンパク質生成方法に関する追加情報は、例えば、米国
特許公開第２００８／０１８７９５４号、国特許第６，４１３，７４６号及び同第６，６
６０，５０１号及び国際公開特許ＷＯ０４００９８２３に見出すことができ、それぞれが
参照によって、本明細書によって、その全体に組み込まれている。
【０１０９】
また、種々の哺乳類または昆虫細胞培養系は、有利にも、組換えタンパク質の発現に用
いられる。こうしたタンパク質は、一般に、正しく折り畳まれ、適切に修飾され、完全に
機能的であるようになるため、哺乳類細胞中において、組換えタンパク質を発現させるこ
とができる。好適な哺乳類宿主細胞株の例としては、Ｇｌｕｚｍａｎによって記述された
サル腎細胞のＣＯＳ−７株（Ｃｅｌｌ  ２３：１７５，１９８１）及び、例えば、Ｌ細胞
、Ｃ１２７、３Ｔ３、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＨｅＬａ細胞株及び
ＢＨＫ細胞株など、適切なベクターを発現させることができる他の細胞株が挙げられる。
哺乳類発現ベクターは、例えば、複製源、発現させる遺伝子に連結させる好適なプロモー
ター及びエンハンサーなどの非転写要素、並びに他の５’または３’のフランキング非転
写配列、及び、例えば、必須リボソーム結合部位、ポリアデニル化部位、スプライス供与
体及び受容体並びに転写終結配列などの５’または３’非転写配列を含むことができる。
昆虫細胞中において、異種タンパク質産生するためのバキュロウイルス系は、Ｌｕｃｋｏ
ｗ  ａｎｄ  Ｓｕｍｍｅｒｓ（Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ６：４７（１９８８））
によって検討されている。
【０１１０】
形質転換宿主によって産生されたタンパク質は、任意の好適な方法よって精製すること
ができる。このような標準方法としては、クロマトグラフィー（例えば、イオン交換、ア
フィニティ、サイズ排除カラムクロマトグラフィー）、遠心分離、溶解度差、または任意
のその他の標準タンパク質精製技術よる方法が挙げられる。ヘキサヒスチジン、マルトー
ス結合ドメイン、インフルエンザコート配列及びグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ
などのアフィニティタグは、タンパク質を付着させて、適切なアフィニティカラムを通過
させることによって簡単に精製することができる。また、単離タンパク質は、タンパク質
加水分解、核磁気共鳴及びＸ線結晶構造解析など、こうした技術を用いて、物理的に特徴
付けることができる。
【０１１１】
例えば、組換えタンパク質を培養培地に分泌される系の上澄みは、市販のタンパク質濃
度フィルター、例えば、最初に、ＡｍｉｃｏｎまたはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｐｅｌｌｉｃ
ｏｎ  ｕｌｔｒａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ  ｕｎｉｔを用いて、濃縮させることができる。
濃縮ステップ後、濃縮物は、好適な精製マトリックスに適用することができる。あるいは
、例えば、ペンダントジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）基を有するマトリックスまたは
基質について、アニオン交換樹脂を用いることができる。マトリックスは、アクリルアミ
ド、アガロース、デキストラン、セルロースまたは一般に、タンパク質の精製に用いられ
る他のタイプであってもよい。あるいは、カチオン交換ステップを使用してもよい。好適
なカチオン交換体としては、スルホプロピル基またはカルボキシメチル基を含む、種々の
不溶性マトリックスが挙げられる。最後に、疎水性ＲＰ−ＨＰＬＣ媒体（例えば、シリカ
ゲルを有するペンダントメチル基または他の脂肪族基）を用いる１つ以上の逆相高速液体
クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）ステップを用いて、ＦＯＬＲ１−結合剤を更に精
製することができる。また、いくつかのまたはすべての前述の精製ステップを、様々に組
み合わせて、均一の組換えタンパク質を提供することもできる。
【０１１２】
細菌培養において作製した組換えタンパク質は、例えば、初期の抽出によって細胞ペレ
ットから分離させることができ、続いて１つ以上の濃縮、塩析、水性イオン交換またはサ
イズ排除クロマトグラフィーステップを行う。最終の精製ステップには、高速液体クロマ
トグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いることができる。組換えタンパク質の発現に用いられる
微生物細胞は、凍結融解サイクル、音波処理、機械的破壊または細胞溶解剤の使用など、
任意の簡便な方法により、破壊され得る。
【０１１３】
当該技術分野において公知の抗体及び他のタンパク質の精製方法としては、例えば、米
国特許明細書第２００８／０３１２４２５号、同第２００８／０１７７０４８号及び同第
２００９／０１８７００５号に記載されているものも挙げられ、それぞれ、参照によって
、その全体が本明細書に組み込まれている。
ＩＩＩ免疫複合体
【０１１４】
本明細書にて開示したように、薬剤またはプロドラッグ（本明細書においては、免疫複
合体とも称される）に連結または共役される抗ＦＯＬＲ１抗体、抗体断片、及びそれらの
機能的等価物を含む複合体の投与方法は、本明細書にも記載されている。好適な薬剤また
はプロドラッグは、当該技術分野で周知である。薬剤またはプロドラッグは、細胞毒性剤
であり得る。本発明の細胞毒性複合体に使用される細胞毒性剤は、細胞死となるまたは細
胞死を誘発する、若しくは、いくつかの方法で細胞生存を減少させる、例えば、メイタン
シノイド及びメイタンシノイド類似体など、任意の化合物であり得る。他の好適な細胞毒
性剤としては、例えば、ベンゾジアゼピン、タキソイド、ＣＣ−１０６５及びＣＣ−１０
６５類似体、デュオカルマイシン及びデュオカルマイシン類似体、カリケアマイシンなど
のエンジイン、アウリスタチンなど、ドラスタチン及びドラスタチン類似体、トメイマイ
シン誘導体、レプトマイシンマイシン誘導体、メトトレキサート、シスプラチン、カルボ
プラチン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、メルフ
ァラン、マイトマイシンＣ、クロラムブシル及びモルホリノドキソルビシンが挙げられる
。
【０１１５】
薬剤またはプロドラッグを抗体または機能的等価物に連結するために、連結基を使用す
ることによってこのような複合体を調製することができる。好適な連結基は、当該技術分
野において公知であり、例えば、ジスルフィド基、チオエーテル基、酸に不安定な基、光
解離性基、ペプチダーゼに不安定な基及びエステラーゼに不安定な基が挙げられる。
【０１１６】
薬剤またはプロドラッグは、例えば、ジスルフィド結合を介して、抗ＦＯＬＲ１抗体ま
たはこれらの断片に連結され得る。リンカー分子または架橋剤は、抗ＦＯＬＲ１抗体また
はこれらの断片と反応可能な反応性化学基を含む。細胞結合剤と反応する反応性化学基は
、Ｎ−スクシンイミジルエステル及びＮ−スルホスクシンイミジルエステルであり得る。
更に、リンカー分子は、ジスルフィド結合を形成するために薬剤と反応し得るジチオピリ
ジル基であってもよい反応性化学基を含む。リンカー分子としては、例えば、以下が挙げ
られる。Ｎ−スクシンイミジル３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）
（例えば、Ｃａｒｌｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，１７３：７２３−
７３７（１９７８）を参照されたい）、Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルジチオ
）ブタノアート（ＳＰＤＢ）（例えば、米国特許明細書第４，５６３，３０４号を参照さ
れたい）、Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルジチオ）２−スルホブタノアート（
スルホ−ＳＰＤＢ）（（米国特許公報第２００９０２７４７１３）号を参照されたい）、
Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルジチオ）ペンタノアート（ＳＰＰ）（例えば、
ＣＡＳ登録番号３４１４９８−０８−６を参照されたい）、２−イミノチオランまたは無
水アセチルコハク酸。例えば、抗体または細胞結合剤は、架橋試薬によって修飾すること
ができ、また、このように誘導される遊離または保護チオール基を含有する抗体または細
胞結合剤は、ジスルフィドまたはチオール含有メイタンシノイドによって反応させて、複
合体を作製することができる。複合体は、これに限定されるものではないが、ＨＰＬＣ、
サイズ排除、吸着、イオン交換及びアフィニティ捕捉、透析またはタンジェンシャルフロ
ーろ過などのクロマトグラフィーによって精製することができる。
【０１１７】
本発明の別の態様では、免疫複合体の効力、溶解度、または有効性を向上させるにあた
って、抗ＦＯＬＲ１抗体は、ジスルフィド結合及びポリエチレングリコールスペーサーを
介して細胞毒性剤に連結される。このような分解可能な親水性リンカーは、ＷＯ２００９
／０１３４９７６に記載されている。このリンカーデザインの更なる有益性は、抗体−薬
物共役の所望のモノマー比が高い点及び凝集が最小である点である。この態様において具
体的に想到されるのは、薬剤負荷２〜８の狭い範囲を有するポリエチレングリコールスペ
ーサー（（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ＝１−１４）を担持するジスルフィド基（−Ｓ−Ｓ−）を
介して連結される細胞結合剤及び薬剤の複合体であり、癌細胞に対して比較的高い効力の
生物活性を示し、高い共役収率、高いモノマー比及び最小のタンパク質凝集など、所望の
生化学的性を有することが記述されている。
【０１１８】
また、非開裂リンカーとの抗体メイタンシノイド複合体を調製することも可能である。
このような架橋剤類は、当該技術に記載され（米国特許公報第２００５０１６９９３３号
を参照されたい）、これらに限定されないが、Ｎ−スクシンイミジル４−（マレイイミド
メチル）シクロヘキサンカルボキシレート（ＳＭＣＣ）が挙げられる。いくつかの実施形
態では、抗体は、文献に記載されているとおり、スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイイミ
ドメチル）−シクロヘキサン−１−カルボキシレート（ＳＭＣＣ）、スルホ−ＳＭＣＣ、
マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＭＢＳ）、スルホ−Ｍ
ＢＳまたはスクシンイミジル−ヨード酢酸などの架橋試薬を用いて改変し、１〜１０の反
応性基を導入する（Ｙｏｓｈｉｔａｋｅ  ｅｔ  ａｌ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，
１０１：３９５−３９９（１９７９）；Ｈａｓｈｉｄａ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ａｐｐｌｉｅ
ｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．，５６−６３  （１９８４）；及びＬｉｕ  ｅｔ  ａｌ，  Ｂｉｏ
ｃｈｅｍ．，１８：６９０−６９７（１９７９））。次いで、改変抗体は、チオール含有
メイタンシノイド誘導体と反応し、複合体を産生する。複合体はゲルろ過により、Ｓｅｐ
ｈａｄｅｘ  Ｇ２５カラムまたは透析またはタンジェンシャルフローろ過を介して、精製
することができる。改変抗体は、チオール含有メイタンシノイド（１〜２モル当量／マレ
イミド基）で処理し、抗体−マイタンシノイド複合体は、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５カ
ラムを介したゲルろ過、セラミックハイドロキシアパタイトカラム、透析またはタンジェ
ンシャルフローろ過若しくはこれらの方法を組み合わせたものにより精製する。典型的に
は、１抗体当たり平均１〜１０個のメイタンシノイドが連結される。１つの方法では、マ
レイミド基を導入して、スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）−シクロヘキサ
ン−１−カルボキシレート（ＳＭＣＣ）で抗体を修飾し、修飾抗体をチオール含有メイタ
ンシノイドと反応させて、チオエーテル連結複合体を得る。再び、抗体分子１個当たり複
合体１対１０薬物分子とする。抗体、抗体断片及び他のタンパク質のメイタンシノイド複
合体は、同じ方法で作製される。
【０１１９】
本発明の別の態様では、ＦＯＬＲ１抗体は、ＰＥＧスペーサーの仲介を通して、非開裂
結合を介して、薬剤に連結される。また、薬剤と抗ＦＯＬＲ１抗体断片との間にリンカー
を形成する親水性ＰＥＧ鎖を含む好適な架橋試薬は、当該技術分野において周知であるか
、または市販されている（例えばＱｕａｎｔａ  Ｂｉｏｄｅｓｉｇｎ，Ｐｏｗｅｌｌ，Ｏ
ｈｉｏ）。また、好適なＰＥＧ含有架橋剤は、当該技術分野において既知の標準合成化学
技術を用いて、市販のＰＥＧ自体から合成され得る。薬剤は、二官能性ＰＥＧ含有する架
橋剤と反応させて、米国特許公報２００９０２７４７１３及びＷＯ２００９／０１３４９
７６に詳細に記述される方法によって次式の化合物；Ｚ−Ｘｌ−（−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ
−）ｎ−Ｙｐ−Ｄが得られ、次いで、細胞結合剤と反応させて、複合体を得る。あるいは
、細胞結合は、二官能性ＰＥＧ架橋剤で修飾して、チオール反応基（マレイミドまたはハ
ロアセトアミド）を導入することができ、次いで、チオール含有メイタンシノイドで処理
して、複合体を提供することができる。別の方法では、細胞結合は、二官能性ＰＥＧ架橋
剤で修飾して、チオール反応基（マレイミドまたはハロアセトアミド）を導入することが
でき、次いで、チオール含有メイタンシノイドで処理して、複合体を提供することができ
る。
【０１２０】
好適なＰＥＧ含有リンカーの例としては、抗ＦＯＬＲ１抗体またはこれらの断片と反応
させるために、Ｎ−スクシンイミジルエステルまたはＮ−スルホスクシンイミジルエステ
ル部分を有し、並びに化合物と反応させるためにマレイミド系部分またはハロアセチル系
部分を有するリンカーが挙げられる。ＰＥＧスペーサーは、本明細書記載の方法によって
、当該技術分野において公知の任意の架橋剤に組み入れることができる。
【０１２１】
いくつかの実施形態では、リンカーは、例えば、米国特許公報第２０１２／０２８２２
８２号（その内容は、参照することによって、完全に本明細書に組み込まれる）に記載さ
れているように、少なくとも１つの荷電基を含有するリンカーである。いくつかの実施形
態では、荷電または荷電後架橋剤は、スルホン酸塩、リン酸塩、カルボキシ基または改変
細胞結合剤及び細胞結合剤−薬剤複合体、特に、薬剤対連結された抗体が２対２０である
モノクロール抗体-薬剤複合体の溶解度が有意に増大する第四級アミン置換基を含有する
ものである。細胞内での複合体代謝後、プロ荷電部分含有リンカーから調製される複合体
により、１つ以上の荷電部分が産生される。いくつかの実施形態では、リンカーは、以下
からなる群から選択される。Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルジチオ）−２−ス
ルホペンタノアート（スルホ−ＳＰＰ）及びＮ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルジ
チオ）−２−スルホブタノアート（スルホ−スルホ−ＳＰＤＢ）。
【０１２２】
本明細書にて開示した多くのリンカーは、米国特許公報第２００５／０１６９９３３号
、同第２００９／０２７４７１３号及び同２０１２／０２８２２８２号、並びにＷＯ２０
０９／０１３４９７６に詳細に記載され、その内容は、参照することによって、全体が本
明細書に組み込まれる。
【０１２３】
本発明としては、約２〜約８個の薬物分子（薬剤負荷）、例えばメイタンシノイドは、
抗ＦＯＬＲ１抗体またはこれらの断片に連結される態様が挙げられる。本明細書で使用す
るとき、「薬剤負荷」とは、細胞結合剤（例えば、抗ＦＯＬＲ１抗体またはこれらの断片
）に結合することができる薬物分子（例えば、メイタンシノイド）数を意味する。一態様
では、細胞結合剤に付着され得る薬物分子数は、平均約２〜約８（例えば、１．９、２．
０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．
０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．
０、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．
０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．
０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．
０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、８．
０、８．１）であってもよい。Ｎ２’−脱アセチル−Ｎ２’−（３−メルカプト−１−オ
キソプロピル）−メイタンシン（ＤＭ１）及びＮ２’−脱アセチル−Ｎ２’−（４−メル
カプト−４−メチル−１−オキソペンチル）メイタンシン（ＤＭ４）が使用可能である。
【０１２４】
したがって、一態様では、免疫複合体は、１つの抗体当たり１つのメイタンシノイドを
含む。別の態様では、免疫複合体は、１つの抗体当たり２つのメイタンシノイドを含む。
別の態様では、免疫複合体は、１つの抗体当たり３つのメイタンシノイドを含む。別の態
様では、免疫複合体は、１つの抗体当たり４つのメイタンシノイドを含む。別の態様では
、免疫複合体は、１つの抗体当たり５つのメイタンシノイドを含む。別の態様では、免疫
複合体は、１つの抗体当たり６つのメイタンシノイドを含む。別の態様では、免疫複合体
は、１つの抗体当たり７つのメイタンシノイドを含む。別の態様では、免疫複合体は、１
つの抗体当たり８つのメイタンシノイドを含む。
【０１２５】
一態様では、免疫複合体は、１つの抗体当たり約１〜約８のメイタンシノイドを含む。
別の態様では、免疫複合体は、１つの抗体当たり約２〜約７のメイタンシノイドを含む。
別の態様では、免疫複合体は、１つの抗体当たり約２〜約６のメイタンシノイドを含む。
別の態様では、免疫複合体は、１つの抗体当たり約２〜約５のメイタンシノイドを含む。
別の態様では、免疫複合体は、１つの抗体当たり約３〜約５のメイタンシノイドを含む。
別の態様では、免疫複合体は、１つの抗体当たり約３〜約４のメイタンシノイドを含む。
【０１２６】
一態様では、免疫複合体を含む組成物は、１つの抗体当たり結合される薬物分子（例え
ば、メイタンシノイド）は、平均約２〜約８（例えば、１．９、２．０、２．１、２．２
、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２
、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２
、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２
、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２
、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２
、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、８．０、８．１）である
。一態様では、免疫複合体を含む組成物は、１つの抗体当たり平均約１〜約８の薬物分子
（例えば、メイタンシノイド）を有する。一態様では、免疫複合体を含む組成物は、１つ
の抗体当たり平均約２〜約７の薬物分子（例えば、メイタンシノイド）を有する。一態様
では、免疫複合体を含む組成物は、１つの抗体当たり平均約２〜約６の薬物分子（例えば
、メイタンシノイド）を有する。一態様では、免疫複合体を含む組成物は、１つの抗体当
たり平均約２〜約５の薬物分子（例えば、メイタンシノイド）を有する。一態様では、免
疫複合体を含む組成物は、１つの抗体当たり平均約３〜約５の薬物分子（例えば、メイタ
ンシノイド）を有する。一態様では、免疫複合体を含む組成物は、１つの抗体当たり平均
約３〜約４の薬物分子（例えば、メイタンシノイド）を有する。
【０１２７】
一態様では、免疫複合体を含む組成物は、１つの抗体当たり平均約２±０．５、約３±
０．５、約４±０．５、約５±０．５、約６±０．５、約７±０．５または約８±０．５
の薬物分子（例えば、メイタンシノイド）を有する。一態様では、免疫複合体を含む組成
物は、１つの抗体当たり平均約３．５±０．５の薬物分子（例えば、メイタンシノイド）
を有する。
【０１２８】
抗ＦＯＬＲ１抗体またはこれらの断片は、二官能性架橋試薬を抗ＦＯＬＲ１抗体または
これらの断片に反応させることによって改変して、それによって、リンカー分子の抗ＦＯ
ＬＲ１抗体またはこれらの断片への共有結合をもたらすことができる。本明細書で使用す
るとき、「二官能性架橋試薬」は、共有結合により細胞結合剤を薬剤、例えば、本明細書
に記載の薬剤に連結する、任意の化学的部分である。別の方法では、連結部分の一部が、
薬剤によって提供される。この点については、薬剤は、細胞結合剤と薬剤とを接合させる
ために使用されるより大きいリンカー分子部分である連結部分を含む。例えば、メイタン
シノイドＤＭ１を形成するにあたって、遊離スルフヒドリル基（ＳＨ）を有するように、
Ｃ−３メイタンシンのヒドロキシル基の側鎖面を修飾させる。メイタンシンのこうしたチ
オレート化形態は、改変細胞結合剤と反応し、複合体を形成され得る。したがって、最終
リンカーは、２つの構成要素から組み立てられ、そのうちの１つは、架橋試薬によって提
供され、もう１つは、ＤＭ１側鎖によって提供される。
【０１２９】
また、薬物分子は、中間担体分子、例えば血清アルブミンなどを介して、抗体分子に連
結されてもよい。
【０１３０】
本明細書で使用するとき、「細胞結合剤に連結された」発現または「抗ＦＯＬＲ１抗体
または断片に連結された」発現とは、好適な連結基またはその前駆体を介して、細胞結合
剤抗ＦＯＬＲ１抗体または断片に結合される少なくとも１つの薬剤誘導体を含む複合体分
子を示す。例示的連結基は、ＳＰＤＢまたはスルホ−ＳＰＤＢである。
【０１３１】
ある種の実施形態にて、本発明において有用な細胞毒性剤は、メイタンシノイド及びメ
イタンシノイド類似体である。好適なメイタンシノイドの実施例としては、メイタンシノ
ール及びメイタンシノール類似体のエステルが挙げられる。微小管形成を阻害し、かつ、
哺乳類細胞に対して非常の毒性の高い、任意の薬剤が挙げられ、これは、メイタンシノー
ル及びメイタンシノール類似体である。
【０１３２】
好適なメイタンシノールエステルの例としては、芳香環及び他の位置に改変を有するも
のが挙げられる。このような好適なメイタンシノイドは、米国特許明細書第第４，４２４
，２１９号；同第４，２５６，７４６号；同第４，２９４，７５７号；同第４，３０７，
０１６号；同第４，３１３，９４６号；同第４，３１５，９２９号；同第４，３３１，５
９８号；同第４，３６１，６５０号；同第４，３６２，６６３号；同第４，３６４，８６
６号；同第４，４５０，２５４号；同第４，３２２，３４８号；同第４，３７１，５３３
号；同第５，２０８，０２０号；同第５，４１６，０６４号；同第５，４７５，０９２号
；同第５，５８５，４９９号；同第５，８４６，５４５号；同第６，３３３，４１０号；
同第７，２７６，４９７号及び同第７，４７３，７９６号に開示されている。
【０１３３】
ある実施形態では、本発明の免疫複合体は、細胞毒性剤としてＮ２’−脱アセチル−Ｎ
２’−（３−メルカプト−１−オキソプロピル）−メイタンシンと正式に称されるチオー
ル含有メイタンシノイド（ＤＭ１）を利用する。ＤＭ１は、以下の構造式（Ｉ）によって
表される：
【化１】
2018197249.tif 000003
【０１３４】
ある実施形態では、本発明の免疫複合体は、細胞毒性剤としてＮ２’−脱アセチル−Ｎ
２’−（（４−メチル−４−メルカプト−１−オキソペンチル）−メイタンシン（例えば
、ＤＭ４））と称されるチオール含有メイタンシノイドを利用する。ＤＭ４は、以下の構
造式（ＩＩ）によって表される：
【化２】
2018197249.tif 000004
【０１３５】
立体障害を受けたチオール結合を含む側鎖を含む別のメイタンシノイドは、Ｎ２’−脱
アセチル−Ｎ−２’（４−メルカプト−１−オキソペンチル）−メイタンシン（ＤＭ３と
称される）であり、以下の構造式（ＩＩＩ）によって表される：
【化３】
2018197249.tif 000005
【０１３６】
米国特許明細書第５，２０８，０２０号及び同第７，２７６，４９７号に教示されてい
る各メイタンシノイドは、本発明の複合体中において更に使用することができる。この点
については、米国特許明細書第５，２０８，０２０号及び同第７，２７６，６９７号の全
体の開示は、参照により本明細書に組み込む。
【０１３７】
メイタンシノイドの多くの位置が、連結部分を化学的連結するための位置として機能し
得る。例えば、ヒドロキシル基を有するＣ−３位、ヒドロキシメチル基で改変されたＣ−
１４位、ヒドロキシ基で改変されたＣ−１５位及びヒドロキシ基を有するＣ−２０位は、
すべて有用であることが期待される。いくつかの実施形態では、Ｃ−３位は、連結部分を
化学的に連結する位置として機能し、また、いくつかの特定の実施形態では、メイタンシ
ノールのＣ−３位は、連結部分を化学的に連結する位置として機能する。
【０１３８】
いくつかの構造を以下に示す：
【化４−１】
2018197249.tif 000006
【化４−２】
2018197249.tif 000007
【化４−３】
2018197249.tif 000008
【０１３９】
本明細書においては、上記任意の構造によって示される任意の化合物または複合体の任
意の立体異性体及びそれらの混合物も更に挙げられる。
【０１４０】
いくつかの明細書を製造するためこのような抗体−メイタンシノイド複合体の作製に関
するいくつかの詳細が米国特許明細書第６，３３３，４１０号、同第６，４４１，１６３
号、同第６，７１６，８２１号、及び同第７，３６８，５６５号に提供され、それぞれは
、その全体が本明細書に組み込まれている。
【０１４１】
一般的に、水性緩衝剤中の抗体溶液は、反応性基を担持するジスルフィド部分を有する
モル過剰のメイタンシノイドでインキュベートされ得る。反応混合物は、過剰アミン（例
えばエタノールアミン、タウリンなど）を添加してクエンチすることができる。次いで、
メイタンシノイド抗体複合体は、ゲルろ過によって精製され得る。
【０１４２】
１つの抗体分子当たりに結合するメイタンシノイド分子数は、吸光度比２５２ｎｍ及び
２８０ｎｍにて、分光光度法により測定することによって、決定することができる。マイ
タンシノイド分子／抗体の平均数は、例えば、１〜１０または２〜５であってもよい。マ
イタンシノイド分子／抗体の平均数は、例えば、約３〜約４であってもよい。マイタンシ
ノイド分子／抗体の平均数は約３．５であってもよい。
【０１４３】
抗体とメイタンシノイドまたはその他の薬剤との複合体は、インビトロにおいて、種々
の不要な細胞株の増殖を抑制するそれらの能力を評価され得る。例えば、ヒトリンパ腫細
胞株Ｄａｕｄｉ及びヒトリンパ腫細胞株Ｒａｍｏｓなどの細胞株は、これら化合物の細胞
毒性の評価に容易に使用することができる。評価対象の細胞は、４〜５日間、化合物に曝
露させることができ、細胞の残存分画は、既知の方法により直接アッセイにて測定される
。次に、アッセイ結果からＩＣ５０値を求めることができる。
【０１４４】
免疫複合体は、本明細書に記載のいくつかの実施形態に従って、細胞内に内在化され得
る。したがって、ＦＯＬＲ１発現細胞に取り込まれるか、またはＦＯＬＲ１発現細胞に内
在化するとき、免疫複合体は、治療的効果を発揮することができる。いくつかの特定の実
施形態では、免疫複合体は、抗体、抗体断片またはポリペプチドを含み、分割可能リンカ
ーによって細胞毒性剤に連結され、また、細胞毒性剤は、抗体、抗体断片またはポリペプ
チドから分割され、ＦＯＬＲ１発現細胞によって内在化される。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、免疫複合体は、腫瘍容積を低減することができる。例えば、
いくつかの実施形態では、免疫複合体による治療により、Ｔ／Ｃ値が約５０％未満、約４
５％未満、約４０％未満、約３５％未満、約３０％未満、約２５％未満、約２０％未満、
約１５％未満、約１０％未満、約５％未満となる。いくつかの特定の実施形態では、免疫
複合体により、ＫＢ、ＯＶＣＡＲ−３、ＩＧＲＯＶ−１及び／またはＯＶ−９０異種移植
片モデルでの腫瘍径が低減し得る。いくつかの実施形態では、免疫複合体は、転移を阻害
することができる。
ＩＩＩ.ＦＯＬＲ１−結合剤の投与方法
【０１４６】
本発明のＦＯＬＲ１−結合剤（抗体、免疫複合体及びポリペプチドなど）は、これらに
限定されないが、癌治療などの治療的処置方法など、多様な用途において有益である。あ
る種の実施形態において、薬剤は、腫瘍成長の阻害、分化の誘導、転移の阻害、腫瘍容積
の減少、及び／または腫瘍の腫瘍形成能の減少に有用である。使用方法は、インビボ法で
あってもよい。
【０１４７】
本明細書記載の方法によって、抗ＦＯＬＲ１結合剤は、特定の用量で投与され得る。例
えば、ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ＩＭＧＮ８５３）は、投与量約０．１５ｍｇ／ｋｇ
〜約７ｍｇ／ｋｇで投与され得る。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤（例え
ば、ＩＭＧＮ８５３）は、投与量約３．０ｍｇ／ｋｇ〜約６．０ｍｇ／ｋｇで投与される
。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ＩＭＧＮ８５３）は、投与量
約３．３ｍｇ／ｋｇ〜約６．０ｍｇ／ｋｇで投与される。いくつかの実施形態では、ＦＯ
ＬＲ１−結合剤（例えば、ＩＭＧＮ８５３）は、投与量約０．１５ｍｇ／ｋｇで投与され
る。したがって、いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ＩＭＧＮ８５
３）は、投与量約０．５ｍｇ／ｋｇで投与される。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１
−結合剤（例えば、ＩＭＧＮ８５３）は、投与量約１．０ｍｇ／ｋｇで投与される。いく
つかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ＩＭＧＮ８５３）は、投与量約２．
０ｍｇ／ｋｇで投与される。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、Ｉ
ＭＧＮ８５３）は、投与量約３．０ｍｇ／ｋｇで投与される。いくつかの実施形態では、
ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ＩＭＧＮ８５３）は、投与量約３．３ｍｇ／ｋｇで投与さ
れる。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ＩＭＧＮ８５３）は、投
与量約５．０ｍｇ／ｋｇで投与される。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤（
例えば、ＩＭＧＮ８５３）は、投与量約５．５ｍｇ／ｋｇで投与される。いくつかの実施
形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ＩＭＧＮ８５３）は、投与量約６．０ｍｇ／ｋ
ｇで投与される。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、ＩＭＧＮ８５
３）は、投与量約６．５ｍｇ／ｋｇで投与される。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１
−結合剤（例えば、ＩＭＧＮ８５３）は、投与量約７．０ｍｇ／ｋｇで投与される。
【０１４８】
更に、ＦＯＬＲ１−結合剤は、特定の投与間隔で投与され得る。例えば、ＦＯＬＲ１結
合剤は、約４回／週〜約１回／４週で投与され得る。したがって、いくつかの実施形態で
は、ＦＯＬＲ１−結合剤は、約１回／３週で投与される。いくつかの実施形態では、ＦＯ
ＬＲ１−結合剤は、約１回／2．５週で投与される。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ
１−結合剤は、約１回／２週で投与される。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合
剤は、約１回／１０日で投与される。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、
約１回／週で投与される。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、約１回／５
日で投与される。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、約１回／４日で投与
される。したがって、いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、約１回／３日で
投与される。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、約１回／２日で投与され
る。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、約2回／1週で投与される。いくつ
かの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、約３回／週で投与される。
【０１４９】
また、ＦＯＬＲ１−結合剤は、約３週間（即ち、約２１日）サイクルで投与され得る。
例えば、ＦＯＬＲ１−結合剤は、約３週間で２回投与され得る。したがって、いくつかの
実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、２１日サイクルの約第１日目及び第８日目に投与
され得る。その他の実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、約３週間で３回投与され得る
。したがって、いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、２１日サイクルの約第
１日目、第８日目及び第１５日目に投与され得る。
【０１５０】
また、ＦＯＬＲ１−結合剤は、約４週間（即ち、約２８日）サイクルで投与され得る。
例えば、ＦＯＬＲ１−結合剤は、約４週間で３回投与され得る。したがって、いくつかの
実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、２８日サイクルの約第１日目、第８日目及び第１
５日目に投与され得る。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、特定のＣｍａｘとなる投与量で投与
され得る。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、Ｃｍａｘが約０．５〜約２
５０μｇ／ｍＬとなる投与量で投与され得る。したがって、いくつかの実施形態では、Ｆ
ＯＬＲ１−結合剤は、Ｃｍａｘが約５０〜約２５０μｇ／ｍＬとなる投与量で投与される
。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、Ｃｍａｘが約５０〜約２００μｇ／
ｍＬとなる投与量で投与される。したがって、いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結
合剤は、Ｃｍａｘが約５０〜約１７５μｇ／ｍＬとなる投与量で投与される。いくつかの
実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、Ｃｍａｘが約５０〜約１５０μｇ／ｍＬとなる投
与量で投与される。したがって、いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、Ｃｍ
ａｘが約１００〜約１７５μｇ／ｍＬとなる投与量で投与される。いくつかの実施形態で
は、ＦＯＬＲ１−結合剤は、Ｃｍａｘが約１００〜約１５０μｇ／ｍＬとなる投与量で投
与される。
【０１５２】
ある種の実施形態にて、ＦＯＬＲ１−結合剤は、特定のＡＵＣとなる投与量で投与され
得る。例えば、ＦＯＬＲ１−結合剤は、ＡＵＣが約５０ｈｒ・μｇ／ｍＬ〜約１８，００
０ｈｒ・μｇ／ｍＬとなる投与量で投与され得る。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１
−結合剤は、ＡＵＣが約１０，０００ｈｒ・μｇ／ｍＬ〜約１８，０００ｈｒ・μｇ／ｍ
Ｌとなる投与量で投与され得る。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、ＡＵ
Ｃが約１０，０００ｈｒ・μｇ／ｍＬ〜約１７，５００ｈｒ・μｇ／ｍＬとなる投与量で
投与され得る。いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、ＡＵＣが約１０，００
０ｈｒ・μｇ／ｍＬ〜約１７，０００ｈｒ・μｇ／ｍＬとなる投与量で投与され得る。い
くつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、ＡＵＣが約１０，０００ｈｒ・μｇ／ｍ
Ｌ〜約１６，０００ｈｒ・μｇ／ｍＬとなる投与量で投与され得る。いくつかの実施形態
では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、ＡＵＣが約１０，０００ｈｒ・μｇ／ｍＬ〜約１５，００
０ｈｒ・μｇ／ｍＬとなる投与量で投与され得る。
【０１５３】
ある種の実施形態において、病気で処理されたＦＯＬＲ１−結合剤またはアンタゴニス
ト（例えば、抗ＦＯＬＲ１抗体）で治療される疾患は、癌である。ある種の実施形態にお
いて、癌は、ＦＯＬＲ１−結合剤（例えば、抗体）が結合するＦＯＬＲ１発現細胞を特徴
とする。ある種の実施形態において、腫瘍により、ヒトＦＯＬＲ１が過剰発現する。
【０１５４】
本発明は、治療的有効量のＦＯＬＲ１−結合剤を対象（例えば、治療の必要のある対象
）に投与することを含む、癌の治療方法を提供する。本発明に包含される方法によって治
療され得る癌は、これらに限定されないが、新生物、腫瘍、転移または制御されていない
細胞増殖によって特徴付けられる任意の疾患または障害が挙げられる。癌は、原発性癌ま
たは転移性癌であり得る。本発明が包含する方法により治療され得る癌の具体例としては
、これらに限定されないが、卵巣癌、肺癌、結腸癌、膵癌、肝癌、乳癌、脳腫瘍、腎癌、
前立腺癌、消化管癌、黒色腫、子宮頸癌、膀胱癌、神経膠芽細胞腫、及び頭頸部癌が挙げ
られる。ある種の実施形態にて、癌は、卵巣癌である。ある種の実施形態にて、癌は、肺
癌である。
【０１５５】
いくつかの実施形態では、癌は、ＦＯＬＲ１（ポリペプチドまたは核酸）を発現させる
癌である。例えば、米国特許公開第２０１２／０２８２１７５号、または国際特許出願Ｗ
Ｏ２０１２／１３５６７５号（双方とも、それらの全体が参照として本明細書に組み込ま
れる）に記載されているように、いくつかの実施形態では、ＦＯＬＲ１−結合剤は、ＦＯ
ＬＲ１発現レベルが上昇している患者に投与する。このため、いくつかの実施形態では、
ＦＯＬＲ１発現は、免疫組織化学（ＩＨＣ）によって測定され、定義されたスコアを示す
対照（例えば、較正対照）と比較することによって、染色強度スコア及び／または染色均
一性スコアが得られる（例えば、その強度が較正対照の強度レベル３に相当する場合、試
験サンプルの強度スコアを３とし、または、その強度が較正対照の強度レベル２に相当す
る場合、試験サンプルの強度スコアを２とする）。また、不均質または均質である染色均
一性は、ＦＯＬＲ１の発現の増加を示す。染色強度スコア及び染色均一性スコアは、単独
でまたは組み合わせて（例えば、ホモ２、ヘテロ２、ホモ３、ヘテロ３など）使用可能で
ある。別の実施例では、ＦＯＬＲ１発現の増大が、対照値に対して、少なくとも２倍、少
なくとも３倍または少なくとも５倍上昇が検出されることによって（例えば、ＦＯＬＲ１
値の上昇を有する癌の有無にかかわらず患者の組織または細胞中での発現レベル）、決定
され得る。
【０１５６】
いくつかの実施形態では、癌は、ＩＨＣによって、ヘテロ２以上のレベルでＦＯＬＲ１
が発現する癌である。いくつかの実施形態では、癌は、ＩＨＣによって、ヘテロ３以上の
レベルでＦＯＬＲ１が発現する癌である。いくつかの実施形態では、癌は、ＩＨＣによっ
て、ヘテロ２以上のレベルでＦＯＬＲ１が発現する肺癌である。いくつかの実施形態では
、癌は、ＩＨＣによって、ヘテロ３以上のレベルでＦＯＬＲ１が発現する肺癌である。
【０１５７】
ある種の実施形態では、腫瘍増殖阻害方法は、治療的有効量のＦＯＬＲ１−結合剤を対
象に投与することを含む。ある種の実施形態にて、対象はヒトである。ある種の実施形態
において、対象は、腫瘍を有するか、または腫瘍を除去している。
【０１５８】
更に、本発明は、治療的有効量のＦＯＬＲ１−結合剤を対象に投与することを含む、対
象において腫瘍の腫瘍形成能を低下させる方法を提供する。ある種の実施形態にて、腫瘍
は、癌幹細胞を含む。ある種の実施形態にて、本薬剤の投与によって、腫瘍中における癌
幹細胞の発生頻度が低下する。
【０１５９】
本発明は、本明細書に記載された１種以上のＦＯＬＲ１−結合剤を含む医薬組成物を更
に提供する。ある種の実施形態において、医薬組成物は、医薬上許容されるビヒクルを更
に含む。これらの医薬組成物から、腫瘍増殖の阻害及びヒト患者における癌治療に使用す
ることがわかる。
【０１６０】
ある種の実施形態において、製剤は保存及び使用のために、精製抗体または本発明の薬
剤を医薬上許容されるビヒクル（例えば、担体、賦形剤）と組み合わせることにより調製
される（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏ
ｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ２０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，
２０００）。好適な医薬上許容されるヒビクルとしては、これに限定されるものではない
が、リン酸塩、クエン酸、及び、他の有機酸などの無毒性バッファ；塩化ナトリウムなど
の塩類；アスコルビン酸及びメチオニンを含む酸化防止剤；防腐剤（例えば、オクタデシ
ルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；ヘキサメトニウムクロリド；ベンザルコニウ
ムクロリド；ベンゼトニウムクロリド；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール；
メチルまたはプロピルパラベンなどのアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；
シクロヘキサノール；３−ペンタノール；及びｍ−クレゾール）；低分子量ポリペプチド
（例えば約１０未満のアミノ酸残基）；血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリ
ンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミ
ン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、またはリジンなどのアミノ酸；単糖、二糖
、グルコース、マンノース、またはデキストリンなどの炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレー
ト剤；ショ糖などの糖、マンニトール、トレハロースまたはソルビトール；ナトリウムな
どの塩形成対イオン；金属錯体（例えばＺｎ−タンパク質複合体）；及びＴＷＥＥＮまた
はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤が挙げられる。
【０１６１】
本明細書に記載された医薬組成物は、局所または全身治療のいずれかの任意の数の方法
で投与され得る。投与は、経皮貼布、軟膏、ローション剤、クリーム、ゲル類、ドロップ
、坐薬、スプレー、液剤及び粉剤などの（経膣及び経直腸送達を含む粘膜への）局所；経
肺（例えば、ネブライザー、気管内、鼻腔内、表皮性及び経皮によるなどの粉剤またはエ
アゾールの吸入またはガス注入によって）；経口；または非経口（静脈内、動脈内、皮下
、腹腔内または筋肉内注射若しくは浸剤など）；または頭蓋内（例えば、くも膜下腔内ま
たは脳室内）投与などであってもよい。いくつかの特定の実施形態では、投与は静脈内で
行われる。
【０１６２】
抗体または免疫複合体は、医薬併用製剤中においてまたは併用療法としての投与計画内
において、第２の化合物と組み合わせることができる。いくつかの実施形態では、第２の
化合物は、ステロイドである。いくつかの実施形態では、本方法は、免疫複合体の単独投
与と比較して、頭痛が減少する、ステロイド及び免疫複合体の投与を包含する。
【０１６３】
ステロイドは、免疫複合体と同時に、免疫複合体の投与前、及び／または投与後に投与
してもよい。いくつかの実施形態では、免疫複合体を投与する前の約１週間、約５日、約
３日、約２日、または約１日または２４時間以内にステロイドを投与する。いくつかの実
施形態では、免疫複合体を投与して１日以内にステロイドを投与する。いくつかの実施形
態では、ステロイドは、複数回投与する。いくつかの実施形態では、免疫複合体投与前の
約１日及び免疫複合体を投与した同じ日に、ステロイドを投与する。ステロイドは、例え
ば、局所的、経肺、経口、非経口または頭蓋内投与など、任意の数の方法を介して投与さ
れ得る。いくつかの実施形態では、経口投与が行われる。いくつかの実施形態では、静脈
内投与が行われる。いくつかの実施形態では、経口投与及び静脈内投与がいずれも行われ
る。
【０１６４】
また、抗体または免疫複合体は、医薬併用製剤中においてまたは併用療法としての投与
計画内において、鎮痛薬または頭痛を予防または治療する他の薬剤と組み合わせることが
できる。例えば、アセトアミノフェン及び／またはジフェンヒドラミンは、抗体または免
疫複合体の投与に加えて、投与することができる。鎮痛剤は、免疫複合体の投与前、投与
と同時に、または投与後に投与してもよく、また、任意の適切な投与経路を介してもよい
。いくつかの実施形態では、鎮痛剤は、経口投与される。
【０１６５】
いくつかの実施形態では、この方法は、抗体または免疫複合体である第１の化合物と、
ステロイドである第２の化合物と、鎮痛剤である第３の化合物とを投与することを含む。
いくつかの実施形態では、この方法は、ＩＭＧＮ３８８である第１の化合物と、デキサメ
タゾンである第２の化合物と、アセトアミノフェン及び／またはジフェンヒドラミンであ
る第３の化合物とを投与することを含む。
【０１６６】
抗体または免疫複合体は、医薬併用製剤中においてまたは併用療法としての投与計画内
において、抗癌特性を有する第２の化合物と組み合わせることができる。医薬併用製剤の
第２の化合物または投与計画は、これらの薬剤が互いに副作用を及ぼすことのないように
、その併用剤のＡＤＣに対する相補的活性を有することができる。ＦＯＬＲ１−結合剤及
び第２の抗癌剤を含む医薬組成物も提供される。
＊  ＊  ＊
【０１６７】
本開示の実施形態は、更に、以下の非限定例を参照することによって規定することがで
き、特定の抗体の調製及び本開示の抗体の使用方法は、詳細に記述する。当業者には、多
くの修正形態（材料及び方法のいずれも）は、本発明の範囲から逸脱せず、実施し得るこ
とは、明らかとなるであろう。
【実施例】
【０１６８】
本明細書に記載の実施例及び実施形態は、例証のみを目的にするものであり、それらを
考慮した種々の修正形態または変更形態が当業者に提示され、また、本出願の趣旨及び権
限の範囲内である。
実施例１
ヒト癌患者におけるＩＭＧＮ８５３投与治験
【０１６９】
ＩＭＧＮ８５３は、葉酸受容体１（ＦＯＬＲ１）−結合抗体及び強力なマイタンシノイ
ドＤＭ４を含む抗体−薬物複合体（ＡＤＣ）である。ＩＭＧＮ８５３は、前述のとおり、
国際公開特許ＷＯ２０１１／１０６５２８、ＷＯ２０１２／１３５６７５及びＷＯ２０１
２／１３８７４９並びに米国公開特許第２０１２／０００９１８１号、第２０１２／０２
８２１７５号及び第２０１２／０２８２２８２号に記述されており、本明細書にその全体
が、それぞれ、参照として組み込まれる。ＩＭＧＮ８５３は、ｈｕＭｏｖ１９−ｓＳＰＤ
Ｂ−ＤＭ４であり、ｈｕＭｏｖ１９抗体は、アミノ酸配列番号３を有する可変重鎖及びア
ミノ酸番号５を有する可変軽鎖を含有する。ＦＯＬＲ１タンパク質は、高濃度で、特に、
上皮性卵巣癌（ＥＯＣ）、子宮内膜癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び腎明細胞癌など
、多くの固体腫瘍上に発現する。
【０１７０】
最大耐量（ＭＴＤ）及び第ＩＩ相推奨投与量（ＲＰ２Ｄ）を測定するため及びＩＭＧＮ
８５３の安全性、薬物動態学（ＰＫ）、薬動力学（ＰＤ）及び有効性を評価するための試
験を開始した。本試験には、ＩＭＧＮ８５３免疫複合体が、上皮性卵巣癌（ＥＯＣ）及び
他のＦＯＬＲ１−陽性固形腫瘍などの任意の種類のＦＯＬＲ１−発現難治性固形腫瘍を有
する患者に投与される用量漸増部分及び用量拡大部分の２つの構成が含まれる。
【０１７１】
本試験の用量漸増部分については、ＩＭＧＮ８５３は、各２１日（三週間）サイクルの
第１日目に、静脈内投与（ＩＶ）された。１８名の患者が、０．１５〜７．０ｍｇ／ｋｇ
ＩＭＧＮ８５３の範囲の７つの投与レベルにわたり、登録した：ＥＯＣ患者１１名、子宮
内膜癌患者５名、明細胞腎癌患者２名（表１を参照されたい）。１８名の患者のうち８名
において、治験薬との関連が考慮される有害事象（ＡＥ）が報告された。ＡＥのほとんど
が、軽度または中程度であった。
【表１】
2018197249.tif 000009
【０１７２】
投与量７．０ｍｇ／ｋｇで、４名の患者が眼毒性を経験した。１名の患者は、グレード
３の用量制限点状角膜炎及びグレード２の視朦を報告され、いずれも、明確に、試験治療
に関連するとみなされた。更に、１名の患者は、それぞれグレード３、グレード２及びグ
レード１の視朦を伴っており、いずれの事象も、おそらく、または、明確に、ＩＭＧＮ８
５３治療に関連したとみなされた。その結果、７．０ｍｇ／ｋｇでこの投与スケジュール
の最大耐量（即ち、３週に１回）は、超過するとみなされ、かつ、投与量７．０ｍｇ／ｋ
ｇでの残りの全患者は、投与量をその前の投与量（５．０ｍｇ／ｋｇ）まで減少させた。
【０１７３】
１４名の患者を対象に薬物曝露を計測し、一般に、直線的に上昇し、３．３ｍｇ／ｋｇ
以上の投与量での半減期が約４日であることがわかった。２名の患者は、ＣＡ１２５応答
が確認されていることが報告されており、そのうちの１名は、漿液性卵巣癌を有し、もう
１名は、漿液性子宮内膜癌を有している。更に、子宮内膜癌患者は、未確認の部分的応答
が得られた。５．０ｍｇ／ｋｇ以上の投与量で、ＩＭＧＮ８５３を投与される患者は、抗
ＦＯＬＲ１免疫複合体（例えば、ＩＭＧＮ８５３）の投与前３０〜６０分、ＩＶで１０ｍ
ｇ（または、類似ステロイドの等量）、デキサメタゾンを投与された。
【０１７４】
ＩＭＧＮ８５３第Ｉ相臨床試験のサイクル１について薬物動態学（ＰＫ）パラメーター
を報告する。（図１）ＩＭＧＮ８５３のクリアランスは、低用量（ＣＬ＝１．１ｍＬ／ｈ
ｒ／ｋｇ）で急速であり、半減期は約３５．４時間または１．５日であることがわかる。
更に高用量でクリアランスは、低下し（ＣＬ＝０．４ｍＬ／ｈｅｒ／ｋｇ）、半減期は、
増大して７．０ｍｇ／ｋｇで約４日である。曝露量（ＡＵＣ）及びＣｍａｘは、一般に、
更に高い投与量で同様に上昇していることがわかる。
【０１７５】
用量漸増臨床試験から、ＩＭＧＮ８５３は、投与量５．０ｍｇ／ｋｇ以下で十分に耐性
を示すことが明らかになった。投与量レベル５．０ｍｇ／ｋｇで引き続き登録を行った。
以前７．０ｍｇ／ｋｇにて治療を受け、引き続き研究を行う場合、いずれの患者も、投与
量を５．０ｍｇ／ｋｇまで減少させた。また、追加の患者は、５．０ｍｇ／ｋｇに登録さ
れ、元来、この投与量に指示された３名に認められる安全特性を更に確認する。
【０１７６】
一旦、ＭＴＤが確定すると、本試験は、用量拡大フェーズに進む。３つの拡大コホート
では、ＦＯＬＲ１タンパク質陽性（１）プラチナ耐性上皮性卵巣癌；（２）再発性または
難治性上皮性卵巣癌、及び（３）再発性または難治性非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）を有す
る患者を評価する。コホート２及びコホート３は、それぞれ、投与前及び投与後の腫瘍生
検及び／またはＦＬＴ−ＰＥＴ画像による、ＩＭＧＮ８５３のＰＤ評価を有する。ＩＭＧ
Ｎ８５３は、少なくとも３．３ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、投与量５．０ｍｇ／ｋｇ
または６．０ｍｇ／ｋｇと同じ量を含んでもよい。まず、ＩＭＧＮ８５３は、速度１ｍｇ
／分で投与されるものとする。３０分後、十分に耐性がある場合には、速度は、３ｍｇ／
分まで上げてもよい。３ｍｇ／分で３０分後に十分に耐性が認められる場合、速度を５ｍ
ｇ／分まで上げてもよい。その後の注射は、耐性を示した速度で行われる。
【０１７７】
３．３ｍｇ／ｋｇ以上でのＩＭＧＮ８５３投与にはいずれも、実施例２に記載のプロト
コールを用いる予防的ステロイド治療が含まれる（例えば、１０ｍｇでは、ＩＭＧＮ８５
３投与前３０〜６０分にはデキサメタゾンのＩＶ（または類似のステロイド等価物）が必
要であり、ＩＭＧＮ８５３投与前には、予防的ジフェンヒドラミンＨＣｌ及びアセトアミ
ノフェンが推奨される）。サイクルは、以下となるまで、繰り返し行う。（ｉ）患者の疾
患が悪化する、（ｉｉ）患者が許容不可能な毒性を受ける、（ｉｉｉ）患者の同意を得ら
れない、（ｉｖ）患者が更なる試験治療を阻む併発状態を発現させる、または（ｖ）患者
がコンプライアンス不履行または管理上の理由により中断する。
【０１７８】
応答は、ＲＥＣＩＳＴ及びＧｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｔｅｒｇｒｏ
ｕｐ（ＧＣＩＧ）基準を用いて（必要に応じて）評価する。
実施例２
注入反応のためのＩＭＧＮ８５３ステロイド系予防
【０１７９】
注入反応の可能性を低下させるために、任意の以下のステロイド系予防プロトコールを
使用することができる。
【０１８０】
（１）抗ＦＯＬＲ１免疫複合体（例えば、ＩＭＧＮ８５３）の投与前３０〜６０分に、
患者は、デキサメタゾン（または、類似ステロイドの等価物）１０ｍｇをＩＶ投与される
。
【０１８１】
（２）患者は、アセトアミノフェン（３２５〜６５０ｍｇＩＶまたはＰＯ）と併用する
か否かにかかわらず、抗ＦＯＬＲ１免疫複合体（例えば、ＩＭＧＮ８５３）の投与前３０
〜６０分に、デキサメタゾン（または、類似ステロイドの等価物）１０ｍｇのＩＶ投与及
びジフェンヒドラミンＨＣｌ（２５〜５０ｍｇＩＶまたはＰＯ）投与が行われる。このよ
うな予防的プロトコールは、各研究者による自由裁量で推奨される。
【０１８２】
（３）患者は、抗ＦＯＬＲ１免疫複合体（例えば、ＩＭＧＮ８５３）の投与前日に、デ
キサメタゾン８ｍｇ（または、類似ステロイドの等価物）を１日２回、経口投与される。
抗ＦＯＬＲ１免疫複合体（例えば、ＩＭＧＮ８５３）の投与日に、アセトアミノフェン（
３２５〜６５０ｍｇＩＶまたはＰＯ）と併用するか否かにかかわらず、抗ＦＯＬＲ１免疫
複合体（例えば、ＩＭＧＮ８５３）の投与前３０〜６０分に、患者には、デキサメタゾン
（または、類似ステロイドの等価物）１０ｍｇのＩＶ投与及びジフェンヒドラミンＨＣｌ
（２５〜５０ｍｇＩＶまたはＰＯ）投与が行われる。
【０１８３】
（４）ステロイド注射前２４時間以内に（例えば、デキサメタゾンが）経口投与される。
****
【０１８４】
課題を解決するための手段及び要約セクションではなく、発明の実施形態のセクション
は、特許請求の範囲を解釈するために使用されることを意図していることは理解されてい
る。課題を解決するための手段及び要約セクションは、すべてではないが、本発明者（複
数可）によって検討されるように、本発明の１つ以上の例示的実施形態が記載されており
、これらは、本発明及び添付の特許請求の範囲を任意の方法で制限することを目的とする
ものではない。
【０１８５】
本発明は、明記された機能及びそれらの関係の実施を示す機能的構築ブロックを用いて
、上記に記述されている。これらの機能的構築ブロックの境界は、説明の便宜上、本明細
書中で適宜確定する。代替境界は、特定の機能及びこれらの関係が適切に実施される限り
、確定され得る。
【０１８６】
特定の実施形態の前述の説明は、他の者が当業者の知識を適用することによって、特定
の実施形態など種々の応用に対する容易な変更及び／または適応が可能であるように、不
当な実験なく、本発明の一般概念からの逸脱なく、本発明の一般的性質を完全に明らかに
する。このため、こうした適応及び変更形態は、本明細書に開示の教示及び指導に基づい
て、開示された実施形態と同等の意味及び範囲内であることを意図する。本明細書に記載
の語句または用語は、本明細書の用語または語句は、教示及び指導を踏まえて、当事者に
よって解釈されるように、説明することを目的としており、制限するものではないことを
理解すべきである。
【０１８７】
本発明の幅及び範囲は、任意の上述の例示的実施形態によって制限されるものであって
はならないが、以下の請求項及びそれらの等価物によって規定されるものとする。
配列
配列番号１−ヒト葉酸受容体１
MAQRMTTQLLLLLVWVAVVGEAQTRIAWARTELLNVCMNAKHHKEKPGPEDKLHEQCRPWRKNACCSTNTSQEAHKDVSY
LYRFNWNHCGEMAPACKRHFIQDTCLYECSPNLGPWIQQVDQSWRKERVLNVPLCKEDCEQWWEDCRTSYTCKSNWHKGW
NWTSGFNKCAVGAACQPFHFYFPTPTVLCNEIWTHSYKVSNYSRGSGRCIQMWFDPAQGNPNEEVARFYAAAMSGAGPWA
AWPFLLSLALMLLWLLS
配列番号２−ヒト葉酸受容体１核酸配列
atggctcagcggatgacaacacagctgctgctccttctagtgtgggtggctgtagtaggggaggctcagacaaggattgc
atgggccaggactgagcttctcaatgtctgcatgaacgccaagcaccacaaggaaaagccaggccccgaggacaagttgc
atgagcagtgtcgaccctggaggaagaatgcctgctgttctaccaacaccagccaggaagcccataaggatgtttcctac
ctatatagattcaactggaaccactgtggagagatggcacctgcctgcaaacggcatttcatccaggacacctgcctcta
cgagtgctcccccaacttggggccctggatccagcaggtggatcagagctggcgcaaagagcgggtactgaacgtgcccc
tgtgcaaagaggactgtgagcaatggtgggaagattgtcgcacctcctacacctgcaagagcaactggcacaagggctgg
aactggacttcagggtttaacaagtgcgcagtgggagctgcctgccaacctttccatttctacttccccacacccactgt
tctgtgcaatgaaatctggactcactcctacaaggtcagcaactacagccgagggagtggccgctgcatccagatgtggt
tcgacccagcccagggcaaccccaatgaggaggtggcgaggttctatgctgcagccatgagtggggctgggccctgggca
gcctggcctttcctgcttagcctggccctaatgctgctgtggctgctcagc
配列番号：３−ｈｕＭｏｖ１９  ｖＨＣ
QVQLVQSGAEVVKPGASVKISCKASGYTFTGYFMNWVKQSPGQSLEWIGRIHPYDGDTFYNQKFQGKATLTVDKSSNTAH
MELLSLTSEDFAVYYCTRYDGSRAMDYWGQGTTVTVSS
配列番号４−ｈｕＭｏｖ１９  ｖＬＣｖ１．００
DIVLTQSPLSLAVSLGQPAIISCKASQSVSFAGTSLMHWYHQKPGQQPRLLIYRASNLEAGVPDRFSGSGSKTDFTLNIS
PVEAEDAATYYCQQSREYPYTFGGGTKLEIKR
配列番号：５−ｈｕＭｏｖ１９  ｖＬＣｖ１．６０
DIVLTQSPLSLAVSLGQPAIISCKASQSVSFAGTSLMHWYHQKPGQQPRLLIYRASNLEAGVPDRFSGSGSKTDFTLTIS
PVEAEDAATYYCQQSREYPYTFGGGTKLEIKR
配列番号：６−ｈｕＭｏｖ１９  ｖＬＣ  ＣＤＲ１
KASQSVSFAGTSLMH
配列番号：７−ｈｕＭｏｖ１９  ｖＬＣ  ＣＤＲ２
RASNLEA
配列番号：８−ｈｕＭｏｖ１９  ｖＬＣ  ＣＤＲ３
QQSREYPYT
配列番号：９−ｈｕＭｏｖ１９  ｖＨＣ  ＣＤＲ１
GYFMN
配列番号：１０−ｈｕＭｏｖ１９  ｖＨＣ  ＣＤＲ２−Ｋａｂａｔ定義
RIHPYDGDTFYNQKFQG
配列番号：１１−ｈｕＭｏｖ１９  ｖＨＣ  ＣＤＲ２−Ａｂｍ定義
RIHPYDGDTF
配列番号：１２−ｈｕＭｏｖ１９  ｖＨＣ  ＣＤＲ３
YDGSRAMDY
配列番号：１３−ｈｕＭｏｖ１９  ＨＣアミノ酸配列
QVQLVQSGAEVVKPGASVKISCKASGYTFTGYFMNWVKQSPGQSLEWIGRIHPYDGDTFYNQKFQGKATLTVDKSSNTAH
MELLSLTSEDFAVYYCTRYDGSRAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWN
SGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPS
VFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEY
KCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLD
SDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
配列番号：１４−ｈｕＭｏｖ１９  ＬＣｖ１．００  
DIVLTQSPLSLAVSLGQPAIISCKASQSVSFAGTSLMHWYHQKPGQQPRLLIYRASNLEAGVPDRFSGSGSKTDFTLNIS
PVEAEDAATYYCQQSREYPYTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQS
GNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
配列番号：１５−ｈｕＭｏｖ１９  ＬＣｖ１．６０
DIVLTQSPLSLAVSLGQPAIISCKASQSVSFAGTSLMHWYHQKPGQQPRLLIYRASNLEAGVPDRFSGSGSKTDFTLTIS
PVEAEDAATYYCQQSREYPYTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQS
GNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
配列番号：１６−ｍｕＭｏｖ１９  ｖＨＣ  ＣＤＲ２−Ｋａｂａｔ定義
RIHPYDGDTFYNQNFKD
【図１】
2018197249.tif 000010
【配列表】
2018197249000001.app
【外国語明細書】
2018197249000001.pdf