(57)【要約】【課題】本発明は、プリナブリン（plinabulin）（ｔ−ブチル−デヒドロフェニラヒスチン、すなわちＮＰＩ−２３５８）、及びタキサン化合物（ドセタキセル等）を組み合わせ使用する新規がん治療方法を提供する。【解決手段】我々の研究によれば、タキサン化合物の後にプリナブリンを注射する最適な組合せが、動物モデル、及びＮＳＣＬＣがん患者における大きな腫瘍分布において、タキサン化合物治療単独と比較して予想外に増強された有効性を発揮することが示された。加えて、この最適な組合せによりタキサン化合物は、全てのグレードでその好中球減少症率を減少させること、そして癌患者におけるＧ−ＣＳＦ使用を減少させることを含め、我慢できない副作用を低下させることに、予想外の安全性効果を達成することができる。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
タキサン化合物の活性成分（ａ）；及びプリナブリンの活性成分（ｂ）を含む医薬品の組合せ。
【請求項２】
タキサン化合物が、パクリタキセル、ドセタキセル、及びアブラキサンを含む、請求項１に記載の組合せ。
【請求項３】
組合せが、ドセタキセル、及びプリナブリンからなる、請求項１に記載の組合せ。
【請求項４】
がんを治療する及び／又は予防する薬物を調製するための、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬の組合せの使用。
【請求項５】
前記がんが、肺癌、結腸癌、肝癌、乳癌、前立腺癌、及び多発性骨髄腫からなる群から選択される、請求項４に記載の使用。
【請求項６】
がん、特に、腫瘍寸法が、＞３ｃｍ、＞５ｃｍ、又は＞７ｃｍであるがんを治療する及び／又は予防するための、タキサンの活性成分（ａ）、及びプリナブリンの活性成分（ｂ）を含む、組成物、キット、又は混合物の使用。
【請求項７】
（ｉ）活性成分（ａ）としてのタキサン化合物、及び任意の医薬的に許容できる担体を含む第１の薬剤を含有する第１の容器；及び
（ｉｉ）活性成分（ｂ）としてのプリナブリン、及び任意の医薬的に許容できる担体を含む第２の薬剤を含有する第２の容器；
（ｉｉｉ）がんの治療及び／又は予防のための、活性成分（ｂ）との組み合わせでの活性成分（ａ）の投与を記録した使用説明書、
を含むキット。
【請求項８】
タキサンの活性成分（ａ）；
プリナブリンの活性成分（ｂ）；及び
（ｃ）医薬的に許容できる担体、
を含む医薬組成物。
【請求項９】
タキサンの副作用を低減するのに使用する医薬を調製するための、プリナブリンの使用。
【請求項１０】
タキサンの活性成分（ａ）及びプリナブリンの活性成分（ｂ）を、投与を必要とする哺乳動物に投与するステップを含む、がんを治療及び／又は予防する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医学分野、特に、がん患者の治療におけるプリナブリン及びタキサンの組合せがん治療方法、及びタキサンの安全性を劇的に向上し、タキサンの副作用を劇的に減少し、並びに、動物モデル及びがん患者の大きな腫瘍のその予想外の有効性に関する。
【背景技術】
【０００２】
がんは、世界中で疾病による死の主要因として循環器疾患を追い越した。米国では、百万人超の人々が、毎年、がんになり、一方、中国では、３百万人超の人々が、毎年、がんになる。世界中の新たながん症例の４５％が中国で起こっている。がんに対する最も広範に使用される治療は、タキサンなどの化学療法薬である。しかしながら、高好中球減少率（３０〜４０％でグレード３〜４）を含むタキサンの耐えがたい副作用のため、その用量を、使用中に減らさなければならず、又はその使用を中止しなければならないほどであり、それ故、がん患者のその有効性の低下及び治療期間を短縮となる。
【０００３】
肺がんは、米国、中国、及び世界中で、がん関連死亡率の主要原因である。非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）は、肺がんの全症例の約８０％を占める。ほとんどの患者がＮＳＣＬＣと診断される時までに、病気は既に進行している。進行型ＮＳＣＬＣに対する標準的認可済み療法としては、一般に、プラチン系、タキサン、ビンカアルカロイド系、ペメトレキセド、及び／又は上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害薬を含む一連の化学療法薬が挙げられる。
【０００４】
ドセタキセルは、米国、欧州連合、中国及び多数の他の国々で、ＮＳＣＬＣのセカンドライン治療として認可されたタキサン化合物である。ドセタキセルは、細胞内の微小管ネットワークを破壊することにより機能する。過敏症応答及び体液貯留の可能性を最小化するデキサメタゾン前投薬と一緒に、７５ｍｇ／ｍ2の用量で、３週間毎に１回の１時間静脈（ＩＶ）点滴として、一般に投与する。プラチナ製剤を用いた化学療法レジメンで前治療したＮＳＣＬＣを有する患者のドセタキセルを用いた２つのランダム治験では、全生存期間（ＯＳ）の中央値は、５．７〜７．５ヶ月の範囲であった。
【０００５】
ドセタキセルの最も共通の副作用としては、炎症、好中球減少症、貧血症、発熱性好中球減少症、過敏症、血小板減少症などが挙げられる。いくつかの追加の化学療法薬は、ステージＩＩＩｂ／ＩＶ  ＮＳＣＬＣのセカンドライン治療薬として認可された（ペメトレキセド、エルロチニブ、及びゲフィチニブ）が、臨床的に均等なＯＳ結果を有する。広いタイプのＮＳＣＬＣ患者（ステージＩＩＩｂ／ＩＶ、セカンドライン）では、ドセタキセルコホート（７５ｍｇ／ｍ2）のＯＳは、８．２ヶ月、いくつかの他薬物のＯＳよりずっと長かった。従って、ドセタキセルは、依然、セカンドラインＮＳＣＬＣ治療での最適な治療である。
【０００６】
がん治療は、依然、不十分であるので、進行型ＮＳＣＬＣを有する者などがん患者のさらなる抗がん薬の明確なまだ対処されていない医療ニーズがある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、がん治療の最適な方法を提供することである。
【０００８】
本発明の別の目的は、がん、特に肺がんの治療及び／又は予防のための医薬の対応する組合せ、キット及びそれらの使用を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の第１の態様では、タキサン化合物の活性成分（ａ）；及びプリナブリンの活性成分（ｂ）を含む薬物の組合せを提供する。
【００１０】
好ましい実施形態では、該タキサン化合物は、パクリタキセル、ドセタキセル、及びアブラキサンを含む。
【００１１】
好ましい実施形態では、該組合せは、ドセタキセル及びプリナブリンから成る。
【００１２】
本発明の第２の態様では、がんの治療及び／又は予防用薬物の製剤のための第一の態様で、該薬物の組合せの使用を提供する。
【００１３】
好ましい実施形態では、肺がん、結腸がん、肝がん、乳がん、前立腺がん、及び多発性骨髄腫から成る群から選択されるがん。
【００１４】
本発明の第３の態様では、がんの治療及び／又は予防用のタキサンの活性成分（ａ）及びプリナブリンの活性成分（ｂ）を含む組成物の使用、キット又は混合物を提供する。
【００１５】
１つの好ましい実施形態では、該がんは、＞３ｃｍ、＞５ｃｍ、又は＞７ｃｍの腫瘍サイズを有する。
【００１６】
本発明の第４の態様では、
（ｉ）活性成分（ａ）としてタキサン化合物を含み、医薬的に許容できる担体を含んでもよい第一医薬品を含む第一容器；及び
（ｉｉ）活性成分（ｂ）としてプリナブリンを含み、医薬的に許容できる担体を含んでもよい第二医薬品を含む第二容器を含み；
（ｉｉｉ）がんの治療及び／又は予防用の活性成分（ｂ）と組み合わせる活性成分（ａ）の投与について記録している使用説明書を含んでもよい
キットを提供する。
【００１７】
好ましくは、該使用説明書は、プリナブリンを、タキサン投与後１〜２４時間で注射しなければならないことを示している。
【００１８】
好ましくは、１つのキット内に、バイアル当たり２０ｍｇの８個の第一医薬品及びバイアル当たり８０ｍｇの２個の第二医薬品がある。
【００１９】
本発明の第５の態様では：
タキサンの活性成分（ａ）；
プリナブリンの活性成分（ｂ）；及び
（ｃ）医薬的に許容できる担体
を含む医薬組成物を提供する。
【００２０】
１つの好ましい実施形態では、活性成分（ｂ）に対する活性成分（ａ）の比（ｍｇ：ｍｇ）は、１：１００〜５０：１；好ましくは、１．５：１〜４：１である。
【００２１】
１つの好ましい実施形態では、活性成分（ａ）及び活性成分（ｂ）の総量は、該組成物の１〜９９重量％であり；より好ましくは、５〜９０重量％である。
【００２２】
本発明の第６の態様では、タキサンの副作用を減少させるために使用する医薬製剤用の
プリナブリンの使用を提供する。
【００２３】
１つの好ましい実施形態では、該副作用は、好中球減少症、貧血症、熱性好中球減少症、血小板減少症を含む。
【００２４】
本発明の第７の態様では、タキサン化合物の投与前、と同時又は後に、必要とする対象にプリナブリンを投与するステップを含む、タキサンの副作用の減少方法を提供する。
【００２５】
本発明の第８の態様では、次のステップ：タキサンの活性成分（ａ）及びプリナブリンの活性成分（ｂ）を、それを必要とする哺乳類に投与することを含む、がんの治療及び／又は予防方法を提供する。
【００２６】
好ましくは、活性成分（ａ）を最初に投与すること、及びそれから活性成分（ｂ）を投与すること。
【００２７】
本発明の第９の態様では、１〜２４時間後の範囲で、がん治療の改良された有効性のため、ドセタキセル後、プリナブリンを注射しなければならない、対象のがん治療用のプリナブリン及びドセタキセルの組合せの使用方法を提供する。
【００２８】
１つの好ましい実施形態では、該対象は、様々ながんタイプの大きな腫瘍の患者である。
【００２９】
１つの好ましい実施形態では、該対象は、＞３ｃｍ、好ましくは＞５ｃｍ、より好ましくは＞７ｃｍの少なくとも１つの肺原発性腫瘍を有するステージＩＩＩｂ／ＩＶ  ＮＳＣＬＣの患者である。
【００３０】
本発明の第１０の態様では、タキサンの毒性、特に、そのグレード３及び４の好中球減少症を減少させるため、プリナブリンと組み合わせたタキサンの使用方法を提供する。
【００３１】
全グレードのドセタキセルの好中球減少率の低減、及びＧ−ＣＳＦ使用の低減の、ＮＳＣＬＣ患者治療におけるプリナブリン及びドセタキセルの使用方法を提供する。
【００３２】
本発明では、特に上記及び下記（実施例など）技術的特徴を互いに組合せて、それにより、本明細書で明記する必要はないが、新規又は好ましい技術的解決を構築できることを理解するべきである。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】プリナブリンの化学構造を示す。
【図２】実施例１（ＮＳＣＬＣ  ＭＶ５２２腫瘍モデル）の平均重量％変化を示す。ドセタキセルへのプリナブリン（ＮＰＩ−２３５８）の添加は、各薬物使用シーケンス（２時間分離）に依存しないドセタキセル関連動物体重損失を減少させた。
【図３】実施例１（ＮＳＣＬＣ  ＭＶ５２２腫瘍モデル）の平均腫瘍量を示す。プリナブリン（ＮＰＩ−２３５８）の添加は、ドセタキセルの抗腫瘍作用を促進した。相乗効果は、最初にドセタキセルを受けて、次いで、２時間後にＮＰＩ−２３５８を受けた群で、より顕著であった。
【図４Ａ】実施例２（ＮＳＣＬＣ  ＭＶ５２２腫瘍モデル）の平均腫瘍量を示す。ドセタキセルに添加したプリナブリン（ＮＰＩ−２３５８）の抗腫瘍作用促進効果は、最初にドセタキセルを受けて、次いで、１、４、又は２４時間後にプリナブリンを受けた群で同様であった。
【図４Ｂ】実施例２（ＮＳＣＬＣ  ＭＶ５２２腫瘍モデル）の平均腫瘍量を示す。ドセタキセルに添加したプリナブリン（ＮＰＩ−２３５８）の抗腫瘍作用促進効果は、最初にドセタキセルを受けて、次いで、１、４、又は２４時間後にプリナブリンを受けた群で同様であった。
【図４Ｃ】実施例２（ＮＳＣＬＣ  ＭＶ５２２腫瘍モデル）の平均腫瘍量を示す。ドセタキセルに添加したプリナブリン（ＮＰＩ−２３５８）の抗腫瘍作用促進効果は、最初にドセタキセルを受けて、次いで、１、４、又は２４時間後にプリナブリンを受けた群で同様であった。
【図５】異なるグレードの重症度の好中球減少症などの副作用が、ＮＳＣＬＣ患者のドセタキセル治療にプリナブリンを添加することにより減少したことを示す。ドセタキセルへ添加したプリナブリン２０ｍｇ／ｍ2又は３０ｍｇ／ｍ2の両方で、ドセタキセルの好中球減少症発症率が減少した（Ｄ：ドセタキセル；ＤＮ：プリナブリン及びドセタキセル）。
【図６】ＮＳＣＬＣ患者（ステージＩＩＩｂ／ＩＶ、少なくとも１回の前化学療法）の全生存期間カプラン・マイヤー曲線を示す。ＤＮ群：３０ｍｇ／ｍ2プリナブリン及び７５ｍｇ／ｍ2ドセタキセル；Ｄ群：７５ｍｇ／ｍ2ドセタキセル。Ｄ群で腫瘍サイズが増加したのに対して、ＤＮ群でＯＳ改善効果が向上する。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
総合的及び徹底的研究及びスクリーニングにより、本発明者は、プリナブリン及びドセタキセルを組み合わせることによる新規ながん治療方法を、予想外に開発した。実験は、ＮＳＣＬＣ  ＭＶ５２２動物モデルを用いて、最適な有効性の改善を示した。本発明者は、ＮＳＣＬＣ  ＭＶ５２２動物モデル実験を用いて、最適な有効性及び安全性の改善を達成するため、プリナブリン及びドセタキセルの使用の一連の組合せ方法も発見した。これに基づき、本発明を完成する。
【００３５】
本発明に従った１つの実施形態では、該最適組合せ方法は、ＮＳＣＬＣ  ＭＶ５２２動物モデル、及びＮＳＣＬＣ患者の両方で、タキサン（ドセタキセルなど）の副作用を劇的に減少させ、予想外の発見だが、ＮＳＣＬＣ患者のＧ−ＣＳＦの使用を減少させ得る。がん患者治療において、ドセタキセルとの組合せでこの作用を有する他のＶＤＡ化合物は発見されていない。
【００３６】
本発明に従った別の実施形態では、該最適組合せ方法は、新規で予想外の発見である、一意的に定義された大きな腫瘍のＮＳＣＬＣ患者、及び大きな腫瘍のＮＳＣＬＣ  ＭＶ５２２動物モデルのＯＳ延長の最も有効な改善を達成した。他のＶＤＡ又は抗血管新生薬で、この一意的に定義された大きな腫瘍のＮＳＣＬＣ患者集団でより良好な有効性を有するものは発見されていない。
【００３７】
タキサン化合物又はその誘導体
本発明の組合せでは、１つの重要な活性成分はタキサン化合物又はその誘導体である。
【００３８】
本発明では、「タキサン化合物」又は「タキサン」という語は、パクリタキセルの同じ又は類似の機序に基づいて、パクリタキセルと類似の抗がん作用を有するタキサンファミリーのメンバーを意味する。実例となるタキサン化合物は、パクリタキセル、ドセタキセル、及びアブラキサンなどが挙げられるが、これに限定されない。本発明では、この用語は、誘導体及びその医薬的に許容できる塩も含む。
【００３９】
本発明では、タキサン化合物量を、好ましくは、ルーチンの方法及びルーチンの投薬量で投与する。例えば、パクリタキセルを、通常、静脈内注射により、５０〜２５０又は１００〜１７５ｍｇ／ｍ2により投与する。
【００４０】
プリナブリン
本発明の組合せでは、もう１つの重要な活性成分は、プリナブリンである。
【００４１】
本明細書で使用されるとき、「プリナブリン」、「ＮＰＩ−２３５８」及び「ｔ−ブチルデヒドロフェニラヒスチン」という語は互換的であり、各々は、図１に示すように、２，５−ピペラジンジオン、３−［［５−（１，１−ジメチルエチル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］メチレン］−６−（フェニルメチレン）−（３Ｚ，６Ｚ）］の化学名を有する合成低分子量化学成分を意味する。本発明では、上記用語は、その医薬的に許容できる塩も含む。
【００４２】
ＮＰＩ−２３５８は、抗がん薬として発見される。国際特許出願第ＷＯ２００４／０５４４９８号は、ＮＰＩ−２３５８の構造、合成及び使用について開示している。
【００４３】
プリナブリンは、チューブリンモノマーの二量化を阻害する。その機序は、腫瘍脈管構造に対しての作用であり、それ故、腫瘍増殖のための血液供給をカットすることにあり、血管破壊剤（ＶＤＡ）として分類される。
【００４４】
本発明では、プリナブリン量を、好ましくは、ルーチンの方法及びルーチンの投薬量で投与する。通常、プリナブリンを、静脈内注射により、１０〜５０又は２０〜３０ｍｇ／ｍ2により投与する。
【００４５】
組合せ、医薬組成物及びキット
本発明では、タキサン化合物の活性成分（ａ）；及びプリナブリンの活性成分（ｂ）を含む組合せを提供する。
【００４６】
さらに、タキサン化合物の活性成分（ａ）；プリナブリンの活性成分（ｂ）；及び（ｃ）医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００４７】
本発明の医薬組成物のための剤形及び製剤方法は、特に限定されず、該組成物を、糖技術分野の従来方法により、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、徐放剤、注射剤などの様々な剤形に製造できる。好ましい剤形は、経口用剤形である。
【００４８】
本発明では：
（ｉ）活性成分（ａ）としてタキサン化合物を含み、医薬的に許容できる担体を含んでもよい第一の医薬品を含む第一の容器；及び
（ｉｉ）活性成分（ｂ）としてプリナブリンを含み、医薬的に許容できる担体を含んでもよい第二の医薬品を含む第二の容器；
（ｉｉｉ）がんの治療及び／又は予防用の活性成分（ｂ）と組み合わせる活性成分（ａ）の投与について記録している使用説明書
を含むキットも提供する。
【００４９】
本発明の組合せ、製剤及びキットは、がんの予防及び／又は治療に有用である。
【００５０】
本発明の組合せを、一緒に投与しても順次投与してもよい。好ましくは、タキサンの活性成分（ａ）を最初に投与し、次いで、０．５〜７２時間以内、好ましくは、０．５〜２４時間以内、より好ましくは、１〜２４時間以内にプリナブリンの活性成分（ｂ）を投与し、それにより、有効性及び患者のコンプライアンスを有意に改善し、好中球減少症などのタキサンの副作用を有意に減少させる。
【００５１】
もちろん、該活性成分の効果的投薬量を、投与方法及び治療する疾病の重症度に応じて
変え得る。
【００５２】
プリナブリン及びタキサンの組合せ治療
本発明は、がん対象を治療するため、プリナブリン及びドセタキセルの最適な使用方法を提供する。
【００５３】
本発明では、タキサン化合物の活性成分（ａ）及びプリナブリンの活性成分（ｂ）の効果量を、哺乳類対象（ヒトなど）に投与、又は活性成分（ａ）を含む第一の医薬品及び第二の医薬品である活性成分（ｂ）を投与することを含む、２つの活性成分の使用によるがんの治療及び予防方法を提供する。
【００５４】
本発明の２つの活性成分又は医薬組成物を；筋肉内、腹腔内、静脈内、皮下、皮内、経口、又は局所投与（これに限定されない）を含む従来の経路により投与してもよい。好ましい投与経路としては、経口投与が挙げられる。
【００５５】
本発明の医薬品は、簡便な投与のため、固体組成物、特に、錠剤及び固体充填又は液体充填カプセル剤であり得る。好ましくは、該医薬品又は医薬組成物を、液体製剤、又は凍結製剤もしくは他の適切な注射剤の形態として製剤する。
【００５６】
さらに、本発明の２つの活性成分又は薬物を、がん治療用の他の薬物（ｃｉｓ−プラチン、パクリタキセル、抗腫瘍抗体など）と組み合わして使用できる。
【００５７】
本発明の実施例では、本発明者は、ＭＶ５２２肺がん異種移植モデルのプリナブリンの抗腫瘍作用を評価した。プリナブリンのインビボ有効性を、単独及びドセタキセルとの組合せで測定した。プリナブリン（３．７５及び７．５ｍｇ／ｋｇ）、ドセタキセル（１５及び２５ｍｇ／ｋｇ）、及び該組合せの腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）を、ＭＶ５２２腫瘍モデルで測定した。薬物組合せのスケジュールも、第一薬物を与えた後２時間で、１つの薬物を投与することにより実施した。この実験の有意なエンドポイントは、平均腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）又は退縮、動物体重損失、可能性のある毒性、及び腫瘍増殖遅延（ＴＧＤ）を含んだ。ＴＧＩ試験の最初のエンドポイントは、平均ＮＰＩ−２３５８媒体腫瘍量が、１．２ｃｍ3に達した日であった。ＴＧＤ試験のエンドポイントは、各腫瘍が、１．５ｃｍ3の体積に達したときであった。加えて、大きな腫瘍（１．５ｃｍ3）のドセタキセル及びＮＰＩ−２３５８＋ドセタキセルの組合せの有効性を比較するため、修正を実施した。
【００５８】
動物を、組織培養から回収したがん細胞移植し、ヌードマウス内に腫瘍を定着させた。約１０５ｍｍ3の平均腫瘍量に達したとき、処置を開始した。いずれのプリナブリン単剤群でも、有意な動物体重損失は起こらず、所与の用量及びスケジュールで、該薬物が良好な忍容性があったことを示した。予想通り、ドセタキセルを用いた次の処置で、有意な動物体重損失を観察した。予想外に、組合せ群のドセタキセルへのＮＰＩ−２３５８の添加は、ドセタキセル関連体重損失を低減した（表２）。
【００５９】
単剤としてのプリナブリンを用いた処置は、媒体対照と比較して、わずかに腫瘍量の減少を誘発したが、ドセタキセル処置は、強く腫瘍量の減少をもたらした。重要なことに、プリナブリンの添加は、このモデルで、ドセタキセルの抗腫瘍作用を促進した。
【００６０】
この作用は、最初にドセタキセルを受けて、次いで、２時間後などに、プリナブリンを受けた群において最も顕著であった（表３）。さらに、この薬物の組合せは、大きな腫瘍（１．５ｃｍ3）の腫瘍量の減少において、単剤のドセタキセルより効果的であった（表４）。
【００６１】
プリナブリン及びドセタキセルの組合せの投与スケジュールについてさらに探求するため、本発明者は、マウスのＭＶ５２２ヒト肺がん異種移植モデルにおいて、ドセタキセル処置後、１、４、及び２４時間目で投与されたプリナブリンのインビボ有効性を調査した。実験計画は、上記動物試験と同様にした。組合せ群でのドセタキセルへのプリナブリンの添加は、ドセタキセル関連動物体重損失を減少させた。プリナブリンを、ドセタキセル処置後１、４、又は２４時間目に与えたかどうかにかかわらず、該体重損失の傾向は異なる群の中で類似していた（表６）。加えて、プリナブリンの添加は、ドセタキセルの抗腫瘍作用を促進した。
【００６２】
プリナブリンを、ドセタキセル処置後１、４、又は２４時間目に与えたかどうかにかかわらず、腫瘍量の劇的な違いはなかった（表７）。１５ｍｇ／ｋｇドセタキセル群後１時間のプリナブリンでは、４及び２４時間群より、わずかに小さな腫瘍を得た（表７）。
【００６３】
この初期試験に続き、同様な腫瘍量を有する動物を、大きな腫瘍に対する、プリナブリン及びドセタキセルの組合せの効果を評価するために再処置した。該プリナブリン及びドセタキセルの組合せでは、ドセタキセル単剤処置と比較して、腫瘍量のより明白な減少を得た。予想外に、本発明者は、プリナブリン及びドセタキセルの組合せは、大きな定着腫瘍に対して効果的であることを発見した（表８）。
【００６４】
本発明者は、ＮＳＣＬＣ患者のＭＶ５２２動物試験から得られる最適なプリナブリン及びドセタキセルの組合せ治療スケジュールを適用した。患者は、３週間サイクルで、１日目及び８日目に治療を受けた。１日目の治療は、１時間にわたる点滴静注（ＩＶ）による７５ｍｇ／ｍ2のドセタキセル投与、次いで、２時間後（該ドセタキセル点滴開始時間から）、３０分間にわたる点滴静注（ＩＶ）による３０ｍｇ／ｍ2のプリナブリンの投与で構成された。８日目の治療は、３０分間にわたる点滴静注（ＩＶ）による２０ｍｇ／ｍ2又は３０ｍｇ／ｍ2のプリナブリンの投与で構成された。
【００６５】
ドセタキセルに添加したときのプリナブリンの忍容性プロファイルは、ドセタキセル単剤よりも良好である。耐えがたいドセタキセルの副作用のせいで、７５ｍｇ／ｍ2のドセタキセルの開始用量を、プリナブリン３０ｍｇ／ｍ2＋ドセタキセル治療群の患者の１０％（５０名の内の５名）で減少させたが、対応するドセタキセル単剤群のパーセントは、患者の１８．２％（５５名の内の１０名）で、ずっと高かった。
【００６６】
特に興味深い、プリナブリン３０ｍｇ／ｍ2＋ドセタキセル群の患者は、対応するドセタキセル単剤群の患者より、統計的に有意に低い好中球減少症発症率であった（全イベント及びそれらのイベントについて≧グレード３）。
【００６７】
好中球減少症は、最も重症であるドセタキセルの副作用である。好中球減少症は、歴史的データと一致して、この同じドセタキセル単剤群中、患者の３６．４％に見られた。対照的に、プリナブリン３０ｍｇ／ｍ2＋ドセタキセル治療群における、８％の好中球減少症発症率は、対応ドセタキセル単剤群より有意に低かった（ｐ＜０．０１）。
【００６８】
プリナブリン２０ｍｇ／ｍ2＋ドセタキセル試験群及びその対応ドセタキセル治療群において、上記と同様な結果が観察された。ドセタキセル群と比較して、組合せ群では、より少ないＧ−ＣＳＦを使用した。
【００６９】
プリナブリンが、ドセタキセルの好中球減少症発症率を減少できるという新規な発見は予想外である。
【００７０】
本発明者は、詳細な分析も実施して、プリナブリン及びドセタキセルの組合せと反応す
るサブグループを予想外に確認した。サブグループ分析の１つは、「３ｃｍより大きな直径サイズを有する少なくとも１つの腫瘍」は、対応ドセタキセル治療群（ＯＳ＝７．８ヶ月）と比較したとき、プリナブリン３０ｍｇ／ｍ2＋ドセタキセル（ＯＳ＝１１．５ヶ月）が、最大有意なＯＳ改善を有したサブグループであった（図６）。ドセタキセル群と比較した組合せ群のＯＳ改善は、他の大きな腫瘍群（１腫瘍＞５ｃｍ、又は＞７ｃｍ、図６）でも見られる。本発明者は、最適なプリナブリン及びドセタキセルの組合せから改善される一意的に定義された大きな腫瘍群を発見し、これは、いずれの文献にも報告されていなかった。認可された腫瘍脈管構造標的薬で、大きな腫瘍のＮＳＣＬＣ集団において、良好な結果を示すものは報告されていない。
【００７１】
要約すると、これは、プリナブリン及びドセタキセルが、一意的に定義された大きな腫瘍集団で改良された有効性を達成及び全患者のドセタキセルの好中球減少症発症率を劇的に減少させる最適な組合せスキームを発見した最初の発明である。本発明は、複数のがん指標の大きな腫瘍を治療するため、他の化学療法薬と組み合わせたプリナブリンの新規な使用を提供する。本発明は、タキサン化合物の衰弱していく好中球減少症副作用を減少させるため、他のタキサン化合物と組み合わせたプリナブリンの新規な使用も提供する。
【００７２】
本発明の主要な利点としては：
（ａ）がん（肺がんなど）の予防におけるプリナブリンと組み合わせたタキサンの効果を開示し、タキサン及びプリナブリンの最適な組合せの使用による治療方法を提供する。
（ｂ）タキサン及びプリナブリンの組合せは、比較的安全である。
（ｃ）タキサン及びプリナブリンの順次投与は腫瘍の相乗的阻害を有し、医学的に関連する統計的有意性を有し、それにより、タキサンに対する忍容性が増加して、副作用が減少する。
が挙げられる。
【００７３】
本発明を、具体的実施例を示して、下記にさらに例証する。これらの実施例は、本発明を例証するためだけのものであり、本発明の範囲を限定しないと理解するべきである。次の実施例に記載する具体的条件のない実験方法を、従来の条件下、又は製造者の使用説明書に従って、一般に実施する。特に明記されない限り、部及びパーセントは、重量基準で算出される。
【実施例】
【００７４】
実施例１
無胸腺ｎｕ／ｎｕマウスのＭＶ５２２ヒト非小細胞肺腫瘍異種移植モデルにおける単剤及びドセタキセルとの組合せでのプリナブリン（ＮＰＩ−２３５８）のインビボ評価
【００７５】
本実施例の目的は、第一薬物を与えた後２時間目で１つの薬物の投与により調査される薬物組合せスケジュールの調査により、ＭＶ５２２モデルのドセタキセルとの組合せでのプリナブリンの可能性のある付加的又は相乗的効果を測定することである。この実験の有意なエンドポイントには、大きな腫瘍の平均腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）又は退縮、腫瘍増殖遅延（ＴＧＤ）、体重損失、及び死亡率が含まれた。
【００７６】
実験計画：
物質及び方法
モデル情報−約２０グラムの体重で５から６週齢の間の雌ヌードマウス（Ｈｓｄ：無胸腺Ｎｕｄｅ−Ｆｏｘｎｌnu）を、Ｈａｒｌａｎ社（ワイオミング州マジソン）から得た。ＭＶ５２２は、通常のヒトＮＳＣ転移性肺腫瘍セルライン（米国特許第７，７００，６１５号又は同第７，６２９，３８０号）である。動物に、組織培養から回収した約１ｘ１０7ＭＶ５２２細胞を、皮下に（ＳＣ）注射した。腫瘍が、約１０５立方ミリメートル（ｍ
ｍ3）の大きさに増殖したとき（移植後３日目）、動物を、腫瘍サイズにより、処置群及び対照群にペアマッチングし；各処置群には、８匹のマウスを含めた。動物の耳に標識を着けて、実験を通して個別に追跡した。
【００７７】
実験計画及び投薬−最初の用量を、ペアマッチング後１日目で投与した。腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）及び腫瘍増殖遅延（ＴＧＤ）試験として、実験を行った。群１のエンドポイントは、腫瘍量が１．２ｃｍ3に達したとき（ＴＧＩ）であり、処置群のエンドポイントは、各個別の動物腫瘍量が、１．５ｃｍ3に達したとき（ＴＧＤ）であった。媒体（８％ソルトール（登録商標）ＨＳ１５、１２％ＰＧ、８０％Ｄ５Ｗ）中のＮＰＩ−２３５８を、下記一覧の用量で、２週間に毎週３回−１日のスケジュール（３ｘＷＫＬＹｘ２−１）又は３週間に毎週２回のスケジュール（２ｘＷＫＬＹｘ３）にて、腹腔内（ＩＰ）注射により投与した（表１）。ネガティブコントロールの役割で、ＮＰＩ−２３５８媒体及びドセタキセル媒体を、それぞれ、２ｘＷＫＬＹｘ３スケジュールで腹腔内注射、Ｑ２Ｄｘ３スケジュールで静脈内注射した。ドセタキセルを、３回の処置のため、隔日に１回、１５ｍｇ／ｋｇで、又はＱ７Ｄｘ３スケジュール（３回の処置のため、毎７日）にて２５ｍｇ／ｋｇで、尾静脈に静脈内（ＩＶ）注射により投与した。ドセタキセル及びドセタキセル媒体を、群７〜９及び１２〜１４について、それぞれ、ＮＰＩ−２３５８媒体及びＮＰＩ−２３５８の２時間前に投与した。群１０、１１、１５、及び１６について、ＮＰＩ−２３５８を、ドセタキセルの２時間前に与えた。
【００７８】
【表１】
2018199726.tif 000003
【００７９】
データ収集及び統計解析
動物体重−個別及び群の平均体重±ＳＤ及び体重変化パーセントを、１日目から始めて、試験が完了するまで、毎週２回記録した。４２日目の群体重及び体重の最低値を記録した。
【００８０】
瀕死／死亡率−動物を、全身瀕死について毎週２回、死亡率について毎日観察した。
【００８１】
腫瘍量−個別及び群の平均腫瘍量±ＳＤを、１日目から始めて（試験完了まで、投与後２４時間目（平均腫瘍量＝１．２ｃｍ3、２５日目））、毎週２回記録した。腫瘍測定値を、下式を用いて、立方ミリメートル腫瘍量に換算した：
【００８２】
腫瘍量（ｍｍ3）＝幅2（ｍｍ）ｘ長さ（ｍｍ）ｘ０．５２
【００８３】
腫瘍ネクローシス−腫瘍ネクローシスの程度を、次の任意の指標を用いて、各腫瘍測定で等級に分類した：
【００８４】
【表２】
2018199726.tif 000004
【００８５】
処置群及び対照群間の腫瘍ネクローシスの注目すべき差を報告した。
【００８６】
腫瘍増殖阻害−一旦、指定対照群（群３、ＮＰＩ−２３５８媒体）が約１．２ｃｍ3の平均腫瘍量（ＴＧＤ試験と区別している）に達したならば、２５日目で試験のＴＧＩ部分は完了した。マウスの体重を測定し、ノギスで腫瘍を測定した。腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）値を、下式を用いて、処置動物を含む各群について算出した：
【００８７】
【数１】
2018199726.tif 000005
【００８８】
腫瘍完全奏功のある動物又は技術的もしくは薬物関連死する動物を、最終ＴＧＩ計算から打ち切った；しかしながら、腫瘍部分奏効のある動物を、最終ＴＧＩ計算に含めた。化合物活性に対する米国国立がん研究所（ＮＣＩ）の判断基準は、ＴＧＩ＞５８％である。各処置群のＴＧＩ値を、試験完了時に報告した；これらの計算は、最終試験日に基づく。
【００８９】
腫瘍増殖遅延−試験のこの群を、スポンサーの要望で、７４日目に終了した。ＴＧＩ試験完了時（２５日目）、対照群及び処置群からの個別の腫瘍量をデータ点検して、指定のＴＧＤ腫瘍量エンドポイント（１．５ｃｍ3）より大きい又は等しいものを試験から取り除き、各動物に、エンドポイントに達した日を基準に殺処分価値の１日を充てた。ＴＧＤ試験完了時、殺処分日の中央値を対照群（Ｃ）及び各治療群（Ｔ）について算出し、次式を用いて、腫瘍増殖遅延（Ｔ−Ｃ）を決定するために使用した：
【００９０】
【数２】
2018199726.tif 000006
【００９１】
ＩＤＳ（個別殺処分日）は、各動物が、その腫瘍量エンドポイント（１．５ｃｍ3）に達した日であり；このエンドポイントに達する動物のみＴＧＤ算出に含められた。各処置群について、全体（Gross）又は正味（net）ｌｏｇ10細胞死滅を、次式を用いて決定した：
【００９２】
【数３】
2018199726.tif 000007
【００９３】
式中、（Ｔ）＝処置群について、死の日の中央値、（Ｃ）＝対照群（ＮＰＩ−２３５８媒体群）について、死の日の中央値、及び（Ｔｄ）は、対照群の時間に対する腫瘍増殖（１００〜８００ｍｍ3）の対数期の対数線形プロットから推定される腫瘍量倍加時間であり；（３．３２）は、集団が、１つのｌｏｇ10単位を増加するのに必要な倍加数である。技術的又は薬物関連死する個別の動物からの体重及び腫瘍データを、最終群計算及び統計解析から打ち切った。長期生存者（前以て設定した時間までに腫瘍量エンドポイントに達しない動物（ＬＴＳ））を、これらの計算に含めない。基準薬物での活性の比較のため、全体又は正味ｌｏｇ10細胞死滅値を、下記任意の活性等級に換算した：
【００９４】
【表３】
2018199726.tif 000008
【００９５】
５日間以上の処置日に投与した薬物活性を、全体ｌｏｇ細胞死滅を用いて算出する一方で、正味ｌｏｇ10細胞死滅を、５日未満の全処置で投与された試験薬に利用し；（＋＋＋）〜（＋＋＋＋）の活性等級は、部分又は完全奏効に影響を及ぼすのに必要である。
【００９６】
腫瘍の部分／完全奏効−１日目より小さい測定値の腫瘍を有する個別のマウスを、部分奏効（ＰＲ）を有するとして分類し、腫瘍退縮パーセント（％ＴＲ）値を、下式を用いて決定する：
【００９７】
【数４】
2018199726.tif 000009
【００９８】
もし、腫瘍の部分奏効が、１つの群内で複数の動物で報告されるならば、平均ＰＲ値を決定した。触知できる腫瘍のない個別マウスを、完全奏効（ＣＲ）を経験しているとして分類した。部分及び完全奏効の数ならびに腫瘍退縮パーセントを、試験完了時、各処置群について報告し；これらの計算は最終試験日基準である。
【００９９】
ＴＧＩ統計値−統計解析を、最終腫瘍量を比較して、処置群及び対照群間で実施した。２つ以上の処置群について、両側一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）、次いで、ダネット多重比較検定を使用した。対照に対して１つの処置群を比較するため、対応のない両側スチューデントｔ検定を使用した。技術的又は薬物関連死する個別の動物からの体重及び腫瘍データを、解析から打ち切った。しかしながら、部分又は完全奏効を報告する動物からの体重及び腫瘍データを、これらの計算に含めた。
【０１００】
ＴＧＤ統計値−対照と比較して各処置群間の全体的生存経験の統計的に有意な差を決定するため、ログランク検定を使用し、利用するとき、マンテル−ヘンツェル検定と均等である。もし、薬物を、同じ経路及びスケジュールで複数の濃度で評価するならば、傾向からのロングラン検定も行う。技術的又は薬物関連死する個別の動物からの体重及び腫瘍データを、解析から打ち切った。しかしながら、部分的もしくは完全退縮又は長期生存者を報告する動物からの体重及び腫瘍データを、これらの計算に含めた。全ての解析を、ＧｒａｐｈＰａｄ（登録商標）ソフトウェア（バージョン５．０）を用いて行った。
【０１０１】
結果
いずれものプリナブリン単剤群で有意な動物体重損失は起こらず、このことは、薬物が所与の用量及びスケジュールに良好な忍容性があることを示した。予想通り、有意な動物体重損失を、次のドセタキセルを用いた処置で観察した。
【０１０２】
予想外に、組合せ群でのドセタキセルへのＮＰＩ−２３５８の添加は、ドセタキセル関連体重損失を減少させた（表２）。
【０１０３】
【表４】
2018199726.tif 000010
【０１０４】
ドセタキセル処置が、腫瘍量の減少をもたらした一方、単剤としてプリナブリンを用いた処置は、媒体対照と比較して、腫瘍量のわずかな減少を含んでいた。重要なことに、ＮＰＩ−２３５８の添加は、このモデルで、ドセタキセルの抗腫瘍作用を促進した。
【０１０５】
この作用は、最初にドセタキセルを受け、次いで、２時間後にＮＰＩ−２３５８を受けた群で最も顕著であった（表３）。さらに、この薬物の組合せは、大きな腫瘍（１．５ｃｍ3）の腫瘍量の減少において、単剤ドセタキセルより効果的であった（表４）。
【０１０６】
【表５】
2018199726.tif 000011
【０１０７】
【表６】
2018199726.tif 000012
【０１０８】
実施例２
無胸腺ｎｕ／ｎｕマウスのＭＶ５２２ヒト非小細胞肺腫瘍異種移植モデルにおけるドセタキセルとの組合せでのプリナブリンのインビボ評価：薬物投与スケジュール
【０１０９】
本実施例の目的は、ＭＶ５２２モデルのドセタキセル後の様々な時点（１時間、４時間、又は２４時間）において、ＮＰＩ−２３５８の投与によるドセタキセルとの組合せでのプリナブリン（ＮＰＩ−２３５８）の可能性のある付加的又は相乗的効果を評価することであった。この実験の有意なエンドポイントには、大きな腫瘍の平均腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）又は退縮、腫瘍増殖遅延（ＴＧＤ）、体重損失、及び死亡率が含まれた。
【０１１０】
実験計画：
物質及び方法
モデル情報−約２０グラムの体重で５から６週齢の間の雌ヌードマウス（Ｈｓｄ：無胸腺Ｎｕｄｅ−Ｆｏｘｎｌnu）を、Ｈａｒｌａｎ社（ワイオミング州マジソン）から得た。動物に、組織培養（１：１  マトリゲル：培地）から回収した約１ｘ１０7ＭＶ５２２細胞を、皮下に（ＳＣ）注射した。腫瘍が、約１００立方ミリメートル（ｍｍ3）の大きさに増殖したとき、動物を、腫瘍サイズにより、処置群及び対照群にペアマッチングした。動物の耳に標識を着けて、実験を通して個別に追跡した。
【０１１１】
元の試験計画及び投薬−最初の用量を、ペアマッチング後１日目で投与した。腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）及び腫瘍増殖遅延（ＴＧＤ）試験として、実験を行った。ＴＧＩのため、エンドポイントは、群１の平均腫瘍量が１．２ｃｍ3に達したときである。ＴＧＤのため、エンドポイントは、各個別の動物腫瘍量が、１．０ｃｍ3に達したときであった。ドセタキセルの１０ｍｇ／ｍｌストックバイアルを、投薬の各日に、０．９％生理食塩水に希釈し、静脈内（ＩＶ）に投与した。スケジュール及び各薬物の用量を、表５にリストした。ドセタキセル媒体（０．９％生理食塩水；静脈内；１，３、５日目）＋ＮＰＩ−２３５８媒体（８％ソルトール（登録商標）ＨＳ１５、１２％ＰＧ、８０％Ｄ５Ｗ；腹腔内；１、３、５、８、１１日目）を、ネガティブコントロールとしての役割のため投与した。
【０１１２】
【表７】
2018199726.tif 000013
【０１１３】
データ収集及び統計解析
一旦、指定した対照群が約１．２ｃｍ3の平均腫瘍量に達すれば、本実施例の試験を２４日目で完了した。
【０１１４】
動物体重−個別及び群の平均体重±ＳＤ及び体重変化パーセントを、１日目から始めて、
試験完了まで、毎週２回記録した。２４又は５３日目の群体重及び体重最低値を報告する。
【０１１５】
瀕死／死亡率−実施例１と同じ。
【０１１６】
腫瘍量−実施例１と同じ。
【０１１７】
腫瘍ネクローシス−実施例１と同じ。
【０１１８】
腫瘍の部分／完全奏効−実施例１と同じ。
【０１１９】
腫瘍増殖阻害−実施例１と同じ。
【０１２０】
ＴＧＩ統計値−実施例１と同じ。
【０１２１】
腫瘍増殖遅延−実施例１と同じ。試験のこの群を、スポンサーの要望で、８０又は５３日目で終了した。長期生存者（前以て設定した時間までに腫瘍量エンドポイントに達しない動物（ＬＴＳ））を、最終試験日（８０日目）のＩＤＳ値に割り当て、これらの計算に含めた。基準薬物での活性の比較のため、全体又は正味ｌｏｇ10細胞死滅値を、下記任意の活性等級に換算した：
【０１２２】
【表８】
2018199726.tif 000014
【０１２３】
５日間以上の処置日に投与した薬物活性を、全体ｌｏｇ細胞死滅を用いて算出する一方で、正味ｌｏｇ10細胞死滅を、５日未満の全処置で投与された試験薬に利用し；（＋＋＋）〜（＋＋＋＋）の活性等級は、部分又は完全奏効に影響を及ぼすのに必要である。
【０１２４】
ＴＧＤ統計値−実施例１と同じ。
【０１２５】
結果
プリナブリン及びドセタキセルの組合せ投与スケジュールをさらに探求するため、本発明者は、マウスのＭＶ５２２ヒト肺がん異種移植モデルのドセタキセル処置後１、４、及び２４時間目に投与されたプリナブリンのインビボ有効性を調査した。実験計画は、上記動物試験と同様であった。組合せ群のドセタキセルへのプリナブリンの追加は、ドセタキセル関連動物体重損失を減少させた。該体重損失傾向は、ドセタキセル処置後１、４、又は２４時間目にプリナブリンを与えたかどうかにかかわらず、異なる群内で類似していた（表６）。
【０１２６】
【表９】
2018199726.tif 000015
【０１２７】
加えて、プリナブリンの添加は、ドセタキセルの抗腫瘍作用を促進するように思われた。ドセタキセル処置後１、４、又は２４時間目にプリナブリンを与えたかどうかにかかわらず、腫瘍量に劇的な差はなかった（表７）。１５ｍｇ／ｋｇのドセタキセル群後の１時間目のプリナブリンは、４及び２４時間目の群より、わずかに小さい腫瘍を得た（表７）。
【０１２８】
【表１０】
2018199726.tif 000016
【０１２９】
この初期試験後、同様な腫瘍量を有する動物を、大きな腫瘍に対するプリナブリン及びドセタキセルの組合せ作用を評価するため、再処置を行った。該プリナブリン及びドセタキセルの組合せは、ドセタキセル処置単独と比較して、腫瘍量のより注目すべき減少を得た。予想外に、本発明者は、プリナブリン及びドセタキセルの組合せが、大きな定着腫瘍に対して効果的であることを発見した（表８）。
【０１３０】
【表１１】
2018199726.tif 000017
【０１３１】
実施例３
進行性非小細胞肺がん患者の最適なプリナブリン及びドセタキセルの組合せの評価
【０１３２】
目的
第一：
ドセタキセル＋プリナブリンで治療した患者に対して、ドセタキセルで治療したＮＳＣＬＣを有する患者の全生存期間を比較すること。
第二：
１．ドセタキセル＋プリナブリンの患者に対して、ドセタキセルで治療したＮＳＣＬＣを有する患者の奏効率、奏効期間、６ヶ月生存率、及び無増悪生存期間を比較すること；
２．ドセタキセル＋プリナブリンに対して、ドセタキセルの安全及び有害事象プロファイルを比較すること。
【０１３３】
試験計画
これは、少なくとも１つの化学療法レジメンを有する治療後に進行した進行性ＮＳＣＬＣを有する患者の非盲検試験であった。患者は、ランダム化され、ドセタキセル＋プリナブリン（ＤＮ）又はドセタキセル単剤（７５ｍｇ／ｍ2）（Ｄ）のどちらかを受けた。２つの投薬コホートを調査した：
１）３０ｍｇ／ｍ2投薬コホート：約１１０名の患者がランダム化（１：１）され、３０ｍｇ／ｍ2でドセタキセル＋プリナブリン（ＤＮ３０ｍｇ／ｍ2群）又はドセタキセル単剤（Ｄ群）のどちらかを受けた。
２）２０ｍｇ／ｍ2投薬コホート：約５７名の患者がランダム化（２：１）され、２０ｍｇ／ｍ2でドセタキセル＋プリナブリン（ＤＮ２０ｍｇ／ｍ2群）又はドセタキセル単剤（Ｄ群）のどちらかを受けた。
【０１３４】
投薬レジメン
患者は、３週間のサイクルで、１日目及び８日目に治療を受けた。
【０１３５】
１日目の治療は、１時間にわたる点滴静注（ＩＶ）により投与された７５ｍｇ／ｍ2のドセタキセル、次いで、２時間後（点滴静注開始時から）の３０分間にわたる点滴静注（ＩＶ）により投与されたプラセボ（Ｄ群）又は３０ｍｇ／ｍ2もしくは２０ｍｇ／ｍ2のプリナブリン（ＤＮ群）ＤＮから構成された。経口デキサメタゾン（１６ｍｇ）を、ドセタキセル点滴（１日目）の前の日に、その日に、及びその後の日に与えた。８日目の治療は、３０分間にわたる点滴静注（ＩＶ）により投与されたプラセボ（Ｄ群）又は３０ｍｇ／ｍ2もしくは２０ｍｇ／ｍ2のプリナブリン（ＤＮ群）から構成された。
【０１３６】
ＣＴＣＡＥ（ｖ３．０）に従った薬物関連グレード＞２治療応急有害事象（脱毛症、食欲不振、及び疲労を除く）を経験している患者では、該有害事象がグレード＜１に回復するまで、治療を遅らせてもよい。安全性臨床検査は、各続くサイクルの開始のドセタキセル治療前に、次の判断基準を満たさなければならない：ＡＳＴ≦２．５ｘＵＬＮ、ＡＬＴ≦２．５ｘＵＬＮ（もし、アルカリ性ホスファターゼが、≧２．５ｘＵＬＮであるならば、≦１．５ｘＵＬＮ）；ビリルビン≦ＵＬＮ；ヘモグロビン≧９ｇ／ｄＬ、好中球絶対数≧１．５ｘ１０9／Ｌ及び血小板≧１００ｘ１０9／Ｌ。再発又は特定の重症毒性を経験する患者については、用量低減を行ってもよい。
【０１３７】
標的集団
少なくとも１つの化学療法レジメンでの治療後に進行したステージＩＩＩｂ／ＩＶ非小細胞肺がんを有する患者。
【０１３８】
選択基準
１．男性及び女性≧１８歳
２．ＥＣＯＧパフォーマンスステータス≦１
３．少なくとも１つの化学療法レジメンでの治療後に進行した病理学的又は組織学的に確認された非小細胞肺がん（切除不能なステージＩＩＩｂ又はＩＶ）。測定可能な疾病は
、この治験の記録を必要としない。
４．いずれかの前の化学療法、外科手術、又は放射線療法の全有害事象は、ＣＴＣＡＥ（ｖ．３．０）グレード≦２を解決していなければならない。
５．次の実験室内結果。１４日目以内：
・ヘモグロビン＞９ｇ／ｄＬ
・好中球絶対数≧１．５ｘ１０9／Ｌ
・血小板数≧１００ｘ１０9／Ｌ
・血清ビリルビン≦ＵＬＮ
・ＡＳＴ及びＡＬＴ≦２．５ｘＵＬＮ（もし、アルカリ性ホスファターゼが≧２．５ｘＵＬＮであるならば、≦１．５ｘＵＬＮ）
６．署名したインフォームドコンセント。
【０１３９】
除外基準
１．試験薬物を受ける前２１日以内の特定の化学療法薬、生物学的作用物質、免疫療法薬、放射線療法薬又は治験薬（治療又は診断）の投与。最初の試験薬投与前６週間以内の診断手術以外の主要な外科手術。
２．有意な心臓の病歴：
・心筋梗塞又は虚血性心疾患の病歴；
・臨床的に有意な不整脈；制御不能な不整脈又は抗不整脈薬が必要な病歴
・先天性ＱＴ延長の病歴；
・左脚ブロック；
・虚血性心疾患と一致する心電図所見；
・ニューヨーク心臓病学会クラスＩＩＩ又はＩＶ心疾患
・制御不能な高血圧：高血圧薬にもかかわらず、連続して最高血圧１５０ｍｍＨｇ及び最低血圧１００ｍｍＨｇより高い血圧。
３．腫瘍血管破壊剤での前の治療。
４．前の発作性疾患。
５．脳転移。脳転移の徴候又は症状を示す患者は、ＣＴ又はＭＲＩで画像検査すべきである。前治療し、治療後に再画像検査して、その病変が新しい病変の暫定的進行がなく安定である脳転移を有する患者を登録してもよい。
６．イレウス症、腸閉塞、出血性下痢症、炎症性腸疾患、制御不能な消化性潰瘍疾患などの有意な胃腸疾患の病歴。（ラニチジン又はその均等物及び／又はオメプラゾール又はその均等物を有する組合せ治療は受け入れられる）。
７．術中骨盤放射線療法、全腹部放射線療法、又は放射線療法からのグレード≧２の胃腸の残存症状の病歴
８．全身治療を要する、制御不能な活動性細菌性、ウイルス性、又は真菌性感染症。
９．ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）を有する公知の感染症、又は活動性Ａ、Ｂ、又はＣ型肝炎。
１０．ポリソルベート８０、タキサン系、ソルトール及び／又はプロピレングリコールを含むいずれかの製品に対する前の過敏症反応を有する患者。
１１．妊娠又は母乳を与えている女性。女性患者は、閉経後、手術による不妊である、又は試験期間及び試験完了後１ヶ月間、バースコントロールの容認可能な方法（すなわち、バリア法、子宮内避妊具、殺精子剤を含むペッサリー又は殺精子剤を含むコンドーム、禁欲）の使用に同意しなければならない。妊娠の可能性がある女性患者は、最初の治験薬投与１０日前以内に血清妊娠試験で陰性でなければならない。男性患者は、手術による不妊又は避妊の容認可能な方法の使用を同意しなければならない。
１２．皮膚の基底細胞がん又は子宮頸部の上皮内癌を除く、患者が治療を受ける同時の活動性二次性悪性腫瘍。
１３．研究者見解で、患者に過剰なリスクを課すことになるいずれもの病状。かかる病状の例としては、非経口抗炎症治療を要する感染症、水腎症、肝不全、いずれもの精神状態
の変化又はインフォームドコンセントの理解を妨げることになるいずれもの精神医学的状態が挙げられる。
１４．このプロトコールに必要な方法に応じる意思がない、又はできない。
【０１４０】
試験長さ
安定であり、応じてくれる患者を、彼／彼女が、許容できない有害事象がなく、臨床効果（安定な疾病又は応答）のある証拠を有する限り、治療した。治験の終了は、最後の患者が参加後１２ヶ月と計画した。
【０１４１】
調査製品／用量／経路／レジメン
プリナブリン又はプラセボ
プリナブリンの開始用量は、３０ｍｇ／ｍ2又は２０ｍｇ／ｍ2であった。用量の調節は、観察された有害事象により依存した。投与量は、指定用量及び患者の体表面積を基準に変更した。臨床製剤は、２０ｍＬ（４ｍｇ／ｍＬ）中の８０ｍｇの薬物を含む褐色バイアル中の４０％ソルトール（登録商標）ＨＳ−１５／６０％プロピレングリコール中の濃縮液として供給し、室温で貯蔵した。各バイアルを、単回使用用に指定した。薬物の正確な体積（バイアル中、４ｍｇ／ｍＬの濃度）を、１：２０の希釈で、水（Ｄ５Ｗ）中の５％デキストロースに希釈し、末梢的に、又は中枢的に静脈内投与した。点滴時間を、スポンサーの指示で、臨床的に適応があれば増やしてもよい。プリナブリン及びプラセボを貯蔵、希釈及び投与を含む全ての時間で光を遮らなければならない。プリナブリン及びプラセボを、希釈の６時間以内に投与すべきである。
【０１４２】
医療機関診療毎の鎮吐薬の前投薬（サブスタンスＰ阻害薬、副腎皮質ステロイド及び／又はドーパミンアゴニスト配合薬などの有意な鎮吐薬レジメンを含む）を、プリナブリン又はプラセボの各投与前に提供すべきである。５−ＨＴ3アンタゴニストを、明白に必要でない限り、プリナブリン又はプラセボの投与に続き、又はその間に、ルーチンに投与するべきではない。患者は、それらの鎮吐作用レジメンの部分としてメトクロプラミドなどの運動改善薬を受けるべきである。
【０１４３】
アヘン製剤などの運動抑制剤の使用を最小限にする、又は適応があれば、メチルナルトレキソンなどの薬物と一緒にアヘン製剤誘発便秘症を処置するだけでなく、明確に指示されるときまで、便軟化剤、増量剤、刺激剤及び／又はドーパミンアゴニストを含むビンクリスチンなどの薬物を使用したとき、医療機関診療毎に腸運動を維持すべきである。もし、有意な便秘症を発症するならば、直ぐに処置すべきであり、プリナブリン又はプラセボの投与を、回復するまで遅らせるべきである。イレウスの徴候の注意深い観察及びＸ線検査及び／又は超音波検査での早期診断評価が推奨される。
【０１４４】
プリナブリン又はプラセボの投与後に最高血圧の＞２０％上昇が観察されるならば、経口アムロジピン１０ｍｇ又は均等なカルシウムチャネル遮断薬を、後続の各投与１時間前に投与すべきである。１８０ｍｍＨｇを超える最高血圧の上昇を、医療機関診療毎に、ニトロプルシド又は同類のレジメンで処置すべきである。
【０１４５】
ドセタキセル：
ドセタキセルの開始用量は、７５ｍｇ／ｍ2であった。用量調節は、観察される有害事象により依存した。
【０１４６】
投与量は、指定用量及び患者の体表面積を基準に変更した。
【０１４７】
標準認可及び市販化学療法薬として、研究者及び試験場所のスタッフは、ドセタキセルの使用の経験があり、製造者から提供された該製剤及びドセタキセル処方情報に精通して
いるべきである。
【０１４８】
ドセタキセルを、医療機関の薬局から得て、医療機関のプロトコール毎に製剤すべきである。この臨床治験プロトコールにより処方された用量で、医療機関のプロトコール毎に、１時間の点滴静注で投与を実施すべきである。
【０１４９】
経口デキサメタゾン（１６ｍｇ）を、ドセタキセル点滴の前の日、その日、及びその後の日に与えた（１日目）。同様な副腎皮質ステロイド前投薬レジメンを、現地医療機関診療に従って使用してもよい。デキサメタゾン又は他の副腎皮質ステロイドの投与を、既に副腎皮質ステロイドを使用している患者については、適宜減らすべきである。
【０１５０】
方法
スクリーニング：（治療開始前２８日以内（すなわち、−２８〜１日目））インフォームドコンセント、病歴及び併用医薬品；ＥＣＧ、Ｘ線検査腫瘍評価及び必要に応じて腫瘍マーカー。
【０１５１】
ベースライン評価：（治療開始前１４日以内、すなわち、−１４〜１日目）身体検査、バイタルサイン、ＥＣＯＧパフォーマンスステータス、併用医薬品使用、安全性実験室試験。妊娠する可能性のある女性は、治療開始の１０日以内に、血性妊娠試験で陰性でなければならない。もし、有意な心疾患のいずれかの病歴又は発見があったならば、循環器科の受診をすべきである。
【０１５２】
治療フェーズ：安全性評価（完全な身体検査を含む）を、治験薬の点滴前に行った。安全性評価（完全な身体検査を含む）を、各次のサイクル（２＋）前に行った。加えて、次を評価した：
・鑑別を伴うＣＢＣ／血小板及び臨床化学を、各サイクルの１日目前７２時間までに行った；追加の評価を、サイクル１／１５日目に行った。
・バイタルサイン（心拍数、呼吸数、血圧及び体温）を、点滴の日に、各治験薬点滴直前及び直後、及び第１サイクルの最後の点滴後、３０分及び６０分に検査した。次のサイクル中、身体検査中に、各点滴前及び後に、バイタルサインを検査した。
【０１５３】
治療に対する応答の評価を、第２サイクルの残りの期間に行った（及びその後の約２サイクル毎）。
【０１５４】
進行性疾病、許容できない治療関連有害事象の証拠があるまで、治療を続け、治験を終了、又は患者を治療から退く（同意の退出あるいは研究者の判断のいずれか）。
【０１５５】
治験終了時（治験離脱）訪問：最後の治験薬投与の２８日以内に、少なくとも１回の治験薬投与を受けた、及び死亡により本評価を終えたものを除き、いずれもの理由で治療を中断した全ての患者。患者は身体検査をして、バイタルサイン、体重、ＥＣＯＧパフォーマンスステータス文書、及び妊娠検査を含むルーチンの臨床検査を提出する。
【０１５６】
フォローアップ訪問：フォローアップ訪問は、進行中の薬物関連有害事象及び生存期間をモニターするために必要であった。治験終了時評価で観察されたグレード≧２の薬物関連有害事象を有する患者を、該有害事象がグレード≦１に回復又は該事象が慢性である、もしくは他の抗がん治療を受けた患者であると考えられるまで、毎月フォローアップすべきである。生存期間のフォローアップは、３ヶ月の間隔で行うべきである。
【０１５７】
評価：
有効性：Ｄ群及びＤＮ群間の有効性のエンドポイントについて比較を行った。主要な有
効性エンドポイントは、全体生存期間である。副次エンドポイントとしては、反応率、応答期間、生活の質、好中球減少率及びＧ−ＣＳＦ使用が挙げられる。
【０１５８】
安全性：患者により自然に明言された、又は身体検査、バイタルサイン、ＥＣＯＧパフォーマンスステータス及び実験室検査中に気づいた有害事象。
【０１５９】
統計解析
有効性：全体生存期間及び他のイベントまでの時間エンドポイントの分布を、カプラン・マイヤー法を用いてまとめた。ログランク検定を、治療群間の有効性エンドポイントを比較するために使用した。全ての統計的試験を、５％の有意水準で片側検定を用いて実施した。この治験の主要目的は、全体生存期間に対するプリナブリンの追加の効果を評価することである。
【０１６０】
安全性：全患者を、もし、少なくとも１回の治験薬投与を受けたならば、安全性分析について評価した。安全性データを、有害事象についての度数分布表及び実験室変数についての度数分布表とシフト表を含む個別リスト及び総括表に治験群により表した。
【０１６１】
結果：
１）好中球減少は、プリナブリン及びドセタキセルの組合せ群で減少する。
ドセタキセルに添加されたとき、プリナブリンの忍容性プロファイルは、ドセタキセル単剤より良好である。耐えがたいドセタキセルの副作用のせいで、７５ｍｇ／ｍ2のドセタキセルの開始用量は、プリナブリン３０ｍｇ／ｍ2＋ドセタキセル群の患者の１０％（５０名の内５名）で減少し、一方、対応ドセタキセル単剤群のパーセントは、患者の１８．２％（５５名の内１０名）で、ずっと高かった。プリナブリン２０ｍｇ／ｍ2コホートでは、同じ結果が見られ、より低い比率の患者が、コンパニオンＤ群（２２．２％）より組合せ（２．５％）で治療したとき、ドセタキセル用量の減少を要した。
【０１６２】
そのコンパニオンＤ群（８．０％対３６．４％、ｐ＜０．００１）と比較したＤＮ３０ｍｇ／ｍ2群及びそのコンパニオンＤ群（７．５％対２２．２％）と比較したＤＮ２０ｍｇ／ｍ2群の患者の好中球減少症の発生はより低かった。ＤＮ３０ｍｇ／ｍ2群（ｎ＝５０）は、全グレードの好中球減少症、特に、それぞれ、８．０％対２７．４％で、プールしたＤ群（ｎ＝７３）と比較して、グレード≧３好中球減少症の発生が有意に低かった（ｐ＝０．０１０）。同様な結果が、２０ｍｇ／ｍ2群で観察された（それぞれ、５．０％対２７．４％；ｐ＝０．０５０）。好中球減少症の減少効果を、図５に示す。Ｇ−ＣＳＦを必要とする患者集団及びドセタキセル用量減少率も、Ｄ群と比較して、両方のＤＮ群で低かった。ＤＮ群との配合対Ｄ群との配合でのＧ−ＣＳＦ使用パーセントの減少は、０．００１３％で、統計的に有意である。
【０１６３】
【表１２】
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【０１６４】
２）プリナブリン及びドセタキセル組合せからの大きな腫瘍患者集団の全体生存期間（ＯＳ）改善
上記治験では、少なくとも１回の前の化学療法レジメンに奏効しなかった、局所的に進行又は転移性ＮＳＣＬＣを有する患者のプリナブリン（３０ｍｇ／ｍ2、各２１日サイクルの１日目及び８日目）＋ドセタキセル（７５ｍｇ／ｍ2、各サイクルの１日目）を、ドセタキセル単剤と比較して、３０ｍｇ／ｍ2群では、ＯＳ（図６、表１１）、無増悪生存期間［ＰＦＳ］、及び反応率において、ドセタキセル対照治療群（ＯＳ＝７．５ヶ月）と比較して、プリナブリン＋ドセタキセル治療群（ＯＳ＝８．７ヶ月）間に有意差はなかった。それから、本発明者は、プリナブリン及びドセタキセルの組合せに対して反応するサブグループを確認するため、データの広範な解析を行った。
【０１６５】
サブグループの解析から、３ｃｍの腫瘍サイズにおいて、ＯＳの明白な区分があった：少なくとも１つの腫瘍が、＞３ｃｍ、＞５ｃｍ、又は＞７ｃｍである群では、Ｄ群と比較して、ＤＮ群では、明白なＯＳ改善があったが、≦３ｃｍの全腫瘍では、ＯＳの差はなかった（６．４５ヶ月対６．４７ヶ月、表１１  図６）。腫瘍サイズがより大きいほど、ドセタキセル群単独と比較して、組合せ群のＯＳ改善、ハザード比、及び反応率はより著しい（表１１、図６）。
【０１６６】
従って、本発明者は、最適なプリナブリン及びドセタキセルの組合せから利益を得る一意的に定義された大きな腫瘍群を発見し、このことは、いかなる文献にも報告されなかった。
【０１６７】
【表１３】
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【０１６８】
本願で言及した全文献は、参照することにより個別に組み入れられるように、参照することにより、本明細書に組み入れられるものとする。加えて、上記教示を読んだ後、当業者により多くの変形及び修飾を行ってもよいこと、及びこれらの均等物も、添付の請求の範囲に定義された範囲内であることを理解するべきである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図５】
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【図６】
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