(57)【要約】      （修正有）【課題】骨原性、骨誘導性及び／又は骨伝導性の促進に使用するためのオキシステロール−治療薬誘導体又はＯＸＹ１３３−治療薬誘導体化合物及びその合成法の提供。【解決手段】オキシステロールの誘導体の製造法であって、（i）プレグネノロン誘導体を、有機金属化合物と反応させて、ジオール誘導体を形成させ、（ii）前記ジオール誘導体をボラン化合物と反応させて、オキシステロール又はその薬学的に許容可能な塩を形成させ、（iii）前記化合物を、治療薬又は治療薬のフラグメントと反応させて、下式のオキシステロール誘導体を形成させることを含む方法。（式中、Ｒ１は保護基であり、Ｒ３は、少なくとも１個の炭素を有する脂肪族又は環状置換基であり、そしてＲ４は、ビスホスホネート部分、抗生物質部分、タンパク質又はタンパク質フラグメント）2018199670.tif 000077【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
オキシステロールの誘導体の製造法であって、該方法は
（ｉ）式Ｉ：
【化１】
2018199670.tif 000056
のプレグネノロン誘導体を、有機金属化合物と反応させて、式II：
【化２】
2018199670.tif 000057
のジオール誘導体を形成させ、
（ii）式IIのジオール誘導体をボラン化合物と反応させて、式III：
【化３】
2018199670.tif 000058
のオキシステロール又はその薬学的に許容可能な塩を形成させ、
（iii）式IIIの化合物を、治療薬又は治療薬のフラグメントと反応させて、式IV：
【化４】
2018199670.tif 000059
のオキシステロール誘導体を形成させることを含み、
式中、Ｒ１は保護基であり、Ｒ３は、少なくとも１個の炭素を有する脂肪族又は環状置換基であり、そしてＲ４は、ビスホスホネート部分、抗生物質部分、タンパク質又はタンパク質フラグメントである方法。
【請求項２】
有機金属化合物が、式Ｒ３ＭｇＸ又はＲ３Ｌｉに相当し、式中、Ｘはハロゲン化物であり、Ｒ３は少なくとも１個の炭素を有する脂肪族又は環状置換基である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ヨウ素又はフッ化物源で処理することにより、式IVの化合物のＲ１を任意に脱保護して、式IVb：
【化５】
2018199670.tif 000060
の化合物を得ることをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
Ｒ１が、メチル、エチル、シリル又はカルバメート基であり、Ｒ３が、（Ｃ６−Ｃ２６）アルキル又はヘテロアルキル、（Ｃ２−Ｃ２０）アリール又はヘテロアリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アリールアルキル又はヘテロアルキル、又は（Ｃ５−Ｃ２０）アリールアルキル又はヘテロアリール−ヘテロアルキル、（Ｃ４−Ｃ１０）アルキルジイル又はヘテロアルキルジイル、（Ｃ４−Ｃ１０）アルキレノ又はヘテロアルキレノ又はカルバメートである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
式IIのプレグネノロン誘導体が、プレグネノロンを塩基中でＲ１Ｘと反応させることによって製造され、式中、Ｒ１はメチル、エチル、シリル又はカルバメートであり、Ｘはハロゲン化物であり、塩基は、ＮａＯＨ、ＫＯＨ又はＣａ（ＯＨ）２である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
Ｒ３ＭｇＸがｎ−ヘキシルマグネシウムクロリドであり、テトラヒドロフラン中で反応させて、式IIa：
【化６】
2018199670.tif 000061
のジオール誘導体を得る、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
式IIaの化合物をＢＨ３と反応させてボラン中間体を形成させ、そのボラン中間体を過酸化水素と反応させて、式IIIa：
【化７】
2018199670.tif 000062
のＯＸＹ１３３誘導体を形成させる、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
（ｉ）式IIIaの化合物を治療薬Ｒ４（Ｒ４は、ビスホスホネート部分、抗生物質部分、又はタンパク質フラグメント）と反応させて、式IVa：
【化８】
2018199670.tif 000063
の化合物を形成させ、
（ii）任意に式IVaの化合物を脱保護して、式IVc：
【化９】
2018199670.tif 000064
の化合物を得ることをさらに含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
式IIaのプレグネノロン誘導体が、プレグネノロンを塩基中でＲ１Ｘと反応させることによって製造され、式中、Ｒ１はメチル、エチル、シリル又はカルバメートであり、Ｘはハロゲン化物であり、塩基は、ＮａＯＨ、ＫＯＨ又はＣａ（ＯＨ）２である、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
式IIIaの化合物を、リンカーＬ（リンカーＬは、アスパラギン酸系リンカー、コハク酸系リンカー又はウレタン系リンカーを含む）を含む化合物と反応させ；治療薬Ｒ４とカップリングさせて、式VIII：
【化１０】
2018199670.tif 000065
［式中、Ｒ４は、ビスホスホネート部分、抗生物質部分、又はタンパク質フラグメントである］の化合物を得；任意に式VIIIの化合物をヨウ素源又はフッ化物源で脱保護し、式VIIIa：
【化１１】
2018199670.tif 000066
の化合物を得ることをさらに含む、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
Ｌがコハク酸系リンカーの場合、オキシステロール誘導体は式IXa：
【化１２】
2018199670.tif 000067
の化合物である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
ヨウ素源がトリメチルシリルヨージドであり、フッ化物源がテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオリド又はＨＦピリジン錯体である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
式IIIaの化合物をコハク酸系リンカーと反応させ；そして式Ｖ：
【化１３】
2018199670.tif 000068
の化合物とカップリングさせて、式VIb：
【化１４】
2018199670.tif 000069
の化合物を得ることをさらに含む、請求項７に記載の方法。
【請求項１４】
ヨウ素源又はフッ化物源で処理することにより、式VIbの化合物のＲ１を脱保護し、式VI（ＯＸＹ１４９）：
【化１５】
2018199670.tif 000070
の化合物を得ることをさらに含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
ヨウ素源がトリメチルシリルヨージドであり、フッ化物源がテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオリド又はＨＦピリジン錯体である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ＯＸＹ１４９メチルエーテルの製造法であって、該方法は、プレグネノロンを塩基中でＣＨ３Ｘと反応させることによって（式中、Ｘはハロゲン化物であり、塩基は、ＮａＯＨ、ＫＯＨ又はＣａ（ＯＨ）２である）、式Ia：
【化１６】
2018199670.tif 000071
のプレグネノロンメチルエーテルを形成させ；
式Iaのプレグネノロンメチルエーテルをテトラヒドロフラン中でヘキシルマグネシウムクロリドと反応させて、式IIb：
【化１７】
2018199670.tif 000072
のプレグネノロンジオールメチルエーテルを形成させ；
式IIbのプレグネノロンジオールメチルエーテルをＢＨ３と反応させ、得られたボラン中間体を過酸化水素と反応させて、式IIIb：
【化１８】
2018199670.tif 000073
のＯＸＹ１３３メチルエーテル又はその薬学的に許容可能な塩を形成させ；
式IIIbのＯＸＹ１３３メチルエーテルを無水コハク酸と反応させて、コハク酸系リンカーを提供し、さらに、式Ｖ：
【化１９】
2018199670.tif 000074
の化合物と反応させて、式VIa（ＯＸＹ１４９メチルエーテル）：
【化２０】
2018199670.tif 000075
の化合物を得ることを含む方法。
【請求項１７】
Ｒ４がカナマイシン部分である、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
Ｒ４がカナマイシン部分である、請求項９に記載の方法。
【請求項１９】
すべての反応が単一容器中で実施される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
式Ｘ：
【化２１】
2018199670.tif 000076
［式中、Ｒ１は、メチル、エチル、シリル又はカルバメート基であり、Ｒ３は、（Ｃ６−Ｃ２６）アルキル又はヘテロアルキル、（Ｃ２−Ｃ２０）アリール又はヘテロアリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アリールアルキル又はヘテロアルキル及び（Ｃ５−Ｃ２０）アリールアルキル又はヘテロアリール−ヘテロアルキル、（Ｃ４−Ｃ１０）アルキルジイル又はヘテロアルキルジイル、又は（Ｃ４−Ｃ１０）アルキレノ又はヘテロアルキレノ、カルバメートであり、Ｌはリンカー部分であり、前記リンカー部分は、アスパラギン酸系リンカー、コハク酸系リンカー又はウレタン系リンカーを含み、Ｒ４は治療薬の誘導体であり、前記治療薬は、ビスホスホネート部分、抗生物質部分、タンパク質又はタンパク質フラグメントを含む］の構造に対応する化合物。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
[0001]生物製剤は、一般的に、骨折治癒及び脊髄障害の外科的処置を含む医学用途において骨成長を促進するために使用されている。脊椎固定術(spine fusion)は、変性円板疾患や腰椎及び頸椎を冒す関節炎に対処するため、整形外科医及び神経外科医により実施されることが多い。歴史的には、通常、患者の腸骨稜から採取される自家骨移植が椎骨レベル(vertebral level)間の固定(fusion)を増強するために使用されてきた。
【０００２】
[0002]骨誘導性で脊椎固定を促進するために一般的に使用される一つのタンパク質は、組換えヒト骨形成タンパク質−２（ｒｈＢＭＰ−２）である。その使用は、単一レベル前方経路腰椎椎体間固定術に関しては米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって承認されている。それ以来、ｒｈＢＭＰ−２の使用は著しく増大し、腰椎後方固定術ならびに頸椎固定術を含むまでに拡大している。
【０００３】
[0003]オキシステロールは、血液中ならびにヒト及び動物の組織中に存在するコレステロールの酸素化誘導体の一大ファミリーを形成する。オキシステロールは、アテローム性動脈硬化病変部に存在することが見出されており、細胞分化、炎症、アポトーシス、及びステロイド産生といった様々な生理的過程に役割を果たしている。一部の天然オキシステロールは堅牢な骨原性を有しており、骨成長に使用できる。最も強力な骨原性天然オキシステロールである２０（Ｓ）−ヒドロキシコレステロールは、骨芽細胞及び脂肪細胞に分化できる多能性間葉細胞に適用すると、骨原性であると同時に抗脂肪生成性でもある。
【０００４】
[0004]一つのそのようなオキシステロールは、ＯＸＹ１３３、すなわち（３Ｓ，５Ｓ，６Ｓ，８Ｒ，９Ｓ，１０Ｒ，１３Ｓ，１４Ｓ，１７Ｓ）  １７−（（Ｓ）−２−ヒドロキシオクタン−２−イル）−１０，１３−ジメチルヘキサデカヒドロ−ｌＨ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，６−ジオールであり、下記構造：
【０００５】
【化１】
2018199670.tif 000002
【０００６】
を示す。
[0005]ＯＸＹ１３３を合成するためには、単一容器での実施が困難な、複雑で多段階の化学反応が必要になることが多い。例えば、ＯＸＹ１３３を合成するためには、分子が合成される際に末端基を保護するための様々な保護剤の利用が必要になりうる。さらに、様々な脱保護剤も利用されることになり、それがコストの増大、安全性の低下、及び環境への悪影響をもたらす。さらに、ＯＸＹ１３３の合成経路は、３０％未満の非常に低い収率しかもたらすことができない。
【０００７】
[0006]組換え的に製造された天然ヒトタンパク質、例えばｒｈＢＭＰ-２及びｒｈＰＤＧＦは、新生骨形成を誘導又は増強するそれらの能力について数十年間にわたり研究されている。これらのタンパク質は骨治癒の支持に有効であるが、製造の複雑さ及び関連コストに関して欠点がある。これらの欠点に対処する一つの方法は、骨治癒を刺激又は増強する骨シグナル伝達経路の一部を調節する小分子を同定することである。例を挙げると、骨誘導性オキシステロール及びその他の治療薬、例えば、ビスホスホネート、抗生物質、タンパク質、それらの部分又はフラグメントである。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
[0007]そこで、骨原性、骨誘導性及び／又は骨伝導性を促進するために使用されるオキシステロール−治療薬誘導体の費用効果の高い合成法を求める需要が存在する。特に、高収率及び改良されたプロセス安全性を有し、工業用にスケールアップできるＯＸＹ１３３−治療薬誘導体の合成法は有益であろう。立体選択的な内因性出発原料からのＯＸＹ１３３−治療薬誘導体の合成法も有益であろう。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
[0008]骨原性、骨誘導性及び／又は骨伝導性の促進に使用するためのオキシステロール−治療薬誘導体又はＯＸＹ１３３誘導体化合物、及びその合成法を提供する。高収率及び改良されたプロセス安全性を有する単一容器中でのＯＸＹ１３３−治療薬誘導体の合成法も提供する。立体選択的なＯＸＹ１３３−治療薬誘導体の合成法も提供する。環境影響が少ない、製品コストの低いＯＸＹ１３３−治療薬誘導体の合成法も提供する。
【００１０】
[0009]一部の態様において、オキシステロールの誘導体の製造法を提供する。該方法は、（ｉ）式Ｉ：
【００１１】
【化２】
2018199670.tif 000003
【００１２】
のプレグネノロン誘導体を、有機金属化合物と反応させて、式II：
【００１３】
【化３】
2018199670.tif 000004
【００１４】
のジオール誘導体を形成させ、
[0010]（ii）式IIのジオール誘導体をヒドロホウ素化−酸化に付して、式III：
【００１５】
【化４】
2018199670.tif 000005
【００１６】
のオキシステロールの誘導体又はその薬学的に許容可能な塩を形成させ、
[0011]（iii）式IIIの化合物を、治療薬又は治療薬のフラグメントと反応させて、式IV：
【００１７】
【化５】
2018199670.tif 000006
【００１８】
のオキシステロール誘導体を形成させることを含む。式中、Ｒ１は保護基、例えばメチル、エチル又はシリルであり、Ｒ３は、少なくとも１個の炭素を有する脂肪族又は環状置換基であり、そしてＲ４は、ビスホスホネート部分、抗生物質部分又はタンパク質フラグメントである。
【００１９】
[0012]これらの態様において、有機金属化合物は、式Ｒ３ＭｇＸ、又はＲ３Ｌｉに相当するグリニャール試薬である。式中、Ｘはハロゲン化物であり、Ｒ３は、少なくとも１個の炭素を有する脂肪族又は環状置換基である。
【００２０】
[0013]他の側面において、式IVの化合物は、Ｒ１の脱保護により、式IVb：
【００２１】
【化６】
2018199670.tif 000007
【００２２】
の化合物を得ることができる。脱保護は、ヨウ素、フッ化物源による処理又はその他の適切な脱保護法によって達成できる。
[0014]一部の態様において、式IIのプレグネノロン誘導体は、プレグネノロンを塩基中でＲ１Ｘと反応させることによって製造される。式中、Ｒ１はメチル、エチル、シリル又はカルバメートであり、Ｘはハロゲン化物であり、塩基は、ＮａＯＨ、ＫＯＨ又はＣａ（ＯＨ）２である。
【００２３】
[0015]他の態様においては、式Ｉのプレグネノロン誘導体を、テトラヒドロフラン中でｎ−ヘキシルマグネシウムクロリドと反応させて、式IIa：
【００２４】
【化７】
2018199670.tif 000008
【００２５】
のジオール誘導体を得る。
[0016]他の側面において、式IIaの化合物を、ボラン化合物がＢＨ３であるヒドロホウ素化−酸化に付してボラン中間体を形成させ、それを例えばＮａＯＨ、ＫＯＨ又はＣａ（ＯＨ）２などの塩基中で水素と反応させて、式IIIa：
【００２６】
【化８】
2018199670.tif 000009
【００２７】
のＯＸＹ１３３誘導体を形成させる。式中、Ｃ３は保護基のＲ１で保護されている。
[0017]別の側面において、式IIIaの化合物は治療薬Ｒ４（Ｒ４は、ビスホスホネート部分、抗生物質部分、又はタンパク質フラグメント）と反応させて、式IVa：
【００２８】
【化９】
2018199670.tif 000010
【００２９】
の化合物を形成させることができる。
[0018]様々な側面において、式IVaの化合物は、任意に脱保護されて、式IVc：
【００３０】
【化１０】
2018199670.tif 000011
【００３１】
の化合物にすることができる。
[0019]様々な態様において、式IIaのプレグネノロン誘導体は、プレグネノロンを塩基中でＲ１Ｘと反応させることによって製造される。式中、Ｒ１はメチル、エチル、シリル又はカルバメートであり、Ｘはハロゲン化物であり、塩基は、ＮａＯＨ、ＫＯＨ又はＣａ（ＯＨ）２である。
【００３２】
[0020]さらにその他の態様において、式IIIaの化合物は、リンカーＬを含む化合物と反応させることができる。有用なリンカーＬは、アスパラギン酸系リンカー、コハク酸系リンカー又はウレタン系リンカーを含む。得られたリンカー含有中間体を治療薬Ｒ４の部分又はフラグメントとカップリングさせて、式VIII：
【００３３】
【化１１】
2018199670.tif 000012
【００３４】
の化合物を得る。式中、Ｒ１は上記定義の通りであり、Ｒ４は、ビスホスホネート部分、抗生物質部分、タンパク質フラグメントでありうる。一部の態様において、Ｒ４は、カナマイシン又はカナマイシンフラグメントでありうる。
【００３５】
[0021]式VIIIの化合物は、任意に、ヨウ素源、フッ化物源又はその他の適切な脱保護法によって、Ｒ１を脱保護し、式VIIIa：
【００３６】
【化１２】
2018199670.tif 000013
【００３７】
の化合物を得ることができる。
[0022]他の側面において、Ｌがコハク酸系リンカーの場合、オキシステロール誘導体は式IXa：
【００３８】
【化１３】
2018199670.tif 000014
【００３９】
の化合物である。
[0023]他の態様において、式IIIaの化合物を無水コハク酸と反応させて、コハク酸系リンカーを提供し、次いで式Ｖ：
【００４０】
【化１４】
2018199670.tif 000015
【００４１】
の化合物とカップリングさせて、式VIb：
【００４２】
【化１５】
2018199670.tif 000016
【００４３】
の化合物を得ることもできる。
[0024]一部の態様において、式VIbの化合物は、任意に、ヨウ素源又はフッ化物源又はその他の適切な脱保護法によって、Ｒ１を脱保護し、式VI：
【００４４】
【化１６】
2018199670.tif 000017
【００４５】
の化合物（ＯＸＹ１４９）を得ることができる。
[0025]他の態様において、本願は、式Ｘ：
【００４６】
【化１７】
2018199670.tif 000018
【００４７】
の構造に対応する化合物を提供する。
[0026]
[0027]式中、Ｒ１は、メチル、エチル、又はシリルであり、Ｒ３は、（Ｃ６−Ｃ２６）アルキル又はヘテロアルキル、（Ｃ２−Ｃ２０）アリール又はヘテロアリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アリールアルキル又はヘテロアルキル及び（Ｃ５−Ｃ２０）アリールアルキル又はヘテロアリール−ヘテロアルキル、（Ｃ４−Ｃ１０）アルキルジイル又はヘテロアルキルジイル、又は（Ｃ４−Ｃ１０）アルキレノ又はヘテロアルキレノ又はカルバメート又はベンジル又はシリルであり、Ｌはリンカー部分であり、該リンカー部分は、アスパラギン酸系リンカー、コハク酸系リンカー又はウレタン系リンカーを含み、Ｒ４は治療薬である。他の側面において、治療薬は、ビスホスホネート部分、抗生物質部分又はタンパク質フラグメントである。
【００４８】
[0028]様々な態様において、アスパラギン酸系リンカー、コハク酸系リンカー又はウレタン系リンカーは、以下の式：
【００４９】
【化１８】
2018199670.tif 000019
【００５０】
を有する。
[0029]様々な態様において、リンカーＬの有無にかかわらずオキシステロール−治療薬誘導体の上記製造法は、単一容器で実施できる。
【００５１】
[0030]一定の態様において、本開示は、式Ｘの化合物と薬学的に許容可能な担体又は希釈剤とを含む医薬組成物を提供する。
[0031]他の態様において、本開示は、骨障害を患う哺乳動物の治療法を提供し、該方法は、哺乳動物に有効量の式Ｘのオキシステロール−誘導体を投与することを含み、該複合体は、哺乳動物への局所送達又は全身送達によって哺乳動物に投与される。骨障害は、骨折、骨粗鬆症又は骨減少症を含む。
【００５２】
[0032]他の側面において、本開示は、骨障害を患う哺乳動物の治療法を提供し、該方法は、哺乳動物に有効量の式Ｘの化合物を投与することを含む。
[0033]様々な態様の追加の特徴及び利点は、一部は以下の説明の中で示され、一部は記載から明らかになるか、又は様々な態様に実施によって学ぶこともできる。様々な態様の目的及びその他の利点は、以下の説明及び添付の特許請求の範囲において特に指摘された構成要素及び組合せにより実現及び達成されるであろう。
【００５３】
[0034]態様のその他の側面、特徴、利益及び利点は、一部は、以下の説明、添付の特許請求の範囲及び添付図面に関して明白になるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００５４】
【図１】[0035]図１は、本開示の一態様に示されている通り、酢酸プレグネノロンを含む出発反応物を用いてＯＸＹ１３３を合成するための段階的反応を示す。プレグネノロンを有機金属化合物と反応させて、２個のヒドロキシル基を有するステロール又はジオールを製造する。次にそのステロール又はジオールをボラン及び過酸化水素と反応させ、精製してＯＸＹ１３３を製造する。
【図２】[0036]図２は、単離され精製されたＯＸＹ１３３から得られた１Ｈ  ＮＭＲデータのグラフ図を示す。
【図３】[0037]図３は、ＯＸＹ１３３から得られた１３Ｃ  ＮＭＲデータのグラフ図を示す。
【図４】[0038]図４は、ＯＸＹ１３３から得られた赤外分光データのグラフ図を示す。
【図５】[0039]図５は、ＯＸＹ１３３から得られた質量分析データのグラフ図を示す。
【図６】[0040]図６は、ＯＸＹ１３３を合成するための中間ステロール又はジオールから得られた１Ｈ  ＮＭＲデータのグラフ図を示す。
【図７】[0041]図７は、ＯＸＹ１３３を合成するための中間ステロール又はジオールから得られた１３Ｃ  ＮＭＲデータのグラフ図を示す。
【図８】[0042]図８は、本願の一態様によるオキシステロール類似体の合成スキームを示す。
【図９】[0043]図９は、Ｃ２０にヘキシル側鎖を有する本願の別の態様によるオキシステロール類似体の合成スキームを示す。
【図１０】[0044]図１０は、本願の態様によるＯＸＹ１３３治療薬類似体の合成スキームを示す。
【図１１】[0045]図１１は、本願の態様によるＯＸＹ１４９の合成スキームを示す。
【図１２】[0046]図１２は、本願の別の態様によるＯＸＹ１４９メチルエーテルの合成スキームを示す。
【図１３】[0047]図１３は、オキシステロールがアレンドロネート部分に結合されているオキシステロール誘導体の合成スキームを示す。
【図１４】[0048]図１４は、オキシステロールがタンパク質フラグメントに結合されているオキシステロール誘導体の合成スキームを示す。タンパク質フラグメントの例はＢＭＰ−２である。
【００５５】
[0049] 図面は正確な縮尺で描かれていないことは理解されるはずである。さらに、図面中の物体間の関係も正確な縮尺とは限らず、実際、サイズに関しては、逆転した関係を有することもある。図面は、示された各物体の構造に対する理解及び明確性をもたらすことを目的としているので、一部の特徴は、構造の特定の特徴を示すために誇張されていることもある。
【発明の詳細な説明】
【００５６】
[0050]本明細書及び添付の特許請求の範囲の目的のために、別途記載のない限り、成分の量、材料のパーセンテージ又は割合、反応条件、ならびに本明細書及び特許請求の範囲で使用されているその他の数値を表すすべての数字は、すべての場合において、“約”という用語によって修飾されていると理解されるものとする。従って、それに反することが示されない限り、以下の明細書及び添付の特許請求の範囲に示されている数値パラメーターは、本願が得ようとしている所望の性質に応じて変動しうる近似値である。少なくとも、そして特許請求の範囲への均等論の適用を制限しようとするのではなく、各数値パラメーターは、少なくとも、報告されている有効数字の桁数を考慮し、通常の丸め技術を適用することによって解釈されるべきである。
【００５７】
[0051]本願の広い範囲を示す数値範囲及び数値パラメーターは近似値ではあるが、特定の実施例中に示されている数値はできる限り正確に報告されている。しかしながら、いずれの数値も、それぞれの試験測定に見出される標準偏差に必然的に由来する一定の誤差を本質的に含有している。さらに、本明細書中に開示されたすべての範囲は、その中に包含されるありとあらゆる部分範囲も包含すると理解されるべきである。例えば、“１〜１０”の範囲は、最小値１と最大値１０の間（それらを含む）のありとあらゆる部分範囲、すなわち、１以上の最小値及び１０以下の最大値を有するありとあらゆる部分範囲、例えば５．５〜１０を含む。
【００５８】
定義
[0052]本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用されている単数形の“ａ”、“ａｎ”、及び“ｔｈｅ”は、一つの指示対象に明示的かつ明白に限定されていない限り、複数の指示対象も含むことに注意する。従って、例えば、“アルカノールアミン”と言う場合、１つ、２つ、３つ又はそれ以上のアルカノールアミンを含む。
【００５９】
[0053]本明細書中で使用されている“生物活性薬”という用語は、一般的に、患者の生理を変更する何らかの物質を意味する。本明細書においては、“生物活性薬”という用語は、“治療薬”、“治療上有効量”、及び“医薬品有効成分”、“ＡＰＩ”又は“薬物”という用語と互換的に使用されうる。“生物活性”組成物又は“医薬”組成物という用語も本明細書においては互換的に使用される。どちらの用語も、対象に投与できる組成物、対象に導入される医療デバイスを被覆するために使用される組成物又は医療デバイス中に存在する組成物を意味する。
【００６０】
[0054]本明細書中で使用されている“対象”という用語は、化合物で治療できる状態の症状を示している任意の動物を含む。適切な対象（患者）は、実験動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、又はモルモット）、家畜、及び飼育動物又はペット（例えば、ネコ、イヌ、又はウマ）を含む。ヒト以外の霊長類及びヒト患者を含むヒトも含まれる。典型的な対象は、ヘッジホッグシグナル伝達によって刺激される一つ又は複数の生理学的活性が異常な量（“正常”又は“健常”対象より低い量）を示す動物を含む。異常な活性は、ヘッジホッグ活性の活性化を含む様々な機序のいずれかによって調節できる。異常な活性は病的状態をもたらしうる。
【００６１】
[0055]“生分解性(biodegradable)”という用語は、ヒト体内で、酵素の作用により、加水分解作用により、及び／又はその他の類似の機序により、時間と共に分解する化合物又は成分を含む。様々な態様において、“生分解性”は、体内で非毒性の成分に分解され、その成分が細胞（例えば骨細胞）に浸透して欠損を修復できる成分を含む。“生体浸食性(bioerodible)”とは、化合物又は成分が、少なくとも一部は、周辺組織中に見出される物質、流体と接触した場合、又は細胞作用により、時間と共に浸食又は分解されることを意味する。“生体吸収性(bioabsorbable)”とは、化合物又は成分が、例えば細胞又は組織によりヒト体内で分解され、吸収されることを意味する。“生体適合性”とは、化合物又は成分が、標的組織部位で実質的な組織刺激又は壊死を引き起こさない、及び／又は発がん性でないことを意味する。
【００６２】
[0056]本明細書中で使用されている“アルキル”という用語は、親アルカン、アルケン又はアルキンの単一炭素原子から１個の水素原子を除去することによって誘導された、飽和又は不飽和の、分枝、直鎖、又は環状一価炭化水素基のことを言う。典型的なアルキル基は、メチル；エチル類、例えばエタノール、エチル；プロピル類、例えばプロパン−１−イル、プロパン−２−イル、シクロプロパン−１−イル、プロパ−１−エン−１−イル、プロパ−１−エン−２−イル、プロパ−２−エン−１−イル、シクロプロパ−１−エン−１−イル、シクロプロパ−２−エン−１−イル、プロパ−１−イン−１−イル、プロパ−２−イン−１−イルなど；ブチル類、例えばブタン−１−イル、ブタン−２−イル、２−メチル−プロパン−１−イル、２−メチル−プロパン−２−イル、シクロブタン−１−イル、ブタ−１−エン−１−イル、ブタ−１−エン−２−イル、２−メチル−プロパ−１−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ブタ−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブタ−１−エン−１−イル、シクロブタ−１−エン−３−イル、シクロブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１−イン−１−イル、ブタ−１−イン−３−イル、ブタ−３−イン−１−イルなどであるが、これらに限定されない。特定の飽和レベルが意図される場合、以下に定義のような“アルケニル”及び／又は“アルキニル”という用語体系が使用される。一部の態様において、アルキル基は（Ｃ１−Ｃ４０）アルキルである。一部の態様において、アルキル基は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルである。
【００６３】
[0057]本明細書中で使用されている“アルカニル”という用語は、親アルカンの単一炭素原子から１個の水素原子を除去することによって誘導された、飽和の、分枝、直鎖、又は環状アルキル基のことを言う。典型的なアルカニル基は、メタノール；エタノール；プロパノール類、例えばプロパン−１−イル、プロパン−２−イル（イソプロピル）、シクロプロパン−１−イルなど；ブタニル類、例えばブタン−１−イル、ブタン−２−イル（ｓｅｃ−ブチル）、２−メチル−プロパン−１−イル（イソブチル）、２−メチル−プロパン−２−イル（ｔ−ブチル）、シクロブタン−１−イルなどであるが、これらに限定されない。一部の態様において、アルカニル基は（Ｃ１−Ｃ４０）アルカニルである。一部の態様において、アルカニル基は（Ｃ１−Ｃ６）アルカニルである。
【００６４】
[0058]本明細書中で使用されている“アルケニル”という用語は、親アルケンの単一炭素原子から１個の水素原子を除去することによって誘導された、少なくとも一つの炭素炭素二重結合を有する不飽和の、分枝、直鎖、又は環状アルキル基のことを言う。該基は二重結合に関してシス又はトランス配置のいずれかを取りうる。典型的なアルケニル基は、エテニル；プロペニル類、例えばプロパ−１−エン−１−イル、プロパ−１−エン−２−イル、プロパ−２−エン−１−イル、プロパ−２−エン−２−イル、シクロプロパ−１−エン−１−イル；シクロプロパ−２−エン−１−イル；ブテニル類、例えばブタ−１−エン−１−イル、ブタ−１−エン−２−イル、２−メチル−プロパ−１−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ブタ−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブタ−１−エン−１−イル、シクロブタ−１−エン−３−イル、シクロブタ−１，３−ジエン−１−イルなどであるが、これらに限定されない。一部の態様において、アルケニル基は（Ｃ２−Ｃ４０）アルケニルである。一部の態様において、アルケニル基は（Ｃ２−Ｃ６）アルケニルである。
【００６５】
[0059]本明細書中で使用されている“アルキニル”という用語は、親アルキンの単一炭素原子から１個の水素原子を除去することによって誘導された、少なくとも一つの炭素炭素三重結合を有する不飽和の、分枝、直鎖、又は環状アルキル基のことを言う。典型的なアルキニル基は、エチニル；プロピニル類、例えばプロパ−１−イン−１−イル、プロパ−２−イン−１−イルなど；ブチニル類、例えばブタ−１−イン−１−イル、ブタ−３−イン−１−イルなどであるが、これらに限定されない。一部の態様において、アルキニル基は（Ｃ２−Ｃ４０）アルキニルである。一部の態様において、アルキニル基は（Ｃ２−Ｃ６）アルキニルである。
【００６６】
[0060]本明細書中で使用されている“アルキルジイル”という用語は、親アルカン、アルケン又はアルキンの２個の異なる炭素原子のそれぞれから１個の水素原子を除去することによって、又は親アルカン、アルケン又はアルキンの単一炭素原子から２個の水素原子を除去することによって誘導された、飽和又は不飽和の、分枝、直鎖又は環状二価炭化水素基のことを言う。２つの一価基中心又は二価基中心の各結合価は、同じ又は異なる原子と結合を形成できる。典型的なアルキルジイルは、メタンジイル；エチルジイル類、例えばエタン−１，１−ジイル、エタン−１，２−ジイル、エテン−１，１−ジイル、エテン−１，２−ジイル；プロピルジイル類、例えばプロパン−１，１−ジイル、プロパン−１，２−ジイル、プロパン−２，２−ジイル、プロパン−１，３−ジイル、シクロプロパン−１，１−ジイル、シクロプロパン−１，２−ジイル、プロパ−１−エン−１，１−ジイル、プロパ−１−エン−１，２−ジイル、プロパ−２−エン−１，２−ジイル、プロパ−１−エン−１，３−ジイル、シクロプロパ−１−エン−１，２−ジイル、シクロプロパ−２−エン−１，２−ジイル、シクロプロパ−２−エン−１，１−ジイル、プロパ−１−イン−１，３−ジイルなど；ブチルジイル類、例えばブタン−１，１−ジイル、ブタン−１，２−ジイル、ブタン−１，３−ジイル、ブタン−１，４−ジイル、ブタン−２，２−ジイル、２−メチル−プロパン−１，１−ジイル、２−メチル−プロパン−１，２−ジイル、シクロブタン−１，１−ジイル；シクロブタン−１，２−ジイル、シクロブタン−１，３−ジイル、ブタ−１−エン−１，１−ジイル、ブタ−１−エン−１，２−ジイル、ブタ−１−エン−１，３−ジイル、ブタ−１−エン−１，４−ジイル、２−メチル−プロパ−１−エン−１，１−ジイル、２−メタニリデン−プロパン−１，１−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，１−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，３−ジイル、シクロブタ−１−エン−１，２−ジイル、シクロブタ−１−エン−１，３−ジイル、シクロブタ−２−エン−１，２−ジイル、シクロブタ−１，３−ジエン−１，２−ジイル、シクロブタ−１，３−ジエン−１，３−ジイル、ブタ−１−イン−１，３−ジイル、ブタ−１−イン−１，４−ジイル、ブタ−１，３−ジイン−１，４−ジイルなどであるが、これらに限定されない。特定の飽和レベルが意図される場合、アルカニルジイル、アルケニルジイル及び／又はアルキニルジイルという用語体系が使用される。一部の態様において、アルキルジイル基は（Ｃ１−Ｃ４０）アルキルジイルである。一部の態様において、アルキルジイル基は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルジイルである。また、基中心が末端炭素にある飽和非環式アルカニルジイル基も想定されている。例えば、メタンジイル（メタノ）；エタン−１，２−ジイル（エタノ）；プロパン−１，３−ジイル（プロパノ）；ブタン−１，４−ジイル（ブタノ）などである（以下に定義のアルキレノとも呼ばれる）。
【００６７】
[0061]本明細書中で使用されている“アルキレノ”という用語は、直鎖の親アルカン、アルケン又はアルキンの２個の末端炭素原子のそれぞれから１個の水素原子を除去することによって誘導された、２つの末端一価基中心を有する直鎖アルキルジイル基のことを言う。典型的なアルキレノ基は、メタノ；エチレノ類、例えばエタノ、エテノ、エチノ；プロピレノ類、例えばプロパノ、プロパ［１］エノ、プロパ［１，２］ジエノ、プロパ［１］イノなど；ブチレノ類、例えばブタノ、ブタ［１］エノ、ブタ［２］エノ、ブタ［１，３］ジエノ、ブタ［１］イノ、ブタ［２］イノ、ブタ［１，３］ジイノなどであるが、これらに限定されない。特定の飽和レベルが意図される場合、アルカノ、アルケノ及び／又はアルキノという用語体系が使用される。一部の態様において、アルキレノ基は（Ｃ１−Ｃ４０）アルキレノである。一部の態様において、アルキレノ基は（Ｃ１−Ｃ６）アルキレノである。
【００６８】
[0062]本明細書中で使用されている“ヘテロアルキル”、“ヘテロアルカニル”、“ヘテロアルケニル”、“ヘテロアルキニル”、“ヘテロアルキルジイル”及び“ヘテロアルキレノ”という用語は、それぞれ、１個又は複数個の炭素原子がそれぞれ独立に同じ又は異なるヘテロ原子基で置換されたアルキル、アルカニル、アルケニル、アルキニル、アルキルジイル及びアルキレノ基のことを言う。これらの基に含めることができる典型的なヘテロ原子基は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｏ−Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｏ−Ｓ−、−ＮＲ’、＝Ｎ−Ｎ＝、−Ｎ-＝Ｎ−、−Ｎ（Ｏ）Ｎ−、−Ｎ＝Ｎ−ＮＲ’−、−ＰＨ−、−Ｐ（Ｏ）２−、−Ｏ−Ｐ（Ｏ）２−、−ＳＨ２−、−Ｓ（Ｏ）２−などであるが、これらに限定されない。式中、各Ｒ’は、独立に、水素、本明細書中に定義のアルキル、アルカニル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル又はヘテロアリール−ヘテロアリールである。
【００６９】
[0063]本明細書中で使用されている“アリール”という用語は、親芳香環系の単一炭素原子から１個の水素原子を除去することによって誘導された一価芳香族炭化水素基のことを言う。典型的なアリール基は、アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、コロネン、フルオランテン、フルオレン、ヘキサセン、ヘキサフェン、ヘキシレン、ａｓ−インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、オクタセン、オクタフェン、オクタレン、オバレン、ペンタ−２，４−ジエン、ペンタセン、ペンタレン、ペンタフェン、ペリレン、フェナレン、フェナントレン、ピセン、プレイアデン、ピレン、ピラントレン、ルビセン、トリフェニレン、トリナフタレンなどから誘導された基などであるが、これらに限定されない。一部の態様において、アリール基は（Ｃ５−Ｃ１４）アリール又は（Ｃ５−Ｃ１０）アリールである。一部の態様において、アリールはフェニル及びナフチルである。
【００７０】
[0064]本明細書中で使用されている“アリールジイル”という用語は、親芳香環系の２個の異なる炭素原子のそれぞれから１個の水素原子を除去することによって、又は親芳香環系の単一炭素原子から２個の水素原子を除去することによって誘導された二価芳香族炭化水素基のことを言う。２つの一価基中心又は二価中心の各結合価は、同じ又は異なる原子と結合を形成できる。典型的なアリールジイル基は、アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、コロネン、フルオランテン、フルオレン、ヘキサセン、ヘキサフェン、ヘキシレン、ａｓ−インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、オクタセン、オクタフェン、オクタレン、オバレン、ペンタ−２，４−ジエン、ペンタセン、ペンタレン、ペンタフェン、ペリレン、フェナレン、フェナントレン、ピセン、プレイアデン、ピレン、ピラントレン、ルビセン、トリフェニレン、トリナフタレンなどから誘導された二価の基であるが、これらに限定されない。一部の態様において、アリールジイル基は（Ｃ５−Ｃ１４）アリールジイル又は（Ｃ５−Ｃ１０）アリールジイルである。例えば、一部のアリールジイル基は、ベンゼン及びナフタレンから誘導された二価基、特にフェナ−１，４−ジイル、ナフタ−２，６−ジイル及びナフタ−２，７−ジイルである。
【００７１】
[0065]本明細書中で使用されている“アリーレノ”という用語は、親芳香環系の２個の隣接炭素原子のそれぞれから１個の水素原子を除去することによって誘導された、２つの隣接一価基中心を有する二価架橋基のことを言う。アリーレノ架橋基、例えばベンゼノを親芳香環系、例えばベンゼンに結合させると、縮合芳香環系、例えばナフタレンが得られる。この架橋は、得られる縮合環系へのその結合と一致する最大数の非累積二重結合を有すると推定される。炭素原子の二重計数を回避するために、アリーレノ置換基が代替置換基を含む構造上の２個の隣接置換基が一緒になることによって形成される場合、アリーレノ架橋の炭素原子は、構造の架橋炭素原子を代替する。一例として、下記構造：
【００７２】
【化１９】
2018199670.tif 000020
【００７３】
を考えてみる。
[0066]式中、Ｒ１は、単独の場合は水素であるか、又はＲ２と一緒になった場合は（Ｃ５−Ｃ１４）アリーレノであり；Ｒ２は、単独の場合は水素であるか、又はＲ１と一緒になった場合は（Ｃ５−Ｃ１４）アリーレノである。
【００７４】
[0067]Ｒ１及びＲ２がそれぞれ水素の場合、得られる化合物はベンゼンである。Ｒ１とＲ２が一緒になってＣ６アリーレノ（ベンゼノ）の場合、得られる化合物はナフタレンである。Ｒ１とＲ２が一緒になってＣ１０アリーレノ（ナフタレノ）の場合、得られる化合物はアントラセン又はフェナントレンである。典型的なアリーレノ基は、アセアントリレノ、アセナフチレノ、アセフェナントリレノ、アントラセノ、アズレノ、ベンゼノ（ベンゾ）、クリセノ、コロネノ、フルオランテノ、フルオレノ、ヘキサセノ、ヘキサフェノ、ヘキシレノ、ａｓ−インダセノ、ｓ−インダセノ、インデノ、ナフタレン（ナフト）、オクタセノ、オクタフェノ、オクタレノ、オバレノ、ペンタ−２，４−ジエノ、ペンタセノ、ペンタレノ、ペンタフェノ、ペリレノ、フェナレノ、フェナントレノ、ピセノ、プレイアデノ、ピレノ、ピラントレノ、ルビセノ、トリフェニレノ、トリナフタレノなどであるが、これらに限定されない。特定の連結が意図される場合、関与する（アリーレノ架橋の）架橋炭素原子は角括弧内に示される。例えば、［１，２］ベンゼノ（［１，２］ベンゾ）、［１，２］ナフタレノ、［２，３］ナフタレノなどである。従って、上記の例において、Ｒ１とＲ２が一緒になって［２，３］ナフタレノの場合、得られる化合物はアントラセンである。Ｒ１とＲ２が一緒になって［１，２］ナフタレノの場合、得られる化合物はフェナントレンである。一態様において、アリーレノ基は（Ｃ５−Ｃ１４）又は（Ｃ５−Ｃ１０）である。
【００７５】
[0068]本明細書中で使用されている“アリールアリール”という用語は、２個以上の同一又は同一でない親芳香環系が単結合によって直接結合されている環系の単一炭素原子から１個の水素原子を除去することによって誘導された一価炭化水素基のことを言う。そのような直接環結合の数は、関与する親芳香環系の数より一つ少ない。典型的なアリールアリール基は、ビフェニル、トリフェニル、フェニル−ナフチル、ビナフチル、ビフェニル−ナフチルなどであるが、これらに限定されない。アリールアリール基を構成する炭素原子の数が特定される場合、その数は各親芳香環を構成する炭素原子の数のことである。例えば、（Ｃ１−Ｃ１４）アリールアリールは、各芳香環が５〜１４個の炭素を含むアリールアリール基、例えばビフェニル、トリフェニル、ビナフチル、フェニルナフチルなどである。一部の場合において、アリールアリール基の各親芳香環系は、独立に、（Ｃ５−Ｃ１４）芳香族又は（Ｃ１−Ｃ１０）芳香族である。一部の態様において、アリールアリール基は、すべての親芳香環系が同一である基、例えば、ビフェニル、トリフェニル、ビナフチル、トリナフチルなどである。
【００７６】
[0069]本明細書中で使用されている“ビアリール”という用語は、単結合によって直接一緒に結合されている２個の同一親芳香族系を有するアリールアリール基のことを言う。典型的なビアリール基は、ビフェニル、ビナフチル、ビアントラシル(bianthracyl)などであるが、これらに限定されない。一部の場合において、芳香環系は（Ｃ５−Ｃ１４）芳香環又は（Ｃ５−Ｃ１０）芳香環である。一態様において、ビアリール基はビフェニルである。
【００７７】
[0070]本明細書中で使用されている“アリールアルキル”という用語は、炭素原子、典型的には末端炭素原子又はｓｐ２炭素原子に結合されている水素原子の１個がアリール基で置換されている非環式アルキル基のことを言う。典型的なアリールアルキル基は、ベンジル、２−フェニルエタン−１−イル、２−フェニルエテン−１−イル、ナフチルメチル、２−ナフチルエタン−１−イル、２−ナフチルエテン−１−イル、ナフトベンジル、２−ナフトフェニルエタン−１−イルなどであるが、これらに限定されない。特定のアルキル部分が意図される場合、アリールアルカニル、アリールアルケニル及び／又はアリールアルキニルという用語体系が使用される。一部の態様において、アリールアルキル基は（Ｃ６−Ｃ４０）アリールアルキル、例えば、アリールアルキル基のアルカニル、アルケニル又はアルキニル部分が（Ｃ１−Ｃ２６）であり、アリール部分が（Ｃ５−Ｃ１４）である。一部の態様において、アリールアルキル基は（Ｃ６−Ｃ１３）、例えば、アリールアルキル基のアルカニル、アルケニル又はアルキニル部分が（Ｃ１−Ｃ３）であり、アリール部分が（Ｃ５−Ｃ１０）である。
【００７８】
[0071]本明細書中で使用されている“ヘテロアリール”という用語は、親ヘテロ芳香環系の単一原子から１個の水素原子を除去することによって誘導された一価ヘテロ芳香族基のことを言う。典型的なヘテロアリール基は、アクリジン、アルシンドール、カルバゾール、β−カルボリン、クロマン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリン、インドリジン、イソベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソインドリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソオキサゾール、ナフチリジン、オキサジアゾール、オキサゾール、ペリミジン、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサリン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、トリアゾール、キサンテンなどから誘導された基を含むが、これらに限定されない。一部の態様において、ヘテロアリール基は５〜１４員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールである。一部の態様において、ヘテロアリール基は、いずれの環ヘテロ原子も窒素である親ヘテロ芳香環系、例えば、イミダゾール、インドール、インダゾール、イソインドール、ナフチリジン、プテリジン、イソキノリン、フタラジン、プリン、ピラゾール、ピラジン、ピリダジン、ピリジン、ピロール、キナゾリン、キノリンなどから誘導されたものである。
【００７９】
[0072]“ヘテロアリールジイル”という用語は、親ヘテロ芳香環系の２個の異なる原子のそれぞれから１個の水素原子を除去することによって、又は親ヘテロ芳香環系の単一原子から２個の水素原子を除去することによって誘導された二価ヘテロ芳香族基のことを言う。２つの一価基中心又は単一の二価中心の各結合価は、同じ又は異なる原子と結合を形成できる。典型的なヘテロアリールジイル基は、アクリジン、アルシンドール、カルバゾール、β−カルボリン、クロマン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリン、インドリジン、イソベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソインドリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソオキサゾール、ナフチリジン、オキサジアゾール、オキサゾール、ペリミジン、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサリン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、トリアゾール、キサンテンなどから誘導された二価の基を含むが、これらに限定されない。一部の態様において、ヘテロアリールジイル基は５〜１４員ヘテロアリールジイル又は５〜１０員ヘテロアリールジイルである。一部の態様において、ヘテロアリールジイル基は、いずれの環ヘテロ原子も窒素である親ヘテロ芳香環系、例えば、イミダゾール、インドール、インダゾール、イソインドール、ナフチリジン、プテリジン、イソキノリン、フタラジン、プリン、ピラゾール、ピラジン、ピリダジン、ピリジン、ピロール、キナゾリン、キノリンなどから誘導された二価の基である。
【００８０】
[0073]本明細書中で使用されている“ヘテロアリーレノ”という用語は、親ヘテロ芳香環系の２個の隣接原子のそれぞれから１個の水素原子を除去することによって誘導された、２つの隣接一価基中心を有する二価架橋基のことを言う。ヘテロアリーレノ架橋基、例えばピリジノを親芳香環系、例えばベンゼンに結合させると、縮合ヘテロ芳香環系、例えばキノリンが得られる。この架橋は、得られる縮合環系へのその結合と一致する最大数の非累積二重結合を有すると推定される。環原子の二重計数を回避するために、ヘテロアリーレノ置換基が、代替置換基を含む構造上の２個の隣接置換基が一緒になることによって形成される場合、ヘテロアリーレノ架橋の環原子は、構造の架橋環原子を代替する。一例として、下記構造：
【００８１】
【化２０】
2018199670.tif 000021
【００８２】
［式中、Ｒ１は、単独の場合は水素であるか、又はＲ２と一緒になった場合は５〜１４員のヘテロアリーレノであり；Ｒ２は、単独の場合は水素であるか、又はＲ１と一緒になった場合は５〜１４員のヘテロアリーレノである］を考えてみる。
【００８３】
[0074]Ｒ１及びＲ２がそれぞれ水素の場合、得られる化合物はベンゼンである。Ｒ１とＲ２が一緒になって６員のヘテロアリーレノ（ピリジノ）の場合、得られる化合物はイソキノリン、キノリン又はキノリジンである。Ｒ１とＲ２が一緒になって１０員のヘテロアリーレノ（例えばイソキノリン）の場合、得られる化合物は、例えばアクリジン又はフェナントリジンである。典型的なヘテロアリーレノ基は、アクリジノ、カルバゾロ、β−カルボリノ、クロメノ、シンノリノ、フラン、イミダゾロ、インダゾレノ、インドレノ、インドリジノ、イソベンゾフラノ、イソクロメノ、イソインドレノ、イソキノリノ、イソチアゾレノ、イソオキサゾレノ、ナフチリジノ、オキサジアゾレノ、オキサゾレノ、ペリミジノ、フェナントリジノ、フェナントロリノ、フェナジノ、フタラジノ、プテリジノ、プリノ、ピラノ、ピラジノ、ピラゾレノ、ピリダジノ、ピリジノ、ピリミジノ、ピロレノ、ピロリジノ、キナゾリノ、キノリノ、キノリジノ、キノキサリノ、テトラゾレノ、チアジアゾレノ、チアゾレノ、チオフェノ、トリアゾレノ、キサンテノなどであるが、これらに限定されない。特定の連結が意図される場合、関与する（ヘテロアリーレノ架橋の）架橋原子は角括弧内に示される。例えば、［１，２］ピリジノ、［２，３］ピリジノ、［３，４］ピリジノなどである。従って、上記の例において、Ｒ１とＲ２が一緒になって［１，２］ピリジノの場合、得られる化合物はキノリジンである。Ｒ１とＲ２が一緒になって［２，３］ピリジノの場合、得られる化合物はキノリンである。Ｒ１とＲ２が一緒になって［３，４］ピリジノの場合、得られる化合物はイソキノリンである。一部の態様において、ヘテロアリーレノ基は５〜１４員ヘテロアリーレノ又は５〜１０員ヘテロアリーレノである。一部の態様において、ヘテロアリーレノ基は、いずれの環ヘテロ原子も窒素である親ヘテロ芳香環系から誘導されたもの、例えば、イミダゾロ、インドロ、インダゾロ、イソインドロ、ナフチリジノ、プテリジノ、イソキノリノ、フタラジノ、プリノ、ピラゾロ、ピラジノ、ピリダジノ、ピリジノ、ピロロ、キナゾリノ、キノリノなどである。
【００８４】
[0075]本明細書中で使用されている“ヘテロアリール−ヘテロアリール”という用語は、２個以上の同一又は同一でない親ヘテロ芳香環系が単結合によって直接結合されている環系の単一原子から１個の水素原子を除去することによって誘導された一価ヘテロ芳香族基のことを言う。そのような直接環結合の数は、関与する親ヘテロ芳香環系の数より一つ少ない。典型的なヘテロアリール−ヘテロアリール基は、ビピリジル、トリピリジル、ピリジルプリニル、ビプリニルなどであるが、これらに限定されない。環原子の数が特定される場合、その数は各親ヘテロ芳香環系を構成する原子の数のことである。例えば、５〜１４員のヘテロアリール−ヘテロアリールは、各親ヘテロ芳香環系が５〜１４個の原子を含むヘテロアリール−ヘテロアリール基、例えばビピリジル、トリピリジルなどである。一部の態様において、各親ヘテロ芳香環系は、独立に、５〜１４員のヘテロ芳香族、又は５〜１０員のヘテロ芳香族である。一部の態様において、ヘテロアリール−ヘテロアリール基は、すべての親ヘテロ芳香環系が同一である基である。一部の態様において、ヘテロアリール−ヘテロアリール基は、各ヘテロアリール基が、いずれの環ヘテロ原子も窒素である親ヘテロ芳香環系、例えば、イミダゾール、インドール、インダゾール、イソインドール、ナフチリジン、プテリジン、イソキノリン、フタラジン、プリン、ピラゾール、ピラジン、ピリダジン、ピリジン、ピロール、キナゾリン、キノリンなどから誘導されたものである。
【００８５】
[0076]本明細書中で使用されている“ビヘテロアリール”という用語は、単結合によって直接一緒に結合されている２個の同一親ヘテロ芳香環系を有するヘテロアリール−ヘテロアリール基のことを言う。典型的なビヘテロアリール基は、ビピリジル、ビプリニル、ビキノリニルなどであるが、これらに限定されない。一部の態様において、ヘテロ芳香環系は５〜１４員ヘテロ芳香環又は５〜１０ヘテロ芳香環である。一部の態様において、ビヘテロアリール基は、ヘテロアリール基が、いずれの環ヘテロ原子も窒素である親ヘテロ芳香環系から誘導されたもの、例えば、ビイミダゾリル、ビインドリル、ビインダゾリル、ビイソインドリル、ビナフチリジニル、ビプテリジニル、ビイソキノリニル、ビフタラジニル、ビプリニル、ビピラゾリル、ビピラジニル、ビピリダジニル、ビピリジニル、ビピロリル、ビキナゾリニル、ビキノリニルなどである。
【００８６】
[0077]本明細書中で使用されている“ヘテロアリールアルキル”という用語は、炭素原子、典型的には末端炭素原子又はｓｐ２炭素原子に結合されている水素原子の１個がヘテロアリール基で置換されている非環式アルキル基のことを言う。特定のアルキル部分が意図される場合、ヘテロアリールアルカニル、ヘテロアリールアルケニル及び／又はヘテロアリールアルキニルという用語体系が使用される。一部の態様において、ヘテロアリールアルキル基は６〜２０員ヘテロアリールアルキル、例えば、ヘテロアリールアルキルのアルカニル、アルケニル又はアルキニル部分が１〜６員であり、ヘテロアリール部分が５〜１４員ヘテロアリールである。一部の態様において、ヘテロアリールアルキルは６〜１３員ヘテロアリールアルキル、例えば、アルカニル、アルケニル又はアルキニル部分が１〜３員であり、ヘテロアリール部分が５〜１０員ヘテロアリールである。
【００８７】
[0078]本明細書中で使用されている“置換された”という用語は、１個又は複数個の水素原子がそれぞれ独立に同じ又は異なる置換基で置換されている基のことを言う。典型的な置換基は、−Ｘ、−Ｒ、−Ｏ−、＝Ｏ、−ＯＲ、−Ｏ−ＯＲ、−ＳＲ、−Ｓ−、＝Ｓ、−ＮＲＲ、＝ＮＲ、ペルハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＣＸ３、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＣＯ、−ＮＣＳ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）２ＯＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）Ｘ、−Ｃ（Ｓ）Ｒ、−Ｃ（Ｓ）Ｘ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ、−Ｃ（Ｓ）ＳＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲＲ及び−Ｃ（ＮＲ）ＮＲＲ［式中、各Ｘは、独立にハロゲン（例えば−Ｆ又は−Ｃｌ）であり、各Ｒは、独立に、水素、アルキル、アルカニル、アルケニル、アルカニル、アリール、アリールアルキル、アリールアリール、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル又はヘテロアリール−ヘテロアリール（本明細書中に定義の通り）である］などであるが、これらに限定されない。何らかの特定基を置換する実際の置換基は、置換される基が何であるか(identity)による。
【００８８】
[0079]本明細書中で使用されている“溶媒和物”という用語は、開示化合物の一つ又は複数の分子と溶媒の一つ又は複数の分子を含む集合体(aggregate)のことを言う。溶媒和物を形成する溶媒の例は、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸、及びエタノールアミンなどであるが、これらに限定されない。“水和物”という用語は、溶媒分子が水である集合体又は複合体のことを言う。溶媒は、例えば水などの無機溶媒でもよく、その場合は溶媒和物は水和物でありうる。あるいは、溶媒はエタノールなどの有機溶媒でもよい。従って、本開示の化合物は、一水和物、二水和物、半水和物、セスキ水和物、三水和物、四水和物などを含む水和物として、ならびにそれに対応する溶媒和物形として存在しうる。開示化合物は真の溶媒和物のこともあるが、他の場合においては、開示化合物は単に偶発的な(adventitious)水を保持しているだけか又は水＋何らかの偶発的な溶媒との混合物のこともある。
【００８９】
[0080]本明細書中で使用されている“オキシステロール”という用語は、酸化コレステロールの一つ又は複数の形態を包含することを意味する。本明細書中に記載のオキシステロールは、ＷＯ  ２０１３１６９３９９  Ａ１（引用によってその全文を本明細書に援用する）に記載されているように、単独で又は集合的に患者の骨成長に対して活性である。
【００９０】
[0081]オキシステロール、ステロール又はジオールは薬学的に許容可能な塩でもよい。可能性ある薬学的に許容可能な塩のいくつかの例は、化合物の毒性を実質的に増大しない塩形成(salt forming)酸及び塩基、例えば、マグネシウム、カリウム及びアンモニウムなどのアルカリ金属の塩、塩酸、ヨウ化水素酸、臭化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸及び硫酸などの鉱酸の塩、ならびに酒石酸、酢酸、クエン酸、リンゴ酸、安息香酸、グリコール酸、グルコン酸、グロン酸、コハク酸、アリールスルホン酸、例えばｐ−トルエンスルホン酸などの有機酸の塩などである。
【００９１】
[0082]オキシステロール、ステロール又はジオールの薬学的に許容可能な塩は、無機又は有機塩基、無機又は有機酸及び脂肪酸を含む薬学的に許容可能な非毒性の塩基又は酸から製造される塩を含む。無機塩基から誘導される塩は、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン、亜マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛などの塩を含む。薬学的に許容可能な有機非毒性塩基から誘導される塩は、第一、第二、及び第三アミン、置換アミン（天然置換アミンを含む）、環状アミン、及び塩基性イオン交換樹脂の塩、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチル−モルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン類、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどの塩を含む。本願の化合物が塩基性の場合、塩は無機及び有機酸を含む薬学的に許容可能な非毒性酸から製造できる。そのような酸は、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、マロン酸、粘液酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、プロピオン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸などである。脂肪酸塩も使用できる。例えば、２個より多い炭素、８個より多い炭素、又は１６個より多い炭素を有する脂肪酸塩、例えば、酪酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキジン酸などの塩である。
【００９２】
[0083]一部の態様において、オキシステロール、ステロール、又はジオールの溶解度を下げて制御放出デポー効果の獲得の一助とするために、オキシステロール、ステロール、又はジオールは、遊離塩基として利用されるか又は比較的低溶解度の塩にして利用される。例えば、本願では、脂肪酸塩などの不溶性塩が利用できる。代表的な脂肪酸塩は、オレイン酸、リノール酸などの塩、又は８〜２０個の炭素の溶解度を有する脂肪酸塩、例えばパルメエート(palmeate)又はステアリン酸塩などである。
【００９３】
[0084]用語“溶媒和物”は、溶質、例えば化合物又はその薬学的に許容可能な塩の一つ又は複数の分子と、溶媒の一つ又は複数の分子とによって形成される複合体又は集合体である。そのような溶媒和物は、実質的に固定された溶質と溶媒のモル比を有する結晶性固体のこともある。適切な溶媒は、例えば、水、エタノールなどである。
【００９４】
[0085]本明細書中で使用されている“生物活性”組成物又は“医薬”組成物という用語は、互換的に使用されうる。どちらの用語も、対象に投与できる組成物を意味する。生物活性組成物又は医薬組成物は、本明細書においては、現開示の“医薬組成物”又は“生物活性組成物”と呼ばれることもある。時に、“ＯＸＹ１３３の投与”という語句は、本明細書においては、この化合物を対象に投与する文脈中で使用される（例えば、対象を化合物と接触させる、化合物を注射する、薬物デポーで化合物を投与するなど）。そのように使用される化合物は、一般的に、ＯＸＹ１３３を含む医薬組成物又は生物活性組成物の形態でありうることは理解されるはずである。
【００９５】
[0086]“治療上有効量”又は“有効量”とは、投与された場合に、オキシステロール（例えばＯＸＹ１３３）、ステロール、ジオールが生物活性の変化、例えば骨成長の増強などをもたらすような量である。患者に投与される用量は、様々な要因、例えば、投与される薬物の薬物動態特性、投与経路、患者の状態及び特徴（性別、年齢、体重、健康、サイズなど）、及び症状の程度、併用療法、治療の頻度及び所望の効果に応じて、単回投与のこともあれば複数回投与のこともある。一部の態様において、製剤は即時放出用として設計される。他の態様において、製剤は持続放出用として設計される。他の態様において、製剤は、一つ又は複数の即時放出表面と一つ又は複数の持続放出表面を含む。
【００９６】
[0087]“薬学的に許容可能な担体”とは、生物学的に又はその他の点で有害でない材料を意味する。例えば、その材料を、何らかの望ましくない生物学的作用を引き起こしたり又はそれが含有されている医薬組成物の他の成分のいずれとも有害な様式で相互作用をすることなく、対象に投与できることを意味する。
【００９７】
[0088]本明細書中において、“類似体”又は“誘導体”という用語は、構造及び機能が別の化学物質に類似している化学分子のことを言う。多くの場合、単一の元素又は基によって構造的に異なるが、親化学物質と同じ機能を保持しているならば、２個以上の基（例えば、２、３、又は４個の基）の修飾によって異なっていてもよい。そのような修飾は当業者には日常操作であり、例えば、酸のエステル又はアミド、アルコール又はチオールのためのベンジル基、及びアミンのためのｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基のような保護基など、化学部分の追加又は置換を含む。そのほか、アルキル置換などのアルキル側鎖に対する修飾（例えば、メチル、ジメチル、エチルなど）、側鎖の飽和又は不飽和レベルに対する修飾、ならびに置換フェニル及びフェノキシなどの修飾基の付加も含まれる。誘導体には、ビオチン又はアビジン部分、西洋ワサビペルオキシダーゼなどの酵素、及び放射性標識、生物発光、化学発光、又は蛍光部分などの複合体(conjugate)も含まれうる。さらに、本明細書中に記載の薬剤に対しても、それらの薬物動態特性を変更するため、例えば、その他の望ましい性質の中でも、インビボもしくはエクスビボにおける半減期を増大させるため、又はそれらの細胞浸透性を増大させるために、部分を付加することができる。また、薬剤の多数の望ましい品質（例えば、溶解度、バイオアベイラビリティ、製造など）を増強することが知られているＯＸＹ１３３誘導体も含まれる。“誘導体”という用語は、その範囲内に、機能的に等価の又は機能的に改良された分子を提供する付加、削除、及び／又は置換など、親配列に対してなされた変更も含む。
【００９８】
[0089]“ポリペプチド”及び“タンパク質”は、本明細書においては互換的に使用され、ペプチド結合によって共有結合された２個以上のアミノ酸の分子鎖を含む。タンパク質又はポリペプチドは、例えば共有結合、非共有結合又は水素結合によってオキシステロールにカップリングさせることができる。該用語は、生成物の特定の長さには言及しない。従って、“ペプチド”及び“オリゴペプチド”は、ポリペプチドの定義内に含まれる。
【００９９】
[0090]本明細書において“ペプチド”は、短いアミノ酸配列を含むポリペプチドを意味し、グリコシル化されているか及び／又は修飾アミノ酸を含有しているかを問わない。ペプチドは、２〜７５個のアミノ酸長でありうる。一部の態様において、ペプチドは、３〜６０、３〜５０、３〜４０、３〜３０、又は３〜２０個のアミノ酸長である。他の態様において、ペプチドは、５〜２５、５〜１５、１０〜２０、又は２０〜３０個のアミノ酸長でありうる。他の態様において、ペプチドは、約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０個のアミノ酸長でありうる。
【０１００】
[0091]本明細書において“ペプチド”、“ポリペプチド”及び“タンパク質”は、全体を通じて互換的に使用され、ペプチド結合によって互いに結合された２個以上のアミノ酸残基を含む分子のことを言う。ペプチド、ポリペプチド及びタンパク質は、グリコシル化、脂質結合、硫酸化、グルタミン酸残基のガンマ−カルボキシル化、ヒドロキシル化及びＡＤＰ−リボシル化（これらに限定されない）などの修飾も含む。ポリペプチドは、タンパク質系の薬物など、科学的又は商業的な関心の対象でありうる。ポリペプチドは、中でも、抗体、融合タンパク質、及びサイトカインを含む。ペプチド、ポリペプチド及びタンパク質は、細胞培養法を用いて組換え動物細胞株によって製造されるので、“組換えペプチド”、“組換えポリペプチド”及び“組換えタンパク質”と呼ばれることもある。
【０１０１】
[0092]用語“タンパク質フラグメント”は、参照タンパク質そのものに比べてアミノ酸残基が欠失しているが、残っているアミノ酸配列は通常、参照タンパク質のそれと同一又は実質的に同一（例えば１００％から９９％、９８％、９７％、９６％、９５％、９０％、８５％、８０％、７５％、７０％、６５％、約６０％まで同一）のタンパク質のことを言う。そのような欠失は、参照タンパク質のアミノ末端又はカルボキシ末端、あるいはその両方で起こりうる。欠失は内部的にも起こりうる。一部の態様において、タンパク質フラグメントは、全タンパク質より小さいが、構造及び機能において全タンパク質と類似している。多くの場合、単一の元素又は基によって構造的に異なるが、オキシステロールへの結合を達成するために除去又は変更された２個以上の基（例えば、２、３、又は４個の基）の修飾によって異なっていてもよい。しかしながら、タンパク質フラグメントは全タンパク質と同じ機能を保持している。適切なタンパク質フラグメントは、骨形成タンパク質−２である。
【０１０２】
[0093]本明細書において、“部分(moiety)”とは、構造及び機能が別の化学物質に類似している化学分子のことを言う。多くの場合、単一の元素又は基によって構造的に異なるが、親化学物質と同じ機能を保持しているならば、２個以上の基（例えば、２、３、又は４個の基）の修飾によって異なっていてもよい。例えば、Ｒ４が抗生物質又はビスホスホネートの場合、抗生物質部分又はビスホスホネート部分はオキシステロールに結合するので、単一の元素又は基によって構造的に異なることが多いが、抗生物質部分又はビスホスホネート部分は親化学物質と同じ機能を保持している。
【０１０３】
[0094]“デポー”は、カプセル、マイクロスフェア、マイクロ粒子、マイクロカプセル、マイクロファイバー粒子、ナノスフェア、ナノ粒子、コーティング、マトリックス、ウェハース、ピル、ペレット、エマルション、リポソーム、ミセル、ゲル、又はその他の医薬送達組成物又はそれらの組合せなどであるが、これらに限定されない。一部の態様において、デポー用の適切な材料は、薬学的に許容可能な生分解性及び／又は何らかの生体吸収性材料で、ＦＤＡ認可又はＧＲＡＳ材料である。これらの材料は、ポリマー性でも非ポリマー性でも、合成でも天然でも、又はそれらの組合せでもよい。
【０１０４】
[0095]本明細書中で利用されている“移植可能な”という用語は、哺乳動物体内への留置成功の可能性を保持している生体適合性デバイス（例えば薬物デポー）のことを言う。本明細書中で利用されている“移植可能なデバイス”という表現及び同様の表現は、手術、注射、又はその他の適切な手段によって移植可能で、その主機能はその物理的存在又は機械的性質のいずれかを通じて達成される物体のことを言う。
【０１０５】
[0096]“局所”送達は、一つ又は複数の薬物が、組織内、例えば、骨空洞内、又はそれにごく近接して（例えば約０．１ｃｍ以内、又は好ましくは約１０ｃｍ以内）配置される送達を含む。例えば、薬物デポーから局所送達される薬物の用量は、経口用量又は注射用量より例えば１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％、９９．９％又は９９．９９９％少ないであろう。
【０１０６】
[0097]“哺乳動物”という用語は、分類学上のクラス“哺乳類”の生物のことを言い、ヒト、その他の霊長類、例えば、チンパンジー、類人猿、オランウータン及びサル、ラット、マウス、ネコ、イヌ、ウシ、ウマなどを含むが、これらに限定されない。
【０１０７】
[0098]オキシステロールは、骨原性、骨伝導性及び／又は骨誘導性などの一つ又は複数の機序により、新しい骨組織の内部成長を増強又は加速できる“骨原性”でありうる。
[0099]産業用のオキシステロール及びオキシステロール誘導体を効率的及び安全に合成するための新規組成物及び方法を提供する。一部の態様において、本開示は、スケールアップ又は産業用に適切な、ＯＸＹ１３３治療薬類似体を含むＯＸＹ１３３類似体又は誘導体の製造法を提供する。ＯＸＹ１３３治療薬類似体又は誘導体を効率的及び安全に生成できる方法及び組成物も提供する。
【０１０８】
[00100]以下のセクション見出しは制限されるべきでなく、他のセクション見出しと交換することも可能である。
オキシステロール
[00101]本開示は、骨原性オキシステロール（例えばＯＸＹ１３３）、ステロール、又はジオール及びインビトロにおけるその骨形成分化促進能力を含む。ＯＸＹ１３３は特に有効な骨原性物質である。様々な用途において、ＯＸＹ１３３は、局所的な骨形成刺激から利益を得る状態、例えば、脊椎固定術、骨折修復、骨再生／組織用途、顎の骨密度増大（歯科インプラントのため）、骨粗鬆症などの治療に有用である。ＯＸＹ１３３の一つの特別な利点は、その他の骨原性オキシステロールと比べた場合に、非常に容易な合成及び固定までの改良された時間を提供することである。ＯＸＹ１３３は、骨成長のための同化治療薬として働くことができる小分子であるだけでなく、様々なその他の状態の治療にも有用な物質である。
【０１０９】
[00102]出願開示の一側面は、式：
【０１１０】
【化２１】
2018199670.tif 000022
【０１１１】
を有するＯＸＹ１３３と称される化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物もしくは水和物である。ＯＸＹ１３３は、ＯＸＹ１３３又はその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物もしくは水和物と、薬学的に許容可能な担体とを含む生物活性組成物又は医薬組成物として使用できる。
【０１１２】
[00103]開示の別の側面は、細胞又は組織においてヘッジホッグ（Ｈｈ）経路媒介応答を誘導（刺激、増強）するための方法であり、該方法は、細胞又は組織を治療上有効量のＯＸＹ１３３と接触させることを含む。細胞又は組織は、体外（in vitro）でも、又は哺乳動物などの対象の体内でもよい。ヘッジホッグ（Ｈｈ）経路媒介応答は、骨芽細胞分化、骨の形態形成、及び／又は骨増殖の刺激；発毛及び／又は軟骨形成の刺激；新生血管形成(neovasculogenesis)、例えば血管新生(angiogenesis)の刺激（それによって虚血組織への血液供給が増強される）；又は脂肪細胞分化、脂肪細胞の形態形成、及び／又は脂肪細胞増殖の阻害；又は神経新生を起こす前駆細胞の刺激を含む。Ｈｈ媒介応答は、再生医療に使用するための様々な種類の組織のいずれの再生も含みうる。開示の別の側面は、骨障害、骨減少症、骨粗鬆症、又は骨折を有する対象の治療法であり、該方法は、ＯＸＹ１３３を含む有効量の生物活性組成物又は医薬組成物を対象に投与することを含む。対象は、例えば、骨量を増大させ、骨粗鬆症の症状を改善し、アテローム性動脈硬化症を低減、排除、予防又は治療するなどのために、生物活性組成物又は医薬組成物を、治療上有効な用量で、有効な剤形で、選択された間隔で投与されうる。対象は、骨粗鬆症の症状を改善するために生物活性組成物又は医薬組成物を、治療上有効な用量で、有効な剤形で、選択された間隔で投与されうる。一部の態様において、ＯＸＹ１３３を含む組成物は、標的手術領域で細胞の骨芽細胞分化を誘導するために間葉幹細胞を含んでいてもよい。
【０１１３】
[00104]様々な側面において、ＯＸＹ１３３は、局所投与により、細胞、組織又は器官に投与できる。例えば、ＯＸＹ１３３は、クリームなどを用いて局所適用することも、又は細胞、組織もしくは器官に注射するか又は別の方法で直接導入することも、又は本明細書において検討されている薬物デポーなどの適切な医療デバイスを用いて導入することもできる。
【０１１４】
[00105]一部の態様において、ＯＸＹ１３３、ステロール、又はジオールの用量は、およそ１０ｐｇ／日〜およそ８０ｍｇ／日である。ＯＸＹ１３３、ステロール、又はジオールの更なる用量は、およそ２．４ｎｇ／日〜およそ５０ｍｇ／日；およそ５０ｎｇ／日〜およそ２．５ｍｇ／日；およそ２５０ｎｇ／日〜およそ２５０ｍｃｇ／日；およそ２５０ｎｇ／日〜およそ５０ｍｃｇ／日；およそ２５０ｎｇ／日〜およそ２５ｍｃｇ／日；およそ２５０ｎｇ／日〜およそ１ｍｃｇ／日；およそ３００ｎｇ／日〜およそ７５０ｎｇ／日又はおよそ０．５０ｍｃｇ／日〜およそ５００ｎｇ／日などである。様々な態様において、用量は、約０．０１〜およそ１０ｍｃｇ／日又はおよそ１ｎｇ／日〜約１２０ｍｃｇ／日であろう。
【０１１５】
[00106]化合物ＯＸＹ１３３、ステロール、又はジオールのほかに、開示の他の態様は、ＯＸＹ１３３中に存在する任意の立体中心におけるありとあらゆる個別の立体異性体、例えばジアステレオマー、ラセミ体、エナンチオマー、及び化合物のその他の異性体も包含する。開示の一部の態様において、ＯＸＹ１３３、ステロール、オキシステロール、ジオールは、化合物のすべての多形、溶媒和物又は水和物、例えば水和物及び有機溶媒と形成される溶媒和物を含みうる。
【０１１６】
[00107]塩を作る能力は化合物の酸性度又は塩基性度に依存する。化合物の適切な塩は、酸付加塩、例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、過塩素酸、硫酸、硝酸、リン酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、炭酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクロヘキサンスルファミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、２−フェノキシ安息香酸、及び２−アセトキシ安息香酸を用いて製造される塩；サッカリンを用いて製造される塩；アルカリ金属塩、例えば、ナトリウム及びカリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えば、カルシウム及びマグネシウム塩；及び有機又は無機リガンドを用いて形成される塩、例えば第四級アンモニウム塩などであるが、これらに限定されない。更なる適切な塩は、化合物の酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、炭酸水素塩、硫酸水素塩、酒石酸水素塩、ホウ酸塩、臭化物、エデト酸カルシウム、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストレート、エシレート、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イソチオネート(isothionate)、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチルブロミド、メチル硝酸塩、メチル硫酸塩、ムチン酸塩(mucate)、ナプシル酸塩、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミンアンモニウム塩、オレイン酸塩、パモ酸塩（エンボネート）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、硫酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、トリエチオジド及び吉草酸塩などであるが、これらに限定されない。
【０１１７】
[00108]様々な態様において、ＯＸＹ１３３、ステロール、又はジオールは一つ又は複数の生物学的機能を含む。すなわち、ＯＸＹ１３３、ステロール、又はジオールは、間葉幹細胞又は骨髄間質細胞と接触すると、生物学的応答を誘導できる。例えば、ＯＸＹ１３３、ステロール、又はジオールは骨芽細胞分化を刺激できる。一部の態様において、ＯＸＹ１３３、ステロール、又はジオールを含む生物活性組成物は、哺乳動物細胞、例えばインビトロの細胞又はヒトもしくは動物体内の細胞に投与されると、一つ又は複数の生物学的機能を含みうる。例えば、そのような生物活性組成物は、骨芽細胞分化を刺激できる。一部の態様において、そのような生物学的機能は、ヘッジホッグ経路の刺激によって生じうる。
【０１１８】
中間ジオールの製造法
[00109]一部の態様において、現開示は、以下に示すように、ＯＸＹ１３３の製造に使用される中間ジオールの製造法を提供する。該ジオールも骨成長の促進のために使用できる。ＯＸＹ１３３を製造するための従来の合成法は、効率が悪く、大規模製造には適していなかった。ＯＸＹ１３３の立体異性体の中には、他の立体異性体より最適性に劣るものもある。開示の方法は、立体選択的であり、以下に示すジオールの特定の異性体を高収率で製造する。このジオールは、最適に効果的なＯＸＹ１３３の異性体を製造することが示されている。
【０１１９】
【化２２】
2018199670.tif 000023
【０１２０】
[00110]開示されているのは、中間ジオールを合成するための反応の複数の態様である。合成されるジオールは、（３Ｓ，８Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ，１３Ｒ，１４Ｓ，１７Ｒ）−１０，１３−ジメチル−１７−［（Ｓ）−２−ヒドロキシオクタン−イル］−２，３，４，７，８，９，１１，１２，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オールのＩＵＰＡＣ名を持つ。一般的に、ジオールの合成法は、以下に示すように、プレグネノロン、酢酸プレグネノロン又はプレグネノロン誘導体を有機金属試薬と反応させて、Ｃ２０位のアルキル化を促進することを含む。
【０１２１】
【化２３】
2018199670.tif 000024
【０１２２】
[00111]一態様において、上記スキーム１に示されているように、酢酸プレグネノロン（式１）は、有機金属試薬によってアルキル化され、式２として上に示されている中間ジオールを合成できる。一部の態様において、酢酸プレグネノロンは、酢酸プレグネノロン分子上のＣ２０位のアルキル化を促進するためにグリニャール試薬と反応させる。一部の態様において、ｎ−ヘキシルマグネシウムクロリドが有機金属試薬として使用される。
【０１２３】
【化２４】
2018199670.tif 000025
【０１２４】
[00112]一部の態様において、上記スキーム２に示されているように、プレグネノロンをｎ−ヘキシルマグネシウムクロリドのようなグリニャール試薬と反応させてプレグネノロン分子上のＣ２０位のアルキル化を促進し、式２として示されている中間ジオールを形成させる。
【０１２５】
[00113]中間ジオール（式２）又は（３Ｓ，８Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ，１３Ｒ，１４Ｓ，１７Ｒ）−１０，１３−ジメチル−１７−［（Ｓ）−２−ヒドロキシオクタン−イル］−２，３，４，７，８，９，１１，１２，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オールの合成法は立体選択的であり、高収率のジオールを製造する。例えば、一部の態様において、ジオールの所望立体異性体の収率は約６０％〜約７０％である。一部の態様において、ジオールの所望立体異性体の収率は約５０％〜約６０％である。しかしながら、パーセント収率はこれらの数値より高いことも又は低いこともありうることは想定されている。例えば、上に示されている式２のパーセント収率は、約２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％又は９５％でありうる。一部の態様において、パーセント収率は９５％より高いこともある。
【０１２６】
[00114]様々な態様において、アルキル化反応は、テトラヒドロフランなどの極性有機溶媒中で実施される。しかしながら、反応は、様々な極性有機溶媒中で実施することができる。例えば、反応は、ジエチルエーテル、エチルエーテル、ジメチルエーテル中などで実施できる。
【０１２７】
[00115]一部の態様においては、プレグネノロン又は酢酸プレグネノロンが出発反応物として使用される。しかしながら、他の態様において、酢酸プレグネノロンの誘導体が使用されることもある。例えば、本開示に使用できる化合物のその他の具体例は、硫酸プレグネノロン、リン酸プレグネノロン、ギ酸プレグネノロン、プレグネノロンヘミオキサレート、プレグネノロンヘミマロネート、プレグネノロンヘミグルタレート、２０−オキソプレグン(oxopregn)−５−エン−３β−イルカルボキシメチルエーテル、３β−ヒドロキシプレグン−５−エン−２０−オンスルフェート、３−ヒドロキシ−１９−ノルプレグナ(norpregna)−１，３，５（１０）−トリエン−２０−オン、３−ヒドロキシ−１９−ノルプレグナ−１，３，５（１０），６，８−ペンタエン−２０−オン、１７α−イソプレグネノロンスルフェート、１７−アセトキシプレグネノロンスルフェート、２１−ヒドロキシプレグネノロンスルフェート、２０β−アセトキシ−３β−ヒドロキシプレグン−５−エン−スルフェート、硫酸プレグネノロン  ２０−エチレンケタール、硫酸プレグネノロン  ２０−カルボキシメチルオキシム、２０−デオキシプレグネノロンスルフェート、２１−アセトキシ−１７−ヒドロキシプレグネノロンスルフェート、１７−プロピルオキシプレグネノロンスルフェート、１７−ブチルオキシプレグネノロンスルフェート、硫酸プレグネノロンの２１−チオールエステル、ピリジニウム、イミダゾリウム、６−メチルプレグネノロンスルフェート、６，１６α−ジメチルプレグネノロンスルフェート、３β−ヒドロキシ−６−メチルプレグナ−５，１６−ジエン−２０−オンスルフェート、３β−ヒドロキシ−６，１６−ジメチルプレグナ−５，１６−ジエン−２０−オンスルフェート、３−ヒドロキシプレグナ−５，１６−ジエン−２０−オンスルフェート、ジオスゲニン(diosgenin)スルフェート、３β−ヒドロキシアンドロスト(hydroxyandrost)−５−エン−１７β−カルボン酸メチルエステルスルフェート、３α  ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オンホルメート、３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オンヘミオキサレート、３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オンヘミマロネート、３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オンヘミスクシネート、３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オンヘミグルタレート、エストラジオール−３−ホルメート、エストラジオール−３−ヘミオキサレート、エストラジオール−３−ヘミマロネート、エストラジオール−３−ヘミスクシネート、エストラジオール−３−ヘミグルタレート、エストラジオール−１７−メチルエーテル、エストラジオール−１７−ホルメート、エストラジオール−１７−ヘミオキサレート、エストラジオール−１７−ヘミマロネート、エストラジオール−１７−ヘミスクシネート、エストラジオール−１７−ヘミグルタレート、エストラジオール−３−メチルエーテル、１７−デオキシエストロン、及び１７β−ヒドロキシエストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルカルボキシメチルエーテルなどである。
【０１２８】
[00116]一部の態様において、有機金属試薬はｎ−ヘキシルマグネシウムクロリドを含む。しかしながら、一部の態様において、アルキル化反応は、例えばｎ−ヘキシルリチウムのようなアルキルリチウムを使用して実施されてもよい。様々な態様において、有機金属試薬は、ハロゲン化アルキルを含む。例えば、有機金属試薬は、下記式：
Ｒ−Ｍｇ−Ｘ
を有しうる。上記式中、Ｍｇはマグネシウムを含み、Ｘは、塩素、臭素、フッ素、ヨウ素、又はアスタチンを含み、そしてＲは、アルキル、ヘテロアルキル、アルカニル、ヘテロアルカニル、アルケニル、ヘテロアルケニル、アルキニル、ヘテロアルキニル、アルキルジイル、ヘテロアルキルジイル、アルキレノ、ヘテロアルキレノ、アリール、アリールジイル、アリーレノ、アリールアリール、ビアリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールジイル、ヘテロアリーレノ、ヘテロアリール−ヘテロアリール、ビヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル又はそれらの組合せを含む。一部の態様において、Ｒ置換基は、（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル又はヘテロアルキル、（Ｃ２−Ｃ２０）アリール又はヘテロアリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アリールアルキル又はヘテロアルキル及び（Ｃ５−Ｃ２０）アリールアルキル又はヘテロアリール−ヘテロアルキル、（Ｃ４−Ｃ１０）アルキルジイル又はヘテロアルキルジイル、又は（Ｃ４−Ｃ１０）アルキレノ又はヘテロアルキレノを含む。Ｒ置換基は、環式又は非環式でも、分枝又は非分枝でも、置換又は非置換でも、芳香族でも、飽和又は不飽和鎖でも、又はそれらの組合せでもよい。一部の態様において、Ｒ置換基は脂肪族基である。一部の態様において、Ｒ置換基は環式基である。一部の態様において、Ｒ置換基はヘキシル基である。
【０１２９】
[00117]あるいは、有機金属試薬は、式：
Ｒ−Ｌｉ
を含んでいてもよい。
上記式中、Ｌｉはリチウムを含み、そしてＲは、アルキル、ヘテロアルキル、アルカニル、ヘテロアルカニル、アルケニル、ヘテロアルケニル、アルキニル、ヘテロアルキニル、アルキルジイル、ヘテロアルキルジイル、アルキレノ、ヘテロアルキレノ、アリール、アリールジイル、アリーレノ、アリールアリール、ビアリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールジイル、ヘテロアリーレノ、ヘテロアリール−ヘテロアリール、ビヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル又はそれらの組合せを含む。一部の態様において、Ｒ置換基は、（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル又はヘテロアルキル、（Ｃ２−Ｃ２０）アリール又はヘテロアリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アリールアルキル又はヘテロアルキル及び（Ｃ５−Ｃ２０）アリールアルキル又はヘテロアリール−ヘテロアルキル、（Ｃ４−Ｃ１０）アルキルジイル又はヘテロアルキルジイル、又は（Ｃ４−Ｃ１０）アルキレノ又はヘテロアルキレノを含む。Ｒ置換基は、環式又は非環式でも、分枝又は非分枝でも、置換又は非置換でも、芳香族でも、飽和又は不飽和鎖でも、又はそれらの組合せでもよい。一部の態様において、Ｒ置換基は脂肪族基である。一部の態様において、Ｒ置換基は環式基である。一部の態様において、Ｒ置換基はヘキシル基である。
【０１３０】
[00118]一部の態様において、アルキル化反応は発熱性であるので、反応容器は、最適な反応動力学を維持するために温度制御されうる。一部の態様において、発熱反応は、溶液１ポンド（約４５４ｇ）あたり約１０００ＢＴＵを放出する。反応が強発熱性であるため、グリニャール試薬は、揮発性成分、例えばエーテルが反応熱によって気化しないように徐々に加えねばならない。一部の態様において、反応容器は内部冷却コイルによって冷却できる。冷却コイルには、外部ガス／液体冷蔵装置によって冷却剤が供給されてもよい。一部の態様において、反応容器の内部温度は、１５℃、１０℃、５℃又は１℃未満に維持される。一部の態様において、反応容器は、式２の中間ジオールを形成させるアルキル化反応の間、約０℃に維持される。
【０１３１】
[00119]様々な態様において、式２のジオールは副産物と共に合成されるので、精製することができる。例えば、得られる式２のジオールはジアステレオマー混合物の副産物のこともある。様々な態様において、式２のジオールは単離及び精製できる。すなわち、式２のジオールは、ろ過、遠心分離、蒸留（揮発性液体をそれらの相対揮発度に基づいて分離する）、結晶化、再結晶化、蒸発（不揮発性溶質から揮発性液体を除去するため）、溶媒抽出（不純物を除去するため）、溶媒中への組成物の溶解（その溶媒にはその他の成分が溶解する）、又はその他の精製法によって単離及び精製し、所望純度、例えば約９５％〜約９９．９％にすることができる。ジオールは、ジオールを有機及び／又は無機溶媒、例えば、ＴＨＦ、水、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、酢酸エチル、アセトン、ｎ，ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、アンモニア、ｔ−ブタノール、ｎ−プロパノール、エタノール、メタノール、酢酸、又はそれらの組合せと接触させることによって精製することもできる。
【０１３２】
[00120]様々な態様において、アルキル化工程及び精製工程は同じ反応容器内で行われる。
[00121]一部の態様において、ジオールは、塩化アンモニウム水溶液又は酢酸でクエンチングして存在するアニオンの量を低減し、反応を中和して、得られる有機層から分離される。分離された残渣は、蒸発により回収され、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製される。
【０１３３】
[00122]ジオールは、無水又は一水和物形でありうる。しかしながら、他の態様において、精製ジオールは他の水和物形、例えば、二水和物、半水和物、セスキ水和物、三水和物、四水和物などのほか、対応する溶媒和物形に結晶化されてもよい。他の態様において、精製ジオールは、共結晶又は薬学的に許容可能な塩として結晶化される。
【０１３４】
ＯＸＹ１３３の製造法
[00123]一部の態様において、現開示は、以下に示すように、ＯＸＹ１３３の製造法を提供する。従来のＯＸＹ１３３の合成法は、ＯＸＹ１３３中間体のジアステレオマー混合物を生成するので、分離のための精製法が必要となる。中間ジオールの形成で上述したように、開示の方法は、立体選択的であり、ＯＸＹ１３３の特定の異性体を高収率で製造する。ＯＸＹ１３３の式を以下に示す。
【０１３５】
【化２５】
2018199670.tif 000026
【０１３６】
[00124]開示されているのは、ＯＸＹ１３３を合成するための反応の複数の態様である。ＯＸＹ１３３は、（３Ｓ，５Ｓ，６Ｓ，８Ｒ，９Ｓ，１０Ｒ，１３Ｓ，１４Ｓ，１７Ｓ）−１７−（（Ｓ）−２−ヒドロキシオクタン−２−イル）−１０，１３−ジメチルヘキサデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，６−ジオールのＩＵＰＡＣ名を持つ。ＯＸＹ１３３は、従来、以下に示すように、スケールアップには不適切な複雑な方法によって合成されていた。
【０１３７】
【化２６】
2018199670.tif 000027
【０１３８】
[00125]しかしながら、反応を単一の容器内で実施するには困難がある。上に示された反応は、反応工程を実施するためにより多くの試薬を必要とし（例えば保護及び脱保護のための基及び工程）、環境に悪影響を及ぼす。さらに、公知法は、高価で入手がしばしば困難な試薬を必要とする。さらに、スキーム３に示された方法は、比較的低収率であり、より多くの分解生成物、不純物を有し、多くの有毒副産物を生じる。
【０１３９】
[00126]一般的に、本明細書中に開示されているＯＸＹ１３３の合成法は、以下に示す反応において、本明細書中に記載のようにして合成されたジオールをボランと反応させることを含む。
【０１４０】
【化２７】
2018199670.tif 000028
【０１４１】
[00127]一部の態様において、粗製及び未精製ＯＸＹ１３３は、スキーム４の反応で、式２を有する中間ジオールのヒドロホウ素化及び酸化反応を通じて製造される。反応に使用できるボラン化合物は、ＢＨ３、Ｂ２Ｈ６、ＢＨ３Ｓ（ＣＨ３）２（ＢＭＳ）、ホスフィン及びアミンとのボラン付加物、例えばボラントリエチルアミン；ＲＢＨ２（式中、Ｒ＝アルキル及びハロゲン化物）の形態の一置換ボラン、モノアルキルボラン（例えば、ＩｐｃＢＨ２、モノイソピノカンフェイルボラン）、モノブロモ−及びモノクロロ−ボラン、モノクロロボランと１，４−ジオキサンの複合体、バルキーボラン(bulky borane)を含む二置換ボラン、例えばジエチルボランなどのジアルキルボラン化合物、ビス−３−メチル−２−ブチルボラン（ジシアミルボラン）、９−ボラビシクロ［３，３，１］ノナン（９−ＢＢＮ）、ジシアミルボラン（Ｓｉａ２ＢＨ）、ジシクロヘキシルボラン（Ｃｈｘ２ＢＨ）、トリアルキルボラン、ジアルキルハロゲノボラン、ジメシチルボラン（Ｃ６Ｈ２Ｍｅ３）２ＢＨ、アルケニルボラン、ピナコールボラン、又はカテコールボラン、又はそれらの混合物などである。
【０１４２】
[00128]手短に言えば、ヒドロホウ素化及び酸化反応は二段階反応である。ホウ素及び水素はアルケンの二重結合に付加し、アルケンと複合体を形成する。従って、反応のホウ素化局面は立体選択的であり位置選択的である。反応の酸化局面は、ホウ素の代わりにヒドロキシル置換基を提供するために塩基性の過酸化水素水を必要とする。Ｖｏｌｌｈａｒｔ，ＫＰ，Ｓｃｈｏｒｅ，ＮＥ，２００７，Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，第５版，Ｃｕｓｔｏｍ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ（ニューヨーク州ニューヨーク）参照。このように、式２を有する中間ジオールをボラン及び過酸化水素と反応させて粗ＯＸＹ１３３を形成させる。一部の態様において、粗ＯＸＹ１３３を形成させる工程は、アルキル化反応と同じ反応容器内で実施される。他の態様において、粗ＯＸＹ１３３を形成させる工程は、アルキル化反応とは異なる反応容器内で実施される。
【０１４３】
[00129]ＯＸＹ１３３を合成するヒドロホウ素化−酸化工程は、中間ジオールの形成工程と同様、立体選択的であり、高収率をもたらす。例えば、一部の態様において、粗ＯＸＹ１３３のパーセント収率は、これらの量より高いことも又は低いこともある。例えば、上に示されている式２のパーセント収率は、約２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％又は９５％でありうる。一部の態様において、パーセント収率は９５％より高いこともある。
【０１４４】
[00130]様々な態様において、ヒドロホウ素化−酸化反応は、テトラヒドロフランなどの極性有機溶媒中で実施される。しかしながら、反応は、様々な極性有機溶媒中で実施することができる。例えば、反応は、ジエチルエーテル、エチルエーテル、ジメチルエーテル中などで実施できる。
【０１４５】
[00131]一部の態様において、ヒドロホウ素化−酸化反応は発熱性であるので、反応容器は、最適な反応動力学を維持するために温度制御することができる。具体的には、酸化局面は極度に発熱性である。反応が強発熱性であるため、過酸化水素は、揮発性成分、例えばエーテルが反応熱のために気化しないように徐々に加えることができる。一部の態様において、反応容器は内部冷却コイルによって冷却できる。冷却コイルには、外部ガス／液体冷蔵装置によって冷却剤が供給されてもよい。一部の態様において、反応容器の内部温度は、１０℃、５℃、１℃又は０℃未満に維持される。一部の態様において、反応容器は、ヒドロホウ素化−酸化反応の間、約−５℃に維持される。
【０１４６】
[00132]一定の態様において、保護ジオールは、ジオールの塩、水和物、溶媒和物又は結晶形のパーセント結晶化度が、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％でありうる。一部の態様において、パーセント結晶化度は実質的に１００％でありうる。実質的に１００％とは、ジオールの全量が当該技術分野で公知の方法を用いて測定できる限りにおいて結晶性であるように見えることを示す。従って、治療上有効量のジオールは、結晶化度が異なる量を含みうる。これらの中には、ある量の固体形の結晶化ジオールが、その後液体中に溶解、部分溶解、懸濁又は分散される場合が含まれる。
【０１４７】
ＯＸＹ１３３の精製
[00133]一部の態様において、粗ＯＸＹ１３３は、精製の前に反応混合物から分離されねばならない。一部の態様において、ジクロロエタンなどの有機溶媒を粗ＯＸＹ１３３反応混合物に加え、得られた有機層を分離する。分離されると、粗ＯＸＹ１３３は半固体の粘稠塊として存在する。粗ＯＸＹ１３３を任意の適切な手段（例えばジクロロメタンなど）によって溶解し、メタノール−酢酸エチルなどの有機溶媒とともにシリカゲルカラムに入れ、粗ＯＸＹ１３３を溶媒和させる。一部の態様において、粗ＯＸＹ１３３は、結晶化又は再結晶化されてもよい。一部の態様において、精製ＯＸＹ１３３は、以下に示すように、アセトン／水の３：１混合物中で粗ＯＸＹ１３３を再結晶化させることにより形成される。
【０１４８】
【化２８】
2018199670.tif 000029
【０１４９】
[00134]上に示されているように、結晶化させると、精製ＯＸＹ１３３は水和物を形成する。しかしながら、それは無水物形であってもよい。一部の態様において、本明細書中に記載のＯＸＹ１３３のいずれかの結晶形のパーセント結晶化度はＯＸＹ１３３の全量に対して変動しうる。
【０１５０】
[00135]一定の態様において、ＯＸＹ１３３は、ＯＸＹ１３３の塩、水和物、溶媒和物又は結晶形のパーセント結晶化度が、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％でありうる。一部の態様において、パーセント結晶化度は実質的に１００％でありうる。実質的に１００％とは、ＯＸＹ１３３の全量が当該技術分野で公知の方法を用いて測定できる限りにおいて結晶性であるように見えることを示す。従って、治療上有効量のＯＸＹ１３３は、結晶化度が異なる量を含みうる。これらの中には、ある量の固体形の結晶化ＯＸＹ１３３が、その後液体中に溶解、部分溶解、又は懸濁もしくは分散される場合が含まれる。
【０１５１】
[00136]一態様において、精製ＯＸＹ１３３は一水和物として結晶化される。しかしながら、他の態様において、精製ＯＸＹ１３３は、他の水和物形、例えば、二水和物、半水和物、セスキ水和物、三水和物、四水和物などのほか、対応する溶媒和物形で結晶化されることもある。他の態様において、精製ＯＸＹ１３３は、共結晶又は薬学的に許容可能な塩として結晶化される。
【０１５２】
[00137]一部の態様において、粗ＯＸＹ１３３を含有する反応混合物は、ヘプタンと混合することによって固化させることもできる。生成物はその後ろ過されて、塩化メチレン中に懸濁できる。一部の態様において、粗ＯＸＹ１３３は、懸濁液からろ過され、アセトンと水又はその他の有機もしくは無機溶媒（例えば、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、酢酸エチル、アセトン、ｎ，ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、アンモニア、ｔ−ブタノール、ｎ−プロパノール、エタノール、メタノール、酢酸又はそれらの組合せ）を用いて結晶化できる。
【０１５３】
[00138]様々な態様において、粗ＯＸＹ１３３は任意のその他の慣用手段によって単離及び精製できる。すなわち、粗ＯＸＹ１３３は、ろ過、遠心分離、蒸留（揮発性液体をそれらの相対揮発度に基づいて分離するため）、結晶化、再結晶化、蒸発（不揮発性溶質から揮発性液体を除去するため）、溶媒抽出（不純物を除去するため）、溶媒中への組成物の溶解（その溶媒にはその他の成分が溶解する）、又はその他の精製法によって単離及び精製し、所望純度、例えば約９５％〜約９９．９％にすることができる。様々な態様において、ヒドロホウ素化−酸化工程と精製工程は同じ反応容器内で実施される。様々な態様において、アルキル化工程、ヒドロホウ素化−酸化工程及び精製工程は同じ反応容器内で実施される。
【０１５４】
[00139]中間ジオール（式２）の合成法は立体選択的であり、高収率のＯＸＹ１３３を製造する。例えば、一部の態様において、精製ＯＸＹ１３３の収率は約２０％〜約９９％である。一部の態様において、精製ＯＸＹ１３３の収率は約２０％〜約８０％である。一部の態様において、精製ＯＸＹ１３３の収率は約２５％〜約７０％又は約２８％である。しかしながら、パーセント収率はこれらの数値より高いことも又は低いこともありうることは想定されている。
【０１５５】
[00140]一部の態様において、精製ＯＸＹ１３３は、結晶化によって結晶形で形成される。すなわち、ＯＸＹ１３３を、液体供給ストリームから、液体供給ストリームを冷却することによって、又は反応混合物中の副産物及び未使用反応物の溶解度を低下させる沈殿剤を添加することによって分離すると、ＯＸＹ１３３は結晶を形成する。一部の態様において、固体結晶は、次に、ろ過又は遠心分離によって残りの液体から分離される。結晶は溶媒中に再溶解された後、再結晶化されてもよく、その後ろ過又は遠心分離によって残りの液体から結晶を分離し、ＯＸＹ１３３の高純度サンプルを得る。一部の態様において、結晶はその後粒状化して所望の粒径にすることもできる。
【０１５６】
[00141]一部の態様において、得られたＯＸＹ１３３の純度は核磁気共鳴又は質量分析によって確認される。図２〜５に示されているように、１Ｈ  ＮＭＲ、１３Ｃ  ＮＭＲ、赤外分光、及び質量分析は、ＯＸＹ１３３生成物が高純度を有している（例えば、９８％〜９９．９９重量％の純度を有している）ことを示していた。
【０１５７】
[00142]一部の態様において、粗ＯＸＹ１３３は精製できる。その場合、精製ＯＸＹ１３３は溶媒中に結晶化形で形成され、次いで溶媒から取り出され、約９８％〜約９９．９９％の純度を有する高純度ＯＸＹ１３３を形成する。一部の態様において、ＯＸＹ１３３は、精製の前又は後にろ過又は真空ろ過によって回収できる。
【０１５８】
プレグネノロン誘導体の製造法
[00143]化合物ＯＸＹ１３３は強力な骨原性オキシステロールとして作用できるので、インビトロにおける骨前駆細胞の骨分化と、ラット及びウサギの脊椎固定モデルにおけるインビボにおいて堅牢な骨形成を誘導する。その結果、ＯＸＹ１３３は、脊椎固定術及び癒着不能骨折の修復に潜在的用途を有する局所投与用の候補薬物である。様々な態様において、ＯＸＹ１３３をベースにした治療薬誘導体は、これまで全身性骨疾患に対して試験されたことがない骨原性の薬物もしくは分子又は高い骨親和性を有する化学物質の骨特異的薬物送達システムとして使用することができ、それらを骨減少症又は骨粗鬆症の有効な治療に提供することを可能にする。
【０１５９】
[00144]図８は、本願の一態様によるオキシステロール治療薬誘導体又は類似体の合成スキームである。特に、図８は、以下に説明する通り、Ｃ３保護プレグネノロン誘導体、Ｃ３保護ジオール誘導体及びＣ３保護ＯＸＹ１３３誘導体の製造法を示す。
【０１６０】
[00145]一部の態様において、本開示は、図８に示されているように、ＯＸＹ１３３類似体の製造に適切なジオール誘導体を製造する際の有用な出発原料であるプレグネノロン誘導体の製造法を提供する。有用なプレグネノロン誘導体は、図８の式Ｉ：
【０１６１】
【化２９】
2018199670.tif 000030
【０１６２】
に示されている化合物を含む。
[00146]式中、Ｒ１は、メチル、エチル、シリル又はカルバメート基でありうる。一部の態様において、プレグネノロン誘導体は、Ｒ１がメチル、エチル、ターシャリーブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）でありうる化合物を含む。一般的に、プレグネノロン誘導体の合成法は当該技術分野で公知であり、ウィリアムソンエーテル合成及びウルマン縮合を含む。
【０１６３】
[00147]一定の態様において、ウィリアムソン合成の後、Ｃ３にアルキルベースのエーテルを提供するために、プレグネノロンを強塩基の存在下でＲ１Ｘなどのハロゲン化アルキルと反応させる。様々な態様において、Ｒ１はＣ１−Ｃ２０第一アルキル基、例えば、メチル、エチル、プロピルでよく、Ｘはハロゲン化物、例えば、フッ化物、塩化物、臭化物、ヨウ化物、又はアスタチン化物である。有用な塩基は、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム又は水酸化カルシウムなどの強塩基を含む。
【０１６４】
[00148]他の態様において、有用なプレグネノロン誘導体は、Ｃ３位に、例えば（Ｃ２−Ｃ２０）アリール又はヘテロアリール基などの芳香族基を含む。一部の態様において、プレグネノロンのＣ３位にフェノール基をカップリングさせるために、ウルマン縮合又はウィリアムソンエーテル合成が使用できる。ウルマン縮合では、プレグネノロンなどの芳香族アルコールを、銅及び強塩基の存在下、約１６０℃で芳香族ハロゲン化物と反応させると、プレグネノロンのＣ３に芳香族エーテルをもたらすことができる。ウィリアムソンエーテル合成と同様、有用な強塩基は、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム又は水酸化カルシウムを含む。
【０１６５】
ジオール誘導体の製造法
[00149]一定の態様において、ＯＸＹ１３３類似体又は誘導体の製造に有用な中間Ｃ３保護ジオールの製造法を提供する。
【０１６６】
[00150]様々な態様において、オキシステロールの誘導体の製造法は、式Ｉ：
【０１６７】
【化３０】
2018199670.tif 000031
【０１６８】
のプレグネノロン誘導体を有機金属化合物と反応させて、図８で式II：
【０１６９】
【化３１】
2018199670.tif 000032
【０１７０】
として同定されているＣ３保護ジオール誘導体を形成させる。式中、Ｒ１は、メチル、エチル、カルバメート、又はシリル基であり、Ｒ３は、（Ｃ６−Ｃ２６）アルキル又はヘテロアルキル、（Ｃ２−Ｃ２０）アリール又はヘテロアリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アリールアルキル又はヘテロアルキル及び（Ｃ５−Ｃ２０）アリールアルキル又はヘテロアリール−ヘテロアルキル、（Ｃ４−Ｃ１０）アルキルジイル又はヘテロアルキルジイル、又は（Ｃ４−Ｃ１０）アルキレノ又はヘテロアルキレノ、カルバメート、ベンジル又はシリル基である。
【０１７１】
[00151]その後、式IIのジオール誘導体をヒドロホウ素化−酸化に付し、図８で式III：
【０１７２】
【化３２】
2018199670.tif 000033
【０１７３】
として同定されているＣ３が保護されたオキシステロールＯＸＹ１３３の誘導体又はその薬学的に許容可能な塩を形成できる。
[00152]一部の態様において、Ｒ３をＣ２０に結合させるために有用な有機金属化合物は、式Ｒ３ＭｇＸに相当する。式中、Ｘはハロゲン化物であり、Ｒ３は、少なくとも１個の炭素を有する脂肪族又は環状置換基を含む。他の態様において、Ｃ３保護ジオール誘導体の形成に有用な有機金属化合物は式Ｒ３Ｌｉを含む又はそれに相当する。式中、Ｒ３は、少なくとも１個の炭素を有する脂肪族又は環状置換基を含み、Ｒ１は、メチル、エチル又はシリルを含む。一部の態様において、Ｒ３はヘキシル基である。
【０１７４】
[00153]中間Ｃ３保護ジオール（式II）の合成法は立体選択的であり、高収率のＣ３保護ジオールを製造する。例えば、一部の態様において、ジオールの所望立体異性体の収率は約６０％〜約７０％である。一部の態様において、ジオールの所望立体異性体の収率は約５０％〜約６０％である。しかしながら、パーセント収率はこれらの数値より高いことも又は低いこともありうることは想定されている。例えば、上に示されている式２のパーセント収率は、約２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％又は９５％でありうる。一部の態様において、パーセント収率は９５％より高いこともある。
【０１７５】
[00154]様々な態様において、グリニャール試薬を用いるアルキル化反応は、テトラヒドロフランなどの極性有機溶媒中で実施される。しかしながら、反応は、様々な極性有機溶媒中で実施することができる。例えば、反応は、ジエチルエーテル、エチルエーテル、ジメチルエーテル中などで実施できる。
【０１７６】
[00155]一部の態様において、有機金属グリニャール試薬はｎ−ヘキシルマグネシウムクロリドを含む。しかしながら、一部の態様において、アルキル化反応は、例えばｎ−ヘキシルリチウムのようなアルキルリチウムを使用して実施されてもよい。様々な態様において、有機金属試薬はハロゲン化アルキルを含む。例えば、有機金属試薬は、下記式：
Ｒ３−Ｍｇ−Ｘ
を有する。上記式中、Ｍｇはマグネシウムを含み、Ｘは、塩素、臭素、フッ素、ヨウ素、又はアスタチンを含み、そしてＲ３は、アルキル、ヘテロアルキル、アルカニル、ヘテロアルカニル、アルケニル、ヘテロアルケニル、アルキニル、ヘテロアルキニル、アルキルジイル、ヘテロアルキルジイル、アルキレノ、ヘテロアルキレノ、アリール、アリールジイル、アリーレノ、アリールアリール、ビアリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールジイル、ヘテロアリーレノ、ヘテロアリール−ヘテロアリール、ビヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル又はそれらの組合せを含む。一部の態様において、Ｒ３置換基は、（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル又はヘテロアルキル、（Ｃ２−Ｃ２０）アリール又はヘテロアリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アリールアルキル又はヘテロアリールアルキル及び（Ｃ５−Ｃ２０）アリールアルキル又はヘテロアリール−ヘテロアルキル、（Ｃ４−Ｃ１０）アルキルジイル又はヘテロアルキルジイル、又は（Ｃ４−Ｃ１０）アルキレノ又はヘテロアルキレノを含む。Ｒ３置換基は、環式又は非環式でも、分枝又は非分枝でも、置換又は非置換でも、芳香族でも、飽和又は不飽和鎖でも、又はそれらの組合せでもよい。一部の態様において、Ｒ３置換基は脂肪族基である。一部の態様において、Ｒ３置換基は環式基である。一部の態様において、Ｒ３置換基はヘキシル基である。
【０１７７】
[00156]あるいは、有機金属試薬は、式：
Ｒ３−Ｌｉ
を含んでいてもよい。
【０１７８】
[00157]上記式中、Ｌｉはリチウムを含み、そしてＲ３は、アルキル、ヘテロアルキル、アルカニル、ヘテロアルカニル、アルケニル、ヘテロアルケニル、アルキニル、ヘテロアルキニル、アルキルジイル、ヘテロアルキルジイル、アルキレノ、ヘテロアルキレノ、アリール、アリールジイル、アリーレノ、アリールアリール、ビアリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールジイル、ヘテロアリーレノ、ヘテロアリール−ヘテロアリール、ビヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル又はそれらの組合せを含む。一部の態様において、Ｒ３置換基は、（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル又はヘテロアルキル、（Ｃ２−Ｃ２０）アリール又はヘテロアリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アリールアルキル又はヘテロアリールアルキル及び（Ｃ５−Ｃ２０）アリールアルキル又はヘテロアリール−ヘテロアルキル、（Ｃ４−Ｃ１０）アルキルジイル又はヘテロアルキルジイル、又は（Ｃ４−Ｃ１０）アルキレノ又はヘテロアルキレノを含む。Ｒ３置換基は、環式又は非環式でも、分枝又は非分枝でも、置換又は非置換でも、芳香族でも、飽和又は不飽和鎖でも、又はそれらの組合せでもよい。一部の態様において、Ｒ３置換基は脂肪族基である。一部の態様において、Ｒ３置換基は環式基である。一部の態様において、Ｒ３置換基はヘキシル基である。
【０１７９】
[00158]一部の態様において、アルキル化反応は発熱性であるので、反応容器は、最適な反応動力学を維持するために温度制御されうる。一部の態様において、発熱反応は、溶液１ポンド（約４５４ｇ）あたり約１０００ＢＴＵを放出する。反応が強発熱性であるため、グリニャール試薬は、揮発性成分、例えばエーテルが反応熱によって気化しないように徐々に加えることができる。一部の態様において、反応容器は内部冷却コイルによって冷却できる。冷却コイルには、外部ガス／液体冷蔵装置によって冷却剤が供給されてもよい。一部の態様において、反応容器の内部温度は、１５℃、１０℃、５℃又は１℃未満に維持される。一部の態様において、反応容器は、式IIの中間Ｃ３保護ジオールを形成させるためのアルキル化反応の間、約０℃に維持される。
【０１８０】
[00159]様々な態様において、式IIのＣ３保護ジオールは副産物と共に合成されるので、精製することができる。例えば、得られる式IIのＣ３保護ジオールはジアステレオマー混合物の副産物のこともある。様々な態様において、式IIのＣ３保護ジオールは単離及び精製できる。すなわち、式IIのＣ３保護ジオールは、ろ過、遠心分離、蒸留（揮発性液体をそれらの相対揮発度に基づいて分離する）、結晶化、再結晶化、蒸発（不揮発性溶質から揮発性液体を除去するため）、溶媒抽出（不純物を除去するため）、溶媒中への組成物の溶解（その溶媒にはその他の成分が溶解する）、又はその他の精製法によって単離及び精製し、所望純度、例えば約９５％〜約９９．９％にすることができる。Ｃ３保護ジオールは、それを有機及び／又は無機溶媒、例えば、ＴＨＦ、水、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、酢酸エチル、アセトン、ｎ，ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、アンモニア、ｔ−ブタノール、ｎ−プロパノール、エタノール、メタノール、酢酸、又はそれらの組合せと接触させることによって精製することもできる。
【０１８１】
[00160]様々な態様において、アルキル化工程及び精製工程は同じ反応容器内で行われる。
[00161]一部の態様において、Ｃ３保護ジオールは、塩化アンモニウム水溶液又は酢酸でクエンチングして存在するアニオンの量を低減し、反応を中和して、得られる有機層からそれを分離する。分離された残渣は、蒸発により回収され、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製される。
【０１８２】
[00162]Ｃ３保護ジオールは、無水又は一水和物形でありうる。しかしながら、他の態様において、精製ジオールは他の水和物形、例えば、二水和物、半水和物、セスキ水和物、三水和物、四水和物などのほか、対応する溶媒和物形に結晶化されてもよい。他の態様において、精製保護ジオールは、共結晶又は薬学的に許容可能な塩として結晶化される。
【０１８３】
オキシステロール−治療薬誘導体の製造法
[00163]さらに図８を参照すると、本明細書中に開示のＣ３保護ＯＸＹ１３３の合成法は、下記の反応スキームにおいて、上記のようにして合成されたＣ３保護ジオールをボランと反応させ、次いで過酸化水素水で酸化することを含む。
【０１８４】
【化３３】
2018199670.tif 000034
【０１８５】
[00164]一部の態様において、粗製及び未精製Ｃ３保護ＯＸＹ１３３は、反応スキーム６において、式IIを有する中間保護ジオールのヒドロホウ素化及び酸化反応を通じて製造される。反応に使用できるボラン化合物は、ＢＨ３、Ｂ２Ｈ６、ＢＨ３Ｓ（ＣＨ３）２（ＢＭＳ）、ホスフィン及びアミンとのボラン付加物、例えばボラントリエチルアミン；ＲＢＨ２（式中、Ｒ＝アルキル及びハロゲン化物）の形態の一置換ボラン、モノアルキルボラン（例えば、ＩｐｃＢＨ２、モノイソピノカンフェイルボラン）、モノブロモ−及びモノクロロ−ボラン、モノクロロボランと１，４−ジオキサンの複合体、バルキーボラン(bulky borane)を含む二置換ボラン、例えばジエチルボランなどのジアルキルボラン化合物、ビス−３−メチル−２−ブチルボラン（ジシアミルボラン）、９−ボラビシクロ［３，３，１］ノナン（９−ＢＢＮ）、ジシアミルボラン（Ｓｉａ２ＢＨ）、ジシクロヘキシルボラン（Ｃｈｘ２ＢＨ）、トリアルキルボラン、ジアルキルハロゲノボラン、ジメシチルボラン（Ｃ６Ｈ２Ｍｅ３）２ＢＨ、アルケニルボラン、ピナコールボラン、又はカテコールボラン、又はそれらの混合物などである。
【０１８６】
[00165]手短に言えば、スキーム６に示されているように、ヒドロホウ素化及び酸化反応は二段階反応である。ホウ素及び水素はアルケンの二重結合に付加し、アルケンと複合体を形成する。従って、反応のホウ素化局面は立体選択的であり位置選択的である。反応の酸化局面は、ホウ素の代わりにヒドロキシル置換基を提供するために塩基性の過酸化水素水を必要とする。Ｖｏｌｌｈａｒｔ，ＫＰ，Ｓｃｈｏｒｅ，ＮＥ，２００７，Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，第５版，Ｃｕｓｔｏｍ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ（ニューヨーク州ニューヨーク）参照。このように、式IIIを有するＣ３保護中間ジオールをボラン及び過酸化水素と反応させてＣ３が保護された粗ＯＸＹ１３３を形成させる。一部の態様において、粗Ｃ３保護ＯＸＹ１３３を形成させる工程は、アルキル化反応と同じ反応容器内で実施される。他の態様において、粗Ｃ３保護ＯＸＹ１３３を形成させる工程は、アルキル化反応とは異なる反応容器内で実施される。
【０１８７】
[00166]Ｃ３保護ＯＸＹ１３３合成のヒドロホウ素化−酸化工程は、中間ジオールの形成工程と同様、立体選択的であり、高収率をもたらす。例えば、一部の態様において、粗ＯＸＹ１３３のパーセント収率は、これらの量より高いことも又は低いこともある。例えば、上に示されている式２のパーセント収率は、約２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％又は９５％でありうる。一部の態様において、パーセント収率は９５％より高いこともある。
【０１８８】
[00167]様々な態様において、ヒドロホウ素化−酸化反応は、テトラヒドロフランなどの極性有機溶媒中で実施される。しかしながら、反応は、様々な極性有機溶媒中で実施することができる。例えば、反応は、ジエチルエーテル、エチルエーテル、ジメチルエーテル中などで実施できる。
【０１８９】
[00168]一部の態様において、ヒドロホウ素化−酸化反応は発熱性であるので、反応容器は、最適な反応動力学を維持するために温度制御することができる。具体的には、酸化局面は極度に発熱性である。反応が強発熱性であるため、過酸化水素は、揮発性成分、例えばエーテルが反応熱のために気化しないように徐々に加えることができる。一部の態様において、反応容器は内部冷却コイルによって冷却できる。冷却コイルには、外部ガス／液体冷蔵装置によって冷却剤が供給されてもよい。一部の態様において、反応容器の内部温度は、１０℃、５℃、１℃又は０℃未満に維持される。一部の態様において、反応容器は、ヒドロホウ素化−酸化反応の間、約−５℃に維持される。
【０１９０】
[00169]一定の態様において、Ｃ３保護ジオールは、ジオールの塩、水和物、溶媒和物又は結晶形のパーセント結晶化度が、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％でありうる。一部の態様において、パーセント結晶化度は実質的に１００％でありうる。実質的に１００％とは、Ｃ３保護ジオールの全量が当該技術分野で公知の方法を用いて測定できる限りにおいて結晶性であるように見えることを示す。従って、治療上有効量のジオールは、結晶化度が異なる量を含みうる。これらの中には、ある量の固体形のＣ３保護結晶化ジオールが、その後液体中に溶解、部分溶解、又は懸濁もしくは分散される場合が含まれる。
【０１９１】
[00170]式IIIのＣ３保護ＯＸＹ１３３分子を考えた場合、別の化合物部分との誘導体又は類似体を形成するために利用できる部位は、ほかに二つ、すなわちＣ６及びＣ２０しかないことは明白である。式IIIのＣ３保護ＯＸＹ１３３分子において、Ｃ６−ヒドロキシル基は、Ｃ２０位のヒドロキシル基よりも別の薬物に対して高反応性である。なぜならば、直鎖アルキル基を有するＣ２０位のヒドロキシル基とは対照的に、ヒドロキシル基との反応を妨害する他の基がその周囲にないからである。他の態様において、ＯＸＹ１３３分子をＣ６及び／又はＣ２０で保護することにより、治療薬がＯＸＹ１３３分子のＣ３又はＣ２０又は全活性部位、Ｃ３、Ｃ６及びＣ２０に結合した類似体を提供することも可能である。
【０１９２】
[00171]様々な態様において、Ｃ３保護ＯＸＹ１３３分子は、Ｃ６−ヒドロキシル基を通じて、公知の骨親和性を有する治療薬、例えば、ビスホスホネート、抗生物質、タンパク質、それらの部分又はフラグメントと反応させることができる。図８において、治療薬で置換されたＯＸＹ１３３は、式IV：
【０１９３】
【化３４】
2018199670.tif 000035
【０１９４】
として示されている。式中、Ｒ１及びＲ３は上記の通りであり、Ｒ４は、ビスホスホネート部分、抗生物質部分又はタンパク質フラグメントを含む治療薬である。
[00172]形成されたら、Ｃ３保護ＯＸＹ１３３治療薬誘導体は、当業者に公知の古典的な化学の方法を使用してＣ３を脱保護できる。例えば、Ｃ３の保護基がシリルの場合、それを脱保護するために、フッ化物源、例えばテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオリド（ＴＢＡＦ）又はＨＦピリジン錯体が使用できる。他の側面において、Ｃ３の保護基がメチル又は別の直鎖アルキルの場合、ヨウ素源、例えばトリメチルシリルヨージド（ＣＨ３）３ＳｉＩ、ヨードトリメチルシラン（ＴＭＳＩ）が使用できる。他の適切な脱保護法もＣ３の保護基の素性(identity)に応じて使用できる。脱保護により、ＯＸＹ１３３治療薬誘導体又は類似体が形成され、図８に式IVb：
【０１９５】
【化３５】
2018199670.tif 000036
【０１９６】
として示されている。
[00173]オキシステロール類似体又は誘導体の全合成は図８に示されている。本願の一態様は、治療薬がビスホスホネートであるオキシステロール誘導体又は類似体に関する。ビスホスホネートは、骨を冒す状態の治療に使用されるクラスの薬物である。それらは、破骨細胞の作用を遮断することにより、骨の石灰化又は吸収を阻害する。ビスホスホネートは、骨の石灰化を通常阻害するピロリン酸の酵素耐性類似体である。用量依存的に、ビスホスホネートは、破骨細胞の動員を阻害し、アポトーシスを促進することにより、骨のターンオーバーを低減する。
【０１９７】
[00174]ビスホスホネートには、窒素含有ビスホスホネートと窒素非含有ビスホスホネートの二つのクラスがある。置換オキシステロール誘導体の製造に有用な窒素含有ビスホスホネートは、制限なしに挙げると、アレンドロネート(alendronate)、イバンドロネート(ibandronate)、リセドロネート(risedronate)、ゾレドロネート(zoledronate)、オルパドロネート(olpadronate)、ネリドロネート(neridronate)又はパミドロネート(pamidronate)などである。本願に有用な窒素非含有ビスホスホネートは、制限なしに挙げると、エチドロネート(etidronate)、クロドロネート(clodronate)又はチルドロネート(tiludronate)などである。ビスホスホネートは、オキシステロールに骨強化活性を付与し、骨喪失を低減又は防止するので、例えば骨粗鬆症などの状態に有用である。
【０１９８】
[00175]本願の別の態様は、治療薬が抗生物質、抗生物質分もしくはフラグメント、又は抗菌剤もしくはそのフラグメントであるオキシステロール誘導体に関する。これは、オキシステロールに抗菌活性を付与し、感染を低減又は予防する。いくつかの例示的な抗生物質又は抗菌剤は、制限なしに実例を挙げると、アセダプソン(acedapsone)；アセトスルホン・ナトリウム(acetosulfone sodium)；アラメシン(alamecin)；アレキシジン(alexidine)；アムジノシリン(amdinocillin)；アムジノシリン・ピボキシル(amdinocillin pivoxil)；アミサイクリン(amicycline)；アミフロキサシン(amifloxacin)；メシル酸アミフロキサシン (amifloxacin mesylate)；アミカシン(amikacin)；硫酸アミカシン(amikacin sulfate)；アミノグリコシド類(aminoglycosides)；アミノサリチル酸(aminosalicylic acid)；アミノサリチル酸ナトリウム(aminosalicylate sodium)；アモキシシリン(amoxicillin)；アンホマイシン(amphomycin)；アンピシリン(ampicillin)；アンピシリン・ナトリウム(ampicillin sodium)；アパルシリン・ナトリウム(apalcillin sodium)；アプラマイシン(apramycin)；アスパルトシン(aspartocin)；硫酸アストロマイシン(astromicin sulfate)；アビラマイシン(avilamycin)；アボパルシン(avoparcin)；アザクタム(azactam)；アジスロマイシン(azithromycin)；アズロシリン(azlocillin)；アズロシリン・ナトリウム(azlocillin sodium)：塩酸バカンピシリン(bacampicillin hydrochloride)；バシトラシン(bacitracin)；バシトラシン・メチレン・ジサリチレート(bacitracin methylene disalicylate)；バシトラシン亜鉛(bacitracin zinc)；バンベルマイシン類(bambermycins)；ベンゾイルパス・カルシウム(benzoylpas calcium)；ベリスロマイシン(berythromycin)；硫酸ベタマイシン(betamicin sulfate)；ベータ−ラクタマーゼ類(beta-lactamases)；ビアペネム(biapenem)；ビニラマイシン(biniramycin)；塩酸ビフェナミン(biphenamine hydrochloride)；ビスピリチオン・マグスルフェクス(bispyrithione magsulfex)；ブチカシン(butikacin)；硫酸ブチロシン(butirosin sulfate)；硫酸カプレオマイシン(capreomycin sulfate)；カルバドクス(carbadox)；カルベニシリン・二ナトリウム(carbenicillin disodium)；カルベニシリン・インダニル・ナトリウム(carbenicillin indanyl sodium)；カルベニシリン・フェニル・ナトリウム(carbenicillin phenyl sodium)；カルベニシリン・カリウム(carbenicillin potassium)；カルモナム・ナトリウム(carumonam sodium)；セファクロル(cefaclor)；セファドロキシル(cefadroxil)；セファマンドール(cefamandole)；セファマンドール・ナファート(cefamandole nafate)；セファマンドール・ナトリウム(cefamandole sodium)；セファパロール(cefaparole)；セファトリジン(cefatrizine)；セファザフルール・ナトリウム(cefazaflur sodium)；セファゾリン(cefazolin)；セファゾリン・ナトリウム(cefazolin sodium)；セフブペラゾン(cefbuperazone)；セフジニル(cefdinir)；セフェピム(cefepime)；塩酸セフェピム(cefepime hydrochloride)；セフェテコル(cefetecol)；セフィキシム(cefixime)；塩酸セフメノキシム(cefmenoxime hydrochloride)；セフメタゾール(cefmetazole)；セフメタゾール・ナトリウム(cefmetazole sodium)；セフォニシド・一ナトリウム(cefonicid monosodium)；セフォニシド・ナトリウム(cefonicid sodium)；セフォペラゾン・ナトリウム(cefoperazone sodium)；セフォラニド(ceforanide)；セフォタキシム・ナトリウム(cefotaxime sodium)；セフォテタン(cefotetan)；セフォテタン・二ナトリウム(cefotetan disodium)；塩酸セフォチアム(cefotiam hydrochloride)；セフォキシチン(cefoxitin)���セフォキシチン・ナトリウム(cefoxitin sodium)；セフピミゾール(cefpimizole)；セフピミゾール・ナトリウム(cefpimizole sodium)；セフピラミド(cefpiramide)；セフピラミド・ナトリウム(cefpiramide sodium)；硫酸セフピロム(cefpirome sulfate)；セフポドキシム・プロキセチル(cefpodoxime proxetil)；セフプロジル(cefprozil)；セフロキサジン(cefroxadine)；セフスロジン・ナトリウム(cefsulodin sodium)；セフタジジム(ceftazidime)；セフチブテン(ceftibuten)；セフチゾキシム・ナトリウム(ceftizoxime sodium)；セフトリアキソン・ナトリウム(ceftriaxone sodium)；セフロキシム(cefuroxime)；セフロキシム・アキセチル(cefuroxime axetil)；セフロキシム・ピボキセチル(cefuroxime pivoxetil)；セフロキシム・ナトリウム(cefuroxime sodium)；セファセトリル・ナトリウム(cephacetrile sodium)；セファレキシン(cephalexin)；塩酸セファレキシン(cephalexin hydrochloride)；セファログリシン(cephaloglycin)；セファロリジン(cephaloridine)；セファロチン・ナトリウム(cephalothin sodium)；セファピリン・ナトリウム(cephapirin sodium)；セフラジン(cephradine)；塩酸セトサイクリン(cetocycline hydrochloride)；セトフェニコール(cetophenicol)；クロラムフェニコール(chloramphenicol)；パルミチン酸クロラムフェニコール(chloramphenicol palmitate)；パントテン酸クロラムフェニコール複合体(chloramphenicol pantothenate complex)；コハク酸クロラムフェニコール・ナトリウム(chloramphenicol sodium succinate)；ホスファニル酸クロルヘキシジン(chlorhexidine phosphanilate)；クロルオキシレノール(chloroxylenol)；硫酸水素クロルテトラサイクリン(chlortetracycline bisulfate)；塩酸クロルテトラサイクリン(chlortetracycline hydrochloride)；シノキサシン(cinoxacin)；シプロフロキサシン(ciprofloxacin)；塩酸シプロフロキサシン(ciprofloxacin hydrochloride)；シロレマイシン(cirolemycin)；クラリスロマイシン(clarithromycin)；塩酸クリナフロキサシン(clinafloxacin hydrochloride)；クリンダマイシン(clindamycin)；塩酸クリンダマイシン(clindamycin hydrochloride)；塩酸パルミチン酸クリンダマイシン(clindamycin palmitate hydrochloride)；リン酸クリンダマイシン(clindamycin phosphate)；クロファジミン(clofazimine)；クロキサシリン・ベンザチン(cloxacillin benzathine)；クロキサシリン・ナトリウム(cloxacillin sodium)；クロルヘキシジン(chlorhexidine)，クロキシキン(cloxyquin)；コリスチメタン酸ナトリウム(colistimethate sodium)；硫酸コリスチン(colistin sulfate)；クメルマイシン(coumermycin)；クメルマイシン・ナトリウム(coumermycin sodium)；シクラシリン(cyclacillin)；シクロセリン(cycloserine)；ダルフォプリスチン(dalfopristin)；ダプソン(dapsone)；ダプトマイシン(daptomycin)；デメクロサイクリン(demeclocycline)；塩酸デメクロサイクリン(demeclocycline hydrochloride)；デメサイクリン(demecycline)；デノフンギン(denofungin)；ジアベリジン(diaveridine)；ジクロキサシリン(dicloxacillin)；ジクロキサシリン・ナトリウム(dicloxacillin sodium)；硫酸ジヒドロストレプトマイシン(dihydrostreptomycin sulfate)；ジピリチオン(dipyrithione)；ジリスロマイシン(dirithromycin)；ドキシサイクリン(doxycycline)；ドキシサイクリン・カルシウム(doxycycline calcium)；ドキシサイクリン・フォスファテクス(doxycycline fosfatex)；ドキシサイクリン・ヒクラート(doxycycline hyclate)；ドロキサシン・ナトリウム(droxacin sodium)；エノキサシン(enoxacin)；エピシリン(epicillin)；塩酸エピテトラサイクリン(epitetracycline hydrochloride)；エリスロマイシン(erythromycin)；エリ��ロマイシン・アシストラート(erythromycin acistrate)；エリスロマイシン・エストレート(erythromycin estolate)；エチルコハク酸エリスロマイシン(erythromycin ethylsuccinate)；エリスロマイシン・グルセプタート(erythromycin gluceptate)；ラクトビオン酸エリスロマイシン(erythromycin lactobionate)；プロピオン酸エリスロマイシン(erythromycin propionate)；ステアリン酸エリスロマイシン(erythromycin stearate)；塩酸エタンブトール(ethambutol hydrochloride)；エチオナミド(ethionamide)；フレロキサシン(fleroxacin)；フロキサシリン(floxacillin)；フルダラニン(fludalanine)；フルメキン(flumequine)；フルオロキノロン類(fluoroquinolones)：ホスホマイシン(fosfomycin)；ホスホマイシン・トロメタミン(fosfomycin tromethamine)；フモキシシリン(fumoxicillin)；塩化フラゾリウム(furazolium chloride)；酒石酸フラゾリウム(furazolium tartrate)；フシジン酸ナトリウム(fusidate sodium)；フシジン酸(fusidic acid)；ガンシクロビル(ganciclovir)及びガンシクロビル・ナトリウム(ganciclovir sodium)；硫酸ゲンタマイシン(gentamicin sulfate)；グロキシモナム(gloximonam)；グラミシジン(gramicidin)；ハロプロジン(haloprogin)；ヘタシリン(hetacillin)；ヘタシリン・カリウム(hetacillin potassium)；ヘキセジン(hexedine)；イバフロキサシン(ibafloxacin)；イミペネム(imipenem)；イソコナゾール(isoconazole)；イセパマイシン(isepamicin)；イソニアジド(isoniazid)；ジョサマイシン(josamycin)；硫酸カナマイシン(kanamycin sulfate)；キタサマイシン(kitasamycin)；レボフラルタドン(levofuraltadone)；レボプロピルシリン・カリウム(levopropylcillin potassium)；レキシスロマイシン(lexithromycin)；リンコマイシン(lincomycin)；塩酸リンコマイシン(lincomycin hydrochloride)；ロメフロキサシン(lomefloxacin)；塩酸ロメフロキサシン(lomefloxacin hydrochloride)；メシル酸ロメフロキサシン(lomefloxacin mesylate)；ロラカルベフ(loracarbef)；マクロライド類(macrolides)；マフェニド(mafenide)；メクロサイクリン(meclocycline)；スルホサリチル酸メクロサイクリン(meclocycline sulfosalicylate)；メガロマイシン・カリウム・ホスファート(megalomicin potassium phosphate)；メキドクス(mequidox)；メロペネム(meropenem)；メタサイクリン(methacycline)；塩酸メタサイクリン(methacycline hydrochloride)；メテナミン(methenamine)；馬尿酸メテナミン(methenamine hippurate)；マンデル酸メテナミン(methenamine mandelate)；メチシリン・ナトリウム(methicillin sodium)；メチオプリム(metioprim)；塩酸メトロニダゾール(metronidazole hydrochloride)；リン酸メトロニダゾール(metronidazole phosphate)；メズロシリン(mezlocillin)；メズロシリン・ナトリウム(mezlocillin sodium)；ミノサイクリン(minocycline)；塩酸ミノサイクリン(minocycline hydrochloride)；塩酸ミリンカマイシン(mirincamycin hydrochloride)；モネンシン(monensin)；モネンシン・ナトリウム(monensin sodiumr)；ナフシリン・ナトリウム(nafcillin sodium)；ナリジクス酸ナトリウム(nalidixate sodium)；ナリジクス酸(nalidixic acid)；ナタマイシン(natainycin)；ネブラマイシン(nebramycin)；パルミチン酸ネオマイシン(neomycin palmitate)；硫酸ネオマイシン(neomycin sulfate)；スルホンアミド(sulfonamide)；ウンデシレン酸ネオマイシン(neomycin undecylenate)；硫酸ネチルマイシン(netilmicin sulfate)；ニュートラマイシン(neutramycin)；ニフイラデン(nifuiradene)；ニフラルデゾン(nifuraldezone)；ニフラテル(nifuratel)；ニフラトロン(nifuratrone)；ニフルダジル(nifurdazil)；ニフリミド(nifurimide)；ニフィウピリノル(nifiupirinol)；ニフルキナゾール(nifurquinazol)；ニフルチアゾール(nifurthiazole)；ニトロサイクリン(nitrocycline)；ニトロフラントイン(nitrofurantoin)；ニトロミド(nitromide)；ノルフロキサシン(norfloxacin)；ノボビオシン・ナトリウム(novobiocin sodium)；オフロキサシン(ofloxacin)；オンネトプリム(onnetoprim)；オキサシリン(oxacillin)及びオキサシリン・ナトリウム(oxacillin sodium)；オキシモナム(oximonam)；オキシモナム・ナトリウム(oximonam sodium)；オキソリン酸(oxolinic acid)；オキシテトラサイクリン(oxytetracycline)；オキシテトラサイクリン・カルシウム(oxytetracycline calcium)；
塩酸オキシテトラサイクリン(oxytetracycline hydrochloride)；パルジマイシン(paldimycin)；パラクロロフェノール(parachlorophenol)；パウロマイシン(paulomycin)；ペフロキサシン(pefloxacin)；メシル酸ペフロキサシン(pefloxacin mesylate)；ペナメシリン(penamecillin)；ペニシリン類、例えばペニシリンｇベンザチン(penicillin g benzathine)、ペニシリンｇカリウム(penicillin g potassium)，ペニシリンｇプロカイン(penicillin g procaine)、ペニシリンｇナトリウム(penicillin g sodium)，ペニシリンｖ(penicillin v)，ペニシリンｖベンザチン(penicillin v benzathine)，ペニシリンｖヒドラバミン(penicillin v hydrabamine)，及びペニシリンｖカリウム(penicillin v potassium)；ペンチジドン・ナトリウム(pentizidone sodium)；アミノサリチル酸フェニル(phenyl aminosalicylate)；ピペラシリン・ナトリウム(piperacillin sodium)；ピルベニシリン・ナトリウム(pirbenicillin sodium)；ピリジシリン・ナトリウム(piridicillin sodium)；塩酸ピルリマイシ(pirlimycin hydrochloride)；塩酸ピバンピシリン(pivampicillin hydrochloride)；パモ酸ピバンピシリン(pivampicillin pamoate)；ピバンピシリン・プロベナート(pivampicillin probenate)；硫酸ポリミキシンＢ(polymyxin B sulfate)；ポルフィロマイシン(porfiromycin)；プロピカシン(propikacin)；ピラジンアミド(pyrazinamide)；ピリチオン亜鉛(pyrithione zinc)；酢酸キンデカミン(quindecamine acetate)；キヌプリスチン(quinupristin)；ラセフェニコール(racephenicol)；ラモプラニン(ramoplanin)；ラニマイシン(ranimycin)；レロマイシン(relomycin)；レプロマイシン(repromicin)；リファブチン(rifabutin)；リファメタン(rifametane)；リファメキシル(rifamexil)；リファミド(rifamide)；リファンピン(rifampin)；リファペンチン(rifapentine)；リファキシミン(rifaximin)；ロリテトラサイクリン(rolitetracycline)；硝酸ロリテトラサイクリン(rolitetracycline nitrate）；ロサラマイシン(rosaramicin)；酪酸ロサラマイシン(rosaramicin butyrate)；プロピオン酸ロサラマイシン(rosaramicin propionate)；ロサラマイシンリン酸ナトリウム(rosaramicin sodium phosphate)；ステアリン酸ロサラマイシン(rosaramicin stearate)；ロソキサシン(rosoxacin)；ロキサルソン(roxarsone)；ロキシスロマイシン(roxithromycin)；サンサイクリン(sancycline)；サンフェトリネム・ナトリウム(sanfetrinem sodium)；サルモキシシリン(sarmoxicillin)；サルピシリン(sarpicillin)；スコパフンギン(scopafungin)；シソマイシン(sisomicin)；硫酸シソマイシン(sisomicin sulfate)；スパルフロキサシン(sparfloxacin)；塩酸スペクチノマイシン(spectinomycin hydrochloride)；スピラマイシン(spiramycin)；塩酸スタリマイシン(stallimycin hydrochloride)；ステフィマイシン(steffimycin)；硫酸ストレプトマイシン(streptomycin sulfate)；ストレプトニコジド(streptonicozid)；スルファベンズ(sulfabenz)；スルファベンズアミド(sulfabenzamide)；スルファセタミド(sulfacetamide)；スルファセタミド・ナトリウム(sulfacetamide sodium)；スルファシチン(sulfacytine)；スルファジアジン(sulfadiazine)；スルファジアジン・ナトリウム(sulfadiazine sodium)；スルファドキシン(sulfadoxine)；スルファレン(sulfalene)；スルファメラジン(sulfamerazine)；スルファメーター(sulfameter)；スルファメタジン(sulfamethazine)；スルファメチゾール(sulfamethizole)；スルファメトキサゾール(sulfamethoxazole)；スルファモノメトキシン(sulfamonomethoxine)；スルファモキソール(sulfamoxole)；スルファニレート亜鉛(sulfanilate zinc)；スルファニトラン(sulfanitran)；スルファサラジン(sulfasalazine)；スルファ���ミゾール(sulfasomizole)；スルファチアゾール(sulfathiazole)；スルファザメト(sulfazamet)；スルフィソキサゾール(sulfisoxazole)；スルフィソキサゾール・アセチル(sulfisoxazole acetyl)；スルフィスボキサゾール・ジオラミン(sulfisboxazole diolamine)；スルホミキシン(sulfomyxin)；スロペネム(sulopenem)；スルタムリシリン(sultamricillin)；スンシリン・ナトリウム(suncillin sodium)；塩酸タランピシリン(talampicillin hydrochloride)；テイコプラニン(teicoplanin)；塩酸テマフロキサシン(temafloxacin hydrochloride)；テモシリン(temocillin)；テトラサイクリン(tetracycline)；塩酸テトラサイクリン(tetracycline hydrochloride)；リン酸テトラサイクリン複合体(tetracycline phosphate complex)；テトロキソプリム(tetroxoprim)；チアンフェニコール(thiamphenicol)；チフェンシリン・カリウム(thiphencillin potassium)；チカルシリン・クレシル・ナトリウム(ticarcillin cresyl sodium)；チカルシリン・二ナトリウム(ticarcillin disodium)；チカルシリン・一ナトリウム(ticarcillin monosodium)；チクラトン(ticlatone)；塩化チオドニウム(tiodonium chloride)；トブラマイシン(tobramycin)；硫酸トブラマイシン(tobramycin sulfate)；トスフロキサシン(tosufloxacin)；トリメトプリム(trimethoprim)；硫酸トリメトプリム(trimethoprim sulfate)；トリメトプリム−スルファムトキサゾール(trimethoprim−sulfamthoxazole)；トリスルファピリミジン類(trisulfapyrimidines)；トロレアンドマイシン(troleandomycin)；硫酸トロスペクトマイシン(trospectomycin sulfate)；チロトリシン(tyrothricin)；バンコマイシン(vancomycin)；塩酸バンコマイシン(vancomycin hydrochloride)；バージニアマイシン(virginiamycin)；ゾルバマイシン(zorbamycin)；又はそれらの組合せなどである。
【０１９９】
[00176]さらに他の態様において、本願のオキシステロール治療薬誘導体は、治療薬としてタンパク質を含有する。いくつかの例示的タンパク質又はタンパク質性材料は、制限なしに実例を挙げると、骨形成又は骨形態形成タンパク質（ＢＭＰ）、骨誘導性タンパク質(bone inductive protein)、骨成長因子又は成長因子、骨原性タンパク質、又は骨誘導性タンパク質(osteoinductive protein)などである。これらの因子は、本明細書中で説明の通り、異なる効果及び機能を有しているが、本明細書中ではまとめて骨誘導因子と呼ばれる。
【０２００】
[00177]骨誘導因子は、ポリペプチド又はポリヌクレオチド組成物でありうる。骨誘導因子のポリヌクレオチド組成物は、単離された骨形成タンパク質（ＢＭＰ）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、結合組織増殖因子（ＣＴＧＦ）、オステオプロテゲリン、増殖分化因子（ＧＤＦ）、軟骨由来形成タンパク質（ＣＤＭＰ）、ＬＩＭ石灰化タンパク質（ＬＭＰ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ又はｒｈＰＤＧＦ）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ）又は形質転換成長因子ベータ（ＴＧＦ−ベータ）ポリペプチドなどであるが、これらに限定されない。
【０２０１】
[00178]骨誘導因子のポリペプチド組成物は、全長タンパク質、そのフラグメント又は変異体などであるが、これらに限定されない。単離された骨誘導因子の変異体は、インビボにおける骨誘導因子の活性期間を増大するように設計されたポリペプチド変異体などであるが、これに限定されない。変異型骨誘導因子の好適な態様は、インビボでの半減期を増大するためにポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分に結合された（ペグ化とも呼ばれる）全長タンパク質又はそのフラグメントなどであるが、これらに限定されない。ポリペプチドのペグ化の方法は当該技術分野で周知である（ペグ化ポリペプチドの生成法の例として、例えば米国特許第６，５５２，１７０号及び欧州特許第０，４０１，３８４号参照）。一部の態様において、骨誘導因子は融合タンパク質として提供される。一態様において、骨誘導因子は、ヒトＩｇＧのＦｃ部分との融合タンパク質として入手可能である。別の態様において、骨誘導因子は、ヘテロ−もしくはホモダイマー又はマルチマーとして入手可能である。いくつかの融合タンパク質の例は、成熟骨誘導性ポリペプチドとヒト免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）のＦｃ部分間のリガンド融合などであるが、これに限定されない。融合タンパク質及びそれをコードする構築物の製造法は当該技術分野で周知である。
【０２０２】
[00179]一部の態様において、オキシステロール治療薬誘導体は、治療薬として、骨形成タンパク質（“ＢＭＰ”）のファミリーの一つ又は複数のメンバーである骨誘導因子を含む。ＢＭＰは、内因性骨組織に対して骨誘導又は成長促進活性を有する、又はプロコラーゲン前駆体として機能すると考えられているタンパク質のクラスである。ＢＭＰファミリーの公知メンバーは、ＢＭＰ−１、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−３、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−７、ＢＭＰ−８、ＢＭＰ−９、ＢＭＰ−１０、ＢＭＰ−１１、ＢＭＰ−１２、ＢＭＰ−１３、ＢＭＰ−１５、ＢＭＰ−１６、ＢＭＰ−１７、ＢＭＰ−１８、ならびにそれらのポリヌクレオチド又はポリペプチドのほか、成熟ポリペプチド又はそれをコードするポリヌクレオチドなどであるが、これらに限定されない。
【０２０３】
[00180]骨誘導因子として利用されるＢＭＰは、ＢＭＰ−１；ＢＭＰ−２；ＢＭＰ−３；ＢＭＰ−４；ＢＭＰ−５；ＢＭＰ−６；ＢＭＰ−７；ＢＭＰ−８；ＢＭＰ−９；ＢＭＰ−１０；ＢＭＰ−１１；ＢＭＰ−１２；ＢＭＰ−１３；ＢＭＰ−１５；ＢＭＰ−１６；ＢＭＰ−１７；又はＢＭＰ−１８；ならびにこれらのＢＭＰの一つ又は複数の任意の組合せ（全長ＢＭＰ又はそのフラグメント、又はそれらの組合せも含めて、ポリペプチド又は上記すべてのＢＭＰのポリペプチドフラグメントをコードするポリヌクレオチドのいずれかとして）の一つ又は複数を含む。ＢＭＰ骨誘導因子は、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、全長タンパク質又はそれらの組合せとして投与できる。ＢＭＰタンパク質の一部又はすべてはオキシステロールに結合できるので、オキシステロールに更なる骨誘導性が付与される。
【０２０４】
[00181]別の態様において、治療薬は、破骨細胞による移植部位周辺の骨組織の骨吸収を阻害するための破骨細胞形成阻害薬を含む骨誘導因子である。破骨細胞及び破骨細胞形成阻害薬は、オステオプロテゲリンポリヌクレオチド又はポリペプチドのほか、成熟オステオプロテゲリンタンパク質、ポリペプチド又はそれをコードするポリヌクレオチドなどであるが、これらに限定されない。オステオプロテゲリンは、ＴＮＦ受容体スーパーファミリーのメンバーで、骨吸収の負の調節因子として機能する骨芽細胞分泌デコイ受容体である。このタンパク質は、そのリガンド、すなわちオステオプロテゲリンリガンド（ＴＮＦＳＦ１１／ＯＰＧＬ）に特異的に結合する。そのいずれも、破骨細胞発生の主要な細胞外調節因子である。
【０２０５】
[00182]図９に示されている別の態様において、Ｃ３位を保護されている中間ジオール誘導体の合成法は、以下に示されているように、プレグネノロンのＣ２０位におけるアルキル化を促進するために、プレグネノロン誘導体、例えば、プレグネノロンエーテル、エステル又はカルバメートと、有機金属試薬との反応を含む。
【０２０６】
【化３６】
2018199670.tif 000037
【０２０７】
[00183]式中、Ｒ１は、少なくとも１個の炭素を有する脂肪族又は環状置換基でありうる。他の態様において、Ｒ１は、（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル又はヘテロアルキル、（Ｃ２−Ｃ２０）アリール又はヘテロアリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アリールアルキル又はヘテロアルキル及び（Ｃ５−Ｃ２０）アリールアルキル又はヘテロアリール−ヘテロアルキル、（Ｃ４−Ｃ１０）アルキルジイル又はヘテロアルキルジイル、又は（Ｃ４−Ｃ１０）アルキレノ又はヘテロアルキレノ又はカルバメート又はベンジル又はシリルでありうる。一部の態様において、Ｒ１は、メチル、エチル又はシリル基でありうる。他の態様において、Ｃ３保護プレグネノロンをヘキシルＭｇＣｌと反応させた後、Ｃ２０にヘキシル基が導入され、式IIaを有するジオール誘導体が得られる。しかしながら、一部の態様において、保護ジオールのＣ２０位にｎ−ヘキシル基が存在する場合、Ｒ１はｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）ではあり得ない。Ｃ２０にヘキシル部分を有する式IIaのジオール誘導体を生物活性について試験した。思いがけないことに、式IIaのジオール誘導体は、Ｃ２０位の側鎖がペンチル基以下のジオール誘導体よりも高い生物活性を示した。理論に拘束されるわけではないが、式IIaのジオール誘導体の向上した生物活性は、式IIaの構造がＣ２０にヘキシル側鎖を有する天然コレステロールの構造に類似しているためである可能性はある。前述のように、Ｃ３保護ジオール誘導体が形成されたら、それをヒドロホウ素化−酸化に付し、式IIIa：
【０２０８】
【化３７】
2018199670.tif 000038
【０２０９】
のＣ３保護ＯＸＹ１３３誘導体を得る。
[00184]様々な態様において、式IIIaのＣ３保護ＯＸＹ１３３誘導体を、ビスホスホネート又はビスホスホネート部分、抗生物質又は抗生物質部分、タンパク質又はタンパク質フラグメントを含む治療薬と反応させると、式IVa：
【０２１０】
【化３８】
2018199670.tif 000039
【０２１１】
のＣ３保護置換オキシステロールを提供することができる。
[00185]形成されたら、Ｃ３保護ＯＸＹ１３３治療薬誘導体は、当業者に公知の古典的な化学の方法を使用してＣ３を脱保護できる。例えば、Ｃ３の保護基がシリルの場合、それを脱保護するために、フッ化物源、例えばテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオリド（ＴＢＡＦ）又はＨＦピリジン錯体が使用できる。他の側面において、Ｃ３の保護基がメチル又は別の直鎖アルキルの場合、ヨウ素源、例えばトリメチルシリルヨージド（ＣＨ３）３ＳｉＩ、ヨードトリメチルシラン（ＴＭＳＩ）が使用できる。さらに他の側面において、Ｃ３の保護基に応じて他の適切な脱保護法も使用できる。式IVaのＣ３保護置換オキシステロールを脱保護すると、ＯＸＹ１３３治療薬誘導体又は類似体が形成され、図９に式IVc：
【０２１２】
【化３９】
2018199670.tif 000040
【０２１３】
として示されている。
[00186]一定の態様において、ビスホスホネート又はビスホスホネート部分、抗生物質又は抗生物質部分、タンパク質又はそのフラグメントなどの骨特異的送達剤は、図１０でＬとして示されている加水分解可能なリンカー結合を介して、Ｃ３保護ＯＸＹ１３３分子に結合させることができる。さらに図１０を参照すると、式IIIaのＣ３保護ＯＸＹ１３３誘導体は、図９に示された態様に関連して上に記載したようにして合成される。式IIIaを、リンカーＬを提供できる化合物と反応させ、次いでビスホスホネート部分、抗生物質部分、又はタンパク質フラグメントから選ばれる治療薬Ｒ４と反応させる。脱保護後、図１０に示されているように、式VIIIaの化合物が得られる。
【０２１４】
【化４０】
2018199670.tif 000041
【０２１５】
[00187]他の態様において、これらの骨特異的送達剤のためのリンカー連結は、コハク酸系リンカー、アスパラギン酸系リンカー及び／又はカルバミン酸系リンカーなどであるが、これらに限定されない。一態様において、図１０にも示されている通り、リンカーはコハク酸をベースにしたものであり、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣＩ）の存在下、無水コハク酸との反応により、エステル結合を介して提供される。その後の治療薬との反応により、Ｃ３保護ＯＸＹ１３３治療薬類似体のリンカーへのＲ４の連結が得られる。脱保護工程の後、図１０に示されているように、式IXaの生成物が得られる。
【０２１６】
【化４１】
2018199670.tif 000042
【０２１７】
式中、Ｒ４は、ビスホスホネート部分、抗生物質部分、又はタンパク質フラグメントから選ばれる治療薬である。
[00188]様々な側面において、ビスホスホネート部分、抗生物質部分又はタンパク質フラグメントは、加水分解可能なリンカー結合を介して薬物分子に連結することができる。薬物分子が、ビスホスホネート部分、抗生物質部分又はタンパク質フラグメントへの結合後も薬理活性を保持している場合、非加水分解性結合も使用できる。エステル基は、より不安定なチオエステル及びより安定なアミドと比較して好適な安定性の範囲にあるので、使用できる（Ｌ．Ｇｉｌら，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９９，７，９０１−９１９）。エステル基のインビボ安定性は、エステル基に隣接して配置された置換によってさらに微調整できる（Ｔ．Ｃ．Ｂｒｕｉｃｅら，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，Ｖｏｌ．１，Ｗ．Ａ．Ｂｅｎｊａｍｉｎ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９６６，１−２５８）。一部の態様において、Ｃ３保護ＯＸＹ１３３−治療薬誘導体は、全身投与（経口、腹腔内、又は静脈内）に適しうる。その場合、骨組織への選択的沈着と、その後のリンカーの酵素的加水分解による骨原性物質ＯＸＹ１３３及びビスホスホネート、抗生物質、タンパク質又はそのフラグメントの、標的組織への制御された速度での放出を伴う。ビスホスホネート部分、抗生物質部分又はタンパク質フラグメントの部分Ｒ４をＣ３保護ＯＸＹ１３３のＣ６位にそのように連結することによるＣ３保護ＯＸＹ１３３−ビスホスホネート部分、ＯＸＹ１３３−抗生物質部分、又はＯＸＹ１３３−タンパク質フラグメントの複合体又は誘導体の形成は、以下に示すように、無水コハク酸へのエステル結合を介した直接的なカップリングにより達成できる。
【０２１８】
【化４２】
2018199670.tif 000043
【０２１９】
式中、Ｒ１は上記定義の通りであり、Ｒ４は、ビスホスホネート部分、抗生物質部分、又はタンパク質フラグメントの部分である。
[00189]他の態様においてＣ３保護ＯＸＹ１３３との結合に有用なリンカーＬは、以下に示すようなアスパラギン酸系リンカー、コハク酸系リンカー又はウレタン系リンカーなどであるが、これらに限定されない。
【０２２０】
【化４３】
2018199670.tif 000044
【０２２１】
[00190]図１１に示されている別の側面において、式IIIaのＣ３保護ＯＸＹ１３３誘導体は、図９及び１０に示された態様に関連して上に記載したようにヒドロホウ素化／酸化によって合成される。図１１では、式IIIaのＣ３保護ＯＸＹ１３３誘導体の前駆体は、Ｃ２０にヘキシル側鎖基を有するＣ３保護ジオール誘導体（式IIaに相当する）と、式Ibのプレグネノロン（塩基の存在下、Ｒ１Ｘのようなハロゲン化アルキル及びｎ−ヘキシルマグネシウムクロリドに相当する有機金属グリニャール試薬による処理に付される）である。コハク酸系リンカーは、Ｃ３保護ＯＸＹ１３３のＣ６位に、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣＩ）の存在下、無水コハク酸へのエステル結合を介したカップリングにより連結できる。ＥＤＣＩは、一般的に、第一アミン（例えば式Ｖのテトラサイクリン部分）をカップリングしてアミド結合を得るためのカルボキシル活性化剤として使用される。式Ｖ：
【０２２２】
【化４４】
2018199670.tif 000045
【０２２３】
に相当するテトラサイクリンフラグメントは、次いで、Ｃ３保護ＯＸＹ１３３誘導体のコハク酸系リンカーにカップリングできる。保護基Ｒ１は、図９及び１０に示された態様に関連して上に記載したように標準的な脱保護によって除去され、ＯＸＹ１４９を得ることができる。これは、式VI：
【０２２４】
【化４５】
2018199670.tif 000046
【０２２５】
に相当する構造を有する。
[00191]図１２は本願のさらに別の態様を示している。図１２で、式Ia：
【０２２６】
【化４６】
2018199670.tif 000047
【０２２７】
に相当する出発原料のプレグネノロンメチルエーテルによって提供されているように、Ｃ３のＯＨ基はメチル基で保護されている。
[00192]ＯＸＹ１４９メチルエーテルを形成させるための残りの工程は、図１１に示されたＯＸＹ１４９の合成に関連して記載したのと同じ工程に従う。ＯＸＹ１４９メチルエーテルは、Ｃ３のＯＨがエーテルのメチル基によって保護されている式VIaに相当する。
【０２２８】
【化４７】
2018199670.tif 000048
【０２２９】
[00193]図１３は、オキシステロール誘導体合成の別の態様である。ここでは、オキシステロールを、式Vb：
【０２３０】
【化４８】
2018199670.tif 000049
【０２３１】
のアレンドロネートと反応させる。
得られた中間体を脱保護して、式VIc：
【０２３２】
【化４９】
2018199670.tif 000050
【０２３３】
のオキシステロール誘導体を得る。図１３に示された合成は、式IIIaのＣ３保護ＯＸＹ１３３を無水コハク酸及びＥＤＣＩと反応させた後、得られた中間体を式Vbのアレンドロネートと反応させて、脱保護後、式VIcのオキシステロール誘導体を得るということ以外は、図１１に示されたオキシステロール誘導体の合成と類似している。
【０２３４】
[00194]図１４は、オキシステロール誘導体合成のさらに別の態様である。ここでは、オキシステロールを、式Vcのタンパク質（ＢＭＰ−２）に連結し、脱保護して、式VId：
【０２３５】
【化５０】
2018199670.tif 000051
【０２３６】
のオキシステロール誘導体を得る。
図１４に示された合成は、式IIIaのＣ３保護ＯＸＹ１３３を無水コハク酸及びＥＤＣＩと反応させた後、得られた中間体を式Vcのタンパク質ＢＭＰ−２と反応させて、脱保護後、式VIdのオキシステロール誘導体を得るということ以外は、図１１に示されたオキシステロール誘導体の合成と類似している。
【０２３７】
オキシステロール−治療薬誘導体又は類似体の使用
[00195]オキシステロールはコレステロールの誘導体で、細胞アポトーシス及びコレステロール恒常性を含む一定範囲の活性を有することが示されている。骨誘導性オキシステロールの群は、インビトロで間葉幹細胞分化を刺激し、インビボで骨形成を誘導し、脊椎固定を支持することが確認されている。オキシステロールは、ヘッジホッグシグナル伝達経路の活性化を通じて骨形成に影響を及ぼすと考えられている。
【０２３８】
[00196]使用時、ＯＸＹ１３３は骨状態に対する治療を提供する。ＯＸＹ１３３は、骨形成、骨芽細胞分化、骨形態形成及び／又は骨増殖を促進する。治療は、開放骨折及び癒着不能のリスクの高い骨折を治療するために投与でき、そしてまた脊椎障害のある対象にも投与できる。すなわち、ＯＸＹ１３３は、脊椎固定を誘導でき、変性円板疾患や腰椎又は頸椎を冒す関節炎の治療に役立ちうる。
【０２３９】
[00197]ＯＸＹ１３３で処置された間葉幹細胞は、骨芽細胞分化を増大することが示されている。従って、一部の態様において、ＯＸＹ１３３を間葉幹細胞と共に脊椎部位に移植すると、骨芽細胞分化を通じて骨成長を誘導できる。骨膜組織は、通常の骨折修復過程の早期に関与する一つの組織タイプであり、様々な細胞タイプ（例えば間葉幹細胞）及び骨折修復に必要な骨成長因子を動員できる。従って、一部の態様において、骨膜組織は、脱灰骨組成物中の間葉幹細胞及び／又は成長因子の供給源として利用される。
【０２４０】
[00198]組換え的に製造された天然ヒトタンパク質、例えばｒｈＢＭＰ-２及びｒｈＰＤＧＦは、新生骨形成を誘導又は増強するそれらの能力について数十年間にわたり研究されている。これらのタンパク質は骨治癒の支持に有効であるが、製造の複雑さ及び関連コストに関して欠点がある。これらの欠点に対処する一つの方法は、骨治癒を刺激又は増強する骨シグナル伝達経路の一部を調節する小分子を同定することである。例を挙げると、骨誘導性オキシステロール及びビスホスホネート、抗生物質、タンパク質、それらの部分又はフラグメントを含む治療薬である。
【０２４１】
[00199]一部の態様において、ＯＸＹ１３３−治療薬誘導体は、患者の手術部位に直接移植又は注入できる。一部の態様において、上で詳細に説明した方法から得られたＯＸＹ１３３−治療薬誘導体はデポーの形態である。様々な態様において、複数のデポー（例えばペレット）が手術部位に投与できる。一部の態様において、複数のデポーが用意され（例えばキットで）、手術部位に投与されて、骨成長に必要な部位を三角形に包囲する(triangulate)及び／又は取り囲む。様々な態様において、複数のデポーは、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個のデポーを含む。一部の態様においては、ガラス転移温度を下げて、デバイスの安定性に影響を及ぼすために、可塑剤が使用される。
【０２４２】
[00200]様々な態様において、デポーは、ＯＸＹ１３３−治療薬誘導体及び生分解性ポリマーを非晶質形、結晶形又は半結晶形で含み、結晶形は、多形、溶媒和物又は水和物を含みうる。
【０２４３】
[00201]一部の態様において、ＯＸＹ１３３−治療薬誘導体は、固体又は半固体形のデバイスで投与される。固体又は半固体形のデバイスは、約１〜約２０００センチポアズ（ｃｐｓ）、１〜約２００ｃｐｓ、又は１〜約１００ｃｐｓの予め付与された(predosed)粘度を有しうる。固体又は半固体のデバイスが標的部位に投与された後、半固体又は固体デポーの粘度は増大し、半固体は、約１×１０２〜約６×１０５ダイン／ｃｍ２、又は２×１０４〜約５×１０５ダイン／ｃｍ２、又は５×１０４〜約５×１０５ダイン／ｃｍ２の範囲の弾性率を有する。
【０２４４】
[00202]様々な態様において、半固体又は固体デポーは、約０．１０ｄＬ／ｇ〜約１．２ｄＬ／ｇ又は約０．２０ｄＬ／ｇ〜約０．５０ｄＬ／ｇの固有粘度によって示されるような分子量（ＭＷ）を有するポリマーを含みうる。その他の固有粘度範囲は、約０．０５〜約０．１５ｄＬ／ｇ、約０．１０〜約０．２０ｄＬ／ｇ、約０．１５〜約０．２５ｄＬ／ｇ、約０．２０〜約０．３０ｄＬ／ｇ、約０．２５〜約０．３５ｄＬ／ｇ、約０．３０〜約０．３５ｄＬ／ｇ、約０．３５〜約０．４５ｄＬ／ｇ、約０．４０〜約０．４５ｄＬ／ｇ、約０．４５〜約０．５５ｄＬ／ｇ、約０．５０〜約０．７０ｄＬ／ｇ、約０．５５〜約０．６ｄＬ／ｇ、約０．６０〜約０．８０ｄＬ／ｇ、約０．７０〜約０．９０ｄＬ／ｇ、約０．８０〜約１．００ｄＬ／ｇ、約０．９０〜約１．１０ｄＬ／ｇ、約１．０〜約１．２ｄＬ／ｇ、約１．１〜約１．３ｄＬ／ｇ、約１．２〜約１．４ｄＬ／ｇ、約１．３〜約１．５ｄＬ／ｇ、約１．４〜約１．６ｄＬ／ｇ、約１．５〜約１．７ｄＬ／ｇ、約１．６〜約１．８ｄＬ／ｇ、約１．７〜約１．９ｄＬ／ｇ、又は約１．８〜約２．１ｄＬ／ｇなどであるが、これらに限定されない。
【０２４５】
[00203]一部の態様において、デポーは完全に生分解性でなくてもよい。例えば、デバイスは、ポリウレタン、ポリ尿素、ポリエーテル（アミド）、ＰＥＢＡ、熱可塑性エラストマー性オレフィン、コポリエステル、及びスチレン性熱可塑性エラストマー、スチール、アルミニウム、ステンレススチール、チタン、金属合金（非鉄金属含量が高く鉄の相対割合が低い）、炭素デバイス、ガラスデバイス、プラスチック、セラミック、メタクリレート、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）、ＰＥＯ−ＰＰＯ−ＰＥＯ（プルロニック）又はそれらの組合せを含みうる。典型的には、このような種類のマトリックスは、一定量の時間の後、除去する必要がありうる。
【０２４６】
[00204]様々な態様において、デポー（例えばデバイス）は、ＯＸＹ１３３−治療薬誘導体の即時放出、又は持続放出を提供できる生体浸食性、生体吸収性、及び／又は生分解性バイオポリマーを含みうる。適切な持続放出バイオポリマーの例は、ポリ（アルファ−ヒドロキシ酸）、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリグリコリド（ＰＧ）、ポリ（アルファ−ヒドロキシ酸）のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）複合体、ポリオルトエステル（ＰＯＥ）、ポリ（エステルアミド）、ポリアスピリン、ポリホスファゲン、デンプン、アルファー化デンプン、ヒアルロン酸、キトサン、ゼラチン、アルギネート、アルブミン、フィブリン、ビタミンＥ化合物、例えばアルファートコフェリルアセテート、ｄ−アルファートコフェリルスクシネート、Ｄ，Ｌ−ラクチド、又はＬ−ラクチド−カプロラクトン、デキストラン、ビニルピロリドン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ＰＶＡ−ｇ−ＰＬＧＡ、ＰＥＧＴ−ＰＢＴコポリマー（多活性）、ＰＥＯ−ＰＰＯ−ＰＡＡコポリマー、ＰＬＧＡ−ＰＥＯ−ＰＬＧＡ、ＰＥＧ−ＰＬＧ、ＰＬＡ−ＰＬＧＡ、ポロキサマー４０７、ＰＥＧ−ＰＬＧＡ−ＰＥＧトリブロックコポリマー、ＳＡＩＢ（スクロース・アセテート・イソブチレート）又はそれらの組合せなどであるが、これらに限定されない。
【０２４７】
[00205]一部の態様において、デポーは、少なくとも一つの生分解性ポリマーを含み、その少なくとも一つの生分解性ポリマーは、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリグリコリド（ＰＧＡ）、Ｄ−ラクチド、Ｄ，Ｌ−ラクチド、Ｌ−ラクチド、Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ−ε−カプロラクトン、Ｌ−ラクチド−コ−ε−カプロラクトン、Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド−コ−ε−カプロラクトン、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ−カプロラクトン）、ポリ（Ｌ−ラクチド−コ−カプロラクトン）、ポリ（Ｄ−ラクチド−コ−カプロラクトン）、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）、ポリ（Ｄ−ラクチド）、ポリ（Ｌ−ラクチド）、ポリ（エステルアミド）又はそれらの組合せの一つ又は複数を含む。
【０２４８】
[00206]一部の態様において、デポーは、デポーの全重量を基にして、ｗｔ％で約９９．５％、９９％、９８％、９７％、９６％、９５％、９４％、９３％、９２％、９１％、９０％、８９％、８８％、８７％、８６％、８５％、８４％、８３％、８２％、８１％、８０％、７９％、７８％、７６％、７５％、７４％、７３％、７２％、７１％、７０％、６５％、６０％、５５％、５０％、４５％、３５％、２５％、２０％、１５％、１０％、又は約５％の少なくとも一つの生分解性材料を含み、残りは活性及び／又は不活性の医薬成分である。
【０２４９】
[00207]マンニトール、トレハロース、デキストラン、ｍＰＥＧ及び／又はＰＥＧがポリマーの可塑剤として使用できる。一部の態様において、所望の放出プロフィールを提供するために、ポリマー及び／又は可塑剤をデポー上に被覆してもよい。一部の態様において、被覆厚は、例えば約５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、又は５０ミクロンの薄さから、デポー（例えばデバイス）からのＯＸＹ１３３−治療薬誘導体、ステロール、又はジオールの放出を遅延させるために、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００ミクロンまでのより厚いコーティングでありうる。一部の態様において、デポー上のコーティングの範囲は、デバイスからの放出を遅延させるために、約５ミクロン〜約２５０ミクロン又は約５ミクロン〜約２００ミクロンの範囲である。
【０２５０】
[00208]デポー（例えばデバイス）は、様々なサイズ、形状及び構造(configuration)でありうる。デポーのサイズ、形状及び構造を決定する際、考慮されうるいくつかの要因がある。例えば、サイズ及び形状はどちらも、標的組織部位におけるデポーの容易な配置を可能にする。さらに、系の形状及びサイズは、移植後にデポーが動くのを最少化又は防止するように選ばれるべきである。様々な態様において、デポーは、ロッド様又はフィルムもしくはシートのような平面状（例えばリボン様）などに成形することができる。デバイスの留置を容易にするために柔軟性は考慮事項であろう。
【０２５１】
[00209]放射線マーカーをデバイスに含めることにより、使用者はデポー（例えばデバイス）を患者の標的部位に正確に配置することが可能になる。これらの放射線マーカーは、使用者が部位におけるデポーの移動及び分解を経時的に追跡することも可能にする。この態様において、使用者は、多数の画像診断法のいずれかを使用して、デポー（例えばデバイス）を部位に正確に配置できる。そのような画像診断法は、例えばＸ線イメージング又は蛍光透視法などである。そのような放射線マーカーの例は、バリウム、ホスフェート、ビスマス、ヨウ素、タンタル、タングステン、及び／又は金属ビーズもしくは粒子などであるが、これらに限定されない。様々な態様において、放射線マーカーは、球状であるか又はデポー（例えばデバイス）を囲むリングでありうる。
【０２５２】
[00210]一部の態様において、ＯＸＹ１３３−治療薬誘導体は、送達デバイス（例えば、注射器、銃式送達デバイス、又はＯＸＹ１３３、ステロール、もしくはジオールを標的器官又は解剖学的領域に適用するのに適切な任意の医療デバイス）の一部でありうる“カニューレ”又は“針”を用いて標的部位に投与できる。デバイスのカニューレ又は針は、患者への身体的及び精神的外傷を最小限にするように設計されている。
【０２５３】
[00211]一部の態様において、デポーは、縫合針を用いて標的組織部位に縫合できる。針の寸法は、とりわけ移植部位に依存する。例えば、様々な手術（外科的処置）における筋肉面の幅は、１〜４０ｃｍで変動しうる。従って、針は、様々な態様において、これらの特定領域に合わせて設計できる。
【０２５４】
[00212]本開示の態様は、治療上有効量の開示化合物（本明細書中に定義の通り）と薬学的に許容可能な担体又は希釈剤とを用いて製造された医薬組成物として有用である。開示化合物は医薬組成物として製剤化でき、治療を必要としている対象、例えばヒト患者などの哺乳動物に、選択された投与経路（例えば、経口、鼻腔内、腹腔内、又は非経口的に、静脈内、筋肉内、局所もしくは皮下経路により、又は組織への注射により）に適合した様々な形態で投与できる。
【０２５５】
[00213]従って、本開示の化合物は、薬学的に許容可能なビヒクル、例えば不活性希釈剤又は吸収（同化）可能な食用担体と組み合わせて経口的に、又は吸入もしくは吹送により、全身投与できる。それらは、硬質又は軟質ゼラチンカプセルに封入することも、圧縮して錠剤にすることも、又は患者の食事の食品に直接配合することもできる。経口治療投与の場合、化合物は、１種又は複数腫の賦形剤と組み合わせ、摂取可能な錠剤、バッカル錠、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ、ウェハースなどの形態で使用できる。化合物は不活性の粉末担体と組み合わせて、対象に吸入させるか又は吹送してもよい。そのような組成物及び製剤は、少なくとも０．１％の本開示の態様の化合物を含有すべきである。組成物及び製剤のパーセンテージは当然ながら変動し得、所与の単位剤形の重量の約２％〜約６０％でありうる。そのような治療上有用な組成物中の化合物の量は、有効な用量レベルが得られるような量である。
【０２５６】
[00214]錠剤、トローチ、ピル、カプセルなどは下記のものも含有しうる。すなわち、結合剤、例えばトラガカントガム、アカシア、コーンスターチ又はゼラチン；賦形剤、例えばリン酸二カルシウム；崩壊剤、例えばコーンスターチ、ジャガイモデンプン、アルギン酸など；滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム；及び甘味剤、例えばスクロース、フルクトース、ラクトースもしくはアスパルテーム、又はフレーバー、例えばペパーミント、ウィンターグリーン油、もしくはチェリーフレーバーなどを加えてもよい。単位剤形がカプセルの場合、上記の種類の材料に加えて、液体担体、例えば植物油又はポリエチレングリコールを含有していてもよい。様々なその他の材料も、コーティングとして又は固体単位剤形の物理的形態を別様に変更するために存在してもよい。例えば、錠剤、ピル、又はカプセルは、ゼラチン、ワックス、セラック又は糖などでコーティングしてもよい。シロップ又はエリキシルは、活性化合物、甘味剤としてスクロース又はフルクトース、保存剤としてメチル及びプロピルパラベン、色素及びチェリー又はオレンジフレーバーなどのフレーバーを含有しうる。当然ながら、何らかの単位剤形の製造に使用されるあらゆる材料は、薬学的に許容可能で、使用される量において実質的に非毒性でなければならない。さらに、化合物は、徐放性製剤及びデバイスに組み込むこともできる。例えば、化合物は、持続放出カプセル、持続放出錠剤、持続放出ピル、及び持続放出ポリマー又はナノ粒子に組み込むこともできる。
【０２５７】
[00215]本開示に記載されている化合物は、点滴又は注射により、静脈内又は腹腔内又は皮下に投与することもできる。化合物の溶液は、任意に非毒性の界面活性剤を混合された水中に調製できる。分散液も、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、トリアセチン、及びそれらの混合物中、及び油中に調製できる。通常の貯蔵及び使用条件下で、これらの製剤は、微生物の増殖を防止するために保存剤を含有できる。
【０２５８】
[00216]注射又は点滴に適切な医薬剤形は、無菌の水溶液又は分散液、又は無菌の注射用又は点滴用の溶液又は分散液を即時調製するために適応された化合物を含む無菌粉末（任意にリポソーム中に封入されていてもよい）などでありうる。いずれの場合も、最終的な剤形は、無菌であり、流体であり、製造及び貯蔵の条件下で安定であるべきである。液体担体又はビヒクルは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコールなど）、植物油、非毒性のグリセリルエステル、及びそれらの適切な混合物を含む溶媒又は液体分散媒でありうる。適切な流動性は、例えば、リポソームの形成によって、分散液の場合は必要な粒径の維持によって又は界面活性剤の使用によって維持できる。微生物の作用の防止は、様々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどによってもたらすことができる。多くの場合、等張剤、例えば糖、緩衝液又は塩化ナトリウムを含めるのが好適である。注射用組成物の長期吸収は、吸収遅延剤、例えばモノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンの使用によってもたらすことができる。
【０２５９】
[00217]無菌の注射用溶液は、所要量の化合物を、適切な溶媒中に、必要に応じて上に列挙された様々なその他の成分と共に配合し、次いでろ過滅菌することによって製造される。無菌の注射用溶液を製造するための無菌粉末の場合、製造法は、真空乾燥及び凍結乾燥技術であり、これにより活性成分に何らかの追加の所望成分（事前に滅菌ろ過された溶液中に存在する）がプラスされた粉末が得られる。
【０２６０】
[00218]局所投与の場合、化合物は純粋形で適用されてもよい。しかしながら、皮膚科学的に許容可能な担体（固体でも又は液体でも）と組み合わせた組成物又は製剤として皮膚に投与するのが望ましいであろう。
【０２６１】
[00219]有用な固体担体は、微粉末固体、例えば、タルク、クレイ、微結晶性セルロース、シリカ、アルミナなどである。その他の固体担体は、非毒性のポリマー性ナノ粒子又はマイクロ粒子などである。有用な液体担体は、化合物が、任意に非毒性の界面活性剤の助けを借りて、有効なレベルで溶解又は分散できる水、アルコール又はグリコール又は水／アルコール／グリコールブレンドなどである。香料及び追加の抗菌剤などのアジュバントも、所与の用途のための性質を最適化するために加えてもよい。得られた液体組成物は、吸収パッド、含浸包帯(impregnated bandage)及びその他のドレッシング(dressing)によって適用できるか、又はポンプ式もしくはエアゾール噴霧器を用いて患部にスプレーできる。
【０２６２】
[00220]合成ポリマー、脂肪酸、脂肪酸塩及びエステル、脂肪アルコール、変性セルロース又は変性無機物質などの増粘剤も液体担体と共に用いて、使用者の皮膚に直接適用するための塗布可能なペースト、ゲル、軟膏、石けんなどを形成することができる。
【０２６３】
[00221]化合物を皮膚に送達するために使用できる有用な皮膚科学的組成物の例は当該技術分野で公知である。例えば、Ｊａｃｑｕｅｔら（米国特許第４，６０８，３９２号）、Ｇｅｒｉａ（米国特許第４，９９２，４７８号）、Ｓｍｉｔｈら（米国特許第４，５５９，１５７号）及びＷｏｒｔｚｍａｎ（米国特許第４，８２０，５０８号）参照。これらはすべて引用によって本明細書に援用する。
【０２６４】
[00222]本開示に記載された化合物の有用な用量は、それらのインビトロ活性、及び動物モデルにおけるインビボ活性を比較することによって決定できる。マウス及びその他の動物の有効量からヒトの用量を推定するための方法は当該技術分野で公知である。例えば米国特許第４，９３８，９４９号参照（引用によって本明細書に援用する）。
【０２６５】
[00223]例えば、ローションなどの液体組成物中の化合物の濃度は、約０．１〜約２５重量％、又は約０．５〜１０重量％でありうる。ゲル又は粉末などの半固体又は固体組成物中の濃度は、約０．１〜約５重量％、又は約０．５〜約２．５重量％でありうる。
【０２６６】
[00224]治療に使用するために必要な化合物の量は、選択された特定の塩だけでなく、投与経路、治療される状態の性質、患者の年齢及び状態によっても変動するので、最終的には担当医又は臨床医の判断に委ねられる。
【０２６７】
[00225]本開示のＯＸＹ１３３誘導体の有効な用量及び投与経路は従来通りである。薬剤の正確な量（有効量）は、例えば、対象の種、年齢、体重及び全身状態又は臨床状態、治療される何らかの障害の重症度又は機序、使用される特定の薬剤又はビヒクル、投与の方法及びスケジュールなどに応じて対象ごとに異なるであろう。治療上有効量は、当業者に公知の従来手順によって経験的に決めることができる。例えば、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｇｏｏｄｍａｎ及びＧｉｌｍａｎ編，Ｍａｃｍｉｌｌａｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，ニューヨーク参照。例えば、有効量は、最初は細胞培養アッセイか又は適切な動物モデルで推定することができる。動物モデルは、適切な濃度範囲及び投与経路の決定にも使用できる。次いで、そのような情報を用いて、ヒトへの投与のための有用な用量及び経路を決定することができる。治療用量は、比較可能な治療薬の用量に対する類似性によって選択することもできる。
【０２６８】
[00226]特定の投与様式及び投与計画は、担当医が症例の詳細（例えば、対象、疾患、関係する病状、及び治療が予防的であるかどうか）を考慮して選択する。治療は、数日間から数ヶ月間、又はさらには数年間にわたる化合物の毎日又は１日数回投与を必要としうる。
【０２６９】
[00227]しかしながら、一般に、適切な用量は、１日約０．００１〜約１００ｍｇ／ｋｇ、例えば約０．０１〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲、例えば、レシピエントの体重１キログラムあたり１日約０．１ｍｇより大、又は約１〜約１０ｍｇの範囲であろう。例えば、適切な用量は、１日約１ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、又は５０ｍｇ／ｋｇ体重でありうる。
【０２７０】
[00228]化合物は、例えば単位剤形あたり０．０５〜１００００ｍｇ、０．５〜１００００ｍｇ、５〜１０００ｍｇ又は約１００ｍｇの活性成分を含有する単位剤形で都合よく投与される。
【０２７１】
[00229]本開示に記載のＯＸＹ１３３−治療薬誘導体化合物は、例えば、約０．５〜約７５μＭ、約１〜５０μＭ、約２〜約３０μＭ、又は約５〜約２５μＭのピーク血漿中濃度を達成するために投与できる。例示的血漿中濃度は、少なくとも又はせいぜい０．２５、０．５、１、５、１０、２５、５０、７５、１００、又は２００μＭなどである。例えば、血漿中濃度は、約１〜１００マイクロモル又は約１０〜約２５マイクロモルでありうる。これは、例えば、化合物の０．０５〜５％溶液（任意に生理食塩水中）の静脈内注射、又は約１〜１００ｍｇの化合物を含有するボーラスの経口投与によって達成できる。望ましい血中濃度は、１時間あたり約０．００００５〜５ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、少なくとも又はせいぜい０．００００５、０．０００５、０．００５、０．０５、０．５、又は５ｍｇ／ｋｇ／時間を提供する連続点滴によって達成できる。あるいは、そのような濃度は、約０．０００２〜２０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、体重１ｋｇあたり少なくとも又はせいぜい０．０００２、０．００２、０．０２、０．２、２、２０、又は５０ｍｇの化合物を含有する間欠点滴によって得ることもできる。
【０２７２】
[00230]ＯＸＹ１３３−治療薬誘導体化合物は、１回量で又は適切な間隔で投与される分割量として、例えば１日１回又は１日２、３、４回もしくはそれ以上のサブ用量(sub-dose)として都合よく提供されうる。サブ用量自体はさらに、緩く間隔を空けたいくつかの別個の投与、例えば吸入器からの頻回吸入などに分割することもできる。
【０２７３】
[00231]本開示の一側面は、本明細書中に示されたＯＸＹ１３３−治療薬誘導体又はＯＸＹ１３３誘導体又はその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物と、薬学的に許容可能な担体とを含む生物活性組成物又は医薬組成物である。これらの生物活性又は医薬組成物は、本明細書においては、“医薬組成物”又は“開示の生物活性組成物”と呼ばれることもある。時に、“化合物の投与”という語句は、本明細書においては、このＯＸＹ１３３−治療薬誘導体化合物を対象に投与する（例えば、対象を化合物と接触させる）文脈中で使用される。そのように使用されるＯＸＹ１３３−治療薬誘導体化合物は、一般的に、ＯＸＹ１３３−治療薬誘導体化合物を含む医薬組成物又は生物活性組成物の形態でありうることは理解されるはずである。
【０２７４】
[00232]開示の別の側面は、例えば対象の細胞又は組織においてヘッジホッグ（Ｈｈ）経路媒介応答を誘導（刺激、増強）するための方法であり、該方法は、細胞又は組織を有効量（例えば治療上有効量）のオキシステロール−治療薬類似体又は誘導体と接触させることを含み、ヘッジホッグ（Ｈｈ）経路媒介応答は、骨芽細胞分化、骨の形態形成、及び／又は骨増殖の刺激である。Ｈｈ媒介応答は、再生医療に有用でありうる。
【０２７５】
[00233]開示の別の側面は、骨障害、骨減少症、骨粗鬆症、又は骨折を有する対象の治療法であり、該方法は、ＯＸＹ１３３−治療薬誘導体を含む有効量の生物活性組成物又は医薬組成物を対象に投与することを含む。対象は、例えば、骨量を増大させ、骨粗鬆症の症状を改善し、又は骨の形態形成及び／又は骨増殖の増大から利益を受けるであろうその他の状態を低減、排除、予防又は治療するために、生物活性組成物又は医薬組成物を、治療上有効な用量で、有効な剤形で、選択された間隔で投与されうる。対象は、骨粗鬆症の症状を改善するために生物活性組成物又は医薬組成物を、治療上有効な用量で、有効な剤形で、選択された間隔で投与されうる。一態様において、対象は、骨形成を誘導するために、哺乳動物の間葉幹細胞を採取し（例えば、対象から、又は適切な哺乳動物から、又は組織もしくは細胞バンクから）、その哺乳動物の間葉幹細胞を化合物で処理して細胞の骨芽細胞分化を誘導し、そしてその分化細胞を対象に投与することによって治療される。
【０２７６】
[00234]開示のいずれの方法においても、ＯＸＹ１３３−治療薬誘導体又はＯＸＹ１３３類似体は、細胞、組織又は器官に局所投与によって投与できる。例えば、ＯＸＹ１３３−治療薬誘導体はクリームなどで局所適用することも、又は細胞、組織もしくは器官に注射又は別の方法で直接導入することも、又は適切な医療デバイス（例えばインプラント）で導入することもできる。あるいは、化合物は、例えば、経口、静脈内（ＩＶ）、又は腹腔内（ｉｐ）注射もしくは皮下注射などの注射によって全身投与することもできる。
【０２７７】
[00235]開示の別の側面は、本明細書中に記載の方法の一つ又は複数を実施するためのキットである。キットは、有効量（例えば治療上有効量）の化合物を任意に容器中に含むことができる。
【０２７８】
[00236]開示の別の側面は、対象（例えばヒトなどの動物）の体内で使用するための、表面を有する基材を含むインプラントである。インプラントの表面又は内部は、周辺骨組織に骨形成を誘導するのに足る量のＯＸＹ１３３−治療薬誘導体を含む生物活性組成物又は医薬組成物を含む。
【０２７９】
[00237]本明細書中に示されている化合物のほかに、開示の他の態様は、式中に示されている任意の立体中心におけるありとあらゆる個別の立体異性体、例えばジアステレオマー、ラセミ体、エナンチオマー、及び化合物のその他の異性体も包含する。開示の態様において、化合物のすべての多形及び溶媒和物、例えば水和物及び有機溶媒と形成されるものも含まれる。そのような溶媒和物は、実質的に固定された溶質と溶媒のモル比を有する結晶性固体のこともある。適切な溶媒は当業者には公知であり、例えば水、エタノール又はジメチルスルホキシドである。そのような異性体、多形、及び溶媒和物は、当該技術分野で公知の方法、例えば、位置特異的及び／又はエナンチオ選択的合成及び分割によって製造できる。
【０２８０】
[00238]塩を作る能力はオキシステロール−治療薬誘導体の酸性度又は塩基性度に依存する。化合物の適切な塩は、酸付加塩、例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、過塩素酸、硫酸、硝酸、リン酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、炭酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクロヘキサンスルファミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、２−フェノキシ安息香酸、及び２−アセトキシ安息香酸を用いて製造される塩；サッカリンを用いて製造される塩；アルカリ金属塩、例えば、ナトリウム及びカリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えば、カルシウム及びマグネシウム塩；及び有機又は無機リガンドを用いて形成される塩、例えば第四級アンモニウム塩などであるが、これらに限定されない。
【０２８１】
[00239]更なる適切な塩は、本開示に記載の化合物の酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、炭酸水素塩、硫酸水素塩、酒石酸水素塩、ホウ酸塩、臭化物、エデト酸カルシウム、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストレート、エシレート、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イソチオネート(isothionate)、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチルブロミド、メチル硝酸塩、メチル硫酸塩、ムチン酸塩(mucate)、ナプシル酸塩、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミンアンモニウム塩、オレイン酸塩、パモ酸塩（エンボネート）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、硫酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、トリエチオジド及び吉草酸塩などであるが、これらに限定されない。本明細書において、化合物への言及は、その薬学的に許容可能な塩又は溶媒和物も含むことは理解されるはずである。
【０２８２】
[00240]特に対象の治療に使用する場合、開示のいずれの方法、組成物又はキットにおいても、開示の組成物は、任意に一つ又は複数のその他の適切な治療薬と組み合わせてもよい。特定の状態の治療に適切な任意の治療薬が使用できる。適切な薬剤又は薬物は当業者には明白であろう。例えば、骨障害の治療の場合、従来の治療薬が本開示の組成物と組み合わせて使用できる。いくつかのそのような薬剤は、例えば、副甲状腺ホルモン、フッ化ナトリウム、インスリン様成長因子Ｉ（ＩＬＧＦ−Ｉ）、インスリン様成長因子II（ＩＬＧＦ−II）、形質転換成長因子ベータ（ＴＧＦ−β）、シトクロムＰ４５０阻害薬、骨原性プロスタノイド、ＢＭＰ２、ＢＭＰ４、ＢＭＰ７、ＢＭＰ１４、及び／又はビスホスホネート又はその他の骨吸収阻害薬などである。
【０２８３】
[00241]一部の態様において、本開示の組成物又は化合物は医薬組成物として製剤化でき、該組成物は、本開示の組成物と薬学的に許容可能な担体とを含む。担体は、当然ながら、当業者には周知の通り、活性成分の何らかの分解を最小化するように、そして患者における何らかの有害副作用を最小化するように選ばれる。医薬組成物の薬学的に許容可能な担体及びその他の成分の検討については、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１８版，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０参照。いくつかの適切な薬学的担体は、当業者には明白であるが、例えば、水（無菌水及び／又は脱イオン水を含む）、適切な緩衝液（例えばＰＢＳ）、生理食塩水、細胞培地（例えばＤＭＥＭ）、人工脳脊髄液、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などである。
【０２８４】
[00242]当業者であれば、開示の特定の製剤は、少なくとも一部は、使用される特定の薬剤又は薬剤の組合せ及び選択された投与経路に依存することは分かるであろう。従って、本開示の組成物の適切な製剤には幅広いバリエーションがある。いくつかの代表的製剤を以下で解説するが、その他は当業者には明白であろう。化合物は、治療を必要としている細胞、組織又は器官に局所的に又は直接的に投与できる。あるいは全身的に投与することもできる。
【０２８５】
[00243]経口投与に適切な製剤又は組成物は、有効量の化合物が水、生理食塩水、又はフルーツジュースなどの希釈剤中に溶解された液体溶液；予め決められた量の活性成分を固体、顆粒又は凍結乾燥細胞として含有するカプセル、サシェ又は錠剤；水性液体中の溶液又は懸濁液；及び油中水型エマルション又は水中油型エマルションを含みうる。錠剤形は、ラクトース、マンニトール、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、微結晶性セルロース、アカシア、ゼラチン、コロイド状二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、及びその他の賦形剤、着色剤、希釈剤、緩衝剤、湿潤剤、保存剤、フレーバー、及び薬理学的に適合可能な担体の一つ又は複数を含みうる。適切な経口送達用製剤は、本開示の薬剤が消化管内で分解するのを防止するために、合成及び天然ポリマー性マイクロスフェア又はその他の手段に組み込むこともできる。
【０２８６】
[00244]非経口投与（例えば静脈内）に適切な製剤は、水性及び非水性の等張無菌注射溶液（抗酸化剤、緩衝液、静菌薬、及び製剤を対象レシピエントの血液と等張にする溶質を含有しうる）、及び水性及び非水性の無菌懸濁液（懸濁化剤、可溶化剤、増粘剤、安定剤、及び保存剤を含みうる）などである。製剤は、単位用量又は複数回用量用の密封容器（例えばアンプル及びバイアル）中に提供でき、使用直前に無菌の液体担体（例えば注射用水）を添加するだけの凍結乾燥条件下で貯蔵できる。即時注射用の溶液及び懸濁液は、前述の種類の無菌の粉末、顆粒、及び錠剤から調製できる。
【０２８７】
[00245]ＯＸＹ１３３−治療薬誘導体を含む化合物は、単独で又はその他の治療薬と組み合わせて、吸入投与のためのエアゾール製剤にすることもできる。これらのエアゾール製剤は、加圧された許容可能な推進剤、例えばジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素などの中に入れることができる。
【０２８８】
[00246]局所投与用の適切な製剤は、ロゼンジ（活性成分をフレーバー、通常はスクロース及びアカシア又はトラガカント中に含む）；芳香錠(pastille)（活性成分を不活性基剤、例えばゼラチン及びグリセリン、又はスクロース及びアカシア中に含む）；洗口液（活性成分を適切な液体担体中に含む）；又はクリーム、エマルション、懸濁液、溶液、ゲル、ペースト、泡沫、滑沢剤、スプレー、坐剤などである。
【０２８９】
[00247]その他の適切な製剤は、例えば、化合物の持続放出に適切なヒドロゲル及びポリマー、又は化合物の小用量送達のためのナノ粒子などである。
[00248]当業者であれば、当面の特定用途に基づいて、適切又は適当な製剤を選択、適応又は開発できることは分かるであろう。さらに、本開示の医薬組成物は、全身投与であれ、局所投与であれ又はその両方であれ、様々に異なる経路による投与用に製造することができる。そのような例は、直接注射、カテーテル又はその他の医療デバイスを用いた導入、局所適用、直接適用により、及び／又は動脈もしくはその他の適切な組織部位へのデバイスの移植により、関節内、頭蓋内、皮内、肝内、筋肉内、眼内、腹腔内、髄腔内、静脈内、皮下、経皮、又は骨領域、アテローム性動脈硬化部位に直接実施される投与などであるが、これらに限定されない。
【０２９０】
[00249]化合物は、外科又は医療デバイス又はインプラント内に含有されるように、又はそれからの放出に適合するように製剤化することもできる。一定の側面において、インプラントは化合物で被覆されるか又は別の方法で処理されてもよい。例えば、本開示の組成物でインプラントを被覆するために、ヒドロゲル、又はその他のポリマー（例えば生体適合性及び／又は生分解性ポリマー）を使用することができる（例えば、ヒドロゲル又はその他のポリマーを使用することにより、組成物を医療デバイスで使用するために適応させることができる）。医療デバイスを薬剤で被覆するためのポリマー及びコポリマーは当該技術分野で周知である。医療デバイス及びインプラントの例は、縫合糸及び人工関節などのプロテーゼ（これらに限定されない）などで、例えば、ピン、スクリュー、プレート又は人工関節の形状でありうる。
【０２９１】
[00250]開示の一部の態様において、化合物は、様々な慣用アッセイのいずれかによる測定で、治療応答を、未処理の対照サンプルのそれよりも約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、１５０％、２００％、又はそれより多く刺激又は阻害することができる。これらの範囲の中間値も含まれる。
【０２９２】
[00251]化合物の用量は錠剤又はカプセルなどの単位剤形に含まれうる。“単位剤形”という用語は、本明細書においては、動物（例えばヒト）対象への単位用量として適切な、物理的に別個の単位のことを言い、各単位は、所望効果をもたらすために十分な量と算出された予め決められた量の開示薬剤を単独で又は他の治療薬と組み合わせて、薬学的に許容可能な希釈剤、担体、又はビヒクルも共に含有する。
【０２９３】
[00252]当業者であれば、個別患者における薬剤の所望効果量又は有効濃度を達成するために、使用される組成物の正確な製剤の適切な用量、スケジュール及び投与法を日常的に決定することができる。また、当業者は、化合物の“有効濃度”の適切な指標を、疾患、障害、又は状態の適切な臨床症状の分析だけでなく、適切な患者サンプル（例えば血液及び／又は組織）の直接又は間接分析により、容易に決定及び使用することもできる。
【０２９４】
[00253]ヒトなどの動物に投与される化合物又はその組成物の正確な用量は、本開示の文脈においては、対象の種、年齢、体重、及び全身状態、治療される何らかの障害の重症度又は機序、使用される特定の薬剤又はビヒクル、その投与様式、患者が受けているその他の投薬、及び特定の患者に対する個別の投与計画及び用量レベルを決定する場合に担当医が通常考慮するその他の要因などに応じて対象ごとに異なるであろう。インビボで所望濃度を達成するために使用される用量は、化合物の形態の効力、宿主における化合物関連の薬力学、追加薬剤の有無、罹患個人の病状の重症度、ならびに全身投与の場合、個人の体重及び年齢によって決定される。用量サイズは、使用される特定の薬剤、又はその組成物に随伴しうる何らかの有害副作用の存在によって決定されることもある。有害副作用は、可能な限り常に最小限に維持するのが一般的に望ましい。
【０２９５】
[00254]例えば、用量は、約５ｎｇ（ナノグラム）〜約１０００ｍｇ（ミリグラム）、又は約１００ｎｇ〜約６００ｍｇ、又は約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、又は約２０ｍｇ〜約４００ｍｇの範囲で投与できる。例えば、用量は、体重に対する用量比約０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜約１５００ｍｇ／ｋｇ、又は約１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇ、又は約５ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、又は約２０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇを達成するように選ぶことができる。例えば、用量単位は、約１ｎｇ〜約５０００ｍｇ、又は約５ｎｇ〜約１０００ｍｇ、又は約１００ｎｇ〜約６００ｍｇ、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、又は約２０ｍｇ〜約４００ｍｇ、又は約４０ｍｇ〜約２００ｍｇの化合物又は化合物を含む組成物の範囲でありうる。開示の一態様において、本開示において記載されている化合物の量（例えば数グラム）は、例えば脊椎固定術において足場の一部として局所投与される。
【０２９６】
[00255]オキシステロール−治療薬誘導体の用量は、所望の治療効果を引き出すために必要に応じて、１日１回、１日２回、１日４回、又は一日５回以上投与できる。例えば、用量投与計画は、本開示の化合物の血清濃度が、約０．０１〜約１０００ｎＭ、又は約０．１〜約７５０ｎＭ、又は約１〜約５００ｎＭ、又は約２０〜約５００ｎＭ、又は約１００〜約５００ｎＭ、又は約２００〜約４００ｎＭの範囲を達成するように選ぶことができる。例えば、本開示の化合物の最大半量(half maximum dose)を示す平均血清濃度が約１μｇ／Ｌ（マイクログラム／リットル）〜約２０００μｇ／Ｌ、又は約２μｇ／Ｌ〜約１０００μｇ／Ｌ、又は約５μｇ／Ｌ〜約５００μｇ／Ｌ、又は約１０μｇ／Ｌ〜約４００μｇ／Ｌ、又は約２０μｇ／Ｌ〜約２００μｇ／Ｌ、又は約４０μｇ／Ｌ〜約１００μｇ／Ｌの範囲を達成するように選ぶことができる。
【０２９７】
[00256]開示の一定の態様は、治療結果を改良するために、オキシステロール−治療薬誘導体とは独立に又はそれと相乗的に作用する追加の薬剤を用いた治療も含みうる。併用療法で投与される場合、オキシステロール−治療薬誘導体以外の薬剤は、化合物と同時に投与することも、又は所望に応じて交互に投与することもできる。組成物中に２種類（以上）の薬物を組み合わせることもできる。それぞれの用量は、組み合わせて使用される場合、いずれかを単独で使用する場合より少なくなりうる。適切な用量は、標準的な投与パラメーターを用いて当業者が決定できる。
【０２９８】
[00257]開示の一態様において、本明細書中に開示されたいずれ方法にとってもキットが有用である（インビトロでも又はインビボでも）。そのようなキットは、化合物又はその生物活性もしくは医薬組成物を含むほか、例えばＨｈ経路媒介活性の増大をもたらす一つ又は複数のその他のオキシステロール、又はその他の適切な治療薬も含みうる。キットは任意に、方法を実施するための説明書を含んでいてもよい。開示のキットの任意の構成要素は、適切な緩衝液、薬学的に許容可能な担体など、容器、又は包装材料などである。キットの試薬は容器に入っていてもよく、試薬はその容器中で例えば凍結乾燥形又は安定化された液体形で安定である。試薬は、単一の使用形態、例えば単一剤形に入っていてもよい。当業者であれば、開示のいずれかの方法を実施するために適切なキットの構成要素は分かるであろう。
【０２９９】
[00258]様々な状態が、オキシステロール−治療薬誘導体を単独で又は他の治療薬と組み合わせて使用することにより、治療できる。オキシステロール−治療薬誘導体はヘッジホッグ経路の活性の増大をもたらすことができる。
【０３００】
[00259]オキシステロール−治療薬誘導体の一つの作用は、多能性細胞を標的にして、骨芽細胞など様々な細胞タイプへのそれらの系統特異的分化を誘導することでありうる。例えば、化合物で処理された間葉幹細胞は、骨芽細胞分化マーカーの誘導発現を示すことができる。いかなる特定機序にも拘束されることは望まないが、この系統特異的分化は、これらの細胞におけるヘッジホッグシグナル伝達の誘導によるものであることが示唆される。しかしながら、本明細書中で議論されている治療法は、化合物が機能する機序がどのようなものであるかを問わず、本開示に含められる。オキシステロール−治療薬誘導体は、骨形成、骨芽細胞分化、骨形態形成及び／又は骨増殖の刺激から利益を受けるであろう状態の治療に有用でありうる。当業者には明白であろうが、これらの状態又は治療の中には、例えば、脊椎固定術又は骨粗鬆症における局所骨形成を刺激するための骨誘導療法、骨折の修復又は治癒、顎骨形成の増大に臨床利益がある歯科処置、外傷又は口蓋裂／口唇裂などの先天性欠陥による頭蓋顔面骨欠損の修復、及び自然の骨成長が不適切ないくつかのその他の筋骨格障害などがある。治療は、開放骨折及び癒着不能リスクの高い骨折を治療するためだけでなく、脊椎固定術（例えば、前方経路腰椎椎体間固定術、腰椎後方固定術、及び頸椎固定術）の必要がある対象を含む脊椎障害を有する対象又は変性円板疾患もしくは腰椎及び頸椎を冒す関節炎を有する対象にも投与できる。さらに、オキシステロール−治療薬誘導体は、特に加齢及び閉経後集団における骨粗鬆症、すなわち破骨細胞による骨吸収の増大と並行して骨芽細胞による骨形成の減少に起因する骨粗鬆症の治療にも使用できる。
【０３０１】
[00260]さらに詳しくは、下記種類の骨関連治療が実施できる。一部の態様において、化合物は、局所骨形成を刺激するために体内に局所的に送達される骨原性物質として使用できる。送達は、コラーゲンＩ（これに限定されない）などの適合性分子で構成される足場(scaffold)を用い、それに化合物を吸収させた後、体内に配置することによって行われる。例えば、オキシステロール−治療薬誘導体を含有する足場は、二つ以上の椎骨の固定が適応される脊椎固定術、偽関節、及び癒着不能固定などにおいて、横突起の間又は椎間板に配置することができる。他の態様において、オキシステロール−治療薬誘導体を含有する足場は、骨形成及び骨折の治癒を刺激するために骨折骨に配置される；化合物による骨再生が適応される頭蓋冠又は顎顔面骨欠損などの骨欠損部に配置される；又は歯科インプラントなどの歯科処置前の骨再生手段として骨形成を刺激するために顎骨に配置される。他の態様において、オキシステロール−治療薬誘導体はインビトロで骨原性物質として使用できる。例えば、オキシステロール−治療薬誘導体は、間葉幹細胞などの骨前駆細胞に、そのような細胞を局所骨形成を刺激するために上記のような整形外科的処置及びその他の処置に適用する前に、それらの骨分化を刺激するために投与することができる。さらにその他の態様において、オキシステロール−治療薬誘導体は、インビトロで骨前駆細胞のヘッジホッグシグナル伝達経路を刺激するために使用することもできる。それによってインビトロ又はインビボで骨前駆細胞の骨分化がもたらされる。
【０３０２】
[00261]上記及び以下の実施例において、すべての温度はセ氏で示され；そして、別途記載のない限り、すべての部及びパーセンテージは重量による。上記の骨原性オキシステロールは、関心対象の標的細胞、組織又は器官への直接的な局所投与に有用である。
【０３０３】
[00262]本願のこれら及びその他の側面は、以下の実施例を検討することにより、さらに理解されるであろう。これらの実施例は、本願のある特定の態様を説明することを目的としたものであり、特許請求の範囲によって定義されているその範囲を制限することを意図したものではない。
【実施例】
【０３０４】
[00263]実施例１
[00264]酢酸プレグネノロンからの製造
[00265]８．２５ｍＬのＴＨＦ中ｎ−ヘキシルマグネシウムクロリド（２Ｍ、１６．５ｍｍｏｌ）を、激しい電磁撹拌下及び氷浴冷却下で、酢酸プレグネノロンのＴＨＦ中溶液に添加した。酢酸プレグネノロン溶液は、４．５ｍＬのＴＨＦ中に１．７９ｇの化合物１、酢酸プレグネノロン（５ｍｍｏｌ）を含有していた。添加は２分間かけて行われた。添加完了後、混合物を室温で３．５時間撹拌した。その時点で混合物はゲルに変わった。次に、そのゲルを、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液及びＭＴＢＥ（メチルターシャリーブチルエーテル）の混合物で砕解(digest)した。有機層を分離し、水で３回洗浄して蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、ＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）／石油エーテル混合物（比率７０／３０）を用いて分離し、化合物２、ジオールを白色固体として得た。１．２９ｇ（３．２１ｍｍｏｌ）の固体ジオールを６４％の単離収率で抽出した。反応を以下のＡに示す。
【０３０５】
【化５１】
2018199670.tif 000052
【０３０６】
[00266]ＣＤＣｌ３中のジオールの４００ＭＨｚにおける１Ｈ  ＮＭＲデータを以下に示す:δ: 0.8-1.9 (40H), 1.98 (m, 1H), 2.09 (m, 1H), 2.23 (m, 1H), 2.29 (m, 1H), 3.52 (m, 1H), 5.35 (m, 1H)（図６に示されている通り）。図７のＣＤＣｌ３中のジオールの１００ＭＨｚにおける１３Ｃ  ＮＭＲデータを以下に示す: d: 13.6, 14.1, 19.4, 20.9, 22.4, 22.6, 23.8, 24.2, 26.4, 30.0, 31.3, 31.6, 31.8, 31.9, 36.5, 37.3, 40.1, 42.3, 42.6, 44.0, 50.1, 56.9, 57.6, 71.7, 75.2, 121.6, 140.8。
【０３０７】
[00267]生成したジオールは、（３Ｓ，８Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ，１３Ｒ，１４Ｓ，１７Ｒ）−１０，１３−ジメチル−１７−［（Ｓ）−２−ヒドロキシオクタン−イル］−２，３，４，７，８，９，１１，１２，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オールのＩＵＰＡＣ名を持つ。
【０３０８】
実施例２
[00268]プレグネノロンからの製造
[00269]実施例１の代わりに、上記反応スキームＡの化合物２は、以下のスキームＢに示されたプレグネノロンから、化合物１から化合物２への変換で利用したのと同じ手順を利用して製造することもできる。この手順では、１０ｇのプレグネノロンが７．０５ｇの化合物２に変換された。これは５５％の収率に相当する。
【０３０９】
【化５２】
2018199670.tif 000053
【０３１０】
[00270]２５００ｍＬのｎ−ヘキシルマグネシウムクロリド（２Ｍ、５ｍｏｌ）を反応器に入れ、溶液を−５℃に冷却した。酢酸プレグネノロンのＴＨＦ中溶液を反応器に、内部反応温度を１℃未満に維持する速度で投入した。プレグネノロン溶液は、８リットルのＴＨＦ中に５００ｇのプレグネノロン（１．４ｍｏｌ）を含有していた。添加完了後、混合物を０℃に１時間保持した後、一晩かけて室温に温まらせた。反応混合物は固体のゼラチン状塊になった。追加のＴＨＦ２リットルを加えた後、１０ｍｌの氷酢酸を加えた。反応混合物を５℃に冷却し、３５０ｍｌの氷酢酸を添加してクエンチングしたところ、溶液が得られた。反応混合物を減圧下で濃縮し、濃厚シロップにした。化合物をジクロロメタンに溶解し、水洗し、最後に飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄した。有機層を減圧下で琥珀色油になるまで濃縮した。質量回収は約８００グラムであった。粗材料をそのまま次の工程に利用した。
【０３１１】
[00271]生成したジオールは、（３Ｓ，８Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ，１３Ｒ，１４Ｓ，１７Ｒ）−１０，１３−ジメチル−１７−［（Ｓ）−２−ヒドロキシオクタン−イル］−２，３，４，７，８，９，１１，１２，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オールのＩＵＰＡＣ名を持つ。
【０３１２】
実施例３
[00272]粗ヘキシルジオール生成物（８００グラム）を８リットルのＴＨＦに溶解し、反応器に入れ、−５℃に冷却した。ＴＨＦ中ボラン−ＴＨＦ複合体（１Ｍ、６．３モル、４．５当量）６３００ｍＬを、内部反応温度を１℃未満に維持する速度で投入した。添加が完了したら、反応混合物を０℃で１．５時間撹拌した後、一晩かけて室温に温まらせた。反応を以下に示す。
【０３１３】
【化５３】
2018199670.tif 000054
【０３１４】
[00273]反応混合物を、１０％水酸化ナトリウム（４７５０ｍＬ）と３０％過酸化水素（１３７５ｍＬ）の混合物の添加によりクエンチングした。クエンチングは極めて発熱性であったので、完了に数時間を要した。内部温度は１０℃未満に維持された。クエンチング量の添加完了後、混合物を１．５時間保冷した後、一晩かけて室温に温まらせた。次に８リットルのジクロロメタンを加えた。有機層を単離し、７リットルの新鮮水で洗浄し、減圧下で濃縮した。生成物は粘稠性の油状塊として単離されたが、放置により固化した。
【０３１５】
[00274]生成物を４リットルのジクロロメタンに溶解し、ジクロロメタン中に調製されたシリカゲルカラムに入れた。カラムを最初に２５％酢酸エチルで溶離し、７−メチル−７−トリデシルアルコール副産物を溶離した。次に、カラムを１０％メタノール−酢酸エチルで溶離して、ＯＸＹ１３３を溶媒和した。回収画分を合わせ、減圧下で濃縮してワックス状固体を得た。化合物をアセトン−水混合物（３：１）に溶解し、減圧下で濃縮して残留溶媒を除去した。得られた粗ＯＸＹ１３３を次の工程で利用した。
【０３１６】
[00275]あるいは、ヒドロホウ素化／酸化から回収された粘稠生成物は、ヘプタンと撹拌することによって固化させ、ろ過により生成物を単離することもできる。単離生成物を塩化メチレン（７．３ｍＬ塩化メチレン／ｇ固体）中に懸濁させる。生成物をろ過により単離し、そのまま次の工程で使用した。
【０３１７】
実施例４
【０３１８】
【化５４】
2018199670.tif 000055
【０３１９】
[00276]６３０グラムの粗ＯＸＹ１３３を１５００ｍｌの３：１  アセトン／水混合物に還流下で溶解し、次いで室温に冷却することによってＯＸＹ１３３を再結晶化させた。結晶固体を真空ろ過により回収し、乾燥させて、３３６ｇを得た。これは化合物１からの通算収率２８％であった。製造されたＯＸＹ１３３は一水和物で、（３Ｓ，５Ｓ，６Ｓ，８Ｒ，９Ｓ，１０Ｒ，１３Ｓ，１４Ｓ，１７Ｓ）−１７−（（Ｓ）−２−ヒドロキシオクタン−２−イル）−１０，１３−ジメチルヘキサデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，６−ジオール、一水和物のＩＵＰＡＣ名を持つ。
【０３２０】
[00277]図１に、酢酸プレグネノロンを含む出発反応物を用いてＯＸＹ１３３を合成するための段階的反応を示す。プレグネノロンを有機金属化合物と反応させて、２個のヒドロキシル基を有するステロール又はジオールを製造する。次にそのステロール又はジオールをボラン及び過酸化水素と反応させ、精製してＯＸＹ１３３を製造する。
【０３２１】
[00278]ＣＤＣｌ３中のＯＸＹ１３３の４００ＭＨｚにおける１Ｈ  ＮＭＲデータを以下に示す:δ: 0.66 (m, 1H), 0.85 (m, 10 H), 1.23 (m, 18 H), 1.47 (m, 9 H), 1.68 (m, 4 H), 1.81 (m, 1H), 1.99 (m, 1H), 2.06 (m. 1H), 2.18 (m, 1H), 3.42 (m, 1H), 3.58 (m, 1H)。ＣＤＣｌ３中のＯＸＹ１３３の４００ＭＨｚにおける１３Ｃ  ＮＭＲデータを以下に示す: d: 13.7, 14.0, 14.3, 21.2, 22.5, 22.8, 23.9, 24.4, 26.6, 30.1, 31.1, 32.1, 32.5, 33.9, 36.5, 37.5, 40.4, 41.7, 43.1, 44.3, 51.9, 53.9, 56.5, 57.9, 69.6, 71.3, 75.4。ＯＸＹ１３３の赤外分光データは、３３４２ｃｍ−１、２９２９ｃｍ−１、２８７２ｃｍ−１、２８４９ｃｍ−１にピークを示した。ＯＸＹ１３３のターボスプレー質量分析データは、438.4 m/z [M+NH４]+、420.4 m/z (M-H２O+NH４]+、403.4 m/z [M-H２O+H]+、385.4 m/z [M-2H２O+H]+にピークを示した。ＯＸＹ１３３の１Ｈ  ＮＭＲ、１３Ｃ  ＮＭＲ、ＩＲ、及びＭＳデータを図２、３、４及び５にそれぞれ示す。図６は、ＯＸＹ１３３を合成するための中間ステロール又はジオールから得られた１Ｈ  ＮＭＲデータのグラフ図である。図７は、ＯＸＹ１３３を合成するための中間ステロール又はジオールから得られた１３Ｃ  ＮＭＲデータのグラフ図である。
【０３２２】
実施例５
[00279]酢酸プレグネノロンからの代替一容器(one-vessel)手順
[00280]１００ｍＬのｎ−ヘキシルマグネシウムクロリド（ＴＨＦ中２Ｍ、２００ｍｍｏｌ）をフラスコに入れ、−１０℃に冷却した。２００ｍｌの無水ＴＨＦ中に２０ｇの酢酸プレグネノロン（５６ｍｍｏｌ）を含有する溶液を、内部反応温度を−１０℃未満に維持しながら滴加した。添加完了後、混合物を３０分間撹拌した後、室温に温まらせた。室温で４時間後、混合物はゼラチン状の撹拌可能な塊になった。混合物を０℃に冷却し、２００ｍＬのボラン−ＴＨＦ複合体（ＴＨＦ中１Ｍ、２００ｍｍｏｌ）を、内部温度を０℃未満に維持しながら滴加した。添加が完了したら、得られた溶液を一晩かけて室温に温まらせた。
【０３２３】
[00281]混合物を０℃に冷却し、１０％ＮａＯＨ（１９０ｍＬ）と３０％Ｈ２Ｏ２（５５ｍＬ）の混合物を徐々に添加してクエンチングした。クエンチングが完了したら、混合物をＭＴＢＥ（合計８００ｍＬ）で抽出し、エマルションを得た。ブラインを添加し、層を分離させた。有機相を減圧下で濃縮し、透明粘稠油を得た。この油を、前に説明したプラグカラム法を利用してさらに精製した。
【０３２４】
[00282]当業者には、本明細書中に記載された様々な態様に対して、本明細書における教示の精神又は範囲から逸脱することなく、様々な修正及び変更が可能であることは明らかであろう。ゆえに、様々な態様は、本教示の範囲内で様々な態様のその他の修正及び変更もカバーするものとする。
【図１】
2018199670.tif 000078
【図２】
2018199670.tif 000079
【図３】
2018199670.tif 000080
【図４】
2018199670.tif 000081
【図５】
2018199670.tif 000082
【図６】
2018199670.tif 000083
【図７】
2018199670.tif 000084
【図８】
2018199670.tif 000085
【図９】
2018199670.tif 000086
【図１０】
2018199670.tif 000087
【図１１】
2018199670.tif 000088
【図１２】
2018199670.tif 000089
【図１３】
2018199670.tif 000090
【図１４】
2018199670.tif 000091
【外国語明細書】
2018199670000001.pdf