(57)【要約】【課題】  従来の胎盤由来原料よりもアンチエイジング効果に有用な成分が多く含まれる羊膜由来原料の製造方法、並びに羊膜由来原料が配合された化粧品及び健康食品を提供すること。【解決手段】  採集した胎盤及び羊膜を凍結する分離前凍結工程１０と、胎盤及び羊膜を流水にて解凍する分離前解凍工程１１と、胎盤及び羊膜の水切りを行う分離前水切工程１２と、胎盤と羊膜を分離する分離工程１３と、羊膜を水洗いする羊膜水洗工程１４と、羊膜の水切りを行う羊膜水切工程１５と、羊膜を細断する羊膜細断工程１６と、羊膜を凍結する羊膜凍結工程１７と、羊膜を解凍する羊膜解凍工程１８とを有する。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
採集した胎盤及び羊膜を凍結する分離前凍結工程と、
前記分離前凍結工程の後に、前記胎盤及び前記羊膜を流水にて解凍する分離前解凍工程と、
前記分離前解凍工程の後に、前記胎盤及び前記羊膜の水切りを行う分離前水切工程と、
前記分離前水切工程の後に、前記胎盤と前記羊膜を分離する分離工程と、
前記分離工程の後に、前記羊膜を水洗いする羊膜水洗工程と、
前記羊膜水洗工程の後に、前記羊膜の水切りを行う羊膜水切工程と、
前記羊膜水切工程の後に、前記羊膜を細断する羊膜細断工程と、
前記羊膜細断工程の後に、前記羊膜を凍結する羊膜凍結工程と、
前記羊膜凍結工程の後に、前記羊膜を解凍する羊膜解凍工程とを有することを特徴とする羊膜由来原料の製造方法。
【請求項２】
前記胎盤は、子宮内の全体に散在して形成される散在性胎盤であり、
前記分離工程では、前記胎盤を分離する前の前記羊膜を切り開いて伸ばし、前記胎盤と前記羊膜を分離し、分離した前記羊膜に付着した胎盤及び血管を除去することを特徴とする請求項１に記載の羊膜由来原料の製造方法。
【請求項３】
前記羊膜解凍工程の後に、前記羊膜を分解抽出してエキスを得る抽出工程を有することを特徴とする請求項１又は請求項２に記載の羊膜由来原料の製造方法。
【請求項４】
前記抽出工程は、前記羊膜に精製水及び中性プロテアーゼを加え、抽出温度を３０度以上７０度以下、抽出時間を１時間以上１０時間以下としたものであることを特徴とする請求項３に記載の羊膜由来原料の製造方法。
【請求項５】
前記抽出工程は、前記羊膜の凍結と融解を所定回数繰り返して水溶性画分を分離するものであることを特徴とする請求項３に記載の羊膜由来原料の製造方法。
【請求項６】
胎盤から分離した羊膜由来原料を配合したことを特徴とする化粧品。
【請求項７】
胎盤から分離した羊膜由来原料を配合したことを特徴とする健康食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒト、ブタ、ウマ又はヒツジなどの哺乳動物の羊膜を原料とする羊膜由来原料の製造方法、並びに羊膜由来原料を配合した化粧品及び健康食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、哺乳動物の胎盤を由来原料とする胎盤（プラセンタ）エキス等の胎盤由来原料の製造方法が知られている。
例えば特許文献１には、ヒト、ウシ、ブタ又はヒツジの胎盤を凍結してミンチ化し、融解し、水洗した後、遠心または濾過により脱水して得た脱水胎盤を、水、アルカリプロテアーゼ等を加えて、加熱、撹拌を行うことで酵素加水分解反応を起こし、さらに、加熱した後、反応を停止させて室温で一晩放置し、上澄液を採取して濾過し、濾液をエチルアルコールで処理してエチルアルコール溶出液にし、溶出液を減圧濃縮したものを凍結乾燥して粉末にする胎盤エキスからなる抗アレルギー剤の製造方法が開示されている。
また、特許文献２には、血液、汚物及び臭い部位の除去を含む前処理をした胎盤と、前処理後の胎盤重量に対して０．２重量％〜２重量％のプロテアーゼを含む酵素とを、可撓性を有する袋体に内挿して真空包装する工程と、真空包装した袋体を、５０ＭＰａ以上〜２００ＭＰａ未満の圧力で、２０度〜５０度の範囲内でプロテアーゼを含む酵素の至適温度に制御した状態で、１日〜３日保持する抽出工程と、袋体内の内容物からプラセンタエキス原液を分離する固液分離工程とを有するプラセンタエキスの製造方法が開示されている。
また、特許文献３には、酵素消化過程における煩雑さの解消を目的として、ヒト又はブタの胎盤を、特定の耐熱性中性タン白質分解酵素を使用して酵素消化するプラセンタエキスの製造方法が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００１−３９８７９号公報
【特許文献２】特開２０１１−１６０７４２号公報
【特許文献３】特開２００４−９７０３３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
胎盤由来原料は、たんぱく質、アミノ酸、ビタミン、ミネラル、酵素、核酸及び成長因子（ＥＧＦ等）等の成分が含まれることにより、皮膚代謝の促進、活性酸素消去、肝機能強化、抗炎症作用及び免疫賦活といったアンチエイジング効果があり、化粧品や健康食品等の原料として活用されている。
しかし、さらにアンチエイジング効果に優れた化粧品や健康食品等を提供するため、有用成分がより多く含まれるエキス等の開発が期待されている。
【０００５】
そこで、本発明は、従来の胎盤由来原料よりもアンチエイジング効果に有用な成分が多く含まれるエキス等の製造方法、並びにそのエキス等が配合された化粧品及び健康食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
請求項１記載の本発明の羊膜由来原料の製造方法は、採集した胎盤及び羊膜を凍結する分離前凍結工程と、前記分離前凍結工程の後に、前記胎盤及び前記羊膜を流水にて解凍する分離前解凍工程と、前記分離前解凍工程の後に、前記胎盤及び前記羊膜の水切りを行う分離前水切工程と、前記分離前水切工程の後に、前記胎盤と前記羊膜を分離する分離工程と、前記分離工程の後に、前記羊膜を水洗いする羊膜水洗工程と、前記羊膜水洗工程の後に、前記羊膜の水切りを行う羊膜水切工程と、前記羊膜水切工程の後に、前記羊膜を細断する羊膜細断工程と、前記羊膜細断工程の後に、前記羊膜を凍結する羊膜凍結工程と、前記羊膜凍結工程の後に、前記羊膜を解凍する羊膜解凍工程とを有することを特徴とする。
請求項２記載の本発明は、請求項１に記載の羊膜由来原料の製造方法において、前記胎盤は、子宮内の全体に散在して形成される散在性胎盤であり、前記分離工程では、前記胎盤を分離する前の前記羊膜を切り開いて伸ばし、前記胎盤と前記羊膜を分離し、分離した前記羊膜に付着した胎盤及び血管を除去することを特徴とする。
請求項３に記載の本発明は、請求項１又は請求項２に記載の羊膜由来原料の製造方法において、前記羊膜解凍工程の後に、前記羊膜を分解抽出してエキスを得る抽出工程を有することを特徴とする。
請求項４記載の本発明は、請求項３に記載の羊膜由来原料の製造方法において、前記抽出工程は、前記羊膜に精製水及び中性プロテアーゼを加え、抽出温度を３０度以上７０度以下、抽出時間を１時間以上１０時間以下としたものであることを特徴とする。
請求項５記載の本発明は、請求項３に記載の羊膜由来原料の製造方法において、前記抽出工程は、前記羊膜の凍結と融解を所定回数繰り返して水溶性画分を分離するものであることを特徴とする。
請求項６記載の本発明の化粧品は、胎盤から分離した羊膜由来原料を配合したことを特徴とする。
請求項７記載の本発明の健康食品は、胎盤から分離した羊膜由来原料を配合したことを特徴とする。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、従来の胎盤由来原料よりもアンチエイジング効果に有用な成分が多く含まれる羊膜由来原料の製造方法、並びに羊膜由来原料が配合された化粧品及び健康食品を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】本実施例による羊膜由来原料の製造工程図
【図２】同羊膜由来原料の指標成分を定量した結果を示す図
【図３】同羊膜由来原料の角質水分量保持データを示す図
【図４】同羊膜由来原料の使用感テストの結果を示す図
【図５】同羊膜由来原料を手の甲に塗布した場合の効果を示す図
【図６】同羊膜由来原料の比較例として胎盤由来原料を手の甲に塗布した場合の効果を示す図
【図７】同羊膜由来原料を足に塗布した場合の効果を示す図
【図８】同羊膜由来原料の飲用テストの結果を示す図
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明の第１の実施の形態による羊膜由来原料の製造方法は、採集した胎盤及び羊膜を凍結する分離前凍結工程と、分離前凍結工程の後に、胎盤及び羊膜を流水にて解凍する分離前解凍工程と、分離前解凍工程の後に、胎盤及び羊膜の水切りを行う分離前水切工程と、分離前水切工程の後に、胎盤と羊膜を分離する分離工程と、分離工程の後に、羊膜を水洗いする羊膜水洗工程と、羊膜水洗工程の後に、羊膜の水切りを行う羊膜水切工程と、羊膜水切工程の後に、羊膜を細断する羊膜細断工程と、羊膜細断工程の後に、羊膜を凍結する羊膜凍結工程と、羊膜凍結工程の後に、羊膜を解凍する羊膜解凍工程とを有するものである。
本実施の形態によれば、従来の胎盤由来原料よりもアンチエイジング効果に有用な成分が多く含まれる羊膜由来原料を提供できる。
【００１０】
本発明の第２の実施の形態は、第１の実施の形態による羊膜由来原料の製造方法において、胎盤は、子宮内の全体に散在して形成される散在性胎盤であり、分離工程では、胎盤を分離する前の羊膜を切り開いて伸ばし、胎盤と羊膜を分離し、分離した羊膜に付着した胎盤及び血管を除去するものである。
本実施の形態によれば、散在性胎盤を用いる場合に、胎盤から羊膜を効率よく分離することができる。また、胎盤や血管が付着していない羊膜のみを用いて抽出を行うことができるため、羊膜由来原料を化粧品や健康食品といった最終製品に配合する場合に、最終製品のにおいや色に影響することを防止できる。また、アンチエイジング効果に有用な成分がより多く含まれる羊膜由来原料を提供できる。
【００１１】
本発明の第３の実施の形態は、第１又は第２の実施の形態による羊膜由来原料の製造方法において、羊膜解凍工程の後に、羊膜を分解抽出してエキスを得る抽出工程を有するものである。
本実施の形態によれば、従来の胎盤エキス（胎盤由来原料）よりもアンチエイジング効果に有用な成分が多く含まれる羊膜エキス（羊膜由来原料）を提供できる。
【００１２】
本発明の第４の実施の形態は、第３の実施の形態による羊膜由来原料の製造方法において、抽出工程は、羊膜に精製水及び中性プロテアーゼを加え、抽出温度を３０度以上７０度以下、抽出時間を１時間以上１０時間以下としたものである。
本実施の形態によれば、効率よく羊膜エキスを抽出できる。
【００１３】
本発明の第５の実施の形態は、第３の実施の形態による羊膜由来原料の製造方法において、抽出工程は、羊膜の凍結と融解を所定回数繰り返して水溶性画分を分離するものである。
本実施の形態によれば、効率よく羊膜エキスを抽出できる。
【００１４】
本発明の第６の実施形態による化粧品は、胎盤から分離した羊膜由来原料を配合したものである。
本実施の形態によれば、アンチエイジング効果に優れた化粧品を提供できる。
【００１５】
本発明の第７の実施形態による健康食品は、胎盤から分離した羊膜由来原料を配合したものである。
本実施の形態によれば、アンチエイジング効果に優れた健康食品を提供できる。
【実施例】
【００１６】
以下に、本発明の一実施例による羊膜由来原料の製造方法、並びに羊膜由来原料を配合した化粧品及び健康食品について説明する。
【００１７】
図１は、本実施例による羊膜由来原料の製造工程図である。
本実施例による羊膜由来原料（羊膜エキス）の製造方法は、分離前凍結工程１０、分離前解凍工程１１、分離前水切工程１２、分離工程１３、羊膜水洗工程１４、羊膜水切工程１５、羊膜細断工程１６、羊膜凍結工程１７、羊膜解凍工程１８及び抽出工程１９を有する。
【００１８】
分離前凍結工程１０においては、分娩直後に採集した胎盤及び羊膜を、直ちに約−２０度で凍結する。凍結した胎盤及び羊膜は、所定場所まで輸送し保管する。これにより、採集した胎盤及び羊膜を良好な状態で保管することができる。
なお、採集する胎盤及び羊膜は、ヒト、ブタ、ウマ又はヒツジなどの哺乳類動物のものであればよいが、その中でも安全性に優れ、かつ化粧品及び健康食品の用途に適したブタ又はウマの胎盤及び羊膜とすることが好ましい。
【００１９】
分離前解凍工程１１においては、分離前凍結工程１０で凍結した胎盤及び羊膜を容器に入れ、その容器に水を流すことによって胎盤及び羊膜を急速解凍する。分離前解凍工程１１は、分離工程１３を開始する直前に行う。
また、胎盤及び羊膜が解凍された後も水を流し続ける。水を流し続けることにより、胎盤や羊膜に触れる水が常に清浄な状態に保たれ、血液等で汚染された解凍用水が胎盤や羊膜に付着することがない。これにより、羊膜由来原料が化粧品又は健康食品といった最終製品のにおいや色に影響することを防止できる。
【００２０】
分離前水切工程１２においては、分離前解凍工程１１で解凍した胎盤及び羊膜を、ザル等の水切り容器に入れて水切りする。これにより、余分な水分を除去でき、後工程での作業性が向上する。
【００２１】
分離工程１３においては、分離前水切工程１２で水切りした胎盤及び羊膜から羊膜を分離する。
胎盤及び羊膜の形状は動物種によって異なり、例えば、ヒトの場合は子宮の一部に円盤状に形成される盤状胎盤、ブタ及びウマの場合は子宮内の全体に散在して形成される散在性胎盤と呼ばれる構造である。胎盤から羊膜を分離する際は、ヒトの場合は胎盤が一つの大きな塊となっているので作業が明確であるが、散在性胎盤であるブタ及びウマの場合はそうではないため、以下の手順で行う。  
まず、胎盤を分離する前の羊膜をハサミなどの切断具で切り開いて伸ばす。次に、胎盤と羊膜を分離する。次に、分離した羊膜に付着した胎盤及び血管を取り残しがないように注意して除去する。これにより、胎盤と羊膜を効率よく分離することができ、胎盤や血管が付着していない羊膜のみを抽出に供することができる。このように分離された羊膜を用いて抽出工程１９で得られた羊膜エキスは、アンチエイジング効果に有用な成分がより多く含まれた羊膜由来原料となる。また、化粧品や健康食品といった最終製品に配合する場合に、最終製品のにおいや色への影響が少ない。
【００２２】
羊膜水洗工程１４においては、分離工程１３で胎盤から分離した羊膜を、再度水洗いする。これにより、分離した羊膜に胎盤や血管が残ることをより確実に防止できる。
【００２３】
羊膜水切工程１５においては、羊膜水洗工程１４で水洗いした羊膜を、ザル等の水切り容器に入れて水切りする。羊膜の水分除去、すなわち羊膜の水分管理を行うことにより、羊膜の重量が水分によってばらつくことを防止し、ひいては羊膜由来原料の品質を向上させることができる。
羊膜水切工程１５の後に羊膜細断工程１６を行う。羊膜細断工程１６で細断した羊膜は、再度水切りする。再度水切りを行うことで水分管理の精度を高め、羊膜の重量の水分によるばらつきを更に抑制し、羊膜由来原料の品質をより一層向上させることができる。
【００２４】
羊膜細断工程１６においては、羊膜水切工程１５で水切りした羊膜を、ミンチ機等の細断機で例えば９ｍｍ角に細断する。
【００２５】
羊膜凍結工程１７においては、羊膜細断工程１６で細断し水切りした羊膜の重量を測定してポリ袋等の収納容器に入れ、空気抜きをして密封し、すみやかに冷凍庫に入れて約−２０度で羊膜を凍結させる。これにより、細断した羊膜を良好な状態で保管することができる。また、上述のように、羊膜水切工程１５及び羊膜細断工程１６において水分管理を行っているため、測定される羊膜の重量は、水分によるばらつきが抑制されたものである。
なお、例えばウマの胎盤からは、分離前の胎盤に対する重量％で約１５％〜４０％重量の羊膜が得られる。
羊膜凍結工程１７で凍結した羊膜は、羊膜解凍工程１８において解凍する。
【００２６】
抽出工程１９においては、羊膜解凍工程１８で解凍した羊膜について、酵素処理、加水分解処理、酸処理又は凍結溶融等の方法で分解抽出を行う。これにより、羊膜エキスを得ることができる。
抽出工程１９で得られた羊膜エキスを遠心分離又はろ過することにより、化粧品や健康食品等に配合する羊膜エキスの液体原料とすることができる。
また、抽出工程１９で得られた羊膜エキスを凍結乾燥又は噴霧乾燥することにより、化粧品や健康食品等に配合する羊膜エキスの粉末原料とすることができる。
羊膜エキスの液体原料又は粉末原料を所定量配合することにより、胎盤から分離した羊膜のエキスが配合された化粧品又は健康食品を得ることができる。
なお、羊膜解凍工程１８の後、抽出工程１９には移行せず、解凍した羊膜についてフリーズドライ等の乾燥を行って破砕した場合には、羊膜の粉末原料を得ることができる。
【００２７】
図２は、図１に示す工程により製造した羊膜エキスの指標成分を酵素免疫測定法により定量した結果を示す図である（単位：pg/g）。
指標成分は、サイトカイン類であるEpidermal Growth Factor（EGF）、acidic Fibroblast Growth Factor（aFGF）、Hepatocyte Growth Factor（HGF）、Growth Differentiation Factor 11（GDF-11）とした。
【００２８】
図２（ａ）は、羊膜エキスの粉末原料の指標成分を定量した結果を示している。羊膜エキスの粉末原料は、羊膜細断工程１６において羊膜をミンチ状に細断した後、羊膜凍結工程１７及び羊膜解凍工程１８を経て、抽出工程１９において精製水と中性プロテアーゼを加えて、抽出温度を３０度以上７０度以下、抽出時間を１時間以上１０時間以下として処理し、得られた羊膜エキスを凍結乾燥することにより製造したものである。由来原料にウマの羊膜を用いた場合を実施例１、ブタの羊膜を用いた場合を実施例２としている。
また、図２（ａ）には、比較例として、胎盤エキスの粉末原料の指標成分を定量した結果を併せて示している。胎盤エキスの粉末原料は、羊膜の代わりに分離前の胎盤を用いた以外は実施例１、２と同条件で処理することにより製造したものである。由来原料にウマの胎盤を用いた場合を比較例１、ブタの胎盤を用いた場合を比較例２としている。
【００２９】
図２（ａ）に示すように、実施例１、２は、比較例１、２に比べて指標成分が高い値でバランスよく検出されていることが分かる。特にGDF-11に関しては、比較例１、２では検出されないか又は検出されても低い値であるのに対して、実施例１、２では高い値が検出されている。これらの指標成分はアンチエイジングに有用な成分であるから、胎盤から分離した羊膜を用いた羊膜エキスの粉末原料を配合することで、羊膜を分離する前の胎盤又は羊膜を分離した後の胎盤を用いた胎盤エキスの粉末原料を配合した場合よりも、アンチエイジング効果に優れた化粧品や健康食品を提供することができる。
また、GDF-11については、実施例２よりも実施例１のほうが高い値となっている。したがって、GDF-11を多く含ませたい場合は、ウマの羊膜エキスの粉末原料を用いることが好ましい。
【００３０】
図２（ｂ）は、羊膜エキスの液体原料の指標成分を定量した結果を示している。羊膜エキスの液体原料は、羊膜細断工程１６において羊膜をミンチ状に細断した後、羊膜凍結工程１７及び羊膜解凍工程１８を経て、抽出工程１９において凍結と乾燥を所定回数繰り返して水溶性画分を分離することにより製造したものである。由来原料にウマの羊膜を用いた場合を実施例３、ブタの羊膜を用いた場合を実施例４としている。
また、図２（ｂ）には、比較例として、胎盤エキスの液体原料の指標成分を定量した結果を併せて示している。胎盤エキスの液体原料は、羊膜の代わりに分離前の胎盤を用いた以外は実施例３、４と同条件で処理することにより製造したものである。由来原料にウマの胎盤を用いた場合を比較例３、ブタの胎盤を用いた場合を比較例４としている。
【００３１】
図２（ｂ）に示すように、実施例３、４は、比較例３、４に比べて指標成分が高い値でバランスよく検出されていることが分かる。特にGDF-11に関しては、比較例３、４では検出されないか又は検出されても低い値であるのに対して、実施例３、４では高い値が検出されている。これらの指標成分はアンチエイジングに有用な成分であるから、胎盤から分離した羊膜を用いた羊膜エキスの液体原料を配合することで、羊膜を分離する前の胎盤又は羊膜を分離した後の胎盤を用いた胎盤エキスの液体原料を配合した場合よりも、アンチエイジング効果に優れた化粧品や健康食品を提供することができる。
また、GDF-11については、実施例４よりも実施例３のほうが高い値となっている。したがって、GDF-11を多く含ませたい場合は、ウマの羊膜エキスの液体原料を用いることが好ましい。
【００３２】
図３は、図１に示す工程により製造した羊膜エキスの角質水分量保持データを示す図である。横軸は経過時間（min）、縦軸は角質水分量（μｓ）である。
図中「▲」は、羊膜細断工程１６においてウマの羊膜をミンチ状に細断した後、羊膜凍結工程１７及び羊膜解凍工程１８を経て、抽出工程１９において精製水と中性プロテアーゼを加えて、抽出温度を３０度以上７０度以下、抽出時間を１時間以上１０時間以下として処理し、０．２μｍのろ過を行うことにより製造した羊膜エキスのデータである（実施例５）。
また、図中「■」及び「◆」は、比較例のデータである。「■」は、ウマの胎盤を処理して得られた胎盤エキスのデータを示し（比較例５）、「◆」は、羊膜エキスも胎盤エキスも含まれていない無添加のコントロール（水）のデータを示している（比較例６）。なお、比較例５の胎盤エキスは、羊膜の代わりに胎盤を用いた以外は実施例５と同条件で処理することにより製造したものである。
【００３３】
図３に示すように、実施例５の羊膜エキスは、塗布してから９０分以降、比較例５の胎盤エキスを塗布した場合と比べて角質水分量が上回っており、比較例５の胎盤エキスよりも持続的な保湿力を有していることが分かる。
【００３４】
図４は、図１に示す工程により製造した羊膜エキスの使用感テストの結果を示す図である。
使用感テストは、羊膜エキスが１％配合された化粧水について、ヒトモニター１０名を対象として一ヶ月行い、「しっとり」、「ハリ」、「つや」及び「やわらかさ」の各項目について評価を得た。
使用感テストに使用した羊膜エキスは、由来原料をウマの羊膜とし、羊膜細断工程１６において羊膜をミンチ状に細断した後、羊膜凍結工程１７及び羊膜解凍工程１８を経て、抽出工程１９において精製水と中性プロテアーゼを加えて、抽出温度を３０度以上７０度以下、抽出時間を１時間以上１０時間以下として処理し、０．２μｍのろ過を行うことにより製造したものである。
【００３５】
図４に示すように、「しっとり（保湿効果）」、「ハリ」、「つや」及び「やわらかさ」のいずれにおいても向上効果が確認された。
【００３６】
図５は、図１に示す工程により製造した羊膜エキスを手の甲に塗布した場合の効果を示す図である（実施例６）。また、図６は、比較例として胎盤エキスを手の甲に塗布した場合の効果を示す図である（比較例７）。また、図７は、図１に示す工程により製造した羊膜エキスを足に塗布した場合の効果を示す図である（実施例７）。
実施例６、７の羊膜エキスは、由来原料をウマの羊膜とし、羊膜細断工程１６において羊膜をミンチ状に細断した後、羊膜凍結工程１７及び羊膜解凍工程１８を経て、抽出工程１９において精製水と中性プロテアーゼを加えて、抽出温度を３０度以上７０度以下、抽出時間を１時間以上１０時間以下として処理し、０．２μｍのろ過を行うことにより製造したものである。
また、比較例７の胎盤エキスは、羊膜の代わりに胎盤を用いた以外は羊膜エキスと同条件で処理することにより製造したものである。
効果は、羊膜エキスを塗布する群としてヒトモニターＡ〜Ｅの５名、胎盤エキスを塗布する群としてヒトモニターＦ〜Ｊの５名を対象として、以下の手順にて５日間行うことで確認した。
１．塗布前に肌の肌理を撮影する。
２．その後、１日１回手の甲に羊膜エキス又は胎盤エキスを塗布する。なお、ヒトモニターＡについては、足にも羊膜エキスを塗布する。
３．最終日の同時間に再度肌の肌理を撮影する。
【００３７】
図５及び図６においては、ヒトモニターごとに肌理の状態を示している。図５（ａ）〜（ｅ）はそれぞれヒトモニターＡ〜Ｅの肌理の状態を示し、図６（ａ）〜（ｅ）はそれぞれヒトモニターＦ〜Ｊの肌理の状態を示しており、各（ａ）〜（ｅ）において、左側が塗布前の肌理の状態、右側が最終日の肌理の状態である。
図５及び図６に示すように、羊膜エキスを手の甲に塗布した結果、胎盤エキスを手の甲に塗布した結果と同等以上に、肌のきめ細かさが向上することが確認された。
【００３８】
図７（ａ）においては、ヒトモニターＡについて、左側が塗布前の肌理の状態、右側が最終日の肌理の状態である。また、図７（ｂ）においては、上段が初日の塗布前の肌の状態を示し、下段が最終日の肌の状態を示している。
図７（ａ）に示すように、羊膜エキスを足に塗布した結果、肌の乾燥が改善し肌のきめ細かさが向上することが確認された。
また、図７（ｂ）に示すように、羊膜エキスを足に塗布した結果、湿疹が改善することが確認された。
【００３９】
図８は、図１に示す工程により製造した羊膜エキスの飲用テストの結果を示す図である。
飲用テストは、ウマの羊膜エキスの粉末原料をハードカプセルに充填した健康食品（実施例８）と、ウマの胎盤エキスの粉末原料をハードカプセルに充填した健康食品（比較例８）について、ヒトモニター１０名を対象として計１０日間行い、「飲みやすさ」、「におい」、「体調の良い変化」、「肌の潤い」、「肌のハリ・弾力」及び「肌のキメ」の各項目について評価を得た。
飲用テストに使用した羊膜エキスの粉末原料は、由来原料をウマの羊膜とし、羊膜細断工程１６において羊膜をミンチ状に細断した後、羊膜凍結工程１７及び羊膜解凍工程１８を経て、抽出工程１９において精製水と中性プロテアーゼを加えて、抽出温度を３０度以上７０度以下、抽出時間を１時間以上１０時間以下として処理し、得られた羊膜エキスを凍結乾燥することにより製造したものである。また、胎盤エキスの粉末原料は、羊膜の代わりに胎盤を用いた以外は実施例８と同条件で処理することにより製造したものである。
飲用テストは、以下の方法で行い、各項目について実施例８と比較例８のどちらが優れているかをヒトモニターに選択してもらった。
第１グループ（ヒトモニター５名）：（１）実施例８の健康食品を５日間飲用→（２）比較例８の健康食品を５日間飲用（計１ヶ月となるまで（１）と（２）を繰り返す）
第２グループ（ヒトモニター５名）：（１）比較例８の健康食品を５日間飲用→（２）実施例８の健康食品を５日間飲用（計１ヶ月となるまで（１）と（２）を繰り返す）
【００４０】
図８に示すように、実施例８の羊膜エキスは、「飲みやすさ」、「におい」及び「肌の潤い」の項目において比較例８の胎盤エキスと同等の体感が得られ、「体調の良い変化」、「肌のハリ・弾力」及び「肌のキメ」において比較例８の胎盤エキスよりも体感の向上効果が確認された。
【産業上の利用可能性】
【００４１】
本発明の羊膜由来原料の製造方法によれば、従来の胎盤由来原料よりもアンチエイジング効果に有用な成分が多く含まれる羊膜由来原料を提供することができる。また、この羊膜由来原料が配合された化粧品や健康食品等を提供することができる。
【符号の説明】
【００４２】
１０  分離前凍結工程 
１１  分離前解凍工程 
１２  分離前水切工程 
１３  分離工程
１４  羊膜水洗工程
１５  羊膜水切工程
１６  羊膜細断工程
１７  羊膜凍結工程
１８  羊膜解凍工程
１９  抽出工程
【図１】
2018188401.tif 000003
【図２】
2018188401.tif 000004
【図３】
2018188401.tif 000005
【図４】
2018188401.tif 000006
【図５】
2018188401.tif 000007
【図６】
2018188401.tif 000008
【図７】
2018188401.tif 000009
【図８】
2018188401.tif 000010
【手続補正書】
【提出日】平成30年4月20日(2018.4.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
採集した胎盤及び羊膜を凍結する分離前凍結工程と、
前記分離前凍結工程の後に、前記胎盤及び前記羊膜を流水にて解凍する分離前解凍工程と、
前記分離前解凍工程の後に、前記胎盤及び前記羊膜の水切りを行う分離前水切工程と、
前記分離前水切工程の後に、前記胎盤と前記羊膜を分離する分離工程と、
前記分離工程の後に、前記羊膜を水洗いする羊膜水洗工程と、
前記羊膜水洗工程の後に、前記羊膜の水切りを行う羊膜水切工程と、
前記羊膜水切工程の後に、前記羊膜を細断し、細断した前記羊膜を再度水切りする羊膜細断工程と、
前記羊膜細断工程の後に、前記羊膜を凍結する羊膜凍結工程と、
前記羊膜凍結工程の後に、前記羊膜を解凍する羊膜解凍工程と、
前記羊膜解凍工程の後に、前記羊膜を分解抽出してエキスを得る抽出工程とを有し、
前記抽出工程は、前記羊膜に精製水及び中性プロテアーゼを加え、抽出温度を３０度以上７０度以下、抽出時間を１時間以上１０時間以下としたものであり、
前記胎盤及び前記羊膜は、ウマから採集されたものであることを特徴とする羊膜由来原料の製造方法。
【請求項２】
採集した胎盤及び羊膜を凍結する分離前凍結工程と、
前記分離前凍結工程の後に、前記胎盤及び前記羊膜を流水にて解凍する分離前解凍工程と、
前記分離前解凍工程の後に、前記胎盤及び前記羊膜の水切りを行う分離前水切工程と、
前記分離前水切工程の後に、前記胎盤と前記羊膜を分離する分離工程と、
前記分離工程の後に、前記羊膜を水洗いする羊膜水洗工程と、
前記羊膜水洗工程の後に、前記羊膜の水切りを行う羊膜水切工程と、
前記羊膜水切工程の後に、前記羊膜を細断し、細断した前記羊膜を再度水切りする羊膜細断工程と、
前記羊膜細断工程の後に、前記羊膜を凍結する羊膜凍結工程と、
前記羊膜凍結工程の後に、前記羊膜を解凍する羊膜解凍工程と、
前記羊膜解凍工程の後に、前記羊膜を分解抽出してエキスを得る抽出工程とを有し、
前記抽出工程は、前記羊膜の凍結と融解を所定回数繰り返して水溶性画分を分離するものであり、
前記胎盤及び前記羊膜は、ウマから採集されたものであることを特徴とする羊膜由来原料の製造方法。
【請求項３】
請求項１又は請求項２に記載の羊膜由来原料の製造方法によって得られた羊膜由来原料を配合することを特徴とする化粧品の製造方法。
【請求項４】
請求項１又は請求項２に記載の羊膜由来原料の製造方法によって得られた羊膜由来原料を配合することを特徴とする健康食品の製造方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒト、ブタ、ウマ又はヒツジなどの哺乳動物の羊膜を原料とする羊膜由来原料の製造方法、並びに羊膜由来原料を配合した化粧品及び健康食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、哺乳動物の胎盤を由来原料とする胎盤（プラセンタ）エキス等の胎盤由来原料の製造方法が知られている。
例えば特許文献１には、ヒト、ウシ、ブタ又はヒツジの胎盤を凍結してミンチ化し、融解し、水洗した後、遠心または濾過により脱水して得た脱水胎盤を、水、アルカリプロテアーゼ等を加えて、加熱、撹拌を行うことで酵素加水分解反応を起こし、さらに、加熱した後、反応を停止させて室温で一晩放置し、上澄液を採取して濾過し、濾液をエチルアルコールで処理してエチルアルコール溶出液にし、溶出液を減圧濃縮したものを凍結乾燥して粉末にする胎盤エキスからなる抗アレルギー剤の製造方法が開示されている。
また、特許文献２には、血液、汚物及び臭い部位の除去を含む前処理をした胎盤と、前処理後の胎盤重量に対して０．２重量％〜２重量％のプロテアーゼを含む酵素とを、可撓性を有する袋体に内挿して真空包装する工程と、真空包装した袋体を、５０ＭＰａ以上〜２００ＭＰａ未満の圧力で、２０度〜５０度の範囲内でプロテアーゼを含む酵素の至適温度に制御した状態で、１日〜３日保持する抽出工程と、袋体内の内容物からプラセンタエキス原液を分離する固液分離工程とを有するプラセンタエキスの製造方法が開示されている。
また、特許文献３には、酵素消化過程における煩雑さの解消を目的として、ヒト又はブタの胎盤を、特定の耐熱性中性タン白質分解酵素を使用して酵素消化するプラセンタエキスの製造方法が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００１−３９８７９号公報
【特許文献２】特開２０１１−１６０７４２号公報
【特許文献３】特開２００４−９７０３３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
胎盤由来原料は、たんぱく質、アミノ酸、ビタミン、ミネラル、酵素、核酸及び成長因子（ＥＧＦ等）等の成分が含まれることにより、皮膚代謝の促進、活性酸素消去、肝機能強化、抗炎症作用及び免疫賦活といったアンチエイジング効果があり、化粧品や健康食品等の原料として活用されている。
しかし、さらにアンチエイジング効果に優れた化粧品や健康食品等を提供するため、有用成分がより多く含まれるエキス等の開発が期待されている。
【０００５】
そこで、本発明は、従来の胎盤由来原料よりもアンチエイジング効果に有用な成分が多く含まれるエキス等の製造方法、並びにそのエキス等が配合された化粧品及び健康食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
請求項１記載の本発明の羊膜由来原料の製造方法は、採集した胎盤及び羊膜を凍結する分離前凍結工程と、前記分離前凍結工程の後に、前記胎盤及び前記羊膜を流水にて解凍する分離前解凍工程と、前記分離前解凍工程の後に、前記胎盤及び前記羊膜の水切りを行う分離前水切工程と、前記分離前水切工程の後に、前記胎盤と前記羊膜を分離する分離工程と、前記分離工程の後に、前記羊膜を水洗いする羊膜水洗工程と、前記羊膜水洗工程の後に、前記羊膜の水切りを行う羊膜水切工程と、前記羊膜水切工程の後に、前記羊膜を細断し、細断した前記羊膜を再度水切りする羊膜細断工程と、前記羊膜細断工程の後に、前記羊膜を凍結する羊膜凍結工程と、前記羊膜凍結工程の後に、前記羊膜を解凍する羊膜解凍工程と、前記羊膜解凍工程の後に、前記羊膜を分解抽出してエキスを得る抽出工程とを有し、前記抽出工程は、前記羊膜に精製水及び中性プロテアーゼを加え、抽出温度を３０度以上７０度以下、抽出時間を１時間以上１０時間以下としたものであり、前記胎盤及び前記羊膜は、ウマから採集されたものであることを特徴とする。
請求項２記載の本発明の羊膜由来原料の製造方法は、採集した胎盤及び羊膜を凍結する分離前凍結工程と、前記分離前凍結工程の後に、前記胎盤及び前記羊膜を流水にて解凍する分離前解凍工程と、前記分離前解凍工程の後に、前記胎盤及び前記羊膜の水切りを行う分離前水切工程と、前記分離前水切工程の後に、前記胎盤と前記羊膜を分離する分離工程と、前記分離工程の後に、前記羊膜を水洗いする羊膜水洗工程と、前記羊膜水洗工程の後に、前記羊膜の水切りを行う羊膜水切工程と、前記羊膜水切工程の後に、前記羊膜を細断し、細断した前記羊膜を再度水切りする羊膜細断工程と、前記羊膜細断工程の後に、前記羊膜を凍結する羊膜凍結工程と、前記羊膜凍結工程の後に、前記羊膜を解凍する羊膜解凍工程と、前記羊膜解凍工程の後に、前記羊膜を分解抽出してエキスを得る抽出工程とを有し、前記抽出工程は、前記羊膜の凍結と融解を所定回数繰り返して水溶性画分を分離するものであり、前記胎盤及び前記羊膜は、ウマから採集されたものであることを特徴とする。
請求項３記載の本発明の化粧品の製造方法は、請求項１又は請求項２に記載の羊膜由来原料の製造方法によって得られた羊膜由来原料を配合することを特徴とする。
請求項４記載の本発明の健康食品の製造方法は、請求項１又は請求項２に記載の羊膜由来原料の製造方法によって得られた羊膜由来原料を配合することを特徴とする。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、従来の胎盤由来原料よりもアンチエイジング効果に有用な成分が多く含まれる羊膜由来原料の製造方法、並びに羊膜由来原料が配合された化粧品及び健康食品を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】本実施例による羊膜由来原料の製造工程図
【図２】同羊膜由来原料の指標成分を定量した結果を示す図
【図３】同羊膜由来原料の角質水分量保持データを示す図
【図４】同羊膜由来原料の使用感テストの結果を示す図
【図５】同羊膜由来原料を手の甲に塗布した場合の効果を示す図
【図６】同羊膜由来原料の比較例として胎盤由来原料を手の甲に塗布した場合の効果を示す図
【図７】同羊膜由来原料を足に塗布した場合の効果を示す図
【図８】同羊膜由来原料の飲用テストの結果を示す図
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明の第１の実施の形態による羊膜由来原料の製造方法は、採集した胎盤及び羊膜を凍結する分離前凍結工程と、分離前凍結工程の後に、胎盤及び羊膜を流水にて解凍する分離前解凍工程と、分離前解凍工程の後に、胎盤及び羊膜の水切りを行う分離前水切工程と、分離前水切工程の後に、胎盤と羊膜を分離する分離工程と、分離工程の後に、羊膜を水洗いする羊膜水洗工程と、羊膜水洗工程の後に、羊膜の水切りを行う羊膜水切工程と、羊膜水切工程の後に、羊膜を細断し、細断した羊膜を再度水切りする羊膜細断工程と、羊膜細断工程の後に、羊膜を凍結する羊膜凍結工程と、羊膜凍結工程の後に、羊膜を解凍する羊膜解凍工程と、羊膜解凍工程の後に、羊膜を分解抽出してエキスを得る抽出工程とを有し、抽出工程は、羊膜に精製水及び中性プロテアーゼを加え、抽出温度を３０度以上７０度以下、抽出時間を１時間以上１０時間以下としたものであり、胎盤及び羊膜は、ウマから採集されたものである。
本実施の形態によれば、従来の胎盤由来原料よりもアンチエイジング効果に有用な成分が多く含まれる羊膜由来原料を提供できる。また、本実施の形態によれば、効率よく羊膜エキスを抽出できる。
【００１０】
本発明の第２の実施の形態による羊膜由来原料の製造方法は、採集した胎盤及び羊膜を凍結する分離前凍結工程と、分離前凍結工程の後に、胎盤及び羊膜を流水にて解凍する分離前解凍工程と、分離前解凍工程の後に、胎盤及び羊膜の水切りを行う分離前水切工程と、分離前水切工程の後に、胎盤と羊膜を分離する分離工程と、分離工程の後に、羊膜を水洗いする羊膜水洗工程と、羊膜水洗工程の後に、羊膜の水切りを行う羊膜水切工程と、羊膜水切工程の後に、羊膜を細断し、細断した羊膜を再度水切りする羊膜細断工程と、羊膜細断工程の後に、羊膜を凍結する羊膜凍結工程と、羊膜凍結工程の後に、羊膜を解凍する羊膜解凍工程と、羊膜解凍工程の後に、羊膜を分解抽出してエキスを得る抽出工程とを有し、抽出工程は、羊膜の凍結と融解を所定回数繰り返して水溶性画分を分離するものであり、胎盤及び羊膜は、ウマから採集されたものである。
本実施の形態によれば、従来の胎盤由来原料よりもアンチエイジング効果に有用な成分が多く含まれる羊膜由来原料を提供できる。また、本実施の形態によれば、効率よく羊膜エキスを抽出できる。
【００１１】
本発明の第３の実施形態による化粧品の製造方法は、第１又は第２の実施の形態による羊膜由来原料の製造方法によって得られた羊膜由来原料を配合するものである。
本実施の形態によれば、アンチエイジング効果に優れた化粧品を提供できる。
【００１２】
本発明の第４の実施形態による健康食品の製造方法は、第１又は第２の実施の形態による羊膜由来原料の製造方法によって得られた羊膜由来原料を配合するものである。
本実施の形態によれば、アンチエイジング効果に優れた健康食品を提供できる。
【実施例】
【００１３】
以下に、本発明の一実施例による羊膜由来原料の製造方法、並びに羊膜由来原料を配合した化粧品及び健康食品について説明する。
【００１４】
図１は、本実施例による羊膜由来原料の製造工程図である。
本実施例による羊膜由来原料（羊膜エキス）の製造方法は、分離前凍結工程１０、分離前解凍工程１１、分離前水切工程１２、分離工程１３、羊膜水洗工程１４、羊膜水切工程１５、羊膜細断工程１６、羊膜凍結工程１７、羊膜解凍工程１８及び抽出工程１９を有する。
【００１５】
分離前凍結工程１０においては、分娩直後に採集した胎盤及び羊膜を、直ちに約−２０度で凍結する。凍結した胎盤及び羊膜は、所定場所まで輸送し保管する。これにより、採集した胎盤及び羊膜を良好な状態で保管することができる。
なお、採集する胎盤及び羊膜は、ヒト、ブタ、ウマ又はヒツジなどの哺乳類動物のものであればよいが、その中でも安全性に優れ、かつ化粧品及び健康食品の用途に適したブタ又はウマの胎盤及び羊膜とすることが好ましい。
【００１６】
分離前解凍工程１１においては、分離前凍結工程１０で凍結した胎盤及び羊膜を容器に入れ、その容器に水を流すことによって胎盤及び羊膜を急速解凍する。分離前解凍工程１１は、分離工程１３を開始する直前に行う。
また、胎盤及び羊膜が解凍された後も水を流し続ける。水を流し続けることにより、胎盤や羊膜に触れる水が常に清浄な状態に保たれ、血液等で汚染された解凍用水が胎盤や羊膜に付着することがない。これにより、羊膜由来原料が化粧品又は健康食品といった最終製品のにおいや色に影響することを防止できる。
【００１７】
分離前水切工程１２においては、分離前解凍工程１１で解凍した胎盤及び羊膜を、ザル等の水切り容器に入れて水切りする。これにより、余分な水分を除去でき、後工程での作業性が向上する。
【００１８】
分離工程１３においては、分離前水切工程１２で水切りした胎盤及び羊膜から羊膜を分離する。
胎盤及び羊膜の形状は動物種によって異なり、例えば、ヒトの場合は子宮の一部に円盤状に形成される盤状胎盤、ブタ及びウマの場合は子宮内の全体に散在して形成される散在性胎盤と呼ばれる構造である。胎盤から羊膜を分離する際は、ヒトの場合は胎盤が一つの大きな塊となっているので作業が明確であるが、散在性胎盤であるブタ及びウマの場合はそうではないため、以下の手順で行う。  
まず、胎盤を分離する前の羊膜をハサミなどの切断具で切り開いて伸ばす。次に、胎盤と羊膜を分離する。次に、分離した羊膜に付着した胎盤及び血管を取り残しがないように注意して除去する。これにより、胎盤と羊膜を効率よく分離することができ、胎盤や血管が付着していない羊膜のみを抽出に供することができる。このように分離された羊膜を用いて抽出工程１９で得られた羊膜エキスは、アンチエイジング効果に有用な成分がより多く含まれた羊膜由来原料となる。また、化粧品や健康食品といった最終製品に配合する場合に、最終製品のにおいや色への影響が少ない。
【００１９】
羊膜水洗工程１４においては、分離工程１３で胎盤から分離した羊膜を、再度水洗いする。これにより、分離した羊膜に胎盤や血管が残ることをより確実に防止できる。
【００２０】
羊膜水切工程１５においては、羊膜水洗工程１４で水洗いした羊膜を、ザル等の水切り容器に入れて水切りする。羊膜の水分除去、すなわち羊膜の水分管理を行うことにより、羊膜の重量が水分によってばらつくことを防止し、ひいては羊膜由来原料の品質を向上させることができる。
羊膜水切工程１５の後に羊膜細断工程１６を行う。羊膜細断工程１６で細断した羊膜は、再度水切りする。再度水切りを行うことで水分管理の精度を高め、羊膜の重量の水分によるばらつきを更に抑制し、羊膜由来原料の品質をより一層向上させることができる。
【００２１】
羊膜細断工程１６においては、羊膜水切工程１５で水切りした羊膜を、ミンチ機等の細断機で例えば９ｍｍ角に細断する。
【００２２】
羊膜凍結工程１７においては、羊膜細断工程１６で細断し水切りした羊膜の重量を測定してポリ袋等の収納容器に入れ、空気抜きをして密封し、すみやかに冷凍庫に入れて約−２０度で羊膜を凍結させる。これにより、細断した羊膜を良好な状態で保管することができる。また、上述のように、羊膜水切工程１５及び羊膜細断工程１６において水分管理を行っているため、測定される羊膜の重量は、水分によるばらつきが抑制されたものである。
なお、例えばウマの胎盤からは、分離前の胎盤に対する重量％で約１５％〜４０％重量の羊膜が得られる。
羊膜凍結工程１７で凍結した羊膜は、羊膜解凍工程１８において解凍する。
【００２３】
抽出工程１９においては、羊膜解凍工程１８で解凍した羊膜について、酵素処理、加水分解処理、酸処理又は凍結融解等の方法で分解抽出を行う。これにより、羊膜エキスを得ることができる。
抽出工程１９で得られた羊膜エキスを遠心分離又はろ過することにより、化粧品や健康食品等に配合する羊膜エキスの液体原料とすることができる。
また、抽出工程１９で得られた羊膜エキスを凍結乾燥又は噴霧乾燥することにより、化粧品や健康食品等に配合する羊膜エキスの粉末原料とすることができる。
羊膜エキスの液体原料又は粉末原料を所定量配合することにより、胎盤から分離した羊膜のエキスが配合された化粧品又は健康食品を得ることができる。
なお、羊膜解凍工程１８の後、抽出工程１９には移行せず、解凍した羊膜についてフリーズドライ等の乾燥を行って破砕した場合には、羊膜の粉末原料を得ることができる。
【００２４】
図２は、図１に示す工程により製造した羊膜エキスの指標成分を酵素免疫測定法により定量した結果を示す図である（単位：pg/g）。
指標成分は、サイトカイン類であるEpidermal Growth Factor（EGF）、acidic Fibroblast Growth Factor（aFGF）、Hepatocyte Growth Factor（HGF）、Growth Differentiation Factor 11（GDF-11）とした。
【００２５】
図２（ａ）は、羊膜エキスの粉末原料の指標成分を定量した結果を示している。羊膜エキスの粉末原料は、羊膜細断工程１６において羊膜をミンチ状に細断した後、羊膜凍結工程１７及び羊膜解凍工程１８を経て、抽出工程１９において精製水と中性プロテアーゼを加えて、抽出温度を３０度以上７０度以下、抽出時間を１時間以上１０時間以下として処理し、得られた羊膜エキスを凍結乾燥することにより製造したものである。由来原料にウマの羊膜を用いた場合を実施例１、ブタの羊膜を用いた場合を実施例２としている。
また、図２（ａ）には、比較例として、胎盤エキスの粉末原料の指標成分を定量した結果を併せて示している。胎盤エキスの粉末原料は、羊膜の代わりに分離前の胎盤を用いた以外は実施例１、２と同条件で処理することにより製造したものである。由来原料にウマの胎盤を用いた場合を比較例１、ブタの胎盤を用いた場合を比較例２としている。
【００２６】
図２（ａ）に示すように、実施例１、２は、比較例１、２に比べて指標成分が高い値でバランスよく検出されていることが分かる。特にGDF-11に関しては、比較例１、２では検出されないか又は検出されても低い値であるのに対して、実施例１、２では高い値が検出されている。これらの指標成分はアンチエイジングに有用な成分であるから、胎盤から分離した羊膜を用いた羊膜エキスの粉末原料を配合することで、羊膜を分離する前の胎盤又は羊膜を分離した後の胎盤を用いた胎盤エキスの粉末原料を配合した場合よりも、アンチエイジング効果に優れた化粧品や健康食品を提供することができる。
また、GDF-11については、実施例２よりも実施例１のほうが高い値となっている。したがって、GDF-11を多く含ませたい場合は、ウマの羊膜エキスの粉末原料を用いることが好ましい。
【００２７】
図２（ｂ）は、羊膜エキスの液体原料の指標成分を定量した結果を示している。羊膜エキスの液体原料は、羊膜細断工程１６において羊膜をミンチ状に細断した後、羊膜凍結工程１７及び羊膜解凍工程１８を経て、抽出工程１９において凍結と融解を所定回数繰り返して水溶性画分を分離することにより製造したものである。由来原料にウマの羊膜を用いた場合を実施例３、ブタの羊膜を用いた場合を実施例４としている。
また、図２（ｂ）には、比較例として、胎盤エキスの液体原料の指標成分を定量した結果を併せて示している。胎盤エキスの液体原料は、羊膜の代わりに分離前の胎盤を用いた以外は実施例３、４と同条件で処理することにより製造したものである。由来原料にウマの胎盤を用いた場合を比較例３、ブタの胎盤を用いた場合を比較例４としている。
【００２８】
図２（ｂ）に示すように、実施例３、４は、比較例３、４に比べて指標成分が高い値でバランスよく検出されていることが分かる。特にGDF-11に関しては、比較例３、４では検出されないか又は検出されても低い値であるのに対して、実施例３、４では高い値が検出されている。これらの指標成分はアンチエイジングに有用な成分であるから、胎盤から分離した羊膜を用いた羊膜エキスの液体原料を配合することで、羊膜を分離する前の胎盤又は羊膜を分離した後の胎盤を用いた胎盤エキスの液体原料を配合した場合よりも、アンチエイジング効果に優れた化粧品や健康食品を提供することができる。
また、GDF-11については、実施例４よりも実施例３のほうが高い値となっている。したがって、GDF-11を多く含ませたい場合は、ウマの羊膜エキスの液体原料を用いることが好ましい。
【００２９】
図３は、図１に示す工程により製造した羊膜エキスの角質水分量保持データを示す図である。横軸は経過時間（min）、縦軸は角質水分量（μｓ）である。
図中「▲」は、羊膜細断工程１６においてウマの羊膜をミンチ状に細断した後、羊膜凍結工程１７及び羊膜解凍工程１８を経て、抽出工程１９において精製水と中性プロテアーゼを加えて、抽出温度を３０度以上７０度以下、抽出時間を１時間以上１０時間以下として処理し、０．２μｍのろ過を行うことにより製造した羊膜エキスのデータである（実施例５）。
また、図中「■」及び「◆」は、比較例のデータである。「■」は、ウマの胎盤を処理して得られた胎盤エキスのデータを示し（比較例５）、「◆」は、羊膜エキスも胎盤エキスも含まれていない無添加のコントロール（水）のデータを示している（比較例６）。なお、比較例５の胎盤エキスは、羊膜の代わりに胎盤を用いた以外は実施例５と同条件で処理することにより製造したものである。
【００３０】
図３に示すように、実施例５の羊膜エキスは、塗布してから９０分以降、比較例５の胎盤エキスを塗布した場合と比べて角質水分量が上回っており、比較例５の胎盤エキスよりも持続的な保湿力を有していることが分かる。
【００３１】
図４は、図１に示す工程により製造した羊膜エキスの使用感テストの結果を示す図である。
使用感テストは、羊膜エキスが１％配合された化粧水について、ヒトモニター１０名を対象として一ヶ月行い、「しっとり」、「ハリ」、「つや」及び「やわらかさ」の各項目について評価を得た。
使用感テストに使用した羊膜エキスは、由来原料をウマの羊膜とし、羊膜細断工程１６において羊膜をミンチ状に細断した後、羊膜凍結工程１７及び羊膜解凍工程１８を経て、抽出工程１９において精製水と中性プロテアーゼを加えて、抽出温度を３０度以上７０度以下、抽出時間を１時間以上１０時間以下として処理し、０．２μｍのろ過を行うことにより製造したものである。
【００３２】
図４に示すように、「しっとり（保湿効果）」、「ハリ」、「つや」及び「やわらかさ」のいずれにおいても向上効果が確認された。
【００３３】
図５は、図１に示す工程により製造した羊膜エキスを手の甲に塗布した場合の効果を示す図である（実施例６）。また、図６は、比較例として胎盤エキスを手の甲に塗布した場合の効果を示す図である（比較例７）。また、図７は、図１に示す工程により製造した羊膜エキスを足に塗布した場合の効果を示す図である（実施例７）。
実施例６、７の羊膜エキスは、由来原料をウマの羊膜とし、羊膜細断工程１６において羊膜をミンチ状に細断した後、羊膜凍結工程１７及び羊膜解凍工程１８を経て、抽出工程１９において精製水と中性プロテアーゼを加えて、抽出温度を３０度以上７０度以下、抽出時間を１時間以上１０時間以下として処理し、０．２μｍのろ過を行うことにより製造したものである。
また、比較例７の胎盤エキスは、羊膜の代わりに胎盤を用いた以外は羊膜エキスと同条件で処理することにより製造したものである。
効果は、羊膜エキスを塗布する群としてヒトモニターＡ〜Ｅの５名、胎盤エキスを塗布する群としてヒトモニターＦ〜Ｊの５名を対象として、以下の手順にて５日間行うことで確認した。
１．塗布前に肌の肌理を撮影する。
２．その後、１日１回手の甲に羊膜エキス又は胎盤エキスを塗布する。なお、ヒトモニターＡについては、足にも羊膜エキスを塗布する。
３．最終日の同時間に再度肌の肌理を撮影する。
【００３４】
図５及び図６においては、ヒトモニターごとに肌理の状態を示している。図５（ａ）〜（ｅ）はそれぞれヒトモニターＡ〜Ｅの肌理の状態を示し、図６（ａ）〜（ｅ）はそれぞれヒトモニターＦ〜Ｊの肌理の状態を示しており、各（ａ）〜（ｅ）において、左側が塗布前の肌理の状態、右側が最終日の肌理の状態である。
図５及び図６に示すように、羊膜エキスを手の甲に塗布した結果、胎盤エキスを手の甲に塗布した結果と同等以上に、肌のきめ細かさが向上することが確認された。
【００３５】
図７（ａ）においては、ヒトモニターＡについて、左側が塗布前の肌理の状態、右側が最終日の肌理の状態である。また、図７（ｂ）においては、上段が初日の塗布前の肌の状態を示し、下段が最終日の肌の状態を示している。
図７（ａ）に示すように、羊膜エキスを足に塗布した結果、肌の乾燥が改善し肌のきめ細かさが向上することが確認された。
また、図７（ｂ）に示すように、羊膜エキスを足に塗布した結果、湿疹が改善することが確認された。
【００３６】
図８は、図１に示す工程により製造した羊膜エキスの飲用テストの結果を示す図である。
飲用テストは、ウマの羊膜エキスの粉末原料をハードカプセルに充填した健康食品（実施例８）と、ウマの胎盤エキスの粉末原料をハードカプセルに充填した健康食品（比較例８）について、ヒトモニター１０名を対象として計１０日間行い、「飲みやすさ」、「におい」、「体調の良い変化」、「肌の潤い」、「肌のハリ・弾力」及び「肌のキメ」の各項目について評価を得た。
飲用テストに使用した羊膜エキスの粉末原料は、由来原料をウマの羊膜とし、羊膜細断工程１６において羊膜をミンチ状に細断した後、羊膜凍結工程１７及び羊膜解凍工程１８を経て、抽出工程１９において精製水と中性プロテアーゼを加えて、抽出温度を３０度以上７０度以下、抽出時間を１時間以上１０時間以下として処理し、得られた羊膜エキスを凍結乾燥することにより製造したものである。また、胎盤エキスの粉末原料は、羊膜の代わりに胎盤を用いた以外は実施例８と同条件で処理することにより製造したものである。
飲用テストは、以下の方法で行い、各項目について実施例８と比較例８のどちらが優れているかをヒトモニターに選択してもらった。
第１グループ（ヒトモニター５名）：（１）実施例８の健康食品を５日間飲用→（２）比較例８の健康食品を５日間飲用（計１ヶ月となるまで（１）と（２）を繰り返す）
第２グループ（ヒトモニター５名）：（１）比較例８の健康食品を５日間飲用→（２）実施例８の健康食品を５日間飲用（計１ヶ月となるまで（１）と（２）を繰り返す）
【００３７】
図８に示すように、実施例８の羊膜エキスは、「飲みやすさ」、「におい」及び「肌の潤い」の項目において比較例８の胎盤エキスと同等の体感が得られ、「体調の良い変化」、「肌のハリ・弾力」及び「肌のキメ」において比較例８の胎盤エキスよりも体感の向上効果が確認された。
【産業上の利用可能性】
【００３８】
本発明の羊膜由来原料の製造方法によれば、従来の胎盤由来原料よりもアンチエイジング効果に有用な成分が多く含まれる羊膜由来原料を提供することができる。また、この羊膜由来原料が配合された化粧品や健康食品等を提供することができる。
【符号の説明】
【００３９】
１０  分離前凍結工程 
１１  分離前解凍工程 
１２  分離前水切工程 
１３  分離工程
１４  羊膜水洗工程
１５  羊膜水切工程
１６  羊膜細断工程
１７  羊膜凍結工程
１８  羊膜解凍工程
１９  抽出工程