(57)【要約】      （修正有）【課題】有益薬剤の送達のために設計される組成物において、製造が容易であり、所望の投与様式に適しており、所望の放出速度を有し、十分なシリンジ通過性及び注射可能性を有し、あるいは細いゲージ針または針無し注射器と共に使用する又は注射に好適であり得る、有益薬剤の送達の組成物の提供。【解決手段】ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体と、ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒を含むビヒクル；及び、該ビヒクル中に分散した、２５℃においてビヒクル中に１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する不溶性の有益薬剤複合体、を含む組成物であって、該組成物が、２５℃で１，２００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有し、かつ、該組成物はエマルションでない、組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体と、
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒とを含むビヒクル、および、
前記ビヒクル中に分散した不溶性の有益薬剤(benefical agent)複合体であって、２５℃において前記ビヒクル中に１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する、不溶性の有益薬剤複合体、を含む組成物であって、
前記組成物は、２５℃で１，２００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有し、かつ
前記組成物はエマルションでない、組成物。
【請求項２】
ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体と、
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒とを含むビヒクル、および、
前記ビヒクル中に分散した不溶性の有益薬剤複合体であって、２５℃において、前記ビヒクル中に１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する、不溶性の有益薬剤複合体とを含む組成物であって、
０．８ｍＬの前記組成物が、２１のゲージを有する０．５インチ針を装着された１ｍＬシリンジ中に２５℃で配置され、１０ｌｂの力が適用されるとき、少なくとも０．５ｍＬの前記組成物が１０秒未満のうちに前記シリンジから噴出され、
前記組成物はエマルションでない、組成物。
【請求項３】
ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体と、
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒からなる単一溶媒とを含むビヒクル、および、
前記ビヒクル中に分散した有益薬剤を含む不溶性の成分であって、２５℃において、前記ビヒクル中に１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する、不溶性の成分を含む組成物であって、
前記組成物は、２５℃で１，２００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有し、かつ
前記組成物はエマルションでない、組成物。
【請求項４】
前記不溶性の成分は、不溶性の有益薬剤複合体を含む、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
ビヒクルの約５重量％〜約３０重量％の量で存在する生分解性重合体と、
ビヒクルの約９５重量％〜約７０重量％の量で存在する疎水性溶媒とを含む単相のビヒクル、および、
前記ビヒクル中に分散した不溶性の有益薬剤複合体であって、そのうちの少なくとも９９％は、２５℃で前記ビヒクル中で不溶性である、有益薬剤複合体、を含む注射用デポー組成物であって、
前記注射用デポー組成物は、２５℃で１２００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有し、かつ
前記注射用デポー組成物はエマルションでない、注射用デポー組成物。
【請求項６】
前記不溶性の有益薬剤複合体が、１０ｍｇの前記不溶性の有益薬剤複合体を、１ｍＬのｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水の試験溶液中に分散し、３７℃で２４時間放置したとき、前記試験溶液中に溶解する有益薬剤の量が、前記１０ｍｇの不溶性の有益薬剤複合体中の有益薬剤の６０％未満となるものである、請求項１、２、４、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
前記組成物は、ゲルでない、請求項１、２、３、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
前記組成物は、１０以上のＧ”／Ｇ’比を有する、請求項１、２、３、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
前記生分解性重合体は、イオン性末端基を含み、１０００ダルトン〜２０，０００ダルトンの範囲の重量平均分子量を有する、請求項１、２、３、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記生分解性重合体は、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ならびにそれらの共重合体および三元重合体から選択される少なくとも１つのメンバーを含む、請求項１、２、３、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記生分解性重合体は、ポリ乳酸およびポリ（乳酸‐ｃｏ‐グリコール酸）のうちの少なくとも１つを含む、請求項１、２、３、または５のいずれかに記載の組成物。
【請求項１２】
前記疎水性溶媒は、ベンジルアルコール、安息香酸メチル、安息香酸エチル、安息香酸ｎ−プロピル、安息香酸イソプロピル、安息香酸ブチル、安息香酸イソブチル、安息香酸ｓｅｃ−ブチル、安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル、安息香酸イソアミル、および安息香酸ベンジルから選択される少なくとも１つのメンバーを含む、請求項１、２、３、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記疎水性溶媒は、安息香酸ベンジルを含む、請求項１、２、３、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１４】
ベンジルアルコールを更に含む、請求項１、２、３、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１５】
エタノールを更に含む、請求項１、２、３、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１６】
前記不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤、二価金属と、重合カチオン性錯化剤および重合アニオン性錯化剤のうちの１つと、を含む、請求項１、２、４、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１７】
前記不溶性の有益薬剤複合体は、プロタミン、ポリリジン、ポリアルギニン、ポリミキシン、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ポリアデノシン、およびポリチミンから選択される少なくとも１つのメンバーを含む、請求項１、２、４、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１８】
前記不溶性の有益薬剤複合体は、電荷中性化粒子の形態である、請求項１、２、４、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１９】
前記不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤およびプロタミンを含む、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤および二価金属またはその塩を含む、請求項１、２、４、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２１】
前記二価金属は、Ｚｎ２＋、Ｍｇ２＋、およびＣａ２＋から選択される、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
前記不溶性の有益薬剤複合体は、プロタミンを更に含む、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
前記不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤およびプロタミンを含み、前記有益薬剤とプロタミンとのモル比は、およそ１：０．１〜０．５である、請求項１、２、４、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２４】
前記不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤、亜鉛、およびプロタミンを含み、前記有益薬剤と、亜鉛と、プロタミンとのモル比は、およそ１：０．４〜２：０．１〜０．５である、請求項１、２、４、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２５】
体内での有益薬剤の平均滞留時間（ＭＲＴ）は、ＭＲＴ溶媒＋ΔＭＲＴ複合体＋ΔＭＲＴ重合体の合計よりも大きく、ＭＲＴ溶媒は、前記疎水性溶媒単独中の前記有益薬剤についてのＭＲＴであり、ΔＭＲＴ複合体は、重合体の不在下での、前記不溶性の有益薬剤複合体に起因するＭＲＴにおける変化であり、ΔＭＲＴ重合体は、前記有益薬剤の錯化の不在下での、前記重合体に起因するＭＲＴにおける変化である、請求項１、２、４、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２６】
前記有益薬剤の前記ＭＲＴは、ＭＲＴ溶媒＋ΔＭＲＴ複合体＋ΔＭＲＴ重合体の合計よりも最大約１０倍大きい、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
前記組成物は、３７℃でｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水中への注射後に液体コアを囲む表層を形成し、前記表層が１０μｍ未満の厚さを有する、請求項１、２、３、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２８】
前記ビヒクルは、安息香酸ベンジルからなる前記疎水性溶媒からなる単一溶媒からなり、前記不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤およびプロタミンを含む、請求項１、２、または５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２９】
前記不溶性の有益薬剤複合体は、亜鉛を更に含む、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
被検体に、注射を介して、請求項１、２、３、または５のいずれか１項に記載の組成物を投与することを含む、有益薬剤を被検体に投与する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１０年１１月２４日に出願された米国仮出願第６１／４１７，１２６号、および「Ｒａｄｉａｔｉｏｎ−Ｓｔｅｒｉｌｉｚｅｄ  Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ」と題され、代理人整理番号ＤＵＲＥ−０７９ＰＲＶの、２０１１年１１月２３日に出願された米国仮出願第６１／５６３，４６９号の利益を主張し、参照によりそれらの開示全体が本明細書に明示的に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
デポー組成物(depot compositions)等の、有益薬剤(benefical agent)の送達のために設計される多様な組成物が入手可能であり、それらは、重合体、溶媒、および他の成分の種々の組み合わせを利用する。しかしながら、これらの組成物のうちの多くは、多数の成分および／または調製ステップを要するため、製剤プロセスを複雑化させている。更に、所望の投与様式に適した組成物を提供するため、または所望の放出速度(release kinetics)を提供するために、種々の添加剤が必要とされる場合がある。例えば、有益薬剤の徐放を提供するように設計された現在入手可能な製剤は、不十分なシリンジ通過性(syringeability)よび注射可能性(injectability)を持つ高粘度ビヒクルに依存することが多く、したがって、細いゲージ針または針無し(needless)注射器と共に使用するのに不適である。代替的に、注射に好適であり得る既存の低粘度製剤は、所望の放出速度を欠いていることが多く、有意な初期バースト、続いて指数関数的に低下する放出プロフィールを示す。本開示は、これらの問題に対処し、関連した利点を提供する。
【発明の概要】
【０００３】
本開示は、生分解性薬物送達組成物であって、ビヒクル、例えば、単相ビヒクル、およびビヒクル中に有益薬剤を含む不溶性の成分を含む、生分解性薬物送達組成物を提供する。幾つかの実施形態では、組成物はエマルションではないが、良好な注射可能性およびシリンジ通過性を提供可能な低粘度を有し、経時的な有益薬剤の持続放出、および最小化された初期バーストを更に提供する。また、生分解性薬物送達組成物またはその成分を含むキット、ならびに生分解性薬物送達組成物を作製および使用する方法も提供される。
【０００４】
本明細書に開示される生分解性薬物送達組成物の驚くべき特徴は、それらが、体内での望ましい薬物動態（ＰＫ）特性を提供しながら、注射前の室温で、および皮下注射または筋肉内注射後の両方で、典型的に低粘度を維持することである。これらの有益なＰＫ特性には、最小のバーストおよび長期にわたる有益薬剤の持続放出が含まれる。
【０００５】
本開示の或る非限定的な態様が以下に提供される：
１．ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体と、
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒を含むビヒクル；および、
前記ビヒクル中に分散した、２５℃においてビヒクル中に１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する不溶性の有益薬剤複合体、
を含む組成物であって、
前記組成物が、２５℃で１，２００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有し、かつ、
前記組成物はエマルションでない、組成物。
２．ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体と、
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒を含むビヒクル、および、
前記ビヒクル中に分散した、２５℃においてビヒクル中に１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する不溶性の有益薬剤複合体、
を含む組成物であって、
０．８ｍＬの組成物が、２１のゲージを有する０．５インチ針を装着された１ｍＬシリンジ中に２５℃で配置され、１０ｌｂの力が適用されるとき、少なくとも０．５ｍＬの組成物が１０秒未満のうちにシリンジから噴出され、かつ、
前記組成物はエマルションでない、組成物。
３．ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体と、
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒からなる単一溶媒を含むビヒクル、および、
前記ビヒクル中に分散した、２５℃においてビヒクル中に１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する不溶性の成分、
を含む組成物であって、
前記組成物は、２５℃で１，２００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有し、かつ、
前記組成物はエマルションでない、組成物。
４．不溶性の成分は、不溶性の有益薬剤複合体を含む、３に記載の組成物。
５．ビヒクルの約５重量％〜約３０重量％の量で存在する生分解性重合体と、
ビヒクルの約９５重量％〜約７０重量％の量で存在する疎水性溶媒を含む単相のビヒクル、および、
前記ビヒクル中に分散した不溶性の有益薬剤複合体であって、そのうちの少なくとも９９％は、２５℃いおいてビヒクル中で不溶性である、有益薬剤複合体、
を含む注射用デポー組成物であって、
前記注射用デポー組成物は、２５℃で１２００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有し、かつ
前記注射用デポー組成物はエマルションでない、組成物。
６．１０ｍｇの不溶性の有益薬剤複合体が、１ｍＬのｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水の試験溶液中に分散され、３７℃で２４時間放置されるとき、試験溶液中に溶解した有益薬剤の量は、１０ｍｇの不溶性の有益薬剤複合体中の有益薬剤の６０％未満である、１、２、４、または５のいずれか１つに記載の組成物。
７．組成物は、ゲルでない、１〜６のいずれか１つに記載の組成物。
８．組成物は、１０以上のＧ”／Ｇ’比を有する、１〜６のいずれか１つに記載の組成物。
９．生分解性重合体は、１０００ダルトン〜２０，０００ダルトンの範囲の重量平均分子量を有し、カルボキシル、スルホン酸塩、リン酸塩、アミノ、二級アミノ、三級アミノ、および四級アンモニウムから選択される少なくとも１つのメンバーを含むイオン性末端基を含む、１〜８のいずれか１つに記載の組成物。
１０．生分解性重合体は、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ポリブチロラクトン、ポリバレロラクトン、ならびにそれらの共重合体および三元重合体から選択される少なくとも１つのメンバーを含む、１〜９のいずれか１つに記載の組成物。
１１．生分解性重合体は、ポリ乳酸およびポリ（乳酸‐ｃｏ‐グリコール酸）のうちの少なくとも１つを含む、１〜１０のいずれかに記載の組成物。
１２．疎水性溶媒は、ベンジルアルコール、安息香酸メチル、安息香酸エチル、安息香酸ｎ−プロピル、安息香酸イソプロピル、安息香酸ブチル、安息香酸イソブチル、安息香酸ｓｅｃ−ブチル、安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル、安息香酸イソアミル、および安息香酸ベンジルから選択される少なくとも１つのメンバーを含む、１〜１１のいずれか１つに記載の組成物。
１３．疎水性溶媒は、安息香酸ベンジルを含む、１〜１１のいずれか１つに記載の組成物。
１４．ベンジルアルコールを更に含む、１〜１３のいずれか１つに記載の組成物。
１５．エタノールを更に含む、１〜１４のいずれか１つに記載の組成物。
１６．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤、二価金属と、重合カチオン性錯化剤および重合アニオン性錯化剤のうちの１つと、を含む、１、２、および４〜１５のいずれか１つに記載の組成物。
１７．不溶性の有益薬剤複合体は、プロタミン、ポリリジン、ポリアルギニン、ポリミキシン、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ポリアデノシン、およびポリチミンから選択される少なくとも１つのメンバーを含む、１、２、および４〜１６のいずれか１つに記載の組成物。
１８．不溶性の有益薬剤複合体は、電荷中性化粒子の形態である、１、２、および４〜１７のいずれか１つに記載の組成物。
１９．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤およびプロタミンを含む、１、２、および４〜１８のいずれか１つに記載の組成物。
２０．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤および二価金属またはその塩を含む、１、２、および４〜１９のいずれか１つに記載の組成物。
２１．二価金属は、Ｚｎ２＋、Ｍｇ２＋、およびＣａ２＋から選択される、２０に記載の組成物。
２２．不溶性の有益薬剤複合体は、プロタミンを更に含む、１、２、および４〜２１のいずれか１つに記載の組成物。
２３．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤およびプロタミンを含み、有益薬剤とプロタミンとのモル比は、およそ１：０．１〜０．５である、１、２、および４〜２２のいずれか１つに記載の組成物。
２４．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤、亜鉛、およびプロタミンを含み、有益薬剤と、亜鉛と、プロタミンとのモル比は、およそ１：０．４〜２：０．１〜０．５である、１、２、および４〜２３のいずれか１つに記載の組成物。
２５．体内での有益薬剤の平均滞留時間（ＭＲＴ）は、ＭＲＴ溶媒＋ΔＭＲＴ複合体＋ΔＭＲＴ重合体の合計よりも大きく、ＭＲＴ溶媒は、疎水性溶媒単独中の有益薬剤についてのＭＲＴであり、ΔＭＲＴ複合体は、重合体の不在下での、不溶性の有益薬剤複合体に起因するＭＲＴにおける変化であり、ΔＭＲＴ重合体は、有益薬剤の錯化の不在下での、重合体に起因するＭＲＴにおける変化である、１、２、および４〜２４のいずれか１つに記載の組成物。
２６．有益薬剤のＭＲＴは、ＭＲＴ溶媒＋ΔＭＲＴ複合体＋ΔＭＲＴ重合体の合計よりも最大約１０倍大きい、２５に記載の組成物。
２７．組成物は、３７℃でｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水中への注射後に液体コアを囲む表層を形成し、表層は、１０μｍ未満の厚さを有する、１〜２６のいずれか１つに記載の組成物。
２８．ビヒクルは、安息香酸ベンジルからなる疎水性溶媒からなる単一溶媒からなり、不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤およびプロタミンを含む、１〜２７のいずれか１つに記載の組成物。
２９．不溶性の有益薬剤複合体は、亜鉛を更に含む、２８に記載の組成物。
３０．被検体に、注射を介して、１〜２９のいずれか１つに記載の組成物を投与することを含む、有益薬剤を被検体に投与する方法。
３１．ビヒクルであって、
ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体、および
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒を含む、ビヒクルと、
ビヒクル中に分散した不溶性の有益薬剤複合体であって、２５℃で、ビヒクル中１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する、不溶性の有益薬剤複合体と、を含む、組成物であって、
組成物は、２５℃で、１，２００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有し、かつ
組成物は、エマルションでない、組成物。
３２．重合体は、ビヒクルの約１０重量％〜約２５重量％の量で存在する、３１に記載の組成物。
３３．重合体は、ビヒクルの約１５重量％〜約２０重量％の量で存在する、３１に記載の組成物。
３４．疎水性溶媒は、ビヒクルの約９０重量％〜約７５重量％の量で存在する、３１〜３３のいずれか１つに記載の組成物。
３５．疎水性溶媒は、ビヒクルの約８５重量％〜約８０重量％の量で存在する、３１〜３４のいずれか１つに記載の組成物。
３６．疎水性溶媒は、２つ以上の疎水性溶媒の組み合わせである、３１〜３５のいずれか１つに記載の組成物。
３７．組成物は、２５℃で、１，０００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有する、３１〜３６のいずれか１つに記載の組成物。
３８．組成物は、２５℃で、５００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有する、３１〜３７のいずれか１つに記載の組成物。
３９．組成物は、２５℃で、１００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有する、３１〜３８のいずれか１つに記載の組成物。
４０．ビヒクルは、少なくとも１週間の期間にわたって（該期間にわたって３７℃で維持されたとき）１桁より大きくは逸脱しないゼロせん断粘度を維持し、ゼロせん断粘度は、１ｍＬのビヒクルの、１００ｍＬのｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中への注射後に３７℃の温度で維持される、３１〜３９のいずれか１つに記載の組成物。
４１．０．８ｍＬの組成物が、２１のゲージを有する０．５インチ針を装着された１ｍＬシリンジ中に２５℃で配置され、１０ｌｂの力が適用されるとき、少なくとも０．５ｍＬの組成物が２５秒未満のうちにシリンジから噴出される、３１〜４０のいずれか１つに記載の組成物。
４２．時間枠は、１０秒未満である、４１に記載の組成物。
４３．時間枠は、５秒未満である、４１に記載の組成物。
４４．組成物は、針無し注射器を使用して注射されることが可能である、３１〜４３のいずれか１つに記載の組成物。
４５．組成物は、ゲルでない、３１〜４４のいずれか１つに記載の組成物。
４６．組成物は、３７℃で７日間維持されたとき、ゲルを形成しない、３１〜４５のいずれか１つに記載の組成物。
４７．組成物は、３７℃で７日間水と接触させられたとき、膨張しない、３１〜４６のいずれか１つに記載の組成物。
４８．生分解性重合体は、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ならびにそれらの共重合体および三元重合体から選択される少なくとも１つのメンバーを含む、３１〜４７のいずれか１つに記載の組成物。
４９．生分解性重合体は、三元重合体である、３１〜４８のいずれか１つに記載の組成物。
５０．生分解性重合体は、ポリ乳酸（ＰＬＡ）を含む、３１〜４８のいずれか１つに記載の組成物。
５１．ＰＬＡは、イオン性末端基を含む、５０に記載の組成物。
５２．イオン性末端基は、酸末端基である、５１に記載の組成物。
５３．ＰＬＡは、非イオン性（ｕｎｉｏｎｉｚａｂｌｅ）末端基を含む、５０に記載の組成物。
５４．非イオン性末端基は、ヒドロキシルおよびエステルから選択される少なくとも１つのメンバーを含む、５３に記載の組成物。
５５．生分解性重合体は、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）を含む、３１〜４８のいずれか１つに記載の組成物。
５６．ＰＬＧＡは、イオン性末端基を含む、５５に記載の組成物。
５７．イオン性末端基は、酸末端基である、５６に記載の組成物。
５８．ＰＬＧＡは、非イオン性末端基を含む、５５に記載の組成物。
５９．非イオン性末端基は、ヒドロキシルおよびエステルから選択される少なくとも１つのメンバーを含む、５８に記載の組成物。
６０．生分解性重合体は、ヒドロキシカプロン酸−グリコール酸−乳酸三元重合体を含む、４８に記載の組成物。
６１．疎水性溶媒は、２５℃で５重量％以下の水中溶解度を有する、３１〜６０のいずれか１つに記載の組成物。
６２．疎水性溶媒は、２５℃で１重量％以下の水中溶解度を有する、６１に記載の組成物。
６３．疎水性溶媒中の水溶解度は、２５℃で１０重量％以下である、３１〜６０のいずれか１つに記載の組成物。
６４．疎水性溶媒中の水溶解度は、２５℃で５重量％以下である、３１〜６０のいずれか１つに記載の組成物。
６５．疎水性溶媒中の水溶解度は、２５℃で１重量％以下である、３１〜６０のいずれか１つに記載の組成物。
６６．疎水性溶媒は、２つ以上の疎水性溶媒の組み合わせを含む、３１〜６０のいずれか１つに記載の組成物。
６７．疎水性溶媒は、安息香酸メチル、安息香酸エチル、安息香酸ｎ−プロピル、安息香酸イソプロピル、安息香酸ブチル、安息香酸イソブチル、安息香酸ｓｅｃ−ブチル、安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル、安息香酸イソアミル、安息香酸ベンジル、およびベンジルアルコールから選択される１つ以上の溶媒を含む、３１〜６０のいずれか１つに記載の組成物。
６８．疎水性溶媒は、ベンジルアルコールである、３１〜６０のいずれか１つに記載の組成物。
６９．組成物は、ベンジルアルコールがない、３１〜６０のいずれか１つに記載の組成物。
７０．疎水性溶媒は、安息香酸ベンジルである、３１〜６０のいずれか１つに記載の組成物。
７１．組成物は、少なくとも１つの追加的溶媒を含む、３１〜７０のいずれか１つに記載の組成物。
７２．少なくとも１つの追加的溶媒は、ベンジルアルコールである、７１に記載の組成物。
７３．少なくとも１つの追加的溶媒は、トリアセチンである、７１に記載の組成物。
７４．少なくとも１つの追加的溶媒は、乳酸エチルである、７１に記載の組成物。
７５．少なくとも１つの追加的溶媒は、エタノールである、７１に記載の組成物。
７６．組成物は、１つを超える溶媒を含まない、３１〜６５のいずれか１つに記載の組成物。
７７．不溶性の有益薬剤複合体は、電荷中性化される、３１〜７６のいずれか１つに記載の組成物。
７８．不溶性の有益薬剤複合体は、プロタミンを含む、３１〜７７のいずれか１つに記載の組成物。
７９．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤の二価金属塩を含む、３１〜７８のいずれか１つに記載の組成物。
８０．二価金属は、Ｚｎ２＋、Ｍｇ２＋、およびＣａ２＋から選択される少なくとも１つのメンバーを含む、７９に記載の組成物。
８１．不溶性の有益薬剤複合体は、プロタミンおよび有益薬剤のＺｎ２＋塩を含む、３１〜８０のいずれか１つに記載の組成物。
８２．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤およびカチオン性薬剤を含む、３１〜７８のいずれか１つに記載の組成物。
８３．カチオン性薬剤は、ポリリジン、ポリアルギニン、およびポリミキシンからなる群から選択される、８２に記載の組成物。
８４．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤およびアニオン性薬剤を含む、３１〜７８のいずれか１つに記載の組成物。
８５．アニオン性薬剤は、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ポリアデノシン、およびポリチミンから選択される少なくとも１つのメンバーを含む、８４に記載の組成物。
８６．アニオン性薬剤は、少なくとも１０ｍｅｒポリアデノシンまたはポリチミンである、８４に記載の組成物。
８７．アニオン性薬剤は、少なくとも２０ｍｅｒポリアデノシンまたはポリチミンである、８６に記載の組成物。
８８．アニオン性薬剤は、少なくとも１５０ｍｅｒポリアデノシンまたはポリチミンである、８７に記載の組成物。
８９．アニオン性薬剤は、少なくとも１５００ｍｅｒポリチミンである、８８に記載の組成物。
９０．組成物は、メチオニンを更に含む、３１〜８９のいずれか１つに記載の組成物。
９１．不溶性の有益薬剤複合体は、約１μｍ〜約４００μｍの範囲の平均粒径を有する粒子の形態でビヒクル中に分散される、３１〜９０に記載の組成物。
９２．不溶性の有益薬剤複合体は、約１μｍ〜約１０μｍの範囲の平均粒径を有する粒子の形態でビヒクル中に分散される、９１に記載の組成物。
９３．不溶性の有益薬剤複合体は、約１０μｍ〜約１００μｍの範囲の平均粒径を有する粒子の形態でビヒクル中に分散される、９１に記載の組成物。
９４．ビヒクルの見かけ密度は、粒子の見かけ密度の１０％以内である、９１に記載の組成物。
９５．１０ｍｇの不溶性の有益薬剤複合体が、１ｍＬのｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水の試験溶液中に分散され、３７℃で２４時間放置されるとき、試験溶液中に溶解した有益薬剤の量は、１０ｍｇの不溶性の有益薬剤複合体中の有益薬剤の５０％以下である、３１〜９４のいずれか１つに記載の組成物。
９６．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤およびプロタミンを含み、有益薬剤とプロタミンとのモル比は、およそ１：０．１〜０．５である、３１〜９５のいずれか１つに記載の組成物。
９７．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤、亜鉛、およびプロタミンを含み、有益薬剤と、亜鉛と、プロタミンとのモル比は、およそ１：０．４〜２：０．１〜０．５である、３１〜８１のいずれか１つに記載の組成物。
９８．  不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤としてペプチドまたはタンパク質を含み、組成物は、２５ｋＧｙの線量でのガンマ線照射への曝露後、少なくとも２４時間の期間にわたって、約９０％以上の純度を維持する、９０に記載の組成物。
９９．期間は、少なくとも１ヶ月である、９８に記載の組成物。
１００．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤としてペプチドまたはタンパク質を含み、組成物は、２５ｋＧｙの線量でのガンマ線照射への曝露後、少なくとも２４時間の期間にわたって、約９５％以上の純度を維持する、９８に記載の組成物。
１０１．期間は、少なくとも１ヶ月である、１００に記載の組成物。
１０２．ビヒクルは、ビヒクルの約５重量％〜約２０重量％の量のイソ酪酸酢酸スクロース（ＳＡＩＢ）を更に含む、３１〜１０１のいずれか１つに記載の組成物。
１０３．ビヒクルは、ビヒクルの約５重量％〜約１０重量％の量のＳＡＩＢを含む、１０２に記載の組成物。
１０４．ビヒクルは、約５％〜１０％ＳＡＩＢ、約７０％〜約７５％の疎水性溶媒、および約１５％〜２５％の生分解性重合体を含み、各々の％は、ビヒクルの重量％である、１０３に記載の組成物。
１０５．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤のＺｎ２＋塩を含む、１０４に記載の組成物。
１０６．ビヒクルは、約５〜約１０％ＳＡＩＢ、約６５％〜約７０％安息香酸ベンジル、約３％〜約７％エタノール、および約１５％〜約２５％ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）を含み、各々の％は、ビヒクルの重量％である、１０３に記載の組成物。
１０７．ビヒクルは、約１５％〜約２５％ＳＡＩＢ、約５５％〜約６５％安息香酸ベンジル、約５％〜約１５％ベンジルアルコール、および約５％〜約１５％ポリ乳酸（ＰＬＡ）を含み、各々の％は、ビヒクルの重量％である、１０２に記載の組成物。
１０８．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤のＺｎ２＋塩を含む、１０７に記載の組成物。
１０９．ビヒクルは、約６５％〜約７５％安息香酸ベンジル、約５％〜約１５％ベンジルアルコール、および約１５％〜約２５％ポリ乳酸（ＰＬＡ）を含み、各々の％は、ビヒクルの重量％である、１０２に記載の組成物。
１１０．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤のＺｎ２＋塩を含む、１０２に記載の組成物。
１１１．不溶性の有益薬剤複合体の量は、組成物の約１重量％〜約５０重量％の範囲である、１１０に記載の組成物。
１１２．不溶性の有益薬剤複合体は、タンパク質、ペプチド、核酸、ヌクレオチド、ヌクレオシド、ならびにそれらの前駆体、誘導体、プロドラッグ、および類似体から選択される少なくとも１つのメンバーを含む、有益薬剤を含む、３１〜１１１のいずれか１つに記載の組成物。
１１３．不溶性の有益薬剤複合体は、タンパク質を含む有益薬剤を含む、１１２に記載の組成物。
１１４．タンパク質は、ＩＦＮα２ａまたは組換えヒトｒｈＩＦＮα２ａである、１１３に記載の組成物。
１１５．タンパク質は、成長ホルモンである、１１３に記載の組成物。
１１６．成長ホルモンは、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）または組換えヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）である、１１５に記載の組成物。
１１７．不溶性の有益薬剤複合体は、ペプチドを含む有益薬剤を含む、１１２に記載の組成物。
１１８．ペプチドは、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）またはその類似体である、１１７に記載の組成物。
１１９．ペプチドは、エクセナチドである、１１７に記載の組成物。
１２０．不溶性の有益薬剤複合体は、抗体またはその断片を含む有益薬剤を含む、３１〜１１１に記載の組成物。
１２１．不溶性の有益薬剤複合体は、ヌクレオチド、ヌクレオシド、またはそれらの類似体を含む有益薬剤を含む、３１〜１１１に記載の組成物。
１２２．不溶性の有益薬剤複合体は、ヌクレオシド類似体を含む有益薬剤を含む、１２１に記載の組成物。
１２３．ヌクレオシド類似体は、アザシチジンである、１２２に記載の組成物。
１２４．不溶性の有益薬剤複合体は、低分子量化合物を含む有益薬剤を含む、３１〜１１１に記載の組成物。
１２５．低分子量化合物は、抗腫瘍薬を含む、１２４に記載の組成物。
１２６．抗腫瘍薬は、ボルテゾミブである、１２５に記載の組成物。
１２７．組成物は、３７℃でｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水中への注射後に液体コアを囲む表層を形成し、表層は、１０μｍ未満の厚さを有する、３１〜１２６のいずれか１つに記載の組成物。
１２８．ビヒクルの約５重量％〜約３０重量％の量で存在する生分解性重合体と、
ビヒクルの約９５重量％〜約７０重量％の量で存在する疎水性溶媒を含む単相のビヒクル、および、
前記ビヒクル中に分散した不溶性の有益薬剤複合体であって、そのうちの少なくとも９９％は、２５℃においてビヒクル中で不溶性である有益薬剤複合体、
を含む注射用デポー組成物であって、
前記注射用デポー組成物は、２５℃で１２００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有し、かつ、
前記注射用デポー組成物はエマルションでない、注射用デポー組成物。
１２９．生分解性重合体は、ポリ乳酸を含む、１２８に記載の組成物。
１３０．ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体と、
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒を含むビヒクル、および、
前記ビヒクル中に分散した不溶性の有益薬剤複合体であって、２５℃においてビヒクル中に１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する不溶性の有益薬剤複合体、
を含む組成物であって、
前記有益薬剤の体内での平均滞留時間（ＭＲＴ）は、ＭＲＴ溶媒＋ΔＭＲＴ複合体＋ΔＭＲＴ重合体の合計よりも大きく、ＭＲＴ溶媒は、疎水性溶媒単独中の有益薬剤についてのＭＲＴであり、ΔＭＲＴ複合体は、重合体の不在下での、不溶性の有益薬剤複合体に起因するＭＲＴにおける変化であり、ΔＭＲＴ重合体は、有益薬剤の錯化の不在下での、重合体に起因するＭＲＴにおける変化である、組成物。
１３１．有益薬剤のＭＲＴは、ＭＲＴ溶媒＋ΔＭＲＴ複合体＋ΔＭＲＴ重合体の合計よりも最大１０倍大きい、１３０に記載の組成物。
１３２．ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体と、
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒を含むビヒクル、および、
ビヒクル中に分散した有益薬剤を含む不溶性の成分であって、２５℃において、ビヒクル中に１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する不溶性の成分、
を含む組成物であって、
前記生分解性重合体はイオン性末端基を含む、組成物。
１３３．  組成物は、３７℃でｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水中への注射後に液体コアを囲む表層を形成し、表層は、１０μｍ未満の厚さを有する、１２８〜１３２のいずれか１つに記載の組成物。
１３４．ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体と、
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒を含むビヒクル、および、
ビヒクル中に分散した有益薬剤を含む不溶性の成分であって、２５℃においてビヒクル中に１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する不溶性の成分、
を含む組成物であって、
前記生分解性重合体は、１０００ダルトン〜１１，０００ダルトンの範囲の重量平均分子量を有する、組成物。
１３５．ビヒクルであって、
ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体、および
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒を含む、ビヒクルと、
ビヒクル中に分散した不溶性の有益薬剤複合体であって、２５℃で、ビヒクル中１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する、不溶性の有益薬剤複合体と、を含む、組成物であって、
０．８ｍＬの組成物が、２１のゲージを有する０．５インチ針を装着された１ｍＬシリンジ中に２５℃で配置され、１０ｌｂの力が適用されるとき、少なくとも０．５ｍＬの組成物が１０秒未満のうちにシリンジから噴出され、かつ
組成物は、エマルションでない、組成物。
１３６．ビヒクルであって、
ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体であって、生分解性重合体は、イオン性末端基を含む、生分解性重合体、および
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒を含む、ビヒクルと、
ビヒクル中に分散した有益薬剤を含む不溶性の成分であって、２５℃で、ビヒクル中１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する、不溶性の成分と、を含む、組成物であって、
組成物は、２５℃で、５００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有し、かつ
組成物は、ゲルでない、組成物。
１３７．組成物は、１０以上のＧ”／Ｇ’比を有する、１３６に記載の組成物。
１３８．ビヒクルであって、
ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体、および
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒からなる単一溶媒を含む、ビヒクルと、
ビヒクル中に分散した有益薬剤を含む不溶性の成分であって、２５℃で、ビヒクル中１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する、不溶性の成分と、を含む、組成物であって、
組成物は、２５℃で、１，２００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有し、かつ
組成物は、エマルションでない、組成物。
１３９．組成物は、１０以上のＧ”／Ｇ’比を有する、１３８に記載の組成物。
１４０．ビヒクルであって、
ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体、および
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒からなる単一溶媒を含む、ビヒクルと、
ビヒクル中に分散した不溶性の有益薬剤複合体であって、２５℃で、ビヒクル中１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する、不溶性の有益薬剤複合体と、を含む、組成物であって、不溶性の有益薬剤は、有益薬剤、金属と、カチオン性薬剤およびアニオン性薬剤のうちの１つとを含み、
組成物は、２５℃で、５００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有し、かつ
組成物は、ゲルでない、組成物。
１４１．組成物は、１０以上のＧ”／Ｇ’比を有する、１４０に記載の組成物。
１４２．ビヒクルであって、
ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体であって、生分解性重合体は、ポリ乳酸またはポリ（乳酸‐ｃｏ‐グリコール酸）である、生分解性重合体、および
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性安息香酸塩溶媒を含む、ビヒクルと、
ビヒクル中に分散した不溶性の有益薬剤複合体であって、２５℃で、ビヒクル中１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有し、有益薬剤、亜鉛、およびプロタミンを含む、不溶性の有益薬剤複合体と、を含む、組成物であって、
組成物は、ゲルでない、組成物。
１４３．組成物は、１０以上のＧ”／Ｇ’比を有する、１４２に記載の組成物。
１４４．乳酸、グリコール酸、ヒドロキシ酪酸、ヒドロキシ吉草酸、およびヒドロキシカプロン酸から選択される少なくとも１つの単量体を含む重合体であって、重合体は、１０００ダルトン〜１１，０００ダルトンの範囲の重量平均分子量を有し、かつ重合体は、イオン性末端基を含む、重合体。
１４５．重量平均分子量は、１５００ダルトン〜１０，５００ダルトンの範囲である、１４４に記載の重合体。
１４６．重量平均分子量は、２０００ダルトン〜１０，０００ダルトンの範囲である、１４４に記載の重合体。
１４７．重量平均分子量は、２５００ダルトン〜９５００ダルトンの範囲である、１４４に記載の重合体。
１４８．イオン性末端基は、カルボキシル、スルホン酸塩、リン酸塩、アミノ、二級アミノ、三級アミノ、および四級アンモニウムから選択される少なくとも１つのメンバーを含む、１４４に記載の重合体。
１４９．イオン性末端基は、カルボキシルを含む、１４４に記載の重合体。
１５０．ビヒクルであって、
ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体、および
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒を含む、ビヒクルと、
ビヒクル中に分散した有益薬剤を含む不溶性の成分であって、２５℃で、ビヒクル中１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する、不溶性の成分と、を含む、組成物であって、
組成物は、２５℃で、１，２００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有し、
組成物は、３７℃でｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水中への注射後に液体コアを囲む表層を形成し、表層は、１０μｍ未満の厚さを有し、かつ
組成物は、エマルションでない、組成物。
１５１．ビヒクルであって、
ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体であって、生分解性重合体は、ポリ乳酸またはポリ（乳酸‐ｃｏ‐グリコール酸）である、生分解性重合体、および
ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性安息香酸塩溶媒を含む、ビヒクルと、
ビヒクル中に分散した有益薬剤を含む不溶性の成分であって、２５℃で、ビヒクル中１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する、不溶性の成分と、を含む、組成物であって、不溶性の有益薬剤は、有益薬剤、亜鉛、およびプロタミンを含み、
組成物は、３７℃でｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水中への注射後に液体コアを囲む表層を形成し、表層は、１０μｍ未満の厚さを有する、組成物。
１５２．生分解性重合体および疎水性溶媒を組み合わせて、ビヒクルを形成することであって、生分解性重合体は、ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で含まれ、疎水性溶媒は、ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で含まれる、組み合わせることと、
不溶性の有益薬剤複合体をビヒクル中に分散させることと、を含み、不溶性の有益薬剤複合体は、２５℃で、ビヒクル中１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有し、それによって、２５℃で、１，２００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有する組成物を提供し、組成物は、エマルションでない、組成物を作製する方法。
１５３．重合体は、ビヒクルの約１０重量％〜約２５重量％の量で含まれる、１５２に記載の方法。
１５４．重合体は、ビヒクルの約１５重量％〜約２０重量％の量で含まれる、１５３に記載の方法。
１５５．疎水性溶媒は、ビヒクルの約９０重量％〜約７５重量％の量で含まれる、１５２〜１５４のいずれか１つに記載の方法。
１５６．疎水性溶媒は、ビヒクルの約８５重量％〜約８０重量％の量で含まれる、１５５に記載の方法。
１５７．疎水性溶媒は、２つ以上の疎水性溶媒の組み合わせである、１５２〜１５６のいずれか１つに記載の方法。
１５８．組成物は、２５℃で、１，０００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有する、１５２〜１５７のいずれか１つに記載の方法。
１５９．組成物は、２５℃で、５００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有する、１５８に記載の方法。
１６０．組成物は、２５℃で、１００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有する、１５９に記載の方法。
１６１．ビヒクルは、１週間の期間にわたって（該期間にわたって３７℃で維持され、かつ１週間の期間中の任意の時点で測定されたとき）１桁より大きくは逸脱しないゼロせん断粘度を維持し、ゼロせん断粘度は、約１ｍＬのビヒクルの、１００ｍＬのｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中への注射後に３７℃の温度で維持される、１５２〜１６０のいずれか１つに記載の方法。
１６２．０．８ｍＬの組成物が、２１のゲージを有する０．５インチ針を装着された１ｍＬシリンジ中に２５℃で配置され、１０ｌｂの力が適用されるとき、少なくとも０．５ｍＬの組成物が２５秒未満のうちにシリンジから噴出される、１５２〜１６０のいずれか１つに記載の方法。
１６３．時間枠は、１０秒未満である、１６２に記載の方法。
１６４．時間枠は、５秒未満である、１６３に記載の方法。
１６５．組成物は、針無し注射器を使用して注射されることが可能である、１５２〜１６４のいずれか１つに記載の方法。
１６６．生分解性重合体は、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ならびにそれらの共重合体および三元重合体から選択される少なくとも１つのメンバーを含む、１５２〜１６５のいずれか１つに記載の方法。
１６７．生分解性重合体は、三元重合体である、１５２〜１６６のいずれか１つに記載の方法。
１６８．生分解性重合体は、ポリ乳酸（ＰＬＡ）を含む、１５２〜１６６のいずれか１つに記載の方法。
１６９．ＰＬＡは、イオン性末端基を含む、１６８に記載の方法。
１７０．イオン性末端基は、酸末端基である、１６９に記載の方法。
１７１．ＰＬＡは、非イオン性末端基を含む、１６８に記載の方法。
１７２．非イオン性末端基は、ヒドロキシルおよびエステルから選択される少なくとも１つのメンバーを含む、１７１に記載の方法。
１７３．生分解性重合体は、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）を含む、１５２〜１６６のいずれか１つに記載の方法。
１７４．ＰＬＧＡは、イオン性末端基を含む、１７３に記載の方法。
１７５．  イオン性末端基は、酸末端基である、１７４に記載の方法。
１７６．  ＰＬＧＡは、非イオン性末端基を含む、１７３に記載の方法。
１７７．  非イオン性末端基は、ヒドロキシルおよびエステルから選択される少なくとも１つのメンバーを含む、１７６に記載の方法。
１７８．生分解性重合体は、ヒドロキシカプロン酸−グリコール酸−乳酸三元重合体を含む、１５２に記載の方法。
１７９．疎水性溶媒は、２５℃で５重量％以下の水中溶解度を有する、１５２〜１５６のいずれか１つに記載の方法。
１８０．疎水性溶媒は、２５℃で１重量％以下の水中溶解度を有する、１７９に記載の方法。
１８１．疎水性溶媒中の水溶解度は、２５℃で１０重量％以下である、１５２〜１５６のいずれか１つに記載の方法。
１８２．疎水性溶媒中の水溶解度は、２５℃で５重量％以下である、１８１に記載の方法。
１８３．疎水性溶媒中の水溶解度は、２５℃で１重量％以下である、１８２に記載の方法。
１８４．組成物は、親水性溶媒がない、１５２〜１８３のいずれか１つに記載の方法。
１８５．疎水性溶媒は、安息香酸メチル、安息香酸エチル、安息香酸ｎ−プロピル、安息香酸イソプロピル、安息香酸ブチル、安息香酸イソブチル、安息香酸ｓｅｃ−ブチル、安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル、安息香酸イソアミル、安息香酸ベンジル、およびベンジルアルコールから選択される少なくとも１つのメンバーを含む、１５２〜１８４のいずれか１つに記載の方法。
１８６．疎水性溶媒は、ベンジルアルコールである、１５２〜１８５のいずれか１つに記載の方法。
１８７．疎水性溶媒は、クエン酸トリエチルである、１５２〜１８５のいずれか１つに記載の方法。
１８８．疎水性溶媒は、安息香酸ベンジルである、１５２〜１８５のいずれか１つに記載の方法。
１８９．組成物は、少なくとも１つの追加的溶媒を含む、１５２〜１８８のいずれか１つに記載の方法。
１９０．少なくとも１つの追加的溶媒は、ベンジルアルコールである、１８９に記載の方法。
１９１．少なくとも１つの追加的溶媒は、トリアセチンである、１８９に記載の方法。
１９２．少なくとも１つの追加的溶媒は、乳酸エチルである、１８９に記載の方法。
１９３．少なくとも１つの追加的溶媒は、エタノールである、１８９に記載の方法。
１９４．不溶性の有益薬剤複合体は、電荷中性化される、１５２〜１９３のいずれか１つに記載の方法。
１９５．不溶性の有益薬剤複合体は、プロタミンを含む、１５２〜１９４のいずれか１つに記載の方法。
１９６．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤の二価金属塩を含む、１５２〜１９５のいずれか１つに記載の方法。
１９７．二価金属は、Ｚｎ２＋、Ｍｇ２＋、およびＣａ２＋から選択される少なくとも１つのメンバーを含む、１９６に記載の方法。
１９８．不溶性の有益薬剤複合体は、プロタミンおよび有益薬剤のＺｎ２＋塩を含む、１５２〜１９７のいずれか１つに記載の方法。
１９９．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤およびカチオン性薬剤を含む、１５２〜１９５のいずれか１つに記載の方法。
２００．カチオン性薬剤は、ポリリジン、ポリアルギニン、およびポリミキシンから選択される少なくとも１つのメンバーを含む、１９９に記載の方法。
２０１．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤およびアニオン性薬剤を含む、１５２〜１９５のいずれか１つに記載の方法。
２０２．アニオン性薬剤は、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ポリアデノシン、およびポリチミンから選択される少なくとも１つのメンバーを含む、２０１に記載の方法。
２０３．アニオン性薬剤は、少なくとも１０ｍｅｒポリアデノシンまたはポリチミンである、２０１に記載の方法。
２０４．アニオン性薬剤は、少なくとも２０ｍｅｒポリアデノシンまたはポリチミンである、２０３に記載の方法。
２０５．アニオン性薬剤は、少なくとも１５０ｍｅｒポリアデノシンまたはポリチミンである、２０４に記載の方法
２０６．アニオン性薬剤は、少なくとも１５００ｍｅｒポリチミンである、２０５に記載の方法。
２０７．組成物は、メチオニンを含む、１５２〜２０６のいずれか１つに記載の方法。
２０８．不溶性の有益薬剤複合体を、約１μｍ〜約４００μｍの範囲の粒径を有する粒子の形態でビヒクル中に分散させることを含む、１５２〜２０７のいずれか１つに記載の方法。
２０９．不溶性の有益薬剤複合体は、約１μｍ〜約１０μｍの範囲の粒径を有する粒子の形態でビヒクル中に分散される、２０８に記載の方法。
２１０．不溶性の有益薬剤複合体は、約１０μｍ〜約１００μｍの範囲の粒径を有する粒子の形態でビヒクル中に分散される、２０８に記載の方法。
２１１．噴霧乾燥によって粒子を形成することを含む、２０９に記載の方法。
２１２．凍結乾燥によって粒子を形成することを含む、２０８、２０９、または２１０に記載の方法。
２１３．ビヒクルの見かけ密度は、粒子の見かけ密度の１０％以内である、２０８に記載の方法。
２１４．ビヒクルは、ビヒクルの約５重量％〜約２０重量％の量のイソ酪酸酢酸スクロース（ＳＡＩＢ）を更に含む、１５２〜２１３のいずれか１つに記載の方法。
２１５．ビヒクルは、ビヒクルの約６重量％〜約１０重量％の量のＳＡＩＢを含む、２１４に記載の方法。
２１６．ビヒクルは、約５％〜約１０％ＳＡＩＢ、約７０％〜約７５％の疎水性溶媒、および約１５％〜約２５％の生分解性重合体を含み、各々の％は、ビヒクルの重量％である、２１５に記載の方法。
２１７．有益薬剤複合体は、有益薬剤のＺｎ２＋塩を含む、２１６に記載の方法。
２１８．ビヒクルは、約５％〜約１０％ＳＡＩＢ、約６５％〜約７０％安息香酸ベンジル、約３％〜約７％エタノール、および約１５％〜約２５％ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）を含み、各々の％は、ビヒクルの重量％である、２１５に記載の方法。
２１９．有益薬剤複合体は、有益薬剤のＺｎ２＋塩を含む、２１８に記載の方法。
２２０．ビヒクルは、約１５％〜約２５％ＳＡＩＢ、約５５％〜約６５％安息香酸ベンジル、約５％〜約１５％ベンジルアルコール、および約５％〜約１５％ポリ乳酸（ＰＬＡ）を含み、各々の％は、ビヒクルの重量％である、２１４に記載の方法。
２２１．有益薬剤複合体は、有益薬剤のＺｎ２＋塩を含む、２２０に記載の方法。
２２２．ビヒクルは、約６５％〜約７５％安息香酸ベンジル、約５％〜約１５％ベンジルアルコール、および約１５％〜約２５％ポリ乳酸（ＰＬＡ）を含み、各々の％は、ビヒクルの重量％である、１５２に記載の方法。
２２３．有益薬剤複合体は、プロタミンを含む、２２２に記載の方法。
２２４．有益薬剤複合体は、有益薬剤のＺｎ２＋塩を含む、２２３に記載の方法。
２２５．不溶性の有益薬剤複合体の量は、組成物の約１重量％〜約５０重量％の範囲である、１５２に記載の方法。
２２６．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤およびプロタミンを含み、有益薬剤とプロタミンとのモル比は、およそ１：０．１〜０．５である、１５２〜２２５のいずれか１つに記載の方法。
２２７．不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤、亜鉛、およびプロタミンを含み、有益薬剤と、亜鉛と、プロタミンとのモル比は、およそ１：０．４〜２：０．１〜０．５である、１５２〜１９８のいずれか１つに記載の方法。
２２８．不溶性の有益薬剤複合体は、タンパク質、ペプチド、核酸、ヌクレオチド、ヌクレオシド、ならびにそれらの前駆体、誘導体、プロドラッグ、および類似体から選択される少なくとも１つの有益薬剤を含む、１５２〜２２７のいずれか１つに記載の方法。
２２９．不溶性の有益薬剤複合体は、タンパク質を含む有益薬剤を含む、１５２〜２２８のいずれか１つに記載の方法。
２３０．タンパク質は、ＩＦＮα２ａまたは組換えヒトｒｈＩＦＮα２ａである、２２９に記載の方法。
２３１．タンパク質は、成長ホルモンである、２２９に記載の方法。
２３２．成長ホルモンは、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）または組換えヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）である、２３１に記載の方法。
２３３．不溶性の有益薬剤複合体は、抗体またはその断片を含む有益薬剤を含む、１５２〜２２７のいずれか１つに記載の方法。
２３４．抗体は、モノクローナル抗体またはその断片である、２３３に記載の方法。
２３５．モノクローナル抗体は、アダリムマブである、２３４に記載の方法。
２３６．モノクローナル抗体は、ベバシズマブである、２３４に記載の方法。
２３７．モノクローナル抗体は、インフリキシマブである、２３４に記載の方法。
２３８．不溶性の有益薬剤複合体は、ペプチドを含む有益薬剤を含む、１５２〜２２８に記載の方法。
２３９．ペプチドは、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）またはその類似体である、２３８に記載の方法。
２４０．ペプチドは、エクセナチドである、２３８に記載の方法。
２４１．不溶性の有益薬剤複合体は、ヌクレオチド、ヌクレオシド、またはそれらの類似体を含む有益薬剤を含む、１５２〜２２８に記載の方法。
２４２．不溶性の有益薬剤複合体は、ヌクレオシド類似体を含む有益薬剤を含む、２４１に記載の方法。
２４３．ヌクレオシド類似体は、アザシチジンである、２４２に記載の方法。
２４４．不溶性の有益薬剤複合体は、低分子量化合物を含む有益薬剤を含む、１５２〜２２７のいずれか１つに記載の方法。
２４５．低分子量化合物は、抗腫瘍薬を含む、２４４に記載の方法。
２４６．抗腫瘍薬は、ボルテゾミブである、２４５に記載の方法。
２４７．有益薬剤を被検体に投与する方法であって、
被検体に、注射を介して、
ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体、およびビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒を含む、単相のビヒクルと、
ビヒクル中に分散した不溶性の有益薬剤複合体と、を含む組成物を投与することを含み、組成物は、２５℃で、１，２００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有し、かつエマルションでない、方法。
２４８．組成物の投与後に、有益薬剤は、被検体の血漿中に、薬物単独の投与または疎水性溶媒単独中の薬物の投与と比較して長期間、検出可能なレベルで存在する、２４７に記載の方法。
２４９．組成物は、被検体に、２１ゲージ以下の針を使用して投与される、２４７または２４８に記載の方法。
２５０．組成物は、被検体に、２１〜２７ゲージ針を使用して投与される、２４７〜２４９のいずれか１つに記載の方法。
２５１．組成物は、被検体に、針無し注射器を使用して投与される、２４７に記載の方法。
２５２．組成物の投与後に、体内での有益薬剤の平均滞留時間（ＭＲＴ）は、ＭＲＴ溶媒＋ΔＭＲＴ複合体＋ΔＭＲＴ重合体の合計の合計よりも大きく、ＭＲＴ溶媒は、疎水性溶媒単独中の有益薬剤についてのＭＲＴであり、ΔＭＲＴ複合体は、重合体の不在下での、不溶性の有益薬剤複合体に起因するＭＲＴにおける変化であり、ΔＭＲＴ重合体は、有益薬剤の錯化の不在下での、重合体に起因するＭＲＴにおける変化である、２４７〜２５１のいずれか１つに記載の方法。
２５３．有益薬剤のＭＲＴは、ＭＲＴ溶媒＋ΔＭＲＴ複合体＋ΔＭＲＴ重合体の合計よりも最大１０倍大きい、２５２に記載の方法。
５４．−ビヒクルの５重量％〜３０重量％の量で存在する生分解性重合体と、
−ビヒクルの９５重量％〜６０重量％の量で存在する液体疎水性溶媒を含むビヒクル、および、
−有益薬剤を含む固体複合体であって、ビヒクル中で不溶性でありビヒクル中に分散される複合体、
を含む、注射用組成物。
２５５．有益薬剤複合体は、重合カチオン性錯化剤または重合アニオン性錯化剤を含む、２５４に記載の注射用組成物。
２５６．−重合カチオン性錯化剤は、プロタミン、ポリリジン、ポリアルギニン、およびポリミキシンから選択されるか、または
−重合アニオン性錯化剤は、カルボキシメチルセルロース、ポリアデノシン、およびポリチミンから選択される、２５５に記載の注射用組成物。
２５７．生分解性重合体は、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ならびにそれらの共重合体および三元重合体から選択される、２５４〜２５６のいずれか１つに記載の注射用組成物。
２５８．疎水性溶媒は、ベンジルアルコール、安息香酸メチル、安息香酸エチル、安息香酸ｎ−プロピル、安息香酸イソプロピル、安息香酸ブチル、安息香酸イソブチル、安息香酸ｓｅｃ−ブチル、安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル、安息香酸イソアミル、安息香酸ベンジル、およびそれらの混合物から選択される、２５４〜２５７のいずれか１つに記載の注射用組成物。
２５９．組成物は、次の（Ａ）および（Ｂ）のうちの少なくとも１つを満たす、２５４〜２５８のいずれか１つに記載の注射用組成物：
（Ａ）組成物は、２５℃で、１，２００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有する、および
（Ｂ）０．８ｍＬの組成物が、２１のゲージを有する０．５インチ針を装着された１ｍＬシリンジ中に２５℃で配置され、１０ｌｂの力が適用されるとき、少なくとも０．５ｍＬの組成物が２５秒未満のうちにシリンジから噴出される。
２６０．組成物は、次の（Ｃ）および（Ｄ）のうちの少なくとも１つを満たす、２５４〜２５９のいずれか１つに記載の注射用組成物：
（Ｃ）該不溶性の有益薬剤複合体は、２５℃で、ビヒクル中１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する、および
（Ｄ）１０ｍｇの不溶性の有益薬剤複合体が、１ｍＬのｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水の試験溶液中に分散され、３７℃で２４時間放置されるとき、試験溶液中に溶解した有益薬剤の量は、１０ｍｇの不溶性の有益薬剤複合体中、有益薬剤の５０％以下である。
２６１．−ビヒクルの５重量％〜４０重量％の量で存在し、ポリラクチドおよびポリ（乳酸‐ｃｏ‐グリコール酸）から選択される生分解性重合体と、
−ビヒクルの９５重量％〜６０重量％の量で存在し、安息香酸ベンジルを含む液体疎水性溶媒を含むビヒクル、および、
−有益薬剤を含む固体複合体であって、ビヒクル中で不溶性でありビヒクル中に分散され、かつプロタミンを含む複合体、
を含む、２５４〜２６０のいずれか１つに記載の注射用組成物。
２６２．有益薬剤複合体は、二価金属またはその塩を含む、２５４〜２６１のいずれか１つに記載の注射用組成物。
２６３．二価金属は、Ｚｎ２＋、Ｍｇ２＋、およびＣａ２＋から選択される、２６２に記載の注射用組成物。
２６４．有益薬剤複合体は、電荷中性粒子の形態である、２５４〜２６３のいずれか１つに記載の注射用組成物。
２６５．生分解性重合体は、イオン性末端基を含む、２５４〜２６４のいずれか１つに記載の注射用組成物。
２６６．組成物は、エマルションまたはゲルでない、２５４〜２６５のいずれか１つに記載の注射用組成物。
２６７．有益薬剤は、ペプチドである、２５４〜２６６のいずれか１つに記載の注射用組成物。
２６８．有益薬剤は、成長ホルモンである、２５４〜２６６のいずれか１つに記載の注射用組成物。
２６９．療法によるヒトまたは動物の身体の治療の方法に使用するための、２５４〜２６８のいずれか１つに記載の注射用組成物。
２７０．注射用組成物を作製する方法であって、
−生分解性重合体および液体疎水性溶媒を混合してビヒクルを形成することであって、当該ビヒクルは、ビヒクルの５重量％〜４０重量％の量での生分解性重合体と、ビヒクルの９５重量％〜６０重量％の量での液体疎水性溶媒を含むこと、および、
−ビヒクル中に固体複合体を分散させることであって、当該複合体は有益薬剤を含み、かつ複合体はビヒクル中に不溶性であること、
を含む、方法。
２７１．２７０に記載の方法によって得られる、注射用組成物。
２７２．複合体を作製する方法であって、
タンパク質およびペプチドのうちの少なくとも１つを、カチオン性錯化剤と、８よりも大きいｐＨで接触させて、複合体を形成することを含む、方法。
２７３．カチオン性錯化剤は、プロタミン、ポリリジン、ポリアルギニン、およびポリミキシンから選択される少なくとも１つのメンバーを含む、２７２に記載の方法。
２７４．  複合体を作製する方法であって、
タンパク質およびペプチドのうちの少なくとも１つを、アニオン性錯化剤と、３未満のｐＨで接触させて、複合体を形成することを含む、方法。
２７５．アニオン性錯化剤は、カルボキシメチルセルロース、ポリアデノシン、およびポリチミンから選択される少なくとも１つのメンバーを含む、２７４に記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
本発明は、後に続く発明の説明において、注記される複数の非限定的な図面を参照して更に説明される。
【図１】本明細書に開示される注射用の生分解性薬物送達デポーを含む、注射用デポー組成物を利用して行われた、体内実験（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット）についての用量正規化群平均ｒｈＧＨ血清プロフィールを示すグラフ。
【図２−１】次の薬物送達デポー試験群に対する６匹の動物の各々について、経時的にプロットした血清ｒｈＧＨ濃度のグラフを示す：水溶液中の非錯化ｒｈＧＨ。
【図２−２】次の薬物送達デポー試験群に対する６匹の動物の各々について、経時的にプロットした血清ｒｈＧＨ濃度のグラフを示す：水性培地中に懸濁させたｒｈＧＨ−プロタミン複合体。
【図２−３】次の薬物送達デポー試験群に対する６匹の動物の各々について、経時的にプロットした血清ｒｈＧＨ濃度のグラフを示す：安息香酸ベンジル（ＢＢ）中のｒｈＧＨ−プロタミン複合体。
【図２−４】次の薬物送達デポー試験群に対する６匹の動物の各々について、経時的にプロットした血清ｒｈＧＨ濃度のグラフを示す：イソ酪酸酢酸スクロース（ＳＡＩＢ）：ＢＢビヒクル中のｒｈＧＨ−プロタミン複合体。
【図２−５】次の薬物送達デポー試験群に対する６匹の動物の各々について、経時的にプロットした血清ｒｈＧＨ濃度のグラフを示す：ＢＢ：ポリ乳酸（ＰＬＡ）中のｒｈＧＨ−プロタミン複合体ビヒクル。
【図２−６】次の薬物送達デポー試験群に対する６匹の動物の各々について、経時的にプロットした血清ｒｈＧＨ濃度のグラフを示す：ＳＡＩＢ：ＢＢ：ＰＬビヒクル中のｒｈＧＨ−プロタミン複合体。
【図３】ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（８：７２：２０、ｗ／ｗ％）ビヒクル中、１％スクロース（ｗ／ｗ）およびプロタミン−亜鉛（噴霧乾燥）を含む２．５ｍｇ／ｍＬ  ＩＦＮα２ａ製剤の皮下注射後の、９６時間の期間にわたる個々のラットにおけるＩＦＮ−α２ａ血清濃度を示すグラフ。ＩＦＮ−α２ａ有益薬剤は、亜鉛およびプロタミンとの有益薬剤複合体として提供される。
【図４】ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＧＡ（８：７２：２０、ｗ／ｗ％）ビヒクル中、１％スクロース（ｗ／ｗ）およびプロタミン−亜鉛（噴霧乾燥）を含む２．５ｍｇ／ｍＬ  ＩＦＮα２ａ製剤の皮下注射後の、９６時間の期間にわたる個々のラットにおけるＩＦＮ−α２ａ血清濃度を示すグラフ。ＩＦＮ−α２ａ有益薬剤は、亜鉛およびプロタミンとの有益薬剤複合体として提供される。
【図５】図３および４に参照される製剤についての経時的な平均血清濃度を示すグラフ。
【図６】ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（８：７２：２０、ｗ／ｗ％）ビヒクル中、１％スクロースを含む２０ｍｇ／ｍＬ  ＩＦＮα２ａ−プロタミン（１：０．３ｍ／ｍ）製剤の５０μＬＳＣボーラス後の、経時的な個々のラットにおけるＩＦＮα２ａ血清濃度を示すグラフ。血清濃度は、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）を介して決定された。
【図７】ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（８：７２：２０、ｗ／ｗ％）ビヒクル中、２０ｍｇ／ｍＬ  ＩＦＮα２ａ、１％ＣＭＣ、１％スクロースの５０μＬＳＣボーラス後の、経時的な個々のラットにおけるＩＦＮα２ａ血清濃度を示すグラフ。血清濃度は、ＥＬＩＳＡを介して決定された。ＩＦＮ−α２ａ有益薬剤は、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）との有益薬剤複合体として提供される。
【図８】ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（８：７２：２０、ｗ／ｗ％）ビヒクル中、スクロースを含む４０ｍｇ／ｍＬ  ＩＦＮα２ａ−プロタミン製剤を使用した２ｍｇ／ｋｇでの投薬後の、経時的な個々の霊長類におけるＩＦＮα２ａ血清濃度を示すグラフ。
【図９】ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（８：７２：２０、ｗ／ｗ％）ビヒクル中、スクロースを含む４０ｍｇ／ｍＬ  ＩＦＮα２ａ−ＣＭＣ製剤を使用した２ｍｇ／ｋｇでの投薬後の、経時的な個々の霊長類におけるＩＦＮα２ａ血清濃度を示すグラフ。
【図１０】図８および９に参照される製剤に対する、ＥＬＩＳＡおよび抗ウイルス活性測定法（抗Ｖｉｒａｌ  Ａｓｓａｙ）（ＡＶＡ）によって決定した、経時的な平均ＩＦＮα２ａ血清濃度を示すグラフ。
【図１１】霊長類において送達されたヌクレオシド類似体プロドラッグについての経時的な平均血清濃度を示すグラフ。
【図１２】図１１のヌクレオシド類似体プロドラッグの活性な代謝産物についての経時的な平均血清濃度を示すグラフ。
【図１３】ミニブタにおいて送達されたグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）類似体についての同等の用量血漿プロフィールを示すグラフ。
【図１４】種々のＢＢ：重合体（８０：２０）ビヒクル中に分散した遊離タンパク質を含有するデポーから送達された（Ａ）、および種々のＢＢ：重合体（８０：２０）ビヒクル中に分散したｒｈＧＨ：プロタミン複合体を含有するデポーから送達された（Ｂ）ｒｈＧＨについての、ラットにおける平均血清プロフィールを示すグラフを提供する。
【図１５】（パネルＡ〜Ｅ）図１４に示される製剤についての遊離ｒｈＧＨ対錯化ｒｈＧＨとの、製剤内の血清プロフィールの比較を示すグラフを提供する。
【図１６】乳酸塩開始ＰＬＡ、１５．１ｋＤａ、またはドデカノール開始ＰＬＡ、１３．９ｋＤａのいずれかを含有するビヒクル中で試験し、非錯化（遊離）ｒｈＧＨ製剤と比較した、３つのｒｈＧＨ複合体についての結果を示すグラフを提供する。（Ａ）ＢＢ中のｒｈＧＨの全ての型、（Ｂ）ＢＢ：乳酸塩開始ＰＬＡ  ８０：２０中のｒｈＧＨの全ての型、（Ｃ）ＢＢ：ドデカノール開始ＰＬＡ  ８０：２０中のｒｈＧＨの全ての型。
【図１７】図１６に記載される各製剤についての平均平均滞留時間（ＭＲＴ）を示すグラフを提供する。
【図１８】実施例１１および１２についての、ＭＲＴへの重合体−複合体相互作用の部分的寄与を示す。
【図１９】ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡビヒクル中の、クラウド形成の開始の写真を提供する。２３Ｇ普通針を使用して、およそ０．５ｍＬのＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（ＬＡ開始）（８：７２：２０）ビヒクルを、ＰＨ７．４および３７℃のＰＢＳ緩衝液中に注射した。最初の写真を、注射の開始後、約１０秒時点で撮った。
【図２０】０．５ｍＬ注射の完了後、約６０秒で撮った、図１９に図示されるビヒクルの第２の写真を提供する。
【図２１】３７℃での経時的な、クラウド形成ビヒクル製剤の粘度安定性を示すグラフを提供する。粘度は、次のビヒクル製剤について特徴付けられる：ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（８／７２／２０）、ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＢＡ／ＰＬＡ（２０／６０／１０／１０）、ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＥｔＯＨ／ＰＬＧＡ  ６５：３５（８／６７／５／２０）、ＢＢ／ＢＡ／ＰＬＡ（７０／１０／２０）。
【図２２】図２１に記載されるビヒクル製剤についての、温度の関数としての粘度安定性を示すグラフを提供する。
【図２３】実施例１９および２０に特定される処置条件の各々についての、経時的な平均血清濃度を示すグラフを提供する。
【図２４】ＢＡ：ｄｄ−ＰＬＧＡおよびＢＡ：ｇａ−ＰＬＧＡビヒクルについての、平均用量正規化ｒｈＧＨ血清プロフィールを示すグラフを提供する。
【図２５】ＥＢ：ｄｄ−ＰＬＧＡおよびＥＢ：ｇａ−ＰＬＧビヒクルについての、平均用量正規化ｒｈＧＨ血清プロフィールを示すグラフを提供する。
【図２６】最大５日間のｈＧＨの制御送達のための、異なる錯化剤からのｈＧＨの溶解速度を示すグラフを提供する。
【図２７】最大５日間のｈＧＨの制御送達のための、異なる錯化剤からのｈＧＨの溶解速度を示すグラフを提供する。
【図２８】種々のｈＧＨ粉末製剤についての、経時的な累積溶解％を示すグラフを提供する。
【図２９】次の製剤中のペプチド有益薬剤（エクセナチド）についての、経時的な血清濃度を示すグラフを提供する：ＳＡＩＢ／ＢＢ／ｌａ−ＰＬＡ（８／７２／２０）中のエクセナチド：プロタミン１：２（ｍ／ｍ）、凍結乾燥、９．５ｍｇ用量、ならびにエクセナチド：プロタミン１：２（ｍ／ｍ）、噴霧乾燥、９．５ｍｇ用量、ＳＡＩＢ／ＢＢ／ｌａ−ＰＬＡ（８／７２／２０）メチオニンおよびポリソルベート８０。
【図３０】Ｚｎ２＋およびプロタミンを含む電荷中性化ペプチド有益薬剤複合体またはタンパク質有益薬剤複合体を含む、本開示による組成物の一実施形態の図示を提供する。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
定義
本明細書で使用されるとき、「不溶性の成分」という用語は、本明細書で定義される不溶性の有益薬剤および／または不溶性の有益薬剤複合体を含む、本明細書に記載される組成物の成分を指す。
【０００８】
本明細書で使用されるとき、「不溶性の有益薬剤」という用語は、完全にまたは実質的に不溶性である有益薬剤を指す。この文脈で使用される「実質的に不溶性」という用語は、有益薬剤の少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または少なくとも９９．５％が、２５℃で、ビヒクル中で不溶性であることを意味する。換言すれば、不溶性の有益薬剤は、ビヒクル中に分散され得、かつビヒクル中に有意に溶解しない、有益薬剤である。不溶性の有益薬剤には、例えば、本明細書に記載されるビヒクル組成物中で実質的に不溶性である分子が含まれてもよい。不溶性の有益薬剤には、例えば、２５℃で、ビヒクル中１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する有益薬剤が含まれてもよい。
【０００９】
本明細書で使用されるとき、「不溶性の有益薬剤複合体」という用語は、ビヒクル中で完全にまたは実質的に不溶性である有益薬剤複合体を指す。この文脈で使用される「実質的に不溶性」という用語は、有益薬剤複合体の少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または少なくとも９９．５％が、２５℃で、ビヒクル中で不溶性であることを意味する。例えば、不溶性の有益薬剤複合体は、ビヒクル中に分散され得、かつビヒクル中に有意に溶解しない複合体である。不溶性の有益薬剤複合体には、例えば、電荷中性化複合体が含まれてもよい。不溶性の有益薬剤複合体には、例えば、２５℃で、ビヒクル中１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する有益薬剤が含まれてもよい。
【００１０】
「電荷中性化複合体」という用語は、本明細書で、有益薬剤と、関連する分子、金属、対イオン等との間の非共有結合的な電荷ベースの相互作用の結果として形成され、正味の電荷を有さないかまたは正味の電荷を実質的に有さない、複合体を指すように使用される。有益薬剤の塩を含む、電荷中性化された有益薬剤が、この定義内に含まれる。
【００１１】
本明細書で使用されるとき、「ビヒクル」という用語は、本明細書に記載される有益薬剤の不在下で生分解性重合体および疎水性溶媒を含む、組成物を意味する。
【００１２】
本明細書で使用されるとき、「ゼロせん断粘度」という用語は、ゼロせん断速度での粘度を意味する。当業者であれば、円錐平板粘度計（例えば、ＢｒｏｏｋｆｉｅｌｄモデルＤＶ−ＩＩＩ＋（ＬＶ））を使用して、低せん断速度（例えば、１秒−１〜７秒−１前後）での粘度を測定し、次いで、粘度対せん断速度のプロットを、目的の温度でのゼロのせん断速度まで外挿することによって、ゼロせん断粘度を決定可能であろう。
【００１３】
本明細書で使用されるとき、「エマルション」という用語は、連続相および分散相を含む、２つ以上の非混和性液の安定な混合物を意味する。
【００１４】
本明細書で使用されるとき、「乳化剤」という用語は、本明細書に記載される生分解性組成物中に含まれるとき、エマルションを形成する傾向がある薬剤を意味する。
【００１５】
本明細書で使用されるとき、「有益薬剤」という用語は、単独でまたは他の活性もしくは不活性成分と組み合わせてのいずれかで、被検体、例えば、ヒトまたは非ヒト動物への投与時に所望の薬理効果を提供する、薬剤、例えば、タンパク質、ペプチド、核酸（ヌクレオチド、ヌクレオシド、およびそれらの類似体を含む）、または小分子薬を意味する。有益薬剤の前駆体、誘導体、類似体、およびプロドラッグが、上の定義に含まれる。
【００１６】
本明細書で使用されるとき、「非水性」という用語は、水が実質的にない材料を指す。非水性組成物は、約２重量％未満、約１重量％未満、０．５重量％未満、または０．１重量％未満等、約５％未満の含水率を有する。本組成物は、典型的には非水性である。
【００１７】
本明細書で使用されるとき、「バースト効果」および「バースト」という用語は、組成物の投与後に、有益薬剤の組成物からの迅速な初期放出を意味するように交換可能に使用され、それは後続の比較的安定な制御放出期間から区別され得る。
【００１８】
本明細書で使用されるとき、「シリンジ通過性」という用語は、注射前に容器から移されるとき、組成物が皮下針を容易に通過する能力を説明する。シリンジ通過性は、例えば、単位時間当たりに、既知の量の組成物を、シリンジおよび針を通じて移動させるために要求される力を測定することによって定量化されてもよい。
【００１９】
本明細書で使用されるとき、「注射可能性」という用語は、注射中の組成物の性能を指し、注射に要求される圧力または力、流動の均一性、吸引の質、および目詰まりのなさ等の要因を含む。注射可能性は、例えば、単位時間当たりに、既知の量の組成物を、シリンジおよび針を通じて移動させるために要求される力を測定することによって定量化されてもよい。
【００２０】
本明細書で交換可能に使用される「ポリペプチド」および「タンパク質」という用語は、任意の長さのアミノ酸の重合型を指し、それは、コードアミノ酸および非コードアミノ酸、化学的または生化学的に修飾されたまたは誘導体化されたアミノ酸、ならびに修飾されたペプチド骨格を有するポリペプチドを含む可能性がある。この用語は、Ｎ末端メチオニン残基を含むまたは含まない、異種性リーダー配列および天然リーダー配列との融合である、異種性アミノ酸配列との融合タンパク質；免疫学的にタグされた（ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ  ｔａｇｇｅｄ）タンパク質；検出可能な融合パートナーとの融合タンパク質、例えば、融合パートナーとして蛍光タンパク質、β−ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ等を含む融合タンパク質等を含むが、これらに限定されない融合タンパク質を含む。
【００２１】
「核酸」、「核酸分子」、「オリゴヌクレオチド」、および「ポリヌクレオチド」という用語は、交換可能に使用され、デオキシリボヌクレオチドもしくはリボヌクレオチドのいずれかの、任意の長さのヌクレオチドの重合型、または２つの天然産の核酸の場合と同様の配列特異的様態で、天然産の核酸とハイブリッド形成することができる、例えば、ワトソン・クリック塩基対形成相互作用に関与することができる、合成的に生成される化合物を指す。ポリヌクレオチドは、任意の３次元構造を有してもよく、既知であれ未知であれ、任意の機能を果たしてもよい。ポリヌクレオチドの非限定的な例としては、遺伝子、遺伝子断片、エクソン、イントロン、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、転移ＲＮＡ、リボソームＲＮＡ、ｃＤＮＡ、組換えポリヌクレオチド、プラスミド、ベクター、任意の配列の単離ＤＮＡ、制御領域、任意の配列の単離ＲＮＡ、核酸プローブ、およびプライマーが挙げられる。
【００２２】
「速度制御クラウド」、「速度制御薄膜」、および「速度制御表層」という用語は、本明細書で、製剤表面および水性環境で形成され、実質的な液体コアを囲み、製剤の実質的な液体コアから水性環境への、有益薬剤に対する放出速度制御効果を有する、製剤の速度制御要素を指すように交換可能に使用される。相反転、相分離、または水性環境中のゲル化プロセスによって形成される重合マトリックスとは異なり、速度制御クラウドまたは薄膜は、特記すべき物理的強度または機械的構造を有さない。
【００２３】
本明細書で使用されるとき、「生物学的利用能」は、投与後に体循環に入る有益薬剤の用量の分率を指す。
【００２４】
本明細書で使用されるとき、「平均滞留時間（ＭＲＴ）」は、所与の用量の分子が体内に存在する平均総時間を指し、それは、一次モーメント曲線下面積（ＡＵＭＣ）／曲線下面積（ＡＵＣ）
2018188457.tif 000002
および
2018188457.tif 000003
として算出され得、式中、Ｃｐ（ｔ）は、時間の関数としての血漿（または血清もしくは血液）濃度である。
【００２５】
本明細書で使用されるとき、「ゲル」という用語は、比較的小さい、例えば、１以下の、Ｇ”／Ｇ’比を有する組成物を指し、式中、Ｇ”＝損失弾性率であり、Ｇ’＝貯蔵弾性率である。逆に、「非ゲル」、「ゲルでない」等の用語は、比較的大きいＧ”／Ｇ’比、例えば、１０以上のＧ”／Ｇ’比を有する組成物を指す。
【００２６】
本明細書で使用されるとき、「ゲル化」、「ゲル形成」等の用語は、（例えば、３７℃で１４日間の期間にわたるエイジング後に）比較的小さい、例えば、１以下のＧ”／Ｇ’比を有する組成物を指し、式中、Ｇ”＝損失弾性率であり、Ｇ’＝貯蔵弾性率である。逆に、「非ゲル化」、「非ゲル形成」等の用語は、本明細書で、（例えば、３７℃で１４日間の期間にわたるエイジング後に）比較的大きいＧ”／Ｇ’比、例えば、１０以上のＧ”／Ｇ’比を有する組成物を指す。
【００２７】
本明細書で使用されるとき、「物理的安定性」は、物質、例えば、化合物または複合体の、物理的変化に抵抗する能力を指す。
【００２８】
本明細書で使用されるとき、「化学的安定性」は、物質、例えば、化合物または複合体の、化学的変化に抵抗する能力を指す。
【００２９】
本明細書で使用されるとき、「グルカゴン様−ペプチド−１」および「ＧＬＰ−１」という用語は、ＧＬＰ−１活性を有する分子を指す。当業者は、米国公開出願第２０１０／０２１０５０５号に開示されるように、任意の所与の部分がＧＬＰ−１活性を有するかどうかを決定することができ、それは参照により本明細書に組み込まれる。「ＧＬＰ−１」という用語は、天然ＧＬＰ−１（ＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨまたはＧＬＰ−１（７−３６）ＮＨ２）、ＧＬＰ−１類似体、ＧＬＰ−１誘導体、ＧＬＰ−１生物学的活性断片、伸長ＧＬＰ−１（例えば、特に、記載される伸長グルカゴン様ペプチド−１類似体に関して、参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ０３／０５８２０３号を参照されたい）、１つまたは２つのシステイン残基を、参照により本明細書に組み込まれるＷＯ２００４／０９３８２３号に記載される特定の位置で含む、エキセンジン−４、エキセンジン−４類似体、およびエキセンジン−４誘導体を含む。
【００３０】
本明細書に記載されるビヒクル成分または成分を特徴付けるために使用されるとき、「ｗ／ｗ％」という用語は、ビヒクルの重量％を指し、例えば、ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（８：７２：２０、ｗ／ｗ％）は、ビヒクルの８重量％のＳＡＩＢ、ビヒクルの７２重量％のＢＢ、およびビヒクルの２０重量％のＰＬＡを含むビヒクルを特定する。
【００３１】
本発明が更に記載される前に、本発明が、記載される特定の実施形態に限定されず、したがって、当然のことながら異なり得ることを理解されたい。本明細書で使用される専門用語が、特定の実施形態の説明を目的とするにすぎず、限定するようには意図されないこともまた理解されたい。
【００３２】
値の範囲が提供される場合、文脈上そうでないとする明確な指示がない限り下限の単位の小数第１位までの、その範囲の上限と下限の間の、かつその指定範囲における任意の他の指定されたまたは介在する値である各介在値（ｉｎｔｅｒｖｅｎｉｎｇ  ｖａｌｕｅ）は、本発明内に包含されることが理解される。これらのより小さい範囲の上限および下限は、指定範囲における任意の具体的な除外限度を条件として、独立して、より小さい範囲に含まれてもよく、それもまた本発明内に包含される。指定範囲が限度の一方または両方を含む場合、それらの含まれた限度の一方または両方を除外する範囲もまた本発明に含まれる。
【００３３】
別途規定されない限り、本明細書で使用される全ての学術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の専門家によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載される方法および物質と同様または同等のいずれの方法および物質もまた、本発明の実践または試験で使用することができるが、好ましい方法および物質が今は記載される。本明細書で言及される全ての刊行物は、刊行物が引用される関連となる方法および／または物質を開示および記載するために、参照により本明細書に組み込まれる。
【００３４】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用されるとき、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈上、そうでないとする明確な指示がない限り、対応する複数形の指示対象を含むことに留意しなければならない。故に、例えば、「不溶性の有益薬剤複合体（ａｎ  ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ  ｂｅｎｅｆｉｃｉａｌ  ａｇｅｎｔ  ｃｏｍｐｌｅｘ）」への言及は、複数のかかる複合体を含み、「注射用デポー組成物（ｔｈｅ  ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ  ｄｅｐｏｔ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）」への言及は、１つ以上の注射用デポー組成物およびそれらの均等物への言及を含み、その他も同様である。特許請求の範囲は、いずれの任意要素を除外するように起草され得ることに更に留意する。したがって、この記述は、特許請求の範囲の要素の列挙に関連する「のみ（ｓｏｌｅｌｙ）」、「のみ（ｏｎｌｙ）」等の排他的専門用語の使用、または「否定的」限定の使用のために、先立つ記載を提供することが意図される。
【００３５】
本明細書で考察される刊行物は、本出願の出願日前にそれらを開示するためのみに提供される。本明細書のいかなる部分も、本発明が、先願発明に基づいて、かかる刊行物に先行する権利を有さないという承認として解釈されるべきではない。更に、提供される刊行物の日付は、実際の刊行物の日付と異なる場合があり、それらは独立して確認される必要があり得る。
【００３６】
詳細な説明
上述のように、本開示は、ビヒクル、例えば、単相ビヒクルを含む、生分解性薬物送達組成物、例えば、注射用生分解性薬物送達デポー組成物、およびビヒクル中に分散した、有益薬剤を含む不溶性の成分、例えば、不溶性の有益薬剤複合体を提供する。幾つかの実施形態では、ビヒクルは、ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で存在する生分解性重合体、およびビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で存在する疎水性溶媒（または疎水性溶媒の混合物）を含む。ビヒクルに加えて、組成物は、ビヒクル中に分散した、有益薬剤を含む不溶性の成分、例えば、不溶性の有益薬剤複合体を含む。幾つかの実施形態では、生分解性組成物は、２５℃で、１，２００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有し、かつエマルションまたはゲルでない。
【００３７】
生体適合性−生分解性重合体
多様な重合体は、本開示における使用に好適であり得るが、それらが生体適合性かつ生分解性であることを条件とする。例えば、好適な重合体には、単一重合体、ブロック−共重合体、およびランダム共重合体が含まれてもよいが、これらに限定されない。好適な重合体には、選択された溶媒または溶媒組み合わせ中、少なくとも約２０重量％、３０重量％、または４０重量％の溶解度を有する、重合体または重合体の組み合わせが含まれる。幾つかの実施形態では、好適な重合体には、親水性領域および疎水性領域の両方を有する重合体、例えば、疎水性成分および親水性成分から構成されるＡＢ型ブロック共重合体が含まれる。かかる重合体は、重合体の両親媒性特徴の結果として、水性環境に曝露されるときミセルを形成する傾向を有し得る。好適な重合体には、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、上記に関与する２つ以上の単量体の任意の組み合わせを含む共重合体、例えば、ラクチド、グリコリド、およびε−カプロラクトンの三元重合体、ならびに上記の２つ以上の任意の組み合わせを含む混合物が含まれてもよいが、これらに限定されない。換言すれば、好適な重合体にはまた、例えば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリカプロラクトン、上記に関与する２つ以上の単量体の任意の組み合わせを含む共重合体、例えば、乳酸、グリコール酸、およびε−カプロラクトンの三元重合体、ならびに上記の２つ以上の任意の組み合わせを含む混合物が含まれてもよい。
【００３８】
幾つかの実施形態では、生分解性重合体は、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、例えば、イオン性末端基を含むＰＬＡ（例えば、酸末端化ＰＬＡにおける、例えば、酸末端基）である。酸末端基ＰＬＡには、例えば、本明細書に記載される乳酸塩開始ＰＬＡが含まれる。幾つかの実施形態では、ＰＬＡは、非イオン性末端基（例えば、エステル末端化ＰＬＡにおける、例えば、エステル末端基）を含む。エステル末端基ＰＬＡには、本明細書に記載されるドデカノール開始（ｄｄ）ＰＬＡが含まれるが、これらに限定されない。幾つかの実施形態では、ＰＬＡは、ｄｌ−ＰＬＡである。他の実施形態では、生分解性重合体は、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、例えば、ｄｌ−ＰＬＧＡである。幾つかの実施形態では、ＰＬＧＡは、イオン性末端基、例えば、酸末端基を含む。酸末端基ＰＬＧＡには、本明細書に記載されるグリコール酸塩開始（ｇａ）ＰＬＧが含まれるが、これらに限定されない。幾つかの実施形態では、ＰＬＧＡは、非イオン性末端基、例えば、エステル末端基を含む。エステル末端基ＰＬＧＡには、本明細書に記載されるドデカノール開始ＰＬＧＡが含まれるが、これらに限定されない。一実施形態では、重合体がポリカプロラクトンである場合、ポリカプロラクトンは、ポリ（ε）カプロラクトンである。
【００３９】
生体適合性の生分解性重合体は、ビヒクル中に、ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％、例えば、ビヒクルの約６重量％〜約３５重量％、約７重量％〜約３０重量％、約８重量％〜約２７重量％、約９重量％〜約２６重量％、約１０重量％〜約２５重量％、約１１重量％〜約２４重量％、約１２重量％〜約２３重量％、約１３重量％〜約２２重量％、約１４重量％〜約２１重量％、約１５重量％〜約２０重量％、約１６重量％〜約１９重量％の範囲の量、または約１７重量％で存在する。幾つかの実施形態では、重合体は、ビヒクルの約２０重量％の量で存在する。
【００４０】
幾つかの実施形態では、生体適合性の生分解性重合体は、約２ｋＤ〜約２０ｋＤ、例えば、約２ｋＤ〜約５ｋＤ、約２ｋＤ〜約１０ｋＤ、または約２ｋＤ〜約１５ｋＤの重量平均分子量を有する。更なる実施形態は、約５ｋＤ〜約１５ｋＤ、例えば、約１０ｋＤの重量平均分子量を有する生体適合性の生分解性重合体を含む。
【００４１】
溶媒
本開示における使用に好適な疎水性溶媒は、本明細書に記載されるビヒクルの重合体成分を可溶化することが可能である、疎水性溶媒である。疎水性溶媒は、水中で不溶性または実質的に不溶性であるとして特徴付けることができる。例えば、好適な疎水性溶媒は、例えば、２５℃で測定されるとき、５重量％未満、４重量％未満、３重量％未満、２重量％未満、または１重量％未満の水中溶解度を有する。好適な疎水性溶媒はまた、２５℃で、約５％以下、約４％以下、約３％以下、約２％以下、または約１％以下の水中溶解度を有するものとして特徴付けられてもよい。例えば、幾つかの実施形態では、好適な疎水性溶媒は、２５℃で、約１％〜約７％、約１％〜約６％、約１％〜約５％、約１％〜約４％、約１％〜約３％、および約１％〜約２％の水中溶解度を有する。好適な疎水性溶媒はまた、２５℃で、水が限定的な溶解度を有する溶媒、例えば、水が１０重量％未満、５重量％未満、または１重量％未満の溶解度を有する溶媒として特徴付けられてもよい。幾つかの実施形態では、好適な疎水性溶媒は、ビヒクルの重合体成分を可溶化し、本明細書に記載される好適な量で重合体成分と組み合わされるとき、低粘度、すなわち、２５℃で１，２００センチポアズ未満のゼロせん断粘度を有するビヒクルをもたらす溶媒である。
【００４２】
幾つかの実施形態では、好適な溶媒には、ベンジルアルコール、安息香酸メチル、安息香酸エチル、安息香酸ｎ−プロピル、安息香酸イソプロピル、安息香酸ブチル、安息香酸イソブチル、安息香酸ｓｅｃ−ブチル、安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル、安息香酸イソアミル、および安息香酸ベンジルを含むが、これらに限定されない安息香酸の誘導体が含まれる。
【００４３】
幾つかの実施形態では、安息香酸ベンジルが、本開示の生分解性送達組成物において使用するための疎水性溶媒として選択される。
【００４４】
好適な溶媒は、次の中からまたは次のうちの２つ以上の組み合わせの中から選択される、単一溶媒であってもよい：ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、安息香酸エチル、およびエタノール。
【００４５】
溶媒が疎水性溶媒である場合、それは、１つ以上の追加的溶媒、例えば、１つ以上の疎水性溶媒および／または１つ以上の極性／親水性溶媒と組み合わせて使用されてもよい。
【００４６】
幾つかの実施形態では、組成物は、任意の追加的溶媒を含むことなく、本明細書に記載される単一の疎水性溶媒を含む。幾つかの実施形態では、単一の疎水性溶媒は、安息香酸ベンジルであり、他の実施形態では、単一の疎水性溶媒は、ベンジルアルコール以外である。
【００４７】
溶媒が極性／親水性溶媒である場合、それは、開示される組成物中で、疎水性溶媒と組み合わせてのみ使用され、疎水性溶媒に対して比較的少量、例えば、ビヒクルの５重量％未満（例えば、４重量％未満、３重量％未満、２重量％未満、または１重量％未満）で存在する。例えば、極性／親水性溶媒は、ビヒクル中に、ビヒクルの約５重量％〜約１重量％（例えば、約４重量％〜約１重量％、約３重量％〜約１重量％、または約２重量％〜約１重量％）の量で存在してもよい。いかなる特定の理論にも拘束されることを望むものではないが、比較的少量の極性／親水性溶媒、例えば、エタノールの、ビヒクル組成物へ追加は、重合体の種類、分子量、および相対的な疎水性／親水性の点で、開示される組成物中で利用され得る重合体の範囲を広げ得ると考えられる。
【００４８】
疎水性溶媒（または疎水性溶媒の組み合わせ）は、ビヒクル中に、ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％、例えば、ビヒクルの約９４重量％〜約６１重量％、約９３重量％〜約６２重量％、約９２重量％〜約６３重量％、約９１重量％〜約６４重量％、約９０重量％〜約６５重量％、約８９重量％〜約６６重量％、約８８重量％〜約６７重量％、約８７重量％〜約６８重量％、約８６重量％〜約６９重量％、約８５重量％〜約７０重量％、約８４重量％〜約７１重量％、約８３重量％〜約７２重量％、約８２重量％〜約７３重量％、約８１重量％〜約７４重量％、約８０重量％〜約７５重量％、約７９重量％〜約７６重量％、または約７８重量％〜約７７重量％で存在する。幾つかの実施形態では、疎水性溶媒（またはの組み合わせ疎水性溶媒）は、ビヒクル中に、ビヒクルの約９５重量％〜約９０重量％、約９５重量％〜約８５重量％、約９５重量％〜約８０重量％、約９５重量％〜約７５重量％、約９５重量％〜約７０重量％、約９５重量％〜約６５重量％、または約９５重量％〜約６０重量％で存在する。幾つかの実施形態では、疎水性溶媒は、ビヒクルの約８０重量％の量で存在する。他の実施形態では、疎水性溶媒は、ビヒクルの約７２重量％の量で存在する。
【００４９】
幾つかの実施形態では、本明細書に開示される生分解性薬物送達組成物は、親水性溶媒がない。幾つかの実施形態では、本明細書に開示される生分解性送達組成物は、チキソトロピー薬剤、例えば、２〜６個の炭素分子を含有する低級アルカノールを含まない。
【００５０】
有益薬剤
多様な有益薬剤は、本明細書に開示される生分解性送達組成物を使用して送達されてもよい。送達され得る有益薬剤の一般のクラスには、例えば、タンパク質、ペプチド、核酸、ヌクレオチド、ヌクレオシド、およびそれらの類似体、抗原、抗体、およびワクチン；ならびに低分子量化合物が含まれる。
【００５１】
幾つかの実施形態では、有益薬剤は、ビヒクル中で少なくとも実質的に不溶性、例えば、ビヒクル中、１０ｍｇ／ｍＬ未満、５ｍｇ／ｍＬ未満、１ｍｇ／ｍＬ未満、０．５ｍｇ／ｍＬ未満、０．３ｍｇ／ｍＬ未満、０．２ｍｇ／ｍＬ未満、または０．１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度である。
【００５２】
本明細書に開示される生分解性送達組成物を使用して送達され得る有益薬剤には、末梢神経、アドレナリン受容体、コリン作動性受容体、骨格筋、心血管系、平滑筋、血液循環系、シナプス部位、神経効果器接合部位、内分泌系およびホルモン系、免疫系、生殖系、骨格系、オータコイド系、消化系および排泄系、ヒスタミン系、ならびに中枢神経系に作用する薬剤が含まれるが、これらに限定されない。
【００５３】
好適な有益薬剤は、例えば、化学療法剤、エピジェネティック剤、プロテアソーム阻害剤、アジュバント薬、制吐薬、食欲刺激薬、抗消耗（ａｎｔｉ−ｗａｓｔｉｎｇ）剤、および強力オピオイドから選択されてもよい。
【００５４】
好適な有益薬剤はまた、とりわけ、例えば、抗悪性腫瘍剤、心臓血作用薬、腎臓作用薬、胃腸薬、リウマチ薬、および神経作用薬（ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｇｅｎｔｓ）から選択されてもよい。
【００５５】
有益薬剤としてのタンパク質、ポリペプチド、およびペプチド
開示される製剤中で有用なタンパク質には、例えば、サイトカインおよびそれらの受容体等の分子、ならびにサイトカインまたはそれらの受容体を含むキメラタンパク質が含まれてもよく、例えば、腫瘍壊死因子アルファおよびベータ、それらの受容体およびそれらの誘導体；レニン；ヒト成長ホルモン、ウシ長ホルモン、メチオン（ｍｅｔｈｉｏｎｅ）−ヒト成長ホルモン、ｄｅｓ−フエニルアラニンヒト成長ホルモン、およびブタ成長ホルモンを含む成長ホルモン；成長ホルモン放出因子（ＧＲＦ）；副甲状腺および脳下垂体ホルモン；甲状腺刺激ホルモン；ヒト膵臓ホルモン放出因子；リポタンパク質；コルヒチン；プロラクチン；コルチコトロピン；甲状腺刺激ホルモン；オキシトシン；バソプレッシン；ソマトスタチン；リプレシン；パンクレオザイミン；ロイプロリド；アルファ−１−アンチトリプシン；インスリンＡ−鎖；インスリンＢ−鎖；プロインスリン；卵胞刺激ホルモン；カルシトニン；黄体形成ホルモン；黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）；ＬＨＲＨアゴニストおよびアンタゴニスト；グルカゴン；第ＶＩＩＩＣ因子、第ＩＸ因子、組織、およびフォンヴィレブランド因子等の凝固因子；プロテインＣ等の抗凝固因子；心房性ナトリウム利尿因子；肺胞界面活性物質；組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）以外のプラスミノーゲン活性化因子、例えば、ウロキナーゼ；ボンベシン；トロンビン；造血成長因子；エンケファリナーゼ；ＲＡＮＴＥＳ（活性時に調節され、通常Ｔ細胞により発現され、分泌される（ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｏｎ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｎｏｒｍａｌｌｙ  Ｔ−ｃｅｌｌ  ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ａｎｄ  ｓｅｃｒｅｔｅｄ）；ヒトマクロファージ炎症性タンパク質（ＭＩＰ−１−アルファ）；ヒト血清アルブミン等の血清アルブミン；ミュラー管抑制因子；リラキシンＡ−鎖；リラキシンＢ−鎖；プロリラキシン；マウスゴナドトロピン関連ペプチド；絨毛性ゴナドトロピン；ゴナドトロピン放出ホルモン；ウシソマトトロピン；ブタソマトトロピン；ベータ−ラクタマーゼ等の微生物タンパク質；ＤＮａｓｅ；インヒビン；アクチビン；血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）；ホルモンもしくは成長因子のための受容体；インテグリン；タンパク質ＡもしくはＤ；リウマトイド因子；骨由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、ニューロトロフィン−３、−４、−５、もしくは−６（ＮＴ−３、ＮＴ−４、ＮＴ−５、もしくはＮＴ−６）等の神経栄養因子、またはＮＧＦ−β等の神経成長因子；血小板由来成成長因子（ＰＤＧＦ）；酸性ＦＧＦおよび塩基性ＦＧＦ等の線維芽細胞成長因子；上皮成長因子（ＥＧＦ）；ＴＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２、ＴＧＦ−β３、ＴＧＦ−β４、もしくはＴＧＦ−β５を含む、ＴＧＦ−アルファおよびＴＧＦ−ベータ等のトランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ）；インスリン様成長因子−Ｉおよび−ＩＩ（ＩＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−ＩＩ）；ｄｅｓ（１−３）−ＩＧＦ−Ｉ（脳ＩＧＦ−Ｉ）、インスリン様成長因子結合タンパク質；ＣＤ−３、ＣＤ−４、ＣＤ−８、およびＣＤ−１９等のＣＤタンパク質；エリスロポエチン；骨形成誘導因子；免疫毒素；骨形成タンパク質（ＢＭＰ）；インターフェロン−アルファ（例えば、インターフェロンα��Ａもしくはインターフェロンα２Ｂ）、−ベータ、−ガンマ、−ラムダ、およびコンセンサスインターフェロン等のインターフェロン；コロニー刺激因子（ＣＳＦ）、例えば、Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、およびＧ−ＣＳＦ；インターロイキン（ＩＬｓ）、例えば、ＩＬ−１〜ＩＬ−１０；スーパーオキシドディスムターゼ；Ｔ細胞受容体；表面膜タンパク質；崩壊促進因子；例えば、ＨＩＶ−１エンベロープ糖タンパク質の一部、ｇｐ１２０、ｇｐ１６０、もしくはそれらの断片等のウイルス抗原；輸送タンパク質；ホーミング受容体；アドレシン；プロスタグランジン等の稔性抑制因子；稔性促進因子；調節性タンパク質；イムノアドヘシン等の抗体およびキメラタンパク質；これらの化合物の前駆体、誘導体、プロドラッグ、および類似体、ならびにこれらの化合物の薬学的に許容される塩、もしくはそれらの前駆体、誘導体、プロドラッグ、および類似体が含まれる。
【００５６】
好適なタンパク質またはペプチドは、天然または組換えであってもよく、例えば、融合タンパク質を含んでもよい。
【００５７】
幾つかの実施形態では、タンパク質は、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）、組換えヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）、ウシ成長ホルモン、メチオン−ヒト成長ホルモン、ｄｅｓ−フエニルアラニンヒト成長ホルモン、およびブタ成長ホルモン等の成長ホルモン；インスリン、インスリンＡ−鎖、インスリンＢ−鎖、およびプロインスリン；または血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、血小板由来成成長因子（ＰＤＧＦ）、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）、トランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ）、ならびにインスリン様成長因子−Ｉおよび−ＩＩ（ＩＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−ＩＩ）等の成長因子である。
【００５８】
本明細書に開示される生分解性送達組成物中で有益薬剤として使用するための好適なペプチドには、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）ならびにそれらの前駆体、誘導体、プロドラッグ、および類似体が含まれるが、これらに限定されない。
【００５９】
更に、好適なタンパク質、ポリペプチド、ペプチド、またはそれらの前駆体、誘導体、プロドラッグ、もしくは類似体は、有益薬剤を含む不溶性の成分、例えば、不溶性の有益薬剤複合体を、例えば、金属または本明細書に記載される他の沈殿剤および／もしくは安定剤との錯化によって形成することが可能なものである。
【００６０】
幾つかの実施形態では、有益薬剤は、成長ホルモンを含み、疎水性溶媒は、ベンジルアルコールを含まない。幾つかの実施形態では、有益薬剤は、成長ホルモンを含み、疎水性溶媒は、安息香酸エチルを含まない。
【００６１】
有益薬剤としての核酸
核酸有益薬剤は、核酸、ならびにそれらの前駆体、誘導体、プロドラッグ、および類似体、例えば、治療用ヌクレオチド、ヌクレオシド、およびそれらの類似体；治療用オリゴヌクレオチド；ならびに治療用ポリヌクレオチドを含む。この群から選択される有益薬剤は、抗癌剤および抗ウイルス剤として特に使用されてもよい。好適な核酸有益薬剤には、例えば、リボザイム、アンチセンスオリゴデオキシヌクレオチド、アプタマー、およびｓｉＲＮＡが含まれてもよい。好適なヌクレオシド類似体の例としては、シタラビン（ａｒａＣＴＰ）、ゲムシタビン（ｄＦｄＣＴＰ）、およびフロクスウリジン（ＦｄＵＴＰ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６２】
他の有益薬剤化合物
多様な他の有益薬剤化合物が、本明細書に開示される組成物中に使用されてもよい。好適な化合物には、次の薬物標的のうちの１つ以上を対象とする化合物が含まれてもよいが、これらに限定されない：クリングルドメイン、カルボキシペプチダーゼ、カルボン酸エステルヒドロラーゼ、グリコシラーゼ、ロドプシン様ドーパミン受容体、ロドプシン様アドレノセプター、ロドプシン様ヒスタミン受容体、ロドプシン様セロトニン受容体、ロドプシン様短鎖ペプチド受容体、ロドプシン様アセチルコリン受容体、ロドプシン様ヌクレオチド様受容体、ロドプシン様脂質様リガンド受容体、ロドプシン様メラトニン受容体、メタロプロテアーゼ、輸送体ＡＴＰａｓｅ、カルボン酸エステルヒドロラーゼ、ペルオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、ＤＯＰＡデカルボキシラーゼ、Ａ／Ｇシクラーゼ、メチルトランスフェラーゼ、スルホニルウレア受容体、他の輸送体（例えば、ドーパミン輸送体、ＧＡＢＡ輸送体１、ノルエピネフリン輸送体、カリウム−輸送ＡＴＰａｓｅ  α−鎖１、ナトリウム−（カリウム）−クロライド共輸送体２、セロトニン輸送体、シナプス小胞アミン輸送体、およびチアジド感受性ナトリウム−クロライド共輸送体）、電気化学ヌクレオシド輸送体、電位開口型イオンチャネル、ＧＡＢＡ受容体（Ｃｙｓ−Ｌｏｏｐ）、アセチルコリン受容体（Ｃｙｓ−Ｌｏｏｐ）、ＮＭＤＡ受容体、５−ＨＴ３受容体（Ｃｙｓ−Ｌｏｏｐ）、リガンド開口型イオンチャネルＧｌｕ：カイナイト、ＡＭＰＡ  Ｇｌｕ受容体、酸感受性イオンチャネルアルドステロン、リアノジン受容体、ビタミンＫエポキシドレダクターゼ、ＭｅｔＧｌｕＲ様ＧＡＢＡＢ受容体、内向き整流性Ｋ＋チャネル、ＮＰＣ１Ｌ１、ＭｅｔＧｌｕＲ様カルシウム感受性受容体、アルデヒドデヒドロゲナーゼ、チロシン３−ヒドロキシラーゼ、アルドースレダクターゼ、キサンチンデヒドロゲナーゼ、リボヌクレオシドレダクターゼ、ジヒドロ葉酸レダクターゼ、ＩＭＰデヒドロゲナーゼ、チオレドキシンレダクターゼ、ジオキシゲナーゼ、イノシトールモノホスファターゼ、ホスホジエステラーゼ、アデノシンデアミナーゼ、ペプチジルプロリルイソメラーゼ、チミジル酸シンターゼ、アミノトランスフェラーゼ、ファルネシル二リン酸シンターゼ、タンパク質キナーゼ、炭酸脱水酵素、チューブリン、トロポニン、ＩκＢキナーゼ−βの阻害因子、アミンオキシダーゼ、シクロオキシゲナーゼ、シトクロムＰ４５０ｓ、チロキシン５−デヨードナーゼ、ステロイドデヒドロゲナーゼ、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ、ステロイドレダクターゼ、ジヒドロオロット酸オキシダーゼ、エポキシドヒドロラーゼ、輸送体ＡＴＰａｓｅ、トランスロケータ、グリコシルトランスフェラーゼ、核受容体ＮＲ３受容体、核受容体：ＮＲ１受容体、およびトポイソメラーゼ。
【００６３】
幾つかの実施形態では、有益薬剤は、ロドプシン様ＧＰＣＲ、核受容体、リガンド開口型イオンチャネル、電位開口型イオンチャネル、ペニシリン結合タンパク質、ミエロペルオキシダーゼ様、ナトリウム：神経伝達物質共輸送体ファミリー、ＩＩ型ＤＮＡトポイソメラーゼ、フィブロネクチンＩＩＩ型、およびシトクロムＰ４５０のうちの１つを標的とする化合物である。
【００６４】
幾つかの実施形態では、有益薬剤は、抗癌剤である。好適な抗癌剤には、アクチノマイシンＤ、アレムツズマブ、アロプリノールナトリウム、アミホスチン、アムサクリン、アナストロゾール、Ａｒａ−ＣＭＰ、アスパラギナーゼ、アザシタジン（Ａｚａｃｙｔａｄｉｎｅ）、ベンダムスチン、ベバシズマブ、ビカルチミド（Ｂｉｃａｌｕｔｉｍｉｄｅ）、ブレオマイシン（例えば、ブレオマイシンＡ２およびＢ２）、ボルテゾミブ、ブスルファン、カンプトテシンナトリウム塩、カペシタビン、カルボプラチン、カルムスチン、セツキシマブ、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、クロファラビン、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、リポソーム化ダウノルビシン、ダカルバジン、デシタビン、ドセタキセル、ドキソルビシン、リポソーム化ドキソルビシン、エピルビシン、エストラムスチン、エトポシド、リン酸エトポシド、エキセメスタン、フロクスウリジン、フルダラビン、リン酸フルダラビン、５−フルオロウラシル、フォテムスチン、フルベストラント、ゲムシタビン、ゴセレリン、ヘキサメチレンアミン、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イフォスファミド、イマチニブ、イリノテカン、イキサベピロン、ラパチニブ、レトロゾール、酢酸ロイプロリド、ロムスチン、メクロレタミン、メルファラン、６−メルカプトプリン、メトトレキサート、ミトラマイシン、マイトマイシンＣ、ミトタン、ミトキサントロン、ニムスチン、オファツムマブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、パリニツムマブ、ペグアスパルガーゼ、ペメトレキセド、ペントスタチン、ペルツズマブ、ピコプラチン、ピポブロマン、プレリキサフォル、プロカルバジン、ラルチトレキセド、リツキシマブ、ストレプトゾシン、テモゾロミド、テニポシド、６−チオグアニン、チオテパ、トポテカン、トラスツズマブ、トレオスルファン、トリエチレンメラミン、トリメトレキサート、ウラシル窒素マスタード、バルルビシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ならびにそれらの類似体、前駆体、誘導体、およびプロドラッグが含まれるが、これらに限定されない。上記の化合物のうちの２つ以上が、本開示の組成物中で組み合わせて使用され得ることに留意すべきである。
【００６５】
開示される組成物中で使用するための目的の有益薬剤にはまた、オピオイドおよびその誘導体、ならびにオピオイド受容体アゴニストおよびアンタゴニスト、例えば、メタドン、ナルトレキソン、ナロキソン、ナルブフィン、フェンタニル、スフェンタニル、オキシコドン、オキシモルホン、ヒドロコドン、ヒドロモルホン、ならびにそれらの薬学的に許容される塩および誘導体が含まれてもよい。
【００６６】
幾つかの実施形態では有益薬剤は、低分子量化合物、例えば、約８００ダルトン以下の分子量を有する化合物である。幾つかの実施形態では、有益薬剤が低分子量化合物である場合、有益薬剤は、１０〜１００ｍｇ／ｍＬ以下、例えば、１００ｍｇ／ｍＬ未満、９０ｍｇ／ｍＬ未満、８０ｍｇ／ｍＬ未満、７０ｍｇ／ｍＬ未満、６０ｍｇ／ｍＬ未満、５０ｍｇ／ｍＬ未満、４０ｍｇ／ｍＬ未満、３０ｍｇ／ｍＬ未満、２０ｍｇ／ｍＬ未満、１０ｍｇ／ｍＬ未満、５ｍｇ／ｍＬ未満、または１ｍｇ／ｍＬ未満の水中溶解度を有するものである。
【００６７】
幾つかの実施形態では、有益薬剤としての使用に好適な低分子量化合物は、ビヒクル中で少なくとも実質的に不溶性である化合物であり、例えば、ビヒクル中の溶解度は、１０ｍｇ／ｍＬ未満、５ｍｇ／ｍＬ未満、１ｍｇ／ｍＬ未満、０．５ｍｇ／ｍＬ未満、０．３ｍｇ／ｍＬ未満、０．２ｍｇ／ｍＬ未満、または０．１ｍｇ／ｍＬ未満である。
【００６８】
幾つかの実施形態では、有益薬剤としての使用に好適な低分子量化合物は、塩型で存在するとき、ビヒクル中で少なくとも実質的に不溶性である化合物であり、例えば、ビヒクル中の溶解度は、１０ｍｇ／ｍＬ未満、５ｍｇ／ｍＬ未満、１ｍｇ／ｍＬ未満、０．５ｍｇ／ｍＬ未満、０．３ｍｇ／ｍＬ未満、０．２ｍｇ／ｍＬ未満、または０．１ｍｇ／ｍＬ未満である。
【００６９】
有益薬剤または有益薬剤複合体は、本明細書に開示される生分解性組成物中に、任意の好適な濃度で存在してもよい。好適な濃度は、有益薬剤の効力、有益薬剤の薬物動態半減期等に依存して変動し得る。例えば、有益薬剤を含む不溶性の成分、例えば、不溶性の有益薬剤複合体は、組成物の約１重量％〜約５０重量％の範囲、例えば、組成物の約５重量％〜約４５重量％、約１０重量％〜約４０重量％、約１５重量％〜約３５重量％、または約２０重量％〜約３０重量％で存在してもよい。有益薬剤を含む不溶性の成分、例えば、不溶性の有益薬剤複合体は、約５０ｍｇ／ｍＬ〜約４５０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ〜約４００ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬ〜約３５０ｍｇ／ｍＬ、または約２００ｍｇ／ｍＬ〜約３００ｍｇ／ｍＬ等の、約１０ｍｇ／ｍＬ〜約５００ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で存在してもよい。
【００７０】
幾つかの実施形態では、有益薬剤は、本明細書で定義される不溶性の有益薬剤、すなわち、本明細書に記載される生分解性薬物送達組成物と組み合わせて使用するために選択されるビヒクル中で完全にまたは実質的に不溶性である、有益薬剤である。換言すれば、有益薬剤の少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または少なくとも９９．５％は、２５℃で、ビヒクル中で不溶性である。不溶性の有益薬剤は、有益薬剤ビヒクル中に分散され得、かつビヒクル中に有意に溶解しない。不溶性の有益薬剤には、例えば、本明細書に記載されるビヒクル組成物中で実質的に不溶性である分子が含まれてもよい。
【００７１】
不溶性の複合体
有益薬剤は、ビヒクル中に分散される、不溶性の有益薬剤複合体、例えば、静電複合体として提供されてもよい。錯化を使用して、有益薬剤の溶解度を低減してもよい。本明細書で先に定義されたように、「不溶性の有益薬剤複合体」という用語は、本明細書に記載される生分解性薬物送達組成物と組み合わせて使用するために選択されるビヒクル中で完全にまたは実質的に不溶性である、有益薬剤複合体を含む。この文脈で使用される「実質的に不溶性の」という用語は、有益薬剤複合体の少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または少なくとも９９．５％が、２５℃で、ビヒクル中で不溶性であることを意味する。換言すれば、不溶性の有益薬剤複合体は、ビヒクル中に分散され得、かつビヒクル中に有意に溶解しない、複合体である。不溶性の有益薬剤複合体には、例えば、電荷中性化複合体が含まれてもよい。「電荷中性化複合体」という用語は、本明細書で、有益薬剤と、関連する分子、金属、対イオン等との間の非共有結合的な電荷ベースの相互作用の結果として形成され、正味の電荷を有さないかまたは正味の電荷を実質的に有さない、複合体を指すように使用される。有益薬剤の塩を含む、電荷中性化された有益薬剤が、この定義内に含まれる。
【００７２】
この錯化は、例えば、組成物中の有益薬剤の化学的安定性および物理的安定性に寄与することによって、例えば、有益薬剤の分解を低減すること、または重力に起因する沈殿の低減を示す複合体を提供することによって、本明細書で考察される、開示される組成物の有益な放出特性に寄与する。幾つかの実施形態では、不溶性の有益薬剤複合体は、有益薬剤と組み合わされるとき、不溶性の複合体の形成を誘導する、沈殿剤および／または安定剤を含めることによって形成される。不溶性の有益薬剤複合体は、例えば、有益薬剤と、１つ以上の沈殿剤および／または安定剤との間で起こる、静電相互作用からもたらされてもよい。幾つかの実施形態では、不溶性の有益薬剤複合体は、電荷中性化される。錯化はまた、錯化の不在下で有益薬剤と、製剤の他の成分、例えば、重合体との間で生じ得る、化学共役（ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ）のレベルを低減し得る。
【００７３】
本開示による不溶性の有益薬剤複合体は、次のように特徴付けられてもよい：１０ｍｇの不溶性の有益薬剤複合体が、１ｍＬのｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水の試験溶液中に分散され、３７℃で２４時間放置されるとき、試験溶液中に溶解した有益薬剤の量は、１０ｍｇの不溶性の有益薬剤複合体中、有益薬剤の６０％未満、例えば、５ｍｇの不溶性の有益薬剤複合体中、有益薬剤の５０％未満、５ｍｇの不溶性の有益薬剤複合体中、有益薬剤の４０％未満、５ｍｇの不溶性の有益薬剤複合体中、有益薬剤の３０％未満、または５ｍｇの不溶性の有益薬剤複合体中、有益薬剤の２０％未満である。
【００７４】
幾つかの実施形態では、沈殿剤または安定剤は、荷電種、例えば、荷電分子、金属イオン、または金属イオンの塩型である。当業者であれば、金属イオンの塩型はそれ自体、荷電種でなく、むしろ、解離時に荷電種の源を提供することを理解するであろう。例えば、幾つかの実施形態では、沈殿剤および／または安定剤は、プロタミン、またはＮｉ２＋、Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｇ２＋、および／もしくはＣａ２＋等の二価金属イオンである。二価金属は、組成物中に、例えば、酢酸亜鉛、炭酸亜鉛、塩化亜鉛、硫酸亜鉛、酢酸マグネシウム、炭酸マグネシウム、塩化マグネシウム、水酸化マグネシウム、酸化マグネシウム、硫酸マグネシウム、酢酸カルシウム、炭酸カルシウム、塩化カルシウム、硫酸カルシウム等として存在してもよい。つまり、二価金属塩は、有益薬剤の二価金属塩が形成されるように、組成物の調製中に含まれてもよい。これらの沈殿剤および／または安定剤は、選択される有益薬剤が負電荷性タンパク質またはペプチドであるとき、特に使用される。
【００７５】
有益薬剤の正味の電荷はまた、例えば、ｐＨを調整することによって、調整されてもよいことに留意すべきである。したがって、好適な電荷を持つ沈殿剤および／または安定剤は、調整され得るタンパク質またはペプチドの正味の電荷に基づいて選択されてもよい。例えば、有益薬剤が、例えば、ｐＨ調整の結果として、正味の正電荷を有する場合、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）等の負電荷性分子が、沈殿剤および／または安定剤として利用されてもよい。
【００７６】
故に、幾つかの実施形態は、タンパク質およびペプチドのうちの少なくとも１つを、カチオン性錯化剤と、８〜１０または８〜９等の、８よりも大きい、例えば、８．５よりも大きい、または９よりも大きいｐＨで接触させて、複合体を形成することを伴う、複合体を作製する方法を伴う。カチオン性錯化剤の例としては、プロタミン、ポリリジン、ポリアルギニン、ポリミキシン、およびそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７７】
他の実施形態は、タンパク質およびペプチドのうちの少なくとも１つを、アニオン性錯化剤と、１〜３または２〜３等の、３未満、例えば、２．５未満または２未満のｐＨで接触させて、複合体を形成することを伴う、複合体を作製する方法を伴う。アニオン性錯化剤の例としては、カルボキシメチルセルロース、ポリアデノシン、ポリチミン、およびそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７８】
幾つかの実施形態では、本明細書に開示される組成物中での有益薬剤複合体の使用前に、非錯化有益薬剤、例えば、非電荷中性化有益薬剤を除去するために、上述の指定のｐＨでの、例えば、８よりも大きいまたは３未満のｐＨでの錯化後に、有益薬剤を錯化剤と接触させることによって形成される混合物から上清を除去することが有益であり得る。
【００７９】
幾つかの実施形態では、カチオン性薬剤は、有益薬剤と錯化されて、不溶性の有益薬剤複合体を形成する。好適なカチオン性薬剤には、プロタミン、ポリリジン、ポリアルギニン、ポリミキシン、Ｃａ２＋、およびＭｇ２＋が含まれてもよいが、これらに限定されない。また、アニオン性薬剤を適宜利用して、不溶性の有益薬剤複合体を形成してもよい。好適なアニオン性薬剤には、上述のＣＭＣ、ならびにポリアデノシンおよびポリチミンが含まれてもよいが、これらに限定されない。アニオン性薬剤がポリアデノシンである場合、ポリアデノシンは、例えば、１０ｍｅｒ〜１５０ｍｅｒであり得る。アニオン性薬剤がポリチミンである場合、ポリチミンは、例えば、１０ｍｅｒ〜１５００ｍｅｒであり得る。
【００８０】
例えば、複合体中の有益薬剤の改善された化学的安定性もしくは物理的安定性、ならびに／または改善された薬物放出速度、例えば、低減されたバースト効果および／もしくは持続的送達プロフィールのために、２つ以上の沈殿剤および／または安定剤を組み合わせて利用して、本明細書に記載される不溶性の有益薬剤複合体の形成を促進してもよい。例えば、プロタミンおよび二価金属またはその塩の、タンパク質有益薬剤との組み合わせは、開示される組成物のビヒクル中に分散されるとき体内での所望の有益薬剤放出プロフィールを有する組成物を提供する、不溶性の複合体を形成し得る。更に、沈殿剤および／または安定剤のかかる組み合わせは、有益薬剤複合体の化学的安定性および物理的安定性を改善し、複合体を、減菌条件、例えば、電子ビーム減菌およびガンマ放射線減菌を含む、放射線減菌に対してより抵抗性にし得る。
【００８１】
したがって、幾つかの実施形態では、不溶性の有益薬剤複合体は、プロタミンおよび二価金属またはその塩（例えば、Ｚｎ２＋または酢酸亜鉛）の両方と組み合わせた有益薬剤を含む。有益薬剤：二価金属または塩：プロタミン（例えば、有益薬剤：亜鉛：プロタミン）のモル比は、１：０．５〜２．０：０．３〜０．５の範囲にあり得る。
【００８２】
プロタミンを単独で、または上述の沈殿剤および／もしくは安定剤のうちの１つと組み合わせて使用して、本開示による不溶性の有益薬剤複合体を形成してもよい。幾つかの実施形態では、例えば、組成物がヒトまたは非ヒト動物に投与されるべき場合、放射線安定組成物を提供するために、メチオニン等の添加剤を含めることが望ましい場合がある。これは、例えば、有益薬剤がタンパク質またはペプチドである場合に有用であり得る。メチオニンを、例えば、凍結乾燥または噴霧乾燥前に組成物に添加して、不溶性の有益薬剤複合体粉末を形成してもよく、それは、粉末を本明細書に記載されるビヒクルと組み合わせる前または後のいずれかに、例えば、ガンマ線照射を介して、滅菌することができる。
【００８３】
幾つかの実施形態では、組成物は、２５ｋＧｙの線量でのガンマ線照射への曝露後の少なくとも２４時間の期間にわたって、少なくとも９０％以上（例えば、９５％）の純度を維持する。幾つかの実施形態では、少なくとも９０％以上（例えば、９５％）の純度は、少なくとも１ヶ月の期間にわたって維持される。
【００８４】
不溶性の有益薬剤複合体は、不溶性の粒子の形態で組成物中に存在する。これらの粒子の粒径は、有益薬剤複合体を調製するために使用される方法に依存して変動させられてもよい。典型的には、粒子は、２５ゲージ針等の小さい針を通過するのに十分に小さい。幾つかの実施形態では、不溶性の有益薬剤複合体は、直径または最大寸法約１μｍ〜約４００μｍ、例えば、直径または最大寸法約１μｍ〜約３００μｍ、約１μｍ〜約２００μｍ、約１μｍ〜約１００μｍ、約１μｍ〜約９０μｍ、約１μｍ〜約８０μｍ、約１μｍ〜約７０μｍ、約１μｍ〜約６０μｍ、約１μｍ〜約５０μｍ、約１μｍ〜約４０μｍ、約１μｍ〜約３０μｍ、約１μｍ〜約２０μｍ、または約１μｍ〜約１０μｍの範囲の平均粒径を有する粒子の形態でビヒクル中に分散される。幾つかの実施形態では、不溶性の有益薬剤複合体は、直径または最大寸法約１０μｍ〜約１００μｍの範囲の平均粒径を有する粒子の形態でビヒクル中に分散される。例えば、粒子の密度がビヒクルの密度と同じまたは同様であるような密度の合致と組み合わせた、この範囲の粒径は、本明細書に開示される組成物の改善されたシリンジ通過性および注射可能性に寄与する。
【００８５】
幾つかの実施形態では、不溶性の粒子の密度は、粒子が分散されるビヒクルの密度とおよそ同じである。これは、特に、例えば、２〜８℃等の低温での組成物の保管中に、ビヒクル中の粒子の増加された物理的安定性およびビヒクル中の粒子の改善された分散性を提供する。例えば、幾つかの実施形態では、粒子およびビヒクルの両方は、約０．９〜１．２ｇ／ｃｍ３の間の密度を有する。幾つかの実施形態では、粒子の平均密度は、ビヒクルの平均密度から０．２５ｇ／ｃｍ３を超えて、例えば、０．２０ｇ／ｃｍ３を超えて、０．１５ｇ／ｃｍ３を超えて、または０．０５ｇ／ｃｍ３を超えては異ならない。場合によっては、ビヒクルの見かけ密度は、粒子の見かけ密度の１０％以内、例えば、８％以内、５％以内、または３％以内である。
【００８６】
追加的な成分
多様な追加的成分が開示される組成物に添加されてもよいが、それらが、本明細書で考察される組成物の有益な特性、例えば、粘度等を、実質的に破壊しないことを条件とする。好適な成分には、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤、例えば、安定剤、染料、充填剤、保存料、緩衝剤、酸化防止剤、湿潤剤、抗発泡剤等が含まれてもよいが、これらに限定されない。追加的な成分には、例えば、スクロース、ポリソルベート、メチオニン等が含まれてもよい。
【００８７】
例えば、メチオニンが酸化防止剤として本開示の組成物中に含まれてもよく、幾つかの実施形態では、スクロースが安定剤として含まれる。上述のように、メチオニンを、本明細書に記載される不溶性の有益薬剤複合体と組み合わせて、本明細書に記載される放射線安定粉末または放射線安定組成物を形成してもよい。
【００８８】
幾つかの実施形態では、イソ酪酸酢酸スクロース（ＳＡＩＢ）等の高粘度担体が、本開示の組成物中に含まれてもよい。例えば、ＳＡＩＢが、ビヒクルの、約５重量％〜約１０重量％等の、約５重量％〜約２０重量％の範囲の量で含まれてもよい。
【００８９】
幾つかの実施形態では、ビヒクルは、約５％〜１０％ＳＡＩＢ、約７０％〜約７５％の疎水性溶媒、および約１５％〜２５％の生分解性重合体を含み、各々の％は、ビヒクルの重量％である。１つ以上の実施形態では、ビヒクルは、約５〜約１０％ＳＡＩＢ、約６５％〜約７０％安息香酸ベンジル、約３％〜約７％エタノール、および約１５％〜約２５％ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）を含み、各々の％は、ビヒクルの重量％である。幾つかの実施形態では、ビヒクルは、約１５％〜約２５％ＳＡＩＢ、約５５％〜約６５％安息香酸ベンジル、約５％〜約１５％ベンジルアルコール、および約５％〜約１５％ポリ乳酸（ＰＬＡ）を含み、各々の％は、ビヒクルの重量％である。１つ以上の実施形態では、ビヒクルは、約６５％〜約７５％安息香酸ベンジル、約５％〜約１５％ベンジルアルコール、および約１５％〜約２５％ポリ乳酸（ＰＬＡ）を含み、各々の％は、ビヒクルの重量％である。
【００９０】
１つ以上の実施形態では、ビヒクルの８重量％でのＳＡＩＢの組み込みは、ビヒクルの７２重量％での疎水性溶媒の組み込みおよびビヒクルの２０重量％での生体適合性の生分解性重合体の組み込みを可能にする。幾つかの実施形態では、組成物中のＳＡＩＢの量は調整されてもよいが、疎水性溶媒の重量％が、ビヒクルの約６０〜約９５重量％の間で維持され、生体適合性の生分解性重合体の重量％が、ビヒクルの約５〜約４０重量％の間で維持されることを条件とする。
【００９１】
例えば、ＳＡＩＢの量は、例えば、１％間隔で、ビヒクルの０〜３５重量％で調整されてもよいが、疎水性溶媒および生体適合性の生分解性重合体の百分率が適宜調整されることを条件とし、好ましくは、結果として生じる組成物のゼロせん断粘度が２５℃で１，２００ｃＰを超えないことを条件とする。指定範囲内に入る上記の３つの成分の各組み合わせを列挙することなく、全てのかかる組み合わせが本開示の範囲内にあること、更に、これは、上記の範囲および粘度の列挙を満たす上記の３つの成分の任意の組み合わせの具体的な列挙のために、先立つ記載を提供することが意図されることを理解されたい。
【００９２】
調製方法
一般に、本組成物は、当業者に既知であり利用可能な種々の方法および技法のいずれによって作製されてもよい。
【００９３】
本開示の組成物は、一般に、本明細書に記載される生分解性重合体および本明細書に記載される疎水性溶媒を組み合わせて、組成物のビヒクルを形成することによって調製されてもよい。生分解性重合体は、典型的にビヒクルの約５重量％〜約４０重量％の量で提供され、疎水性溶媒は、典型的にビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％の量で提供される。有益薬剤を含む不溶性の成分、例えば、不溶性の有益薬剤複合体は、ビヒクル中に分散される。かかる分散は、所望の粒径の粒子を得るために、１つ以上の摩砕またはふるい分けステップ後に生じてもよい。ビヒクル中の不溶性の有益薬剤または不溶性の有益薬剤複合体の分散後に、１つ以上の均質化ステップが利用されてもよい。所望の粘度範囲、例えば、２５℃で１，２００センチポアズ（ｃＰ）未満、例えば、１０００ｃＰ未満、５００ｃＰ未満、または１００ｃＰ未満のゼロせん断粘度を維持しながら、上記の範囲内で、生分解性重合体および疎水性溶媒の重量％が調整されてもよいことに留意すべきである。更に、本明細書に前述されるように、１つ以上の追加的成分が、ビヒクル中に含まれてもよい。
【００９４】
不溶性の有益薬剤複合体粒子は、例えば、有益薬剤を好適な緩衝液中に溶解させ、その後、好適な量の安定剤／沈殿剤を、緩衝液の凝固点よりも高いが沸点よりも低い温度で沈殿物が形成されるまで添加することによって、調製されてもよい。分散した沈殿物を有する好適な緩衝液は、不溶性の有益薬剤複合体を含む粉末を提供するために、次いで、好適な乾燥プロセス、例えば、噴霧乾燥または凍結乾燥に供される。代替的に、沈殿物は、遠心分離および結果として生じる上清の除去によって、回収することができる。それは次いで、直接、噴霧乾燥または凍結乾燥のために、水性培地中に再懸濁させることができる。１つ以上のサイズ縮小およびふるい分けステップを利用して、有益薬剤複合体の粒径を調整してもよい。錯化粉末は、有益薬剤複合体粒子をビヒクル中に分散させるのに好適な量の、調製されたビヒクルと混合される。幾つかの実施形態では、有益薬剤が低分子量化合物である場合、有益薬剤複合体は、有益薬剤の塩型を含むのみでもよいが、有益薬剤の塩型がビヒクル中で少なくとも実質的に不溶性であることを条件とする。製剤は、当業者に既知の任意の好適な方法、例えば、１０ｋＧｙ以上の線量でのガンマ減菌を使用して、使用前に滅菌されてもよい。代替的に、有益薬剤複合体およびビヒクルは別個に滅菌され、次いで使用前に組み合わされてもよい。
【００９５】
生分解性製剤
本明細書に上述されたように、幾つかの実施形態では、本開示の生分解性組成物は、Ａ）ｉ）ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％（例えば、約６重量％〜約２９重量％、約７重量％〜約２８重量％、約８重量％〜約２７重量％、約９重量％〜約２６重量％、約１０重量％〜約２５重量％、約１１重量％〜約２４重量％、約１２重量％〜約２３重量％、約１３重量％〜約２２重量％、約１４重量％〜約２１重量％、約１５重量％〜約２０重量％、約１６重量％〜約１９重量％、または約１７重量％〜約１８重量％）の量で存在する生分解性重合体、およびｉｉ）ビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％（例えば、約９４重量％〜約６１重量％、約９３重量％〜約６２重量％、約９２重量％〜約６３重量％、約９１重量％〜約６４重量％、約９０重量％〜約６５重量％、約８９重量％〜約６６重量％、約８８重量％〜約６７重量％、約８７重量％〜約６８重量％、約８６重量％〜約６９重量％、約８５重量％〜約７０重量％、約８４重量％〜約７１重量％、約８３重量％〜約７２重量％、約８２重量％〜約７３重量％、約８１重量％〜約７４重量％、約８０重量％〜約７５重量％、約７９重量％〜約７６重量％、または約７８重量％〜約７７重量％）の量で存在する疎水性溶媒を含む、単相ビヒクル、ならびにＢ）生分解性組成物が、２５℃で１，２００センチポアズ（ｃＰ）未満（例えば、１１００ｃＰ未満、１０００ｃＰ未満、９００ｃＰ未満、８００ｃＰ未満、７００ｃＰ未満、６００ｃＰ未満、５００ｃＰ未満、４００ｃＰ未満、３００ｃＰ未満、２００ｃＰ未満、または１００ｃＰ未満）のゼロせん断粘度を有し、小さいゲージ針を通じて注射可能であり、かつエマルションまたはゲルでない、ビヒクル中に分散した有益薬剤を含む不溶性の成分、例えば、不溶性の有益薬剤複合体を含む。
【００９６】
幾つかの実施形態では、本開示の生分解性組成物は、２５℃で１，２００ｃＰ未満（例えば、１１００ｃＰ未満、１０００ｃＰ未満、９００ｃＰ未満、８００ｃＰ未満、７００ｃＰ未満、６００ｃＰ未満、５００ｃＰ未満、４００ｃＰ未満、３００ｃＰ未満、２００ｃＰ未満、または１００ｃＰ未満）のゼロせん断粘度を有する。
【００９７】
生分解性重合体の量および疎水性溶媒の量は、例えば、所望の粘度を達成するために、例えば、１重量％増分で変動させられてもよいが、それらが、典型的に、それぞれ、ビヒクルの約５重量％〜約４０重量％およびビヒクルの約９５重量％〜約６０重量％以内に維持されることを条件とすることに留意すべきである。したがって、上記の範囲内に入るあらゆる可能な組み合わせを列挙することなく、これは、かかる組み合わせのために、先立つ記載を提供することが意図される。
【００９８】
幾つかの実施形態では、生分解性組成物のゼロせん断粘度は、２５℃で、約１０００ｃＰ〜約１００ｃＰ、例えば、約９００ｃＰ〜約１００ｃＰ、約８００ｃＰ〜約１００ｃＰ、約７００ｃＰ〜約１００ｃＰ、約６００ｃＰ〜約１００ｃＰ、約５００ｃＰ〜約１００ｃＰ、約４００ｃＰ〜約１００ｃＰ、約３００ｃＰ〜約１００ｃＰ、または約２００ｃＰ〜約１００ｃＰである。
【００９９】
幾つかの実施形態では、２５℃で比較的低粘度であることに加えて、開示される生分解性組成物はまた、３７℃でも比較的低い粘度、例えば、５００ｃＰ未満、４００ｃＰ未満、３００ｃＰ未満、２００ｃＰ未満、または１００ｃＰ未満のゼロせん断粘度を示す。幾つかの実施形態では、生分解性組成物のゼロせん断粘度は、３７℃で、約５００ｃＰ〜約１００ｃＰ、約４００ｃＰ〜約２００ｃＰ、または約３００ｃＰである。これらの製剤の粘度は、上昇する温度と共に、頻繁には指数関数的様式で低下する。
【０１００】
開示される生分解性組成物はまた、典型的に、体外でリン酸塩緩衝食塩水に曝露された後、３７℃で比較的低い粘度（例えば、５００ｃＰ未満、４００ｃＰ未満、３００ｃＰ未満、２００ｃＰ未満、または１００ｃＰ未満のゼロせん断粘度）を示し、この低粘度を経時的に、例えば、リン酸塩緩衝食塩水への曝露の、少なくとも５時間、少なくとも２４時間、少なくとも４８時間、少なくとも７２時間、または少なくとも１６８時間にわたって維持する。
【０１０１】
驚くべきことに、開示される生分解性デポー組成物は、典型的に、最小のバーストと共に体内での有益薬剤の持続放出を提供しながら、良好なシリンジ通過性および注射可能性を示す。シリンジ通過性および注射可能性は、既知の容量の生分解性デポー組成物を、比較的小さいゲージ針を装着された既知のサイズのシリンジ、例えば、約２１〜約２７のゲージを有する針を装着された１〜５ｍＬシリンジを通じて注射するのにかかる時間によって、特徴付けられてもよい。幾つかの実施形態では、本開示の生分解性デポー組成物は、約２１〜約２７のゲージを有するおよそ０．５インチ針を装着された１ｍＬシリンジを通じて注射される、それらの能力に基づいて、良好なシリンジ通過性および注射可能性を有するものとして特徴付けられてもく、ここで０．５ｍＬ容量の生分解性デポーは、２５℃で５〜１０ｌｂの力の適用により、２５秒未満（例えば、２０秒未満、１５秒未満、１０秒未満、または５秒未満）のうちに注射されることが可能である。幾つかの実施形態では、上記の条件下で、生分解性デポーは、約２５秒〜約１．５秒の範囲、例えば、約２０秒〜約１．５秒、約１５秒〜約１．５秒、約１０秒〜約１．５秒、または約５秒〜約１．５秒のうちに注射されることが可能である。
【０１０２】
本明細書に記載される良好な注射可能性およびシリンジ通過性に加えて、幾つかの実施形態では、生分解性本開示の組成物は、最小のバーストおよび経時的な有益薬剤の持続的送達を示す。「最小のバースト」は、Ｃｍａｘ／Ｃｍｉｎの観点で特徴付けられてもよく、式中、許容されるＣｍａｘ／Ｃｍｉｎ上限は、送達対象の有益薬剤に依存して変動し得る。幾つかの実施形態では、最初の２４時間にわたってバーストとして放出される有益薬剤の重量％は、１週間にわたって放出される総量の３０％未満、例えば、１週間にわたって放出される総量の２０％未満または１０％未満である。幾つかの実施形態では、最初の２４時間にわたってバーストとして放出される有益薬剤の重量％は、１ヶ月にわたって放出される総量の１０％未満、例えば、１ヶ月にわたって放出される総量の８％未満または５％未満である。本明細書で使用されるとき、「持続的送達」は、同じ有益薬剤の即時放出（ＩＲ）製剤の単回用量から得られる持続期間よりも、少なくとも数倍、例えば、少なくとも５倍〜少なくとも１０倍長い持続期間を指す（有益薬剤自体の吸収、分布、代謝、および排泄（ＡＤＭＥ）特性によって決定）。
【０１０３】
上述のように、開示される生分解性組成物は、上述の良好な注射可能性、シリンジ通過性、および化学的安定性有することに加えて、最小のバースト効果を伴う、体内での有益薬剤の持続放出を提供する。現在入手可能な製剤は一般に、制御放出または注射可能性／シリンジ通過性のいずれかを提供するが、双方を提供しないため、これは予想外かつ驚くべき結果である。例えば、市販のデポー製剤は、有益薬剤の制御放出を提供するために、極度に粘性の重合体マトリックスの形成に依存し得る。しかしながら、かかる製剤は、デポーの粘性性質に起因して、不十分な注射可能性／シリンジ通過性を有する。代替的に、他の市販の製剤は、高溶媒含量に起因して良好な注射可能性／シリンジ通過性を有し得るが、有益薬剤の放出に対する制御が不十分である、ビヒクルを利用する。更に、本明細書に開示される組成物等の低粘度液体組成物は、実質的なバースト効果および指数関数的に低下する送達プロフィールの形態で、不十分な放出速度を有することが予想される。この予想とは対照的に、本組成物は、低いバースト効果および１日〜１ヶ月以上の期間にわたる有益薬剤の放出に対する良好な制御を示す。
【０１０４】
いかなる特定の理論にも拘束されることを意図するものではないが、本開示の組成物の有益な放出特性は、少なくとも一部には、体内での、組成物の表面における、流動的で非構成的な（いかなる特記すべき機械的完全性も有さない）「速度制御クラウド」または「速度制御薄膜」の形成に起因すると考えられる。速度制御クラウドまたは薄膜は、水性環境における組成物の表面で生じるものとして特徴付けることができる。開示される組成物の望ましい制御送達特性は、組成物の液体コア中に分散した、有益薬剤を含む不溶性の成分、例えば、不溶性の有益薬剤複合体、および組成物の表面上の重合体のクラウドまたは薄膜の両方の速度制御寄与からもたらされてもよい。更に、幾つかの実施形態では、例えば、ＭＲＴによって示される、放出速度制御に関する相乗効果は、有益薬剤複合体と速度制御クラウドまたは薄膜との間の相互作用の明らかな結果と見なされる。速度制御クラウドまたは薄膜が特記すべき機械的完全性を欠く一方で、それは１０μｍ未満の測定可能な厚さを有する。
【０１０５】
幾つかの実施形態では、本開示の組成物は、ゲル形成またはゲル化特性を欠く。例えば、多くの先行技術のビヒクル組成物は、３７℃でエイジングさせたときゲル形成を示し、それは損失弾性率に対する貯蔵弾性率の増加によって特徴付けることができる。対照的に、本開示の組成物は、３７℃で１４日間の期間にわたるエイジング後の、比較的大きいＧ”／Ｇ’比、例えば、１５以上または２０以上等の、１０以上のＧ”／Ｇ’比によって特徴付けることができ、式中、Ｇ”は、損失弾性率であり、Ｇ’は、貯蔵弾性率である。
【０１０６】
ある種の実施形態では、組成物は、ニュートン性である。例えば、場合によっては、２５℃での組成物の粘度は、７秒−１〜５００秒−１の範囲のせん断速度で測定されるとき、７％未満、６％未満、５％未満、４％未満、または３％未満変動する。
【０１０７】
いかなる特定の理論にも拘束されることを意図するものではないが、図３０は、ペプチドまたはタンパク質等の酸基を含有する有益薬剤の電荷中性化複合体を含む組成物を表すものとして提供される。電荷中性化の事象中、ペプチドもしくはタンパク質または任意の酸末端分子のいずれかは、緩衝液の存在下で塩基性ｐＨ（ｐＨ＞８）の負電荷性となることができる。水溶液中の荷電有益分子は、最適なモル比で、プロタミンまたはＺｎ２＋イオン等の正電荷性の対イオンの溶液で中性化されるであろう。プロタミンまたは亜鉛イオンのいずれかのこのモル濃度は、負電荷性ペプチドまたはタンパク質の固定濃度に対する、プロタミンまたは亜鉛イオンの滴定によって得られる。プロタミンまたは亜鉛イオンのいずれかのモル濃度はまた、タンパク質またはペプチド上の正味の電荷およびそのモル濃度にも依存するであろう。電荷中性化複合体（ペプチドまたはタンパク質と対イオン）の水溶解度は、劇的に低減され、それは溶液から沈殿分離するであろう。タンパク質またはペプチドのいずれの荷電種および対イオンも溶液中に留まる。不溶性の有益薬剤−対イオン複合体の乾燥粉末は、手混合または機械混合（例えば、均質化）のいずれかによって、重合体溶液（ビヒクル）中に一様に分散させることができる。結果として生じる製剤は、溶解度、溶解速度、および拡散率を介して有益薬剤の放出を制御する。静電、水素結合、および疎水性相互作用もまた、電荷中性化有益薬剤および重合体の分散した粒子の間で生じる場合があり、これらもまた、体内での有益薬剤のＭＲＴへの重合体−複合体相互作用による驚くべき寄与によって明示されるように、放出速度を調節する場合がある。
【０１０８】
幾つかの実施形態では、開示される組成物は、約３ヶ月間にわたって、更により好ましくは約６ヶ月間にわたって、なおも更により好ましくは約１年間にわたって、実質的に均質に留まる懸濁液である。１つ以上の実施形態では、不溶性の有益薬剤複合体は、約３ヶ月間にわたって、更により好ましくは約６ヶ月間にわたって、なおも更により好ましくは約１年間にわたって、懸濁ビヒクル中で物理的かつ化学的に安定に留まる。
【０１０９】
生分解性製剤の投与
本明細書に上述されたように、開示される生分解性製剤は、良好な注射可能性およびシリンジ通過性と共に、低粘度を有するため、細いゲージ針、例えば、２１〜２７ゲージを有するシリンジ（例えば、１〜５ｍＬシリンジ）を介した送達によく適したものとなっている。更に、注射用デポー製剤もまた、当業者に既知の１つ以上の針無し注射器を介して送達されてもよい。
【０１１０】
投与の好適な経路には、皮下注射および筋肉内注射が含まれるが、これらに限定されない。投与の好適な経路にはまた、局所送達のために、例えば、関節内および眼内、例えば、硝子体内投与が含まれる。
【０１１１】
本明細書に開示される製剤はまた、経口製剤、例えば、ゲルキャップ（軟性または硬性）中でまたはマウスウォッシュとして送達される製剤において、使用されてもよい。
【０１１２】
本明細書に開示される製剤はまた、医療デバイス、例えば、埋め込み式の医療デバイスのためのコーティングとして使用されてもよい。かかるコーティングは、例えば、埋め込み前に医療デバイスを浸漬コーティングすることによって、適用されてもよい。
【０１１３】
本開示の製剤は、所望の薬理効果が周期的ベースでの投与を介して達成されるように、製剤化されてもよい。例えば、製剤は、日次、週次、または月次ベースでの投与のために製剤化されてもよい。
【０１１４】
投与対象の有益薬剤または不溶性の有益薬剤複合体の実際の用量は、有益薬剤、治療されている病態、ならびに被検体の年齢、体重、および全身状態、ならびに治療されている病態の重症度、および健康管理専門家の判断に依存して変動するであろう。治療上有効量は、当業者に既知であり、かつ／または関連する参考文書および文献に記載されている。
【０１１５】
例えば、タンパク質およびペプチド有益薬剤の場合、有益薬剤は、典型的には、有益薬剤の血漿レベルが約５ピコモル／リットル〜約２００ピコモル／リットルの範囲内であるように送達されるであろう。体重ベースでは、タンパク質またはペプチドの治療上有効投薬量は、典型的には、成人について１日当たり約０．０１ｍｇ〜１日当たり約１０００ｍｇの範囲であろう。例えば、ペプチドまたはタンパク質投薬量は、１日当たり約０．１ｍｇ〜１日当たり約１００ｍｇ、または１日当たり約１．０ｍｇ〜約１０ｍｇ／日の範囲であってもよい。
【０１１６】
幾つかの実施形態では、好適な低分子量化合物は、週１回投与されるデポーから送達されるとき、約３０ｍｇ／日以下の用量、または１ヶ月に１回投与されるデポーから送達されるとき、約１０ｍｇ／日以下の用量で、所望の治療効果を提供可能なものとして特徴付けられてもよい。例えば、好適な低分子量化合物は、週１回投与されるデポーから送達されるとき、約３０ｍｇ／日、例えば、約２５ｍｇ／日未満、約２０ｍｇ／日未満、約１５ｍｇ／日未満、約１０ｍｇ／日未満、約５ｍｇ／日未満、または約１ｍｇ／日未満の用量で、所望の治療効果を提供可能なものであり得る。幾つかの実施形態では、好適な低分子量化合物は、週１回投与されるデポーから送達されるとき、約３０ｍｇ／日〜約１ｍｇ／日、例えば、約２５ｍｇ／日〜約５ｍｇ／日、または約２０ｍｇ／日〜約１０ｍｇ／日の用量で、所望の治療効果を提供可能なものである。
【０１１７】
同様に、好適な低分子量化合物は、１ヶ月に１回投与されるデポーから送達されるとき、約１０ｍｇ／日未満、約９ｍｇ／日未満、約８ｍｇ／日未満、約７ｍｇ／日未満、約６ｍｇ／日未満、約５ｍｇ／日未満、約４ｍｇ／日未満、約３ｍｇ／日未満、約２ｍｇ／日未満、または約１ｍｇ／日未満の用量で、所望の治療効果を提供可能なものであり得る。幾つかの実施形態では、好適な低分子量化合物は、１ヶ月に１回投与されるデポーから送達されるとき、約１０ｍｇ／日〜約１ｍｇ／日、例えば、約９ｍｇ／日〜約２ｍｇ／日、約８ｍｇ／日〜約３ｍｇ／日、約７ｍｇ／日〜約４ｍｇ／日、または約６ｍｇ／日〜約５ｍｇ／日の用量で、所望の治療効果を提供可能なものであり得る。
【０１１８】
幾つかの実施形態では、例えば、製剤が注射前に一定期間保管状態にあった場合、有益薬剤を含む不溶性の成分、例えば、不溶性の有益薬剤複合体がビヒクル担体中に十分に分散していることを確実にするために、製剤は、投与前に、例えば、振盪を介して、混合されてもよい。
【０１１９】
キット
本明細書に開示される生分解性製剤の１つ以上の成分と共に、それを調製するおよび／または使用するための指示書を含む、多様なキットが提供されてもよい。例えば、一実施形態では、好適なキットは、本明細書に記載されるビヒクルを第１の容器中に、および本明細書に記載される有益薬剤を含む不溶性の成分、例えば、不溶性の有益薬剤複合体を第２の容器中に、例えば、粉末形態で含んでもよい。これらの成分を次いで、注射前に一緒に混合して、本開示による生分解性製剤を形成してもよい。幾つかの実施形態では、第１の容器は、第２の容器に、例えば、ルアーロックを備えるバイアルを介して連結されて、ビヒクルと、不溶性の成分、例えば、不溶性の有益薬剤複合体を含む有益薬剤とを混合するための機構を提供し得る、シリンジである。他の実施形態では、第１および第２の容器の両方は、例えば、ルアーロックを介して連結されて、ビヒクルと、不溶性の成分、例えば、不溶性の有益薬剤複合体を含む有益薬剤とを混合するための機構を提供し得る、シリンジである。
【０１２０】
別の実施形態では、生分解性製剤は、単一の容器、例えば、単一のシリンジ中に予混合されて提供されてもよい。
【０１２１】
別の実施形態では、生分解性製剤は、ビヒクルを含有する第１のチャンバ、および不溶性の成分、例えば、不溶性の有益薬剤複合体を含む有益薬剤を含有する第２のチャンバを含むプレフィルド二重チャンバシリンジ中に、混合されずに提供されてもよい。シリンジは、ユーザが、ビヒクルと、不溶性の成分、例えば、不溶性の有益薬剤複合体を含む有益薬剤との、接触および後続の混合を開始することができるように提供されてもよい。
【０１２２】
キットおよび／またはキット成分の使用のための指示書は、キットと共に完全な書面の指示書として、例えば、挿入カードとしてまたはキットパッケージ上に印刷されて、あるいはキットと共に提供されるコンピュータ可読メモリデバイス上に記憶されて、提供されてもよい。代替的に、キットは、ユーザに簡潔な指示を提供し、ユーザを、より完全な使用法指示のための代替的源に導く指示書を含んでもよい。例えば、キットは、使用のための完全な指示にアクセスし得、かつ／またはそれをダウンロードし得る、インターネットサイトへの参照を含んでもよい。
【実施例】
【０１２３】
次の実施例は、当業者に本発明の作製および使用方法の開示および説明を提供するために提示されるものであり、本発明者らが何を本発明として見なすかについての範囲を限定するようには意図されず、かつそれらが、下記の実験が全てのまたは唯一の行われた実験であることを表すことも意図されない。使用された数（例えば、量、温度等）に関する正確性を確実にするための努力がなされてきたが、幾つかの実験的誤差および偏差が考慮されるべきである。別途指示しない限り、部分は重量部であり、分子量はゲル浸透クロマトグラフィーで測定された重量平均分子量であり、温度は摂氏度であり、圧力は大気圧またはほぼ大気圧である。標準的な略号が使用され得、例えば、ｂｐ、塩基対（複数可）；ｋｂ、キロベース（複数可）；ｋｄ、キロダルトン（複数可）；ｐＬ、ピコリットル（複数可）；秒（ｓ）または秒（ｓｅｃ）、秒（ｓｅｃｏｎｄ）（複数可）；分（ｍｉｎ）、分（ｍｉｎｕｔｅ）（複数可）；時間（ｈ）または時間（ｈｒ）、時間（ｈｏｕｒ）（複数可）；ａａ、アミノ酸（複数可）；ｎｔ、ヌクレオチド（複数可）；ｉ．ｍ、筋肉内（に）；ｉ．ｐ、腹腔内（に）；ｓ．ｃ、皮下（に）等である。
【０１２４】
実施例１：ｒｈＧＨ−プロタミン複合体の調製
噴霧乾燥
硫酸プロタミンと錯化されたｈＧＨ（ＢｒｅｓａＧｅｎ）の噴霧乾燥粉末製剤を次のように調製した。１．００ｇのＢｒｅｓａＧｅｎ  ｒｈＧＨ粉末を、１５０ｍＬ広口ガラスジャー中に配置した。５５ｍＬの２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３（ｐＨ約７．５）溶液を添加し、化合物を、それが透明になるまで３０分間室温で、４００ｒｐｍで撹拌した。１．９ｍＬの２９０ｍＭスクロース溶液を次いで、４００ｒｐｍで撹拌しながら添加した。溶液が透明となったとき、１５２μＬの１０％ポリソルベート２０溶液を添加した。１２．９ｍＬの硫酸プロタミン溶液（濃縮１０ｍｇ／ｍＬ）を次いで緩徐に添加して、白色沈殿物を得た。混合物を３０分間撹拌した後、噴霧乾燥させて、錯化反応を完了させた。
【０１２５】
プロタミンに加えて、二価金属またはその塩（例えば、酢酸亜鉛）を含む製剤について、かかる成分は、プロタミンの添加前に所望の比率まで添加されてもよい。例えば、酢酸亜鉛の１００ｍＭ保存液を利用して、酢酸亜鉛を所望の比率まで添加してもよい。
【０１２６】
噴霧乾燥条件は、次の通りであった：
入口温度設定：１４０℃、
吸引器１００％、
ポンプ：１３％、
ノズルクリーナー：１分間当たり２パルス。
【０１２７】
噴霧乾燥後、錯化粉末の収率は、１．１０６６ｇであった。錯化粉末中のｒｈＧＨ含量を、ＨＰＬＣを介して次のように決定した。粉末を２％リン酸中に溶解させ、透明溶液をＨＰＬＣ系上で送液した。粉末のｒｈＧＨ含量は、７５重量％であることが見出された。錯化粉末をその後、３ｍＬガラスシリンジに移し、密封し、ホイルパウチ中、冷蔵下で保管した。
【０１２８】
凍結乾燥
上述の噴霧乾燥プロセスの代替手段として、本開示の不溶性の有益薬剤複合体は、凍結乾燥プロセスを使用して提供されてもよい。例示的な凍結乾燥プロセスは、下に記載される。
【０１２９】
１．００ｇのＢｒｅｓａＧｅｎ  ｈＧＨ粉末を、１５０ｍＬ広口ガラスジャー中に配置した。５５ｍＬの２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３（ｐＨ約７．５）溶液を添加し、化合物を、それが透明になるまで３０分間室温で、４００ｒｐｍで撹拌した。１．９ｍＬの２９０ｍＭスクロース溶液を次いで、４００ｒｐｍで撹拌しながら添加した。溶液が透明となったとき、１５２μＬの１０％ポリソルベート２０溶液を添加した。次いで、１２．９ｍＬの硫酸プロタミン溶液（濃縮１０ｍｇ／ｍＬ）を緩徐に添加して、白色沈殿物を得た。結果として生じた懸濁液を３０分間撹拌して、錯化反応を完了させた。
【０１３０】
上記のステップからの各々３ｍＬのバルク懸濁液のアリコートを、５ｍＬタイプのＨｙｐａｋ  ＢＤガラスシリンジ中に移し、表１に提供される凍結乾燥サイクルおよびプログラムＰ９０（ｈＧＨに対して最適化）を使用して凍結乾燥させて、ＦＴＳ凍結乾燥器、Ｄｕｒａ  Ｓｔｏｐ，ＭＰ  Ｓｔｏｐｐｅｒｉｎｇ  Ｔｒａｙ  Ｄｒｙｅｒ，Ｓｔｏｎｅ  Ｒｉｄｇｅ，ＮＹに提供されるステップを当てはめた。各シリンジ中の有益薬剤の最終量は、５０ｍｇであった。シリンジを密封し、パウチに入れ、更なる研究のために−２０℃冷凍庫中で保管した。
【表１】
2018188457.tif 000004
【０１３１】
実施例２：ｒｈＧＨ生分解性薬物送達デポー製剤の調製および体内評価
調製
ｒｈＧＨ−プロタミン複合体およびビヒクルの５つの異なる製剤を調製し、試験した。製剤を、下に示されるように、次の物質を使用して調製した。安息香酸ベンジル、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ；ＳＡＩＢ、医薬品グレード、ＤＵＲＥＣＴ；およびＰＬＡ、ポリ（ＤＬ−ラクチド）、ＭＷ  １５１００Ｄａ、ＤＵＲＥＣＴ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ。次の５つの製剤を含めた：
１）リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中に懸濁させたｒｈＧＨ−プロタミン（１：０．５モル比）、
２）安息香酸ベンジル（ＢＢ）中に懸濁させたｒｈＧＨ−プロタミン、
３）ＳＡＩＢ／ＢＢ  ８／９２ｗ／ｗ％（１００ｍＬガラスジャー中、４．００２ｇのＳＡＩＢを４６．０１７ｇの安息香酸ベンジルと混合し、室温で３０分間超音波処理することによって調製した原液ビヒクル）中に懸濁させたｒｈＧＨ−プロタミン。
４）ＢＢ／ＰＬＡ（ＤＵＲＥＣＴ）８０／２０ｗ／ｗ％（１００ｍＬガラスジャー中、２０．０１５ｇの安息香酸ベンジルを５．００７ｇのＰＬＡと混合し、室温で３０分間超音波処理することによって調製した原液ビヒクル）中に懸濁させたｒｈＧＨ−プロタミン、および
５）ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（ＤＵＲＥＣＴ）８／７２／２０ｗ／ｗ％（１００ｍＬガラスジャー中、２０．０１４ｇのＰＬＡを秤量し、７２．３０９ｇの安息香酸ベンジルおよび８．１４７ｇのＳＡＩＢと混合し、続いて３０分間室温の超音波処理を行うことによって調製した原液ビヒクル）中に懸濁させたｒｈＧＨ−プロタミン。
【０１３２】
上記の１〜５に示される成分を有する注射用製剤を、次のように調製した：
Ａ）錯化粉末を含有するシリンジを有するホイルパウチを冷蔵から除去し、あらかじめ清潔な乾燥領域中に室温で最低６０分間配置し、開封した。
Ｂ）ビヒクルを含有するバイアルをまた、あらかじめ清潔な乾燥領域中に室温で少なくとも６０分間配置し、開封した。
Ｃ）ホイルパウチを平衡化させた後、各パウチを清潔な鋏で開封し、パウチ内容物のいずれも切断しないように注意しながらシリンジを除去した。
Ｄ）各試験物品について、１ｍＬのビヒクルを、１６Ｇａ、１インチ針（ＢＤ  ＰＮ３０５１９７または均等物）を装着した１ｍＬシリンジ（Ｅｘｃｅｌまたは均等物）を用いて保存液から回収した。
Ｅ）プラスチックチップを、試験物品粉末を含有する３ｍＬガラスシリンジから除去した。
Ｆ）滅菌メス−メスルアーアダプターの一方の側面を、ステップＥのシリンジに固定した。
Ｇ）ビヒクルを含有する１ｍＬシリンジ（ステップＤ）を、滅菌メス−メスルアーの他方の側面に接続した。
Ｈ）１ｍＬシリンジの液体内容物全体を、メス−メスルアーに押し通して、３ｍＬガラスシリンジの粉末内容物中に入れた。
Ｉ）シリンジを少なくとも１０〜１５分間接続したまま放置して、ビヒクルにより粉末を湿潤させた。
Ｊ）一様な懸濁液が生成されるまで、混合物に、２つのシリンジの間を通過させることによって（シリンジ間を少なくとも２０回通過）、ビヒクルを粉末と混合した。
Ｋ）要求される容量の内容物を（動物投薬＋死腔のために５０μＬ）、１ｍＬ  Ｅｘｃｅｌシリンジに押し入れ、３ｍＬガラスシリンジを切り離した。
Ｌ）メス−メスルアーを次いで、１ｍＬＥｘｃｅｌシリンジから除去した。
Ｍ）２１Ｇａ、１インチ針（テルモ、ＵＴＷ、または均等物）を次いで、容量標示を有する１ｍＬシリンジのルアーロック中に配置し、針を試験物品懸濁液でプライミングした。シリンジを次いで投薬動物１のために準備した。
Ｎ）追加的動物投薬量を調製するために、メス−メスルアーを３ｍＬガラスシリンジに取り付け、新たな１ｍＬ  Ｅｘｃｅｌシリンジを取り付けた。要求される容量（第２の動物投薬＋死腔のために５０μＬ）を次いで１ｍＬ  Ｅｘｃｅｌシリンジ中に押し入れ、３ｍＬガラスシリンジを切り離した。メス−メスルアーを次いで１ｍＬ  Ｅｘｃｅｌシリンジから除去した。
Ｏ）２１Ｇａ、１インチ針（テルモ、ＵＴＷ、または均等物）を次いで、容量標示を有する１ｍＬシリンジのルアーロック中に配置し、針を試験物品懸濁液でプライミングした。シリンジを次いで動物２に投薬するために準備した。全ての動物が投薬されるまで、このプロセスを必要に応じて継続した。
【０１３３】
体内投与および監視
体内実験を次のように行った。Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに、皮下ボーラス注射を介して投薬し、１週間の期間にわたって監視した。６つの実験的処置群を、１群当たり６匹の動物を用いて利用した。これらの群は、上述の５つの製剤、およびプロタミンを含まないＰＢＳ中のｒｈＧＨ（水溶液）である参照製剤を利用した。ＰＢＳ中のｒｈＧＨおよびｒｈＧＨ−プロタミン製剤（水性複合体）の両方について、送達は、１０ｍｇ／ｍＬ製剤の３００μＬ注射を介して、３ｍｇ用量を達成した。安息香酸ベンジル（ＢＢ）１００ｗ／ｗ％中のｒｈＧＨ−プロタミン、ＳＡＩＢ／ＢＢ（８／９２）ｗ／ｗ％中のｒｈＧＨ−プロタミン、ＢＢ／ＰＬＡ（８０／２０）ｗ／ｗ％中のｒｈＧＨ−プロタミン、およびＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（８／７２／２０）ｗ／ｗ％中のｒｈＧＨ−プロタミンの各々について、送達は、５０ｍｇ／ｍＬ製剤の１００μＬ注射を介して、５ｍｇ用量を達成した。
【０１３４】
血液試料を、ｒｈＧＨ（ＰＢＳ）製剤について、投薬後０．５、１、２、４、８、１２、２４、および４８時間時点で採取し、一方でｒｈＧＨ−プロタミン製剤の各々についての試料を、１、４、８、１２、２４、４８、７２、１２０、および１６８時間時点で採取した。血清ｒｈＧＨプロフィールを、ＥＬＩＳＡを介して決定した。
【０１３５】
結果
図１は、皮下投薬後の参照および５つの試験製剤についての、用量正規化、群平均血清ｒｈＧＨプロフィールを示す。図２は、各試験群中の各動物についての経時的な血清ｒｈＧＨ濃度をプロットする。これらのプロットは、錯化およびビヒクルの効果を容易に識別することを可能にし、また動物間の変動性を示す。（注：全てのゼロ以外の濃度をプロットした）。
【０１３６】
水溶液（プロタミンを含まないＰＢＳ中のｒｈＧＨ）と比べて、ＰＢＳ中に懸濁させた複合体からの血清レベルは、更に２４時間維持された。ｒｈＧＨ複合体をＢＢ中に懸濁させることにより、ＰＢＳ中に懸濁させた複合体と比べて、０〜２４時間の血漿レベルは６〜８倍低下したが、タンパク質送達は延長されなかった。ＳＡＩＢのＢＢへの添加により、送達は約４８時間延長された。２０％（ｗ／ｗ）酸開始ＰＬＡ（Ｍｗ約１４．５ｋＤａ）のＢＢへの添加により、ｒｈＧＨ送達は１６８時間を超えるまで延長されたが、ＢＢ：ＰＬＡ  ８０：２０ｗ／ｗ％中、ＢＢの代わりの８ｗ／ｗ％ＳＡＩＢでの置換は、ｒｈＧＨ送達に対する有意な効果を有さなかった。
【０１３７】
これらの結果は、体内で、プロタミン複合体が、溶液中のｒｈＧＨの皮下水性ボーラスと比べて、初期血清レベルを低下させ、送達を延長したことを示す。複合体をＢＢ中に分散させることにより、ビヒクルを含まないプロタミン複合体と比べて、初期放出は低下したが、全体的な送達の持続期間は延長されなかった。８％ＳＡＩＢのＢＢへの添加は、ＢＢ単独と比べて、中程度の放出の延長を提供したが、２０％ＰＬＡのＢＢへの添加は、タンパク質の送達を大幅に延長した。最後に、８％ＳＡＩＢのＢＢ：ＰＬＡへの添加は、送達の更なる延長を提供しなかった。
【０１３８】
実施例３：ＩＦＮα２生分解性薬物送達デポー製剤についてのラットにおける体内評価
次の製剤をラットに皮下投与し、ＩＦＮα２ａ血清濃度を経時的に監視した：
Ａ）ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（８：７２：２０、ｗ／ｗ％）ビヒクル中に分散した、１％スクロースおよびプロタミン−亜鉛（噴霧乾燥）を有する２．５ｍｇ／ｍＬ  ＩＦＮα２製剤、ならびに
Ｂ）ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＧＡ（８：７２：２０、ｗ／ｗ％）ビヒクル中に分散した、１％スクロースおよびプロタミン−亜鉛（噴霧乾燥）を有する２．５ｍｇ／ｍＬ  ＩＦＮα２製剤。
【０１３９】
各製剤について、複合体中のＩＦＮα２ａ対Ｚｎ２＋対プロタミンの比率は、（１：１：０．３ｍ／ｍ）であった。タンパク質用量は、各製剤について０．５ｍｇであった。タンパク質の酸化を防止するために、メチオニンを各製剤に添加した。ラットをシクロスポリンおよびメチル−プレドニゾロンで免疫抑制した。注射は、Ｅｘｃｅｌ  １ｍＬシリンジを介し、２３ゲージ５／８インチテルモ針を使用した。
【０１４０】
製剤群Ａ）およびＢ）の両方における各ラットについての血清濃度を、それぞれ図３および４に示されるように、対時間で最大９６時間までプロットした。プロフィールは、製剤全てにわたって同様である。２つの製剤についての平均血清プロフィールは、図５に図示されるように、１１日間までほぼ同様であった。平均して、ｔｍａｘは、両製剤について８時間（１〜２４時間範囲）であり、Ｃｍａｘは、４０〜６０×１０４ｐｇ／ｍＬの範囲であった。血清レベルは、１１日間にわたって約５０分の１に下落し、Ｃｍａｘ／Ｃｌａｓｔは、約５００であった。研究した製剤は、それらの生物学的利用能（ＢＡ）プロフィールにおいて同様であり、最大２８日間のＢＡは、２０〜５０％の範囲であった。
【０１４１】
実施例４：ＩＦＮα２生分解性薬物送達デポー製剤についてのラットにおける更なる体内評価
次の製剤を、皮下ボーラスを介してラットに投与し、ＩＦＮα２ａ血清濃度を経時的に監視した：
Ｃ）ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（８：７２：２０）ビヒクル中に分散した、１％スクロースおよびプロタミン（ＩＦＮα２ａ：プロタミン１：０．３ｍ／ｍ）を有する２０ｍｇ／ｍＬ  ＩＦＮα２製剤、ならびに
Ｄ）ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（８：７２：２０、ｗ／ｗ％）ビヒクル中に分散した、１％ＣＭＣおよび１％スクロースを有する２０ｍｇ／ｍＬ  ＩＦＮα２ａ製剤。
【０１４２】
タンパク質用量は、各製剤（５０μＬの２０ｍｇ／ｍＬ製剤）について１ｍｇであった。注射は、Ｅｘｃｅｌ  １ｍＬシリンジを介し、２３ゲージ５／８インチテルモ針を使用した。
【０１４３】
各製剤群中の各ラットについての血清濃度（ＥＬＩＳＡによって決定したとき）を対時間でプロットした。製剤Ｃ）およびＤ）についての結果は、それぞれ図６および７に提供される。両製剤は、注射用デポー製剤に望ましい放出速度を示した。
【０１４４】
実施例５：ＩＦＮα２ａ生分解性薬物送達デポー製剤についての霊長類における体内分析
実施例４についての上記のものと同様のデポー組成物を使用して、薬物動態研究を霊長類において行った（カニクイザル（ｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓ  ｍｏｎｋｅｙ）−カニクイザル（Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ））。具体的には、ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（８：７２：２０、ｗ／ｗ％）ビヒクル中に分散した、１％スクロースおよびプロタミン（ＩＦＮα２ａ：プロタミン１：０．３ｍ／ｍ）を有する２ｍｇ／ｋｇの４０ｍｇ／ｍＬ  ＩＦＮα２製剤を、第１の群に投与した。別の実験群は、ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（８：７２：２０、ｗ／ｗ％）ビヒクル中に分散した、１％ＣＭＣおよび１％スクロースを有する、２ｍｇ／ｋｇの第２の製剤、４０ｍｇ／ｍＬ  ＩＦＮα２製剤を受容した。注射は、皮下で、Ｅｘｃｅｌ  １ｍＬシリンジを介し、２３ゲージ５／８インチテルモ針を使用した。
【０１４５】
各群中の個々の動物についての血清プロフィールは、それぞれ図８および９に示される。示されるように、初期の１０〜１２日間にわたって、プロタミン−ＩＦＮα２複合体を用いることにより、ＣＭＣ−ＩＦＮα２ａ複合体を用いるよりも、より高い血清レベルが達成された。
【０１４６】
各処置群中の個々の動物からの血清試料をＥＬＩＳＡによって分析し、各処置群からプールした血清試料を抗ウイルス活性測定法（ＡＶＡ）によって分析した。ＥＬＩＳＡおよびＡＶＡによって決定された実験群についての群平均血清プロフィールの比較は、図１０に提供され、それはＣＭＣ−複合体がプロタミン複合体よりも長い送達持続期間を提供したことを明らかにしている。
【０１４７】
実施例６：ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＥｔＯＨ／ＰＬＧＡ（８／６７／５／２０）ビヒクルから送達される抗癌ヌクレオシド類似体の薬物動態評価
注射用デポー組成物を、抗癌ヌクレオシド類似体プロドラッグのプロタミン複合体およびビヒクルとしてＳＡＩＢ／ＢＢ／ＥｔＯＨ／ＰＬＧＡ（８／６７／５／２０、ｗ／ｗ％）を使用して調製し、それは次のように調製した：３．３１８０ｇのヌクレオシド類似体プロドラッグを５００ｍＬガラス容器中で計量した。１６６ｍＬの水をガラス容器に添加し、４００ｒｐｍで１時間、全ての粉末が溶解するまで撹拌した。水中のヌクレオシド類似体の溶解度は、約２０ｍｇ／ｍＬであった。結果として生じた透明水溶液を、４３０ｍＬの１０ｍｇ／ｍＬ硫酸プロタミン溶液に添加した。混合物を、反応が完了するように１時間室温で再び撹拌し、その時間後、白色の綿状の懸濁液が形成された。白色懸濁液を５０ｍＬプラスチック管中に分配した。ガラス容器を６５ｍＬの水ですすぎ、残りの混合物を５０ｍＬ管に移した。懸濁液を含有する管を、２５００ｒｐｍで１２分間遠心分離した。遠心分離後、管は、５４７ｍＬの上清および１１７ｍＬの白色沈殿物の総量を算出した。
【０１４８】
上清を、ＨＰＬＣを介して、遊離有益薬剤含量について分析した。標的投薬量は、１５０ｍｇの有益薬剤であった。したがって、懸濁液を、各々が５．８ｍＬの白色沈殿物を含有する２０個の１０ｍＬガラスバイアル中にアリコートした。沈殿物を含有するバイアルを次いで、ＦＴＳ凍結乾燥器を使用して凍結乾燥させた。
【０１４９】
１０ｍＬバイアルからの安定化有益薬剤複合体粉末を２ｍＬバイアル中に移し、計量した。ビヒクル（ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＥｔＯＨ／ＰＬＧＡ）（８／６７／５／２０）を計量した粉末に添加して、１２０ｍｇ／ｍＬの有益薬剤の標的濃度を得た。混合物をビヒクルで１．５時間湿潤させ、湿潤した混合物を次いで、１０分間、ＰｏｗｅｒＧｅｎ  １０００（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）上で、プローブ５×９５ｍｍを用いて均質化して、均質な乳白色懸濁液を得た。この懸濁液を霊長類へ投薬し、血液試料を、有益薬剤およびその代謝産物の両方について最大１６８時間監視した。注射は、皮下で、Ｅｘｃｅｌ  １ｍＬシリンジを介し、２３ゲージ５／８インチテルモ針を使用した。次の投薬量を監視した：３ｍｇ／ｋｇの即時放出製剤（ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＥｔＯＨ／ＰＬＧＡビヒクルを含まない）、ならびに９ｍｇ／ｋｇ、１３．５ｍｇ／ｋｇ、および１８ｍｇ／ｋｇのプロドラッグ−ビヒクル組成物。
【０１５０】
ヌクレオシド類似体プロドラッグおよびその活性な代謝産物（有益薬剤）の送達についての薬物動態曲線は、それぞれ図１１および１２に提供される。これらの曲線は、低いバースト効果および１６８時間までの持続放出を伴う、望ましい送達プロフィールを示す。
【０１５１】
実施例７：ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＢＡ／ＰＬＡ（２０／５０／１０／２０）ビヒクルから送達されるＧＬＰ−１類似体の薬物動態評価
薬物動態分析を、亜鉛およびプロタミンと錯化され、ミニブタにおけるＳＡＩＢ（イソ酪酸酢酸スクロース）：ＢＢ（安息香酸ベンジル）：ＢＡ（ベンジルアルコール）：乳酸開始ＰＬＡ（ポリ乳酸）（２０／５０／１０／２０、ｗ／ｗ％）ビヒクルから送達された、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）類似体有益薬剤について行った。
【０１５２】
ＧＬＰ−１類似体複合体粉末を、下記の表２および３に述べられるように噴霧乾燥を介して調製した。
【表２】
2018188457.tif 000005
【表３】
2018188457.tif 000006
【０１５３】
噴霧乾燥後、ＧＬＰ−１類似体複合体粉末を５ｍＬガラスシリンジ中に充填し、栓をし、アルミニウムパウチ中に密封した。シリンジをその後、体内でのミニブタ研究において使用するため、１シリンジ当たり１ｍＬのビヒクル、ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＢＡ／ＰＬＡ（２０／５０／１０／２０）と混合した。投与は、ビヒクル中、６０μＬの４０ｍｇ／ｍＬ  ＧＬＰ−１類似体皮下注射を介し、２５ゲージ１／２インチ針を有するテルモＳｕｒｓａｖｅｒシリンジを使用した。ＧＬＰ−１類似体についての血清濃度を、投与後１２日間の期間にわたって監視した。この実験の結果は、経時的な平均ＧＬＰ−１類似体血清濃度のグラフである、図１３に示される。１２日間の期間にわたってＳＡＩＢ／ＢＢ／ＢＡ／ＰＬＡビヒクルから送達されたＧＬＰ−１類似体の持続放出が実証された。水溶液中のＧＬＰ−１類似体の即時放出製剤の皮下注射からもたらされる血漿プロフィールが、比較のために図１３に提供される。
【０１５４】
実施例８：ビヒクル粘度
体外ビヒクル粘度を、次のビヒクル物質の組み合わせについて決定した：ＢＢ（単独）、ＢＢ：ＰＬＡ、ＳＡＩＢ：ＢＢ：ＰＬＡ、ＳＡＩＢ：ＢＢ。物質の各組み合わせについて、物質のｗ／ｗ％を下記の表４に示されるように変動させた。表４は、水性培地への曝露を伴わない２５および３７℃での種々の組み合わせの各々についての、センチポアズ（ｃＰ）単位での粘度値を提供する。（Ｃ）製剤についての結果を比較目的で提供するが、それは、成分％および／または結果として生じる粘度に基づいて、本開示の注射用デポー組成物（Ｄ）としては見なされない。
【表４】
2018188457.tif 000007
【０１５５】
表４は、本開示のビヒクル組成物、例えば、生分解性重合体（本明細書ではポリ乳酸−ＰＬＡ）を含むビヒクル組成物が、ビヒクルの約５重量％〜約３０重量％の量で存在し、疎水性溶媒（本明細書では安息香酸ベンジル−ＢＢ）が、ビヒクルの約９５重量％〜約７０重量％の量で存在し、２５および３７℃の両方で１，２００センチポアズ未満の粘度値を有することを示す。
【０１５６】
水性培地への曝露中の、選択したビヒクル組成物中の経時的な粘度変化を示す、インサイツ粘度測定もまた行った。これらの結果は、下記の表５に提供され、このうち値は、低せん断速度および高せん断速度の両方について提供される。粘度を、１．５ｍＬのビヒクルの、１００ｍＬのリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中へのｐＨ７．４および３７℃での注射後に測定した。
【表５】
2018188457.tif 000008
【０１５７】
ＬＡ開始ＰＬＡを含有するビヒクル中の幾らかのエタノールの組み込みは、ビヒクルの幾つかについて観察された、３７℃のＰＢＳ緩衝液への曝露後の粘度における増加に関与すると考えられる。しかしながら、水への曝露後の個々のビヒクルの粘度は、ビヒクルの組成に関わらず、最大１６８時間の試験期間にわたって比較的一定に留まり、製剤およびＰＢＳ緩衝液の表面で、製剤のＰＢＳ緩衝液への曝露時に形成されるいずれの速度制御性表面「クラウド」層も、表５に示されるせん断速度の範囲で適用されるせん断応力に抵抗する物理的強度または特記すべき機械的構造を有さないことが確認された。これは、水性環境に曝露されたとき、経時的な粘度における実質的増加を示す、ゲル形成ビヒクルと対比され得る。
【０１５８】
追加的なインサイツ粘度測定は、下記の表６に提供される。観察された製剤の粘度に依存して、要求される（または最適な）トルクの範囲を合致させるために、適切なＢｒｏｏｋｆｉｅｌｄ粘度計モデルを選択した。例えば、Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ粘度計モデルＤＶ−ＩＩＩ＋ＵＬＴＲＡ（ＨＡ）モデルを使用して、２５℃で１４０〜３２０秒−１の低せん断速度および２５℃で５００秒−１の高せん断速度を提供し、Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＤＶ−ＩＩＩ＋ＵＬＴＲＡ（ＬＶ）モデルを使用して、２５℃で７−２８秒−１の低せん断速度および２５℃で４０〜２００秒−１の高せん断速度を提供し、Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＤＶ−ＩＩＩ＋（ＨＢ）モデルを使用して、３７℃で３７０〜５００秒−１の低せん断速度および３７℃で５００秒−１の高せん断速度を提供し、Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＤＶ−ＩＩＩ＋（ＬＶ）モデルを使用して、３７℃で２０〜４６秒−１の低せん断速度および３７℃で９０〜３５０秒−１の高せん断速度を提供した。粘度を、１．５ｍＬのビヒクルの、１００ｍＬのｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中への注射後に測定した。
【表６】
2018188457.tif 000009
【０１５９】
表６に記載されるビヒクルは、双方が外部水性培地中に容易に溶出する溶媒ＥｔＯＨおよびＮＭＰから構成されるもの、ならびに極度にゆっくりと溶出する疎水性溶媒ＢＢおよび中間速度で溶出するＢＡを含有するものである、２つのカテゴリーに分類される。表６に示されるように、親水性溶媒を含むビヒクルについて、インサイツ粘度は、７日間にわたって複数の対数で増加し、大部分が水性培地への曝露の最初の５時間のうちに増加する。ＢＢ／ＢＡビヒクルについてのインサイツ粘度は、このレベルの粘度を示さず、代わりに、経時的に比較的安定な粘度を示す。
【０１６０】
追加的なインサイツ粘度測定は、溶媒としてＢＢのみを有する担体を、ＢＢおよび二次的疎水性溶媒、例えば、ＢＡ（ベンジルアルコール）またはＴＡ（トリアセチン）を含む担体と比較する、下記の表７に提供される。インサイツ粘度を、表６について上述されるように測定した。
【表７】
2018188457.tif 000010
【０１６１】
一般に、溶媒としてＢＢのみを含有するビヒクルは、３７℃で最大１２０時間の期間にわたって、比較的安定な粘度を示した。ＢＢおよびＢＡを含有するビヒクルは、３７℃で１２０時間の時間枠にわたって、約２倍の粘度における増加を示した。最後に、ＢＢおよびＴＡを含有するビヒクルは、３７℃で１２０時間の時間枠にわたって、粘度における若干の増加（約５０％）を示した。しかしながら、粘度における増加を示すビヒクルについてでさえ、粘度は、比較的低く、例えば、１２０時間の時間枠にわたって５００ｃＰ未満に留まった。
【０１６２】
下記の表８は、様々な温度にわたる、２つのＳＡＩＢ：ＢＢ：ＰＬＡ（８：７２：２０）ビヒクルおよびＳＡＩＢ：ＢＢ：ＰεＣＧＬ（８：７２：２０）ビヒクルについての体外粘度（ｃＰ）測定を提供する。２５℃（２９８°Ｋ）および３７℃（３１０°Ｋ）についての粘度値は、太字で示される。
【表８】
2018188457.tif 000011
【０１６３】
表８は、上記のビヒクルの各々が、２５℃および３７℃の両方で、比較的低い体外粘度、例えば、５００ｃＰ未満を有することを示す。
【０１６４】
下に提供される表９は、２５℃および３７℃での更なるビヒクルについての、体外粘度測定値を提供する。ビヒクルは、次の通りである：ＢＡ：ｄｄ−ＰＬＧＡ、３３３−４４−１、６．７ｋＤａ、ドデカノール開始、６５：３５  Ｌ：Ｇ；ＢＡ：ｇａ−ＰＬＧＡ、１１．５ｋＤａ、グリコール酸塩開始、６４：３６  Ｌ：Ｇ；ＥＢ：ｄｄ−ＰＬＧＡ（安息香酸エチル）；ＥＢ：ｇａ−ＰＬＧＡ；ＴＡ：ｄｄ−ＰｅＣＬ（トリアセチン）、１４．２ｋＤａ、ドデカノール開始２０：８０  Ｃ：Ｌ；ＴＡ：ｌａ−ＰｅＣＬ、および１４．８ｋＤａ、乳酸塩開始、２０：８０  Ｃ：Ｌ。
【０１６５】
全てのビヒクルは、８０：２０（ｗ／ｗ％）溶媒：重合体であった。ＢＡ＝ベンジルアルコール、ＥＢ＝安息香酸エチル、およびＴＡ＝トリアセチン、該当なし（Ｎ／Ａ）＝該当なし（ｎｏｔ  ａｖａｉｌａｂｌｅ）。
【表９】
2018188457.tif 000012
【０１６６】
表９は、上記のビヒクルの各々が、２５℃および３７℃の両方で、比較的低い体外粘度、例えば、５００ｃＰ未満を有することを示す。
【０１６７】
実施例９：注射可能性研究：ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＥｔＯＨ／ＰＬＧＡ
注射可能性データおよび試験条件は、表１０に提示される。製剤は、ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＥｔＯＨ／ＰＬＧＡ（８／６７／５／２０、ｗ／ｗ％）ビヒクル中に分散したプロタミン複合体と共に凍結乾燥させた、１２０ｍｇ／ｍＬ負荷のヌクレオシド類似体プロドラッグから成り立っていた。注射用デポー組成物を、実施例６に前述されるように調製した。
【０１６８】
１００μＬ懸濁液を、永久的に取り付けた針２１Ｇまたは２３Ｇ×１／２インチ（テルモＲＥＦ  ＳＳ０１Ｄ２３１３）を有する１ｍＬシリンジ中に裏込めすることによって、懸濁液を注射可能性について試験した。１０ｌｂの力をシリンジに適用し、混合後、遅滞しておよび遅滞なく、注射時間を監視した。温度は、２５℃であった。
【０１６９】
注射時間（０．２１〜０．２５ｍＬにつき２秒未満）を、２１Ｇインチ針および２３Ｇ×１インチ針の両方を使用したヌクレオシド類似体複合体製剤に対して許容できると見なした。
【表１０】
2018188457.tif 000013
【０１７０】
実施例１０：注射可能性研究：ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（８／７２／２０）
更なる注射可能性研究を、亜鉛およびプロタミンと錯化され、ＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬビヒクル中に分散した、有益薬剤としてＧＬＰ−１類似体を使用して行った。試験条件および結果は、下記の表１１に提供される。１０ｌｂの力を、２５または２７ゲージ針のいずれかを使用した１ｍＬ  ＥＸＥＬシリンジに適用し、注射時間を監視した。
【表１１】
2018188457.tif 000014
【０１７１】
上記の注射時間を、およそ２５℃で２５ゲージ針および２７ゲージ針の両方を使用して注射したとき、ＧＬＰ−１類似体製剤に対して許容できると見なした。
【０１７２】
実施例１１：有益薬剤としてｒｈＧＨを使用した更なる体内デポーの特徴付け：重合体特性に対する制御放出の感受性
本開示の注射用デポー組成物を更に特徴付けるために、追加的実験を、有益薬剤としてｒｈＧＨを使用して行った。実験設計には、Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットにおける１０個の異なる製剤の試験を含めた。１０個の製剤は、表１２において一般的に記載され、下により詳細に記載される。
【表１２】
2018188457.tif 000015
【０１７３】
製剤
製剤番号１、同定：ｒｈＧＨ製剤１、説明／物理的外見：懸濁液、１ｍＬの安息香酸ベンジル（ＢＢ）中５０ｍｇのｈＧＨ、保管条件：２〜８℃。
【０１７４】
製剤番号２、同定：ｒｈＧＨ製剤２、説明／物理的外見：懸濁液、１ｍＬのＢＢ：ＰＬＡ１（８０：２０）中５０ｍｇのｈＧＨ、保管条件：２〜８℃。
【０１７５】
製剤番号３、同定：ｒｈＧＨ製剤３、説明／物理的外見：懸濁液、１ｍＬのＢＢ：ＰＬＡ２（８０：２０）中５０ｍｇのｈＧＨ、保管条件：２〜８℃。
【０１７６】
製剤番号４、同定：ｒｈＧＨ製剤４、説明／物理的外見：懸濁液、１ｍＬのＢＢ：ＰＬＧＡ１（８０：２０）中５０ｍｇのｈＧＨ、保管条件：２〜８℃。
【０１７７】
製剤番号５、同定：ｒｈＧＨ製剤５、説明／物理的外見：懸濁液、１ｍＬのＢＢ：ＰＬＧＡ２（８０：２０）中５０ｍｇのｈＧＨ、保管条件：２〜８℃。
【０１７８】
製剤番号６、同定：ｒｈＧＨ：プロタミン製剤６、説明／物理的外見：懸濁液、１ｍＬのＢＢ＋メチオニン中５０ｍｇのｈＧＨ＋プロタミン、保管条件：２〜８℃。
【０１７９】
製剤番号７、同定：ｒｈＧＨ：プロタミン製剤７、説明／物理的外見：懸濁液、１ｍＬのＢＢ：ＰＬＡ１＋メチオニン中５０ｍｇのｈＧＨ＋プロタミン、保管条件：２〜８℃。
【０１８０】
製剤番号８、同定：ｒｈＧＨ：プロタミン製剤８、説明／物理的外見：懸濁液、１ｍＬのＢＢ：ＰＬＡ２（８０：２０）＋メチオニン中５０ｍｇのｈＧＨ＋プロタミン、保管条件：２〜８℃。
【０１８１】
製剤番号９、同定：ｒｈＧＨ：プロタミン製剤９、説明／物理的外見：懸濁液、１ｍＬのＢＢ：ＰＬＧＡ１（８０：２０）＋メチオニン中５０ｍｇのｈＧＨ＋プロタミン、保管条件：２〜８℃。
【０１８２】
製剤番号１０、同定：ｒｈＧＨ：プロタミン製剤１０、説明／物理的外見：懸濁液、１ｍＬのＢＢ：ＰＬＧＡ２（８０：２０）中５０ｍｇのｈＧＨ＋プロタミン、保管条件：２〜８℃。
【０１８３】
略号：ＢＢ＝安息香酸ベンジル、ＰＬＡ１＝ポリ乳酸（乳酸開始、Ｍｗ＝１５．１Ｋｄ）、ＰＬＡ２＝ポリ乳酸（ドデカノール開始、Ｍｗ＝１３．９Ｋｄ）、ＰＬＧＡ１＝ポリラクチド−ｃｏ−グリコリド（グリコール酸塩開始（６４：３６）、Ｍｗ＝１１．５Ｋｄ、ＰＬＧＡ２＝ポリラクチド−ｃｏ−グリコリド（ドデカノール開始（６５：３５）、Ｍｗ＝６．５Ｋｄ。Ｍｗは、ゲル浸透クロマトグラフィーによって測定した重量平均分子量である。
【０１８４】
用量調製およびプロトコル（試験物品１〜１０）
乾燥形態でｒｈＧＨまたはｒｈＧＨ複合体を含有する５ｍＬガラスシリンジを含有するホイルパウチを、あらかじめ清潔な乾燥領域中に室温で最低６０分間配置し、開封した。ビヒクルを含有する希釈バイアルを、あらかじめ清潔な乾燥領域中に室温で配置し、開封した。ホイルパウチを室温で６０分間平衡化させた後、各パウチを一対の清潔な鋏で開封した。各製剤のために正しい容量の希釈剤（１．０ｍＬ）を、１６Ｇａ  １インチ針（ＢＤ  ＰＮ３０５１９７または均等物）を装着された３ｍＬシリンジ（ＢＤ  ＰＮ３０９５８５または均等物）を用いて回収した。プラスチックチップを、試験物品粉末を含有する各５ｍＬガラスシリンジから除去した。滅菌メス−メスルアーアダプターの一方の側面を、各ガラスシリンジに固定した。希釈剤を含有する３ｍＬシリンジを次いで、滅菌メス−メスルアーの他方の側面に接続した。３ｍＬシリンジの総液体内容物を、メス−メスルアーを通して、５ｍＬガラスシリンジの粉末内容物中に押し入れた。接続されたシリンジを次いで、少なくとも１５分間放置して、粉末を液体で湿潤させた。一様な懸濁液が生成されるまで、混合物に、２つのシリンジの間を通過させることによって（シリンジ間をおよそ５０回通過）、液体を次いで粉末と混合した。双方のシリンジの総含量を次いで、１ｍＬプラスチックシリンジ中に押し入れ、ロット番号および溶液を特定するために１ｍＬプラスチックシリンジを標識した。メス−メスルアーを次いで１ｍＬプラスチックシリンジから除去した。最後に、２１Ｇａ  １インチ針を、１ｍＬシリンジのルアーロック中に配置し、針を試験物品懸濁液でプライミングした。
【０１８５】
上記の製剤を、５ｍｇ／ラットの単回用量として、１００μＬの投与容量で皮下注射した。研究には、６匹のラット／群を用いる１０群を含めた。群１〜５について、血液を頸静脈から、次の時点で収集した：投薬前（−２４時間）、０．５、１、２、４、８、および１２時間；ならびに投薬後１、２、３、および５日目。群６〜１０について、血液を頸静脈から、次の時点で収集した：投薬前（−２４時間）、１、４、８、および１２時間；ならびに投薬後１、２、３、５、および７日目。
【０１８６】
結果
上記の研究についての血清プロフィールは、図１４、パネルＡおよびＢに提供される。パネルＡは、試験された５つのビヒクル中の遊離ｒｈＧＨについての、５日間の期間にわたる血清濃度を示す。パネルＢは、試験された５つのビヒクル中のｒｈＧＨ：プロタミン０．５：１（ｍ／ｍ）複合体についての、７日間の期間にわたる血清濃度を示す。パネルＡに示されるように、遊離ｒｈＧＨについて、ドデカノール開始重合体は、ＢＢ単独と比べてＰＫ特性における差異をほとんど示さなかった。乳酸開始およびグリコール酸開始重合体は、ＢＢ単独と比べてより低い初期バーストおよび延長した送達を示し、このうちグリコール酸開始ＰＬＧＡが、乳酸開始ＰＬＡよりも放出に対するより高い制御を提供した。
【０１８７】
ｒｈＧＨ：プロタミン製剤についてパネルＢに示されるように、表示される試験ビヒクルの各々は、遊離ｒｈＧＨが分散された製剤と比べて、初期放出を低下させ、送達の持続期間を延長した。特に、送達は、酸開始重合体を利用した２つの製剤において、更に一層延長された。ｒｈＧＨ：プロタミン複合体の使用は、パネルＡにおけるドデカノール開始重合体によって示された、より不十分な本来の放出制御を大部分補ったことに留意されたい。
【０１８８】
図１５、パネルＡ〜Ｅは、製剤内での、遊離ｒｈＧＨ対錯化ｒｈＧＨでの血清プロフィールの比較を示す。示されるように、プロタミンとの錯化は、全ての場合において、１時間の血清レベルを約２．５〜８分の１に低下させ、送達を延長した。
【０１８９】
平均滞留時間（ＭＲＴ）は、送達の持続期間を示す。溶解、輸送、吸収、およびＰＫを含む、複数のプロセスが、ＭＲＴに寄与する。上記の実験に由来するデータを使用して、プロタミン複合体および重合体の、ＢＢ単独（それぞれ、ΔＭＲＴ複合体およびΔＭＲＴ重合体）中の遊離ｒｈＧＨのＭＲＴに対する個々の効果が、それらの組み合わされた効果を予測するかどうかを決定するために、重合体および複合体のＭＲＴへの別個の寄与を抽出した。ＭＲＴのための加法モデルは、次の通りであろう：
ＭＲＴ複合体＋重合体＝ＭＲＴＢＢ＋ΔＭＲＴ複合体＋ΔＭＲＴ重合体
【表１３】
2018188457.tif 000016
【０１９０】
表１３に示されるように、加法モデルは、一般に、観察されたＭＲＴを予測しない。したがって、重合体とタンパク質複合体との間に、ＭＲＴに寄与する幾らかの相互作用（相乗作用）が存在したと思われる。この相互作用の部分的寄与は、表の最後の欄に列挙される。
【０１９１】
要約すると、ＢＢ：重合体ビヒクル中に懸濁した遊離ｒｈＧＨの送達において、酸末端基重合体（例えば、酸開始重合体）と、エステル末端基重合体（例えば、ドデカノール開始）重合体との間に明確な差異が観察された。ドデカノール開始重合体の添加は、ＢＢ単独がｒｈＧＨ送達の制御を提供しなかったのと同程度であった。これは、Ｍｗ約６．５〜１４ｋＤａを有する重合体について、ならびにＰＬＡおよび６５：３５  ＰＬＧＡ（６５：３５は、重合体中のラクチドおよびグリコリド残基のそれぞれの分率またはパーセントを指す）の両方について当てはまる。ＢＢ単独中のｒｈＧＨ：プロタミン複合体の懸濁液からのｒｈＧＨ放出は、遊離タンパク質の懸濁液と比べて延長された。プロタミン複合体および重合体は、タンパク質放出を制御するのに（延長されたＭＲＴ）明らかに相乗的に働き、この相乗作用は、観察されたＭＲＴの４０〜７０％を占めた。
【０１９２】
実施例１２：更なる体内デポーの特徴付け
２つの追加的ｒｈＧＨ複合体を、乳酸塩開始ＰＬＡ、Ｍｗ＝１５．１ｋＤａ、またはドデカノール開始ＰＬＡ、Ｍｗ＝１３．９ｋＤａのいずれかを含有するビヒクル中で試験し、非錯化（遊離）ｒｈＧＨ製剤と比較した。製剤および試料採取時間は、表１４に一般的に記載される通りである。
【表１４】
2018188457.tif 000017
【０１９３】
製剤
製剤番号１、同定：デポーｒｈＧＨ  １、説明／物理的外見：懸濁液、１ｍＬの安息香酸ベンジル（ＢＢ）中５０ｍｇのｒｈＧＨ、保管条件：２〜８℃。
【０１９４】
製剤番号２、同定：デポーｒｈＧＨ  ２、説明／物理的外見：懸濁液、ＬＡ−ＰＬＡ、１ｍＬのＢＢ：ＰＬＡ１（８０：２０ｗ／ｗ％）中５０ｍｇのｒｈＧＨ、保管条件：２〜８℃。
【０１９５】
製剤番号３、同定：デポーｒｈＧＨ  ３、説明／物理的外見：懸濁液、ＤＤ−ＰＬＡ、１ｍＬのＢＢ：ＰＬＡ２（８０：２０ｗ／ｗ％）中５０ｍｇのｒｈＧＨ、保管条件：２〜８℃。
【０１９６】
製剤番号４、同定：デポーｒｈＧＨ  ４、説明／物理的外見：懸濁液、１ｍＬのＢＢ中、スクロース、ポリソルベート８０、およびメチオニンとのＺｎ２＋複合体としての５０ｍｇのｒｈＧＨ、保管条件：２〜８℃。
【０１９７】
製剤番号５、同定：デポーｒｈＧＨ  ５、説明／物理的外見：懸濁液、１ｍＬのＢＢ：ＰＬＡ１（８０：２０ｗ／ｗ％）中、スクロース、ポリソルベート８０、およびメチオニンとのＺｎ２＋複合体としての５０ｍｇのｒｈＧＨ、保管条件：２〜８℃。
【０１９８】
製剤番号６、同定：デポーｒｈＧＨ  ６、説明／物理的外見：懸濁液、ＤＤ−ＰＬＡ、１ｍＬのＢＢ：ＰＬＡ２（８０：２０ｗ／ｗ％）中、スクロース、ポリソルベート８０、およびメチオニンとのＺｎ２＋複合体としての５０ｍｇのｒｈＧＨ、保管条件：２〜８℃。
【０１９９】
製剤番号７、同定：デポーｒｈＧＨ  ７、説明／物理的外見：懸濁液、１ｍＬのＢＢ中、スクロース、ポリソルベート８０、およびメチオニンとのＺｎ２＋／プロタミン複合体としての５０ｍｇのｒｈＧＨ、保管条件：２〜８℃。
【０２００】
製剤番号８、同定：デポーｒｈＧＨ  ８、説明／物理的外見：懸濁液、ＬＡ−ＰＬＡ、１ｍＬのＢＢ：ＰＬＡ１（８０：２０ｗ／ｗ％）中、スクロース、ポリソルベート８０、およびメチオニンとのＺｎ２＋／プロタミン複合体としての５０ｍｇのｒｈＧＨ、保管条件：２〜８℃。
【０２０１】
製剤番号９、同定：デポーｒｈＧＨ  ９、説明／物理的外見：懸濁液、ＤＤ−ＰＬＡ、１ｍＬのＢＢ：ＰＬＡ２（８０：２０ｗ／ｗ％）中、スクロース、ポリソルベート８０、およびメチオニンとのＺｎ２＋／プロタミン複合体としての５０ｍｇのｒｈＧＨ、保管条件：２〜８℃。
【０２０２】
略号：ＢＢ＝安息香酸ベンジル、ＰＬＡ１＝ポリ乳酸（乳酸塩開始、Ｍｗ＝１５．１ｋＤａ）、およびＰＬＡ２＝ポリ乳酸（ドデカノール開始、Ｍｗ＝１３．９ｋＤａ）。
【０２０３】
用量調製およびプロトコル（試験物品１〜９）
試験物品番号１〜番号９を含有するバイアルを、手により約２分間、一様な製剤懸濁液が得られるまで振盪した。フリップオフクリンプおよび栓を次いで除去した。１６Ｇ、１１／２インチ針を１ｍＬ  Ｅｘｃｅｌシリンジ上に配置した。試験物品番号１〜９について、およそ１ｍＬの試験物品を回収し、０．１ｍＬの試験物品を、プランジャを後端から除去することによって、試験物品のために事前に取り付けされた１ｍＬテルモＳｕｒｓａｖｅｒシリンジ：２３Ｇ  １／２インチの中に裏込めした。シリンジを次いで、各動物に対して送達するためにプライミングした。針目詰まりを回避するために、シリンジは、投与直前まで、０．１ｍＬまでプライミングされなかった。注射前後のシリンジの重量を測定し、記録した。
【０２０４】
結果
上記の実験の結果は、図１６、パネルＡ〜Ｃに提供され、そこでそれらは、実施例１１からの結果と組み合わされている。各ビヒクル中のｒｈＧＨの各型について、用量正規化血清プロフィール（投薬される１ｍｇ／ｋｇのタンパク質当たりｎｇ／ｍＬ血清濃度）をプロットすることにより、これらの製剤において、錯化が血清レベルを約１０分の１に低下させ、重合体含量および種類から独立して放出を延長したことが示される。錯化単独（重合体なし、パネルＡ）は、送達を延長し、このうちプロタミンが明らかにＺｎ２＋よりも有効であったが、２つの組み合わせは、プロタミン単独と同程度に有効でなかった。ｌａ−ＰＬＡ単独（複合体なし）の添加もまた、送達を延長したが、ｄｄ−ＰＬＡ単独の効果は、曖昧であった（パネルＡ〜Ｃにおける遊離ｒｈＧＨを比較されたく、それらのグラフは異なる時間の尺度を使用することに留意されたい）。
【０２０５】
ＭＲＴを、各動物につき各製剤について算出し、平均化した。これらの結果は、図１７に要約される。重合体および複合体単独の効果は、水平軸に沿って見ることによって判別することができる。重合体および複合体の組み合わされた効果における変動もまた明らかである。
【０２０６】
実施例１１にあるように、複合体および重合体の、ＭＲＴを延長することに対する別個の寄与を算出し、加法モデルを使用して、組み合わされた製剤についてのＭＲＴを予測した。これらの結果は、下記の表１５に提供される。
【表１５】
2018188457.tif 000018
【０２０７】
再び、加法モデルは、観察されたＭＲＴを十分に予測せず（ｌａ−ＰＬＡ中のＺｎ２＋複合体を除く）、幾つかの製剤について、重合体および複合体の相乗効果が存在することを示した。
【０２０８】
ＢＢ単独、重合体、および複合体の、ＭＲＴへの部分的寄与は、実施例１１および１２の全てにわたって同様であったが、相乗寄与は、実施例１２において幾分高めであった。実施例１１および１２についての重合体−複合体相互作用の、ＭＲＴへの部分的寄与は、図１８に提供される。次の組み合わせは試験されず、したがって相互作用寄与は決定されなかった：ｌａ−ＰＬＧＡ：Ｚｎ２＋：プロタミン、ｄｄ−ＰＬＧＡ：Ｚｎ２＋：プロタミン、ｌａ−ＰＬＧＡ：Ｚｎ２＋、およびｄｄ−ＰＬＧＡ：Ｚｎ２＋。
【０２０９】
要約すると、実施例１２の結果は、実施例１１の結果を確証および拡張する。個々のおよび相乗の、ｒｈＧＨ：プロタミン複合体の効果もまた、ｒｈＧＨ：Ｚｎ２＋、ならびにＺｎ２＋およびプロタミンの両方により形成される複合体で観察した。いかなる特定の理論にも拘束されることを意図するものではないが、ｒｈＧＨの複合体を用いて製剤化することにより、重合体の選択における許容度が提供され得、それは酸末端化重合体およびエステル末端化重合体の、タンパク質放出を制御する能力における本来の差異を補う。
【０２１０】
実施例１３：更なる体内デポーの特徴付け
追加的な実験を行って、追加的溶媒−重合体の組み合わせの適合性を決定した。試験された製剤は次の通りであった：ＢＡ：ｄｄ−ＰＬＧＡ（６．７ｋＤａ、ドデカノール開始、６５：３５  Ｌ：Ｇ）、ＢＡ：ｇａ−ＰＬＧＡ（１１．５ｋＤａ、グリコール酸塩開始、６４：３６  Ｌ：Ｇ）、ＥＢ：ｄｄ−ＰＬＧＡ（安息香酸エチル）、ＥＢ：ｇａ−ＰＬＧＡ。全てのビヒクルは、８０：２０（ｗ／ｗ％）溶媒：重合体比を含有した。注記される場合を除いて、天然ｒｈＧＨ（凍結乾燥）を有益薬剤（遊離およびプロタミンとの錯化の両方）として使用した。試料を０．５、１、２、４、８、１２、２４、４８、７２、１２０、および１６８時間時点で採取しながら、ＰＫを７日間の期間にわたって監視した。上記の製剤についての群平均用量正規化血清プロフィールは、図２４（ＢＡ：ｄｄ−ＰＬＧＡおよびＢＡ：ｇａ−ＰＬＧＡ）および２５（ＥＢ：ｄｄ−ＰＬＧＡおよびＥＢ：ｇａ−ＰＬＧＡ）に提供される。全てのゼロ以外の値が示される。
【０２１１】
予想外に、ＢＡ：ＰＬＧビヒクルからの送達は極度に低く、このうち生物学的利用能はそれぞれ、０．２未満および２％であった。ＥＢ：ＰＬＧＡからの送達は、ＢＢ：ＰＬＧＡについて本明細書において先に示されたものに匹敵した。ｄｄ−重合体についてのピーク血清濃度は、恐らくはアッセイ飽和に起因して、より低いと思われた。エステル末端化重合体と酸末端化重合体との間のＭＲＴにおける差異は、ＢＢ−ＰＬＧＡビヒクルにおける場合よりも顕著でなかった。ＭＲＴを上記の製剤の各々について算出したが、結果は、下記の表１６に提供される。
【表１６】
2018188457.tif 000019
【０２１２】
ＥＢ：ｄｄ−ＰＬＧＡ中の遊離ｒｈＧＨの懸濁液からのｒｈＧＨ送達の持続期間は、本明細書で先に試験された同等のＢＢベースのビヒクルからのものよりも長かった。ＥＢ：ｇａ−ＰＬＧＡ中の遊離ｒｈＧＨの懸濁液からのｒｈＧＨ送達の持続期間は、本明細書で先に試験された同等のＢＢベースのビヒクルからのもの以下であった。ＢＡ製剤からの非常に低いｒｈＧＨ送達は、ＥＢおよびＢＢとのその構造的類似性に鑑みて予想外であった。
【０２１３】
ＢＡ製剤からの体外のｒｈＧＨの放出は、ほぼ１１日間にわたって１％未満で、かなり低かった。更に、放出実験の終了時の、これらのデポーからＰＢＳ抽出培地中への無傷のタンパク質の回収は、１％未満であったが、６Ｎグアニジンの添加によって大幅に改善され、これは製剤中の広範なタンパク質凝集を示唆している。ＥＢベースの製剤からのｒｈＧＨの回収は、ほぼ完全であり、６Ｎグアニジンの抽出培地への添加による影響を受けなかった。
【０２１４】
体外および体内での観察は、ＢＡとｒｈＧＨとの間の何らかの具体的な相互作用を示唆するが、１０％ＢＡを有するｒｈＧＨの製剤は、体内で、ＢＢ単独を含有する製剤と同様によく機能している。ＢＡ：ＰＬＧＡ製剤からのｒｈＧＨの送達が、ここで観察されたものよりもはるかに長い時間にわたって生じる可能性もまた存在する。
【０２１５】
これらの結果は、より短い送達持続期間、すなわち数日間〜１週間のために設計される注射用デポー製剤のためのＢＡおよびＥＢの実用性を示唆し得る。
【０２１６】
実施例１４：「クラウド」の特徴付け
本明細書に上述されたように、本開示の注射用生分解性デポー組成物の有益な放出特性は、少なくとも一部には、体内での、デポーの表面上での、非常に流動的な、非構成的（いかなる特記すべき機械的完全性も有さない）、「速度制御クラウド」または「速度制御薄膜」の形成に起因すると考えられる。開示されるデポー組成物の望ましい制御送達特性は、デポーの液体コア中に分散した不溶性の有益薬剤複合体、およびデポーの表面上の重合体のクラウドまたは薄膜の両方の速度制御寄与からもたらされてもよい。
【０２１７】
この速度制御クラウドの物理的発達は、図１９および２０に示されるようにインサイツで可視的に見ることができる。２３ゲージ普通針を使用して、およそ０．５ｍＬのＳＡＩＢ／ＢＢ／ＰＬＡ（ＬＡ開始）（８：７２：２０）ビヒクルを、ＰＨ７．４および３７℃のＰＢＳ緩衝液中に注射した。第１の写真（図１９）を注射の開始後約１０秒時点で撮り、第２の写真（図２０）を０．５ｍＬ注射の完了後約６０秒で撮った。図１９は、ビヒクルの中心における不透明度の若干の発達を示すが、それはビヒクルのＰＢＳとの初期接触に起因する可能性が高く、手順のアーチファクトと見なされる。ほぼ不透明な白色クラウドは、図２０に示されるように、６０秒時点までにビヒクルの表面全体にわたって形成される。
【０２１８】
クラウド形成動力学は、下記の表１７における多様な疎水性溶媒：ＰＬＡの組み合わせについて記載され、表中、インデックス番号０〜４のうちの１つが、ビヒクルの透過率の可視的特徴付けに基づいて選択され、ここで０は、およそ１００％の透過率を示し、１は、およそ８０％よりも大きい透過率を示し、２は、およそ５０％よりも大きい透過率を示し、３は、およそ５０％未満の透過率を示し、４は、およそ０％の透過率を示す。
【０２１９】
試料調製
試験試料を、各溶媒につきＰＬＡの３つの濃度レベル（１０ｗ／ｗ％、２０ｗ／ｗ％、および３０ｗ／ｗ％）で、重合体が完全に溶解するまで回転子上で混合することによって、調製した。
【０２２０】
クラウド形成試験条件
試験試料容量は１ｍＬであり、試験培地は、フッ素重合体樹脂ライニングＧｒｅｅｎ  Ｔｈｅｒｍｏｓｅｔ  Ｃａｐを備えるＦｒｅｎｃｈ  Ｓｑｕａｒｅ  Ｂｏｔｔｌｅｓ，Ｗｉｄｅ  Ｍｏｕｔｈ，Ｑｏｒｐａｋ（登録商標）１２０ｍＬ（４ＯＺ）中、ｐＨ７．４の１００ｍＬの１０ｍＭ  ＰＢＳであった。試験温度は３７℃であった。試験のために、１００ｍＬの培地をＦｒｅｎｃｈ  Ｓｑｕａｒｅ  Ｂｏｔｔｌｅｓ中に移した。培地を、３７℃のボトル中、インキュベーターにおいて平衡化した。１ｍＬの重合体溶液を、ボトルの下隅にピペット注入し、緩徐に放出した。ボトルを次いで、３７℃のインキュベーター中に再び配置した。指定された時点で、ボトルをインキュベーターから除去し、組成物を可視的に検査した。不透明度（クラウド量）の程度を、上で定義されたインデックス番号１〜４を使用して記録し、ボトルをインキュベーター中に再び配置した。
【表１７】
2018188457.tif 000020
【０２２１】
上記の表に示されるように、１時間時点までに、低下した透過率によって明らかとなる有意なクラウド形成が、上記のビヒクルの各々（ベンジルアルコール−１０％ＰＬビヒクルを除く）で生じた。
【０２２２】
実施例１５：更なる「クラウド」の特徴付け
本開示の速度制御クラウド形成ビヒクルはまた、３７℃でエイジングされたときのそれらのゲル形成特性の欠如によっても特徴付けることができる。これは、選択した温度での経時的な粘度安定性を監視することによって示すことができる。ビヒクル組成物を下記の表１８に示されるように調製した。
【表１８】
2018188457.tif 000021
【０２２３】
４つのビヒクルをガラスバイアル中に配置し、３７℃で１４日間インキュベートした。動的粘度を、Ａｎｔｏｎ  Ｐａａｒ  ＭＣＲ３０１流動計を使用して、２５℃で、１０％の定歪および０．１〜１００ｓ−１の範囲の角振動数で測定した。他の試験条件は、試験物質の量：１００μＬ、静止円錐平板と回転円錐平板との間のギャップ距離：０．０５ｍＭであった。
【０２２４】
３７℃でエイジングされたビヒクルについての結果は、図２１に示される。温度の関数としての安定性は、図２２に示される。３、７、および１４日目の粘度測定は、下記の表１９に提供される。
【表１９】
2018188457.tif 000022
【０２２５】
Ｇ’（貯蔵弾性率）およびＧ’’（損失弾性率）についての値を決定し、減衰係数Ｔａｎ  δ（Ｇ’’／Ｇ’）を算出した。これらの結果は、下記の表２０〜２７に示される。
【表２０】
2018188457.tif 000023
【表２１】
2018188457.tif 000024
【表２２】
2018188457.tif 000025
【表２３】
2018188457.tif 000026
【表２４】
2018188457.tif 000027
【表２５】
2018188457.tif 000028
【表２６】
2018188457.tif 000029
【表２７】
2018188457.tif 000030
【０２２６】
ＳＡＩＢの存在下で、ＰＬＡ（１５．２ＫＤ）ビヒクルは、３７℃で中程度の粘度減少を示す（２〜３ｃＰ／週の減少）。いかなる特定の理論にも拘束されることを意図するものではないが、これは、緩徐な重合体分解の結果であり得る。重合体分解は、ＳＡＩＢを含まないビヒクルについて、有意に増加（３〜５倍の増加）されることが示された（遮蔽効果）。
【０２２７】
ＰＬＧＡ  ６５／３５（６．２ＫＤ）を用いて調製された唯一のビヒクルは、他方で、経時的な粘度増加を示した（１１ｃＰ／週の増加）。再び、いかなる特定の理論にも拘束されることを意図するものではないが、これは、恐らく、強化されたファンデルワールス相互作用をもたらす、段階的な重合体鎖再編成に起因する。しかしながら、弾性（保管）モジュラスがごく少量であり、優勢とはならないため、ゲル形成の指標は何ら存在しない。したがって、試験されたビヒクルは、ゲル形成特性を欠いている。
【０２２８】
実施例１６：追加的な錯化薬剤の特徴付け
追加的な錯化薬剤を、ｒｈＧＨを沈殿させるそれらの能力について、体外で試験した。この実験の結果は、下記の表２８に提供される。
【０２２９】
ヒト成長ホルモン（Ｈｏｓｐｉｒａ，Ａｄｅｌａｉｄｅから購入）を、ポリリジン、ポリアルギニン、ポリアデニル酸（ポリ−Ａ）、またはポリチミン（ポリ−Ｔ）と、適切な比率で錯化して（表２８に指定されるように）、懸濁液を形成した。上清を、錯化物質懸濁液の遠心分離によって沈殿物（ｐｐｔ）から分離した。上清溶液を、逆相液体クロマトグラフィー（ＲＰＬＣ）によって、非錯化ｈＧＨについて分析した。
【表２８】
2018188457.tif 000031
【０２３０】
表２８に示されるように、列挙された錯化薬剤の各々（ヒアルロン酸を除いて）は、ｒｈＧＨ有益薬剤を少なくとも部分的に沈殿させることが可能であった。カチオン性薬剤については、ポリリジンが、ポリアルギニンよりも、ｒｈＧＨを沈殿させることにおいて有効であった。試験されたアニオン性薬剤については、ポリチミンは、１５００ｍｅｒ長において、２０または１０ｍｅｒ長におけるよりも有効であった一方で、ポリアデノシンは、１０ｍｅｒ長において、１５０ｍｅｒ長におけるよりも若干有効であるように思われた。
【０２３１】
追加的な実験を行って、種々の錯化剤と錯化されたｈＧＨ有益薬剤の溶解速度を特徴付けた。ｈＧＨおよび異なる錯化剤の溶液を、次の比率で提供して、不溶性の有益薬剤複合体を得た：ｈＧＨ＋ポリ−リジン（１：１）、ｈＧＨ＋ポリアデニル酸＋プロタミン（１：０．２：０．３）、ｈＧＨ＋Ｚｎ＋プロタミン（１：２：０．３）、ｈＧＨ＋Ｚｎ（１：１０）。遊離ｈＧＨを対照として提供した。溶解速度を次いで、逆相液体クロマトグラフィー（ＲＰＬＣ）によって監視した。これらの溶解実験の結果は、図２６および２７に提供される。上記の複合体のうち、Ｚｎ／プロタミン複合体が、より制御された溶解速度を提供したが、それは所望の放出プロフィールをもたらすであろう。
【０２３２】
実施例１７：種々のｈＧＨ複合体についての溶解速度
次の粉末製剤を調製および分析して、体外でのｈＧＨの溶解に対する、種々の錯化剤の効果を決定した。
【０２３３】
ｈＧＨ粉末の調製：
ＢｒｅｓａＧｅｎからの緩衝液中、各々３ｍＬのバルクｈＧＨ溶液のアリコートを、５ｍＬタイプのＨｙｐａｋ  ＢＤガラスシリンジ中に移し、表１に提供される凍結乾燥サイクルおよびプログラムＰ９０（ｈＧＨに対して最適化）を使用して凍結乾燥させて、ＦＴＳ凍結乾燥器、Ｄｕｒａ  Ｓｔｏｐ，ＭＰ  Ｓｔｏｐｐｅｒｉｎｇ  Ｔｒａｙ  Ｄｒｙｅｒ，Ｓｔｏｎｅ  Ｒｉｄｇｅ，ＮＹに提供されるステップを当てはめた。この粉末からの放出は、初期ｈＧＨ含量の４０％のみであった。タンパク質の残りは、放出培地中で変性または凝集した。
【０２３４】
ｈＧＨ：Ｚｎ粉末の調製：
１００ｍｇのＢｒｅｓａＧｅｎ  ｈＧＨ粉末を、１５ｍＬ広口ガラスジャー中に配置した。５．５ｍＬの２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３（ｐＨ約７．５）溶液を添加し、化合物を３０分間室温で、それが透明になるまで４００ｒｐｍで撹拌した。次いで、０．４５ｍＬの１００ｍＭ酢酸亜鉛溶液を緩徐に添加して、白色沈殿物を形成させた。結果として生じた懸濁液を３０分間撹拌して、錯化反応を完了させた。０．１９ｍＬの２９０ｍＭスクロース溶液を次いで、４００ｒｐｍで撹拌しながら添加した。溶液が透明となったとき、１５．２μＬの１０％ポリソルベート２０溶液を添加した。上記のステップからの各々３ｍＬのバルク懸濁液のアリコートを、５ｍＬタイプのＨｙｐａｋ  ＢＤガラスシリンジ中に移し、表１に提供される凍結乾燥サイクルおよびプログラムＰ９０（ｈＧＨに対して最適化）を使用して凍結乾燥させて、ＦＴＳ凍結乾燥器、Ｄｕｒａ  Ｓｔｏｐ，ＭＰ  Ｓｔｏｐｐｅｒｉｎｇ  Ｔｒａｙ  Ｄｒｙｅｒ，Ｓｔｏｎｅ  Ｒｉｄｇｅ，ＮＹに提供されるステップを当てはめた。この粉末からは、放出されたタンパク質はより多い（＞７０％）が、全ての放出は、４８時間未満のうちに起こる。
【０２３５】
ｈＧＨ：Ｚｎ：プロタミン粉末の調製：
１００ｍｇのＢｒｅｓａＧｅｎ  ｈＧＨ粉末を、１５ｍＬ広口ガラスジャー中に配置した。５．５ｍＬの２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３（ｐＨ約７．５）溶液を添加し、化合物を３０分間室温で、それが透明になるまで４００ｒｐｍで撹拌した。次いで、９０μＬの１００ｍＭ酢酸亜鉛溶液を撹拌しながら添加し、続いて１．０２ｍＬの硫酸プロタミン溶液（濃縮１０ｍｇ／ｍＬ）を緩徐に添加して、白色沈殿物を形成させた。結果として生じた懸濁液を３０分間撹拌して、錯化反応を完了させた。０．１９ｍＬの２９０ｍＭスクロース溶液を次いで、４００ｒｐｍで撹拌しながら添加した。溶液が透明となったとき、１５．２μＬの１０％ポリソルベート２０溶液を添加した。上記のステップからの各々３ｍＬのバルク懸濁液のアリコートを、５ｍＬタイプのＨｙｐａｋ  ＢＤガラスシリンジ中に移し、表１に提供される凍結乾燥サイクルおよびプログラムＰ９０（ｈＧＨに対して最適化）を使用して凍結乾燥させて、ＦＴＳ凍結乾燥器、Ｄｕｒａ  Ｓｔｏｐ，ＭＰ  Ｓｔｏｐｐｅｒｉｎｇ  Ｔｒａｙ  Ｄｒｙｅｒ，Ｓｔｏｎｅ  Ｒｉｄｇｅ，ＮＹに提供されるステップを当てはめた。プロタミンおよび亜鉛のこの錯化粉末からは、溶解は、遊離ｈＧＨまたは亜鉛のみの複合体粉末よりも緩徐である。
【０２３６】
図２８は、種々の調製物についての経時的な累積溶解％を示す。
【０２３７】
実施例１８：更なる有益薬剤
エクセナチド（Ｂａｃｈｅｍ，Ｉｎｃ．から購入）を、重炭酸アンモニウム（５０ｍＭ）中に緩衝させることによって、酢酸亜鉛（１：０．４モル比）としての亜鉛および硫酸プロタミン（１：０．３）としてのプロタミンと錯化した。沈殿物を含有する結果として生じた懸濁液を、Ｂｕｃｈｉ  ３２９噴霧乾燥器を使用して噴霧乾燥させた。
【０２３８】
ペプチド有益薬剤（エクセナチド）を、体内での有益薬剤の放出に対するデポー製剤の効果（ラット）を決定するために、本開示による注射用デポー組成物中で試験した。次の製剤を試験した：エクセナチド：プロタミン１：２（ｍ／ｍ）、凍結乾燥、９．５ｍｇ用量、ＳＡＩＢ／ＢＢ／ｌａ−ＰＬＡ（８／７２／２０）中、およびエクセナチド：プロタミン１：２（ｍ／ｍ）、噴霧乾燥、９．５ｍｇ用量、ＳＡＩＢ／ＢＢ／ｌａ−ＰＬＡ（８／７２／２０）メチオニン＆ポリソルベート８０。これらの製剤を、２．１μｇ、２１μｇ、および２１０μｇのＳＣ水性用量と比較した。血清濃度を経時的に監視した。この実験についての結果は、図２９に提供され、水性ボーラスに比べて改善された制御放出を示す。
【０２３９】
実施例１９：更なる注射可能性研究
更なる注射可能性研究を、有益薬剤として、プロタミン、または亜鉛およびプロタミンの組み合わせで錯化され、下記の多様なビヒクル中に分散された、ＧＬＰ−１類似体を使用して行った。試験された製剤の説明は、下記の表２９に提供される（このＧＬＰ−類似体は、上の実施例７で利用されたものと異なる）。
【０２４０】
Ｉｎｓｔｒｏｎ  ３３４３器具を、１ｍＬ  ＥＸＥＬシリンジ（ＥＸＥＬ  １ｍＬルアーロックチップシリンジ、ＲＥＦ番号２６０５０）および２７Ｇ×１／２インチのサイズのＢ−Ｄ針、または永久的に取り付けられた針２５Ｇ×５／８インチを備える１ｍＬテルモＳｕｒＳａｖｅｒシリンジ（ＲＥＦ番号ＳＳＯ１Ｄ２５１６）と共に、研究において使用した。送達された容量は、およそ０．２ｍＬであり、適用された力は、１０ｌｂｆであった。試験を約２１．８℃〜２２．２℃の室温で行った。製剤中の標的ペプチド含量は、７０ｍｇ／ｍＬであった。製剤についての注射可能性の結果は、下に提供される。
【表２９】
2018188457.tif 000032
【０２４１】
上記の製剤の８つ全ては、２５Ｇ×５／８インチおよび２７Ｇ×１／２インチのサイズの針を円滑に通過し、許容される注射可能性を有すると見なされた。
【０２４２】
実施例２０：ＧＬＰ−１類似体製剤についての追加的な薬物動態の特徴付け
追加的な体内実験を、実施例１９について上述されるＧＬＰ−１類似体製剤を使用して行った。製剤の各々の持続放出、初期バースト、および生物学的利用能特性を決定した。
【０２４３】
局所注射部位における体毛の除去後に、上記の製剤をＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラット中に皮下注射した。製剤を、およそ１００μＬの容量で、７．３〜９．５ｍｇ／ラットの範囲の投薬量により、１処置群当たり３匹のラットを用いて投与した。これらの製剤を、２ｍｇ／ラットの線量でのＡＰＩ単独の投与と比較した。上記の処置条件の各々についての平均ＰＫプロフィールは、図２３に示される。
【０２４４】
上記のデータに基づいて、上記の製剤の各々についての薬物放出速度ＡＵＣ（１日目）／ＡＵＣ（１４日目）（初期バーストの測定）が１０％未満であると決定した。製剤のうちの幾つか（００１、００４、および００７）は、ＡＰＩのＴｍａｘと同時に、小さい初期バーストを示した。ＡＵＣ（１日目）／ＡＵＣ（１４日目）についての平均値は、下記の表３０に提供される。
【表３０】
2018188457.tif 000033
【０２４５】
生物学的利用能を上記の実験に基づいて算出し、結果は、下記の表３１に提供される。
【表３１】
2018188457.tif 000034
【０２４６】
上記の製剤は、ＡＰＩと比べて１４日間までで１８〜３４％の許容される生物学的利用能を示した。
【０２４７】
要約すると、上記のデータは、試験された製剤の全てが、ラットにおけるＧＬＰ−１類似体の十分な濃度を維持したことを示した。更に、０〜２４時間にわたる累積薬物投与量（ＡＵＣ１日目／ＡＵＣ１４日目）は、製剤の各々について１０％未満であった。予測された定常状態濃度は、製剤ＦおよびＧを除いて、完全に治療域内であった。最後に、上記の製剤の各々は、許容される生物学的利用能を示した。
【０２４８】
本発明は、その具体的な実施形態を参照して記載されたが、本発明の真の趣旨および範囲から逸脱することなく、種々の変更が行われてもよく、均等物が置換されてもよいことが当業者によって理解されるべきである。更に、特定の状況、物質、物質の組成、プロセス、プロセスステップ（単数または複数）を本発明の目的、趣旨、および範囲に適合させるために、多くの修正が行われてもよい。全てのかかる修正は、本明細書に添付される特許請求の範囲内であることが意図される。
【図１】
2018188457.tif 000035
【図２−１】
2018188457.tif 000036
【図２−２】
2018188457.tif 000037
【図２−３】
2018188457.tif 000038
【図２−４】
2018188457.tif 000039
【図２−５】
2018188457.tif 000040
【図２−６】
2018188457.tif 000041
【図３】
2018188457.tif 000042
【図４】
2018188457.tif 000043
【図５】
2018188457.tif 000044
【図６】
2018188457.tif 000045
【図７】
2018188457.tif 000046
【図８】
2018188457.tif 000047
【図９】
2018188457.tif 000048
【図１０】
2018188457.tif 000049
【図１１】
2018188457.tif 000050
【図１２】
2018188457.tif 000051
【図１３】
2018188457.tif 000052
【図１４】
2018188457.tif 000053
【図１５】
2018188457.tif 000054
【図１６】
2018188457.tif 000055
【図１７】
2018188457.tif 000056
【図１８】
2018188457.tif 000057
【図１９】
2018188457.tif 000058
【図２０】
2018188457.tif 000059
【図２１】
2018188457.tif 000060
【図２２】
2018188457.tif 000061
【図２３】
2018188457.tif 000062
【図２４】
2018188457.tif 000063
【図２５】
2018188457.tif 000064
【図２６】
2018188457.tif 000065
【図２７】
2018188457.tif 000066
【図２８】
2018188457.tif 000067
【図２９】
2018188457.tif 000068
【図３０】
2018188457.tif 000069
【手続補正書】
【提出日】平成30年8月9日(2018.8.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書に記載された発明。
【外国語明細書】
2018188457000001.pdf
2018188457000002.pdf
2018188457000003.pdf
2018188457000004.pdf