(57)【要約】【課題】熱ショックタンパク質結合化合物、組成物、およびそれらを製造するための方法を提供すること。【解決手段】本発明の主題は、一般式（Ｉ）または（Ｉ’）によって示した化合物またはその薬理学的に許容可能な塩；これらの化合物の少なくとも１つを含む薬学的組成物；これらの化合物の少なくとも１つの作製方法；種々の癌および／または増殖障害の処置および／または防止のためのこれらの化合物の少なくとも１つの使用方法；種々の癌に対する抗癌治療の有効性をモニタリングするためのこれらの化合物の少なくとも１つの使用方法に関する。１つの実施形態では、主題は、熱ショックタンパク質７０（Ｈｓｐ７０）に一定の特異性レベルで結合する化合物に関する。別の実施形態では、主題は、熱ショックタンパク質７０（Ｈｓｐ７０）および熱ショック同族タンパク質７０（Ｈｓｃ７０）の両方に一定の特異性レベルで結合して阻害する化合物に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
熱ショックタンパク質結合化合物、組成物、ならびにそれらを製造および使用するための方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
謝辞
本明細書の主題は、一部、ＮＩＨ  Ｒ０１  ＣＡ１１９００１の下、政府の支援を受けてなされた。政府は、本発明に一定の権利を有する。
【０００２】
分野
本発明の主題は、本明細書中に開示の一般式によって示された化合物またはその薬理学的に許容可能な塩、前記化合物を含む薬学的組成物、前記化合物の作製方法、種々の悪性腫瘍または増殖障害の処置および／または防止のための前記化合物の使用方法、種々の悪性腫瘍または増殖障害を処置および／または防止する物質を同定するための前記化合物の使用方法、種々の悪性腫瘍または増殖障害を処置および／または防止する物質の臨床開発のためのバイオマーカーを同定するための前記化合物の使用方法、および併用療法でのその妥当な使用を同定するための前記化合物の使用方法に関する。特に、本発明の主題は、熱ショックタンパク質７０（Ｈｓｐ７０）の小分子モジュレーターである化合物に関する。別の実施形態では、主題は、Ｈｓｐ７０のヌクレオチド結合部位の外側に存在するＨｓｐ７０のアロステリックポケットを占める小分子およびかかる小分子を同定、特徴付け、および使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
癌細胞は、しばしば、高レベルのいくつかの熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）を発現し、この発現により、これらの腫瘍の攻撃性が増大し、細胞に致死的条件（治療による死滅が含まれる）を乗りきらせることも可能となる。処置に対する耐性の付与に加えて、ＨＳＰ発現の上昇はまた、プログラム細胞死の阻害および自律的増殖の促進によって癌を助長する。
【０００４】
これらのうちで主なＨＳＰはＨｓｐ９０およびＨｓｐ７０（相関するが異なる様式で悪性表現型を調節するように作用するタンパク質）である。Ｈｓｐ９０は、いくつかのオンコプロテイン（そのうちでＨＥＲ２、ＡＫＴ、ＲＡＦ１、ＩＧＦ−ＩＲ、およびＨＩＦ−１）の変換能力（Ｈｓｃ７０、構成性Ｈｓｐ７０、誘導性Ｈｓｐ７０イソ型によって促進される機能）を維持する。Ｈｓｐ９０阻害の際に、Ｈｓｐ９０−クライアントオンコプロテインは不安定化されるようになり、プロテアソーム経路によって分解される（図１ａ）。転写因子ＨＳＦ−１（熱ショック応答の主制御因子）は別のＨｓｐ９０クライアントであり、オンコプロテインと異なり、Ｈｓｐ９０が阻害された場合に活性化するようになる。ＨＳＦ−１活性化によってＨｓｐ７０レベルが増大する（一定の腫瘍におけるＨｓｐ９０インヒビターの潜在力を制限するフィードバック応答）。Ｈｓｐ７０は、本来、強力な抗アポトーシス分子であり、Ｈｓｐ７０レベルの上昇による内因性および外因性のアポトーシス経路の両方の阻害がＨｓｐ９０阻害の影響を減少させ得ることが示唆される。アポトーシスの阻害およびＨｓｐ９０の補助に加えて、Ｈｓｐ７０およびその高度に相同な細胞質イソ型は、多数の他の重複するシャペロン機能を果たし、いくつかの場合、相互に置換することができる。
【０００５】
Ｈｓｐ９０マルチシャペロン複合体（Ｈｓｐ９０スーパーシャペロン機構とも呼ばれる）は、クライアントタンパク質を駆動および支持するいくつかの悪性腫瘍の調節による病原性細胞形質転換の発達および進行で重要な役割を果たす。Ｈｓｐ９０マルチシャペロン系の活性は、複雑なシャペロン系によって維持および遂行される。Ｈｓｐ７０（構成的に
発現されるＨｓｃ７０および熱誘導性Ｈｓｐ７０−１およびＨｓｐ７０−６）は予備段階に関与するのに対して、Ｈｓｐ９０は後期に関与する（図１ａ）。その機能は、複数のコシャペロン（Ｈｓｐ７０制御因子、Ｈｓｐ４０、Ｈｓｐ１１０、ＢＡＧ、およびＨＩＰなど）；クライアントがＨｓｐ７０からＨｓｐ９０に通過する中間体分子シャペロン複合体の形成に関与するＨＳＰ組織化タンパク質（ＨＯＰ）、ならびにその他（最終または成熟Ｈｓｐ９０複合体で作用するｐ２３、ｃｄｃ３７、およびイムノフィリンなど）を必要とする（図１ａ）。Ｈｓｐ９０の調節ＡＴＰアーゼポケットへの直接結合によって作用する作用因子（ゲルダナマイシン（ＧＭ）など）ならびにＰＵ誘導体であるＰＵ２４ＦＣｌおよびＰＵ−Ｈ７１（図１ｂ）を介したＨｓｐ９０機構の阻害は成熟複合体の形成を妨害し、それにより、クライアントタンパク質をプロテアソーム分解に向かわせる（図１ａ）。興味深いことに、Ｈｓｐ９０活性の減少は（Ｈｓｐ７０またはコシャペロンであるＨＯＰ、ＨＩＰ、ｐ２３、およびＨｓｐ４０の発現下ではない）、ＨＳＦ−１を劇的に活性化することが報告されている。この所見の興味深い結果は、Ｈｓｐ９０機構のオンコプロテインクライアントと異なり、ＨＳＦ−１活性化がＨｓｐ７０を必要としないことである。
【０００６】
直接的なＨｓｐ９０阻害の意義は現在十分に理解されておらず、現在は複数の癌の臨床評価で小分子インヒビターの開発において利用されているのに対して、Ｈｓｐ９０機構の活性を介在するための別の方法についてほとんど知られていない。直接的なＨｓｐ９０阻害以外の方法でのシャペロン機構の妨害は、いくつかのその機能の間で識別することができ、特異的生物活性を付与することができる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
概要
まとめると、癌内のＨＳＰとこれらのタンパク質上の腫瘍細胞の内因性の依存性との間の複雑な相互関係を考慮すると、一方のＨＳＰの阻害の際に細胞が他方のＨＳＰの作用によってこの機能喪失のバランスをとるための機構を発達させることは驚くべきことではない。その結果として、アプローチ（１つを超えるＨＳＰを同時にターゲティングするという本明細書中の主題に記載のアプローチなど）が治療的に成功する可能性がより高い。
【０００８】
したがって、本発明の主題は、Ｈｓｐ７０シャペロンの特異的調整によってＨｓｐ９０分子機構の２つの機能（すなわち、オンコプロテインの調節およびＨＳＦ−１の抑制）を識別するための化合物および方法を提供する。
【０００９】
新規の化合物ならびに当該化合物の作製および使用方法を本明細書中に記載する。本発明の主題の１つの実施形態では、本明細書中に記載の化合物は、細胞成長の調整（例えば、悪性細胞の阻害および／または癌細胞に対する細胞傷害性の増加など）に有用であり得る。別の実施形態では、本明細書中に記載の化合物は、熱ショックタンパク質７０（Ｈｓｐ７０）モジュレーターとして機能することができる。そのようなものとして、これらまたは他の化合物を使用したＨｓｐ７０の薬理学的調整によって癌細胞において実質的且つ広範に有用な結果が得られることが発見された。さらに他の実施形態では、本明細書中に記載の化合物は、Ｈｓｐ９０機構／オンコプロテイン複合体の形成を破壊し、それにより、非発癌性キナーゼを破壊したり分解したりすることなくいくつかのオンコプロテインをプロテアソーム分解することができる。さらなる実施形態では、本明細書中に記載の化合物の抗癌効果は、例えば、増殖の阻害、細胞周期の形質転換特異的遮断、アポトーシスの誘導、または侵襲性の軽減を含むことができる。
【００１０】
本明細書中に記載の重要な活性を不可逆的または可逆的な結合様式のいずれかによって相互作用する物質の組成物によって達成することができることを本主題の別の実施形態に記載する。特定の実施形態では、これらの化合物はＨｓｐ７０と相互作用する。さらに別
の実施形態では、これらの化合物は、本明細書中に記載のＨｓｐ７０上のアロステリック部位と相互作用する。
【００１１】
１つの実施形態では、ヒトＨｓｐ７０の相同性モデルを示す。主題の別の実施形態では、相同性モデルを使用して、哺乳動物Ｈｓｐ７０の活性を調整する化合物を合理的にデザインする。この相同性モデルは、方法（合理的な薬物デザインおよび仮想スクリーニングが含まれるが、これらに限定されない）による本発明の主題の化合物の発見に有用であろう。
【００１２】
さらなる実施形態では、Ｈｓｐ７０およびＨｓｃ７０のヌクレオチド結合部位の外側に存在するアロステリックポケットを示す。このポケットについての天然や合成の小分子リガンドは知られていない。さらに他の実施形態では、このポケットを小分子リガンドで占めることにより、例えば、増殖の阻害、細胞周期の形質転換特異的遮断、アポトーシスの誘導、侵襲性の軽減が起こることを示す。このポケットは、本発明の主題の化合物の発見に有用であろう。候補化合物を、いくつかの方法によってコンピュータ的に提供することができる。かかる方法の例には、分子フラグメントの候補化合物への組み立て、ｄｅ  ｎｏｖｏでの候補化合物のデザイン、部位への結合が公知の化合物の修飾、候補化合物を形成するために本明細書中に記載の組成物を含めること、および、最後ではないが、候補化合物のデータベースのスクリーニングが含まれる。
【００１３】
別の実施形態によれば、本明細書中に記載の本発明の主題の化合物が占める場合、公知の天然に存在するか合成的に作製されたリガンドを持たないＨｓｐ７０タンパク質中の空隙により、正常細胞に毒性のない用量で悪性細胞成長の阻害、異常な細胞周期進行の阻害、いくつかのオンコプロテインの分解および阻害、アポトーシスの誘導、および癌細胞の侵襲性の軽減が起こる。別の実施形態によれば、他の小分子リガンドによるこの依然として調査されていないポケットの占有により、以下の効果（これらに制限されない）の全てまたは一部が得られるであろう：正常細胞に毒性のない用量での悪性細胞成長の阻害、異常な細胞周期進行の阻害、いくつかのオンコプロテインの分解および阻害、アポトーシスの誘導、および癌細胞の侵襲性の軽減。
【００１４】
さらなる実施形態では、このポケットを占めるリガンドの発見方法を示す。さらに他の実施形態では、このポケットを小分子リガンドで占めることにより、Ｈｓｐ９０およびＨｓｐ７０発癌経路が共に阻害されることを示す。本明細書中に記載の新規の結合空隙およびＨｓｐ７０における相互作用様式はまた、類似の作用機構および治療用途のインヒビターのデザインのための有益な足掛かりを示す。１つのＨＳＰの一度のターゲティングがその明確な治療的意義を有する一方で、本明細書中に示す実施形態は、Ｈｓｐ７０およびＨｓｃ７０の同時阻害によって、Ｈｓｐ９０阻害の有益な効果（すなわち、オンコプロテインが駆動する悪性過程（増殖、生存、および転移など）の腫瘍の枯渇）およびＨｓｐ７０阻害のアポトーシス効果を得ることができることを示す。結論として、１つの実施形態は、Ｈｓｐ７０およびＨｓｃ７０のヌクレオチド結合部位の外側に存在するアロステリックポケットの阻害による新規の癌ターゲティングストラテジーを記載する。
【００１５】
本発明の主題の他の実施形態では、候補化合物が作用して本明細書中に記載の本発明の主題の化合物の癌細胞において実質的および広範な有益な結果を得る能力を評価するためのいくつかの方法のうちの１つ以上を含むストラテジーを示す。ストラテジーは、選択した癌細胞における本明細書中に記載の表現型の結果について試験する工程、競合蛍光偏光アッセイを行って本明細書中に記載のＨｓｐ９０およびＨｓｐ７０結合について試験する工程、および候補化合物の本明細書中に記載のポケットへの構造的適合をコンピュータ的に評価する工程を含む。表現型試験には、巨大な癌細胞群における成長阻害についての試験、ＨＥＲ２＋ＳＫＢｒ３乳癌細胞におけるＨＥＲ２およびＲａｆ−１の分解、ＭＯＬＭ
−１３  ＡＭＬ細胞におけるＦＬＴ３およびｐ−ＳＴＡＴ５の不活化、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８トリプルネガティブ乳癌細胞におけるｐ−ＳＴＡＴ３およびｐ−ＰＤＫ１の不活化、ＬＮＣａＰ前立腺癌細胞における変異体ＡＲ分解、巨大な癌細胞群におけるＰＡＲＰ切断、ＭＯＬＭ−１３細胞におけるカスパーゼ３，７活性化、乳癌細胞におけるインターフェロンおよびＴＮＦのアポトーシス効果の増大、および巨大な癌細胞群におけるＨｓｐ７０誘導の欠如が含まれるが、これらに限定されない。Ｈｓｐ７０およびＨｓｐ９０の競合アッセイは、癌細胞中に発現したＨＳＰへの候補化合物の競合的結合を試験する。
【００１６】
他の実施形態では、本明細書中に記載の化合物がそのオンコ−クライアントタンパク質カーゴとの複合体中のＨｓｐ７０を分離することを示す。したがって、本明細書中に記載の化合物の固体支持体固定化バージョンは、前例のない内因性細胞環境下での癌Ｈｓｐ７０インタラクトームの調査が可能である。
【００１７】
他の実施形態では、本明細書中に記載の主題の化合物を、ストレプトアビジンまたはアビジンビーズ上に付着させるか、対応して官能化された樹脂（アガロース、セファロース、およびマトリゲル樹脂などであるが、これらに限定されない）に直接連結することができるビオチン含有化合物を形成するように誘導体化することもできる。
【００１８】
さらに別の実施形態では、本明細書中に記載の化合物を、蛍光色素（Ｃｙ３Ｂ、ＦＩＴＣ、およびＢＯＤｉＰＹなどであるが、これらに限定されない）を用いて誘導体化することができる。本明細書中に記載の蛍光偏光アッセイの文脈で使用する場合、この化合物を使用して、本明細書中に記載の本発明の主題の化合物に類似の様式でＨｓｐ７０と相互作用する候補化合物をスクリーニングすることができる。
【００１９】
さらなる実施形態では、本明細書中に記載の固体支持体に固定した化合物を使用して、腫瘍形成的に活性化された経路の腫瘍毎の成分がＨｓｐ７０と複合体化することを同定する。特異的癌細胞への本明細書中に記載の組成物の添加により、これらの複合体の不安定化、オンコプロテインの分解または阻害、および癌細胞成長の阻害および死滅が起こる。腫瘍Ｈｓｐ７０阻害のこれらの下流事象を使用して、本明細書中に記載の本発明の主題の化合物の効果を機能的にモニタリングすることができる。したがって、本明細書中に記載の方法は、記載の本発明の主題の化合物および本明細書中に記載のアロステリックポケットの占有によって作用するか、本明細書中に記載のアッセイによって同定される他の治療に対する応答に関連する機能的な分子バイオマーカーの有効な分析を提供する。これらのバイオマーカーが本明細書中に記載の物質の組成物、本明細書中に記載のポケットを占有する物質の組成物、または本明細書中に記載のアッセイによって同定される物質の組成物の臨床開発で有用であることを提案する。
【００２０】
興味深いことに、そのＨｓｐ９０−機構コシャペロン（Ｈｓｐ７０、またはＨＯＰ、ＨＩＰ、ｐ２３、またはＨｓｐ４０など）ではなく、Ｈｓｐ９０の活性の減少のみにより、ＨＳＦ−１を劇的に活性化し、本発明の主題の化合物を使用して、そのコシャペロンの特異的調節によって分子機構の２つの機能を区別することが可能である。直接Ｈｓｐ９０インヒビターと異なり、本発明の主題の化合物は、例えば、ＨＳＦ−１を活性化することができず、防御的フィードバック熱ショック応答も誘導できない。本発明の主題の１つの実施形態では、化合物は、ＨＳＦ−１の活性化および／または防御的フィードバック熱ショック応答の誘導を行うことなくＨｓｐ９０機構／オンコプロテイン複合体の形成を破壊する。
【００２１】
直接的なＨｓｐ９０阻害と比較した場合、いくつかの実施形態における化合物の薬理学的投与により、例えば、アポトーシスによって癌細胞に対する細胞傷害性が増加するが、この細胞傷害性は依然として選択的である。悪性細胞におけるＨｓｐ７０の薬理学的阻害
の生物学的結果は、本発明の主題の化合物の使用によって特徴づけられている。Ｈｓｐ７０が乳癌細胞におけるＳＴＡＴ１腫瘍抑制因子の脱リン酸化（ＳＴＡＴ１腫瘍抑制因子の新規の不活化機構）を調整することが見出されている。本発明の主題の別の実施形態では、本明細書中に記載の化合物は、乳癌細胞におけるＳＴＡＴ１脱リン酸化のＨｓｐ７０促進を阻害または不活化し、それにより、腫瘍抑制因子ＳＴＡＴ１の活性の持続によって腫瘍抑制を促進する。
【００２２】
ＳＴＡＴ１は、インターフェロン−（ＩＦＮ）γシグナル伝達の主なエフェクターである。ＩＦＮγは、腫瘍発生を防御する不可欠な免疫刺激機能を有するＴ細胞およびナチュラルキラー細胞によって産生されたサイトカインである。さらなる実施形態では、本明細書中に示す物質の組成物がＩＦＮγおよび別のサイトカイン（ＴＮＦα）の影響を増大させ、免疫応答によってさらに一層強力に腫瘍を除去することができることが見出されている。これはワクチン治療試験についての刺激的な所見であり、生物学的に活性なインターフェロンの本明細書中に記載の本発明の主題の化合物（すなわち、記載のポケットを占有する本発明の主題の化合物または本明細書中に記載のアッセイによって同定される本発明の主題の化合物）との同時投与によってワクチン効率を改善することができ、より少ないワクチン接種用量の使用が可能であることを示唆する。
例えば、本発明は、以下の項目を提供する：
（項目１）
式２ａ：
【化５８】
2018188476.tif 000002
の化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩であって、式中、
Ｘ５〜Ｘ９は、ＣＨ、置換Ｃ、および置換Ｎから独立して選択され、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン
、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ１およびＷ２が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択される、化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩。
（項目２）
式２ａ’：
【化５９】
2018188476.tif 000003
の化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩であって、式中、
各ＸおよびＹは、任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはアルキニル；任意選択的に置換された炭素環基、複素環基、アリール基、またはヘテロアリール基；ハロ；任意選択的に置換されたＣ２〜２２アシル基；−ＮＲ４Ｒ５基；−Ｃ（Ｏ）Ｒ６基；−（エトキシ）ｎ−Ｒ６基（式中、ｎは１〜１２である）；任意選択的に置換されたアルコキシカルボニル基；任意選択的に置換されたアルキルオキシ基；任意選択的に置換されたアミノ基；ニトロ基；およびカルボキシル基からなる群から独立して選択され、
Ｒ４およびＲ５は、Ｈ；任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはアルキニル；および−Ｃ（Ｏ）Ｒ６からなる群からそれぞれ独立して選択され、
各Ｒ６は、任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはアルキニル；任意選択的に置換された炭素環基、複素環基、アリール基、またはヘテロアリール基；任意選択的に置換されたアルキルオキシ基；およびアルキルアクリラート基（エチルアクリラートなど）からなる群から独立して選択される、化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩。
（項目３）
式２ａ’’：
【化６０】
2018188476.tif 000004
の化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩であって、式中、
各Ｒ１は、Ｈ；任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはアルキニル；任意選択的に置換された炭素環基、複素環基、アリール基、またはヘテロアリール基；ハロ；任意選択的に置換されたＣ２〜２２アシル基；−Ｃ（Ｏ）Ｒ６基；および−（エトキシ）ｎ−Ｒ６基（式中、ｎは１〜１２である）からなる群から独立して選択され、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、Ｈ；任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはアルキニル；任意選択的に置換された炭素環基、複素環基、アリール基、またはヘテロアリール基；任意選択的に置換されたＣ２〜２２アシル基；−Ｃ（Ｏ）Ｒ６基；および任意選択的に置換されたアルコキシカルボニル基からなる群からそれぞれ独立して選択され、
Ｘは、任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはアルキニル；任意選択的に置換された炭素環基、複素環基（例えば、４−アルキルピペラジン）、アリール基、またはヘテロアリール基；ハロ；任意選択的に置換されたＣ２〜２２アシル基；−ＮＲ４Ｒ５基；−Ｃ（Ｏ）Ｒ６基；−（エトキシ）ｎ−Ｒ６基（式中、ｎは１〜１２である）；任意選択的に置換されたアルコキシカルボニル基；任意選択的に置換されたアルキルオキシ基；任意選択的に置換されたアミノ基；ニトロ基；およびカルボキシル基からなる群から選択され、
各Ｒ６は、任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはアルキニル；任意選択的に置換された炭素環基、複素環基、アリール基、またはヘテロアリール基；任意選択的に置換されたアルキルオキシ基；およびアルキルアクリラート基（エチルアクリラートなど）からなる群から独立して選択され、
但し、Ｘは架橋した環構造を含まないものとする、化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩。
（項目４）
各Ｒ１は、Ｈ；および任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはアルキニルからなる群から独立して選択され、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、Ｈ；任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ６アルキル；および−Ｃ（Ｏ）Ｒ６（式中、Ｒ６は任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ６アルキル、アルケニル、またはアルキニルである）からなる群からそれぞれ独立して選択され、
Ｘは、任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基；任意選択的に置換された炭素環基、複素環基、アリール基、またはヘテロアリール基；およびハロからなる群から選択される、項目３に記載の化合物。
（項目５）
各Ｒ１は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ６アルキルおよび置換された直鎖または分枝鎖の
Ｃ１〜Ｃ６アルキルからなる群から独立して選択される、項目４に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目６）
各Ｒ１はメチルおよびエチルから独立して選択され、
ＮＲ２Ｒ３はＮＨ２であり、
ＮＲ４Ｒ５はＮＨＣ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはＮＨＣ（Ｏ）−Ｃ２〜Ｃ６アルケニルであり、
Ｘは窒素原子で連結したピペラジン環であり、上記ピペラジン環は、ハロ、ハロアルキル、または直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ６アルキルで任意選択的に置換される、
項目４に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目７）
各Ｒ１は同一または異なり、且つメチルまたはエチルであり、
Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４はそれぞれＨであり、
Ｒ５は−Ｃ（Ｏ）−メチル、−Ｃ（Ｏ）−エチル、または−Ｃ（Ｏ）−エテニルであり、
Ｘは、ピペラジン、４−メチルピペラジン−１−イル、または４−（２−（２−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）ピペラジン−１−イルである、項目３に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目８）
式３ａ：
【化６１】
2018188476.tif 000005
の化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩であって、式中、
Ｘ５〜Ｘ９は、ＣＨ、置換Ｃ、および置換Ｎから独立して選択され、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ
、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる、化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩。
（項目９）
式４ａ：
【化６２】
2018188476.tif 000006
の化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩であって、式中、
Ｘ５〜Ｘ９は、ＣＨ、置換Ｃ、および置換Ｎから独立して選択され、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル
、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる、化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩。
（項目１０）
式５ａ：
【化６３】
2018188476.tif 000007
の化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩であって、式中、
Ｘ５〜Ｘ９は、ＣＨ、置換Ｃ、および置換Ｎから独立して選択され、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ
、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ１およびＷ２が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる、化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩。
（項目１１）
式６ａ：
【化６４】
2018188476.tif 000008
の化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩であって、式中、
Ｘ５〜Ｘ９は、ＣＨ、置換Ｃ、および置換Ｎから独立して選択され、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ
、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ１およびＷ２が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる、化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩。
（項目１２）
式７ａ：
【化６５】
2018188476.tif 000009
の化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩であって、式中、
Ｘ５〜Ｘ９は、ＣＨ、置換Ｃ、および置換Ｎから独立して選択され、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ
、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ１およびＷ２が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる、化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩。
（項目１３）
式２ｂ：
【化６６】
2018188476.tif 000010
の化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩であって、式中、
Ｘ１０およびＸ１１は、芳香族性が維持されるようにＣＨ、ＣＨ２、ＮＨ、ＮＲ’、Ｏ、およびＳから独立して選択され、Ｒ’はアルキル鎖または置換アルキル鎖であり、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル
、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる、化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩。
（項目１４）
式３ｂ：
【化６７】
2018188476.tif 000011
の化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩であって、式中、
Ｘ１０およびＸ１１は、芳香族性が維持されるようにＣＨ、ＣＨ２、ＮＨ、ＮＲ’、Ｏ、およびＳから独立して選択され、Ｒ’はアルキル鎖または置換アルキル鎖であり、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル
、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる、化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩。
（項目１５）
式４ｂ：
【化６８】
2018188476.tif 000012
の化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩であって、式中、
Ｘ１０およびＸ１１は、芳香族性が維持されるようにＣＨ、ＣＨ２、ＮＨ、ＮＲ’、Ｏ、およびＳから独立して選択され、Ｒ’はアルキル鎖または置換アルキル鎖であり、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル
、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる、化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩。
（項目１６）
式５ｂ：
【化６９】
2018188476.tif 000013
の化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩であって、式中、
Ｘ１０およびＸ１１は、芳香族性が維持されるようにＣＨ、ＣＨ２、ＮＨ、ＮＲ’、Ｏ、およびＳから独立して選択され、Ｒ’はアルキル鎖または置換アルキル鎖であり、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ１およびＷ２が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる、化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩。
（項目１７）
式６ｂ：
【化７０】
2018188476.tif 000014
の化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩であって、式中、
Ｘ１０およびＸ１１は、芳香族性が維持されるようにＣＨ、ＣＨ２、ＮＨ、ＮＲ’、Ｏ、およびＳから独立して選択され、Ｒ’はアルキル鎖または置換アルキル鎖であり、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル
、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ１およびＷ２が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる、化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩。
（項目１８）
式７ｂ：
【化７１】
2018188476.tif 000015
の化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩であって、式中、
Ｘ１０およびＸ１１は、芳香族性が維持されるようにＣＨ、ＣＨ２、ＮＨ、ＮＲ’、Ｏ、およびＳから独立して選択され、Ｒ’はアルキル鎖または置換アルキル鎖であり、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリ
ハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ１およびＷ２が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択されるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる、化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩。
（項目１９）
本明細書中に開示の表１、２、３、４、５、６、７、８．９、１０、１１、および１２の化合物からなる群から選択される、項目１〜２０のいずれか１項に記載の化合物、またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩。
（項目２０）
Ｎ−（６−アミノ−２−（４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−イル）アクリルアミド、
Ｎ−（６−アミノ−２−（４，６−ジエトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−イル）アクリルアミド、
Ｎ−（２−（４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−イル）アクリルアミド、
Ｎ−（３−（４−（ベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド、
Ｎ−（３−（４−（ベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）ベンズアミド、
２−アミノ−Ｎ−（３−（４−（ベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド、
２−アミノ−Ｎ−（３−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−４−（ピリジン−３−イルメトキシ）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド、
２−アミノ−Ｎ−（３−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−４−（ピリジン−４−イルメトキシ）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド、
２−アミノ−Ｎ−（３−（４−（４−クロロベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド、
２−アミノ−Ｎ−（３−（４−（３−アミノベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド、
２−アミノ−Ｎ−（３−（４−（２−アミノベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド、
２−アミノ−Ｎ−（３−（４−（ジフルオロ（フェニル）メトキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド、
２−アミノ−Ｎ−（３−（４−（３，５−ジフルオロベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド、
Ｎ−（３−（４−（ベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アクリルアミド、
Ｎ−（２−（４−（ベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−イル）アクリルアミド、および
Ｎ−（６−アミノ−２−（４−（ベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−イル）アクリルアミド
からなる群から選択される項目１に記載の化合物。
（項目２１）
上記化合物が標識を含むようにさらに誘導体化されている、項目１〜２０のいずれか１項に記載の化合物。
（項目２２）
上記標識が蛍光色素である、項目２１に記載の化合物。
（項目２３）
項目１〜２０のいずれか１項に記載の化合物および薬学的に許容可能な賦形剤を含む薬学的組成物。
（項目２４）
動物における癌または増殖性障害の処置方法であって、
治療有効量の項目１〜２０に記載の化合物を、それを必要とする動物に投与する工程を含み、但し、上記化合物のＩＣ５０値が、ＡＭＬ  Ｋａｓｕｍｉ−１細胞の成長阻害についての試験、乳癌ＳＫＢｒ３細胞の成長阻害についての試験、またはこれらの両方において１００μＭ未満であるものとする、方法。
（項目２５）
動物における腫瘍または増殖性障害の処置方法であって、
治療有効量のＨｓｐ７０インヒビターを、それを必要とする動物に投与する工程を含み、
その結果、上記Ｈｓｐ７０インヒビターがＨｓｐ７０およびＨｓｃ７０のヌクレオチド結合部位の外側に存在するアロステリック結合ドメインに結合し、
Ｈｓｐ７０およびＨｓｃ７０の両方を阻害し、それにより、
正常な細胞、支質、または血管のアポトーシスを誘導せずに腫瘍細胞または増殖性障害に関連する細胞のアポトーシスを誘導する、方法。
（項目２６）
上記Ｈｓｐ７０インヒビターが項目１〜２０から選択される化合物である、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
上記アロステリック結合ドメインが配列番号１上に存在し、上記ドメインが、Ｔｈｒ１３、Ｔｈｒ１４、Ｔｙｒ１５、Ｌｙｓ５６、Ｌｙｓ２７１、Ａｒｇ２６９、Ｇｌｕ２６８、Ａｒｇ２６４、Ｔｈｒ２６５、Ｃｙｓ２６７、Ｌｅｕ２３７、Ｖａｌ２３８、Ｖａｌ２６０、Ａｒｇ２６１、Ｖａｌ５９、Ｐｒｏ６３、Ｔｈｒ６６、Ａｓｎ２３５、Ａｓｐ２３４、Ｇｌｕ２３１、Ａｓｐ６９、Ｐｈｅ６８、Ｔｙｒ４１、Ｌｙｓ８８、Ｈｉｓ８９、Ｔｒｐ９０、Ｐｒｏ９１、Ｐｈｅ９２、およびその組み合わせからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸残基によって規定される、項目２５に記載の方法。
（項目２８）
動物における腫瘍または増殖性障害の処置方法であって、
治療有効量の項目１〜２０に記載の化合物を、それを必要とする動物に投与する工程を
含み、
その結果、上記化合物が、Ｔｈｒ１３、Ｔｈｒ１４、Ｔｙｒ１５、Ｌｙｓ５６、Ｌｙｓ２７１、Ａｒｇ２６９、Ｇｌｕ２６８、Ａｒｇ２６４、Ｔｈｒ２６５、Ｃｙｓ２６７、Ｌｅｕ２３７、Ｖａｌ２３８、Ｖａｌ２６０、Ａｒｇ２６１、Ｖａｌ５９、Ｐｒｏ６３、Ｔｈｒ６６、Ａｓｎ２３５、Ａｓｐ２３４、Ｇｌｕ２３１、Ａｓｐ６９、Ｐｈｅ６８、Ｔｙｒ４１、Ｌｙｓ８８、Ｈｉｓ８９、Ｔｒｐ９０、Ｐｒｏ９１、Ｐｈｅ９２、およびその組み合わせからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸残基によって規定される配列番号１上に存在するリガンド結合ドメインに結合する、方法。
（項目２９）
Ｈｓｐ７０の活性を阻害する方法であって、上記Ｈｓｐ７０が、Ｔｈｒ１３、Ｔｈｒ１４、Ｔｙｒ１５、Ｌｙｓ５６、Ｌｙｓ２７１、Ａｒｇ２６９、Ｇｌｕ２６８、Ａｒｇ２６４、Ｔｈｒ２６５、Ｃｙｓ２６７、Ｌｅｕ２３７、Ｖａｌ２３８、Ｖａｌ２６０、Ａｒｇ２６１、Ｖａｌ５９、Ｐｒｏ６３、Ｔｈｒ６６、Ａｓｎ２３５、Ａｓｐ２３４、Ｇｌｕ２３１、Ａｓｐ６９、Ｐｈｅ６８、Ｔｙｒ４１、Ｌｙｓ８８、Ｈｉｓ８９、Ｔｒｐ９０、Ｐｒｏ９１、Ｐｈｅ９２、およびその組み合わせからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸残基によって規定されるリガンド結合ドメインを配列番号１のタンパク質またはその改変体上に含み、上記方法は、
上記リガンド結合ドメインをリガンドと接触させてＨｓｐ７０の活性を阻害する工程を含む、方法。
（項目３０）
上記リガンドが項目１〜２０に記載の化合物である、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
Ｈｓｐ７０の活性を調整する方法であって、上記Ｈｓｐ７０が、ＡＴＰ／ＡＤＰ結合ドメインの外側の裂溝領域中に存在し、且つ小領域ＩｂおよびＩＩｂに隣接する部位１を有する結合ポケットを含み、上記方法は、上記結合ポケットの部位１を上記結合ポケットに結合するリガンドと接触させてＨｓｐ７０の活性を調整する工程を含む、方法。
（項目３２）
部位１が、Ｔｈｒ１３、Ｔｈｒ１４、Ｔｙｒ１５、Ｌｙｓ５６、Ｌｙｓ２７１、Ａｒｇ２６９、Ｇｌｕ２６８、Ａｒｇ２６４、およびＴｈｒ２６５の極性アミノ酸を含む第１の大型の親水性サブポケット、このサブポケット中に包埋したシステイン残基（Ｃｙｓ２６７）を有し、かつこのサブポケットに近接して、Ｌｅｕ２３７、Ｖａｌ２３８、Ｖａｌ２６０、Ａｒｇ２６１、Ｖａｌ５９、Ｐｒｏ６３、Ｔｈｒ６６、Ａｓｎ２３５、Ａｓｐ２３４、Ｇｌｕ２３１、Ａｓｐ６９、Ｐｈｅ６８、およびＴｙｒ４１などの非極性および極性の両方のアミノ酸残基を含む２番目に大きなサブポケットがＨｓｐ７０上に存在し、部位１はＬｙｓ８８、Ｈｉｓ８９、Ｔｒｐ９０、Ｐｒｏ９１、およびＰｈｅ９２などのアミノ酸からなる別のサブポケットも含む、項目３１に記載のＨｓｐ７０の活性を調整する方法。（項目３３）
腫瘍または増殖性障害に関連する細胞中のＨｓｐ７０関連タンパク質を同定する方法であって、
項目１〜２０のいずれか１項に記載の化合物を固体支持体に間接的または直接的に連結させる工程、
生物学的なサンプルを上記固体支持体に連結した上記化合物と接触させて、上記化合物を上記サンプル中に存在する任意のＨｓｐ７０複合体に結合させる工程、および
上記化合物に結合したＨｓｐ関連タンパク質を同定する工程
を含み、
その結果、上記腫瘍または増殖性障害に関連する上記細胞中の上記Ｈｓｐ関連タンパク質を同定する、方法。
（項目３４）
腫瘍または増殖性障害について処置されている患者の処置状況をモニタリングするための方法であって、
処置期間前または処置期間中の時において上記患者から第１の生物学的なサンプルを得てＨｓｐ関連タンパク質のレベルおよび活性を測定する工程、
処置期間以後の時において上記患者から第２の生物学的なサンプルを得て同じＨｓｐ関連タンパク質のレベルおよび活性を測定する工程、
上記第１の生物学的なサンプル中の上記Ｈｓｐ関連タンパク質のレベルおよび活性を上記第２の生物学的なサンプル中の上記Ｈｓｐ関連タンパク質のレベルおよび活性と比較する工程であって、上記Ｈｓｐ関連タンパク質のレベルおよび／または活性の減少が、治療が有益な効果を有することを示す、工程
を含む、方法。
（項目３５）
項目１に記載のＨｓｐ７０またはその改変体の結合部位１の三次元構造を生成するためのコンピュータ支援システムであって、上記システムは、（ａ）コンピュータ可読データをエンコードしたデータ記憶材料を含むコンピュータ可読データ記憶媒体であって、上記データがペプチド配列配列番号１および図２１中のボックス中に示した配列の少なくとも一部を含む、コンピュータ可読データ記憶媒体、（ｂ）上記コンピュータ可読データを処理するための命令が格納されたワーキングメモリ；（ｃ）上記コンピュータ可読データを上記三次元構造に処理するための上記コンピュータ可読データ記憶媒体および上記ワーキングメモリに接続された中央処理装置；および（ｄ）上記三次元構造を表示するための上記中央処理装置に接続されたディスプレイを含む、コンピュータ支援システム。
（項目３６）
Ｈｓｐ７０またはＨｓｃ７０の活性を調整するモジュレーターをスクリーニングするための項目３５に記載のコンピュータ支援システムによって生成されるＨｓｐ７０またはその改変体の結合部位１の三次元構造であって、上記結合部位が、Ｔｈｒ１３、Ｔｈｒ１４、Ｔｙｒ１５、Ｌｙｓ５６、Ｌｙｓ２７１、Ａｒｇ２６９、Ｇｌｕ２６８、Ａｒｇ２６４、Ｔｈｒ２６５、Ｃｙｓ２６７、Ｌｅｕ２３７、Ｖａｌ２３８、Ｖａｌ２６０、Ａｒｇ２６１、Ｖａｌ５９、Ｐｒｏ６３、Ｔｈｒ６６、Ａｓｎ２３５、Ａｓｐ２３４、Ｇｌｕ２３１、Ａｓｐ６９、Ｐｈｅ６８、Ｔｙｒ４１、Ｌｙｓ８８、Ｈｉｓ８９、Ｔｒｐ９０、Ｐｒｏ９１、Ｐｈｅ９２、およびその組み合わせからなる群から選択されるアミノ酸残基によって規定されるリガンド結合ドメインを含む、三次元構造。
（項目３７）
上記結合部位が、Ｔｈｒ１３、Ｔｈｒ１４、Ｔｙｒ１５、Ｌｙｓ５６、Ｌｙｓ２７１、Ａｒｇ２６９、Ｇｌｕ２６８、Ａｒｇ２６４、Ｔｈｒ２６５、Ｃｙｓ２６７、Ｌｅｕ２３７、Ｖａｌ２３８、Ｖａｌ２６０、Ａｒｇ２６１、Ｖａｌ５９、Ｐｒｏ６３、Ｔｈｒ６６、Ａｓｎ２３５、Ａｓｐ２３４、Ｇｌｕ２３１、Ａｓｐ６９、Ｐｈｅ６８、Ｔｙｒ４１、Ｌｙｓ８８、Ｈｉｓ８９、Ｔｒｐ９０、Ｐｒｏ９１、Ｐｈｅ９２、およびその組み合わせからなる群から選択されるアミノ酸残基によって規定されるリガンド結合ドメインを含む、項目３６に記載のＨｓｐ７０またはその改変体の結合部位１の三次元構造。
（項目３８）
Ｈｓｐ７０またはその改変体の結合部位１での調整活性についてモジュレーターをスクリーニングする方法であって、上記方法が、配列番号１および図２１中のボックス中に示した配列の少なくとも一部を使用してＨｓｐ７０または改変体のモジュレーターを同定する工程、上記モジュレーターをＨｓｐ７０または改変体と接触させる工程、および上記モジュレーターの上記調整活性を決定する工程を含む、方法。
（項目３９）
上記Ｈｓｐ７０の結合部位１が、Ｔｈｒ１３、Ｔｈｒ１４、Ｔｙｒ１５、Ｌｙｓ５６、Ｌｙｓ２７１、Ａｒｇ２６９、Ｇｌｕ２６８、Ａｒｇ２６４、Ｔｈｒ２６５、Ｃｙｓ２６７、Ｌｅｕ２３７、Ｖａｌ２３８、Ｖａｌ２６０、Ａｒｇ２６１、Ｖａｌ５９、Ｐｒｏ６３、Ｔｈｒ６６、Ａｓｎ２３５、Ａｓｐ２３４、Ｇｌｕ２３１、Ａｓｐ６９、Ｐｈｅ６８、Ｔｙｒ４１、Ｌｙｓ８８、Ｈｉｓ８９、Ｔｒｐ９０、Ｐｒｏ９１、Ｐｈｅ９２、およびその組み合わせからなる群から選択されるアミノ酸残基によって規定されるリガンド結合ド
メインを含む、項目３８に記載のモジュレーターのスクリーニング方法。
（項目４０）
上記モジュレーターが、乳癌、前立腺癌、膵臓癌、肝細胞癌、肺癌、リンパ腫、および白血病からなる群から選択されるＨｓｐ７０関連細胞成長疾患または増殖性障害の予防および／または処置に関連する、項目３８に記載のモジュレーターのスクリーニング方法。
（項目４１）
上記モジュレーターを、
ＨＥＲ２＋ＳＫＢｒ３乳癌細胞におけるＨＥＲ２またはＲａｆ−１の分解、
ＭＯＬＭ−１３  ＡＭＬ細胞におけるＦＬＴ３またはｐ−ＳＴＡＴ５の不活化、
ＭＤＡ−ＭＢ−４６８トリプルネガティブ乳癌細胞におけるｐ−ＳＴＡＴ３またはｐ−ＰＤＫ１の不活化、
ＬＮＣａＰ前立腺癌細胞における変異体ＡＲの分解、
１つ以上の癌細胞群におけるＰＡＲＰ切断、
ＭＯＬＭ−１３細胞におけるカスパーゼ３，７活性化、
乳癌細胞におけるインターフェロンおよびＴＮＦのアポトーシス効果の増大、
１つ以上の癌細胞群におけるＨｓｐ７０誘導の欠如、
およびその任意の組み合わせ
からなる群から選択される癌表現型を測定する１つ以上の成長阻害アッセイを使用して癌細胞の成長阻害についてさらに試験する、項目３８〜４０のいずれか１項に記載の方法。（項目４２）
競合蛍光偏光アッセイを実施して上記モジュレーターへのＨｓｐ９０またはＨｓｐ７０結合について試験する工程、および結合部位１での上記モジュレーターの構造的適合をコンピュータ的に評価する工程をさらに含む、項目４１に記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】図１。Ｈｓｐ９０機構シャペロニングサイクルの種々の態様。ａ）Ｈｓｐ９０シャペロニングサイクルは、クライアントタンパク質がＨｓｐ７０、Ｈｓｐ４０、ＨＩＰ、およびＨＯＰを含む中間複合体中のＨｓｐ９０に送られる動的過程である。ＡＴＰの結合および加水分解の際、Ｈｓｐ９０はｐ２３、ｐ５０／ｃｄｃ３７、およびイムノフィリン（ＩＰ）を含む成熟複合体を形成し、Ｈｓｐ９０クライアントタンパク質の高次構造的成熟を触媒する。Ｈｓｐ９０−阻害薬（ゲルダナマイシン（ＧＭ）およびプリン足場誘導体（ＰＵ−Ｈ７１およびＰＵ２４ＦＣｌ）など）は、Ｈｓｐ９０のＮ末端ＡＴＰ結合ポケットに結合し、ＡＴＰの結合および加水分解を阻害し、それにより、中間複合体中のＨｓｐ９０をロックする。クライアントタンパク質は、その後にユビキチン化され（おそらく、Ｅ３ユビキチンリガーゼ（ＣＨＩＰなど）による）、分解のためにプロテアソームにターゲティングされる。これは、この過程の１つの現在の理解に基づいた略図である。ｂ）代表的なＨｓｐ９０インヒビターの構造。
【図２】図２。ＹＫ−クラスＨｓｐ７０相互作用因子のデザインおよびＹＫ５−Ｈｓｐ７０複合体の計算モデル。ａ）Ｈｓｐ７０の推定結合部位を、Ｍａｅｓｔｒｏ８．５のＳｉｔｅＭａｐ  ｖ２．２プログラム（Ｓｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒ  Ｌ．Ｌ．Ｃ．、ＮＹ）によって予想した。ＳｉｔｅＭａｐを、ＳｉｔｅスコアおよびＤｒｕｇｇａｂｉｌｉｔｙスコアにしたがって順位をつけた５つまでの有望な部位に戻るように設定した。この研究では、ＳｉｔｅＭａｐの全ての他のパラメーターをデフォルト値に設定した。示した構造は、ヒトＨｓｐ７０のＮ末端ドメイン（ＰＤＢ  ＩＤ：１Ｓ３Ｘ）、大腸菌ＤｎａＫ（ＰＤＢ  ＩＤ：２ｋｈｏ）、およびヒトＨｓｐ７０タンパク質配列を使用して構築した相同性モデルである。２，５’−チオジピリミジン足場（右）に基づいたいくつかの化合物を、Ｈｓｐ７０と相互作用するように合理的にデザインした。２，５’−チオジピリミジン足場を、簡単に認識できるように太字の結合で示す。ｂ）システイン修飾小分子タンパク質相互作用因子の構造。簡単に認識できるようにアクリルアミド官能性を取り囲んでいる。ｃ）Ｍａｅｓｔｒｏ８．５およびＧｌｉｄｅ４．０（Ｓｃｈｒｏｅｄｉｎｇｅｒ）を使用した分子モデリングによって明らかとなったＹＫ５のヒトＨｓｐ７０の相同性モデルとの提案された相互作用。
【図３】図３。ＹＫ５発見のための試験ストラテジー。ａ、ｂ）ＳＫＢｒ３細胞を表示濃度のインヒビターで２４時間処置し、ウェスタンブロット（ＷＢ）分析のために細胞を溶解した。ローディングコントロールとしてβアクチンを使用した。データは、複数の反復実験（ｎ≧３）から得たデータと一致する。ｃ）表示のインヒビターがＧＭ−Ｃｙ３ＢとＳＫＢｒ３細胞抽出物中でＨｓｐ９０結合を競合する能力を、蛍光偏光によって試験した。インヒビターを添加したウェル中で記録した値をコントロールウェル中で読み取った値に対して正規化し、試験したインヒビターの濃度に対してプロットした。薬物を三連でアッセイした。全化合物を、ＤＭＳＯストックとして使用した。点、平均；バー、標準偏差。ｄ）成長阻害：ＳＫＢｒ３細胞を漸増濃度の化合物と三連でインキュベートし、７２時間にわたって成長を評価した。０％未満のＹ軸の値は、出発集団の細胞死を示す。ＨＥＲ２分解をパネルａ）にあるように分析し、ゲルをデンシトメトリーによって定量した。記録した値をコントロール（ビヒクルのみで処置した細胞）に対して正規化し、データをＹＫ５濃度に対してグラフ化した。エラーバーは、平均の標準偏差（ｎ＝３）を示す。
【図４】図４。ＹＫ５は、Ｈｓｐ７０およびＨｓｃ７０と選択的に相互作用する。ａ）ビオチン化ＹＫ５の構造。ｂ）Ｋ５６２細胞を表示濃度のＹＫ５５で６時間処置し、その後に溶解およびストレプトアビジンビーズ（５０μｌ）上での４℃で１時間のタンパク質複合体の沈殿を行った。ビーズを高塩（１Ｍ  ＮａＣｌ）緩衝液で洗浄し、２％ＳＤＳ中でのボイルによってタンパク質を溶離し、変性ゲル上で分離し、銀染色した。ＢＢ７０抗体プルダウンを使用して、Ｈｓｐ７０の位置を示した（ＢＢ７０  ＩＰ；２μｌ）。この抗体は、いくつかのＨｓｐ７０イソ型（Ｈｓｐ７０、Ｈｓｃ７０、Ｇｒｐ７５、およびＧｒｐ７８など）を認識する。ＨＣ＝重鎖。ｃ）ＳＫＢｒ３細胞を表示濃度のＹＫ５で２４時間処置し、細胞を溶解した。タンパク質複合体を、細胞抽出物（５００μｇ）のＹＫ５５−ビーズ（５０μｌ）とのインキュベーションによる化学沈殿によって単離し、２％ＳＤＳで溶離し、変性ゲル上で分離し、示すように視覚化した。ＹＫ５５ビーズを、ＹＫ５５（５０μＭ）のストレプトアビジンビーズ（５０μｌ）とのインキュベーションによって作製した。ｄ）ＳＫＢｒ３細胞抽出物（５００μｇ）由来のタンパク質複合体を、ＹＫ５５−ビーズまたは不活性分子（Ｄ−ビオチン）での化学沈殿によって単離した。ビーズを、表示濃度のＹＫ５５またはＤ−ビオチンのストレプトアビジンビーズ（５０μｌ）とのインキュベーションによって作製した。次いで、タンパク質を変性ゲル上で分離し、ウェスタンブロットによって分析した。ｅ）ＹＫ５５−ビーズ（５０μｌストレプトアビジンビーズに添加した１００μＭ  ＹＫ５５）またはＨｓｐ７０抗体（３０μｌプロテインＧビーズに添加した５μｌ抗体）を用いてＳＫＢｒ３抽出物（５００μｇ）から沈殿したＨｓｐ７０複合体をＷＢによって分析した。ＨＣ＝重鎖（左）。タンパク質複合体のＹＫ５５ビーズへの結合を、Ｈｓｐ／ｃ７０レベルがそれぞれＢＢ７０抗体またはＩｇＧ免疫沈降によって減少したＳＫＢｒ３細胞抽出物中で探索した。タンパク質をＷＢによって分析した（右）。ｆ）ＳＫＢｒ３抽出物を、表示濃度のＹＫ５と４℃で３時間インキュベートし、その後にＹＫ５５−ビーズ（５０μｌストレプトアビジンビーズに添加した１００μＭ  ＹＫ５５）上でＨｓｐ７０複合体を沈殿させた。タンパク質をＷＢによって分析した。データは、複数の反復実験（ｎ≧３）から得たデータと一致する。
【図５】図５。ＹＫ５は、Ｈｓｐ７０への結合の際にＣｙｓ２６７と共有結合を形成する。ａ）Ｋ５６２細胞をＹＫ５５（２５μＭ）で表示の時間処置し、その後に溶解およびストレプトアビジンビーズ（５０μｌ）上での４℃で１時間のタンパク質複合体の沈殿を行った。ビーズを高塩（１Ｍ  ＮａＣｌ）緩衝液で洗浄し、２％ＳＤＳ中でのボイルによってタンパク質を溶離し、変性ゲル上で分離し、銀染色した。ＢＢ７０抗体プルダウンを使用して、Ｈｓｐ７０の位置を示した（ＢＢ７０  ＩＰ；２μｌ）。この抗体は、Ｈｓｐ７０、Ｈｓｃ７０、Ｇｒｐ７５、およびＧｒｐ７８を認識する。ＨＣ＝重鎖。ｂ）実験の設定は、パネルａ）に類似しているが、タンパク質をＷＢによって分析した。ｃ）Ｋ５６２細胞をＹＫ５５またはＤ−ビオチン（５０μＭ）で６時間処置し、溶解させた。抽出物（５００μｇ）を、ストレプトアビジン（ＳＴ）−ビーズと４℃で１時間インキュベートし、プルダウンを高塩緩衝液（１Ｍ  ＮａＣｌ）で洗浄した。方法に記載のように、タンパク質を緩衝液ＡまたはＢ中でのボイルによって溶離した。変性ゲル上での分離後、タンパク質をＷＢによって可視化した。データは、複数の反復実験（ｎ≧２）から得たデータと一致する。ｄ）癌細胞におけるＨｓｐ７０へのＹＫ５５結合のＭＡＬＤＩ−ｒｅＴＯＦ−ＭＳ／ＭＳ分析。Ｋ５６２細胞を１００μＭ  ＹＫ５５で４時間処置し、溶解させた。ＹＫ５５処置した細胞抽出物（５００μｇ）を、ストレプトアビジンアガロースビーズと４℃で１時間インキュベートした。ビーズを高塩緩衝液（１Ｍ  ＮａＣｌ）で洗浄し、２％ＳＤＳ中でのボイルによってタンパク質を溶離し、変性ゲル上で分離し、クーマシー染色を行った。方法に示すように、ゲル分離したタンパク質をトリプシンで消化し、ペプチドを同定した。
【図６】図６。ＹＫ５は、Ｈｓｐ７０の中心的な生化学的機能を阻害し、Ｈｓｐ９０／Ｈｓｐ７０相互作用を破壊する。ａ）Ｈｓｃ７０およびＤＪＡ２による３０℃での変性ルシフェラーゼの再折り畳みを、ＹＫ５（１００μＭ）またはビヒクルの存在下で表示の時間（左）または表示濃度のＹＫ５の存在下で６０分間（右）測定した。ｂ）Ｈｓｃ７０  ＡＴＰアーゼの速度を、ビヒクル（ＤＭＳＯ）またはＹＫ５（１００μＭ）の存在下でのＨｓｃ７０とコシャペロンとの表示の組み合わせとの３０℃での反応について測定した。ＡＤＰ産生を、ＡＴＰ由来の放射性標識したＡＤＰの薄層クロマトグラフィ分離およびリン光体画像分析によってモニタリングした（下）。データは、複数の反復実験（ｎ≧２）から得たデータと一致する。ｃ，ｄ）ＳＫＢｒ３細胞をビヒクルまたは表示濃度のＹＫ５（ｃ）で２４時間処置するか、ＹＫ５（１０μＭ）と表示の時間処置した。（ｄ）抗Ｈｓｐ９０抗体および抗Ｈｓｐ７０抗体（ＩＰ：Ｈｓｐ９０またはＨｓｐ７０）を使用して単離したタンパク質または細胞抽出物（溶解物）中に存在するタンパク質を、ＷＢによって分析した。結合特異性を、コントロールＩｇＧを使用して試験した。ＨＣ＝重鎖；ＤＪＡ１およびＨｄｊ１＝Ｈｓｐ４０イソ型。ｅ）Ｈｓｐ９０インヒビターと異なり、ＹＫ５はＨＳＦ−１を活性化できない。ＳＫＢｒ３細胞に４２℃で４５分間熱ショックを与えるか、ビヒクル、ＹＫ５、またはＰＵ２４ＦＣｌ（５μＭ）と３時間インキュベートした。タンパク質を未変性ゲルにアプライし、免疫ブロッティングによって分析した。データは、複数の反復実験（ｎ≧３）から得たデータと一致する。ｆ）ＹＫ５を、ｓｃａｎＭＡＸスクリーニング（Ａｍｂｉｔ）において３５９種のキナーゼに対して試験した。ＹＫ５についてのＴＲＥＥｓｐｏｔ（商標）相互作用マップを示す。ｃ−Ｍｅｔ（キナーゼツリー上の赤色の点）のみがＹＫ５の潜在的な低親和性キナーゼに当たる。
【図７】図７。ＹＫ５は、Ｈｓｐ９０／Ｈｓｐ７０／オンコ−クライアントタンパク質複合体を破壊し、それによってオンコプロテインを不安定化し、その後にプロテアソームによる分解される。ａ）ＳＫＢｒ３細胞を、ＹＫ５（１０μＭ）で表示の時間処置した。抗Ｈｓｐ９０抗体（ＩＰ：Ｈｓｐ９０）を使用して単離したか細胞抽出物（Ｌｙｓａｔｅ）中に存在するタンパク質を、ＷＢによって分析した。結合特異性を、コントロールＩｇＧを使用して試験した。ＨＣ＝重鎖。ｂ）ＳＫＢｒ３細胞を、ビヒクル（ＤＭＳＯ）またはＹＫ５（１０μＭ）の存在下でタンパク質生合成インヒビターであるシクロヘキシミド（１００μｇ／ｍｌ）を使用して表示の時間処置した。ＷＢ分析後、タンパク質発現を、デンシトメトリーによって定量し、処置時間に対してグラフ化した。点、平均；バー、標準偏差。ｃ）方法に記載のように、ＳＫＢｒ３細胞を、表示のタンパク質分解機構インヒビターで予め処理し、その後にＹＫ５（１０μＭ）を添加した。処置２４時間後、界面活性剤可溶性画分および不溶性画分中のタンパク質発現を、ウェスタンブロッティングによって決定した。タンパク質プロセシングに及ぼすインヒビターのみの影響を、右側のパネル中に示す。
【図８】図８。ＹＫシリーズにおける構造活性の相関関係。ａ）ＳＫＢｒ３乳癌細胞を表示濃度のＹＫ誘導体で２４時間処置し、タンパク質をウェスタンブロットによって分析した。ｂ）方法に示すように、Ｋａｓｕｍｉ−１細胞を漸増濃度のＹＫ誘導体とインキュベートし、細胞成長の阻害を、アラマーブルーアッセイを使用して分析した。点、平均；バー、標準偏差。０％未満のＹ軸の値は、出発集団の細胞死を示す。ｃ）ストレプトアビジンビーズ（５０μｌ）を表示濃度のＹＫ５５、ＹＫ５６、またはＤ−ビオチンとインキュベートし、ビーズ上の対応する化合物を固定した。ビーズ（５０μｌ）をＳＫＢｒ３細胞抽出物（５００μｇ）を使用して探索し、沈殿したＨｓｐ７０をウェスタンブロットによって分析し、ドシメトリーによって定量した。３つの独立した実験由来の結果をグラフ化して、ＹＫの相対結合親和性を決定した。点、平均；バー、標準偏差。ｄ）代表的なＹＫの構造。ＹＫ５５およびＹＫ５６は、それぞれ、ＹＫ５４およびＹＫ５７のビオチン化誘導体である。
【図９】図９。（ａ）本発明の主題の化合物の例は、ＳＫＢｒ３  ＨＥＲ２を過剰発現する乳癌細胞におけるＨＥＲ２およびＲａｆ−１オンコ−キナーゼの定常状態レベルを用量依存性に減少させ、ＰＡＲＰ切断によって示されるようにアポトーシスを誘導する。細胞を、表示濃度のＹＫ１４９およびＹＫ５で２４時間処置した。細胞を溶解し、ウェスタンブロッティングによってタンパク質を分析した。ｂ）本発明の主題の化合物の例は、トリプルネガティブ乳癌細胞ＭＤＡ−ＭＢ−４６８における発癌性ＳＴＡＴ３の活性を阻害する。細胞を化合物またはビヒクルで表示の時間処置し、タンパク質をウェスタンブロットによって分析した。（ｃ）本発明の主題の化合物の例は、急性骨髄性白血病細胞ＭＯＬＭ１３のアポトーシスを用量依存性に誘導する。細胞を表示濃度の化合物で２４時間処置し、カスパーゼ３，７活性の増加を測定し、ビヒクル（ＤＭＳＯ）のみで処置した細胞と比較した。カスパーゼ−３，７活性は、カスパーゼ基質Ｚ−ＤＥＶＤ−Ｒ１１０の切断およびローダミン放出における化合物効力の基準であった。アポトーシス細胞の増加率を、化合物から得た蛍光の読み取りとビヒクル（ＤＭＳＯ）処置細胞から得た蛍光の読み取りとの比較によって計算した。
【図１０】図１０。（ａ）本発明の主題の化合物の例は、トリプルネガティブ乳癌細胞ＭＤＡ−ＭＢ−４６８におけるＲａｆ−１オンコ−キナーゼの定常状態レベルを用量依存性に減少させ、ＰＡＲＰ切断によって示されるようにアポトーシスを誘導する。本発明の主題の化合物の例は、ＳＫＢｒ３  ＨＥＲ２を過剰発現する乳癌細胞におけるＨＥＲ２およびＲａｆ−１オンコ−キナーゼの定常状態レベルを用量依存性に減少させ、ＰＡＲＰおよびカスパーゼ−３切断によって示されるようにアポトーシスを誘導する。Ｈｓｐ７０の関連誘導は認められない。本発明の主題の化合物の例は、ＭＯＬＭ−１３変異ＦＬＴ３を発現する急性骨髄性白血病細胞におけるＦＬＴ３およびｐ−ＳＴＡＴ５の定常状態レベルを用量依存性に減少させる。細胞を、表示濃度の化合物で２４時間または表示濃度の化合物で表示の時間処置した。細胞を溶解し、ウェスタンブロッティングによってタンパク質を分析した。（ｂ）本発明の主題の化合物の例は、急性骨髄性白血病細胞ＭＯＬＭ１３のアポトーシスを用量依存性に誘導する。細胞を表示濃度の化合物で２４時間処置し、カスパーゼ３，７活性の増加を測定し、ビヒクル（ＤＭＳＯ）のみで処置した細胞と比較した。カスパーゼ−３，７活性は、カスパーゼ基質Ｚ−ＤＥＶＤ−Ｒ１１０の切断およびローダミン放出における化合物効力の基準であった。アポトーシス細胞の増加率を、化合物から得た蛍光の読み取りとビヒクル（ＤＭＳＯ）処置細胞から得た蛍光の読み取りとの比較によって計算した。
【図１１】図１１。（ａ）本発明の主題の化合物の例は、ＳＫＢｒ３  ＨＥＲ２を過剰発現する乳癌細胞におけるＨＥＲ２およびＲａｆ−１オンコ−キナーゼの定常状態レベルを用量依存性に減少させ、ＰＡＲＰ切断によって示されるようにアポトーシスを誘導する。細胞を、表示濃度の薬剤で２４時間処置した。細胞を溶解し、ウェスタンブロッティングによってタンパク質を分析した。（ｂ）本発明の主題の化合物の例は、トリプルネガティブ乳癌細胞ＭＤＡ−ＭＢ−４６８において発癌性ＳＴＡＴ３の活性を阻害し、Ｒａｆ−１の定常状態レベルを減少させ、アポトーシスを誘導する。細胞を、表示の化合物で２４時間または表示濃度の化合物で表示の時間処置し、ウェスタンブロットによってタンパク質を分析した。
【図１２】図１２。ＹＫ５は、以下のように癌の主な特徴に影響を及ぼす：増殖および侵襲性を阻害し、癌細胞の細胞周期を停止する。（ａ）表示の癌細胞を漸増濃度のインヒビターとインキュベートし、７２時間にわたる成長を評価した。０％未満のＹ軸の値は、出発集団の細胞死を示す。薬物を三連でアッセイした。（ｂ）方法に記載のように、体積約１００〜２００ｍｍ３に到達した腫瘍を皮下に（ｓ．ｃ．）異種移植したＭＤＡ−ＭＢ−４６８を保有するマウス（ｎ＝５）に、ＹＫ５またはビヒクルをｉ．ｔ．投与した。腫瘍体積（ｍｍ３）を、カリパス測定から評価した。（ｃ）細胞を表示濃度のＹＫ５で２４時間処置した。ＤＮＡ含有量をヨウ化プロピジウム染色およびフローサイトメトリーによって分析したのに対して（左）、タンパク質をウェスタンブロッティングによって分析した（右）。（ｄ）ＳＫＢｒ３およびＭＤＡ−ＭＢ−４６８抽出物（５００μｇ）由来のＹＫ５５−ビーズによって単離したＨｓｐ７０クライアントタンパク質を、ウェスタンブロッティングによって分析した。コントロールビーズは、付着したＤ−ビオチン（１００μＭ）を含む。（ｅ）ＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌細胞をＹＫ５（１μＭ）で２４時間処置し、タンパク質抽出物を免疫ブロッティング（上）に供するかビヒクルまたはＹＫ５で２４時間前処置し、２０時間にわたってマトリゲルを通って移動することができる生細胞を定量し、データをグラフ化した（下）。点、平均；バー、標準偏差。データは、複数の反復実験（ｎ≧３）から得たデータと一致する。
【図１３】図１３。ＹＫ５は、選択した腫瘍においてＨｓｐ９０インヒビターより高いアポトーシス効果を有する。（ａ〜ｄ）細胞を、表示濃度のインヒビターで表示の時間処置した。（ａ，ｂ）アポトーシス細胞を、方法に記載の二重アクリジンオレンジ／臭化エチジウム染色によって定量した。（ｃ，ｄ）表示濃度のインヒビターで２４時間（ｃ）または表示濃度のインヒビターで表示の時間（ｄ）処置した細胞のアポトーシスの分子マーカー（ＰＡＲＰ切断）を、ウェスタンブロッティングによって分析した。（ｅ）ＭＤＡＭＢ−４６８細胞を、ビヒクル、ＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍｌ）、ＹＫ５（１μＭ）で処置したか、ＹＫ５で前処置した２時間後にＴＮＦαで処置したか、同時処置し、細胞をウェスタンブロット分析のために溶解したか（左）、細胞死をヨウ化プロピジウム（ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ  ｉｏｄｉｎｅ）染色の際の低二倍体集団の分析によって定量した（右）。データは、複数の反復実験（ｎ≧３）から得たデータと一致する。点、平均；バー、標準偏差。
【図１４】図１４。ＹＫ５は、腫瘍Ｈｓｐ７０に対してより高い親和性を有し、癌細胞を選択的に死滅させる。（ａ〜ｃ）方法に記載のように、細胞を表示濃度のインヒビターで表示の時間処置し、アラマーブルー取り込みによって代謝的に生存可能な細胞を評価した（ａ）。表示濃度のインヒビターで２４時間処置した細胞のアポトーシスの分子マーカー（ＰＡＲＰ切断およびカスパーゼ−３切断）を、ウェスタンブロッティングによって分析した（ｂ、ｃ）。ビヒクルまたは表示のインヒビターで２４時間処置した細胞の形態学を、光学顕微鏡法によって分析した（ｃ）。（ｄ）抽出物（５００μｇ）を、Ｄ−ビオチン（７５μＭ）を含むビーズまたは５０μｌストレプトアビジンビーズに添加した表示濃度のＹＫ５５と一晩インキュベートした。ＨＳ＝熱ショック。（ｅ）ＳＫＢｒ３（２００μｇ）およびＭＲＣ−５（４００μｇ）抽出物ならびに組換えヒトＨｓｐ７０（２μｇ）を表示濃度のＹＫ５と３時間インキュベートし、その後にＹＫ５５−ビーズ（５０μｌストレプトアビジンビーズに添加した５０μＭのＹＫ５５）上でＨｓｐ７０複合体を沈殿させた。３つの独立した実験から得たデータをグラフ化した（右）。点、平均；バー、標準偏差。
【図１５】図１５。固体支持体に結合したＹＫ５（ＹＫ５５−ビーズ）は、腫瘍特異的様式でオンコプロテインと複合体化したＨｓｐ７０を単離する。（ａの左およびｂ）ＹＫ５５−ビーズまたはＤ−ビオチン−ビーズ（それぞれ、５０μｌストレプトアビジンビーズに添加した１００μＭ  ＹＫ５５またはＤ−ビオチン）を使用して表示の細胞抽出物（５００μｇ）から沈殿させたＨｓｐ７０複合体を、ＷＢによって分析した。（ａ、右）タンパク質複合体のＹＫ５５ビーズへの結合を、Ｈｓｐ／ｃ７０レベルがそれぞれＢＢ７０抗体またはＩｇＧ免疫沈降によって減少した細胞抽出物中で探索した。（ｃ）細胞抽出物を表示濃度のＹＫ５と４℃で３時間インキュベートし、その後にＹＫ５５−ビーズ（５０μｌストレプトアビジンビーズに添加した１００μＭ  ＹＫ５５）上でＨｓｐ７０複合体を沈殿させた。（ｄ）ＹＫ５は、Ｈｓｐ７０調節されたオンコプロテインの定常状態レベルを減少させる。癌細胞を表示濃度のＹＫ５で２４時間処置し、細胞をＷＢ分析のために溶解した。ローディングコントロールとしてβ−アクチンを使用した。
【図１６】図１６。Ｈｓｐ７０競合蛍光偏光アッセイ。方法に示すように、漸増濃度の表示のインヒビターを、三連でアッセイプレートに添加し、蛍光偏光（ＦＰ）アッセイを行った。競合効果を、コントロールに対するパーセンテージとして示し、各プレート中のインヒビターウェル由来のミリ偏光（ｍＰ；遊離ｃｙ３Ｂ−ＹＫ５を引く）値をコントロール（ビヒクルＤＭＳＯを使用したｃｙ３Ｂ−ＹＫ５および細胞溶解物）由来の平均ｍＰ（遊離ｃｙ３Ｂ−ＹＫ５を引く）で割ることによって計算した。リガンド結合をｌｏｇ１０インヒビター濃度に対してプロットし、ＥＣ５０値をＰｒｉｓｍ４．０中の非線形最小二乗カーブフィッティングプログラムを使用して計算した。点、平均；バー、標準偏差。
【図１７】図１７。ＹＫ５はＳＴＡＴ１およびＳＴＡＴ３を乳癌細胞における新規のＨｓｐ７０相互作用発癌性産物として同定する。（ａ）ＹＫ５５−ビーズは、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８抽出物中でＳＴＡＴ１およびＳＴＡＴ３との複合体中のＨｓｐ７０を認識するが、ビオチン−ビーズは認識しない（左）。ＳＴＡＴの定常状態レベルおよび活性に及ぼすＹＫ５の影響を調査するために、細胞をビヒクル（ＤＭＳＯ）またはＹＫ５（１０μＭ）で２４時間処置した（右）。（ｂ）主題の例示的組成物は、トリプルネガティブ細胞ＭＤＡ−ＭＢ−４６８においてＳＴＡＴ３を強く阻害する。活性化したＳＴＡＴ３は、トリプルネガティブ乳癌における重要な発癌経路の一部である。
【図１８】図１８。ＹＫ５は、ＳＴＡＴ１腫瘍抑制因子のアポトーシス促進効果の新規の阻害機構を明らかにする。（ａ）ＹＫ５５ビーズは、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８抽出物（５００μｇ）中のｐ−ＳＴＡＴ１およびＳＴＡＴ１との複合体中のＨｓｐ７０を認識する。（ｂ）ＭＤＡ−ＭＢ−４６８細胞抽出物中のタンパク質複合体のＹＫ５５ビーズへの結合を、ＢＢ７０抗体によって減少したＨｓｐ／ｃ７０レベルまたはＩｇＧ免疫沈降を使用して探索した。（ｃ）ＭＤＡ−ＭＢ−４６８細胞を、ビヒクル、ＩＦＮγ１００ｎｇ／ｍｌ）、ＹＫ５（１０μＭ）で７時間処置したか、ＹＫ５で前処置した２時間後にＩＦＮγ刺激したか、同時処置し、細胞をウェスタンブロット分析のために溶解した。（ｄ）細胞をＩＦＮγ（１００ｎｇ／ｍｌ）で刺激し、抽出物（５００μｇ）中のＨｓｐ７０／ＳＴＡＴ１複合体をそれぞれＤ−ビオチン、ＹＫ５５−ビーズ、およびＨｓｐ７０抗体での化学的沈降および免疫沈降によって分析した。（ｅ，ｆ）方法に記載のように、細胞を、ＹＫ５（１０μＭ）の存在下または非存在下にて表示の時間ＩＦＮγで刺激し、スタウロスポリンまたは正バナジン酸塩を添加するか添加しなかった。ｐ−ＳＴＡＴ１レベルを、ウェスタンブロッティングによって分析し、ドシメトリーによって定量した。２つの反復実験由来のデータを処置時間に対してグラフ化した。
【図１９】図１９。ＹＫ５は、ＩＦＮγ活性化ＳＴＡＴ１の核含有量を増大させ、ＤＮＡへの結合を増強する。ＭＤＡＭＢ−４６８細胞をＩＦＮγ（１００ｎｇ／ｍｌ）で処置したか、ＩＦＮγ（１００ｎｇ／ｍｌ）およびＹＫ５（１０μＭ）で同時処置した。（ａ）活性化されたＳＴＡＴ１（ｐＴｙｒ７０１）を、ＦＩＴＣに抱合した二次抗体を使用した免疫蛍光顕微鏡法によって決定した。ＤＡＰＩを使用して核染色を行った。（ｂ）ＳＴＡＴコンセンサス結合部位（５’−ＴＴＣＣＣＧＧＡＡ−３’）への活性化されたＳＴＡＴ１の結合を、ＥＬＩＳＡベースのアッセイによって決定した。非処置（白色バー）であるか、ＹＫ５（ライトグレーのバー）、ＩＦＮγ（ダークグレーのバー）、またはＩＦＮγとＹＫ５との混合物（黒色バー）で処置され、且つオリゴヌクレオチドに結合した細胞由来の溶解物中に含まれる活性化されたＳＴＡＴ１を、抗ＳＴＡＴ１抗体の使用によって検出した。野生型または変異したＳＴＡＴコンセンサス結合部位のいずれかを含む２０ｐｍｏｌの競合物オリゴヌクレオチドの非存在下または存在下でＩＦＮγ処置細胞を使用してアッセイを行った（ダークグレーのバー）。実験を４回反復して行った。結果を、ＳＥＭを使用した平均吸光度値（ＯＤ４５０ｎｍ）として示す。
【図２０】図２０。初代ＡＭＬ細胞のＹＫ５での処置。ＹＫ５は、芽細胞および癌幹細胞の両方を死滅させるが、正常細胞を死滅させない。細胞を、漸増濃度のＹＫ５で２４時間処置した。（ａ〜ｂ）非処置コントロールと比較した生存％を示す。白抜きのバー：「その他」は同一患者中の正常細胞（非芽細胞）示す。灰色のバー：芽細胞（ＣＤ４５  ｄｉｍ）。赤色バー：白血病幹細胞（ＬＳＣ）（ＣＤ３４＋ＣＤ３８−ＣＤ１２３＋）。（ｃ）初代ＡＭＬ細胞のＹＫ５での処置後にＣＦＵ（コロニー形成単位）が減少する。＊＊ｐ＜０．００１。
【図２１】図２１。全長ｈＨｓｐ７０（配列番号１）（受入番号：Ｐ０８１０７）、Ｎ末端ｈＨｓｐ７０タンパク質（配列番号２）（ＰＤＢ  ＩＤ：１Ｓ３Ｘ）、大腸菌Ｈｓｐ７０（ＤＮＡＫ）構造（配列番号３）（ＰＤＢ  ＩＤ：２ＫＨＯ）、およびＣ．ｅｌｅｇａｎｓ（ＰＤＢ  ＩＤ：２Ｐ３２）（配列番号４）のタンパク質配列のアラインメント。残基アノテーションに下線を引き、保存残基を類似の色で示す。アロステリックポケット部位１を定義する配列を、ボックスで示す。これらの配列中の重要なアミノ酸は、本明細書中でデザインしたリガンドと相互作用する。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
詳細な説明
定義
本明細書中で使用する場合、用語「投与する（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒ）」、「投与（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｉｎｇ）」、および「投与（ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」は、適切な医療行為の下で治療効果が得られるような様式で被験体に組成物を送達させる任意の方法をいう。
【００２５】
句「誘導体」は、本明細書中で使用する場合、特定の化合物または分子の任意の水和物、溶媒和物、塩、ラセミ体、異性体、鏡像異性体、プロドラッグ、代謝産物、エステル、または他のアナログもしくは誘導体をいう。用語「誘導体」はまた、開示の化合物の修飾物（開示の化合物の加水分解生成物、還元生成物、または酸化生成物が含まれるが、これらに限定されない）も意味し得る。加水分解反応、還元反応、および酸化反応は当該分野で公知である。
【００２６】
用語「調整」は、生物学的活性、機能、健康、または状態が、生物の全体的な健康および幸福に一致する様式で維持、増強、減少、または処置される、生物の生物学的活性、機能、健康、または状態に及ぼす影響を得る過程をいう。用語、生物の生物学的活性、機能、健康、または状態の「増強」は、増大、強化、補強、または改善の過程をいう。
【００２７】
本明細書中で使用する場合、句、活性薬剤もしくは成分または薬学的に活性な薬剤または成分（本明細書中において同義である）の「有効量」または「治療有効量」は、投与の際に治療効果を得るのに十分な薬学的に活性な薬剤の量をいう。薬学的に活性な薬剤の治療有効量は、症状を軽減し得るか、軽減するか、軽減すると期待される。薬学的に活性な薬剤の有効量は、処置される特定の容態、容態の重症度、処置の持続期間、使用される組成物の特定の成分などの要因に応じて変化するであろう。
【００２８】
句「任意の置換基」は、本明細書中の式（Ｉ）および（Ｉ’）の定義で使用する場合、水素と置換することができる任意の置換基を意味する。いくつかの実施形態では、用語「任意の置換基」は、本明細書中の式（Ｉ）および（Ｉ’）の定義で使用する場合、任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基；任意選択的に置換された炭素環基、複素環基、アリール基、またはヘテロアリール基；ハロ；任意選択的に置換されたＣ２〜２２アシル基；ヒドロキシル；ニトロ；シアノ；アリールオキシ；アルコキシ；ハロゲン化アルコキシ；アルケニルオキシ；ヒドロキシアルキル；アミノ；アルキルアミノ；ジアルキルアミノ；シクロアルキルアミノ；アリールアミノ；ジアリールアミノ；アシルアミノ；カルバミル；置換または非置換のアミド；アルキ
ルアミド；アルキルスルホンアミド；スルホンアミド；−ＮＨＳＯ２アルケニル；−ＮＨＣＯアルケニル；−ＮＨＣＯアルキニル；−ＣＯアルケニル；−ＣＯアルキニル；トリハロカーボン；チオアルキル；ＳＯ２−アルキル；−ＣＯＯ−アルキル；−ＣＯアルキル；およびアルキル−ＣＮ；またはその薬学的に許容可能な塩もしくはその水和物である。他の実施形態では、句「任意の置換基」は、化合物の同定、追跡、および／または単離に有用な標識基またはマーカー基を含む置換基をいう。本明細書中で有用な標識基およびマーカー基の非限定的な例には、例えば、蛍光基、ビオチン基、アビジン基、および酵素リンカー基が含まれる。
【００２９】
以下のＺおよびＷ１〜Ｗ４などについての置換基の選択肢の命名において、名称は、中心構造に直接結合する基の型をいい、基本置換基に結合したさらなる官能性を排除しない。
【００３０】
したがって、用語「アルキル」は、構造の残部に結合した原子が炭素原子である、任意選択的に置換された直鎖、環式、または分枝鎖の飽和炭化水素基をいう。アルキル基は、１〜２４個の炭素原子を有することができる（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、オクチル、デシル、テトラデシル、ヘキサデシル、エイコシル、およびテトラコシルなど）。本明細書中で好ましい「アルキル」基は、１〜１２個の炭素原子を含む。「低級アルキル」は、１〜６個、より好ましくは１〜４個の炭素原子のアルキル基をいう。アルキル基は、置換基（例えば、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、置換および非置換の置換および非置換のアミド、スルホンアミノ、スルホンアミド、スルホキシ、アリール、シアノ、カルボキシ、カルボキサミド、アシル、ニトロ、チオ）を有することができる。
【００３１】
用語「アルケニル」は、１つ以上の位置に炭素−炭素二重結合を有し、構造の残部に結合した原子が炭素原子である、任意選択的に置換された直鎖、環式、または分枝鎖の不飽和炭化水素基をいう。アルケニル基は、２〜２０個の炭素、好ましくは２〜８個の炭素を有することができる。直鎖アルケニル基には、例えば、以下が含まれる：１−アルケニル基（エテニル基、１−プロペニル基、および１−ブテニル基など）および２−アルケニル基（２−ブテニル基および２−ペンテニル基など）。アルケニル基は、アルキル基と同一の置換基を有することができる。
【００３２】
用語「アルキニル」は、１つ以上の位置に炭素−炭素三重結合を有し、構造の残部に結合した原子が炭素原子である、任意選択的に置換された分枝鎖または非分枝鎖の不飽和炭化水素基をいう。アルキニル（ａｌｙｎｙｌ）基は、２〜２０個の炭素、好ましくは２〜８個の炭素を有することができる。例には、以下が含まれる：１−アルキニル基（エチニル基、１−プロピニル基、および３，３−ジメチル−１−ブチニル基など）および２−アルキニル基（２−プロピニル基、２−ブチニル基、および３−フェニル−２−プロピニル基など）。アルキニル基は、アルキル基と同一の置換基を有することができる。
【００３３】
用語「ハロ」または「ハロゲン」は、通常は有機化合物中の水素原子のハロ置換に関するフルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨードをいう。ハロのうち、クロロおよびフルオロが一般に好ましく、クロロが一般により好ましい。
【００３４】
用語「アミノ」は、アミンＮが中心構造に直接結合している分子を含む（ＮＨ２基、アルキルアミノ基、およびアルケニルアミノ基が含まれる）。
【００３５】
用語「アシル」は、水素、アルキル、部分飽和または完全飽和のシクロアルキル、部分飽和または完全飽和の複素環、およびアリール置換カルボニル基をいう。
【００３６】
用語「アリール」は、５〜約３０個の炭素原子（約６〜約１４個の炭素原子が好ましい）を有する置換または非置換の芳香族炭化水素環基をいう。「アリール」基は、単環または複数の縮合環を有することができる。置換基がアリール置換基と同定される場合、アリール環の原子は構造の残部の原子に直接結合する。アリールオキシ置換基は、−Ｏ−架橋によって構造の残部に連結したアリール基である。アリール基は、アルキル基と同一の置換基、さらにアルキル置換基、アルケニル置換基、またはアルキニル置換基を有することができる。用語「アリール」には、フェニル、α−ナフチル、β−ナフチル、ビフェニル、アントリル、テトラヒドロナフチル、フルオレニル、インダニル、ビフェニレニル、およびアセナフテニルが含まれるが、これらに限定されない。任意選択的に置換されたこれらの芳香族基は、「アリール」の定義の範囲内に明確に含まれる。例えば、本発明の主題の代表的な実施形態では、「アリール」基は、アシルオキシ、ヒドロキシ、アシル、１〜６個の炭素原子のアルキル、１〜６個の炭素原子のアルコキシ、２〜６個の炭素原子のアルケニル、２〜６個の炭素原子のアルキニル、アミノ、１または２個のアルキル基に置換された１〜６個の炭素原子のアミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アジド、シアノ、ハロ、ニトロ、チオアルコキシ、トリハロメチル、およびアリールからなる群から選択される１〜５個の置換基で任意選択的に置換される。用語「アラルキル」は、アリール置換アルキル部分を含む。好ましいアラルキル基は、１〜６個の炭素原子を有するアルキル基に結合したアリール基を有する「低級アラルキル」基である。かかる基の例には、ベンジル、ジフェニルメチル、トリフェニルメチル、フェニルエチル、およびジフェニルエチルが含まれる。
【００３７】
用語「炭素環式」は、１つ以上の共有結合閉環構造を含み、且つ環の骨格を形成する原子が全て炭素原子である任意選択的に置換された基をいう。したがって、この用語は、炭素環を環骨格が少なくとも１つの非炭素原子を含む複素環と区別する。用語「シクロアルカン」または「環状アルカン」または「シクロアルキル」は、環が任意選択的に置換された環式脂肪族炭化水素である炭素環基をいう（例えば、好ましくは３〜１２個の環炭素を有する環式アルキル基）。「シクロアルキル」には、例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、またはシクロオクチルなどが含まれる。
【００３８】
用語「複素環式または複素環」は、４〜約２０個炭素原子（好ましくは、約５〜約６個）を有し、１〜約４個の炭素原子が窒素、酸素、または硫黄に置換された任意選択的に置換された飽和または不飽和の芳香族または非芳香族の環式炭化水素基を意味する。好ましい複素環は、ベンズイミダゾール、ジヒドロチオフェン、ジオキシン、ジオキサン、ジオキソラン、ジチアン、ジチアジン、ジチアゾール、ジチオラン、フラン、イミダゾール、モルホリン、オキサゾール、オキサジアゾール、オキサチアゾール、オキサチアゾリジン、オキサジン、オキサジアジン、ピペラジン、ピペリジン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、テトラヒドロフラン、テトラジン、チアジアジン、チアジアゾール、チアトリアゾール、チアジン、チアゾール、チオモルホリン、チオフェン、チオピラン、トリアジン、およびトリアゾールからなる群から選択される。いくつかの複素環の構造を以下に示す。
【００３９】
【化１】
2018188476.tif 000016
本明細書中で使用する場合、用語「ヘテロアリール」を、置換または非置換の芳香族複素環系（単環または二環）と定義する。ヘテロアリール基は、例えば、約４〜約２０個の炭素原子（他で明確に特定しない限り）（約４〜約１０個が好ましい）を有することができる。いくつかの実施形態では、ヘテロアリール基は、約４〜約１４個の環原子を有し、且つ炭素原子および酸素、窒素、または硫黄から選択される１、２、３、または４個のヘテロ原子を含む芳香族複素環系である。代表的なヘテロアリール基は、フラン、チオフェン、インドール、アザインドール、オキサゾール、チアゾール、イソキサゾール、イソチアゾール、イミダゾール、Ｎ−メチルイミダゾール、ピリジン、ピリミジン、ピラジン、ピロール、Ｎ−メチルピロール、ピラゾール、Ｎ−メチルピラゾール、１，３，４−オキサジアゾール、１，２，４−トリアゾール、１−メチル−１，２，４−トリアゾール、１Ｈ−テトラゾール、１−メチルテトラゾール、ベンズオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾフラン、ベンズイソキサゾール、ベンズイミダゾール、Ｎ−メチルベンズイミダゾール、アザベンズイミダゾール、インダゾール、キナゾリン、キノリン、およびイソキノリンである。
【００４０】
用語「架橋環」は、２個以上の非隣接環原子が連結した１つ以上の環を含む任意選択的に置換された炭素環、複素環、アリール、またはヘテロアリールを形成する６〜１２個の原子の基をいう。架橋環構造の非限定的な例には、トリシクロアルカン（ｔｒｉｃｃｙｃｌｏａｌｋａｎｅ）（例えば、アダマンタンイルなど）が含まれ得る。
【００４１】
「任意選択的な」または「任意選択的に」は、その後に記載の事象または環境が起こっても起こらなくてもよく、且つ記述には前述の事象または環境が起こる例および起こらない例が含まれることを意味する。「任意選択的に」は、記載の条件が存在する実施形態および記載の条件が存在しない実施形態を含む。例えば、「任意選択的に置換されたフェニル」は、フェニルが置換されていてもされていなくてもよく、記述には非置換のフェニルおよび置換が存在するフェニルの両方が含まれることを意味する。「任意選択的に」は、記載の条件が存在する実施形態および記載の条件が存在しない実施形態を含む。
【００４２】
本発明の主題の化合物は、互変異性体、幾何異性体、または立体異性体の形態で存在し得る。本発明の主題は、本発明の主題の範囲内である場合、全てのかかる化合物（シス−およびトランス−幾何異性体、Ｅ−およびＺ−幾何異性体、Ｒ−およびＳ−鏡像異性体、ジアステレオマー、ｄ−異性体、ｌ−異性体、そのラセミ混合物およびその他の混合物が含まれる）を意図する。
【００４３】
句「薬学的に許容可能なキャリア」は、これに関して使用する場合、組成物の安定性または有効性などを増強するのに有効な量で本明細書中に記載の１つの組成物中に存在する任意の不活性成分をいう。かかる薬学的に許容可能なキャリアの非限定的な例には、希釈剤、賦形剤、懸濁剤、潤滑剤、アジュバント、ビヒクル、送達系、乳化剤、崩壊剤、吸収剤、吸着剤、防腐剤、界面活性剤、着色剤、香味料、軟化剤、緩衝液、ｐＨ調整剤、濃厚剤、水軟化剤、湿潤剤、香料、安定剤、品質改良剤、キレート剤、甘味料、噴射剤、固化防止剤、増粘剤、可溶化剤、可塑剤、浸透促進剤、流動促進剤、皮膜形成剤、充填剤、コーティング剤、結合剤、抗酸化剤、硬化剤、湿潤薬、またはこれらの成分の任意の混合物が含まれる。
【００４４】
本明細書中で使用する場合、句「薬学的に許容可能な塩」は、非修飾の化合物と同一の活性を保有し、且つ生物学的およびその他で望ましくないことはない一定の成分の塩をいう。塩を、例えば、有機酸または無機酸を使用して形成することができる。適切な酸の非限定的な例には、酢酸、アセチルサリチル酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、安息香酸、ベンゼンスルホン酸、二亜硫酸、ホウ酸、酪酸、ショウノウ酸、カンファースルホン酸、炭酸、クエン酸、シクロペンタンプロピオン酸、ジグルコン酸、ドデシル亜硫酸、エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、グリセリン酸、グリセロリン酸、グリシン、グルコヘプタン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グルタル酸、グリコール酸、ヘミ亜硫酸、ヘプタン酸、ヘキサン酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、ヨウ化水素酸、ヒドロキシエタンスルホン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムシン酸、ナフチランスルホン酸、ナフチル酸、ニコチン酸、亜硝酸、シュウ酸、ペラルゴン酸、リン酸、プロピオン酸、サッカリン、サリチル酸、ソルビン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、チオシアン酸、チオグリコール酸、チオ硫酸、トシル酸、ウンデシレン酸、ならびに天然および合成により誘導されたアミノ酸が含まれる。
【００４５】
本明細書中で使用する場合、「被験体」または「個体」または「動物」または「患者」または「哺乳動物」は、診断、予後、または治療を受けることが望ましい任意の被験体、特に哺乳動物被験体（例えば、ヒト）をいう。
【００４６】
本明細書中で使用する場合、疾患、障害、または容態の「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」または「処置（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」は、少なくとも１つのその症状の緩和、その重症度の軽減、またはその進行の遅延、防止、もしくは阻害を含む。処置は、疾患、障害、または容態が完全に治癒することを意味する必要はない。本明細書中の有用な組成物は、疾患、障害、または容態の重症度を軽減するか、関連する症状の重症度を軽減するか、患者または被験体の生活の質を改善するか、疾患、障害、または容態の発症を遅延、防止、または阻害することのみを必要とする。
【００４７】
本明細書中で使用する場合、用語「調整」は、本発明の主題の化合物がＨｓｐ７０またはＨｓｃ７０のアクチベーターまたはインヒビターであり得ることを意味する。アクチベーターは、ＨＳＰ経路を促進するであろう。アクチベーターは、増殖の増加が有益な治療効果をもたらし得る疾患に有用であろう。インヒビターは、Ｈｓｐ７０またはＨｓｃ７０を阻害し、それにより、ＨＳＰ経路を阻害し、種々の癌および増殖性障害の成長を阻害するであろう。その結果として、ＨＳＰ経路の活性が増加する必要がある容態では、アクチベーターが好ましい。ＨＳＰ経路の阻害が必要な容態では、インヒビターが好ましい。
【００４８】
一定の実施形態では、本発明の主題の化合物は、増殖性障害の処置で有用である。用語「増殖性障害」は、本明細書中で使用する場合、癌（乳癌、前立腺癌、肺癌、結腸癌、胃癌、膵臓癌、卵巣癌、脳腫瘍、および造血性の癌造血系の癌、食道癌、腎細胞癌、膀胱癌、頭頸部癌、白血病、ならびに肉腫（胆管肉腫および食道肉腫など）が含まれる）をいう。特に、これには、乳癌および卵巣癌、前立腺癌、膵臓癌、肝細胞癌、非小細胞肺癌および小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣおよびＳＣＬＣ）、結腸直腸癌、白血病、およびリンパ腫が含まれる。転移性癌（例えば、転移性乳癌など）が含まれる。
【００４９】
本明細書中で使用する場合、「オンコプロテイン」は、細胞の腫瘍性形質転換を潜在的に誘導または促進することができるタンパク質を意味する。１つの例では、このタンパク質は、癌遺伝子によってコードされ得る。癌遺伝子は、本明細書中で使用する場合、細胞の腫瘍性形質転換を潜在的に誘導または促進することができる遺伝子産物を産生する遺伝子である。癌遺伝子は、ウイルス起源または細胞起源であり得る。オンコプロテインの非限定的な例には、成長因子受容体、プロテインキナーゼ、シグナル伝達物質、核リンタンパク質、メチルトランスフェラーゼ、および転写因子が含まれる。これらのタンパク質が構造および／または調節の変化後に細胞内で異常に発現されるか、活性化されるか、移動する場合、非制御の細胞増殖および細胞死の欠陥が起こり得る。本発明の主題のオンコプロテインの非限定的な例には、ＥｒｂＢ２（Ｈｅｒ２／Ｎｅｕ）、ＥＧＦＲ／ＥｒｂＢ１、ＥｒｂＢ３、ＥｒｂＢ４、ＥｒｂＢ５、および任意の他のｅｒｂＢファミリーメンバー、ＰＤＧＦＲ、ＰＭＬ−ＲＡＲ  ＡＫＴ、ＢＣＲ−ａｂｌ、ｓｒｃ、Ｒａｆファミリーメンバー（例えば、Ｃ−Ｒａｆ、Ｂ−Ｒａｆ）、ドミナントネガティブｐ５３、ＨＩＦ−１α、テロメラーゼ、ＭＴＧ８（骨髄性白血病タンパク質）、熱ショック因子、Ｂ型肝炎ウイルス逆転写酵素、ｃ−ｓｒｃ、ｖ−ｓｒｃ、変異型または異常なｐ５３、エストロゲン受容体、変異Ｋ−ｒａｓタンパク質、一酸化窒素シンターゼ、およびキメラタンパク質ｐ２１０ＢＣＲ−ＡＢＬ（個別および／または任意の組み合わせ）が含まれる。本発明は、さらに、Ｈｓｐ７０またはＨｓｐ７０−Ｈｓｐ９０複合体に関連することが現在公知であるかその後に同定される任意の他のオンコプロテインを含む。いくつかの実施形態では、患者内に存在するオンコプロテインを、治療前、治療中、および治療後に測定する。他の実施形態では、本発明の主題の化合物の必要とする患者への投与により、患者内の１つ以上のオンコプロテインが不安定化および分解される。
【００５０】
本明細書中に引用した任意の濃度範囲、割合の範囲、または比の範囲は、特に示されない場合、その範囲内の任意の整数および分数（整数の１／１０および１／１００など）の濃度、割合、または比が含まれると理解される。
【００５１】
用語「ａ」および「ａｎ」は、上記および本明細書中の他の場所で使用する場合、列挙した成分の「１つ以上」をいうと理解すべきである。他で特記しない場合、単数形の使用には複数形が含まれることが当業者に明確であろう。したがって、用語「ａ」、「ａｎ」、および「少なくとも１つ」を、本出願で交換可能に使用する。例えば、「ａ  ｐｏｌｙｍｅｒ」は、１つのポリマーおよび２つ以上のポリマーを含む混合物の両方をいう。
【００５２】
本出願を通して、種々の実施形態の記載には、「〜を含む」という用語を使用しているが、いくつかの特定の例では、実施形態を、用語「から本質的になる」または「からなる」を代わりに使用して記載することができると当業者に理解されるであろう。
【００５３】
本教示をより深く理解するために、教示の範囲を決して限定しないが、他で示さない限り、明細書およびクレーム中で使用される量、割合、または比を示す全ての数字および他の数値は、あらゆる場合において用語「約」によって修飾されると理解すべきである。したがって、逆に示さない限り、以下の明細書および添付のクレームに記載の数値パラメーターは、得られるように探求される所望の性質に応じて変化し得る近似値である。最低限でも、各数値パラメーターを、報告した有効数字を考慮し、且つ通常の丸め技術を適用することによって少なくとも解釈すべきである。
【００５４】
本明細書中で使用される他の用語は、当該分野で周知のその意味によって定義されることを意味する。
【００５５】
本発明の主題の化合物
第１の一般的な実施形態によれば、本発明の主題は、以下の式：
【００５６】
【化２】
2018188476.tif 000017
（式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７、Ｘ８、およびＸ９は、ＣＨ、置換Ｃ、および置換Ｎから独立して選択され、
Ｘ１０およびＸ１１は、芳香族性が維持されるようにＣＨ、ＣＨ２、ＮＨ、ＮＲ、Ｏ、およびＳから独立して選択され、Ｒはアルキル鎖または置換アルキル鎖であり、
Ｙは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級アルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換の置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド（ｓｕｆｏｎａｍｉｄｏ）、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−ア
ルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換の置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ１およびＷ２が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換の置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる）を有する化合物、その立体異性体、互変異性体、および薬学的に許容可能な塩に関する。
【００５７】
さらに、Ｗ２を、右側のアリール環に直接連結して５員環を形成するか、リンカーを介して６または７員環を形成することができる。
【００５８】
式（１ａ）および式（１ｂ）の好ましい実施形態では、Ｘ１〜Ｘ４は以下から独立して選択されるが、これらに限定されない。
【００５９】
【化３】
2018188476.tif 000018
式（１ａ）の好ましい実施形態では、Ｘ５〜Ｘ９は以下から独立して選択されるが、これらに限定されない。
【００６０】
【化４】
2018188476.tif 000019
式（１ｂ’）の好ましい実施形態では、Ｘ１０は、ＣＨ２、ＮＨ、ＮＲ’、Ｏ、および
Ｓであり、Ｒ’は低級アルキル鎖である。
【００６１】
式（Ｉ）および式（Ｉ’）の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、またはＣＨ２である。
【００６２】
式（１ａ）および式（１ａ’）の好ましい実施形態では、Ｚは、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換の置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドである。
【００６３】
式（１ａ）および式（１ａ’）の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換の置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択され、Ｗ１およびＷ２が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる。
【００６４】
式（１ｂ）および式（１ｂ’）の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択され、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる。
【００６５】
１つの実施形態では、式（Ｉ）または（Ｉ’）の化合物は上記定義の通りであるが、但し、以下を条件とする：（１）Ｙは、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２からなる群から選択され、（２）Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、およびジアリールアミノからなる群から選択され、（３）式１ａまたは１ａ’の左側のアリールは少なくとも１つの環窒素を含み、（４）Ｗ１およびＷ２のうちの少なくとも１つは、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、およびジアリールアミノからなる群から選択され、（５）Ｗ３およびＷ４のうちの少なくとも１つは、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換または非置換のアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、およびスルホンアミドからなる群から選択される。
【００６６】
別の実施形態では、式（Ｉ）または（Ｉ’）の化合物は上記定義の通りであるが、但し、以下を条件とする：（１）Ｚは、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、およびジアリールアミノからなる群から選択され、（２）Ｗ１
およびＷ２のうちの少なくとも１つは、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、およびジアリールアミノからなる群から選択され、（３）Ｗ３および（４）Ｗ４のうちの少なくとも１つは、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換または非置換のアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、およびスルホンアミドからなる群から選択される。
【００６７】
さらなる実施形態では、式（Ｉ）または（Ｉ’）の化合物は上記定義の通りであるが、但し、以下を条件とする：（１）Ｙは、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２からなる群から選択され、（２）Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、およびジアリールアミノからなる群から選択され、（３）Ｗ１およびＷ２のうちの少なくとも１つは、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、およびジアリールアミノからなる群から選択され、（４）Ｗ３およびＷ４のうちの少なくとも１つは、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換または非置換のアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、およびスルホンアミドからなる群から選択される。
【００６８】
さらなる実施形態では、式（Ｉ）または（Ｉ’）の化合物は上記定義の通りであるが、但し、以下を条件とする：（１）Ｚは、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、およびジアリールアミノからなる群から選択され、（２）Ｗ１およびＷ２の両方は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、およびジアリールアミノからなる群から選択され、（３）Ｗ３およびＷ４のうちの少なくとも１つは、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換または非置換のアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、およびスルホンアミドからなる群から選択される。
【００６９】
さらなる実施形態では、式（Ｉ）または（Ｉ’）の化合物は上記定義の通りであるが、但し、以下を条件とする：（１）Ｗ１およびＷ２の両方は、アリール、複素環、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、およびジアリールアミノからなる群から選択され、（４）Ｗ３およびＷ４のうちの少なくとも１つは、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換または非置換のアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、およびスルホンアミドからなる群から選択される。
【００７０】
１つの実施形態では、式（Ｉ）または（Ｉ’）の化合物は上記定義の通りであるが、但し、以下を条件とする：（１）Ｙは、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２からなる群から選択され、（２）Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和の
シクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、およびジアリールアミノからなる群から選択され、（３）式１ａまたは１ａ’の左側のアリールまたは右側のアリールのいずれかは少なくとも２つの環窒素を含み、（４）Ｗ１およびＷ２のうちの少なくとも１つは、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、およびジアリールアミノからなる群から選択され、（５）Ｗ３およびＷ４のうちの少なくとも１つは、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換または非置換のアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、およびスルホンアミドからなる群から選択される。
【００７１】
１つの実施形態では、式（Ｉ）または（Ｉ’）の化合物は上記定義の通りであるが、但し、以下を条件とする：（１）Ｙは、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２からなる群から選択され、（２）Ｚは、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、およびジアリールアミノからなる群から選択され、（３）式１ａまたは１ａ’の左側のアリールまたは右側のアリールのいずれかまたはアリールの両方は、少なくとも２つの環窒素を含み、（４）Ｗ１およびＷ２のうちの少なくとも１つは、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、およびジアリールアミノからなる群から選択され、（５）Ｗ３およびＷ４のうちの少なくとも１つは、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換または非置換のアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、およびスルホンアミドからなる群から選択される。
【００７２】
本発明の主題の別の実施形態は、式：
【００７３】
【化５】
2018188476.tif 000020
（式中、
Ｘ５〜Ｘ９は、ＣＨ、置換Ｃ、および置換Ｎから独立して選択され、
Ｙは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級アルキルまたはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールア
ミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる）を有する化合物、その立体異性体、互変異性体、および薬学的に許容可能な塩に関する。
【００７４】
さらに、Ｗ２を、右側のアリール環に直接連結して５員環を形成するか、リンカーを介して６または７員環を形成することができる。
【００７５】
式（２ａ）の好ましい実施形態では、Ｘ５〜Ｘ９は以下から独立して選択されるが、これらに限定されない。
【００７６】
【化６】
2018188476.tif 000021
式（２ａ）の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、またはＣＨ２である。
【００７７】
式（２ａ）の好ましい実施形態では、Ｚは、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドである。
【００７８】
式（２ａ）の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【００７９】
式（２ａ）の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【００８０】
式（２ａ）の特に好ましい実施形態では、Ｘ５〜Ｘ９は、以下である。
【００８１】
【化７】
2018188476.tif 000022
式（２ａ）の特に好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、またはＳＯ２である。
【００８２】
式（２ａ）の特に好ましい実施形態では、Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【００８３】
式（２ａ）の特に好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【００８４】
式（２ａ）の特に好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮである。
【００８５】
表１は、この実施形態を例示する特定の化合物の例を示す。これらの化合物のいくつかについて列挙したＩＣ５０値は、本化合物の抗増殖効果を示し、この値を、本明細書中に記載の成長阻害アッセイを使用して得た。
【００８６】
表１
【００８７】
【表１−１】
2018188476.tif 000023
【００８８】
【表１−２】
2018188476.tif 000024
【００８９】
【表１−３】
2018188476.tif 000025
【００９０】
【表１−４】
2018188476.tif 000026
【００９１】
【表１−５】
2018188476.tif 000027
【００９２】
【表１−６】
2018188476.tif 000028
【００９３】
【表１−７】
2018188476.tif 000029
【００９４】
【表１−８】
2018188476.tif 000030
【００９５】
【表１−９】
2018188476.tif 000031
【００９６】
【表１−１０】
2018188476.tif 000032
【００９７】
【表１−１１】
2018188476.tif 000033
【００９８】
【表１−１２】
2018188476.tif 000034
【００９９】
【表１−１３】
2018188476.tif 000035
【０１００】
【表１−１４】
2018188476.tif 000036
【０１０１】
【表１−１５】
2018188476.tif 000037
【０１０２】
【表１−１６】
2018188476.tif 000038
【０１０３】
【表１−１７】
2018188476.tif 000039
【０１０４】
【表１−１８】
2018188476.tif 000040
【０１０５】
【表１−１９】
2018188476.tif 000041
【０１０６】
【表１−２０】
2018188476.tif 000042
【０１０７】
【表１−２１】
2018188476.tif 000043
【０１０８】
【表１−２２】
2018188476.tif 000044
【０１０９】
【表１−２３】
2018188476.tif 000045
【０１１０】
【表１−２４】
2018188476.tif 000046
【０１１１】
【表１−２５】
2018188476.tif 000047
【０１１２】
【表１−２６】
2018188476.tif 000048
【０１１３】
【表１−２７】
2018188476.tif 000049
式２ａの化合物の１つの実施形態は、式２ａ’：
【０１１４】
【化８】
2018188476.tif 000050
（式中、各ＸおよびＹは、任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはアルキニル；任意選択的に置換された炭素環基、複素環基、アリール基、またはヘテロアリール基；ハロ；任意選択的に置換されたＣ２〜２２アシル基；−ＮＲ４Ｒ５基；−Ｃ（Ｏ）Ｒ６基；−（エトキシ）ｎ−Ｒ６基（式中、ｎは１〜１２である）；任意選択的に置換されたアルコキシカルボニル基；任意選択的に置換されたアルキルオキシ基；任意選択的に置換されたアミノ基；ニトロ基；およびカルボキシル基からなる群から独立して選択され、Ｒ４およびＲ５は、Ｈ；任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはアルキニル；および−Ｃ（Ｏ）Ｒ６からなる群からそれぞれ独立して選択され、各Ｒ６は、任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはアルキニル；任意選択的に置換された炭素環基、複素環基、アリール基、またはヘテロアリール基；任意選択的に置換されたアルキルオキシ基；およびアルキルアクリラート基（エチルアクリラートなど）からなる群から独立して選択される）の化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩である。
【０１１５】
別の実施形態では、式２ａ’の化合物は上記の通りであるが、但し、Ｘは架橋した環構造を含まないものとする。
【０１１６】
別の実施形態では、式２ａ’の化合物は上記の通りであるが、但し、ＸまたはＹ置換基のうちの少なくとも１つが化合物の同定、追跡、および／または単離に有用な少なくとも１つの標識基またはマーカー基を含むことを条件とする。本明細書中で有用な標識基およびマーカー基の非限定的な例には、例えば、蛍光基、ビオチン基、アビジン基、および酵素リンカー基が含まれる。
【０１１７】
本発明の主題の別の実施形態は、式２ａ’’：
【０１１８】
【化９】
2018188476.tif 000051
（式中、各Ｒ１は、Ｈ；任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはアルキニル；任意選択的に置換された炭素環基、複素環基、アリール基、またはヘテロアリール基；ハロ；任意選択的に置換されたＣ２〜２２アシル基；−Ｃ（Ｏ）Ｒ６基；および−（エトキシ）ｎ−Ｒ６基（式中、ｎは１〜１２である）からなる群から独立して選択され、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、Ｈ；任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはアルキニル；任意選択的に置換された炭素環基、複素環基、アリール基、またはヘテロアリール基；任意選択的に置換されたＣ２〜２２アシル基；−Ｃ（Ｏ）Ｒ６基；および任意選択的に置換されたアルコキシカルボニル基からなる群からそれぞれ独立して選択され、Ｘは、任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはアルキニル；任意選択的に置換された炭素環基、複素環基（例えば、４−アルキルピペラジン）、アリール基、またはヘテロアリール基；ハロ；任意選択的に置換されたＣ２〜２２アシル基；−ＮＲ４Ｒ５基；−Ｃ（Ｏ）Ｒ６基；−（エトキシ）ｎ−Ｒ６基（式中、ｎは１〜１２である）；任意選択的に置換されたアルコキシカルボニル基；任意選択的に置換されたアルキルオキシ基；任意選択的に置換されたアミノ基；ニトロ基；およびカルボキシル基からなる群から選択され、各Ｒ６は、任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはアルキニル；任意選択的に置換された炭素環基、複素環基、アリール基、またはヘテロアリール基；任意選択的に置換されたアルキルオキシ基；およびアルキルアクリラート基（エチルアクリラートなど）からなる群から独立して選択され、但し、Ｘは架橋した環構造を含まないものとする）の化合物またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩である。
【０１１９】
別の実施形態では、式２ａ’の化合物は上記の通りであるが、但し、化合物がＮ−（６−アミノ−２−（４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−イル）オクタンアミド（ＹＫ２０）ではないことを条件とする。
【０１２０】
さらに別の実施形態では、式２ａ’’の化合物は上記の通りであり、各Ｒ１は、Ｈ；および任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはアルキニルからなる群から独立して選択され、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、Ｈ；任意選択的
に置換された直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ６アルキル；および−Ｃ（Ｏ）Ｒ６（式中、Ｒ６は任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ６アルキル、アルケニル、またはアルキニルである）からなる群からそれぞれ独立して選択され、Ｘは、任意選択的に置換された直鎖または分枝鎖のアルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基；任意選択的に置換された炭素環基、複素環基、アリール基、またはヘテロアリール基；およびハロからなる群から選択される。さらなる実施形態では、Ｘは窒素原子で連結したピペラジン環であり、ピペラジンは、ハロ、ハロアルキル、直鎖または分枝鎖のアルキル、置換された直鎖または分枝鎖のアルキル、およびＨＯ−（エトキシ）ｎ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−（式中、ｎ＝１〜８）（例えば、ＨＯ−（エトキシ）３−Ｃ２Ｈ４−など）からなる群から選択される少なくとも１つの基で任意選択的に置換される。
【０１２１】
別の実施形態では、式２ａ’の化合物は上記の通りであり、式中、各Ｒ１は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ６アルキルおよび置換された直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から独立して選択される。例えば、Ｒ１を、メチル、エチル、エテニル、プロピル、およびブチルからなる群から選択することができる。
【０１２２】
別の実施形態では、式２ａ’の化合物は上記の通りであり、式中、各Ｒ１はメチルおよびエチルから独立して選択され、ＮＲ２Ｒ３はＮＨ２であり、ＮＲ４Ｒ５はＮＨＣ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはＮＨＣ（Ｏ）−Ｃ２〜Ｃ６アルケニルであり、Ｘは窒素原子で連結したピペラジン環であり、ピペラジン環は、ハロ、ハロアルキル、または直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ６アルキルで任意選択的に置換される。
【０１２３】
別の実施形態では、式２ａ’の化合物は上記の通りであり、式中、各Ｒ１は同一または異なり、且つメチルまたはエチルであり、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４はそれぞれＨであり、Ｒ５は−Ｃ（Ｏ）−メチル、−Ｃ（Ｏ）−エチル、または−Ｃ（Ｏ）−エテニルであり、Ｘは、ピペラジン、４−メチルピペラジン−１−イル、または４−（２−（２−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）ピペラジン−１−イルである。
【０１２４】
本発明の主題の別の実施形態は、式：
【０１２５】
【化１０】
2018188476.tif 000052
（式中、
Ｘ５〜Ｘ９は、ＣＨ、置換Ｃ、および置換Ｎから独立して選択され、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールア
ミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる）を有する化合物、その立体異性体、互変異性体、および薬学的に許容可能な塩に関する。
【０１２６】
さらに、Ｗ２を、右側のアリール環に直接連結して５員環を形成するか、リンカーを介して６または７員環を形成することができる。
【０１２７】
式（３ａ）の好ましい実施形態では、Ｘ５〜Ｘ９は以下から独立して選択されるが、これらに限定されない。
【０１２８】
【化１１】
2018188476.tif 000053
式（３ａ）の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、またはＣＨ２である。
【０１２９】
式（３ａ）の好ましい実施形態では、Ｚは、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドである。
【０１３０】
式（３ａ）の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０１３１】
式（３ａ）の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０１３２】
式（３ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｘ５〜Ｘ９は、以下である：
【０１３３】
【化１２】
2018188476.tif 000054
式（３ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、またはＳＯ２である。
【０１３４】
式（３ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０１３５】
式（３ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０１３６】
式（３ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮである。
【０１３７】
表２は、この実施形態を例示する特定の化合物の例を示す。
【０１３８】
表２
【０１３９】
【表２−１】
2018188476.tif 000055
【０１４０】
【表２−２】
2018188476.tif 000056
【０１４１】
【表２−３】
2018188476.tif 000057
【０１４２】
【表２−４】
2018188476.tif 000058
【０１４３】
【表２−５】
2018188476.tif 000059
【０１４４】
【表２−６】
2018188476.tif 000060
本発明の主題の別の実施形態は、式：
【０１４５】
【化１３】
2018188476.tif 000061
（式中、
Ｘ５〜Ｘ９は、ＣＨ、置換Ｃ、および置換Ｎから独立して選択され、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ
、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる）を有する化合物、その立体異性体、互変異性体、および薬学的に許容可能な塩に関する。
【０１４６】
さらに、Ｗ２を、右側のアリール環に直接連結して５員環を形成するか、リンカーを介して６または７員環を形成することができる。
【０１４７】
式（４ａ）の好ましい実施形態では、Ｘ５〜Ｘ９は以下から独立して選択されるが、これらに限定されない。
【０１４８】
【化１４】
2018188476.tif 000062
式（４ａ）の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、またはＣＨ２である。
【０１４９】
式（４ａ）の好ましい実施形態では、Ｚは、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドである。
【０１５０】
式（４ａ）の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０１５１】
式（４ａ）の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０１５２】
式（４ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｘ５〜Ｘ９は、以下である：
【０１５３】
【化１５】
2018188476.tif 000063
式（４ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、またはＳＯ２である。
【０１５４】
式（４ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０１５５】
式（４ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０１５６】
式（４ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮである。
【０１５７】
表３は、この実施形態を例示する特定の化合物の例を示す。
【０１５８】
表３
【０１５９】
【表３−１】
2018188476.tif 000064
【０１６０】
【表３−２】
2018188476.tif 000065
【０１６１】
【表３−３】
2018188476.tif 000066
【０１６２】
【表３−４】
2018188476.tif 000067
【０１６３】
【表３−５】
2018188476.tif 000068
【０１６４】
【表３−６】
2018188476.tif 000069
本発明の主題の別の実施形態は、式：
【０１６５】
【化１６】
2018188476.tif 000070
（式中、
Ｘ５〜Ｘ９は、ＣＨ、置換Ｃ、および置換Ｎから独立して選択され、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ
、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から独立して選択されるか、Ｗ１およびＷ２が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる）を有する化合物、その立体異性体、互変異性体、および薬学的に許容可能な塩に関する。
【０１６６】
さらに、Ｗ２を、右側のアリール環に直接連結して５員環を形成するか、リンカーを介して６または７員環を形成することができる。
【０１６７】
式（５ａ）の好ましい実施形態では、Ｘ５〜Ｘ９は以下から独立して選択されるが、これらに限定されない。
【０１６８】
【化１７】
2018188476.tif 000071
式（５ａ）の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、またはＣＨ２である。
【０１６９】
式（５ａ）の好ましい実施形態では、Ｚは、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドである。
【０１７０】
式（５ａ）の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０１７１】
式（５ａ）の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０１７２】
式（５ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｘ５〜Ｘ９は、以下である：
【０１７３】
【化１８】
2018188476.tif 000072
式（５ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、またはＳＯ２である。
【０１７４】
式（５ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０１７５】
式（５ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０１７６】
式（５ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮである。
【０１７７】
表４は、この実施形態を例示する特定の化合物の例を示す。
【０１７８】
表４
【０１７９】
【表４−１】
2018188476.tif 000073
【０１８０】
【表４−２】
2018188476.tif 000074
【０１８１】
【表４−３】
2018188476.tif 000075
【０１８２】
【表４−４】
2018188476.tif 000076
【０１８３】
【表４−５】
2018188476.tif 000077
【０１８４】
【表４−６】
2018188476.tif 000078
本発明の主題の別の実施形態は、式：
【０１８５】
【化１９】
2018188476.tif 000079
（式中、
Ｘ５〜Ｘ９は、ＣＨ、置換Ｃ、および置換Ｎから独立して選択され、
Ｙは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級アルキルまたはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ１およびＷ２が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる）を有する化合物、その立体異性体、互変異性体、および薬学的に許容可能な塩に関する。
【０１８６】
さらに、Ｗ２を、右側のアリール環に直接連結して５員環を形成するか、リンカーを介して６または７員環を形成することができる。
【０１８７】
式（６ａ）の好ましい実施形態では、Ｘ５〜Ｘ９は以下から独立して選択されるが、これらに限定されない。
【０１８８】
【化２０】
2018188476.tif 000080
式（６ａ）の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、またはＣＨ２である。
【０１８９】
式（６ａ）の好ましい実施形態では、Ｚは、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドである。
【０１９０】
式（６ａ）の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０１９１】
式（６ａ）の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０１９２】
式（６ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｘ５〜Ｘ９は、以下である：
【０１９３】
【化２１】
2018188476.tif 000081
式（６ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、またはＳＯ２である。
【０１９４】
式（６ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０１９５】
式（６ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０１９６】
式（６ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮである。
【０１９７】
表５は、この実施形態を例示する特定の化合物の例を示す。
【０１９８】
表５
【０１９９】
【表５−１】
2018188476.tif 000082
【０２００】
【表５−２】
2018188476.tif 000083
【０２０１】
【表５−３】
2018188476.tif 000084
【０２０２】
【表５−４】
2018188476.tif 000085
【０２０３】
【表５−５】
2018188476.tif 000086
【０２０４】
【表５−６】
2018188476.tif 000087
本発明の主題の別の実施形態は、式：
【０２０５】
【化２２】
2018188476.tif 000088
（式中、
Ｘ５〜Ｘ９は、ＣＨ、置換Ｃ、および置換Ｎから独立して選択され、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ１およびＷ２が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる）を有する化合物、その立体異性体、互変異性体、および薬学的に許容可能な塩に関する。
【０２０６】
さらに、Ｗ２を、右側のアリール環に直接連結して５員環を形成するか、リンカーを介して６または７員環を形成することができる。
【０２０７】
式（７ａ）の好ましい実施形態では、Ｘ５〜Ｘ９は以下から独立して選択されるが、これらに限定されない。
【０２０８】
【化２３】
2018188476.tif 000089
式（７ａ）の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、またはＣＨ２である。
【０２０９】
式（７ａ）の好ましい実施形態では、Ｚは、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドである。
【０２１０】
式（７ａ）の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０２１１】
式（７ａ）の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０２１２】
式（７ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｘ５〜Ｘ９は、以下である：
【０２１３】
【化２４】
2018188476.tif 000090
式（７ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、またはＳＯ２である。
【０２１４】
式（７ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０２１５】
式（７ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０２１６】
式（７ａ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホ
ンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮである。
【０２１７】
表６は、この実施形態を例示する特定の化合物の例を示す。
【０２１８】
表６
【０２１９】
【表６−１】
2018188476.tif 000091
【０２２０】
【表６−２】
2018188476.tif 000092
【０２２１】
【表６−３】
2018188476.tif 000093
【０２２２】
【表６−４】
2018188476.tif 000094
【０２２３】
【表６−５】
2018188476.tif 000095
【０２２４】
【表６−６】
2018188476.tif 000096
本発明の主題の別の実施形態は、式：
【０２２５】
【化２５】
2018188476.tif 000097
（式中、
Ｘ１０およびＸ１１は、芳香族性が維持されるようにＣＨ、ＣＨ２、ＮＨ、ＮＲ’、Ｏ、およびＳから独立して選択され、Ｒ’はアルキル鎖または置換アルキル鎖であり、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン
、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる）を有する化合物、その立体異性体、互変異性体、および薬学的に許容可能な塩に関する。
【０２２６】
さらに、Ｗ２を、右側のアリール環に直接連結して５員環を形成するか、リンカーを介して６または７員環を形成することができる。
【０２２７】
式（２ｂ）の好ましい実施形態では、Ｘ１０およびＸ１１は、以下から独立して選択されるが、これらに限定されない。
【０２２８】
【化２６】
2018188476.tif 000098
（式中、Ｒはアルキル鎖または置換アルキル鎖である）
式（２ｂ）の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、またはＣＨ２である。
【０２２９】
式（２ｂ）の好ましい実施形態では、Ｚは、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドである。
【０２３０】
式（２ｂ）の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシア
ルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０２３１】
式（２ｂ）の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０２３２】
式（２ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｘ１０およびＸ１１は、以下から独立して選択される。
【０２３３】
【化２７】
2018188476.tif 000099
（式中、Ｒはアルキル鎖または置換アルキル鎖である）
式（２ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、またはＳＯ２である。
【０２３４】
式（２ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０２３５】
式（２ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０２３６】
式（２ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮである。
【０２３７】
表７は、この実施形態を例示する特定の化合物の例を示す。
【０２３８】
表７
【０２３９】
【表７−１】
2018188476.tif 000100
【０２４０】
【表７−２】
2018188476.tif 000101
【０２４１】
【表７−３】
2018188476.tif 000102
本発明の主題の別の実施形態は、式：
【０２４２】
【化２８】
2018188476.tif 000103
（式中、
Ｘ１０およびＸ１１は、芳香族性が維持されるようにＣＨ、ＣＨ２、ＮＨ、ＮＲ’、Ｏ、およびＳから独立して選択され、Ｒ’はアルキル鎖または置換アルキル鎖であり、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる）を有する化合物、その立体異性体、互変異性体、および薬学的に許容可能な塩に関する。
【０２４３】
さらに、Ｗ２を、右側のアリール環に直接連結して５員環を形成するか、リンカーを介して６または７員環を形成することができる。
【０２４４】
式（３ｂ）の好ましい実施形態では、Ｘ１０およびＸ１１は、以下から独立して選択されるが、これらに限定されない。
【０２４５】
【化２９】
2018188476.tif 000104
（式中、Ｒはアルキル鎖または置換アルキル鎖である）
式（３ｂ）の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、またはＣＨ２である。
【０２４６】
式（３ｂ）の好ましい実施形態では、Ｚは、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドである。
【０２４７】
式（３ｂ）の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０２４８】
式（３ｂ）の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０２４９】
式（３ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｘ１０およびＸ１１は、以下から独立して選択される。
【０２５０】
【化３０】
2018188476.tif 000105
（式中、Ｒはアルキル鎖または置換アルキル鎖である）
式（３ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、またはＳＯ２である。
【０２５１】
式（３ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０２５２】
式（３ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０２５３】
式（３ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮである。
【０２５４】
表８は、この実施形態を例示する特定の化合物の例を示す。
【０２５５】
表８
【０２５６】
【表８−１】
2018188476.tif 000106
【０２５７】
【表８−２】
2018188476.tif 000107
【０２５８】
【表８−３】
2018188476.tif 000108
【０２５９】
【表８−４】
2018188476.tif 000109
本発明の主題の別の実施形態は、式：
【０２６０】
【化３１】
2018188476.tif 000110
（式中、
Ｘ１０およびＸ１１は、芳香族性が維持されるようにＣＨ、ＣＨ２、ＮＨ、ＮＲ’、Ｏ、およびＳから独立して選択され、Ｒ’はアルキル鎖または置換アルキル鎖であり、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる）を有する化合物、その立体異性体、互変異性体、および薬
学的に許容可能な塩に関する。
【０２６１】
さらに、Ｗ２を、右側のアリール環に直接連結して５員環を形成するか、リンカーを介して６または７員環を形成することができる。
【０２６２】
式（４ｂ）の好ましい実施形態では、Ｘ１０およびＸ１１は、以下から独立して選択されるが、これらに限定されない。
【０２６３】
【化３２】
2018188476.tif 000111
（式中、Ｒはアルキル鎖または置換アルキル鎖である）
式（４ｂ）の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、またはＣＨ２である。
【０２６４】
式（４ｂ）の好ましい実施形態では、Ｚは、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドである。
【０２６５】
式（４ｂ）の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０２６６】
式（４ｂ）の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０２６７】
式（４ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｘ１０およびＸ１１は、以下から独立して選択される。
【０２６８】
【化３３】
2018188476.tif 000112
（式中、Ｒはアルキル鎖または置換アルキル鎖である）
式（４ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、またはＳＯ２である。
【０２６９】
式（４ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０２７０】
式（４ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０２７１】
式（４ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮである。
【０２７２】
表９は、この実施形態を例示する特定の化合物の例を示す。
【０２７３】
表９
【０２７４】
【表９−１】
2018188476.tif 000113
【０２７５】
【表９−２】
2018188476.tif 000114
【０２７６】
【表９−３】
2018188476.tif 000115
【０２７７】
【表９−４】
2018188476.tif 000116
本発明の主題の別の実施形態は、式：
【０２７８】
【化３４】
2018188476.tif 000117
（式中、
Ｘ１０およびＸ１１は、芳香族性が維持されるようにＣＨ、ＣＨ２、ＮＨ、ＮＲ’、Ｏ、およびＳから独立して選択され、Ｒ’はアルキル鎖または置換アルキル鎖であり、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ１およびＷ２が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ
、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる）を有する化合物、その立体異性体、互変異性体、および薬学的に許容可能な塩に関する。
【０２７９】
さらに、Ｗ２を、右側のアリール環に直接連結して５員環を形成するか、リンカーを介して６または７員環を形成することができる。
【０２８０】
式（５ｂ）の好ましい実施形態では、Ｘ１０およびＸ１１は、以下から独立して選択されるが、これらに限定されない。
【０２８１】
【化３５】
2018188476.tif 000118
（式中、Ｒはアルキル鎖または置換アルキル鎖である）
式（５ｂ）の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、またはＣＨ２である。
【０２８２】
式（５ｂ）の好ましい実施形態では、Ｚは、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドである。
【０２８３】
式（５ｂ）の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０２８４】
式（５ｂ）の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０２８５】
式（５ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｘ１０およびＸ１１は、以下から独立して選択される。
【０２８６】
【化３６】
2018188476.tif 000119
（式中、Ｒはアルキル鎖または置換アルキル鎖である）
式（５ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、またはＳＯ２である。
【０２８７】
式（５ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０２８８】
式（５ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０２８９】
式（５ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮである。
【０２９０】
表１０は、この実施形態を例示する特定の化合物の例を示す。
【０２９１】
表１０
【０２９２】
【表１０−１】
2018188476.tif 000120
【０２９３】
【表１０−２】
2018188476.tif 000121
【０２９４】
【表１０−３】
2018188476.tif 000122
【０２９５】
【表１０−４】
2018188476.tif 000123
本発明の主題の別の実施形態は、式：
【０２９６】
【化３７】
2018188476.tif 000124
（式中、
Ｘ１０およびＸ１１は、芳香族性が維持されるようにＣＨ、ＣＨ２、ＮＨ、ＮＲ’、Ｏ、およびＳから独立して選択され、Ｒ’はアルキル鎖または置換アルキル鎖であり、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ１およびＷ２が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯ
アルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる）を有する化合物、その立体異性体、互変異性体、および薬学的に許容可能な塩に関する。
【０２９７】
さらに、Ｗ２を、右側のアリール環に直接連結して５員環を形成するか、リンカーを介して６または７員環を形成することができる。
【０２９８】
式（６ｂ）の好ましい実施形態では、Ｘ１０およびＸ１１は、以下から独立して選択されるが、これらに限定されない。
【０２９９】
【化３８】
2018188476.tif 000125
（式中、Ｒはアルキル鎖または置換アルキル鎖である）
式（６ｂ）の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、またはＣＨ２である。
【０３００】
式（６ｂ）の好ましい実施形態では、Ｚは、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドである。
【０３０１】
式（６ｂ）の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０３０２】
式（６ｂ）の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０３０３】
式（６ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｘ１０およびＸ１１は、以下から独立して選択される。
【０３０４】
【化３９】
2018188476.tif 000126
（式中、Ｒはアルキル鎖または置換アルキル鎖である）
式（６ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、またはＳＯ２である。
【０３０５】
式（６ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０３０６】
式（６ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０３０７】
式（６ｂ）の特定の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮである。
【０３０８】
表１１は、この実施形態を例示する特定の化合物の例を示す。
【０３０９】
表１１
【０３１０】
【表１１−１】
2018188476.tif 000127
【０３１１】
【表１１−２】
2018188476.tif 000128
【０３１２】
【表１１−３】
2018188476.tif 000129
【０３１３】
【表１１−４】
2018188476.tif 000130
本発明の主題の別の実施形態は、式：
【０３１４】
【化４０】
2018188476.tif 000131
（式中、
Ｘ１０およびＸ１１は、芳香族性が維持されるようにＣＨ、ＣＨ２、ＮＨ、ＮＲ’、Ｏ、およびＳから独立して選択され、Ｒ’はアルキル鎖または置換アルキル鎖であり、
ＹはＳ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ、ＣＲＲ、ＣＯ、Ｏ、ＮＨ、またはＮＲであり、Ｒは低級のアルキル鎖またはアルコキシル鎖であり、
Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択され、
Ｗ１およびＷ２は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ１およびＷ２が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができ、
Ｗ３およびＷ４は、各出現ごとに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ
、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮからなる群から選択することができるか、Ｗ３およびＷ４が共にリンカーを介して連結して縮合した５員環または６員環を形成することができる）を有する化合物、その立体異性体、互変異性体、および薬学的に許容可能な塩に関する。
【０３１５】
さらに、Ｗ２を、右側のアリール環に直接連結して５員環を形成するか、リンカーを介して６または７員環を形成することができる。
【０３１６】
式（７ｂ）の好ましい実施形態では、Ｘ１０およびＸ１１は、以下から独立して選択されるが、これらに限定されない。
【０３１７】
【化４１】
2018188476.tif 000132
（式中、Ｒはアルキル鎖または置換アルキル鎖である）
式（７ｂ）の好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、またはＣＨ２である。
【０３１８】
式（７ｂ）の好ましい実施形態では、Ｚは、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドである。
【０３１９】
式（７ｂ）の好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０３２０】
式（７ｂ）の好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、それぞれ、水素、アルキル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、およびジアルキルアミドからなる群から独立して選択される。
【０３２１】
式（７ｂ）の特に好ましい実施形態では、Ｘ１０およびＸ１１は、以下から独立して選択される。
【０３２２】
【化４２】
2018188476.tif 000133
（式中、Ｒはアルキル鎖または置換アルキル鎖である）
式（７ｂ）の特に好ましい実施形態では、Ｙは、Ｓ、ＳＯ、またはＳＯ２である。
【０３２３】
式（７ｂ）の特に好ましい実施形態では、Ｚは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、飽和または不飽和のシクロアルキル、飽和または不飽和の複素環、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０３２４】
式（７ｂ）の特に好ましい実施形態では、Ｗ１およびＷ２は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、またはジアリールアミノである。
【０３２５】
式（７ｂ）の特に好ましい実施形態では、Ｗ３およびＷ４は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アリールオキシ、アルコキシ、ハロゲン化アルコキシ、アルケニルオキシ、ヒドロキシアルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アシルアミノ、カルバミル、置換および非置換のアミド、アルキルアミド、アルキルスルホンアミド、スルホンアミド、−ＮＨＳＯ２アルケニル、−ＮＨＣＯアルケニル、−ＮＨＣＯアルキニル、−ＣＯアルケニル、−ＣＯアルキニル、トリハロカーボン、チオアルキル、ＳＯ２−アルキル、−ＣＯＯ−アルキル、−ＣＯアルキル、およびアルキル−ＣＮである。
【０３２６】
表１２は、この実施形態を例示する特定の化合物の例を示す。
【０３２７】
表１２
【０３２８】
【表１２−１】
2018188476.tif 000134
【０３２９】
【表１２−２】
2018188476.tif 000135
【０３３０】
【表１２−３】
2018188476.tif 000136
本発明の主題の１つの実施形態では、本発明の主題の化合物は、表１の化合物、表２の化合物、表３の化合物、表４の化合物、表５の化合物、表６の化合物、表７の化合物、表８の化合物、表９の化合物、表１０の化合物、表１１の化合物、および表１２の化合物からなる群から選択される化合物である。
【０３３１】
別の実施形態では、本発明の主題は、少なくとも１つの本明細書中の実施例に記載の合成工程を実施する工程を含む、化合物またはその中間体の作製方法に関する。
【０３３２】
その占有率が抗癌活性を付与する調査されていないｈＨｓｐ７０上のアロステリック部位（部位１）の説明
別の実施形態によれば、本明細書中に記載の本発明の主題の化合物によって占められる場合、公知の天然に存在するリガンドや合成的に作製されたリガンドを持たないＨｓｐ７
０タンパク質中の空隙により、正常な細胞に毒性を示さない用量で悪性細胞成長の阻害、異常な細胞周期進行の阻害、１つ以上のオンコプロテインの分解および阻害、アポトーシスの誘導、癌細胞の侵襲性の軽減、またはその組み合わせが起こる。別の実施形態によれば、他の小分子リガンドによるこの以前に未調査のポケットの占有により、以下の効果（これらに限定されない）の全てまたは一部が起こるであろう：正常な細胞に毒性を示さない用量での悪性細胞成長の阻害、異常な細胞周期進行の阻害、いくつかのオンコプロテインの分解および阻害、アポトーシスの誘導、癌細胞の侵襲性の軽減、またはその組み合わせ。
【０３３３】
本明細書中でアロステリック部位１と呼ばれるポケットは、ＡＴＰ／ＡＤＰ結合ポケットに隣接し、Ｔｈｒ１３、Ｔｈｒ１４、Ｔｙｒ１５、Ｌｙｓ５６、Ｌｙｓ２７１、Ａｒｇ２６９、Ｇｌｕ２６８、Ａｒｇ２６４、およびＴｈｒ２６５極性アミノ酸（これらに限定されない）に覆われた親水性サブポケットから構成される。このサブポケット中には、適切なＣｙｓ反応性官能基を含むリガンド（アクリルアミド、ビニルスルホンアミド、プロピオルアミド、またはα−ハロカルボニルなどであるが、これらに限定されない）に共有結合することができるシステイン残基（Ｃｙｓ２６７）が包埋している。親水性サブポケットに近接して、リガンドと疎水性および静電気的に（π−π）相互作用する非極性および極性の両方のアミノ酸残基（Ｌｅｕ２３７、Ｖａｌ２３８、Ｖａｌ２６０、Ａｒｇ２６１、Ｖａｌ５９、Ｐｒｏ６３、Ｔｈｒ６６、Ａｓｎ２３５、Ａｓｐ２３４、Ｇｌｕ２３１、Ａｓｐ６９、Ｐｈｅ６８、Ａｒｇ７２、およびＴｙｒ４１などであるが、これらに限定されない）から構成される強大なサブポケットが存在する。リガンドは、アミノ酸（Ｌｙｓ８８、Ｈｉｓ８９、Ｔｒｐ９０、Ｐｒｏ９１、およびＰｈｅ９２などであるが、これらに限定されない）と相互作用する。
【０３３４】
ヒトＨｓｐ７０の全長結晶構造を利用できなかったので、全長ヒトＨｓｐ７０の相同性モデルを作製した。利用可能な結晶構造中でＣｙｓ２６７が露呈していないのに対して、全長Ｈｓｐ７０の相同性モデルでは、Ｃｙｓ２６７を含むポケットが露呈するようになる。同定されたＹＫ５の相互作用は、ヒトＨｓｐ７０の全長相同性モデルとの相互作用である。
【０３３５】
１つの実施形態では、治療有効量のＨｓｐ７０インヒビターを必要とする動物に投与する工程、Ｈｓｐ７０インヒビターを、Ｈｓｐ７０およびＨｓｃ７０のヌクレオチド結合部位の外側に存在するアロステリック結合ドメインと接触させる工程、Ｈｓｐ７０およびＨｓｃ７０の両方を同時に阻害する工程、腫瘍細胞または増殖性障害を有する細胞のアポトーシスを誘導する工程、正常な細胞、支質、または血管のアポトーシスの増加を誘導しない工程を含む、動物の腫瘍または増殖性障害を処置または防止する方法を提供する。さらなる実施形態では、上記方法で使用したＨｓｐ７０インヒビターは、式（Ｉ）または（Ｉ’）から選択される化合物である。
【０３３６】
いくつかのさらなる実施形態では、アロステリック結合ドメインは配列番号１上に存在し、このドメインは、Ｔｈｒ１３、Ｔｈｒ１４、Ｔｙｒ１５、Ｌｙｓ５６、Ｌｙｓ２７１、Ａｒｇ２６９、Ｇｌｕ２６８、Ａｒｇ２６４、Ｔｈｒ２６５、Ｃｙｓ２６７、Ｌｅｕ２３７、Ｖａｌ２３８、Ｖａｌ２６０、Ａｒｇ２６１、Ｖａｌ５９、Ｐｒｏ６３、Ｔｈｒ６６、Ａｓｎ２３５、Ａｓｐ２３４、Ｇｌｕ２３１、Ａｓｐ６９、Ｐｈｅ６８、Ｔｙｒ４１、Ｌｙｓ８８、Ｈｉｓ８９、Ｔｒｐ９０、Ｐｒｏ９１、Ｐｈｅ９２、およびその組み合わせからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸残基によって規定される。別の実施形態では、アロステリック結合ドメインは、３個以上の上記で引用したアミノ酸残基によって規定される１である。別の実施形態では、アロステリック結合ドメインは、４個以上の上記で引用したアミノ酸残基によって規定される１である。別の実施形態では、アロステリック結合ドメインは、５個以上の上記で引用したアミノ酸残基によって規定される１であ
る。別の実施形態では、アロステリック結合ドメインは、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５個、またはそれを超える上記で引用したアミノ酸残基によって規定される１である。いくつかの実施形態では、本発明の主題の化合物は、このアロステリック結合ドメインに結合し、Ｈｓｐ７０、Ｈｓｃ７０、またはこれらの両方を同時に阻害する。
【０３３７】
別の実施形態では、アロステリック結合ドメインは配列番号１上に存在し、このドメインは、Ｃｙｓ２６７、Ｌｅｕ２３７、Ａｒｇ２６４、Ａｓｐ２３４、Ａｒｇ２６１、Ｔｙｒ４１、Ｐｈｅ６８、Ｔｒｐ９０、Ｈｉｓ８９、およびその組み合わせからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸残基によって規定される。さらに別の実施形態では、アロステリック結合ドメインは配列番号１上に存在し、このドメインは、Ｃｙｓ２６７、Ａｒｇ２６４、Ａｒｇ２６１、Ｐｈｅ６８、Ｈｉｓ８９、およびその組み合わせからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸残基によって規定される。
【０３３８】
別の実施形態は、Ｈｓｐ７０を活性化する方法であって、Ｈｓｐ７０が、ＡＴＰ／ＡＤＰ結合ドメインの外側の裂溝領域（ｃｌｅｆｔ  ｒｅｇｉｏｎ）中に存在し、且つ小領域（ｓｕｂｒｅｇｉｏｎ）ＩｂおよびＩＩｂに近接する部位１を有する結合ポケットを配列番号１上に含み、結合ポケットの部位１を結合ポケットに結合するリガンドと接触させてＨｓｐ７０の活性を活性化する工程を含む、活性化する方法に関する。さらなる実施形態は、部位１がＴｙｒ１５、Ｌｙｓ５６、Ｌｙｓ２７１、Ａｒｇ２６９、Ｇｌｕ２６８、Ａｒｇ２６４、およびＴｈｒ２６５の極性アミノ酸を含む第１の大型の親水性サブポケット、このサブポケット中に包埋したシステイン残基（Ｃｙｓ２６７）を有し、このサブポケットに近接して、非極性および極性の両方のアミノ酸残基（Ｌｅｕ２３７、Ｖａｌ２３８、Ｖａｌ２６０、Ａｒｇ２６１、Ｖａｌ５９、Ｐｒｏ６３、Ｔｈｒ６６、Ａｓｎ２３５、Ａｓｐ２３４、Ｇｌｕ２３１、Ａｓｐ６９、Ｐｈｅ６８、およびＴｙｒ４１など）を含む２番目に大きなサブポケットがＨｓｐ７０上に存在し、このサブポケットが疎水性および静電気的（π−π）相互作用を形成することができる、請求項２７に記載のＨｓｐ７０を活性化する方法を含む。
【０３３９】
さらなる実施形態では、Ｈｓｐ−７０またはＨｓｃ−７０の活性を調整するモジュレーターをスクリーニングするためのＨｓｐ７０またはその改変体の結合部位であって、結合部位が、Ｔｈｒ１３、Ｔｈｒ１４、Ｔｙｒ１５、Ｌｙｓ５６、Ｌｙｓ２７１、Ａｒｇ２６９、Ｇｌｕ２６８、Ａｒｇ２６４、Ｔｈｒ２６５、Ｃｙｓ２６７、Ｌｅｕ２３７、Ｖａｌ２３８、Ｖａｌ２６０、Ａｒｇ２６１、Ｖａｌ５９、Ｐｒｏ６３、Ｔｈｒ６６、Ａｓｎ２３５、Ａｓｐ２３４、Ｇｌｕ２３１、Ａｓｐ６９、Ｐｈｅ６８、Ｔｙｒ４１、Ｌｙｓ８８、Ｈｉｓ８９、Ｔｒｐ９０、Ｐｒｏ９１、Ｐｈｅ９２、およびその組み合わせからなる群から選択されるアミノ酸残基によって規定されるリガンド結合ドメインを配列番号１上に含む、結合部位の三次元構造を提供する。
【０３４０】
１つの実施形態は、請求項１のＨｓｐ７０またはその改変体の結合部位１の三次元構造を生成するためのコンピュータ支援システムであって、該システムは：（ａ）コンピュータ可読データをエンコードしたデータ記憶材料を含むコンピュータ可読データ記憶媒体であって、前記データがペプチド配列配列番号１および図２１中のボックス中に示した配列の少なくとも一部を含む、コンピュータ可読データ記憶媒体、（ｂ）前記コンピュータ可読データを処理するための命令が格納されたワーキングメモリ；（ｃ）前記コンピュータ可読データを前記三次元構造に処理するための前記コンピュータ可読データ記憶媒体および前記ワーキングメモリに接続された中央処理装置；および（ｄ）前記三次元構造を表示するための前記中央処理装置に接続されたディスプレイを含む、コンピュータ支援システムに関する。さらなる実施形態では、配列番号１上のＨｓｐ７０またはその改変体の結合部位１は、Ｔｈｒ１３、Ｔｈｒ１４、Ｔｙｒ１５、Ｌｙｓ５６、Ｌｙｓ２７１、Ａｒｇ２
６９、Ｇｌｕ２６８、Ａｒｇ２６４、Ｔｈｒ２６５、Ｃｙｓ２６７、Ｌｅｕ２３７、Ｖａｌ２３８、Ｖａｌ２６０、Ａｒｇ２６１、Ｖａｌ５９、Ｐｒｏ６３、Ｔｈｒ６６、Ａｓｎ２３５、Ａｓｐ２３４、Ｇｌｕ２３１、Ａｓｐ６９、Ｐｈｅ６８、Ｔｙｒ４１、Ｌｙｓ８８、Ｈｉｓ８９、Ｔｒｐ９０、Ｐｒｏ９１、Ｐｈｅ９２、およびその組み合わせからなる群から選択されるアミノ酸残基によって規定される。
【０３４１】
本発明の主題の化合物を含む薬学的組成物
１つの実施形態では、本発明の主題は、本明細書中に記載の化合物を含む組成物に関する。別の実施形態では、本発明の主題は、本明細書中に記載の化合物および薬学的に許容可能なキャリアを含む薬学的組成物に関する。本明細書中で有用なキャリアは、ヒトまたは動物への投与に適切な１つ以上の適合性の固体または液体の充填剤、希釈剤、またはカプセル化材料をさらに含むことができる。
【０３４２】
生体適合性キャリアは、本明細書中で使用する場合、通常の使用環境下で薬学的組成物の有効性を実質的に減少させるいかなる相互作用も生じない成分である。可能な薬学的キャリアは、処置を受ける被験体への投与に適切となるように十分に低い毒性を示さなければならない。
【０３４３】
任意の非毒性、不活性、および有効なキャリアを使用して、本明細書中で意図される組成物を処方することができる。これに関する適切な薬学的に許容可能なキャリア、賦形剤、および希釈剤は、当業者に周知である（Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ，Ｔｈｉｒｔｅｅｎｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｂｕｄａｖａｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｄｓ．，Ｍｅｒｃｋ
＆  Ｃｏ．，Ｉｎｃ．，Ｒａｈｗａｙ，Ｎ．Ｊ．（２００１）；およびｔｈｅ  “Ｉｎａｃｔｉｖｅ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ  Ｇｕｉｄｅ”，Ｕ．Ｓ．  Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ（ＦＤＡ）Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（ＣＤＥＲ）Ｏｆｆｉｃｅ  ｏｆ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ（その全ての内容の全体が本明細書中で参考として援用される）に記載のものなど）。本組成物で有用な好ましい薬学的に許容可能な賦形剤、キャリア、および希釈剤の例には、蒸留水、生理学的食塩水、リンゲル液、デキストロース液、ハンクス液、およびＤＭＳＯが含まれる。
【０３４４】
これらのさらなる不活性成分ならびに有効な処方および投与手順は当該分野で周知であり、標準的なテキストブック（Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｌｍａｎ’ｓ：Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｅｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，８ｔｈ  Ｅｄ．，Ｇｉｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｅｄｓ．  Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ（１９９０）およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．（１９９０）（その両方全体が本明細書中で参考として援用される）など）に記載されている。キャリアは、全部で、約０．１重量％〜約９９．９９９９９重量％の本明細書中に示した組成物を含むことができる。
【０３４５】
治療的適用
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）および式（Ｉ’）の化合物は、抗増殖活性を有することが見出されている。したがって、増殖性障害（癌および非制御の細胞増殖に関連する他の障害など）の処置で有用であると考えられる。本明細書中で定義する場合、本発明の主題の範囲内の抗増殖効果を、例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで細胞増殖特異的キナーゼを阻害するか、ｉｎ  ｖｉｔｒｏホールセルアッセイ、ｉｎ  ｖｉｖｏ動物モデル、またはヒト臨床投与において細胞増殖を阻害する能力によって証明することができる。
【０３４６】
投与
本発明の主題の薬学的組成物を、経口、直腸、膣、非経口、筋肉内、腹腔内、動脈内、髄腔内、気管支内、皮下、皮内、静脈内、鼻、口内、または舌下投与経路に適応させることができる。
【０３４７】
経口投与のために、特に、圧縮錠、丸薬、錠剤、カプセル剤、点滴剤、およびカプセルを使用する。好ましくは、これらの組成物は、用量あたり１〜２５０ｍｇ、より好ましくは１０〜１００ｍｇの有効成分を含む。
【０３４８】
他の投与形態は、静脈内、動脈内、髄腔内、皮下、皮内、腹腔内、または筋肉内に注射することができ、且つ滅菌溶液または滅菌可能な溶液から調製された溶液または乳濁液を含む。本発明の主題の薬学的組成物はまた、坐剤、ペッサリー、懸濁液、乳濁液、ローション、軟膏、クリーム、ゲル、スプレー、溶液、または散布粉剤の形態であり得る。
【０３４９】
別の経皮投与手段は、皮膚パッチの使用による手段である。例えば、有効成分を、ポリエチレングリコールまたは流動パラフィンの水性乳剤からなるクリームに組み込むことができる。有効成分を、１重量％と１０重量％との間の濃度で、必要であり得る安定剤および防腐剤など共に白蝋基剤または白色ワセリン基剤からなる軟膏に組み込むこともできる。
【０３５０】
注射形態は、用量あたり１０〜１０００ｍｇ、好ましくは１０〜２５０ｍｇの有効成分を含むことができる。
【０３５１】
組成物を、単位投薬形態（すなわち、単位用量、複数の単位用量、または単位用量のサブユニットを含む個別の部分の形態）で処方することができる。
【０３５２】
投薬量
適切な投薬量レベル（約０．００１ｍｇ〜約５，０００ｍｇ／キログラム体重の化合物）で、活性薬剤は、本明細書中で意図する疾患、障害、および容態の処置で有用であり得る。典型的には、活性薬剤のこの有効量は、一般に、約０．００１ｍｇ〜約１００ｍｇ／患者のキログラム体重／日を含むであろう。さらに、この投薬量の活性薬剤を所望の治療効果を得るために単回投薬単位または複数回投薬単位で投与することができると理解されるであろう。
【０３５３】
１つの実施形態では、好ましい治療有効投薬量は、血清、しかしより好ましくは腫瘍を得るために必要な本発明の主題の化合物の量（本明細書中に記載の多数のアッセイのうちのいずれかで表現型効果（ＡＭＬ  Ｋａｓｕｍｉ−１細胞の成長阻害、ＭＯＬＭ−１３  ＡＭＬ細胞におけるカスパーゼ３，７活性化によって示されるアポトーシスの誘導、ＳＫＢｒ３乳癌細胞におけるＨＥＲ−２キナーゼおよびＲａｆ−１キナーゼの分解、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８乳癌細胞におけるｐ−ＳＴＡＴ３の不活化などであるが、これらに限定されない）を達成するための濃度に等しい濃度）（１ｎＭ〜２００ｕＭ、１ｎＭ〜１００ｕＭ、１ｎＭ〜５０ｕＭ、１００ｎＭ〜１００ｕＭ、１００ｎＭ〜５０ｕＭ、１００ｎＭ〜２０ｕＭ、１ｎＭ〜１ｕＭ、および１ｎＭ〜１００ｎＭからなる群から選択される）であろう。１つの実施形態では、アッセイについての表現型効果はＩＣ５０値である。さらなる実施形態では、好ましい治療有効投薬量は、血清、しかしより好ましくは腫瘍を得るために必要な量（本明細書中に記載の多数のアッセイのうちのいずれかで表現型効果（ＡＭＬ
Ｋａｓｕｍｉ−１細胞の成長阻害、ＭＯＬＭ−１３  ＡＭＬ細胞におけるカスパーゼ３，７活性化によって示されるアポトーシスの誘導、ＳＫＢｒ３乳癌細胞におけるＨＥＲ−２キナーゼおよびＲａｆ−１キナーゼの分解、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８乳癌細胞におけるｐ−ＳＴＡＴ３の不活化などであるが、これらに限定されない）を達成するための濃度に等
しい濃度に等しい濃度）（２００ｕＭ未満、１００ｕＭ未満、５０ｕＭ未満、２５ｕＭ未満、１５ｕＭ未満、１０ｕＭ未満、５ｕＭ未満、２ｕＭ未満、１ｕＭ未満、５００ｎＭ未満、２００ｎＭ未満、または１００ｎＭ未満からなる群から選択される）であろう。さらなる実施形態では、アッセイについての表現型効果はＩＣ５０値である。
【０３５４】
必要に応じて、他の治療薬を、上記組成物中で提供した治療薬と併せて使用することができる。単回投薬形態を得るためにキャリア材料と組み合わせることができる薬学的に活性な成分の量は、処置される宿主、疾患、障害、または容態の性質、および有効成分の性質に応じて変化するであろう。
【０３５５】
好ましい薬学的組成物を、毎日単回または複数回投与することができる。１つの実施形態では、薬学的組成物を１日１回〜３回投与する。低用量で１日２回から開始し、必要に応じてより高い用量にゆっくり増加することがストラテジーである。単回投薬形態を得るためにキャリア材料と組み合わせることができる薬学的に活性な成分の量は、処置される宿主、疾患、障害、または容態の性質、および有効成分の性質に応じて変化するであろう。しかし、任意の特定の患者に特異的な用量レベルは、種々の要因（特異的な薬学的に活性な薬剤の活性、患者の年齢、体重、全身健康、性別、および食事、投与時間、排泄速度、可能な薬物の組み合わせ、処置される特定の容態の重症度、ならびに投与形態が含まれる）に応じて変化するであろうと理解される。当業者は、かかる要因の変動を認識し、日常的実験しか使用せずに特異的な用量レベルを確立することができるであろう。
【０３５６】
薬物動態パラメータ（生物学的利用能、吸収速度定数、見かけ上の分布体積、非結合画分、総クリアランス、そのまま排泄された画分、初回通過代謝、排出速度定数、半減期、および平均滞留時間など）が当該分野で周知である。
【０３５７】
最適な薬学的処方物を、当業者が検討事項（特定の薬学的に活性な薬剤の組み合わせおよび所望の投薬量など）に応じて決定するであろう。例えば、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ
Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ”，１８ｔｈ  ｅｄ．（１９９０，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ  １８０４２），ｐｐ．１４３５−１７１２（その開示が本明細書中で参考として援用される）を参照のこと。かかる処方物は、必須脂質の物理的状態、安定性、ｉｎ  ｖｉｖｏ放出速度、およびｉｎ  ｖｉｖｏクリアランス速度の影響を受け得る。
【０３５８】
１つの実施形態では、本明細書中に記載の主題に従った本発明の薬学的組成物は、例えば、複数回使用または単回使用のパッケージ（例えば、コンテナまたはボトル、ブリスターパッケージが含まれる）にパッケージングされた静脈内形態または経口投薬形態（例えば、カプセル、錠剤、液体、および／または粉末）であり得る。
【０３５９】
１日１回または処置あたり１回の量の薬学的組成物を含む単回投薬キットおよびパッケージを調製することができる。本発明の薬学的組成物の単回用量、単位用量、および１日１回の使い捨てコンテナは、本発明の主題の範囲内と認識される。
【０３６０】
併用療法
別の実施形態では、本発明の薬学的組成物を、さらなる薬学的投薬形態と組み合わせて使用して、癌、悪性腫瘍、または増殖性障害の処置でのその有効性を増強することができる。これに関して、本発明の好ましい組成物を、癌、悪性腫瘍、または増殖性障害の処置に有効であることが当該分野で公知の任意の他の薬学的および／または薬学的投薬形態をさらに含むレジメンの一部として投与することができる。同様に、本明細書中に特定した成分以外の薬学的に活性な成分を、本発明の好ましい実施形態に添加して、癌、悪性腫瘍、または増殖性障害の処置でのその有効性を増強することができる。したがって、このさ
らなる薬学的に活性な成分またはさらなる薬学的投薬形態を、本明細書中に記載の好ましい組成物と共に直接または間接的および同時または連続的のいずれかで患者に投与することができる。
【０３６１】
これに関して、上記で考察した化合物以外の抗癌薬、抗悪性腫瘍薬、または抗増殖性障害薬は、本明細書中で考察した併用療法に有用であることがさらに意図される。上記薬剤またはその薬学的に許容可能な塩もしくは誘導体のいずれかの組み合わせを本明細書中で意図する。
【０３６２】
これに関する１つの実施形態では、本発明の組成物およびさらなる薬学的投薬形態を、同時に患者に投与することができる。別の実施形態では、本発明の好ましい組成物およびさらなる薬学的投薬形態のうちの１つを午前中に投与し、他方を午後に投与することができる。
【０３６３】
別の実施形態では、本明細書中に記載の化合物を、複数の薬学的投薬形態で必要とする患者に投与することができる。この併用療法は、癌、悪性腫瘍、または増殖性障害の処置における本発明の組成物の有効性を最大にすることができる。
【実施例】
【０３６４】
以下の実施例は本発明の薬学的組成物の例であり、本発明を制限することを意図しない。化合物を、ＣｈｅｍＢｉｏＤｒａｗ  Ｕｌｔｒａ  Ｖ．１１．０．１（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｓｏｆｔ；Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）の「Ｃｏｎｖｅｒｔ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ
ｔｏ  Ｎａｍｅ」機能の使用によって命名した。
【０３６５】
実施例１：化学合成および精製
一般的方法。ＮＭＲスペクトルを、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＶ−ＩＩＩ−５００ＭＨｚ  ＮＭＲ分光計にて記録した。化学シフトを、内部標準としてのＴＭＳから低磁場のδ値をｐｐｍで報告する。１Ｈデータを以下のように報告する：化学シフト、多重度（ｓ＝シングレット、ｄ＝ダブレット、ｔ＝トリプレット、ｑ＝カルテット、ｂｒ＝ブロード、ｍ＝マルチプレット）、結合定数（Ｈｚ）、積分。１３Ｃ化学シフトを、内部標準としてのＴＭＳから低磁場のδ値をｐｐｍで報告する。高分解能マススペクトルを、Ｗａｔｅｒｓ  ＬＣＴ  Ｐｒｅｍｉｅｒシステムで記録した。低分解能マススペクトルを、エレクトロスプレーイオン化およびＳＱ検出器を備えたＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  Ｕｌｔｒａ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ＬＣで得た。分析ＨＰＬＣを、ＰＤＡ、ＭｉｃｒｏＭａｓｓ  ＺＱ、およびＥＬＳＤ検出器を備えたＷａｔｅｒｓ  Ａｕｔｏｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎシステムで行った。分析薄層クロマトグラフィを、２５０μＭシリカゲルＦ２５４プレート上で行った。分取薄層クロマトグラフィを、１０００μＭシリカゲルＦ２５４プレート上で行った。フラッシュカラムクロマトグラフィを、２３０〜４００メッシュのシリカゲルを使用して行った。溶媒は、ＨＰＬＣグレードであった。全ての試薬を、ＡｌｄｒｉｃｈまたはＡｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓのいずれかから購入し、精製することなく使用した。全反応をアルゴン保護下で行った。
【０３６６】
（２）−ＰＵ２４ＦＣｌ
２を、既出の手順にしたがって合成した。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ６．４６  （ｓ，  １Ｈ），  ６．１７（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ４．３１
（ｓ，  ２Ｈ），  ４．１２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．９１
（ｓ，  ３Ｈ），  ３．８６  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．７２  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．１９（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ６．６，  ２．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．９７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ２．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  １．９４−１．８７（ｍ，  ２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）δ  １５９．８，  １５７．７，  １５６．２，  １
５２．８，  １５２．４，  １５０．５，  １５０．２，  １４２．６，  １２８．７，
１１９．７，  １１６．８，  １０８．５，  ８２．２，  ６９．８，  ６１．１，  ５６．２，  ４２．１，  ３１．５，  ２８．１，  １５．７；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４３４．１。
【０３６７】
（３）−ＰＵ−Ｈ７１
３を、既出の手順にしたがって合成した。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．３３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．３１  （ｓ，  １Ｈ），  ６．８９  （ｓ，  １Ｈ），  ５．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ５．５８（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ４．３０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．７４−２．６９（ｍ，  １Ｈ），  ２．５８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．０１−１．９６（ｍ，
２Ｈ），  １．０３（ｄ，  Ｊ  ＝  ６．２  Ｈｚ，  ６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）δ  １５４．６，  １５２．９，  １５１．６，  １４９．２，  １４８．９，  １４６．２，  １２７．９，  １２０．１，  １１９．２，  １１２．２，  １０２．２，  ９１．１，  ４８．７，  ４３．９，  ４１．７，  ３０．３，  ２２．９；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５１３．０。
【０３６８】
（５）−ＧＭ−Ｃｙ３Ｂ
５を、既出の手順にしたがって合成した。ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｎａ］＋１１８１．３。
【０３６９】
合成スキーム１
合成スキーム１は、化合物１８〜２６、ＹＫ５（４）、およびＹＫ２０（６）の合成例を示す。
【０３７０】
【化４３】
2018188476.tif 000137
試薬および条件：（ａ）ＰＭＢＣｌ、ＮａＨ、ＤＭＦ、０℃〜室温、１２時間、９５％；（ｂ）ＮＩＳ、ＭｅＣＮ、室温、１時間、９８％；（ｃ）４，６−ジアミノ−２−メルカプトピリミジン、ネオクプロイン、ＣｕＩ、Ｋ２ＣＯ３、ＤＭＳＯ、１２０℃、１６時間、６５％；（ｄ）Ａｃ２Ｏ、ＤＭＡＰ、１１０℃、２時間、９１％；（ｅ）ＴＦＡ、ＣＨＣｌ３、６２℃、２４時間、９５％；（ｆ）ＨＦ／ピリジン、ＮａＮＯ２、０℃、１時間、５４％；（ｇ）１−メチルピペリジン、ＤＭＦ、９０℃、１時間、９０％；（ｈ）ＮａＯＨ、Ｈ２Ｏ、ＭｅＯＨ、６０℃、１時間、９５％；（ｉ）アクリロイルクロリド、Ｅｔ３Ｎ、ジオキサン、室温、２４時間、５０％またはオクタノイルクロリド、Ｅｔ３Ｎ、ジオキサン、室温、１２時間、７１％。
【０３７１】
（１９）−４，６−ジメトキシ−Ｎ，Ｎ−ビス（４−メトキシベンジル）ピリミジン−２−アミン
０℃の２−アミノ−４，６−ジメトキシピリミジン（２．０ｇ、１２．９ｍｍｏｌ）を含む２０ｍＬのＤＭＦ溶液に、ＮａＨ（１．２４ｇ、５１．５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で１０分間撹拌した。４−メトキシベンジルクロリド（４．０３ｇ、２５．７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。メタノールで反応を停止させ、溶媒を減圧下で除去した。残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、４：１）によって精製して、４．８ｇ（９５％）の１９を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．２６（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ４Ｈ），
６．８９（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ５．４７  （ｓ，  １Ｈ），  
４．７８  （ｓ，  ４Ｈ），  ３．８５  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８０  （ｓ，  ６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７１．９，  １６１．５，  １５８．７，  １３０．９，  １２９．１，  １１３．８，  ７８．７，  ５５．２，  ５３．４，  ４８．３；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３９６．３。
【０３７２】
（２０）−５−ヨード−４，６−ジメトキシ−Ｎ，Ｎ−ビス（４−メトキシベンジル）ピリミジン−２−アミン
１９（４．８ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）を含む５０ｍＬのアセトニトリル溶液に、Ｎ−ヨードスクシンイミド（４．１３ｇ、１８．４ｍｍｏｌ）を添加し、室温で１時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、４：１）によって精製して、６．３ｇ（９８％）の２０を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，
ＣＤＣｌ３）：δ  ７．１８（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．６  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ６．８３（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．６  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ４．７１  （ｓ，  ４Ｈ），  ３．８９  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．７９  （ｓ，  ６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １６９．１，  １６０．９，  １５８．８，  １３０．５，  １２９．０，  １１３．９，  ５５．３，  ５４．７，  ４８．６，  ４３．９；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５２２．４。
【０３７３】
（２１）２−（２−（ビス（４−メトキシベンジル）アミノ）−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジアミン
２０（６．２ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）、４，６−ジアミノ−２−メルカプトピリミジン（１．７ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）、ネオクプロイン（０．５３８ｇ、２．３８ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（０．４５２ｇ、２．３８ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（３．３ｇ、３３．８ｍｍｏｌｅ）を含む１００ｍＬのＤＭＳＯの混合物を１２０℃で１６時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して、４．２ｇ（６５％）の２１を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ７．１８（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．６  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ６．８０（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．６  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ５．０９  （ｓ，  １Ｈ），  ４．６８  （ｓ，  ４Ｈ），  ４．４０  （ｓ，  ４Ｈ），  ３．７９
（ｓ，  ６Ｈ），  ３．７４  （ｓ，  ６Ｈ）；  ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５３６．５。
【０３７４】
（２２）Ｎ，Ｎ’−（２−（２−（ビス（４−メトキシベンジル）アミノ）−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジイル）ジアセトアミド
２１（３．２ｇ、６．０ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．０３７ｇ、０．３ｍｍｏｌ）を含む２０ｍＬの無水酢酸溶液を、１１０℃で２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、１：１）によって精製して、３．４ｇ（９１％）の２２を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３／ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．２５（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ７．７０（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），
７．１８（ｄ，  Ｊ  ＝  １０．０  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ６．８１（ｄ，  Ｊ  ＝  １０．０  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ４．７０  （ｓ，  ４Ｈ），  ３．７８  （ｓ，  ６Ｈ），
３．７４  （ｓ，  ６Ｈ），  ２．１０  （ｓ，  ６Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋６２０．４。
【０３７５】
（２３）Ｎ，Ｎ’−（２−（２−アミノ−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジイル）ジアセトアミド
２２（０．９５０ｇ、１．５ｍｍｏｌ）を含む２０ｍＬのＴＦＡ：ＣＨＣｌ３（１：１）の溶液を６２℃で２４時間加熱した。過剰なＴＦＡおよび溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、２０：１）によって精製して、０．５５０ｇ（９５％）の２３を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ
６）：δ  １０．５１（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ８．３７（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ６．９８  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７８  （ｓ，  ６Ｈ），  ２．０６  （ｓ，  ６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １７０．９，  １７０．１，  １６９．２，  １６２．５，  １５８．９，  ９２．８，  ７８．５，  ５３．９，
２４．１；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３８０．２。
【０３７６】
（２４）Ｎ，Ｎ’−（２−（２−フルオロ−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジイル）ジアセトアミド
２３（２．０ｇ、５．３ｍｍｏｌ）を、撹拌子を入れたプラスチックチューブに添加し、０℃に冷却した。次いで、ＨＦ／ピリジン溶液（３．６ｍＬ、１４４ｍｍｏｌ）を添加した。ＮａＮＯ２（０．５４５ｇ、７．９ｍｍｏｌ）を、２０分間にわたって撹拌しながら少しずつ添加した。これを、さらに０℃で５０分間および室温で２時間強く撹拌した。ＣａＣＯ３（１４．４ｇ、１４４ｍｍｏｌ）を添加して過剰なＨＦを破壊した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、カラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して、１．１ｇ（５４％）の２４を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．４５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．６１  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．００  （ｓ，  ６Ｈ），  ２．１８  （ｓ，  ６Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３８３．２。
【０３７７】
（２５）Ｎ，Ｎ’−（２−（４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジイル）ジアセトアミド
２４（３０ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）を含む２ｍＬのＤＭＦ溶液に、１−メチルピペラジン（３１ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を添加し、９０℃で１時間加熱した。溶媒および過剰な試薬を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、３２ｍｇ（９０％）の２５を得た。１Ｈ
ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．３６（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．１３（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ３．８８  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８７（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４６（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．９９  （ｓ，  ６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７２．２，  １６９．４，  １６８．９，  １６０．４，  １５８．９，  ９６．１，  ９５．９，  ５４．７，  ５４．３，  ４６．１，  ４３．８，  ２４．７；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４６３．２。
【０３７８】
（２６）２−（４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジアミン
２５（５０ｍｇ、０．１０８ｍｍｏｌ）、１Ｎ  ＮａＯＨ（水溶液）（２ｍＬ）を含む４ｍＬメタノールの混合物を、６０℃で１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を分取ＴＬＣによって精製して、３９ｍｇ（９５％）の２６を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ５．１９  （ｓ，  １Ｈ），  ４．４８  （ｓ，  ４Ｈ），  ３．８８  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８７（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４８（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３７８．９。
【０３７９】
ＹＫ５（４）−Ｎ−（６−アミノ−２−（４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−イル）アクリルアミド２６（０．３７０ｇ、０．９７７ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（０．９８８ｇ、９．７７ｍｍｏｌ）を含む１０ｍＬ無水ジオキサン溶液に、アクリロイルクロリド（０．８５５ｇ、９．７７ｍｍｏｌ）を水浴下で滴下した。得られた混合物を室温で２４時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、０．２１１ｇ（５０％）の４を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００
ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．９６（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ７．０４  （ｓ，  
１Ｈ），  ６．４１（ｄ，  Ｊ  ＝  １６．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．１７（ｄｄ，  Ｊ  ＝  １６．８，  １０．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．７８（ｄ，  Ｊ  ＝  １０．３
Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．８３（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ３．８８  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８７（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４７（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １６９．３，  １６８．８，  １６２．６，  １６２．５，  １５８．３，  １５４．９，  １２８．９，  １２７．１，  ８６．７，  ７８．２，  ５３．１，  ５２．４，  ４４．５，  ４１．９；ＨＲＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ１８Ｈ２５Ｎ８Ｏ３Ｓの計算値，４３３．１７７０；実測値４３３．１７５０；ＨＰＬＣ：（ａ）Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ（ｂ）ＡＣＮ＋０．１％ＴＦＡ（１０分間で５→９５％ＡＣＮ）Ｒｔ＝６．２８分。
【０３８０】
ＹＫ２０（６）−Ｎ−（６−アミノ−２−（４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−イル）オクタンアミド
２６（２０ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（４９ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を含む１ｍＬ無水ジオキサン溶液に、オクタノイルクロリド（８０ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を室温で１２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、１７ｍｇ（７１％）の６を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．０１（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ６．９７  （ｓ，  １Ｈ），  ４．８６（ｂｒ
ｓ，  ２Ｈ），  ３．８９  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８６（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４６（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．３０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．６２（ｍ，  ２Ｈ），  １．２０−１．３０（ｍ，  ８Ｈ），  ０．８７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ６．９  Ｈｚ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７２．７，  １７１．１，  １７０．４，  １６４．３，  １６０．０，  １５６．７，  ８７．９，  ８０．１，  ５４．９，  ５４．２，  ４６．３，  ４３．７，  ３７．７，  ３１．６，  ２９．１，  ２９．０，  ２５．２，  ２２．６，  １４．１；ＨＲＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２３Ｈ３７Ｎ８Ｏ３Ｓの計算値，５０５．２７０９；実測値５０５．２７０１；ＨＰＬＣ：（ａ）Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ（ｂ）ＡＣＮ＋０．１％ＴＦＡ（１０分間で５→９５％ＡＣＮ）Ｒｔ＝７．９８分。
【０３８１】
合成スキーム２
合成スキーム２は、化合物２８〜３６、ＹＫ３０（１５）、およびＹＫ３１（１６）の合成例を示す。
【０３８２】
【化４４】
2018188476.tif 000138
試薬および条件：（ａ）ＮａＨ、ＥｔＯＨ、還流、１２時間、８９％；（ｂ）ＰＭＢＣｌ、ＮａＨ、ＤＭＦ、０℃〜室温、１２時間、９７％；（ｃ）ＮＩＳ、ＭｅＣＮ、室温、１時間、９６％；（ｄ）４，６−ジアミノ−２−メルカプトピリミジン、ネオクプロイン、ＣｕＩ、Ｋ２ＣＯ３、ＤＭＳＯ、１２０℃、１６時間、８０％；（ｅ）Ａｃ２Ｏ、ＤＭＡＰ、１１０℃、２時間、８９％；（ｆ）ＴＦＡ、ＣＨＣｌ３、６２℃、２４時間、９２％；（ｇ）ＨＦ／ピリジン、ＮａＮＯ２、０℃、１時間、４６％；（ｈ）１−メチルピペリジン、ＤＭＦ、９０℃、１時間、９０％；（ｉ）ＮａＯＨ、Ｈ２Ｏ、ＭｅＯＨ、６０℃、１時間、９３％；（ｊ）アクリロイルクロリド、Ｅｔ３Ｎ、ジオキサン、室温、１２時間、４０％またはプロピオニルクロリド、Ｅｔ３Ｎ、ジオキサン、室温、１２時間、６６％。
【０３８３】
（２８）−２−アミノ−４，６−ジエトキシピリミジン
２−アミノ−４，６−ジクロロピリミジン（１．０ｇ、６．０９ｍｍｏｌ）を含む２０ｍＬ無水エタノール溶液に、室温でＮａＨ（０．５８５ｇ、２４．３９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を還流下で１２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をジクロロメタンに溶解し、ブラインで洗浄した。溶媒を蒸発させ、得られた固体をカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、４：１）によって精製して、１．０ｇ（８９％）の２８を
得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ５．４２  （ｓ，  １Ｈ），  ４．７８（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ４．２４（ｑ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ４Ｈ），  １．３４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ６Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋１８３．９。
【０３８４】
（２９）−４，６−ジエトキシ−Ｎ，Ｎ−ビス（４−メトキシベンジル）ピリミジン−２−アミン
０℃の２８（１．００ｇ、５．４６ｍｍｏｌ）を含む２０ｍＬのＤＭＦ溶液に、ＮａＨ（０．５２４ｇ、２１．８３ｍｍｏｌ）を添加し、室温で１０分間撹拌した。４−メトキシベンジルクロリド（１．８８ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。エタノールで反応を停止させ、溶媒を減圧下で除去した。残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して残渣を得た。この残渣をカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、４：１）によって精製して、２．２５ｇ（９７％）の２９を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．１８（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１，  ４Ｈ），  ６．８４（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１，  ４Ｈ），
５．３８  （ｓ，  １Ｈ），  ４．７０  （ｓ，  ４Ｈ），  ４．２７（ｑ，  Ｊ  ＝
７．１  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ３．７９  （ｓ，  ６Ｈ），  １．２９  （ｔ，  Ｊ  ＝
７．１  Ｈｚ，  ６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７１．５，  １６１．４，  １５８．６，  １３０．９，  １２９．０，  １１３．７，  ７８．６，  ６１．８，  ５５．２，  ４８．１，  １４．６；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４２４．２。
【０３８５】
（３０）−５−ヨード−４，６−ジエトキシ−Ｎ，Ｎ−ビス（４−メトキシベンジル）ピリミジン−２−アミン
２９（２．２ｇ、５．２ｍｍｏｌ）を含む５０ｍＬアセトニトリルの溶液に、Ｎ−ヨードスクシンイミド（１．７ｇ、８ｍｍｏｌ）を添加し、室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、４：１）によって精製して、２．７５ｇ（９６％）の３０を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．１７（ｍ，  ４Ｈ），  ６．８４（ｍ，  ４Ｈ），  ４．６８  （ｓ，  ４Ｈ），  ４．３４（ｑ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ３．８０  （ｓ，  ６Ｈ），  １．３２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ
（１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３／ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １６８．３，  １６０．４，  １５８．２，  １３０．１，  １２８．４，  １１３．２，  ６２．６，  ５４．８，  ４８．１，  ４４．２，  １４．１；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５５０．１。
【０３８６】
（３１）２−（２−（ビス（４−メトキシベンジル）アミノ）−４，６−ジエトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジアミン
３０（２．７５ｇ、５．０ｍｍｏｌ）、４，６−ジアミノ−２−メルカプトピリミジン（０．７１ｇ、５．０ｍｍｏｌ）、ネオクプロイン（０．２２６ｇ、１．０ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（０．１９０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（１．３８ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）を含む６０ｍＬのＤＭＳＯの混合物を、１２０℃で１６時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって部分精製して、２．２ｇ（８０％）の不純物を含む３１［ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５６４．２］を得た。これをさらに精製せずに次の工程で使用した。
【０３８７】
（３２）Ｎ，Ｎ’−（２−（２−（ビス（４−メトキシベンジル）アミノ）−４，６−ジエトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジイル）ジアセトアミド
３１（１．２ｇ、２．１９ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．０１３ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を含む２０ｍＬ無水酢酸溶液を、１１０℃で２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し
、残渣をカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、１：１）によって精製して、１．２ｇ（８９％）の３２を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２２  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．２１（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ４Ｈ），
６．８６（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ４．７０  （ｓ，  ４Ｈ）４．３２（ｑ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ３．８０  （ｓ，  ６Ｈ），  ２．１６  （ｓ，  ６Ｈ），  １．２０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ６Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋６４８．１。
【０３８８】
（３３）Ｎ，Ｎ’−（２−（２−アミノ−４，６−ジエトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジイル）ジアセトアミド
３２（２．００ｇ、３．０９ｍｍｏｌ）を含む２０ｍＬのＴＦＡ：ＣＨＣｌ３（１：１）溶液を、６２℃で２４時間加熱した。過剰なＴＦＡおよび溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、２０：１）によって精製して、１．１５ｇ（９２％）の３３を得た。［ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４０７．８］。
【０３８９】
（３４）Ｎ，Ｎ’−（２−（２−フルオロ−４，６−ジエトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジイル）ジアセトアミド
３３（１．５ｇ、３．６８ｍｍｏｌ）を、撹拌子を入れたプラスチックチューブに添加し、０℃に冷却した。次いで、ＨＦ／ピリジン溶液（３．０ｍＬ、１２０ｍｍｏｌ）を添加した。数分後、ＮａＮＯ２（０．３８０ｇ、５．５２ｍｍｏｌ）を、２０分間にわたって撹拌しながら少しずつ添加した。これを、０℃でさらに５０分間強く撹拌した。ＣａＣＯ３（１２．０ｇ、１２０ｍｍｏｌ）を添加して過剰なＨＦを破壊した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、カラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して、０．７６ｇ（４６％）の３４を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．４７（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ７．８５（ｂｒ
ｓ，  ２Ｈ），  ４．４４（ｑ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ２．１７  （ｓ，  ６Ｈ），  １．３１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ６Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４１１．３。
【０３９０】
（３５）Ｎ，Ｎ’−（２−（４，６−ジエトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジイル）ジアセトアミド
３４（０．１６５ｇ、０．４０２ｍｍｏｌ）を含む３ｍＬのＤＭＦ溶液に、１−メチルピペラジン（４００ｍｇ、４．４ｍｍｏｌ）を添加し、９０℃に１時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、０．１８０ｇ（９１％）の３５を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．３５（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．０６（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ４．３５（ｑ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ３．８２（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４３（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３６  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．１５  （ｓ，  ６Ｈ），  １．２６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ６Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４９１．２。
【０３９１】
（３６）−２−（４，６−ジエトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジアミン
３５（０．１３０ｇ、０．２６５ｍｍｏｌ）、１Ｎ  ＮａＯＨ（水溶液）（２ｍＬ）を含む７ｍＬメタノールの混合物を、６０℃で１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、１０：１）によって精製して、０．１００ｇ（９３％）の３６を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ５．１７（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ４．４８  （ｓ，  ４Ｈ），  ４．３４（ｑ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ３．８３（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４７（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ６Ｈ）；ＭＳ
（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４０７．１。
【０３９２】
ＹＫ３０（１５）−Ｎ−（６−アミノ−２−（４，６−ジエトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−イル）アクリルアミド
３６（２０ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（４９ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を含む１ｍＬ無水ジオキサン溶液に、アクリロイルクロリド（４４ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を室温で１２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、９ｍｇ（４０％）の１５を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１４（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ７．０４  （ｓ，  １Ｈ），  ６．４０（ｄ，
Ｊ  ＝  １６．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．１９（ｄｄ，  Ｊ  ＝  １６．９，  １０．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．７７（ｄ，  Ｊ  ＝  １０．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．８３（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ４．３５（ｑ，  Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ３．８３（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４６（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，  ６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １７０．１，  １６９．２，  １６４．８，  １６４．２，
１５９．４，  １５６．４，  １３１．３，  １２８．１，  ８７．５，  ７９．９，
６２．０，  ５４．３，  ４６．６，  ４３．２，  １４．４；ＨＲＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２０Ｈ２９Ｎ８Ｏ３Ｓの計算値，４６１．２０８３；実測値４６１．２０９６；ＨＰＬＣ：（ａ）Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ（ｂ）ＡＣＮ＋０．１％ＴＦＡ（１０分間で５→９５％ＡＣＮ）Ｒｔ＝５．５７分。
【０３９３】
ＹＫ３１（１６）−Ｎ−（６−アミノ−２−（４，６−ジエトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−イル）プロピオンアミド
３６（２０ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（４９ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を含む１ｍＬ無水ジオキサン溶液に、プロピオニルクロリド（４５ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を室温で１２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、１５ｍｇ（６６％）の１６を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１７（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ６．９５  （ｓ，  １Ｈ），  ４．８４（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ４．３５（ｑ，  Ｊ  ＝  ７．５，  ４Ｈ），  ３．８２（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４４（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３４  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．３４（ｑ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．２８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ６Ｈ），  １．１５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６
ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７３．３，  １７０．６，  １７０．５，  １６４．２，  １６０．０，  １５６．７，  ８７．７，  ８０．３，  ６２．４，  ５４．９，
４６．３，  ４３．７，  ３０．６，  １４．５，  ９．１；ＨＲＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２０Ｈ３１Ｎ８Ｏ３Ｓの計算値，４６３．２２４０；実測値４６３．２２５３；ＨＰＬＣ：（ａ）Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ（ｂ）ＡＣＮ＋０．１％ＴＦＡ（１０分間で５→９５％ＡＣＮ）Ｒｔ＝６．２２分。
【０３９４】
合成スキーム３
合成スキーム３は、化合物３８〜４３、ＹＫ５７（１１）、およびＹＫ５６（１０）の合成例を示す。
【０３９５】
【化４５】
2018188476.tif 000139
試薬および条件：（ａ）Ｈ（ＯＣＨ２ＣＨ２）４ＯＨ、ＤＭＦ、８０℃、３時間、８３％；（ｂ）ＨＦ／ピリジン、ＮａＮＯ２、０℃、４２％；（ｃ）１−メチルピペラジン、ＤＭＦ、９０℃、１時間、９１％；（ｄ）ＮＩＳ、ＣＨ３ＣＮ、室温、１．５時間、８５％；（ｅ）４，６−ジアミノ−２−メルカプトピリミジン、ネオクプロイン、ＣｕＩ、Ｋ３ＰＯ４、ＤＭＳＯ、１５０℃、２．５時間、７３％；（ｆ）アクリロイルクロリド、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ２Ｃｌ２、０℃〜室温、８時間、３８％；（ｇ）ＮａＯＨ、Ｈ２Ｏ、ＴＨＦ、室温、６時間、５２％；（ｈ）Ｄ−ビオチン、ＤＣＣ、ＤＭＡＰ、ＣＨ２Ｃｌ２、超音波処理、８時間、７２％。
【０３９６】
（３８）−２−（２−（２−（２−（２−アミノ−６−メトキシピリミジン−４−イルオキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エタノール
２０ｍＬのＤＭＦに溶解した７．２８ｇ（３７．５ｍｍｏｌ）のテトラエチレングリコールに０．９００ｇ（３７．５ｍｍｏｌ）のＮａＨを添加し、得られた懸濁液を室温で１
０分間撹拌した。次いで、２．０ｇ（１２．５ｍｍｏｌ）の２−アミノ−４−クロロ−６−メトキシピリミジンを添加し、反応混合物を８０℃で３時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、油性残渣をカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、１００：０→９５：５）によって精製して、３．３０ｇ（８３％）のオイル３８を得た。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ，９５：５  ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．２４；１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ５．４８  （ｓ，  １Ｈ），  ５．０８（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），
４．３９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ４．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．８３  （ｓ，  ３Ｈ），
３．７９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ４．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．６０−３．７３（ｍ，  １２Ｈ），  ３．２１（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７２．６，  １７２．０，  １６２．４，  ８０．２，  ７２．８，
７０．８６，  ７０．８０，  ７０．７７，  ７０．５７，  ６９．７，  ６５．６，
６１．８，  ５３．９；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３１８．１。
【０３９７】
（３９）−２−（２−（２−（２−（２−フルオロ−６−メトキシピリミジン−４−イルオキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エタノール
１．５５ｇ（４．８８ｍｍｏｌ）の３８を、撹拌子を入れたプラスチックチューブに添加し、０℃に冷却した。次いで、ＨＦ／ピリジン溶液（１．２２ｍｌ、４８．８ｍｍｏｌ）を添加した。数分後、０．５０５ｇ（７．３２ｍｍｏｌ）のＮａＮＯ２を、２０分間にわたって撹拌しながら少しずつ添加した。これをさらに０℃で７０分間および室温で３時間強く撹拌した。次いで、１５ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２および４．８８ｇのＣａＣＯ３（４８．８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で５時間撹拌した。次いで、これを焼結（ｃｉｎｔｅｒｅｄ）ディスク漏斗で濾過し、固体をＥｔＯＡｃ（４×２５ｍｌ）で洗浄した。合わせた濾液をセライトで濾過し、減圧下で濃縮し、油性残渣をカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、１００：０→９５：５）によって精製して、０．６５ｇ（４２％）のオイル３９を得た。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ）：Ｒｆ＝０．１９；１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ５．９９  （ｓ，  １Ｈ），  ４．４８−４．５０（ｍ，  ２Ｈ），  ３．９５  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．８０−３．８４（ｍ，  ２Ｈ），  ３．５８−３．７５（ｍ，  １２Ｈ），  ２．５６（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７３．７（ｄ，  Ｊ  ＝  １５．７  Ｈｚ），  １７３．０（ｄ，  Ｊ  ＝  １５．７  Ｈｚ），  １６１．６（ｄ，  Ｊ  ＝  ２１５．９  Ｈｚ），  ８８．０（ｄ，  Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ），  ７２．５，  ７０．７０，  ７０．６８，  ７０．５７，  ７０．３７，  ６９．２，  ６６．６，  ６１．８，  ５４．７；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３２１．２。
【０３９８】
（４０）２−（２−（２−（２−（６−メトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−４−イルオキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エタノール
０．５５ｇ（１．７２ｍｍｏｌ）の３９を４０ｍｌのＤＭＦに溶解し、１．７２ｇ（１７．２ｍｍｏｌ）の１−メチルピペラジンを添加し、９０℃で１時間加熱した。溶媒および過剰な試薬を減圧下で除去し、油性残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して、０．６３ｇ（９１％）のオイル４０を得た。ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ），２０：１  ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．２４；１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ５．４０  （ｓ，  １Ｈ），  ４．４２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．８５  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．８０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．１  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ３．６５−３．７３（ｍ，  １２Ｈ），  ３．６０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ４．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．４４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．１  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ２．３３  （ｓ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７２．０，  １７１．３，  １６０．７，  ７８．５，  ７２．６，  ７１．８，  ７０．６４，  ７０．５５，  ７０．３３，  ６９．５，  ６５．１，  ６１．７，  ５４．９，  ５３．５，  ４６．２，
４３．７；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４０１．３。
【０３９９】
（４１）２−（２−（２−（２−（５−ヨード−６−メトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−４−イルオキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エタノール
２０ｍｌのＣＨ３ＣＮに溶解した０．６００ｇ（１．５０ｍｍｏｌ）の４０に０．５８１ｇ（２．５８ｍｍｏｌ）のＮ−ヨードスクシンイミドを添加し、溶液を室温で１．５時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、油性残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ：Ｅｔ３Ｎ、９０：１０：２）によって精製して、０．６７０ｇ（８５％）のオイル４１を得た。ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ：Ｅｔ３Ｎ，９０：１０：２  ｖ／ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．２９；１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ４．４６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ４．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．９２  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．８６（ｍ，  ４Ｈ），  ３．５７−３．８３（ｍ，  １４Ｈ），  ２．４６（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３３  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５２７．２。
【０４００】
（４２）−２−（２−（２−（２−（５−（４，６−ジアミノピリミジン−２−イルチオ）−６−メトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−４−イルオキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エタノール
０．６２０ｇ（１．１８ｍｍｏｌ）の４１、０．５０１ｇ（２．３６ｍｍｏｌ）Ｋ３ＰＯ４、０．０５３ｇ（０．２３６ｍｍｏｌ）ネオクプロイン、０．０４５ｇ（０．２３６ｍｍｏｌ）ヨウ化銅、および０．１８４ｇ（１．３０ｍｍｏｌ）４，６−ジアミノ−２−メルカプトピリミジンを含む１４ｍｌのＤＭＳＯを、１５０℃で２．５時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ：Ｅｔ３Ｎ、９９：１：２→９５：５：２）によって精製して、０．４６５ｇ（７３％）の４２を得た。ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ：Ｅｔ３Ｎ，８５：１５：２  ｖ／ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．３５；１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ５．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ４．９４（ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ４．４５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ４．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．８７  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．８０−３．８６（ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ３．７４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ４．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．６９  （ｔ，  Ｊ  ＝
４．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．５１−３．６３（ｍ，  １０Ｈ），  ２．４６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ４．６  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５４１．４。
【０４０１】
（４３）−２−（２−（２−（２−（５−（４−アクリルアミド−６−アミノピリミジン−２−イルチオ）−６−メトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−４−イルオキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エチルアクリラート
０℃の０．１００ｇ（０．１８５ｍｍｏｌ）の４２を含む２ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２に、０．０３７ｇ（５１μｌ、０．３７０ｍｍｏｌ）のＥｔ３Ｎを添加した。次いで、０．１１７ｇ（１０５μｌ、１．３０ｍｍｏｌ）のアクリロイルクロリドを０℃で添加した。５分後、氷浴を除去し、室温で撹拌し続けた。２時間後、さらなる０．０３７ｇ（５１μｌ、０．３７０ｍｍｏｌ）のＥｔ３Ｎおよび０．０５０ｇ（４５μｌ、０．５５５ｍｍｏｌ）のアクリロイルクロリドを添加し、さらに６時間撹拌し続けた。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１２：１）によって精製して、０．０４９ｇ（３８％）の４３を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，
ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１６（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ７．０６  （ｓ，  １Ｈ），  ６．３９−６．４２（ｍ，  ２Ｈ），  ６．１０−６．２７（ｍ，  ２Ｈ），  ５．７６−５．８３（ｍ，  ２Ｈ），  ４．９２  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．４９（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ４．２９（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ３．８９  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．８６  （ｓ，  ４Ｈ），  ３．５１−３．７４（ｍ，  １２Ｈ），  ２．４８  （ｓ，  ４Ｈ），
２．３７  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋６４９．４。
【０４０２】
ＹＫ５７（１１）−Ｎ−（６−アミノ−２−（４−（２−（２−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）−６−メトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−イル）アクリルアミド
０．８ｍｌのＴＨＦに溶解した０．０４２ｇ（０．０６４７ｍｍｏｌ）の４３に０．２ｍＬの０．５Ｎ  ＮａＯＨを室温で添加し、６時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して０．０２０ｇ（５２％）の１１を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．３８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．０７  （ｓ，  １Ｈ），  ６．４２（ｄ，  Ｊ  ＝  １６．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．２４（ｄｄ，  Ｊ  ＝  １６．７，  １０．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．７７（ｄ，  Ｊ  ＝  １０．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．９５（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ４．４９（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ３．９０  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．８６（ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ３．５１−３．７４（ｍ，  １４Ｈ），  ２．４７（ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ２．３６  （ｓ，  ３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２５Ｈ３９Ｎ８Ｏ７Ｓの計算値，５９５．２６６２；実測値，５９５．２６５８；ＨＰＬＣ：（ａ）Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ（ｂ）ＡＣＮ＋０．１％ＴＦＡ（１０分間で５→９５％ＡＣＮ）Ｒｔ＝５．０５分。
【０４０３】
ＹＫ５６（１０）−２−（２−（２−（２−（５−（４−アクリルアミド−６−アミノピリミジン−２−イルチオ）−６−メトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−４−イルオキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル５−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタノアート
５．０ｍｇ（０．００８４ｍｍｏｌ）の１１、７．０ｍｇ（０．０２８７ｍｍｏｌ）Ｄ−（＋）−ビオチン、１．０ｍｇ（０．００８４ｍｍｏｌ）ＤＭＡＰ、１４．０ｍｇ（０．０６７９ｍｍｏｌ）ＤＣＣを含む２ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２を、密封した管内で８時間超音波処理した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、５．０ｍｇ（７２％）の１０を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ９．５８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．１５  （ｓ，  １Ｈ），  ６．４１−６．４３（ｍ，  ２Ｈ），  ６．１９（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ５．７７（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ５．７３（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．３，
４．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．３１（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ４．５−４．６（ｍ，
２Ｈ），  ４．４１−４．４７（ｍ，  １Ｈ），  ４．３５−  ４．４（ｍ，  １Ｈ），  ４．１５−４．２５（ｍ，  ２Ｈ），  ３．８５−３．９３（ｂｒ  ｓ，  ７Ｈ），
３．５−３．７５（ｍ，  １２Ｈ），  ３．１４−３．１９（ｍ，  １Ｈ），  ２．９３（ｄｄ，  Ｊ  ＝  １２．９，  ４．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．８４（ｄ，  Ｊ  ＝
１２．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．５６（ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ２．４１  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．２８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ３Ｈ），  １．３７−１．７８（ｍ，  ６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ＝  １７３．２，  １７０．７，  １７０．２，  １６９．４，  １６４．６，  １６４．３，  １６３．７，  １５９．５，  １５６．６，  １３０．６，  １２８．３，  ８８．３，  ７７．２，  ７０．５，  ７０．２，  ７０．１，  ６９．３，  ６８．８，  ６５．８，  ６３．１，  ６１．８，  ５９．９，  ５５．２，  ５４．２，  ５３．８，  ４５．４，  ４２．９，  ４０．１，  ３３．４，  ２９．３，  ２７．９，  ２７．８，  ２４．４；ＨＲＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３５Ｈ５３Ｎ１０Ｏ９Ｓ２の計算値，８２１．３４３８；実測値，８２１．３４３９；ＨＰＬＣ：（ａ）Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ（ｂ）ＡＣＮ＋０．１％ＴＦＡ（１０分間で５→９５％ＡＣＮ）Ｒｔ＝７．１０分。
【０４０４】
合成スキーム４
合成スキーム４は、化合物４５〜５０、ＹＫ５４（１２）、およびＹＫ５５（９）の合成例を示す。
【０４０５】
【化４６】
2018188476.tif 000140
試薬および条件：（ａ）ＴｓＣｌ、ＮａＯＨ、ＴＨＦ、Ｈ２Ｏ、０℃、２時間、７８％；（ｂ）ピペラジン、ＣＨ３ＣＮ、７５℃、１２時間、６６％；（ｃ）２４、ＤＭＦ、９０℃、２時間、７９％；（ｄ）ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ、Ｈ２Ｏ、６０℃、２時間、９８％；（ｅ）アクリロイルクロリド、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ２Ｃｌ２、０℃、７時間、３６％；（ｆ）ＮａＯＨ、ＴＨＦ、Ｈ２Ｏ、３時間、７５％；（ｇ）Ｄ−ビオチン、ＤＣＣ、ＤＭＡＰ、ＣＨ２Ｃｌ２、超音波処理、１３時間、８５％；（ｈ）アクリロイルクロリド、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ２Ｃｌ２、０℃、６時間、４１％。
【０４０６】
（４５）−２−（２−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル
４−メチルベンゼンスルホナート
２．０ｇ（１０．３ｍｍｏｌ）のテトラエチレングリコールを含む１０ｍｌのＴＨＦを０℃に冷却した。０．２００ｇ（５ｍｍｏｌ）のＮａＯＨを含む２ｍｌの蒸留水を添加し、３０分間撹拌した。次いで、０．４９１ｇ（２．５８ｍｍｏｌ）のｐ−トルエンスルホ
ニルクロリドをゆっくり添加し、０℃で２時間撹拌し続けた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、５０：５０→１０：９０）によって精製して、０．７０５ｇ（７８％）のオイル４５を得た。ＴＬＣ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ，１０：９０ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．２６；１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．８０（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．３４（ｄ，  Ｊ
＝  ８．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．１６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ４．９  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．５９−３．７４（ｍ，  １４Ｈ），  ２．４５  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｎａ］＋３７１．３。
【０４０７】
（４６）−２−（２−（２−（２−（ピペラジン−１−イル）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エタノール
０．７０５ｇ（２．０２ｍｍｏｌ）の４５および０．６９７ｇ（８．０９ｍｍｏｌ）のピペラジンを含む４５ｍｌのＣＨ３ＣＮを、７５℃で１２時間加熱した。溶媒および過剰な試薬を減圧下で除去し、油性残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、９０：５：５→９０：０：１０）によって精製して、０．３５０ｇ（６６％）のオイル４６を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ３．７２（ｍ，  ２Ｈ），  ３．５８−３．７０（ｍ，  １２Ｈ），  ２．９１（ｍ，  ４Ｈ），  ２．５９（ｂｒ  ｍ，  ２Ｈ），  ２．４９（ｍ，  ４Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋２６３．３。
【０４０８】
（４７）−Ｎ，Ｎ’−（２−（２−（４−（２−（２−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）ピペラジン−１−イル）−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジイル）ジアセトアミド
０．４３０ｇ（１．１２ｍｍｏｌ）の２４を含む２７ｍｌのＤＭＦに０．３１０ｇ（１．１８ｍｍｏｌ）の４６を添加し、９０℃で２時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、１０：１）によって精製して、０．５５２ｇ（７９％）の４７を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．３８（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ８．１３  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８８（ｂｒ  ｓ，  １０Ｈ），  ３．５７−３．７４（ｍ，  １４Ｈ），  ２．６６（ｂｒ  ｓ，
２Ｈ），  ２．５８（ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ２．１５  （ｓ，  ６Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋６２５．５。
【０４０９】
（４８）−２−（２−（２−（２−（４−（５−（４，６−ジアミノピリミジン−２−イルチオ）−４，６−ジメトキシピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エタノール
０．５２０ｇ（０．８３２ｍｍｏｌ）の４７に２５ｍｌのＭｅＯＨおよび７ｍｌの１０％ＮａＯＨ（水溶液）を添加し、懸濁液を６０℃で２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、１５：１）によって精製して、０．４４０ｇ（９８％）の４８を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ５．１７  （ｓ，  １Ｈ），  ４．６０（ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ３．８８（ｂｒ  ｓ，  １０Ｈ），  ３．５７−３．７７（ｍ，  １４Ｈ），  ２．６７（ｂｒ
ｓ，  ２Ｈ），  ２．５９（ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５４１．４。
【０４１０】
（４９）２−（２−（２−（２−（４−（５−（４−アクリルアミド−６−アミノピリミジン−２−イルチオ）−４，６−ジメトキシピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エチルアクリラート
０℃の２２．６ｍｇ（０．０４２ｍｍｏｌ）の４８を含む３ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２に、８３．６ｍｇ（１１６μｌ、０．８３６ｍｍｏｌ）のＥｔ３Ｎを添加した。１１．４ｍｇ（１０．２μｌ、０．１２６ｍｍｏｌ）のアクリロイルクロリドを０℃で添加した。１時間
後、さらなる１１．４ｍｇ（１０．２μｌ、０．１２６ｍｍｏｌ）のアクリロイルクロリドを添加した。これをさらに５回繰り返し、総反応時間は７時間であった（総アクリロイルクロリド、７９．８ｍｇ、７１．７μｌ、０．８８２ｍｍｏｌ）。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、１０：１）によって精製して、９．８ｍｇ（３６％）の４９を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１０（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ７．０５  （ｓ，  １Ｈ），  ６．３５−６．４５（ｍ，  ２Ｈ），  ６．１０−６．２０（ｍ，  ２Ｈ），  ５．７３−５．８５（ｍ，  ２Ｈ），  ４．９０（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ４．３２（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ３．８９（ｂｒ  ｓ，  １０Ｈ），  ３．６０−３．７０（ｍ，  １２Ｈ），  ２．６９（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ２．６１（ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋６４９．５。
【０４１１】
ＹＫ５４（１２）Ｎ−（６−アミノ−２−（２−（４−（２−（２−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）ピペラジン−１−イル）−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−イル）アクリルアミド
１．６ｍｌのＴＨＦに溶解した８．０ｍｇ（０．０１２ｍｍｏｌ）の４９に０．４ｍＬの０．５Ｎ  ＮａＯＨを室温で添加し、３時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、１０：１）によって精製して、５．５ｍｇ（７５％）の１２を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．６５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．０３  （ｓ，  １Ｈ），  ６．３６（ｄ，  Ｊ  ＝  １６．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．１１（ｍ，  １Ｈ），  ５．７０（ｄ，  Ｊ  ＝  １０．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．１４（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ３．８８（ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ３．８５  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．５７−３．７５（ｍ，  １５Ｈ），  ２．７０（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ２．６２（ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ）；ＨＲＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２５Ｈ３９Ｎ８Ｏ７Ｓの計算値，５９５．２６６２；実測値，５９５．２６８４。ＨＰＬＣ：（ａ）Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ（ｂ）ＡＣＮ＋０．１％ＴＦＡ（１０分間で５→９５％ＡＣＮ）Ｒｔ＝６．０５分。
【０４１２】
（５０）−２−（２−（２−（２−（４−（５−（４，６−ジアミノピリミジン−２−イルチオ）−４，６−ジメトキシピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル５−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈチエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタノアート
５０．０ｍｇ（０．０９２５ｍｍｏｌ）の４８、９０．０ｍｇ（０．３７ｍｍｏｌ）のＤ−（＋）−ビオチン、１１．３ｍｇ（０．０９２５ｍｍｏｌ）のＤＭＡＰ、１５３．０ｍｇ（０．７４ｍｍｏｌ）のＤＣＣを含む１５ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２を、密封した管内で１３時間超音波処理した。反応混合物を蒸発乾固し、残渣に対してカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１→１０：１）を行って、不純物を含む５０を得た。これを分取ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、６０．０ｍｇ（８５％）の５０を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ５．２７（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ５．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ４．８２（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ４．５９（ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ４．４９（ｍ，  １Ｈ），  ４．３２（ｍ，  １Ｈ），  ４．２２（ｍ，  ２Ｈ），  ３．８８（ｂｒ  ｓ，  １０Ｈ），  ３．６０−３．７５（ｍ，  １２Ｈ），  ３．１５（ｍ，  １Ｈ），  ２．９２（ｍ，  １Ｈ），  ２．９０（ｍ，  １Ｈ），  ２．６９（ｍ，  ２Ｈ），  ２．６０（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．９  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．３７−１．７８（ｍ，  ６Ｈ）；ＨＲＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３２Ｈ５１Ｎ１０Ｏ８Ｓ２の計算値，７６７．３３３３；実測値７６７．３３６１。
【０４１３】
ＹＫ５５（９）−２−（２−（２−（２−（４−（５−（４−アクリルアミド−６−アミノピリミジン−２−イルチオ）−４，６−ジメトキシピリミジン−２−イル）ピペラジ
ン−１−イル）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル５−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタノアート
０℃の５０．０ｍｇ（０．０６５ｍｍｏｌ）の５０を含む１０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２に、１９５．４ｍｇ（２７１μｌ、１．９５３ｍｍｏｌ）のＥｔ３Ｎを添加した。次いで、１７．７ｍｇ（１５．９μｌ、０．１９６ｍｍｏｌ）のアクリロイルクロリドを０℃で添加した。１時間後、さらなる１７．７ｍｇ（１５．９μｌ、０．１９６ｍｍｏｌ）のアクリロイルクロリドを添加した。これをさらに４回繰り返し、総反応時間は６時間であった（総アクリロイルクロリド、１０６．２ｍｇ、９５．４μｌ、１．１７ｍｍｏｌ）。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、２２．０ｍｇ（４１％）の９を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．９９  （ｓ，  １Ｈ），  ７．０９  （ｓ，  １Ｈ），  ６．４０（ｄ，  Ｊ  ＝  １６．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．３１（ｄｄ，  Ｊ
＝  １６．７，  ９．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．７９（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ５．７４（ｄ，  Ｊ  ＝  １０．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．０９  （ｓ，  ２Ｈ），  ５．０８  （ｓ，  １Ｈ），  ４．５０（ｍ，  １Ｈ），  ４．３６（ｍ，  １Ｈ），  ４．２１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．８７  （ｓ，  １０Ｈ），  ３．６−３．７５（ｍ，  １２Ｈ），  ３．１６（ｍ，  １Ｈ），  ２．９１（ｄｄ，  Ｊ
＝  １２．８，  ５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．７４（ｄ，  Ｊ  ＝  １２．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．７０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ４．８  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ２．３１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，
２Ｈ），  １．３７−１．８（ｍ，  ６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７２．９，  １７０．４，  １６９．５，  １６４．１，  １６４．０，  １６３．２，  １５９．３，  １５６．３，  １３０．３，  １２７．９，  ８８．１，  ７８．９，  ６９．９，  ６９．８，  ６９．７，  ６８．５，  ６８．０，
６２．８，  ６１．４，  ５９．６，  ５７．７，  ５７．１，  ５４．９，  ５３．５，  ５２．５，  ４２．９，  ３９．９，  ３３．１，  ２７．８，  ２７．６，  ２４．０；ＨＲＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３５Ｈ５３Ｎ１０Ｏ９Ｓ２の計算値，８２１．３４３８；実測値８２１．３４５５；ＨＰＬＣ：（ａ）Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ（ｂ）ＡＣＮ＋０．１％ＴＦＡ（１０分間で５→９５％ＡＣＮ）Ｒｔ＝６．９８分。
【０４１４】
【化４７】
2018188476.tif 000141
スキーム５．Ｃｙ３Ｂ−ＹＫ５（５７）の調製。
【０４１５】
試薬および条件：ａ．ピペラジン、ＤＭＦ、９０℃、１時間；ｂ．Ｎ−（４−ブロモブチル）フタルイミド、ＤＭＦ、８０℃、１時間；ｃ．ヒドラジン、ＴＨＦ、室温、１６時間；ｄ．ＮａＯＨ、メタノール、６０℃、１時間；ｅ．ジ−ｔ−ブチルジカルボナート、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ２Ｃｌ２、室温、２時間；ｆ．アクリロイルクロリド、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ２Ｃｌ２；ｇ．ＴＦＡ：ＣＨ２Ｃｌ２（１：４）、室温、１時間；ｈ．Ｃｙ３Ｂ−ＯＳｕ、ＤＭＦ、室温、１２時間。
【０４１６】
（５１）Ｎ，Ｎ’−（２−（（４，６−ジメトキシ−２−（ピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イル）チオ）ピリミジン−４，６−ジイル）ジアセトアミド
２４（１００ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）およびピペラジン（４５ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を含む５ｍＬのＤＭＦ溶液を、９０℃に１時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、８４ｍｇ（７２％）の５１を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，
ＣＤＣｌ３）δ  ８．２０  （ｓ，  １Ｈ），  ８．０３  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８７  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８０（ｍ，  ４Ｈ），  ３．４５（ｍ，  ４Ｈ），  ２．０８  （ｓ，  ６Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４４９．１。
【０４１７】
（５２）Ｎ，Ｎ’−（２−（（２−（４−（４−（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）ブチル）ピペラジン−１−イル）−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イル）チオ）ピリミジン−４，６−ジイル）ジアセトアミド
５１（５０ｍｇ、０．１１１ｍｍｏｌ）およびＮ−（４−ブロモブチル）フタルイミド
（１２５ｍｇ、０．４４６ｍｍｏｌ）を含む５ｍＬのＤＭＦ溶液を、８０℃に１時間加熱した。溶媒を減圧下で除去した。残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、６１ｍｇ（８６％）の５２を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋６５０．１。
【０４１８】
（５３）２−（（２−（４−（４−アミノブチル）ピペラジン−１−イル）−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イル）チオ）ピリミジン−４，６−ジアミン［ＹＫ９１］
５２（６１ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）を含む３ｍＬのＴＨＦ溶液に、ヒドラジン（１００μＬ）を添加した。得られた混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣にメタノール（１０ｍｌ）、水酸化ナトリウム（５００ｍｇ）を添加し、混合物を６０℃に１時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、２５ｍｇ（６０％）の５３を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）δ  ５．１６  （ｓ，  １Ｈ），  ４．５８  （ｓ，  ４Ｈ），  ３．８７  （ｓ，  ６Ｈ），
３．７１（ｍ，  ４Ｈ），  ２．７５（ｍ，  ２Ｈ），  ２．５０（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３６（ｍ，  ２Ｈ），  １．６８（ｍ，  ２Ｈ），  １．６０（ｍ，  ２Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４３６．１。
【０４１９】
（５４）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（５−（４，６−ジアミノピリミジン−２−イルチオ）−４，６−ジメトキシピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）ブチルカルバマート
５３（８０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（１００μＬ）を含む３ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２溶液に、ジ−ｔ−ブチルジカルボナート（３９ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、９５ｍｇ（９５％）の５４を得た。これを次の反応に供した。
【０４２０】
（５５）ｔｅｒｔ−ブチル（４−（４−（５−（（４，６−ジアミノピリミジン−２−イル）チオ）−４，６−ジメトキシピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）ブチル）カルバマート
５４（９５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（９４μｌ）を含む５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２溶液に、アクリロイルクロリドを少しずつ添加した。反応物をＴＬＣによってモニタリングし、ＳＭが消失した場合、冷却条件下でのメタノールの添加によって反応を停止させた。生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、４８ｍｇ（４６％）の５５を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）δ  ８．２１  （ｓ，  １Ｈ），  ７．０５  （ｓ，  １Ｈ），  ６．４２（ｍ，  １Ｈ），  ６．３２（ｍ，  １Ｈ），  ５．７９（ｍ，  １Ｈ），  ３．８８  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８７（ｍ，  ４Ｈ），  ３．１５（ｍ，  ２Ｈ），  ２．４９（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３９（ｍ，  ４Ｈ），  １．５９（ｍ，  ４Ｈ），  １．４４
（ｓ，  ９Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５９０．４。
【０４２１】
（５６）Ｎ−（６−アミノ−２−（（２−（４−（４−アミノブチル）ピペラジン−１−イル）−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イル）チオ）ピリミジン−４−イル）アクリルアミド
５５（４８ｍｇ、１７ｍｍｏｌ）を含む２０％ＴＦＡ−ＣＨ２Ｃｌ２溶液を、室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を高真空下で乾燥させて３１ｍｇ（８０％）の５６を得た。これを、さらに精製することなく使用した。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）δ  ７．０１  （ｓ，  １Ｈ），  ６．４０（ｍ，  １Ｈ），  ６．２９（ｍ，  １Ｈ），  ５．８０（ｍ，  １Ｈ），  ３．８８  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８６（ｍ，  ４Ｈ），  ２．７５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  ２Ｈ），  ２．５４（
ｍ，  ４Ｈ），  ２．４５（ｍ，  ２Ｈ），  １．５９（ｍ，  ４Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４９０．２。
【０４２２】
（５７）Ｃｙ３Ｂ−ＹＫ５
Ｃｙ３Ｂ−ＯＳｕ（１ｍｇ、０．００１７８ｍｍｏｌｅ）および５６（１．７４ｍｇ、０．００３５ｍｍｏｌ）を含む１００μＬのＤＭＦ溶液を、室温で１２時間撹拌した。生成物をＨＰＬＣによって精製して５７を得た（０．５４ｍｇ、収率３０％）。ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋１３１２．４。
【０４２３】
【化４８】
2018188476.tif 000142
スキーム６：ＹＫ５ビーズ（５９）の調製
試薬および条件：ａ．１−Ｂｏｃ−ピペラジン、ＮａＩ、Ｋ２ＣＯ３、アセトン、還流、２２時間；ｂ．ＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）、室温、１時間；ｃ．２４、Ｋ２ＣＯ３、９０℃、１．５時間；ｄ．ヒドラジン水和物、ＭｅＯＨ、室温、２時間、その後に１Ｍ  ＮａＯＨ、５５℃、２時間；ｅ．ジ−ｔ−ブチルジカルボナート、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ２Ｃｌ２、室温、２０時間、ｆ．アクリロイルクロリド、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ２Ｃｌ２、０℃、２時間；ｇ．ＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）、室温、４５分間；ｈ．Ａｆｆｉ−Ｇｅｌ（登録商標）１０ビーズ、ＤＩＥＡ、ＤＭＡＰ、ＤＭＦ、３時間。
【０４２４】
（５８）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）ブチル）ピペラジン−１−カルボキシラート
Ｎ−（４−ブロモブチル）フタルイミド（１．９５ｇ、６．８９ｍｍｏｌ）およびヨウ化ナトリウム（８１ｍｇ、０．５３７ｍｍｏｌ）を、Ｋ２ＣＯ３（１．６４ｇ、１１．８８ｍｍｏｌ）および１−Ｂｏｃ−ピペラジン（１．００ｇ、５．３７ｍｍｏｌ）を含むアセトン（２５ｍＬ）懸濁液に添加し、２２時間還流した。反応混合物を濾過し、固体をアセトン（３×５０ｍＬ）で洗浄した。濾液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、７：３→０：１）によって精製して、２．０８ｇ（１００％）の５８を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．８４（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ３．０，  ５．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．７１（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ３．０，  ５．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．７１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３
．３８−３．４３（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３２−２．４０（ｍ，  ６Ｈ），  １．７０（ｍ，  ２Ｈ），  １．５３（ｍ，  ２Ｈ），  １．４５  （ｓ，  ９Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３８８．４。
【０４２５】
（５２）Ｎ，Ｎ’−（２−（２−（４−（４−（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）ブチル）ピペラジン−１−イル）−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジイル）ジアセトアミド
５８（４２９．７ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（１２ｍＬ）にＴＦＡ（３ｍＬ）を滴下し、室温で１時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、ＭｅＯＨとの数回の同時蒸発によってＴＦＡを除去し、高真空下で一晩乾燥させた。これにＫ２ＣＯ３（３８４ｍｇ、２．７８ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（２１ｍＬ）を添加し、得られた懸濁液を室温で１０分間撹拌した。次いで、２４（４２４ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を添加し、懸濁液を９０℃で９０分間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、１００：１→４０：１）によって精製して、０．３５５ｇ（４９％）の５２を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．３５（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ７．８２−７．８８（ｍ，  ４Ｈ），  ７．７２（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ３．１，  ５．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．８８  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８４（ｍ，  ４Ｈ），  ３．７４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．４８（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．１６  （ｓ，  ６Ｈ），  １．７４（ｍ，  ２Ｈ），  １．５９（ｍ，  ２Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋６５０．５。
【０４２６】
ＹＫ９１（５３）２−（２−（４−（４−アミノブチル）ピペラジン−１−イル）−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジアミン
５２（０．３５５ｇ、０．５４６ｍｍｏｌ）を含むＭｅＯＨ（１０ｍＬ）にヒドラジン水和物（７９７μＬ、０．８２０ｇ、１６．４ｍｍｏｌ）を添加し、室温で２時間撹拌した。次いで、５ｍＬの１Ｍ  ＮａＯＨを添加し、反応混合物を５５℃で２時間加熱した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１→５：１）によって精製して、０．２２８ｇ（９６％）の５３を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３／ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ  ５．２２  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８８  （ｓ，  １０Ｈ），  ２．７２  （ｔ，  Ｊ  ＝
７．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．５３（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．４６−１．６２（ｍ，  ４Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４３６．４。
【０４２７】
（５４）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（５−（４，６−ジアミノピリミジン−２−イルチオ）−４，６−ジメトキシピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）ブチルカルバマート
５３（０．２２１ｇ、０．５０７ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（６ｍＬ）にＥｔ３Ｎ（１０７μＬ、７７ｍｇ、０．７６１ｍｍｏｌ）およびジ−ｔ−ブチルジカルボナート（０．１３３ｇ、０．６１１ｍｍｏｌ）を添加し、室温で２０時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１００：１→３０：１）によって精製して、０．２５４ｇ（９３％）の５４を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ５．１９  （ｓ，  １Ｈ），
４．４１  （ｓ，  ４Ｈ），  ３．８９（ｍ，  １０Ｈ），  ３．１４（ｍ，  ２Ｈ），  ２．５０（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），
１．５４−１．６３（ｍ，  ４Ｈ），  １．４４  （ｓ，  ９Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５３６．５。
【０４２８】
（５５）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（５−（４−アクリルアミド−６−アミノピリミ
ジン−２−イルチオ）−４，６−ジメトキシピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）ブチルカルバマート
０℃の８０ｍｇ（０．１４９ｍｍｏｌ）の５４を含む８ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２に、４１４μｌ（２９８ｍｇ、２．９８ｍｍｏｌ）のＥｔ３Ｎを添加した。次いで、１４．５μｌ（１６．２ｍｇ、０．１７９ｍｍｏｌ）のアクリロイルクロリドを添加した。３０分後、さらなる１４．５μｌのアクリロイルクロリドを０℃で添加した。これをさらに２回繰り返し、総反応時間は２時間であった（総アクリロイルクロリド、５８μｌ、６４．８ｍｇ、０．７１６ｍｍｏｌ）。１ｍＬのＭｅＯＨの添加によって反応を停止させ、次いで、減圧下で濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１５：１）によって精製して、４２．５ｍｇ（４８％）の５５を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．７８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．０５  （ｓ，  １Ｈ），  ６．４２（ｄ，  Ｊ  ＝  １６．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．１８（ｄｄ，  Ｊ  ＝
１０．４，  １６．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．８０（ｄ，  Ｊ  ＝  １０．２，  １Ｈ），  ５．１５（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ４．８０（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ３．８９
（ｓ，  １０Ｈ），  ３．１４（ｍ，  ２Ｈ），  ２．５４（ｍ，  ６Ｈ），  １．５８（ｍ，  ４Ｈ），  １．４４  （ｓ，  ９Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５９０．５。
【０４２９】
（５９）ＹＫ５ビーズ
５５（４５ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）を含む３ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２溶液に０．７５ｍＬのＴＦＡを室温で滴下した。４５分間の撹拌後、反応混合物を減圧下で濃縮した。ＭｅＯＨとの数回の同時蒸発および高真空下で一晩乾燥によってＴＦＡを除去して残渣を得た。これをＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、固相ペプチド合成容器中の４．２ｍＬ（０．０６３６ｍｍｏｌ）のＡｆｆｉ−Ｇｅｌ（登録商標）１０ビーズ（予備洗浄済み、３×６ｍＬ  ＤＭＦ）に添加した。１００μＬのＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンおよびいくつかのＤＭＡＰ結晶を添加し、これを室温で３時間震盪した。次いで、溶媒を除去し、ビーズを１０分間（それぞれ、ＣＨ２Ｃｌ２（４×１０ｍＬ）、ＤＭＦ（４×１０ｍＬ）、およびｉ−ＰｒＯＨ（３×１０ｍＬ））洗浄した。ＹＫ５ビーズ（５９）をｉ−ＰｒＯＨ中にて−８０℃で保存した。
【０４３０】
【化４９】
2018188476.tif 000143
スキーム７．ＹＫ７１ビーズ（６５）の調製
試薬および条件：ａ．ＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）、室温、１時間；ｂ．Ｎ−（２−（２−フルオロ−４，６−ジメトキシピリジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−イル）アセトアミド、Ｋ２ＣＯ３、９０℃、１．５時間；ｃ．ヒドラジン水和物、ＭｅＯＨ、室温、２０時間、その後に５０℃、３時間；ｄ．ジ−ｔ−ブチルジカルボナート、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ２Ｃｌ２、室温、２０時間、ｅ．アクリロイルクロリド、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ２Ｃｌ２、０℃、１．５時間；ｆ．ＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）、室温、４５分間；ｇ．Ａｆｆｉ−Ｇｅｌ（登録商標）１０ビーズ、ＤＩＥＡ、ＤＭＡＰ、ＤＭＦ、３時間。
【０４３１】
（６０）Ｎ−（２−（２−（４−（４−（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）ブチル）ピペラジン−１−イル）−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−イル）アセトアミド
５８（４０２．４ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（１２ｍＬ）にＴＦＡ（３ｍＬ）を滴下し、室温で１時間撹拌する。反応混合物を減圧下で濃縮し、ＭｅＯＨとの数回の同時蒸発および高真空下で一晩の乾燥によってＴＦＡを除去した。これに、Ｋ２ＣＯ３（３５９ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（２０ｍＬ）を添加し、得られた懸濁液を室温で１０分間撹拌した。次いで、Ｎ−（２−（２−フルオロ−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−イル）アセトアミド（３３８ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を添加し、懸濁液を９０℃で９０分間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、１００：１→４０：１）によ
って精製して、０．６０ｇ（９７％）の６０を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，
ＣＤＣｌ３）：δ  ８．３４（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８５（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ３．０，  ５．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．８１（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ７．５９−７．７１（ｍ，  ３Ｈ），  ３．８８  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８５（ｍ，  ４Ｈ），  ３．７４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．４９（ｍ，
４Ｈ），  ２．４３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．１８  （ｓ，
３Ｈ），  １．７５（ｍ，  ２Ｈ），  １．６０（ｍ，  ２Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５９３．４。
【０４３２】
ＹＫ９３（６１）２−（２−（４−（４−アミノブチル）ピペラジン−１−イル）−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−アミン
６０（０．６００ｇ、１．０１ｍｍｏｌ）を含むＭｅＯＨ（２８ｍＬ）にヒドラジン水和物（８１３μＬ、０．８３６ｇ、１６．７ｍｍｏｌ）を添加し、室温で２０時間撹拌した。次いで、さらなるヒドラジン水和物（８１３μＬ、０．８３６ｇ、１６．７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を５０℃で３時間で加熱した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、８０：１→１０：１）によって精製して、０．３７０ｇ（８７％）の６１を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３／ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ  ７．８５（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．９
Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．１１（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．８８  （ｓ，  １０Ｈ），  ２．７１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．５３（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．４７−１．６３（ｍ，  ４Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４２１．３。
【０４３３】
（６２）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（５−（４−アミノピリミジン−２−イルチオ）−４，６−ジメトキシピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）ブチルカルバマート
６１（０．３７０ｇ、０．８８０ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）にＥｔ３Ｎ（１８６μＬ、１３４ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）およびジ−ｔ−ブチルジカルボナート（０．２３０ｇ、１．０６ｍｍｏｌ）を添加し、室温で２０時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１００：１：０→５０：０：１）によって精製して、０．４４ｇ（９６％）の６２を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．９７（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．０５（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．２１（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ４．７６（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ３．８９  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８７（ｍ，  ４Ｈ），  ３．１５（ｍ，  ２Ｈ），  ２．４９（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．５４−１．６３（ｍ，  ４Ｈ），  １．４４  （ｓ，  ９Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５２１．３。
【０４３４】
（６３）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（５−（４−アクリルアミドピリミジン−２−イルチオ）−４，６−ジメトキシピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）ブチルカルバマート
０℃の１００ｍｇ（０．１９２ｍｍｏｌ）の６２を含む１０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２に、５３３μｌ（３８４ｍｇ、３．８４ｍｍｏｌ）のＥｔ３Ｎを添加した。次いで、１９μｌ（２１ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）のアクリロイルクロリドを添加した。３０分後、さらなる１９μｌのアクリロイルクロリドを０℃で添加した。これをさらに１回繰り返し、総反応時間は１．５時間であった（総アクリロイルクロリド、５７μｌ、６３ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）。２ｍＬのＭｅＯＨの添加によって反応を停止させ、次いで、減圧下で濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して、７２ｍｇ（６５％）の６３を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣ
ｌ３）：δ  ８．８３（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．３６（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８５（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４６（ｄ，  Ｊ  ＝  １６．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．２８（ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．２，  １６．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．８１（ｄ，  Ｊ  ＝  １０．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．２３（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ３．８７  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８５（ｍ，  ４Ｈ），  ３．１６（ｍ，  ２Ｈ），  ２．４８（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４０（ｍ，  ２Ｈ），  １．５７（ｍ，  ４Ｈ），  １．４４  （ｓ，  ９Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７１．４，  １７１．０，  １６４．４，  １６０．１，  １５８．９，  １５７．４，  １５６．１，  １３０．４，  １２９．７，  １０６．０，  ７９．１，  ７８．９，  ５８．２，  ５３．４，  ５２．９，  ４３．６，  ４０．５，  ２８．５，  ２８．０，  ２４．３；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５７５．３。
【０４３５】
ＹＫ９４（６４）Ｎ−（２−（２−（４−（４−アミノブチル）ピペラジン−１−イル）−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４−イル）アクリルアミド
７０ｍｇ（０．１２２ｍｍｏｌ）の６３を含む４ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２に、１ｍＬのＴＦＡを室温で滴下した。４５分間の撹拌後、反応混合物を減圧下で濃縮した。ＭｅＯＨとの数回の同時蒸発および高真空下で一晩の乾燥によってＴＦＡを除去して６４をＴＦＡ塩として得た。これをさらに精製することなく使用した。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，
ＣＤＣｌ３／ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ  ８．３３（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１９（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．０３（ｄ，  Ｊ  ＝  ６．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．５１（ｄ，  Ｊ  ＝  １６．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４０（ｄｄ，  Ｊ
＝  １０．６，  １６．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．８８（ｄ，  Ｊ  ＝  １０．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９０  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．５５−３．７２（ｍ，  ２Ｈ），
３．３８−３．５４（ｍ，  ２Ｈ），  ３．１９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．９４−３．１３（ｍ，  ４Ｈ），  １．８６−１．９５（ｍ，  ２Ｈ），
１．７３−１．８２（ｍ，  ２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３／ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ  １７１．４，  １７０．２，  １６５．４，  １５９．９，
１５８．９，  １５５．７，  １３０．５，  １２９．９，  １０６．２，  ７９．２，  ５６．２，  ５４．４，  ５１．５，  ４０．７，  ３８．６，  ２４．１，  ２０．６；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４７５．４。
【０４３６】
（６５）ＹＫ７１ビーズ
６４（約０．１２２ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（４ｍＬ）の溶液を、固相ペプチド合成容器中の６．８ｍＬ（０．１０２ｍｍｏｌ）のＡｆｆｉ−Ｇｅｌ（登録商標）１０ビーズ（予備洗浄済み、３×１０ｍＬ  ＤＭＦ）に添加した。１００μＬのＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンおよびいくつかのＤＭＡＰ結晶を添加し、これを室温で３時間震盪した。次いで、溶媒を除去し、ビーズを１０分間（それぞれ、ＣＨ２Ｃｌ２（４×１０ｍＬ）、ＤＭＦ（４×１０ｍＬ）、およびｉ−ＰｒＯＨ（３×１０ｍＬ））洗浄した。ＹＫ７１ビーズ（６５）をｉ−ＰｒＯＨ中にて−８０℃で保存した。
【０４３７】
【化５０】
2018188476.tif 000144
スキーム８．ＴＴ−６（７２）の合成
試薬および条件：ａ．フタルイミドカリウム、ＤＭＦ、１１０℃、１８時間；ｂ．ｐ−トシルクロリド、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＡＰ、ＣＨ２Ｃｌ２、５℃〜室温、２４時間；ｃ．１−Ｂｏｃ−ピペラジン、Ｋ２ＣＯ３、ジオキサン、８０℃、２２時間；ｄ．ＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）、室温、１時間；ｅ．２４、Ｋ２ＣＯ３、ＤＭＦ、９０℃、１．５時間；ｆ．ＮＨ２ＮＨ２、ＭｅＯＨ、室温、２時間、その後１Ｍ  ＮａＯＨ（水溶液）、５０℃、１．５時間；ｇ．Ｄ−ビオチン、ＥＤＣｌ、ＤＭＡＰ、ＣＨ２Ｃｌ２、超音波処理、２時間；ｈ．アクリロイルクロリド、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ２Ｃｌ２、０℃。
【０４３８】
（６６）２−（２−（２−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）イソインドリン−１，３−ジオン
４５（１．２２ｇ、３．５ｍｍｏｌ）およびフタルイミドカリウム（０．７１３ｇ、３．８５ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）に懸濁し、１１０℃で１８時間加熱した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）に溶解し、１Ｍ  ＨＣｌ（２×２０ｍＬ）、ブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過した。溶媒を減圧下で除去してオイルを得た。これをカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ）
によって精製して、０．９５ｇ（８４％）の６６を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．８５（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ３．１，  ５．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．７２（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ３．０，  ５．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．９１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．９  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．７５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．８  Ｈｚ，
２Ｈ），  ３．５５−３．７３（ｍ，  １２Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｎａ］＋３４６．１。
【０４３９】
（６７）２−（２−（２−（２−（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル４−メチルベンゼンスルホナート
６６（０．９５ｇ、２．７ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（３９５μＬ、０．２８７ｇ、２．８ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（３３ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）の溶液を、氷浴を使用して５℃に冷却した。トシルクロリド（０．５１５ｇ、２．７ｍｍｏｌ）を５℃で少しずつ添加し、３０分後、氷浴を除去し、室温で２４時間撹拌し続けた。反応混合物を分液漏斗（ｓｅｐｅｒａｔｏｒｙ  ｆｕｎｎｅｌ）に添加し、１Ｎ
ＨＣｌ（２×２５ｍＬ）、水（２５ｍＬ）、およびブライン（２×２５ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮してオイルを得た。これをカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、６：４→４：６）によって精製して、１．１２ｇ（８７％）の６７を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．８４（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ３．１，  ５．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．７９（ｄ，  Ｊ  ＝
８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．７２（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ３．０，  ５．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．３４（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．１４  （ｔ，  Ｊ
＝  ４．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．８９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．９  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．７３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．４８−３．６８（ｍ，
１０Ｈ），  ２．４４  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｎａ］＋５００．０。
【０４４０】
（６８）ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（２−（２−（２−（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）ピペラジン−１−カルボキシラート
６７（１．１０ｇ、０．００２３ｍｏｌ）を含むジオキサン（２５ｍＬ）に１−Ｂｏｃ−ピペラジン（１．０７ｇ、０．００５８ｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（１．３７ｇ、０．００９９ｍｏｌ）を添加し、８０℃で２２時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）中に取り、水（２×５０ｍＬ）およびブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、オイルに濃縮した。これをカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１：０→３０：１）によって精製して、０．８１９（７２％）の６８を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．８４（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ３．１，  ５．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．７１（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ３．０，  ５．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．９０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．９  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．７４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．９  Ｈｚ，
２Ｈ），  ３．５２−３．６７（ｍ，  １０Ｈ），  ３．４３（ｍ，  ４Ｈ），  ２．５７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ６．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．４３（ｍ，  ４Ｈ），  １．４５（ｍ，  ９Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４９２．１。
【０４４１】
（６９）Ｎ，Ｎ’−（２−（２−（４−（２−（２−（２−（２−（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）ピペラジン−１−イル）−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジイル）ジアセトアミド
６８（５４２ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（２８ｍＬ）にＴＦＡ（７ｍＬ）を滴下し、室温で１時間撹拌する。反応混合物を減圧下で濃縮し、ＭｅＯＨとの数回の同時蒸発および高真空下で一晩の乾燥によってＴＦＡを除去した。これにＫ２ＣＯ３
（３８１ｍｇ、２．７６ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（２０ｍＬ）を添加し、得られた懸濁液を室温で１０分間撹拌した。次いで、２４（４２１ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を添加し、懸濁液を９０℃で９０分間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、１００：１→２５：１）によって精製して、０．５３７ｇ（６５％）の６９を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．３５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．８４（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ３．１，  ５．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．８１（ｂｓ，  ２Ｈ），  ７．７１（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ３．１，  ５．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．８３−３．９２（ｍ，  １２Ｈ），  ３．７４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．５５−３．６７（ｍ，  １０Ｈ），  ２．６４  （ｔ，
Ｊ  ＝  ５．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．５６（ｍ，  ４Ｈ），  ２．１５  （ｓ，  ６Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋７５４．２。
【０４４２】
（７０）２−（２−（４−（２−（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）ピペラジン−１−イル）−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）ピリミジン−４，６−ジアミン
６９（３００ｍｇ、０．３９８ｍｍｏｌ）を含むＭｅＯＨ（９ｍＬ）にヒドラジン水和物（５８０μＬ、５９８ｍｇ、１１．９ｍｍｏｌ）を添加し、室温で２時間撹拌した。次いで、１Ｍ  ＮａＯＨ（４．５ｍＬ）を添加し、反応混合物を５０℃で１．５時間加熱した。反応混合物を乾燥するまで濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、６０：１→１０：１）によって精製して、０．２１４ｇ（９３％）の７０を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ５．１６  （ｓ，  １Ｈ），  ４．５６  （ｓ，  ４Ｈ），  ３．８４−３．９１（ｍ，  １０Ｈ），  ３．６１−３．６９（ｍ，  １０Ｈ），  ３．５１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．８６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．５７（ｍ，  ４Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５４０．１。
【０４４３】
（７１）Ｎ−（２−（２−（２−（２−（４−（５−（４，６−ジアミノピリミジン−２−イルチオ）−４，６−ジメトキシピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）−５−（２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタンアミド
２０．０ｍｇ（０．０３７１ｍｍｏｌ）の７０、１８．１ｍｇ（０．０７４１ｍｍｏｌ）のＤ−（＋）−ビオチン、ＤＭＡＰ（触媒）、１４．２ｍｇ（０．０７４１ｍｍｏｌ）のＥＤＣＩを含む１ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２を、密封した管内で２時間超音波処理した。反応混合物を蒸発乾固し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、１５．６ｍｇ（５５％）の７１を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３／ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ  ５．２３  （ｓ，  １Ｈ），  ４．４９（ｍ，  １Ｈ），  ４．３０（ｍ，  １Ｈ），  ３．８６−３．９１（ｍ，  １０Ｈ），  ３．６０−３．７２（ｍ，  １２Ｈ），  ３．４０（ｍ，  ２Ｈ），  ３．１２−３．１８（ｍ，  １Ｈ），  ２．９１（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ５．０，  １２．９  Ｈｚ，
１Ｈ），  ２．７２（ｄ，  Ｊ  ＝  １２．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．６８  （ｔ，
Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６０（ｍ，  ４Ｈ），  ２．１９（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ２．１，  ７．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．３８−１．７６（ｍ，  ６Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋７６６．２５。
【０４４４】
ＴＴ−６（７２）Ｎ−（２−（２−（２−（２−（４−（５−（４−アクリルアミド−６−アミノピリミジン−２−イルチオ）−４，６−ジメトキシピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）−５−（２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタンアミド
０℃の１５ｍｇ（０．０２０ｍｍｏｌ）の７１を含む２ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２に、８３μｌ
（６０ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）のＥｔ３Ｎを添加した。次いで、３．３μｌ（３．６ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）のアクリロイルクロリドを含むＣＨ２Ｃｌ２（０．５ｍＬ）を０℃で滴下した。１時間後、さらなる３．３μｌのアクリロイルクロリドを含むＣＨ２Ｃｌ２（０．５ｍＬ）を滴下した。これを３０分間隔でさらに４回繰り返し、総反応時間は３．５時間であった（総アクリロイルクロリド、１９．８μｌ、２１．６ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）。１ｍＬのＭｅＯＨの添加によって反応を停止させ、次いで、減圧下で濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、６．０ｍｇ（３７％）の７２を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ９．５７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．１３  （ｓ，  １Ｈ），  ６．９４（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ６．５３（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ６．３２−６．４５（ｍ，  ２Ｈ），  ５．７２（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ２．４，  ９．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．５８（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ５．１９（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ４．４８（ｍ，  １Ｈ），  ４．３４（ｍ，  １Ｈ），  ３．８２−３．９３（ｍ，  １０Ｈ），  ３．５５−３．７７（ｍ，  １２Ｈ），  ３．３９（ｍ，  ２Ｈ），  ３．０８−３．１５（ｍ，  １Ｈ），  ２．８９（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ５．１，  １２．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．８１（ｍ，  ２Ｈ），  ２．７２（ｄ，  Ｊ  ＝  １２．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．７０（ｍ，
４Ｈ），  ２．１９（ｍ，  ２Ｈ），  １．３８−１．７６（ｍ，  ６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７３．６，  １７１．０，  １７０．３，  １６５．１，  １６４．８，  １６３．８，  １５９．８，  １５７．１，  １３０．９，  １２８．８，  ８８．７，  ７９．５，  ７１．０，  ７０．４，  ７０．３，  ７０．２，  ６９．５，  ６２．３，  ５９．９，  ５７．３，  ５６．０，  ５４．２，  ５３．４，  ５２．５，  ４３．６，  ４０．７，  ３９．２，  ３５．４，
２８．５，  ２８．０，  ２５．７；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋８２０．３。
【０４４５】
【化５１】
2018188476.tif 000145
スキーム９．ＹＫ１４０（７５）、ＹＫ１４１（７７）、ＹＫ１４２（７８）の合成
試薬および条件：ａ．３−アミノベンゼンチオール、ネオクプロイン、ＣｕＩ、Ｋ２ＣＯ３、ＤＭＦ、１２５℃、２０時間；ｂ．プロピオニルクロリド、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ２Ｃｌ２、０℃〜室温；ｃ．ＣＨＣｌ３：ＴＦＡ（１：１）、６２℃、２２時間；ｄ．ＨＦ／ピリジン、ＮａＮＯ２、０℃〜室温；ｅ．４６、ＤＭＦ、９０℃、７５分間；ｆ．Ｄ−ビオチン、ＤＣＣ、ＤＭＡＰ、ＣＨ２Ｃｌ２、超音波処理、６時間。
【０４４６】
（７３）５−（３−アミノフェニルチオ）−４，６−ジメトキシ−Ｎ，Ｎ−ビス（４−メトキシベンジル）ピリミジン−２−アミン
２０（０．５２１ｇ、１．０ｍｍｏｌ）、３−アミノベンゼンチオール（１０６μｌ、０．１２５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）、ネオクプロイン（４２ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（３８ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（０．４１５ｇ、３．０ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１０ｍＬ）の混合物を、１２５℃で２０時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、７５：２５）によって精製して、０．１８３ｇ（３５％）の７３を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，
ＣＤＣｌ３）：δ  ７．２３（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．６  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ７．００  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．８７（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．６  Ｈｚ，
４Ｈ），  ６．５４（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４４  （ｓ，  １Ｈ），  ６．４１（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．７６  （ｓ，  ４Ｈ），  ３．８９  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８１  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．５９（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５１９．０。
【０４４７】
（７４）Ｎ−（３−（２−（ビス（４−メトキシベンジル）アミノ）−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）フェニル）プロピオンアミド
１８３ｍｇ（０．３５３ｍｍｏｌ）の７３を含む１０ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２にＥｔ３Ｎ（４９２μＬ、３５７ｍｇ、３．５３ｍｍｏｌ）を添加し、氷浴を使用して０℃に冷却した。プロピオニルクロリド（１６８μＬ、１７９ｍｇ、１．７６５ｍｇ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）の溶液を滴下し、反応混合物を撹拌した。２０分後、氷浴を除去し、さらに４０分間撹拌し続けた。２ｍＬのＭｅＯＨを添加して反応を停止させ、溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、７０：３０→６０：４０）によって精製して、０．１８８ｇ（９３％）の７４を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．４７（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２４（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ７．１７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．９
Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．０１  （ｓ，  １Ｈ），  ６．８７（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．６  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ６．８３（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．７７  （ｓ，  ４Ｈ），  ３．８９  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８１
（ｓ，  ６Ｈ），  ２．３６（ｑ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．２６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｎａ］＋５９７．１。
【０４４８】
ＹＫ１４０（７５）Ｎ−（３−（２−アミノ−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）フェニル）プロピオンアミド
１８８ｍｇ（０．３２７ｍｍｏｌ）の７４を含む５ｍＬのＣＨＣｌ３：ＴＦＡ（１：１）を６２℃で２２時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、１：１→４：６）によって精製して、９０ｍｇ（８３％）の７５を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．４３（ｄ，  Ｊ
＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９５−７．０６（ｍ，  ３Ｈ），  ６．７４−６．８５（ｍ，  ２Ｈ），  ３．９０  （ｓ，  ６Ｈ），  ２．３６（ｑ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．２６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  ３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ１５Ｈ１９Ｎ４Ｏ３Ｓの計算値，３３５．１１７８；実測値，３３５．１１８３。
【０４４９】
（７６）Ｎ−（３−（２−フルオロ−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）フェニル）プロピオンアミド
６０ｍｇ（０．１７８ｍｍｏｌ）の７５およびピリジン（２５０μＬ）を撹拌子を入れたプラスチックチューブに添加し、０℃に冷却した。次いで、ＨＦ／ピリジン溶液（３００μＬ、１２ｍｍｏｌ）を添加した。数分後、２０ｍｇ（０．２９０ｍｍｏｌ）のＮａＮＯ２を添加し、さらに０℃で９０分間および室温で３時間強く撹拌した。次いで、５ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２および１００ｍｇのＣａＣＯ３を添加し、混合物を室温で５時間撹拌した。次いで、これを焼結（ｃｉｎｔｅｒｅｄ）ディスク漏斗で濾過し、固体をＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液をセライトで濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、６０：４０）によって精製して、３５ｍｇ（５８％）の７６を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．３５（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９６−７．０５（ｍ，  １Ｈ），  ６．７５−６．９０（ｍ，  ２Ｈ），  ４．０１  （ｓ，  ６Ｈ），  ２．３６（ｑ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．２３  （ｔ，  Ｊ  ＝
７．５  Ｈｚ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３３８．２。
【０４５０】
ＹＫ１４１（７７）Ｎ−（３−（２−（４−（２−（２−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）ピペラジン−１−イル）−４，６−ジメトキシピリミジン−５−イルチオ）フェニル）プロピオンアミド
３５ｍｇ（０．１０４ｍｍｏｌ）の７６を含む２ｍｌのＤＭＦに３０ｍｇ（０．１１４ｍｍｏｌ）の４６を添加し、９０℃で７５分間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１５：１）によって精製して、４４．２ｍｇ（７４％）の７７を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．５１（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２２  （ｓ，  １Ｈ），  ７．１４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９５  （ｓ，  １Ｈ），  ６．８０（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９４  （ｓ，  ４Ｈ），  ３．８９  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．６０−３．８０（ｍ，  １５Ｈ），  ２．６０−２．８２（ｍ，  ６Ｈ），  ２．３５（ｑ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．２１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．４  Ｈｚ，  ３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２７Ｈ４２Ｎ５Ｏ７Ｓの計算値，５８０．２８０５；実測値，５８０．２８０６。
【０４５１】
ＹＫ１４２（７８）２−（２−（２−（２−（４−（４，６−ジメトキシ−５−（３−プロピオンアミドフェニルチオ）ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル５−（２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタノアート
２９ｍｇ（０．０５０ｍｍｏｌ）の７７、３６ｍｇ（０．１４７ｍｍｏｌ）のＤ−（＋）−ビオチン、ＤＭＡＰ（４．５ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）、６１ｍｇ（０．２９６ｍｍｏｌ）のＤＣＣを含む５ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２を、密封した管内で６時間超音波処理した。反応混合物を蒸発乾固し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１５：１）によって精製して、３６ｍｇ（９０％）の７８を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．４５−７．５３（ｍ，  ２Ｈ），  ７．１３
（ｔ，  Ｊ  ＝  ６．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０５  （ｓ，  １Ｈ），  ６．７７（ｄ，  Ｊ  ＝  ６．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．９０  （ｓ，  １Ｈ），  ５．３５  （ｓ，  １Ｈ），  ４．４６−４．５３（ｍ，  １Ｈ），  ４．２７−４．３３（ｍ，  １Ｈ），  ４．１８−４．２６（ｍ，  ２Ｈ），  ３．８５−４．００（ｍ，  １０Ｈ），  ３．６３−３．７４（ｍ，  １２Ｈ），  ３．１０−３．１８（ｍ，  １Ｈ），  ２．９０（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ４．５，  １０．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．７４（ｄ，  Ｊ
＝  １０．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．６１（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４２  （ｔ，  Ｊ
＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．３６（ｍ，  ４Ｈ），  １．１０−１．８２（ｍ，  ９Ｈ）；ＨＲＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３７Ｈ５６Ｎ７Ｏ９Ｓ２の計算値，８０６．３５８１；実測値，８０６．３５６６。
【０４５２】
【化５２】
2018188476.tif 000146
スキーム１０．ＹＫ１２９（８３）、ＹＫ１３０（８４）、ＹＫ１３９（８５）、ＹＫ１４９（８６）、ＴＴ−２（８７）、ＴＴ−３（８８）、ＴＴ−４（８９）の合成。
【０４５３】
試薬および条件：ａ．Ｎ−メチルピペラジン、ＤＭＦ、９０℃、２．５時間；ｂ．ＮＩＳ、ＴＦＡ、ＣＨ３ＣＮ、室温、１．５時間；ｃ．３−アミノベンゼンチオール、ネオクプロイン、ＣｕＩ、Ｋ３ＰＯ４、ＤＭＦ、１２５℃、１７時間；ｄ．ＲＣＯＣｌ、Ｅｔ３Ｎ；ｅ．ＲＣＯＯＨ、ＤＣＣ、ＴＨＦ、室温；ｆ．ＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）、室温。
【０４５４】
（８０）４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン
５ｇ（０．０２８６ｍｏｌ）の２−クロロ−４，６−ジメトキシピリミジン（７９）および７．９３ｍＬ（７．１６ｇ、０．０７１５ｍｏｌ）のＮ−メチルピペラジンを含む２２ｍＬのＤＭＦを９０℃で２．５時間加熱した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を２００ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２中に取った。これをブライン（３×５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して６．５１ｇ（９５％）の８０を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ５．３７  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８５  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８２（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４４（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３３  （ｓ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７２．０，  １６０．８，  ７７．８，  ５５．０，  ５３．４，  ４６．３，  ４３．７；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋２３９．２。
【０４５５】
（８１）５−ヨード−４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン
１．５９ｇ（６．６７ｍｍｏｌ）の８０を含む４０ｍＬのアセトニトリルに１．８０ｇ（８．０１ｍｍｏｌ）のＮ−ヨードスクシンイミド、０．７７１ｍＬ（１．１４ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）のＴＦＡを添加し、室温で１．５時間撹拌した。反応混合物を乾燥するまで濃縮し、残渣を１００ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２中に取り、５％ＮａＨＣＯ３（３×５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して残渣を得た。これをカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１：０→２０：１）によって精製して、２．０６ｇ（８６％）の８１を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ３．９３  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８２（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４７（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３６  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３６５．１。
【０４５６】
ＹＫ１３３（８２）３−（４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）アニリン
８１（０．５００ｇ、１．３７ｍｍｏｌ）、３−アミノベンゼンチオール（１４６μｌ、０．１７２ｇ、１．３７ｍｍｏｌ）、ネオクプロイン（８６ｍｇ、０．４１１ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（７８ｍｇ、０．４１１ｍｍｏｌ）、およびリン酸カリウム（０．５８２ｇ、２．７４ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１５ｍＬ）の混合物を、１２５℃で１７時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１００：１→３０：１）によって精製して、０．２５３ｇ（５１％）の８２を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ６．９７  （ｔ，
Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４６−６．５１（ｍ，  １Ｈ），  ６．３６−６．４０（ｍ，  ２Ｈ），  ３．８８−４．０３（ｍ，  １０Ｈ），  ２．５２（ｍ，
４Ｈ），  ２．３８  （ｓ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７１．８，  １６０．１，  １４６．９，  １３９．５，  １２９．６，
１１６．２，  １１２．２，  １１２．１，  ８１．１，  ５５．０，  ５４．６，  ４６．３，  ４３．８；ＨＲＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ１７Ｈ２４Ｎ５Ｏ２Ｓの計算値，３６２．１６５１；実測値，３６２．１６４９。
【０４５７】
ＹＫ１２９（８３）Ｎ−（３−（４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アクリルアミド
８２（１０ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（５０μＬ、３６ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を含む１ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２溶液に、アクリロイルクロリド（２２μＬ、２４．４ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で１２時間撹拌し、次いで、冷ＭｅＯＨの添加によって反応を停止させた。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して、６．０ｍｇ（５４％）の８３を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）δ  ７．４９（ｍ，  １Ｈ），  ７．３６（ｍ，  １Ｈ），  ７．１４（ｍ，  ２Ｈ），  ６．８４（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．３６（ｍ，  １Ｈ），  ６．２２（ｍ，  １Ｈ），  ５．７３（ｍ，  １Ｈ），  ４．０２（ｍ，  ４Ｈ），  ３．９０  （ｓ，  ６Ｈ），  ２．７０（ｍ，  ４Ｈ），  ２．５０  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４１６．４。
【０４５８】
ＹＫ１３０（８４）Ｎ−（３−（４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）プロピオンアミド
８２（１０ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（５０μＬ、３６ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を含む１ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２溶液に、プロピオニルクロリド（２２μＬ、２４．４ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で１２時間撹拌し、次いで、冷ＭｅＯＨの添加によって反応を停止させた。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣を分取ＴＬ
Ｃ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して、７．３ｍｇ（６５％）の８４を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）δ  ７．４４（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１３（ｍ，  ２Ｈ），  ７．０４  （ｓ，  １Ｈ），  ６．７８（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９３（ｍ，  ４Ｈ），  ３．９０  （ｓ，  ６Ｈ），  ２．５５（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３６  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．３３（ｑ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．２１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２０Ｈ２８Ｎ５Ｏ３Ｓの計算値，４１８．１９１３；実測値，４１８．１９１０。
【０４５９】
ＹＫ１３９（８５）Ｎ−（３−（４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）シクロプロパンカルボキサミド
８２（１０．９ｍｇ、０．０３０２ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（２１μｌ、１５．３ｍｇ、０．１５１ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）の溶液にシクロプロパンカルボニルクロリド（１４μｌ、１５．８ｍｇ、０．１５０８ｍｍｏｌ）を添加し、室温で２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して、７．９ｍｇ（６１％）の８５を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．４９（ｍ，  １Ｈ），  ７．２９
（ｓ，  １Ｈ），  ７．１３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９７
（ｓ，  １Ｈ），  ６．７８（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．８８−３．９５（ｍ，  １０Ｈ），  ２．４８（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３６  （ｓ，  ３Ｈ），
１．０５−１．１３（ｍ，  １Ｈ），  ０．７４−０．９６（ｍ，  ４Ｈ）；ＨＲＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２１Ｈ２８Ｎ５Ｏ３Ｓの計算値，４３０．１９１３；実測値，４３０．１８９７。
【０４６０】
ＹＫ１４９（８６）２−アミノ−Ｎ−（３−（４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
８２（２０ｍｇ、０．０５５２ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ（１ｍＬ）溶液にＢｏｃ−グリシン（９．７ｍｇ、０．０５５２ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１２ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）を添加し、室温で５時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して固体を得た。これを２ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）に溶解し、室温で１時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１５：１）によって精製して、１３．９ｍｇ（６０％）の８６を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３／ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ  ７．３８（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．１５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．７９（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．８６−３．９７（ｍ，  １０Ｈ），  ３．５２  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．５８（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４１  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４１９．１。
【０４６１】
ＴＴ−２（８７）Ｎ−（３−（４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）シクロブタンカルボキサミド
８２（１０ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（１９．５μｌ、１４．２ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、およびシクロブタンカルボニルクロリド（９．６μｌ、１０．０ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）を室温で２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を分取ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して、４．１ｍｇ（３３％）の８７を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．５０（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．００  （ｓ，  １Ｈ），  ６．９４（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ６．７７（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９０（ｂｒ  ｓ，  １０Ｈ），  ３．０７（ｍ，  １Ｈ），  ２．５０（ｍ，  １４Ｈ
），  ２．１４−２．４２（ｍ，  ７Ｈ），  １．８２−２．０２（ｍ，  ２Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４４４．１。
【０４６２】
ＴＴ−３（８８）Ｎ−（３−（４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）シクロヘキサンカルボキサミド
８２（１０ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（１９．５μｌ、１４．２ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、およびシクロヘキサンカルボニルクロリド（１１．４μｌ、１２．３ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）を室温で３時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を分取ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して、１２ｍｇ（９１％）の８８を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．５０（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．１３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０２  （ｓ，  １Ｈ），  ６．７６（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９０（ｂｒ  ｓ，  １０Ｈ），  ２．５１（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３８  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．１１−２．２２（ｍ，  １Ｈ），  １．１９−１．９６（ｍ，  １０Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４７２．０。
【０４６３】
ＴＴ−４（８９）Ｎ−（３−（４，６−ジメトキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）ベンズアミド
８２（１０ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（１９．５μｌ、１４．２ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、および塩化ベンゾイル（９．８μｌ、１１．８ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）を室温で３時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を分取ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して、８．６ｍｇ（６６％）の８９を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．８３（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．７４（ｂｒ  ｓ，
１Ｈ），  ７．５９（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１３  （ｓ，  １Ｈ），  ６．８６（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．８７−３．９３（ｍ，
１０Ｈ），  ２．５０（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３７  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４６６．１。
【０４６４】
【化５３】
2018188476.tif 000147
スキーム１１．ＴＴ−５（９５）の合成。
【０４６５】
試薬および条件：ａ．ＰｈＢ（ＯＨ）２、Ｎａ２ＣＯ３、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、ＰＰｈ３、ＤＭＥ、９５℃、１５〜２０時間；ｂ．Ｎ−メチルピペラジン、ＤＭＦ、９０℃、１．５時間；ｃ．ＮＩＳ、ＴＦＡ、ＣＨ３ＣＮ；ｄ．３−アミノベンゼンチオール、ネオクプロイン、ＣｕＩ、Ｋ３ＰＯ４、ＤＭＦ、１２０℃、１２時間；ｅ．Ｂｏｃ−グリシン、ＤＣＣ、ＴＨＦ、室温、１２時間；ｆ．ＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）、室温。
【０４６６】
（９１）２−クロロ−４−フェニルピリミジン
２，４−ジクロロピリミジン（９０）（５０ｍｇ、０．３３６ｍｍｏｌ）、フェニルボロン酸（４１ｍｇ、０．３３６ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（１１０ｍｇを含有する０．５ｍＬ水溶液）、およびＤＭＥ（２．５ｍＬ）の混合物に、酢酸パラジウム（３．８ｍｇ、０．０１６８ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（８．８ｍｇ、０．０３３６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を９５℃で２０時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をジクロロメタン（２０ｍＬ）中に取り、水（３×５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、８：２）によって精製して、４１ｍｇ（６４％）の９１を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，
ＣＤＣｌ３）：δ  ８．６３（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０６−８．１１（ｍ，  ２Ｈ），  ７．６４（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４７−７．５７（ｍ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １６７．２，  １６１．９，  １５９．８，  １３５．１，  １３１．９，  １２９．１，  １２７．４，  １１５．２。
【０４６７】
（９２）２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−４−フェニルピリミジン
９１（３８ｍｇ、０．２０１ｍｍｏｌ）を含む０．５ｍＬのＤＭＦ溶液に１−メチルピペラジン（５６μｌ、５０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を添加し、９０℃で１．５時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して、４９ｍｇ（９５％）の９２を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  
（５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．３６（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０１−８．０９（ｍ，  ２Ｈ），  ７．４３−７．５０（ｍ，  ３Ｈ），  ６．９２（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９６（ｍ，  ４Ｈ），  ２．５０（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３４  （ｓ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １６４．４，  １６２．１，  １５８．４，  １３７．８，  １３０．６，  １２８．８，  １２７．１，  １０５．８，  ５５．２，  ４６．４，  ４３．９；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋２５５．１。
【０４６８】
（９３）５−ヨード−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−４−フェニルピリミジン
９２（４９ｍｇ、０．１９３ｍｍｏｌ）を含むアセトニトリル（１．４ｍＬ）にＴＦＡ（５９μｌ、８８ｍｇ、０．７７２ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヨードスクシンイミド（４３ｍｇ、０．１９３ｍｍｏｌ）を添加し、室温で１時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をジクロロメタン（１５ｍＬ）に取り、１０％Ｎａ２ＣＯ３（２×５ｍＬ）、水（５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、１０：１）によって精製して、６７ｍｇ（９２％）の９３を得た。１Ｈ  ＮＭＲ
（５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．６０  （ｓ，  １Ｈ），  ７．６５−７．７３（ｍ，  ２Ｈ），  ７．４２−７．４９（ｍ，  ３Ｈ），  ３．８６（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４５（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３３  （ｓ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １６７．５，  １６５．８，  １６０．９，  １４０．３，  １２９．７，  １２９．３，  １２８．１，  ７６．２，  ５５．０，  ４６．４，  ４３．９；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３８０．９。
【０４６９】
（９４）３−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−４−フェニルピリミジン−５−イルチオ）アニリン
９３（３７．６ｍｇ、０．０９９ｍｍｏｌ）、３−アミノベンゼンチオール（１２μｌ、１３．６ｍｇ、０．１０９ｍｍｏｌ）、ネオクプロイン（６．２ｍｇ、０．０２９７ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（５．７ｍｇ、０．０２９７ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（４２ｍｇ、０．１９８ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１．４ｍＬ）の混合物を１１０℃で１２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、１０ｍｇ（２７％）の９４を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．４５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．７１（ｄ，  Ｊ  ＝  ６．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．３２−７．４２（ｍ，  ３Ｈ），  ６．９９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４７（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４３（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ２．０，  ６．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．３６（ｄ，  Ｊ  ＝  １．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９７（ｍ，  ４Ｈ），  ３．６０（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ２．５２（ｍ，  ４Ｈ），２．３７  （ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３７８．１。
【０４７０】
ＴＴ−５（９５）２−アミノ−Ｎ−（３−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−４−フェニルピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
９４（５ｍｇ、０．０１３３ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ（０．５ｍＬ）の溶液に、Ｂｏｃ−グリシン（２．３ｍｇ、０．０１３３ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（３ｍｇ、０．０１４６ｍｍｏｌ）を添加した。室温で２時間の撹拌後、ＴＨＦを蒸発させ、０．５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）を添加した。溶液を４５分間撹拌し、次いで、減圧下で乾燥するまで濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１０：１）によって精製して、２ｍｇ（３５％）の９５を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３／ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ  ８．４５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．６９（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．３５−７．４５（ｍ，  ４Ｈ），  ７．３１（ｍ，  １Ｈ），  ７．１７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），
６．７６（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９６（ｍ，  ４Ｈ），  ３．３６  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．５６（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３８  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４３５．０。
【０４７１】
【化５４】
2018188476.tif 000148
スキーム１２．ＴＴ−７（１００）、ＴＴ−８（１０１）、ＴＴ−９（１０２）、ＴＴ−１８（１０３）、ＴＴ−１９（１０４）、ＴＴ−２０（１０５）の合成。
【０４７２】
試薬および条件：ａ．ベンジルアルコール、ＫＯＨ、１８−クラウン−６、トルエン、室温、１時間；ｂ．Ｎ−メチルピペラジン、ＤＭＦ、８０℃、１．７５時間；ｃ．ＮＩＳ、ＴＦＡ、ＣＨ３ＣＮ、室温、１時間；ｄ．３−アミノベンゼンチオール、ネオクプロイン、ＣｕＩ、Ｋ２ＣＯ３、ＤＭＦ、１２０℃、１８時間；ｅ．Ａｃ２Ｏ、ＣＨ２Ｃｌ２またはＰｈＣＯＣｌ、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ２Ｃｌ２；ｆ．ＲＣＯＯＨ、ＤＣＣ、ＴＨＦ、室温、１２時間；ｇ．ＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）、室温。
【０４７３】
（９６）４−（ベンジルオキシ）−２−クロロピリミジン
２，４−ジクロロピリミジン（９０）（２．０ｇ、０．０１３４ｍｍｏｌ）を含むトルエン（２０ｍＬ）溶液に、ベンジルアルコール（１．５３ｍｌ、１．５９ｇ、０．０１４７ｍｏｌ）、ＫＯＨ（０．８２ｇ、０．０１４７ｍｏｌ）、および１８−クラウン−６（０．１７７ｇ、０．０００６７ｍｏｌ）を添加し、室温で１時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）で希釈し、水（３×５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して白色固体を得た。これに対してクロマトグラフィ（ヘキサン：ＣＨ２Ｃｌ２、１：１→３：７）を行って２．０９ｇ（７１％）の９６の位置異性体２−（ベンジルオキシ）−４−クロロピリミジンとの混合物（それぞれ１Ｈ−ＮＭＲによる相対比
７５：２５）を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｎａ］＋２４３．１。
【０４７４】
（９７）４−（ベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン
９６（２．０９、０．００９４７ｍｏｌ；位置異性体を含む）を含むＤＭＦ（３４ｍＬ）溶液に、１−メチルピペラジン（３．１５ｍＬ、２．８５ｇ、０．０２８４ｍｏｌ）を添加し、８０℃で１．７５時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（３５０ｍＬ）中に取り、ブライン（３×５０ｍＬ）で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮してオイルを得た。これをカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１：０→２５：１）によって精製して、１．８８ｇ（７０％）の９７を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．０６（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４１（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．３５  （ｔ，  Ｊ  ＝
７．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．３２（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．０３（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．３５  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８３（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４５（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３３  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋２８４．９。
【０４７５】
（９８）４−（ベンジルオキシ）−５−ヨード−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン
９７（０．９３７ｇ、０．００３３ｍｏｌ）を含むアセトニトリル（１６ｍＬ）にＴＦＡ（１．０２ｍＬ、１．５１ｇ、０．０１３２ｍｏｌ）およびＮ−ヨードスクシンイミド（０．９６５ｇ、０．００４３ｍｏｌ）を添加し、室温で１時間撹拌した。次いで、７ｍＬの１０％Ｎａ２ＣＯ３（０．７０ｇ、０．０６６ｍｏｌ）を添加し、２分間撹拌した。反応混合物を乾燥するまで濃縮し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍｌ）中に取り、１０％Ｎａ２ＣＯ３（２×５０ｍＬ）、１０％チオ硫酸ナトリウム（５０ｍＬ）、およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮してオイルを得た。これをカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、５０：１）によって精製して、１．３１ｇ（９７％）の９８を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００
ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４４（ｄ，  Ｊ  ＝
７．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．３７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．３２（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．４０  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７９（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４２（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３２  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４１１．０。
【０４７６】
（９９）３−（４−（ベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）アニリン
９８（０．９８５ｇ、２．４０ｍｍｏｌ）、３−アミノベンゼンチオール（２５５μｌ、３００．５ｍｇ、２．４０ｍｍｏｌ）、ネオクプロイン（１５０ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（１３７ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（０．６６３ｇ、４．８０ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（２５ｍＬ）の混合物を１２０℃で１８時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、５０：１→２０：１）によって精製して、０．７５ｇ（７７％）の９９を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ７．１６−７．３０（ｍ，  ５Ｈ），  ６．９９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．５６（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．３８−６．４６（ｍ，  ２Ｈ），  ５．３８  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８４（ｍ，  ４Ｈ），  ３．５６（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ２．４５（ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ２．３３  （ｓ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １６９．３，  １６４．５，  １６１．４，  １５８．１，  １４６．９，  １３８．５，  １３６．８，  １２
９．６，  １２８．３，  １２７．７，  １２７．４，  １１７．６，  １１３．６，  １１２．６，  ６７．６，  ５４．８，  ４６．２，  ４３．９；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４０８．１。
【０４７７】
ＴＴ−７（１００）Ｎ−（３−（４−（ベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
９９（５．２ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（０．２ｍＬ）に無水酢酸（１．５μＬ、１．６ｍｇ、０．０１５６ｍｍｏｌ）を添加し、室温で４時間撹拌した。次いで、これを乾燥するまで減圧下で濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して、４．５ｍｇ（７９％）の１００を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３／ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ  ８．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ７．５４（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２２−７．２７（ｍ，  ３Ｈ），  ７．１３−７．２０（ｍ，  ３Ｈ），  ７．０９  （ｓ，  １Ｈ），  ６．８７（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．３６  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８５（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４９（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．１０  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４５０．１。
【０４７８】
ＴＴ−８（１０１）Ｎ−（３−（４−（ベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）ベンズアミド
９９（１４ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（２４μｌ、１７．２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、および塩化ベンゾイル（１２μｌ、１４．３ｍｇ、０．１０２ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）を室温で２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２５：１）によって精製して、１３．６ｍｇ（７８％）の１０１を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３／ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ  ８．２６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．８４（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．６９（ｄｄ，  Ｊ  ＝  １．４，  ８．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１４−７．２７（ｍ，  ７Ｈ），  ６．９３（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ０．９，  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．３７  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８５（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４８（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ）；１３Ｃ
ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３／ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ  １６８．６，  １６６．３，  １６４．２，  １６１．３，  １３８．６，  １３８．３，  １３６．４，
１３４．８，  １３１．８，  １２９．３，  １２８．６，  １２８．３，  １２７．７，  １２７．５，  １２７．２，  １２３．４，  １１８．８，  １１７．９，  １００．１，  ６７．８，  ５４．６，  ４５．９，  ４３．６；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５１２．１。
【０４７９】
ＴＴ−９（１０２）２−アミノ−Ｎ−（３−（４−（ベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
９９（３０ｍｇ、０．０７３６ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ（３ｍＬ）にＢｏｃ−グリシン（１４．２ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（１６．７ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）を添加し、室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２５：１）によって精製してオイルを得た。これを２．５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）に溶解し、室温で４５分間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１５：１）によって精製して、２４．６ｍｇ（７２％）の１０２を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３／ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ  ８．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ７．５０（ｄｄ，  Ｊ  ＝  １．２，  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３１（ｍ，  １Ｈ），  ７．２２−７．２７（ｍ，  ３Ｈ），  ７．１３−７．２０（ｍ，  ３Ｈ
），  ６．８６（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．３７  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８５（ｍ，  ４Ｈ），  ３．３９  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．４９（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３／ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ  １７１．４，  １６８．５，  １６４．１，  １６１．２，  １３８．２，  １３８．１，  １３６．４，  １２９．２，  １２８．２，  １２７．６，  １２７．２，  １２３．０，  １１８．２，  １１７．０，  ６７．７，  ５４．５，  ４５．８，  ４４．６，  ４３．５；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４６５．３。
【０４８０】
ＴＴ−２０（１０５）Ｎ−（３−（４−（ベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）ピロリジン−２−カルボキサミド
９９（８．６ｍｇ、０．０２１１ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ（０．５ｍＬ）にＢｏｃ−Ｌ−プロリン（５ｍｇ、０．０２３２ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（５ｍｇ、０．０２３２ｍｍｏｌ）を添加し、室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を０．３５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）に溶解し、室温で４５分間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１５：１）によって精製して、６．０ｍｇ（５７％）の１０５を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ９．６３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２６  （ｓ，  １Ｈ），
７．５８（ｄｄ，  Ｊ  ＝  １．２，  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３１  （ｔ，
Ｊ  ＝  １．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１２−７．１７（ｍ，  ３Ｈ），  ７．２２−７．２６（ｍ，  ３Ｈ），  ６．８３（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．３６  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８０−３．９１（ｍ，  ５Ｈ），  ３．０４−３．１１（ｍ，  １Ｈ），  ２．９４−３．００（ｍ，  １Ｈ），  ２．４７（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．１５−２．２５（ｍ，  １Ｈ），  １．９８−２．０６（ｍ，  １Ｈ），  １．７０−１．８１（ｍ，  １Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋５０５．２。
【０４８１】
【化５５】
2018188476.tif 000149
スキーム１３．ＴＴ−１２（１１５）、ＴＴ−１３（１１６）、ＴＴ−１４（１１７）、ＴＴ−１５（１１８）、ＴＴ−１６（１１９）、ＴＴ−１７（１２０）の合成。
試薬および条件：ａ．ｐ−メトキシベンジルアルコール、ＫＯＨ、１８−クラウン−６、トルエン、室温、１時間；ｂ．Ｎ−メチルピペラジン、ＤＭＦ、８０℃、１．５時間；ｃ．ＮＩＳ、ＴＦＡ、ＣＨ３ＣＮ、室温、１時間；ｄ．３−アミノベンゼンチオール、２−チオフェンカルボン酸銅（Ｉ）、Ｋ２ＣＯ３、ＤＭＦ、１２０℃、２５時間；ｅ．Ａｃ２
Ｏ、ＣＨ２Ｃｌ２、室温、３時間；ｆ．ＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（１：１）、室温、４時間；ｇ．ＰＯＣｌ３、６０℃、２時間；ｈ．ＲＯＨ、ＮａＨ、ＤＭＦ、８０℃、１．５時間；ｉ．ＢＦ３−ＭｅＯＨ、還流、５時間；Ｊ．ＲＣＯＯＨ、ＤＣＣ、ＴＨＦ、室温、１２時間；ｋ．ＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）、室温またはＣＨ２Ｃｌ２：ピペリジン（９：１）、室温。
【０４８２】
（１０６）２−クロロ−４−（４−メトキシベンジルオキシ）ピリミジン
２，４−ジクロロピリミジン（９０）（２．０ｇ、０．０１３４ｍｍｏｌ）を含むトルエン（２０ｍＬ）にｐ−メトキシベンジルアルコール（１．８４ｍｌ、２．０４ｇ、０．０１４７ｍｏｌ）、ＫＯＨ（０．８２５ｇ、０．０１４７ｍｏｌ）、および１８−クラウン−６（０．１７７ｇ、０．０００６７ｍｏｌ）を添加し、室温で１時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３５０ｍＬ）で希釈し、水（２×５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮してオイルを得た。これをカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：ＣＨ２Ｃｌ２、１：１→３：７）によって精製して、２．３９ｇ（７１％）の１０６の位置異性体４−クロロ−２−（４−メトキシベンジルオキシ）ピリミジンとの混合物（それぞれ、１Ｈ−ＮＭＲによる相対比７８：２２）を得た。
【０４８３】
（１０７）４−（４−メトキシベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン
１０６（２．３９、０．００９５ｍｏｌ；位置異性体を含む）を含むＤＭＦ（３４ｍＬ）溶液に１−メチルピペラジン（３．１６ｍＬ、２．８５ｇ、０．０２８５ｍｏｌ）を添加し、８０℃で１．５時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（３５０ｍＬ）中に取り、ブライン（３×５０ｍＬ）で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮してオイルを得た。これをカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ：ｉ−ＰｒＯＨ：Ｅｔ３Ｎ、４０：１：１％→２０：１：１％）によって精製して、２．１０ｇ（７０％）の１０７を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．０５（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３５（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．９０（ｄ，
Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．００（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．２７  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８４（ｍ，  ４Ｈ），  ３．８１  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．４６（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３４  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３１５．２。
【０４８４】
（１０８）５−ヨード−４−（４−メトキシベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン
１０７（１．１６ｇ、３．６９ｍｍｏｌ）を含むアセトニトリル（１８ｍＬ）にＮ−ヨードスクシンイミド（１．０８ｇ、４．８０ｍｍｏｌ）、ＴＦＡ（１．１４ｍＬ、１．６８ｇ、１４．７６ｍｍｏｌ）を添加し、室温で１時間撹拌した。次いで、１５．６ｍＬの１０％Ｎａ２ＣＯ３（１．５６ｇ、１４．７６ｍｍｏｌ）を添加し、２分間撹拌した。反応混合物を乾燥するまで濃縮し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍｌ）中に取り、１０％Ｎａ２ＣＯ３（２×５０ｍＬ）、１０％チオ硫酸ナトリウム（５０ｍＬ）、およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮してオイルを得た。これをカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、５０：１）によって精製して、１．４４ｇ（８５％）の１０８を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００
ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．３７（ｄ，  Ｊ  ＝
８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．９０（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．３３  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８１  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．８０（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４４（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３３  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４４１．０。
【０４８５】
（１０９）３−（４−（４−メトキシベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）アニリン
１０８（１．１４ｇ、２．５９ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（０．７１６ｇ、５．１８ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（３７ｍＬ）の混合物を脱気し、アルゴンを３回再充填した。チオフェン−２−カルボン酸銅（Ｉ）（０．１９８ｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を添加し、脱気し、アルゴンを２回再充填した。３−アミノチオフェノール（３３０μｌ、０．３８９ｇ、３．１１ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１２０℃で２５時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２００：１→４０：１）によって精製して、０．９３３ｇ（８２％）の１０９を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２３  （ｓ，  １Ｈ），
７．１４（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．９８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．８０（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．５４（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４４（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４０  （ｔ，  Ｊ  ＝  １．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．３０  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８６（ｍ，  ４Ｈ），  ３．７９  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．５５（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ２．４７（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１６６  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １６８．６，  １６４．４，  １６１．４，  １５９．２，  １４６．８，  １３８．６，  １２９．５，  １２９．３，  １２８．８，  １１７．６，  １１３．７，  １１３．６，  １１２．５，  １００．１，
６７．４，  ５５．３，  ５４．８，  ４６．２，  ４３．９；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４３８．３。
【０４８６】
ＴＴ−１１（１１０）Ｎ−（３−（４−（４−メトキシベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
１０９（０．９３３ｇ、２．１３ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（６ｍＬ）溶液に無水酢酸（２４２μＬ、２６１ｍｇ、２．５６ｍｍｏｌ）を添加し、室温で３時間撹拌した。反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（９０ｍＬ）で希釈し、１０％Ｎａ２ＣＯ３（２×２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。これをカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２００：１→５０：１）によって精製して、０．８９５ｇ（８８％）の１１０を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ７．５５（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１１（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．８５−６．９３（ｍ，  ３Ｈ），  ６．７８（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．３１  （ｓ，  ２Ｈ），
３．８８（ｍ，  ４Ｈ），  ３．７８  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．４８（ｍ，  ４Ｈ），
２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．１２  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４８０．１。
【０４８７】
（１１１）Ｎ−（３−（４−ヒドロキシ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
１１０（０．８７２ｇ、１．８２ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（４ｍＬ）を５分間にわたって滴下し、室温で４時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、高真空下で一晩乾燥させて１１１を得た。これをさらに精製せずに使用した。ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３６０．２。
【０４８８】
（１１２）Ｎ−（３−（４−クロロ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
１１１（約１．８２ｍｍｏｌ）およびＰＯＣｌ３（５ｍＬ）を６５℃で２時間加熱した。室温への冷却後、反応混合物を、氷片を含むビーカーに添加した。ＰＯＣｌ３の完全な反応停止後、約ｐＨ９まで固体Ｎａ２ＣＯ３を慎重に添加した。これを分液漏斗（ｓｅｐ
ｅｒａｔｏｒｙ  ｆｕｎｎｅｌ）に移し、ＣＨ２Ｃｌ２（４×６０ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して固体を得た。これをカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２００：１→５０：１）によって精製して、０．２１５ｇ（３１％）の１１２を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．３７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４０（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１６−７．２５（ｍ，  ２Ｈ），  ６．８９（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．８８（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４７（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３４  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．１４  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３７８．２。
【０４８９】
（１１３Ａ）Ｎ−（３−（４−（シクロペンチルメトキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
ＤＭＦ（２５０μＬ）に溶解したシクロペンタンメタノール（２１．３μＬ、１９．９ｍｇ、０．１９８ｍｍｏｌ）にＮａＨ（４．３ｍｇ、０．１７９ｍｍｏｌ）を添加し、得られた懸濁液を室温で１０分間撹拌した。次いで、１１２（１５ｍｇ、０．０３９７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を８０℃で１．５時間加熱した。ＭｅＯＨ（１ｍＬ）を添加し、５分間撹拌し、次いで、反応混合物を減圧下で濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して、１３．９ｍｇ（７９％）の１１３Ａを得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４２（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），
７．１０−７．２２（ｍ，  ３Ｈ），  ６．８６（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．１６（ｄ，  Ｊ  ＝  ６．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），    ３．８６（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４８（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．１９（ｍ，  １Ｈ），  ２．０９  （ｓ，  ３Ｈ），  １．５６−１．６７（ｍ，  ２Ｈ），  １．４０−１．５５（ｍ，  ４Ｈ），  １．１０−１．２０（ｍ，  ２Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４４２．１。
【０４９０】
（１１４Ａ）３−（４−（シクロペンチルメトキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）アニリン
１１３Ａ（１３．９ｍｇ、０．０３１５ｍｍｏｌ）を含むメタノール（１ｍＬ）にＢＦ３−ＭｅＯＨ（４７μＬ、５３．６ｍｇ、０．３７８ｍｍｏｌ）を添加し、５時間還流した。Ｅｔ３Ｎを添加し、次いで、反応混合物を濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して、１１ｍｇ（８７％）の１１４Ａを得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２２  （ｓ，  １Ｈ），  ６．９８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．５５（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４５  （ｓ，  １Ｈ），  ６．４３（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．１７（ｄ，  Ｊ  ＝  ６．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．８６（ｍ，  ４Ｈ），  ３．５８（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ２．４８（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．２３（ｍ，  １Ｈ），  １．５９−１．６８（ｍ，  ２Ｈ），  １．４３−１．５８（ｍ，  ４Ｈ），  １．１３−１．２３（ｍ，  ２Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４００．３。
【０４９１】
ＴＴ−１２（１１５）２−アミノ−Ｎ−（３−（４−（シクロペンチルメトキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
１１４Ａ（１１ｍｇ、０．０２７５ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ（１ｍＬ）にＢｏｃ−グリシン（５．３ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（６．２ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）を添加し、室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して残渣を得た。これを１．２５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）に溶解し、室温で４５分間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ
）、１０：１）によって精製して、１０．３ｍｇ（８２％）の１１５を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３／ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ  ８．２１  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４４（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３４  （ｓ，  １Ｈ），  ７．１７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．８６（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．１７（ｄ，  Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．８４（ｍ，  ４Ｈ），  ３．４１  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．５１（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３６  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．２１（ｍ，  １Ｈ），  １．５７−１．６７（ｍ，  ２Ｈ），  １．４２−１．５７（ｍ，  ４Ｈ），  １．１０−１．２２（ｍ，  ２Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４５７．４。
【０４９２】
（１１３Ｂ）Ｎ−（３−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−４−フェノキシピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
ＤＭＦ（２５０μＬ）に溶解したフェノール（１９ｍｇ、０．１９８ｍｍｏｌ）にＮａＨ（４．３ｍｇ、０．１７９ｍｍｏｌ）を添加し、得られた溶液を室温で１０分間撹拌した。次いで、１１２（１５ｍｇ、０．０３９７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を８０℃で１．５時間加熱した。ＭｅＯＨ（１ｍＬ）を添加し、５分間撹拌し、次いで、反応混合物を減圧下で濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２０：１）によって精製して、１６．２ｍｇ（９４％）の１１３Ｂを得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．３５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４０（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３０−７．３６（ｍ，  ３Ｈ），  ７．２８（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ７．１５−７．２３（ｍ，  ２Ｈ），  ７．０２（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．９６（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，
１Ｈ），  ３．６５（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３６（ｍ，  ４Ｈ），  ２．２８  （ｓ，
３Ｈ），  ２．１３  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４３６．２。
【０４９３】
（１１４Ｂ）３−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−４−フェノキシピリミジン−５−イルチオ）アニリン
１１３Ｂ（１６．２ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）を含むメタノール（１ｍＬ）にＢＦ３−ＭｅＯＨ（５５μＬ、６３．３ｍｇ、０．４４６ｍｍｏｌ）を添加し、５時間還流した。Ｅｔ３Ｎを添加し、次いで、反応混合物を濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ヘキサン：ＣＨ２Ｃｌ２：ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２：２：１：０．５）によって精製して、６．５ｍｇ（４５％）の１１４Ｂを得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．３４  （ｓ，  １Ｈ），  ７．３３  （ｔ，  Ｊ  ＝
７．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０１−７．０７（ｍ，  ３Ｈ），  ６．６３（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．５６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４７（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ２．２，  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．６３（ｍ，  ６Ｈ），  ２．３７（ｍ，
４Ｈ），  ２．３０  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３９４．３。
【０４９４】
ＴＴ−１３（１１６）２−アミノ−Ｎ−（３−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−４−フェノキシピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
１１４Ｂ（６．５ｍｇ、０．０１６５ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ（０．６５ｍＬ）にＦｍｏｃ−グリシン（５．４ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（３．８ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）を添加し、室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ヘキサン：ＣＨ２Ｃｌ２：ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２：２：１：０．５）によって精製して残渣を得た。これをＣＨ２Ｃｌ２（０．９ｍＬ）およびピペリジン（０．１ｍＬ）に溶解し、室温で５時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１５：１）によって精製して、３．５ｍｇ（４７％）の１１６を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ９．３４（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．３６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．５０
（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．３３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０３（ｄ，
Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．９６（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．６８（ｍ，  ４Ｈ），  ３．４６  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．４０（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３１  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４５１．１。
【０４９５】
（１１３Ｃ）Ｎ−（３−（４−（シクロペンチルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
ＤＭＦ（２００μＬ）に溶解したシクロペンタノール（１１．８μＬ、１１．２ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）にＮａＨ（２．８ｍｇ、０．１１７ｍｍｏｌ）を添加し、得られた懸濁液を室温で１０分間撹拌した。次いで、１１２（１０ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を８０℃で２時間加熱した。ＭｅＯＨ（１ｍＬ）を添加し、５分間撹拌し、次いで、反応混合物を減圧下で濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１５：１）によって精製して、８．５ｍｇ（７７％）の１１３Ｃを得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２１  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４１（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１０−７．１９（ｍ，  ３Ｈ），  ６．８６（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．３９（ｍ，  １Ｈ），  ３．８６（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４８（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．１４  （ｓ，  ３Ｈ），  １．６３−１．８６（ｍ，  ４Ｈ），
１．４５−１．５６（ｍ，  ４Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４２８．２。
【０４９６】
（１１４Ｃ）３−（４−（シクロペンチルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）アニリン
１１３Ｃ（８．５ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）を含むメタノール（０．７５ｍＬ）にＢＦ３−ＭｅＯＨ（３０μＬ、３４．１ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を添加し、５時間還流した。Ｅｔ３Ｎを添加し、次いで、反応混合物を濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１５：１）によって精製して、７．２ｍｇ（９４％）の１１４Ｃを得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２０  （ｓ，  １Ｈ），  ６．９８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．５５（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ２．０
Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４３（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ２．０，  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），
５．４０（ｍ，  １Ｈ），  ３．８６（ｍ，  ４Ｈ），  ３．５８（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ２．４８（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．６７−１．８７（ｍ，  ４Ｈ），  １．５１−１．６２（ｍ，  ４Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３８６．２。
【０４９７】
ＴＴ−１４（１１７）２−アミノ−Ｎ−（３−（４−（シクロペンチルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
１１４Ｃ（７．２ｍｇ、０．０１８７ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ（０．５ｍＬ）溶液に、Ｂｏｃ−グリシン（３．６ｍｇ、０．０２０６ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（４．３ｍｇ、０．０２０６ｍｍｏｌ）を添加した。室温で一晩の撹拌後、ＴＨＦを蒸発させ、０．５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）を添加した。溶液を４５分間撹拌し、次いで、乾燥するまで減圧下で濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１５：１）によって精製して、７．４ｍｇ（８９％）の１１７を得た。１Ｈ
ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ９．２９（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．２２  （ｓ，  １Ｈ），  ７．５２（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３０  （ｓ，  １Ｈ），  ７．１６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．８６（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．４０（ｍ，  １Ｈ），  ３．８
６（ｍ，  ４Ｈ），  ３．４５  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．４８（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．６１−１．８６（ｍ，  ４Ｈ），  １．４４−１．５７（ｍ，  ４Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４４３．２。
【０４９８】
（１１３Ｄ）Ｎ−（３−（４−（シクロヘキシルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
ＤＭＦ（２００μＬ）に溶解したシクロヘキサノール（１４μＬ、１３．０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）にＮａＨ（２．８ｍｇ、０．１１７ｍｍｏｌ）を添加し、得られた懸濁液を室温で１０分間撹拌した。次いで、１１２（１０ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を８０℃で２時間加熱した。ＭｅＯＨ（１ｍＬ）を添加し、５分間撹拌し、次いで、反応混合物を減圧下で濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ヘキサン：ＣＨ２Ｃｌ２：ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２：２：１：０．５）によって精製して、２．９ｍｇ（２５％）の１１３Ｄを得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４３（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１２−７．１９（ｍ，  ２Ｈ），  ７．０６（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），
６．８８（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．０５（ｍ，  １Ｈ），  ３．８５（ｍ，  ４Ｈ），  ２．５０（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３６（ｍ，  ３Ｈ），  ２．１４  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２２−１．８０（ｍ，  １０Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４４２．２。
【０４９９】
（１１４Ｄ）３−（４−（シクロヘキシルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）アニリン
１１３Ｄ（２．９ｍｇ、０．００６６ｍｍｏｌ）を含むメタノール（０．５ｍＬ）にＢＦ３−ＭｅＯＨ（１０μＬ、１１．２ｍｇ、０．０７９ｍｍｏｌ）を添加し、５時間還流した。Ｅｔ３Ｎを添加し、次いで、反応混合物を濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１５：１）によって精製して、２．４ｍｇ（９２％）の１１４Ｄを得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２２  （ｓ，  １Ｈ），  ６．９８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．５７（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４３（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ２．０，  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．０５（ｍ，  １Ｈ），  ３．８６（ｍ，  ４Ｈ），  ３．５８（ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ２．５１（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３７  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２２−１．８０（ｍ，  １０Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４００．２。
【０５００】
ＴＴ−１５（１１８）２−アミノ−Ｎ−（３−（４−（シクロヘキシルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
１１４Ｄ（２．４ｍｇ、０．００６ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ（０．２５ｍＬ）溶液に、Ｂｏｃ−グリシン（１．２ｍｇ、０．００６６ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１．４ｍｇ、０．００６６ｍｍｏｌ）を添加した。室温で一晩の撹拌後、ＴＨＦを蒸発させ、０．２５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）を添加した。溶液を４５分間撹拌し、次いで、乾燥するまで減圧下で濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１５：１）によって精製して、２．５ｍｇ（９３％）の１１８を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ９．２８（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），
８．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ７．５４（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３０  （ｓ，  １Ｈ），  ７．１７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．８８（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．０６（ｍ，  １Ｈ），  ３．８４（ｍ，  ４Ｈ），  ３．４５  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．４８（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２２−１．８０（ｍ，  １０Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４５７．１。
【０５０１】
（１１３Ｅ）Ｎ−（３−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−４−（ピリジン−３−イルメトキシ）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
ＤＭＦ（２００μＬ）に溶解した３−ピリジルカルビノール（１５．５μＬ、１７．４ｍｇ、０．１５９ｍｍｏｌ）にＮａＨ（３．４ｍｇ、０．１４３ｍｍｏｌ）を添加し、得られた懸濁液を室温で１０分間撹拌した。次いで、１１２（１２ｍｇ、０．０３１８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を８０℃で１．５時間加熱した。ＭｅＯＨ（１ｍＬ）を添加し、５分間撹拌し、次いで、反応混合物を減圧下で濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ヘキサン：ＣＨ２Ｃｌ２：ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、２：２：１：０．５）によって精製して、１１．８ｍｇ（８３％）の１１３Ｅを得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４５１．３。
【０５０２】
（１１４Ｅ）３−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−４−（ピリジン−３−イルメトキシ）ピリミジン−５−イルチオ）アニリン
１１３Ｅ（１１．８ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）を含むメタノール（１ｍＬ）にＢＦ３−ＭｅＯＨ（３９μＬ、４４．３ｍｇ、０．３１２ｍｍｏｌ）を添加し、５時間還流した。Ｅｔ３Ｎを添加し、次いで、反応混合物を濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１５：１）によって精製して、７ｍｇ（６６％）の１１４Ｅを得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３／ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ  ８．４５（ｄ，  Ｊ  ＝  ４．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．４３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．５０（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２７（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ５．０，  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４７−６．５５（ｍ，  ３Ｈ），  ５．３９  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８８（ｍ，  ４Ｈ），  ２．５２（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３７  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４０９．３。
【０５０３】
ＴＴ−１６（１１９）２−アミノ−Ｎ−（３−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−４−（ピリジン−３−イルメトキシ）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
１１４Ｅ（６ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ（０．５ｍＬ）溶液に、Ｂｏｃ−グリシン（３ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（３．３ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）を添加した。室温で一晩の撹拌後、ＴＨＦを蒸発させ、０．３５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）を添加した。溶液を４５分間撹拌し、次いで、乾燥するまで減圧下で濃縮して残渣を得た。これを分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１５：１）によって精製して、６．１ｍｇ（８８％）の１１９を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３／ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ  ９．３１（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．５０（ｍ，  ２Ｈ），  ８．２８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．５０（ｄ，  Ｊ  ＝
７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４２（ｍ，  １Ｈ），  ７．３３  （ｓ，  １Ｈ），
７．１１−７．２５（ｍ，  ２Ｈ），  ６．８６（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．４０  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８７（ｍ，  ４Ｈ），  ３．４６  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．４８（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３６  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４６６．２。
【０５０４】
【化５６】
2018188476.tif 000150
スキーム１４：ＴＴ−１０（１２１）の合成。
【０５０５】
試薬および条件：ａ．Ｆｍｏｃ−グリシン、ＤＣＣ、ＴＨＦ、室温、１２時間；ｂ．ＣＨ２Ｃｌ２：ピペリジン（９：１）、室温、２時間。
【０５０６】
ＴＴ−１０（１２１）２−アミノ−Ｎ−（３−（４−（４−メトキシベンジルオキシ）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−５−イルチオ）フェニル）アセトアミド
１０９（１０ｍｇ、０．０２２８ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ（１ｍＬ）にＦｍｏｃ−グリシン（７．５ｍｇ、０．０２５１ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（５．２ｍｇ、０．０２５１ｍｍｏｌ）を添加し、室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（０．９ｍＬ）およびピペリジン（０．１ｍＬ）に溶解し、室温で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１５：１）によって精製して、８．２ｍｇ（７３％）の１２１を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ９．２０（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．２５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．６０（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１７−７．２０（ｍ，  ２Ｈ），  ７．０９（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．８５（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．７７（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．３０  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８８（ｍ，  ４Ｈ），  ３．７８  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．４４  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．４８（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４９５．２。
【０５０７】
【化５７】
2018188476.tif 000151
スキーム１５．ＹＫ１７１（１２６）、ＹＫ１７２（１２７）、ＹＫ１７３（１２９）、ＹＫ１７４（１３０）、ＹＫ１７５（１３１）の合成。
【０５０８】
試薬および条件：ａ．Ｎ−メチルピペラジン、Ｋ２ＣＯ３、ＤＭＦ、１３０℃、１６時間；ｂ．ＮＩＳ、ＣＨ３ＣＮ、室温、２時間；ｃ．３−アミノベンゼンチオール、ネオクプロイン、ＣｕＩ、Ｋ２ＣＯ３、ＤＭＦ、１３０℃、１６時間；ｄ．ＲＣＯＣｌ、Ｅｔ３Ｎ；ｅ．ＲＣＯＯＨ、ＥＤＣｌ、ＴＨＦ、室温；ｆ．ＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４：１）、室温。
【０５０９】
（１２３）１−（６−メトキシピリジン−２−イル）−４−メチルピペラジン
２−ブロモ−６−メトキシピリジン（１２２）（１５０ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）および１−メチルピペラジン（２４０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）を含む２ｍｌのＤＭＦ溶液にＫ２ＣＯ３（２２０ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を１３０℃に１６時間加熱した。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣を（５−１０％ＭｅＯＨを含むＣＨ２Ｃｌ２）でのカラムクロマトグラフィによって精製して、１４５ｍｇ（８８％）の１２３を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．４１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．１６（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．０８（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３，  ８７  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．５４（ｍ，  ４Ｈ），  ２．５１（ｍ，  ４Ｈ），  ２．５４  （ｓ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２５  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １６３．１，  １５８．３，  １４０．１，  ９８．２，  ９８．１，  ５４．８，  ５２．９，  ４６．２，  ４５．１；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋２０８．４。
【０５１０】
（１２４）１−（５−ヨード−６−メトキシピリジン−２−イル）−４−メチルピペラジン
１２３（１２４ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を含む５ｍＬのアセトニトリルの溶液にＮ−ヨードスクシンイミド（２０３ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣を（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１：０→８５：１５）でのカラムクロマトグラフィによって精製して、１９０ｍｇ（９５％）の１２４を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．７０（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．０２（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０
Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９０  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．６０（ｍ，  ４Ｈ），  ２．６２（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３９  （ｓ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２５ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７７．７，  １６０．５，  １５７．８，  １４８．６，  １００．７，  ６１．７，  ５４．２，  ４５．５，  ４４．５；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３３４．１。
【０５１１】
（１２５）２−（（２−メトキシ−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）チオ）ピリミジン−４−アミン
１２４（１００ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、４−アミノピリミジン−２−チオール（３９ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（８３ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、ネオクプロイン（１１ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）、およびＣｕＩ（１０ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（３ｍｌ）の混合物を１３０℃に１６時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１：０→８５：１５）によって精製して、６０ｍｇ（６０％）の１２５を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．９５（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５９（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．２０（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．０５（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．０１  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８７  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．６２（ｍ，  ４Ｈ），  ２．５４（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３６  （ｓ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２５  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７１．９，  １６２．９，  １６２．５，  １５８．６，  １５６．２，  １４７．８，  １０１．１，  ９８．６，  ９７．６，  ５４．６，  ５３．６，
４６．０，  ４４．６；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３３３．５。
【０５１２】
ＹＫ１７１（１２６）Ｎ−（２−（（２−メトキシ−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）チオ）ピリミジン−４−イル）プロピオンアミド
１２５（２０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を含む１．５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２およびＥｔ３Ｎ（１００μＬ）の溶液に、プロピオニルクロリドを含むＣＨ２Ｃｌ２を滴下した。反応完了の際（ＴＬＣによる）、冷ＭｅＯＨの添加によって反応を停止させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣を（ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）２−１０％を含むＣＨ２Ｃｌ２）でのカラムクロマトグラフィによって精製して、１８ｍｇ（８０％）の１２６を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．５３（ｂｓ，  １Ｈ），  ８．３４（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７９（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５８（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．２１（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．８６  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．６３（ｍ，  ４Ｈ），  ２．５２（ｍ，  ４Ｈ），  ２．４１（ｑ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．３６  （ｓ，  ３Ｈ），  １．０８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２５ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７３．４，  １７２．２，  １７１．７，  １６２．９，  １５８．８，  １５７．３，  １４７．６，  １０５．６，
９８．７，  ９６．７，  ５４．６，  ５３．７，  ４６．０，  ４４．６，  ３０．６，  ８．９６；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３８９．３。
【０５１３】
ＹＫ１７２（１２７）Ｎ−（２−（（２−メトキシ−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）チオ）ピリミジン−４−イル）シクロプロパンカルボキサミド
１２５（２０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を含む１．５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２およびＥｔ３Ｎ（１００μＬ）の溶液に、シクロプロパンカルボニルクロリドを含むＣＨ２Ｃｌ２を滴下した。反応完了の際（ＴＬＣによる）、冷ＭｅＯＨの添加によって反応を停止させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣を（ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）２−１０％を含むＣＨ２Ｃｌ２）でのカラムクロマトグラフィによって精製して、（２１ｍｇ（９０％）の１２７を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ８．８７（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．３１（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７５（ｄ，  Ｊ  ＝
８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５７（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．２０（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．８７  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．６２（ｍ，  ４Ｈ），  ２．５２（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３６  （ｓ，  ３Ｈ），  １．６１（ｍ，  １Ｈ），  １．０８（ｍ，  ２Ｈ），  ０．８８（ｍ，  ２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２５ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７６．４，  １７３．５，  １７１．７，  １６２．９，  １５８．８，  １５７．２，  １４７．６，  １０５．７，  ９８．６，  ９６．７，  ５４．７，  ５３．６，  ４６．１，  ４４．６，  １４．０，  ７．７；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋４０１．３。
【０５１４】
（１２８）３−（（２−メトキシ−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）チオ）アニリン
１２４（１００ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、３−アミノベンゼンチオール（３７ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（８３ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、ネオクプロイン（１１ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）、およびＣｕＩ（１０ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（３ｍｌ）の混合物を１３０℃に１６時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１：０→８５：１５）によって精製して、６０ｍｇ（６０％）の１２８を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．５４（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９６（ｍ，  １Ｈ），  ６．５１（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４１（ｍ，  ２Ｈ），  ６．１９（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．８８  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．６２（ｍ，  ４Ｈ），  ２．５４（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３６  （ｓ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２５  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １６２．７，  １５８．４，  １４７．５，  １４６．８，  １３９．５，  １２９．５，  １１７．１，  １１３．０，  １１２．２，  ９９．８，  ９８．９，  ５４．６，  ５３．７，  ４６．１，  ４４．８；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３３１．２。
【０５１５】
ＹＫ１７３（１２９）Ｎ−（３−（（２−メトキシ−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）チオ）フェニル）プロピオンアミド
１２８（２０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（１００μＬ）を含む１．５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２溶液に、プロピオニルクロリドを含むＣＨ２Ｃｌ２を滴下した。反応完了の際（ＴＬＣによる）、冷ＭｅＯＨの添加によって反応を停止させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣を（ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）２−１０％を含むＣＨ２Ｃｌ２）でのカラムクロマトグラフィによって精製して、１５ｍｇ（７０％）の１２９を得た。１Ｈ  ＮＭＲ
（５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ７．５５（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２２（ｂｒ  ｓ，
１Ｈ），  ７．１４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０８  （ｓ，
１Ｈ），  ６．８１（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．２０（ｄ，  Ｊ
＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．８８  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．４７（ｍ，  ４Ｈ），  ２．５７（ｍ，  ４Ｈ），  ２．３６  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．３３（ｑ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．１９  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３８７．２。
【０５１６】
ＹＫ１７４  Ｎ−（３−（（２−メトキシ−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）
ピリジン−３−イル）チオ）フェニル）シクロプロパンカルボキサミド
１２８（２０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（１００μＬ）を含む１．５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２溶液に、シクロプロパンカルボニルクロリドを含むＣＨ２Ｃｌ２を滴下した。反応完了の際（ＴＬＣによる）、冷ＭｅＯＨの添加によって反応を停止させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣を（ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）２−１０％を含むＣＨ２Ｃｌ２）でのカラムクロマトグラフィによって精製して、１６ｍｇ（７０％）の１３０を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）δ  ７．６１  （ｓ，  １Ｈ），  ７．３１（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２０（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ６．８８（ｍ，  ２Ｈ），  ６．５５（ｍ，  １Ｈ），  ５．９５（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．６３  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．３７（ｍ，  ４Ｈ），  ２．２９（ｍ，  ４Ｈ），  ２．０９  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２５（ｍ，  １Ｈ），  ０．７８（ｍ，  ２Ｈ），  ０．５７（ｍ，  ２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２５  ＭＨｚ，
ＣＤＣｌ３）δ  １７６．４，  １７２．１，  １６２．７，  １５８．４，  １４７．５，  １３９．３，  １３８．７，  １２９．２，  １２２．２，  １１７．５，  １１６．８，  ９９．０，  ５４．６，  ５３．６，  ４６．１，  ４４．７，  １３．９，  ７．９；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３９８．３。
【０５１７】
ＹＫ１７５（１３１）２−アミノ−Ｎ−（３−（（２−メトキシ−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）チオ）フェニル）アセトアミド
１２８（２０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（１ｍｌ）の溶液に、Ｂｏｃ−グリシン（１０．６ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１．０ｍｇ）、Ｅｔ３Ｎ（１０μＬ）、およびＥＤＣＩ（１１ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を室温で２時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１：０→８５：１５）によって精製して、２６ｍｇ（９０％）の残渣を得た。これに５ｍｌの１０％ＴＦＡ−ＣＨ２Ｃｌ２を添加し、室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ−ＮＨ３（７Ｎ）、１：０→８５：１５）によって精製して、１６ｍｇ（８５％）の１３１を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  ９．２６（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ７．５５（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４７（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．１５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．８２（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  １Ｈ），  ６．２１（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．８９  （ｓ，
３Ｈ），  ３．６２（ｍ，  ４Ｈ），  ３．４２  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．５４（ｍ，
４Ｈ），  ２．３６  （ｓ，  ３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ  （１２５  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：δ  １７０．６，  １６２．７，  １５８．４，  １４７．５，  １３９．４，
１３８．０，  １２９．３，  １２２．５，  １１７．５，  １１６．５，  ９９．４，  ９８．９，  ５４．６，  ５３．６，  ４６．０，  ４５．１，  ４４．７；ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋３８８．３。
【０５１８】
実施例２：ヒトＨｓｐ７０（ｈＨｓｐ７０）相同性モデルの構築およびＹＫ５のデザイン
Ｈｓｐ７０のインヒビター／モジュレーターをデザインするために、異なるコンピュータアプローチ（相同性モデリング、ＳｉｔｅＭａｐ、およびドッキングなど）を使用して、それぞれ、ヒトＨｓｐ７０（ｈＨｓｐ７０）の三次元モデルを決定し、有望な結合部位を同定し、タンパク質／リガンド相互作用を評価した。ｈＨｓｐ７０タンパク質の全長結晶構造に関する情報は利用できないので、その構築のためにｈＨｓｐ７０の理論上の三次元構造（相同性モデル）を考慮した。Ｗａｌｌｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．に記載のように、相同性モデル構築における最も重要な要因は、アラインメントの精度および最良のテンプレート構造の選択である。目的の受容体と高い配列同一性（５０％超）を示す３つのテンプレート結晶構造を、ｈＨｓｐ７０タンパク質の相同性モデルの構築のために選択した。ｈ
Ｈｓｐ７０タンパク質のＮ末端結晶構造（ＰＤＢ  ＩＤ：１Ｓ３Ｘ）は、Ｎ末端アミノ酸（Ｍｅｔ１−Ｇｌｙ３８２、ｈＨｓｐ７０）のための利用可能な最良のテンプレートであった。ｈＨｓｐ７０のＳＢＤの結晶構造は存在しなかったので、大腸菌Ｈｓｐ７０（ＤＮＡＫ）構造（ＰＤＢ  ＩＤ：２ＫＨＯ）（ｈＨｓｐ７０と６２％類似性を有する）を、ＳＢＤのセグメントのモデリングのためのテンプレートとして選択した（Ａｓｐ３８５−Ｇｌｎ５３８、大腸菌；Ａｓｐ３８３−Ａｌａ５４１、ｈＨｓｐ７０）。最後に、Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ  Ｈｓｐ７０（ＰＤＢ  ＩＤ：２Ｐ３２）の結晶構造を、Ｃ末端アミノ酸のためのテンプレートとして使用した（Ｌｅｕ５４３−Ｓｅｒ６１４、Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ；Ｌｅｕ５４２−Ｇｌｙ６１３、ｈＨｓｐ７０）。ｈＨｓｐ７０のＣ末端アミノ酸（６１４−６４１）はテンプレート構造を持たなかったので、モデリングしなかった。Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋが提案するように、テンプレート選択後、テンプレートのアラインメントおよびアミノ酸配列に基づいて構造類似性を検出することができることにより、モデルの全体的な質が決定される。ｈＨｓｐ７０残基をアラインメントした。類似性の高い密接に関連するタンパク質配列のアラインメントがほとんどの場合に最適であることがＷａｌｌｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．によって報告されている。本発明者らの研究では、６１３残基のうちの６０６残基が３つの実施されたテンプレート（ＰＤＢ  ＩＤ：１Ｓ３Ｘ、ＰＤＢ  ＩＤ：２ＫＨＯ、ＰＤＢ  ＩＤ：２Ｐ３２）と同一であり、最適なアラインメントであることを示していた。残基側鎖のアラインメント後、テンプレート構造（ＰＤＢ  ＩＤ：２ＫＨＯ）中のアミノ酸喪失（Ｌｙｓ３８４、Ｓｅｒ３８５、Ｇｌｕ３８６、Ａｓｎ３８７、およびＡｒｇ５０９（ｈＨｓｐ７０）など）を、Ｐｒｉｍｅ中の自動化または半自動化手順を使用して首尾よく挿入した。このようにして得た相同性モデルは、テンプレート構造（末端を除く）に基づいた細胞内および細胞外のループを含んでいた。全ループ領域（３３ループ）をＰｒｉｍｅ中のループ緻密化ツールを使用して最適にしてループの安定な高次構造を生成した。最後に、得られたタンパク質モデルを、タンパク質調製ウィザードユーティリティおよびその後の厳密なエネルギー最小化に供して、好ましくない接触を弱めた。
【０５１９】
テンプレートとモデル化タンパク質との間のｒｍｓ偏差が良好な確証方法であることがＷａｌｌｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．によって以前に示されている。相同性モデルのＮＢＤおよびテンプレート構造（ＰＤＢ  ＩＤ：１Ｓ３Ｘ）中の骨格原子の重ね合わせにより、ｒｍｓ偏差１．０１Åおよび良好なアラインメントスコア０．０５が得られ、本発明者らのモデルが確証された。
【０５２０】
このようにして作製された相同性モデルは、６１３個のアミノ酸残基を含み、２つの主要ドメイン（ＮＢＤおよびＳＢＤ）を有し、これらが共に可動性リンカーによって連結している（図２ａ）。Ｎ末端ＡＴＰアーゼドメインは、アクチン様ヘキソキナーゼ折り畳みを示し、２つの球状ローブ、Ｉ（サブドメインＩＡおよびＩＢ）およびＩＩ（サブドメインＩＩＡおよびＩＩＢ）を有する。１２個のαヘリックスおよび１６個のβシートがＮＢＤをコンパイルし、ＮＢＤの結晶構造を実証する。Ｃ末端ＳＢＤを２つの機能的に関連するサブドメインにさらに分割することができる（ペプチド結合サブドメインを含む２つの四本鎖β−シートのサンドイッチ（ＳＢＤ−β）および４つのα−ヘリックスサブドメイン（ＳＢＤ−α）（ｌｉｄドメインともいう））。この治療上重要なシャペロンの全長結晶構造の非存在下で、この相同性モデルは、構造ベースのデザインおよび仮想スクリーニングなど（これらに限定されない）の方法によるＨｓｐ７０インヒビターのデザインのための結合部位の決定に有用である。
【０５２１】
部位の予測：構造ベースのデザインストラテジーのために、小分子インヒビターターゲティングが可能なｈＨｓｐ７０上の潜在的な結合部位を、ＳｉｔｅＭａｐによって同定した。ＳｉｔｅＭａｐは、潜在的な部位を決定するためにいくつかの物理的記述子（サイズ、包囲／曝露の程度、堅固さ、ファンデルワールス力、疎水性／親水性、および水素結合
の可能性など）を考慮する。タンパク質／リガンド相互作用またはタンパク質／タンパク質相互作用に寄与する可能性が最も高い部位点を共に連結することによって考慮する。
【０５２２】
ＳｉｔｅＭａｐは、構造全体を試験し、部位を順位付けする。部位のサイズ（見出された部位点数によって測定）、部位の相対的開放性（曝露性および包囲性によって測定）、および部位の堅固さ（接触期間ならびに部位の疎水性および親水性によって測定）は、順位づけに有意に寄与する。Ｈｓｐ７０上の利用可能な結合部位を広範に調査するために、ＳｉｔｅＭａｐを、１０個までの部位に戻るように設定した。本発明者らは、スコアの低い部位（部位６〜１０など）が表面上に存在することに注目した（図２に示さず）ことに注目した。これらはコンピュータモデルの人工産物であり、外面に対応する部位を見出し、より低いＳスコアを有する。それ故、ＳｉｔｅＭａｐを、相同性モデリングしたｈＨｓｐ７０タンパク質中の５位までの上位に順位づけられた有望な結合部位に戻るように設定した。これら５個の部位のＳスコアは０．８０以上であり、これはＴ．Ａ  Ｈａｌｇｒｅｅｎによって推奨される尤もらしい結合部位を定義するためのスコアである。
【０５２３】
別の重要な結合部位の決定基準は、ＳｉｔｅＭａｐにおいてＤスコアによって記載される部位の薬物可能性である。これには、リガンド結合を促進する用語（適切なサイズおよび溶媒からの単離など）が含まれるが、親水性の増加にペナルティを課す用語を使用して前記用語が相殺される。Ｔ．Ａ．Ｈａｌｇｒｅｅｎに従って、部位を、薬物不可能、薬物困難、および薬物可能に分類する。薬物不可能部位は、親水性が高く、サイズが比較的小さく、疎水性をほとんど示さないか全く示さず、０．８３より低いＤスコア値によって特徴づけられる。困難部位は、プロドラッグとしての投与に必要な親水性が十分であるが典型的な結合部位より疎水性が低く、０．８３と０．９８との間のＤスコア値によって定義される。薬物可能部位は、サイズ、包囲、および疎水性が妥当であり、通常の親水性を示し、０．９８を超えるＤスコア値を保持する。
【０５２４】
ＳｉｔｅＭａｐによって予測した５つの部位（部位１〜５）のうち（図２）、部位３、４、および５は部位点がほとんどなく、空隙は小さく、且つ部位は浅い。結果として、これらの部位に対して十分な結合親和性を得ることは困難である。部位２（内因性リガンドであるＡＴＰおよびＡＤＰによって占有された溝を含む）は、合理的なサイズ（部位点：１７８）および合理的に高いＳスコアを有する。目視による調査では、部位２は比較的より小さな溝を有し、主に親水性アミノ酸からなる。疎水性相互作用に適切な領域の非存在下では、比較的より低いＤスコア（０．９１）によって予測されるように、ターゲティングが潜在的により困難である。ＡＴＰ／ＡＤＰ結合ドメインの外側の裂溝領域中に存在し、且つ小領域ＩｂおよびＩＩｂに近接する部位１は、サイズがより大きく（部位点：３８５）、より大きな溝を有し、親水性および疎水性のアミノ酸からなり、部位の薬物可能性をより高くしている（Ｄスコア：１．００）。ＳスコアおよびＤスコア、そのサイズ、そのバランスの取れた疎水性および親水性、曝露および包囲の性質を考慮して、部位１が最高の薬物可能性を示す空隙であると予想され、したがって、Ｈｓｐ７０インヒビターのさらなるデザインのためにこの新規のアロステリック部位１に注目した。
【０５２５】
部位全体の性質を認識するために、部位１および２の疎水性／親水性マップを作成した。これらのマップは部位全体を考慮しており、最も密接な受容体原子のみを考慮する表面モデルと対照的である。これらのマップは部位の形状を明確に示し、疎水性領域および親水性領域の範囲を示唆する。部位２は主に親水性を示し、疎水性をほとんど示さない。対照的に、部位１はバランスのとれた性質を有し、疎水性領域および親水性領域の両方が存在する。これらの結果は、部位１の薬物可能性がより高いことをさらに支持する。
タンパク質／リガンド相互作用およびインヒビターのデザイン：
現在までに、Ｈｓｐ７０活性を調整する分子はほとんど知られていない。ＳＢＤをターゲティングする多数の分子が同定されている（１５−デオキシスペルグアリンおよび脂肪
酸アシルベンズアミドが含まれる）。細菌Ｈｓｐ７０のＳＢＤに結合するようにデザインされた低分子量ペプチドは、そのＡＴＰアーゼ活性を刺激した。そのうち、ＮＢＤをターゲティングする薬剤はジヒドロピリミジンおよびヌクレオチド模倣物である。ジヒドロピリミジンは、酵母Ｈｓｐ７０のＡＴＰアーゼ活性を測定するスクリーニングで発見された。ＡＴＰ競合インヒビターの同定は困難であることが判明している。Ｗｉｌｌｉａｍｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．は、ＡＴＰアーゼポケット内で結合するようにデザインされたアデノシンベースのアナログを記載していた。Ｈｓｐ７０は、ＡＴＰアーゼのアクチン様ファミリーに属し、これらのタンパク質の間に特にそのＡＴＰアーゼドメイン内に高い構造相同性が存在する。結果として、上記で決定されたこの部位のより低い薬物様特性をまとめると、直接ＡＴＰ−競合物の開発がＨｓｐ７０についての最も好ましいアプローチであるかどうかは不明である。したがって、本発明者らは、ターゲティングのために部位１を選択する。
【０５２６】
図２１：全長ｈＨｓｐ７０のタンパク質配列（受入番号：Ｐ０８１０７）、Ｎ末端ｈＨｓｐ７０タンパク質（ＰＤＢ  ＩＤ：１Ｓ３Ｘ）、大腸菌Ｈｓｐ７０（ＤＮＡＫ）構造（ＰＤＢ  ＩＤ：２ＫＨＯ）、およびＣ．ｅｌｅｇａｎｓ（ＰＤＢ  ＩＤ：２Ｐ３２）のアラインメント。残基アノテーションに下線を引き、保存残基を類似の色で示す。アロステリックポケット部位１を定義する配列をボックス内に示す。これらの配列内の重要なアミノ酸は、本明細書中でデザインしたリガンドと相互作用する。
【０５２７】
部位１を特異的にターゲティングするＨｓｐ７０インヒビターを同定するために、その溝構造との相互作用に適切な調査されていない化学的空間のいくつかの化学ライブラリーをデザインし、合成した。部位１はまた潜在的に反応性を示すシステイン（Ｃｙｓ２６７）を含み、潜在的な共有結合性相互作用を活用するために、アクリルアミド官能性（ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ＝ＣＨ２）を、デザインした化学ライブラリー内に組み込んだ。図３に例示するように、首尾の良いフィードバックデザインおよび試験により、ＹＫ５が同定された（図２）。ＹＫ５の部位１への結合を確認し、且つ潜在的なリガンド／タンパク質相互作用を研究するために、化合物ＹＫ５を、ＳｉｔｅＭａｐによって５つの予測される各部位上にドッキングした。結合相互作用、化合物の配向、およびＧｌｉｄｅスコア値の調査により、ＹＫ５が部位１に最も好ましく結合すると結論づけられた。部位１上のＹＫ５のドッキングによって導かれた最良の結合様式を図２ｃに示す。
【０５２８】
【表１３】
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提案した結合相互作用をさらに確証するために、Ｈｓｐ７０に対する親和性がより低いと予測されるＹＫ２０をアロステリック結合部位１上にドッキングした。ＹＫ５と異なり、全てのＹＫ２０のドッキングした形態が結合ポケットの外側に配向しており、より劣るＧスコアを示した。かかる配向の潜在的な理由を決定するために、ＹＫ２０を相同性モデリングしたｈＨｓｐ７０に結合したＹＫ５と重ね合わせ、それにより、ＹＫ２０がそのよ
り劣る阻害活性が説明される潜在的な立体不調和を有することが示された。
【０５２９】
実施例３：新規のモジュレーターの特徴付け。
【０５３０】
Ｈｓｐ７０インヒビターを同定するために、Ｎ末端領域の溝構造（図２、パネルａ）と相互作用するようにデザインされた調査されていない化学的空間のいくつかの化学ライブラリーを合成した。このドメインは、２つの潜在的に薬物可能性を示す領域に適応する。第１の領域はヌクレオチド結合部位（図２のパネルａ中に部位２として示す）であり、これは主に親水性を示すので、ターゲティングが潜在的により困難である。第２の領域はより巨大であり、且つ潜在的なさらなる薬物様結合溝であり、これは、ヌクレオチド結合ドメインの外側の裂溝領域中に存在し、且つ小領域ＩｂおよびＩＩｂ（図２のパネルａ中に部位１として示す）に近接する。Ｈｓｐ７０はまた、いくつかの潜在的に反応性を示すシステインを含み、そのうちの２つが２つの潜在的な薬物可能部位の周辺に存在する（図２、パネルａ）。これらの残基を活用するために、アクリルアミド官能性をいくつかのデザインした誘導体に組み込み、タンパク質結合の際のインヒビターとシステイン残基との間の共有結合形成の可能性を探索した（図２、パネルａ）。不可逆性のＥＧＦＲインヒビターおよびＨＥＲ２インヒビター（ＣＩ−１０３３（カネルチニブ）（図２、パネルｂ）およびＥＫＢ−５６９（Ｐｅｌｉｔｉｎｉｂ）（癌臨床試験中の化合物）など）の開発におけるアクリルアミド「ウォーヘッド」の使用の前例が存在する。ＥＧＦＲおよびＨＥＲ２は、Ｈｓｐ７０と同様に、その調節部位内に反応性システインを含む。
【０５３１】
癌細胞においてＨｓｐ７０インヒビターがフィードバックＨｓｐ７０誘導を欠くがＨｓｐ９０インヒビターの表現型結果を有するという１つの作業仮説にしたがって、これらの薬剤を、Ｃｈｉｏｓｉｓ研究所で以前に開発された表現型アッセイで腫瘍Ｈｓｐ９０についてスクリーニングした。これらのアッセイを、Ｈｓｐ９０阻害の細胞フィンガープリント（関連する遺伝的背景におけるＨｓｐ９０オンコ−クライアントの分解およびこれに関連する腫瘍細胞成長の阻害など）が読み取られるようにデザインした。Ｈｓｐ７０の誘導を分析して、ＨＳＦ−１を活性化したものを排除した。薬理学的に関連する濃度で化合物がＨｓｐ７０媒介機構によって選択的に作用する可能性が高いことを保証するために、全アッセイで類似の濃度で活性なもののみを選択した。Ｈｓｐ９０への結合をさらに探索して、直接Ｈｓｐ９０インヒビターを排除した。
【０５３２】
新規の足場である２，５’−チオジピリミジン（本明細書中でＹＫと呼ばれるより大きな属の一部である）のいくつかの実体は、これらの基準によって活性であった（図２、パネルａ）。ＹＫ−足場をアセンブリするための合成方法を、実施例１のスキームに示す。
【０５３３】
本発明者らのデザインおよびスクリーニングストラテジーから同定した１つの誘導体は、ＹＫ５（図２、パネルｂ）であった。その合成を本明細書中に記載している。
【０５３４】
ＳＫＢｒ３乳癌細胞で証明されるように、ＹＫ５（低親和性で標的に結合するコントロール誘導体ＹＫ２０（２０μＭ）ではない）は、ＨＥＲ２キナーゼ、Ｒａｆ−１キナーゼ、およびＡｋｔキナーゼ（これら３つ全てがこの細胞状況における公知のＨｓｐ９０オンコ−クライアントタンパク質である）の分解を誘導した（図３、パネルａ）。さらに、非発癌性チロシン−プロテインキナーゼＣＳＫ（ｃ−Ｓｒｃ関連チロシンキナーゼ）は、ＹＫ−薬剤および直接Ｈｓｐ９０インヒビターＰＵ−Ｈ７１に影響を受けないままであった（図３、パネルａ）。ＹＫ５はまた、ＰＡＲＰ切断によって証明されるように、これらの細胞のアポトーシスを誘導した（図３、パネルａ）。直接的なＨｓｐ９０インヒビターについての以前の報告と一致し、且つＰＵ−Ｈ７１を使用して本明細書中で認められるように（図３、パネルａ）、βアクチンおよびＨｓｐ９０コシャペロンｐ２３（そのレベルがＨｓｐ９０阻害に対して非感受性を示すタンパク質）は、ＹＫの細胞添加の際に不変のま
まであった（図３、パネルａ）。
【０５３５】
Ｈｓｐ７０のフィードバック誘導は、Ｈｓｐ９０機構オンコ−クライアントを分解した濃度でＹＫ５を使用して検出されなかった（図３、パネルａおよびｂ）。一方、これらの細胞では、Ｈｓｐ７０誘導によって証明されるように、直接Ｈｓｐ９０インヒビターは熱ショック応答を強く活性化した（図３、パネルａ中のＰＵ−Ｈ７１およびパネルｂ中のＰＵ２４ＦＣｌ）。直接Ｈｓｐ９０インヒビターであるＰＵ−Ｈ７１およびＰＵ２４ＦＣｌと異なり、ＹＫ−誘導体は、蛍光標識したゲルダナマイシン誘導体（ＧＭ−Ｃｙ３Ｂ）とＨｓｐ９０結合を競合できなかった（図３、パネルｃ）。
【０５３６】
ＳＫＢｒ３乳癌細胞では、ＹＫ５によるＨｓｐ９０−オンコ−クライアントタンパク質の分解は、漸増する低マイクロモル濃度で起こり（図３、パネルａ）、細胞増殖も阻害された（図３、パネルｄ）。それにより、この濃度範囲でＹＫ５の生物学的活性が機能的Ｈｓｐ９０機構の阻害（おそらく、Ｈｓｐ７０結合機構による）によって伝達される可能性が高いことが示唆された。
【０５３７】
ＹＫ５は、癌細胞における選択的なＨｓｐ７０結合剤である。Ｈｓｐ７０がＹＫ５活性を担うことを確認するために、ビオチン化ＹＫ５誘導体であるＹＫ５５（図４、パネルａ）をデザインした。ＹＫ５５の合成を本明細書中に記載する。別の実施形態では、本発明の主題の他の化合物を、本明細書中に記載の方法に従ってビオチン化し、使用することができる。
【０５３８】
ＹＫ５５（Ｄ−ビオチンではない）の細胞への添加およびその後のストレプトアビジンビーズでの単離によっておよそ７０ｋＤａの主要バンドが同定され（図４、パネルｂ）、このバンドは可溶性ＹＫ５によって用量依存様式で競合して減少した（図４、パネルｃ）。このバンドから得たペプチド消化物のタンデム液体クロマトグラフィ−質量スペクトル（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）分析により、２つの誘導性Ｈｓｐ７０イソ型（Ｈｓｐ７０−１およびＨｓｐ７０−６）およびＨｓｃ７０（構成性Ｈｓｐ７０メンバー）の存在が確認された。その同一性をウェスタンブロットによってさらに調査して、ＹＫ５５−プルダウン中のＨｓｐ７０（Ｈｓｐ９０ではない）を証明した（図４、パネルｄ）。
【０５３９】
ＹＫ５に最高の感受性を示すＨｓｐ７０サイクリング段階を調査するために、ＹＫ５５−ビーズによって単離したコシャペロン複合体を分析し、抗Ｈｓｐ７０抗体によって同定された複合体と比較した（図４、パネルｅ、左）。ＹＫ５５−ビーズがその活性化コシャペロン（Ｈｓｐ４０およびＨｓｐ１１０）との複合体中のＨｓｐ７０を優先的に捕捉したのに対して、抗体単離物はヌクレオチド交換因子Ｈｓｐ１１０を欠いていた。抗Ｈｓｐ７０抗体ＢＢ７０がＨｓｐ７０およびＨｓｃ７０の細胞レベルを枯渇させることができるが、コシャペロン（すなわち、Ｈｓｐ１１０）結合高次構造中のＨｓｐ７０の捕捉では不十分であるので、Ｈｓｐ７０に対するＹＫ５５−ビーズの特異性をさらに調査することが可能であった（図４、パネルｅ、右）。すなわち、ＢＢ７０（無関係のＩｇＧ  Ｈｓｐ７０枯渇抽出物ではない）とインキュベートした場合、ＹＫ５５−ビーズはＨｓｐ１１０と有意に相互作用することができず、ＹＫ５５のＨｓｐ１１０との相互作用がＨｓｐ７０媒介複合体を介して起こることが確認された。可溶性ＹＫ５は、ＹＫ５５−ビーズとＨｓｐ７０複合体への結合を用量依存性に競合した（図４、パネルｆ）。
【０５４０】
細胞のＹＫ５５とのインキュベーションの際、高塩洗浄（１Ｍ  ＮａＣｌ）によって破壊されない強力且つ選択的な相互作用が薬剤とＨｓｐ７０との間で形成された（図４、パネルｂ）。ＹＫ５は、タンパク質結合の際に共有結合を作製することができるアクリルアミド官能性を含む。不可逆性結合がある役割を果たす化合物について、結合についての５０％結合阻害（ＩＣ５０）値は２つの成分（一方は可逆的結合を反映し、他方はその後の
共有結合を反映する）からなり、この値は共有結合性相互作用が起こった範囲に依存する。実際に、細胞のＹＫ５５との１〜４時間のインキュベーションによって７０ｋＤａバンドの固定量が漸増し（図５、パネルａ）、抗ビオチンおよびＨｓｐ７０免疫ブロットによってＹＫ５５−Ｈｓｐ７０含有種であると示唆された（図５、パネルｂ）。これらの条件下で、ＹＫ５５のＧｒｐ７５およびＧｒｐ７８（それぞれ、ミトコンドリアおよび小胞体のＨｓｐ７０ファミリーメンバー）との相互作用は弱いか全く検出されなかった（図５、パネルｂ）。
【０５４１】
最も強固な公知の非共有結合（ストレプトアビジン−ビオチン複合体）を破壊するのに十分に強い条件下でのＹＫ５５−ストレプトアビジンビーズからのタンパク質複合体の溶離により、細胞をＹＫ５５とインキュベートした場合に実際に共有結合したＹＫ５５−Ｈｓｐ７０種が形成されることが確認された（図５、パネルｃ）。ＹＫ５５結合Ｈｓｐ７０種（ＢＢ７０プルダウン（抗Ｈｓｐ７０抗体）ではない）のトリプシン消化により、原子質量単位１８６７．９１５および１３７２．６４９に２つのｍ／ｚピークが同定された（図５、パネルｄ）。これらのピークは、それぞれ、ＬＲＴＡＣ２６７ＥＲＡＫに結合したＹＫ５５（８２０．３４Ｄａ）およびＴＡＣ２６７ＥＲＡＫに結合したビオチンを欠くＹＫ５５（ＹＫ５５−ビオチン）（５９４．２６Ｄａ）に対応する。ＹＫ５５Ｈｓｐ７０単離物をそれぞれβ−メルカプトエタノールおよびアクリルアミドを使用して還元およびアルキル化した場合、これらのペプチドの標識は認められなかった。ＬＲＴＡＣ２６７（ＹＫ５５）ＥＲＡＫの質量分析配列決定を行って、配列同一性をさらに確認した（示さず）。
【０５４２】
ＴＡＣＥＲＡＫ配列はヒトサイトゾルＨｓｐ７０中で保存されているがＧｒｐ７５およびＧｒｐ７８では異なり、このことは、類似の条件下でのＹＫ５５との相互作用の欠損と一致している（図５、パネルｂ）。まとめると、これらのデータは、ＹＫ５５によるサイトゾルＨｓｐ７０の特異的誘導を示唆する。
【０５４３】
ＹＫ５は、主な生化学的Ｈｓｐ７０機能を阻害する。次に、ＹＫ５のＨｓｐ７０への結合を調査して、その主な生化学活性、変性クライアントタンパク質の特異的折り畳み、およびそのＡＴＰアーゼ活性を妨害するかどうかを調査した。Ｈｓｐ７０活性は、Ｈｓｐ４０タンパク質およびヌクレオチド交換因子（Ｈｓｐ１１０など）によって刺激される。ヒトはいくつかのサイトゾルＨｓｐ４０（そのうち、Ｈｄｊ１、ＤＪＡ１、ＤＪＡ２、およびＤＪＡ４）を有し、ＤＪＡ１がＨｓｃ７０のＡＴＰアーゼ活性を最も強く刺激するのに対して、ＤＪＡ２はＨｓｃ７０ポリペプチド基質（ホタルルシフェラーゼ）の再折り畳みの促進に最も有効であることが最近報告された。ＹＫ５は、精製されたＨｓｃ７０およびＤＪＡ２によってルシフェラーゼの再折り畳みを用量依存性に阻害し（図６、パネルａ）、Ｈｓｃ７０のＡＴＰアーゼ刺激率を部分的に阻害した（図６、パネルｂ）。Ｈｓｐ７０のＮ末端ドメインへのＹＫ５の結合がＡＴＰアーゼ部位を塞がないので、その影響がＮ末端ドメインおよびＣ末端ドメインの不可欠な配位の破壊に起因する可能性が最も高い。Ｈｓｐ７０の中心的な生化学機能は共有結合の形成を好まないアッセイ条件下でＹＫ５によって阻害された。それにより、共有結合的反応性に加えて、標的の活性部位中のＹＫ５に適していることが示唆された。
【０５４４】
ＹＫ５は、活性なＨｓｐ７０／Ｈｓｐ９０／オンコプロテイン複合体の形成を阻害する。Ｈｓｐ７０がＨｓｐ９０マルチシャペロン複合体の機能を促進し、中間タンパク質ＨＯＰを介したＨｓｐ９０複合体上へのクライアントタンパク質ローディングによって最初の複合体形成工程で作用することが示唆される。Ｈｓｐ９０のクライアントは、病原性細胞形質転換の発達および進行で重要な役割を果たすクライアントタンパク質を駆動および支持するいくつかの悪性腫瘍である。オンコプロテインに加えて、Ｈｓｐ９０は、転写因子熱ショック因子−１（ＨＳＦ−１）（細胞傷害に応答した熱ショック応答の主制御因子）
を調節する。Ｈｓｐ９０は、単量体の状態でＨＳＦ−１に結合して転写因子を維持する。Ｈｓｐ９０インヒビターまたは細胞ストレスを誘導するエレメントへの細胞の曝露の際、シャペロンは、ＨＳＦ−１から解離して三量体化し、核に侵入し、熱ショックタンパク質（Ｈｓｐ７０が含まれる）のプロモーターおよびそのアクチベーター（Ｈｓｐ４０）中に見出される熱ショック応答エレメントに結合する。
【０５４５】
ＹＫ５は、複合体−成分シャペロンの細胞発現に影響を及ぼすことなく（図６、パネルｃ、右）、Ｈｓｐ９０複合体の形成を用量依存性に妨害した（図６、パネルｃ、左および中央）。ＹＫ５によるＨｓｐ９０複合体形成の阻害により、オンコプロテインの放出および不安定化が起こったが（図６、パネルｄ）、ＨＳＦ−１活性化には影響を及ぼさなかった（図６、パネルｅ）。ＹＫ５によるＨｓｐ９０／ＨＳＦ−１複合体の不安定化の欠如と一致して、熱ショックおよび直接Ｈｓｐ９０インヒビター（ＹＫ５ではない）のみによってＨＳＦ−１三量体が形成された（図６、パネルｅ）。これらの結果は、ＨＳＦ−１の転写能力がＨｓｐ９０（Ｈｓｐ７０含有複合体ではない）との会合によって抑制されるという仮説を支持する証拠を提供する。これらの結果はまた、Ｈｓｐ９０機構のオンコプロテイン調節作用を上流Ｈｓｐ７０阻害によってＨＳＦ−１に及ぼすその影響と区別することができることを示す。これに関して、ＹＫ５は、化学的なＨＳＦ−１ノックダウン環境下でＨｓｐ９０機構阻害の生物学的影響を研究するための化学ツールとなる。この介入の利点はＨＳＦ−１の遺伝子操作を超えることが明らかであり、細胞環境の一過性および空間的分析が可能である。漸増する低マイクロモル濃度でＹＫ５によるＨｓｐ９０複合体の変化が起こり（図６ｃ、中央）、この濃度でＨｓｐ９０−オンコ−クライアントタンパク質の分解も起こった（図３ａ）。まとめると、ＹＫ５は、Ｈｓｐ７０／Ｈｓｐ９０複合体の形成を破壊する濃度でＳＫＢｒ３細胞の成長を阻害し、Ｈｓｐ７０／Ｈｓｐ９０オンコプロテインクライアントＨＥＲ２を分解した。それにより、この濃度範囲でＹＫ５の生物学的活性が機能的Ｈｓｐ９０機構の破壊によって部分的に伝達されることが示唆された。タンパク質半減期の減少（図７ｂ）およびオンコプロテインの細胞定常状態レベルのその後の減少（図７ａ）によって証明されるように、ＹＫ５によるＨｓｐ９０機構／オンコプロテイン複合体の破壊は、オンコプロテイン不安定化およびその細胞クリアランスの加速に関連していた。Ｈｓｐ９０機構媒介効果のさらなる確証となり、且つシャペロン阻害の際のプロテアソーム経路を介したＨｓｐ９０機構クライアントタンパク質の分解と一致して、プロテアソームインヒビター（他のタンパク質分解酵素のインヒビターではない）はＹＫ５によるオンコプロテインの分解を有効に救出した（図７ｃ）。
【０５４６】
まとめると、これらの実施形態は、オンコ−クライアントタンパク質の調節に関するＹＫ５および他の関連する本発明の主題の化合物の生物学的活性が、少なくとも部分的に、Ｈｓｐ９０オンコ−クライアントタンパク質の細胞プロセシングが不適切になる活性な中間Ｈｓｐ９０機構複合体の形成を妨害する能力の結果であり、それにより、その後に主にプロテアソームによって分解されることを証明している。
【０５４７】
実施例４：ＹＫ−シリーズにおける構造活性相関
ＹＫ５−インヒビターの反応性を有するＩＣ５０値の絶対的依存性を可逆的（非共有）結合を反映するＩＣ５０の成分によって説明することができないことをさらに確認するために、関連する構造−活性関連の研究を行った。実際に、アクリルアミド（ＹＫ３０などの場合）のエチルアミド（ＹＫ３１などの場合）への還元により（図８ａ）Ｈｓｐ７０駆動作用機構が保持され、生物学的活性がわずか１／３０に低下した（図８ａおよび示さず）。さらに、アクリルアミドが保持されるがエチレングリコール鎖が位置Ｒ１（ＹＫ５４およびそのビオチン化バージョンであるＹＫ５５などの場合）からＲ２（ＹＫ５７およびそのビオチン化バージョンであるＹＫ５６などの場合）へ変更されることにより、生物学的活性がおよそ１／２０〜１／２５に低下した（図８ｂおよびｃ）。いくつかの実施形態では、他の本発明の主題の化合物と比較して生物学的活性が低い本発明の主題の化合物は
、有用なＩＣ５０濃度または結合定数で選択した酵素またはタンパク質の阻害または結合を達成するための十分な活性を依然として有することができる。
【０５４８】
まとめると、これらのデータは、ＹＫ５および他の関連する本発明の主題の化合物のＨｓｐ７０との相互作用が２つの要素（一方は可逆的結合を反映し、他方はその後の共有結合的システイン修飾を反映する）からなることを示す。
【０５４９】
アクリルアミド実体が非標的関連タンパク質と無差別に反応して多面発現効果を得ることができるという懸念がある一方で、細胞のＹＫ５５とのインキュベーションによってＹＫ５５−Ｈｓｐ７０付加物が選択的に形成された（図４および５）。さらに、システインの非特異的酸化を生じる薬剤は、細胞タンパク質の誤折り畳みを増加させることが公知であり、結果として熱ショック応答の防御的活性化が起こる（ＹＫ５を使用して認められない現象）。生理学的に関連する濃度（１０μＭ）で、３５９キナーゼに対して試験した場合にＹＫ５は不活性でもあった（図６ｆ）。これらの所見は、試験濃度でＹＫ５は特異的Ｈｓｐ７０モジュレーターであり、したがって、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物系において薬理学的Ｈｓｐ７０阻害の意義を解析するのに適切なツールであることが確認される。
【０５５０】
創薬の試みは、不可逆的阻害に関連する潜在的な毒性学的事象を考慮して非競合動態学（理解可能な警告）を示す分子を回避する傾向がある。にもかかわらず、抗癌剤および抗菌剤として臨床的に用いられる少なくとも２５種の薬剤は、共有結合性タンパク質修飾因子である。不可逆的結合剤について、体循環において薬物濃度を高く保持する必要性は低いので、一旦標的阻害が達成されると、新規の標的タンパク質が合成されるまでその効果が保持されると理由づけることができる。さらに、ＡＴＰに対して比較的高い親和性を有するタンパク質（Ｈｓｐ７０など）について、高レベルの細胞ＡＴＰの存在下で、不可逆的標的阻害によって治療上の利点が得られると主張することができる。まとめると、これらの所見は、初回通過代謝および十分な標的送達と阻害との間のバランスが限られた毒性を費やして達成される場合、不可逆的インヒビターが抗癌治療で有意な役割を果たし得ることを示唆する。
【０５５１】
ＹＫ５について、本発明者らのデータは可逆的インヒビターがＨｓｐ７０媒介機構を保持することを証明し、それにより、アクリルアミド基を一斉に消失させることができ、且つ結合エンタルピーの改善によって強力な可逆的インヒビターを同定することができることが示唆される。実際に、本明細書中の他の実施形態は、可逆的Ｈｓｐ７０相互作用モードを有する本発明の主題の化合物を示す（図９、図１０、および図１１）。これらの本発明の主題の化合物のいくつかの癌細胞への添加により、ＹＫ５に類似の様式で関連オンコ−クライアントタンパク質が分解され、アポトーシスが誘導された。したがって、これらの実施形態は、不可逆的または可逆的な結合様式のいずれかによってＨｓｐ７０と相互作用する本発明の主題の化合物によって、本明細書中に記載の重要な活性を達成することができることを証明する。特定の実施形態では、これらの化合物は上記の部位１と相互作用する。
【０５５２】
小分子によるＨｓｐ７０阻害の生物学的関連を調査する試みも報告されている。これらは、Ｈｓｐ７０がＨｓｐ９０ほど容易にターゲティング可能でないことを示唆する。いくつかのＨｓｐ７０モジュレーターが最近開示されているが、それにもかかわらず、これらの化合物は効力が低く、細胞生理学に及ぼすその潜在的な多面発現効果は完全に不明である。Ｈｓｐ７０イソ型とのその相互作用様式もほとんど知られていない。さらに、これらの化合物は、薬物様特徴が制限された足場に基づく。さらに、驚いたことに、癌細胞においてこれらのＨｓｐ７０インヒビターのうちのいくつかを使用したアポトーシス応答は低いか全くなかった（報告されたＨｓｐ７０の強力な抗アポトーシス機能を考慮して明らかな逆説である）。
【０５５３】
さらに、Ｈｓｐ７０の遺伝子操作によって矛盾する所見が得られた。Ｈａｖｉｋ  ｅｔ
ａｌは、２つの乳癌細胞（ＳＫＢｒ３およびＭＣＦ−７）におけるＨｓｐ７０発現およびＨｓｃ７０発現の単一または混合した減少が、細胞生存率を低下させる一方で、Ｈｓｐ９０／Ｈｓｐ７０シャペロン複合体の活性を減少させる能力を示さないことを報告していた。他方では、ｈｓｃ７０およびｈｓｐ７０の両方の同時トランスフェクションターゲティングは、ＨＣＴ１１６結腸癌細胞におけるＨｓｐ９０機能を阻害した。Ｎｙｌａｎｓｔｅｄ  ｅｔ  ａｌがＨｓｐ７０枯渇のみによって膠芽細胞腫ならびに乳癌および結腸癌の異種移植片を根絶することを見出したのに対して、前立腺癌細胞では、他者は抗癌剤に対する感作のみを報告していた。
【０５５４】
上記ストラテジーと対照的に、本発明者らの研究により、広範な医薬品化学に受け入れられる潜在的に薬物可能性を示す足場上にデザインされたＹＫ５（Ｈｓｐ７０およびＨｓｃ７０の二重且つ選択的なモジュレーター）を同定する。また、上記ストラテジーと対照的に、ＹＫ５および関連する本発明の主題の化合物は、本明細書中に記載の多数の測定によって正常細胞に毒性を示すことなく強力な抗増殖性を有することを示した。
【０５５５】
実施例５：薬理学的Ｈｓｐ７０調整は悪性腫瘍の主な特徴を妨害する。
【０５５６】
正常細胞の悪性細胞への形質転換は多段階過程であり、細胞内の重要な調節過程に影響を及ぼす多数の遺伝子変化の蓄積が必要である。Ｈａｎａｈａｎ  ａｎｄ  Ｗｅｉｎｂｅｒｇは、完全な悪性表現型の発生に必要な６つの不可欠な表現型形質（癌の「シックスホールマーク」と呼ばれる）を記載していた。各特徴的形質について、この過程を調整する能力を有する少なくとも１つのＨｓｐ９０−機構クライアントタンパク質が同定されており、直接Ｈｓｐ９０インヒビターはこれら６つの特徴全てに影響を及ぼす能力を有する。薬理学的Ｈｓｐ７０制御因子が開発されていたので、次いで、癌の特徴に関するＨｓｐ９０機構におけるＨｓｐ７０の役割を調査した。
【０５５７】
癌細胞は、異常な増殖によって特徴づけられる。一定のＨｓｐ９０−機構クライアント（ＡｋｔおよびＲａｆ−１など）は、腫瘍の成長および生存に必要な経路における主なプレーヤーであり、大多数の腫瘍においてＨｓｐ９０によって調節される。これらのＨｓｐ９０機能におけるＨｓｐ７０の関与と一致して、これらの遍在性の腫瘍駆動分子の用量依存性の分解および不活化は、ＹＫ５および関連する本発明の主題の化合物の一定範囲の癌細胞（乳癌細胞ＳＫＢｒ３およびＭＤＡ−ＭＢ−４６８、小細胞性肺癌ＮＣＩ−Ｈ５２６、および急性骨髄性白血病ＭＯＬＭ−１３が含まれる）への添加の際に認められた（図３、７〜１０および表１）。特定の悪性表現型に特異的な他のＨｓｐ９０オンコ−クライアントもＹＫ５に感受性を示した。乳癌細胞株ＳＫＢｒ３の場合、ＨＥＲ２チロシンキナーゼの過剰発現によって形質転換が駆動され、それにより、シグナル伝達経路を活性化して細胞の成長および生存を促進する。この細胞におけるＨＥＲ２の安定性はＨｓｐ９０によって調節され、直接Ｈｓｐ９０インヒビターによるシャペロン阻害によってＨＥＲ２分解が起こる（図３）。ＬＮＣａＰ前立腺癌細胞中に発現する変異アンドロゲン受容体（ＡＲ）および急性骨髄性白血病に特徴的であり、且つＭＯＬＭ−１３細胞中に発現する変異ＦＬＴ−３キナーゼ（共にＨｓｐ９０機構クライアント）はまた、本明細書中に記載のＹＫ５および関連する本発明の主題の化合物に感受性を示した（図１０ａおよび１５ｄ）。トリプルネガティブ乳癌で活性化されるＳＴＡＴ３およびＰＤＫ１ならびに白血病で活性化されるＳＴＡＴ５はまた、本明細書中に記載のＹＫ５および関連する本発明の主題の化合物に感受性を示した（図９〜１１、１５ｄ）。
【０５５８】
病理学的Ｈｓｐ７０／Ｈｓｐ９０複合体阻害を介した共通の作用機構と調和して、直接Ｈｓｐ９０インヒビター（ＰＵ−Ｈ７１およびＰＵ２４ＦＣｌ）は、ＹＫ５と同様に、そ
の起源および遺伝的背景と無関係に試験した全癌細胞の成長を阻害した（図１２ａおよび表１）。ＭＤＡ−ＭＢ−４６８トリプルネガティブ乳癌細胞、ＳＫＢｒ３  ＨＥＲ２＋乳癌細胞、ＬＮＣａＰ  ｍＡＲ＋前立腺癌細胞、ＭＯＬＭ−１３、およびＫａｓｕｍｉ−１急性骨髄性白血病細胞、ＯＣＩ−Ｌｙ７びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫細胞、およびＨｕＨ７肝細胞癌細胞を試験した。ＹＫ５はまた、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８異種移植腫瘍の成長を阻害した（図１２ｂ）。癌細胞では、ＹＫ５について記録した５０％成長阻害濃度（ＧＩ５０）は、Ｈｓｐ９０オンコ−クライアントを分解する能力と非常に一致した。まとめると、これらの結果は、薬理学的に関連する用量で、ＹＫ５の生物学的活性がその標的（Ｈｓｐ７０）の阻害を反映することをさらに示唆する。
【０５５９】
癌細胞の異常な増殖は細胞周期の調節解除に関連し、細胞周期を通した移行のいくつかの分子成分はＨｓｐ９０機構によって調節される。直接Ｈｓｐ９０インヒビターによって細胞依存性の周期停止が起こり、一定の細胞（ＳＫＢｒ３など）がＧ０／Ｇ１期にブロッキングされるのに対して、他の細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−４６８など）はＧ２／Ｍ期でブロッキングされる。そのＨｓｐ９０−機構ターゲティング機構と一致して、ＹＫ５はこれらの細胞において細胞周期に類似の影響を及ぼす（図１２ｃ、左）。その影響は、Ｈｓｐ９０機構依存製細胞周期タンパク質（ＭＤＡ−ＭＢ−４６８におけるＧ２／Ｍ調節タンパク質ＣＤＫ１およびＳＫＢｒ３におけるＧ１調節タンパク質サイクリンＤ１など）の枯渇に関連していた（図１２ｃ、右）。さらに、これらのタンパク質は、ＹＫ５単離Ｈｓｐ７０との複合体中で見出された（図１２ｄ）。
【０５６０】
近接組織への浸潤および遠位部位への転移は、悪性癌細胞の主な特徴であり、ヒトの癌による死因の９０％を占める。浸潤および転移は複雑な過程であり、非常に多様な遺伝子（多数のキナーゼが含まれる）の調和した作用が必要である。癌細胞の転移能の増大に関与するいくつかのタンパク質は、Ｈｓｐ９０（ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ経路（腫瘍細胞浸潤を駆動する重要なシグナル伝達経路）を含む）によって調節される。高転移性ＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌細胞では、この経路の阻害は、その浸潤能を減少させるのに十分である。調和して、ＹＫ５（Ｓｅｒ４７３でリン酸化したＡｋｔの減少によって証明されるように、活性化Ａｋｔの細胞レベルを減少させる（図１２ｅ、上））は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞がマトリゲルを通過して浸潤する能力を阻害した（図１２ｅ、下）。まとめると、これらの所見は、ＹＫ５媒介機構を介した薬理学的Ｈｓｐ７０調整がオンコプロテイン分解、異常な細胞増殖および細胞周期の阻害、および浸潤能の軽減に関する直接Ｈｓｐ９０インヒビターの影響を部分的に模倣することを証明している。同様に、他の本発明の主題の化合物はまた、これらの同一の活性も有すると期待することができる。
【０５６１】
アポトーシスの回避は、癌の別の重要な特徴である。癌細胞はＹＫ５でチャレンジした場合に有意な細胞死を受け、一定の癌細胞株について、この影響は直接的なＨｓｐ９０阻害の際よりも一貫して高かった（図３ａおよび１３）。一定の細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＯＣＩ−Ｌｙ７、およびＭＯＬＭ−１３など）ではＰＵ２４ＦＣｌによるＨｓｐ９０阻害およびＹＫ５によるＨｓｐ７０阻害の際に相当且つ等しい死滅が認められる一方で、他の細胞（ＬＮＣａＰ、ＳＫＢｒ３、およびＨｕＨ７など）はＨｓｐ７０阻害に対してより感受性が高いようである（図１２ａ）。異なる化学型の他のＨｓｐ９０インヒビターについてのこれらの細胞における細胞死滅効果の減少を報告した。これは、非特異的事象（潜在的なＨｓｐ９０インヒビター代謝など）ではなく、特異的標的に関連する結果を示唆する。
【０５６２】
ＹＫ５による細胞死がアポトーシスに寄与し得るかどうかを決定するために、細胞をＹＫ５で処置し、形態学ならびにアポトーシスのいくつかのエフェクターおよびメディエーターに及ぼす影響を分析した（図１３）。アポトーシスを受ける細胞数を定量するために、細胞をアクリジンオレンジ／臭化エチジウム（ＡＯ／ＥＢ）で染色し、蛍光顕微鏡下で
生細胞、アポトーシス細胞（初期および後期）、および壊死細胞の比率について分析した。ＹＫ５処置細胞培養物により、細胞における有意且つ優先的な用量依存性の増加が証明され、アポトーシスの形態学的特徴（核の縮小および断片化など）を示した（図１３ａの左および図１３ｂ）。処置２４時間後のこれらの実験の定量は、ビヒクル処置した急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）Ｋａｓｕｍｉ−１細胞のおよそ５％の細胞がアポトーシスを受け、１０μＭのＹＫ５でチャレンジした場合にその数が７０％に増加したことを示した（図１３ａ、右）。ＰＵ２４ＦＣｌを使用した同一条件下ではたった９％のアポトーシス細胞死しか認められなかった（図１３ａ、右）。直接Ｈｓｐ９０インヒビターと比較した場合のＹＫ５のアポトーシス効果の増加は、他の癌細胞（乳癌細胞および前立腺癌細胞など）で認められた（示さず）。膵臓癌細胞がＹＫ５に対して最も感受性が高かった。Ｍｉａ−ＰａＣａ２細胞、ＡｓＰＣ−１細胞、ＢｘＰＣ３細胞、およびＰＬ４５細胞からなるパネルで試験した場合、ＹＫ５（１０μＭ）は、処置からたった２４〜４８時間後に有意なアポトーシスを誘導した（図１３ｂおよび示さず）。これは、膵臓癌の高い抗アポトーシス閾値および治療に対するその耐性を考慮すると注目すべき所見であった。
【０５６３】
分子レベルでは、癌細胞におけるＹＫ５および関連する本発明の主題の化合物によるアポトーシスは、ＰＡＲＰの増加（図１３ｃ）およびカスパーゼ−３の切断および活性（図９，１０，１４）によって証明された。アポトーシスに及ぼすこれらの影響はその抗増殖活性およびＨｓｐ９０−機構依存性オンコプロテインを分解する能力と一致するＹＫ５濃度で起こり、癌の特徴に対するＹＫ５の一般的なＨｓｐ７０媒介性作用機構が示唆された。
【０５６４】
実施例６．ＹＫ５はＨｓｐ７０およびＨｓｐ９０媒介性経路を介してアポトーシスを誘導する。Ｈｓｐ７０およびＨｓｐ９０の両方は、アポトーシスを阻害することが報告されている。Ｈｓｐ７０は、広範なアポトーシス刺激および壊死刺激から細胞を防御し、Ｈｓｐ７０レベルの上昇によって腫瘍細胞の生存率が増加すると考えられる。簡潔に述べれば、Ｈｓｐ７０は、ミトコンドリアからのシトクロムｃおよびＡＩＦの両方の放出に先行するミトコンドリア膜電位の喪失を阻害することが報告されている。シトクロムｃ、Ａｐａｆ−１、およびＡＩＦに及ぼすＨｓｐ７０の直接的な影響も記述されている。アポトーシスシグナル伝達における初期段階でのＨｓｐ７０の関与も、ストレス活性化ＪＮＫキナーゼの抑制を通して報告した。さらに、Ｈｓｐ７０は、ＴＮＦ細胞傷害性からの防御を媒介し、結合して抗アポトーシス因子（Ｂｃｌ２など）の活性および局在化を調整し、アポトーシス促進因子（ｐ５３およびｃ−ｍｙｃなど）の分解および不活化を促進することが見出された。したがって、Ｈｓｐ７０は、内因性および外因性のアポトーシス経路の多数の重要なエレメントの調整によってアポトーシスを阻害する。対照的に、Ｈｓｐ９０によるアポトーシスの調節はより限られており、Ｈｓｐ９０によって調節される主な抗アポトーシス分子は、ＡｋｔおよびＢｃｌ−ｘＬである。いくつかの抗アポトーシス分子が調節される一方で、２つのシャペロン（Ｈｓｐ９０およびＨｓｐ７０）は癌におけるアポトーシスの遍在性インヒビターではない。その影響は、細胞のワイヤリングおよびアポトーシス経路の機能性に依存する形質転換特異的様式で出現する。
【０５６５】
これらの株と共に、ＳＫＢｒ３細胞においてＨｓｐ９０不活化がその成長を停止させてＡｋｔを分解するが、相当量のアポトーシスを誘導できないことが最近報告された。対照的に、これらの薬剤は、小細胞性肺癌細胞ＮＣＩ−Ｈ５２６で強力なアポトーシスを誘導する。正反対に、ＭＡＬ３−１０１（Ｊ−タンパク質によるＨｓｐ７０活性化を妨害する薬剤）またはケルセチンおよびＫＮＫ４３７（共に誘導性Ｈｓｐ７０発現インヒビター）での細胞の処置により、ＳＫＢｒ３（ＮＣＩ−Ｈ５２６ではない）においてアポトーシスによる実質的な細胞死が起こった。アンチセンス配列によるＨｓｐ７０発現の減少も、ＳＫＢｒ３細胞の実質的な細胞死を誘導した。まとめると、これらの研究は、ＳＫＢｒ３（ＮＣＩ−Ｈ５２６ではない）におけるアポトーシス経路の重要な制御因子としてＨｓｐ７
０を提案し、逆に、ＮＣＩ−Ｈ５２６（ＳＫＢｒ３ではない）におけるアポトーシスの主な制御因子としてＨｓｐ９０を示した。Ｈｓｐ９０経路およびＨｓｐ７０経路に同時に作用するので、ＹＫ５および関連する本発明の主題の化合物は、ＳＫＢｒ３（図１３ｃ）細胞およびＮＣＩ−Ｈ５２６細胞（図１４および示さず）の両方において有意なアポトーシスを誘導する。
【０５６６】
自律的細胞生存の阻害に加えて、Ｈｓｐ７０発現の誘導は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、酸化ストレス、ＵＶ照射、カスパーゼ−３過剰発現、およびいくつかの化学療法薬によって誘導される細胞死に対して高い耐性を細胞に付与することが報告されている。Ｈｓｐ７０に及ぼすその影響に従って、ＹＫ５は、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８（トリプルネガティブ乳癌細胞）におけるＴＮＦαのアポトーシス効果を増加させた（図１３ｅ）。
【０５６７】
まとめると、これらの所見は、Ｈｓｐ７０およびＨｓｃ７０の二重阻害が一連の腫瘍においてＨｓｐ９０またはＨｓｐ７０阻害のみよりも大きなアポトーシスを誘導することを示唆し、癌におけるこれらのインヒビターの治療能の潜在的増加を示す。これらはまた、本明細書中に記載の本発明の主題の化合物が他の介入の治療効果を増強することができることを示す。
【０５６８】
直接Ｈｓｐ９０インヒビターと比較した場合にＹＫ５を使用して認められたアポトーシスの増加を、フィードバック熱ショック応答を誘導できないことによって部分的に説明することもできる。一定の腫瘍が直接的なＨｓｐ９０阻害後にアポトーシスに感受性を示していたのに対して、直接的なＨｓｐ９０阻害の際のＨｓｐ７０のフィードバック誘導により、多数の腫瘍型においてこれらの薬剤の細胞傷害性が制限される。タンパク質レベルでは、全ての公知のＨｓｐ９０インヒビターについてのＨｓｐ７０タンパク質合成の誘導が証明されており、この誘導は前臨床段階および臨床段階の両方で認められている。直接Ｈｓｐ９０インヒビターは、ＨＳＦ−１がノックアウトされた細胞に対して優先的に細胞傷害性を示し、ｓｉＲＮＡおよびアンチセンスアプローチによる一定の癌細胞におけるＨｓｐ７０の短期間の下方制御でさえＨｓｐ９０のインヒビターに対するこれらの細胞の感受性をより高くする。これらの株と共に、ＨＳＦ−１活性化を害する小分子も細胞にＨｓｐ９０阻害に対する感受性を付与する。さらに、Ｈｓｐ７０レベルを上方制御できない一定の腫瘍細胞は、特にＨｓｐ９０阻害に感受性を示すようである。他の介入によるＨｓｐ７０の誘導によって細胞保護が起こることが報告されており、実験的証拠により、Ｈｓｐ７０の細胞レベルがアポトーシスに対する感受性の重大なパラメーターであることが示唆される。これらの主要な抗アポトーシス能を考慮して、ＹＫ５がＨｓｐ７０の誘導およびＨＳＦ−１の活性化が不可能であることは（図３）、直接Ｈｓｐ９０インヒビターと比較した場合のそのより高い細胞傷害性（図１２ａ）およびアポトーシス応答（図１３）を少なくとも部分的に説明している。さらにこの所見によれば、Ｈｓｐ９０インヒビターは、ＹＫ５で前処置したか、Ｈｓｐ９０阻害剤およびＨｓｐ７０阻害剤を共に添加した場合に癌細胞により高い毒性を示した。
【０５６９】
まとめると、これらの所見は、Ｈｓｐ７０およびＨｓｃ７０の二重薬理学的阻害が多数の発癌性特性に影響を及ぼす能力を有し、それによって悪性表現型を網羅的に攻撃して癌細胞が死滅することを示唆する。
【０５７０】
さらに、本発明者らのデータは、Ｈｓｐ９０不活化と比較した場合にＨｓｐ７０の阻害がアポトーシスにより顕著な影響を及ぼすことを示す。それにより、癌におけるこれらのインヒビターの治療能力の潜在的増加が示唆される。
【０５７１】
実施例７：薬理学的Ｈｓｐ７０阻害は、癌細胞に対して選択的に毒性を示す。
【０５７２】
Ｈｓｐ７０が正常細胞のハウスキーピング機能（新規の合成されたポリペプチドの折り畳み、誤折り畳みしたタンパク質の再折り畳み、および生体膜を介したタンパク質の移行など）を補助するので、Ｈｓｐ７０およびＨｓｃ７０イソ型（ＹＫ５など）の両方をターゲティングする薬理学的介入がこれらの細胞に対して無毒であるかどうかは依然として不明である。この問題に取り組むために、一連の正常細胞（すなわち、健康な血液ドナーから得た末梢血白血球（ＰＢＬ）および培養された正常な線維芽細胞（結腸細胞ＣＣＤ１８Ｃｏおよび肺ＭＲＣ−５など））におけるＹＫ５の細胞傷害効果を評価した（図１４ａ〜ｃ）。代謝活性（図１４ａ、上）、アポトーシス活性化（図１４ｂ，ｃ）、および細胞形態学の目視による調査（図１４ｃ、下）から判断すれば、ＹＫ５によるＨｓｐ７０の薬理学的不活化後の正常細胞における細胞死は最小であった。一方、類似の条件下で、癌細胞は、ＹＫ５でチャレンジした場合に有意な細胞死を受けた（図１４ａ〜ｃ）。初代ＡＭＬ検体では、ＹＫ５が芽細胞集団において強い細胞死を誘導した一方で、同一の患者サンプル内で見出された非腫瘍細胞は、処置によってあまり有意に影響を受けなかった。さらに、ＥＲ，ＰＲ，ＨＥＲ２状態の低分化浸潤性腺管癌患者から手術で得た新鮮な組織をｅｘ
ｖｉｖｏにてＹＫ５（５μＭ）で処置した場合、処置に関連する変化が支質および正常な血管で認められなかったが、腫瘍細胞で強力なアポトーシスが認められた（ＹＫ５添加の２４時間後に腫瘍細胞の６０％が死滅したか死滅しかけていた）（示さず）。まとめると、これらの所見は、ＹＫ５および関連する本発明の主題の化合物が癌細胞に対して選択的に毒性であることを示す。
【０５７３】
Ｈｓｐ７０の遺伝子操作由来の所見（Ｈｓｐ７０イソ型のサイレンシングが癌細胞よりも非腫瘍形成性細胞株で毒性が低かった）と合わせると、Ｈｓｐ７０の発現および機能の不活化に対する癌細胞のより高い感受性を、Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎによって提案された「癌遺伝子嗜癖」モデルに類似のモデルによって正当化することができる。このモデルでは、適切な遺伝学的状況（例えば、チロシンキナーゼが過剰発現した細胞におけるＨＥＲ２）におけるＹＫ５による特異的Ｈｓｐ７０クライアントの分解によってアポトーシスおよび／または分化が起こるのに対して、正常細胞におけるその分解は、ほとんど影響を及ぼさないか、全く影響を及ぼさないであろう。このモデルを使用して、広範な種々の腫瘍型における直接Ｈｓｐ９０インヒビターの臨床開発を正当化している。
【０５７４】
しかし、一定のＨｓｐ９０インヒビターが腫瘍Ｈｓｐ９０種を選択する様式で、ＹＫ５小分子によって選択的にターゲティングすることができる癌細胞におけるＨｓｐ７０のより精緻な使用を排除することができない。かかる可能性を調査するために、ＹＫ５５−ビーズの正常細胞抽出物および癌細胞抽出物との相互作用を測定した。第１の実験では、正常細胞（ＭＲＣ−５）および癌細胞（ＳＫＢｒ３）由来の化学沈殿実験を、漸増濃度のＹＫ５５−ビーズを使用して行った（図１４ｄ、上のパネル）。ＹＫ５５−ビーズは、ＳＫＢｒ３においてＨｓｐ４０結合Ｈｓｃ／ｐ７０種と強く相互作用した。ＭＲＣ−５では、相互作用は弱く、ＹＫ５５プルダウン中でＨｓｐ４０種は検出不可能であった。ＭＲＣ−５細胞のＨｓｐレベルを増加させるために、これらの細胞を、化学沈殿工程前に熱ショック処置に供した。熱ショックはＨｓｐ７０およびＨｓｐ４０の発現を上昇させたが、ＹＫ５５の選択性および親和性は不変であった（図１４ｄ、中央のパネル）。類似の所見が脳抽出物で決定された。この組織のＨｓｃ７０発現が高いにもかかわらず（癌細胞に類似）、脳抽出物中のＨｓｐ７０種はＹＫ５５と弱く相互作用した（図１４ｄ、下のパネル）。
【０５７５】
第２の実験では、可溶性ＹＫ５が正常細胞および癌細胞のＨｓｐ７０種へのＹＫ５５結合を競合する能力を試験した（図１４ｅ）。興味深いことに、ＳＫＢｒ３癌細胞抽出物由来のＨｓｐ７０種へのＹＫ５５−ビーズの結合を低マイクロモル濃度のＹＫ５と競合したのに対して、ＭＲＣ−５細胞中で発現したＨｓｐ７０の置換を観察するのに２００μＭを超えるＹＫ５濃度が必要であった（図１４ｅ）。ＹＫ５の組換えヒトＨｓｐ７０との相互作用はさらにより弱かった（図１４ｅ）。
【０５７６】
癌細胞中のＨｓｐ７０は、オンコ−クライアントタンパク質およびコシャペロン結合Ｈｓｐ７０種との不均一な複合体中に存在する（遊離Ｈｓｐ７０およびコシャペロン結合Ｈｓｐ７０と常に共存する可能性が高い）。この状況における図１５由来の所見の分析により、オンコプロテインが結合したＨｓｐ７０種が可溶性ＹＫ５との競合に最も高い感受性を示すことが示される。それにより、これらのＨｓｐ７０種に対するＹＫ５の親和性がより高いことが示唆される。
【０５７７】
まとめると、これらの結果は、本発明の主題の化合物（ＹＫ５など）が悪性細胞中に発現されるＨｓｐ７０種に対してより高い親和性を有することができ、さらに、これらがオンコプロテインおよびコシャペロンに結合するＨｓｐ７０種を好み得ることが示唆され、本発明の主題の化合物（ＹＫ５など）の癌細胞に対する認められた選択的感受性および、本発明の主題の化合物によって誘導された阻害に対するオンコプロテインの感受性の増加についての有望な説明が得られる。
【０５７８】
実施例８．Ｈｓｐ７０  Ｃｙ３Ｂ−Ｋ５競合蛍光偏光アッセイ
ＹＫ５および関連する本発明の主題の化合物が組換えタンパク質よりも癌細胞中で見出されたＨｓｐ／ｃ７０複合体に高い親和性で結合するので（図１４ｄ、ｅ）、ｃｙ３Ｂ標識したＹＫ５または関連する本発明の主題の化合物の癌溶解物Ｈｓｐ／ｃ７０複合体への競合的結合を測定する蛍光偏光（ＦＰ）アッセイをデザインした。原則として、細胞溶解物を本明細書中に記載の本発明の主題の化合物で予めインキュベートし、ＹＫ５−ｃｙ３Ｂの付加および平衡の際に、Ａｎａｌｙｓｔ  ＧＴプレートリーダーでシグナルが読まれる。アッセイを９６ウェル形式用に組み立て、それにより、化合物が迅速に評価される（図１６）。
【０５７９】
ヒト癌細胞溶解物の調製：ヒト乳癌細胞株ＭＤＡ−ＭＢ−４６８をＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）から入手し、供給元が示すように培養した。細胞を回収し、凍結して膜を破壊し、次いで、プロテアーゼおよびホスファターゼインヒビターを添加した結合緩衝液に溶解して溶解物を形成させた。溶解物を使用前に−８０℃で保存した。総タンパク質含有量を、製造者の説明書に従ってビシンコニン酸アッセイキット（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）を使用して決定した。
【０５８０】
Ｈｓｐ７０  Ｃｙ３Ｂ−Ｋ５競合ＦＰアッセイ：ＦＰ測定を、ブラック９６ウェルマイクロタイタープレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ番号３６５０）（励起および発光の両方がウェルの上部から起こる）を使用して行った。Ｈｓｐ７０  ＦＰ結合緩衝液は、以下を含んでいた：２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ−Ｋ（ｐＨ＝７．２）、２０ｍＭ  ＮａＣｌ、２００μＭ  ＣａＣｌ２、１１０ｍＭ  ＫＯＡｃ、２ｍＭ  Ｍｇ（ＯＡｃ）２、０．０１％ＮＰ４０。各アッセイウェルは、７５μＬの緩衝液中に２０μｇの細胞溶解物およびＹＫ−インヒビターを含んでいた。混合物を震盪器上で１０分間保持し、次いで、３７℃で２時間インキュベートした。トレーサーを各ウェルに添加して、Ｃｙ３Ｂ−ＹＫ５の最終濃度を３ｎＭにし、最終体積を１００μＬにした。次いで、Ａｎａｌｙｓｔ  ＧＴプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）にて測定した。積分時間１００ｍｓを使用し、Ｚ高を３ｍｍ（中間）に設定した。励起偏光をスタティックに設定し、発光偏光をダイナミックに設定した。ｃｙ３Ｂ−ＹＫ５について、５３０ｎｍでの励起フィルタおよび５８０ｎｍでの発光フィルタを、５６１ｎｍのダイクロイックミラーと共に使用した。全ＦＰ値を、ミリ偏光（ｍＰ）単位で示した。ｍＰ値を、式ｍＰ＝１０００×［（ＩＳ−ＩＳＢ）−（ＩＰ−ＩＰＢ）］／［（ＩＳ−ＩＳＢ）＋（ＩＰ−ＩＰＢ）］（式中、ＩＳは平行発光強度の測定値であり、ＩＰは垂直発光強度サンプルの測定値であり、ＩＳＢおよびＩＳＰは、対応するバックグラウンドの測定値（緩衝液）である）
を使用して計算した。全蛍光を、２×ＩＰ＋ＩＳとして決定した。
【０５８１】
図１６中に認められるように、漸増濃度の表示のインヒビターを三連でアッセイプレートに添加し、上記のようにＦＰアッセイを行った。競合効果を、コントロールに対するパーセンテージとして示し、各プレート中のインヒビターウェル由来のミリ偏光（ｍＰ；遊離ｃｙ３Ｂ−ＹＫ５を引く）値をコントロール（ビヒクルＤＭＳＯを使用したｃｙ３Ｂ−ＹＫ５および細胞溶解物）由来の平均ｍＰ（遊離ｃｙ３Ｂ−ＹＫ５を引く）で割ることによって計算した。リガンド結合をｌｏｇ１０インヒビター濃度に対してプロットし、ＥＣ５０値をＰｒｉｓｍ４．０中の非線形最小二乗カーブフィッティングプログラムを使用して計算した。点、平均；バー、標準偏差。図１６は、表示の本発明の主題の化合物の添加が細胞溶解物中のＹＫ５−ｃｙ３ＢのＨｓｐ７０への結合を用量依存性に競合したことを示す。
【０５８２】
実施例９．ＹＫ５は、クライアント−タンパク質結合高次構造中のＨｓｐ７０を捕捉する。乳癌における癌特異的オンコプロテイン（ＳＴＡＴ１）を同定するための固体支持体固定ＹＫ５の使用。
【０５８３】
ＹＫ５５−ビーズは、いくつかの腫瘍特異的オンコプロテインとの複合体中のＨｓｐ７０を優先的に単離する（図１５ａ〜ｄ）。細胞溶解物のＹＫ５とのプレインキュベーションにより、用量依存様式でＹＫ５５−ビーズがＨｓｐ７０と相互作用する能力を減少させ、それにより、結合したオンコプロテインが置換された（図１５ｃ）。抗Ｈｓｐ７０抗体ＢＢ７０が細胞レベルのＨｓｐ７０およびＨｓｃ７０を枯渇することができるが、コシャペロン（すなわち、Ｈｓｐ１１０）およびオンコプロテインクライアント結合高次構造中のＨｓｐ７０捕捉で弱いので、Ｈｓｐ７０に対するＹＫ５５−ビーズの特異性を探索した。すなわち、ＢＢ７０（無関係のＩｇＧ  Ｈｓｐ７０枯渇抽出物ではない）とインキュベートした場合、ＹＫ５５−ビーズはＨｓｐ１１０およびＲａｆ−１と有意に相互作用することができなかった。それにより、Ｈｓｐ７０媒介複合体を介したＹＫ５５のＨｓｐ１１０およびＲａｆ−１との相互作用が確認された（図１５ａ、右）。
【０５８４】
まとめると、これらの所見は、ＹＫ５がオンコ−クライアント高次構造中のＨｓｐ７０を単離することを示し、腫瘍型依存性Ｈｓｐ７０クライアントの発見におけるＹＫ５５−ビーズまたは関連する本発明の主題の化合物の使用が示唆される。それにより、内因性細胞環境下で癌Ｈｓｐ７０インタラクトームを調査する前例のない可能性が付与される。これらの試みは、Ｈｓｐ７０阻害に対する腫瘍の感受性に関連する機構の発見、活性化されたオンコプロテインおよび経路を単離する本明細書中に記載の本発明の主題の化合物およびＹＫ−ビーズのインヒビターを含む合理的な併用療法のデザイン、ならびに本明細書中に記載の本発明の主題の化合物および他のＨｓｐ７０インヒビターの癌処置への合理的翻訳に重要である。
【０５８５】
ＹＫ５５−ビーズの有用性を確証するために、ＹＫ５５（ビオチンではない）によって単離されたＨｓｐ７０プールが確立されたＨｓｐ７０クライアント（セリン／トレオニンキナーゼＲａｆ−１など）を含むことを最初に示した（図１５ａ、左）。ＹＫ５５−ビーズはＨｓｐ７０枯渇細胞中で発癌性Ｒａｆ−１キナーゼと有意に相互作用できず、ＹＫ５５の癌遺伝子産物との相互作用がＨｓｐ７０媒介複合体を通して起こることが確認された（図１５ａ、右）。
【０５８６】
次に、Ｈｓｐ７０がＨｓｐ９０と同様に遺伝的背景に特異的なオンコプロテインと相互作用する能力を有するかどうかを探索した。Ｈｓｐ７０との複合体中に病原性経路を介したシグナル伝達の増加または異常な細胞周期のいずれかに関与するいくつかのオンコプロテインが見出された。これら（Ｈｓｐ９０相互作用因子としても公知）には、ＳＫＢｒ３
乳癌細胞を過剰発現するＨＥＲ２中のサイクリンＤ１およびＨＥＲ２キナーゼ、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８乳癌細胞中のサイクリン依存性キナーゼ１（ＣＤＫ１）およびホスホイノシチド依存性キナーゼ−１（ＰＤＫ１）、ならびにＬＮＣａＰ前立腺癌細胞中の変異アンドロゲン受容体（ＡＲ）が含まれる（図１５ｂ、ｃ）。細胞溶解物のＹＫ５とのプレインキュベーションにより、ＹＫ５５−ビーズがＨｓｐ７０と相互作用する能力を用量依存様式で減少させ、それにより、結合したオンコプロテインが置換された（図１５ｃ）。
【０５８７】
まとめると、これらのデータは、ＹＫ５−ビーズが細胞特異性の異常なシグナル伝達に関与するいくつかのＨｓｐ７０調節癌遺伝子産物を単離することを証明している。正しい遺伝学的背景におけるこれらの癌遺伝子産物の阻害により、腫瘍阻害およびアポトーシスが起こる。したがって、その分解を機能アッセイ（すなわち、応答のバイオマーカー）として使用して、本明細書中に記載の本発明の主題の化合物に対する応答を臨床的に評価することができる。これらの癌遺伝子産物のインヒビターを、本明細書中に記載の本発明の主題の化合物と組み合わせて使用して、結果が改善された個別治療をデザインすることもできる。本明細書中に記載の組成物および関連組成物によるＨｓｐ７０の阻害に感受性を示す関連癌遺伝子産物を同定するために、ＹＫ５５−ビーズの使用を本明細書中に記載する。
【０５８８】
乳房腫瘍におけるＨｓｐ７０インタラクトームの調査
ＨＳＰは、種々のタンパク質の折り畳みおよび細胞移行において広範な機能を有する遍在的に発現するタンパク質である。これらのハウスキーピング機能は十分に認識されており、且つ注目されている調査対象であるのに対して、個別且つ特殊化した疾患特異的な役割を実行するために病原性細胞中でシャペロンが選択されることが現在より明らかとなりつつある。
【０５８９】
Ｈｓｐ９０シャペロンについて、悪性腫瘍におけるこれらの機能は、主に、小分子インヒビターであるゲルダナマイシンの発見によって解読されている。対照的に、この状況においてＨｓｐ７０を選択的に調整する小分子の欠如およびＨｓｐ７０およびＨｓｃ７０遺伝子操作を用いたいくらか矛盾する所見が、悪性形質転換におけるＨｓｐ７０およびＨｓｃ７０の関与の完全理解を制限している。ＹＫ５および関連する本発明の主題の化合物は、オンコ−クライアントタンパク質およびアポトーシス調節分子との複合体中にＨｓｐ７０を欠く新規の作用機能を有するＨｓｐ７０モジュレーターであるので、これにより、癌細胞中のＨｓｐ７０インタラクトームを不偏性をもって調査することが可能な稀な機会が得られる。
【０５９０】
【表１４】
2018188476.tif 000153
表１４。固体支持体固定化ＹＫ５は、乳癌細胞におけるＨｓｐ７０相互作用因子としてＳＴＡＴ１を同定する。ヒトＭＤＡ−ＭＢ−４６８乳癌溶解物およびヒトＳＫＢｒ３乳癌溶解物中のＤ−ビオチンが結合したコントロールビーズおよびＹＫ５５−ビーズによって単離されたタンパク質複合体を、ＳＤＡ−ＰＡＧＥ上で分離し、９０ｋＤａバンドを切り出し、抽出したタンパク質を消化し、方法に記載のＬＣ／ＭＳ／ＭＳによって分析した。括弧内のアミノ酸を、抽出中に配列の残部から切り離した。配列分析によってバンドがＳＴＡＴ１であることが同定された。
【０５９１】
癌Ｈｓｐ７０インタラクトームの不偏性分析を行うために、プロテオミクス分析を、ＳＫＢｒ３乳癌細胞およびＭＤＡ−ＭＢ−４６８乳癌細胞由来のコントロール−ビーズ−プルダウンおよびＹＫ５５−ビーズ−プルダウンに対して行った。そのうち、同定（表１４）および確証（図１７、図１８）したカーゴタンパク質は、転写１および３のシグナル伝達物質およびアクチベーターであった（ＳＴＡＴ１およびＳＴＡＴ３）。ＹＫ５５は、Ｈｓｐ７０免疫枯渇細胞中でＳＴＡＴと相互作用できず（図１８ｂ）、ＹＫ５５のＳＴＡＴへの結合がＨｓｐ７０媒介性およびＨｓｐ７０特異的であることを示した。興味深いことに、Ｒａｆ−１および他のオンコプロテインに反して、ＹＫ５の細胞への添加はＳＴＡＴ１の定常状態レベルを減少させることができなかった（図１７ａ、右）。他方では、ｐ−ＳＴＡＴ３レベルの顕著な減少によって証明されるように、ＹＫ５処置の際に活性ＳＴＡＴ３（ＳＴＡＴ１ではない）の減少が認められた（図１７ａ、右）。
【０５９２】
ＳＴＡＴは、種々の細胞外刺激の統合で重要な役割を果たす転写因子ファミリーである。ほとんどのＳＴＡＴファミリーメンバー（ＳＴＡＴ３およびＳＴＡＴ５など）が腫瘍形成を促進することが示されているのに対して、ＳＴＡＴ１は腫瘍形成を抑制し、癌細胞が生存するためにはｐ−ＳＴＡＴ１レベルを抑制しながらｐ−ＳＴＡＴ３およびｐ−ＳＴＡＴ５の発現増加を同時に保持するための対立する機構を発生させる必要があることが示唆される。実際に、乳癌細胞中にｐ−ＳＴＡＴ３が豊富に見出されたが（図８〜１１、図１７）、活性化ＳＴＡＴ１レベルはわずかに検出可能であった（図１７，１８、内因性細胞
対ＩＦＮγ刺激細胞におけるｐ−ＳＴＡＴ１レベルを参照のこと）。したがって、本発明者らは、癌細胞においてｐ−ＳＴＡＴ１種およびｐ−ＳＴＡＴ３種のレベルをＨｓｐ７０によって微調整することができるのかどうかに疑問を感じた。ＳＴＡＴ１活性化が細胞死を促進することができるならば、乳癌細胞がＳＴＡＴ１を発現するので、これらの細胞におけるＨｓｐ７０のＳＴＡＴ１への結合がそのアポトーシス促進機能の阻害で役割を果たすことができると仮定され、癌細胞をＩＦＮγおよび免疫系から防御する有望な機構が示唆された。
【０５９３】
これらの株と共に、ＩＦＮγは、ｐ−ＳＴＡＴ１の細胞レベルを増加させ（図１８ｃ，ｄ）、且つＭＤＡ−ＭＢ−４６８細胞のアポトーシスを誘導する（図１８ｃ）ことが見出された。ｐ−ＳＴＡＴ１に及ぼすＩＦＮγの影響は、ＹＫ５によって増大された（図１８ｃ）。これらの細胞におけるＳＴＡＴ１レベルおよびｐ−ＳＴＡＴ１レベルのＹＫ５５−ビーズによって捕捉されたレベルとの比較によって大部分の活性化ＳＴＡＴ１がＹＫ５／Ｈｓｐ７０との複合体中に存在することが示され、Ｈｓｐ７０によるｐ−ＳＴＡＴ１の捕捉がＩＦＮγ−ＳＴＡＴ１経路の阻害に関与することが示唆された。
【０５９４】
ＳＴＡＴ１は、インターフェロン−（ＩＦＮγ）シグナル伝達の主なエフェクターである。ＩＦＮγは、Ｔ細胞およびナチュラルキラー細胞によって産生されるサイトカインであり、病原体および腫瘍発生から防御する不可欠な免疫刺激機能を有する。ＩＦＮγは、広範な種々の腫瘍細胞（乳房の腫瘍細胞が含まれる）に抗増殖効果を発揮することができ、これらの効果はＳＴＡＴ１を介して伝達される。ＩＦＮγは、免疫正常マウスにおいて外因性の腫瘍監視効果を有し、これらの効果には、インタクトなＪＡＫ（ヤヌスキナーゼ）−ＳＴＡＴシグナル伝達経路が必要である。具体的には、ＩＦＮγによってチロシン残基７０１およびセリン残基７２７上のＳＴＡＴ１がリン酸化され、それにより、いくらかアポトーシスの役割を果たすその標的遺伝子のホモ二量体化、ＤＮＡ結合、および転写活性化が起こる。ＩＦＮγに応答したアポトーシスおよびカスパーゼ活性化は、機能的ＳＴＡＴ１を欠く細胞中で無効にされる。同様に、ＳＴＡＴ１陰性細胞は、機能的ＳＴＡＴ１を発現する密接に適合した細胞と比較して、カスパーゼ発現および腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）誘導アポトーシスが減少する。これらの所見は、ＳＴＡＴ１の活性化が調節性サイトカイン（ＩＦＮγまたはＴＮＦαなど）に応答したアポトーシスの誘導で重要な役割を果たすことを示す。さらに、最近の研究により、ＳＴＡＴ１およびＲＡＧ２（Ｖ（Ｄ）Ｊ組換えに重要なタンパク質）の両方を欠損するマウスが自発性乳腺癌を罹患しやすいことが示された。ＳＴＡＴ１が腫瘍の血管形成、成長、および転移のための負の制御因子であるという証拠も提供されている。
【０５９５】
これらの結果は、本明細書中に記載の本発明の主題の化合物を組み込んだ併用療法の使用がインターフェロンの影響を刺激する可能性があり、且つ腫瘍関連脆弱化機構の遮断によって免疫応答が腫瘍をさらにより強力に除去することが可能であることを示す。これはワクチン療法試験についての刺激的所見であり、生物学的に活性なインターフェロンの本明細書中に記載の本発明の主題の化合物との同時投与がワクチンの有効性を改良することができ、且つより少ないワクチン接種用量を使用することが可能であることが示唆される。他の病原性形質転換がサイトカイン／ＳＴＡＴ１シグナル伝達（細菌感染およびウイルス感染ならびにＩＩ型糖尿病の後期合併症など）に依存するので、本発明者らの研究は、Ｈｓｐ７０インヒビターを組み込んだ治療が、癌に加えて、これらの疾患の処置の効果を増強することもできることを示唆している。
【０５９６】
Ｈｓｐ７０結合は、腫瘍抑制因子活性の新規の阻害機構である。
【０５９７】
Ｈｓｐ７０によるＳＴＡＴ１阻害機構を詳細に調査するために、残基Ｔｙｒ７０１でのＳＴＡＴ１の時間依存性チロシンリン酸化の測定を目的として、ＩＦＮγ処置したＭＤＡ
−ＭＢ−４６８細胞をＹＫ５ならびにタンパク質のリン酸化および脱リン酸化のインヒビターの存在下および非存在下にて異なる時点で分析した（図１８ｅ，ｆ）。ＹＫ５の存在下ではＳＴＡＴ１−リン酸化が急速に最大レベルに到達した一方で、Ｈｓｐ７０インヒビターの非存在下ではその活性化は遅延し、類似の規模に到達できなかった。
【０５９８】
全ｐ−ＳＴＡＴ１レベルをリン酸化事象と脱リン酸化事象とのバランスによって決定するので、ＳＴＡＴ１  Ｈｓｐ７０阻害細胞の長期のチロシンリン酸化は、ＳＴＡＴ１に対するＪＡＫキナーゼ活性の増加またはタンパク質チロシンホスファターゼ（ＰＴＰアーゼ）活性の減少のいずれかに起因し得る。
【０５９９】
ＳＴＡＴ１脱リン酸化速度をモニタリングするために、スタウロスポリン（プロテインキナーゼインヒビター）をＩＦＮγで３０分間予め処置した細胞に添加するパルスチェイスストラテジー（ＪＡＫによるＳＴＡＴ１の連続的リン酸化を急激に遮断する）を使用した（図１８ｆ、上）。次いで、その後のいくつかの時点のチロシンリン酸化ＳＴＡＴ１の残留レベルを決定した。ＹＫ５の非存在下では、ＳＴＡＴ１のチロシンリン酸化が即時に低下したのに対して、その存在下では、細胞ｐ−ＳＴＡＴ１レベルが長期化した。これらの結果は、Ｈｓｐ７０が乳癌細胞におけるＳＴＡＴ１リン酸化のＩＦＮγ誘導を弱めることができ、Ｈｓｐ７０インヒビターが脱リン酸化の潜在的遅延によってｐ−ＳＴＡＴ１蓄積を容易にすることを示す。したがって、正バナジン酸塩（Ｎａ３ＶＯ４）（非特異的ＰＴＰアーゼインヒビター）の存在下では、ＳＴＡＴ１リン酸化はＹＫ５で非処置および処置した細胞においてほぼ同一の効率で起こった（図１８ｆ、下）。正バナジン酸塩によるＳＴＡＴ１脱リン酸化の遮断により、チロシンリン酸化ＳＴＡＴ１が核内に蓄積し、その後持続する。調和して、ＩＦＮγ刺激前のＭＤＡ−ＭＢ−４６８細胞のＹＫ５での前処置により、活性化ＳＴＡＴ１の核移行が増強され（図１９ａ）、そのＤＮＡ結合効力が増加した（（図１９ｂ）。これらの結果は、Ｈｓｐ７０がＰＴＰアーゼによる脱リン酸化速度を変化させる高次構造でｐ−ＳＴＡＴ１を保持する機構と一致する。
【０６００】
実施例１０：乳癌における癌特異的オンコプロテイン（ＳＴＡＴ３）を同定するための固体支持体固定化ＹＫ５の使用
実施例９に示すように、ＹＫ５５−ビーズ単離物中のＳＴＡＴ３も同定した（図１７ｃ）。ＳＴＡＴ１と対照的に、ＳＴＡＴ３は乳癌において構成的活性型であることが頻繁に見出され、腫瘍をＳＴＡＴ３に引き付けることができるようになる。ＳＴＡＴ３チロシンリン酸化およびＤＮＡ結合は、多数の乳癌の腫瘍株および細胞株で上昇することが見出されている。その証拠により、ＳＴＡＴ３が細胞周期の進行、細胞の生存、および形質転換に関連するいくつかの遺伝子の転写を活性化することができるとが示唆される。逆に、ＳＴＡＴ３活性の薬理学的およびドミナントネガティブな阻害が乳癌細胞の増殖および生存を遮断した。まとめると、乳癌における形質転換表現型にはＳＴＡＴ３活性が必要であることが示唆された。
【０６０１】
ＳＴＡＴ１のためにデザインした実験ストラテジーを使用して、Ｈｓｐ７０は、ＳＴＡＴ１に及ぼす影響とは逆の影響をＳＴＡＴ３に及ぼす。本発明者らの結果は、Ｈｓｐ７０が、キナーゼによってリン酸化を容易にすることおよび／またはＰＴＰアーゼによるＳＴＡＴ３脱リン酸化の遅延によってｐ−ＳＴＡＴ３の細胞蓄積を容易にすることを示す。ＳＴＡＴ３活性化は、上流キナーゼ（ヤヌスキナーゼ２（ＪＡＫ２）など）による保存されたチロシン残基（Ｙ７０５）のリン酸化に付随する。まとめると、Ｈｓｐ７０への結合は、ＰＴＰアーゼにほとんど接近しないがＪＡＫリン酸化に適する高次構造のｐ−ＳＴＡＴ３を保持し、細胞内のｐ−ＳＴＡＴ３レベルのリザーバ上昇の主な維持機構であると結論づけられた。Ｈｓｐ７０によるＳＴＡＴ３活性の調節機構と共に、記載の化合物の存在下でのチロシン残基（Ｙ７０５）リン酸化の減少によって示されるように、本明細書中に記載の本発明の主題の化合物は、ＳＴＡＴ３を強力に不活化する（図９ｂ、１０ａ、１１ｂ
）。したがって、Ｈｓｐ７０のｐ−ＳＴＡＴ３促進効果は、ＹＫ５および関連する本発明の主題の化合物によって復帰する。ＳＴＡＴ３シグナル伝達経路の持続的活性化は、広範なヒトの固形癌および血液の癌で報告されており、一般に予後不良に関連する。そのうち、持続的ＳＴＡＴ３シグナル伝達に帰する癌促進活性は、細胞増殖、転移、血管形成、宿主免疫回避、およびアポトーシス耐性に関与する活性である。本発明者らは、ここに、本明細書中に記載の本発明の主題の化合物によるＳＴＡＴシグナル伝達経路の妨害が癌性細胞における異常に活性化したＳＴＡＴシグナル伝達を阻害するための新規のストラテジーであることを示す。
【０６０２】
結論として、本明細書中に含まれる実施形態は、サイトゾルＨｓｐ７０のインタラクトームを調査するためのＹＫ５およびそのビオチン化誘導体（ＹＫ５５）の使用を示す。広範な癌型で活性化されるいくつかの癌遺伝子産物を、これらのビーズによって同定した。これらには、ＨＥＲ２過剰発現乳癌におけるＨＥＲ２、サイクリンＤ１、Ｒａｆ−１、ＳＴＡＴ１、およびＳＴＡＴ３、トリプルネガティブ乳癌におけるＰＤＫ１、ＳＴＡＴ１、ＳＴＡＴ３、およびＣＤＫ１、ならびに前立腺癌における変異体ＡＲが含まれるが、これらに限定されない。これらにより、本明細書中に記載の本発明の主題の化合物がいくつかの活性化された発癌経路に対して組み合わせ的に作用し、広範な癌で活性を有するという証拠が得られる。Ｈｓｐ７０によるこれらのタンパク質の結合はその機能安定性の維持に必要であり、ＹＫ５および関連する本発明の主題の化合物によるＨｓｐ７０の阻害により、オンコプロテインの不安定化およびプロテアソーム経路によるその後の消失、またはその不活化が起こる。
【０６０３】
形質転換表現型を生じる分子異常をより深く理解することが必要である。かかる理解により、腫瘍促進分子のインヒビターに基づいて低毒性抗癌処置を開発することができる。ほとんどの癌はいくつかの分子の変化によって特徴づけられるので、臨床背景で最良の結果が得られる分子ターゲティングされた薬剤の正確な組み合わせを決定することは困難である。あらゆる癌細胞型／患者腫瘍組織で異常になるタンパク質サブセットを「探し出す」ためのＹＫ−ビーズの使用を推察することができる。細胞および癌特異的形質転換経路の分子マップの作製においてこれらの「探し出し」実験から得た情報を収集することができる。「腫瘍特異的分子異常」マップの作成により、最終的には医師が患者のための個別治療をデザインすることが可能であろう。かかるプロテオミックマップは、より一般的な遺伝子シグネチャーマップを超える明らかな利点を有し得る。何故なら、ほとんどの抗癌剤が遺伝子ではなくタンパク質をターゲティングする小分子であり、多数の小分子ターゲティング特異的分子の変化が現在開発段階にあるからである。これらの試みは、癌患者の処置におけるより良好な効率およびより低い毒性を示す併用療法のデザインのための根拠を確立することができ、さらに、特定の腫瘍における特異的な分子の変化を定義して新規の分子標的療法の開発を容易にすることができる。
【０６０４】
本発明の主題の１つの実施形態は、腫瘍または増殖性障害を処置される患者の処置状態をモニタリングする方法であって、請求項１〜２０に記載の化合物を固体基質と共有結合させて基質−化合物複合体を形成する工程、処置前または処置中に患者から第１の生物学的なサンプルを得る工程、サンプルを基質−化合物複合体と接触させて、基質−化合物複合体をＨＳＰ７０複合体と接触させる工程、ＨＳＰ７０複合体から示されたオンコプロテインの型および量を測定および記録する工程、処置後に患者から第２の生物学的なサンプルを得、ｔ測定工程を繰り返し、ＨＳＰ７０複合体から示されたオンコプロテインの型および量を記録する工程、結果を前の測定値と比較して、オンコプロテイン代謝経路が阻害されたか、あるいは他のオンコプロテイン経路にシフトしたかどうかを同定する工程、および患者の治療が有益な効果をもたらしたかどうかを同定する工程を含む、方法を提供する。
【０６０５】
これらの実施形態はまた、ＹＫ５および関連する本発明の主題の化合物の使用によって細胞内でのタンパク質リン酸化の新規の調節機構が同定されることを示す。具体的には、Ｈｓｐ７０は乳癌細胞におけるＳＴＡＴ１活性およびＳＴＡＴ３活性のための細胞緩衝物質として作用することを示す。本発明者らのデータは、Ｈｓｐ７０がＳＴＡＴ１およびＳＴＡＴ３に結合し、ホスファターゼによるその脱リン酸化を容易にして促進するか（ＳＴＡＴ１について）、減速する（ＳＴＡＴ３について）高次構造でタンパク質を保持する機構を示す。この機構により、Ｈｓｐ７０は、内因性ｐ−ＳＴＡＴ１を低下させてそのアポトーシス促進性を減少させ、逆に、内因性ｐ−ＳＴＡＴ３を増加させてその増殖誘導能を増大させる。
【０６０６】
結論ではないが、本発明者らの所見は、ＹＫ５機構を介したＨｓｐ７０の薬理学的阻害が広範な癌細胞に多様式で影響を及ぼし、主要な癌の特徴を網羅的に攻撃することを示唆している。この影響は、本明細書中に記載の本発明の主題の化合物が複数のオンコプロテインの安定性および機能を損わせ、且つ腫瘍抑制因子活性を修復する能力と高度に関連する。そのフィードバック熱ショック応答、正常細胞に細胞傷害効果がほとんどないこと、および異なる遺伝的背景の広範な癌細胞での強力な活性を合わせると、本発明者らの結果は、Ｈｓｐ７０およびＨｓｃ７０に対する二重の薬理学的阻害は潜在的な新規の抗癌介入として位置付けられる。
【０６０７】
実施例１１．幹細胞を除去するための本発明の主題の化合物の使用
ＹＫ５は、癌幹細胞を強力に死滅させる。自己複製、増殖、および白血病性芽細胞への分化が可能な白血病幹細胞（ＬＳＣ）として公知の細胞の比較的稀な化学療法耐性の亜集団によって急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）が発症し、維持されることを示唆する証拠が増加している。表現型で定義されたＬＳＣの比率がより高い患者は、ＬＳＣの比率が低い患者よりも無再発性の生存が有意に不良である。また、診断時にＬＳＣの比率がより高い場合に微小残存病変（ＭＲＤ）と予測される確率が高く、ＬＳＣがＭＲＤの有意な一因であることが示唆される。最後に、多数の薬物が白血病性芽細胞を死滅させることができる一方で、ＬＳＣを除去する薬物はほとんど存在しないことが証明された。
【０６０８】
初代ＡＭＬ検体では、ＹＫ５は、芽細胞、幹細胞、および前駆細胞集団で強い細胞死を誘導した（図２０）。顕著には、表現型で説明された白血病幹細胞および総白血病性芽細胞の高い感受性が認められた（図２０ｂ；赤色対灰色のバー）。最後に、同一の患者サンプル内で見出される非腫瘍細胞は、ＹＫ５による処置による影響は有意に低かった（図２０、白色のバー）。したがって、癌幹細胞毒性を有する化合物（ＹＫなど）は、癌治療の改善において有意に有益である。
【０６０９】
実施例１２：分析方法
試薬。前述のようにＰＵ２４ＦＣｌおよびＰＵ−Ｈ７１を合成し、特徴づけた。アンサマイシンＨｓｐ９０インヒビターベースの蛍光プローブＧＭ−ｃｙ３Ｂを、報告されている通りに合成した。本明細書中に記載の本発明の主題の化合物の合成および特徴付け。ロイペプチン、ＭＧ  １３２、ＭＧ  １０１、ＰＭＳＦ、ヨウ化プロピジウム（ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ  ｉｏｄｉｎｅ）、および腫瘍壊死因子−αを、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから入手し、ＡＥＢＳＦをＡ．Ｇ．Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから入手し、Ｚ−ＶＡＤ−ＦＭＫ、ＢＯＣ−Ｄ−ＦＭＫ、カテプシンインヒビター１、カルペプチン、およびＩＦＮγをＣａｌｂｉｏｃｈｅｍから入手した。組換えヒトＨｓｐ７０タンパク質を、Ｓｔｒｅｓｓｇｅｎから購入した。
【０６１０】
細胞株。ヒト癌細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＬＮＣａＰ）、正常なヒト肺線維芽細胞ＭＲＣ５、および正常なヒト結腸細胞ＣＣＤ１８Ｃｏを、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖ
Ａ）から購入した。ＳＫＢｒ−３細胞はＤｒ．Ｎｅａｌ  Ｒｏｓｅｎ，ＭＳＫＣＣから譲渡され、ＨｕＨ７細胞はＤｒ．Ｍａｓｓａｇｕｅ，ＭＳＫＣＣから譲渡され、ＯＣＩ−Ｌｙ７，ＭＯＬＭ−１３、およびＫａｓｕｍｉ−１はＤｒ．Ｓ．Ｎｉｍｅｒ，ＭＳＫＣＣから譲渡され、Ｍｉａ−ＰａＣａ２、ＡｓＰＣ−１、ＢｘＰＣ３、およびＰＬ４５はＤｒ．Ｄ．Ｂａｒ−Ｓａｇｉ，ＮＹＵから譲渡された。細胞を、１０％ウシ胎児血清、１％Ｌ−グルタミン、１％ペニシリンおよびストレプトマイシンを補足したＤＭＥ／Ｆ１２（ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、およびＳＫＢｒ３）、ＲＰＭＩ（ＬＮＣａＰ、ＭＯＬＭ−１３、ＢｘＰＣ３、およびＡｓＰＣ−１およびＫａｓｕｍｉ−１）、ＭＥＭ（ＭＲＣ５およびＣＣＤ１８Ｃｏ）、ＩＭＤＭ（ＯＣＩ−Ｌｙ７）、またはＤＭＥＭ（ＨｕＨ７、Ｍｉａ−Ｐａｃａ２、およびＰＬ４５）中で日常的に培養した。ＰＢＬ（ヒト末梢血白血球）を、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  Ｂｌｏｏｄ  Ｃｅｎｔｅｒから購入した患者血液から単離した。３５ｍｌの細胞懸濁液を、１５ｍｌのＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ  ｐｌｕｓ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）上に重層した。サンプルを４℃にて２，０００ｒｐｍで４０分間遠心分離し、白血球界面を回収した。細胞を１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ培地にプレートし、翌日に、適切な濃度のＹＫ５で表示の時間処置した。
【０６１１】
初代細胞の単離および培養。初代ヒトＡＭＬ細胞を、インフォームドコンセントを使用して入手した。検体の全ての操作および分析は、Ｗｅｉｌｌ  Ｃｏｒｎｅｌｌ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ  Ｂｏａｒｄで承認された。単核球を、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐｌａｑｕｅ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＹ）密度勾配分離を使用して単離した。場合によっては、細胞を、イスコフダルベッコ改変培地（ＩＭＤＭ）、４０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、および１０％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）またはＣｒｙｏＳｔｏｒ（商標）ＣＳ−１０（Ｂｉｏｌｉｆｅ）からなる凍結用培地中で低温保存した。
【０６１２】
緩衝液：ＹＫ５５−ビーズまたはＢＢ７０−抗体上に単離したタンパク質複合体を洗浄するために、高塩緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、１Ｍ  ＮａＣｌ、０．１％ＮＰ−４０）または低塩緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、２５ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％ＮＰ−４０緩衝液）のいずれかを表示のように使用した。ＹＫ５５−ビーズからタンパク質複合体を溶離するために、示すように、溶離緩衝液Ａ（６２．５ｍＭ  ＴｒｉｓＨＣｌ（ｐＨ６．８）、２％  ＳＤＳ、１０％グリセロール、１５．５ｍｇ／ｍｌ  ＤＴＴ、ブロモフェノールブルー０．０２ｍｇ／ｍｌ）を使用してサンプルを１００℃で３分間ボイルするか、溶離緩衝液Ｂ（２％  ＳＤＳ、５０ｍＭリン酸塩、１００ｍＭ
ＮａＣｌ、６Ｍ尿素、および２ｍＭチオ尿素）を使用してサンプルを室温で１５分間インキュベートし、その後に１００℃で１５分間インキュベートした。
【０６１３】
計算方法：タンパク質配列および結晶構造を、それぞれＮＣＢＩデータベースおよびＲＣＳＢデータベースからダウンロードした。相同性モデルをＰｒｉｍｅ  ｖ２．０によって構築し、未完成の相同性モデルをＭａｃｒｏｍｏｄｅｌ  ｖ９．６を使用した最小化によってさらに精巧にした。その後の相同性モデルに対してＳｉｔｅＭａｐ  ｖ２．２分析を行い、その後にデザインし、予想されるアロステリック部位上にＹＫ５をドッキングした。全ての計算を、Ｕｂｕｎｔｕ  ８．１０オペレーティングシステムを備えたＨＰワークステーションｘｗ８２００にてＭａｅｓｔｒｏ  ｖ８．５を使用して行った。
【０６１４】
残基番号付けスキーム：他で特記しない限り、Ｈｓｐ７０タンパク質中の各アミノ酸残基の位置は、Ｍｉｌｎｅｒ、ｅｔ  ａｌ．によって提唱されたｈＨｓｐ７０（受入番号：Ｐ０８１０７）の配列番号付けに従った。
【０６１５】
相同性モデルの構築：相同性モデルを、Ｐｒｉｍｅ  ｖ２．０を使用して生成した。ＡＴＰとの複合体中のｈＨｓｐ７０  Ｎ末端ドメインのタンパク質構造（ＰＤＢ  ＩＤ：１
Ｓ３Ｘ）、ＡＤＰおよび基質（ペプチド−ＮＲＬＬＬＴＧ）の両方と複合体化した大腸菌Ｈｓｐ７０（ＤｎａＫ）（ＰＤＢ  ＩＤ：２ＫＨＯ）、Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ  Ｈｓｐ７０のＣ末端ドメイン（ＰＤＢ  ＩＤ：２Ｐ３２）、および全長ｈＨｓｐ７０タンパク質のアミノ酸配列（受入番号：Ｐ０８１０７）をモデル構築のために使用した。モデルを作製するために、ｈＨｓｐ７０のタンパク質配列（受入番号：Ｐ０８１０７）を、Ｐｒｉｍｅ構造調製ウィザードの入力配列として入力した。配列相同性検索を行って、５０％超の配列相同性を示すテンプレートを同定した。この検索により、３つのテンプレート結晶構造（ＰＤＢ  ＩＤ：１Ｓ３Ｘ、２ＫＨＯ、および２Ｐ３２）が同定された。全長ｈＨｓｐ７０配列およびテンプレートを、Ｐｒｉｍｅのデフォルトパラメーターを使用してアラインメントした。Ｐｒｉｍｅの構造構築オプションでは、アミノ酸Ｍｅｔ１−Ｇｌｙ３８２（ｈＨｓｐ７０）を、ＰＤＢ  ＩＤ：１Ｓ３Ｘから選択し、アミノ酸Ａｓｐ３８５−Ｇｌｎ５３８（大腸菌）（すなわち、Ａｓｐ３８３−Ａｌａ５４１（ｈＨｓｐ７０））をＰＤＢ  ＩＤ：２ＫＨＯから選択し、最後に、アミノ酸Ｌｅｕ５４３−Ｓｅｒ６１４（Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ）（すなわち、Ｌｅｕ５４２−Ｇｌｙ６１３（ｈＨｓｐ７０））をＰＤＢ  ＩＤ：２Ｐ３２から選択した。アミノ酸残基（６１４−６４１、ｈＨｓｐ７０）はモデリングしなかった。何故なら、これらのＣ末端アミノ酸のテンプレート構造が存在しなかったからである。次いで、溶媒、リガンド（ＡＤＰ）、力場、および他の寄与を考慮して、Ｐｒｉｍｅで実行される一連のアルゴリズムによって、アラインメントしたテンプレートの部分からの原子の位置を使用して構造を構築した。２０種を超える残基ギャップをテンプレートに挿入することによって構造の不連続性を最適化した。全ループを、Ｐｒｉｍｅのデフォルトパラメーター設定を使用して精巧にした。
【０６１６】
構造の準備：相同性モデリングしたｈＨｓｐ７０タンパク質の構造を、Ｍａｅｓｔｒｏ
８．５で利用可能なＳｉｔｅＭａｐおよびタンパク質調製ウィザードを使用したドッキング計算のために精巧にした。ＯＬＰＳ−ＡＡ力場にしたがって部分原子電荷を割り当てた。ｈＨｓｐ７０のより信頼できる三次元構造を得るために、相同性モデルを、一連のエネルギー最小化工程にさらに供した。この工程は、二乗平均（ｒｍｓ）勾配エネルギーが０．００１ｋｃａｌ  ｍｏｌ−１  Å−１未満になるまでの最急降下（ＳＤ）および共役勾配（ＣＧ）の５０００回の繰り返しからなる。
【０６１７】
結合部位の予想：ｈＨｓｐ７０の精巧にした相同性モデルを、計算による解析に供した。この解析は、Ｍａｅｓｔｒｏ  ｖ８．５のＳｉｔｅＭａｐ  ｖ２．２で実行されるデフォルトパラメーターを使用して有望な薬物可能部位を決定することを目的としていた。ＳｉｔｅＭａｐ計算を、Ｔ．Ｈａｌｇｒｅｎが記載するように３つの段階に分ける。第１の段階では、関連部位点を、幾何学的およびエネルギー的特性に基づいて選択し、これらの点を組にグループ分けして部位を定義する。次に、疎水性、親水性、および他の重要な性質をグリッド点で計算し、等高線地図を準備する。最後に、部位スコア（Ｓスコア）、薬物可能性スコア（Ｄスコア）、サイズ、包囲、親水性、および疎水性のような部位の特性を計算する。潜在的な受容体結合部位を、ＳスコアおよびＤスコアに基づいて順位付けする。
【０６１８】
適切な薬物結合部位を決定するために、ＳｉｔｅＭａｐは、リガンドに強力に結合することができる部位（高Ｓスコア）を認識するが、活性が最も高い活性リガンドが荷電構造（天然のリン酸塩基質の構造など）を含むので薬物様特性を示す見込みがない場合（低Ｄスコア）、その部位を薬物可能として評価付けない。
【０６１９】
リガンド構造の準備：ｈＨｓｐ７０モジュレーター（ＹＫ５）および新規にデザインしたモジュレーターを、Ｍａｅｓｔｒｏｖ８．５のフラグメントディクショナリーを使用して構築した。モジュレーターの幾何学を、Ｍａｃｒｏｍｏｄｅｌプログラムｖ９．６によってＯＬＰＳ−ＡＡ力場を使用して最適化した。
【０６２０】
リガンドドッキング。ドッキングの計算を、Ｇｌｉｄｅ  ｖ４．０の標準精度（ＳＰ）モードで行った。グリッドを、Ｇｌｉｄｅ中のＲｅｃｅｐｔｏｒ  Ｇｒｉｄ  Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎツールを使用して、入力リガンドとしてＳｉｔｅＭａｐによって得た各エントリー部位（部位１〜５）の選択によって調製した。種々のエネルギーグリッドが計算および保存された結合部位を、以下の２つのコンセントリックキューブに関して定義する：バウンディングボックス（任意の許容可能なリガンドポーズの中心を含まなければならない）およびエンクロージングボックス（許容可能なポーズの全てのリガンド原子を含まなければならない）。バウンディングボックスおよびエンクロージングボックスを、辺の長さがそれぞれ１２Åおよび３０Åであり、リガンドの最も長い原子間距離の中間点を中心とする立方体によって定義する。０．５Å未満のｒｍｓ偏差および１．３Å未満の最大原子変位を有するポーズを消去して冗長性を排除した。ファンデルワールス半径のスケール因子を、絶対部分電荷がリガンドおよびタンパク質についてそれぞれ０．１５（スケール因子０．８）および０．２５（スケール因子１．０）以下の電子を有する原子に適用した。最初のドッキング計算段階で得られた最大ポーズ数を設定するｍａｘｋｅｅｐ変数を５０００に設定し、エネルギー最小化を入力するリガンドあたりのポーズ数を設定するキープベスト変数を１０００に設定した。エネルギー最小化プロトコールは、誘電率４．０および１０００段階の共役勾配を含む。各ドッキング計算の完了の際、リガンドあたり多くても１００ポーズの生成を許可した。配向およびＧｌｉｄｅスコア（Ｇスコア）を考慮して最良のドッキングした高次構造を選択した。
【０６２１】
ウェスタンブロッティング。細胞を６０〜７０％コンフルエンスまで成長させ、インヒビターまたはＤＭＳＯビヒクルで表示の時間処置した。タンパク質溶解物を、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、および１％ＮＰ−４０溶解緩衝液中に調製した。タンパク質濃度を、製造者の説明書にしたがってＢＣＡキット（Ｐｉｅｒｃｅ）を使用して測定した。タンパク質溶解物（１０〜５０μｇ）をＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分離し、ニトロセルロース膜に移し、以下に示した一次抗体とインキュベートした：抗ｅｒｂＢ２抗体（ウサギ由来）（１：２５０、２８−０００４、Ｚｙｍｅｄ）、抗Ｈｓｐ９０抗体（マウス由来）（１：５００、ＳＰＡ−８３０、Ｓｔｒｅｓｓｇｅｎ）、抗Ｈｓｐ４０抗体（ウサギ由来）（１：１０００、ＳＰＡ−４００、Ｓｔｒｅｓｓｇｅｎ）、抗ＨＯＰ抗体（マウス由来）（１：１０００、ＳＲＡ−１５００  Ｓｔｒｅｓｓｇｅｎ）、抗Ｈｓｃ７０抗体（ウサギ由来）（１：５００、ＳＰＡ−８１６、Ｓｔｒｅｓｓｇｅｎ）、抗アンドロゲン受容体抗体（マウス由来）（１：５００、５５４２２５、Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、抗Ｆｌｔ−３抗体（ウサギ由来）（１：５００、ｓｃ−４８０、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ）、抗ビオチン抗体（マウス由来）（１：２５０、Ｂ７６５３、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、抗Ｈｓｐ９０抗体（マウス由来）（１：１０００、ＳＭＣ−１０７、Ｓｔｒｅｓｓｍａｒｑ）、抗ＨＳＦ１抗体（ウサギ由来）（１：５００、ＳＰＡ−９０１、Ｓｔｒｅｓｓｇｅｎ）、抗ＣＤＫ１抗体（マウス由来）（１：１０００、９０５−７７７−１００、Ａｓｓａｙ  Ｄｅｓｉｇｎｓ）、抗サイクリンＤ１抗体（マウス由来）（１：１２５、２９２６、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）、抗カスパーゼ３抗体（ウサギ由来）（１：５００、９６６５、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）、抗ホスホＳＴＡＴ１（Ｔｙｒ  ７０１）抗体（ウサギ由来）（１：２５０、９１７１、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）、抗ＳＴＡＴ１抗体（マウス由来）（１：１０００、６１０１８６、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、抗Ｈｓｐ７０抗体（マウス由来）（１：５００、ＳＰＡ−８１０、Ｓｔｒｅｓｓｇｅｎ）、抗Ａｋｔ抗体（ウサギ由来）（１：５００、９２７２、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）、抗ホスホ−Ａｋｔ（Ｓｅｒ  ４７３）抗体（ウサギ由来）（１：５００、９２７１、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）、抗Ｒａｆ−１抗体（ウサギ由来）（１：５００、ｓｃ−１３３、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ）、抗ＰＡＲＰ（ｐ８５フラグメント）抗体（ウサギ由来）（１：５００、Ｇ７３４１、Ｐｒｏｍｅｇａ）、抗ＣＳＫ抗体（ウサギ由来）（１：１０００、ｓｃ−１３０７４、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ）、抗β
アクチン抗体（マウス由来）（１：２５００、Ａ１９７８、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、および抗ＰＩ３Ｋ（ｐ８５）抗体（ウサギ由来）（１：４０００、０６−１９５、Ｕｐｓｔａｔｅ）。次いで、膜を対応するペルオキシダーゼ抱合二次抗体（３，０００倍希釈）とインキュベートした。抗ｐ２３（ＪＪ３）は、Ｄｒ．Ｄ．Ｔｏｆｔから譲渡された。抗ＨＩＰ抗体、抗Ｈｓｐ９０（Ｈ９０１０）抗体、および抗Ｈｓｐ／ｃ７０（ＢＢ７０）抗体を、前述のように産生した。
【０６２２】
Ｈｓｐ９０結合アッセイ。以前に記載のように、ブラック９６ウェルマイクロタイタープレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ番号３６５０）で測定した７。簡潔に述べれば、各９６ウェルプレートは、最終体積１００μｌで３ｎＭ  Ｃｙ３Ｂ−ＧＭ、１０ｎＭ  Ｈｓｐ９０（Ｓｔｒｅｓｓｇｅｎ  ＃ＳＰＰ−７７０）、および試験したインヒビター（ＤＭＳＯ中での最初のストック）を含んでいた。プレートを、震盪器上に４℃で２４時間入れ、蛍光偏光（ＦＰ）値（ｍＰ）を記録した。ＥＣ５０値を、５０％のＣｙ３Ｂ−ＧＭが置換された競合物濃度として決定した。ＦＰ測定を、ＡｎａｌｙｓｔＧＴ装置（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）で行った。
【０６２３】
Ｈｓｃ７０  ＡＴＰアーゼ活性およびルシフェラーゼ再折り畳み。ヒトＨｓｃ７０、ＤＪＡ１／ＤＮＡＪＡ１、ＤＪＡ２／ＤＮＡＪＡ２、およびＨｓｐ１１０／Ｈｓｐ１０５／ＨＳＰＨ１を精製し、分析した。Ｈｓｃ７０  ＡＴＰアーゼ活性を測定するために、４μＭ  Ｈｓｃ７０を、異なる濃度のＹＫ５または１％ＤＭＳＯ（ビヒクルコントロールとして）とアッセイ緩衝液（１００ｍＭ  ＫＯＡｃ、２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ−ＫＯＨ（ｐＨ７．５）、５ｍＭ  ＭｇＯＡｃ２）中で３７℃で２時間プレインキュベートした。４μＭ  ＤＪＡ１またはＤＪＡ２、１μＭ  Ｈｓｐ１１０、２ｍＭ  ＡＴＰ、および５μＣｉ／ｍｌのμ［３２Ｐ］−ＡＴＰ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を添加し、反応物を３０℃でインキュベートした。サンプルを測定点で３７．５ｍＭ  ＥＤＴＡを使用して反応停止させ、０．５Ｍ  ＬｉＣｌおよび０．５Ｍギ酸中で展開するポリエチレン−イミンセルロース（Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ  Ｂａｋｅｒ）上での薄層クロマトグラフィによって分析した。産生されたＡＤＰを画像リン光体定量によって決定し、酵素線形速度（Ｖｍａｘ）を回帰分析によって計算した。ルシフェラーゼ再折り畳みを分析するために、ホタルルシフェラーゼ（Ｓｉｇｍａ）を６Ｍグアニジニウム−ＨＣｌおよび１ｍＭジチオトレイトール中で１０分間変性させた。４μＭ  Ｈｓｃ７０を、上記のように薬物またはビヒクルコントロールとプレインキュベートした。４μＭ  ＤＪＡ２および２ｍＭ  ＡＴＰを添加し、ルシフェラーゼを反応物中で迅速に５．４ｎＭに１００倍希釈し、３０℃でインキュベートした。６０分および表示の時点で、サンプルをルシフェラーゼアッセイ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）にて２：２５に希釈し、Ｂｅｒｔｈｏｌｄ  Ｌｕｍａｔ  ＬＢ９５０７照度計で活性を測定した。
【０６２４】
ＹＫ５５ビーズを使用したＨｓｐ７０競合アッセイ。タンパク質溶解物を、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、２５ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％ＮＰ−４０溶解緩衝液を使用して調製した。細胞抽出物を表示濃度の可溶性競合物と２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、２５ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％ＮＰ−４０緩衝液中にて４℃で３時間インキュベートした。一方で、ＹＫ５５−ビーズを、ストレプトアビジンアガロースビーズ（５０μｌ）（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）のＹＫ５５（示すように５０または１００μＭ）との４℃で１時間のインキュベーションによって調製した。緩衝液でのビーズの３回の洗浄の際、溶解物を含む上記の可溶性競合物を、ＹＫ５５−ビーズと共にインキュベートした。サンプルを４℃で一晩インキュベートし、溶解緩衝液で５回洗浄し、ＳＤＳ−ＰＡＧＥに供した。
【０６２５】
Ｈｓｐ７０  Ｃｙ３Ｂ−Ｋ５競合蛍光偏光アッセイ：ＦＰ測定を、ブラック９６ウェルマイクロタイタープレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ番号３６５０）（励起および発光の両方がウ
ェルの上部から起こる）を使用して行った。Ｈｓｐ７０  ＦＰ結合緩衝液は、以下を含んでいた：２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ−Ｋ（ｐＨ＝７．２）、２０ｍＭ  ＮａＣｌ、２００μＭ
ＣａＣｌ２、１１０ｍＭ  ＫＯＡｃ、２ｍＭ  Ｍｇ（ＯＡｃ）２、０．０１％ＮＰ４０。各アッセイウェルは、７５μＬの緩衝液中に２０μｇの細胞溶解物およびＹＫ−インヒビターを含んでいた。混合物を震盪器上で１０分間保持し、次いで、３７℃で２時間インキュベートした。トレーサーを各ウェルに添加して、Ｃｙ３Ｂ−ＹＫ５の最終濃度を３ｎＭにし、最終体積を１００μＬにした。次いで、Ａｎａｌｙｓｔ  ＧＴプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）にて測定した。積分時間１００ｍｓを使用し、Ｚ高を３ｍｍ（中間）に設定した。励起偏光をスタティックに設定し、発光偏光をダイナミックに設定した。ｃｙ３Ｂ−ＧＡについて、５３０ｎｍでの励起フィルタおよび５８０ｎｍでの発光フィルタを、５６１ｎｍのダイクロイックミラーと共に使用した。全ＦＰ値を、ミリ偏光（ｍＰ）単位で示した。ｍＰ値を、式ｍＰ＝１０００×［（ＩＳ−ＩＳＢ）−（ＩＰ−ＩＰＢ）］／［（ＩＳ−ＩＳＢ）＋（ＩＰ−ＩＰＢ）］（式中、ＩＳは平行発光強度の測定値であり、ＩＰは垂直発光強度サンプルの測定値であり、ＩＳＢおよびＩＳＰは、対応するバックグラウンドの測定値（緩衝液）である）を使用して計算した。全蛍光を、２×ＩＰ＋ＩＳとして決定した。
【０６２６】
ネイティブゲル電気泳動。細胞に４２℃で４５分間熱ショックを与えるか、表示のインヒビターまたはビヒクルで３時間処置し、その後に２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ（ｐＨ７．９）、０．４２Ｍ  ＮａＣｌ、１．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、２５％グリセロール緩衝液に溶解した。７５μｇのタンパク質サンプルを、予備泳動した未変性勾配ポリアクリルアミドゲル（４％濃縮用ゲル、５〜２０％分離ゲル）にロードし、５０ｍＭ
Ｔｒｉｓ（ｐＨ８．０）、０．３８Ｍグリシン電気泳動緩衝液中にて４℃で一晩分離した。ゲルを、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ泳動緩衝液中にて室温で１５分間予め平衡化した。次いで、タンパク質を、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、３８０ｍＭグリシン、０．１％ＳＤＳ、２０％メタノール緩衝液中でニトロセルロース膜上に４℃で電気泳動的に移し、ＨＳＦ−１についてブロッティングした。
【０６２７】
免疫沈降。細胞を回収し、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、２５ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％ＮＰ−４０緩衝液に溶解した。各サンプルは、５００μｇの総タンパク質を含んでいた。適切な抗体（Ｈｓｐ７０用のＢＢ７０およびＨｓｐ９０用のＨ９０１０）（５μｌ）または正常ＩｇＧ（５μｌ）（ネガティブコントロールとして）をプロテインＧアガロースビーズ（３０μｌ）（Ｕｐｓｔａｔｅ）と共に各サンプルに添加し、４℃で一晩インキュベートした。サンプルを溶解緩衝液で５回洗浄し、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ上にアプライし、その後に標準的なウェスタンブロッティング手順を行った。
【０６２８】
化学沈殿。タンパク質溶解物を、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、２５ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％ＮＰ−４０溶解緩衝液を使用して調製した。ストレプトアビジンアガロースビーズ（５０μｌ）（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を溶解緩衝液で３回洗浄し、表示濃度のＹＫ５５を添加し、複合体を４℃で１時間インキュベートした。緩衝液での３回の洗浄の際、ビーズを、表示の総細胞タンパク質を含む緩衝液に添加した。サンプルを４℃で一晩インキュベートし、溶解緩衝液で５回洗浄し、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにアプライした。
【０６２９】
Ｈｓｐ７０枯渇。４μｌのＢＢ７０抗Ｈｓｐ７０抗体または正常マウスＩｇＧおよび３０μｌのプロテインＧアガロース懸濁液を、２００μｇのＭＤＡ−ＭＢ−４６８タンパク質細胞溶解物を含む２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、２５ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％ＮＰ−４０緩衝液に添加した。４℃で３時間のインキュベーション後、サンプルを遠心分離し、上清を回収し、ビーズペレットを破棄した。この手順を２回繰り返した。ＹＫ５５−ビーズ（５０μｌストレプトアビジンビーズに添加した１００μＭのＹＫ５５）を前述
のように調製し、上清に添加し、４℃で一晩インキュベートした。ビーズを、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、２５ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％ＮＰ−４０緩衝液で５回洗浄し、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにアプライした。
【０６３０】
共有結合。Ｋ５６２細胞を、表示量のＹＫ５５で表示の時間処置した。細胞を回収し、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、２５ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％ＮＰ−４０緩衝液に溶解した。細胞抽出物（５００μｇ）を含む１００μｌの溶解緩衝液を、ストレプトアビジンアガロースビーズと４℃で１時間インキュベートした。サンプルを溶解緩衝液または高塩（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、１Ｍ  ＮａＣｌ、０．１％ＮＰ−４０）緩衝液で５回洗浄し、ＳＤＳ−ＰＡＧＥに供した。ゲルを製造者の説明書（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に従って銀染色するか、タンパク質をニトロセルロース膜上に移し、その後に免疫ブロッティングを行った。
【０６３１】
不可逆性試験プロトコール。ＭＤＡ−ＭＢ−４６８細胞を、６ウェルプレート中で約８０％コンフルエンシーまで成長させた。細胞組をＹＫ５（１０μＭ）またはビヒクル（ＤＭＳＯ）で２時間処置した。次いで、１つのＹＫ５処置細胞組を１００ｎｇ／ｍＬ  ＩＦＮγで３０分間刺激し、ウェスタンブロッティングのために抽出物を作製した。他の細胞組を、化合物を含まない加温した培地で洗浄し、２時間インキュベートし、再度洗浄し、さらに２時間インキュベートし、再度洗浄し、次いで、さらに４時間インキュベートした。次いで、細胞組をＩＦＮγで刺激し、第１の細胞組と同様に抽出物を作製した。
【０６３２】
シクロヘキシミド処置。細胞を、ビヒクルまたは本発明の主題化合物を添加したシクロヘキシミド（最終濃度１００μｇ／ｍｌ）で表示の時間処置した。上記のように細胞を溶解し、得られたサンプルをウェスタンブロッティングによって分析した。
【０６３３】
細胞を、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、および１％ＮＰ−４０溶解緩衝液に溶解した。ＮＰ−４０不溶性画分を５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）および２％ＳＤＳに溶解し、１５分間ボイルした。タンパク質をＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分離し、その後に標準的なウェスタンブロッティング手順を行った。ブロットを、高感度化学発光検出システム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用したオートラジオグラフィによって視覚化した。
【０６３４】
デンシトメトリー。ゲルをＡｄｏｂｅ  Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ７．０．１でスキャンし、定量的濃度分析を、Ｕｎ−Ｓｃａｎ−Ｉｔ  ５．１ソフトウェア（Ｓｉｌｋ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｏｒｅｍ、ＵＴ）を使用して行った。
【０６３５】
キナーゼスクリーニング。ほとんどのアッセイのために、キナーゼタグ化Ｔ７ファージ株を、２４ウェルブロック中のＢＬ２１株由来の大腸菌宿主内で並行して成長させた。大腸菌を対数期まで成長させ、凍結ストック由来のＴ７ファージを感染させ（感染多重度＝０．４）、溶解するまで（９０〜１５０分間）３２℃で震盪しながらインキュベートした。溶解物を遠心分離し（６，０００×ｇ）、濾過して（０．２μｍ）、細胞片を除去した。残存キナーゼをＨＥＫ−２９３細胞中で産生させ、その後にｑＰＣＲ検出のためにＤＮＡでタグ化した。ストレプトアビジンコーティングした磁性ビーズを、ビオチン化小分子リガンドにて室温で３０分間処置して、キナーゼアッセイ用のアフィニティ樹脂を生成した。リガンド化ビーズを過剰なビオチンでブロッキングし、ブロッキング緩衝液（ＳｅａＢｌｏｃｋ（Ｐｉｅｒｃｅ）、１％  ＢＳＡ、０．０５％ツウィーン２０、１ｍＭ  ＤＴＴ）で洗浄して、非結合リガンドを除去し、非特異的ファージ結合を減少させた。結合反応を、キナーゼ、リガンド化アフィニティビーズ、および試験化合物を１×結合緩衝液（２０％ＳｅａＢｌｏｃｋ、０．１７×ＰＢＳ、０．０５％ツウィーン２０、６ｍＭ  ＤＴＴ）中で合わせることによってアセンブリした。試験化合物を１００％ＤＭＳＯの４０倍
ストックとして調製し、アッセイ系に直接添加することによって希釈した。全反応を、ポリプロピレン３８４ウェルプレート中にて最終体積０．０４ｍｌで行った。アッセイプレートを、震盪しながら室温で１時間インキュベートし、アフィニティビーズを、洗浄緩衝液（１×ＰＢＳ、０．０５％ツウィーン２０）で洗浄した。次いで、ビーズを、溶離緩衝液（１×ＰＢＳ、０．０５％ツウィーン２０、０．５μｍ非ビオチン化アフィニティリガンド）に再懸濁し、震盪しながら室温で３０分間インキュベートした。溶離液中のキナーゼ濃度を、ｑＰＣＲによって測定した。ＫＩＮＯＭＥｓｃａｎの選択性スコア（Ｓ）は、化合物選択性の定量的基準である。このスコアは、化合物に結合するキナーゼの数を異なる試験キナーゼ（変異改変体を除く）の総数で割ることによって計算する。ＴＲＥＥｓｐｏｔ（商標）は、ＫＩＮＯＭＥｓｃａｎによって開発された専売のデータ視覚化ソフトウェアツールである。結合することが見出されたキナーゼを、赤円でマークする。円が大きいほどより高い親和性結合を示す。キナーゼ樹状図を改造した。これは、Ｓｃｉｅｎｃｅ
ａｎｄ  Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｉｎｃ．の許可を得て再現している。
【０６３６】
成長阻害アッセイ。インヒビターの抗増殖効果を、色素アラマーブルーを使用して評価した。この試薬は、細胞培養物における細胞生存の迅速な客観的尺度を提供し、細胞の代謝能（細胞生存の指標）を測定するための指示染料レサズリンを使用する。簡潔に述べれば、細胞をＣｏｓｔａｒ９６ウェルプレート上にプレートした。結合細胞（ＳＫＢｒ３、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＬＮＣａＰ、ＭＲＣ５など）については、８，０００細胞／ウェルを使用した。浮遊細胞（ＭＯＬＭ−１３、Ｋａｓｕｍｉ−１、ＯＣＩ−Ｌｙ７、ＰＢＬなど）については、２０，０００細胞／ウェルをプレートした。細胞を、薬物処置前に３７℃で２４時間インキュベートした。薬物を表示濃度にて三連で添加し、プレートを７２時間インキュベートした。アラマーブルー（４４０μＭ）を添加し、６時間後にＡｎａｌｙｓｔ  ＧＴ（蛍光強度モード、励起５３０ｎｍ、発光５８０ｎｍ、５６０ｎｍダイクロイックミラーを使用）を使用してプレートを読み取った。結果を、Ｓｏｆｔｍａｘ  Ｐｒｏソフトウェアを使用して分析した。細胞増殖阻害パーセンテージを、処置細胞から得た蛍光読み取りとコントロール細胞（初期細胞集団（時間０）を占める）から得た蛍光読み取りとの比較によって計算した。ＩＣ５０を、細胞成長を５０％阻害する薬物濃度として計算した。
【０６３７】
アポトーシス−アクリジンオレンジ／臭化エチジウム。アポトーシスを、アクリジンオレンジ／臭化エチジウム（ＡＯ／ＥＢ）二重染色を使用して決定した。アクリジンオレンジは生細胞および非生細胞の両方によって取り込まれ、二本鎖核酸（ＤＮＡ）に挿入された場合に緑色蛍光を発するか、一本鎖核酸（ＲＮＡ）に結合した場合に赤色蛍光を発する。臭化エチジウムは非生細胞のみによって取り込まれ、ＤＮＡへの挿入によって赤色蛍光を発する。（１）生細胞は、組織化された構造を有する均一の緑色の核を有する。（２）初期アポトーシス細胞（依然としてインタクトな膜を有するが、ＤＮＡ切断を受けはじめている）は、緑色の核を有するが、核周囲のクロマチン凝縮が鮮緑色の斑点または断片として認められる。（３）後期アポトーシス細胞は、凝縮または断片化したクロマチンを有する橙色から赤色の核を有する。（４）壊死細胞は、組織化された構造を有する不均一な橙色から赤色の核を有する。簡潔に述べれば、細胞を２０ｍｍ  Ｆａｌｃｏｎプレート上にプレートし、さらに２４時間インキュベートした。薬物を表示濃度で２４時間または４８時間添加し、細胞をＰＢＳで洗浄し、トリプシン処理した。アクリジンオレンジおよび臭化エチジウムでの染色後、細胞を蛍光顕微鏡（Ｚｅｉｓｓ  Ａｘｉｏｖｅｒｔ  ４０  ＣＦＬ）で視覚化し、計数した。アポトーシス細胞の割合を、各群で計数した２００〜３００細胞から決定した。
【０６３８】
ヨウ化プロピジウム細胞染色およびフローサイトメトリー分析。断片化ＤＮＡ（アポトーシスを示す）を有する細胞の存在を、２Ｎ未満のＤＮＡを含有する細胞（ｓｕｂ−Ｇ１
）として検出することもできる。ＤＮＡ含量分析のために、細胞を氷冷ＰＢＳで洗浄し、７０％エタノール中にて４℃で１時間固定した。固定した細胞を１，２００ｒｐｍで５分間遠心分離し、５０μｇ／ｍＬヨウ化プロピジウム（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）および５０μｇ／ｍＬ無ＤＮアーゼリボヌクレアーゼＡ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を含むＰＢＳ中での室温で１時間のインキュベーションによって染色した。ＤＮＡ含量を、ＦＡＣＳｃａｎ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）におけるフローサイトメトリーによって分析した。Ｃｅｌｌ  Ｑｕｅｓｔ  Ｐｒｏソフトウェア（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）を使用して少なくとも１０，０００細胞からデータを収集し、ＦｌｏｗＪｏ（Ａｓｈｌａｎｄ、ＯＲ）で分析した。
【０６３９】
パルス−チェイス。ＭＤＡ−ＭＢ−４６８細胞を、１００ｎｇ／ｍｌ  ＩＦＮγで３０分間予め処置し、次いで、１０μＭ  ＹＫ５を３０分間添加し、その後に５００ｎＭスタウロスポリンまたは１ｍＭ  Ｎａ３ＶＯ４処置を行った。細胞を表示の時間で回収し、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、および１％ＮＰ−４０溶解緩衝液に溶解し、ウェスタンブロッティング手順に供した。
【０６４０】
活性化ＳＴＡＴ１  ＤＮＡ結合アッセイ。ＳＴＡＴ１のＤＮＡ結合能を、製造者の説明書にしたがってＥＬＩＳＡベースのアッセイ（ＴｒａｎｓＡＭ，Ａｃｔｉｖｅ  Ｍｏｔｉｆ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）によってアッセイした。簡潔に述べれば、５×１０６個のＭＤＡ−ＭＢ−４６８細胞を、ＩＦＮγ（１００ｎｇ／ｍｌ）、ＹＫ５（１０μＭ）、またはＩＦＮγ（１００ｎｇ／ｍｌ）とＹＫ５との組み合わせ（１、５、および１０μＭ）で処置した。１０μｇの細胞溶解物を、予備吸着させたＳＴＡＴコンセンサスオリゴヌクレオチド（５’−ＴＴＣＣＣＧＧＡＡ−３’）を含むウェルに添加した。ＩＦＮγ処置細胞について、アッセイを、野生型または変異したＳＴＡＴコンセンサス結合部位のいずれかを含む２０ｐｍｏｌの競合物オリゴヌクレオチドの非存在下または存在下で行った。インターフェロン処置したＨｅＬａ細胞（５μｇ／ウェル）を、アッセイのためのポジティブコントロールとして使用した。インキュベーションおよび洗浄後、ウサギポリクローナル抗ＳＴＡＴ１α抗体（１：１０００、Ａｃｔｉｖｅ  Ｍｏｔｉｆ）を各ウェルに添加し、その後にＨＰＲ−抗ウサギ二次抗体（１：１０００、Ａｃｔｉｖｅ  Ｍｏｔｉｆ）を添加した。ＨＲＰ基質の添加後、参照波長６５５ｎｍを使用して４５０ｎｍでの吸光度を読み取った（Ｓｙｎｅｒｇｙ４，Ｂｉｏｔｅｋ，Ｗｉｎｏｏｓｋｉ，ＶＴ）。このアッセイでは、吸光度は、サンプル中のＤＮＡ結合転写因子の存在量に正比例する。四連で実験を行った。結果を、ＳＥＭを用いた平均吸光度値として示した。Ｐ値を、両側Ｔ検定によって得た。
【０６４１】
免疫蛍光顕微鏡法。ＭＤＡ−ＭＢ−４６８細胞を１００ｎｇ／ｍｌ  ＩＦＮγで３０分間処置し、次いで、本発明の主題の化合物をさらに３０分間添加した。細胞をパラホルムアルデヒド（４％）中にて室温で１５分間固定し、その後に１×ＴＢＳ（３〜５分間）で洗浄した。次いで、細胞を、０．１％水素化ホウ素ナトリウムを含む１×ＴＢＳで５分間クエンチし、上述のようにリンスし、その後に室温の５．５％正常ウシ血清および０．１％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００を含むブロック液とインキュベートして、非特異的結合を減少させた。次いで、細胞を、一次抗体（抗ホスホＳＴＡＴ１（Ｙ７０１）；Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）と室温で１時間インキュベートし、その後にリンスし、ＦＩＴＣ標識したヤギ抗ウサギ二次抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｍａｒｉｌｌｏ，ＣＡ）とさらにインキュベートした。核染色用の４’，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール（ＤＡＰＩ）を含むＶｅｃｔａｓｈｉｅｌｄ（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ，ＣＡ）中にスライドをマウントした。ＤＡＰＩおよびフルオレセインイソチオシアナート（ＦＩＴＣ）フィルタセットを使用し、対物レンズを４０倍に設定したＺｅｉｓｓ  Ａｘｉｏｖｅｒｔ  ２００Ｍ倒立顕微鏡を用いて蛍光をモニタリングした。
【０６４２】
細胞浸潤アッセイ。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の浸潤能を、ボイデンチャンバーマトリゲル浸潤アッセイを使用して試験した。５×１０５細胞／ウェルで６ウェルプレート（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ，ＮＪ）にプレートしたＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を、ＤＭＳＯおよびＹＫ５（１μＭ）で２４時間前処置した。細胞生存を、トリパンブルー排除によって評価した。まとめると、細胞をトリパンブルーで染色し、血球計を用いて手作業で計数した。生細胞（トリパンブルーを排除する細胞である）を無血清ＤＭＥＭで３回洗浄し、０．３ｍｌの無血清ＤＭＥＭに再懸濁した。同数の生細胞（２×１０５）をボイデンチャンバーの上の区画に添加し、ＤＭＥＭ中に１０％ＦＢＳを含む処置培地を下のチャンバーに添加した。ボイデンチャンバーは、マトリゲルトランスウェル（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）でコーティングした８μｍ  ＰＥＴトラックエッチドメンブレンを含んでいた。細胞を３７℃で２０時間インキュベートした後、膜の下側に浸潤した細胞を１００％メタノールで２分間固定し、０．５％クリスタルバイオレット中で２分間染色し、水でリンスし、明視野顕微鏡下で試験した。膜あたり１０視野中の細胞を、１００倍対物レンズで計数した。
【０６４３】
カスパーゼ３／７活性アポトーシスアッセイ。ブラック９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  ３６０３）上に、５０ｕｌの培地を含むバックグラウンドカラム（細胞なし）以外に細胞をプレートし、インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ２）中に静置して細胞を結合させ、平衡化した。化合物を含む５０μｌの培地を、表示濃度範囲で表示の時間添加した。Ｚ−ＤＥＶＤ−Ｒ１１０（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ  Ｒ２２１２０）を含む１００μＬのアッセイ緩衝液（１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、２ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１％  ＣＨＡＰＳ、０．１ｍｇ／ｍｌ  ＰＭＳＦ、完全プロテアーゼインヒビターミックス（Ｒｏｃｈｅ  １  ６９７  ４９８））を、各ウェルに添加した。インキュベーション後、Ａｎａｌｙｓｔ（４８５での発光および５３０での励起）を使用して蛍光強度を読み取った。
【０６４４】
化学沈殿およびプロテオミクス。タンパク質溶解物を、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、２５ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％ＮＰ−４０溶解緩衝液を使用して調製した。ストレプトアビジンアガロース（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を溶解緩衝液で３回洗浄し、ＹＫ５５（１００μＭ）を添加し、複合体を４℃で１時間インキュベートした。緩衝液での３回の洗浄の際、ビーズを、５００μｇの細胞タンパク質を含む緩衝液に添加した。サンプルを４℃で一晩インキュベートし、溶解緩衝液で５回洗浄し、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにアプライした。ゲルを、製造者の説明書にしたがってＳｉｌｖｅｒＱｕｅｓｔ銀染色キット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）によって染色した。タンパク質バンドを切り出し、水での洗浄後、ゲルスライスを１ｍｍ３の小片に切断し、１０ｍＭ  ＤＴＴを含む１００ｍＭ
ＮＨ４ＨＣＯ３にて５６℃で３０分間還元し、５５ｍＭヨードアセトアミド溶液を含む１００ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３で暗所にて室温で２０分間アルキル化し、次いで、トリプシン（１３ｎｇ／μｌ）で３７℃にて一晩消化した。ペプチドを１００〜２００μｌの６６．６％アセトニトリル／５％ギ酸で抽出し、合わせたペプチド抽出物の体積を、ＭＳ分析の前にＳｐｅｅｄＶａｃにて約１０μｌに減少させた。Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  ｆａｃｉｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｗｅｉｌｌ  Ｃｏｒｎｅｌｌ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｃｏｌｌｅｇｅ（ＷＣＭＣ）での液体クロマトグラフィ−タンデム質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）を、ＸＣＴプラスイオントラップ質量分析計（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｐａｌｏ
Ａｌｔｏ，ＣＡ）に接続された１１００シリーズＬＣを使用して行った。システムは、Ｃ１８富化カラム、Ｃ１８分離カラム、およびナノスプレーエミッターを統合するＡｇｉｌｅｎｔ  Ｃｈｉｐ  Ｃｕｂｅインターフェースおよびシリコンウエハー「チップカラム」を備えている。ゲル内のタンパク質消化物をロードし、流速４μＬ／分で富化カラムを脱塩し、次いで、４０ｍｍ×７５μＭ  ＺＯＲＢＡＸ３００  Ｃ１８カラム（Ａｇｉｌｅｎｔ）にて流速０．３５μｌ／分で分離した。ＬＣ勾配は、３→４５％溶媒Ｂで２５分間
、その後４５→９０％溶媒Ｂで５分間であった。移動相の溶媒Ａは０．１％ギ酸を含む３％ＡＣＮであり、溶媒Ｂは０．１％ギ酸を含む９０％ＡＣＮである。前駆体ＭＳスキャン由来の４つの最強のイオンのマススペクトルを、自動化データ依存ＭＳ／ＭＳを使用して陽イオンモードで得た。ＳＰＥＣＴＲＵＭ  ＭＩＬＬソフトウェア（Ａｇｉｌｅｎｔ）を使用してＬＣ−ＭＳ／ＭＳの生データを処理し、タンパク質同定のためにタンパク質データベースを検索した。
【０６４５】
化学沈殿およびＭＳ分析：１：Ｎａｎｏ−ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ。Ｋ５６２細胞を、１００μＭ  ＹＫ５５またはＤ−ビオチンで４時間処置した。細胞を回収し、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、２５ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％ＮＰ−４０緩衝液に溶解した。ＹＫ５５処置した細胞抽出物（５００μｇ）を含む１００μｌの溶解緩衝液を、ストレプトアビジンアガロースビーズと４℃で１時間インキュベートした。Ｄ−ビオチン処置した細胞抽出物（５００μｇ）を、プロテインＧアガロースビーズ（３０μｌ）（Ｕｐｓｔａｔｅ）上に結合させたＢＢ７０抗体（４μｌ）と４℃で１時間インキュベートした。ビーズを高塩緩衝液（１Ｍ  ＮａＣｌ）で洗浄し、２％ＳＤＳ中でのボイルによってタンパク質を溶離し、変性ゲル上で分離し、製造者の説明書（Ｂｉｏｒａｄ）に従ってクーマシー染色した。ＹＫ５５−薬物処置したプルダウンおよびＢＢ７０プルダウン由来のゲル分離したタンパク質をトリプシンで消化し、システイン含有ペプチドを、記載のようにβ−メルカプトエタノールおよびアクリルアミドを使用して還元およびアルキル化した（１０）。ゲル中のトリプシン消化物を、エッペンドルフゲルローディングチップ中に充填した総容積２μＬのＰｏｒｏｓ５０Ｒ２（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ−‘ＡＢ’）逆相ビーズでのマイクロクリーンアップ手順に供し、溶離液を０．１％ギ酸で希釈した。バッチ精製プールの分析を、ナノスプレーイオン源を備えたＯｒｂｉＴｒａｐ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＬＴＱ  ＸＬ  Ｌｉｎｅａｒ  Ｉｏｎ  Ｔｒａｐ）質量分析計を使用して行った。ペプチド混合物（２０μＬ中）を、捕捉ガードカラム（ＬＣ  Ｐａｃｋｉｎｇｓの０．３×５ｍｍ  ＰｅｐＭａｐＣ１８  １００カートリッジ）上に、Ｅｋｓｉｇｅｎｔ  ｎａｎｏ  ＭＤＬＣシステム（Ｅｋｓｉｇｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ）を使用して流速２０μＬ／分でロードする。洗浄後、ガードカラムを逆流させ、ペプチドを５−４５％ＭｅＣＮ勾配（０．１％ＦＡ中）にて８５分間にわたって流速２００ｎＬ／分で７５ミクロン×１５ｃｍ溶融石英キャピラリーＰｅｐＭａｐＣ１８カラム（ＬＣ  Ｐａｃｋｉｎｇｓ）で溶離した。溶離液を、７５ミクロン（開口部１０ミクロンを備える）の溶融石英ナノエレクトロスプレーニードル（Ｎｅｗ  Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ）に進める。エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）ニードル電圧を、約１８００Ｖに設定した。質量分析器を自動で操作した（データ依存ＭＳ／ＭＳ取得モード）。衝突エネルギーを、ＭＳ／ＭＳのために選択した前駆イオンのｍ／ｚ値に従って自動で調整した。ＬＣ−ＭＳ／ＭＳデータ由来の初期タンパク質同定を、Ｍａｓｃｏｔ検索エンジン（Ｍａｔｒｉｘ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，バージョン２．２．０４；ｗｗｗ．ｍａｔｒｉｘｓｃｉｅｎｃｅ．ｃｏｍ）ならびにＮＣＢＩデータベース（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｌｉｂｒａｒｙ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ＮＩＨ）およびＩＰＩ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｉｎｄｅｘ，ＥＢＩ，Ｈｉｎｘｔｏｎ，ＵＫ）データベースを使用して行った。２つの喪失したトリプシン切断部位が認められ（前駆イオンの質量許容範囲＝１０ｐｐｍ、フラグメントイオンの質量許容範囲＝０．���Ｄａ）、Ｍｅｔ−オキシド、Ｃｙｓ−アクリルアミド、およびＮ末端アセチル化にタンパク質修飾が認められた。ＭｕｄＰｉｔスコアリングを、典型的には、「ｒｅｑｕｉｒｅ  ｂｏｌｄ  ｒｅｄ」を選択し、且つ有意閾値スコアｐ＜０．０１を使用して適用した。同定した全タンパク質についての固有のペプチド数（または「スペクトル数」）および配列包括度を、さらなる分析のためにＥｘｃｅｌにエクスポートした。
【０６４６】
ＭＡＬＤＩ−ｒｅＴＯＦ−ＭＳ／ＭＳ：ゲル中の消化物から得たペプチドプールを、ＢＲＵＫＥＲ  ＵｌｔｒａＦｌｅｘ  ＴＯＦ／ＴＯＦ装置（Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄａｌｔｏｎｉ
ｃｓ；Ｂｒｅｍｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用してマトリックス支援レーザー脱離／イオン化リフレクトロン飛行時間型（ＭＡＬＤＩ−ｒｅＴＯＦ）ＭＳによって分析した。選択した実験質量（ｍ／ｚ）により、非冗長性タンパク質データベース（「ＮＲ」；エントリー数約２２３，６９５；Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ；Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）のヒトセグメントを、Ｍａｓｃｏｔペプチド質量フィンガープリント（ＰＭＦ）プログラムのバージョン２．２．０４（Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）用）（ｗｗｗ．ｍａｔｒｉｘｓｃｉｅｎｃｅ．ｃｏｍ）（質量精度の制限３５ｐｐｍ超およびペプチドあたり最大で２つの切断部位喪失を許容を使用）を使用して検索した。これは、タンパク質の同一性を確認し、修飾（システインアクリルアミド誘導体化）ペプチドのトリプシンペプチドマップ間の相違を示すのに役立った。異なるピークｍ／ｚ値を同定したタンパク質に適合させ、それにより、８２０．３４ダルトン（＋ＹＫ５５−薬物）および５９４．２６ダルトン（＋ビオチン基を持たないＹＫ５５−薬物）での薬物誘導体化群の存在が認められた。実験値に適合する計算上のモノアイソトピックフラグメントを使用して認められたペプチドを確認するために、選択したペプチドの質量分析による配列決定を、「ＬＩＦＴ」モードでＵｌｔｒａＦｌｅｘ装置を使用した同一の調製サンプルに対するＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ／ＴＯＦ（ＭＳ／ＭＳ）分析によって行った。フラグメントイオンスペクトルにより、ＭＡＳＣＯＴ  ＭＳ／ＭＳイオン検索プログラム（Ｍａｔｒｉｘ  Ｓｃｉｅｎｃｅ）およびｈｔｔｐ：／／ｄｂ．ｓｙｓｔｅｍｓｂｉｏｌｏｇｙ．ｎｅｔ：８０８０／ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓＴｏｏｌｋｉｔ／ＦｒａｇＩｏｎＳｅｒｖｌｅｔ．ｈｔｍｌから利用可能なオンラインプロテオミクスツールキットを使用してＮＲを検索した。結果を手作業で確認した。このようにして得た任意の仮の結果を、予想されるトリプシンペプチドのコンピュータで作成したフラグメントイオンシリーズの実験ＭＳ／ＭＳデータとの比較によって確証した。
【０６４７】
腫瘍異種移植片。４〜６週齢のｎｕ／ｎｕ胸腺欠損雌マウスを、Ｔａｃｏｎｉｃ（Ｆａｒｍｓ  ＩＮＣ）から入手した。Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ
ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅで承認されたプロトコールの下で実験を行い、研究動物の適切且つヒトへの使用のための施設のガイドラインに従った。ＭＤＡ−ＭＢ−４６８（１×１０７細胞）を、２０ゲージ針を使用してマウスの右脇腹に皮下移植し、成長させた。投与前に、ＹＫ５  ＨＣｌ溶液を滅菌水で処方した。マウスに、２０μｌのＹＫ５溶液を隔日スケジュールで腫瘍内（ｉ．ｔ．）注射した。ＹＫ５の注射濃度を腫瘍体積と調和させて評価し、実験期間を通して１０μＭに保持した。全マウスに、治療中にオーグメンチン（アモキシシリン／クラブラン酸カリウム；ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ）を含む飲料水を投与した。マウスをＣＯ２安楽死によって屠殺した。体積１００〜１５０ｍｍ３に到達したＭＤＡ−ＭＢ−４６８腫瘍を保有するマウス（ｎ＝５）を、隔日に腫瘍内（ｉ．ｔ．）処置した。腫瘍体積をバーニアカリパスでの測定によって決定し、腫瘍体積を、その長さ×幅２×０．４の積として計算した。腫瘍体積を、表示した日にマウス群について示した腫瘍体積の中央値±ｓ．ｄ．として示した。腫瘍成長阻害率（％）値を、研究最終日に薬物処置マウスのビヒクル処置マウスとの比較のために測定し、１００×｛１−［（処置最終日−処置１日目）／（コントロール最終日−コントロール１日目）］｝で計算する。
【０６４８】
統計学。Ｗデータを、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（バージョン４；ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）で実行した対応のない両側ｔ検定によって分析した。０．０５未満のＰ値を、有意と見なした。他で示さない限り、データを、二連または三連の実験の平均±ＳＤとして示す。エラーバーは、平均のＳＤを示す。１つのパネルを示す場合、データは、２つの個別の実験の代表である。
【０６４９】
実施例１３：患者の処置
患者は乳癌を罹患している。薬学的有効量の化合物ＹＫ５または関連する本発明の主題
の化合物を含む薬学的組成物を、患者に投与する。患者は乳癌が改善するか回復し、そして／または乳癌の増殖が遅延および／または阻害されると予想される。
【０６５０】
実施例１４：患者の処置
患者は白血病を罹患している。薬学的有効量の本発明の主題の化合物を含む薬学的組成物を患者に投与する。患者は白血病が改善するか回復し、そして／または白血病の拡大が遅延および／または阻害されると予想される。
【０６５１】
明確にするために個別の実施形態に記載した本明細書中に記載の主題の一定の特徴を単一の実施形態と組み合わせて提供することもできると認識される。逆に、簡潔にするために単一の実施形態に記載した本明細書中に記載の主題の種々の特徴を個別または任意の適切なサブコンビネーションで提供することもできる。
【０６５２】
本発明の主題を記載しているが、多くの方法で修正または変更することができることが明らかであろう。かかる修正形態および変更形態は、本発明の主題の精神および範囲から逸脱していると見なされず、全てのかかる修正形態および変更形態は、以下に記載の主題の範囲内に含まれることが意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【配列表】
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【外国語明細書】
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