(57)【要約】【課題】従来よりも優れた日焼け（サンタン）、シミ、そばかす、くすみ等に対して予防または改善作用を有する美肌剤を提供する。【解決手段】美肌剤は、紫外線による細胞傷害に対する保護作用を有するイワベンケイ属植物抽出物を必須成分とし、チロシナーゼ活性阻害剤であるＬ−システインまたはアスコルビン酸を配合することによりチロシナーゼ活性阻害作用を増強できるものである。イワベンケイ属植物は中でも、紅景天（Ｒｈｏｄｉｏｌａ  ｒｏｓｅａ）を使用するのが好ましい。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
紫外線による細胞傷害に対する保護作用を有するイワベンケイ属植物抽出物を含む美肌剤。
【請求項２】
Ｌ−システインまたはアスコルビン酸から選択されるチロシナーゼ活性阻害剤の内少なくとも１成分を含む請求項１記載の美肌剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、美肌剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は紫外線暴露により、日焼け（サンタン）、シミ、そばかす、くすみ等の色素沈着が引き起こされる。この色素沈着はメラノサイトおよびメラニンの増加、メラニン顆粒の授受障害、排泄障害が発生機序として挙げられている。また、紫外線暴露により皮膚組織内に活性酸素が発生し、細胞傷害を起こすことでしわ、たるみなどの皮膚老化の原因となることが知られている。
【０００３】
このような紫外線暴露による皮膚障害を改善する美肌剤が種々開発されている。色素沈着症状を抑制する方法としては、メラニン産生の抑制、特にメラニン産生に関わる酵素チロシナーゼの活性を抑制する方法が検討されている。例えば、コウジ酸、エラグ酸、アルブチン、ハイドロキノンなどがチロシナーゼ活性阻害剤としてあげられる。
【０００４】
また、植物由来のマストツリー抽出物はメラニン産生抑制による色素沈着抑制作用のみならず、フリーラジカル捕捉能を有し皮膚老化、皮膚疾患を予防することが開示されている（特許文献１）。
【０００５】
色素沈着抑制剤は、単独よりも複数の成分を組み合わせることで活性が増強する可能性が示唆されている。例えば、プロアントシアニジンもしくは水溶性ルチンは、Ｌ−システインをはじめとするチロシナーゼ活性阻害剤と併用することで、チロシナーゼ活性阻害作用が増強する（特許文献２、３）。
【０００６】
本発明者は、ベンケイソウ科イワベンケイ属植物の紅景天から製造した抽出物について、紫外線照射マウスへの経口投与により色素沈着抑制作用を有することを明らかにしている（特許文献４、非特許文献１、２）。また、イワベンケイ属植物はチロシナーゼ活性阻害作用を有している（特許文献５）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２０１１−３７７６４号公報
【特許文献２】特許第３４６０１００号
【特許文献３】特許第３８０５７９８号
【特許文献４】特開２００８−１３４４０号公報
【特許文献５】特許第３６５７７８９号
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】ＦＯＯＤ  Ｓｔｙｌｅ  ２１  ２００８  Ｖｏｌ．１２  Ｎｏ．２  １−３
【非特許文献２】ＣＯＳＭＥＴＩＣ  ＳＴＡＧＥ  ２００８  Ｖｏｌ．３  Ｎｏ．２  ５１−５４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
上述したように、イワベンケイ属植物抽出物は、マウスにおいて紫外線により誘発される色素沈着に対して抑制作用を有することが見出されていたが、紫外線非照射群と同様の結果となるほどの抑制作用はなく、その作用は必ずしも十分とはいえなかった。
また、色素沈着抑制作用は複数の成分を配合することにより作用が増強されることが知られているが、イワベンケイ属植物抽出物とほかの成分を組み合わせて色素沈着抑制作用の増強を試みたことはなかった。加えて、イワベンケイ属植物抽出物が色素沈着抑制作用以外に紫外線による皮膚老化に対する予防作用を有しているか調べたこともなかった。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者は前記の目的を達成するために鋭意研究を重ねた結果、イワベンケイ属植物抽出物とチロシナーゼ活性阻害剤の１種又は２種を併用すれば、チロシナーゼ活性阻害作用が相加もしくは相乗的に増強することを見出した。また、イワベンケイ属植物抽出物が紫外線による色素沈着に対する抑制作用に加えて、細胞傷害に対する保護作用を有することを見出し、本発明を完成した。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によって、色素沈着抑制作用に加えて、紫外線による皮膚老化に対して予防または改善効果が期待できる。また、チロシナーゼ活性阻害剤を１種または２種配合することでイワベンケイ属植物抽出物単独よりも、優れた美白作用を有する美肌剤が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】表皮角化細胞の生細胞率を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
［イワベンケイ属植物抽出物］
ベンケイソウ科イワベンケイ属に属する植物としては、経口投与で美白作用を有する活性成分を含むものであればいかなる種類のものであってもよく、たとえば紅景天（Ｒｈｏｄｉｏｌａ  ｒｏｓｅａ）、高山紅景天（Ｒ．ｓａｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓ）、大花紅景天（Ｒ．ｃｒｅｎｕｌａｔａ）、四裂紅景天（Ｒ．ｑｕａｄｒｉｆｉｄａ）、大紫紅景天（Ｒ．ａｔｒｏｐｕｒｐｕｒｅａ）、雲南紅景天（Ｒ．ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ）、長園紅景天（Ｒ．ｆｏｒｒｅｓｔｉｉ）、紫緑紅景天（Ｒ．ｐｕｒｐｕｒｅｏｖｉｒｉｄｉｓ）、長鞭紅景天（Ｒ．ｇｅｌｉｄａ）、条葉紅景天（Ｒ．ｌｉｎｅａｒｉｆｏｌｉａ）、羽裂紅景天（Ｒ．ｐｉｎｎａｔｉｆｉｄａ）、浅緑紅景天（Ｒ．ｖｉｒｉｄｕｌａ）、異歯紅景天（Ｒ．ｈｅｔｅｒｏｄｏｎｔａ）、謝氏紅景天（Ｒ．ｓｅｍｅｎｏｖｉｉ）、黄萼紅景天（Ｒ．ｌｉｔｖｉｎｏｖｉｉ）、優美紅景天（Ｒ．ｃｏｃｃｉｎｅａ）等の１種または２種以上を使用することができ、中でも紅景天（Ｒ．ｒｏｓｅａ）を使用するのが好ましい。
【００１４】
上記植物の粉末化や抽出は常法によって行えばよい。抽出は、例えば上記植物の１種または２種以上を乾燥して刻み、または粉末状にして抽出溶媒を加え、冷浸または加熱することによって行うことができる。抽出溶媒としては、水、アルコール類、エーテル類、エステル類、ケトン類、ニトリル類、芳香族炭化水素類、ハロゲン化脂肪族炭化水素類の１種または２種以上の混合溶媒を使用することができる。
【００１５】
［チロシナーゼ活性阻害剤］
チロシナーゼ活性阻害剤としては、Ｌ−システインおよびその誘導体、アスコルビン酸およびその誘導体、コウジ酸、エラグ酸、アルブチン、ハイドロキノンなどが挙げられるが、中でもＬ−システインおよびその誘導体、並びにアスコルビン酸およびその誘導体が好ましい。
【００１６】
本発明の美肌剤は、美白作用を有する上記イワベンケイ属植物抽出物を必須成分とし、該必須成分に対する助成分として上記チロシナーゼ活性阻害剤を配合して得られるものである。
上記美肌剤は、経口摂取可能な形態、例えば、粉末、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤などの剤型にすることができ、またそれ以外常法に従い、例えば、菓子や清涼飲料水や主食に添加する等様々な使用形態の食品とすることができる。本発明の美肌剤が添加される食品には、上記美肌剤のほか必要に応じて通常食品に用いられる賦形剤、増量剤、甘味剤、香味剤、着色剤等の添加物を本発明の効果を損なわない範囲で適宜配合することができる。
【実施例】
【００１７】
以下、本発明を実施例によって説明する。ただし、本発明の範囲は以下に示される実施例のみに限定されるものではない。
【００１８】
［イワベンケイ属植物抽出物の製造］
ベンケイソウ科イワベンケイ属植物の根の乾燥物を刻んだものに５０％エタノールを加えて抽出を行った。その後、抽出液を遠心分離し、上清を得た。これを減圧濃縮し、噴霧乾燥して乾燥物とした後、イワベンケイ属植物抽出物を得た。
【００１９】
［試験例１：チロシナーゼ活性阻害試験］
酵素溶液は、チロシナーゼ（ＳＩＧＭＡ−ＡＬＤＲＩＣＨ）を０．２ｍｇ／ｍＬとなるように６７ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）で溶解し調製した。また、基質溶液はＤ、Ｌ−ＤＯＰＡ（東京化成工業）３ｍｇを６７ｍＭリン酸緩衝液１０ｍＬに溶解し調製した。
はじめに６７ｍＭリン酸緩衝液６４μＬに対して、各被験物を８０μＬ添加し、これに酵素溶液１６μＬ加え、室温で１０分間プレインキュベートした。次に、素早く基質溶液８０μＬ加えた直後に４７５ｎｍにおける吸光度（Ａ１）を測定した。室温で５分反応させた後、４７５ｎｍにおける吸光度（Ａ２）を測定した。
被験物の代わりに超純水を添加したものをコントロールとし、阻害率を以下の式により算出した。
阻害率（％）＝１００−（被験物のＡ２−被験物のＡ１）／（コントロールのＡ２−コントロールのＡ１）×１００
併せて得られた値をもとに、Ｃｈｏｕらにより確立されたＣｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  Ｉｎｄｅｘ(ＣＩ)値の方法(日本薬理学雑誌  ２００９  Ｖｏｌ．１３４  Ｎｏ．５  ２６５−２７０、Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ２００６  Ｖｏｌ．５８  Ｉｓｓｕｅ３  ６２１−６８１)を用い併用効果を評価した。ＣＩ値は以下の式により算出した。
ＣＩ値＝（被験物Ａの併用量／併用した際に生じる作用を示す被験物Ａの用量）＋(被験物Ｂの併用量／併用した際に生じる作用を示す被験物Ｂの用量)
また、効果の判定は、ＣＩ値＜０．９の場合を相乗作用、０．９≦ＣＩ値≦１．１の場合を相加作用、ＣＩ値＞１．１の場合を拮抗作用とした。
【００２０】
［試験例２：表皮角化細胞における紫外線照射による細胞傷害に対する保護作用］
正常ヒト表皮角化細胞（ＫＵＲＡＢＯ）をゲンタマイシン／アンフォテリシンＢ（終濃度５０μｇ／ｍＬ、５０ｎｇ／ｍＬ、ＫＵＲＡＢＯ）を含むＨｕＭｅｄｉａ−ＫＧ２（ＫＵＲＡＢＯ）に懸濁して２．０×１０４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌとなるように９６ｗｅｌｌ  ｐｌａｔｅに播種し、３７℃、５％ＣＯ２条件下で２４時間培養した。次に、被験物をゲンタマイシン／アンフォテリシンＢを含むＨｕＭｅｄｉａ−ＫＢ２で図１に示す濃度（終濃度２．５、１０、２５μｇ/ｍＬ）となるように調製し、添加後２４時間培養した。次に、ＰＢＳを加え細胞を２回洗浄後、５０μＬのＰＢＳを満たし、総照射量３５ｍＪ／ｃｍ２となるように紫外線を照射した。最後にＰＢＳを除き被験物を添加して６時間培養後、ＭＴＴ法によって生細胞率を算出した。
【００２１】
［結果と考察］
試験例１の結果を表１、２に示した。ＣＩ値からイワベンケイ属植物抽出物とＬ−システインもしくはアスコルビン酸を併用することで、相加もしくは相乗効果が認められた。
【表１】
2018150252.tif 000002
【表２】
2018150252.tif 000003
【００２２】
試験例２の結果を図１に示した。紫外線非照射群の生細胞率を１００％としたところ、イワベンケイ属植物抽出物を添加していない紫外線照射群は細胞が傷害され生細胞率が６１．１％となった。一方、イワベンケイ属植物抽出物を添加した群は、濃度依存的に生細胞率が上昇した。これにより、イワベンケイ属植物抽出物は紫外線による細胞傷害に対して保護作用を有することが示唆された。
【００２３】
イワベンケイ属植物抽出物は、Ｌ−システイン、アスコルビン酸の少なくとも１成分を配合することによりチロシナーゼ阻害作用が増強されること、また、紫外線による細胞傷害に対する保護作用を有することが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【００２４】
イワベンケイ属植物抽出物およびＬ-システイン、アスコルビン酸は容易に入手可能であるため産業上の利用が可能である。
【図１】
2018150252.tif 000004