(57)【要約】【課題】細胞の培養に支障をきたすことなく、細胞を適切に撮影可能な細胞撮影装置を提供する。【解決手段】培養液Ｌを収容可能な凹状の収容部Ｐａを少なくとも１つ有する培養容器Ｐの収容部Ｐａの底面に付着している細胞Ｃを撮影する撮影装置６と、レーザー光を照射するレーザー光照射装置５と、を備え、レーザー光照射装置５は、レーザー光によって収容部Ｐａの底面に傷部Ｍを形成し、撮影装置６は、傷部Ｍを利用して、細胞Ｃに焦点を合わせる。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
培養液を収容可能な凹状の収容部を少なくとも１つ有する培養容器の前記収容部の底面に付着している細胞を撮影する撮影装置と、
レーザー光を照射するレーザー光照射装置と、
を備え、
前記レーザー光照射装置は、前記レーザー光によって前記収容部の底面に傷部を形成し、
前記撮影装置は、前記傷部を利用して、前記細胞に焦点を合わせることを特徴とする細胞撮影装置。
【請求項２】
前記撮影装置が撮影した画像に基づいて、前記細胞に含まれる不要細胞の位置情報を取得する画像処理部をさらに備え、
前記レーザー光照射装置は、前記位置情報に基づいて前記不要細胞に前記レーザー光を照射することを特徴とする請求項１に記載の細胞撮影装置。
【請求項３】
前記収容部は平面視で円形であり、
前記レーザー光照射装置は、前記収容部の底面の中心部に前記傷部を形成することを特徴とする請求項１又は２に記載の細胞撮影装置。
【請求項４】
前記レーザー光照射装置は、前記傷部を線状に形成することを特徴とする請求項１〜３の何れか１項に記載の細胞撮影装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞を撮影するための細胞撮影装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
ｉＰＳ細胞やＥＳ細胞等の細胞を培養する際には、培養液が入れられた培養容器の中で細胞の培養が行われる。培養容器内の細胞は、培養液に含まれる養分を吸収し、培養容器の底面に付着した状態で成長する。このような細胞の成育状況等を観察するために、培養容器の底面に付着した細胞を撮影装置で撮影することがある。撮影装置の焦点を細胞に合わせるために、例えば特許文献１に記載されているような合焦用のマークを、培養容器の底面に設けることが考えられる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特許第３７３６２７８号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、特許文献１に記載されている合焦用のマークは、刻印やシートの添付によって形成されるものであり、マークを形成する際にばい菌や異物等が培養液に混入するおそれがある。その結果、細胞の培養の支障が生じるおそれがあった。
【０００５】
本発明は、上述の課題を鑑みて、細胞の培養に支障をきたすことなく、細胞を適切に撮影可能な細胞撮影装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明に係る細胞撮影装置は、培養液を収容可能な凹状の収容部を少なくとも１つ有する培養容器の前記収容部の底面に付着している細胞を撮影する撮影装置と、レーザー光を照射するレーザー光照射装置と、を備え、前記レーザー光照射装置は、前記レーザー光によって前記収容部の底面に傷部を形成し、前記撮影装置は、前記傷部を利用して、前記細胞に焦点を合わせることを特徴とする。
【０００７】
本発明では、撮影装置が細胞に焦点を合わせる際に、レーザー光によって収容部の底面に形成された傷部が利用される。このように、レーザー光で形成した傷部を合焦用のマークとして利用することで、ばい菌や異物等が培養液に混入することを防止することができる。したがって、細胞の培養に支障をきたすことなく、細胞を適切に撮影することが可能となる。
【０００８】
本発明において、前記撮影装置が撮影した画像に基づいて、前記細胞に含まれる不要細胞の位置情報を取得する画像処理部をさらに備え、前記レーザー光照射装置は、前記位置情報に基づいて前記不要細胞に前記レーザー光を照射するとよい。
【０００９】
細胞の培養過程では、培養対象としている目的細胞とは異なる細胞に変化した不要細胞が発生することがある。本発明では、レーザー光を不要細胞に照射することで、不要細胞を除去することができるので、目的細胞のみを効率的に培養することができる。また、不要細胞にレーザー光を照射するためのレーザー光照射装置を、傷部を形成するために兼用することができるので、経済的に傷部を形成することができる。
【００１０】
本発明において、前記収容部は平面視で円形であり、前記レーザー光照射装置は、前記収容部の底面の中心部に前記傷部を形成するとよい。
【００１１】
傷部を形成するときと、細胞を撮影するときとで、培養容器Ｐの向きが変わっていると（中心周りに回動していると）、傷部の位置が不明となり、焦点合わせができなくなるおそれがある。しかしながら、上述のように、円形の収容部の中心部に傷部を形成しておけば、傷部を形成したときと比べて撮影時に培養容器の向きが変わったとしても、傷部は常に収容部の中心部に位置するため、容易に焦点合わせを行うことができる。
【００１２】
本発明において、前記レーザー光照射装置は、前記傷部を線状に形成するとよい。
【００１３】
細胞の成育状況等を時系列で観察する場合、撮影のたびに培養容器の向きが変わっていると、時系列での比較が困難となる。そこで、上述のように、傷部を線状に形成しておくことで、線状の傷部の回動角度に基づいて各回の撮影画像の向きを合わせることができ、時系列での比較が容易となる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】本実施形態の不要細胞除去装置を模式的に示す正面図である。
【図２】不要細胞除去装置の電気的構成を示すブロック図である。
【図３】細胞を培養する手順を示すフローチャートである。
【図４】不要細胞除去処理の流れを示すフローチャートである。
【図５】傷部の一例を示す平面図である。
【図６】傷部の一例を示す平面図である。
【図７】傷部の一例を示す平面図である。
【図８】傷部の一例を示す平面図である。
【図９】傷部の一例を示す平面図である。
【図１０】他の実施形態の不要細胞除去装置を模式的に示す正面図である。
【図１１】培養容器の変形例の一例を示す平面図である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
（不要細胞除去装置の構成）
以下、本発明に係る細胞撮影装置を適用した不要細胞除去装置について、図面を参照しつつ説明する。図１に示す不要細胞除去装置１は、機台２と、ステージ３と、ステージ移動装置４と、レーザー光照射装置５と、撮影装置６と、照明装置７と、制御装置８（図２参照）と、を備える。
【００１６】
機台２は、不要細胞除去装置１を構成する各部材を支持する箱状の部材である。機台２の内部には、レーザー光照射装置５及び撮影装置６の一部構成が収容されている。
【００１７】
ステージ３は、機台２の上方に配置されており、可視光やレーザー光が透過可能な透明の部材からなる。ステージ３には、培養容器Ｐが載置される。培養容器Ｐは、可視光やレーザー光が透過可能な透明の部材、例えば透明のプラスチック部材からなる。培養容器Ｐは平面視で円形の凹状の収容部Ｐａを有しており、収容部Ｐａの中には培養液Ｌが入れられている。なお、本実施形態では、培養容器Ｐそのものも円形であるが、培養容器Ｐは円形以外であってもよい。細胞Ｃは、収容部Ｐａの底面に付着している。細胞Ｃには、培養対象としている目的細胞と、目的細胞とは異なる細胞に変化した不要細胞とが含まれている。
【００１８】
ステージ移動装置４は、ステージ３を水平方向（左右方向及び前後方向）に移動させるための装置である。ステージ移動装置４によってステージ３を移動させることにより、培養容器Ｐを後述の照射用対物レンズ１４及び撮影用対物レンズ２１に対して水平方向に相対移動させることができる。
【００１９】
レーザー光照射装置５は、レーザー光生成器１１、コリメートレンズ１２、光学ミラー１３、及び、照射用対物レンズ１４を有する。レーザー光照射装置５においては、レーザー光生成器１１で生成されたレーザー光が、コリメートレンズ１２及び光学ミラー１３を経て照射用対物レンズ１４に至るように、光路１５が規定されている。レーザー光生成器１１は、主に近赤外線（波長が約７８０〜２０００ｎｍの範囲の光、特に水に吸収されやすい１４６０ｎｍが好ましい）からなる一定の出力の近赤外線レーザー光を生成する。照射用対物レンズ１４は、ステージ３の下方に配置されている。ステージ移動装置４によって培養容器Ｐを水平方向に移動させながら、細胞Ｃに含まれる不要細胞が照射用対物レンズ１４の鉛直上方にきたタイミングでレーザー光を照射することで、不要細胞を培養容器Ｐの底面から剥離させることができる。
【００２０】
撮影装置６は、撮影用対物レンズ２１、光学ミラー２２、２３、及び、撮像部２４を有する。撮影装置６においては、撮影用対物レンズ２１の視野内の画像が、光学ミラー２２、２３を経て撮像部２４で撮像されるように、光路２５が規定されている。撮影用対物レンズ２１は、ステージ３の下方に配置されている。撮像部２４は、例えばＣＣＤやＣＭＯＳからなるイメージセンサを有している。ステージ移動装置４による培養容器Ｐの水平方向への移動と、撮影装置６による撮影とを順番に繰り返すことで、培養容器Ｐ内に点在している細胞Ｃの全領域を撮影することができる。撮影装置６によって撮影された画像データは、制御装置８に送られる。
【００２１】
照明装置７は、撮影用対物レンズ２１の鉛直上方に配置されており、撮影装置６による撮影に必要な光量を供給する。
【００２２】
レーザー光照射装置５の照射用対物レンズ１４と、撮影装置６の撮影用対物レンズ２１とは、支持部材３１によって一体的に支持されている。支持部材３１は、昇降装置３２によって昇降可能に構成されている。これにより、照射用対物レンズ１４及び撮影用対物レンズ２１は、昇降装置３２によって一体的に昇降可能となっている。
【００２３】
図２に示すように、制御装置８は、ステージ移動装置４、レーザー光照射装置５、撮影装置６、照明装置７、及び、昇降装置３２の各動作を制御する。制御装置８は、画像処理部８ａ及び記憶部８ｂを有する。画像処理部８ａは、撮影装置６によって撮影された細胞Ｃの画像データに画像処理を施すことによって、細胞Ｃに含まれる不要細胞を検出してその位置情報を取得する。記憶部８ｂは、画像処理部８ａによって取得された不要細胞の位置情報や後述の傷部Ｍ（図１参照）の位置情報等を記憶する。
【００２４】
（培養の手順）
細胞Ｃを培養する手順について、図３を参照しつつ説明する。まず、細胞Ｃを定着させるためのコーティングが収容部Ｐａの底面に施された培養容器Ｐに培養液Ｌを少量入れ、培養容器Ｐを不要細胞除去装置１のステージ３にセットする（ステップＳ１１）。この作業は、オペレータによって行われてもよいし、ロボット等によって行われてもよい。この時点では、培養容器Ｐに細胞Ｃは投入されていない。
【００２５】
次に、制御装置８は、ステージ移動装置４及びレーザー光照射装置５の動作を制御して、培養容器Ｐの収容部Ｐａの底面に傷部Ｍを形成する（ステップＳ１２）。傷部Ｍについては後で詳細に説明するが、撮影装置６が細胞Ｃに焦点を合わせる際に利用されるものである。オペレータは、培養容器Ｐの所定位置に傷部Ｍが形成されるように、予め、制御装置８に傷部Ｍの形成位置に関する情報を入力しておく。
【００２６】
制御装置８は、ステージ移動装置４を制御して、培養容器Ｐの所定位置を照射用対物レンズ１４の鉛直上方に位置させる。続いて、制御装置８は、レーザー光生成器１１をＯＮ状態とし、近赤外線レーザー光を培養容器Ｐの所定位置に向かって下方から照射させる。近赤外線は、特に波長が１４６０ｎｍ付近で水によく吸収されるため、培養容器Ｐの所定位置近傍では、底面付近の培養液Ｌが近赤外線を吸収して高温になり、この熱によって収容部Ｐａの所定位置の内側の底面に傷部Ｍが形成される。上述のように、この時点で培養容器Ｐに細胞Ｃは投入されていないので、レーザー光の照射によって細胞Ｃに損傷を与えるおそれはない。
【００２７】
傷部Ｍの形成が終わると、細胞Ｃを追加の培養液Ｌとともに培養容器Ｐに投入し（ステップＳ１３）、培養容器Ｐを不要細胞除去装置１から不図示のインキュベータに移して、一定時間細胞Ｃを培養する（ステップＳ１４）。これらの作業は、オペレータによって行われてもよいし、ロボット等によって行われてもよい。インキュベータで培養している間に、細胞Ｃは培養容器Ｐの底面に付着した状態で成長する。
【００２８】
一定時間細胞Ｃを培養した後は、再び、培養容器Ｐを不要細胞除去装置１のステージ３にセットする（ステップＳ１５）。この作業は、オペレータによって行われてもよいし、ロボット等によって行われてもよい。このとき、基本的に、培養容器Ｐは、ステップＳ１１にて培養容器Ｐをステージ３にセットしたときと同じように位置決めされた状態でセットされる。
【００２９】
続けて、撮影装置６の焦点を傷部Ｍに合わせる（ステップＳ１６）。具体的には、制御装置８は、ステージ移動装置４を制御して、傷部Ｍが撮影用対物レンズ２１の鉛直上方に位置するように培養容器Ｐを移動させ、昇降装置３２を制御して、撮影用対物レンズ２１を昇降させることで傷部Ｍに焦点を合わせる。傷部Ｍ及び細胞Ｃはともに収容部Ｐａの内側の底面に存在するので、傷部Ｍに焦点を合わせることで、細胞Ｃに焦点を合わせることができる。また、撮影用対物レンズ２１を昇降させる際に、一緒に照射用対物レンズ１４も昇降するので、照射用対物レンズ１４の焦点も同時に細胞Ｃに合わせられる。
【００３０】
撮影装置６の焦点合わせが済むと、細胞Ｃに含まれる不要細胞を除去するための不要細胞除去処理が行われる（ステップＳ１７）。不要細胞除去処理の詳細について、図４を参照しつつ説明する。制御装置８は、ステージ３を移動させながら、撮影装置６で撮影を行う（ステップＳ２１）。このとき、ステージ３を一時停止させてから撮影を行うようにしてもよいし、ステージ３を一時停止させずに継続的に移動させながら撮影を行うようにしてもよい。撮影装置６が１回で撮影できる範囲は限られているため、収容部Ｐａ内の領域を複数の撮影範囲に区切り、区切られた各範囲の撮影が順番に行われる。
【００３１】
撮影装置６で撮影された画像データは制御装置８に送られる。制御装置８は、画像処理部８ａで画像データに画像処理を施すことによって、複数の画像をつなぎ合わせ、その画像から細胞Ｃを検出する（ステップＳ２２）。さらに、制御装置８は、不要細胞を検出するとともに不要細胞の位置情報を取得し、当該位置情報を記憶部８ｂに記憶する（ステップＳ２３）。次に、制御装置８は、収容部Ｐａ内の全領域の撮影が終了したか否かを判断し（ステップＳ２４）、全領域の撮影が終了するまで、ステップＳ２１〜Ｓ２３を繰り返し実行する。なお、収容部Ｐａ内の全領域を撮影することは必須ではなく、一部領域のみを撮影するようにしてもよい。
【００３２】
細胞Ｃの全領域の撮影が終了すると、制御装置８は、記憶部８ｂに記憶されている不要細胞の位置情報に基づいて、ステージ移動装置４及びレーザー光照射装置５を制御し、不要細胞が照射用対物レンズ１４の直上に位置するタイミングでレーザー光を照射させる（ステップＳ２５）。これにより、不要細胞は培養容器Ｐの底面から剥離して、培養液Ｌ中に浮遊した状態となる。最後に、制御装置８は、全領域の不要細胞にレーザー光を照射し終えたか否かを判断し（ステップＳ２６）、全ての不要細胞にレーザー光を照射し終えるまで、ステップＳ２５を繰り返し実行する。以上のような不要細胞除去処理を実行することで、細胞Ｃに含まれる不要細胞を除去することができ、目的細胞のみを効率的に培養することができる。
【００３３】
図３に戻って、説明を続ける。不要細胞除去処理が終了すると、培養容器Ｐ内の培養液Ｌを交換する（ステップＳ１８）。なお、培養液Ｌの交換を不要細胞除去処理を行う前（例えば、ステップＳ１５の前）に行うようにしてもよい。この作業は、オペレータによって行われてもよいし、ロボット等によって行われてもよい。培養液Ｌを交換することで、新しい養分を補給できるとともに、培養液Ｌ中に浮遊している不要細胞を廃棄することができる。最後に、細胞Ｃの培養が終了したか否かを判断し（ステップＳ１９）、培養が終了するまでステップＳ１４〜Ｓ１８が繰り返される。
【００３４】
（傷部の具体例）
撮影装置６によって細胞Ｃを撮影する際には、細胞Ｃに焦点を合わせる必要がある。しかしながら、培養容器Ｐの外側の底面に傷がある場合や、培養液Ｌに浮遊物が存在する場合には、傷や浮遊物に焦点が合ってしまい、細胞Ｃがぼやけてしまうことがある。そこで、本実施形態では、上述のように、培養容器Ｐの収容部Ｐａの内側の底面にレーザー光によって傷部Ｍを形成し、この傷部Ｍに撮影装置６の焦点を合わせるようにしている。
【００３５】
上述したように、収容部Ｐａの底面に傷部Ｍを形成するために培養容器Ｐをステージ３にセットするとき（ステップＳ１１）と、細胞Ｃを撮影するために培養容器Ｐをステージ３にセットするとき（ステップＳ１５）とでは、基本的に、培養容器Ｐは同じように位置決めされる。換言すると、ステップＳ１１とステップＳ１５とでは、培養容器Ｐの水平方向の位置が同じであり、且つ、向きも同じである（中心周りに回動していない）。この場合、傷部Ｍの形成位置、形状、数にかかわらず、傷部Ｍは同じ位置に位置することになり、記憶部８ｂに記憶されている傷部Ｍの位置情報に基づいて、撮影装置６の焦点合わせを容易に行うことができる。
【００３６】
しかしながら、オペレータによる作業ミスやロボット等の作動誤差により、ステップＳ１５にて培養容器Ｐをステージ３にセットしたときの位置が、ステップＳ１１にて培養容器Ｐをステージ３にセットしたときの位置が異なる場合がある。特に、培養容器Ｐの向きが変わっている場合（培養容器Ｐが回動している場合）には、その違いに気づきにくいという問題がある。このとき、記憶部８ｂに記憶されている位置に傷部Ｍが存在しないことになり、撮影装置６の焦点合わせができなくなるおそれがある。このような場合にも焦点合わせが可能な、傷部Ｍの好ましい態様について、図５〜図９を参照しつつ説明する。
【００３７】
図５〜図９において、多数の正方形のマスは撮影装置６による１回の撮影で撮影される撮影範囲を示す。図５では、円形の培養容器Ｐ（収容部Ｐａ）の中心部にスポット状の傷部Ｍ１を形成している。こうすれば、ステップＳ１５にて培養容器Ｐをステージ３にセットしたときの向きが、ステップＳ１１にて培養容器Ｐをステージ３にセットしたときの向きと異なっていても、傷部Ｍ１は常に中心部に位置することになるので、確実に焦点合わせを行うことができる。また、傷部Ｍ１はスポット状であるので、傷部Ｍ１を短時間で形成することができる。
【００３８】
ここで、細胞Ｃの培養過程では、図３のステップＳ１４〜Ｓ１８を繰り返し実行し、細胞Ｃの成育状況を時系列で観察する場合がある。このような場合に、ステップＳ１５にて培養容器Ｐをステージ３にセットするたびに、培養容器Ｐの向きが変わっていると、時系列での比較が困難となる。このような場合に備えて、図６に示すように、傷部Ｍ２を線状に形成しておくとよい。
【００３９】
図６（ａ）はある撮影時（以下、基準時と言う）における傷部Ｍ２の状態、図６（ｂ）、（ｃ）は基準時と比べて培養容器Ｐが角度θだけ回動した場合の傷部Ｍ２の拡大図を示している（図７についても同様）。傷部Ｍ２を線状としていることで、各回の撮影時に基準時と比べて培養容器Ｐが角度θだけ回動していることを把握することができる。したがって、画像処理部８ａで各回の画像を角度−θだけ回転させて補正することで、各回の画像の向きを基準時の画像と揃えることができる。したがって、細胞Ｃの成育状況を時系列で観察することが容易となる。
【００４０】
しかしながら、傷部Ｍ２が直線状だと、図６（ｃ）に示すように、培養容器Ｐが基準時と比べて１８０度回動している場合には、傷部Ｍ２の見え方が基準時と非常に類似しており、培養容器Ｐの向きが基準時と同じであると誤判断するおそれがある。このような場合に備えて、図７に示すように、傷部Ｍ３を折れ線状にするとより好ましい。傷部Ｍ３を折れ線状としていることで、図７（ｃ）に示すように、培養容器Ｐが基準時と比べて１８０度回動している場合にも、傷部Ｍ３の見え方が基準時とは明らかに異なる。したがって、培養容器Ｐの向きが変わっていることを確実に認識することができる。
【００４１】
また、図８に示すように、収容部Ｐａの中心部において、複数の撮影範囲にわたるように傷部Ｍ４を形成してもよい。なお、傷部Ｍ４は、スポット状の複数の傷部ｍの集まりを指す。このように、収容部Ｐａの中心部のより広い範囲に傷部Ｍ４を形成することで、ステージ移動装置４の精度や培養容器Ｐの位置決め用部材の配置等に多少誤差があっても、より確実に撮影用対物レンズ２１の視野内に傷部Ｍ４を映り込ませることができ、容易に焦点合わせが行える。また、複数の傷部ｍの形成位置を、図８に示すように左右方向及び前後方向において非対称とすることで、培養容器Ｐの向きが変わっていることを容易に把握することもできる。
【００４２】
また、図９に示すように、収容部Ｐａの中心部に加えて、収容部Ｐａの略全域に傷部Ｍ５を形成してもよい。収容部Ｐａの中心部の傷部としては、図５に示すもののほか、図６〜図８に示すもの、さらには他の形態を採用してもよい。なお、傷部Ｍ５は、スポット状の複数の傷部ｍの集まりを指す。複数の傷部ｍは、収容部Ｐａの中心部から周縁部にわたって概ね等間隔で形成されている。収容部Ｐａの底面は、基本的に平坦面であるが、わずかながら凹凸や傾斜が存在する場合がある。このような場合に、培養容器Ｐの略全域に傷部ｍを点在させておけば、撮影装置６の焦点を各傷部ｍに合わせながら撮影を行うことで、収容部Ｐａの底面の凹凸や傾斜の影響を抑えて、細胞Ｃへの焦点合わせをより好適に行うことができる。
【００４３】
（効果）
以上のように、本実施形態では、レーザー光照射装置５は、レーザー光によって収容部Ｐａの底面に傷部Ｍ（Ｍ１〜Ｍ６）を形成し、撮影装置６は、傷部Ｍを利用して、細胞Ｃに焦点を合わせるよう構成されている。このように、レーザー光で形成した傷部Ｍを合焦用のマークとして利用することで、刻印やシートの添付によってマークを形成する場合の懸念事項であったばい菌や異物等の培養液Ｌへの混入を防止することができる。したがって、細胞Ｃの培養に支障をきたすことなく、細胞Ｃを適切に撮影することが可能となる。
【００４４】
本実施形態では、撮影装置６が撮影した画像に基づいて、細胞Ｃに含まれる不要細胞の位置情報を取得する画像処理部８ａをさらに備え、レーザー光照射装置５は、当該位置情報に基づいて不要細胞にレーザー光を照射するよう構成されている。細胞Ｃの培養過程では、培養対象としている目的細胞とは異なる細胞に変化した不要細胞が発生することがある。本実施形態では、レーザー光を不要細胞に照射することで、不要細胞を除去することができるので、目的細胞のみを効率的に培養することができる。また、不要細胞にレーザー光を照射するためのレーザー光照射装置５を、傷部Ｍを形成するために兼用することができるので、経済的に傷部Ｍを形成することができる。
【００４５】
本実施形態では、レーザー光照射装置５は、近赤外線レーザー光を収容部Ｐａの下方から照射するよう構成されている。近赤外線は、主に水に吸収される。したがって、培養容器Ｐの下方から近赤外線レーザー光を照射すると、培養容器Ｐの底面付近の培養液Ｌが近赤外線を吸収することによって高温となり、この熱によって収容部Ｐａの内側の底面に確実に傷部Ｍを形成することができる。また、この場合、多少レーザー光の焦点が収容部Ｐａの底面からずれていても、底面付近の培養液Ｌに近赤外線が吸収されれば傷部Ｍを形成することができるので、確実且つ容易に傷部Ｍを形成することができる。
【００４６】
本実施形態では、図５〜図９に示すように、収容部Ｐａは平面視で円形であり、レーザー光照射装置５は、収容部Ｐａの底面の中心部に傷部Ｍを形成すると好適である。傷部Ｍを形成するときと、細胞Ｃを撮影するときとで、培養容器Ｐの向きが変わっていると、傷部Ｍの位置が不明となり、焦点合わせができなくなるおそれがある。しかしながら、上述のように、円形の収容部Ｐａの中心部に傷部Ｍを形成しておけば、傷部Ｍを形成したときと比べて撮影時に培養容器Ｐの向きが変わったとしても、傷部Ｍは常に収容部Ｐａの中心部に位置するため、容易に焦点合わせを行うことができる。
【００４７】
本実施形態では、図６及び図７に示すように、レーザー光照射装置５は、傷部Ｍ２、Ｍ３を線状に形成すると好適である。細胞Ｃの成育状況等を時系列で観察する場合、撮影のたびに培養容器Ｐの向きが変わっていると、時系列での比較が困難となる。そこで、上述のように、傷部Ｍ２、Ｍ３を線状に形成しておくことで、線状の傷部Ｍ２、Ｍ３の回動角度θに基づいて各回の撮影画像の向きを合わせることができ、時系列での比較が容易となる。
【００４８】
本実施形態では、図７に示すように、線状の傷部Ｍ３が、折れ線状であるとより好適である。図６に示すように、傷部Ｍ２が直線状だと、培養容器Ｐの向きが１８０度異なっている場合、傷部Ｍ２の形状及び向きが同じように撮影されるため、培養容器Ｐの向きが変わっていることを見落としてしまうおそれがある。そこで、上述のように、傷部Ｍ３を折れ線状にすることで、培養容器Ｐの向きが１８０度異なっている場合でも、傷部Ｍ３の形状及び向きが異なるように撮影されるため、培養容器Ｐの向きが変わっていることを容易に認識することができる。
【００４９】
本実施形態では、細胞Ｃを撮影するための撮影用対物レンズ２１と、細胞Ｃにレーザー光を照射するための照射用対物レンズ１４とが、それぞれ個別に設けられている。照射用対物レンズ１４を撮影用対物レンズ２１と別に設けることで、レーザー光の集光能力に優れた対物レンズを照射用対物レンズ１４として採用することができ、レーザー光照射装置５の照射能力を向上させることができる。
【００５０】
本実施形態では、撮影用対物レンズ２１及び照射用対物レンズ１４を一体的に支持する支持部材３１と、支持部材３１を昇降させる昇降装置３２と、をさらに備えるよう構成されている。こうすれば、撮影用対物レンズ２１を昇降させて傷部Ｍに焦点を合わせる際に、同時に照射用対物レンズ１４も昇降する。したがって、照射用対物レンズ１４の焦点を調整する手間を省くことができ、効率的にレーザー光を照射することが可能となる。
【００５１】
（他の実施形態）
上記実施形態に種々の変更を加えた変形例について説明する。
【００５２】
上記実施形態では、撮影用対物レンズ２１と照射用対物レンズ１４とを個別に設けるものとした。しかしながら、図１０に示すように、撮影用及び照射用の両方に用いられる対物レンズ４１を設けるようにしてもよい。この場合、基本的な構成に大きな変更はないが、レーザー光照射装置５の光路１５と撮影装置６の光路２５との合流点には、可視光を透過させ、且つ、レーザー光を反射させるダイクロイックミラー４２が配置される。このように、１つの対物レンズ４１を撮影用と照射用とに兼用することで、撮影時とレーザー光の照射時とで、ステージ３を移動させる距離を短くすることができ、不要細胞除去処理を効率的に実行することができる。
【００５３】
上記実施形態では、ステージ移動装置４が培養容器Ｐが載置されたステージ３を移動させることで、細胞Ｃの全領域を撮影したり、細胞Ｃの全領域において不要細胞にレーザー光を照射するものとした。しかしながら、レーザー光照射装置５及び撮影装置６を可動式に構成し、レーザー光照射装置５及び撮影装置６を移動させることで、細胞Ｃの全領域を撮影したり、細胞Ｃの全領域において不要細胞にレーザー光を照射するようにしてもよい。
【００５４】
上記実施形態では、細胞Ｃの全領域の撮影が終わってから、不要細胞にレーザー光を照射するものとした。しかしながら、細胞Ｃの撮影と、不要細胞へのレーザー光の照射とを、順番に繰り返すようにしてもよい。
【００５５】
上記実施形態では、図３のステップＳ１２にて傷部Ｍを形成するものとした。しかしながら、傷部Ｍを他のタイミングで形成してもよい。例えば、培養容器Ｐをステージ３にセットするたびに、傷部Ｍを形成するようにしてもよい。なお、培養容器Ｐに細胞Ｃが投入された後に傷部Ｍを形成する場合は、細胞Ｃの領域を避けてレーザー光を照射することで傷部Ｍを形成するのが好ましい。
【００５６】
上記実施形態では、円形の培養容器Ｐに１つの円形の収容部Ｐａが形成されているものとした。しかしながら、培養容器Ｐの具体的な形態はこれに限定されない。例えば、図１１に示すように、平面視で矩形状の培養容器Ｐに、複数の円形の収容部Ｐａが形成されていてもよい。
【００５７】
また、傷部Ｍの具体的な態様は、上記実施形態に示したものに限定されない。例えば、傷部を面状に構成することも可能である。
【符号の説明】
【００５８】
１：不要細胞除去装置（細胞撮影装置）
５：レーザー光照射装置
６：撮影装置
８ａ：画像処理部
１４：照射用対物レンズ
２１：撮影用対物レンズ
３１：支持部材
３２：昇降装置
Ｍ（Ｍ１〜Ｍ５）：傷部
Ｃ：細胞
Ｐ：培養容器
Ｐａ：収容部
Ｌ：培養液
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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