(57)【要約】      （修正有）【課題】パーキンソン病の治療のためのＡＡＤＣをコードするポリヌクレオチドを提供する。【解決手段】ＡＡＶベクターゲノムは、ａ）１４１ヌクレオチド長の５’逆方向末端反復（ＩＴＲ）、ｂ）配列番号１の配列をコードするヌクレオチド配列を含む、ＡＡＤＣ配列領域、および、ｃ）１４１ヌクレオチド長の３’逆方向末端反復（ＩＴＲ）を、上記の順に含む。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＡＡＶベクターゲノムであって、
ａ）１４１ヌクレオチド長の５’逆方向末端反復（ＩＴＲ）、
ｂ）配列番号１の配列をコードするヌクレオチド配列を含む、ＡＡＤＣ配列領域、および、
ｃ）１４１ヌクレオチド長の３’逆方向末端反復（ＩＴＲ）を、
上記の順に含む、ＡＡＶベクターゲノム。
【請求項２】
前記５’ＩＴＲおよび前記３’ＩＴＲがＡＡＶ２に由来する、請求項１に記載のＡＡＶベクターゲノム。
【請求項３】
前記ＡＡＶベクターゲノムが、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）遺伝子由来のＣＭＶ配列領域を含み、前記ＣＭＶ配列領域が、エンハンサー領域とプロモーター領域とを含む、請求項２に記載のＡＡＶベクターゲノム。
【請求項４】
前記ＣＭＶ配列領域が、５０７ヌクレオチド長である、請求項３に記載のＡＡＶベクターゲノム。
【請求項５】
前記ＡＡＶベクターゲノムが、即時型初期１（ＩＥ１）遺伝子由来のＩＥ１配列領域を含む、請求項２に記載のＡＡＶベクターゲノム。
【請求項６】
前記ＩＥ１配列領域が、ＩＥ１エキソン１由来のヌクレオチド配列を含む、請求項５に記載のＡＡＶベクターゲノム。
【請求項７】
前記ＩＥ１配列領域が、ＩＥ１イントロン１またはその断片由来のヌクレオチド配列を含む、請求項６に記載のＡＡＶベクターゲノム。
【請求項８】
前記ＩＥ１配列領域が、１６６ヌクレオチド長である、請求項７に記載のＡＡＶベクターゲノム。
【請求項９】
前記ＡＡＶベクターゲノムが、ヒトβグロビン（ＨＢ）遺伝子由来のＨＢ配列領域を含む、請求項２に記載のＡＡＶベクターゲノム。
【請求項１０】
前記ＨＢ配列領域が、ＨＢイントロン２由来のヌクレオチド配列を含む、請求項９に記載のＡＡＶベクターゲノム。
【請求項１１】
前記ＨＢ配列領域が、ＨＢエキソン３由来のヌクレオチド配列を含む、請求項１０に記載のＡＡＶベクターゲノム。
【請求項１２】
前記ＨＢ配列領域が、４００ヌクレオチド長である、請求項１１に記載のＡＡＶベクターゲノム。
【請求項１３】
前記ＡＡＶベクターゲノムが、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）遺伝子由来のポリ（Ａ）シグナル配列領域を含む、請求項２に記載のＡＡＶベクターゲノム。
【請求項１４】
前記ポリ（Ａ）シグナル配列領域が４７７ヌクレオチド長である、請求項１３に記載のＡＡＶベクターゲノム。
【請求項１５】
前記ＡＡＶベクターゲノムは、配列番号１〜１３，１５，および１６またはこれらの配列に少なくとも９５％の同一性を有するバリアントからなる群から選択される配列を含む、請求項１に記載のＡＡＶベクターゲノム。
【請求項１６】
前記ＡＡＤＣ領域は、配列番号１の配列をコードするコドン最適化ヌクレオチド配列を含む、請求項２に記載のＡＡＶベクターゲノム。
【請求項１７】
前記ＡＡＶベクターゲノムは、配列番号７および１２またはそれらの配列と少なくとも９５％の同一性を有するバリアントからなる群から選択される配列を含む、請求項１６に記載のＡＡＶベクターゲノム。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれか一項に記載のＡＡＶベクターゲノムを含む、組換えＡＡＶウイルス。
【請求項１９】
ＡＡＶ２、ＡＡＶ１、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９（ｈｕ１４）、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ−ＤＪ、およびＡＡＶ−ＤＪ８からなる群より選択されたキャプシド血清型を含む、請求項１８に記載の組換えＡＡＶウイルス。
【請求項２０】
前記キャプシド血清型がＡＡＶ２である、請求項１９に記載の組換えＡＡＶウイルス。
【請求項２１】
請求項１８〜２０のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶウイルスを含む医薬組成物。
【請求項２２】
組換えＡＡＶベクターの少なくとも７０％がＡＡＶベクターゲノムを含む、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
それを必要とする対象におけるジスキネジーの期間を短縮する方法に使用するための、請求項２１または２２に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
ジスキネジーの期間の減少が、すり減り現象時間および運動症状の変動が少なくとも３０％改善したことにより示される、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記改善が少なくとも６時間続く、請求項２４に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
対象がパーキンソン病を有する、請求項２３〜２５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
それを必要とする対象の睡眠覚醒サイクルを改善する方法に使用するための、請求項２１または２２に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記医薬組成物の前記対象への投与後における前記対象の急速眼球運動（ＲＥＭ）睡眠の量が、前記医薬組成物の投与前のこの対象のレム睡眠の量と比較して減少する、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記医薬組成物の前記対象への投与後における前記対象のノンレム（ＮＲＥＭ）睡眠の量が、前記医薬組成物の投与前のこの対象のレム睡眠の量と比較して増加する、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
対象がパーキンソン病を有する、請求項２７〜２９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
それを必要とする対象の睡眠障害の治療に使用するための、請求項２１または２２に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
前記睡眠障害が不眠症である、請求項３１に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
対象がパーキンソン病を有する、請求項３１または３２に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
それを必要とする対象におけるＡＡＤＣタンパク質のレベルを増加させる方法に使用するための、請求項２１または２２に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
この出願は、２０１４年１１月５日に出願されたパーキンソン病の治療のためのＡＡＤＣポリヌクレオチドと題された米国仮特許出願第６２／０７５，２９８号、２０１５年５月１日に出願されたパーキンソン病の治療のためのＡＡＤＣポリヌクレオチドと題された米国仮特許出願第６２／１５５，６９２号、２０１５年７月３１日に提出されたパーキンソン病の治療のためのＡＡＤＣポリヌクレオチドと題する米国仮特許出願第６２／１９９，５７８号、２０１５年１０月１９日に出願されたパーキンソン病の治療のためのＡＡＤＣポリヌクレオチドと題する米国仮特許出願第６２／２４３，５３７号の仮出願の権利を主張しており、その各々の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
配列表の参照
本出願は、電子フォーマットの配列表と共に提出されている。配列表ファイル（１０１０ＰＣＴＳＥＱＬＳＴ．ｔｘｔ）は、２０１５年１１月５日に作成され、１７８，１４４バイトのサイズである。配列表の電子フォーマットの情報は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００３】
発明の分野
本発明は、パーキンソン病の治療に使用するための組成物、特に核酸分子、例えばＡＡＤＣをコードするポリヌクレオチドに関する。いくつかの実施形態では、そのようなＡＡＤＣポリヌクレオチドは、組換えアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）によってまたはその中にコードされ得る。
【背景技術】
【０００４】
芳香族Ｌ−アミノ酸デカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）は、ドーパミンおよびセロトニンの合成を担うホモ二量体のピリドキサールリン酸依存性酵素である。コードされたタンパク質は、ドーパミンに対するＬ−３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン（Ｌ−ＤＯＰＡまたはレボドパ）の、セロトニンに対するＬ−５−ヒドロキシトリプトファンの、またトリプタミンに体するＬ−トリプトファンの脱カルボキシル化を触媒する。この遺伝子の欠損は、芳香族Ｌ−アミノ酸デカルボキシラーゼ欠損（ＡＡＤＣＤ）の原因であり、これは神経伝達物質の代謝における先天性異常であり、セロトニンとカテコールアミン双方の欠乏をもたらし、重度の運動機能および自律神経機能不全をもたらす。
【０００５】
パーキンソン病（ＰＤ）は、ＣＮＳ（ＣＮＳ）の進行性の神経変性疾患であり、感覚および運動に症状を引き起こす。ドーパミン置換（すなわち、レボドパ）は、ＰＤにおける運動障害の標準的な薬物療法であった。しかしながら、ドーパミン療法の利点は、時間の経過と共に効果が薄れてくる。その原因の一部は、ドーパミン生成細胞の進行性の死およびそれに対応するＡＡＤＣ活性の喪失である。さらに、高用量のドーパミンの全身投与により、中脳辺縁系のドーパミン作動性刺激に起因する、運動能力の変動、ジスキネジー、および幻覚などの副作用が併発する。ドーパミン作動能を回復し、副作用を最小限に抑えるための１つのストラテジーは、ＣＮＳの標的領域にＡＡＤＣを直接投与する遺伝子治療を使用することである。
【０００６】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）は、その長期間の遺伝子発現、ヘルパーウイルスなしには自律的に複製できないこと、分裂および非潜在細胞を形質導入する能力、および野生型感染からの病原性の欠如という性質を有しているため、遺伝子治療のための魅力的なベクターとして注目され始めている（例えば、Ｈａｄａｃｚｅｋ  ｅｔ  ａｌ．  Ｍｏｌ．  Ｔｈｅｒ．  １８（８），  １４５８−１４６１，  Ａｕｇ．  ２０１０を参照せよ）。ＡＡＶは、ディペンドウイルス属に属するヘルパー依存性ＤＮＡパルボウイルスである。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、そのような改良された核酸構築物、例えばポリヌクレオチドを提供し、これを、パーキンソン病の治療における遺伝子治療の目的で、全長ＡＡＤＣタンパク質をコードするドーパカルボキシラーゼ（「ＤＤＣ」）遺伝子配列からなるＡＡＶ由来ベクターと共に使用する。
【０００８】
本明細書中に記載されている核酸構築物は、少なくとも５’−ＩＴＲおよび３’−ＩＴＲからなり、その各々または両方が、約１個のＤＤＣ遺伝子配列に位置するＡＡＶに由来し得る。さらに、当該核酸構築物は、遺伝子発現およびクローン選択のために必要とされる付加的な成分をも含む。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本明細書には、ＡＡＤＣポリヌクレオチドの設計、調製、製造および／または処方のための組成物、方法、プロセス、キットおよびデバイスが記載されている。
いくつかの実施形態において、そのようなＡＡＤＣポリヌクレオチドは、プラスミドまたはベクターまたは組換えアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）によってコードされるか、またはそれらに含まれ得る。
【００１０】
本発明の様々な実施形態の詳細は、以下の説明に記載されている。本発明のその他の特徴、目的および利点は、説明および特許請求の範囲から明らかになるであろう。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
発明の組成物
本発明によれば、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、単独で、または追加の核酸配列（群）と組み合わせて機能し、ＡＡＤＣタンパク質をコードするように提供されている。本明細書中では、「ＡＡＤＣポリヌクレオチド」という語は、ＡＡＤＣタンパク質をコードする任意の核酸ポリマーを意味し、ＡＡＤＣタンパク質がベクター、プラスミドまたは翻訳可能な構築物中に存在する場合、そのようなＡＡＤＣタンパク質を細胞、組織、器官または生物中で発現させる。
【００１２】
ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、細胞内でプロセシングされる前駆体分子を含む。ＡＡＤＣポリヌクレオチドまたはそのプロセシングされた形態を、細胞に投与するためのプラスミド、ベクター、ゲノムまたは他の核酸発現ベクターでコードしてもよい。
【００１３】
いくつかの実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、ＡＡＶウイルスゲノムの成分として設計され、細胞内で処理されるＡＡＶウイルス粒子にパッケージングされ、野生型ＡＡＤＣタンパク質を産生する。
【００１４】
本明細書中では、野生型ＡＡＤＣタンパク質という語は、天然に存在するアイソフォームまたはＤＤＣ遺伝子由来の変異体のいずれかであり得る。ＡＡＤＣの異なるアイソフォームをコードする複数の選択的にスプライシングされた転写物変異体が同定されている。具体的には、ＤＤＣ遺伝子は、６つの異なるアイソフォームをコードする７つの転写変異体を産生する。ＤＤＣ転写物変異体１および２の双方が、ＡＡＤＣアイソフォーム１をコードする。いくつかの実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドはＤＤＣ転写物変異体２をコードし、それによって天然のＡＡＤＣアイソフォーム１（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿０００７８１．１）をコードする。この配列は次の通りである：ＭＮＡＳＥＦＲＲＲＧＫＥＭＶＤＹＶＡＮＹＭＥＧＩＥＧＲＱＶＹＰＤＶＥＰＧＹＬＲＰＬＩＰＡＡＡＰＱＥＰＤＴＦＥＤＩＩＮＤＶＥＫＩＩＭＰＧＶＴＨＷＨＳＰＹＦＦＡＹＦＰＴＡＳＳＹＰＡＭＬＡＤＭＬＣＧＡＩＧＣＩＧＦＳＷＡＡＳＰＡＣＴＥＬＥＴＶＭＭＤＷＬＧＫＭＬＥＬＰＫＡＦＬＮＥＫＡＧＥＧＧＧＶＩＱＧＳＡＳＥＡＴＬＶＡＬＬＡＡＲＴＫＶＩＨＲＬＱＡＡＳＰＥＬＴＱＡＡＩＭＥＫＬＶＡＹＳＳＤＱＡＨＳＳＶＥＲＡＧＬＩＧＧＶＫＬＫＡＩＰＳＤＧＮＦＡＭＲＡＳＡＬＱＥＡＬＥＲＤＫＡＡＧＬＩＰＦＦＭＶＡＴＬＧＴＴＴＣＣＳＦＤＮＬＬＥＶＧＰＩＣＮＫＥＤＩＷＬＨＶＤＡＡＹＡＧＳＡＦＩＣＰＥＦＲＨＬＬＮＧＶＥＦＡＤＳＦＮＦＮＰＨＫＷＬＬＶＮＦＤＣＳＡＭＷＶＫＫＲＴＤＬＴＧＡＦＲＬＤＰＴＹＬＫＨＳＨＱＤＳＧＬＩＴＤＹＲＨＷＱＩＰＬＧＲＲＦＲＳＬＫＭＷＦＶＦＲＭＹＧＶＫＧＬＱＡＹＩＲＫＨＶＱＬＳＨＥＦＥＳＬＶＲＱＤＰＲＦＥＩＣＶＥＶＩＬＧＬＶＣＦＲＬＫＧＳＮＫＶＮＥＡＬＬＱＲＩＮＳＡＫＫＩＨＬＶＰＣＨＬＲＤＫＦＶＬＲＦＡＩＣＳＲＴＶＥＳＡＨＶＱＲＡＷＥＨＩＫＥＬＡＡＤＶＬＲＡＥＲＥ（配列番号１）。
【００１５】
本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドを操作して、ＡＡＤＣポリヌクレオチド構築物を作製するために組み立てられたモジュール要素および／または配列モチーフを含むようにすることができる。
【００１６】
ＡＡＤＣポリヌクレオチド構築物
本発明によれば、ＡＡＤＣポリヌクレオチドが提供される。そのようなポリヌクレオチドは、ＡＡＤＣタンパク質の１つまたはそれ以上のアイソフォームまたは変異体をコードする連結ヌクレオシドの領域からなる核酸ポリマーからなる。
【００１７】
いくつかの実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、ＡＡＤＣタンパク質をコードするコドン最適化転写物からなる。
いくつかの実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、ＡＡＤＣタンパク質の１つまたはそれ以上の野生型アイソフォームまたは変異体をコードする配列領域からなる。そのようなポリヌクレオチドはまた、以下のいずれか１つまたはそれ以上をコードする配列領域からなっていてもよい：５’ＩＴＲ、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサー、ＣＭＶプロモーター、ｉｅ１エキソン１、ｉｅ１イントロン１、ｈｂＢグロビンイントロン２、ｈＢグロビンエキソン３、５’ＵＴＲ、３’ＵＴＲ、ｈＧＨポリ（Ａ）シグナルおよび／または３’ＩＴＲ。このような配列領域は、本明細書に教示されているか、または当該分野で公知の配列領域のいずれかであり得る。
【００１８】
いくつかの実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、配列番号２〜２３のいずれかの配列からなる。
一実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、配列番号２〜２３のいずれかに対してパーセント同一性を有する配列からなる。ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、配列番号２〜２３のいずれかに対して、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、あるいは１００％の同一性を有し得る。ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、配列番号２〜２３のいずれかに対して、１〜１０％、１０〜２０％、３０〜４０％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９９％、５０〜１００％  ６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９９％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９９％、７０〜１００％、８０〜８５％  ８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜９９％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜９９％、または９０〜１００％の同一性を有し得る。非限定的な一例として、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、配列番号６，７，８，９，１７，１８，１９，２０，２１，２２および２３のいずれかと８０％の同一性を有する配列からなる。別の非限定的な一例として、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、配列番号６，７，８，９，１７，１８，１９，２０，２１，２２および２３のいずれかと８５％の同一性を有する配列からなる。別の非限定的な一例として、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、配列番号６，７，８，９，１７，１８，１９，２０，２１，２２および２３のいずれかと９０％の同一性を有する配列からなる。別の非限定的な一例として、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、配列番号６，７，８，９，１７，１８，１９，２０，２１，２２および２３のいずれかと９５％の同一性を有する配列からなる。別の非限定的な一例として、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、配列番号６，７，８，９，１７，１８，１９，２０，２１，２２および２３のいずれかと９９％の同一性を有する配列からなる。
【００１９】
いくつかの実施形態では、ＡＡＤＣコード領域は１４４０ヌクレオチドの長さである。そのようなＡＡＤＣポリヌクレオチドは、ポリヌクレオチドの全部または一部にわたってコドン最適化され得る。
【００２０】
いくつかの実施形態では、ＡＡＤＣコード領域は１４４３ヌクレオチドの長さである。そのような場合、追加のコドンがポリヌクレオチドの３’末端に存在してもよい。
いくつかの実施形態では、ＡＡＤＣコード領域は１４４９ヌクレオチドの長さである。そのような場合、追加のコドンがポリヌクレオチドの３’末端に存在してもよい。
【００２１】
いくつかの実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、配列番号６〜９，１７〜２３のいずれかからなるが、５’ＩＴＲおよび／または３’ＩＴＲを欠いている。そのようなポリヌクレオチドは、プラスミドまたはベクターに組み込まれ、コードされたＡＡＤＣタンパク質を発現させるために利用され得る。
【００２２】
一実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、昆虫細胞（例えば、Ｓｆ９細胞）において産生され得る。
一実施形態において、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、トリプルトランスフェクションを用いて産生され得る。
【００２３】
一実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、ＡＡＤＣ  ｍＲＮＡ、少なくとも１つの５’ＩＴＲおよび少なくとも１つの３’ＵＴＲのコドン最適化オープンリーディングフレームからなり、ここでは、１つまたはそれ以上の５’ＩＴＲがプロモーター領域の５’末端に位置してもよく、１つまたはそれ以上の３’ＩＴＲがポリ（Ａ）シグナルの３’末端に位置していてもよい。ＡＡＤＣ  ｍＲＮＡは、プロモーター領域、５’非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’ＵＴＲ、およびポリ（Ａ）シグナルからなり得る。プロモーター領域は、エンハンサー要素、プロモーター要素、第１エキソン領域、第１イントロン領域、第２イントロン領域、および第２エキソン領域を含み得るが、これらに限定されない。非限定的な一例として、エンハンサーエレメントおよびプロモーターエレメントはＣＭＶ由来である。別の非限定的な一例として、第１エキソン領域は、ｉｅ１エキソン１またはその断片であり、第１イントロン領域は、ｉｅ１イントロン１またはその断片であり、第２イントロン領域は、ｈｂＢグロビンイントロン２またはその断片であり、第２エキソン領域は、ｈｂＢグロビンエキソン３またはその断片である。さらに別の非限定的な一例として、ポリ（Ａ）シグナルは、ヒト成長ホルモンに由来する。
【００２４】
一実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）に由来し得るプラスミドまたはベクターでコードされる。ＡＡＶは組換えＡＡＶウイルスであってもよく、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９（ｈｕ１４）、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ−ＤＪ、およびＡＡＶ−ＤＪ８の（これらに限定されない）キャプシド血清型からなり得る。非限定的な一例として、組換えＡＡＶウイルスのキャプシドはＡＡＶ２である。非限定的な一例として、組換えＡＡＶウイルスのキャプシドはＡＡＶｒｈ１０である。非限定的な一例として、組換えＡＡＶウイルスのキャプシドはＡＡＶ９（ｈｕ１４）である。非限定的な一例として、組換えＡＡＶウイルスのキャプシドはＡＡＶ−ＤＪである。非限定的な一例として、組換えＡＡＶウイルスのキャプシドはＡＡＶ９．４７である。非限定的な一例として、組換えＡＡＶウイルスのキャプシドはＡＡＶ−ＤＪ８である。
【００２５】
プロモーター
当業者は、標的細胞が、種特異的、誘導性、組織特異的または細胞周期特異的なプロモーターを含むがこれらに限定されるものではない特異的なプロモーターを必要とすることを認識するであろう（Ｐａｒｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ  Ｍｅｄ．３：１１４５−９  （１９９７）；この内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【００２６】
一実施形態では、プロモーターは、ＡＡＤＣポリヌクレオチドに対して効率的であると考えられるプロモーターである。
一実施形態では、プロモーターは、標的とされる細胞に対して効率的であると考えられるプロモーターである。
【００２７】
一実施形態では、プロモーターは、標的組織（神経系組織を含むが、これに限定されるものではない）において、ある期間中ペイロードの発現を提供する弱いプロモーターである。発現は、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１５時間後、１６時間後、１７時間後、１８時間後、１９時間後、２０時間後、２１時間後、２２時間後、２３時間後、１日後、２日後、３日後、４日後、５日後、６日後、１０日、１１日、１２日、１３日、２週間、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、３週間、２２日、２３日、２４日、２７日、２８日、２９日、３０日、３１日、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１１ヶ月、１年、１３ヶ月、１４ヶ月、１５ヶ月、１６ヶ月、１７ヶ月、１８ヶ月、１９ヶ月、２０ヶ月、２１ヶ月、２２ヶ月、２３ヶ月、２年、３年、４年、６年、７年、８年、９年、１０年、または１０年以上の期間、持続する。発現は、１〜５時間、１〜１２時間、１〜２日、１〜５日、１〜２週間、１〜３週間、１〜４週間、１〜２ヶ月、１〜４ヶ月、１  ６〜６ヶ月、３〜６ヶ月、３〜９ヶ月、４〜８ヶ月、６〜１２ヶ月、１〜２年、１〜５年、２〜５年、３〜６年、３〜８、４〜８年、または５〜１０年の期間、持続する。非限定的な一例として、プロモーターは、神経組織におけるペイロードの持続的発現のための弱いプロモーターである。別の非限定的な一例として、プロモーターは、神経系組織（ニューロン組織およびグリア組織を含むが、それらに限定されない）における持続的なフラタキシン発現を発現する弱いプロモーターである。
【００２８】
一実施形態では、ＦＲＤＡプロモーターは、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用される。
一実施形態では、ペイロードの第１エキソンの約５ｋｂ上流に位置する領域が存在する。非限定的な一例として、ＦＲＤＡプロモーターを用いた発現を可能にするために、フラタキシン遺伝子の第１エキソンの約４．９ｋｂ上流に位置する１７ｂｐ領域が存在する（例えば、Ｐｕｓｐａｓａｒｉ  ｅｔ  ａｌ．  Ｌｏｎｇ  Ｒａｎｇｅ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  ＦＸＮ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，  ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，  ２０１１を参照せよ；この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。
【００２９】
一実施形態では、プロモーターは、１ｋｂ未満のプロモーターであってよい。プロモーターは、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００、６１０、６２０、６３０、６４０、６５０、６６０、６７０、６８０、６９０、７００、７１０、７２０、７３０、７４０、７５０、７６０、７７０、７８０、７９０、８００、あるいは８００以上の長さであってよい。プロモーターは、２００〜３００，２００〜４００，２００〜５００，２００〜６００，２００〜７００，２００〜８００，３００〜４００，３００〜５００，３００〜６００，３００〜７００，３００〜８００、４００〜５００，４００〜６００，４００〜７００，４００〜８００，５００〜６００，５００〜７００，６００〜８００，６００〜７００，６００〜８００，７００〜８００の長さであってよい。
【００３０】
一実施形態では、プロモーターは、ＣＭＶおよびＣＢＡを含むがこれらに限定されない２つあるいはそれ以上の構成要素の組み合わせであってよい。各構成要素は、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００、６１０、６２０、６３０、６４０、６５０、６６０、６７０、６８０、６９０、７００、７１０、７２０、７３０、７４０、７５０、７６０、７７０、７８０、７９０、８００または８００以上の長さであってよい。各構成要素は、２００−３００、２００−４００、２００−５００、２００−６００、２００−７００、２００−８００、３００−４００、３００−５００、３００−６００、３００−７００、３００−８００、４００−５００、４００−６００、４００−７００、４００−８００、５００−６００、５００−７００、５００−８００、６００−７００、６００−８００、７００−８００の長さを有することができる。非限定的な一例として、プロモーターは、３８２ヌクレオチドのＣＭＶエンハンサー配列と２６０ヌクレオチドのＣＢＡプロモーター配列との組み合わせである。
【００３１】
一実施形態では、少なくとも１つのエレメントを本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用し、導入遺伝子標的特異性および発現を増強することができる（例えば、Ｖｉｒａｌ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｃａｓｓｅｔｔｅ  Ｅｌｅｍｅｎｔｓ  ｔｏ  Ｅｎｈａｎｃｅ  Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ  Ｔａｒｇｅｔ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ａｎｄ
Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ，  ２０１５を参照せよ；この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。導入遺伝子標的特異性および発現を増強するエレメントの非限定的な例には、プロモーター、内在性ｍｉＲＮＡ、転写後調節エレメント（ＰＲＥ）、ポリアデニル化（ＰｏｌｙＡ）シグナル配列および上流エンハンサー（ＵＳＥ）、ＣＭＶエンハンサーおよびイントロンがある。
【００３２】
一実施形態では、少なくとも１つのエレメントを本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用し、導入遺伝子標的特異性および発現を増強することができる（例えば、Ｖｉｒａｌ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｃａｓｓｅｔｔｅ  Ｅｌｅｍｅｎｔｓ  ｔｏ  Ｅｎｈａｎｃｅ  Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ  Ｔａｒｇｅｔ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ａｎｄ
Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ，  ２０１５を参照せよ；この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。一実施形態では、少なくとも１つのエレメントを本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用し、導入遺伝子標的特異性および発現を増強することができる（例えば、Ｖｉｒａｌ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｃａｓｓｅｔｔｅ  Ｅｌｅｍｅｎｔｓ  ｔｏ  Ｅｎｈａｎｃｅ  Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ  Ｔａｒｇｅｔ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ
Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ，  ２０１５を参照せよ；この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。ほとんどの組織において発現を促進するプロモーターには、ヒト伸長因子１α−サブユニット（ＥＦ１α）、最初期サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、ニワトリβ−アクチン（ＣＢＡ）およびその誘導体ＣＡＧ、βグルクロニダーゼ  ＧＵＳＢ）、またはユビキチンＣ（ＵＢＣ）がある。組織特異的発現要素を使用して、発現をニューロン、星状細胞、または希突起膠細胞に制限するために使用することができる特定の細胞型（神経系プロモーターを含むがこれに限定されない）に発現を制限することができる。ニューロンに対する組織特異的発現エレメントの非限定的な例には、ニューロン特異的エノラーゼ（ＮＳＥ）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、血小板由来成長因子Ｂ鎖（ＰＤＧＦ−β）、シナプシン（Ｓｙｎ）、メチル−ＣｐＧ結合タンパク質２（ＭｅＣＰ２）、ＣａＭＫＩＩ、ｍＧｌｕＲ２、ＮＦＬ、ＮＦＨ、ｎβ２、ＰＰＥ、ＥｎｋおよびＥＡＡＴ２プロモーターが挙げられる。星状細胞に対する組織特異的発現エレメントの非限定的な例には、グリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）およびＥＡＡＴ２プロモーターが挙げられる。希突起膠細胞に対する組織特異的発現エレメントの非限定的な例には、ミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）プロモーターが挙げられる。
【００３３】
一実施形態では、ユビキタスプロモーターを、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用することができる。ユビキタスプロモーターの非限定的な例には、ＣＭＶ、ＣＢＡ（誘導体ＣＡＧ、ＣＢｈなどを含む）、ＥＦ−１α、ＰＧＫ、ＵＢＣ、ＧＵＳＢ（ｈＧＢｐ）、およびＵＣＯＥ（ＨＮＲＰＡ２Ｂ１−ＣＢＸ３のプロモーター）が挙げられる。Ｙｕら  （Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐａｉｎ  ２０１１，  ７：６３；この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）は、レンチウイルスベクターを用いて、ラットＤＲＧ細胞および一次ＤＲＧ細胞におけるＣＡＧ、ＥＦＩα、ＰＧＫおよびＵＢＣプロモーター下でのｅＧＦＰの発現を評価し、ＵＢＣが他の３つのプロモーターよりも弱い発現しか示さず、すべてのプロモーターについて見られたグリア発現がわずか１０〜１２％であったことを見いだした。Ｓｏｄｅｒｂｌｏｍら（Ｅ．  Ｎｅｕｒｏ  ２０１５；この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）は、運動皮質に注入後のＡＡＶ８におけるＣＭＶおよびＵＢＣプロモーターによるｅＧＦＰの発現、およびＣＭＶプロモーターによるＡＡＶ２におけるｅＧＦＰの発現を評価した。ＵＢＣまたはＥＦＩαプロモーターを含むプラスミドの鼻腔内投与は、ＣＭＶプロモーターによる発現よりも長く持続した気道発現を示した（例えば、Ｇｉｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ２００１，  Ｖｏｌ．  ８，  １５３９−１５４６を参照せよ；この内容は、その全体が参照により本明細書に組み入れられる）。Ｈｕｓａｉｎら（Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ２００９；この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）は、ｈＧＵＳＢプロモーター、ＨＳＶ−１ＬＡＴプロモーター、およびＮＳＥプロモーターを用いてＨβＨ構築物を評価し、ＨβＨ構築物がマウスの脳におけるＮＳＥよりも弱い発現を示したことを見いだした。ＰａｓｓｉｎｉおよびＷｏｌｆｅ（Ｊ．  Ｖｉｒｏｌ．  ２００１，
１２３８２−１２３９２；この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）は、新生児マウスにおける脳室内注射後のＨβＨベクターの長期効果を評価し、持続的発現が少なくとも１年間あったことを見いだした。Ｘｕ  ら（Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ２００１，  ８，  １３２３−１３３２；この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）は、ＣＭＶ−ｌａｃＺ、ＣＭＶ−ｌｕｃ、ＥＦ、ＧＦＡＰ、ｈＥＮＫ、ｎＡＣｈＲ、ＰＰＥ、ＰＰＥ  ＋  ｗｐｒｅ、ＮＳＥ（０．３ｋｂ）、ＮＳＥ（１．８ｋｂ）、およびＮＳＥ（１．８ｋｂ  ＋  ｗｐｒｅ）に比較して、ＮＦ−ＬおよびＮＦ−Ｈプロモーターを使用した場合に、すべての脳領域において発現が低いことを見いだした。Ｘｕらは、プロモーター活性の降順が、ＮＳＥ（１．８ｋｂ）、ＥＦ、ＮＳＥ（０．３ｋｂ）、ＧＦＡＰ、ＣＭＶ、ｈＥＮＫ、ＰＰＥ、ＮＦＬおよびＮＦＨであることを見出した。ＮＦＬは６５０ヌクレオチドのプロモーターであり、ＮＦＨは９２０ヌクレオチドのプロモーターであり、いずれも肝臓には存在しないが、ＮＦＨは感覚固有受容体ニューロン、脳および脊髄に豊富であり、ＮＦＨは心臓に存在する。Ｓｃｎ８ａは、ＤＲＧ、脊髄、および脳に広く発現する４７０ヌクレオチドのプロモーターであり、海馬ニューロンおよび小脳プルキンエ細胞、皮質、視床および視床下部に特に高い発現が見られる  （例えば、Ｄｒｅｗｓ  ｅｔ  ａｌ．  ２００７  およびＲａｙｍｏｎｄ  ｅｔ  ａｌ．  ２００４を参照せよ；これらの各々の内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。
【００３４】
一実施形態において、ＵＢＣプロモーターを、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用してよい。ＵＢＣプロモーターは、３００〜３５０ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な一例として、ＵＢＣプロモーターは３３２ヌクレオチドの長さである。
【００３５】
一実施形態において、ＧＵＳＢプロモーターを、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドと共に使用してよい。ＧＵＳＢプロモーターは、３５０〜４００ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な例として、ＧＵＳＢプロモーターは３７８ヌクレオチドの長さである。非限定的な一例として、構築物は、ＡＡＶ−プロモーター−ＣＭＶ／グロビンイントロンｈＦＸＮ−ＲＢＧであってよく、この構築物では、ＡＡＶが自己相補的であってよく、ＡＡＶがＤＪ血清型であってよい。
【００３６】
一実施形態では、ＮＦＬプロモーターを、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用してよい。ＮＦＬプロモーターは、６００〜７００ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な一例として、ＮＦＬプロモーターは６５０ヌクレオチドの長さである。非限定的な一例として、構築物は、ＡＡＶ−プロモーター−ＣＭＶ／グロビンイントロンｈＦＸＮ−ＲＢＧであってよく、この構築物では、ＡＡＶが自己相補的であってよく、ＡＡＶがＤＪ血清型であってよい。
【００３７】
一実施形態では、ＮＦＨプロモーターを、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用することができる。前記ＮＦＨプロモーターは、９００〜９５０ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な一例として、ＮＦＨプロモーターは９２０ヌクレオチドの長さである。非限定的な一例として、構築物は、ＡＡＶ−プロモーター−ＣＭＶ／グロビンイントロンｈＦＸＮ−ＲＢＧであってよく、この構築物では、ＡＡＶが自己相補的であってよく、ＡＡＶがＤＪ血清型であってよい。
【００３８】
一実施形態では、ｓｃｎ８ａプロモーターを、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用することができる。ｓｃｎ８ａプロモーターは、４５０〜５００ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な一例として、ｓｃｎ８ａプロモーターは４７０ヌクレオチドの長さである。非限定的な一例として、構築物は、ＡＡＶ−プロモーター−ＣＭＶ／グロビンイントロンｈＦＸＮ−ＲＢＧであってよく、この構築物では、ＡＡＶが自己相補的であってよく、ＡＡＶがＤＪ血清型であってよい。
【００３９】
一実施形態では、ＦＸＮプロモーターを、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用することができる。
一実施形態では、ＰＧＫプロモーターを、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用することができる。
【００４０】
一実施形態では、ＣＢＡプロモートを、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用することができる。
一実施形態では、ＣＭＶプロモーターを、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用することができる。
【００４１】
一実施形態では、肝臓または骨格筋プロモーターを、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用することができる。肝臓プロモーターの非限定的な例には、ｈＡＡＴおよびＴＢＧが挙げられる。骨格筋プロモーターの非限定的な例には、Ｄｅｓｍｉｎ、ＭＣＫおよびＣ５−１２が挙げられる。
【００４２】
一実施形態では、エンハンサーエレメント、プロモーターおよび／または５’ＵＴＲイントロンを、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用することができる。エンハンサーはＣＭＶエンハンサーであってよいが、これに限定されず；プロモーターはＣＭＶ、ＣＢＡ、ＵＢＣ、ＧＵＳＢ、ＮＳＥ、サナプシン、ＭｅＣＰ２、およびＧＦＡＰプロモーターであってよいが、これに限定されず；また５’ＵＴＲ／イントロンは、ＳＶ４０およびＣＢＡ−ＭＶＭであってよいが、これらに限定されない。非限定的な例として、組み合わせて使用されるエンハンサー、プロモーターおよび／またはイントロンには以下が挙げられる：（１）ＣＭＶエンハンサー、ＣＭＶプロモーター、ＳＶ４０  ５’ＵＴＲイントロン；（２）ＣＭＶエンハンサー、ＣＢＡプロモーター、ＳＶ４０  ５’ＵＴＲイントロン；（３）ＣＭＶエンハンサー、ＣＢＡプロモーター、ＣＢＡ−ＭＶＭ  ５’ＵＴＲイントロン；（４）ＵＢＣプロモーター；（５）ＧＵＳＢプロモーター；（６）ＮＳＥプロモーター；（７）シノプシンプロモーター；（８）ＭｅＣＰ２プロモーターおよび（９）ＧＦＡＰプロモーター。
【００４３】
一実施形態では、操作されたプロモーターを、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用することができる。
イントロン
一実施形態では、少なくとも１つのエレメントを本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用し、導入遺伝子標的特異性および発現を増強することができる（例えば、Ｖｉｒａｌ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｃａｓｓｅｔｔｅ  Ｅｌｅｍｅｎｔｓ  ｔｏ  Ｅｎｈａｎｃｅ  Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ  Ｔａｒｇｅｔ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ａｎｄ
Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ，  ２０１５を参照せよ；この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。一実施形態では、少なくとも１つのエレメントを本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドとともに使用し、イントロンなどの導入遺伝子標的特異性および発現を増強することができる（例えば、Ｖｉｒａｌ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｃａｓｓｅｔｔｅ  Ｅｌｅｍｅｎｔｓ  ｔｏ  Ｅｎｈａｎｃｅ  Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ  Ｔａｒｇｅｔ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ，  ２０１５を参照せよ；この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。イントロンの非限定的な例には、ＭＶＭ（６７〜９７  ｂｐｓ）、Ｆ．ＩＸ短縮イントロン１（３００  ｂｐｓ）、βグロビンＳＤ／免疫グロブリン重鎖スプライスアクセプター（２５０  ｂｐｓ）、アデノウイルススプライスドナー／免疫グロブリンスプライスアクセプター（５００  ｂｐｓ）、ＳＶ４０晩期スプライスドナー／スプライスアクセプター（１９Ｓ／１６Ｓ）（１８０ｂｐｓ）、およびハイブリッドアデノウイルススプライスドナー／ＩｇＧスプライスアクセプター（２３０ｂｐｓ）が挙げられる。
【００４４】
一実施形態では、イントロンは１００〜５００ヌクレオチドの長さを有し得る。イントロンは、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０または５００の長さを有し得る。イントロンは、８０〜１００、８０〜１２０、８０〜１４０、８０〜１６０、８０〜１８０、８０〜２００、８０〜２５０、８０〜３００、８０〜３５０、８０〜４００、８０〜４５０、８０〜５００、２００〜３００、２００〜４００、２００〜５００、３００〜４００、３００〜５００または４００〜５００の長さを有し得る。
【００４５】
細胞への導入
本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドは、様々なアプローチのいずれかを用いて宿主細胞に導入することができる。ＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターによる感染を行うことができる。適切なウイルスベクターの例には、複製欠損レトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ベクター、およびレンチウイルスベクターが挙げられる。
【００４６】
本発明によれば、治療および／または診断に使用するためのウイルスベクターは、目的の核酸ペイロードまたは  カーゴの形質導入に必要な最小構成要素まで蒸留または還元されたウイルスからなる。
【００４７】
このようにして、ウイルスベクターは特異的投与のための媒体として設計され、そのようなウイルスベクターは野生型ウイルスに見られる有害な複製および／または組み込みの特徴を欠いている。
【００４８】
本明細書中では、「ベクター」という語は、本発明のポリヌクレオチドなどの異種分子を輸送するか、形質導入するか、あるいはそれらの異種分子の担体として作用する任意の分子または部分を意味する。「ウイルスベクター」という語は、目的のペイロード分子をコードするかまたは目的のペイロード分子からなる１つまたはそれ以上のポリヌクレオチド領域をからなるベクターを意味し、その例には、導入遺伝子、ポリペプチドまたはマルチポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが挙げられる。本発明のウイルスベクターは、組み換えにより産生され、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）親または参照配列に基づくものであってもよい。本発明において有用であり得る血清型は、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９（ｈｕ１４）、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ−ＤＪとＡＡＶ−ＤＪ８．から生じるあらゆるものが挙げられる。
【００４９】
一実施形態において、本発明において有用であり得る血清型は、ＡＡＶ−ＤＪ８であり得る。ＡＡＶ−ＤＪ８のアミノ酸配列は、ヘパリン結合ドメイン（ＨＢＤ）を除去するために、２つまたはそれ以上の突然変異を含んでいてよい。非限定的な一例として、米国特許第７，５８８，７７２号（この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に配列番号１として記載されているＡＡＶ−ＤＪ配列は、以下に示す２つの突然変異からなっていてよい：（１）アミノ酸５８７のアルギニン（Ｒ；ａｒｇ）がグルタミン（Ｑ；ｇｌｎ）に変わっているＲ５８７Ｑ、および（２）アミノ酸５９０のアルギニン（Ｒ；ａｒｇ）がスレオニン（Ｔ；ｔｈｒ）に変わっているＲ５９０Ｔ。別の非限定的な一例として、当該ＡＡＶ−ＤＪ配列は、以下に示す３つの突然変異からなっていてよい：（１）アミノ酸４０６のリシン（Ｋ；ｌｙｓ）がアルギニン（Ｒ；ａｒｇ）に変わっているＫ４０６Ｒ、（２）  アミノ酸５８７のアルギニン（Ｒ；ａｒｇ）がグルタミン（Ｑ；ｇｌｎ）に変わっているＲ５８７Ｑ、（３）アミノ酸５９０のアルギニン（Ｒ；ａｒｇ）がスレオニン（Ｔ；ｔｈｒ）に変わっているＲ５９０Ｔ。
【００５０】
ＡＡＶベクターはまた、自己相補的ＡＡＶベクター（ｓｃＡＡＶ）からなっていてよい。ｓｃＡＡＶベクターは、双方のＤＮＡ鎖を含み、それらが共にアニーリングし、二本鎖ＤＮＡを形成する。第二鎖合成をスキップすることにより、ｓｃＡＡＶは細胞内での迅速な発現を可能にする。
【００５１】
医薬組成物
投与されるペイロード（例えば、ＡＡＤＣコード配列）からなる、本明細書に記載されている医薬組成物（例えば、ＡＡＶなどのウイルスなどのコードプラスミドまたは発現ベクターを含むポリヌクレオチド）の記載は、主にヒトへの投与に適した医薬組成物に関するものであり、そのような組成物は、一般に、他の動物（例えば、ヒト以外の動物、例えば、ヒト以外の哺乳動物）への投与に適している。医薬組成物を種々の動物への投与に適したものにするために、ヒトへの投与に適した医薬組成物の改変はよく理解されており、通常の熟練した獣医学の薬理学者は、もし実験を行なうとすれば、単に通常の実験でこのような改変を設計および／または実施することができる。当該医薬組成物の投与が企図される対象には、ヒトおよび／または他の霊長類；ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ネコ、イヌ、マウスおよび／またはラットのような商業的に関連する哺乳動物を含む哺乳類；および／または家禽、ニワトリ、アヒル、ガチョウ、および／またはシチメンチョウのような商業的に関連する鳥類を含むが、それらに限定されない。
【００５２】
いくつかの実施形態では、組成物は、ヒト、ヒトの患者、または対象に投与される。本開示の目的においては、「有効成分」という語句は、一般に、ペイロードを担持するウイルスベクター、または本明細書に記載のウイルスベクターによって投与されるポリヌクレオチドペイロード分子のいずれかを指す。
【００５３】
本明細書に記載された医薬組成物の製剤は、薬理学の分野において既知または今後開発される任意の方法によって調製することができる。一般に、そのような調製方法は、活性成分を賦形剤および／または１つまたはそれ以上の他の補助成分と会合させる工程を包含し、必要であればおよび／または望ましい場合には、生成物を所望の単回投与単位または複数回投与単位に、分割し、成形し、および／または包装する工程をも包含する。
【００５４】
本発明による医薬組成物中の活性成分、薬学的に許容される賦形剤および／または任意の追加の成分の相対量は、処置される対象の同一性、サイズおよび／または状態に依存して変化し、さらに  組成物が投与されるルートに依存して変化する。
【００５５】
一実施形態では、医薬組成物は、ＡＡＶキャプシドおよびＡＡＶベクターゲノムからなる組換えアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターからなる。ＡＡＶベクターゲノムは、本明細書に記載の少なくとも１つのＡＡＤＣポリヌクレオチドを含んでもよく、その例には、配列番号６，７，８，９，１７，１８，１９，２０，２１，２２および２３、あるいはそれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する変異体が含まれるがそれらに限定されない。医薬組成物中の組換えＡＡＶベクターの少なくとも７０％は、ＡＡＶベクターゲノムを含む。
【００５６】
製剤化
それらをコードするＡＡＤＣポリヌクレオチドまたはウイルスベクターは、以下の目的のために１つあるいはそれ以上の賦形剤を用いて、製剤化される：（１）安定性を高める；（２）細胞トランスフェクションまたは形質導入を高める；（３）持続放出または遅延放出を可能にする；（４）生体内分布を変化させる（例えば、ウイルスベクターを特定の組織または細胞型に標的化する）。
【００５７】
本発明の製剤には、限定することなく、生理食塩水、リピドイド、リポソーム、脂質ナノ粒子、ポリマー、リポプレックス、コア−シェルナノ粒子、ペプチド、タンパク質、ウイルスベクターでトランスフェクションした細胞（例えば、対象への移植のための細胞）、ナノ粒子模倣物、およびそれらの組み合わせを含めてよい。さらに、本発明のウイルスベクターは、自己組織化核酸ナノ粒子を用いて製剤化してよい。
【００５８】
本明細書に記載された医薬組成物の製剤は、薬理学の分野において既知または今後開発される任意の方法によって調製することができる。一般に、そのような調製方法は、有効成分を賦形剤および／または１つまたはそれ以上の他の補助成分と会合させる工程を含む。
【００５９】
本開示による医薬組成物は、バルクで、単一の単位用量として、および／または複数の単一単位用量として調製、包装および／または販売されてよい。本明細書では、「単位用量」という語は、所定量の活性成分からなる医薬組成物の個別の量を指す。活性成分の量は、一般的に、対象に投与されるであろう活性成分の用量および／またはこのような用量の特定のニーズを満たす一部分（例えば、そのような用量の半分または三分の一）に等しい。
【００６０】
本開示による医薬組成物中の活性成分、薬学的に許容される賦形剤および／または任意の追加の成分の相対量は、処置される対象の同一性、サイズおよび／または状態に依存して変化し、さらに組成物が投与されるルートに依存して変化する。例えば、組成物は、０．１％〜９９％（ｗ／ｗ）の有効成分からなっていてよい。一例として、組成物は、０．１％〜１００％（例えば、０．５〜５０％、１〜３０％、５〜８０％、少なくとも８０％（ｗ／ｗ））の活性成分からなっていてよい。
【００６１】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の製剤は、少なくとも１個のペイロード分子（例えば１個のＡＡＤＣポリヌクレオチド）を含んでいてよい。非限定的な一例として、製剤は、１個、２個、３個、４個、または５個のＡＡＤＣポリヌクレオチドペイロード分子を含んでいてよい。
【００６２】
いくつかの実施形態において、薬学的に許容される賦形剤は、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％純粋であってよい。いくつかの実施形態において、賦形剤は、ヒトおよび獣医学のための使用が承認されている。いくつかの実施形態において、賦形剤は、米国食品医薬品局によって承認されている。いくつかの実施形態において、賦形剤は、医薬グレードのものである。いくつかの実施形態において、賦形剤は、米国薬局方（ＵＳＰ）、欧州薬局方（ＥＰ）、英国薬局方および／または国際薬局方の基準を満たす。
【００６３】
本明細書では、賦形剤は、所望の特定の剤形に適したものである限り、任意のおよび全ての溶媒、分散媒、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散または懸濁助剤、界面活性剤、等張剤、増粘剤または乳化剤、防腐剤などを含むが、これらに限定されない。医薬組成物を調製するための様々な賦形剤および組成物を調製するための技術は、当該分野で公知である（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，  ２１ｓｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ａ．  Ｒ．  Ｇｅｎｎａｒｏ，  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，  ＭＤ，  ２００６を参照せよ；その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。任意の従来の賦形剤媒体が、任意の望ましくない生物学的効果を生じさせることによって、あるいは医薬組成物の他の成分（群）と有害に相互作用することによって、ある物質またはその誘導体と不適合でない限りにおいては、従来の賦形剤媒体の使用は、本開示の範囲内で考えられてよい。
【００６４】
希釈剤の例には、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、リン酸ナトリウム乳糖、ショ糖、セルロース、微晶質セルロース、カオリン、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、塩化ナトリウム、乾燥デンプン、コーンスターチ、粉末糖等、および／またはそれらの組み合わせが含まれるが、それらに限定されない。
【００６５】
一実施形態において、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、投与前にヒドロゲル中で製剤化してよい。ヒドロゲルは、水分含量が多いため、天然組織に類似した柔軟性を有する。
別の実施形態において、ＡＡＤＣポリヌクレオチド製剤の投与の前に、ヒドロゲルを対象に投与してよい。非限定的な一例として、ヒドロゲルの投与部位は、ＡＡＤＣポリヌクレオチド製剤の投与部位から、３インチ以内（例えば、２．９、２．８、２．７、２．６、２．５、２．４、２．３、２．２、２．１、２．０、１．９、１．８、１．７、１．６、１．５、１．４、１．３、１．２、１．１、１．０、０．９、０．８、０．７、０．６、０．５、０．４、０．３、０．２、０．１あるいは０．１インチ未満）であってよい。
【００６６】
一実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、生食水中で投与してよい。非限定的な一例として、製剤は、０．００１％プルロン酸（Ｆ−６８）を含むリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）であってもよい。さらに、製剤は滅菌されていてもよい。
【００６７】
不活性成分
いくつかの実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチド製剤は、不活性成分である少なくとも１つの賦形剤を含み得る。本明細書中では、「不活性成分」という語は、製剤に含まれる１つ以上の不活性薬剤を指す。いくつかの実施形態では、本発明の処方物において使用され得る不活性成分の全てまたは一部は、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって承認されているか、あるいは承認されていない。
【００６８】
本明細書に開示されるＡＡＤＣポリヌクレオチドを保有するウイルスベクターの製剤は、カチオンまたはアニオンを含み得る。一実施形態では、製剤は、限定されないが、Ｚｎ２＋、Ｃａ２＋、Ｃｕ２＋、Ｍｇ＋およびそれらの組み合わせなどの金属カチオンを含む。非限定的な一例として、製剤は、金属陽イオンと複合体を形成したポリマーおよびＡＡＤＣポリヌクレオチドを含み得る（米国特許第６，２６５，３８９号および第６，５５５，５２５号を参照せよ；それぞれその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【００６９】
投与
本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、任意の経路によって投与され、治療上有効な結果もたらす。これらには、以下が含まれるが、これらに限定されない：硬膜外（硬膜内）、口腔（口を介す）、経皮的、経皮、脳内（大脳に）、脳室内（脳室に）、皮下（皮膚の下）、経鼻投与（鼻を通じて）、静脈内（静脈内）、静脈内ボーラス、点滴、動脈内（動脈内）、くも膜下腔内（脊柱管内）、子宮内、脊髄内（尾骨内）、大槽内（大槽内の小脳髄腔内）、椎間板内（脊柱管内）、硬膜内（または硬膜下）、髄膜内（髄膜内）、脊髄内（脊柱内）、髄腔内（脳脊髄軸の任意のレベルの脳脊髄液内）、胸腔内（胸腔内）、線条体（線条体、尾状核および／または被殻内）、尾骨ブロック、神経ブロック、または脊髄が挙げられる。特定の実施形態では、組成物は、それらが血液脳関門、血管関門またはその他の上皮障壁を通過するように投与してよい。一実施形態では、投与経路のための製剤は、少なくとも１つの不活性成分を含んでいてよい。
【００７０】
一実施形態では、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、右被殻および／または左対象被殻に投与してよい。投与は、被殻の１つまたはそれ以上の部位（例えば２つの部位、３つの部位、４つの部位、または４つ以上の部位を含むが、これらに限定されない）で行なってよい。非限定的な一例として、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターは、左被殻の２つの部位および右被殻の２つの部位に投与される。
【００７１】
一実施形態では、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターの製剤の対象への投与は、対象の被殻（例えば、左および／または右の被殻）の適用範囲を提供する。一態様では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターの投与は、対象の左および／または右の被殻に、少なくとも８％、９％、１０％、１３％、１４％、１５％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％以上の適用範囲を提供する。非限定的な一例として、適用範囲は少なくとも２０％である。非限定的な一例として、適用範囲は少なくとも４０％である。別の態様では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドを含むウイルスベクターの投与は、対象の左および／または右の被殻の表面積の少なくとも８％、９％、１０％、１３％、１４％、１５％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９５％以上の適用範囲を提供する。非限定的な一例として、全適用範囲は少なくとも２０％である。非限定的な一例として、全適用範囲は少なくとも４０％である。さらに別の態様では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターの投与は、対象の左および／または右の被殻に対し、または対象の左および／または右の被殻の全表面積に対し、１０〜４０％、２０〜４０％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜５０％、３０〜４０％、３５〜４０％、３０〜６０％、４０〜７０％、５０〜８０％または６０〜９０％の適用範囲を提供する。
【００７２】
一実施形態において、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターの製剤の対象への投与は、対象の後部被殻（例えば、左および／または右の後部被殻）の適用範囲を提供する。一態様では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターの投与は、対象の左および／または右の後部被殻の少なくとも１０％、１５％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９５％以上の適用範囲を提供する。非限定的な一例として、適用範囲は少なくとも２０％である。非限定的な一例として、適用範囲は少なくとも４０％である。一態様では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターの投与は、対象の左および／または右の後部被殻の表面積の少なくとも１０％、１５％、２０％、２１％、２２％  、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９５％以上の適用範囲を提供する。非限定的な一例として、全適用範囲は少なくとも２０％  である。非限定的な一例として、全適用範囲は少なくとも４０％である。さらに別の態様では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターの投与は、対象の左および／または右の後部被殻に対し、または対象の左および／または右被殻の全表面積に対して、１０〜４０％、２０〜５０％、３０〜６０％、４０〜７０％、５０〜８０％または６０〜９０％の適用範囲を提供する。
【００７３】
一実施形態では、対象に、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターは、黒質緻密部（ＳＮｐｃ）および腹側被蓋領域（ＶＴＡ）に、あるいは線条体内に（尾状核および被殻に）または視床下部核（ＳＴＮ）に、バイラテラル注入を介して、安全に投与され得る。
【００７４】
一実施形態では、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドは、各被殻へのカテーテルの急性両側留置を用いて投与され得る。その留置は、当技術分野で知られているか、または本明細書に記載されている磁気共鳴画像（ＭＲＩ）ガイド下の定位神経外科手技を使用して行なうことができる。さらに、ガドリニウム系の造影剤（例えば、ＰＲＯＨＡＮＣＥ（登録商標））を含むがそれに限定されない造影剤を製剤に使用して、製剤の分布をモニターし、確認することができる。
【００７５】
一実施形態では、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドをからなるウイルスベクターを、被殻（例えば、後交連被殻）へのバイラテラル定位ＣＥＤ補助ステップ注入により、対象に投与し得る。
【００７６】
一実施形態では、本発明によるウイルスベクター医薬組成物のＣＮＳの細胞（例えば、実質）への投与は、［ＶＧ／時間＝ｍＬ／時間＊ＶＧ／ｍＬ］によって定義される投与速度からなり、ここで、ＶＧはウイルスゲノムであり、ＶＧ／ｍＬは組成物の濃度であり、ｍＬ／時間は長期間注入の速度である。
【００７７】
一実施形態では、本発明によるウイルスベクター医薬組成物のＣＮＳの細胞（例えば、実質）への投与は、最高で１ｍＬの注入からなる。一実施形態において、本発明によるウイルスベクター医薬組成物のＣＮＳの細胞（例えば、実質）への投与は、０．００１、０．００２、０．００３、０．００４、０．００５、０．０１０、０．０１５、０．０２０、０．０２５、０．０３０、０．０４０、０．０５０、０．０６０、０．０７０、０．０８０、０．０９０、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８または０．９ｍＬである。
【００７８】
一実施形態において、本発明によるウイルスベクター医薬組成物のＣＮＳの細胞（例えば、実質）への投与は、約１ｍＬ〜約１２０ｍＬの間の注入からなる。一実施形態では、本発明によるウイルスベクター医薬組成物のＣＮＳの細胞（例えば、実質）への投与は、０．１、１、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９または１２０ｍＬの注入からなる。一実施形態では、ＣＮＳの細胞（例えば、実質）へのＡＡＶ粒子の投与は、少なくとも３ｍＬの注入からなる。一実施形態では、ＣＮＳの細胞（例えば、実質）へのＡＡＶ粒子の投与は、３ｍＬの注入からなる。一実施形態では、ＣＮＳの細胞（例えば、実質）へのＡＡＶ粒子の投与は、少なくとも１０ｍＬの注入からなる。一実施形態では、ＣＮＳの細胞（例えば、実質）へのＡＡＶ粒子の投与は、少なくとも１０ｍＬの注入から構成されている。
【００７９】
一実施形態では、対象のＣＮＳ（例えば、実質）の細胞に投与されるウイルスベクター医薬組成物の容量は、５０μｌ、１００μｌ、２００μｌ、３００μｌ、４００μｌ、５００μｌ、６００μｌ  ７００μｌ、８００μｌ、９００μｌ、１０００μｌ、１１００μｌ、１２００μｌ、１３００μｌ、１４００μｌ、１５００μｌ、１６００μｌ、１７００μｌ、１８００μｌ、１９００μｌ、２０００μｌまたは２０００μｌ以上である。
【００８０】
一実施形態では、対象の脳の両半球の領域に投与されるウイルスベクター医薬組成物の容量は、５０μｌ、１００μｌ、２００μｌ、３００μｌ、４００μｌ、５００μｌ、６００μｌ、７００μｌ  ９００μｌ、１０００μｌ、１１００μｌ、１２００μｌ、１３００μｌ、１４００μｌ、１５００μｌ、１６００μｌ、１７００μｌ、１８００μｌ、１９００μｌ、２０００μｌ、または２０００μｌ以上である。非限定的な一例として、両方の半球の領域に投与される用量は、２００μｌである。別の非限定的な一例として、両方の半球の領域に送達される用量は、９００ｕｌである。さらに別の非限定的な一例として、両方の半球の領域に投与される容量は、１８００μｌである。
【００８１】
一実施形態では、対象の脳の両半球の被殻に投与されるウイルスベクター医薬組成物の容量は、５０μｌ、１００μｌ、２００μｌ、３００μｌ、４００μｌ、４５０μｌ、５００μｌ、６００μｌ  ７００μｌ、８００μｌ、９００μｌ、１０００μｌ、１１００μｌ、１２００μｌ、１３００μｌ、１４００μｌ、１５００μｌ、１６００μｌ、１７００μｌ、１８００μｌ、１９００μｌ、２０００μｌ、または２０００μｌ以上である。非限定的な一例として、両半球の被殻に投与される容積は１００μｌである。別の非限定的な一例として、両半球の被殻に投与される体積は２００μｌである。非限定的な一例として、両半球の被殻に投与される容積は３００μｌである。別の非限定的な一例として、両半球の被殻に投与される容積は４５０μｌである。別の非限定的な一例として、両半球の被殻に投与される容積は９００ｕｌである。さらに別の非限定的な一例として、両半球の被殻に投与される容積は、１８００ｕｌである。
【００８２】
非限定的な一例として、一個体の対象に投与される総容量は、一つまたはそれ以上の投与部位（例えば、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、あるいは５つ以上の投与部位）の間で分割される。非限定的な一例として、総容量は、左被殻への投与と右被殻への投与の間で分割される。別の非限定的な一例として、総容量は、左右の被殻の各々への２つの投与部位の間で分割される。
【００８３】
一実施形態において、ウイルスベクター医薬組成物は、有窓針を用いて投与される。有窓針の非限定的な例は、米国特許第８，３３３，７３４号、第７，１３５，０１０号、第７，５７５，５７２号、第７，６９９，８５２号、第４，４１１，６５７号、第６，８９０，３１９号、第６，６１３，０２６号、第６，７２６，６５９号、第６，５６５，５７２号、第６，５２０，９４９号、第６，３８２，２１２号、第５，８４８，９９６号、第５，７５９，１７９号、第５，６７４，２６７号、第５，５８８，９６０号、第５，４８４，４０１号、第５，１９９，４４１号、第５，０１２，８１８号、第４，４７４，５６９号、第３，７６６，９０７号、第３，５５２，３９４号に記載されており、その各々の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００８４】
一実施形態では、組成物は、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドからなり、ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、ＡＡＶウイルス粒子中にパッケージングされたＡＡＶウイルスゲノムの成分である。組成物中で、ＡＡＤＣポリヌクレオチド（本明細書では空のキャプシドとも呼ばれる）を含まないＡＡＶウイルス粒子に対する、ＡＡＤＣポリヌクレオチド（本明細書中ではＡＡＤＣ粒子とも呼ばれる）を含むＡＡＶウイルス粒子のパーセント（％）比は、０：１００、１：９９、０：９０、１５：８５、２５：７５、３０：７０、５０：５０、７０：３０、８５：１５、９０：１０、９９：１、または１００：０である。非限定的な一例として、空のキャプシドに対するＡＡＤＣ粒子のパーセント比は５０：５０である。別の非限定的な一例として、空のカプシドに対するＡＡＤＣ粒子のパーセント比は７０：３０である。別の非限定的な一例として、空のキャプシドに対するＡＡＤＣ粒子のパーセント比は８５：１５である。別の非限定的な一例として、空のキャプシドに対するＡＡＤＣ粒子のパーセント比は１００：０である。
【００８５】
一実施形態では、本明細書に記載の組成物は、少なくとも１，５，１０，１５，２０，２５，３０，３５，４０，４５，５０，５１，５２，５３，５４，５５，６０，６５，７０，７５，８０，８１，８２，８３，８４，８５，８６，８７，８８，８９，９０，９１，９２，９３，９４，９５，９６，９７，９８，９９、または９９％を越えるＡＡＤＣ粒子からなる。非限定的な一例として、組成物は少なくとも５０％のＡＡＤＣ粒子からなる。別の非限定的な一例として、組成物は少なくとも５２％のＡＡＤＣ粒子からなる。別の非限定的な一例として、組成物は少なくとも５８％のＡＡＤＣ粒子からなる。別の非限定的な一例として、組成物は少なくとも７０％のＡＡＤＣ粒子からなる。別の非限定的な一例として、組成物は少なくとも８３％のＡＡＤＣ粒子からなる。別の非限定的な一例として、組成物は少なくとも８５％のＡＡＤＣ粒子からなる。別の非限定的な一例として、組成物は少なくとも９９％のＡＡＤＣ粒子からなる。別の非限定的な一例として、組成物は１００％ＡＡＤＣ粒子からなる。
【００８６】
一実施形態では、本明細書に記載の組成物は、１〜１０％、１０〜２０％、３０〜４０％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９９％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９９％、７０〜１００％、８０〜８５％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜９９％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜９９％、または９０〜１００％のＡＡＤＣ粒子からなる。非限定的な一例として、本明細書に記載の組成物は５０〜１００％のＡＡＤＣ粒子からなる。別の非限定的な一例として、本明細書に記載の組成物は５０〜６０％のＡＡＤＣ粒子からなる。別の非限定的な一例として、本明細書に記載の組成物は８０〜９９％のＡＡＤＣ粒子からなる。別の非限定的な一例として、本明細書に記載の組成物は８０〜９０％のＡＡＤＣ粒子からなる。非限定的な一例として、本明細書に記載の組成物は８０〜９５％のＡＡＤＣ粒子からなる。非限定的な一例として、本明細書に記載の組成物は８０〜８５％のＡＡＤＣ粒子からなる。
【００８７】
一実施形態では、本明細書に記載の組成物は、組成物の全重量に基づいて、１，５，１０，１５，２０，２５，３０，３５，４０，４５，５０，５１，５２，５３，５４，５５，６０，６５，７０，７５，８０，８１，８２，８３，８４，８５，８６，８７，８８，８９，９０，９１，９２，９３，９４，９５，９６，９７，９８，９９または１００％未満の空の粒子からなる。非限定的な一例として、組成物は５０％未満の空の粒子からなる。非限定的な一例として、組成物は４５％未満の空の粒子からなる。非限定的な一例として、組成物は４０％未満の空の粒子からなる。非限定的な一例として、組成物は３５％未満の空の粒子からなる。非限定的な一例として、組成物は３０％未満の空の粒子からなる。非限定的な一例として、組成物は２５％未満の空の粒子からなる。非限定的な一例として、組成物は２０％未満の空の粒子からなる。非限定的な一例として、組成物は１５％未満の空の粒子からなる。非限定的な一例として、組成物は１０％未満の空の粒子からなる。非限定的な一例として、組成物は５％未満の空の粒子からなる。非限定的な一例として、組成物は１％未満の空の粒子からなる。
【００８８】
本明細書に記載の組成物では、１〜１０％、１０〜２０％、３０〜４０％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９９％、５０〜１００％、６０〜７０％  ６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９９％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９９％、７０〜１００％、８０〜８５％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜９９％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜９９％または９０〜１００％の空の粒子からなる。非限定的な一例として、本明細書に記載の組成物は３０〜４０％の空の粒子からなる。別の非限定的な一例として、本明細書に記載の組成物は３０〜５０％の空の粒子からなる。別の非限定的な一例として、本明細書に記載の組成物は３０〜６０％の空の粒子からなる。別の非限定的な一例として、本明細書に記載の組成物は３０〜７０％の空の粒子からなる。非限定的な一例として、本明細書に記載の組成物は３０〜８０％の空の粒子からなる。非限定的な一例として、本明細書に記載の組成物は３０〜９０％の空の粒子からなる。
【００８９】
一実施形態では、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドは、レボドパ療法も受けている対象に投与してよい。非限定的な一例として、対象は、レボドパ療法に対する肯定的な応答を示し、ＰＤの少なくとも１つの症状が軽減される。別の非限定的な一例として、対象は、対象が経験するＰＤの症状が安定している場合に、レボドパ療法に対する応答を示していてもよい。さらに別の非限定的な一例として、対象は、対象が経験するＰＤの症状が高まっている場合に、レボドパ療法に対する否定的な応答を示していてもよい。
【００９０】
一実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドに先立って対象に投与されるレボドパの用量は、１，２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７，１８，１９，２０，２１，２２，２３，２４，２５、または２５ｍｇ／ｋｇを超える量である。非限定的な一例として、その用量は３ｍｇ／ｋｇである。別の非限定的な一例として、その用量は１０ｍｇ／ｋｇである。さらに別の非限定的な市例として、その用量は２０ｍｇ／ｋｇである。レボドパに対する対象の応答（例えば、行動応答）は、ＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与前に評価する。さらに、ＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与後に、対象にレボドパを再度投与してもよい（例えば、ＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与後、１週間、２週間、３週間、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、８カ月、９カ月、１０カ月、１１カ月、１年、または１年以上）。行動反応を再評価し、初期応答と比較して、ＡＡＤＣポリヌクレオチドの効果を判断することができる。対象には、１％，２％，３％，４％，５％，６％，７％，８％，９％，１０％，１５％，２０％，２５％，３０％，３５％，４０％，４５％，５０％，５５％，６０％，６５％，７０％，７５％，８０％，８５％，９０％，９５％，９９％ｏｒ１００％の行動改善が見られる。
【００９１】
一実施形態において、レボドパは、ＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与後に複数回投与してよい。レボドパは、反復スケジュール（例えば、５日ごと、１週間毎、１０日毎、１５日毎、３０日毎、月１回、２ヶ月毎、３ヶ月毎、４ヶ月毎、５ヶ月毎、６ヶ月毎、７ヶ月毎、８ヶ月毎、９ヶ月ごと、１０ヶ月毎、１１ヶ月毎、または毎年）、または症状が現れた時に、投与してよい。非限定的な一例として、ＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与の３年後に、対象の被殻の注入領域内の線条体ニューロンの１〜１０％、５〜１５％、１０〜２０％、１５〜３０％、２０〜４０％、２５〜５０％、３０％〜５０％、４０〜５０％、４０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜９０％、７０〜８０％、７０〜９０％、７５〜９０％、８０〜９０％、９０〜１００％がＡＡＤＣ免疫反応性である。非限定的な一例として、ＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与６年後に、対象の被殻の注入領域内の線条体ニューロンの１〜１０％、５〜１５％、１０〜２０％、１５〜３０％、２０〜４０％、２５〜５０％  ３０〜５０％、４０〜５０％、４０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜９０％、７０〜８０％、７０〜９０％、７５〜９０％、８０〜９０％、９０〜１００％がＡＡＤＣ免疫反応性である。非限定的な一例として、ＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与９年後に、対象の被殻の注入領域内の線条体ニューロンの、１〜１０％、５〜１５％、１０〜２０％、１５〜３０％、２０〜４０％、２５〜５０％  ３０〜５０％、４０〜５０％、４０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜９０％、７０〜８０％、７０〜９０％、７５〜９０％、８０〜９０％、９０〜１００％がＡＡＤＣ免疫反応性である。
【００９２】
一実施形態では、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドを投与することができる対象は、レボドパ療法に対する文書化された応答を有するが、医学的に不応性の変動を有し、良好な外科的候補と考えられる。対象が良好な外科的候補者であるかどうかの判定は、その対象をＰＤに関し治療している医師、またはＡＡＤＣポリヌクレオチドを投与する医師により下され、その場合に、医師は、ＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与に必要とされる外科的介入について、患者の全体的なリスクに対する利益の比を考慮する。
【００９３】
一実施形態では、対象の一領域の実質における分布容積の、対象の一領域の注入容積に対する比は、０．１，０．２，０．３，０．４，０．５，０．６，０．７，０．８，０．９，１．０，１．１，１．２，１．３，１．４，１．５，１．６，１．７，１．８，１．９，２．０，２．１，２．２，２．３，２．４，２．５，２．６，２．７，２．８，２．９，３．０，３．１，３．２，３．３，３．４，３．５，３．６，３．７，３．８，３．９，４．０，４．１，４．２，４．３，４．４，４．５，４．６，４．７，４．８，４．９，５．０，５．１，５．２，５．３，５．４，５．５，５．６，５．７，５．８，５．９，６．０、または６．０以上である。非限定的な一例として、実質の分布容積対注入容積の比は、尾状核において１．６であった。非限定的な一例として、実質の分布容積対注入容積の比は、被殻において３．１であった。非限定的な一例として、被殻におけるＡＡＤＣポリヌクレオチドの分布は、注入される容積の２〜３倍であり得る。
【００９４】
投薬
本発明は、本発明によるウイルスベクターおよびそのＡＡＤＣポリヌクレオチドペイロードまたは複合体を、それを必要とする対象に投与することからなる方法を提供する。ウイルスベクターの医薬用、造影用、診断用、または予防用の組成物は、疾患、障害、および／または状態（例えば、作業記憶障害に関連する疾患、障害、および／または状態）を予防、治療、診断または造影するのに有効な任意の量および投与経路を用いて、対象に投与することができる。正確な必要量は、対象の動物種、年齢、および一般的な状態、疾患の重篤度、特定の組成物、その投与様式、その活性様式などに依存して、対象によって異なるであろう。本発明による組成物は、典型的には、投与の容易さおよび投与量の均一性のために、単位剤形で処方される。しかし、本発明の組成物の１日総使用量は、健全な医学的判断の範囲内で主治医によって決定され得ることが理解されるであろう。特定の患者に対し治療上有効な、予防的に有効な、または適切な造影用の用量レベルは、以下を含む多様な要因に依存している：治療対象の障害および当該障害の重篤度；使用される特定の化合物の活性；使用される特定の組成物；患者の年齢、体重、全般的な健康状態、性別および食事；投与時間、投与経路、および使用される特定のポリヌクレオチドペイロードの排泄速度；治療の持続時間；使用される特定の化合物と組み合わせてまたは同時に使用される薬物；医学分野でよく知られている同様の要因。
【００９５】
ある実施形態では、本発明のウイルスベクター医薬組成物は、対象の体重に比して１日当たり、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．００５ｍｇ／ｋｇ〜約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．００５ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇを投与するのに十分なＡＡＤＣポリヌクレオチド用量レベルで、１日１回または複数回投与することにより、所望の治療効果、診断効果、予防効果または造影効果を得ることができる。所望のＡＡＤＣポリヌクレオチド用量は、１日に３回、１日に２回、１日に１回投与してよく、または２４時間内にその用量は、１回、２回、３回、または３回より多く投与してよい。ある実施形態では、所望のＡＡＤＣポリヌクレオチド用量は、複数の投与（例えば、２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４、またはそれ以上の投与）を行なって投与してよい。複数の投与を行なう場合、本明細書に記載されているような分割投与計画を使用することができる。本明細書で使用される「分割投与量」という語は、単回単位用量または総用量の分割を意味し、例えば単一単位用量を２回あるいはそれ以上に分割することを意味する。本明細書で使用される「単一単位用量」という語は、一用量／一回の投与／単一の経路／単一の接触点すなわち単回投与イベントで投与される任意のポリヌクレオチド治療剤の用量を意味する。本明細書中で使用される「１日総投与量」という語は、２４時間に投与または処方される量である。それは単一単位用量として投与することができる。一実施形態では、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターは、分割用量で対象に投与される。それらは、緩衝液中でのみ、または本明細書に記載の製剤中で処方することができる。
【００９６】
一実施形態では、本発明によるウイルスベクター医薬組成物のＣＮＳの細胞（例えば、実質）への投与は、約１ｘ１０６  ＶＧ／ｍＬおよび約１ｘ１０１６  ＶＧ／ｍＬの総濃度からなる。いくつかの実施形態において、投与は、以下の組成物濃度からなる：１ｘ１０６、２ｘ１０６、３ｘ１０６、４ｘ１０６、５ｘ１０６、６ｘ１０６、７ｘ１０６、８ｘ１０６、９ｘ１０６、１ｘ１０７、２ｘ１０７、３ｘ１０７、４ｘ１０７、５ｘ１０７、６ｘ１０７、７ｘ１０７、８ｘ１０７、９ｘ１０７、１ｘ１０８、２ｘ１０８、３ｘ１０８、４ｘ１０８、５ｘ１０８、６ｘ１０８、７ｘ１０８、８ｘ１０８、９ｘ１０８、１ｘ１０９、２ｘ１０９、３ｘ１０９、４ｘ１０９、５ｘ１０９、６ｘ１０９、７ｘ１０９、８ｘ１０９、９ｘ１０９、１ｘ１０１０、２ｘ１０１０、３ｘ１０１０、４ｘ１０１０、５ｘ１０１０、６ｘ１０１０、７ｘ１０１０、８ｘ１０１０、９ｘ１０１０、１ｘ１０１１、１．８ｘ１０１１、２ｘ１０１１、３ｘ１０１１、４ｘ１０１１、５ｘ１０１１、５．５ｘ１０１１、６ｘ１０１１、７ｘ１０１１、８ｘ１０１１、９ｘ１０１１、０．８ｘ１０１２、０．８３ｘ１０１２、１ｘ１０１２、１．１ｘ１０１２、１．２ｘ１０１２、１．３ｘ１０１２、１．４ｘ１０１２、１．５ｘ１０１２、１．６ｘ１０１２、１．７ｘ１０１２、１．８ｘ１０１２、１．９ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．１ｘ１０１２、２．２ｘ１０１２、２．３ｘ１０１２、２．４ｘ１０１２、２．５ｘ１０１２、２．６ｘ１０１２、２．７ｘ１０１２、２．８ｘ１０１２、２．９ｘ１０１２、３ｘ１０１２、３．１ｘ１０１２、３．２ｘ１０１２、３．３ｘ１０１２、３．４ｘ１０１２、３．５ｘ１０１２、３．６ｘ１０１２、３．７ｘ１０１２、３．８ｘ１０１２、３．９ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．１ｘ１０１２、４．２ｘ１０１２、４．３ｘ１０１２、４．４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、４．６ｘ１０１２、４．７ｘ１０１２、４．８ｘ１０１２、４．９ｘ１０１２、５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、７ｘ１０１２、８ｘ１０１２、９ｘ１０１２、１ｘ１０１３、２ｘ１０１３、３ｘ１０１３、４ｘ１０１３、５ｘ１０１３、６ｘ１０１３、７ｘ１０１３、８ｘ１０１３、９ｘ１０１３、１ｘ１０１４、２ｘ１０１４、３ｘ１０１４、４ｘ１０１４、５ｘ１０１４、６ｘ１０１４、７ｘ１０１４、８ｘ１０１４、９ｘ１０１４、１ｘ１０１５、２ｘ１０１５、３ｘ１０１５、４ｘ１０１５、５ｘ１０１５、６ｘ１０１５、７ｘ１０１５、８ｘ１０１５、９ｘ１０１５、あるいは１ｘ１０１６  ＶＧ／ｍＬ。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、１ｘ１０１３  ＶＧ／ｍＬである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、３ｘ１０１２  ＶＧ／ｍＬである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、１．１ｘ１０１２  ＶＧ／ｍＬである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、３．７ｘ１０１２  ＶＧ／ｍＬである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、８ｘ１０１１  ＶＧ／ｍＬである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、２．６ｘ１０１２  ＶＧ／ｍＬである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、４．９ｘ１０１２  ＶＧ／ｍＬである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、０．８ｘ１０１２  ＶＧ／ｍＬである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、０．８３ｘ１０１２  ＶＧ／ｍＬである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、バイアルに含まれ得る最大最終用量である。
【００９７】
一実施形態では、本発明によるウイルスベクター医薬組成物のＣＮＳの細胞（例えば、実質）への投与は、対象１個体当たりの全濃度が約１ｘ１０６  ＶＧと約１ｘ１０１６  ＶＧの間である。いくつかの実施形態において、投与は、以下の組成物濃度からなる：対象一個体当たり、約１ｘ１０６、２ｘ１０６、３ｘ１０６、４ｘ１０６、５ｘ１０６、６ｘ１０６、７ｘ１０６、８ｘ１０６、９ｘ１０６、１ｘ１０７、２ｘ１０７、３ｘ１０７、４ｘ１０７、５ｘ１０７、６ｘ１０７、７ｘ１０７、８ｘ１０７、９ｘ１０７、１ｘ１０８、２ｘ１０８、３ｘ１０８、４ｘ１０８、５ｘ１０８、６ｘ１０８、７ｘ１０８、８ｘ１０８、９ｘ１０８、１ｘ１０９、２ｘ１０９、３ｘ１０９、４ｘ１０９、５ｘ１０９、６ｘ１０９、７ｘ１０９、８ｘ１０９、９ｘ１０９、１ｘ１０１０、１．５ｘ１０１０、２ｘ１０１０、３ｘ１０１０、４ｘ１０１０、５ｘ１０１０、６ｘ１０１０、７ｘ１０１０、８ｘ１０１０、９ｘ１０１０、１ｘ１０１１、１．３ｘ１０１１、２ｘ１０１１、２．１ｘ１０１１、２．２ｘ１０１１、２．３ｘ１０１１、２．４ｘ１０１１、２．５ｘ１０１１、２．６ｘ１０１１、２．７ｘ１０１１、２．８ｘ１０１１、２．９ｘ１０１１、３ｘ１０１１、４ｘ１０１１、５ｘ１０１１、５．４ｘ１０１１、６ｘ１０１１、７ｘ１０１１、７．１ｘ１０１１、７．２ｘ１０１１、７．３ｘ１０１１、７．４ｘ１０１１、７．５ｘ１０１１、７．６ｘ１０１１、７．７ｘ１０１１、７．８ｘ１０１１、７．９ｘ１０１１、８ｘ１０１１、９ｘ１０１１、９．４ｘ１０１１、１ｘ１０１２、１．１  ｘ１０１２、１．２ｘ１０１２、１．３ｘ１０１２、１．４ｘ１０１２、１．５ｘ１０１２、１．６ｘ１０１２、１．７ｘ１０１２、１．８ｘ１０１２、１．９ｘ１０１２、２ｘ１０１２、２．３ｘ１０１２、２．４ｘ１０１２、３ｘ１０１２、４ｘ１０１２、４．１ｘ１０１２、４．２ｘ１０１２、４．３ｘ１０１２、４．４ｘ１０１２、４．５ｘ１０１２、４．６ｘ１０１２、４．７ｘ１０１２、４．８ｘ１０１２、４．９ｘ１０１２、５ｘ１０１２、６ｘ１０１２、７ｘ１０１２、８ｘ１０１２、８．１ｘ１０１２、８．２ｘ１０１２、８．３ｘ１０１２、８．４ｘ１０１２、８．５ｘ１０１２、８．６ｘ１０１２、８．７ｘ１０１２、８．８  ｘ１０１２、８．９ｘ１０１２、９ｘ１０１２、１ｘ１０１３、２ｘ１０１３、３ｘ１０１３、４ｘ１０１３、５ｘ１０１３、６ｘ１０１３、７ｘ１０１３、８ｘ１０１３、９ｘ１０１３、１ｘ１０１４、２ｘ１０１４、３ｘ１０１４、４ｘ１０１４、５ｘ１０１４、６ｘ１０１４、７ｘ１０１４、８ｘ１０１４、９ｘ１０１４、１ｘ１０１５、２ｘ１０１５、３ｘ１０１５、４ｘ１０１５、５ｘ１０１５、６ｘ１０１５、７ｘ１０１５、８ｘ１０１５、９ｘ１０１５、あるいは１ｘ１０１６  ＶＧである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、対象一個体当たり、１ｘ１０１３  ＶＧである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、対象一個体当たり、３ｘ１０１２  ＶＧである。非限定的な一例として、対象に投与される組成物は、対象一個体当たり、３ｘ１０１１  ＶＧの濃度を有する。非限定的な一例として、対象に投与される組成��は、対象一個体当たり、約９ｘ１０１１  ＶＧの濃度を有する。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、対象一個体当たり、２．３ｘ１０１１  ＶＧである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、対象一個体当たり、７．２ｘ１０１１  ＶＧである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、対象一個体当たり、７．５ｘ１０１１  ＶＧである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、対象一個体当たり、１．４ｘ１０１２  ＶＧである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、対象一個体当たり、４．８ｘ１０１２  ＶＧである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、対象一個体当たり、８．８ｘ１０１２  ＶＧである。一実施形態では、組成物中のウイルスベクターの濃度は、対象一個体当たり、２．３ｘ１０１２  ＶＧである。
【００９８】
一実施形態では、用量、投与経路および／または投与量の有効性は、ＰＥＴ造影、Ｌ−ＤＯＰＡチャレンジ試験などの本明細書に記載の様々な方法（例えば、Ｆｏｒｓａｙｅｔｈ  ｅｔ  ａｌ．  ２００６，  Ｍｏｌ．  １４（４）：  ５７１−５７７）、ＵＰＤＲＳスコア、および患者ダイアリー）を含むがそれらに限定されない方法を用いて、評価することができる。非限定的な一例として、対象は、ＡＡＤＣポリヌクレオチド組成物の投与後に、ジスキネジーが軽減するか、あるいはジスキネジーが軽減する期間が出現する。別の非限定的な一例として、対象は、限られた運動性およびジスキネジーを含む、パーキンソン病関連症状が軽減する。さらに別の非限定的な一例として、対象は、薬剤に対する肯定的反応が示されない期間（オフ時間）および運動症状の変動において改善を示す。改善は、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または９０％以上において見られる。改善は、数分間（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５分間または５５分間以上）、数時間（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３時間、または２４時間以上）、数週間（１、２、３、４、５、６、７週間、または７週間以上）、数ヶ月間（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１カ月間、または１１カ月間以上）、または数年間（例えば、１、２、３、４、５、６，７，８，９年間、または９年間以上）続く。
【００９９】
一実施形態では、本明細書に記載のウイルスベクターの投与のための対象の選択、および／または用量、投与経路および／または投与量の有効性は、血管周囲腔（ＰＶＳ；別名、Ｖｉｒｃｈｏｗ−Ｒｏｂｉｎ腔）の画像化を用いて評価することができる。血管周囲腔は、脳実質の中まで突き通って、脳脊髄液（ＣＳＦ）／間質液で満たされていることから、細動脈および小静脈を取り囲んでいる。血管周囲腔は、中脳、ＢＧおよび中枢半腱に共通して存在する。理論に縛られることを望むものではないが、血管周囲腔は代謝産物の正常なクリアランスに寄与する可能性があり、パーキンソン病を含む認知能の低下およびいくつかの疾患状態と関連している。血管周囲腔の大きさは通常、正常であるが、多くの疾患状態でその大きさが増大することがある。Ｐｏｔｔｅｒら（Ｐｏｔｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．  Ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃ  Ｄｉｓ．  ２０１５  Ｊａｎ；３９（４）：  ２２４−２３１；この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）は、全範囲の血管周囲腔を研究し、基底核、中央半球および中脳血管周囲腔を格付けした、格付け方法を開発した。Ｐｏｔｔｅｒらは、Ｍａｃ  およびＬｕｌｌｉｃｈら（Ｍａｃ  ａｎｄ  Ｌｕｌｌｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．
２００４  Ｎｏｖ；７５（１１）：１５１９−２３；この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）が使用したＰＶＳの頻度と範囲を使用し、Ｐｏｔｔｅｒらは、基底核および中央半球血管周囲腔を、以下の５つに格付けした：０（なし）、１（１−１０）、２（１１−２０）、３（２１−４０）および４（＞４０）。さらに、中脳血管周囲腔を、以下の２つに格付けした：０（眼に見えない）または１（眼に見える）。Ｐｏｔｔｅｒらによる評価システムのユーザーガイドは、以下のウェブサイトに掲載されている：ｗｗｗ．ｓｂｉｒｃ．ｅｄ．ａｃ．ｕｋ／ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ／ｅｐｖｓ−ｒａｔｉｎｇ−ｓｃａｌｅ−ｕｓｅｒ−ｇｕｉｄｅ．ｐｄｆ．
一実施形態では、本明細書に記載のウイルスベクターの投与のための対象の選択、および／または用量、投与経路および／または投与量の有効性は、［１８Ｆ］ＦＤＯＰＡを含むがそれに限定されない神経画像バイオマーカーの陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）測定値を用いて評価することができる。［１８Ｆ］ＦＤＯＰＡのような神経画像バイオマーカーは、疾患に冒された個体を同定するために使用することができ、および／または臨床症状の発症前に黒質線条体欠損を検出するために使用することができる。さらに、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）に基づく基準を使用して、その黒質線条体ニューロンの完全性（例えば、異常、正常または不確実な黒質線条体ニューロンの完全性）に基づいて、対象を分類することができる（Ｒａｃｈｅｔｔｅ  ｅｔ  ａｌ．  Ａｍ  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｇｅｎｅｔ  Ｂ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｉａｔｒ  Ｇｅｎｅｔ．  ２００６  Ａｐｒ  ５；１４１Ｂ（３）：  ２４５−２４９；この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。
【０１００】
一実施形態では、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドの用量を投与することができる対象は、進行したＰＤを有し、依然としてレボドパ療法に応答するが、対象はまた、医学的に難治性の運動合併症（例えば、投薬の調節および最適化にもかかわらず、レボドパおよび他のドーパミン作動性療法の間に生じる重篤な運動症状の変動）を有する対象である。対象は、当技術分野で公知の方法によって決定される神経外科的処置を受けることができる程度に健康である個体である。非限定的な一例として、対象は深部脳刺激（ＤＢＳ）の選択基準を満たしている個体である。対象は、６９歳未満の特発性ＰＤを有し、レボドパに対する反応が明白であり、薬物不応症（例えば、運動変動および／またはジスキネジー）を有し、および／または認知機能障害がほとんどまたは全くない個体である。
【０１０１】
一実施形態では、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドの用量を投与することができる対象はまた、認知症または認知障害を患う個体である。
一実施形態では、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドの用量を投与することができる対象は、以前に同一のまたは同様の治療剤で治療されている個体である。別の実施形態では、対象は、パーキンソン病の症状を軽減することがわかっている治療薬で治療されている個体である。
【０１０２】
一実施形態では、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドの用量を投与することができる対象は、標準的な医学的治療から十分な恩恵を受けることができなかった個体である。非限定的な一例として、対象は治療に応答しなかった個体である。別の非限定的な一例として、対象は治療にもかかわらず残存する障害を有する個体である。
【０１０３】
一実施形態では、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドの用量を投与することができる対象は、用量の有効性を決定するために神経伝達物質分析物のレベルを評価するための試験を受けることができる個体である。非限定的な一例として、ＣＳＦ神経伝達物質、血漿ＡＡＤＣ活性および／または尿ＶＬＡを分析する。
【０１０４】
一実施形態では、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドの用量を投与することができる対象は、治療過程で対象の経過をモニターするために、ビデオテープまたは記録される。
【０１０５】
組み合わせ
ＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターは、１つまたはそれ以上の他の治療剤、予防剤、診断剤または造影剤と組み合わせて使用することができる。「〜と組み合わせて」とは、薬剤を同時に投与しなければならないこと、および／または共に投与するように処方しなければならないことを暗示することを意図するものではない。尤も、これらの投与方法は本開示の範囲内である。組成物は、１つまたはそれ以上の他の所望の治療または医療処置と同時に、その前に、またはその後に投与することができる。一般に、各薬剤は、その薬剤について決定された用量および／または時間スケジュールで投与される。いくつかの実施形態では、本開示は、医薬組成物、予防組成物、診断組成物または画像形成組成物を、その生物学的利用能を改善し、その代謝を低減および／または修飾し、その排泄を阻害し、および／または身体内の分布を改変する薬剤と組み合わせて投与することができる。
【０１０６】
投与
一実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターは、欧州特許出願ＥＰ１８５７５５２（この内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているＡＡＶビリオンの投与方法を用いて投与または提供することができる。
【０１０７】
一実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターは、欧州特許出願第ＥＰ２６７８４３３号（この内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているＡＡＶベクターを用いてタンパク質を投与する方法を用いて投与または提供することができる。
【０１０８】
一実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターは、米国特許第５８５８３５１号（この内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているＡＡＶベクターを使用してＤＮＡ分子を投与する方法を用いて投与または提供することができる。
【０１０９】
一実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターは、米国特許第６２１１１６３号（この内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の血流にＤＮＡを投与するための方法を用いて投与または提供することができる。
【０１１０】
一実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターは、米国特許第６３２５９９８号（この内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているＡＡＶビリオンを投与するための方法を用いて投与または提供することができる。
【０１１１】
一実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターは、米国特許第７５８８７５７号（この内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているペルロードをＣＮＳに投与する方法を用いて投与または提供することができる。
【０１１２】
一実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターは、米国特許第８２８３１５１号（この内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されたペイロードを投与するための方法を用いて投与または提供することができる。
【０１１３】
一実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターは、国際特許公開第ＷＯ２００１０８９５８３号（この内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のグルタミン酸デカルボキシラーゼ（ＧＡＤ）投与ベクターを使用してペイロードを投与する方法を用いて投与または提供することができる。
【０１１４】
一実施形態では、ＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターは、国際特許公開第ＷＯ２０１２０５７３６３号（この内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているペイロードを神経細胞に投与するための方法を用いて投与または提供することができる。
【０１１５】
本明細書に記載のウイルスベクターの医薬組成物は、バイオアベイラビリティ、治療許容域および／または分布容積の１つまたはそれ以上によって特徴付けられる。
バイオアベイラビリティ
本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターは、本明細書に記載の投与／製剤剤またはビヒクルを含む組成物に処方される場合は、本明細書に記載の投与剤を欠いている組成物と比較して、バイオアベイラビリティの増加を示す可能性がある。本明細書で使用する「バイオアベイラビリティ」という語は、対象に投与される特定の薬剤の所定量の全身利用可能性を指す。バイオアベイラビリティは、化合物の哺乳動物への投与後の無変化体の化合物の曲線下面積（ＡＵＣ）または最大血清または血漿濃度（Ｃｍａｘ）  を測定することによって評価することができる。ＡＵＣは、横軸（Ｘ軸）に沿った時間に対する縦軸（Ｙ軸）に沿って、化合物の血清または血漿濃度をプロットした曲線下面積を定量するものである。一般に、特定の化合物のＡＵＣは、当業者に公知であり、Ｇ．
Ｓ．  Ｂａｎｋｅｒ，  Ｍｏｄｅｒｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，  Ｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  ｖ．  ７２，  Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  Ｉｎｃ．，  １９９６（この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載されている方法により計算することができる。
【０１１６】
Ｃｍａｘ値とは、対象への化合物の投与後に対象の血清または血漿中で観察される化合物の最大濃度を指す。特定の化合物のＣｍａｘ値は、当業者に公知の方法を用いて測定することができる。本明細書で使用される「バイオアベイラビリティの増加」または「薬物動態の改善」という語句は、対象における本発明のウイルスベクターの全身利用可能性（ＡＵＣ、Ｃｍａｘ、またはＣｍｉｎにより測定する）を増加させ得る作用を指す。いくつかの実施形態では、このような作用は、本明細書に記載の１つあるいはそれ以上の投与剤との同時投与からなる。いくつかの実施形態では、ウイルスベクターのバイオアベイラビリティは、少なくとも約２％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％  約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０  少なくとも約７５重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９５重量％、または約１００重量％である。
【０１１７】
治療許容域
本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターは、本明細書に記載されているような１つまたはそれ以上の投与剤と共に処方される場合、本明細書に記載の１つまたはそれ以上の投与剤なしで投与されたウイルスベクターの治療許容域と比較して、化合物および／または組成物の投与の治療許容域の増加を示し得る。本明細書で使用される「治療許容域」という語は、治療効果を引き出す可能性が高い、血漿濃度の範囲、または作用部位における治療活性物質のレベルの範囲を指す。いくつかの実施形態では、ウイルスベクターが製剤中で投与された場合に、治療許容域は、少なくとも約２％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％  、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または約１００％高まる。
【０１１８】
分布容積
本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターは、本明細書に記載されているような１つまたはそれ以上の投与剤と共に処方された場合に、本明細書に記載の１つまたはそれ以上の投与剤を欠いている製剤と比較して、改善された分布容積（Ｖｄｉｓｔ）（例えば、分布容積が減少するか、または標的化する）を示し得る。Ｖｄｉｓｔは、血液または血漿中の薬剤の濃度に対する、体内の同一薬剤の量を指す。本明細書で使用される「分布容積」という語は、血液または血漿中の濃度と同じ濃度で、体内の薬剤の総量を含有するであろう流体容積を指す：Ｖｄｉｓｔは、体内の薬剤の量を、血液または血漿中の薬剤の濃度で除したものに等しい。例えば、所定の薬剤の用量が１０ｍｇで、血漿濃度が１０  ｍｇ／Ｌである場合は、分布容積は１リットルになる。分布容積は、薬剤が血管外組織に存在する程度を反映している。分布容積が大量である場合は、血漿タンパク質と比較して、薬剤が組織成分に結合する傾向を反映している。臨床現場では、Ｖｄｉｓｔは、定常状態の濃度を達成するための負荷量を決定するために使用されることがある。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の１つまたはそれ以上の投与剤と同時投与された場合の本発明のウイルスベクター組成物の分布容積は、少なくとも約２％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％  約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５  少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、減少する。
【０１１９】
キットとデバイス
本発明は、本発明の方法を簡便および／または効果的に実施するための様々なキットを提供する。典型的に、キットは、ユーザが対象の複数回の治療を行い、および／または複数回の実験を行うのに十分な量および／または数の成分からなる。
【０１２０】
キットは、本発明のＡＡＤＣベクター、ＡＡＤＣ構築物、ＡＡＤＣポリヌクレオチド、またはＡＡＤＣポリペプチドのいずれかによりなる。いくつかの実施形態では、キットは、本発明の化合物および／または組成物を作製および／または合成するための試薬および／または指示書をさらに含み得る。いくつかの実施形態では、キットは、１つまたはそれ以上のバッファも含み得る。いくつかの実施形態において、本発明のキットは、タンパク質または核酸アレイまたはライブラリを作製するための成分を含み得るので、例えば、固体支持体を含み得る。
【０１２１】
いくつかの実施形態では、キット成分は、水性媒体または凍結乾燥形態のいずれかで包装され得る。キットの容器手段は、一般に、少なくとも１つのバイアル、試験管、フラスコ、ボトル、シリンジまたはその他の容器手段を含み、その中に構成要素を配置し、好ましくは適切に分注する。複数のキット成分がある場合（標識試薬と標識は一緒に包装されてもよい）、キットは一般に第２、第３またはその他の追加の容器を含み、その中に追加の成分を別々に配置し得る。いくつかの実施形態では、キットはまた、滅菌した薬学的に許容される緩衝液および／またはその他の希釈剤を収容するための第２の容器手段からなり得る。いくつかの実施形態では、成分の様々な組み合わせを１つまたはそれ以上のバイアルに含めてよい。本発明のキットはまた、典型的には、本発明の化合物および／または組成物を収用する手段（例えば、商業的販売用に密閉された、タンパク質、核酸、およびその他の試薬を収用する容器）を含み得る。そのような容器は、所望のバイアルが保持される注入またはブロー成形されたプラスチック容器を含み得る。
【０１２２】
いくつかの実施形態において、キット構成要素は、１つおよび／またはそれ以上の液体溶液で提供される。いくつかの実施形態では、液体溶液は水溶液であり、滅菌水溶液が特に好ましい。いくつかの実施形態において、キット成分は、乾燥粉末として提供され得る。試薬および／または成分が乾燥粉末として提供される場合は、そのような粉末は、適切な量の溶媒の添加によって再構成され得る。いくつかの実施形態では、溶媒は、別の容器手段で提供され得ることが想定される。いくつかの実施形態において、標識色素は、乾燥粉末として提供される。いくつかの実施形態では、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００マイクログラムの乾燥色素、または少なくともまたは最大限で、それらの量の乾燥色素が、本発明のキットで提供される。そのような実施形態では、次に、ＤＭＳＯなどの任意の適切な溶媒に色素を再懸濁させることができる。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、キットは、キット構成要素の使用法、およびキットに含まれていないその他の試薬の使用法に関する説明書を含み得る。説明書は、実施可能な変形を含み得る。
【０１２４】
デバイス
いくつかの実施形態では、本発明のＡＡＤＣ化合物および／またはＡＡＤＣ組成物を、デバイスと組み合わせるか、デバイス上にコーティングするか、またはデバイス中に埋め込むことができる。デバイスは、ステント、ポンプ、および／またはその他の移植可能な治療デバイスを含み得るが、これに限定されない。さらに、ＡＡＤＣ化合物および／またはＡＡＤＣ組成物は、対象が深部静脈血栓症（ＤＶＴ）の可能性を低下させるための圧縮装置など（これに限定されない）の圧縮装置を使用している場合でも、対象に投与され得る。
【０１２５】
本発明は、１つまたはそれ以上のＡＡＤＣポリヌクレオチドペイロード分子をコードするウイルスベクターを組み込むことができる装置を提供する。これらの装置は、ヒト患者のようなそれを必要とする対象に直ちに投与され得るウイルスベクターを安定な製剤中に含む。
【０１２６】
投与のための装置を使用して、本明細書に教示される単回投与、複数回投与または分割投与計画に従って、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドからなるウイルスベクターを投与することができる。
【０１２７】
細胞、器官および組織への複数投与のための当技術分野で公知の方法およびデバイスを、本発明の実施形態として本明細書に開示された方法および組成物と組み合わせて使用することが考えられる。これらには、例えば、複数の針を有する方法及びデバイス、ルーメン又はカテーテルなどを使用するハイブリッドデバイス、並びに熱／電流／放射線駆動メカニズムを利用するデバイスが含まれる。
【０１２８】
いくつかの実施形態では、本発明のＡＡＤＣ化合物および／またはＡＡＤＣ組成物は、ステント、チューブ、カテーテル、パイプ、ストロー、針および／  またはダクトを含むがそれらに限定されないデバイスを用いて投与し得る。これらのデバイスを使用する方法は、本明細書に記載されており、当該技術分野において公知である。
【０１２９】
一実施形態では、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドは、画像誘導療法を一体化した投与系、およびレーザ、ＭＲｇＦＵＳ、内視鏡およびロボット外科手術デバイスを含むがこれらに限定されない造影を一体化した投与系を使って、対象に投与することができる。
【０１３０】
一実施形態において、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドは、ＭＲＩ  Ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｓ，  Ｉｎｃ．製のＣＬＥＡＲＰＯＩＮＴ（登録商標）神経介入システムを用いて、対象に投与することができる。ＣＬＥＡＲＰＯＩＮＴ（登録商標）神経介入システムは、単独で、または本明細書に記載の他の投与方法およびデバイスのいずれかと組み合わせて使用することができる。ＣＬＥＡＲＰＯＩＮＴ（登録商標）神経介入システムは、神経学的処置の計画と操作を行なう場合に、器具またはデバイスの配置と操作において定位指針を提供するのに役立つ。
【０１３１】
一実施形態では、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドは、Ｒｅｎｉｓｈａｗ  ＰＬＣ製のＮＥＵＲＯＭＡＴＥ（登録商標）定位固定ロボットシステムを用いて対象に投与することができる。ＮＥＵＲＯＭＡＴＥ（登録商標）システムは、単独で、または本明細書に記載の他の投与方法およびデバイスのいずれかと組み合わせて使用することができる。非限定的な一例として、ＮＥＵＲＯＭＡＴＥ（登録商標）システムは、ヘッドホルダ、ＣＴ画像ローカライザ、フレームアタッチメント、遠隔制御およびソフトウェアと共に使用され得る。
【０１３２】
一実施形態では、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドはＥｌｅｋｔａ  ＡＢ製のＥｌｅｋｔａ  ＭＩＣＲＯＤＲＩＶＥ（商標）デバイスを用いて、対象に投与することができる。ＭＩＣＲＯＤＲＩＶＥ（商標）デバイスは、単独で、または本明細書に記載のその他の投与方法およびデバイスのいずれかと組み合わせて使用することができる。非限定的な一例として、ＭＩＣＲＯＤＲＩＶＥ（商標）デバイスを使用し、電極（例えば、微小電極記録（ＭＥＲ）、マクロ刺激および深部脳刺激（ＤＢＳ）電極の埋め込み）、カテーテルの埋め込み、チューブまたはＤＢＳ電極の埋め込みの位置決めを行い、クロスヘアおよびＡ−Ｐホルダーを使用して、位置、生検、注射および吸引、脳損傷、内視鏡ガイダンス、およびＧＡＭＭＡ  ＫＮＩＦＥ（登録商標）放射線手術を検証する。
【０１３３】
一実施形態では、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドは、ＭＯＮＴＥＲＩＳ（登録商標）  Ｍｅｄｉｃａｌ，  Ｉｎｃ．製のＡＸＩＩＩＳ（登録商標）定位固定ミニフレームを用いて対象に投与することができる。ＡＸＩＩＩＳ（登録商標）定位固定ミニフレームは、単独で、または本明細書に記載のその他の投与方法およびデバイスのいずれかと組み合わせて使用することができる。ＡＸＩＩＩＳ（登録商標）定位ミニフレームは、レーザー凝固、生検、カテーテル配置、電極インプラント、内視鏡検査、血塊排出のために使用される軌道整列デバイスである。ミニフレームは、３６０度のインタフェースが可能であり、簡単な調整で複数の頭蓋内標的へのアクセスを提供する。さらに、ミニフレームはＭＲＩと互換性がある。
【０１３４】
一実施形態では、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドは、Ｉｎｔｅｇｒａ  ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ製のＩＮＴＥＧＲＡ（商標）  ＣＲＷ（登録商標）システムを用いて、対象に投与することができる。Ｔｈｅ  ＩＮＴＥＧＲＡ（商標）
ＣＲＷ（登録商標）システムは、単独で、または本明細書に記載のその他の投与方法およびデバイスのいずれかと組み合わせて使用することができる。ＣＲＷ（登録商標）システムは、定位手術、顕微手術、カテーテル挿入および生検などを含むがこれらに限定されない様々な用途に使用することができる。ＣＲＷ（登録商標）システムは、システムを使用するオペレーターに、正確性を提供するように設計されている（例えば、親指固定ネジ、バーニアスケーリング、二重ボルト固定、および一体構造）。
【０１３５】
一実施形態では、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドは、Ｓｔｅｒｅｏｔａｘｉｓ，  Ｉｎｃ．製のＥＰＯＣＨ（登録商標）ソリューションシステムを用いて対象に投与することができる。このＥＰＯＣＨ（登録商標）ソリューションシステムは、ＮＩＯＢＥ（登録商標）ＥＳ磁気ナビゲーションシステム、ＶＤＲＩＶＥ（登録商標）ロボットナビゲーションシステム、および／またはＯＤＹＳＳＥＹ（登録商標）情報ソリューション（すべてＳｔｅｒｅｏｔａｘｉｓ，  Ｉｎｃ．製）を含み得る。ＥＰＯＣＨ（登録商標）ソリューションシステムは、単独で、または本明細書に記載のその他の投与方法およびデバイスのいずれかと組み合わせて使用することができる。非限定的な一例として、ＮＩＯＢＥ（登録商標）ＥＳ磁気ナビゲーションシステムを使用して、対象に正確に接触することができる。別の非限定的な一例として、ＮＩＯＢＥ（登録商標）ＥＳ磁気システムをＶＤＲＩＶＥ（登録商標）ロボットナビゲーションシステムとともに使用して、正確な動きと安定性を提供することができる。
【０１３６】
一実施形態では、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドは、ＮｅｕｒｏＳｔａｔｉｏｎワークステーションを使用して、対象に投与することができる。このＮｅｕｒｏＳｔａｔｉｏｎワークステーションは、フレームレスの定位方法を使用しており、手術計画、生検、頭蓋切開、内視鏡、術中超音波および放射線療法などを含むがこれらに限定されない用途に画像ガイドを提供することができる。
【０１３７】
一実施形態では、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドは、ロボット定位固定システムを使用して対象に投与することができ、ロボット定位固定システムの例には、米国特許第５，０７８，１４０号に記載されているデバイスが含まれるがこれに限定されるものではない（この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。当該でバイスのロボットアームを使用して、処置を行うために使用する手術器具またはその他の器具を正確に配置することができる。
【０１３８】
一実施形態では、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドは、自動投与システムを使用して対象に投与することができ、自動投与システムの例には、米国特許第５，８６５，７４４号に記載されているデバイスが含まれるがこれに限定されるものではない（この内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。投与システムによって収集された画像に基づいて、コンピュータは、針の配置を特定の対象のための適切な深さに調整する。
【０１３９】
一実施形態では、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドは、投与中に同時に、および／または投与前の期間に、および／または投与後の期間に、圧縮装置（例えば、対象の深部静脈血栓症（ＤＶＴ）の可能性を低減させる圧縮装置などを含むがこれに限定されない）を使用している対象に、投与することができる。圧縮装置は、対象へのＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与の、少なくとも５分前、１５分前、３０分前、４５分前、１時間前、２時間前、３時間前、４時間前、５時間前、６時間前、７時間前、８時間前に投与し得る。圧縮装置は、対象へのＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与の、１５分後、３０分後、４５分後、１時間後、２時間後、３時間後、４時間後、５時間後、６時間後、７時間後、８時間後、９時間後、１０時間後、１１時間後、１２時間後、１５時間後、１６時間後、１７時間後、１８時間後、１９時間後、２０時間後、２１時間後、２２時間後、２３時間後、１日後、２日後、３日後、４日後、５日後、１週間後、２週間後、３週間後または１ヶ月後に投与し得る。非限定的な一例として、圧縮装置は、ＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与プロシージャ中に同時に使用される。別の非限定的な一例として、圧縮装置は、ＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与前に使用される。別の非限定的な一例として、圧縮装置は、ＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与後に使用される。別の非限定的な一例として、圧縮装置は、ＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与前、投与中、および投与後に使用される。
【０１４０】
圧縮装置の非限定的な例には、ＡｃｔｉｖｅＣａｒｅ  ＋Ｓ．Ｆ．Ｔ．間欠圧縮装置、ＡｃｔｉｖｅＣａｒｅ  ＋Ｓ．Ｆ．Ｔ空気圧縮装置、ＤＶＴｌｉｔｅのＶｅｎｏｗａｖｅ、ＫＣＩシステム圧縮ポンプ、Ａｉｒｃａｓｔ  ＶｅｎａＦｌｏｗシステム、ＳＣＤ  Ｅｘｐｒｅｓｓ  Ｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎ  ＳｙｓｔｅｍまたはＢｉｏ  Ｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｉｎｃ．製の空気圧圧縮治療装置（ポンプのモデルは、例えば、モデルＳＣ−２００４、モデルＳＣ−２００４−ＦＣ、モデルＳＣ−３００４、モデルＳＣ−３００４−ＦＣ、モデルＳＣ−２００８、モデルＳＣ−２００８−ＤＬ、モデルＳＣ−３００８−Ｔ、ＢｉｏＣｒｙｏシステム、モデルＩＣ−ＢＡＰ−ＤＬ  ｍｕｌｔｉ−ｆｌｏ  ＤＶＴ  ｃｏｍｂｏ  ＩＣ＿１５４５−ＤＬから選択し、ポンプと共に使用される衣類は、４チャンバー、８チャンバー、ＢｉｏＣｒｙｏ、Ｍｕｌｔｉ−ＦｌｏまたはＢｉｏＡｒｔｅｒｉａｌの衣類であってよい）。
【０１４１】
ＣＮＳ疾患
本発明のポリヌクレオチドは、異常なまたは望ましくない標的発現によって特徴付けられる任意の疾患または障害の治療、予防、または改善に使用することができる。一実施形態では、本発明は、パーキンソン病の治療に用いる組成物、特に核酸分子（例えばＡＡＤＣをコードするポリヌクレオチド）に関する。
【０１４２】
いくつかの実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ペイロード、すなわちＡＡＤＣが代替のペイロードのために交換される、異常なまたは望ましくない標的発現によって特徴付けられる任意の疾患または障害の治療、予防または改善において使用され得る。
【０１４３】
本開示は、ヒト対象を含む哺乳動物対象における疾患、障害および／または状態を治療するための方法を提供し、本開示は、本明細書に記載のウイルス粒子（すなわち、ウイルスゲノムまたは「ＶＧ」；例えば、ＡＡＶ、ＡＡＶポリヌクレオチドまたはＡＡＶゲノム）のいずれかを対象に投与すること、あるいは前記ＡＡＶポリヌクレオチドまたはＡＡＶゲノムからなる粒子を対象に投与すること、あるいは医薬組成物を含む上記の組成物のいずれかを対象に投与することからなる。
【０１４４】
一実施形態において、疾患、障害および／または状態とは、神経学的な疾患、障害および／または状態である。ＣＮＳ疾患は、脳のあらゆる構成要素（大脳半球、脳幹、脳幹、および小脳を含む）または脊髄に影響を及ぼす疾患であり得る。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、本発明のウイルス粒子を、ＣＮＳにおける遺伝子産物のレベルまたは機能を調節することができる治療用製品である機能性ペイロードの投与を介して、使用し、神経変性、神経筋疾患、リソソーム病、外傷、骨髄損傷、疼痛（神経因性疼痛を含む）、神経系の癌、脱髄疾患、神経系の自己免疫疾患、神経毒性症候群、睡眠障害、遺伝的脳障害および発生性ＣＮＳ障害により特徴付けられる神経変性疾患および／または疾患または障害を治療することができる。機能的なペイロードは、遺伝子産物を必要としている対象において、遺伝子産物の異常なレベルおよび／または機能から生じる症状（例えば、タンパク質の欠如または欠損）を緩和または軽減し得る；または、遺伝子産物を必要としている対象において、ＣＮＳ障害に益をもたらす。
【０１４６】
非限定的な一例として、本発明のウイルス粒子によって投与される治療用生成物には、増殖および栄養因子、サイトカイン、ホルモン、神経伝達物質、酵素、抗アポトーシス因子、血管新生因子、および「運動ニューロンの生存」タンパク質（ＳＭＮ）などの病理学的障害において突然変異されることが知られている任意のタンパク質；本明細書に記載のＣＮＳ疾患のいずれかに治療上の関心を有するタンパク質をコードするメッセンジャーＲＮＡを標的とするアンチセンスＲＮＡまたはＲＮＡｉ；遺伝子サイレンシングおよび転写後のＣＮＳにおける遺伝子発現の調節において機能するマイクロＲＮＡ（例えば、脳特異的Ｍｉｒ−１２８ａ、Ａｄｌａｋｈａ  ａｎｄ  Ｓａｉｎｉ，  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｃａｎｃｅｒ，  ２０１４，  １３：３３を参照せよ）が含まれるが、これらに限定されない。例えば、スーパーオキシドジスムターゼ酵素を標的とするＲＮＡｉは、ＡＬＳの治療のために、本発明のウイルス粒子によってパッケージングされ得る。
【０１４７】
成長因子および栄養因子には、脳由来成長因子（ＢＤＮＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）、塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）、毛様体神経栄養因子（ＣＮＴＦ）、コルチコトロピン放出因子（ＣＲＦ）、グリア細胞株由来増殖因子（ＧＤＮＦ）、インスリン様増殖因子−１（ＩＧＦ−１）、神経成長因子（ＮＧＦ）、ニューロトロフィン−３（ＮＴ−３）、ニューロトロフィン−４（ＮＴ−４）、および血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）が含まれるが、これらに限定されない。サイトカインには、インターロイキン−１０（ＩＬ−１０）、インターロイキン−６、インターロイキン−８、ケモカインＣＸＣＬ１２（ＳＤＦ−１）、ＴＧＦ−ベータ、および成長および分化因子（ＧＤＦ−１／１０）が含まれる。
【０１４８】
いくつかの実施形態では、神経学的障害には、アルツハイマー病（ＡＤ）；筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）；クロイツフェルト−ヤコブ病（ＣＪＤ）；ハンチントン病（ＨＤ）；フリードライヒ運動失調（ＦＡ）；パーキンソン病（ＰＤ）；多系統萎縮症（ＭＳＡ）；脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）、多発性硬化症（ＭＳ）；原発性進行性失語症；進行性核上麻痺（ＰＳＰ）；痴呆；脳腫瘍、変性神経疾患、脳炎、てんかん、神経変性を引き起こす遺伝的脳障害、網膜色素変性（ＲＰ）、頭部および脳の奇形、水頭症、脳卒中、プリオン病、幼児期ニューロン性セロイド脂漏症（ＩＮＣＬ）（リソソーム酵素パルミトイルタンパク質チオエステラーゼ−１（ＰＰＴ１）の欠乏により引き起こされる、子供の神経変性疾患）などが含まれるが、これらに限定されない。
【０１４９】
いくつかの実施形態において、本発明のウイルス粒子は、ＣＮＳの成長および発達の障害、すなわち神経発達障害に関連する疾患を治療するために使用することができる。いくつかの局面において、そのような神経発達障害は、以下を含むが、それらに限定されない遺伝的突然変異に起因し得る：脆弱Ｘ症候群（ＦＭＲ１遺伝子の変異に起因する）、ダウン症候群（第２１染色体のトリソミーに起因する）、レット症候群、ウィリアムズ症候群、アンジェルマン症候群、スミス−マゲニス症候群、ＡＴＲ−Ｘ症候群、バース症候群免疫機能不全および／または幼児期の感染症（例えば、シデナム舞踏病）、統合失調症、先天性トキソプラズマ症、先天性風疹症候群、代謝障害（例えば真性糖尿病およびフェニルケトン尿症）、栄養障害および／または脳外傷、自閉症および自閉スペクトラム症。
【０１５０】
いくつかの実施形態において、本発明のウイルス粒子は、以下を含むがそれらに限定されないＣＮＳ中の腫瘍を治療するために使用することができる：聴神経腫瘍、星状細胞腫（グレードＩ、ＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶ）、脊索腫、ＣＮＳリンパ腫、頭蓋咽頭腫、神経膠腫（脳幹グリオーマ、上衣細胞腫、視神経神経膠腫、副甲状腺腫など）、髄芽細胞腫、髄膜腫、転移性脳腫瘍、希突起神経膠腫、下垂体腫瘍、原始神経外胚葉（ＰＮＥＴ、およびシュワン細胞腫。
【０１５１】
いくつかの実施形態において、神経学的障害は、ＣＮＳに神経学的起源を有する運動および／または感覚症状を伴う機能的神経学的障害であり得る。非限定的な例として、機能的な神経学的障害は、慢性疼痛、発作、発語障害、不随意運動、および睡眠障害であり得る。
【０１５２】
いくつかの実施形態において、神経学的障害は、以下を含むがこれらに限定されない白質障害（ＣＮＳの神経線維に影響を及ぼす疾患群）であり得る：ペリツェウス−メルツバッハー病、基底核および小脳の萎縮を伴うミエリン形成不全、Ａｉｃａｒｄｉ−Ｇｏｕｔｉｅｒｅｓ症候群、皮質嚢胞を伴う大脳半球性白質脳症、先天性筋ジストロフィー、筋緊張性ジストロフィー、ウィルソン病、ロウ症候群、シェーグレン−ラーソン症候群、ＰＩＢＤまたはテイ症候群、コケイン病、勃起性黄斑変性症、ツェルウィガー症候群、新生児副腎白質ジストロフィー、幼児期レムサム病、ゼルウィガー様症候群、偽ゼルウィガー症候群、偽新生児副腎白質ジストロフィー、二機能性タンパク質欠損症、Ｘ連鎖副腎白質ジストロフィーおよび副腎脊髄神経症、レムサム病。
【０１５３】
いくつかの実施形態では、神経学的障害は、ＣＮＳの細胞が代謝産物を分解することができないことによって引き起こされる、以下含むがこれらに限定されないリソソーム蓄積障害（ＬＳＤ）であり得る：ニーマン−ピック病（酸性スフィンゴミエリナーゼ（ＡＳＭ）の遺伝的欠損に起因するＬＳＤ；異染性白質萎縮症（ＭＬＤ）（グリア細胞およびニューロンにおけるスルファチドの蓄積を特徴とするＬＳＤ、アリールスルファターゼＡ（ＡＲＳＡ）の遺伝的欠損に起因する）；グロボイド細胞白質萎縮症（ＧＬＤ）（ガラクトシルセラミダーゼの突然変異によって引き起こされるＬＳＤ）；ファブリー病（αガラクトシダーゼＡ（ＧＬＡ）遺伝子の突然変異によって引き起こされるＬＳＤ）；ゴーシェ病（β−グルコセレブロシダーゼ（ＧＢＡ）遺伝子の突然変異によって引き起こされる）；ＧＭ１  ／  ＧＭ２ガングリオシドーシス；ムコ多糖症障害；ポンペ病；ニューロンセロイドリポフスチノーシス。
【０１５４】
一実施形態において、神経学的疾患、障害および／または状態は、パーキンソン病である。一実施形態において、パーキンソン病を治療するために使用されるポリヌクレオチドは、配列番号６〜９および１７〜２３を含むがそれらに限定されない配列番号２〜２３のいずれか１つを含み、これらの配列内では、ペイロードが、ＡＡＤＣまたはパーキンソン病を治療するための当該分野で公知の任意のその他のペイロードによって置換されている。非限定的な一例として、当該状態は初期のパーキンソン病である。別の非限定的な一例として、当該状態は末期のパーキンソン病である。
【０１５５】
一実施形態では、対象は、統一パーキンソン病評価尺度において、最大得点の約１００点に対し約３０点、最大得点の約１００点に対し約１０点、最大得点の約１００点に対し約２０点と評価されたヒト患者である。
【０１５６】
一実施形態では、対象は、本明細書に記載の組成物による治療の前５年間に、パーキンソン病と診断されている。非限定的な一例として、対象は、本明細書に記載の組成物による治療の前、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、１カ月、２カ月、３カ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、１２ヶ月、１３ヶ月、１４ヶ月、１５ヶ月、１６ヶ月、１７ヶ月、１８ヶ月、１年、２年、３年、４年、または５年未満の期間に、パーキンソン病と診断されている。
【０１５７】
一実施形態では、対象は、本明細書に記載の組成物での治療の前、５年から１０年の期間にパーキンソン病と診断されている。非限定的な一例として、対象は、本明細書に記載の組成物での治療の前、５年、５．５年，６年，６．５年，７年，７．５年，８年、８．５年、９年、９．５年、または１０年間に、パーキンソン病診断されている。
【０１５８】
一実施形態では、対象は、本明細書に記載の組成物での治療の前、１０年以上の期間に、パーキンソン病と診断されている。非限定的な一例として、対象は、本明細書に記載の組成物での治療の前、１０．５年、１１年、１１．５年、１２年、１２．５年、１３年、１３．５年、１４年、１４．５年、１５年、１５．５年、１６年、１６．５年、１７年、１７．５年、１８年、１８．５年、１９年、１９．５年、２０年、２０．５年、２１年、２１．５年、２２年、２２．５年、２３年、２３．５年、２４年、または２４年以上の期間に、パーキンソン病と診断されている。
【０１５９】
一実施形態では、対象は、本明細書に記載の組成物の投与前に、振戦および運動などの運動症状の変化があった。振戦の非限定的な一例としては、片側または両側における軽度の振戦、両側または正中線における中程度の振戦または難治性の振戦が挙げられる。運動の非限定的な例には、軽度の運動緩慢、中程度の運動緩慢、重度の運動緩和、および朝に見られる無動が含まれる。
【０１６０】
一実施形態では、対象は、バランス障害、正反射性障害、重大なバランス障害、または転倒などを含むがこれらに限定されない、バランスの変化を有する。
一実施形態では、対象は、生活の質が低下している。非限定的な一例として、被験者は、日常生活の活動への制限など、生活の質に中程度の影響がある。別の非限定的な一例として、対象は、疾患により生活の質が低下している。
【０１６１】
一実施形態では、対象は、本明細書に記載の組成物の投与前に、非運動症状の変化があった。非限定的な一例として、対象は、本明細書に記載の組成物の投与前に、軽度から中程度の認知障害があった。別の非限定的な一例として、対象は、幻覚などの行動障害も含み得る認知症のような顕著な認知障害がある。
【０１６２】
一実施形態では、対象は、本明細書に記載の組成物の投与前に、１つまたはそれ以上のドーパミン作動性薬物の投与を受けて、変動が制限される満足のいく反応を呈していた。
一実施形態では、対象は、本明細書に記載の組成物の投与前に、１つまたはそれ以上のドーパミン作動性薬物の投与を受けて、軽度から中程度の身体障害を引き起こす運動症状の変動があった。
【０１６３】
一実施形態では、対象は、本明細書に記載の組成物の投与前に、重篤な障害を引き起こす「すり減り現象」および／またはレボドパ誘発性ジスキネジーからなる医学的に不応性の運動症状の変動があった。
【０１６４】
一実施形態では、対象は、以下を含むがそれらに限定されないパーキンソン病に関連する軽度の症状がある：過去５年間に認知障害があると診断されていない；１つまたはそれ以上のドーパミン作動性薬物の投与を受けて、変動が制限される満足のいく反応を呈していた；片側または両側における振戦が軽度である；生活の質がほとんど影響を受けていない；および／またはバランス障害がない。
【０１６５】
一実施形態では、対象は、以下を含むがそれらに限定されないパーキンソン病に関連する中程度の症状がある：軽度から中等度の認知障害；バランス障害の最初の兆候；１つまたはそれ以上のドーパミン作動性薬物の投与を受けながらも、過去５〜１０年以内に診断された、軽度から中程度の身体障害を引き起こす運動症状の変動；両側または正中線における中程度の振戦；中程度の運動緩徐；および／または日常生活の活動に制限がいくらかある。
【０１６６】
一実施形態では、対象は、以下を含むがそれらに限定されないパーキンソン病に関連する進行した症状がある：１０年以上前にパーキンソン病と診断されている；著しい身体障害を引き起こす、中程度の難治性運動障害のすり減り現象および／またはレボドパ誘発性ジスキネジー；難治性振戦；重度のバランス障害および／または転倒；重度の認知障害（例えば、行動障害を伴うまたは伴わない認知症）；重度の運動緩徐；疾患により生活の質が著しく低下している；および／または朝に見られる無動症。
【０１６７】
一実施形態において、対象は、運動障害専門医（ＭＤＳ）のもとに送られているが、深部脳刺激を受けていない。
一実施形態では、対象は、本明細書に記載の組成物と組み合わせて、ＤＵＯＰＡ（商標）を使用している。非限定的な一例として、対象は、ＤＵＯＰＡ（商標）のみを使用して、その治療が功を奏している。非限定的な一例として、対象は、ＤＵＯＰＡ（商標）のみを使用して、その治療が功を奏しているか、あるいはある程度功を奏している。
【０１６８】
別の実施形態において、神経学的疾患、障害、および／または状態は、フリードライヒ失調症である。一実施形態では、フリードライヒ失調症の治療に使用されるポリヌクレオチドは、配列番号：６〜９および１７〜２３を含むがこれらに限定されるものではない配列番号２〜２３のいずれか１つからなり、これらの配列では、ペイロードが、Ｆｒａｔａｘｉｎに、またはＦｒｉｅｄｒｅｉｃｈ運動失調症を治療するための当該技術分野で知られているその他の任意のペイロードによって置き換えられる。
【０１６９】
別の実施形態において、神経学的疾患、障害および／または状態は、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）である。一実施形態では、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療に使用されるポリヌクレオチドは、配列番号：６〜９および１７〜２３を含むがこれらに限定されるものではない配列番号２〜２３のいずれか１つからなり、これらの配列では、ペイロードが、ＳＯＤ１のｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ＲＮＡｉに、または筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）を治療するための当該技術分野で知られているその他の任意のペイロードによって置き換えられる。
【０１７０】
別の実施形態において、神経学的疾患、障害および／または状態は、ハンチントン病である。一実施形態では、ハンチントン病の治療に使用されるポリヌクレオチドは、配列番号：６〜９および１７〜２３を含むがこれらに限定されるものではない配列番号２〜２３のいずれか１つからなり、これらの配列では、ペイロードが、ＨｔｔのｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ＲＮＡｉに、またはハンチントン病を治療するための当該技術分野で知られているその他の任意のペイロードによって置き換えられる。
【０１７１】
別の実施形態において、神経学的疾患、障害または状態は、脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）である。一実施形態では、脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）の治療に使用されるポリヌクレオチドは、配列番号：６〜９および１７〜２３を含むがこれらに限定されるものではない配列番号２〜２３のいずれか１つからなり、これらの配列では、ペイロードが、ＳＭＮに、または脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）を治療するための当該技術分野で知られているその他の任意のペイロードによって置き換えられる。
【０１７２】
概日リズムと睡眠−覚醒サイクル
概日リズムとは、２４時間周期に従う傾向がある身体的、精神的および行動的な変動を指す。概日リズムは、睡眠−覚醒サイクル、ホルモン放出、体温、およびその他の身体機能に影響を及ぼし得る。概日リズムの変動は、睡眠障害（例えば、不眠症）、うつ病、双極性障害、季節性情動障害、肥満および糖尿病などを含むがこれらに限定されない状態および／または障害引き起こす可能性がある。
【０１７３】
一実施形態では、本明細書に記載されるＡＡＤＣポリヌクレオチドは、不眠症を治療するために使用することができる。
睡眠−覚醒サイクルは、睡眠の期間および覚醒の期間からなる。一般に、２４時間の時間帯では、睡眠の総時間は覚醒の総時間よりも短い。非限定的な一例として、睡眠−覚醒サイクルは、７〜９時間の睡眠と１５〜１７時間の覚醒状態からなる。非限定的な一例として、睡眠−覚醒サイクルは、８時間の睡眠および１６時間の覚醒からなる。非限定的な一例として、睡眠−覚醒サイクルは８−１０時間の睡眠および１４−１６時間の覚醒からなる。
【０１７４】
一実施形態では、対象の睡眠覚醒サイクルは、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドを対象に投与することによって改善される。
一実施形態では、対象の睡眠−覚醒サイクルは、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドを対象に投与することによって調節される。非限定的な一例として、調節とは、夜間により多くの睡眠が起こるようにし、日中により少ない睡眠が起こるようにする時間帯の矯正を指す。
【０１７５】
一実施形態では、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドを投与された対象の睡眠覚醒サイクルは、ＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与前の対象の睡眠覚醒サイクルと比較して、改善する。非限定的な一例として、対象は、睡眠期間が増加し、覚醒期間が減少している。別の非限定的な一例として、対象は、睡眠期間が減少し、覚醒期間が増加している。
【０１７６】
一実施形態では、本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドを投与された対象の睡眠−覚醒サイクルは、ＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与前の対象の睡眠−覚醒サイクルと比較して、調節される。非限定的な一例として、睡眠期間の長さおよび覚醒期間の長さは、少なくとも２日間、ほぼ同じ（例えば、＋／−  １時間）である。別の非限定的な一例として、２４時間内の睡眠期間および覚醒時間の長さは、過去２４時間内で、１０分以内、１５分以内、２０分以内、２５分以内、３０分以内、３５分以内、４０分以内、４５分以内、５０分以内、５５分以内、１時間以内、１．５時間以内、または２時間以内である。
【０１７７】
一実施形態では、対象が２４時間以内に経験する急速眼球運動（ＲＥＭ）睡眠の量は、対象に本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドを投与した後に、変化する。レム睡眠は、激しい脳活動によって特徴づけられる睡眠の活動期と一般的に考えられており、レム睡眠では脳波が速く、非同期である。成人では、平均で、１日の総睡眠期間の約２０〜２５％がレム睡眠である。非限定的な一例として、レム睡眠の量は、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、または６５％以上減少している。非限定的な一例として、レム睡眠の量は、１〜１０％、５〜１０％、５〜１５％、１０〜１５％、１５〜２０％、１５〜２５％、２０〜２５％
２０〜３０％、２５〜３０％、２５〜３５％、３０〜３５％、３０〜４０％、３５〜４０％、４０〜５０％、または４０〜６０％減少している。非限定的な一例として、レム睡眠の量は、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％  、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、または６５％以上増加している。非限定的な一例として、レム睡眠の量は、１〜１０％、５〜１０％、５〜１５％、１０〜１５％、１５〜２０％、１５〜２５％、２０〜２５％  ２０〜３０％、２５〜３０％、２５〜３５％、３０〜３５％、３０〜４０％、３５〜４０％、４０〜５０％、または４０〜６０％増加している。
【０１７８】
一実施形態では、対象が２４時間以内に経験するノンレム（ＮＲＥＭ）睡眠の量は、対象に本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドが投与された後に、変化する。ノンレム睡眠は、ＥＥＧによって測定される脳波がより遅くなり、より大きな振幅を有するので、一般に、生理学的活動の低下により特徴付けられる。ノンレム睡眠には、４つの段階がある：ステージ１は、入眠期、すなわち覚醒から睡眠に移行する時であり、このステージでは脳波および筋肉活動が遅くなる；ステージ２は、軽睡眠期であり、このステージでは目の動きが止まり、時折急激な脳波の高まり（紡錘波と呼ばれることもある）を伴いながら、脳波が遅くなる；ステージ３およびステージ４（総称して、低速波睡眠と呼ぶ）は、より小さく速い脳波が点在する低速の脳波（デルタ波）の存在を特徴とし、目の動きはない。成人では、平均で、１日の総睡眠期間の約７５〜８０％がノンレム睡眠であり、一日の睡眠時間の約半分がステージ２のノンレム睡眠である。
【０１７９】
一実施形態では、対象が経験するノンレム睡眠の量は、対象が本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドを投与された後に、変化する。非限定的な一例として、ノンレム睡眠の量は、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％  、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、または６５％以上減少している。非限定的な一例として、ノンレム睡眠の量は、１〜１０％、５〜１０％、５〜１５％、１０〜１５％、１５〜２０％、１５〜２５％、２０〜２５％  ２０〜３０％、２５〜３０％、２５〜３５％、３０〜３５％、３０〜４０％、３５〜４０％、４０〜５０％、または４０〜６０％減少している。非限定的な一例として、ノンレム睡眠の量は、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％  、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、または６５％以上増加している。非限定的な一例として、ノンレム睡眠の量は、１〜１０％、５〜１０％、５〜１５％、１０〜１５％、１５〜２０％、１５〜２５％、２０〜２５％  ２０〜３０％、２５〜３０％、２５〜３５％、３０〜３５％、３０〜４０％、３５〜４０％、４０〜５０％、または４０〜６０％増加している。
【０１８０】
一実施形態では、対象が経験するステージ１のノンレム睡眠の量は、対象が本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドを投与された後に、変化する。非限定的な一例として、ステージ１のノンレム睡眠の量は、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％  、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、または６５％以上減少している。非限定的な一例として、ステージ１のノンレム睡眠の量は、１〜１０％、５〜１０％、５〜１５％、１０〜１５％、１５〜２０％、１５〜２５％、２０〜２５％  ２０〜３０％、２５〜３０％、２５〜３５％、３０〜３５％、３０〜４０％、３５〜４０％、４０〜５０％、または４０〜６０％減少している。非限定的な一例として、ステージ１のノンレム睡眠の量は、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％  、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、または６５％以上増加している。非限定的な一例として、ステージ１のノンレム睡眠の量は、１〜１０％、５〜１０％、５〜１５％、１０〜１５％、１５〜２０％、１５〜２５％、２０〜２５％  ２０〜３０％、２５〜３０％、２５〜３５％、３０〜３５％、３０〜４０％、３５〜４０％、４０〜５０％、または４０〜６０％増加している。
【０１８１】
一実施形態では、対象が経験するステージ２のノンレム睡眠の量は、対象が本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドを投与された後に、変化する。非限定的な一例として、ステージ２のノンレム睡眠の量は、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％  、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、または６５％以上減少している。非限定的な一例として、ステージ２のノンレム睡眠の量は、１〜１０％、５〜１０％、５〜１５％、１０〜１５％、１５〜２０％、１５〜２５％、２０〜２５％  ２０〜３０％、２５〜３０％、２５〜３５％、３０〜３５％、３０〜４０％、３５〜４０％、４０〜５０％、または４０〜６０％減少している。非限定的な一例として、ステージ２のノンレム睡眠の量は、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％  、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、または６５％以上増加している。非限定的な一例として、ステージ２のノンレム睡眠の量は、１〜１０％、５〜１０％、５〜１５％、１０〜１５％、１５〜２０％、１５〜２５％、２０〜２５％  ２０〜３０％、２５〜３０％、２５〜３５％、３０〜３５％、３０〜４０％、３５〜４０％、４０〜５０％、または４０〜６０％増加している。
【０１８２】
一実施形態では、対象が経験するステージ３および４のノンレム睡眠の量は、対象が本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドを投与された後に、変化する。非限定的な一例として、ステージ３および４のノンレム睡眠の量は、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％  、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、または６５％以上減少している。非限定的な一例として、ステージ３および４のノンレム睡眠の量は、１〜１０％、５〜１０％、５〜１５％、１０〜１５％、１５〜２０％、１５〜２５％、２０〜２５％  ２０〜３０％、２５〜３０％、２５〜３５％、３０〜３５％、３０〜４０％、３５〜４０％、４０〜５０％、または４０〜６０％減少している。非限定的な一例として、ステージ３および４のノンレム睡眠の量は、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％  、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、または６５％以上増加している。非限定的な一例として、ステージ３および４のノンレム睡眠の量は、１〜１０％、５〜１０％、５〜１５％、１０〜１５％、１５〜２０％、１５〜２５％、２０〜２５％  ２０〜３０％、２５〜３０％、２５〜３５％、３０〜３５％、３０〜４０％、３５〜４０％、４０〜５０％、または４０〜６０％増加している。
【０１８３】
一実施形態では、ノンレム睡眠およびレム睡眠のサイクルの期間は、対象が本明細書に記載のＡＡＤＣポリヌクレオチドを投与された後、対象においてより一貫している。一般的に、ノンレム睡眠およびレム睡眠のサイクルは、毎晩９０〜１１０分毎に４〜６回交互に変わる。
【０１８４】
定義
本明細書中の様々な箇所において、本開示の化合物の置換基は、群でまたは範囲で開示される。本開示が、そのような群および範囲の構成員のそれぞれおよび全てのサブコンビネーションを含むことが、特に意図されている。
【０１８５】
約：本明細書で使用されている「約」という語は、列挙された値の＋／−  １０％を意味する。
活動／活性：本明細書で使用されている「活動」という語は、物事が起こっているかまたは行われている状態を指す。本明細書に記載の組成物は活性を有し、この活性は１つまたはそれ以上の生物学的事象に関与する。
【０１８６】
アデノ随伴ウイルス：本明細書中で使用されている「アデノ随伴ウイルス」または「ＡＡＶ」という語は、それに由来する任意の粒子、配列、遺伝子、タンパク質または成分からなる依存ウイルス属の構成員を指す。本明細書で使用されている「ＡＡＶ粒子」という語は、キャプシドおよびポリヌクレオチドからなる。ＡＡＶ粒子は、本明細書に記載されているかまたは当該分野で公知の任意の血清型（血清型の組み合わせを含む；（すなわち、「シュードタイピング」化したＡＡＶ）に由来するものであってもよく、または種々のゲノム（例えば、一本鎖または自己相補性）に由来するものであってもよい。さらに、ＡＡＶ粒子は、複製欠陥および／または標的化されていてもよい。
【０１８７】
併用投与：本明細書中で使用されている「組み合わせて投与される」または「併用投与」という語句は、２つまたはそれ以上の薬剤（例えば、ＡＡＶ）を、同時またはある間隔内で対象に投与し、患者に対する各薬剤の効果の重なりが存在し得るように、および／または対象がある時点で同時に両方に曝露されているようにすることを意味する。いくつかの実施形態において、それらの薬剤は、薬剤投与間隔が約６０分、３０分、１５分、１０分、５分、または１分以内に、または１つまたはそれ以上のその他の薬剤の少なくとも１回の用量の約２４時間、１２時間、６時間、３時間以内に投与される。いくつかの実施形態では、投与は、重複する投与計画で行なう。本明細書で使用されている  「投薬計画」という語は、時間的に間隔を空けた複数の用量を指す。そのような用量は、規則的な間隔で行なうか、または投与における１つまたはそれ以上の中断を含み得る。いくつかの実施形態において、薬剤の投与は、短い間隔をあけて行なわれるので、コンビナトリアル（例えば、相乗）効果が達成される。
【０１８８】
改善：本明細書で使用されている「改善」または「改善する」という語は、状態または疾患の少なくとも１つの指標の重篤度を軽減することを指す。例えば、神経変性障害の文脈において、改善には、ニューロン損失の減少が含まれる。
【０１８９】
動物：本明細書で使用されている「動物」という語は、動物界の任意の構成員を指す。いくつかの実施形態では、「動物」とは、任意の発達段階のヒトを指す。いくつかの実施形態において、「動物」とは、任意の発生段階における非ヒト動物を指す。ある実施形態では、非ヒト動物は、哺乳動物（例えば、げっ歯類、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ヒツジ、ウシ、またはブタ）である。いくつかの実施形態では、動物には、哺乳動物、鳥類、爬虫類、両生類、魚類、および虫類が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、動物は、トランスジェニック動物、遺伝子操作された動物、またはクローンである。
【０１９０】
アンチセンス鎖：本明細書中で使用されているｓｉＲＮＡ分子の「アンチセンス鎖」または「第１鎖」または「ガイド鎖」という語は、約１０〜５０ヌクレオチドの部分に実質的に相補的な鎖を指し、例えば、サイレンシングの標的となる遺伝子のｍＲＮＡの約１５〜３０，１６〜２５，１８〜２３または１９〜２２ヌクレオチドである。アンチセンス鎖または第１の鎖は、標的特異的サイレンシングを導くために所望の標的ｍＲＮＡ配列に十分相補的な配列を有し、例えば、ＲＮＡｉの機構またはプロセスによって所望の標的ｍＲＮＡの破壊を引き起こすのに十分な相補性を有する。
【０１９１】
約：本明細書で使用されている「約」または「約」という語は、関心のもたれている１つまたはそれ以上の値に適用される場合に、記載された基準値に類似する値を指す。ある実施形態において、「約」または「約」という語は、別段の記載がない限り、または文脈から明らかでない限り（そのような数が可能な値の１００％を超える場合を除いて）、２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、あるいは記載された基準値のいずれかの方向（より大きいか、より小さい）を指す。
【０１９２】
と関連した：本明細書中で使用されている「と関連した」、「共役した」、「連結された」、「付着した」および「係留された」という語は、２つまたはそれ以上の部分に関して使用される場合、以下を意味する：当該部分が、直接的にまたは連結剤として機能する１つまたはそれ以上の追加の部分を介して、相互に物理的に会合しているかまたは結合して、当該部分が条件（当該構造が使用される、例えば、生理学的条件）の下で物理的に結合したままであるように、十分に安定した構造を形成する。「関連」は、厳密に直接共有化学結合によるものである必要はない。この語はまた、「関連する」存在が物理的に結合したままであるように、イオン結合または水素結合またはハイブリダイゼーションに基づく結合が十分に安定していることを示唆し得る。
【０１９３】
二官能性の：本明細書中で使用されている「二官能性の」という語は、少なくとも２つの官能を有し、またはそれらを維持する任意の物質、分子、または部分を指す。これらの官能は、同じ結果または異なる結果に影響を与える可能性がある。官能を生成する構造は、同じであっても異なっていてもよい。
【０１９４】
生物学的に活性がある：本明細書で使用されている「生物学的に活性がある」という語は、生体系および／または生物体において活性を有する任意の物質（例えば、ＡＡＶ）の特性を指す。例えば、生物に投与された場合に、その生物に生物学的作用を及ぼす物質は、生物学的に活性であると考えられる。特定の実施形態では、本発明のポリヌクレオチドは、ポリヌクレオチドの一部でも生物学的に活性であるかまたは生物学的に関連すると考えられる活性を模倣する場合、生物学的に活性であると考えられ得る。
【０１９５】
生物系：本明細書中で使用されている「生物系」というは、器官、組織、細胞、細胞内成分、タンパク質、核酸、分子（生体分子を含むが、これに限定されない）を指し、これらは、協調して機能し、細胞膜、細胞コンパートメント、細胞、組織、器官、臓器系、多細胞生物、または任意の生物学的存在内で、特定の生物学的作業を行う。いくつかの実施形態では、生体系は、細胞内および／または細胞外の細胞シグナル伝達生体分子からなる細胞シグナル伝達経路である。いくつかの実施形態において、生物学的系は、細胞外／細胞マトリックスおよび／または細胞ニッチ内の成長因子シグナル伝達事象からなる。
【０１９６】
生体分子：本明細書で使用されている「生体分子」という語は、アミノ酸ベース、核酸ベース、炭水化物ベースまたは脂質ベースなどの任意の天然分子である。
相補的な、または実質的に相補的な：本明細書中で使用されているように、「相補的な」という語は、相互に塩基対を形成するポリヌクレオチドの能力を指す。塩基対は、典型的には、逆平行ポリヌクレオチド鎖中のヌクレオチド単位間の水素結合によって形成される。相補的ポリヌクレオチド鎖は、ワトソン−クリック様式（例えば、ＡからＴ、ＡからＵ、ＣからＧ）、または二重鎖の形成を可能にするその他の任意の様式で、塩基対を形成することができる。当業者が認識しているように、ＤＮＡでなくＲＮＡを用いる場合、チミンではなくウラシルがアデノシンに相補的であると考えられる塩基である。しかし、Ｕが本発明の文脈において示される場合、特に断らない限り、Ｔを置換する能力が示唆されている。完全な相補性または１００％相補性は、１つのポリヌクレオチド鎖の各ヌクレオチド単位が第２のポリヌクレオチド鎖のヌクレオチド単位と水素結合を形成し得る状況を指す。完全な相補性よりも低いというのは、２本の鎖のヌクレオチド単位の一部が、すべてではないが互いに水素結合を形成し得る状況を指す。例えば、２つの２０ｍｅｒについて、各鎖上の２つの塩基対が相互に水素結合を形成し得る場合のみ、ポリヌクレオチド鎖は１０％の相補性を示す。同じ例において、各鎖上の１８個の塩基対が相互に水素結合を形成することができる場合、ポリヌクレオチド鎖は９０％の相補性を示す。本明細書で使用されている「実質的に相補的」という語は、ｓｉＲＮＡが、所望の標的ｍＲＮＡと結合し、標的ｍＲＮＡのＲＮＡサイレンシングを引き起こすのに十分な配列（例えば、アンチセンス鎖中に）を有することを意味する。
【０１９７】
化合物：本明細書中で使用されている「化合物」という語は、固有の化学物質を指す。いくつかの実施形態では、特定の化合物は、１つまたはそれ以上の異性体または同位体形態（立体異性体、幾何異性体、および同位体を含むが、これらに限定されない）で存在し得る。いくつかの実施形態では、化合物は、このような形態のうち一つの形態で提供または利用される。いくつかの実施形態では、化合物は、２つまたはそれ以上のこのような形態の混合物（立体異性体のラセミ混合物を含むが、これに限定されない）として、提供または利用される。当業者は、いくつかの化合物が、そのような異なる形態で存在し、異なる特性および／または活性（生物学的活性を含むが、これに限定されない）を示すことを理解する。そのような場合、本発明に従って使用するための化合物の特定の形態を選択または回避することは、当業者の通常の技術の範囲内である。例えば、非対称的に置換された炭素原子を含む化合物は、光学活性体またはラセミ体で単離することができる。光学的に活性な形態を光学活性出発物質から調製する方法に関する方法は、ラセミ混合物の分割または立体選択的合成など、当技術分野で公知である。オレフィンの多くの幾何異性体、Ｃ＝Ｎ二重結合などもまた、本明細書に記載の化合物中に存在することができ、このような安定した異性体は全て、本開示において考慮される。本開示の化合物のシスおよびトランス幾何異性体が記載され、異性体の混合物として、または分離された異性体として単離され得る。
【０１９８】
本開示の化合物は、互変異性体も含む。互変異性体は、単結合が隣接する二重結合と交換され、それに付随してプロトンが移動することに起因する。互変異性体は、同じ実験式および全電荷を有する異性体プロトン化状態であるプロトン互変異性体を含む。
【０１９９】
本開示の化合物はまた、中間化合物または最終化合物中に存在する原子の同位体の全てを含む。「同位体」は、原子番号は同じであるが、核内の異なる数の中性子から生じる異なる質量数を有する原子を指す。例えば、水素の同位体には、トリチウムおよび重水素がある。
【０２００】
本開示の化合物および塩は、通常の方法によって、溶媒分子または水分子と組み合わせて、溶媒和物および水和物を形成することにより、調製することができる。
保存された：本明細書中で使用されている「保存された」という語は、比較対象の２つまたはそれ以上の配列の同じ位置において、それぞれ改変されていない状態で発生するポリヌクレオチド配列またはポリペプチド配列のヌクレオチドまたはアミノ酸残基を指す。比較的保存されているヌクレオチドまたはアミノ酸は、配列中のその他の場所に現れるヌクレオチドまたはアミノ酸に比べて、多くの関連配列の間で保存されているものである。
【０２０１】
いくつかの実施形態では、２つまたはそれ以上の配列は、相互に１００％同一である場合に、「完全に保存されている」と言う。いくつかの実施形態において、２つまたはそれ以上の配列は、それらが少なくとも７０％同一、少なくとも８０％同一、少なくとも９０％同一、または少なくとも９５％同一である場合に、「高度に保存されている」と言う。いくつかの実施形態では、２つまたはそれ以上の配列は、それらが約７０％同一、約８０％同一、約９０％同一、約９５％、約９８％、または約９９％同一である場合に、「高度に保存されている」と言う。いくつかの実施形態では、２つまたはそれ以上の配列は、それらが少なくとも３０％同一、少なくとも４０％同一、少なくとも５０％同一、少なくとも６０％同一、少なくとも７０％同一、８０％同一、少なくとも９０％同一、または少なくとも９５％同一である場合に、「保存されている」と言う。いくつかの実施形態では、２つまたはそれ以上の配列は、それらが約３０％同一、約４０％同一、約５０％同一、約６０％同一、約７０％同一、約８０％同一、約９０％  ％同一、約９５％同一、約９８％同一、または約９９％同一である場合に、「保存されている」と言う。配列の保存は、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの全長に適用され得るか、またはその一部、領域、または特徴に適用され得る。
【０２０２】
一実施形態では、保存された配列は隣接していない。隣接する整列の間隙が配列間に存在する場合に、当業者は、いかに整列を達成するか、また、挿入または欠失が存在するにもかかわらず、対応する残基をいかに整列させるかを理解することができる。
【０２０３】
一実施形態では、保存された配列は隣接していない。隣接する整列の間隙が配列間に存在する場合に、当業者は、いかに整列を達成するか、また、挿入または欠失が存在するにもかかわらず、対応する残基をいかに整列させるかを理解することができる。
【０２０４】
投与：本明細書中で使用されているように、「投与」とは、パルボウイルスなどの化合物（例えば、ＡＡＶおよび／またはＡＡＶの化合物、物質、存在、部分、カーゴまたはペイロード）を、標的に投与する行為または様式を指す。そのような標的は、細胞、組織、臓器、生物、または系（生物学的または産生的）であり得る。
【０２０５】
投与剤：本明細書中で使用されている「投与剤」という語は、ポリヌクレオチドおよび／または１つまたはそれ以上の物質のｉｎ  ｖｉｖｏおよび／またはｉｎ  ｖｉｔｒｏでの投与を、少なくとも部分的に促進する薬剤あるいは物質（例えば、ウイルス粒子または発現ベクターなどの本発明の化合物および／または組成物を含むが、これに限定されない）を標的細胞に投与することを指す。
【０２０６】
不安定化した：本明細書中で使用されている「不安定な」、「不安定化する」または「不安定化した領域」という語は、同じ領域または同じ分子の開始型、基準型、野生型、または未変性型に比べて、安定性の低い領域または分子を指す。
【０２０７】
検出可能な標識：本明細書中で使用されている「検出可能な標識」という語は、他の存在に結合させる、組み込ませる、または会合させる１つまたはそれ以上のマーカー、シグナル、または部分を指し、これらのマーカー、シグナル、または部分は、放射線、蛍光、化学発光、酵素活性、吸光度免疫学的検出などを含む当技術分野で公知の方法によって容易に検出される。検出可能な標識には、放射性同位体、発蛍光団、発色団、酵素、色素、金属イオン、リガンド（例えば、ビオチン、アビジン、ストレプトアビジンおよびハプテン）、量子ドットなどがある。検出可能な標識は、それらが結合、組み込み、または会合している存在の任意の位置に配置することができる。例えば、ペプチドまたはタンパク質に結合し、組み込まれ、または会合される場合、それらは、アミノ酸、ペプチド、またはタンパク質内にあってもよく、またはＮ−またはＣ−末端に位置してもよい。
【０２０８】
投薬計画：本明細書で使用されている「投薬計画」は、治療、予防、または緩和ケアの投与スケジュールまたは医師により決定された投薬計画である。
有効量：本明細書で使用されている薬剤の「有効量」という語は、本明細書に記載された化合物の投与により、ある疾患の１つまたはそれ以上の症状の治癒、軽減、緩和、または改善において、有益なまたは望ましい結果をもたらすのに十分な量を指し、臨床結果および「有効量」は、従って、それが適用されている状況に依存して変化する。例えば、パーキンソン病を治療する薬剤を投与する状況において、薬剤の有効量は、例えば、薬剤を投与しなかった場合に得られた応答と比較して、本明細書で定義するパーキンソン病の治療を達成するのに十分な量である。
【０２０９】
カプセル化する：本明細書で使用されている「カプセル化する」という語は、封入、包囲または封入することを意味する。
遺伝子操作された：本明細書で使用されてように、実施形態が、出発点の分子、野生型の分子、または天然の分子から、構造的にまたは化学的に、変化した特徴または性質を有するようにデザインされる場合に、当該実施形態は「遺伝子操作された」と言う。したがって、遺伝子操作された薬剤または存在は、そのデザインおよび／または生産が人間の手による行為を含むものである。
【０２１０】
エピトープ：本明細書中で使用されている「エピトープ」という語は、生体分子と相互作用することができる分子上の表面または領域を指す。例えば、タンパク質は、抗体（例えば、生体分子）と、相互作用する１つまたはそれ以上のアミノ酸（例えば、エピトープ）を含み得る。いくつかの実施形態では、タンパク質またはタンパク質モジュールに言及する場合に、エピトープは、アミノ酸の直線的な伸長または折りたたまれたアミノ酸鎖によって形成される三次元構造からなり得る。
【０２１１】
発現：本明細書中で使用されている核酸配列の「発現」という語は、以下の事象の１つまたはそれ以上を指す：（１）ＤＮＡ配列から（例えば、転写により）ＲＮＡ鋳型を産生すること；（２）  ＲＮＡ転写産物を、（例えば、スプライシング、編集、５’キャップ形成、および／または３’末端プロセシングにより）プロセシングすること；（３）ＲＮＡを、ポリペプチドまたはタンパク質へ翻訳すること；（４）ポリペプチドまたはタンパク質を折り畳むこと；（５）ポリペプチドまたはタンパク質を翻訳後修飾すること。
【０２１２】
特徴：本明細書で使用されている「特徴」という語は、特質、特性、または特有の要素を指す。
製剤：本明細書で使用されている「製剤」という語は、本開示の少なくとも１つのポリヌクレオチドおよび／または化合物および／または組成物（例えば、ベクター、ＡＡＶ粒子など）、さらに投与剤を含む。
【０２１３】
断片：本明細書で使用されている「断片」という語は、全体の連続部分を指す。例えば、タンパク質の断片は、培養細胞から単離された全長タンパク質を消化することによって得られるポリペプチドからなる。いくつかの実施形態では、あるタンパク質の一つの断片は、少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１５０、２００、２５０個、またはそれ以上のアミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、ある抗体の断片は、酵素消化に供される抗体の部分を含むか、またはそのまま合成される。
【０２１４】
機能性：本明細書中で使用されている「機能的」生物学的分子という語は、それが特徴付けられる特性および／または活性を示す構造を有するか、またはそのような形態にある生体分子および／または存在である。
【０２１５】
遺伝子発現：「遺伝子発現」という語は、核酸配列が首尾よく転写され、そしてほとんどの場合翻訳されてタンパク質またはペプチドを産生するプロセスを指す。分かりやすく言えば、「遺伝子発現」の測定を参照する場合、これは、測定値が転写の核酸産物（例えば、ＲＮＡまたはｍＲＮＡ）由来であるか、あるいは翻訳のアミノ酸産物（例えば、ポリペプチドまたはペプチド）由来であることを意味すると理解されるべきである。ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ポリペプチドおよびペプチドの量またはレベルを測定する方法は、当技術分野で周知である。
【０２１６】
相同性：本明細書中で使用されている「相同性」という語は、ポリマー分子間の全体的な関連性を指し、例えば、核酸分子間（（ｅ．ｇ．，ＤＮＡ分子および／またはＲＮＡ分子）および／またはポリペプチド分子間の関連性を指す。いくつかの実施形態では、ポリマー分子は、その配列が少なくとも２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９９％同一であるかまたは類似している場合に、互いに「相同性」を有すると考えられる。「相同性を有する」という語は、必然的に、少なくとも２つの配列（ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの配列）の間の比較を指す。本発明によれば、２つのポリヌクレオチド配列がコードするポリペプチドが、少なくとも約２０アミノ酸の少なくとも１つのストレッチについて、少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、またはさらには９９％である場合に、これらのポリヌクレオチド配列は相同性を有すると考えられる。いくつかの実施形態では、相同性を有するポリヌクレオチド配列は、少なくとも４〜５個の一意的に特定されるアミノ酸のストレッチをコードする能力によって特徴付けられる。長さが６０ヌクレオチド未満のポリヌクレオチド配列の場合、相同性は、典型的には、少なくとも４−５個の一意的に特定されるアミノ酸のストレッチをコードする能力によって決定される。本発明によれば、２つのタンパク質が、少なくとも約２０アミノ酸の少なくとも１つのストレッチについて、少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％または９０％同一である場合に、これらのタンパク質配列は相同であるとみなされる。多くの態様において、相同性を有するタンパク質は、少なくとも３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７，１８，１９，２０，２５，３０，３５，４０，４５，５０またはそれ以上のアミノ酸の、少なくとも１つの短いストレッチにわたって、程度の大きい全体的な相同性および高度の相同性を示す。多くの実施形態では、相同性を有するタンパク質は１つまたはそれ以上の特徴的配列要素を共有する。本明細書中で使用されている「特徴的配列エレメント」という語は、関連するタンパク質に存在するモチーフを指す。いくつかの実施形態では、そのようなモチーフの存在は、特定の活性（例えば、生物学的活性）と相関する。
【０２１７】
同一性：本明細書中で使用されている「同一性」という語は、ポリマー分子間の全体的な関連性を指し、例えば、オリゴヌクレオチド分子間およびまたはポリヌクレオチド分子間（例えば、ＤＮＡ分子および／またはＲＮＡ分子などの）および／またはポリペプチド分子の間の全体的な関連性を指す。例えば、２つのポリヌクレオチド配列のパーセント同一性の計算は、最適な比較目的のために２つの配列を整列させることによって行うことができる（例えば、第１および第２の核酸配列の一方または両方にギャップを導入し、最適な整列を達成することができ、非同一配列は比較目的について無視することができる）。特定の実施形態では、比較目的のために整列された配列の長さは、参照配列の長さの少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％である。次いで、対応するヌクレオチド位置のヌクレオチドを比較する。第１の配列中の位置が、第２の配列中の対応する位置と同じヌクレオチドによって占有される場合、当該分子はその位置で同一である。２つの配列間のパーセント同一性は、２つの配列の最適な整列のために導入される必要があるギャップの数および各ギャップの長さを考慮に入れた、当該配列によって共有される同一位置の数の関数である。２つの配列間の配列の比較および同一性パーセントの決定は、数学的アルゴリズムを使用して達成することができる。例えば、２つのヌクレオチド配列間のパーセント同一性は、以下に記載されるような方法を用いて決定され得る：Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，
Ｌｅｓｋ，  Ａ．  Ｍ．，  ｅｄ．，  Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９８８；Ｂｉｏｃｏｍｐｕｔｉｎｇ：  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｐｒｏｊｅｃｔｓ，  Ｓｍｉｔｈ，  Ｄ．  Ｗ．，  ｅｄ．，  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９９３；Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，  ｖｏｎ  Ｈｅｉｎｊｅ，  Ｇ．，  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，  １９８７；Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｄａｔａ，  Ｐａｒｔ  Ｉ，  Ｇｒｉｆｆｉｎ，  Ａ．  Ｍ．，  ａｎｄ  Ｇｒｉｆｆｉｎ，  Ｈ．  Ｇ．，  ｅｄｓ．，  Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ，  １９９４；ａｎｄ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｐｒｉｍｅｒ，  Ｇｒｉｂｓｋｏｖ，  Ｍ．  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｒｅｕｘ，  Ｊ．，  ｅｄｓ．，  Ｍ  Ｓｔｏｃｋｔｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９９１；これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。例えば、２つのヌクレオチド配列間のパーセント同一性は、例えば、Ｍｅｙｅｒｓ  ａｎｄ  Ｍｉｌｌｅｒのアルゴリズム（ＣＡＢＩＯＳ、１９８９，４：１１−１７）を用いて決定することができ、これは、ＰＡＭ１２０加重残基表、ギャップ長ペナルティ＝１２およびギャップペナルティ＝４を用いてＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれている。あるいは、２つのヌクレオチド配列間のパーセント同一性は、ＮＷＳｇａｐｄｎａ．ＣＭＰマトリックスを使用するＧＣＧソフトウェアパッケージのＧＡＰプログラムを使用して決定することができる。配列間のパーセント同一性を決定するために一般的に用いられる方法には、Ｃａｒｉｌｌｏ，  Ｈ．，  ａｎｄ  Ｌｉｐｍａｎ，  Ｄ．，
ＳＩＡＭ  Ｊ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｍａｔｈ．，  ４８：１０７３  （１９８８）（この全体が参照により本明細書に組み込まれる）に開示されているものが含まれるが、これらに限定されない。同一性を決定する技法は、広く入手可能なコンピュータプログラムにまとめられている。２つの配列間の相同性を決定するためのコンピュータソフトウェアの例には、ＧＣＧプログラムパッケージ、Ｄｅｖｅｒｅｕｘ，  Ｊ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  １２（１），  ３８７  （１９８４）），  ＢＬＡＳＴＰ，  ＢＬＡＳＴＮ，  ａｎｄ  ＦＡＳＴＡ  Ａｌｔｓｃｈｕｌ，  Ｓ．  Ｆ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｍｏｌｅｃ．  Ｂｉｏｌ．，  ２１５，  ４０３  （１９９０））が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２１８】
遺伝子の発現を阻害する：本明細書において、「遺伝子の発現を阻害する」という句は、遺伝子の発現産物の量を減少させることを意味する。発現産物は、遺伝子（例えば、ｍＲＮＡ）から転写されたＲＮＡまたは遺伝子から転写されたｍＲＮＡから翻訳されたポリペプチドであってもよい。典型的には、ｍＲＮＡレベルの低下は、そこから翻訳されるポリペプチドのレベルの低下をもたらす。発現レベルは、ｍＲＮＡまたはタンパク質を測定するための標準的な技術を用いて決定することができる。
【０２１９】
Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ：本明細書中で使用されている「ｉｎ  ｖｉｔｒｏ」という語は、生物（例えば、動物、植物、または微生物）内ではなく、人工的な環境で起こる事象を指し、その例には、例えば、試験管または反応容器中、細胞培養中、ペトリ皿中などがある。
【０２２０】
Ｉｎ  ｖｉｖｏ：本明細書中で使用されている「ｉｎ  ｖｉｖｏ」という語は、生物（例えば、動物、植物、または微生物、あるいはそれらの細胞または組織）内で起こる事象を指す。
【０２２１】
単離された：本明細書で使用されている「単離された」という語は、「分離した」と同義語であるが、分離が人間の手によって実行されたという推定を含む。一実施形態では、単離された物質または存在は、それが以前に結合していた成分の少なくとも一部から分離されたものである（天然あるいは実験的な設定にかかわらず）。単離された物質は、それらが結合していた物質に関して、様々なレベルの純度を有し得る。単離された物質および／または存在は、それらが最初に結合していたその他のコンポーネントの少なくとも約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、またはそれ以上から分離している。いくつかの実施形態において、単離された薬剤は、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％  ９８％、約９９％、または約９９％以上純粋である。本明細書中で使用されているように、物質が実質的にその他の成分を含まない場合に、その物質は「純粋」である。
【０２２２】
実質的に単離された：「実質的に単離された」とは、化合物が、それが形成または検出された環境から実質的に分離されることを意味する。部分的な分離には、例えば、本開示の化合物において豊化された組成物が含まれる。実質的な分離には、本開示の化合物またはその塩の重量で、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、または  少なくとも約９９重量％を含む組成物が含まれる。化合物およびその塩を単離するための方法は、当技術分野では日常的に行なわれている作業である。いくつかの実施形態では、物質または存在の単離には、化学的会合および／または結合の破壊が含まれる。いくつかの実施形態では、単離は、単離された物質または存在が以前に結合された成分からの分離のみを含み、そのような破壊を含まない。
【０２２３】
修飾された：本明細書で使用されている「修飾された」という語は、親または参照の分子または存在と比較して、本発明の分子または存在の変化した状態または構造を指す。分子は、化学的、構造的、および機能的に多くの態様で修飾することができる。いくつかの実施形態では、本開示の化合物および／または組成物は、非天然アミノ酸または非天然ヌクレオチドの導入によって修飾される。
【０２２４】
突然変異：本明細書中で使用されている「突然変異」という語は、変化および／または改変を指す。いくつかの実施形態において、突然変異は、タンパク質（ペプチドおよびポリペプチドを含む）および／または核酸（ポリ核酸を含む）の変化および／または改変であり得る。いくつかの実施形態において、突然変異は、タンパク質および／または核酸配列の変化および／または改変からなる。このような変化および／または変化は、１つまたはそれ以上のアミノ酸（タンパク質および／またはペプチドの場合）および／またはヌクレオチド（核酸および／またはポリ核酸の場合）の付加、置換、および／または欠失からなる。突然変異がアミノ酸および／またはヌクレオチドの付加および／または置換からなる実施形態において、このような付加および／または置換は、１つまたはそれ以上のアミノ酸および／またはヌクレオチド残基からなり、修飾されたアミノ酸および／またはヌクレオチドを含み得る。
【０２２５】
天然起源の：本明細書で使用されている「天然に存在する」という語句は、人工的援助または人間の手による介入なしに自然界に存在することを意味する。
非ヒト脊椎動物：本明細書で使用されている「非ヒト脊椎動物」という語句は、野生および家畜種を含むホモ・サピエンスを除くすべての脊椎動物を含む。非ヒト脊椎動物の例には、アルパカ、バンテン、バイソン、ラクダ、ネコ、ウシ、シカ、イヌ、ロバ、ガヤル、ヤギ、モルモット、ウマ、ラマ、ラバ、ブタ、ウサギ、トナカイ、ヒツジ、水牛、ヤクなどの哺乳類が含まれるが、それらに限定されない。
【０２２６】
核酸：本明細書で使用されている「核酸」、「ポリヌクレオチド」および「オリゴヌクレオチド」という語は、ポリデオキシリボヌクレオチド（２−デオキシ−Ｄ−リボースを含む）からなるか；またはポリリボヌクレオチド（Ｄ−リボースを含む）からなるか；またはプリンまたはピリミジン塩基のＮグリコシドであるかまたは修飾されたプリンもしくはピリミジン塩基である任意の他のタイプのポリヌクレオチドからなる、任意の核酸ポリマーを指す。「核酸」という語、「ポリヌクレオチド」という語、および「オリゴヌクレオチド」という語の間には、その長さに意図された区別はなく、これらの用語は互換的に使用される。これらの語は、分子の一次構造のみを指す。したがって、これらの語は、二本鎖および一本鎖ＤＮＡ、ならびに二本鎖および一本鎖ＲＮＡを含む。
【０２２７】
オフターゲット：本明細書中で使用されている「オフターゲット」という語は、１つまたはそれ以上の標的、遺伝子および／または細胞転写産物に対する任意の意図しない効果を指す。
【０２２８】
オープンリーディングフレーム：本明細書で使用されている「オープンリーディングフレーム」または「ＯＲＦ」という語は、所与のリーディングフレームにおける終止コドンを含まない配列を指す。
【０２２９】
作動可能に連結された：本明細書中で使用されている「作動可能に連結された」という語句は、２つまたはそれ以上の分子、構築物、転写物、存在、部分などの間の機能的連結を指す。
【０２３０】
粒子：本明細書で使用されている「粒子」という語は、少なくとも２つの成分（タンパク質キャプシドと、キャプシド内に封入されたポリヌクレオチド配列）からなるウイルスである。
【０２３１】
患者：本明細書中で使用されている「患者」という語は、治療を求めているか治療の必要性があるか、治療を必要としているか、治療を受けているか、治療を受けている治療を受けるであろう対象、あるいは、例えばパーキンソン病のような、特定の疾患または状態について訓練された専門家によって医療を受けている対象を指す。
【０２３２】
ペイロード：本明細書中で使用されている「ペイロード」という語は、ウイルスゲノムまたはそのようなポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチド領域の発現産物によってコードされる１つまたはそれ以上のポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチド領域を指し、それらには例えば、導入遺伝子、ポリペプチドまたはマルチポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、または調節核酸もしくは調節核酸がある。
【０２３３】
ペイロード構築物：本明細書中で使用されている「ペイロード構築物」という語は、逆方向末端反復（ＩＴＲ）配列によって片側または両側に隣接するペイロードをコードするかまたはそれからなる１つまたはそれ以上のポリヌクレオチド領域を指す。ペイロード構築物は、ウイルス産生細胞に複製されて、ウイルスゲノムを生成する鋳型である。
【０２３４】
ペイロード構築ベクター：本明細書中で使用されている「ペイロード構築ベクター」という語は、ペイロード構築物をコードするかまたはそれからなるベクター、および細菌細胞における複製および発現のための調節領域である。
【０２３５】
ペイロード構築発現ベクター：本明細書中で使用されている「ペイロード構築物発現ベクター」という語は、ペイロード構築物をコードするかまたはそれからなるベクターであり、このベクターはさらに、ウイルス複製細胞におけるウイルス発現のための成分をコードするかまたはそれからなる１つまたはそれ以上のポリヌクレオチド領域からなる。
【０２３６】
ペプチド：本明細書中で使用されている「ペプチド」という語は、５０アミノ酸の長さ未満（例えば、約５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、または５０アミノ酸の長さ）である。
【０２３７】
薬学的に許容される：「薬学的に許容される」という語句は、「薬学的に許容される」という句は、本明細書では、健全な医学的判断の範囲内で、ヒトおよび動物の組織と接触して使用するのに適しており、合理的な利益／リスク比に見合う、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題または合併症なしに投与することができる化合物、材料、組成物および／または剤形を指す。
【０２３８】
薬学的に許容される賦形剤：本明細書で使用されている「薬学的に許容される賦形剤」という語は、医薬組成物中に存在する化合物および／または活性薬剤以外の任意の成分（例えば、本明細書に記載の成分）であって、対象（例えば患者）において実質的に非毒性で非炎症性であるという性質を有する成分を指す。いくつかの実施形態において、薬学的に許容される賦形剤は、活性薬剤を懸濁および／または溶解することができるビヒクルである。賦形剤の例には、抗癒着防止剤、抗酸化剤、結合剤、コーティング剤、圧縮助剤、崩壊剤、染料（色）、皮膚軟化剤、乳化剤、充填剤（希釈剤）、フィルム形成剤またはコーティング、風味剤、香料、流動化剤（流動促進剤）  、滑沢剤、保存剤、印刷インキ、吸着剤、懸濁剤または分散剤、甘味料、および水和水がある。賦形剤の例には、以下が含まれるが、それらに限定されるものではない：ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム（二塩基性）、ステアリン酸カルシウム、クロスカルメロース、架橋ポリビニルピロリドン、クエン酸、クロスポビドン、システイン、エチルセルロース、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、マルチトール、マンニトール、メチオニン、メチルセルロース、メチルパラベン、微晶質セルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ポビドン、アルファ化デンプン、プロピルパラベン、パルミチン酸レチニル、シェラック、二酸化ケイ素、カルボキシメチルセルロースナトリウム、クエン酸ナトリウム、グリコール酸ナトリウムデンプン、ソルビトール、デンプン（トウモロコシ）、ステアリン酸、スクロース、タルク、二酸化チタン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＣ、およびキシリトール。
【０２３９】
薬学的に許容される塩：本明細書に記載の化合物の薬学的に許容される塩。本明細書中で使用されている、「薬学的に許容される塩」という語は、開示された化合物の誘導体または形態を指し、それらの化合物の誘導体または形態では、親化合物が、既存の酸部分または塩基部分をその塩形態（例えば、遊離塩基を適切な有機酸と反応させることにより発生させる）に変換することにより、修飾されている。薬学的に許容される塩の例としては、アミンのような塩基性残基の無機または有機酸塩；カルボン酸などの酸性残基のアルカリまたは有機塩；等が含まれるが、それらに限定されるものではない。代表的な酸付加塩の例としては、酢酸塩、酢酸、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプトン酸塩、ヘキサン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが挙げられる。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩の例には、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなど、ならびに非毒性のアンモニウム、第四級アンモニウム、およびアミンカチオンがあり、それらの例には、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミンなどが挙げられるが、これらに限定されない。本開示の薬学的に許容される塩には、例えば非毒性無機または有機酸から形成される親化合物の従来の非毒性塩が含まれる。いくつかの実施形態では、本開示の薬学的に許容される塩は、従来の化学的方法によって塩基性部分または酸性部分を含む親化合物から調製された合成塩であってよい。一般に、このような塩は、これらの化合物の遊離酸または塩基形態を、適切な塩基または酸の化学量論量と、水中または有機溶媒中で、またはその２種の混合物中で反応させることによって調製することができる。一般に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールまたはアセトニトリルのような非水性媒体が好ましい。適切な塩のリストは、以下の文献に見られる：Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  １７ｔｈ  ｅｄ．，  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，  Ｅａｓｔｏｎ，  Ｐａ．，  １９８５，  ｐ．  １４１８，  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，  Ｓｅｌｅｃｔ���ｏｎ，  ａｎｄ  Ｕｓｅ，  Ｐ．Ｈ．  Ｓｔａｈｌ  ａｎｄ  Ｃ．Ｇ．  Ｗｅｒｍｕｔｈ  （ｅｄｓ．），  Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，  ２００８，  ａｎｄ  Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  ６６，  １−１９  （１９７７）；これらはそれぞれ参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２４０】
薬学的に許容される溶媒和物：本明細書で使用されている「薬学的に許容される溶媒和物」という語は、適切な溶媒の分子が結晶格子に組み込まれている本発明の化合物の結晶形を指す。適切な溶媒は、投与される投与量で生理学的に許容される。例えば、溶媒和物は、有機溶媒、水、またはそれらの混合物を含む溶液からの結晶化、再結晶化、または沈殿によって調製することができる。適切な溶媒の例には、エタノール、水（例えば、一水和物、二水和物および三水和物）、Ｎ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ’−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノン（ＤＭＥＵ）、１，３−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２−（１Ｈ）−ピリミジノン（ＤＭＰＵ）  アセトニトリル（ＡＣＮ）、プロピレングリコール、酢酸エチル、ベンジルアルコール、２−ピロリドン、安息香酸ベンジル等が挙げられる。水が溶媒である場合、溶媒和物は「水和物」と呼ばれる。いくつかの実施形態では、溶媒和物に組み込まれる溶媒は、溶媒和物が投与される（例えば、医薬組成物の単位投与形態で）生物にとって生理学的に許容されるタイプであるか、またはそのようなレベルである。
【０２４１】
薬物動態学：本明細書中で使用されている「薬物動態学」という語は、分子または化合物の任意の１つまたはそれ以上の特性を指し、そのような特性は、生体に投与される物質の結果予測の決定に関連する。薬物動態は、吸収、分布、代謝および排泄の程度および速度を含むいくつかの領域に分けられる。これは一般に、以下を表すＡＤＭＥという略語で呼ばれている：（Ａ）吸収（Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ）とは、物質が血液循環に入る過程を指す；（Ｄ）（Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ）分布とは、身体の体液および組織全体に物質が分散または拡散することを指す；（Ｍ）代謝（Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ）（または生物変換）（Ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ）とは、親化合物の娘代謝物への不可逆的変換を指す；（Ｅ）排泄（Ｅｘｃｒｅｔｉｏｎ）（または排除）（Ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ）とは、物質が身体から排除されることを指す。まれに、一部の薬物は、体組織に不可逆的に蓄積することがある。
【０２４２】
物理化学的：本明細書中で使用されている「物理化学的」という語は、物理的および／または化学的性質を意味するかまたはそれに関連していることを指す。
予防する：本明細書中で使用されている「予防する」という語は、例えばパーキンソン病などの、感染症、疾患、障害および／または状態の発症を部分的にまたは完全に遅延させること；特定の感染症、疾患、障害および／または状態の１つまたはそれ以上の症状、特徴、または臨床症状の発症を部分的にまたは完全に遅延させること；特定の感染症、疾患、障害および／または状態の１つまたはそれ以上の症状、特徴、または出現の発症を部分的にまたは完全に遅延させること；特定の感染症、疾患、障害および／または状態の進行を部分的にまたは完全に遅延させること；および／または、感染症、疾患、障害および／または状態に関連した病理を発症するリスクを低下させる。
【０２４３】
プロドラッグ：本開示は、本明細書に記載の化合物のプロドラッグも含む。本明細書中で使用されている「プロドラッグ」という語は、それが化学的または物理的変化により治療剤として作用することが予測される形態の任意の物質、分子または存在をいう。プロドラッグは、何らかの方法で共有結合または隔離され、哺乳動物対象に投与する前に、投与中に、または投与後に活性薬物部分を放出するかまたは活性薬物部分に変換され得る。プロドラッグの調製および使用は、Ｔ．  Ｈｉｇｕｃｈｉ  ａｎｄ  Ｖ．  Ｓｔｅｌｌａ，
“Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，”  Ｖｏｌ．  １４  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａ．Ｃ．Ｓ．  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ、およびＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，
ｅｄ．  Ｅｄｗａｒｄ  Ｂ．  Ｒｏｃｈｅ，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，  １９８７（これらは双方ともその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。
【０２４４】
増殖する：本明細書中で使用されている  「増殖する」という語は、増殖、拡大、複製または増加することを意味し、または増殖、拡大、複製または増加することを引き起こすことを意味する。「増殖性」とは増殖能力を有することを意味する。「抗増殖性」とは、増殖特性に対抗する特性、または反対の特性を有することを意味する。
【０２４５】
予防法：本明細書中で使用されている「予防法」という語は、疾患の広がりを防ぐために使用される治療または治療経過を指す。
予防措置：本明細書において、「予防措置」とは、健康を維持し、疾患の広がりを防ぐためにとられる措置を指す。
【０２４６】
目的のタンパク質：本明細書中で使用されている語「目的のタンパク質」または「所望のタンパク質」という語には、本明細書で提供されるものおよびそのフラグメント、突然変異体、改変体、および改変が含まれる。
【０２４７】
精製された：本明細書で使用する「精製する」、「精製された」、「精製」とは、望ましくない成分、材料の脱脂、混和または不完全なものから実質的に純粋または異物がない状態にすることを意味する。「精製された」とは、純粋な状態を指す。「精製」とは、純粋なものを作製する過程を指す。
【０２４８】
領域：本明細書で使用されている「領域」という語は、ゾーンまたは一般領域を指す。いくつかの実施形態では、タンパク質またはタンパク質モジュールの文脈では、領域は、タンパク質またはタンパク質モジュールに沿ったアミノ酸の直鎖配列からなるか、あるいは３次元領域、エピトープおよび／またはエピトープのクラスターからなり得る。いくつかの実施形態では、領域は末端領域からなる。本明細書中で使用されている  「末端領域」という語は、所定の作用物質の末端に位置する領域を指す。タンパク質の文脈では、末端領域はＮ末端および／またはＣ末端からなり得る。Ｎ末端は、遊離アミノ基を有するアミノ酸からなるタンパク質の末端を指す。Ｃ末端は、遊離カルボキシル基を有するアミノ酸からなるタンパク質の末端を指す。したがって、Ｎ末端領域および／またはＣ末端領域は、Ｎ末端および／またはＣ末端ならびにその周囲のアミノ酸からなり得る。いくつかの実施形態では、Ｎ末端領域および／またはＣ末端領域は、約３アミノ酸〜約３０アミノ酸、約５アミノ酸〜約４０アミノ酸、約１０アミノ酸〜約５０アミノ酸、約２０アミノ酸〜約１００個のアミノ酸、および／または少なくとも１００個のアミノ酸からなる。いくつかの実施形態では、Ｎ末端領域は、Ｎ末端を含むがＣ末端を含まないアミノ酸の任意の長さからなり得る。いくつかの実施形態では、Ｃ末端領域は、Ｃ末端を含むがＮ末端を含まないアミノ酸の任意の長さからなり得る。
【０２４９】
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドの文脈では、領域は、ポリヌクレオチドに沿った核酸の線状配列からなり得るか、または三次元領域、二次構造、または三次構造からなり得る。いくつかの実施形態では、領域は末端領域からなる。本明細書中で使用されている「末端領域」という語は、所定の作用物質の末端に位置する領域を指す。ポリヌクレオチドの文脈では、末端領域は５’末端および３’末端からなり得る。５’末端は、遊離リン酸基を有する核酸からなるポリヌクレオチドの末端を指す。３’末端は、遊離ヒドロキシル基を有する核酸からなるポリヌクレオチドの末端を指す。したがって、５’領域および３’領域は、５’末端および３’末端ならびにその周囲の核酸からなり得る。いくつかの実施形態では、５’末端領域および３’末端領域は、約９個の核酸〜約９０個の核酸、約１５個の核酸〜約１２０個の核酸、約３０個の核酸〜約１５０個の核酸、約６０個の核酸〜約３００個の核酸、および／または少なくとも３００個の核酸からなる。いくつかの実施形態では、５’領域は、５’末端を含むが３’末端を含まない核酸の任意の長さからなり得る。いくつかの実施形態では、３’領域は、３’末端を含むが５’末端を含まない核酸の任意の長さからなり得る。
【０２５０】
ＲＮＡまたはＲＮＡ分子：本明細書で使用されている「ＲＮＡ」または「ＲＮＡ分子」または「リボ核酸分子」という語は、リボヌクレオチドのポリマーを指し、「ＤＮＡ」または「ＤＮＡ分子」または「デオキシリボ核酸分子」という語は、デオキシリボヌクレオチドのポリマーを指す。ＤＮＡおよびＲＮＡは、例えば、ＤＮＡ複製およびＤＮＡの転写によって、それぞれ天然に合成することができ、また化学的に合成することもできる。ＤＮＡおよびＲＮＡは、一本鎖（すなわち、それぞれｓｓＲＮＡまたはｓｓＤＮＡ）または複数鎖（例えば、二本鎖、すなわちｄｓＲＮＡおよびｄｓＤＮＡ）であり得る。本明細書で使用されている「ｍＲＮＡ」または「メッセンジャーＲＮＡ」という語は、１つまたはそれ以上のポリペプチド鎖のアミノ酸配列をコードする一本鎖ＲＮＡを指す。
【０２５１】
ＲＮＡ干渉：本明細書で使用されている「ＲＮＡ干渉」または「ＲＮＡｉ」という語は、対応するタンパク質コード遺伝子の発現の阻害または干渉または「サイレンシング」をもたらすＲＮＡ分子によって媒介される配列特異的調節機構を指す。
【０２５２】
試料：本明細書で使用されている「試料」という語は、供給源から採取されたアリコート、サブセット、または部分、および／または分析または処理のために提供されるアリコート、サブセット、または部分を指す。いくつかの実施形態では、試料は、組織、細胞または構成要素部分などの生物学的供給源に由来するものである（例えば、血液、粘液、リンパ液、滑液、脳脊髄液、唾液、羊水、羊水、尿、膣液および精液を含むがこれに限定されない体液）。いくつかの実施形態では、試料は、全生物またはその組織、細胞もしくは構成部分のサブセット、またはその断片もしくは一部分から調製されたホモジネート、溶解物または抽出物であってもよく、それらの例には、血漿、血清、脊髄液、リンパ液、皮膚の外部切片、呼吸器系／腸管系／泌尿生殖系の管、涙、唾液、乳、血液細胞、腫瘍または器官が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、試料は、タンパク質または核酸分子などの細胞成分を含み得る栄養培地またはゲルなどの培地であるか、またはそれらからなる。いくつかの実施形態では、「一次」試料は、供給源のアリコートである。いくつかの実施形態では、一次試料は、分析またはその他の用途に使用する試料を調製するための一つまたはそれ以上の処理（例えば、分離、精製など）工程に付される。
【０２５３】
自己相補性ウイルス粒子：本明細書で使用されている「自己相補性ウイルス粒子」という語は、少なくとも２つの成分、つまり、タンパク質キャプシドおよび当該キャプシド内に封入された自己相補的ゲノムをコードするポリヌクレオチド配列からなる粒子である。
【０２５４】
センス鎖：本明細書中で使用されているｓｉＲＮＡ分子の「センス鎖」または「第２鎖」または「パッセンジャー鎖」という語は、アンチセンス鎖または第１鎖に相補的な鎖を指す。ｓｉＲＮＡ分子のアンチセンス鎖およびセンス鎖は、二本鎖構造を形成するようにハイブリダイズされる。本明細書中で使用される場合、「ｓｉＲＮＡ二本鎖」は、サイレンシングの標的となる遺伝子のｍＲＮＡの約１０〜５０ヌクレオチドの部分に十分な相補性を有するｓｉＲＮＡ鎖、およびｓｉＲＮＡ鎖と二本鎖を形成するのに十分な相補性を有するｓｉＲＮＡ鎖を含む。
【０２５５】
信号シーケンス：本明細書中で使用されている「シグナル配列」という語は、輸送または局在を指示することができる配列を指す。
単一単位用量：本明細書で使用されている「単一単位用量」という語は、１回の用量／１回の投与／単一の投与経路／単一の接触点（すなわち単一の投与事象）で投与される任意の治療剤の用量を指す。いくつかの実施形態では、単一単位用量が別個の剤形（例えば、錠剤、カプセル、パッチ、充填済みの注射器、バイアルなど）として提供される。
【０２５６】
類似性：本明細書中で使用されている「類似性」という語は、例えば、ポリヌクレオチド分子間（例えば、ＤＮＡ分子および／またはＲＮＡ分子など）および／またはポリペプチド分子間などのポリマー分子間の全体的な関連性を指す。パーセント類似性の計算が当技術分野で理解されるような保存的置換を考慮に入れていることを除いて、パーセント同一性の計算と同じ方法で、ポリマー分子の相互のパーセント類似性の計算を行うことができる。
【０２５７】
小／短鎖干渉ＲＮＡ：本明細書中で使用されている「小／短鎖干渉ＲＮＡ」または「ｓｉＲＮＡ」という語は、ＲＮＡｉを指向または仲介することができる約５から６０の間のヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）からなるＲＮＡ分子（またはＲＮＡ類似体）を指す。好ましくは、ｓｉＲＮＡ分子は、約１５から３０の間のヌクレオチドまたはヌクレオチド類似体、より好ましくは約１６から２５の間のヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）、さらにより好ましくは約１８から２３の間のヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）の間、さらにより好ましくは約１９から２２の間のヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）（例えば、１９，２０，２１、または２２ヌクレオチドまたはヌクレオチド類似体）からなる。「短い」ｓｉＲＮＡという語は、５〜２３ヌクレオチド、好ましくは２１ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）、例えば１９，２０，２１または２２ヌクレオチドからなるｓｉＲＮＡを指す。「長い」ｓｉＲＮＡという語は、２４〜６０ヌクレオチド、好ましくは約２４〜２５ヌクレオチド、例えば２３，２４，２５、または２６ヌクレオチドからなるｓｉＲＮＡを指す。短いｓｉＲＮＡは、場合によっては、より短いｓｉＲＮＡがＲＮＡｉを媒介する能力を保持するならば、１９ヌクレオチド未満（例えば、１６，１７または１８ヌクレオチド、または５ヌクレオチド未満）からなり得る。同様に、より長いｓｉＲＮＡが、ＲＮＡｉ媒介する能力を保持する限り、または短いｓｉＲＮＡへのさらなるプロセシング（例えば、酵素プロセシング）で欠いている翻訳抑制を保持する限り、長いｓｉＲＮＡは、いくつかの例では、２６を超えるヌクレオチド（例えば、２７、２８、２９、３０、３５、４０、４５、５０、５５、またはさらには６０ヌクレオチド）を含み得る。ｓｉＲＮＡは、一本鎖ＲＮＡ分子（ｓｓ−ｓｉＲＮＡ）または二本鎖ＲＮＡ分子（ｄｓ−ｓｉＲＮＡ）であり得、これらは、ｓｉＲＮＡ二重鎖と呼ばれる二本鎖構造を形成するようにハイブリダイズされたセンス鎖およびアンチセンス鎖を含む。
【０２５８】
分割用量：本明細書で使用されている「分割用量」は、単一単位用量または１日総用量を２回またはそれ以上の用量に分割することを指す。
安定した：本明細書中で使用されている「安定した」という語は、反応混合物から有用な程度の純度まで単離しても破壊されない程十分に頑強であり、好ましくは有効な治療剤に処方することができる化合物または存在を指す。
【０２５９】
安定化された：明細書中で使用されている「安定化する」、「安定化された」、「安定化された領域」は、安定した状態にする、または安定した状態になることを指す。いくつかの実施形態において、安定性は、絶対値に比較して測定される。いくつかの実施形態において、安定性は、参照化合物または存在に比較して測定される。
【０２６０】
対象：本明細書中で使用されている「対象」または「患者」という語は、例えば、実験、診断、予防および／または治療の目的で、本発明による組成物を投与する任意の生体を指す。典型的な対象には、動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類、およびヒトなどの哺乳類）および／または植物が含まれる。いくつかの実施形態では、対象は、乳児、新生児、または１２歳未満の小児であり得る。いくつかの実施形態では、対象は、子宮内に居ることもあり得る。
【０２６１】
実質的に：本明細書中で使用されている「実質的に」という語は、関心の持たれている特徴または特性の全体またはほぼ全体的な範囲または程度を示す定性的条件を指す。生物学的技術における当業者は、生物学的および化学的現象が、完了する、完全に進む、および／または絶対的な結果を達成あるかまたは回避することは極めてまれであることを、理解しているであろう。したがって、「実質的に」という語は、本明細書では、多くの生物学的および化学的現象に特有である完全性の潜在的な欠如を表すために使用されている。
【０２６２】
実質的に等しい：用量間の時間差に関連して本明細書で使用されているこの語は、プラスマイナス２％を意味する。
実質的に同時に：複数の用量に関連して本明細書で使用されているこの語は、典型的には約２秒以内を意味する。
【０２６３】
〜に罹患している：疾患、障害および／または状態「に罹患している」個体は、例えばパーキンソン病のような疾患、障害および／または状態の１つまたはそれ以上の症状を有すると診断されているか、またはそれらを呈している。
【０２６４】
〜に罹患しやすい：疾患、障害および／または状態「に罹患しやすい」個体は、疾患、障害および／または状態を有する診断されていないか、および／または疾患、障害および／または状態の症状を示していないが、疾患またはその症状を発症する傾向を有する。いくつかの実施形態では、疾患、障害および／または状態（例えば、癌）に罹患しやすい個体は、以下の１つまたはそれ以上によって特徴付けられ得る：（１）疾患、障害および／または状態の発症に関連する遺伝子変異；（２）疾患、障害および／または状態の発症に関連する遺伝的多型；（３）疾患、障害および／または状態に関連するタンパク質および／または核酸の発現および／または活性の増加および／または低下；（４）疾患、障害および／または状態の発症に関連する習慣および／またはライフスタイル；（５）疾患、障害および／または状態の家族歴；および（６）疾患、障害、および／または状態の発症に関連する微生物への曝露および／または感染。いくつかの実施形態では、疾患、障害および／または状態に罹患しやすい個体は、疾患、障害および／または状態を発症する。いくつかの実施形態では、疾患、障害および／または状態に罹りやすい個体は、疾患、障害および／または状態を発症しない。
【０２６５】
徐放：本明細書で使用されている「徐放」という語は、特定の期間にわたる放出速度に適合する医薬組成物または化合物放出プロファイルを指す。
合成された：「合成された」という語は、人間の手によって生み出された、調製された、および／または製造されたことを意味する。本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチドまたはその他の分子の合成は、化学的または酵素的であってもよい。
【０２６６】
標的設定：本明細書中で使用されている「標的設定」という語は、標的核酸にハイブリダイズし所望の効果を誘導する核酸配列の設計および選択のプロセスを意味する。
標的細胞：本明細書中で使用されている「標的細胞」という語は、関心のもたれている任意の１つまたはそれ以上の細胞を指す。このような細胞は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｉｎ  ｖｉｖｏ、ｉｎ  ｓｉｔｕ、または生物の組織または臓器に存在する。このような生物は、動物、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒト、最も好ましくは患者である。
【０２６７】
治療薬：「治療剤」という語は、対象に投与された場合に、治療的、診断的および／または予防的効果を有し、および／または所望の生物学的および／または薬理学的効果を引き出す任意の薬剤を指す。
【０２６８】
治療有効量：本明細書中で使用されている「治療有効量」という語は、疾患、障害、および／または状態に罹患しているかまたは罹患しやすい対象に投与された場合に、例えば、パーキンソン病などの感染症、疾患、障害および／または状態の発症を治療、症状改善、診断、予防、および／または遅延させるのに十分である投与薬剤（例えば、核酸、薬物、治療剤、診断剤、予防剤  など）の量を指す。いくつかの実施形態において、治療有効量は、単位用量で提供される。いくつかの実施形態では、治療有効量は、複数の投与量からなる投与計画で投与される。当業者は、いくつかの実施形態において、単位剤形が、そのような投与計画の一部として投与された場合に有効量からなっているのであれば、特定の薬剤または存在の治療有効量からなると考えられることを理解しているであろう。
【０２６９】
治療上有効な転帰：本明細書中で使用されている「治療的に有効な転帰」という語は、感染、疾患、障害および／または状態に罹患しているかまたは感染、疾患、障害および／または状態に罹患しやすい対象において、感染症、疾患、障害および／または状態を治療、改善、診断、予防、および／またはその発症を遅延させるに十分である転帰を意味する。
【０２７０】
一日の用量の総量：本明細書中で使用される「１日総投与量」という語は、２４時間に投与または処方される量である。それは単一単位用量として投与することができる。
トランスフェクション：本明細書中で使用されている「トランスフェクション」という語は、外因性核酸を細胞に導入する方法を指す。トランスフェクションの方法には、化学的方法、物理的処理およびカチオン性脂質または混合物が含まれるが、これらに限定されない。
【０２７１】
治療する：本明細書で使用されている「治療する」という語は、特定の感染症の１つまたはそれ以上の症状または特徴の部分的または完全な緩和、改良、改善、軽減、発症の遅延、進行の阻害、重症度の軽減、および／または発生率  の減少を指す。例えば、癌を「治療する」とは、腫瘍の生存、成長および／または拡散を阻害することを指す。治療は、疾患、障害および／または状態の徴候を示していない対象、および／または疾患、障害および／または状態の初期徴候のみを示している対象に対し、例えばパーキンソン病のような疾患、障害、および／または状態に関連する病理を発症するリスクを低下させる目的で、投与する。
【０２７２】
修飾されていない：本明細書中で使用されている「修飾されていない」という語は、いずれかの方法で変更される前の任意の物質、化合物、または分子を指す。修飾されていない型は、必ずしもそうであるとは限らないが、生体分子または存在の野生型または天然形態を指す場合がある。分子または存在は一連の修飾を受け、それによって各修飾された物質、化合物、分子または存在は、その後の修飾のための「修飾されていない」出発分子として供される。
【０２７３】
ベクター：本明細書中で使用されている「ベクター」という語は、異種分子の運搬体として輸送、形質導入、またはその他の方法で作用する任意の分子または部分を指す。本開示のベクターは、組換え的に産生することができ、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）親または参照配列に基づいているか、および／またはそれらからなり得る。そのような親ＡＡＶ配列または参照ＡＡＶ配列は、エンジニアリングベクターの元の配列、第２の配列、第３の配列または後続の配列として機能し得る。非限定的な例において、このような親ＡＡＶ配列または参照ＡＡＶ配列は、以下の配列のいずれか１つまたはそれ以上からなり得る：ポリペプチドまたはマルチポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列（この配列は野生型であってもよく、野生型から修飾されていてもよく、またこの配列は、タンパク質、タンパク質ドメイン、またはタンパク質の１つまたはそれ以上のサブユニットの完全長または部分配列をコードし得る）；調節核酸または制御核酸をからなるポリヌクレオチド（この配列は野生型であってもよく、または野生型から修飾されていてもよい）；および導入遺伝子（野生型配列から修飾されていてもいなくてもよい）。これらのＡＡＶ配列は、（核酸レベルでは）１つまたはそれ以上のコドンの「ドナー」配列として、（ポリペプチドレベルでは）アミノ酸として、（核酸レベルでは）１つまたはそれ以上のコドンの「アクセプター」配列として、または（ポリペプチドレベルでは）アミノ酸として機能する。
【０２７４】
ウイルス構築ベクター：本明細書で使用されている「ウイルス構築ベクター」という語は、Ｒｅｐおよび／またはＣａｐタンパク質をコードするか、またはそれらからなる１つまたはそれ以上のポリヌクレオチド領域からなるベクターを指す。
【０２７５】
ウイルス構築発現ベクター：本明細書中で使用されている「ウイルス構築物発現ベクター」という語は、Ｒｅｐおよび／またはＣａｐをコードするかまたはそれらからなる１つまたはそれ以上のポリヌクレオチド領域からなるベクターを指し、このポリヌクレオチド領域はさらに、ウイルス複製細胞においてウイルス発現のための成分をコードするかまたはそれらからなる１つまたはそれ以上のポリヌクレオチド領域からなる。
【０２７６】
ウイルスゲノム：本明細書で使用されている「ウイルスゲノム」という語は、少なくとも１つの逆方向末端反復（ＩＴＲ）、少なくとも１つの制御配列、および少なくとも１つのペイロードをコードするポリヌクレオチドを指す。ウイルスゲノムは、ペイロード構築物発現ベクターからのペイロード構築物の複製によって誘導される。ウイルスゲノムは、ペイロード構築物の少なくとも１コピーをコードする。
【０２７７】
同等のものおよび適用範囲
当業者であれば、本明細書に記載された本発明による特定の実施形態について多くの同等のものを認識するか、またはルーチンの実験のみを用いて確認することができるであろう。本発明の範囲は、上記の説明に限定されるように意図されているのではなく、添付の特許請求の範囲に記載されている。
【０２７８】
特許請求の範囲において、「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」などの不定冠詞は、文脈からその逆であることあるいは明らかに示されていない限り、１つまたはそれ以上のものを意味する。ある群の１つまたはそれ以上の構成員の間に「ｏｒ」を含む請求項または説明は、文脈からその逆であることあるいは明らかに示されていない限り、群の構成員の１つ、１つ以上、またはすべてが所与の製品またはプロセスに存在しているか、使用されているか、または関連している場合に、満たされているとみなされる：本発明は、群の構成員の１つだけが所与の製品またはプロセスに存在しているか、使用されているか、または関連している実施形態を含む。本発明は、群の構成員の１つ以上またはすべてが所与の製品またはプロセスに存在しているか、使用されているか、または関連している実施形態を含む。
【０２７９】
「〜からなる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という語は、開かれていることを意図しており、追加の要素またはステップを含めることを許可するが、追加の要素またはステップを含めることを必要とはしていないことにも留意されたい。「〜からなる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という語が本明細書で使用される場合、「から構成されている（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」という語もこのように包含され、明示される。
【０２８０】
別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。方法および材料は、本開示での使用のために本明細書に記載されており、当技術分野で公知の他の適切な方法および材料も使用することができる。
【０２８１】
範囲が与えられている場合、エンドポイントが含まれる。さらに、別途示されない限り、あるいは文脈および当業者の理解から明白でない限り、範囲として表される値は、本発明の多様な実施形態において記載された範囲内の任意の特定の値または部分範囲、当該範囲の下限の単位の１０分の１までと想定される（文脈上明確に別途指示されている場合を除く）と理解されるべきである。
【０２８２】
さらに、先行技術に含まれる本発明の特定の実施形態はすべて、特許請求の範囲のいずれか１つまたはそれ以上から明白に除外され得ることが理解されるべきである。そのような実施形態は、当業者に知られているとみなされるので、除外が明示的に本明細書に記載されていなくても除外されてよい。本発明の組成物の特定の実施形態（例えば、それによってコードされる任意の核酸またはタンパク質、任意の生産方法、任意の使用方法など）は、先行技術の存在に関連しているか否かにかかわらず、何らかの理由で、１つまたはそれ以上の請求項から除外されることがある。
【０２８３】
引用文献に明示的に記載されていない場合でも、すべての出典（例えば、参考文献、出版物、データベース、データベースエントリー、およびここに引用された先行技術）は、参照により本出願に組み込まれる。引用された出典と本出願に矛盾する記述がある場合は、本出願の記述が優先するものとする。
【０２８４】
セクションおよび表の見出しは、限定することを意図していない。
（実施例）
実施例１：ＡＡＤＣポリヌクレオチドの設計
ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、少なくとも、ＡＡＤＣタンパク質をコードする核酸配列からなるように設計される。
【０２８５】
設計された配列は、操作されるか、合成されるか、またはプラスミドまたはベクターに挿入されて、細胞または生物に投与される。適切なプラスミドまたはベクターは、標的細胞に形質導入またはトランスフェクトするものである。
【０２８６】
アデノ随伴ウイルスベクター（ＡＡＶ）、ウイルス粒子またはウイルス全体を使用することができる。
投与により、疾患の病因（この場合はパーキンソン病）を変化させるＡＡＤＣタンパク質を産生するＡＡＤＣポリヌクレオチドのプロセシングが起こる。
【０２８７】
非限定的な一例において、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドを含有するプラスミドを表１に示す。表中のこれらのＡＡＤＣポリヌクレオチドは、Ｆａｓｔｂａｃｋプラスミドに含まれ、ＣＭＶプロモーターを有し、ＡＡＤＣをコードする。いくつかの実施形態において、ＡＡＤＣタンパク質ｍＲＮＡのオープンリーディングフレームは、コドン最適化されている（例えば、ｃｏｄｏｐ）。
【０２８８】
【表１】
2018198622.tif 000002
実施例２：ＡＡＤＣポリヌクレオチド：ＩＴＲからＩＴＲまで
ＡＡＶウイルスベクターにおける使用に適したＡＡＤＣポリヌクレオチドは、表２のものを含む。
【０２８９】
表２に記載されているものは、表１のＩＴＲからＩＴＲまでの配列である。
【０２９０】
【表２】
2018198622.tif 000003
実施例３：ＩＴＲからＩＴＲまでの親配列との比較
ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、表３および表４に従って設計される。記載されている開始および停止位置は、表２に記載のＩＴＲからＩＴＲまでのＡＡＤＣポリヌクレオチドと比較している。
【０２９１】
【表３】
2018198622.tif 000004
【０２９２】
【表４】
2018198622.tif 000005
【０２９３】
【表５】
2018198622.tif 000006
実施例４：ＡＡＤＣポリヌクレオチドの設計
ＡＡＤＣポリヌクレオチドは、少なくとも、ＡＡＤＣタンパク質をコードする核酸配列からなるように設計される。
【０２９４】
設計された配列は、操作されるか、合成されるか、またはプラスミドまたはベクターに挿入されて、細胞または生物に投与される。適切なプラスミドまたはベクターは、標的細胞に形質導入またはトランスフェクトするものである。
【０２９５】
アデノ随伴ウイルスベクター（ＡＡＶ）、ウイルス粒子またはウイルス全体を使用することができる。
投与により、疾患の病因（この場合はパーキンソン病）を変化させるＡＡＤＣタンパク質を産生するＡＡＤＣポリヌクレオチドのプロセシングが起こる。
【０２９６】
非限定的な一例において、本発明のＡＡＤＣポリヌクレオチドを含有するプラスミドを表６に示す。表中のこれらのＡＡＤＣポリヌクレオチドは、Ｆａｓｔｂａｃｋプラスミドに含まれ、ＣＭＶプロモーターを有し、ＡＡＤＣをコードする。いくつかの実施形態において、ＡＡＤＣタンパク質ｍＲＮＡのオープンリーディングフレームは、コドン最適化されている（例えば、ｃｏｄｏｐ）。
【０２９７】
【表６】
2018198622.tif 000007
表７に記載されているものは、表６のＩＴＲからＩＴＲまでの配列である。
【０２９８】
【表７】
2018198622.tif 000008
実施例５：遺伝子治療を目的とした患者へのＡＡＤＣポリヌクレオチド組成物の投与
ＡＡＤＣポリヌクレオチド含有組換えＡＡＶベクター組成物を、パーキンソン病を有しており治療に適格であると特定された患者の黒質、特に黒質緻密部（ＳＮｐｃ）、および腹側被蓋領域（ＶＴＡ）に、当該分野で公知の方法により注入した。
【０２９９】
本明細書に記載の方法における使用が考えられる投与方法の１つは、ＡＡＤＣポリヌクレオチド含有ＡＡＶベクター組成物のリアルタイム対流増強投与（ＲＣＤ）である。この投与法では、ガドテリドール（磁気共鳴（ＭＲ）造影剤）とＴ１またはＴ２磁気共鳴画像（ＭＲＩ）の同時注入によって、その後のＡＡＤＣ遺伝子発現の領域を予測することができる。Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ，  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１１に記載されているように、カニューレの配置と最初の注入液分布の精度は、トレーサー剤のその後の分布を大きく変えることなく、生理食塩水の注入によって、安全に決定することができる（Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ，  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１１，  Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，  ６９（１）：１５４−１６３）。Ｔ２  ＲＣＤにより、損傷していない脳内での実質内の対流強化投与の検出をすることができ、ウイルスベクター注入後の導入遺伝子のその後の分布を予測することができる。対象は、生理食塩水注入／Ｔ２獲得を受け、その後直ちに被殻および脳幹にガドテリドール注入／Ｔ１獲得が行われる。分布量と空間パターンが分析される。視床における交互のＴ２／Ｔ１獲得下で、ガドテリドールおよびＡＡＶでコードされたＡＡＤＣを同時注入し、高強度領域をその後のトランスジーン発現領域と比較する。輸液量に対する分布容積の比は、生理食塩水とガドテリドールＲＣＤとの間で同様であると予想される。空間的な重なりは、Ｔ２画像とＴ１画像との間に良好に相関するはずである。第２注入液は、第１注入液と同様の時空間的パターンに従い、標的外分布を形成する前に標的領域を満たす。ＡＡＤＣ発現の領域は、ＲＣＤの間に観察されたＴ１およびＴ２の高強度の領域とよく相関するはずである（Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ，  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１１，
Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，  ６９（１）：１５４−１６３）。
【０３００】
巨大分子の脳実質への対流増強投与（ＣＥＤ）は、２０年以上前から知られている。ＣＥＤは、圧力勾配を使用して、脳実質内のバルク流（すなわち標的構造に直接配置されたカニューレを介して溶液を注入することによって駆動される間質液内の巨大分子の対流）を生成することを意味する語である。この方法により、治療薬を、血液脳関門を迂回し、単純拡散を超えることにより、大量の脳組織全体に均一に分布させることができる  （Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ，  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１１，  Ｓｔｅｒｅｏｔａｃｔ．  Ｆｕｎｃｔ．  Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．  ８９：１４１−１５１）。
【０３０１】
Ｓａｌｅｇｉｏらは、近年、齧歯類およびＮＨＰのＣＮＳ内に、ミセル（１５ｎｍまでのサイズ）、ＡＡＶ（約２０〜２５ｎｍ）およびリポソーム（約６５ｎｍまで）を含む様々なサイズのナノ粒子の分布を実証した（Ｓａｌｅｇｉｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１４，
Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｎｅｕｒｏａｎａｔｏｍｙ，  ｖｏｌ．  ８，  ａｒｔｉｃｌｅ  ９：  ｐｐ．  １−８）。単純な注射は血管周囲系に関与することができず、特殊な注入カニューレが必要とされる。この特殊な注入カニューレは、カニューレの先端に一定の圧力を加えることができるので、間質静水圧を超えて、注入液が組織に流出する。単純な針は著しい逆流を引き起こす。従って、この傾向に対抗するために、逆流防止カニューレが開発されている。ＭＲＩガイド下の対流強化注入のためのプラットフォームの出現により、血管周囲流れのメカニズムの理解がさらに精緻化され、リポソームの血管周囲分布が時間的に直線的であり、有髄領域では曲線の傾きが増加し、注入の停止が分布容積のさらなる拡大を妨げることが実証された（Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ，  ｅｔ  ａｌ，  ２０１１，  Ｓｔｅｒｅｏｔａｃｔ．  ８９：１４１−１５１；Ｓａｌｅｇｉｏ  ｅｔ  ａｌ，  ２０１４，  Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｎｅｕｒｏａｎａｔｏｍｙ，  ｖｏｌ．
８，  ａｒｔｉｃｌｅ  ９：  ｐｐ．  １−８）。
【０３０２】
実質内へのｒＡＡＶ注射は、ロバストであるが比較的局所的な形質導入をもたらすことが知られている。そのような局所投与法は、パーキンソン病のような特定の解剖学的領域または解剖学的回路に局在する神経病理に起因する神経学的障害の遺伝子治療を試みる場合に有利である。しかしながら、より広範囲のＣＮＳ形質導入を必要とする治療では、実質内注射は実用的ではない。先天性代謝異常および／または単一遺伝子欠損に起因する神経障害、または脊髄の運動ニューロンに影響を及ぼす神経障害の治療には、大部分の脳または脊髄の形質導入がそれぞれ必要となることがある。ベクターに対する低侵襲性トランス−ＢＢＢ投与法の開発は、極めて重要な試みである。様々な能動輸送機構（恐らくは受容体媒介）と相互作用して、ＢＢＢを横切ってタンパク質を運ぶことが知られている分子を使用しようとする数多くの試みが行なわれているが、その結果報告は多様である。多数のＡＡＶ血清型が利用可能であると仮定すると、１つ以上の血清型は、ＡＡＶキャプシドをＢＢＢを横切って輸送することができる細胞進入受容体に結合し得る（Ｍａｎｆｒｅｄｓｓｏｎ，  ｅｔ  ａｌ．，  ２００９，  “ＡＡＶ９：  ａ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｂｌｏｏｄ-ｂｒａｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ  ｂｕｓｔｅｒ．”  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ  １７（３）：４０３−４０５）。
【０３０３】
ベクトルおよび定位注入
ＡＡＤＣポリヌクレオチドを外科的に投与するために定位的手法を使用することができる。ＡＡＤＣ欠乏症の個体はエピネフリンとノルエピネフリンを欠くが、これらの患者については手術中に安定した血圧と心拍数を維持すべきである。術後のコンピュータ断層撮影（ＣＴ）またはＭＲＩスキャンには顕著な脳内出血はないはずである。ＭＲＩスキャン像で、針管は、黒質緻密部（ＳＮｐｃ）および腹側被蓋領域（ＶＴＡ）へ正確に配置されていなければならない。患者は手術後約１週間で病院から退院する（Ｈｗｕ，  Ｗ．Ｌ．，  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１２．  Ｇｅｎｅ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｌ−ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄ  ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ  ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ．
Ｓｃｉ．  Ｔｒａｎｓｌ．  Ｍｅｄ．  Ｖｏｌ．  ４，  １３４ｒａ６１）。
【０３０４】
治療を受ける対象には、ＡＡＶベクター組成物ベクターが、バイラテラル注入を介して黒質緻密部（ＳＮｐｃ）および腹側被蓋領域（ＶＴＡ）に、あるいは腔内（尾状核および被殻に）、または視床下部核（ＳＴＮ）に、安全に投与される。この投与には、例えば、臨床適用のために特別に設計されたＦＤＡ認可のＳＭＡＲＴＦＬＯＷ（登録商標）神経心室カニューレ（ＳｕｒｇｉＶｉｓｉｏｎ，  Ｉｎｃ．製）をオプションとして使用することができ、さらにＣＬＥＡＲＰＯＩＮＴ（登録商標）システムを利用して（またはこれを利用せずに）、脳神経外科医が脳における治療薬の投与を、標的設定し観察するのを補助することもできる（例えば、以下を参照せよ：Ｓａｎ  Ｓｅｂａｓｔｉａｎ，  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１４，  Ｍｏｌ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｃｌｉｎ．  Ｄｅｖ．  ３：  １４０４９；例えば、以下を参照せよ：Ｆｅｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｇｕｉｒｅ−Ｚｅｉｓｓ，  ２０１０，  ＣＮＳ  Ｄｒｕｇｓ  ２４（３）：１７７−１９２）。
【０３０５】
例えば、手術中に、２つの標的点が、黒質緻密部（ＳＮｐｃ）および腹側被蓋領域（ＶＴＡ）において決定される。これらの標的点は、背側方向に互いに十分に離れており、磁気共鳴画像上で同定される。１つの穿頭孔を、頭蓋骨の各側にトレパニングし、この穿頭孔を通して、ベクターを２軌道の挿入経路を介して、２つの標的点に注入する。ＡＡＶベクター含有溶液は、１．５×１０１２ベクターゲノム／ｍｌの濃度に調製され、１標的点あたり５０μｌの溶液が１μｌ／分の速度で注入される。各患者は、ＡＡＶベクター構築物の３×１０１１ベク−ターゲノムを受け取る。
【０３０６】
ＡＡＶ２に対する中和抗体力価は、種々の血清希釈物中のβ−ガラクトシダーゼを発現するＡＡＶ２ベクターの５×１０３ベクターゲノム／細胞で形質導入されたＨＥＫ２９３細胞におけるβ−ガラクトシダーゼ活性を測定することによって決定される。
【０３０７】
ＰＥＴ
黒質におけるＡＡＤＣ発現レベルは、外科手術の６日前および遺伝子導入の１ヶ月から６ヶ月後に、ＦＭＴを用いたＰＥＴイメージングで評価される。全ての患者は、ＰＥＴの１８時間前にドーパミン作動薬の服用を中止し、ＦＭＴ注射の１時間前にカルビドパ２．５ｍｇ／ｋｇを経口服用する。続いて、生理食塩水中に溶解した０．１２ｍＣｉ／ｋｇの濃度のＦＭＴを前胸静脈に注入し、９０分の動的獲得配列を得る。ＰＥＴおよび磁気共鳴イメージングデータを、フュージョン処理プログラム（オランダ国アムステルダムのＰｈｉｌｉｐｓ  社製のＳｙｎｔｅｇｒａ）に共記載し、融合画像を生成する。黒質線条体経路に描きだされた、関心の持たれている体積内の放射能は、トレーサー注射の８０〜９０分後に計算される。基準値から２４週までの黒質線条体路ＦＭＴ取り込みの変化を、黒質と線条体の放射能比を用いて評価する。
【０３０８】
統計分析
基準値および遺伝子導入後６ヶ月後の値を、スチューデントのｔ検定（ペア分析）を用いて比較する。両側ｐ値＜０．０５を使って、有意差を示す。Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ補正によりＰ値を補正した２方向分散分析を、レボドパに対する短期間の応答に用いる（例えば、以下を参照せよ：Ｍｕｒａｍａｔｓｕ，  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１０，  “Ａ  ｐｈａｓｅ  Ｉ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｌ−ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄ  ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ  ｇｅｎｅ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ．”  １８：１７３１−１７３５）。
【０３０９】
パーキンソン病患者の脳に、リアルタイム画像誘導注入を用いて、ＡＡＶベクター組成物をバイラテラル投与した場合の安全性および忍容性は、手術後９か月までモニターすることができる。標的領域（黒質緻密部（ＳＮｐｃ）および腹側被蓋領域（ＶＴＡ））および線条体内の広範なＡＡＤＣタンパク質分布の広範な網羅範囲を、なんら副作用を誘発することなく達成しなければならない。
【０３１０】
成長と運動能力における変化：遺伝子移入治療後１年以内に、患者は体重が増え、運動スコアの改善を示すはずである。体重を、遺伝子導入後３〜６ヶ月で測定する。全ての患者は、最初は、アルバータ乳幼児運動発達検査法（Ａｌｂｅｒｔａ  Ｉｎｆａｎｔ  Ｍｏｔｏｒ  Ｓｃａｌｅ、略してＡＩＭＳ）の素点がゼロで、ピーボディ運動発達検査法、第２版（Ｐｅａｂｏｄｙ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ  Ｍｏｔｏｒ  Ｓｃａｌｅ，  Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ、略してＰＤＭＳ−ＩＩ）の素点が非常に低いはずである。遺伝子導入後、全ての患者は、これらの２つの尺度における素点が連続的な増加を示す。これはそれらの運動機能が改善したことを示す。乳幼児の包括的発達目録（Ｔｈｅ  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ  Ｉｎｖｅｎｔｏｒｙ  ｆｏｒ  Ｉｎｆａｎｔｓ  ａｎｄ  Ｔｏｄｄｌｅｒｓ、略してＣＤＩＩＴ）  は、認知と運動発達の双方を網羅している。全ての患者は、遺伝子移入前のＣＤＩＩＴ素点が低く、その後の素点が上昇するが、これは運動機能および認知機能の改善を示す。
【０３１１】
遺伝子導入後の主観的改善
定量化が困難な症状を文書化するために、患者の配偶者、保護者または介護者に対し、研究の最後にアンケートに記入するように求める。眼球上転発作の症状は緩和すべきであり、眼球偏位や睡眠障害は、例えば、遺伝子治療後に残る可能性がある眼球上転発作の軽度の症状である。対象は、感情的安定性の増加、および／または発汗および温熱（外気温が高い時の一般的な症状である体温不安定性）の改善が見られることがある。遺伝子導入の前または後の２４時間ホルターモニタリングによって評価される心拍変動の検出可能な異常はないはずである。遺伝子治療の前に、寝たきりで自発的な動きがほとんど見られない患者は、遺伝子導入の１〜２週間後に重度の眼瞼下垂（上まぶたの垂れ下がり）の改善を示す。以前の研究によれば、ジスキネジーが遺伝子導入の１ヶ月後に起こることがあるが、ジスキネジーの軽減が観察された後すぐに運動発達が始まるはずである（Ｈｗｕ，  Ｗ．Ｌ．，  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１２．  ４，  １３４ｒａ６１）。対象は、遺伝子移入の３ヶ月後に首のすわりが強まり、６〜９ヶ月後に支えを当てて座れるようになり、１３ヶ月後に腹臥位に座れるようになり、さらに１６ヶ月後におもちゃを持ったり、支えがあれば立てるようになる。抗ＡＡＶ２抗体は、遺伝子治療前の患者において陰性であるが、その力価は遺伝子導入後にわずかに増加し得る。
【０３１２】
ＰＥＴスキャンおよびＣＳＦ分析
治療を受けた患者について、ＰＥＴスキャンとＣＳＦ解析を完了させる。遺伝子導入から６ヵ月後、ＰＥＴスキャンにより、合併（右および左）治療部位における基準値に比べて、６−［１８Ｆ］  フルオロドーパ（ＦＤＯＰＡ）の摂取が増加していることが示されるはずである。ＣＳＦ分析により、ホモバニリン酸（ＨＶＡ、ドーパミンの代謝産物）および５−ヒドロキシインドール酢酸（ＨＩＡＡ、セロトニンの代謝産物）のレベルの増加が明らかにされる。しかし、Ｌ−ＤＯＰＡおよび３−Ｏ−メチルドーパのレベルは上昇したままである（Ｈｗｕ，  Ｗ．Ｌ．，  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１２）。
【０３１３】
実施例６：ＡＡＤＣポリヌクレオチドの投与
ＡＡＤＣポリヌクレオチド含有組換えＡＡＶベクター組成物を、実施例５に記載の投与方法を用いて、パーキンソン病を有する患者の被殻に注入する。用量、患者数、および容積を表８に概説する。
【０３１４】
【表８】
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研究の過程で、パーキンソン病と診断されたヒト患者におけるＡＡＤＣポリヌクレオチド含有組換えアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター組成物の注入の安全性および忍容性が評価される。患者は、術前に、また術後は月１回６ヶ月間にわたって、複数の尺度を用いて評価される。評価尺度には、グローバルジストニア尺度（Ｇｌｏｂａｌ  Ｄｙｓｔｏｎｉａ  Ｓｃａｌｅ  ［ｓｉｃ］、略してＧＤＳ）（以下を参照せよ：Ｃｏｍｅｌｌａ，
ｅｔ  ａｌ．，  ２００３，  Ｍｏｖｅｍｅｎｔ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，  １８（３）：３０３−３１２）、Ｌ−ＤＯＰＡチャレンジテスト、ＵＰＤＲＳスコア、運動状態日記、ラボテストなどがある。患者の介護者は、１日を３０分単位で分けた日記を使用して、入院前の４日間および入院後６ヶ月間の移動能力  を記録する。患者の介護者は、被験者の状態を、睡眠、不動、煩わしいジスキネジーを伴わない移動能力、または煩わしいジスキネジーを伴った移動能力という各カテゴリーに評価するように訓練される。これらの各カテゴリーの合計時間数が計算され、基準値と６ヶ月のスコアの差が群間で比較される。レボドパに対する短期間の反応が、ベースライン時と遺伝子導入後６ヶ月後に評価される；被験者は、ドーパミン作動薬を中止してから２０時間後に、経口的に１００ｍｇのレボドパを服用し、２５ｍｇのベンズラジドを併用服用した。ＧＤＳおよび血漿レボドパ濃度に基づく運動症状を、ベースライン時およびレボドパ摂取の３０分後、１，２，３および４時間後に評価する（例えば、以下を参照せよ：Ｍｕｒａｍａｔｓｕ，  ｅｔ  ａｌ．，
２０１０，  “Ａ  ｐｈａｓｅ  Ｉ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｌ−ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄ  ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ  ｇｅｎｅ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ．”）。
【０３１５】
実施例７：ＡＡＤＣポリヌクレオチドのＩｎ  Ｖｉｖｏ投与
２つのＡＡＤＣポリヌクレオチド含有組換えＡＡＶベクター組成物（プラスミド配列番号：１０および１２；ＩＴＲ  から  ＩＴＲ  までの配列番号：１７および１９）、対照、および参照を、ラットに、バイラテラル線条体内（１０ｕｌ／側）経路で、２ｘ１０１２ｖｇ／ｍｌの用量レベルで投与した。ラット線条体におけるＡＡＤＣの発現は、４週間および８週間後にＥＬＩＳＡによって測定した。注入部位間の可変投与に起因とする、動物間および脳半球間に変動が見られた。双方の構築物ともＡＡＤＣを発現したが、ｐｈＡＡＤＣ＿３ｋ構築物（プラスミド配列番号１２；ＩＴＲからＩＴＲまでの配列番号１９）は、参照構築物と比較して、発現が最高で２００％まで増加した。
【０３１６】
実施例８：ＡＡＤＣポリヌクレオチドの用量反応研究
ＡＡＤＣポリヌクレオチド含有組換えＡＡＶベクター（プラスミド配列番号１０；ＩＴＲからＩＴＲまでの配列番号１７）の組成物（１ｘ１０１１  ｖｇ／ｍｌ  から  １ｘ１０１３  ｖｇ／ｍｌまでの範囲の５種の異なる用量レベルで）と、対照とを６−ＯＨＤＡ病変ラットに投与する。低用量レボドパ投与に対する行動的応答は、組成物の投与の前後（第３週および第４週）に定量化される。投与後５週間で、剖検を行い、ＡＡＤＣ酵素活性をｅｘ  ｖｉｖｏ  線条体組織アッセイで測定し、脳におけるＡＡＤＣの分布を免疫組織化学（ＩＨＣ）染色によって判定する。
【０３１７】
実施例９：線条体内形質導入に及ぼす空粒子の影響
成熟ラット（ｎ  ＝  ６）に、完全ベクター粒子：空ベクター粒子の比率を変化させて投与した：完全ベクター粒子の比率がそれぞれ０％、５０％、８５％、または９９％。ＡＡＤＣポリヌクレオチド含有組換えＡＡＶベクター（プラスミド配列番号１７）を一定用量および容量（５μｌおよび１×１０ｖｇ）で、線条体内に投与した。ラットを投与後４週間で評価した。ベクター用量が低かった場合は、ＡＡＤＣベクター発現は限られていた。粒子の分布容積を表９（ＥＬＩＳＡ）に示し、ＡＡＤＣ発現の線条体内レベルを表１０（組織学）に示す。
【０３１８】
【表９】
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【０３１９】
【表１０】
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分布はすべてのグループで同等であった。ベクター用量が比較的低かった場合は、ＡＡＤＣ発現が限られていた。空の粒子が＞３０％あった場合に、ＡＡＤＣ発現レベルを低下させる傾向もあった。
【０３２０】
本発明は、記載された幾つかの実施形態に関して、ある程度の長さで、ある程度の特殊性を以て説明されているが、本発明は、そのような特殊性、実施形態、または任意の特定の実施形態に限定されるように意図されておらず、本発明は、添付の特許請求の範囲を参照して解釈されるべきである。その理由は、先行技術を考慮してそのような請求の範囲を可能な限り広く解釈するためであり、また本発明の意図する範囲を効果的に包含するためである。
【０３２１】
本明細書で言及された全ての刊行物、特許出願、特許およびその他の参考文献は、その全体が参照により組み込まれる。矛盾する場合、定義を含む本明細書が支配する。さらに、セクション見出し、材料、方法、および実施例は、例示的なものに過ぎず、限定することを意図するものではない。
【配列表】
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