(57)【要約】      （修正有）【課題】睡眠の質を改善するためのシジミ抽出物、及び前記シジミ抽出物を含む食品組成物の提供。【解決手段】ウリジン濃度が0.05〜1質量％であり、質量比でウリジン：全窒素＝1：50〜1：150であり、ウリジンと全窒素はシジミ由来のもののみからなる、シジミ抽出物。前記シジミ抽出物を含む食品組成物。タブレット、ソフトカプセル、ハードカプセル、顆粒、散剤及び液剤から選ばれるいずれかの製剤形態である、前記食品組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ウリジン濃度が0.05〜1質量％であり、質量比でウリジン：全窒素＝1：50〜1：150であり、ウリジンと全窒素はシジミ由来のもののみからなる、シジミ抽出物。
【請求項２】
請求項1に記載のシジミ抽出物を含む、食品組成物。
【請求項３】
タブレット、ソフトカプセル、ハードカプセル、顆粒、散剤及び液剤からなる群から選ばれるいずれかの製剤形態である、請求項２に記載の食品組成物。
【請求項４】
サプリメントである、請求項２又は３に記載の食品組成物。
【請求項５】
睡眠改善用の請求項２〜４のいずれか１項に記載の食品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、シジミ抽出物及び食品組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
シジミは古くから味噌汁や佃煮として食されてきた一般的な和食材であると同時に、「肝臓に良い」、「黄疸によい」などの理由から民間療法として利用されてきた。更に、近年の健康志向の高まりからシジミ抽出物食品が栄養補助食品、健康補助食品やサプリメントとして流通している。
【０００３】
特許文献１は、オルニチンが寝つきまたは寝起きを改善することを記載し、特許文献２は、シジミエキスにオルニチンが含まれることが記載されている。
【０００４】
しかしながら、シジミエキスに含まれるオルニチン量は少ないので、シジミエキスに含まれるオルニチン量では睡眠改善作用は得られない。
【０００５】
一方、近年は生活リズムの乱れ、ストレス、運動不足などにより睡眠不足、不眠等の睡眠障害を訴える人が増加している。不眠は、一般に、入眠障害（寝つきが悪い）、中途覚醒（夜中に目が覚めてしまう）、熟眠障害（眠りが浅く何度も目が覚める）、早期覚醒（朝早く眼が覚めてしまう）に分類される。睡眠不足、睡眠障害は全身倦怠、疲労感を促進させる。
【０００６】
特許文献3は、タイワンシジミを用いたシジミ抽出物を実施例で得ているが、本願明細書の比較例1に記載されるようにシジミ抽出物中のウリジン量は検出限界(0.01質量%)未満であった。
【０００７】
非特許文献１は、シジミ抽出物をエサに混ぜてラットに投与するとノンレム睡眠時間が増加し、シジミ抽出物が睡眠量の増加や睡眠の質の向上に作用していることを記載しているが、シジミ抽出物中のウリジン濃度、ウリジンと全窒素の質量比についての記載はない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開2006-342148号公報
【特許文献２】特開2001-204432号公報
【特許文献３】特開2007-210990号公報
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】日本食品科学工学会西日本支部大会講演要旨，2011年，Vol.2010，pp.31-40
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
睡眠障害は睡眠薬により治療できるが、睡眠薬は習慣性・依存性があり、より安全に睡眠の質を改善することが求められていた。
【００１１】
本発明は安全・安心に睡眠を改善することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者は上記課題に鑑み検討を重ねた結果、特定のウリジン濃度、並びにウリジン量と全窒素量が特定の比率であるときに、優れた睡眠改善効果が得られることを見出した。
【００１３】
本発明は、以下のシジミ抽出物及び食品組成物を提供するものである。
項１．  ウリジン濃度が0.05〜1質量％であり、質量比でウリジン：全窒素＝1：50〜1：150であり、ウリジンと全窒素はシジミ由来のもののみからなる、シジミ抽出物。
項２．  項1に記載のシジミ抽出物を含む、食品組成物。
項３．  タブレット、ソフトカプセル、ハードカプセル、顆粒、散剤及び液剤からなる群から選ばれるいずれかの製剤形態である、項２に記載の食品組成物。
項４．  サプリメントである、項２又は３に記載の食品組成物。
項５．  睡眠改善用の項２〜４のいずれか１項に記載の食品組成物。
【発明の効果】
【００１４】
本発明のシジミ抽出物は、ウリジンを0.05〜1質量％含み、質量比でウリジン：全窒素＝1：50〜1：150であるので、それを食品組成物として経口摂取することで睡眠を改善することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】OSA睡眠調査、入眠と睡眠維持(１２週間後)。縦軸は、入眠と睡眠維持に関するOSA睡眠調査票のスコアを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明のシジミ抽出物中のウリジンはシジミ由来のものに限定される。
【００１７】
本発明に使用されるシジミとしては、二枚貝であり、ヤマトシジミ（Ｃｏｒｂｉｃｕｌａ ｊａｐｏｎｉｃａ）、セタシジミ（Ｃｏｒｂｉｃｕｌａ Ｓａｎｄａｉ）、マシジミ（Ｃｏｒｂｉｃｕｌａ ｌｅａｎａ）やタイワンシジミ（Ｃｏｒｂｉｃｕｌａ ｆｌｕｍｉｎｅａ）などが挙げられ、これらのいずれを使用してもよいが、価格及び入手のしやすさの観点から好ましくはタイワンシジミが挙げられる。シジミ抽出物に用いられるのはシジミの可食部である。可食部は粉砕したものがウリジン及びタンパク質を効率よく抽出するために好ましい。
ウラシル(Uracil)、ウリジン(Uridine)の化学構造式を以下に示す。
【００１８】
【化１】
2018074993.tif 000002
【００１９】
国中明の論文（「醤油中のプリン・ピリミジン塩基について」  第３０巻第１２号、７８７頁、１９５６年）には、シジミ抽出物にウラシル、グアニンに相当する成分を認めたことが記載されている。シジミ抽出液には、ウリジンの他にウラシル、ＵＭＰ、ＵＤＰ、ＵＤＰ−グルコースなどのＵＤＰ−糖、ＵＴＰなどが存在すると考えられ、さらにＲＮＡ中のウリジンの形態も存在する。
【００２０】
シジミ中にはタンパク質、アミノ酸、ペプチド、アミド類、プリン類、ピリミジン類、クレアチン類などの有機窒素分及び硝酸イオンなどの無機窒素分が含まれている。本明細書において、「全窒素」とは、有機窒素分と無機窒素分の合計を意味する。シジミ抽出物中の全窒素はシジミ由来のものに限定される。
【００２１】
本発明のシジミ抽出物は、ウリジン量と全窒素量の質量比は、ウリジン：全窒素＝1：50〜1：150、好ましくは1：80〜1：130である。シジミ抽出物において、ウリジン単独或いは全窒素成分単独では睡眠改善の効果が認められないが、ウリジン濃度が0.05〜1質量％であり、かつ、質量比でウリジン：全窒素＝1：50〜1：150であれば睡眠改善効果が認められ、ウリジン：全窒素＝1：80〜1：130であれば最も強い睡眠改善効果が得られる。
【００２２】
シジミ抽出物中のウリジン濃度は、0.05〜1質量％、好ましくは0.05〜0.5質量％、より好ましくは0.05〜0.3質量％、さらに好ましくは0.05〜0.2質量％である。
【００２３】
シジミの抽出液としては、水が好ましく、ｐＨを調整するためにｐＨ調整剤または緩衝液を使用してもよい。抽出は常圧又は加圧下に行ってもよく、抽出温度は、例えば室温から３７４℃程度（亜臨界）が好ましく、抽出時間は、例えば３０分〜２４時間程度が好ましい。抽出液のｐＨは弱酸性（ｐＨ４〜６．５程度）であるのが、シジミ中に含まれるＵＭＰ(ウリジンモノリン酸)を加水分解してウリジンに導くために好ましい。また、抽出前のシジミは、RNaseで処理するか、抽出前にシジミ細胞内に含まれるRNaseの失活を避けるために５〜３７℃程度の温度で前処理し、RNAを分解してUMPに導くのが、抽出時にUMPのリン酸エステルを加水分解してウリジン濃度を増加させるために好ましい。
【００２４】
ウリジン及び全窒素量はシジミの種類または前処理の条件、抽出時におけるUMPからウリジンへの変換効率(リン酸エステルの加水分解効率)に依存し、また、シジミを細断することでウリジン、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、核酸塩基などの全窒素成分を速やかに抽出液中に溶出することができる。
【００２５】
シジミは、抽出時にプロテアーゼを作用させてもよい。プロテアーゼの作用によりタンパク質がペプチド、さらにはアミノ酸に分解されても全窒素量に大きな影響はない。
【００２６】
プロテアーゼとしては、スブチリシン、パパイン、トリプシン、キモトリプシン、サブチリシン、ペプシン、サーモリシン、カテプシン、サーモリシン、プロナーゼ、カスパーゼ、カルパイン、フューリン、ブロメライン、プロテイナーゼＫ、カルボキシペプチダーゼなどが挙げられ、プロテアーゼの由来は特に制限されず、微生物、動物、植物等いずれの由来のものを用いてもよい。また、プロテアーゼとしては、公知のプロテアーゼのホモログや改変体を利用してもよい。
【００２７】
プロテアーゼとしては、市販品を用いてもよく、適宜製造して取得したものを用いてもよい。市販品としては、酵素製剤が挙げられる。市販の酵素製剤として、具体的には、例えば、Protamex(ノボザイム製)が挙げられるが、これに限定されない。
【００２８】
抽出条件は、シジミ抽出物のウリジン含量が0.05〜1質量％になり、かつ、ウリジン：全窒素＝1：50〜1：150になるように適宜決定することができる。
【００２９】
抽出後はろ過により不溶物を除去し、抽出液を濃縮することにより、シジミ抽出物を得ることができる。
【００３０】
抽出に使用する溶媒量は、可食部重量に対して１〜１０倍量程度、好ましくは１．５〜３倍量程度である。
【００３１】
本発明の食品組成物は、入眠と睡眠維持を改善することにより睡眠の質を改善する作用を有する。
【００３２】
本発明の食品組成物は、睡眠改善用の製剤の形態が好ましい。製剤としては、具体的には錠剤、カプセル剤(ハードカプセル、ソフトカプセル)、丸剤、チュアブル錠、口腔内崩壊錠、顆粒剤、散剤、液剤、ドリンク剤、懸濁剤、乳濁剤などが挙げられる。
【００３３】
本発明の食品組成物は、シジミ抽出物とともに製剤用の担体を含むことができる。このような担体としては、固形製剤の場合、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味・矯臭剤などが挙げられ、液状製剤の場合、溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤などが挙げられる。また、必要に応じて防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤、安定化剤等の製剤添加物を用いることもできる。カプセル剤の担体としては、ハードカプセルの場合には、カプセル皮膜としてゼラチンを挙げることができ、ソフトカプセルの場合には、カプセル用皮膜として、ゼラチン、多価アルコール（グリセリン、ソルビトール、マンニトール、マルチトール等）等を挙げることができる。ソフトカプセルはさらに水を含んでいてもよい。賦形剤としては、乳糖、白糖、D-マンニトール、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、無水ケイ酸等が挙げられる。
【００３４】
結合剤としては、水、エタノール、1-プロパノール、2-プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、α-デンプン液、ゼラチン液、D-マンニトール、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。
【００３５】
崩壊剤としては、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等が挙げられる。
【００３６】
滑沢剤としては、精製タルク、ステアリン酸塩ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、ホウ砂、ポリエチレングリコール等が挙げられる。
【００３７】
着色剤としては、酸化チタン、酸化鉄等が挙げられる。
【００３８】
矯味・矯臭剤としては白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等が挙げられる。
【００３９】
緩衝剤としては、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。
【００４０】
安定剤としては、トラガント、アラビアゴム、ゼラチン等が挙げられる。
【００４１】
本発明の組成物は、サプリメントの形態であってもよい。
【００４２】
本発明において、食品としては、グミ、ドリンクゼリー、キャンデー、クッキー、ビスケットなどが挙げられる。
【００４３】
本発明の有効成分であるシジミ抽出物中のウリジンは、健常な成人１日当たり０．００５〜２０ｍｇ程度、好ましくは０．０１〜１０ｍｇ程度、より好ましくは０．０２〜５ｍｇ程度、さらに好ましくは０．０３〜３ｍｇ程度、特に好ましくは０．０５〜１ｍｇ程度である。
【実施例】
【００４４】
以下に参考例、実施例及び試験例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、これらは本発明を限定するものではない。
製造例1
生きたタイワンシジミの殻を破砕し、タイワンシジミの身を取り出して細かく切り刻み、室温で５時間放置してタイワンシジミに含まれるＲＮＡの加水分解を誘導した。タイワンシジミ１ｋｇに対し、１０リットルの抽出液を加え、１００℃で５時間抽出した。抽出液は、水にクエン酸を加え、ｐＨを４．５に調整したものを用いた。
【００４５】
得られたシジミエキスを噴霧乾燥し、ウリジン含量、全窒素をＨＰＬＣで測定したところ、ウリジン含量は０．１質量%であり、質量比でウリジン：全窒素＝1：96であった。
実施例１
（１）試験サンプル
製造例1と同様なウリジン含量とウリジン：全窒素の質量比を有するシジミエキスを新たに製造し、新たに製造したシジミエキスを用い、1粒にシジミエキス110mgを含むようにソフトカプセルを調製した。対照（プラセボ）としてシジミエキスをデキストリンで置き換えたソフトカプセルを調製した。色素を用いて外観からは区別がつかないように調製した。以下において、得られたソフトカプセルを「ウリジン含有シジミエキスカプセル」ということがある。
（２）対象者
被験者は習慣的に飲酒をする日本人成人男女とした。除外基準は、何らかの慢性疾患を患い治療を受けている者、医薬品、サプリメントなどを使用している者、食品や医薬品に対しアレルギー症状を示す恐れのある者、妊娠中、授乳中或いは試験期間中に妊娠する意思のある者とした。
（３）試験サンプル飲用方法
0.1質量%のウリジン、全窒素成分9.6質量%（ウリジン：全窒素＝1：96）を含むシジミエキス粉末110mgを含むウリジン含有シジミエキスカプセルまたはプラセボを1日2回、朝食後に1粒、夕食後に1粒を水またはぬるま湯で摂取することとした(2粒/日)。
※摂取を忘れた際には気づいたときに摂取することとした。
（４）試験スケジュールと摂取方法
摂取期間は１８週とした。試験期間中は、医薬品、サプリメントなどは摂取しないように指示した。その他の食事・飲酒等については特に指定しなかった。
（５）睡眠状況調査
リッカートスケール法によって、「飲んだ翌日の目覚めが悪い」かどうかの自覚症状を調査した。リッカートスケール法は6段階での回答とした（1: まったくあてはまらない / 2: ほとんどあてはまらない / 3: あまりあてはまらない / 4: 少しあてはまる / 5: かなりあてはまる / 6: 非常によくあてはまる）。また、OSA睡眠調査票を用い、起床時眠気、入眠と睡眠維持、夢み、疲労回復、睡眠時間を調査し睡眠の状態を評価した。
（６）統計解析
母集団のばらつきに応じて、共分散分析(Analysis of covariance; ANCOVA) またはマンホイットニーのU検定 (Mann-Whitney U test) を用いた。結果を表１及び図１に示す。
【００４６】
【表１】
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【００４７】
表1に示すように、自覚症状として、飲んだ翌日の目覚めに対して改善傾向が見られた。
【００４８】
摂取12週間後の入眠と睡眠維持について平均値と95%信頼区間を図に示した。摂取前においては差が見られなかったが、摂取12週間後に入眠と睡眠維持に有意な差が見られた。また摂取12週間後で睡眠時間の増加傾向も見られた。以上のことから、ウリジンを含有し、ウリジンと全窒素成分の質量比が特定の範囲内にあるシジミエキスカプセルを摂取することで、睡眠の質が改善することが明らかとなった。
比較例１
特開2007-210990号公報の実施例１の記載に従いシジミエキスを得、そのウリジン含量をＨＰＬＣで測定したところ、ウリジン含量は検出限界以下であり、測定できなかった。
【図１】
2018074993.tif 000004