(57)【要約】      （修正有）【課題】８ＯＨｄＧを高感度かつ高特異性で検出可能な重合体の製造方法の提供。【解決手段】式（１）の化合物の存在下で重合を行う重合方法。（Ｒ１はＣ１〜１８の脂肪族炭化水素基又は式（２）の構造；Ｒ２及びＲ３は独立にＯＨ基又はアルキルカルボニルオキシ基；Ｒ２及びＲ３は同時にＯＨ基ではない；＊はＲ１が結合するＮの位置）2018080278.tif 000047【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）で表わされる化合物の存在下で重合反応を行うことを特徴とする、重合体の製造方法。
【化１】
2018080278.tif 000038
（前記式（１）中、Ｒ１は炭素数１から１８の脂肪族炭化水素基または、下記式（２）で表わされる構造であり、
【化２】
2018080278.tif 000039
上記式（２）中、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ独立に、ヒドロキシル基、または炭素数１から１６のアルキルカルボニルオキシ基であり、ただしＲ２およびＲ３は同時にヒドロキシル基ではなく、＊は前記式（１）中のＲ１が結合するＮの位置を示す。）
【請求項２】
前記重合反応が、下記式（３）、式（４）および式（５）で表わされる単量体の少なくともいずれかを重合することを特徴とする、請求項１に記載の重合体の製造方法。
【化３】
2018080278.tif 000040
（前記式（３）、（４）、および（５）中、Ａ１はそれぞれ独立に、水素原子またはメチル基であり、Ｒ４およびＲ５はそれぞれ独立に、水素原子、または飽和もしくは不飽和の炭素数１から１２の脂肪族炭化水素基である。）
【請求項３】
前記重合反応が、下記式（６）、式（７）、および式（８）で表わされる単量体の少なくともいずれか１つを重合することを特徴とする、請求項１または２に記載の重合体の製造方法。
【化４】
2018080278.tif 000041
（前記式（６）、（７）、および（８）中、Ａ１はそれぞれ独立に、水素原子またはメチル基であり、Ａ２はそれぞれ独立に、式（９）、式（１０）、式（１１）、または式（１２）で表わされる構造であり、Ａ３は炭素数１から１８の脂肪族炭化水素基であり、
【化５】
2018080278.tif 000042
前記式（９）、（１０）、（１１）、および（１２）中、Ｒ６およびＲ１６はそれぞれ独立に、水素原子、またはニトロ基もしくはハロゲン原子で置換されていてもよい飽和もしくは不飽和の脂肪族炭化水素基であり、Ｒ７からＲ１５はそれぞれ独立に、水素原子、ニトロ基、ハロゲン原子、またはニトロ基もしくはハロゲン原子で置換されていてもよい飽和もしくは不飽和の脂肪族炭化水素基であり、Ｒ７およびＲ８、またはＲ９、Ｒ１０およびＲ１１は、互いに結合し環中に不飽和結合を有していてもよい環状構造を形成してもよく、＊は前記式（６）、（７）、および（８）中のＮの位置を示す。）
【請求項４】
前記式（６）、式（７）、および式（８）で表わされる単量体中のＡ２が、下記式（１３）、式（１４）、または式（１５）で表わされる構造であることを特徴とする、請求項３に記載の重合体の製造方法。
【化６】
2018080278.tif 000043
（前記式（１３）、（１４）、および（１５）中、Ｒ１７およびＲ２７はそれぞれ独立に、水素原子、または飽和もしくは不飽和の脂肪族炭化水素基であり、Ｒ１８からＲ２６はそれぞれ独立に、水素原子、ニトロ基、ハロゲン原子、または飽和もしくは不飽和の脂肪族炭化水素基であり、＊は前記式（６）から（８）中のＮの位置を示す。）
【請求項５】
前記重合反応が、下記式（１６）、式（１７）、および式（１８）で表わされる単量体の少なくともいずれか１つを重合することを特徴とする請求項１または２に記載の重合体の製造方法。
【化７】
2018080278.tif 000044
（前記式（１６）、（１７）、（１８）中、Ａ１はそれぞれ独立に、水素原子またはメチル基であり、Ｒ１７およびＲ２７はそれぞれ独立に、水素原子、または飽和もしくは不飽和の脂肪族炭化水素基であり、Ｒ１８からＲ２６はそれぞれ独立に、水素原子、ニトロ基、ハロゲン原子、または飽和もしくは不飽和の脂肪族炭化水素基である。）
【請求項６】
前記重合反応が、少なくとも前記式（６）および式（７）で表わされる単量体を重合することを特徴とする、請求項３または４に記載の重合体の製造方法。
【請求項７】
前記重合反応が、少なくとも前記式（６）、式（７）、および式（８）で表わされる単量体を重合することを特徴とする請求項６に記載の重合体の製造方法。
【請求項８】
前記重合反応が、少なくとも多官能性単量体を重合することを特徴とする、請求項１乃至７のいずれか１項に記載の重合体の製造方法。
【請求項９】
前記多官能性単量体が、下記式（１９）で表わされる単量体であることを特徴とする、請求項８に記載の重合体の製造方法。
【化８】
2018080278.tif 000045
（前記式（１９）中、Ａ１はそれぞれ独立に、水素原子またはメチル基であり、Ｒ２８は、炭素数１から２０の直鎖または環状の脂肪族炭化水素基、置換基を有してもよい芳香族炭化水素基、または置換基を有してもよいヘテロ芳香族炭化水素基である。）
【請求項１０】
前記式（１９）で表わされる単量体が、下記式（１９−１）および式（１９−２）からなる群から選ばれることを特徴とする、請求項９に記載の重合体の製造方法。
【化９】
2018080278.tif 000046
（上記式（１９−１）および式（１９−２）中、Ａ１はそれぞれ独立に、水素原子またはメチル基であり、Ａ４はそれぞれ独立に、窒素原子または水素原子が一つ結合した炭素原子であり、Ｒ２９およびＲ３０はそれぞれ独立に、炭素数１から２０のアルコキシ基、アルコキシカルボニル基、アルキルカルボニルオキシ基、アルキルアミノカルボニル基、アルキルカルボニルアミノ基、アルキルチオ基、またはアルキルスルホニル基である。）
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、水性検体溶液中の８−オキソ−２’−デオキシグアノシン（以下、「８ＯＨｄＧ」とも記載する。）を高感度かつ特異的に定量検出することができる、重合体の製造方法に関するものである。８ＯＨｄＧは互変異性体を有し、下記構造式で表わされる。
【化１】
2018080278.tif 000002
【背景技術】
【０００２】
８ＯＨｄＧは、環境因子や生体内の代謝活動に伴って生成する活性酸素の量を直接反映することから、酸化ストレスマーカーとして注目されている。そのため、生体内・尿中の８ＯＨｄＧの存在量を正確に計測することは、突然変異や老化、多くの疾患を研究する上で極めて意義がある。一般的に現在の測定技術は、高度に洗練された分離技術、濃縮技術、分析手法の選択と組み合わせ等によって、ｐｐｔ（１兆分の１）レベル以下であっても様々な化学物質の分析が可能となっている。そのように微量なレベルの分析の場合には、通常、検出対象物に合わせた最適な分離、濃縮、定性分析、および定量分析等の各工程を経なければならない。必然的に８ＯＨｄＧの存在量をｐｐｔレベルで正確に計測することは、多大な労力と多くの時間、そして高い分析コストを必要とすることになる。しかしながら活性酸素の発生量は変動的であるため、さまざま測定環境で迅速に測定する方法の開発が期待されている。
【０００３】
一般的に、分子認識機能を有する樹脂を分子鋳型法により製造し、化学センサとして用いることで、比較的安価に様々な環境下で迅速に対象化学物質の測定ができることが知られている（例えば非特許文献１）。しかし、このような化学センサを用いる方法は、対象化学物質に対する特異的選択性（以下特異性）に関し課題が多いとされている。例えば、８ＯＨｄＧの存在量の検知に関しても分子認識機能を有する樹脂を用いる検討が行われているが、そのような樹脂は生体内において多量に存在する尿酸も検知してしまう。そのため、８ＯＨｄＧに対する特異性は不十分であり（例えば非特許文献２）、さまざま測定環境で迅速に測定することが困難な装置（例えばＱｕａｒｔｚ  Ｃｒｙｓｔａｌ  Ｍｉｃｒｏｂａｌａｎｃｅ等）を用いた検討（非特許文献３）が行われているのみである。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｒｅｖ．，２０１１，４０，２９２２−２９４２
【非特許文献２】Ａｎａｌｙｔｉｃａ  Ｃｈｉｍｉｃａ  Ａｃｔａ  ６４０（２００９）８２−８６
【非特許文献３】Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ  ８６（２０１６）２２５-２３４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
そこで、本発明は、８ＯＨｄＧを高感度かつ高い特異性で検出可能な重合体の製造方法の提供を課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
前記課題を解決するため、本発明の重合体の製造方法は、下記式（１）で表わされる化合物の存在下で重合反応を行うことを特徴とする、重合体の製造方法である。
【化２】
2018080278.tif 000003
前記式（１）中、Ｒ１は炭素数１から１８の脂肪族炭化水素基または、下記式（２）で表わされる構造であり、
【化３】
2018080278.tif 000004
上記式（２）中、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ独立に、ヒドロキシル基または炭素数１から１６のアルキルカルボニルオキシ基であり、ただしＲ２およびＲ３は同時にヒドロキシル基ではなく、＊は前記式（１）中のＲ１が結合するＮの位置を示す。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、低分子化合物、特に８ＯＨｄＧに対して高感度、かつ特異的な繰り返し単位を有する、重合体および共重合体の製造方法の提供が可能となる。
また、本発明により、８ＯＨｄＧの高感度での定量検出に用いるデバイスの提供も可能となる。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
本発明の実施形態に係る重合体の製造方法は、下記式（１）で表わされる化合物の存在下で重合反応を行うことを特徴とする。
【化４】
2018080278.tif 000005
前記式（１）中、Ｒ１は炭素数１から１８の脂肪族炭化水素基または、下記式（２）で表わされる構造であり、
【化５】
2018080278.tif 000006
上記式（２）中、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ独立に、ヒドロキシル基、または炭素数１から１６のアルキルカルボニルオキシ基であり、ただしＲ２およびＲ３は同時にヒドロキシル基ではなく、＊は式（１）中のＲ１が結合するＮの位置を示す。前記炭素数１から１６のアルキルカルボニルオキシ基は、炭素数１から１６のアルキル基がカルボニルオキシ基を介して結合する基を表す。
なお、本明細書では、脂肪族炭化水素基の炭素数の規定は、置換基、枝分かれ構造などに含まれるすべての炭素の数を意味する。
【０００９】
なお、式（１）で表わされる化合物は、以下に示す式（１'）、式（１''）、および式（１'''）で表わされる互変異性体を有するが、本明細書において式（１）で表わされる化合物はこれら互変異性体の全てを含むものとする。
【化６】
2018080278.tif 000007
【００１０】
本発明の実施形態において、式（１）で表わされる化合物の好ましい具体例のうち、Ｒ１が炭素数１から１８の脂肪族炭化水素基であるものを以下に示すが、下記の例に限定されるものではない。
【化７】
2018080278.tif 000008
【００１１】
本発明の実施形態において、式（１）で表わされる化合物の好ましい具体例において、Ｒ１が式（２）で表わされる構造である化合物の好ましい式（２）で表わされる構造の具体例を以下に示すが、下記の例に限定されるものではない。
【化８】
2018080278.tif 000009
【化９】
2018080278.tif 000010
【化１０】
2018080278.tif 000011
【００１２】
なお、本明細書中において、式（１）で表わされる化合物のＲ１が式（２）で表わされる構造である化合物を表す場合、上記の式（２）で表わされる構造に付した番号を、式（１）で表わされる化合物の番号としても用いる。たとえば、式（２−１）で表わされる化合物は、Ｒ１が式（２−１）で表わされる構造を有する式（１）で表わされる化合物を意味する。
【００１３】
通常、分子鋳型法で分子認識機能を有する重合体を作成する場合、検知する物質をいわゆる鋳型物質として使用する。しかし、単純に８ＯＨｄＧを鋳型物質とし、アクリル酸やアクリルアミドを用いて重合体を作成した場合、得られた重合体は、８ＯＨｄＧに対して十分な感度が得られないことを本発明の発明者らは見出している。また、８ＯＨｄＧのデオキシリボースにエステル結合した脂肪族炭化水素基の炭素原子数が１７以上の場合や８ＯＨｄＧの構成要素である８−ヒドロキシグアニンに直接結合したＲ１で表わされる脂肪族炭化水素基の炭素原子数が１９以上の場合、得られた重合体は８ＯＨｄＧに対して十分な特異性が得られないことも我々の検討で判明している。以上のことから鑑みると、詳細は不明であるが鋳型物質が形成する孔の大きさと形状が、８ＯＨｄＧ認識の特異性において重要な役割を果たしていると考えられる。すなわち、鋳型物質の脂肪族炭化水素基で形成される孔の大きさと形状が不適切であれば、十分な感度と特異性が得られないことを本発明の発明者らは見出した。
【００１４】
本発明の実施形態に係る重合体は、式（１）で表わされる化合物の存在下で重合反応を行うことにより製造される重合体であれば、単一の種類の単量体の重合により合成されるいわゆるホモポリマー、および複数の種類の単量体の重合により合成されるいわゆる共重合体のいずれであっても良い。しかし、８ＯＨｄＧに対する特異性の観点から、式（３）、式（４）および式（５）で表わされる単量体の少なくともいずれか１つ由来の繰り返し単位を含む重合体が好ましい。ここで、単量体由来の繰り返し単位を含む重合体とは、単量体が重合反応により繰り返し単位として含まれる重合体を示す。
【化１１】
2018080278.tif 000012
式（３）、式（４）、および式（５）中、Ａ１はそれぞれ独立に、水素原子またはメチル基であり、Ｒ４およびＲ５はそれぞれ独立に、水素原子、または飽和もしくは不飽和の炭素数１から１２の脂肪族炭化水素基である。
【００１５】
しかし、これら式（３）、式（４）、および式（５）で表わされる単量体由来の繰り返し単位のみを含む重合体は、８ＯＨｄＧに対する特異性が依然として低い場合がある。そのため、本発明の実施形態に係る重合体は、式（６）、式（７）、および式（８）で表わされる単量体の少なくともいずれか１つ由来の繰り返し単位を含む重合体であることがより好ましい。式（６）、式（７）、および式（８）で表わされる単量体由来の繰り返し単位は、８ＯＨｄＧの３つの水素結合部位に対して、水素結合を形成することで分子認識を行うため、８ＯＨｄＧに対する特異性が高くなる。以下、式（６）、式（７）、および式（８）で表わされる単量体由来の繰り返し単位を分子認識単位という。これに対して、式（３）、式（４）および式（５）で表わされる単量体由来の繰り返し単位を低認識単位という。
【化１２】
2018080278.tif 000013
Ａ１はそれぞれ独立に、水素原子またはメチル基であり、Ａ２はそれぞれ独立に、式（９）、式（１０）、式（１１）、または式（１２）で表わされる構造であり、Ａ３は炭素数１から１８の脂肪族炭化水素基であり、
【化１３】
2018080278.tif 000014
式（９）、式（１０）、式（１１）、および式（１２）中、Ｒ６およびＲ１６はそれぞれ独立に、水素原子、またはニトロ基もしくはハロゲン原子で置換されていてもよい飽和もしくは不飽和の脂肪族炭化水素基であり、Ｒ７〜Ｒ１５はそれぞれ独立に、水素原子、ニトロ基、ハロゲン原子、またはニトロ基もしくはハロゲン原子で置換されていてもよい飽和もしくは不飽和の脂肪族炭化水素基であり、Ｒ７およびＲ８、またはＲ９、Ｒ１０およびＲ１１は、互いに結合し環中に不飽和結合を有していてもよい環状構造を形成してもよく、＊は式（６）、式（７）、および式（８）中のＮの位置を示す。
【００１６】
本発明の実施形態に係る重合体としては、分子認識単位が、式（６）、式（７）、および式（８）で表わされる単量体中のＡ２が、式（１３）、式（１４）、または式（１５）で表わされる構造である単量体由来の繰り返し単位である重合体がより好ましい。
【化１４】
2018080278.tif 000015
式（１３）、式（１４）、および式（１５）中、Ｒ１７およびＲ２７はそれぞれ独立に、水素原子、または飽和もしくは不飽和の脂肪族炭化水素基であり、Ｒ１８〜Ｒ２６はそれぞれ独立に、水素原子、ニトロ基、ハロゲン原子、または飽和もしくは不飽和の脂肪族炭化水素基であり、＊は式（６）、式（７）、および式（８）中のＮの位置を示す。
【００１７】
本発明の実施形態に係る重合体としてさらに好ましい重合体は、分子認識単位が、式（１６）、式（１７）、および式（１８）で表わされる単量体由来の繰り返し単位である重合体である。
【化１５】
2018080278.tif 000016
式（１６）、式（１７）、および式（１８）中、Ａ１はそれぞれ独立に、水素原子またはメチル基であり、Ｒ１７およびＲ２７はそれぞれ独立に、水素原子、または飽和もしくは不飽和の脂肪族炭化水素基であり、Ｒ１８〜Ｒ２６はそれぞれ独立に、水素原子、ニトロ基、ハロゲン原子、または飽和もしくは不飽和の脂肪族炭化水素基である。
【００１８】
本発明の実施形態に係る重合体の８ＯＨｄＧに対する感度に鑑みて、本発明の実施形態に係る重合体の製造方法において、分子認識単位を構成する単量体と低認識単位を構成する単量体とのモル比は、１：１００〜７０：３０が好ましく、１０：９０〜５０：５０であることがさらに好ましい。
【００１９】
本発明の実施形態に係る重合体は、分子認識単位として、式（６）および式（７）で表わされる単量体由来の繰り返し単位を有すること、または式（６）、式（７）および式（８）で表わされる単量体由来の繰り返し単位を有することで、高い感度と特異性の両立が実現できる。詳細は不明であるが、それぞれの分子認識単位が互いに補完しあい、８ＯＨｄＧの異なる部分と水素結合ができるようになるためと予想している。本発明の実施形態に係る重合体中の、式（６）で表わされる単量体由来の繰り返し単位と式（７）で表わされる単量体由来の繰り返し単位のモル比がモル比で１：１〜１：４が好ましく、１：２に近づくほど、本発明の実施形態に係る重合体の８ＯＨｄＧに対する感度も特異性も上昇する。また、式（６）で表わされる単量体由来の繰り返し単位、式（７）で表わされる単量体由来の繰り返し単位、および式（８）で表わされる単量体由来の繰り返し単位のモル比が１：１：１〜１：４：１が好ましく、１：１：１に近づくほど、本発明の実施形態に係る重合体の８ＯＨｄＧに対する感度も特異性も上昇する。
【００２０】
本発明の実施形態に係る重合体は、上記に示した重合性官能基を１つ有する単量体が鎖状に重合した重合体でもよく、重合性官能基を２以上有する多官能性単量体を重合することにより得られる架橋した重合体でもよい。架橋を有することで、本発明の実施形態に係る重合体は８ＯＨｄＧ対する特異性が向上する。これは、分子認識部の構造が固定されることで一度捕捉した８ＯＨｄＧの脱離を抑制することが理由と考えられるが、詳細は不明である。多官能性単量体はいかなる構造を有していてもよいが、２官能性単量体であることが好ましく、式（１９）で表わされる単量体であることがより好ましい。多官能性単量体が式（１９）で表わされる単量体である場合、式（１９）で表わされる単量体由来の繰り返し単位が分子認識単位となるため、本発明の実施形態に係る重合体の８ＯＨｄＧ対する特異性がより向上する。
【化１６】
2018080278.tif 000017
式（１９）中、Ａ１はそれぞれ独立に、水素原子またはメチル基であり、Ｒ２８は、炭素数１から２０の直鎖または環状の脂肪族炭化水素基、置換基を有してもよい芳香族炭化水素基、または置換基を有してもよいヘテロ芳香族炭化水素基である。
【００２１】
また、式（１９）で表わされる単量体が、特に構造式（１９−１）または式（１９−２）で表わされる単量体であると、本発明の実施形態に係る重合体の８ＯＨｄＧ対する特異性がより向上する。
【化１７】
2018080278.tif 000018
式（１９−１）および式（１９−２）中、Ａ１はそれぞれ独立に、水素原子またはメチル基であり、Ａ４はそれぞれ独立に、窒素原子または水素原子が一つ結合した炭素原子であり、Ｒ２９およびＲ３０はそれぞれ独立に、炭素数１から２０のアルコキシ基、アルコキシカルボニル基、アルキルカルボニルオキシ基、アルキルアミノカルボニル基、アルキルカルボニルアミノ基、アルキルチオ基、またはアルキルスルホニル基である。これらの基は、それぞれ炭素数１から２０のアルキル基が、酸素原子、オキシカルボニル基、カルボニルオキシ基、アミノカルボニル基、カルボニルアミノ基、硫黄原子、またはスルホニル基を介して結合する基を表す。
【００２２】
本発明の実施形態に係る重合体の製造方法において、式（１９）で表わされる単量体とそれ以外の単量体のモル比は、１：９９〜５０：５０が好ましい。本発明の実施形態に係る重合体の重合率を上げ、より高い８ＯＨｄＧ対する特異性を得るためには、本発明の実施形態に係る重合体の製造方法における式（１９）で表わされる単量体とそれ以外の単量体のモル比は、１：９０〜３０：７０であることがより好ましい。
【００２３】
本発明の実施形態において、上記式中の炭化水素基とは、少なくとも炭素原子、水素原子を含有することができる化学構造を意味し、ニトロ基、ハロゲン原子等で置換されていてもよい。脂肪族炭化水素基と限定している場合には非環式または環式の、非芳香族性の炭化水素基を意味し、直鎖または枝分かれ構造があっても良い。本発明の実施形態における脂肪族炭化水素基とは、少なくとも一つ以上の炭素原子により、直鎖、分枝、または脂環式構造を形成し、且つ炭素原子の結合が、飽和結合でも不飽和結合のどちらでも良い基を意味し、例えば、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、シクロアルキニル基、アルキレン基、アルケニレン基、アルキニレン基、シクロアルキレン基、シクロアルケニレン基、シクロアルキニレン基等が挙げられる。
【００２４】
なお炭化水素基は、脂肪族炭化水素基と特に記載のないものに関しては、芳香族炭化水素基も含むものとする。また、芳香族炭化水素基と限定している場合には、上記脂肪族炭化水素基を含まない。本発明の実施形態における、芳香族炭化水素基としては、例えばフェニル基、ナフチル基、アントラセニル基、フェナントレニル基、ビフェニル基およびこれらに対応する２価の基などが具体例として挙げられる。また、ヘテロ芳香族炭化水素基としては、ピリジル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、ピリジニル基、チエニル基、チアゾリル基およびこれらの基に対応する２価の基などが具体例として挙げられる。
【００２５】
本発明の実施形態の重合体の製造方法において、重合反応はいかなる反応であってもよく、限定されるものではない。重合反応に用いる重合開始剤は光重合開始剤であっても、熱重合開始剤であってもよいが、熱重合開始剤においては、反応開始時の重合温度が重合体のガラス転移温度以上となる場合があるため、光重合開始剤が好ましい。
【００２６】
重合開始剤としては、具体的には、２，２'−アゾビス（イソブチロニトリル）、２，２'−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）、２，２'−アゾビス（２−メチルブチロニトリル）、４，４'−アゾビス（４−シアノ吉草酸）、２，２'−アゾビス（２−メチルプロピオンアミジン）二塩酸塩、２，２'−アゾビス［２−（２−イミダゾリン−２−イル）プロパン］二塩酸塩、過酸化ベンゾイル、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシド、クメンヒドロペルオキシド、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシド、２，２'−アゾビス（２−メチルプロピオン酸）ジメチル、ジクミルペルオキシド、アセトフェノン、ｐ−アニシル、ベンジル、ベンゾイン、ベンゾフェノン、４，４'−ビス（ジエチルアミノ）ベンゾフェノン、４，４'−ビス（ジメチルアミノ）ベンゾフェノン、ベンゾインメチルエーテル、ベンゾインイソプロピルエーテル、ベンゾインイソブチルエーテル、ベンゾインエチルエーテル、４−ベンゾイル安息香酸、２，２'−ビス（２−クロロフェニル）−４，４'，５，５'−テトラフェニル−１，２'−ビイミダゾール、２−ベンゾイル安息香酸メチル、２−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−４，６−ビス（トリクロロメチル）−１，３，５−トリアジン、２−ベンジル−２−（ジメチルアミノ）−４'−モルホリノブチロフェノン、４，４'−ジクロロベンゾフェノン、２，２−ジエトキシアセトフェノン、２，２−ジメトキシ−２−フェニルアセトフェノン、２，４−ジエチルチオキサンテン−９−オン、２，２−ジエトキシアセトフェノン、２，２−ジメトキシ−２−フェニルアセトフェノン、ジフェニル（２，４，６−トリメチルベンゾイル）ホスフィンオキシド、１，４−ジベンゾイルベンゼン、２−エチルアントラキノン、１−ヒドロキシシクロヘキシルフェニルケトン、２−ヒドロキシ−２−メチルプロピオフェノン、フェニル（２，４，６−トリメチルベンゾイル）ホスフィン酸リチウム、２−メチル−４'−（メチルチオ）−２−モルホリノプロピオフェノンン、２−イソニトロソプロピオフェノン、２−フェニル−２−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）アセトフェノンン、フェニルビス（２，４，６−トリメチルベンゾイル）ホスフィンオキシドなどが挙げられるが、本発明の実施形態における開始剤は上記化合物に限定されるものではない。
【００２７】
本発明の実施形態の重合体の製造方法において、重合反応は単量体、鋳型物質、および重合開始剤が相溶する場合には、無溶媒で行うことが好ましい。また、単量体、鋳型物質および重合開始剤が相溶せずに反応ができない場合には、反応溶媒を使用することが好ましい。したがって反応溶媒は、単量体、鋳型物質および重合開始剤を溶解または分散し、反応を阻害しないものであればよい。反応溶媒としては、具体的には、トルエン、ヘプタン、ヘキサン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、イソプロピルアルコール、エタノール、メタノール、水およびこれらの混合溶媒などが挙げられる。反応溶媒として水を用いる場合、ＮａＣｌ等の塩、緩衝材、酸、塩基などの水溶液であっても良く、これらを用いて水溶液のｐＨ調整を行うことができる。
【００２８】
重合反応終了後に、重合体に取り込まれている鋳型物質を除去する溶媒（以下、「洗浄用溶媒」ともいう。）は、樹脂を溶解することなく、鋳型物質や残存した単量体、重合開始剤等を溶解除去できるものであれば良い。洗浄用溶媒としては、具体的には、トルエン、ヘプタン、ヘキサン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、イソプロピルアルコール、エタノール、メタノール、水およびこれらの混合溶剤が挙げられる。洗浄用溶媒として水を用いる場合、ＮａＣｌ等の塩、緩衝材、酸、塩基などの水溶液であっても良く、これらを用いて水溶液のｐＨ調整を行うことができる。
【００２９】
また、本発明の実施形態の重合体の製造方法は、いわゆるランダム重合であってもブロック重合であっても良い。コスト面に鑑みるとランダム重合が好ましい。
【００３０】
本発明の実施形態の重合体の製造方法に用いる単量体の好ましい具体例を以下に示すが、下記の具体例に限定されるものではない。式（６−１）〜式（８−２）で表わされる構造中のＡ２は９−１−Ｘ〜１５−１２−Ｘで表される構造であり、＊部分は式（６−１）〜式（８−２）で表わされる構造中のＮとの結合位置を示す。なお、具体例として示される化合物の番号は、Ａ２の番号に対応する。主鎖部が式（６−１）で表わされる構造である場合は、Ａ２を示す番号のＸが１であるものを化合物番号とし、主鎖部が式（６−２）で表わされる構造である場合は、Ａ２を示す番号のＸが２であるものを化合物番号とする。また、主鎖部が式（７−１）で表わされる構造である場合は、Ａ２を示す番号のＸが３であるものを化合物番号とし、主鎖部が式（７−２）で表わされる構造である場合は、Ａ２を示す番号のＸが４であるものを化合物番号とする。同様に、主鎖部が式（８−１）で表わされる構造である場合は、Ａ２を示す番号のＸが５であるものを化合物番号とし、主鎖部が式（８−２）で表わされる構造である場合は、Ａ２を示す番号のＸが６であるものを化合物番号とする。たとえば化合物９−１−１は、主鎖部が式（６−１）で表わされる構造を有し、Ａ２が９−１−Ｘで表わされる分子認識部である化合物である。
【化１８】
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【化１９】
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【化２０】
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【化２１】
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【化２２】
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【化２３】
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【化２４】
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【００３１】
本発明の実施形態の重合体の製造方法に用いる、多官能性単量体の好ましい具体例を以下に示すが、下記の具体例に限定されるものではない。
【化２５】
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【化２６】
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【化２７】
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【化２８】
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【化２９】
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【化３０】
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【化３１】
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【化３２】
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【化３３】
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【実施例】
【００３２】
以下に、実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明はその要旨を超えない限り、これらの実施例によって限定されるものではない。
【００３３】
＜合成例＞
＜重合体（１）の合成＞
モノマーとしてアクリル酸（キシダ化学株式会社製）、重合開始剤として１−ヒドロキシシクロヘキシルフェニルケトン（東京化成株式会社製）、鋳型物質として式（２−１）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）を１０：１：１０のモル比で混合した。その後、窒素気流下でハンディキュアラブ（セン特殊光源株式会社製）により８時間、紫外線照射を行うことにより、重合反応を行った。その後、得られた重合体をメタノール、イオン交換水中で、それぞれ室温で８時間ずつ撹拌洗浄を行った。洗浄溶媒を減圧濾過により取り除き、ついで真空乾燥を行うことで目的とする重合体（１）を得た。
【００３４】
＜重合体（２）の合成＞
モノマーをアクリルアミド（キシダ化学株式会社製）に代えた以外は重合体（１）の合成と同様な方法で目的とする重合体（２）を得た。
【００３５】
＜重合体（３）の合成＞
モノマーとしてアクリル酸（キシダ化学株式会社製）、ビスコート＃８０２（大阪有機化学株式会社製）とし、重合開始剤として１−ヒドロキシシクロヘキシルフェニルケトン（東京化成株式会社製）、鋳型物質として式（２−１）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）を１０：１００：１：１０のモル比で混合した。その後、窒素気流下でハンディキュアラブ（セン特殊光源株式会社製）により８時間、紫外線照射を行うことにより、重合反応を行った。その後、得られた重合体をクロロホルム、メタノール、イオン交換水中で、それぞれ室温で８時間ずつ撹拌洗浄を行った。洗浄溶媒を減圧濾過により取り除き、ついで真空乾燥を行うことで目的とする重合体（３）を得た。
【００３６】
＜重合体（４）の合成＞
モノマーをアクリルアミド（キシダ化学株式会社製）に代えた以外は重合体（３）の合成と同様な方法で目的とする重合体（４）を得た。
【００３７】
＜重合体（５）の合成＞
モノマーを式（１３−６−１）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）、式（１５−６−１）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）、ビスコート＃８０２（大阪有機化学株式会社製）を、重合開始剤として１−ヒドロキシシクロヘキシルフェニルケトン（東京化成株式会社製）を、鋳型物質として式（２−１）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とし、それぞれのモノマー、重合開始剤および鋳型物質を２０：１０：１０：１００：１：１０のモル比で混合した。その後、窒素気流下でハンディキュアラブ（セン特殊光源株式会社製）により８時間、紫外線照射を行うことにより、重合反応を行った。その後、得られた重合体をクロロホルム、メタノール、イオン交換水中で、それぞれ室温で８時間ずつ撹拌洗浄を行った。洗浄溶媒を減圧濾過により取り除き、ついで真空乾燥を行うことで目的とする重合体（５）を得た。
【００３８】
＜重合体（６）の合成＞
モノマーを式（１３−６−１）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）、式（１４−１−１）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）、式（１５−６−１）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）、ビスコート＃８０２（大阪有機化学株式会社製）とし、それぞれのモノマー、重合開始剤および鋳型物質を１０：１０：１０：１０：１００：１：１０のモル比で用いた以外は重合体（５）の合成と同様な方法で目的とする重合体（６）を得た。
【００３９】
＜重合体（７）の合成＞
モノマーを式（１９−１−８）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（２）の合成と同様な方法で目的とする重合体（７）を得た。
【００４０】
＜重合体（８）の合成＞
鋳型物質を式（２−６）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（５）の合成と同様な方法で目的とする重合体（８）を得る。
【００４１】
＜重合体（９）の合成＞
鋳型物質を式（２−６）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（６）の合成と同様な方法で目的とする重合体（９）を得る。
【００４２】
＜重合体（１０）の合成＞
鋳型物質を式（２−６）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（７）の合成と同様な方法で目的とする重合体（１０）を得る。
【００４３】
＜重合体（１１）の合成＞
鋳型物質を式（２−１０）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（５）の合成と同様な方法で目的とする重合体（１１）を得た。
【００４４】
＜重合体（１２）の合成＞
鋳型物質を式（２−１０）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（６）の合成と同様な方法で目的とする重合体（１２）を得る。
【００４５】
＜重合体（１３）の合成＞
鋳型物質を式（２−１０）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（７）の合成と同様な方法で目的とする重合体（１３）を得る。
【００４６】
＜重合体（１４）の合成＞
鋳型物質を式（１−１）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（５）の合成と同様な方法で目的とする重合体（１４）を得る。
【００４７】
＜重合体（１５）の合成＞
鋳型物質を式（１−１）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（６）の合成と同様な方法で目的とする重合体（１５）を得る。
【００４８】
＜重合体（１６）の合成＞
鋳型物質を式（１−１）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（７）の合成と同様な方法で目的とする重合体（１６）を得る。
【００４９】
＜重合体（１７）の合成＞
鋳型物質を式（１−７）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（５）の合成と同様な方法で目的とする重合体（１７）を得る。
【００５０】
＜重合体（１８）の合成＞
鋳型物質を式（１−７）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（６）の合成と同様な方法で目的とする重合体（１８）を得る。
【００５１】
＜重合体（１９）の合成＞
鋳型物質を式（１−７）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（７）の合成と同様な方法で目的とする重合体（１９）を得る。
【００５２】
＜重合体（２０）の合成＞
鋳型物質を式（１−１１）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（５）の合成と同様な方法で目的とする重合体（２０）を得る。
【００５３】
＜重合体（２１）の合成＞
鋳型物質を式（１−１１）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（６）の合成と同様な方法で目的とする重合体（２１）を得る。
【００５４】
＜重合体（２２）の合成＞
鋳型物質を式（１−１１）で表わされる化合物（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（７）の合成と同様な方法で目的とする重合体（２２）を得る。
【００５５】
＜重合体（２３）の合成＞
鋳型物質を８ＯＨｄＧ（東京化成株式会社製）とした以外は重合体（１）の合成と同様な方法で目的とする重合体（２３）を得た。
【００５６】
＜重合体（２４）の合成＞
鋳型物質を８ＯＨｄＧ（東京化成株式会社製）とした以外は重合体（２）の合成と同様な方法で目的とする重合体（２４）を得た。
【００５７】
＜重合体（２５）の合成＞
鋳型物質を下記化合物２−４０（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（１）の合成と同様な方法で目的とする重合体（２５）を得た。
【００５８】
＜重合体（２６）の合成＞
鋳型物質を下記化合物２−４０（三友化学株式会社製）とした以外は重合体（２）の合成と同様な方法で目的とする重合体（２６）を得た。
【００５９】
＜重合体（２７）の合成＞
モノマーをスチレン（キシダ化学株式会社製）に代えた以外は重合体（１）の合成と同様な方法で目的とする重合体（２７）を得た。
【化３４】
2018080278.tif 000035
【００６０】
以下に、本発明の実施例における重合体の８ＯＨｄＧに対する感度の算出法を示す。なお測定は、Ｌａｎｂｄａ  Ｂｉｏ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社製）を用いた。
（８ＯＨｄＧ感度の算出）
４０μｌの８ＯＨｄＧ（和光純薬社製）のメタノール溶液（１０μＭ）の３００ｎｍの吸光度（ａｂｓｒ）を測定した。
上記で製造した重合体（１）〜（２６）の各４ｍｇに、１０μＭの８ＯＨｄＧ（和光純薬社製）のヘキサン溶液４０μｌを投入し、２０℃で２４時間撹拌を行った。１００００ｒｐｍで遠心分離し抽出した上澄み成分の３００ｎｍの吸光度（ａｂｓｋ）を測定し、１．０−（ａｂｓｋ／ａｂｓｒ）を算出し、感度とした。
感度の評価としては、本発明の実施例においては下記の基準とし、Ａ〜Ｃまでを許容レベル、Ｄが許容できないレベルとした。
Ａ：感度が０．９０以上
Ｂ：感度が０．７５以上０．９０未満
Ｃ：感度が０．５０以上０．７５未満
Ｄ：感度が０．５０未満
【００６１】
本発明の実施例で得られた重合体の感度および評価結果を表１に記載する。
【表１】
2018080278.tif 000036
【００６２】
以下に、本発明の実施例における重合体の８ＯＨｄＧに対する特異性の算出法を示す。なお測定は、Ｌａｎｂｄａ  Ｂｉｏ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社製）を用いた。
（特異性の算出）８ＯＨｄＧを尿酸（キシダ化学社製）に代えた以外は、８ＯＨｄＧの感度（８ＯＨｄＧ感度）の算出と同様な方法で本発明の実施形態における重合体の尿酸に対する感度（尿酸感度）を測定し、８ＯＨｄＧ感度／尿酸感度を算出し、特異性とした。
特異性の評価としては、本発明の実施例においては下記の基準とし、Ａ〜Ｃまでを許容レベル、Ｄが許容できないレベルとした。
Ａ：特異性が１０．０以上
Ｂ：特異性が５．０以上１０．０未満
Ｃ：特異性が１．１以上５．０未満
Ｄ：特異性が１．１未満
【００６３】
【表２】
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【産業上の利用可能性】
【００６４】
本発明の製造方法で製造された重合体は、８ＯＨｄＧの検知により、生体内における酸化ストレスの特異的な検知を高感度かつ比較的に安価、簡便に行うことができる。