(57)【要約】【課題】アニオン性ポリマーとペプチドを含む複合粒子の製造に好適な新規の技術を提供する。【解決手段】ｐＨが５以下の水系溶媒中でアニオン性ポリマーとペプチドとを混合する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｐＨが５以下の水系溶媒中でアニオン性ポリマーとペプチドとを混合することを特徴とする、アニオン性ポリマーとペプチドを含む複合粒子の製造方法。
【請求項２】
前記アニオン性ポリマーがヒアルロナンであることを特徴とする、請求項１に記載の製造方法。
【請求項３】
前記ペプチドが酸性及び／又は中性のアミノ酸残基を含むペプチドであることを特徴とする、請求項１又は２に記載の製造方法。
【請求項４】
前記ペプチドが水溶性コラーゲン、オリゴペプチド−２０及びポリリジンからなる群から選ばれる１種又は２種以上であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の製造方法。
【請求項５】
前記ペプチドが水溶性コラーゲンであり、前記水系溶媒のｐＨが３以下であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の製造方法。
【請求項６】
前記ペプチドがオリゴペプチド−２０であり、前記水系溶媒のｐＨが３．５以下であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の製造方法。
【請求項７】
前記ペプチドがポリリジンであり、前記水系溶媒のｐＨが４．４以下であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の製造方法。
【請求項８】
前記アニオン性ポリマーの水溶液と、前記ペプチドの水溶液と、を別途調製し、これら水溶液を混合することを特徴とする、請求項１〜７の何れか一項に記載の製造方法。
【請求項９】
請求項１〜８の何れか一項に記載の製造方法により前記複合粒子を製造した後、前記水系溶媒と他の成分を混合する工程を含み、混合後の組成物と前記水系溶媒のｐＨが異なっていてもよいことを特徴とする、複合粒子含有組成物の製造方法。
【請求項１０】
アニオン性ポリマーとペプチドを含む複合粒子であって、前記ペプチドが水溶性コラーゲン、オリゴペプチド−２０及びポリリジンからなる群から選ばれる１種又は２種以上であり、粒子径が５００ｎｍ以下であることを特徴とする、複合粒子。
【請求項１１】
前記アニオン性ポリマーがヒアルロナンであることを特徴とする、請求項１０に記載の複合粒子。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚外用剤の原料として利用され得るナノ粒子、及びそのナノ粒子の製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
皮膚外用剤の有効成分を角質細胞層内に送達するためには、従来以下のような点が問題とされてきた。
皮膚の角層細胞層は、外界からの異物の侵入を防ぐためにバリア機能を有しており、有効成分が角層細胞層内に到達しにくい。特に、有効成分が高分子化合物である場合には、高分子化合物が低浸透性であるため角層細胞層内に浸透しにくく、有効成分が皮膚表面で残留してしまう。
【０００３】
このような状況において、有効成分を角層細胞層内に送達するためのキャリアとして、ナノ粒子の開発が進められてきた。
特許文献１には、核酸、オリゴ核酸、又はその誘導体；カチオン性ポリマー又はカチオン性脂質若しくはそれを含む集合体；及びアニオン性ポリマーを含む複合体の凍結乾燥体が記載されている。
【０００４】
特許文献２には、直径１μｍ未満の活性成分の投与用のナノ粒子を得る方法であって、ａ）ヒアルロナン塩の水溶液を調製し、ｂ）カチオン性ポリマーの水溶液を調製し、ｃ）ポリアニオン塩を前記ヒアルロナン塩溶液に加え、ｄ）前記ｂ）およびｃ）において得られた溶液を撹拌混合し、自然発生的にナノ粒子を得ることを含んでおり、前記ａ）、ｂ）またはｃ）において得られた溶液のうち１つに、あるいは前記ｄ）において得られたナノ粒子の懸濁液に、前記活性成分を溶解させ、ナノ粒子に吸着させる、方法が記載されている。
【０００５】
特許文献３には、生物学的に活性な分子を放出するためのナノ粒子を含んでなる系であって、前記ナノ粒子が、ａ）少なくとも５０重量％のキトサンまたはキトサン誘導体、およびｂ）５０重量％未満のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）またはＰＥＧ誘導体を含んでなる共役物を含んでおり、前記料成分ａ）とｂ）とが、キトサンアミノ基を介して共有結合しており、前記ナノ粒子が架橋剤により架橋していることを特徴とする系が記載されている。
【０００６】
特許文献４には、平均サイズ１マイクロメートル未満のナノ粒子を含み、ナノ粒子がａ）ヒアルロナンまたはその塩；およびｂ）キトサンまたはその誘導体、を含む生物活性分子の放出のための系であって、キトサンまたはその誘導体の分子量が９０ｋＤａ未満であることを特徴とする系が記載されている。また、生物活性分子として核酸等を含む系、網状化剤としてトリポリリン酸塩を含む系が記載されている。
【０００７】
特許文献５には、ヒアルロナンとキトサンを含む二元複合体と、さらにアニオン性ポリマーを含む三元複合体が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開第２００７／１３２８７３号パンフレット
【特許文献２】特表２００７−５２０４２４号公報
【特許文献３】特表２００８−５３３１０８号公報
【特許文献４】特表２００９−５３７６０４号公報
【特許文献５】特開２０１４−１１４２７２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
特許文献５に記載されているように、ヒアルロナンとキトサンは中性付近（ｐＨ６．５）において容易に複合粒子を形成する。
本発明者らはアニオン性ポリマーと複合粒子を形成し得るポリマーを種々検討する過程において、このような中性条件下では、ヒアルロナンとペプチドは粒子径の小さい複合粒子を形成しにくいことを発見した。
そこで、本発明の解決しようとする課題は、アニオン性ポリマーとペプチドを含む複合粒子の製造に好適な新規の技術を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者は鋭意研究努力の結果、ヒアルロナンとペプチドをｐＨ５以下の酸性領域にある水系溶媒中で混合することにより、微小な複合粒子を製造することができることを見出した。
【００１１】
すなわち、上記課題を解決する本発明は、ｐＨが５以下の水系溶媒中でアニオン性ポリマーとペプチドとを混合することを特徴とする、アニオン性ポリマーとペプチドを含む複合粒子の製造方法である。
本発明の製造方法によれば、比較的粒子径の小さいアニオン性ポリマーとペプチドを含む複合粒子を製造することができる。
【００１２】
本発明の好ましい形態では、アニオン性ポリマーがヒアルロナンである。
本発明はヒアルロナンを含む複合粒子の製造に応用することが好ましい。
【００１３】
アニオン性ポリマーと、酸性及び／又は中性のアミノ酸残基を含むペプチドとは、中性付近において複合粒子を形成することが困難である。
そのため、本発明は、酸性及び／又は中性のアミノ酸残基を含むペプチドに適用することが好ましい。
【００１４】
本発明の好ましい形態では、前記ペプチドが水溶性コラーゲン、オリゴペプチド−２０及びポリリジンからなる群から選ばれる１種又は２種以上である。
本発明はこれら人体に有用な作用を有するペプチドを含む複合粒子の製造に応用することが好ましい。
【００１５】
本発明の好ましい形態では、前記ペプチドが水溶性コラーゲンであるときに水系溶媒のｐＨを３以下とする。
このような形態とすることで、粒子径の小さな複合粒子を製造することができる。
【００１６】
本発明の好ましい形態では、前記ペプチドがオリゴペプチド−２０であるときに前記水系溶媒のｐＨを３．５以下とする。
このような形態とすることで、粒子径の小さな複合粒子を製造することができる。
【００１７】
本発明の好ましい形態では、前記ペプチドがポリリジンであるときに、前記水系溶媒のｐＨが４．４以下とする。
このような形態とすることで、粒子径の小さな複合粒子を製造することができる。
【００１８】
本発明の好ましい形態では、前記アニオン性ポリマーの水溶液と、前記ペプチドの水溶液と、を別途調製し、これら水溶液を混合する。
このようにアニオン性ポリマーの水溶液と、ペプチドの水溶液とを別途調製する形態とすることで、複合粒子の凝集を防ぐことができる。
【００１９】
本発明は上述の製造方法により製造した複合粒子を含む複合粒子含有組成物の製造方法にも関する。
すなわち、本発明の複合粒子含有組成物の製造方法は、上述の製造方法により複合粒子を製造した後、水系溶媒と他の成分を混合する工程を含み、混合後の組成物と前記水系溶媒のｐＨが異なっていてもよいことを特徴とする。
上述の製造方法により製造された複合粒子は、その後ｐＨが変動しても消失することはない。そのため、本発明によれば複合粒子含有組成物を容易に製造することができる。
【００２０】
また、本発明は、アニオン性ポリマーとペプチドを含む複合粒子であって、前記ペプチドが水溶性コラーゲン、オリゴペプチド−２０及びポリリジンからなる群から選ばれる１種又は２種以上であり、粒子径が５００ｎｍ以下であることを特徴とする、複合粒子にも関する。
本発明の複合粒子はアニオン性ポリマーとペプチドを皮膚内部に浸透させる目的で用いることができる。
【００２１】
本発明の好ましい形態では、前記アニオン性ポリマーがヒアルロナンである。
本発明の複合粒子によればヒアルロナンを皮膚内部に導入することができる。
【発明の効果】
【００２２】
本発明の製造方法によれば、アニオン性ポリマーとペプチドを含む、比較的粒子径の小さな複合粒子を提供することができる。
また、本発明の複合粒子によれば、皮膚内部にアニオン性ポリマーとペプチドを浸透させることができる。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
本発明の製造方法は、アニオン性ポリマーとペプチドをｐＨ５以下の水系溶媒中で混合することを技術的特徴とする。以下、発明の要素についてそれぞれ詳述する。
【００２４】
本発明に用いることができるアニオン性ポリマーとしては、人体に対して害のない限り制限されることはないが、好適にはポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸等のアニオン性ポリアミノ酸、寒天、ヒアルロナン、コンドロイチン硫酸、デキストラン硫酸、ヘパラン硫酸、デルマタン硫酸、フコイダン、ケラタン硫酸、ヘパリン、カラギナン、サクシノグルカン、アラビアゴム、キサンタンガム、アルギン酸、ペクチン、カルボキシメチルセルロース等のアニオン性多糖類、ポリアクリル酸、並びに、これらの塩等を挙げることができる。特に、ヒアルロナン、ポリグルタミン酸及びこれらの塩を好適に例示することができる。
アニオン性ポリマーは、市販品を用いることが可能である。
【００２５】
ヒアルロナン塩及びポリグルタミン酸塩を形成する塩としては、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、マグネシウム、塩基性アミノ酸塩などが挙げられる。
【００２６】
本発明で用いられるアニオン性ポリマーの分子量は制限されないが、好ましくは１００〜１０００００ｋＤａ、より好ましくは２００〜５００００ｋＤａである。
【００２７】
より具体的には、アニオン性ポリマーとして、ヒアルロナン又はその塩を用いる場合には、分子量が、好ましくは１００〜２０００ｋＤａ、さらに好ましくは２００〜１５００ｋＤａのものを用いることができる。
【００２８】
また、アニオン性ポリマーとして、ポリグルタミン酸又はその塩を用いる場合には、分子量が、好ましくは５００〜３００００ｋＤａ、より好ましくは１０００〜２００００ｋＤａ、さらに好ましくは１５００〜１５０００ｋＤａのものを用いることができる。
【００２９】
本発明に用いることができるペプチドとしては、人体に対して害のない限り制限されることはなく、同一アミノ酸残基からなるペプチドであっても、複数種のアミノ酸残基からなるペプチドであってもよい。
ペプチドは天然物であっても合成物でもよく、また、天然物又は合成物であるタンパク質を分解することで得られたペプチドを用いてもよい。また化学的な修飾が施されたペプチドを用いることもできる。
【００３０】
具体的には、水溶性コラーゲン、オリゴペプチド−２４（ＥＧＦ様合成ペプチド、１３個のアミノ酸配列、分子量１２７１）、アセチルデカペプチドー３（ＦＧＦ様合成ペプチド）、オリゴペプチド−３４（ＴＧＦβ様合成ペプチド、１３個のアミノ酸配列、分子量１４６８）、オリゴペプチド−２０（ＩＧＦ様合成ペプチド、１２個のアミノ酸配列、分子量１４７６）、ポリリジン、ポリアルギニンなどを例示することができ、特に水溶性コラーゲン、オリゴペプチド−２０及びポリアルギニンを好適に例示できる。
【００３１】
本発明の製造方法においては、上述したアニオン性ポリマーとペプチドを水系溶媒中で混合する。
ここで、水系溶媒とは、水（例えば、精製水、イオン交換水、水道水等）または水溶性成分の水溶液のことをいう。水溶性成分としては、本発明の効果を損なわないものであれば特に制限無く用いることができ、例えば、通常化粧料や医薬部外品等に配合される粉末類、保湿剤、増粘剤、防腐剤等の添加物が挙げられる。なお、高融点の水溶性成分を配合する場合は、予め加熱して水に均一溶解させておくことができるが、水溶性成分が溶解した後は水溶液を室温程度に戻してから複合粒子の製造に用いることが好ましい。
【００３２】
水系溶媒のｐＨの上限は５以下であり、好ましくは４．５以下であり、より好ましくは４．２以下である。
また、水系溶媒のｐＨの下限は特に制限されないが、好ましくは１以上であり、より好ましくは２以上であり、より好ましくは２．５以上である。
【００３３】
アニオン性ポリマーと組み合わせるペプチドとして水溶性コラーゲンを用いる場合には、水系溶媒のｐＨは好ましくは４以下、より好ましくは３．５以下、さらに好ましくは３以下とする。
この場合のｐＨの下限は特に制限されないが、好ましくは２以上、より好ましくは２．５以上、さらに好ましくは２．７以上とすることができる。
【００３４】
また、アニオン性ポリマーと組み合わせるペプチドとしてオリゴペプチド−２０を用いる場合には、水系溶媒のｐＨは好ましくは４．５以下、より好ましくは４以下、さらに好ましくは３．５以下とする。
この場合のｐＨの下限は特に制限されないが、好ましくは２以上、より好ましくは２．５以上、さらに好ましくは２．７以上、より好ましくは２．７５以上とすることができる。
【００３５】
さらに、アニオン性ポリマーと組み合わせるペプチドとしてポリリジンを用いる場合には、水系溶媒のｐＨは好ましくは４．７以下、より好ましくは４．４以下、さらに好ましくは４．２以下とする。
この場合のｐＨの下限は特に制限されないが、好ましくは２以上、より好ましくは２．５以上、さらに好ましくは３以上、より好ましくは３．５以上とすることができる。
【００３６】
水系溶媒中でアニオン性ポリマーとペプチドとを混合する際の形態は特に限定されない。
本発明においては、予めアニオン性ポリマー水溶液と、ペプチド水溶液をそれぞれ別途調製し、これらを混合する実施の形態とすることが好ましい。
このように別途調製した各ポリマー水溶液を混合する形態とすることによって、複合粒子が凝集することを防ぐことができる。
予め調製するアニオン性ポリマー水溶液とペプチド水溶液のそれぞれのｐＨは特に限定されず、混合後の水系溶媒のｐＨが上記範囲となればよい。
【００３７】
混合後の水系溶媒のｐＨを調製するための工程を特に設けず、予め目的のｐＨに調製しておいたアニオン性ポリマー水溶液とペプチド水溶液を混合する形態としてもよい。
【００３８】
また、アニオン性ポリマー水溶液とペプチド水溶液を混合した後に、酸性の水溶液を加えることで、水系溶媒のｐＨを調整する実施の形態とすることが、製造工程を簡素化する観点から好ましい。
【００３９】
水系溶媒のｐＨを調整するための酸性水溶液は特に限定されず、クエン酸、リン酸、リンゴ酸、乳酸などの有機酸の水溶液を好ましく例示することができる。
【００４０】
アニオン性ポリマー水溶液を予め調製する場合には、当該水溶液におけるアニオン性ポリマーの濃度は、好ましくは１．７ｍＭ以下、より好ましくは１ｍＭ以下、さらに好ましくは０．９ｍＭ以下であることが好ましい。
このような濃度に調節しておくことにより、後の工程でペプチドと混合した際に、粒子の不要な凝集を回避することができる。
【００４１】
ペプチド水溶液を予め調製する場合には、当該水溶液における各ポリマーの濃度は、好ましくは５．１ｍＭ以下、より好ましくは３ｍＭ以下、さらに好ましくは２．７ｍＭ以下である。
このような濃度に調節しておくことにより、後の工程でアニオン性ポリマー水溶液と混合した際に、粒子の不要な凝集を回避することができる。
なお、ここでいうペプチドのモル濃度は、構成するアミノ酸のそれぞれの分子量を構成比で乗じたものを1モルとし、算出する値である。
【００４２】
混合後の溶液に対するアニオン性ポリマーの濃度は、好ましくは０．９ｍＭ以下、より好ましくは０．５ｍＭ以下である。
混合後の溶液に対するペプチドの濃度は、好ましくは２．７ｍＭ以下、より好ましくは１．５ｍＭ以下である。
【００４３】
混合の方法としては、各溶液を一度に混合する方法、一つの溶液に、他の溶液を滴下する方法などが挙げられる。いずれも、溶液を撹拌しながら混合を行うことが、凝集を回避する観点から好ましい。
【００４４】
本発明の製造方法によれば、中性付近の水系溶媒中でアニオン性ポリマーとペプチドを混合することで得られる複合粒子と同程度か、ペプチドの種類によっては、これよりも粒子径の小さな複合粒子を製造することができる。
【００４５】
そして、本発明はアニオン性ポリマーとペプチドを含む複合粒子にも関する。
皮膚内部へ複合粒子を浸透させる観点から、粒子径は５００ｎｍ以下、より好ましくは４００ｎｍ以下、さらに好ましくは３００ｎｍ以下とする。
なお、粒子径は粒子径分布測定装置を用いて光散乱法により測定することが可能である。
【００４６】
本発明の複合粒子に用いることができるアニオン性ポリマーとペプチドに関しては、上述した製造方法に関する事項を適用することができる。
【００４７】
本発明の複合粒子は、任意の成分と組み合わせることにより、複合粒子含有組成物とすることができる。本発明は、上述の製造方法により複合粒子を製造した後、水系溶媒と他の成分を混合する工程を含む複合粒子含有組成物の製造方法にも関する。
なお、一度形成された複合粒子はｐＨの変動により消失しない。そのため、水系溶媒と他の成分を混合した後の混合物のｐＨは水系溶媒のｐＨから変動していてもよい。
【００４８】
複合粒子含有組成物は、皮膚外用組成物の形態とすることが好ましい。皮膚外用組成物としては、医薬品、医薬部外品、化粧品の何れの形態であってもよい。
【００４９】
複合粒子と組み合わせる任意の成分としては、例えば、脂肪酸セッケン（ラウリン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム等）、ラウリル硫酸カリウム、アルキル硫酸トリエタノールアミンエーテル等のアニオン界面活性剤類、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、ラウリルアミンオキサイド等のカチオン界面活性剤類、イミダゾリン系両性界面活性剤（２−ココイル−２−イミダゾリニウムヒドロキサイド−１−カルボキシエチロキシ２ナトリウム塩等）、ベタイン系界面活性剤（アルキルベタイン、アミドベタイン、スルホベタイン等）、アシルメチルタウリン等の両性界面活性剤類、ソルビタン脂肪酸エステル類（ソルビタンモノステアレート、セスキオレイン酸ソルビタン等）、グリセリン脂肪酸類（モノステアリン酸グリセリン等）、プロピレングリコール脂肪酸エステル類（モノステアリン酸プロピレングリコール等）、硬化ヒマシ油誘導体、グリセリンアルキルエーテル、ＰＯＥソルビタン脂肪酸エステル類（ＰＯＥソルビタンモノオレエート、モノステアリン酸ポリオキエチレンソルビタン等）、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−ソルビットモノラウレート等）、ＰＯＥグリセリン脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−グリセリンモノイソステアレート等）、ＰＯＥ脂肪酸エステル類（ポリエチレングリコールモノオレート、ＰＯＥジステアレート等）、ＰＯＥアルキルエーテル類（ＰＯＥ２−オクチルドデシルエーテル等）、ＰＯＥアルキルフェニルエーテル類（ＰＯＥノニルフェニルエーテル等）、プルロニック型類、ＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル類（ＰＯＥ・ＰＯＰ２−デシルテトラデシルエーテル等）、テトロニック類、ＰＯＥヒマシ油・硬化ヒマシ油誘導体（ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ硬化ヒマシ油等）、ショ糖脂肪酸エステル、アルキルグルコシド等の非イオン界面活性剤類、ピロリドンカルボン酸ナトリウム、乳酸、乳酸ナトリウム等の保湿成分類、表面処理されていても良い、マイカ、タルク、カオリン、合成雲母、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、無水ケイ酸（シリカ）、酸化アルミニウム、硫酸バリウム等の粉体類、表面処理されていても良い、酸化コバルト、群青、紺青、酸化亜鉛の無機顔料類、表面処理されていても良い、酸化鉄二酸化チタン焼結体等の複合顔料、表面処理されていても良い、雲母チタン、魚燐箔、オキシ塩化ビスマス等のパール剤類、レーキ化されていても良い赤色２０２号、赤色２２８号、赤色２２６号、黄色４号、青色４０４号、黄色５号、赤色５０５号、赤色２３０号、赤色２２３号、橙色２０１号、赤色２１３号、黄色２０４号、黄色２０３号、青色１号、緑色２０１号、紫色２０１号、赤色２０４号等の有機色素類、ポリエチレン末、ポリメタクリル酸メチル、ナイロン粉末、オルガノポリシロキサンエラストマー等の有機粉体類、エタノール、イソプロパノール等の低級アルコール類、ビタミンＡ又はその誘導体、ビタミンＢ６塩酸塩，ビタミンＢ６トリパルミテート，ビタミンＢ６ジオクタノエート，ビタミンＢ２又はその誘導体，ビタミンＢ１２，ビタミンＢ１５又はその誘導体等のビタミンＢ類、α−トコフェロール，β−トコフェロール，γ−トコフェロール，ビタミンＥアセテート等のビタミンＥ類、ビタミンＤ類、ビタミンＨ、パントテン酸、パンテチン、ピロロキノリンキノン等のビタミン類などが例示できる。
【実施例】
【００５０】
ヒアルロナン水溶液と、ポリリジン、オリゴペプチド−２０及び水溶性コラーゲンの各ペプチド水溶液を別途調製した。なお、ヒアルロナン水溶液は８０．２μｇ／ｍＬ、ポリリジン水溶液は２４．０μｇ／ｍＬ、オリゴペプチド−２０水溶液は８８．２μｇ／ｍＬ、水溶性コラーゲン水溶液は２１．８７μｇ／ｍＬとなるように各水溶液を調製した。
【００５１】
次いで、攪拌しながらヒアルロナン水溶液に、各ペプチド水溶液を滴下することで混合溶液を調製した。この際、各ペプチド水溶液は、ヒアルロナン水溶液に対して、容積比で０．８〜１の割合で滴下した。その後、１〜３％のクエン酸水溶液を少量ずつ添加し、表１〜３に示すｐＨとなるように調整した。
【００５２】
【表１】
2018065756.tif 000002
【００５３】
【表２】
2018065756.tif 000003
【００５４】
【表３】
2018065756.tif 000004
【００５５】
このようにして調製した混合溶液をＥＬＳ−Ｚ２（大塚電子株式会社）により測定し、同溶液中に形成されたヒアルロナンとペプチドの複合粒子の粒子径を測定した。表１〜３にその結果を示す。
また、同測定結果に基づき、混合溶液において形成された複合粒子を以下の基準に従い３段階評価した結果も表１〜３に示す。
（微小な複合粒子の形成の有無の評価基準）
○：３００ｎｍ未満の粒子を形成
△：３００ｎｍ以上５００ｎｍ未満の粒子を形成
×：粒子の形成が見られない
【００５６】
表１に示すように、ヒアルロナンとポリリジンの組み合わせに関しては、混合溶液のｐＨが中性付近であるときであっても微小な粒径を有する複合粒子が形成されていることが確認できた。しかし、混合溶液が５．１５〜５．６４のｐＨ領域にあるときには、微小な複合粒子は形成されなかった。
また、表２及び３に示すように、ヒアルロナンとオリゴペプチド−２０の複合粒子、及びヒアルロナンと水溶性コラーゲンの複合粒子に関しては、混合溶液のｐＨが５より小さい領域については、微小な複合粒子は形成されなかった。
【００５７】
一方、表１〜３に示すように、何れのペプチドであっても、ヒアルロナンと混合する際の混合溶液のｐＨが５以下である場合には、粒子径５００ｎｍ以下の微小な複合粒子が形成された。
この結果は、アニオン性ポリマーとペプチドを含む複合粒子を製造するに当たっては、これらポリマーをｐＨ５以下の水系溶媒において混合することが、微小な複合粒子を製造する目的において重要であることを示している。
【産業上の利用可能性】
【００５８】
本発明は化粧料に応用することができる。