(57)【要約】      （修正有）【課題】狭窄症、狭窄病変、閉塞管腔、塞栓事象、または血栓障害の治療またはイメージングのための組成物および方法、更に内出血の治療のための組成物および方法の提供。【解決手段】生物活性化合物を含有する複数のナノ粒子を含む治療使用のための凝集物。【選択図】図１Ａ
2018065823.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
複数のナノ粒子を含む、治療使用のための凝集物であって、所定の剪断応力に曝露された場合に該所定の剪断応力超で脱凝集する凝集物。
【請求項２】
５０μｍ以下のサイズである、請求項１に記載の凝集物。
【請求項３】
前記ナノ粒子が、ポロキサマー、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ酸無水物、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリアミド、ポリウレタン、ポリエステルアミド、ポリオルトエステル、ポリジオキサノン、ポリアセタール、ポリケタール、ポリカーボネート、ポリオルトカーボネート、ポリジヒドロピラン、ポリホスファゼン、ポリヒドロキシブチレート、ポリヒドロキシバレレート、ポリアルキレンオキサレート、ポリアルキレンスクシネート、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（アミノ酸）、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリヒドロキシセルロース、ポリメチルメタクリレート、キチン、キトサン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ（グリセロールセバケート）（ＰＧＳ）、ゼラチン、コラーゲン、シルク、キトサン、アルギネート、セルロース、ポリ核酸、セルロースアセテート（セルロースジアセテートを含む）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリブチレン、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリアミド、ナイロン、ポリカーボネート、ポリスルフィド、ポリスルホン、ヒドロゲル（例えばアクリル）、ポリアクリロニトリル、ポリビニルアセテート、セルロースアセテートブチレート、ニトロセルロース、ウレタン／カーボネートのコポリマー、スチレン／マレイン酸のコポリマー、ポリ（エチレンイミン）、ヒアルロン（Ｈｙａｌｕｒｏｎ）、ヘパリン、アガロース、プルラン（Ｐｕｌｌｕｌａｎ）、ならびにそれらの任意の組合せを含むコポリマー、ターポリマー、およびコポリマーからなる群から選択されるポリマーを含む、請求項１または２に記載の凝集物。
【請求項４】
有機もしくは無機の小分子もしくは大分子、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、生体高分子、例えば、酵素、ペプチド、タンパク質、ペプチドアナログおよびその誘導体、ペプチドミメティック、脂質、炭水化物、核酸、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、遺伝子、制御領域および終結領域を含む遺伝子、ウイルスもしくはプラスミドＤＮＡなどの自己複製システム、一本鎖および二本鎖のｓｉＲＮＡ、ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ作用物質またはｉＲＮＡ作用物質）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣物、アプタマー、アンチｍｉｒ（ａｎｔｉｍｉｒ）、アンタゴｍｉｒ（ａｎｔａｇｏｍｉｒ）、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化因子、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ならびにデコイオリゴヌクレオチド）、核酸アナログおよび誘導体、細菌、植物、真菌、もしくは動物の細胞もしくは組織などの生体材料から作製された抽出物、天然もしくは合成の組成物、またはそれらの任意の組合せからなる群から選択される分子をさらに含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項５】
前記分子がナノ粒子中に被包されているか、またはナノ粒子の表面上に吸収／吸着されている、請求項１〜４のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項６】
前記分子がナノ粒子に共有結合している、請求項１〜５のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項７】
前記分子が生物学的に活性である、請求項４〜６のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項８】
前記生物活性が、生物アッセイにおける、刺激、阻害、調節、毒性、または致死の応答からなる群から選択される、請求項７に記載の凝集物。
【請求項９】
前記生物活性が、酵素活性の表出または調節、受容体の遮断、受容体の刺激、１つまたは複数の遺伝子の発現レベルの調節、細胞増殖の調節、細胞分裂の調節、細胞遊走の調節、細胞分化の調節、細胞アポトーシスの調節、細胞形態の調節、またはそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項７または８に記載の凝集物。
【請求項１０】
前記分子が疎水性、親水性、または両親媒性である、請求項５〜９のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項１１】
前記分子が、治療剤、またはそのアナログ、誘導体、プロドラッグ、もしくは薬学的に許容可能な塩である、請求項４〜１０のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項１２】
前記治療剤が抗トロンビン剤および／または血栓溶解剤である、請求項１１に記載の凝集物。
【請求項１３】
前記抗トロンビン剤または血栓溶解剤が、抗凝血剤、凝血促進剤アンタゴニスト、抗血小板剤、血栓溶解剤、抗血栓溶解剤アンタゴニスト、線維素溶解酵素、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１２に記載の凝集物。
【請求項１４】
前記治療剤が血栓形成剤である、請求項１１に記載の凝集物。
【請求項１５】
前記血栓形成剤が、血栓溶解剤アンタゴニスト、抗凝血剤アンタゴニスト、凝血促進酵素、凝血促進分子、およびそれらの任意の組合せから選択される、請求項１４に記載の凝集物。
【請求項１６】
前記血栓形成剤が、プロタミン、ビタミンＫ１、アミノカプロン酸（アミカー（ａｍｉｃａｒ））、トラネキサム酸（アムスタット（ａｍｓｔａｔ））、アナグレリド、アルガトロバン、シロスタゾール、ダルトロバン、デフィブロチド、エノキサパリン、フラキシパリン（ｆｒａｘｉｐａｒｉｎｅ）、インドブフェン、ラモパラン（ｌａｍｏｐａｒａｎ）、オザグレル、ピコタミド、プラフィブリド、テデルパリン（ｔｅｄｅｌｐａｒｉｎ）、チクロピジン、トリフルサル、コラーゲン、およびコラーゲンコーティング粒子、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１４または１５に記載の凝集物。
【請求項１７】
前記治療剤が、組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、ストレプトキナーゼ（ＳＫ）、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（ｕＰＡ）、アルテプラーゼ（Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、レテプラーゼ（ｒ−ＰＡまたはｒｅｔａｖａｓｅ（登録商標）、Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｉｎｃ．としても知られている）、テネクテプラーゼ（ＴＮＫ（商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、Ｓｔｒｅｐｔａｓｅ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，ＬＰ）、ラノテプラーゼ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、モンテプラーゼ（エーザイ株式会社）、サルプラーゼ（ｒ−ｓｃｕ−ＰＡおよびｒｅｓｃｕｐａｓｅ（商標）、Ｇｒｕｎｅｎｔｈａｌ  ＧｍｂＨ，Ｃｏｒｐ．としても知られている）、スタフィロキナーゼ、およびアニソイル化されたプラスミノーゲン−ストレプトキナーゼ活性化因子複合体（ＡＰＳＡＣ、Ａｎｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ、およびＥｍｉｎａｓｅ（登録商標）、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｃｏｒｐ．としても知られている）、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される血栓溶解剤である、請求項１１に記載の凝集物。
【請求項１８】
前記治療剤が抗炎症剤である、請求項１１に記載の凝集物。
【請求項１９】
前記抗炎症剤が、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ−アスピリン、イブプロフェン、またはナプロキセンなど）、コルチコステロイド（プレドニゾンなど）、抗マラリア薬（ヒドロキシクロロキンなど）、メトトレキセート、スルファサラジン、レフルノミド、抗ＴＮＦ薬、シクロホスファミド、ミコフェノレート、デキサメタゾン、ロシグリタゾン、プレドニゾロン、コルチコステロン、ブデソニド、エストロゲン、エストラジオール、スルファサラジン、フェノフィブレート、プラバスタチン、シンバスタチン、ピオグリタゾン、アセチルサリチル酸、ミコフェノール酸、メサラミン、ヒドロキシ尿素、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項１８に記載の凝集物。
【請求項２０】
前記治療剤が血管拡張剤である、請求項１１に記載の凝集物。
【請求項２１】
前記血管拡張剤が、アルファ−アドレナリン受容体アンタゴニスト（α−遮断薬）、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、ベータ２−アドレナリン受容体アゴニスト（β２−アゴニスト）、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、中枢作用性交感神経遮断剤、直接作用性血管拡張剤、エンドセリン受容体アンタゴニスト、神経節遮断薬、ニトロダイレーター、ホスホジエステラーゼ阻害剤、カリウムチャネル開口剤、レニン阻害剤、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項２０に記載の凝集物。
【請求項２２】
前記血管拡張剤が、プラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、トリマゾシン、フェントラミン、フェノキシベンザミン、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、キナプリル、ラミプリル、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルメサルタン、テルミサルタン、バルサルタン、エピネフリン、ノルエピネフリン、ドーパミン、ドブタミン、イソプロテレノール、アムロジピン、フェロジピン、イソラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、クロニジン、グアナベンズ、グアンファシン、α−メチルドーパ、ヒドララジン、ボセンタン、カンシル酸トリメタファン、二硝酸イソソルビド、一硝酸イソソルビド、ニトログリセリン、四硝酸エリトリチル、四硝酸ペンタエリスリトール、ニトロプルシドナトリウム、ミルリノン、イナムリノン（以前はアムリノン）、シロスタゾール、シルデナフィル、タダラフィル、ミノキシジル、アリスキレン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項２０または２１に記載の凝集物。
【請求項２３】
前記治療剤が血管収縮剤である、請求項１１に記載の凝集物。
【請求項２４】
前記血管収縮剤が、アルファ−アドレナリン受容体アゴニスト、カテコールアミン、バソプレッシン、バソプレッシン受容体モジュレーター、およびカルシウムチャネルアゴニストからなる群から選択される、請求項２３に記載の凝集物。
【請求項２５】
前記血管収縮剤が、硫酸アルミニウム、アミデフリン、アンフェタミン、アンジオテンシン、抗ヒスタミン薬、アルギプレシン、次没食子酸ビスマス、カファミノール、カフェイン、カテコールアミン、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、ドーパミン、エフェドリン、エピネフリン、フェリプレシン、インダナゾリン、イソプロテレノール、リセルグ酸ジエチルアミン、リプレシン（ＬＶＰ）、リセルグ酸、メフェドロン、メトキサミン、メチルフェニデート、メチゾリン、メタラミノール、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、ノルエピネフリン、オクトドリン、オルニプレシン、オキシメタゾリン、フェニルエタノールアミン、フェニレフリン、フェニルイソプロピルアミン、フェニルプロパノールアミン、フェニプレッシン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、サイロシビン、テトラヒドララジン、テトラヒドロゾリン、塩酸テトラヒドロゾリン、硫酸亜鉛を含む塩酸テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシン、バソトシン、キシロメタゾリン、酸化亜鉛、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項２３または２４に記載の凝集物。
【請求項２６】
前記治療剤が、抗悪性腫瘍剤、抗増殖剤、および／または有糸分裂阻害剤、および／または遊走阻害（ａｎｔｉ−ｍｉｇｒａｔｏｒｙ）剤である、請求項１１に記載の凝集物。
【請求項２７】
前記抗悪性腫瘍剤／抗増殖剤／有糸分裂阻害剤／遊走阻害剤が、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、シクロスポリン、シスプラチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エポチロン、メトトレキセート、アザチオプリン、アドリアマイシン、およびマイトマイシン；エンドスタチン、アンジオスタチンおよびチミジンキナーゼ阻害剤、クラドリビン、タキソール、トラピジル、ハロフジノン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項２６に記載の凝集物。
【請求項２８】
前記治療剤が、アスピリン、ワルファリン（クマジン）、アセノクマロール、アンクロッド、アニシンジオン、ブロミンジオン、クロリンジオン、クメタロール、シクロクマロール、デキストラン、デキストラン硫酸ナトリウム、ジクマロール、ジフェナジオン、ビスクマ酢酸エチル、エチリデンジクマロール、フルインジオン、ヘパリン、ヒルジン、リアポレートナトリウム（ｌｙａｐｏｌａｔｅ  ｓｏｄｉｕｍ）、オキサジジオン、ペントサンポリサルフェート、フェニンジオン、フェンプロクモン、ホスビチン、ピコタミド、チオクロマロール、ジピリダモール（ペルサンチン）、スルフィンピラゾン（アンツラン）、チクロピジン（チクリド）、組織プラスミノーゲン活性化因子（アクチバーゼ）、プラスミン、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（アボキナーゼ（ａｂｂｏｋｉｎａｓｅ））、ストレプトキナーゼ（ストレプターゼ）、およびアニストレプラーゼ／ＡＰＳＡＣ（エミナーゼ（ｅｍｉｎａｓｅ））、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項１１〜２７のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項２９】
前記分子が、脱凝集していない凝集物と比較して、脱凝集した凝集物からより高速度および／またはより高量で放出される、請求項４〜２８のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項３０】
前記放出速度が、脱凝集していない凝集物と比較して、脱凝集した凝集物では少なくとも１０％高い、請求項２９に記載の凝集物。
【請求項３１】
前記複数のナノ粒子の中で少なくとも１つのナノ粒子が、リガンドを含む、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項３２】
前記リガンドがターゲティングリガンドである、請求項３１に記載の凝集物。
【請求項３３】
前記リガンドが、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ペプチドミメティック、糖タンパク質、レクチン、ヌクレオシド、ヌクレオチド、核酸（例えば、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、遺伝子、制御領域および終結領域を含む遺伝子、ウイルスもしくはプラスミドＤＮＡなどの自己複製システム、一本鎖および二本鎖のｓｉＲＮＡ、ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ作用物質またはｉＲＮＡ作用物質）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣物、スーパーｍｉｒ（ｓｕｐｅｒｍｉｒ）、アプタマー、アンチｍｉｒ、アンチｍｉｒ、アンタゴｍｉｒ、Ｕ１アダプター、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化因子、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ならびにデコイオリゴヌクレオチド）、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、リポ多糖類、脂質、ビタミン、ステロイド、ホルモン、補因子、受容体、受容体リガンド、ならびにそれらのアナログおよび誘導体からなる群から選択される、請求項３１または３２に記載の凝集物。
【請求項３４】
前記リガンドが、ポリリシン（ＰＬＬ）、ポリＬ−アスパラギン酸、ポリＬ−グルタミン酸、スチレン−無水マレイン酸コポリマー、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）コポリマー、ジビニルエーテル−無水マレイン酸コポリマー、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミドコポリマー（ＨＭＰＡ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリウレタン、ポリ（２−エチルアクリル酸）、Ｎ−イソプロピルアクリルアミドポリマー、ポリホスファジン（ｐｏｌｙｐｈｏｓｐｈａｚｉｎｅ）、ポリエチレンイミン、スペルミン、スペルミジン、ポリアミン、偽ペプチド−ポリアミン、ペプチドミメティックポリアミン、デンドリマーポリアミン、アルギニン、アミジン、プロタミン、チロトロピン、メラノトロピン、レクチン、サーファクタントタンパク質Ａ、ムチン、トランスフェリン、ビスホスホネート、ポリグルタメート、ポリアスパルタート、アプタマー、アシアロフェツイン、ヒアルロナン、プロコラーゲン、インスリン、トランスフェリン、アルブミン、アクリジン、クロス−ソラレン（ｃｒｏｓｓ−ｐｓｏｒａｌｅｎ）、マイトマイシンＣ、ＴＰＰＣ４、テキサフィリン、サフィリン、多環式芳香族炭化水素（例えば、フェナジン、ジヒドロフェナジン）、胆汁酸、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、１−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、１，３−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、１，３−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ３−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ３−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチルまたはフェノキサジン）、ＲＧＤペプチド、放射標識マーカー、ハプテン、ナプロキセン、アスピリン、ジニトロフェニル、ＨＲＰ、ＡＰ、レクチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＢ、葉酸、Ｂ１２、リボフラビン、ビオチン、ピリドキサール、タキソン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、サイトカラシン、ノコダゾール、ジャプラキノリド（ｊａｐｌａｋｉｎｏｌｉｄｅ）、ラトランクリンＡ、ファロイジン、スウィンホリドＡ、インダノシン、ミオセルビン（ｍｙｏｓｅｒｖｉｎ）、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦアルファ）、インターロイキン−１ベータ、ガンマインターフェロン、ＧａｌＮＡｃ、ガラクトース、マンノース、マンノース−６Ｐ、ＧａｌＮＡｃクラスター、マンノースクラスター、ガラクトースクラスターなどの糖クラスター、アプタマー、インテグリン受容体リガンド、ケモカイン受容体リガンド、セロトニン受容体リガンド、ＰＳＭＡ、エンドセリン、ＧＣＰＩＩ、ソマトスタチン、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項３１〜３３のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項３５】
前記リガンドが、
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、セクロピン、リコトキシン（ｌｙｃｏｔｏｘｉｎ）、パラダキシン（ｐａｒａｄａｘｉｎ）、ブホリン（ｂｕｆｏｒｉｎ）、ＣＰＦ、ボンビニン様ペプチド（ＢＬＰ）、カテリシジン、セラトトキシン（ｃｅｒａｔｏｔｏｘｉｎ）、Ｓ．クラバ（Ｓ．Ｃｌａｖａ）ペプチド、ヌタウナギ腸内抗微生物ペプチド（ｈａｇｆｉｓｈ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ）（ＨＦＩＡＰ）、マガイニン、ブレビニン−２（ｂｒｅｖｉｎｉｎ−２）、デルマセプチン、メリチン、プルロシジン（ｐｌｅｕｒｏｃｉｄｉｎ）、Ｈ２Ａペプチド、ゼノパスペプチド、エスクレンチン−１、カエリン（ｃａｅｒｉｎ）ならびにそれらの任意のアナログおよび誘導体からなる群から選択されるペプチドである、請求項３１〜３４のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項３６】
前記リガンドが、対照と比較して、脱凝集速度を少なくとも１０％低下させる、請求項３１〜３５のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項３７】
非狭窄領域と比較して、狭窄領域において少なくとも１０％脱凝集する、請求項１〜３６のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項３８】
前記狭窄領域の剪断応力が、非狭窄領域と比較して、少なくとも１倍高い、請求項３７に記載の凝集物。
【請求項３９】
前記非狭窄領域の剪断応力が、正常な生理学的剪断応力である、請求項３７または３８に記載の凝集物。
【請求項４０】
前記狭窄領域の剪断応力が、少なくとも７０ｄｙｎ／ｃｍ２である、請求項３７〜３９のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項４１】
球、円筒、盤、長方形、立方体、または不規則形状である、請求項１〜４０のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項４２】
前記ナノ粒子が、球、円筒、盤、長方形、立方体、または不規則形状である、請求項１〜４１のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項４３】
前記ナノ粒子の表面が改変されて、２つ以上のナノ粒子間の分子間静電的相互作用、水素結合相互作用、双極子相互作用、親水性相互作用、疎水性相互作用、ファンデルワールス力、およびそれらの任意の組合せが調節される、請求項１〜４２のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項４４】
前記所定の剪断応力が、少なくとも７０ｄｙｎ／ｃｍ２である、請求項１〜４３のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項４５】
１μｍ〜３μｍのサイズである、請求項１〜４４のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項４６】
前記分子がイメージング剤である、請求項４に記載の凝集物。
【請求項４７】
前記イメージング剤が、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）色素（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＣｏｒｐ．；Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆ）；フルオレセイン；フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）；Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ（商標）；テトラローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）、５−カルボキシフルオレセイン（ＦＡＭ）；２'７'−ジメトキシ−４'５'−ジクロロ−６−カルボキシフルオレセイン（ＪＯＥ）；テトラクロロフルオレセイン（ＴＥＴ）；６−カルボキシローダミン（Ｒ６Ｇ）；Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ'−テトラメチル−６−カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）；６−カルボキシ−Ｘ−ローダミン（ＲＯＸ）；１−ジメチルアミノ−ナフチル−５−スルホネート、１−アニリノ−８−ナフタレンスルホネート、２−ｐ−トルイジニル−６−ナフタレンスルホネート、および５−（２'−アミノエチル）アミノナフタレン−１−スルホン酸（ＥＤＡＮＳ）を含むナフチルアミノ化合物など、アルファまたはベータ位にアミノ基を有するナフチルアミン色素；３−フェニル−７−イソシアナトクマリンなどのクマリン；９−イソチオシアナトアクリジンおよびアクリジンオレンジなどのアクリジン；Ｎ−（ｐ（２−ベンゾオキサゾリル）フェニル）マレイミド；Ｃｙ２、インドジカルボシアニン３（Ｃｙ３）、インドジカルボシアニン５（Ｃｙ５）、インドジカルボシアニン５．５（Ｃｙ５．５）、３−（−カルボキシ−ペンチル）−３'エチル−５，５'−ジメチルオキサカルボシアニン（ＣｙＡ）などのシアニン；１Ｈ，５Ｈ，１１Ｈ，１５Ｈ−キサンテノ［２，３，４−ｉｊ：５，６，７−ｉ'ｊ'］ジキノリジン−１８−イウム、９−［２（または４）−［［［６−［２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−６−オキソヘキシル］アミノ］スルホニル］−４（または２）−スルホフェニル］−２，３，６，７，１２，１３，１６，１７オクタヒドロ−分子内塩（ＴＲまたはテキサスレッド）；ＢＯＤＩＰＹ（商標）色素；ベンゾオキサジアゾール；スチルベン；ピレン；緑色蛍光タンパク質、増強緑色蛍光タンパク質（ＥＧＰＦ）、不安定化ＥＧＦＰ、赤色蛍光タンパク質（例えばＤｓＲｅｄ）、ｄｓＲＥｄ変異体のｍＲＦＰｍａｒｓおよびｍＲＦＰｒｕｂｙ、黄色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、青色蛍光タンパク質、濃青色（ｃｅｒｕｌｅａｎ）蛍光タンパク質などの蛍光タンパク質、およびそれらの変異体；９９ｍＴｃ、９５Ｔｃ、１１１Ｉｎ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、Ｇａ、６８Ｇａ、１５３Ｇｄ、１８Ｆ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、４７Ｓｃ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、８９Ｓｒ、８６Ｙ、８７Ｙ、９０Ｙ、１０５Ｒｈ、１１１Ａｇ、１１１Ｉｎ、１１７ｍＳｎ、１４９Ｐｍ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉなどの放射性同位元素；Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、およびＭｎ（ＩＩ）などの常磁性金属イオン；Ｒｅ、Ｓｍ、Ｈｏ、Ｌｕ、Ｐｍ、Ｙ、Ｂｉ、Ｐｄ、Ｇｄ、Ｌａ、Ａｕ、Ａｕ、Ｙｂ、Ｄｙ、Ｃｕ、Ｒｈ、Ａｇ、およびＩｒなどのＸ線吸収体；ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項４６に記載の凝集物。
【請求項４８】
前記ナノ粒子が、凝集物のインビボ寿命を増加させる少なくとも１つの部分を含む、請求項１〜４７のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項４９】
前記少なくとも１つの部分がポリエチレングリコールである、請求項４８に記載の凝集物。
【請求項５０】
請求項１〜４９のいずれか一項に記載の凝集物を含む医薬組成物。
【請求項５１】
対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変を治療する方法であって、それを必要とする対象に請求項１〜５０のいずれか一項に記載の凝集物または医薬組成物を投与することを含む方法。
【請求項５２】
対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変をイメージングする方法であって、それを必要とする対象に請求項１〜５０のいずれか一項に記載の凝集物または医薬組成物を投与することを含む方法。
【請求項５３】
前記狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、間欠性跛行（末梢動脈狭窄症）、アンギナ（冠状動脈狭窄症）、頚動脈狭窄症、大動脈弁狭窄症、ボタン穴狭窄症、石灰化結節性狭窄症、冠状動脈口狭窄症、二重大動脈狭窄症、魚口僧帽弁狭窄症、特発性肥厚性大動脈弁下部狭窄症、漏斗部狭窄症、僧帽弁狭窄症、筋性大動脈弁下部狭窄症、肺動脈弁狭窄症、肺動脈塞栓症、肺高血圧症、大動脈弁下部狭窄症、弁下部狭窄症、大動脈弁上部狭窄症、三尖弁狭窄症、腎動脈狭窄症、幽門狭窄症（胃の流出閉塞）、閉塞性黄疸（胆管狭窄症）、腸閉塞症、包茎、水頭症、狭窄性腱鞘炎、脊椎管狭窄症、声門下狭窄症（ＳＧＳ）、高血圧症、鎌状赤血球貧血症、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項５１または５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、外傷または損傷、アテローム性動脈硬化症、先天性欠損、糖尿病、医原病、感染、炎症、虚血、腫瘍、血管攣縮、冠血管攣縮、レイノー現象、脳卒中、血液凝固、モヤモヤ病、高安病、結節性多発動脈炎、播種状エリトマトーデス、関節リウマチ、脊椎腫瘍、骨ページェット病、フッ素症、血液透析、鎌状赤血球貧血症、ならびにそれらの任意の組合せに起因する、請求項５１〜５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５５】
対象の内出血を治療する方法であって、それを必要とする対象に請求項１〜５０のいずれか一項に記載の凝集物または医薬組成物を投与することを含む方法。
【請求項５６】
前記内出血が、外傷、高血圧による血管破裂、感染（例えば、エボラ、マールブルク）、癌、壊血病、肝細胞腫、自己免疫性血小板減少症、子宮外妊娠、悪性低温症、卵巣嚢胞、肝癌、ビタミンＫ欠乏症、血友病、薬物の副作用の結果である、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記投与が、注射、点滴、点眼、吸入、または経口摂取によるものである、請求項５１〜５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５８】
マイクロサイズの凝集物を調製するための方法であって、
（ｉｖ）複数のナノ粒子を得ること；
（ｖ）前記複数のナノ粒子をミクロンサイズの粒子の中に凝集させること；および
（ｖｉ）任意で、所望のサイズの粒子を選択すること
を含む方法。
【請求項５９】
前記複数のナノ粒子を得ることが、前記複数のナノ粒子を形成させることまたは作製することを含む、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記ナノ粒子が、ポロキサマー、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ酸無水物、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリアミド、ポリウレタン、ポリエステルアミド、ポリオルトエステル、ポリジオキサノン、ポリアセタール、ポリケタール、ポリカーボネート、ポリオルトカーボネート、ポリジヒドロピラン、ポリホスファゼン、ポリヒドロキシブチレート、ポリヒドロキシバレレート、ポリアルキレンオキサレート、ポリアルキレンスクシネート、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（アミノ酸）、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリヒドロキシセルロース、ポリメチルメタクリレート、キチン、キトサン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ（グリセロールセバケート）（ＰＧＳ）、ゼラチン、コラーゲン、シルク、キトサン、アルギネート、セルロース、ポリ核酸、セルロースアセテート（セルロースジアセテートを含む）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリブチレン、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリアミド、ナイロン、ポリカーボネート、ポリスルフィド、ポリスルホン、ヒドロゲル（例えばアクリル）、ポリアクリロニトリル、ポリビニルアセテート、セルロースアセテートブチレート、ニトロセルロース、ウレタン／カーボネートのコポリマー、スチレン／マレイン酸のコポリマー、ポリ（エチレンイミン）、ヒアルロン、ヘパリン、アガロース、プルラン、ならびにそれらの任意の組合せを含むコポリマー、ターポリマー、およびコポリマーからなる群から選択されるポリマーを含む、請求項５８または５９に記載の方法。
【請求項６１】
前記所望の凝集物サイズが５０μｍ以下である、請求項５８〜６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６２】
前記マイクロサイズの粒子が、有機もしくは無機の小分子もしくは大分子、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、生体高分子、例えば、ペプチド、タンパク質、ペプチドアナログおよびその誘導体、ペプチドミメティック、脂質、炭水化物、核酸、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、遺伝子、制御領域および終結領域を含む遺伝子、ウイルスもしくはプラスミドＤＮＡなどの自己複製システム、一本鎖および二本鎖のｓｉＲＮＡ、ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ作用物質またはｉＲＮＡ作用物質）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣物、アプタマー、アンチｍｉｒ、アンタゴｍｉｒ、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化因子、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ならびにデコイオリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、核酸アナログおよび誘導体、細菌、植物、真菌、もしくは動物の細胞もしくは組織などの生体材料から作製された抽出物、天然もしくは合成の組成物、ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される分子をさらに含む、請求項５８〜６１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６３】
前記分子がナノ粒子に被包されているか、またはナノ粒子の表面上に吸収／吸着されている、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記分子がナノ粒子に共有結合している、請求項６２または６３のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項６５】
前記分子が生物活性を有する、請求項６２〜６４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６６】
前記生物活性が、生物アッセイにおける、酵素、刺激、阻害、調節、毒性、または致死の応答からなる群から選択される、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
前記生物活性が、酵素活性の表出または調節、受容体の遮断、受容体の刺激、１つまたは複数の遺伝子の発現レベルの調節、細胞増殖の調節、細胞分裂の調節、細胞分化の調節、細胞運動性の調節、細胞形態の調節、またはそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項６５または６６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６８】
前記分子が疎水性、親水性、または両親媒性である、請求項６２〜６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６９】
前記分子が、治療剤、またはそのアナログ、誘導体、プロドラッグ、もしくは薬学的に許容可能な塩である、請求項６２〜６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７０】
前記治療剤が抗トロンビン剤および／または血栓溶解剤もしくは線維素溶解剤である、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
前記抗トロンビン剤、血栓溶解剤、または線維素溶解剤が、抗凝血剤、凝血促進剤アンタゴニスト、抗血小板剤、血栓溶解剤、抗血栓溶解剤アンタゴニスト、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項７０に記載の方法。
【請求項７２】
前記治療剤が血栓形成剤である、請求項６９に記載の方法。
【請求項７３】
前記血栓形成剤が、血栓溶解剤アンタゴニスト、抗凝血剤アンタゴニスト、凝血促進酵素、凝血促進分子、およびそれらの任意の組合せから選択される、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
前記血栓形成剤が、プロタミン、ビタミンＫ１、アミノカプロン酸（アミカー）、トラネキサム酸（アムスタット）、アナグレリド、アルガトロバン、シロスタゾール、ダルトロバン、デフィブロチド、エノキサパリン、フラキシパリン、インドブフェン、ラモパラン、オザグレル、ピコタミド、プラフィブリド、テデルパリン、チクロピジン、トリフルサル、コラーゲン、およびコラーゲンコーティング粒子、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項７２または７３に記載の方法。
【請求項７５】
前記治療剤が、組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、ストレプトキナーゼ（ＳＫ）、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（ｕＰＡ）、アルテプラーゼ（Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、レテプラーゼ（ｒ−ＰＡまたはｒｅｔａｖａｓｅ（登録商標）、Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｉｎｃ．としても知られている）、テネクテプラーゼ（ＴＮＫ（商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、Ｓｔｒｅｐｔａｓｅ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，ＬＰ）、ラノテプラーゼ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、モンテプラーゼ（エーザイ株式会社）、サルプラーゼ（ｒ−ｓｃｕ−ＰＡおよびｒｅｓｃｕｐａｓｅ（商標）、Ｇｒｕｎｅｎｔｈａｌ  ＧｍｂＨ，Ｃｏｒｐ．としても知られている）、スタフィロキナーゼ、およびアニソイル化されたプラスミノーゲン−ストレプトキナーゼ活性化因子複合体（ＡＰＳＡＣ、Ａｎｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ、およびＥｍｉｎａｓｅ（登録商標）、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｃｏｒｐ．としても知られている）、ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される血栓溶解剤である、請求項６９に記載の方法。
【請求項７６】
前記治療剤が抗炎症剤である、請求項６９に記載の凝集物。
【請求項７７】
前記抗炎症剤が、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、コルチコステロイド（プレドニゾンなど）、抗マラリア薬（ヒドロキシクロロキンなど）、メトトレキセート、スルファサラジン、レフルノミド、抗ＴＮＦ薬、シクロホスファミド、ミコフェノレート、デキサメタゾン、ロシグリタゾン、プレドニゾロン、コルチコステロン、ブデソニド、エストロゲン、エストラジオール、スルファサラジン、フェノフィブレート、プラバスタチン、シンバスタチン、ピオグリタゾン、アセチルサリチル酸、ミコフェノール酸、メサラミン、ヒドロキシ尿素、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項７６に記載の凝集物。
【請求項７８】
前記治療剤が血管拡張剤である、請求項６９に記載の凝集物。
【請求項７９】
前記血管拡張剤が、アルファ−アドレナリン受容体アンタゴニスト（α−遮断薬）、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、ベータ２−アドレナリン受容体アゴニスト（β２−アゴニスト）、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、中枢作用性交感神経遮断剤、直接作用性血管拡張剤、エンドセリン受容体アンタゴニスト、神経節遮断薬、ニトロダイレーター、ホスホジエステラーゼ阻害剤、カリウムチャネル開口剤、レニン阻害剤、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項７８に記載の凝集物。
【請求項８０】
前記血管拡張剤が、プラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、トリマゾシン、フェントラミン、フェノキシベンザミン、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、キナプリル、ラミプリル、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルメサルタン、テルミサルタン、バルサルタン、エピネフリン、ノルエピネフリン、ドーパミン、ドブタミン、イソプロテレノール、アムロジピン、フェロジピン、イソラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、クロニジン、グアナベンズ、グアンファシン、α−メチルドーパ、ヒドララジン、ボセンタン、カンシル酸トリメタファン、二硝酸イソソルビド、一硝酸イソソルビド、ニトログリセリン、四硝酸エリトリチル、四硝酸ペンタエリスリトール、ニトロプルシドナトリウム、ミルリノン、イナムリノン（以前はアムリノン）、シロスタゾール、シルデナフィル、タダラフィル、ミノキシジル、アリスキレン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項７８または７９に記載の凝集物。
【請求項８１】
前記治療剤が、抗悪性腫瘍剤、抗増殖剤、および／または有糸分裂阻害剤、および／または遊走阻害剤である、請求項６９に記載の凝集物。
【請求項８２】
前記抗悪性腫瘍剤／抗増殖剤／有糸分裂阻害剤／遊走阻害剤が、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、シクロスポリン、シスプラチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エポチロン、メトトレキセート、アザチオプリン、アドリアマイシン、およびマイトマイシン；エンドスタチン、アンジオスタチンおよびチミジンキナーゼ阻害剤、クラドリビン、タキソール、トラピジル、ハロフジノン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項８１に記載の凝集物。
【請求項８３】
前記治療剤が、アスピリン、ワルファリン（クマジン）、アセノクマロール、アンクロッド、アニシンジオン、ブロミンジオン、クロリンジオン、クメタロール、シクロクマロール、デキストラン、デキストラン硫酸ナトリウム、ジクマロール、ジフェナジオン、ビスクマ酢酸エチル、エチリデンジクマロール、フルインジオン、ヘパリン、ヒルジン、リアポレートナトリウム、オキサジジオン、ペントサンポリサルフェート、フェニンジオン、フェンプロクモン、ホスビチン、ピコタミド、チオクロマロール、ジピリダモール（ペルサンチン）、スルフィンピラゾン（アンツラン）、チクロピジン（チクリド）、組織プラスミノーゲン活性化因子（アクチバーゼ）、プラスミン、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（アボキナーゼ）、ストレプトキナーゼ（ストレプターゼ）、およびアニストレプラーゼ／ＡＰＳＡＣ（エミナーゼ）、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項６９〜８２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８４】
前記分子が、脱凝集していない凝集物と比較して、脱凝集した凝集物からより高速度および／またはより高量で放出される、請求項６２〜８３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８５】
前記放出速度が、脱凝集していない凝集物と比較して、脱凝集した凝集物では少なくとも１０％高い、請求項８４に記載の方法。
【請求項８６】
前記複数のナノ粒子の中で少なくとも１つのナノ粒子が、リガンドを含む、請求項５８〜８５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８７】
前記リガンドがターゲティングリガンドである、請求項８６に記載の方法。
【請求項８８】
前記リガンドが、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ペプチドミメティック、糖タンパク質、レクチン、ヌクレオシド、ヌクレオチド、核酸、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、リポ多糖類、ビタミン、ステロイド、ホルモン、補因子、受容体、受容体リガンド、ならびにそれらのアナログおよび誘導体からなる群から選択される、請求項８６または８７に記載の方法。
【請求項８９】
前記リガンドが、ポリリシン（ＰＬＬ）、ポリＬ−アスパラギン酸、ポリＬ−グルタミン酸、スチレン−無水マレイン酸コポリマー、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）コポリマー、ジビニルエーテル−無水マレイン酸コポリマー、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミドコポリマー（ＨＭＰＡ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリウレタン、ポリ（２−エチルアクリル酸）、Ｎ−イソプロピルアクリルアミドポリマー、ポリホスファジン、ポリエチレンイミン、スペルミン、スペルミジン、ポリアミン、偽ペプチド−ポリアミン、ペプチドミメティックポリアミン、デンドリマーポリアミン、アルギニン、アミジン、プロタミン、チロトロピン、メラノトロピン、レクチン、サーファクタントタンパク質Ａ、ムチン、トランスフェリン、ビスホスホネート、ポリグルタメート、ポリアスパルタート、アプタマー、アシアロフェツイン、ヒアルロナン、プロコラーゲン、インスリン、トランスフェリン、アルブミン、アクリジン、クロス−ソラレン、マイトマイシンＣ、ＴＰＰＣ４、テキサフィリン、サフィリン、多環式芳香族炭化水素（例えば、フェナジン、ジヒドロフェナジン）、胆汁酸、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、１−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、１，３−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、１，３−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ３−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ３−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチルまたはフェノキサジン）、ＲＧＤペプチド、放射標識マーカー、ハプテン、ナプロキセン、アスピリン、ジニトロフェニル、ＨＲＰ、ＡＰ、レクチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＢ、葉酸、Ｂ１２、リボフラビン、ビオチン、ピリドキサール、タキソン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、サイトカラシン、ノコダゾール、ジャプラキノリド、ラトランクリンＡ、ファロイジン、スウィンホリドＡ、インダノシン、ミオセルビン、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦアルファ）、インターロイキン−１ベータ、ガンマインターフェロン、ＧａｌＮＡｃ、ガラクトース、マンノース、マンノース−６Ｐ、ＧａｌＮＡｃクラスター、マンノースクラスター、ガラクトースクラスターなどの糖クラスター、アプタマー、インテグリン受容体リガンド、ケモカイン受容体リガンド、セロトニン受容体リガンド、ＰＳＭＡ、エンドセリン、ＧＣＰＩＩ、ソマトスタチン、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項８６〜８８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９０】
前記リガンドが、
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、セクロピン、リコトキシン（ｌｙｃｏｔｏｘｉｎ）、パラダキシン（ｐａｒａｄａｘｉｎ）、ブホリン（ｂｕｆｏｒｉｎ）、ＣＰＦ、ボンビニン様ペプチド（ＢＬＰ）、カテリシジン、セラトトキシン（ｃｅｒａｔｏｔｏｘｉｎ）、Ｓ．クラバ（Ｓ．Ｃｌａｖａ）ペプチド、ヌタウナギ腸内抗微生物ペプチド（ｈａｇｆｉｓｈ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｐｅｐｔｉｄｅ）（ＨＦＩＡＰ）、マガイニン、ブレビニン−２（ｂｒｅｖｉｎｉｎ−２）、デルマセプチン、メリチン、プルロシジン（ｐｌｅｕｒｏｃｉｄｉｎ）、Ｈ２Ａペプチド、ゼノパスペプチド、エスクレンチン−１、カエリン（ｃａｅｒｉｎ）ならびにそれらの任意のアナログおよび誘導体からなる群から選択されるペプチドである、請求項８６〜８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９１】
前記リガンドが、対照と比較して、脱凝集速度を少なくとも１０％低下させる、請求項８６〜９０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９２】
前記凝集物が、非狭窄領域と比較して、狭窄領域において少なくとも１０％脱凝集する、請求項５８〜９１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９３】
前記狭窄領域の剪断応力が、非狭窄領域と比較して、少なくとも１倍高い、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
前記非狭窄領域の剪断応力が、正常な生理学的剪断応力である、請求項９２または９３に記載の方法。
【請求項９５】
前記狭窄領域の剪断応力が、少なくとも７０ｄｙｎ／ｃｍ２である、請求項９２〜９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９６】
前記凝集物が、球、円筒、盤、長方形、立方体、または不規則形状である、請求項５８〜９５のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項９７】
前記ナノ粒子が、球、円筒、盤、長方形、立方体、または不規則形状である、請求項５８〜９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９８】
前記ナノ粒子の表面が改変されて、２つ以上のナノ粒子間の分子間静電的相互作用、水素結合相互作用、双極子相互作用、親水性相互作用、疎水性相互作用、ファンデルワールス力、およびそれらの任意の組合せが調節される、請求項５８〜９７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９９】
前記凝集物のサイズが１μｍ〜３μｍである、請求項５８〜９８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１００】
前記分子がイメージング剤である、請求項６２に記載の方法。
【請求項１０１】
前記イメージング剤が、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）色素（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＣｏｒｐ．；Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆ）；フルオレセイン；フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）；Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ（商標）；テトラローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）、５−カルボキシフルオレセイン（ＦＡＭ）；２'７'−ジメトキシ−４'５'−ジクロロ−６−カルボキシフルオレセイン（ＪＯＥ）；テトラクロロフルオレセイン（ＴＥＴ）；６−カルボキシローダミン（Ｒ６Ｇ）；Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ'−テトラメチル−６−カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）；６−カルボキシ−Ｘ−ローダミン（ＲＯＸ）；１−ジメチルアミノ−ナフチル−５−スルホネート、１−アニリノ−８−ナフタレンスルホネート、２−ｐ−トルイジニル−６−ナフタレンスルホネート、および５−（２'−アミノエチル）アミノナフタレン−１−スルホン酸（ＥＤＡＮＳ）を含むナフチルアミノ化合物など、アルファまたはベータ位にアミノ基を有するナフチルアミン色素；３−フェニル−７−イソシアナトクマリンなどのクマリン；９−イソチオシアナトアクリジンおよびアクリジンオレンジなどのアクリジン；Ｎ−（ｐ（２−ベンゾオキサゾリル）フェニル）マレイミド；Ｃｙ２、インドジカルボシアニン３（Ｃｙ３）、インドジカルボシアニン５（Ｃｙ５）、インドジカルボシアニン５．５（Ｃｙ５．５）、３−（−カルボキシ−ペンチル）−３'エチル−５，５'−ジメチルオキサカルボシアニン（ＣｙＡ）などのシアニン；１Ｈ，５Ｈ，１１Ｈ，１５Ｈ−キサンテノ［２，３，４−ｉｊ：５，６，７−ｉ'ｊ'］ジキノリジン−１８−イウム、９−［２（または４）−［［［６−［２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−６−オキソヘキシル］アミノ］スルホニル］−４（または２）−スルホフェニル］−２，３，６，７，１２，１３，１６，１７オクタヒドロ−分子内塩（ＴＲまたはテキサスレッド）；ＢＯＤＩＰＹ（商標）色素；ベンゾオキサジアゾール；スチルベン；ピレン；緑色蛍光タンパク質、増強緑色蛍光タンパク質（ＥＧＦＰ）、不安定化ＥＧＦＰ、赤色蛍光タンパク質（例えばＤｓＲｅｄ）、ｄｓＲＥｄ変異体のｍＲＦＰｍａｒｓおよびｍＲＦＰｒｕｂｙ、黄色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、青色蛍光タンパク質、濃青色蛍光タンパク質などの蛍光タンパク質、およびそれらの変異体；９９ｍＴｃ、９５Ｔｃ、１１１Ｉｎ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、Ｇａ、６８Ｇａ、１５３Ｇｄ、１８Ｆ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、４７Ｓｃ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、８９Ｓｒ、８６Ｙ、８７Ｙ、９０Ｙ、１０５Ｒｈ、１１１Ａｇ、１１１Ｉｎ、１１７ｍＳｎ、１４９Ｐｍ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉなどの放射性同位元素、Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、およびＭｎ（ＩＩ）などの常磁性金属イオン；Ｒｅ、Ｓｍ、Ｈｏ、Ｌｕ、Ｐｍ、Ｙ、Ｂｉ、Ｐｄ、Ｇｄ、Ｌａ、Ａｕ、Ａｕ、Ｙｂ、Ｄｙ、Ｃｕ、Ｒｈ、Ａｇ、およびＩｒなどのＸ線吸収体；ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０２】
前記ナノ粒子が、凝集物のインビボ寿命を増加させる少なくとも１つの部分を含む、請求項５８〜１０１のいずれか一項に記載の凝集物。
【請求項１０３】
前記少なくとも１つの部分がポリエチレングリコールである、請求項１０２に記載の凝集物。
【請求項１０４】
前記治療剤が血管収縮剤である、請求項６９に記載の凝集物。
【請求項１０５】
前記血管収縮剤が、アルファ−アドレナリン受容体アゴニスト、カテコールアミン、バソプレッシン、バソプレッシン受容体モジュレーター、およびカルシウムチャネルアゴニストからなる群から選択される、請求項１０４に記載の凝集物。
【請求項１０６】
前記血管収縮剤が、硫酸アルミニウム、アミデフリン、アンフェタミン、アンジオテンシン、抗ヒスタミン薬、アルギプレシン、次没食子酸ビスマス、カファミノール、カフェイン、カテコールアミン、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、ドーパミン、エフェドリン、エピネフリン、フェリプレシン、インダナゾリン、イソプロテレノール、リセルグ酸ジエチルアミン、リプレシン（ＬＶＰ）、リセルグ酸、メフェドロン、メトキサミン、メチルフェニデート、メチゾリン、メタラミノール、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、ノルエピネフリン、オクトドリン、オルニプレシン、オキシメタゾリン、フェニルエタノールアミン、フェニレフリン、フェニルイソプロピルアミン、フェニルプロパノールアミン、フェニプレッシン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、サイロシビン、テトラヒドララジン、テトラヒドロゾリン、塩酸テトラヒドロゾリン、硫酸亜鉛を含む塩酸テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシン、バソトシン、キシロメタゾリン、酸化亜鉛、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１０４または１０５に記載の凝集物。
【請求項１０７】
それを必要とする対象に赤血球を投与することを含む、対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変および／または内出血を治療する方法であって、該赤血球が治療剤を含み、該治療剤が赤血球の中に被包されており、該治療剤が、所定の剪断応力に曝露された場合に該所定の剪断応力超で赤血球から放出される、方法。
【請求項１０８】
それを必要とする対象に赤血球を投与することを含む、対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変および／または内出血をイメージングする方法であって、該赤血球がイメージング剤を含み、該イメージング剤が赤血球の中に被包されており、該イメージング剤が、所定の剪断応力に曝露された場合に該所定の剪断応力超で赤血球から放出される、方法。
【請求項１０９】
前記狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、間欠性跛行（末梢動脈狭窄症）、アンギナ（冠状動脈狭窄症）、頚動脈狭窄症、大動脈弁狭窄症、ボタン穴狭窄症、石灰化結節性狭窄症、冠状動脈口狭窄症、二重大動脈狭窄症、魚口僧帽弁狭窄症、特発性肥厚性大動脈弁下部狭窄症、漏斗部狭窄症、僧帽弁狭窄症、筋性大動脈弁下部狭窄症、肺動脈弁狭窄症、肺動脈塞栓症、肺高血圧症、大動脈弁下部狭窄症、弁下部狭窄症、大動脈弁上部狭窄症、三尖弁狭窄症、腎動脈狭窄症、幽門狭窄症（胃の流出閉塞）、閉塞性黄疸（胆管狭窄症）、腸閉塞症、包茎、水頭症、狭窄性腱鞘炎、脊椎管狭窄症、声門下狭窄症（ＳＧＳ）、高血圧症、鎌状赤血球貧血症、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１０７または１０８に記載の方法。
【請求項１１０】
前記狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、外傷または損傷、アテローム性動脈硬化症、先天性欠損、糖尿病、医原病、感染、炎症、虚血、腫瘍、血管攣縮、冠血管攣縮、レイノー現象、脳卒中、血液凝固、モヤモヤ病、高安病、結節性多発動脈炎、播種状エリトマトーデス、関節リウマチ、脊椎腫瘍、骨ページェット病、フッ素症、血液透析、鎌状赤血球貧血症、およびそれらの任意の組合せに起因する、請求項１０７または１０８に記載の方法。
【請求項１１１】
前記内出血が、外傷、高血圧による血管破裂、感染（例えば、エボラ、マールブルク）、癌、壊血病、肝細胞腫、自己免疫性血小板減少症、子宮外妊娠、悪性低温症、卵巣嚢胞、肝癌、ビタミンＫ欠乏症、血友病、薬物の副作用の結果である、請求項１０７または１０８に記載の方法。
【請求項１１２】
前記治療剤が抗トロンビン剤および／または血栓溶解剤である、請求項１０７〜１１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１３】
前記抗トロンビン剤または血栓溶解剤が、抗凝血剤、凝血促進剤アンタゴニスト、抗血小板剤、血栓溶解剤、抗血栓溶解剤アンタゴニスト、線維素溶解酵素、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１１２に記載の方法。
【請求項１１４】
前記治療剤が血栓形成剤である、請求項１０７〜１１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１５】
前記血栓形成剤が、血栓溶解剤アンタゴニスト、抗凝血剤アンタゴニスト、凝血促進酵素、凝血促進分子、およびそれらの任意の組合せから選択される、請求項１１４に記載の方法。
【請求項１１６】
前記血栓形成剤が、プロタミン、ビタミンＫ１、アミノカプロン酸（アミカー）、トラネキサム酸（アムスタット）、アナグレリド、アルガトロバン、シロスタゾール、ダルトロバン、デフィブロチド、エノキサパリン、フラキシパリン、インドブフェン、ラモパラン、オザグレル、ピコタミド、プラフィブリド、テデルパリン、チクロピジン、トリフルサル、コラーゲン、およびコラーゲンコーティング粒子、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１１４または１１５に記載の方法。
【請求項１１７】
前記治療剤が、組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、ストレプトキナーゼ（ＳＫ）、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（ｕＰＡ）、アルテプラーゼ（Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、レテプラーゼ（ｒ−ＰＡまたはｒｅｔａｖａｓｅ（登録商標）、Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｉｎｃ．としても知られている）、テネクテプラーゼ（ＴＮＫ（商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、Ｓｔｒｅｐｔａｓｅ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，ＬＰ）、ラノテプラーゼ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、モンテプラーゼ（エーザイ株式会社）、サルプラーゼ（ｒ−ｓｃｕ−ＰＡおよびｒｅｓｃｕｐａｓｅ（商標）、Ｇｒｕｎｅｎｔｈａｌ  ＧｍｂＨ，Ｃｏｒｐ．としても知られている）、スタフィロキナーゼ、およびアニソイル化されたプラスミノーゲン−ストレプトキナーゼ活性化因子複合体（ＡＰＳＡＣ、Ａｎｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ、およびＥｍｉｎａｓｅ（登録商標）、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｃｏｒｐ．としても知られている）、ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される血栓溶解剤である、請求項１０７〜１１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１８】
前記治療剤が抗炎症剤である、請求項１０７〜１１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１９】
前記抗炎症剤が、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ−アスピリン、イブプロフェン、またはナプロキセンなど）、コルチコステロイド（プレドニゾンなど）、抗マラリア薬（ヒドロキシクロロキンなど）、メトトレキセート、スルファサラジン、レフルノミド、抗ＴＮＦ薬、シクロホスファミド、ミコフェノレート、デキサメタゾン、ロシグリタゾン、プレドニゾロン、コルチコステロン、ブデソニド、エストロゲン、エストラジオール、スルファサラジン、フェノフィブレート、プラバスタチン、シンバスタチン、ピオグリタゾン、アセチルサリチル酸、ミコフェノール酸、メサラミン、ヒドロキシ尿素、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項１１８に記載の方法。
【請求項１２０】
前記治療剤が血管拡張剤である、請求項１０７〜１１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２１】
前記血管拡張剤が、アルファ−アドレナリン受容体アンタゴニスト（α−遮断薬）、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、ベータ２−アドレナリン受容体アゴニスト（β２−アゴニスト）、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、中枢作用性交感神経遮断剤、直接作用性血管拡張剤、エンドセリン受容体アンタゴニスト、神経節遮断薬、ニトロダイレーター、ホスホジエステラーゼ阻害剤、カリウムチャネル開口剤、レニン阻害剤、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２２】
前記血管拡張剤が、プラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、トリマゾシン、フェントラミン、フェノキシベンザミン、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、キナプリル、ラミプリル、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルメサルタン、テルミサルタン、バルサルタン、エピネフリン、ノルエピネフリン、ドーパミン、ドブタミン、イソプロテレノール、アムロジピン、フェロジピン、イソラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、クロニジン、グアナベンズ、グアンファシン、α−メチルドーパ、ヒドララジン、ボセンタン、カンシル酸トリメタファン、二硝酸イソソルビド、一硝酸イソソルビド、ニトログリセリン、四硝酸エリトリチル、四硝酸ペンタエリスリトール、ニトロプルシドナトリウム、ミルリノン、イナムリノン（以前はアムリノン）、シロスタゾール、シルデナフィル、タダラフィル、ミノキシジル、アリスキレン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項１２０または１２１に記載の方法。
【請求項１２３】
前記治療剤が、抗悪性腫瘍剤、抗増殖剤、および／または有糸分裂阻害剤、および／または遊走阻害剤である、請求項１０７〜１１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２４】
前記抗悪性腫瘍剤／抗増殖剤／有糸分裂阻害剤／遊走阻害剤が、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、シクロスポリン、シスプラチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エポチロン、メトトレキセート、アザチオプリン、アドリアマイシン、およびマイトマイシン；エンドスタチン、アンジオスタチンおよびチミジンキナーゼ阻害剤、クラドリビン、タキソール、トラピジル、ハロフジノン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１２５】
前記治療剤が、アスピリン、ワルファリン（クマジン）、アセノクマロール、アンクロッド、アニシンジオン、ブロミンジオン、クロリンジオン、クメタロール、シクロクマロール、デキストラン、デキストラン硫酸ナトリウム、ジクマロール、ジフェナジオン、ビスクマ酢酸エチル、エチリデンジクマロール、フルインジオン、ヘパリン、ヒルジン、リアポレートナトリウム、オキサジジオン、ペントサンポリサルフェート、フェニンジオン、フェンプロクモン、ホスビチン、ピコタミド、チオクロマロール、ジピリダモール（ペルサンチン）、スルフィンピラゾン（アンツラン）、チクロピジン（チクリド）、組織プラスミノーゲン活性化因子（アクチバーゼ）、プラスミン、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（アボキナーゼ）、ストレプトキナーゼ（ストレプターゼ）、およびアニストレプラーゼ／ＡＰＳＡＣ（エミナーゼ）、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項１０７〜１１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２６】
前記治療剤が血管収縮剤である、請求項１０７〜１１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２７】
前記血管収縮剤が、アルファ−アドレナリン受容体アゴニスト、カテコールアミン、バソプレッシン、バソプレッシン受容体モジュレーター、およびカルシウムチャネルアゴニストからなる群から選択される、請求項１２６に記載の方法。
【請求項１２８】
前記血管収縮剤が、硫酸アルミニウム、アミデフリン、アンフェタミン、アンジオテンシン、抗ヒスタミン薬、アルギプレシン、次没食子酸ビスマス、カファミノール、カフェイン、カテコールアミン、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、ドーパミン、エフェドリン、エピネフリン、フェリプレシン、インダナゾリン、イソプロテレノール、リセルグ酸ジエチルアミン、リプレシン（ＬＶＰ）、リセルグ酸、メフェドロン、メトキサミン、メチルフェニデート、メチゾリン、メタラミノール、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、ノルエピネフリン、オクトドリン、オルニプレシン、オキシメタゾリン、フェニルエタノールアミン、フェニレフリン、フェニルイソプロピルアミン、フェニルプロパノールアミン、フェニプレッシン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、サイロシビン、テトラヒドララジン、テトラヒドロゾリン、塩酸テトラヒドロゾリン、硫酸亜鉛を含む塩酸テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシン、バソトシン、キシロメタゾリン、酸化亜鉛、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１２６または１２７に記載の方法。
【請求項１２９】
前記イメージング剤が、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）色素（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＣｏｒｐ．；Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆ）；フルオレセイン；フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）；Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ（商標）；テトラローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）、５−カルボキシフルオレセイン（ＦＡＭ）；２'７'−ジメトキシ−４'５'−ジクロロ−６−カルボキシフルオレセイン（ＪＯＥ）；テトラクロロフルオレセイン（ＴＥＴ）；６−カルボキシローダミン（Ｒ６Ｇ）；Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ'−テトラメチル−６−カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）；６−カルボキシ−Ｘ−ローダミン（ＲＯＸ）；１−ジメチルアミノ−ナフチル−５−スルホネート、１−アニリノ−８−ナフタレンスルホネート、２−ｐ−トルイジニル−６−ナフタレンスルホネート、および５−（２'−アミノエチル）アミノナフタレン−１−スルホン酸（ＥＤＡＮＳ）を含むナフチルアミノ化合物など、アルファまたはベータ位にアミノ基を有するナフチルアミン色素；３−フェニル−７−イソシアナトクマリンなどのクマリン；９−イソチオシアナトアクリジンおよびアクリジンオレンジなどのアクリジン；Ｎ−（ｐ（２−ベンゾオキサゾリル）フェニル）マレイミド；Ｃｙ２、インドジカルボシアニン３（Ｃｙ３）、インドジカルボシアニン５（Ｃｙ５）、インドジカルボシアニン５．５（Ｃｙ５．５）、３−（−カルボキシ−ペンチル）−３'エチル−５，５'−ジメチルオキサカルボシアニン（ＣｙＡ）などのシアニン；１Ｈ，５Ｈ，１１Ｈ，１５Ｈ−キサンテノ［２，３，４−ｉｊ：５，６，７−ｉ'ｊ'］ジキノリジン−１８−イウム、９−［２（または４）−［［［６−［２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−６−オキソヘキシル］アミノ］スルホニル］−４（または２）−スルホフェニル］−２，３，６，７，１２，１３，１６，１７オクタヒドロ−分子内塩（ＴＲまたはテキサスレッド）；ＢＯＤＩＰＹ（商標）色素；ベンゾオキサジアゾール；スチルベン；ピレン；緑色蛍光タンパク質、増強緑色蛍光タンパク質（ＥＧＰＦ）、不安定化ＥＧＦＰ、赤色蛍光タンパク質（例えばＤｓＲｅｄ）、ｄｓＲＥｄ変異体のｍＲＦＰｍａｒｓおよびｍＲＦＰｒｕｂｙ、黄色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、青色蛍光タンパク質、濃青色蛍光タンパク質などの蛍光タンパク質、およびそれらの変異体；９９ｍＴｃ、９５Ｔｃ、１１１Ｉｎ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、Ｇａ、６８Ｇａ、１５３Ｇｄ、１８Ｆ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、４７Ｓｃ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、８９Ｓｒ、８６Ｙ、８７Ｙ、９０Ｙ、１０５Ｒｈ、１１１Ａｇ、１１１Ｉｎ、１１７ｍＳｎ、１４９Ｐｍ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉなどの放射性同位元素；Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、およびＭｎ（ＩＩ）などの常磁性金属イオン；Ｒｅ、Ｓｍ、Ｈｏ、Ｌｕ、Ｐｍ、Ｙ、Ｂｉ、Ｐｄ、Ｇｄ、Ｌａ、Ａｕ、Ａｕ、Ｙｂ、Ｄｙ、Ｃｕ、Ｒｈ、Ａｇ、およびＩｒなどのＸ線吸収体；およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１０８〜１１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３０】
前記ＲＢＣがリガンドを含む、請求項１０７〜１２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３１】
前記リガンドが、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ペプチドミメティック、糖タンパク質、レクチン、ヌクレオシド、ヌクレオチド、核酸（例えば、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、遺伝子、制御領域および終結領域を含む遺伝子、ウイルスもしくはプラスミドＤＮＡなどの自己複製システム、一本鎖および二本鎖のｓｉＲＮＡ、ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ作用物質またはｉＲＮＡ作用物質）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣物、スーパーｍｉｒ（ｓｕｐｅｒｍｉｒ）、アプタマー、アンチｍｉｒ、アンチｍｉｒ、アンタゴｍｉｒ、Ｕ１アダプター、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化因子、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ならびにデコイオリゴヌクレオチド）、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、リポ多糖類、脂質、ビタミン、ステロイド、ホルモン、補因子、受容体、受容体リガンド、ならびにそれらのアナログおよび誘導体からなる群から選択される、請求項１３０に記載の方法。
【請求項１３２】
前記リガンドが、ポリリシン（ＰＬＬ）、ポリＬ−アスパラギン酸、ポリＬ−グルタミン酸、スチレン−無水マレイン酸コポリマー、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）コポリマー、ジビニルエーテル−無水マレイン酸コポリマー、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミドコポリマー（ＨＭＰＡ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリウレタン、ポリ（２−エチルアクリル酸）、Ｎ−イソプロピルアクリルアミドポリマー、ポリホスファジン、ポリエチレンイミン、スペルミン、スペルミジン、ポリアミン、偽ペプチド−ポリアミン、ペプチドミメティックポリアミン、デンドリマーポリアミン、アルギニン、アミジン、プロタミン、チロトロピン、メラノトロピン、レクチン、サーファクタントタンパク質Ａ、ムチン、トランスフェリン、ビスホスホネート、ポリグルタメート、ポリアスパルタート、アプタマー、アシアロフェツイン、ヒアルロナン、プロコラーゲン、インスリン、トランスフェリン、アルブミン、アクリジン、クロス−ソラレン、マイトマイシンＣ、ＴＰＰＣ４、テキサフィリン、サフィリン、多環式芳香族炭化水素（例えば、フェナジン、ジヒドロフェナジン）、胆汁酸、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、１−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、１，３−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、１，３−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ３−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ３−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチルまたはフェノキサジン）、ＲＧＤペプチド、放射標識マーカー、ハプテン、ナプロキセン、アスピリン、ジニトロフェニル、ＨＲＰ、ＡＰ、レクチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＢ、葉酸、Ｂ１２、リボフラビン、ビオチン、ピリドキサール、タキソン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、サイトカラシン、ノコダゾール、ジャプラキノリド、ラトランクリンＡ、ファロイジン、スウィンホリドＡ、インダノシン、ミオセルビン、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦアルファ）、インターロイキン−１ベータ、ガンマインターフェロン、ＧａｌＮＡｃ、ガラクトース、マンノース、マンノース−６Ｐ、ＧａｌＮＡｃクラスター、マンノースクラスター、ガラクトースクラスターなどの糖クラスター、アプタマー、インテグリン受容体リガンド、ケモカイン受容体リガンド、セロトニン受容体リガンド、ＰＳＭＡ、エンドセリン、ＧＣＰＩＩ、ソマトスタチン、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１３０または１３１に記載の方法。
【請求項１３３】
前記リガンドが、
2018065823.tif 000017
、セクロピン、リコトキシン（ｌｙｃｏｔｏｘｉｎ）、パラダキシン（ｐａｒａｄａｘｉｎ）、ブホリン（ｂｕｆｏｒｉｎ）、ＣＰＦ、ボンビニン様ペプチド（ＢＬＰ）、カテリシジン、セラトトキシン（ｃｅｒａｔｏｔｏｘｉｎ）、Ｓ．クラバ（Ｓ．Ｃｌａｖａ）ペプチド、ヌタウナギ腸内抗微生物ペプチド（ｈａｇｆｉｓｈ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ）（ＨＦＩＡＰ）、マガイニン、ブレビニン−２（ｂｒｅｖｉｎｉｎ−２）、デルマセプチン、メリチン、プルロシジン（ｐｌｅｕｒｏｃｉｄｉｎ）、Ｈ２Ａペプチド、ゼノパスペプチド、エスクレンチン−１、カエリン（ｃａｅｒｉｎ）ならびにそれらの任意のアナログおよび誘導体からなる群から選択されるペプチドである、請求項１３０〜１３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３４】
前記ＲＢＣがヒト赤血球である、請求項１０７〜１３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３５】
前記ＲＢＣが自己の赤血球である、請求項１０７〜１３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３６】
前記所定の剪断応力が、少なくとも７０ｄｙｎ／ｃｍ２である、請求項１０７〜１３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３７】
前記投与が、注射、点滴、点眼、吸入、または経口摂取によるものである、請求項１０７〜１３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３８】
それを必要とする対象に治療剤を含むマイクロカプセルを投与することを含む、対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変および／または内出血を治療する方法であって、該治療剤がマイクロカプセルの中に被包されており、該マイクロカプセルが、所定の剪断応力に曝露された場合に該所定の剪断応力超で分解する、方法。
【請求項１３９】
それを必要とする対象にイメージング剤を含むマイクロカプセルを投与することを含む、対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変および／または内出血をイメージングする方法であって、治療剤がマイクロカプセルの中に被包されており、該マイクロカプセルが、所定の剪断応力に曝露された場合に該所定の剪断応力超で分解する、方法。
【請求項１４０】
前記狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、間欠性跛行（末梢動脈狭窄症）、アンギナ（冠状動脈狭窄症）、頚動脈狭窄症、大動脈弁狭窄症、ボタン穴狭窄症、石灰化結節性狭窄症、冠状動脈口狭窄症、二重大動脈狭窄症、魚口僧帽弁狭窄症、特発性肥厚性大動脈弁下部狭窄症、漏斗部狭窄症、僧帽弁狭窄症、筋性大動脈弁下部狭窄症、肺動脈弁狭窄症、肺動脈塞栓症、肺高血圧症、大動脈弁下部狭窄症、弁下部狭窄症、大動脈弁上部狭窄症、三尖弁狭窄症、腎動脈狭窄症、幽門狭窄症（胃の流出閉塞）、閉塞性黄疸（胆管狭窄症）、腸閉塞症、包茎、水頭症、狭窄性腱鞘炎、脊椎管狭窄症、声門下狭窄症（ＳＧＳ）、高血圧症、鎌状赤血球貧血症、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１３８または１３９に記載の方法。
【請求項１４１】
前記狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、外傷または損傷、アテローム性動脈硬化症、先天性欠損、糖尿病、医原病、感染、炎症、虚血、腫瘍、血管攣縮、冠血管攣縮、レイノー現象、脳卒中、血液凝固、モヤモヤ病、高安病、結節性多発動脈炎、播種状エリトマトーデス、関節リウマチ、脊椎腫瘍、骨ページェット病、フッ素症、血液透析、鎌状赤血球貧血症、およびそれらの任意の組合せに起因する、請求項１３８〜１４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４２】
前記内出血が、外傷、高血圧による血管破裂、感染（例えば、エボラ、マールブルク）、癌、壊血病、肝細胞腫、自己免疫性血小板減少症、子宮外妊娠、悪性低温症、卵巣嚢胞、肝癌、ビタミンＫ欠乏症、血友病、薬物の副作用の結果である、請求項１３８〜１４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４３】
前記治療剤が抗トロンビン剤および／または血栓溶解剤である、請求項１３８〜１４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４４】
前記抗トロンビン剤または血栓溶解剤が、抗凝血剤、凝血促進剤アンタゴニスト、抗血小板剤、血栓溶解剤、抗血栓溶解剤アンタゴニスト、線維素溶解酵素、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１４３に記載の方法。
【請求項１４５】
前記治療剤が血栓形成剤である、請求項１３８〜１４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４６】
前記血栓形成剤が、血栓溶解剤アンタゴニスト、抗凝血剤アンタゴニスト、凝血促進酵素、凝血促進分子、およびそれらの任意の組合せから選択される、請求項１４５に記載の方法。
【請求項１４７】
前記血栓形成剤が、プロタミン、ビタミンＫ１、アミノカプロン酸（アミカー）、トラネキサム酸（アムスタット）、アナグレリド、アルガトロバン、シロスタゾール、ダルトロバン、デフィブロチド、エノキサパリン、フラキシパリン、インドブフェン、ラモパラン、オザグレル、ピコタミド、プラフィブリド、テデルパリン、チクロピジン、トリフルサル、コラーゲン、およびコラーゲンコーティング粒子、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１４５または１４６に記載の方法。
【請求項１４８】
前記治療剤が、組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、ストレプトキナーゼ（ＳＫ）、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（ｕＰＡ）、アルテプラーゼ（Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、レテプラーゼ（ｒ−ＰＡまたはｒｅｔａｖａｓｅ（登録商標）、Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｉｎｃ．としても知られている）、テネクテプラーゼ（ＴＮＫ（商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、Ｓｔｒｅｐｔａｓｅ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，ＬＰ）、ラノテプラーゼ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、モンテプラーゼ（エーザイ株式会社）、サルプラーゼ（ｒ−ｓｃｕ−ＰＡおよびｒｅｓｃｕｐａｓｅ（商標）、Ｇｒｕｎｅｎｔｈａｌ  ＧｍｂＨ，Ｃｏｒｐ．としても知られている）、スタフィロキナーゼ、およびアニソイル化されたプラスミノーゲン−ストレプトキナーゼ活性化因子複合体（ＡＰＳＡＣ、Ａｎｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ、およびＥｍｉｎａｓｅ（登録商標）、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｃｏｒｐ．としても知られている）、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される血栓溶解剤である、請求項１３８〜１４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４９】
前記治療剤が抗炎症剤である、請求項１３８〜１４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５０】
前記抗炎症剤が、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ−アスピリン、イブプロフェン、またはナプロキセンなど）、コルチコステロイド（プレドニゾンなど）、抗マラリア薬（ヒドロキシクロロキンなど）、メトトレキセート、スルファサラジン、レフルノミド、抗ＴＮＦ薬、シクロホスファミド、ミコフェノレート、デキサメタゾン、ロシグリタゾン、プレドニゾロン、コルチコステロン、ブデソニド、エストロゲン、エストラジオール、スルファサラジン、フェノフィブレート、プラバスタチン、シンバスタチン、ピオグリタゾン、アセチルサリチル酸、ミコフェノール酸、メサラミン、ヒドロキシ尿素、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項１４９に記載の方法。
【請求項１５１】
治療剤が血管拡張剤である、請求項１３８〜１４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５２】
前記血管拡張剤が、アルファ−アドレナリン受容体アンタゴニスト（α−遮断薬）、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、ベータ２−アドレナリン受容体アゴニスト（β２−アゴニスト）、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、中枢作用性交感神経遮断剤、直接作用性血管拡張剤、エンドセリン受容体アンタゴニスト、神経節遮断薬、ニトロダイレーター、ホスホジエステラーゼ阻害剤、カリウムチャネル開口剤、レニン阻害剤、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１５１に記載の方法。
【請求項１５３】
前記血管拡張剤が、プラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、トリマゾシン、フェントラミン、フェノキシベンザミン、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、キナプリル、ラミプリル、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルメサルタン、テルミサルタン、バルサルタン、エピネフリン、ノルエピネフリン、ドーパミン、ドブタミン、イソプロテレノール、アムロジピン、フェロジピン、イソラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、クロニジン、グアナベンズ、グアンファシン、α−メチルドーパ、ヒドララジン、ボセンタン、カンシル酸トリメタファン、二硝酸イソソルビド、一硝酸イソソルビド、ニトログリセリン、四硝酸エリトリチル、四硝酸ペンタエリスリトール、ニトロプルシドナトリウム、ミルリノン、イナムリノン（以前はアムリノン）、シロスタゾール、シルデナフィル、タダラフィル、ミノキシジル、アリスキレン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項１５１または１５２に記載の方法。
【請求項１５４】
前記治療剤が、抗悪性腫瘍剤、抗増殖剤、および／または有糸分裂阻害剤、および／または遊走阻害剤である、請求項１３８〜１４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５５】
前記抗悪性腫瘍剤／抗増殖剤／有糸分裂阻害剤／遊走阻害剤が、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、シクロスポリン、シスプラチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エポチロン、メトトレキセート、アザチオプリン、アドリアマイシン、およびマイトマイシン；エンドスタチン、アンジオスタチンおよびチミジンキナーゼ阻害剤、クラドリビン、タキソール、トラピジル、ハロフジノン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項１５４に記載の方法。
【請求項１５６】
前記治療剤が、アスピリン、ワルファリン（クマジン）、アセノクマロール、アンクロッド、アニシンジオン、ブロミンジオン、クロリンジオン、クメタロール、シクロクマロール、デキストラン、デキストラン硫酸ナトリウム、ジクマロール、ジフェナジオン、ビスクマ酢酸エチル、エチリデンジクマロール、フルインジオン、ヘパリン、ヒルジン、リアポレートナトリウム、オキサジジオン、ペントサンポリサルフェート、フェニンジオン、フェンプロクモン、ホスビチン、ピコタミド、チオクロマロール、ジピリダモール（ペルサンチン）、スルフィンピラゾン（アンツラン）、チクロピジン（チクリド）、組織プラスミノーゲン活性化因子（アクチバーゼ）、プラスミン、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（アボキナーゼ）、ストレプトキナーゼ（ストレプターゼ）、およびアニストレプラーゼ／ＡＰＳＡＣ（エミナーゼ）、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項１３８〜１４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５７】
前記治療剤が血管収縮剤である、請求項１３８〜１４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５８】
前記血管収縮剤が、アルファ−アドレナリン受容体アゴニスト、カテコールアミン、バソプレッシン、バソプレッシン受容体モジュレーター、およびカルシウムチャネルアゴニストからなる群から選択される、請求項１５７に記載の方法。
【請求項１５９】
前記血管収縮剤が、硫酸アルミニウム、アミデフリン、アンフェタミン、アンジオテンシン、抗ヒスタミン薬、アルギプレシン、次没食子酸ビスマス、カファミノール、カフェイン、カテコールアミン、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、ドーパミン、エフェドリン、エピネフリン、フェリプレシン、インダナゾリン、イソプロテレノール、リセルグ酸ジエチルアミン、リプレシン（ＬＶＰ）、リセルグ酸、メフェドロン、メトキサミン、メチルフェニデート、メチゾリン、メタラミノール、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、ノルエピネフリン、オクトドリン、オルニプレシン、オキシメタゾリン、フェニルエタノールアミン、フェニレフリン、フェニルイソプロピルアミン、フェニルプロパノールアミン、フェニプレッシン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、サイロシビン、テトラヒドララジン、テトラヒドロゾリン、塩酸テトラヒドロゾリン、硫酸亜鉛を含む塩酸テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシン、バソトシン、キシロメタゾリン、酸化亜鉛、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１５７または１５８に記載の方法。
【請求項１６０】
前記イメージング剤が、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）色素（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＣｏｒｐ．；Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆ）；フルオレセイン；フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）；Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ（商標）；テトラローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）、５−カルボキシフルオレセイン（ＦＡＭ）；２'７'−ジメトキシ−４'５'−ジクロロ−６−カルボキシフルオレセイン（ＪＯＥ）；テトラクロロフルオレセイン（ＴＥＴ）；６−カルボキシローダミン（Ｒ６Ｇ）；Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ'−テトラメチル−６−カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）；６−カルボキシ−Ｘ−ローダミン（ＲＯＸ）；１−ジメチルアミノ−ナフチル−５−スルホネート、１−アニリノ−８−ナフタレンスルホネート、２−ｐ−トルイジニル−６−ナフタレンスルホネート、および５−（２'−アミノエチル）アミノナフタレン−１−スルホン酸（ＥＤＡＮＳ）を含むナフチルアミノ化合物など、アルファまたはベータ位にアミノ基を有するナフチルアミン色素；３−フェニル−７−イソシアナトクマリンなどのクマリン；９−イソチオシアナトアクリジンおよびアクリジンオレンジなどのアクリジン；Ｎ−（ｐ（２−ベンゾオキサゾリル）フェニル）マレイミド；Ｃｙ２、インドジカルボシアニン３（Ｃｙ３）、インドジカルボシアニン５（Ｃｙ５）、インドジカルボシアニン５．５（Ｃｙ５．５）、３−（−カルボキシ−ペンチル）−３'エチル−５，５'−ジメチルオキサカルボシアニン（ＣｙＡ）などのシアニン；１Ｈ，５Ｈ，１１Ｈ，１５Ｈ−キサンテノ［２，３，４−ｉｊ：５，６，７−ｉ'ｊ'］ジキノリジン−１８−イウム、９−［２（または４）−［［［６−［２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−６−オキソヘキシル］アミノ］スルホニル］−４（または２）−スルホフェニル］−２，３，６，７，１２，１３，１６，１７オクタヒドロ−分子内塩（ＴＲまたはテキサスレッド）；ＢＯＤＩＰＹ（商標）色素；ベンゾオキサジアゾール；スチルベン；ピレン；緑色蛍光タンパク質、増強緑色蛍光タンパク質（ＥＧＦＰ）、不安定化ＥＧＦＰ、赤色蛍光タンパク質（例えばＤｓＲｅｄ）、ｄｓＲＥｄ変異体のｍＲＦＰｍａｒｓおよびｍＲＦＰｒｕｂｙ、黄色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、青色蛍光タンパク質、濃青色蛍光タンパク質などの蛍光タンパク質、およびそれらの変異体；９９ｍＴｃ、９５Ｔｃ、１１１Ｉｎ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、Ｇａ、６８Ｇａ、１５３Ｇｄ、１８Ｆ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、４７Ｓｃ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、８９Ｓｒ、８６Ｙ、８７Ｙ、９０Ｙ、１０５Ｒｈ、１１１Ａｇ、１１１Ｉｎ、１１７ｍＳｎ、１４９Ｐｍ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉなどの放射性同位元素；Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、およびＭｎ（ＩＩ）などの常磁性金属イオン；Ｒｅ、Ｓｍ、Ｈｏ、Ｌｕ、Ｐｍ、Ｙ、Ｂｉ、Ｐｄ、Ｇｄ、Ｌａ、Ａｕ、Ａｕ、Ｙｂ、Ｄｙ、Ｃｕ、Ｒｈ、Ａｇ、およびＩｒなどのＸ線吸収体；およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１３９〜１４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６１】
前記マイクロカプセルがリガンドを含む、請求項１３８〜１６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６２】
前記リガンドが、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ペプチドミメティック、糖タンパク質、レクチン、ヌクレオシド、ヌクレオチド、核酸（例えば、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、遺伝子、制御領域および終結領域を含む遺伝子、ウイルスもしくはプラスミドＤＮＡなどの自己複製システム、一本鎖および二本鎖のｓｉＲＮＡ、ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ作用物質またはｉＲＮＡ作用物質）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣物、スーパーｍｉｒ（ｓｕｐｅｒｍｉｒ）、アプタマー、アンチｍｉｒ、アンチｍｉｒ、アンタゴｍｉｒ、Ｕ１アダプター、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化因子、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ならびにデコイオリゴヌクレオチド）、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、リポ多糖類、脂質、ビタミン、ステロイド、ホルモン、補因子、受容体、受容体リガンド、ならびにそれらのアナログおよび誘導体からなる群から選択される、請求項１６１に記載の方法。
【請求項１６３】
前記リガンドが、ポリリシン（ＰＬＬ）、ポリＬ−アスパラギン酸、ポリＬ−グルタミン酸、スチレン−無水マレイン酸コポリマー、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）コポリマー、ジビニルエーテル−無水マレイン酸コポリマー、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミドコポリマー（ＨＭＰＡ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリウレタン、ポリ（２−エチルアクリル酸）、Ｎ−イソプロピルアクリルアミドポリマー、ポリホスファジン、ポリエチレンイミン、スペルミン、スペルミジン、ポリアミン、偽ペプチド−ポリアミン、ペプチドミメティックポリアミン、デンドリマーポリアミン、アルギニン、アミジン、プロタミン、チロトロピン、メラノトロピン、レクチン、サーファクタントタンパク質Ａ、ムチン、トランスフェリン、ビスホスホネート、ポリグルタメート、ポリアスパルタート、アプタマー、アシアロフェツイン、ヒアルロナン、プロコラーゲン、インスリン、トランスフェリン、アルブミン、アクリジン、クロス−ソラレン、マイトマイシンＣ、ＴＰＰＣ４、テキサフィリン、サフィリン、多環式芳香族炭化水素（例えば、フェナジン、ジヒドロフェナジン）、胆汁酸、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、１−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、１，３−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、１，３−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ３−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ３−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチルまたはフェノキサジン）、ＲＧＤペプチド、放射標識マーカー、ハプテン、ナプロキセン、アスピリン、ジニトロフェニル、ＨＲＰ、ＡＰ、レクチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＢ、葉酸、Ｂ１２、リボフラビン、ビオチン、ピリドキサール、タキソン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、サイトカラシン、ノコダゾール、ジャプラキノリド、ラトランクリンＡ、ファロイジン、スウィンホリドＡ、インダノシン、ミオセルビン、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦアルファ）、インターロイキン−１ベータ、ガンマインターフェロン、ＧａｌＮＡｃ、ガラクトース、マンノース、マンノース−６Ｐ、ＧａｌＮＡｃクラスター、マンノースクラスター、ガラクトースクラスターなどの糖クラスター、アプタマー、インテグリン受容体リガンド、ケモカイン受容体リガンド、セロトニン受容体リガンド、ＰＳＭＡ、エンドセリン、ＧＣＰＩＩ、ソマトスタチン、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１６１または１６２に記載の方法。
【請求項１６４】
前記リガンドが、
2018065823.tif 000018
、セクロピン、リコトキシン（ｌｙｃｏｔｏｘｉｎ）、パラダキシン（ｐａｒａｄａｘｉｎ）、ブホリン（ｂｕｆｏｒｉｎ）、ＣＰＦ、ボンビニン様ペプチド（ＢＬＰ）、カテリシジン、セラトトキシン（ｃｅｒａｔｏｔｏｘｉｎ）、Ｓ．クラバ（Ｓ．Ｃｌａｖａ）ペプチド、ヌタウナギ腸内抗微生物ペプチド（ｈａｇｆｉｓｈ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ）（ＨＦＩＡＰ）、マガイニン、ブレビニン−２（ｂｒｅｖｉｎｉｎ−２）、デルマセプチン、メリチン、プルロシジン（ｐｌｅｕｒｏｃｉｄｉｎ）、Ｈ２Ａペプチド、ゼノパスペプチド、エスクレンチン−１、カエリン（ｃａｅｒｉｎ）ならびにそれらの任意のアナログおよび誘導体からなる群から選択されるペプチドである、請求項１６１〜１６３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６５】
前記所定の剪断応力が、少なくとも７０ｄｙｎ／ｃｍ２である、請求項１３８〜１６４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６６】
前記投与が、注射、点滴、点眼、吸入、または経口摂取によるものである、請求項１３８〜１６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６７】
前記マイクロカプセルが単層マイクロカプセルである、請求項１３８〜１６６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６８】
前記マイクロカプセルが多層マイクロカプセルである、請求項１３８〜１６６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６９】
前記マイクロカプセルのサイズが、約１マイクロ〜約５，０００ミクロンである、請求項１３８〜１６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７０】
前記マイクロカプセルのポリマーシェルが生体適合性ポリマーを含む、請求項１３８〜１６９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７１】
前記マイクロカプセルのポリマーシェルが、ポロキサマー、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ酸無水物、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリアミド、ポリウレタン、ポリエステルアミド、ポリオルトエステル、ポリジオキサノン、ポリアセタール、ポリケタール、ポリカーボネート、ポリオルトカーボネート、ポリジヒドロピラン、ポリホスファゼン、ポリヒドロキシブチレート、ポリヒドロキシバレレート、ポリアルキレンオキサレート、ポリアルキレンスクシネート、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（アミノ酸）、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリヒドロキシセルロース、ポリメチルメタクリレート、キチン、キトサン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ（グリセロールセバケート）（ＰＧＳ）、ゼラチン、コラーゲン、シルク、キトサン、アルギネート、セルロース、ポリ核酸、セルロースアセテート（セルロースジアセテートを含む）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリブチレン、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリアミド、ナイロン、ポリカーボネート、ポリスルフィド、ポリスルホン、ヒドロゲル（例えばアクリル）、ポリアクリロニトリル、ポリビニルアセテート、セルロースアセテートブチレート、ニトロセルロース、ウレタン／カーボネートのコポリマー、スチレン／マレイン酸のコポリマー、ポリ（エチレンイミン）、ヒアルロン、ヘパリン、アガロース、プルラン、ならびにそれらの任意の組合せを含むコポリマー、ターポリマー、およびコポリマーからなる群から選択されるポリマーを含む、請求項１３８〜１７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７２】
前記マイクロカプセルからの治療剤またはイメージング剤の放出速度が、正常な血管剪断応力下での放出に比較して、所定の剪断応力以上の剪断応力下で、少なくとも１０％高い、請求項１３８〜１７１のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、米国特許法第１１９条（ｅ）項に基づいて、２０１０年８月３０日に出願された米国仮特許出願第６１／３７８，０５７号明細書および２０１１年４月２５日に出願された同第６１／４７８，７００号明細書の利益を主張するものであり、これら両出願の内容全体は参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
政府の支援
本発明は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈからの助成金Ｒ０ｌ  ＥＳ０１６６６５ならびに米国国防省からの助成金ＢＣ０７４９８６および８１ＸＷＨ−０８−１−０６５９の下で、政府の支援によりなされた。政府は本発明において一定の権利を有する。
【０００３】
発明の分野
本発明は、狭窄症、狭窄病変、および血栓溶解療法の治療またはイメージングのための組成物および方法に関する。本発明はまた、内出血の治療またはイメージングのための組成物および方法に関する。
【背景技術】
【０００４】
発明の背景
疾患の特定部位への薬物の選択的送達は、ナノスケールの薬物担体の最も有望な利点の１つである。薬物およびイメージング剤のターゲティングは、腫瘍内のｐＨの上昇、癌における血管透過性の増大、低酸素領域内の酸素レベルの低下、細胞表面抗原の発現上昇、または病的組織へのターゲティング部分の分子親和性などの疾患状態の異常な特徴の利用に基づいている。これらの特性に応じて、種々の薬物送達スキームが開発されている。物理的な力が組織機能および疾患において主要な役割を果たすが、そのようなパラメーターに基づくターゲティング戦略は提案されていない。
【０００５】
流体剪断応力は、正常な生理学的条件下で厳密に調節される血液循環の重要な生理学的特徴である。剪断応力は、内皮細胞の表現型および遺伝子発現、血小板および赤血球（ＲＢＣ）の凝集、動脈形成および血行力学特性の調節に主要な役割を果たすことが示されている。狭窄、すなわち閉塞物、絞窄、または奇形による血管の異常な狭細は、局所血流特性を顕著に変化させ、その領域を正常な生理学的条件とは異なるものにする。例えば、アテローム硬化性狭窄部位での壁剪断応力は、正常な生理学的剪断応力レベルよりも２オーダー高くなる可能性がある。これらの異常な剪断応力は、血小板の活性化を誘導し、血栓形成を促進する。
【０００６】
推進力として、剪断は、種々の長さスケールで単一および集合的要素の形態学的および構造的変化を誘発することができる。剪断応力と、ナノ／マイクロスフェア、マイクロカプセル、およびミクロゲルを含む種々の形態の潜在的薬物担体との間の相互作用が広範に研究されてきた。剪断が増大するにつれて、単一粒子は変形し最終的に破壊される。剪断により誘発されるマイクロカプセル／ナノカプセルの分解は、皮膚にこすりつけると有効成分が放出されるような化粧用製品における使用で成功している。しかしながら、これらの手法または代替手法による、血管または体内の他の流体充満チャネル内の狭窄部位に対するターゲティング薬物送達は提案も開発もされていない。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
一態様では、本発明は、複数のナノ粒子を含む凝集物であって、剪断応力下で脱凝集する凝集物を提供する。
【０００８】
別の態様では、本発明は、対象の狭窄症および／または狭窄病変の治療またはイメージングのための方法であって、それを必要とする対象に本明細書に記載の凝集物を投与することを含む方法を提供する。
【０００９】
別の態様では、本発明は、対象の血塊および／または閉塞性病変の治療またはイメージングのための方法であって、それを必要とする対象に本明細書に記載の凝集物を投与することを含む方法を提供する。
【００１０】
さらに別の態様では、本発明は、対象の内出血の治療またはイメージングのための方法であって、それを必要とする対象に本明細書に記載の凝集物を投与することを含む方法を提供する。
【００１１】
さらに別の態様では、本発明は、本明細書の凝集物または本明細書に記載の凝集物を作製するための成分を含むキットを提供する。
【００１２】
[本発明1001]
複数のナノ粒子を含む、治療使用のための凝集物であって、所定の剪断応力に曝露された場合に該所定の剪断応力超で脱凝集する凝集物。
[本発明1002]
50μｍ以下のサイズである、本発明1001の凝集物。
[本発明1003]
前記ナノ粒子が、ポロキサマー、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ酸無水物、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリアミド、ポリウレタン、ポリエステルアミド、ポリオルトエステル、ポリジオキサノン、ポリアセタール、ポリケタール、ポリカーボネート、ポリオルトカーボネート、ポリジヒドロピラン、ポリホスファゼン、ポリヒドロキシブチレート、ポリヒドロキシバレレート、ポリアルキレンオキサレート、ポリアルキレンスクシネート、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（アミノ酸）、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリヒドロキシセルロース、ポリメチルメタクリレート、キチン、キトサン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ（グリセロールセバケート）（ＰＧＳ）、ゼラチン、コラーゲン、シルク、キトサン、アルギネート、セルロース、ポリ核酸、セルロースアセテート（セルロースジアセテートを含む）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリブチレン、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリアミド、ナイロン、ポリカーボネート、ポリスルフィド、ポリスルホン、ヒドロゲル（例えばアクリル）、ポリアクリロニトリル、ポリビニルアセテート、セルロースアセテートブチレート、ニトロセルロース、ウレタン／カーボネートのコポリマー、スチレン／マレイン酸のコポリマー、ポリ（エチレンイミン）、ヒアルロン（Ｈｙａｌｕｒｏｎ）、ヘパリン、アガロース、プルラン（Ｐｕｌｌｕｌａｎ）、ならびにそれらの任意の組合せを含むコポリマー、ターポリマー、およびコポリマーからなる群から選択されるポリマーを含む、本発明1001または1002の凝集物。
[本発明1004]
有機もしくは無機の小分子もしくは大分子、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、生体高分子、例えば、酵素、ペプチド、タンパク質、ペプチドアナログおよびその誘導体、ペプチドミメティック、脂質、炭水化物、核酸、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、遺伝子、制御領域および終結領域を含む遺伝子、ウイルスもしくはプラスミドＤＮＡなどの自己複製システム、一本鎖および二本鎖のｓｉＲＮＡ、ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ作用物質またはｉＲＮＡ作用物質）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣物、アプタマー、アンチｍｉｒ（ａｎｔｉｍｉｒ）、アンタゴｍｉｒ（ａｎｔａｇｏｍｉｒ）、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化因子、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ならびにデコイオリゴヌクレオチド）、核酸アナログおよび誘導体、細菌、植物、真菌、もしくは動物の細胞もしくは組織などの生体材料から作製された抽出物、天然もしくは合成の組成物、またはそれらの任意の組合せからなる群から選択される分子をさらに含む、本発明1001〜1003のいずれかの凝集物。
[本発明1005]
前記分子がナノ粒子中に被包されているか、またはナノ粒子の表面上に吸収／吸着されている、本発明1001〜1004のいずれかの凝集物。
[本発明1006]
前記分子がナノ粒子に共有結合している、本発明1001〜1005のいずれかの凝集物。
[本発明1007]
前記分子が生物学的に活性である、本発明1004〜1006のいずれかの凝集物。
[本発明1008]
前記生物活性が、生物アッセイにおける、刺激、阻害、調節、毒性、または致死の応答からなる群から選択される、本発明1007の凝集物。
[本発明1009]
前記生物活性が、酵素活性の表出または調節、受容体の遮断、受容体の刺激、1つまたは複数の遺伝子の発現レベルの調節、細胞増殖の調節、細胞分裂の調節、細胞遊走の調節、細胞分化の調節、細胞アポトーシスの調節、細胞形態の調節、またはそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1007または1008の凝集物。
[本発明1010]
前記分子が疎水性、親水性、または両親媒性である、本発明1005〜1009のいずれかの凝集物。
[本発明1011]
前記分子が、治療剤、またはそのアナログ、誘導体、プロドラッグ、もしくは薬学的に許容可能な塩である、本発明1004〜1010のいずれかの凝集物。
[本発明1012]
前記治療剤が抗トロンビン剤および／または血栓溶解剤である、本発明1011の凝集物。
[本発明1013]
前記抗トロンビン剤または血栓溶解剤が、抗凝血剤、凝血促進剤アンタゴニスト、抗血小板剤、血栓溶解剤、抗血栓溶解剤アンタゴニスト、線維素溶解酵素、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1012の凝集物。
[本発明1014]
前記治療剤が血栓形成剤である、本発明1011の凝集物。
[本発明1015]
前記血栓形成剤が、血栓溶解剤アンタゴニスト、抗凝血剤アンタゴニスト、凝血促進酵素、凝血促進分子、およびそれらの任意の組合せから選択される、本発明1014の凝集物。
[本発明1016]
前記血栓形成剤が、プロタミン、ビタミンＫ1、アミノカプロン酸（アミカー（ａｍｉｃａｒ））、トラネキサム酸（アムスタット（ａｍｓｔａｔ））、アナグレリド、アルガトロバン、シロスタゾール、ダルトロバン、デフィブロチド、エノキサパリン、フラキシパリン（ｆｒａｘｉｐａｒｉｎｅ）、インドブフェン、ラモパラン（ｌａｍｏｐａｒａｎ）、オザグレル、ピコタミド、プラフィブリド、テデルパリン（ｔｅｄｅｌｐａｒｉｎ）、チクロピジン、トリフルサル、コラーゲン、およびコラーゲンコーティング粒子、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1014または1015の凝集物。
[本発明1017]
前記治療剤が、組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、ストレプトキナーゼ（ＳＫ）、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（ｕＰＡ）、アルテプラーゼ（Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、レテプラーゼ（ｒ−ＰＡまたはｒｅｔａｖａｓｅ（登録商標）、Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｉｎｃ．としても知られている）、テネクテプラーゼ（ＴＮＫ（商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、Ｓｔｒｅｐｔａｓｅ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，ＬＰ）、ラノテプラーゼ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、モンテプラーゼ（エーザイ株式会社）、サルプラーゼ（ｒ−ｓｃｕ−ＰＡおよびｒｅｓｃｕｐａｓｅ（商標）、Ｇｒｕｎｅｎｔｈａｌ  ＧｍｂＨ，Ｃｏｒｐ．としても知られている）、スタフィロキナーゼ、およびアニソイル化されたプラスミノーゲン−ストレプトキナーゼ活性化因子複合体（ＡＰＳＡＣ、Ａｎｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ、およびＥｍｉｎａｓｅ（登録商標）、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｃｏｒｐ．としても知られている）、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される血栓溶解剤である、本発明1011の凝集物。
[本発明1018]
前記治療剤が抗炎症剤である、本発明1011の凝集物。
[本発明1019]
前記抗炎症剤が、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ−アスピリン、イブプロフェン、またはナプロキセンなど）、コルチコステロイド（プレドニゾンなど）、抗マラリア薬（ヒドロキシクロロキンなど）、メトトレキセート、スルファサラジン、レフルノミド、抗ＴＮＦ薬、シクロホスファミド、ミコフェノレート、デキサメタゾン、ロシグリタゾン、プレドニゾロン、コルチコステロン、ブデソニド、エストロゲン、エストラジオール、スルファサラジン、フェノフィブレート、プラバスタチン、シンバスタチン、ピオグリタゾン、アセチルサリチル酸、ミコフェノール酸、メサラミン、ヒドロキシ尿素、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、本発明1018の凝集物。
[本発明1020]
前記治療剤が血管拡張剤である、本発明1011の凝集物。
[本発明1021]
前記血管拡張剤が、アルファ−アドレナリン受容体アンタゴニスト（α−遮断薬）、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、ベータ2−アドレナリン受容体アゴニスト（β2−アゴニスト）、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、中枢作用性交感神経遮断剤、直接作用性血管拡張剤、エンドセリン受容体アンタゴニスト、神経節遮断薬、ニトロダイレーター、ホスホジエステラーゼ阻害剤、カリウムチャネル開口剤、レニン阻害剤、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1020の凝集物。
[本発明1022]
前記血管拡張剤が、プラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、トリマゾシン、フェントラミン、フェノキシベンザミン、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、キナプリル、ラミプリル、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルメサルタン、テルミサルタン、バルサルタン、エピネフリン、ノルエピネフリン、ドーパミン、ドブタミン、イソプロテレノール、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、クロニジン、グアナベンズ、グアンファシン、α−メチルドーパ、ヒドララジン、ボセンタン、カンシル酸トリメタファン、二硝酸イソソルビド、一硝酸イソソルビド、ニトログリセリン、四硝酸エリトリチル、四硝酸ペンタエリスリトール、ニトロプルシドナトリウム、ミルリノン、イナムリノン（以前はアムリノン）、シロスタゾール、シルデナフィル、タダラフィル、ミノキシジル、アリスキレン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、本発明1020または1021の凝集物。
[本発明1023]
前記治療剤が血管収縮剤である、本発明1011の凝集物。
[本発明1024]
前記血管収縮剤が、アルファ−アドレナリン受容体アゴニスト、カテコールアミン、バソプレッシン、バソプレッシン受容体モジュレーター、およびカルシウムチャネルアゴニストからなる群から選択される、本発明1023の凝集物。
[本発明1025]
前記血管収縮剤が、硫酸アルミニウム、アミデフリン、アンフェタミン、アンジオテンシン、抗ヒスタミン薬、アルギプレシン、次没食子酸ビスマス、カファミノール、カフェイン、カテコールアミン、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、ドーパミン、エフェドリン、エピネフリン、フェリプレシン、インダナゾリン、イソプロテレノール、リセルグ酸ジエチルアミン、リプレシン（ＬＶＰ）、リセルグ酸、メフェドロン、メトキサミン、メチルフェニデート、メチゾリン、メタラミノール、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、ノルエピネフリン、オクトドリン、オルニプレシン、オキシメタゾリン、フェニルエタノールアミン、フェニレフリン、フェニルイソプロピルアミン、フェニルプロパノールアミン、フェニプレッシン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、サイロシビン、テトラヒドララジン、テトラヒドロゾリン、塩酸テトラヒドロゾリン、硫酸亜鉛を含む塩酸テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシン、バソトシン、キシロメタゾリン、酸化亜鉛、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1023または1024の凝集物。
[本発明1026]
前記治療剤が、抗悪性腫瘍剤、抗増殖剤、および／または有糸分裂阻害剤、および／または遊走阻害（ａｎｔｉ−ｍｉｇｒａｔｏｒｙ）剤である、本発明1011の凝集物。
[本発明1027]
前記抗悪性腫瘍剤／抗増殖剤／有糸分裂阻害剤／遊走阻害剤が、パクリタキセル、5−フルオロウラシル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、シクロスポリン、シスプラチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エポチロン、メトトレキセート、アザチオプリン、アドリアマイシン、およびマイトマイシン；エンドスタチン、アンジオスタチンおよびチミジンキナーゼ阻害剤、クラドリビン、タキソール、トラピジル、ハロフジノン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、本発明1026の凝集物。
[本発明1028]
前記治療剤が、アスピリン、ワルファリン（クマジン）、アセノクマロール、アンクロッド、アニシンジオン、ブロミンジオン、クロリンジオン、クメタロール、シクロクマロール、デキストラン、デキストラン硫酸ナトリウム、ジクマロール、ジフェナジオン、ビスクマ酢酸エチル、エチリデンジクマロール、フルインジオン、ヘパリン、ヒルジン、リアポレートナトリウム（ｌｙａｐｏｌａｔｅ  ｓｏｄｉｕｍ）、オキサジジオン、ペントサンポリサルフェート、フェニンジオン、フェンプロクモン、ホスビチン、ピコタミド、チオクロマロール、ジピリダモール（ペルサンチン）、スルフィンピラゾン（アンツラン）、チクロピジン（チクリド）、組織プラスミノーゲン活性化因子（アクチバーゼ）、プラスミン、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（アボキナーゼ（ａｂｂｏｋｉｎａｓｅ））、ストレプトキナーゼ（ストレプターゼ）、およびアニストレプラーゼ／ＡＰＳＡＣ（エミナーゼ（ｅｍｉｎａｓｅ））、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、本発明1011〜1027のいずれかの凝集物。
[本発明1029]
前記分子が、脱凝集していない凝集物と比較して、脱凝集した凝集物からより高速度および／またはより高量で放出される、本発明1004〜1028のいずれかの凝集物。
[本発明1030]
前記放出速度が、脱凝集していない凝集物と比較して、脱凝集した凝集物では少なくとも10％高い、本発明1029の凝集物。
[本発明1031]
前記複数のナノ粒子の中で少なくとも1つのナノ粒子が、リガンドを含む、本発明1001〜1030のいずれかの凝集物。
[本発明1032]
前記リガンドがターゲティングリガンドである、本発明1031の凝集物。
[本発明1033]
前記リガンドが、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ペプチドミメティック、糖タンパク質、レクチン、ヌクレオシド、ヌクレオチド、核酸（例えば、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、遺伝子、制御領域および終結領域を含む遺伝子、ウイルスもしくはプラスミドＤＮＡなどの自己複製システム、一本鎖および二本鎖のｓｉＲＮＡ、ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ作用物質またはｉＲＮＡ作用物質）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣物、スーパーｍｉｒ（ｓｕｐｅｒｍｉｒ）、アプタマー、アンチｍｉｒ、アンチｍｉｒ、アンタゴｍｉｒ、Ｕ1アダプター、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化因子、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ならびにデコイオリゴヌクレオチド）、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、リポ多糖類、脂質、ビタミン、ステロイド、ホルモン、補因子、受容体、受容体リガンド、ならびにそれらのアナログおよび誘導体からなる群から選択される、本発明1031または1032の凝集物。
[本発明1034]
前記リガンドが、ポリリシン（ＰＬＬ）、ポリＬ−アスパラギン酸、ポリＬ−グルタミン酸、スチレン−無水マレイン酸コポリマー、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）コポリマー、ジビニルエーテル−無水マレイン酸コポリマー、Ｎ−（2−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミドコポリマー（ＨＭＰＡ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリウレタン、ポリ（2−エチルアクリル酸）、Ｎ−イソプロピルアクリルアミドポリマー、ポリホスファジン（ｐｏｌｙｐｈｏｓｐｈａｚｉｎｅ）、ポリエチレンイミン、スペルミン、スペルミジン、ポリアミン、偽ペプチド−ポリアミン、ペプチドミメティックポリアミン、デンドリマーポリアミン、アルギニン、アミジン、プロタミン、チロトロピン、メラノトロピン、レクチン、サーファクタントタンパク質Ａ、ムチン、トランスフェリン、ビスホスホネート、ポリグルタメート、ポリアスパルタート、アプタマー、アシアロフェツイン、ヒアルロナン、プロコラーゲン、インスリン、トランスフェリン、アルブミン、アクリジン、クロス−ソラレン（ｃｒｏｓｓ−ｐｓｏｒａｌｅｎ）、マイトマイシンＣ、ＴＰＰＣ4、テキサフィリン、サフィリン、多環式芳香族炭化水素（例えば、フェナジン、ジヒドロフェナジン）、胆汁酸、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、1−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、1，3−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、1，3−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ3−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ3−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチルまたはフェノキサジン）、ＲＧＤペプチド、放射標識マーカー、ハプテン、ナプロキセン、アスピリン、ジニトロフェニル、ＨＲＰ、ＡＰ、レクチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＢ、葉酸、Ｂ12、リボフラビン、ビオチン、ピリドキサール、タキソン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、サイトカラシン、ノコダゾール、ジャプラキノリド（ｊａｐｌａｋｉｎｏｌｉｄｅ）、ラトランクリンＡ、ファロイジン、スウィンホリドＡ、インダノシン、ミオセルビン（ｍｙｏｓｅｒｖｉｎ）、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦアルファ）、インターロイキン−1ベータ、ガンマインターフェロン、ＧａｌＮＡｃ、ガラクトース、マンノース、マンノース−6Ｐ、ＧａｌＮＡｃクラスター、マンノースクラスター、ガラクトースクラスターなどの糖クラスター、アプタマー、インテグリン受容体リガンド、ケモカイン受容体リガンド、セロトニン受容体リガンド、ＰＳＭＡ、エンドセリン、ＧＣＰＩＩ、ソマトスタチン、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1031〜1033のいずれかの凝集物。
[本発明1035]
前記リガンドが、
2018065823.tif 000003
、セクロピン、リコトキシン（ｌｙｃｏｔｏｘｉｎ）、パラダキシン（ｐａｒａｄａｘｉｎ）、ブホリン（ｂｕｆｏｒｉｎ）、ＣＰＦ、ボンビニン様ペプチド（ＢＬＰ）、カテリシジン、セラトトキシン（ｃｅｒａｔｏｔｏｘｉｎ）、Ｓ．クラバ（Ｓ．Ｃｌａｖａ）ペプチド、ヌタウナギ腸内抗微生物ペプチド（ｈａｇｆｉｓｈ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ）（ＨＦＩＡＰ）、マガイニン、ブレビニン−2（ｂｒｅｖｉｎｉｎ−2）、デルマセプチン、メリチン、プルロシジン（ｐｌｅｕｒｏｃｉｄｉｎ）、Ｈ2Ａペプチド、ゼノパスペプチド、エスクレンチン−1、カエリン（ｃａｅｒｉｎ）ならびにそれらの任意のアナログおよび誘導体からなる群から選択されるペプチドである、本発明1031〜1034のいずれかの凝集物。
[本発明1036]
前記リガンドが、対照と比較して、脱凝集速度を少なくとも10％低下させる、本発明1031〜1035のいずれかの凝集物。
[本発明1037]
非狭窄領域と比較して、狭窄領域において少なくとも10％脱凝集する、本発明1001〜1036のいずれかの凝集物。
[本発明1038]
前記狭窄領域の剪断応力が、非狭窄領域と比較して、少なくとも1倍高い、本発明1037の凝集物。
[本発明1039]
前記非狭窄領域の剪断応力が、正常な生理学的剪断応力である、本発明1037または1038の凝集物。
[本発明1040]
前記狭窄領域の剪断応力が、少なくとも70ｄｙｎ／ｃｍ2である、本発明1037〜1039のいずれかの凝集物。
[本発明1041]
球、円筒、盤、長方形、立方体、または不規則形状である、本発明1001〜1040のいずれかの凝集物。
[本発明1042]
前記ナノ粒子が、球、円筒、盤、長方形、立方体、または不規則形状である、本発明1001〜1041のいずれかの凝集物。
[本発明1043]
前記ナノ粒子の表面が改変されて、2つ以上のナノ粒子間の分子間静電的相互作用、水素結合相互作用、双極子相互作用、親水性相互作用、疎水性相互作用、ファンデルワールス力、およびそれらの任意の組合せが調節される、本発明1001〜1042のいずれかの凝集物。
[本発明1044]
前記所定の剪断応力が、少なくとも70ｄｙｎ／ｃｍ2である、本発明1001〜1043のいずれかの凝集物。
[本発明1045]
1μｍ〜3μｍのサイズである、本発明1001〜1044のいずれかの凝集物。
[本発明1046]
前記分子がイメージング剤である、本発明1004の凝集物。
[本発明1047]
前記イメージング剤が、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）色素（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＣｏｒｐ．；Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆ）；フルオレセイン；フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）；Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ（商標）；テトラローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）、5−カルボキシフルオレセイン（ＦＡＭ）；2'7'−ジメトキシ−4'5'−ジクロロ−6−カルボキシフルオレセイン（ＪＯＥ）；テトラクロロフルオレセイン（ＴＥＴ）；6−カルボキシローダミン（Ｒ6Ｇ）；Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ'−テトラメチル−6−カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）；6−カルボキシ−Ｘ−ローダミン（ＲＯＸ）；1−ジメチルアミノ−ナフチル−5−スルホネート、1−アニリノ−8−ナフタレンスルホネート、2−ｐ−トルイジニル−6−ナフタレンスルホネート、および5−（2'−アミノエチル）アミノナフタレン−1−スルホン酸（ＥＤＡＮＳ）を含むナフチルアミノ化合物など、アルファまたはベータ位にアミノ基を有するナフチルアミン色素；3−フェニル−7−イソシアナトクマリンなどのクマリン；9−イソチオシアナトアクリジンおよびアクリジンオレンジなどのアクリジン；Ｎ−（ｐ（2−ベンゾオキサゾリル）フェニル）マレイミド；Ｃｙ2、インドジカルボシアニン3（Ｃｙ3）、インドジカルボシアニン5（Ｃｙ5）、インドジカルボシアニン5．5（Ｃｙ5．5）、3−（−カルボキシ−ペンチル）−3'エチル−5，5'−ジメチルオキサカルボシアニン（ＣｙＡ）などのシアニン；1Ｈ，5Ｈ，11Ｈ，15Ｈ−キサンテノ［2，3，4−ｉｊ：5，6，7−ｉ'ｊ'］ジキノリジン−18−イウム、9−［2（または4）−［［［6−［2，5−ジオキソ−1−ピロリジニル）オキシ］−6−オキソヘキシル］アミノ］スルホニル］−4（または2）−スルホフェニル］−2，3，6，7，12，13，16，17オクタヒドロ−分子内塩（ＴＲまたはテキサスレッド）；ＢＯＤＩＰＹ（商標）色素；ベンゾオキサジアゾール；スチルベン；ピレン；緑色蛍光タンパク質、増強緑色蛍光タンパク質（ＥＧＰＦ）、不安定化ＥＧＦＰ、赤色蛍光タンパク質（例えばＤｓＲｅｄ）、ｄｓＲＥｄ変異体のｍＲＦＰｍａｒｓおよびｍＲＦＰｒｕｂｙ、黄色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、青色蛍光タンパク質、濃青色（ｃｅｒｕｌｅａｎ）蛍光タンパク質などの蛍光タンパク質、およびそれらの変異体；99ｍＴｃ、95Ｔｃ、111Ｉｎ、62Ｃｕ、64Ｃｕ、Ｇａ、68Ｇａ、153Ｇｄ、18Ｆ、124Ｉ、125Ｉ、131Ｉ、47Ｓｃ、64Ｃｕ、67Ｃｕ、89Ｓｒ、86Ｙ、87Ｙ、90Ｙ、105Ｒｈ、111Ａｇ、111Ｉｎ、117ｍＳｎ、149Ｐｍ、153Ｓｍ、166Ｈｏ、177Ｌｕ、186Ｒｅ、188Ｒｅ、211Ａｔ、212Ｂｉなどの放射性同位元素；Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、およびＭｎ（ＩＩ）などの常磁性金属イオン；Ｒｅ、Ｓｍ、Ｈｏ、Ｌｕ、Ｐｍ、Ｙ、Ｂｉ、Ｐｄ、Ｇｄ、Ｌａ、Ａｕ、Ａｕ、Ｙｂ、Ｄｙ、Ｃｕ、Ｒｈ、Ａｇ、およびＩｒなどのＸ線吸収体；ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1046の凝集物。
[本発明1048]
前記ナノ粒子が、凝集物のインビボ寿命を増加させる少なくとも1つの部分を含む、本発明1001〜1047のいずれかの凝集物。
[本発明1049]
前記少なくとも1つの部分がポリエチレングリコールである、本発明1048の凝集物。
[本発明1050]
本発明1001〜1049のいずれかの凝集物を含む医薬組成物。
[本発明1051]
対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変を治療する方法であって、それを必要とする対象に本発明1001〜1050のいずれかの凝集物または医薬組成物を投与することを含む方法。
[本発明1052]
対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変をイメージングする方法であって、それを必要とする対象に本発明1001〜1050のいずれかの凝集物または医薬組成物を投与することを含む方法。
[本発明1053]
前記狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、間欠性跛行（末梢動脈狭窄症）、アンギナ（冠状動脈狭窄症）、頚動脈狭窄症、大動脈弁狭窄症、ボタン穴狭窄症、石灰化結節性狭窄症、冠状動脈口狭窄症、二重大動脈狭窄症、魚口僧帽弁狭窄症、特発性肥厚性大動脈弁下部狭窄症、漏斗部狭窄症、僧帽弁狭窄症、筋性大動脈弁下部狭窄症、肺動脈弁狭窄症、肺動脈塞栓症、肺高血圧症、大動脈弁下部狭窄症、弁下部狭窄症、大動脈弁上部狭窄症、三尖弁狭窄症、腎動脈狭窄症、幽門狭窄症（胃の流出閉塞）、閉塞性黄疸（胆管狭窄症）、腸閉塞症、包茎、水頭症、狭窄性腱鞘炎、脊椎管狭窄症、声門下狭窄症（ＳＧＳ）、高血圧症、鎌状赤血球貧血症、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1051または1052の方法。
[本発明1054]
前記狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、外傷または損傷、アテローム性動脈硬化症、先天性欠損、糖尿病、医原病、感染、炎症、虚血、腫瘍、血管攣縮、冠血管攣縮、レイノー現象、脳卒中、血液凝固、モヤモヤ病、高安病、結節性多発動脈炎、播種状エリトマトーデス、関節リウマチ、脊椎腫瘍、骨ページェット病、フッ素症、血液透析、鎌状赤血球貧血症、ならびにそれらの任意の組合せに起因する、本発明1051〜1053のいずれかの方法。
[本発明1055]
対象の内出血を治療する方法であって、それを必要とする対象に本発明1001〜1050のいずれかの凝集物または医薬組成物を投与することを含む方法。
[本発明1056]
前記内出血が、外傷、高血圧による血管破裂、感染（例えば、エボラ、マールブルク）、癌、壊血病、肝細胞腫、自己免疫性血小板減少症、子宮外妊娠、悪性低温症、卵巣嚢胞、肝癌、ビタミンＫ欠乏症、血友病、薬物の副作用の結果である、本発明1055の方法。
[本発明1057]
前記投与が、注射、点滴、点眼、吸入、または経口摂取によるものである、本発明1051〜1056のいずれかの方法。
[本発明1058]
マイクロサイズの凝集物を調製するための方法であって、
（ｉｖ）複数のナノ粒子を得ること；
（ｖ）前記複数のナノ粒子をミクロンサイズの粒子の中に凝集させること；および
（ｖｉ）任意で、所望のサイズの粒子を選択すること
を含む方法。
[本発明1059]
前記複数のナノ粒子を得ることが、前記複数のナノ粒子を形成させることまたは作製することを含む、本発明1058の方法。
[本発明1060]
前記ナノ粒子が、ポロキサマー、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ酸無水物、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリアミド、ポリウレタン、ポリエステルアミド、ポリオルトエステル、ポリジオキサノン、ポリアセタール、ポリケタール、ポリカーボネート、ポリオルトカーボネート、ポリジヒドロピラン、ポリホスファゼン、ポリヒドロキシブチレート、ポリヒドロキシバレレート、ポリアルキレンオキサレート、ポリアルキレンスクシネート、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（アミノ酸）、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリヒドロキシセルロース、ポリメチルメタクリレート、キチン、キトサン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ（グリセロールセバケート）（ＰＧＳ）、ゼラチン、コラーゲン、シルク、キトサン、アルギネート、セルロース、ポリ核酸、セルロースアセテート（セルロースジアセテートを含む）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリブチレン、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリアミド、ナイロン、ポリカーボネート、ポリスルフィド、ポリスルホン、ヒドロゲル（例えばアクリル）、ポリアクリロニトリル、ポリビニルアセテート、セルロースアセテートブチレート、ニトロセルロース、ウレタン／カーボネートのコポリマー、スチレン／マレイン酸のコポリマー、ポリ（エチレンイミン）、ヒアルロン、ヘパリン、アガロース、プルラン、ならびにそれらの任意の組合せを含むコポリマー、ターポリマー、およびコポリマーからなる群から選択されるポリマーを含む、本発明1058または1059の方法。
[本発明1061]
前記所望の凝集物サイズが50μｍ以下である、本発明1058〜1060のいずれかの方法。
[本発明1062]
前記マイクロサイズの粒子が、有機もしくは無機の小分子もしくは大分子、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、生体高分子、例えば、ペプチド、タンパク質、ペプチドアナログおよびその誘導体、ペプチドミメティック、脂質、炭水化物、核酸、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、遺伝子、制御領域および終結領域を含む遺伝子、ウイルスもしくはプラスミドＤＮＡなどの自己複製システム、一本鎖および二本鎖のｓｉＲＮＡ、ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ作用物質またはｉＲＮＡ作用物質）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣物、アプタマー、アンチｍｉｒ、アンタゴｍｉｒ、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化因子、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ならびにデコイオリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、核酸アナログおよび誘導体、細菌、植物、真菌、もしくは動物の細胞もしくは組織などの生体材料から作製された抽出物、天然もしくは合成の組成物、ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される分子をさらに含む、本発明1058〜1061のいずれかの方法。
[本発明1063]
前記分子がナノ粒子に被包されているか、またはナノ粒子の表面上に吸収／吸着されている、本発明1062の方法。
[本発明1064]
前記分子がナノ粒子に共有結合している、本発明1062または1063のいずれかの凝集物。
[本発明1065]
前記分子が生物活性を有する、本発明1062〜1064のいずれかの方法。
[本発明1066]
前記生物活性が、生物アッセイにおける、酵素、刺激、阻害、調節、毒性、または致死の応答からなる群から選択される、本発明1065の方法。
[本発明1067]
前記生物活性が、酵素活性の表出または調節、受容体の遮断、受容体の刺激、1つまたは複数の遺伝子の発現レベルの調節、細胞増殖の調節、細胞分裂の調節、細胞分化の調節、細胞運動性の調節、細胞形態の調節、またはそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1065または1066のいずれかの方法。
[本発明1068]
前記分子が疎水性、親水性、または両親媒性である、本発明1062〜1067のいずれかの方法。
[本発明1069]
前記分子が、治療剤、またはそのアナログ、誘導体、プロドラッグ、もしくは薬学的に許容可能な塩である、本発明1062〜1068のいずれかの方法。
[本発明1070]
前記治療剤が抗トロンビン剤および／または血栓溶解剤もしくは線維素溶解剤である、本発明1069の方法。
[本発明1071]
前記抗トロンビン剤、血栓溶解剤、または線維素溶解剤が、抗凝血剤、凝血促進剤アンタゴニスト、抗血小板剤、血栓溶解剤、抗血栓溶解剤アンタゴニスト、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1070の方法。
[本発明1072]
前記治療剤が血栓形成剤である、本発明1069の方法。
[本発明1073]
前記血栓形成剤が、血栓溶解剤アンタゴニスト、抗凝血剤アンタゴニスト、凝血促進酵素、凝血促進分子、およびそれらの任意の組合せから選択される、本発明1072の方法。
[本発明1074]
前記血栓形成剤が、プロタミン、ビタミンＫ1、アミノカプロン酸（アミカー）、トラネキサム酸（アムスタット）、アナグレリド、アルガトロバン、シロスタゾール、ダルトロバン、デフィブロチド、エノキサパリン、フラキシパリン、インドブフェン、ラモパラン、オザグレル、ピコタミド、プラフィブリド、テデルパリン、チクロピジン、トリフルサル、コラーゲン、およびコラーゲンコーティング粒子、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1072または1073の方法。
[本発明1075]
前記治療剤が、組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、ストレプトキナーゼ（ＳＫ）、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（ｕＰＡ）、アルテプラーゼ（Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、レテプラーゼ（ｒ−ＰＡまたはｒｅｔａｖａｓｅ（登録商標）、Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｉｎｃ．としても知られている）、テネクテプラーゼ（ＴＮＫ（商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、Ｓｔｒｅｐｔａｓｅ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，ＬＰ）、ラノテプラーゼ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、モンテプラーゼ（エーザイ株式会社）、サルプラーゼ（ｒ−ｓｃｕ−ＰＡおよびｒｅｓｃｕｐａｓｅ（商標）、Ｇｒｕｎｅｎｔｈａｌ  ＧｍｂＨ，Ｃｏｒｐ．としても知られている）、スタフィロキナーゼ、およびアニソイル化されたプラスミノーゲン−ストレプトキナーゼ活性化因子複合体（ＡＰＳＡＣ、Ａｎｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ、およびＥｍｉｎａｓｅ（登録商標）、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｃｏｒｐ．としても知られている）、ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される血栓溶解剤である、本発明1069の方法。
[本発明1076]
前記治療剤が抗炎症剤である、本発明1069の凝集物。
[本発明1077]
前記抗炎症剤が、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、コルチコステロイド（プレドニゾンなど）、抗マラリア薬（ヒドロキシクロロキンなど）、メトトレキセート、スルファサラジン、レフルノミド、抗ＴＮＦ薬、シクロホスファミド、ミコフェノレート、デキサメタゾン、ロシグリタゾン、プレドニゾロン、コルチコステロン、ブデソニド、エストロゲン、エストラジオール、スルファサラジン、フェノフィブレート、プラバスタチン、シンバスタチン、ピオグリタゾン、アセチルサリチル酸、ミコフェノール酸、メサラミン、ヒドロキシ尿素、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、本発明1076の凝集物。
[本発明1078]
前記治療剤が血管拡張剤である、本発明1069の凝集物。
[本発明1079]
前記血管拡張剤が、アルファ−アドレナリン受容体アンタゴニスト（α−遮断薬）、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、ベータ2−アドレナリン受容体アゴニスト（β2−アゴニスト）、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、中枢作用性交感神経遮断剤、直接作用性血管拡張剤、エンドセリン受容体アンタゴニスト、神経節遮断薬、ニトロダイレーター、ホスホジエステラーゼ阻害剤、カリウムチャネル開口剤、レニン阻害剤、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1078の凝集物。
[本発明1080]
前記血管拡張剤が、プラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、トリマゾシン、フェントラミン、フェノキシベンザミン、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、キナプリル、ラミプリル、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルメサルタン、テルミサルタン、バルサルタン、エピネフリン、ノルエピネフリン、ドーパミン、ドブタミン、イソプロテレノール、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、クロニジン、グアナベンズ、グアンファシン、α−メチルドーパ、ヒドララジン、ボセンタン、カンシル酸トリメタファン、二硝酸イソソルビド、一硝酸イソソルビド、ニトログリセリン、四硝酸エリトリチル、四硝酸ペンタエリスリトール、ニトロプルシドナトリウム、ミルリノン、イナムリノン（以前はアムリノン）、シロスタゾール、シルデナフィル、タダラフィル、ミノキシジル、アリスキレン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、本発明1078または1079の凝集物。
[本発明1081]
前記治療剤が、抗悪性腫瘍剤、抗増殖剤、および／または有糸分裂阻害剤、および／または遊走阻害剤である、本発明1069の凝集物。
[本発明1082]
前記抗悪性腫瘍剤／抗増殖剤／有糸分裂阻害剤／遊走阻害剤が、パクリタキセル、5−フルオロウラシル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、シクロスポリン、シスプラチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エポチロン、メトトレキセート、アザチオプリン、アドリアマイシン、およびマイトマイシン；エンドスタチン、アンジオスタチンおよびチミジンキナーゼ阻害剤、クラドリビン、タキソール、トラピジル、ハロフジノン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、本発明1081の凝集物。
[本発明1083]
前記治療剤が、アスピリン、ワルファリン（クマジン）、アセノクマロール、アンクロッド、アニシンジオン、ブロミンジオン、クロリンジオン、クメタロール、シクロクマロール、デキストラン、デキストラン硫酸ナトリウム、ジクマロール、ジフェナジオン、ビスクマ酢酸エチル、エチリデンジクマロール、フルインジオン、ヘパリン、ヒルジン、リアポレートナトリウム、オキサジジオン、ペントサンポリサルフェート、フェニンジオン、フェンプロクモン、ホスビチン、ピコタミド、チオクロマロール、ジピリダモール（ペルサンチン）、スルフィンピラゾン（アンツラン）、チクロピジン（チクリド）、組織プラスミノーゲン活性化因子（アクチバーゼ）、プラスミン、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（アボキナーゼ）、ストレプトキナーゼ（ストレプターゼ）、およびアニストレプラーゼ／ＡＰＳＡＣ（エミナーゼ）、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、本発明1069〜1082のいずれかの方法。
[本発明1084]
前記分子が、脱凝集していない凝集物と比較して、脱凝集した凝集物からより高速度および／またはより高量で放出される、本発明1062〜1083のいずれかの方法。
[本発明1085]
前記放出速度が、脱凝集していない凝集物と比較して、脱凝集した凝集物では少なくとも10％高い、本発明1084の方法。
[本発明1086]
前記複数のナノ粒子の中で少なくとも1つのナノ粒子が、リガンドを含む、本発明1058〜1085のいずれかの方法。
[本発明1087]
前記リガンドがターゲティングリガンドである、本発明1086の方法。
[本発明1088]
前記リガンドが、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ペプチドミメティック、糖タンパク質、レクチン、ヌクレオシド、ヌクレオチド、核酸、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、リポ多糖類、ビタミン、ステロイド、ホルモン、補因子、受容体、受容体リガンド、ならびにそれらのアナログおよび誘導体からなる群から選択される、本発明1086または1087の方法。
[本発明1089]
前記リガンドが、ポリリシン（ＰＬＬ）、ポリＬ−アスパラギン酸、ポリＬ−グルタミン酸、スチレン−無水マレイン酸コポリマー、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）コポリマー、ジビニルエーテル−無水マレイン酸コポリマー、Ｎ−（2−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミドコポリマー（ＨＭＰＡ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリウレタン、ポリ（2−エチルアクリル酸）、Ｎ−イソプロピルアクリルアミドポリマー、ポリホスファジン、ポリエチレンイミン、スペルミン、スペルミジン、ポリアミン、偽ペプチド−ポリアミン、ペプチドミメティックポリアミン、デンドリマーポリアミン、アルギニン、アミジン、プロタミン、チロトロピン、メラノトロピン、レクチン、サーファクタントタンパク質Ａ、ムチン、トランスフェリン、ビスホスホネート、ポリグルタメート、ポリアスパルタート、アプタマー、アシアロフェツイン、ヒアルロナン、プロコラーゲン、インスリン、トランスフェリン、アルブミン、アクリジン、クロス−ソラレン、マイトマイシンＣ、ＴＰＰＣ4、テキサフィリン、サフィリン、多環式芳香族炭化水素（例えば、フェナジン、ジヒドロフェナジン）、胆汁酸、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、1−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、1，3−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、1，3−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ3−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ3−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチルまたはフェノキサジン）、ＲＧＤペプチド、放射標識マーカー、ハプテン、ナプロキセン、アスピリン、ジニトロフェニル、ＨＲＰ、ＡＰ、レクチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＢ、葉酸、Ｂ12、リボフラビン、ビオチン、ピリドキサール、タキソン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、サイトカラシン、ノコダゾール、ジャプラキノリド、ラトランクリンＡ、ファロイジン、スウィンホリドＡ、インダノシン、ミオセルビン、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦアルファ）、インターロイキン−1ベータ、ガンマインターフェロン、ＧａｌＮＡｃ、ガラクトース、マンノース、マンノース−6Ｐ、ＧａｌＮＡｃクラスター、マンノースクラスター、ガラクトースクラスターなどの糖クラスター、アプタマー、インテグリン受容体リガンド、ケモカイン受容体リガンド、セロトニン受容体リガンド、ＰＳＭＡ、エンドセリン、ＧＣＰＩＩ、ソマトスタチン、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1086〜1088のいずれかの方法。
[本発明1090]
前記リガンドが、
2018065823.tif 000004
、セクロピン、リコトキシン（ｌｙｃｏｔｏｘｉｎ）、パラダキシン（ｐａｒａｄａｘｉｎ）、ブホリン（ｂｕｆｏｒｉｎ）、ＣＰＦ、ボンビニン様ペプチド（ＢＬＰ）、カテリシジン、セラトトキシン（ｃｅｒａｔｏｔｏｘｉｎ）、Ｓ．クラバ（Ｓ．Ｃｌａｖａ）ペプチド、ヌタウナギ腸内抗微生物ペプチド（ｈａｇｆｉｓｈ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｐｅｐｔｉｄｅ）（ＨＦＩＡＰ）、マガイニン、ブレビニン−2（ｂｒｅｖｉｎｉｎ−2）、デルマセプチン、メリチン、プルロシジン（ｐｌｅｕｒｏｃｉｄｉｎ）、Ｈ2Ａペプチド、ゼノパスペプチド、エスクレンチン−1、カエリン（ｃａｅｒｉｎ）ならびにそれらの任意のアナログおよび誘導体からなる群から選択されるペプチドである、本発明1086〜1089のいずれかの方法。
[本発明1091]
前記リガンドが、対照と比較して、脱凝集速度を少なくとも10％低下させる、本発明1086〜1090のいずれかの方法。
[本発明1092]
前記凝集物が、非狭窄領域と比較して、狭窄領域において少なくとも10％脱凝集する、本発明1058〜1091のいずれかの方法。
[本発明1093]
前記狭窄領域の剪断応力が、非狭窄領域と比較して、少なくとも1倍高い、本発明1092の方法。
[本発明1094]
前記非狭窄領域の剪断応力が、正常な生理学的剪断応力である、本発明1092または1093の方法。
[本発明1095]
前記狭窄領域の剪断応力が、少なくとも70ｄｙｎ／ｃｍ2である、本発明1092〜1094のいずれかの方法。
[本発明1096]
前記凝集物が、球、円筒、盤、長方形、立方体、または不規則形状である、本発明1058〜1095のいずれかの凝集物。
[本発明1097]
前記ナノ粒子が、球、円筒、盤、長方形、立方体、または不規則形状である、本発明1058〜1096のいずれかの方法。
[本発明1098]
前記ナノ粒子の表面が改変されて、2つ以上のナノ粒子間の分子間静電的相互作用、水素結合相互作用、双極子相互作用、親水性相互作用、疎水性相互作用、ファンデルワールス力、およびそれらの任意の組合せが調節される、本発明1058〜1097のいずれかの方法。
[本発明1099]
前記凝集物のサイズが1μｍ〜3μｍである、本発明1058〜1098のいずれかの方法。
[本発明1100]
前記分子がイメージング剤である、本発明1062の方法。
[本発明1101]
前記イメージング剤が、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）色素（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＣｏｒｐ．；Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆ）；フルオレセイン；フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）；Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ（商標）；テトラローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）、5−カルボキシフルオレセイン（ＦＡＭ）；2'7'−ジメトキシ−4'5'−ジクロロ−6−カルボキシフルオレセイン（ＪＯＥ）；テトラクロロフルオレセイン（ＴＥＴ）；6−カルボキシローダミン（Ｒ6Ｇ）；Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ'−テトラメチル−6−カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）；6−カルボキシ−Ｘ−ローダミン（ＲＯＸ）；1−ジメチルアミノ−ナフチル−5−スルホネート、1−アニリノ−8−ナフタレンスルホネート、2−ｐ−トルイジニル−6−ナフタレンスルホネート、および5−（2'−アミノエチル）アミノナフタレン−1−スルホン酸（ＥＤＡＮＳ）を含むナフチルアミノ化合物など、アルファまたはベータ位にアミノ基を有するナフチルアミン色素；3−フェニル−7−イソシアナトクマリンなどのクマリン；9−イソチオシアナトアクリジンおよびアクリジンオレンジなどのアクリジン；Ｎ−（ｐ（2−ベンゾオキサゾリル）フェニル）マレイミド；Ｃｙ2、インドジカルボシアニン3（Ｃｙ3）、インドジカルボシアニン5（Ｃｙ5）、インドジカルボシアニン5．5（Ｃｙ5．5）、3−（−カルボキシ−ペンチル）−3'エチル−5，5'−ジメチルオキサカルボシアニン（ＣｙＡ）などのシアニン；1Ｈ，5Ｈ，11Ｈ，15Ｈ−キサンテノ［2，3，4−ｉｊ：5，6，7−ｉ'ｊ'］ジキノリジン−18−イウム、9−［2（または4）−［［［6−［2，5−ジオキソ−1−ピロリジニル）オキシ］−6−オキソヘキシル］アミノ］スルホニル］−4（または2）−スルホフェニル］−2，3，6，7，12，13，16，17オクタヒドロ−分子内塩（ＴＲまたはテキサスレッド）；ＢＯＤＩＰＹ（商標）色素；ベンゾオキサジアゾール；スチルベン；ピレン；緑色蛍光タンパク質、増強緑色蛍光タンパク質（ＥＧＦＰ）、不安定化ＥＧＦＰ、赤色蛍光タンパク質（例えばＤｓＲｅｄ）、ｄｓＲＥｄ変異体のｍＲＦＰｍａｒｓおよびｍＲＦＰｒｕｂｙ、黄色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、青色蛍光タンパク質、濃青色蛍光タンパク質などの蛍光タンパク質、およびそれらの変異体；99ｍＴｃ、95Ｔｃ、111Ｉｎ、62Ｃｕ、64Ｃｕ、Ｇａ、68Ｇａ、153Ｇｄ、18Ｆ、124Ｉ、125Ｉ、131Ｉ、47Ｓｃ、64Ｃｕ、67Ｃｕ、89Ｓｒ、86Ｙ、87Ｙ、90Ｙ、105Ｒｈ、111Ａｇ、111Ｉｎ、117ｍＳｎ、149Ｐｍ、153Ｓｍ、166Ｈｏ、177Ｌｕ、186Ｒｅ、188Ｒｅ、211Ａｔ、212Ｂｉなどの放射性同位元素、Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、およびＭｎ（ＩＩ）などの常磁性金属イオン；Ｒｅ、Ｓｍ、Ｈｏ、Ｌｕ、Ｐｍ、Ｙ、Ｂｉ、Ｐｄ、Ｇｄ、Ｌａ、Ａｕ、Ａｕ、Ｙｂ、Ｄｙ、Ｃｕ、Ｒｈ、Ａｇ、およびＩｒなどのＸ線吸収体；ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1100の方法。
[本発明1102]
前記ナノ粒子が、凝集物のインビボ寿命を増加させる少なくとも1つの部分を含む、本発明1058〜1101のいずれかの凝集物。
[本発明1103]
前記少なくとも1つの部分がポリエチレングリコールである、本発明1102の凝集物。
[本発明1104]
前記治療剤が血管収縮剤である、本発明1069の凝集物。
[本発明1105]
前記血管収縮剤が、アルファ−アドレナリン受容体アゴニスト、カテコールアミン、バソプレッシン、バソプレッシン受容体モジュレーター、およびカルシウムチャネルアゴニストからなる群から選択される、本発明1104の凝集物。
[本発明1106]
前記血管収縮剤が、硫酸アルミニウム、アミデフリン、アンフェタミン、アンジオテンシン、抗ヒスタミン薬、アルギプレシン、次没食子酸ビスマス、カファミノール、カフェイン、カテコールアミン、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、ドーパミン、エフェドリン、エピネフリン、フェリプレシン、インダナゾリン、イソプロテレノール、リセルグ酸ジエチルアミン、リプレシン（ＬＶＰ）、リセルグ酸、メフェドロン、メトキサミン、メチルフェニデート、メチゾリン、メタラミノール、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、ノルエピネフリン、オクトドリン、オルニプレシン、オキシメタゾリン、フェニルエタノールアミン、フェニレフリン、フェニルイソプロピルアミン、フェニルプロパノールアミン、フェニプレッシン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、サイロシビン、テトラヒドララジン、テトラヒドロゾリン、塩酸テトラヒドロゾリン、硫酸亜鉛を含む塩酸テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシン、バソトシン、キシロメタゾリン、酸化亜鉛、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1104または1105の凝集物。
[本発明1107]
それを必要とする対象に赤血球を投与することを含む、対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変および／または内出血を治療する方法であって、該赤血球が治療剤を含み、該治療剤が赤血球の中に被包されており、該治療剤が、所定の剪断応力に曝露された場合に該所定の剪断応力超で赤血球から放出される、方法。
[本発明1108]
それを必要とする対象に赤血球を投与することを含む、対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変および／または内出血をイメージングする方法であって、該赤血球がイメージング剤を含み、該イメージング剤が赤血球の中に被包されており、該イメージング剤が、所定の剪断応力に曝露された場合に該所定の剪断応力超で赤血球から放出される、方法。
[本発明1109]
前記狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、間欠性跛行（末梢動脈狭窄症）、アンギナ（冠状動脈狭窄症）、頚動脈狭窄症、大動脈弁狭窄症、ボタン穴狭窄症、石灰化結節性狭窄症、冠状動脈口狭窄症、二重大動脈狭窄症、魚口僧帽弁狭窄症、特発性肥厚性大動脈弁下部狭窄症、漏斗部狭窄症、僧帽弁狭窄症、筋性大動脈弁下部狭窄症、肺動脈弁狭窄症、肺動脈塞栓症、肺高血圧症、大動脈弁下部狭窄症、弁下部狭窄症、大動脈弁上部狭窄症、三尖弁狭窄症、腎動脈狭窄症、幽門狭窄症（胃の流出閉塞）、閉塞性黄疸（胆管狭窄症）、腸閉塞症、包茎、水頭症、狭窄性腱鞘炎、脊椎管狭窄症、声門下狭窄症（ＳＧＳ）、高血圧症、鎌状赤血球貧血症、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1107または1108の方法。
[本発明1110]
前記狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、外傷または損傷、アテローム性動脈硬化症、先天性欠損、糖尿病、医原病、感染、炎症、虚血、腫瘍、血管攣縮、冠血管攣縮、レイノー現象、脳卒中、血液凝固、モヤモヤ病、高安病、結節性多発動脈炎、播種状エリトマトーデス、関節リウマチ、脊椎腫瘍、骨ページェット病、フッ素症、血液透析、鎌状赤血球貧血症、およびそれらの任意の組合せに起因する、本発明1107または1108の方法。
[本発明1111]
前記内出血が、外傷、高血圧による血管破裂、感染（例えば、エボラ、マールブルク）、癌、壊血病、肝細胞腫、自己免疫性血小板減少症、子宮外妊娠、悪性低温症、卵巣嚢胞、肝癌、ビタミンＫ欠乏症、血友病、薬物の副作用の結果である、本発明1107または1108の方法。
[本発明1112]
前記治療剤が抗トロンビン剤および／または血栓溶解剤である、本発明1107〜1111のいずれかの方法。
[本発明1113]
前記抗トロンビン剤または血栓溶解剤が、抗凝血剤、凝血促進剤アンタゴニスト、抗血小板剤、血栓溶解剤、抗血栓溶解剤アンタゴニスト、線維素溶解酵素、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1112の方法。
[本発明1114]
前記治療剤が血栓形成剤である、本発明1107〜1111のいずれかの方法。
[本発明1115]
前記血栓形成剤が、血栓溶解剤アンタゴニスト、抗凝血剤アンタゴニスト、凝血促進酵素、凝血促進分子、およびそれらの任意の組合せから選択される、本発明1114の方法。
[本発明1116]
前記血栓形成剤が、プロタミン、ビタミンＫ1、アミノカプロン酸（アミカー）、トラネキサム酸（アムスタット）、アナグレリド、アルガトロバン、シロスタゾール、ダルトロバン、デフィブロチド、エノキサパリン、フラキシパリン、インドブフェン、ラモパラン、オザグレル、ピコタミド、プラフィブリド、テデルパリン、チクロピジン、トリフルサル、コラーゲン、およびコラーゲンコーティング粒子、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1114または1115の方法。
[本発明1117]
前記治療剤が、組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、ストレプトキナーゼ（ＳＫ）、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（ｕＰＡ）、アルテプラーゼ（Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、レテプラーゼ（ｒ−ＰＡまたはｒｅｔａｖａｓｅ（登録商標）、Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｉｎｃ．としても知られている）、テネクテプラーゼ（ＴＮＫ（商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、Ｓｔｒｅｐｔａｓｅ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，ＬＰ）、ラノテプラーゼ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、モンテプラーゼ（エーザイ株式会社）、サルプラーゼ（ｒ−ｓｃｕ−ＰＡおよびｒｅｓｃｕｐａｓｅ（商標）、Ｇｒｕｎｅｎｔｈａｌ  ＧｍｂＨ，Ｃｏｒｐ．としても知られている）、スタフィロキナーゼ、およびアニソイル化されたプラスミノーゲン−ストレプトキナーゼ活性化因子複合体（ＡＰＳＡＣ、Ａｎｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ、およびＥｍｉｎａｓｅ（登録商標）、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｃｏｒｐ．としても知られている）、ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される血栓溶解剤である、本発明1107〜1111のいずれかの方法。
[本発明1118]
前記治療剤が抗炎症剤である、本発明1107〜1111のいずれかの方法。
[本発明1119]
前記抗炎症剤が、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ−アスピリン、イブプロフェン、またはナプロキセンなど）、コルチコステロイド（プレドニゾンなど）、抗マラリア薬（ヒドロキシクロロキンなど）、メトトレキセート、スルファサラジン、レフルノミド、抗ＴＮＦ薬、シクロホスファミド、ミコフェノレート、デキサメタゾン、ロシグリタゾン、プレドニゾロン、コルチコステロン、ブデソニド、エストロゲン、エストラジオール、スルファサラジン、フェノフィブレート、プラバスタチン、シンバスタチン、ピオグリタゾン、アセチルサリチル酸、ミコフェノール酸、メサラミン、ヒドロキシ尿素、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、本発明1118の方法。
[本発明1120]
前記治療剤が血管拡張剤である、本発明1107〜1111のいずれかの方法。
[本発明1121]
前記血管拡張剤が、アルファ−アドレナリン受容体アンタゴニスト（α−遮断薬）、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、ベータ2−アドレナリン受容体アゴニスト（β2−アゴニスト）、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、中枢作用性交感神経遮断剤、直接作用性血管拡張剤、エンドセリン受容体アンタゴニスト、神経節遮断薬、ニトロダイレーター、ホスホジエステラーゼ阻害剤、カリウムチャネル開口剤、レニン阻害剤、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1120の方法。
[本発明1122]
前記血管拡張剤が、プラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、トリマゾシン、フェントラミン、フェノキシベンザミン、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、キナプリル、ラミプリル、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルメサルタン、テルミサルタン、バルサルタン、エピネフリン、ノルエピネフリン、ドーパミン、ドブタミン、イソプロテレノール、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、クロニジン、グアナベンズ、グアンファシン、α−メチルドーパ、ヒドララジン、ボセンタン、カンシル酸トリメタファン、二硝酸イソソルビド、一硝酸イソソルビド、ニトログリセリン、四硝酸エリトリチル、四硝酸ペンタエリスリトール、ニトロプルシドナトリウム、ミルリノン、イナムリノン（以前はアムリノン）、シロスタゾール、シルデナフィル、タダラフィル、ミノキシジル、アリスキレン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、本発明1120または1121の方法。
[本発明1123]
前記治療剤が、抗悪性腫瘍剤、抗増殖剤、および／または有糸分裂阻害剤、および／または遊走阻害剤である、本発明1107〜1111のいずれかの方法。
[本発明1124]
前記抗悪性腫瘍剤／抗増殖剤／有糸分裂阻害剤／遊走阻害剤が、パクリタキセル、5−フルオロウラシル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、シクロスポリン、シスプラチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エポチロン、メトトレキセート、アザチオプリン、アドリアマイシン、およびマイトマイシン；エンドスタチン、アンジオスタチンおよびチミジンキナーゼ阻害剤、クラドリビン、タキソール、トラピジル、ハロフジノン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、本発明1123の方法。
[本発明1125]
前記治療剤が、アスピリン、ワルファリン（クマジン）、アセノクマロール、アンクロッド、アニシンジオン、ブロミンジオン、クロリンジオン、クメタロール、シクロクマロール、デキストラン、デキストラン硫酸ナトリウム、ジクマロール、ジフェナジオン、ビスクマ酢酸エチル、エチリデンジクマロール、フルインジオン、ヘパリン、ヒルジン、リアポレートナトリウム、オキサジジオン、ペントサンポリサルフェート、フェニンジオン、フェンプロクモン、ホスビチン、ピコタミド、チオクロマロール、ジピリダモール（ペルサンチン）、スルフィンピラゾン（アンツラン）、チクロピジン（チクリド）、組織プラスミノーゲン活性化因子（アクチバーゼ）、プラスミン、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（アボキナーゼ）、ストレプトキナーゼ（ストレプターゼ）、およびアニストレプラーゼ／ＡＰＳＡＣ（エミナーゼ）、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、本発明1107〜1111のいずれかの方法。
[本発明1126]
前記治療剤が血管収縮剤である、本発明1107〜1111のいずれかの方法。
[本発明1127]
前記血管収縮剤が、アルファ−アドレナリン受容体アゴニスト、カテコールアミン、バソプレッシン、バソプレッシン受容体モジュレーター、およびカルシウムチャネルアゴニストからなる群から選択される、本発明1126の方法。
[本発明1128]
前記血管収縮剤が、硫酸アルミニウム、アミデフリン、アンフェタミン、アンジオテンシン、抗ヒスタミン薬、アルギプレシン、次没食子酸ビスマス、カファミノール、カフェイン、カテコールアミン、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、ドーパミン、エフェドリン、エピネフリン、フェリプレシン、インダナゾリン、イソプロテレノール、リセルグ酸ジエチルアミン、リプレシン（ＬＶＰ）、リセルグ酸、メフェドロン、メトキサミン、メチルフェニデート、メチゾリン、メタラミノール、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、ノルエピネフリン、オクトドリン、オルニプレシン、オキシメタゾリン、フェニルエタノールアミン、フェニレフリン、フェニルイソプロピルアミン、フェニルプロパノールアミン、フェニプレッシン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、サイロシビン、テトラヒドララジン、テトラヒドロゾリン、塩酸テトラヒドロゾリン、硫酸亜鉛を含む塩酸テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシン、バソトシン、キシロメタゾリン、酸化亜鉛、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1126または1127の方法。
[本発明1129]
前記イメージング剤が、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）色素（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＣｏｒｐ．；Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆ）；フルオレセイン；フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）；Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ（商標）；テトラローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）、5−カルボキシフルオレセイン（ＦＡＭ）；2'7'−ジメトキシ−4'5'−ジクロロ−6−カルボキシフルオレセイン（ＪＯＥ）；テトラクロロフルオレセイン（ＴＥＴ）；6−カルボキシローダミン（Ｒ6Ｇ）；Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ'−テトラメチル−6−カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）；6−カルボキシ−Ｘ−ローダミン（ＲＯＸ）；1−ジメチルアミノ−ナフチル−5−スルホネート、1−アニリノ−8−ナフタレンスルホネート、2−ｐ−トルイジニル−6−ナフタレンスルホネート、および5−（2'−アミノエチル）アミノナフタレン−1−スルホン酸（ＥＤＡＮＳ）を含むナフチルアミノ化合物など、アルファまたはベータ位にアミノ基を有するナフチルアミン色素；3−フェニル−7−イソシアナトクマリンなどのクマリン；9−イソチオシアナトアクリジンおよびアクリジンオレンジなどのアクリジン；Ｎ−（ｐ（2−ベンゾオキサゾリル）フェニル）マレイミド；Ｃｙ2、インドジカルボシアニン3（Ｃｙ3）、インドジカルボシアニン5（Ｃｙ5）、インドジカルボシアニン5．5（Ｃｙ5．5）、3−（−カルボキシ−ペンチル）−3'エチル−5，5'−ジメチルオキサカルボシアニン（ＣｙＡ）などのシアニン；1Ｈ，5Ｈ，11Ｈ，15Ｈ−キサンテノ［2，3，4−ｉｊ：5，6，7−ｉ'ｊ'］ジキノリジン−18−イウム、9−［2（または4）−［［［6−［2，5−ジオキソ−1−ピロリジニル）オキシ］−6−オキソヘキシル］アミノ］スルホニル］−4（または2）−スルホフェニル］−2，3，6，7，12，13，16，17オクタヒドロ−分子内塩（ＴＲまたはテキサスレッド）；ＢＯＤＩＰＹ（商標）色素；ベンゾオキサジアゾール；スチルベン；ピレン；緑色蛍光タンパク質、増強緑色蛍光タンパク質（ＥＧＰＦ）、不安定化ＥＧＦＰ、赤色蛍光タンパク質（例えばＤｓＲｅｄ）、ｄｓＲＥｄ変異体のｍＲＦＰｍａｒｓおよびｍＲＦＰｒｕｂｙ、黄色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、青色蛍光タンパク質、濃青色蛍光タンパク質などの蛍光タンパク質、およびそれらの変異体；99ｍＴｃ、95Ｔｃ、111Ｉｎ、62Ｃｕ、64Ｃｕ、Ｇａ、68Ｇａ、153Ｇｄ、18Ｆ、124Ｉ、125Ｉ、131Ｉ、47Ｓｃ、64Ｃｕ、67Ｃｕ、89Ｓｒ、86Ｙ、87Ｙ、90Ｙ、105Ｒｈ、111Ａｇ、111Ｉｎ、117ｍＳｎ、149Ｐｍ、153Ｓｍ、166Ｈｏ、177Ｌｕ、186Ｒｅ、188Ｒｅ、211Ａｔ、212Ｂｉなどの放射性同位元素；Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、およびＭｎ（ＩＩ）などの常磁性金属イオン；Ｒｅ、Ｓｍ、Ｈｏ、Ｌｕ、Ｐｍ、Ｙ、Ｂｉ、Ｐｄ、Ｇｄ、Ｌａ、Ａｕ、Ａｕ、Ｙｂ、Ｄｙ、Ｃｕ、Ｒｈ、Ａｇ、およびＩｒなどのＸ線吸収体；およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1108〜1111のいずれかの方法。
[本発明1130]
前記ＲＢＣがリガンドを含む、本発明1107〜1129のいずれかの方法。
[本発明1131]
前記リガンドが、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ペプチドミメティック、糖タンパク質、レクチン、ヌクレオシド、ヌクレオチド、核酸（例えば、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、遺伝子、制御領域および終結領域を含む遺伝子、ウイルスもしくはプラスミドＤＮＡなどの自己複製システム、一本鎖および二本鎖のｓｉＲＮＡ、ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ作用物質またはｉＲＮＡ作用物質）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣物、スーパーｍｉｒ（ｓｕｐｅｒｍｉｒ）、アプタマー、アンチｍｉｒ、アンチｍｉｒ、アンタゴｍｉｒ、Ｕ1アダプター、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化因子、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ならびにデコイオリゴヌクレオチド）、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、リポ多糖類、脂質、ビタミン、ステロイド、ホルモン、補因子、受容体、受容体リガンド、ならびにそれらのアナログおよび誘導体からなる群から選択される、本発明1130の方法。
[本発明1132]
前記リガンドが、ポリリシン（ＰＬＬ）、ポリＬ−アスパラギン酸、ポリＬ−グルタミン酸、スチレン−無水マレイン酸コポリマー、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）コポリマー、ジビニルエーテル−無水マレイン酸コポリマー、Ｎ−（2−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミドコポリマー（ＨＭＰＡ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリウレタン、ポリ（2−エチルアクリル酸）、Ｎ−イソプロピルアクリルアミドポリマー、ポリホスファジン、ポリエチレンイミン、スペルミン、スペルミジン、ポリアミン、偽ペプチド−ポリアミン、ペプチドミメティックポリアミン、デンドリマーポリアミン、アルギニン、アミジン、プロタミン、チロトロピン、メラノトロピン、レクチン、サーファクタントタンパク質Ａ、ムチン、トランスフェリン、ビスホスホネート、ポリグルタメート、ポリアスパルタート、アプタマー、アシアロフェツイン、ヒアルロナン、プロコラーゲン、インスリン、トランスフェリン、アルブミン、アクリジン、クロス−ソラレン、マイトマイシンＣ、ＴＰＰＣ4、テキサフィリン、サフィリン、多環式芳香族炭化水素（例えば、フェナジン、ジヒドロフェナジン）、胆汁酸、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、1−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、1，3−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、1，3−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ3−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ3−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチルまたはフェノキサジン）、ＲＧＤペプチド、放射標識マーカー、ハプテン、ナプロキセン、アスピリン、ジニトロフェニル、ＨＲＰ、ＡＰ、レクチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＢ、葉酸、Ｂ12、リボフラビン、ビオチン、ピリドキサール、タキソン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、サイトカラシン、ノコダゾール、ジャプラキノリド、ラトランクリンＡ、ファロイジン、スウィンホリドＡ、インダノシン、ミオセルビン、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦアルファ）、インターロイキン−1ベータ、ガンマインターフェロン、ＧａｌＮＡｃ、ガラクトース、マンノース、マンノース−6Ｐ、ＧａｌＮＡｃクラスター、マンノースクラスター、ガラクトースクラスターなどの糖クラスター、アプタマー、インテグリン受容体リガンド、ケモカイン受容体リガンド、セロトニン受容体リガンド、ＰＳＭＡ、エンドセリン、ＧＣＰＩＩ、ソマトスタチン、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1130または1131の方法。
[本発明1133]
前記リガンドが、
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、セクロピン、リコトキシン（ｌｙｃｏｔｏｘｉｎ）、パラダキシン（ｐａｒａｄａｘｉｎ）、ブホリン（ｂｕｆｏｒｉｎ）、ＣＰＦ、ボンビニン様ペプチド（ＢＬＰ）、カテリシジン、セラトトキシン（ｃｅｒａｔｏｔｏｘｉｎ）、Ｓ．クラバ（Ｓ．Ｃｌａｖａ）ペプチド、ヌタウナギ腸内抗微生物ペプチド（ｈａｇｆｉｓｈ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ）（ＨＦＩＡＰ）、マガイニン、ブレビニン−2（ｂｒｅｖｉｎｉｎ−2）、デルマセプチン、メリチン、プルロシジン（ｐｌｅｕｒｏｃｉｄｉｎ）、Ｈ2Ａペプチド、ゼノパスペプチド、エスクレンチン−1、カエリン（ｃａｅｒｉｎ）ならびにそれらの任意のアナログおよび誘導体からなる群から選択されるペプチドである、本発明1130〜1132のいずれかの方法。
[本発明1134]
前記ＲＢＣがヒト赤血球である、本発明1107〜1133のいずれかの方法。
[本発明1135]
前記ＲＢＣが自己の赤血球である、本発明1107〜1134のいずれかの方法。
[本発明1136]
前記所定の剪断応力が、少なくとも70ｄｙｎ／ｃｍ2である、本発明1107〜1135のいずれかの方法。
[本発明1137]
前記投与が、注射、点滴、点眼、吸入、または経口摂取によるものである、本発明1107〜1136のいずれかの方法。
[本発明1138]
それを必要とする対象に治療剤を含むマイクロカプセルを投与することを含む、対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変および／または内出血を治療する方法であって、該治療剤がマイクロカプセルの中に被包されており、該マイクロカプセルが、所定の剪断応力に曝露された場合に該所定の剪断応力超で分解する、方法。
[本発明1139]
それを必要とする対象にイメージング剤を含むマイクロカプセルを投与することを含む、対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変および／または内出血をイメージングする方法であって、治療剤がマイクロカプセルの中に被包されており、該マイクロカプセルが、所定の剪断応力に曝露された場合に該所定の剪断応力超で分解する、方法。
[本発明1140]
前記狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、間欠性跛行（末梢動脈狭窄症）、アンギナ（冠状動脈狭窄症）、頚動脈狭窄症、大動脈弁狭窄症、ボタン穴狭窄症、石灰化結節性狭窄症、冠状動脈口狭窄症、二重大動脈狭窄症、魚口僧帽弁狭窄症、特発性肥厚性大動脈弁下部狭窄症、漏斗部狭窄症、僧帽弁狭窄症、筋性大動脈弁下部狭窄症、肺動脈弁狭窄症、肺動脈塞栓症、肺高血圧症、大動脈弁下部狭窄症、弁下部狭窄症、大動脈弁上部狭窄症、三尖弁狭窄症、腎動脈狭窄症、幽門狭窄症（胃の流出閉塞）、閉塞性黄疸（胆管狭窄症）、腸閉塞症、包茎、水頭症、狭窄性腱鞘炎、脊椎管狭窄症、声門下狭窄症（ＳＧＳ）、高血圧症、鎌状赤血球貧血症、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1138または1139の方法。
[本発明1141]
前記狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、外傷または損傷、アテローム性動脈硬化症、先天性欠損、糖尿病、医原病、感染、炎症、虚血、腫瘍、血管攣縮、冠血管攣縮、レイノー現象、脳卒中、血液凝固、モヤモヤ病、高安病、結節性多発動脈炎、播種状エリトマトーデス、関節リウマチ、脊椎腫瘍、骨ページェット病、フッ素症、血液透析、鎌状赤血球貧血症、およびそれらの任意の組合せに起因する、本発明1138〜1140のいずれかの方法。
[本発明1142]
前記内出血が、外傷、高血圧による血管破裂、感染（例えば、エボラ、マールブルク）、癌、壊血病、肝細胞腫、自己免疫性血小板減少症、子宮外妊娠、悪性低温症、卵巣嚢胞、肝癌、ビタミンＫ欠乏症、血友病、薬物の副作用の結果である、本発明1138〜1141のいずれかの方法。
[本発明1143]
前記治療剤が抗トロンビン剤および／または血栓溶解剤である、本発明1138〜1142のいずれかの方法。
[本発明1144]
前記抗トロンビン剤または血栓溶解剤が、抗凝血剤、凝血促進剤アンタゴニスト、抗血小板剤、血栓溶解剤、抗血栓溶解剤アンタゴニスト、線維素溶解酵素、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1143の方法。
[本発明1145]
前記治療剤が血栓形成剤である、本発明1138〜1142のいずれかの方法。
[本発明1146]
前記血栓形成剤が、血栓溶解剤アンタゴニスト、抗凝血剤アンタゴニスト、凝血促進酵素、凝血促進分子、およびそれらの任意の組合せから選択される、本発明1145の方法。
[本発明1147]
前記血栓形成剤が、プロタミン、ビタミンＫ1、アミノカプロン酸（アミカー）、トラネキサム酸（アムスタット）、アナグレリド、アルガトロバン、シロスタゾール、ダルトロバン、デフィブロチド、エノキサパリン、フラキシパリン、インドブフェン、ラモパラン、オザグレル、ピコタミド、プラフィブリド、テデルパリン、チクロピジン、トリフルサル、コラーゲン、およびコラーゲンコーティング粒子、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1145または1146の方法。
[本発明1148]
前記治療剤が、組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、ストレプトキナーゼ（ＳＫ）、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（ｕＰＡ）、アルテプラーゼ（Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、レテプラーゼ（ｒ−ＰＡまたはｒｅｔａｖａｓｅ（登録商標）、Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｉｎｃ．としても知られている）、テネクテプラーゼ（ＴＮＫ（商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、Ｓｔｒｅｐｔａｓｅ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，ＬＰ）、ラノテプラーゼ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、モンテプラーゼ（エーザイ株式会社）、サルプラーゼ（ｒ−ｓｃｕ−ＰＡおよびｒｅｓｃｕｐａｓｅ（商標）、Ｇｒｕｎｅｎｔｈａｌ  ＧｍｂＨ，Ｃｏｒｐ．としても知られている）、スタフィロキナーゼ、およびアニソイル化されたプラスミノーゲン−ストレプトキナーゼ活性化因子複合体（ＡＰＳＡＣ、Ａｎｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ、およびＥｍｉｎａｓｅ（登録商標）、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｃｏｒｐ．としても知られている）、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される血栓溶解剤である、本発明1138〜1142のいずれかの方法。
[本発明1149]
前記治療剤が抗炎症剤である、本発明1138〜1142のいずれかの方法。
[本発明1150]
前記抗炎症剤が、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ−アスピリン、イブプロフェン、またはナプロキセンなど）、コルチコステロイド（プレドニゾンなど）、抗マラリア薬（ヒドロキシクロロキンなど）、メトトレキセート、スルファサラジン、レフルノミド、抗ＴＮＦ薬、シクロホスファミド、ミコフェノレート、デキサメタゾン、ロシグリタゾン、プレドニゾロン、コルチコステロン、ブデソニド、エストロゲン、エストラジオール、スルファサラジン、フェノフィブレート、プラバスタチン、シンバスタチン、ピオグリタゾン、アセチルサリチル酸、ミコフェノール酸、メサラミン、ヒドロキシ尿素、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、本発明1149の方法。
[本発明1151]
治療剤が血管拡張剤である、本発明1138〜1142のいずれかの方法。
[本発明1152]
前記血管拡張剤が、アルファ−アドレナリン受容体アンタゴニスト（α−遮断薬）、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、ベータ2−アドレナリン受容体アゴニスト（β2−アゴニスト）、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、中枢作用性交感神経遮断剤、直接作用性血管拡張剤、エンドセリン受容体アンタゴニスト、神経節遮断薬、ニトロダイレーター、ホスホジエステラーゼ阻害剤、カリウムチャネル開口剤、レニン阻害剤、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1151の方法。
[本発明1153]
前記血管拡張剤が、プラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、トリマゾシン、フェントラミン、フェノキシベンザミン、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、キナプリル、ラミプリル、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルメサルタン、テルミサルタン、バルサルタン、エピネフリン、ノルエピネフリン、ドーパミン、ドブタミン、イソプロテレノール、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、クロニジン、グアナベンズ、グアンファシン、α−メチルドーパ、ヒドララジン、ボセンタン、カンシル酸トリメタファン、二硝酸イソソルビド、一硝酸イソソルビド、ニトログリセリン、四硝酸エリトリチル、四硝酸ペンタエリスリトール、ニトロプルシドナトリウム、ミルリノン、イナムリノン（以前はアムリノン）、シロスタゾール、シルデナフィル、タダラフィル、ミノキシジル、アリスキレン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、本発明1151または1152の方法。
[本発明1154]
前記治療剤が、抗悪性腫瘍剤、抗増殖剤、および／または有糸分裂阻害剤、および／または遊走阻害剤である、本発明1138〜1142のいずれかの方法。
[本発明1155]
前記抗悪性腫瘍剤／抗増殖剤／有糸分裂阻害剤／遊走阻害剤が、パクリタキセル、5−フルオロウラシル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、シクロスポリン、シスプラチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エポチロン、メトトレキセート、アザチオプリン、アドリアマイシン、およびマイトマイシン；エンドスタチン、アンジオスタチンおよびチミジンキナーゼ阻害剤、クラドリビン、タキソール、トラピジル、ハロフジノン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、本発明1154の方法。
[本発明1156]
前記治療剤が、アスピリン、ワルファリン（クマジン）、アセノクマロール、アンクロッド、アニシンジオン、ブロミンジオン、クロリンジオン、クメタロール、シクロクマロール、デキストラン、デキストラン硫酸ナトリウム、ジクマロール、ジフェナジオン、ビスクマ酢酸エチル、エチリデンジクマロール、フルインジオン、ヘパリン、ヒルジン、リアポレートナトリウム、オキサジジオン、ペントサンポリサルフェート、フェニンジオン、フェンプロクモン、ホスビチン、ピコタミド、チオクロマロール、ジピリダモール（ペルサンチン）、スルフィンピラゾン（アンツラン）、チクロピジン（チクリド）、組織プラスミノーゲン活性化因子（アクチバーゼ）、プラスミン、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（アボキナーゼ）、ストレプトキナーゼ（ストレプターゼ）、およびアニストレプラーゼ／ＡＰＳＡＣ（エミナーゼ）、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、本発明1138〜1142のいずれかの方法。
[本発明1157]
前記治療剤が血管収縮剤である、本発明1138〜1142のいずれかの方法。
[本発明1158]
前記血管収縮剤が、アルファ−アドレナリン受容体アゴニスト、カテコールアミン、バソプレッシン、バソプレッシン受容体モジュレーター、およびカルシウムチャネルアゴニストからなる群から選択される、本発明1157の方法。
[本発明1159]
前記血管収縮剤が、硫酸アルミニウム、アミデフリン、アンフェタミン、アンジオテンシン、抗ヒスタミン薬、アルギプレシン、次没食子酸ビスマス、カファミノール、カフェイン、カテコールアミン、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、ドーパミン、エフェドリン、エピネフリン、フェリプレシン、インダナゾリン、イソプロテレノール、リセルグ酸ジエチルアミン、リプレシン（ＬＶＰ）、リセルグ酸、メフェドロン、メトキサミン、メチルフェニデート、メチゾリン、メタラミノール、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、ノルエピネフリン、オクトドリン、オルニプレシン、オキシメタゾリン、フェニルエタノールアミン、フェニレフリン、フェニルイソプロピルアミン、フェニルプロパノールアミン、フェニプレッシン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、サイロシビン、テトラヒドララジン、テトラヒドロゾリン、塩酸テトラヒドロゾリン、硫酸亜鉛を含む塩酸テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシン、バソトシン、キシロメタゾリン、酸化亜鉛、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1157または1158の方法。
[本発明1160]
前記イメージング剤が、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）色素（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＣｏｒｐ．；Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆ）；フルオレセイン；フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）；Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ（商標）；テトラローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）、5−カルボキシフルオレセイン（ＦＡＭ）；2'7'−ジメトキシ−4'5'−ジクロロ−6−カルボキシフルオレセイン（ＪＯＥ）；テトラクロロフルオレセイン（ＴＥＴ）；6−カルボキシローダミン（Ｒ6Ｇ）；Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ'−テトラメチル−6−カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）；6−カルボキシ−Ｘ−ローダミン（ＲＯＸ）；1−ジメチルアミノ−ナフチル−5−スルホネート、1−アニリノ−8−ナフタレンスルホネート、2−ｐ−トルイジニル−6−ナフタレンスルホネート、および5−（2'−アミノエチル）アミノナフタレン−1−スルホン酸（ＥＤＡＮＳ）を含むナフチルアミノ化合物など、アルファまたはベータ位にアミノ基を有するナフチルアミン色素；3−フェニル−7−イソシアナトクマリンなどのクマリン；9−イソチオシアナトアクリジンおよびアクリジンオレンジなどのアクリジン；Ｎ−（ｐ（2−ベンゾオキサゾリル）フェニル）マレイミド；Ｃｙ2、インドジカルボシアニン3（Ｃｙ3）、インドジカルボシアニン5（Ｃｙ5）、インドジカルボシアニン5．5（Ｃｙ5．5）、3−（−カルボキシ−ペンチル）−3'エチル−5，5'−ジメチルオキサカルボシアニン（ＣｙＡ）などのシアニン；1Ｈ，5Ｈ，11Ｈ，15Ｈ−キサンテノ［2，3，4−ｉｊ：5，6，7−ｉ'ｊ'］ジキノリジン−18−イウム、9−［2（または4）−［［［6−［2，5−ジオキソ−1−ピロリジニル）オキシ］−6−オキソヘキシル］アミノ］スルホニル］−4（または2）−スルホフェニル］−2，3，6，7，12，13，16，17オクタヒドロ−分子内塩（ＴＲまたはテキサスレッド）；ＢＯＤＩＰＹ（商標）色素；ベンゾオキサジアゾール；スチルベン；ピレン；緑色蛍光タンパク質、増強緑色蛍光タンパク質（ＥＧＦＰ）、不安定化ＥＧＦＰ、赤色蛍光タンパク質（例えばＤｓＲｅｄ）、ｄｓＲＥｄ変異体のｍＲＦＰｍａｒｓおよびｍＲＦＰｒｕｂｙ、黄色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、青色蛍光タンパク質、濃青色蛍光タンパク質などの蛍光タンパク質、およびそれらの変異体；99ｍＴｃ、95Ｔｃ、111Ｉｎ、62Ｃｕ、64Ｃｕ、Ｇａ、68Ｇａ、153Ｇｄ、18Ｆ、124Ｉ、125Ｉ、131Ｉ、47Ｓｃ、64Ｃｕ、67Ｃｕ、89Ｓｒ、86Ｙ、87Ｙ、90Ｙ、105Ｒｈ、111Ａｇ、111Ｉｎ、117ｍＳｎ、149Ｐｍ、153Ｓｍ、166Ｈｏ、177Ｌｕ、186Ｒｅ、188Ｒｅ、211Ａｔ、212Ｂｉなどの放射性同位元素；Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、およびＭｎ（ＩＩ）などの常磁性金属イオン；Ｒｅ、Ｓｍ、Ｈｏ、Ｌｕ、Ｐｍ、Ｙ、Ｂｉ、Ｐｄ、Ｇｄ、Ｌａ、Ａｕ、Ａｕ、Ｙｂ、Ｄｙ、Ｃｕ、Ｒｈ、Ａｇ、およびＩｒなどのＸ線吸収体；およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1139〜1142のいずれかの方法。
[本発明1161]
前記マイクロカプセルがリガンドを含む、本発明1138〜1160のいずれかの方法。
[本発明1162]
前記リガンドが、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ペプチドミメティック、糖タンパク質、レクチン、ヌクレオシド、ヌクレオチド、核酸（例えば、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、遺伝子、制御領域および終結領域を含む遺伝子、ウイルスもしくはプラスミドＤＮＡなどの自己複製システム、一本鎖および二本鎖のｓｉＲＮＡ、ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ作用物質またはｉＲＮＡ作用物質）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣物、スーパーｍｉｒ（ｓｕｐｅｒｍｉｒ）、アプタマー、アンチｍｉｒ、アンチｍｉｒ、アンタゴｍｉｒ、Ｕ1アダプター、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化因子、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ならびにデコイオリゴヌクレオチド）、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、リポ多糖類、脂質、ビタミン、ステロイド、ホルモン、補因子、受容体、受容体リガンド、ならびにそれらのアナログおよび誘導体からなる群から選択される、本発明1161の方法。
[本発明1163]
前記リガンドが、ポリリシン（ＰＬＬ）、ポリＬ−アスパラギン酸、ポリＬ−グルタミン酸、スチレン−無水マレイン酸コポリマー、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）コポリマー、ジビニルエーテル−無水マレイン酸コポリマー、Ｎ−（2−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミドコポリマー（ＨＭＰＡ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリウレタン、ポリ（2−エチルアクリル酸）、Ｎ−イソプロピルアクリルアミドポリマー、ポリホスファジン、ポリエチレンイミン、スペルミン、スペルミジン、ポリアミン、偽ペプチド−ポリアミン、ペプチドミメティックポリアミン、デンドリマーポリアミン、アルギニン、アミジン、プロタミン、チロトロピン、メラノトロピン、レクチン、サーファクタントタンパク質Ａ、ムチン、トランスフェリン、ビスホスホネート、ポリグルタメート、ポリアスパルタート、アプタマー、アシアロフェツイン、ヒアルロナン、プロコラーゲン、インスリン、トランスフェリン、アルブミン、アクリジン、クロス−ソラレン、マイトマイシンＣ、ＴＰＰＣ4、テキサフィリン、サフィリン、多環式芳香族炭化水素（例えば、フェナジン、ジヒドロフェナジン）、胆汁酸、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、1−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、1，3−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、1，3−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ3−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ3−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチルまたはフェノキサジン）、ＲＧＤペプチド、放射標識マーカー、ハプテン、ナプロキセン、アスピリン、ジニトロフェニル、ＨＲＰ、ＡＰ、レクチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＢ、葉酸、Ｂ12、リボフラビン、ビオチン、ピリドキサール、タキソン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、サイトカラシン、ノコダゾール、ジャプラキノリド、ラトランクリンＡ、ファロイジン、スウィンホリドＡ、インダノシン、ミオセルビン、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦアルファ）、インターロイキン−1ベータ、ガンマインターフェロン、ＧａｌＮＡｃ、ガラクトース、マンノース、マンノース−6Ｐ、ＧａｌＮＡｃクラスター、マンノースクラスター、ガラクトースクラスターなどの糖クラスター、アプタマー、インテグリン受容体リガンド、ケモカイン受容体リガンド、セロトニン受容体リガンド、ＰＳＭＡ、エンドセリン、ＧＣＰＩＩ、ソマトスタチン、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、本発明1161または1162の方法。
[本発明1164]
前記リガンドが、
2018065823.tif 000006
、セクロピン、リコトキシン（ｌｙｃｏｔｏｘｉｎ）、パラダキシン（ｐａｒａｄａｘｉｎ）、ブホリン（ｂｕｆｏｒｉｎ）、ＣＰＦ、ボンビニン様ペプチド（ＢＬＰ）、カテリシジン、セラトトキシン（ｃｅｒａｔｏｔｏｘｉｎ）、Ｓ．クラバ（Ｓ．Ｃｌａｖａ）ペプチド、ヌタウナギ腸内抗微生物ペプチド（ｈａｇｆｉｓｈ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ）（ＨＦＩＡＰ）、マガイニン、ブレビニン−2（ｂｒｅｖｉｎｉｎ−2）、デルマセプチン、メリチン、プルロシジン（ｐｌｅｕｒｏｃｉｄｉｎ）、Ｈ2Ａペプチド、ゼノパスペプチド、エスクレンチン−1、カエリン（ｃａｅｒｉｎ）ならびにそれらの任意のアナログおよび誘導体からなる群から選択されるペプチドである、本発明1161〜1163のいずれかの方法。
[本発明1165]
前記所定の剪断応力が、少なくとも70ｄｙｎ／ｃｍ2である、本発明1138〜1164のいずれかの方法。
[本発明1166]
前記投与が、注射、点滴、点眼、吸入、または経口摂取によるものである、本発明1138〜1165のいずれかの方法。
[本発明1167]
前記マイクロカプセルが単層マイクロカプセルである、本発明1138〜1166のいずれかの方法。
[本発明1168]
前記マイクロカプセルが多層マイクロカプセルである、本発明1138〜1166のいずれかの方法。
[本発明1169]
前記マイクロカプセルのサイズが、約1マイクロ〜約5，000ミクロンである、本発明1138〜1168のいずれかの方法。
[本発明1170]
前記マイクロカプセルのポリマーシェルが生体適合性ポリマーを含む、本発明1138〜1169のいずれかの方法。
[本発明1171]
前記マイクロカプセルのポリマーシェルが、ポロキサマー、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ酸無水物、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリアミド、ポリウレタン、ポリエステルアミド、ポリオルトエステル、ポリジオキサノン、ポリアセタール、ポリケタール、ポリカーボネート、ポリオルトカーボネート、ポリジヒドロピラン、ポリホスファゼン、ポリヒドロキシブチレート、ポリヒドロキシバレレート、ポリアルキレンオキサレート、ポリアルキレンスクシネート、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（アミノ酸）、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリヒドロキシセルロース、ポリメチルメタクリレート、キチン、キトサン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ（グリセロールセバケート）（ＰＧＳ）、ゼラチン、コラーゲン、シルク、キトサン、アルギネート、セルロース、ポリ核酸、セルロースアセテート（セルロースジアセテートを含む）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリブチレン、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリアミド、ナイロン、ポリカーボネート、ポリスルフィド、ポリスルホン、ヒドロゲル（例えばアクリル）、ポリアクリロニトリル、ポリビニルアセテート、セルロースアセテートブチレート、ニトロセルロース、ウレタン／カーボネートのコポリマー、スチレン／マレイン酸のコポリマー、ポリ（エチレンイミン）、ヒアルロン、ヘパリン、アガロース、プルラン、ならびにそれらの任意の組合せを含むコポリマー、ターポリマー、およびコポリマーからなる群から選択されるポリマーを含む、本発明1138〜1170のいずれかの方法。
[本発明1172]
前記マイクロカプセルからの治療剤またはイメージング剤の放出速度が、正常な血管剪断応力下での放出に比較して、所定の剪断応力以上の剪断応力下で、少なくとも10％高い、本発明1138〜1171のいずれかの方法。
本特許または出願ファイルは、カラーで作成された少なくとも１つの図面を含む。カラー図面を有する本特許または特許出願のコピーは、要求および必要手数料の支払時に特許局によって提供されることになる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１Ａ】剪断脱凝集に基づく、狭窄領域のターゲティングを示す概略図である。図１Ａは、剪断応力（τ）がハーゲン・ポァズィユ流れ条件下で血管径（ｄ）に強く依存した関数（τ≒ｄ３）であり、したがって、狭窄または閉塞領域が、いかなる正常な剪断応力よりも数オーダー高い異常に高レベルの剪断応力を形成することを示す。この上昇した剪断応力により、ミクロンサイズの凝集物がそれらのＮＰ成分に物理的に分解する。
【図１Ｂ】剪断脱凝集に基づく、狭窄領域のターゲティングを示す概略図である。図１Ｂは、放出されたＮＰは、ミクロンスケールの粒子と比較して、それらのより小さなサイズにより（Ｆｈｙｄｒｏ≒ｒ２）、受ける血行力学力（Ｆｈｙｄｒｏ）が小さく、それによって、より迅速に沈降して、周囲の血管壁および表面内皮により効率的に付着するが、一方、大きな粒子は流体の流れにより遠方に引きずられることを示す（図６Ａおよび６Ｂを参照のこと）。
【図１Ｃ】剪断脱凝集に基づく、狭窄領域のターゲティングを示す概略図である。図１Ｃは、マイクロスケールの凝集物が複数のＮＰに分解すると、全露出表面積が顕著に増大し、それによって、ターゲティング部位における、ＮＰ上に固定された薬物または酵素の放出または活性がさらに増強されることを示す。
【図２Ａ】病的剪断応力に曝露されると、マイクロスケールの血小板ミメティックのみがナノ粒子凝集物に分散することを示す。図２Ａは、マイクロスケール（約２〜５μｍ）の血小板ミメティック（左）およびそれらを生成するために使用されるＰＬＧＡナノ粒子（約１８０ｎｍ）（右）（バー、２μｍ）の走査型電子顕微鏡写真である。
【図２Ｂ】病的剪断応力に曝露されると、マイクロスケールの血小板ミメティックのみがナノ粒子凝集物に分散することを示す。図２Ｂは、インタクトな血小板ミメティック（左）、および血流計を使用して、それらを１０分間、１，０００ｄｙｎｅ／ｃｍ２に曝露した後の分散したナノ粒子（右）（バー、１０μｍ）を示す蛍光顕微鏡写真である。
【図２Ｃ】病的剪断応力に曝露されると、マイクロスケールの血小板ミメティックのみがナノ粒子凝集物に分散することを示す。図２Ｃは、剪断の関数として血小板ミメティックからの蛍光ＮＰの放出量を示す棒グラフである。これにより、病的レベルの剪断に曝露されると（≧１００ｄｙｎｅ／ｃｍ２に１分間）、生理学的レベルの剪断（１または１０ｄｙｎｅ／ｃｍ２）と比較して、マイクロスケールの凝集物に有意な（＊ｐ＜０．００５）分解が起こることが示される。
【図２Ｄ】病的剪断応力に曝露されると、マイクロスケールの血小板ミメティックのみがナノ粒子凝集物に分散することを示す。図２Ｄは、６３歳の男性患者における狭窄した左冠状動脈の血管造影である。
【図２Ｅ】病的剪断応力に曝露されると、マイクロスケールの血小板ミメティックのみがナノ粒子凝集物に分散することを示す。図２Ｅは、正常な冠状動脈（左）と図２Ｄに示される６０％管腔閉塞を伴う狭窄血管とにおける流れ分布を比較する、計算流体力学（ＣＦＤ）シミュレーションを示す。幾何構造は血管内超音波スキャンに基づいて再構築された。血管の狭窄領域の上昇した壁剪断応力レベル（＞１００ｄｙｎｅ／ｃｍ２）は、図２Ｃに示される血小板ミメティックからＮＰの放出を誘導するのに必要とされる剪断応力レベルに類似していることに留意されたい。
【図３Ａ】マイクロ流体装置における、血行力学条件下の血小板ミメティックの剪断誘導分散およびナノ粒子ターゲティングを示す。図３Ａｂは、マイクロ流体の血管狭窄モデルの概略図である。血小板ミメティック（大きな球体）は、血管狭窄を模倣して、中央部の横断面が９０％絞窄しているマイクロ流体チャネルの中に注入される。チャネルの底部には単層の培養ウシ動脈内皮細胞が裏打ちされている。血小板ミメティックは、狭窄前領域ではインタクトなままであるが、その後、それらが絞窄を通って流れると、ナノ粒子（より小さな球体）に分解する。
【図３Ｂ】マイクロ流体装置における、血行力学条件下の血小板ミメティックの剪断誘導分散およびナノ粒子ターゲティングを示す。図３Ｂは、ＰＤＭＳで作製された狭窄微細血管装置の写真である。
【図３Ｃ】マイクロ流体装置における、血行力学条件下の血小板ミメティックの剪断誘導分散およびナノ粒子ターゲティングを示す。図３Ｃは、図３Ｂに示されたマイクロ流体装置のＣＦＤシミュレーションを示す。これにより、絞窄から上流の１，０００（１／ｓ）の生理学的な入口剪断速度は、狭窄領域（９０％の管腔閉塞）で約１００，０００（１／ｓ）の病的レベルにまで増加することが示される；これらの剪断速度はそれぞれ、１０および１，０００ｄｙｎｅ／ｃｍ２の剪断応力に相当する。
【図３Ｄ】マイクロ流体装置における、血行力学条件下の血小板ミメティックの剪断誘導分散およびナノ粒子ターゲティングを示す。図３Ｄは、生理学的レベルの剪断応力（１０ｄｙｎｅ／ｃｍ２）による絞窄のないチャネルを通る流れと比較して、血小板ミメティックが図３Ｂに示されたチャネルを通って潅流されると、血小板ミメティックからの蛍光ＮＰの放出が有意に（＊ｐ＜０．００５）増加することを示す棒グラフである。右の蛍光顕微鏡写真は、それぞれの流出液中で収集されたＮＰを、絞窄のないチャネル（上部）と９０％絞窄のあるチャネル（下部）とで比較している。
【図３Ｅ】マイクロ流体装置における、血行力学条件下の血小板ミメティックの剪断誘導分散およびナノ粒子ターゲティングを示す。図３Ｅは、絞窄の上流部位（狭窄前）と比較して、下流部位（狭窄後）を裏打ちしている内皮細胞における蛍光ＮＰの明白な（ｐ＜０．００５）蓄積を示す棒グラフである。絞窄前領域（左）および絞窄後領域（右）からの細胞の対応する蛍光顕微鏡像を右に示す（バー、２０μｍ）。
【図４】概略図（左）およびコンピュータ断層血管撮影（ＣＴＡ）像（右）で示される肺塞栓の血栓溶解に基づく提案された手法を示す図である。下段：血栓溶解剤（組織プラスミノーゲン活性化因子；ｔＰＡ）でコーティングされた／負荷されたＮＰ凝集物は、部分的に流れが閉塞され、したがって上昇した剪断応力が形成される、塞栓のある領域を流れると分解する。ＮＰはこれらの部位に蓄積し、局所的に作用して塞栓を溶解する。
【図５Ａ】血栓溶解薬の剪断ターゲティングを示す。図５Ａは、実験的な剪断活性化薬物ターゲティング手法の概略図である。血管の流れを部分的に閉塞する塞栓（滞留した血塊）の形成により、狭くなった管腔で局所的に上昇した剪断応力が生成し（左）、それによって、血小板ミメティックが分解し、局所的に蓄積することになるＮＰ成分が送達される（中心）。ＮＰがｔＰＡなどの血栓溶解薬でコーティングされていれば、血塊に結合したＮＰは閉塞物を溶解するであろう（右）。
【図５Ｂ】血栓溶解薬の剪断ターゲティングを示す。図５Ｂは、ヒト肺における肺塞栓症のコンピュータ断層血管造影像である；塞栓は、この図では造影剤の使用により白く見える血流を圧縮する、高倍率で見ることができる暗い領域（挿入図の矢印）として出現する。
【図５Ｃ】血栓溶解薬の剪断ターゲティングを示す。図５Ｃは、ｔ−ＰＡ（５０ｎｇ／ｍｌ）でコーティングされた血小板ミメティックの注入前（０分）および注入後（１分および６０分）における、マイクロ流体装置の狭くなったマイクロチャネル中の流れを閉塞する人為的なマイクロ塞栓（約２００μｍ）の経時的蛍光（上段）および明視野（下段）像である。蛍光ＮＰは、注入後１分以内に血塊の表面に局所的に蓄積し、その結果、血塊の漸進的な溶解および縮小が時間と共に生じた。
【図５Ｄ】血栓溶解薬の剪断ターゲティングを示す。図５Ｄは、可溶性ｔ−ＰＡと比較して、ｔＰＡでコーティングされた血小板ミメティックを使用すると、塞栓溶解カイネティクスが増強されることを示す線グラフである。ｔ−ＰＡ（５０ｎｇ／ｍｌ）でコーティングされた血小板ミメティックでは、１時間以内に塞栓サイズが５０％超減少した（青線）が、同じ濃度の遊離ｔ−ＰＡでは、５％未満のサイズ減少であった（赤線）。
【図５Ｅ】血栓溶解薬の剪断ターゲティングを示す。図５Ｅは、マウスの生体外肺換気灌流モデルを使用して、人為的なフィブリン塊を肺動脈の中に注入した肺全体の組織学的切片の蛍光（上段）および位相差（下段）像である。これらの像は、閉塞塞栓内の蛍光ＮＰの局所的蓄積を示す。塞栓は一部の血管には存在しないが（左）、他の血管では、容易に視覚化することができる（右）。
【図５Ｆ】血栓溶解薬の剪断ターゲティングを示す。図５Ｆは、マイクロフルオリメトリー（ｍｉｃｒｏｆｌｕｏｒｉｍｅｔｒｙ）により検出された、非閉塞血管と比較した、閉塞領域における蛍光ＮＰ蓄積の大幅な（１０〜２０倍）増加（ｐ＜０．００５）を示す棒グラフである。
【図５Ｇ】血栓溶解薬の剪断ターゲティングを示す。図５Ｇは、５０ｎｇ／ｍｌのｔＰＡでコーティングされた血小板ミメティックは、生体外肺塞栓症モデルにおいて、静脈内注射後１時間以内に肺動脈圧を正常化するが、一方、同じ濃度または１０倍高用量（５００ｎｇ／ｍｌ）の遊離ｔ−ＰＡでは、肺動脈圧は減少せず（Ｎ＝３；＊ｐ＜０．００５）、血栓溶解に対して同様の効果を生み出すには、１００倍用量（５０００ｎｇ／ｍｌ）が必要とされることを示す棒グラフである。
【図５Ｈ】血栓溶解薬の剪断ターゲティングを示す。図５Ｈは、ｔＰＡでコーティングされた血小板ミメティック（青線）は、約１時間にわたり肺高血圧を回復させるが、同じ濃度（５０ｎｇ／ｍｌ）の遊離ｔ−ＰＡには効果がない（赤線）ことを示す、肺塞栓症モデルにおける肺動脈圧のリアルタイム測定である。
【図６】流れの下で、マイクロ粒子と比較して、ナノ粒子の亢進した付着を示す。図６Ａは、フィブリンでコーティングされた８０ｍｍのチャネル（１０ｄｙｎｅ／ｃｍ２）の中を１５分間流されたときの、ＰＬＧＡ  ｔＰＡでコーティングされたナノ粒子（平均サイズ２００ｎｍ）およびマイクロ凝集物（平均サイズ２ｍｍ；両方ともＰＢＳ中で１００ｍｇ／ｍｌ、ｔＰＡコーティング０．５ｍｇ／ｍｇ）の表面付着量を示す棒グラフである。図６Ｂは、右のマイクロ凝集物と比較して、左の極めて高レベルのＮＰ結合を示す蛍光顕微鏡像である。
【図７】実際の狭窄血管を模倣した特性を備えた狭窄チャネルの中を流されたときの、マイクロ凝集物のナノ粒子への加速された分解を示す棒グラフである。凝集物の懸濁液を、狭窄領域なし（高さ６４０ミクロンのチャネル、壁剪断応力１０ｄｙｎｅ／ｃｍ２）または狭窄領域あり（８０％狭窄、高さ８０ミクロン）の装置の中に注入した。次いで、この懸濁液を、ミクロンサイズの粒子をすべて除去する０．２２ミクロンのフィルターを通して濾過し、蛍光強度を測定した（対応する蛍光画像を各棒の上に示す）。流れに誘導された放出は、狭窄なしと比較して狭窄ありでは８倍高くなった。
【図８】調製から５日目に撮影されたＦＩＴＣデキストラン（ＭＷ  ７０ｋＤａ）を負荷されたＲＢＣゴーストの蛍光画像である。
【図９】狭窄を通って流れるＲＢＣゴーストからの放出の増加を示す棒グラフである。
【図１０】狭窄を通って流れるＰｌｕｒｏｎｉｃ−ＰＥＩマイクロカプセルからのＦＩＴＣデキストランの放出を示す棒グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
発明の詳細な説明
一態様では、本発明は、複数のナノ粒子を含む凝集物であって、剪断応力下で脱凝集する凝集物を提供する。本発明を使用して、目的の化合物、例えば治療剤および／またはイメージング剤を、その部位の制限されかつ／または抑制された流体の流れにより流体剪断応力が上昇する局所部位に送達することができる。本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、凝集物は生物医学的な使用に向けたものである。本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、凝集物は非医学的または工業的使用に向けたものである。
【００１５】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、凝集物はマイクロサイズの凝集物である。「マイクロサイズ」により、０．１μｍ〜１０００μｍのオーダーにある凝集物が意図される。凝集物は規則的形状であっても不規則的形状であってもよい。例えば、凝集物は、回転楕円体、中空回転楕円体、立方体、多面体、角柱、円筒、棒、盤、または他の幾何学的形状もしくは不規則的形状であってもよい。一般に、本発明の凝集物は、少なくとも１方向が１μｍ以上である（例えば、１μｍ以上、２μｍ以上、５μｍ以上、１０μｍ以上、２０μｍ以上、３０μｍ以上、４０μｍ以上、５０μｍ以上、６０μｍ以上、７０μｍ以上、８０μｍ以上、９０μｍ以上、１００μｍ以上、１５０μｍ以上、２００μｍ以上、２５０μｍ以上、３００μｍ以上、または５００μｍ以上）。一部の実施形態では、凝集物は、少なくとも１方向が５００μｍ以下である（例えば、５００μｍ以下、４００μｍ以下、３００μｍ以下、２５０μｍ以下、２００μｍ以下、１５０μｍ以下、１００μｍ以下、５０μｍ以下、２５μｍ以下、２０μｍ以下、１５μｍ以下、１０μｍ以下、または５μｍ以下）。一部の実施形態では、凝集物は、１方向が約０．５μｍ〜約２００μｍの範囲、好ましくは約０．７５μｍ〜約５０μｍの範囲、より好ましくは約１μｍ〜約２０μｍの範囲である。一部の実施形態では、凝集物はサイズが１μｍ〜３μｍである。一部の実施形態では、凝集物はサイズが２．５μｍ〜５．５μｍである。一実施形態では、凝集物はサイズが約３．８μｍである。
【００１６】
理論に拘束されたくはないが、本発明の凝集物は、マイクロサイズであるので、胆汁中に容易に排出されうるか、または生分解性であれば、化学成分に分解されて、腎臓を通って排泄されうる。これは、軍事および／または緊急事態の薬物送達では有利となりうる。例えば、凝集物は、血管梗塞（脳卒中、心臓発作、肺塞栓症）の治療のために使用することができる。血塊による血管の急速な閉塞は、剪断応力の大きな増加を局所的に引き起こす。凝集物はまた、出血を治療するために使用することができる。高容量が血管壁の小さな穴を通り抜けるため、剪断応力が出血部位で高くなるので、本発明の凝集物は出血部位で脱凝集することになる。したがって、凝血促進剤が、ＮＰ上に含有されていれば、出血部位に送達される。
【００１７】
本明細書で使用される用語「剪断応力」は、面積に対する力の比を指す。流体は、加えられた剪断力に応じて流れる。しかしながら、流体がチャネルを通って流れる場合、チャネルの壁に隣接する流体は、壁に付着する傾向があり、その結果、図１Ａの左側に示されるように、速度勾配が生じる。壁からの距離が増加するにつれて、流体速度は増加する。流体速度の差により、速度勾配により示されるように、流体中を流れる細胞および粒子上に剪断応力が加えられるようになる。壁までの距離が減少するにつれて、流体速度の差が大きくなり、剪断応力が増加する。剪断応力はまた、半径の関数であり、したがって、図１Ａの中央に示されるように、チャネルが絞窄されると、剪断応力も増加する。本明細書で使用される用語「剪断応力条件」は、剪断応力が流体により加えられる条件を指す。流れる流体により生成される剪断応力は、流れる流体中に存在しうる分子、粒子、および凝集物に伝達されうるかまたは加えられうる。これらの剪断応力条件は、一般に層流特性または乱流特性がある流体中で起こりうる。凝集物が受ける剪断応力量は、凝集物サイズの関数である。
【００１８】
一般に、正常な血管では、壁剪断応力は７０ｄｙｎ／ｃｍ２（７Ｐａ）を十分下回るが、狭窄部位では、剪断応力は、７０ｄｙｎ／ｃｍ２を上回る（ＡＭ  Ｍａｌｅｋ，Ｓ．Ａ．＆  Ｓ．Ｉｚｕｍｏ  "Ｈｅｍｏｄｙａｍｉｃ  ｓｈｅａｒ  ｓｔｒｅｓｓ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｒｏｌｅ  ｉｎ  ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ．"ＪＡＭＡ，１９９９，２８２：２０３５−２０４２）。したがって、本明細書に記載の凝集物が脱凝集する剪断応力は５〜３０００ｄｙｎ／ｃｍ２である。一部の実施形態では、本明細書に記載の凝集物が脱凝集する剪断応力は、５ｄｙｎ／ｃｍ２以上、６ｄｙｎ／ｃｍ２以上、７ｄｙｎ／ｃｍ２以上、８ｄｙｎ／ｃｍ２以上、９ｄｙｎ／ｃｍ２以上、１０ｄｙｎ／ｃｍ２以上、１１ｄｙｎ／ｃｍ２以上、１２ｄｙｎ／ｃｍ２以上、１３ｄｙｎ／ｃｍ２以上、１４ｄｙｎ／ｃｍ２以上、１５ｄｙｎ／ｃｍ２以上、または２０ｄｙｎ／ｃｍ２以上である。凝集物の完全な脱凝集は要求されないことを理解されたい。
【００１９】
本明細書に記載の凝集物は、対照剪断条件（例えば、正常な血管剪断応力）と比較して、剪断応力条件（例えば、狭窄部位剪断応力）の下では、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％（すなわち完全な脱凝集）脱凝集することができる。
【００２０】
脱凝集の量および／または速度は、凝集物中のナノ粒子の非共有結合を調節することにより制御することができる。本明細書で使用される用語「非共有結合」は、共有結合を含まない、２つ以上の個々の分子間の分子間相互作用を指す。分子間相互作用は、例えば、個々の分子の極性、電荷、および／またはその他の特性に依存し、これらに限定されないが、静電的（例えばイオン的）相互作用、双極子相互作用、ファンデルワールス力、およびそれらの２つ以上の組合せを含む。したがって、非共有結合の強度は、上記分子間相互作用の１つまたは複数を変化させることにより調節することができる。例えば、ナノ粒子の表面を改変して、２つ以上のナノ粒子間の分子間静電的相互作用、水素結合相互作用、双極子相互作用、親水性相互作用、疎水性相互作用、ファンデルワールス力、およびそれらの任意の組合せを調節することができる。
【００２１】
結合強度を制御する方法の１つは、ナノ粒子の表面上に親和性結合ペアの一組を含めて、上述の分子間相互作用の１つまたは複数の調節によりこれらの親和性結合ペアの分子間結合を調節することによるものである。
【００２２】
本明細書で使用される用語「親水性相互作用」は、水分子に対する引力を指し、それにより物質／化合物またはその一部が水と結合、水を吸収、および／または水に溶解することができる。本明細書で使用される用語「疎水性相互作用」は、水分子に対する斥力を指し、それにより物質／化合物またはその一部が水と結合、水を吸収、および／または水に溶解しない。結合強度は、ナノ粒子表面の親水特性および／または疎水特性の調節により制御することができる。例えば、疎水性が高いナノ粒子ほど、親水性条件下（例えば血液中）で一緒になってクラスターを形成するであろう。逆に、親水性が高いナノ粒子ほど、親水性条件下では、クラスターは形成されないであろう。
【００２３】
本明細書で使用される用語「静電的相互作用」は、２つ以上の正または負に荷電した部分／基の間の分子間相互作用を指し、この相互作用は、２つが反対に荷電した場合（すなわち、一方が正で、他方が負）には引力になり、２つの電荷が同符合の場合（すなわち、２つとも正または２つとも負）には斥力になり、またはそれらの組合せとなりうる。静電的相互作用は、ナノ粒子の表面上に正および負に荷電した部分／基を含めることにより調節することができる。負電荷に対する正電荷の比を調節することにより、ナノ粒子の結合強度を調節することができる；したがって、脱凝集の速度を制御することができる。
【００２４】
本明細書で使用される用語「双極子相互作用」は、２つ以上の極性分子、例えば、非電荷で部分的に正の末端δ＋（例えば、ホスファチジルコリンのコリン頭部などの陽性頭部）を有する第１の分子と非電荷で部分的に負の末端δ−（例えば、多糖におけるヘテロ原子Ｏ、Ｎ、またはＳなど陰性原子）を有する第２の分子との間の分子間引力を指す。双極子相互作用はまた、水素原子が別々の分子上の陰性原子間の架橋として働き、水素原子が共有結合により第１の分子に、静電力により第２の分子に保持される分子間水素結合を指す。
【００２５】
本明細書で使用される用語「水素結合」は、第１の陰性原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ）に共有結合した水素原子と第２の陰性原子との間の引力または架橋を指し、ここで、第１および第２の陰性原子は、２つの異なる分子（分子間の水素結合）にあっても、単一分子（分子内水素結合）にあってもよい。ナノ粒子間の結合強度は、ナノ粒子が互いと形成することができる分子間水素結合の数を調節することにより調節することができる。分子間水素結合が多くなると、結合は強くなり、したがって脱凝集速度は遅くなる。逆に、分子間水素結合が少なくなると、結合は弱くなり、したがって脱凝集速度は速くなる。
【００２６】
本明細書で使用される用語「ファンデルワールス力」は、量子力学により説明される無極性分子間の引力を指す。ファンデルワールス力は、一般に、電子分布の変化を受けた隣接分子により誘導される瞬間的な双極モーメントに関係している。
【００２７】
本明細書に記載の本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、１つまたは複数の化合物、例えば送達される化合物を、凝集物と結合させることができる。本明細書で使用する場合、凝集物に関して、語句「結合した」は、凝集物または凝集物のナノ粒子成分に巻き込まれた、被包された、表面に結合した、または他の方法で連結されたことを意味する。
【００２８】
理論に拘束されたくはないが、化合物は、凝集物中のナノ粒子と共有結合的または非共有結合的に結合することができる。したがって、本明細書に記載の本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、化合物はナノ粒子内に被包される。
【００２９】
本明細書に記載の本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、化合物はナノ粒子の表面上に吸収／吸着される。
【００３０】
本明細書に記載の本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、化合物はナノ粒子に共有結合される。
【００３１】
化合物は、凝集物中にある間、ナノ粒子と結合している必要はないことを理解されたい。例えば、前もって形成されたナノ粒子は、化合物の存在下で凝集することができる。理論に拘束されたくはないが、化合物は、その後、凝集物中の空間（または空洞）に存在することができる。
【００３２】
本明細書に記載の本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、凝集物は少なくとも２つ以上の治療剤を含む。非限定例として、凝集物は、疾患、障害、または症状を治療するための、当技術分野で公知の２つ以上の異なる治療剤を含むことができる。
【００３３】
本明細書に記載の本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、凝集物は催炎物質および別の治療剤を含む。別の治療剤は、催炎物質であっても、催炎物質でなくてもよい。
【００３４】
ナノ粒子
本明細書で使用される用語「ナノ粒子」は、１０−９すなわち１０億分の１メートルのオーダーで、かつ１０−６すなわち１００万分の１メートル未満のサイズの粒子を指す。用語「ナノ粒子」は、ナノスフェア；ナノロッド；ナノシェル；およびナノプリズムを含み、これらのナノ粒子は、ナノネットワークの一部となりうる。用語「ナノ粒子」はまた、ナノ粒子のサイズを有するリポソームおよび脂質粒子を包含する。粒子は、例えば単分散であっても多分散であってもよく、所与の分散の粒子径は、例えば、約０．１〜数百ｎｍの間の粒子径など、変動してもよい。
【００３５】
本明細書で使用される用語「リポソーム」は、脂質二重層により包まれたいかなるコンパートメントも包含する。リポソームは膜型およびサイズにより特徴づけることができる。リポソームはまた、当技術分野では脂質小胞とも呼ばれる。リポソームを形成するために、脂質分子は細長い無極性（疎水性）部分と極性（親水性）部分とを含む。分子の疎水性および親水性部分は、好ましくは細長い分子構造の２つの末端に位置する。このような脂質が、水中に分散すると、ラメラと呼ばれる二分子膜を自発的に形成する。ラメラは、無極性（疎水性）表面が互いに面し、極性（親水性）表面が水性媒体に面する脂質分子の２つの単層シートで構成される。脂質により形成される膜は、細胞の内容物を包む細胞膜と同様に、水相の一部を包む。したがって、リポソームの二重層は、細胞膜内にタンパク成分を保持しない細胞膜と類似している。
【００３６】
リポソームには、単一脂質層で構成され、一般に直径が２０〜１００ナノメートルである単層小胞が含まれる；大きな単層小胞（ＬＵＶＳ）は、典型的には、１００ｎｍより大きく、多層リポソームを超音波処理することにより生成することができる。好ましいリポソームは、直径が２０〜２５０ｎｍの範囲のものである。
【００３７】
これらに限定されることはないが、本発明の凝集物を形成するために使用することができる少なくとも１０タイプのナノ粒子がある。すなわち、（１）目的の分子、例えば、治療剤、イメージング剤、またはリガンドが、吸収／吸着するか、またはナノ粒子コア上に薬物コーティングを形成するポリマーまたは他の材料から形成されるナノ粒子；（２）目的の分子、例えば、治療剤、イメージング剤、またはリガンドによって形成され、ポリマーまたは他の材料でコーティングされるコアから形成されるナノ粒子；（３）目的の分子、例えば、治療剤、イメージング剤、またはリガンドが共有結合するポリマーまたは他の材料から形成されるナノ粒子；（４）目的の分子（例えば、治療剤、イメージング剤、またはリガンド）および他の分子から形成されるナノ粒子；（５）治療剤、イメージング剤、またはリガンドとナノ粒子の成分または他の非薬物物質との概ね均一な混合物を含むように形成されるナノ粒子；（６）目的の分子、例えば、治療剤、イメージング剤、またはリガンドのコアの上にコーティングを有する純粋薬物または薬物混合物のナノ粒子；（７）目的の化合物がまったく結合していないナノ粒子；（８）治療剤、イメージング剤、または生物学的に活性な化合物のみで構成されるナノ粒子；（９）ナノ粒子の中に浸透した目的の分子、例えば、治療剤、イメージング剤、またはリガンドを有するナノ粒子；および（１０）ナノ粒子に吸着した目的の分子、例えば、治療剤、イメージング剤、またはリガンドを有するナノ粒子。
【００３８】
一部の実施形態では、目的の化合物、例えば、治療剤、イメージング剤、またはリガンドは、凝集物の外表面上にコーティングされる。すなわち、目的の化合物は凝集物の外表面上にコーティングを形成する。理論に拘束されたくはないが、凝集物中に存在するナノ粒子のサブセットは、表面上に目的の化合物を含み（すなわち、表面は目的の化合物でコーティングされている）、その場合これらのナノ粒子は、凝集物の外表面上に目的の化合物を提示している。
【００３９】
一部の実施形態では、凝集物の外表面は、ナノ粒子により凝集物を形成させた後に目的の化合物でコーティングすることができる。例えば、リガンドおよび／または化学反応性基を、凝集物中のナノ粒子の外表面上に存在させることができ、これらのリガンドおよび／または化学基を利用して、凝集物の外表面に目的の化合物を結合することができる。
【００４０】
一部の実施形態では、目的の化合物を、前もって形成された凝集物の外表面上に吸収／吸着させて、凝集物の外表面上に目的の化合物のコーティングを形成させることができる。
【００４１】
凝集物中のすべてのナノ粒子が目的の化合物を含む必要はない。ナノ粒子のサブセットのみが目的の化合物を含んでもよい。例えば、凝集物では、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５０％、または１００％（すなわちナノ粒子のすべて）が、目的の化合物を含んでもよい。
【００４２】
当業者は、当技術分野で公知の薬物送達用の多種多様なナノ粒子について十分認識している。したがって、本発明によるナノ粒子は、例えば、米国特許第６，６４５，５１７号明細書；同第５，５４３，１５８号明細書；同第７，３４８，０２６号明細書；同第７，２６５，０９０号明細書；同第７，５４１，０４６号明細書；同第５，５７８，３２５号明細書；同第７，３７１，７３８号明細書；同第７，６５１，７７０号明細書；同第９，８０１，１８９号明細書；同第第７，３２９，６３８号明細書；同第７，６０１，３３１号明細書；および同第５，９６２，５６６号明細書、ならびに米国特許出願公開第２００６／０２８０７９８号明細書；同第２００５／０２８１８８４号明細書；同第２００３／０２２３９３８号明細書；同第２００４／０００１８７２号明細書；同第２００８／００１９９０８号明細書；同第２００７／０２６９３８０号明細書；同第２００７／０２６４１９９号明細書；同第２００８／０１３８４３０；同第２００５／０００３０１４号明細書；同第２００６／０１２７４６７；同第２００６／００７８６２４号明細書；同第２００７／０２４３２５９；同第２００５／００５８６０３号明細書；同第２００７／００５３８７０号明細書；同第２００６／０１０５０４９号明細書；同第２００７／０２２４２７７号明細書；同第２００３／０１４７９６６号明細書；同第２００３／００８２２３７号明細書；同第２００９／０２２６５２５号明細書；同第２００６／０２３３８８３号明細書；同第２００８／０１９３５４７号明細書；同第２００７／０２９２５２４号明細書；同第２００７／００１４８０４号明細書；同第２００４／０２１９２２１号明細書；同第２００６／０１９３７８７号明細書；同第２００４／００８１６８８号明細書；同第２００８／００９５８５６号明細書；同第２００６／０１３４２０９号明細書；および同第２００４／０２４７６８号明細書に記載されているものを含み、これらの明細書すべての内容は本明細書に組み込まれる。
【００４３】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、ナノ粒子は、Ａｃｕｓｐｈｅｒｅ（ｗｗｗ．ａｃｕｓｐｈｅｒｅ．ｃｏｍ／ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ／ｈｏｍｅ．ｈｔｍｌ）のＰｅｒｆｌｕｂｕｔａｎｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  ＭｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅまたはＨＤＤＳ（商標）（Ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍ）である。Ｐｅｒｆｌｕｂｕｔａｎｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅは、ＰＬＧＡ（ポリ乳酸−ｃｏ−グリコール酸）、リン脂質、および細孔形性剤を含有するエマルジョンの形成により作製される。このエマルジョンは、さらに噴霧乾燥により処理されて、ハチの巣構造中にガス類似体を含有する小さな多孔性マイクロスフェアを生成する。
【００４４】
理論に拘束されたくはないが、ＨＤＤＳ（商標）は、水に難溶性の広範囲の薬物または疎水性薬物を、水に迅速に溶解しうる小さなマイクロスフェアに埋め込まれた薬物のマイクロスフェアまたはナノスフェアに変換することができる。好ましいＨＤＤＳ（商標）の１つは、ＡＩ−８５０（商標）であり、これは、疎水性薬物のパクリタキセル（ｐａｃｌａｔａｘｅｌ）の改良型であり、代表的な制癌剤である、Ａｂｒａｘｉｓ  ＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅのＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）に生物学的に同等である。これを送達することにより、細胞の異常増殖による内膜過形成または血管絞窄を阻害することができる。
【００４５】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、ナノ粒子の平均直径は、約１０ｎｍ〜約５００ｎｍである。一部の実施形態では、ナノ粒子の平均直径は、約５０ｎｍ〜約２５０ｎｍである。一実施形態では、ナノ粒子の平均直径は、約１００ｎｍ〜約２５０ｎｍである。一実施形態では、ナノ粒子の平均直径は、約１８０ｎｍである。
【００４６】
限定されることなく、本発明に適用可能なナノ粒子は任意の材料から構成することができる。本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、ナノ粒子は、ポリマー、例えば生体適合性ポリマーを含む。ポリマーの平均分子量は、ゲル透過クロマトグラフィーにより決定される場合、２０，０００〜約５００，０００の範囲になりうる。
【００４７】
本明細書で使用される用語「生体適合性」は、体液または組織と接触している間、本質的に細胞毒性または免疫原性を示さないことを意味する。本明細書で使用される用語「ポリマー」は、オリゴマー、コオリゴマー、ポリマー、およびコポリマー、例えばランダムブロック、マルチブロック、スター、グラフト、グラジエントコポリマー、およびそれらの組合せを指す。
【００４８】
用語「生体適合性ポリマー」は、対象において体内で使用された場合、無毒で、化学的に不活性かつ実質的に非免疫原性であり、血液に実質的に不溶性であるポリマーを指す。生体適合性ポリマーは、非生分解性であっても好ましくは生分解性であっても、いずれでもよい。好ましくは、インサイチューで使用される場合、生体適合性ポリマーは非炎症性でもある。
【００４９】
生分解性ポリマーは当技術分野で開示されている。適切な生分解性ポリマーの例としては、これらに限定されないが、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ酸無水物、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリアミド、ポリウレタン、ポリエステルアミド、ポリオルトエステル、ポリジオキサノン、ポリアセタール、ポリケタール、ポリカーボネート、ポリオルトカーボネート、ポリジヒドロピラン、ポリホスファゼン、ポリヒドロキシブチレート、ポリヒドロキシバレレート、ポリアルキレンオキサレート、ポリアルキレンスクシネート、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（アミノ酸）、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリヒドロキシセルロース、ポリメチルメタクリレート、キチン、キトサン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ（グリセロールセバケート）（ＰＧＳ）、ならびに前述の１つまたは複数を含むコポリマー、ターポリマー、およびコポリマーなどの線状ポリマーが挙げられる。他の生分解性ポリマーとしては、例えば、ゼラチン、コラーゲン、シルク、キトサン、アルギネート、セルロース、ポリ核酸などが挙げられる。
【００５０】
適切な非生分解性の生体適合性ポリマーとしては、例えば、セルロースアセテート（セルロースジアセテートを含む）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリブチレン、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリアミド、ナイロン、ポリカーボネート、ポリスルフィド、ポリスルホン、ヒドロゲル（例えばアクリル）、ポリアクリロニトリル、ポリビニルアセテート、セルロースアセテートブチレート、ニトロセルロース、ウレタン／カーボネートのコポリマー、スチレン／マレイン酸のコポリマー、ポリ（エチレンイミン）、ポロキサマー（例えばＰｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７および１８８などのＰｌｕｒｏｎｉｃ）、ヒアルロン（Ｈｙａｌｕｒｏｎ）、ヘパリン、アガロース、プルラン（Ｐｕｌｌｕｌａｎ）、ならびにエチレン／ビニルアルコールコポリマー（ＥＶＯＨ）など、前述の１つまたは複数を含むコポリマーが挙げられる。
【００５１】
一部の実施形態では、生体適合性ポリマーは、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ（グリセロールセバケート）（ＰＧＳ）、ポリ（エチレンイミン）、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７，１８８）、ヒアルロン、ヘパリン、アガロース、またはプルランである。
【００５２】
目的の分子に加えて、ナノ粒子は、血液中のナノ粒子のインビボ寿命を延長することができる追加の部分を含むことができる。例えば、ナノ粒子は、血液中のナノ粒子のインビボ寿命を高める機能性部分を含むことができる。インビボ寿命を増加させる代表的な１つの部分は、ポリエチレングリコールである。したがって、凝集物は、表面上でポリエチレングリコール処理されたナノ粒子を含むことができる。
【００５３】
赤血球
本発明の種々の態様が凝集物に関して論述されているが、凝集物の代わりに、目的の化合物、例えば、治療剤および／またはイメージング剤が結合している赤血球（ＲＢＣ）を使用することもできる。発明者らは、赤血球に被包された化合物が、剪断応力下で赤血球から優先的に放出されうることを発見した。したがって、一態様では、本発明は、対象の狭窄症、狭窄病変、血塊、閉塞性病変、および／または内出血の治療またはイメージングのための方法であって、それを必要とする対象に治療剤および／イメージング剤を含む赤血球を投与することを含む方法を提供する。
【００５４】
化合物とＲＢＣとの間の結合に関する２つの主要な手法がある。最も広範に使用される手法は、いくつかの被包法の１つを使用する、ＲＢＣ中への化合物の被包である。第２の手法は、ＲＢＣ膜への可逆的または不可逆的な化合物の付着である。したがって、一部の実施形態では、目的の化合物（例えば、治療剤および／またはイメージング剤）はＲＢＣ中に被包される。したがって、目的の化合物とＲＢＣ膜との間に共有結合はない。
【００５５】
赤血球は血液の最も一般的な細胞であり、酸素運搬の役割を担い、典型的な両凹形状をしている。正常なヒトＲＢＣは、直径が７〜８μｍ、平均容量が９０ｆｌである。哺乳動物では、ＲＢＣは無核であり、成熟過程でそれらの細胞小器官は失われる。人体には、毎秒２００万の速度で常時生成される、２〜３×１０１３個のＲＢＣが通常存在している。ＲＢＣは、循環系を移動しながら１００〜１２０日の寿命を過ごした後、細網内皮系（ＲＥＳ）のマクロファージにより選択的に除去される。
【００５６】
両凹形状の成熟ＲＢＣの表面積は、約１３６μｍ２であるが、約１５０ｆｌのスフェアに膨潤することができる。直径が２〜３μｍの無傷の毛細管をＲＢＣが横断できることも注目されたい。ＲＢＣ膜は、均一シェルに組織化されている膜骨格タンパク質としっかり結合している。ＲＢＣ形状はいくつかの可逆的な変形を受けることができる。ＲＢＣ生存の重要な決定要素はその変形能である。変形能に影響を与える主要因は、内部粘度（主としてＲＢＣヘモグロビンの寄与）、細胞の表面／体積、および膜の固有の変形能である。ＲＢＣには他の極めて興味深い特性がある。すなわち、ＲＢＣが高張液に入れられた場合は収縮し、または低張液に入れられた場合は膨潤するので、浸透圧計として機能することである。ＲＢＣは、１０ｎｍから最大で５００ｎｍの範囲の膜上の穴を生じさせる、決定的な溶血性体積に到達することができる。これらの過程は、通常可逆的であり、溶血の後に穴は閉じ、細胞はその両凹形状を取り戻す。
【００５７】
赤血球は、毒性生成物を生成することなく完全に生分解性であり、特に自己の赤血球が使用される場合、高い生体適合性を示すので、生体適合性担体である。赤血球は、種々の分子の被包化のためのいくつかの手法によって、生体外で容易に取り扱うことができ、その後、自然細胞と類似した形態学的、免疫学的、および生化学的特性を有する負荷された赤血球を得ることができる。核および他の細胞小器官を欠損すると、それらの体積の大部分が薬物の被包化に利用可能となる。赤血球は、内因性因子による早発の不活化および分解から被包された物質を保護し、同時に、薬物の毒性作用から対象を保護し、そして免疫反応を回避する。潜在的に、多種多様な化学物質を被包することができる。赤血球は、他の合成担体と比較して、血液循環において長寿命であり、負荷された分子に直接影響を与え、プロドラッグが負荷された場合には、活性薬物自体を生じさせうる数種の酵素活性の存在によりバイオリアクターとして機能することができる。
【００５８】
限定はされないが、赤血球には、自己の赤血球、すなわち治療を必要とする対象から採取された１つまたは複数の細胞（すなわち、ドナーおよびレシピエントは同じ個体である）を含めることができる。自己の赤血球には、いかなる免疫に基づいた細胞拒絶も回避できるという利点がある。あるいは、細胞は、例えばドナーから採取された、異種のものであってもよい。二次対象は同種であっても、異種であってもよい。典型的には、細胞がドナーから来る場合、その細胞は、免疫抑制の必要性を減少または除去するために、レシピエントと免疫学的に十分適合する、すなわち移植拒絶反応が起こることはないドナーからのものとなる。一部の実施形態では、細胞は異種の供給源、すなわち、レシピエントまたはそのレシピエント種と免疫学的に十分適合するように遺伝子操作された非ヒト哺乳動物から採取される。免疫学的適合性を判定する方法は、当技術分野で公知であり、ＨＬＡおよびＡＢＯ決定基に対するドナー−レシピエント適合性を評価するための組織適合試験を含む。例えば、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｂａｃｈ  ａｎｄ  Ａｕｃｈｉｎｃｌｏｓｓ，Ｅｄｓ．（Ｗｉｌｅｙ，Ｊｏｈｎ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ  １９９４）を参照のこと。一部の実施形態では、赤血球は、組換え赤血球または赤血球由来小胞、例えば米国特許第７，５２１，１７４号明細書および米国特許出願公開第２００９／０２７４６３０号明細書に記載のものである。両明細書の内容は参照により本明細書に組み込まれる。
【００５９】
ＲＢＣに目的の化合物を負荷または被包するために、いくつかの異なる方法を使用することができる。これらの方法には、物理的性質（例えば、浸透に基づいた方法および電気パルス法）または化学的性質（例えば、膜の化学的撹乱）のものがある。
【００６０】
赤血球負荷に最も広く使用される方法は、低張液の存在下など、低浸透圧の条件下に置かれたときに、ＲＢＣが体積を増加させる顕著な特性に通常基づいている。したがって、浸透に基づいた方法が、赤血球における化合物の被包のためのより標準的な方法を構成する。方法論の観点からは、それぞれの方法の間には相違があるが、これらの方法はすべて、低張液に暴露された場合に、赤血球膜の透過性の増加に伴って細胞が膨潤することに基づいている。赤血球が低浸透圧条件下にあると、膜に細孔が出現するので、物質の被包が促進される。低張稀釈、低張前膨潤、浸透圧パルス、低張溶血、および低張透析など、これらの方法には数種の変法があるが、最後のものが最も一般的に使用される方法の１つである。
【００６１】
低張溶血手順の３つの変法、すなわち希釈法、前膨潤希釈法、および透析法が利用可能である。一般には、その処理から得られるＲＢＣの生化学的および生理学的特性が保存され、かつ最も高いパーセントの被包が得られるので、低張透析法が使用される。
【００６２】
低張透析では、適切なヘマトクリットを有する赤血球の懸濁液を透析バッグの中に入れ、イヌ赤血球における１００ｍｏｓＭ／ｋｇからヒツジにおける２００〜２２０ｍｏｓＭ／ｋｇまでの範囲のオスモル濃度の低浸透圧緩衝液に４℃で浸す。一般に、ヒト赤血球のために推奨されるオスモル濃度は、約１２０ｍｏｓＭ／ｋｇである。媒体のオスモル濃度は、被包の効率と透析される赤血球の最小限の溶血との間の妥協点を意味する。被包される化合物は、透析バッグ内部の赤血球懸濁液の中に含められる傾向がある。低浸透圧緩衝液は、その組成は変動するが、通常は、ｐＨ７．４で、ＮａＨ２ＰＯ４、ＣＯ３ＨＮａ、グルコース、還元グルタチオン、およびＡＴＰを含む。ＡＴＰおよび還元グルタチオンをそれぞれ、細胞のエネルギーを維持するために、および赤血球内部の環境を還元的にするために透析緩衝液に加えることができる。透析時間は２０〜１８０分の間で変えることができる。低浸透圧透析を実施するために、Ｃ．Ｒｏｐａｒｓ，Ｇ．Ａｖｅｎａｒｄ  ａｎｄ  Ｍ．Ｃｈａｓｓａｉｇｎｅ．Ｉｎ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１４９，Ｒ．Ｇｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｋ．Ｊ．Ｗｉｄｄｅｒ，Ｅｄｉｔｏｒｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ（１９８７），ｐｐ．２４２−２４８に記載の連続フロー透析装置を使用することができる。
【００６３】
続いて、負荷された赤血球について、３７℃で１０分間、等張媒体中でアニーリング処理が実施される。最後に、赤血球の再シールが、高浸透圧緩衝液を使用して、３７℃で実施される。高浸透圧緩衝液は、通常、ｐＨ７．４で、アデニン、イノシン、グルコース、ピルベート、ＮａＨ２ＰＯ４、およびＮａＣｌを含有する。被包化工程の終わりに、赤血球は、後の投与のために自己血漿の中に再懸濁される。
【００６４】
低浸透圧透析が使用される場合、数種の因子、すなわち、使用される溶液の張性、透析の回数、媒体のｐＨ、温度、赤血球に接触する薬物またはペプチドの濃度等が被包化過程に影響を与えうる。この手順により、加えられた化合物の約４０〜５０％が被包されうる。化合物の最終的な細胞内濃度は細胞外濃度と同様である。
【００６５】
さらに、ＺｎＣｌ２を、負荷されたＲＢＣに外から加えることができる。理論に拘束されたくはないが、これにより、バンド３タンパク質（ＲＢＣ表面上の陰イオントランスポーター）の可逆的なクラスター形成が誘導される。使用されるＺｎ２＋の量を変えることにより、バンド３クラスタリングの広がりを制御することにより、処理された細胞のインビボ生存を調節することが可能になりうる。
【００６６】
浸透圧パルス法は浸透圧に基づいた方法の変法であり、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を使用して、赤血球の中へ物質が到達するのを促進する。この機序は、赤血球膜を横切る一時的な浸透圧勾配であり、それに伴い赤血球の中に薬物の負荷が起こる。浸透圧パルスの使用は、例えば、Ｒ．Ｆｒａｎｃｏ，Ｒ．Ｂａｒｋｅｒ  ａｎｄ  Ｍ．Ｗｅｉｎｅｒ，Ａｄｖ．Ｂｉｏｓｃｉ．（ｓｅｒｉｅｓ）６７（１９８７），ｐｐ．６３−７２に記載されており、その内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００６７】
低張溶血の使用は、例えば、Ｓ．Ｊａｉｎ  ａｎｄ  Ｎ．Ｋ．Ｊａｉｎ，Ｉｎｄｉａｎ  Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．５９（１９９７），ｐｐ．２７５−２８１；Ｇ．Ｍ．Ｉｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｈ．Ｃ．Ｗ．Ｔｓｏｎｇ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．（ｓｅｒｉｅｓ）１４９（１９８７），ｐｐ．２２１−２２９；およびＧ．Ｍ．Ｉｈｌｅｒ，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．２０（１９８３），ｐｐ．１５１−１６９に記載されており、その内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００６８】
低張稀釈の使用は、例えば、Ｄ．Ａ．Ｌｅｗｉｓ  ａｎｄ  Ｈ．Ｏ．Ａｌｐａｒ，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．２２（１９８４），ｐｐ．１３７−１４６；Ｕ．Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ，Ｉｎ：Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｄｒｕｇｓ，Ｅ．Ｐ．Ｇｏｌｄｂｅｒｇ，Ｅｄｉｔｏｒ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８３），ｐｐ．１５３−２００；Ｖ．Ｊａｉｔｅｌｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｄｉａｎ  Ｄｒｕｇｓ  ３３（１９９６），ｐｐ．５８９−５９４；Ｓ．Ｊ．Ｕｐｄｉｋｅ  ａｎｄ  Ｒ．Ｔ．Ｗａｋａｍｉｙａ，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１０１（１９８３），ｐｐ．６７９−６９１；Ｄ．Ａ．Ｌｅｗｉｓ，Ｐｈａｒｍ．Ｊ．２３３（１９８４），ｐｐ．３８４−３８５；Ｋ．Ａｄｒｉａｅｎｓｓｅｎｓｅｔ  ａｌ．ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．２２（１９７６），ｐｐ．３２３−３２６；Ｒ．Ｂａｋｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ  ２１５（１９６７），ｐｐ．４２４−４２５；Ｇ．Ｍ．Ｉｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｈ．Ｃ．Ｗ．Ｔｓｏｎｇ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．（ｓｅｒｉｅｓ）１４９（１９８７），ｐｐ．２２１−２２９；Ｓ．Ｊ．Ｕｐｄｉｋｅ，Ｒ．Ｔ．Ｗａｋａｒｎｉｙａ  ａｎｄ  Ｅ．Ｎ．Ｌｉｇｈｔｆｏｏｔ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９３（１９７６），ｐｐ．６８１−６８３；Ｎ．Ｔａｌｗａｒ  ａｎｄ  Ｎ．Ｋ．Ｊａｉｎ，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌ．Ｉｎｄ．Ｐｈａｒｍ．１８（１９９２），ｐｐ．１７９９−１８１２；Ｅ．Ｐｉｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２２（１９８３），ｐｐ．３３５９−３３６８；Ｇ．Ｍ．Ｉｈｅｒ，Ｒ．Ｍ．Ｇｌｅｗ  ａｎｄ  Ｆ．Ｗ．Ｓｃｈｎｕｒｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．７０  １９７３），ｐｐ．２６６３−２６６６；Ｊ．Ｒ．Ｄｅｌｏａｃｈ  ａｎｄ  Ｇ．Ｍ．Ｉｈｌｅｒ，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ  ４９６（１９７７），ｐｐ．１３６−１４５；およびＳ．Ｂｈａｓｋａｒａｎ  ａｎｄ  Ｓ．Ｓ．Ｄｈｉｒ，Ｉｎｄｉａｎ  Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．５７（１９９５），ｐｐ．２４０−２４２に記載されており、その内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００６９】
低張透析の使用は、例えば、Ｕ．Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ，Ｉｎ：Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｄｒｕｇｓ，Ｅ．Ｐ．Ｇｏｌｄｂｅｒｇ，Ｅｄｉｔｏｒ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８３），ｐｐ．１５３−２００；Ｖ．Ｊａｉｔｅｌｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｄｉａｎ  Ｄｒｕｇｓ  ３３（１９９６），ｐｐ．５８９−５９４；Ｈ．Ｇ．Ｅｒｃｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．４０（１９８６），ｐｐ．３００−３０３；Ｇ．Ｍ．Ｉｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｈ．Ｃ．Ｗ．Ｔｓｏｎｇ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．（ｓｅｒｉｅｓ）１４９（１９８７），ｐｐ．２２１−２２９；Ｕ．Ｂｅｎａｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．Ｂｉｏｓｃｉ．（ｓｅｒｉｅｓ）６７（１９８７），ｐｐ．１２９−１３６；  Ｒ．Ｋｒａｖｔｏｚｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４２（１９９０），ｐｐ．４７３−４７６；Ｊ．Ｄ．Ｂｅｒｍａｎ，Ａｄｖ．Ｂｉｏｓｃｉ．（ｓｅｒｉｅｓ）６７（１９８７），ｐｐ．１４５−１５２；Ｊ．Ｒ．Ｄｅｌｏａｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．Ｂｉｏｓｃｉ．（ｓｅｒｉｅｓ）６７（１９８７），ｐｐ．１８３−１９０；Ｊ．Ｒ．Ｄｅｌｏａｃｈ  ａｎｄ  Ｇ．Ｍ．Ｉｈｌｅｒ，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ  ４９６（１９７７），ｐｐ．１３６−１４５；Ｍ．Ｊｒａｄｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．Ｂｉｏｓｃｉ．（ｓｅｒｉｅｓ）６７（１９８７），ｐｐ．２９−３６；Ａ．Ｚａｎｅｌｌａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．Ｂｉｏｓｃｉ．（ｓｅｒｉｅｓ）６７（１９８７），ｐｐ．１７−２７；Ｇ．Ｆｉｏｒｅｌｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．Ｂｉｏｓｃｉ．（ｓｅｒｉｅｓ）６７（１９８７），ｐｐ．４７−５４；およびＭ．Ｉ．Ｇａｒｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１３（１９９６），ｐｐ．８６９−８７４に記載されており、その内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００７０】
低張前膨潤の使用は、例えば、Ｖ．Ｊａｉｔｅｌｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｄｉａｎ  Ｄｒｕｇｓ  ３３（１９９６），ｐｐ．５８９−５９４；Ｓ．Ｊａｉｎ  ａｎｄ  Ｎ．Ｋ．Ｊａｉｎ，Ｉｎｄｉａｎ  Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．５９（１９９７），ｐｐ．２７５−２８１；Ｈ．Ｏ．Ａｌｐａｒ  ａｎｄ  Ｗ．Ｊ．Ｉｒｗｉｎ，Ａｄｖ．Ｂｉｏｓｃｉ．（ｓｅｒｉｅｓ）６７（１９８７），ｐｐ．１−９；Ｎ．Ｔａｌｗａｒ  ａｎｄ  Ｎ．Ｋ．Ｊａｉｎ，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌ．Ｒｅｌｅａｓｅ  ２０（１９９２），ｐｐ．１３３−１４２；  Ｄ．Ｊ．Ｊｅｎｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．７３  （１９８１），ｐｐ．２１２Ｐ−２１３Ｐ；Ｈ．Ｏ．Ａｌｐａｒ  ａｎｄ  Ｄ．Ａ．Ｌｅｗｉｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３４（１９８５），ｐｐ．２５７−２６１；Ｇ．Ｍ．Ｉｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｈ．Ｃ．Ｗ．Ｔｓｏｎｇ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．（ｓｅｒｉｅｓ）１４９（１９８７），ｐｐ．２２１−２２９；Ｅ．Ｐｉｔｔ，Ｄ．Ａ．Ｌｅｗｉｓ  ａｎｄ  Ｒ．Ｏｆｆｏｒｄ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１３２（１９８３），ｐｐ．３３５５−３３５８；Ｎ．Ｔａｌｗａｒ  ａｎｄ  Ｎ．Ｋ．Ｊａｉｎ，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌ．Ｉｎｄ．Ｐｈａｒｍ．１８（１９９２），ｐｐ．１７９９−１８１２；Ｅ．Ｐｉｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２２（１９８３），ｐｐ．３３５９−３３６８；Ｓ．Ｊａｉｎ，Ｓ．Ｋ．Ｊａｉｎ  ａｎｄ  Ｖ．Ｋ．Ｄｉｘｉｔ，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌ．Ｉｎｄ．Ｐｈａｒｍ．２３（１９９７），ｐｐ．９９９−１００６；Ｈ．Ｔａｊｅｒｚａｄｅｈ  ａｎｄ  Ｍ．Ｈａｍｉｄｉ，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌ．Ｉｎｄ．Ｐｈａｒｍ．２６（２０００），ｐｐ．１２４７−１２５７；  Ｍ．Ｈａｍｉｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．８（２００１），ｐｐ．２３１−２３７；およびＪ．Ｂｉｒｄ，Ｒ．Ｂｅｓｔ  ａｎｄ  Ｄ．Ａ．Ｌｅｗｉｓ，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３５（１９８３），ｐｐ．２４６−２４７に記載されており、その内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００７１】
化合物はまた、細胞膜にストマトサイト形成を誘導することが知られているプリマキン、ヒドロコルチゾン、ビンブラスチン、およびクロルプロマジンなどの膜活性薬に赤血球を曝露することによっても、赤血球に被包させることができる。化学的撹乱の使用は、例えば、Ｕ．Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ，Ｉｎ：Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｄｒｕｇｓ，Ｅ．Ｐ．Ｇｏｌｄｂｅｒｇ，Ｅｄｉｔｏｒ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８３），ｐｐ．１５３−２００；Ｊ．Ｃｏｎｎｏｒ  ａｎｄ  Ａ．Ｊ．Ｓｃｈｒｏｉｔ，Ａｄｖ．Ｂｉｏｓｃｉ．（ｓｅｒｉｅｓ）６７（１９８７），ｐｐ．１６３−１７１；  Ｉ．Ｂｅｎ−Ｂａｓｓａｔ，Ｋ．Ｇ．Ｂｅｎｓｃｈ  ａｎｄ  Ｓ．Ｌ．Ｓｃｈｒｉｅｒ，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．５１（１９７２），ｐｐ．１８３３−１８４４；Ｌ．Ｍ．Ｍａｔｏｖｃｉｋ，Ｉ．Ｇ．Ｊｕｎｇａ  ａｎｄ  Ｓ．Ｌ．Ｓｃｈｒｉｅｒ，Ｄｒｕｇ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｅｎｄｏｃｙｔｏｓｉｓ  ｏｆ  ｎｅｏｎａｔａｌ  ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ．Ｂｌｏｏｄ  ６５（１９８５），ｐｐ．１０５６−１０６３；Ｓ．Ｌ．Ｓｃｈｒｉｅｒ，Ａ．Ｚａｃｈｏｗｓｋｉ  ａｎｄ  Ｐ．Ｆ．Ｄｅｖａｕｘ，Ｂｌｏｏｄ  ７９（１９９２），ｐｐ．７８２−７８６；およびＭ．Ｔｏｎｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ２７（１９９１），ｐｐ．９４７−９４８に記載されており、その内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００７２】
電気穿孔法は、強力な外部電場に細胞を曝露することにより、赤血球膜に細孔を誘導することに基づいている。これらの細孔は、異なるサイズの化合物を通過させることができる。この被包方法は、他の一般に使用される手法の有効な代替法となり、アルコールデヒドロゲナーゼおよびアルデヒドデヒドロゲナーゼなどの酵素およびジクロフェナクナトリウムなどの薬物の被包に使用されている。電気穿孔希釈の使用は、例えば、Ｄ．Ａ．Ｌｅｗｉｓ  ａｎｄ  Ｈ．Ｏ．Ａｌｐａｒ，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．２２（１９８４），ｐｐ．１３７−１４６；Ｕ．Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ，Ｉｎ：Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｄｒｕｇｓ，Ｅ．Ｐ．Ｇｏｌｄｂｅｒｇ，Ｅｄｉｔｏｒ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８３），ｐｐ．１５３−２００；Ｖ．Ｊａｉｔｅｌｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｄｉａｎ  Ｄｒｕｇｓ  ３３（１９９６），ｐｐ．５８９−５９４；Ｄ．Ａ．Ｌｅｗｉｓ，Ｐｈａｒｍ．Ｊ．２３３（１９８４），ｐｐ．３８４−３８５；Ｋ．Ｋｉｎｏｓｉｔａ  ａｎｄ  Ｔ．Ｙ．Ｔｓｏｎｇ，Ｎａｔｕｒｅ  ２７２（１９７８），ｐｐ．２５８−２６０；Ｓ．Ｊａｉｎ，Ｓ．Ｋ．Ｊａｉｎ  ａｎｄ  Ｖ．Ｋ．Ｄｉｘｉｔ，Ｉｎｄｉａｎ  Ｄｒｕｇｓ  ３２（１９９５），ｐｐ．４７１−４７６；Ｃ．Ａ．Ｋｒｕｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．Ｂｉｏｓｃｉ．（ｓｅｒｉｅｓ）６７（１９８７），ｐｐ．１３７−１４４；Ｕ．Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ，Ｆ．Ｒｉｅｍａｎｎ  ａｎｄ  Ｇ．Ｐｉｌｗａｔ，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ  ４３６  （１９７６），ｐｐ．４６０−４７４；Ｄ．Ｈ．Ｍｉｔｃｈｅｌｌ，Ｇ．Ｔ．Ｊａｍｅｓ  ａｎｄ  Ｃ．Ａ．Ｋｒｕｓｅ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１２（１９９０）（３），ｐｐ．２６４−２７５；Ｔ．Ｙ．Ｔｓｏｎｇ，Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｊ．６０（１９９１），ｐｐ．２９７−３０６；Ｃ．Ｌｉｚａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ  １４２５（１９９８），ｐｐ．３２８−３３６；Ｃ．Ｌｉｚａｎｏ，Ｍ．Ｔ．Ｐｅｒｅｚ  ａｎｄ  Ｍ．Ｐｉｎｉｌｌａ，Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．６８  （２００１），ｐｐ．２００１−２０１６；Ｑ．Ｄｏｎｇ  ａｎｄ  Ｗ．Ｊｉｎ，Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ  ２２  １３（２００１），ｐｐ．２７８６−２７９２；Ｍ．Ｈａｒｉｔｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｈｅｍｏｒｈｅｏｌ．Ｍｉｃｒｏｃｉｒｃ．１９（１９８８），ｐｐ．２０５−２１７；およびＰ．Ｃ．Ｍａｎｇａｌ  ａｎｄ  Ａ．Ｋａｕｒ，Ｉｎｄｉａｎ  Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２８（１９９１），ｐｐ．２１９−２２１に記載されており、その内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００７３】
ＲＢＣにおいて関心対象の化合物を封入する方法は、例えば、Ｌ．Ｒｏｓｓｉ，Ｓ．Ｓｅｒａｆｉｎｉ  ａｎｄ  Ｍ．Ｍａｇｎａｎｉ，Ｉｎ：Ｍ．Ｍａｇｎａｎｉ，Ｅｄｉｔｏｒ，Ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ａｎｄ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ，Ｍ．Ｍａｇｎａｎｉ，Ｅｄｉｔｏｒ，Ｋｌｕｗｅｒ  Ａｃａｄｅｍｉｃ／Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（２００３），ｐｐ．１−１８；Ｃ．Ｌｉｚａｎｏ，Ｍ．Ｔ．Ｐｅｒｅｚ  ａｎｄ  Ｍ．Ｐｉｎｉｌｌａ，Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．６８（２００１），ｐｐ．２００１−２０１６；Ｒ．Ｓ．Ｆｒａｎｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ  ３０（１９９０），ｐｐ．１９６−２００；Ｍ．Ｉｈｌｅｒ，Ｂｉｂｌ．Ｈａｅｍａｔｏｌ．５１（１９８５），ｐｐ．１２７−１３３；Ｇ．Ｍ．Ｉｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｈ．Ｃ．Ｗ．Ｔｓｏｎｇ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．（ｓｅｒｉｅｓ）  １４９（１９８７），ｐｐ．２２１−２２９；Ｓ．Ｅ．Ｍｕｌｈｏｌｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１６（１９９９）（４），ｐｐ．５１４−５１８；およびＬ．Ａ．Ｌｏｔｅｒｏ，Ｇ．Ｏｌｍｏｓ  ａｎｄ  Ｊ．Ｃ．Ｄｉｅｚ，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ  １６２０（２００３）（１−３），ｐｐ．１６０−１６６にも記載されており、その内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００７４】
多くの活性物質がＲＢＣに封入されている。例えば、Ｍ．Ｍａｇｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．２（１９９５），ｐｐ．５７−６１；Ｕ．Ｂｅｎａｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２２０（１９９６），ｐｐ．２０−２５；Ａ．Ｆｒａｔｅｒｎａｌｅ，Ｌ．Ｒｏｓｓｉ  ａｎｄ  Ｍ．Ｍａｇｎａｎｉ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ  １２９１（１９９６），ｐｐ．１４９−１５４；Ｌ．Ｒｏｓｓｉ  ｅｔ  ａｌ．，ＡＩＤＳ  Ｒｅｓ．Ｈｕｍ．Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ  １５（１９９９），ｐｐ．３４５−３５３；Ｍ．Ｍａｇｎａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９３（１９９６），ｐｐ．４４０３−４４０８；Ｌ．Ｒｏｓｓｉ  ｅｔ  ａｌ．，ＡＩＤＳ  Ｒｅｓ．Ｈｕｍ．Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ  １４（１９９８），ｐｐ．４３５−４４４；Ｌ．Ｒｏｓｓｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４７（２００１），ｐｐ．８１９−８２７；Ｐ．Ｆｒａｎｃｈｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｖｉｒ．Ｃｈｅｍ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．１２（２００１），ｐｐ．１５１−１５９；Ｐ．Ｆｒａｎｃｈｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｖｉｒ．Ｒｅｓ．４７（２０００），ｐｐ．１４９−１５８；Ｍ．Ｄ'Ａｓｃｅｎｚｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎ：Ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ  ａｓ  Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｕ．Ｓｐｒａｎｄｅｌ  ａｎｄ  Ｊ．Ｌ．Ｗａｙ，Ｅｄｉｔｏｒｓ，Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９７），ｐｐ．８１−８８；Ｒ．Ｃｒｉｎｅｌｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  Ｃｅｌｌｓ  Ｍｏｌ．Ｄｉｓｅａｓｅｓ  ２６（２０００），ｐｐ．２１１−２２２；Ｌ．Ｒｏｓｓｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．３３（２００１），ｐｐ．８５−８９；Ｌ．Ｒｏｓｓｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  Ｃｅｌｌｓ  Ｍｏｌ．Ｄｉｓｅａｓｅｓ  ３３（２００４），ｐｐ．５７−６３；Ｒ．Ｋｒａｖｔｚｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎ：Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｒ．Ｇｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｊ．Ｒ．Ｄｅ  Ｌｏａｃｈ，Ｅｄｉｔｏｒｓ，Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ（１９９１），ｐｐ．１２７−１３７；  Ｍ．Ｍａｇｎａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１８（１９９３），ｐｐ．２１７−２２６；Ｍ．Ｍａｇｎａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｃｏｈｏｌ  Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｒｅｓ．１３（１９８９），ｐ．８４９；Ｌ．Ｒｏｓｓｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎ：Ｒｅｓｅａｌｅｄ  Ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ  ａｓ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｒｅａｃｔｏｒｓ，Ｒ．Ｇｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｊ．Ｒ．Ｄｅ  Ｌｏａｃｈ，Ｅｄｉｔｏｒｓ，Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ  （１９９１），ｐｐ．１６９−１７９；Ｌ．Ｒｏｓｓｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．５３（２００４），ｐｐ．８６３−８６６；Ｃ．Ｄｅ  Ｃｈａｓｔｅｌｌｉｅｒ，Ｔ．Ｌａｎｇ  ａｎｄ  Ｌ．Ｔｈｉｌｏ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．６８（１９９５），ｐｐ．１６７−１８２；Ａ．Ａｎｔｏｎｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｈａｅｍａｔｏｌ．１０４（１９９９），ｐｐ．４７５−４８１；Ａ．Ｆｒａｔｅｒｎａｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｖｉｒ．Ｒｅｓ．５６（２００２），ｐｐ．２６３−２７２；Ａ．Ｔ．Ｐａｌａｍａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，ＡＩＤＳ  Ｒｅｓ．Ｈｕｍ．Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ  １２（１９９６），ｐｐ．１３７３−１３８１；Ａ．Ｆｒａｔｅｒｎａｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．５２（２００３），ｐｐ．５５１−５５４；Ｒ．Ｂｕｈｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ  ２（１９８９），ｐｐ．１２９４−１２９８；Ｆ．Ｊ．Ｓｔａａｌ  ｅｔ  ａｌ．，ＡＩＤＳ  Ｒｅｓ．Ｈｕｍ．Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ  ８（１９９２），ｐｐ．３０５−３１１；Ｓ．Ｍｉｈｍ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＡＳＥＢ  Ｊ．９（１９９５），ｐｐ．２４６−２５２；Ｅ．Ｇａｒａｃｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１８８（１９９２），ｐｐ．１０９０−１０９６；Ａ．Ｔ．Ｐａｌａｍａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｖｉｒ．Ｒｅｓ．２７（１９９５），ｐｐ．２３７−２５３；Ａ．Ｔ．Ｐａｌａｍａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，ＡＩＤＳ  Ｒｅｓ．Ｈｕｍ．Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ  １２（１９９６），ｐｐ．１５３７−１５４１；Ｍ．Ｍａｇｎａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，ＡＩＤＳ  Ｒｅｓ．Ｈｕｍ．Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ  １３（１９９７），ｐｐ．１０９３−１０９９；Ｙ．Ｍｕｒａｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４（２００２），ｐｐ．２０１−２１２；Ｍ．Ｅｇｈｏｌｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３６５（１９９３），ｐｐ．５６６−５６８；Ｐ．Ｗｉｔｔｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．３６５（１９９５），ｐｐ．２７−２９；Ｌ．Ｃｈｉａｒａｎｔｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４１（２００２），ｐｐ．８４７１−８４７７；およびＨ．Ａｒｉｍａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．８６（１９９７），ｐｐ．１０７９−１０８４を参照のこと。これら文献すべての内容は、参照により本明細書に組み込まれる。これらの参考文献では、ほとんどの場合、薬物は拡散性のないプロドラッグとして被包され、このプロドラッグはＲＢＣ常在酵素により拡散性薬物に変換され、血液循環に放出される。あるいは、ＲＢＣがマクロファージの標的となり、貪食されて、その内容物が放出されるまで、薬物はＲＢＣの中に保持される。一部の実例では、ＲＢＣは代謝産物または生体異物を分解するための循環バイオリアクターとして使用される。この場合、酵素がＲＢＣの中に被包され、細胞が循環している間は、その中で触媒活性が維持される。代謝産物および／または生体異物がＲＢＣ膜を通過して、細胞内の酵素に到達しうる場合、これらの改変ＲＢＣは、循環バイオリアクターとして機能することができる。
【００７５】
目的の化合物、例えば治療剤および／またはイメージング剤との結合に加えて、多種多様な実体、例えばリガンドを赤血球に結合させることもできる。これらのリガンドは、当技術分野で公知の方法を使用して、赤血球膜に付着させることができる。例えば、タンニン酸および塩化クロムなどの非特異的化学架橋剤を使用して、ＲＢＣにリガンドを結合させることができる。例えば、Ｖ．Ｒ．Ｍｕｚｙｋａｎｔｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．（１９９３）２０８：３３８−３４２；Ｖ．Ｒ．Ｍｕｚｙｋａｎｔｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ．（１９８７）１２８：２７６−２８５；およびＬ．Ｃｈｉａｒａｎｔｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  Ａｐｐｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．（１９９２），１５：１７１−１８４を参照のこと。これら文献すべての内容は、参照により本明細書に組み込まれる。あるいは、ＲＢＣ膜上の特定の反応性基に結合させるための特異的架橋剤を使用して、ＲＢＣにリガンドを結合させることができる。具体的には、ビオチンのＮＨＳエステルを使用する、ＲＢＣリシン残基の制御されたビオチン化が、インビトロおよびインビボにおける多種多様な用途のためのＲＢＣ表面への結合カーゴに関して最も普及している手段の１つである。ＲＢＣに分子を結合させるための特異的架橋剤の使用は、例えば、Ｇ．Ａ．Ｏｒｒ  ＧＡ，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．（１９８１）２５６：７６１−７６６；Ｗ．Ｇｏｄｆｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｓ．（１９８１）１３５：１３７−１４５；Ｅ．Ｒｏｆｆｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．（１９８６）１３６：８０−８５；Ｅ．Ａ．Ｂａｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．（１９８７）１６１：２６２−２７１；  Ｍ．Ｗｉｌｃｈｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．（１９８６）１３８：８７２−８７９；Ｇ．Ｐ．Ｓａｍｏｋｈｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．（１９８３）１５４：２５７−２６１；Ｖ．Ｒ．Ｍｕｚｙｋａｎｔｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ．（１９９３）１５８：１８３−１９０；Ｍ．Ｄ．Ｓｍｉｒｎｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．（１９８３）１１６：９９−１０５；Ｖ．Ｒ．Ｍｕｚｙｋａｎｔｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．（１９８５）１８２：６２−６６；Ｍ．Ｍａｇｎａｎｉｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  Ａｐｐｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．（９９４）２０（Ｐｔ  ３）：３３５−３４５；Ｖ．Ｒ．Ｍｕｚｙｋａｎｔｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．（１９９４）２２３：１４２−１４８；およびＨ．Ｃｏｗｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ（１９９９）３９：１６３−１６８に記載されており、その内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００７６】
分子量３〜１０ｋＤの範囲の鎖長を有する高度に親水性のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）の結合は、リポソーム、ナノ粒子、ポリマーナノ担体、タンパク質、他の薬物担体、および薬物自体の血液循環を延長し、それらを体内の防御システムから遮蔽する、汎用的な「ステルス」技術として発展してきた。したがって、本明細書に記載の赤血球はＰＥＧ化することができる。理論に拘束されたくはないが、ＰＥＧでコーティングされたＲＢＣは、効率的なオプソニン化、食細胞による貪食、およびＲＢＣ抗原に対する抗体による認識を受けにくくなる。ＰＥＧをＲＢＣに結合する方法は当業者に良く知られており、例えば、Ａ．Ｊ．Ｂｒａｄｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ  ４１（２００１）ｐｐ：１２２５−１２３３；Ｄ．Ｓａｂｏｌｏｖｉｃ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ  ２１（２０００）ｐｐ：３０１−３０６；Ｐ．Ｎａｃｈａｒａｊｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ  ４５（２００５）ｐｐ：３７４−３８３；Ｐ．Ｎａｃｈａｒａｊｕ  ｅｔ  ａｌ．Ａｒｔｉｆ  Ｃｅｌｌｓ  Ｂｌｏｏｄ  Ｓｕｂｓｔｉｔ  Ｉｍｍｏｂｉｌ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  ３５（２００７）ｐｐ：１０７−１１８；Ｈ．Ａ．Ｃｈｕｎｇｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｍｅｄ  Ｍａｔｅｒ  Ｒｅｓ  Ａ  ７０  （２００４）ｐｐ  １７９−１８５；Ｍ．Ｄ．Ｓｃｏｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ９４（１９９７）ｐｐ：７５６６−７５７１；Ｊ．Ｋ．Ｌｅａｃｈ，Ａ．Ｈｉｎｍａｎ  ａｎｄ  Ｅ．Ａ．Ｏ'Ｒｅａｒ，Ｂｉｏｍｅｄ  Ｓｃｉ  Ｉｎｓｔｒｕｍ  ３８（２００２）ｐｐ：３３３−３３８；およびＳ．Ｈａｓｈｅｍｉ−Ｎａｊａｆａｂａｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ  １７（２００６）ｐｐ：１２８８−１２９３に記載されており、その内容は、参照により本明細書に組み込まれる。Ｊ．Ｋ．Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｒｈｅｏｌｏｇｙ  ３８  （２００１）ｐｐ：２３９−２４７に記載されているとおり、低親水性部分の末端において２つのＰＥＧ鎖を結合するトリブロックコポリマーであるＰｌｕｒｏｎｉｃによりＲＢＣを修飾することもできる。
【００７７】
一部の実施形態では、ＲＢＣは少なくとも１つの治療剤および少なくとも１つのイメージング剤を含む。
【００７８】
マイクロカプセル
目的の化合物、例えば治療剤および／またはイメージング剤を、狭窄部位に送達するためにマイクロカプセルの中に被包することができる。したがって、一態様では、本発明は、対象の狭窄症、狭窄病変、血塊、閉塞性病変、および／または内出血の治療またはイメージングのための方法であって、それを必要とする対象に治療剤および／またはイメージング剤を含むマイクロカプセルを投与することを含む方法を提供する。理論に拘束されたくはないが、マイクロカプセルは狭窄部位の上昇した剪断応力で上昇した剪断応力の下で分解し、目的の化合物（例えば、治療剤またはイメージング剤）を放出する。
【００７９】
本明細書で使用される用語「マイクロカプセル」は、約１ミクロンのオーダーから約５，０００ミクロンのサイズ範囲にある回転楕円体、立方体、多面体、角柱、円筒、棒、盤、または他の幾何学的または不規則的形状の構造を意味し、これらは、例えば目的の化合物をシェル内部に入れる壁形成材料、周囲被包媒体として機能する。この用語は、マイクロスフェアとは別である。マイクロスフェアはポリマー中に分散した目的の化合物の球状の均一果粒からなり、厳密な意味で、球状の中空粒子である。
【００８０】
マイクロカプセルは、単層マイクロカプセルであっても多層マイクロカプセルであってもよい。本明細書で使用される用語「単層マイクロカプセル」は、単一ポリマーシェルとマイクロカプセルの中心のシェル内部にある被覆された化合物とからなるマイクロカプセルを指す。用語「多層マイクロカプセル」は、内部コアマイクロカプセルと１つまたは複数の外側のポリマーシェルとからなるマイクロカプセルを指す。用語「二層マイクロカプセル」は、第２のポリマーシェルでコーティングされた内部コアマイクロカプセルからなるマイクロカプセルを指す。マイクロカプセル化の過程では、コアマイクロカプセルが、高分子可塑剤溶液またはポリマーミネラル分散液に導入され、「胚（ｅｍｂｒｙｏ）」シェルの形成を促進し、二層マイクロカプセルの構造化した固体シェルに変換される。
【００８１】
本明細書で使用される用語「内部コアマイクロカプセル」は、二層または多層マイクロカプセルの内部にある場合で、上記に定義されるような単層マイクロカプセルを指す。
【００８２】
用語「壁形成ポリマー」は、典型的には、マイクロカプセルの外側の壁または層またはシェルの成分を形成する、本明細書で定義されるポリマーまたは２つ以上の異なるポリマーの組合せを指す。一部の実施形態では、壁形成ポリマーは生体適合性ポリマーである。
【００８３】
一部の実施形態では、壁形成ポリマーはポロキサマーである。ポロキサマーは、中心の疎水性鎖ポリオキシプロピレン（ポリ（プロピレンオキシド）とそれを挟む２つの親水性鎖ポリオキシエチレン（ポリ（エチレンオキシド））で構成される非イオン性トリブロックコポリマーである。ポロキサマーは、商品名ＰｌｕｒｏｎｉｃまたはＰｌｕｒｏｎｉｃｓとしても知られている。ポリマーブロックの長さはカスタマイズすることができるので、特性がわずかに異なる様々なポロキサマーが存在する。総称名「ポロキサマー」に対して、これらのコポリマーは、文字「Ｐ」（ポロキサマーに対する）およびそれに続く３桁の数字を用いて通常指定される。最初の２桁の数字×１００が、ポリオキシプロピレンコアのおよその分子量を与え、最後の数字×１０がポリオキシエチレン含量のパーセントを与える（例えば、Ｐ４０７は、４，０００ｇ／ｍｏｌのポリオキシプロピレン分子量および７０％のポリオキシエチレン含量を有するポロキサマーである）。商品名Ｐｌｕｒｏｎｉｃに対しては、これらのコポリマーのコードは、室温でのその物理的形態を定義する文字（Ｌ＝液体、Ｐ＝ペースト、Ｆ＝フレーク（固体））で始まり、その後に２桁または３桁の数字が続く。この番号名称の最初の１桁の数字（３桁の数では２桁の数字）に３００を乗じたものが、疎水性物質のおよその分子量を示し、最後の数字×１０がポリオキシエチレン含量のパーセントを与える（例えば、Ｌ６１は、１，８００ｇ／ｍｏｌのポリオキシプロピレン分子量および１０％のポリオキシエチレン含量を有するＰｌｕｒｏｎｉｃである）。一部の実施形態では、ポロキサマーはＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ１２７である。
【００８４】
本明細書で使用される用語「ポリマーシェル」は、壁形成ポリマー、および任意で、可塑剤および／またはミネラルなどのさらなる成分を含有するポリマー層を指す。
【００８５】
マイクロカプセルを形成するための数多くの手法が、被包される物質の性質および使用される壁形成ポリマーのタイプに応じて利用可能である。一部のビタミン、薬物、およびオイルなどの水不溶性物質を水不溶性ポリマー内部に被包するために広範に使用される方法は、溶媒除去法である。一般にこのような方法では、所望の壁形成ポリマーを適切な有機溶媒に溶解する。この作業に続いて、被包される所望の化合物を添加する。この化合物は有機溶媒への溶解状態でも分散状態でも、いずれでもよい。得られる有機溶液または分散液を水相に分散し、油状のマイクロ粒子が水相に分散されている水中油滴型エマルジョンを得る。マイクロ粒子から溶媒を完全に除去すると、マイクロカプセルが形成される。この方法の基本的な前提条件は、被包される化合物および壁形成材料を効率的に溶解することができる溶媒の使用である。この溶媒は、水に部分的にしか溶解せず、水の連続相の中に有機相のエマルジョンを生じさせるものでなければならない。ジクロロメタンおよびクロロホルムなどの塩素系溶媒およびグリコールまたはそれらと他の溶媒との混合物が、マイクロカプセル化過程を促進するので広範に使用されている。
【００８６】
限定はされないが、溶媒は、減圧蒸留、蒸発、または水による抽出により除去することができる。溶媒除去の代表的な方法は、例えば米国特許第４，３８４，９７５号明細書および同第３，８９１，５７０号明細書に記載されており、これらの明細書すべての内容は本明細書に組み込まれる。
【００８７】
マイクロカプセルを形成する方法は、例えば、米国特許第３，１７３，８７８号明細書；同第３，４６０，９７２号明細書；同第３，５１６，９４１号明細書；同第４，０８９，８０２号明細書；同第４，０９３，５５６号明細書；同第４，１０５，８２３号明細書；同第４，１４０，５１６号明細書；同第４，１５７，９８３号明細書；同第４，２１９，６０４号明細書；同第４，２１９，６３１号明細書；同第４，２２１，７１０号明細書；同第４，２７２，２８２号明細書；同第４，５３４，７８３号明細書；同第４，５５７，７５５号明細書；同第４，５７４，１１０号明細書；同第４，６０１，８６３号明細書；同第４，７１１，７４９号明細書；同第４，７５３，７５９号明細書；同第４，８９８，６９６号明細書；同第４，９３６，９１６号明細書；同第４，９５６，１２９号明細書；同第４，９５７，６６６号明細書；同第５，０１１，６３４号明細書；同第５，０６１，４１０号明細書；同第５，１６０，５２９号明細書；同第５，２０４，１８５号明細書；同第５，２３６，７８２；同第５，４０１，５７７；同第５，５２９，８７７号明細書；同第５，６０３，９８６号明細書；同第５，６５０，１７３号明細書；同第５，６５４，００８号明細書；同第５，７３３，５６１号明細書；同第５，８３７，６５３号明細書；同第５，８６１，３６０号明細書；同第５，８６，９４２４号明細書；同第６，０９９，８６４号明細書；同第６，１９７，７８９号明細書；同第６，２４８，３６４号明細書；同第６，２５１，９２０号明細書；同第６，２７０，８３６号明細書；同第６，５２４，７６３号明細書；同第６，５３４，０９１号明細書；同第６，７３３，７９０号明細書；同第６，８１８，２９６号明細書；同第６，９５１，８３６号明細書；同第６，９６９，５３０号明細書；同第６，９７４，５９２号明細書；同第７，０４１，２７７号明細書；同第７，７３６，６９５号明細書；同第７，８０３，４２２号明細書；同第７，８３３，６４０号明細書；および同第７８９７，５５５号明細書、ならびに米国特許出願公開第２００３／０１１８８２２号明細書；同第２００４／０１１５２８０号明細書；同第２００４／０１７０６９３号明細書；同第２００６／００４０８４４号明細書；同第２００７／００４２１８４号明細書；同第２００６／０２５６４２３号明細書；同第２００９／０２８９２１６号明細書；および同第２０１０／０００９８９３号明細書に記載されており、これらの明細書すべての内容は本明細書に組み込まれる。多層マイクロスフェアを調製する方法は、例えば、米国特許第３，４２９，８２７号明細書；同第４，８６１，６２７号明細書；同第５，７９５，５７０号明細書；同第５，９８５，３５４号明細書；同第６，５１１，７４９号明細書；および同第６，５２８，０３５号明細書；ならびに米国特許出願公開第２００３／０２２２３７８号明細書に記載されており、これらの明細書すべての内容は本明細書に組み込まれる。
【００８８】
本明細書に記載のマイクロカプセルが分解しうる剪断応力は５〜３０００ｄｙｎ／ｃｍ２である。一部の実施形態では、本明細書に記載のマイクロカプセルが分解する剪断応力は、５ｄｙｎ／ｃｍ２以上、６ｄｙｎ／ｃｍ２以上、７ｄｙｎ／ｃｍ２以上、８ｄｙｎ／ｃｍ２以上、９ｄｙｎ／ｃｍ２以上、１０ｄｙｎ／ｃｍ２以上、１１ｄｙｎ／ｃｍ２以上、１２ｄｙｎ／ｃｍ２以上、１３ｄｙｎ／ｃｍ２以上、１４ｄｙｎ／ｃｍ２以上、１５ｄｙｎ／ｃｍ２以上、または０ｄｙｎ／ｃｍ２以上である。
【００８９】
本明細書で使用される「分解」は、マイクロカプセルのポリマーシェルがより小さな断片に壊れることを指す。ポリマーシェルの完全な分解は要求されないことを理解されたい。したがって、一部の実施形態では、マイクロカプセルが分解して、その結果、ポリマーシェルの少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％（すなわち完全な分解）が、対照剪断条件（例えば、正常な血管剪断応力）と比較して、剪断応力（例えば、狭窄部位剪断応力）条件下でより小さな断片に壊れうる。
【００９０】
上昇した剪断応力下における、マイクロカプセルからの被包された化合物の放出速度は、上昇していない剪断応力（すなわち正常な血管剪断応力）下の放出と比較して、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも１倍、少なくとも２倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも３０倍、少なくとも４０倍、少なくとも５０倍、または少なくとも１００倍以上である。
【００９１】
一部の実施形態では、マイクロカプセルから放出される被包された化合物の量は、対照剪断条件（例えば、正常な血管剪断応力）と比較して、剪断応力条件（例えば、狭窄部位剪断応力）下で、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも１倍、少なくとも２倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも３０倍、少なくとも４０倍、少なくとも５０倍、または少なくとも１００倍以上である。
【００９２】
本発明によるマイクロカプセルの例は、例えば、米国特許第３，１７３，８７８号明細書；同第３，４２９，８２７号明細書；同第３，４６０，９７２号明細書；同第３，５１６，９４１号明細書；同第４，０８９，８０２号明細書；同第４，０９３，５５６号明細書；同第４，１０５，８２３号明細書；同第４，１４０，５１６号明細書；同第４，１５７，９８３号明細書；同第４，２１９，６０４号明細書；同第４，２１９，６３１号明細書；同第４，２２１，７１０号明細書；同第４，２７２，２８２号明細書；同第４，５３４，７８３号明細書；同第４，５５７，７５５号明細書；同第４，５７４，１１０号明細書；同第４，６０１，８６３号明細書；同第４，７１１，７４９号明細書；同第４，７５３，７５９号明細書；同第４，８６１，６２７号明細書；同第４，８９８，６９６号明細書；同第４，９３６，９１６号明細書；同第４，９５６，１２９号明細書；同第４，９５７，６６６号明細書；同第５，０１１，６３４号明細書；同第５，０６１，４１０号明細書；同第５，１６０，５２９号明細書；同第５，２０４，１８５号明細書；同第５，２３６，７８２号明細書；同第５，４０１，５７７号明細書；同第５，５２９，８７７号明細書；同第５，６０３，９８６号明細書；同第５，６５０，１７３号明細書；同第５，６５４，００８号明細書；同第５，７３３，５６１号明細書；同第５，７９５，５７０号明細書；同第５，８３７，６５３号明細書；同第５，８６１，３６０号明細書；同第５，８６，９４２４号明細書；同第５，９８５，３５４号明細書；同第６，０９９，８６４号明細書；同第６，１９７，７８９号明細書；同第６，２４８，３６４号明細書；同第６，２５１，９２０号明細書；同第６，２７０，８３６号明細書；６，５１１，７４９号明細書；同第６，５２４，７６３号明細書；同第６，５２８，０３５号明細書；同第６，５３４，０９１号明細書；同第６，７３３，７９０号明細書；同第６，８１８，２９６号明細書；同第６，９５１，８３６号明細書；同第６，９６９，５３０号明細書；同第６，９７４，５９２号明細書；同第７，０４１，２７７号明細書；同第７，７３６，６９５号明細書；同第７，８０３，４２２号明細書；同第７，８３３，６４０号明細書；および同第７８９７，５５５号明細書、ならびに米国特許出願公開第２００３／０１１８８２２号明細書；同第２００３／０２２２３７８号明細書  同第２００４／０１１５２８０号明細書；同第２００４／０１７０６９３号明細書；同第２００６／００４０８４４号明細書；同第２００７／００４２１８４号明細書；同第２００６／０２５６４２３号明細書；同第２００９／０２８９２１６号明細書；および同第２０１０／０００９８９３号明細書に記載されており、これらの明細書すべての内容は本明細書に組み込まれる。
【００９３】
一部の実施形態では、マイクロカプセルは少なくとも１つの治療剤および少なくとも１つのイメージング剤を含む。
【００９４】
目的の化合物
多種多様の化合物が凝集物、赤血球、およびマイクロカプセルに結合することができる。したがって、限定はされないが、目的の化合物は、有機または無機の小分子または大分子、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、生体高分子、例えば、ペプチド、タンパク質、ペプチドアナログおよびその誘導体、ペプチドミメティック、核酸、核酸アナログおよび誘導体、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、酵素、細菌、植物、真菌、もしくは動物の細胞もしくは組織などの生体材料から作製された抽出物、天然または合成の組成物、微粒子、非凝集ナノ粒子、またはそれらの任意の組合せからなる群から選択することができる。化合物は、疎水性であっても、親水性であっても、または両親媒性であってもよい。
【００９５】
本明細書で使用される用語「微粒子」は、本来比較的小さな形態で存在し、例えば、粉砕、切断、断片化、微粉砕、粉末化、またはそうでなければ大きな形態の材料を相対的に小さな形態に細分することにより形成することができる粒子、粉末、フレーク等を指す。
【００９６】
本明細書で使用される用語「非凝集ナノ粒子」は、本明細書に記載の凝集条件下で凝集しないナノ粒子を指す。
【００９７】
本明細書で使用される用語「小分子」は、「天然物様」の化合物を指すことができるが、用語「小分子」は「天然物様」化合物に限定されない。むしろ、小分子は、典型的には、いくつかの炭素−炭素結合を含有し、５０００ダルトン（５ｋＤ）未満、好ましくは３ｋＤ未満、より一層好ましくは２ｋＤ未満、最も好ましくは１ｋＤ未満の分子量を有する点に特徴がある。ある場合には、小分子の分子量は７００ダルトン以下であることが極めて好まれる。
【００９８】
一実施形態では、化合物はペプチドまたはタンパク質である。本明細書で使用される用語「ペプチド」は、その最も幅広い意味で使用され、ペプチド結合または改変ペプチド結合によって相互に結合された２つ以上のアミノ酸、アミノ酸等価物、または他の非アミノ基を含有する化合物を指す。ペプチド等価物は、関連する有機酸（ＰＡＢＡなど）、アミノ酸等による１つもしくは複数のアミノ酸の置換、または側鎖もしくは官能基の置換もしくは改変により、従来のペプチドとは異なりうる。ペプチドは、極めて長い任意のサイズであってもよいが、一部の実施形態では、全アミノ酸が２０以下のペプチドが好ましい。さらに、ペプチドは線状であっても環状であってもよい。本明細書で具体的に列挙されたペプチド配列は、アミノ末端を左側に、カルボキシ末端を右側にして記載されている。
【００９９】
さらに、用語「ペプチド」は、一般にポリペプチドとされるタンパク質も幅広く含む。本明細書で使用される用語「タンパク質」は、タンパク質およびその断片を記載するために使用される。したがって、３次元構造を示すアミノ酸のいかなる鎖も、用語「タンパク質」に含まれ、そのため、タンパク質断片も包含される。
【０１００】
ペプチドミメティックは、天然ペプチドに類似した特定の３次元構造にフォールディング可能な分子である。本明細書で使用される用語「核酸」は、天然の塩基、糖、および糖間結合からなる、ヌクレオチドまたはヌクレオシドモノマーのポリマー（ポリヌクレオチド）またはオリゴマー（オリゴヌクレオチド）を指す。用語「核酸」にはまた、同様に機能する非天然モノマーまたはその一部を含むポリマーまたはオリゴマーが含まれる。このような改変または置換核酸は、多くの場合、例えば、細胞取込みの亢進およびヌクレアーゼ存在下での安定性の増大などの特性のために、天然形態よりも好ましい。
【０１０１】
核酸は一本鎖であっても二本鎖であってもよい。一本鎖核酸に二本鎖領域があってもよく、二本鎖核酸に一本鎖領域があってもよい。代表的な核酸の例としては、これらに限定されないが、構造遺伝子、制御領域および終結領域を含む遺伝子、ウイルスまたはプラスミドＤＮＡなどの自己複製システム、一本鎖および二本鎖のｓｉＲＮＡ、ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ作用物質またはｉＲＮＡ作用物質）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣物、アプタマー、アンチｍｉｒ（ａｎｔｉｍｉｒ）、アンタゴｍｉｒ（ａｎｔａｇｏｍｉｒ）、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化因子、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ならびにデコイオリゴヌクレオチドが挙げられる。
【０１０２】
本明細書に記載の本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、化合物は生物学的に活性であるか、または生物活性を有する。
【０１０３】
本明細書で使用される用語「生物活性」または「生理活性」は、化合物が生体試料に影響を与える能力を指す。生物活性には、限定はされないが、生物アッセイにおける、分子、細胞、組織、または器官レベルでの刺激、阻害、調節、毒性、または致死的応答の誘発が含まれうる。例えば、生物活性は、酵素の効果／活性の表出または調節、受容体の遮断、受容体の刺激、１つまたは複数の遺伝子の発現レベルの調節、細胞増殖の調節、細胞分裂の調節、細胞形態の調節、またはそれらの任意の組合せを行う化合物の能力を指すことができる。一部の実例では、生物活性は、生体試料に毒作用をもたらす化合物の能力を指すことであっても、標的分子または標的細胞を化学的に修飾する能力を指すことであってもよい。
【０１０４】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、化合物は治療剤である。本明細書で使用される用語「治療剤」は、対象の有害症状の治療、治癒、緩和、または予防のために使用される生物薬剤または化学薬剤を指す。用語「治療剤」はまた、対象の疾患、症状、または障害と闘うための物質または薬剤を含み、薬物、診断法、および機器を含む。「治療剤」はまた、医学的診断、または生理機能の回復、調整、または修飾に使用されるものすべてを含む。用語「治療剤」および「医薬として活性な薬剤」は、本明細書において互換的に使用される。
【０１０５】
治療剤は所望の治療目的および生物作用に応じて選択される。治療剤の一般分類としては、アドレナリン作用薬、抗生物質、または抗菌剤などの抗微生物薬、抗ウイルス剤、駆虫剤、抗炎症剤、抗腫瘍剤、抗酸化剤、生体反応阻害剤、ボツリヌス毒素薬、化学療法剤、診断薬、遺伝子治療薬、ホルモン剤、粘液溶解剤、放射線防護剤、密封小線源治療物質を含む放射性剤、組織成長阻害剤、組織増殖促進剤、血管作用薬、血栓溶解剤（すなわち、血塊破壊剤）、血液凝固の誘導物質、および鎌状赤血球症におけるＲＢＣ凝集の阻害剤が挙げられる。
【０１０６】
治療剤は治療目的に適した任意の分類から選択することができる。例えば、目的が疾患または症状に付随した狭窄症の治療であれば、治療剤としては、抗トロンビン剤もしくは血栓溶解剤、または線維素溶解剤を挙げることができる。さらなる例として、所望の治療目的が癌の治療であれば、治療剤としては、腫瘍またはその近接部位に放射線治療を直接提供する放射性シード形態の放射性物質を挙げることができる。さらに、治療剤は、ある期間にわたって治療活性を提供するように選択または調整することができる。
【０１０７】
代表的な医薬として活性な化合物としては、これらに限定されないが、Ｈａｒｒｉｓｏｎ'ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１３ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄｓ．Ｔ．Ｒ．Ｈａｒｒｉｓｏｎ  ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｎ．Ｙ．，ＮＹ；Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ，５０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９７，Ｏｒａｄｅｌｌ  Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ，Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ  Ｃｏ．；Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ，１９９０；Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ，Ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ，ＵＳＰ  ＸＩＩ  ＮＦ  ＸＶＩＩ，１９９０；ｃｕｒｒｅｎｔ  ｅｄｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｏｉｌｍａｎ'ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ；およびＴｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘの現行版の中にあるものがあげられる。これらの文献すべての内容全体は、本明細書に組み込まれる。
【０１０８】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、治療剤は、抗凝血剤、抗凝血剤アンタゴニスト、抗血小板剤、血栓溶解剤、血栓溶解剤アンタゴニスト、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される抗トロンビンもしくは血栓溶解剤または線維素溶解剤である。
【０１０９】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、治療剤は、血栓溶解剤アンタゴニスト、抗凝血剤アンタゴニスト、凝血促進酵素、凝血促進タンパク質、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される血栓形成剤である。一部の代表的な血栓形成剤としては、これらに限定されないが、プロタミン、ビタミンＫ１、アミノカプロン酸（アミカー（ａｍｉｃａｒ））、トラネキサム酸（アムスタット（ａｍｓｔａｔ））、アナグレリド、アルガトロバン、シロスタゾール（ｃｉｌｓｔａｚｏｌ）、ダルトロバン（ｄａｌｔｒｏｂａｎ）、デフィブロチド、エノキサパリン、フラキシパリン（ｆｒａｘｉｐａｒｉｎｅ）、インドブフェン、ラモパラン（ｌａｍｏｐａｒａｎ）、オザグレル、ピコタミド、プラフィブリド、テデルパリン（ｔｅｄｅｌｐａｒｉｎ）、チクロピジン、トリフルサル、コラーゲン、およびコラーゲンコーティング粒子が挙げられる。
【０１１０】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、治療剤は血栓溶解剤である。本明細書で使用される用語「血栓溶解剤」は、血塊の溶解、移動、またはそうでなければ崩壊により、例えばフィブリン血小板血塊の溶解またはそのような血塊の形成阻害のいずれかにより、再潅流を誘導することができる任意の薬剤を指す。血塊が溶解され、血流が回復される場合に、再潅流が起こる。代表的な血栓溶解剤としては、これらに限定されないが、組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、ストレプトキナーゼ（ＳＫ）、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（ｕＰＡ）、アルテプラーゼ（Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、レテプラーゼ（ｒ−ＰＡまたはｒｅｔａｖａｓｅ（登録商標）、Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｉｎｃ．としても知られている）、テネクテプラーゼ（ＴＮＫ（商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、Ｓｔｒｅｐｔａｓｅ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，ＬＰ）、ラノテプラーゼ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、モンテプラーゼ（エーザイ株式会社）、サルプラーゼ（ｒ−ｓｃｕ−ＰＡおよびｒｅｓｃｕｐａｓｅ（商標）、Ｇｒｕｎｅｎｔｈａｌ  ＧｍｂＨ，Ｃｏｒｐ．としても知られている）、スタフィロキナーゼ、およびアニソイル化されたプラスミノーゲン−ストレプトキナーゼ活性化因子複合体（ＡＰＳＡＣ、Ａｎｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ、およびＥｍｉｎａｓｅ（登録商標）、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｃｏｒｐ．としても知られている）。血栓溶解剤には、他の遺伝子改変プラスミノーゲン活性化因子も含まれる。本発明は、さらに、上記の血栓溶解剤のハイブリッド、生理活性断片、または変異形態を使用することができる。本明細書で使用される用語「組織型プラスミノーゲン活性化因子」は、そのようなハイブリッド、断片、および変異体、ならびに天然由来および組換え型由来の両方の組織型プラスミノーゲン活性化因子を含むことを意図する。
【０１１１】
用語「抗凝血剤」は、プロトロンビンおよび部分トロンボプラスチン時間試験を延長し、プロトロンビンならびに第ＶＩＩ因子、第ＩＸ因子、および第Ｘ因子のレベルを低下させることができる任意の薬剤を指すことを意図する。抗凝血剤には、典型的には、クマリン（ｃｏｒｍａｒｉｎ）誘導体およびヘパリン、ならびにアスピリンが含まれ、これらは抗血小板剤とも呼ばれることがある。
【０１１２】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、医薬として活性な薬剤には、炎症もしくは炎症に付随した障害、または感染の治療のための、当技術分野で公知の薬剤が含まれる。代表的な抗炎症剤としては、これらに限定されないが、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ−アスピリン、イブプロフェン、またはナプロキセンなど）、コルチコステロイド（ｃｏｒｉｃｏｓｔｅｒｏｉｄ）（プレドニゾン（ｐｒｅｓｎｉｓｏｎｅ）など）、抗マラリア薬（ヒドロキシクロロキン（ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｏｑｕｉｎｅ）など）、メトトレキセート（ｍｅｔｈｏｔｒｅｘｒａｔｅ）、スルファサラジン、レフルノミド、抗ＴＮＦ薬、シクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｓｅ）、ミコフェノレート（ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌａｔｅ）、デキサメタゾン、ロシグリタゾン、プレドニゾロン、コルチコステロン、ブデソニド、エストロゲン、エストラジオール（ｅｓｔｒｏｄｉｏｌ）、スルファサラジン、フェノフィブレート（ｆｅｎｆｉｂｒａｔｅ）、プラバスタチン（ｐｒｏｖａｓｔａｔｉｎ）、シンバスタチン、ピオグリタゾン（ｐｒｏｇｌｉｔａｚｏｎｅ）、アセチルサリチル酸、ミコフェノール酸、メサラミン、ヒドロキシ尿素、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩が挙げられる。
【０１１３】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、医薬として活性な薬剤は血管拡張剤である。血管拡張剤は、アルファ−アドレナリン受容体アンタゴニスト（α−遮断薬）、アンジオテンシン（ａｇｉｏｔｅｎｓｉｎ）変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、ベータ２−アドレナリン受容体アゴニスト（β２−アゴニスト）、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、中枢作用性交感神経遮断剤、直接作用性血管拡張剤、エンドセリン受容体アンタゴニスト、神経節遮断薬、ニトロダイレーター（ｎｉｔｒｏｄｉｌａｔｏｒ）、ホスホジエステラーゼ阻害剤、カリウムチャネル開口剤、レニン阻害剤、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択することができる。代表的な血管拡張剤としては、これらに限定されないが、プラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、トリマゾシン、フェントラミン、フェノキシベンザミン、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、キナプリル、ラミプリル、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルメサルタン、テルミサルタン、バルサルタン、エピネフリン、ノルエピネフリン、ドーパミン、ドブタミン、イソプロテレノール、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、クロニジン、グアナベンズ、グアンファシン、α−メチルドーパ、ヒドララジン、ボセンタン、カンシル酸トリメタファン、二硝酸イソソルビド、一硝酸イソソルビド、ニトログリセリン、四硝酸エリトリチル、四硝酸ペンタエリスリトール、ニトロプルシドナトリウム、ミルリノン、イナムリノン（以前はアムリノン）、シロスタゾール、シルデナフィル、タダラフィル、ミノキシジル、アリスキレン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩が挙げられる。
【０１１４】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、医薬として活性な薬剤は血管収縮剤である。本明細書で使用される用語「血管収縮剤」は、血管を狭くし、それによって血圧を維持もしくは増加させ、かつ／または血流を減少させる化合物または分子を指す。血管収縮剤を使用する治療から恩恵を受けることができる多くの障害がある。例えば、典型的には膨張した血管を含む皮膚の発赤（例えば、紅斑またはクーペローゼ（ｃｕｐｅｒｏｓｅ））は、毛細血管を収縮させることにより有害な発赤を減少させる血管収縮剤による治療から恩恵を受ける。血管収縮剤群の他の記述名には、血管作動薬、昇圧薬、および血管収縮薬が含まれる。特定の血管収縮剤は、バソプレッシン受容体またはアドレナリン受容体などの特異的受容体に作用する。代表的な血管収縮剤としては、これらに限定されないが、アルファ−アドレナリン受容体アゴニスト、カテコールアミン（ｃｈａｔｅｃｏｌａｍｉｎｅｓ）、バソプレッシン、バソプレッシン受容体モジュレーター（ｍｏｄｕａｌｏｒ）、カルシウムチャネルアゴニスト、および他の内因性または外因性血管収縮剤が挙げられる。
【０１１５】
一部の実施形態では、血管収縮剤は、硫酸アルミニウム、アミデフリン（ａｍｉｄｅｐｈｒｉｎｅ）、アンフェタミン、アンジオテンシン、抗ヒスタミン薬、アルギプレシン、次没食子酸ビスマス、カファミノール（ｃａｆａｍｉｎｏｌ）、カフェイン、カテコールアミン、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、ドーパミン、エフェドリン、エピネフリン、フェリプレシン、インダナゾリン（ｉｎｄａｎａｚｏｌｉｎｅ）、イソプロテレノール、リセルグ酸（ｌｉｓｅｒｇｉｃ  ａｃｉｄ）ジエチルアミン、リプレシン（ＬＶＰ）、リセルグ酸、メフェドロン（ｍｅｐｈｅｄｒｏｎｅ）、メトキサミン、メチルフェニデート、メチゾリン、メタラミノール（ｍｅｔｒａｍｉｎｏｌ）、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、ノルエピネフリン、オクトドリン、オルニプレシン、オキシメタゾリン（ｏｘｙｍｅｔｈａｚｏｌｉｎｅ）、フェニルエタノールアミン（ｐｈｅｎｙｌｅｆｈａｎｏｌａｍｉｎｅ）、フェニレフリン、フェニルイソプロピルアミン、フェニルプロパノールアミン、フェニプレッシン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、サイロシビン、テトラヒドララジン（ｔｅｔｒａｈｙｄｒａｌａｚｉｎｅ）、テトラヒドロゾリン、塩酸テトラヒドロゾリン、硫酸亜鉛を含む塩酸テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシン、バソトシン、キシロメタゾリン、酸化亜鉛等からなる群から選択される。
【０１１６】
一部の実施形態では、血管作用薬は、シナマオウ（ｅｐｈｅｄｒａ  ｓｉｎｉｃａ）（マオウ）、ケンジン（ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ  ｂｉｓｔｏｒｔ）（イブキトラノオ根）、ハマメリス（ｈａｍａｍｅｌｉｓ  ｖｉｒｇｉｎｉａｎａ）（アメリカマンサク）、ゴールデンシール（ｈｙｄｒａｔｉｓ  ｃａｎａｄｅｎｓｉｓ）（ヒドラスチス根）、キランソウ（ｌｙｃｏｐｕｓ  ｖｉｒｇｉｎｉｃｕｓ）（ムラサキセンダイハギ）、アスピドスペルマ・ケブラコ（ａｓｐｉｄｏｓｐｅｒｍａ  ｑｕｅｂｒａｃｈｏ）（ケブラコビアンコ）、エニシダ（ｃｙｔｉｓｕｓ  ｓｃｏｐａｒｉｕｓ）（エニシダ）、イトヒバを含む群から選択される草木源に由来するかまたはそれらから抽出される物質、ならびにそれらの塩、異性体、アナログ、および誘導体である。
【０１１７】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、医薬として活性な薬剤は、抗悪性腫瘍剤、抗増殖剤、および／または抗縮瞳剤である。代表的な抗悪性腫瘍剤／抗増殖剤／抗縮瞳剤としては、これらに限定されないが、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、シクロスポリン、シスプラチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エポチロン、メトトレキセート、アザチオプリン、アドリアマイシン、およびマイトマイシン（ｍｕｔａｍｙｃｉｎ）；エンドスタチン、アンジオスタチンおよびチミジンキナーゼ阻害剤、クラドリビン、タキソール、トラピジル、ハロフジノン、プラスミン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩が挙げられる。一部の実施形態では、医薬として活性な薬剤は、血中または血清半減期が極めて短い。例えば、医薬として活性な薬剤の血中または血清半減期は、１分、２分、３分、４分、５分、５分、１０分、２０分、３０分、４０分、５０分、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、または１２時間以下である。これらの短寿命薬剤には、局所効果がありうる。
【０１１８】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、治療剤は、アスピリン、ワルファリン（ｗａｆａｒｉｎ）（クマジン）、アセノクマロール、アンクロッド、アニシンジオン、ブロミンジオン、クロリンジオン、クメタロール、シクロクマロール、デキストラン、デキストラン硫酸ナトリウム、ジクマロール、ジフェナジオン、ビスクマ酢酸エチル、エチリデンジクマロール、フルインジオン、ヘパリン、ヒルジン、リアポレートナトリウム（ｌｙａｐｏｌａｔｅ  ｓｏｄｉｕｍ）、オキサジジオン、ペントサンポリサルフェート、フェニンジオン、フェンプロクモン、ホスビチン、ピコタミド、チオクロマロール、ジピリダモール（ペルサンチン）、スルフィンピラゾン（アンツラン（ａｎｔｕｒａｎｅ））、チクロピジン（チクリド（ｔｉｃｌｉｄ））、組織プラスミノーゲン活性化因子（アクチバーゼ）、プラスミン、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（アボキナーゼ（ａｂｂｏｋｉｎａｓｅ））、ストレプトキナーゼ（ストレプターゼ）、およびアニストレプラーゼ／ＡＰＳＡＣ（エミナーゼ（ｅｍｉｎａｓｅ））、ならびにそれらのアナログ、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される。
【０１１９】
治療剤は放射性物質であってもよい。適切な放射性物質には、例えば、９０イットリウム、１９２イリジウム、１９８金、１２５ヨウ素、１３７セシウム、６０コバルト、５５コバルト、５６コバルト、５７コバルト、５７マグネシウム、５５鉄、３２リン、９０ストロンチウム、８１ルビジウム、２０６ビスマス、６７ガリウム、７７臭素、１２９セシウム、７３セレン、７２セレン、７２ヒ素、１０３パラジウム、１２３鉛、１１１インジウム、５２鉄、１６７ツリウム、５７ニッケル、６２亜鉛、６２銅、２０１タリウム、および１２３ヨウ素の物質が含まれる。理論に拘束されたくはないが、放射性物質を含む凝集物を使用して、腫瘍、動静脈奇形等の患部組織を治療することができる。
【０１２０】
本明細書に記載の凝集物、赤血球、およびマイクロカプセルは、これらに限定されないが、血管閉塞、腫瘍のイメージング、器官の断層撮影イメージング、器官機能のモニタリング、冠状動脈撮影法、蛍光内視鏡検査、レーザー誘導手術、光音響法および音響蛍光（ｓｏｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ）法等を含む種々の生物医学的用途で、組織および器官のインビボイメージング剤として使用することができる。本明細書に記載の凝集物、赤血球、およびマイクロカプセルは、アテローム斑または血塊の検出および／または診断に有用である。イメージング用途で使用される場合、本明細書に記載の凝集物、赤血球、およびマイクロカプセルは、典型的には、凝集物に共有結合的または非共有結合的に付着することができるイメージング剤を含む。
【０１２１】
したがって、一部の実施形態では、化合物はイメージング剤である。本明細書で使用される用語「イメージング剤」は、症状、病的障害、および／または疾患の存在および／または進行の検出、イメージング、および／またはモニタリングを可能にする、分子中の要素または官能基を指す。イメージング剤は、エコー源性物質（液体またはガスのいずれか）、非金属同位体、光学レポーター、ホウ素中性子吸収体、常磁性金属イオン、強磁性金属、ガンマ線放射の放射性同位元素、陽電子放射の放射性同位元素、またはＸ線吸収体とすることができる。
【０１２２】
適切な光学レポーターには、これらに限定されないが、蛍光レポーターおよび化学発光基が含まれる。多種多様の蛍光レポーター色素が当技術分野で公知である。典型的には、フルオロフォアは、芳香族化合物またはヘテロ芳香族化合物であり、ピレン、アントラセン、ナフタレン、アクリジン、スチルベン、インドール、ベンズインドール、オキサゾール、チアゾール、ベンゾチアゾール、シアニン、カルボシアニン、サリチレート、アントラニラート、クマリン、フルオレセイン、ローダミン、または他の類似化合物とすることができる。適切な蛍光レポーターとしては、これらに限定されないが、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）色素（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＣｏｒｐ．；Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆ）、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ（商標）、ローダミン、テキサスレッド、テトラローダミンイソチオシアネート（ｔｅｔｒａｒｈｏｄａｍｉｎｅ  ｉｓｏｔｈｉｏｃｙｎａｔｅ）（ＴＲＩＴＣ）、５−カルボキシフルオレセイン（ＦＡＭ）、２'７'−ジメトキシ−４'５'−ジクロロ−６−カルボキシフルオレセイン（ＪＯＥ）、テトラクロロフルオレセイン（ＴＥＴ）、６−カルボキシローダミン（Ｒ６Ｇ）、Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ'−テトラメチル（ｔｅｔｒａｍｅｆｈｙｌ）−６−カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）、６−カルボキシ−Ｘ−ローダミン（ＲＯＸ）を含む、フルオレセインまたはローダミン色素などのキサンテン色素が挙げられる。適切な蛍光レポーターには、アルファ位またはベータ位にアミノ基を有するナフチルアミン色素も含まれる。例えば、ナフチルアミノ化合物としては、１−ジメチルアミノ−ナフチル−５−スルホネート、１−アニリノ−８−ナフタレンスルホネート、２−ｐ−トルイジニル−６−ナフタレンスルホネート、および５−（２'−アミノエチル）アミノナフタレン−１−スルホン酸（ＥＤＡＮＳ）が挙げられる。他の蛍光レポーター色素としては、３−フェニル−７−イソシアナトクマリンなどのクマリン；９−イソチオシアナトアクリジンおよびアクリジンオレンジなどのアクリジン；Ｎ−（ｐ（２−ベンゾオキサゾリル）フェニル）マレイミド；Ｃｙ２、インドジカルボシアニン３（Ｃｙ３）、インドジカルボシアニン５（Ｃｙ５）、インドジカルボシアニン５．５（Ｃｙ５．５）、３−（−カルボキシ−ペンチル）−３'エチル−５，５'−ジメチルオキサカルボシアニン（ＣｙＡ）などのシアニン；１Ｈ，５Ｈ，１１Ｈ，１５Ｈ−キサンテノ［２，３，４−ｉｊ：５，６，７−ｉ'ｊ'］ジキノリジン−１８−イウム、９−［２（または４）−［［［６−［２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−６−オキソヘキシル］アミノ］スルホニル］−４（または２）−スルホフェニル］−２，３，６，７，１２，１３，１６，１７オクタヒドロ−分子内塩（ＴＲまたはテキサスレッド）；ＢＯＤＩＰＹ（商標）色素；ベンゾオキサジアゾール；スチルベン；ピレン；等が挙げられる。これらの蛍光化合物は、多くの適切な形態で入手可能であり、使用することができる。
【０１２３】
イメージング剤として使用するのに適した蛍光タンパク質の例としては、これらに限定されないが、緑色蛍光タンパク質、赤色蛍光タンパク質（例えばＤｓＲｅｄ）、黄色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、青色蛍光タンパク質、およびそれらの変異体が挙げられる（例えば、米国特許第６，４０３，３７４号明細書，同第６，８００，７３３号明細書、および同第７，１５７，５６６号明細書を参照のこと）。ＧＦＰ変異体の特定の例としては、これらに限定されないが、増強ＧＦＰ（ＥＧＦＰ）、不安定化ＥＧＦＰ、Ｄｏａｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｍｏｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，５５：１７６７−１７８１（２００５）に記載のＧＦＰ変異体、Ｃｒａｍｅｒｉ  ｅｔ  ａｌ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１４：３１５３１９（１９９６）に記載のＧＦＰ変異体、Ｒｉｚｚｏ  ｅｔ  ａｌ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２２：４４５（２００４）およびＴｓｉｅｎ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，６７：５０９（１９９８）に記載の濃青色（ｃｅｒｕｌｅａｎ）蛍光タンパク質、ならびにＮａｇａｌ  ｅｔ  ａｌ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，２０：８７−９０（２００２）に記載の黄色蛍光タンパク質が挙げられる。ＤｓＲｅｄ変異体は、例えば、Ｓｈａｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，２２：１５６７−１５７２（２００４）に記載されており、ｍＳｔｒａｗｂｅｒｒｙ、ｍＣｈｅｒｒｙ、ｍＯｒａｎｇｅ、ｍＢａｎａｎａ、ｍＨｏｎｅｙｄｅｗ、およびｍＴａｎｇｅｒｉｎｅが含まれる。さらなるＤｓＲｅｄ変異体が、例えば、Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１０１：１６７４５−１６７４９（２００４）に記載されており、ｍＲａｓｐｂｅｒｒｙおよびｍＰｌｕｍが含まれる。ＤｓＲｅｄ変異体のさらなる例としては、Ｆｉｓｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ，５８０：２４９５−２５０２（２００６）に記載のｍＲＦＰｍａｒｓおよびＦｉｓｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．，５７７：２２７−２３２（２００４）に記載のｍＲＦＰｒｕｂｙが挙げられる。
【０１２４】
適切なエコー源性ガスとしては、これらに限定されないが、パーフルオロメタン、パーフルオロエタン、パーフルオロプロパン、パーフルオロブタン、パーフルオロシクロブタン、パーフルオロペンタン、またはパーフルオロヘキサンなどの六フッ化硫黄またはパーフルオロカーボンガスが挙げられる。
【０１２５】
適切な非金属同位元素としては、これらに限定されないが、１１Ｃ、１４Ｃ、１３Ｎ、１８Ｆ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、および１２５Ｉが挙げられる。
【０１２６】
適切な放射性同位元素としては、これらに限定されないが、９９ｍＴｃ、９５Ｔｃ、１１１Ｉｎ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、Ｇａ、６８Ｇａ、および１５３Ｇｄが挙げられる。
【０１２７】
適切な常磁性金属イオンとしては、これらに限定されないが、Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、およびＭｎ（ＩＩ）が挙げられる。
【０１２８】
適切なＸ線吸収体としては、これらに限定されないが、Ｒｅ、Ｓｍ、Ｈｏ、Ｌｕ、Ｐｍ、Ｙ、Ｂｉ、Ｐｄ、Ｇｄ、Ｌａ、Ａｕ、Ａｕ、Ｙｂ、Ｄｙ、Ｃｕ、Ｒｈ、Ａｇ、およびＩｒが挙げられる。
【０１２９】
一部の実施形態では、放射性核種は、凝集物に付着したキレート剤またはキレート剤リンカーに結合している。直接的な結合に適した放射性核種としては、限定されないが、１８Ｆ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、およびそれらの混合物が含まれる。キレート剤と一緒に使用するのに適した放射性核種は、限定されないが、４７Ｓｃ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、８９Ｓｒ、８６Ｙ、８７Ｙ、９０Ｙ、１０５Ｒｈ、１１１Ａｇ、１１１Ｉｎ、１１７ｍＳｎ、１４９Ｐｍ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉ、およびそれらの混合物が挙げられる。適切なキレート剤としては、これらに限定されないが、ＤＯＴＡ、ＢＡＤ、ＴＥＴＡ、ＤＴＰＡ、ＥＤＴＡ、ＮＴＡ、ＨＤＴＡ、それらのホスホネートアナログ、およびそれらの混合物が挙げられる。当業者は、放射性核種、キレート剤、およびキレート剤リンカーをナノ粒子に付着させる方法に精通している。
【０１３０】
検出可能な応答は、一般に、観察または機器のいずれかにより検出可能なシグナルの変化または発生を指す。特定の実例では、検出可能な応答は、蛍光または蛍光の変化、例えば、蛍光強度、蛍光励起または発光の波長分布、蛍光寿命、および／または蛍光偏光の変化である。当業者は、対象または試料中の標識の程度および／または位置が標準または対照（例えば、健常組織または器官）と比較されうることを認識している。他の特定の実例では、検出可能な応答検出可能な応答は、放射性核種などの放射性物質により放射されるα粒子、β粒子、核子、電子、陽電子、ニュートリノ、およびγ線を含む放射能（すなわち放射線）である。
【０１３１】
例えばフルオロフォアまたは蛍光タンパク質からの蛍光のインビボ検出において当技術分野で公知の特定の装置または方法としては、これらに限定されないが、インビボ近赤外蛍光（例えば、Ｆｒａｎｇｉｏｎｉ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ，７：６２６−６３４（２００３）を参照のこと）、Ｍａｅｓｔｒｏ（商標）のインビボ蛍光イメージングシステム（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＆  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ，Ｉｎｃ．；Ｗｏｂｕｒｎ，Ｍａｓｓ．）、フライングスポットスキャナを使用するインビボ蛍光イメージング（例えば、Ｒａｍａｎｕｊａｍ  ｅｔ  ａｌ，ＩＥＥＥ  Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ  ｏｎ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，４８：１０３４−１０４１（２００１）を参照のこと）等が挙げられる。光学応答を検出するための他の方法または装置としては、限定はされないが、目視検査、ＣＣＤカメラ、ビデオカメラ、写真フィルム、レーザースキャニング装置、蛍光測定器、フォトダイオード、量子カウンター、落射蛍光顕微鏡、走査型顕微鏡、フローサイトメーター、蛍光マイクロプレートリーダー、または光電子増倍管を使用するシグナル増幅が挙げられる。
【０１３２】
対象の放射性核種の放射性放出を検出するための、当技術分野で公知のいかなる装置または方法も、本発明で使用するのに適している。例えば、回転ガンマカメラを使用して、単一光子ガンマ線を放射する放射性核種からの放射線を検出する単一光子放射型コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）およびシンチレーションガンマカメラを使用して、組織、器官、または身体システム中の放射性核種分布の画像または一連の連続画像を得る放射性核種シンチグラフィーなどの方法を、放射性標識された凝集物から放射される放射線の検出のために使用することができる。陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）は、対象の放射線の検出に適した別の手法である。
【０１３３】
当業者は、ナノ粒子にリガンドを付着させるための本明細書に記載の方法は、ナノ粒子にイメージング剤を付着させるためにも使用することができることを理解する。さらに、当業者は、ナノ粒子にイメージング剤を付着させる、および／またはイメージング剤を含むナノ粒子を作製する他の方法にも精通している。
【０１３４】
一部の実施形態では、凝集物は少なくとも１つの治療剤および少なくとも１つのイメージング剤を含む。
【０１３５】
理論に拘束されたくはないが、凝集物の中へのナノ粒子の凝集により、凝集物に結合した化合物の放出速度および／または放出量が低下するか、または化合物を吸収もしくは吸着する細胞への化合物の接触が防止される。これは、個々のナノ粒子の表面積の合計に対する凝集物の表面積の減少によるものとすることができる。したがって、一部の実施形態では、結合した化合物は、脱凝集していない凝集物からの放出と比較して、脱凝集した凝集物からより高い速度および／または量で放出される。例えば、脱凝集した凝集物からの放出速度は、脱凝集していない凝集物からの放出と比較して、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも１倍、少なくとも２倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも３０倍、少なくとも４０倍、少なくとも５０倍、または少なくとも１００倍以上である。
【０１３６】
凝集物の中へのナノ粒子の凝集により、凝集物に結合した化合物の放出速度および／または放出量が低下するので、本明細書に記載の凝集物は、除放性薬物担体として使用して、治療剤の血液循環半減期を延長させることができる。例えば、正常な血管剪断応力下で部分的な脱凝集を受ける凝集物は、ナノ粒子およびそれに結合した分子を放出しないか、またはほとんど放出しないであろう。これにより、ナノ粒子および結合した治療剤の血液循環寿命を増加させることができる。したがって、例えば、正常な血管剪断応力（例えば、７０ｄｙｎｅ／ｃｍ２未満、６０ｄｙｎｅ／ｃｍ２未満、５０ｄｙｎｅ／ｃｍ２未満、４０ｄｙｎｅ／ｃｍ２未満、３０ｄｙｎｅ／ｃｍ２未満、２５ｄｙｎｅ／ｃｍ２未満、２０ｄｙｎｅ／ｃｍ２未満、または１５ｄｙｎｅ／ｃｍ２未満）下で２０％未満、１５％未満、１０％未満、５％未満、４％未満、３％未満、または２％未満が部分的に脱凝集する凝集物は、除放性薬物担体として使用して、治療剤の血液循環半減期を延長させることができる。
【０１３７】
一部の実施形態では、約１ｄｙｎｅ／ｃｍ２〜約２５ｄｙｎｅ／ｃｍ２、約２ｄｙｎｅ／ｃｍ２〜約２０ｄｙｎｅ／ｃｍ２、または約５ｄｙｎｅ／ｃｍ２〜約１５ｄｙｎｅ／ｃｍ２の剪断応力範囲において、例えば、２０％未満、１５％未満、１０％未満、５％未満、４％未満、３％未満、または２％未満が部分的に脱凝集する凝集物は、除放性薬物担体として使用して、治療剤の血液循環半減期を延長させることができる。
【０１３８】
さらに、この除放性は、血管全体にわたって時間を通して起こりうる。これは、生理学的剪断応力条件下で内皮を長期間ターゲティングするのに有用となりうる。
【０１３９】
リガンド
多種多様な実体が、ナノ粒子、赤血球、およびマイクロカプセルに結合することができる。好ましい部分はリガンドであり、このリガンドは介在するつなぎ部分を介して、直接的または間接的のいずれかによって、好ましくは共有結合的に結合する。好ましい実施形態では、リガンドは、それが組み込まれるナノ粒子、赤血球、またはマイクロカプセルの分布、ターゲティング、または寿命を変化させる。好ましい実施形態では、リガンドは、選択された標的、例えば分子、細胞もしくは細胞型、細胞もしくは器官のコンパートメントなどのコンパートメント、組織、器官、または体内部位に対する親和性を、例えばそのようなリガンドがない化学種と比較して、増強する。凝集を増強するリガンドは、本明細書では、凝集リガンドと命名する。
【０１４０】
さらに、選択された標的に対する親和性を増強するリガンドは、本明細書では、ターゲティングリガンドと命名する。本明細書で使用される用語「ターゲティングリガンド」は、標的分子と結合するかまたは相互作用する分子を指す。典型的には、相互作用または結合の性質は、非共有結合的、例えば水素結合、静電的相互作用、またはファンデルワールス相互作用であるが、結合が共有結合的であってもよい。
【０１４１】
限定はされないが、リガンドは、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ペプチドミメティック、糖タンパク質、レクチン、ヌクレオシド、ヌクレオチド、核酸、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、リポ多糖類、ビタミン、ステロイド、ホルモン、補因子、受容体、受容体リガンド、ならびにそれらのアナログおよび誘導体からなる群から選択することができる。
【０１４２】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、リガンドは、ポリリシン（ＰＬＬ）、ポリＬ−アスパラギン酸、ポリＬ−グルタミン酸、スチレン−無水マレイン酸コポリマー、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）コポリマー、ジビニルエーテル−無水マレイン酸コポリマー、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミドコポリマー（ＨＭＰＡ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリウレタン、ポリ（２−エチルアクリル酸）、Ｎ−イソプロピルアクリルアミドポリマー、ポリホスファジン（ｐｏｌｙｐｈｏｓｐｈａｚｉｎｅ）、ポリエチレンイミン、スペルミン、スペルミジン、ポリアミン、偽ペプチド−ポリアミン、ペプチドミメティックポリアミン、デンドリマーポリアミン、アルギニン、アミジン、プロタミン、チロトロピン、メラノトロピン、レクチン、サーファクタントタンパク質Ａ、ムチン、トランスフェリン、ビスホスホネート、ポリグルタメート、ポリアスパルタート、アプタマー、アシアロフェツイン、ヒアルロナン、プロコラーゲン、インスリン、トランスフェリン、アルブミン、アクリジン、クロス−ソラレン（ｃｒｏｓｓ−ｐｓｏｒａｌｅｎ）、マイトマイシンＣ、ＴＰＰＣ４、テキサフィリン、サフィリン、多環式芳香族炭化水素（例えば、フェナジン、ジヒドロフェナジン）、胆汁酸、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、１−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、１，３−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、１，３−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ３−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ３−（オレオイル）コレン酸（ｃｈｏｌｅｎｉｃ  ａｃｉｄ）、ジメトキシトリチルまたはフェノキサジン）、ＲＧＤペプチド、放射標識マーカー、ハプテン、ナプロキセン、アスピリン、ジニトロフェニル、ＨＲＰ、ＡＰ、レクチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＢ、葉酸、Ｂ１２、リボフラビン、ビオチン、ピリドキサール、タキソン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、サイトカラシン、ノコダゾール、ジャプラキノリド（ｊａｐｌａｋｉｎｏｌｉｄｅ）、ラトランクリンＡ、ファロイジン、スウィンホリドＡ、インダノシン、ミオセルビン（ｍｙｏｓｅｒｖｉｎ）、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦアルファ）、インターロイキン−１ベータ、ガンマインターフェロン、ＧａｌＮＡｃ、ガラクトース、マンノース、マンノース−６Ｐ、ＧａｌＮＡｃクラスター、マンノースクラスター、ガラクトースクラスターなどの糖クラスター、アプタマー、インテグリン受容体リガンド、ケモカイン受容体リガンド、セロトニン受容体リガンド、ＰＳＭＡ、エンドセリン、ＧＣＰＩＩ、ソマトスタチン、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される。
【０１４３】
本発明のこの態様および他の態様のいくつかの実施形態では、リガンドは、
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、セクロピン、リコトキシン（ｌｙｃｏｔｏｘｉｎ）、パラダキシン（ｐａｒａｄａｘｉｎ）、ブホリン（ｂｕｆｏｒｉｎ）、ＣＰＦ、ボンビニン様ペプチド（ＢＬＰ）、カテリシジン、セラトトキシン（ｃｅｒａｔｏｔｏｘｉｎ）、Ｓ．クラバ（Ｓ．Ｃｌａｖａ）ペプチド、ヌタウナギ腸内抗微生物ペプチド（ｈａｇｆｉｓｈ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ）（ＨＦＩＡＰ）、マガイニン、ブレビニン−２（ｂｒｅｖｉｎｉｎ−２）、デルマセプチン、メリチン、プルロシジン（ｐｌｅｕｒｏｃｉｄｉｎ）、Ｈ２Ａペプチド、ゼノパスペプチド、エスクレンチン−１、カエリン（ｃａｅｒｉｎ）ならびにそれらの任意のアナログおよび誘導体からなる群から選択されるペプチドである。
【０１４４】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、リガンドは凝集リガンドである。理論に拘束されたくはないが、凝集リガンドは、対照と比較して、脱凝集速度を、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、または少なくとも９０％以上低下させることができる。
【０１４５】
一部の実施形態では、リガンドは蛍光レポーターまたは化学発光分子である。
【０１４６】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、ナノ粒子はターゲティングリガンドおよび標的分子の両方を含む。理論に拘束されたくはないが、１つのナノ粒子上のターゲティングリガンドと別のナノ粒子上の標的分子が結合すると、凝集が増強される。
【０１４７】
分子の連結
分子（例えば、化合物またはリガンド）は、当業者に公知の種々の方法のいずれかを使用して、ナノ粒子、赤血球、またはマイクロカプセルに結合させることができる。分子は、ナノ粒子、赤血球、またはマイクロカプセルに共有結合的にまたは非共有結合的に連結または結合させることができる。分子とナノ粒子、赤血球、またはマイクロカプセルとの間の共有結合は、リンカーにより媒介することができる。分子とナノ粒子、赤血球、またはマイクロカプセルとの間の非共有結合は、イオン相互作用、ファンデルワールス相互作用、双極子−双極子相互作用、水素結合、静電的相互作用、および／または形状認識相互作用に基づいている。
【０１４８】
本明細書で使用される用語「リンカー」は、化合物の２つの部分を結合する有機部分を意味する。リンカーは、典型的には、直接結合、または酸素もしくはイオウなどの原子、ＮＨ、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＳＯ、ＳＯ２、ＳＯ２ＮＨなどの単位、または置換または非置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル、置換または非置換Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、置換または非置換Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、置換または非置換Ｃ６〜Ｃ１２アリール、置換または非置換Ｃ５〜Ｃ１２ヘテロアリール、置換または非置換Ｃ５〜Ｃ１２ヘテロシクリル（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｙｌ）、置換または非置換Ｃ３〜Ｃ１２シクロアルキル（ここで、１つまたは複数のメチレンがＯ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ２、ＮＨ、Ｃ（Ｏ）により中断または終結されうる）などの原子鎖を含む。
【０１４９】
分子は、親和性結合ペアによりナノ粒子、赤血球、またはマイクロカプセルと結合することができる。用語「親和性結合ペア」または「結合ペア」は、互いに特異的に結合する第１および第２の分子を指す。結合ペアの一方のメンバーが分子と結合しており、他方のメンバーがナノ粒子、赤血球、またはマイクロカプセルと結合している。本明細書で使用される用語「特異的結合」は、結合ペアの第１のメンバーが結合ペアの第２のメンバーに対して、他の分子に対するよりも高い親和性および特異性で結合することを指す。
【０１５０】
代表的な結合ペアとしては、任意のハプテンまたは抗原性化合物と対応抗体またはその結合部分もしくは断片との組合せ（例えば、ジゴキシゲニンと抗ジゴキシゲニン；マウス免疫グロブリンとヤギ抗マウス免疫グロブリン）、および非免疫学的結合ペア（例えば、ビオチン−アビジン、ビオチン−ストレプトアビジン、ホルモン［例えば、チロキシンおよびコルチゾール−ホルモン結合タンパク質、受容体−受容体アゴニスト、受容体−受容体アンタゴニスト（例えば、アセチルコリン受容体−アセチルコリンまたはそのアナログ）、ＩｇＧ−プロテインＡ、レクチン−炭水化物、酵素−酵素補因子、酵素−酵素阻害剤、および核酸二本鎖を形成することができる相補的なオリゴヌクレオチドペア）等が挙げられる。結合ペアとして、負に荷電した第１の分子と正に荷電した第２の分子を挙げることもできる。
【０１５１】
結合ペアの結合を使用する一例は、ビオチン−アビジンまたはビオチン−ストレプトアビジン結合である。この手法では、分子またはナノ粒子、赤血球、もしくはマイクロカプセルの一方がビオチン化され、他方がアビジンまたはストレプトアビジンと結合する。また、多くの商用キットがタンパク質などの分子のビオチン化に利用可能である。
【０１５２】
結合ペアの結合を使用する別の例は、ビオチン−サンドイッチ法である。例えば、Ｄａｖｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：８１５５−６０（２００６）を参照のこと。相互に結合する２つの分子がビオチン化され、次いでリンカーとして４価ストレプトアビジンを使用して相互に結合される。
【０１５３】
結合ペアの結合を使用するさらに別の例は、二本鎖の核酸結合である。この手法では、分子またはナノ粒子、赤血球、もしくはマイクロカプセルの一方が二本鎖核酸の第１の鎖と結合し、他方が二本鎖核酸の第２の鎖と結合する。核酸としては、限定はされないが、ヌクレオチド、リボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド、ヌクレオチドアナログ、改変ヌクレオチド、ならびに骨格修飾、分岐点、および非ヌクレオチドの残基、基、または架橋を含むヌクレオチドを含む、特定配列セグメントおよび配列を挙げることができる。
【０１５４】
凝集物の作製
一態様では、本発明は、本明細書に記載の凝集物を調製する方法であって、（ｉ）複数のナノ粒子を作製すること；（ｉｉ）前記複数のナノ粒子をミクロンサイズの粒子の中に凝集させることを含む方法を提供する。作製されたナノ粒子を、さらに遠心分離に付して、凝集物中の単一非結合ナノ粒子の濃度を低下させることもできる。作製されたナノ粒子を、さらに遠心分離に付して、凝集物中の単一非結合ナノ粒子の濃度を低下させることもできる。
【０１５５】
凝集後、所望のサイズの粒子を、サイズ排除クロマトグラフィーまたはトラックエッチング処理フィルターの使用など、当業者に周知の種々の手法を使用することにより選択することができる。一非限定例では、凝集した粒子は、適切な孔径を有するフィルターを使用して濾過することができる。別の非限定例では、凝集した粒子は、密度勾配遠心分離に付することができる。
【０１５６】
したがって、一部の実施形態では、この方法は、サイズが１μｍ以上、２μｍ以上、３μｍ以上、４μｍ以上、５μｍ以上、６μｍ以上、７μｍ以上、８μｍ以上、８μｍ以上、または１０μｍ以上の凝集した粒子を選択するステップをさらに含む。
【０１５７】
一部の実施形態では、この方法は、サイズが２０μｍ以下、１５μｍ以下、１０μｍ以下、または５μｍ以下の凝集した粒子を選択するステップをさらに含む。
【０１５８】
一部の実施形態では、この方法は、例えば、１μｍ〜５０μｍ、１μｍ〜２５μｍ、１μｍ〜２０μｍ、１μｍ〜１０μｍ、または０．５μｍ〜５μｍの特定のサイズ範囲にある凝集した粒子を選択することをさらに含む。これは、サイズ上限より小さいサイズの粒子を最初に選択し、次いで、これらの粒子からサイズ下限より大きいサイズの粒子を選択することにより、またはその逆の順番で行うことにより達成することができる。
【０１５９】
凝集に適切なサイズのナノ粒子を作製するために、種々の方法を使用することができる。これらの方法としては、気化方法（例えば、自由噴流膨張（ｆｒｅｅ  ｊｅｔ  ｅｘｐａｎｓｉｏｎ）、レーザー気化、スパークエロージョン（ｓｐａｒｋ  ｅｒｏｓｉｏｎ）、電気爆発（ｅｌｅｃｔｒｏ  ｅｘｐｌｏｓｉｏｎ）、および化学蒸着）、機械的摩擦を含む物理的方法（例えば、Ｅｌａｎ  Ｎａｎｏｓｙｓｔｅｍｓ  ｏｆ  Ｄｕｂｌｉｎ，Ｉｒｅｌａｎｄにより開発されたパールミリング（ｐｅａｒｌｍｉｌｌｉｎｇ）技術）、および溶媒置換後の界面沈着が挙げられる。
【０１６０】
溶媒置換法は、研究室または工業規模で実施するのが比較的簡単であり、０．２２μｍフィルターを通過できるナノ粒子を生成することができる。この方法により生成されるナノ粒子のサイズは、有機溶媒中のポリマー濃度、混合速度、およびこの工程で使用される界面活性剤に影響を受けやすい。界面活性剤のドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）を用いる溶媒置換法を使用すると、小さなナノ粒子（＜１００ｎｍ）を得るが、ＳＤＳは医薬製剤にとって理想的ではない。しかしながら、類似の天然界面活性剤（例えば、コール酸またはタウロコール酸塩）を、ＳＤＳの代わりに使用して、同様に小型のナノ粒子を得ることができる。コール酸およびタウリンから形成されるコンジュゲートであるタウロコール酸は、ＳＤＳに極めて類似の両親媒性溶液化学を有する完全に代謝可能のスルホン酸である。タウロコール酸のアナログであるタウロウルソデオキシコール酸（ＴＵＤＣＡ）は、毒性がなく、神経保護特性および抗アポトーシス特性を有することが実際に知られている。ＴＵＤＣＡは天然の胆汁酸であり、タウリンおよびウルソデオキシコール酸（ＵＤＣＡ）のコンジュゲートである。ＵＤＣＡは、胆嚢結石溶解の治療のために認可された薬物（ＡＣＴＩＧＡＬＬ（登録商標），Ｗａｔｓｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）である。他の天然のアニオン性界面活性剤（例えば、ガラクトセレブロシドスルフェート）、中性界面活性剤（例えば、ラクトシルセラミド）、または双性イオン界面活性剤（例えば、スフィンゴミエリン、ホスファチジルコリン、パルミトイルカルニチン）を、ナノ粒子製剤研究で通常使用されるＳＤＳまたは他の界面活性剤の代わりに使用することができる。塩基形態のガサイクリジン（ｇａｃｙｃｌｉｄｉｎｅ）を溶解するのに使用される賦形剤など、安全性認定されている他の賦形剤も、ナノ粒子の調製に使用することができる。このような賦形剤としては、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル（例えば、ポリソルベート８０（例えば、ＴＷＥＥＮ  ８０（登録商標））、１２−ヒドロキシステアリン酸のポリグリコールモノエステルまたはジエステル（例えば、ＳＯＬＵＴＯＬ（登録商標）ＨＳ  １５）およびＣＡＰＴＩＳＯＬ（登録商標）が挙げられる。（限定はされないが）ポロキサマー４０７などのポロキサマーも使用することができる。
【０１６１】
種々の界面活性剤のサンプリングを使用して、無毒薬物を含有する小さな（例えば、２００ｎｍ未満）ナノ粒子に最適な界面活性剤を決定することができる。また、界面活性剤濃度は、ナノ粒子の形成、それらの密度およびサイズに影響を与える。界面活性剤濃度は、各ポリマー組成、所望の薬物濃度、および使用目的に対して最適化することができる。
【０１６２】
ナノ粒子製剤でこれまでに使用された種々の有機溶媒の中で、アセトンが、濾過可能なナノ粒子の調製で以前に使用されていること、低毒性であること、および取り扱いが容易であることのために、魅力的である。Ｌ−およびＤ，Ｌ−乳酸（ＰＬＡ）または乳酸とグリコール酸との混合物（ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド））（ＰＬＧＡ）で構成された種々のポリマーが、１００％のＬ−ＰＬＡおよび１００％のグリコール酸（ＰＧＡ）を除いて、アセトンに可溶である。１００％のＬ−ＰＬＡで構成されたポリマーは、塩化メチレンに溶解し、１００％のＬ−ＰＬＡまたは１００％のＰＧＡのいずれかで構成されたポリマーは、ヘキサフルオロイソプロパノール（ＨＦＩＰ）に溶解するであろう。
【０１６３】
溶媒置換法を使用してナノ粒子を調製する場合には、迅速混合を使用することができる。一部のそのような実施形態では、典型的には、５００ｒｐｍ以上の撹拌速度が使用される。混合時の溶媒交換速度を遅くすると、より大きな粒子が得られる。変動圧力勾配を使用すると、高いレイノルズ数および高度に発達した乱流での効率的な混合が生み出される。高重力反応混合を使用すると、高いレイノルズ数での乱流混合により達成されるものと同様の遠心粒子加速が達成されることにより、小さなナノ粒子（１０ｎｍ）が生成された。
【０１６４】
超音波処理は、乱流混合を提供することができる１つの方法である。超音波処理は、二重エマルジョンナノ粒子作製法と共に最も一般に使用される方法であるが、溶媒置換法にはあまり適していない。超音波処理は、ストリーム交差点でインライン超音波振動プレートを備えたチューブを通過する２つの液体ストリーム（例えば、溶解した粒子ポリマー材料を含む１つのストリームと、粒子を溶液から出現させ、固化させる薬物および／または薬物の組合せを含む別のストリーム）を混合することにより実施することができる。振動噴霧による極めて小さな液滴の形成もまた、ナノ粒子の作製で使用されている。例えば、Ｄｉｍａｔｉｘ，Ｉｎｃ．（Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ，Ｃａｌｉｆ．）のＳｐｅｃｔｒａ  Ｐｒｉｎｔｉｎｇ  Ｄｉｖｉｓｉｏｎ（Ｌｅｂａｎｏｎ，Ｎ．Ｈ．）により製作された、ＤＭＰ−２８００  ＭＥＭＳをベースとした圧電マイクロポンプ（インクジェット）システムにより、１００，０００ｐＬ／ｓで１０〜５０ｐＬ（１〜５×ｌ０−１１リットル）サイズの液滴が形成される。マイクロポンプ（インクジェットシステム）は、均一混合および実験室から製造規模にこの工程を信頼性高く移行させる能力を提供するが、圧電マイクロポンプを使用してポリマーを含む小さな液滴を製造する場合、２００ｎｍより小さなナノ粒子の製造は、依然として、混合動力学（すなわち、混合時に生成する沈殿固体または液体中間体の固化のタイミング）に依存する。温度、界面活性剤、および溶媒組成は、固化動力学および生成ナノ粒子の密度を変化させるので、この手法を使用する際の重要な変量となる。
【０１６５】
ナノ粒子を誘導して、当業者に利用可能で周知の多種多様な方法により、凝集物を形成することができる。ＰＬＧＡをベースとしたナノ粒子など、多くの疎水性ナノ粒子が水溶液中で自己凝集することができる。例えば、Ｃ．Ｅ．Ａｓｔｅｔｅ  ａｎｄ  Ｃ．Ｍ．Ｓａｂｌｉｏｖ，Ｊ．Ｂｉｏｍａｔｅｒ．Ｓｃｉ，Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｅｄ．１７：２４７（２００６）を参照のこと。したがって、ナノ粒子を含む濃縮溶液は、暫くの間、室温以下で保存することができる。一部の実施形態では、保存温度は４℃以下である。限定はされないが、保存期間は分単位から日単位または週単位まで継続することができる。例えば、保存期間は、１日間、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、１週間、または２週間以上である。
【０１６６】
あるいは、ナノ粒子の濃縮溶液を乾燥噴霧して、凝集物を形成させることができる。例えば、Ｓｕｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．２６：１８４７（２００９）およびＴｓａｐｉｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９９：１２００１（２００２）を参照のこと。
【０１６７】
濃縮溶液は、ナノ粒子を２ｍｇ／ｍｌ、３ｍｇ／ｍｌ、４ｍｇ／ｍｌ、５ｍｇ／ｍｌ、６ｍｇ／ｍｌ、７ｍｇ／ｍｌ、８ｍｇ／ｍｌ、９ｍｇ／ｍｌ、１０ｍｇ／ｍｌ、１１ｍｇ／ｍｌ、１２ｍｇ／ｍｌ、１３ｍｇ／ｍｌ、１４ｍｇ／ｍｌ、１５ｍｇ／ｍｌ、１６ｍｇ／ｍｌ、１７ｍｇ／ｍｌ、１８ｍｇ／ｍｌ、１９ｍｇ／ｍｌ、２０ｍｇ／ｍｌ以上含むことができる。
【０１６８】
凝集物を形成する他の方法としては、これらに限定されないが、ｗ／ｏ／ｗ型エマルジョン法および簡単な溶媒置換法が挙げられる。
【０１６９】
一非限定例では、ナノ粒子はＰＬＧＡポリマーから作製される。ＰＬＧＡポリマーはＰＥＧおよび／またはリガンドと結合することができる。したがって、本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、ナノ粒子はＰＥＧ−ＰＬＧＡポリマーに加え、ペプチド
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から作製される。ＣＲＥＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）ペプチドは、多種多様な腫瘍を標的にすることが知られている。理論に拘束されたくはないが、ＣＲＥＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）ペプチドは、腫瘍血管の裏層には存在するが、正常組織の血管には存在しない凝固血を認識する。さらに、ＣＲＥＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）ペプチドは、アテローム斑の管腔表面に位置するフィブリンをターゲティングするために使用される。
【０１７０】
ＣＲＫＲＬＤＲＮＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）ペプチドは、炎症内皮をターゲティングする公知のペプチドである。
【０１７１】
ＣＨＶＬＷＳＴＲＣ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３）ペプチドは、膵島内皮細胞をターゲティングする公知のペプチドである。
【０１７２】
狭窄症の治療
別の態様では、本発明は、対象の狭窄症および／または狭窄病変の治療のための方法であって、それを必要とする対象に本明細書に記載の凝集物を投与することを含む方法を提供する。
【０１７３】
本明細書で使用される用語「狭窄症」は、体内の中空通路（例えば、管（ｄｕｃｔ）または管（ｃａｎａｌ））の狭細または狭窄を指す。用語「血管狭窄症」は、循環系の管または管腔の閉塞または狭細を指す。血管狭窄症は、多くの場合、脂肪沈着（アテローム性動脈硬化症の場合のように）、血管平滑筋細胞および内皮細胞の過度の遊走および増殖、血栓形成による急性狭細によって、または血管奇形の結果として生じる。本明細書で使用される用語「血管狭窄症」は閉塞病変を含む。動脈は、狭窄症に特になりやすい。本明細書で使用される用語「狭窄症」は、具体的には、最初の狭窄症および再狭窄症を含む。管または管腔内の閉塞物の典型例としては、インサイチューでのまたは塞栓化したアテローム性材料またはプラーク、疾患または損傷からまたは創傷治癒の部位で生じる血塊における、血小板、フィブリンなどの血液成分および／または他の細胞成分の凝集が挙げられる。血塊形成状態には、血栓症、塞栓症、そして極端な場合、異常な凝固状態が含まれる。他の血管閉塞物としては、真菌感染または糸状虫感染など、循環系内の微生物または肉眼で見える生物による感染から生じる閉塞物が挙げられる。鎌状赤血球症もまた、微細血管の管腔よりも大きい構造の中でＲＢＣが鎌状化しかつ積層化する結果として、血管閉塞を生じうる。したがって、鎌状赤血球クリーゼの間、ＲＢＣは形状／剛性を変化させ、血管を閉塞することがある。この現象は、マラリアのクリーゼ病期中にも存在する。
【０１７４】
用語「再狭窄症」は、最初の狭窄症の治療が見かけ上成功した後の狭窄症の再発を指す。例えば、血管狭窄症の文脈における「再狭窄症」は、例えばバルーン血管形成による脂肪沈着の除去によって、血管狭窄症の治療が見かけ上成功した後の血管狭窄症の再発を指す。再狭窄症の要因の１つは、内膜過形成である。用語「内膜過形成」は、「新生内膜過形成」および「新生内膜形成」と互換的に使用され、血管平滑筋細胞および内皮細胞の過度の増殖および遊走の結果として起こる、血管の最内層である内膜の肥厚を指す。再狭窄症の間に起こる種々の変化は、まとめて「血管壁リモデリング」と呼ばれることが多い。
【０１７５】
用語「バルーン血管形成術」および「経皮経管冠動脈形成術」（ＰＴＣＡ）は、多くの場合、互換的に使用され、冠状動脈からプラークを除去するための非外科的なカテーテルベースの治療法を指す。狭窄症または再狭窄症は、血流に対する抵抗性が増加する結果、高血圧をもたらすことが多い。
【０１７６】
用語「高血圧」は、異常に高い血圧、すなわち正常範囲の上限値を超えた血圧を指す。
【０１７７】
狭窄症および／または狭窄病変の代表的な原因の一部として、これらに限定されないが、外傷または損傷、アテローム性動脈硬化症、先天性欠損、糖尿病、医原病、感染、炎症、虚血、腫瘍、血管攣縮、冠血管攣縮、レイノー現象、脳卒中、血液凝固、モヤモヤ病、高安病、結節性多発動脈炎、播種状エリトマトーデス、関節リウマチ、脊椎腫瘍、骨ページェット病、フッ素症、体外装置（例えば、血液透析、血液ポンプ等）、血栓性および／または塞栓性障害、鎌状赤血球症、ならびにそれらの任意の組合せが挙げられる。
【０１７８】
本明細書で使用される用語「血栓性および／または塞栓性障害」は、血栓または塞栓による血管の閉塞または部分的閉塞から生じる急性または慢性の病的状態または病的症状を意味する。同様に、用語「血栓性または塞栓性閉塞」は、血栓または塞栓による血管の閉塞または部分的閉塞を意味する。血栓性または塞栓性障害の例としては、これらに限定されないが、脳梗塞（脳卒中）、一過性脳虚血発作、および血管性認知症などの大脳の血栓性および塞栓性障害；心筋梗塞、急性冠動脈症候群、不安定狭心症、および虚血性突然死などの心臓の血栓性および塞栓性障害；肺塞栓症；肺梗塞または腎梗塞、末梢循環障害、および深部静脈血栓症が挙げられる。
【０１７９】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、狭窄症または狭窄病変は、間欠性跛行（末梢動脈狭窄症）、アンギナ（冠状動脈狭窄症）、頚動脈狭窄（脳卒中および一時的な虚血性症状の発現をもたらす）、大動脈弁狭窄症、ボタン穴狭窄症、石灰沈着性結節型狭窄症、冠状動脈口狭窄症、二重大動脈狭窄症、魚口僧帽弁狭窄症、特発性肥厚性大動脈弁下部狭窄症、漏斗部狭窄症、僧帽弁狭窄症、筋性大動脈弁下部狭窄症、肺動脈弁狭窄症、大動脈弁下部狭窄症、弁下部狭窄症、大動脈弁上部狭窄症、三尖弁狭窄症、腎動脈狭窄症、幽門狭窄症（胃の流出閉塞）、閉塞性黄疸（胆管狭窄症）、腸閉塞症、包茎、水頭症、狭窄性腱鞘炎、脊椎管狭窄症、声門下狭窄症（ＳＧＳ）、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される。
【０１８０】
内出血の治療
本明細書で使用される用語「内出血」は、体の内部で起こっている出血を指す。そのような出血は、それが起こる場所（例えば、脳、胃、肺）によっては重篤となることがあり、適切な医学的治療を迅速に受けられない場合には、可能性として死亡および心拍停止が起こりうる。したがって、一態様では、本発明は、対象の内出血または出血性障害の治療のための方法であって、それを必要とする対象に本明細書に記載の凝集物を投与することを含む方法を提供する。出血の性質によっては、剪断応力が出血部位またはその近傍で高くなることがある。
【０１８１】
内出血は、外傷、高血圧による血管破裂、感染（例えば、エボラ、マールブルク）、癌、壊血病、肝細胞腫、自己免疫性血小板減少症、子宮外妊娠、悪性低温症、卵巣嚢胞、肝癌、ビタミンＫ欠乏症、血友病、または薬物の副作用に起因する可能性がある。
【０１８２】
本明細書で使用される用語「出血性障害」は、損傷を受けた血管からの出血に起因する急性または慢性の病的状態または病的症状を意味する。出血性障害の例としては、これらに限定されないが、脳内出血（ＩＣＨ）、くも膜下出血（ＳＡＨ）、および出血性卒中などの脳出血が挙げられる。
【０１８３】
本明細書に記載の凝集物はまた、血液透析装置（おそらく人工血管／バルブ等も）などの体外装置でも使用することができる−これらは、血小板等の剪断活性化を誘導する剪断応力を上昇させることができる。上昇した剪断応力がこれらの体外装置に存在する場合、本明細書に記載の凝集物を体外装置に加えて、抗血小板薬を放出させることができる。
【０１８４】
凝集物はまた、体内／体外装置での異常な流れを検出するために使用することもできる。例えば、標識分子の放出速度および／または放出量の測定により。
【０１８５】
さらに、凝集物は、塞栓術治療と組み合わせて使用することもできる。塞栓術は、出血の阻止または防止のいずれかのために；その血液供給の閉塞による、組織、腫瘍、または器官の活力低減のために；または動静脈奇形への血流の低減のために、血液循環の中に種々の物質を導入して血管を閉塞することを指す。したがって、塞栓術には、血管に意図的に塞栓を導入することによる血管の選択的な閉塞が含まれる。塞栓術は、動静脈奇形、脳動脈瘤、消化管出血、鼻出血、一次分娩後出血、外科的出血、腫瘍サイズを低減させるための血液供給の低下または停止、肝臓病変、腎臓病変、および子宮筋腫を含む、人体の様々な器官に影響を与える多種多様な症状を治療するために使用される。
【０１８６】
医薬組成物
対象への投与のために、薬学的に許容可能な組成物で凝集物を提供することができる。これらの薬学的に許容可能な組成物は、１つまたは複数の薬学的に許容可能な担体（添加物）および／または希釈剤と一緒に製剤化された凝集物を含む。下記に詳細に記載されるように、本発明の医薬組成物は、以下のものに適合したものを含めて、固体形態または液体形態での投与のために特に製剤化することができる：（１）経口投与、例えば水薬（水性または非水性の溶液または懸濁液）、胃管栄養、ロゼンジ、糖衣錠、カプセル剤、丸剤、錠剤（例えば、頬側、舌下腺、および全身性の吸収に向けられたもの）、巨丸剤、散剤、果粒剤、舌に適用のペースト剤；（２）非経口投与、例えば無菌の溶液もしくは懸濁液として、または徐放性製剤として、例えば皮下、筋肉内、静脈内、または硬膜外への注射；（３）局所適用、例えば、皮膚に適用されるクリーム、軟膏、または制御放出のパッチもしくはスプレーとして；（４）膣内または直腸内、例えばペッサリー、クリーム、または泡として；（５）経舌下；（６）経眼；（７）経皮；（８）経粘膜；または（９）経鼻。さらに、化合物を患者の中に植え込むかまたは薬物送達システムを使用して注射することができる。例えば、Ｕｒｑｕｈａｒｔ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．２４：１９９−２３６（１９８４）；Ｌｅｗｉｓ，ｅｄ．"Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ"（Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ，１９８１）；米国特許第３，７７３，９１９号明細書；および米国特許第３５３，２７０，９６０号明細書を参照のこと。これらの文献すべての内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０１８７】
本明細書で使用される用語「薬学的に許容可能な」は、健全な医療判断の範囲内にあり、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を起こすことなく、人間および動物の組織と接触する用途に適し、妥当なベネフィット・リスク比を有する化合物、材料、組成物、および／または投与剤形を指す。
【０１８８】
本明細書で使用される用語「薬学的に許容可能な担体」は、液体もしくは固体の充填剤、希釈剤、賦形剤、製造補助剤（例えば、滑沢剤、タルクマグネシウム、ステアリン酸カルシウムもしくはステアリン酸亜鉛、またはステアリン酸）、または１つの器官もしくは体内の一部から別の器官もしくは体内の一部に対象の化合物を運搬または輸送するのに関与する溶媒封入材料など、薬学的に許容可能な材料、組成物、または媒体を意味する。各担体は、製剤の他の成分と適合し患者にとって有害でないという意味で「許容される」ものでなければならない。薬学的に許容可能な担体として有用となりうる材料の一部の例としては、（１）糖、例えば、ラクトース、グルコース、およびスクロース；（２）デンプン、例えば、コーンスターチ、およびジャガイモデンプン；（３）セルロースおよびその誘導体、例えば、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、エチルセルロース、結晶セルロース、および酢酸セルロース；（４）トラガント末；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）平滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、およびタルク；（８）賦形剤、例えば、ココアバターおよび坐薬ワックス；（９）油、例えば、落花生油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブオイル、トウモロコシ油、および大豆油；（１０）グリコール、例えば、プロピレングリコール；（１１）多価アルコール、例えば、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、およびポリエチレングリコール（ＰＥＧ）；（１２）エステル、例えば、オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル；（１３）寒天；（１４）緩衝剤、例えば、水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム；（１５）アルギン酸；（１６）パイロジェンフリー水；（１７）等張生理食塩水；（１８）リンゲル液；（１９）エチルアルコール；（２０）ｐＨ緩衝液；（２１）ポリエステル、ポリカーボネート、および／またはポリ酸無水物；（２２）増量剤、例えば、ポリペプチドおよびアミノ酸；（２３）血清成分、例えば、血清アルブミン、ＨＤＬ、およびＬＤＬ；（２２）Ｃ２〜Ｃ１２アルコール、例えば、エタノール；および（２３）医薬製剤で使用される無毒な他の適合物質が挙げられる。湿潤剤、着色剤、剥離剤、コーティング剤、甘味料、香味料、芳香剤、防腐剤、および抗酸化剤も製剤中に存在してよい。「賦形剤」、「担体」、「薬学的に許容可能な担体」などの用語は、本明細書で互換的に使用される。
【０１８９】
本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、治療剤の治療有効量が対象に投与される。本明細書で使用される語句「治療有効量」は、いかなる医学的治療にも適用できる妥当なベネフィット・リスク比で、動物の少なくとも部分集団の細胞に、ある程度の所望の治療効果を有効にもたらす治療剤の量を意味する。例えば、統計的に有意で計測可能な狭窄症の変化を生み出すのに十分な、対象に投与される治療剤の量。
【０１９０】
治療有効量の決定は、当業者の能力の十分範囲内である。一般に、治療有効量は、対象の病歴、年齢、症状、性、および対象の医学的症状の重症度およびタイプ、ならびに他の医薬として活性な薬剤の投与に応じて異なりうる。
【０１９１】
本明細書で使用される用語「投与する」は、所望の効果が得られるように、所望の部位で組成物の少なくとも部分的な局在化をもたらす方法または経路によって、対象の中に組成物を配置することを指す。本発明の方法に適した投与ルートは、局所投与および全身投与の両方を含む。一般に、局所投与は、治療剤の多くが、対象の全身に比べて、特定の場所に送達されることになるが、全身投与は、治療剤が基本的に対象の全身に送達されることになる。
【０１９２】
対象への投与は、これらに限定されないが、静脈内、筋肉内、皮下、経皮的、気管（エアロゾル）、肺、鼻、直腸、および外用的（頬側および舌下を含む）投与を含めた、経口または非経口の経路を含む、当技術分野で公知の任意の適切な経路によってなされうる。
【０１９３】
代表的な投与方法としては、これらに限定されないが、注射、点滴、点眼、吸入、または経口摂取が挙げられる。「注射」は、限定はされないが、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、脳室内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢下、クモ膜下、脊髄内、脳脊髄内、および胸骨内の注射および点滴を含む。本明細書に記載の一部の実施形態では、投与は静脈内への点滴または注射による。
【０１９４】
本明細書で使用される「対象」は、ヒトまたは動物を意味する。通常、動物は、霊長類、げっ歯類、家畜、または狩猟動物などの脊椎動物である。霊長類としては、チンパンジー、カニクイザル、クモザル、およびマカク、例えばアカゲザルが挙げられる。げっ歯類としては、マウス、ラット、マーモット、フェレット、ウサギ、およびハムスターが挙げられる。家畜および狩猟動物としては、ウシ、ウマ、ブタ、シカ、バイソン、バッファロー、家ネコなどのネコ種、イヌ、キツネ、オオカミなどの犬種、ニワトリ、エミュー、ダチョウなどの鳥類、およびマス、ナマズ、サケなどの魚類が挙げられる。患者または対象は、前述の任意のサブセット、例えば、上記のすべてからヒト、霊長類、またはげっ歯類など、１つまたは複数の群または種を除外したものを含む。本明細書に記載の態様の特定の実施形態では、対象は、哺乳動物、例えば霊長類、例えばヒトである。用語「患者」および「対象」は、本明細書において互換的に使用される。用語「患者」および「対象」は、本明細書において互換的に使用される。対象は雄性であっても雌性であってもよい。
【０１９５】
好ましくは、対象は哺乳動物である。哺乳動物は、ヒト、非ヒト霊長類、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウマ、またはウシとすることができるが、これらの例に限定されない。ヒト以外の哺乳動物は、自己免疫疾患または炎症に付随した障害の動物モデルとなる対象として有利に使用することができる。さらに、本明細書に記載の方法および組成物は、飼育動物および／またはペットを治療するために使用することができる。
【０１９６】
対象は、狭窄症もしくは狭窄病変または血行力学の障害もしくは症状を特徴とする疾患または障害に罹患またはそれを有するとあらかじめ診断または確認された対象とすることができる。
【０１９７】
対象は、狭窄症のために、狭窄病変のために、狭窄症もしくは狭窄病変または血行力学の障害もしくは症状を特徴とする疾患または障害のために、現在治療されている対象とすることができる。
【０１９８】
対象は、内出血に罹患またはそれを有するとあらかじめ診断または確認された対象とすることができる。
【０１９９】
対象は、内出血のために治療されている対象とすることができる。
【０２００】
本明細書に記載の態様の一部の実施形態では、本方法は、本発明の方法による治療の開始前に、狭窄症、狭窄病変、内出血、または血行力学の障害もしくは症状について対象を診断することをさらに含む。
【０２０１】
本明細書に記載の態様の一部の実施形態では、本方法は、本発明の方法による治療の開始前に、狭窄症、狭窄病変、内出血、または血行力学の障害もしくは症状に罹患した対象を選択することをさらに含む。
【０２０２】
毒性および治療効果は、例えばＬＤ５０（集団の５０％が死に至る用量）およびＥＤ５０（集団の５０％に治療上有効な用量）の決定など、細胞培養または実験動物における標準的な医薬品評価手順により決定することができる。毒性と治療効果との間の用量比は治療係数であり、比ＬＤ５０／ＥＤ５０として表現することができる。大きい治療係数を示す組成物が好ましい。
【０２０３】
本明細書で使用される用語ＥＤは、有効用量を示し、動物モデルに関して使用される。用語ＥＣは、有効濃度を示し、インビトロモデルに関して使用される。
【０２０４】
細胞培養アッセイおよび動物試験から得られるデータは、ヒトで使用するための用量範囲を策定するために使用することができる。そのような化合物の投与量は、毒性がほとんどないかまたは無毒性である、ＥＤ５０を含む血液循環濃度の範囲内にあることが好ましい。この投与量は、使用される投与剤形および利用される投与ルートに応じてこの範囲内で異なりうる。
【０２０５】
治療有効用量は、細胞培養アッセイから最初に評価することができる。用量は、細胞培養で決定されるＩＣ５０（徴候の最大阻害の半分が達成される治療濃度）を含む循環血漿濃度範囲を達成するように、動物モデルで策定することができる。血漿レベルは、例えば高速液体クロマトグラフィーにより測定することができる。任意の特定投与量の効果は、適切なバイオアッセイによりモニターすることができる。
【０２０６】
投与量は、医師により決定され、観察された治療効果に応じて、必要なときに調整することができる。一般に、組成物は、１μｇ／ｋｇ〜１５０ｍｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ〜１ｍｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ〜１ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ、または１０ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇの用量で治療剤が与えられるように、投与される。ここで示される範囲は、あらゆる中間の範囲を含み、例えば、範囲１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇは、１ｍｇ／ｋｇ〜２ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜４ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜６ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜７ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜９ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ等を含むことを理解されたい。上記のものの中間の範囲、例えば、範囲１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇにおいて、２ｍｇ／ｋｇ〜８ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ〜７ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ〜６ｍｇ／ｋｇなどの用量範囲も本発明の範囲内であることも理解されたい。
【０２０７】
一部の実施形態では、治療剤またはその代謝物が、投与の１５分、３０分、１時間、１．５時間、２時間、２．５時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間以上後に、５００ｎＭ未満、４００ｎＭ未満、３００ｎＭ未満、２５０ｎＭ未満、２００ｎＭ未満、１５０ｎＭ未満、１００ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、２５ｎＭ未満、２０ｎＭ未満、１０ｎＭ未満、５ｎＭ未満、１ｎＭ未満、０．５ｎＭ未満、０．１ｎＭ未満、０．０５ｎＭ未満、０．０１ｎＭ未満、０．００５ｎＭ未満、０．００１ｎＭ未満のインビボ濃度を有するような投与量で組成物が投与される。
【０２０８】
治療期間および治療回数に関しては、治療が治療上の有益性を提供する時点を判定するために、かつ投与量の増加もしくは減少、投与回数の増加もしくは減少、治療の中止、治療の再開、または治療レジメンの他のものへの変更を決定するために、対象をモニターすることは熟練した臨床医にとっては標準的である。投与スケジュールは、治療剤に対する対象の感受性など、いくつかの臨床的因子に応じて、週１回から毎日投与まで変更することができる。所望の用量は、毎日、または３日ごと、４日ごと、５日ごと、もしくは６日ごとに投与することができる。所望の用量は、１回で投与するか、または副用量（例えば２〜４回の副用量）に分割して、ある時間にわたって、例えば、１日を通して適切な間隔で、もしくは他の適切なスケジュールで投与することができる。このような副用量は、単位投与剤形として投与することができる。本明細書に記載の態様の一部の実施形態では、投与は、例えば週単位または月単位にわたって、毎日１回または複数用量など、長期にわたる。投与スケジュールの例としては、１週、２週、３週、４週、１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、または６か月以上の期間にわたる、１日１回、１日２回、１日３回、１日４回以上の投与がある。
【０２０９】
非医学的使用
本明細書に記載の凝集物は、工業的用途にも有用である。例えば、凝集物は、パイプ詰まりの除去および／またはパイプ漏れの修復に使用することができる。限定はされないが、パイプはいかなる直径であってもよく、かついかなる物質、例えば化学物質、水、オイル、ガス等がパイプを通って流れていてもよい。本明細書で使用される用語「パイプ」は、流体が流れることができる任意のタイプの装置を含むように意図される。例としては、水、ガス、およびオイルなど、化学供給システム、都市サービス、および供給パイプラインが挙げられる。本明細書で使用される用語「流体」は、流れることができる物質を指す。したがって、用語「流体」には、液体、気体、および半固形物質が含まれる。
【０２１０】
理論に拘束されたくはないが、詰まった領域の剪断応力は、詰まっていない領域の剪断応力よりも高い。したがって、凝集物は、詰まった領域の近傍またはその領域で脱凝集し、詰まりを除去することができる薬剤を放出することになる。したがって、本明細書のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、凝集物はパイプの詰まりを除去することができる薬剤を含む。パイプの詰まりを除去するための薬剤としては、これらに限定されないが、発熱反応の生成、酸化反応の生成、酵素反応の生成、およびそれらの任意の組合せを可能にする薬剤が挙げられる。
【０２１１】
発熱反応を生成することができる薬剤としては、塩基および金属の組合せを挙げることができる。塩基および金属は、別々の凝集物に製剤化され、塩基および金属が詰まり箇所で放出されると、発熱反応が起こり、詰まりが除去されうる。一部の実施形態では、塩基は水酸化ナトリウムである。一部の実施形態では、金属はアルミニウムである。
【０２１２】
酸化反応を生成することができる薬剤としては、過酸素物（ｐｅｒｏｘｙｇｅｎ）、例えば、過炭酸ナトリウム、過硫酸ナトリウム、および過ホウ酸ナトリウム；およびハロゲン含有酸化剤、例えば、次亜塩素酸カルシウム、次亜塩素酸アルカリ土類金属塩（ａｌｋａｌｉ  ｅａｒｔｈ  ｍｅｔａｌ  ｈｙｐｏｃｈｌｏｒｉｔｅ）、次亜塩素酸アルカリ土類金属塩（ａｌｋａｌｉｎｅ  ｅａｒｔｈ  ｍｅｔａｌ  ｈｙｐｏｃｈｌｏｒｉｔｅ）、ナトリウムジクロロ−ストリアジントリオン（ｓｔｒｉａｚｉｎｅｔｒｉｏｎｅ）、塩素化イソシアヌレート、１，３−ジブロモおよび１，３−ジクロロ−５−イソブチルヒダントインが挙げられる。一部の実施形態では、酸化剤には、過酸素物質と有機物質、例えば炭水化物との組合せが含まれる。
【０２１３】
酵素反応を生成することができる薬剤としては、細菌を挙げることができる。細菌はリグニン分解細菌であってもよい。本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、細菌は、リパーゼ、アミラーゼ、セルラーゼ、またはプロテアーゼの少なくとも１つを生成する。
【０２１４】
抗詰まり剤に加えて、凝集物は、界面活性剤、スリップ剤、泡抑制剤、固化防止剤、結合剤、剥離剤、防蝕剤、消泡剤、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される化合物を含むことができる。
【０２１５】
上記に論述されたように、漏出口を通る流れも、高い剪断応力をもたらすことがある。漏出口の性質に応じて、剪断応力は漏出口またはその近傍で高くなりうる。したがって、本発明のこの態様および他の態様の一部の実施形態では、凝集物はシーリング材を含む。代表的なシーリング材としては、これらに限定されないが、アルギネート、微粒子（ｐａｒｔｉｃｌｕｌａｔｅ）、鉱油、シリコーンゴム、熱可塑性または熱硬化性樹脂（酢酸ビニル樹脂、またはアタクチックポリプロピレン）、ゴムラテックス、非シリコーンタイプゴム（天然ゴム（ＭＲ）、イソプレンゴム（ＩＲ）、ブタジエンゴム（ＢＲ）、ポリ（ｌ，２−ブタジエン）（１，２−ＢＲ）、スチレン‐ブタジエンゴム（ＳＢＲ）、クロロプレンゴム（ＣＲ）、ニトリルゴム（ＮＢＲ）、ブチルゴム（ＴｆＲ）、エチレン−プロピレンゴム（ＥＰＭ、ＥＰＤＭ）、クロロスルホン化ポリエチレン（ＣＳＭ）、およびアクリルゴム（ＡＣＭ、ＡＮＭ）が挙げられる。
【０２１６】
キット
別の態様では、本発明は、凝集物、凝集物を含む製剤、凝集物を作製するための成分、または本明細書に記載の凝集物を含む製剤を含むキットを提供する。
【０２１７】
上述の成分に加えて、キットは情報資料を含むことができる。情報資料は、本明細書に記載の方法および／または本明細書に記載の方法のための凝集物の使用に関する解説、使用説明、マーケティング、または他の資料とすることができる。例えば、情報資料は、対象に凝集物を投与するための方法を記載する。キットはまた、送達装置を含むことができる。
【０２１８】
一実施形態では、情報資料は、適切な方法で、例えば適切な用量、投与剤形、または投与方法（例えば、本明細書に記載の用量、投与剤形、または投与方法）で、製剤を投与するための説明書を含むことができる。別の実施形態では、情報資料は、適切な対象、例えばヒト、例えば成人を特定するための説明書を含むことができる。キットの情報資料は、その形態が限定されることはない。多くの場合に、情報資料、例えば説明書は、印刷物、例えば印刷されたテキスト、図面、および／または写真、例えばラベルまたは印刷シートで提供される。しかしながら、情報資料はまた、点字、コンピュータ読取り可能材料、録画、または音声記録など、他のフォーマットで提供することもできる。別の実施形態では、キットの情報資料は、本明細書に記載の方法における製剤および／またはその使用についての実質的な情報をキットの使用者が得ることができる、リンクまたはコンタクト情報、例えば物理アドレス、電子メールアドレス、ハイパーリンク、ウェブサイト、電話番号である。当然、情報資料は、フォーマットを任意に組み合わせて提供することもできる。
【０２１９】
一部の実施形態では、製剤の個々の成分を、１つの容器で提供することができる。あるいは、製剤の成分を別々に２つ以上の容器で、例えばオリゴヌクレオチド調製物に対して１つの容器、担体化合物に対して少なくとももう１つの容器で提供することが望ましいこともある。例えば、キットと共に提供される説明書に従って、異なる成分を合わせることができる。例えば、医薬組成物を調製し投与するために、本明細書に記載の方法に従って、成分を合わせることができる。
【０２２０】
製剤に加えて、キットの構成に、溶媒または緩衝液、安定剤または防腐剤、および／または本明細書に記載の症状または障害を治療するための第２の薬剤などの他の成分を含めることができる、あるいは、他の成分を、キットの中ではあるが、製剤とは異なる構成物または容器に含むことができる。このような実施形態では、キットは、製剤と他の成分を混合するための説明書、または他の成分と一緒にオリゴヌクレオチドを使用するための説明書を含むことができる。
【０２２１】
製剤は、任意の形態、例えば、液体、乾燥または凍結乾燥形態で提供することができる。製剤は、実質的に純粋および／または無菌であることが好ましい。製剤が溶液で提供される場合、溶液は好ましくは水溶液であり、無菌水溶液が好ましい。製剤が乾燥形態として提供される場合、再構成は、一般に、適切な溶媒の添加による。溶媒、例えば無菌の水または緩衝液は、任意でキットの中に提供することができる。
【０２２２】
一部の実施形態では、キットは、製剤および情報資料のために別々の容器、ディバイダー、またはコンパートメントを含有する。例えば、製剤は、瓶、バイアル、または注射器に含有することができ、情報資料は、プラスチックスリーブまたはパケットに含有することができる。他の実施形態では、キットの別々の要素は、単一の分割されていない容器内に含有される。例えば、製剤は、ラベルの形態で情報資料が貼付された瓶、バイアル、または注射器に含有される。
【０２２３】
一部の実施形態では、キットは、それぞれが１つまたは複数の用量単位形態の製剤を含有する個々の容器を複数個、例えば多数個含む。例えば、キットは、それぞれが１用量単位の製剤を含有する複数の注射器、アンプル、ホイルパケット、またはブリスターパックを含む。キットの容器は気密および／または耐水性とすることができる。
【０２２４】
定義
他に指定されないかまたは文脈から了解されない限り、以下の用語および語句は、以下に規定の意味を含む。他に明示的に指定されないかまたは文脈から明らかでないかぎり、下記の用語および語句は、それが属する技術分野でその用語または語句が取得した意味を除外しない。定義は、本明細書に記載された態様の特定の実施形態を説明する際に助けとなるものであり、特許請求の範囲によってのみ本発明の範囲は限定されるので、特許請求された発明を限定するように意図するものではない。さらに、文脈により別に要求されない限り、単数形の用語は複数を含み、複数形の用語は単数を含むものとする。
【０２２５】
本明細書に使用される用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」は、本発明に不可欠である組成物、方法、およびそれらの個々の成分に関して使用されるが、明記されない要素が、不可欠であるか否かにかかわらず包含されてもよい。
【０２２６】
本明細書に使用される用語「から本質的になる」は、所与の実施形態に必要な要素を指す。この用語は、本発明のその実施形態の基本的かつ新規または機能的特徴に実質的に影響を与えない追加の要素の存在を許容する。
【０２２７】
用語「からなる」は、本明細書に記載の組成物、方法、およびそれらの個々の成分を指し、実施形態のその記載に列挙されていないいずれの要素も除外される。
【０２２８】
操作例または他に指示されている場合以外は、本明細書に使用される成分量または反応条件を表現するすべての数は、すべての実例で、用語「約」で修飾されるものと理解されるべきである。用語「約」は、パーセントと関連して使用される場合、±１％を意味することができる。
【０２２９】
単数形の用語「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈上他に明確な指示がない限り、複数形の対象も含む。同様に、単語「または」は、文脈上他に明確な指示がない限り、「および」を含むように意図される。
【０２３０】
本明細書に記載のものと類似または等価な方法および材料も、本開示の実施または試験において使用することができるが、以下に適切な方法が記載される。用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」は、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」を意味する。略語「例えば（ｅ．ｇ．）」は、ラテン語のｅｘｅｍｐｌｉ  ｇｒａｔｉａに由来し、非限定例を示すために本明細書で使用される。したがって、略語「例えば（ｅ．ｇ．）」は、用語「例えば（ｆｏｒ  ｅｘａｍｐｌｅ）」と同義である。
【０２３１】
用語「減少する（ｄｅｃｒｅａｓｅ）」、「低下した（ｒｅｄｕｃｅｄ）」「低下（ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ）」、「減少する（ｄｅｃｒｅａｓｅ）」、または「阻害する（ｉｎｈｉｂｉｔ）」はすべて、統計的に有意な量の減少を意味するために、本明細書で一般に使用される。しかしながら、疑問を回避するために、「低下した」「低下」、「減少する」、または「阻害する」は、参照レベルと比較して少なくとも１０％の減少、例えば少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％、または１００％（例えば、参照試料と比較してレベルなし）以下の減少、または参照レベルと比較して１０〜１００％の間の任意の減少を意味する。
【０２３２】
用語「増加した（ｉｎｃｒｅａｓｅｄ）」、「増加する（ｉｎｃｒｅａｓｅ）」または「促進する（ｅｎｈａｎｃｅ）」または「活性化する（ａｃｔｉｖａｔｅ）」はすべて、統計的に有意な量の増加を一般に意味するために、本明細書で使用され、疑問を回避するために、用語「増加した（ｉｎｃｒｅａｓｅｄ）」、「増加する（ｉｎｃｒｅａｓｅ）」または「促進する（ｅｎｈａｎｃｅ）」または「活性化する（ａｃｔｉｖａｔｅ）」は、参照レベルと比較して少なくとも１０％の増加、例えば少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％、または１００％以下の増加、または参照レベルと比較して１０〜１００％の間の任意の増加、または少なくとも約２倍、または少なくとも約３倍、または少なくとも約４倍、または少なくとも約５倍、または少なくとも約１０倍の増加、または参照レベルと比較して２倍〜１０倍以上の間の任意の増加を意味する。
【０２３３】
本明細書に使用される用語「治療する」および「治療」は、対象に有効量の組成物を投与し、その結果、対象に、疾患の少なくとも１つの徴候の軽減または疾患の改善、例えば有益なまたは所望の臨床結果をもたらすことを指す。本発明の目的にとって、有益なまたは所望の臨床結果としては、これらに限定されないが、検出可能であるか否かにかかわらず、１つまたは複数の徴候の緩和、疾患の程度の減弱、疾患の安定した（例えば、悪化することがない）状態、疾患進行の遅延または減速、疾患状態の改善または緩和、および緩解（部分的でも全体的でも）が挙げられる。一部の実施形態では、治療するということは、治療を受けていない場合に予想される生存期間と比較して、延長した生存期間を指すこともある。したがって、当業者は、治療は疾患症状を改善することはできるが、その疾患の完全治癒ではない場合もあることを理解する。本明細書で使用される用語「治療」には、予防が含まれる。あるいは、疾患の進行が低下または停止する場合、治療は「有効」である。一部の実施形態では、用語「治療」はまた、治療を受けていない場合に予想される生存期間と比較して、延長した生存期間を意味することもできる。治療を必要とする対象には、疾患または症状を有するとすでに診断された対象および遺伝的感受性またはその疾患または症状に関与する他の因子（例えば、非限定例として、対象の体重、食事、および健康状態は、糖尿病を発症する可能性のある対象に関与しうる因子である）により疾患または症状を発症する可能性のある対象が含まれる。治療を必要とする対象には、内科的または外科的な配慮、看護、または管理を必要とする対象も含まれる。対象は、通常、病気もしくは負傷しているか、または集団の平均メンバーに比べて発病するリスクが高く、このような配慮、看護、または管理を必要としている。
【０２３４】
用語「統計的に有意な」または「有意に」は、統計的有意性を指し、参照レベルの上または下の２つの標準偏差（２ＳＤ）を一般に意味する。この用語は、差があるという統計的な証拠を指す。これは、帰無仮説が実際には真の場合に、帰無仮説を棄却する判断を下す確率として定義される。この判断は、多くの場合、ｐ値を使用して下される。
【０２３５】
用語「ナノスフェア」は、最大で３：１のアスペクト比を有するナノ粒子を意味する。用語「アスペクト比」は、対象物の最長軸と対象物の最短軸との比を意味し、ここで、軸は必ずしも直交していない。
【０２３６】
ナノ粒子の「最長寸法」という用語は、ナノ粒子の最長の直線経路を意味する。用語「直線経路」は、ナノ粒子内に含まれる、ナノ粒子の表面上の２点間の最短経路を意味する。例えば、らせん状のナノ粒子は、それが直線的に伸長しているならば、らせんの長さに相当する最長寸法を有するであろう。
【０２３７】
用語「ナノロッド」は、最長寸法が最大２００ｎｍであり、アスペクト比が３：１〜２０：１であるナノ粒子を意味する。
【０２３８】
用語「ナノプリズム」は、共通のエッジにより接続された少なくとも２つの非平行面を有するナノ粒子を意味する。
【０２３９】
ナノ粒子の「長さ」は、ナノ粒子の最長寸法を意味する。
【０２４０】
ナノ粒子の「幅」は、ナノ粒子の幅の平均を意味し、ナノ粒子の「直径」は、ナノ粒子の直径の平均を意味する。
【０２４１】
複数のナノ粒子の「平均」寸法は、複数のその寸法の平均を意味する。例えば、複数のナノスフェアの「平均直径」は、ナノスフェアの直径の平均を意味し、ここで、単一ナノスフェアの直径は、そのナノスフェアの直径の平均である。
【０２４２】
本明細書に使用される用語「薬学的に許容可能な塩」は、例えば無毒な有機酸または無機酸に由来する、化合物の従来からの無毒な塩または第四級アンモニウム塩を指す。これらの塩は、投与媒体もしくは投与剤形の製造工程においてインサイチューで、または遊離塩基もしくは酸の形態で精製された化合物を適切な有機酸もしくは無機酸と別個に反応させ、こうして形成された塩を次の精製段階で単離することによって、調製することができる。従来からの無毒な塩としては、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸に由来する塩；酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パルミチン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イソチオン酸などの有機酸から調製される塩が挙げられる。例えば、Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，"Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ"，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６６：１−１９（１９７７）を参照のこと。この文献の内容全体は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２４３】
本明細書に記載の態様の一部の実施形態では、代表的な塩としては、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、硫酸水素塩、リン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、コハク酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩、メシル酸塩、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩、およびラウリルスルホン酸塩等が挙げられる。
【０２４４】
本明細書で使用される「プロドラッグ」は、ある化学的または生理学的過程（例えば、酵素過程および代謝的加水分解）によって、活性化合物に変換されうる化合物を指す。こうして、用語「プロドラッグ」はまた、薬学的に許容可能な生物学的に活性な化合物の前駆体を指す。プロドラッグ、すなわちエステルは、対象に投与されたとき、不活性でありうるが、例えば、遊離カルボン酸または遊離ヒドロキシルへの加水分解によって、インビボで活性化合物に変換される。プロドラッグ化合物には、生物において、溶解性、組織適合性、または遅延放出性という利点があることが多い。用語「プロドラッグ」はまた、このようなプロドラッグが対象に投与された場合に、活性化合物をインビボで放出する、共有結合した任意の担体も含むことが意図される。活性化合物のプロドラッグは、その修飾がルーチン的な操作またはインビボのいずれかで、親活性化合物に切断されるように、活性化合物に存在する官能基を修飾することにより調製することができる。プロドラッグは、活性化合物のプロドラッグが対象に投与されたときに、開裂して遊離ヒドロキシ基、遊離アミノ基、または遊離メルカプト基をそれぞれ形成する任意の基に、ヒドロキシ基、アミノ基、またはメルカプト基が結合している化合物を含む。プロドラッグの例としては、これらに限定されないが、活性化合物中のアルコールの酢酸エステル、ギ酸エステルおよび安息香酸エステル誘導体、またはアミン官能基のアセトアミド、ホルムアミド、およびベンズアミド誘導体等が挙げられる。Ｈａｒｐｅｒ，"Ｄｒｕｇ  Ｌａｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ"ｉｎ  Ｊｕｃｋｅｒ，ｅｄ．Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ４：２２１−２９４（１９６２）；Ｍｏｒｏｚｏｗｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ，"Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｔｏ  Ｐｒｏｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ"ｉｎ  Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ  ｅｄ．Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ａｎａｌｏｇｓ，ＡＰＨＡ  Ａｃａｄ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．４０（１９７７）；Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，Ｔｈｅｏｒｙ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ，Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ，ｅｄ．，ＡＰＨＡ  Ａｃａｄ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．（１９８７）；Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ（１９８５）；Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．"Ｐｒｏｄｒｕｇ  ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｄｒｕｇ"ｉｎ  Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓｉｇｎ．５（４）：２６５−２８７（１９９９）；Ｐａｕｌｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ  ｉｎ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ：Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｄｒｕｇ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ．Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．２７：２３５−２５６；Ｍｉｚｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９８）"Ｔｈｅ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｅｓｔｅｒｓ  ａｓ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  Ｏｒａｌ  Ｄｅｌｉ��ｅｒｙ  ｏｆ  （３−Ｌａｃｔａｍ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，"Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．ｌｌ，：３４５−３６５；Ｇａｉｇｎａｕｌｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）"Ｄｅｓｉｇｎｉｎｇ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ  Ｉ．Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，"Ｐｒａｃｔ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．６７１−６９６；Ａｓｇｈａｒｎｅｊａｄ，"Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ  Ｏｒａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ"，ｉｎ  Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  Ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｇ．Ｌ．Ａｍｉｄｏｎ，Ｐ．Ｉ．Ｌｅｅ  ａｎｄ  Ｅ．Ｍ．Ｔｏｐｐ，Ｅｄｓ．，Ｍａｒｃｅｌｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，ｐ．１８５−２１８（２０００）；Ｂａｌａｎｔ  ｅｔ  ａｌ．，"Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｄｒｕｇ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｖｉａ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｒｏｕｔｅｓ  ｏｆ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ"，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．，１５（２）：１４３−５３（１９９０）；Ｂａｌｉｍａｎｅ  ａｎｄ  Ｓｉｎｋｏ，"Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｏｒａｌ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ"，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．，３９（１−３）：１８３−２０９（１９９９）；Ｂｒｏｗｎｅ，"Ｆｏｓｐｈｅｎｙｔｏｉｎ（Ｃｅｒｅｂｙｘ）"，Ｃｌｉｎ．Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０（１）：１−１２（１９９７）；Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，"Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｒｕｇｓ−ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｙ  ｔｏ  ｉｍｐｒｏｖｅ  ｔｈｅ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｄｒｕｇｓ"，Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍ．Ｃｈｅｍｉ  ８６（１）：１−３９（１９７９）；Ｂｕｎｄｇａａｒｄ  Ｈ．"Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｐｒｏｄｒｕｇ  ａｐｐｒｏａｃｈ"，Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  １７：１７９−９６（１９８７）；Ｂｕｎｄｇａａｒｄ  Ｈ．"Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ａｓ  ａ  ｍｅａｎｓ  ｔｏ  ｉｍｐｒｏｖｅ  ｔｈｅ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｄｒｕｇｓ"，Ａｒｆｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．８（１）：１−３８（１９９２）；Ｆｌｅｉｓｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．"Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｏｒａｌ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ：ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎｓ  ｏｖｅｒｃｏｍｅ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ"，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．１９（２）：１１５−１３０（１９９６）；Ｆｌｅｉｓｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．"Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｂｙ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｅｎｚｙｍｅ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ"，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．１１２（Ｄｒｕｇ  Ｅｎｚｙｍｅ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ，Ｐｔ．Ａ）：３６０−８１，（１９８５）；Ｆａｒｑｕｈａｒ  Ｄ，ｅｔ  ａｌ．，"Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ  Ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｐｈｏ��ｐｈａｔｅ−Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ"，Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，７２（３）：３２４−３２５（１９８３）；Ｆｒｅｅｍａｎ  Ｓ，ｅｔ  ａｌ．，"Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｐｈｏｓｐｈｏ  Ｇｒｏｕｐ：Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｄｉ（４−ａｃｅｔｏｘｙ−ｂｅｎｚｙｌ）  Ｍｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ  ｗｉｔｈ  Ｃａｒｂｏｘｙｅｓｔｅｒａｓｅ，"Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，８７５−８７７（１９９１）；Ｆｒｉｉｓ  ａｎｄ  Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，"Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｏｆ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓ  ａｎｄ  ｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅｓ：Ｎｏｖｅｌ  ｌｉｐｏｐｈｉｌｉｃ  ａｌｐｈａａｃｙｌｏｘｙａｌｋｙｌ  ｅｓｔｅｒ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ｏｆ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ−  ｏｒ  ｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｄｒｕｇｓ  ｍａｓｋｉｎｇ  ｔｈｅ  ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｃｈａｒｇｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅｓｅ  ｇｒｏｕｐｓ"，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．４：４９−５９（１９９６）；Ｇａｎｇｗａｒ  ｅｔ  ａｌ．，"Ｐｒｏ−ｄｒｕｇ，ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ"，Ｄｅｓ．Ｂｉｏｐｈａｒｍ．Ｐｒｏｐ．Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  Ａｎａｌｏｇｓ，［Ｓｙｍｐ．］  Ｍｅｅｔｉｎｇ  Ｄａｔｅ  １９７６，４０９−２１．（１９７７）；Ｎａｔｈｗａｎｉ  ａｎｄ  Ｗｏｏｄ，"Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎｓ：ａ  ｃｕｒｒｅｎｔ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｔｈｅｉｒ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｕｓｅ"，Ｄｒｕｇｓ  ４５（６）：８６６−９４（１９９３）；Ｓｉｎｈａｂａｂｕ  ａｎｄ  Ｔｈａｋｋｅｒ，"Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｏｆ  ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ａｇｅｎｔｓ"，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．１９（２）：２４１−２７３（１９９６）；Ｓｔｅｌｌａ  ｅｔ  ａｌ．，"Ｐｒｏｄｒｕｇｓ．Ｄｏ  ｔｈｅｙ  ｈａｖｅ  ａｄｖａｎｔａｇｅｓ  ｉｎ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｐｒａｃｔｉｃｅ？"，Ｄｒｕｇｓ  ２９（５）：４５５−７３（１９８５）；Ｔａｎ  ｅｔ  ａｌ．"Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｔｉ−ＨＩＶ  ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ  ａｎａｌｏｇｓ  ａｎｄ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ：Ａ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｔｈｅｉｒ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ  ａｎｄ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ"，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．３９（１−３）：１１７−１５１（１９９９）；Ｔａｙｌｏｒ，"Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｐａｓｓｉｖｅ  ｏｒａｌ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｖｉａ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ"，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．，１９（２）：１３１−１４８（１９９６）；Ｖａｌｅｎｔｉｎｏ  ａｎｄ  Ｂｏｒｃｈａｒｄｔ，"Ｐｒｏｄｒｕｇ  ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ  ｔｏ  ｅｎｈａｎｃｅ  ｔｈｅ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ"，Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ  ２（４）：１４８−１５５（１９９７）��Ｗｉｅｂｅ  ａｎｄ  Ｋｎａｕｓ，"Ｃｏｎｃｅｐｔｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ａｎｔｉ−ＨＩＶ  ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｉｎｇ  ｃｅｐｈａｌｉｃ  ＨＩＶ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ"，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．：３９（１−３）：６３−８０（１９９９）；Ｗａｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，"Ｐｒｏｄｒｕｇｓ"，Ｂｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃ．２８：４９７−５０７（１９８９）を参照のこと。これらの文献すべての内容全体は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２４５】
本明細書で使用される用語「アナログ」は、親化合物から、種々の有機基または水素原子が置換、交換、または欠失した化合物を指す。そのため、モノテルペノイドの一部は、モノテルペンのアナログ、またはある場合には、モノテルペンの誘導体を含む他のモノテルペノイドのアナログと考えることができる。アナログは、親化合物に構造上類似しているが、それが置換する元素と同じ原子価および周期表の族の単一元素だけ異なっているのでもよい。
【０２４６】
本明細書で使用される用語「誘導体」は、別のもの、すなわち、「親」化合物と呼ぶことができる「オリジナル」物質と構造上関連する化学物質を指す。「誘導体」は、１つまたは複数の工程で構造上関連する親化合物から作ることができる。語句「密接に関連する誘導体」は、その分子量が親化合物の分子量を５０％超えて上回らない誘導体を意味する。さらに、密接に関連する誘導体の全般的な物理的および化学的性質も、親化合物に類似している。
【０２４７】
本発明は、以下の番号付けられた項目のいずれか１つにより定義することができる。
１．複数のナノ粒子を含む、治療使用のための凝集物であって、所定の剪断応力に曝露された場合に該所定の剪断応力超で脱凝集する凝集物。
２．５０μｍ以下のサイズである、項目１に記載の凝集物。
３．ナノ粒子が、ポロキサマー、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ酸無水物、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリアミド、ポリウレタン、ポリエステルアミド、ポリオルトエステル、ポリジオキサノン、ポリアセタール、ポリケタール、ポリカーボネート、ポリオルトカーボネート、ポリジヒドロピラン、ポリホスファゼン、ポリヒドロキシブチレート、ポリヒドロキシバレレート、ポリアルキレンオキサレート、ポリアルキレンスクシネート、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（アミノ酸）、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリヒドロキシセルロース、ポリメチルメタクリレート、キチン、キトサン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ（グリセロールセバケート）（ＰＧＳ）、ゼラチン、コラーゲン、シルク、キトサン、アルギネート、セルロース、ポリ核酸、セルロースアセテート（セルロースジアセテートを含む）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリブチレン、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリアミド、ナイロン、ポリカーボネート、ポリスルフィド、ポリスルホン、ヒドロゲル（例えばアクリル）、ポリアクリロニトリル、ポリビニルアセテート、セルロースアセテートブチレート、ニトロセルロース、ウレタン／カーボネートのコポリマー、スチレン／マレイン酸のコポリマー、ポリ（エチレンイミン）、ヒアルロン（Ｈｙａｌｕｒｏｎ）、ヘパリン、アガロース、プルラン（Ｐｕｌｌｕｌａｎ）、ならびにそれらの任意の組合せを含むコポリマー、ターポリマー、およびコポリマーからなる群から選択されるポリマーを含む、項目１または２に記載の凝集物。
４．有機もしくは無機の小分子もしくは大分子、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、生体高分子、例えば、酵素、ペプチド、タンパク質、ペプチドアナログおよびその誘導体、ペプチドミメティック、脂質、炭水化物、核酸、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、遺伝子、制御領域および終結領域を含む遺伝子、ウイルスもしくはプラスミドＤＮＡなどの自己複製システム、一本鎖および二本鎖のｓｉＲＮＡ、ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ作用物質またはｉＲＮＡ作用物質）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣物、アプタマー、アンチｍｉｒ（ａｎｔｉｍｉｒ）、アンタゴｍｉｒ（ａｎｔａｇｏｍｉｒ）、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化因子、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ならびにデコイオリゴヌクレオチド）、核酸アナログおよび誘導体、細菌、植物、真菌、もしくは動物の細胞もしくは組織などの生体材料から作製された抽出物、天然もしくは合成の組成物、またはそれらの任意の組合せからなる群から選択される分子をさらに含む、項目１〜３のいずれか一項目に記載の凝集物。
５．分子がナノ粒子中に被包されているか、またはナノ粒子の表面上に吸収／吸着されている、項目１〜４のいずれか一項目に記載の凝集物。
６．分子がナノ粒子に共有結合している、項目１〜５のいずれか一項目に記載の凝集物。
７．分子が生物学的に活性である、項目４〜６のいずれか一項目に記載の凝集物。
８．生物活性が、生物アッセイにおける、刺激、阻害、調節、毒性、または致死の応答からなる群から選択される、項目７に記載の凝集物。
９．生物活性が、酵素活性の表出または調節、受容体の遮断、受容体の刺激、１つまたは複数の遺伝子の発現レベルの調節、細胞増殖の調節、細胞分裂の調節、細胞遊走の調節、細胞分化の調節、細胞アポトーシスの調節、細胞形態の調節、またはそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目７または８に記載の凝集物。
１０．分子が疎水性、親水性、または両親媒性である、項目５〜９のいずれか一項目に記載の凝集物。
１１．分子が、治療剤、またはそのアナログ、誘導体、プロドラッグ、もしくは薬学的に許容可能な塩である、項目４〜１０のいずれか一項目に記載の凝集物。
１２．治療剤が抗トロンビン剤および／または血栓溶解剤である、項目１１に記載の凝集物。
１３．抗トロンビン剤または血栓溶解剤が、抗凝血剤、凝血促進剤アンタゴニスト、抗血小板剤、血栓溶解剤、抗血栓溶解剤アンタゴニスト、線維素溶解酵素、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１２に記載の凝集物。
１４．治療剤が血栓形成剤である、項目１１に記載の凝集物。
１５．血栓形成剤が、血栓溶解剤アンタゴニスト、抗凝血剤アンタゴニスト、凝血促進酵素、凝血促進分子、およびそれらの任意の組合せから選択される、項目１４に記載の凝集物。
１６．血栓形成剤が、プロタミン、ビタミンＫ１、アミノカプロン酸（アミカー（ａｍｉｃａｒ））、トラネキサム酸（アムスタット（ａｍｓｔａｔ））、アナグレリド、アルガトロバン、シロスタゾール、ダルトロバン、デフィブロチド、エノキサパリン、フラキシパリン（ｆｒａｘｉｐａｒｉｎｅ）、インドブフェン、ラモパラン（ｌａｍｏｐａｒａｎ）、オザグレル、ピコタミド、プラフィブリド、テデルパリン（ｔｅｄｅｌｐａｒｉｎ）、チクロピジン、トリフルサル、コラーゲン、およびコラーゲンコーティング粒子、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１４または１５に記載の凝集物。
１７．治療剤が、組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、ストレプトキナーゼ（ＳＫ）、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（ｕＰＡ）、アルテプラーゼ（Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、レテプラーゼ（ｒ−ＰＡまたはｒｅｔａｖａｓｅ（登録商標）、Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｉｎｃ．としても知られている）、テネクテプラーゼ（ＴＮＫ（商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、Ｓｔｒｅｐｔａｓｅ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，ＬＰ）、ラノテプラーゼ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、モンテプラーゼ（エーザイ株式会社）、サルプラーゼ（ｒ−ｓｃｕ−ＰＡおよびｒｅｓｃｕｐａｓｅ（商標）、Ｇｒｕｎｅｎｔｈａｌ  ＧｍｂＨ，Ｃｏｒｐ．としても知られている）、スタフィロキナーゼ、およびアニソイル化されたプラスミノーゲン−ストレプトキナーゼ活性化因子複合体（ＡＰＳＡＣ、Ａｎｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ、およびＥｍｉｎａｓｅ（登録商標）、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｃｏｒｐ．としても知られている）、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される血栓溶解剤である、項目１１に記載の凝集物。
１８．治療剤が抗炎症剤である、項目１１に記載の凝集物。
１９．抗炎症剤が、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ−アスピリン、イブプロフェン、またはナプロキセンなど）、コルチコステロイド（プレドニゾンなど）、抗マラリア薬（ヒドロキシクロロキンなど）、メトトレキセート、スルファサラジン、レフルノミド、抗ＴＮＦ薬、シクロホスファミド、ミコフェノレート、デキサメタゾン、ロシグリタゾン、プレドニゾロン、コルチコステロン、ブデソニド、エストロゲン、エストラジオール、スルファサラジン、フェノフィブレート、プラバスタチン、シンバスタチン、ピオグリタゾン、アセチルサリチル酸、ミコフェノール酸、メサラミン、ヒドロキシ尿素、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、項目１８に記載の凝集物。
２０．治療剤が血管拡張剤である、項目１１に記載の凝集物。
２１．血管拡張剤が、アルファ−アドレナリン受容体アンタゴニスト（α−遮断薬）、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、ベータ２−アドレナリン受容体アゴニスト（β２−アゴニスト）、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、中枢作用性交感神経遮断剤、直接作用性血管拡張剤、エンドセリン受容体アンタゴニスト、神経節遮断薬、ニトロダイレーター、ホスホジエステラーゼ阻害剤、カリウムチャネル開口剤、レニン阻害剤、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目２１に記載の凝集物。
２２．血管拡張剤が、プラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、トリマゾシン、フェントラミン、フェノキシベンザミン、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、キナプリル、ラミプリル、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルメサルタン、テルミサルタン、バルサルタン、エピネフリン、ノルエピネフリン、ドーパミン、ドブタミン、イソプロテレノール、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、クロニジン、グアナベンズ、グアンファシン、α−メチルドーパ、ヒドララジン、ボセンタン、カンシル酸トリメタファン、二硝酸イソソルビド、一硝酸イソソルビド、ニトログリセリン、四硝酸エリトリチル、四硝酸ペンタエリスリトール、ニトロプルシドナトリウム、ミルリノン、イナムリノン（以前はアムリノン）、シロスタゾール、シルデナフィル、タダラフィル、ミノキシジル、アリスキレン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、項目２１または２２に記載の凝集物。
２３．治療剤が血管収縮剤である、項目１１に記載の凝集物。
２４．血管収縮剤が、アルファ−アドレナリン受容体アゴニスト、カテコールアミン、バソプレッシン、バソプレッシン受容体モジュレーター、およびカルシウムチャネルアゴニストからなる群から選択される、項目２３に記載の凝集物。
２５．血管収縮剤が、硫酸アルミニウム、アミデフリン、アンフェタミン、アンジオテンシン、抗ヒスタミン薬、アルギプレシン、次没食子酸ビスマス、カファミノール、カフェイン、カテコールアミン、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、ドーパミン、エフェドリン、エピネフリン、フェリプレシン、インダナゾリン、イソプロテレノール、リセルグ酸ジエチルアミン、リプレシン（ＬＶＰ）、リセルグ酸、メフェドロン、メトキサミン、メチルフェニデート、メチゾリン、メタラミノール、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、ノルエピネフリン、オクトドリン、オルニプレシン、オキシメタゾリン、フェニルエタノールアミン、フェニレフリン、フェニルイソプロピルアミン、フェニルプロパノールアミン、フェニプレッシン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、サイロシビン、テトラヒドララジン、テトラヒドロゾリン、塩酸テトラヒドロゾリン、硫酸亜鉛を含む塩酸テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシン、バソトシン、キシロメタゾリン、酸化亜鉛、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目２３または２４に記載の凝集物。
２６．治療剤が、抗悪性腫瘍剤、抗増殖剤、および／または有糸分裂阻害剤、および／または遊走阻害（ａｎｔｉ−ｍｉｇｒａｔｏｒｙ）剤である、項目１１に記載の凝集物。
２７．抗悪性腫瘍剤／抗増殖剤／有糸分裂阻害剤／遊走阻害剤が、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、シクロスポリン、シスプラチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エポチロン、メトトレキセート、アザチオプリン、アドリアマイシン、およびマイトマイシン；エンドスタチン、アンジオスタチンおよびチミジンキナーゼ阻害剤、クラドリビン、タキソール、トラピジル、ハロフジノン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、項目２６に記載の凝集物。
２８．治療剤が、アスピリン、ワルファリン（クマジン）、アセノクマロール、アンクロッド、アニシンジオン、ブロミンジオン、クロリンジオン、クメタロール、シクロクマロール、デキストラン、デキストラン硫酸ナトリウム、ジクマロール、ジフェナジオン、ビスクマ酢酸エチル、エチリデンジクマロール、フルインジオン、ヘパリン、ヒルジン、リアポレートナトリウム（ｌｙａｐｏｌａｔｅ  ｓｏｄｉｕｍ）、オキサジジオン、ペントサンポリサルフェート、フェニンジオン、フェンプロクモン、ホスビチン、ピコタミド、チオクロマロール、ジピリダモール（ペルサンチン）、スルフィンピラゾン（アンツラン）、チクロピジン（チクリド）、組織プラスミノーゲン活性化因子（アクチバーゼ）、プラスミン、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（アボキナーゼ（ａｂｂｏｋｉｎａｓｅ））、ストレプトキナーゼ（ストレプターゼ）、およびアニストレプラーゼ／ＡＰＳＡＣ（エミナーゼ（ｅｍｉｎａｓｅ））、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、項目１１〜２７のいずれか一項目に記載の凝集物。
２９．分子が、脱凝集していない凝集物と比較して、脱凝集した凝集物からより高速度および／またはより高量で放出される、項目４〜２８のいずれか一項目に記載の凝集物。
３０．放出速度が、脱凝集していない凝集物と比較して、脱凝集した凝集物では少なくとも１０％高い、項目２９に記載の凝集物。
３１．複数のナノ粒子の中で少なくとも１つのナノ粒子が、リガンドを含む、項目１〜３０のいずれか一項目に記載の凝集物。
３２．リガンドがターゲティングリガンドである、項目３１に記載の凝集物。
３３．リガンドが、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ペプチドミメティック、糖タンパク質、レクチン、ヌクレオシド、ヌクレオチド、核酸（例えば、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、遺伝子、制御領域および終結領域を含む遺伝子、ウイルスもしくはプラスミドＤＮＡなどの自己複製システム、一本鎖および二本鎖のｓｉＲＮＡ、ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ作用物質またはｉＲＮＡ作用物質）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣物、スーパーｍｉｒ（ｓｕｐｅｒｍｉｒ）、アプタマー、アンチｍｉｒ、アンチｍｉｒ、アンタゴｍｉｒ、Ｕ１アダプター、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化因子、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ならびにデコイオリゴヌクレオチド）、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、リポ多糖類、脂質、ビタミン、ステロイド、ホルモン、補因子、受容体、受容体リガンド、ならびにそれらのアナログおよび誘導体からなる群から選択される、項目３１または３２に記載の凝集物。
３４．リガンドが、ポリリシン（ＰＬＬ）、ポリＬ−アスパラギン酸、ポリＬ−グルタミン酸、スチレン−無水マレイン酸コポリマー、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）コポリマー、ジビニルエーテル−無水マレイン酸コポリマー、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミドコポリマー（ＨＭＰＡ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリウレタン、ポリ（２−エチルアクリル酸）、Ｎ−イソプロピルアクリルアミドポリマー、ポリホスファジン（ｐｏｌｙｐｈｏｓｐｈａｚｉｎｅ）、ポリエチレンイミン、スペルミン、スペルミジン、ポリアミン、偽ペプチド−ポリアミン、ペプチドミメティックポリアミン、デンドリマーポリアミン、アルギニン、アミジン、プロタミン、チロトロピン、メラノトロピン、レクチン、サーファクタントタンパク質Ａ、ムチン、トランスフェリン、ビスホスホネート、ポリグルタメート、ポリアスパルタート、アプタマー、アシアロフェツイン、ヒアルロナン、プロコラーゲン、インスリン、トランスフェリン、アルブミン、アクリジン、クロス−ソラレン（ｃｒｏｓｓ−ｐｓｏｒａｌｅｎ）、マイトマイシンＣ、ＴＰＰＣ４、テキサフィリン、サフィリン、多環式芳香族炭化水素（例えば、フェナジン、ジヒドロフェナジン）、胆汁酸、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、１−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、１，３−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、１，３−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ３−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ３−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチルまたはフェノキサジン）、ＲＧＤペプチド、放射標識マーカー、ハプテン、ナプロキセン、アスピリン、ジニトロフェニル、ＨＲＰ、ＡＰ、レクチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＢ、葉酸、Ｂ１２、リボフラビン、ビオチン、ピリドキサール、タキソン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、サイトカラシン、ノコダゾール、ジャプラキノリド（ｊａｐｌａｋｉｎｏｌｉｄｅ）、ラトランクリンＡ、ファロイジン、スウィンホリドＡ、インダノシン、ミオセルビン（ｍｙｏｓｅｒｖｉｎ）、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦアルファ）、インターロイキン−１ベータ、ガンマインターフェロン、ＧａｌＮＡｃ、ガラクトース、マンノース、マンノース−６Ｐ、ＧａｌＮＡｃクラスター、マンノースクラスター、ガラクトースクラスターなどの糖クラスター、アプタマー、インテグリン受容体リガンド、ケモカイン受容体リガンド、セロトニン受容体リガンド、ＰＳＭＡ、エンドセリン、ＧＣＰＩＩ、ソマトスタチン、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目３１〜３３のいずれか一項目に記載の凝集物。
３５．リガンドが、
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、セクロピン、リコトキシン（ｌｙｃｏｔｏｘｉｎ）、パラダキシン（ｐａｒａｄａｘｉｎ）、ブホリン（ｂｕｆｏｒｉｎ）、ＣＰＦ、ボンビニン様ペプチド（ＢＬＰ）、カテリシジン、セラトトキシン（ｃｅｒａｔｏｔｏｘｉｎ）、Ｓ．クラバ（Ｓ．Ｃｌａｖａ）ペプチド、ヌタウナギ腸内抗微生物ペプチド（ｈａｇｆｉｓｈ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ）（ＨＦＩＡＰ）、マガイニン、ブレビニン−２（ｂｒｅｖｉｎｉｎ−２）、デルマセプチン、メリチン、プルロシジン（ｐｌｅｕｒｏｃｉｄｉｎ）、Ｈ２Ａペプチド、ゼノパスペプチド、エスクレンチン−１、カエリン（ｃａｅｒｉｎ）ならびにそれらの任意のアナログおよび誘導体からなる群から選択されるペプチドである、項目３１〜３４のいずれか一項目に記載の凝集物。
３６．リガンドが、対照と比較して、脱凝集速度を少なくとも１０％低下させる、項目３１〜３５のいずれか一項目に記載の凝集物。
３７．非狭窄領域と比較して、狭窄領域において少なくとも１０％脱凝集する、項目１〜３６のいずれか一項目に記載の凝集物。
３８．狭窄領域の剪断応力が、非狭窄領域と比較して、少なくとも１倍高い、項目３７に記載の凝集物。
３９．非狭窄領域の剪断応力が、正常な生理学的剪断応力である、項目３７または３８に記載の凝集物。
４０．狭窄領域の剪断応力が、少なくとも７０ｄｙｎ／ｃｍ２である、項目３７〜３９のいずれか一項目に記載の凝集物。
４１．球、円筒、盤、長方形、立方体、または不規則形状である、項目１〜４０のいずれか一項目に記載の凝集物。
４２．ナノ粒子が、球、円筒、盤、長方形、立方体、または不規則形状である、項目１〜４１のいずれか一項目に記載の凝集物。
４３．ナノ粒子の表面が改変されて、２つ以上のナノ粒子間の分子間静電的相互作用、水素結合相互作用、双極子相互作用、親水性相互作用、疎水性相互作用、ファンデルワールス力、およびそれらの任意の組合せが調節される、項目１〜４２のいずれか一項目に記載の凝集物。
４４．所定の剪断応力が、少なくとも７０ｄｙｎ／ｃｍ２である、項目１〜４３のいずれか一項目に記載の凝集物。
４５．１μｍ〜３μｍのサイズである、項目１〜４４のいずれか一項目に記載の凝集物。
４６．分子がイメージング剤である、項目４に記載の凝集物。
４７．イメージング剤が、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）色素（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＣｏｒｐ．；Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆ）；フルオレセイン；フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）；Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ（商標）；テトラローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）、５−カルボキシフルオレセイン（ＦＡＭ）；２'７'−ジメトキシ−４'５'−ジクロロ−６−カルボキシフルオレセイン（ＪＯＥ）；テトラクロロフルオレセイン（ＴＥＴ）；６−カルボキシローダミン（Ｒ６Ｇ）；Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ'−テトラメチル−６−カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）；６−カルボキシ−Ｘ−ローダミン（ＲＯＸ）；１−ジメチルアミノ−ナフチル−５−スルホネート、１−アニリノ−８−ナフタレンスルホネート、２−ｐ−トルイジニル−６−ナフタレンスルホネート、および５−（２'−アミノエチル）アミノナフタレン−１−スルホン酸（ＥＤＡＮＳ）を含むナフチルアミノ化合物など、アルファまたはベータ位にアミノ基を有するナフチルアミン色素；３−フェニル−７−イソシアナトクマリンなどのクマリン；９−イソチオシアナトアクリジンおよびアクリジンオレンジなどのアクリジン；Ｎ−（ｐ（２−ベンゾオキサゾリル）フェニル）マレイミド；Ｃｙ２、インドジカルボシアニン３（Ｃｙ３）、インドジカルボシアニン５（Ｃｙ５）、インドジカルボシアニン５．５（Ｃｙ５．５）、３−（−カルボキシ−ペンチル）−３'エチル−５，５'−ジメチルオキサカルボシアニン（ＣｙＡ）などのシアニン；１Ｈ，５Ｈ，１１Ｈ，１５Ｈ−キサンテノ［２，３，４−ｉｊ：５，６，７−ｉ'ｊ'］ジキノリジン−１８−イウム、９−［２（または４）−［［［６−［２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−６−オキソヘキシル］アミノ］スルホニル］−４（または２）−スルホフェニル］−２，３，６，７，１２，１３，１６，１７オクタヒドロ−分子内塩（ＴＲまたはテキサスレッド）；ＢＯＤＩＰＹ（商標）色素；ベンゾオキサジアゾール；スチルベン；ピレン；緑色蛍光タンパク質、増強緑色蛍光タンパク質（ＥＧＰＦ）、不安定化ＥＧＦＰ、赤色蛍光タンパク質（例えばＤｓＲｅｄ）、ｄｓＲＥｄ変異体のｍＲＦＰｍａｒｓおよびｍＲＦＰｒｕｂｙ、黄色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、青色蛍光タンパク質、濃青色（ｃｅｒｕｌｅａｎ）蛍光タンパク質などの蛍光タンパク質、およびそれらの変異体；９９ｍＴｃ、９５Ｔｃ、１１１Ｉｎ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、Ｇａ、６８Ｇａ、１５３Ｇｄ、１８Ｆ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、４７Ｓｃ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、８９Ｓｒ、８６Ｙ、８７Ｙ、９０Ｙ、１０５Ｒｈ、１１１Ａｇ、１１１Ｉｎ、１１７ｍＳｎ、１４９Ｐｍ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉなどの放射性同位元素；Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、およびＭｎ（ＩＩ）などの常磁性金属イオン；Ｒｅ、Ｓｍ、Ｈｏ、Ｌｕ、Ｐｍ、Ｙ、Ｂｉ、Ｐｄ、Ｇｄ、Ｌａ、Ａｕ、Ａｕ、Ｙｂ、Ｄｙ、Ｃｕ、Ｒｈ、Ａｇ、およびＩｒなどのＸ線吸収体；ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目４６に記載の凝集物。
４８．ナノ粒子が、凝集物のインビボ寿命を増加させる少なくとも１つの部分を含む、項目１〜４７のいずれか一項目に記載の凝集物。
４９．少なくとも１つの部分がポリエチレングリコールである、項目４８に記載の凝集物。
５０．項目１〜４９のいずれか一項目に記載の凝集物を含む医薬組成物。
５１．対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変を治療する方法であって、それを必要とする対象に項目１〜５０のいずれか一項目に記載の凝集物または医薬組成物を投与することを含む方法。
５２．対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変をイメージングする方法であって、それを必要とする対象に項目１〜５０のいずれか一項目に記載の凝集物または医薬組成物を投与することを含む方法。
５３．狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、間欠性跛行（末梢動脈狭窄症）、アンギナ（冠状動脈狭窄症）、頚動脈狭窄症、大動脈弁狭窄症、ボタン穴狭窄症、石灰化結節性狭窄症、冠状動脈口狭窄症、二重大動脈狭窄症、魚口僧帽弁狭窄症、特発性肥厚性大動脈弁下部狭窄症、漏斗部狭窄症、僧帽弁狭窄症、筋性大動脈弁下部狭窄症、肺動脈弁狭窄症、肺動脈塞栓症、肺高血圧症、大動脈弁下部狭窄症、弁下部狭窄症、大動脈弁上部狭窄症、三尖弁狭窄症、腎動脈狭窄症、幽門狭窄症（胃の流出閉塞）、閉塞性黄疸（胆管狭窄症）、腸閉塞症、包茎、水頭症、狭窄性腱鞘炎、脊椎管狭窄症、声門下狭窄症（ＳＧＳ）、高血圧症、鎌状赤血球貧血症、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目５１または５２に記載の方法。
５４．狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、外傷または損傷、アテローム性動脈硬化症、先天性欠損、糖尿病、医原病、感染、炎症、虚血、腫瘍、血管攣縮、冠血管攣縮、レイノー現象、脳卒中、血液凝固、モヤモヤ病、高安病、結節性多発動脈炎、播種状エリトマトーデス、関節リウマチ、脊椎腫瘍、骨ページェット病、フッ素症、血液透析、鎌状赤血球貧血症、ならびにそれらの任意の組合せに起因する、項目５１〜５３のいずれか一項目に記載の方法。
５５．対象の内出血を治療する方法であって、それを必要とする対象に項目１〜５０のいずれか一項目に記載の凝集物または医薬組成物を投与することを含む方法。
５６．内出血が、外傷、高血圧による血管破裂、感染（例えば、エボラ、マールブルク）、癌、壊血病、肝細胞腫、自己免疫性血小板減少症、子宮外妊娠、悪性低温症、卵巣嚢胞、肝癌、ビタミンＫ欠乏症、血友病、薬物の副作用の結果である、項目５５に記載の方法。
５７．前記投与が、注射、点滴、点眼、吸入、または経口摂取によるものである、項目５１〜５６のいずれか一項目に記載の方法。
５８．マイクロサイズの凝集物を調製するための方法であって、
（ｉ）複数のナノ粒子を得ること；
（ｉｉ）前記複数のナノ粒子をミクロンサイズの粒子の中に凝集させること；および
（ｉｉｉ）任意で、所望のサイズの粒子を選択すること
を含む方法。
５９．前記複数のナノ粒子を得ることが、前記複数のナノ粒子を形成させることまたは作製することを含む、項目５８に記載の方法。
６０．ナノ粒子が、ポロキサマー、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ酸無水物、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリアミド、ポリウレタン、ポリエステルアミド、ポリオルトエステル、ポリジオキサノン、ポリアセタール、ポリケタール、ポリカーボネート、ポリオルトカーボネート、ポリジヒドロピラン、ポリホスファゼン、ポリヒドロキシブチレート、ポリヒドロキシバレレート、ポリアルキレンオキサレート、ポリアルキレンスクシネート、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（アミノ酸）、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリヒドロキシセルロース、ポリメチルメタクリレート、キチン、キトサン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ（グリセロールセバケート）（ＰＧＳ）、ゼラチン、コラーゲン、シルク、キトサン、アルギネート、セルロース、ポリ核酸、セルロースアセテート（セルロースジアセテートを含む）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリブチレン、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリアミド、ナイロン、ポリカーボネート、ポリスルフィド、ポリスルホン、ヒドロゲル（例えばアクリル）、ポリアクリロニトリル、ポリビニルアセテート、セルロースアセテートブチレート、ニトロセルロース、ウレタン／カーボネートのコポリマー、スチレン／マレイン酸のコポリマー、ポリ（エチレンイミン）、ヒアルロン、ヘパリン、アガロース、プルラン、ならびにそれらの任意の組合せを含むコポリマー、ターポリマー、およびコポリマーからなる群から選択されるポリマーを含む、項目５８または５９に記載の方法。
６１．前記所望の凝集物サイズが５０μｍ以下である、項目５８〜６０のいずれか一項目に記載の方法。
６２．前記マイクロサイズの粒子が、有機もしくは無機の小分子もしくは大分子、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、生体高分子、例えば、ペプチド、タンパク質、ペプチドアナログおよびその誘導体、ペプチドミメティック、脂質、炭水化物、核酸、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、遺伝子、制御領域および終結領域を含む遺伝子、ウイルスもしくはプラスミドＤＮＡなどの自己複製システム、一本鎖および二本鎖のｓｉＲＮＡ、ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ作用物質またはｉＲＮＡ作用物質）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣物、アプタマー、アンチｍｉｒ、アンタゴｍｉｒ、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化因子、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ならびにデコイオリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、核酸アナログおよび誘導体、細菌、植物、真菌、もしくは動物の細胞もしくは組織などの生体材料から作製された抽出物、天然もしくは合成の組成物、ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される分子をさらに含む、項目５８〜６１のいずれか一項目に記載の方法。
６３．分子がナノ粒子に被包されているか、またはナノ粒子の表面上に吸収／吸着されている、項目６１に記載の方法。
６４．分子がナノ粒子に共有結合している、項目６３または６４のいずれか一項目に記載の凝集物。
６５．分子が生物活性を有する、項目６１〜６４のいずれか一項目に記載の方法。
６６．生物活性が、生物アッセイにおける、酵素、刺激、阻害、調節、毒性、または致死の応答からなる群から選択される、項目６５に記載の方法。
６７．生物活性が、酵素活性の表出または調節、受容体の遮断、受容体の刺激、１つまたは複数の遺伝子の発現レベルの調節、細胞増殖の調節、細胞分裂の調節、細胞分化の調節、細胞運動性の調節、細胞形態の調節、またはそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目６５または６６のいずれか一項目に記載の方法。
６８．分子が疎水性、親水性、または両親媒性である、項目６２〜６７のいずれか一項目に記載の方法。
６９．分子が、治療剤、またはそのアナログ、誘導体、プロドラッグ、もしくは薬学的に許容可能な塩である、項目６２〜６８のいずれか一項目に記載の方法。
７０．治療剤が抗トロンビン剤および／または血栓溶解剤もしくは線維素溶解剤である、項目６９に記載の方法。
７１．抗トロンビン剤、血栓溶解剤、または線維素溶解剤が、抗凝血剤、凝血促進剤アンタゴニスト、抗血小板剤、血栓溶解剤、抗血栓溶解剤アンタゴニスト、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目７０に記載の方法。
７２．治療剤が血栓形成剤である、項目６９に記載の方法。
７３．血栓形成剤が、血栓溶解剤アンタゴニスト、抗凝血剤アンタゴニスト、凝血促進酵素、凝血促進分子、およびそれらの任意の組合せから選択される、項目７２に記載の方法。
７４．血栓形成剤が、プロタミン、ビタミンＫ１、アミノカプロン酸（アミカー）、トラネキサム酸（アムスタット）、アナグレリド、アルガトロバン、シロスタゾール、ダルトロバン、デフィブロチド、エノキサパリン、フラキシパリン、インドブフェン、ラモパラン、オザグレル、ピコタミド、プラフィブリド、テデルパリン、チクロピジン、トリフルサル、コラーゲン、およびコラーゲンコーティング粒子、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目７２または７３に記載の方法。
７５．治療剤が、組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、ストレプトキナーゼ（ＳＫ）、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（ｕＰＡ）、アルテプラーゼ（Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、レテプラーゼ（ｒ−ＰＡまたはｒｅｔａｖａｓｅ（登録商標）、Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｉｎｃ．としても知られている）、テネクテプラーゼ（ＴＮＫ（商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、Ｓｔｒｅｐｔａｓｅ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，ＬＰ）、ラノテプラーゼ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、モンテプラーゼ（エーザイ株式会社）、サルプラーゼ（ｒ−ｓｃｕ−ＰＡおよびｒｅｓｃｕｐａｓｅ（商標）、Ｇｒｕｎｅｎｔｈａｌ  ＧｍｂＨ，Ｃｏｒｐ．としても知られている）、スタフィロキナーゼ、およびアニソイル化されたプラスミノーゲン−ストレプトキナーゼ活性化因子複合体（ＡＰＳＡＣ、Ａｎｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ、およびＥｍｉｎａｓｅ（登録商標）、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｃｏｒｐ．としても知られている）、ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される血栓溶解剤である、項目６９に記載の方法。
７６．治療剤が抗炎症剤である、項目６９に記載の凝集物。
７７．抗炎症剤が、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、コルチコステロイド（プレドニゾンなど）、抗マラリア薬（ヒドロキシクロロキンなど）、メトトレキセート、スルファサラジン、レフルノミド、抗ＴＮＦ薬、シクロホスファミド、ミコフェノレート、デキサメタゾン、ロシグリタゾン、プレドニゾロン、コルチコステロン、ブデソニド、エストロゲン、エストラジオール、スルファサラジン、フェノフィブレート、プラバスタチン、シンバスタチン、ピオグリタゾン、アセチルサリチル酸、ミコフェノール酸、メサラミン、ヒドロキシ尿素、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、項目７６に記載の凝集物。
７８．治療剤が血管拡張剤である、項目６９に記載の凝集物。
７９．血管拡張剤が、アルファ−アドレナリン受容体アンタゴニスト（α−遮断薬）、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、ベータ２−アドレナリン受容体アゴニスト（β２−アゴニスト）、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、中枢作用性交感神経遮断剤、直接作用性血管拡張剤、エンドセリン受容体アンタゴニスト、神経節遮断薬、ニトロダイレーター、ホスホジエステラーゼ阻害剤、カリウムチャネル開口剤、レニン阻害剤、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目７８に記載の凝集物。
８０．血管拡張剤が、プラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、トリマゾシン、フェントラミン、フェノキシベンザミン、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、キナプリル、ラミプリル、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルメサルタン、テルミサルタン、バルサルタン、エピネフリン、ノルエピネフリン、ドーパミン、ドブタミン、イソプロテレノール、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、クロニジン、グアナベンズ、グアンファシン、α−メチルドーパ、ヒドララジン、ボセンタン、カンシル酸トリメタファン、二硝酸イソソルビド、一硝酸イソソルビド、ニトログリセリン、四硝酸エリトリチル、四硝酸ペンタエリスリトール、ニトロプルシドナトリウム、ミルリノン、イナムリノン（以前はアムリノン）、シロスタゾール、シルデナフィル、タダラフィル、ミノキシジル、アリスキレン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、項目７８または７９に記載の凝集物。
８１．治療剤が、抗悪性腫瘍剤、抗増殖剤、および／または有糸分裂阻害剤、および／または遊走阻害剤である、項目６９に記載の凝集物。
８２．抗悪性腫瘍剤／抗増殖剤／有糸分裂阻害剤／遊走阻害剤が、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、シクロスポリン、シスプラチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エポチロン、メトトレキセート、アザチオプリン、アドリアマイシン、およびマイトマイシン；エンドスタチン、アンジオスタチンおよびチミジンキナーゼ阻害剤、クラドリビン、タキソール、トラピジル、ハロフジノン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、項目８１に記載の凝集物。
８３．治療剤が、アスピリン、ワルファリン（クマジン）、アセノクマロール、アンクロッド、アニシンジオン、ブロミンジオン、クロリンジオン、クメタロール、シクロクマロール、デキストラン、デキストラン硫酸ナトリウム、ジクマロール、ジフェナジオン、ビスクマ酢酸エチル、エチリデンジクマロール、フルインジオン、ヘパリン、ヒルジン、リアポレートナトリウム、オキサジジオン、ペントサンポリサルフェート、フェニンジオン、フェンプロクモン、ホスビチン、ピコタミド、チオクロマロール、ジピリダモール（ペルサンチン）、スルフィンピラゾン（アンツラン）、チクロピジン（チクリド）、組織プラスミノーゲン活性化因子（アクチバーゼ）、プラスミン、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（アボキナーゼ）、ストレプトキナーゼ（ストレプターゼ）、およびアニストレプラーゼ／ＡＰＳＡＣ（エミナーゼ）、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、項目６９〜８２のいずれか一項目に記載の方法。
８４．分子が、脱凝集していない凝集物と比較して、脱凝集した凝集物からより高速度および／またはより高量で放出される、項目６２〜８３のいずれか一項目に記載の方法。
８５．放出速度が、脱凝集していない凝集物と比較して、脱凝集した凝集物では少なくとも１０％高い、項目８４に記載の方法。
８６．複数のナノ粒子の中で少なくとも１つのナノ粒子が、リガンドを含む、項目５８〜８６のいずれか一項目に記載の方法。
８７．リガンドがターゲティングリガンドである、項目８６に記載の方法。
８８．リガンドが、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ペプチドミメティック、糖タンパク質、レクチン、ヌクレオシド、ヌクレオチド、核酸、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、リポ多糖類、ビタミン、ステロイド、ホルモン、補因子、受容体、受容体リガンド、ならびにそれらのアナログおよび誘導体からなる群から選択される、項目８６または８７に記載の方法。
８９．リガンドが、ポリリシン（ＰＬＬ）、ポリＬ−アスパラギン酸、ポリＬ−グルタミン酸、スチレン−無水マレイン酸コポリマー、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）コポリマー、ジビニルエーテル−無水マレイン酸コポリマー、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミドコポリマー（ＨＭＰＡ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリウレタン、ポリ（２−エチルアクリル酸）、Ｎ−イソプロピルアクリルアミドポリマー、ポリホスファジン、ポリエチレンイミン、スペルミン、スペルミジン、ポリアミン、偽ペプチド−ポリアミン、ペプチドミメティックポリアミン、デンドリマーポリアミン、アルギニン、アミジン、プロタミン、チロトロピン、メラノトロピン、レクチン、サーファクタントタンパク質Ａ、ムチン、トランスフェリン、ビスホスホネート、ポリグルタメート、ポリアスパルタート、アプタマー、アシアロフェツイン、ヒアルロナン、プロコラーゲン、インスリン、トランスフェリン、アルブミン、アクリジン、クロス−ソラレン、マイトマイシンＣ、ＴＰＰＣ４、テキサフィリン、サフィリン、多環式芳香族炭化水素（例えば、フェナジン、ジヒドロフェナジン）、胆汁酸、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、１−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、１，３−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、１，３−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ３−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ３−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチルまたはフェノキサジン）、ＲＧＤペプチド、放射標識マーカー、ハプテン、ナプロキセン、アスピリン、ジニトロフェニル、ＨＲＰ、ＡＰ、レクチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＢ、葉酸、Ｂ１２、リボフラビン、ビオチン、ピリドキサール、タキソン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、サイトカラシン、ノコダゾール、ジャプラキノリド、ラトランクリンＡ、ファロイジン、スウィンホリドＡ、インダノシン、ミオセルビン、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦアルファ）、インターロイキン−１ベータ、ガンマインターフェロン、ＧａｌＮＡｃ、ガラクトース、マンノース、マンノース−６Ｐ、ＧａｌＮＡｃクラスター、マンノースクラスター、ガラクトースクラスターなどの糖クラスター、アプタマー、インテグリン受容体リガンド、ケモカイン受容体リガンド、セロトニン受容体リガンド、ＰＳＭＡ、エンドセリン、ＧＣＰＩＩ、ソマトスタチン、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目８６〜８８のいずれか一項目に記載の方法。
９０．リガンドが、
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、セクロピン、リコトキシン（ｌｙｃｏｔｏｘｉｎ）、パラダキシン（ｐａｒａｄａｘｉｎ）、ブホリン（ｂｕｆｏｒｉｎ）、ＣＰＦ、ボンビニン様ペプチド（ＢＬＰ）、カテリシジン、セラトトキシン（ｃｅｒａｔｏｔｏｘｉｎ）、Ｓ．クラバ（Ｓ．Ｃｌａｖａ）ペプチド、ヌタウナギ腸内抗微生物ペプチド（ｈａｇｆｉｓｈ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｐｅｐｔｉｄｅ）（ＨＦＩＡＰ）、マガイニン、ブレビニン−２（ｂｒｅｖｉｎｉｎ−２）、デルマセプチン、メリチン、プルロシジン（ｐｌｅｕｒｏｃｉｄｉｎ）、Ｈ２Ａペプチド、ゼノパスペプチド、エスクレンチン−１、カエリン（ｃａｅｒｉｎ）ならびにそれらの任意のアナログおよび誘導体からなる群から選択されるペプチドである、項目８６〜８９のいずれか一項目に記載の方法。
９１．リガンドが、対照と比較して、脱凝集速度を少なくとも１０％低下させる、項目８６〜９０のいずれか一項目に記載の方法。
９２．凝集物が、非狭窄領域と比較して、狭窄領域において少なくとも１０％脱凝集する、項目５８〜９１のいずれか一項目に記載の方法。
９３．狭窄領域の剪断応力が、非狭窄領域と比較して、少なくとも１倍高い、項目９２に記載の方法。
９４．非狭窄領域の剪断応力が、正常な生理学的剪断応力である、項目９２または９３に記載の方法。
９５．狭窄領域の剪断応力が、少なくとも７０ｄｙｎ／ｃｍ２である、項目９２〜９４のいずれか一項目に記載の方法。
９６．凝集物が、球、円筒、盤、長方形、立方体、または不規則形状である、項目５８〜９５のいずれか一項目に記載の凝集物。
９７．ナノ粒子が、球、円筒、盤、長方形、立方体、または不規則形状である、項目５８〜９６のいずれか一項目に記載の方法。
９８．ナノ粒子の表面が改変されて、２つ以上のナノ粒子間の分子間静電的相互作用、水素結合相互作用、双極子相互作用、親水性相互作用、疎水性相互作用、ファンデルワールス力、およびそれらの任意の組合せが調節される、項目５８〜９７のいずれか一項目に記載の方法。
９９．凝集物のサイズが１μｍ〜３μｍである、項目５８〜９９のいずれか一項目に記載の方法。
１００．分子がイメージング剤である、項目６２に記載の方法。
１０１．イメージング剤が、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）色素（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＣｏｒｐ．；Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆ）；フルオレセイン；フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）；Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ（商標）；テトラローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）、５−カルボキシフルオレセイン（ＦＡＭ）；２'７'−ジメトキシ−４'５'−ジクロロ−６−カルボキシフルオレセイン（ＪＯＥ）；テトラクロロフルオレセイン（ＴＥＴ）；６−カルボキシローダミン（Ｒ６Ｇ）；Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ'−テトラメチル−６−カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）；６−カルボキシ−Ｘ−ローダミン（ＲＯＸ）；１−ジメチルアミノ−ナフチル−５−スルホネート、１−アニリノ−８−ナフタレンスルホネート、２−ｐ−トルイジニル−６−ナフタレンスルホネート、および５−（２'−アミノエチル）アミノナフタレン−１−スルホン酸（ＥＤＡＮＳ）を含むナフチルアミノ化合物など、アルファまたはベータ位にアミノ基を有するナフチルアミン色素；３−フェニル−７−イソシアナトクマリンなどのクマリン；９−イソチオシアナトアクリジンおよびアクリジンオレンジなどのアクリジン；Ｎ−（ｐ（２−ベンゾオキサゾリル）フェニル）マレイミド；Ｃｙ２、インドジカルボシアニン３（Ｃｙ３）、インドジカルボシアニン５（Ｃｙ５）、インドジカルボシアニン５．５（Ｃｙ５．５）、３−（−カルボキシ−ペンチル）−３'エチル−５，５'−ジメチルオキサカルボシアニン（ＣｙＡ）などのシアニン；１Ｈ，５Ｈ，１１Ｈ，１５Ｈ−キサンテノ［２，３，４−ｉｊ：５，６，７−ｉ'ｊ'］ジキノリジン−１８−イウム、９−［２（または４）−［［［６−［２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−６−オキソヘキシル］アミノ］スルホニル］−４（または２）−スルホフェニル］−２，３，６，７，１２，１３，１６，１７オクタヒドロ−分子内塩（ＴＲまたはテキサスレッド）；ＢＯＤＩＰＹ（商標）色素；ベンゾオキサジアゾール；スチルベン；ピレン；緑色蛍光タンパク質、増強緑色蛍光タンパク質（ＥＧＦＰ）、不安定化ＥＧＦＰ、赤色蛍光タンパク質（例えばＤｓＲｅｄ）、ｄｓＲＥｄ変異体のｍＲＦＰｍａｒｓおよびｍＲＦＰｒｕｂｙ、黄色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、青色蛍光タンパク質、濃青色蛍光タンパク質などの蛍光タンパク質、およびそれらの変異体；９９ｍＴｃ、９５Ｔｃ、１１１Ｉｎ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、Ｇａ、６８Ｇａ、１５３Ｇｄ、１８Ｆ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、４７Ｓｃ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、８９Ｓｒ、８６Ｙ、８７Ｙ、９０Ｙ、１０５Ｒｈ、１１１Ａｇ、１１１Ｉｎ、１１７ｍＳｎ、１４９Ｐｍ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉなどの放射性同位元素、Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、およびＭｎ（ＩＩ）などの常磁性金属イオン；Ｒｅ、Ｓｍ、Ｈｏ、Ｌｕ、Ｐｍ、Ｙ、Ｂｉ、Ｐｄ、Ｇｄ、Ｌａ、Ａｕ、Ａｕ、Ｙｂ、Ｄｙ、Ｃｕ、Ｒｈ、Ａｇ、およびＩｒなどのＸ線吸収体；ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１００に記載の方法。
１０２．ナノ粒子が、凝集物のインビボ寿命を増加させる少なくとも１つの部分を含む、項目５８〜１０１のいずれか一項目に記載の凝集物。
１０３．少なくとも１つの部分がポリエチレングリコールである、項目１０２に記載の凝集物。
１０４．治療剤が血管収縮剤である、項目６９に記載の凝集物。
１０５．血管収縮剤が、アルファ−アドレナリン受容体アゴニスト、カテコールアミン、バソプレッシン、バソプレッシン受容体モジュレーター、およびカルシウムチャネルアゴニストからなる群から選択される、項目１０４に記載の凝集物。
１０６．血管収縮剤が、硫酸アルミニウム、アミデフリン、アンフェタミン、アンジオテンシン、抗ヒスタミン薬、アルギプレシン、次没食子酸ビスマス、カファミノール、カフェイン、カテコールアミン、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、ドーパミン、エフェドリン、エピネフリン、フェリプレシン、インダナゾリン、イソプロテレノール、リセルグ酸ジエチルアミン、リプレシン（ＬＶＰ）、リセルグ酸、メフェドロン、メトキサミン、メチルフェニデート、メチゾリン、メタラミノール、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、ノルエピネフリン、オクトドリン、オルニプレシン、オキシメタゾリン、フェニルエタノールアミン、フェニレフリン、フェニルイソプロピルアミン、フェニルプロパノールアミン、フェニプレッシン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、サイロシビン、テトラヒドララジン、テトラヒドロゾリン、塩酸テトラヒドロゾリン、硫酸亜鉛を含む塩酸テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシン、バソトシン、キシロメタゾリン、酸化亜鉛、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１０４または１０５に記載の凝集物。
１０７．それを必要とする対象に赤血球を投与することを含む、対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変および／または内出血を治療する方法であって、該赤血球が治療剤を含み、該治療剤が赤血球の中に被包されており、該治療剤が、所定の剪断応力に曝露された場合に該所定の剪断応力超で赤血球から放出される、方法。
１０８．それを必要とする対象に赤血球を投与することを含む、対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変および／または内出血をイメージングする方法であって、該赤血球がイメージング剤を含み、該イメージング剤が赤血球の中に被包されており、該イメージング剤が、所定の剪断応力に曝露された場合に該所定の剪断応力超で赤血球から放出される、方法。
１０９．狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、間欠性跛行（末梢動脈狭窄症）、アンギナ（冠状動脈狭窄症）、頚動脈狭窄症、大動脈弁狭窄症、ボタン穴狭窄症、石灰化結節性狭窄症、冠状動脈口狭窄症、二重大動脈狭窄症、魚口僧帽弁狭窄症、特発性肥厚性大動脈弁下部狭窄症、漏斗部狭窄症、僧帽弁狭窄症、筋性大動脈弁下部狭窄症、肺動脈弁狭窄症、肺動脈塞栓症、肺高血圧症、大動脈弁下部狭窄症、弁下部狭窄症、大動脈弁上部狭窄症、三尖弁狭窄症、腎動脈狭窄症、幽門狭窄症（胃の流出閉塞）、閉塞性黄疸（胆管狭窄症）、腸閉塞症、包茎、水頭症、狭窄性腱鞘炎、脊椎管狭窄症、声門下狭窄症（ＳＧＳ）、高血圧症、鎌状赤血球貧血症、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１０７または１０８に記載の方法。
１１０．狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、外傷または損傷、アテローム性動脈硬化症、先天性欠損、糖尿病、医原病、感染、炎症、虚血、腫瘍、血管攣縮、冠血管攣縮、レイノー現象、脳卒中、血液凝固、モヤモヤ病、高安病、結節性多発動脈炎、播種状エリトマトーデス、関節リウマチ、脊椎腫瘍、骨ページェット病、フッ素症、血液透析、鎌状赤血球貧血症、およびそれらの任意の組合せに起因する、項目１０７または１０８に記載の方法。
１１１．内出血が、外傷、高血圧による血管破裂、感染（例えば、エボラ、マールブルク）、癌、壊血病、肝細胞腫、自己免疫性血小板減少症、子宮外妊娠、悪性低温症、卵巣嚢胞、肝癌、ビタミンＫ欠乏症、血友病、薬物の副作用の結果である、項目１０７または１０８に記載の方法。
１１２．治療剤が抗トロンビン剤および／または血栓溶解剤である、項目１０７〜１１１のいずれか一項目に記載の方法。
１１３．抗トロンビン剤または血栓溶解剤が、抗凝血剤、凝血促進剤アンタゴニスト、抗血小板剤、血栓溶解剤、抗血栓溶解剤アンタゴニスト、線維素溶解酵素、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１１２に記載の方法。
１１４．治療剤が血栓形成剤である、項目１０７〜１１１のいずれか一項目に記載の方法。
１１５．血栓形成剤が、血栓溶解剤アンタゴニスト、抗凝血剤アンタゴニスト、凝血促進酵素、凝血促進分子、およびそれらの任意の組合せから選択される、項目１１４に記載の方法。
１１６．血栓形成剤が、プロタミン、ビタミンＫ１、アミノカプロン酸（アミカー）、トラネキサム酸（アムスタット）、アナグレリド、アルガトロバン、シロスタゾール、ダルトロバン、デフィブロチド、エノキサパリン、フラキシパリン、インドブフェン、ラモパラン、オザグレル、ピコタミド、プラフィブリド、テデルパリン、チクロピジン、トリフルサル、コラーゲン、およびコラーゲンコーティング粒子、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１１４または１１５に記載の方法。
１１７．治療剤が、組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、ストレプトキナーゼ（ＳＫ）、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（ｕＰＡ）、アルテプラーゼ（Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、レテプラーゼ（ｒ−ＰＡまたはｒｅｔａｖａｓｅ（登録商標）、Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｉｎｃ．としても知られている）、テネクテプラーゼ（ＴＮＫ（商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、Ｓｔｒｅｐｔａｓｅ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，ＬＰ）、ラノテプラーゼ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、モンテプラーゼ（エーザイ株式会社）、サルプラーゼ（ｒ−ｓｃｕ−ＰＡおよびｒｅｓｃｕｐａｓｅ（商標）、Ｇｒｕｎｅｎｔｈａｌ  ＧｍｂＨ，Ｃｏｒｐ．としても知られている）、スタフィロキナーゼ、およびアニソイル化されたプラスミノーゲン−ストレプトキナーゼ活性化因子複合体（ＡＰＳＡＣ、Ａｎｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ、およびＥｍｉｎａｓｅ（登録商標）、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｃｏｒｐ．としても知られている）、ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される血栓溶解剤である、項目１０７〜１１１のいずれか一項目に記載の方法。
１１８．治療剤が抗炎症剤である、項目１０７〜１１１のいずれか一項目に記載の方法。
１１９．抗炎症剤が、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ−アスピリン、イブプロフェン、またはナプロキセンなど）、コルチコステロイド（プレドニゾンなど）、抗マラリア薬（ヒドロキシクロロキンなど）、メトトレキセート、スルファサラジン、レフルノミド、抗ＴＮＦ薬、シクロホスファミド、ミコフェノレート、デキサメタゾン、ロシグリタゾン、プレドニゾロン、コルチコステロン、ブデソニド、エストロゲン、エストラジオール、スルファサラジン、フェノフィブレート、プラバスタチン、シンバスタチン、ピオグリタゾン、アセチルサリチル酸、ミコフェノール酸、メサラミン、ヒドロキシ尿素、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、項目１１８に記載の方法。
１２０．治療剤が血管拡張剤である、項目１０７〜１１１のいずれか一項目に記載の方法。
１２１．血管拡張剤が、アルファ−アドレナリン受容体アンタゴニスト（α−遮断薬）、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、ベータ２−アドレナリン受容体アゴニスト（β２−アゴニスト）、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、中枢作用性交感神経遮断剤、直接作用性血管拡張剤、エンドセリン受容体アンタゴニスト、神経節遮断薬、ニトロダイレーター、ホスホジエステラーゼ阻害剤、カリウムチャネル開口剤、レニン阻害剤、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１２０に記載の方法。
１２２．血管拡張剤が、プラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、トリマゾシン、フェントラミン、フェノキシベンザミン、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、キナプリル、ラミプリル、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルメサルタン、テルミサルタン、バルサルタン、エピネフリン、ノルエピネフリン、ドーパミン、ドブタミン、イソプロテレノール、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、クロニジン、グアナベンズ、グアンファシン、α−メチルドーパ、ヒドララジン、ボセンタン、カンシル酸トリメタファン、二硝酸イソソルビド、一硝酸イソソルビド、ニトログリセリン、四硝酸エリトリチル、四硝酸ペンタエリスリトール、ニトロプルシドナトリウム、ミルリノン、イナムリノン（以前はアムリノン）、シロスタゾール、シルデナフィル、タダラフィル、ミノキシジル、アリスキレン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、項目１２０または１２１に記載の方法。
１２３．治療剤が、抗悪性腫瘍剤、抗増殖剤、および／または有糸分裂阻害剤、および／または遊走阻害剤である、項目１０７〜１１１のいずれか一項目に記載の方法。
１２４．抗悪性腫瘍剤／抗増殖剤／有糸分裂阻害剤／遊走阻害剤が、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、シクロスポリン、シスプラチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エポチロン、メトトレキセート、アザチオプリン、アドリアマイシン、およびマイトマイシン；エンドスタチン、アンジオスタチンおよびチミジンキナーゼ阻害剤、クラドリビン、タキソール、トラピジル、ハロフジノン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、項目１２３に記載の方法。
１２５．治療剤が、アスピリン、ワルファリン（クマジン）、アセノクマロール、アンクロッド、アニシンジオン、ブロミンジオン、クロリンジオン、クメタロール、シクロクマロール、デキストラン、デキストラン硫酸ナトリウム、ジクマロール、ジフェナジオン、ビスクマ酢酸エチル、エチリデンジクマロール、フルインジオン、ヘパリン、ヒルジン、リアポレートナトリウム、オキサジジオン、ペントサンポリサルフェート、フェニンジオン、フェンプロクモン、ホスビチン、ピコタミド、チオクロマロール、ジピリダモール（ペルサンチン）、スルフィンピラゾン（アンツラン）、チクロピジン（チクリド）、組織プラスミノーゲン活性化因子（アクチバーゼ）、プラスミン、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（アボキナーゼ）、ストレプトキナーゼ（ストレプターゼ）、およびアニストレプラーゼ／ＡＰＳＡＣ（エミナーゼ）、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、項目１０７〜１１１のいずれか一項目に記載の方法。
１２６．治療剤が血管収縮剤である、項目１０７〜１１１のいずれか一項目に記載の方法。
１２７．血管収縮剤が、アルファ−アドレナリン受容体アゴニスト、カテコールアミン、バソプレッシン、バソプレッシン受容体モジュレーター、およびカルシウムチャネルアゴニストからなる群から選択される、項目１２６に記載の方法。
１２８．血管収縮剤が、硫酸アルミニウム、アミデフリン、アンフェタミン、アンジオテンシン、抗ヒスタミン薬、アルギプレシン、次没食子酸ビスマス、カファミノール、カフェイン、カテコールアミン、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、ドーパミン、エフェドリン、エピネフリン、フェリプレシン、インダナゾリン、イソプロテレノール、リセルグ酸ジエチルアミン、リプレシン（ＬＶＰ）、リセルグ酸、メフェドロン、メトキサミン、メチルフェニデート、メチゾリン、メタラミノール、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、ノルエピネフリン、オクトドリン、オルニプレシン、オキシメタゾリン、フェニルエタノールアミン、フェニレフリン、フェニルイソプロピルアミン、フェニルプロパノールアミン、フェニプレッシン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、サイロシビン、テトラヒドララジン、テトラヒドロゾリン、塩酸テトラヒドロゾリン、硫酸亜鉛を含む塩酸テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシン、バソトシン、キシロメタゾリン、酸化亜鉛、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１２６または１２７に記載の方法。１２９．イメージング剤が、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）色素（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＣｏｒｐ．；Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆ）；フルオレセイン；フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）；Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ（商標）；テトラローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）、５−カルボキシフルオレセイン（ＦＡＭ）；２'７'−ジメトキシ−４'５'−ジクロロ−６−カルボキシフルオレセイン（ＪＯＥ）；テトラクロロフルオレセイン（ＴＥＴ）；６−カルボキシローダミン（Ｒ６Ｇ）；Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ'−テトラメチル−６−カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）；６−カルボキシ−Ｘ−ローダミン（ＲＯＸ）；１−ジメチルアミノ−ナフチル−５−スルホネート、１−アニリノ−８−ナフタレンスルホネート、２−ｐ−トルイジニル−６−ナフタレンスルホネート、および５−（２'−アミノエチル）アミノナフタレン−１−スルホン酸（ＥＤＡＮＳ）を含むナフチルアミノ化合物など、アルファまたはベータ位にアミノ基を有するナフチルアミン色素；３−フェニル−７−イソシアナトクマリンなどのクマリン；９−イソチオシアナトアクリジンおよびアクリジンオレンジなどのアクリジン；Ｎ−（ｐ（２−ベンゾオキサゾリル）フェニル）マレイミド；Ｃｙ２、インドジカルボシアニン３（Ｃｙ３）、インドジカルボシアニン５（Ｃｙ５）、インドジカルボシアニン５．５（Ｃｙ５．５）、３−（−カルボキシ−ペンチル）−３'エチル−５，５'−ジメチルオキサカルボシアニン（ＣｙＡ）などのシアニン；１Ｈ，５Ｈ，１１Ｈ，１５Ｈ−キサンテノ［２，３，４−ｉｊ：５，６，７−ｉ'ｊ'］ジキノリジン−１８−イウム、９−［２（または４）−［［［６−［２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−６−オキソヘキシル］アミノ］スルホニル］−４（または２）−スルホフェニル］−２，３，６，７，１２，１３，１６，１７オクタヒドロ−分子内塩（ＴＲまたはテキサスレッド）；ＢＯＤＩＰＹ（商標）色素；ベンゾオキサジアゾール；スチル���ン；ピレン；緑色蛍光タンパク質、増強緑色蛍光タンパク質（ＥＧＰＦ）、不安定化ＥＧＦＰ、赤色蛍光タンパク質（例えばＤｓＲｅｄ）、ｄｓＲＥｄ変異体のｍＲＦＰｍａｒｓおよびｍＲＦＰｒｕｂｙ、黄色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、青色蛍光タンパク質、濃青色蛍光タンパク質などの蛍光タンパク質、およびそれらの変異体；９９ｍＴｃ、９５Ｔｃ、１１１Ｉｎ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、Ｇａ、６８Ｇａ、１５３Ｇｄ、１８Ｆ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、４７Ｓｃ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、８９Ｓｒ、８６Ｙ、８７Ｙ、９０Ｙ、１０５Ｒｈ、１１１Ａｇ、１１１Ｉｎ、１１７ｍＳｎ、１４９Ｐｍ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉなどの放射性同位元素；Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、およびＭｎ（ＩＩ）などの常磁性金属イオン；Ｒｅ、Ｓｍ、Ｈｏ、Ｌｕ、Ｐｍ、Ｙ、Ｂｉ、Ｐｄ、Ｇｄ、Ｌａ、Ａｕ、Ａｕ、Ｙｂ、Ｄｙ、Ｃｕ、Ｒｈ、Ａｇ、およびＩｒなどのＸ線吸収体；およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１０８〜１１１のいずれか一項目に記載の方法。
１３０．ＲＢＣがリガンドを含む、項目１０７〜１２９のいずれか一項目に記載の方法。
１３１．リガンドが、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ペプチドミメティック、糖タンパク質、レクチン、ヌクレオシド、ヌクレオチド、核酸（例えば、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、遺伝子、制御領域および終結領域を含む遺伝子、ウイルスもしくはプラスミドＤＮＡなどの自己複製システム、一本鎖および二本鎖のｓｉＲＮＡ、ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ作用物質またはｉＲＮＡ作用物質）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣物、スーパーｍｉｒ（ｓｕｐｅｒｍｉｒ）、アプタマー、アンチｍｉｒ、アンチｍｉｒ、アンタゴｍｉｒ、Ｕ１アダプター、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化因子、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ならびにデコイオリゴヌクレオチド）、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、リポ多糖類、脂質、ビタミン、ステロイド、ホルモン、補因子、受容体、受容体リガンド、ならびにそれらのアナログおよび誘導体からなる群から選択される、項目１３０に記載の方法。
１３２．リガンドが、ポリリシン（ＰＬＬ）、ポリＬ−アスパラギン酸、ポリＬ−グルタミン酸、スチレン−無水マレイン酸コポリマー、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）コポリマー、ジビニルエーテル−無水マレイン酸コポリマー、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミドコポリマー（ＨＭＰＡ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリウレタン、ポリ（２−エチルアクリル酸）、Ｎ−イソプロピルアクリルアミドポリマー、ポリホスファジン、ポリエチレンイミン、スペルミン、スペルミジン、ポリアミン、偽ペプチド−ポリアミン、ペプチドミメティックポリアミン、デンドリマーポリアミン、アルギニン、アミジン、プロタミン、チロトロピン、メラノトロピン、レクチン、サーファクタントタンパク質Ａ、ムチン、トランスフェリン、ビスホスホネート、ポリグルタメート、ポリアスパルタート、アプタマー、アシアロフェツイン、ヒアルロナン、プロコラーゲン、インスリン、トランスフェリン、アルブミン、アクリジン、クロス−ソラレン、マイトマイシンＣ、ＴＰＰＣ４、テキサフィリン、サフィリン、多環式芳香族炭化水素（例えば、フェナジン、ジヒドロフェナジン）、胆汁酸、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、１−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、１，３−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、１，３−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ３−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ３−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチルまたはフェノキサジン）、ＲＧＤペプチド、放射標識マーカー、ハプテン、ナプロキセン、アスピリン、ジニトロフェニル、ＨＲＰ、ＡＰ、レクチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＢ、葉酸、Ｂ１２、リボフラビン、ビオチン、ピリドキサール、タキソン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、サイトカラシン、ノコダゾール、ジャプラキノリド、ラトランクリンＡ、ファロイジン、スウィンホリドＡ、インダノシン、ミオセルビン、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦアルファ）、インターロイキン−１ベータ、ガンマインターフェロン、ＧａｌＮＡｃ、ガラクトース、マンノース、マンノース−６Ｐ、ＧａｌＮＡｃクラスター、マンノースクラスター、ガラクトースクラスターなどの糖クラスター、アプタマー、インテグリン受容体リガンド、ケモカイン受容体リガンド、セロトニン受容体リガンド、ＰＳＭＡ、エンドセリン、ＧＣＰＩＩ、ソマトスタチン、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１３０または１３１に記載の方法。
１３３．リガンドが、
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、セクロピン、リコトキシン（ｌｙｃｏｔｏｘｉｎ）、パラダキシン（ｐａｒａｄａｘｉｎ）、ブホリン（ｂｕｆｏｒｉｎ）、ＣＰＦ、ボンビニン様ペプチド（ＢＬＰ）、カテリシジン、セラトトキシン（ｃｅｒａｔｏｔｏｘｉｎ）、Ｓ．クラバ（Ｓ．Ｃｌａｖａ）ペプチド、ヌタウナギ腸内抗微生物ペプチド（ｈａｇｆｉｓｈ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ）（ＨＦＩＡＰ）、マガイニン、ブレビニン−２（ｂｒｅｖｉｎｉｎ−２）、デルマセプチン、メリチン、プルロシジン（ｐｌｅｕｒｏｃｉｄｉｎ）、Ｈ２Ａペプチド、ゼノパスペプチド、エスクレンチン−１、カエリン（ｃａｅｒｉｎ）ならびにそれらの任意のアナログおよび誘導体からなる群から選択されるペプチドである、項目１３０〜１３２のいずれか一項目に記載の方法。
１３４．ＲＢＣがヒト赤血球である、項目１０７〜１３３のいずれか一項目に記載の方法。
１３５．ＲＢＣが自己の赤血球である、項目１０７〜１３４のいずれか一項目に記載の方法。
１３６．所定の剪断応力が、少なくとも７０ｄｙｎ／ｃｍ２である、項目１０７〜１３５のいずれか一項目に記載の方法。
１３７．前記投与が、注射、点滴、点眼、吸入、または経口摂取によるものである、項目１０７〜１３６のいずれか一項目に記載の方法。
１３８．それを必要とする対象に治療剤を含むマイクロカプセルを投与することを含む、対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変および／または内出血を治療する方法であって、該治療剤がマイクロカプセルの中に被包されており、該マイクロカプセルが、所定の剪断応力に曝露された場合に該所定の剪断応力超で分解する、方法。
１３９．それを必要とする対象にイメージング剤を含むマイクロカプセルを投与することを含む、対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変および／または内出血をイメージングする方法であって、治療剤がマイクロカプセルの中に被包されており、該マイクロカプセルが、所定の剪断応力に曝露された場合に該所定の剪断応力超で分解する、方法。
１４０．狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、間欠性跛行（末梢動脈狭窄症）、アンギナ（冠状動脈狭窄症）、頚動脈狭窄症、大動脈弁狭窄症、ボタン穴狭窄症、石灰化結節性狭窄症、冠状動脈口狭窄症、二重大動脈狭窄症、魚口僧帽弁狭窄症、特発性肥厚性大動脈弁下部狭窄症、漏斗部狭窄症、僧帽弁狭窄症、筋性大動脈弁下部狭窄症、肺動脈弁狭窄症、肺動脈塞栓症、肺高血圧症、大動脈弁下部狭窄症、弁下部狭窄症、大動脈弁上部狭窄症、三尖弁狭窄症、腎動脈狭窄症、幽門狭窄症（胃の流出閉塞）、閉塞性黄疸（胆管狭窄症）、腸閉塞症、包茎、水頭症、狭窄性腱鞘炎、脊椎管狭窄症、声門下狭窄症（ＳＧＳ）、高血圧症、鎌状赤血球貧血症、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１３８または１３９に記載の方法。
１４１．狭窄症、狭窄病変または閉塞病変が、外傷または損傷、アテローム性動脈硬化症、先天性欠損、糖尿病、医原病、感染、炎症、虚血、腫瘍、血管攣縮、冠血管攣縮、レイノー現象、脳卒中、血液凝固、モヤモヤ病、高安病、結節性多発動脈炎、播種状エリトマトーデス、関節リウマチ、脊椎腫瘍、骨ページェット病、フッ素症、血液透析、鎌状赤血球貧血症、およびそれらの任意の組合せに起因する、項目１３８〜１４０のいずれか一項目に記載の方法。
１４２．内出血が、外傷、高血圧による血管破裂、感染（例えば、エボラ、マールブルク）、癌、壊血病、肝細胞腫、自己免疫性血小板減少症、子宮外妊娠、悪性低温症、卵巣嚢胞、肝癌、ビタミンＫ欠乏症、血友病、薬物の副作用の結果である、項目１３８〜１４１のいずれか一項目に記載の方法。
１４３．治療剤が抗トロンビン剤および／または血栓溶解剤である、項目１３８〜１４２のいずれか一項目に記載の方法。
１４４．抗トロンビン剤または血栓溶解剤が、抗凝血剤、凝血促進剤アンタゴニスト、抗血小板剤、血栓溶解剤、抗血栓溶解剤アンタゴニスト、線維素溶解酵素、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１４３に記載の方法。
１４５．治療剤が血栓形成剤である、項目１３８〜１４２のいずれか一項目に記載の方法。
１４６．血栓形成剤が、血栓溶解剤アンタゴニスト、抗凝血剤アンタゴニスト、凝血促進酵素、凝血促進分子、およびそれらの任意の組合せから選択される、項目１４５に記載の方法。
１４７．血栓形成剤が、プロタミン、ビタミンＫ１、アミノカプロン酸（アミカー）、トラネキサム酸（アムスタット）、アナグレリド、アルガトロバン、シロスタゾール、ダルトロバン、デフィブロチド、エノキサパリン、フラキシパリン、インドブフェン、ラモパラン、オザグレル、ピコタミド、プラフィブリド、テデルパリン、チクロピジン、トリフルサル、コラーゲン、およびコラーゲンコーティング粒子、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１４５または１４６に記載の方法。
１４８．治療剤が、組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、ストレプトキナーゼ（ＳＫ）、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（ｕＰＡ）、アルテプラーゼ（Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、レテプラーゼ（ｒ−ＰＡまたはｒｅｔａｖａｓｅ（登録商標）、Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｉｎｃ．としても知られている）、テネクテプラーゼ（ＴＮＫ（商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．としても知られている）、Ｓｔｒｅｐｔａｓｅ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，ＬＰ）、ラノテプラーゼ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、モンテプラーゼ（エーザイ株式会社）、サルプラーゼ（ｒ−ｓｃｕ−ＰＡおよびｒｅｓｃｕｐａｓｅ（商標）、Ｇｒｕｎｅｎｔｈａｌ  ＧｍｂＨ，Ｃｏｒｐ．としても知られている）、スタフィロキナーゼ、およびアニソイル化されたプラスミノーゲン−ストレプトキナーゼ活性化因子複合体（ＡＰＳＡＣ、Ａｎｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ、およびＥｍｉｎａｓｅ（登録商標）、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｃｏｒｐ．としても知られている）、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される血栓溶解剤である、項目１３８〜１４２のいずれか一項目に記載の方法。
１４９．治療剤が抗炎症剤である、項目１３８〜１４２のいずれか一項目に記載の方法。
１５０．抗炎症剤が、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ−アスピリン、イブプロフェン、またはナプロキセンなど）、コルチコステロイド（プレドニゾンなど）、抗マラリア薬（ヒドロキシクロロキンなど）、メトトレキセート、スルファサラジン、レフルノミド、抗ＴＮＦ薬、シクロホスファミド、ミコフェノレート、デキサメタゾン、ロシグリタゾン、プレドニゾロン、コルチコステロン、ブデソニド、エストロゲン、エストラジオール、スルファサラジン、フェノフィブレート、プラバスタチン、シンバスタチン、ピオグリタゾン、アセチルサリチル酸、ミコフェノール酸、メサラミン、ヒドロキシ尿素、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、項目１４９に記載の方法。
１５１．治療剤が血管拡張剤である、項目１３８〜１４２のいずれか一項目に記載の方法。
１５２．血管拡張剤が、アルファ−アドレナリン受容体アンタゴニスト（α−遮断薬）、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、ベータ２−アドレナリン受容体アゴニスト（β２−アゴニスト）、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、中枢作用性交感神経遮断剤、直接作用性血管拡張剤、エンドセリン受容体アンタゴニスト、神経節遮断薬、ニトロダイレーター、ホスホジエステラーゼ阻害剤、カリウムチャネル開口剤、レニン阻害剤、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１５１に記載の方法。
１５３．血管拡張剤が、プラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、トリマゾシン、フェントラミン、フェノキシベンザミン、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、キナプリル、ラミプリル、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルメサルタン、テルミサルタン、バルサルタン、エピネフリン、ノルエピネフリン、ドーパミン、ドブタミン、イソプロテレノール、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、クロニジン、グアナベンズ、グアンファシン、α−メチルドーパ、ヒドララジン、ボセンタン、カンシル酸トリメタファン、二硝酸イソソルビド、一硝酸イソソルビド、ニトログリセリン、四硝酸エリトリチル、四硝酸ペンタエリスリトール、ニトロプルシドナトリウム、ミルリノン、イナムリノン（以前はアムリノン）、シロスタゾール、シルデナフィル、タダラフィル、ミノキシジル、アリスキレン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、項目１５１または１５２に記載の方法。
１５４．治療剤が、抗悪性腫瘍剤、抗増殖剤、および／または有糸分裂阻害剤、および／または遊走阻害剤である、項目１３８〜１４２のいずれか一項目に記載の方法。
１５５．抗悪性腫瘍剤／抗増殖剤／有糸分裂阻害剤／遊走阻害剤が、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、シクロスポリン、シスプラチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エポチロン、メトトレキセート、アザチオプリン、アドリアマイシン、およびマイトマイシン；エンドスタチン、アンジオスタチンおよびチミジンキナーゼ阻害剤、クラドリビン、タキソール、トラピジル、ハロフジノン、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、項目１５４に記載の方法。
１５６．治療剤が、アスピリン、ワルファリン（クマジン）、アセノクマロール、アンクロッド、アニシンジオン、ブロミンジオン、クロリンジオン、クメタロール、シクロクマロール、デキストラン、デキストラン硫酸ナトリウム、ジクマロール、ジフェナジオン、ビスクマ酢酸エチル、エチリデンジクマロール、フルインジオン、ヘパリン、ヒルジン、リアポレートナトリウム、オキサジジオン、ペントサンポリサルフェート、フェニンジオン、フェンプロクモン、ホスビチン、ピコタミド、チオクロマロール、ジピリダモール（ペルサンチン）、スルフィンピラゾン（アンツラン）、チクロピジン（チクリド）、組織プラスミノーゲン活性化因子（アクチバーゼ）、プラスミン、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ（アボキナーゼ）、ストレプトキナーゼ（ストレプターゼ）、およびアニストレプラーゼ／ＡＰＳＡＣ（エミナーゼ）、ならびにそれらのアナログ、誘導体、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、項目１３８〜１４２のいずれか一項目に記載の方法。
１５７．治療剤が血管収縮剤である、項目１３８〜１４２のいずれか一項目に記載の方法。
１５８．血管収縮剤が、アルファ−アドレナリン受容体アゴニスト、カテコールアミン、バソプレッシン、バソプレッシン受容体モジュレーター、およびカルシウムチャネルアゴニストからなる群から選択される、項目１５７に記載の方法。
１５９．血管収縮剤が、硫酸アルミニウム、アミデフリン、アンフェタミン、アンジオテンシン、抗ヒスタミン薬、アルギプレシン、次没食子酸ビスマス、カファミノール、カフェイン、カテコールアミン、シクロペンタミン、デオキシエピネフリン、ドーパミン、エフェドリン、エピネフリン、フェリプレシン、インダナゾリン、イソプロテレノール、リセルグ酸ジエチルアミン、リプレシン（ＬＶＰ）、リセルグ酸、メフェドロン、メトキサミン、メチルフェニデート、メチゾリン、メタラミノール、ミドドリン、ナファゾリン、ノルデフリン、ノルエピネフリン、オクトドリン、オルニプレシン、オキシメタゾリン、フェニルエタノールアミン、フェニレフリン、フェニルイソプロピルアミン、フェニルプロパノールアミン、フェニプレッシン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、サイロシビン、テトラヒドララジン、テトラヒドロゾリン、塩酸テトラヒドロゾリン、硫酸亜鉛を含む塩酸テトラヒドロゾリン、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、バソプレッシン、バソトシン、キシロメタゾリン、酸化亜鉛、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１５７または１５８に記載の方法。
１６０．イメージング剤が、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）色素（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＣｏｒｐ．；Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆ）；フルオレセイン；フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）；Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ（商標）；テトラローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）、５−カルボキシフルオレセイン（ＦＡＭ）；２'７'−ジメトキシ−４'５'−ジクロロ−６−カルボキシフルオレセイン（ＪＯＥ）；テトラクロロフルオレセイン（ＴＥＴ）；６−カルボキシローダミン（Ｒ６Ｇ）；Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ'−テトラメチル−６−カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）；６−カルボキシ−Ｘ−ローダミン（ＲＯＸ）；１−ジメチルアミノ−ナフチル−５−スルホネート、１−アニリノ−８−ナフタレンスルホネート、２−ｐ−トルイジニル−６−ナフタレンスルホネート、および５−（２'−アミノエチル）アミノナフタレン−１−スルホン酸（ＥＤＡＮＳ）を含むナフチルアミノ化合物など、アルファまたはベータ位にアミノ基を有するナフチルアミン色素；３−フェニル−７−イソシアナトクマリンなどのクマリン；９−イソチオシアナトアクリジンおよびアクリジンオレンジなどのアクリジン；Ｎ−（ｐ（２−ベンゾオキサゾリル）フェニル）マレイミド；Ｃｙ２、インドジカルボシアニン３（Ｃｙ３）、インドジカルボシアニン５（Ｃｙ５）、インドジカルボシアニン５．５（Ｃｙ５．５）、３−（−カルボキシ−ペンチル）−３'エチル−５，５'−ジメチルオキサカルボシアニン（ＣｙＡ）などのシアニン；１Ｈ，５Ｈ，１１Ｈ，１５Ｈ−キサンテノ［２，３，４−ｉｊ：５，６，７−ｉ'ｊ'］ジキノリジン−１８−イウム、９−［２（または４）−［［［６−［２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−６−オキソヘキシル］アミノ］スルホニル］−４（または２）−スルホフェニル］−２，３，６，７，１２，１３，１６，１７オクタヒドロ−分子内塩（ＴＲまたはテキサスレッド）；ＢＯＤＩＰＹ（商標）色素；ベンゾオキサジアゾール；スチルベン；ピレン；緑色蛍光タンパク質、増強緑色蛍光タンパク質（ＥＧＦＰ）、不安定化ＥＧＦＰ、赤色蛍光タンパク質（例えばＤｓＲｅｄ）、ｄｓＲＥｄ変異体のｍＲＦＰｍａｒｓおよびｍＲＦＰｒｕｂｙ、黄色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、青色蛍光タンパク質、濃青色蛍光タンパク質などの蛍光タンパク質、およびそれらの変異体；９９ｍＴｃ、９５Ｔｃ、１１１Ｉｎ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、Ｇａ、６８Ｇａ、１５３Ｇｄ、１８Ｆ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、４７Ｓｃ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、８９Ｓｒ、８６Ｙ、８７Ｙ、９０Ｙ、１０５Ｒｈ、１１１Ａｇ、１１１Ｉｎ、１１７ｍＳｎ、１４９Ｐｍ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉなどの放射性同位元素；Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、およびＭｎ（ＩＩ）などの常磁性金属イオン；Ｒｅ、Ｓｍ、Ｈｏ、Ｌｕ、Ｐｍ、Ｙ、Ｂｉ、Ｐｄ、Ｇｄ、Ｌａ、Ａｕ、Ａｕ、Ｙｂ、Ｄｙ、Ｃｕ、Ｒｈ、Ａｇ、およびＩｒなどのＸ線吸収体；およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１３９〜１４２のいずれか一項目に記載の方法。
１６１．マイクロカプセルがリガンドを含む、項目１３８〜１６０のいずれか一項目に記載の方法。
１６２．リガンドが、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ペプチドミメティック、糖タンパク質、レクチン、ヌクレオシド、ヌクレオチド、核酸（例えば、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、遺伝子、制御領域および終結領域を含む遺伝子、ウイルスもしくはプラスミドＤＮＡなどの自己複製システム、一本鎖および二本鎖のｓｉＲＮＡ、ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ作用物質またはｉＲＮＡ作用物質）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣物、スーパーｍｉｒ（ｓｕｐｅｒｍｉｒ）、アプタマー、アンチｍｉｒ、アンチｍｉｒ、アンタゴｍｉｒ、Ｕ１アダプター、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化因子、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ならびにデコイオリゴヌクレオチド）、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類、多糖類、グリコサミノグリカン、リポ多糖類、脂質、ビタミン、ステロイド、ホルモン、補因子、受容体、受容体リガンド、ならびにそれらのアナログおよび誘導体からなる群から選択される、項目１６１に記載の方法。
１６３．リガンドが、ポリリシン（ＰＬＬ）、ポリＬ−アスパラギン酸、ポリＬ−グルタミン酸、スチレン−無水マレイン酸コポリマー、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）コポリマー、ジビニルエーテル−無水マレイン酸コポリマー、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミドコポリマー（ＨＭＰＡ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリウレタン、ポリ（２−エチルアクリル酸）、Ｎ−イソプロピルアクリルアミドポリマー、ポリホスファジン、ポリエチレンイミン、スペルミン、スペルミジン、ポリアミン、偽ペプチド−ポリアミン、ペプチドミメティックポリアミン、デンドリマーポリアミン、アルギニン、アミジン、プロタミン、チロトロピン、メラノトロピン、レクチン、サーファクタントタンパク質Ａ、ムチン、トランスフェリン、ビスホスホネート、ポリグルタメート、ポリアスパルタート、アプタマー、アシアロフェツイン、ヒアルロナン、プロコラーゲン、インスリン、トランスフェリン、アルブミン、アクリジン、クロス−ソラレン、マイトマイシンＣ、ＴＰＰＣ４、テキサフィリン、サフィリン、多環式芳香族炭化水素（例えば、フェナジン、ジヒドロフェナジン）、胆汁酸、コレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、１−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、１，３−ビス−Ｏ（ヘキサデシル）グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メントール、１，３−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、Ｏ３−（オレオイル）リトコール酸、Ｏ３−（オレオイル）コレン酸、ジメトキシトリチルまたはフェノキサジン）、ＲＧＤペプチド、放射標識マーカー、ハプテン、ナプロキセン、アスピリン、ジニトロフェニル、ＨＲＰ、ＡＰ、レクチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＢ、葉酸、Ｂ１２、リボフラビン、ビオチン、ピリドキサール、タキソン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、サイトカラシン、ノコダゾール、ジャプラキノリド、ラトランクリンＡ、ファロイジン、スウィンホリドＡ、インダノシン、ミオセルビン、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦアルファ）、インターロイキン−１ベータ、ガンマインターフェロン、ＧａｌＮＡｃ、ガラクトース、マンノース、マンノース−６Ｐ、ＧａｌＮＡｃクラスター、マンノースクラスター、ガラクトースクラスターなどの糖クラスター、アプタマー、インテグリン受容体リガンド、ケモカイン受容体リガンド、セロトニン受容体リガンド、ＰＳＭＡ、エンドセリン、ＧＣＰＩＩ、ソマトスタチン、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、項目１６１または１６２に記載の方法。
１６４．リガンドが、
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、セクロピン、リコトキシン（ｌｙｃｏｔｏｘｉｎ）、パラダキシン（ｐａｒａｄａｘｉｎ）、ブホリン（ｂｕｆｏｒｉｎ）、ＣＰＦ、ボンビニン様ペプチド（ＢＬＰ）、カテリシジン、セラトトキシン（ｃｅｒａｔｏｔｏｘｉｎ）、Ｓ．クラバ（Ｓ．Ｃｌａｖａ）ペプチド、ヌタウナギ腸内抗微生物ペプチド（ｈａｇｆｉｓｈ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ）（ＨＦＩＡＰ）、マガイニン、ブレビニン−２（ｂｒｅｖｉｎｉｎ−２）、デルマセプチン、メリチン、プルロシジン（ｐｌｅｕｒｏｃｉｄｉｎ）、Ｈ２Ａペプチド、ゼノパスペプチド、エスクレンチン−１、カエリン（ｃａｅｒｉｎ）ならびにそれらの任意のアナログおよび誘導体からなる群から選択されるペプチドである、項目１６１〜１６３のいずれか一項目に記載の方法。
１６５．所定の剪断応力が、少なくとも７０ｄｙｎ／ｃｍ２である、項目１３８〜１６４のいずれか一項目に記載の方法。
１６６．前記投与が、注射、点滴、点眼、吸入、または経口摂取によるものである、項目１３８〜１６５のいずれか一項目に記載の方法。
１６７．マイクロカプセルが単層マイクロカプセルである、項目１３８〜１６６のいずれか一項目に記載の方法。
１６８．マイクロカプセルが多層マイクロカプセルである、項目１３８〜１６６のいずれか一項目に記載の方法。
１６９．マイクロカプセルのサイズが、約１マイクロ〜約５，０００ミクロンである、項目１３８〜１６８のいずれか一項目に記載の方法。
１７０．マイクロカプセルのポリマーシェルが生体適合性ポリマーを含む、項目１３８〜１６９のいずれか一項目に記載の方法。
１７１．マイクロカプセルのポリマーシェルが、ポロキサマー、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ酸無水物、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリアミド、ポリウレタン、ポリエステルアミド、ポリオルトエステル、ポリジオキサノン、ポリアセタール、ポリケタール、ポリカーボネート、ポリオルトカーボネート、ポリジヒドロピラン、ポリホスファゼン、ポリヒドロキシブチレート、ポリヒドロキシバレレート、ポリアルキレンオキサレート、ポリアルキレンスクシネート、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（アミノ酸）、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリヒドロキシセルロース、ポリメチルメタクリレート、キチン、キトサン、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリ（グリセロールセバケート）（ＰＧＳ）、ゼラチン、コラーゲン、シルク、キトサン、アルギネート、セルロース、ポリ核酸、セルロースアセテート（セルロースジアセテートを含む）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリブチレン、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリアミド、ナイロン、ポリカーボネート、ポリスルフィド、ポリスルホン、ヒドロゲル（例えばアクリル）、ポリアクリロニトリル、ポリビニルアセテート、セルロースアセテートブチレート、ニトロセルロース、ウレタン／カーボネートのコポリマー、スチレン／マレイン酸のコポリマー、ポリ（エチレンイミン）、ヒアルロン、ヘパリン、アガロース、プルラン、ならびにそれらの任意の組合せを含むコポリマー、ターポリマー、およびコポリマーからなる群から選択されるポリマーを含む、項目１３８〜１７０のいずれか一項目に記載の方法。
１７２．マイクロカプセルからの治療剤またはイメージング剤の放出速度が、正常な血管剪断応力下での放出に比較して、所定の剪断応力以上の剪断応力下で、少なくとも１０％高い、項目１３８〜１７１のいずれか一項目に記載の方法。
【０２４８】
これまでに示されてはいないが、当業者は、本明細書に記載および説明された種々の実施形態のいずれについても、さらに改変して、本明細書に開示の他の任意の実施形態に示された特徴を組み込むことができることを理解している。
【０２４９】
以下の実施例は本発明の一部の実施形態および態様を説明する。種々の改変、追加、置換等が、本発明の精神または範囲を変更することなく実施することができ、そのような改変および変形が以下の特許請求の範囲に定義される本発明の範囲内に包含されることは、当業者には明らかである。以下の実施例は、本発明を限定するものでは決してない。
【実施例】
【０２５０】
実施例１
ＰＥＧ−ＰＬＧＡ（５０：５０  ＭＷ４：１７ｋＤＡ）またはＰＬＧＡ（５０：５０  ＭＷ１７ｋＤａ）ナノ粒子は、以下のように調製した。ＣＯＯＨ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡまたはＣＯＯＨ−ＰＬＧＡポリマーを、マレイミド−ＰＥＧ−ＮＨ２リンカーを使用して、結合ペプチド（ＣＲＥＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）またはＣＲＫＲＬＤＲＮＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３））と結合させた。最初に、ペプチドのシステイン末端を、ＰＢＳ緩衝液中、ｐＨ６．５でＰＥＧリンカーのマレイミド末端に結合した。次に、カルボキシル官能基を有するＰＥＧ−ＰＬＧＡポリマーを、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）（ＥＤＣ）およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）を用いて、あらかじめ活性化し、次いで、ＰＢＳ／ＤＭＳＯ混合物中で、対応するＰＥＧ修飾ペプチドと室温で約４時間反応させた。最終生成物を透析により精製し、凍結乾燥粉末を得た。この結合反応は、１Ｈ  ＮＭＲにより確認した。次いで、ペプチド結合ポリマーをクマリン疎水性色素と共に、酢酸エチルまたはＤＭＳＯのいずれかに溶解し、ナノ粒子を、ｗ／ｏ／ｗ型エマルジョン法または簡単な溶媒置換法により調製した。
【０２５１】
４℃で３日間以上、５ｍｇ／ｍｌの濃縮溶液を保存することによって、自発的な自己凝集を促進することにより、ナノ粒子凝集物を調製した。凝集物懸濁液を５ミクロンのフィルターを通して濾過し、過大な凝集物はいずれも取り除いた。さらに、遠心分離（×２０００ｇ、５分間）とその後の洗浄によって、単一の非結合ナノ粒子の濃度を低減した。
【０２５２】
ＣＯＯＨ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡ（５０：５０  ＭＷ４：１７ｋＤＡ）ポリマーを、標準のＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）エステル化学を使用して、結合ペプチド（ＣＨＶＬＷＳＴＲＣ）と結合させた。手短に言えば、カルボキシル官能基を有するＰＥＧ−ＰＬＧＡポリマーを、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）（ＥＤＣ）およびＮＨＳを用いて、あらかじめ活性化し、次いで、ＤＭＳＯ中で、対応するペプチドと室温で約４時間反応させた。生成物を透析により精製し、凍結乾燥粉末を得た。この結合ペプチドは、膵島内皮細胞をターゲティングする。次いで、ペプチド結合ポリマーをクマリン疎水性色素と共に、ＤＭＳＯに溶解し、ナノ粒子を、簡単な溶媒置換法により調製した。ナノ粒子を５ｍｇ／ｍｌ溶液に調製し、上記のように凝集させた。
【０２５３】
狭窄症を模倣するマイクロチャネルを、従来のソフトリソグラフィーを使用して、ＰＤＭＳから作製した。マイクロチャネルの高さは３００ミクロンであり、９０％狭窄セグメント（高さ３０ミクロン）が狭窄前領域と狭窄後領域との間を分離した。ＰＤＭＳチャネルを、プラズマボンディングを使用して、ガラス製マイクロスライド（厚さ１７０ミクロン）で密封した。酸素プラズマを使用してチャネルを滅菌し、フィブロネクチン（５０ｕｇ／ｍｌ、３０分間）でコーティングして、細胞接着性を向上させた。マウス膵島内皮細胞をマイクロチャネルに導入し、静的条件（インキュベーター中で２時間）下で接着させた。細管をチャネルに接続し、チャネルを組織培養インキュベーター中に置き、シリンジポンプを使用して培地を注入した。膵島内皮細胞をチャネル中で３〜４日間培養して、単層を形成させた。
【０２５４】
ナノ粒子凝集物（１００ｕｇ／ｍｌ）を含有する溶液を、メインチャネル中で１ｄｙｎｅ／ｃｍ２の推定壁剪断応力に相当する流速で、チャネルの中に１０分間注入する。この工程に続いて、付着していない粒子を洗浄するために、水を同じ流速で５分間、チャネルの中に注入した。狭窄前部位および狭窄後部位における、細胞の位相画像およびナノ粒子の蛍光画像を、ツァイス顕微鏡を使用して取得した。ナノ粒子の蛍光画像を位相画像の上に載せ、ナノ粒子の局在を視覚化した（通常、核領域以外の細胞全体にわたる）。狭窄前部位と比較して、狭窄後部位中により多くのナノ粒子が蓄積した（付着およびエンドサイトーシス）（データを示さず）。これにより、ナノ粒子凝集物が狭窄部位で分解して、単一ナノ粒子に分散し、標的部位に付着することが実証される。
【０２５５】
実施例２：閉塞血管への薬物ターゲティングのための剪断活性化血小板ミメティック
材料および方法
ナノ粒子の調製：ナノ粒子（ＮＰ）は、簡単な溶媒置換法を使用して、ＰＬＧＡ（５０：５０、１７ｋＤａ、酸末端；Ｌａｋｅｓｈｏｒｅ  Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ，ＡＬ）から調製した（Ｃ．Ｅ．Ａｓｔｅｔｅ  ＆  Ｃ．Ｍ．Ｓａｂｌｉｏｖ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  １７，２４７（２００６））。蛍光疎水性色素であるクマリンを、本研究の視覚化および定量化を可能にするためにＮＰ中に含めた。手短に言えば、１ｍｇ／ｍｌのポリマーをクマリンと共に、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ，Ｓｉｇｍａ，ＭＯ）に溶解し、室温で水に対し透析して、溶媒置換によってナノ粒子を形成させた。形成されたＮＰのサイズ分布および形態は、動的光散乱（ＤＬＳ）、走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）、および透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）を使用して特徴づけた。
【０２５６】
血小板ミメティックの作製
ＰＬＧＡ  ＮＰを遠心分離して、１０ｍｇ／ｍｌの水懸濁液に濃縮し、１ｍｇ／ｍｌのＬ−ロイシン（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ＆  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，ＣＡ）を加えた。ＮＰ凝集物（血小板ミメティック）は、Ｍｏｂｉｌｅ  Ｍｉｎｏｒ噴霧乾燥器（Ｎｉｒｏ，Ｉｎｃ．；Ｃｏｌｕｍｂｉａ，ＭＤ）を使用して、噴霧乾燥手法により調製した。ロイシン−ＮＰ水性懸濁液を、有機相（エタノール）とは別に、１．５：１の比で注入し、微粒化直前にインラインで混合した（Ｊ．Ｃ．Ｓｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２６，１８４７（２００９））。入口温度を８０℃、液体供給速度を５０ｍｌ／分とした。ガス流速を２５ｇ／分に設定し、ノズル圧を４０ｐｓｉとした。噴霧乾燥粉末を、サイクロンの出口で容器に集めた。この粉末を水中で所望の濃度で再構成することにより、血小板ミメティック懸濁液を形成させた。５μｍフィルターを通して凝集物懸濁液を濾過し、過大な凝集物を取り除いた。遠心分離（２０００ｇで５分間）とその後の洗浄によっても、単一の非結合ナノ粒子を除去した。ＤＬＳを用いるゼータ粒子サイズアナライザー（Ｍａｌｖｅｒｎ  ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，ＵＫ）を使用して、ＨｅＮｅレーザー、１７３°後方散乱検出器を作動させながら、希薄溶液におけるＮＰサイズを測定した。試料は、ＰＢＳ緩衝液、ｐＨ７．４中に１ｍｇ／ｍｌの濃度で調製した。データ収集および分析は、Ｍａｌｖｅｒｎ機器ソフトウェアを用いて実施した。
【０２５７】
ｔＰＡによる機能化
ＮＰ凝集物（１ｍｇ／ｍｌ）を、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）（ＥＤＣ）およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）を用いて、１：５：１０（ＰＬＧＡ：ＥＤＣ：ＮＨＳ）のモル比であらかじめ活性化し、続いて、リンカーＮＨ２−ＰＥＧビオチン（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）と、１：１０のモル比で、ＰＢＳ、ｐＨ７．４中で、室温にて２時間反応させた。次いで、凝集物を、２回遠心分離して洗浄し、ストレプトアビジン（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）と室温で１５分間反応させた。凝集物は、未反応試薬を除去するために、遠心分離および洗浄を繰り返して精製した。これとは別に、組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ，Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ＭＡ）を、ＮＨＳ−ＰＥＧ−ビオチンを使用して、ＰＢＳ中、１：１０のモル比で室温にて２時間、ビオチンを用いて機能化した（Ｊ．Ｃ．Ｍｕｒｃｉａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２１，８９１（２００３））。次いで、機能化されたｔＰＡを、ストレプトアビジン−ビオチン−凝集物と室温で３０分間反応させた。次いで、ｔＰＡで機能化されたｔＰＡ機能化ＮＰ凝集物を遠心分離および洗浄により精製し、凝集物に結合したｔＰＡ量を蛍光分光分析法により測定した。手短に言えば、凝集物を、３７℃で約６時間、撹拌しながら１Ｍ  ＮａＯＨに溶解して、透明なポリマー溶液を得た。次いで、ポリマー溶液中のｔＰＡ（ＴＲＩＴＣ標識、Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ＭＡ）量を、５９４ｎｍで測定した。ｔ−ＰＡコーティング粒子の活性は、蛍光定量的ｔＰＡ活性アッセイ（ＳｅｎｓｏＬｙｔｅ，ＡｎａＳｐｅｃ，ＣＡ）を使用して確認した。凝集ナノ粒子のＳＥＭは、ツァイスＦＥＳＥＭ  Ｓｕｐｒａ５５ｖＰ（Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｎａｎｏｓｙｓｔｅｍｓ（ＣＮＳ），Ｈａｒｖａｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）を使用して実施した。試料をカーボンテープ接着基材の上にマウントし、イオンスパッタ装置を使用して、真空下で金を用いてコーティングした。コーティングされたＮＰ凝集物は、９ｍｍの作動距離でインレンズ検出器を使用して、４ｋＶで画像化した。
【０２５８】
血流計による剪断アッセイ
血小板ミメティック溶液（８％ポリビニルピロリドン溶液中に５ｍｇ／ｍｌ）を、血流計（ＡＲ−Ｇ２  ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，ＤＥ）において２０ｍｍプレートを使用して、１分間剪断した。次いで、溶液を集め、０．４５ミクロンのフィルター（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，ＭＡ）を通して濾過して、ＮＰから大きなマイクロスケールの凝集物を除去し、水で１：３に希釈した。これらのＮＰ懸濁液の蛍光強度を分光計（Ｐｈｏｔｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，ＮＪ）を使用して測定し、最大剪断レベル（１，０００ｄｙｎｅ／ｃｍ２）に対して規準化した。
【０２５９】
計算流体力学（ＣＦＤ）シミュレーション
マイクロ流体チャネルに対するＣＦＤシミュレーションは、有限要素法に基づいて、ソフトウェアパッケージＣｏｍｓｏｌ  ３．５（Ｃｏｍｓｏｌ，ＵＳＡ）を使用して実施した。本発明者らは、流れは安定して、圧縮不可能であると考え、壁でのノンスリップ境界条件および流体媒体（ＰＢＳ）が１０００ｋｇ／ｍ３の一定密度および１ｍＰａ−秒の粘度を有すると仮定した。以前に記載されたように（Ａ．Ｕ．Ｃｏｓｋｕｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｔｈｅｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｓ  ６０，６７（２００３））、ＩＶＵＳ再構築血管のＣＦＤシミュレーションを実施した。
【０２６０】
血管狭窄症のマイクロ流体モデル
マイクロ塞栓形成に関する試験に使用された血管絞窄を模倣するマイクロチャネルは、従来のソフトリソグラフィー（Ｙ．Ｘｉａ，Ｇ．Ｍ．Ｗｈｉｔｅｓｉｄｅｓ，Ａｎｎｕａｌ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｍａｔｅｒｉａｌｓ  ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８，１５３（１９９８））を使用して、ポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）から作製した。種型は、ＣＡＤプログラムを使用して設計した８０ミクロンの層を並べて準備し、カッタープロッター（ＣＥ５０００，Ｇｒａｐｈｔｅｃ，ＣＡ）を使用して形成した。この装置は、上流および下流のチャネル領域（それぞれ：高さ６４０μｍ×幅２ｍｍ×長さ２０ｍｍ）に対して９０％絞窄の領域（高さ１６０μｍ×幅４００μｍ×長さ１０ｍｍ）を含んでいた。ＰＤＭＳチャネルを、プラズマボンディングを使用して、ガラス製マイクロスライド（厚さ１７０μｍ）で密封した。一部の試験では、血小板ミメティック溶液（５ｍｌ、１００μｇ／ｍｌ）を、ペリスタル型ポンプ（ＩＳＭ  ８３４Ｃ，Ｉｓｍａｔｅｃ  ＳＡ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を使用して、９０％閉塞があるマイクロ流体装置または絞窄のないマイクロ流体装置を通して再循環した。流速は、無構成チャネルで１０ｄｙｎｅ／ｃｍ２の壁剪断応力が得られるように調整した。懸濁液を２０分間流した後に集め、サブミクロン（０．４５μｍ）フィルターを通して濾過した。集めたＮＰ懸濁液の蛍光強度を分光計（Ｐｈｏｔｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，ＮＪ）を使用して測定し、無狭窄チャネル値に対して規準化した。狭窄領域における、ＮＰの放出および内皮細胞へのＮＰの結合に関する試験のために、マイクロ流体装置を、酸素プラズマを使用して滅菌し、細胞接着を促進するために、フィブロネクチン（５０μｇ／ｍｌ、３０分）を用いてコーティングした。ウシ大動脈内皮細胞（Ｌｏｎｚａ，ＭＤ）をマイクロチャネルに導入し、静的条件（３７℃で２時間）下で接着させた。次いで、この装置を組織培養インキュベーターの中に配置し、シリンジポンプ（Ｂｒａｉｎｔｒｅｅ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｂｒａｉｎｔｒｅｅ，ＭＡ）を使用して、培地（ＥＧＭ（登録商標）−ＭＶ  ＢｕｌｌｅｔＫｉｔ，Ｌｏｎｚａ，ＭＤ）を注入した（５０μＬ／ｈｒ）。内皮細胞を装置内で３〜４日間培養して、連続した細胞単層を形成させた。次いで、血小板ミメティックを含有する溶液（１０μｇ／ｍｌ）を、無構成チャネル内に約１０ｄｙｎｅ／ｃｍ２の壁剪断応力を生成する流速で、装置の中に１０分間注入した。付着していない粒子は、同じ流速でチャネルの中に水を５分間注入することにより、洗い流した。絞窄に隣接した上流および下流領域内にある細胞および結合ＮＰの位相コントラストおよび蛍光顕微鏡の画像を、ツァイス顕微鏡を使用して取得した。これらの視野から得られた、細胞に結合したクマリン負荷ＮＰの平均蛍光強度を使用して、狭窄前領域と狭窄後領域との間のＮＰ蓄積の差を評価した。
【０２６１】
血管塞栓症のマイクロ流体モデル
狭くなった横断面（高さ８０μｍ×幅０．５ｍｍ×長さ２００ｍｍ）を有するマイクロ流体装置を、上記のように、ソフトリソグラフィーを使用して作製した。メインチャネルに注入された、以下に記載のように形成されたフィブリン塊は、これらのより小さなチャネルの流れを止め、閉塞した。ｔ−ＰＡまたはｔ−ＰＡコーティングマイクロ凝集物の溶液を、非閉塞チャネルにおける１０ｄｙｎｅ／ｃｍ２の剪断応力に対応する流速で注入した。ｔ−ＰＡ溶液の注入前に、ウシプラスミノーゲン（Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ＭＡ）を、２．２μＭの最終濃度で加えた（Ｓ．Ｌ．Ｄｉａｍｏｎｄ，Ａｎｎｕａｌ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  １，４２７（１９９９））。繊維素溶解過程の間、フィブリン塊のサイズを、倒立ツァイス顕微鏡上にてリアルタイム（画像を３０秒ごとに取得）でモニターした。
【０２６２】
実験的なフィブリン塞栓
フィブリン塊は、以前に記載のように（Ｊ．Ｃ．Ｍｕｒｃｉａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２１，８９１（２００３）ａｎｄ  Ｃ．Ｋ．Ｌａｍ，Ｔ．Ｙｏｏ，Ｂ．Ｈｉｎｅｒ，Ｚ．Ｌｉｕ，Ｊ．Ｇｒｕｔｚｅｎｄｌｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ  ４６５，４７８（２０１０））、ヒトフィブリノーゲン（５ｍｇ／ｍｌ、Ｅｎｚｙｍｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，ＩＮ）にＣａＣｌ２（２０ｍＭ）およびヒトα−トロンビン（最終濃度１ユニット／ｍｌ、Ｅｎｚｙｍｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，ＩＮ）を加えることにより形成させた。この溶液を、Ｓｐａｎ−８０（０．０５％）を含むキャノーラ油溶液に直ちに滴加した。エマルジョンを３５０ｒｐｍで４時間混合し、遠心分離（５００ｇ、５分間）した後、エタノールと水で洗浄を繰り返した。得られたフィブリンビーズの直径は、光学顕微鏡によると、約２００μｍであった。
【０２６３】
マウス肺塞栓症モデル
雄性６〜８週齢Ｃ５７ＢＬ／６マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ  ＭＥ）を体重測定し、アベルチン（２００ｍｇ／ｋｇのＩＰ）で麻酔した。気管を外科的な気管切開によって切開し、鈍くした２２Ｇステンレス鋼ニードルチップを挿入した。次いで、マウス人工呼吸器（ＶＣＭ−Ｒ，Ｈｕｇｏ  Ｓａｃｈｓ  Ｅｌｅｋｔｒｏｎｉｋｓ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用し、圧縮空気による１０ｃｍＨ２Ｏの最大吸気圧（Ｐｉｐ）および３ｃｍＨ２Ｏの呼気終末陽圧（Ｐｅｅｐ）を用いて、６０呼吸／分の速度で肺を換気した。マウス肺の生体外換気および灌流を、ＩＬ１生体外マウス肺換気灌流システム（Ｈａｒｖａｒｄ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ，Ｎａｔｉｃｋ，ＭＡ），（Ｄ．Ｈｕｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３２８，１６６２（２０１０））を使用して実施した。機械的換気の開始に続いて、開胸術によって胸を開き、ヘパリン（１００ＩＵ）を右心室に注射した。３０秒後、胸大動脈および上大静脈を切断し、動物を失血させた。肺動脈および大動脈のまわりを縫合した。ポリエチレン細管（ＰＥ９０（０．８６ｍｍＩＤ、１．７ｍｍＯＤ））から作製したカニューレを、肺動脈（ＰＡ）および左心房（ＬＡ）に配置し、４％ウシアルブミンを含有するＲＰＭＩ−１６４０（Ｐｒｏｂｕｍｉｎ（商標）  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｇｒａｄｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）および０．７ｇ  ＮａＣｌ／５００ｍＬを用い、ローラーポンプ（ＩＳＭ  ８３４Ｃ，Ｉｓｍａｔｅｃ  ＳＡ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）セットを介して、システム体積が６ｍＬの再循環システムで０．５ｍｌ／分の一定流速で肺を潅流した。灌流液および肺の温度は、ＣＯ２なしの標準細胞インキュベーター（Ｆｏｒｍａ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｏｈｉｏ）の内部に生体外換気灌流システム全体を収容することにより、３７℃に維持した。湿度は９０〜９５％の範囲に維持した。肺の動脈圧および静脈圧ならびに気管の流れおよび圧力は、専用タイプ３７９血管圧力およびＤＬＰ２．５フローおよびＭＰＸタイプ３９９／２気道圧変換器およびＴＡＭ−Ａ増幅器（Ｈｕｇｏ  Ｓａｃｈｓ  Ｅｌｅｋｔｒｏｎｉｋｓ，Ｇｅｒｍａｎｙ）で記録した。血管圧力は、各実験前に中葉肺レベルでゼロにし、Ｗｉｎｄｏｗｓ  ＸＰ  ＳＰ２（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｒｅｄｍｏｎｄ，ＷＡ）上で作動するデスクトップＰＣ上のＰｏｌｙｖｉｅｗ１６（著作権）ソフトウェア（Ｇｒａｓｓ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｗｅｓｔ  Ｗａｒｗｉｃｋ，ＲＩ）を使用して記録した。
【０２６４】
実験的なフィブリン塊（上記のように調製）の注入前に、測定パラメーターを安定化させ、１０分を超える時間、安定な状態にした。灌流媒体中に懸濁したフィブリン塊の溶液を０．１ｍｌ／分の流速で注入し、肺動脈に入る通常の灌流系と混合した。肺動脈圧がベースラインよりも約３倍の高さに増加するまで、フィブリン塊懸濁液を注入した。次いで、システムを平衡化し、少なくとも１０分間安定な状態にした。次に、ｔＰＡコーティング血小板ミメティックまたは遊離の可溶ｔＰＡを、メインの灌流系に加え、灌流システムを通して循環させた。マイクロ流体装置の実験のように、ｔＰＡを潅流した場合は、プラスミノーゲンを最終濃度２．２μＭになるように加えた。肺の動脈圧および静脈圧を、灌流期間中、継続して取得した。各実験の終了時に、４％パラホルムアルデヒドを用いて肺を潅流し、４％パラホルムアルデヒド、次いでスクロースおよびＯＣＴ中でインキュベートすることにより、切片の準備を行った。実験動物プロトコールはすべて、Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ａｔ  Ｃｈｉｌｄｒｅｎ'ｓ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ  Ｂｏｓｔｏｎ  ａｎｄ  Ｈａｒｖａｒｄ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｃｈｏｏｌにより承認を受けた。
【０２６５】
流れの下でのＮＰおよびマイクロ凝集物の付着
狭くなったチャネル（高さ８０μｍ×幅２ｍｍ×長さ２００ｍｍ）を含むマイクロ流体装置を、上記のように、ソフトリソグラフィーを使用して作製した。フィブリンの乾燥した薄層（１μｍ未満の厚さ）を用いてコーティングしたスライドガラスをチャネルの底部に接着した。蛍光ＮＰ（２００ｎｍ）およびマイクロ粒子（２μｍ）を、上記に詳述したように、ｔＰＡを用いてコーティングした。コーティングされたＮＰまたはマイクロ凝集物（１００ｍｇ／ｍｌ）の溶液を、１０ｄｙｎｅ／ｃｍ２の壁剪断応力に対応する流速で１５分間チャネルに注入した。実験の終了時に、チャネルを同じ流速の水を用いて１０分間を超えて洗浄した。蛍光顕微鏡画像を取得して分析し、粒子に覆われた領域を評価した。
【０２６６】
結果および考察
心臓、肺、および脳への正常な血流の破壊が、西洋世界における死亡および成人の長期的な障害の代表的な原因である（Ｃ．Ｊ．Ｌ．Ｍｕｒｒａｙ，Ａ．Ｄ．Ｌｏｐｅｚ，Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ  ３４９，１２６９（１９９７））。冠状動脈梗塞、肺塞栓症、および脳卒中のための緊急治療に対する現行の手法は、数時間にわたる血栓溶解薬の継続した送達を必要とし、血栓溶解薬は、通常は病院環境下での全身投与または閉塞血管内部に配置されたカテーテルを介した投与を必要とする（Ｔ．Ｊ．Ｉｎｇａｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｔｒｏｋｅ  ３５，２４１８（２００４）  ａｎｄ  Ｔ．Ｇ．Ｋｗｉａｔｋｏｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ３４０，１７８１（１９９９））。効果的であるためには、患者は徴候の発現後、数時間以内に治療を受けなければならず、投与することができる血塊溶解薬の用量は、薬物が体全体にわたって自由に分布することができるため、出血の潜在的リスクにより制限される。これらの制限を克服するために、また急性の血管閉塞の徴候が観察された直後に、その場で静脈内投与することができる可能性がある治療を開発するために、本発明者らは、流れが閉塞された部位で薬物を選択的に放出する血栓溶解送達システムの設計に着手した。
【０２６７】
閉塞かつ狭窄した血管は、流体剪断応力が、正常血管における約７０ｄｙｎｅ／ｃｍ２未満から、高度に狭窄した動脈における１，０００ｄｙｎｅ／ｃｍ２超に、１〜２オーダー局所的に増加する点で、近傍の正常血管と識別されるユニークな物理的特性を示す（Ｊ．Ｓｔｒｏｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ−Ｈｅａｒｔ  ａｎｄ  Ｃｉｒｃｕｌａｔｏｒｙ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ２６５，Ｈ１７８７（１９９３）；Ｄ．Ｍ．Ｗｏｏｔｔｏｎ  ＆  Ｄ．Ｎ．Ｋｕ，Ａｎｎｕａｌ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  １，２９９（１９９９）；およびＪ．Ｍ．Ｓｉｅｇｅｌ，Ｃ．Ｐ．Ｍａｒｋｏｕ，Ｄ．Ｎ．Ｋｕ，Ｓ．Ｈａｎｓｏｎ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｂｉｏｍｅｃｈａｎｉｃａｌ  ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  １１６，４４６（１９９４））。循環する血小板は、これらの領域の高い剪断応力により局所的に活性化され、狭くなった血管の隣接表面の裏層に迅速に付着する（Ｚ．Ｍ．Ｒｕｇｇｅｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １０８，１９０３（２００６）；Ｗ．Ｓ．Ｎｅｓｂｉｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １５，６６５（２００９）；およびＳ．Ｇｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ９９，６０８（１９９９））。組織または患者の間で異なりうる別の分子種の発現に注目する薬物ターゲティング機序とは対照的に、剪断応力は、閉塞の原因または場所にかかわらず、すべての患者において、管腔径の狭細の関数として増加する。血小板ターゲティングのこの自然な物理機序に触発されて、本発明者らは、血塊、狭窄症、または発育異常により狭窄する血管領域に薬物送達をターゲティングするための一般的機序として局所的に高い剪断応力を使用する戦略を開発した。
【０２６８】
本発明の血小板ミメティックは、自然な血小板（直径が１〜５μｍ）にサイズの点で類似している。しかしながら、それらは複数のより小さなナノ粒子（ＮＰ）の凝集物として作製される。生理学的な流れ条件下で血液中を流れる場合は、このマイクロスケールの凝集物はインタクトなままであるが、高い局所剪断応力に曝露されると、個々のナノスケール成分に分解し、血管表面に迅速に付着する。ＮＰ−ＮＰ付着が剪断応力に応じて破壊されることに基づいて、これらの領域に特異的に配置されるＮＰ上に関連薬物および酵素を固定化することにより、所望の化学活性または酵素活性を高濃度で、血管閉塞部位に直接送達することができる。
【０２６９】
生体適合性で生分解性のポリ乳酸−ｃｏ−グリコール酸（ＰＬＧＡ  ５０：５０、ＭＷ１７ｋＤａ）の濃縮溶液を噴霧乾燥して、小さな（１８０±７０ｎｍ）ＮＰのマイクロメートルサイズ（３．８±１．６μｍ）の凝集物を形成させることにより、血小板ミメティックを生成した。「方法および材料」、ならびにＪ．Ｃ．Ｓｕｎｇ，Ｐｈａｒｍａ．Ｒｅｓ．，２６：１８４７（２００９）およびＮ．Ｔｓａｐｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９９：１２００１（２００２）、図２Ａを参照のこと。これらは、疎水性により水溶液において安定である（Ｒ．Ｃ．Ｓｏｎｎｔａｇ  ＆  Ｗ．Ｂ．Ｒｕｓｓｅｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｃｏｌｌｏｉｄ  ａｎｄ  ｉｎｔｅｒｆａｃｅ  ｓｃｉｅｎｃｅ  １１３，３９９（１９８６）；Ｈ．Ａ．Ｓｔｏｎｅ，Ａｎｎｕａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｆｌｕｉｄ  Ｍｅｃｈａｎｉｃｓ  ２６，６５（１９９４）；およびＲ．Ｇｒｅｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６３，１６００（１９９４））。ＮＰを一緒に保持する引力に打ち勝つ、血行力学的剪断応力などの機械力に曝露されると、凝集物は、砂の湿ったボールが手でこすられると個々の粒にまさに分散するように、分解する（図２Ｂ）（Ｒ．Ｃ．Ｓｏｎｎｔａｇ  ＆  Ｗ．Ｂ．Ｒｕｓｓｅｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｃｏｌｌｏｉｄ  ａｎｄ  ｉｎｔｅｒｆａｃｅ  ｓｃｉｅｎｃｅ  １１３，３９９（１９８６）ａｎｄ  Ｈ．Ａ．Ｓｔｏｎｅ，Ａｎｎｕａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｆｌｕｉｄ  Ｍｅｃｈａｎｉｃｓ  ２６，６５（１９９４））。
【０２７０】
凝集物の安定性および機械的結着性は、粒子−粒子分子付着力により制御される。ＰＬＧＡをベースとしたＮＰは、本質的に疎水性であり、水溶液中で自己凝集する（Ｃ．Ｅ．Ａｓｔｅｔｅ  ａｎｄ  Ｃ．Ｍ．Ｓａｂｌｉｏｖ，Ｊ．Ｂｉｏｍａｔｅｒ．Ｓｃｉ．，Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｅｄ．，１７：２４７（２００６））。ＰＬＧＡをベースとしたＮＰの従来の用途では、超音波処理を行って、これらの所望しない凝集物を不安定化し、破壊する（Ｋ．Ａｖｇｏｕｓｔａｋｉｓ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，１：３２１（２００４））。本発明者らは、この観察を活用して、流体剪断応力により撹乱されると分解するナノ担体凝集物を設計した。流体力が粒子間の引力に打ち勝つと、粒子は分散する。
【０２７１】
ＮＰ凝集物の剪断誘導による分解を検討するために、本発明者らは、血流計を様々な剪断レベルで使用して、凝集物懸濁液を剪断した。図２Ｃに、サブミクロン（０．４５μｍ）フィルターを通して濾過された、剪断された溶液中のＮＰ濃度を示す。剪断応力が１０ｄｙｎｅ／ｃｍ２を超えるにつれて、ＮＰ濃度が有意に増大した。剪断応力のレベルが多くの血管疾患において妥当な範囲である１００ｄｙｎｅ／ｃｍ２に到達した場合に、ＮＰの放出濃度が応力に応じて８〜１２倍増加することが観察された（図２Ｃ）。これらの剪断応力レベルは、狭窄した血管形状の計算流体力学（ＣＦＤ）モデリングで示されるように、病的狭窄部位での剪断応力と関連する。図２Ｅに、ヒト患者の血管内超音波復元幾何構造のＣＦＤシミュレーションにより得られた、正常および狭窄の右冠状動脈（６０％の管腔閉塞）についての壁剪断応力を示す。例えば、超音波イメージングに基づいた、正常および狭窄のヒト左冠状動脈内の流れの計算流体力学（ＣＦＤ）モデリング（「方法」ならびにＢ．Ｅ．Ｆｉｇｕｅｒｏａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｔｒｏｋｅ  ２９，１２０２（１９９８）およびＣ．Ｄ．Ｍｕｒｒａｙ，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ９，８３５（１９２６）を参照のこと）により、ＮＰ放出を誘導した剪断レベルが６０％の管腔閉塞により生成された剪断レベル（図２Ｄ、Ｅ）に類似し、一方、正常な冠状血管では、剪断応力レベルは１／５である（約１０〜３０ｄｙｎｅ／ｃｍ２）ことが判明した。
【０２７２】
これらの血小板ミメティックが適切な血行力学的流れ条件下でＮＰを放出することができるか否かを判定するために、９０％の管腔閉塞を有する（図３Ａ、Ｂ）、実際の血管領域を模倣するように設計された、ポリ−ジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）から作製の血管狭細三次元（３Ｄ）マイクロ流体モデルにおいて、血行力学条件下でこの手法を試験した。ＣＦＤモデリングに基づくと、このような絞窄により、狭窄部位で剪断が約１００倍増大する（図３Ｃ）。これらのマイクロ流体装置を通した、血小板ミメティック溶液（ＰＢＳ中に１００μｇ／ｍｌ）の灌流により、類似の寸法の閉塞していないマイクロ流体チャネルを流れる流体と比較して、閉塞の下流を流れる溶液で測定すると、遊離ＮＰの放出が１６倍増大した（図３Ｄ）。蛍光顕微鏡イメージングにより、狭くなった領域から若干遠位にある人為的マイクロ流体管の内部表面上で培養された内皮細胞には、放出されたＮＰが蓄積するが、一方絞窄前方のチャネルを裏打ちする細胞では取り込みが最小限であることが確認された（図３Ｅ）。
【０２７３】
本発明者らはさらに、剪断ターゲティング戦略を利用する血栓溶解に関する治療戦略を試験した。現在使用される血栓溶解療法は、病院環境において血塊部位に正確に位置付けなければならないカテーテルを介した局所投与、または組織プラスミン活性化因子（ｔＰＡ）など、血塊を溶解する線維素溶解剤の数時間にわたる全身性送達に基づいている。不幸にも、これら両方の治療に対する主な懸念および制限は、出血（例えば、頭蓋内出血）の重篤な副作用および循環する薬物による神経細胞毒性である（Ｔ．Ｇ．Ｋｗｉａｔｋｏｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，３４０：１７８１（１９９９））。全身性活性は低レベルになるが、所望の部位への治療は一層局所的になる形態で血栓溶解薬を投与することは、このような治療にとって高度に有用となりうる。本発明は、部分的に血管を閉塞するかまたは再疎通中の血塊近くの異常に高い剪断応力を利用して、これらの部位で血栓溶解を局所的に促進する方法を提供する（図４）。この手法は、薬物の循環レベルを顕著に低減すると共に、薬物の血管外漏出、例えば脳組織への拡散を減少させることもできる。
【０２７４】
これらの機能的ポテンシャルを評価するために、本発明者らは、ＦＤＡ認可の血栓溶解薬である組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ）を用いて、蛍光ＮＰを含有する血小板ミメティックをコーティングし、インビトロおよびインビボでそれらが血塊を溶解する能力を試験した（図５）。剪断ターゲティング戦略（図５Ａ）に基づいて、血小板ミメティックは、血流が異常に絞られる領域（図５Ｂ）で選択的に脱凝集する。その結果、血栓溶解薬を含有する脱凝集したＮＰは、塞栓部位に蓄積し、局所的に作用して閉塞を溶解する。油中水型エマルジョン手法（Ｒ．Ｇｒｅｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６３，１６００（１９９４））によって生成した特定サイズ（直径２５０±１５０μｍ）の人為的フィブリン塊を、高さ８０μｍで幅５００μｍの絞窄領域を有するマイクロ流体チャネルに注入すると、これらのフィブリン塞栓は装置内に留まり、チャネルの流れを部分的に閉塞した（図５Ｃ）。ｔＰＡ（５０ｎｇ／ｍＬ）を担持する血小板ミメティック（１００μｇ／ｍｌ）を、これらの同じ装置に生理学的な流速で注入すると、マイクロ凝集物は、剪断が上昇する閉塞領域で分解してｔ−ＰＡコーティングＮＰを放出した。重要なことは、蛍光ｔＰＡコーティングＮＰは、人為的な塞栓の表面に蓄積して、血塊を漸進的に溶解し、処理から１時間を超えずに、それらのサイズを半分縮小した（図５Ｃ）。これに対して、同じ濃度および流れ条件下での可溶性ｔ−ＰＡ酵素による処理では、血塊サイズへの影響は無視できるものであった（５％未満の縮小）（図５Ｄ）。
【０２７５】
上記の結果に基づいて、本発明者らは、生体外の全マウス肺換気灌流モデルにおける、塞栓に起因する急性肺血管閉塞の影響を引き戻すための治療戦略を試験した。マイクロ流体チャネル（図５Ｃ）で試験されたものとサイズが類似した前形成フィブリン塊（１×１０５／ｍＬ）を含有する溶液を、灌流肺（０．１ｍＬ／分で約５分間）の肺動脈を介して注入した。多重マイクロ塞栓（図５Ｅ）による肺微細血管の閉塞は、肺動脈圧を、その正常値と比較して約３倍に増大させた［３０対８ｍｍＨｇ］（図５Ｈ）。次いで、本発明者らは、ｔＰＡコーティング血小板ミメティック（５０ｎｇ／ｍＬのｔＰＡでコーティングされたＮＰを含有する１００μｇ／ｍｌの血小板ミメティック）を、生理学的な流速（０．５ｍＬ／分）で肺動脈を介して灌流した。組織切片の蛍光顕微鏡分析により、ｔＰＡ−ＮＰが血管閉塞領域で選択的に放出されて、これらの部位でＮＰの蓄積が２５倍を超えて増加し、蛍光ＮＰが閉塞する肺塞栓の表面上に高密度で結合することが確認された（図５Ｅ、Ｆ）。ｔＰＡ−ＮＰによる塞栓の漸進的な溶解により、この全肺モデルにおいて、約１時間後に肺動脈圧レベルが正常化した（図５Ｇ、Ｈ）。重要なことには、注入されたｔＰＡコーティングＮＰ上で送達されたものと同じ濃度（５０ｎｇ／ｍｌ）の可溶性ｔＰＡの灌流は、このモデルにおいて、何ら顕著な臨床応答をもたらさなかった（図５Ｇ）。実際、本発明者らが同一流れ条件下で可溶性ｔＰＡを１００倍高濃度（５０００ｎｇ／ｍｌ）で投与した場合のみ、同様の血塊溶解効果が観察された（図５Ｇ）。したがって、血塊溶解および肺塞栓の生理学的症状の回復は、血小板ミメティックを使用して投与する場合には、可溶性ｔＰＡ用量のごく一部分を用いて得られた。さらに、同じ媒体中濃度のｔ−ＰＡの全身灌流は、圧力を低下させなかった−したがって、本明細書に記載の治療戦略の有効性が優れていることが実証された。
【０２７６】
ヒトでは、肺塞栓症による血管閉塞は、高レベルの罹患率および死亡率と関連する（Ｖ．Ｆ．Ｔａｐｓｏｎ，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ３５８，１０３７（２００８））。血栓溶解療法は、現在、病院環境において血管内カテーテルを介した数時間にわたる、可溶性ｔＰＡなどの線維素溶解剤のボーラス投与および／または連続送達に基づいており、主要な副作用として、出血、頭蓋内出血、および神経細胞毒性が挙げられる（Ｔ．Ｇ．Ｋｗｉａｔｋｏｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ３４０，１７８１（１９９９）；Ｓ．Ｇ．Ｓｏｒｉａｎｏ  ＆  Ｓ．Ａ．Ｌｉｐｔｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ４，（１９９８）；およびＢ．Ｅ．Ｆｉｇｕｅｒｏａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｔｒｏｋｅ  ２９，１２０２（１９９８））。この新しい剪断活性化ｔＰＡターゲティング手法は、閉塞性塞栓により血管が異常に狭窄した領域にターゲティングすることにより、循環する薬物レベルを顕著に低下させることができる。血小板ミメティックはまた、活性薬剤が、内皮の透過障壁を横切って容易に拡散しない、はるかに大きな（マイクロメートルサイズの）凝集物の成分であるＮＰに結合しているので、薬物の血管外漏出（例えば、脳組織への拡散）を大幅に減少させるであろう。したがって、この物理学に基づいた薬物送達戦略は、ｔＰＡまたは他の治療剤を使用する治療の安全性および有効性を改善する可能性がある。
【０２７７】
この実施例で使用されたモデル、肺塞栓症−高レベルの罹患率および死亡率と関連した疾患（Ｖ．Ｆ．Ｔａｐｓｏｎ，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，３５８：１０３７（２００８））は、本明細書に記載の治療戦略が目的とする、可能性としてある多数の治療用途のほんの１つを示しているに過ぎない。例えば、脳卒中、急性冠状動脈症候群、心筋梗塞、アテローム性動脈硬化症、末梢血管疾患、血管内膜過形成、血管攣縮、およびもやもや病などの発育異常はすべて、共通の特徴として疾患部位に血管狭細を有する。したがって、剪断活性化薬物送達システムは、実際の血管の設計では、生理学的条件下での仕事量を最小化するために、壁剪断応力を狭くほとんど一定の範囲に制限する傾向があるため、これらの疾患すべてに有用となりうる（Ｃ．Ｄ．Ｍｕｒｒａｙ，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ９，８３５（１９２６）およびＭ．Ｚａｍｉｒ，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ６９，４４９（１９７７））。この物理パラメーターを厳格に調節することは、内皮細胞表現型、遺伝子発現、血小板および赤血球の凝集、動脈形成、ならびに血管壁リモデリングの調節にとって重要である（Ｎ．Ｒｅｓｎｉｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ  １０，１９７（２００３）；Ｊ．Ｊ．Ｈａｔｈｃｏｃｋ，Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ，ａｎｄ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ２６，１７２９（２００６）；Ｏ．Ｋ．Ｂａｓｋｕｒｔ，Ｂｉｏｒｈｅｏｌｏｇｙ  ４５，６２９（２００８）；およびＪ．Ｎ．Ｔｏｐｐｅｒ  ＆  Ｍ．Ａ．Ｇｉｍｂｒｏｎｅ  Ｊｒ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ｔｏｄａｙ  ５，４０（１９９９））。剪断応力は血管径と密接に結合しており（図１Ａ）、したがって、狭窄領域または閉塞領域では、いずれの正常な剪断応力よりも数オーダー高い異常なレベルの剪断応力が形成される。正常な血管では、剪断応力は７０ｄｙｎｅ／ｃｍ２を十分下回っており（Ｊ．Ａ．Ｃｈａｍｐｉｏｎ，Ａ．Ｗａｌｋｅｒ，Ｓ．Ｍｉｔｒａｇｏｔｒｉ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２５，１８１５（２００８））、それによっては本発明者らの血小板ミメティックは活性化されない。これに対して、狭窄部位では剪断応力はこの値を超えて顕著に増大し、時として３，０００ｄｙｎｅ／ｃｍ２ほどの値に到達する（Ｊ．Ｓｔｒｏｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ−Ｈｅａｒｔ  ａｎｄ  Ｃｉｒｃｕｌａｔｏｒｙ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ２６５，Ｈ１７８７（１９９３））。これらの高レベルの剪断により、マイクロスケールのＮＰ凝集物の内部のＮＰ−ＮＰ相互作用が破壊され、それによって、血小板ミメティックが「活性化」されて、そのＮＰ成分が放出される（図１Ａ）。
【０２７８】
本発明は、血行力学的剪断応力の上昇に基づいた治療および薬物送達のための新規組成物および方法に関する。この発見は、西洋世界の代表的な死因であるアテローム性動脈硬化症の治療、血栓溶解療法、および狭窄領域が存在する血管攣縮、もやもや病などの他の血管症状の治療に新たな可能性を開く。本明細書に記載の組成物および方法はまた、体外装置（血液透析など）における剪断誘導凝固イベントを最小化するために有用であり、大きく損傷した血管において血液が小さな裂け目を通して浸潤する場合に内出血をターゲティングするのに使用することができる。
【０２７９】
推進力として、剪断は、種々の長さスケールで単一および集合的要素の形態学的および構造的変化を誘発することができる。剪断応力と、ナノ／マイクロスフェア、マイクロカプセル、およびミクロゲルを含む種々の形態の潜在的薬物担体との間の相互作用が広範囲に研究されている。剪断が増加するにつれて、単一粒子は変形し最終的に破壊される。剪断により誘発されるマイクロカプセル／ナノカプセルの分解は、皮膚にこすりつけると有効成分が放出されるような化粧用製品における使用で成功している。しかしながら、これらの手法または代替手法は、医療用途のためには提案も開発もされていない。
【０２８０】
一態様では、本発明は、狭窄領域を通って流れる場合にはナノ粒子に分解するが、正常な生理学的流れの下ではインタクトのままであるミクロンサイズの凝集物に関する（図１Ａ）；したがって、生理学的な異常−狭窄または部分的に閉塞された領域の血行力学的剪断応力の局所的上昇により駆動される局所送達機構が可能になる。ターゲティング戦略は３段階に基づいている。第１段階では、剪断応力の上昇は、凝集物のナノ粒子への分解を誘導する（図１Ａ）。剪断応力（τ）は、ハーゲン・ポァズィユ流れ条件下で、血管径（ｄ）に強く依存した関数、τ≒ｄ３である；したがって、狭窄部位では、いかなる正常応力よりも数オーダー高い異常なレベルの剪断応力が形成される（Ｊ．Ｓｔｒｏｎｙ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ−Ｈｅａｒｔ  ａｎｄ  Ｃｉｒｃｕｌａｔｏｒｙ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ２６５，Ｈ１７８７（１９９３））。これらの剪断応力レベルが上昇すると、ＮＰ凝集物が分解し、したがって「血小板ミメティック」が活性化される。第２段階では、一旦凝集物が分散すると、分散したナノ粒子は、標的部位での付着および取り込みの増強を示す。流れの下で、ＮＰは、その上に加えられる流体力（Ｆｈｙｄｒｏ）が小さいため（Ｆｈｙｄｒｏ≒ｒ２）、標的領域に付着するが、ミクロンサイズの粒子は付着しない（図１Ｂ）。Ｏ．Ｃ．Ｆａｒｏｋｈｚａｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，７７：５４５３（２００５）も参照のこと。さらに、ＮＰはエンドシトーシスを容易に受け、したがって、それらの細胞成分への効果的なホーミングも増加する。第３段階では、薬物は、標的部位に蓄積するナノサイズ粒子およびＮＰ放出カイネティクスによって調節される制御方法で局所的に送達される（図１Ｃ）。ミクロンサイズの凝集物のＮＰへの分解は、表面積（Ｓ、Ｓ≒ｒ２）を増大させ、それによって薬物放出の増強が可能になる。さらに、ＮＰ放出カイネティクスは調整することができる：迅速介入のための急速もしくは活発な放出、または長時間治療のための受動的持続放出。まとめると、これにより、特定の処方で、狭窄部位に薬物またはイメージング剤を局所的に送達することが可能になる。
【０２８１】
血小板ミメティックにはさらにいくつかの利点が他にある。例えば、サイズが小さいため、ＮＰが受ける流体力（Ｆｈｙｄｒｏ）は小さく（図１Ｂ）、したがって、ＮＰは近傍の内皮表面または血管壁に迅速に付着するが、マイクロメートルサイズの大きな粒子は、流れと共に移動し続ける傾向がある（図１Ｂ）（Ｏ．Ｃ．Ｆａｒｏｋｈｚａｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ  ７７，５４５３（２００５））。小さなＮＰはまた、大きな粒子よりも容易に飲み込まれるため、周囲の内皮細胞内に薬物を選択的に送達するために利用することができる（Ｒ．Ｗｉｅｗｒｏｄｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  ９９，９１２（２００２））。本研究では、マイクロスケール凝集物の表面を薬物でコーティングしたが、高剪断において局所的に送達される薬物の空間選択性および活性は、大きな凝集体を形成させる前に、個々のＮＰを薬物でコーティングすることによってさらに増強することも可能である。これにより、薬物負荷に利用可能な総面積が大きく純増加することになる（図１Ｃ）。
【０２８２】
ＰＬＧＡまたはＰＥＧ−ＰＬＧＡナノ粒子のミクロンサイズのナノ粒子凝集物は、濃縮ＰＬＧＡナノ粒子溶液の自発的な自己会合およびその後の過大サイズの凝集物（＞５ミクロン）に対する濾過によって生成することができる。ＰＬＧＡをベースとするナノ粒子は、本質的に疎水性であり、水溶液中で自己凝集する。凝集物の安定性および機械的結着性は、粒子−粒子分子付着力により制御される。ＰＬＧＡをベースとしたナノ粒子の従来の用途では、超音波処理を行って、これらの所望しない凝集物を不安定化し、破壊する。同様に、流体剪断応力による撹拌は、ナノ担体凝集物の脱凝集を駆動することもできる。
【０２８３】
理論に拘束されたくはないが、狭窄部位の異常な剪断応力は、ミクロンサイズの凝集物を分解し、ナノ粒子を分散させることができる。本発明者らは、血管狭窄状態を模倣するマイクロ流体装置の中にナノ凝集物の溶液を注入した。図７に、０．２２ミクロンのフィルターを通して濾過された溶液の蛍光強度を示す；このように、蛍光強度は溶液中のナノ粒子濃度と相関する。図７により、狭窄模倣部位を通った流れでは、対照および正常な生理学的条件下での流れと比較して、ナノ粒子の濃度が顕著に増加していることがわかる。
【０２８４】
第２段階は、一旦凝集物が分散した場合に、標的部位に吸着して、取り込まれるナノ粒子の高い能力を利用する。流れの下では、ナノ粒子は、それらに加えられる流体力が小さいため、標的領域に付着するが、ミクロンサイズの粒子は付着しない（図１Ｂ）。さらに、ナノ粒子は、エンドシトーシスを容易に受けるため、それらの効果的なターゲティングが増強される。さらに、この手法はＰＬＧＡナノ粒子に基づいており、この粒子をターゲティングペプチドでコーティングして、特定部位への付着をさらに選択的に促進することができる。このようにして、発明者らは、剪断機序を他のターゲティング手法と組み合わせて多機能ターゲティング粒子を示した。
【０２８５】
第３段階では、一旦ナノ粒子が定着すると、薬物は、ナノ粒子放出カイネティクスにより局所に送達される。ミクロンサイズの凝集物がナノ粒子に分解すると、表面積が増加し、その結果、要求された部位での薬物放出の増強が可能になる。次いで、薬物はその部位に存在する細胞により取り込まれることが可能であり、かつ／または薬物は細胞により取り込まれることなく、その部位の表面を覆うことが可能である。
【０２８６】
あるいは、またはさらに、ナノ粒子それ自体が治療活性または生物活性を有することができる。例えば、ナノ粒子に血栓形成性があってもよい（例えば、コラーゲンコーティング粒子など血栓形成剤でコーティングされたナノ粒子、または凝血促進酵素／タンパク質でコーティングされた、もしくはそれを被包するナノ粒子）。分解すると、凝集物は、出血部位（すなわち、高容量が血管壁の小さな穴を通り抜けるため、剪断が高くなる部位）にのみ凝血促進剤を放出することになる。しかし、そうでなければ、それらはステルスになり、生分解性の場合、胆汁または尿中に排出される。
【０２８７】
このようにして、本発明者らは、ナノ粒子凝集物の剪断誘導脱凝集およびナノ粒子の生物物理学的特性を使用して、狭窄血管の多機能ターゲティングのための新規戦略を作成することができることを発見した。この新規戦略は、アテローム性動脈硬化症、脳卒中、肺塞栓症、および血管または体内の流体で満たされた他の中空チャネルの狭細または閉塞を含む他の血行力学に関連する障害の非侵襲的治療のための全く新しい治療手法を提供する。
【０２８８】
本明細書に記載の結果は、病態生理学的機序により触発された工学的手法をどのようにして生物模倣型の治療システムの開発に使用することができるかについて説得力のある例を提供する。本明細書に記載のターゲティング薬物送達システムは、閉塞の原因または場所にかかわらず、狭くなった血管の物理的特性である局所剪断応力の増加に基づいているので、従来の生化学的ターゲティング手法（例えば、特異的細胞表面抗原を使用する）とは異なる。剪断活性化送達技術には、実際の血小板がまさに行うように、正常な小血管および大血管に存在する流体剪断応力レベルの下ではインタクトなままであるが、高剪断（＞１００ｄｙｎｅ／ｃｍ２）を特徴とする病的領域では脱凝集し、それらの活性なＮＰ成分を送達する、ＮＰのマイクロ凝集物の作製が含まれる。マイクロスケールの凝集物とは対照的に、分散したＮＰは、より小さな流体抵抗のため、近傍の血管壁の表面に迅速に付着するが、これは、内皮細胞またはフィブリン塊などの適切な血管標的に結合する、ＮＰ上の表面コーティング（例えば、本研究ではｔＰＡ）によりさらに増強することができる。その結果、静脈内に投与された薬物を高い局所濃度で、血管の複数の閉塞領域に同時に選択的に送達することができ、同様の手法を使用すれば、これらの狭窄部位にイメージング剤を濃縮することもできよう。この生物模倣型戦略は治療介入のために新しい経路を提供し、この経路では、肺塞栓症、脳卒中、または血管が急性閉塞された他の疾患の患者に、病院環境に患者を運搬する前に、診断時直ぐに救急医療士または医師が全身投与することにより、救命治療を施すことができる。
【０２８９】
実施例３：ＲＢＣからの剪断応力制御放出
赤血球ゴーストは低張溶血法を使用して調製した。手短に言えば、ＲＢＣを血液から遠心分離（２０００ｇ、１０分）し、カルシウム／マグネシウムフリーの希釈ＰＢＳ（ＰＢＳとＤＤ水との体積比が１：１０）に再懸濁した。細胞を４℃で１５分間インキュベートし、次いで、遠心分離した（１２，０００ｇ、１０分間）。この工程を４回繰り返した。その後、希釈ＰＢＳ中で５ｍｇ／ｍｌのデキストランと共に細胞を４℃で１時間インキュベートすることにより、ＦＩＴＣ−デキストランを細胞に負荷した。細胞を遠心分離し、Ｃａ／Ｍｇを含むＰＢＳ緩衝液中に懸濁して、３７℃インキュベーター中で、２時間超の間再シール形成させた。再シール形成手順に従って、細胞をＰＢＳ中で４回洗浄して、溶液中のいかなる残留物も除去した。図８に、ＦＩＴＣ−デキストラン負荷ゴーストの調製５日後に取り出したＦＩＴＣ−デキストラン負荷ＲＢＣゴーストの蛍光画像を示す。
【０２９０】
ＦＩＴＣ−デキストラン負荷ＲＢＣゴーストの懸濁液を、狭窄領域がない装置（高さ６４０ミクロンのチャネル、壁剪断応力１０ｄｙｎｅ／ｃｍ２）または狭窄領域がある装置（８０％狭窄、高さ８０ミクロン）の中に注入した。次いで、この懸濁液を遠心分離し、０．２２μｍフィルターを通して濾過してＲＢＣを除去し、蛍光強度を測定した。図９に示すように、流れが誘導した放出は、狭窄なしの場合と比較して、狭窄ありの場合に２倍超高くなった。
【０２９１】
実施例４：マイクロカプセルからの剪断応力制御放出
ナノカプセルについては、ローダミン色素を被包するＰｌｕｒｏｎｉｃ／ポリ（エチレンイミン）（Ｆ１２７／ＰＥＩ）ナノカプセルを、以前に報告された方法（Ｓ．Ｈ．Ｃｈｏｉ，Ｓ．Ｈ．Ｌｅｅ  ＆  Ｔ．Ｇ．，Ｐａｒｋ，Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ−ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  ｐｌｕｒｏｎｉｃ／ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｉｍｉｎｅ）ｎａｎｏｃａｐｓｕｌｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅｒｍａｌｌｙ  ｔｒｉｇｇｅｒｅｄ  ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｅｎｄｏｓｏｍａｌ  ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．２００６  Ｊｕｎ；７（６）：１８６４−７０）を少し改変した乳化／溶媒蒸発により調製した。手短に言えば、ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ１２７を、トルエン中でｐ−ニトロフェニルクロロホルマートを用いて、室温で２４時間活性化した。生成物をエーテル中に沈殿させ、１Ｈ  ＮＭＲで特徴づけた。ナノカプセルを調製するために、３０％の活性化Ｆ１２７および少量の疎水性色素（ローダミン）をジクロロメタン（１ｍｌ）に溶解し、次いで、ＰＥＩ水溶液（７．５ｗ／ｖ、ｐＨ９）１０ｍｌに滴加した。この混合物を室温で約１時間撹拌して、ナノ／マイクロカプセルを得ると共に、捕捉されたジクロロメタンを蒸発させた。次いで、得られたマイクロカプセルを、遠心分離または中和してｐＨ４の水に対する透析のいずれかにより精製した。
【０２９２】
ＦＩＴＣ−デキストラン（７０ｋＤａ）負荷Ｐｌｕｒｏｎｉｃ−ＰＥＩマイクロカプセルの懸濁液を、狭窄領域がない装置（高さ６４０ミクロンのチャネル、壁剪断応力１０ｄｙｎｅ／ｃｍ２）または狭窄領域がある装置（８０％狭窄、高さ８０ミクロン）の中に注入した。次いで、この懸濁液を遠心分離し、０．２２μｍフィルターを通して濾過してマイクロカプセルを除去し、蛍光強度を測定した。図１０に示すように、流れが誘導した放出は、狭窄なしの場合と比較して、狭窄ありの場合に２倍超高くなった。
【０２９３】
参考文献
2018065823.tif 000013
2018065823.tif 000014
【０２９４】
本明細書に記載されたすべての特許および他の刊行物の内容は、あらゆる目的のために、参照により本明細書に明示的に組み込まれる。これらの刊行物は、本出願の出願日前の開示内容のためにのみ提示するものである。この点に関しては何も、本発明者が、先行発明の理由で、または任意の他の理由で、そのような開示に先行する権利がないと認めるものとして解釈されるべきではない。日付に関する供述またはこれらの文書の内容についての表現は、本出願人が入手可能な情報に基づくものであり、これらの文書の日付または内容の正確性に関して何ら是認することを構成するものではない。
【図１Ａ】
2018065823.tif 000019
【図１Ｂ】
2018065823.tif 000020
【図１Ｃ】
2018065823.tif 000021
【図２Ａ】
2018065823.tif 000022
【図２Ｂ】
2018065823.tif 000023
【図２Ｃ】
2018065823.tif 000024
【図２Ｄ】
2018065823.tif 000025
【図２Ｅ】
2018065823.tif 000026
【図３Ａ】
2018065823.tif 000027
【図３Ｂ】
2018065823.tif 000028
【図３Ｃ】
2018065823.tif 000029
【図３Ｄ】
2018065823.tif 000030
【図３Ｅ】
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【図４】
2018065823.tif 000032
【図５Ａ】
2018065823.tif 000033
【図５Ｂ】
2018065823.tif 000034
【図５Ｃ】
2018065823.tif 000035
【図５Ｄ】
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【図５Ｅ】
2018065823.tif 000037
【図５Ｆ】
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【図５Ｇ】
2018065823.tif 000039
【図５Ｈ】
2018065823.tif 000040
【図６】
2018065823.tif 000041
【図７】
2018065823.tif 000042
【図８】
2018065823.tif 000043
【図９】
2018065823.tif 000044
【図１０】
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【配列表】
2018065823000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成29年12月19日(2017.12.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
複数のナノ粒子および治療剤を含む凝集物の、対象の狭窄症および／または狭窄病変および／または閉塞病変および／または内出血を治療するための薬物の製造における使用。
【請求項２】
前記狭窄症が、間欠性跛行、末梢動脈狭窄症、アンギナ、冠状動脈狭窄症、頚動脈狭窄症、大動脈弁狭窄症、ボタン穴狭窄症、石灰化結節性狭窄症、冠状動脈口狭窄症、二重大動脈狭窄症、魚口僧帽弁狭窄症、特発性肥厚性大動脈弁下部狭窄症、漏斗部狭窄症、僧帽弁狭窄症、筋性大動脈弁下部狭窄症、心筋梗塞、肺動脈弁狭窄症、肺動脈塞栓症、肺高血圧症、大動脈弁下部狭窄症、弁下部狭窄症、大動脈弁上部狭窄症、三尖弁狭窄症、腎動脈狭窄症、幽門狭窄症、胃の流出閉塞、閉塞性黄疸、胆管狭窄症、腸閉塞症、包茎、水頭症、狭窄性腱鞘炎、脊椎管狭窄症、脳卒中、声門下狭窄症、高血圧症、鎌状赤血球貧血症、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項1に記載の使用。
【請求項３】
前記狭窄症が、外傷または損傷、アテローム性動脈硬化症、先天性欠損、糖尿病、塞栓症、医原病、感染、炎症、虚血、腫瘍、血管攣縮、冠血管攣縮、レイノー現象、脳卒中、血液凝固、モヤモヤ病、高安病、結節性多発動脈炎、播種状エリトマトーデス、関節リウマチ、脊椎腫瘍、骨ページェット病、フッ素症、血液透析、鎌状赤血球貧血症、ならびにそれらの任意の組合せに起因する、請求項1に記載の使用。
【請求項４】
前記狭窄症が、血管攣縮、収縮性の増強、発育異常、脳卒中、網膜動脈梗塞、もしくはアテローム斑の形成による、請求項1に記載の使用。
【請求項５】
前記狭窄症が、狭窄病変、閉塞病変、動脈狭窄症、もしくは末梢動脈狭窄症である、請求項1に記載の使用。
【請求項６】
前記閉塞病変が、肺動脈塞栓症もしくは心筋梗塞による、請求項5に記載の使用。
【請求項７】
前記治療剤が、抗トロンビン剤、血栓溶解剤、線維素溶解剤、および血管拡張剤からなる群から選択される、請求項1に記載の使用。
【請求項８】
前記治療剤が血管拡張剤である、請求項1に記載の使用。
【請求項９】
前記治療剤が血栓溶解剤である、請求項1に記載の使用。
【請求項１０】
前記血栓溶解剤が組織型プラスミノーゲン活性化因子である、請求項9に記載の使用。
【請求項１１】
前記治療剤がナノ粒子に共有結合している、請求項1に記載の使用。
【請求項１２】
前記治療剤が、血栓形成促進剤（pro-thrombotic agent）、線維素形成誘導剤、血小板凝集誘導剤、および血管収縮剤からなる群から選択される、請求項1に記載の使用。
【請求項１３】
前記ナノ粒子が、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー（PLGA）を含む、請求項1に記載の使用。
【請求項１４】
前記ナノ粒子が、PLGAもしくはポリエチレングリコール（PEG）-PLGAを含む、請求項1に記載の使用。
【請求項１５】
前記ナノ粒子がPLGAを含み、PLGAが約17kDaの分子量を有する、請求項1に記載の使用。
【請求項１６】
前記ナノ粒子がPEG-PLGAを含み、PEGが約4kDaの分子量およびPLGAが約17kDaの分子量を有する、請求項1に記載の使用。
【請求項１７】
前記ナノ粒子が、アミノ酸配列CREKA（配列番号：1）、CRKRLDRNK（配列番号：2）、もしくはCHVLWSTRC（配列番号：3）を有するペプチドをさらに含む、請求項1に記載の使用。
【請求項１８】
狭窄領域の剪断応力が、非狭窄領域と比較して、少なくとも１倍高い、請求項1に記載の使用。
【請求項１９】
非狭窄領域の剪断応力が、正常な生理学的剪断応力である、請求項1に記載の使用。
【請求項２０】
狭窄領域の剪断応力が、少なくとも70dyn/cm2である、請求項1に記載の使用。
【請求項２１】
前記凝集物が狭窄領域の剪断応力に曝露された場合に、該凝集物が非狭窄領域の剪断応力に曝露された場合と比較して、前記ナノ粒子の少なくとも10％が該凝集物から放出される、請求項1に記載の使用。