(57)【要約】【課題】機能強化する微生物の組み合わせを迅速に探索するために、異種微生物の効率的な集団化方法を提供する。【解決手段】異種微生物の集団化方法である。複数種の微生物（例えば、ラン藻と大腸菌）を磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL: Magnetite cationic liposome）などにより、磁性化して複数種の磁性化微生物とし、これら複数種の磁性化微生物を磁力により引きつけて集団化する。好ましくは、磁石の上に置いた剣山状鉄製デバイスを用意し、その上に磁性化微生物を入れた容器を載せる。【選択図】図１
2018046785.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
異種微生物の集団化方法であって、
複数種の微生物を磁性化して複数種の磁性化微生物とし、
前記複数種の磁性化微生物を磁力により引きつけて集団化する異種微生物の集団化方法。
【請求項２】
前記微生物に磁性微粒子を保持させることにより、前記微生物を磁性化する請求項１に記載の異種微生物の集団化方法。
【請求項３】
前記磁性微粒子は、磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL: Magnetite cationic liposome）内の磁性微粒子である請求項１又は２に記載の異種微生物の集団化方法。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の異種微生物の集団化方法によって、
異種微生物の人工的な共生関係を構築する共生関係構築方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、異種微生物の集団化方法、及び共生関係構築方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
自然環境の中で、微生物は複数種が共生し、互いに助け合いながら生活している。ところが、人間が微生物の機能を工業的に利用する際、例えば、アルコール発酵に利用する際には、単一種の微生物を単離して利用している場合が多い。このような微生物の利用では、本来、微生物が持つ機能を生かしきれていないと考えられている。
このような状況の下、共生を利用して、微生物の機能を強化する技術が検討されている。例えば、次の技術が知られている。２種微生物の共生を利用し環境汚染物質を分解する技術である（特許文献１参照）。この技術は、混合微生物を用いて塩素化エチレン類または塩素化エタン類で汚染された環境を浄化する技術である。また、２種微生物の共生を利用し新規抗生物質を生産する技術が開示されている（非特許文献１参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２０１４−１０８０６１号公報
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Appl. Environ. Microbiol. Feb. 2011. p.400-406 Vol.77. N0.2.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
これらの技術では、単離した微生物を組み合わせた上で培養して評価しており、長い地道な作業が必要である。そして、微生物の組み合わせを評価するためには、その前提として、異種微生物を集団化する必要があり、効率的な異種微生物の集団化方法が切望されていた。
本発明は、上記実情に鑑みてなされたものであり、機能強化する微生物の組み合わせを迅速に探索するために、異種微生物の効率的な集団化方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、新規な異種微生物の集団化方法を開発した。
そして、この方法によれば、効率的に異種微生物の集団を形成でき、機能強化する微生物の組み合わせの迅速な探索に貢献できるということを見いだした。この成果に基づいて、次の発明を提供する。
【０００７】
〔１〕異種微生物の集団化方法であって、
複数種の微生物を磁性化して複数種の磁性化微生物とし、
前記複数種の磁性化微生物を磁力により引きつけて集団化する異種微生物の集団化方法。
【０００８】
〔２〕前記微生物に磁性微粒子を保持させることにより、前記微生物を磁性化する〔１〕に記載の異種微生物の集団化方法。
【０００９】
〔３〕前記磁性微粒子は、磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL: Magnetite cationic liposome）内の磁性微粒子である〔１〕又は〔２〕に記載の異種微生物の集団化方法。
【００１０】
〔４〕  〔１〕〜〔３〕のいずれか１項に記載の異種微生物の集団化方法によって、
異種微生物の人工的な共生関係を構築する共生関係構築方法。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の異種微生物の集団化方法によれば、効率的に異種微生物の集団を形成できる。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
本発明について、本発明による典型的な実施形態の非限定的な例を挙げ、言及された複数の図面を参照しつつ以下の詳細な記述にて更に説明する。
【図１】異種微生物の集団化方法の一実施形態を表す説明図である。
【図２】形成した異種微生物の集団の蛍光顕微鏡像（画像処理済み）である。
【図３】形成した異種微生物の集団の蛍光顕微鏡像（画像処理済み）である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、本発明を詳しく説明する。
本発明は、複数種の微生物を磁性化して複数種の磁性化微生物とし、複数種の磁性化微生物を磁力により引きつけて集団化する異種微生物の集団化方法である。
【００１４】
〔微生物〕
複数種の微生物とは、異なる２種以上の微生物を意味する。微生物の種類は特に限定されない。微生物としては、例えば、大腸菌、枯草菌、乳酸菌、好熱性菌などの細菌、ラン藻、酵母（例えばパン酵母、ビール酵母など）、カビ（アオカビなど）、藻類（例えば、緑藻、褐藻、紅藻など）、ウイルス（例えば、レトロウイルス、カゼウイルス、アデノウイルス、ノロウイルスなど）、原虫（例えば、線虫など）などが好適に例示される。
なお、これらは天然に存在するものであってもよいし、あるいは遺伝子組換技術を利用して製造されたものでもよい。
【００１５】
〔微生物の磁性化〕
異種微生物の集団化方法において、微生物の磁性化の方法は特に限定されないが、好ましくは磁性粒子を導入又は付着することによって行う。磁性粒子は、微生物に保持されることで細胞に磁性を付加するものであれば特に限定されない。例えば、磁性材料の粒子（磁性粒子）を用いることができる。具体的には、フェライト、マグネタイトなどの酸化鉄の粒子、酸化クロムの粒子、コバルトの粒子などを用いることができる。磁性粒子は、１種あるいは２種以上を組み合わせて用いることができる。磁性粒子は、微生物と親和性のある表面を有していることが好ましく、例えば、リポソームなどの脂質膜を表面に備える磁性粒子を用いることができる。また、表面に正電荷を備えることも好ましい。例えば、磁性粒子をリポソームに封入した磁性粒子封入リポソーム（ML: MagnetoliposomeあるいはMagnetite liposome）、磁性粒子を正電荷リポソームに封入した磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL: Magnetite cationic liposome）を用いることができる。磁性粒子が微生物と親和性のある表面を有することで、磁性粒子が微生物へ付着すること、又は磁性粒子が微生物に取り込まれることを可能としている。なお、磁性粒子が微生物へ付着すること、又は磁性粒子が微生物に取り込まれることによって、微生物を確実に磁性化できる。
微生物の磁性化を、磁性粒子封入リポソーム（ML）、磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）で行う場合には、PBS（リン酸緩衝生理食塩水）、TBS、LB、M9、BG11、R2A等を使用すると、スムーズに微生物の磁性化が行われる。
なお、磁性粒子封入リポソーム（ML）、磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）は、レクチンや抗体等のタンパク質、糖鎖、ペプチド、その他の分子によって修飾されていてもよい。修飾することによって、微生物との親和性が高まる場合がある。
【００１６】
磁性粒子の粒径は特に限定されない。また、上述の磁性粒子封入リポソーム（ML）、磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）の粒径は、特に限定されない。磁性粒子封入リポソーム（ML）、磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）の粒径は、例えば５ｎｍ〜１００μｍが好適である。
磁性粒子の使用量は、微生物の種類などに応じて適宜選定することができる。磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）を採用するときには、磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）を１微生物当り磁性微粒子として１〜１５０ｐｇ、特に２０〜１５０ｐｇ使用することが好ましい。また、磁性化するに際しては、微生物と磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）との接触を開始してから０．５〜８時間後、特に３〜５時間後に次工程へ進むことが好ましい。磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）の使用量を上記範囲内にすると、磁力による集団化が適切になされるとともに、コストの面からも有利である。
【００１７】
磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）の一例を図１に示す。図１に示した磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）は、マグネタイト等の磁性ナノ粒子が、正電荷脂質を含有するリポソームに封入された構造を備える。磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）は表面に正電荷を帯びているために微生物への接着性（付着性）に優れるとともに、リポソームを構成成分とするために微生物内へと取り込まれやすい。このような特性を備える磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）は様々な微生物の磁性化に適する。磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）は、例えばJpn.J. Cancer Res.第87巻第1179〜1183頁（1996年）に記載された磁性粒子封入正電荷リポソームの製造方法を参照して調製することができる。
【００１８】
〔磁性化微生物の磁力による集団化〕
磁性化微生物の磁力による集団化は、磁力を磁性化微生物に作用させて行う。
磁力による集団化は例えば次のように行う。すなわち、磁性化微生物を播種する培養面の後方に（即ち、培養面の裏面側に）、所定のパターンで磁石を配置する。このようにすると、培養面のうち磁石が配された位置において二次元的なパターンの磁力が微生物に作用する。容器として培養皿を使用する場合、典型的には、所定のパターンで配置された磁石の上に培養皿を設置することになる。培養皿の場合は通常、内底面が培養面となるが、容器の種類や形態の如何によっては容器の内底面以外の内壁面が培養面に設定される場合がある。
なお、容器は、特に限定されない。例えば、公知の各種培養容器を用いることができる。通常、培地を保持あるいは貯留するため底面を有する容器である培養容器を用いることができる。
また、磁性化微生物の磁力による集団化を、磁性粒子封入リポソーム（ML）、磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）を用いて行う場合には、PBS（リン酸緩衝生理食塩水）、TBS、LB、M9、BG11、R2A等を使用すると、スムーズに微生物の集団化が行われる。
【００１９】
本発明の一実施形態では、特定の微生物（「第１微生物」ともいう）を磁性化して第１磁性化微生物とする。また、特定の微生物（「第２微生物」ともいう）を磁性化して第２磁性化微生物とする。そして、第１磁性化微生物及び第２磁性化微生物を容器に導入し、容器内の特定の位置に磁力を作用させる。すると、磁力が放出されている特定位置では、第１磁性化微生物及び第２磁性化微生物が引きつけられて固定される。すなわち、磁力により、容器内の同じ位置において、第１磁性化微生物及び第２磁性化微生物が固定されて、両者は集団化する。このように本発明では、磁力により種類の異なる微生物が接触して、又は近距離に位置して確実に集団化するので、共生によって相手方微生物の機能を強化するか否かを適切に評価することができる。
容器に、第１磁性化微生物及び第２磁性化微生物を導入するに際して、導入する順序は特に限定されない。また、両者をほぼ同時に容器に導入してもよい。
なお、磁力により種類の異なる微生物が、接触した状態で又は近距離で存在した状態で集団されているか否かの確認方法は、特に限定されない。例えば、光学的に蛍光顕微鏡などを用いて、異なる微生物の存在部位を調べることにより、両者が集団化していることを確認することができる。
【００２０】
本発明では、第１磁性化微生物には、１種あるいは２種以上の磁性化微生物を用いることができる。２種以上とした場合には、第１磁性化微生物の種類ごとに別の位置に固定することができる。例えば、具体的には、それぞれ種類が異なるｎ種類の第１磁性化微生物を、第１磁性化微生物（１−１）、第１磁性化微生物（１−２）、第１磁性化微生物（１−３）、第１磁性化微生物（１−４）、第１磁性化微生物（１−５）・・・第１磁性化微生物（１−ｎ）とした場合（ｎは自然数）に、これらの第１磁性化微生物を所定距離離隔して別の場所に固定する。次に、第２磁性化微生物を固定することができる。すると、第１磁性化微生物（１−１）と第２磁性化微生物の集団、第１磁性化微生物（１−２）と第２磁性化微生物の集団、第１磁性化微生物（１−３）と第２磁性化微生物の集団、第１磁性化微生物（１−４）と第２磁性化微生物の集団、第１磁性化微生物（１−５）と第２磁性化微生物の集団、・・・第１磁性化微生物（１−ｎ）と第２磁性化微生物の集団、という多様な微生物の組み合わせの集団が１つの容器内に形成される。従って、この容器を用いれば、多様な微生物の組み合わせを同時に評価することができ、機能を強化する組み合わせの探索が容易であり、微生物の組み合わせを１つずつ評価するよりも、効率的である。
すなわち、同一の容器内に、微生物の組み合わせ方が異なる２種以上の異種微生物の集団が形成されている態様を採用することができる。
【００２１】
集団化に用いる磁石の種類は特に限定されない。例えば、永久磁石又は電磁石を用いることができる。電磁石を使用すれば、通電状態をコントロールすることによって磁力を制御可能である。永久磁石は、特に限定されない。永久磁石としては、例えば、鋳造磁石（アルニコ磁石、鉄・クロム・コバルト磁石を含む）、塑性加工磁石（Fe-Mn系、Fe-Cr-Co系を含む）、フェライト磁石（Ba系、Sr系を含む）、希土類磁石（Sm-Co系、Nd-Fe-B系を含む）、ボンド磁石（Sm-Co系、Nd-Fe-B系、Sm-Fe-N系を含む）が好適に例示される。
【００２２】
磁力を作用させる時間は、使用する磁石の種類、磁性粒子の種類などに応じて適宜選定することができる。例えば５秒〜７２時間である。
【００２３】
磁石から放出される磁力を直接利用するのではなく、磁石から放出される磁力を他の部材に伝搬させた後に利用してもよい。例えば、Fe、Co、Ni、Fe-C、Fe-Ni、Fe-Co、Fe-Ni-Co-Al、Fe-Ni-Cr、SmCo5、Nd2Fe14B、Fe3O4、γ-Fe2O3、BaFe12O19等のように磁力を伝搬する特性の部材を磁石に接触又は近接させれば、この部材の表面（端面など）から磁力を放出させることが可能である。この構成に用いられる部材の形状、構造は特に限定されない。この部材の具体例として、図１に示す剣山状磁石デバイス（「剣山状デバイス」ともいう）が挙げられる。剣山状デバイスは例えば鉄製であり、その上面側には所定の間隔で規則的に多数のピン（支柱）が形成されている。ピンの配列は、ランダムであってもよいが、ここでは、アレイ状、すなわち、格子（複数の縦の線と横の線が交差した状態）の交差部分に規則的に並べた配列を例示している。ピンの高さ及び間隔は微生物の種類などに応じて適宜選定することができる。
【００２４】
ここで、異種微生物の集団化方法の一例を、図１を参照して説明する。この例では、剣山状デバイスを用いている。また、複数種の磁性化微生物として、磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）により磁性化した大腸菌と、レクチン修飾MCLにより磁性化したラン藻を用いている。
（１）第１微生物（例えば、大腸菌）に磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）を付着又は取り込ませて、第１微生物を第１磁性化微生物とする。
（２）第２微生物（例えば、ラン藻）にレクチン修飾MCLを付着又は取り込ませて、第２微生物を第２磁性化微生物とする。なお、第２微生物の種類に応じてレクチン修飾されていないMCLを作用させることも可能である。
（３）容器内に第１磁性化微生物及び第２磁性化微生物を入れる。
（４）容器の下方から磁力を作用させる。例えば、磁石の上に置いた剣山状デバイスを用意し、剣山状デバイスの上に容器を載せる。この状態で所定時間放置する。すると、剣山状デバイスの各ピンから放出される磁力により、各ピンの上方に、第１磁性化微生物及び第２磁性化微生物が集合する。このように、各ピンの上方には、第１磁性化微生物及び第２磁性化微生物が集合するから、異種微生物の集団が形成されることになる。
尚、剣山状デバイスを用いる場合には、ピンの形状、大きさ、間隔、配置態様などは、適宜設定することができる。
【００２５】
〔本実施形態の集団化方法の効果〕
本実施形態の異種微生物の集団化方法は、複数種の微生物を磁性化して複数種の磁性化微生物とし、複数種の磁性化微生物を磁石の磁力により引きつけて集団化しているから、簡便な方法で効率的に異種微生物の集団を形成できる。磁性化のために、磁性微粒子を用いると、確実に微生物の磁性化が行える。特に磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）を用いると、磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）の微生物に対する高い親和性から、効率的に微生物を磁性化できる。
【００２６】
〔共生関係構築方法及び効果〕
本発明の共生関係構築方法は、上述の異種微生物の集団化方法によって、異種微生物の人工的な共生関係を構築する方法である。この共生関係構築方法では、磁力を用いているから、簡便かつ低コストで共生関係を構築できる。
【実施例】
【００２７】
以下、実施例により更に具体的に説明する。
【００２８】
１．磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）、及びレクチン修飾MCLの作製
（１）磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）の作製
磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）は、（Ａ）脂質薄膜作製工程、（Ｂ）脂質薄膜にマグネタイトを添加するリポソーム作製工程、を順に行い作製した。各工程について、詳細に説明する。
【００２９】
（Ａ）脂質薄膜作製工程
下記化合物をクロロホルムに溶解してナス型フラスコに入れた。内容物を湯浴にて40℃とし、回転しながら減圧乾燥することで、ナス型フラスコ底面に脂質薄膜を形成した。
1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine    6.637mg
1,2-dilauroyl-sn-glycero-3-phosphocholine        5.583mg
N-(α-trimethylammonioacetyl)‐didodecyl -D-glutamate chloride    2.78mg
【００３０】
（Ｂ）リポソーム作製工程
水に分散したマグネタイト（7mg/mL）を、（Ａ）で作製した脂質薄膜の上に2mL滴下した。その後、激しく撹拌し薄膜を溶解させた後、1時間超音波処理して磁性粒子封入正電荷リポソーム（MCL）を得た。
【００３１】
（２）レクチン修飾MCLの作製
下記化合物を1mLの水に溶解し、25℃で24時間撹拌して、MCLにレクチンを修飾した。その後、透析チューブ（100,000 MWCO、再生セルロース、Spectrum Laboratories, Inc., CA）に入れ、24時間透析した。レクチン修飾MCLを取り出し、1.8μgのグリシンを加え3時間撹拌した。このように処理したレクチン修飾MCLを再び透析チューブに入れ、48時間透析して目的とするレクチン修飾MCLを得た。
MCL    1.1mg-マグネタイト
Lectin (LCA)    250μg
1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride    300μg
N-Hydroxysuccinimide    180μg
【００３２】
２．異種微生物の集団化
異種微生物の集団化は、（１）各微生物の磁性化、（２）異種微生物集団化と配列の順で行った。異種微生物の集団化は、（３）蛍光顕微鏡観察で評価した。
【００３３】
（１）各微生物の磁性化
（Ａ）大腸菌の磁性化
大腸菌(Escherichia coli BW25113)は、LB(Luria-Bertani medium)液体培地で、37℃、12時間、200rpmで振とう培養することで得た。LB液体培地の組成は以下の通りである。
次に、大腸菌  4.86×108個、MCL  0.32mg-マグネタイトを1mLのPBS（リン酸緩衝生理食塩水）に入れ、室温で2時間静置し、大腸菌を磁性化した。磁性化された大腸菌を含有するPBSを、PBSで45倍に希釈した。PBSの組成は以下の通りである。
（LB液体培地組成）
トリプトン      10g/L
酵母エキス      5g/L
塩化ナトリウム  10g/L
（PBS組成）
NaCl  8g/L
KCl  0.2g/L
Na2HPO4・12H2O  2.9g/L
KH2PO4  2g/L
【００３４】
（Ｂ）ラン藻の磁性化
ラン藻(Synechococcus elongatus PCC7942)は、BG11液体培地を用いて、37℃、1週間、光照射下(50μmol photons m-2 s-1)で静置培養することで得た。BG11液体培地の組成は以下の通りである。
そして、ラン藻   1.64×106個、レクチン修飾MCL  0.096mg-マグネタイトを1mLのPBSに入れ、室温で2時間静置し磁性化した。
（BG11液体培地組成）
KNO3    1.5 g/L
(NH4)3SO4    0.4955g/L
citric acid anhydrate ferric citrate    0.006g/L
Na2EDTA    0.001g/L
NaCl    1.03g/L
K2HPO4    0.039g/L
MgSO4    0.073g/L
CaCl2・2H2O    0.038g/L
Na2CO3    0.020g/L
H3BO3    0.00286g/L
MnCl2・4H2O    0.00181g/L
ZnSO4・7H2O    0.000222g/L
Na2MoO4・2H2O    0.00039g/L
CuSO4・5H2O    0.000079g/L
CoCl2・6H2O    0.00004g/L 
【００３５】
（２）異種微生物集団化と配列
（１）で磁性化した各微生物を含有するPBSを1mLずつ、等量混合して2mLの磁性化微生物溶液とし、これに蛍光色素Acridine orangeを1μg添加した。ネオジウム磁石の上に置いた剣山状デバイスの上にlumox dish(SARSTEDT, N?mbrecht, Germany)を置き、そのlumox dishの中に、蛍光色素を加えた磁性化微生物溶液を2mL入れ、25℃で2時間静置し、異種微生物の集団化と配列を行った。
なお、剣山状デバイスは、例えば、Biotechnol Prog 29(1):135-142.に記載された方法に準じて作製することができる。本実験に用いた剣山状デバイスは具体的には、6400本のピンを持つ磁性デバイスである。これは、ワイヤカット放電加工機（DIAX-FX10、三菱電機）とカッティングワイヤ（直径100μm、住友電工）を使用して作製した。なお、基材の大きさは、20mm(縦)×20mm（横）×10mm（高さ）とし、ピンの大きさは100μm(縦)×100μm（横）×320μm（高さ）とした。
【００３６】
（３）蛍光顕微鏡観察
（Ａ）観察方法
（２）で集団化し配列した微生物を、蛍光顕微鏡（顕微鏡：OLYMPUS IX70、光源：水銀灯）を用いて観察した。なお、大腸菌、ラン藻は、それぞれ下記に示す異なる波長で発光するので両者を区別することができる。
大腸菌：Acridine orangeの蛍光（励起470-490nm、蛍光515-550nm）
ラン藻：クロロフィルの自家蛍光（励起520-550nm、蛍光580nm以上）
【００３７】
（Ｂ）観察結果
図２、図３に試験結果を示す。これらの図は、蛍光顕微鏡の画像を画像処理したものである。図２には、１０倍の倍率で観察した画像を示す。白丸がラン藻を示し、黒丸が大腸菌を示している。破線で囲まれた領域にラン藻と大腸菌の集団が形成される部分が観察された。また、１０倍の倍率での観察から、集団化したラン藻と大腸菌は、剣山状デバイスのピンの配置に対応して、アレイ状に配列していることが確認された。
図３には、４０倍の倍率で観察した画像を示す。ここでは、一つのピンの上にあたる部分の画像を示す。ラン藻と記載された円の中の白丸部分がラン藻を示し、大腸菌と記載された円の中の縦長の黒い部分が大腸菌を示している。この画像から、ラン藻と大腸菌が剣山状デバイスの同一ピンの上に集団化していることが確認された。
なお、図２、図３にそれぞれ示したスケールバーは、画像のおおよその大きさを示すための参考であり、厳密な大きさを表しているものではない。
【００３８】
３．実施例の効果
ラン藻と大腸菌を磁性化して２種の磁性化微生物とし、剣山状デバイスを介して磁石の磁力により両者を引きつけることで、効率的に異種微生物の集団を形成できる。よって、機能強化する微生物の組み合わせの迅速な探索に貢献できる。
【００３９】
前述の例は単に説明を目的とするものでしかなく、本発明を限定するものと解釈されるものではない。本発明を典型的な実施形態の例を挙げて説明したが、本発明の記述および図示において使用された文言は、限定的な文言ではなく説明的および例示的なものであると理解される。ここで詳述したように、その形態において本発明の範囲または本質から逸脱することなく、添付の特許請求の範囲内で変更が可能である。ここでは、本発明の詳述に特定の構造、材料および実施例を参照したが、本発明をここにおける開示事項に限定することを意図するものではなく、むしろ、本発明は添付の特許請求の範囲内における、機能的に同等の構造、方法、使用の全てに及ぶものとする。
【００４０】
本発明は上記で詳述した実施形態に限定されず、本発明の請求項に示した範囲で様々な変形または変更が可能である。
なお、本発明は、複数種の微生物を磁性化して複数種の磁性化微生物とし、複数種の磁性化微生物を磁力により引きつけて集団化することに特徴を有するが、２種の微生物の集団化のみならず、３種以上の微生物の集団化にも適用できることは勿論である。
【産業上の利用可能性】
【００４１】
本発明の異種微生物の集団化方法は、微生物の持つ有用な機能を強化する共生微生物の組み合わせを迅速に探索するために非常に有用である。例えば、ケナフ等の繊維のレッティング、CFRP（Carbon Fiber Reinforced Plastics）の分解を強化する共生微生物の組み合わせを迅速に探索するために非常に有用である。
本発明の異種微生物の集団化方法は、遺伝子組換えを使わずに、共生によって、微生物の持つ有用な機能を発揮する微生物の組み合わせの探索を可能とする。従って、遺伝子組換えに伴う高度な隔離を必要とせず、微生物の工業的利用コストを大幅に低下させることが可能である。
【図１】
2018046785.tif 000003
【図２】
2018046785.tif 000004
【図３】
2018046785.tif 000005