(57)【要約】【課題】ＸＢＰ１、ＣＤ１３８およびＣＳ１ペプチド、該ペプチドを含有する薬学的組成物、ならびにかかるペプチドおよび組成物を使用する方法の提供。【解決手段】本開示は、とりわけ、ＸＢＰ１、ＣＤ１３８およびＣＳ１に由来する免疫原性ペプチド（およびそれらの薬学的組成物）を特徴とする。それらのペプチドは、種々の方法（例えば、免疫応答を誘導するための方法、抗体を産生させるための方法およびがん（例えば、乳がん、結腸がん、膵がん、血液のがん、例えば白血病、または形質細胞障害、例えば、多発性骨髄腫もしくはワルデンシュトレームマクログロブリン血症）を処置するための方法）において使用され得る。それらのペプチド（およびそれらのペプチドを含む薬学的組成物）は、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫などの前がん状態を処置する方法において、使用され得る。【選択図】図１a
2018172435.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書に記載された発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１２年１１月５日に出願された米国特許出願第６１／７２２，４４６号および２０１３年３月１５日に出願された米国特許出願第６１／７９０，７８０号の優先権を請求し、その全体の内容が、参照により本明細書に援用される。
【０００２】
連邦政府後援の研究または開発に関する声明
本出願に記載の研究は、米国国立衛生研究所によってそれぞれ授与された助成金ＰＯ１−７８３７８、ＰＯ１−１５５２５８およびＰ５０−１００７０７に支援された。したがって、政府は、本発明における特定の権利を有する。
【背景技術】
【０００３】
背景
弱毒化された微生物、組換えタンパク質およびＤＮＡワクチンを含むいくつかのタイプのワクチンが、感染症の防止のために開発された。近年、がん患者を処置するためのワクチン免疫療法の開発に関する研究が行われている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
要旨
本開示は、ＨＬＡ−Ａ分子などのＭＨＣクラス１分子に結合する免疫原性ペプチドに関する。Ｘ−Ｂｏｘタンパク質１（ＸＢＰ１）、ＣＤ１３８およびＣＤ２サブセット１（ＣＳ１）に由来するペプチドは、免疫原性であり、例えば、様々ながん細胞に対して免疫応答を誘導するために有用であることが見出された。いくつかの実施形態において、それらのペプチドは、ＨＬＡ−Ａ分子に対する高い親和性、ＨＬＡ−Ａのペプチド結合間隙（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｃｌｅｆｔ）内における高い安定性、ならびに細胞（例えば、がん細胞）の表面上でＭＨＣ分子との関連で発現された場合、Ｔ細胞（例えば、エフェクターメモリーＴ細胞および／またはセントラルメモリーＴ細胞）の活性化および増殖を誘導する能力を有する。
【０００５】
さらに、これらのペプチドの組み合わせが、標的抗原に対して広範囲の免疫応答を誘導し得ること、およびこの広範囲の応答が、主要な治療上のハードル（とりわけ、腫瘍関連抗原の発現の不均一性、特定の抗原の高頻度の変異および個体間のヒトＴ細胞レパートリーのばらつきを含む）を克服し得ることが見出された。したがって、例えば、薬学的組成物において組み合される、これらのペプチドの様々な組み合わせの投与は、様々ながんに対して、増強された免疫応答を提供し得る。
【０００６】
上記ペプチド（およびそれらの薬学的組成物）が、種々の用途（例えば、免疫応答を誘導するための方法、Ｔ細胞（例えば、エフェクター（ｅｆｆｅｃｔｏｒｙ）メモリーＴ細胞および／またはセントラルメモリーＴ細胞を含む）を活性化するための方法、抗体を産生させるための方法、ならびに例えば、がん（例えば、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬ）、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症および前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を処置するための方法）において使用され得ることは、以下の記載から明らかである。
【０００７】
１つの態様において、本開示は、複数のＭＨＣ分子、例えば、ＨＬＡ−Ａ分子（例えば、ＨＬＡ−Ａ２およびＨＬＡ−Ａ２４）に対する親和性、複数のＭＨＣ分子（例えば、ＨＬＡ−Ａ２およびＨＬＡ−Ａ２４）のペプチド結合間隙内における高い安定性、ならびに細胞（例えば、がん細胞）の表面上でＭＨＣ分子（例えば、ＨＬＡ−Ａ２またはＨＬＡ−Ａ２４）との関連で発現された場合、例えば、エフェクターメモリーＴ細胞および／またはセントラルメモリーＴ細胞を含む、Ｔ細胞の活性化および増殖を誘導する能力を有する、ペプチド、例えば、ＸＢＰ１ペプチド、ＣＤ１３８ペプチドおよびＣＳ−１ペプチドを特徴とする。
【０００８】
上記ペプチド（およびそれらの薬学的組成物）が、種々の用途（例えば、免疫応答を誘導するための方法、Ｔ細胞（例えば、エフェクターメモリーＴ細胞および／またはセントラルメモリーＴ細胞）を活性化するための方法、抗体を産生させるための方法、ならびに例えば、がん（例えば、肺がん、肝臓がん、胆管がん、胃がん、子宮頸がん、鼻咽頭がん、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬ）、多発性骨髄腫および前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を処置するための方法）において使用され得ることは、以下の記載から明らかである。
【０００９】
１つの態様において、本開示は、配列番号５１〜５３６のいずれか１つと少なくとも６６（例えば、少なくとも６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８または９９）％同一のアミノ酸配列を含む単離されたペプチドを特徴とする。そのペプチドは、主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子（例えば、ＭＨＣクラスＩまたはクラスＩＩ分子）に結合し得る。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号５１〜５３６のいずれか１つのアミノ酸配列または配列番号５１〜５３６のいずれかと少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％同一のアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号５１〜５３６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、そのペプチドは、３つ、２つまたは１つの置換を有する、配列番号５１〜５３６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。それらの置換は、保存的または非保存的であり得る。１つの実施形態において、そのペプチドは、がん、例えば、本明細書中に記載されるがん、例えば、肺がん、肝臓がん、胆管がん、胃がん、子宮頸がん、鼻咽頭がん、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬもしくはＣＭＬまたは多発性骨髄腫を有するかまたは有するリスクがある被験体を処置するために使用される。
【００１０】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を有する被験体を処置するために使用される。
【００１１】
ある実施形態において、がんは、本明細書中に記載されるがんである。例えば、がんは、膀胱がん（進行性（ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ）および転移性膀胱がんを含む）、乳がん（例えば、エストロゲンレセプター陽性乳がん、エストロゲンレセプター陰性乳がん、ＨＥＲ−２陽性乳がん、ＨＥＲ−２陰性乳がん、トリプルネガティブ乳がん、炎症性乳がん）、結腸がん（結腸直腸がんを含む）、腎臓がん（例えば、腎細胞癌（例えば、乳頭状腎細胞癌、明細胞癌、嫌色素性（ｃｈｒｏｍｐｈｏｂｉｃ）癌））、肝臓がん、肺がん（小細胞肺がんおよび非小細胞肺がん（腺がん、扁平上皮癌、気管支肺胞癌および大細胞癌を含む）を含む）、泌尿生殖器がん、例えば、卵巣がん（卵管（ｆａｌｌｏｐｉａｎ）がん、子宮内膜がんおよび腹膜がんを含む）、子宮頸がん、前立腺がんおよび精巣がん、リンパ系のがん、直腸がん、喉頭がん、膵がん（膵外分泌癌を含む）、胃がん（例えば、胃食道がん、胃上部がんまたは胃下部がん）、消化器がん（例えば、肛門がんまたは胆管がん）、胆嚢がん、甲状腺がん、白血病（例えば、急性骨髄性白血病）、神経細胞がんおよびグリア細胞がん（例えば、多形神経膠芽腫）ならびに頭頸部がん（例えば、鼻咽頭がん）であり得る。１つの実施形態において、がんは、乳がん（例えば、浸潤性小葉癌、浸潤性乳管癌、小葉乳管混合癌、乳管内篩状（ｉｎｔｒａｄｕｃｔａｌ  ｃｒｉｂｒｉｆｏｒｍ）癌、浸潤性乳管小葉癌または浸潤癌）である。１つの実施形態において、がんは、結腸腺癌（例えば、粘液性腺癌）である。
【００１２】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、配列番号５１〜５３６のいずれか１つと少なくとも６６（例えば、少なくとも６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８または９９）％同一のアミノ酸配列からなる。１つの実施形態において、上記ペプチドは、３つ、２つまたは１つの置換を有する、配列番号５１〜５３６のいずれか１つのアミノ酸配列からなる。１つの実施形態において、上記ペプチドは、配列番号５１〜５３６のいずれか１つのアミノ酸配列からなる。
【００１３】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、グループＣからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド（例えば、表３を参照のこと）、例えば、配列番号５１〜２０６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む非スプライシング型ＸＢＰ−１ペプチドまたは配列番号５１〜２０６のいずれか１つと７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドである。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号５１〜２０６のいずれか１つのアミノ酸配列または配列番号５１〜２０６のいずれか１つと７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、グループＣからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、そのペプチドは、３つ、２つ、１つの置換を有する、配列番号５１〜２０６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。それらの置換は、保存的または非保存的であり得る。１つの実施形態において、グループＣからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドは、配列番号５１〜２０６のいずれか１つのアミノ酸配列からなる。
【００１４】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、グループＣからのＣＤ１３８ペプチド、例えば、配列番号２０７〜３７１のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＣＤ１３８ペプチドまたは配列番号２０７〜３７１のいずれか１つのアミノ酸配列と７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＣＤ１３８ペプチドである。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号２０７〜３７１のいずれか１つのアミノ酸配列または配列番号２０７〜３７１のいずれか１つと７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、グループＣからのＣＤ１３８ペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、そのペプチドは、配列番号２０７〜３７１のいずれか１つのアミノ酸配列の３つ、２つ、１つの置換を有するアミノ酸配列を含む。それらの置換は、保存的または非保存的であり得る。１つの実施形態において、グループＣからのＣＤ１３８ペプチドは、配列番号２０７〜３７１のいずれか１つのアミノ酸配列からなる。
【００１５】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、グループＣからのＣＳ−１ペプチド、例えば、配列番号３７２〜５３６のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＣＳ−１ペプチドまたは配列番号３７２〜５３６のいずれか１つのアミノ酸配列と７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＣＳ−１ペプチドである。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号３７２〜５３６のいずれか１つのアミノ酸配列または配列番号３７２〜５３６のいずれか１つと７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、グループＣからのＣＳ−１ペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、そのペプチドは、３つ、２つ、１つの置換を有する、配列番号３７２〜５３６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。それらの置換は、保存的または非保存的であり得る。１つの実施形態において、グループＣからのＣＳ−１ペプチドは、配列番号３７２〜５３６のいずれか１つのアミノ酸配列からなる。
【００１６】
１つの実施形態において、グループＣからのペプチド、例えば、ＸＢＰペプチド、ＣＤ１３８ペプチドおよび／またはＣＳ−１ペプチドは、がん、例えば、本明細書中に記載されるがん、例えば、肺がん、肝臓がん、胆管がん、胃がん、子宮頸がん、鼻咽頭がん、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬを有するかまたは有するリスクがある被験体を処置するために使用される。１つの実施形態において、グループＣからのペプチドは、前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を有する被験体を処置するために使用される。ある実施形態において、がんは、膀胱がん（進行性および転移性膀胱がんを含む）、乳がん（例えば、エストロゲンレセプター陽性乳がん、エストロゲンレセプター陰性乳がん、ＨＥＲ−２陽性乳がん、ＨＥＲ−２陰性乳がん、トリプルネガティブ乳がん、炎症性乳がん）、結腸がん（結腸直腸がんを含む）、腎臓がん（例えば、腎細胞癌（例えば、乳頭状腎細胞癌、明細胞癌、嫌色素性癌））、肝臓がん、肺がん（小細胞肺がんおよび非小細胞肺がん（腺癌、扁平上皮癌、気管支肺胞癌および大細胞癌を含む）を含む）、泌尿生殖器がん、例えば、卵巣がん（卵管がん、子宮内膜がんおよび腹膜がんを含む）、子宮頸がん、前立腺がんおよび精巣がん、リンパ系のがん、直腸がん、喉頭がん、膵がん（膵外分泌癌を含む）、胃がん（例えば、胃食道がん、胃上部がんまたは胃下部がん）、消化器がん（例えば、肛門がんまたは胆管がん）、胆嚢がん、甲状腺がん、白血病（例えば、急性骨髄性白血病）、神経細胞がんおよびグリア細胞がん（例えば、多形神経膠芽腫）ならびに頭頸部がん（例えば、鼻咽頭がん）であり得る。
【００１７】
いくつかの実施形態において、本明細書中に記載される任意の単離されたペプチドは、主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子（例えば、ＭＨＣクラスＩまたはクラスＩＩ分子）に結合し得る。そのＭＨＣ分子は、例えば、ヒトＭＨＣ分子であり得る。そのＭＨＣ分子は、例えば、ＨＬＡ−Ａ分子、ＨＬＡ−Ｂ分子および／またはＨＬＡ−Ｃ分子であり得る。好ましくは、そのＭＨＣ分子は、１つ以上のＨＬＡ−Ａ分子（例えば、ＨＬＡ−Ａ１、ＨＬＡ−Ａ２、ＨＬＡ−Ａ３およびＨＬＡ−Ａ２４）である。
【００１８】
１つの態様において、本開示は、例えば、ＨＬＡ−Ａ２分子に対する高い親和性、ＨＬＡ−Ａ２のペプチド結合間隙内における高い安定性、ならびに細胞（例えば、がん細胞）の表面上でＭＨＣ分子との関連で発現された場合、Ｔ細胞（例えば、エフェクターメモリーＴ細胞および／またはセントラルメモリーＴ細胞）の活性化および増殖を誘導する能力を有する、Ｘ−Ｂｏｘタンパク質１（ＸＢＰ１）、ＣＤ１３８およびＣＤ２サブセット１（ＣＳ１）由来の免疫原性ペプチドを特徴とする。例えば、これらのペプチドのすべてまたはサブセットは、多発性骨髄腫細胞、詳細には、くすぶり型多発性骨髄腫細胞、結腸がん細胞、乳がん細胞、膵がん細胞、前立腺がん細胞および白血病、例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞を含む様々ながん細胞の表面上でＭＨＣ分子との関連で発現され、これらのペプチドの存在は、これらのおよび他のがんに対するＴ細胞の活性化および増殖を誘導する。
【００１９】
さらに、これらのペプチドの組み合わせが、標的抗原に対して広範囲の免疫応答を誘導し得ること、およびこの広範囲の応答が、主要な治療上のハードル（とりわけ、腫瘍関連抗原発現の不均一性、特定の抗原の高頻度の変異および個体間のヒトＴ細胞レパートリーのばらつきを含む）を克服し得ることが見出された。したがって、例えば、薬学的組成物において組み合される、これらのペプチドの組み合わせの投与は、様々ながんに対して、増強された免疫応答を提供し得る。
【００２０】
上記ペプチド（およびそれらの薬学的組成物）が、種々の用途（例えば、免疫応答を誘導するための方法、Ｔ細胞（例えば、エフェクターメモリーＴ細胞および／またはセントラルメモリーＴ細胞）を活性化するための方法、抗体を産生させるための方法、ならびに例えば、がん（例えば、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬ）、多発性骨髄腫および前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を処置するための方法）において使用され得ることは、以下の記載から明らかである。
【００２１】
１つの態様において、本開示は、配列番号１〜１８のいずれか１つと少なくとも６６（例えば、少なくとも６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８または９９）％同一のアミノ酸配列を含む単離されたペプチドを特徴とする。そのペプチドは、主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子（例えば、ＭＨＣクラスＩまたはクラスＩＩ分子）に結合し得る。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号１〜１８のいずれか１つのアミノ酸配列または配列番号１〜１８のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％同一のアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号１〜１８のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、そのペプチドは、配列番号１〜１８のいずれか１つのアミノ酸配列の３つ、２つまたは１つの置換を有するアミノ酸配列を含む。それらの置換は、保存的または非保存的であり得る。１つの実施形態において、そのペプチドは、がん、例えば、本明細書中に記載されるがん、例えば、乳がん（例えば、浸潤性小葉癌、浸潤性乳管癌、小葉乳管混合癌、乳管内篩状癌、浸潤性小葉乳管（ｌｏｂｕｌａｒ  ａｎｄ  ｄｕｃｔａｌ）癌、浸潤癌）、結腸がん（例えば、腺癌、例えば、粘液性腺癌）、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬもしくはＣＭＬまたは多発性骨髄腫を有するかまたは有するリスクがある被験体を処置するために使用される。
【００２２】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を有する被験体を処置するために使用される。ある実施形態において、がんは、本明細書中に記載されるがんである。例えば、そのがんは、膀胱がん（進行性および転移性膀胱がんを含む）、乳がん（例えば、エストロゲンレセプター陽性乳がん、エストロゲンレセプター陰性乳がん、ＨＥＲ−２陽性乳がん、ＨＥＲ−２陰性乳がん、トリプルネガティブ乳がん、炎症性乳がん）、結腸がん（結腸直腸がんを含む）、腎臓がん（例えば、腎細胞癌（例えば、乳頭状腎細胞癌、明細胞癌、嫌色素性癌））、肝臓がん、肺がん（小細胞肺がんおよび非小細胞肺がん（腺癌、扁平上皮癌、気管支肺胞癌および大細胞癌を含む）を含む）、泌尿生殖器がん、例えば、卵巣がん（卵管がん、子宮内膜がんおよび腹膜がんを含む）、子宮頸がん、前立腺がんおよび精巣がん、リンパ系のがん、直腸がん、喉頭がん、膵がん（膵外分泌癌を含む）、胃がん（例えば、胃食道がん、胃上部がんまたは胃下部がん）、消化器がん（例えば、肛門がんまたは胆管がん）、胆嚢がん、甲状腺がん、白血病（例えば、急性骨髄性白血病）、神経細胞がんおよびグリア細胞がん（例えば、多形神経膠芽腫）ならびに頭頸部がんであり得る。
【００２３】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、配列番号１〜１８のいずれか１つと少なくとも６６（例えば、少なくとも６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８または９９）％同一のアミノ酸配列からなる。１つの実施形態において、上記ペプチドは、３つ、２つまたは１つの置換を有する配列番号１〜１８のアミノ酸配列のいずれかからなる。１つの実施形態において、上記ペプチドは、配列番号１〜１８のいずれか１つのアミノ酸配列からなる。
【００２４】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、グループＡからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド（例えば、表１を参照のこと）、例えば、配列番号１〜６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む非スプライシング型ＸＢＰ−１ペプチド、配列番号１〜６のいずれか１つのアミノ酸配列と７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドである。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号１〜６のいずれか１つのアミノ酸配列または配列番号１〜６のいずれか１つのアミノ酸配列と７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、グループＡからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、そのペプチドは、配列番号１〜６のいずれか１つのアミノ酸配列の３つ、２つ、１つの置換を有するアミノ酸配列を含む。それらの置換は、保存的または非保存的であり得る。１つの実施形態において、グループＡからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドは、配列番号１〜６のいずれか１つのアミノ酸配列からなる。
【００２５】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、グループＡからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、配列番号７〜１０のいずれか１つのアミノ酸配列を含むスプライシング型ＸＢＰ−１ペプチド、配列番号７〜１０のいずれか１つのアミノ酸配列と７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含むスプライシング型ＸＢＰ１ペプチドである。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号７〜１０のいずれか１つのアミノ酸配列または配列番号７〜１０のいずれか１つのアミノ酸配列と７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、グループＡからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、そのペプチドは、配列番号７〜１０のいずれか１つのアミノ酸配列の３つ、２つ、１つの置換を有するアミノ酸配列を含む。それらの置換は、保存的または非保存的であり得る。１つの実施形態において、グループＡからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチドは、配列番号７〜１０のいずれか１つのアミノ酸配列からなる。
【００２６】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、グループＡからのＣＤ１３８ペプチド、例えば、配列番号１１〜１４のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＣＤ１３８ペプチド、配列番号１１〜１４のいずれか１つのアミノ酸配列と７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＣＤ１３８ペプチドである。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号１１〜１４のいずれか１つのアミノ酸配列または配列番号１１〜１４のいずれか１つのアミノ酸配列と７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、グループＡからのＣＤ１３８ペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、そのペプチドは、配列番号１１〜１４のいずれか１つのアミノ酸配列の３つ、２つ，１つの置換を有するアミノ酸配列を含む。それらの置換は、保存的または非保存的であり得る。１つの実施形態において、グループＡからのＣＤ１３８ペプチドは、配列番号１１〜１４のいずれか１つのアミノ酸配列からなる。
【００２７】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、グループＡからのＣＳ−１ペプチド、例えば、配列番号１５〜１８のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＣＳ−１ペプチド、配列番号１５〜１８のいずれか１つのアミノ酸配列と７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＣＳ−１ペプチドである。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号１５〜１８のいずれか１つのアミノ酸配列または配列番号１５〜１８のいずれか１つのアミノ酸配列と７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、グループＡからのＣＳ−１ペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、そのペプチドは、配列番号１５〜１８のいずれか１つのアミノ酸配列の３つ、２つ、１つの置換を有するアミノ酸配列を含む。それらの置換は、保存的または非保存的であり得る。１つの実施形態において、グループＡからのＣＳ−１ペプチドは、配列番号１５〜１８のいずれか１つのアミノ酸配列からなる。
【００２８】
１つの実施形態において、グループＡからのペプチド、例えば、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、ＣＤ１３８ペプチドおよび／またはＣＳ−１ペプチドは、がん、例えば、本明細書中に記載されるがん、例えば、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬを有するかまたは有するリスクがある被験体を処置するために使用される。１つの実施形態において、グループＡからのペプチド、例えば、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、ＣＤ１３８ペプチドおよび／またはＣＳ−１ペプチドは、前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を有する被験体を処置するために使用される。ある実施形態において、がんは、本明細書中に記載されるがんである。例えば、そのがんは、膀胱がん（進行性および転移性膀胱がんを含む）、乳がん（例えば、エストロゲンレセプター陽性乳がん、エストロゲンレセプター陰性乳がん、ＨＥＲ−２陽性乳がん、ＨＥＲ−２陰性乳がん、トリプルネガティブ乳がん、炎症性乳がん）、結腸がん（結腸直腸がんを含む）、腎臓がん（例えば、腎細胞癌（例えば、乳頭状腎細胞癌、明細胞癌、嫌色素性癌））、肝臓がん、肺がん（小細胞肺がんおよび非小細胞肺がん（腺癌、扁平上皮癌、気管支肺胞癌および大細胞癌を含む）を含む）、泌尿生殖器がん、例えば、卵巣がん（卵管がん、子宮内膜がんおよび腹膜がんを含む）、子宮頸がん、前立腺がんおよび精巣がん、リンパ系のがん、直腸がん、喉頭がん、膵がん（膵外分泌癌を含む）、胃がん（例えば、胃食道がん、胃上部がんまたは胃下部がん）、消化器がん（例えば、肛門がんまたは胆管がん）、胆嚢がん、甲状腺がん、白血病（例えば、急性骨髄性白血病）、神経細胞がんおよびグリア細胞がん（例えば、多形神経膠芽腫）ならびに頭頸部がんであり得る。
【００２９】
いくつかの実施形態において、本明細書中に記載される任意の単離されたペプチドは、主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子（例えば、ＭＨＣクラスＩまたはクラスＩＩ分子）に結合し得る。そのＭＨＣ分子は、例えば、ＨＬＡ−Ａ２分子であり得る。そのＭＨＣ分子は、例えば、ヒトＭＨＣ分子であり得る。
【００３０】
別の態様において、本開示は、例えば、ＨＬＡ−Ａ２４分子に対する高い親和性、ＨＬＡ−Ａ２４のペプチド結合間隙内における高い安定性、ならびに細胞（例えば、がん細胞）の表面上でＭＨＣ分子との関連で発現された場合、Ｔ細胞（例えば、エフェクターメモリーＴ細胞および／またはセントラルメモリーＴ細胞）の活性化および増殖を誘導する能力を有する、Ｘ−Ｂｏｘタンパク質１（ＸＢＰ１）、ＣＤ１３８およびＣＤ２サブセット１（ＣＳ１）由来の免疫原性ペプチドを特徴とする。例えば、これらのペプチドのすべてまたはサブセットは、多発性骨髄腫細胞、結腸がん細胞、乳がん細胞、膵がん細胞、前立腺がん細胞および白血病、例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞を含む様々ながん細胞の表面上でＭＨＣ分子との関連で発現され、これらのペプチドの存在は、これらのおよび他のがんに対するＴ細胞の活性化および増殖を誘導する。
【００３１】
上記ペプチド（およびそれらの薬学的組成物）が、種々の用途（例えば、免疫応答を誘導するための方法、Ｔ細胞（例えば、エフェクターメモリーＴ細胞および／またはセントラルメモリーＴ細胞）を活性化するための方法、抗体を産生させるための方法、ならびに例えば、がん（例えば、肺がん、肝臓がん、胆管がん、胃がん、子宮頸がん、鼻咽頭がん、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬ）、多発性骨髄腫および前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を処置するための方法）において使用され得ることは、以下の記載から明らかである。
【００３２】
１つの態様において、本開示は、配列番号２９〜５０のいずれか１つと少なくとも６６（例えば、少なくとも６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８または９９）％同一のアミノ酸配列を含む単離されたペプチドを特徴とする。そのペプチドは、主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子（例えば、ＭＨＣクラスＩまたはクラスＩＩ分子）に結合し得る。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号２９〜５０のいずれか１つのアミノ酸配列または配列番号２９〜５０のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％同一のアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号２９〜５０のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、そのペプチドは、配列番号２９〜５０のいずれか１つのアミノ酸配列の３つ、２つまたは１つの置換を有するアミノ酸配列を含む。それらの置換は、保存的または非保存的であり得る。１つの実施形態において、そのペプチドは、がん、例えば、本明細書中に記載されるがん、例えば、肺がん、肝臓がん、胆管がん、胃がん、子宮頸がん、鼻咽頭がん、乳がん（例えば、浸潤性小葉癌、浸潤性乳管癌、小葉乳管混合癌、乳管内篩状癌、浸潤性小葉乳管癌、浸潤癌）、結腸がん（例えば、結腸腺癌、例えば、粘液性腺癌）、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬもしくはＣＭＬまたは多発性骨髄腫を有するかまたは有するリスクがある被験体を処置するために使用される。
【００３３】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を有する被験体を処置するために使用される。ある実施形態において、がんは、本明細書中に記載されるがんである。例えば、そのがんは、膀胱がん（進行性および転移性膀胱がんを含む）、乳がん（例えば、エストロゲンレセプター陽性乳がん、エストロゲンレセプター陰性乳がん、ＨＥＲ−２陽性乳がん、ＨＥＲ−２陰性乳がん、トリプルネガティブ乳がん、炎症性乳がん）、結腸がん（結腸直腸がんを含む）、腎臓がん（例えば、腎細胞癌（例えば、乳頭状腎細胞癌、明細胞癌、嫌色素性癌））、肝臓がん、肺がん（小細胞肺がんおよび非小細胞肺がん（腺癌、扁平上皮癌、気管支肺胞癌および大細胞癌を含む）を含む）、泌尿生殖器がん、例えば、卵巣がん（卵管がん、子宮内膜がんおよび腹膜がんを含む）、子宮頸がん、前立腺がんおよび精巣がん、リンパ系のがん、直腸がん、喉頭がん、膵がん（膵外分泌癌を含む）、胃がん（例えば、胃食道がん、胃上部がんまたは胃下部がん）、消化器がん（例えば、肛門がんまたは胆管がん）、胆嚢がん、甲状腺がん、白血病（例えば、急性骨髄性白血病）、神経細胞がんおよびグリア細胞がん（例えば、多形神経膠芽腫）ならびに頭頸部がん（例えば、鼻咽頭がん）であり得る。
【００３４】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、配列番号２９〜５０のいずれか１つと少なくとも６６（例えば、少なくとも６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８または９９）％同一のアミノ酸配列からなる。１つの実施形態において、上記ペプチドは、３つ、２つまたは１つの置換を有する配列番号２９〜５０のいずれか１つのアミノ酸配列からなる。１つの実施形態において、上記ペプチドは、配列番号２９〜５０のいずれか１つのアミノ酸配列からなる。
【００３５】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、グループＢからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド（表２を参照のこと）、例えば、配列番号２９および３３〜３７のいずれか１つのアミノ酸配列を含む非スプライシング型ＸＢＰ−１ペプチドまたは配列番号２９および３３〜３７のいずれか１つと７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドである。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号２９および３３〜３７のいずれか１つのアミノ酸配列または配列番号２９および３３〜３７のいずれか１つと７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、グループＢからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、そのペプチドは、３つ、２つ、１つの置換を有する、配列番号２９および３３〜３７のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。それらの置換は、保存的または非保存的であり得る。１つの実施形態において、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドは、配列番号１９のアミノ酸配列からのものであり、配列番号２９のアミノ酸配列、および配列番号１９の中の配列番号２９に対してＣ末端側の１、２、３、４、５、６、７、８、９個以上（例えば、１、２、３個）のアミノ酸を含む。１つの実施形態において、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドは、配列番号１９のアミノ酸配列からのものであり、配列番号３３のアミノ酸配列、ならびに配列番号１９の中の配列番号３３に対してＮ末端側の１、２、３、４、５個以上（例えば、１または２個）のアミノ酸および／または配列番号１９の中の配列番号３３に対してＣ末端側の１、２、３個以上（ｏｒ  ｍｏｉｒｅ）（例えば、１個）のアミノ酸を含む。１つの実施形態において、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドは、配列番号１９のアミノ酸配列からのものであり、配列番号３６のアミノ酸配列、ならびに配列番号１９の中の配列番号３６に対してＮ末端側の１、２、３、４、５、６、７、８、９個以上（例えば、１、２、３または４個）のアミノ酸および／または配列番号１９の中の配列番号３６に対してＣ末端側の１、２、３、５、６個以上（例えば、１、２、３、４、５または６個）のアミノ酸を含む。１つの実施形態において、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドは、配列番号１９のアミノ酸配列からのものであり、配列番号３４、３５または３７のいずれか１つのアミノ酸配列、ならびに配列番号１９の中の配列番号３４、３５または３７のいずれか１つに対してＮ末端側および／またはＣ末端側の１、２、３、４、５、６、７、８、９個以上（例えば、１、２、３個）のアミノ酸を含む。１つの実施形態において、グループＢからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドは、配列番号２９および３３〜３７のいずれか１つのアミノ酸配列からなる。
【００３６】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、配列番号３０、３８および３９のいずれか１つのアミノ酸配列を含むスプライシング型ＸＢＰ−１ペプチドまたは配列番号３０、３８および３９のいずれか１つと７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含むスプライシング型ＸＢＰ１ペプチドである。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号３０、３８および３９のいずれか１つのアミノ酸配列または配列番号３０、３８および３９のいずれか１つと７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、そのペプチドは、３つ、２つ、１つの置換を有する、配列番号３０、３８および３９のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。それらの置換は、保存的または非保存的であり得る。１つの実施形態において、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドは、配列番号２０のアミノ酸配列からのものであり、配列番号３０、３８および３９のいずれか１つのアミノ酸配列、ならびに配列番号２０の中の配列番号３０、３８および３９のいずれか１つに対してＮ末端側および／またはＣ末端側の１、２、３、４、５、６、７、８、９個以上（例えば、１、２、３個）のアミノ酸を含む。１つの実施形態において、グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチドは、配列番号３０、３８および３９のいずれか１つのアミノ酸配列からなる。
【００３７】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、グループＢからのＣＤ１３８ペプチド、例えば、配列番号３１のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＣＤ１３８ペプチド、または配列番号３１および４０〜４５のいずれか１つと７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＣＤ１３８ペプチドである。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号３１および４０〜４５のいずれか１つのアミノ酸配列または配列番号３１および４０〜４５のいずれか１つと７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、グループＢからのＣＤ１３８ペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、そのペプチドは、３つ、２つ、１つの置換を有する、配列番号３１および４０〜４５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。それらの置換は、保存的または非保存的であり得る。１つの実施形態において、ＣＤ１３８ペプチドは、配列番号２１のアミノ酸配列からのものであり、配列番号３１のアミノ酸配列および配列番号２１の中の配列番号３１に対してＮ末端側の１、２、３、４、５、６、７、８個以上（例えば、１、２、３、４個）のアミノ酸を含む。１つの実施形態において、ＣＤ１３８ペプチドは、配列番号２１のアミノ酸配列からのものであり、配列番号４２または４４のアミノ酸配列、ならびに配列番号２１の中の配列番号４２もしくは４４に対してＮ末端側の１、２、３、４、５個以上（例えば、１、２、３、４個）のアミノ酸および／または配列番号２１の中の配列番号４２もしくは４４に対してＣ末端側の１、２、３、４、５、６、７、８、９個以上（例えば、１、２、３、４、５、６個）のアミノ酸を含む。１つの実施形態において、ＣＤ１３８ペプチドは、配列番号２１のアミノ酸配列からのものであり、配列番号４５のアミノ酸配列、ならびに配列番号２１の中の配列番号４５に対してＮ末端側の１、２、３、４、５、６、７、８個以上（例えば、１、２、３または４個）のアミノ酸および／または配列番号２１の中の配列番号４５に対してＣ末端側の１、２、３、５、６、７、８、９個以上（例えば、１、２、３、４、５または６個）のアミノ酸を含む。１つの実施形態において、ＣＤ１３８ペプチドは、配列番号２１のアミノ酸配列からのものであり、配列番号４０、４１または４３のいずれか１つのアミノ酸配列、ならびに配列番号２１の中の配列番号４０、４１または４３のいずれか１つに対してＮ末端側および／またはＣ末端側の１、２、３、４、５、６、７、８、９個以上（例えば、１、２、３個）のアミノ酸を含む。１つの実施形態において、グループＢからのＣＤ１３８ペプチドは、配列番号３１および４０〜４５のいずれか１つのアミノ酸配列からなる。
【００３８】
１つの実施形態において、上記ペプチドは、グループＢからのＣＳ−１ペプチド、例えば、配列番号３２および４６〜５０のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＣＳ−１ペプチドまたは配列番号３２および４６〜５０のいずれか１つと７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＣＳ−１ペプチドである。１つの実施形態において、そのペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、配列番号３２および４６〜５０のいずれか１つのアミノ酸配列または配列番号３２および４６〜５０のいずれか１つと７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。１つの実施形態において、グループＢからのＣＳ−１ペプチドは、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であり、そのペプチドは、配列番号３２および４６〜５０のいずれか１つの、３つ、２つ、１つの置換を有するアミノ酸配列を含む。それらの置換は、保存的または非保存的であり得る。１つの実施形態において、ＣＳ−１ペプチドは、配列番号２２のアミノ酸配列からのものであり、配列番号３２のアミノ酸配列および配列番号２２の中の配列番号３２に対してＣ末端側の１、２、３、４、５、６、７、８、９個以上（例えば、１、２、３個）のアミノ酸を含む。１つの実施形態において、ＣＳ−１ペプチドは、配列番号２２のアミノ酸配列からのものであり、配列番号４６〜５０のいずれか１つのアミノ酸配列ならびに配列番号２２の中の配列番号４６〜５０のいずれか１つに対してＮ末端側および／またはＣ末端側の１、２、３、４、５、６、７、８、９個以上（例えば、１、２、３個）のアミノ酸を含む。１つの実施形態において、グループＢからのＣＳ−１ペプチドは、配列番号３２および４６〜５０のいずれか１つのアミノ酸配列からなる。
【００３９】
１つの実施形態において、グループＢからのペプチド、例えば、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、ＣＤ１３８ペプチドおよび／またはＣＳ−１ペプチドは、がん、例えば、本明細書中に記載されるがん、例えば、肺がん、肝臓がん、胆管がん、胃がん、子宮頸がん、鼻咽頭がん、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬを有するかまたは有するリスクがある被験体を処置するために使用される。１つの実施形態において、グループＢからのペプチド、例えば、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、ＣＤ１３８ペプチドおよび／またはＣＳ−１ペプチドは、前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を有する被験体を処置するために使用される。ある実施形態において、がんは、本明細書中に記載されるがんである。例えば、そのがんは、膀胱がん（進行性および転移性膀胱がんを含む）、乳がん（例えば、エストロゲンレセプター陽性乳がん、エストロゲンレセプター陰性乳がん、ＨＥＲ−２陽性乳がん、ＨＥＲ−２陰性乳がん、トリプルネガティブ乳がん、炎症性乳がん）、結腸がん（結腸直腸がんを含む）、腎臓がん（例えば、腎細胞癌（例えば、乳頭状腎細胞癌、明細胞癌、嫌色素性癌））、肝臓がん、肺がん（小細胞肺がんおよび非小細胞肺がん（腺癌、扁平上皮癌、気管支肺胞癌および大細胞癌を含む）を含む）、泌尿生殖器がん、例えば、卵巣がん（卵管がん、子宮内膜がんおよび腹膜がんを含む）、子宮頸がん、前立腺がんおよび精巣がん、リンパ系のがん、直腸がん、喉頭がん、膵がん（膵外分泌癌を含む）、胃がん（例えば、胃食道がん、胃上部がんまたは胃下部がん）、消化器がん（例えば、肛門がんまたは胆管がん）、胆嚢がん、甲状腺がん、白血病（例えば、急性骨髄性白血病）、神経細胞がんおよびグリア細胞がん（例えば、多形神経膠芽腫）ならびに頭頸部がん（例えば、鼻咽頭がん）であり得る。
【００４０】
いくつかの実施形態において、本明細書中に記載される任意の単離されたペプチドは、主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子と会合した状態で、Ｔ細胞上の抗原特異的Ｔ細胞レセプターによって認識され得る。
【００４１】
別の態様において、本開示は、本明細書中に記載されるペプチド、例えば、グループＡ、グループＢもしくはグループＣからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、グループＡもしくはグループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、グループＡ、グループＢもしくはグループＣからのＣＤ１３８ペプチドおよび／またはグループＡ、グループＢもしくはグループＣからのＣＳ−１ペプチドからなる第１のアミノ酸配列（例えば、本明細書中に記載されるもの）；ならびに第１のアミノ酸配列と異種の第２のアミノ酸配列を含む融合タンパク質を特徴とする。
【００４２】
いくつかの実施形態において、第２のアミノ酸配列は、標的化ポリペプチド、免疫刺激分子、免疫グロブリンもしくはその抗原結合フラグメント、免疫グロブリン分子のＦｃレセプター結合領域またはキャリアポリペプチドを含み得るか、またはそれらであり得る。標的化ポリペプチドは、例えば、単離されたペプチドを抗原提示細胞（例えば、樹状細胞、マクロファージ、単球またはＢ細胞）に対して標的化するポリペプチドであり得る。免疫刺激分子は、例えば、サイトカインまたはＴヘルパーエピトープであり得る。免疫グロブリンは、例えば、一本鎖Ｆｖ免疫グロブリンフラグメントまたは免疫グロブリン分子全体であり得る。キャリアポリペプチドは、ＫＬＨ（キーホールリンペットヘモシアニン）ポリペプチドまたはアルブミンポリペプチドを含み得るか、またはそれらであり得る。
【００４３】
いくつかの実施形態において、本明細書中に記載される任意の単離されたペプチドは、リンカー配列を含み得る。そのリンカー配列は、第１のアミノ酸配列を第２のアミノ酸配列に直接または間接的に接続し得る。そのリンカー配列は、１つ以上のアミノ酸、例えば、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個のアミノ酸を含み得るか、またはそれらからなり得る。１つの実施形態において、そのリンカーは、少なくとも１つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個以上）のプロテアーゼ切断部位を含み得るか、またはそれらからなり得る。
【００４４】
いくつかの実施形態において、第２のアミノ酸配列は、第１のアミノ酸配列に対してアミノ末端側またはカルボキシ末端側であり得る。
【００４５】
いくつかの実施形態において、本明細書中に記載される任意の単離されたペプチドまたは融合タンパク質は、検出可能に標識され得る。その検出可能な標識は、発光標識、蛍光標識、放射性標識および酵素標識からなる群より選択され得る。
【００４６】
なおも別の態様において、本開示は、（ｉ）本明細書中に記載される任意の単離されたペプチドをコードする単離された核酸；（ｉｉ）（ｉ）の単離された核酸を含むベクター；または（ｉｉｉ）（ｉｉ）のベクターを含む培養細胞を特徴とする。そのベクターは、発現調節配列に作動可能に連結され得る。その培養細胞は、原核細胞または真核細胞であり得る。その培養細胞は、例えば、真菌細胞、植物細胞または動物細胞（例えば、線形動物細胞、昆虫細胞、鳥類細胞、魚類細胞または哺乳動物細胞（例えば、ヒト細胞））であり得る。その培養細胞は、本明細書中に記載される任意の免疫細胞などの免疫細胞であり得る。
【００４７】
別の態様において、本開示は、ペプチドを産生させる方法を特徴とする。その方法は、本明細書中に記載される任意の培養細胞を、ペプチドの発現を可能にする条件下で培養する工程を含む。その方法は、ペプチドを細胞または細胞が培養された培地から単離する工程も含み得る。
【００４８】
別の態様において、本開示は、本明細書中に記載される任意の単離されたペプチド（または融合タンパク質）の１つ以上および薬学的に許容され得るキャリアを含む薬学的組成物を特徴とする。１つの実施形態において、その組成物は、少なくとも２つのペプチド、例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４個以上の本明細書中に記載されるペプチドを含む。例えば、１つの実施形態において、その組成物は、少なくとも２、３または４個の本明細書中に記載されるペプチドを含む。
【００４９】
１つの実施形態において、上記組成物は、少なくとも２つのペプチドを含む。例えば、上記組成物は、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＡからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、およびスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＡからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチドを含み；上記組成物は、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＡからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、およびＣＤ１３８ペプチド、例えば、グループＡからのＣＤ１３８ペプチドを含み；上記組成物は、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＡからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、およびＣＳ−１ペプチド、例えば、グループＡからのＣＳ−１ペプチドを含み；上記組成物は、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＡからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、およびＣＤ１３８ペプチド、例えば、グループＡからのＣＤ１３８ペプチドを含み；上記組成物は、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＡからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、およびＣＳ−１ペプチド、例えば、グループＡからのＣＳ−１ペプチドを含み；上記組成物は、ＣＤ１３８ペプチド、例えば、グループＡからのＣＤ１３８ペプチド、およびＣＳ−１ペプチド、例えば、グループＡからのＣＳ−１ペプチドを含む。
【００５０】
１つの実施形態において、上記組成物は、少なくとも３つのペプチドを含む。例えば、上記組成物は、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＡから記載された非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループからＡのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、およびＣＤ１３８ペプチド、例えば、グループＡからのＣＤ１３８ペプチドを含み；上記組成物は、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＡからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＡからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、およびＣＳ−１ペプチド、例えば、グループからＡのＣＳ−１ペプチドを含み；上記組成物は、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＡからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、ＣＤ１３８ペプチド、例えば、グループＡからのＣＤ１３８ペプチド、およびＣＳ−１ペプチド、例えば、グループＡからのＣＳ−１ペプチドを含み；上記組成物は、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＡからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、ＣＤ１３８ペプチド、例えば、グループＡからのＣＤ１３８ペプチド、およびＣＳ−１ペプチド、例えば、グループＡからのＣＳ−１ペプチドを含む。１つの実施形態において、上記組成物は、少なくとも３つのペプチド、例えば、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド（例えば、グループＡからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド）、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド（例えば、グループＡからのスプライシング型ＸＢＰ−１ペプチド）およびＣＤ１３８ペプチド（例えば、グループＡからのＣＤ１３８ペプチド）を含む。
【００５１】
１つの実施形態において、上記組成物は、４つのペプチドを含み、例えば、上記組成物は、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＡからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＡからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、ＣＤ１３８ペプチド、例えば、グループＡからのＣＤ１３８ペプチド、およびＣＳ−１ペプチド、例えば、グループＡからのＣＳ−１ペプチドを含む。
【００５２】
１つの実施形態において、上記組成物は、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であって、配列番号１〜６のいずれか、例えば、配列番号６のアミノ酸配列を含む、グループＡからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドを含む。１つの実施形態において、上記組成物は、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であって、配列番号７〜１０のいずれか、例えば、配列番号１０のアミノ酸配列を含む、グループＡからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチドを含む。１つの実施形態において、上記組成物は、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であって、配列番号１１〜１４のいずれか、例えば、配列番号１２のアミノ酸配列を含む、グループＡからのＣＤ１３８ペプチドを含む。１つの実施形態において、上記組成物は、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であって、配列番号１５〜１８のいずれか、例えば、配列番号１６のアミノ酸配列を含む、グループＡからのＣＳ−１ペプチドを含む。
【００５３】
１つの実施形態において、上記組成物は、４つのペプチドを含み、その４つのペプチドは、配列番号６のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）グループＡからのペプチド、配列番号１０のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）グループＡからのペプチド、配列番号１２のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）グループＡからのペプチド、および配列番号１６のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）グループＡからのペプチドである。
【００５４】
１つの実施形態において、上記組成物は、少なくとも２つのペプチドを含む。例えば、上記組成物は、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＢからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、およびスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチドを含み；上記組成物は、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＢからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、およびＣＤ１３８ペプチド、例えば、グループＢからのＣＤ１３８ペプチドを含み；上記組成物は、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＢからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、およびＣＳ−１ペプチド、例えば、グループＢからのＣＳ−１ペプチドを含み；上記組成物は、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、およびＣＤ１３８ペプチド、例えば、グループＢからのＣＤ１３８ペプチドを含み；上記組成物は、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、およびＣＳ−１ペプチド、例えば、グループＢからのＣＳ−１ペプチドを含み；上記組成物は、ＣＤ１３８ペプチド、例えば、グループＢからのＣＤ１３８ペプチド、およびＣＳ−１ペプチド、例えば、グループＢからのＣＳ−１ペプチドを含む。
【００５５】
１つの実施形態において、上記組成物は、少なくとも３つのペプチドを含む。例えば、上記組成物は、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＢから記載された非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、およびＣＤ１３８ペプチド、例えば、グループＢからのＣＤ１３８ペプチドを含み；上記組成物は、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＢからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、およびＣＳ−１ペプチド、例えば、グループＢからのＣＳ−１ペプチドを含み；上記組成物は、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＢからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、ＣＤ１３８ペプチド、例えば、グループＢからのＣＤ１３８ペプチド、およびＣＳ−１ペプチド、例えば、グループＢからのＣＳ−１ペプチドを含み；上記組成物は、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、ＣＤ１３８ペプチド、例えば、グループＢからのＣＤ１３８ペプチド、およびＣＳ−１ペプチド、例えば、グループＢからのＣＳ−１ペプチドを含む。１つの実施形態において、上記組成物は、少なくとも３つのペプチド、例えば、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド（例えば、グループＢからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド）、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド（例えば、グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ−１ペプチド）およびＣＤ１３８ペプチド（例えば、グループＢからのＣＤ１３８ペプチド）を含む。
【００５６】
１つの実施形態において、上記組成物は、４つのペプチドを含み、例えば、上記組成物は、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＢからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、例えば、グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、ＣＤ１３８ペプチド、例えば、グループＢからのＣＤ１３８ペプチド、およびＣＳ−１ペプチド、例えば、グループＢからのＣＳ−１ペプチドを含む。
【００５７】
１つの実施形態において、上記組成物は、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であって、配列番号２９および３３〜３７のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、グループＢからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドを含む。１つの実施形態において、上記組成物は、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であって、配列番号３０、３８および３９のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチドを含む。１つの実施形態において、上記組成物は、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であって、配列番号３１および４０〜４５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、グループＢからのＣＤ１３８ペプチドを含む。１つの実施形態において、上記組成物は、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、最大２５、３０または３５アミノ酸長であって、配列番号３２および４６〜５０のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、グループＢからのＣＳ−１ペプチドを含む。
【００５８】
１つの実施形態において、上記組成物は、４つのペプチドを含み、その４つのペプチドは、配列番号２９および３３〜３７のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）グループＢからのペプチド、配列番号３０、３８および３９のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）グループＢからのペプチド、配列番号３１および４０〜４５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）グループＢからのペプチド、ならびに配列番号３２および４６〜５０のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）グループＢからのペプチドである。
【００５９】
１つの実施形態において、上記組成物は、グループＡおよびグループＢからのペプチドを含む。例えば、上記組成物は、グループＡからの１、２、３、４つ以上のペプチドおよびグループＢからの１、２、３、４つ以上のペプチドを含む。
【００６０】
上記組成物は、例えば、１つ以上のさらなる薬剤、例えば、１つ以上の治療薬、診断薬または予防薬または免疫刺激剤もしくは免疫調節剤（ｉｍｍｕｎｅ  ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ）も含み得る。免疫刺激剤としては、例えば、Ｔヘルパーエピトープ、変更されたペプチドリガンド、アジュバントまたは本明細書中に記載される他の任意の免疫刺激剤が挙げられるが、これらに限定されない。Ｔヘルパーエピトープは、例えば、ＰＡＤＲＥ配列またはユニバーサル破傷風トキソイドＴヘルパー（ＴＴ  Ｔｈ）エピトープであり得る。アジュバントは、フロイント完全アジュバント、フロイント不完全アジュバント、ミョウバン、Ｔｏｌｌレセプターに対するリガンド、サポニン（例えば、ＱＳ２１）、ＲＩＢＩ、コレラ毒素（ＣＴ）、大腸菌易熱性トキシン（ＬＴ）、変異ＣＴ（ＭＣＴ）、変異大腸菌易熱性トキシン（ＭＬＴ）、カルボキシメチルセルロース、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸およびポリ−Ｌ−リジン二本鎖ＲＮＡを含むアジュバント（例えば、ポリＩＣ−ＬＣ、例えば、ヒルトノール（ｈｉｌｔｏｎｏｌ））、水と油のエマルジョン（ｗａｔｅｒ−ａｎｄ−ｏｉｌ  ｅｍｕｌｓｉｏｎ）を含むアジュバント（例えば、モンタナイド）、ならびにタンパク質（例えば、サイトカイン、補体、ＧＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ）を含むアジュバントからなる群より選択され得る。１つの実施形態において、免疫刺激剤は、カルボキシメチルセルロース、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸およびポリ−Ｌ−リジン二本鎖ＲＮＡを含むアジュバント、例えば、ポリＩＣ−ＬＣ、例えば、ヒルトノールである。１つの実施形態において、アジュバントは、水と油のエマルジョン、例えば、モンタナイドである。１つの実施形態において、アジュバントは、タンパク質、例えば、サイトカイン、補体、ＧＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦである。１つの実施形態において、免疫調節剤は、タンパク質、例えば、免疫系を調節する抗体であり得る。例えば、免疫系を調節する抗体は、抗ＣＴＬＡ４抗体、例えば、イピリムマブ（ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ）もしくはトレメリムマブ（ｔｒｅｍｅｌｉｍｕｍａｂ）、または抗ＰＤ−１抗体、または抗ＰＤＬ−１抗体であり得る。１つの実施形態において、免疫調節剤は、小分子アジュバント、例えば、サリドマイドまたはサリドマイド誘導体、例えば、レナリドマイドであり得る。
【００６１】
上記組成物は、上に開示されたもの以外の免疫原性ペプチド、例えば、ＷＴ１由来の免疫原性ペプチドまたはその誘導体も含み得る。例示的なＷＴ１ペプチドは、米国特許第７，５９８，２２１号（その内容が、参照により本明細書中に援用される）に記載されている。１つの実施形態において、上記組成物は、例えば、ＷＴ１クラス１エピトープ；ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ（配列番号５３８）（ＷＴ１  １２６〜１３４）を含む（またはそれからなる）ペプチド；ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ（配列番号５３９）を含む（またはそれからなる）ペプチド；ＲＳＤＥＬＶＲＨＨＮＭＨＱＲＮＭＴＫＬ（配列番号５４０）（ＷＴ１  ４２７〜４４５）を含む（またはそれからなる）ペプチド；ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ（配列番号５４１）（ＷＴ１  ３３１〜３５２）を含む（またはそれからなる）ペプチド；ＳＧＱＡＲＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ（配列番号５４２）（ＷＴ１  １２２〜１４０）を含む（またはそれからなる）ペプチド；およびＳＧＱＡＹＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ（配列番号５４３）を含む（またはそれからなる）ペプチドの１つ以上から選択される、ＷＴ１由来の１つ以上の免疫原性ペプチドまたはその誘導体を含む。他の免疫原性ペプチドとしては、ＭＵＣ１由来の免疫原性ペプチド、ｇｐ１００由来の免疫原性ペプチド、ＴＲＰ−２由来の免疫原性ペプチド、ＭＡＧ１由来の免疫原性ペプチド、ＮＹ−ＥＳＯ１由来の免疫原性ペプチド、ＨＥＲ−２由来の免疫原性ペプチド；およびＡＩＭ２由来の免疫原性ペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６２】
１つの実施形態において、本明細書中に記載される組成物は、がん、例えば、本明細書中に記載されるがん、例えば、乳がん（例えば、浸潤性小葉癌、浸潤性乳管癌、小葉乳管混合癌、乳管内篩状癌、浸潤性小葉乳管癌、浸潤癌）、結腸がん（例えば、結腸腺癌、例えば、粘液性腺癌）、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬもしくはＣＭＬまたは多発性骨髄腫を有するかまたは有するリスクがある被験体を処置するために使用される。１つの実施形態において、本明細書中に記載される組成物は、前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を有する被験体を処置するために使用される。ある実施形態において、がんは、本明細書中に記載されるがんである。例えば、そのがんは、膀胱がん（進行性および転移性膀胱がんを含む）、乳がん（例えば、エストロゲンレセプター陽性乳がん、エストロゲンレセプター陰性乳がん、ＨＥＲ−２陽性乳がん、ＨＥＲ−２陰性乳がん、トリプルネガティブ乳がん、炎症性乳がん）、結腸がん（結腸直腸がんを含む）、腎臓がん（例えば、腎細胞癌（例えば、乳頭状腎細胞癌、明細胞癌、嫌色素性癌））、肝臓がん、肺がん（小細胞肺がんおよび非小細胞肺がん（腺癌、扁平上皮癌、気管支肺胞癌および大細胞癌を含む）を含む）、泌尿生殖器がん、例えば、卵巣がん（卵管がん、子宮内膜がんおよび腹膜がんを含む）、子宮頸がん、前立腺がんおよび精巣がん、リンパ系のがん、直腸がん、喉頭がん、膵がん（膵外分泌癌を含む）、胃がん（例えば、胃食道がん、胃上部がんまたは胃下部がん）、消化器がん（例えば、肛門がんまたは胆管がん）、胆嚢がん、甲状腺がん、白血病（例えば、急性骨髄性白血病）、神経細胞がんおよびグリア細胞がん（例えば、多形神経膠芽腫）ならびに頭頸部がんであり得る。
【００６３】
なおも別の態様において、本開示は、（ｉ）グループＡ、グループＢおよび／またはグループＣからの任意の単離されたペプチドの１つ以上；ならびにそのペプチドを、被験体、例えば、がん、例えば、本明細書中に記載されるがん、例えば、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬもしくはＣＭＬまたは多発性骨髄腫を有する被験体、あるいは前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を有する被験体に投与するための指示；（ｉｉ）本明細書中に記載される組成物、および上記ペプチドを被験体、例えば、がん、例えば、本明細書中に記載されるがん、例えば、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬもしくはＣＭＬまたは多発性骨髄腫を有する被験体、あるいは前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を有する被験体に投与するための指示；および／または（ｉｉｉ）単離されたペプチドをコードする単離された核酸の１つ以上、単離された核酸を含む１つ以上のベクターもしくはそれらのベクターを含む１つ以上の培養細胞および単離されたペプチドを生成するための指示を含むキットを特徴とする。ある実施形態において、がんは、本明細書中に記載されるがんである。例えば、そのがんは、膀胱がん（進行性および転移性膀胱がんを含む）、乳がん（例えば、エストロゲンレセプター陽性乳がん、エストロゲンレセプター陰性乳がん、ＨＥＲ−２陽性乳がん、ＨＥＲ−２陰性乳がん、トリプルネガティブ乳がん、炎症性乳がん）、結腸がん（結腸直腸がんを含む）、腎臓がん（例えば、腎細胞癌（例えば、乳頭状腎細胞癌、明細胞癌、嫌色素性癌））、肝臓がん、肺がん（小細胞肺がんおよび非小細胞肺がん（腺癌、扁平上皮癌、気管支肺胞癌および大細胞癌を含む）を含む）、泌尿生殖器がん、例えば、卵巣がん（卵管がん、子宮内膜がんおよび腹膜がんを含む）、子宮頸がん、前立腺がんおよび精巣がん、リンパ系のがん、直腸がん、喉頭がん、膵がん（膵外分泌癌を含む）、胃がん（例えば、胃食道がん、胃上部がんまたは胃下部がん）、消化器がん（例えば、肛門がんまたは胆管がん）、胆嚢がん、甲状腺がん、白血病（例えば、急性骨髄性白血病）、神経細胞がんおよびグリア細胞がん（例えば、多形神経膠芽腫）ならびに頭頸部がんであり得る。
【００６４】
いくつかの実施形態において、上記キットは、例えば、１つ以上の薬学的に許容され得るキャリア、１つ以上の免疫刺激剤もしくは免疫調節剤または１つ以上の治療薬、診断薬もしくは予防薬も含み得る。１つの実施形態において、免疫刺激剤は、本明細書中に記載される免疫刺激剤である。１つ以上の免疫刺激剤は、Ｔヘルパーエピトープ、変更されたペプチドリガンドおよびアジュバントからなる群より選択され得る。１つの実施形態において、免疫刺激剤は、カルボキシメチルセルロース、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸およびポリ−Ｌ−リジン二本鎖ＲＮＡを含むアジュバント（例えば、ポリＩＣ−ＬＣ  ｔ、例えば、ヒルトノール）；水と油のエマルジョンを含むアジュバント（例えば、モンタナイド）；タンパク質（例えば、サイトカイン、補体、ＧＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ）を含むアジュバントである。１つの実施形態において、免疫調節剤は、本明細書中に記載される免疫調節剤、例えば、タンパク質、例えば、免疫系を調節する抗体（例えば、抗ＣＴＬＡ４抗体、例えば、イピリムマブまたはトレメリムマブ、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤＬ−１抗体）、小分子アジュバント（例えば、サリドマイドまたはサリドマイド誘導体、例えば、レナリドマイド）である。１つの実施形態において、上記キットは、免疫刺激剤および／または免疫調節剤を、本明細書中に記載されるペプチド（単数または複数）または本明細書中に記載される組成物とともに投与するための指示をさらに含む。
【００６５】
１つの実施形態において、上記キットは、さらなる免疫原性ペプチド、例えば、Ｗｔ１由来の免疫原性ペプチドまたはその誘導体、例えば、本明細書中に記載される免疫原性ＷＴ１ペプチドをさらに含む。他の免疫原性ペプチドとしては、ＭＵＣ１由来の免疫原性ペプチド、ｇｐ１００由来の免疫原性ペプチド、ＴＲＰ−２由来の免疫原性ペプチド、ＭＡＧ１由来の免疫原性ペプチド、ＮＹ−ＥＳＯ１由来の免疫原性ペプチド、ＨＥＲ−２由来の免疫原性ペプチド；およびＡＩＭ２由来の免疫原性ペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。１つの実施形態において、上記キットは、さらなる免疫原性ペプチド、例えば、ＷＴ１ペプチドを、本明細書中に記載されるペプチド（単数または複数）または本明細書中に記載される組成物とともに投与するための指示をさらに含む。
【００６６】
別の態様において、本開示は、容器；およびその容器内に含められた組成物を含む製造品を特徴とし、ここで、その組成物は、本明細書中に記載される組成物である。その容器は、その組成物が哺乳動物、例えば、ヒトにおいて免疫応答を誘導するために使用するためのものであることを示す表示を有し得る。その表示は、その組成物が、がん、例えば、本明細書中に記載されるがん、例えば、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬもしくはＣＭＬまたは多発性骨髄腫を有するか、有すると疑われるか、または発症するリスクがある哺乳動物、あるいは前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を有する被験体に投与されるべきであることをさらに示し得る。その製造品は、その組成物を哺乳動物、例えば、ヒトに投与するための指示も含み得る。その組成物は、例えば、溶液状態、乾燥されたまたは凍結乾燥された状態であり得る。
【００６７】
ある実施形態において、がんは、本明細書中に記載されるがんである。例えば、そのがんは、膀胱がん（進行性および転移性膀胱がんを含む）、乳がん（例えば、エストロゲンレセプター陽性乳がん、エストロゲンレセプター陰性乳がん、ＨＥＲ−２陽性乳がん、ＨＥＲ−２陰性乳がん、トリプルネガティブ乳がん、炎症性乳がん）、結腸がん（結腸直腸がんを含む）、腎臓がん（例えば、腎細胞癌（例えば、乳頭状腎細胞癌、明細胞癌、嫌色素性癌））、肝臓がん、肺がん（小細胞肺がんおよび非小細胞肺がん（腺癌、扁平上皮癌、気管支肺胞癌および大細胞癌を含む）を含む）、泌尿生殖器がん、例えば、卵巣がん（卵管がん、子宮内膜がんおよび腹膜がんを含む）、子宮頸がん、前立腺がんおよび精巣がん、リンパ系のがん、直腸がん、喉頭がん、膵がん（膵外分泌癌を含む）、胃がん（例えば、胃食道がん、胃上部がんまたは胃下部がん）、消化器がん（例えば、肛門がんまたは胆管がん）、胆嚢がん、甲状腺がん、白血病（例えば、急性骨髄性白血病）、神経細胞がんおよびグリア細胞がん（例えば、多形神経膠芽腫）ならびに頭頸部がんであり得る。
【００６８】
なおも別の態様において、本開示は、被験体において免疫応答を誘導するための方法を特徴とし、その方法は、本明細書中に記載される任意の単離されたペプチドの１つ以上および／または本明細書中に記載される組成物を被験体に送達する工程、例えば、投与する工程を含む。１つの実施形態において、その被験体には、少なくとも２つ、例えば、２、３または４つの、グループＡからのペプチドが投与される。例えば、その被験体には、グループＡからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、グループＡからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、グループＡからのＣＤ１３８ペプチド、グループＡからのＣＳ−１ペプチドおよびそれらの組み合わせのうちの２つ以上が投与され得る。１つの実施形態において、その被験体には、グループＡからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド（例えば、配列番号６を含む非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド）、グループＡからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド（例えば、配列番号１０を含むスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド）、グループＡからのＣＤ１３８ペプチド（例えば、配列番号１２を含むＣＤ１３８ペプチド）およびグループＡからのＣＳ−１ペプチド（例えば、配列番号１６を含むＣＳ−１ペプチド）が投与される。１つの実施形態において、その被験体には、少なくとも２つ、例えば、２、３または４つの、グループＢからのペプチドが投与される。例えば、その被験体には、グループＢからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、グループＢからのＣＤ１３８ペプチド、グループＢからのＣＳ−１ペプチドおよびそれらの組み合わせが投与され得る。１つの実施形態において、その被験体には、グループＢからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド（例えば、配列番号２９を含む非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド）、グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド（例えば、配列番号３０を含むスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド）、グループＢからのＣＤ１３８ペプチド（例えば、配列番号３１を含むＣＤ１３８ペプチド）およびグループＢからのＣＳ−１ペプチド（例えば、配列番号３２を含むＣＳ−１ペプチド）が投与される。１つの実施形態において、その被験体には、少なくとも２つ（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０個以上）の、グループＣからのペプチドが投与される。別の実施形態において、その被験体には、グループＡおよびグループＣまたはグループＢおよびグループＣからの２つ以上のペプチドが投与される。
【００６９】
上記方法は、１つ以上のペプチドまたは組成物を被験体に送達した後に、その被験体において免疫応答が生じたかを測定する工程も含み得る。その１つ以上のペプチドは、薬学的組成物、例えば、本明細書中に記載される薬学的組成物として被験体に送達され得る。その被験体は、例えば、哺乳動物（例えば、ヒト）または本明細書中に記載される他の任意の被験体であり得る。その被験体は、がん、例えば、本明細書中に記載されるがん、例えば、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬもしくはＣＭＬまたは多発性骨髄腫を有し得るか、それらを有すると疑われ得るか、それらを発症するリスクがあり得るか、またはそれらから寛解している可能性がある。１つの実施形態において、その被験体は、前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を有する。ある実施形態において、がんは、本明細書中に記載されるがんである。例えば、そのがんは、膀胱がん（進行性および転移性膀胱がんを含む）、乳がん（例えば、エストロゲンレセプター陽性乳がん、エストロゲンレセプター陰性乳がん、ＨＥＲ−２陽性乳がん、ＨＥＲ−２陰性乳がん、トリプルネガティブ乳がん、炎症性乳がん）、結腸がん（結腸直腸がんを含む）、腎臓がん（例えば、腎細胞癌（例えば、乳頭状腎細胞癌、明細胞癌、嫌色素性癌））、肝臓がん、肺がん（小細胞肺がんおよび非小細胞肺がん（腺癌、扁平上皮癌、気管支肺胞癌および大細胞癌を含む）を含む）、泌尿生殖器がん、例えば、卵巣がん（卵管がん、子宮内膜がんおよび腹膜がんを含む）、子宮頸がん、前立腺がんおよび精巣がん、リンパ系のがん、直腸がん、喉頭がん、膵がん（膵外分泌癌を含む）、胃がん（例えば、胃食道がん、胃上部がんまたは胃下部がん）、消化器がん（例えば、肛門がんまたは胆管がん）、胆嚢がん、甲状腺がん、白血病（例えば、急性骨髄性白血病）、神経細胞がんおよびグリア細胞がん（例えば、多形神経膠芽腫）ならびに頭頸部がんであり得る。
【００７０】
いくつかの実施形態において、上記方法は、がん細胞（または複数のがん細胞）が、ＸＢＰ１、ＣＤ１３８またはＣＳ−１のうちの１つ以上を発現しているかを決定する工程を含み得る。
【００７１】
いくつかの実施形態において、上記方法は、１つ以上のさらなる処置、例えば、化学療法剤、電離放射線、手術または１つ以上のさらなる免疫療法剤を被験体に施行する工程をさらに含み得る。電離放射線の１つ以上の形態は、例えば、ガンマ線照射、Ｘ線照射またはベータ線照射であり得る。１つ以上の化学療法剤は、本明細書中に記載される化学療法剤、例えば、白金ベースの薬剤、タキサン、トポイソメラーゼ（ｔｏｐｉｓｏｍｅｒａｓｅ）阻害剤、代謝拮抗物質、アルキル化剤、プロテアーゼ阻害剤およびビンカアルカロイドからなる群より選択される化学療法剤であり得る。例示的な化学療法剤としては：シスプラチン、カルボプラチン、プロカルバジン、メクロレタミン、シクロホスファミド、カンプトテシン、アドリアマイシン、イホスファミド、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン（ｂｉｓｕｌｆａｎ）、ニトロソ尿素（ｎｉｔｒｏｓｕｒｅａ）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、プリカマイシン（ｐｌｉｃｏｍｙｃｉｎ）、マイトマイシン、エトポシド、ベランピル（ｖｅｒａｍｐｉｌ）、ポドフィロトキシン、タキソール、トランス白金（ｔｒａｎｓｐｌａｔｉｎｕｍ）、５−フルオロウラシル（ｆｌｕｒｏｕｒａｃｉｌ）、ビンクリスチン（ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎ）、ビンブラスチン（ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎ）、メトトレキサートおよび上述のいずれかのアナログが挙げられるが、これらに限定されない。上記方法は、１つ以上の免疫刺激剤、例えば、本明細書中に記載される１つ以上の免疫刺激剤を被験体に投与する工程も含み得る。
【００７２】
１つの実施形態において、上記方法は、さらなる免疫原性ペプチド、例えば、ＷＴ１由来の免疫原性ペプチドまたはその誘導体、例えば、本明細書中に記載される免疫原性ＷＴ１ペプチドを、本明細書中に記載される１つ以上のペプチドとともに投与する工程をさらに含む。他の免疫原性ペプチドとしては、ＭＵＣ１由来の免疫原性ペプチド、ｇｐ１００由来の免疫原性ペプチド、ＴＲＰ−２由来の免疫原性ペプチド、ＭＡＧ１由来の免疫原性ペプチド、ＮＹ−ＥＳＯ１由来の免疫原性ペプチド、ＨＥＲ−２由来の免疫原性ペプチド；およびＡＩＭ２由来の免疫原性ペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７３】
いくつかの実施形態において、上記送達する工程は、グループＡ、グループＢおよび／もしくはグループＣからの１つ以上のペプチドまたは本明細書中に記載される組成物を被験体に投与する工程を含む。いくつかの実施形態において、上記送達する工程は、１つ以上の核酸を被験体に投与する工程を含み、それらの核酸の各々は、１つ以上のペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、そのヌクレオチド配列は、発現調節配列に作動可能に連結されている。その核酸は、その核酸でトランスフェクトされ、１つ以上のペプチドを発現している、組換え細胞内に存在し得る。その組換え細胞は、被験体から得られた細胞をトランスフェクトすることによって作製された、トランスフェクトされた細胞またはトランスフェクトされた細胞の子孫であり得る。その組換え細胞は、抗原提示細胞（例えば、樹状細胞、マクロファージ、単球またはＢ細胞であるがこれらに限定されない）であり得る。
【００７４】
上に記載された方法のいずれかのいくつかの実施形態において、送達する工程は、１つ以上のペプチドを細胞と接触させる工程；および１つ以上のペプチドを細胞と接触させた後に、その細胞を被験体に送達する工程を含む。その細胞は、例えば、抗原提示細胞（例えば、本明細書中に記載されるもののいずれか）であり得る。その細胞は、例えば、被験体から得られた、細胞または細胞の子孫であり得る。いくつかの実施形態において、その細胞は、被験体と同じ種の別の被験体から得られた細胞または細胞の子孫であり得る。その他の被験体は、被験体と共通の少なくとも１つのＭＨＣ分子を発現し得る。その少なくとも１つのＭＨＣ分子は、例えば、ＭＨＣクラスＩ分子（例えば、ＨＬＡ−Ａ２分子および／またはＨＬＡ−Ａ２４分子）であり得る。
【００７５】
別の態様において、本開示は、がん、例えば、本明細書中に記載されるがん、例えば、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬもしくはＣＭＬまたは多発性骨髄腫を有する被験体あるいは前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を有する被験体を処置するための方法を特徴とする。１つの実施形態において、その方法は、グループＡからの１つ以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７または１８個）の任意のペプチドまたは本明細書中に記載される組成物を被験体に投与する工程を含み、ここで、その被験体は、がん、例えば、本明細書中に記載されるがん、例えば、乳がん（例えば、浸潤性小葉癌、浸潤性乳管癌、小葉乳管混合癌、乳管内篩状癌、浸潤性小葉乳管癌、浸潤癌）、結腸がん（例えば、結腸腺癌、例えば、粘液性腺癌）、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬもしくはＣＭＬまたは多発性骨髄腫を有するかまたは発症するリスクがあるか、あるいはその被験体は、前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を有する。１つの実施形態において、その方法は、グループＢからの１つ以上（例えば、１、２、３または４つ）の任意のペプチドまたは本明細書中に記載される組成物を被験体に投与する工程を含み、その被験体は、がん、本明細書中に記載されるがん、例えば、肺がん、肝臓がん、胆管がん、胃がん、子宮頸がん、鼻咽頭がん、乳がん（例えば、浸潤性小葉癌、浸潤性乳管癌、小葉乳管混合癌、乳管内篩状癌、浸潤性小葉乳管癌、浸潤癌）、結腸がん（例えば、結腸腺癌、例えば、粘液性腺癌）、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬもしくはＣＭＬまたは多発性骨髄腫を有するか、または発症するリスクがある。１つの実施形態において、その方法は、グループＣからの１つ以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０個以上）の任意のペプチドまたは本明細書中に記載される組成物を被験体に投与する工程を含み、ここで、その被験体は、がん、例えば、本明細書中に記載されるがん、例えば、乳がん（例えば、浸潤性小葉癌、浸潤性乳管癌、小葉乳管混合癌、乳管内篩状癌、浸潤性小葉乳管癌、浸潤癌）、結腸がん（例えば、結腸腺癌、例えば、粘液性腺癌）、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬもしくはＣＭＬまたは多発性骨髄腫を有するかまたは発症するリスクがあるか、あるいはその被験体は、前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を有する。
【００７６】
ある実施形態において、がんは、本明細書中に記載されるがんである。例えば、そのがんは、膀胱がん（進行性および転移性膀胱がんを含む）、乳がん（例えば、エストロゲンレセプター陽性乳がん、エストロゲンレセプター陰性乳がん、ＨＥＲ−２陽性乳がん、ＨＥＲ−２陰性乳がん、トリプルネガティブ乳がん、炎症性乳がん）、結腸がん（結腸直腸がんを含む）、腎臓がん（例えば、腎細胞癌（例えば、乳頭状腎細胞癌、明細胞癌、嫌色素性癌））、肝臓がん、肺がん（小細胞肺がんおよび非小細胞肺がん（腺癌、扁平上皮癌、気管支肺胞癌および大細胞癌を含む）を含む）、泌尿生殖器がん、例えば、卵巣がん（卵管がん、子宮内膜がんおよび腹膜がんを含む）、子宮頸がん、前立腺がんおよび精巣がん、リンパ系のがん、直腸がん、喉頭がん、膵がん（膵外分泌癌を含む）、胃がん（例えば、胃食道がん、胃上部がんまたは胃下部がん）、消化器がん（例えば、肛門がんまたは胆管がん）、胆嚢がん、甲状腺がん、白血病（例えば、急性骨髄性白血病）、神経細胞がんおよびグリア細胞がん（例えば、多形神経膠芽腫）ならびに頭頸部がんであり得る。
【００７７】
１つの実施形態において、上記被験体には、少なくとも２つ、例えば、２、３または４つの、グループＡからのペプチドが投与される。例えば、その被験体には、グループＡからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、グループＡからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、グループＡからのＣＤ１３８ペプチド、グループＡからのＣＳ−１ペプチドおよびそれらの組み合わせのうちの２つ以上が投与され得る。１つの実施形態において、その被験体には、グループＡからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド（例えば、配列番号６を含む非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド）、グループＡからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド（例えば、配列番号１０を含むスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド）、グループＡからのＣＤ１３８ペプチド（例えば、配列番号１２を含むＣＤ１３８ペプチド）およびＣＳ−１ペプチド（例えば、配列番号１６を含むＣＳ−１ペプチド）が投与される。その１つ以上のペプチドは、薬学的組成物、例えば、グループＡからの薬学的組成物として被験体に送達され得る。
【００７８】
１つの実施形態において、上記被験体には、少なくとも２つ、例えば、２、３または４つの、グループＢからのペプチドが投与される。例えば、その被験体には、グループＢからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、グループＢからのＣＤ１３８ペプチド、グループＢからのＣＳ−１ペプチドおよびそれらの組み合わせが投与され得る。１つの実施形態において、その被験体には、グループＢからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド（例えば、配列番号２９を含む非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド）、グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド（例えば、配列番号３０を含むスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド）、グループＢからのＣＤ１３８ペプチド（例えば、配列番号３１を含むＣＤ１３８ペプチド）およびグループＢからのＣＳ−１ペプチド（例えば、配列番号３２を含むＣＳ−１ペプチド）が投与される。
【００７９】
１つの実施形態において、上記被験体には、少なくとも２つ（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０個以上）の、グループＣからのペプチドが投与される。別の実施形態において、その被験体には、グループＡおよびグループＣまたはグループＢおよびグループＣからの２つ以上のペプチドが投与される。
【００８０】
１つの実施形態において、上記方法は、さらなる薬剤を被験体に投与する工程、例えば、化学療法剤および／または免疫刺激剤および／または免疫調節剤を投与する工程をさらに含む。１つの実施形態において、そのさらなる薬剤は、免疫刺激剤、例えば、本明細書中に記載される免疫刺激剤である。１つの実施形態において、その免疫刺激剤は、カルボキシメチルセルロース、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸およびポリ−Ｌ−リジン二本鎖ＲＮＡを含むアジュバント（例えば、ポリＩＣ−ＬＣ、例えば、ヒルトノール）；水と油のエマルジョンを含むアジュバント（例えば、モンタナイド）；タンパク質（例えば、サイトカイン、補体、ＧＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ）を含むアジュバントである。１つの実施形態において、そのさらなる薬剤は、免疫調節剤、例えば、本明細書中に記載される免疫調節剤である。１つの実施形態において、その免疫調節剤は、タンパク質、例えば、免疫系を活性化する抗体（例えば、抗ＣＴＬＡ４抗体、例えば、イピリムマブまたはトレメリムマブ、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤＬ−１抗体）；小分子アジュバント（例えば、サリドマイドまたはサリドマイド誘導体、例えば、レナリドマイド）である。１つの実施形態において、上記方法は、さらなる免疫原性ペプチド、例えば、ＷＴ１由来の免疫原性ペプチドまたはその誘導体、例えば、本明細書中に記載されるＷＴ１ペプチドを、上記ペプチドの１つ以上とともに投与する工程を含む。他の免疫原性ペプチドとしては、ＭＵＣ１由来の免疫原性ペプチド、ｇｐ１００由来の免疫原性ペプチド、ＴＲＰ−２由来の免疫原性ペプチド、ＭＡＧ１由来の免疫原性ペプチド、ＮＹ−ＥＳＯ１由来の免疫原性ペプチド、ＨＥＲ−２由来の免疫原性ペプチド；およびＡＩＭ２由来の免疫原性ペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８１】
１つの実施形態において、上記方法は、グループＡ、グループＢおよび／もしくはグループＣからのペプチドまたは本明細書中に記載される組成物を１回以上の追加投与が施行される工程（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ）をさらに含む。１つの実施形態において、上記被験体には、前回の投与の約１４日後にさらなる１回以上の追加投与が施行され、例えば、上記被験体にはグループＡ、グループＢおよび／もしくはグループＣからのペプチドまたは本明細書中に記載される組成物の、２、３、４、５、６、７、８、９または１０回投与が１週間おきに施行される。
【００８２】
別の態様において、本開示は、処置を必要とする哺乳動物のための処置を選択するための方法を特徴とする。その方法は、哺乳動物におけるがん、例えば、本明細書中に記載されるがんの１つ以上のがん細胞、例えば、乳がん細胞、結腸がん細胞、膵がん細胞、前立腺がん、血液細胞、例えば、形質細胞が、ＸＢＰ１を発現しているかを決定する工程；およびそれらのがん細胞の１つ以上が、ＸＢＰ１を発現している場合、グループＡ、グループＢおよび／もしくはグループＣからの１つ以上のペプチド、そのようなペプチドを含む融合タンパク質または本明細書中に記載される組成物をその哺乳動物のための治療薬として選択する工程を含む。その方法は、上記がん細胞の１つ以上がＸＢＰ１を発現していることを決定した後に、グループＡ、グループＢおよび／もしくはグループＣからの１つ以上のペプチド、そのようなペプチドを含む融合タンパク質または本明細書中に記載される組成物を被験体に送達する工程も含み得る。
【００８３】
なおも別の態様において、本開示は、がんを有する哺乳動物のための処置を選択するための方法を特徴とする。その方法は、哺乳動物におけるがん、例えば、本明細書中に記載されるがんの１つ以上のがん細胞、例えば、乳がん細胞、結腸がん細胞、膵がん細胞、前立腺がん細胞、血液細胞、例えば、形質細胞が、ＣＤ１３８を発現しているかを決定する工程；およびそれらのがん細胞の１つ以上が、ＣＤ１３８を発現している場合、グループＡ、グループＢおよび／もしくはグループＣからの１つ以上のペプチド、そのようなペプチドを含む融合タンパク質または本明細書中に記載される組成物をその哺乳動物のための治療薬として選択する工程を含む。その方法は、上記がん細胞の１つ以上がＣＤ１３８を発現していることを決定した後に、グループＡ、グループＢおよび／もしくはグループＣからの１つ以上のペプチド、そのようなペプチドを含む融合タンパク質または本明細書中に記載される組成物を被験体に送達する工程も含み得る。
【００８４】
別の態様において、本開示は、処置を必要とする哺乳動物のための処置を選択するための方法を特徴とする。その方法は、哺乳動物におけるがん、例えば、本明細書中に記載されるがんの１つ以上のがん細胞、例えば、乳がん細胞、結腸がん細胞、膵がん細胞、前立腺がん細胞、血液細胞、例えば、形質細胞が、ＣＳ−１を発現しているかを決定する工程；およびそれらのがん細胞の１つ以上が、ＣＳ−１を発現している場合、グループＡ、グループＢおよび／もしくはグループＣからの１つ以上のペプチド、そのようなペプチドを含む融合タンパク質または本明細書中に記載される組成物をその哺乳動物のための治療薬として選択する工程を含む。その方法は、上記がん細胞の１つ以上がＣＳ１を発現していることを決定した後に、グループＡ、グループＢおよび／もしくはグループＣから選択された１つ以上のペプチド、そのようなペプチドを含む融合タンパク質または本明細書中に記載される組成物を被験体に送達する工程も含み得る。
【００８５】
なおも別の態様において、本開示は、がん、例えば、本明細書中に記載されるがん、例えば、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がんまたは前がん性の障害、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を有する哺乳動物のための治療薬を選択するための方法を特徴とする。その方法は、その哺乳動物の１つ以上のがん細胞が、ＸＢＰ１、ＣＤ１３８および／またはＣＳ−１を発現している場合、グループＡ、グループＢおよび／もしくはグループＣからの１つ以上のペプチド、そのようなペプチドを含む融合タンパク質または本明細書中に記載される組成物をその哺乳動物のための治療薬として選択する工程を含む。その方法は、上記がん細胞の１つ以上がＸＢＰ１、ＣＤ１３８および／またはＣＳ−１を発現していることを決定した後に、グループＡ、グループＢおよび／もしくはグループＣから選択された１つ以上のペプチド、そのようなペプチドを含む融合タンパク質または本明細書中に記載される組成物を被験体に送達する工程も含み得る。
【００８６】
上記方法のいずれかのいくつかの実施形態において、上記被験体または哺乳動物は、がん、例えば、本明細書中に記載されるがん、例えば、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がんに対する治療を受けたことがあり、かつその治療に非反応性だった、被験体または哺乳動物であり得、例えば、グループＡ、グループＢおよび／もしくはグループＣからのペプチド、そのようなペプチドを含む融合タンパク質または本明細書中に記載される組成物は、第２選択、第３選択または第４選択の処置であり得る。
【００８７】
なおも別の態様において、本開示は、本明細書中に記載される組成物および（ｉｉ）主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子多量体を特徴とし、ここで、その多量体は、ＭＨＣ分子の２つ以上（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個以上）のペプチド結合領域を含む。いくつかの実施形態において、各ペプチド結合領域は、それに結合されたグループＡ、グループＢおよび／またはグループＣからのペプチドを有する。いくつかの実施形態において、各ペプチド結合領域は、それに非共有結合的にまたは共有結合的に結合されたグループＡ、グループＢおよび／またはグループＣからのペプチドを有する。ＭＨＣ分子多量体は、２つ以上（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個以上）のＭＨＣ分子全体を含み得る。ＭＨＣ分子多量体は、ヒトＭＨＣ分子を含み得る。ＭＨＣ分子多量体は、ＭＨＣクラスＩ分子、例えば、ＨＬＡ−Ａ分子、例えば、ＨＬＡ−Ａ２分子またはＨＬＡ−Ａ２４分子を含み得る。
【００８８】
いくつかの実施形態において、上記２つ以上のペプチド結合領域は、同じＭＨＣ分子に由来し得る。いくつかの実施形態において、上記２つ以上のペプチド結合領域は、異なるＭＨＣ分子に由来する。いくつかの実施形態において、上記２つ以上のペプチド結合領域は、同じＭＨＣ分子に由来する少なくとも２つ（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個以上）の領域と、異なるＭＨＣ分子に由来する少なくとも１つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個以上）の領域との混合物であり得る。
【００８９】
いくつかの実施形態において、ＭＨＣ分子多量体は、上記組成物の１つ以上の（ｏｎｅ
ｏｆ  ｍｏｒｅ）ペプチドの少なくとも１つに結合することができる。
【００９０】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、検出可能に標識され得る。例えば、上記ペプチドの１つ以上および／または上記ペプチド結合領域の１つ以上が、検出可能に標識され得る。いくつかの実施形態において、上記１つ以上のＭＨＣ分子多量体の少なくとも１つまたは上記１つ以上のペプチドの少なくとも１つが、検出可能に標識される。
【００９１】
別段定義されない限り、本明細書中で使用されるすべての専門用語および科学用語は、本発明が属する分野の当業者が通常理解している意味と同じ意味を有する。矛盾する場合、定義を含む本文書が、支配するものとする。好ましい方法および材料が、下記に記載されるが、本明細書中に記載されるそれらと類似または等価の方法および材料もまた、本発明の実施または試験において使用することができる。本明細書中で述べられるすべての刊行物、特許出願、特許および他の参考文献は、その全体が参照により援用される。本明細書中に開示される材料、方法および例は、単に例証的であって、限定すると意図されていない。
本発明は、例えば、以下の項目も提供する。
（項目１）
本明細書中に記載されている非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、本明細書中に記載されているスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、本明細書中に記載されているＣＤ１３８ペプチドおよび本明細書中に記載されているＣＳ−１ペプチド、ならびに必要に応じて、薬学的に許容され得るキャリアを含む、薬学的組成物。
（項目２）
前記非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号６のアミノ酸配列を含む、項目１に記載の薬学的組成物。
（項目３）
前記スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１０のアミノ酸配列を含む、項目１に記載の薬学的組成物。
（項目４）
前記ＣＤ１３８ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１２のアミノ酸配列を含む、項目１に記載の薬学的組成物。
（項目５）
前記非スプライシング型ＣＳ−１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１６のアミノ酸配列を含む、項目１に記載の薬学的組成物。
（項目６）
前記非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、配列番号６のアミノ酸配列からなる、項目１に記載の薬学的組成物。
（項目７）
前記スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、配列番号１０のアミノ酸配列からなる、項目１に記載の薬学的組成物。
（項目８）
前記ＣＤ１３８ペプチドが、配列番号１２のアミノ酸配列からなる、項目１に記載の薬学的組成物。
（項目９）
前記ＣＳ−１ペプチドが、配列番号１６のアミノ酸配列からなる、項目１に記載の薬学的組成物。
（項目１０）
前記非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号６のアミノ酸配列を含み；前記スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１０のアミノ酸配列を含み；前記ＣＤ１３８ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１２のアミノ酸配列を含み；かつ前記ＣＳ−１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１６のアミノ酸配列を含む、項目１に記載の薬学的組成物。
（項目１１）
前記非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、配列番号６のアミノ酸配列からなり；前記スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、配列番号１０のアミノ酸配列からなり；前記ＣＤ１３８ペプチドが、配列番号１２のアミノ酸配列からなり；かつ前記ＣＳ−１ペプチドが、配列番号１６のアミノ酸配列からなる、項目１に記載の薬学的組成物。
（項目１２）
１つ以上の免疫刺激剤または免疫調節剤をさらに含む、先行する項目のいずれかに記載の薬学的組成物。
（項目１３）
前記免疫刺激剤が、カルボキシメチルセルロース、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸およびポリ−Ｌ−リジン二本鎖ＲＮＡを含むアジュバント（例えば、ポリＩＣ−ＬＣ、例えば、ヒルトノール）；水と油のエマルジョンを含むアジュバント（例えば、モンタナイド）；ならびにタンパク質（例えば、サイトカイン、ＧＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ）を含むアジュバントから選択される、項目１２に記載の薬学的組成物。
（項目１４）
前記免疫調節剤が、免疫系を活性化する抗体（例えば、抗ＣＴＬＡ４抗体、例えば、イピリムマブまたはトレメリムマブ）；抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤＬ−１抗体、小分子アジュバント（例えば、サリドマイドまたはサリドマイド誘導体、例えば、レナリドマイド）から選択される、項目１２に記載の薬学的組成物。
（項目１５）
項目１〜１４のいずれかに記載の組成物および該組成物を被験体に投与するための指示を含むキット。
（項目１６）
１つ以上の薬学的に許容され得るキャリアをさらに含む、項目１５に記載のキット。
（項目１７）
１つ以上の免疫刺激剤および／または免疫調節剤をさらに含む、項目１５または１６に記載のキット。
（項目１８）
前記被験体が、がん、例えば、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病（例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬ）、多発性骨髄腫またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症（Ｗａｌｄｅｎｓｔｒｏｍ’ｓ  ｍａｃｒｏｇｌｏｕｌｉｎｅｍｉａ）を有する、項目１５〜１７のいずれかに記載のキット。
（項目１９）
前記被験体が、くすぶり型多発性骨髄腫を有する、項目１５〜１７のいずれかに記載のキット。
（項目２０）
容器および該容器内に含められた項目１〜１４のいずれかに記載の組成物を含む、製造品。
（項目２１）
前記容器が、前記組成物が哺乳動物において免疫応答を誘導するために使用するためのものであることを示す表示を有する、項目２０に記載の製造品。
（項目２２）
前記容器が、前記組成物が、がん、例えば、乳がん、結腸がん、膵がん、白血病（例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬ）、多発性骨髄腫またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症を処置するために使用するためのものであることを示す表示を有する、項目２０に記載の製造品。
（項目２３）
前記容器が、前記組成物が、くすぶり型多発性骨髄腫を処置するために使用するためのものであることを示す表示を有する、項目２０に記載の製造品。
（項目２４）
前記組成物を前記哺乳動物に投与するための指示をさらに含む、項目２０〜２３のいずれかに記載の製造品。
（項目２５）
被験体において免疫応答を誘導するための方法であって、該方法は、項目１〜１４のいずれかに記載の組成物を被験体に送達する工程を含む、方法。
（項目２６）
前記組成物を前記被験体に送達した後に、該被験体において免疫応答が生じたかを決定する工程をさらに含む、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
前記被験体が、ヒトである、項目２５または２６に記載の方法。
（項目２８）
前記被験体が、乳がん、結腸がん、膵がん、白血病（例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬ）、多発性骨髄腫またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症を有するか、または有していると疑われる、項目２５〜２７のいずれか１項に記載の方法。
（項目２９）
前記被験体が、くすぶり型多発性骨髄腫を有する、項目２５〜２７のいずれか１項に記載の方法。
（項目３０）
１つ以上のがん細胞が、ＸＢＰ１、ＣＤ１３８またはＣＳ１を発現しているかを決定する工程をさらに含む、項目２８に記載の方法。
（項目３１）
前記被験体が、がん、例えば、乳がん、結腸がん、白血病（例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬ）、多発性骨髄腫またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症から寛解している、項目２８または３０に記載の方法。
（項目３２）
前記組成物を、さらなる処置、例えば、１つ以上の化学療法剤、１つ以上の形態の電離放射線または１つ以上の免疫療法剤と組み合わせて投与する工程を含む、項目２５〜３１のいずれかに記載の方法。
（項目３３）
前記被験体に１つ以上の免疫刺激剤および／または免疫調節剤を投与する工程をさらに含む、項目２５〜３１のいずれか１項に記載の方法。
（項目３４）
前記免疫刺激剤が、カルボキシメチルセルロース、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸およびポリ−Ｌ−リジン二本鎖ＲＮＡを含むアジュバント（例えば、ポリＩＣ−ＬＣ、例えば、ヒルトノール）；水と油のエマルジョンを含むアジュバント（例えば、モンタナイド）；ならびにタンパク質（例えば、サイトカイン、ＧＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ）を含むアジュバントから選択される、項目３３に記載の方法。
（項目３５）
前記免疫調節剤が、免疫系を活性化する抗体（例えば、抗ＣＴＬＡ４抗体、例えば、イピリムマブまたはトレメリムマブ、ＰＤ−１抗体、抗ＰＤＬ−１抗体）；小分子アジュバント（例えば、サリドマイドまたはサリドマイド誘導体、例えば、レナリドマイド）から選択される、項目３３に記載の方法。
（項目３６）
がん、例えば、乳がん、結腸がん、膵がん、白血病（例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬ）、多発性骨髄腫またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症を処置するための方法であって、該方法は、項目１〜１４のいずれかに記載の任意の組成物の１つ以上を被験体に投与する工程を含み、ここで、該被験体は、がん、例えば、乳がん、結腸がん、膵がん、白血病（例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬ）、多発性骨髄腫またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症を有するか、または発症するリスクがある、方法。
（項目３７）
１つ以上の免疫刺激剤および／または免疫調節剤を前記被験体に投与する工程をさらに含む、項目３６に記載の方法。
（項目３８）
前記免疫刺激剤が、カルボキシメチルセルロース、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸およびポリ−Ｌ−リジン二本鎖ＲＮＡを含むアジュバント（例えば、ポリＩＣ−ＬＣ、例えば、ヒルトノール）；水と油のエマルジョンを含むアジュバント（例えば、モンタナイド）；ならびにタンパク質（例えば、サイトカイン、ＧＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ）を含むアジュバントから選択される、項目３７に記載の方法。
（項目３９）
前記免疫調節剤が、免疫系を活性化する抗体（例えば、抗ＣＴＬＡ４抗体、例えば、イピリムマブまたはトレメリムマブ、ＰＤ−１抗体、ＰＤＬ−１抗体）；小分子アジュバント（例えば、サリドマイドまたはサリドマイド誘導体、例えば、レナリドマイド）から選択される、項目３７に記載の方法。
（項目４０）
くすぶり型多発性骨髄腫を処置するための方法であって、該方法は、項目１〜１４のいずれかに記載の任意の組成物の１つ以上を被験体に投与する工程を含み、ここで、該被験体は、くすぶり型多発性骨髄腫を有する、方法。
（項目４１）
１つ以上の免疫刺激剤および／または免疫調節剤を前記被験体に投与する工程をさらに含む、項目４０に記載の方法。
（項目４２）
前記免疫刺激剤が、カルボキシメチルセルロース、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸およびポリ−Ｌ−リジン二本鎖ＲＮＡを含むアジュバント（例えば、ポリＩＣ−ＬＣ、例えば、ヒルトノール）；水と油のエマルジョンを含むアジュバント（例えば、モンタナイド）；ならびにタンパク質（例えば、サイトカイン、ＧＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ）を含むアジュバントから選択される、項目４１に記載の方法。
（項目４３）
前記免疫調節剤が、免疫系を活性化する抗体（例えば、抗ＣＴＬＡ４抗体、例えば、イピリムマブまたはトレメリムマブ、ＰＤ−１抗体、抗ＰＤＬ−１抗体）；小分子アジュバント（例えば、サリドマイドまたはサリドマイド誘導体、例えば、レナリドマイド）から選択される、項目４１に記載の方法。
（項目４４）
被験体における乳がんを処置する方法であって、該方法は、本明細書中に記載されている非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、本明細書中に記載されているスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、本明細書中に記載されているＣＤ１３８ペプチドおよび本明細書中に記載されているＣＳ−１ペプチドのうちの１つ以上を投与し、それにより、乳がんを有する該被験体を処置する工程を含む、方法。
（項目４５）
前記非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号６のアミノ酸配列を含む、項目４４に記載の方法。
（項目４６）
前記スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１０のアミノ酸配列を含む、項目４４に記載の方法。
（項目４７）
前記ＣＤ１３８ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１２のアミノ酸配列を含む、項目４４に記載の方法。
（項目４８）
前記ＣＳ−１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１６のアミノ酸配列を含む、項目４４に記載の方法。
（項目４９）
前記非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、配列番号６のアミノ酸配列からなる、項目４４に記載の方法。
（項目５０）
前記スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、配列番号１０のアミノ酸配列からなる、項目４４に記載の方法。
（項目５１）
前記ＣＤ１３８ペプチドが、配列番号１２のアミノ酸配列からなる、項目４４に記載の方法。
（項目５２）
前記ＣＳ−１ペプチドが、配列番号１６のアミノ酸配列からなる、項目４４に記載の方法。
（項目５３）
被験体における結腸がんを処置する方法であって、該方法は、本明細書中に記載されている非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、本明細書中に記載されているスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、本明細書中に記載されているＣＤ１３８ペプチドおよび本明細書中に記載されているＣＳ−１ペプチドのうちの１つ以上を投与し、それにより、結腸がんを有する該被験体を処置する工程を含む、方法。
（項目５４）
前記非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号６のアミノ酸配列を含む、項目５３に記載の方法。
（項目５５）
前記スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１０のアミノ酸配列を含む、項目５３に記載の方法。
（項目５６）
前記ＣＤ１３８ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１２のアミノ酸配列を含む、項目５３に記載の方法。
（項目５７）
前記ＣＳ−１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１６のアミノ酸配列を含む、項目５３に記載の方法。
（項目５８）
前記非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、配列番号６のアミノ酸配列からなる、項目５３に記載の方法。
（項目５９）
前記スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、配列番号１０のアミノ酸配列からなる、項目５３に記載の方法。
（項目６０）
前記ＣＤ１３８ペプチドが、配列番号１２のアミノ酸配列からなる、項目５３に記載の方法。
（項目６１）
前記ＣＳ−１ペプチドが、配列番号１６のアミノ酸配列からなる、項目５３に記載の方法。
（項目６２）
被験体における膵がんを処置する方法であって、該方法は、本明細書中に記載されている非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、本明細書中に記載されているスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、本明細書中に記載されているＣＤ１３８ペプチドおよび本明細書中に記載されているＣＳ−１ペプチドのうちの１つ以上を投与し、それにより、膵がんを有する該被験体を処置する工程を含む、方法。
（項目６３）
前記非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号６のアミノ酸配列を含む、項目６２に記載の方法。
（項目６４）
前記スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１０のアミノ酸配列を含む、項目６２に記載の方法。
（項目６５）
前記ＣＤ１３８ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１２のアミノ酸配列を含む、項目６２に記載の方法。
（項目６６）
前記ＣＳ−１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１６のアミノ酸配列を含む、項目６２に記載の方法。
（項目６７）
前記非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、配列番号６のアミノ酸配列からなる、項目６２に記載の方法。
（項目６８）
前記スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、配列番号１０のアミノ酸配列からなる、項目５８に記載の方法。
（項目６９）
前記ＣＤ１３８ペプチドが、配列番号１２のアミノ酸配列からなる、項目６２に記載の方法。
（項目７０）
前記ＣＳ−１ペプチドが、配列番号１６のアミノ酸配列からなる、項目６２に記載の方法。
（項目７１）
被験体における白血病（例えば、ＡＭＬ）を処置する方法であって、該方法は、本明細書中に記載されている非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、本明細書中に記載されているスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、本明細書中に記載されているＣＤ１３８ペプチドおよび本明細書中に記載されているＣＳ−１ペプチドのうちの１つ以上を投与し、それにより、白血病を有する該被験体を処置する工程を含む、方法。
（項目７２）
前記非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号６のアミノ酸配列を含む、項目７１に記載の方法。
（項目７３）
前記スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１０のアミノ酸配列を含む、項目７１に記載の方法。
（項目７４）
前記ＣＤ１３８ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１２のアミノ酸配列を含む、項目７１に記載の方法。
（項目７５）
前記ＣＳ−１ペプチドが、３５アミノ酸長以下であり、配列番号１６のアミノ酸配列を含む、項目７１に記載の方法。
（項目７６）
前記非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、配列番号６のアミノ酸配列からなる、項目７１に記載の方法。
（項目７７）
前記スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが、配列番号１０のアミノ酸配列からなる、項目７１に記載の方法。
（項目７８）
前記ＣＤ１３８ペプチドが、配列番号１２のアミノ酸配列からなる、項目７１に記載の方法。
（項目７９）
前記ＣＳ−１ペプチドが、配列番号１６のアミノ酸配列からなる、項目７１に記載の方法。
【００９２】
本発明、例えば、被験体において免疫応答を誘導するための方法の他の特徴および利点は、以下の記載、図面および特許請求の範囲から明らかである。
【図面の簡単な説明】
【００９３】
【図１ａ】図１ａは、マルチペプチドカクテルのＨＬＡ−Ａ２結合能を示している棒グラフである。Ｙ軸は、平均蛍光強度を表しており、Ｘ軸は、そのカクテルのペプチド濃度を表している。インフルエンザウイルスマトリックスタンパク質５８−６６（ＩＶＭＰ５８−６６；ＧＩＬＧＦＶＦＴＬ）（配列番号２５）を、ＨＬＡ−Ａ２特異的ポジティブコントロールペプチドとして使用した。
【００９４】
【図１ｂ】図１ｂは、Ｔ２細胞を使用したときのマルチペプチドカクテルのＨＬＡ−Ａ２安定性を示している棒グラフである。Ｙ軸は、平均蛍光強度を表しており、Ｘ軸は、Ｂｒｅｆｅｌｄｉｎ  Ａ（ＢＦＡ）で処置した後の時間を表している。インフルエンザウイルスマトリックスタンパク質５８−６６（ＩＶＭＰ５８−６６；ＧＩＬＧＦＶＦＴＬ）（配列番号２５）を、ＨＬＡ−Ａ２特異的ポジティブコントロールペプチドとして使用した。
【００９５】
【図２】図２は、マルチペプチド特異的ＣＴＬ（ＭＰ−ＣＴＬ）の異なる表現型を示している一連の棒グラフである。Ｙ軸は、所与の集団における細胞のパーセンテージを示している。
【００９６】
【図３】図３は、ＨＬＡ−Ａ２＋ＭＭ細胞株に応答したＭＰ−ＣＴＬによるＩＦＮ−γ産生を示している一連の棒グラフである。Ｙ軸は、所与の集団におけるＩＦＮ−γ＋細胞のパーセンテージを示している。
【００９７】
【図４】図４は、初代骨髄腫細胞および多発性骨髄腫細胞株を含むＨＬＡ−Ａ２＋ＭＭ細胞用いての刺激によるＭＰ−ＣＴＬ増殖の誘導を示している。上のパネルは、フローサイトメトリー解析からの代表的なドットプロットである。Ｙ軸は、ＣＤ８発現を示しており、Ｘ軸は、細胞増殖の直接的な尺度であるＣＦＳＥ染色の減少を示している。下のパネルは、初代多発性骨髄腫細胞（下の左パネル）および多発性骨髄腫細胞株（下の右パネル）に対するＭＰ−ＣＴＬの増殖応答を示している棒グラフである。棒グラフにおけるＹ軸は、増殖しているＭＰ−ＣＴＬのパーセンテージを示しており、Ｘ軸は、試験された刺激性ＭＭ細胞の起源を示している。
【００９８】
【図５】図５は、初代ＭＭ細胞および細胞株を含むＨＬＡ−Ａ２＋ＭＭ細胞に対するＭＰ−ＣＴＬの細胞傷害活性を示している一連のグラフである。Ｙ軸は、パーセント細胞傷害性を示しており、Ｘ軸は、エフェクター細胞（ＭＰ−ＣＴＬ）と標的細胞との比を示している。
【００９９】
【図６ａ】図６ａは、単一のドナー（ドナーＡ）から生成したマルチペプチド特異的ＣＴＬのペプチド特異的応答を示している一連のドットプロットである。Ｙ軸は、ＣＤ１０７αの発現レベルを示しており、Ｘ軸は、ＩＦＮ−γの発現レベルを示している。
【０１００】
【図６ｂ】図６ｂは、３人のドナー（ドナーＢ、ドナーＣおよびドナーＤ）から生成したマルチペプチド特異的ＣＴＬのペプチド特異的応答を示している一連の棒グラフである。Ｙ軸は、ＣＤ１０７α＋細胞（上のパネル）またはＩＦＮ−γ＋細胞（下のパネル）のパーセンテージを示しており、Ｘ軸は、Ｋ５６２−Ａ２細胞によって提示されたペプチドを示している。
【０１０１】
【図７】図７は、様々ながん細胞株における非スプライシング型ＸＢＰ１およびスプライシング型ＸＢＰ１の相対的な発現を示している表である。相対的な発現レベルは、プラス記号またはマイナス記号で示され、また、プラス記号の数を示す数字も示されている。
【０１０２】
【図８ａ】図８ａは、ＨＬＡ−Ａ２＋乳がん細胞株に対するＸＢＰ１−ＣＴＬの６日目における増殖応答を示している一連のヒストグラムである。Ｘ軸は、細胞増殖の直接的な尺度であるＣＦＳＥ染色の減少を示している。
【図８ｂ】図８ｂは、ＨＬＡ−Ａ２＋乳がん細胞に対するＸＢＰ１−ＣＴＬの７日目における増殖応答を示している一連のヒストグラムである。Ｘ軸は、細胞増殖の直接的な尺度であるＣＦＳＥ染色の減少を示している。
【０１０３】
【図９】図９は、ＨＬＡ−Ａ２＋乳がん細胞株に対するＸＢＰ１−ＣＴＬのＩＦＮ−γ産生および細胞活性化（ＣＤ６９発現）を示している一連のドットプロットである。Ｙ軸は、ＣＤ６９の発現を示しており、Ｘ軸は、ＩＦＮ−γの発現を示している。
【０１０４】
【図１０】図１０は、ＨＬＡ−Ａ２＋乳がん細胞株に対するＸＢＰ１−ＣＴＬの脱顆粒（ＣＤ１０７α）を示している一連のドットプロットである。Ｙ軸は、ＣＤ１０７αの発現を示しており、Ｘ軸は、ＣＤ８の発現を示している。
【０１０５】
【図１１】図１１は、ＨＬＡ−Ａ２＋膵がん細胞株および結腸がん細胞株に対するＸＢＰ１−ＣＴＬの増殖応答を示している一連のヒストグラムである。Ｘ軸は、細胞増殖の直接的な尺度であるＣＦＳＥ染色の減少を示している。
【０１０６】
【図１２】図１２は、ＨＬＡ−Ａ２＋膵がん細胞株および結腸がん細胞株に対するＸＢＰ１−ＣＴＬのＩＦＮ−γ産生および脱顆粒応答を示している一連のドットプロットである。Ｙ軸は、ＣＤ１０７αの発現を示しており、Ｘ軸は、ＩＦＮ−γの発現を示している。
【０１０７】
【図１３】図１３は、様々ながん細胞株における相対的なＣＤ１３８の発現を示している表である。相対的な発現は、プラス記号またはマイナス記号で示され、また、プラス記号の数を示す数字も示されている。
【０１０８】
【図１４】図１４は、様々ながん細胞株における相対的なＣＳ１の発現を示している表である。相対的な発現は、プラス記号またはマイナス記号で示され、また、プラス記号の数を示す数字も示されている。
【０１０９】
【図１５ａ】図１５ａおよびｂは、異なるくすぶり型多発性骨髄腫患者のＴ細胞からの、免疫原性のＸＢＰ１非スプライシング型、ＸＢＰ１スプライシング型、ＣＤ１３８およびＣＳ−１  ＨＬＡ−Ａ２特異的ペプチドのカクテルによって誘導されたＣＤ８＋ＣＴＬの増加を示している一連の棒グラフである。左側のパネルにおけるＹ軸は、ＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＴＬのパーセンテージを示しており、右側のパネルにおけるＹ軸は、ＣＤ４＋Ｔｈ細胞のパーセンテージを示しており、Ｘ軸は、表現型解析の前のペプチド刺激の回数を示している。
【０１１０】
【図１５ｂ】図１５ａおよびｂは、異なるくすぶり型多発性骨髄腫患者のＴ細胞からの、免疫原性のＸＢＰ１非スプライシング型、ＸＢＰ１スプライシング型、ＣＤ１３８およびＣＳ−１  ＨＬＡ−Ａ２特異的ペプチドのカクテルによって誘導されたＣＤ８＋ＣＴＬの増加を示している一連の棒グラフである。左側のパネルにおけるＹ軸は、ＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＴＬのパーセンテージを示しており、右側のパネルにおけるＹ軸は、ＣＤ４＋Ｔｈ細胞のパーセンテージを示しており、Ｘ軸は、表現型解析の前のペプチド刺激の回数を示している。
【０１１１】
【図１６ａ】図１６ａは、ＨＬＡ−Ａ２に拘束された様式での、骨髄腫細胞に対する、くすぶり型多発性骨髄腫患者から生成したＭＰ−ＣＴＬの増殖応答を示している一連のヒストグラムである。Ｘ軸は、細胞増殖の直接的な尺度であるＣＦＳＥ染色の減少を示している。刺激の５日後の応答が、上段のパネルに示されており、６日後の応答が、中段のパネルに示されており、７日後の応答が、下段のパネルに示されている。
【０１１２】
【図１６ｂ】図１６ｂは、ＨＬＡ−Ａ２に拘束された様式での、骨髄腫細胞に応答した、第２のくすぶり型多発性骨髄腫患者から生成したＭＰ−ＣＴＬの増殖応答を示している一連のヒストグラムである。Ｙ軸は、細胞数を示しており、Ｘ軸は、ＣＦＳＥ染色を示している。刺激の５日後の応答が、上段のパネルに示されており、６日後の応答が、中段のパネルに示されており、７日後の応答が、下段のパネルに示されている。
【０１１３】
【図１７ａ】図１７ａは、ＨＬＡ−Ａ２に拘束された様式での、骨髄腫細胞株に応答した、くすぶり型多発性骨髄腫患者から生成したＭＰ−ＣＴＬのＩＦＮ−γ産生を示している一連のドットプロットである。Ｙ軸は、ＩＦＮ−γの発現を示しており、Ｘ軸は、ＣＤ８の発現を示している。
【０１１４】
【図１７ｂ】図１７ｂは、ＨＬＡ−Ａ２に拘束された様式での、骨髄腫細胞株に応答した、４人のくすぶり型多発性骨髄腫患者から生成したＭＰ−ＣＴＬのＩＦＮ−γ産生を示している一連の棒グラフである。Ｙ軸は、ＩＦＮ−γ＋細胞のパーセンテージを示しており、Ｘ軸は、ＭＰ−ＣＴＬを刺激するために使用された細胞のタイプを示している。
【０１１５】
【図１８ａ】図１８ａは、ＨＬＡ−Ａ２に拘束された様式での、骨髄腫細胞株に応答した、くすぶり型多発性骨髄腫患者から生成したＭＰ−ＣＴＬの脱顆粒を示している一連のドットプロットである。Ｙ軸は、ＣＤ１０７αの発現を示しており、Ｘ軸は、ＣＤ８の発現を示している。
【０１１６】
【図１８ｂ】図１８ｂは、ＨＬＡ−Ａ２に拘束された様式での、骨髄腫細胞株に応答した、４人のくすぶり型多発性骨髄腫患者から生成したＭＰ−ＣＴＬの脱顆粒を示している一連の棒グラフである。Ｙ軸は、ＣＤ１０７α＋細胞のパーセンテージを示しており、Ｘ軸は、ＭＰ−ＣＴＬを刺激するために使用された細胞のタイプを示している。
【０１１７】
【図１９ａ】図１９ａは、個々のペプチドを提示しているＫ５６２−Ａ２細胞に応答した、くすぶり型多発性骨髄腫患者から生成したＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＤ１３７＋ＭＰ−ＣＴＬの間での多機能性のＩＦＮ−γ産生および脱顆粒（ＣＤ１０７α）を示している一連のドットプロットである。Ｙ軸は、ＣＤ１０７αの発現を示しており、Ｙ軸は、＋細胞を示しており、Ｘ軸は、ＩＦＮ−γの発現を示している。
【０１１８】
【図１９ｂ】図１９ｂは、個々のペプチドを提示しているＫ５６２−Ａ２細胞に応答した、３人のくすぶり型多発性骨髄腫患者から生成したＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＤ１３７＋ＭＰ−ＣＴＬの間での多機能性のＩＦＮ−γ産生および脱顆粒（ＣＤ１０７α）を示している一連の棒グラフである。Ｙ軸は、ＩＦＮ−γとＣＤ１０７αの両方を発現しているＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＤ１３７＋細胞のパーセンテージを示しており、Ｘ軸は、Ｋ５６２  Ａ２＋細胞によって提示されたペプチドを示している。
【０１１９】
【図１９ｃ】図１９ｃは、個々のペプチドを提示しているＫ５６２−Ａ２細胞に応答した、３人のくすぶり型多発性骨髄腫患者から生成したＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＤ１３７＋ＭＰ−ＣＴＬの間でのＩＦＮ−γ産生と脱顆粒（ＣＤ１０７α）の両方を示している要約の棒グラフである。Ｙ軸は、ＩＦＮ−γとＣＤ１０７αの両方を発現しているＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＤ１３７＋細胞のパーセンテージを示しており、Ｘ軸は、Ｋ５６２−Ａ２細胞によって提示されたペプチドを示している。
【０１２０】
【図１９ｄ】図１９ｄは、個々のペプチドを提示しているＫ５６２−Ａ２細胞に応答した、３人のくすぶり型多発性骨髄腫患者から生成したＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＤ１３７＋ＭＰ−ＣＴＬの間でのＩＦＮ−γ産生と脱顆粒（ＣＤ１０７α）の両方を示している、２つの別個の実験からの要約の棒グラフである。Ｙ軸は、ＩＦＮ−γとＣＤ１０７αの両方を発現しているＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＤ１３７＋細胞のパーセンテージを示しており、Ｘ軸は、Ｋ５６２−Ａ２細胞によって提示されたペプチドを示している。
【０１２１】
【図２０ａ】図２０ａは、４人のくすぶり型多発性骨髄腫患者から生成したＭＰ−ＣＴＬにおけるメモリーＣＤ８＋Ｔ細胞の増加を示している、一連のドットプロット（上のパネル）および棒グラフ（下のパネル）である。ドットプロットにおけるＹ軸は、ＣＣＲ７の発現を示しており、Ｘ軸は、ＣＤ４５ＲＰの発現を示している。棒グラフにおけるＹ軸は、Ｘ軸上に定義されたＴ細胞サブセットについて陽性の細胞のパーセンテージを示している。
【０１２２】
【図２０ｂ】図２０ｂは、２人のくすぶり型多発性骨髄腫患者から生成したＭＰ−ＣＴＬの間でのエフェクターメモリー（ＥＭ）細胞の増加を示している一連の棒グラフである。４回から７回へのペプチド刺激の回数の増加は、ＥＭタイプの細胞のパーセンテージの増加をもたらした。棒グラフにおけるＹ軸は、Ｘ軸上に定義されたＴ細胞サブセットについて陽性の細胞のパーセンテージを示している。
【０１２３】
【図２０ｃ】図２０ｃは、３人のくすぶり型多発性骨髄腫患者由来のエフェクターメモリー細胞（ＥＭ）およびターミナルエフェクター細胞（ＴＥ）の間でのＩＦＮ−γ＋ＣＤ１０７α＋の増加を示している一連のヒストグラムである。Ｙ軸は、ＩＦＮ−γ＋ＣＤ１０７α＋二重陽性細胞のパーセンテージを示しており、Ｘ軸は、ＭＰ−ＣＴＬを刺激するために使用された細胞のタイプを示している。
【０１２４】
【図２０ｄ】図２０ｄは、ＭＭ細胞株（ＨＬＡ−Ａ２＋Ｕ２６６細胞またはＨＬＡ−Ａ２−ＲＰＭＩ細胞）に応答した、４人のくすぶり型多発性骨髄腫患者から生成したＭＰ−ＣＴＬにおけるナイーブおよびメモリーＣＤ８＋Ｔ細胞サブセットに対するＣＤ６９活性化を示している一連の棒グラフである。Ｙ軸は、ＣＤ６９＋細胞のパーセンテージを示しており、Ｘ軸は、ＣＴＬの部分集団を示している。
【０１２５】
【図２１】図２１は、非スプライシング型ＸＢＰ１、スプライシング型ＸＢＰ１、ＣＤ１３８およびＣＳ１由来のペプチドの、ＨＬＡ−Ａ２４に対する親和性を示しているグラフである。Ｔ２細胞を、１ｍｇ／ｍｌの濃度の示されているペプチドに曝露した。ＨＩＶエンベロープタンパク質５８３−５９１（ＲＹＬＫＤＱＱＬＬ；配列番号５３７）を、ＨＬＡ−Ａ２４特異的ポジティブコントロールペプチドとして使用した。
【０１２６】
【図２２】図２２は、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド４（配列番号３５）、非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド７（配列番号２９）およびスプライシング型ペプチド１（配列番号３０）の、ＨＬＡ−Ａ２４に対する親和性を示しているグラフである。Ｔ２細胞を、示されている濃度のペプチドに曝露した。
【０１２７】
【図２３】図２３は、ＣＤ１３８ペプチド１（配列番号３１）、３（配列番号４１）および４（配列番号４２）の、ＨＬＡ−Ａ２４に対する親和性を示しているグラフである。Ｔ２細胞を、示されている濃度のペプチドに曝露した。
【０１２８】
【図２４】図２４は、ＣＳ１ペプチド３（配列番号４８）および５（配列番号３２）の、ＨＬＡ−Ａ２４に対する親和性を示しているグラフである。Ｔ２細胞を、示されている濃度のペプチドに曝露した。
【０１２９】
【図２５】図２５は、ペプチド特異的ＣＴＬを生成するために使用された方法の模式図である。示されているペプチドを提示しているＡＰＣを、ドナー由来のＣＤ３＋Ｔリンパ球を刺激するために使用して、ペプチド特異的ＣＴＬを生成した。
【０１３０】
【図２６ａ】図２６ａは、２人のドナー（ドナーＡおよびドナーＢ）由来のＴリンパ球上に提示された非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド７によって誘導されたＣＤ８＋Ｔ細胞の増加を示している棒グラフである。Ｙ軸は、ＣＤ８＋Ｔリンパ球のパーセンテージを示しており、Ｘ軸は、表現型解析の前のペプチド刺激の回数を示している。
【０１３１】
【図２６ｂ】図２６ｂは、２人のドナー（ドナーＡおよびドナーＢ）由来のＴリンパ球上に提示されたスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド１によって誘導されたＣＤ８＋Ｔ細胞の増加を示している棒グラフである。Ｙ軸は、ＣＤ８＋Ｔリンパ球のパーセンテージを示しており、Ｘ軸は、表現型解析の前のペプチド刺激の回数を示している。
【０１３２】
【図２６ｃ】図２６ｃは、２人のドナー（ドナーＡおよびドナーＢ）由来のＴリンパ球上に提示されたＣＤ１３８ペプチド１によって誘導されたＣＤ８＋Ｔ細胞の増加を示している棒グラフである。Ｙ軸は、ＣＤ８＋Ｔリンパ球のパーセンテージを示しており、Ｘ軸は、表現型解析の前のペプチド刺激の回数を示している。
【０１３３】
【図２６ｄ】図２６ｄは、２人のドナー（ドナーＡおよびドナーＢ）由来のＴリンパ球上に提示されたＣＳ１ペプチド１によって誘導されたＣＤ８＋Ｔ細胞の増加を示している棒グラフである。Ｙ軸は、ＣＤ８＋Ｔリンパ球のパーセンテージを示しており、Ｘ軸は、表現型解析の前のペプチド刺激の回数を示している。
【０１３４】
【図２７】図２７は、様々な多発性骨髄腫の腫瘍細胞に対するペプチド特異的ＣＴＬの応答を評価するために使用された方法の模式図である。ペプチド特異的ＣＴＬを、ＫＭＳ、ＯＰＭ１またはＵ２６６多発性骨髄腫細胞とともに５時間インキュベートし、ＩＦＮ−γ産生、ＣＤ１０７αアップレギュレーション、ＣＤ８Ｔ細胞増殖またはＩＬ−２産生についてアッセイした。
【０１３５】
【図２８】図２８は、多発性骨髄腫細胞に応答したペプチド特異的ＣＴＬのＩＦＮ−γ産生およびＣＤ８発現を示している一連のドットプロットである。Ｙ軸は、ＩＦＮ−γの発現レベルを示しており、Ｘ軸は、ＣＤ８の発現を示している。解析されたＣＴＬ集団のペプチド特異性が、左に示されている。ＣＤ８＋、ＩＦＮ−γ＋の集団が、四角で囲まれた領域に表されている。
【０１３６】
【図２９ａ】図２９ａは、ＣＴＬの集団および部分集団におけるＩＦＮ−γ発現を示している一連のドットプロットである。非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド７（配列番号２９）に特異的なＣＴＬをＫＭＳ１１細胞で刺激した。四角で囲まれた領域に表されている集団が、グラフ上に示されている。
【０１３７】
【図２９ｂ】図２９ｂは、ＣＴＬの集団および部分集団におけるＩＦＮ−γ発現を示している一連のドットプロットである。スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド１（配列番号３０）に特異的なＣＴＬを、ＫＭＳ１１細胞で刺激した。四角で囲まれた領域に表されている集団が、グラフ上に示されている。
【０１３８】
【図２９ｃ】図２９ｃは、ＣＴＬの集団および部分集団におけるＩＦＮ−γ発現を示している一連のドットプロットである。ＣＤ１３８ペプチド１（配列番号３１）に特異的なＣＴＬを、ＫＭＳ１１細胞で刺激した。四角で囲まれた領域に表されている集団が、グラフ上に示されている。
【０１３９】
【図２９ｄ】図２９ｄは、ＣＴＬの集団および部分集団におけるＩＦＮ−γ発現を示している一連のドットプロットである。ＣＳ１ペプチド５（配列番号３２）に特異的なＣＴＬを、ＫＭＳ１１細胞で刺激した。四角で囲まれた領域に表されている集団が、グラフ上に示されている。
【０１４０】
【図３０】図３０は、脱顆粒を測定するために使用されたＣＤ１０７α検出アッセイの模式図である。腫瘍細胞の脱顆粒に起因する溶解性顆粒の放出は、抗ＣＤ１０７α抗体によって検出され得る、ＣＴＬにおけるＣＤ１０７αのアップレギュレーションを引き起こす。
【０１４１】
【図３１】図３１は、ペプチド特異的ＣＴＬにおけるＩＦＮ−γ発現および脱顆粒を示している一連のドットプロットである。ＣＴＬを、上部に示されているように、刺激しないかまたはＫＭＳ１１細胞もしくはＯＰＭ１細胞で刺激した。ＣＴＬのペプチド特異性が、左に示されている。Ｙ軸は、ＣＤ１０７αの発現を表し、Ｘ軸は、ＩＦＮ−γの発現を表している。
【０１４２】
【図３２】図３２は、多発性骨髄腫細胞に応答したペプチド特異的ＣＴＬの増殖を測定するために使用されたアッセイの模式図である。ペプチド特異的ＣＴＬおよび照射された多発性骨髄腫細胞を、６または８日間にわたって共にインキュベートし、ＣＴＬの増殖をＣＦＳＥの取り込みによって測定した。
【０１４３】
【図３３ａ】図３３ａは、骨髄腫細胞に対するペプチド特異的ＣＴＬの６日目の増殖応答を示している一連のヒストグラムである。ＣＴＬのペプチド特異性が、左に示されている。Ｘ軸は、細胞増殖の直接的な尺度であるＣＦＳＥ染色の減少を示している。
【０１４４】
【図３３ｂ】図３３ｂは、骨髄腫細胞に対するペプチド特異的ＣＴＬの８日目の増殖応答を示している一連のヒストグラムである。ＣＴＬのペプチド特異性が、左に示されている。Ｘ軸は、細胞増殖の直接的な尺度であるＣＦＳＥ染色の減少を示している。
【０１４５】
【図３４】図３４は、骨髄腫細胞に応答したペプチド特異的ＣＴＬのＩＬ−２産生を示している一連のドットプロットである。ＣＴＬのペプチド特異性が、左に示されている。Ｙ軸は、ＩＬ−２の発現を示しており、Ｘ軸は、ＣＤ８の発現を示している。四角で囲まれた領域は、ＩＬ−２＋ＣＤ８＋集団を表している。
【０１４６】
【図３５】図３５は、様々な結腸がん細胞株に応答した、ドナーＡ由来のペプチド特異的ＣＴＬのＩＦＮ−γ発現を示している一連のドットプロットである。ＣＴＬを、上部に示されているように、刺激しないか、またはＳＷ８０細胞、ＷｉＤｒ細胞もしくはＬＳ１８０細胞で刺激した。ＣＴＬのペプチド特異性が、左に示されている。Ｙ軸は、ＩＦＮ−γの発現を示しており、Ｘ軸は、ＣＤ８の発現を示している。四角で囲まれた領域は、ＩＦＮ−γ＋ＣＤ８＋集団を表している。
【０１４７】
【図３６】図３６は、様々な結腸がん細胞株に応答した、ドナーＡ由来のペプチド特異的ＣＴＬにおけるＩＦＮ−γ発現および脱顆粒を示している一連のドットプロットである。ＣＴＬを、上部に示されているように、刺激しないか、またはＳＷ８０細胞、ＷｉＤｒ細胞もしくはＬＳ１８０細胞で刺激した。ＣＴＬのペプチド特異性が、左に示されている。Ｙ軸は、ＣＤ１０７αの発現を表しており、Ｘ軸は、ＩＦＮ−γの発現を表している。
【０１４８】
【図３７】図３７は、様々な結腸がん細胞株に応答した、ドナーＢ由来のペプチド特異的ＣＴＬのＩＦＮ−γ発現を示している一連のドットプロットである。ＣＴＬを、上部に示されているように、刺激しないか、またはＳＷ８０細胞、ＷｉＤｒ細胞もしくはＬＳ１８０細胞で刺激した。ＣＴＬのペプチド特異性が、左に示されている。Ｙ軸は、ＩＦＮ−γの発現を示しており、Ｘ軸は、ＣＤ８の発現を示している。四角で囲まれた領域は、ＩＦＮ−γ＋ＣＤ８＋集団を表している。
【０１４９】
【図３８】図３８は、ドナーＢ由来のペプチド特異的ＣＴＬにおけるＩＦＮ−γ発現および脱顆粒を示している一連のドットプロットである。ＣＴＬを、上部に示されているように、刺激しないか、またはＳＷ８０細胞、ＷｉＤｒ細胞もしくはＬＳ１８０細胞で刺激した。ＣＴＬのペプチド特異性が、左に示されている。Ｙ軸は、ＣＤ１０７αの発現を表しており、Ｘ軸は、ＩＦＮ−γの発現を表している。
【０１５０】
【図３９ａ】図３９ａは、ＳＷ４８０腫瘍細胞に対するＣＤ１３８ペプチド特異的ＣＴＬの脱顆粒応答を示している一連のヒストグラムである。ＣＴＬおよびＳＷ４８０腫瘍細胞を、左に示されているような様々な細胞：細胞比で共インキュベートし、上部に示されているように、ＣＤ１０７α、ＩＦＮ−γおよびＩＬ−２の発現について解析した。
【０１５１】
【図３９ｂ】図３９ｂは、ＬＳ１８０腫瘍細胞に対するＣＤ１３８ペプチド特異的ＣＴＬの様々な応答を示している一連のヒストグラムである。ＣＴＬおよびＬＳ１８０腫瘍細胞を、左に示されているような様々な細胞：細胞比で共インキュベートし、上部に示されているように、ＣＤ１０７α、ＩＦＮ−γおよびＩＬ−２の発現について解析した。
【０１５２】
【図４０ａ】図４０ａは、異なるがん細胞タイプに応答した、ドナーＡ由来のペプチド特異的ＣＴＬのＩＦＮ−γ発現を示している一連のドットプロットである。ＣＴＬを、単独でインキュベートしたか、またはＳＷ４８０結腸がん細胞もしくはＫＭＳ１１多発性骨髄腫細胞とともに共インキュベートし、ＩＦＮ−γの発現について解析した。ＣＴＬのペプチド特異性が、左に示されている。Ｙ軸は、ＩＦＮ−γの発現を示しており、Ｘ軸は、ＣＤ８の発現を示している。四角で囲まれた領域は、ＩＦＮ−γ＋ＣＤ８＋集団を表している。
【０１５３】
【図４０ｂ】図４０ｂは、異なるがん細胞タイプに応答した、ドナーＡ由来のペプチド特異的ＣＴＬの脱顆粒およびＩＦＮ−γ発現を示している一連のドットプロットである。ＣＴＬを、単独でインキュベートしたか、またはＳＷ４８０結腸がん細胞もしくはＫＭＳ１１多発性骨髄腫細胞とともに共インキュベートし、ＩＦＮ−γの発現について解析した。ＣＴＬのペプチド特異性が、左に示されている。Ｙ軸は、ＣＤ１０７αの発現を示しており、Ｘ軸は、ＩＦＮ−γの発現を示している。
【０１５４】
【図４１ａ】図４１ａは、異なるがん細胞タイプに応答した、ドナーＢ由来のペプチド特異的ＣＴＬのＩＦＮ−γ発現を示している一連のドットプロットである。ＣＴＬを、単独でインキュベートしたか、またはＳＷ４８０結腸がん細胞もしくはＫＭＳ１１多発性骨髄腫細胞とともに共インキュベートし、ＩＦＮ−γの発現について解析した。ＣＴＬのペプチド特異性が、左に示されている。Ｙ軸は、ＩＦＮ−γの発現を示しており、Ｘ軸は、ＣＤ８の発現を示している。四角で囲まれた領域は、ＩＦＮ−γ＋ＣＤ８＋集団を表している。
【０１５５】
【図４１ｂ】図４１ｂは、異なるがん細胞タイプに応答した、ドナーＢ由来のペプチド特異的ＣＴＬの脱顆粒およびＩＦＮ−γ発現を示している一連のドットプロットである。ＣＴＬを、単独でインキュベートしたか、またはＳＷ４８０結腸がん細胞もしくはＫＭＳ１１多発性骨髄腫細胞とともに共インキュベートし、ＩＦＮ−γの発現について解析した。ＣＴＬのペプチド特異性が、左に示されている。Ｙ軸は、ＣＤ１０７αの発現を示しており、Ｘ軸は、ＩＦＮ−γの発現を示している。
【０１５６】
【図４２】図４２は、様々な膵がん細胞株に応答した、ドナーＢ由来のペプチド特異的ＣＴＬのＩＦＮ−γ発現を示している一連のドットプロットである。ＣＴＬを、単独でインキュベートしたか、または８９０２、ＰＬ４５もしくはＭｉａＰａｃａ細胞とともに共インキュベートし、ＩＦＮ−γの発現について解析した。ＣＴＬのペプチド特異性が、左に示されている。Ｙ軸は、ＩＦＮ−γの発現を示しており、Ｘ軸は、ＣＤ８の発現を示している。四角で囲まれた領域は、ＩＦＮ−γ＋ＣＤ８＋集団を表している。
【０１５７】
【図４３】図４３は、Ｐａｎｃ１膵臓腫瘍細胞に対するＣＤ１３８ペプチド特異的ＣＴＬの様々な応答を示している、一連のヒストグラムおよびドットプロットである。ＣＴＬおよびＰａｎｃ１細胞を、左に示されているような１：１または１：５という様々な細胞：細胞比で共インキュベートし、上部に示されているように、ＣＤ１０７α、ＩＦＮ−γおよびＩＬ−２の発現について解析した。ドットプロットのＹ軸は、ＣＤ１０７αの発現を示しており、ヒストグラムおよびドットプロットのＸ軸は、各グラフの下に示されているようなＩＦＮ−γまたはＩＬ−２の発現を示している。
【０１５８】
【図４４】図４４は、非スプライシング型ヘテロクリティック（ｈｅｔｅｒｏｃｌｉｔｉｃ）ＸＢＰ１ペプチドおよびスプライシング型ヘテロクリティックＸＢＰ１ペプチドのカクテルで誘導されたＣＴＬにおける、Ｔ細胞（ナイーブＴ細胞、セントラルメモリー（ＣＭ）、エフェクター細胞およびエフェクターメモリー（ＥＭ）ＣＤ８＋Ｔ細胞）の表現型の変化を示している一連のドットプロットである。ドットプロットにおけるＹ軸は、ＣＣＲ７の発現を示しており、Ｘ軸は、ＣＤ４５ＲＰの発現を示している。
【０１５９】
【図４５】図４５は、非スプライシング型ヘテロクリティックＸＢＰ１ペプチドおよびスプライシング型ヘテロクリティックＸＢＰ１ペプチドのカクテルに応答した、３人のドナーにおけるセントラルメモリーＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔ細胞の生成を表している一連の棒グラフである。
【０１６０】
【図４６】図４６は、非スプライシング型ヘテロクリティックＸＢＰ１ペプチドおよびスプライシング型ヘテロクリティックＸＢＰ１ペプチドのカクテルに応答した、３人のドナーにおけるエフェクターメモリーＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔ細胞の生成を表している一連の棒グラフである。
【０１６１】
【図４７】図４７は、ＭＢ２３１乳がん細胞に対するＸＢＰ１ペプチドカクテル特異的ＣＴＬの増殖応答を示している一連のヒストグラムである。その応答により、ＣＤ４５ＲＯ−非メモリー細胞の増殖およびＣＤ４５ＲＯ＋メモリー細胞の増殖の状態となり、それらのメモリー細胞内でのその割合は、ＣＤ４５ＲＯ＋、ＣＣＲ７＋セントラルメモリーＴ細胞およびＣＤ４５ＲＯ＋、ＣＣＲ７−エフェクターメモリーＴ細胞での割合である。
【０１６２】
【図４８】図４８は、ＬＳ１８０結腸がん細胞に対するＸＢＰ１ペプチドカクテル特異的ＣＴＬの増殖応答を示している一連のヒストグラムである。その応答により、ＣＤ４５ＲＯ−非メモリー細胞の増殖およびＣＤ４５ＲＯ＋メモリー細胞の増殖の状態となり、それらのメモリー細胞内でのその割合は、ＣＤ４５ＲＯ＋、ＣＣＲ７＋セントラルメモリーＴ細胞およびＣＤ４５ＲＯ＋、ＣＣＲ７−エフェクターメモリーＴ細胞での割合である。
【０１６３】
【図４９】図４９は、Ｐａｎｃ１膵がん細胞に対するＸＢＰ１ペプチドカクテル特異的ＣＴＬの増殖応答を示している一連のヒストグラムである。その応答により、ＣＤ４５ＲＯ−非メモリー細胞の増殖およびＣＤ４５ＲＯ＋メモリー細胞の増殖の状態となり、それらのメモリー細胞内でのその割合は、ＣＤ４５ＲＯ＋、ＣＣＲ７＋セントラルメモリーＴ細胞およびＣＤ４５ＲＯ＋、ＣＣＲ７−エフェクターメモリーＴ細胞での割合である。
【０１６４】
【図５０】図５０は、様々な腫瘍細胞（ＭＢ２３１、ＭＣＦ７、ＬＳ１８０、ＳＷ４８０、Ｐａｎｃ１およびＰＬ４５）に対するＸＢＰ１ペプチドカクテル特異的ＣＴＬの様々な応答を示している一連のヒストグラムである。セントラルメモリーＴ細胞およびエフェクターメモリーＴ細胞を、ＩＦＮ−γの発現について解析した。
【０１６５】
【図５１】図５１は、様々な腫瘍細胞（ＭＢ２３１、ＭＣ７、ＬＳ１８０、ＳＷ４８０、Ｐａｎｃ１およびＰＬ４５）に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのエフェクターメモリーＴ細胞およびセントラルメモリーＴ細胞によるＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフ（ｂａｒ  ｇｒａｆｔｓ）である。
【０１６６】
【図５２】図５２は、様々な腫瘍細胞（ＭＢ２３１、ＭＣＦ７、ＬＳ１８０、ＳＷ４８０、Ｐａｎｃ１およびＰＬ４５）に対するＸＢＰ１ペプチドカクテル特異的ＣＴＬの様々な応答を示している一連のヒストグラムである。セントラルメモリーＴ細胞およびエフェクターメモリーＴ細胞を、ＩＬ−２の発現について解析した。
【０１６７】
【図５３】図５３は、様々な腫瘍細胞（ＭＢ２３１、ＭＣ７、ＬＳ１８０、ＳＷ４８０、Ｐａｎｃ１およびＰＬ４５）に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのエフェクターメモリーＴ細胞およびセントラルメモリーＴ細胞によるＩＬ−２の発現を示している棒グラフを表している。
【０１６８】
【図５４】図５４は、様々な腫瘍細胞（ＭＢ２３１、ＭＣＦ７、ＬＳ１８０、ＳＷ４８０、Ｐａｎｃ１およびＰＬ４５）に対するＸＢＰ１ペプチドカクテル特異的ＣＴＬの様々な応答を示している一連のヒストグラムである。セントラルメモリーＴ細胞およびエフェクターメモリーＴ細胞を、細胞傷害性について解析した。
【０１６９】
【図５５】図５５は、様々な腫瘍細胞（ＭＢ２３１、ＭＣ７、ＬＳ１８０、ＳＷ４８０、Ｐａｎｃ１およびＰＬ４５）に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのエフェクターメモリーＴ細胞およびセントラルメモリーＴ細胞の細胞傷害性を示している棒グラフを表している。
【０１７０】
【図５６】図５６は、ＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬの非メモリーＴ細胞およびメモリーＴ細胞によるＴｂｅｔの発現を示している棒グラフを表している。
【０１７１】
【図５７】図５７は、ＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるＴｂｅｔの発現を示している棒グラフを表している。
【０１７２】
【図５８】図５８は、様々な腫瘍細胞（ＭＢ２３１、ＳＷ４８０およびＰａｎｃ１）に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬの非メモリーＴ細胞およびメモリーＴ細胞によるＴｂｅｔおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１７３】
【図５９】図５９は、ＭＢ２３１乳がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるＴｂｅｔおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１７４】
【図６０】図６０は、Ｐａｎｃ１膵がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるＴｂｅｔおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１７５】
【図６１】図６１は、ＳＷ４８０結腸がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるＴｂｅｔおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１７６】
【図６２】図６２は、ＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬの非メモリーＴ細胞およびメモリーＴ細胞によるＥｏｍｅｓの発現を示している棒グラフを表している。
【０１７７】
【図６３】図６３は、ＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるＥｏｍｅｓの発現を示している棒グラフを表している。
【０１７８】
【図６４】図６４は、様々な腫瘍細胞（ＭＢ２３１、ＳＷ４８０およびＰａｎｃ１）に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬの非メモリーＴ細胞およびメモリーＴ細胞によるＥｏｍｅｓおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１７９】
【図６５】図６５は、ＭＢ２３１乳がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるＥｏｍｅｓおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１８０】
【図６６】図６６は、Ｐａｎｃ１膵がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるＥｏｍｅｓおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１８１】
【図６７】図６７は、ＳＷ４８０結腸がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるＥｏｍｅｓおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１８２】
【図６８】図６８は、様々な腫瘍細胞（ＭＢ２３１、ＳＷ４８０およびＰａｎｃ１）に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬの非メモリーＴ細胞およびメモリーＴ細胞によるグランザイムＢの発現を示している棒グラフを表している。
【０１８３】
【図６９】図６９は、ＭＢ２３１乳がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるグランザイムＢおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１８４】
【図７０】図７０は、Ｐａｎｃ１膵がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるグランザイムＢおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１８５】
【図７１】図７１は、ＳＷ４８０結腸がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるグランザイムＢおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１８６】
【図７２】図７２は、アジュバントであるレナリドマイドの存在下および非存在下における、ＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬの非メモリーＴ細胞およびメモリーＴ細胞の数を示している棒グラフを表している。
【０１８７】
【図７３】図７３は、アジュバントであるレナリドマイドの存在下および非存在下における、ＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのセントラルメモリーＴ細胞およびエフェクターメモリーＴ細胞の数を示している棒グラフを表している。
【０１８８】
【図７４】図７４は、アジュバントであるレナリドマイドの存在下および非存在下における、ＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬにおけるＣＤ４０Ｌ、ＣＤ６９およびＣＤ３８の発現を示している棒グラフを表している。
【０１８９】
【図７５】図７５は、アジュバントであるレナリドマイドの存在下または非存在下における、ＭＢ２３１乳がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるＴｂｅｔおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１９０】
【図７６】図７６は、アジュバントであるレナリドマイドの存在下または非存在下における、ＭＢ２３１乳がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるＥｏｍｅｓおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１９１】
【図７７】図７７は、アジュバントであるレナリドマイドの存在下または非存在下における、Ｐａｎｃ１膵がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるＴｂｅｔおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１９２】
【図７８】図７８は、アジュバントであるレナリドマイドの存在下または非存在下における、Ｐａｎｃ１膵がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるＥｏｍｅｓおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１９３】
【図７９】図７９は、アジュバントであるレナリドマイドの存在下または非存在下における、ＳＷ４８０結腸がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるＴｂｅｔおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１９４】
【図８０】図８０は、アジュバントであるレナリドマイドの存在下または非存在下における、ＳＷ４８０結腸がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬのナイーブＴ細胞、セントラルメモリー細胞、エフェクターメモリー細胞およびエフェクターＴ細胞によるＥｏｍｅｓおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１９５】
【図８１】図８１は、アジュバントであるレナリドマイドの存在下または非存在下における、ＭＢ２３１乳がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬの非メモリーＴ細胞およびメモリーＴ細胞によるグランザイムおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１９６】
【図８２】図８２は、アジュバントであるレナリドマイドの存在下または非存在下における、Ｐａｎｃ１膵がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬの非メモリーＴ細胞およびメモリーＴ細胞によるグランザイムおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【０１９７】
【図８３】図８３は、アジュバントであるレナリドマイドの存在下または非存在下における、ＳＷ４８０結腸がん細胞に対するＸＢＰ１カクテル特異的ＣＴＬの非メモリーＴ細胞およびメモリーＴ細胞によるグランザイムおよびＩＦＮ−γの発現を示している棒グラフを表している。
【発明を実施するための形態】
【０１９８】
詳細な説明
本開示は、ＸＢＰ１、ＣＤ１３８およびＣＳ−１に由来する免疫原性ペプチド（およびそれらの薬学的組成物）を特徴とし、それは、例えば、被験体において、免疫応答を誘導する（例えば、ＣＴＬ応答を刺激する）ためまたは抗体の産生を刺激するために使用され得る。それらのペプチドは、種々の用途（例えば、免疫応答を誘導するための方法、抗体を産生させるための方法、ならびにがん（例えば、肺がん、肝臓がん、胆管がん、胃がん、子宮頸がん、鼻咽頭がん、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病（例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬ）および形質細胞障害（例えば、多発性骨髄腫またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症））または前がん性の障害（例えば、くすぶり型多発性骨髄腫））を処置するための方法）において使用され得る。それらのペプチドはまた、ＭＨＣ分子多量体組成物に含められ得、例えば、細胞集団中のＴ細胞を検出するための方法において使用され得る。
【０１９９】
上記ペプチド、ならびにそれらのペプチドを生成するためおよび使用するための例示的な方法の詳細な説明が、下記に示される。
【０２００】
ペプチド
グループＡペプチド。本開示は、表１に示されるような配列番号１〜１８のいずれか１つと十分な同一性を有するかまたは同一であるアミノ酸配列を含む単離されたペプチド（「グループＡペプチド」）を特徴とする。
【表１】
2018172435.tif 000003
【０２０１】
好ましくは、グループＡからの単離されたペプチドは、少なくとも９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０または３５アミノ酸長（例えば、９〜３５アミノ酸長、例えば、９〜３０、９〜２５、９〜２０、９〜１５アミノ酸長）であり、配列番号１〜１８のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％同一性であるかまたは同一であるアミノ酸配列を含む。他の好ましいペプチドは、少なくとも９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０または３５アミノ酸長（例えば、９〜３５アミノ酸長、例えば、９〜３０、９〜２５、９〜２０、９〜１５アミノ酸長）であり得、配列番号１〜１８のアミノ酸配列、または配列番号１〜１８のアミノ酸配列の１、２、３もしくは４つの置換を有するアミノ酸配列を含み得る。その置換は、保存的または非保存的置換であり得る。
【０２０２】
グループＡからの「非スプライシング型ＸＢＰ１」ペプチドには、表１に示されたペプチドが含まれ、それは、２６１アミノ酸および以下の配列：
ＭＶＶＶＡＡＡＰＮＰＡＤＧＴＰＫＶＬＬＬＳＧＱＰＡＳＡＡＧＡＰＡＧＱＡＬＰＬＭＶＰＡＱＲＧＡＳＰＥＡＡＳＧＧＬＰＱＡＲＫＲＱＲＬＴＨＬＳＰＥＥＫＡＬＲＲＫＬＫＮＲＶＡＡＱＴＡＲＤＲＫＫＡＲＭＳＥＬＥＱＱＶＶＤＬＥＥＥＮＱＫＬＬＬＥＮＱＬＬＲＥＫＴＨＧＬＶＶＥＮＱＥＬＲＱＲＬＧＭＤＡＬＶＡＥＥＥＡＥＡＫＧＮＥＶＲＰＶＡＧＳＡＥＳＡＡＬＲＬＲＡＰＬＱＱＶＱＡＱＬＳＰＬＱＮＩＳＰＷＩＬＡＶＬＴＬＱＩＱＳＬＩＳＣＷＡＦＷＴＴＷＴＱＳＣＳＳＮＡＬＰＱＳＬＰＡＷＲＳＳＱＲＳＴＱＫＤＰＶＰＹＱＰＰＦＬＣＱＷＧＲＨＱＰＳＷＫＰＬＭＮ（配列番号１９；Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００５０７１）を有するスプライシングされていない形態のヒトＸＢＰ１タンパク質からの少なくとも５つ（例えば、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４または３５個）連続したアミノ酸のアミノ酸配列を有するペプチド、ならびに配列番号１９のアミノ酸配列に由来するアミノ酸の１、２、３、４、５つ以下の置換（例えば、保存的置換）を有するペプチドのことを指す。表１において言及されたアミノ酸位置は、配列番号１９に基づく。
【０２０３】
グループＡからの「スプライシング型ＸＢＰ１」ペプチドには、表１に示されたペプチドが含まれ、それは、３７６アミノ酸および以下の配列：
ＭＶＶＶＡＡＡＰＮＰＡＤＧＴＰＫＶＬＬＬＳＧＱＰＡＳＡＡＧＡＰＡＧＱＡＬＰＬＭＶＰＡＱＲＧＡＳＰＥＡＡＳＧＧＬＰＱＡＲＫＲＱＲＬＴＨＬＳＰＥＥＫＡＬＲＲＫＬＫＮＲＶＡＡＱＴＡＲＤＲＫＫＡＲＭＳＥＬＥＱＱＶＶＤＬＥＥＥＮＱＫＬＬＬＥＮＱＬＬＲＥＫＴＨＧＬＶＶＥＮＱＥＬＲＱＲＬＧＭＤＡＬＶＡＥＥＥＡＥＡＫＧＮＥＶＲＰＶＡＧＳＡＥＳＡＡＧＡＧＰＶＶＴＰＰＥＨＬＰＭＤＳＧＧＩＤＳＳＤＳＥＳＤＩＬＬＧＩＬＤＮＬＤＰＶＭＦＦＫＣＰＳＰＥＰＡＳＬＥＥＬＰＥＶＹＰＥＧＰＳＳＬＰＡＳＬＳＬＳＶＧＴＳＳＡＫＬＥＡＩＮＥＬＩＲＦＤＨＩＹＴＫＰＬＶＬＥＩＰＳＥＴＥＳＱＡＮＶＶＶＫＩＥＥＡＰＬＳＰＳＥＮＤＨＰＥＦＩＶＳＶＫＥＥＰＶＥＤＤＬＶＰＥＬＧＩＳＮＬＬＳＳＳＨＣＰＫＰＳＳＣＬＬＤＡＹＳＤＣＧＹＧＧＳＬＳＰＦＳＤＭＳＳＬＬＧＶＮＨＳＷＥＤＴＦＡＮＥＬＦＰＱＬＩＳＶ（配列番号２０；Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１０７３００７）を有するスプライシングされた形態のヒトＸＢＰ１（ＸＢＰ１スプライシング型）タンパク質からの少なくとも５つ（例えば、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３１、３２、３３、３４または３５個）連続したアミノ酸のアミノ酸配列を有するペプチド、ならびに配列番号２０のアミノ酸配列に由来するアミノ酸の１、２、３、４、５つ以下の置換（例えば、保存的置換）を有するペプチドのことを指す。表１において言及されたアミノ酸位置は、配列番号２０に基づく。
【０２０４】
グループＡからの「ＣＤ１３８」ペプチドには、表１に示されたペプチドが含まれ、それは、３１０アミノ酸および以下の配列：
ＭＲＲＡＡＬＷＬＷＬＣＡＬＡＬＳＬＱＰＡＬＰＱＩＶＡＴＮＬＰＰＥＤＱＤＧＳＧＤＤＳＤＮＦＳＧＳＧＡＧＡＬＱＤＩＴＬＳＱＱＴＰＳＴＷＫＤＴＱＬＬＴＡＩＰＴＳＰＥＰＴＧＬＥＡＴＡＡＳＴＳＴＬＰＡＧＥＧＰＫＥＧＥＡＶＶＬＰＥＶＥＰＧＬＴＡＲＥＱＥＡＴＰＲＰＲＥＴＴＱＬＰＴＴＨＱＡＳＴＴＴＡＴＴＡＱＥＰＡＴＳＨＰＨＲＤＭＱＰＧＨＨＥＴＳＴＰＡＧＰＳＱＡＤＬＨＴＰＨＴＥＤＧＧＰＳＡＴＥＲＡＡＥＤＧＡＳＳＱＬＰＡＡＥＧＳＧＥＱＤＦＴＦＥＴＳＧＥＮＴＡＶＶＡＶＥＰＤＲＲＮＱＳＰＶＤＱＧＡＴＧＡＳＱＧＬＬＤＲＫＥＶＬＧＧＶＩＡＧＧＬＶＧＬＩＦＡＶＣＬＶＧＦＭＬＹＲＭＫＫＫＤＥＧＳＹＳＬＥＥＰＫＱＡＮＧＧＡＹＱＫＰＴＫＱＥＥＦＹＡ（配列番号２１；Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００２９８８）を有するヒトＣＤ１３８タンパク質からの少なくとも５つ（例えば、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４または３５個）連続したアミノ酸のアミノ酸配列を有するペプチド、ならびに配列番号２１のアミノ酸配列に由来するアミノ酸の１、２、３、４、５つ以下の置換（例えば、保存的置換）を有するペプチドのことを指す。表１において言及されたアミノ酸位置は、配列番号２１に基づく。
【０２０５】
グループＡからの「ＣＳ−１」ペプチドには、表１に示されたペプチドが含まれ、それは、３３５アミノ酸および以下の配列：
ＭＡＧＳＰＴＣＬＴＬＩＹＩＬＷＱＬＴＧＳＡＡＳＧＰＶＫＥＬＶＧＳＶＧＧＡＶＴＦＰＬＫＳＫＶＫＱＶＤＳＩＶＷＴＦＮＴＴＰＬＶＴＩＱＰＥＧＧＴＩＩＶＴＱＮＲＮＲＥＲＶＤＦＰＤＧＧＹＳＬＫＬＳＫＬＫＫＮＤＳＧＩＹＹＶＧＩＹＳＳＳＬＱＱＰＳＴＱＥＹＶＬＨＶＹＥＨＬＳＫＰＫＶＴＭＧＬＱＳＮＫＮＧＴＣＶＴＮＬＴＣＣＭＥＨＧＥＥＤＶＩＹＴＷＫＡＬＧＱＡＡＮＥＳＨＮＧＳＩＬＰＩＳＷＲＷＧＥＳＤＭＴＦＩＣＶＡＲＮＰＶＳＲＮＦＳＳＰＩＬＡＲＫＬＣＥＧＡＡＤＤＰＤＳＳＭＶＬＬＣＬＬＬＶＰＬＬＬＳＬＦＶＬＧＬＦＬＷＦＬＫＲＥＲＱＥＥＹＩＥＥＫＫＲＶＤＩＣＲＥＴＰＮＩＣＰＨＳＧＥＮＴＥＹＤＴＩＰＨＴＮＲＴＩＬＫＥＤＰＡＮＴＶＹＳＴＶＥＩＰＫＫＭＥＮＰＨＳＬＬＴＭＰＤＴＰＲＬＦＡＹＥＮＶＩ（配列番号２２；Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿０６７００４）を有するヒトＣＳ−１タンパク質からの少なくとも５つ（例えば、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４または３５個）連続したアミノ酸のアミノ酸配列を有するペプチド、ならびに配列番号２２のアミノ酸配列に由来するアミノ酸の１、２、３、４、５つ以下の置換（例えば、保存的置換）を有するペプチドのことを指す。表１において言及されたアミノ酸位置は、配列番号２２に基づく。
【０２０６】
グループＢペプチド。本開示は、表２に示されるような配列番号２９〜５０のいずれか１つと十分な同一性を有するかまたは同一であるアミノ酸配列を含む単離されたペプチド（「グループＢペプチド」）も特徴とする。
【表２−１】
2018172435.tif 000004
【表２−２】
2018172435.tif 000005
【０２０７】
好ましくは、グループＢからの単離されたペプチドは、少なくとも９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０または３５アミノ酸長（例えば、９〜３５アミノ酸長、例えば、９〜３０、９〜２５、９〜２０、９〜１５アミノ酸長）であり、配列番号２９〜５０のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％同一性であるかまたは同一であるアミノ酸配列を含む。他の好ましいペプチドは、少なくとも９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０または３５アミノ酸長（例えば、９〜３５アミノ酸長、例えば、９〜３０、９〜２５、９〜２０、９〜１５アミノ酸長）であり得、配列番号２９〜５０のアミノ酸配列、または配列番号２９〜５０のアミノ酸配列の１、２、３もしくは４つの置換を有するアミノ酸配列を含み得る。その置換は、保存的または非保存的置換であり得る。
【０２０８】
グループＢからの「非スプライシング型ＸＢＰ１」ペプチドには、表２に示されたペプチドが含まれ、それは、２６１アミノ酸および配列番号１９のアミノ酸配列を有するスプライシングされていない形態のヒトＸＢＰ１タンパク質からの少なくとも５つ（例えば、５、６、７、８、９、１０、１１または１２個）連続したアミノ酸のアミノ酸配列を有するペプチド、ならびに配列番号１９のアミノ酸配列に由来するアミノ酸の１、２、３、４、５つ以下の置換（例えば、保存的置換）を有するペプチドのことを指す。グループＢからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドには、配列番号２９および３３〜３７のいずれか１つの一部または全部を含む配列番号１９からのアミノ酸配列、例えば、配列番号２９および３３〜３７のいずれか１つに対してＮ末端側および／またはＣ末端側の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０個のアミノ酸を含む配列を有するペプチドが含まれる。表２において言及されたアミノ酸位置は、配列番号１９に基づく。
【０２０９】
グループＢからの「スプライシング型ＸＢＰ１」ペプチドには、表２に示されたペプチドが含まれ、それは、３７６アミノ酸および配列番号２０のアミノ酸配列を有するスプライシングされた形態のヒトＸＢＰ１（ＸＢＰ１スプライシング型）タンパク質からの少なくとも５つ（例えば、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３１、３２、３３、３４または３５個）連続したアミノ酸のアミノ酸配列を有するペプチド、ならびに配列番号２０のアミノ酸配列に由来するアミノ酸の１、２、３、４、５つ以下の置換（例えば、保存的置換）を有するペプチドのことを指す。グループＢからのスプライシング型ＸＢＰ１ペプチドには、配列番号３０、３８および３９のいずれか１つの一部または全部を含む配列番号２０からのアミノ酸配列、例えば、配列番号３０、３８および３９のいずれか１つに対してＮ末端側および／またはＣ末端側の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０個のアミノ酸を含む配列を有するペプチドが含まれる。表２において言及されたアミノ酸位置は、配列番号２０に基づく。
【０２１０】
グループＢからの「ＣＤ１３８」ペプチドには、表２に示されたペプチドが含まれ、それは、３１０アミノ酸および配列番号２１のアミノ酸配列を有するヒトＣＤ１３８タンパク質からの少なくとも５つ（例えば、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４または３５個）連続したアミノ酸のアミノ酸配列を有するペプチド、ならびに配列番号２１のアミノ酸配列に由来するアミノ酸の１、２、３、４、５つ以下の置換（例えば、保存的置換）を有するペプチドのことを指す。グループＢからのＣＤ１３８ペプチドには、配列番号３１および４０〜４５のいずれか１つの一部または全部を含む配列番号２１からのアミノ酸配列、例えば、配列番号３１および４６〜５０のいずれか１つに対してＮ末端側および／またはＣ末端側の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０個のアミノ酸を含む配列を有するペプチドが含まれる。表２において言及されたアミノ酸位置は、配列番号２１に基づく。
【０２１１】
グループＢからの「ＣＳ−１」ペプチドには、表２に示されたペプチドが含まれ、それは、３３５アミノ酸および配列番号２２のアミノ酸配列を有するヒトＣＳ−１タンパク質からの少なくとも５つ（例えば、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４または３５個）連続したアミノ酸のアミノ酸配列を有するペプチド、ならびに配列番号２２のアミノ酸配列に由来するアミノ酸の１、２、３、４、５つ以下の置換（例えば、保存的置換）を有するペプチドのことを指す。グループＢからのＣＳ１ペプチドには、配列番号３２および４６〜５０のいずれか１つの一部または全部を含む配列番号２２からのアミノ酸配列、例えば、配列番号３２および４６〜５０のいずれか１つに対してＮ末端側および／またはＣ末端側の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０個のアミノ酸を含む配列を有するペプチドが含まれる。表２において言及されたアミノ酸位置は、配列番号２２に基づく。
【０２１２】
グループＣペプチド。本開示は、表３に示されるような配列番号５１〜５３６のいずれか１つと十分な同一性を有するかまたは同一であるアミノ酸配列を含む単離されたペプチド（「グループＣペプチド」）を特徴とする。
【表３−１】
2018172435.tif 000006
【表３−２】
2018172435.tif 000007
【表３−３】
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【表３−４】
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【表３−５】
2018172435.tif 000010
【表３−６】
2018172435.tif 000011
【表３−７】
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【表３−８】
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【表３−９】
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【表３−１０】
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【表３−１１】
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【表３−１２】
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【表３−１３】
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【表３−１４】
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【表３−１５】
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【表３−１６】
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【表３−１７】
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【表３−１８】
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【表３−１９】
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【表３−２０】
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【表３−２１】
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【０２１３】
好ましくは、グループＣからの単離されたペプチドは、少なくとも９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０または３５アミノ酸長（例えば、９〜３５アミノ酸長、例えば、９〜３０、９〜２５、９〜２０、９〜１５アミノ酸長）であり、配列番号５１〜５３６のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％同一性であるかまたは同一であるアミノ酸配列を含む。他の好ましいペプチドは、少なくとも９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０または３５アミノ酸長（例えば、９〜３５アミノ酸長、例えば、９〜３０、９〜２５、９〜２０、９〜１５アミノ酸長）であり得、配列番号５１〜５３６のアミノ酸配列、または配列番号５１〜５３６のアミノ酸配列の１、２、３もしくは４つの置換を有するアミノ酸配列を含み得る。その置換は、保存的または非保存的置換であり得る。
【０２１４】
グループＣからの「非スプライシング型ＸＢＰ１」ペプチドには、表３に示されたそれらのペプチドが含まれ、それは、２６１アミノ酸および配列番号１９のアミノ酸配列を有するスプライシングされていない形態のヒトＸＢＰ１タンパク質からの少なくとも５つ（例えば、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４または３５個）連続したアミノ酸のアミノ酸配列を有するペプチド、ならびに配列番号１９のアミノ酸配列に由来するアミノ酸の１、２、３、４、５つ以下の置換（例えば、保存的置換）を有するペプチドのことを指す。グループＣからの非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドには、配列番号５１〜２０６の一部または全部を含む配列番号１９からのアミノ酸配列を有するペプチドが含まれる。表３において言及されたアミノ酸位置は、配列番号１９に基づく。
【０２１５】
グループＣからの「ＣＤ１３８」ペプチドには、表３に示されたそれらのペプチドが含まれ、それは、３１０アミノ酸および配列番号２１のアミノ酸配列を有するヒトＣＤ１３８タンパク質からの少なくとも５つ（例えば、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４または３５個）連続したアミノ酸のアミノ酸配列を有するペプチド、ならびに配列番号２１のアミノ酸配列に由来するアミノ酸の１、２、３、４、５つ以下の置換（例えば、保存的置換）を有するペプチドのことを指す。グループＣからのＣＤ１３８ペプチドには、配列番号２０７〜３７１の一部または全部を含む配列番号２１からのアミノ酸配列を有するペプチドが含まれる。表３において言及されたアミノ酸位置は、配列番号２１に基づく。
【０２１６】
グループＣからの「ＣＳ−１」ペプチドには、表３に示されたそれらのペプチドが含まれ、それは、３３５アミノ酸および配列番号２２のアミノ酸配列を有するヒトＣＳ−１タンパク質からの少なくとも５つ（例えば、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４または３５個）連続したアミノ酸のアミノ酸配列を有するペプチド、ならびに配列番号２２のアミノ酸配列に由来するアミノ酸の１、２、３、４、５つ以下の置換（例えば、保存的置換）を有するペプチドのことを指す。グループＣからのＣＳ−１ペプチドには、配列番号３７２〜５３６の一部または全部を含む配列番号２２からのアミノ酸配列を有するペプチドが含まれる。表３において言及されたアミノ酸位置は、配列番号２２に基づく。
【０２１７】
ペプチド全般。
本明細書中に記載されるペプチドは、関連する配列が、配列番号１９〜２２を有する野生型で全長の成熟ヒトタンパク質として存在する場合、多くの場合、それらのペプチドのＮおよびＣ末端アミノ酸の残基番号を用いて言及される（例えば、ＸＢＰ１１１８−１２６）。これらのペプチドは、頻繁に、配列番号１９〜２２を有する野生型で全長の成熟タンパク質の対応するセグメントと同一の配列を有し得る。しかしながら、用語「非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド」（例えば、アミノ酸位置：１１８〜１３６、１８５〜１９３、１８６〜１９４、１９０〜１９８、１９３〜２００または１１１〜１１９を有する非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド）、「スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド」（例えば、アミノ酸位置：１９７〜２０５、１９４〜２０２、２２４〜２３２、３６８〜３７６を有するスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド）、「ＣＤ１３８ペプチド」（例えば、アミノ酸位置：２５６〜２６４、２６５〜２７３、２６０〜２６８、５〜１３または７〜１５を有するＣＤ１３８ペプチド）およびＣＳ１ペプチド（例えば、アミノ酸位置２３６〜２４５、２４０〜２４８、２３９〜２４７、２３２〜２４０または９〜１７を有するＣＳ−１ペプチド）が、ヒト以外の種の（それぞれ）ＸＢＰ１非スプライシング型ペプチド、ＸＢＰ１スプライシング型ペプチド、ＣＤ１３８またはＣＳ−１ポリペプチドのペプチドフラグメントであり得ることが理解される。当業者によって認識されるように、そのような非ヒトポリペプチドのペプチドフラグメントのＮおよびＣ末端のアミノ酸の番号は、ヒトポリペプチドの対応するペプチドフラグメントにおける番号と必ずしも同じでない。さらに、非ヒトポリペプチドのペプチドフラグメントの長さおよび／またはアミノ酸は、ヒトポリペプチドの対応するペプチドフラグメントにおけるそれらと必ずしも同じでないだろう。当業者は、非ヒトの非スプライシング型ＸＢＰ１、スプライシング型ＸＢＰ１、ＣＤ１３８およびＣＳ−１ポリペプチドに由来するペプチドのＮ末端およびＣ末端のアミノ酸、長さならびにアミノ酸配列を確立する方法を承知しているだろう。これを行うために有用な方法の１つは、配列アラインメント、特に、最大相同性（ｍａｘｉｍｕｍ  ｈｏｍｏｌｏｇｙ）配列アラインメントである。
【０２１８】
２つのペプチド配列（例えば、配列番号１〜１８および２９〜５３６のペプチドならびにそのペプチドと少なくとも６６％同一であり得る別のアミノ酸配列）間の同一性パーセントは、Ｃｌｕｓｔａｌ  Ｗ（Ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＥＭＢＬ−ＥＢＩ）、ＢＬＡＳＴ−Ｐｒｏｔｅｉｎ（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＢＩ），Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ）およびＰＳＡｌｉｇｎ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｔｅｘａｓ  Ａ＆Ｍ；Ｓｚｅら（２００６）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １３：３０９−３１９）を含むがこれらに限定されない種々のアルゴリズムおよびコンピュータプログラムを使用して決定され得る。
【０２１９】
上に記載されたヒトペプチドおよび非ヒトペプチドのバリアントもまた本明細書中に開示される。本明細書中に記載されるヒトペプチドおよび非ヒトペプチドのバリアントには、（ｉ）多くとも４つ（例えば、３、２または１つ）のアミノ酸置換（例えば、保存的または非保存的置換）；（ｉｉ）末端もしくは内部の欠失；または（ｉｉｉ）末端もしくは内部の付加を有するペプチドの形態（これらのすべてが、下記で詳しく述べられる）が含まれ得る。
【０２２０】
本開示は、配列番号１〜１８および２９〜５３６のいずれかのアミノ酸配列（表１〜３に示されたような）を含むか、それからなるか、またはそれから本質的になるが、多くとも４つ（例えば、多くとも３つ、多くとも２つまたは多くとも１つ）の置換を有する、ペプチドも特徴とする。これらの置換は、例えば、保存的または非保存的であり得る（上に記載されたように）。
【０２２１】
保存的置換には、以下の群内の置換が含まれる：バリン、アラニンおよびグリシン；ロイシン、バリンおよびイソロイシン；アスパラギン酸およびグルタミン酸；アスパラギンおよびグルタミン；セリン、システインおよびトレオニン；リジンおよびアルギニン；ならびにフェニルアラニンおよびチロシン。非極性の疎水性アミノ酸には、アラニン、ロイシン、イソロイシン、バリン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファンおよびメチオニンが含まれる。極性の中性アミノ酸には、グリシン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギンおよびグルタミンが含まれる。正に帯電した（塩基性）アミノ酸には、アルギニン、リジンおよびヒスチジンが含まれる。負に帯電した（酸性）アミノ酸には、アスパラギン酸およびグルタミン酸が含まれる。上述の極性、塩基性または酸性の群の１つのメンバーの、同じ群の別のメンバーによる任意の置換は、保存的置換と見なされ得る。対照的に、非保存的置換は、異なる特徴を有する別のアミノ酸に対する、１つのアミノ酸の置換である。
【０２２２】
いくつかの実施形態において、上記ペプチドのいずれかの３、４、５、６、７および８つの位置のうちの１つ以上（例えば、１、２、３、４つまたは５つすべて）は、置換されない。いくつかの実施形態において、上記ペプチドのいずれかの３、４、５、６、７および８つの位置のうちの１つ以上は、表１〜３の中のペプチドのアミノ酸と同一である。
【０２２３】
本明細書中に記載されるペプチド（例えば、本明細書中に記載される非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、本明細書中に記載されるスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、本明細書中に記載されるＣＤ１３８ペプチドおよび／または本明細書中に記載されるＣＳ−１ペプチド）の第１のアミノ酸配列；および第１のアミノ酸配列と異種である第２のアミノ酸配列を含む融合タンパク質もまた特徴とする。
【０２２４】
上記ペプチドの第２の異種アミノ酸配列は、通常、配列番号１〜１８および２９〜５３６のいずれかの免疫原性ペプチドの細胞における産生に悪影響を及ぼさない（および悪影響を及ぼさないように選択される）。細胞機構は、そのペプチドの中の任意のさらなる配列を除去することにより、配列番号１〜１８および２９〜５３６のいずれかの免疫原性ペプチドをもたらすと予想され、そのペプチドは、クラスＩまたはクラスＩＩ  ＭＨＣ分子によって提示されることにより、ＸＢＰ１、ＣＤ１３８またはＣＳ１を発現しているがん細胞に対する免疫応答が刺激される。
【０２２５】
第１のアミノ酸配列と「異種」であるアミノ酸配列、または用語「異種アミノ酸配列」は、第１のアミノ酸配列が天然に存在する場合、それに隣接しているアミノ酸配列以外の任意のアミノ酸配列である。例えば、ヒトＸＢＰ１におけるＬＬＲＥＫＴＨＧＬ（配列番号１）に直接隣接する２つ以上（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０個以上）および／または２０個未満（例えば、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２または１個）のカルボキシ末端および／またはアミノ末端のアミノ酸は、配列番号１と異種であると見なされない。配列番号１〜１８および２９〜５３６のいずれかのアミノ酸配列と１００％未満同一であるかまたはそれらの配列に１〜４つの保存的置換を含む第１のアミノ酸配列を含む融合タンパク質は、決して天然には存在しない可能性があることが理解される。
【０２２６】
いくつかの実施形態において、第２のアミノ酸配列は、単一のアミノ酸であり得る。第１のアミノ酸配列と「異種」であるアミノ酸、または用語「異種アミノ酸」は、第１のアミノ酸配列が天然に存在する場合、それに隣接しているアミノ酸以外の任意のアミノ酸であることが理解される。例えば、ヒトＸＢＰ１においてＬＬＲＥＫＴＨＧＬ（配列番号１）に直接隣接している２つのアミノ酸は、配列番号１と異種であると見なされない。
【０２２７】
異種配列は、例えば、組換えタンパク質の精製のために使用される配列（例えば、ＦＬＡＧ、ポリヒスチジン（例えば、ヘキサヒスチジン）（配列番号５４４）、赤血球凝集素（ｈｅｍａｇｌｕｔｔａｎｉｎ）（ＨＡ）、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）またはマルトース結合タンパク質（ＭＢＰ））であり得る。異種配列は、診断マーカーまたは検出可能なマーカー、例えば、ルシフェラーゼ、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）またはクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）として有用なタンパク質でもあり得る。いくつかの実施形態において、融合タンパク質は、ＫＤＥＬ（配列番号２３）配列などの別のタンパク質または本明細書中に記載される他の任意のもの由来のシグナル配列を含み得る。いくつかの実施形態において、融合タンパク質は、免疫グロブリン分子の全部または一部（例えば、免疫グロブリン重鎖定常領域の全部または一部；下記を参照のこと）を含み得る。いくつかの実施形態において、融合タンパク質は、治療的ポリペプチドもしくは免疫刺激ポリペプチド（例えば、Ｔヘルパーエピトープ（例えば、ＰＡＤＲＥエピトープまたは破傷風トキソイドユニバーサルＴヘルパー細胞エピトープ）またはサイトカインもしくはケモカインの全部もしくは一部）および／または例えば、免疫応答の誘発（例えば、抗体の産生）において有用なキャリア（例えば、ＫＬＨ）を含み得る。いくつかの実施形態において、融合タンパク質は、１つ以上のリンカー、例えば、ペプチド配列を含むリンカー（下記を参照のこと）を含み得る。融合タンパク質は、標的化ポリペプチドも含み得る。異種配列は、様々な長さであり得、場合によっては、異種アミノ酸配列に結合している第１のアミノ酸配列よりも長い配列であり得る。第１のアミノ酸配列および第１と異種である第２のアミノ酸配列を含む融合タンパク質は、天然に存在するタンパク質と順序どおりに対応しないことが理解される。
【０２２８】
標的化ポリペプチドは、本明細書中で使用される場合、それらが付着されている部分（例えば、第１のアミノ酸配列）を、特定の組織（例えば、リンパ節）もしくは細胞（例えば、抗原提示細胞または他の免疫細胞）、またはインビトロの場合、特定の単離された分子もしくは分子錯体に標的化するポリペプチドである。標的化ポリペプチドは、例えば、抗体（免疫グロブリン）もしくはその抗原結合フラグメント、または細胞表面レセプターに対するリガンドであり得る。抗体（またはその抗原結合フラグメント）は、例えば、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、ヒト化抗体、完全ヒト抗体、一本鎖抗体、キメラ抗体、または抗体のＦａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、ＦｖフラグメントもしくはｓｃＦｖフラグメントであり得る。Ｆｃ領域を含むかまたはＦｃ領域である（抗原結合領域を伴ってまたは伴わずに）抗体フラグメントは、試薬を、Ｆｃレセプターを発現している細胞（例えば、抗原提示細胞、例えば、指状嵌入樹状細胞、マクロファージ、単球またはＢ細胞）に標的化するためにも使用され得る。細胞表面レセプターに対するリガンドは、例えば、ケモカイン、サイトカイン（例えば、インターロイキン１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５または１６）またはデスレセプターリガンド（例えば、ＦａｓＬまたはＴＮＦα）であり得る。
【０２２９】
いくつかの実施形態において、異種配列は、例えば、細胞または細胞の特定のコンパートメント（例えば、小胞体またはゴルジ装置）へのペプチドの送達を助ける「輸送配列」であり得る。輸送配列としては、例えば、膜転位配列、トランスポータン配列、アンテナペディア配列、環状インテグリン結合ペプチドおよびＴａｔ媒介ペプチドまたはそれらの改変バージョンが挙げられ得る。
【０２３０】
リンカー、例えば、リンカーペプチドは、第１のアミノ酸配列を１つ以上の異種アミノ酸配列に直接または間接的に接続し得る。例えば、リンカーは、第１のアミノ酸配列を第２のアミノ酸配列に接続し得る。リンカーペプチドは、例えば、少なくとも４〜６つのアミノ酸がグリシンである一続きのアミノ酸であり得るか、またはそれを含み得る（例えば、Ｍａｎｃｅｂｏら（１９９０）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０：２４９２−２５０２を参照のこと）。リンカーペプチドはまた、６つ以上（例えば、７、８、９、１０、１１または１２個以上）のヒスチジン残基であり得るか、またはそれを含み得る。そのリンカーペプチドは、少なくとも１つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７または８個以上）のプロテアーゼ切断部位であり得るか、またはそれを含み得る。そのプロテアーゼ部位は、例えば、トリプシン、キモトリプシン（ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｉｎ）またはＸａ因子切断部位であり得る。そのようなプロテアーゼ部位は、例えば、第１のアミノ酸配列を異種配列から切り離すのに有用であり得る。例えば、トリプシンプロテアーゼ切断部位によってポリヒスチジン配列（この場合、精製のために使用される）に連結された第１のアミノ酸配列を含む融合タンパク質の発現および精製の後、そのポリヒスチジン配列は、その融合タンパク質をトリプシンと接触させることによって、第１のアミノ酸配列から除去され得る。
【０２３１】
第１のアミノ酸配列および第２のアミノ酸配列は、種々の方法で互いと会合され得る。本明細書中で使用される場合、２つ以上の原子間または分子単位間の相互作用の文脈における「〜と会合される」は、２つ以上の原子または分子単位（例えば、第１のアミノ酸配列および第２のアミノ酸配列）の任意の共有結合もしくは非共有結合または物理的混合を含む。共有結合の化学的性質（２つの原子が１つ以上の価電子対を共有すること）は、当該分野で公知であり、それには、例えば、ジスルフィド結合またはペプチド結合が含まれる。非共有結合は、価電子対の共有を伴わない原子間または分子間の化学結合である。例えば、非共有結合性の相互作用としては、例えば、疎水性相互作用、水素結合相互作用、イオン結合、ファンデルワールス結合または双極子間相互作用が挙げられる。そのような非共有結合性の相互作用の例としては、抗体と抗原の複合体化または結合対相互作用（結合対の第１のメンバーと第２のメンバーとの相互作用、例えば、ストレプトアビジンとビオチンとの間の相互作用）が挙げられる。したがって、用語「〜と会合される」（例えば、第１のアミノ酸配列および第２のアミノ酸配列の文脈において）は、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」と同一の広がりをもつことが理解される。
【０２３２】
いくつかの実施形態において、第１のアミノ酸配列および第２のアミノ酸配列は、単一の核酸配列によってコードされ得る（および単一の核酸配列から融合タンパク質として発現され得る）。場合によっては、第１のアミノ酸配列および第２のアミノ酸配列は、２つ以上（例えば、３、４、５または６つ以上）の異なる核酸配列によってコードされ得る。例えば、第１のアミノ酸配列は、第１の核酸配列によってコードされ得、第２のアミノ酸配列は、第２の核酸配列によってコードされ得る（下記の「ペプチドを産生させるための核酸および方法」を参照のこと）。
【０２３３】
別々に発現されるかまたは産生される場合、第１のアミノ酸配列および第２のアミノ酸配列は、いくつかの公知の化学的架橋剤のいずれかを用いて共に架橋され得る。そのような化学的架橋剤の例は、２つのアミノ酸残基を、「妨害された（ｈｉｎｄｅｒｅｄ）」ジスルフィド結合を含む結合を介して連結するものである。これらの結合において、架橋単位内のジスルフィド結合は、例えば、還元型グルタチオンまたは酵素ジスルフィドレダクターゼの作用による還元から保護される（ジスルフィド結合のいずれかの側の基を妨害することによって）。１つの好適な化学的架橋剤である４−スクシンイミジルオキシカルボニル−α−メチル−α（２−ピリジルジチオ）トルエン（ＳＭＰＴ）は、２つのアミノ酸配列の一方における末端リジンおよび他方の末端システインを利用して、それらのアミノ酸配列の間にそのような結合を形成する。ヘテロ二官能性試薬は、各アミノ酸配列における異なる結合部分によって架橋する。このようにして、得られる「二量体」は、ホモ二量体（例えば、２つの第１のアミノ酸配列または２つの第２のアミノ酸配列）でもホモ二量体とヘテロ二量体との混合物でもなく、ヘテロ二量体（第１および第２のアミノ酸配列を含むペプチド）である。したがって、第１のアミノ酸配列における結合部分は、システイン残基であり得、他方では、リジン残基であり得る。他の有用な架橋剤としては、２つのアミノ基を連結する化学物質（例えば、Ｎ−５−アジド−２−ニトロベンゾイルオキシスクシンイミド）、２つのスルフヒドリル基を連結する化学物質（例えば、１，４−ビス−マレイミドブタン）、アミノ基およびスルフヒドリル基を連結する化学物質（例えば、ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）、アミノ基およびカルボキシル基を連結する化学物質（例えば、４−［ｐ−アジドサリチルアミド］ブチルアミン）ならびにアミノ基およびアルギニンの側鎖に存在するグアニジウム（ｇｕａｎａｄｉｕｍ）基を連結する化学物質（例えば、ｐ−アジドフェニルグリオキサール一水和物）が挙げられるがこれらに限定されない。
【０２３４】
上記結合部分は、好ましくは、各アミノ酸配列の末端（ＣまたはＮ）に存在する。それらの結合部分は、上で示されたように、各アミノ酸配列におけるシステイン残基、または一方におけるシステインおよび他方におけるリジンであり得る。それらの結合部分が、２つのシステイン残基である場合、架橋は、例えば、アミノ酸配列を酸化条件に曝露することによって、もたらされ得る。
【０２３５】
融合タンパク質は、第１のアミノ酸配列および第２のアミノ酸配列を含み得るか、または融合タンパク質は、１つより多い（例えば、２、３、４、５、６、７または８つ以上の）さらなる異種アミノ酸配列を含み得る。そのさらなる異種アミノ酸配列は、第１のアミノ酸配列のアミノ末端および／またはカルボキシ末端に隣接し得るかまたは連結され得る。
【０２３６】
２つより多いアミノ酸配列が連結される場合、それらのアミノ酸配列の少なくとも１つは、１つより多い架橋部分を有し得る。例えば、第１のアミノ酸配列は、アミノ末端およびカルボキシ末端に架橋部分を有し得る。そのような多量体は、「連続的に」構築され得る。したがって、各アミノ酸配列は、その鎖における末端のアミノ酸配列だけが、ドメイン間（または作用物質間（ｉｎｔｅｒ−ａｇｅｎｔ））の結合に関与する１つの残基を有する一方で、「内部の」アミノ酸配列の各々は、ドメイン間の結合に関与する２つの部分を有するように、その次のアミノ酸配列に連結される。あるいは、１つのアミノ酸配列（例えば、第１のアミノ酸配列）は、複数（例えば、２、３、４または５つ）の他のアミノ酸配列に連結され得る。
【０２３７】
第１の構成要素および第２の構成要素を含むペプチド組成物も特徴とされ、ここで、その第１の構成要素は、本明細書中に記載されるペプチドである。第２の構成要素は、例えば、異種アミノ酸配列（上に記載されたような）、他の任意の抗原ペプチド（例えば、本明細書中に記載されるもの以外のペプチド、検出可能な標識（下記を参照のこと）、治療薬、診断薬または予防薬（下記を参照のこと）であり得る。例えば、ペプチド組成物は、配列番号１〜１８および２９〜５３６のいずれかからなるかまたはそれから本質的になるアミノ酸配列ならびに放射性核種などの検出可能な標識を含み得る。
【０２３８】
いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるペプチドは、異種である最大２００個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０または２００個）のアミノ酸をアミノ末端および／またはカルボキシ末端に有し得ることが理解される。
【０２３９】
本明細書中に記載されるペプチドは、主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子（例えば、ＭＨＣクラスＩ分子またはＭＨＣクラスＩＩ分子）に結合し得る。「主要組織適合複合体」または「ＭＨＣ」は、生理学的な免疫応答に関与する細胞相互作用の制御において役割を果たす遺伝子の一群である。ヒトでは、ＭＨＣは、ＨＬＡ複合体として公知である（例えば、Ｐａｕｌら、ＦＵＮＤＡＭＥＮＴＡＬ  ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＹ，３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，（１９９３）およびＳｔｉｔｅｓら、ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＹ，８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌａｎｇｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｌｏｓ  Ａｌｔｏｓ，Ｃａｌｉｆ．（１９９４）を参照のこと）。
【０２４０】
「ＨＬＡスーパータイプまたはファミリー」は、本明細書中で使用される場合、共有されるペプチド結合特異性に基づいてグループ分けされるＨＬＡ分子のセットのことを指す。ある特定のアミノ酸モチーフを有するペプチドに対していくらか類似の結合親和性を共有するＨＬＡクラスＩ分子は、ＨＬＡスーパータイプにグループ分けされる。ＨＬＡスーパーファミリー、ＨＬＡスーパータイプファミリー、ＨＬＡファミリーおよびＨＬＡ  ｘｘ様分子（ここで、ｘｘは、特定のＨＬＡタイプを表す）という用語は、同義語である。ＨＬＡクラスＩ分子のタイプとしては、例えば、ＨＬＡ−Ａ１、ＨＬＡ−Ａ２、ＨＬＡ−Ａ３、ＨＬＡ−Ａ２４、ＨＬＡ−Ｂ７、ＨＬＡ−Ｂ２７、ＨＬＡ−Ｂ４４、ＨＬＡ−Ｂ５８またはＨＬＡ−Ｂ６２が挙げられる。そのようなＨＬＡ分子は、米国特許第７，０２６，４４３号（その開示全体がすべて、参照により援用される）に詳細に記載されている。
【０２４１】
ペプチドは、高親和性または中間の親和性でＭＨＣ分子に結合し得る。本明細書中で使用される場合、ＨＬＡクラスＩ分子に対するペプチドの「高親和性」結合は、５０ｎＭ未満（例えば、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、５、１、０．５、０．１ｎＭまたは０．０５ｎＭ未満）の解離定数（ＫＤ）での結合として定義される。「中間の親和性」は、約５０ｎＭ〜約５００ｎＭ（例えば、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１１５、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０または５００ｎＭ）のＫＤでのＨＬＡクラスＩ分子に対するペプチドの結合である。ＨＬＡクラスＩＩ分子に対するペプチドの「高親和性」結合は、１００ｎＭ未満（例えば、９５、９０、８５、８０、７５、７０、６５、６０、５５、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、５、１、０．５、０．１ｎＭまたは０．０５ｎＭ未満）のＫＤでの結合として定義される。ＨＬＡクラスＩＩ分子に対するペプチドの「中間の親和性」は、約１００〜約１０００ｎＭ（例えば、１００、１１０、１１５、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００、６１０、６２０、６３０、６４０、６５０、６６０、６７０、６８０、６９０、７００、７１０、７２０、７３０、７４０、７５０、７６０、７７０、７８０、７９０、８００、８１０、８２０、８３０、８４０、８５０、８６０、８７０、８８０、８９０、９００、９１０、９２０、９３０、９４０、９５０、９６０、９７０、９８０、９９０または１０００ｎＭ）のＫＤでの結合である。ペプチドおよびＭＨＣ分子の結合親和性を決定するための方法は、当該分野で公知であり、添付の実施例に示される。好適な方法は、例えば、米国特許第７，０２６，４４３号にも記載されている。
【０２４２】
本明細書中に記載されるペプチドは、ＭＨＣ分子と会合した状態において、Ｔ細胞上の抗原特異的Ｔ細胞レセプターによって認識され得る。種々の好適な方法を用いることにより、ペプチドが、ＭＨＣ分子と会合した状態において、Ｔ細胞上のＴ細胞レセプターによって認識されるかを決定することができる。例えば、正常な被験体由来の末梢血リンパ球（ＰＢＬ）を、インビトロにおいて数週間にわたって抗原提示細胞の存在下で試験ペプチドとともに培養し得る。そのペプチドに特異的なＴ細胞は、この時間の間に活性化状態になり、例えば、増殖アッセイ（カルボキシフルオレセイン（ｃａｒｂｏｘｙｆｌｕｏｒｏｓｃｅｉｎ）スクシンイミジルエステル（ＣＦＳＥ）アッセイまたは３Ｈ−チミジンアッセイ）、限界希釈アッセイ、細胞傷害性アッセイ（例えば、カルセイン放出アッセイ）またはサイトカイン放出アッセイ（例えば、ＩＦＮγ）、リンフォカイン放出アッセイもしくは５１Ｃｒ放出アッセイ（例えば、Ｗｅｎｔｗｏｒｔｈ，Ｐ．Ａ．ら、Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３２：６０３，１９９５；Ｃｅｌｉｓ，Ｅ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９１：２１０５，１９９４；Ｔｓａｉ，Ｖ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５８：１７９６，１９９７；Ｋａｗａｓｈｉｍａ，Ｉ．ら、Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５９：１，１９９８（これらの各開示はその全体が、参照により援用される）を参照のこと）を使用して検出され得る。好適なインビボ方法は、ＨＬＡトランスジェニックマウスを免疫することを含み、ここで、アジュバント中のペプチドを、ＨＬＡトランスジェニックマウスの皮下に投与し、免疫化の数週間後に、脾細胞を取り出し、インビトロにおいて試験ペプチドの存在下でおよそ１週間培養し、ペプチド特異的Ｔ細胞を、例えば、５１Ｃｒ放出アッセイを用いて検出する（例えば、Ｗｅｎｔｗｏｒｔｈ，Ｐ．Ａ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２６：９７，１９９６；Ｗｅｎｔｗｏｒｔｈ，Ｐ．Ａ．ら、Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．８：６５１，１９９６；Ａｌｅｘａｎｄｅｒ，Ｊ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５９：４７５３，１９９７（これらの各開示はその全体が、参照により援用される）を参照のこと）。好適な方法は、添付の実施例にも示される。例えば、ペプチド（ＭＨＣ分子との関連で）によるＴ細胞の活性化は、ＩＦＮ−γサイトカイン産生、ＣＤ１０７α脱顆粒またはカルセイン放出細胞傷害性アッセイによって決定され得る（例えば、実施例１３および１４を参照のこと）。
【０２４３】
さらに、抗原特異的Ｔ細胞の直接的な定量が、検出可能に標識されたＭＨＣ複合体（例えば、本明細書中に記載されるＭＨＣ分子多量体組成物（下記を参照のこと）またはＨＬＡ−Ｉ四量体（例えば、Ａｌｔｍａｎ，Ｊ．Ｄ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：１０３３０，１９９３およびＡｌｔｍａｎ，Ｊ．Ｄ．ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２７４：９４，１９９６（これらの各開示はその全体が、参照により援用される）に記載されているような）のいずれか）でＴ細胞を染色することによって行われ得る。
【０２４４】
いくつかの実施形態において、上記ペプチドは、それらのペプチドの１つ以上の特性を調節するため（例えば、増加または減少させるため）に、改変され得る（例えば、それらのペプチドのアミノ酸が置換され得る）。例えば、表１に示されたペプチドのうちの１つの、１つ以上（例えば、２、３または４個）のアミノ酸が、ＭＨＣ分子に対するそのペプチドの親和性を高めるために、置換され得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるペプチドのうちの１つのアミノ酸（例えば、そのペプチドのアミノ酸残基と接触するＴ細胞レセプター）は、Ｔ細胞レセプターとそのペプチド（ＭＨＣ分子との関連で）との間の結合相互作用を増強するために、改変され得る。そのような改変されたペプチドは、多くの場合、「変更されたペプチドリガンド」と称される（例えば、Ｋａｌｅｒｇｉｓら（２０００）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６５（１）：２８０；Ｃｏｎｌｏｎら（２００２）Ｓｃｉｅｎｃｅ  １８０１；および国際公開番号ＷＯ０２０７０００３（これらの各開示はその全体が、参照により援用される）を参照のこと）。
【０２４５】
ペプチドを改変するため、ならびにその改変の影響を決定するための好適な方法は、添付の実施例に示され、例えば、Ｃｏｌｌｉｎｓら（Ｉｍｍｕｎｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ（１９９８）１６３：１５１−１６０（この開示はその全体が、参照により援用される））に記載されている。
【０２４６】
ペプチドを産生させるための核酸および方法
本開示は、１つ以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４個）の本明細書中に記載される任意のペプチド（または本明細書中に記載される融合タンパク質）をコードする核酸配列（ならびに核酸配列を含む核酸ベクター）およびそれを産生させるための方法も特徴とする。そのような方法は、必要に応じて、１つ以上の本明細書中に記載される任意のペプチド（または本明細書中に記載される融合タンパク質）をコードする核酸配列を含む核酸ベクターを含む細胞（または細胞の群）を提供する工程（その核酸配列は、発現調節配列に作動可能に連結されている）、およびその細胞を、そのペプチド（または融合タンパク質）の発現を可能にする条件下で培養する工程を含み得る。その方法は、その細胞またはその細胞を培養した培地から１つ以上のペプチド（またはタンパク質）を単離する工程も含み得る。
【０２４７】
本明細書中に記載されるペプチド（または融合タンパク質）の１つ以上を組換え発現するための核酸配列およびベクター（例えば、発現ベクター）を構築するための好適な方法は、当業者に周知であり、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  ｖｏｌ．１、２および３．Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
Ｐｒｅｓｓ：Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＵＳＡ，Ｎｏｖ．１９８９（この開示はその全体が、参照により援用される）に記載されている。それらの核酸およびベクターは、例えば、多種多様の宿主細胞（例えば、細菌細胞、酵母細胞または哺乳動物細胞を含む）においてそれらのペプチド（または融合タンパク質）を発現させるために使用され得る。それらの核酸およびベクターは、例えば、下記に記載されるようなインビボおよびエキソビボでの方法においても使用され得る。
【０２４８】
ペプチドをコードする配列（または融合タンパク質をコードする配列）は、核酸によってコードされるペプチド（または融合タンパク質）の発現を指向するプロモーターおよび／またはエンハンサーエレメントに作動可能に連結され得る。エンハンサーは、時間、位置およびレベルに関して、発現の特異性を提供する。プロモーターとは異なり、エンハンサーは、プロモーターが存在する条件で、転写開始部位から不定の距離に位置する場合、機能し得る。エンハンサーは、転写開始部位の下流または関連する遺伝子のエキソンの中にも位置し得る。コード配列をプロモーターの制御下に置くためには、ペプチドの翻訳読み枠の翻訳開始部位を、プロモーターの１〜約５０ヌクレオチド下流（３’）に位置させる必要がある。目的のプロモーターとしては、サイトメガロウイルスｈＣＭＶ前初期遺伝子、ＳＶ４０アデノウイルスの初期もしくは後期プロモーター、ｌａｃ系、ｔｒｐ系、ＴＡＣ系、ＴＲＣ系、ファージＡの主要オペレ−ターおよびプロモーター領域、ｆｄコートタンパク質の制御領域、３ホスホグリセリン酸キナーゼに対するプロモーター、酸ホスファターゼのプロモーター、ならびに酵母α接合因子のプロモーター、アデノウイルスＥ１ｂ最小プロモーター、またはチミジンキナーゼ最小プロモーターが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２４９】
ペプチドをコードする配列、融合タンパク質をコードする配列、またはそのような配列を含むベクターは、シグナルペプチドをコードするリーダー配列を含み得る。そのリーダー配列は、本明細書中に記載されるペプチドまたは融合タンパク質の１つ以上をコードする配列の５’末端に存在し得る。シグナルペプチドは、所与のペプチド（または融合タンパク質）のすぐＮ末端側であり得るか、またはリーダー配列が、ペプチドまたは融合タンパク質をコードする核酸配列とインフレームである条件で、１つ以上（例えば、２、３、４、６、８、１０、１５または２０個）のアミノ酸によってそのペプチドから分断され得る。シグナルペプチドは、通常、分泌前に（当然のことながら、そのシグナルペプチドが、膜貫通（ｔｒａｓｍｅｍｂｒａｎｅ）タンパク質の挿入を指向しない限り）、ペプチド（または融合タンパク質）から切断され、それが結合しているペプチド（または融合タンパク質）を、翻訳中に宿主細胞の小胞体（ＥＲ）の内腔に指向させ、次いで、そのペプチド（または融合タンパク質）は、分泌小胞を介して、宿主細胞の環境に分泌される。有用なシグナルペプチドとしては、例えば、サイトカインもしくは成長因子の天然のリーダー配列、ＫＤＥＬ（配列番号２３）、または例えば、米国特許第５，８２７，５１６号（その開示はその全体が、参照により本明細書中に援用される）に記載されている、任意のシグナル配列が挙げられる。
【０２５０】
いくつかの実施形態において、ペプチドをコードする配列（または融合タンパク質をコードする配列）の５’末端は、非天然のＡＴＧ「開始配列」を含み得る。すなわち、例えば、ＡＴＧ配列は、ペプチド（または融合タンパク質）が正しく転写され、翻訳されるのを確実にするために、そのペプチド（または融合タンパク質）をコードする核酸に付加され得る。リーダー配列は、通常、ＡＴＧ開始配列を含むが、リーダー配列がＡＴＧ開始配列を含まない実施形態では、リーダー配列をコードする核酸の５’末端にＡＴＧ配列が付加され得る。
【０２５１】
ペプチドをコードする配列および発現ベクターを構築するための好適な方法は、当業者に周知であり、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  ｖｏｌ．１、２および３．Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ：Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＵＳＡ，Ｎｏｖ．１９８９（その開示はその全体が、参照により本明細書中に援用される）に記載されている。
【０２５２】
組換えベクターは、種々の方法を用いて細胞内に導入され得、それらの方法は、その核酸が導入される細胞のタイプに少なくとも部分的に依存し得る。例えば、細菌細胞は、エレクトロポレーションまたは熱ショックなどの方法を用いて形質転換され得る。酵母細胞をトランスフェクトするための方法としては、例えば、スフェロプラスト法または全細胞塩化リチウム酵母形質転換法が挙げられる（例えば、米国特許第４，９２９，５５５号；Ｈｉｎｎｅｎら（１９７８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７５：１９２９；Ｉｔｏら（１９８３）Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．１５３：１６３；米国特許第４，８７９，２３１号；およびＳｒｅｅｋｒｉｓｈｎａら（１９８７）Ｇｅｎｅ  ５９：１１５（これらの各開示はその全体が、参照により本明細書中に援用される）を参照のこと）。動物細胞のトランスフェクションは、例えば、リン酸カルシウム、エレクトロポレーション、熱ショック、リポソームもしくはトランスフェクション試薬（例えば、ＦＵＧＥＮＥ（登録商標）またはＬＩＰＯＦＥＣＴＡＭＩＮＥ（登録商標））を用いるか、または裸の核酸ベクターを溶液中の細胞と接触させることによって（例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら、前出を参照のこと）、細胞にベクターを導入することを特徴とし得る。
【０２５３】
本明細書中に記載されるペプチド（または融合タンパク質）の小規模または大規模産生のために使用され得る発現系としては、組換えバクテリオファージＤＮＡ、プラスミドＤＮＡまたはコスミドＤＮＡ発現ベクターで形質転換された微生物、例えば、細菌（例えば、大腸菌およびＢ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）；組換え酵母発現ベクターで形質転換された真菌（例えば、酵母（例えば、ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓおよびＰｉｃｈｉａ））；組換えウイルス発現ベクター（例えば、バキュロウイルス）に感染した昆虫細胞系；組換えウイルス発現ベクター（例えば、カリフラワーモザイクウイルス（ＣａＭＶ）およびタバコモザイクウイルス（ＴＭＶ））に感染したかもしくは組換えプラスミド発現ベクター（例えば、Ｔｉプラスミド）で形質転換された植物細胞系；または哺乳動物細胞のゲノムに由来するプロモーター（例えば、メタロチオネインプロモーター）もしくは哺乳動物ウイルスに由来するプロモーター（例えば、アデノウイルス後期プロモーター、ＣＭＶプロモーター、ＳＶ４０プロモーターまたはワクシニアウイルス７．５Ｋプロモーター）を含む組換え発現構築物を有する哺乳動物細胞系（例えば、ＣＯＳ、ＣＨＯ、ＢＨＫ、２９３、ＶＥＲＯ、ＨｅＬａ、ＭＤＣＫ、ＷＩ３８およびＮＩＨ  ３Ｔ３細胞）が挙げられるが、これらに限定されない。哺乳動物から直接得られたか、プラスミドベクターでトランスフェクトされたか、またはウイルスベクター（例えば、ウイルスベクター、例えば、とりわけ、ヘルペスウイルス、レトロウイルス、ワクシニアウイルス、弱毒化ワクシニアウイルス、カナリアポックスウイルス、アデノウイルスおよびアデノ随伴ウイルス）に感染した、初代細胞または二次細胞（ｓｅｃｏｎｄａｒｙ  ｃｅｌｌ）もまた宿主細胞として有用である。
【０２５４】
上に記載されたように、本明細書中に記載される任意のペプチド（または融合タンパク質）の発現の後、それらのペプチド（または融合タンパク質）は、標準的な手法を用いて、培養細胞から、またはそれらの細胞が培養された培地から、単離され得る（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、前出を参照のこと）。タンパク質を単離する方法は、当該分野で公知であり、それらとしては、例えば、液体クロマトグラフィー（例えば、ＨＰＬＣ）、アフィニティークロマトグラフィー（例えば、金属キレート化またはイムノアフィニティークロマトグラフィー）、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、沈殿または差次的可溶化（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ）が挙げられる。
【０２５５】
より小さいペプチド（例えば、２００未満（例えば、１７５未満、１５０未満、１２５未満、１００未満、９０未満、８０未満、７０未満または６０未満）のアミノ酸を有するペプチド）は、ＦＭＯＣ固相合成などの標準的な化学的手段によって化学的に合成され得る（実施例１を参照のこと）。
【０２５６】
本明細書中に記載されるペプチド（および融合タンパク質）は、単離され得るが、必ずしも単離されなくてもよい。用語「単離される」は、本明細書中に記載される任意のペプチド（または融合タンパク質）に適用される場合、天然に付随する構成要素（例えば、タンパク質または他の天然に存在する生物学的分子もしくは有機分子）から分離または精製された、ペプチド、そのフラグメント（または組成物の場合、巨大分子複合体）のことを指す。組換え分子（例えば、組換えペプチド）は、常に「単離」されていると理解される。典型的には、ペプチド（またはフラグメントまたは巨大分子複合体）は、調製物中の同じタイプの全分子の少なくとも６０重量％、例えば、サンプル中の同じタイプの全分子の６０％を構成する場合、単離されている。例えば、本明細書中に記載されるペプチドは、調製物中またはサンプル中の全タンパク質の少なくとも６０重量％を構成する場合、単離されていると見なされる。いくつかの実施形態において、調製物中の分子は、調製物中の同じタイプの全分子の少なくとも７５重量％、少なくとも９０重量％または少なくとも９９重量％からなる。
【０２５７】
同様に、本明細書中に記載される、ペプチドをコードする配列、融合タンパク質をコードする配列またはそのような配列を含むベクターもまた、単離され得る。用語「単離される」は、本明細書中に記載される、ペプチドをコードする配列、融合タンパク質をコードする配列またはベクターのいずれかに適用される場合、天然に付随する構成要素（例えば、核酸、タンパク質または他の天然に存在する生物学的分子もしくは有機分子）から分離または精製された、ペプチドをコードする配列、融合タンパク質をコードする配列またはベクター、それらのフラグメントのことを指す。組換え分子（例えば、組換えベクター、またはペプチドをコードする配列もしくは融合タンパク質をコードする配列）は、常に「単離」されていると理解される。典型的には、ペプチドをコードする配列、融合タンパク質をコードする配列またはベクター（またはそれらのフラグメント）は、調製物中の同じタイプの全分子の少なくとも６０重量％、例えば、サンプル中の同じタイプの全分子の６０％を構成する場合、単離されている。例えば、本明細書中に記載される、ペプチドをコードする配列またはベクターは、調製物中またはサンプル中の全核酸の少なくとも６０重量％を構成する場合、単離されていると見なされる。いくつかの実施形態において、調製物中の分子は、調製物中の同じタイプの全分子の少なくとも７５重量％、少なくとも９０重量％または少なくとも９９重量％からなる。
【０２５８】
いくつかの実施形態において、単離されたペプチド、融合タンパク質、ペプチドをコードする配列、融合タンパク質をコードする配列またはベクターは、凍結され得るか、凍結乾燥され得るか、または固定化され得、それらの分子が活性（例えば、ペプチドがＭＨＣクラスＩ分子などのＭＨＣ分子に結合する能力、またはベクターが細胞内でのペプチドの発現を支持する能力）を保持することを可能にする適切な条件下で保存され得る。
【０２５９】
ペプチドのさらなる処理
本明細書中に記載される任意のペプチド（または融合タンパク質）の発現または合成の後、それらのペプチド（または融合タンパク質）は、さらに処理され得る。そのさらなる処理には、ペプチド（または融合タンパク質）に対する化学的もしくは酵素的な修飾が含まれ得るか、またはそれらのペプチド（または融合タンパク質）が修飾される場合、その処理には、既存の修飾の酵素的もしくは化学的な変更またはその両方が含まれ得る。ペプチドのさらなる処理には、異種アミノ酸配列（例えば、上に記載された任意の異種アミノ酸配列であるがこれらに限定されない）の付加（共有結合性または非共有結合性の連結）が含まれ得る。酵素的処理は、ペプチドを、例えば、１つ以上のプロテアーゼ、ホスファターゼまたはキナーゼと、そのペプチドが修飾されるのを可能にする条件下で、接触させる工程を含み得る。酵素的処理は、ペプチドを、そのペプチドをグリコシル化することができるかまたはそのペプチドのグリコシル化を修飾することができる１つ以上の酵素（例えば、オリゴサッカリルトランスフェラーゼまたはマンノシダーゼ）と、接触させる工程を含み得る。
【０２６０】
上記処理には、ペプチドへの、例えば検出可能な標識の、付加が含まれ得る。例えば、ペプチドは、酵素（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼまたはアセチルコリンエステラーゼ）、蛍光材料（例えば、ウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミン、フルオレセイン、塩化ダンシル、アロフィコシアニン（ＡＰＣ）またはフィコエリトリン）、発光材料（例えば、ランタニドまたはそのキレート）、生物発光材料（例えば、ルシフェラーゼ、ルシフェリンまたはエクオリン）または放射性核種（例えば、３Ｈ、３２Ｐ、３３Ｐ、１２５Ｉまたは３５Ｓ）で検出可能に標識され得る。
【０２６１】
上記処理は、上記ペプチド（または融合タンパク質）をポリマー（例えば、ポリアルキレングリコール部分、例えば、ポリエチレングリコール部分）に結合させることも含み得る。いくつかの実施形態において、そのポリマーは、ペプチド上のＮ末端の部位において、そのペプチドに結合される。いくつかの実施形態において、ペプチドは、ポリマーが結合体化され得る内部ポリマー結合体化部位をもたらす１つ以上の内部アミノ酸挿入を含み得る。
【０２６２】
薬学的組成物
本明細書中に記載されるペプチド、融合タンパク質、およびそれらのペプチドまたは融合タンパク質をコードする核酸のいずれかが、薬学的組成物に組み込まれ得る。そのような組成物は、典型的には、それらのペプチド（および／またはそれらのペプチドをコードする核酸）の１つ以上および薬学的に許容され得るキャリアを含む。本明細書中で使用される場合、語「薬学的に許容され得るキャリア」には、医薬の投与に適合する、溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などが含まれる。１つ以上のペプチドが、シロップ、エリキシル、懸濁液、粉末、顆粒、錠剤、カプセル、ロゼンジ、トローチ、溶液、クリーム、軟膏、ローション、ゲル、エマルジョンなどの形態の薬学的組成物として製剤化され得る。補助的な活性な化合物（例えば、１つ以上の化学療法剤）もまた、組成物に組み込まれ得る。好ましくは、組成物は、本明細書中に記載される２つ以上（例えば、２、３、４、５または６つ）のペプチドを含む。組成物は、本明細書中に開示される免疫原性ペプチド以外の免疫原性ペプチド、例えば、ＷＴ１由来のペプチドまたはその誘導体、例えば、本明細書中に記載されるような免疫原性ペプチドも含み得る。他の免疫原性ペプチドとしては、ＭＵＣ１由来の免疫原性ペプチド、ｇｐ１００由来の免疫原性ペプチド、ＴＲＰ−２由来の免疫原性ペプチド、ＭＡＧ１由来の免疫原性ペプチド、ＮＹ−ＥＳＯ１由来の免疫原性ペプチド、ＨＥＲ−２由来の免疫原性ペプチド；およびＡＩＭ２由来の免疫原性ペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２６３】
薬学的組成物は、通常、意図される投与経路と適合するように製剤化される。投与経路の例としては、経口、直腸および非経口的、例えば、静脈内、筋肉内、皮内、皮下、吸入、経皮的または経粘膜的が挙げられる。非経口適用のために使用される溶液または懸濁液は、以下の構成要素：無菌の希釈剤（例えば、注射用水、食塩水溶液、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒）；抗菌剤（例えば、ベンジルアルコールまたはメチルパラベン）；抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウム）；キレート剤（例えば、エチレンジアミン四酢酸）；緩衝剤（例えば、酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩および浸透圧を調整するための作用物質、例えば、塩化ナトリウムまたはデキストロース）を含み得る。ｐＨは、酸または塩基（例えば、塩酸または水酸化ナトリウム）で調整され得る。組成物は、ガラスまたはプラスチックで作られた、アンプル、使い捨て注射器または複数回投与バイアルに封入され得る。
【０２６４】
注射可能な使用に適した薬学的組成物には、無菌の水溶液（水溶性である場合）または分散液、および無菌の注射可能な溶液または分散液の即時調製用の無菌の粉末が含まれる。静脈内投与の場合、好適なキャリアとしては、生理食塩水、静菌水、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ（商標）（ＢＡＳＦ，Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ，Ｎ．Ｊ．）またはリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）が挙げられる。すべての場合において、薬学的組成物は、無菌でなければならなく、容易な注射可能性（ｅａｓｙ  ｓｙｒｉｎｇａｂｉｌｉｔｙ）が存在する程度に流動性であるべきである。薬学的組成物は、製造条件下および貯蔵条件下において安定であるべきであり、微生物（例えば、細菌および真菌）による任意の汚染から保護されなければならない。キャリアは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコールなど）およびそれらの好適な混合物を含む溶媒または分散媒であり得る。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用、分散液の場合、要求される粒径の維持、および界面活性物質の使用によって、維持され得る。微生物による汚染の防止は、様々な抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなどによって達成され得る。多くの場合、等張剤、例えば、糖類、多価アルコール類、例えば、マンニトール（ｍａｎｉｔｏｌ）、ソルビトール、塩化ナトリウムを組成物中に含めることが望ましいだろう。注射可能な組成物の長期の吸収は、吸収を遅延させる作用物質、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを組成物中に含めることによって、促進され得る。
【０２６５】
無菌の注射可能な溶液は、要求される場合、上に列挙された成分のうちの１つまたは組み合わせとともに、１つ以上のペプチド（またはそのペプチドをコードする１つ以上の核酸）を要求される量で適切な溶媒に組み込んだ後、濾過滅菌することによって、調製され得る。一般に、分散液は、ペプチド（または融合タンパク質、もしくはペプチドをコードする核酸）を、塩基性分散媒および上に列挙された成分からの要求される他の成分を含む無菌のビヒクルに組み込むことによって、調製される。無菌の注射可能な溶液を調製するための無菌の粉末の場合、調製方法は、その予め濾過滅菌された溶液から、活性成分＋任意のさらなる所望の成分の粉末をもたらす真空乾燥または凍結乾燥を含み得る。
【０２６６】
経口組成物は、通常、不活性な希釈剤または可食キャリアを含む。経口の治療的投与の目的で、１つ以上のペプチド（または融合タンパク質）は、賦形剤とともに組み込まれ、錠剤、トローチまたはカプセル、例えば、ゼラチンカプセルの形態で使用され得る。経口組成物はまた、うがい薬として使用するために流動性のキャリアを使用して調製され得る。薬学的に適合性の結合剤および／またはアジュバント材料を、組成物の一部として含み得る。錠剤、丸剤、カプセル、トローチなどは、以下の成分のいずれかまたは類似の性質の化合物を含み得る：結合剤（例えば、微結晶性セルロース、トラガカントガムまたはゼラチン）；賦形剤（例えば、デンプンまたはラクトース）、崩壊剤（例えば、アルギン酸、Ｐｒｉｍｏｇｅｌまたはトウモロコシデンプン）；潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウムまたはステロート（ｓｔｅｒｏｔｅｓ））；滑剤（ｇｌｉｄａｎｔ）（例えば、コロイド状二酸化ケイ素）；甘味剤（例えば、スクロースまたはサッカリン）；香味剤（例えば、ペパーミント、サリチル酸メチルまたはオレンジ香料）。
【０２６７】
粉末および錠剤は、１％〜９５％（ｗ／ｗ）の、個別のペプチドまたは２つ以上のペプチドの混合物を含み得る。ある特定の実施形態において、そのペプチドは、約５％〜７０％（ｗ／ｗ）の範囲であり得る。好適なキャリアは、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、ラクトース、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、低融点ろう、カカオバターなどである。用語「調製物」には、ペプチドが、他のキャリアを伴ってまたは伴わずに、キャリアによって包囲され、それにより、それと会合している、カプセルを提供するキャリアとして封入材料を伴うペプチド（または核酸）の製剤が含まれると意図されている。同様に、カシェおよびロゼンジが含まれる。錠剤、粉末、カプセル、丸剤、カシェおよびロゼンジは、経口投与に適した固形の剤形として使用され得る。
【０２６８】
経口使用に適した水溶液は、活性な構成要素を水に溶解し、好適な着色料、香料、安定剤および増粘剤を所望のとおりに加えることによって、調製され得る。経口使用に適した水性懸濁液は、微粉化された活性な構成要素を、粘稠性材料、例えば、天然ゴムまたは合成ゴム、樹脂、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および他の周知の懸濁剤とともに水に分散させることによって、生成され得る。
【０２６９】
吸入による投与の場合、上記ペプチド（または融合タンパク質または核酸）は、好適な噴霧剤、例えば、二酸化炭素などの気体を含む加圧容器もしくはディスペンサーまたは噴霧器からのエアロゾルスプレーの形態で送達され得る。
【０２７０】
全身投与は、経粘膜的または経皮的な手段によっても行われ得る。経粘膜的または経皮的投与の場合、透過すべきバリアに対して適切な浸透剤が、製剤において使用される。そのような浸透剤は、当該分野で広く公知であり、それらとしては、例えば、経粘膜的投与の場合、界面活性剤、胆汁酸塩およびフシジン酸誘導体が挙げられる。経粘膜的投与は、点鼻薬または坐剤を使用することによって達成され得る。経皮的投与の場合、上記ペプチド（または融合タンパク質または核酸）は、当該分野で広く公知であるような軟膏、膏薬、ゲルまたはクリームに製剤化され得る。
【０２７１】
上記ペプチド（または融合タンパク質または核酸）は、直腸送達用の坐剤（例えば、カカオバターおよび他のグリセリドなどの従来の坐剤基剤を用いて）または停留浣腸（ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ  ｅｎｅｍａｓ）の形態でも調製され得る。
【０２７２】
１つの実施形態において、上記ペプチド（または融合タンパク質または核酸）は、それらのペプチド（融合タンパク質または核酸）を身体からの迅速な排出から保護するキャリアを用いて調製され得る（例えば、インプラントおよびマイクロカプセル化された送達系を含む、放出制御製剤）。生分解性の生体適合性ポリマー（例えば、エチレンビニルアセテート、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステルおよびポリ乳酸）が使用され得る。そのような製剤を調製するための方法は、当業者に明らかであろう。それらの材料は、Ａｌｚａ  ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎおよびＮｏｖａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．からも商業的に入手することができる。リポソーム懸濁液（例えば、ＡＰＣ特異的抗原に対するモノクローナル抗体によってＡＰＣに標的化されたリポソームを含む）もまた、薬学的に許容され得るキャリアとして使用され得る。これらは、当業者に公知の方法に従って、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号に記載されているように、調製され得る。
【０２７３】
投与を容易にするためおよび投与量の均一性のために、経口または非経口組成物を投薬単位形態（ｄｏｓａｇｅ  ｕｎｉｔ  ｆｏｒｍ）で製剤化することが、有益であり得る。投薬単位形態は、本明細書中で使用される場合、処置される被験体に対する単位投与量として適した物理的に別個の単位のことを指し；各単位は、必要とされる薬学的キャリアとともに所望の治療効果をもたらすように計算された所定の量のペプチド（または融合タンパク質または核酸）を含む。投薬単位は、使用するための指示も伴い得る。
【０２７４】
上記ペプチド（または融合タンパク質）をコードする核酸分子は、ベクターに挿入され得、遺伝子治療ベクター（上に記載されたような）として使用され得る。遺伝子治療ベクターは、例えば、静脈内注射、局所投与（例えば、米国特許第５，３２８，４７０号を参照のこと）または定位注射（例えば、Ｃｈｅｎら（１９９４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９１：３０５４−３０５７を参照のこと）によって、被験体に送達され得る。遺伝子治療ベクターの薬学的調製物は、許容され得る希釈剤中に遺伝子治療ベクターを含み得るか、または遺伝子送達ビヒクルが埋め込まれている持続放出マトリックスを含み得る。あるいは、完全な遺伝子送達ベクターが、組換え細胞からインタクトに産生され得る場合（例えば、レトロウイルスベクター）、薬学的調製物は、遺伝子送達系を産生する１つ以上の細胞を含み得る（下記の「エキソビボ方法」を参照のこと）。
【０２７５】
遺伝子送達ビヒクルのさらなる例としては、リポソーム、天然ポリマーおよび合成ポリマーを含む生体適合性ポリマー；リポタンパク質；ポリペプチド；多糖類；リポ多糖類；人工ウイルスエンベロープ；金属粒子；細菌；ウイルス（例えば、バキュロウイルス、アデノウイルスおよびレトロウイルス）；バクテリオファージ；コスミド；プラスミド；真菌ベクター、ならびに種々の真核生物宿主および原核生物宿主における発現について記載されており、遺伝子治療ならびに単純なタンパク質発現のために使用され得る、当該分野において典型的に使用される他の組換えビヒクルが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２７６】
ウイルスベクターの例としては、レトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター、アルファウイルスベクターなどが挙げられる。抗体またはそのフラグメントなどの標的化部分を含むリポソームは、被験体に送達するための核酸の薬学的組成物を調製するためにも使用され得る。
【０２７７】
本明細書中に記載される任意の薬学的組成物が、下記に記載されるような投与に対する指示とともに、容器、パックまたはディスペンサーの中に含められ得る。
【０２７８】
ＭＨＣ分子多量体組成物およびその組成物を使用するための方法
本開示は、（ｉ）上に記載された１つ以上の任意のペプチド、および（ｉｉ）主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子多量体を含む組成物も特徴とする。その多量体は、２つ以上（例えば、３、４、５、６、７、８、９または１０個以上）のＭＨＣ分子全体またはＭＨＣ分子のペプチド結合領域を含む。その１つ以上のペプチドは、ＭＨＣ分子多量体と会合（例えば、共有結合的または非共有結合的に結合）し得る。
【０２７９】
上記多量体のＭＨＣ分子は、ＭＨＣクラスＩ分子（例えば、ＨＬＡ−Ａ分子、例えば、ＨＬＡ−Ａ２またはＨＬＡ−Ａ２４分子）またはＭＨＣクラスＩＩ分子であり得る。そのＭＨＣ分子は、哺乳動物（例えば、げっ歯類、非ヒト霊長類、ヒトまたは本明細書中に記載される他の任意の哺乳動物）のＭＨＣ分子であり得る。
【０２８０】
上記多量体における２つ以上のＭＨＣ分子（またはそのＭＨＣ分子のペプチド結合領域）は、同じＭＨＣ分子または異なるＭＨＣ分子に由来し得る。例えば、ＭＨＣ分子多量体は、５つのＭＨＣ分子を含み得、そのうちの３つは、同じＭＨＣ分子であり、そのうちの２つは、最初の３つとは異なる。別の例では、多量体の各ＭＨＣ分子は、異なる。それらのＭＨＣ分子の少なくとも１つは、上記ペプチドのうちの少なくとも１つに結合し得る。
【０２８１】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、少なくとも２つ（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１５個以上）の本明細書中に記載される任意のペプチドを含み得る。上記組成物は、本明細書中に開示される免疫原性ペプチド以外の免疫原性ペプチド、例えば、ＷＴ１由来のペプチドまたはその誘導体も含み得る。他の免疫原性ペプチドとしては、ＭＵＣ１由来の免疫原性ペプチド、ｇｐ１００由来の免疫原性ペプチド、ＴＲＰ−２由来の免疫原性ペプチド、ＭＡＧ１由来の免疫原性ペプチド、ＮＹ−ＥＳＯ１由来の免疫原性ペプチド、ＨＥＲ−２由来の免疫原性ペプチド；およびＡＩＭ２由来の免疫原性ペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２８２】
上記組成物はまた、検出可能な標識に会合され得る。例えば、上記多量体のＭＨＣ分子の１つ以上が、検出可能な標識に共有結合的にまたは非共有結合的に結合され得る。好適な検出可能な標識（例えば、酵素、蛍光材料、発光材料、生物発光材料または放射性核種）ならびに検出可能な標識をペプチドまたはＭＨＣ分子に連結するための方法が、上に記載されている。
【０２８３】
ＭＨＣ多量体組成物は、以下のとおり、上に記載されたペプチドを使用して生成され得る：ＨＬＡ分子に結合するペプチドを、対応するＨＬＡ重鎖およびβ２−ミクログロブリンの存在下においてリフォールディングすることにより、三分子複合体を生成する。次いで、その複合体を、予め重鎖へと操作された部位における重鎖のカルボキシル末端においてビオチン化する。次いで、ストレプトアビジンを加えることによって、多量体形成を誘導する。
【０２８４】
Ｔ細胞レセプターが、多種多様の他のペプチド−ＭＨＣ複合体の中で、標的細胞上の特異的なペプチド−ＭＨＣ複合体を認識することができる場合、本明細書中に記載されるＭＨＣ多量体組成物は、例えば、無関係のＴ細胞の集団内の抗原特異的Ｔ細胞を検出するために使用され得る（下記を参照のこと）。そのようなアッセイのために、その多量体は、一般に、検出可能に標識される（上記を参照のこと）。
【０２８５】
例えば、多量体ＭＨＣ分子／ペプチド複合体は、免疫原への曝露後の抗原特異的ＣＴＬの存在について末梢血単核球を評価するアッセイにおいて使用され得る。そのＭＨＣ多量体複合体は、抗原特異的ＣＴＬを直接可視化するため（例えば、Ｏｇｇら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２７９：２１０３−２１０６，１９９８；およびＡｌｔｍａｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  １７４：９４−９６，１９９６を参照のこと）および末梢血単核球のサンプル中の抗原特異的ＣＴＬ集団の頻度を決定するために、使用され得る。１つの例において、ＭＨＣ多量体を多量体化するために使用される検出可能に標識されたストレプトアビジンは、その多量体のＭＨＣ分子／ペプチド複合体に結合するＴ細胞を標識するために使用され得る。これを行うために、その多量体で処理された細胞は、例えば、標識（例えば、ビオチンに結合体化されたフルオロフォア）に曝露される。次いで、それらの細胞は、例えば、フローサイトメトリーを使用して、容易に単離され得るかまたは検出され得る。
【０２８６】
用途
本明細書中に記載される、ペプチド、融合タンパク質（およびそれらの薬学的組成物）、ＭＨＣ多量体を含む組成物、キットおよび製造品は、種々の方法において使用され得る。例えば、本明細書中に記載されるペプチドは、（ｉ）被験体（例えば、がんを有する被験体）において免疫応答を誘導するため；（ｉｉ）培養中のＴ細胞（例えば、セントラルメモリーＴ細胞および／またはエフェクターメモリーＴ細胞）を活性化するため；および／または（ｉｉｉ）がんを処置するためもしくは防止するために、使用され得る。がんとしては、例えば、肺がん、肝臓がん、胆管がん、胃がん、子宮頸がん、鼻咽頭がん、乳がん、結腸がん、膵がん、血液細胞がん、例えば、形質細胞がん、例えば、多発性骨髄腫および白血病（ｌｅａｕｋｅｍｉａ）、例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬが挙げられる。本明細書中に記載されるペプチドは、くすぶり型多発性骨髄腫などの前がん状態を処置するためにも使用され得る。上に記載されたように、ＭＨＣ多量体を含む組成物は、例えば、無関係のＴ細胞の集団内の抗原特異的Ｔ細胞を検出するために、使用され得る。
【０２８７】
上記ペプチド（またはその薬学的組成物）、ＭＨＣ多量体を含む組成物、キットまたは製造品の有用性は、本明細書中に記載される任意の特定の実施形態に決して限定されないが、これらの試薬が使用され得る例示的な方法を、下記に提供する。
【０２８８】
免疫応答を誘導するための方法
本開示は、被験体において免疫応答を誘導するための種々の方法も特徴とする。被験体において免疫応答を誘導するための方法は、本明細書中に記載される任意の１つ以上のペプチドまたは本明細書中に記載される任意の薬学的組成物を被験体に投与する工程を含み得る。免疫応答は、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、ＴＨ１応答、ＴＨ２応答または両方のタイプの応答の組み合わせであり得る。
【０２８９】
上記の任意の方法は、例えば、被験体においてがん（例えば、形質細胞障害、例えば、多発性骨髄腫もしくはワルデンシュトレームマクログロブリン血症、またはＸＢＰ１、ＣＤ１３８もしくはＣＳ１を発現している他の任意のがん）を処置するためまたは防止するため（がんに対する予防）の方法でもあり得る。用語「防止する（ｐｒｅｖｅｎｔ）」、「防止する（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」または「防止」は、所与の状態に対する所与の処置に関連して本明細書中で使用される場合、それらは、処置された被験体が、臨床的に観察可能なレベルの状態をまったく発症しないこと（例えば、その被験体は、その状態の１つ以上の症状を示さないか、またはがんの場合、その被験体は、検出可能なレベルのがんを発症しないこと）を意味する。
【０２９０】
本明細書中で使用される場合、障害、例えば、がんを有する被験体を「処置する（ｔｒｅａｔ）」、「処置」または「処置する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」という用語は、所与の障害に対する所与の処置に関連して使用され、ここで、その障害の少なくとも１つの症状は、治療されるか、治癒するか、緩和されるか、軽減されるか、変化するか、治されるか、回復するか、または改善される。処置には、その障害またはその障害の症状を緩和するか、軽減するか、変化させるか、治すか、回復させるか、改善するか、またはそれに影響するのに有効な量の組成物の投与が含まれる。処置は、障害の症状の増悪もしくは悪化を阻害し得るか、または処置がない場合よりも、被験体においてよりゆっくりおよび／もしくはより低い程度に状態（例えば、被験体においてより少ない症状またはより少ない数のがん細胞）を発症させ得る。例えば、処置とは、その状態の間に、例えば、その状態（進行がん）の所与の兆候をもたらすと予想されたがんの早期診断（例えば、被験体由来のサンプルにおけるいくつかのがん細胞の検出）の間に、処置が与えられ、そうでない場合に予想されるよりもその状態のより少ないおよび／またはより軽度の症状を被験体が経験する場合、その状態を「処置した」と言われるだろう。処置とは、被験体が、がん（例えば、形質細胞障害、例えば、多発性骨髄腫またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症）の単なる軽度の明らかな症状を示す場合、そのがんを「処置」し得る。
【０２９１】
ある実施形態において、がんは、本明細書中に記載されるがんである。例えば、そのがんは、膀胱がん（進行性膀胱がんおよび転移性膀胱がんを含む）、乳がん（例えば、エストロゲンレセプター陽性乳がん、エストロゲンレセプター陰性乳がん、ＨＥＲ−２陽性乳がん、ＨＥＲ−２陰性乳がん、トリプルネガティブ乳がん、炎症性乳がん）、結腸がん（結腸直腸がんを含む）、腎臓がん（例えば、腎細胞癌（例えば、乳頭状腎細胞癌、明細胞癌、嫌色素性癌））、肝臓がん、肺がん（小細胞肺がんおよび非小細胞肺がん（腺癌、扁平上皮癌、気管支肺胞癌および大細胞癌を含む）を含む）、泌尿生殖器がん、例えば、卵巣がん（卵管がん、子宮内膜がんおよび腹膜がんを含む）、子宮頸がん、前立腺がんおよび精巣がん、リンパ系のがん、直腸がん、喉頭がん、膵がん（膵外分泌癌を含む）、胃がん（例えば、胃食道がん、胃上部がんまたは胃下部がん）、消化器がん（例えば、肛門がんまたは胆管がん）、胆嚢がん、甲状腺がん、白血病（例えば、急性骨髄性白血病）、神経細胞がんおよびグリア細胞がん（例えば、多形神経膠芽腫）ならびに頭頸部がん（例えば、鼻咽頭がん）であり得る。
【０２９２】
一般に、被験体に送達されるペプチド（複数可）は、薬学的に許容され得るキャリア（例えば、生理食塩水）に懸濁され、経口的に、直腸に、または非経口的に投与され、例えば、静脈内に、皮下に、筋肉内に、髄腔内に、腹腔内に、直腸内に、膣内に、鼻腔内に、胃内に、気管内に、または肺内に注射される（下記を参照のこと）。
【０２９３】
投与は、薬学的組成物の定期的なボーラス注射による投与であり得るか、または外部のリザーバー（例えば、ＩＶバッグ）もしくは内部のリザーバー（例えば、生体分解可能な（ｂｉｏｅｒｏｄａｂｌｅ）インプラント、生体人工器官、または埋め込まれた試薬産生細胞のコロニー）からの静脈内投与もしくは腹腔内投与による、途切れないかもしくは連続的なものであり得る。例えば、米国特許第４，４０７，９５７号、同第５，７９８，１１３号および同第５，８００，８２８号（各々はその全体が、参照により本明細書中に援用される）を参照のこと。
【０２９４】
一般に、必要とされるペプチドまたは核酸の投与量は、投与経路の選択；製剤の性質；被験体の疾病の性質または重症度；被験体の免疫状態；被験体のサイズ、体重、表面積、年齢および性別；投与されている他の薬物；ならびに担当の医療専門家の判断に依存する。
【０２９５】
免疫応答を誘導するためのペプチドの好適な投与量は、被験体１ｋｇあたり０．０００００１〜１０ｍｇの試薬または抗原性／免疫原性組成物の範囲内である。必要とされる投与量の広範な変動は、試薬の多様性および様々な投与経路の異なる効率を考慮して予想されるべきである。例えば、経鼻投与または直腸投与は、静脈内注射による投与よりも多い投与量を必要とし得る。これらの投与量のレベルの変動は、当該分野において十分に理解されているような、最適化するための標準的で経験的なルーチンを用いて調整され得る。投与は、単回または複数回（例えば、２、３、４、６、８、１０、２０、５０、１００、１５０倍またはそれ以上）であり得る。例えば、ペプチド（複数可）は、初回免疫として投与され得、次いで、その後、追加免疫として１回以上投与され得る。
【０２９６】
治療効果（例えば、被験体において免疫応答を誘導する１つ以上のペプチドまたはそれらのペプチドをコードする核酸の有効性）を最適化するために、それらのペプチドまたは核酸を含む組成物は、まず、種々の投薬レジメンで投与され得る。単位用量およびレジメンは、例えば、哺乳動物の種、その免疫状態、哺乳動物の体重を含む因子に依存する。
【０２９７】
薬学的組成物（例えば、本明細書中に記載される薬学的組成物）に対する投薬頻度は、医療従事者（例えば、医師または看護師）の技能および臨床上の判断の範囲内である。典型的には、投与レジメンは、最適な投与パラメータを確立し得る臨床試験によって確立される。しかしながら、その従事者が、被験体の年齢、健康状態、体重、性別および医学的状態に従って、そのような投与レジメンを変更してもよい。
【０２９８】
いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、少なくとも２回（例えば、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１５または２０回以上）、被験体に投与され得る。例えば、薬学的組成物は、３ヶ月間にわたって１ヶ月に１回；１ヶ月間にわたって１週間に１回；１週間おきに、３年間にわたって１年に１回、５年間にわたって１年に１回；５年に１回；１０年に１回；または生涯にわたって３年に１回、被験体に投与され得る。
【０２９９】
いくつかの実施形態において、試薬は、免疫調節因子（ｉｍｍｕｎｅ  ｍｏｄｕｌａｔｏｒ）（例えば、Ｔｏｌｌレセプターリガンドまたはアジュバント（下記を参照のこと））とともに、投与され得る。
【０３００】
本明細書中で定義されるように、ペプチドまたはペプチドをコードする核酸の「治療有効量」は、処置される被験体において免疫応答をもたらすことができる、ペプチドまたは核酸の量である。ペプチドの治療有効量（すなわち、有効投与量）は、被験体の体重またはサンプルの重量１キログラムあたりのミリグラム、マイクログラム、ナノグラムまたはピコグラムの量の試薬を含む（例えば、１キログラムあたり約１ナノグラム〜１キログラムあたり約５００マイクログラム、１キログラムあたり約１マイクログラム〜１キログラムあたり約５００ミリグラム、１キログラムあたり約１００マイクログラム〜１キログラムあたり約５ミリグラムまたは１キログラムあたり約１マイクログラム〜１キログラムあたり約５０マイクログラム）。核酸の治療有効量もまた、被験体の体重またはサンプルの重量１キログラムあたりのマイクログラム、ナノグラムまたはピコグラムの量の試薬を含む（例えば、１キログラムあたり約１ナノグラム〜１キログラムあたり約５００マイクログラム、１キログラムあたり約１マイクログラム〜１キログラムあたり約５００マイクログラム、１キログラムあたり約１００マイクログラム〜１キログラムあたり約５００マイクログラムまたは１キログラムあたり約１マイクログラム〜１キログラムあたり約５０マイクログラム）。
【０３０１】
本明細書中で定義されるように、ペプチドまたはペプチドをコードする核酸の「予防有効量」は、処置される被験体においてがん細胞（例えば、乳がん細胞、結腸がん細胞、膵がん細胞、前立腺がん細胞、多発性骨髄腫細胞またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症細胞）に対する免疫応答をもたらすことができる、ペプチドまたは核酸の量であり、その免疫応答は、被験体においてがんの発症を防止することができるか、または被験体ががんを発症するもしくは発症を継続する確率を実質的に減少させることができる（上記を参照のこと）。ペプチドの予防有効量（すなわち、有効投与量）は、被験体の体重またはサンプルの重量１キログラムあたりのミリグラム、マイクログラム、ナノグラムまたはピコグラムの量の試薬を含む（例えば、１キログラムあたり約１ナノグラム〜１キログラムあたり約５００マイクログラム、１キログラムあたり約１マイクログラム〜１キログラムあたり約５００ミリグラム、１キログラムあたり約１００マイクログラム〜１キログラムあたり約５ミリグラムまたは１キログラムあたり約１マイクログラム〜１キログラムあたり約５０マイクログラム）。核酸の予防有効量もまた、被験体の体重またはサンプルの重量１キログラムあたりのマイクログラム、ナノグラムまたはピコグラムの量の試薬を含む（例えば、１キログラムあたり約１ナノグラム〜１キログラムあたり約５００マイクログラム、１キログラムあたり約１マイクログラム〜１キログラムあたり約５００マイクログラム、１キログラムあたり約１００マイクログラム〜１キログラムあたり約５００マイクログラムまたは１キログラムあたり約１マイクログラム〜１キログラムあたり約５０マイクログラム）。
【０３０２】
被験体は、抗原に対して免疫応答できる任意の動物（例えば、哺乳動物、例えば、ヒト（例えば、ヒト患者）または非ヒト霊長類（例えば、チンパンジー、ヒヒまたはサル）、マウス、ラット、ウサギ、モルモット、スナネズミ、ハムスター、ウマ、家畜の一種（例えば、ウシ、ブタ、ヒツジまたはヤギ）、イヌ、ネコまたはクジラであるがこれらに限定されない）であり得る。被験体は、がん（例えば、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、またはＸＢＰ１、ＣＤ１３８もしくはＣＳ−１を発現している他の任意のタイプのがん（例えば、肺がん、肝臓がん、胆管がん、胃がん、子宮頸がん、鼻咽頭がん、乳がん、結腸がん、膵がん、白血病、例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬ））を有するか、有していると疑われるか、または発症するリスクがある被験体であり得る。被験体は、がん、例えば、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病、例えば、ＡＭＬもしくはＣＭＬ、多発性骨髄腫またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症から寛解している被験体であり得る。
【０３０３】
上記方法は、１つ以上のペプチド（または核酸）を被験体に投与する前に、被験体のがん（例えば、肺がん、肝臓がん、胆管がん、胃がん、子宮頸がん、鼻咽頭がん、乳がん、結腸がん、膵（ｐａｎｃｒｅａｃｔｉｃ）がん、前立腺がん、白血病または形質細胞障害、例えば、多発性骨髄腫もしくはワルデンシュトレームマクログロブリン血症）の１つ以上のがん細胞が、ＸＢＰ１、ＣＤ１３８またはＣＳ−１を発現しているかを決定する工程も含み得る。これらのタンパク質の発現は、ｍＲＮＡとタンパク質の両方の発現を含む。細胞におけるタンパク質およびｍＲＮＡの発現を検出するための方法は、当該分野で公知であり、それらとしては、例えば、タンパク質を検出するための、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、ウエスタンブロッティングおよびドットブロッティング法または免疫組織化学法、ならびにｍＲＮＡを検出するための、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）またはノーザンブロッティング法が挙げられる（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、前出を参照のこと）。
【０３０４】
上記ペプチドまたは組成物は、他の公知の治療と組み合わせて使用され得る。「組み合わせて」投与されるとは、本明細書中で使用される場合、２つ（またはそれ以上）の異なる処置が、その障害による被験体の苦痛の経過の間に被験体に送達されること、例えば、被験体がその障害と診断された後、かつその障害が治療されるかもしくは排除される前または処置が他の理由により中断される前に、その２つ以上の処置が送達されることを意味する。いくつかの実施形態において、１つの処置の送達は、第２の処置の送達が始まるときになおも行われており、その結果投与に関して重複が存在する。これは、時折、「同時」または「併用送達」と本明細書中で称される。他の実施形態において、１つの処置の送達は、他方の処置の送達が始まる前に終了する。いずれかの場合のいくつかの実施形態において、処置は、併用投与に起因して、より効果的である。例えば、第２の処置が、より効果的であり、例えば、より少ない第２の処置で、等価な効果が見られるか、または第２の処置は、第２の処置を第１の処置の非存在下において投与した場合に見られるであろう程度よりも大きく症状を減少させるか、または第１の処置と類似の状況が見られる。いくつかの実施形態において、送達は、症状の減少、またはその障害に関する他のパラメータが、一方の処置が他方の非存在下において送達されたときに観察されるであろうものよりも大きいような送達である。２つの処置の効果は、部分的に相加的であるか、完全に相加的であるか、または相加的より大きい可能性がある。送達は、送達される第１の処置の効果が、第２の処置が送達されるときになおも検出可能であるような送達であり得る。
【０３０５】
さらなる処置は、例えば、手術、１つ以上の化学療法剤、１つ以上の形態の電離放射線および／または１つ以上の免疫調節剤であり得る。
【０３０６】
１つ以上の形態の電離放射線は、ガンマ線照射、Ｘ線照射またはベータ線照射であり得る。
【０３０７】
化学療法剤の例示的なクラスとしては、例えば、以下が挙げられる：
アルキル化剤（ナイトロジェンマスタード、エチレンイミン誘導体、スルホン酸アルキル、ニトロソ尿素およびトリアゼンを含むが、これらに限定されない）：ウラシルマスタード（Ａｍｉｎｏｕｒａｃｉｌ  Ｍｕｓｔａｒｄ（登録商標）、Ｃｈｌｏｒｅｔｈａｍｉｎａｃｉｌ（登録商標）、Ｄｅｍｅｔｈｙｌｄｏｐａｎ（登録商標）、Ｄｅｓｍｅｔｈｙｌｄｏｐａｎ（登録商標）、Ｈａｅｍａｎｔｈａｍｉｎｅ（登録商標）、Ｎｏｒｄｏｐａｎ（登録商標）、Ｕｒａｃｉｌ  ｎｉｔｒｏｇｅｎ  ｍｕｓｔａｒｄ（登録商標）、Ｕｒａｃｉｌｌｏｓｔ（登録商標）、Ｕｒａｃｉｌｍｏｓｔａｚａ（登録商標）、Ｕｒａｍｕｓｔｉｎ（登録商標）、Ｕｒａｍｕｓｔｉｎｅ（登録商標））、クロルメチン（Ｍｕｓｔａｒｇｅｎ（登録商標））、シクロホスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標）、Ｎｅｏｓａｒ（登録商標）、Ｃｌａｆｅｎ（登録商標）、Ｅｎｄｏｘａｎ（登録商標）、Ｐｒｏｃｙｔｏｘ（登録商標）、Ｒｅｖｉｍｍｕｎｅ（商標））、イホスファミド（Ｍｉｔｏｘａｎａ（登録商標））、メルファラン（Ａｌｋｅｒａｎ（登録商標））、クロラムブシル（Ｌｅｕｋｅｒａｎ（登録商標））、ピポブロマン（Ａｍｅｄｅｌ（登録商標）、Ｖｅｒｃｙｔｅ（登録商標））、トリエチレンメラミン（Ｈｅｍｅｌ（登録商標）、Ｈｅｘａｌｅｎ（登録商標）、Ｈｅｘａｓｔａｔ（登録商標））、トリエチレンチオホスホルアミン、テモゾロミド（Ｔｅｍｏｄａｒ（登録商標））、チオテパ（Ｔｈｉｏｐｌｅｘ（登録商標））、ブスルファン（Ｂｕｓｉｌｖｅｘ（登録商標）、Ｍｙｌｅｒａｎ（登録商標））、カルムスチン（ＢｉＣＮＵ（登録商標））、ロムスチン（ＣｅｅＮＵ（登録商標））、ストレプトゾシン（Ｚａｎｏｓａｒ（登録商標））およびダカルバジン（ＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（登録商標））。
【０３０８】
抗ＥＧＦＲ抗体（例えば、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））およびパニツムマブ（Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（登録商標））。
【０３０９】
抗ＨＥＲ−２抗体（例えば、トラスツズマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標））。
【０３１０】
代謝拮抗物質（葉酸アンタゴニスト（本明細書中では抗葉酸剤とも称される）、ピリミジンアナログ、プリンアナログおよびアデノシンデアミナーゼ阻害剤を含むが、これらに限定されない）：メトトレキサート（Ｒｈｅｕｍａｔｒｅｘ（登録商標）、Ｔｒｅｘａｌｌ（登録商標））、５−フルオロウラシル（Ａｄｒｕｃｉｌ（登録商標）、Ｅｆｕｄｅｘ（登録商標）、Ｆｌｕｏｒｏｐｌｅｘ（登録商標））、フロクスウリジン（ＦＵＤＦ（登録商標））、シタラビン（Ｃｙｔｏｓａｒ−Ｕ（登録商標）、Ｔａｒａｂｉｎｅ  ＰＦＳ）、６−メルカプトプリン（Ｐｕｒｉ−Ｎｅｔｈｏｌ（登録商標）））、６−チオグアニン（Ｔｈｉｏｇｕａｎｉｎｅ  Ｔａｂｌｏｉｄ（登録商標））、リン酸フルダラビン（Ｆｌｕｄａｒａ（登録商標））、ペントスタチン（Ｎｉｐｅｎｔ（登録商標））、ペメトレキセド（Ａｌｉｍｔａ（登録商標））、ラルチトレキセド（ｒａｌｔｉｔｒｅｘｅｄ）（Ｔｏｍｕｄｅｘ（登録商標））、クラドリビン（Ｌｅｕｓｔａｔｉｎ（登録商標））、クロファラビン（ｃｌｏｆａｒａｂｉｎｅ）（Ｃｌｏｆａｒｅｘ（登録商標）、Ｃｌｏｌａｒ（登録商標））、メルカプトプリン（Ｐｕｒｉ−Ｎｅｔｈｏｌ（登録商標））、カペシタビン（Ｘｅｌｏｄａ（登録商標））、ネララビン（Ａｒｒａｎｏｎ（登録商標））、アザシチジン（Ｖｉｄａｚａ（登録商標））およびゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（登録商標））。好ましい代謝拮抗物質としては、例えば、５−フルオロウラシル（Ａｄｒｕｃｉｌ（登録商標）、Ｅｆｕｄｅｘ（登録商標）、Ｆｌｕｏｒｏｐｌｅｘ（登録商標））、フロクスウリジン（ＦＵＤＦ（登録商標））、カペシタビン（Ｘｅｌｏｄａ（登録商標））、ペメトレキセド（Ａｌｉｍｔａ（登録商標））、ラルチトレキセド（Ｔｏｍｕｄｅｘ（登録商標））およびゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（登録商標））が挙げられる。
【０３１１】
ビンカアルカロイド：ビンブラスチン（Ｖｅｌｂａｎ（登録商標）、Ｖｅｌｓａｒ（登録商標））、ビンクリスチン（Ｖｉｎｃａｓａｒ（登録商標）、Ｏｎｃｏｖｉｎ（登録商標））、ビンデシン（Ｅｌｄｉｓｉｎｅ（登録商標））、ビノレルビン（Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（登録商標））。
【０３１２】
白金ベースの薬剤：カルボプラチン（Ｐａｒａｐｌａｔ（登録商標）、Ｐａｒａｐｌａｔｉｎ（登録商標））、シスプラチン（Ｐｌａｔｉｎｏｌ（登録商標））、オキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標））。
【０３１３】
アントラサイクリン：ダウノルビシン（Ｃｅｒｕｂｉｄｉｎｅ（登録商標）、Ｒｕｂｉｄｏｍｙｃｉｎ（登録商標））、ドキソルビシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標））、エピルビシン（Ｅｌｌｅｎｃｅ（登録商標））、イダルビシン（Ｉｄａｍｙｃｉｎ（登録商標））、ミトキサントロン（Ｎｏｖａｎｔｒｏｎｅ（登録商標））、バルルビシン（Ｖａｌｓｔａｒ（登録商標））。好ましいアントラサイクリンとしては、ダウノルビシン（Ｃｅｒｕｂｉｄｉｎｅ（登録商標）、Ｒｕｂｉｄｏｍｙｃｉｎ（登録商標））およびドキソルビシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標））が挙げられる。
【０３１４】
トポイソメラーゼ阻害剤：トポテカン（Ｈｙｃａｍｔｉｎ（登録商標））、イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ（登録商標））、エトポシド（Ｔｏｐｏｓａｒ（登録商標）、ＶｅＰｅｓｉｄ（登録商標））、テニポシド（Ｖｕｍｏｎ（登録商標））、ラメラリン（ｌａｍｅｌｌａｒｉｎ）Ｄ、ＳＮ−３８、カンプトテシン。
【０３１５】
タキサン：パクリタキセル（Ｔａｘｏｌ（登録商標））、ドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標））、ラロタキセル（ｌａｒｏｔａｘｅｌ）、カバジタキセル（ｃａｂａｚｉｔａｘｅｌ）。
【０３１６】
エポチロン：イクサベピロン（ｉｘａｂｅｐｉｌｏｎｅ）、エポチロンＢ、エポチロンＤ、ＢＭＳ３１０７０５、デヒデロン（ｄｅｈｙｄｅｌｏｎｅ）、ＺＫ−エポチロン（ＺＫ−ＥＰＯ）。
【０３１７】
ポリＡＤＰ−リボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害剤：（例えば、ＢＳＩ２０１、Ｏｌａｐａｒｉｂ（ＡＺＤ−２２８１）、ＡＢＴ−８８８、ＡＧ０１４６９９、ＣＥＰ９７２２、ＭＫ４８２７、ＫＵ−００５９４３６（ＡＺＤ２２８１）、ＬＴ−６７３、３−アミノベンズアミド）。
【０３１８】
抗生物質：アクチノマイシン（Ｃｏｓｍｅｇｅｎ（登録商標））、ブレオマイシン（Ｂｌｅｎｏｘａｎｅ（登録商標））、ヒドロキシ尿素（Ｄｒｏｘｉａ（登録商標）、Ｈｙｄｒｅａ（登録商標））、マイトマイシン（Ｍｉｔｏｚｙｔｒｅｘ（登録商標）、Ｍｕｔａｍｙｃｉｎ（登録商標））。
【０３１９】
免疫調節物質：レナリドマイド（Ｒｅｖｌｉｍｉｄ（登録商標））、サリドマイド（Ｔｈａｌｏｍｉｄ（登録商標））。
【０３２０】
免疫細胞抗体：アレムツズマブ（ａｌｅｍｔｕｚａｍａｄ）（Ｃａｍｐａｔｈ（登録商標））、ゲムツズマブ（Ｍｙｅｌｏｔａｒｇ（登録商標））、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標））、トシツモマブ（Ｂｅｘｘａｒ（登録商標））。
【０３２１】
インターフェロン（例えば、ＩＦＮ−アルファ（Ａｌｆｅｒｏｎ（登録商標）、Ｒｏｆｅｒｏｎ−Ａ（登録商標）、Ｉｎｔｒｏｎ（登録商標）−Ａ）またはＩＦＮ−ガンマ（Ａｃｔｉｍｍｕｎｅ（登録商標）））。
【０３２２】
インターロイキン：ＩＬ−１、ＩＬ−２（Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標））、ＩＬ−２４、ＩＬ−６（Ｓｉｇｏｓｉｘ（登録商標））、ＩＬ−１２。
【０３２３】
ＨＳＰ９０阻害剤（例えば、ゲルダナマイシン（ｇｅｌｄａｎａｍｙｃｉｎ）またはその任意の誘導体）。ある特定の実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤は、ゲルダナマイシン、１７−アルキルアミノ−１７−デスメトキシゲルダナマイシン（「１７−ＡＡＧ」）または１７−（２−ジメチルアミノエチル）アミノ−１７−デスメトキシゲルダナマイシン（「１７−ＤＭＡＧ」）から選択される。
【０３２４】
血管新生阻害剤（Ａ６（Ａｎｇｓｔｒｏｍ  Ｐｈａｒｍａｃｕｅｔｉｃａｌｓ）、ＡＢＴ−５１０（Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、ＡＢＴ−６２７（Ａｔｒａｓｅｎｔａｎ）（Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ／Ｘｉｎｌａｙ）、ＡＢＴ−８６９（Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、Ａｃｔｉｍｉｄ（ＣＣ４０４７、Ｐｏｍａｌｉｄｏｍｉｄｅ）（Ｃｅｌｇｅｎｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ＡｄＧＶＰＥＤＦ．１１Ｄ（ＧｅｎＶｅｃ）、ＡＤＨ−１（Ｅｘｈｅｒｉｎ）（Ａｄｈｅｒｅｘ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ＡＥＥ７８８（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＡＧ−０１３７３６（Ａｘｉｔｉｎｉｂ）（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＡＧ３３４０（Ｐｒｉｎｏｍａｓｔａｔ）（Ａｇｏｕｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＡＧＸ１０５３（ＡｎｇｉｏＧｅｎｅｘ）、ＡＧＸ５１（ＡｎｇｉｏＧｅｎｅｘ）、ＡＬＮ−ＶＳＰ（ＡＬＮ−ＶＳＰ  Ｏ２）（Ａｌｎｙｌａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＡＭＧ３８６（Ａｍｇｅｎ）、ＡＭＧ７０６（Ａｍｇｅｎ）、Ａｐａｔｉｎｉｂ（ＹＮ９６８Ｄ１）（Ｊｉａｎｇｓｕ  Ｈｅｎｇｒｕｉ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、ＡＰ２３５７３（Ｒｉｄａｆｏｒｏｌｉｍｕｓ／ＭＫ８６６９）（Ａｒｉａｄ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＡＱ４Ｎ（Ｎｏｖａｖｅａ）、ＡＲＱ１９７（ＡｒＱｕｌｅ）、ＡＳＡ４０４（Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ａｎｔｉｓｏｍａ）、Ａｔｉｐｒｉｍｏｄ（Ｃａｌｌｉｓｔｏ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＡＴＮ−１６１（Ａｔｔｅｎｕｏｎ）、ＡＶ−４１２（Ａｖｅｏ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＡＶ−９５１（Ａｖｅｏ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、Ａｖａｓｔｉｎ（Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、ＡＺＤ２１７１（Ｃｅｄｉｒａｎｉｂ／Ｒｅｃｅｎｔｉｎ）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ＢＡＹ  ５７−９３５２（Ｔｅｌａｔｉｎｉｂ）（Ｂａｙｅｒ）、ＢＥＺ２３５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＢＩＢＦ１１２０（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＢＩＢＷ２９９２（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＢＭＳ−２７５２９１（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＢＭＳ−５８２６６４（Ｂｒｉｖａｎｉｂ）（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＢＭＳ−６９０５１４（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、Ｃａｌｃｉｔｒｉｏｌ、ＣＣＩ−７７９（Ｔｏｒｉｓｅｌ）（Ｗｙｅｔｈ）、ＣＤＰ−７９１（ＩｍＣｌｏｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）、Ｃｅｆｌａｔｏｎｉｎ（Ｈｏｍｏｈａｒｒｉｎｇｔｏｎｉｎｅ／ＨＨＴ）（ＣｈｅｍＧｅｎｅｘ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、Ｃｅｌｅｂｒｅｘ（Ｃｅｌｅｃｏｘｉｂ）（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＣＥＰ−７０５５（Ｃｅｐｈａｌｏｎ／Ｓａｎｏｆｉ）、ＣＨＩＲ−２６５（Ｃｈｉｒｏｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ＮＧＲ−ＴＮＦ、ＣＯＬ−３（Ｍｅｔａｓｔａｔ）（Ｃｏｌｌａｇｅｎｅｘ  Ｐｈａｒａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、Ｃｏｍｂｒｅｔａｓｔａｔｉｎ（Ｏｘｉｇｅｎｅ）、ＣＰ−７５１，８７１（Ｆｉｇｉｔｕｍｕｍａｂ）（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＣＰ−５４７，６３２（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＣＳ−７０１７（Ｄａｉｉｃｈｉ  Ｓａｎｋｙｏ  Ｐｈａｒｍａ）、ＣＴ−３２２（Ａｎｇｉｏｃｅｐｔ）（Ａｄｎｅｘｕｓ）、Ｃｕｒｃｕｍｉｎ、Ｄａｌｔｅｐａｒｉｎ（Ｆｒａｇｍｉｎ）（Ｐｆｉｚｅｒ）、Ｄｉｓｕｌｆｉｒａｍ（Ａｎｔａｂｕｓｅ）、Ｅ７８２０（Ｅｉｓａｉ  Ｌｉｍｉｔｅｄ）、Ｅ７０８０（Ｅｉｓａｉ  Ｌｉｍｉｔｅｄ）、ＥＭＤ１２１９７４（Ｃｉｌｅｎｇｉｔｉｄｅ）（ＥＭＤ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＥＮＭＤ−１１９８（ＥｎｔｒｅＭｅｄ）、ＥＮＭＤ−２０７６（ＥｎｔｒｅＭｅｄ）、Ｅｎｄｏｓｔａｒ（Ｓｉｍｃｅｒｅ）、Ｅｒｂｉｔｕｘ（ＩｍＣｌｏｎｅ／Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＥＺＮ−２２０８（Ｅｎｚｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＥＺＮ−２９６８（Ｅｎｚｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＧＣ１００８（Ｇｅｎｚｙｍｅ）、Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ、ＧＳＫ１３６３０８９（Ｆｏｒｅｔｉｎｉｂ）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、ＧＷ７８６０３４（Ｐａｚｏｐａｎｉｂ）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、ＧＴ−１１１（Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｇｅｎｉｃｓ  Ｌｔｄ．）、ＩＭＣ−−１１２１Ｂ（Ｒａｍｕｃｉｒｕｍａｂ）（ＩｍＣｌｏｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）、ＩＭＣ−１８Ｆ１（ＩｍＣｌｏｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）、ＩＭＣ−３Ｇ３（ＩｍＣｌｏｎｅ  ＬＬＣ）、ＩＮＣＢ００７８３９（Ｉｎｃｙｔｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ＩＮＧＮ２４１（Ｉｎｔｒｏｇｅｎ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、Ｉｒｅｓｓａ（ＺＤ１８３９／Ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）、ＬＢＨ５８９（Ｆａｒｉｄａｋ／Ｐａｎｏｂｉｎｏｓｔｓｔ）（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、Ｌｕｃｅｎｔｉｓ（Ｒａｎｉｂｉｚｕｍａｂ）（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＬＹ３１７６１５（Ｅｎｚａｓｔａｕｒｉｎ）（Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、Ｍａｃｕｇｅｎ（Ｐｅｇａｐｔａｎｉｂ）（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＭＥＤＩ５２２（Ａｂｅｇｒｉｎ）（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ）、ＭＬＮ５１８（Ｔａｎｄｕｔｉｎｉｂ）（Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ）、Ｎｅｏｖａｓｔａｔ（ＡＥ９４１／Ｂｅｎｅｆｉｎ）（Ａｅｔｅｒｎａ  Ｚｅｎｔａｒｉｓ）、Ｎｅｘａｖａｒ（Ｂａｙｅｒ／Ｏｎｙｘ）、ＮＭ−３（Ｇｅｎｚｙｍｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、Ｎｏｓｃａｐｉｎｅ（Ｃｏｕｇａｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、ＮＰＩ−２３５８（Ｎｅｒｅｕｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＯＳＩ−９３０（ＯＳＩ）、Ｐａｌｏｍｉｄ５２９（Ｐａｌｏｍａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）、Ｐａｎｚｅｍ  Ｃａｐｓｕｌｅｓ（２ＭＥ２）（ＥｎｔｒｅＭｅｄ）、Ｐａｎｚｅｍ  ＮＣＤ（２ＭＥ２）（ＥｎｔｒｅＭｅｄ）、ＰＦ−０２３４１０６６（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＰＦ−０４５５４８７８（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＰＩ−８８（Ｐｒｏｇｅｎ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ／Ｍｅｄｉｇｅｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、ＰＫＣ４１２（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、Ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｎ  Ｅ（Ｇｒｅｅｎ  Ｔｅａ  Ｅｘｔｒａｃｔ）（Ｐｏｌｙｐｈｅｎｏ  Ｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ）、ＰＰＩ−２４５８（Ｐｒａｅｃｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＰＴＣ２９９（ＰＴＣ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ＰＴＫ７８７（Ｖ���ｔａｌａｎｉｂ）（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＰＸＤ１０１（Ｂｅｌｉｎｏｓｔａｔ）（ＣｕｒａＧｅｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ＲＡＤ００１（Ｅｖｅｒｏｌｉｍｕｓ）（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＲＡＦ２６５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、Ｒｅｇｏｒａｆｅｎｉｂ（ＢＡＹ７３−４５０６）（Ｂａｙｅｒ）、Ｒｅｖｌｉｍｉｄ（Ｃｅｌｇｅｎｅ）、Ｒｅｔａａｎｅ（Ａｌｃｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、ＳＮ３８（Ｌｉｐｏｓｏｍａｌ）（Ｎｅｏｐｈａｒｍ）、ＳＮＳ−０３２（ＢＭＳ−３８７０３２）（Ｓｕｎｅｓｉｓ）、ＳＯＭ２３０（Ｐａｓｉｒｅｏｔｉｄｅ）（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、Ｓｑｕａｌａｍｉｎｅ（Ｇｅｎａｅｒａ）、Ｓｕｒａｍｉｎ、Ｓｕｔｅｎｔ（Ｐｆｉｚｅｒ）、Ｔａｒｃｅｖａ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、ＴＢ−４０３（Ｔｈｒｏｍｂｏｇｅｎｉｃｓ）、Ｔｅｍｐｏｓｔａｔｉｎ（Ｃｏｌｌａｒｄ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、Ｔｅｔｒａｔｈｉｏｍｏｌｙｂｄａｔｅ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、ＴＧ１００８０１（ＴａｒｇｅＧｅｎ）、Ｔｈａｌｉｄｏｍｉｄｅ（Ｃｅｌｇｅｎｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、Ｔｉｎｚａｐａｒｉｎ  Ｓｏｄｉｕｍ、ＴＫＩ２５８（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＴＲＣ０９３（Ｔｒａｃｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ．）、ＶＥＧＦ  Ｔｒａｐ（Ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＶＥＧＦ  Ｔｒａｐ−Ｅｙｅ（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、Ｖｅｇｌｉｎ（ＶａｓＧｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、Ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ（Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ）、ＸＬ１８４（Ｅｘｅｌｉｘｉｓ）、ＸＬ６４７（Ｅｘｅｌｉｘｉｓ）、ＸＬ７８４（Ｅｘｅｌｉｘｉｓ）、ＸＬ８２０（Ｅｘｅｌｉｘｉｓ）、ＸＬ９９９（Ｅｘｅｌｉｘｉｓ）、ＺＤ６４７４（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、Ｖｏｒｉｎｏｓｔａｔ（Ｍｅｒｃｋ）およびＺＳＴＫ４７４を含むが、これらに限定されない）。
【０３２５】
抗アンドロゲン（ニルタミド（Ｎｉｌａｎｄｒｏｎ（登録商標））およびビカルタミド（Ｃａｘｏｄｅｘ（登録商標））を含むが、これらに限定されない）。
【０３２６】
抗エストロゲン（タモキシフェン（Ｎｏｌｖａｄｅｘ（登録商標））、トレミフェン（Ｆａｒｅｓｔｏｎ（登録商標））、レトロゾール（Ｆｅｍａｒａ（登録商標））、テストラクトン（Ｔｅｓｌａｃ（登録商標））、アナストロゾール（Ａｒｉｍｉｄｅｘ（登録商標））、ビカルタミド（Ｃａｓｏｄｅｘ（登録商標））、エキセメスタン（Ａｒｏｍａｓｉｎ（登録商標））、フルタミド（Ｅｕｌｅｘｉｎ（登録商標））、フルベストラント（Ｆａｓｌｏｄｅｘ（登録商標））、ラロキシフェン（Ｅｖｉｓｔａ（登録商標）、Ｋｅｏｘｉｆｅｎｅ（登録商標））およびラロキシフェン塩酸塩を含むが、これらに限定されない）。
【０３２７】
抗高カルシウム血症剤（硝酸ガリウム（ＩＩＩ）水和物（Ｇａｎｉｔｅ（登録商標））およびパミドロン酸二ナトリウム（Ａｒｅｄｉａ（登録商標））を含むが、これらに限定されない）。
【０３２８】
アポトーシス誘導因子（エタノール，２−［［３−（２，３−ジクロロフェノキシ）プロピル］アミノ］−（９Ｃｌ）、ガンボギン酸（ｇａｍｂｏｇｉｃ  ａｃｉｄ）、エンベリンおよび三酸化ヒ素（Ｔｒｉｓｅｎｏｘ（登録商標））を含むが、これらに限定されない）。
【０３２９】
オーロラキナーゼ阻害剤（ビヌクレイン（ｂｉｎｕｃｌｅｉｎｅ）２を含むが、これに限定されない）。
【０３３０】
ブルトン型チロシンキナーゼ阻害剤（テルレ酸（ｔｅｒｒｅｉｃ  ａｃｉｄ）を含むが、これに限定されない）。
【０３３１】
カルシニューリン阻害剤（シペルメトリン、デルタメトリン、フェンバレレートおよびチロホスチン８を含むが、これらに限定されない）。
【０３３２】
ＣａＭキナーゼＩＩ阻害剤（５−イソキノリンスルホン酸、４−［｛２Ｓ）−２−［（５−イソキノリニルスルホニル）メチルアミノ］−３−オキソ−３−｛４−フェニル−１−ピペラジニル）プロピル］フェニルエステルおよびベンゼンスルホンアミドを含むが、これらに限定されない）。
【０３３３】
ＣＤ４５チロシンホスファターゼ阻害剤（ホスホン酸を含むが、これに限定されない）。
【０３３４】
ＣＤＣ２５ホスファターゼ阻害剤（１，４−ナフタレンジオン，２，３−ビス［（２−ヒドロキシエチル）チオ］−（９Ｃｌ）を含むが、これに限定されない）。
【０３３５】
ＣＨＫキナーゼ阻害剤（デブロモヒメニアルジシンを含むが、これに限定されない）。
【０３３６】
シクロオキシゲナーゼ阻害剤（１Ｈ−インドール−３−アセトアミド，１−（４−クロロベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−Ｎ−（２−フェニルエチル）−（９Ｃｌ）、５−アルキル置換２−アリールアミノフェニル酢酸およびその誘導体（例えば、セレコキシブ（Ｃｅｌｅｂｒｅｘ（登録商標））、ロフェコキシブ（Ｖｉｏｘｘ（登録商標））、エトリコキシブ（ｅｔｏｒｉｃｏｘｉｂ）（Ａｒｃｏｘｉａ（登録商標））、ルミラコキシブ（ｌｕｍｉｒａｃｏｘｉｂ）（Ｐｒｅｘｉｇｅ（登録商標））、バルデコキシブ（Ｂｅｘｔｒａ（登録商標））または５−アルキル−２−アリールアミノフェニル酢酸を含むが、これらに限定されない）。
【０３３７】
ｃＲＡＦキナーゼ阻害剤（３−（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシベンジリデン）−５−ヨード−１，３−ジヒドロインドール−２−オンおよびベンズアミド，３−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［３−［（４−ヒドロキシベンゾイル）アミノ］−４−メチルフェニル］−（９Ｃｌ）を含むが、これらに限定されない）。
【０３３８】
サイクリン依存性キナーゼ阻害剤（オロモウシン（ｏｌｏｍｏｕｃｉｎｅ）およびその誘導体、プルバラノールＢ、ロスコビチン（ｒｏａｓｃｏｖｉｔｉｎｅ）（Ｓｅｌｉｃｉｃｌｉｂ（登録商標））、インジルビン、ケンパウロン（ｋｅｎｐａｕｌｌｏｎｅ）、プルバラノールＡおよびインジルビン−３’−モノオキシムを含むが、これらに限定されない）。
【０３３９】
システインプロテアーゼ阻害剤（４−モルホリンカルボキサミド，Ｎ−［（１Ｓ）−３−フルオロ−２−オキソ−１−（２−フェニルエチル）プロピル］アミノ］−２−オキソ−１−（フェニルメチル）エチル］−（９Ｃｌ）を含むが、これに限定されない）。
【０３４０】
ＤＮＡインターカレーター（プリカマイシン（Ｍｉｔｈｒａｃｉｎ（登録商標））およびダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））を含むが、これらに限定されない）。
【０３４１】
ＤＮＡ鎖切断剤（ブレオマイシン（Ｂｌｅｎｏｘａｎｅ（登録商標））を含むが、これに限定されない）。
【０３４２】
Ｅ３リガーゼ阻害剤（Ｎ−（（３，３，３−トリフルオロ−２−トリフルオロメチル）プロピオニル）スルファニルアミドを含むが、これらに限定されない）。
【０３４３】
ＥＧＦ経路阻害剤（チロホスチン４６、ＥＫＢ−５６９、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））、ゲフィチニブ（Ｉｒｅｓｓａ（登録商標））、ラパチニブ（ｌａｐａｔｉｎｉｂ）（Ｔｙｋｅｒｂ（登録商標））ならびにＷＯ９７／０２２６６、ＥＰ０５６４４０９、ＷＯ９９／０３８５４、ＥＰ０５２０７２２、ＥＰ０５６６２２６、ＥＰ０７８７７２２、ＥＰ０８３７０６３、米国特許第５，７４７，４９８号、ＷＯ９８／１０７６７、ＷＯ９７／３００３４、ＷＯ９７／４９６８８、ＷＯ９７／３８９８３およびＷＯ９６／３３９８０に一般的におよび詳細に開示されている化合物を含むが、これらに限定されない）。
【０３４４】
ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤（Ａ−ヒドロキシファルネシルホスホン酸、ブタン酸，２−［（２Ｓ）−２−［［（２Ｓ，３Ｓ）−２−［［（２Ｒ）−２−アミノ−３−メルカプトプロピル］アミノ］−３−メチルペンチル］オキシ］−１−オキソ−３−フェニルプロピル］アミノ］−４−（メチルスルホニル）−１−メチルエチルエステル（２Ｓ）−（９Ｃｌ）およびマニュマイシンＡを含むが、これらに限定されない）。
【０３４５】
Ｆｌｋ−１キナーゼ阻害剤（２−プロペンアミド，２−シアノ−３−［４−ヒドロキシ−３，５−ビス（１−メチルエチル）フェニル］−Ｎ−（３−フェニルプロピル）−（２Ｅ）−（９Ｃｌ）を含むが、これに限定されない）。
【０３４６】
グリコーゲンシンターゼキナーゼ−３（ＧＳＫ３）阻害剤（インジルビン−３’−モノオキシムを含むが、これに限定されない）。
【０３４７】
熱ショックタンパク質９０（Ｈｓｐ９０）シャペロン調節因子（ＡＵＹ９２２、ＳＴＡ−９０９０、ＡＴＩ１３３８７、ＭＣＰ−３１００、ＩＰＩ−５０４、ＩＰＩ−４９３、ＳＮＸ−５４２２、Ｄｅｂｉｏ０９３２、ＨＳＰ９９０、ＤＳ−２２４８、ＰＵ−Ｈ７１、１７−ＤＭＡＧ（Ａｌｖｅｓｐｉｍｙｃｉｎ）およびＸＬ８８８を含むが、これらに限定されない）。
【０３４８】
ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）阻害剤（スベロイルアニリドヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）、［４−（２−アミノ−フェニルカルバモイル）−ベンジル］−カルバミン酸ピリジン−３−イルメチルエステルおよびその誘導体、酪酸、ピロキサミド（ｐｙｒｏｘａｍｉｄｅ）、トリコスタチンＡ、オキサムフラチン（ｏｘａｍｆｌａｔｉｎ）、アピシジン（ａｐｉｃｉｄｉｎ）、デプシペプチド、デプデシン（ｄｅｐｕｄｅｃｉｎ）、トラポキシンならびにＷＯ０２／２２５７７に開示されている化合物を含むが、これらに限定されない）。
【０３４９】
Ｉ−カッパーＢ−アルファキナーゼ阻害剤（ＩＫＫ）（２−プロペンニトリル，３−［（４−メチルフェニル）スルホニル］−（２Ｅ）−（９Ｃｌ）を含むが、これに限定されない）。
【０３５０】
イミダゾテトラジノン（ｉｍｉｄａｚｏｔｅｔｒａｚｉｎｏｎｅ）（テモゾロミド（Ｍｅｔｈａｚｏｌａｓｔｏｎｅ（登録商標）、Ｔｅｍｏｄａｒ（登録商標）およびその誘導体（例えば、米国特許第５，２６０，２９１号に一般的におよび詳細に開示されているような））およびＭｉｔｏｚｏｌｏｍｉｄｅを含むが、これらに限定されない）。
【０３５１】
インスリン様成長因子経路阻害剤（例えば、ＩＧＦ阻害剤またはＩＧＦレセプター（ＩＧＦＲ１またはＩＧＦＲ２）阻害剤としては、小分子阻害剤、例えば、ＯＳＩ−９０６；抗ＩＧＦ抗体または抗ＩＧＦＲ抗体、例えば、ＡＶＥ−１６４２、ＭＫ−０６４６、ＩＭＣ−Ａ１２（シキスツマブ（ｃｉｘｕｔｕｍａｂ））、Ｒ１５０７、ＣＰ−７５１，８７１（Ｆｉｇｉｔｕｍｕｍａｂ）が挙げられるが、これらに限定されない）。
【０３５２】
インスリンチロシンキナーゼ阻害剤（ヒドロキシル−２−ナフタレニルメチルホスホン酸を含むが、これに限定されない）。
【０３５３】
ｃ−Ｊｕｎ−Ｎ末端キナーゼ（ＪＮＫ）阻害剤（ピラゾールアントロン（ｐｙｒａｚｏｌｅａｎｔｈｒｏｎｅ）および没食子酸エピガロカテキンを含むが、これらに限定されない）。
【０３５４】
マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰ）阻害剤（ベンゼンスルホンアミド，Ｎ−［２−［［［３−（４−クロロフェニル）−２−プロペニル］メチル］アミノ］メチル］フェニル］−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−４−メトキシ−（９Ｃｌ）を含むが、これらに限定されない）。
【０３５５】
ＭＤＭ２阻害剤（トランス−４−ヨード、４’−ボラニル−カルコンを含むが、これらに限定されない）。
【０３５６】
ＭＥＫ阻害剤（ブタンジニトリル，ビス［アミノ［２−アミノフェニル）チオ］メチレン］−（９Ｃｌ）を含むが、これに限定されない）。
【０３５７】
ＭＭＰ阻害剤（Ａｃｔｉｎｏｎｉｎ、没食子酸エピガロカテキン、コラーゲンペプチド模倣物および非ペプチド模倣物阻害剤、テトラサイクリン誘導体マリマスタット（ｍａｒｉｍａｓｔａｔ）（Ｍａｒｉｍａｓｔａｔ（登録商標））、プリノマスタット（ｐｒｉｎｏｍａｓｔａｔ）、インサイクリニド（ｉｎｃｙｃｌｉｎｉｄｅ）（Ｍｅｔａｓｔａｔ（登録商標））、サメ軟骨抽出物ＡＥ−９４１（Ｎｅｏｖａｓｔａｔ（登録商標））、Ｔａｎｏｍａｓｔａｔ、ＴＡＡ２１１、ＭＭＩ２７０ＢまたはＡＡＪ９９６を含むが、これらに限定されない）。
【０３５８】
ｍＴｏｒ阻害剤（ラパマイシン（Ｒａｐａｍｕｎｅ（登録商標））ならびにそのアナログおよび誘導体、ＡＰ２３５７３（リダフォロリムス（ｒｉｄａｆｏｒｏｌｉｍｕｓ）、デフォロリムス（ｄｅｆｏｒｏｌｉｍｕｓ）またはＭＫ−８６６９としても知られる）、ＣＣＩ−７７９（テムシロリムスとしても知られる）（Ｔｏｒｉｓｅｌ（登録商標））およびＳＤＺ−ＲＡＤを含むが、これらに限定されない）。
【０３５９】
ＮＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（チロホスチンＡＧ８７９を含むが、これに限定されない）。
【０３６０】
ｐ３８  ＭＡＰキナーゼ阻害剤（フェノール，４−［４−（４−フルオロフェニル）−５−（４−ピリジニル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−（９Ｃｌ）およびベンズアミド，３−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［３−［（４−ヒドロキシルベンゾイル）アミノ］−４−メチルフェニル］−（９Ｃｌ）を含むが、これらに限定されない）。
【０３６１】
ｐ５６チロシンキナーゼ阻害剤（ダムナカンタールおよびチロホスチン４６を含むが、これらに限定されない）。
【０３６２】
ＰＤＧＦ経路阻害剤（チロホスチンＡＧ１２９６、チロホスチン９、１，３−ブタジエン−１，１，３−トリカルボニトリル，２−アミノ−４−（１Ｈ−インドール−５−イル）−（９Ｃｌ）、イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標））およびゲフィチニブ（Ｉｒｅｓｓａ（登録商標））ならびに欧州特許第０５６４４０９号およびＰＣＴ公開番号ＷＯ９９／０３８５４に一般的におよび詳細に開示されている化合物を含むが、これらに限定されない）。
【０３６３】
ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ阻害剤（ワートマニンおよびケルセチン二水和物を含むが、これらに限定されない）。
【０３６４】
ホスファターゼ阻害剤（カンタリジン酸、カンタリジンおよびＬ−ロイシンアミドを含むが、これらに限定されない）。
【０３６５】
ＰＫＣ阻害剤（１−Ｈ−ピロロ−２，５−ジオン，３−［１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−１Ｈ−インドール−３−イル］−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−（９Ｃｌ）、ビスインドリルマレイミドＩＸ、Ｓｐｈｉｎｏｇｏｓｉｎｅ、スタウロスポリンおよびヒペリシンを含むが、これらに限定されない）。
【０３６６】
ＰＫＣデルタキナーゼ阻害剤（ロットレリン（ｒｏｔｔｌｅｒｉｎ）を含むが、これに限定されない）。ポリアミン合成阻害剤（ＤＭＦＯを含むが、これに限定されない）。
【０３６７】
プロテアソーム阻害剤（アクラシノマイシンＡ、グリオトキシンおよびボルテゾミブ（Ｖｅｌｃａｄｅ（登録商標））を含むが、これらに限定されない）。
【０３６８】
タンパク質ホスファターゼ阻害剤（カンタリジン酸、カンタリジン、Ｌ−Ｐ−ブロモテトラミソールオキサレート、２（５Ｈ）−フラノン、４−ヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）−３−（１−オキソヘキサデシル）−（５Ｒ）−（９Ｃｌ）およびベンジルホスホン酸を含むが、これらに限定されない）。
【０３６９】
タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤（チロホスチンＡｇ２１６、チロホスチンＡｇ１２８８、チロホスチンＡｇ１２９５、ゲルダナマイシン、ゲニステインおよび７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン誘導体を含むが、これらに限定されない）；
【０３７０】
ＰＴＰ１Ｂ阻害剤（Ｌ−ロイシンアミドを含むが、これに限定されない）。
【０３７１】
ＳＲＣファミリーチロシンキナーゼ阻害剤（ＰＰ１およびＰＰ２を含むが、これらに限定されない）。
【０３７２】
Ｓｙｋチロシンキナーゼ阻害剤（ピセタノール（ｐｉｃｅａｔａｎｎｏｌ）を含むが、これに限定されない）。
【０３７３】
Ｊａｎｕｓ（ＪＡＫ−２および／またはＪＡＫ−３）チロシンキナーゼ阻害剤（チロホスチンＡＧ４９０および２−ナフチルビニルケトンを含むが、これらに限定されない）。
【０３７４】
レチノイド（イソトレチノイン（Ａｃｃｕｔａｎｅ（登録商標）、Ａｍｎｅｓｔｅｅｍ（登録商標）、Ｃｉｓｔａｎｅ（登録商標）、Ｃｌａｒａｖｉｓ（登録商標）、Ｓｏｔｒｅｔ（登録商標））およびトレチノイン（Ａｂｅｒｅｌ（登録商標）、Ａｋｎｏｔｅｎ（登録商標）、Ａｖｉｔａ（登録商標）、Ｒｅｎｏｖａ（登録商標）、Ｒｅｔｉｎ−Ａ（登録商標）、Ｒｅｔｉｎ−Ａ  ＭＩＣＲＯ（登録商標）、Ｖｅｓａｎｏｉｄ（登録商標））を含むが、これらに限定されない）。
【０３７５】
ＲＮＡポリメラーゼＩＩ伸長阻害剤（５，６−ジクロロ−１−ベータ−Ｄ−リボフラノシルベンゾイミダゾールを含むが、これに限定されない）。
【０３７６】
セリン／トレオニンキナーゼ阻害剤（２−アミノプリンを含むが、これに限定されない）。
【０３７７】
ステロール生合成阻害剤（スクアレンエポキシダーゼおよびＣＹＰ２Ｄ６を含むが、これらに限定されない）。ＶＥＧＦ経路阻害剤（抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブおよび小分子、例えば、スニチニブ（ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ）（Ｓｕｔｅｎｔ（登録商標））、ソラフェニブ（ｓｏｒａｆｉｎｉｂ）（Ｎｅｘａｖａｒ（登録商標））、ＺＤ６４７４（バンデタニブ（ｖａｎｄｅｔａｎｉｂ）としても知られる）（Ｚａｃｔｉｍａ（商標））、ＳＵ６６６８、ＣＰ−５４７６３２、ＡＶ−９５１（チボザニブ（ｔｉｖｏｚａｎｉｂ））およびＡＺＤ２１７１（セジラニブ（ｃｅｄｉｒａｎｉｂ）としても知られる）（Ｒｅｃｅｎｔｉｎ（商標））を含むが、これらに限定されない）。
【０３７８】
例えば、１つ以上の化学療法剤は、シスプラチン、カルボプラチン、プロカルバジン、メクロレタミン、シクロホスファミド、カンプトテシン、アドリアマイシン、イホスファミド、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン（ｂｉｓｕｌｆａｎ）、ニトロソ尿素、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、プリカマイシン、マイトマイシン、エトポシド、ベランピル（ｖｅｒａｍｐｉｌ）、ポドフィロトキシン、タモキシフェン、タキソール、サリドマイド、レナリドマイド、プロテオソーム阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）、ｈｓｐ９０阻害剤（例えば、タネスピマイシン（ｔｅｎｅｓｐｉｎｍｙｃｉｎ））、トランス白金（ｔｒａｎｓｐｌａｔｉｎｕｍ）、５−フルオロウラシル、ビンクリスチン、ビンブラスチン、メトトレキサートまたは上述のいずれかのアナログからなる群より選択され得る。免疫調節剤としては、例えば、種々のケモカインおよびサイトカイン（例えば、インターロイキン２（ＩＬ−２）、顆粒球／マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）およびインターロイキン１２（ＩＬ−１２））が挙げられる。
【０３７９】
１つの実施形態において、さらなる治療は、１つ以上のさらなる免疫原性ペプチド、例えば、ＷＴ１またはその誘導体に由来する１つ以上の免疫原性ペプチドである。例示的なＷＴ１免疫原性ペプチドとしては、ＷＴ１クラス１エピトープ；ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ（配列番号５３８）（ＷＴ１  １２６〜１３４）を含む（またはそれからなる）ペプチド；ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ（配列番号５３９）を含む（またはそれからなる）ペプチド；ＲＳＤＥＬＶＲＨＨＮＭＨＱＲＮＭＴＫＬ（配列番号５４０）（ＷＴ１  ４２７〜４４５）を含む（またはそれからなる）ペプチド；ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ（配列番号５４１）（ＷＴ１  ３３１〜３５２）を含む（またはそれからなる）ペプチド；ＳＧＱＡＲＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ（配列番号５４２）（ＷＴ１  １２２〜１４０）を含む（またはそれからなる）ペプチド；およびＳＧＱＡＹＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ（配列番号５４３）を含む（またはそれからなる）ペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。他のＷＴ１免疫原性ペプチドは、米国特許第７，５９８，２２１号（この内容は、参照により本明細書中に援用される）に記載されている。他の免疫原性ペプチドとしては、ＭＵＣ１由来の免疫原性ペプチド、ｇｐ１００由来の免疫原性ペプチド、ＴＲＰ−２由来の免疫原性ペプチド、ＭＡＧ１由来の免疫原性ペプチド、ＮＹ−ＥＳＯ１由来の免疫原性ペプチド、ＨＥＲ−２由来の免疫原性ペプチド；およびＡＩＭ２由来の免疫原性ペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３８０】
被験体は、がん（例えば、肺がん、肝臓がん、胆管がん、胃がん、子宮頸がん、鼻咽頭がん、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病、多発性骨髄腫またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症）を有し得るか、有していると疑われ得るか、または発症するリスクがあり得る。「がんを有していると疑われる」被験体は、がんの１つ以上の症状を有する被験体である。がんの症状は、当業者に周知であり、通常、それらとしては、疼痛、体重減少、脱力、過度の疲労、摂食困難、食欲不振、慢性咳嗽、息切れの悪化、喀血（ｃｏｕｇｈｉｎｇ  ｕｐ  ｂｌｏｏｄ）、血尿、血便、悪心、嘔吐、腹部膨満、鼓脹、腹水（ｆｌｕｉｄ  ｉｎ  ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ  ｃａｖｉｔｙ）、膣出血、便秘、腹部膨満感、結腸の穿孔、急性腹膜炎（感染、発熱、疼痛）、疼痛、吐血、大量の発汗、発熱、高血圧、貧血、下痢、黄疸、眩暈、悪寒、筋痙攣、嚥下困難などが挙げられるがこれらに限定されない。多発性骨髄腫の症状としては、詳細には、例えば、骨痛（例えば、背部または肋骨）、血液中の高レベルのカルシウム、過度の口渇もしくは排尿、便秘、悪心、食欲不振、錯乱、脚の脱力もしくはしびれ、体重減少または反復性感染症が挙げられる。ワルデンシュトレームマクログロブリン血症を示す症状としては、例えば、脱力、リンパ節の腫れ、重度の疲労、鼻出血、体重減少、神経学的問題が挙げられる。
【０３８１】
本明細書中で使用される場合、「がんを発症するリスクがある」被験体は、がんを発症する素因、すなわち、がんを発症する遺伝的素因を有する（例えば、腫瘍抑制遺伝子における変異（例えば、ＢＲＣＡ１、ｐ５３、ＲＢまたはＡＰＣにおける変異）か、がんをもたらし得る状況に曝されたことがあるか、または現在、がんをもたらし得る状況に影響を受けている）被験体である。したがって、ある被験体が、変異原性または発がん性のレベルのある特定の化合物（例えば、タバコの煙の中の発がん性の化合物、例えば、アクロレイン、４−アミノビフェニル、芳香族アミン、ベンゼン、ベンズ｛ベンザ｝アントラセン、ベンゾ｛ベンザ｝ピレン、ホルムアルデヒド、ヒドラジン、ポロニウム−２１０（ラドン）、ウレタンまたは塩化ビニル）に曝露されたことがある場合、その被験体は、「がんを発症するリスクがある」被験体でもあり得る。その被験体が、例えば、大線量の紫外線もしくはＸ線に曝露されたことがあるか、または腫瘍を引き起こす／腫瘍に関連するウイルス（例えば、パピローマウイルス、エプスタイン・バーウイルス、Ｂ型肝炎ウイルスまたはヒトＴ細胞白血病リンパ腫ウイルス）に曝露された（例えば、感染した）ことがある場合、その被験体は、「がんを発症するリスクがあり」得る。さらに、ある被験体が、炎症（例えば、慢性炎症）に罹患している場合、その被験体は、「がんを発症するリスクがあり」得る。例えば、ある被験体が、意義不明の単クローン性免疫グロブリン血症（ＭＧＵＳ）を有する場合、その被験体は、多発性骨髄腫を発症するリスクがあり得る。被験体は、本明細書中に記載される任意のがん、例えば、膀胱がん（進行性膀胱がんおよび転移性膀胱がんを含む）、乳がん（例えば、エストロゲンレセプター陽性乳がん、エストロゲンレセプター陰性乳がん、ＨＥＲ−２陽性乳がん、ＨＥＲ−２陰性乳がん、トリプルネガティブ乳がん、炎症性乳がん）、結腸がん（結腸直腸がんを含む）、腎臓がん（例えば、腎細胞癌（例えば、乳頭状腎細胞癌、明細胞癌、嫌色素性癌））、肝臓がん、肺がん（小細胞肺がんおよび非小細胞肺がん（腺癌、扁平上皮癌、気管支肺胞癌および大細胞癌を含む）を含む）、泌尿生殖器がん、例えば、卵巣がん（卵管がん、子宮内膜がんおよび腹膜がんを含む）、子宮頸がん、前立腺がんおよび精巣がん、リンパ系のがん、直腸がん、喉頭がん、膵がん（膵外分泌癌を含む）、胃がん（例えば、胃食道がん、胃上部がんまたは胃下部がん）、消化器がん（例えば、肛門がんまたは胆管がん）、胆嚢がん、甲状腺がん、白血病（例えば、急性骨髄性白血病）、神経細胞がんおよびグリア細胞がん（例えば、多形神経膠芽腫）、頭頸部がんまたは多発性骨髄腫を発症するリスクがあり得る。
【０３８２】
多発性骨髄腫は、米国において毎年およそ４５，０００人が罹患している血液のがんである。多発性骨髄腫は、骨髄内での形質細胞の多巣性増殖およびクローン増殖を特徴とし、それは、骨格機能不全、血清単クローン性免疫グロブリン血症、免疫抑制および終末器官続発症（ｅｎｄ−ｏｒｇａｎ  ｓｅｑｕｅｌａｅ）をもたらし得る。くすぶり型多発性骨髄腫（ＳＭＭ）患者は、アクティブ多発性骨髄腫への進行に対して高リスクである。骨髄移植および化学療法を含む処置が、アクティブ多発性骨髄腫を発症する患者を処置するために使用されるが、これらの段階の疾患を有する患者の予後は、不良であることが多い。
【０３８３】
くすぶり型多発性骨髄腫（ＳＭＭ）は、腎機能障害、高カルシウム血症、骨疾患または貧血を伴わない、骨髄における形質細胞の単クローン性増殖、ならびに血液中および／または尿中の単クローン性タンパク質を特徴とする無症候性の形質細胞増殖性障害である。ＳＭＭの診断には、≧３ｇ／ｄＬの血清単クローン性（Ｍ）タンパク質レベルおよび／または＞１０％の骨髄クローン形質細胞（ＢＭＰＣ）、ならびに終末器官の損傷（すなわち、高カルシウム血症、腎機能不全、貧血または骨病変［ＣＲＡＢ］）がないことが必要である。ＳＭＭは、無症候性であるにもかかわらず、症候性多発性骨髄腫（ＭＭ）またはアミロイドーシスへの進行の高リスクに関連する。
【０３８４】
現在、ＳＭＭに対する積極的な処置は存在しない。代わりに、「用心深い」待機アプローチがとられており、症候性の疾患に進行した後に、処置が開始される。ほとんどの患者の場合、進行は、貧血の増大（正常下限未満である２ｇ／ｄＬより低いまたは＜１０ｇ／ｄＬのヘモグロビン）および／または骨格の合併症（骨病変および／またはびまん性骨粗鬆症を含む）によって示される。
【０３８５】
くすぶり型多発性骨髄腫を有する被験体は、多発性骨髄腫の発症に対してリスクがある被験体でもある。くすぶり型多発性骨髄腫は、例えば、被験体の尿中または血液中の、高レベルの単クローン性タンパク質によって決定され得る。さらに、くすぶり型多発性骨髄腫を有する被験体は、骨髄における骨髄腫細胞数の増加を示し得る。現在、ＳＭＭは、新たに診断されたＭＭの全症例のおよそ１５％を占めると推定されている。診断から症候性のＭＭまで進行する時間の中央値は、２〜３年の範囲であり、ＳＭＭから処置を必要とする症候性のＭＭまでに進行する１年間のリスクは、１０％であると推定される。進行のリスクは、１）≧３ｇ／ｄＬという単クローン性タンパク質のレベル；２）ＢＭＰＣ≧１０％；および３）異常な無血清軽鎖（ＦＬＣ）比の存在に左右される。表１に示されるように、進行までの時間の中央値は、これらの予後基準のうちの１つだけを満たす患者（１０年）またはこれらの基準のうちの２つを満たす患者（５．１年）と比べて、これらの基準の３つすべてを満たす患者において著しく短い（１．９年）。同様に、５年までに症候性のＭＭに進行する患者の割合は、これらの基準の１または２つしか満たさない患者（それぞれ２５％および５１％）と比べて、３つすべての予後基準を満たす患者において著しく高い（７６％）。
【表４−１】
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【０３８６】
最近のデータは、関与していない免疫グロブリン（Ｉｇ）アイソタイプのうちの１つまたは２つの減少として定義されるＢＭＰＣの異常な表現型の存在、ならびにＭタンパク質が安定して残存しているかまたは経時的に進行的に悪化しているかを含む、ＳＭＭに対する他の予後基準の重要性を証明している。進行（ｅｖｏｌｖｉｎｇ）ＳＭＭと称される、この後者の場合、血清Ｍタンパク質レベルの進行的上昇を有する患者は、安定したＭタンパク質を有する患者と比べて、進行までの時間（ＴＴＰ）の中央値が、短い（それぞれ１．３年  対  ３．９年）。
【０３８７】
いくつかの実施形態において、上記方法は、本明細書中に記載されるペプチド、核酸または組成物を被験体に投与した後に、その被験体において免疫応答が生じたかを決定する工程も含み得る。被験体において免疫応答が生じたかを決定するための好適な方法は、被験体由来の生物学的サンプル中における、例えば、ペプチドに特異的な抗体の存在を検出するためのイムノアッセイの使用を含む。例えば、ペプチドまたは組成物を被験体に投与した後、生物学的サンプル（例えば、血液サンプル）を、その被験体から得て、そのペプチドに特異的な抗体の存在について試験し得る。免疫応答は、サンプル中の活性化されたＴ細胞の存在または量についてアッセイすることによっても検出され得る。そのようなアッセイとしては、例えば、増殖アッセイ、限界希釈アッセイ、細胞傷害性アッセイ（例えば、リンフォカイン放出アッセイまたは５１Ｃｒ放出アッセイ）（上に記載されたような）が挙げられる。
【０３８８】
いくつかの実施形態において、上記方法は、被験体ががんを有するかを決定する工程も含み得る。そのような決定のための好適な方法は、被験体において検出されるがんのタイプに依存するが、当該分野で公知である。そのような方法は、定性的または定量的であり得る。例えば、医療従事者は、ある被験体が、多発性骨髄腫の２つ以上（例えば、３、４、５または６つ以上）の症状（例えば、本明細書中に記載される症状のいずれか）を示す場合、その被験体が多発性骨髄腫を有すると診断し得る。被験体は、血中カルシウムレベル、白血球細胞数もしくは赤血球細胞数、または被験体の尿中のタンパク質量を測定することによってもまた、多発性骨髄腫を有すると決定され得る。
【０３８９】
エキソビボアプローチ。被験体において免疫応答を誘導するためのエキソビボストラテジーは、被験体から得られた好適なＡＰＣ（例えば、樹状細胞、単球またはマクロファージ）を本明細書中に記載される任意のペプチドまたは組成物と接触させる工程を含み得る。あるいは、それらの細胞を、上記ペプチドの１つ以上をコードする核酸（例えば、発現ベクター）でトランスフェクトし、必要に応じて、それらのペプチドの発現を可能にする時間にわたっておよびそのような条件下で培養し得る。そのトランスフェクション方法は、細胞のタイプおよび細胞にトランスフェクトされる核酸に依存する。（上記の「ペプチドを産生させるための核酸および方法」およびＳａｍｂｒｏｏｋら、前出を参照のこと）。次いで、接触またはトランスフェクションの後、細胞を被験体に戻す。
【０３９０】
上記細胞は、ＭＨＣクラスＩまたはＭＨＣクラスＩＩ分子を発現している広範囲のタイプの任意の細胞であり得る。例えば、それらの細胞としては、骨髄細胞、マクロファージ、単球、樹状細胞、Ｔ細胞（例えば、Ｔヘルパー細胞、ＣＤ４＋細胞、ＣＤ８＋細胞または細胞傷害性Ｔ細胞）またはＢ細胞が挙げられ得る。
【０３９１】
免疫応答を刺激するためのエキソビボ方法は、インビトロにおいてＴ細胞（例えば、被験体から得られたリンパ球の集団中のＴ細胞）を、本明細書中に記載されるペプチドのうちの１つと結合するＭＨＣ分子を発現している抗原提示細胞と、そのＴ細胞を活性化するのに十分な時間にわたって（および条件下において）接触させる工程を含み得る。接触の後、活性化されたＴ細胞を、細胞を得た被験体に再導入する。本明細書中に記載されるペプチドのうちの１つと結合するＭＨＣ分子を発現しているＡＰＣを生成するための方法は、この項において上記されている。
【０３９２】
任意のエキソビボ方法のいくつかの実施形態において、細胞は、被験体以外の同じ種の被験体から得ることができ（同種間）、試薬（または免疫原性／抗原性組成物）と接触され得、被験体に投与され得る。
【０３９３】
被験体において抗体を産生させるための方法
免疫原（例えば、本明細書中に記載される任意の１つ以上のペプチド）に特異的な抗体を産生させる方法は、当該分野で公知であり、下記に詳述される。例えば、本明細書中に記載されるペプチドに特異的な抗体または抗体フラグメントは、免疫化によって、例えば、動物を用いて、またはファージディスプレイなどのインビトロの方法によって、生成され得る。本明細書中に記載されるペプチドの全部または一部は、抗体または抗体フラグメントを生成するために使用され得る。
【０３９４】
あるペプチドを使用して、好適な被験体（例えば、ウサギ、ヤギ、マウス、またはヒトなどの他の哺乳動物）をそのペプチドで免疫することによって、抗体を調製することができる。適切な免疫原性調製物は、例えば、本明細書中に記載される試薬のいずれかを含み得る。その調製物は、アジュバント（例えば、フロイント完全アジュバントもしくはフロイント不完全アジュバント、ミョウバン、ＲＩＢＩまたは同様の免疫賦活性剤）をさらに含み得る。アジュバントには、例えば、コレラ毒素（ＣＴ）、大腸菌易熱性トキシン（ＬＴ）、変異ＣＴ（ＭＣＴ）（Ｙａｍａｍｏｔｏら（１９９７）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８５：１２０３−１２１０）変異体大腸菌易熱性トキシン（ＭＬＴ）（Ｄｉ  Ｔｏｍｍａｓｏら（１９９６）Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ６４：９７４−９７９）、カルボキシメチルセルロース、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸およびポリ−Ｌ−リジン二本鎖ＲＮＡの組み合わせ（例えば、ポリＩＣ−ＬＣ、例えば、ヒルトノール（ｈｉｌｔｏｎｏｌ））、水と油のエマルジョン（例えば、モンタナイド）、ならびにタンパク質（例えば、サイトカイン、補体、ＧＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ）も含まれる。ＭＣＴおよびＭＬＴは、親分子と比べて、アジュバント活性を実質的に損なわずに毒性を実質的に低下させる点変異を含む。免疫原性ペプチド調製物（例えば、本明細書中に記載される試薬のいずれか）で好適な被験体を免疫することにより、ポリクローナル抗ペプチド抗体応答が誘導される。
【０３９５】
本明細書中で使用される抗体という用語は、免疫グロブリン分子および免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な部分（すなわち、ペプチド（例えば、本明細書中に記載されるペプチド）に特異的に結合する抗原結合部位を含む分子）のことを指す。本明細書中に記載されるペプチドに特異的に結合する抗体は、そのペプチドに結合するがサンプル中の他の分子には実質的に結合しない抗体である。免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な部分の例としては、例えば、Ｆ（ａｂ）フラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、または本明細書中に記載される他の任意の抗体フラグメント（下記を参照のこと）が挙げられる。
【０３９６】
抗ペプチド抗体は、モノクローナル抗体、またはポリクローナル抗体の調製物であり得る。モノクローナル抗体という用語は、本明細書中で使用される場合、ペプチドと免疫反応することができるただ１つの種の抗原結合部位を含む抗体分子の集団のことを指す。したがって、モノクローナル抗体組成物は、典型的には、それと免疫反応する特定のペプチドに対して単一の結合親和性を示す。
【０３９７】
ポリクローナル抗ペプチド抗体は、好適な被験体をペプチド免疫原で免疫することによって、上に記載されたように調製され得る。免疫された被験体における抗ペプチド抗体価は、標準的な手法（例えば、固定化されたペプチドを用いる酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ））によって、経時的にモニターされ得る。所望であれば、そのペプチドに対する抗体分子は、哺乳動物（例えば、血液）から単離され、ＩｇＧ画分を得るためにプロテインＡクロマトグラフィーなどの手法によってさらに精製され得る。免疫してから適切な時間が経過した後、例えば、抗ペプチド抗体価が最も高くなるとき、抗体産生細胞を被験体から得て、それを使用することにより、標準的な手法（例えば、Ｋｏｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５）Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５−４９７によって初めて記載されたハイブリドーマ法、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ法（Ｋｏｚｂｏｒら（１９８３）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ  ４：７２）またはＥＢＶ−ハイブリドーマ法（Ｃｏｌｅら（１９８５），Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．，ｐｐ．７７−９６））によってモノクローナル抗体を調製することができる。リンパ球と不死化細胞株とを融合するために使用される多くの周知のプロトコルのいずれかを、抗ペプチドモノクローナル抗体を生成する目的で適用することができる（例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，前出；Ｇａｌｆｒｅら（１９７７）Ｎａｔｕｒｅ  ２６６：５５０５２；Ｒ．Ｈ．Ｋｅｎｎｅｔｈ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｎｅｗ  Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎ  Ｉｎ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｎａｌｙｓｅｓ，Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｒｐ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８０）；およびＬｅｒｎｅｒ（１９８１）Ｙａｌｅ  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．，５４：３８７−４０２（これらの各開示はその全体が、参照により援用される）を参照のこと）。
【０３９８】
モノクローナル抗体を分泌するハイブリドーマを調製する代替法として、ペプチドに結合する免疫グロブリンライブラリーメンバーを単離するために本明細書中に記載されるペプチドを用いて、組換えコンビナトリアル免疫グロブリンライブラリー（例えば、抗体ファージディスプレイライブラリー）をスクリーニングすることによって、モノクローナル抗ペプチド抗体を同定し、単離することができる。
【０３９９】
抗ペプチド抗体（例えば、モノクローナル抗体）は、アフィニティークロマトグラフィーまたは免疫沈降などの手法によって、ペプチドを単離するために使用され得る。さらに、抗ペプチド抗体は、本明細書中に記載されるスクリーニングアッセイにおいてペプチドを検出するために使用され得る。抗体は、必要に応じて、検出可能な標識（例えば、本明細書中に記載される標識のいずれか、または結合対の第１もしくは第２のメンバー（例えば、ストレプトアビジン／ビオチンまたはアビジン／ビオチン）に結合され得る（その第２のメンバーは、検出可能な標識に結合体化され得る）。
【０４００】
標的ペプチド（例えば、本明細書中に記載されるペプチド）に対する非ヒト抗体は、非ヒト宿主（例えば、げっ歯類）においても産生され得、次いで、例えば、米国特許第６，６０２，５０３号、ＥＰ２３９４００、米国特許第５，６９３，７６１号および米国特許第６，４０７，２１３号（これらの各開示はその全体が、参照により援用される）に記載されているようにヒト化され得る。
【０４０１】
治療を選択するための方法
がん（例えば、形質細胞障害、例えば、多発性骨髄腫および／もしくはワルデンシュトレームマクログロブリン血症、またはＸＢＰ１、ＣＤ１３８もしくはＣＳ１が発現されている任意のがん（例えば、肺がん、肝臓がん、胆管がん、胃がん、子宮頸がん、鼻咽頭がん、乳がん、結腸がん、膵がん、白血病、例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬ））または前がん状態（例えば、くすぶり型多発性骨髄腫）を有する被験体に対する治療を選択するための方法は、必要に応じて、被験体のがんの１つ以上の細胞（例えば、形質細胞）がＸＢＰ１を発現しているかを決定する工程；および１つ以上の細胞がＸＢＰ１を発現している場合、その被験体に対する治療として、本明細書中に記載されるペプチドまたは組成物、例えば、本明細書中に記載されるＸＢＰ１ペプチドまたはＸＢＰ１ペプチドを含む組成物を選択する工程を含む。
【０４０２】
がんを有する被験体に対する治療を選択するための方法は、必要に応じて、被験体のがんの１つ以上の細胞（例えば、形質細胞）がＣＤ１３８を発現しているかを決定する工程；および１つ以上の細胞がＣＤ１３８を発現している場合、その被験体に対する治療として、本明細書中に記載されるペプチドまたは組成物、例えば、本明細書中に記載されるＣＤ１３８ペプチドまたはＣＤ１３８ペプチドを含む組成物を選択する工程を含み得る。
【０４０３】
がんを有する被験体に対する治療を選択するための方法は、必要に応じて、被験体のがんの１つ以上の細胞（例えば、形質細胞）がＣＳ−１を発現しているかを決定する工程；および１つ以上の細胞がＣＳ−１を発現している場合、その被験体に対する治療として、本明細書中に記載されるペプチドまたは組成物、例えば、本明細書中に記載されるＣＳ−１ペプチドまたはＣＳ−１ペプチドを含む組成物を選択する工程を含み得る。
【０４０４】
被験体のがんの１つ以上の細胞（例えば、形質細胞）が、ＸＢＰ１、ＣＤ１３８およびＣＳ−１のうちの２つ以上を発現する場合、好適なペプチドの組み合わせが、例えば、本明細書中に記載される組成物を介して、その被験体に送達され得ることが理解される。例えば、被験体のがんの１つ以上の細胞（例えば、形質細胞）が、ＸＢＰ１およびＣＤ１３８を発現していると決定される場合、治療を選択するための方法は、その被験体に対する治療として：本明細書中に記載される、少なくとも１つのＸＢＰ１ペプチドおよび少なくとも１つのＣＤ１３８ペプチド、またはそのようなペプチドを含む組成物を選択する工程を含み得る。
【０４０５】
１つ以上の細胞がＸＢＰ１、ＣＤ１３８またはＣＳ−１を発現しているかを決定するための方法は、当該分野で公知であり、上に記載されている。例えば、被験体から得られた生物学的サンプル（例えば、血液サンプルまたはリンパ節組織サンプル）が、本明細書中に記載される方法によって生成された、ＸＢＰ１、ＣＤ１３８またはＣＳ−１に特異的な抗体を使用して試験されることにより、細胞（または細胞可溶化物）によって発現されたＸＢＰ１、ＣＤ１３８またはＣＳ−１ポリペプチドの存在または量が検出され得る。（例えば、実施例およびＳａｍｂｒｏｏｋら、前出を参照のこと）。ポリペプチドの存在または量について生物学的サンプルをアッセイするための方法としては、例えば、ＥＬＩＳＡ、免疫組織化学、フローサイトメトリー、ウエスタンブロッティングアッセイまたはドットブロッティングアッセイが挙げられる。
【０４０６】
いくつかの実施形態において、本明細書中に記載される任意の方法は、被験体から生物学的サンプルを提供する工程および／または被験体から生物学的サンプルを得る工程も含み得る。本明細書中に記載される方法に適した生物学的サンプルとしては、目的の被検体タンパク質（例えば、ＸＢＰ１、ＣＤ１３８またはＣＳ−１タンパク質）を含む、任意の生体液、細胞、組織またはそれらの画分が挙げられる。生物学的サンプルは、例えば、被験体（例えば、ヒトなどの哺乳動物）から得られた検体であり得るか、またはそのような被験体に由来し得る。例えば、サンプルは、生検によって得られた組織切片、または組織培養において配置されたかもしくは組織培養に適合された細胞であり得る。生物学的サンプルは、細胞を含む生体液（例えば、尿、血液、血漿、血清、唾液、精液、痰、脳脊髄液、涙、粘液または吸引液（例えば、肺または乳頭の吸引液））または紙もしくはポリマー基材上に吸収されたそのようなサンプルでもあり得る。生物学的サンプルは、所望であれば、特定の細胞型を含む画分にさらに分画され得る。例えば、血液サンプルは、血清、または特定のタイプの血液細胞（例えば、赤血球細胞または白血球細胞（白血球））を含む画分に分画され得る。所望であれば、サンプルは、被験体由来のサンプルタイプの組み合わせ、例えば、組織と生体液との組み合わせであり得る。
【０４０７】
生物学的サンプルは、被験体、例えば、がん（例えば、肺がん、肝臓がん、胆管がん、胃がん、子宮頸がん、鼻咽頭がん、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病（例えば、ＡＭＬまたはＣＭＬ）、多発性骨髄腫および／またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症）を有するか、有すると疑われるか、または発症するリスクがある被験体から得ることができる。生物学的サンプルを得るための任意の好適な方法を使用することができるが、例示的な方法としては、例えば、静脈切開、スワブ（例えば、頬側スワブ）、吸引または細針吸引生検の手順が挙げられる。細針吸引しやすい組織の非限定的な例としては、リンパ節、肺、甲状腺、乳房および肝臓が挙げられる。サンプルは、例えば、顕微解剖（例えば、レーザーキャプチャー顕微解剖（ＬＣＭ）またはレーザー顕微解剖（ＬＭＤ））、膀胱洗浄、スメア（ＰＡＰスメア）または管洗浄（ｄｕｃｔａｌ  ｌａｖａｇｅ）によっても回収され得る。
【０４０８】
例えば、上に記載された方法を用いて、被験体においてがん（例えば、肺がん、肝臓がん、胆管がん、胃がん、子宮頸がん、鼻咽頭がん、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、白血病、多発性骨髄腫および／またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症）または前がん状態、例えば、くすぶり型多発性骨髄腫を検出した後、医療従事者（例えば、医師）は、例えば、（ｉ）医薬に対する処方箋を書くこと；（ｉｉ）被験体に医薬を与えること（しかし必ずしも投与ではない）（例えば、患者が医師の診療所にいる間、その患者に対して処方薬のサンプルを手渡すこと）；（ｉｉｉ）提案されるまたは推奨される治療様式（例えば、本明細書中に記載されるペプチドの１つ以上を含む治療）に関する患者とのコミュニケーション（口頭、書面（処方箋以外）または電子的（電子メール、安全なサイトへの電子ポスト（ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  ｐｏｓｔ）））；または（ｉｖ）被験体に対する好適な治療様式を同定し、例えば、患者記録を経由して、他の医療関係者にその情報を流すことによって、その被験体に対する適切な治療様式（例えば、本明細書中に記載されるペプチドの１つ以上を含む治療）を選択することができる。終わりの（ｉｖ）は、例えば、２つ以上の治療または治療薬が、異なる医療従事者によって患者に投与される場合、有用であり得る。
【０４０９】
被験体においてＸＢＰ１、ＣＤ１３８またはＣＳ−１の存在または量を検出した後（上記の方法のいずれかを用いて）；および／または被験体に対する治療を選択した後、医療従事者（例えば、医師）は、その被験体に適切な治療様式を施すことができる。上に詳述されたような本明細書中に記載されるペプチドの１つ以上を含む治療を施すための方法。
【０４１０】
さらに、医療従事者はまた、がんを処置する１つ以上のさらなる治療薬、または抗がん剤の副作用を処置する１つ以上の医薬も選択、処方および／または投与することができる。多発性骨髄腫および／またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症を処置するための好適な化学療法剤としては、例えば、メルファラン、シクロホスファミド、ビンクリスチン、ドキソルビシン、プレドニゾン、デキサメタゾン、プロテオソーム阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）、サリドマイドまたはレナリドマイドが挙げられる。
【０４１１】
抗がん剤の副作用としては、例えば、貧血、消化管の症状（例えば、悪心、嘔吐、下痢）、白血球減少（感染を引き起こし得る、白血球細胞数の減少）、一時的な毛髪脱落または血小板減少（出血を引き起こし得る、血小板数の減少）が挙げられる。したがって、医師は、ビンクリスチンなどの化学療法剤を、抗貧血薬（例えば、エポエチンアルファ（例えば、Ｐｒｏｃｒｉｔ（登録商標）またはＥｐｏｇｅｎ（登録商標）））とともに被験体に処方し得るかまたは投与し得る。
【０４１２】
キットおよび製造品
本開示は、種々のキットも特徴とする。それらのキットは、例えば、１つ以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個以上）の本明細書中に記載される任意のペプチドまたは組成物（または１つ以上のペプチドをコードする核酸配列を含む発現ベクター）；およびそのペプチドまたは組成物を被験体に投与するための指示を含み得る。そのキットは、１つ以上の薬学的に許容され得るキャリアおよび／または１つ以上の免疫刺激剤および／または１つ以上の免疫調節剤を含み得る。免疫刺激剤は、例えば、Ｔヘルパーエピトープ、変更されたペプチドリガンドまたはアジュバントであり得る。１つの実施形態において、免疫刺激剤は、カルボキシメチルセルロース、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸およびポリ−Ｌ−リジン二本鎖ＲＮＡの組み合わせ（例えば、ポリＩＣ−ＬＣ、例えば、ヒルトノール）；水と油のエマルジョン（例えば、モンタナイド）；またはタンパク質（例えば、サイトカイン、補体、ＧＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ）であり得る。１つの実施形態において、免疫調節剤は、タンパク質、例えば、免疫系を活性化する抗体（例えば、抗ＣＴＬＡ４抗体、例えば、イピリムマブまたはトレメリムマブ、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤＬ−１抗体）；小分子アジュバント（例えば、サリドマイドまたはサリドマイド誘導体、例えば、レナリドマイド）である。
【０４１３】
上記キットは、１つ以上の治療薬、診断薬または予防薬も含み得る。その１つ以上の治療薬、診断薬または予防薬としては、（ｉ）炎症反応を調節する薬剤（例えば、アスピリン、インドメタシン、イブプロフェン、ナプロキセン、ステロイド、クロモリンナトリウムまたはテオフィリン）；（ｉｉ）腎臓および／もしくは心臓血管の機能に影響する薬剤（例えば、フロセミド、サイアザイド、アミロライド、スピロノラクトン、カプトプリル、エナラプリル、リシノプリル、ジルチアゼム、ニフェジピン、ベラパミル、ジゴキシン、イソルジル、ドブタミン、リドカイン、キニジン、アデノシン、ジギタリス、メバスタチン、ロバスタチン、シンバスタチンまたはメバロネート）；（ｉｉｉ）消化管機能に影響する薬物（例えば、オメプラゾールまたはスクラルファート）；（ｉｖ）抗生物質（例えば、テトラサイクリン、クリンダマイシン、アンホテリシンＢ、キニン、メチシリン、バンコマイシン、ペニシリンＧ、アモキシシリン、ゲンタマイシン、エリスロマイシン、シプロフロキサシン、ドキシサイクリン、ストレプトマイシン、ゲンタマイシン、トブラマイシン、クロラムフェニコール、イソニアジド、フルコナゾールまたはアマンタジン）；（ｖ）抗がん剤（例えば、シクロホスファミド、メトトレキサート、フルオロウラシル、シタラビン、メルカプトプリン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシンＣ、ヒドロキシ尿素、プレドニゾン、タモキシフェン、シスプラチンまたはダカルバジン（ｄｅｃａｒｂａｚｉｎｅ））；（ｖｉ）免疫調節剤（例えば、インターロイキン、インターフェロン（例えば、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦα）、腫瘍壊死因子ベータ（ＴＮＦβ）、シクロスポリン、ＦＫ５０６、アザチオプリン、ステロイド）；（ｉｘ）血液および／または造血器官に対して作用する薬物（例えば、インターロイキン、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、エリトロポイエチン、ヘパリン、ワルファリンまたはクマリン）；または（ｖｉｉ）ホルモン（例えば、成長ホルモン（ＧＨ）、プロラクチン、黄体形成ホルモン、ＴＳＨ、ＡＣＴＨ、インスリン、ＦＳＨ、ＣＧ、ソマトスタチン、エストロゲン、アンドロゲン、プロゲステロン、性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）、チロキシン、トリヨードチロニン）；ホルモンアンタゴニスト；石灰化および骨代謝に影響する薬剤（例えば、カルシウム、ホスフェート、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、ビタミンＤ、ビスホスホネート、カルシトニン、フッ化物）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０４１４】
容器；およびその容器内に含められた組成物を含む製造品もまた特徴とし、ここで、その組成物は、哺乳動物（例えば、ヒト）において免疫応答を誘導するための活性成分を含み、その活性成分は、１つ以上（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個以上）の本明細書中に記載される任意のペプチドを含み、その容器は、その組成物が、哺乳動物（例えば、本明細書中に記載される哺乳動物のいずれか）において免疫応答を誘導するために使用するためのものであることを示す表示を有する。その表示は、その組成物が、がん、例えば、肺がん、肝臓がん、胆管がん、胃がん、子宮頸がん、鼻咽頭がん、乳がん、結腸がん、膵がん、前立腺がん、多発性骨髄腫、くすぶり型多発性骨髄腫および／またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症を有するか、有すると疑われるか、または発症するリスクがある哺乳動物に投与されるべきであることをさらに示し得る。その製造品の組成物は、乾燥され得るかまたは凍結乾燥され得、乾燥されたまたは凍結乾燥された組成物を可溶化するための、例えば、１つ以上の溶液（および／または指示）を含み得る。
【０４１５】
上記製造品は、哺乳動物（例えば、上に記載されたような）に上記組成物を投与するための指示も含み得る。
【０４１６】
以下の実施例は、本発明を限定するのではなく例証することを意図されている。
【実施例】
【０４１７】
実施例１：材料および方法
細胞株。多発性骨髄腫細胞株：ＭｃＣＡＲ、ＭＭ１ＳおよびＵ２６６は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ；Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）から入手した。ヒト急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞株ＭＬ−２は、Ｄｒ．Ｙ．Ｍａｔｓｕｏ，Ｆｕｊｉｓａｋｉ  Ｃｅｌｌ  Ｃｅｎｔｅｒ，Ｏｋａｙａｍａ，Ｊａｐａｎの厚意により提供された。ＨＬＡ−Ａ２．１分子を発現しているヒトＢ細胞およびＴ細胞ハイブリッドであるＴ２細胞株（Ｚｗｅｅｒｉｎｋら（１９９３）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０（５）：１７６３−７１）は、Ｄｒ．Ｊ．Ｍｏｌｌｄｒｅｍ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｔｅｘａｓ  Ｍ．Ｄ．Ａｎｄｅｒｓｏｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｎｔｅｒ，Ｈｏｕｓｔｏｎ，ＴＸ）によって提供され、抗原提示細胞（ＡＰＣ）の起源として使用した。Ｋ５６２−Ａ＊０２０１細胞は、Ｋａｒｅｎ  Ａｎｄｅｒｓｏｎ（Ｄａｎａ  Ｆａｒｂｅｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）によって提供され、ＣＴＬに対して個々のペプチドを提示する免疫モニタリングアッセイにおいて使用した。ＬｎＣａｐ、ＶＣａｐ、ＭＢ２３１、ＭＣＦ７、ＢＴ４７４、ＬＳ１８０、ＳＷ４８０、ＷｉＤＲｒ、ＯＣＩ、Ｕ９３７、ＨＥＬ、ＵＴ７、ＨＬ６０、Ｎｏｍｏ１およびＴＨＰ１を含む様々ながん細胞をＡＴＣＣから入手した。すべての細胞株を、１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ；ＢｉｏＷｈｉｔｔａｋｅｒ，Ｗａｌｋｅｒｓｖｉｌｌｅ，ＭＤ）、１００ＩＵ／ｍｌのペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ−Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）が補充されたＲＰＭＩ−１６４０培地（Ｇｉｂｃｏ−Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）中で培養した。
【０４１８】
試薬。フィコエリトリン（ＰＥ）に結合体化されたマウス抗ヒトＣＤ８０またはＣＤ８３モノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ（Ｈｉａｌｅｉｇｈａ，ＦＬ）から購入した。ＦＩＴＣ、ＰＥ、ＰｅｒＣＰ、ＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５、ＡＰＣ、Ｐａｃｉｆｉｃ  Ｂｌｕｅ、ＡＰＣ−Ｈ７またはＰＥ−Ｃｙ７に結合体化された、マウス抗ヒトＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＣＲ７、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ６９、ＣＤ１０７α、ＩＦＮ−γおよびＨＬＡ−Ａ２  ｍＡｂは、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ（ＢＤ）／ＰｈａｒｍｉｎｇｅｎまたはＢＤ／Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）から購入した。組換えヒトＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＦＮ−αおよびＴＮＦ−αは、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）から購入し、ＧＭ−ＣＳＦは、Ｉｍｍｕｎｅｘ（Ｓｅａｔｔｌｅ，ＷＡ）から入手した。
【０４１９】
合成ペプチド。インフルエンザウイルスタンパク質マトリックスペプチド５８−６６（ＧＩＬＧＦＶＦＴＬ；配列番号２５）およびＭＡＧＥ−３ペプチド（ＦＬＷＧＰＲＡＬＶ；配列番号２６）を、コントロールＨＬＡ−Ａ２結合ペプチドとして使用した。６つの天然の非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド：ＸＢＰ１１１８−１２６（ＬＬＲＥＫＴＨＧＬ；配列番号１）；ＸＢＰ１１８５−１９３（ＮＩＳＰＷＩＬＡＶ（配列番号２））；ＸＢＰ１１９０−１９８（ＩＬＡＶＬＴＬＱＩ（配列番号３））；ＸＢＰ１１９３−２０１（ＶＬＴＬＱＩＱＳＬ（配列番号４））；ＸＢＰ１１１１−１１９（ＫＬＬＬＥＮＱＬＬ（配列番号５））；ＸＢＰ１９４−１０２（ＲＭＳＥＬＥＱＱＶ（配列番号２７））；ＳＰ  ＸＢＰ１１９７−２０５（ＧＩＬＤＮＬＤＰＶ（配列番号７））、ＳＰ  ＸＢＰ１１９４−２０２（ＩＬＬＧＩＬＤＮＬ（配列番号８））、ＳＰ  ＸＢＰ１３６８−３７６（ＥＬＦＰＱＬＩＳＶ（配列番号９））を含む３つの天然のスプライシング型ＸＢＰ１ペプチド；ヘテロクリティックＸＢＰ１（ＹＩＳＰＷＩＬＡＶ（配列番号６））；およびスプライシング型ヘテロクリティックＸＢＰ１（ＹＩＬＤＮＬＤＰＶ（配列番号２４））；およびＹＬＦＰＱＬＩＳＶ（配列番号１０））ペプチドをデザインし、潜在的なＨＬＡ−Ａ２結合ペプチドとして調べた。本明細書中で使用される場合、「ヘテロクリティック」（例えば、ヘテロクリティックペプチド）とは、対応する野生型ペプチドよりも免疫原性であるペプチドを生成するために、１つ以上のアミノ酸が野生型または元の配列から改変されたペプチドの形態のことを指す。例えば、すぐ上に記載された例示的なヘテロクリティックペプチドにおいて、太字のアミノ酸は、ＸＢＰ１の野生型配列から改変されたアミノ酸を示している。
【０４２０】
４つの天然のＣＤ１３８ペプチド：ＣＤ１３８２５６−２６４（ＶＩＡＧＧＬＶＧＬ（配列番号１１））；ＣＤ１３８２６０−２６８（ＧＬＶＧＬＩＦＡＶ（配列番号１２））；ＣＤ１３８５−１３（ＡＬＷＬＷＬＣＡＬ（配列番号１３））；およびＣＤ１３８７−１５（ＷＬＷＬＣＡＬＡＬ（配列番号１４））をデザインし、潜在的なＨＬＡ−Ａ２結合ペプチドとして調べた。
【０４２１】
４つの天然のＣＳ１ペプチド：ＣＳ１−Ｐ１：ＣＳ１２３６−２４５（ＬＬＬＳＬＦＶＬＧＬ（配列番号１５））；ＣＳ１−Ｐ２：ＣＳ１２３９−２４７（ＳＬＦＶＬＧＬＦＬ（配列番号１６））；ＣＳ１−Ｐ３：ＣＳ１２３２−２４０（ＬＬＶＰＬＬＬＳＬ（配列番号１７））；およびＣＳ１−Ｐ４：ＣＳ１９−１７（ＴＬＩＹＩＬＷＱＬ（配列番号１８））をデザインし（３つの異なるデータベースＲＡＮＫＰＥＰ、ＢＩＭＡＳおよびＮｅｔＭＨＣを使用して）、潜在的なＨＬＡ−Ａ２結合ペプチドとして調べた。（例えば、Ｒｅｃｈｅら（２００２）Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ６３：７１０−７０９を参照のこと）。
【０４２２】
ＸＢＰ−１およびＣＤ１３８ペプチドを、標準的なＦＭＯＣ（９−フルオレニルメチル−オキシカルボニル）化学によって合成し（Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｌｅｗｉｓｖｉｌｌｅ，ＴＸ）、逆相クロマトグラフィーを使用して＞８５％に精製し、質量分析によって分子量について検証した。ＣＳ１ペプチドは、Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ＬＬＣが９５％超の純度で合成した。
【０４２３】
ヘテロクリティックＸＢＰ１  ＵＳ１８５−１９３（ＹＩＳＰＷＩＬＡＶ）（配列番号６）、ヘテロクリティックＸＢＰ１  ＳＰ３６８−３７６（ＹＬＦＰＱＬＩＳＶ）（配列番号１０）、天然のＣＤ１３８２６０−２６８（ＧＬＶＧＬＩＦＡＶ）（配列番号１２）および天然のＣＳ１２３９−２４７（ＳＬＦＶＬＧＬＦＬ）（配列番号１６）ペプチドは、それぞれ、ＸＢＰ１非スプライシング型（ＵＳ）、ＸＢＰ１スプライシング型（ＳＰ）、ＣＤ１３８およびＣＳ１抗原に由来した。インフルエンザウイルスマトリックスタンパク質５８−６６（ＧＩＬＧＦＶＦＴＬ）（配列番号２５）およびＣＭＶ  ｐｐ６５（ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ）（配列番号２８）を、ＨＬＡ−Ａ２特異的コントロールペプチドとして選択した。すべてのペプチドを、標準的なｆｍｏｃ（９−フルオレニルメチル−オキシカルボニル）化学によって合成し、逆相クロマトグラフィーを使用して＞９０％に精製し、質量分析によって分子量について検証した（Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｌｅｗｉｓｖｉｌｌｅ，ＴＸ）。凍結乾燥されたペプチドを、ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）に溶解し、ＡＩＭ−Ｖ培地（Ｇｉｂｃｏ−Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）において希釈し、−１４０℃で保存した。
【０４２４】
ペプチド結合アッセイ。４つのＨＬＡ−Ａ２ペプチド、ヘテロクリティックＸＢＰ１  ＵＳ１８５−１９３、ヘテロクリティックＸＢＰ１  ＳＰ３６８−３７６、ＣＤ１３８２６０−２６８およびＣＳ１２３９−２４７のカクテルを、Ｔ２細胞株を使用して結合親和性について評価した。そのアッセイにおいて、Ｔ２細胞を、３回洗浄し、１×１０６細胞／ｍｌの最終濃度になるように無血清ＡＩＭ−Ｖ培地（Ｇｉｂｃｏ−Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）に再懸濁し、４８ウェル組織培養プレートに移した。それらの細胞を、０〜５０μｇ／ｍｌの範囲の総ペプチド濃度の上記４つのペプチドのカクテル＋３μｇ／ｍｌのヒトβ２−ミクログロブリン（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ  Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）でパルスし、加湿空気中、３７℃、５％ＣＯ２においてインキュベートした。一晩のインキュベーションの後、細胞を洗浄し、４℃において１５分間、マウス抗ヒトＨＬＡ−Ａ２−ＦＩＴＣ  ｍＡｂで染色し、ＦＡＣＳＣａｎｔｏ（商標）ＩＩフローサイトメーター（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）を用いて解析した。
【０４２５】
ペプチド安定性アッセイ。上記マルチペプチドカクテルを、ＨＬＡ−Ａ２の安定性について経時的に調べた。マルチペプチドカクテル（２５μｇ／ｍｌ；６．２５μｇ／ｍｌ／ペプチド）でパルスされたＴ２細胞の一晩のインキュベーションの後、それらの細胞を洗浄して、未結合のペプチドを除去し、１０μｇ／ｍｌのＢｒｅｆｅｌｄｉｎ  Ａ（Ｓｉｇｍａ）とともに３７℃および５％ＣＯ２において１時間インキュベートすることにより、新しく合成されるＨＬＡ−Ａ２分子の細胞表面発現をブロックした。ペプチド／ＨＬＡ−Ａ２複合体の安定性を、ＢＦＡ処置の０、２、４、６および１４時間後に、細胞をマウス抗ヒトＨＬＡ−Ａ２−ＦＩＴＣ  ｍＡｂで染色し、フローサイトメトリーで解析することによって、測定した。
【０４２６】
単球由来の成熟樹状細胞の生成。末梢血単核球（ＰＢＭＣ）を、ＨＬＡ−Ａ２＋正常個体から得られたロイコパック（ｌｅｕｋｏｐａｋｓ）から、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ（商標）Ｐｌｕｓ（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  ＡＢ，Ｕｐｐｓａｌａ  Ｓｗｅｄｅｎ）上の標準的な密度勾配遠心分離によって単離した。樹状細胞（ＤＣ）を生成するために、接着性細胞画分として単離された単球を、１０％ＦＣＳが補充されたＲＰＭＩ−１６４０培地（Ｇｉｂｃｏ−Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中の１，０００Ｕ／ｍｌのＧＭ−ＣＳＦおよび１，０００Ｕ／ｍｌのＩＬ−４の存在下において７日間培養した。新鮮培地＋ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−４を、１日おきにその培養物に加えた。７日目に、１，０００Ｕ／ｍｌのＩＦＮ−α＋１０ｎｇ／ｍｌのＴＮＦ−αを新鮮ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−４とともに、１０％ＦＣＳ−ＲＰＭＩ中に加え、さらに３日間インキュベートすることによって、成熟ＤＣ（ｍＤＣ）を得た。
【０４２７】
ＣＤ３＋Ｔ細胞の単離。ＣＤ３＋Ｔ細胞を、ＳｔｅｍＣｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ，Ｃａｎａｄａ）製のＥａｓｙＳｅｐ（登録商標）磁石およびＲｏｂｏｓｅｐ（登録商標）を使用して、非接着性細胞画分からネガティブ選択によって得た。手短に言えば、Ｔ細胞濃縮は、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３６、ＣＤ５６、ＣＤ６６ｂ、ＣＤ１２３およびグリコホリンＡに対する二重特異性四量体抗体複合体における標識による、Ｂ細胞、単球、ＮＫ細胞、赤血球細胞、血小板および好塩基球を含む非ＣＤ３Ｔ細胞の枯渇によって達成される。磁気的に標識された望まれない細胞を除去した後、濃縮されたＣＤ３＋Ｔ細胞を洗浄し、フローサイトメトリーによって調べた。
【０４２８】
ＭＭ患者の骨髄単核細胞からの初代ＣＤ１３８＋細胞の単離。骨髄単核細胞（ＢＭＭＣ）を、ＭＭ患者から得られた骨髄細胞から、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ（商標）Ｐｌｕｓの上の標準的な密度勾配遠心分離によって単離した。ＣＤ１３８＋ＭＭ細胞を、ＲｏｂｏＳｅｐ（登録商標）ＣＤ１３８免疫磁気ポジティブ選択法（ＳｔｅｍＣｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いてＢＭＭＣから単離した。
【０４２９】
ペプチド特異的ＣＴＬの誘導。個々のペプチドに特異的なＣＴＬ（ペプチド特異的ＣＴＬ）またはマルチプルペプチドに特異的なＣＴＬ（ＭＰ−ＣＴＬ）を、正常なＨＬＡ−Ａ２＋またはＨＬＡ−Ａ２４＋ドナーから得られたＣＤ３＋Ｔリンパ球の反復刺激によってエキソビボにおいて生成した（図２５を参照のこと）。手短に言えば、ＡＰＣ（ｍＤＣまたはＴ２細胞）を、加湿空気中の３７℃および５％ＣＯ２において、ヘテロクリティックＸＢＰ１  ＵＳ１８５−１９３、ヘテロクリティックＸＢＰ１  ＳＰ３６８−３７６、ＣＤ１３８２６０−２６８およびＣＳ１２３９−２４７ペプチド（２５μｇ／ｍｌ総ペプチド）の個々のペプチドまたはカクテルで一晩パルスした。負荷されたＡＰＣを回収し、洗浄し、２０Ｇｙで照射し、１０％ヒトＡＢ血清（Ｇｅｍｎｉ  Ｂｉｏ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｗｅｓｔ  Ｓａｃｒａｍｅｎｔｏ，ＣＡ）が補充されたＡＩＭ−Ｖ培地に再懸濁した。ｍｐパルスされ、照射されたｍＤＣを使用して、１０％ヒトＡＢ血清が補充されたＡＩＭ−Ｖ培地中において、ＡＰＣ／ｍｐとＣＤ３＋Ｔ細胞の１：２０の比で自己のＣＤ３＋Ｔ細胞を初回刺激した。その培養物を、合計４サイクルにわたって、照射されたＡＰＣ／ｍｐで７日ごとに再刺激することにより、ｍｐに特異的なＣＴＬを生成した。ＩＬ−２（５０Ｕ／ｍｌ）を、２回目の刺激の２日後に培養物に加え、その培養が完了するまで補充した。
【０４３０】
ＸＢＰ１−ＣＴＬ、ＣＤ１３８−ＣＴＬまたは標的細胞の表現型解析。４回目の刺激の１週間後に、ＭＰ−ＣＴＬおよびコントロールＴ細胞を、４℃において３０分間、ＣＤ３−ＰａｃＢｌｕｅ、ＣＤ８−ＡＰＣ−Ｈ７、ＣＣＲ７−ＰｅＣｙ７、ＣＤ４５ＲＯ−ＰＥおよび／またはＣＤ６９−ＰｅｒＣＰ  ｍＡｂで染色することによって、全ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔ細胞またはナイーブＴ細胞、エフェクターメモリーＴ細胞および活性化されたＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔ細胞について評価した。染色の後、それらの細胞を洗浄し、２％パラホルムアルデヒド−ＰＢＳ中で固定し、フローサイトメトリーによって解析した。
【０４３１】
ウエスタンブロッティング。各細胞株（Ｕ２６６、ＭｃＣＡＲ、ＭＬ−２およびＭＭ１Ｓ）由来のおよそ１００μｇのタンパク質可溶化物を、Ｌａｅｍｍｌｉのサンプルバッファー（１％ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、０．０５％β−メルカプトエタノール、１０％グリセロールおよび０．００１％ブロモフェノールブルーを含む０．１Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液，ｐＨ６．８）に懸濁し、２分間煮沸し、８０Ｖで２時間、８〜１６％の勾配ドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）（Ｘｃｅｌｌ  Ｓｕｒｅｌｏｃｋ  Ｍｉｎｉ  Ｃｅｌｌ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）に供した。タンパク質ラダー（既知分子量のタンパク質の混合物）を、そのゲルにおいてサイズマーカーとして使用することにより、ペプチドの分子量を決定した（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）。ゲルを、Ｔｒｉｓ−グリシン緩衝液中において、ニトロセルロース膜（Ｔｒａｎｓ−Ｂｌｏｔ，０．２ミクロンの転写膜，Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，ＣＡ）上に４０Ｖで２時間、エレクトロブロットした。ニトロセルロース膜上へのタンパク質の移行を、Ｐｏｎｃｅａｕ  Ｓ染色によって確かめた。その膜とマウス抗ヒトＸＢＰ１抗体または抗ヒトＣＤ１３８抗体とのンキュベーションを、一定に揺らしながら、１％ＢＳＡを含むリン酸緩衝食塩水およびＴｗｅｅｎ２０（ＰＢＳＴ）中で１時間行った。その膜をＰＢＳＴで３回洗浄し、３％脱脂粉乳を含むＰＢＳＴ中、抗マウスＩｇＧ−西洋ワサビペルオキシダーゼ結合体において１時間インキュベートした。洗浄後、製品マニュアルに提供されている指示に従って（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．，Ａｒｌｉｎｇｔｏｎ  Ｈｅｉｇｈｔｓ，ＩＬ）高感度化学発光を使用して、特定のタンパク質を検出した。
【０４３２】
ＩＦＮ−γ  ＥＬＩＳＡ。多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞（ＭｃＣＡＲ、ＭＭ１Ｓ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞（ＭＬ−２）またはＴ２細胞（上記）とともに共培養した後のＸＢＰ１−ＣＴＬ、ＣＤ１３８−ＣＴＬまたはＣＳ１−ＣＴＬによるＩＦＮ−γ放出を、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）製のヒトＩＦＮ−γ  ＥＬＩＳＡキットを使用して測定した（図２７を参照のこと）。簡潔には、標準物質としての精製されたＩＦＮ−γの希釈物またはＣＴＬ上清を、モノクローナル抗ヒトＩＦＮ−γ捕捉抗体で予めコーティングされた９６ウェルプレートのウェルに移し、室温において２時間インキュベートした。数回洗浄した後、検出抗体およびアビジン−西洋ワサビペルオキシダーゼ結合体を含む緩衝液を各ウェルに加え、室温において１時間インキュベートした。それらのウェルを洗浄し、次いで、各ウェルに西洋ワサビペルオキシダーゼ基質溶液を加え、室温において３０分間インキュベートした。停止液を各ウェルに加え、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｗａｌｌａｃ  Ｖｉｃｔｏｒ２カウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，Ｗｅｌｌｅｓｌｅｙ，ＭＡ）を用いて、４５０ｎｍにおける吸光度を決定した。ＣＴＬ培養上清中に存在するサイトカインの量を、ＩＦＮ−γ検量線に基づいて計算した。
【０４３３】
カルボキシフルオレセインスクシンイミジルエステル（ＣＦＳＥ）追跡による細胞増殖。ＣＴＬの増殖を、多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞（ＭｃＣＡＲ、ＭＭ１Ｓ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞（ＭＬ−２）またはＴ２細胞（上記）とともに共培養した後に測定した（図２７および３２を参照のこと）。個々のＸＢＰ１−ＣＴＬ、ＣＤ１３８−ＣＴＬ、ＣＳ１−ＣＴＬまたはマルチペプチドによって生成されたＣＴＬを、ＰＢＳ（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ）中で２回洗浄し、１×１０６細胞／ｍｌの濃度でＲＰＭＩ−１６４０培養培地に再懸濁した。ＤＭＳＯ中の５ｍＭ原液の形態のＣＦＳＥ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）を、５μＭの最終濃度が得られるように上記ＣＴＬに加え、光から保護されたＣＯ２恒温器内で３７℃において１０分間インキュベートした。インキュベーションの後、上記ＣＴＬ細胞の体積の５倍に等しい体積の氷冷ＰＢＳ（２％ＦＣＳを含む）をそれらの細胞に加えることにより、反応をクエンチした。細胞を氷上で５分間インキュベートし、遠心し、合計３回洗浄した後、新しいＰＢＳ（２％ＦＣＳを含む）に再懸濁した。ＣＦＳＥで標識されたＴ細胞を、ＲＰＭＩ培養培地で２×１０６細胞／ｍｌの濃度に調整し、２×１０５細胞／ｍｌの初代多発性骨髄腫細胞、ＭＭ細胞株、様々ながん細胞株または個々のペプチドを提示しているＫ５６２−Ａ２細胞で刺激した。刺激された、ＣＦＳＥで標識された細胞を、フローサイトメトリーによって調べた。
【０４３４】
細胞傷害性アッセイ。個々のＸＢＰ１−ＣＴＬ、ＣＤ１３８−ＣＴＬ、ＣＳ１−ＣＴＬまたはマルチペプチドによって生成されたＣＴＬの細胞傷害活性を、例えば、Ｒｏｄｅｎら（１９９９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２２６：２９−４１によって記載されたような、カルセイン放出アッセイによって測定した。簡潔には、Ｔ２、Ｕ２６６細胞、ＭｃＣＡＲ細胞、ＭＬ−２細胞、ＭＭ１Ｓ細胞株または初代多発性骨髄腫細胞を含む標的細胞（３×１０５細胞）を、１０ｍＭカルセイン−ＡＭ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ）を含む無血清培養培地中において３７℃で３０分間インキュベートし、５％ＦＣＳを含む冷ＰＢＳ中で３回洗浄し、９６ウェルＵ底マイクロタイタープレート（３つ組のウェル／サンプル）において、エフェクター細胞（５×１０３細胞／ウェル）とともに様々なエフェクター：標的細胞比でインキュベートした。プレートを、３７℃および５％ＣＯ２において３時間インキュベートした。インキュベーションの後、それらの細胞を、１，０００ｒｐｍにおける５分間の遠心分離によってペレットにし、１００μｌの上清を９６ウェル平底マイクロタイタープレート（Ｎｕｎｃ）のウェルに移し、それらの細胞から放出された蛍光の量としてカルセイン放出を測定した（ＶＩＣＴＯＲ２−１４２０マルチラベルカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）を使用して）。最大のカルセイン放出が、界面活性剤によって放出された標的細胞のカウントおよびエフェクター細胞の非存在下における標的細胞からの自発的な放出のカウントから得られた。細胞傷害性を、以下のとおり計算した：％特異的溶解＝［（実験による放出−自発的な放出）÷（最大放出−自発的な放出）］×１００。
【０４３５】
ＣＤ１０７α脱顆粒アッセイ。ＣＤ１０７α脱顆粒を、多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞（ＭｃＣＡＲ、ＭＭ１Ｓ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞（ＭＬ−２）またはＴ２細胞（上記）とともに共培養した後に測定した（図２７および３０を参照のこと）。細胞傷害活性の測定であるＣＤ１０７α脱顆粒アッセイを、下記に詳述されるような軽微な改変を加えて、Ｂｅｔｔｓら（２００３）およびＭｉｔｔｅｎｄｏｒｆら（２００５）に記載されているとおりに行った。個々のペプチドでパルスされた、初代多発性骨髄腫細胞、ＭＭ細胞株、様々ながん細胞株またはＫ５６２−Ａ２細胞を、様々なエフェクター：標的比でＣＴＬとともに共培養した。ＣＤ１０７αおよびＣＤ１０７ｂ（両方とも、検出可能な標識ＦＩＴＣに結合体化されている）の各々の１０μｌアリコートを、ＣＤ１３８−ＣＴＬの添加と同時に、各ウェルに加えた。それらの細胞を含むプレートを、１０００ｒｐｍで５分間遠心し、３７℃で１時間インキュベートした。インキュベーションの後、Ｂｒｅｆｅｌｄｉｎ  ＡおよびＭｏｎｅｎｓｉｎを各ウェルに加え、それらの細胞を３７℃でさらに４時間インキュベートした。それらの細胞を回収し、洗浄し、蛍光色素に結合体化された抗ヒトＭＡＢで染色した。それらの細胞を洗浄し、フローサイトメトリーによって解析した。
【０４３６】
ＣＤ１０７αのアップレギュレーションおよび細胞内ＩＦＮ−γの産生。多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞（ＭｃＣＡＲ、ＭＭ１Ｓ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞（ＭＬ−２）またはＴ２細胞（上記）とともに共培養した後、ＣＤ１０７αのアップレギュレーションおよびＩＦＮ−γの産生を測定した（図２７および３０を参照のこと）。ＣＤ１０７α脱顆粒、およびＩＦＮ−γを産生するＣＤ８＋ＣＴＬを、フローサイトメトリーによって、細胞表面マーカーおよび細胞内サイトカインの染色によって決定した。簡潔には、１×１０６個のキラー細胞（ｒｅｓｐｏｎｄｅｒ  ｃｅｌｌ）（ＭＰ−ＣＴＬ，コントロールＴ細胞）を、１×１０６個の刺激細胞（それぞれのペプチドでパルスされた、ＨＬＡ−Ａ２＋ＭｃＣＡＲまたはＵ２６６ＭＭ細胞株またはＫ５６２−Ａ＊０２０１細胞）で刺激した。その培養物にＣＤ１０７α  ｍＡｂを加え、細胞を３７℃、５％のＣＯ２恒温器に入れた。１時間のインキュベーションの後、ＣＤ２８／ＣＤ４９ｄ  ｍＡｂ（ＢＤ）およびタンパク質輸送阻害剤Ｂｒｅｆｅｌｄｉｎ  Ａ（ＢＤ）およびＭｏｎｅｎｓｉｎ（ＢＤ）をその細胞培養物に加え、さらに５時間インキュベートした。ベースラインコントロールとして、ＭＰ−ＣＴＬを、ＣＤ２８／ＣＤ４９ｄ  ｍＡｂ、Ｂｒｅｆｅｌｄｉｎ  ＡおよびＭｏｎｅｎｓｉｎ単独を含む培地中で、さらなる刺激なしで培養した。インキュベーションの後、それらの細胞を回収し、洗浄し、表面をＣＤ３−ＰａｃＢｌｕｅおよびＣＤ８−ＡＰＣ−Ｈ７、ＣＣＲ７−ＰｅＣｙ７、ＣＤ４５ＲＯ−ＰＥおよび／またはＣＤ６９−ＰｅｒＣＰ抗ヒトｍＡｂで３０分間染色した。次いで、細胞を透過処理し、Ｃｙｔｏｆｉｘ／Ｃｙｔｏｐｅｒｍ（ＢＤ）を使用して固定し、抗ＩＦＮ−γ  ＦＩＴＣ  ｍＡｂで４５分間染色することにより、細胞内のサイトカイン産生を検出した。最後に、細胞をＰｅｒｍ／Ｗａｓｈ溶液（ＢＤ）で洗浄し、２％パラホルムアルデヒド中で固定し、フローサイトメトリーによって取得した。
【０４３７】
ＩＬ−２産生アッセイ。ＣＤ１０７α脱顆粒、およびＩＬ−２を産生するＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＴＬを、細胞表面マーカーおよび細胞内のサイトカイン染色によって、フローサイトメトリーで同定した。簡潔には、ペプチド特異的ＣＴＬまたはコントロールＴ細胞を、ＣＤ１０７ａ  ｍＡｂの存在下において、特定の各刺激因子（ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒ）で刺激した。１時間のインキュベーションの後、ＣＤ２８／ＣＤ４９ｄ  ｍＡｂ（ＢＤ）ならびにタンパク質輸送阻害剤Ｂｒｅｆｅｌｄｉｎ  ＡおよびＭｏｎｅｎｓｉｎをその培養物に加え、さらに５時間インキュベートした。ベースラインコントロールとして、そのＣＴＬを、ＣＤ２８／ＣＤ４９ｄ  ｍＡｂ、Ｂｒｅｆｅｌｄｉｎ  ＡおよびＭｏｎｅｎｓｉｎ単独を含む培地中で培養した。インキュベーションの後、細胞をＣＤ３−ＰａｃＢｌｕｅおよびＣＤ８−ＡＰＣ−Ｈ７抗ヒトｍＡｂで染色し、続いて固定／透過処理を行い、抗ＩＬ−２  ＡＰＣ抗ヒトｍＡｂで染色することにより、細胞内のサイトカイン産生を検出した。染色の後、細胞をＰｅｒｍ／Ｗａｓｈ溶液で３回洗浄し、２％パラホルムアルデヒド中で固定し、フローサイトメトリーによって解析した。
【０４３８】
統計解析。結果は、平均値±ＳＥとして表される。独立スチューデントのｔ検定を用いて、群を比較した。ｐ＜０．０５の場合、差を有意であると見なした。
【０４３９】
実施例２：ＸＢＰ１非スプライシング型、ＸＢＰ１スプライシング型、ＣＤ１３８およびＣＳ１に特異的なペプチドのマルチペプチド（ＭＰ）カクテルは、高いＨＬＡ−Ａ２結合親和性および安定性を示す。
【０４４０】
４つの免疫原性ペプチド、ヘテロクリティックＸＢＰ１  ＵＳ１８５−１９３（ＹＩＳＰＷＩＬＡＶ，配列番号６）、ヘテロクリティックＸＢＰ１  ＳＰ３６８−３７６（ＹＬＦＰＱＬＩＳＶ，配列番号１０）、天然のＣＤ１３８２６０−２６８（ＧＬＶＧＬＩＦＡＶ，配列番号１２）および天然のＣＳ１２３９−２４７（ＳＬＦＶＬＧＬＦＬ，配列番号１６）（表１）は、免疫応答を誘導すると個別に証明されている。ここでは、本発明者らは、それらをＭＰカクテルとして評価した。そのＭＰカクテルのＨＬＡ−Ａ２特異的結合および安定性を、フローサイトメトリーによってＴ２細胞上のＨＬＡ−Ａ２分子のアップレギュレーションを測定することによって評価した（２７）。ペプチド結合アッセイは、用量依存的様式（０〜５０μｇ／ｍｌ）でＴ２細胞上のＨＬＡ−Ａ２の平均蛍光強度（ＭＦＩ）の上昇を示し、２５μｇ／ｍｌの総ペプチド濃度においてプラトーに達し（６．２５μｇ／ペプチド／ｍｌ；ＭＦＩ：１０，７８７．３３±２，３７１．７１）、これは、最も高い総ペプチド濃度，５０μｇ／ｍｌ（ＭＦＩ：１０，８８９．３３±２，８８８．４８）と類似だった（図１ａ）。ゆえに、２５μｇ／ｍｌというＭＰ濃度（６．２５μｇ／ペプチド／ｍｌ）を、ＨＬＡ−Ａ２結合安定性の評価のために選択した。
【０４４１】
ペプチド結合安定性アッセイでは、Ｔ２細胞を、２５μｇ／ｍｌの上記ＭＰカクテルで一晩パルスし、洗浄して、未結合のペプチドを除去し、次いで、Ｂｒｅｆｅｌｄｉｎ  Ａ（ＢＦＡ）で処置することにより、新しく合成されるＨＬＡ−Ａ２分子の細胞表面発現をブロックした。次いで、Ｔ２細胞を、ＢＦＡ処置の０、２、４、６または１４時間後に、ＨＬＡ−Ａ２  ＭＦＩについて評価した。フローサイトメトリー解析は、ＭＰカクテルの安定性が、ＢＦＡ処置の６時間後まで高度に維持されることを証明した（ＭＦＩ：０時間後＝９，７２６．００±１，３７３．２４、２時間後＝９，１３２．３３±１，４３５．５１、４時間後：９，１２５．３３±１，１３０．６２、６時間後：８，８１８．６７±４１３．５０）（図１ｂ）。ＢＦＡ処置の１４時間後、ＭＰカクテルのＨＬＡ−Ａ２特異的親和性は、より低くなったが、コントロールインフルエンザウイルスマトリックスタンパク質（ＩＶＭＰ）５８−６６ペプチドの親和性（ＭＦＩ：４，９２１．３３±１，４２８．１６）よりも高かった（ＭＦＩ：６，７９３．６７±１，６１７．０１）。これらの結果に基づいて、本発明者らは、ＭＰカクテルの高レベルのＨＬＡ−Ａ２特異的親和性および安定性を確認し、そのカクテルを、免疫原性およびＭＭ特異的ＣＴＬを誘導する能力についてさらに評価することを進めた。
【表４−２】
2018172435.tif 000028
【０４４２】
実施例３：マルチペプチド特異的ＣＴＬは、特定のＴ細胞サブタイプである異なる表現型を示す
【０４４３】
上記ＭＰカクテル（２５μｇ／ｍｌ合計；６．２５μｇ／ｍｌ／ペプチド）でパルスされたＡＰＣで毎週、ＨＬＡ−Ａ２＋正常ドナーのＴ細胞を刺激することによって、ＭＰ−ＣＴＬを生成した。４回目の刺激の１週間後、得られたＭＰ−ＣＴＬを、表現型および機能活性について評価した。フローサイトメトリー解析は、そのＭＰ−ＣＴＬが、コントロールＴ細胞培養物（ドナー１：２５％、ドナー２：２５％；図２）と比べて、より高い割合のＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔ細胞（ドナー１：８６％、ドナー２：７４％）を含むことを示した。本発明者らは、ＭＰ−ＣＴＬ内のＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔ細胞サブセットにおいて異なる表現型の変化も観察した。エフェクターメモリーＴ細胞（ＥＭ：ＣＤ４５ＲＯ＋ＣＣＲ７−／ＣＤ３＋ＣＤ８＋）の頻度は、ナイーブＴ細胞（ＣＤ４５ＲＯ−ＣＣＲ７＋／ＣＤ３＋ＣＤ８＋）の対応する減少（ドナー１：コントロール７４％  対  ＭＰ−ＣＴＬ  ８％、ドナー２：コントロール６０％  対  ＭＰ−ＣＴＬ  ６％）と関連して、上昇した（ドナー１：コントロール５％  対  ＭＰ−ＣＴＬ  ４４％、ドナー２：コントロール４％  対  ＭＰ−ＣＴＬ  ３５％）。さらに、本発明者らは、コントロールＴ細胞培養物と比べて、ＭＰ−ＣＴＬ内の活性化されたＣＤ６９＋／ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔ細胞の頻度の上昇を観察した（ドナー１：コントロール３％  対  ＭＰ−ＣＴＬ  ３９％、ドナー２：コントロール５％  対  ＭＰ−ＣＴＬ  １３％；図２）。したがって、これらの結果は、ＸＢＰ１、ＣＤ１３８またはＣＳ１に特異的なＭＰカクテルによるＣＤ３＋Ｔ細胞の反復刺激が、異なる表現型の変化および抗原特異的ＣＴＬに特徴的なＣＤ３＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞サブセットの拡大をもたらすことを証明する。
【０４４４】
実施例４：マルチペプチド特異的ＣＴＬは、ＨＬＡ−Ａ２＋ＭＭ細胞に応答してＩＦＮ−γを産生する高い割合のＣＤ８＋ＣＴＬを含む。
【０４４５】
ＭＰ−ＣＴＬを、ＨＬＡ−Ａ２＋ＭＭ細胞株で刺激したときに、細胞内ＩＦＮ−γを産生する能力についてフローサイトメトリーによって解析した。ＭＰ−ＣＴＬ内の、ＥＭ（ＣＤ４５ＲＯ＋ＣＣＲ７−）と活性化された（ＣＤ６９＋）ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔ細胞の両方が、ＨＬＡ−Ａ２＋ＭＭ細胞株に応答してＩＦＮ−γを産生した（図３）。ＩＦＮ−γ産生細胞の頻度は、ＭｃＣＡＲ細胞［ドナー１：コントロール  対  ＭＰ−ＣＴＬ−０％  対  ４．７％ＥＭ細胞、０．８％  対  ６．１％活性化された細胞；ドナー２：０．２％  対  ２．７％ＥＭ細胞、１％  対  ３．９％活性化された細胞］またはＵ２６６細胞［ドナー１：コントロール  対  ＭＰ−ＣＴＬ−０％  対  ８％ＥＭ細胞、０％  対  １１．２％活性化された細胞；ドナー２：０．４％  対  ２．９％ＥＭ細胞、１．３％  対  ３．０％活性化された細胞］のいずれかでの刺激において上昇した。ＭＰ−ＣＴＬ内のナイーブ（ＣＤ４５ＲＯ−ＣＣＲ７＋）ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＭＭ細胞株で刺激したとき、最低レベルのＩＦＮ−γ産生を示した（データ示さず）。
【０４４６】
実施例５：マルチペプチド特異的ＣＴＬは、ＨＬＡ−Ａ２＋ＭＭ細胞に応答して細胞増殖を示す。
【０４４７】
ＭＰ−ＣＴＬの機能を、ＣＦＳＥ増殖アッセイを用いて解析した。ＭＰ−ＣＴＬの増殖を、ＨＬＡ−Ａ２＋ＭＭ初代細胞または細胞株での刺激の後の、ＣＦＳＥで標識されたＭＰ−ＣＴＬ（Ｑ１ゲート細胞（ｇａｔｅｄ  ｃｅｌｌ））の蛍光の減少として５日目に測定した（図４）。ＭＰ−ＣＴＬは、異なる３人のＨＬＡ−Ａ２＋ＭＭ患者から得られたＣＤ１３８＋初代細胞に応答して高レベルの細胞増殖を示した（細胞の増殖：３３％、２９％または４１％）。さらに、ＭＰ−ＣＴＬは、ＭｃＣＡＲ（細胞の増殖：５７％）およびＵ２６６（細胞の増殖：４９％）を含むＨＬＡ−Ａ２＋ＭＭ細胞株に応答して高レベルの細胞増殖を示した。培地単独において培養されたＭＰ−ＣＴＬは、低レベル（５％）の増殖を示した。まとめると、これらのデータは、ＨＬＡ−Ａ２＋初代ＭＭ細胞またはＭＭ細胞株のいずれかで刺激したときに増殖する能力によってＭＰ−ＣＴＬの機能活性を証明する。
【０４４８】
実施例６：マルチペプチド特異的ＣＴＬは、ＨＬＡ−Ａ２＋ＭＭ細胞の特異的な溶解を誘導する。
【０４４９】
本発明者らは、４時間のカルセイン放出アッセイを用いて、ＭＰ−ＣＴＬの細胞傷害活性を評価した。異なるＨＬＡ−Ａ２＋ドナーのＣＤ３＋Ｔ細胞から生成されたＭＰ−ＣＴＬを、ＨＬＡ−Ａ２＋ＭＭ初代細胞または細胞株に対する細胞傷害活性について評価した（図５）。ＨＬＡ−Ａ２＋初代ＭＭ細胞は、ＭＰ−ＣＴＬによって効果的に溶解された（［ドナーＡ  ＭＰ−ＣＴＬ；患者＃１：６〜２９％，患者＃２：０〜４９％］、［ドナーＢ  ＭＰ−ＣＴＬ；患者＃１：０〜１７％、患者＃２：０〜１５％）。さらに、ＭＰ−ＣＴＬは、様々なエフェクター：標的細胞比において、Ｕ２６６細胞（ドナーＡ  ＭＰ−ＣＴＬ：０〜８５％、ドナーＢ  ＭＰ−ＣＴＬ：２〜４４％）およびＭｃＣＡＲ細胞（ドナーＡ  ＭＰ−ＣＴＬ：０〜１３％、ドナーＢ  ＭＰ−ＣＴＬ：０〜７９％：）に対して高レベルの細胞傷害活性を示した。ＭＰ−ＣＴＬと比べて、同じドナー由来のコントロールＣＤ３＋Ｔ細胞は、ＨＬＡ−Ａ２＋ＭＭ初代細胞または細胞株に対して有意に低いレベルの細胞傷害性を示した。さらに、ＭＰ−ＣＴＬは、ＨＬＡ−Ａ２＋乳がん細胞株（ＭＣＦ−７）、ＨＬＡ−Ａ２−ＭＭ細胞株（ＭＭ１Ｓ）または異なる３人のＭＭ患者由来のＨＬＡ−Ａ２−初代細胞を含む、抗原不適合またはＭＨＣ不適合の腫瘍細胞を溶解しなかった（データ示さず）。まとめると、これらのデータは、ＨＬＡ−Ａ２によって拘束され、かつ抗原特異的である、ＭＰ−ＣＴＬの細胞傷害活性を裏付ける。
【０４５０】
実施例７：マルチペプチド特異的ＣＴＬは、関連する各ペプチドに対して個別の免疫応答を発生させる
【０４５１】
ＭＰ−ＣＴＬを、ヘテロクリティックＸＢＰ１  ＵＳ１８５−１９３（ＹＩＳＰＷＩＬＡＶ）（配列番号６）、ヘテロクリティックＸＢＰ１  ＳＰ３６８−３７６（ＹＬＦＰＱＬＩＳＶ）（配列番号１０）、天然のＣＤ１３８２６０−２６８（ＧＬＶＧＬＩＦＡＶ）（配列番号１２）および天然のＣＳ１２３９−２４７（ＳＬＦＶＬＧＬＦＬ）（配列番号１６）を含む関連する各ペプチドに応答して、脱顆粒する能力（ＣＤ１０７α発現）および細胞内ＩＦＮ−γを産生する能力について解析した。それらの解析は、それぞれのペプチドでパルスされたＫ５６２−Ａ＊０２０１細胞に対する特異的なＭＰ−ＣＴＬ応答を測定することによって、行われた。コントロールとして、本発明者らは、ペプチドなしでパルスされたＫ５６２−Ａ＊０２０１細胞、または無関係のＨＬＡ−Ａ２特異的ＣＭＶ  ｐｐ６５（ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ）（配列番号２８）ペプチドでパルスされたＫ５６２−Ａ＊０２０１細胞を使用した。図６ａは、ドナーＡのＭＰ−ＣＴＬからのペプチド特異的な応答の代表的なフローサイトメトリー解析を示している。そのＭＰ−ＣＴＬは、ＸＢＰ１  ＵＳ（２．７％）、ＣＤ１３８（１．７％）およびＣＳ１（１２．５％）ペプチドに応答して、高い割合のＣＤ１０７α＋ＩＦＮγ＋／ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔ細胞（ゲートＱ２）を示したが、ＸＢＰ１  ＳＰ（０．２％）ペプチドには応答しなかった。無関係のＣＭＶ  ｐｐ６５ペプチド（０．２％）またはペプチドなし（０．２％）のコントロールに対して応答は観察されなかった。さらなる解析を、３人のさらなるＨＬＡ−Ａ２＋ドナー（ドナーＢ、ドナーＣ、ドナーＤ）から生成されたＭＰ−ＣＴＬを用いて、各個別のペプチドを提示しているＫ５６２−Ａ＊０２０１細胞に応答したＣＤ１０７α脱顆粒またはＩＦＮ−γ産生について行った（図６ｂ）。特異的な応答が、これらの各ドナーから生成されたＭＰ−ＣＴＬにおいて、関連するすべてのペプチドに対して検出されたが、無関係のＣＭＶ  ｐｐ６５ペプチドに対しては検出されなかった。しかしながら、異なる個体から生成されたＣＴＬの間で、関連する各ペプチドに対する脱顆粒およびＩＦＮ−γ産生における特異的な応答のレベルにばらつきが検出された。ゆえに、これらの研究は、ＸＢＰ１  ＵＳ、ＸＢＰ１  ＳＰ、ＣＤ１３８およびＣＳ１エピトープを含むＭＰカクテルが、ＭＭ細胞上の複数の抗原を標的化することができる特異的なＣＴＬによってそれぞれのペプチドに対する応答を誘導し得ることを示す。
【０４５２】
実施例８：がん細胞株におけるＸＢＰ１の発現。
【０４５３】
様々ながん細胞株を、非スプライシング型およびスプライシング型ＸＢＰ１抗原の発現についてフローサイトメトリーによって解析した。関連する発現レベルは、プラス記号またはマイナス記号で示され、また、プラス記号の数を示す数字も示されている（図７）。
【０４５４】
実施例９：ＨＬＡ−Ａ２＋乳がん細胞に応答したＸＢＰ１−ＣＴＬの増殖。
【０４５５】
乳がん細胞株からの刺激細胞に応答したＸＢＰ１−ＣＴＬの増殖を、ＣＦＳＥ増殖アッセイを用いて解析した。ＸＢＰ１−ＣＴＬの増殖を、ＨＬＡ−Ａ２＋乳がん細胞株ＭＣＦ−７、ＨＬＡ−Ａ２−乳がん細胞株ＢＴ４３４、ＨＬＡ−Ａ２＋前立腺がん細胞株ＬｎＣａｐ、ＨＬＡ−Ａ２−前立腺がん細胞株ＶＣａｐおよびＮＫ感受性ＣＭＬ  Ｋ５６２または細胞なしでの刺激の後のＣＦＳＥで標識されたＭＰ−ＣＴＬ（Ｐ３ゲート細胞）の蛍光の減少として６および７日目に測定した。ＸＢＰ１−ＣＴＬは、６日目（図８ａ）および７日目（図８ｂ）に、ＨＬＡ−Ａ２＋乳がん細胞に応答して高レベルの細胞増殖を示したが、コントロールとして働いた他のがん細胞株に対しては細胞増殖を示さなかった。
【０４５６】
実施例１０：ＨＬＡ−Ａ２＋乳がん細胞に応答したＸＢＰ１−ＣＴＬのＩＦＮ−γ産生および細胞活性化。
【０４５７】
ＸＢＰ１−ＣＴＬを、乳がん細胞株（ＭＢ２３１、ＭＣＦ−７、ＢＴ４３４）および前立腺がん細胞株（ＬｎＣＡＰ、ＶＣａｐ）に応答したＣＤ８＋Ｔ細胞におけるＩＦＮ−γ発現およびＣＤ６９アップレギュレーションについてフローサイトメトリーによって解析した。ＸＢＰ１−ＣＴＬのＩＦＮ−γ発現および活性化（ＣＤ６９）は、ＭＢ２３１およびＭＣＦ−７を含むＨＬＡ−Ａ２＋乳がん細胞で刺激されると増加したが、コントロールとして働いた他のがん細胞株で刺激されても増加しなかった（図９）。
【０４５８】
実施例１１：ＨＬＡ−Ａ２＋乳がん細胞株に応答したＸＢＰ１−ＣＴＬの脱顆粒（ＣＤ１０７α）。
【０４５９】
ＸＢＰ１−ＣＴＬを、乳がん細胞株（ＭＢ２３１、ＭＣＦ−７、ＢＴ４３４）および前立腺がん細胞株（ＬｎＣＡＰ、ＶＣａｐ）に応答して脱顆粒する能力について解析した。ＣＤ１０７αのアップレギュレーションを、フローサイトメトリーによって、ゲーティングされたＣＤ８＋Ｔ細胞における細胞傷害活性の尺度として解析した。有意なレベルの脱顆粒（ＣＤ１０７αのアップレギュレーション）が、ＭＢ２３１およびＭＣＦ−７を含むＨＬＡ−Ａ２＋乳がん細胞に応答して検出されたが、コントロールとして働いた他のがん細胞株に応答して検出されることはなかった（図１０）。
【０４６０】
実施例１２：ＨＬＡ−Ａ２＋膵がんおよび結腸がん細胞株に応答したＸＢＰ１−ＣＴＬの増殖。
【０４６１】
膵がんおよび結腸がん細胞株に応答したＸＢＰ１−ＣＴＬの増殖を、ＣＦＳＥベースのアッセイを用いて行った。ＸＢＰ１−ＣＴＬの増殖を、ＨＬＡ−Ａ２＋前立腺がん細胞株（ＬｎＣａｐ）、ＨＬＡ−Ａ２＋膵がん細胞株（８９０２）、ＨＬＡ−Ａ２−膵がん細胞株（ＭｉａＰａｃａ）、ＨＬＡ−Ａ２＋結腸がん細胞株（ＬＳ１８０）およびＨＬＡ−Ａ２−結腸がん細胞株（ＷｉＤｒ）または細胞なしのコントロールでの刺激の後のＣＦＳＥで標識されたＸＢＰ１−ＣＴＬの蛍光の減少として６日目に測定した。ＸＢＰ１−ＣＴＬは、ＨＬＡ−Ａ２＋膵臓細胞株８９０２およびＨＬＡ−Ａ２＋結腸がん細胞株ＬＳ１８０に応答して、より高いレベルの細胞増殖を示した（図１１）。
【０４６２】
実施例１３：ＨＬＡ−Ａ２＋膵がんおよび結腸がん細胞株に応答した、ＸＢＰ１−ＣＴＬのＩＦＮ−γ産生および脱顆粒。
【０４６３】
ＸＢＰ１−ＣＴＬを、膵がんまたは結腸がん細胞株に応答して脱顆粒する能力およびＩＦＮ−γを産生する能力について解析した。ＸＢＰ１−ＣＴＬを、ＨＬＡ−Ａ２＋膵がん細胞株（Ｐａｎ１およびＰＬ４５）、ＨＬＡ−Ａ２−膵がん細胞株（ＭｉａＰａｃａ）、ＨＬＡ−Ａ２＋結腸がん細胞株（ＬＳ１８０およびＳＷ４８０）、ＨＬＡ−Ａ２−前立腺がん細胞株（ＷｉＤｒ）または細胞なしのコントロールとともにインキュベートした。ＣＤ１０７αおよびＩＦＮ−γ産生を、フローサイトメトリーによって解析した。ＸＢＰ１−ＣＴＬによるＣＤ１０７αアップレギュレーションおよびＩＦＮ−γ産生は、ＨＬＡ−Ａ２＋膵がん細胞およびＨＬＡ−Ａ２＋結腸がん細胞で刺激されると増加したが、他のコントロールがん細胞で刺激されても増加せず、抗原特異的様式およびＨＬＡ−Ａ２に拘束された様式での応答を示した（図１２）。
【０４６４】
さらに、下に示されるようなｃａｎＥｖｏｌｖｅ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃａｎｅｖｏｌｖｅ．ｏｒｇ／ＡｎａｌｙｓｉｓＲｅｓｕｌｔｓ／ＡｎａｌｙｓｉｓＲｅｓｕｌｔｓ．ｈｔｍｌ）およびＯｎｃｏｍｉｎｅ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｗｅｂｃｉｔａｔｉｏｎ．ｏｒｇ／ｇｅｔｆｉｌｅ？ｆｉｌｅｉｄ＝ｂｃｂｅ２９７ｅ４０８５ｂ１９９３３ｃｃａ７５９ａ８８ｅ０ｅ２ｂ９ｆａｃ３ｂ１ｅ）公的データベースを検索することによって示されるように、健常ドナー由来の細胞と比べて、有意に高いレベルのＸＢＰ１遺伝子発現が、乳がん患者または結腸がん患者由来の原発腫瘍細胞において見られた。
【表Ａ−１】
2018172435.tif 000029
【表Ａ−２】
2018172435.tif 000030
【０４６５】
実施例１４：がん細胞株におけるＣＤ１３８およびＣＳ１の発現。
【０４６６】
様々ながん細胞株を、フローサイトメトリーによって、ＣＤ１３８およびＣＳ１抗原の発現について解析した。様々ながん細胞株に対する相対的なＣＤ１３８およびＣＳ−１の発現レベルは、プラス記号またはマイナス記号で示され、また、ＣＤ１３８（図１３）およびＣＳ１（図１４）の発現レベルを示す数字も示されている。
【０４６７】
実施例１５：ＸＢＰ１／ＣＤ１３８／ＣＳ１ペプチドでの刺激によるくすぶり型多発性骨髄腫患者由来のＴ細胞におけるＣＤ８＋ＣＴＬのパーセンテージ。
【０４６８】
４人のＨＬＡ−Ａ２＋くすぶり型多発性骨髄腫患者から得られたＴ細胞から生成されたマルチペプチド特異的ＣＴＬ（ＭＰ−ＣＴＬ）を、フローサイトメトリーによって特定のＴ細胞について解析した。各患者のＴ細胞から生成されたＭＰ−ＣＴＬは、高いパーセンテージのＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＴＬおよび低いパーセンテージのＣＤ３＋ＣＤ４＋Ｔｈ細胞を示す（図１５）。
【０４６９】
実施例１６：くすぶり型多発性骨髄腫患者由来のＭＰ−ＣＴＬの増殖。
【０４７０】
様々なＭＭ細胞株に応答した、２人のくすぶり型多発性骨髄腫患者から生成されたＭＰ−ＣＴＬの増殖を、ＣＦＳＥベースのアッセイを用いて解析した。細胞増殖を、ＨＬＡ−Ａ２＋細胞株（ＭｃＣＡＲ）、ＨＬＡ−Ａ２−細胞株（ＭＭ１Ｓ、ＲＰＭＩ）、ＮＫ感受性細胞株（Ｋ５６２）での刺激におけるまたは刺激なしでの、ＣＦＳＥで標識されたＭＰ−ＣＴＬ（Ｐ３ゲート）の蛍光の減少として５、６および７日目に測定した。両方のＳＭＭ患者のＴ細胞から生成されたＭＰ−ＣＴＬは、ＨＬＡ−Ａ２＋多発性骨髄腫細胞株ＭｃＣＡＲに応答して高レベルの細胞増殖を示したが、ＨＬＡ−Ａ２−細胞株に対してもＮＫ感受性細胞株に対しても高レベルの細胞増殖を示さなかったことから、多発性骨髄腫細胞に対する、ＨＬＡ−Ａ２に拘束されたＭＰ−ＣＴＬ活性が証明される（図１６ａ、ｂ）。
【０４７１】
実施例１７：くすぶり型多発性骨髄腫患者から生成されたＭＰ−ＣＴＬによるＩＦＮ−γの産生。
【０４７２】
様々なＭＭ細胞株に応答した、４人のくすぶり型多発性骨髄腫患者から生成されたＭＰ−ＣＴＬのＩＦＮ−γ産生を解析した。その産生を、ＨＬＡ−Ａ２＋細胞株（ＭｃＣＡＲ、Ｕ２６６）、ＨＬＡ−Ａ２−細胞株（ＭＭ１Ｓ、ＲＰＭＩ）、ＮＫ感受性細胞株（Ｋ５６２）での刺激の後またはいかなる刺激なしで、フローサイトメトリーによって解析した。４人すべての患者から生成されたＭＰ−ＣＴＬが、ＨＬＡ−Ａ２＋多発性骨髄腫細胞株で刺激したとき、ＨＬＡ−Ａ２に拘束された様式で、ＩＦＮ−γ産生の増加を示した（図１７ａ、ｂ）。
【０４７３】
実施例１８：骨髄腫細胞株に対する、くすぶり型多発性骨髄腫患者から生成されたＭＰ−ＣＴＬの脱顆粒（ＣＤ１０７α）。
【０４７４】
４人のくすぶり型多発性骨髄腫患者から生成されたＭＰ−ＣＴＬを、様々なＨＬＡ−Ａ２＋およびＨＬＡ−Ａ２−がん細胞株に応答した細胞傷害活性の尺度として、脱顆粒について解析した。それらの解析は、Ｕ２６６、ＭｃＣＡＲ、ＭＭ１Ｓ、ＲＰＭＩ、Ｋ５６２細胞または刺激細胞なしに対するＭＰ−ＣＴＬ特異的応答を測定することによって行われた。ＣＤ１０７αのアップレギュレーションを、フローサイトメトリーによって、ゲーティングされたＣＤ８＋Ｔ細胞において解析した。ＳＭＭ患者から生成されたＭＰ−ＣＴＬは、ＨＬＡ−Ａ２＋ＭＭ細胞株であるＵ２６６およびＭｃＣＡＲに応答して高いレベルのＣＤ１０７α脱顆粒を示した（図１８ａ）。多発性骨髄腫細胞に対する、ＨＬＡ−Ａ２に拘束された脱顆粒応答が、４人のＳＭＭ患者から生成されたＭＰ−ＣＴＬを用いて確認された（図１８ｂ）。
【０４７５】
実施例１９：くすぶり型多発性骨髄腫患者から生成されたＭＰ−ＣＴＬからのＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＤ１３７＋サブセットの中のＩＦＮ−γ＋ＣＤ１０７α＋二重陽性細胞のパーセンテージ。
【０４７６】
くすぶり型多発性骨髄腫患者から生成されたＭＰ−ＣＴＬのＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＤ１３７＋サブセットを、個々のペプチドを提示するＫ５６２−Ａ２細胞に応答した、脱顆粒する能力（ＣＤ１０７α発現）およびＩＦＮ−γ産生について解析した。ＣＤ１０７αおよび／またはＩＦＮ−γの発現を、フローサイトメトリーを用いて、ＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＤ１３７＋サブセット内で解析した。３人のＳＭＭ患者から生成されたＭＰ−ＣＴＬは、高いレベルのペプチド特異的なＩＦＮ−γ産生および／またはＣＤ１０７α脱顆粒を示した（図１９ａ〜ｄ）。
【０４７７】
実施例２０：くすぶり型多発性骨髄腫患者から生成されたＭＰ−ＣＴＬの表現型の特徴づけ。
【０４７８】
合計４つのマルチペプチドでの刺激によって生成されたＭＰ−ＣＴＬを、ナイーブ（ｎａｔｉｖｅ）、セントラルメモリー（ＣＭ）、エフェクターメモリー（ＥＭ）およびターミナルエフェクター（ＴＥ）ＣＤ８＋Ｔサブセットについて、フローサイトメトリーによって解析した。４人のＳＭＭ患者から生成されたＭＰ−ＣＴＬは、高いパーセンテージのＥＭおよびＴＥ  ＣＤ８＋細胞を示す（図２０ａ）。ＳＭＭ患者＃２およびＳＭＭ患者＃４由来のＭＰ−ＣＴＬに、さらなる３回のマルチペプチド刺激（合計７サイクルの刺激）を与え、それらをフローサイトメトリーによって解析した。さらなる３サイクルのＭＰ刺激は、ＥＭサブセットのさらなる拡大をもたらした（サイクル４  対  サイクル７）（図２０ｂ）。さらなる実験において、３人のＳＭＭ患者から生成されたＭＰ−ＣＴＬからのＥＭおよびＴＥサブセットを、様々ながん細胞株に応答したＩＦＮ−γ産生およびＣＤ１０７αアップレギュレーションについて評価した。ＴＥと比べて、３人すべての患者由来のＭＰ−ＣＴＬ内のＥＭ細胞が、ＨＬＡ−Ａ２＋ＭＭ細胞株ＭｃＣＡＲに応答して、より高いパーセンテージのＩＦＮ−γ＋ＣＤ１０７α＋二重陽性細胞を示す（図２０ｃ）。さらに、ナイーブ（ＣＤ４５ＲＯ−ＣＣＲ７＋）ＣＤ８＋Ｔ細胞と比べて、４人のくすぶり型多発性骨髄腫患者から生成されたＭＰ−ＣＴＬ内のメモリー（ＣＤ４５ＲＯ＋）タイプのＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＨＬＡ−Ａ２＋多発性骨髄腫細胞株Ｕ２６６に対してＣＤ６９活性化マーカーのより高い発現を示したことから、メモリーサブセットによるＭＰ−ＣＴＬのより高い抗腫瘍活性が裏付けられた（図２０ｄ）。
【０４７９】
実施例２１．非スプライシング型ＸＢＰ１、スプライシング型ＸＢＰ１、ＣＤ１３８およびＣＳ１由来のペプチドは、高親和性でＨＬＡ−Ａ２４に結合する。
非スプライシング型またはスプライシング型ＸＢＰ１タンパク質（上記を参照のこと）の全長配列を、検索ソフトウェアＳＹＦＰＥＩＴＨＩ（ＭＨＣリガンドおよびペプチドモチーフのデータベース，Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｌｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｈｅｉｄｌｂｅｒｇ）を用いて解析して、ＨＬＡ−Ａ２４に特異的なペプチドを予測した後、ＢＩＭＡＳプログラムを用いて解析して、長い半減期解離速度を有するペプチドを選択した。非スプライシング型ＸＢＰ１由来の以下のペプチドを、潜在的なＨＬＡ−Ａ２４結合ペプチドとして選択した：ペプチド１（配列番号３３）、ペプチド２（配列番号５）、ペプチド３（配列番号３４）、ペプチド４（配列番号３５）、ペプチド５（配列番号３６）、ペプチド６（配列番号３７）およびペプチド７（配列番号２９）。スプライシング型ＸＢＰ１由来の以下のペプチドを、潜在的なＨＬＡ−Ａ２４結合ペプチドとして選択した：ペプチド１（配列番号３０）、ペプチド２（配列番号３８）、ペプチド３（配列番号３９）およびペプチド４（配列番号５）。ＣＤ１３８由来の以下のペプチドを、潜在的なＨＬＡ−Ａ２４結合ペプチドとして選択した：ペプチド１（配列番号３１）、ペプチド２（配列番号４０）、ペプチド３（配列番号４１）、ペプチド４（配列番号４２）、ペプチド５（配列番号４３）、ペプチド６（配列番号４４）およびペプチド７（配列番号４５）。ＣＳ１由来の以下のペプチドを、潜在的なＨＬＡ−Ａ２４結合ペプチドとして選択した：ペプチド１（配列番号４６）、ペプチド２（配列番号４７）、ペプチド３（配列番号４８）、ペプチド４（配列番号４９）、ペプチド５（配列番号３２）およびペプチド６（配列番号５０）。これらの天然ＸＢＰ１ペプチド、およびＨＬＡ−Ａ２４結合ペプチドであると知られているＨＩＶエンベロープタンパク質５８３−５９１（配列番号５３７）のＨＬＡ−Ａ２４親和性を、Ｔ２ペプチド結合アッセイを用いて、１ｍｇ／ｍｌのペプチド濃度において評価した。それらのペプチドの特異的な親和性を、ＨＬＡ−Ａ２４へのペプチド結合後のＴ２細胞に対するＨＬＡ−Ａ２４アップレギュレーションの関数である、ＨＬＡ−Ａ２４−平均蛍光強度（ＭＦＩ）として評価した。試験されたペプチドのうち、以下のペプチドが、ＨＬＡ−Ａ２４に対して、ＨＩＶエンベロープタンパク質５８３−５９１（配列番号５３７）の結合親和性に匹敵するかまたはそれより高い結合親和性を示した：非スプライシング型ＸＢＰ１由来のペプチド４および７、スプライシング型ＸＢＰ１由来のペプチド１、ＣＤ１３８由来のペプチド１、３および４、ならびにＣＳ１由来のペプチド３および５（図２１）。次いで、それらの高親和性ペプチドのＨＬＡ−Ａ２４親和性を、より低いペプチド濃度を使用して、Ｔ２ペプチド結合アッセイにおいて解析した（図２２〜２４）。これらのデータに基づいて、各タンパク質由来の１つのペプチドを含む以下の４つのペプチドを、さらなる調査のために選択した：非スプライシング型ＸＢＰ１由来のペプチド７（ＸＢＰ１１８６−１９４，配列：ＩＳＰＷＩＬＡＶＬ，配列番号２９）、スプライシング型ＸＢＰ１由来のペプチド１（ＳＰ  ＸＢＰ１２２４−２３２，配列：ＶＹＰＥＧＰＳＳＬ，配列番号３０）、ＣＤ１３８由来のペプチド３（ＣＤ１３８２６５−２７３，配列：ＩＦＡＶＣＬＶＧＦ，配列番号３１）およびＣＳ１由来のペプチド５（ＣＳ１２４０−２４８，配列：ＬＦＶＬＧＬＦＬＷ，配列番号３２）。
【０４８０】
実施例２２：ＸＢＰ１、ＣＤ１３８およびＣＳ１ペプチドでの刺激による２人のドナー由来のＴ細胞におけるＣＤ８＋ＣＴＬのパーセンテージ
【０４８１】
２人のドナー患者由来のＣＴＬを、フローサイトメトリーによって特定のＴ細胞について解析した。各患者のＴ細胞から生成されたペプチド特異的ＣＴＬは、高いパーセンテージのＣＤ８＋ＣＴＬを示す（図２６）。
【０４８２】
実施例２３：ＨＬＡ−Ａ２４＋多発性骨髄腫細胞に応答したペプチド特異的ＣＴＬのＩＦＮ−γ産生および細胞活性化
【０４８３】
ペプチド特異的ＣＴＬを、ＨＬＡ−Ａ２４＋（ＫＭＳ）およびＨＬＡ−Ａ２４−（ＯＭＰ１およびＵ２６６）多発性骨髄腫細胞株に応答したＩＦＮ−γおよびＣＤ８の発現について、フローサイトメトリーによって解析した。ペプチド特異的ＣＴＬのＩＦＮ−γ発現は、ＨＬＡ−Ａ２４＋で刺激されると増加したが、ＨＬＡ−Ａ２４−多発性骨髄腫細胞で刺激されても増加しなかった（図２８および２９）。
【０４８４】
実施例２４：ＨＬＡ−Ａ２４＋多発性骨髄腫細胞株に応答したペプチド特異的ＣＴＬのＩＦＮ−γ産生および脱顆粒
【０４８５】
ペプチド特異的ＣＴＬを、多発性骨髄腫細胞株に応答して脱顆粒する能力およびＩＦＮ−γを産生する能力について解析した。ペプチド特異的ＣＴＬを、ＨＬＡ−Ａ２４＋（ＫＭＳ１１）およびＨＬＡ−Ａ２４−（ＯＭＰ１）多発性骨髄腫細胞株とともにインキュベートした。ＣＤ１０７αおよびＩＦＮ−γ産生をフローサイトメトリーによって解析した。ペプチド特異的ＣＴＬによるＣＤ１０７αのアップレギュレーションおよびＩＦＮ−γの産生は、ＨＬＡ−Ａ２４＋多発性骨髄腫細胞での刺激によって増加したが、ＨＬＡ−Ａ２４−多発性骨髄腫細胞での刺激では増加しなかった（図３１）。
【０４８６】
実施例２５：ＨＬＡ−Ａ２４＋多発性骨髄腫細胞に応答したペプチド特異的ＣＴＬの増殖。
【０４８７】
多発性骨髄腫細胞からの刺激に応答したペプチド特異的ＣＴＬの増殖を、ＣＦＳＥ増殖アッセイを用いて解析した。ペプチド特異的ＣＴＬの増殖を、ＨＬＡ−Ａ２４＋多発性骨髄腫細胞株ＫＭＳ１１もしくはＨＬＡ−Ａ２４−多発性骨髄腫細胞株ＯＭＰ１での刺激のいずれかの後または刺激なしでの、ＣＦＳＥで標識されたＭＰ−ＣＴＬ（Ｐ３ゲート細胞）の蛍光の減少として６および８日目に測定した。そのペプチド特異的ＣＴＬは、６日目（図３３ａ）および８日目（図３３ｂ）に、ＨＬＡ−Ａ２４＋多発性骨髄腫細胞に応答して高レベルの細胞増殖を示したが、ＨＬＡ−Ａ２４−多発性骨髄腫細胞に応答して、高レベルの細胞増殖を示すことはなかった。
【０４８８】
実施例２６：ＨＬＡ−Ａ２４＋多発性骨髄腫細胞に応答したペプチド特異的ＣＴＬによるＩＬ−２産生。
【０４８９】
多発性骨髄腫細胞からの刺激に応答したペプチド特異的ＣＴＬによるＩＬ−２産生を、フローサイトメトリーによって解析した。ペプチド特異的ＣＴＬの増殖によるＩＬ−２産生を、ＨＬＡ−Ａ２４＋多発性骨髄腫細胞株ＫＭＳ１１もしくはＨＬＡ−Ａ２４−多発性骨髄腫細胞株ＯＭＰ１およびＵ２６６での刺激のいずれかの後にまたは刺激なしで、測定した。そのペプチド特異的ＣＴＬは、ＨＬＡ−Ａ２４＋多発性骨髄腫細胞に応答して高レベルのＩＬ−２産生を示したが、ＨＬＡ−Ａ２４−多発性骨髄腫細胞に応答して、高レベルのＩＬ−２産生を示すことはなかった（図３４）。
【０４９０】
実施例２７：ＨＬＡ−Ａ２４＋結腸がん細胞に応答したペプチド特異的ＣＴＬのＩＦＮ−γ産生および細胞活性化。
【０４９１】
２人のドナー由来のペプチド特異的ＣＴＬを、ＨＬＡ−Ａ２４＋結腸がん細胞株（ＳＷ４８０）およびＨＬＡ−Ａ２４−結腸がん細胞株（ＷｉＤｒおよびＬＳ１８０）に応答したＩＦＮ−γおよびＣＤ８の発現についてフローサイトメトリーによって解析した。ＣＤ８およびＩＦＮ−γの発現を、フローサイトメトリーによって解析した。ペプチド特異的ＣＴＬのＩＦＮ−γの発現は、ＨＬＡ−Ａ２４＋で刺激されると増加したが、ＨＬＡ−Ａ２４−結腸がん細胞で刺激されても増加しなかった（図３５および３７）。
【０４９２】
実施例２８：ＨＬＡ−Ａ２４＋結腸がん細胞に応答したペプチド特異的ＣＴＬのＩＦＮ−γ産生および脱顆粒。
【０４９３】
ペプチド特異的ＣＴＬを、ＨＬＡ−Ａ２４＋結腸がん細胞株（ＳＷ４８０）およびＨＬＡ−Ａ２４−結腸がん細胞株（ＷｉＤｒおよびＬＳ１８０）に応答して脱顆粒する能力およびＩＦＮ−γを産生する能力について解析した。ＣＤ１０７αおよびＩＦＮ−γ産生を、フローサイトメトリーによって解析した。ペプチド特異的ＣＴＬによるＣＤ１０７αのアップレギュレーションおよびＩＦＮ−γの産生は、ＨＬＡ−Ａ２４＋の刺激によって増加したが、ＨＬＡ−Ａ２４−結腸がん細胞で刺激されても増加しなかった（図３６および３８）。
【０４９４】
実施例２９：様々な量のＨＬＡ−Ａ２４＋結腸がん細胞に応答したＣＤ１３８−ＣＴＬにおける脱顆粒ならびにＩＦＮ−γおよびＩＬ−２の産生。
【０４９５】
ＣＤ１３８−ＣＴＬを、ＣＴＬと腫瘍細胞の５：１、１：１および１：５という比においてＨＬＡ−Ａ２４＋結腸がん細胞（ＳＷ４８０）およびＨＬＡ−Ａ２４−結腸がん細胞（ＬＳ１８０）に応答して脱顆粒する能力ならびにＩＦＮ−γおよびＩＬ−２を産生する能力について解析した。脱顆粒、ＩＦＮ−γ産生およびＩＬ−２産生は、ＨＬＡ−Ａ２４＋結腸がん細胞で刺激されると、腫瘍細胞に対するより高い割合のＣＴＬにおいて実質的な増加を示した（図３９ａ）が、ＨＬＡ−Ａ２４−結腸がん細胞で刺激されても増加を示さなかった（図３９ｂ）。
【０４９６】
実施例３０：ＨＬＡ−Ａ２４＋結腸がん細胞および多発性骨髄腫細胞に応答したＨＬＡ−Ａ２４特異的ＣＤ１３８ペプチド特異的ＣＴＬの細胞活性化、ＩＦＮ−γ産生および脱顆粒。
【０４９７】
２人のドナー由来のペプチド特異的ＣＴＬを、ＨＬＡ−Ａ２４＋結腸がん細胞株（ＳＷ４８０）および多発性骨髄腫細胞株（ＫＭＳ１１）に応答したＣＤ８発現、脱顆粒およびＩＦＮ−γ産生について解析した。両方のドナー由来のスプライシング型ＸＢＰ１−ＣＴＬおよびＣＤ１３８−ＣＴＬが、結腸がん細胞に応答して高い活性化、ＩＦＮ−γ産生および脱顆粒を示した（図４０および４１）。ドナーＡ由来の非スプライシング型ＸＢＰ１−ＣＴＬは、結腸がん細胞に応答して高い活性化、ＩＦＮ−γ産生および脱顆粒を示したのに対し、これらの効果は、ドナーＢ由来の非スプライシング型ＸＢＰ１−ＣＴＬにおける多発性骨髄腫細胞に対する応答において、より強かった（図４０および４１）。
【０４９８】
実施例３１：ＨＬＡ−Ａ２４＋膵がん細胞に応答したペプチド特異的ＣＤ１３８−ＣＴＬのＩＦＮ−γ産生および細胞活性化。
【０４９９】
ドナーＢ由来のペプチド特異的ＣＴＬを、ＨＬＡ−Ａ２４＋結腸がん細胞株（８９０２およびＰＬ４５）およびＨＬＡ−Ａ２４−結腸がん細胞株（ＭｉａＰａｃａ）に応答したＩＦＮ−γおよびＣＤ８の発現についてフローサイトメトリーによって解析した。ＣＤ８およびＩＦＮ−γの発現を、フローサイトメトリーによって解析した。ペプチド特異的ＣＴＬのＩＦＮ−γ発現は、ＨＬＡ−Ａ２４＋膵がん細胞で刺激されると増加したが、ＨＬＡ−Ａ２４−膵がん細胞で刺激されても増加しなかった（図４２）。
【０５００】
実施例３２：様々な量のＨＬＡ−Ａ２４＋膵がん細胞に応答したＣＤ１３８−ＣＴＬにおける脱顆粒ならびにＩＦＮ−γおよびＩＬ−２の産生。
【０５０１】
ＣＤ１３８−ＣＴＬを、ＣＴＬと腫瘍細胞の１：１および１：５という比においてＨＬＡ−Ａ２４＋（Ｐａｎｃ１）膵がん細胞に応答して脱顆粒する能力ならびにＩＦＮ−γおよびＩＬ−２を産生する能力について解析した。脱顆粒、ＩＦＮ−γ産生およびＩＬ−２産生は、ＣＴＬと腫瘍細胞の１：１という比においてより高かった（図４３）。
【０５０２】
実施例３３：非スプライシング型ヘテロクリティックＸＢＰ１１８４−１９２（ＹＩＳＰＷＩＬＡＶ）（配列番号６）およびスプライシング型ヘテロクリティックＸＢＰ１  ＳＰ１９６−２０４（ＹＬＦＰＱＬＩＳＶ）（配列番号１０）ペプチドによる、機能的に活性なメモリー細胞の誘導。
【０５０３】
非スプライシング型ヘテロクリティックＸＢＰ１１８４−１９２（ＹＩＳＰＷＩＬＡＶ）（配列番号６）およびスプライシング型ヘテロクリティックＸＢＰ１  ＳＰ１９６−２０４（ＹＬＦＰＱＬＩＳＶ）（配列番号１０）ペプチドのカクテルで誘導された細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）は、腫瘍細胞上の特異的なＸＢＰ１抗原を認識して標的化し得る、セントラルメモリー（ＣＭ）ＣＤ８＋Ｔ細胞とエフェクターメモリー（ＥＭ）ＣＤ８＋Ｔ細胞の両方を含む（図４４、４５および４６）。ＸＢＰ１ペプチド特異的ＣＴＬ（ＸＢＰ１−ＣＴＬ）は、乳がん細胞株（ＭＢ２３１；図４７）、結腸がん細胞株（ＬＳ１８０；図４８）または膵がん細胞株（Ｐａｎｃ１；図４９）に応答して、メモリーＣＴＬサブセット内の高レベルの細胞増殖を示す。全体的に見て、エフェクターメモリーＣＴＬは、種々の腫瘍細胞株に応答して、セントラルメモリーＣＴＬ（図４７、４８および４９）と比べてより高いレベルの細胞増殖を有した。対照的に、セントラルメモリーＣＴＬは、ＨＬＡ−Ａ２＋乳がん細胞株（ＭＢ２３１、ＭＣＦ７）、結腸がん細胞株（ＬＳ１８０、ＳＷ４８０）および膵がん細胞株（Ｐａｎｃ１、ＰＬ４５）に応答して、エフェクターメモリーＣＴＬと比べてより高いレベルのＩＦＮ−γ産生、ＩＬ−２産生および細胞傷害活性を誘導した（図５０、５１、５２、５３、５４、５５）。Ｔ−ｂｅｔおよびＥｏｍｅｓは、エフェクターおよびメモリーＴ細胞に見られる重要な転写制御因子であり、抗腫瘍活性に関する役割を有する。ＸＢＰ１−ＣＴＬメモリー細胞は、Ｔ−ｂｅｔ（図５６、５７、５８）とＥｏｍｅｓ（図６２、６３、６４）の両方の高レベルの発現を示した。乳がん株、結腸がん株および膵がん株に応答して、Ｔ−ｂｅｔ＋（図５９、６０、６１）およびＥｏｍｅ＋（図６５、６６、６７）細胞は、高レベルのＩＦＮ−γ産生を示す。ＸＢＰ１−ＣＴＬ内のメモリー細胞を、乳がん株、結腸がん株および膵がん株に対するグランザイムＢのアップレギュレーション（抗腫瘍細胞傷害活性の指標）について評価した。非メモリー細胞と比べて、メモリー細胞は、より高いレベルのグランザイムのアップレギュレーションを示した（図６８）。さらに、グランザイム＋ＸＰＢ１−ＣＴＬは、乳がん細胞、結腸がん細胞または膵がん細胞に応答してＩＦＮ−γも産生した（図６９、７０、７１）。ゆえに、非スプライシング型ヘテロクリティックＸＢＰ１１８４−１９２（ＹＩＳＰＷＩＬＡＶ）（配列番号６）およびスプライシング型ヘテロクリティックＸＢＰ１  ＳＰ１９６−２０４（ＹＬＦＰＱＬＩＳＶ）（配列番号１０）ペプチドのカクテルで誘導されたＣＴＬは、セントラルメモリーＣＤ８＋Ｔ細胞とエフェクターメモリーＣＤ８＋Ｔ細胞の両方を含み、そのＸＢＰ１−ＣＴＬのメモリー細胞は、乳がん、結腸がんおよび膵がん細胞に対して抗腫瘍活性を示した。
【０５０４】
実施例３４：レナリドマイド処置は、ＸＢＰ１−ＣＴＬ内のメモリー細胞サブセットの総数および機能を増加させる。
【０５０５】
ＸＢＰ１ペプチド特異的ＣＴＬ内のメモリーＣＤ８＋Ｔ細胞の数は、レナリドマイドでの処置（５μＭで５日間）の後に増加する（図７２）。この観察結果は、ＸＢＰ１−ＣＴＬ内の非メモリーＣＤ８＋Ｔ細胞の全体の減少に対応する。セントラルメモリーＣＤ８＋Ｔ細胞またはセントラルメモリーＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔ細胞の頻度のそれぞれ一貫した増加またはいくらかの増加は、レナリドマイドでの処置後に検出される（図７３）。さらに、Ｔ細胞活性化および他の免疫学的機能に対する重要なマーカー（すなわち、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ６９、ＣＤ３８）が、レナリドマイドで処置されるとＸＢＰ１−ＣＴＬ上で増加する（図７４）。ＸＢＰ１−ＣＴＬの、全ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔ細胞、セントラルメモリーＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔ細胞およびエフェクターメモリーＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔ細胞が、レナリドマイドでの処置によって、乳がん細胞（ＭＢ２３１；図７５、７６）、膵がん細胞（Ｐａｎｃ１；図７７、７８）または結腸がん細胞（ＳＷ４８０；図７９、８０）に応答した、高いレベルのＴ−ｂｅｔ発現／ＩＦＮ−γ産生およびＥｏｍｅｓ発現／ＩＦＮ−ｇ産生を示す。レナリドマイドで処置されたメモリーＸＢＰ１−ＣＴＬは、ＸＢＰ１  ＣＴＬ単独と比べて、乳がん細胞（ＭＢ２３１；図８１）、膵がん細胞（Ｐａｎｃ１；図８２）または結腸がん細胞（ＳＷ４８０；図８３）に対して多機能性の免疫応答（細胞傷害性およびＩＦＮ−γ産生）を増加させた。ゆえに、これらの結果は、非スプライシング型ヘテロクリティックＸＢＰ１１８４−１９２（ＹＩＳＰＷＩＬＡＶ）（配列番号６）およびスプライシング型ヘテロクリティックＸＢＰ１  ＳＰ１９６−２０４（ＹＬＦＰＱＬＩＳＶ）（配列番号１０）ペプチドのカクテルで誘導されたＣＴＬの抗活性が、レナリドマイドによるＣＴＬの処置によって増強されたという証拠を提供する。
【０５０６】
他の実施形態
本発明は、その詳細な説明と併せて記載されてきたが、前述の説明は、本発明の範囲を例証することを意図しており、限定することを意図するものではなく、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によって定義される。他の態様、利点および改変は、以下の特許請求の範囲の範囲内である。
【図１ａ】
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【図１ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６ａ】
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【図６ｂ】
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【図７】
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【図８ａ】
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【図８ｂ】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５ａ】
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【図１５ｂ】
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【図１６ａ】
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【図１６ｂ】
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【図１７ａ】
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【図１７ｂ】
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【図１８ａ】
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【図１８ｂ】
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【図１９ａ】
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【図１９ｂ】
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【図１９ｃ】
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【図１９ｄ】
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【図２０ａ】
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【図２０ｂ】
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【図２０ｃ】
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【図２０ｄ】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６ａ】
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【図２６ｂ】
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【図２６ｃ】
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【図２６ｄ】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９ａ】
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【図２９ｂ】
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【図２９ｃ】
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【図２９ｄ】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３ａ】
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【図３３ｂ】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９ａ】
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【図３９ｂ】
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【図４０ａ】
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【図４０ｂ】
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【図４１ａ】
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【図４１ｂ】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９】
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【図５０】
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【図５１】
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【図５２】
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【図５３】
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【図５４】
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【図５５】
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【図５６】
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【図５７】
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【図５８】
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【図５９】
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【図６０】
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【図６１】
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【図６２】
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【図６３】
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【図６４】
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【図６５】
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【図６６】
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【図６７】
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【図６８】
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【図６９】
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【図７０】
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【図７１】
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【図７２】
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【図７３】
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【図７４】
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【図７５】
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【図７６】
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【図７７】
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【図７８】
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【図７９】
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【図８０】
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【図８１】
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【図８２】
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【図８３】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】平成30年9月19日(2018.9.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号２９のアミノ酸配列を含む、３５アミノ酸長以下の非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、
３５アミノ酸長以下の、かつ、配列番号３０のアミノ酸配列を含む、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、
３５アミノ酸長以下の、かつ、配列番号３１のアミノ酸配列を含む、ＣＤ１３８ペプチド、
を含む、組成物。
【請求項２】
配列番号３２のアミノ酸配列を含む３５アミノ酸長以下のＣＳ−１ペプチドをさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが配列番号２９のアミノ酸配列からなり、
前記スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが配列番号３０のアミノ酸配列からなり、かつ
前記ＣＤ１３８ペプチドが配列番号３１のアミノ酸配列からなる、
請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが配列番号２９のアミノ酸配列からなり、
前記スプライシング型ＸＢＰ１ペプチドが配列番号３０のアミノ酸配列からなり、
前記ＣＤ１３８ペプチドが配列番号３１のアミノ酸配列からなり、かつ
前記ＣＳ−１ペプチドが配列番号３２のアミノ酸配列からなる、
請求項２に記載の組成物。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物と、薬学的に許容され得るキャリアとを含む、薬学的組成物。
【請求項６】
多発性骨髄腫、くすぶり型多発性骨髄腫  乳がん、結腸がん、膵臓がん、前立腺がんまたは白血病を有する被験体における免疫応答の誘導における使用のための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物、または、請求項５に記載の薬学的組成物。
【請求項７】
被験体における多発性骨髄腫、くすぶり型多発性骨髄腫、乳がん、結腸がん、膵臓がん、前立腺がんまたは白血病の処置における使用のための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物、または、請求項５に記載の薬学的組成物。
【請求項８】
前記乳がんが、エストロゲン受容体陽性乳がん、エストロゲン受容体陰性乳がん、ＨＥＲ−２陽性乳がん、ＨＥＲ−２陰性乳がん、トリプルネガティブ乳がん、または炎症性乳がんである、請求項６または７に記載の使用のための組成物。
【請求項９】
化学療法剤、電離放射線、または免疫療法剤の１つ以上から選択されるさらなる処置と組み合わせて投与するために製剤化される、請求項６〜８のいずれかに記載の使用のための組成物。
【請求項１０】
１つ以上の免疫刺激剤および／または１つ以上の免疫調節剤と組み合わせて投与するために製剤化される、請求項６〜９のいずれかに記載の組成物。
【請求項１１】
前記１つ以上の免疫刺激剤が、カルボキシメチルセルロース、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸およびポリ−Ｌ−リジン二本鎖ＲＮＡを含むアジュバント；水と油のエマルジョンを含むアジュバント；ならびに、タンパク質を含むアジュバントから選択される、請求項１０に記載の使用のための組成物。
【請求項１２】
前記１つ以上の免疫調節剤が、免疫系を活性化する抗体、および、小分子アジュバントから選択される、請求項１０に記載の使用のための組成物。
【請求項１３】
前記カルボキシメチルセルロース、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸およびポリ−Ｌ−リジン二本鎖ＲＮＡを含むアジュバントが、ポリＩＣＬＣである、請求項１１に記載の使用のための組成物。
【請求項１４】
前記水と油のエマルジョンを含むアジュバントが、モンタナイドである、請求項１１に記載の使用のための組成物。
【請求項１５】
前記小分子アジュバントがサリドマイド誘導体である、請求項１２に記載の使用のための組成物。
【請求項１６】
前記小分子アジュバントがレナリドマイドである、請求項１５に記載の使用のための組成物。
【請求項１７】
抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤＬ−１抗体またはＨＤＡＣ阻害剤と組み合わせて使用するための、請求項６〜１６のいずれかに記載の使用のための組成物。
【請求項１８】
がんもしくは前がん状態を有する被験体における免疫応答の誘導、および／または、被験体におけるがんもしくは前がん状態の処置における使用のための組成物であって、
配列番号２９のアミノ酸配列を含む、３５アミノ酸長以下の非スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、
３５アミノ酸長以下の、かつ、配列番号３０のアミノ酸配列を含む、スプライシング型ＸＢＰ１ペプチド、
３５アミノ酸長以下の、かつ、配列番号３１のアミノ酸配列を含む、ＣＤ１３８ペプチド、
を含み、該組成物は、免疫系を活性化する抗体またはＨＤＡＣ阻害剤と組み合わせて使用するためのものである、組成物。
【請求項１９】
配列番号３２のアミノ酸を含む３５アミノ酸長以下のＣＳ−１ペプチドをさらに含む、請求項１８に記載の使用のための組成物。
【請求項２０】
前記免疫系を調節する抗体が、抗ＰＤ−１抗体または抗ＰＤＬ−１抗体から選択される、請求項１８または１９に記載の使用のための組成物。
【請求項２１】
前記がんが多発性骨髄腫もしくは乳がん、例えば、トリプルネガティブ乳がんであるか、または、前記前がん状態がくすぶり型多発性骨髄腫である、請求項１８〜２０のいずれかに記載の使用のための組成物。
【請求項２２】
前記被験体がＨＬＡ−Ａ２４を発現する、請求項６〜２１のいずれかに記載の使用のための組成物。