(57)【要約】【課題】測定対象の試料における複数の部分を透過した光の各光量に基づいて、前記試料の吸光度分布を近似式により推定するにあたり、分析を高速化しても吸光度分布を精度良く求められる方法を提供する。他の目的は、こうした推定方法を用いた分光分析装置を提供する。【解決手段】測定対象の試料における複数の部分を透過した光の各光量に基づいて、前記試料の吸光度分布を近似式により推定する方法であって、前記近似式を、当該近似式による吸光度から換算された光量と予め記憶された光量との誤差が最小となる条件で決定する方法。【選択図】図６
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
測定対象の試料における複数の部分を透過した光の各光量に基づいて、前記試料の吸光度分布を近似式により推定する方法であって、
前記近似式を、当該近似式による吸光度から換算された光量と前記各光量との誤差が最小となる条件で決定することを特徴とする、方法。
【請求項２】
前記各光量は、複数の波長ごとに測定されており、
前記近似式は、各波長で相似であることを特徴とする、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記近似式は、前記試料における複数の部分のそれぞれついて決定することを特徴とする、請求項１記載の方法。
【請求項４】
前記近似式に基づいて、吸光度のピーク位置または吸光度の強度を求めることを特徴とする、請求項１記載の方法。
【請求項５】
光源と、当該光源から出力され、試料を透過した光を受光して光量を出力する受光手段とにより構成される光学系と、
当該光学系または前記試料を移動させながら、当該試料における複数の部分を透過したときの前記光量を順次記憶する記憶手段と、
前記記憶手段に記憶された光量に基づいて、試料の吸光度分布を近似式により推定する推定手段とを有し、
前記推定手段は、前記近似式を、当該近似式による吸光度から換算された光量と前記記憶された光量との誤差が最小となる条件で決定することを特徴とする、分光分析装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、測定対象の試料における複数の部分を透過した光の各光量に基づいて、前記試料の吸光度分布を近似式により推定する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
分光分析装置は、物質が特定の波長において固有の吸光係数を有するという特性を利用し、吸光される波長によって物質を特定し、その波長における吸光度（または透過率）によって物質の濃度を測定する装置である。分光分析装置としては、赤外線、可視光線等を利用する装置や、クロマトグラフなどが知られている（例えば、特許文献１）。
【０００３】
分光分析装置は、測定対象とする試料に光源から光を照射し、試料を透過した光をグレーティングミラーで分光し、分光した光の光量を分光光度計に備えられた受光手段である光センサーで測定する。光センサーには、例えば、フォトダイオードアレイ（ＰＤＡ）素子が用いられている。
【０００４】
上記分光光度計は、上記光センサーの他に、光量を順次記憶する記憶手段を備えている。記憶手段は、光センサーで刻々と測定された光量を演算して試料の吸光度を推定する推定手段を有している。時間または空間を引数として推定手段で推定した複数の吸光度を線で結ぶことによって、吸光度のピークを求めることができる。
【０００５】
ＰＤＡ素子を備えた分光光度計では、ＰＤＡ素子で測定された光量を規定のＰＤＡ積算時間で積算し、吸光度を推定する。ＰＤＡ素子で光量を測定するときの積算時間は、一般に、分光分析装置に設けられたランプ光源、およびスリット幅に応じて、吸光度ピークのＳ／Ｎ比を考慮して一定の値に設定される。このためＰＤＡ素子による測定周期は、分光分析装置に依存することなく固定される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２００３−１８５４９８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
分光分析装置のうちクロマトグラフとしては、ガスクロマトグラフ（ＧＣ）や液体クロマトグラフ（ＬＣ）が知られている。例えば、液体クロマトグラフは、試料に含まれる成分が溶媒へ溶け出すのに必要な溶出時間が成分によって異なることを利用し、測定領域に時系列に流れてくる成分の吸光度を測定し、各成分の濃度を検出する装置である。液体クロマトグラフでは、測定領域に成分が時間方向にずれて流れてくるが、単一の物質であっても、時間方向に一定の広がりを持って溶出するため、測定領域に存在する物質の濃度は一定の広がりをもって変動し、その吸光度も一定の広がりをもって変動する。従って、１回の光量の測定時間（蓄積時間）が長くなると信号強度が高くなるため、Ｓ／Ｎ比は増加するものの、その期間中における光量の変動が大きくなる。即ち、１回の測定時間中に光量は大きく変動しているにも関わらず、観測されるのは、その期間における光量の積分値にすぎない。よって、光量には非線型の歪みが生じる。
【０００８】
一方、吸光度は、光量の対数に対応するため、光量の吸光度の平均値は吸光度の平均値と一致しないため、非線型の歪みが生じた光量に基づいて推定される吸光度の精度は更に低下する。例えば、基準の吸光度を１、基準の光量を１Ｅ−１（即ち、１０−１）とすると、吸光度が２のときの光量は１Ｅ−２（即ち、１０−２）、吸光度が３のときの光量は１Ｅ−３（即ち、１０−３）となる。
【０００９】
吸光度が２と吸光度が３の吸光度の平均は２．５となる。
（２＋３）／２＝２．５
【００１０】
一方、吸光度が２のとき光量と吸光度が３のときの光量との平均を求めると５．５Ｅ−３（即ち、５．５×１０−３）となる。
｛（１Ｅ−２）＋（１Ｅ−３）｝／２＝５．５Ｅ−３
【００１１】
光量５．５Ｅ−３を吸光度に換算すると、おおよそ２．２６となり、上述した吸光度の平均（２．５）と一致しない。
【００１２】
分光光度計での測定が単一波長であれば、吸光度の平均と、光量の平均を換算して求められる吸光度が一致しない場合であっても、定量精度が落ちる程度の影響しか受けない。しかし、分光光度計で複数の波長を計測して吸光度スペクトルとして扱う場合は、単一物質の結果であるのに、ピーク波形の傾斜やピーク強度に応じてスペクトルが歪む事を示す。このため、不純物を含まない単一物質であっても、スペクトル変動があるように検出され、不純物を含むように見えたり、スペクトル形状による物質同定精度が低下するという問題があった。
【００１３】
こうした問題を防ぐために、従来では、吸光度ピーク半値幅に対して、測定点を２０点以上確保することが求められる。
【００１４】
しかし、実際の測定では、光量の蓄積時間はほぼ固定されているため、光量の蓄積時間を調整して測定点の数を調整することは難しい。
【００１５】
また、分光分析装置（特に、クロマトグラフ）は、近年、高分解能化が進んでいる反面、分析時間を短く、分析を高速化することが望まれている。分析を高速化するには、サンプリング回数を減らすことが考えられ、サンプリング回数を減らしても吸光度のピークを精度良く検出することが望まれる。しかし、サンプリング回数を減らすと、信号強度が低下するため、Ｓ／Ｎ比が低下し、推定される吸光度の精度が悪くなる。
【００１６】
本発明は上記の様な事情に着目してなされたものであって、その目的は、測定対象の試料における複数の部分を透過した光の各光量に基づいて、前記試料の吸光度分布を近似式により推定するにあたり、分析を高速化しても吸光度分布を精度良く求められる方法を提供することにある。また、本発明の他の目的は、こうした推定方法を用いた分光分析装置を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
上記課題を解決することのできた本発明に係る方法とは、測定対象の試料における複数の部分を透過した光の各光量に基づいて、前記試料の吸光度分布を近似式により推定する方法であって、前記近似式を、当該近似式による吸光度から換算された光量と予め記憶された光量との誤差が最小となる条件で決定する点に要旨を有する。
【００１８】
前記各光量は、複数の波長ごとに測定されており、前記近似式は、各波長で相似であることが好ましい。
【００１９】
前記近似式は、前記試料における複数の部分のそれぞれついて決定することが好ましい。
【００２０】
前記近似式に基づいて、吸光度のピーク位置または吸光度の強度を求めることが好ましい。
【００２１】
上記課題を解決できた本発明に係る分光分析装置とは、光源と、当該光源から出力され、試料を透過した光を受光して光量を出力する受光手段とにより構成される光学系と、当該光学系または前記試料を移動させながら、当該試料における複数の部分を透過したときの前記光量を順次記憶する記憶手段と、前記記憶手段に記憶された光量に基づいて、試料の吸光度分布を近似式により推定する推定手段とを有し、前記推定手段は、前記近似式を、当該近似式による吸光度から換算された光量と前記記憶された光量との誤差が最小となる条件で決定する点に要旨を有する。
【発明の効果】
【００２２】
本発明によれば、測定対象の試料における複数の部分を透過した光の各光量に基づいて、前記試料の吸光度分布を近似式により推定するにあたり、前記近似式を、当該近似式による吸光度から換算された光量と予め記憶された光量との誤差が最小となる条件で決定しているため、分析を高速化しても吸光度分布を精度良く求めることができる。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】図１は、液体クロマトグラフの構成の一部を示したブロック図である。
【図２】図２は、吸光度分布を推定する手順を説明するためのフローチャートを示している。
【図３】図３は、クロマトグラフの保持時間に対して吸光度分布をプロットしたグラフである。
【図４】図４は、クロマトグラフの保持時間に対して吸光度分布をプロットしたグラフである。
【図５】図５は、クロマトグラフの保持時間に対して吸光度分布をプロットしたグラフである。
【図６】図６は、クロマトグラフの保持時間に対して吸光度分布をプロットしたグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本発明者は、測定対象の試料における複数の部分を透過した光の各光量に基づいて、前記試料の吸光度分布を近似式により推定するにあたり、分析を高速化しても吸光度分布を精度良く求める方法を提供するために、鋭意検討を重ねてきた。その結果、前記近似式を、当該近似式による吸光度から換算された光量と予め記憶された光量との誤差が最小となる条件で決定すれば、分析を高速化しても、吸光度分布を精度良く求められることを見出し、本発明を完成した。
【００２５】
即ち、本発明は、区間平均を移動平均に変更したうえで、吸光度曲線（例えば、クロマトグラフで求められる曲線）が局所的に多項式に近似できることを利用し、近似式を用いて光量で誤差エネルギーを最小化して（好ましくは、最小二乗法によるあてはめを行って）吸光度分布を推定したものである。従来では光量が１次関数として変化すると仮定して吸光度分布を求めていたが、本発明によれば光量が多項式の関数として変化すると考えて吸光度分布を求めているため、吸光度分布を精度良く求めることができる。また、本発明によれば、従来よりも蓄積時間を短くして信号処理を行うことができるため、細かい時間ステップでデータを表示でき、その結果、クロマトピークの視認性を高めることができる。
【００２６】
以下、本発明について説明する。
【００２７】
まず、本発明の推定方法を実施する推定手段を備えた分光分析装置の一例を、図１を用いて説明する。図１は、分光分析装置として知られている液体クロマトグラフの構成の一部を示したブロック図である。なお、本発明の推定方法を実施できる分光分析装置は、液体クロマトグラフに限定されるものではなく、ガスクロマトグラフなどのクロマトグラフや、赤外線、可視光線等を利用する装置が挙げられる。
【００２８】
液体クロマトグラフは、通常、試料導入部、カラム、光源１、光源１から出力され、試料を透過した光を受光して光量３を出力する受光手段２、Ａ／Ｄ変換器、光量３を記憶する記憶手段４、記憶手段４に記憶された光量３に基づいて、試料の吸光度分布を近似式により推定する推定手段５、およびデータ表示部を含んで構成されている。光源１および受光手段２は、まとめて光学系と呼ばれる。
【００２９】
試料導入部からカラムには一定流量で溶媒が供給されており、試料導入部に試料が注入されると、該試料は溶媒流に随伴してカラムに導入される。カラムを通過する間に試料中の各成分は時間方向に分離され、カラム出口から順に排出され、検出器へ導入される。
【００３０】
検出器は、測定対象とする試料に光を照射する光源１、試料を透過した光を分光するグレーティングミラー、分光した光を受光して光量を出力する受光手段２を備えている。受光手段２は、光センサーと呼ばれることがある。
【００３１】
検出器では、グレーティングミラーで分光した光の光量３が、受光手段２で検出され、検出信号が時々刻々と出力される。出力された検出信号は、Ａ／Ｄ変換器でデジタル値に変換され、光量３を順次記憶する記憶手段４に入力される。
【００３２】
記憶手段４は、Ａ／Ｄ変換器で変換されたデジタル値（クロマトグラムデータ）を格納するメモリ４ａを備えている。メモリ４ａには、後述する図２に示したフローチャートに基づく吸光度分布を推定するプログラムが記憶されている。
【００３３】
記憶手段４に備えられたメモリ４ａは、後述する図２に示した手順でクロマトグラムデータ（即ち、受光手段２で測定された光量）を演算し、試料の吸光度分布を推定手段５で推定し、データ表示部に表示する。
【００３４】
なお、記憶手段４は、例えば、パーソナルコンピュータであり、該コンピュータに予めインストールされたデータ処理ソフトウエアを動作させることにより、各部の機能を実現できる。記憶手段４は、デジタル電子回路でもよい。
【００３５】
上記検出器および記憶手段４において本発明に係る推定方法を用いて吸光度分布を推定する手順を、図２のフローチャートを用いて説明する。なお、図２では、上記Ａ／Ｄ変換器における変換工程は省略して説明した。
【００３６】
Ｓ１は、吸光度分布の推定を開始するステップである。Ｓ２は、移動窓の範囲におけるデータを取得するステップである。Ｓ２では、試料に光源から光を照射し、試料を透過した光をグレーティングミラーで分光し、分光した光の光量を光センサーで測定する。Ｓ３は、近似式ｍ（ｔ）をフィッティングするステップである。Ｓ４は、誤差エネルギーを最小とする近似式ｍ（ｔ）のパラメータを決定し、吸光度分布を決定するステップである。Ｓ５は、全ての処理が済んでいるかどうか、確認するステップである。Ｓ６は、Ｓ５で処理済みと判断された場合に、吸光度分布の推定を終了するステップである。Ｓ７は、Ｓ５で未処理部分があると判断された場合に、移動窓をシフトし、Ｓ２に戻るステップである。
【００３７】
以下、上記Ｓ４で吸光度分布を決定する際に用いる本発明に係る吸光度分布の推定方法について説明する。
【００３８】
本発明に係る吸光度分布の推定方法は、時間ごとまたは空間ごとに試料の吸光度分布を推定する受光手段で刻々と得られた各光量から吸光度分布を推定する方法であり、前記受光手段は、吸光度分布においての時間方向または空間方向の近似式を有しており、該近似式を用いて、近似式による吸光度から換算された光量と、予め記憶された前記各光量との誤差エネルギーが最小となる条件で吸光度分布を決定する点に特徴がある。
【００３９】
各光量３は、複数の波長ごとに測定されており、上記近似式は、各波長で相似であることが好ましい。
【００４０】
上記近似式は、上記試料における複数の部分のそれぞれについて決定することが好ましい。
【００４１】
上記近似式に基づいて、吸光度のピーク位置または吸光度の強度を求めることが好ましい。
【００４２】
上記近似式は、時間または空間を引数とした多項式であればよい。
【００４３】
上記近似式を用い、光量で誤差エネルギーを最小化することにより、吸光度分布を精度良く推定できる。
【００４４】
光量で誤差エネルギーを最小化する際には、誤差エネルギーが最小となるように、上記近似式のパラメータを最小二乗法で決定することが好ましい。
【００４５】
上記光センサーは、単一チャンネルでも、複数チャンネルでもよい。単一チャンネルとは、特定の波長における光量を測定できることを意味する。複数チャンネルとは、複数の特定の波長における光量を測定できることを意味する。
【００４６】
以下、単一チャンネルの光センサーを用い、分光分析装置としてクロマトグラフを用いた場合について、本発明に係る吸光度分布の推定方法を説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【００４７】
単一チャンネルの光センサーに入力された光量をｘ（ｔ）とすると、測定初期、即ち、変数ｔ＝ｔ０のときの光量は、ｘ（ｔ０）で表すことができる。ｔは所定の時間幅または空間幅である。基準光量（例えば、クロマトグラフでは移動相）が入力されているとすると、ノイズを考慮しない場合の吸光度分布は下記（ａ）で表される。下記（ａ）では、常用対数を用いているが、自然対数を用いてもよい。
ｌｏｇ１０｛ｘ（ｔ０）／ｘ（ｔ）｝  ・・・（ａ）
【００４８】
クロマトグラフの場合は、吸光度分布の形状が、ほぼガウス関数の形状になるため、標準偏差をσとしたとき、通常、±０．５σ程度の範囲であれば２次関数で近似できる。
【００４９】
そこで、±０．５σ程度の区間を移動窓として、その移動窓の中心の吸光度分布を求める事を考える。
【００５０】
ここでは、吸光度分布を求める近似式として、移動窓の中心がｔ＝０となる２次式（下記（ｂ）を参照）を用いて考える。なお、吸光度分布を求める近似式は、時間または空間を引数とした多項式であればよい。上記多項式は２次式に限定されず、１次式でもよいし、３次式以上の多項式でもよい。多項式は、１次式または２次式が好ましい。時間を引数にするとは、例えば、クロマトグラフのように、アクティブな光センサーの位置は固定し、吸光度分布の経時変化を推定することを意味する。空間を引数にするとは、例えば、Ｘ線回折や赤外吸光顕微鏡のように、アクティブな光センサーを移動し、空間全体を一度にスキャンすることを意味する。
ｍ（ｔ）＝ａ×ｔ２＋ｂ×ｔ＋ｃ  ・・・（ｂ）
【００５１】
光センサーで得られた初期光量をｘ（ｔ０）、初期より後のタイミングにおける光センサーで刻々と得られた光量をｘ（ｔ）、吸光度分布においての近似式をｍ（ｔ）としたとき、誤差エネルギーは、例えば、下記（１）で与えられ、下記（１）が最小となる近似式ｍ（ｔ）を決定する。即ち、下記（１）で表される誤差エネルギーが最小となるように、近似式ｍ（ｔ）におけるパラメータａ、ｂ、ｃを求める。移動窓の中心をｔ＝０とするため、上記近似式ｍ（ｔ）にｔ＝０を代入して算出されるパラメータｃが移動窓の中心における吸光度分布となる。
｜１０ｍ（ｔ）×ｘ（ｔ０）−ｘ（ｔ）｜  ・・・（１）
【００５２】
上記誤差エネルギーを最小とする近似式ｍ（ｔ）を決定するにあたっては、最小二乗法を用いることができる。
【００５３】
上記誤差エネルギーを最小とする近似式ｍ（ｔ）を決定して吸光度分布を推定する方法は、ＰＤＡのショットノイズよりもＡＤコンバータの熱雑音が支配的な領域において有用である。なお、ＰＤＡのショットノイズなど他のノイズ分布が支配的な場合は、別のモデル関数を用いることができる。
【００５４】
このようにして吸光度分布を推定する処理を、移動窓をずらしながら行えば、それぞれの時間における吸光度分布を推定できる。
【００５５】
上記では、移動窓の中心をｔ＝０とし、吸光度分布を推定する手順について説明したが、本発明は、これに限定されるものではない。例えば、分析結果の応答性が重要となるシステムでは、移動窓の中心ではなく、最新データを求める位置をｔ＝０とした近似式ｍ（ｔ）を用いても良い。
【００５６】
上記では、近似式ｍ（ｔ）として２次式を用いたが、近似式の次数は２次に限定されず、例えば、プラント内部での原料濃度の時系列変化を測定する場合は、近似式ｍ（ｔ）としてより単純な１次式を用いてもよい。
【００５７】
以上、単一チャンネルの光センサーを用いた場合について説明した。
【００５８】
上記光センサーは、単一チャンネルに限定されず、複数チャンネルでもよい。複数チャンネルの場合は、上述した単一チャンネルによる推定方法を各チャンネルに適用すればよい。
【００５９】
複数チャンネルの光センサーを用いた場合であって、チャンネル数よりも試料の数が少ないときは、近似式ｍ（ｔ）を各チャンネル間で共有して吸光度分布を推定することが好ましく、近似式ｍ（ｔ）を共有することにより、パラメータ数を減らすことができる。
【００６０】
以下、複数チャンネルの光センサーを用い、（ａ）単一物質の吸光度分布を推定する方法と、（ｂ）複数物質の吸光度分布を推定する方法について説明する。
【００６１】
（ａ）複数チャンネルの光センサーを用い、単一物質の吸光度分布を推定する方法
複数チャンネルの光センサーを用い、単一物質の吸光度分布を推定するにあたっては、上記（１）の代わりに、下記（１ａ）で与えられる誤差エネルギーを最小化して吸光度分布を推定すればよく、下記（１ａ）で与えられる誤差エネルギーを最小化するために、近似式ｍ（ｔ）のパラメータを決定し、該近似式ｍ（ｔ）を用いて吸光度分布を推定すればよい。下記（１ａ）において、Ｓｉはチャンネルｉにおけるスペクトル、ｘｉ（ｔ０）はチャンネルｉにおける光センサーで得られた初期光量、ｘｉ（ｔ）はチャンネルｉにおける光センサーで得られた初期より後のタイミングの光量を示す。
｜１０Ｓｉ×ｍ（ｔ）×ｘｉ（ｔ０）−ｘｉ（ｔ）｜  ・・・（１ａ）
【００６２】
複数チャンネルで単一物質の吸光度変化（濃度変化）を測定する場合であって、近似式ｍ（ｔ）が時間または空間に依存しているときは、近似式ｍ（ｔ）は各チャンネルで相似形である。従って、各チャンネルで近似式ｍ（ｔ）とパラメータａ、ｂ、ｃを共有し、近似式ｍ（ｔ）に、各チャンネルにおけるスペクトル（即ち、チャンネルｉにおけるスペクトルＳｉ）を掛けることで、吸光度分布を推定できる。即ち、移動窓の中心をｔ＝０とすると、上記近似式ｍ（ｔ）にｔ＝０を代入して算出されるパラメータｃに、チャンネルｉにおけるスペクトルＳｉを掛けたＳｉ×ｃが移動窓の中心における吸光度分布となる。
【００６３】
但し、各チャンネルにおけるスペクトルＳｉを掛るため、ａ＝１と固定して良く、実際には、パラメータとして、Ｓｉ、ｂ、ｃを求めればよい。
【００６４】
（ｂ）複数チャンネルの光センサーを用い、複数物質の吸光度分布を推定する方法
複数チャンネルの光センサーを用い、複数物質の吸光度分布を推定するにあたっては、上記（１）の代わりに、下記（１ｂ）で与えられる誤差エネルギーを最小化して吸光度分布を推定すればよく、下記（１ｂ）で与えられる誤差エネルギーを最小化するために、近似式ｍｓ（ｔ）のパラメータを決定し、該近似式ｍｓ（ｔ）を用いて吸光度分布を推定すればよい。下記（１ｂ）において、ΣＳｓｉはチャンネルｉにおけるスペクトルＳｉの和、ｘｉ（ｔ０）はチャンネルｉにおける光センサーで得られた初期光量、ｘｉ（ｔ）はチャンネルｉにおける光センサーで得られた初期より後のタイミングの光量を示す。
｜１０ΣＳｓｉ×ｍｓ（ｔ）×ｘｉ（ｔ０）−ｘｉ（ｔ）｜  ・・・（１ｂ）
【００６５】
試料に複数物資が含まれる場合は、物質の数に応じた近似式ｍｓ（ｔ）が必要になる。また、それぞれに対応したＳｓｉも必要になる。従って、求めるべきパラメータは、Ｓｓｉ、ｂｓ、ｃｓとなる。即ち、移動窓の中心をｔ＝０とすると、上記近似式ｍｓ（ｔ）にｔ＝０を代入して算出されるパラメータｃｓに、チャンネルｉにおけるスペクトルＳｉを掛けたΣＳｓｉ×ｃｓが移動窓の中心における吸光度分布となる。
【００６６】
Ｓｓｉは「チャンネル数」×「試料に含まれる物質の数」の２次元のマトリックス状ではあるが、実際には、チャンネルが変っても物質の濃度比は変らないため、各試料由来のスペクトルＳｓと各試料の濃度ｍｓの二つのスペクトルのベクトルの直積で示される。
【００６７】
以上、複数チャンネルの光センサーを用い、吸光度分布を推定する方法について説明した。
【００６８】
上記では、（１）に示すように、吸光度分布を常用対数変換したときの誤差エネルギーを用いて説明したが、吸光度分布を自然対数変換して誤差エネルギーを求めてもよく、この場合は、下記（２）で与えられる誤差エネルギーを最小化して吸光度分布を推定すればよい。
｜ｅｍ（ｔ）×ｘ（ｔ０）−ｘ（ｔ）｜  ・・・（２）
【００６９】
上記分光光度計を備えた分光分析装置としては、例えば、赤外線、可視光線等を利用する装置や、クロマトグラフなどを用いることができる。上記分光分析装置は、特に、クロマトグラフが好ましい。本発明の方法は、例えば、ＬＣ−ＰＤＡで吸光度クロマトを計測する場合や、吸光度の時間または空間の変化を計測する場合に好適に用いられる。
【実施例】
【００７０】
以下、実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明は下記実施例によって制限を受けるものではなく、前記および後記の趣旨に適合し得る範囲で変更を加えて実施することも勿論可能であり、それらはいずれも本発明の技術的範囲に包含される。
【００７１】
クロマトグラフにおける分光光度計の光センサーで刻々と得られた光量のデータとして、シミュレーションによるノイズのない光量データを用いて、次の条件で吸光度分布を推定した。
【００７２】
（比較例１）
（Ａ）シミュレーションによるノイズのない光量データにノイズを付加した後、吸光度分布を推定した。付加したノイズは、標準偏差σ＝７ｅ−５、平均＝０として加えた。
【００７３】
図３に、クロマトグラフの保持時間に対し、（Ａ）で推定した吸光度分布の結果を点線で示す。また、図３には、クロマトグラフの保持時間に対し、シミュレーションによるノイズのない光量データに基づいて推定した吸光度分布の結果を実線で示す。
【００７４】
図３から明らかなように、（Ａ）では、一定のノイズを付加しているため、吸光度分布を推定する過程で対数変換すると、光量の少ない領域（即ち、吸光度の高い領域）でノイズの影響度が大きくなり、精度のよい吸光度ピークが得られていない。
【００７５】
（比較例２）
（Ｂ）シミュレーションによるノイズのない光量データにノイズを付加した後、光量で移動平均を算出し、吸光度分布を推定した。光量は、１０の「−吸光度」乗で算出し、移動窓幅は５とした。
【００７６】
図４に、クロマトグラフの保持時間に対し、（Ｂ）で推定した吸光度分布の結果を点線で示す。また、図４には、クロマトグラフの保持時間に対し、シミュレーションによるノイズのない光量データに基づいて推定した吸光度分布の結果を実線で示す。
【００７７】
図４から明らかなように、（Ｂ）では、一定のノイズを付加し、非直線的に変化する（即ち、指数的に変化）ものに対して、移動平均を適用しているため、吸光度分布を推定する過程で対数変換すると、ノイズを付加しない場合に比べて吸光度分布が全体的に小さい結果となった。
【００７８】
（比較例３）
（Ｃ）シミュレーションによるノイズのない光量データにノイズを付加した後、吸光度分布を推定し、推定した吸光度分布で移動平均を推定し、吸光度分布を推定した。移動窓幅は５とした。
【００７９】
図５に、クロマトグラフの保持時間に対し、（Ｃ）で推定した吸光度分布の結果を点線で示す。また、図５には、クロマトグラフの保持時間に対し、シミュレーションによるノイズのない光量データに基づいて推定した吸光度分布の結果を実線で示す。
【００８０】
図５から明らかなように、（Ｃ）は、一定のノイズを付加し、吸光度分布で移動平均を推定したため、吸光度分布を推定する過程で対数変換すると、光量の少ない領域（即ち、吸光度の高い領域）でノイズの影響度が大きくなり、精度のよい吸光度ピークが得られていない。
【００８１】
（発明例）
（Ｄ）シミュレーションによるノイズのない光量データにノイズを付加した後、本発明に係る推定方法を用いて、吸光度分布を推定した。即ち、１次式の近似式を用いて光量で誤差エネルギーを最小化して吸光度分布を推定した。上記（１）で与えられる誤差エネルギーを最小二乗法により最小とする近似式ｍ（ｔ）のパラメータを決定し、該近似式ｍ（ｔ）を用いて吸光度分布を推定した。移動窓幅は５とした。
【００８２】
図６に、クロマトグラフの保持時間に対し、（Ｄ）で推定した吸光度分布の結果を点線で示す。また、図６には、クロマトグラフの保持時間に対し、シミュレーションによるノイズのない光量データに基づいて推定した吸光度分布の結果を実線で示す。
【００８３】
図６から明らかなように、本発明に係る吸光度分布の推定方法を用いれば、精度の良い吸光度ピークが得られる。
【００８４】
以上のように、光量で誤差エネルギーを最小化して吸光度分布を推定すれば、精度の良い吸光度ピークが得られる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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