(57)【要約】      （修正有）【課題】腸内フローラ改善剤を提供する。【解決手段】腸内フローラ改善剤は、乳酸菌ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシーズ・ラクティス（Lactococcus lactis subsp. lactis）ＢＦ３株（ＮＩＴＥ  Ｐ−０１９１９）を有効成分として含有し、盲腸内のバクテロイデス門（Bacteroidetes）の細菌を増加させる一方、フィルミクテス門（Firmicutes）の細菌を低減させる。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
乳酸菌ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシーズ・ラクティス（Lactococcus lactis subsp. lactis）ＢＦ３株（受託番号：ＮＩＴＥ  Ｐ−０１９１９）を有効成分として含有することを特徴とする腸内フローラ改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腸内フローラ改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、発酵食品等の各種分離源から単離された乳酸菌が知られており、例えば、シロザケの腸内容物から単離された乳酸菌として、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシーズ・ラクティス（Lactococcus lactis subsp. lactis）ＢＦ３株（受託番号：ＮＩＴＥ  Ｐ−０１９１９）が知られている（例えば、特許文献１参照）。
【０００３】
乳酸菌として、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシーズ・ラクティス（Lactococcus lactis subsp. lactis）ＢＦ３株（以下、ＢＦ３株と略記する）は、胆汁耐性、酸耐性、食塩耐性、活性酸素種の毒性に対する保護作用に優れ、豆乳に対する発酵能を備えている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特許５６９７７８８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、乳酸菌には様々な効能があることが知られており、菌種や菌株によって特異な効能を有することも知られているところから、ＢＦ３株についてもさらに多くの効能の発見と、それに伴う新たな用途の開発が望まれる。
【０００６】
本発明は、かかる事情に鑑み、ＢＦ３株について新たな用途を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、ＢＦ３株の有する効能について種々検討を重ねた結果、ＢＦ３株は腸内フローラを改善する作用を備えることを知見した。
【０００８】
本発明は前記知見に基づくものであり、前記目的を達成するために、本発明の腸内フローラ改善剤は、乳酸菌ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシーズ・ラクティス（Lactococcus lactis subsp. lactis）ＢＦ３株（受託番号：ＮＩＴＥ  Ｐ−０１９１９）を有効成分として含有することを特徴とする。
【０００９】
本発明の腸内フローラ改善剤は、ＢＦ３株を有効成分として含有することにより、該腸内フローラ改善剤を摂取しなかった場合に比較して、バクテロイデス門（Bacteroidetes）の細菌を増加させる一方、フィルミクテス門（Firmicutes）の細菌を低減させることができ、腸内フローラを改善することができる。
【００１０】
前記ＢＦ３株は、生菌液として用いてもよく、加熱死菌液として用いてもよい。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】ＢＦ３株の生菌液を摂取したマウスの盲腸内のバクテリア群の割合を示すグラフ。
【図２】ＢＦ３株の加熱死菌液を摂取したマウスの盲腸内のバクテリア群の割合を示すグラフ。
【図３】蒸留水を摂取したマウスの盲腸内のバクテリア群の割合を示すグラフ。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
次に、添付の図面を参照しながら本発明の実施の形態についてさらに詳しく説明する。
【００１３】
本実施形態の腸内フローラ改善剤は、ＢＦ３株を有効成分として含有する。前記ＢＦ３株は、生菌液として用いてもよく、加熱死菌液として用いてもよい。
【００１４】
前記ＢＦ３株は、北海道羅臼産の雄のシロザケの腸内容物から単離された乳酸菌であり、本出願人により、独立行政法人産業技術総合研究所特許微生物寄託センターに受託番号ＮＩＴＥ  Ｐ−０１９１９として、２０１４年８月２１日付けで寄託されている。
【００１５】
ＢＦ３株の菌学的性質を表１、表２に示す。
【００１６】
【表１】
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【００１７】
【表２】
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【００１８】
本実施形態の腸内フローラ改善剤は、次のようにして調製されたＢＦ３株菌液を有効成分として含有していればよく、例えば、飲料、ヨーグルトタイプ食品、錠剤、顆粒等の剤形とすることができる。
【００１９】
ＢＦ３株菌液は、ＢＦ３株をＭＲＳブイヨンに接種し、３０℃で２日間培養し、培養液を７０００×ｇ、５分、４℃の条件下に遠心分離し、上澄みを取り除いた後、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄し、波長６６０ｎｍの光線における光学密度（ＯＤ６６０）が１０になるように、ＰＢＳで懸濁することにより調製することができる。ＢＦ３株菌液は、前述のようにして調製されたものをそのまま生菌液として用いてもよく、例えば１０５℃で２０分間加熱して加熱死菌液として用いてもよい。
【００２０】
本実施形態の腸内フローラ改善剤の効果は、マウスを用いて、次のようにして確認した。まず、２１匹のｄｄＹマウス（５週齢、オス）に、日本クレア株式会社製マウス・ラット用一般飼料（商品名：ＣＥ−２）と滅菌蒸留水とを自由摂取させて、４日間の予備飼育を行った。次に、前記予備飼育後、各群の平均体重が均等になるように、前記ｄｄＹマウスを７匹ずつ、Ａ群、Ｂ群、Ｃ群の３群に分けた。
【００２１】
次に、各群のマウスに日本クレア株式会社製マウス・ラット用高脂肪飼料（商品名：Ｑｕｉｃｋ  ｆａｔ）を与える一方、飲料水として、Ａ群にはＢＦ３株生菌液、Ｂ群にはＢＦ３株加熱死菌液、Ｃ群にはコントロールとして滅菌蒸留水を与え、２週間飼育した。飼育終了後、各群のマウスをジエチルエーテル麻酔下で腹部大動脈より全採血して致死させ、盲腸を摘出した。
【００２２】
次に、パイロシーケンシング法（pyrosequencing）により盲腸内フローラを解析した。Ａ群のマウスの盲腸内のバクテリア群の割合を図１に、Ｂ群のマウスの盲腸内のバクテリア群の割合を図２に、Ｃ群のマウスの盲腸内のバクテリア群の割合を図３に、それぞれ示す。図１〜３において、Ａはアクチノバクテリア門（Actinobacteria）、Ｂはバクテロイデス門（Bacteroidetes）、Ｆはフィルミクテス門（Firmicutes）、Ｐはプロテオバクテリア門（Proteobacteria）、Ｔはテネリクテス門（Tenericutes）、ＴＭ７はＴＭ７門、Ｏはその他を示す。
【００２３】
図１〜３に示すように、バクテロイデス門の細菌は、コントロールとしてＢＦ３株菌液を全く摂取しなかったＣ群のマウスの５．１％に対し、ＢＦ３株の生菌液を摂取したＡ群のマウスでは１１．８％、ＢＦ３株の加熱死菌液を摂取したＢ群のマウスでは８．６％と、いずれも増加した。一方、フィルミクテス門の細菌は、コントロールとしてＢＦ３株菌液を全く摂取しなかったＣ群のマウスの７６．３％に対し、ＢＦ３株の生菌液を摂取したＡ群のマウスでは６２．２％、ＢＦ３株の加熱死菌液を摂取したＢ群のマウスでは６４．２％と、いずれも減少した。
【００２４】
従って、ＢＦ３株菌液を摂取した場合には、摂取しなかった場合に比較して、バクテロイデス門の細菌が増加する一方、フィルミクテス門の細菌が減少して、バクテロイデス：フィルミクテス比が高くなり、ＢＦ３株菌液を有効成分として含有する腸内フローラ改善剤によれば、腸内フローラを改善することが可能である。
【符号の説明】
【００２５】
符号なし。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【手続補正書】
【提出日】平成29年4月21日(2017.4.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
乳酸菌ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシーズ・ラクティス（Lactococcus lactis subsp. lactis）ＢＦ３株（受託番号：ＮＩＴＥ  Ｐ−０１９１９）を有効成分として含有し、盲腸内のバクテロイデス門（Bacteroidetes）の細菌を増加させる一方、フィルミクテス門（Firmicutes）の細菌を低減させることを特徴とする腸内フローラ改善剤。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
本発明は前記知見に基づくものであり、前記目的を達成するために、本発明の腸内フローラ改善剤は、乳酸菌ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシーズ・ラクティス（Lactococcus lactis subsp. lactis）ＢＦ３株（受託番号：ＮＩＴＥ  Ｐ−０１９１９）を有効成分として含有し、盲腸内のバクテロイデス門（Bacteroidetes）の細菌を増加させる一方、フィルミクテス門（Firmicutes）の細菌を低減させることを特徴とする。