(57)【要約】      （修正有）【課題】上皮組織表面における、細菌病原による感染の予防、病原性のプランクトン性細胞の細胞生存性又は細胞発育の阻害、細菌病原によるバイオフィルム形成の阻害等を行う方法の提供。【解決手段】ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含むＢＴ組成物であって、前記微粒子の実質的に全てが、０．４〜５μｍの体積平均径を有し、前記ＢＴ化合物が、ビスマスまたはビスマス塩およびチオール含有化合物を含み、前記チオール含有化合物が、メタンチオール等の薬剤を含む組成物等。【選択図】図２
2018076358.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の（Ｉ）および（ＩＩ）から選択される組成物：
（Ｉ）ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含むビスマス−チオール組成物であって、前記微粒子の実質的に全てが、０．４μｍ〜５μｍの体積平均径を有し、前記ＢＴ化合物が、ビスマスまたはビスマス塩およびチオール含有化合物を含み、
前記チオール含有化合物が、メタンチオール、エタンチオール、１−プロパンチオール、２−プロパンチオール、ブタンチオール、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン、ペンタンチオール、コエンザイムＡ、リポアミド、グルタチオン、システイン、シスチン、２−メルカプトインドール、トランスグルタミナーゼ、（１１−メルカプトウンデシル）ヘキサ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）官能基化金ナノ粒子、１，１’，４’，１’’−テルフェニル−４−チオール、１，１１−ウンデカンジチオール、１，１６−ヘキサデカンジチオール、１，４−ベンゼンジメタンチオール、１，４−ブタンジチオール二酢酸塩、１，５−ペンタンジチオール、１，６−ヘキサンジチオール、１，８−オクタンジチオール、１，９−ノナンジチオール、アダマンタンチオール、１−ブタンチオール、１−デカンチオール、１−ドデカンチオール、１−ヘプタンチオール、１−ヘキサデカンチオール、１−ヘキサンチオール、１−メルカプト（トリエチレングリコール）、１−メルカプト（トリエチレングリコール）メチルエーテル官能基化金ナノ粒子、１−ノナンチオール、１−オクタデカンチオール、１−オクタンチオール、１−ペンタデカンチオール、１−テトラデカンチオール、１−ウンデカンチオール、１１−（１Ｈ−ピロル−１−イル）ウンデカン−１−チオール、１１−アミノ−１−ウンデカンチオール塩酸塩、１１−ブロモ−１−ウンデカンチオール、１１−メルカプト−１−ウンデカノール、１１−メルカプトウンデカン酸、１１−メルカプトウンデシルトリフルオロ酢酸塩、１１−メルカプトウンデシルリン酸、１２−メルカプトドデカン酸、１５−メルカプトペンタデカン酸、１６−メルカプトヘキサデカン酸、１Ｈ，１Ｈ，２Ｈ，２Ｈ−ペルフルオロデカンチオール、２，２’−（エチレンジオキシ）ジエタンチオール、２，３−ブタンジチオール、２−ブタンチオール、２−エチルヘキサンチオール、２−メチル−１−プロパンチオール、２−メチル−２−プロパンチオール、２−フェニルエタンチオール、３，３，４，４，５，５，６，６，６−ノナフルオロ−１−ヘキサンチオール、３−（ジメトキシメチルシリル）−１−プロパンチオール、３−クロロ−１−プロパンチオール、３−メルカプト−１−プロパノール、３−メルカプト−２−ブタノール、３−メルカプト−Ｎ−ノニルプロピオンアミド、３−メルカプトプロピオン酸、３−メルカプトプロピル−官能基化シリカゲル、３−メチル−１−ブタンチオール、４，４’−ビス（メルカプトメチル）ビフェニル、４，４′−ジメルカプトスチルベン、４−（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンジルアルコール、４−シアノ−１−ブタンチオール、４−メルカプト−１−ブタノール、６−（フェロセニル）ヘキサンチオール、６−メルカプト−１−ヘキサノール、６−メルカプトヘキサン酸、８−メルカプト−１−オクタノール、８−メルカプトオクタン酸、９−メルカプト−１−ノナノール、ビフェニル−４，４’−ジチオール、３−メルカプトプロピオン酸ブチル、１−ブタンチオール酸銅（Ｉ）、シクロヘキサンチオール、シクロペンタンチオール、デカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化金ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ヘキサ（エチレングリコール）モノ−１１−（アセチルチオ）ウンデシルエーテル、メルカプトコハク酸、３−メルカプトプロピオン酸メチル、ヘプタンヒドラジドビスフェノールＡ置換５−（ヒドロキシメチル）−１，３−ビス（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンゼン、オクタデカンチオール試薬、オクタンチオール試薬、１１−メルカプトウンデカン酸試薬、１６−メルカプトヘキサデカン酸試薬、１１−メルカプト−１−ウンデカノール試薬、１，８−オクタンジチオール、オクタンチオール官能基化金ナノ粒子、ＰＥＧジチオール平均Ｍｎ８，０００、ＰＥＧジチオール平均分子量１，５００、ＰＥＧジチオール平均分子量３，４００、Ｓ−（１１−ブロモウンデシル）チオアセタート、Ｓ−（４−シアノブチル）チオアセタート、チオフェノール、トリエチレングリコールモノ−１１−メルカプトウンデシルエーテル、トリメチロールプロパントリス（３−メルカプトプロピオナート）、［１１−（メチルカルボニルチオ）ウンデシル］テトラ（エチレングリコール）、ｍ−カルボラン−９−チオール、ｐ−テルフェニル−４，４’’−ジチオール、ｔｅｒｔ−ドデシルメルカプタン、およびｔｅｒｔ−ノニルメルカプタンからなる群から選択される１種以上の薬剤を含む組成物；および
（ＩＩ）ビスマス‐チオール組成物であって、ビスマス‐チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、前記微粒子の実質的に全てが、０．４μｍ〜５μｍの体積平均径を有し、
（ａ）固体沈殿物を実質的に含まない溶液を得るのに十分となる条件および時間で、（ｉ）少なくとも５０ｍＭの濃度のビスマスを含むビスマス塩を含み、親水性、極性、または有機性可溶化剤を含まない酸性水溶液を、（ｉｉ）２５容量％のエタノールを含む混和物を得るのに十分な量のエタノールと混和すること、ならびに、
（ｂ）チオール含有化合物を含むエタノール性溶液を（ａ）の混和物に添加して反応溶液を得ることであって、前記チオール含有化合物が、前記ＢＴ化合物を含む微粒子を含む沈殿物の形成に十分となる時間および条件で、前記ビスマスに対して１：３〜３：１のモル比で前記反応溶液中に存在し、前記チオール含有化合物が、メタンチオール、エタンチオール、１−プロパンチオール、２−プロパンチオール、ブタンチオール、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン、ペンタンチオール、コエンザイムＡ、リポアミド、グルタチオン、システイン、シスチン、２−メルカプトインドール、トランスグルタミナーゼ、（１１−メルカプトウンデシル）ヘキサ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）官能基化金ナノ粒子、１，１’，４’，１’’−テルフェニル−４−チオール、１，１１−ウンデカンジチオール、１，１６−ヘキサデカンジチオール、１，４−ベンゼンジメタンチオール、１，４−ブタンジチオール二酢酸塩、１，５−ペンタンジチオール、１，６−ヘキサンジチオール、１，８−オクタンジチオール、１，９−ノナンジチオール、アダマンタンチオール、１−ブタンチオール、１−デカンチオール、１−ドデカンチオール、１−ヘプタンチオール、１−ヘキサデカンチオール、１−ヘキサンチオール、１−メルカプト（トリエチレングリコール）、１−メルカプト（トリエチレングリコール）メチルエーテル官能基化金ナノ粒子、１−ノナンチオール、１−オクタデカンチオール、１−オクタンチオール、１−ペンタデカンチオール、１−テトラデカンチオール、１−ウンデカンチオール、１１−（１Ｈ−ピロル−１−イル）ウンデカン−１−チオール、１１−アミノ−１−ウンデカンチオール塩酸塩、１１−ブロモ−１−ウンデカンチオール、１１−メルカプト−１−ウンデカノール、１１−メルカプトウンデカン酸、１１−メルカプトウンデシルトリフルオロ酢酸塩、１１−メルカプトウンデシルリン酸、１２−メルカプトドデカン酸、１５−メルカプトペンタデカン酸、１６−メルカプトヘキサデカン酸、１Ｈ，１Ｈ，２Ｈ，２Ｈ−ペルフルオロデカンチオール、２，２’−（エチレンジオキシ）ジエタンチオール、２，３−ブタンジチオール、２−ブタンチオール、２−エチルヘキサンチオール、２−メチル−１−プロパンチオール、２−メチル−２−プロパンチオール、２−フェニルエタンチオール、３，３，４，４，５，５，６，６，６−ノナフルオロ−１−ヘキサンチオール、３−（ジメトキシメチルシリル）−１−プロパンチオール、３−クロロ−１−プロパンチオール、３−メルカプト−１−プロパノール、３−メルカプト−２−ブタノール、３−メルカプト−Ｎ−ノニルプロピオンアミド、３−メルカプトプロピオン酸、３−メルカプトプロピル−官能基化シリカゲル、３−メチル−１−ブタンチオール、４，４’−ビス（メルカプトメチル）ビフェニル、４，４′−ジメルカプトスチルベン、４−（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンジルアルコール、４−シアノ−１−ブタンチオール、４−メルカプト−１−ブタノール、６−（フェロセニル）ヘキサンチオール、６−メルカプト−１−ヘキサノール、６−メルカプトヘキサン酸、８−メルカプト−１−オクタノール、８−メルカプトオクタン酸、９−メルカプト−１−ノナノール、ビフェニル−４，４’−ジチオール、３−メルカプトプロピオン酸ブチル、１−ブタンチオール酸銅（Ｉ）、シクロヘキサンチオール、シクロペンタンチオール、デカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化金ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ヘキサ（エチレングリコール）モノ−１１−（アセチルチオ）ウンデシルエーテル、メルカプトコハク酸、３−メルカプトプロピオン酸メチル、ヘプタンヒドラジドビスフェノールＡ置換５−（ヒドロキシメチル）−１，３−ビス（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンゼン、オクタデカンチオール試薬、オクタンチオール試薬、１１−メルカプトウンデカン酸試薬、１６−メルカプトヘキサデカン酸試薬、１１−メルカプト−１−ウンデカノール試薬、１，８−オクタンジチオール、オクタンチオール官能基化金ナノ粒子、ＰＥＧジチオール平均Ｍｎ８，０００、ＰＥＧジチオール平均分子量１，５００、ＰＥＧジチオール平均分子量３，４００、Ｓ−（１１−ブロモウンデシル）チオアセタート、Ｓ−（４−シアノブチル）チオアセタート、チオフェノール、トリエチレングリコールモノ−１１−メルカプトウンデシルエーテル、トリメチロールプロパントリス（３−メルカプトプロピオナート）、［１１−（メチルカルボニルチオ）ウンデシル］テトラ（エチレングリコール）、ｍ−カルボラン−９−チオール、ｐ−テルフェニル−４，４’’−ジチオール、ｔｅｒｔ−ドデシルメルカプタン、およびｔｅｒｔ−ノニルメルカプタンからなる群から選択される１種以上の薬剤を含む組成物。
【請求項２】
ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含むビスマス−チオール組成物を調製する方法であって、前記微粒子の実質的に全てが、０．４μｍ〜５μｍの体積平均径を有し、
前記方法が、以下の（ａ）および（ｂ）のステップを含み、
（ａ）固体沈殿物を実質的に含まない溶液を得るのに十分となる条件および時間で、（ｉ）少なくとも５０ｍＭの濃度のビスマスを含むビスマス塩を含み、親水性、極性または有機性可溶化剤を含まない酸性水溶液を、（ｉｉ）２５容量％のエタノールを含む混和物を得るのに十分な量のエタノールと混和するステップ；ならびに
（ｂ）前記ＢＴ化合物を含む微粒子を含む沈殿物の形成に十分となる条件および時間で、ビスマスに対して１：３〜３：１のモル比で反応溶液中に存在するチオール含有化合物を含むエタノール性溶液を（ａ）の混和物に添加して、反応溶液を得るステップであって、前記チオール含有化合物が、メタンチオール、エタンチオール、１−プロパンチオール、２−プロパンチオール、ブタンチオール、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン、ペンタンチオール、コエンザイムＡ、リポアミド、グルタチオン、システイン、シスチン、２−メルカプトインドール、トランスグルタミナーゼ、（１１−メルカプトウンデシル）ヘキサ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）官能基化金ナノ粒子、１，１’，４’，１’’−テルフェニル−４−チオール、１，１１−ウンデカンジチオール、１，１６−ヘキサデカンジチオール、１，４−ベンゼンジメタンチオール、１，４−ブタンジチオール二酢酸塩、１，５−ペンタンジチオール、１，６−ヘキサンジチオール、１，８−オクタンジチオール、１，９−ノナンジチオール、アダマンタンチオール、１−ブタンチオール、１−デカンチオール、１−ドデカンチオール、１−ヘプタンチオール、１−ヘキサデカンチオール、１−ヘキサンチオール、１−メルカプト（トリエチレングリコール）、１−メルカプト（トリエチレングリコール）メチルエーテル官能基化金ナノ粒子、１−ノナンチオール、１−オクタデカンチオール、１−オクタンチオール、１−ペンタデカンチオール、１−テトラデカンチオール、１−ウンデカンチオール、１１−（１Ｈ−ピロル−１−イル）ウンデカン−１−チオール、１１−アミノ−１−ウンデカンチオール塩酸塩、１１−ブロモ−１−ウンデカンチオール、１１−メルカプト−１−ウンデカノール、１１−メルカプトウンデカン酸、１１−メルカプトウンデシルトリフルオロ酢酸塩、１１−メルカプトウンデシルリン酸、１２−メルカプトドデカン酸、１５−メルカプトペンタデカン酸、１６−メルカプトヘキサデカン酸、１Ｈ，１Ｈ，２Ｈ，２Ｈ−ペルフルオロデカンチオール、２，２’−（エチレンジオキシ）ジエタンチオール、２，３−ブタンジチオール、２−ブタンチオール、２−エチルヘキサンチオール、２−メチル−１−プロパンチオール、２−メチル−２−プロパンチオール、２−フェニルエタンチオール、３，３，４，４，５，５，６，６，６−ノナフルオロ−１−ヘキサンチオール、３−（ジメトキシメチルシリル）−１−プロパンチオール、３−クロロ−１−プロパンチオール、３−メルカプト−１−プロパノール、３−メルカプト−２−ブタノール、３−メルカプト−Ｎ−ノニルプロピオンアミド、３−メルカプトプロピオン酸、３−メルカプトプロピル−官能基化シリカゲル、３−メチル−１−ブタンチオール、４，４’−ビス（メルカプトメチル）ビフェニル、４，４′−ジメルカプトスチルベン、４−（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンジルアルコール、４−シアノ−１−ブタンチオール、４−メルカプト−１−ブタノール、６−（フェロセニル）ヘキサンチオール、６−メルカプト−１−ヘキサノール、６−メルカプトヘキサン酸、８−メルカプト−１−オクタノール、８−メルカプトオクタン酸、９−メルカプト−１−ノナノール、ビフェニル−４，４’−ジチオール、３−メルカプトプロピオン酸ブチル、１−ブタンチオール酸銅（Ｉ）、シクロヘキサンチオール、シクロペンタンチオール、デカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化金ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ヘキサ（エチレングリコール）モノ−１１−（アセチルチオ）ウンデシルエーテル、メルカプトコハク酸、３−メルカプトプロピオン酸メチル、ヘプタンヒドラジドビスフェノールＡ置換５−（ヒドロキシメチル）−１，３−ビス（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンゼン、オクタデカンチオール試薬、オクタンチオール試薬、１１−メルカプトウンデカン酸試薬、１６−メルカプトヘキサデカン酸試薬、１１−メルカプト−１−ウンデカノール試薬、１，８−オクタンジチオール、オクタンチオール官能基化金ナノ粒子、ＰＥＧジチオール平均Ｍｎ８，０００、ＰＥＧジチオール平均分子量１，５００、ＰＥＧジチオール平均分子量３，４００、Ｓ−（１１−ブロモウンデシル）チオアセタート、Ｓ−（４−シアノブチル）チオアセタート、チオフェノール、トリエチレングリコールモノ−１１−メルカプトウンデシルエーテル、トリメチロールプロパントリス（３−メルカプトプロピオナート）、［１１−（メチルカルボニルチオ）ウンデシル］テトラ（エチレングリコール）、ｍ−カルボラン−９−チオール、ｐ−テルフェニル−４，４’’−ジチオール、ｔｅｒｔ−ドデシルメルカプタン、およびｔｅｒｔ−ノニルメルカプタンからなる群から選択される薬剤を１つ以上含む、ステップ
を含む、
前記方法。
【請求項３】
細菌病原、真菌病原およびウイルス病原のうちの１種以上に対して天然表面を防御するための薬物製造用のビスマス‐チオール（ＢＴ）化合物の使用であって、前記防御が、
（ｉ）細菌、真菌またはウイルス病原による天然表面の感染の予防、
（ｉｉ）細菌、真菌またはウイルス病原の実質的に全てのプランクトン性細胞の細胞生存性または細胞発育の阻害、
（ｉｉｉ）細菌、真菌またはウイルス病原によるバイオフィルム形成の阻害、および
（ｉｖ）細菌、真菌またはウイルス病原の実質的に全てのバイオフィルム型細胞のバイオフィルム生存性またはバイオフィルム発育の阻害、
のうちの１つ以上に十分となる条件および時間で、天然表面を有効量のＢＴ組成物と接触させることを含み、
前記ＢＴ組成物が、ビスマスまたはビスマス塩およびチオール含有化合物を含むビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、前記微粒子の実質的に全てが、０．４μｍ〜５μｍの体積平均径を有し、前記チオール含有化合物が、１，２−エタンジチオール、２，３−ジメルカプトプロパノール、ピリチオン、ジチオエリトリトール、３，４−ジメルカプトトルエン、２，３−ブタンジチオール、１，３−プロパンジチオール、２−ヒドロキシプロパンチオール、１−メルカプト−２−プロパノール、ジチオエリトリトール、αリポ酸、ジチオトレイトール、メタンチオール、エタンチオール、１−プロパンチオール、２−プロパンチオール、ブタンチオール、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン、ペンタンチオール、コエンザイムＡ、リポアミド、グルタチオン、システイン、シスチン、２−メルカプトインドール、トランスグルタミナーゼ、（１１−メルカプトウンデシル）ヘキサ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）官能基化金ナノ粒子、１，１’，４’，１’’−テルフェニル−４−チオール、１，１１−ウンデカンジチオール、１，１６−ヘキサデカンジチオール、１，４−ベンゼンジメタンチオール、１，４−ブタンジチオール二酢酸塩、１，５−ペンタンジチオール、１，６−ヘキサンジチオール、１，８−オクタンジチオール、１，９−ノナンジチオール、アダマンタンチオール、１−ブタンチオール、１−デカンチオール、１−ドデカンチオール、１−ヘプタンチオール、１−ヘキサデカンチオール、１−ヘキサンチオール、１−メルカプト（トリエチレングリコール）、１−メルカプト（トリエチレングリコール）メチルエーテル官能基化金ナノ粒子、１−ノナンチオール、１−オクタデカンチオール、１−オクタンチオール、１−ペンタデカンチオール、１−テトラデカンチオール、１−ウンデカンチオール、１１−（１Ｈ−ピロル−１−イル）ウンデカン−１−チオール、１１−アミノ−１−ウンデカンチオール塩酸塩、１１−ブロモ−１−ウンデカンチオール、１１−メルカプト−１−ウンデカノール、１１−メルカプトウンデカン酸、１１−メルカプトウンデシルトリフルオロ酢酸塩、１１−メルカプトウンデシルリン酸、１２−メルカプトドデカン酸、１５−メルカプトペンタデカン酸、１６−メルカプトヘキサデカン酸、１Ｈ，１Ｈ，２Ｈ，２Ｈ−ペルフルオロデカンチオール、２，２’−（エチレンジオキシ）ジエタンチオール、２，３−ブタンジチオール、２−ブタンチオール、２−エチルヘキサンチオール、２−メチル−１−プロパンチオール、２−メチル−２−プロパンチオール、２−フェニルエタンチオール、３，３，４，４，５，５，６，６，６−ノナフルオロ−１−ヘキサンチオール、３−（ジメトキシメチルシリル）−１−プロパンチオール、３−クロロ−１−プロパンチオール、３−メルカプト−１−プロパノール、３−メルカプト−２−ブタノール、３−メルカプト−Ｎ−ノニルプロピオンアミド、３−メルカプトプロピオン酸、３−メルカプトプロピル−官能基化シリカゲル、３−メチル−１−ブタンチオール、４，４’−ビス（メルカプトメチル）ビフェニル、４，４′−ジメルカプトスチルベン、４−（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンジルアルコール、４−シアノ−１−ブタンチオール、４−メルカプト−１−ブタノール、６−（フェロセニル）ヘキサンチオール、６−メルカプト−１−ヘキサノール、６−メルカプトヘキサン酸、８−メルカプト−１−オクタノール、８−メルカプトオクタン酸、９−メルカプト−１−ノナノール、ビフェニル−４，４’−ジチオール、３−メルカプトプロピオン酸ブチル、１−ブタンチオール酸銅（Ｉ）、シクロヘキサンチオール、シクロペンタンチオール、デカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化金ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ヘキサ（エチレングリコール）モノ−１１−（アセチルチオ）ウンデシルエーテル、メルカプトコハク酸、３−メルカプトプロピオン酸メチル、ヘプタンヒドラジドビスフェノールＡ置換５−（ヒドロキシメチル）−１，３−ビス（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンゼン、オクタデカンチオール試薬、オクタンチオール試薬、１１−メルカプトウンデカン酸試薬、１６−メルカプトヘキサデカン酸試薬、１１−メルカプト−１−ウンデカノール試薬、１，８−オクタンジチオール、オクタンチオール官能基化金ナノ粒子、ＰＥＧジチオール平均Ｍｎ８，０００、ＰＥＧジチオール平均分子量１，５００、ＰＥＧジチオール平均分子量３，４００、Ｓ−（１１−ブロモウンデシル）チオアセタート、Ｓ−（４−シアノブチル）チオアセタート、チオフェノール、トリエチレングリコールモノ−１１−メルカプトウンデシルエーテル、トリメチロールプロパントリス（３−メルカプトプロピオナート）、［１１−（メチルカルボニルチオ）ウンデシル］テトラ（エチレングリコール）、ｍ−カルボラン−９−チオール、ｐ−テルフェニル−４，４’’−ジチオール、ｔｅｒｔ−ドデシルメルカプタン、およびｔｅｒｔ−ノニルメルカプタンから選択される１種以上の薬剤を含む、
前記使用。
【請求項４】
前記細菌病原が、
（ｉ）１種以上のグラム陰性菌；
（ｉｉ）１種以上のグラム陽性菌；
（ｉｉｉ）１種以上の抗生物質感受性菌；
（ｉｖ）１種以上の抗生物質耐性菌；
（ｖ）スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓ．アウレウス）、ＭＲＳＡ（メチシリン耐性Ｓ．アウレウス）、スタフィロコッカス・エピデルミディス、ＭＲＳＥ（メチシリン耐性Ｓ．エピデルミディス）、マイコバクテリウム・ツベルクローシス、マイコバクテリウム・アビウム、シュードモナス・エルギノーサ、薬物耐性Ｐ．エルギノーサ、エシェリヒア・コリ、腸管毒素原性Ｅ．コリ、腸管出血性Ｅ．コリ、クレブシエラ・ニューモニエ、クロストリジウム・ディフィシル、ヘリコバクター・ピロリ、レジオネラ・ニューモフィラ、エンテロコッカス・フェカーリス、メチシリン感受性エンテロコッカス・フェカーリス、エンテロバクター・クロアカエ、サルモネラ・ティフィムリウム、プロテウス・ブルガリス、エルシニア・エンテロコリチカ、ビブリオ・コレラ、シゲラ・フレクスネリ、バンコマイシン耐性エンテロコッカス（ＶＲＥ）、バークホルデリア・セパシア菌群、フランシセラ・ツラレンシス、バチルス・アントラシス、エルシニア・ペスチス、シュードモナス・エルギノーサ、ストレプトコッカス・ニューモニエ、ペニシリン耐性ストレプトコッカス・ニューモニエ、エシェリヒア・コリ、バークホルデリア・セパシア、バークホルデリア・マルチボランス、マイコバクテリウム・スメグマチスおよびアシネトバクター・バウマニーからなる群より選択される細菌病原、
のうちの少なくとも１つを含む、請求項３に記載の使用。
【請求項５】
（ａ）前記細菌病原が、メチシリン、バンコマイシン、ナフシリン、ゲンタマイシン、アンピシリン、クロラムフェニコール、ドキシサイクリンおよびトブラマイシンからなる群より選択される抗生物質に対して耐性を示すこと、
（ｂ）前記表面が、表皮、真皮、呼吸器管、胃腸管および腺の内層からなる群より選択される上皮組織表面を含むこと、
（ｃ）前記接触のステップが、１回または複数回実施されること、
（ｄ）少なくとも１回の接触ステップが、前記表面をスプレーすること、イリゲーションすること、浸漬および塗布することのうちの１つを含むこと、
（ｅ）少なくとも１回の接触ステップが、吸入、摂取および経口イリゲーションのうちの１つを含むこと、
（ｆ）少なくとも１回の接触ステップが、局所、腹腔内、経口、非経口、静脈内、動脈内、経皮、舌下、皮下、筋肉内、口腔内、鼻腔内、吸入、眼内、耳内、心室内、脂肪内、関節内および髄腔内から選択される経路による対象への投与を含むこと、および
（ｇ）前記ＢＴ組成物が、ＢｉｓＢＡＬ、ＢｉｓＥＤＴ、Ｂｉｓ−ジメルカプロール、Ｂｉｓ−ＤＴＴ、Ｂｉｓ−２−メルカプトエタノール、Ｂｉｓ−ＤＴＥ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ、Ｂｉｓ−Ｅｒｙ、Ｂｉｓ−Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−ＢＤＴ、Ｂｉｓ−ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｂａｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＥＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｅｒｙ、ビスマス−１−メルカプト−２−プロパノール、およびＢｉｓ−ＥＤＴ／２−ヒドロキシ−１−プロパンチオールからなる群より選択されるＢＴ化合物を１種以上含むこと
の内の少なくとも１つが該当する、請求項３に記載の使用。
【請求項６】
前記防御が、前記表面をＢＴ組成物と接触させるステップに関して、同時に、または連続して、前記表面を（ｉ）相乗効果をもたらす抗生物質および（ｉｉ）協同  抗微生物効果促進抗生物質、のうちの少なくとも一方と接触させることを更に含む、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
抗生物質耐性菌病原が存在する天然表面で抗生物質耐性を克服するための薬物の製造のためのビスマス‐チオール（ＢＴ）組成物の使用であって、前記克服が、
（ｉ）上皮組織表面の、細菌病原による感染の予防、
（ｉｉ）細菌病原の実質的に全てのプランクトン性細胞の細胞生存性または細胞発育の阻害、
（ｉｉｉ）細菌病原によるバイオフィルム形成の阻害、および
（ｉｖ）細菌病原の実質的に全てのバイオフィルム型細胞のバイオフィルム生存性またはバイオフィルム発育の阻害、
のうちの１つ以上に十分となる条件および時間で、前記天然表面を、有効量の（１）少なくとも１種のビスマス−チオール（ＢＴ）組成物および（２）少なくとも１種のＢＴ組成物の効果を促進するもしくは少なくとも１種のＢＴ組成物と相乗的に作用することが可能である少なくとも１種の抗生物質と同時に、または連続して接触させることを含み、
前記ＢＴ組成物が、ビスマスまたはビスマス塩およびチオール含有化合物を含むビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、前記微粒子の実質的に全てが、０．４μｍ〜５μｍの体積平均径を有し、それにより上皮組織表面での抗生物質耐性を克服し、
前記チオール含有化合物が、１，２−エタンジチオール、２，３−ジメルカプトプロパノール、ピリチオン、ジチオエリトリトール、３，４−ジメルカプトトルエン、２，３−ブタンジチオール、１，３−プロパンジチオール、２−ヒドロキシプロパンチオール、１−メルカプト−２−プロパノール、ジチオエリトリトール、αリポ酸、ジチオトレイトール、メタンチオール、エタンチオール、１−プロパンチオール、２−プロパンチオール、ブタンチオール、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン、ペンタンチオール、コエンザイムＡ、リポアミド、グルタチオン、システイン、シスチン、２−メルカプトエタノール、２−メルカプトインドール、トランスグルタミナーゼ、（１１−メルカプトウンデシル）ヘキサ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）官能基化金ナノ粒子、１，１’，４’，１’’−テルフェニル−４−チオール、１，１１−ウンデカンジチオール、１，１６−ヘキサデカンジチオール、１，４−ベンゼンジメタンチオール、１，４−ブタンジチオール、１，４−ブタンジチオール二酢酸塩、１，５−ペンタンジチオール、１，６−ヘキサンジチオール、１，８−オクタンジチオール、１，９−ノナンジチオール、アダマンタンチオール、１−ブタンチオール、１−デカンチオール、１−ドデカンチオール、１−ヘプタンチオール、１−ヘキサデカンチオール、１−ヘキサンチオール、１−メルカプト（トリエチレングリコール）、１−メルカプト（トリエチレングリコール）メチルエーテル官能基化金ナノ粒子、１−ノナンチオール、１−オクタデカンチオール、１−オクタンチオール、１−ペンタデカンチオール、１−テトラデカンチオール、１−ウンデカンチオール、１１−（１Ｈ−ピロル−１−イル）ウンデカン−１−チオール、１１−アミノ−１−ウンデカンチオール塩酸塩、１１−ブロモ−１−ウンデカンチオール、１１−メルカプト−１−ウンデカノール、１１−メルカプトウンデカン酸、１１−メルカプトウンデシルトリフルオロ酢酸塩、１１−メルカプトウンデシルリン酸、１２−メルカプトドデカン酸、１５−メルカプトペンタデカン酸、１６−メルカプトヘキサデカン酸、１Ｈ，１Ｈ，２Ｈ，２Ｈ−ペルフルオロデカンチオール、２，２’−（エチレンジオキシ）ジエタンチオール、２−ブタンチオール、２−エチルヘキサンチオール、２−メチル−１−プロパンチオール、２−メチル−２−プロパンチオール、２−フェニルエタンチオール、３，３，４，４，５，５，６，６，６−ノナフルオロ−１−ヘキサンチオール、３−（ジメトキシメチルシリル）−１−プロパンチオール、３−クロロ−１−プロパンチオール、３−メルカプト−１−プロパノール、３−メルカプト−２−ブタノール、３−メルカプト−Ｎ−ノニルプロピオンアミド、３−メルカプトプロピオン酸、３−メルカプトプロピル−官能基化シリカゲル、３−メチル−１−ブタンチオール、４，４’−ビス（メルカプトメチル）ビフェニル、４，４′−ジメルカプトスチルベン、４−（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンジルアルコール、４−シアノ−１−ブタンチオール、４−メルカプト−１−ブタノー���、６−（フェロセニル）ヘキサンチオール、６−メルカプト−１−ヘキサノール、６−メルカプトヘキサン酸、８−メルカプト−１−オクタノール、８−メルカプトオクタン酸、９−メルカプト−１−ノナノール、ビフェニル−４，４’−ジチオール、３−メルカプトプロピオン酸ブチル、１−ブタンチオール酸銅（Ｉ）、シクロヘキサンチオール、シクロペンタンチオール、デカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化金ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ヘキサ（エチレングリコール）モノ−１１−（アセチルチオ）ウンデシルエーテル、メルカプトコハク酸、３−メルカプトプロピオン酸メチル、ヘプタンヒドラジドビスフェノールＡ置換５−（ヒドロキシメチル）−１，３−ビス（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンゼン、オクタデカンチオール試薬、オクタンチオール試薬、１１−メルカプトウンデカン酸試薬、１６−メルカプトヘキサデカン酸試薬、１１−メルカプト−１−ウンデカノール試薬、１，８−オクタンジチオール、オクタンチオール官能基化金ナノ粒子、ＰＥＧジチオール平均Ｍｎ８，０００、ＰＥＧジチオール平均分子量１，５００、ＰＥＧジチオール平均分子量３，４００、Ｓ−（１１−ブロモウンデシル）チオアセタート、Ｓ−（４−シアノブチル）チオアセタート、チオフェノール、トリエチレングリコールモノ−１１−メルカプトウンデシルエーテル、トリメチロールプロパントリス（３−メルカプトプロピオナート）、［１１−（メチルカルボニルチオ）ウンデシル］テトラ（エチレングリコール）、ｍ−カルボラン−９−チオール、ｐ−テルフェニル−４，４’’−ジチオール、ｔｅｒｔ−ドデシルメルカプタン、およびｔｅｒｔ−ノニルメルカプタンからなる群から選択される、少なくとも１種の薬剤を含む、
使用。
【請求項８】
（ａ）細菌病原が、メチシリン、バンコマイシン、ナフシリン、ゲンタマイシン、アンピシリン、クロラムフェニコール、ドキシサイクリン、トブラマイシン、クリンダマイシンおよびガチフロキサシンからなる群より選択される抗生物質に対して耐性を示し、
（ｂ）前記表面が、表皮、真皮、呼吸器管、胃腸管および腺の内層からなる群より選択される組織の上皮表面を含むこと、
（ｃ）前記接触のステップが、１回または複数回実施されること、
（ｄ）少なくとも１回の接触ステップが、前記表面をスプレーすること、イリゲーションすること、浸漬コーティングすること、および塗布することのうちの１つを含むこと、
（ｅ）少なくとも１回の接触ステップが、吸入、摂取および経口イリゲーションのうちの１つを含むこと、
（ｆ）少なくとも１回の接触ステップが、局所、腹腔内、経口、非経口、静脈内、動脈内、経皮、舌下、皮下、筋肉内、口腔内、鼻腔内、吸入、眼内、耳内、心室内、脂肪内、関節内および髄腔内から選択される経路による対象への投与を含むこと、
（ｇ）前記ＢＴ組成物が、ＢｉｓＢＡＬ、ＢｉｓＥＤＴ、Ｂｉｓ−ジメルカプロール、Ｂｉｓ−ＤＴＴ、Ｂｉｓ−２−メルカプトエタノール、Ｂｉｓ−ＤＴＥ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ、Ｂｉｓ−Ｅｒｙ、Ｂｉｓ−Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−ＢＤＴ、Ｂｉｓ−ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｂａｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＥＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｅｒｙ、ビスマス−１−メルカプト−２−プロパノール、およびＢｉｓ−ＥＤＴ／２−ヒドロキシ−１−プロパンチオールからなる群より選択されるＢＴ化合物を１種以上含むこと、
（ｈ）前記相乗性または増強性抗生物質が、クリンダマイシン、ガチフロキサシン、アミノグリコシド系抗生物質、カルバペネム系抗生物質、セファロスポリン系抗生物質、フルオロキノロン系抗生物質、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン系抗生物質、およびアミノペニシリン系抗生物質からなる群より選択される抗生物質を含むこと、および
（ｉ）前記相乗性または増強性抗生物質が、アミカシン、アルベカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、ロドストレプトマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシンおよびアプラマイシンからなる群より選択されるアミノグリコシド系抗生物質であること
の内の少なくとも１つが該当する、請求項７に記載の使用。
【請求項９】
（ａ）ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、前記微粒子の実質的に全てが０．４μｍ〜５μｍの体積平均径を有する少なくとも１種のＢＴ組成物と、
（ｂ）前記ＢＴ化合物と相乗的に作用すること、またはそれを増強することが可能である少なくとも１種の抗生物質化合物と
を含む細菌バイオフィルムを含有する天然表面を処置するための消毒性組成物であって、
前記ＢＴ化合物が、ビスマスまたはビスマス塩およびチオール含有化合物を含み、
前記チオール含有化合物が、メタンチオール、エタンチオール、１−プロパンチオール、２−プロパンチオール、ブタンチオール、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン、ペンタンチオール、コエンザイムＡ、リポアミド、グルタチオン、システイン、シスチン、２−メルカプトインドール、トランスグルタミナーゼ、（１１−メルカプトウンデシル）ヘキサ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）官能基化金ナノ粒子、１，１’，４’，１’’−テルフェニル−４−チオール、１，１１−ウンデカンジチオール、１，１６−ヘキサデカンジチオール、１，４−ベンゼンジメタンチオール、１，４−ブタンジチオール二酢酸塩、１，５−ペンタンジチオール、１，６−ヘキサンジチオール、１，８−オクタンジチオール、１，９−ノナンジチオール、アダマンタンチオール、１−ブタンチオール、１−デカンチオール、１−ドデカンチオール、１−ヘプタンチオール、１−ヘキサデカンチオール、１−ヘキサンチオール、１−メルカプト（トリエチレングリコール）、１−メルカプト（トリエチレングリコール）メチルエーテル官能基化金ナノ粒子、１−ノナンチオール、１−オクタデカンチオール、１−オクタンチオール、１−ペンタデカンチオール、１−テトラデカンチオール、１−ウンデカンチオール、１１−（１Ｈ−ピロル−１−イル）ウンデカン−１−チオール、１１−アミノ−１−ウンデカンチオール塩酸塩、１１−ブロモ−１−ウンデカンチオール、１１−メルカプト−１−ウンデカノール、１１−メルカプトウンデカン酸、１１−メルカプトウンデシルトリフルオロ酢酸塩、１１−メルカプトウンデシルリン酸、１２−メルカプトドデカン酸、１５−メルカプトペンタドカン酸、１６−メルカプトヘキサデカン酸、１Ｈ，１Ｈ，２Ｈ，２Ｈ−ペルフルオロデカンチオール、２，２’−（エチレンジオキシ）ジエタンチオール、２，３−ブタンジチオール、２−ブタンチオール、２−エチルヘキサンチオール、２−メチル−１−プロパンチオール、２−メチル−２−プロパンチオール、２−フェニルエタンチオール、３，３，４，４，５，５，６，６，６−ノナフルオロ−１−ヘキサンチオール、３−（ジメトキシメチルシリル）−１−プロパンチオール、３−クロロ−１−プロパンチオール、３−メルカプト−１−プロパノール、３−メルカプト−２−ブタノール、３−メルカプト−Ｎ−ノニルプロピオンアミド、３−メルカプトプロピオン酸、３−メルカプトプロピル−官能基化シリカゲル、３−メチル−１−ブタンチオール、４，４’−ビス（メルカプトメチル）ビフェニル、４，４′−ジメルカプトスチルベン、４−（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンジルアルコール、４−シアノ−１−ブタンチオール、４−メルカプト−１−ブタノール、６−（フェロセニル）ヘキサンチオール、６−メルカプト−１−ヘキサノール、６−メルカプトヘキサン酸、８−メルカプト−１−オクタノール、８−メルカプトオクタン酸、９−メルカプト−１−ノナノール、ビフェニル−４，４’−ジチオール、３−メルカプトプロピオン酸ブチル、１−ブタンチオール酸銅（Ｉ）、シクロヘキサンチオール、シクロペンタンチオール、デカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化金ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ヘキサ（エチレングリコール）モノ−１１−（アセチルチオ）ウンデシルエーテル、メルカプトコハク酸、３−メルカプトプロピオン酸メチル、ヘプタンヒドラジドビスフェノールＡ置換５−（ヒドロキシメチル）−１，３−ビス（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンゼン、オクタデカンチオール試薬、オクタンチオール試薬、１１−メルカプトウンデカン酸試薬、１６−メルカプトヘキサデカン酸試薬、１１−メルカプト−１−ウンデカノール試薬、１，８−オクタンジチオール、オクタンチオール官能基化金ナノ粒子、ＰＥＧジチオール平均Ｍｎ８，０００、ＰＥＧジチオール平均分子量１，５００、ＰＥＧジチオール平均分子量３，４００、Ｓ−（１１−ブロモウンデシル）チオアセタート、Ｓ−（４−シアノブチル）チオアセタート、チオフェノール、トリエチレングリコールモノ−１１−メルカプトウンデシルエーテル、トリメチロールプロパントリス（３−メルカプトプロピオナート）、［１１−（メチルカルボニルチオ）ウンデシル］テトラ（エチレングリコール）、ｍ−カルボラン−９−チオール、ｐ−テルフェニル−４，４’’−ジチオール、ｔｅｒｔ−ドデシルメルカプタン、およびｔｅｒｔ−ノニルメルカプタンからなる群から選択される１種以上の薬剤を含む、
組成物。
【請求項１０】
前記抗生物質化合物が、メチシリン、バンコマイシン、ナフシリン、ゲンタマイシン、アンピシリン、クロラムフェニコール、ドキシサイクリン、トブラマイシン、クリンダマイシン、ガチフロキサシン、セファゾリンおよびアミノグリコシド系抗生物質から選択される抗生物質を含む、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
細菌バイオフィルムを含有する天然表面を処置するための薬物の製造のためのビスマス‐チオール（ＢＴ）化合物の使用であって、前記処置が、
（ａ）前記天然表面上または表面内の細菌感染部が、（ｉ）グラム陽性菌、（ｉｉ）グラム陰性菌、ならびに（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の両方、のいずれかを含むと特定すること、および
（ｂ）１種以上のＢＴ化合物を含むＢＴ組成物を含む製剤を前記表面へ投与すること、
を含み、ここで
（ｉ）前記細菌感染部が、グラム陽性菌を含む場合、前記製剤が、有効量の少なくとも１種のＢＴ化合物および少なくとも１種のリファマイシン系抗生物質を含み、
（ｉｉ）前記細菌感染部が、グラム陰性菌を含む場合、前記製剤が、有効量の少なくとも１種のＢＴ化合物およびアミカシンを含み、
（ｉｉｉ）前記細菌感染部が、グラム陽性菌およびグラム陰性菌の両方を含む場合、前記製剤は有効量のＢＴ化合物、リファマイシンおよびアミカシンのうちの１種または複数を含み、
前記ＢＴ化合物が、ビスマスまたはビスマス塩、およびチオール含有化合物を含む、
前記使用。
【請求項１２】
（ａ）細菌感染物が、１種または複数の抗生物質耐性菌を含み、
（ｂ）処置することが、（ｉ）細菌バイオフィルムを根絶すること、（ｉｉ）細菌バイオフィルムを低減すること、および（ｉｉｉ）細菌バイオフィルムの発育を抑制すること、のうちの少なくとも１つを含み、
（ｃ）前記ＢＴ組成物が、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、前記微粒子の実質的に全てが、０．４μｍ〜５μｍの体積平均径を有する、
請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
（ａ）（Ｉ）または（ＩＩ）において、前記ビスマス塩は、Ｂｉ（ＮＯ３）３であること、
（ｂ）（ＩＩ）中において、前記酸性水溶液が、少なくとも５重量％、１０重量％、１５重量％、２０重量％、２２重量％、もしくは２２．５重量％のビスマスを含むこと、および、
（ｃ）（ＩＩ）において、前記酸性水溶液が、少なくとも０．５重量％、１重量％、１．５重量％、２重量％、２．５重量％、３重量％、３．５重量％、４重量％、４．５重量％、もしくは５重量％の硝酸を含むこと、
の少なくとも１つが該当する、請求項１に記載の組成物。
【請求項１４】
（ａ）（Ｉ）または（ＩＩ）において、前記ビスマス塩は、Ｂｉ（ＮＯ３）３であること、
（ｂ）（ＩＩ）中において、前記酸性水溶液が、少なくとも５重量％、１０重量％、１５重量％、２０重量％、２２重量％、もしくは２２．５重量％のビスマスを含むこと、および、
（ｃ）（ＩＩ）において、前記酸性水溶液が、少なくとも０．５重量％、１重量％、１．５重量％、２重量％、２．５重量％、３重量％、３．５重量％、４重量％、４．５重量％、もしくは５重量％の硝酸を含むこと、
の少なくとも１つが該当する、請求項２に記載の方法。
【請求項１５】
不純物を除去するために、前記沈殿物を回収することをさらに含む、請求項２に記載の方法。
【請求項１６】
前記相乗抗生物質または前記協調的抗微生物効力を増強する抗生物質が、アミノグリコシド系抗生物質、カルバペネム系抗生物質、セファロスポリン系抗生物質、フルオロキノロン系抗生物質、グリコペプチド系抗生物質、リンコサミド系抗生物質、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン系抗生物質、およびアミノペニシリン系抗生物質からなる群より選択される、請求項６に記載の使用。
【請求項１７】
前記アミノグリコシド系抗生物質が、アミカシン、アルベカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、ロドストレプトマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシンおよびアプラマイシンからなる群より選択される、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
前記アミノグリコシド系抗生物質が、アミカシン、アルベカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、ロドストレプトマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシンおよびアプラマイシンからなる群より選択される、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１９】
前記細菌病原が、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓ．アウレウス）、ＭＲＳＡ（メチシリン耐性Ｓ．アウレウス）、スタフィロコッカス・エピデルミディス、ＭＲＳＥ（メチシリン耐性Ｓ．エピデルミディス）、マイコバクテリウム・ツベルクローシス、マイコバクテリウム・アビウム、シュードモナス・エルギノーサ、薬物耐性Ｐ．エルギノーサ、エシェリヒア・コリ、腸管毒素原性Ｅ．コリ、腸管出血性Ｅ．コリ、クレブシエラ・ニューモニエ、クロストリジウム・ディフィシル、ヘリコバクター・ピロリ、レジオネラ・ニューモフィラ、エンテロコッカス・フェカーリス、メチシリン感受性エンテロコッカス・フェカーリス、エンテロバクター・クロアカエ、サルモネラ・ティフィムリウム、プロテウス・ブルガリス、エルシニア・エンテロコリチカ、ビブリオ・コレレ、シゲラ・フレクスネリ、バンコマイシン耐性エンテロコッカス（ＶＲＥ）、バークホルデリア・セパシア菌群、フランシセラ・ツラレンシス、バチルス・アントラシス、エルシニア・ペスチス、シュードモナス・エルギノーサ、ストレプトコッカス・ニューモニエ、ペニシリン耐性ストレプトコッカス・ニューモニエ、エシェリヒア・コリ、バークホルデリア・セパシア、バークホルデリア・マルチボランス、マイコバクテリウム・スメグマチスおよびアシネトバクター・バウマニーからなる群より選択される、請求項７に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２０１０年２月３日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０２３１０８号、および２０１０年８月１２日出願の米国特許仮出願第６１／３７３，１８８号の利益を主張するものであり、それらは、それぞれ参照により全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
背景
技術分野
ここに開示された発明の実施形態は、微生物感染の処置のための組成物および方法に関する。詳細には、本発明の実施形態は、細菌バイオフィルムおよび他の状態の処置をはじめとし、慢性創傷および急性創傷などの創傷において、そして臨床でのパーソナルヘルスケアおよび他の局面で、上皮組織における細菌感染を管理する改善された処置に関する。
【背景技術】
【０００３】
関連技術の記載
皮膚の創傷治癒と微生物感染への応答および抵抗、ならびに／または身体組織の治癒もしくは保持に寄与する複雑な一連の協調的分子内および分子間相互作用は一般に、例えば日和見感染および院内感染（例えば、感染のリスクを高めうる臨床レジメン）、抗生物質の局所もしくは全身投与（細胞の発育、遊走または他の機能に影響を及ぼす場合があり、抗生物質耐性微生物に向けて選択することもできる）、頻繁な創傷ドレッシング材交換、治癒を早めるための創傷の外気暴露、一時的な人工の構造支持マトリックスもしくは足場材料の使用、壊死組織除去および／もしくは反復手術により感染もしくは壊死組織を切除することの潜在的必要性、ならびに／または他の要因など、様々な外的要因により有害な影響を受ける場合がある。
【０００４】
こうして創傷治癒は、世界中の臨床担当者にとって、長年にわたる手強い難題である。不応性創傷への現行の処置は、非実用的で効果がなく、多くの場合、創傷の閉鎖に複数回の手術が必要となる。例えば、Ｒｅｇｒａｎｅｘ（登録商標）（ベカプレルミン、Ｏｒｔｈｏ−ＭｃＮｅｉｌ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ，  Ｉｎｃ．，  Ｅｔｈｉｃｏｎ，  Ｉｎｃ．から入手、組換え血小板由来成長因子）は、慢性創傷用の数少ない利用可能な処置の１つとして挙げられるが、製造に費用がかかり、臨床での効用が限定される。
【０００５】
慢性および急性創傷および創傷バイオフィルム
組織内の細胞間の連続性、または組織間の連続性が、例えば物理的、機械的、生物学的、病理学的および／または化学的力（例えば、熱傷、真皮感染、刺し傷、拳銃または榴散弾による創傷、皮膚潰瘍、放射能中毒、悪性腫瘍、壊疽、自己免疫疾患、免疫欠損性疾患、吸入または感染などによる呼吸器傷害、危険物の摂取または感染などによる胃腸傷害、凝固不能などの循環および造血障害）、または他の外傷性損傷などにより崩壊された時に、創傷が生じる。
【０００６】
創傷におけるわずかなレベルの細菌汚染、または創傷の「コロニー形成」は、創傷治癒のプロセスを必ずしも妨害しないが、宿主の免疫防御を圧倒するのに十分な数の細菌が存在すれば、急性創傷または慢性創傷または細菌バイオフィルムが存在する創傷、例えば細菌の発育で宿主の傷害が進行する創傷感染などをもたらす可能性がある。Ｂｒｙａｎｔ  ａｎｄ  Ｎｉｘ，  Ａｃｕｔｅ  ａｎｄ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｗｏｕｎｄｓ：  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  Ｃｏｎｃｅｐｔｓ，  ２００６  Ｍｏｓｂｙ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ），  ＮＹ；  Ｂａｒｏｎｓｋｉ，  Ｗｏｕｎｄ  Ｃａｒｅ  Ｅｓｓｅｎｔｉａｌｓ：  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ（２ｎｄ  Ｅｄ．），  ２００７  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，  ＰＡ）。例えば、損傷、外傷、外科的介入、または他の原因により生じうる急性創傷は、典型的には根本的な健康上の欠陥は存在せず急速に治癒するが、場合により、感染が存在することでそのようにならないこともあり、細菌バイオフィルムの急速な形成は、急性創傷において記載されている（例えば、ＷＯ／２００７／０６１９４２）。慢性創傷発生の原因となりうる更なる要因としては、可動性の欠如（例えば、それにより創傷部位に連続的な圧力が加えられる）、感覚または精神能力の欠損、創傷部位への接近不能（例えば、呼吸器または胃腸管）、および循環器欠損が挙げられる。慢性創傷部位での感染は、皮膚の発赤、浮腫、膿の形成および／もしくは不快臭、または他の関連の臨床的に認められた基準により検出される場合がある。
【０００７】
こうして、宿主の免疫系が創傷部位（例えば、急性創傷）の細菌感染に圧倒されていて、細菌が組織に侵入し更に破壊するための許容条件が生じた時に、高等な生物体（非限定的に、ヒトおよび他のホ乳類）において、適切に治癒できない急性創傷が存在する場合があり、こうして慢性損傷が発生する場合がある。一般に慢性創傷は、３ヶ月以内には治癒されず、創傷が小さくなる代わりに、細菌の侵入が進むにつれて大きく成長する傾向がある創傷である。慢性創傷は、創傷の進行に伴って付近の神経が障害（ニューロパチー）を受けるようになると、患者の疼痛およびストレスが大きくなる場合がある。これらの創傷は、毎年４００万人のアメリカ人に影響を及ぼし、処置費用が約９０億ドルかかる。罹患した人は、ほとんどが６０歳を超えている。
【０００８】
慢性創傷は、場合により急性創傷として発生することがあり、つまり例えば、拳銃または榴散弾による創傷、熱傷、刺し傷、静脈潰瘍、圧迫性潰瘍、糖尿病性潰瘍、放射能中毒、悪性腫瘍、真皮感染、壊疽、手術創、糖尿病性下肢潰瘍、褥瘡、静脈性下肢潰瘍、感染および／もしくはバイオフィルム含有難治性手術創、壊疽性膿皮症、外傷性創傷、急性動脈不全、壊死性筋膜炎、骨髄炎（骨感染）、放射能傷害、例えば放射線性骨壊死および軟部組織放射線性壊死、または他のタイプの創傷を挙げることができる。例えば静脈潰瘍は、ほとんどの場合、循環の制限（例えば虚血）、静脈弁の機能不全、または繰り返す身体的外傷（例えば、反復的損傷）により下肢に生じる。例えば創傷部位またはその付近に加えられる局所的圧力が、血圧よりも大きいと、圧力性潰瘍が生じる場合があり、その結果、循環の抑制、麻痺、および／または床ずれが、慢性損傷の原因となる、またはそれを悪化させる場合がある。糖尿病性潰瘍は、糖尿病患者に生じる場合があり、例えばコントロールできない高血糖により四肢の感覚が喪失し、患者の身体部分が反復的損傷を起こし、そして／または損傷に気付かない場合がある。慢性創傷の臨床徴候および臨床転帰を複雑化させる、または他の形で影響を及ぼす要因としては、患者の免疫状態（例えば、免疫抑制、病理的（例えば、ＨＩＶ−ＡＩＤＳ）、放射線治療により、または薬物により損傷された免疫系；年齢；ストレス）；皮膚の加齢（光化学的加齢など）、および創傷内のバイオフィルムの発生および進行が挙げられる。呼吸器および／または胃腸管内の上皮組織の場合、接近不能、閉塞、上皮表面を洗浄する流動力を発生させることが困難であること、または微生物の生存を誘導する局所的微細環境の生成が、臨床問題を引き起こす可能性がある。
【０００９】
創傷関連の損傷は、器官機能の喪失または障害、ショック、出血および／もしくは血栓、細胞死（例えば、壊死および／またはアポトーシス）、ストレスならびに／または微生物感染を伴う場合がある。これらの事象のいずれかまたは全て、特に感染は、創傷治癒に関与する効果的な組織修復プロセスを遅延または妨害する可能性がある。このため、創傷が持続する個体では、可能な限り早期に、創傷部位から非生存組織を除去すること（壊死組織除去と呼ばれるプロセス）、および創傷部位から任意の異物を除去すること（創傷浄化とも呼ばれる）が重要となる可能性がある。
【００１０】
重度の創傷、急性創傷、慢性創傷、熱傷、および潰瘍は、細胞創傷ドレッシング材が有益となる可能性がある。複数の人工皮膚製品、例えばＡｐｌｉｇｒａｆｔ（登録商標）（Ｎｏｒｖａｒｔｉｓ）、Ｄｅｍａｇｒａｆｔ（登録商標）、Ｂｉｏｂｒａｎｅ（登録商標）、Ｔｒａｎｓｃｙｔｅ（登録商標）（Ａｄｖａｎｃｅ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ）、Ｉｎｔｅｇｒａ（登録商標）  Ｄｅｒｍａｌ  Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  Ｔｅｍｐｌａｔｅ（登録商標）（Ｉｎｔｅｇｒａ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、およびＯｒＣｅｌ（登録商標）は、難治性創傷または熱傷に利用できる。しかしこれらの製品は、細菌の組織侵入および創傷拡大の問題に取り組むための設計ではない。
【００１１】
不幸にも全身性抗生物質は、慢性創傷の処置に効果的でなく、一般には、急性細菌感染が存在しない限り用いられない。現行のアプローチとしては、抗生物質の投与または適用が挙げられるが、そのような救済法は、抗生物質耐性菌株の出現を促進する場合があり、そして／または細菌バイオフィルムに無効となる場合がある。それゆえ、薬物耐性菌（例えば、メチシリン耐性スタフィロコッカス・アウレウスまたはＭＲＳＡ）が検出された場合に消毒薬を用いることが特に重要となりうる。広範に用いられる消毒薬が多く存在するが、定着した細菌集団または亜集団が、これらの薬剤、または任意の他の現在利用できる処置に応答しない場合がある。加えて、複数の消毒薬は、定着した細菌感染物に効果的となるのに必要な濃度では、宿主細胞に有毒となる場合があり、このためそのような消毒薬は、不適切である。この問題は、体内上皮表面、例えば呼吸器管（例えば、気道、鼻咽頭および喉頭管、気管、肺、気管支、気管支梢、肺胞など）もしくは胃腸管（例えば、口腔、食道、胃、腸、直腸、肛門など）、または他の上皮表面をはじめとする天然表面からの感染を浄化しようとする試みの場合には、特に深刻となりうる。
【００１２】
特に問題なのは、比較的近年に認知された細菌組織である細菌バイオフィルムで構成された感染物であり、それは浮遊性単細胞（プランクトン性）細菌が、細胞間接着により、著しく異なる行動様式、遺伝子発現、および抗生物質などの環境薬物への感受性を有する組織化された多細胞共同体（バイオフィルム）に構築されたものである。バイオフィルムは、プランクトン性細菌に見出されない生物学的防衛機構を展開する場合があり、その機構は、バイオフィルム共同体を抗生物質および宿主免疫反応から防御することができる。定着されたバイオフィルムは、組織治癒プロセスを停止させることができる。
【００１３】
持続的で潜在的に有毒な感染に潜む一般的な微生物学的汚染体としては、ＭＲＳＡ（メチシリン耐性スタフィロコッカス・アウレウス）をはじめとするＳ．アウレウス、エンテロコッカス属、Ｅ．コリ、Ｐ．エルギノーサ、ストレプトコッカス属、およびアシネトバクター・バウマニーが挙げられる。これらの生物体の幾つかは、数ヶ月間にわたり無栄養の臨床表面上で生存する能力を示す。Ｓ．アウレウスは、乾燥したガラス上で４週間、そして乾燥血液および木綿繊維上で３〜６ヶ月間生存可能であることが示された（Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９９  Ｉｎｆｅｃｔ．  Ｉｍｍｕｎ．  ６７：６６４−６６９）。Ｅ．コリおよびＰ．エルギノーサは両者とも、乾燥血液および木綿繊維上でＳ．アウレウスよりも長期間生存することが示された（前著）。
【００１４】
微生物バイオフィルムは、殺菌剤および抗生物質の両者に対する耐性の実質的上昇に関連する。バイオフィルムの形態は、細菌および／または真菌が表面に付着すると生じる。この付着は、遺伝子転写の変化を惹起し、著しく活発で、多糖マトリクスを浸透することが困難な分泌物をもたらして、微生物を防御する。バイオフィルムは、抗生物質に対して非常に実質的な耐性を有することに加えて、ホ乳類の免疫系に非常に耐性がある。バイオフィルムは、一旦定着すると根絶が非常に困難となるため、バイオフィルムの形成を予防することは、非常に重要な臨床的優先事項である。近年の研究から、開放型創傷がバイオフィルムにより急速に汚染されうることが示された。これらの微生物バイオフィルムは、創傷治癒を遅延させると考えられ、重篤な創傷感染の定着に関連する可能性が高い。
【００１５】
例えば現行での軍事創傷ケアのためのガイドラインは、精力的で完全なイリゲーションおよび壊死組織除去を明記している（Ｂｌａｎｋｅｎｓｈｉｐ  ＣＬ，  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｃａｒｅ  ｏｆ  ｏｐｅｎ  ｃｏｍｂａｔ  ｃａｓｕａｌｔｙ  ｗｏｕｎｄｓ，  Ｆｌｅｅｔ  Ｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｓｕｐｐｏｒｔ．  Ｕ．  Ｓ．  Ｂｕｒｅａｕ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｓｕｒｇｅｒｙ）。この初期介入は、重要であるが、感染の発症を防ぐのに十分ではない。続く壊死組織除去を受けて治癒を促進し、微生物の生物負荷を低減し、それにより創傷感染および創傷バイオフィルムが定着する機会を低減するには、追加的な治療ステップが必要となる。
【００１６】
軍事的な外傷創は複雑な性質であるため、感染の可能性が大きく、異物および他の環境汚染物質の導入が特に考慮される。軍事環境および臨床環境（これらの環境の両方に存在するヒトを含む）は両者とも、特に開放型の、そして／または複雑な創傷に見舞われたものに対しては、潜在的病原性微生物の重要な供給源として作用する。手術創および軍事的創傷を含む急性および慢性創傷は、感染に対する身体の一次的防御およびバリアである皮膚を既に傷つけている。こうして創傷は、身体の内部（湿潤的で栄養的な環境）を日和見感染および病原感染にさらしている。これらの感染の多く、特に持続的創傷感染は、慢性創傷の例で示される通り、バイオフィルム形成に関与する可能性がある（Ｊａｍｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００８）。病院施設内での創傷感染は、院内感染の最も一般的な原因の１つであり、軍事的および自然災害的環境で得られた創傷は、微生物汚染を特に受け易い。軍事的創傷は、典型的には組織障害に関連し、広範で深部になる傾向があり、異物を導入して局所血液供給を妨害する場合があり、骨折および熱傷に関連する場合があり、ショックを起こして免疫防御を損なう場合があるため、軍事的創傷は、感染に罹り易い。
【００１７】
皮膚構造および創傷治癒
無傷で機能を果たしている皮膚および他の上皮組織（例えば、生物体とその外部環境の間にバリアを形成する一般には無血管の上皮表面、例えば皮膚内に見出され、呼吸器および胃腸管、腺組織などの内層にも見出されるもの）の維持は、ヒトおよび他の動物の健康および生存に重大である。皮膚は、ヒトおよび他の高等な脊椎動物（例えば、ホ乳類）の最大身体器官であり、バリア機能、機械的強度および水への不浸透性を通して環境傷害から防御する。重大な環境的境界面として、皮膚は、防御的身体被覆を提供して生理学的平衡の維持を可能にする。
【００１８】
皮膚の構造は、周知である。手短に言えば、表皮、つまり皮膚の外層が、角質層、つまり不活性の表皮皮膚細胞（例えば、角化細胞）および細胞外結合組織タンパク質の保護層により覆われている。表皮は、下層の表皮顆粒細胞、有棘細胞、および基底細胞層から押し上げられた新しい材料により交換されると脱皮の連続工程を受け、連続した細胞分裂およびタンパク質合成により新しい皮膚細胞および皮膚タンパク質（例えば、ケラチン、コラーゲン）を生成する。真皮は、表皮の下に存在しており、真皮線維芽細胞により結合組織タンパク質（例えばコラーゲン、エラスチンなど）を同化し、細胞外マトリックスおよび線維構造を組み立てて、皮膚に柔軟性、強度および弾性を付与する部位である。真皮内には、神経、血管、平滑筋細胞、毛包および脂肪腺も存在する。
【００１９】
身体の第一の防御線として、皮膚は、構造および機能を変化させうる物理的、機械的、化学的および生物学的（例えば、生体異物、自己免疫）攻撃などの臨床傷害の重要なターゲットである。皮膚は、生物体の免疫防御の重要な成分とも見なされている。皮膚においては、強力な抗原提示活性を有し、免疫学的防御に寄与する遊走および常在白血球（例えば、リンパ球、マクロファージ、肥満細胞）および表皮樹状（ランゲルハンス）細胞を見出すことができる。基底層内の有色メラノサイトは、潜在的に有害な紫外（ＵＶ）線を吸収する。皮膚の破壊は、日和見感染、不完全で不適切な組織リモデリング、瘢痕化、可動性の障害、疼痛および／または他の障害に関連するリスクなど、不適当なリスクを対象に与える。皮膚と同様に、他の上皮表面（例えば、呼吸器管、胃腸管および腺の内層）は、健常時には定義された構造属性を有するため、感染または他の破壊が重大な健康的リスクを与える場合がある。
【００２０】
例えば、切り傷、擦り傷、擦過傷、刺し傷、熱傷（化学的熱傷を含む）、感染、極温、切開（例えば、外科的切開）、外傷および他の損傷などの創傷によって、皮膚が損傷または破壊する場合がある。それゆえ創傷治癒による効率的な皮膚修復が、これらおよび同様の局面において明らかに望ましい。
【００２１】
皮膚は、自然には多くのタイプの損傷の後に顕著な自己修復能力を示すが、皮膚治癒が十分に急速に行われず、そして／または不適切な細胞組織の修復機構により不完全にリモデリングされた皮膚が生じて、結果的に完全性、バリア特性、機械的強度、弾性、柔軟性、または他の未損傷の皮膚に望ましい特性を欠損しうる局面は、依然として多く存在する。こうして皮膚の創傷治癒は、例えば慢性創傷の局面において、そのような関連する難題を与える。
【００２２】
創傷治癒は、３種の動的で重複した時期に起こり、フィブリン塊の形成と共に開始する。フィブリン塊は、増殖因子の一時的なシールドおよびリザーバを提供して、細胞を創傷内に引き付ける。それは、細胞が修復時に侵入する暫定的な細胞外マトリックス（ＥＣＭ）としても作用する。フィブリン塊形成と重なって起こるのが炎症期であり、それは創傷への食細胞および好中球の浸潤により、初期治癒反応を増幅させる増殖因子を放出する一方で、創傷の残屑および細菌を清浄することを特徴とする。剥皮された領域を再生するプロセスが、治癒の増殖期において開始されて、免疫細胞から分泌されたケモカイン、サイトカインおよびプロテアーゼにより操作され、それらはフィブリン塊内に濃縮される。角化細胞は、増殖および遊走するように刺激されて創傷を覆う新しい上皮層を形成し、その一方で創傷の血管新生が、酸素、栄養素、および炎症細胞を創傷領域へ送達する。リモデリング期は、創傷修復の最終期であり、筋線維芽細胞により実施され、その細胞は、結合組織の収縮を促進し、創傷の強度を増大して、ＥＣＭを付着させて瘢痕を形成する（Ｍａｒｔｉｎ，  Ｐ．  Ｗｏｕｎｄ  Ｈｅａｌｉｎｇ−Ａｉｍｉｎｇ  ｆｏｒ  Ｐｅｒｆｅｃｔ  Ｓｋｉｎ  Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ．  Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９７；４：７５−８０）。
【００２３】
ビスマスチオール（ＢＴ）を基剤とする消毒薬
抗微生物性、詳細には抗菌性を有する複数の天然産物（例えば、抗生物質）および合成化学薬品は、当該技術分野で公知であり、化学構造と、抗微生物効果、例えば微生物を殺傷する能力（殺菌性などの「殺傷」効果）、微生物の発育を停止もしくは損傷する能力（静菌性などの「静止」効果）、あるいは微生物機能、例えば部位でのコロニー形成もしくは感染、細菌によるエキソポリサッカライド分泌、ならびに／またはプランクトン性集団からバイオフィルム集団への変換もしくはバイオフィルム形成の拡大などを妨害する能力と、により少なくとも一部が特徴づけられている。例えば殺菌または静菌能力、効果的濃度、および宿主組織への毒性のリスクなど、そのような組成物の選択および使用に影響を及ぼす因子を含む抗生物質、殺菌剤、消毒薬など（ビスマス−チオールまたはＢＴ化合物を含む）は、例えば、Ｕ．Ｓ．６，５８２，７１９号で議論されている。
【００２４】
ビスマスは第Ｖ族金属であり、（銀と同様に）抗微生物性を有する元素である。ビスマス単独では、治療的に有用となりえず、特定の不適切な性質を示す場合があり、そのため、代わりに錯化剤、担体、および／または他のビヒクルでの送達によって投与してもよく、その最も一般的な例が、ビスマスを次サリチル酸塩と組み合わせた（キレート化した）Ｐｅｐｔｏ  Ｂｉｓｍｏｌ（登録商標）である。特定のチオール（−ＳＨ、スルフヒドリル）含有化合物、例えばエタンジチオールとビスマスとを組み合わせて、例示的なビスマスチオール（ＢＴ）化合物を提供すると、現在入手できる他のビスマス調製物と比較して、ビスマスの抗微生物能が改善されることが、これまでの研究で決定された。ＢＴを製造するのに用いられうるチオール化合物は多く存在し（例えば、Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐ．  ４５（５）：１４１７−１４２１，  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４１（８）：１６９７−１７０３、およびＵ．Ｓ  ＲＥ３７，７９３号、Ｕ．Ｓ．６，２４８，３７１号、同６，０８６，９２１号、および同６，３８０，２４８号に開示されており；例えばＵ．Ｓ．６，５８２，７１９号も参照）、これらの調製物の複数は、バイオフィルム形成を阻害することができる。
【００２５】
ＢＴ化合物は、ＭＲＳＡ（メチシリン耐性Ｓ．アウレウス）、ＭＲＳＥ（メチシリン耐性Ｓ．エピデルミディス）、マイコバクテリウム・ツベルクローシス、マイコバクテリウム・アビウム、薬物耐性Ｐ．エルギノーサ、腸管毒素原性Ｅ．コリ、腸管出血性Ｅ．コリ、クレブシエラ・ニューモニエ、クロストリジウム・ディフィシル、ヘリコバクター・ピロリ、レジオネラ・ニューモフィラ、エンテロコッカス・フェカーリス、エンテロバクター・クロアカエ、サルモネラ・ティフィムリウム、プロテウス・ブルガリス、エルシニア・エンテロコリチカ、ビブリオ・コレレ、およびシゲラ・フレクスネリに対する活性が立証されている（Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４１：１６９７−１７０３）。サイトメガロウイルス、単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ−１）およびＨＳＶ−２、ならびに酵母および真菌、例えばカンジダ・アルビカンスに対する活性の証拠も存在する。ＢＴの役割は、細菌の病原性を低下させて、広域スペクトル抗生物質に耐性の微生物（グラム陽性菌およびグラム陰性菌）を阻害または殺傷し、バイオフィルムの形成を予防し、敗血症性ショックを予防し、敗血症を処置し、過去に耐性を示した抗生物質への細菌感受性を上昇させることにおいても実証された（例えば、Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１  Ａｇｅｎｔ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４５：１４１７−１４２１；Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０００  Ｉｎｆｅｃｔ．  Ｍｅｄ．  １７：１２３−１２７；  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  ＆  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ３：７９−８５のＤｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３  Ｒｅｓ．  Ａｄｖ．；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９7  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４１（８）：１６９７−１７０３；Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９  Ｉｎｆｅｃｔ．  Ｉｍｍｕｎ．  ６７：６６４−６６９；  Ｈｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．  １９９９  Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４４：６０１−６０５；  Ｖｅｌｏｉｒａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３  Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ５２：９１５−９１９；  Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．  ２６：７３１−７３８参照）。
【００２６】
１０年を十分に超える期間のＢＴ化合物の利用性にもかかわらず、特定の感染疾患の徴候に関する適切なＢＴ化合物の効果的選択は、依然として捕えどころのない目標であり、特定の微生物に対する特定のＢＴの挙動は予測できず、特定の微生物に対する特定のＢＴと特定の抗生物質との相乗活性は予測できず、インビトロでのＢＴの効果からは通常、インビボでのＢＴ効果を予測することができず、プランクトン（単一細胞）性微生物集団に対するＢＴ効果は、微生物共同体、例えばバイオフィルムへ構成された細菌に対するＢＴ効果の予測因子となりえない。加えて、溶解度、組織透過性、生物学的利用度、生体内分布などの限界が、一部のＢＴ化合物の場合に、臨床利益を安全に、そして効果的に送達する能力を妨害する可能性がある。ここに開示された発明の実施形態は、これらの必要性に取り組んでおり、他の関連の利益を提示する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２７】
簡単な概要
初めて本明細書に開示されており、理論に束縛されるのを望むものではないが、本明細書に記載された特定の実施形態によれば、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物は、非常に様々な臨床的感染疾患および状態の処置、ならびにパーソナルヘルスケアに用いられる消毒薬として用いることができ、ＢＴにより少なくとも一部は仲介される予防または防護により実行される節減など、そのような感染の処置にかかるコストも低下させる。
【００２８】
同じく特定の実施形態において、本明細書に記載された１種以上のＢＴ化合物および１種以上の抗生物質化合物を含み、細菌バイオフィルムまたはバイオフィルム形成に関連する細菌（例えば、バイオフィルムを形成または他の方法で促進することができる細菌）を含む組織および／または表面を処置するための配合剤が企図され、非限定的理論によれば、本開示を基にして適宜選択されたＢＴ化合物と抗生物質との組み合わせは、そのような配合剤の抗菌（抗バイオフィルムを含む）効果において以前は予測されなかった相乗性、ならびに／または細菌バイオフィルムを含む感染などの微生物感染の予防、防護および／もしくは治療上効果的な処置のための予測されなかった増強効果を提供する。
【００２９】
同じく、初めて本明細書において提供されるのは、実質的に単分散の微粒子懸濁液を含む前例のないビスマス−チオール組成物、ならびにそれを合成および使用する方法である。
【課題を解決するための手段】
【００３０】
本明細書に記載された発明の特定の実施形態によれば、こうして、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含むビスマス−チオール組成物が提供され、前記微粒子の実質的に全てが、約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有し、ＢＴ化合物は、ビスマスまたはビスマス塩およびチオール含有化合物を含む。別の実施形態において、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含むビスマス−チオール組成物が提供され、前記微粒子の実質的に全てが、約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有し、（ａ）固体沈殿物を実質的に含まない溶液を得るのに十分となる条件および時間で、（ｉ）少なくとも５０ｍＭの濃度のビスマスを含むビスマス塩を含み、親水性、極性または有機性可溶化剤を含まない酸性水溶液を、（ii）少なくとも約５容量％、１０容量％、１５容量％、２０容量％、２５容量％または３０容量％のエタノールを含む混和物を得るのに十分な量のエタノールと混和すること；ならびに（ｂ）ＢＴ化合物を含む微粒子を含む沈殿物の形成に十分となる条件および時間で、ビスマスに対して約１：３〜約３：１のモル比で反応溶液中に存在するチオール含有化合物を含むエタノール性溶液を（ａ）の混和物に添加して、反応溶液を得ること、を含む方法により形成される。特定の実施形態において、ビスマス塩は、Ｂｉ（ＮＯ３）３である。特定の実施形態において、酸性水溶液は、少なくとも５重量％、１０重量％、１５重量％、２０重量％、２２重量％または２２．５重量％のビスマスを含む。特定の実施形態において、酸性水溶液は、少なくとも０．５重量％、１重量％、１．５重量％、２重量％、２．５重量％、３重量％。３．５重量％、４重量％、４．５重量％または５重量％の硝酸を含む。特定の実施形態において、チオール含有化合物は、１，２−エタンジチオール、２，３−ジメルカプトプロパノール、ピリチオン、ジチオエリトリトール、３，４−ジメルカプトトルエン、２，３−ブタンジチオール、１，３−プロパンジチオール、２−ヒドロキシプロパンチオール、１−メルカプト−２−プロパノール、α−リポ酸、およびジチオトレイトールから選択される薬剤を１種以上含む。
【００３１】
別の実施形態において、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含むビスマス−チオール組成物を調製する方法が提供され、前記微粒子の実質的に全てが、約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有し、前記方法が、（ａ）固体沈殿物を実質的に含まない溶液を得るのに十分となる条件および時間で、（ｉ）少なくとも５０ｍＭの濃度のビスマスを含むビスマス塩を含み、親水性、極性または有機性可溶化剤を含まない酸性水溶液を、（ii）少なくとも約５容量％、１０容量％、１５容量％、２０容量％、２５容量％または３０容量％のエタノールを含む混和物を得るのに十分な量のエタノールと混和するステップ；ならびに（ｂ）ＢＴ化合物を含む微粒子を含む沈殿物の形成に十分となる条件および時間で、ビスマスに対して約１：３〜約３：１のモル比で反応溶液中に存在するチオール含有化合物を含むエタノール性溶液を（ａ）の混和物に添加して、反応溶液を得るステップ、を含む。特定の実施形態において、その方法は、沈殿物を回収して不純物を除去することを更に含む。特定の実施形態において、ビスマス塩は、Ｂｉ（ＮＯ３）３である。特定の実施形態において、酸性水溶液は、少なくとも５重量％、１０重量％、１５重量％、２０重量％、２２重量％または２２．５重量％のビスマスを含む。特定の実施形態において、酸性水溶液は、少なくとも０．５重量％、１重量％、１．５重量％、２重量％、２．５重量％、３重量％。３．５重量％、４重量％、４．５重量％または５重量％の硝酸を含む。特定の実施形態において、チオール含有化合物は、１，２−エタンジチオール、２，３−ジメルカプトプロパノール、ピリチオン、ジチオエリトリトール、３，４−ジメルカプトトルエン、２，３−ブタンジチオール、１，３−プロパンジチオール、２−ヒドロキシプロパンチオール、１−メルカプト−２−プロパノール、ジチオトレイトール、α−リポ酸、メタンチオール（ＣＨ３ＳＨ［ｍ−メルカプタン］）、エタンチオール（Ｃ２Ｈ５ＳＨ［ｅ−メルカプタン］）、１−プロパンチオール（Ｃ３Ｈ７ＳＨ［ｎ−Ｐメルカプタン］）、２−プロパンチオール（ＣＨ３ＣＨ（ＳＨ）ＣＨ３［２Ｃ３メルカプタン］）、ブタンチオール（Ｃ４Ｈ９ＳＨ［ｎ−ブチルメルカプタン］）、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン（Ｃ（ＣＨ３）３ＳＨ［ｔ−ブチルメルカプタン］）、ペンタンチオール（Ｃ５Ｈ１１ＳＨ［ペンチルメルカプタン］）、コエンザイムＡ、リポアミド、グルタチオン、システイン、シスチン、２−メルカプトエタノール、ジチオトレイトール、２−メルカプトインドール、トランスグルタミナーゼ、（１１−メルカプトウンデシル）ヘキサ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）官能基化金ナノ粒子、１，１’，４’，１’’−テルフェニル−４−チオール、１，１１−ウンデカンジチオール、１，１６−ヘキサデカンジチオール、技術的な等級の１，２−エタンジチオール、１，３−プロパンジチオール、１，４−ベンゼンジメタンチオール、１，４−ブタンジチオール、１，４−ブタンジチオール二酢酸塩、１，５−ペンタンジチオール、１，６−ヘキサンジチオー���、１，８−オクタンジチオール、１，９−ノナンジチオール、アダマンタンチオール、１−ブタンチオール、１−デカンチオール、１−ドデカンチオール、１−ヘプタンチオール、１−ヘプタンチオールプルム（ｐｕｒｕｍ）、１−ヘキサデカンチオール、１−ヘキサンチオール、１−メルカプト（トリエチレングリコール）、１−メルカプト（トリエチレングリコール）メチルエーテル官能基化金ナノ粒子、１−メルカプト−２−プロパノール、１−ノナンチオール、１−オクタデカンチオール、１−オクタンチオール、１−ペンタデカンチオール、１−ペンタンチオール、１−プロパンチオール、１−テトラデカンチオール、１−テトラデカンチオールプルム、１−ウンデカンチオール、１１−（１Ｈ−ピロル−１−イル）ウンデカン−１−チオール、１１−アミノ−１−ウンデカンチオール塩酸塩、１１−ブロモ−１−ウンデカンチオール、１１−メルカプト−１−ウンデカノール、１１−メルカプトウンデカン酸、１１−メルカプトウンデシルトリフルオロ酢酸塩、１１−メルカプトウンデシルリン酸、１２−メルカプトドデカン酸、１５−メルカプトペンタデカン酸、１６−メルカプトヘキサデカン酸、１Ｈ，１Ｈ，２Ｈ，２Ｈ−ペルフルオロデカンチオール、２，２’−（エチレンジオキシ）ジエタンチオール、２，３−ブタンジチオール、２−ブタンチオール、２−エチルヘキサンチオール、２−メチル−１−プロパンチオール、２−メチル−２−プロパンチオール、２−フェニルエタンチオール、３，３，４，４，５，５，６，６，６−ノナフルオロ−１−ヘキサンチオールプルム、３−（ジメトキシメチルシリル）−１−プロパンチオール、３−クロロ−１−プロパンチオール、３−メルカプト−１−プロパノール、３−メルカプト−２−ブタノール、３−メルカプト−Ｎ−ノニルプロピオンアミド、３−メルカプトプロピオン酸、３−メルカプトプロピル官能基化シリカゲル、３−メチル−１−ブタンチオール、４，４’−ビス（メルカプトメチル）ビフェニル、４，４’−ジメルカプトスチルベン、４−（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンジルアルコール、４−シアノ−１−ブタンチオール、４−メルカプト−１−ブタノール、６−（フェロセニル）ヘキサンチオール、６−メルカプト−１−ヘキサノール、６−メルカプトヘキサン酸、８−メルカプト−１−オクタノール、８−メルカプトオクタン酸、９−メルカプト−１−ノナノール、ビフェニル−４，４’−ジチオール、３−メルカプトプロピオン酸ブチル、１−ブタンチオール酸銅（Ｉ）、シクロヘキサンチオール、シクロペンタンチオール、デカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化金ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ヘキサ（エチレングリコール）モノ−１１−（アセチルチオ）ウンデシルエーテル、メルカプトコハク酸、３−メルカプトプロピオン酸メチル、ＮａｎｏＴｅｔｈｅｒ  ＢＰＡ−ＨＨ、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）１８、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）８、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）ＡＣＩＤ１１、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）ＡＣＩＤ１６、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）ＡＬＣＯ１１、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）ＴＨＩＯ８、オクタンチオール官能基化金ナノ粒子、Ｐ��Ｇジチオール平均Ｍｎ８，０００、ＰＥＧジチオール平均分子量１，５００、ＰＥＧジチオール平均分子量３，４００、Ｓ−（１１−ブロモウンデシル）チオアセタート、Ｓ−（４−シアノブチル）チオアセタート、チオフェノール、トリエチレングリコールモノ−１１−メルカプトウンデシルエーテル、トリメチロールプロパントリス（３−メルカプトプロピオナート）、［１１−（メチルカルボニルチオ）ウンデシル］テトラ（エチレングリコール）、ｍ−カルボラン−９−チオール、ｐ−テルフェニル−４，４’’−ジチオール、ｔｅｒｔ−ドデシルメルカプタン、ｔｅｒｔ−ノニルメルカプタンからなる群より選択される薬剤を１種以上含む。
【００３２】
別の実施形態において、（ｉ）細菌、真菌またはウイルス病原による天然表面の感染の予防、（ii）細菌、真菌またはウイルス病原の実質的に全てのプランクトン性細胞の細胞生存性または細胞発育の阻害、（iii）細菌、真菌またはウイルス病原によるバイオフィルム形成の阻害、および（iv）細菌、真菌またはウイルス病原の実質的に全てのバイオフィルム型細胞のバイオフィルム生存性またはバイオフィルム発育の阻害、のうちの１つ以上に十分となる条件および時間で、上皮組織表面を効果的量のＢＴ組成物と接触させることを含み、ＢＴ組成物が、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、前記微粒子の実質的に全てが、約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有する、細菌病原、真菌病原およびウイルス病原のうちの１種以上に対して、上皮組織表面などの生体組織表面をはじめとする天然表面を防御する方法が提供される。特定の実施形態において、細菌病原は、（ｉ）１種以上のグラム陰性菌；（ii）１種以上のグラム陽性菌；（iii）１種以上の抗生物質感受性菌；（iv）１種以上の抗生物質耐性菌；（ｖ）スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓ．アウレウス）、ＭＲＳＡ（メチシリン耐性Ｓ．アウレウス）、スタフィロコッカス・エピデルミディス、ＭＲＳＥ（メチシリン耐性Ｓ．エピデルミディス）、マイコバクテリウム・ツベルクローシス、マイコバクテリウム・アビウム、シュードモナス・エルギノーサ、薬物耐性Ｐ．エルギノーサ、エシェリヒア・コリ、腸管毒素原性Ｅ．コリ、腸管出血性Ｅ．コリ、クレブシエラ・ニューモニエ、クロストリジウム・ディフィシル、ヘリコバクター・ピロリ、レジオネラ・ニューモフィラ、エンテロコッカス・フェカーリス、メチシリン感受性エンテロコッカス・フェカーリス、エンテロバクター・クロアカエ、サルモネラ・ティフィムリウム、プロテウス・ブルガリス、エルシニア・エンテロコリチカ、ビブリオ・コレレ、シゲラ・フレクスネリ、バンコマイシン耐性エンテロコッカス（ＶＲＥ）、バークホルデリア・セパシア菌群、フランシセラ・ツラレンシス、バチルス・アントラシス、エルシニア・ペスチス、シュードモナス・エルギノーサ、バンコマイシン耐性エンテロコッカス属、ストレプトコッカス・ニューモニエ、ペニシリン耐性ストレプトコッカス・ニューモニエ、エシェリヒア・コリ、バークホルデリア・セパシア、バークホルデリア・マルチボランス、マイコバクテリウム・スメグマチスおよびアシネトバクター・バウマニーから選択される細菌病原、のうちの少なくとも１つを含む。特定の実施形態において、細菌病原は、抗生物質耐性を示す。特定の実施形態において、細菌病原は、メチシリン、バンコマイシン、ナフシリン、ゲンタマイシン、アンピシリン、クロラムフェニコール、ドキシサイクリンおよびトブラマイシン、から選択される抗生物質に対して耐性を示す。
【００３３】
特定の実施形態において、天然表面は、口内／口腔表面を含む。更なる実施形態において、天然表面は、生物学的表面、例えば骨、関節、筋肉、靭帯、または腱を含む。
【００３４】
特定の実施形態において、表面は、表皮、真皮、呼吸器管、胃腸管および腺の内層から選択される組織を含む上皮組織表面を含む。
【００３５】
特定の実施形態において、接触のステップは、１回または複数回実施される。特定の実施形態において、少なくとも１回の接触ステップは、天然表面をスプレー、イリゲーション、浸漬および塗布することのうちの１つを含む。特定の実施形態において、少なくとも１回の接触ステップは、吸入、摂取および経口イリゲーションのうちの１つを含む。特定の実施形態において、少なくとも１回の接触ステップは、局所、腹腔内、経口、非経口、静脈内、動脈内、経皮、舌下、皮下、筋肉内、経頬、鼻腔内、吸入、眼内、耳内、心室内、脂肪内、関節内および髄腔内から選択される経路により投与することを含む。特定の実施形態において、ＢＴ組成物は、ＢｉｓＢＡＬ、ＢｉｓＥＤＴ、Ｂｉｓ−ジメルカプロール、Ｂｉｓ−ＤＴＴ、Ｂｉｓ−２−メルカプトエタノール、Ｂｉｓ−ＤＴＥ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ、Ｂｉｓ−Ｅｒｙ、Ｂｉｓ−Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−ＢＤＴ、Ｂｉｓ−ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｂａｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＥＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｅｒｙ、ビスマス−１−メルカプト−２−プロパノール、およびＢｉｓ−ＥＤＴ／２−ヒドロキシ−１−プロパンチオールからなる群より選択されるＢＴ化合物を１種以上含む。
【００３６】
特定の実施形態において、細菌病原は、抗生物質耐性を示す。他の特定の実施形態において、上記方法は、天然表面をＢＴ組成物と接触させるステップに関して同時に、または連続して任意の順序で、天然表面を相乗性抗生物質（ｓｙｎｅｒｇｉｚｉｎｇ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ）および／または増強性抗生物質（ｅｎｈａｎｃｉｎｇ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ）と接触させることを更に含む。特定の実施形態において、相乗性抗生物質および／または増強性抗生物質は、アミノグリコシド系抗生物質、カルバペネム系抗生物質、セファロスポリン系抗生物質、フルオロキノロン系抗生物質、グリコペプチド系抗生物質、リンコサミド系抗生物質、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン系抗生物質、およびアミノペニシリン系抗生物質から選択される抗生物質を含む。特定の実施形態において、相乗性抗生物質および／または増強性抗生物質は、アミカシン、アルベカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、ロドストレプトマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシンおよびアプラマイシンから選択されるアミノグリコシド系抗生物質である。
【００３７】
本明細書に記載された本発明の別の実施形態において、（ｉ）抗生物質耐性菌病原が存在する天然表面の、細菌病原による感染の予防、（ii）細菌病原の実質的に全てのプランクトン性細胞の細胞生存性または細胞発育の阻害、（iii）細菌病原によるバイオフィルム形成の阻害、および（iv）細菌病原の実質的に全てのバイオフィルム型細胞のバイオフィルム生存性またはバイオフィルム発育の阻害、のうちの１つ以上に十分となる条件および時間で、抗生物質耐性菌病原が存在する天然表面を、効果的量の（１）少なくとも１種のビスマス−チオール（ＢＴ）組成物および（２）少なくとも１種のＢＴ組成物により増強され、そして／またはそれと相乗的に作用することが可能である少なくとも１種の抗生物質と同時に、または連続して任意の順序で接触させることを含み、ＢＴ組成物が、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、前記微粒子の実質的に全てが、約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有し、それにより上皮組織表面での抗生物質耐性を克服する、抗生物質耐性菌病原が存在する天然表面で抗生物質耐性を克服する（例えば、同じ菌種の細菌に対して抗菌効果を有することが公知の少なくとも１種の抗生物質の少なくとも１種の抗菌効果に耐性のある細菌病原に関して、そのような病原を抗生物質に対して感受性にさせる）方法が提供される。特定の実施形態において、細菌病原は、（ｉ）１種以上のグラム陰性菌；（ii）１種以上のグラム陽性菌；（iii）１種以上の抗生物質感受性菌；（iv）１種以上の抗生物質耐性菌；（ｖ）スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓ．アウレウス）、ＭＲＳＡ（メチシリン耐性Ｓ．アウレウス）、スタフィロコッカス・エピデルミディス、ＭＲＳＥ（メチシリン耐性Ｓ．エピデルミディス）、マイコバクテリウム・ツベルクローシス、マイコバクテリウム・アビウム、シュードモナス・エルギノーサ、薬物耐性Ｐ．エルギノーサ、エシェリヒア・コリ、腸管毒素原性Ｅ．コリ、腸管出血性Ｅ．コリ、クレブシエラ・ニューモニエ、クロストリジウム・ディフィシル、ヘリコバクター・ピロリ、レジオネラ・ニューモフィラ、エンテロコッカス・フェカーリス、メチシリン感受性エンテロコッカス・フェカーリス、エンテロバクター・クロアカエ、サルモネラ・ティフィムリウム、プロテウス・ブルガリス、エルシニア・エンテロコリチカ、ビブリオ・コレレ、シゲラ・フレクスネリ、バンコマイシン耐性エンテロコッカス（ＶＲＥ）、バークホルデリア・セパシア菌群、フランシセラ・ツラレンシス、バチルス・アントラシス、エルシニア・ペスチス、シュードモナス・エルギノーサ、バンコマイシン耐性エンテロコッカス属、ストレプトコッカス・ニューモニエ、ペニシリン耐性ストレプトコッカス・ニューモニエ、エシェリヒア・コリ、バークホルデリア・セパシア、バークホルデリア・マルチボランス、マイコバクテリウム・スメグマチスおよびアシネトバクター・バウマニーから選択される細菌病原、のうちの少なくとも１種を含む。
【００３８】
特定の実施形態において、細菌病原は、メチシリン、バンコマイシン、ナフシリン、ゲンタマイシン、アンピシリン、クロラムフェニコール、ドキシサイクリン、トブラマイシン、クリンダマイシンおよびガチフロキサシンから選択される抗生物質に対して耐性を示す。
【００３９】
特定の実施形態において、天然表面は、口内／口腔表面を含む。更なる実施形態において、天然表面は、生物学的表面、例えば骨、関節、筋肉、靭帯、または腱を含む。
【００４０】
特定の実施形態において、表面は、表皮、真皮、呼吸器管、胃腸管および腺の内層からなる群より選択される組織を含む。特定の実施形態において、接触のステップは、１回または複数回実施される。特定の実施形態において、少なくとも１回の接触ステップは、表面をスプレー、イリゲーション、浸漬および塗布することのうちの１つを含む。他の特定の実施形態において、少なくとも１回の接触ステップは、吸入、摂取および経口イリゲーションのうちの１つを含む。特定の実施形態において、少なくとも１回の接触ステップは、局所、腹腔内、経口、非経口、静脈内、動脈内、経皮、舌下、皮下、筋肉内、経頬、鼻腔内、吸入、眼内、耳内、心室内、脂肪内、関節内および髄腔内から選択される経路により投与することを含む。特定の実施形態において、ＢＴ組成物は、ＢｉｓＢＡＬ、ＢｉｓＥＤＴ、Ｂｉｓ−ジメルカプロール、Ｂｉｓ−ＤＴＴ、Ｂｉｓ−２−メルカプトエタノール、Ｂｉｓ−ＤＴＥ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ、Ｂｉｓ−Ｅｒｙ、Ｂｉｓ−Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−ＢＤＴ、Ｂｉｓ−ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｂａｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＥＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｅｒｙ、ビスマス−１−メルカプト−２−プロパノール、およびＢｉｓ−ＥＤＴ／２−ヒドロキシ−１−プロパンチオールからなる群より選択されるＢＴ化合物を１種以上含む。特定の実施形態において、相乗性抗生物質および／または増強性抗生物質は、クリンダマイシン、ガチフロキサシン、アミノグリコシド系抗生物質、カルバペネム系抗生物質、セファロスポリン系抗生物質、フルオロキノロン系抗生物質、グリコペプチド系抗生物質、リンコサミド系抗生物質、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン系抗生物質、およびアミノペニシリン系抗生物質から選択される抗生物質を含む。特定の実施形態において、相乗性抗生物質および／または増強性抗生物質は、アミカシン、アルベカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、ロドストレプトマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシンおよびアプラマイシンから選択されるアミノグリコシド系抗生物質である。
【００４１】
別の実施形態に変わると、（ａ）少なくとも１種のＢＴ化合物；（ｂ）ＢＴ化合物により増強され、そして／またはそれと相乗的に作用することが可能である少なくとも１種の抗生物質化合物；および（ｃ）局所使用のための担体をはじめとする薬学的に許容しうる賦形剤または担体、を含む、消毒性組成物が提供される。特定の実施形態において、ＢＴ化合物は、ＢｉｓＢＡＬ、ＢｉｓＥＤＴ、Ｂｉｓ−ジメルカプロール、Ｂｉｓ−ＤＴＴ、Ｂｉｓ−２−メルカプトエタノール、Ｂｉｓ−ＤＴＥ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ、Ｂｉｓ−Ｅｒｙ、Ｂｉｓ−Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−ＢＤＴ、Ｂｉｓ−ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｂａｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＥＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｅｒｙ、ビスマス−１−メルカプト−２−プロパノール、およびＢｉｓ−ＥＤＴ／２−ヒドロキシ−１−プロパンチオールから選択される。特定の実施形態において、ＢＴ組成物は、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、前記微粒子の実質的に全てが、約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有する。特定の実施形態において、ＢＴ化合物は、ＢｉｓＥＤＴおよびＢｉｓＢＡＬから選択される。特定の実施形態において、抗生物質化合物は、メチシリン、バンコマイシン、ナフシリン、ゲンタマイシン、アンピシリン、クロラムフェニコール、ドキシサイクリン、トブラマイシン、クリンダマイシン、ガチフロキサシンおよびアミノグリコシド系抗生物質から選択される抗生物質を含む。特定の実施形態において、アミノグリコシド系抗生物質は、アミカシン、アルベカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、ロドストレプトマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシンおよびアプラマイシンから選択される。特定の実施形態において、アミノグリコシド系抗生物質は、アミカシンである。
【００４２】
他の特定の実施形態において、（ａ）表面上または表面内の細菌感染物を、（ｉ）グラム陽性菌、（ii）グラム陰性菌、ならびに（iii）（ｉ）および（ii）の両方、のうちの１つを含むことについて同定すること；および（ｂ）１種以上のビスマスチオール（ＢＴ）組成物を含む配合剤を表面へ投与し、それにより表面を処置すること、を含む細菌バイオフィルムを支持または含有する天然表面を処置する方法が提供され、ここで（ｉ）細菌感染物がグラム陽性菌を含む場合、配合剤は少なくとも１種のＢＴ化合物と、リファマイシンである少なくとも１種の抗生物質との治療上効果的な量を含み、（ii）細菌感染物がグラム陰性菌を含む場合、配合剤は少なくとも１種のＢＴ化合物とアミカシンとの治療上効果的な量を含み、（iii）細菌感染物がグラム陽性菌およびグラム陰性菌の両方を含む場合、配合剤はＢＴ化合物、リファマイシンおよびアミカシンのうちの１種または複数の治療上効果的な量を含む。
【００４３】
特定の実施形態において、バイオフィルムは、１種または複数の抗生物質耐性菌を含む。特定の実施形態において、表面を処置することは、（ｉ）細菌バイオフィルムを根絶すること、（ii）細菌バイオフィルムを低減すること、および（iii）細菌バイオフィルムの発育を抑制すること、のうちの少なくとも１つを含む。特定の実施形態において、ＢＴ組成物は、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、前記微粒子の実質的に全てが、約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有する。
【００４４】
本明細書に記載された本発明の実施形態のこれらおよび他の態様は、以下の詳細な説明および添付の図面を参照することにより自明となろう。Ｕ．Ｓ．ＲＥ３７，７９３号、Ｕ．Ｓ．６，２４８，３７１号、Ｕ．Ｓ．６，０８６，９２１号、およびＵ．Ｓ．６，３８０，２４８号をはじめとする、本明細書において参照され、そして／または出願データシートに列挙された米国特許および米国特許出願公開、米国特許出願、外国特許、外国特許出願および非特許発行物の全てが、それぞれ個別に組み入れられるように、全体として参照により本明細書に組み入れられる。本発明の態様および実施形態は、必要に応じて改良され、様々な特許、出願および発行物の概念を用いて、更なる実施形態を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００４５】
図面の複数の外観の簡単な説明
【図１】１０％トリプシン大豆寒天（ＴＳＡ）上で３７℃で２４時間発育させ、その後、示された処置を１８時間行った後得られたシュードモナス・エルギノーサ・コロニーバイオフィルムの生存数（ｌｏｇＣＦＵ；コロニー形成単位）を示す。示された抗生物質処置は、ＴＯＢ、トブラマイシン１０×ＭＩＣ；ＡＭＫ、アミカシン、１００×ＭＩＣ；ＩＰＭ、イミペネム１０×ＭＩＣ;ＣＥＦ、セフェピム１０×ＭＩＣ;ＣＩＰ、シプロフロキサシン、１００×ＭＩＣ;Ｃｐｄ  ２Ｂ、化合物２Ｂ（Ｂｉｓ−ＢＡＬ、１：１．５）である。（ＭＩＣ；最小阻止濃度、例えば、細菌の発育を予防する最低濃度）。
【図２】１０％トリプシン大豆寒天上で２４時間発育させ、その後、示された処置を行った後得られたスタフィロコッカス・アウレウス・コロニーバイオフィルムの生存数（ｌｏｇＣＦＵ）を示す。示された抗生物質処置は、リファマイシン、ＲＩＦ  １００×ＭＩＣ；ダプトマイシン、ＤＡＰ  ３２０×ＭＩＣ；ミノサイクリン、ＭＩＮ  １００×ＭＩＣ;アンピシリン、ＡＭＰ  １０×ＭＩＣ;バンコマイシン、ＶＡＮ  １０×ＭＩＣ;Ｃｐｄ  ２Ｂ、化合物２Ｂ（Ｂｉｓ−ＢＡＬ、１：１．５）、Ｃｐｄ８−２、化合物８−２（Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ、１：１／０．５）。
【図３】バイオフィルムに暴露された角化細胞の、時間経過による掻き傷閉鎖を示す。（＊）対照との有意差あり（Ｐ＜０．００１）。
【図４Ａ】複数の抗生物質に対する抗生物質耐性を抑制する亜阻害ＢｉｓＥＤＴを示す。ＭＲＳＡ（メチシリン耐性Ｓ．アウレウス）の菌叢に対するＢｉｓＥＤＴを含む、または含まない抗生物質の効果を示す。パネルＡは、標準の抗生物質浸漬ディスクのみを示す。［ＧＭ＝ゲンタマイシン、ＣＺ＝セファゾリン、ＦＥＰ＝セフェピム、ＩＰＭ＝イミペネム、ＳＡＭ＝アンピシリン／スルバクタム］、ＬＶＸ＝レボフロキサシン。
【図４Ｂ】複数の抗生物質に対する抗生物質耐性を抑制する亜阻害ＢｉｓＥＤＴを示す。ＭＲＳＡ（メチシリン耐性Ｓ．アウレウス）の菌叢に対するＢｉｓＥＤＴを含む、または含まない抗生物質の効果を示す。パネルＢは、ＢｉｓＥＤＴ（ＢＥ）を混和されたディスクを示す。［ＧＭ＝ゲンタマイシン、ＣＺ＝セファゾリン、ＦＥＰ＝セフェピム、ＩＰＭ＝イミペネム、ＳＡＭ＝アンピシリン／スルバクタム］、ＬＶＸ＝レボフロキサシン。
【図５】バイオフィルム形成に対するＢｉｓＥＤＴおよび抗生物質の効果を示す。Ｓ．エピデルミディスを、ポリスチレンプレート内のＴＳＢ＋２％グルコース中で３７℃で４８時間発育させた。ガチフロキサシン（ＧＦ）、クリンダマイシン（ＣＭ）、ミノサイクリン（ＭＣ）、ゲンタマイシン（ＧＭ）、バンコマイシン（ＶＭ）、セファゾリン（ＣＺ）、ナフシリン（ＮＣ）、およびリファンピシン（ＲＰ）。結果を、０．２５μＭ  ＢｉｓＥＤＴでのＢＰＣ（２倍系列希釈ステップ）の平均変動率として表わした（ｎ＝３）。
【図６】ＴＳＢ＋２％グルコース中で３７℃で４８時間発育させたＳ．エピデルミディスの発育に対するＢｉｓＥＤＴおよび抗生物質の効果を示す。結果を、ＢｉｓＥＤＴの増加を伴うＭＩＣ（希釈ステップ）の平均変動率として表わす（ｎ＝３）。抗生物質の定義に関しては図５の凡例を参照されたい。
【図７】３種のＢＴ配合剤、Ｂｉｓ−ＥＤＴ、ＭＢ−１１およびＭＢ−８−２に加えて、セファゾリン抗生物質処置を行った、または行わなかったインビボラットモデルにおける開放骨折の骨および装置試料において検出されたＳ．アウレウス平均レベルを示す棒グラフである。その平均値の標準誤差を、エラーバーとして示す。早期に安楽死された動物は、分析から除外しないが、群２中の動物１匹の試料は、著しい汚染により除外した。
【発明を実施するための形態】
【００４６】
本明細書に開示された本発明の特定の実施形態は、本明細書に提供された特定のビスマス−チオール（ＢＴ）化合物が（約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有するＢＴ微粒子を含む特定の実施形態において）、細菌バイオフィルムを含みうる感染を含む複数の臨床的に重大な感染に関連する細菌をはじめとする特定の細菌に対して、強力な消毒、抗菌および／または抗バイオフィルム活性を示すが、他の特定のＢＴ化合物が示さない（微粒子として提供されたとしても）、という驚くべき発見に基づいている。
【００４７】
予想に反して、全てのＢＴ化合物が、そのような細菌に対して予測可能な様式で均一に効果的というわけではないが、代わりに標的菌種に応じて異なる効能を示す。詳細には、本明細書に記載された通り、非限定的理論により細菌バイオフィルム感染物をはじめとする細菌感染物の管理のための臨床関連方策を初めて付与しうる手法で、特定のＢＴ化合物（好ましくは約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有するＢＴ微粒子を含む）は、グラム陰性菌に対してより高い効能を示すことが見出されたが、他の特定のＢＴ化合物（好ましくは約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有するＢＴ微粒子を含む）は、グラム陽性菌に対してより大きな効能を示すことが見出された。
【００４８】
加えて、以下により詳細に記載される通り、本明細書に記載された本発明の特定の実施形態は、本明細書に開示された通り、粒子径（例えば、約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有する）に関して実質的に単分散である複数のＢＴ微粒子を含む調製物において製造されうる新規なビスマス−チオール（ＢＴ）組成物により提供される驚くべき利点に関する。これらおよび関連の実施形態の特定のものにおいて、微粒子ＢＴは、マルチラメラホスホコリン−コレステロールリポソームまたは他のマルチラメラもしくはユニラメラリポソーム小胞などの脂質小胞またはリポソームの成分として提供されない。
【００４９】
同じく本明細書に開示される通り、特定の実施形態に関して、そのような細菌感染物に対する強力な治療効果が欠如していることが過去に見出された特定の抗生物質の抗菌および抗バイオフィルム効力が、これらの抗生物質の１種以上と選択されたＢＴ化合物とで協調的に、同時に、または連続していずれかの順序で感染物を処置することにより（例えば、天然表面などの感染部位の表面または内部に直接適用することにより）、有意に増強しうる（例えば、統計学的に有意な手法で上昇させうる）ことが発見された。本発明の開示以前に予測することができなかった手法において、特定のＢＴ化合物は、特定の抗生物質と組み合わせて、特定の菌種または菌株に対する抗菌および／または抗バイオフィルム活性に関して本明細書に提供された相乗的または増強的な組み合わせを提供することができる。特定のＢＴ／抗生物質・組み合わせが特定の細菌に対して相乗的に作用するか、または増強性を示し、他の特定のＢＴ／抗生物質・組み合わせがそのような相乗的または増強的な抗菌および／または抗バイオフィルム活性を示すことができなかったという観察によって、以下により詳細に記載されるそのような組み合わせの予測されなかった性質が立証される。
【００５０】
これらおよび関連の実施形態によれば、抗生物質およびＢＴ化合物は、同時に、または連続していずれかの順序で投与してもよく、特定の感染物（例えば、グラム陰性菌またはグラム陽性菌により形成されたバイオフィルム）を処置するための本明細書に開示された１種以上の抗生物質と１種以上のＢＴ化合物との特異的な相乗的または増強的組み合わせが、予測可能な（例えば、単に相加的）活性を示さず、代わりに、選択された抗生物質、選択されたＢＴ化合物および特異的に同定された標的細菌の関数として、予想外に相乗的または増強的な（例えば、超相加的）様式で作用したことは、注目に値する。
【００５１】
例えば、限定ではなく例示として、実際にまたは潜在的に微生物感染された非常に様々な天然表面という局面において、そして更に、改善された実質的に単分散の微粒子ＢＴ配合剤という局面において本明細書に開示された、特定の抗生物質化合物および特定のＢＴ化合物のいずれかまたは両方は、特定の菌株または菌種に対して単独で用いられた場合にわずかな抗菌効果を発揮しうるが、抗生物質化合物とＢＴ化合物の両方の組み合わせは、同じ菌株または菌種に対して、単独で用いられた場合の各化合物の効果の単純な合計よりも、大きな規模で（統計学的有意差のある）強力な抗菌効果を発揮し、それにより非限定的理論により、抗生物質の効能に対するＢＴの、そして／またはＢＴの効能に対する抗生物質の、抗生物質−ＢＴ相乗効果（例えば、ＦＩＣＩ≦０．５）または増強効果（例えば０．５＜ＦＩＣＩ≦１．０）を反映すると考えられる。したがって各々のＢＴ化合物が、各々の抗生物質に関して相乗的または増強的となるわけではなく、各々の抗生物質が、各々のＢＴ化合物に対して相乗的または増強的となるわけではないため、抗生物質−ＢＴの相乗性およびＢＴ−抗生物質の増強性は、一般に予測可能ではない。代わりに、本明細書に開示された特定の実施形態によれば、抗生物質およびＢＴ化合物を相乗または増強する特定の組み合わせは、驚くべきことに、本明細書に記載された天然表面などの特定の環境、そして更に特定の状況における、特定の細菌により形成されたバイオフィルムに対する抗菌効果など、特定の細菌に対する強力な抗菌効果を付与する。
【００５２】
即ち、本明細書に提供された少なくとも１種のＢＴ化合物を含む少なくとも１種のＢＴ組成物と相乗的に作用することが可能である（ＦＩＣＩ≦０．５）抗生物質を含む、特定のＢＴと相乗する抗生物質が、本明細書に記載されており、そのような相乗性は、抗生物質が存在するがＢＴ化合物が存在しない場合、そして／またはＢＴ化合物が存在するが抗生物質が存在しない場合に、検出されうる効果よりも大きな規模で（即ち、適切な対照条件に関して統計学的に有意な手法で）検出可能な効果として発現する。同様に、特定のＢＴ−抗生物質・組み合わせは、増強性（０．５＜ＦＩＣＩ＜１．０）を示し、そのような増強性は、抗生物質が存在するがＢＴ化合物が存在しない場合、そして／またはＢＴ化合物が存在するが抗生物質が存在しない場合に、検出されうる効果よりも大きな規模で（即ち、適切な対照条件に関して統計学的に有意な手法で）検出可能な効果として発現する。
【００５３】
そのような検出可能な効果の例は、特定の実施形態において、（ｉ）細菌病原による感染の予防、（ii）細菌病原の実質的に全てのプランクトン性細胞の細胞生存性または細胞発育の阻害、（iii）細菌病原によるバイオフィルム形成の阻害、および（iv）細菌病原の実質的に全てのバイオフィルム型細胞のバイオフィルム生存性またはバイオフィルム発育の阻害、を含むが、本発明は、それに限定されるものではなく、他の企図される実施形態において、抗生物質−ＢＴ相乗性は、１種以上の他の臨床的に重要なパラメータ、例えば１種以上の抗生物質または他の薬物もしくは化学剤に対する細菌病原の耐性または感受性の度合い、１種以上の化学的、物理的または機械的条件（例えば、ｐＨ、イオン強度、温度、圧力）に対する細菌病原の耐性および感受性の度合い、ならびに／あるいは１種以上の生物剤（例えば、ウイルス、別の細菌、生物活性のあるポリヌクレオチド、免疫細胞または免疫細胞産物、例えば抗体、サイトカイン、ケモカイン、分解酵素をはじめとする酵素、膜崩壊タンパク質、フリーラジカル、例えば活性酸素種など）に対する細菌病原の耐性または感受性の度合い、の変化（例えば、統計学的に有意な上昇または減少）を含みうる１種以上の検出可能な効果として発現してもよい。
【００５４】
本明細書において提供された通り、相乗的または増強的な抗生物質−ＢＴ・組み合わせの効果が、組み合わせの一方の成分が存在しない場合に観察される効果の単純な合計を超える場合に存在する抗生物質−ＢＴ相乗性または増強性を確認する目的で、構造、機能および／または細菌集団の活性に対する特定の薬剤の効果を決定しうるこれらおよび他の様々な基準を、当業者は理解するであろう（例えば、Ｃｏｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．（Ｅｄｓ．），  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，  ２００８，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｈｏｂｏｋｅｎ，  ＮＪ；Ｓｃｈｗａｌｂｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，  ２００７，  ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，  ＦＬ）。
【００５５】
例えば、特定の実施形態において、本明細書に記載されたような抗菌効果を、様々な濃度の候補剤（例えば、単独または組み合わせたＢＴおよび抗生物質）を用いて測定して、Ｅｌｉｏｐｏｕｌｏｓ他（Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  ｉｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（Ｌｏｒｉａｎ，  Ｖ．，  Ｅｄ．），  ｐｐ．３３０−９６，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｌｋｉｎｓ，  Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，  ＭＤ、ＵＳＡ内のＥｌｉｏｐｏｕｌｏｓ  ａｎｄ  Ｍｏｅｌｌｅｒｉｎｇ，  （１９９６）  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ）により部分阻止濃度指数（ＦＩＣＩ）および部分殺菌濃度指数（ＦＢＣＩ）を計算することにより、相乗性を決定してもよい。相乗性は０．５以下の、そしてアンタゴニズムは４を超えるＦＩＣＩまたはＦＢＣＩ指数として、定義してもよい（例えば、Ｏｄｄs,  ＦＣ（２００３）  Ｓｙｎｅｒｇｙ，  ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ，  ａｎｄ  ｗｈａｔ  ｔｈｅ  ｃｈｅｑｕｅｒｂｏａｒｄ  ｐｕｔｓ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｔｈｅｍ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ５２：１）。相乗性は、従来通り抗生物質濃度の４倍以上の低下として、あるいは、例えばＨｏｌｌａｎｄｅｒ他（１９９８  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４２：７４４）により記載された通り、部分阻止濃度（ＦＩＣ）を用いて、定義してもよい。特定の実施形態において、相乗性は、２種の薬物（例えば、抗生物質およびＢＴ組成物）の組み合わせにより得られ、第二の薬物の濃度を第一の薬物で置き換えた場合よりも大きくなる（例えば、統計学的に有意な手法で）組み合わせの効果として定義されてもよい。
【００５６】
したがって本明細書に記載された通り、特定の好ましい実施形態において、ＢＴと抗生物質との組み合わせは、０．０５以下のＦＩＣＩ値が観察された場合に相乗すると理解されよう（Ｏｄｄｓ，  ２００３）。同じく本明細書に記載された通り、他の特定の好ましい実施形態において、そして非限定的理論によれば、特定のＢＴ−抗生物質・組み合わせが、そのような相乗性の高い可能性を表わす０．５〜１．０のＦＩＣＩ値を示しうることが開示され、その相乗性は、片側または相互に増強された協同的抗菌効力を示す少なくとも１種のＢＴおよび少なくとも１種の抗生物質の非最適濃度を用いて観察される場合がある。そのような効果は、本明細書において「増強的」抗生物質活性または「増強的」ＢＴ活性と呼んでもよい。
【００５７】
特定の実施形態により、（ｉ）所定の標的微生物（例えば、所定の菌種または菌株）のためのＢＴの特徴的最小阻止濃度（ＭＩＣ）よりも低い（統計学的に有意な手法で）濃度の少なくとも１種のＢＴと、（ii）特徴的ＩＣ５０（微生物集団の５０％の発育を阻止する濃度；例えば、Ｓｏｏｔｈｉｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９２  Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ２９（２）：１３７）よりも低く（統計学的に有意な手法で）、そして／または所定の標的微生物のための抗生物質のバイオフィルム予防濃度（ＢＰＣ）よりも低い濃度の少なくとも１種の抗生物質、の両方の存在が、いずれかの抗微生物剤（例えば、ＢＴまたは抗生物質）が他方の抗菌剤（例えば、抗生物質またはＢＴ）の非存在下で同じ濃度で用いられた場合に観察される抗微生物効果に関して、高い（統計学的に有意な手法で）ＢＴ−抗生物質・組み合わせの抗菌効力をもたらす場合に、増強性抗生物質および／またはＢＴ活性が検出されうる。好ましい実施形態において、１．０以下で０．５を超えるＦＩＣＩ値が測定された場合に、「増強的」抗生物質および／またはＢＴ活性が存在する。
【００５８】
本発明の開示に基づいて当業者に理解される通り、特定の実施形態において、相乗性または増強性抗生物質および／またはＢＴ活性は、当該技術分野で公知の方法により、例えばＬｏｅｗｅの付加性に基づくモデル（例えば、ＦＩＣ指数、Ｇｒｅｃｏモデル）、またはＢｌｉｓｓの独立性に基づくモデル（例えば、ノンパラメトリックおよびセミパラメトリックモデル）または本明細書に記載された当該技術分野で公知の他の方法（例えば、Ｍｅｌｅｔｉａｄｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００５  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｍｙｃｏｌｏｇｙ    ４３：１３３−１５２）を用いて測定してもよい。こうして相乗性または増強性抗生物質および／またはＢＴ活性を測定する例示的方法は、例えばＭｅｌｅｔｉａｄｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００５  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｍｙｃｏｌｏｇｙ    ４３：１３３−１５２およびそれに引用された参考資料に記載されている（同じく、Ｍｅｌｅｔｉａｄｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２  Ｒｅｖ  Ｍｅｄ  Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  １３：１０１−１１７；  Ｗｈｉｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９６  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ４０：１９１４−１９１８；  Ｍｏｕｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９９  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ４３：２４７３−２４７８参照）。
【００５９】
他の特定の実施形態は、ＢＴ化合物および抗生物質がインビボで予測可能な（単に相加的な）活性を示さず、代わりに、選択された抗生物質、選択されたＢＴ化合物、および感染物を含む特異的に同定された標的菌種の１種以上の関数として、予想外に相乗的または増強的な（例えば、超相加的；または２種以上のそのような薬剤が組み合わせで存在する場合に、第二の薬剤の濃度を第一の薬剤に置き換えた場合に得られる効果よりも大きな（例えば、統計学的に有意な手法で）効果を付与する）様式で作用する場合でも、特定の感染物（例えば、グラム陰性菌またはグラム陽性菌により形成されたバイオフィルム）の処置のためにインビボで相乗的または増強的効果を示す場合がある、本明細書に開示された１種以上の抗生物質と１種以上のＢＴ化合物との特異的組み合わせを企図する。それゆえ、これらおよび関連の実施形態によれば、特定のインビボの状況において、ＦＩＣＩまたはＦＢＣＩ値（インビトロでの測定）は、直ちに入手できない場合があり、代わりにＢＴ−抗生物質の相乗または増強効果を、感染物の定量可能な尺度により得られる手法で決定してもよいことは、理解されよう。
【００６０】
例えば、実施例１１に記載されたインビボ開放骨折のドブネズミ大腿骨臨界欠損モデルなどの一実施形態において、抗生物質処置またはＢＴ化合物単独に比較した、ＢＴ−抗生物質・組み合わせでの処置後に観察された細菌数の統計学的に有意な減少は、相乗的または増強的効果の指標である。統計学的有意性は、当業者に周知の方法を用いて決定することができる。他の特定の実施形態において、抗生物質処置またはＢＴ化合物単独に比較した、ＢＴ−抗生物質・組み合わせでの処置後に損傷において観察された細菌数の少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％、または５０％という、このインビボモデルまたは他のインビボモデルにおいて観察された減少は、相乗または増強効果の指標と見なされる。
【００６１】
インビボ感染の他の例示的指標は、感染の重症度を定量するために開発された確立された方法論、例えば当業者に公知の様々な創傷スコアリングシステム（例えば、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｗｏｕｎｄ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  （ＥＷＭＡ），  Ｐｏｓｉｔｉｏｎ  Ｄｏｃｕｍｅｎｔ：  Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｆｏｒ  ｗｏｕｎｄ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．  Ｌｏｎｄｏｎ：  ＭＥＰ  Ｌｔｄ，  ２００５にレビューされたスコアリングシステムを参照）に従って決定してもよい。本明細書に記載されたＢＴ−抗生物質・組み合わせの相乗または増強活性を評価する際に用いられうる例示的な創傷スコアリングシステムとしては、ＡＳＥＰＳＩＳ（Ｗｉｌｓｏｎ  ＡＰ，  Ｊ  Ｈｏｓｐ  Ｉｎｆｅｃｔ  １９９５；２９（２）：８１−８６；Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｌａｎｃｅｔ  １９８６；１：３１１−１３）、ｔｈｅ  Ｓｏｕｔｈａｍｐｔｏｎ  Ｗｏｕｎｄ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  Ｓｃａｌｅ（Ｂａｉｌｅｙ  ＩＳ，  Ｋａｒｒａｎ  ＳＥ，  Ｔｏｙｎ  Ｋ，  ｅｔ  ａｌ．  ＢＭＪ  １９９２；  ３０４：４６９−７１）が挙げられる。Ｈｏｒａｎ  ＴＣ，  Ｇａｙｎｅｓ  Ｐ，  Ｍａｒｔｏｎｅ  ＷＪ，  ｅｔ  ａｌ．，１９９２  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｈｏｓｐ  Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ  １９９２；１３：６０６−０８も参照されたい。加えて、熟練の臨床医に公知の創傷治癒の認知された臨床指標、例えば創傷のサイズ、深さ、肉芽組織の状態、感染などを、ＢＴ化合物および／または抗生物質の存在下または非存在下で測定してもよい。したがって本発明の開示に基づけば、ＢＴ組成物−抗生物質・組み合わせがインビボ創傷治癒を変化させるか（例えば適切な対照に関して統計学的に有意な手法で増加または減少させるか）を決定するための様々な方法は、当業者に直ちに理解されよう。
【００６２】
これらおよび関連の実施形態を考慮して、微生物感染された天然表面、例えば細菌バイオフィルムを支持または含有する表面を、１種以上のＢＴ化合物および場合により１種以上の抗生物質化合物、例えば本明細書に提供された１種以上の相乗性抗生物質または１種以上の増強性抗生物質を含む組成物または配合剤の効果的量（例えば特定の実施形態において、治療上効果的な量）で処置するための非常に様々な方法が、本明細書において提供される。本開示に基づけば、当業者により過去に所定のタイプの感染に対して無効であると見なされた特定の抗生物質が、ここに同じタイプの感染の処置における使用に企図されることを理解されたい。
【００６３】
つまり特定の実施形態は、消毒薬として使用される１種以上のＢＴ化合物を含む組成物を企図する。消毒薬は、微生物を殺傷する、またはその発育を妨害する物質であり、典型的には生存する組織に適用されることで、通常は無生物対象へ適用される殺菌剤と分類を区別する場合がある（Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ'ｓ“Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ”，  Ｓｅｖｅｎｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｇｉｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ｅｄｉｔｏｒｓ，  １９８５，  Ｍａｃｍｉｌｌａｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，（本明細書では以後、Ｇｏｄｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ）ｐｐ．９５６−９６０）。消毒薬の一般的例は、エチルアルコールおよびヨードチンキである。殺菌薬は、微生物病原などの微生物を殺傷する消毒薬を含む。
【００６４】
本明細書に記載された特定の実施形態は、１種以上のＢＴ化合物および１種以上の抗生物質化合物（例えば、本明細書に提供された相乗性抗生物質および／または増強性抗生物質）を含む組成物を企図してもよい。抗生物質は当該技術分野で公知であり、典型的には微生物の１種により産生されて、微生物の別の種を殺傷する化合物から製造される薬物、または同一もしくは類似の化学構造および作用機序を有する合成産物から製造される薬物、例えば局所適用される場合の、生存生物体の体内または体表面の微生物を破壊する薬物、を含む。とりわけ本明細書に開示された実施形態は、抗生物質が以下の分類のうちの１種に属しうるものである：アミノグリコシド、カルバペネム、セファロスポリン、フルオロキノロン、グリコペプチド系抗生物質、リンコサミド（例えば、クリンダマイシン）、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン、およびアミノペニシリン。つまり抗生物質は、限定される必要はないが、オキサシリン、ピペラシリン、セフロキシム、セフォタキシム、セフェピム、イミペネム、アズトレオナム、ストレプトマイシン、トブラマイシン、テトラサイクリン、ミノサイクリン、シプロフロキサシン、レボフロキサシン、エリスロマイシン、リネゾリド、ホスホマイシン、カプレオマイシン、イソニアジド、アンサマイシン、カルバセフェム、モノバクタム、ニトロフラン、ペニシリン、キノロン、スルホンアミド、クロファジミン、ダプソン、カプレオマイシン、シクロセリン、エタムブトール、エチオナミド、イソニアジド、ピラジナミド、リファムピシン、リファムピン、リファブチン、リファペンチン、ストレプトマイシン、アルスフェナミン、クロラムフェニコール、ホスホマイシン、フシジン酸、リネゾリド、メトロニダゾール、ムピロシン、プラテンシマイシン、キヌプリスチン、ダルホプリスチン、リファキシミン、チアムフェニコール、チニダゾール、アミノグリコシド、β−ラクタム、ペニシリン、セファロスポリン、カルバペネム、フルロキノロン、ケトリド、リンコサミド、マクロリド、オキサゾリジノン、ストレプトグラミン、スルホンアミド、テトラサイクリン、グリシルサイクリン、メチシリン、バンコマイシン、ナフシリン、ゲンタマイシン、アンピシリン、クロラムフェニコール、ドキシサイクリン、トブラマイシン、アミカシン、アルベカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、ロドストレプトマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシン、アプラマイシン、クリンダマイシン、ガチグロキサシン、アミノペニシリン、および当該技術分野で公知の他のものを挙げることができる。これらおよび他の臨床的に有用な抗生物質の概論は入手可能であり、当業者に公知である（例えば、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｈｏｏｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  Ｔｈｅ  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（３２ｎｄ  Ｅｄ．），  ２００７  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，  ＰＡ；  Ｈａｕｓｅｒ，  ＡＬ，  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  Ｂａｓｉｃｓ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃｉａｎｓ，  ２００７  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，  Ｗｉｌｌｉａｎｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，  ＰＡ）。
【００６５】
特定の本明細書に開示された実施形態における１種以上のＢＴ化合物と共に使用される抗生物質の例示的分類は、Ｅｄｓｏｎ  ＲＳ，  Ｔｅｒｒｅｌｌ  ＣＬ．  Ｔｈｅ  ａｍｉｎｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ．  Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎ  Ｐｒｏｃ．  １９９９  Ｍａｙ；  ７４（５）：５１９−２８にレビューされているアミノグリコシド類の抗生物質である。この分類の抗生物質は、細菌のリボソームサブユニットの結合および不活化を通して、細菌のタンパク質合成を損傷することにより、細菌の発育を阻害する。アミノグリコシドは、そのような静菌特性に加えて、グラム陰性菌の細胞壁の崩壊を通して殺菌効果も示す。
【００６６】
アミノグリコシド抗生物質としては、ゲンタマイシン、アミカシン、ストレプトマイシンなどが挙げられ、一般にはグラム陰性菌、マイコバクテリアおよび他の微生物病原の処置に有用と見なされるが、耐性株の分類は報告されている。アミノグリコシドは、消化管からは吸収されず、そのため一般には経口配合剤に適用可能と見なされていない。アミカシンは例えば、多くの場合、ゲンタマイシン耐性菌株に対して効果的であるが、典型的には静脈内または筋肉内に投与されて、患者において疼痛を誘発する可能性がある。加えて、アミカシンなどのアミノグリコシド系抗生物質に関連する毒性は、腎臓障害および／または不可逆的聴力損傷をまねく可能性がある。
【００６７】
これらの特性にもかかわらず、本明細書に開示された特定の実施形態は、例えば口腔、胃腸管／消化管に沿って１ヶ所以上の位置で上皮組織表面を処置するために、相乗的なＢＴ／抗生物質・組み合わせの経口投与（例えば、抗生物質はアミノグリコシドに限定される必要がない）を企図する。同じく他の特定の実施形態において企図されるのは、本明細書において、無生物対象の外表面の微生物を殺傷する、またはその発育を遮断する調製物を指す殺菌剤としての、本明細書に記載された組成物および方法の使用であってもよい。
【００６８】
同じく本明細書の他の箇所に記載された通り、ＢＴ化合物は、Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４１（８）：１６９７−１７０３、Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４５（５）：１４１７−１４２１、ならびにＵ．Ｓ  ＲＥ３７，７９３号、Ｕ．Ｓ．６，２４８，３７１号、同６，０８６，９２１号、および同６，３８０，２４８号（例えばＵ．Ｓ．６，５８２，７１９号も参照）に記載されたもの（調製方法を含む）をはじめとする、ビスマスまたはビスマス塩およびチオール（例えば、−ＳＨ、またはスルフヒドリル）含有化合物を含む組成物であってもよい。しかし特定の実施形態は、そのように限定されず、ビスマスまたはビスマス塩およびチオール含有化合物を含む他のＢＴ化合物を企図してもよい。チオール含有化合物は、１、２、３、４、５、６またはそれを超えるチオール（例えば、−ＳＨ）基を含んでいてもよい。好ましい実施形態において、ＢＴ化合物は、イオン結合を介して、そして／または配位錯体として、チオール含有化合物と会合したビスマスを含むが、他の幾つかの実施形態において、ビスマスは、有機金属化合物中で見出されうる通り、共有結合を介してチオール含有化合物と会合していてもよい。しかし、特定の企図される実施形態は、有機金属化合物、例えばビスマスが有機部分への共有結合的なつながりにおいて見出される化合物であるＢＴ化合物を明白に除外する。
【００６９】
例示的なＢＴ化合物を、表１に示す。
【表１】
2018076358.tif 000003
＊  硫黄含有化合物と三価錯体を形成するために用いられる反応体の化学量論比およびビスマスの公知の傾向に基づき、比較のために単一ビスマス原子に対する原子比を示す。示された原子比は、所定の調製物中の全ての化学種の正確な分子式でない場合がある。カッコ内の数字は、１種（またはそれを超える）チオール剤に対するビスマスの比である（例えば、Ｂｉ：チオール１／チオール２）。「ＣＰＤ」：化合物。
【００７０】
ここに開示された実施形態の特定のものにおいて使用されるＢＴ化合物は、確立された手順（例えば、Ｕ．Ｓ  ＲＥ３７，７９３号、Ｕ．Ｓ．６，２４８，３７１号、同６，０８６，９２１号、および同６，３８０，２４８号；Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４１（８）：１６９７−１７０３、Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４５（５）：１４１７−１４２１）に従って調製してもよく、他の特定の実施形態において、ＢＴ化合物は、本明細書に記載された方法論に従って調製してもよい。つまり特定の好ましい実施形態は、ＢＴ化合物を含む微粒子を含む沈殿物の形成に十分な条件および時間で（例えば、本明細書に記載され、本開示に基づいて当業者に理解される濃度、溶媒強度、温度、ｐＨ、混合および／または圧力などの条件で）、溶解されたビスマスを少なくとも５０ｍＭ、少なくとも１００ｍＭ、少なくとも１５０ｍＭ、少なくとも２００ｍＭ、少なくとも２５０ｍＭ、少なくとも３００ｍＭ、少なくとも３５０ｍＭ、少なくとも４００ｍＭ、少なくとも５００ｍＭ、少なくとも６００ｍＭ、少なくとも７００ｍＭ、少なくとも８００ｍＭ、少なくとも９００ｍＭ、または少なくとも１Ｍの濃度で含有し、親水性、極性または有機性可溶化剤を含まない酸性ビスマス水溶液を、エタノールと混和して第一のエタノール性溶液を得て、ビスマスに対して約１：３〜約３：１のモル比で反応溶液中に存在するチオール含有化合物を含む第二のエタノール性溶液と反応させて、反応溶液を得る、ＢＴ化合物を調製するための、詳細にはＢＴ化合物を実質的に単分散の微粒子形態で得るための本明細書に記載された合成方法を企図する。
【００７１】
従って例示的ＢＴとしては、化合物  １Ｂ−１、Ｂｉｓ−ＥＤＴ（１：１のビスマス−１，２−エタンジチオール反応体）；化合物  １Ｂ−２、Ｂｉｓ−ＥＤＴ（１：１．５）；化合物  １Ｂ−３、Ｂｉｓ−ＥＤＴ（１：１．５）；化合物  １Ｃ、Ｂｉｓ−ＥＤＴ（可溶性Ｂｉ調製物、１：１．５）；化合物  ２Ａ、Ｂｉｓ−Ｂａｌ（ビスマス−イギリス抗ルイサイト（ビスマス−ジメルカプロール、ビスマス−２，３−ジメルカプトプロパノール）、１：１）；化合物  ２Ｂ、Ｂｉｓ−Ｂａｌ（１：１．５）；化合物  ３Ａ  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ（ビスマスピリチオン、１：１．５）；化合物  ３Ｂ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ（１：３）；化合物  ４、Ｂｉｓ−Ｅｒｙ（ビスマスジチオエリトリトール、１：１．５）；化合物  ５、Ｂｉｓ−Ｔｏｌ（ビスマス−３，４−ジメルカプトトルエン、１：１．５）；化合物  ６、Ｂｉｓ−ＢＤＴ（ビスマス−２，３−ブタンジオール、１：１．５）；化合物  ７、Ｂｉｓ−ＰＤＴ（ビスマス−１，３−プロパンジチオール、１：１．５）；化合物  ８−１  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ（１：１／１）；化合物  ８−２、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ（１：１／０．５）；化合物  ９、Ｂｉｓ−２−ヒドロキシ，プロパンチオール（ビスマス−１−メルカプト−２−プロパノール、１：３）；化合物  １０、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｂａｌ（１：１／０．５）；化合物  １１、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＥＤＴ（１：１／０．５）；化合物  １２  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｔｏｌ（１：１／０．５）；化合物  １３、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＰＤＴ（１：１／０．５）；化合物  １４  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｅｒｙ（１：１／０．５）；化合物  １５、Ｂｉｓ−ＥＤＴ／２−ヒドロキシ，プロパンチオール（１：１／１）が挙げられる（例えば、表１参照）。
【００７２】
理論に束縛されるのを望むものではないが、特定の好ましい実施形態において、硝酸ビスマスを含む硝酸水溶液などのビスマスを含む酸性水性液体溶液を調製する、または得ることを含んでいてもよい、ＢＴ化合物を調製するための本開示の方法は、所望なら、大量生産の容易性、改善された生成物純度、均質性もしくは一貫性（粒子径の均一性を含む）、または本発明の局所配合剤の調製および／もしくは投与に有用な他の特性をはじめとする１種以上の所望の特性を有する、ＢＴ化合物を含む組成物を得ることができると考えられる。
【００７３】
特定の実施形態において、初めて本明細書に記載された方法により調製されたＢＴ組成物が、特定の目下好ましい実施形態により、それぞれが約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径（ＶＭＤ）を有する実質的に単分散の微粒子懸濁液としてのそれらの出現に関連して有利な均質度を示すことが発見された。粒子径の測定値は、体積平均径（ＶＭＤ）、質量中央径（ＭＭＤ）、または空気動力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）と呼ぶことができる。これらの測定は、例えば、インパクション（ＭＭＤおよびＭＭＡＤ）またはレーザ（ＶＭＤ）での特徴づけにより実施してもよい。液体粒子の場合、環境条件、例えば標準的湿度が保持されていれば、ＶＭＤ、ＭＭＤおよびＭＭＡＤは同一となりえる。しかし、湿度が保持されていなければ、インパクター測定時の脱水により、ＭＭＤおよびＭＭＡＤの測定値は、ＶＭＤよりも小さくなるであろう。本明細書の目的では、ＶＭＤ、ＭＭＤおよびＭＭＡＤの測定値は、標準条件下のものと見なされるため、ＶＭＤ、ＭＭＤおよびＭＭＡＤの記載は、同等であろう。同様に、ＭＭＤおよびＭＭＡＤでの乾燥粉末の粒子径測定値も、同等と見なされる。
【００７４】
本明細書に記載された通り、好ましい実施形態は、ＢＴ含有微粒子の実質的に単分散の懸濁液に関する。わずかな幾何学的標準偏差（ＧＳＤ）を有する定義されたＢＴ粒子径を生成すると、例えば、ＢＴの付着、天然表面内もしくは表面上にある所望の標的部位への接近性、および／またはＢＴ微粒子を投与する対象による耐容性が最適化される場合がある。狭いＧＳＤであれば、所望のＶＭＤまたはＭＭＡＤサイズ範囲以外の粒子の数が限定される。
【００７５】
一実施形態において、本明細書に開示されたＢＴ化合物を１種以上含有する、約０．５ミクロン〜約５ミクロンのＶＭＤを有する微粒子の液体またはエアロゾル懸濁液が、提供される。別の実施形態において、約０．７ミクロン〜約４．０ミクロンのＶＭＤまたはＭＭＡＤを有する液体またはエアロゾル懸濁液が、提供される。別の実施形態において、約１．０ミクロン〜約３．０ミクロンのＶＭＤまたはＭＭＡＤを有する液体またはエアロゾル懸濁液が、提供される。他の特定の実施形態において、ＶＭＤが約０．１〜約５．０ミクロン、または約０．１、約０．２、約０．３、約０．４、約０．５、約０．６、約０．７、約０．８または約０．９〜約１．０、約１．５、約２．０、約２．５、約３．０、約３．５、約４．０、約４．５、約５．０、約５．５、約６．０、約６．５、約７．０、約７．５または約８．０ミクロンの本明細書に記載された通り調製されたＢＴ化合物粒子を１種または複数含む液状懸濁液が提供される。
【００７６】
したがって、特定の好ましい実施形態において、「実質的に」単分散である本明細書に初めて記載されたＢＴ調製物、例えば微粒子の「実質的に」全てが具体的な範囲内（例えば、約０．４μｍ〜約５μｍ）の体積平均径（ＶＭＤ）を有する微粒子形態のＢＴ化合物を含むＢＴ組成物は、粒子の少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、または９４％、より好ましくは少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれを超えて、引用されたサイズ範囲内のＶＭＤを有する、それらの組成物を包含する。
【００７７】
本明細書に記載された合成方法により調製されたＢＴ組成物のこれらおよび関連の特性は、１種以上の医薬、処方薬および薬用化粧品基準に従って規制順守を促進する手法で、特徴づけを可能にしうる、より低い製造コストおよび製造の容易性、ならびに組成物内の均質性などの、過去に記載されたＢＴを超える前例のない利点を提示する。
【００７８】
加えて、またはあるいは、本明細書に記載された実質的に単分散のＢＴ微粒子は、有利には微粒子化を必要とせずに、即ち高価で労作の多い摩砕もしくは超臨界流体プロセシング、または微粒子を生成するのに典型的に用いられる他の機器および手順を用いずに、製造してもよい（例えば、Ｍａｒｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．２００８  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ    Ｄｅｌｉｖ．  Ｒｅｖ．６０（３）：３３９；Ｍｏｒｉｂｅ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００８  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．  Ｒｅｖ．  ６０（３）：３２８；  Ｃａｐｅ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００８  Ｐｈａｒｍ．  Ｒｅｓ．  ２５（９）：１９６７；  Ｒａｓｅｎａｃｋ  ｅｔ  ａｌ．２００４  Ｐｈａｒｍ．  Ｄｅｖ．  Ｔｅｃｈｎｏｌ．９（１）：１−１３）。こうして本発明の実施形態は、非限定的に、強化されて実質的に均質な可溶化特性、経口、吸入または皮膚科的／皮膚の創傷への局所形態など所望の投与形態への適切性、高度の生物学的利用度および他の有益な特性をはじめとする、実質的に均質な微粒子調製物の有益効果を提示する。
【００７９】
ＢＴ化合物の微粒子懸濁液は、例えば懸濁液中に個々の微粒子を保持するための、湿潤剤、界面活性剤、鉱物油、または処方の当業者に公知であろう他の成分もしくは添加剤を含有する調製物など、水性配合剤として、ハロゲン化炭化水素噴射剤など水性溶媒および有機溶媒中の懸濁液もしくは溶液として、乾燥粉末として、または以下の詳述された他の形態で投与することができる。水性配合剤は、例えば液圧式または超音波式のいずれかの噴霧を用いて、液体ネブライザによりエアロゾル化してもよい。噴射剤を基にしたシステムは、適切な加圧式ディスペンサを用いてもよい。乾燥粉末は、ＢＴ含有微粒子を効果的に分散させることが可能な乾燥粉末分散デバイスを用いてもよい。適切なデバイスを選択することにより、所望の粒子径および分布を得てもよい。
【００８０】
先にも言及された通り、同じく特定の実施形態により本明細書に提供されるのは、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含むＢＴ組成物を調製する方法であり、そのような微粒子の実質的に全てが約０．１〜約８ミクロン、特定の好ましい実施形態において約０．４ミクロン〜約５ミクロンの体積平均径（ＶＭＤ）を有する。
【００８１】
一般的条件において、その方法は、（ａ）固体沈殿物を実質的に含まない溶液を得るのに十分な条件および時間で、（ｉ）少なくとも５０ｍＭの濃度のビスマスを含むビスマス塩を含み、親水性、極性または有機性可溶化剤を含まない酸性水溶液を、（ii）十分な量のエタノールと混和して、少なくとも約５容量％、１０容量％、１５容量％、２０容量％、２５容量％または３０容量％、好ましくは約２５容量％のエタノールを含む混和物を得るステップ；および（ｂ）ＢＴ化合物を含む沈殿物の形成に十分な条件および時間で、ビスマスに対して約１：３〜約３：１のモル比で反応溶液中に存在するチオール含有化合物を含むエタノール性溶液を、（ａ）の混和物に添加して、反応溶液を得るステップ、を含む。
【００８２】
特定の好ましい実施形態において、ビスマス塩は、Ｂｉ（ＮＯ３）３であってもよいが、ビスマスが他の形態で提供されうることは、本開示により理解されよう。特定の実施形態において、酸性水溶液中のビスマス濃度は、少なくとも１００ｍＭ、少なくとも１５０ｍＭ、少なくとも２００ｍＭ、少なくとも２５０ｍＭ、少なくとも３００ｍＭ、少なくとも３５０ｍＭ、少なくとも４００ｍＭ、少なくとも５００ｍＭ、少なくとも６００ｍＭ、少なくとも７００ｍＭ、少なくとも８００ｍＭ、少なくとも９００ｍＭまたは少なくとも１Ｍであってもよい。特定の実施形態において、酸性水溶液は、少なくとも５重量％、１０重量％、１５重量％、２０重量％、２２重量％または２２．５重量％のビスマスを含む。酸性水溶液は、特定の好ましい実施形態において、少なくとも５重量％またはそれを超える硝酸を含んでいてもよく、他の特定の実施形態において、酸性水溶液は、少なくとも０．５重量％、少なくとも１重量％、少なくとも１．５重量％、少なくとも２重量％、少なくとも２．５重量％、少なくとも３重量％、少なくとも３．５重量％、少なくとも４重量％、少なくとも４．５重量％または少なくとも５重量％の硝酸を含んでいてもよい。
【００８３】
チオール含有化合物は、本明細書に記載された任意のチオール−含有化合物であってもよく、特定の実施形態において、１，２−エタンジチオール、２，３−ジメルカプトプロパノール、ピリチオン、ジチオエリトリトール、３，４−ジメルカプトトルエン、２，３−ブタンジチオール、１，３−プロパンジチオール、２−ヒドロキシプロパンチオール、１−メルカプト−２−プロパノール、およびジチオトレイトールのうちの１種以上を含んでいてもよい。他の例示的なチオール含有化合物としては、α−リポ酸、メタンチオール（ＣＨ３ＳＨ［ｍ−メルカプタン］）、エタンチオール（Ｃ２Ｈ５ＳＨ［ｅ−メルカプタン］）、１−プロパンチオール（Ｃ３Ｈ７ＳＨ［ｎ−Ｐメルカプタン］）、２−プロパンチオール（ＣＨ３ＣＨ（ＳＨ）ＣＨ３［２Ｃ３メルカプタン］）、ブタンチオール（Ｃ４Ｈ９ＳＨ［ｎ−ブチルメルカプタン］）、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン（Ｃ（ＣＨ３）３ＳＨ［ｔ−ブチルメルカプタン］）、ペンタンチオール（Ｃ５Ｈ１１ＳＨ［ペンチルメルカプタン］）、コエンザイムＡ、リポアミド、グルタチオン、システイン、シスチン、２−メルカプトエタノール、ジチオトレイトール、ジチオエリトリトール、２−メルカプトインドール、トランスグルタミナーゼ、およびＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（ミズーリ州セントルイス）から入手できる以下のチオール化合物のいずれかが挙げられる：（１１−メルカプトウンデシル）ヘキサ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）官能基化金ナノ粒子、１，１’，４’，１’’−テルフェニル−４−チオール、１，１１−ウンデカンジチオール、１，１６−ヘキサデカンジチオール、技術的な等級の１，２−エタンジチオール、１，３−プロパンジチオール、１，４−ベンゼンジメタンチオール、１，４−ブタンジチオール、１，４−ブタンジチオール二酢酸塩、１，５−ペンタンジチオール、１，６−ヘキサンジチオール、１，８−オクタンジチオール、１，９−ノナンジチオール、アダマンタンチオール、１−ブタンチオール、１−デカンチオール、１−ドデカンチオール、１−ヘプタンチオール、１−ヘプタンチオールプルム、１−ヘキサデカンチオール、１−ヘキサンチオール、１−メルカプト（トリエチレングリコール）、１−メルカプト（トリエチレングリコール）メチルエーテル官能基化金ナノ粒子、１−メルカプト−２−プロパノール、１−ノナンチオール、１−オクタデカンチオール、１−オクタンチオール、１−ペンタデカンチオール、１−ペンタンチオール、１−プロパンチオール、１−テトラデカンチオール、１−テトラデカンチオールプルム、１−ウンデカンチオール、１１−（１Ｈ−ピロル−１−イル）ウンデカン−１−チオール、１１−アミノ−１−ウンデカンチオール塩酸塩、１１−ブロモ−１−ウンデカンチオール、１１−メルカプト−１−ウンデカノール、１１−メルカプトウンデカン酸、１１−メルカプトウンデシルトリフルオロ酢酸塩、１１−メルカプトウンデシルリン酸、１２−メルカプトドデカン酸、１５−メルカプトペンタデカン酸、１６−メルカプトヘキサデカン酸、１Ｈ，１Ｈ，２Ｈ，���Ｈ−ペルフルオロデカンチオール、２，２’−（エチレンジオキシ）ジエタンチオール、２，３−ブタンジチオール、２−ブタンチオール、２−エチルヘキサンチオール、２−メチル−１−プロパンチオール、２−メチル−２−プロパンチオール、２−フェニルエタンチオール、３，３，４，４，５，５，６，６，６−ノナフルオロ−１−ヘキサンチオールプルム、３−（ジメトキシメチルシリル）−１−プロパンチオール、３−クロロ−１−プロパンチオール、３−メルカプト−１−プロパノール、３−メルカプト−２−ブタノール、３−メルカプト−Ｎ−ノニルプロピオンアミド、３−メルカプトプロピオン酸、３−メルカプトプロピル官能基化シリカゲル、３−メチル−１−ブタンチオール、４，４’−ビス（メルカプトメチル）ビフェニル、４，４’−ジメルカプトスチルベン、４−（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンジルアルコール、４−シアノ−１−ブタンチオール、４−メルカプト−１−ブタノール、６−（フェロセニル）ヘキサンチオール、６−メルカプト−１−ヘキサノール、６−メルカプトヘキサン酸、８−メルカプト−１−オクタノール、８−メルカプトオクタン酸、９−メルカプト−１−ノナノール、ビフェニル−４，４’−ジチオール、３−メルカプトプロピオン酸ブチル、１−ブタンチオール酸銅（Ｉ）、シクロヘキサンチオール、シクロペンタンチオール、デカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化金ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ヘキサ（エチレングリコール）モノ−１１−（アセチルチオ）ウンデシルエーテル、メルカプトコハク酸、３−メルカプトプロピオン酸メチル、ＮａｎｏＴｅｔｈｅｒ  ＢＰＡ−ＨＨ、ＮａｎｏＴｈｉｎｋ（商標）１８、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）８、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）ＡＣＩＤ１１、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）ＡＣＩＤ１６、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）ＡＬＣＯ１１、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）ＴＨＩＯ８、オクタンチオール官能基化金ナノ粒子、ＰＥＧジチオール平均Ｍｎ８，０００、ＰＥＧジチオール平均分子量１，５００、ＰＥＧジチオール平均分子量３，４００、Ｓ−（１１−ブロモウンデシル）チオアセタート、Ｓ−（４−シアノブチル）チオアセタート、チオフェノール、トリエチレングリコールモノ−１１−メルカプトウンデシルエーテル、トリメチロールプロパントリス（３−メルカプトプロピオナート）、［１１−（メチルカルボニルチオ）ウンデシル］テトラ（エチレングリコール）、ｍ−カルボラン−９−チオール、ｐ−テルフェニル−４，４’’−ジチオール、ｔｅｒｔ−ドデシルメルカプタンおよびｔｅｒｔ−ノニルメルカプタン。
【００８４】
温度、ｐＨ、反応時間、溶質を溶解するための撹拌またはかきまぜの利用、および沈殿物を回収および洗浄する手順などの例示的反応条件は、本明細書に記載されており、当該技術分野で一般に公知の技術を用いる。
【００８５】
過去に記載された、ＢＴ化合物を製造するための方法論とは異なり、ＢＴを調製するための本発明の方法によれば、ＢＴ生成物は、特定の好ましい実施形態において約０．４ミクロン〜約５ミクロン、他の特定の実施形態によれば一般に約０．１ミクロン〜約８ミクロンのＶＭＤを有する、実質的に全ての微粒子を有する微粒子懸濁液として提供される。更に過去のアプローチとは異なり、本発明の実施形態によれば、ビスマスは、少なくとも約５０ｍＭ〜約１Ｍの濃度のビスマス塩、および少なくとも約０．５％（ｗ／ｗ）〜約５％（ｗ／ｗ）、好ましくは５％（重量／重量）未満の量の硝酸を含み、親水性、極性または有機性可溶化剤を含まない酸性水溶液中で提供される。
【００８６】
これに関連して本発明の方法は、ビスマスが５０μＭで水溶性でなく（例えば、Ｕ．Ｓ．ＲＥ３７７９３号）、ビスマスが水中で不安定であり（例えば、Ｋｕｖｓｈｉｎｏｖａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００９  Ｒｕｓｓ．  Ｊ  Ｉｎｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ  ５４（１１）：１８１６）、親水性、極性または有機性可溶化剤が存在しない限りビスマスが硝酸水溶液中でも不安定になる、という一般に認識された当該技術を考慮すると驚くべき、そして予想外の利益を提示する。例えば、ＢＴ調製方法論の最も信頼のおける記載の全てにおいて（例えば、Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４１：１６９７；Ｕ．Ｓ．６，３８０，２４８号；Ｕ．Ｓ  ＲＥ３７，７９３号、Ｕ．Ｓ．６，２４８，３７１号）、親水性可溶化剤プロピレングリコールは、硝酸ビスマスを溶解するのに必要とされ、チオールとの反応用に調製された溶液のビスマス濃度は、１５ｍＭよりも十分に低く、それによりＢＴ化合物の利用可能な生産様式が限定される。
【００８７】
これに反して、本開示によれば、ビスマスを溶解するのに親水性、極性または有機性可溶化剤を必要とせず、驚くべきことに、より高い濃度が実現される。親水性、極性または有機性可溶化剤は、プロピレングリコール（ＰＧ）およびエチレングリコール（ＥＧ）が挙げられ、ジオキサンおよびジメチレンスルホキシド（ＤＭＳＯ）などの極性溶媒、ポリオール（例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ペンタエリトリトールなどを含む）、グリセロールおよびマンニトールなどの多価アルコール、ならびに他の薬剤をはじめとする多数の公知の溶解度増強剤のいずれかを含んでいてもよい。他の高極性の水混和性有機物質としては、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）およびＮＭＰ（Ｎ−メチル−２−ピロリドン）が挙げられる。
【００８８】
つまり本明細書において提供された親水性、極性または有機性可溶化剤として一般に用いられるような溶媒は、例えば、Ｃａｔａｌａｎ他（例えば、１９９５  Ｌｉｅｂｉｇｓ  Ａｎｎ．  ２４１；Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｓｏｌｖｅｎｔ，  Ｗｙｐｙｃｈ  （Ｅｄ．），  Ａｎｄｒｅｗ  Ｐｕｂｌ．，  ＮＹ内のＣａｔａｌａｎ，  ２００１、およびそれらに引用された参考資料も参照）のシステムを用いた溶媒極性／分極率（ＳＰＰ）スケール値に基づいて選択してもよく、それによれば、例えば水はＳＰＰ値０．９６２、トルエンはＳＰＰ値０．６５５、そして２−プロパノールはＳＰＰ値０．８４８を有することは、当業者に理解されるであろう。２−Ｎ，Ｎ−ジメチル−７−ニトロフルオレン／２−フルオロ−７−ニトロフルオレンプローブ／同型対（ｈｏｍｏｍｏｒｐｈ  ｐａｉｒ）の紫外線測定に基づいて溶媒のＳＰＰ値を測定する方法は、記載されている（Ｃａｔａｌａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９５）。
【００８９】
特定のＢＴ組成物の溶解度特性に基づいて所望のＳＰＰ値を有する溶媒（純粋な単一成分溶媒、または２種、３種、４種またはそれを超える溶媒の溶媒混合物のいずれかとして；溶媒混和性に関しては、例えばＧｏｄｆｒｅｙ  １９７２  Ｃｈｅｍ．  Ｔｅｃｈｎｏｌ．  ２：３５９参照）は、本開示を考慮して当業者により直ちに同定することができるが、先に言及された通り、本明細書に記載された合成方法ステップに関する特定の好ましい実施形態によれば、親水性、極性または有機性可溶化剤は、ビスマスを溶解するのに必要とならない。
【００９０】
溶解度パラメータは、相互作用パラメータＣ、ヒルデブランド溶解度パラメータｄ、または部分（ハンセン）溶解度パラメータ：溶媒極性、水素結合能および分散力相互作用能を表わす、それぞれδｐ、δｈおよびδｄを含んでいてもよい。特定の実施形態において、ビスマスを含むビスマス塩が溶解する溶媒または共溶媒系を記載する溶解度パラメータの最高値が、例えば本明細書に記載された微粒子ＢＴ組成物を調製する方法により、ビスマス塩を含む水溶液の限界を提供してもよい。例えば高いδｈ値ほど、大きな水素結合能力を有し、それゆえ水などの溶媒分子に対してより大きな親和力を有する。それゆえ、より親水性の環境が望ましい状況では、観察された溶媒の最大δｈがより高い値であることが好ましくなりうる。
【００９１】
非限定的実施例により、以下の式Ｉに示された構造を有するＢｉｓＥＤＴを、以下の反応スキームにより調製してもよい：
【化１】
2018076358.tif 000004
【００９２】
手短に言えば、非限定的例示として、室温の５％水性ＨＮＯ３の過剰量（１１．４Ｌ）に、Ｂｉ（ＮＯ３）３溶液（例えば、４３％Ｂｉ（ＮＯ３）３（ｗ／ｗ）、５％硝酸（ｗ／ｗ）、５２％水（ｗ／ｗ）、Ｓｈｅｐｈｅｒｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，  Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ，  ＯＨから入手）などの酸性ビスマス水溶液０．３３１Ｌ（約０．５７５モル）を撹拌しながら緩やかに添加して、無水エタノール（４Ｌ）を緩やかに添加してもよい。別個に、６０ｍＬシリンジを用いて１，２−エタンジチオール７２．１９ｍＬ（０．８６３モル）を無水エタノール１．５Ｌに添加し、その後５分間撹拌することにより、１，２−エタンジチオール［〜０．５５Ｍ］などのチオール化合物のエタノール性溶液（１．５６Ｌ）を調製してもよい。１，２−エタンジチオール（ＣＡＳ  ５４０−６３−６）および他のチオール化合物は、例えばＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，  Ｓｔ．  Ｌｏｕｉｓ，  ＭＯから入手できる。その後、チオール化合物のエタノール性溶液を、水性Ｂｉ（ＮＯ３)３／ＨＮＯ３溶液に緩やかに添加して、一晩撹拌し、反応溶液を形成させてもよい。チオール含有化合物は、特定の好ましい実施形態によれば、ビスマスに対して約１：３〜約３：１のモル比で反応溶液中に存在してもよい。形成された生成物は、本明細書に記載された微粒子を含む沈殿物として沈殿させ、その後、ろ過により回収し、エタノール、水およびアセトンで引き続き洗浄して、ＢｉｓＥＤＴを黄色非晶質粉末固体として得る。粗生成物を撹拌しながら無水アルコールに再溶解し、その後、ろ過して、エタノールで数回、その後、アセトンで数回引き続き洗浄してもよい。洗浄した粉末を１Ｍ  ＮａＯＨ（５００ｍＬ）中で研和し、ろ過して水、エタノールおよびアセトンで引き続き洗浄して、精製された微粒子ＢｉｓＥＤＴを得てもよい。
【００９３】
非限定的理論によれば、ビスマスは、細菌による、菌体外多糖などの細胞外ポリマー物質（ＥＰＳ）を産生する能力を阻害し、この阻害がバイオフィルム形成の減損に導く。細菌は、バイオフィルム粘着のためにニカワ状ＥＰＳを用いると考えられる。感染物の性質に応じて、バイオフィルム形成およびＥＰＳの同化は、創傷治癒の妨害など細菌病原性に寄与する可能性がある。しかしビスマス単独では、介入剤として治療上有用ではなく、代わりに典型的にＢＴなどの錯体の一部として投与される。つまりビスマス−チオール（ＢＴ）は、チオール化合物でのビスマスのキレート化から得られ、ビスマスの抗菌治療効力の劇的改善を示す化合物を含む組成物のファミリーである。ＢＴは、顕著な抗感染効果、抗バイオフィルム効果、および免疫調整効果を示す。ビスマス−チオールは、広範囲の微生物に対して効果的であり、典型的には抗生物質耐性による影響を受けない。ＢＴは、著しく低い（亜阻害）濃度でバイオフィルム形成を予防し、同じ亜阻害レベルで一般の創傷病原の多くの病原的特徴を予防し、動物モデルにおける敗血性ショックを予防することができ、多くの抗生物質と相乗性を有しうる。
【００９４】
本明細書に記載された通り、１種以上の特異的抗生物質化合物と組み合わせた場合の１種以上の特異的ＢＴの抗菌効果におけるそのような相乗性は、特定の細菌タイプに対する別個の抗生物質およびＢＴ効果のプロファイルに基づいて直ちに予測することはできないが、驚くべきことに、グラム陰性菌またはグラム陽性菌（または両方）が存在するかどうかの確認など、特異的細菌集団を考慮した特定のＢＴ−抗生物質・組み合わせを選択することで得られる場合がある。例えば本明細書に開示された通り、特定のＢＴと相乗する抗生物質は、アミカシン、アンピシリン、アズトレオナム、セファゾリン、セフェピム、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、クリンダマイシン（または他のリンコサミド系抗生物質）、ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、ドキシサイクリン、ガチフロキサシン、ゲンタマイシン、イミペニム、レボフロキサシン、リネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標））、ミノサイクリン、ナフシリン、パロモマイシン、リファムピン、スルファメトキサゾール、テトラサイクリン、トブラマイシンおよびバンコマイシンのうちの１種以上を含んでいてもよい。例えばゲンタマイシン、セファゾリン、セフェピム、スファメトキサゾール、イミペニムまたはレボフロキサシンに対して個別では感受性がほとんど、または全くないＭＲＳＡが、ＢＴ化合物のＢｉｓＥＤＴの存在下でこれらの抗生物質に暴露すると、抗生物質のいずれか１種への顕著な感受性を示すことが、インビトロ試験で示された。つまり本明細書において企図される特定の実施形態は、ＢＴ化合物と、アミカシン、アンピシリン、セファゾリン、セフェピム、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、クリンダマイシン（または他のリンコサミド系抗生物質）、ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、ドキシサイクリン、ガチフロキサシン、ゲンタマイシン、イミペニム、レボフロキサシン、リネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標））、ミノサイクリン、ナフシリン、パロモマイシン、リファムピン、スルファメトキサゾール、トブラマイシンおよびバンコマイシンから選択される１種以上の抗生物質との組み合わせを含みうる組成物および／または方法を明白に企図し、本明細書において企図される他の特定の実施形態は、ＢＴ化合物と、アミカシン、アンピシリン、アズトレオナム、セファゾリン、セフェピム、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、クリンダマイシン（または他のリンコサミド類）、ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、ドキシサイクリン、ガチフロキサシン、ゲンタマイシン、イミペニム、レボフロキサシン、リネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標））、ミノサイクリン、ナフシリン、パロモマイシン、リファムピン、スルファメトキサゾール、トブラマイシンおよびバンコマイシンから選択される１種以上の抗生物質が明白に除外されうる、１種以上の抗生物質との組み合わせを含んでいてもよい組成物および／または方法を企図する。本明細書において、ゲンタマイシンおよびトブラマイシンが抗生物質のアミノグリコシド類に属することに、留意されたい。同じく特定の企図される実施形態から明白に除外されるのは、Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１  Ａｇｅｎｔ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４５（５）：１４１７−１４２１；Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，２０００  Ｉｎｆｅｃｔ．  Ｍｅｄ．１７：１２３−１２７；Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  ＆  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．３：７９−８５内のＤｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００３  Ｒｅｓ．  Ａｄｖ．；Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４１（８）：１６９７−１７０３；Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９９  Ｉｎｆｅｃｔ．  Ｉｍｍｕｎ．  ６７：６６４−６６９；  Ｈｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．  １９９９  Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４４：６０１−６０５；Ｖｅｌｏｉｒａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３  Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ５２：９１５−９１９；  Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．  ２６：７３１−７３８；Ｈａｌｗａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００８  Ｉｎｔ．  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．  ３５８：２７８；  Ｈａｌｗａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００９  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．  ３７３：１４１−１４６に記載された特定の組成物および方法であり、これらの発行物のいずれも、本明細書に開示された単分散微粒子ＢＴ組成物を教示または示唆していないことに留意されたい。
【００９５】
したがって本明細書に記載された通り、特定の好ましい実施形態において、本明細書に記載された微粒子ＢＴを含み、場合により、他の特定の実施形態において、相乗性および／または増強性抗生物質も含む組成物で、対象を処置するための組成物および方法が提供される。関連の技術分野の当業者は、本発明の開示に基づけば、そのような処置が望ましくなりうる適切な臨床局面および状況を認識すると思われ、その基準は、とりわけ、例えば外科的、軍事外科的、皮膚科学的、外傷薬による、老年学的、心臓血管の、代謝的な疾患（例えば、糖尿病、肥満など）、感染および炎症（呼吸器管もしくは胃腸管の上皮内層、または腺組織などの他の上皮組織表面など）、ならびに関連の医療専門分野および下位専門領域をはじめとする医療技術分野で確立されている。
【００９６】
それゆえ、本明細書に開示され当該技術分野で公知である特定の実施形態において、皮膚組織修復（または他の組織、例えば上皮組織、骨、関節、筋肉、腱、または靭帯の修復）の促進が、企図される。特定の実施形態において、皮膚組織または他の上皮組織修復の促進は、（ｉ）上皮細胞（例えば、角化細胞）または真皮線維芽細胞の遊走、（ii）上皮細胞（例えば、角化細胞）または真皮線維芽細胞の発育、（iii）上皮細胞（例えば、角化細胞）または真皮線維芽細胞のコラーゲナーゼ、ゼラチナーゼまたはマトリックスメタロプロテイナーゼ活性のダウンレギュレーション、（iv）真皮線維芽細胞の細胞外マトリックスタンパク質の沈着、および（ｖ）真皮血管新生の誘導または増強、から選択される１種以上の細胞内創傷修復活性を刺激または抑制解除することを含んでいてもよい。そのような細胞内創傷修復活性を確認および特徴づけするための方法論は記載されているため、本明細書に開示された創傷組織の修復促進化合物、例えば本明細書に記載されたＢＴ剤を含む組成物の、これらおよび関連の活性に対する効果は、本開示に基づいて直ちに、そして過剰な実験を行わずに決定することができる。例えば本明細書に開示されるのは、掻き傷に続く角化細胞創傷閉鎖に基づく創傷修復のための当該技術分野で受け入れられたモデルに関する組成物および方法である。
【００９７】
本明細書に記載された実施形態に従って用いられる天然表面上または表面内の微生物感染を処置する好ましい組成物は、特定の実施形態において、本明細書に記載されたビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む組成物を含んでいてもよく、それは、異なるが関連する特定の実施形態において、本明細書に記載された１種以上の抗生物質化合物など当該技術分野で公知の他の化合物を含んでいてもよい。ＢＴ化合物およびそれを製造する方法が、本明細書において開示されており、例えば、Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４１（８）：１６９７−１７０３；２００１  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４５（５）：１４１７−１４２１）ならびにＵ．Ｓ  ＲＥ３７，７９３号、Ｕ．Ｓ．６，２４８，３７１号、同６，０８６，９２１号、および同６，３８０，２４８号にも開示されている。同じく先に言及された通り、特定の好ましいＢＴ化合物は、チオール含有化合物にイオン結合した、またはそれとの配位錯体におけるビスマスまたはビスマス塩を含有するもの、例えばチオール含有化合物にキレート化されたビスマスを含む組成物であり、他の特定の好ましいＢＴ化合物は、チオール含有化合物への共有結合的つながりにおいてビスマスまたはビスマス塩を含有するものである。同じく好ましいのは、本明細書に記載された実質的に単分散の微粒子ＢＴ組成物である。過去の、細菌感染物を処置する努力からも、または天然表面の本明細書に記載された処置を促進するための組成物および方法において用途を有する、本明細書に初めて記載された任意の化合物の他の局面における特徴づけからも、そのような化合物を用いる本発明の方法が本明細書に記載された有益効果を有することを予測できなかった。
【００９８】
こうして好ましい実施形態によれば、本明細書に記載された少なくとも１種の微粒子ＢＴ化合物を天然表面に投与することを含む、天然表面を処置する方法が提供される。特定の実施形態において、その方法は、特定の好ましい実施形態において、本明細書に記載された相乗性抗生物質となる可能性があり、他の特定の実施形態において、本明細書に記載された増強性抗生物質となる可能性がある、少なくとも１種の抗生物質化合物を同時、または連続していずれかの順序で投与することを更に含む。抗生物質化合物は、アミノグリコシド系抗生物質、カルバペネム系抗生物質、セファロスポリン系抗生物質、フルオロキノロン系抗生物質、グリコペプチド系抗生物質、リンコサミド系抗生物質、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン系抗生物質、またはアミノペニシリン系抗生物質であってもよい。臨床的に有用な抗生物質は、本明細書の他の箇所で議論されており、例えば、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｈｏｏｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  Ｔｈｅ  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（３２ｎｄ  Ｅｄ．），  ２００７  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，  ＰＡ；  Ｈａｕｓｅｒ，  ＡＬ，  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  Ｂａｓｉｃｓ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃｉａｎｓ，  ２００７  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，  Ｗｉｌｌｉａｎｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，  ＰＡにも記載されている。
【００９９】
本明細書に記載された通り、特定の実施形態は、グラム陽性菌を含む細菌感染物の場合に、好ましい治療上効果的な配合剤が、ＢＴ化合物（例えば、ＢｉｓＥＤＴ、ビスマス；１，２−エタンジチオール；ＢｉｓＰｙｒ、ビスマス：ピリチオン；ＢｉｓＥＤＴ／Ｐｙｒ、ビスマス：１，２−エタンジチオール／ピリチオン）とリファマイシン、またはＢＴ化合物とダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標）、Ｃｕｂｉｓｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，  Ｌｘｉｎｔｏｎ，  ＭＡ）、またはＢＴ化合物とリネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒ，  Ｉｎｃ．，  ＮＹ，  ＮＹ）、またはＢＴ化合物（例えば、ＢｉｓＥＤＴ、ビスマス；１，２−エタンジチオール；ＢｉｓＰｙｒ、ビスマス：ピリチオン；ＢｉｓＥＤＴ／Ｐｙｒ、ビスマス：１，２−エタンジチオール／ピリチオン）とアンピシリン、セファゾリン、セフェピム、クロラムフェニコール、クリンダマイシン（または他のリンコサミド系抗生物質）、ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、ドキシサイクリン、ガチフロキサシン、ゲンタマイシン、イミペニム、レボフロキサシン、リネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標））、ナフシリン、パロモマイシン、リファムピン、スルファメトキサゾール、トブラマイシンおよびバンコマイシンのうちの１種以上、を含みうる、という予想外の発見に由来する。
【０１００】
同じく本明細書に記載された通り、特定の実施形態は、グラム陰性菌を含む細菌感染物の場合に、好ましい治療上効果的な配合剤が、ＢＴ化合物およびアミカシンを含みうる、という予想外の発見に由来する。特定の関連する実施形態は、グラム陰性菌を含む感染物を、ＢＴ化合物および別の抗生物質、例えば特定の実施形態においてゲンタマイシンまたはトブラマイシンではない別のアミノグリコシド系抗生物質で処置することを企図する。したがって、これらの実施形態を考慮して、他の関連の実施形態は、本発明の方法により投与される配合剤に含まれる適切な抗生物質化合物を選択するステップとして、医療的方法論の技術分野の当業者によく熟知された方法論により、グラム陽性またはグラム陰性である周知基準により天然表面内または天然表面上の１種以上の細菌集団または亜集団を同定することを企図する。
【０１０１】
ここに記載された組成物および方法は、典型的には本明細書に記載された化合物を（例えば、１種以上の微粒子ＢＴのみで、または本明細書に開示された１種以上の相乗性および／もしくは増強性抗生物質と組み合わせて）、天然表面上または天然表面内の微生物の存在など微生物部位へ適用または投与することにより、様々な局面における微生物（例えば、細菌、ウイルス、酵母、カビおよび他の真菌、微生物寄生虫など）の処置において用途を見出してもよい。そのような天然表面としては、非限定的にホ乳類組織（例えば、皮膚、頭皮、胃腸管内層、口腔などの上皮；内皮、細胞および組織膜、例えば腹膜、心膜、肋膜、骨膜、髄膜、筋線維膜など；角膜、強膜、粘膜など；および他のホ乳類組織、例えば歯、骨、関節、腱、靭帯、筋肉、心臓、肺、腎臓、肝臓、脾臓、胆嚢、膵臓、膀胱、神経など）が挙げられる。
【０１０２】
本明細書に記載された微粒子抗微生物剤は、微生物の発育を抑制するため、微生物の寄生を低減するため、バイオフィルムを減少させるため、細菌からバイオフィルムへの変換を予防するため、微生物感染を予防または阻害するため、そして本明細書に記載された他の任意の使用のために用いてもよい。これらの薬剤は、サイトメガロウイルス、単純ヘルペス１型、および単純ヘルペス２型などのヘルペス族ウイルスによるウイルス感染、ならびに／または他のウイルスによる感染の予防または阻害をはじめとする、複数の抗ウイルス目的にも有用である。これに関連して、その薬剤は、様々なウイルス、例えば一本鎖ＲＮＡウイルス、一本鎖ＤＮＡウイルス、ラウス肉腫ウイルス（ＲＳＡ）、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、インフルエンザウイルス、西ナイルウイルス（ＷＮＶ）、エプスタイン・バー・ウイルス（ＥＢＶ）、東部ウマ脳炎ウイルス（ＥＥＥＶ）、重症急性呼吸器ウイルス（ＳＡＲＳ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、およびヒトＴ細胞リンパ腫ウイルス（ＨＴＬＶ）によるウイルス感染の予防または阻害に有用である。
【０１０３】
本明細書に記載された抗微生物剤の他の内用および外用医薬品使用として、非限定的に、細菌感染の、結核の、酵母およびカビ感染などの真菌感染の（例えば、カンジダ（例えば、カンジダ属（例えば、カンジダ・アルビカンス、カンジダ・グラブラタ、Ｃ．パラプシローシス、Ｃ．トロピカリス、およびＣ．デュブリニエンシス）またはクリプトコッカスもしくは他の真菌）、ヘリコバクター・ピロリ感染の、そして消化性潰瘍疾患の処置または予防が挙げられる。一実施形態において、その薬剤は、細菌にとって一般に致死的でないが、それでもなお自然な免疫反応に他の方法で抵抗する防御的多糖コーティングを低下させるのに十分となる投与量で用いられる。こうしてこの技術は、ヒト共生微生物（例えば、通常の腸内細菌叢など）を損傷することなく、抗生物質を用いる症例になりうる程度まで、免疫系を介した細菌感染の根絶を補助すると考えられる。
【０１０４】
限定ではなく例示として、特定の企図される実施形態を、ここに記載する。
【０１０５】
特定の実施形態において、本明細書に記載された微粒子ＢＴ化合物（または微粒子ＢＴ化合物を含む組成物）を、バイオフィルム発生を制御するため、バイオフィルムを崩壊させるため、またはバイオフィルムの量を減少させるための少なくとも１種のまたはそれを超える抗バイオフィルム剤と組み合わせてもよい。当該技術分野で理解される通り、種間クオラムセンシングが、バイオフィルムの形成に関係する。ＬｕｘＳ依存性経路または種間クオラムセンシングシグナルを増加させる特定の薬剤は（例えば、米国特許第７，４２７，４０８号参照）、バイオフィルムの発生および／または増殖の制御に寄与する。例示的薬剤としては、例えば、組み合わせまたは別個での、Ｎ−（３−オキソドデカノイル)−Ｌ−ホモセリンラクトン（ＯｄＤＨＬ）遮断化合物およびＮ−ブチリル−Ｌ−ホモセリンラクトン（ＢＨＬ）類似体が挙げられる（例えば、米国特許第６，４５５，０３１号参照）。微粒子ＢＴ化合物および少なくとも１種の抗バイオフィルム剤を含む口内衛生組成物を、細菌バイオフィルムの崩壊および阻害のため、そして歯周病の処置のために局所に送達することができる（例えば、米国特許第６，７２６，８９８号参照）。
【０１０６】
微粒子ビスマス−チオールを含む組成物、ならびに口内衛生のため、そして口の炎症および感染を処置するための使用
別の実施形態において、微粒子ＢＴ化合物を含む組成物が、経口使用のために配合され、口内の微生物発育を予防または低減するため、そして口腔の微生物感染および炎症を予防および／または処置するための方法において用いてもよい。それゆえこれらの組成物は、歯垢、口臭、歯周病、歯肉炎、および口の他の感染を予防または処置するのに（即ち、それらの発症を低下もしくは阻害する、また発生もしくは再発の尤度を低下させるのに）有用である。微粒子ＢＴ化合物を含む経口組成物は、バイオフィルムの発生を予防および／もしくは制御する（即ち、緩徐にする、遅延する、阻害する）、バイオフィルムを崩壊させる、または口内表面、詳細には歯もしくは歯茎上に存在するバイオフィルムの量を減少させるのにも有用となりうる。
【０１０７】
閉じ込められた食物粒子、劣悪な口内衛生および劣悪な口内健康、ならびに総義歯の不適切な洗浄は、歯、歯茎周辺、および舌上の微生物発育を促進する可能性がある。微生物の継続的な発育および虫歯の存在は、口臭、歯垢（即ち、微生物のコロニー形成により形成されたバイオフィルム）、歯肉炎、および炎症をもたらす場合がある。適切な口内ケア（例えば、歯磨き、フロッシング）が行われていない場合、より重症の感染、例えば歯周病および顎の感染が、結果として起こりうる。
【０１０８】
良好な口内衛生は、口内健康だけでなく、複数の慢性状態の予防にとっても重要である。口内の細菌発育を制御することは、心臓疾患のリスク低下、記憶の維持、ならびに身体の他の領域での感染および炎症のリスク低下を支援することができる。糖尿病の人々は、重度の歯茎問題を発症するリスクが大きく、良好な口内健康を維持することにより歯肉炎のリスクを低下させることが、血糖値制御の一助となりうる。妊婦は、歯肉炎に見舞われる可能性が高く、幾つかの研究で、妊婦における歯茎疾患と、早産で出生時低体重児の分娩との関連性が、示唆されている。
【０１０９】
細菌は、歯周病における主要な病因物質である。５００を超える菌株が、歯垢において見出される場合がある（Ｋｒｏｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ９６：１４５４７−５２（１９９９））。細菌は、歯の表面、歯肉の上皮、および口腔の環境で、バイオフィルムとして生き残るように進化したが、それが歯周炎処置を困難にする原因である。そのような感染を処置するのに現在用いられている殺菌剤および抗生物質は、多くの場合、問題のある生物体の全てを殺傷するのではない。特定の菌種に対して無効となる薬剤を使用すると、耐性菌種の増殖をもたらす場合がある。その上、これらの薬剤は、好ましくない副作用、そのようなアレルギー反応、炎症、および歯の変色を誘発する場合がある。
【０１１０】
歯の細菌性歯垢は、歯の表面、修復物、補綴に頑固に付着するバイオフィルムである。口内のバイオフィルムを制御する主な手段は、機械的洗浄（即ち、歯磨き、フロッシングなど）による。そのような洗浄を受けなかった場合、その後２日以内に、歯の表面が主としてストレプトコッカス属である通性グラム陽性球菌により主に着色される。細菌は、表面への細菌固定を助けて付着された細菌を保護する、細胞外粘液層を分泌する。歯の表面が付着された細菌で覆われると、ミクロコロニー形成が開始する。バイオフィルムは、新しい細菌の付着よりもむしろ、主として粘着した細菌の細胞分裂により成長する。細菌が形成する歯垢の倍加時間は、初期の発達時は急速であり、より成熟したバイオフィルムでは緩徐である。
【０１１１】
既に菌膜に付着した細菌に生着菌が引き続き粘着すると、共凝集が起こる。共凝集の結果、互いにつながった異なる細菌の複合配列（ｃｏｍｐｌｅｘ  ａｒｒａｙ）が形成される。中断されずに歯垢が形成された２、３日後に、歯肉縁が炎症を起こして腫脹するようになる。炎症により、深い歯肉溝が形成する場合がある。バイオフィルムは、この歯肉下の領域へ拡大し、この防御された環境で増殖し、成熟した歯肉下歯垢バイオフィルムが形成される。バイオフィルムが、大部分がグラム陽性菌で構成されたものからグラム陰性嫌気細菌を含むものに変化するまでは、歯肉の炎症は認められない。主にグラム陰性嫌気性細菌で構成された歯肉下細菌ミクロコロニーが、歯肉縁上の歯垢形成が開始した後、３〜１２週間の間に歯肉溝に定着するようになる。現在、歯周病原の疑いがあるほとんどの菌種が、嫌気性グラム陰性菌である。
【０１１２】
バイオフィルム内で防御された細菌ミクロコロニーは、典型的には抗生物質（全身投与）、消毒薬または殺菌剤（局所投与）、および免疫防御に対して耐性である。例えば、浮遊菌を殺傷する抗生物質用量は、バイオフィルム菌を殺傷する用量の１５００倍も増加させる必要がある。この高濃度では、これらの抗微生物剤は、患者にも毒性となる傾向がある（例えば、Ｃｏｇｈｌａｎ  １９９６，  Ｎｅｗ  Ｓｃｉｅｎｔｉｓｔ  ２０４５：３２−６；Ｅｌｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９５，  Ｅｙｅ  ９：１０２−９参照）。
【０１１３】
細菌性歯垢バイオフィルムの入念で頻繁な物理的除去が、歯垢を排除および制御する最も効果的な手段である。しかし、ポケット内の歯肉下歯垢は、ブラシ、フロス、または口内すすぎにより届くことができない。それゆえ、歯科衛生士または歯科医による歯肉下の歯根表面の頻繁な歯周デブリドマンが、歯周炎の予防および処置に不可欠な要素となる。
【０１１４】
特定の実施形態において、微粒子ＢＴ化合物は、任意の対象により日常的に用いられうる口内衛生組成物、例えば非限定的に、練り歯磨き、マウスウォッシュ（即ち、マウスリンス）、口腔ゲル、歯磨き粉、口内スプレー（口内吸入器により分散されるスプレーなど）、食用フィルム、チューインガム、口内スラリー、総義歯洗浄液、総義歯保存液、およびデンタルフロスなどの中に組み入れられていてもよい。微粒子ＢＴ化合物は、例えば液体フッ素処置、洗浄組成物、バフ研磨組成物、口内リンス、およびデンタルフロスをはじめとする、主としてデンタルケアの専門家により用いられる口内衛生組成物に組み入れられてもよい。本発明の実施形態は、当該技術分野で記載された口内衛生組成物と共に配合される抗菌剤を、本明細書に記載された微粒子ＢＴ化合物と置換して、抗菌活性、溶解度および生物学的利用度の範囲、抗バイオフィルム効果、非毒性、抗生物質効力の増強、ならびに本明細書に記載された他の特性をはじめとする、本明細書に開示された利点を提供することを企図する。
【０１１５】
微粒子ＢＴ化合物は、微粒子ＢＴ化合物を歯の表面に投与することにより、虫歯および／または炎症を予防または処置するために（即ち、それぞれ虫歯および／または炎症の発生または再発の尤度を低下させるために）用いられてもよい。微粒子ＢＴ化合物を含む組成物は、歯および／または歯茎または口腔粘膜の表面に適用される粘膜付着性組成物であってもよく、表面にある程度付着する任意の形態、または薬学上効果的な量の有効成分を所望の表面に送達する任意の形態であってもよい。微粒子ＢＴ化合物は、歯に適用される組成物から緩徐に放出されるように配合することもできる。例えばその組成物は、ゲル（例えば、ハイドロゲル、チオマー、エアロゲル、またはオルガノゲル）または液体であってもよい。オルガノゲルは、有機溶媒、リポ酸、植物油、または鉱物油を含んでいてもよい。そのようなゲルまたは液体コーティング配合剤は、アマルガムまたはコンポジットまたは他の修復組成物の内部または外部に適用してもよい。徐放性組成物が、薬学上効果的な量の微粒子ＢＴ化合物を１、２、３、４、５、６、もしくは７日間（１週間）、または２、３、４、５、６、７週間、または１、２、３、４、５、もしくは６ヶ月間送達してもよい。そのような組成物は、当該技術分野で公知の任意の数の方法を用いて、当業者により調製することができる。
【０１１６】
他の特定の実施形態において、本明細書に記載された通り、微粒子ＢＴ化合物および１種以上の追加の抗微生物化合物または薬剤を含む抗微生物性組成物が、経口使用に向けて提供される。特に有用なのは、組み合わせて投与されると、本明細書に記載される通り増強的または相乗的抗微生物効果を有する第二の抗微生物剤を含む組成物である。例としては、増強的抗微生物効果は、微粒子ＢＴ化合物を、鉄をキレート化する抗微生物剤と共に投与する際に観察される可能性がある。他の特定の実施形態において、微粒子ＢＴ化合物は、抗炎症剤、化合物、小分子、または巨大分子（例えば、ペプチドまたはポリペプチド）と共に配合される。
【０１１７】
本明細書に記載された微粒子ＢＴ化合物のいずれかを、経口使用に向けて配合してもよい。特定の実施形態において、疎水性チオール（例えば、チオクロロフェノール）を用いて調製される微粒子ＢＴ化合物を用いてもよく、それは疎水性の低いＢＴ化合物よりも歯および口の組織に付着する能力を大きく示す場合がある。モル比１：２（ビスマス対チオール）を有するものなど、正味の負電荷を有するＢＴ化合物が、好適な付着性を有する場合がある。
【０１１８】
微粒子ＢＴ化合物を含む口内衛生組成物は、１種以上の有効成分および／または１種以上の経口的に適した賦形剤もしくは担体を更に含んでいてもよい。一実施形態において、口内衛生組成物は、重曹または他のアルカリ化合物もしくは物質を更に含んでいてもよい。重曹の化学的および物理的特性により、それは、洗浄、脱臭、および緩衝をはじめとする広範囲の適用例を有する。重曹は、臭気を遮蔽または吸収するというよりむしろ化学的に中和する。重曹は、微粒子ＢＴ化合物と、粉末混合物として組み合わせることができ、または本明細書に記載された歯磨き粉、ゲル、ペースト、および液体のいずれか１つに溶解もしくは懸濁させることができる。他の実施形態において、微粒子ＢＴ化合物は、所望のアルカリｐＨを保持する一助となり、洗浄および脱臭特性も有する他のアルカリ金属重炭酸塩または炭酸塩物質（例えば、重炭酸カリウムまたは炭酸カルシウム）と組み合わせることができる。
【０１１９】
微粒子ＢＴ化合物を含む口内衛生組成物は、以下の成分の１種以上を更に含んでいてもよい。
抗微生物剤：例えば、クロルヘキシジン：サンギナリンエキス、メトロニダゾール、第四級アンモニウム化合物（例えば、セチルピリジニウムクロリド）；ビスグアニド（例えば、クロルヘキシジンジグルコナート、ヘキセチジン、オクテニジン、アレキシジン）；ハロゲン化ビスフェノール系化合物（例えば、２，２’−メチレンビス−（４−クロロ−６−ブロモフェノール）または他のフェノール系抗菌化合物；アルキルヒドロキシベンゾアート；カチオン性抗微生物ペプチド；アミノグリコシド；キノロン；リンコサミド；ペニシリン：セファロスポリン；マクロリド；テトラサイクリン；当該技術分野で公知の他の抗生物質；コレウス・フォルスコリのエッセンシャルオイル；銀または銀コロイド抗微生物剤；スズまたは銅を基剤とする抗微生物剤；マヌカオイル；オレガノ；タイム；ローズマリー；または他のハーブエキス；およびグレープフルーツシードエキス。
抗炎症剤または抗酸化剤：例えば、イブプロフェン、フルルビプロフェン、アスピリン、インドメタシン、アロエベラ、ターメリック、オリーブリーフエキス、クローブ、パンテノール、レチノール、ω−３脂肪酸、γ−リノレン酸（ＧＬＡ）、緑茶、生姜、グレープシードなど。虫歯予防剤：例えば、フッ化ナトリウムおよびフッ化第一スズ、フッ化アミン、モノフルオロリン酸ナトリウム、トリメタリン酸ナトリウム、クエン酸亜鉛または他の亜鉛剤、およびカゼイン。プラーク緩衝液：例えば、尿素、乳酸カルシウム、グリセロリン酸カルシウム、およびポリアクリル酸ストロンチウム。ビタミン：例えば、ビタミンＡ、ＣおよびＥ。植物エキス。脱感作剤：例えば、クエン酸カリウム、塩化カリウム、酒石酸カリウム、重炭酸カリウム、シュウ酸カリウム、硝酸カリウム、およびストロンチウム塩。歯石防止剤：例えば、アルカリ金属ピロリン酸塩、次亜リン酸塩含有ポリマー、有機ホスホン酸塩およびホスホクエン酸塩など。生体分子：例えば、バクテリオシン、バクテリオファージ、抗体、酵素など。着香剤：例えば、ペパーミントおよびスペアミントオイル、ウイキョウ、シナモンなど。タンパク質性材料：例えば、コラーゲン。防腐剤。不透明化剤。着色剤。ｐＨ調整剤。甘味剤。薬学的に許容しうる担体：例えば、デンプン、スクロース、水または水／アルコール系など。界面活性剤：例えば、陰イオン性、非イオン性、陽イオン性および双性イオン性または両性界面活性剤、植物材料由来のサポニン（例えば、米国特許第６，４８５，７１１号参照）。粒子研磨剤：例えば、シリカ、アルミナ、炭酸カルシウム、リン酸二カルシウム、ピロリン酸カルシウム、ヒドロキシアパタイト、トリメタリン酸塩、不溶性ヘキサメタリン酸塩、凝集粒子研磨剤、チョーク、微粉砕性天然チョークなど。吸湿剤：例えば、グリセロール、ソルビトール、プロピレングリコール、キシリトール、ラクチトールなど。結合剤および増粘剤：例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシエチルセルロース（Ｎａｔｒｏｓｏｌ（登録商標））、キサンタンガム、アラビアガム、合成ポリマー（例えば、ポリアクリラートおよびカルボキシビニルポリマー、例えばＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標））。抗微生物剤などの有効成分の送達を向上させるポリマー化合物。オーラルケア組成物のｐＨおよびイオン強度を緩衝する緩衝剤および塩。漂白剤：例えば、ペルオキシ化合物（例えば、ペルオキシ二リン酸カリウム）。発砲系：例えば、重炭酸ナトリウム／クエン酸系。変色系。特定の実施形態において、研磨剤は、シリカまたは微粉砕天然チョークである。
【０１２０】
練り歯磨きとして使用されるために配合された微粒子ＢＴ化合物を含む口内衛生組成物は、吸湿剤（例えば、グリセロールまたはソルビトール）、界面活性剤、結合剤、および／または着香剤を更に含んでいてもよい。練り歯磨きは、甘味剤、白色化剤、防腐剤、および抗微生物剤を含んでいてもよい。練り歯磨きおよび他の経口使用に向けた組成物のｐＨは、典型的にはｐＨ５．５〜８．５である。特定の実施形態において、練り歯磨きをはじめとする口内衛生組成物は、７〜７．５、７．５〜８、８〜８．５、または８．５〜９のｐＨを有し、微粒子ＢＴ化合物の抗微生物活性を増強することができる。本明細書に記載された練り歯磨き組成物は、チョーク、リン酸二カルシウム二水和物、ソルビトール、水、水和酸化アルミニウム、沈降シリカ、ラウリル硫酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、着香剤、モノオレイン酸ソルビタン、サッカリンナトリウム、ピロリン酸四ナトリウム、メチルパラベン、プロピルパラベン。所望なら、１種以上の着色剤、例えばＦＤ＆Ｃ  Ｂｌｕｅを用いることができる。練り歯磨き配合剤に含まれうる他の適切な成分は、当該技術分野において、例えば米国特許第５，５６０，５１７号に記載されている。
【０１２１】
特定の一実施形態において、口内衛生組成物は、マウススプレーであり、微粒子ＢＴ化合物、アルカリ緩衝剤（例えば、重炭酸カリウム）、アルコール、甘味成分、および着香剤系を含む。着香剤系は、以下のものを１種以上有していてもよい：着香剤、吸湿剤、界面活性剤、甘味剤、および着色剤（例えば、米国特許第６，５７９，５１３号参照）。本明細書に記載され、口内衛生組成物中での使用に関する技術分野で公知である界面活性剤は、陰イオン性、非イオン性または両性であってもよい。
【０１２２】
別の実施形態において、微粒子ＢＴ含有口内衛生組成物は、重症の感染を処置するための練り歯磨き、歯磨き用ゲル、およびマウスウォッシュなどへの含有に有用であることが当該技術分野において記載されたタウロリジンおよびタウルルタムなどの更なる有効成分と組み合わせてもよい（例えば、英国特許出願第ＧＢ１５５７１６３号、米国特許第６，４８８，９１２号参照）。本明細書に記載された通り、微粒子ＢＴは、微粒子ＢＴと組み合わせると、その組み合わせが付加または相乗効果を有する、１種以上の追加的抗微生物剤と組み合わせることもできる。
【０１２３】
更に別の特定の実施形態において、本明細書に記載された口内衛生組成物は、バイオフィルム発生を制御するため、バイオフィルムを崩壊させるため、またはバイオフィルムの量を減少させるための少なくとも１種のまたはそれを超える抗バイオフィルム剤を更に含んでいてもよい。当該技術分野で理解される通り、種間クオラムセンシングが、バイオフィルムの形成に関係する。ＬｕｘＳ依存性経路または種間クオラムセンシングシグナルを増加させる特定の薬剤は（例えば、米国特許第７，４２７，４０８号参照）、バイオフィルムの発生および／または増殖の制御に寄与する。例示的薬剤としては、例えば、組み合わせまたは別個での、Ｎ−（３−オキソドデカノイル)−Ｌ−ホモセリンラクトン（ＯｄＤＨＬ）遮断化合物およびＮ−ブチリル−Ｌ−ホモセリンラクトン（ＢＨＬ）類似体が挙げられる（例えば、米国特許第６，４５５，０３１号参照）。微粒子ＢＴ化合物および少なくとも１種の抗バイオフィルム剤を含む口内衛生組成物を、細菌バイオフィルムの崩壊および阻害、ならびに歯周病の処置のための局所に送達することができる（例えば、例えば、米国特許第６，７２６，８９８号参照）。
【０１２４】
本明細書に記載された口内衛生組成物は、実質的な抗微生物作用を通常の歯磨き、口すすぎ、またはフロッシングに必要な時間に実行する、十分な量の微粒子ＢＴ化合物を含有していてもよい。本明細書に記載された通り、微粒子ＢＴ化合物は、口内表面（例えば、歯、アマルガム、コンポジット、粘膜、歯茎）に保持されてもよい。例えば、ブラッシング、すすぎ、フロッシングの完了後に歯および歯茎に保持された微粒子ＢＴ化合物が、長期間の抗バイオフィルムおよび抗炎症作用を提供し続けてもよい。
【０１２５】
別の実施形態において、微粒子ＢＴ化合物は、粘膜または歯の表面への微粒子ＢＴ化合物の保持に寄与する粘膜付着性ポリマーまたは他の薬剤から緩徐に放出される。微粒子ＢＴ化合物は、安定した粘性粘膜付着性水性組成物へ添加されてもよく、それが粘膜の潰瘍性、炎症性、および／もしくはびらん性障害の予防および処置、ならびに／または局所処置のための薬学的活性化合物の粘膜表面への送達もしくは全身循環への移入に用いられてもよい（例えば、米国特許第７，５４７，４３３号参照）。
【０１２６】
別の実施形態において、微粒子ＢＴ化合物を含む口内衛生組成物は、歯垢除去を強化しうるオリーブオイルを更に含む。口内衛生を目的とした製品、例えば練り歯磨き、マウスウォッシュ、スプレー、口内吸入器、またはチューインガムの中でのオリーブオイルの使用は、細菌性歯垢の排除もしくは低下（減少）および／または口腔内に存在する細菌数の排除または低下（減少）に寄与し、それにより歯の疾患（例えば、う歯、歯周病）および口臭の発生低下を実現することができる（例えば、米国特許第７，０７４，３９１号参照）。
【０１２７】
他の実施形態において、微粒子ＢＴ化合物を含む口内衛生組成物は、口内の局所適用のための粘膜用殺菌調製物を更に含んでいてもよい。口内衛生組成物は、舌および喉を洗浄するのに有用な水性スラリーを更に含んでいてもよい（例えば、米国特許第６，８６１，０４９号）。更に別の実施形態において、微粒子ＢＴ化合物を含む口内衛生組成物は、窩洞（虫歯）の形成を予防する（即ち、発生の尤度を低下させる）または窩洞の数を減少させるのに用いられる少なくとも１種のミントを更に含んでいてもよい。ＣａｖｉＳｔａｔ（登録商標）（Ｏｒｔｅｋ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，  Ｉｎｃ．，  Ｒｏｓｌｙｎ  Ｈｅｉｇｈｔｓ，  ＮＹ）と呼ばれるそのようなミントの１種は、アルギニンおよびカルシウムを含有し、酸性ｐＨの中和を助け、エナメル質表面へのカルシウム付着を促進する。微粒子ＢＴ化合物を含む口内衛生組成物におけるミントの含有は、こうしてｐＨを上昇させて、口内表面への微粒子ＢＴ化合物の付着を増強することができる。
【０１２８】
整形外科的使用のために配合された微粒子ビスマス−チオールを含む組成物
特定の実施形態において、整形外科的手順（例えば、整形外科手術、整形外科治療、関節形成術（二段階関節形成術を含む）、歯科矯正治療）により生じた微生物感染および炎症を予防および／または処置するための微粒子ＢＴ化合物を含む組成物を使用する方法が、提供される。本明細書に記載された微粒子ＢＴ化合物を含む組成物は、それゆえ、骨格および支持構造（即ち、骨、関節、筋肉、靭帯、腱）の微生物感染、例えば骨髄炎を予防および／または処置する（即ち、その発症を低下または阻害する、その発生または再発の尤度を低下させる）のに有用である。微粒子ＢＴ化合物を含む本明細書に記載された組成物は、バイオフィルムの発生を予防および／もしくは制御する（即ち、緩徐化、遅延、阻害する）、バイオフィルムを崩壊させる、あるいは関節内、または骨、靭帯、腱もしくは歯の表面に存在するバイオフィルムの量を減少させるのにも有用となりうる。
【０１２９】
微粒子ＢＴ化合物を含む整形外科使用のための本明細書に記載された組成物は、１種以上の追加の抗微生物化合物または薬剤を更に含んでいてもよい。特に有用なのは、組み合わせて投与されると、本明細書に記載された増強的または相乗的抗微生物効果を有する、微粒子ＢＴ化合物および第二の抗微生物剤を含む組成物である。追加的例として、増強的抗微生物効果は、鉄をキレート化する抗微生物剤と共に微粒子ＢＴ化合物を投与した場合に、観察することができる。他の特定の実施形態において、微粒子ＢＴ化合物は、抗炎症剤、化合物、小分子、または巨大分子（例えば、ペプチドまたはポリペプチド）と共に配合される。
【０１３０】
微粒子ＢＴ化合物を含む組成物は、組み合わせて投与すると、増強的または相乗的抗微生物効果を有する（即ち、相加効果よりも大きい）、少なくとも１種の他の抗微生物剤（即ち、第二、第三、第四などの抗微生物剤）と組み合わせてもよい。例として、増強的微生物効果は、鉄をキレート化する抗微生物剤と共に微粒子ＢＴ化合物を投与した場合に、観察することができる。特定の実施形態において、微粒子ＢＴ化合物を含む組成物は、以下のものから選択される少なくとも１種の他の抗微生物剤および／または抗炎症剤と組み合わせてもよい：抗微生物剤：例えば、クロルヘキシジン：サンギナリンエキス、メトロニダゾール、第四級アンモニウム化合物（例えば、セチルピリジニウムクロリド）；ビスグアニド（例えば、クロルヘキシジンジグルコナート、ヘキセチジン、オクテニジン、アレキシジン）；ハロゲン化ビスフェノール系化合物（例えば、２，２’−メチレンビス−（４−クロロ−６−ブロモフェノール）または他のフェノール系抗菌化合物；アルキルヒドロキシベンゾアート；カチオン性抗微生物ペプチド；アミノグリコシド；キノロン；リンコサミド；ペニシリン：セファロスポリン；マクロリド；テトラサイクリン；当該技術分野で公知の他の抗生物質；コレウス・フォルスコリのエッセンシャルオイル；銀または銀コロイド抗微生物剤；スズまたは銅を基剤とする抗微生物剤；マヌカオイル；オレガノ；タイム；ローズマリー；または他のハーブエキス；およびグレープフルーツシードエキス。抗炎症剤または抗酸化剤：例えば、イブプロフェン、フルルビプロフェン、アスピリン、インドメタシン、アロエベラ、ターメリック、オリーブリーフエキス、クローブ、パンテノール、レチノール、ω−３脂肪酸、γ−リノレン酸（ＧＬＡ）、緑茶、生姜、グレープシードなど。特定の実施形態において、微粒子ＢＴ化合物を含む組成物は、クリンダマイシン、バンコマイシン、ダプトマイシン、セファゾリン、ゲンタマイシン、トブラマイシン、メトロニダゾール、セファクロル、シプロフロキサシンから選択される抗生物質、または他の抗微生物剤、例えば、第四級アンモニウム化合物（例えば、塩化ベンザルコニウム、セチルピリジニウムクロリド）、抗微生物性ゼオライト、アルカリ金属水酸化物、もしくはアルカリ土類金属酸化物を更に含んでいてもよい。その組成物は、本明細書に記載された１種以上の薬学的に適切な担体（即ち、賦形剤）、界面活性剤、緩衝剤、希釈剤、および塩、および漂白剤を場合により含んでいてもよい。したがって関連する本明細書に開示された実施形態のこれらおよび特定のものは、１種以上の微粒子ＢＴを含む可能性があり、本明細書に記載された相乗性または増強性抗生物質などの抗生物質を場合により更に含む可能性もある、ここに開示された微粒子ＢＴ組成物の、そのような生成物への含有およびプロセスを企図する。
【０１３１】
微粒子ＢＴの生物学的、生物医学的および他の使用
他の特定の実施形態は、単独でのＢＴ、またはビスマス部分が異なるＶ族金属、例えばアンチモン（Ｓｂ）もしくはヒ素（Ａｓ）で置換されたＢＴ、および／あるいは本明細書に記載された通り、ＢＴが経口摂取される栄養配合剤中で相乗的もしくは増強的抗微生物活性を示す、１種以上の抗生物質と組み合わせられたそのようなＢＴのいずれである、本明細書に記載された微粒子ＢＴの使用を企図する。
【０１３２】
非限定的理論によれば、ビタミン、ミネラル、アミノ酸、炭水化物を含む炭化水素、脂肪酸、油、植物栄養素、茶、ハーブもしくはハーブエキス、および／または他の栄養もしくは食物製品などの他の成分を伴う、そのような配合剤中の微粒子ＢＴの含有は、特定の実施形態において、ＢＴおよび場合により抗生物質の、そして／または追加的栄養成分の、宿主の消化管への生物学的利用度上昇（例えば、適切な対照に対して統計学的に有意な手法で）を促進する手法で、胃腸管内の微生物集団による栄養素取り込みの遮断または遅延をもたらすことができる。他の特定の実施形態において、経口微粒子ＢＴ（またはＡｓＴもしくはＳｂＴ）配合剤に含まれる特定のビタミン、ミネラル、アミノ酸、炭水化物を含む炭化水素、脂肪酸、油、植物栄養素、茶、ハーブもしくはハーブエキス、および／または他の栄養もしくは食物製品を変更することにより、ＢＴおよび場合により抗生物質の、そして／または追加的栄養成分の、宿主の消化管への生物学的利用度を低下させることができる（例えば、適切な対照に対して統計学的に有意な手法で）。
【０１３３】
例えば、病理学的な胃腸（ＧＩ）管感染が存在する場合には、感染性病原に対する抗微生物効果を発揮するために、ＧＩ管内での生物学的利用性を保持するように、ＢＴ化合物の腸管吸収を妨害する微粒子ＢＴ配合剤を投与することが望ましい場合がある。当業者は、栄養素のＧＩ管吸収を促進または妨害する複数のビタミン、ミネラル、アミノ酸、炭水化物を含む炭化水素、脂肪酸、油、植物栄養素、茶、ハーブおよび／またはハーブエキスを認識しているため、ＧＩ管の１種以上の成分（例えば、微粒子ＢＴ化合物、抗生物質、または１種以上の特定の栄養素）の存在を増加または減少させる配合剤を、本明細書に開示されている微粒子ＢＴ（またはＡｓＴもしくはＳｂＴ）を用いて調製することができる。
【０１３４】
本明細書に提供された他の特定の実施形態は、例えば人工肛門形成術を受けた患者において、糞便もしくは消化ガスの臭気を減少させるために経口送達用組成物に、または局所の微生物の存在に関連するわきが、足もしくは他の体臭を減少させるために他の局所送達用組成物に、ここに開示された微粒子ＢＴ化合物を含有させることを企図する。プランクトン性細菌およびバイオフィルム細菌をはじめとする複数の皮膚およびＧＩ管微生物集団は、本明細書に記載された増強性または相乗性抗生物質と共に存在する場合に、本明細書に記載された微粒子ＢＴ化合物をはじめとする、低濃度のそのような微粒子ＢＴ化合物に感受性がある。
【０１３５】
従って、特定の実施形態は、不適当な臭気の問題を減少または軽減する手法で、ＧＩ常在菌または皮膚常在菌の集団を減少させる（例えば、適切な対照に対して統計学的に有意な手法で）経口送達および局所送達用微粒子ＢＴ配合剤を企図する。経口および局所医薬配合剤が、以下に記載されており、これらおよび関連の実施形態は、本発明の微粒子ＢＴ配合剤に関連する利点、例えば適合性のある生物学的利用度および溶解度特性、ならびに低毒性を提示し、抗微生物性組成物の選択に影響を及ぼしうる他の因子は、本明細書の他の箇所に記載されており、例えばＵ．Ｓ．６，５８２，７１９号に見出すこともできる。
【０１３６】
例示的ＢＴ化合物であるＢｉｓＥＤＴを、ヒト検査対象において腋窩領域に適用すると（ＤＭＳＯ中の１ｍｇ／ｍＬ溶液を５０μＬ）、体臭が２〜３日間中和されることが示された。ヒト検査対象の足に適用された滑石粉末中のＢｉｓＥＤＴ混合物は、脚の臭気を実質的に減少させた。１ｍｇ／ｋｇ  ＢｉｓＥＤＴを５日間にわたり１日２回経口摂取した実験用マウスは、糞便菌叢数の９０％減少を示した。過剰のビスマスを用いて生成され、臭気除去剤としてチオール含有溶液へ添加することができる、本明細書に記載された微粒子ＢＴ調製物を含む、臭気を発散する任意のチオール含有溶液（例えば、鮭の油などの魚油）のための一般に有用な脱臭剤も企図する。得られた混合物は、微粒子ＢＴの抗微生物特性を保持している。他の企図される適用例としては、他の生物学的供給源の油またはバターなどの溶媒、例えばヘンプオイル、ティーツリーオイル、シアバター、亜麻仁油、魚油が挙げられ、特定の実施形態において、独立した、または相乗的な抗炎症性および／または疼痛減少性および／または他の有益な生理学的効果を有しうるオイルが挙げられる。
【０１３７】
医薬組成物および投与
特定の実施形態は、本明細書に開示された微粒子ＢＴ化合物を含有する医薬組成物にも関し、特定のそのような実施形態において、医薬組成物は、ＢＴ化合物が本明細書に記載された相乗的または増強的効果を示す抗生物質など、１種以上の抗生物質を更に含んでいてもよい。一実施形態において、動物、好ましくはホ乳類、最も好ましくはヒト患者に投与される場合に、１種以上のそのような微粒子ＢＴ化合物を、本明細書に開示された薬学的に許容しうる担体、賦形剤または希釈剤中で、薬学的量で含有する組成物が提供される。
【０１３８】
純粋な形態の、または適切な医薬組成物中の、微粒子ＢＴ化合物または薬学的に許容しうる塩の投与は、類似の用途に適う薬剤の許容された投与様式のいずれかを介して実施することができる。医薬組成物は、微粒子ＢＴ化合物を適切な薬学的に許容しうる担体、希釈剤または賦形剤と組み合わせることにより調製することができ、錠剤、カプセル、粉末、顆粒、軟膏、溶液、坐剤、注射液、吸入剤、ゲル、ミクロスフェア、およびエアロゾルなどの固体、半固体、液体または気体形態で、調製物に配合させてもよい。そのような医薬組成物を投与する典型的な経路としては、非限定的に、経口、局所、経皮、吸入、非経口、舌下、経直腸、経膣、および鼻内が挙げられる。本明細書で用いられる用語、非経口は、皮下注射、静脈内、筋肉内、髄腔内注射または輸注法を含む。医薬組成物は、組成物を患者に投与する際に、含有される有効成分が生物学的利用可能になるように配合される。対象または患者へ投与される組成物は、１つ以上の投与単位の形態をとっており、例えば錠剤は、単回投与単位であってもよく、エアロゾル形態の化合物の容器は、複数の投与単位を保持していてもよい。そのような投与形態を調製する実際の方法は、公知であるか、または当業者に明白であり、例えば、Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，  ２０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ａｎｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  ２０００）を参照されたい。投与される組成物は、任意の事象において、本明細書における教示に従って該当する疾患または状態の処置のための化合物またはその薬学的に許容しうる塩の薬学上効果的な量を含有する。
【０１３９】
本明細書において有用な医薬組成物は、任意の希釈剤または賦形剤をはじめとする薬学的に許容しうる担体も含有しており、それ自体では組成物を投与される個体に有害となる抗体を生成させず、過度の毒性を示さずに投与されうる任意の医薬剤を含む。薬学的に許容しうる担体としては、非限定的に、液体、例えば水、生理食塩水、グリセロールおよびエタノールなどが挙げられる。薬学的に許容しうる担体、希釈剤、および他の賦形剤の徹底した議論は、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ．  Ｃｏ．，  Ｎ．Ｊ．最新版）に示されている。
【０１４０】
医薬組成物は、固体または液体の形態であってもよい。一態様において、担体が粒子であるため、組成物は、例えば錠剤または粉末形態である。担体が液体であり、組成物が、例えば経口シロップ、注射液、または例えば吸入投与に有用なエアロゾルであってもよい。
【０１４１】
経口投与が意図されている場合、医薬組成物は、好ましくは固体または液体形態のいずれかであり、半固体、半液体、懸濁液およびゲル形態は、固体または液体のいずれかとして、本明細書で考慮される形態に含まれる。
【０１４２】
経口投与用の固体組成物としての医薬組成物を、粉末、顆粒、圧縮錠、丸薬、カプセル、チューインガム、オブラートなどの形態に配合させてもよい。そのような固体組成物は、典型的には１種以上の不活性希釈剤または食用担体を含有する。加えて、以下のものの１種以上が存在してもよい：結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、微結晶セルロース、トラガカントガムまたはゼラチン；賦形剤、例えばデンプン、ラクトースまたはデキストリン；崩壊剤、例えばアルギン酸、アルギン酸ナトリウム、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ、コーンスターチなど；潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウムまたはＳｔｅｒｏｔｅｘ；滑剤、例えばコロイド状二酸化ケイ素；甘味剤、例えば蜂蜜、スクロースまたはサッカリン、；着香剤、例えばペパーミント、サリチル酸メチルまたはオレンジ香料；および着色剤。
【０１４３】
医薬組成物が、カプセル、例えばゼラチンカプセルの形態である場合、それは、上記タイプの材料に加えて、液体担体、例えばポリエチレングリコールまたは油を含有していてもよい。
【０１４４】
医薬組成物は、液体形態、例えばエリキシル、シロップ、溶液、エマルジョンまたは懸濁液の形態であってもよい。液体は、二例として、経口投与用、または注射での送達用であってもよい。経口投与が意図されている場合、好ましい組成物は、本発明の化合物に加えて、甘味剤、防腐剤、染色剤／着色剤、および香味増強剤のうちの１種以上を含有する。注射による投与を意図した組成物において、界面活性剤、防腐剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、緩衝剤、安定化剤および等張剤のうちの１種以上を含んでいてもよい。
【０１４５】
液体医薬組成物は、それらが溶液、懸濁液などの形態のいずれであろうと、以下のアジュバントのうちの１種以上を含んでいてもよい：滅菌希釈剤、例えば注射用水、生理食塩溶液、好ましくは生理食塩水、リンガー液、等張性塩化ナトリウム、不揮発性油、例えば溶媒または懸濁媒体として作用しうる合成モノまたはジグリセリド、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の溶媒；抗菌剤、例えばベンジルアルコールまたはメチルパラベン；抗酸化剤、例えばアスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウム；キレート化剤、例えばエチレンジアミン四酢酸；緩衝剤、例えば酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩、ならびに張度調整剤、例えば塩化ナトリウムまたはデキストロース。非経口調製物は、ガラスまたはプラスチック製のアンプル、ディスポーザブルシリンジまたは反復投与用バイアルに封入されていてもよい。生理学的食塩水は、好ましいアジュバントである。注射用医薬組成物は、好ましくは滅菌性である。
【０１４６】
非経口または経口投与のいずれかが意図されている液体医薬組成物は、適切な投与量が得られるような、微粒子ＢＴ化合物量を含有していなければならない。典型的にはこの量は、組成物中に微粒子ＢＴ化合物を少なくとも０．０１％である。経口投与が意図されている場合、この量は、組成物の０．１〜約７０重量％で変動してもよい。好ましい経口医薬組成物は、ＢＴ化合物を約４％〜約５０％含有する。本発明による好ましい医薬組成物および調製物は、非経口投与単位が希釈前に微粒子ＢＴ化合物を０．０１〜１０重量％含有するように、調製される。
【０１４７】
医薬組成物は、局所投与を意図していてもよく、その場合、担体は、適宜、溶液、エマルジョン、軟膏またはゲル基剤を含んでいてもよい。基剤は、例えば以下のものうちの１種以上を含んでいてもよい：ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール、蜜ろう、鉱物油、シアバター、ティーツリーオイル、亜麻仁油、ヘンプオイル、または抗炎症性および／もしくは抗疼痛性もしくは他の有益効果を有することが公知のものを含む他の植物性油または植物油、鮭の油、または抗炎症性および／もしくは抗疼痛性もしくは他の有益効果を有することが公知のものを含む他の魚油、希釈剤、例えば水およびアルコール、ならびに乳化剤および安定化剤。増粘剤が、局所投与用の医薬組成物中に存在してもよい。経皮投与が意図されている場合、組成物は、経皮貼付剤またはイオン泳動性デバイスを含んでいてもよい。局所配合剤は、約０．１〜約１０％ｗ／ｖ（単位容量あたりの重量）の微粒子ＢＴ化合物濃度を含有してもよい。
【０１４８】
医薬組成物は、直腸内で融解して薬物を放出する、例えば坐剤の形態で、経直腸投与を意図されてもよい。経直腸投与用の組成物は、適切な非刺激性賦形剤として油性基剤を含有していてもよい。そのような基剤としては、非限定的に、ラノリン、ココアバター、およびポリエチレングリコールが挙げられる。
【０１４９】
医薬組成物は、固体または液体投与単位の物理的形態を改良する様々な材料を含んでいてもよい。例えば、組成物は、有効成分の周囲でコーティングシェルを形成する材料を含んでいてもよい。コーティングシェルを形成する材料は、典型的には不活性であり、例えば砂糖、シェラック、および他の腸溶性コーティング剤から選択してもよい。あるいは有効成分は、ゼラチンカプセルに包まれていてもよい。
【０１５０】
固体または液体形態の医薬組成物は、微粒子ＢＴ化合物に結合していて、それにより化合物の送達を支援する薬剤を含んでいてもよい。この能力において作用しうる適切な薬剤としては、モノクローナルもしくはポリクローナル抗体、タンパク質またはリポソームが挙げられる。しかし特定の企図される実施形態は、医薬組成物内へリポソームの含有を明白に除外する。
【０１５１】
医薬組成物は、エアロゾルとして投与されうる投与単位で構成されていてもよい。用語、エアロゾルは、コロイド性のものから加圧容器からなるシステムまで、様々なシステムを示すのに用いられる。送達が、有効成分を分配する液化もしくは圧縮ガス、または適切なポンプシステムによるものであってもよい。微粒子ＢＴ化合物のエアロゾルは、有効成分を送達するために、単相、二相、または三相系で送達されてもよい。エアロゾルの送達は、必要な容器、アクチベータ、バルブ、サブコンテナなどを含んでおり、それらが一緒になってキットを形成していてもよい。当業者は、過度の実験を行なわずに、好ましいエアロゾルを決定してもよい。
【０１５２】
医薬組成物は、医薬業界において周知の方法論により調製してもよい。例えば、注射による投与が意図された医薬組成物は、溶液を形成させるために本発明の化合物を滅菌蒸留水と混和することにより調製することができる。界面活性剤を添加して、均質溶液または懸濁液の形成を促進してもよい。界面活性剤は、水性送達系への化合物の溶解または均質懸濁を促進するために、本発明の化合物と非共有結合的に相互作用する化合物である。
【０１５３】
本明細書に記載された微粒子ＢＴ化合物、またはその薬学的に許容しうる塩は、治療上効果的な量で投与されるが、その量は、用いられる特異的化合物の活性；化合物の代謝安定性および作用期間；患者の年齢、体重、一般的健康状態、性別および食事；投与様式および時間；排泄速度；薬物の組み合わせ；特定の障害または状態の重症度；ならびに対象が受けている治療、をはじめとする様々な因子に応じて変動する。一般に治療上効果的な日用量は、（７０ｋｇのホ乳類では）約０．００１ｍｇ／ｋｇ（即ち、０．０７ｍｇ）〜約１００ｍｇ／ｋｇ（即ち、７．０ｇ）；好ましくは治療上効果的な量は、（７０ｋｇのホ乳類では）約０．０１ｍｇ／ｋｇ（即ち、７ｍｇ）〜約５０ｍｇ／ｋｇ（即ち、３．５ｇ）；より好ましくは治療上効果的な用量は、（７０ｋｇのホ乳類では）約１ｍｇ／ｋｇ（即ち、７０ｍｇ）〜約２５ｍｇ／ｋｇ（即ち、１．７５ｇ）である。
【０１５４】
本明細書において提供された効果的用量の範囲は、限定されるものではなく、好ましい用量範囲を表わす。しかし最も好ましい投与量は、関連の技術分野の当業者により理解され、決定されうるように、各対象へ適合させることになる（例えば、Ｂｅｒｋｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ，Ｔｈｅ  Ｍｅｒｋ  Ｍａｎｕａｌ  １６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｍｅｒｋ  ａｎｄ  Ｃｏ．，  Ｒａｈｗａｙ，  Ｎ．Ｊ．，  １９９２；Ｇｏｏｄｍａｎｅｔｎａ  ｅｄｓ．，  Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｉｌｍａｎ'ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｉｎｃ．，  Ｅｌｍｓｆｏｒｄ，  Ｎ．Ｙ．，（２００１）；Ａｖｅｒｙ’ｓ  Ｄｒｕｇ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ：  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，  ３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  ＡＤＩＳ  Ｐｒｅｓｓ，ＬＴＤ．，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，  ＭＤ．（１９８７），  Ｅｂａｄｉ，  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，  Ｌｉｔｔｌｅ，  Ｂｒｏｗｎ  ａｎｄ  Ｃｏ．，  Ｂｏｓｔｏｎ，  （１９８５）；  Ｏｓｏｌｃｉ  ａｌ．，  ｅｄｓ．，  Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  １８ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，  Ｅａｓｔｏｎ，  ＰＡ（１９９０）；Ｋａｔｚｕｎｇ，  Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，  Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ａｎｄ  Ｌａｎｇｅ，  Ｎｏｒｗａｌｋ，  ＣＴ（１９９２）参照）。
【０１５５】
所望なら、各処置に必要な総用量を、１日のうちに反復投与または単回投与により投与することができる。一般に処置は、化合物の最適用量よりも少ない少なめの用量で開始される。その後、その状況下で最適な効果に達するまで、投与量を少ない増分で増加させる。診断的医薬化合物または組成物を単独で、あるいは他の診断薬および／またはその病原用もしくはその病原の他の症状用の医薬品と一緒に投与することができる。微粒子ＢＴ化合物および／または組成物の投与のレシピエントは、任意の脊椎動物、例えばホ乳類であってもよい。ホ乳類のうち好ましいレシピエントは、霊長類（ヒト、類人猿、サルなど）、偶蹄目（ウマ、ヤギ、ウシ、ヒツジ、ブタなど）、げっ歯類（マウス、ラット、ウサギ、およびハムスターなど）、および食肉目（ネコ、およびイヌなど）のホ乳類である。トリのうち、好ましいレシピエントは、シチメンチョウ、ニワトリおよび同じ目の他の動物である。最も好ましいレシピエントは、ヒトである。
【０１５６】
局所適用の場合、効果的量の微粒子ＢＴ含有医薬組成物を標的領域、例えば皮膚表面、粘膜などに投与することが好ましい。この量は、使用が診断、予防または治療のいずれであろうと処理される領域、症状の重症度、および用いられる局所用ビヒクルの性質に応じて、一般に適用あたりのＢＴ化合物が約０．０００１ｍｇ〜約１ｇの範囲内であろう。好ましい局所調製物は軟膏であり、その場合、軟膏基剤１ｃｃあたり、約０．００１〜約５０ｍｇの有効成分が用いられる。医薬組成物は、経皮組成物または経皮送達デバイス（「貼付剤」）として配合することができる。そのような組成物は、例えば支持体、活性化合物のリザーバ、制御膜、ライナーおよび接触接着剤を含む。そのような経皮貼付剤は、所望なら本発明の化合物の連続的、脈動的、またはオンデマンドの送達を提供するために用いられてもよい。
【０１５７】
微粒子ＢＴ組成物は、当該技術分野で公知の手順を用いることにより患者に投与した後に有効成分の急速、持続、または遅延放出を提供するように、配合させることができる。制御放出性薬物送達システムは、浸透圧ポンプシステム、およびポリマーコートされたリザーバまたは薬物ポリマーマトリックス配合剤を含有する溶解システムを含む。制御放出システムの例は、米国特許第３，８４５，７７０号および同第４，３２６，５２５号、ならびにＰ．  Ｊ．  Ｋｕｚｍａ  ｅｔ  ａｌ，  Ｒｅｇｉｏｎａｌ  Ａｎｅｓｔｈｅｓｉａ  ２２（６）：５４３−５５１（１９９７）に示されており、それらの全てが参照により本明細書に組み入れられる。
【０１５８】
微粒子ＢＴ組成物は、局所、全身、および鼻から脳までの医学療法（ｎｏｓｅ−ｔｏ−ｂｒａｉｎ  ｍｅｄｉｃａｌ  ｔｈｅｒａｐｉｅｓ）のための鼻内薬物送達システムを介して送達することもできる。Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ（ＣＰＤ）（商標）技術、伝統的な鼻内スプレーボトル、吸入器またはネブライザは、嗅覚領域および副鼻腔を標的とすることにより薬物の効果的な局所および全身送達を提供することが、当業者に公知である。
【０１５９】
本発明は、特定の実施形態において、ヒトまたは動物の雌への投与に適した膣内シェルまたはコア型薬物送達デバイスにも関する。そのデバイスは、ＷＯ９８／５００１６に記載されたとおり、ポリマーマトリックス内の医薬有効成分で構成されて、シースに取り囲まれていてもよく、テストステロンを適用するのに用いられるデバイスに類似した１日回数で、化合物を実質的に０次パターンで放出することが可能であってもよい。
【０１６０】
現行の眼内送達方法としては、局所投与（目薬）、結膜下注射、眼球周囲注射、硝子体内注射、外科的移植およびイオン泳動法（小電流を用いて、体組織内へ、そして体組織を介してイオン化薬物を輸送する）が挙げられる。当業者は、最良に適した賦形剤を、安全で効果的な眼内投与用の化合物と組み合わせるであろう。
【０１６１】
最も適した経路は、処置される状態の性質および重症度に依存するであろう。当業者は、投与方法（経口、静脈内、吸入、皮下、経直腸など）、投与形態、適切な医薬賦形剤、および必要とする対象への化合物送達に関連する他の事柄の決定も熟知しているであろう。
【０１６２】
本明細書に記載された組成物および方法は、例えば熱傷用クリームとして、本明細書に記載されたような既存の創傷を処置する局所薬として、慢性創傷を予防するため、ＭＲＳＡ皮膚感染の処置のため、そして本明細書に開示され、本発明の開示を考慮して当業者に明白となる他の関連する適応症のためなど、急性および慢性創傷および創傷バイオフィルムの処置における用途を見出してもよい。
【０１６３】
本明細書に記載された特定の実施形態により、本明細書に記載された組成物および方法が有益な用途を見出しうる細菌の非限定的例としては、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓ．アウレウス）、ＭＲＳＡ（メチシリン耐性Ｓ．アウレウス）、スタフィロコッカス・エピデルミディス、ＭＲＳＥ（メチシリン耐性Ｓ．エピデルミディス）、マイコバクテリウム・ツベルクローシス、マイコバクテリウム・アビウム、シュードモナス・エルギノーサ、薬物耐性Ｐ．エルギノーサ、エシェリヒア・コリ、腸管毒素原性Ｅ．コリ、腸管出血性Ｅ．コリ、クレブシエラ・ニューモニエ、クロストリジウム・ディフィシル、ヘリコバクター・ピロリ、レジオネラ・ニューモフィラ、エンテロコッカス・フェカーリス、メチシリン感受性エンテロコッカス・フェカーリス、エンテロバクター・クロアカエ、サルモネラ・ティフィムリウム、プロテウス・ブルガリス、エルシニア・エンテロコリチカ、ビブリオ・コレレ、シゲラ・フレクスネリ、バンコマイシン耐性エンテロコッカス（ＶＲＥ）、バークホルデリア・セパシア菌群、フランシセラ・ツラレンシス、バチルス・アントラシス、エルシニア・ペスチス、シュードモナス・エルギノーサ、バンコマイシン感受性およびバンコマイシン耐性エンテロコッカス属（例えば、Ｅ．フェカーリス、Ｅ．フェシウム）、メチシリン感受性およびメチシリン耐性スタフィロコッカス属（例えば、Ｓ．アウレウス、Ｓ．エピデルミディス）およびアシネトバクター・バウマニー、スタフィロコッカス・ヘモリティカス、スタフィロコッカス・ホミニス、エンテロコッカス・フェシウム、ストレプトコッカス・ピオゲネス、ストレプトコッカス・アガラクチア、バチルス・アントラシス、クレブシエラ・ニューモニエ、プロテウス・ミラビリス、プロテウス・ブルガリス、エルシニア・エンテロコリチカ、ステノトロホモナス・マルトフィリア、ストレプトコッカス・ニューモニエ、ペニシリン耐性ストレプトコッカス・ニューモニエ、バークホルデリア・セパシア、バークホルデリア・マルチボランス、マイコバクテリウム・スメグマチスおよびＥ．クロアカエが挙げられる。
【０１６４】
本発明の特定の実施形態の実践は、反することが明記されない限り、当該技術の範囲内である微生物学、分子生物学、生化学、細胞生物学、ウイルス学および免疫学の技術の従来法、ならびに例示の目的で以下に示された複数の参考資料を用いる。そのような技術は、文献に完全に説明されている。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  １９８９）：Ｍａｎｉａｔｉｓ  ｅｔ  ａｌ．  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（１９８２）；ＤＮＡ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，  ｖｏｌ．  Ｉ  ＆  ＩＩ（Ｄ．  Ｇｌｏｖｅｒ，  ｅｄ．）；Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｎ．  Ｇａｉｔ  ｅｄ．，  １９８４）；Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ（Ｂ．  Ｈａｍｅｓ  ＆  Ｓ．  Ｈｉｇｇｉｎｓ  ｅｄｓ．，  １９８５）；Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ（Ｂ．  Ｈａｍｅｓ  ＆  Ｈｉｇｇｉｎｓ  ｅｄｓ．，  １９８４）；  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．  Ｆｒｅｓｈｎｅｙ  ｅｄ．，  １９８６）；Ｐｅｒｂａｌ，  Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ（１９８４）を参照されたい。
【０１６５】
文脈がその他のことを必要としていない限り、本明細書および特許請求の範囲の全体を通して、言語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」およびその変形例、例えば「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含んでいる」は、開かれた包括的な意味であり、「含むが、非限定的である」と解釈されなければならない。
【０１６６】
本明細書全体を通した「一実施形態」または「実施形態」または「態様」の参照は、その実施形態に関連して記載された特定の特色、構造または特徴が、本発明の少なくとも１つの実施形態に含まれることを意味している。本明細書全体の様々な箇所にある「一実施形態」または「実施形態」という熟語の出現は、必ずしも全てがその実施形態を参照しているのではない。更に、特定の特色、構造または特徴を、１つ以上の実施形態における任意の適切な手法において組み合わせてもよい。
【０１６７】
特定の実施形態は、対象における皮膚組織修復を促進することを含みうる、対象における急性もしくは慢性の創傷もしくは創傷バイオフィルムを処置するための、または１つの細胞もしくは複数の細胞における１種以上の細胞創傷修復活性を変化させるための方法、組成物およびキットに関する。細胞は一般に単一細胞を示すが、複数の細胞は１つを超える細胞を示す。細胞は、組織、器官または生物体全体を含んでいてもよい。更に細胞または複数の細胞は、インビボ、インビトロ、またはエクスビボで設置されていてもよい。細胞、組織および器官の培養を保持することは、当業者にとって日常的手順であり、その条件および培地は、容易に確認することができる（例えば、Ｆｒｅｓｈｎｅｙ，  Ｃｕｌｔｕｒｅ  ｏｆ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌｓ：  Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｂａｓｉｃ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，  Ｗｉｌｅｙ−Ｌｉｓｓ  ５ｔｈ  Ｅｄ．（２００５）；  Ｄａｖｉｓ，  Ｂａｓｉｃ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ，  Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ  ２ｎｄ  Ｅｄ．（２００２）参照）。
【０１６８】
本明細書に開示された通り、特定の実施形態は、対象における急性または慢性の創傷または創傷バイオフィルムを処置する方法に関し、その方法は、そのような方法において用いられる本明細書に記載されたＢＴ化合物（例えば、複数の実質的に単分散の微粒子の形態で提供される）を含み、場合により特定の更なる実施形態において、そのような方法に使用される本明細書に記載された抗生物質化合物も含む組成物を治療上効果的な量で対象に投与することを含み、例えばＢＴ化合物は、ＢｉｓＥＤＴもしくはＢｉｓＢＡＬ、または本明細書の表１に示された他の化合物、あるいはＤｏｍｅｎｉｃｏ他（１９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４１：１６９７；２００１  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４５：１４２１）ならびに／またはＵ．Ｓ  ＲＥ３７，７９３号、Ｕ．Ｓ．６，２４８，３７１号、同６，０８６，９２１号、および同６，３８０，２４８号に記載され、そして／または本明細書に開示された方法により調製された、他の任意のＢＴ剤である。他の特定の実施形態は、任意の天然表面を、本明細書に記載された微粒子ＢＴ化合物の１種以上を含む組成物と接触させることを含む方法に関し、そのような接触のステップは、直接の適用、コーティング、浸漬、イリゲーション、スプレー、塗布またはＢＴ組成物を天然表面に接触させるようにする他の方法のうちの１種以上を含んでいてもよい。
【０１６９】
ヒトまたは他のホ乳類対象などの対象への投与ステップは、当該技術分野で公知の任意手段により、例えば局所的（皮膚または任意の上皮組織表面、例えば腺組織または呼吸器管および／または胃腸管において存在しうる表面などへの直接投与を含む）、膣内、腹腔内、経口、非経口、静脈内、動脈内、経皮、舌下、皮下、筋肉内、経頬、鼻腔内、吸入、眼内、脂肪内、関節内または髄腔内へ実施してもよい。
【０１７０】
好ましい実施形態において、投与は、局所的に実施してもよく、局所使用のための医薬賦形剤または担体は、本明細書に記載されており、当該技術分野で公知である。
【０１７１】
先に言及された通り、本明細書に記載された本発明の特定の実施形態は、記載されたＢＴ化合物（例えば、ＢｉｓＥＤＴおよび／またはＢｉｓＢＡＬ）の局所配合剤に関し、その配合剤は、特定の更なる実施形態において、本明細書に記載された１種以上の抗生物質化合物、例えば、アミカシン、アンピシリン、セファゾリン、セフェピム、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、クリンダマイシン（または他のリンコサミド系抗生物質）、ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、ドキシサイクリン、ガチフロキサシン、ゲンタマイシン、イミペニム、レボフロキサシン、リネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標））、ミノサイクリン、ナフシリン、パロモマイシン、リファムピン、スルファメトキサゾール、トブラマイシンおよびバンコマイシン；またはカルバペネム系抗生物質、セファロスポリン系抗生物質、フルオロキノロン系抗生物質、グリコペプチド系抗生物質、リンコサミド系抗生物質、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン系抗生物質、および／またはアミノペニシリン系抗生物質および／またはアミノグリコシド系抗生物質、例えばアミカシン、アルベカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、ロドストレプトマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシンもしくはアプラマイシン、および／またはリポペプチド系抗生物質、例えばダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、またはオキサゾリジノン系抗生物質、例えばリネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標））を含んでいてもよい。これらおよび関連の配合剤は、動物、好ましくはホ乳類、最も好ましくはヒト、特に好ましい実施形態においては、急性または慢性の創傷を有するヒト、あるいはバイオフィルムに関連しうる（例えば、バイオフィルム形成を促進しうる細菌が存在する可能性があるがバイオフィルムはまだ検出可能でない）細菌感染を含む創傷、またはバイオフィルムなどの細菌感染もしくは細菌の存在を含む創傷を有するヒトへ局所投与された場合に、本明細書に開示された通り、薬学的に許容しうる担体、賦形剤または希釈剤中で、治療的量で、ＢＴ化合物（および場合により１種以上の抗生物質）を含んでいてもよい。
【０１７２】
純粋な形態または適切な医薬組成物中の、本明細書に記載されたＢＴ化合物またはその薬学的に許容しうる塩の局所投与は、類似の用途に適う薬物の許容される局所投与様式のいずれかを介して実施することができる。組成物の局所適用または投与は、好ましい実施形態において、組成物（例えば、局所配合剤）を、処置を受ける対象の皮膚および／または他の上皮組織表面（例えば、呼吸器管、胃腸管および／または腺上皮内層）と直接接触させることを含み、それは、１ヶ所以上の局在化された、または広く分布する皮膚および／または他の上皮組織表面部位であってもよく、一般には局所配合剤を、限定する必要はないが無傷の角質層または表皮層に取り囲まれた急性または慢性創傷部位と接触させることを指してもよく、例えば特定の実施形態は、局所適用として、損傷、擦り傷もしくは障害を負った皮膚、または手術を受けた対象の皮膚へ本明細書に記載された局所配合剤を投与することを企図しており、局所配合剤の接触が、角質層または表皮層だけでなく、例えば特定のタイプの創傷修復または創傷治癒または他の皮膚組織リモデリングを伴うような皮膚顆粒細胞、有棘細胞、および／もしくは基底細胞層で、そして／または真皮もしくは下層組織で行われてもよい。
【０１７３】
そのような皮膚組織修復は、それゆえ特定の好ましい実施形態において、例えば急性もしくは慢性創傷もしくは創傷バイオフィルムを予防もしくは寛解すること、または別の例として、皮膚創傷の裂開を予防もしくは寛解すること、または急性もしくは慢性創傷および／もしくは皮膚創傷裂が存在しうる場合の真皮創傷治癒を改善、促進、さもなければ強化すること、において所望となりうる真皮創傷治癒を含んでいてもよい。呼吸器管、胃腸管および／または腺上皮内層に存在する上皮組織表面への局所投与を企図する他の特定の実施形態は、同様に、本明細書に提供された局所調製物を、呼吸器管（例えば、気道、鼻咽頭および喉頭経路、気管、肺、気管支、細気管支、肺胞など）および／または胃腸管（例えば、口腔、食道、胃、腸、直腸、肛門など）に存在する１つ以上の上皮組織、および／または他の上皮表面へ送達するための、当該技術分野で公知の適切な経路による局所配合剤の投与を含んでいてもよい。
【０１７４】
特定の企図される実施形態によれば、局所投与は、開放型創傷への直接適用を含んでいてもよい。例えば、開放骨折または他の開放型創傷は、微生物感染を感受性にする手法で、更なる下部組織を外部環境へ暴露しうる皮膚内の裂傷を含んでいてもよい。そのような状況は、例えばIII型（重度）開放骨折をはじめとする特定のタイプの急性外傷の軍事創傷においては珍しいことではない。これらおよび関連の実施形態によれば、局所投与は、本明細書に記載されたＢＴ組成物をそのような障害を負った皮膚および／または他の上皮表面および／または他の組織、例えば筋肉、靭帯、腱、骨などの結合組織、血管などの循環組織、関連の神経組織、およびそのような開放型創傷内で暴露されうる任意の他の器官など、との直接接触によるものであってもよい。暴露されうる、つまりそのような直接接触が企図される他の組織の例としては、腎臓、膀胱、肝臓、膵臓、およびそのような有害な状態で開放型創傷に関連する日和見感染に暴露されうる任意の他の組織または器官が挙げられる。
【０１７５】
局所配合剤（例えば、医薬組成物）は、記載されたＢＴ化合物（例えば、ＲＥ３７，７９３号、Ｕ．Ｓ．６，２４８，３７１号、同６，０８６，９２１号、および／もしくは同６，３８０，２４８号に記載された化合物、ならびに／または本明細書に記載された微粒子ＢＴ懸濁液などの本開示により調製された化合物を含む）を組み合わせることにより調製してもよく、特定の関連する実施形態において、１種以上の所望の抗生物質（例えば、アミカシンなどのアミノグリコシド系抗生物質）を、ＢＴ化合物と別個にまたは一緒に、局所配合剤調製物中で用いられる適切な薬学的に許容しうる担体、希釈剤または賦形剤と組み合わせることにより調製してもよく、固体、半固体、ゲル、クリーム、コロイド、懸濁液もしくは液体、または他の局所適用形態、例えば粉末、顆粒、軟膏、溶液、ウォッシュ、ゲル、ペースト、プラスター、塗布剤、生体接着剤、ミクロスフェア懸濁液、およびエアロゾルスプレーなどで、調製物に配合させてもよい。
【０１７６】
これらおよび関連の実施形態の医薬組成物は、有効成分を組成物に含ませることができるように配合させ、そして特定の好ましい実施形態において、本明細書に記載されたＢＴ化合物を単独または１種以上の所望の抗生物質（例えば、カルバペネム系抗生物質、セファロスポリン系抗生物質、フルオロキノロン系抗生物質、グリコペプチド系抗生物質、リンコサミド系抗生物質、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン系抗生物質、およびアミノペニシリン系抗生物質、またはアミノグリコシド系抗生物質、例えばアミカシン、またはリファマイシン）と配合させるが、それらは、対象、例えばヒトなどのホ乳類、特定の好ましい実施形態において、急性もしくは慢性創傷を有するヒト患者、または急性もしくは慢性創傷もしくは創傷バイオフィルムもしくは創傷裂開を有するリスクの高いヒト患者（例えば、肥満および／または糖尿病の個体）の、急性または慢性創傷および場合により周辺皮膚への、ＢＴ化合物および／または抗生物質化合物を含有する配合剤の局所投与時に生物学的利用性となるように、同時または連続していずれかの順序で適用してもよい。本明細書に開示された特定の実施形態は、同時または連続していずれかの順序であってもよい投与など、ＢＴ化合物および抗生物質の局所投与を企図するが、本発明は、それに限定されず、他の実施形態において、抗生物質の投与経路に関して別個のＢＴ化合物投与経路を明白に企図する。つまり、抗生物質は、経口、静脈内、または本明細書に記載された他の任意の投与経路により投与してもよく、ＢＴ化合物は、抗生物質に用いられる経路とは独立した経路により投与してもよい。非限定的な例として、ＢＴ化合物は、本明細書に提供された通り局所投与してもよく、抗生物質は、同時にまたは連続して（そして任意の順序で）異なる経路により、例えば、経口、静脈内、経皮、皮下、筋肉内、および／または他の任意の投与経路により投与してもよい。
【０１７７】
本明細書に記載された局所配合剤は、スプレー、イリゲーション、浸漬および／または塗布することにより、治療上効果的な量の消毒薬または創傷治癒剤（そして場合により抗生物質）を、創傷部位、例えば真皮線維芽細胞などの皮膚細胞へ送達する。好ましい配合を、所望の部位、例えば局所創傷部位、慢性創傷、上皮組織表面または投与が意図された他の部位と接触させてもよく、そのような配合剤はそれゆえ、薬物組成物の皮膚浸透性を検査する当該技術分野で公知の、任意の複数の確立された方法論により決定されうる、皮膚への即時の浸透性を示してもよい（例えば、Ｗａｇｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２  Ｊ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．  １１８：５４０およびそれに引用された参考資料；Ｂｒｏｎａｕｇｈ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８５  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．  ７４：６４；  Ｂｏｓｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９８  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｂｉｏｍｅｄ．  Ａｎａｌ．  １７：４９３−４９９；  Ｂｏｓｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９６  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｂｉｏｍｅｄ．  Ａｎａｌ．  １９９６  １４：１０１５−２３；  Ｂｏｎｆｅｒｏｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９９  Ｐｈａｒｍ．  Ｄｅｖ．  Ｔｅｃｈｎｏｌ．  ４：４５−５３；  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｓｋｉｎ  Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ（Ｋｅｍｐｐａｉｎｅｎ  ＆  Ｒｅｉｆｅｎｒａｔｈ，  Ｅｄｓ），  ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｆｌｏｒｉｄａ，  １９９０，  ｐｐ３５−５９内のＦｒａｎｔｚ，  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ  ｆｏｒ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｓｋｉｎ  ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ  ｆｏｒ  ｓｋｉｎ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ；Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｓｙｓｔｅｍｉｃ  Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｃｈｉｅｎ  ＹＷ，  Ｅｄ），  Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９８７，  １２７−１５８内のＴｏｊｏ，  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ  ａｐｐａｒａｔｕｓ；Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ：  Ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ，  Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９８３，  ２３４−２９５内のＢａｒｒｙ，  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  ｓｔｕｄｙｉｎｇ  ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ参照）。
【０１７８】
対象または患者の皮膚へ投与される組成物、およびそのような組成物を含む配合剤は、特定の実施形態において、１種以上の投与単位の形態をとってもよいが、例えば液体充填カプセルまたはアンプルが、単一投与単位を含んでいてもよく、エアロゾル形態の本明細書に記載された局所配合剤の容器が、複数の投与単位を保持していてもよい。そのような投与形態を調製する実際の方法は、公知であるか、または当業者に明白であり、例えば、Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，  ２０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ａｎｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  ２０００）を参照されたい。投与される組成物または配合剤は、任意の事象において、本発明の教示に従って本明細書に提供された消毒薬および／もしくは治癒促進化合物（例えば、ＢＴ化合物）、またはその薬学的に許容しうる塩の治療上効果的な量を含有する。
【０１７９】
先に言及された通り、本発明の局所配合剤は、非常に様々な形態のいずれをとってもよく、例えば、クリーム、ローション、溶液、スプレー、ゲル、軟膏、ペーストなどが挙げられ、そして／またはリポソーム、ミセルおよび／もしくはミクロスフェアを含有するように調製されていてもよい。例えば、米国特許第７，２０５，００３号を参照されたい。例えばクリームは、医薬および化粧品配合剤の技術分野で周知の通り、粘液または半固体エマルジョンであり、水中油または油中水のいずれかである。クリーム基剤は、水洗可能であり、油相、乳化剤および水相を含有する。油相は、「内」相とも呼ばれ、一般にはワセリンおよび脂肪アルコール、例えばセチルアルコールまたはステアリルアルコールで構成される。水相は必ずではないが通常は、容量が油相を超えていて、一般に吸湿剤を含有する。クリーム配合剤中の乳化剤は、一般に非イオン性、陰イオン性、陽イオン性または両性界面活性剤である。
【０１８０】
化粧剤の送達に好ましいローションは、摩擦せずに皮膚表面へ適用される調製物であり、典型的には活性剤を含む固体粒子が水またはアルコール基剤中に存在する液体または半液体調製物である。ローションは通常、固体の懸濁液であり、好ましくは水中油型の液体油性エマルジョンを含む。ローションは、流動性の高い組成物を適用する容易さから、大きな体表面積を処置するための、本明細書における好ましい配合剤である。ローション中の不溶性物質が超微粒子化されていることが、一般に好ましい。ローションは、典型的には懸濁剤を含有していて、より良好な分散物を生成する懸濁剤に加え、活性成分を局在化させて皮膚との接触時にを保持するのに有用な化合物、例えばメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムなどを含有する。
【０１８１】
溶液は、１種以上の化学物質（溶質）を液体に溶解して、溶解された物質の分子を溶媒の分子に分散させることにより調製される、均質混合物である。溶液は、他の薬学的に許容しうる、そして／または化粧品として許容しうる化学薬品を含有することで、溶質を緩衝、安定化または保存してもよい。溶液を調製するのに用いられる溶媒の一般的例は、エタノール、水、プロピレングリコールまたは他の任意の薬学的に許容しうる、そして／もしくは化粧品として許容しうるビヒクルである。
【０１８２】
ゲルは、半固体の懸濁タイプの系である。単相ゲルは、典型的には水性であるが、好ましくはアルコール、そして任意の油も含有する担体液全体に実質的に均質に分配された有機巨大分子を含有する。好ましい「有機巨大分子」、即ちゲル化剤は、化学的に架橋されたポリマー、例えば架橋アクリル酸ポリマー、例えばポリマーの「カルボマー」類、例えばカルボキシポリアルキレンであってもよく、それらはＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）の商品名で商業的に得てもよい。同じく特定の実施形態において好ましいのは、親水性ポリマー、例えば、ポリエチレンオキシド、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン・コポリマー、およびポリビニルアルコール；セルロース系ポリマー、例えばヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタラート、およびメチルセルロース；ガム、例えばトラガカントガムおよびキサンタンガム；アルギン酸ナトリウム；ならびにゼラチンであってもよい。均質なゲルを調製するために、アルコールまたはグリセリンなどの分散剤を添加することができ、研和、機械的混合もしくは撹拌、またはそれらの組み合わせにより、ゲル化剤を分散させることができる。
【０１８３】
同じく当該技術分野で周知である軟膏は、典型的にはワセリンまたは他の石油誘導体を基にした半固体調製物である。用いられる具体的な軟膏基剤は、当業者により理解された通り、複数の所望の特徴、例えばエモリエント性などを提供するものである。他の担体またはビヒクルと同様に、軟膏基剤は、不活性、安定性、非刺激性、そして非感作性でなければならない。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，  １９ｔｈ  Ｅｄ（Ｅａｓｔｏｎ，  Ｐａ．：Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，１９９５）のｐ１３９９−１４０４に説明される通り、軟膏基剤は、４つの分類：油性基剤；乳化性基剤；エマルジョン基剤；および水溶性基剤にグループ化することができる。油性の軟膏基剤は、例えば、植物油、動物から得られる脂肪、および石油から得られる半固体炭化水素を含む。吸収性軟膏基剤としても公知である乳化性軟膏基剤は、水をほとんど、または全く含有せず、例えばヒドロキシステアリン硫酸、無水ラノリン、および親水性ワセリンを含む。エマルジョンの軟膏基剤は、油中水（Ｗ／Ｏ）エマルジョンまたは水中油（Ｏ／Ｗ）エマルジョンのいずれかであり、例えば、セチルアルコール、モノステアリン酸グリセリル、ラノリン、およびステアリン酸を含む。好ましい水溶性軟膏基剤は、様々な分子量のポリエチレングリコールから調製される（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎの前著を参照）
【０１８４】
ペーストは、半固体投与形態であり、その活性剤は、適切な基剤で懸濁されている。ペーストは、基剤の性質に応じて、脂肪ペーストまたは単相水性ゲルで生成されたペーストに分別される。脂肪ペースト中の基剤は、一般にワセリンまたは親水性ワセリンなどである。単相水性ゲルで生成されたペーストは、一般にカルボキシメチルセルロースなどを基剤として組み込んでいる。
【０１８５】
配合剤は、リポソーム、ミセルおよびミクロスフェアを用いて調製してもよい。リポソームは、脂質二重層を含む１つ（ユニラメラ）または複数（マルチラメラ）の脂質壁を有する微視的ベシクルであり、本明細書においては、本明細書に記載された局所配合剤の１種以上の成分、例えば消毒薬、創傷治癒／皮膚組織／上皮組織修復−促進化合物（例えば、微粒子ＢＴ化合物、場合により１種以上の抗生物質を伴う）または特定の担体もしくは賦形剤を、脂質膜表面に封入および／またはそれを脂質膜表面に吸着させていてもよい。本明細書のリポソーム調製物は、陽イオン性（正電荷）、陰イオン性（負電荷）、および中性の調製物を含む。陰イオン性リポソームは、直ちに入手できる。例えば、Ｎ［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリエチルアンモニウム（ＤＯＴＭＡ）リポソームは、商品名Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ（登録商標）（ＧＩＢＣＯ  ＢＲＬ，Ｇｒａｎｄ  Ｉｓｌａｎｄ，Ｎ．Ｙ．）として入手できる。同様に陰イオン性および中性リポソームも、例えばＡｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ（Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，  ＡＬ）から直ちに入手でき、または直ちに入手できる材料を用いて容易に調製することができる。そのような材料としては、とりわけ、ホスファチジルコリン、コレステロール、ホスファチジルエタノールアミン、ジオレイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジオレイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、およびジオレイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）が挙げられる。これらの材料は、適切な比でＤＯＴＭＡと混合することもできる。これらの材料を用いたリポソームの製造方法は、当該技術分野で周知である。
【０１８６】
ミセルは、極性頭部基が外側の球状シェルを形成し、疎水性炭化水素鎖がその球状物の中心に向かって配置してコアを形成するように配列された界面活性剤分子で構成されていることが、当該術分野で公知である。ミセルは、十分に高い濃度の界面活性剤を含有する水溶液中で形成するため、ミセルは自然に得られる。ミセルを形成するのに有用な界面活性剤としては、非限定的に、ラウリン酸カリウム、オクタンスルホン酸ナトリウム、デカンスルホン酸ナトリウム、ドデカンスルホン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ドクサートナトリウム、デシルトリメチルアンモニウムブロミド、ドデシルトリメチルアンモニウムブロミド、テトラデシルトリメチルアンモニウムブロミド、テトラデシルトリメチルアンモニウムクロリド、ドデシルアンモニウムクロリド、ポリオキシ−８ドデシルエーテル、ポリオキシ−１２ドデシルエーテル、ノノキシノール１０、およびノノキシノール３０が挙げられる。
【０１８７】
同様にミクロスフェアが、本明細書に記載された局所配合剤に組み込まれていてもよい。リポソームおよびミセルと同様に、ミクロスフェアは、本質的に本発明の配合剤の１種以上の成分を封入している。それらは必ずではないが一般に、脂質、好ましくは帯電した脂質、例えばリン脂質から形成されている。脂質性ミクロスフェアの調製は、当該技術分野で周知である。
【０１８８】
当業者に公知の様々な添加剤が、局所配合剤に含まれていてもよい。例えば比較的少量のアルコールを含む溶媒を、特定の配合剤成分を可溶化するのに用いてもよい。特定の局所配合剤では、または特に重度の皮膚損傷、例えば術後の急性もしくは慢性創傷または術後の真皮創傷裂開の場合には、局所配合剤中に添加された皮膚浸透増強剤を含むことが望ましい場合がある。適切な増強剤の例としては、非限定的に、エーテル、例えばジエチレングリコールモノエチルエーテル（Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ（登録商標）として市販）およびジエチレングリコールモノメチルエーテル；界面活性剤、例えばラウリン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、セチルトリメチルアンモニウムブロミド、塩化ベンザルコニウム、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ（登録商標）（２３１、１８２、１８４）、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）（２０、４０、６０、８０）、およびレシチン（米国特許第４，７８３，４５０号）；アルコール、例えばエタノール、プロパノール、オクタノール、ベンジルアルコールなど；ポリエチレングリコールおよびそのエステル、例えばポリエチレングリコールモノラウラート（ＰＥＧＭＬ；例えば、米国特許第４，５６８，３４３号参照）；アミドおよび他の窒素化合物、例えば尿素、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、２−ピロリドン、１−メチル−２−ピロリドン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、およびトリエタノールアミン；テルペン；アルカノン；ならびに有機酸、特にクエン酸およびコハク酸が挙げられる。Ａｚｏｎｅ（登録商標）およびスルホキシド、例えばＤＭＳＯおよびＣ１０ＭＳＯを用いてもよいが、あまり好ましくはない。
【０１８９】
最も好ましい皮膚浸透増強剤は、典型的には「可塑化」増強剤と呼ばれるそれらの親油性共増強剤（ｃｏ−ｅｎｈａｎｃｅｒ）、即ち、約１５０〜１０００ダルトンの範囲内の分子量、約１重量％未満、好ましくは約０．５重量％未満、最も好ましくは約０．２重量％未満の水溶性を有する増強剤である。可塑化増強剤のヒルデブランド溶解度パラメータは、約２．５〜約１０の範囲内、好ましくは約５〜約１０の範囲内である。好ましい親油性増強剤は、脂肪エステル、脂肪アルコール、および脂肪エーテルである。特異的で最も好ましい脂肪酸エステルの例としては、ラウリン酸メチル、オレイン酸エチル、プロピレングリコールモノラウラート、プロピレングリセロールジラウラート、グリセロールモノラウラート、グリセロールモノオレアート、イソプロピルｎ−デカノアート、およびオクチルドデシルミリスタートが挙げられる。脂肪アルコールとしては、例えば、ステアリルアルコールおよびオレイルアルコールが挙げられ、脂肪エーテルとしては、ジオールまたはトリオール、好ましくはＣ２−Ｃ４アルカンジオールまたはトリオールが１または２個の脂肪エーテル置換基で置換されている化合物が挙げられる。追加的な皮膚浸透増強剤は、局所薬物送達の当業者に公知であり、そして／または関連の文献に記載されている。例えば、Ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ  Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎ  Ｅｎｈａｎｃｅｒｓ  ｅｄｓ．  Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．（ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，  ＦＬ，  １９９５）を参照されたい。
【０１９０】
先に同定されたものに加えて、様々な他の添加剤が、本発明の特定の実施形態による局所配合剤に含まれていてもよい。これらには、非限定的に、抗酸化剤、収れん剤、香料、防腐剤、エモリエント剤、顔料、染色剤、吸湿剤、噴射剤、および日焼け防止剤に加え、存在が化粧品として、薬品として、または他の面で望ましい他の種類の材料が挙げられる。本発明の特定の実施形態の配合剤に含まれる任意の添加剤の典型的な例は、以下の通りである：防腐剤、例えばソルビン酸塩；溶媒、例えばイソプロパノールおよびプロピレングリコール；収れん剤、例えばメントールおよびエタノール；エモリエント剤、例えばポリアルキレンメチルグルコシド；吸湿剤、例えばグリセリン；乳化剤、例えばステアリン酸グリセロール、ステアリン酸ＰＥＧ−１００、ポリグリセリル−３ヒドロキシラウリルエーテル、およびポリソルベート６０；ソルビトールおよび他のポリヒドロキシアルコール、例えばポリエチレングリコール；日焼け防止剤、例えばメトキシケイヒ酸オクチル（Ｐａｒｓｏｌ  ＭＣＸとして市販）およびブチルメトキシベンゾイルメタン（商品名Ｐａｒｓｏｌ  １７８９として市販）；抗酸化剤、例えばアスコルビン酸（ビタミンＣ）、α−トコフェロール（ビタミンＥ）、β−トコフェロール、γ−トコフェロール、δ−トコフェロール、ε−トコフェロール、ζ１−トコフェロール、ζ２−トコフェロール、η−トコフェロール、およびレチノール（ビタミンＡ）；エッセンシャルオイル、セラミド、必須脂肪酸、鉱物油、湿潤剤および他の界面活性剤、例えばＢＡＳＦ（Ｍｔ  Ｏｌｉｖｅ，  ＮＪ）から入手できる親水性ポリマーのＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）シリーズ、植物油（例えば、大豆油、パーム油、シアバターの液体分画、ヒマワリ油）、動物油（例えば、ペルヒドロスクアレン）、鉱物油、合成油、シリコーン油またはワックス（例えば、シクロメチコーンおよびジメチコーン）、フッ素化油（一般にペルフルオロポリエーテル）、脂肪アルコール（例えば、セチルアルコール）、およびワックス（例えば、ビーズワックス、カルナバワックス、およびパラフィンワックス）；スキンフィールモディファー（ｓｋｉｎ−ｆｅｅｌ  ｍｏｄｉｆｉｅｒ）；ならびに増粘剤および構造体（ｓｔｒｕｃｔｕｒａｎｔｓ）、例えば膨潤性粘土および商品名Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）として商業的に得てもよい架橋カルボキシポリアルキレン。
【０１９１】
他の添加剤としては、皮膚の水分量低下を遅延させることにより、皮膚の調子を整えて（特に角質層内の皮膚の上層）柔軟性を保持し、そして／または皮膚を保護する材料などの有益な薬剤が挙げられる。そのようなコンディショナーおよび保湿剤としては、例として、ピロリジンカルボン酸およびアミノ酸；有機抗微生物剤、例えば２，４，４’−トリクロロ−２−ヒドロキシジフェニルエーテル（トリクロサン）および安息香酸；抗炎症剤、例えばアセチルサリチル酸およびグリチルレチン酸；抗脂漏剤、例えばレチノイン酸；血管拡張剤、例えばニコチン酸；メラニン形成阻害剤、例えばコウジ酸；ならびにその混合物が挙げられる。有利には含まれる化粧品として活性のある他の薬剤として、例えばα−ヒドロキシ酸、α−ケト酸、ポリマーヒドロキシ酸、保湿剤、コラーゲン、海洋性エキス、および抗酸化剤、例えばアスコルビン酸（ビタミンＣ）、α−トコフェロール（ビタミンＥ）もしくは他のトコフェロール、例えば先に記載されたもの、およびレチノール（ビタミンＡ）、ならびに／または化粧品として許容しうるその塩、エステル、アミド、もしくは他の誘導体が存在してもよい。追加的な化粧剤としては、例えばＷＯ９４／０００９８号およびＷＯ９４／００１０９号に記載された、皮膚組織内での酸素供給の改善が可能なものが挙げられる。日焼け防止剤が、含まれていてもよい。
【０１９２】
他の実施形態が、本発明の特定の実施形態の配合剤での処置を促進する様々な非発癌性、非刺激性治癒材料を含んでいてもよい。そのような治癒材料は、栄養素、ミネラル、ビタミン、電解質、酵素、ハーブ、植物エキス、蜂蜜、腺もしくは動物エキス、または配合剤に添加して真皮の治癒を促進しうる安全な治療剤を含んでいてもよい。これらの様々な添加剤の量は、化粧品分野で従来から用いられる量であり、例えば局所配合剤の総重量の約０．０１％〜約２０％の範囲内である。
【０１９３】
本発明の特定の実施形態の配合剤は、不透明化剤、芳香剤、着色剤、ゲル化剤、増粘剤、安定化剤、界面活性剤などの従来の添加剤を含んでいてもよい。貯蔵時の腐敗を予防するため、即ち、酵母およびカビなどの微生物の発育を阻害するために、他の薬剤、例えば抗微生物剤を添加してもよい。適切な抗微生物剤は、典型的にはｐ−ヒドロキシ安息香酸のメチルおよびプロピルエステル（例えば、メチルおよびプロピルパラベン）、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、イミド尿素、およびそれらの組み合わせから選択される。配合剤は、投与される感染防止性急性もしくは慢性創傷治癒および皮膚組織修復−促進化合物から、または組成物の他の成分から生じる皮膚刺激または皮膚損傷の可能性を最小化または排除する刺激緩和性添加剤を含有していてもよい。適切な刺激緩和性添加剤として、α−トコフェロール；モノアミンオキシダーゼ阻害剤、詳細にはフェニルアルコール、例えば２−フェニル−１−エタノール；グリセリン；サリチル酸塩；アスコルビン酸塩；イオノフォア、例えば、モネンシン；両親媒性アミン；塩化アンモニウム；Ｎ−アセチルシステイン；カプサイシン；およびクロロキンが挙げられる。刺激緩和性添加剤は、存在するならば、典型的には配合剤の約２０重量％以下、より典型的には約５重量％以下を表す、刺激または皮膚損傷を緩和するのに効果的な濃度で、局所配合剤に組み込まれていてもよい。
【０１９４】
局所配合剤が、消毒／創傷治癒／抗バイオフィルム／皮膚組織修復−促進化合物（例えば、ＢＴ化合物、好ましくは本明細書に提供された実質的に均質な微粒子として、そして場合により本明細書に記載された１種以上の相乗性抗生物質と組み合わせて）に加えて、局所投与に適した治療上効果的な量の１種以上の追加の薬理学的活性剤を含有していてもよい。そのような薬剤は、例えば国際特許公開第ＷＯ９４／０００９８号およびＷＯ９４／００１０９号に記載された通り、皮膚組織内の酸素供給の改善が可能なリン脂質と、酸素添加されたフルオロカーボンまたはフルオロカーボン化合物の混合物とからなる非対称ラメラ凝集物を含んでいてもよい。
【０１９５】
本発明の局所配合剤に組み込まれうる、つまり局所適用されうる適切な薬理学的活性剤は、非限定的に以下のものを含んでいてもよい：着色または非着色の加齢によるシミ、角化症、およびしわを改善または根治する薬剤；抗微生物剤；抗菌剤、かゆみ止めおよび抗乾燥症剤；抗炎症剤；局所麻酔および鎮痛剤；コルチコステロイド；レチノイド（例えば、レチノイン酸；ビタミン、ホルモン、および代謝拮抗剤）。局所用の薬理学的活性剤の幾つかの例としては、アシクロビル、アンホテリシン、クロルヘキシジン、クロトリマゾール、ケトコナゾール、エコナゾール、ミコナゾール、メトロニダゾール、ミノサイクリン、ナイスタチン、ネオマイシン、カナマイシン、フェニトイン、ｐ−アミノ安息香酸エステル、メトキシケイヒ酸オクチル、サリチル酸オクチル、オキシベンゾン、ジオキシベンゾン、トコフェロール、酢酸トコフェリル、硫化セレニウム、ピリチオン亜鉛、ジフェンヒドラミン、パラモキシン、リドカイン、プロカイン、エリスロマイシン、テトラサイクリン、クリンダマイシン、クロタミトン、ヒドロキノンおよびそのモノメチルおよびベンジルエーテル、ナプロキセン、イブプロフェン、クロモリン、レチノイン酸、レチノール、パルミチン酸レチニル、酢酸レチニル、コールタール、グリセオフルビン、エストラジオール、ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾン２１−酢酸、ヒドロコルチゾン１７−吉草酸、ヒドロコルチゾン１７−酪酸、プロゲステロン、ベタメタゾン吉草酸、ベタメタゾンジプロピオン酸、トリアムシノロンアセトニド、フルオシノニド、クロベタゾールプロピオン酸、ミノキシジル、ジピリダモール、ジフェニルヒダントイン、過酸化ベンゾイル、および５−フルオロウラシルが挙げられる。同じく先に言及された通り、特定の実施形態は、抗生物質、例えばカルバペネム系抗生物質、セファロスポリン系抗生物質、フルオロキノロン系抗生物質、グリコペプチド系抗生物質、リンコサミド系抗生物質、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン系抗生物質、アミノペニシリン系抗生物質、またはアミノグリコシド系抗生物質、例えばアミカシンなどの配合剤への含有を企図する。
【０１９６】
薬理学的に許容しうる担体が、特定の本発明の実施形態の局所配合剤に組み込まれていてもよく、当該技術分野で従来から用いられる任意の担体であってもよい。例としては、水、低級アルコール、高級アルコール、蜂蜜、多価アルコール、単糖類、二糖類、多糖類、糖アルコール、例えば、グリコール（２−炭素）、グリセロール（３−炭素）、エリトリトールおよびトレイトール（４−炭素）、アラビトール、キシリトールおよびリビトール（５−炭素）、マンニトール、ソルビトール、ダルシトールおよびイジトール（６−炭素）、イソマルトール、マルチトール、ラクチトールおよびポリグリシトール、炭化水素油、油脂、ワックス、脂肪酸、シリコーン油、非イオン性界面活性剤、イオン性界面活性剤、シリコーン界面活性剤、ならびにそのような担体の水系混合物およびエマルジョン系混合物が挙げられる。
【０１９７】
本発明の局所配合剤の実施形態は、所望の結果を実現するのに必要な頻度および量での処置を必要とするあらゆる急性または慢性創傷部位（例えば、創傷そのものおよび周辺組織、例えば感染により影響を受けていないと思われる、またはその他の通常もしくは健常と思われる周辺組織）または皮膚領域または他の上皮組織表面（例えば、胃腸管、呼吸器管、腺組織）へ、定期的に適用してもよい。処置頻度は、皮膚（または上皮組織）の状態（例えば、急性もしくは慢性創傷、または外科的切除により生じた裂開に見出されうる他の皮膚創傷、または他のタイプの皮膚創傷）、皮膚（または他の組織）の障害もしくは悪化の程度、使用者の皮膚（または他の組織）の応答性、特定の実施形態における有効成分の強度（例えば、本明細書に記載された創傷治癒／消毒／抗バイオフィルム／皮膚組織修復−促進化合物、例えば、ＢＴ化合物および場合により１種以上の追加の薬学的有効成分、例えば抗生物質、例えばアミカシンまたは他の抗生物質）、皮膚（または他の上皮表面含有組織）の適切な層へ有効成分を送達するのに用いられるビヒクルの効力、包帯または他のドレッシングもしくはクロージングとの物理的接触により配合剤が除去される容易性、汗または他の内在的もしくは外在的液体による除去、ならびに対象または患者の活動レベルまたは生活様式への簡便性に依存する。
【０１９８】
活性物質、例えば本明細書に記載されたＢＴ化合物の消毒／抗バイオフィルム／創傷治癒／皮膚組織修復−促進組成物の典型的濃度は、例えば組成物の総重量に基づいて０．００１〜３０重量％から、約０．０１〜５．０％まで、より好ましくは約０．１〜２．０％までの範囲内であってもよい。代表的な一例として、本発明のこれらの実施形態の組成物は、約１．０ｍｇ／ｃｍ２皮膚〜約２０．０ｍｇ／ｃｍ２皮膚の割合で急性もしくは慢性創傷および／または皮膚へ適用されてもよい。局所配合剤の代表的な例としては、非限定的に、エアロゾル、アルコール、無水基剤（例えば口紅および粉末）、水溶液、クリーム、エマルジョン（油中水または水中油のいずれかのエマルジョンを含む）、脂肪、フォーム、ゲル、ヒドロアルコール性溶液、リポソーム、ローション、ミクロエマルジョン、軟膏、油、有機溶媒、ポリオール、ポリマー、粉末、塩、シリコーン誘導体、およびワックスが挙げられる。局所配合剤は、例えば、キレート化剤、コンディショニング剤、エモリエント剤、賦形剤、吸湿剤、保護剤、増粘剤、またはＵＶ吸収剤を含んでいてもよい。当業者には、列挙されたもの以外の配合剤を本発明の実施形態に用いうることが理解されるであろう。
【０１９９】
キレート化剤が、局所配合剤に場合により含まれていてもよく、化粧品組成物中での使用に適した任意の薬剤から選択されてもよく、Ｃａ２＋、Ｍｎ２＋、またはＭｇ２＋などの二価陽イオン金属に結合する能力を有する任意の天然または合成化学薬品を含んでいてもよい。キレート化剤の例としては、非限定的に、ＥＤＴＡ、ＥＤＴＡ二ナトリウム、ＥＧＴＡ、クエン酸、およびジカルボン酸が挙げられる。
【０２００】
コンディショニング剤も、局所配合剤に場合により含まれていてもよい。皮膚コンディショニング剤の例としては、非限定的に、アセチルシステイン、Ｎ−アセチルジヒドロスフィンゴシン、アクリラート／ベヘニルアクリラート／ジメチコーンアクリラート・コポリマー、アデノシン、環状アデノシン一リン酸、アデノシン一リン酸、アデノシン三リン酸、アラニン、アルビューメン、海藻エキス、アラントインおよび誘導体、アロエバルバデンシスエキス、アルミニウムＰＣＡ、アミログルコシダーゼ、アルブチン、アルギニン、アズレン、ブロメライン、粉末バターミルク、ブチレングリコール、カフェイン、グルコン酸カルシウム、カプサイシン、カルボシステイン、カルノシン、β−カロテン、カゼイン、カタラーゼ、セファリン、セラミド、カモミラ・レキュチタ （マトリカリア)花エキス、コレカルシフェロール、コレステリルエステル、ココベタイン、コエンザイムＡ、加工コーンスターチ、クリスタリン、シクロエトキシメチコーン、システインＤＮＡ、シトクロムＣ、ダルトシド、デキストラン硫酸、ジメチコーンコポリオール、ヒアルロン酸ジメチルシラノール、ＤＮＡ、エラスチン、エラスチンアミノ酸、上皮成長因子、エルゴカルシフェロール、エルゴステロール、エチルヘキシルＰＣＡ、フィブロネクチン、葉酸、ゼラチン、グリアジン、β−グルカン、グルコース、グリシン、グリコーゲン、糖脂質、糖タンパク質、グリコサミノグリカン、グリコスフィンゴリピド、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、水素化タンパク質、タンパク質加水分解物、ホホバ油、ケラチン、ケラチンアミノ酸、およびキネチン、ラクトフェリン、ラノステロール、ラウリルＰＣＡ、レシチン、リノール酸、リノレン酸、リパーゼ、リシン、リゾチーム、麦芽エキス、マルトデキストリン、メラニン、メチオニン、無機塩、ナイアシン、ナイアシンアミド、燕麦アミノ酸、オリザノール、パルミトイル加水分解タンパク質、パンクレアチン、パパイン、ＰＥＧ、ペプシン、リン脂質、フィトステロール、胎盤の酵素、胎盤の脂質、ピリドキサル５−リン酸、ケルセチン、酢酸レゾルシノール、リボフラビン、ＲＮＡ、サッカロミセス溶解質エキス、シルクアミノ酸、スフィンゴリピド、ステアラミドプロピルベタイン、パルミチン酸ステアリル、トコフェロール、酢酸トコフェリル、リノール酸トコフェリル、ユビキノン、ヴィティス・ヴィニヘラ(グレープ)シードオイル、小麦アミノ酸、キサンタンガム、およびグルコン酸亜鉛が挙げられる。当業者により直ちに理解されうる通り、先に列記されたもの以外の皮膚コンディショニング剤を、開示された組成物またはそれらにより提供される調製物と組み合わせてもよい。
【０２０１】
局所配合剤が、１種以上のエモリエント剤を場合により含んでもよく、その例としては、非限定的に、アセチル化ラノリン、アセチル化ラノリンアルコール、アクリラート／Ｃ１０−３０アルキルアクリラート・クロスポリマー、アクリラートコポリマー、アラニン、海藻エキス、アロエバルバデンシスエキスまたはゲル、アルテア・オフィシナリスエキス、オクテニルコハク酸デンプンアルミニウム、ステアリン酸アルミニウム 、アンズ(プルヌス・アルメニアカ)核油、アルギニン、アスパラギン酸アルギニン、アルニカ・モンタナエキス、アスコルビン酸、パルミチン酸アスコルビル、アスパラギン酸、アボカド(パーシア・グラティッシマ)油、硫酸バリウム、バリア(ｂａｒｒｉｅｒ)スフィンゴリピド、ブチルアルコール、蜜ろう、ベヘニルアルコール、β−シトステロール、ＢＨＴ、バーチ(ベチュラ・アルバ)バークエキス、ルリジサ(ボラゴ・オフィシナリス)エキス、２−ブロモ−２−ニトロプロパン−１，３−ジオール、ナギイカダ(ルスカス・アキュレアツス)エキス、ブチレングリコール、カレンデュラ・オフィシナリスエキス、カレンデュラ・オフィシナリス油、キンセンカ(ユーホルビア・セリフェラ)ワックス、キャノーラ油、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、カルダモン(エレッタリア・カルダモムム)油、カルナバ(コペルニシア・セリフェラ)ワックス、カラゲナン(コンドラス・クリスパス)、ニンジン(ダウカス・キャロッタ・サティバ)油、ヒマシ(リシナス・コミュニス)油、セラミド、セレシン、セテアレス−５、セテアレス−１２、セテアレス−２０、オクタン酸セテアリル、セテス−２０、セテス−２４、酢酸セチル、オクタン酸セチル、パルミチン酸セチル、カモミール(アンテミス・ノビリス)油、コレステロール、コレステロールエステル、ヒドロキシステアリン酸コレステリル、クエン酸、サルビア(サルビア・スクラレア)油、ココア(テオブロマカカオ)バター、ココ−カプリル酸／カプリン酸、ココナッツ(ココス・ヌシフェラ)油、コラーゲン、コラーゲンアミノ酸、コーン(ジー・メイス)油、脂肪酸、オレイン酸デシル、デキストリン、ジアゾリジニル尿素、ジメチコーンコポリオール、ジメチコノール、アジピン酸ジオクチル、コハク酸ジオクチル、ヘキサカプリル酸／ヘキサカプリン酸ジペンタエリトリチル、ＤＭＤＭヒダントイン、ＤＮＡ、エリトリトール、エトキシジグリコール、リノール酸エチル、ユーカリ・グロブルス油、月見草(オエノセラ・ビエンニス)油、脂肪酸、果糖、ゼラチン、ワイルドゼラニウム油、グルコサミン、グルタミン酸グルコース、グルタミン酸、グリセレス−２６、グリセリン、グリセロール、ジステアリン酸グリセリル、ヒドロキシステアリン酸グリセリル、ラウリン酸グリセリル、リノール酸グリセリル、ミリスチン酸グリセリル、オレイン酸グリセリル、ステアリン酸グリセリル、ステアリン酸グリセリルＳＥ、グリシン、ステアリン酸グリコール、ステアリン酸グリコールＳＥ、グリコサミノグリカン、グレープ(ヴィティス・ヴィニヘラ)シードオイル、ヘーゼル(コリラス・アメリカーナ)ナッツ油、ヘーゼル(コリラス・アベラナ)ナッツ油、ヘキシレングリコール、蜂蜜、ヒアルロン酸、ハイブリッドベニバナ(カーサマス・ティンクトリアス)油、水���ヒマシ油、水素化ココグリセリド、水素化ココナッツ油、水素化ラノリン、水素化レシチン、水素化パームグリセリド、水素化パーム核油、水素化大豆油、水素化獣脂グリセリド、水素化植物油、加水分解コラーゲン、加水分解エラスチン、加水分解グリコサミノグリカン、加水分解ケラチン、加水分解大豆タンパク質、ヒドロキシル化ラノリン、ヒドロキシプロリン、イミダゾリジニル尿素、ヨードプロピニルブチルカルバマート、ステアリン酸イソセチル、ステアロイルステアリン酸イソセチル、オレイン酸イソデシル、イソステアリン酸イソプロピル、ラノリン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸イソプロピル、イソステアラミドＤＥＡ、イソステアリン酸、乳酸イソステアリル、ネオペンタン酸イソステアリル、ジャスミン(ジャスミナム・オフィシナレ)油、ホホバ(バクサス・チネンシス)油、ケルプ、ククイ(アレウリテス・モルカナ)ナッツ油、ラクタミドＭＥＡ、ラネス−１６、酢酸ラネス−１０、ラノリン、ラノリン酸、ラノリンアルコール、ラノリン油、ラノリンワックス、ラベンダー(ラバンデュラ・アングスティフォリア)油、レシチン、レモン(シトラス・メディカ・リモナム)油、リノール酸、リノレン酸、マカダミア・テルニフォリア・ナッツ油、ステアリン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、マルチトール、カツミレ(カモミラ・レキュチタ)油、セスキステアリン酸メチルグルコース、メチルシラノールＰＣＡ、微結晶ワックス、鉱物油、ミンクオイル、モルティエレラ油、乳酸ミリスチル、ミリスチン酸ミリスチル、プロピオン酸ミリスチル、ジカプリル酸／ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、オクチルドデカノール、ミリスチン酸オクチルドデシル、ステアロイルステアリン酸オクチルドデシル、ヒドロキシステアリン酸オクチル、パルミチン酸オクチル、サリチル酸オクチル、ステアリン酸オクチル、オレイン酸、オリーブ(オレア・エウロパエア)油、オレンジ(シトラス・アウランチウム・デュルシス)油、ヤシ(エラエイス・グイネンシス)油、パルミチン酸、パンテチン、パンテノール、パンテニルエチルエーテル、パラフィン、ＰＣＡ、モモ(プルヌス・ペルシカ)核油、ピーナッツ(アラキス・ヒポガエ)油、ＰＥＧ−８  Ｃ１２  １８エステル、ＰＥＧ−１５コカミン、ＰＥＧ−１５０ジステアリン酸、イソステアリン酸ＰＥＧ−６０グリセリル、ステアリン酸ＰＥＧ−５グリセリル、ステアリン酸ＰＥＧ−３０グリセリル、ＰＥＧ−７水添ヒマシ油、ＰＥＧ−４０水添ヒマシ油、ＰＥＧ−６０水添ヒマシ油、セスキステアリン酸ＰＥＧ−２０メチルグルコース、ＰＥＧ−４０ペルオレイン酸ソルビタン、ＰＥＧ−５大豆ステロール、ＰＥＧ−１０大豆ステロール、ステアリン酸ＰＥＧ−２、ステアリン酸ＰＥＧ−８、ステアリン酸ＰＥＧ−２０、ステアリン酸ＰＥＧ−３２、ステアリン酸ＰＥＧ−４０、ステアリン酸ＰＥＧ−５０、ステアリン酸ＰＥＧ−１００、ステアリン酸ＰＥＧ−１５０、ペンタデカラクトン、ペパーミント(メンタ・ピペリタ)油、ワセリン、リン脂質、ポリアミノ糖縮合物、ジイソステアリン酸ポリグリセリル−３、ポリクオタニウム−２４、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０、ポリソルベート８５、ミリスチン酸カリウム、パルミチン酸カリウム、ソルビン酸カリウム、ステアリン酸カリウム、プロピレングリコール、ジカプリル酸／ジカプリン酸プロピレングリコール、ジオクタン酸プロピレングリコール、ジペラルゴン酸プロピレングリコール、ラウリン酸プロピレングリコール、ステアリン酸プロピレングリコール、ステアリン酸ＳＥプロピレングリコール、ＰＶＰ、ジパルミチン酸ピリドキシン、クオタニウム−１５、クオタニウム−１８ヘクトライト、クオタニウム−２２、レチノール、パルミチン酸レチニル、コメ(オリザ・サティバ)ヌカ油、ＲＮＡ、ローズマリー(ロスマリヌス・オフィシナリス)油、バラ油、ベニバナ(カーサマス・ティンクトリアス)油、セージ(サルビア・オフィシナリス)油、サリチル酸、白檀(サンタラム・アルバム)油、セリン、血清タンパク質、ゴマ(セサマム・インディカム)油、シアバター(ブチロスパーマム・パーキー)、シルクパウダー、コンドロイチン硫酸ナトリウム、ＤＮＡナトリウム、ヒアルロン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム、ナトリウムＰＣＡ、ポリグルタミン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、水溶性コラーゲン、ソルビン酸、ラウリン酸ソルビタン、オレイン酸ソルビタン、パルミチン酸ソルビタン、セスキオレイン酸ソルビタン、ステアリン酸ソルビタン、ソルビトール、大豆(グリシンソヤ)油、スフィンゴリピド、スクワラン、スクアレン、ステアリン酸ステアラミドＭＥＡ、ステアリン酸、ステアロキシジメチコーン、ステアロキシトリメチルシラン、ステアリルアルコール、グリチルレチン酸ステアリル、ヘプタン酸ステアリル、ステアリン酸ステアリル、ヒマワリ(ヘリアンサス・アナス)種子油、スイートアーモンド(プルーナス・アミグダラス・デュルシス）油、合成蜜ろう、トコフェロール、酢酸トコフェリル、リノレイン酸トコフェリル、トリベヘニン、ネオペンタン酸トリデシル、ステアリン酸トリデシル、トリエタノールアミン、トリステアリン、尿素、植物油、水、ワックス、小麦(トリチカム・ブルガレ)胚芽油、およびイランイラン(カナンガ・オドラータ)油が挙げられる。
【０２０２】
幾つかの実施態様において、局所配合剤は、適切な賦形剤を含有していてもよいが、それは典型的には、皮膚に対して高い親和力を有していて、耐容性が良好で、安定していて、容易に利用できる粘稠度を生じなければならない。適切な局所賦形剤およびビヒクルは、当業者により、特にＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．１８，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，  Ｅａｓｔｏｎ，  Ｐａ．（１９９０）の特に第８７章など、当該技術分野の多くの標準的教書の１つを参照されながら、特定の用途に関して日常的に選択することができる。場合により１種以上の吸湿剤も、局所配合剤に含まれる。吸湿剤の例としては、非限定的に、アミノ酸、コンドロイチン硫酸、ジグリセリン、エリトリトール、フルクトース、グルコース、グリセリン、グリセロール、グリコール、１，２，６−ヘキサントリオール、蜂蜜、ヒアルロン酸、水素化蜂蜜、水素化デンプン水解物、イノシトール、ラクチトール、マルチトール、マルトース、マンニトール、天然保湿因子、ＰＥＧ−１５ブタンジオール、ポリグリセリルソルビトール、ピロリドンカルボン酸塩、カリウムＰＣＡ、プロピレングリコール、グルクロン酸ナトリウム、ナトリウムＰＣＡ、ソルビトール、スクロース、トレハロース、尿素、およびキシリトールが挙げられる。
【０２０３】
特定の実施態様は、1種以上の追加の皮膚保護剤を含有する局所配合剤を企図する。皮膚保護剤の例としては、非限定的に、海藻エキス、アラントイン、水酸化アルミニウム、硫酸アルミニウム、ベタイン、カメリアシネンシス葉エキス、セレブロシド、ジメチコーン、グルクロノラクトン、グリセリン、カオリン、ラノリン、麦芽エキス、鉱物油、ワセリン、グルコン酸カリウム、およびタルクを挙げることができる。当業者には、先に列挙されたもの以外の皮膚保護剤も、開示された本発明の組成物またはそれにより提供された調製物と組み合わせてよいことが、直ちに理解されるであろう。
【０２０４】
界面活性剤も、所望なら、本明細書において企図された特定の局所配合剤に含まれていてもよく、陽イオン性、陰イオン性、双性イオン性もしくは非イオン性界面活性剤、またはそれらの混合物などの、化粧品組成物における使用に適した任意の天然または合成界面活性剤から選択することができる(Ｒｏｓｅｎ，  Ｍ．，  “Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ  ａｎｄ  Ｉｎｔｅｒｆａｃｉａｌ  Ｐｈｅｎｏｍｅｎａ，”  Ｓｅｃｏｎｄ    Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ．，  １９８８，  Ｃｈａｐｔｅｒ  １ｐ４３１参照)。陽イオン性界面活性剤の例としては、非限定的に、ＤＭＤＡＯまたは他のアミンオキシド、長鎖第一級アミン、ジアミン、ポリアミンおよびそれらの塩、第四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン化された長鎖アミン、ならびに第四級化ポリオキシエチレン化された長鎖アミンを挙げることができる。陰イオン性界面活性剤の例としては、非限定的に、ＳＤＳ；カルボン酸の塩(例えば石鹸)；スルホン酸の塩、硫酸の塩、リン酸およびポリリン酸エステル；アルキルホスファート；モノアルキルホスファート(ＭＡＰ)；およびペルフルオロカルボン酸の塩を挙げることができる。双性イオン性界面活性剤の例としては、コカミドプロピルヒドロキシスルタイン(ＣＡＰＨＳ)、およびｐＨ感受性があり配合剤の至適ｐＨを設計する際に特別な注意を必要とするその他のもの(すなわち、アルキルアミノプロピオン酸、カルボン酸イミダゾリン、およびベタイン)またはｐＨ感受性でないもの(例えば、スルホベタイン、スルタイン) を挙げることができる。非イオン性界面活性剤の例としては、非限定的に、アルキルフェノールエトキシラート、アルコールエトキシラート、ポリオキシエチレン化されたポリオキシプロピレングリコール、ポリオキシエチレン化されたメルカプタン、長鎖カルボン酸エステル、アルカノールアミド、第三級アセチレングリコール、ポリオキシエチレン化されたシリコーン、Ｎ−アルキルピロリドン、およびアルキルポリグリコシダーゼを挙げることができる。湿潤剤、鉱物油または他の界面活性剤、例えば非イオン性洗剤またはＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）シリーズ（ＢＡＳＦ，  Ｍｔ  Ｏｌｉｖｅ，  ＮＪ）のうちの１種以上などの薬剤も、例えば非限定的理論により、微粒子懸濁液中のＢＴ微粒子の凝集を防止するために、含まれていてもよい。界面活性剤の任意の組み合わせを、許容しうる。特定の実施形態は、相溶性である、即ち混合の際に感知できるほどに沈殿する錯体を形成しない、少なくとも１種の陰イオン性界面活性剤と少なくとも１種の陽イオン性界面活性剤、または少なくとも１種の陽イオン性界面活性剤と少なくとも１種の双性イオン性界面活性剤を含んでいてもよい。
【０２０５】
同じく特定の局所配合剤中に存在しうる増粘剤の例としては、非限定的に、アクリルアミドコポリマー、アガロース、アミロペクチン、ベントナイト、アルギン酸カルシウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボマー、カルボキシメチルキチン、セルロースガム、デキストリン、ゼラチン、水素化獣脂、ヒドロキシエチルセルロース(ｈｙｄｒｏｘｙｔｈｅｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルデンプン、アルギン酸マグネシウム、メチルセルロース、微結晶セルロース、ペクチン、様々なＰＥＧ類、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリビニルアルコール、様々なＰＰＧ類、アクリル酸ナトリウムコポリマー、カラゲナンナトリウム、キサンタンガム、および酵母β−グルカンが挙げられる。先に列挙されたもの以外の増粘剤を、本発明の実施態様に用いてもよい。
【０２０６】
本明細書において企図された特定の実施態様によれば、局所配合剤は、１種以上の日焼け防止剤またはＵＶ吸収剤を含んでいてもよい。紫外線(ＵＶＡおよびＵＶＢ)吸収特性が望ましい場合、そのような薬剤は、例えば、ベンゾフェノン、ベンゾフェノン−１、ベンゾフェノン−２、ベンゾフェノン−３、ベンゾフェノン−４、ベンゾフェノン−５、ベンゾフェノン−６、ベンゾフェノン−７、ベンゾフェノン−８、ベンゾフェノン−９、ベンゾフェノン−１０、ベンゾフェノン−１１、ベンゾフェノン−１２、サリチル酸ベンジル、ブチルＰＡＢＡ、ケイヒ酸エステル、シノキサート、ＤＥＡ−メトキシケイヒ酸、メチルケイヒ酸ジイソプロピル、エチルジヒドロキシプロピルＰＡＢＡ、ジイソプロピルケイヒ酸エチル、メトキシケイヒ酸エチル、エチルＰＡＢＡ、ウロカニン酸エチル、ジメトキシケイヒ酸オクタン酸グリセリル、グリセリルＰＡＢＡ、サリチル酸グリコール、ホモサレート、ｐ−メトキシケイヒ酸イソアミル、チタン、亜鉛、ジルコニウム、ケイ素、マンガンおよびセリウムの酸化物、ＰＡＢＡ、ＰＡＢＡエステル、Ｐａｒｓｏｌ  １７８９、ならびにサリチル酸イソプロピルベンジル、ならびにそれらの混合物を含んでいてもよい。当業者には、列挙されたもの以外の日焼け防止剤およびＵＶ吸収剤または保護剤を本発明の特定の実施形態で用いてもよいことが、理解されよう。
【０２０７】
本明細書において開示された局所配合剤は、典型的には、約２．５〜約１０．０の間のｐＨ値で効果的である。好ましくは、組成物のｐＨは、下記のｐＨ範囲またはその近似値である：約ｐＨ５．５〜約ｐＨ８．５、約ｐＨ５〜約ｐＨ１０、約ｐＨ５〜約ｐＨ９、約ｐＨ５〜約ｐＨ８、約ｐＨ３〜約ｐＨ１０、約ｐＨ３〜約ｐＨ９、約ｐＨ３〜約ｐＨ８、および約ｐＨ３〜約ｐＨ８．５。最も好ましくは、ｐＨは、約ｐＨ７〜約ｐＨ８である。当業者は、ｐＨを許容しうる範囲に調整するために、適切なｐＨ調整成分を本発明の組成物に添加してもよい。配合剤の組成および貯蔵条件により、ｐＨが本来の値から変動しうることが認識されれば、「約」の付いた具体的なｐＨが、任意の所定の時間に実測されたｐＨが具体的な値よりも０．７、０．６、０．５、０．４、０．３、０．２または０．１ｐＨ単位以下だけ上下しうる配合剤を含むことを、当業者は理解するであろう。
【０２０８】
クリーム、ローション、ゲル、軟膏、ペーストなどを、罹患した表面に延ばして、優しく擦り込んでもよい。溶液は、同じ方式で適用してもよいが、より典型的には、点滴器、綿棒などを用いて適用され、罹患領域に慎重に適用されるであろう。この適用レジメンは、創傷の重症度および初期処置への応答性など、直ちに決定されうる多くの要因に依存するであろうが、通常は、継続的な１日１回以上の適用を含むであろう。当業者は、投与される配合剤の適量、投与方法および反復の割合を直ちに決定することができる。一般に本発明のこれらおよび関連の実施形態の配合剤は、週に１または２またはそれを超える回数から、１日１、２、３、４回またはそれを超える回数までの範囲で適用されることが企図される。
【０２０９】
同じく先に議論された通り、こうして本明細書において有用な局所配合剤は、任意の適切な希釈剤または賦形剤をはじめとする薬学的に許容しうる担体も含有しており、それ自体では組成物を投与される対象に有害ではない任意の医薬剤を含み、過度の毒性を示さずに投与することができる。薬学的に許容しうる担体としては、非限定的に、液体、例えば水、生理食塩水、グリセロールおよびエタノールが挙げられ、粘度増強剤(例えば、バルサムモミ樹脂)またはコロジオンもしくはニトロセルロース溶液など被膜形成剤も含むことができる。薬学的に許容しうる担体、希釈剤、および他の賦形剤の徹底した議論は、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ．  Ｃｏ．，  Ｎ．Ｊ．最新版）に示されている。
【０２１０】
局所配合剤が、例えばゼラチンカプセルなど、ゲル−または液体−充填カプセルの形態である場合、それは先のタイプの材料に加えて、ポリエチレングリコールまたは油のような液体担体を含有していてもよい。本発明の特定の実施形態の液体医薬組成物は、溶液、懸濁液または他の類似形態のいずれでああろうと、以下のものを１種以上含んでいてもよい：滅菌希釈剤、例えば注射用水、生理食塩溶液、好ましくは生理学的生理食塩水、リンガー液、等張性塩化ナトリウム、溶媒もしくは懸濁媒体として働くことができる合成のモノグリセリドもしくはジグリセリドなどの不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の溶媒；抗菌剤、例えばベンジルアルコールまたはメチルパラベン；追加の抗酸化剤、例えばアスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウム；キレート化剤、例えばエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）；緩衝剤、例えば酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩、および張度調整剤、例えば塩化ナトリウムまたはデキストロース。
【０２１１】
局所投与の場合、担体は、適切には、溶液、エマルジョン、軟膏またはゲル基剤を含んでいてもよい。基剤は、例えば、以下のものを１種以上含んでいてもよい：ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール、蜜ろう、鉱物油、希釈剤、例えば水およびアルコール、ならびに乳化剤および安定化剤。増粘剤が、局所投与のための医薬または化粧品組成物中に存在してよい。経皮投与が意図されている場合、組成物は、経皮貼付剤またはイオン泳動デバイスを含んでいてもよい。局所配合剤は、約０．１〜約１０％ｗ／ｖ(重量／単位容量)の、本発明の特定の実施形態の化合物の濃度を含んでいてもよい。局所配合剤は、クリーム、ローション、溶液、スプレー、ゲル、軟膏、ペーストなどの形態で提供されてよく、そして／あるいはリポソーム、ミセル、ミクロスフェアおよび／または他の微粒子もしくはナノ粒子送達要素を含有していてもよい。局所配合剤は、創傷部位へ直接投与することができる時間放出または持続放出性粒子またはペレット、例えば徐放性エチレン酢酸ビニルポリマー（例えば、Ｅｌｖａｘ（登録商標）４０、Ａｌｄｒｉｃｈ，  Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，  ＷＩ）ペレットの形態で提供されてもよい。
【０２１２】
局所配合剤は、皮膚組織修復促進化合物に結合し、それにより皮膚上皮細胞（例えば、角化細胞）および／または線維芽細胞への送達を支援する薬剤を含んでいてもよい。この能力において作用しうる適切な薬剤は、包接化剤、例えばシクロデキストリンを含み；他の薬剤は、タンパク質またはリポソームを含んでいてもよい。
【０２１３】
本発明の特定の実施形態の局所配合剤は、エアロゾルとして投与されうる投与単位の形態で提供されてよい。用語エアゾルは、コロイド性のものから、加圧包装からなるシステムまでの範囲内の様々なシステムを示すために用いられる。送達は、液化ガスもしくは圧縮ガスによるか、または有効成分を分散させる適切なポンプシステムによるものであってもよい。本発明の特定の実施形態の化合物のエアゾルは、有効成分(複数を含む)を送達するために、単相、二相、または三相系で送達されてもよい。エアゾルの送達は、必要な容器、アクチベータ、バルブ、サブコンテナなどを含んでおり、一緒になってキットを形成していてもよい。当業者は、過度の実験を行なわずに、皮膚または創傷部位へ局所配合剤を送達するための好ましいエアロゾルを決定してもよい。
【０２１４】
局所配合剤は、医薬の技術分野において周知の方法論により調製してもよい。例えば、創傷部位または皮膚へスプレー、ウォッシュまたはリンスとして投与される予定の医薬組成物は、本明細書に記載されたＢＴ消毒／創傷治癒／抗バイオフィルム／皮膚組織修復−促進化合物を、溶液を形成するための滅菌蒸留水と混和することにより、調製することができる。界面活性剤を添加して、均質溶液または懸濁液の形成を促進してもよい。界面活性剤は、水性送達系中での化合物の溶解または均質な懸濁を促進するために、抗酸化性活性化合物と非共有結合的に相互作用する化合物である。
【０２１５】
局所配合剤中で用いられるＢＴ消毒／創傷治癒／抗バイオフィルム／皮膚組織修復−促進化合物、またはその薬学的に許容しうる塩は、治療上効果的な量で投与されるが、その量は、創傷部位の性質（関連する場合）、用いられる特異的ＢＴ化合物の活性（アミノグリコシド系抗生物質、例えばアミカシンなど抗生物質の配合物を含む、または含まないものなど）；化合物の代謝安定性および作用期間；対象の年齢、体重、一般的健康状態、性別、皮膚のタイプ、免疫状態および食事；投与様式および時間；排泄速度；薬物の組み合わせ；皮膚組織修復が望ましい特定の皮膚創傷の重症度；ならびに対象が受けている治療、をはじめとする様々な因子に応じて変動する。一般に治療上効果的な日用量は、（７０ｋｇのホ乳類では）約０．００１ｍｇ／ｋｇ（即ち、０．０７ｍｇ）〜約１００ｍｇ／ｋｇ（即ち、７．０ｇ）；好ましくは治療上効果的な用量は、（７０ｋｇのホ乳類では）約０．０１ｍｇ／ｋｇ（即ち、７ｍｇ）〜約５０ｍｇ／ｋｇ（即ち、３．５ｇ）；より好ましくは治療上効果的な用量は、（７０ｋｇのホ乳類では）約１ｍｇ／ｋｇ（即ち、７０ｍｇ）〜約２５ｍｇ／ｋｇ（即ち、１．７５ｇ）である。
【０２１６】
本明細書において提供された効果的用量の範囲は、限定されるものではなく、好ましい用量範囲を表わす。しかし最も好ましい投与量は、関連の技術分野の当業者により理解され、決定しうる通り、各対象に適合させることになる（例えば、Ｂｅｒｋｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，  Ｔｈｅ  Ｍｅｒｋ  Ｍａｎｕａｌ  １６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｍｅｒｋ  ａｎｄ  Ｃｏ．，  Ｒａｈｗａｙ，  Ｎ．Ｊ．，１９９２；Ｇｏｏｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ｅｄｓ．，  Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ'ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，  １０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｉｎｃ．，  Ｅｌｍｓｆｏｒｄ，  Ｎ．Ｙ．，（２００１）；Ａｖｅｒｙ’ｓ  Ｄｒｕｇ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ：  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，  ３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  ＡＤＩＳ  Ｐｒｅｓｓ，Ｌｔｄ．，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，  ＭＤ．（１９８７），  Ｅｂａｄｉ，  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，  Ｌｉｔｔｌｅ，  Ｂｒｏｗｎ  ａｎｄ  Ｃｏ．，  Ｂｏｓｔｏｎ，  （１９８５）；  Ｏｓｏｌｃｉ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  １８ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，  Ｅａｓｔｏｎ，  ＰＡ（１９９０）；Ｋａｔｚｕｎｇ，  Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，  Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ａｎｄ  Ｌａｎｇｅ，Ｎｏｒｗａｌｋ，  ＣＴ（１９９２）参照）。
【０２１７】
所望なら、各処置に必要な総用量を、その日のうちに反復投与または単回投与により投与することができる。特定の好ましい実施形態は、１日あたりに局所配合剤を単回適用することを企図する。一般に、明白な実施形態において、処置は、化合物の最適用量よりも少ない少なめの用量で開始させてもよい。その後、その状況下で最適な効果に達するまで、投与量を少ない増分で増加させる。
【０２１８】
局所配合剤を単独で、あるいは皮膚創傷に向けた、または他の関連する症状もしくは病因的因子に向けた他の処置および／または医薬品と一緒に投与することができる。例えば、先に言及された通り、局所配合剤は、レチノイン酸を更に含んでいてもよい。別の例として、局所配合剤は、本明細書に記載された皮膚組織修復促進化合物を１種以上含んでいてもよく、または異なる細胞創傷修復活性を有するそのような化合物を２種以上含んでいてもよい。
【０２１９】
本明細書に記載された局所配合剤のレシピエントは、任意の脊椎動物、例えばホ乳類であってもよい。ホ乳類のうち好ましいレシピエントは、霊長類（ヒト、類人猿、サルなど）、偶蹄目（ウマ、ヤギ、ウシ、ヒツジ、ブタなど）、げっ歯類（マウス、ラット、ウサギ、およびハムスターなど）、および食肉目（ネコ、およびイヌなど）のホ乳類である。トリのうち、好ましいレシピエントは、シチメンチョウ、ニワトリおよび同じ目の他の動物である。最も好ましいレシピエントは、ヒトであり、特に好ましいのは、急性もしくは慢性の創傷、またはバイオフィルムを含む創傷を有するヒトである。
【０２２０】
局所適用に関しては、本明細書に記載された実施形態によれば、ＢＴ化合物消毒／創傷治癒／抗バイオフィルム／皮膚組織修復−促進化合物を含む医薬組成物の効果的量を、標的領域、例えば急性もしくは慢性創傷などの皮膚の創傷、および／または皮膚のリスクのある領域（例えば、創傷の裂開）などへ投与することが、好ましい。この量は一般に、処置される領域、症状の重症度（または過去の、もしくは企図された外科的切除）、および使用される局所ビヒクルの性質に応じて、適用あたりに本発明の特定の実施形態の化合物約０．０００１ｍｇ〜約１ｇの範囲であろう。好ましい局所調製物は、軟膏または徐放性ペレットであり、その場合、軟膏基剤またはペレット懸濁液１ccあたり有効成分約０．００１〜約５０ｍｇが使用される。医薬組成物は、経皮組成物または経皮送達デバイス(「貼付剤」)として配合剤させることができる。そのような組成物は、例えば、支持体、活性化合物リザーバ、制御膜、ライナーおよび接触接着剤を含む。そのような経皮貼付剤は、所望なら本発明の化合物の連続的、脈動的、またはオンデマンドでの送達を提供するために使用されてもよい。
【０２２１】
特定の実施形態の組成物は、当該技術分野で公知の手順を用いることにより患者に投与した後に有効成分の急速、持続、または遅延放出を提供するように、配合させることができる。制御放出性薬物送達システムは、浸透圧ポンプシステム、およびポリマーコートされたリザーバまたは薬物ポリマーマトリックス配合剤を含有する溶解システムを含む。制御放出システムの例は、米国特許第３，８４５，７７０号および同第４，３２６，５２５号、ならびにＰ．  Ｊ．  Ｋｕｚｍａ  ｅｔ  ａｌ，  Ｒｅｇｉｏｎａｌ  Ａｎｅｓｔｈｅｓｉａ  ２２（３）：５４３−５５１（１９９７）に示されており、それらの全てが参照により本明細書に組み入れられる。
【０２２２】
最も適切な経路は、処置される状態の性質および重症度に依存するであろう。当業者は、局所投与方法(スプレー、クリーム、開放的適用(ｏｐｅｎ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ)、閉鎖ドレッシング、浸漬、洗浄など)、投与形態、適切な医薬賦形剤、およびそれらを必要とする対象への化合物の送達に関連したその他の事柄を決定することも熟知している。
【０２２３】
本明細書全体を通して、他に必要がなければ、言語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含んでいる」は、言及されたステップもしくは要素、またはステップ群もしくは要素群を包括し、任意の他のステップもしくは要素、またはステップ群もしくは要素群を除外しないことを意味すると理解されたい。「からなる」は、熟語「からなる」に続く事柄を含むことを意味し、それに限定される。つまり熟語「からなる」は、列挙された要素が必要または必須であり、他の要素が存在しえないことを示す。「本質的に〜からなる」は、その熟語の後に列挙された任意の要素を含むことを意味し、列挙された要素に関する開示に明記された活性または作用と干渉しない、またはそれに寄与しない他の要素に限定される。つまり熟語「本質的に〜からなる」は、列挙された要素が必要または必須であるが、他の要素は必要でなく、列挙された要素の活性または作用に影響を及ぼすか否かに応じて、存在しても、または存在しなくてもよい。
【０２２４】
本明細書および添付の特許請求の範囲において、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、他に明記されない限りは、複数の参照例を含む。本明細書の特定の実施形態において用いられる用語「約」または「およそ」は、数値の前に存在する場合には、その値プラスまたはマイナス５％、６％、７％、８％または９％の範囲を示す。他の実施形態において用語「約」または「およそ」は、数値の前に存在する場合には、その値プラスまたはマイナス１０％、１１％、１２％、１３％または１４％の範囲を示す。更に別の実施形態において用語「約」または「およそ」は、数値の前に存在する場合には、その値プラスまたはマイナス１５％、１６％、１７％、１８％、１９％または２０％の範囲を示す。
【０２２５】
以下の実施例は、例示として示されており、限定を示すものではない。
【０２２６】
実施例
実施例１
ＢＴ化合物の調製
以下のＢＴ化合物を、Ｄｏｍｅｎｉｃｏ他（Ｕ．Ｓ  ＲＥ３７，７９３号、Ｕ．Ｓ．６，２４８，３７１号、同６，０８６，９２１号、同６，３８０，２４８号）の方法により、またはＢｉｓＥＤＴに関して以下に記載された合成プロトコルによる微粒子として、調製した。示されているのは、硫黄含有化合物と三価錯体を形成するのに用いられた反応体の理論比およびビスマスの公知の性向に基づく、比較としての、単一ビスマス原子に対する原子比である。カッコ内の数値は、１種の（または数種の）チオール剤に対するビスマスの比である（例えば、Ｂｉ：チオール１／チオール２；表１も参照）。
１）ＣＰＤ  １Ｂ−１  Ｂｉｓ−ＥＤＴ（１：１）  ＢｉＣ２Ｈ４Ｓ２
２）ＣＰＤ  １Ｂ−２  Ｂｉｓ−ＥＤＴ（１：１．５）  ＢｉＣ３Ｈ６Ｓ３
３）ＣＰＤ  １Ｂ−３  Ｂｉｓ−ＥＤＴ（１：１．５）  ＢｉＣ３Ｈ６Ｓ３
４）ＣＰＤ  １Ｃ  Ｂｉｓ−ＥＤＴ（可溶性Ｂｉ調製物）（１：１．５）  ＢｉＣ３Ｈ６Ｓ３
５）ＣＰＤ  ２Ａ  Ｂｉｓ−Ｂａｌ（１：１）  ＢｉＣ３Ｈ６Ｓ２Ｏ
６）ＣＰＤ  ２Ｂ  Ｂｉｓ−Ｂａｌ（１：１．５）  ＢｉＣ４．５Ｈ９Ｏ１．５Ｓ３
７）ＣＰＤ  ３Ａ  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ（１：１．５）  ＢｉＣ７．５Ｈ６Ｎ１．５Ｏ１．５Ｓ１．５
８）ＣＰＤ  ３Ｂ  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ（１：３）  ＢｉＣ１５Ｈ１２Ｎ３Ｏ３Ｓ３
９）ＣＰＤ  ４  Ｂｉｓ−Ｅｒｙ（１：１．５）  ＢｉＣ６Ｈ１２Ｏ３Ｓ３
１０）ＣＰＤ  ５  Ｂｉｓ−Ｔｏｌ（１：１．５）  ＢｉＣ１０．５Ｈ９Ｓ３
１１）ＣＰＤ  ６  Ｂｉｓ−ＢＤＴ（１：１．５）  ＢｉＣ６Ｈ１２Ｓ３
１２）ＣＰＤ  ７  Ｂｉｓ−ＰＤＴ（１：１．５）  ＢｉＣ４．５Ｈ９Ｓ３
１３）ＣＰＤ  ８−１  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ（１：１／１）
１４）ＣＰＤ  ８−２  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ（１：１／０．５）
１５）ＣＰＤ  ９  Ｂｉｓ−２ヒドロキシ，プロパンチオール（１：３）
１６）ＣＰＤ  １０  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｂａｌ（１：１／０．５）
１７）ＣＰＤ  １１  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＥＤＴ（１：１／０．５）
１８）ＣＰＤ  １２  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｔｏｌ（１：１／０．５）
１９）ＣＰＤ  １３  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＰＤＴ（１：１／０．５）
２０）ＣＰＤ  １４  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｅｒｙ（１：１／０．５）
２１）ＣＰＤ  １５  Ｂｉｓ−ＥＤＴ／２ヒドロキシ，プロパンチオール（１：１／１）
【０２２７】
微粒子ビスマス−１，２−エタンジチオール（Ｂｉｓ−ＥＤＴ、可溶性ビスマス調製物）を、以下の通り調製した：
【０２２８】
１５Ｌポリプロピレンカルボイ内の室温の５％水性ＨＮＯ３の過剰量（１１．４Ｌ）に、水性Ｂｉ（ＮＯ３）３溶液（４３％Ｂｉ（ＮＯ３）３（ｗ／ｗ）、５％硝酸（ｗ／ｗ）、５２％（ｗ／ｗ）水、Ｓｈｅｐｈｅｒｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，  Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ，  ＯＨ，製品番号２３６２；δ〜１．６ｇ／ｍＬ）０．３３１Ｌ（〜０．５７５モル）を撹拌しながら緩やかに滴加して、無水エタノール（４Ｌ）を緩やかに添加した。少量の白色沈殿物が形成されたが、連続して撹拌すると溶解した。別個に、６０ｍＬシリンジを用いて、無水エタノール１．５Ｌに１，２−エタンジチオール（ＣＡＳ  ５４０−６３−６）７２．１９ｍＬ（０．８６３モル）を添加し、その後、５分間撹拌することにより、１，２−エタンジチオールのエタノール性溶液（〜１．５６Ｌ、〜０．５５Ｍ）を調製した。その後、１，２−エタンジチオール／ＥｔＯＨ試薬を水性Ｂｉ（ＮＯ３）３／ＨＮＯ３溶液に５時間かけて緩やかに滴加し、連続して一晩撹拌した。形成された生成物をおよそ１５分間沈殿物として沈殿させ、その後、ペリスタポンプを用いて３００ｍＬ／分でろ液を除去した。その後、生成物を１５ｃｍ径ブフナー漏斗内の濾紙でろ過することにより回収し、エタノール、ＵＳＰ水およびアセトンそれぞれ５００ｍＬ容量で３回ずつ引き続き洗浄して、ＢｉｓＥＤＴ（６９４．５１ｇ／モル）を黄色非晶質粉末固体として得た。生成物を５００ｍＬ褐色ガラス瓶に入れて、高真空下で４８時間、ＣａＣｌ２により脱水した。回収された材料（収量〜２００ｇ）は、チオールに特徴的な臭気を放出した。粗生成物を無水エタノール７５０ｍＬに再溶解し、３０分間撹拌し、その後、ろ過して、エタノル５０ｍＬで３回、アセトン５０ｍＬで２回、引き続き洗浄し、アセトン５００ｍＬで再度洗浄した。再洗浄された粉末を１Ｍ  ＮａＯＨ（５００ｍＬ）中で研和し、ろ過して水２２０ｍｌで３回、エタノール５０ｍＬで２回、アセトン４００ｍＬで１回洗浄して、精製されたＢｉｓＥＤＴ１５６．７４ｇを得た。本質的に同じ手法で調製された次のバッチは、収率約７８．９１％をもたらした。
【０２２９】
生成物は、１Ｈおよび１３Ｃ核磁気共鳴（ＮＭＲ）、赤外分光法（ＩＲ）、紫外分光法（ＵＶ）、質量分析（ＭＳ）および元素分析からのデータの分析により、先に示された式Ｉの構造を有することが特徴づけられた。ＨＰＬＣの方法を開発して、ＢｉｓＥＤＴの化学純度を決定し、それにより試料をＤＭＳＯ（０．５ｍｇ／ｍＬ）中に調製した。ＤＭＳＯ中のＢｉｓＥＤＴの溶液を１９０〜６００ｎｍでスキャニングすることにより、λｍａｘを測定した。２６５ｎｍ（λｍａｘ）でモニタリングするＵＶ検出器を有し、注入容量２μＬでＹＭＣ  Ｐａｃｋ  ＰＶＣ  Ｓｉｌ  ＮＰ（内径２５０×４．６ｍｍ）分析カラム（Ｗａｔｅｒｓ）を備えたＷａｔｅｒｓ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｃｏｒｐ．，Ｍｉｌｆｏｒｄ，  ＭＡ）モデル２６９５クロマトグラフを用い、アセトン：水（９：１）中の０．１％ギ酸を移動相として、１ｍＬ／分での無勾配ＨＰＬＣ溶離を周囲温度で実施し、単一ピークを検出して、化学的純度１００±０１％を示した。元素分析は、式（Ｉ）の構造と一致した。
【０２３０】
乾燥粒子物質を、粒子径の特性を評価するために特徴づけた。手短に言えば、微粒子を２％Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ−６８（ＢＡＳＦ、Ｍｔ．  Ｏｌｉｖｅ，  ＮＪ）に再懸濁させて、その懸濁液を標準設定の水浴音波装置内で１０分間音波処理した後、Ｎａｎｏｓｉｚｅｒ／Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ  Ｎａｎｏ−Ｓ粒子分析機（モデルＺＥＮ１６００（ゼータ電位測定能を有さない）、Ｍａｌｖｅｒｍ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｗｏｒｃｅｓｔｅｒｓｈｉｒｅ，  ＵＫ）を用いて製造業者の推奨に従って分析した。２つの測定値をまとめたデータから、微粒子が一峰性分布を示し、全ての検出可能な事象が体積平均径（ＶＭＤ）０．６ミクロン〜４ミクロンの間で生じ、約１．３ミクロンにピークＶＭＤを有していた。これに反してＢｉｓＥＤＴを先行技術の方法（Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４１（８）：１６９７−１７０３）により調製すると、粒子の大部分がヘテロ分散で有意に大きなサイズとなり、ＶＭＤに基づく特徴づけが不可能となった。
【０２３１】
実施例２
慢性創傷感染のコロニーバイオフィルムモデル：ＢＴ化合物による阻害
慢性創傷内に存在する細菌は、バイオフィルムのライフスタイルを採り入れるため、本質的には記載された方法に従って（Ａｎｄｅｒｌ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ４７：１２５１−５６；  Ｗａｌｔｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ４７：３１７；  Ｗｅｎｔｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９６  Ｂｉｏｔｃｈｎｏｌ．  Ｐｒｏｇ．  １２：３１６；  Ｚｈｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ４６：９００）、調製されたバイオフィルムを用いて、細菌細胞生存に対する効果について、ＢＴをバイオフィルムに対して検査した。
【０２３２】
手短に言えば、コロニーバイオフィルムを１０％トリプシン大豆寒天上で２４時間発育させて、トリートメント含有Ｍｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎプレートへ移し入れた。処理の後、バイオフィルムを２％ｗ／ｖグルタチオン（ＢＴの中和）含有ペプトン水に分散させて、ペプトン水で系列希釈した後、カウント用プレートにスポットした。慢性創傷から単離された２種の細菌を別個に、検査用のコロニーバイオフィルムを生成する際に用いた。これらは、シュードモナス・エルギノーサのグラム陰性菌株、およびグラム陽性菌であるメチシリン耐性スタフィロコッカス・アウレウス（ＭＲＳＡ）であった。
【０２３３】
細菌バイオフィルムコロニーを、本質的に記載された通り（Ａｎｄｅｒｌ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ４７：１２５１−５６；  Ｗａｌｔｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ４７：３１７；  Ｗｅｎｔｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９６  Ｂｉｏｔｃｈｎｏｌ．  Ｐｒｏｇ．  １２：３１６；  Ｚｈｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ４６：９００）、寒天プレート上の微細孔膜の上で発育させた。コロニーバイオフィルムは、他のバイオフィルムモデルの熟知された特性の多くを示しており、例えばそれらは、高水和マトリックス中に高密度に凝集された細胞で構成されていた。他でも報告された通り（Ｂｒｏｗｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｓｕｒｇ  Ｒｅｓ  ５６：５６２；Ｍｉｌｌｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８９  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｓ  ５８：１５５；  Ｓｕｔｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９５  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ４７：１０９４；Ｔｈｒｏｗｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９７  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  ４６；：４２５）、コロニーバイオフィルム内の細菌が、より高性能のインビトロバイオフィルムリアクター内での定量で、同様に顕著に低下した抗微生物感受性を示すことが観察された。コロニーバイオフィルムは、直ちに、そして再生可能に大多数発生した。非限定的理論によれば、このコロニーバイオフィルムモデルは、感染された創傷の特性の幾つかを共有しており、細菌は、バイオフィルムおよび最小量の流体の下から供給された栄養素との空気界面で発育した。インビボ栄養条件を模倣すると考えられる血液寒天など、様々な栄養素の供給源を、コロニーバイオフィルムを培養するのに用いた。
【０２３４】
コロニーバイオフィルムは、２５ｍｍ径ポリカーボネートフィルター膜上へプランクトン性細菌液体培地５μｌのスポットを接種することにより、調製した。接種前に膜へ片面あたり１０分間ずつ紫外線を暴露することにより、滅菌した。接種物を３７℃の細菌培地で一晩発育させ、新しい培地で、６００ｎｍで０．１の光学密度に希釈した後、膜に付着させた。その後、発育培地を含む寒天プレート上に、膜を置いた。その後、プレートに蓋をして３７℃のインキュベータに反転させて入れた。２４時間ごとに、滅菌ピンセットを用いて、膜およびコロニーバイオフィルムを新しいプレートへ移し入れた。コロニーバイオフィルムを、典型的には発育の４８時間後に実験に用い、その時間には膜あたりおよそ１０９個の細菌が存在した。コロニーバイオフィルム法は、非常に様々な単一種および混合種バイオフィルムの培養への使用に成功した。
【０２３５】
抗微生物剤（例えば、ＢＴ化合物の組み合わせなどのＢＴ化合物；抗生物質；およびＢＴ化合物−抗生物質・組み合わせ）への感受性を測定するために、コロニーバイオフィルムを、候補となる抗微生物処置剤を補足した寒天プレートへ移し入れた。抗微生物処置への暴露期間が２４時間を超えたら、コロニーバイオフィルムを新しい処置プレートに毎日移動させた。処置期間の終了時に、緩衝液１０ｍｌを含む試験管にコロニーバイオフィルムを入れて、１〜２分間ボルテックスにかけてバイオフィルムを分散させた。幾つかの例において、試料を組織ホモジナイザーで簡単に処理して、細胞凝集物を破壊する必要があった。得られた細胞懸濁液を、その後系列希釈して静置し、生存する細菌を数え上げて、単位面積あたりのコロニー形成単位（ＣＦＵ）として報告した。生存データは、ｌｏｇ１０変換を利用して分析した。
【０２３６】
細菌バイオフィルムコロニー培養物の各タイプについて（シュードモナス・エルギノーサ、ＰＡ；メチシリン耐性スタフィロコッカス・アウレウス、ＭＲＳＡまたはＳＡ）、５種の抗生物質および１３種のＢＴ化合物を検査した。ＰＡに対して検査された抗微生物剤は、本明細書においてＢｉｓＥＤＴならびに化合物２Ｂ、４、５、６、８−２、９、１０、１１および１５（表１参照）と呼ばれるＢＴと、抗生物質トブラマイシン、アミカシン、イミペニム、セファゾリン、およびシプロフロキサンと、を含むものであった。ＳＡに対して検査された抗微生物剤は、ＢｉｓＥＤＴならびに化合物２Ｂ、４、５、６、８−２、９、１０および１１（表１参照）と呼ばれるＢＴと、抗生物質リファンピシン、ダプトマイシン、ミノサイクリン、アンピシリン、およびバンコマイシンとを含むものであった。先に「図面の簡単な説明」で記載された通り、抗生物質は、確立された微生物学的方法論に従って、最小阻止濃度（ＭＩＣ）のおよそ１０〜４００倍の濃度で検査した。
【０２３７】
７種のＢＴ化合物は、検査された濃度でＰＡ細菌生存に対して顕著な効果を示し、２種のＢＴ化合物は、検査された濃度でＭＲＳＡ生存に対して顕著な効果を実証し；細菌生存に対するＢＴの効果を示す代表的な結果を、ＢｉｓＥＤＴおよびＢＴ化合物２Ｂ（ＰＡに対して検査）に関しては図１に、そしてＢＴ化合物２Ｂおよび８−２（ＳＡに対して検査）に関しては図２に示しており、両者とも示された抗生物質の効果に相対させている。同じく図１および２に示す通り、示された抗生物質との組み合わせで、示されたＢＴ化合物を含有すると、相乗効果が得られ、それにより細菌生存を低下させる能力が、抗生物質単独またはＢＴ化合物単独のいずれかの抗菌効果に比較して増強した。ＰＡ生存アッセイにおいて、８０μｇ／ｍＬの濃度の化合物１５（ＢｉｓＥＤＴ／２−ヒドロキシ，プロパンチオール（１：１／１））が、１６００μｇ／ｍＬ  ＡＭＫ＋８０μｇ／ｍＬ  ＢｉｓＥＤＴの組み合わせを用いて得られた効果（図１）に匹敵する効果（図示しない）を示した。
【０２３８】
実施例３
慢性創傷感染のドリップフローバイオフィルムモデル
ＢＴ化合物による阻害
ドリップフローバイオフィルムは、細菌バイオフィルムを形成させて、それに対して候補となる抗菌化合物の効果を検査するための公認の信頼性のあるモデルである。ドリップフローバイオフィルムは、ドリップフローリアクターの溝に入れたクーポン（基質）上に生成する。すりガラス顕微鏡スライドなど、多くの異なるタイプの材料を、細菌バイオフィルム形成用の基板として用いることができる。栄養性液体培地をドリップフローバイオリアクターの細胞チャンバーに上部付近で滴加することにより、培地をチャンバーに入れ、その後、クーポンの長さに１０℃の傾斜で流す。
【０２３９】
バイオフィルムをドリップフローバイオリアクター内で発育させて、ＢＴ化合物に単独で、または抗生物質化合物と組み合わせて、そして／または抗生物質化合物に単独で、またはＢＴ化合物をはじめとする他の抗菌剤と組み合わせて、または慢性創傷用の他の従来処置もしくは候補処置に暴露する。こうしてＢＴ化合物を、ドリップフローリアクター内の細菌バイオフィルムへの効果に関して特徴づける。ドリップフローリアクター内のバイオフィルムは、確立された方法論に従って調製される（例えば、Ｓｔｅｗａｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１  Ｊ  Ａｐｐｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．  ９１：５２５；Ｘｕ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９８  Ａｐｐｌ．  Ｅｎｖｉｒｏｎ．  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．  ６４：４０３５）。この設計は、カバーのあるチャンバー内で傾けたポリスチレンクーポン上でバイオフィルムを培養することを含む。例示的な培地は、慢性創傷などのインビボのバイオフィルム発育条件と類似した、血清蛋白質が高濃度で鉄濃度が非常に低い条件を模倣する５％ｖ／ｖ成体ドナーウシ血清（ｐＨ６．８）を補足した、１ｇ／ｌグルコース、０．５ｇ／ｌ  ＮＨ４ＮＯ３、０．２５ｇ／ｌ  ＫＣｌ、０．２５ｇ／ｌ  ＫＨ２ＰＯ４、０．２５ｇ／ｌ  ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏを含有している。それぞれが１０ｃｍ×１．９ｃｍで深さ１．９ｃｍである４つの別々の並行チャンバー内に含まれる４つのクーポンの上に、この培地を滴加して流す（５ｍｌ／時）。チャンバーに分けられたリアクターを、ポリスルホンプラスチックで組み立てた。チャンバーのそれぞれに、緊密に閉鎖しうる個々の取り外し可能なプラスチック蓋を取り付ける。バイオフィルムリアクターを３７℃のインキュベータに入れて、細菌細胞培地をインキュベータ内に保持されたアルミニウム加熱槽に通過させることにより、加温する。この方法は、特定のバイオフィルム内で観察された抗生物質耐性フェノタイプを再現しており、流体せん断力の低い環境と慢性創傷の空気界面的特徴への近似性とを模倣する一方で栄養素の連続補充を提供し、導入された候補の抗菌レジメンの効果を特徴づけてモニタリングする多数の分析方法と適合する。ドリップフローリアクターは、非常に様々な純粋および混合種バイオフィルムの培養への使用に成功した。バイオフィルムは、典型的には２〜５日間発育させた後、抗微生物剤を適用する。
【０２４０】
ドリップフローリアクター内で発育させたバイオフィルムに対する抗バイオフィルム剤の効果を測定するために、バイオフィルムの上を通過する流体流れを、所望の処置配合剤（例えば、１種以上のＢＴ化合物および／または１種以上の抗生物質、または対照、および／または他の候補剤）で改変または補充する。流れを特定の処置期間、継続させる。処置されたバイオフィルムクーポンを、その後、リアクターから手短に取り出して、緩衝剤１０ｍｌを含むビーカーにバイオフィルムをこすり取る。試料を組織ホモジナイザーで手短に（典型的には３０秒〜１分間）処理して、細菌凝集物を分散させる。懸濁液を系列希釈して、標準の微生物学的方法論に従って生存する微生物を数え上げる。
【０２４１】
実施例４
創傷バイオフィルムによる、角化細胞の掻き傷修復の阻害：ＢＴ化合物によるバイオフィルム抑制
この実施例は、創傷治癒の確立されたインビトロ角化細胞掻き傷モデルを改変して、バイオフィルム関連の創傷病理および創傷治癒への関連性、詳細には急性もしくは慢性創傷または本明細書に記載された創傷含有バイオフィルムへの関連性を有するモデルへ到達することを記載している。慢性創傷バイオフィルムの効果についての角化細胞掻き傷モデルにより、ホ乳類（例えばヒト）角化細胞および細菌バイオフィルム集団の培養を、互いに流動接触している別個のチャンバー内で進行させて、バイオフィルムにより同化された可溶性成分の、角化細胞創傷治癒事象に対する効果に影響を及ぼす条件の効果の評価を可能にする。
【０２４２】
新生児ヒト包皮細胞を、処理済みプラスチックディッシュ内で単層として培養し、その単層内で、制御された「創傷」または掻き傷を機械的手段により形成させる（例えば、滅菌されたメス、かみそり、細胞スクレーパ、ピンセット、または他の器具などの適切な道具を用いて単層の領域の間の本質的に直線上の無細胞ゾーンを引っ掻くなど、単相の物理的破壊による）。インビトロ角化細胞単層モデルシステムは、インビボでの創傷治癒を模擬する手法で、創傷事象に応答して細胞の構造的および機能的プロセスを受けることが公知である。本明細書に開示された実施形態によれば、そのようなプロセスに対する、例えば掻き傷の治癒時間に対する、細菌バイオフィルムの存在の影響を観察して、これらおよび関連の実施形態において、選択された候補の抗微生物（例えば、抗菌および抗バイオフィルム）処置の存在の効果も評価される。
【０２４３】
バイオフィルムの存在下で培養された創傷のある角化細胞単層を、形態学的、生化学的、分子遺伝子学的、細胞生理学的および他のパラメータにより調査して、ＢＴ化合物の導入がバイオフィルムの障害的影響を変化させるか（例えば、適切な対照に対して統計学的に有意な手法で増加または減少させるか）を決定する。各ＢＴ化合物処置の毒性を検査した後でモデル創傷治癒プロセスへのバイオフィルムの影響に対するそのような処置の効果を評価するために、最初に創傷を各ＢＴ化合物のみ、およびＢＴ化合物の企図された組み合わせに暴露する。
【０２４４】
代表的な実施形態において、先の組織培養ウェルに保持されていて、創傷治癒プロセスを開始するために引っ掻かれる角化細胞単層と流体連通している膜（例えば、ＴｒａｎｓＷｅｌｌメンブレンインサートなど）の上で、３日目のバイオフィルムを培養する。本物の急性または慢性創傷から培養されたバイオフィルムが、これらおよび関連の実施形態における使用に企図される。
【０２４５】
こうして、ヒト角化細胞の遊走および増殖に対する可溶性バイオフィルム成分の効果を評価するインビトロシステムが、開発された。そのシステムは、バイオフィルムおよび角化細胞を、透析膜を用いて分離する。角化細胞を、先に記載された通り（Ｆｌｅｃｋｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９７  Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ．  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．  １０９：３６；  Ｐｉｅｐｋｏｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８７  Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ．  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．  ８８：２１５−２１９）新生児包皮から培養し、ガラスカバースリップ上にコンフルエントな単層として発育させる。その後、角化細胞の単層を引っ掻いて、均一の幅の「創傷」を生成させて、その後、細胞修復プロセスをモニタリングすることができる（例えば、Ｔａｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００７  ＰＬｏＳ  ＯＮＥ  ２：ｅ６９７；  Ｂｕｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００７  Ｅｕｒ．  Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  ８６：７４７；  Ｐｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０００  Ａｎｎ．  Ａｃａｄ．  Ｍｅｄ．  Ｓｉｎｇａｐｏｒｅ  ２９：２７）。その後、無菌技術を用いて、その人工的な創傷を滅菌両側チャンバー（ｄｏｕｂｌｅ−ｓｉｄｅｄ  ｃｈａｍｂｅｒ）の底に入れて、チャンバーを組み立てる。抗生物質および／またはビスマス−チオールを含む、または含まない角化細胞発育培地（ＥｐｉＬｉｆｅ）を、チャンバーの両側に充填する。無接種のシステムを、対照として用いる。
【０２４６】
創傷から単離された細菌をシステムに接種し、静的条件で２時間インキュベートして、細菌を上部チャンバー内の表面に付着させる。付着期間に続いて、液体培地流れを上部チャンバー内で開始させて、付着されていない細胞を除去する。その後、付着されていない細胞を洗い出すことにより、上部チャンバー内のプラクトン性細胞の発育を最小限にする速度で、培地の流れを継続させる。６〜４８時間の範囲内のインキュベート時間の後、システム（カバースリップ上の角化細胞単層および膜基板上の細菌バイオフィルム）を分解し、カバースリップを取り出して分析する。関連の実施形態において、成熟したバイオフィルムを上部チャンバー内で発育させた後、チャンバーを組み立てる。他の関連の実施形態において、例えば創傷修復が起こる間経過する時間または他の創傷修復の徴候など、掻き傷治癒の少なくとも１種の指標を変化させる（例えば、適切な対照に対して統計学的に有意な手法で増加または減少させる）薬剤または薬剤の組み合わせを同定するために、角化細胞の掻き傷修復に対する、ＢＴ化合物などの候補剤または潜在的相乗性のＢＴ化合物＋抗生物質・組み合わせ（例えば、微粒子形態で提供されるＢＴなど本明細書で提供されるＢＴ化合物、ならびにアミカシン、アンピシリン、セファゾリン、セフェピム、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、クリンダマイシン（または他のリンコサミド系抗生物質）、ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、ドキシサイクリン、ガチフロキサシン、ゲンタマイシン、イミペニム、レボフロキサシン、リネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標））、ミノサイクリン、ナフシリン、パロモマイシン、リファムピン、スルファメトキサゾール、トブラマイシンおよびバンコマイシンうちの１種以上）の効果を決定するために、バイオフィルムおよび掻き傷のある角化細胞単層の別々の共培養を、場合により１種以上の抗生物質を含み、または含まずに、１種以上のＢＴ化合物の非存在下または存在下で実施する（例えば、Ｔａｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００７  ＰＬｏＳ  ＯＮＥ  ２：ｅ６９７；  Ｂｕｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００７  Ｅｕｒ．  Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  ８６：７４７；  Ｐｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０００  Ａｎｎ．  Ａｃａｄ．  Ｍｅｄ．  Ｓｉｎｇａｐｏｒｅ  ２９：２７）。
【０２４７】
実施例５
創傷バイオフィルムによる、角化細胞の掻き傷修復の阻害
単離されたヒト角化細胞を、ガラスカバースリップ上で培養して、先の実施例４に記載された方法論に従って掻き傷を作製した。創傷された培養物を、角化細胞培養物と流体連通している膜支持体上で、培養条件下、単独で、または共培養されたバイオフィルムの存在下で保持した。その後、角化細胞の細胞発育および／または遊走が掻き傷のゾーン全体で角化細胞単層を再度定着させる間の掻き傷閉鎖の時間間隔を、測定した。図３は、バイオフィルムの流体連通による（しかし直接接触していない）存在が引っ掻かれた角化細胞単層の治癒時間に与えた効果を示している。
【０２４８】
従って特定の実施形態において、候補となる抗バイオフィルム剤が存在する、または存在しない細菌バイオフィルムの存在下で、掻き傷のある細胞（例えば、角化細胞または線維芽細胞）単層を培養すること；および候補となる抗バイオフィルム剤の非存在下および存在下で掻き傷のある細胞単層の治癒の指標を評価すること、を含み、ここで、治癒の少なくとも１種の指標を促進する薬剤（例えば、本明細書に記載された実質的に単分散のＢＴ微粒子懸濁液などのＢＴ化合物を単独で、または抗生物質、例えばアミカシン、アンピシリン、セファゾリン、セフェピム、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、クリンダマイシン、ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、ドキシサイクリン、ガチフロキサシン、ゲンタマイシン、イミペニム、レボフロキサシン、リネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標））、ミノサイクリン、ナフシリン、パロモマイシン、リファムピン、スルファメトキサゾール、トブラマイシンおよびバンコマイシンのうちの１種以上と相乗的な組み合わせで）が、急性もしくは慢性創傷、またはバイオフィルムを含む創傷を処置する適切な薬剤として同定される、慢性創傷を処置する薬剤を同定する方法が企図される。
【０２４９】
実施例６
相乗的なビスマス−チオール（ＢＴ）抗生物質の組み合わせ
この実施例は、１種以上のビスマス−チオール化合物と、複数の抗生物質耐性菌など様々な菌種および菌株に対する１種以上の抗生物質との組み合わせによる、実証された相乗的効果の例を示す。
【０２５０】
材料と方法  感受性試験を、ＮＣＣＬＳプロトコル（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ．（１９９７）．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｄｉｌｕｔｉｏｎ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｓ  ｆｏｒ  Ｂａｃｔｅｒｉａ  ｔｈａｔ  Ｇｒｏｗ  Ａｅｒｏｂｉｃａｌｌｙ：  Ａｐｐｒｏｖｅｄ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｍ７−Ａ２  ａｎｄ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  Ｍ１００−Ｓ１０．  ＮＣＣＬＳ，  Ｗａｙｎｅ，  ＰＡ，  ＵＳＡ）を遵守して、９６ウェル組織培養プレート（Ｎａｌｇｅ  Ｎｕｎｃ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，  Ｄｅｎｍａｒｋ）でのブロス希釈により実施した。
【０２５１】
手短に言えば、一晩の細菌培養を利用して、０．５  ＭｃＦａｒｌａｎｄ標準懸濁液を調製し、それをカチオン調整Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎブロス培地（ＢＢＬ，Ｃｏｃｋｅｙｓｖｉｌｌｅ，  ＭＤ，  ＵＳＡ）で更に１：５０（〜２×１０６ｃｆｕ／ｍｌ）希釈した。ＢＴ（先に記載された通り調製）および抗生物質を増加濃度で添加して、最終容量を０．２ｍＬに一定に保持した。培養物を３７℃で２４時間インキュベートし、製造業者の推奨に従ってＥＬＩＳＡプレートリーダー（Ｂｉｏｔｅｋ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，  Ｗｉｎｏｏｓｋｉ，  ＶＴ，  ＵＳＡ）を用いて、６３０ｎｍでの吸光度により濁度を評価した。最小阻止濃度（ＭＩＣ）は、２４時間の発育を阻止する最低薬物濃度として表した。栄養寒天上の標準のプレーティングにより、生存細菌数（ｃｆｕ／ｍＬ）を測定した。最小殺菌濃度（ＭＢＣ）は、接種の２４時間目に初期生存性を９９．９％低下させた薬物濃度として表した。
【０２５２】
チェッカーボード法を用いて、抗微生物的組み合わせの活性を評価した。部分阻止濃度指数（ＦＩＣＩ）および部分殺菌濃度指数（ＦＢＣＩ）を、Ｅｌｉｏｐｏｕｌｏｓ他（Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  ｉｎ  Ｌａｂｏｒａｔｒｙ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（Ｌｏｒｉａｎ，  Ｖ．，  Ｅｄ．），ｐｐ．３３０−９６，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，  ＭＤ，  ＵＳＡ内のＥｌｉｏｐｏｕｌｏｓ  ａｎｄ  Ｍｅｏｌｌｅｒｉｎｇ，（１９９６）Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ．）に従って計算した。相乗性は、ＦＩＣＩまたはＦＢＣＩ指数が０．５以下と定義し、０．５を超え４以下は相互作用なし、４を超えたものは拮抗性と定義した（Ｏｄｄｓ，  ＦＣ（２００３）  Ｓｙｎｅｒｇｙ，  ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ，  ａｎｄ  ｗｈａｔ  ｔｈｅ  ｃｈｅｑｕｅｒｂｏｒｄ  ｐｕｔｓ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｔｈｅｍ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ５２：１）。従来通り、抗生物質濃度の４倍以上の低下も、相乗性として定義した。
【０２５３】
結果を表２〜１７に表わす。
【表２】
2018076358.tif 000005
ＢＥ＝０．２μｇ／ｍｌ  ＢｉｓＥＤＴ；菌株は、Ｗｉｎｔｈｒｏｐ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｍｉｎｅｏｌａ，  ＮＹのＣｌｉｎｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから得た。ナフシリンは、Ｓｉｇｍａ（Ｓｔ．  Ｌｏｕｉｓ，  ＭＯ）から得た。
【表３】
2018076358.tif 000006
ＢＥ＝０．２μｇ／ｍｌ  ＢｉｓＥＤＴ；菌株は、Ｗｉｎｔｈｒｏｐ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｍｉｎｅｏｌａ，  ＮＹのＣｌｉｎｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから得た。ナフシリンは、Ｓｉｇｍａから得た。
【表４】
2018076358.tif 000007
ＢＥ＝０．２μｇ／ｍｌ  ＢｉｓＥＤＴ；菌株Ｓ２４４６−３は、Ｗｉｎｔｈｒｏｐ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｍｉｎｅｏｌａ，  ＮＹのＣｌｉｎｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから得た。抗体は、Ｓｉｇｍａから得た。
【表５】
2018076358.tif 000008
ＧＭ＝ゲンタマイシン；菌株Ｓ２４００−１は、Ｗｉｎｔｈｒｏｐ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｍｉｎｅｏｌａ，  ＮＹのＣｌｉｎｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから得た。ゲンタマイシンは、ＷｉｎｔｈｒｏｐのＰｈａｒｍａｃｙ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔから得た。太字は相乗性。
【表６】
2018076358.tif 000009
μｇ／ｍｌでのデータ；菌株Ｓ２４００−１は、Ｗｉｎｔｈｒｏｐ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｍｉｎｅｏｌａ，  ＮＹのＣｌｉｎｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから得た。抗生物質は、ＷｉｎｔｈｒｏｐのＰｈａｒｍａｃｙ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔから得た。
【表７】
2018076358.tif 000010
μｇ／ｍｌでのデータ；菌株Ｓ２４００−１は、Ｗｉｎｔｈｒｏｐ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｍｉｎｅｏｌａ，  ＮＹのＣｌｉｎｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから得た。抗生物質は、ＷｉｎｔｈｒｏｐのＰｈａｒｍａｃｙ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔから得た。
【表８】
2018076358.tif 000011
μｇ／ｍｌでのデータ；菌株Ｓ２４００−１は、Ｗｉｎｔｈｒｏｐ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｍｉｎｅｏｌａ，  ＮＹのＣｌｉｎｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから得た。抗生物質は、ＷｉｎｔｈｒｏｐのＰｈａｒｍａｃｙ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔから得た。
【表９】
2018076358.tif 000012
μｇ／ｍｌでのデータ；抗生物質は、Ｗｉｎｔｈｒｏｐ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｍｉｎｅｏｌａ，  ＮＹのＰｈａｒｍａｃｙ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔから得た。
【表１０】
2018076358.tif 000013
ＡＢ＝抗生物質；ＣＭ＝クロラムフェニコール；ＡＭ＝アンピシリン；ＢＥ＝０．３μｇ／ｍｌのＢｉｓＥＤＴ、菌株は、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｔｈｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｉｔｙ  ｏｆ  Ｃｈｉｃａｇｏ，  Ｃｈｉｃａｇｏ，ＩＬのＤｒ．  ＭＪ  Ｃａｓａｄａｂａｎの研究室から得た。抗生物質は、Ｗｉｎｔｈｒｏｐ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｍｉｎｅｏｌａ，  ＮＹのＰｈａｒｍａｃｙ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔから得た。
【表１１】
2018076358.tif 000014
ＤＯＸ＝ドキシサイクリン；ＢＥ＝０．３μｇ／ｍｌのＢｉｓＥＤＴ；菌株は、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ，  Ｔｈｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｂｒｉｓｔｏｌ，  Ｂｒｉｓｔｏｌ，  ＵＫのＤｒ．Ｉ  Ｃｈｏｐｒａの研究室から得た。抗生物質は、Ｗｉｎｔｈｒｏｐ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｍｉｎｅｏｌａ，  ＮＹのＰｈａｒｍａｃｙ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔから得た。
【表１２】
2018076358.tif 000015
Ａｇｒ＝アミノグリコシド耐性；ＮＮ＝トブラマイシン；ＰＡ＝シュードモナス・エルギノーサ；ＢＥ＝ＢｉｓＥＤＴ、０．３μｇ／ｍｌ；菌株は、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，  Ｑｕｅｅｎｓ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，  Ｏｎｔａｒｉｏ，  ＣＮのＤｒ．  Ｋ．  Ｐｏｏｌｅの研究室から得た。トブラマイシンは、Ｗｉｎｔｈｒｏｐ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｍｉｎｅｏｌａ，  ＮＹのＰｈａｒｍａｃｙ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔから得た。
【表１３】
2018076358.tif 000016
ＮＮ＝トブラマイシン；ＢＥ＝ＢｉｓＥＤＴ、０．４μｇ／ｍｌ；菌株は、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ  ａｎｄ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｂｌｅ  Ｄｉｓｅａｓｅ，  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｍｉｃｈｉｇａｎ，  Ａｎｎ  Ａｒｂｏｒ，  ＭＩのＤｒ．  Ｊ．  Ｊ．  ＬｉＰｕｍａの研究室から；そして同じくＶｅｌｏｉｒａ．他，２００３により得た。トブラマイシンは、Ｗｉｎｔｈｒｏｐ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｍｉｎｅｏｌａ，  ＮＹのＰｈａｒｍａｃｙ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔから得た。
【表１４】
2018076358.tif 000017
ＮＮ＝トブラマイシン；ＢＥ＝ＢｉｓＥＤＴ、０．４μｇ／ｍｌ；菌株は、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ  ａｎｄ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｂｌｅ  Ｄｉｓｅａｓｅ，  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｍｉｃｈｉｇａｎ，  Ａｎｎ  Ａｒｂｏｒ，  ＭＩのＤｒ．  Ｊ．  Ｊ．  ＬｉＰｕｍａの研究室から；そして同じくＶｅｌｏｉｒａ．他，２００３により得た。トブラマイシンは、Ｗｉｎｔｈｒｏｐ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｍｉｎｅｏｌａ，  ＮＹのＰｈａｒｍａｃｙ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔから得た。
【表１５】
2018076358.tif 000018
ＮＮ＝トブラマイシン；ＢＥ＝ＢｉｓＥＤＴ、０．８μｇ／ｍｌ；Ｌｉｐｏ−ＢＥ−ＮＮ＝リポソームＢＥ−ＮＮ；菌株は、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  Ｌａｕｒｅｎｔｉａｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，  Ｏｎｔａｒｉｏ，  ＣＮのＤｒ．  Ａ．  Ｏｍｒｉの研究室から得た（Ｍ株は、粘液様Ｂ．セパシア；ＰＡ＝Ｐ．エルギノーサ；ＳＡ＝Ｓ．アウレウス）。トブラマイシンは、Ｗｉｎｔｈｒｏｐ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｍｉｎｅｏｌａ，  ＮＹのＰｈａｒｍａｃｙ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔから得た。
【表１６】
2018076358.tif 000019
ＮＮ＝トブラマイシン；ＢＥ＝ＢｉｓＥＤＴ、０．８μｇ／ｍｌ；Ｌｉｐｏ−ＢＥ−ＮＮ＝リポソームＢＥ−ＮＮ；菌株は、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  Ｌａｕｒｅｎｔｉａｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，  Ｏｎｔａｒｉｏ，  ＣＮのＤｒ．  Ａ．  Ｏｍｒｉの研究室から得た（Ｍ株は、粘液様Ｂ．セパシア；ＰＡ＝Ｐ．エルギノーサ；ＳＡ＝Ｓ．アウレウス）。トブラマイシンは、Ｗｉｎｔｈｒｏｐ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｍｉｎｅｏｌａ，  ＮＹのＰｈａｒｍａｃｙ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔから得た。
【表１７】
2018076358.tif 000020
ＢＥ＝ＢｉｓＥＤＴ；ＮａＰＹＲ＝ナトリウムピリチオン；化学薬品は、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈから得た。太字は相乗性。示された菌株は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  （ＡＴＣＣ，  Ｍａｎａｓｓａｓ，  ＶＡ）からのものであった。
【０２５４】
実施例７
抗生物質耐性菌株を含むグラム陽性およびグラム陰性菌に対するビスマス−チオール（ＢＴ）および抗生物質の効果の比較
この実施例において、ＢｉｓＥＤＴおよび比較剤のインビトロ活性を、皮膚および軟部組織感染を担うグラム陽性および陰性菌の複数の臨床単離物に対して評価した。
【０２５５】
材料と方法  検査化合物および検査濃度範囲は、以下の通りである：ＢｉｓＥＤＴ（Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ  １９９７；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４５（５）：１４１７−１４２１、および実施例１）、１６〜０．０１５μｇ／ｍＬ；リネゾリド（ＣｈｅｍＰａｃｉｆｉｃａ  Ｉｎｃ．，  ＃３５７１０）、６４−０．０６μｇ／ｍＬ；ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｓｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  ＃ＭＣＢ２００７）、３２〜０．０３μｇ／ｍｌおよび１６〜０．０１５μｇ／ｍＬ；バンコマイシン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，  Ｓｔ．  Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ，＃Ｖ２００２）、６４〜０．０６μｇ／ｍＬ；セフタジジム（Ｓｉｇｍａ  ＃Ｃ３８０９）、６４〜０．０６μｇ／ｍＬおよび３２〜０．０３μｇ／ｍＬ；イミペネム（米国薬局方、ＮＪ，＃１３３７８０９）、１６〜０．０１５μｇ／ｍＬおよび８〜０．００８μｇ／ｍＬ；シプロフロキサシン（米国薬局方、＃ＩＯＣ２６５）、３２〜０．０３μｇ／ｍＬおよび４〜０．００４μｇ／ｍＬ；ゲンタマイシン（Ｓｉｇｍａ  ＃Ｇ３６３２）３２〜０．０３μｇ／ｍＬおよび１６〜０．０１５μｇ／ｍＬ。ゲンタマイシン以外の検査物質は全て、ＤＭＳＯに溶解し、ゲンタマイシンは、水に溶解した。原液は、検査プレート内の最高濃度の４０倍で調製した。検査システムのＤＭＳＯの最終濃度は、２．５％であった。
【０２５６】
生物体  検査生物体は、以下の臨床検査室から得た：ＣＨＰ，  Ｃｌａｒｉａｎ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ，  Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，  ＩＮ；  ＵＣＬＡ，  Ｕｎｉｖｅｒｃｉｔｙ  ｏｆ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ  Ｌｏｓ  Ａｎｇｅｌｅｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ，  Ｌｏｓ  Ａｎｇｅｌｅｓ，  ＣＡ；  ＧＲ  Ｍｉｃｒｏ，  Ｌｏｎｄｏｎ，  ＵＫ；  ＰＨＲＩ  ＴＢ  Ｃｅｎｅｒ，  Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ  Ｃｅｎｔｅｒ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ；  ＡＴＣＣ，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，  Ｍａｎａｓｓａｓ，  ＶＡ；  Ｍｔ  Ｓｉｎａｉ  Ｈｏｓｐ．，  Ｍｏｕｎｔ  Ｓｉｎａｉ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ；  ＵＣＳＦ，  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，  ＣＡ；  Ｂｒｏｎｓｏｎ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｂｒｏｎｓｏｎ  Ｍｅｔｈｏｄｉｓｔ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，  Ｋａｌａｍａｚｏｏ，  ＭＩ； 品質管理用単離物は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ，  Ｍａｎａｓｓａｓ，  ＶＡ）からのものであった。各生物体に適した寒天培地での単離のために、生物体をストリークした。コロニーをスワブにより単離プレートから取り出して、凍結保護物質を含む適切なブロス中の懸濁液に入れた。懸濁液を低温貯蔵バイアルに分取して、−８０℃に保持した。略語：ＢｉｓＥＤＴ、ビスマス−１，２−エタンジチオール；ＬＺＤ、リネゾリド；ＤＡＰ、ダプトマイシン；ＶＡ、バンコマイシン；ＣＡＺ、セフタジジム；ＩＰＭ、イミペネム；ＣＩＰ、シプロフロキサシン；ＧＭ、ゲンタマイシン；ＭＳＳＡ、メチシリン感受性スタフィロコッカス・アウレウス；ＣＬＳＩ  ＱＣ、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅの品質管理株；ＭＲＳＡ、メチシリン耐性スタフィロコッカス・アウレウス；ＣＡ−ＭＲＳＡ、市中感染型メチシリン耐性スタフィロコッカス・アウレウス；ＭＳＳＥ、メチシリン感受性スタフィロコッカス・エピデルミディス；ＭＲＳＥ、メチシリン耐性スタフィロコッカス・エピデルミディス；ＶＳＥ、バンコマイシン感受性エンテロコッカス。
【０２５７】
単離物を、凍結バイアルから適切な培地（ほとんどの生物体でＴｒｙｐｔｉｃａｓｅ  Ｓｏｙ    Ａｇａｒ（Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，  Ｓｐａｒｋｓ，  ＭＤ）、またはストレプトコッカス属用のＴｒｙｐｔｉｃａｓｅ  Ｓｏｙ  Ａｇａｒ＋５％ヒツジ血液（Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，  Ｂａｔｈ，  ＯＨ））上へストリークした。プレートを３５℃で一晩インキュベートした。品質管理用生物体を、含ませた。ＭＩＣアッセイ用に用いられた培地は、ほとんどの生物体でＭｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ  ＩＩ  Ｂｒｏｔｈ（ＭＨＢ  ＩＩ−Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，  ＃２１２３２２）であった。ＭＨＢＩＩに２％溶解ウマ血液（Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｌｏｔ＃Ｈ１３９１３）を補足して、ストレプトコッカス・ピオゲネスおよびストレプトコッカス・アガラクチアの発育に適応させた。培地を通常重量の１０２．５％で調製して、微量希釈パネルの各ウェルに薬物溶液５μＬを添加することにより生じる希釈を相殺した。加えて、ダプトマイシンでの検査では、培地に追加の２５ｍｇ／Ｌ  Ｃａ２+を補足した。
【０２５８】
ＭＩＣアッセイ法は、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｄｉｌｕｔｉｏｎ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｙｉｔｙ  Ｔｅｓｔｓ  ｆｏｒ  Ｂａｃｔｅｒｉａ  Ｔｈａｔ  Ｇｒｏｗ  Ａｅｒｏｂｉｃａｌｌｙ；  Ａｐｐｒｏｖｅｄ  Ｓｔａｎｄａｒｄ−Ｓｅｖｅｎｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ．  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｄｏｃｕｍｅｎｔ  Ｍ７−Ａ７［ＩＳＢＮ  １−５６２３８−５８７−９］．  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，９４０  Ｗｅｓｔ  Ｖａｌｌｅｙ  Ｒｏａｄ，  Ｓｕｉｔｅ  １４００，  Ｗａｙｎｅ，  Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ  １９０８７−１８９８  ＵＳＡ，  ２００６）に記載された手順に従っており、自動リキッドハンドラーを用いて系列希釈および液体移動を実施した。自動リキッドハンドラーは、Ｍｕｌｔｉｄｒｏｐ  ３８４（Ｌａｂｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｈｅｌｓｉｎｋｉ，  Ｆｉｎｌａｎｄ）、Ｂｉｏｍｅｋ  ２０００およびＭｕｌｔｉｍｅｋ  ９６（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，  Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ  ＣＡ）を含むものであった。標準の９６ウェル微量希釈プレート（Ｆａｌｃｏｎ  ３９１８）の２〜１２列目のウェルに、ＤＭＳＯまたはゲンタマイシン用の水１５０μＬをＭｕｌｔｉｄｒｏｐ  ３８４で充填した。薬物（３００μＬ）を、これらのプレート内の適切な行の１列目に分配した。これらは、検査プレート（ドータープレート）を調製する際のマザープレートになった。Ｂｉｏｍｅｋ  ２０００により、マザープレートの１１列目までの系列移動を完了した。１２列目のウェルは、薬物を含まず、ドータープレートでは生物体発育制御ウェルであった。ドータープレートに適切な検査培地（先に記載）１８５μＬをＭｕｌｔｉｄｒｏｐ  ３８４を用いて添加した。Ｍｕｌｔｉｍｅｋ  ９６機器で、薬物溶液５μＬをマザープレートの各ウェルから各ドータープレートの各対応するウェルへ一段階で移し入れることにより、ドータープレートを調製した。
【０２５９】
各生物体の標準接種物を、ＣＬＳＩ法により調製した（ＩＳＢＮ  １−５６２３８−５８７−９、先に引用）。懸濁液を０．５マクファーランド標準液の濁度と等しくなるように、ＭＨＢ中で調製した。懸濁液を生物体に適したブロスで１：９に希釈した。各生物体の接種物を縦に分かれた滅菌リザーバ（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ）に分配し、Ｂｉｏｍｅｋ  ２０００を用いてプレートに接種した。接種が低い薬物濃度から高い薬物濃度へ行われるように逆に向けたＢｉｏｍｅｋ  ２０００の作業面に、ドータープレートを静置した。Ｂｉｏｍｅｋ  ２０００が、標準化された接種物１０μＬを各ウェルへ送達した。これにより、ドータープレートの最終細胞濃度およそ５×１０５コロニー形成単位／ｍＬが得られた。こうしてドータープレートのウェルは、最終的にブロス１８５μＬ、薬物溶液５μＬ、および細菌接種物１０μＬを含んでいた。プレートを３枚ずつ積み重ね、最上プレートに蓋をかぶせて、プラスチック袋に入れ、単離物のほとんどを３７℃でおよそ１８時間インキュベートした。ストレプトコッカスのプレートを、２０時間のインキュベーション後に読み取った。プレートビューワーを用いて、マイクロプレートを底から見た。検査培地それぞれで、未接種の可溶性対照プレートを、薬物沈殿の証拠に関して観察した。ＭＩＣを、生物体の視覚的な発育を阻害した最低薬物濃度として読み取り記録した。
【０２６０】
結果  市販の薬物は全て、両方の培地での全ての検査濃度に可溶性であった。ＢｉｓＥＤＴは、３２μｇ／ｍＬで微量の沈殿物を示したが、検査された生物体全ての阻害濃度がその濃度よりも十分に低かったため、ＭＩＣの読み取りに影響を及ぼさなかった。各アッセイ日に、適切な品質管理用菌株を、ＭＩＣアッセイに含ませた。これらの菌株から得られたＭＩＣ値を、適宜、各薬物について公表された品質管理範囲（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ．  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  ｆｏｒ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｉｎｇ；  Ｅｉｇｈｔｅｅｎｔｈ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ．  ＣＬＳＩ  ｄｏｃｕｍｅｎｔ  Ｍ１００−Ｓ１８［ＩＳＢＮ  １−５６２３８−６５３−０］．  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、９４０  Ｗｅｓｔ  Ｖａｌｌｅｙ  Ｒｏａｄ，  Ｓｕｉｔｅ  １４００，  Ｗａｙｎｅ，  Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ  １９０８７−１８９８  ＵＳＡ，  ２００８）と比較した。
【０２６１】
各アッセイ日に、適切な品質管理用菌株を、ＭＩＣアッセイに含ませた。これらの菌株から得られたＭＩＣ値を、適宜、各薬物について公表された品質管理範囲（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ．  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  ｆｏｒ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｉｎｇ；  Ｅｉｇｈｔｅｅｎｔｈ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ．  ＣＬＳＩ  ｄｏｃｕｍｅｎｔ  Ｍ１００−Ｓ１８［ＩＳＢＮ  １−５６２３８−６５３−０］）と比較した。品質管理範囲が公表された品質管理株の１４１種の値のうち、１４０種（９９．３％）が明記された範囲内であった。１種の例外は、Ｓ．アウレウス２９２１３株に対するイミペネムであり、一度の実施で得られた１つの数値が公表されたＱＣ範囲より１希釈分低かった（０．００８μｇ／ｍＬ以下）。その実施の際の他の品質管理の結果は全て、明記された品質管理範囲内であった。
【０２６２】
ＢｉｓＥＤＴは、メチシリン感受性スタフィロコッカス・アウレウス（ＭＳＳＡ）、メチシリン耐性Ｓ．アウレウス（ＭＲＳＡ）、および市中感染型ＭＲＳＡ（ＣＡ−ＭＲＳＡ）対する強力な活性を実証し、１μｇ／ｍＬ以下で検査された菌株全てを阻害し、ＭＩＣ９０値が３種の生物体群全てで０．５μｇ／ｍＬであった。ＢｉｓＥＤＴは、リネゾリドおよびバンコマイシンよりも大きな活性、そしてダプトマイシンと同等の活性を示した。イミペネムは、ＭＳＳＡに対してＢｉｓＥＤＴよりも強力であった（ＭＩＣ９０＝０．０３μｇ／ｍＬ）。しかし、ＭＲＳＡおよびＣＡＭＲＳＡは、イミペネムに耐性があったが、ＢｉｓＥＤＴは、ＭＳＳＡで示されたものと同等の活性を実証した。ＢｉｓＥＤＴは、メチシリン感受性およびメチシリン耐性スタフィロコッカス・エピデルミディス（ＭＳＳＥおよびＭＲＳＥ）に対して高活性であり、ＭＩＣ９０がそれぞれ０．１２および０２５μｇ／ｍＬであった。ＢｉｓＥＤＴは、ＭＳＳＥに対して、イミペネム以外で試験された他の薬剤のいずれよりも活性があった。ＢｉｓＥＤＴは、ＭＲＳＥに対して検査された最も活性のある薬剤であった。
【０２６３】
ＢｉｓＥＤＴは、バンコマイシン感受性エンテロコッカス・フェカーリス（ＶＳＥｆｃ）に対してダプトマイシン、バンコマイシン、およびイミペネムと同等の活性を実証し、ＭＩＣ９０値が２μｇ／ｍＬであった。重要なこととして、ＢｉｓＥＤＴは、バンコマイシン耐性エンテロコッカス・フェカーリス（ＶＲＥｆｃ）に対して検査された最も活性のある薬剤であり、ＭＩＣ９０値は１μｇ／ｍＬであった。
【０２６４】
ＢｉｓＥＤＴは、バンコマイシン感受性エンテロコッカス・フェシウム（ＶＳＥｆｍ）に対して非常に活性があり、ＭＩＣ９０値が２μｇ／ｍＬであり、その活性は、ダプトマイシンと同等または類似しており、バンコマイシンよりも１希釈分高かった。ＢｉｓＥＤＴおよびリネゾリドは、バンコマイシン耐性エンテロコッカス・フェシウム（ＶＲＥｆｍ）に対して検査された最も活性のある薬剤であり、それぞれが２μｇ／ｍＬのＭＩＣ９０値を実証した。ストレプトコッカス・ピオゲネスに対するＢｉｓＥＤＴの活性（ＭＩＣ９０値が０．５μｇ／ｍＬ）は、バンコマイシンと同等であり、リネゾリドよりも大きく、ダプトマイシンおよびセフタジジムよりもわずかに低かった。その化合物は、０．５μｇ／ｍＬ以下で検査された菌株全てを阻害した。これらの試験において、ＢｉｓＥＤＴに少なくとも感受性のある菌種は、ストレプトコッカス・アガラクチアであり、観察されたＭＩＣ９０値は、１６μｇ／ｍＬであった。ＢｉｓＥＤＴは、ゲンタマイシン以外では、検査された薬剤全てよりも低い活性であった。
【０２６５】
含まれたグラム陰性菌に対するＢｉｓＥＤＴおよび比較物質の活性から、アシネトバクター・バウマニーに対するＢｉｓＥＤＴの効力が実証され（ＭＩＣ９０値が２μｇ／ｍＬ）、ＢｉｓＥＤＴが検査された最も活性のある化合物となった。比較剤用の試験単離物のかなりの数でＭＩＣが上昇しており、これらの薬剤では測定域を外れたＭＩＣ９０値となった。ＢｉｓＥＤＴは、エシェリヒア・コリの強力な阻害剤であり、２μｇ／ｍＬ以下で菌株全てを阻害した（ＭＩＣ９０＝２μｇ／ｍＬ）。その化合物は、イミペネムよりも活性が低いが、セフタジジム、シプロフロキサシンおよびゲンタマイシンよりも活性が高かった。ＢｉｓＥＤＴは、クレブシエラ・ニューモニエに対する活性も実証し、ＭＩＣ９０値はイミペネムと同等の８μｇ／ｍＬであった。イミペネム、セフタジジム、シプロフロキサシン、およびゲンタマイシンにより示された比較的高いＭＩＣ９０値から、これが抗生物質耐性の高い生物体群であることが示された。ＢｉｓＥＤＴは、シュードモナス・エルギノーサに対して検査された最も活性のある化合物であり、ＭＩＣ９０値が４μｇ／ｍＬであった。この群の検査単離物では比較剤に対して高レベルの耐性が存在した。
【０２６６】
要約すると、ＢｉｓＥＤＴは、ヒトにおける急性および慢性皮膚および皮膚構造感染に一般に関与する菌種など、複数の菌種を代表する複数の臨床単離物に対して広域スペクトルの能力を示す。ＢｉｓＥＤＴおよび重要な比較剤の活性を、グラム陽性およびグラム陰性菌の臨床単離物７２３種に対して評価した。ＢＴ化合物は、広域スペクトル活性を実証し、この試験での多数の検査生物体に関して、ＢｉｓＥＤＴは、抗菌活性について検査された最も活性のある化合物であった。ＢｉｓＥＤＴは、ＭＳＳＡ、ＭＲＳＡ、ＣＡ−ＭＲＳＡ、ＭＳＳＥ、ＭＲＳＥおよびＳ．ピオゲネスに対して最も活性があり、ＭＩＣ９０値は、０．５μｇ／ｍＬ以下であった。強力な活性が、ＶＳＥｆｃ、ＶＲＥｆｃ、ＶＳＥｆｍ、ＶＲＥｆｍ、Ａ．バウマニー、Ｅ．コリ、およびＰ．エルギノーサでも実証され、ＭＩＣ９０値は、１〜４μｇ／ｍＬの範囲内であった。ＭＩＣ９０値が、Ｋ．ニューモニエ（ＭＩＣ９０＝８μｇ／ｍＬ）およびＳ．アガラクチア（ＭＩＣ９０＝１６μｇ／ｍＬ）で観察された。
【０２６７】
実施例８
微粒子ＢＴ−抗生物質の増強および相乗活性
この実施例は、微粒子ビスマス−チオール（ＢＴ）が、増強的および／または相乗的相互作用を通して抗生物質活性を促進することを示している。
【０２６８】
感染を処置する際の主な複雑化要因は、細菌の抗生物質耐性の出現である。Ｓ．エピデルミディス（ＭＲＳＥ）およびＳ．アウレウス（ＭＲＳＡ）におけるメチシリン耐性は、実際に多剤耐性を表わし、それがこれらの病原の根絶を非常に困難にしている。しかし、検査された何百もの菌株のスタフィロコッカス属は、ＢＴへの耐性を示さなかった。更に亜阻止（ｓｕｂＭＩＣ）濃度のＢＴは、複数の重要な抗生物質に対して耐性を低下させた。
【０２６９】
スタフィロコッカス・アウレウス  ＭＲＳＡに対するｓｕｂＭＩＣのビスマスエタンジチオール（ＢｉｓＥＤＴ）の抗生物質再感作的効果（ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ−ｒｅｓｅｎｓｉｔｉｚｉｎｇ  ｅｆｆｅｃｔｓ）のグラフ表示を提供すると（図４）、ゲンタマイシン、セファゾリン、セフェピム、イミペネム、スルファメトキサゾール、およびレボフロキサシンをはじめとする複数の分類の抗生物質による増強性抗生物質作用が示される。つまりＢｉｓＥＤＴは、ほとんどの抗生物質の活性を非特異的に増強した。
【０２７０】
ｓｕｂＭＩＣレベルのＢｉｓＥＤＴと組み合わせた複数の抗生物質を用いて、ブロス希釈による抗微生物感受性試験を、１２のＭＲＳＡ菌株に対して実施した。バイオフィルム予防濃度（ＢＰＣ）および最小阻止濃度（ＭＩＣ）の両方を、特別なバイオフィルム培地（ＢＨＩＧ／Ｘ）で測定した。ゲンタマイシンおよびセファゾリンのＭＩＣおよびＢＰＣは、ｓｕｂＭＩＣのＢｉｓＥＤＴにより低下したが（ＢｉｓＥＤＴ  ＭＩＣ、０．２〜０．４μｇ／ｍＬ）、感受性のブレークポイント未満ではなかった。ｓｕｂＭＩＣのＢｉｓＥＤＴは、ガチフロキサシンおよびセフェピムへのＭＲＳＡの感受性を、感受性のブレークポイント付近まで増強した。これらの菌株は、バンコマイシンには既に感受性があったが、ｓｕｂＭＩＣのＢｉｓＥＤＴの存在下では更に顕著になった。概してＭＩＣおよびＢＰＣは、ｓｕｂＭＩＣのＢｉｓＥＤＴによって２〜５倍低下した。
【表１８】
2018076358.tif 000021
１２のＭＲＳＡ臨床単離物をＢＨＩＧ／Ｘ中で発育させて、０〜０．１μｇ／ｍＬ  ＢｉｓＥＤＴの存在下で抗生物質の系列希釈物に暴露した。μｇ／ｍＬで計算されたＭＩＣおよびＢＰＣは、少なくとも３回のトライアルから得た平均±標準偏差である。右側の列は、抗生物質感受性（Ｓ）および耐性（Ｒ）に関する標準ＭＩＣを列挙している。
【０２７１】
セフェピム耐性ＭＲＳＡ単離物のブロス希釈試験を、表１９に示す。０．１μｇ／ｍＬのＢｉｓＥＤＴは、１２種の単離物のうち１１種で、セフェピムの阻害活性を有意に増強した。この特定の試験において、データは、ＢｉｓＥＤＴとセフェピムの間の相乗性を示しており（ＦＩＣ＜０．５）、単離物の多くが感受性のブレークポイントにあった。
【表１９】
2018076358.tif 000022
１２種のセフェピム耐性ＭＲＳＡを、ｓｕｂＭＩＣのＢｉｓＥＤＴと組み合わせたセフェピムへの感受性について、ポリスチレンプレート内のＢＨＩＧ／Ｘ培地で３７℃で４８時間検査した。
【０２７２】
ナフシリンまたはゲンタマイシンでの組み合わせ試験の結果を、表２０に示す。ナフシリンと組み合わせたＢｉｓＥＤＴ（０．２μｇ／ｍＬ）は、ナフシリンのＭＩＣ９０をＭＲＳＡに対して４倍を超えて低下させた（ＦＩＣ、０．７４）。ゲンタマイシンと組み合わせたＢｉｓＥＤＴは、ゲンタマイシンのＭＩＣ９０をＭＲＳＡに対して１０倍を超えて低下させた（ＦＩＣ、０．６）。ＢＴは、検査されたゲンタマイシン耐性単離物の４種全ての、臨床的に関連する濃度への耐性を抑制した［Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２］。これらの抗微生物剤のＭＩＣは、特にゲンタマイシンに関して、実質的に低下した。これらの試験に用いられたブロスは、２％グルコースを含むＴｒｙｐｔｉｃａｓｅ  Ｓｏｙ  Ｂｒｏｔｈ（ＴＳＢ）であり、１％ヒツジ血液を補強したＭｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ  ＩＩブロス中で認められたものと類似の結果を示した。
【表２０】
2018076358.tif 000023
ＮＡＦまたはＧＭはμｇ／ｍＬを表わし；ＢＥは０．２μｇ／ｍＬ
【０２７３】
スタフィロコッカス・エピデルミディス  抗生物質のほとんどの分類の活性が、ＢｉｓＥＤＴの存在下で促進された。ＢＰＣに関して、クリンダマイシンおよびガチフロキサシンは、ＢｉｓＥＤＴと組み合わせた場合に、Ｓ．エピデルミディスに対して有意に高い抗バイオフィルム活性を示した（図５）。異なる項目で述べると、クリンダマイシン、ガチフロキサシンおよびゲンタマイシンのＢＰＣは、ｓｕｂＭＩＣのＢｉｓＥＤＴの存在下でそれぞれ５０倍、１０倍および４倍低下した。
【０２７４】
バイオフィルム予防濃度（ＢＰＣ）のわずかな低下が、ミノサイクリン、バンコマイシン、およびセファゾリンで認められたが、リファンピシンおよびナフシリンは、０．０５μｇ／ｍＬ  ＢｉｓＥＤＴで依然として影響を示さなかった。０．１μｇ／ｍＬ  ＢｉｓＥＤＴでは、用いられた抗生物質とは無関係にバイオフィルムが検出されず、拮抗性が生じなかったことが表わされる。このＢｉｓＥＤＴ濃度は、Ｓ．エピデルミディスのＭＩＣに近似していた［Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３］（図５参照）。
【０２７５】
発育阻害に関して、検査された８種の抗生物質のうち７種が、Ｓ．エピデルミディスに対して、０．１μｇ／ｍＬ（０．５μＭ）ＢｉｓＥＤＴの存在下で有意に増強された（図６）。ＭＩＣの変動は、クリンダマイシンおよびゲンタマイシンで最も顕著であり、続いてバンコマイシン、セファゾリン、ミノサイクリン、ガチフロキサシンおよびナフシリンであり、リファンピシンは影響を及ぼさなかった。これらの菌株は、抗生物質のうち（ＮＣ、ＣＺ、ＧＭ、ＣＭ）に耐性があり、セファゾリン耐性のみが、ＢｉｓＥＤＴにより臨床的に関連するレベルに抑制された。
【０２７６】
Ｓ．エピデルミディスに対して検査されたほとんどの抗生物質の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）が、ｓｕｂＭＩＣのＢｉｓＥＤＴによりわずかに低下した。ゲンタマイシンは、ＭＢＣの最大低下を示し（４倍〜１６倍）、続いてセファゾリン（４倍〜５倍）、バンコマイシンおよびナフシリン（３倍〜４倍）、ミノサイクリンおよびガチフロキサシン（２倍〜３倍）となり、クリンダマイシンおよびリファンピシンのＭＢＣは、依然として大きな影響を受けなかった。クリンダマイシンは、静菌剤であり、殺菌活性がないことが説明される。セファゾリン耐性は、ＭＢＣに関しては抑制された［Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３］。これらの効果は、相加的であった。
【０２７７】
抗微生物剤の効能は、インビボでのラット移植片感染モデルにおいても実証された（表２１）。０．１μｇ／ｍＬという低レベルのＢｉｓＥＤＴで、７日間の耐性Ｓ．エピデルミディス・バイオフィルムの予防を促進することができた。
【０２７８】
表２１に要約された通り、０．１μｇ／ｍＬ  ＢｉｓＥＤＴ、１０μｇ／ｍＬ  ＲＩＰおよび１０μｇ／ｍＬリファンピンを単独で、または組み合わせて含浸させた移植片をラットの皮下へ移植した。２×１０７ｃｆｕ／ｍｌのＭＳおよびＭＲ菌株を含む生理学的溶液（１ｍｌ）を、ツベルクリン注射器を用いて移植片の表面へ接種した。移植片は全て、移植後７日目に取り出して、滅菌生理食塩液中で５分間音波処理して、付着した細菌を除去した。希釈物を血液寒天プレート上で培養することにより、生存する細菌の定量を得た。検出限界は、およそ１０ｃｆｕ／ｃｍ２であった。
【表２１】
2018076358.tif 000024
ａ  各群は動物１５匹であった。ＭＳ、メチシリン感受性Ｓ．エピデルミディス；ＭＲ、メチシリン耐性Ｓ．エピデルミディス
ｂ  ダクロン移植片に０．１ｍｇ／ｌのＢＴ、１０ｍｇ／ｌのＲＩＰ、１０ｍｇ／ｌのリファンピンを含浸させた。
ｃ  対照群のＭＳおよびＭＲと比較した場合に統計学的に有意
ｄ  ＭＳ３群と比較した場合に統計学的に有意
ｅ  ＭＲ１群、ＭＲ２群およびＭＲ３群と比較した場合に統計学的に有意
【０２７９】
グラム陰性菌  耐性シュードモナス・エルギノーサに対するトブラマイシンの活性が、ｓｕｂＭＩＣのＢｉｓＥＤＴにより数倍増強された（表２２）。これらのトライアルにおいて、ＭＩＣをＩＣ２４として、より正確に定義した。
【表２２】
2018076358.tif 000025
Ｐ．エルギノーサの耐性株を、トブラマイシン（ＮＮ）およびＢｉｓＥＤＴ（ＢＥ；０．３３μｇ／ｍｌ）の存在下、３７℃のＭｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ  ＩＩブロス中で培養した。ＭＩＣを、２４±１時間の発育を阻害する抗生物質濃度として測定した。
【０２８０】
トブラマイシン耐性バークホルデリア・セパシアに対して、０．４μｇ／ｍＬ  ＢｉｓＥＤＴは、１０種の単離物のうち７種をトブラマイシン感受性にし（平均ＦＩＣ；０．４８）、ＭＩＣ９０を１０倍低下させた（表２３）。トブラマイシンのＭＩＣおよびＭＢＣは両者とも、ｓｕｂＭＩＣのＢｉｓＥＤＴにより５０種の臨床的バークホルデリア・セパシア単離物に対して実現可能なレベルまで有意に低下した［Ｖｅｌｏｒｉａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３］。リポソーム形態のＢｉｓＥＤＴおよびトブラマイシンは、Ｐ．エルギノーサに対して立証された高い相乗性を有する（Ｈａｌｗａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００８；  Ｈａｌｗａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００９）。
【表２３】
2018076358.tif 000026
ａ  ０．４μｇ／ｍｌのＢｉｓＥＤＴにより阻害された３種の菌株は、更なる試験から除外した。
０．５以下のＦＩＣ指数は、相乗性を示し、０．５を超え１．０未満のＦＩＣは、増強性を示す。
【０２８１】
クロラムフェニコールおよびアンピシリン耐性エシェリヒア・コリは、ｓｕｂＭＩＣのＢｉｓＥＤＴの添加により、これらの薬物への感受性となった（表２４）。
【表２４】
2018076358.tif 000027
Ｅ．コリの耐性株を、単独または組み合わせでのクロラムフェニコール（ＣＭ）またはアンピシリン（ＡＭＰ）およびＢｉｓＥＤＴの存在下、３７℃のＭｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ  ＩＩブロス中で培養した（ＢＥ：０．３３μｇ／ｍｌ）。ＭＩＣを、２４±１時間の発育を阻害した抗生物質濃度として測定した。
【０２８２】
テトラサイクリン耐性エシェリヒア・コリは、ｓｕｂＭＩＣのＢｉｓＥＤＴの添加により、テトラサイクリンへの感受性となった（表２５）。その組み合わせは、ＴＥＴ  ＭおよびＴＥＴ  Ｄ株に対して相乗性を示し（ＦＩＣ≦０．５）、ＴＥＴ  ＡおよびＴＥＴ  Ｂ株に対して相加効果を示した。
【表２５】
2018076358.tif 000028
Ｅ．コリの耐性株を、単独または組み合わせでのドキシサイクリン（ＤＯＸ）およびＢｉｓＥＤＴの存在下、３７℃のＭｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ  ＩＩブロス中で培養した（ＢＥ：０．３３μｇ／ｍｌ）。ＭＩＣを、２４±１時間の発育を阻害した抗生物質濃度として測定した。
【０２８３】
参考資料
Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  Ｐ，  Ｒ  Ｏ’Ｌｅａｒｙ，  ＢＡ  Ｃｕｎｈａ．  １９９２．  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｂｉｓｍｕｔｈ  ａｎｄ  ｓａｌｉｃｙｌａｔｅ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ｏｎ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  Ｐｓｅｕｄｏｍａｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｉｎｆｅｃ  Ｄｉｓ  １１：１７０−１７５；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  Ｐ，  Ｄ  Ｐａｒｉｋｈ，  ＢＡ  Ｃｕｎｈａ．  １９９４．  Ｂｉｓｍｕｔｈ  ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｇａｉｎｓｔ  ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｐａｔｈｏｇｅｎｓ．  Ｍｅｄ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｌｅｔｔ  ３：１１４−１１９；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  Ｐ，  Ｋａｚｚａｚ  ＪＡ，  Ｄａｖｉｓ  ＪＭ，  Ｎｉｅｄｅｒｍａｎ  ＭＳ．２００２．  Ｓｕｂｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｂｉｓｍｕｔｈ  ｅｔｈａｎｅｄｉｔｈｉｏｌ（ＢｉｓＥＤＴ）ｓｅｎｓｉｔｉｚｅｓ  ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ｔｏ  ｎａｆｃｉｌｌｉｎ  ｏｒ  ｇｅｎｔａｍｉｃｉｎ．  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ，  ＡＳＭ，  Ｓａｌｔ  Ｌａｋｅ  Ｃｉｔｙ，  ＵＴ；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  Ｐ，  Ｋａｚｚａｚ  ＪＡ，  Ｄａｖｉｓ  ＪＭ．  ２００３．  Ｃｏｍｂａｔｉｎｇ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｗｉｔｈ  ｂｉｓｍｕｔｈ−ｔｈｉｏｌ．  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ３：７９−８５；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  Ｐ，  Ｅ  Ｇｕｒｚｅｎｄａ，  Ａ  Ｇｉａｃｏｍｅｔｔｉ，  Ｏ  Ｃｉｒｉｏｎｉ，  Ｒ  Ｇｈｉｓｅｌｌｉ，  Ｆ  Ｏｒｌａｎｄ，  Ｍ  Ｋｏｒｅｍ，  Ｖ  Ｓａｂａ，  Ｇ  Ｓｃａｌｉｓｅ，  Ｎ  Ｂａｌａｂａｎ．  ２００４．  ＢｉｓＥＤＴ  ａｎｄ  ＲＩＰ  ａｃｔ  ｉｎ  ｓｙｎｅｒｇｙ  ｔｏ  ｐｒｅｖｅｎｔ  ｇｒａｆｔ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  ｂｙ  ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ．  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ２５：２０４７−２０５３；  Ｈａｌｗａｎｉ  Ｍ，  Ｂｌｏｍｍｅ  Ｓ，  Ｓｕｎｔｒｅｓ  ＺＥ，  Ａｌｉｐｏｕｒ  Ｍ，  Ａｚｇｈａｎｉ  ＡＯ，  Ｋｕｍａｒ  Ａ，  Ｏｍｒｉ  Ａ．  ２００８．  Ｌｉｐｏｓｏｍａｌ  ｂｉｓｍｕｔｈ−ｅｔｈａｎｅｄｉｔｈｉｏｌ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ｅｎｈａｎｃｅｓ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｔｏｂｒａｍｙｃｉｎ．  Ｉｎｔｌ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ  ３５８：２７８−８４；Ｈａｌｗａｎｉ  Ｍ，  Ｈｅｂｅｒｔ  Ｓ，  Ｓｕｎｔｒｅｓ  ＺＥ，  Ｌａｆｒｅｎｉｅ  ＲＭ，  Ａｚｇｈａｎｉ  ＡＯ，  Ｏｍｒｉ  Ａ．  ２００９．  Ｂｉｓｍｕｔｈ−ｔｈｉｏｌ  ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ  ｅｎｈａｎｃｅｓ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ｌｉｐｏｓｏｍａｌ  ｔｏｂｒａｍｙｃｉｎ  ａｇａｉｎｓｔ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｂｉｏｆｉｌｍ  ａｎｄ  ｑｕｏｒｕｍ  ｓｅｎｓｉｎｇ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ  ３７３：１４１−６；  Ｖｅｌｏｉｒａ  ＷＧ，  Ｇｕｒｚｅｎｄａ  ＥＭ，  Ｄ���ｍｅｎｉｃｏ  Ｐ，  Ｄａｖｉｓ  ＪＭ，  Ｋａｚｚａｚ  ＪＡ．  ２００３．  Ｓｙｎｅｒｇｙ  ｏｆ  ｔｏｂｒａｍｙｃｉｎ  ａｎｄ  ｂｉｓｍｕｔｈ  ｔｈｉｏｌｓ  ａｇａｉｎｓｔ  Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｃｅｐａｃｉａ．  Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ５２：９１５−９１９．
【０２８４】
実施例９
微粒子ＢＴ−抗生物質の増強および相乗活性
この実施例は、微粒子ビスマスチオールであるＢｉｓＥＤＴが、特異的な微生物標的生物体に対する特異的抗生物質との増強的および／または相乗的相互作用を通して抗生物質活性を促進することを示す。表２６に示された各組み合わせの一点データは、本質的には実施例８で用いられた方法に従って作成した。
【表２６】
2018076358.tif 000029
ＳＡ、スタフィロコッカス・アウレウス；ＭＲＳＡ、メチシリン耐性スタフィロコッカス・アウレウス；ＥＦｃ、エンテロコッカス・フェカーリス；ＳＰ、ストレプトコッカス・ニューモニエ；ＰＲＳＰ、ペニシリン耐性ストレプトコッカス・ニューモニエ；ＥＣ、エシェリヒア・コリ；ＫＰ、クレブシエラ・ニューモニエ；ＰＡ、シュードモナス・エルギノーサ；Ｂｃｅｐ、バークホルデリア・セパシア；Ｂｍｕｌｔ、バークホルデリア・マルチボランス；Ａｂａｕ、アシネトバクター・バウマニー；Ｍｓｍｅｇ、マイコバクテリウム・スメグマチス
【０２８５】
実施例１０
微粒子ＢＴ−抗生物質の増強および相乗活性
先に記載された通り調製された微粒子ＢｉｓＥＤＴおよび４種のＢｉｓＥＤＴ類似体と他の薬剤との組み合わせの、複数のグラム陰性病原菌の代表的菌株に対する効果を検査した。一般的検査法の変法を利用して、用いられた部分阻止濃度（ＦＩＣ）およびＦＩＣ指数（ＦＩＣＩ）の相乗性（ＦＩＣＩ≦０．５）、増強性（０．５＜ＦＩＣＩ≦１．０）、拮抗性（ＦＩＣＩ＞４．０）および重要性なし（１．０＜ＦＩＣＩ≦４．０）を決定した（Ｖ  Ｌｏｒｉａｎ．  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｋｉｎｓ，  Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，  ＭＤにより編集されたＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  ｉｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  ｐｐ．４３２−４９２内のＥｌｉｐｏｕｌｏｓ  Ｇ  ａｎｄ  Ｒ  Ｍｏｅｌｌｅｒｉｎｇ．  １９９１．  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ．；  Ｏｄｄｓ，  ２００３  Ｊ．  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ５２（１）：１）。チェッカーボード技術を用いて、ＦＩＣ指数を決定し、この試験に用いた。
【表２７】
2018076358.tif 000030
【０２８６】
全ての検査物質の原液を、適切な溶媒で最終目的濃度の４０倍に調製した。検査物質は全て、これらの条件下で溶液であった。菌株が検査剤に対して全体的に耐性とならない限り、各検査生物体に関する各薬剤のＭＩＣ値が一括されるように、ＦＩＣアッセイプレート内の最終薬物濃度を設定した。検査された濃度範囲を、表２７に示している。検査生物体は、最初、臨床的供給源から、またはＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから入手した。入手の際に、単離物をＴｒｙｐｔｉｃ  Ｓｏｙ  Ａｇａｒ  ＩＩ（ＴＳＡ）上にストリークした。コロニーをこれらのプレートから回収し、凍結保護物質を含有する適切なブロス発育培地で細胞懸濁液を調製した。その後、アリコットを−８０℃で凍結した。所定のアッセイで検査される生物体の凍結シードを解凍し、単離するためにＴＳＡプレートにストリークし、３５℃でインキュベートした。生物体は全て、Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ  ＩＩ  Ｂｒｏｔｈ（Ｂｅｃｋｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、ロット番号９０４４４１１）で検査した。ブロスを通常の重量／容量の１．０５倍で調製して、最終的な試験プレートの薬物の５％容量を相殺した。
【０２８７】
最終阻止濃度（ＭＩＣ）値は、好気性菌用のブロス微量希釈法を利用して、これまで通り測定した（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＣＬＳＩ）．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｄｉｌｕｔｉｏｎ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｓ  ｆｏｒ  Ｂａｃｔｅｒｉａ  Ｔｈａｔ  Ｇｒｏｗ  Ａｅｒｏｂｉｃａｌｌｙ；  Ａｐｐｒｏｖｅｄ  Ｓｔａｎｄａｒｄ−Ｅｉｇｈｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ．  ＣＬＳＩ  ｄｏｃｕｍｅｎｔ  Ｍ０７−Ａ８［ＩＳＢＮ  １−５６２３８−６８９−１］．  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、９４０  Ｗｅｓｔ  Ｖａｌｌｅｙ  Ｒｏａｄ，  Ｓｕｉｔｅ  １４００，  Ｗａｙｎｅ，  Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ  １９０８７−１８９８  ＵＳＡ，  ２００９）。
【０２８８】
ＦＩＣ値は、過去に記載されたブロス微量希釈法を用いて測定した（Ｓｗｅｅｎｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ４７（６）：１９０２−１９０６）。検査プレートを調製するために、自動リキッドハンドラー（Ｍｕｌｔｉｄｒｏｐ  ３８４，  Ｌａｂｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｈｅｌｓｉｎｋｉ，  Ｆｉｎｌａｎｄ；  Ｂｉｏｍｅｋ  ２０００およびＭｕｌｔｉｍｅｋ  ９６，  Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，  Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ  ＣＡ）を用いて、系列希釈および液体移動を実施した。
【０２８９】
Ｍｕｌｔｉｄｒｏｐ  ３８４を用いて、標準の９６ウェル微量希釈プレート（Ｆａｌｃｏｎ  ３９１８）の適切なウェルに適切な溶媒１５０μＬを、２列目から１２列目まで充填した。各第二の検査薬３００μＬを、プレートの１列目の各ウェルに添加した。これらのプレートを用いて、薬物の組み合わせプレート用の系列希釈を提供する薬物の「マザープレート」を調製した。Ｂｉｏｍｅｋ  ２０００を用いて、マザープレートの１列目のウェルから各第二の薬物溶液（４０倍）１５０μＬを移し入れて、１１個の２倍希釈系列を生成した。Ｂｉｓ−ＥＤＴ（および類似体）のマザープレートを、マルチチャンネルピペットを用いて用手法で上から下へ系列希釈した。２枚のマザープレート、つまり各第二の薬物用の１枚およびＢｉｓ−ＥＤＴ（または類似体）用の１枚を組み合わせて、（マルチチャンネルピペットを用いて）同容量を薬物組み合わせプレートへ移し入れることにより、「チェッカーボード」パターンを形成させた。Ｈ行および１２列は、それぞれＭＩＣを測定する薬物の１種単独での系列希釈を含んでいた。
【０２９０】
「ドータープレート」に、Ｍｕｌｔｉｄｒｏｐ  ３８４を用いて検査培地１８０μＬを添加した。その後、Ｍｕｌｔｉｍｅｋ  ９６を用いて、薬物溶液１０μＬを、薬物組み合わせマザープレートの各ウェルからドータープレートの対応する各ウェルへ一段階で移し入れた。最後に、ドータープレートに検査生物体を接種した。各生物体の標準化接種物を、公表されたガイドライン（ＣＬＳＩ，２００９）により調製した。全ての単離物について、各生物体の接種物を縦に分かれた滅菌リザーバ（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ）へ分配し、Ｂｉｏｍｅｋ  ２０００を用いてプレートに接種した。機器により標準化接種物１０μＬを各ウェルへ送達して、ドータープレート内の最終細胞濃度およそ５×１０５コロニー形成単位／ｍＬを得た。
【０２９１】
検査フォーマットにより、各化合物を単独で（１２列目および８行目）、そして薬物濃度を様々な比で組み合わせて検査する８×１２のチェッカーボードを作製した。生物体プレートは全て、３枚ずつ積み重ね、最上プレートに蓋をかぶせて、プラスチック袋に入れ、３５℃でおよそ２０時間インキュベートした。インキュベーションの後、マイクロプレートをインキュベータから取り出し、ＳｃｉｅｎｃｅＷａｒｅプレートビューワを用いて底から見た。準備された読み取りシートに、薬物１（Ｈ行目）のＭＩＣ、薬物２（１２列目）のＭＩＣおよび発育ありとなしの境界のウェルを記入した。
【０２９２】
エクセルプログラムを用いて、式：（組み合わせにおける化合物１のＭＩＣ／化合物１単独のＭＩＣ）＋（組み合わせにおける化合物２のＭＩＣ／化合物２単独のＭＩＣ）によりＦＩＣを測定した。チェッカーボード用のＦＩＣＩは、式：（ＦＩＣ１＋ＦＩＣ２＋．．．ＦＩＣｎ）／ｎ（式中、ｎ＝ＦＩＣを計算するプレートあたりの各ウェルの数）により、各ＦＩＣから計算した。単独の薬物で測定域を外れたＭＩＣ結果を生じた場合には、最高の次の濃度を、ＦＩＣ計算でのＭＩＣ値として用いた。
【０２９３】
微粒子Ｂｉｓ−ＥＤＴ、４種の微粒子ＢＴ類似体、および他の薬剤（および薬剤の組み合わせ）の全てが、全ての最終検査濃度で可溶性であった。測定されたＭＩＣおよびＦＩＣＩ値を、以下の表に示す。
【表２８】
2018076358.tif 000031
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表２９】
2018076358.tif 000032
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表３０】
2018076358.tif 000033
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表３１】
2018076358.tif 000034
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表３２】
2018076358.tif 000035
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表３３】
2018076358.tif 000036
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表３４】
2018076358.tif 000037
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表３５】
2018076358.tif 000038
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表３６】
2018076358.tif 000039
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表３７】
2018076358.tif 000040
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表３８】
2018076358.tif 000041
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表３９】
2018076358.tif 000042
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表４０】
2018076358.tif 000043
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表４１】
2018076358.tif 000044
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表４２】
2018076358.tif 000045
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表４３】
2018076358.tif 000046
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表４４】
2018076358.tif 000047
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表４５】
2018076358.tif 000048
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表４６】
2018076358.tif 000049
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【表４７】
2018076358.tif 000050
１ＭＩＣ、最小阻止濃度
２ＦＩＣＩ、部分阻止濃度指数
【０２９４】
実施例１１
ドブネズミの大腿骨臨界欠損における感染へのビスマス−チオールの効果
開放骨折のための現行のケア標準法は、イリゲーション、壊死組織除去および抗生物質であり、これは、創傷における細菌量を感染が生じない程度に減少させることを意図するものである。これらの処置にもかかわらず、感染は、戦争による重度の脛骨開放骨折の最大７５％を複雑化させる。興味深いことに、初期感染が、多くの場合グラム陰性菌により起こるとしても、治癒問題および切断に関与する後期感染は、グラム陽性菌感染、多くはスタフィロコッカス種によるものである（Ｊｏｈｎｓｏｎ  ２００７）。
【０２９５】
Ｓ．アウレウスが標準処置に耐性である理由の一つは、バイオフィルムを形成する能力である。バイオフィルム内の細菌は、培地中の類似の生物体を殺傷する抗微生物化合物の濃度に耐えることができる（Ｃｏｓｔｅｒｔｏｎ  １９８７）。
【０２９６】
この試験の目的は、ＢＴが単独または抗生物質と一緒になって、汚染された開放骨折モデルでの感染を低減するか、を決定することであった。汚染されたラット大腿骨臨界欠損モデルは、十分に容認されたモデルであり、この実施例に記載された実験に用いた。このモデルは、様々な潜在的処置およびその効果を、感染の低減および／または治癒の改善に関して比較するための標準化モデルである。
【０２９７】
化合物（ＣＰＤ）ＣＰＤ−８−２（ビスマス−ピリチオン／ブタンジチオール；表１）およびＣＰＤ−１１（ビスマスピリチオン／エタンジチオール；表１）は、Ｂｉｓ−ＥＤＴとは異なるスペクトルの活性を有するにもかかわらず、インビトロでバイオフィルム分泌細菌に対する能力を示した２種のＢＩＳ−Ｂｉｓ類似体である。
【０２９８】
３種のＢＴ配合剤：Ｂｉｓ−ＥＤＴ、ＣＰＤ−１１およびＣＰＤ−８−２（表１参照）は、ポリメチルメタクリラート（ＰＭＭＡ）セメントビーズビヒクル中のトブラマイシンおよびバンコマイシンを伴って、または伴わずに用いた場合、インビトロでのＳ．アウレウス株に対して阻害効果を示した。微粒子ＢＴの３種の配合剤を、本明細書に記載された臨床的に有用なハイドロゲル形態で製造した。これらのＢＴを、ゲル送達のための適切な濃度であることが見出された５ｍｇ／ｍｌ−１濃度で、ゲルに懸濁させて検査した。ゲル配合剤は、創傷の輪郭に適合し、適用後に除去する必要はなかった。
【０２９９】
２つの処置目的を利用し、第一の目的ではＢＴを単独で用い、第二の目的ではＢＴを全身性抗生物質（ＡＢｘ）と一緒に使用した。
【０３００】
（ａ）ＢＴ単独
Ｓ．アウレウスの接種後６時間目に、創傷の壊死組織を除去して、生理食塩水でイリゲーションし、ＢＴゲル  １ｍｌを欠損内に挿入した。
【０３０１】
（ｂ）ＢＴおよび全身性抗生物質（ＡＢｘ）
Ｓ．アウレウスの接種後６時間目に、創傷の壊死組織除を除去して、生理食塩水でイリゲーションし、添加されたＢＴゲル  １ｍｌを欠損内に挿入した。用いられた抗生物質は、損傷後合計３日間に１日２回の皮下注射により送達された５ｍｇｋｇ−１と等しい用量のセファゾリンであった。最初の用量は、壊死組織除去の直前に投与した。過去のデータから、この用量が細菌レベルを約１０６から約１０４へ低減し、それゆえ異なるＢＴの相対的効果を測定する可能性が示唆された。
【０３０２】
（ｃ）対照
Ｓ．アウレウスの接種後６時間目に、創傷の壊死組織を除去して、生理食塩水でイリゲーションした。対照動物は、先に記載されたレジメンによりセファゾリンでも処置した。
【０３０３】
手順：
インビボラット損傷モデルの手順を、Ｃｈｅｎ他により記載された通り実施した（２００２  Ｊ．  Ｏｒｔｈｏｐ．  Ｒｅｓ．２０：１４２；２００５  Ｊ．  Ｏｒｔｈｏｐ．  Ｒｅｓ．  ２３：８１６；２００６  Ｊ．  Ｂｏｎｅ  Ｊｏｉｎｔ  Ｓｕｒｇ．  Ａｍ．  ８８：１５１０；  ２００７  Ｊ．  Ｏｒｔｈｏｐ．  Ｔｒａｕｍａ  ２１：６９３）。ラットに麻酔をかけて、手術の準備をした。大腿骨骨幹部の前外側面を、３ｃｍ切開して暴露させた。骨膜および付着した筋肉を、骨から剥離させた。ポリアセチルプレート（２７×４×４ｍｍ）を大腿骨の前外側表面に配置した。プレートをプレドリルして、０．９ｍｍ径のねじれたキルシュナーワイヤを通した。これらのプレートの基板は、大腿骨骨幹部の輪郭に適合するようにかたどった。プレートを鋳型として用いて両方の大腿皮質骨を通して、パイロットホールを削り、プレートおよび大腿骨を通してねじれたキルシュナーワイヤを挿入した。プレート上の６ｍｍ間隔に存在するくぼみが、骨の除去のためのガイドになった。熱による損傷を予防する試みとして、組織を継続的なイリゲーションにより冷却しながら、小型の振動鋸を用いて欠損を作製した。
【０３０４】
１０匹からなる複数の群それぞれに、Ｓ．アウレウス  １×１０５ＣＦＵを接種して、先に記載された通り、接種後６時間目にＢＴを単独で、または抗生物質と組み合わせて処置した。群は以下の通りであった：Ｂｉｓ−ＥＤＴゲル；ＭＢ−８−２ゲル；Ｂｉｓ−ＥＤＴゲル；Ｂｉｓ−ＥＤＴゲル＆Ａｂｘ；ＭＢ−１１ゲル＆Ａｂｘ；ＭＢ−８−２ゲル＆Ａｂｘ；対照（Ａｂｘのみ）。
【０３０５】
手術の１４日後に動物を安楽死させて、骨および装置を微生物分析に送り、その結果を図７に示している。
【０３０６】
検出力分析に基づけば、群あたり動物１０匹は、処置群と対照群の間の２５％の差を検出するのに８０％の検出力を与えることになる。この場合、予測された標準偏差は３５％でαは０．０５である。
【０３０７】
図７に示す通り、Ｂｉｓ−ＥＤＴ、ＭＢ−１１およびＭＢ−８−２と組み合わせると、セファゾリンの抗生物質活性は、セファゾリンまたは任意のＢｉｓ化合物の単独と比較して増強され、損傷した骨のＳ．アウレウス感染を低減した。ＭＢ−１１およびＭＢ−８−２と組み合わせたセファゾリンは、単独のセファゾリンと比較して高い抗生物質活性を示し、装置上で検出されたＳ．アウレウス感染を低減することを示した。Ｂｉｓ−ＥＤＴは、この能力におけるセファゾリン活性に影響を及ぼすことは考えられなかった。
【０３０８】
参考資料：
Ｃｏｓｔｅｒｔｏｎ  ＪＷ，  Ｃｈｅｎｇ  ＫＪ，  Ｇｅｅｓｅｙ  ＧＧ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｂａｃｅｒｉａｌ  Ｂｉｏｆｉｌｍｓ  ｉｎ  Ｎａｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ．  Ａｎｎ  Ｒｅｖ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．  １９８７；４１：４３５−６４
Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  Ｐ，  Ｂａｌｄａｓｓａｒｒｉ  Ｌ，  Ｓｃｈｏｃｈ  ＰＥ，  Ｋａｅｈｌｅｒ  Ｋ，  Ｓａｓａｔｓｕ  Ｍ，  Ｃｕｎｈａ  ＢＡ．  Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  Ｂｉｓｍｕｔｈ  Ｔｈｉｏｌｓ  ａｇａｉｎｓｔ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ  ａｎｄ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｃｏｃａｌ  Ｂｉｏｆｉｌｍｓ．  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ２００１；４５（５）：１４１７−２１
Ｈａｌｗａｎｉ  Ｍ，  Ｂｌｏｍｍｅ  Ｓ，  Ｓｕｎｔｒｅｓ  ＺＥ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｌｉｐｏｓｏｍａｌ  ｂｉｓｍｕｔｈ−ｅｔｈａｎｅｄｉｔｈｏｌ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ｅｎｈａｎｃｅｓ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｔｏｂｒａｍｙｃｉｎ．  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ．  ２００８；３５８：２７８−８４
Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＥＮ，  Ｂｕｒｎｓ  ＴＣ，  Ｈａｙｄａ  ＲＡ，  Ｈｏｓｐｅｎｔｈａｌ  ＤＲ，  Ｍｕｒｒａｙ  ＣＫ．  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｏｐｅｎ  ｔｙｐｅ  ＩＩＩ  ｔｉｂｉａｌ  ｆｒａｃｔｕｒｅｓ  ａｍｏｎｇ  ｃｏｍｂａｔ  ｃａｓｕａｌｔｉｅｓ．  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ．  ２００７；  ４５（４）：４０９−４１５
【０３０９】
他の引用文書および関連文書
Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎａｄｉａｎ  Ｊ．  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．  ３１：４７２−７８（１９８５）；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｐｓｕｌａｒ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ａｎｄ  ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｍｉｎｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｉｎ  ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｂａｃｔｅｒｉａ  ｗｉｔｈ  ｂｉｓｍｕｔｈ  ｓｕｂｓａｌｉｃｙｌａｔｅ．  Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ｃｈｅｍｏ  １９９１；２８：８０１−８１０；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ２０：６６−７２（１９９２）；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｆｅｃｔ．  Ｉｍｍｕｎ．  ６２：４４９５−９９（１９９４）；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｌ．  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ３８：１０３１−４０（１９９６）；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｂｉｓｍｕｔｈ  ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｗｉｔｈ  ｌｉｐｏｐｈｉｌｉｃ  ｔｈｉｏｌ  ｃｈｅｌａｔｏｒｓ．  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  １９９７；４１：１６９７−７０３；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｕｒｆａｃｅ  ａｎｔｉｇｅｎ  ｅｘｐｏｓｕｒｅ  ｂｙ  ｂｉｓｍｕｔｈ−ｄｉｍｅｒｃａｐｒｏｌ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  ｃａｐｓｕｌａｒ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ．  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ  ６７：６６４−６６９（１９９９）；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０００．  Ｔｈｅ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｏｆ  ｂｉｓｍｕｔｈ−ｔｈｉｏｌｓ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｍｅｄ  １７：１２３−１２７；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ｂｉｓｍｕｔｈ  ｔｈｉｏｌｓ  ａｇａｉｎｓｔ  ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ  ａｎｄ  ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃａｌ  ｂｉｏｆｉｌｍｓ．  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ２００１；  ４５：１４１７−２１；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｏｍｂａｔｉｎｇ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｗｉｔｈ  ｂｉｓｍｕｔｈ−ｔｈｉｏｌｓ．  Ｒｅｓａｅｒｃｈ  Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ２００３；  ３：７９−８５；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｐｓｕｌａｒ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ａｎｄ  ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｍｉｎｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｉｎ  ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｂａｃｔｅｒｉａ  ｗｉｔｈ  ｂｉｓｍｕｔｈ  ｓｕｂｓａｌｉｃｙｌａｔｅ．  Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ｃｈｅｍｏ  １９９１；２８：８０１−８１０；  Ｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ＢｉｓＥＤＴ  ａｎｄ  ＲＩＰ  ａｃｔ  ｉｎ  ｓｙｎｅｒｇｙ  ｔｏ  ｐｒｅｖｅｎｔ  ｇｒａｆｔ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  ｂｙ  ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ．  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ２００４．；２５：２０４７−５３；  ��ｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００５．  Ｐｙｒｉｔｈｉｏｎ  ｅｎｈａｎｃｅｄ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｂｉｓｍｕｔｈ．  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃｉａｎｓ  ９：２９１−２９７；米国特許第６，５８２，７１９号；米国特許ＲＥ３７，７９３号、米国特許第６，２４８，３７１号、同６，０８６，９２１号、同６，３８０，２４８号；同第６，５８２，７１９号、同第６，３８０，２４８号、同第６，８７５，４５３号。
【０３１０】
先に記載された様々な実施形態を組み合わせて、更なる実施形態を提供することができる。本明細書において参照され、そして／または出願データシートに列挙された米国特許、米国特許出願公開、米国特許出願、外国特許、外国特許出願および非特許発行物の全てが、参照により全体として本明細書に組み入れられる。実施形態の態様は、必要に応じて改良され、様々な特許、出願および公開の概念を用いて更なる実施形態を提供することができる。
【０３１１】
先に詳述された記載に照らして、実施形態にこれらおよび他の変更を施すことができる。一般に以下の特許請求の範囲において、用いられる用語は、特許請求の範囲を本明細書および特許請求の範囲に開示された特定の実施形態に限定するものと解釈してはならず、そのような特許請求の範囲が権利を与えた均等物の全ての範囲と共に、可能な実施形態全てを包含すると解釈しなければならない。
【図１】
2018076358.tif 000051
【図２】
2018076358.tif 000052
【図３】
2018076358.tif 000053
【図４】
2018076358.tif 000054
【図５】
2018076358.tif 000055
【図６】
2018076358.tif 000056
【図７】
2018076358.tif 000057
【手続補正書】
【提出日】平成30年1月24日(2018.1.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の（Ｉ）および（ＩＩ）から選択される組成物：
（Ｉ）ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含むビスマス−チオール組成物であって、前記微粒子の実質的に全てが、０．４μｍ〜５μｍの体積平均径を有し、前記ＢＴ化合物が、ビスマスまたはビスマス塩およびチオール含有化合物を含み、
前記チオール含有化合物が、メタンチオール、エタンチオール、１−プロパンチオール、２−プロパンチオール、ブタンチオール、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン、ペンタンチオール、コエンザイムＡ、リポアミド、グルタチオン、システイン、シスチン、２−メルカプトインドール、トランスグルタミナーゼ、（１１−メルカプトウンデシル）ヘキサ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）官能基化金ナノ粒子、１，１’，４’，１’’−テルフェニル−４−チオール、１，１１−ウンデカンジチオール、１，１６−ヘキサデカンジチオール、１，４−ベンゼンジメタンチオール、１，４−ブタンジチオール二酢酸塩、１，５−ペンタンジチオール、１，６−ヘキサンジチオール、１，８−オクタンジチオール、１，９−ノナンジチオール、アダマンタンチオール、１−ブタンチオール、１−デカンチオール、１−ドデカンチオール、１−ヘプタンチオール、１−ヘキサデカンチオール、１−ヘキサンチオール、１−メルカプト（トリエチレングリコール）、１−メルカプト（トリエチレングリコール）メチルエーテル官能基化金ナノ粒子、１−ノナンチオール、１−オクタデカンチオール、１−オクタンチオール、１−ペンタデカンチオール、１−テトラデカンチオール、１−ウンデカンチオール、１１−（１Ｈ−ピロル−１−イル）ウンデカン−１−チオール、１１−アミノ−１−ウンデカンチオール塩酸塩、１１−ブロモ−１−ウンデカンチオール、１１−メルカプト−１−ウンデカノール、１１−メルカプトウンデカン酸、１１−メルカプトウンデシルトリフルオロ酢酸塩、１１−メルカプトウンデシルリン酸、１２−メルカプトドデカン酸、１５−メルカプトペンタデカン酸、１６−メルカプトヘキサデカン酸、１Ｈ，１Ｈ，２Ｈ，２Ｈ−ペルフルオロデカンチオール、２，２’−（エチレンジオキシ）ジエタンチオール、２，３−ブタンジチオール、２−ブタンチオール、２−エチルヘキサンチオール、２−メチル−１−プロパンチオール、２−メチル−２−プロパンチオール、２−フェニルエタンチオール、３，３，４，４，５，５，６，６，６−ノナフルオロ−１−ヘキサンチオール、３−（ジメトキシメチルシリル）−１−プロパンチオール、３−クロロ−１−プロパンチオール、３−メルカプト−１−プロパノール、３−メルカプト−２−ブタノール、３−メルカプト−Ｎ−ノニルプロピオンアミド、３−メルカプトプロピオン酸、３−メルカプトプロピル−官能基化シリカゲル、３−メチル−１−ブタンチオール、４，４’−ビス（メルカプトメチル）ビフェニル、４，４′−ジメルカプトスチルベン、４−（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンジルアルコール、４−シアノ−１−ブタンチオール、４−メルカプト−１−ブタノール、６−（フェロセニル）ヘキサンチオール、６−メルカプト−１−ヘキサノール、６−メルカプトヘキサン酸、８−メルカプト−１−オクタノール、８−メルカプトオクタン酸、９−メルカプト−１−ノナノール、ビフェニル−４，４’−ジチオール、３−メルカプトプロピオン酸ブチル、１−ブタンチオール酸銅（Ｉ）、シクロヘキサンチオール、シクロペンタンチオール、デカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化金ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ヘキサ（エチレングリコール）モノ−１１−（アセチルチオ）ウンデシルエーテル、メルカプトコハク酸、３−メルカプトプロピオン酸メチル、ヘプタンヒドラジドビスフェノールＡ置換５−（ヒドロキシメチル）−１，３−ビス（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンゼン、オクタデカンチオール試薬、オクタンチオール試薬、１１−メルカプトウンデカン酸試薬、１６−メルカプトヘキサデカン酸試薬、１１−メルカプト−１−ウンデカノール試薬、１，８−オクタンジチオール、オクタンチオール官能基化金ナノ粒子、ＰＥＧジチオール平均Ｍｎ８，０００、ＰＥＧジチオール平均分子量１，５００、ＰＥＧジチオール平均分子量３，４００、Ｓ−（１１−ブロモウンデシル）チオアセタート、Ｓ−（４−シアノブチル）チオアセタート、チオフェノール、トリエチレングリコールモノ−１１−メルカプトウンデシルエーテル、トリメチロールプロパントリス（３−メルカプトプロピオナート）、［１１−（メチルカルボニルチオ）ウンデシル］テトラ（エチレングリコール）、ｍ−カルボラン−９−チオール、ｐ−テルフェニル−４，４’’−ジチオール、ｔｅｒｔ−ドデシルメルカプタン、およびｔｅｒｔ−ノニルメルカプタンからなる群から選択される１種以上の薬剤を含む組成物；および
（ＩＩ）ビスマス‐チオール組成物であって、ビスマス‐チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、前記微粒子の実質的に全てが、０．４μｍ〜５μｍの体積平均径を有し、
（ａ）固体沈殿物を実質的に含まない溶液を得るのに十分となる条件および時間で、（ｉ）少なくとも５０ｍＭの濃度のビスマスを含むビスマス塩を含み、親水性、極性、または有機性可溶化剤を含まない酸性水溶液を、（ｉｉ）２５容量％のエタノールを含む混和物を得るのに十分な量のエタノールと混和すること、ならびに、
（ｂ）チオール含有化合物を含むエタノール性溶液を（ａ）の混和物に添加して反応溶液を得ることであって、前記チオール含有化合物が、前記ＢＴ化合物を含む微粒子を含む沈殿物の形成に十分となる時間および条件で、前記ビスマスに対して１：３〜３：１のモル比で前記反応溶液中に存在し、前記チオール含有化合物が、メタンチオール、エタンチオール、１−プロパンチオール、２−プロパンチオール、ブタンチオール、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン、ペンタンチオール、コエンザイムＡ、リポアミド、グルタチオン、システイン、シスチン、２−メルカプトインドール、トランスグルタミナーゼ、（１１−メルカプトウンデシル）ヘキサ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）官能基化金ナノ粒子、１，１’，４’，１’’−テルフェニル−４−チオール、１，１１−ウンデカンジチオール、１，１６−ヘキサデカンジチオール、１，４−ベンゼンジメタンチオール、１，４−ブタンジチオール二酢酸塩、１，５−ペンタンジチオール、１，６−ヘキサンジチオール、１，８−オクタンジチオール、１，９−ノナンジチオール、アダマンタンチオール、１−ブタンチオール、１−デカンチオール、１−ドデカンチオール、１−ヘプタンチオール、１−ヘキサデカンチオール、１−ヘキサンチオール、１−メルカプト（トリエチレングリコール）、１−メルカプト（トリエチレングリコール）メチルエーテル官能基化金ナノ粒子、１−ノナンチオール、１−オクタデカンチオール、１−オクタンチオール、１−ペンタデカンチオール、１−テトラデカンチオール、１−ウンデカンチオール、１１−（１Ｈ−ピロル−１−イル）ウンデカン−１−チオール、１１−アミノ−１−ウンデカンチオール塩酸塩、１１−ブロモ−１−ウンデカンチオール、１１−メルカプト−１−ウンデカノール、１１−メルカプトウンデカン酸、１１−メルカプトウンデシルトリフルオロ酢酸塩、１１−メルカプトウンデシルリン酸、１２−メルカプトドデカン酸、１５−メルカプトペンタデカン酸、１６−メルカプトヘキサデカン酸、１Ｈ，１Ｈ，２Ｈ，２Ｈ−ペルフルオロデカンチオール、２，２’−（エチレンジオキシ）ジエタンチオール、２，３−ブタンジチオール、２−ブタンチオール、２−エチルヘキサンチオール、２−メチル−１−プロパンチオール、２−メチル−２−プロパンチオール、２−フェニルエタンチオール、３，３，４，４，５，５，６，６，６−ノナフルオロ−１−ヘキサンチオール、３−（ジメトキシメチルシリル）−１−プロパンチオール、３−クロロ−１−プロパンチオール、３−メルカプト−１−プロパノール、３−メルカプト−２−ブタノール、３−メルカプト−Ｎ−ノニルプロピオンアミド、３−メルカプトプロピオン酸、３−メルカプトプロピル−官能基化シリカゲル、３−メチル−１−ブタンチオール、４，４’−ビス（メルカプトメチル）ビフェニル、４，４′−ジメルカプトスチルベン、４−（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンジルアルコール、４−シアノ−１−ブタンチオール、４−メルカプト−１−ブタノール、６−（フェロセニル）ヘキサンチオール、６−メルカプト−１−ヘキサノール、６−メルカプトヘキサン酸、８−メルカプト−１−オクタノール、８−メルカプトオクタン酸、９−メルカプト−１−ノナノール、ビフェニル−４，４’−ジチオール、３−メルカプトプロピオン酸ブチル、１−ブタンチオール酸銅（Ｉ）、シクロヘキサンチオール、シクロペンタンチオール、デカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化金ナノ粒子、ドデカンチオール官能基化銀ナノ粒子、ヘキサ（エチレングリコール）モノ−１１−（アセチルチオ）ウンデシルエーテル、メルカプトコハク酸、３−メルカプトプロピオン酸メチル、ヘプタンヒドラジドビスフェノールＡ置換５−（ヒドロキシメチル）−１，３−ビス（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンゼン、オクタデカンチオール試薬、オクタンチオール試薬、１１−メルカプトウンデカン酸試薬、１６−メルカプトヘキサデカン酸試薬、１１−メルカプト−１−ウンデカノール試薬、１，８−オクタンジチオール、オクタンチオール官能基化金ナノ粒子、ＰＥＧジチオール平均Ｍｎ８，０００、ＰＥＧジチオール平均分子量１，５００、ＰＥＧジチオール平均分子量３，４００、Ｓ−（１１−ブロモウンデシル）チオアセタート、Ｓ−（４−シアノブチル）チオアセタート、チオフェノール、トリエチレングリコールモノ−１１−メルカプトウンデシルエーテル、トリメチロールプロパントリス（３−メルカプトプロピオナート）、［１１−（メチルカルボニルチオ）ウンデシル］テトラ（エチレングリコール）、ｍ−カルボラン−９−チオール、ｐ−テルフェニル−４，４’’−ジチオール、ｔｅｒｔ−ドデシルメルカプタン、およびｔｅｒｔ−ノニルメルカプタンからなる群から選択される１種以上の薬剤を含む組成物。