(57)【要約】【課題】抗疲労効果を発揮する抗疲労食品組成物の摂取しやすい食品の形態での提供。【解決手段】加熱熟成ニンニクエキスを含んでなる、抗疲労用食品組成物。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
加熱熟成ニンニクエキスを含んでなる、抗疲労剤。
【請求項２】
日常生活での疲労感の蓄積を抑制するための、請求項１に記載の抗疲労剤。
【請求項３】
次の（１）〜（１１）：
（１）作業効率の向上ができる効能；
（２）リラックス感の低下の抑制ができる効能；
（３）ストレス感の蓄積が抑制できる効能；
（４）集中力の向上ができる効能；
（５）覚醒感の低下の抑制ができる効能；
（６）覚醒感の向上ができる効能；
（７）いきいきしている状態の低下の抑制ができる効能；
（８）熟睡感の向上ができる効能；
（９）起床時の疲労感が軽減できる効能；
（１０）自律神経のバランスを維持する効能；および
（１１）自律神経のバランスを改善する効能
からなる群から選択される少なくとも一つの効能を得るための、請求項１に記載の抗疲労剤。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗疲労剤を含んでなる、抗疲労用飲食品。
【請求項５】
加熱熟成ニンニクエキスと黒糖と黒酢と砂糖を含むペーストである、請求項４に記載の抗疲労用飲食品。
【請求項６】
加熱熟成ニンニクエキスを含んでなる、抗疲労用組成物。
【請求項７】
日常生活での疲労感の蓄積を抑制するための、請求項６に記載の抗疲労用組成物。
【請求項８】
次の（１）〜（１１）：
（１）作業効率の向上ができる効能；
（２）リラックス感の低下の抑制ができる効能；
（３）ストレス感の蓄積が抑制できる効能；
（４）集中力の向上ができる効能；
（５）覚醒感の低下の抑制ができる効能；
（６）覚醒感の向上ができる効能；
（７）いきいきしている状態の低下の抑制ができる効能；
（８）熟睡感の向上ができる効能；
（９）起床時の疲労感が軽減できる効能；
（１０）自律神経のバランスを維持する効能；および
（１１）自律神経のバランスを改善する効能
からなる群から選択される少なくとも一つの効能を得るための、請求項７に記載の抗疲労用組成物。
【請求項９】
食品組成物である、請求項７または８に記載の抗疲労用組成物。
【請求項１０】
加熱熟成ニンニクエキスと黒糖と黒酢と砂糖を含むペーストである、請求項９に記載の抗疲労用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗疲労食品組成物および抗疲労剤に関し、より具体的には、加熱熟成ニンニクエキスを有効成分として含有する抗疲労食品組成物および抗疲労剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、急激な社会構造の変化などにより、労働環境や生活環境は大きく変化してきているため、肉体的、身体的な疲労を感じている人が著しく増加している。１９９９年の旧厚生省疲労調査研究班が行った調査では、約６割の人が疲労感を感じているという結果が得られている。また最近では健康に生活していた人が急に原因不明の激しい倦怠感に襲われ、健全な社会生活が送れなくなる慢性疲労症候群の存在が明らかになり、病因、病態の解明や診断、治療法の開発が進められている。これらのことから、疲労感を予防、軽減できる食品を日々の食事で摂取することは、多くの人の健康の維持・増進にとって有益であると考えられる。
【０００３】
ニンニクは古くはエジプト時代から摂取されてきたとされており、現在ではその特徴的な味や香りから香辛料としての摂取、また滋養強壮、食欲増進効果などがある食品として摂取されている。ニンニク中に含まれるアリインは切る、潰す、擦るなどの処理により細胞が破壊されると、アリイナーゼの作用によりニンニク特有の香りや辛味成分であるアリシンへと変化する。そのため、生のニンニクを摂取するとアリシン等の硫黄化合物による香りが口や胃に残り不快である。ニンニクを加熱調理することでアリシンはスルフィド類などの誘導体へ変化するが、それらの誘導体も香りが強い成分が多いため、食べた後の臭いは長時間続く場合が多い。また生ニンニクを大量に摂取すると、アリシンの強い刺激により胃腸障害が発生する場合がある。このようなことからニンニクは食べる際の味や香りは好ましいが、食後の臭いの問題等で摂取するのを避けている人が多い。
【０００４】
熟成（黒）ニンニクは生のニンニクを長時間かけて加熱熟成することにより、アリイナーゼを不活性化することでニンニク特有の香りが弱く辛味のないニンニクとなる。熟成ニンニクの製造過程で、フルクタンなどの多糖類はフルクトースなどの単糖類に変化する。このことにより、甘味が増しプルーン様の味となり、調理せずに直接摂取できることから、近年摂取する人が増加している。また加熱熟成することで、生ニンニクには少ないＳ−アリルシステイン（S-allylcystein: SAC）やポリフェノールなどの機能性物質が著しく増加することから、生ニンニクは有していない新規な機能性が期待されている。
【０００５】
熟成ニンニクは通常７０℃前後で１ヶ月程度管理しながら熟成させるため、多くの時間や手間がかかり、高価なものとなっている（特許文献１）。
【０００６】
この問題を解決するため、短時間で熟成でき、特に機能性が期待されているＳ−アリルシステインを通常の熟成ニンニクよりも多く含有する熟成ニンニクエキスが報告されている（特許文献２）。
【０００７】
広義の疲労とは、一般に、運動などの身体的負荷またはデスクワークなどの精神的負荷を連続したときにみられる独特の不快感と身体的または精神的パフォーマンスの低下と定義されている。よって、抗疲労食品とは、身体的または精神的な負荷を与えられたときにみられる独特の不快感と身体的または精神的なパフォーマンスの低下を軽減する食品のことを指す。
【０００８】
当技術分野において、疲労の大きな要因は、脳にある自律神経の中枢が疲労することであることが知られている。また、近年の研究により、疲労の直接的原因となるのは、活性酸素による酸化ストレスであり、抗酸化力を有する抗酸化物質で酸化ストレスを軽減することにより疲労を軽減する効果をもたらすことが明らかになっている。抗酸化物質としては、ビタミン、ポリフェノール、カロテノイドなど様々な物質が知られているが、これらは抗酸化の作用機序が異なることや、生体内での抗酸化作用を発揮する時間が異なるため、生体内で抗疲労効果を発揮するのは一部であり、特に、脳の疲労回復に直接的に寄与し得る血液脳関門を通過可能な物質は、その中でもごく一部である。
【０００９】
これまで、ニンニクを含む抗疲労剤に関しては、オルニチンとの併用（特許文献３）、ニラ抽出物との併用（特許文献４）、カルノシン、アンセリン、バレリン並びにその塩からなるイミダゾールペプチドまたはその塩との併用（特許文献５）、他の複数の機能性原料との相乗効果により（特許文献６）抗疲労効果を示すという先行技術が従来からあった。熟成ニンニクに関しては、わずかに黒ニンニクの粉末と高麗人参を併用することで、抗疲労効果が認められたとの先行技術があった（特許文献７）。しかし、この黒ニンニクの抗疲労食品組成物に関しては、１日複数回摂取する必要があるため、摂取することが負担である可能性、飲み忘れの原因となる可能性があった。抗疲労効果の評価に関しては、２日間と短期間の摂取期間での評価であることから、長期的な摂取でも効果が得られるかは不明であった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特許第４０８０５０７号公報
【特許文献２】特許第５９６８７２９号公報
【特許文献３】特願２００７−５３８７７８号公報
【特許文献４】特開２００８−０７４７９２号公報
【特許文献５】特開２０１６−００８２０２号公報
【特許文献６】特開２００１−１１４６９５号公報
【特許文献７】特許第５６０１７４７号公報
【発明の概要】
【００１１】
以上に説明した状況下、客観的に評価が可能な長期的摂取でも継続的な効果が得られ、更に、摂取することが負担とならない抗疲労食品が必要とされていた。
【００１２】
本発明者らは、高機能性のＳ−アリルシステインなどを豊富に含む熟成ニンニクエキスを食べやすくペースト状にした食品組成物が、日々の生活の中での疲労感の蓄積を抑制し、その結果、作業効率を向上させることを見出した。本発明はこの知見に基づくものである。
【００１３】
従って、本発明は、日常生活での疲労感の蓄積の抑制ができる抗疲労効果を発揮する抗疲労食品組成物を摂取しやすい食品の形態として提供することを目的とするものである。
【００１４】
本発明によれば以下の発明が提供される。
第１の発明は、加熱熟成ニンニクエキスを含んでなる、抗疲労剤である。
第２の発明は、日常生活での疲労感の蓄積を抑制するための、第１の発明に記載の抗疲労剤である。
第３の発明は、次の（１）〜（１１）：
（１）作業効率の向上ができる効能；
（２）リラックス感の低下の抑制ができる効能；
（３）ストレス感の蓄積が抑制できる効能；
（４）集中力の向上ができる効能；
（５）覚醒感の低下の抑制ができる効能；
（６）覚醒感の向上ができる効能；
（７）いきいきしている状態の低下の抑制ができる効能；
（８）熟睡感の向上ができる効能；
（９）起床時の疲労感が軽減できる効能；
（１０）自律神経のバランスを維持する効能；および
（１１）自律神経のバランスを改善する効能
からなる群から選択される少なくとも一つの効能を得るための、第１の発明に記載の抗疲労剤である。
第４の発明は、第１〜第３の発明のいずれかに記載の抗疲労剤を含んでなる、抗疲労用飲食品である。
第５の発明は、加熱熟成ニンニクエキスと黒糖と黒酢と砂糖を含むペーストである、第４の発明に記載の抗疲労用飲食品である。
第６の発明は、加熱熟成ニンニクエキスを含んでなる、抗疲労用組成物である。
第７の発明は、日常生活での疲労感の蓄積を抑制するための、第６の発明に記載の抗疲労用組成物である。
第８の発明は、次の（１）〜（１１）：
（１）作業効率の向上ができる効能；
（２）リラックス感の低下の抑制ができる効能；
（３）ストレス感の蓄積が抑制できる効能；
（４）集中力の向上ができる効能；
（５）覚醒感の低下の抑制ができる効能；
（６）覚醒感の向上ができる効能；
（７）いきいきしている状態の低下の抑制ができる効能；
（８）熟睡感の向上ができる効能；
（９）起床時の疲労感が軽減できる効能；
（１０）自律神経のバランスを維持する効能；および
（１１）自律神経のバランスを改善する効能
からなる群から選択される少なくとも一つの効能を得るための、第７の発明に記載の抗疲労用組成物である。
第９の発明は、食品組成物である、第７または８の発明に記載の抗疲労用組成物である。
第１０の発明は、加熱熟成ニンニクエキスと黒糖と黒酢と砂糖を含むペーストである、第９の発明に記載の抗疲労用組成物である。
【００１５】
本発明の抗疲労剤、抗疲労用飲食品および抗疲労用組成物によれば、日常生活の中での疲労感の蓄積を抑制すること、また、疲労感を抑制することにより作業効率を向上させることが可能となる。特に、本発明によれば、日常生活での疲労感の蓄積の抑制、作業効率向上、リラックス感の低下の抑制、ストレス感の蓄積の抑制、集中力の向上、覚醒感の低下の抑制、覚醒感の向上、いきいきしている状態の低下の抑制、熟睡感の向上、起床時の疲労感の軽減、自律神経のバランスの維持、および自律神経のバランスの改善といった効果が得られる点で有利である。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】実施例１の試験期間中の、試験群およびプラセボ群の疲労感（ＶＡＳ）の経時的変化を表したものである。
【図２】実施例１の試験期間中の、プラセボ群の疲労感（ＰＯＭＳ）の経時的変化を表したものである。
【図３】実施例１の試験期間中の、試験群の疲労感（ＰＯＭＳ）の経時的変化を表したものである。
【図４】実施例１の試験期間中の、試験群およびプラセボ群のクレペリン検査における作業数の経時的変化を表したものである。
【図５】実施例１の試験期間中の、プラセボ群の覚醒感（ＳＡＣＬ）の経時的変化を表したものである。
【図６】実施例１の試験期間中の、試験群の覚醒感（ＳＡＣＬ）の経時的変化を表したものである。
【図７】実施例１の試験期間中の、試験群およびプラセボ群のリラックス感（ＶＡＳ）の経時的変化を表したものである。
【図８】実施例１の試験期間中の、プラセボ群のストレス感（ＳＡＣＬ）の経時的変化を表したものである。
【図９】実施例１の試験期間中の、試験群のストレス感（ＳＡＣＬ）の経時的変化を表したものである。
【図１０】実施例１の試験期間中の、試験群およびプラセボ群の集中力（ＶＡＳ）の経時的変化を表したものである。
【図１１】実施例１の試験期間中の、試験群およびプラセボ群の覚醒感（ＳＡＣＬ）のうち、「いきいきしている（ｌｉｖｅｌｙ）」という項目の経時的変化を表したものである。
【図１２】実施例２の試験期間中の、試験群およびプラセボ群の疲労感（ＶＡＳ）の経時的変化を表したものである。
【図１３】実施例２の試験期間中の、試験群およびプラセボ群の起床時の精神的疲労感（日誌における五段階評価）の経時的変化を表したものである。
【図１４】実施例２の試験期間中の、試験群およびプラセボ群の起床時の身体的疲労感（日誌における五段階評価）の経時的変化を表したものである。
【図１５】実施例２の試験期間中の、試験群およびプラセボ群の起床時の精神的疲労感と身体的疲労感との合計（日誌における五段階評価）の経時的変化を表したものである。
【図１６】実施例２の試験期間中の、試験群およびプラセボ群の熟睡感（日誌における五段階評価）の経時的変化を表したものである。
【図１７】実施例２の試験期間中の、試験群およびプラセボ群の覚醒感（ＳＡＣＬ）の経時的変化を表したものである。
【図１８】実施例２の試験期間前後の、プラセボ群の交換・副交感神経のバランスの変化を表したものである。
【図１９】実施例２の試験期間前後の、試験群の交換・副交感神経のバランスの変化を表したものである。
【図２０】本発明の加熱熟成ニンニクエキスと、市販品サンプルＡおよびＢとに含まれる、ニンニク由来成分の含有比率を表したものである。
【発明の具体的説明】
【００１７】
本発明の抗疲労剤、抗疲労用飲食品および抗疲労用組成物は、有効成分としてＳ−アリルシステインを含む。さらに、本発明の好ましい実施態様によれば、本発明の抗疲労剤、抗疲労用飲食品および抗疲労用組成物は、Ｓ−アリルシステインの供給源として、熟成ニンニクエキスを含む。
【００１８】
熟成ニンニクエキス
本発明において「熟成ニンニクエキス」、「加熱熟成ニンニクエキス」または「黒ニンニクエキス」とは、ニンニクを加熱熟成させることにより製造した熟成ニンニクを加工することにより得られたエキスを指す。ニンニクを熟成させることにより、ニンニク特有の香りや辛味を軽減しながら、Ｓ−アリルシステインやポリフェノールなどの高機能性成分の含有量を増加させることができる。
【００１９】
本発明の「熟成ニンニクエキス」の原料としては、乾燥ニンニク、生ニンニク、塩蔵ニンニクなどを使用することができる。これらのニンニク原料は、通常表皮を剥がしたものをそのまま使用するが、必要に応じて適宜カットもしくは細片化したものを用いてもよい。
【００２０】
本発明の好ましい実施態様によれば、「熟成ニンニクエキス」は、特開２０１４−４５６９３号公報に記載の方法により製造され、そのようにして製造された熟成ニンニクエキスは、ニンニク原料を短時間加熱処理して高生理活性物質であるＳ−アリルシステイン、シクロアリイン、ポリフェノールなどを富化したものとされる。
【００２１】
具体的には、乾燥ニンニク原料を使用する場合には、基本的に、乾燥ニンニク原料に水を加えて抽出処理することにより得られる抽出物（液）を、９０℃以上の温度で加熱熟成させることができる。乾燥ニンニク原料に対する水の使用割合は、通常皮むきしたニンニク１重量部に対して２〜１２重量部程度であり、３〜４重量部がより好ましい。また、使用する水の温度は通常５〜７０℃程度、好ましくは２０〜４０℃である。抽出時間は通常２０〜６０分程度、好ましくは３０〜４０分である。このような処理により、ニンニク抽出物（ニンニク固形部を含む）が得られる。
【００２２】
乾燥ニンニク原料を使用する場合には、抽出処理後に得られる抽出物（ニンニク固形部を含む）は、通常ニンニクの固形物を濾布等で濾過して除去した抽出液部分を次の加熱熟成工程に用いることができる。この場合、ニンニク固形部を含む抽出物でも使用できるが、抽出液中に目的の高生理活性物質が十分抽出されているため、この段階でニンニク固形部を除去しておいた方が以後の工程が効率的である。このようなニンニクの抽出物としては、乾燥ニンニク原料のさらし工程で生ずるニンニク浸漬液の形態のものであっても上記と同様の抽出条件で得られるため使用することができ、浸漬液の有効利用ともなるので好ましい。
【００２３】
抽出処理で得られるニンニク抽出物（好ましい態様における抽出液）は、その後９０℃以上の温度で加熱熟成させることができる。加熱熟成温度は９０℃〜１３５℃程度とすることができるが、９０℃〜１３０℃が好ましく、１００℃〜１３０℃がより好ましい。１００℃以上で加熱する場合は、加圧容器（例えば加圧釜、加圧式ニーダー）等を用いて常圧以上の環境下で行う。加熱熟成期間は通常２時間〜７日間であり、好ましくは２時間〜２日間（加熱温度１３０〜１００℃）である。加熱熟成工程は解放状態または密閉状態で行うが、熟成後の熟成ニンニクエキスの味覚、生理活性物質含量の向上、作業性等の点から密閉容器（例えばニーダー、圧力釜）等を用いて密閉系で行うことが好ましい。熟成工程終了の目安は上記熟成期間であるか、あるいはエキスのｐＨ、官能評価等である。このような加熱熟成により、液状もしくはペースト状の熟成ニンニクエキスが得られる。この熟成ニンニクエキスのｐＨは通常３．５〜５．０、好ましくは４．０〜４．５であり、糖度計示度（Brix）は５〜５０、好ましくは１０〜３０である。
【００２４】
本発明においては、上記のようにして得られるニンニクエキスを熟成ニンニクエキスとして用いることができるが、目的の生理活性物質の濃度をさらに高めるためには加熱熟成工程の後に濃縮を行うことが好ましい。濃縮操作は、通常蒸気等を用いて開放状態で、または減圧濃縮機等を用いて（通常減圧度５０〜７００ Torrの条件）５０〜７０℃で糖度計示度（Brix）を所望程度まで、通常４５〜５５程度（ｐＨ３．５〜５．０）、好ましくは４８〜５２（ｐＨ４．０〜４．５）まで濃縮を行い、生じた固形物を濾布等で除去する。
濃縮の程度は温度、時間、Brix、減圧度等を適宜調整することにより行うことができる。
上記のような方法により、濃縮された熟成ニンニクエキスが得られる。また、上記の方法において、加熱抽出時のニンニク抽出物のBrixは通常５〜２０程度であるが、ニンニクに対する水の添加割合を少なくするか減圧濃縮したBrixの高い抽出物（例えばBrix２０〜５０）を加熱熟成工程に使用することにより、濃縮操作をせずに高濃度の成分を含有する熟成ニンニクエキスを得ることができる。
【００２５】
本発明の飲食品中のＳ−アリルシステイン濃度は、０．３ｍｇ／１００ｇ〜１０００ｍｇ／１００ｇ、好ましくは０．５ｍｇ／１００ｇ〜１０００ｍｇ／１００ｇ、より好ましくは１ｍｇ／１００ｇ〜５００ｍｇ／１００ｇ、さらに好ましくは２ｍｇ／１００ｇ〜５００ｍｇ／１００ｇとされる。
【００２６】
また本発明の飲食品中のＳ−アリルシステインの一日の摂取量としては、０．１ｍｇ〜３００ｍｇ、好ましくは０．１ｍｇ〜１００ｍｇ、より好ましくは０．５ｍｇ〜５０ｍｇ、さらに好ましくは０．５ｍｇ〜５ｍｇとされる。
【００２７】
Ｓ−アリルシステインの測定法
Ｓ−アリルシステインの濃度は、例えば、次のようにして測定することができる。まず、試料１０ｇに蒸留水４９０ｇを加え、よく撹拌し、この希釈液をＡｃｃＱ・Ｔａｇアミノ酸分析法（Ｗａｔｅｒｓ）を用いた液体クロマトグラフィーにより分析ことができる。好ましくは、ＵＰＬＣ（登録商標）（Ｕｌｔｒａ  Ｈｉｇｈ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ：超高速液体クロマトグラフィー）により分析を行うことができ、ＵＰＬＣ条件は以下の通りとすることができる。
【００２８】
（ＵＰＬＣ分析条件）
装置：ＵＰＬＣシステム（日本ウォーターズ株式会社製）
カラム：ＡｃｃＱ・Ｔａｇ  Ｕｌｔｒａ  Ｃ１８（１．７μｍ、２．１ｍｍ×１００ｍｍ）
移動相Ａ液：ＡｃｃＱ・Ｔａｇ  Ｕｌｔｒａ  溶離液Ａ濃縮（Ｗａｔｅｒｓ）
移動相Ｂ液：Ｄ液をＭｉｌｌｉ−Ｑ水で１０倍希釈した液
移動相Ｃ液：Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水
移動相Ｄ液：アセトニトリル/ギ酸＝９７/３
グラジエント：下表１の通りとした。
【００２９】
【表１】
2018070602.tif 000003
カラムオーブン温度：４３℃
サンプル室温度：２０℃
流速：０．７ｍＬ/ｍｉｎ
検出波長：蛍光  Ｅｘ（励起波長）２６６ｎｍ、Ｅｍ（蛍光波長）４７３ｎｍ
【００３０】
本明細書において、熟成ニンニクエキスは、日常生活での疲労感の蓄積の抑制、作業効率向上、リラックス感の低下の抑制、ストレス感の蓄積の抑制、集中力の向上、覚醒感の低下の抑制、覚醒感の向上、いきいきしている状態の低下の抑制、熟睡感の向上、起床時の疲労感の軽減、自律神経のバランスの維持、および自律神経のバランスの改善といった効果を得られることが実証されている。よって、本発明の抗疲労剤、抗疲労用飲食品および抗疲労用組成物は、好ましくは疲労感の蓄積を抑制するために用いられる。
【００３１】
本発明において「疲労感」とは、疲労が存在することを自覚する感覚のことを指す。ここで、「疲労」とは「心身への過負荷により生じた活動能力低下」のことを指す。また、「抗疲労食品」とは、「身体的または精神的な負荷を与えられたときにみられる身体的または精神的なパフォーマンスの低下を軽減する食品」のことを指す。
【００３２】
本発明において「リラックス感」とは、リラックスしていることを自覚する感覚のことを指す。ここで、「リラックス」とは「くつろぐこと、力を抜くこと、緊張をゆるめること」を指す（広辞苑第六版）。
【００３３】
本発明において「覚醒感」とは、覚醒していることを自覚する感覚のことを指す。ここで、「覚醒」とは「目がさめること、目をさますこと」を指す（広辞苑第六版）。また、「いきいきしている」とは、Ｓｔｒｅｓｓ  Ａｒｏｕｓａｌ  Ｃｈｅｃｋ  Ｌｉｓｔ（ＳＡＣＬ）における覚醒感についての質問項目の一つである「ｌｉｖｅｌｙ」が日本語訳版において「いきいきしている」として翻訳されたものであり、これは「Ｇｅｎｅｒａｌ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ」に分類される（Ｓｔｒｅｓｓ，Ｓｔｒｅｓｓ  Ｆａｃｔｏｒｓ，ａｎｄ  Ｓｅｌｆ−ｒｅｐｏｒｔ  Ｍｅａｓｕｒｅｓ；Ｃｌａｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｏｗｅｒ，ａ  Ｎｅｗ  Ｆａｃｔｏｒ、Ｐａｒｔｉｃｉａ  Ｊ．Ｗｈｅｅｌｅｒ）。そして、「Ｇｅｎｅｒａｌ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ」とは、心理学における覚醒の４つの次元「ｔｅｎｓｉｏｎ（Ｈｉｇｈ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ）」、「ｃａｌｍｎｅｓｓ（Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｄｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎ）」、「ｅｎｅｒｇｙ（Ｇｅｎｅｒａｌ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ）」、および「ｔｉｒｅｄｎｅｓｓ（Ｄｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎ−Ｓｌｅｅｐ）」のうちの一つである（川村学園女子大学研究紀要  第６巻  第１号  １１１頁−１２３頁  １９９５年、田中  裕）。
【００３４】
本発明において「ストレス感」とは、ストレスがあることを自覚する感覚のことを指し、「ストレス」とは、種々の外部刺激が負担として働くとき、心身に生じる機能変化を指す（広辞苑第六版）。
【００３５】
また、本発明において「集中力」とは、ある物事に向ける意識や注意を持続させることのできる力を指す（広辞苑第六版）。
【００３６】
本発明の抗疲用労組成物の医薬品としての応用
本発明の抗疲労剤および抗疲労用組成物を医薬品として提供する場合には、そのような医薬品は、本発明の加熱熟成ニンニクエキスを薬学上許容される担体と混合することにより製造できる。
【００３７】
本発明の抗疲労剤および抗疲労用組成物は、有効成分として経口投与または非経口投与することができ、好ましくは経口投与される。経口剤としては、顆粒剤、散剤、錠剤（糖衣錠を含む）、丸剤、カプセル剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤が挙げられる。非経口剤としては、注射剤（例えば、皮下注射剤、静脈内注射剤、筋肉内注射剤、腹腔内注射剤）、点滴剤、外用剤（例えば、経鼻投与製剤、経皮製剤、軟膏剤）、坐剤（例えば、直腸坐剤、膣坐剤）が挙げられる。これらの製剤は、当分野で通常行われている手法により、薬学上許容される担体を用いて製剤化することができる。薬学上許容される担体としては、賦形剤、結合剤、希釈剤、添加剤、香料、緩衝剤、増粘剤、着色剤、安定剤、乳化剤、分散剤、懸濁化剤、防腐剤等が挙げられ、例えば、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、砂糖、ラクトース、ペクチン、デキストリン、澱粉、ゼラチン、トラガント、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、低融点ワックス、カカオバターを担体として使用できる。
【００３８】
製剤は、例えば、下記のようにして製造できる。
【００３９】
経口剤は、有効成分に、例えば賦形剤（例えば、乳糖、白糖、デンプン、マンニトール）、崩壊剤（例えば、炭酸カルシウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム）、結合剤（例えば、α化デンプン、アラビアゴム、カルボキシメチルセルロース、ポリビニールピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース）または滑沢剤（例えば、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール６０００）を添加して圧縮成形し、次いで必要により、味のマスキング、腸溶性あるいは持続性の目的のため自体公知の方法でコーティングすることにより製造することができる。コーティング剤としては、例えばエチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ポリオキシエチレングリコール、セルロースアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートおよびオイドラギット（ローム社製、ドイツ、メタアクリル酸・アクリル酸共重合物）などを用いることができる。
【００４０】
注射剤は、有効成分を分散剤（例えば、ツイーン（Ｔｗｅｅｎ）８０（アトラスパウダー社製、米国）、ＨＣＯ６０（日光ケミカルズ製）、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウムなど）、保存剤（例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン、ベンジルアルコール、クロロブタノール、フェノール）、等張化剤（例えば、塩化ナトリウム、グリセリン、ソルビトール、ブドウ糖、転化糖）などと共に水性溶剤（例えば、蒸留水、生理的食塩水、リンゲル液等）あるいは油性溶剤（例えば、オリーブ油、ゴマ油、綿実油、コーン油などの植物油、プロピレングリコール）などに溶解、懸濁あるいは乳化することにより製造することができる。この際、所望により溶解補助剤（例えば、サリチル酸ナトリウム、酢酸ナトリウム）、安定剤（例えば、ヒト血清アルブミン）、無痛化剤（例えば、塩化ベンザルコニウム、塩酸プロカイン）等の添加物を添加してもよい。
【００４１】
外用剤は、有効成分を固状、半固状または液状の組成物とすることにより製造することができる。例えば、上記固状の組成物は、有効成分をそのまま、あるいは賦形剤（例えば、ラクトース、マンニトール、デンプン、微結晶セルロース、白糖）、増粘剤（例えば、天然ガム類、セルロース誘導体、アクリル酸重合体）などを添加、混合して粉状とすることにより製造できる。上記液状の組成物は、注射剤の場合とほとんど同様にして製造できる。半固状の組成物は、水性または油性のゲル剤、あるいは軟膏状のものがよい。また、これらの組成物は、いずれもｐＨ調節剤（例えば、炭酸、リン酸、クエン酸、塩酸、水酸化ナトリウム）、防腐剤（例えば、パラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、塩化ベンザルコニウム）などを含んでいてもよい。坐剤は、有効成分を油性または水性の固状、半固状あるいは液状の組成物とすることにより製造できる。該組成物に用いる油性基剤としては、高級脂肪酸のグリセリド〔例えば、カカオ脂、ウイテプゾル類（ダイナマイトノーベル社製）〕、中級脂肪酸〔例えば、ミグリオール類（ダイナマイトノーベル社製）〕、あるいは植物油（例えば、ゴマ油、大豆油、綿実油）が挙げられる。水性基剤としては、ポリエチレングリコール類、プロピレングリコールが挙げられる。また、水性ゲル基剤としては、天然ガム類、セルロース誘導体、ビニール重合体、アクリル酸重合体が挙げられる。
【００４２】
本発明の抗疲労用組成物の食品としての応用
本発明の抗疲労用組成物は、食品添加剤として利用することもできる。したがって、本発明の他の態様によれば、本発明の抗疲労用組成物と同じ成分を含んでなる食品添加剤が提供される。また、本発明の抗疲労用組成物は、食品組成物として提供することもできる。本発明のさらに別の態様によれば、本発明の抗疲労用組成物、または本発明の抗疲労用組成物と同じ成分を含んでなる食品組成物が提供される。
【００４３】
熟成ニンニクエキスは、前記のように、特に日常生活での疲労感の蓄積の抑制という生理的作用を発揮する。従って、本発明の抗疲労剤および抗疲労用組成物には、この生理的作用を期待した食品への添加が意図されたものも含まれる。添加対象や添加態様は本発明の食品組成物に関する記載に従うことができる。
【００４４】
本発明の食品組成物は、本発明の抗疲労用組成物、または本発明の抗疲労用組成物と同じ成分を有効量含有した飲食品である。ここで「有効量含有した」とは、個々の飲食品において通常喫食される量を摂取した場合に、後述するような範囲で熟成ニンニクエキスが摂取されるような含有量をいう。
【００４５】
本発明の抗疲労用組成物を食品組成物として提供する場合には、本発明の抗疲労用組成物、または本発明の抗疲労用組成物と同じ成分をそのまま食品に配合することができる。より具体的には、本発明の食品組成物は、本発明の抗疲労用組成物をそのまま飲食品として調製したもの、各種タンパク質、糖類、脂肪、微量元素、ビタミン類等を更に配合したもの、液状、半液体状若しくは固体状にしたもの、カリウム塩、ナトリウム塩等の水溶液状にしたもの、一般の飲食品へ添加したものであってもよい。
【００４６】
本発明において「食品組成物」とは、一般食品（いわゆる健康食品を含む）、特別用途食品、保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品、および機能性表示食品）を含む意味で用いられる。
【００４７】
本発明の飲食品は、熟成ニンニクエキスを含む飲食品の製造に用いられる他の成分を含んでもよい。このような他の成分としては、例えば、酢（例えば、黒酢、米酢、穀物酢、果実酢など）、砂糖（例えば、上白糖、黒糖など）、調味料（例えば、みりん、塩など）、甘味料（例えば、ブドウ糖、果糖、オリゴ糖、異性化液糖、糖アルコール、高甘味度甘味料等）、酸味料（例えば、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、乳酸、リン酸、フィチン酸、イタコン酸、フマル酸、グルコン酸、アジピン酸、酢酸、またはそれらの塩類等）、色素、食品添加剤（例えば、保存料、酸化防止剤、食物繊維、乳化剤など）などを適宜添加することができる。
【００４８】
本発明の飲食品は、好ましくは、容器詰飲食品として提供される。本発明の飲食品に使用される容器は、飲食品の充填に通常使用される容器であればよく、例えば、プラスチック製ボトル（例えば、ＰＥＴボトル、カップ）、紙容器、瓶、パウチ容器などが挙げられる。
【００４９】
飲料としては、例えば、水、清涼飲料水、果汁飲料、茶飲料、乳飲料、スポーツドリンク、栄養ドリンク等が挙げられる。食品としては、例えば、パン類、麺類、米類、惣菜類、乳製品、調味料類、菓子類等が挙げられる。
【００５０】
本発明の食品組成物は、当該分野で通常使用される添加物を、本発明の効果に影響を及ぼさない範囲で更に含有していてもよい。そのような添加物としては、例えば、甘味料、酸味料、香料、酸化防止剤、苦味料、リンゴファイバー、大豆ファイバー、肉エキス、黒酢エキス、ゼラチン、コーンスターチ、蜂蜜、動植物油脂；グルテン等のタンパク質；アミノ酸；ペプチド；グルコース、フルクトース等の単糖類；スクロース等の二糖類；デキストロース、デンプン等の多糖類；エリスリトール、キシリトール、ソルビトール、マンニトール等の糖アルコール類；ビタミンＣ等のビタミン類；亜鉛、銅、マグネシウム等のミネラル類；ＣｏＱ１０、α−リポ酸、カルニチン、カプサイシン、ポリフェノール類等の機能性素材；果汁；乳、乳成分などが挙げられる。これらの添加物は、各々を単独で、または複数種を組み合わせて使用することができる。
【実施例】
【００５１】
以下の実施例に基づいて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００５２】
［試験内容］
［熟成ニンニクエキスの調製］
乾燥ニンニク１０ｋｇに水４０ｋｇを加え、１００℃で３２時間加熱熟成させた。最終的にＢｒｉｘ５０（糖度計示度）まで濃縮後、濾過により固形物を除去した。その他の調製方法は、本発明者らによる特開２０１４−４５６９３号公報に記載の方法に従った。この得られたエキスを熟成ニンニクエキスとした。
【００５３】
［熟成ニンニクエキスペーストの調製］
熟成ニンニクエキス、黒糖蜜、砂糖、黒酢を加熱しながら混合した。この得られたペーストを試験食とした。
【００５４】
［黒蜜ペーストの調製］
市販の黒糖蜜、砂糖、黒酢、液糖、醸造酢を加熱しながら混合し、この得られたペーストをプラセボ食とした。
【００５５】
試験食として用いた熟成ニンニクエキスペースト１００ｇ中、熟成ニンニクエキスは１２．５ｇ含まれていた。また、試験食およびプラセボ食の栄養成分値は、表２に記載の通りである。
【００５６】
【表２】
2018070602.tif 000004
【００５７】
［Ｓ―アリルシステイン分析］
○分析方法
試料１０ｇに蒸留水４９０ｇを加え、よく撹拌した。この希釈液を使用し、ＡｃｃＱ・Ｔａｇアミノ酸分析法（Ｗａｔｅｒｓ）を用いた液体クロマトグラフィーにより測定を行うことができる。好ましくは、ＵＰＬＣ（登録商標）（Ｕｌｔｒａ  Ｈｉｇｈ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ：超高速液体クロマトグラフィー）により分析を行うことができ、ＵＰＬＣ条件は以下の通りとした。
【００５８】
（ＵＰＬＣ分析条件）
装置：ＵＰＬＣシステム（日本ウォーターズ株式会社製）
カラム：ＡｃｃＱ・Ｔａｇ  Ｕｌｔｒａ  Ｃ１８（１．７μｍ、２．１ｍｍ×１００ｍｍ）
移動相Ａ液：ＡｃｃＱ・Ｔａｇ  Ｕｌｔｒａ  溶離液Ａ濃縮（Ｗａｔｅｒｓ）
移動相Ｂ液：Ｄ液をＭｉｌｌｉ−Ｑ水で１０倍希釈した液
移動相Ｃ液：Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水
移動相Ｄ液：アセトニトリル/ギ酸＝９７/３
グラジエント：下表３の通りとした。
【００５９】
【表３】
2018070602.tif 000005
カラムオーブン温度：４３℃
サンプル室温度：２０℃
流速：０．７ｍＬ/ｍｉｎ
検出波長：蛍光  Ｅｘ（励起波長）２６６ｎｍ、Ｅｍ（蛍光波長）４７３ｎｍ
【００６０】
○分析結果
Ｓ−アリルシステイン分析の結果、試験食では１７．７ｍｇ/１００ｇ、プラセボ食では０．０ｍｇ/１００ｇであった（表４）。
【００６１】
【表４】
2018070602.tif 000006
【００６２】
実施例１：摂取試験１
［ヒト試験デザイン］
摂取試験はランダム化二重盲検プラセボ対照並行群間試験で行った。なお、本願における試験は全て、女子栄養大学研究倫理審査委員会の承認を得て、専門家の指導の下で行われた。
【００６３】
［被験者年齢、被験者数］
被験者の対象は２０歳以上６５歳未満の健常な男女合計４９名とし、摂取試験を行った。
【００６４】
［試験期間］
試験期間は前観察期間２週間および摂取期間４週間の合計６週間の期間で行った。実施日時に関しては、２０１５年６月５日〜７月２４日の期間で合計６週間となるように行った。２０１５年は、関東甲信地方では６月３日に梅雨入りし、７月１０日に梅雨明けしたため、試験期間中は雨の日又は湿度が高い日が多く、気温に関しては最高気温２０℃〜３５℃と気温差が大きく、次第に気温が上昇していく時期であったため、疲労感を感じやすい時期であった。また被験者には学生が含まれ、学生に関しては、試験や実習などで多忙となる時期であったため、更に疲労を感じやすい時期であった。
【００６５】
［測定項目］
○感情評価アンケート
アンケート用紙を用い、以下の３種類について記入させた。
（１）ＶＡＳ（視覚的アナログスケール）：
疲労感、リラックス感、集中力について１０ｃｍの線上の両端を「非常に感じる」と「まったく感じない」とし、現在の状態がどの程度であるか印をつけることにより評価を行った。
（２）ＰＯＭＳ（気分プロフィール検査）：
緊張・不安、抑うつ・落ち込み、怒り・敵意、疲労、混乱、活気についての全３０問に、「非常に思う」から「まったく思わない」までの５段階で回答することにより評価を行った。
（３）ＳＡＣＬ（ストレス覚醒感調査票）：
ストレス、覚醒感についての全３０問に４段階で評価することにより評価を行った。また、全３０問のうち特に、「覚醒感（Ｐｏｓｉｔｉｖｅ  Ａｒｏｕｓａｌ）」に分類される項目の一つである「ｌｉｖｅｌｙ（いきいきしている）」について、より詳細な評価を行った。
○単純加算課題（クレペリン検査）：
１桁の足し算を繰り返し、作業数と誤答数を数えて被験者の作業効率を評価した。
○体重、ＢＭＩ、体脂肪率、血圧、脈拍、体温、血液成分
【００６６】
［測定日のスケジュール］
測定日は以下のような順序で測定した。
体重測定、血圧測定、採血  →  感情評価アンケート  →  体温測定  →  安静時間（２０分）  →  クレペリン検査（１５分）  →  終了
【００６７】
［群分け］
摂取試験説明会時に各測定を行い、得られた情報からランダムに群分けを行った。今回測定した項目全てにおいて群間の差はなかった。試験期間中、試験食を摂取する群を試験群、プラセボ食を摂取する群をプラセボ群とした。
【００６８】
［試験内容］
群分けの結果に基づき試験食またはプラセボ食を１日１回５ｇ、４週間摂取させた。摂取開始日、摂取２週間後、摂取４週間後に上記の各測定を行った。
【００６９】
［統計解析］
疲労感ＶＡＳ、単純作業効率、リラックス感ＶＡＳ、集中力ＶＡＳに関しては、平均値±標準偏差で示し、Ｐａｒａｍｅｔｒｉｃ検定を行った。疲労スコア、ストレススコア、覚醒感スコアに関しては、Ｐｅｒｃｅｎｔｉｌｅ(９０、７５、５０、２５、１０)で示し、Ｎｏｎ  ｐａｒａｍｅｔｒｉｃ検定を行った。
全ての検定は両側検定で有意水準５％とした（図中では、有意水準５％で有意なものを「＊」、有意水準１％で有意なものを「＊＊」で示した）。また０．０５＜ｐ＜０．１の場合は、有意ではないものの「傾向あり」とした。
【００７０】
［結果及び考察］
（１）疲労感
ＶＡＳの結果
プラセボ群では、前述の通り疲労感が高まる時期であったため、試験開始日より摂取２週間後に疲労感ＶＡＳが増加している傾向（ｐ＝０．０９５）が見られ、摂取４週間後には有意に増加した（ｐ＝０．００６）（図１）。一方、試験群では、試験期間中に疲労感ＶＡＳの増加は見られず、４週間後にはプラセボ群より有意に低い値となった（ｐ＝０．０３）。
ＰＯＭＳの結果
また疲労スコアにおいては、プラセボ群では、摂取４週間後には摂取開始日より有意に増加した（ｐ＝０．０３５）（図２）。一方、試験群では、摂取開始日から４週間後まで疲労スコアが増加しなかった（図３）。
これらのことから、試験食は日々の疲労感の蓄積を抑制することが示された。
（２）単純作業効率
クレペリン検査の結果
プラセボ群では、摂取２週間後には摂取開始日より有意に作業数が増加したが（ｐ＝０．０１４）、摂取４週間後は摂取２週間後と同程度であった（図４）。一方、試験群は摂取２週間後（ｐ＝０．００３）および摂取４週間後（ｐ＝０．００３）において、摂取開始日より有意に作業数が増加した。
これらのことから、試験食は単純作業効率を向上させることが示された。
（３）覚醒感
ＳＡＣＬの結果
プラセボ群では、摂取４週間後に摂取開始日より覚醒感スコアが減少する傾向であった（ｐ＝０．０８１）（図５）。一方、試験群では摂取開始日から摂取４週間後までに覚醒感スコアに差はなく、摂取４週間後ではプラセボ群に比べ有意に高くなった（ｐ＝０．００４）（図６）。これらのことから、試験食は覚醒感の低下を抑制することが示された。
また、覚醒感ＳＡＣＬの設問項目のうち「いきいきしている（ｌｉｖｅｌｙ）」において群間の有意差が見られた（ｐ＝０．０４９７）（図１１）。プラセボ群では、摂取期間中低下したが、試験群では「いきいきしている」状態の低下を抑制することができた。
（４）リラックス感
ＶＡＳの結果
プラセボ群では、摂取２週間後（ｐ＝０．００５）および摂取４週間後（ｐ＝０．０１１）において、摂取開始日よりリラックス感ＶＡＳが有意に減少した（図７）。一方、試験群では摂取開始日から摂取４週間後までリラックス感に差は無かった。
これらのことから、試験食はリラックス感の低下を抑制することが示された。
（５）ストレス
ＳＡＣＬの結果
プラセボ群では、摂取４週間後には摂取開始日よりストレススコアの値が有意に増加した（ｐ＝０．０１２）（図８）。一方、試験群では、摂取開始日から４週間後までストレススコアに差はなかった（図９）。
これらのことから、試験食はストレスの増加を抑制することが示された。
（６）集中力
ＶＡＳの結果
プラセボ群では、集中力ＶＡＳが摂取２週間後には摂取開始日より有意に低い値となった（ｐ＝０．０２５）（図１０）。一方、試験群では、集中力ＶＡＳが摂取２週間後に摂取開始日より有意に高くなった（ｐ＝０．０１１）。また、摂取２週間後（ｐ＝０．０８２）および４週間後（ｐ＝０．０７９）において、試験群の方がプラセボ群より高い傾向が見られた。
これらのことから、試験食は集中力を向上させることが示された。
【００７１】
実施例２：摂取試験２
［ヒト試験デザイン］
摂取試験はランダム化二重盲検プラセボ対照並行群間試験で行った。なお、本願における試験はすべて、女子栄養大学研究倫理審査委員会の承認を得て、専門家の指導の下で行われた。
【００７２】
［被験者年齢、被験者数］
被験者の対象は２０歳以上６５歳未満の健常な男女合計５２名とし、摂取試験を行った。
【００７３】
［試験期間］
試験期間は前観察期間４週間および摂取期間８週間の合計１２週間の期間で行った。実施日時に関しては、２０１７年１月４日〜４月６日の期間で合計１２週間となるように行った。
【００７４】
［測定項目］
○感情評価アンケート
アンケート用紙を用い、以下について記入させた。
（１）  ＶＡＳ（視覚的アナログスケール）：
疲労感について１０ｃｍの線上の両端を「非常に感じる」と「まったく感じない」とし、現在の状態がどの程度であるか印をつけることにより評価を行った。
（２）  ＳＡＣＬ（ストレス覚醒感調査票）：
ストレス、覚醒感についての全３０問に４段階で評価することにより評価を行った。
○疲労・ストレス測定システム
指先に生体センサーを密着させることで心電と脈派を同時の計測・解析し、自律神経機能の状態を評価する「疲労・ストレス測定システム」（株式会社日立システムズ）を使用して自律神経のバランスを測定した。
なお、自律神経のバランスについては、ＬＦ／ＨＦにより評価した。これは心拍変動のパワースペクトルのＬＦ（低周波）成分の領域、およびＨＦ（高周波）成分の領域の強度の積分値により計算される。
○日常生活の疲労に関する日誌による評価
起床時刻、睡眠時間、睡眠の状態、起床時の疲労度（精神的、身体的）、１日の負荷程度（精神的、身体的、環境的）、１日の食事の程度を被験者自身が５段階で記録した。飲酒は３段階、喫煙本数は実数を記録した。
【００７５】
［試験スケジュール］
日誌は試験期間中毎日被験者自身が記録した。４週間の前観察期間の後、被験者は群分け結果に基づき試験食またはプラセボ食を１日１回５ｇ、８週間摂取した。試験期間中の測定日は摂取開始日と摂取８週間後とした。感情評価アンケートは測定日の前日に被験者自身が直前７日間を振り返って記入した。疲労・ストレス測定システムは測定日に測定し、２分間の安静時間の後、１５０秒間測定した。
【００７６】
［群分け］
摂取試験説明会時に体重測定、身長の聞き取りを行いＢＭＩを算出した。また疲労感ＶＡＳの測定も行った。性別、年齢、ＢＭＩ、疲労感ＶＡＳを基にランダムに群分けを行った。摂取開始日のデータに群間の差はなかった。試験期間中、試験食を摂取する群を試験群、プラセボ食を摂取する群をプラセボ群とした。
【００７７】
［統計解析］
疲労感ＶＡＳに関しては、Ｐａｒａｍｅｔｒｉｃ検定を行い、グラフは平均値±標準誤差で示した。ＳＡＣＬ、日誌の項目に関してはＮｏｎ  Ｐａｒａｍｅｔｒｉｃ検定を行ったが、グラフは各被験者の中央値の平均値で示した。自律神経のバランスに関しては、摂取開始日と摂取８週間後の差を算出し、個人ごとにどのように変化したかについて割合を求めた。
全ての検定は両側検定で有意水準５％とした（図中では、摂取開始日または前観察との比較において有意水準５％で有意なものを「＊＊」、有意水準１％で有意なものを「＊＊＊」で示した）。０．０５＜ｐ＜０．１の場合は、有意ではないものの「＊」で示し「傾向あり」とした。また群間比較において有意水準５％で有意なものを「＃＃」、有意水準１％で有意なものを「＃＃＃」で示した。０．０５＜ｐ＜０．１の場合は、有意ではないものの「＃」で示し「傾向あり」とした。
【００７８】
［結果および考察］
（疲労感）
ＶＡＳの結果
疲労感ＶＡＳにより、摂取８週間後に群間の有意差が見られた（図１２）。プラセボ群では疲労感が維持されていたが、試験群では疲労感が軽減されていた。
【００７９】
日誌による起床時の疲労感の結果
毎日記入した日誌を２週間ごとに集計した。起床時刻、睡眠時間、１日の負荷程度（精神的、身体的、環境的）、１日の食事の程度、飲酒、喫煙本数に変化がなく、疲労に関する生活状況には変化がなかった。そのためプラセボ群では起床時の疲労感が精神的、身体的、それらの合計において変化がなかった（図１３、１４、１５）。しかしながら試験群では、起床時の疲労感が精神的、身体的、それらの合計において摂取期間中軽減しており、プラセボ群との群間の有意差、前観察からの有意差が見られた。
【００８０】
（熟睡感）
日誌による熟睡感の結果
プラセボ群では試験期間中熟睡感の変化は見られなかったが、試験群では摂取期間中に熟睡感の向上が見られ、プラセボ群との群間の有意差、前観察からの有意差が見られた（図１６）。
【００８１】
（覚醒感）
ＳＡＣＬによる覚醒感の結果
覚醒感についてプラセボ群は摂取により有意な結果は見られなかったが、試験群では摂取開始に比べ有意に上昇した（図１７）。
【００８２】
（自律神経のバランス）
疲労・ストレス測定システムの結果
自律神経のバランスについてはＬＦ／ＨＦで示され、ＬＦ／ＨＦが基準値より小さい状態というのは、副交感神経系の活動が高く、交感神経系の活動が低下している状態を示す。摂取開始日の時点でＬＦ／ＨＦが基準値以下であった者に対しては、この値を基準値内に上昇させるのが望ましい。そこで、摂取開始日と摂取８週間後の差が基準値以下の者に対しては、基準値の上限を超えない範囲で上昇した者を「改善」とし、低下した者と基準値の上限を超えて上昇した者は「悪化」とした。
一方ＬＦ／ＨＦが高い状態というのは、交感神経系の活動が高く、副交感神経系の活動が低下している状態を示す。摂取開始日の時点でＬＦ／ＨＦが基準値以上であった者に対しては、この値を基準値内に低下させるのが望ましい。そこで、摂取開始日と摂取８週間後の差が基準値以上の者に対しては、基準値の下限を下回らない範囲で低下した者を「改善」とし、上昇した者と基準値の下限を下回って低下した者は「悪化」とした。
摂取開始日の値が基準値の範囲内であった者に対しては、摂取８週間後に基準値の範囲内であった者は「基準値内の変化」とし、基準値を外れた者は「悪化」とした。
その結果、プラセボ群では、「悪化」が５８％と高く、摂取試験を行った時期が季節の変わり目であったことから、自律神経のバランスを崩しやすい状態であったことが考えられた（図１８）。一方試験群では「悪化」が２８％と低く抑えられていた（図１９）。また「基準値内の変化」がプラセボ群では１３％だったのに対し、試験群では24％と高く、試験食の摂取により自律神経のバランスがとれた状態を維持できることがわかった。さらに「改善」はプラセボ群では２９％だったのに対し、試験群では４８％であり、試験食の摂取により自律神経のバランスを改善できることがわかった。
【００８３】
上記のとおり、本発明による抗疲労用食品組成物により、疲労感の軽減効果が見られた。これに関し、覚醒感が上昇しながらも熟睡感が向上し、起床時の精神的、身体的疲労感が軽減することがわかった。覚醒感が上昇しながらも熟成感が向上する効果は、自律神経のバランスがとれた状態を維持したり自律神経のバランスを改善したりすることで得られると考えられた。
【００８４】
実施例３：製法による熟成ニンニクエキスの成分比較
本発明者らによる特開２０１４−４５６９３号公報に記載の方法により製造された「熟成ニンニクエキス」と、アルコール抽出法によりにんにくを熟成させたもの（サンプルＡ）、加熱・湿度調整法によりにんにくを熟成させたもの（サンプルＢ）について成分量の比較を行った。
「熟成ニンニクエキス」以外のサンプル（サンプルＡおよびＢ）は、市販品を分析したものであり、サンプルＡについてはにんにく以外の原料も含まれるものである。そこで、各サンプルについてにんにく由来成分のみ分析を行い、その比率を算出して比較することとした。
【００８５】
［分析方法］
アリシンの測定法
サンプルＡに含まれるにんにく由来の成分のうち、アリシンの濃度を以下のようにして測定した。まず、サンプル１０ｇに４５％メタノール溶液２５ｍＬを加えてよく攪拌し、５０ｍＬを定容する。この希釈液を遠心分離し、上澄みを回収後、更に限外ろ過（メルクミリポア社製、アミコンウルトラ−０．５、分画分子量３，０００）により、サンプル中の低分子量画分を回収する。回収した低分子量サンプルは、液体クロマトグラフィーにより分析することができる。好ましくはＨＰＬＣにより分析を行うことができ、ＨＰＬＣ条件は以下のとおりとすることができる。
【００８６】
（ＨＰＬＣ分析条件）
装置：ＬＣ−２０Ａシステム（株式会社島津製作所製）
カラム：Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  Ｃ１８（５μｍ、４．６ｍｍ×１５０ｍｍ）
移動相：メタノール／Ｍｉｌｌ−Ｑ水＝４５／６５（イソクラティックモード）
カラムオーブン室温度：室温
流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
検出波長：２１０ｎｍ
【００８７】
スルフィド類（アリルメチルスルフィド、ジメチルジスルフィド、ジメチルトリスルフィド、アリルスルフィド、ジアリルジスルフィド、ジアリルトリスルフィド）の測定法
サンプルＡに含まれるにんにく由来の成分のうち、スルフィド類の濃度を以下のようにして測定した。まず、サンプル１０ｇに蒸留水３０ｇを加えてよく攪拌し、更にヘキサン４０ｍＬを加えて１分以上振盪させる。この混合液を遠心分離し、上清のヘキサン層を回収する。回収したものを、減圧濃縮によりヘキサンを除去した後、アセトンに溶融させ、液体クロマトグラフィーにより分析することができる。好ましくは、ＨＰＬＣ（Ｈｉｇｈ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ：高速液体クロマトグラフィー）により分析を行うことができ、ＨＰＬＣ条件は以下の通りとすることができる。
【００８８】
（ＨＰＬＣ分析条件）
装置：ＬＣ−２０Ａシステム（株式会社島津製作所製）
カラム：Ｓｙｍｍｅｔｒｙ Ｃ１８（５μｍ、４．６ｍｍ×１５０ｍｍ）
移動相Ａ液：アセトニトリル／Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水／テトラヒドロフラン＝４０／５７／３
移動相Ｂ液：アセトニトリル／Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水／テトラヒドロフラン＝７０／２７／３
グラジエント：下表５の通りとした。
カラムオーブン温度：４０℃
サンプル室温度：室温
流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
検出波長：２１０ｎｍ
【００８９】
【表５】
2018070602.tif 000007
【００９０】
Ｓ−アリルシステイン、Ｓ−メチルシステイン、アリイン、イソアリイン、メチインの測定法
サンプルＡに含まれるにんにく由来の成分のうち、Ｓ−アリルシステイン、Ｓ−メチルシステイン、アリイン、イソアリイン、メチインの濃度は、例えば、次のようにして測定することができる。まず、サンプル１０ｇに蒸留水４９０ｇを加え、よく撹拌し、この希釈液をＡｃｃＱ・Ｔａｇアミノ酸分析法（Ｗａｔｅｒｓ）を用いた液体クロマトグラフィーにより分析することができる。好ましくは、ＵＰＬＣ（登録商標）（Ｕｌｔｒａ  Ｈｉｇｈ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ：超高速液体クロマトグラフィー）により分析を行うことができ、ＵＰＬＣ条件は以下の通りとすることができる。
【００９１】
（ＵＰＬＣ分析条件）
装置：ＵＰＬＣシステム（日本ウォーターズ株式会社製）
カラム：ＡｃｃＱ・Ｔａｇ  Ｕｌｔｒａ  Ｃ１８（１．７μｍ、２．１ｍｍ×１００ｍｍ）
移動相Ａ液：ＡｃｃＱ・Ｔａｇ  Ｕｌｔｒａ  溶離液Ａ濃縮（Ｗａｔｅｒｓ）
移動相Ｂ液：Ｄ液をＭｉｌｌｉ−Ｑ水で１０倍希釈した液
移動相Ｃ液：Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水
移動相Ｄ液：アセトニトリル／ギ酸＝９７／３
グラジエント：下表６の通りとした。
カラムオーブン温度：４３℃
サンプル室温度：２０℃
流速：０．７ｍＬ／ｍｉｎ
検出波長：蛍光  Ｅｘ（励起波長）２６６ｎｍ、Ｅｍ（蛍光波長）４７３ｎｍ
【００９２】
【表６】
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【００９３】
シクロアリインの測定法
サンプルＡに含まれるにんにく由来の成分のうち、シクロアリインの濃度は、例えば、次のようにして測定することができる。まず、サンプル１０ｇに４５％メタノール溶液２５ｍｌを加え、よく撹拌し、５０ｍｌに定容する。この希釈液を遠心分離し、上清を回収する。回収したサンプルは、液体クロマトグラフィーにより分析することができる。好ましくはＨＰＬＣにより分析を行うことができ、ＨＰＬＣ条件は以下の通りとすることができる。
【００９４】
（ＨＰＬＣ分析条件）
装置：ＬＣ−２０Ａシステム（株式会社島津製作所製）
カラム：Ａｓａｈｉｐａｋ  ＮＨ２Ｐ−５０  ４Ｅ（５μｍ、４．６ｍｍ×２５０ｍｍ）
移動相：リン酸／Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水／アセトニトリル＝０．１／２０／８０（イソクラティックモード）
カラムオーブン温度：４０℃
サンプル室温度：室温
流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
検出波長：２１０ｎｍ
【００９５】
［比較試験結果］
測定したにんにく由来成分構成比率について図２０に示した。いずれのサンプルでもアリシンとスルフィド類の含有量は少なく、Ｓ−メチルシステイン、アリイン、イソアリイン、メチインは含まれなかった。
一方、各サンプルのＳ−アリルシステインとシクロアリインの比率は大きく異なった。特開２０１４−４５６９３号公報に記載の方法により製造した熟成ニンニクエキス中ではＳ−アリルシステインが多く約８０％を占め、サンプルＢではほとんどがシクロアリインだった。サンプルＡは両者の中間で約３５％がＳ−アリルシステイン、約６５％がシクロアリインであった。
以上の通り、特開２０１４−４５６９３号公報に記載の熟成ニンニクエキスと、同じくニンニクを熟成させた２種類のサンプルについて分析を行ったが、その熟成方法によりその成分組成は異なることが明らかになった。
【００９６】
［まとめ］
上記の通り、本発明による抗疲労用食品組成物は、日常生活での疲労感の蓄積の抑制、作業効率向上、リラックス感の低下の抑制、ストレス感の蓄積の抑制、集中力の向上、覚醒感の低下の抑制、覚醒感の向上、いきいきしている状態の低下の抑制、熟睡感の向上、起床時の疲労感の軽減、自律神経のバランスの維持、および自律神経のバランスの改善といった効果を有することが分かった。
【００９７】
疲労の大きな要因は脳にある自律神経の中枢が疲労することであり、疲労の直接的原因となるのは、活性酸素による酸化ストレスである。酸化ストレスを軽減するものとして、Ｓ−アリルシステイン以外には、ビタミン、ポリフェノール、カロテノイドなどの様々な抗酸化物質が知られているが、抗酸化の作用機序や、生体内での抗酸化作用を発揮する時間が異なるため、生体内で抗疲労効果を発揮するのは抗酸化物質の内の一部である。また、特に、脳の疲労回復に直接的に寄与し得る、Ｓ−アリルシステインのような血液脳関門を通過可能な物質は、その中でもごく一部に過ぎない。したがって、本願によるＳ−アリルシステインを豊富に含む加熱熟成ニンニクエキスを配合した熟成ニンニクペーストは、効率的に疲労感を抑制する点において、有用であると考えられる。
【００９８】
また、疲労感は脳が疲労しているという生体アラームであるため、疲労感を抑制するだけでは生体アラームを無効化するだけであり、その後のパフォーマンスの向上につながるとはいえないところ、本願によるペーストにおいては、疲労感の蓄積を抑制するだけではなく、リラックス感の低下を抑制、ストレス感の増加を抑制する効果を有し、その結果、集中力を向上させ、単純作業効率を上げることから、疲労感の蓄積を抑制すると同時にパフォーマンスを向上させるという、より優れた抗疲労剤であるといえる。また、自律神経のバランスがとれた状態を維持または改善することにより、覚醒感が上昇しながらも熟睡感が向上し、起床時の精神的・身体的疲労感が軽減されるという点においても、優れた抗疲労剤であるといえる。
【００９９】
さらに、加熱熟成ニンニクエキスは、アルコール抽出法によりにんにくを熟成させたもの、加熱・湿度調整法によりにんにくを熟成させたものと比較して、その成分組成は大きく異なっていた。
【０１００】
［産業上の利用の可能性］
以上の結果から、Ｓ−アリルシステインなどの高機能性成分を豊富に含む加熱熟成ニンニクエキスに他の食品素材を配合した熟成ニンニクペーストが、日常生活において蓄積していく疲労感を抑制すること、また日々の蓄積していく疲労感を抑制すると同時に単純作業効率（パフォーマンス）を向上させることを見出した。さらに、自律神経のバランスがとれた状態を維持または改善することにより、覚醒感が上昇しながらも熟睡感が向上し、起床時の精神的・身体的疲労感が軽減されることを見出した。本発明の抗疲労用食品組成物は、健康食品分野及び医薬品分野において有用である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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