(57)【要約】      （修正有）【課題】白金抵抗性卵巣癌と診断された患者を治療する方法の提供。【解決手段】前記患者に有効量の抗ＶＥＧＦ抗体及びパクリタキセル、トポテカン又はペグ化リポソームドキソルビシン（ＰＬＤ）からなる群より選択される化学療法剤を投与することを含む方法に関する。【選択図】図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者に有効量の抗ＶＥＧＦ抗体及び化学療法剤を投与することを含む、白金抵抗性卵巣癌と診断された患者を治療する方法であって、前記患者は以前に２回またはそれより少ない抗癌レジメンを受けており、前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、前記治療は前記患者の無増悪生存期間の中央値を延長する方法。
【請求項２】
前記白金抵抗性卵巣癌が、上皮性卵巣癌（ＥＯＣ）、卵管癌（ＦＴＣ）又は原発性腹膜癌（ＰＰＣ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記患者は以前の白金治療に対して難治性ではない、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記患者は、ＲＥＣＩＳＴ１．０に従って測定可能な疾患又はＧＣＩＧ基準に従ってＣＡ−１２５評価可能な疾患を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記患者のＥＣＯＧパフォーマンスステータスが０−２である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記患者の余命が少なくとも１２週間である、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記化学療法剤は、パクリタキセル、トポテカン又はペグ化リポソームドキソルビシン（ＰＬＤ）からなる群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記パクリタキセルの前記有効量は、４週毎に１、８、１５及び２２日目に１時間の静脈注入として８０ｍｇ／ｍ２で投与される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記トポテカンの前記有効量は、４週毎に１、８及び１５日目に３０分の静脈注入として４ｍｇ／ｍ２で投与される、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記トポテカンの前記有効量は、３週毎に１日目から５日目まで３０分の静脈注入として１．２５ｍｇ／ｍ２で投与される、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＰＬＤの前記有効量は、４週毎に１日目のみ１ｍｇ／分の静脈注入として、その後は１時間の注入として、４０ｍｇ／ｍ２で投与される、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
前記抗ＶＥＧＦ抗体がＡ４．６．１エピトープと結合する、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記抗ＶＥＧＦ抗体がベバシズマブである、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記抗ＶＥＧＦ抗体は可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）を含み、前記ＶＨは配列番号：２のアミノ酸配列を有し、前記ＶＬは配列番号：１のアミノ酸配列を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記抗ＶＥＧＦ抗体の前記有効量は、２週毎に静脈内に１０ｍｇ／ｋｇである、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記抗ＶＥＧＦ抗体の前記有効量は、３週毎に静脈内に１５ｍｇ／ｋｇである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１７】
前記抗ＶＥＧＦ抗体の前記有効量は、初回は９０分にわたって静脈内に投与され、２回目以降は６０分にわたって注入され、その後３０分にわたって注入される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記抗ＶＥＧＦ抗体の前記有効量は、初回は９０分にわたって静脈内に投与され、２回目以降は６０分にわたって注入され、その後３０分にわたって注入される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記抗ＶＥＧＦ抗体が前記患者に初回サイクルで最初に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
前記抗ＶＥＧＦ抗体のそれ以降の投与が、前記化学療法剤の前又は後のいずれかである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記抗ＶＥＧＦ抗体が前記化学療法剤と同時に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、無増悪生存期間の中央値が約３ヶ月延長され、ハザード比（ＨＲ）が０．４８に等しい、請求項１に記載の方法。
【請求項２３】
前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、無増悪生存期間の中央値が少なくとも３ヶ月又はそれ以上延長され、ハザード比（ＨＲ）が０．４８に等しい、請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、無増悪生存期間の中央値が約３ヶ月延長され、ハザード比（ＨＲ）が約０．３２から約０．５７までである、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、無増悪生存期間の中央値が少なくとも３ヶ月又はそれ以上延長され、ハザード比（ＨＲ）が約０．３２から約０．５７までである、請求項１に記載の方法。
【請求項２６】
前記患者が６５歳未満である、請求項２２から２５の何れか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記患者が６５歳に等しいか又はそれ以上である、請求項２２から２５の何れか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記患者は白金無投薬期間（ＰＦＩ）が３ヶ月未満である、請求項２２から２５の何れか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記患者はＰＦＩが３ヶ月から６ヶ月までである、請求項２２から２５の何れか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記患者は腹部の腹水を有する、請求項２２から２５の何れか一項に記載の方法。
【請求項３１】
前記患者は腹部の腹水を有しない、請求項２２から２５の何れか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、前記治療法は前記患者の奏効率（ＯＲＲ）を更に改善する、請求項１に記載の方法。
【請求項３３】
前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、前記ＯＲＲが少なくとも１．５倍改善される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、前記ＯＲＲが少なくとも２倍改善される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３５】
前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、前記ＯＲＲが約３０．９％に改善される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３６】
前記化学療法剤はパクリタキセルであり、更に、前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、前記患者の無増悪生存期間の中央値は少なくとも６ヶ月又はそれ以上延長され、ハザード比（ＨＲ）は約０．４６である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３７】
前記化学療法剤はペグ化リポソームドキソルビシン（ＰＬＤ）であり、更に、前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、前記患者の無増悪生存期間の中央値は少なくとも２ヶ月又はそれ以上延長され、ハザード比は約０．５７である、請求項２４に記載の方法。
【請求項３８】
前記化学療法剤はトポテカンであり、更に、前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、前記患者の無増悪生存期間の中央値は少なくとも３ヶ月又はそれ以上延長され、ハザード比（ＨＲ）は約０．３２である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３９】
前記化学療法剤がパクリタキセルである、請求項３３に記載の方法。
【請求項４０】
前記化学療法剤がペグ化リポソームドキソルビシン（ＰＬＤ）である、請求項３３に記載の方法。
【請求項４１】
前記化学療法剤がトポテカンである、請求項３４に記載の方法。
【請求項４２】
本質的にエピトープＡ４．６．１に結合する抗ＶＥＧＦ抗体、化学療法剤、及び白金抵抗性卵巣癌と診断された患者に有効量の抗ＶＥＧＦ抗体及び化学療法剤を投与することを含む前記患者を治療するための説明書きを伴った添付文書又はラベルを含むキットであって、前記患者は２回またはそれより少ない抗癌レジメンを以前に受けており、また前記治療は、前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、前記患者の無増悪生存期間の中央値を延長するキット。
【請求項４３】
前記白金抵抗性卵巣癌は、上皮性卵巣癌（ＥＯＣ）、卵管癌（ＦＴＣ）又は原発性腹膜癌（ＰＰＣ）である、請求項４２に記載のキット。
【請求項４４】
前記抗ＶＥＧＦ抗体はベバシズマブであり、前記化学療法剤はパクリタキセル、トポテカン又はペグ化リポソームドキソルビシン（ＰＬＤ）からなる群から選択される、請求項４２に記載のキット。
【請求項４５】
患者における白金抵抗性卵巣癌を治療するために、本質的にエピトープＡ４．６．１に結合する抗ＶＥＧＦ抗体及び化学療法剤の投与を促進する方法であって、前記促進は書類によってなる方法。
【請求項４６】
前記抗ＶＥＧＦ抗体はベバシズマブであり、前記化学療法剤はパクリタキセル、トポテカン又はペグ化リポソームドキソルビシン（ＰＬＤ）からなる群から選択される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記書類は、前記抗ＶＥＧＦ抗体及び前記化学療法剤の市販製剤に伴う添付文書又はラベルである、請求項４５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般に、抗ＶＥＧＦ抗体を用いた疾病及び病態の治療に関する。より具体的には、本発明は、一つ又はそれ以上の追加的な抗腫瘍治療薬と併用して抗ＶＥＧＦ抗体を用いた、卵巣癌になりやすい又は卵巣癌と診断されたヒト患者の治療に関する。
【背景技術】
【０００２】
上皮性卵巣癌は、原発性腹膜癌及び卵管癌と共に、欧州での女性における５番目に一般的な癌関連の死因である。それはまた、死亡率の最も高い婦人科の悪性腫瘍である(Bray F 等 Ovarian cancer in Europe: Cross-sectional trends in incidence and mortality in 28 countries, 1953-2000. Int J Cancer 113,977-90 (2005); National Comprehensive Cancer Network, Clinical Practice Guidelines in Oncology: Ovarian cancer v.1 (2008)  http://www.nccn.org/professionals/physician_gls/PDF/ovarian.pdf. (2008))。卵巣癌の治療における進歩にも関わらず、ＯＳの増加は、あまり大きくなかった (Chan,J.K. 等 Patterns and progress in ovarian cancer over 14 years, Obstet. Gynecol. 108, 521-528 (2006); Engel,J. 等 Moderate progress for ovarian cancer in the last 20 years: prolongation of survival, but no improvement in the cure rate, Eur. J Cancer 38, 2435-2445 (2002)) ので、死亡者数は高いままである。これは、卵巣癌は進行期に進むまでしばしば診断されないという事実に、ある程度はよる。卵巣癌は、化学物質反応性の新生物と考えられ、初期の腫瘍細胞縮小手術と組み合わせた場合に全身化学療法に対する初回奏効率が８０％を超える(Bookman,M.A. Developmental chemotherapy and management of recurrent ovarian cancer. J. Clin. Oncol. 21, 149s-167s (2003))。これにも関わらず、上皮性卵巣癌と診断された女性の５０％以上が最終的にこの疾病で死亡する(Harries,M. と Gore,M. Part I: chemotherapy for epithelial ovarian cancer-treatment at first diagnosis. Lancet Oncol. 3, 529-536 (2002))。過去１５年にわたって発表された主要な臨床試験は、病気が進行した患者のＰＦＳの中央値が１６ヶ月から２３ヶ月の間の範囲であり、一方、ＯＳの中央値は３１ヶ月から６５ヶ月の間にあると報告している(International Collaborative Ovarian Neoplasm Group. Paclitaxel plus carboplatin versus standard chemotherapy with either single-agent carboplatin or cyclophosphamide, doxorubicin, and cisplatin in women with ovarian cancer: the ICON3 randomised trial. Lancet 360, 505-515 (2002); Armstrong,D.K. 等 Intraperitoneal cisplatin and paclitaxel in ovarian cancer. N. Engl. J. Med. 354, 34-43 (2006); McGuire,W.P. 等 Cyclophosphamide and cisplatin compared with paclitaxel and cisplatin in patients with stage III and stage IV ovarian cancer. N. Engl. J. Med. 334, 1-6 (1996); Muggia,F.M. 等 Phase III randomized study of cisplatin versus paclitaxel versus cisplatin and paclitaxel in patients with suboptimal stage III or IV ovarian cancer: a gynecologic oncology group study. J. Clin. Oncol. 18, 106-115 (2000); Piccart,M.J. 等 Randomized intergroup trial of cisplatin-paclitaxel versus cisplatin-cyclophosphamide in women with advanced epithelial ovarian cancer: three-year results. J. Natl. Cancer Inst. 92, 699-708 (2000))。
【０００３】
第一選択化学療法でＣＲを達成する患者の大部分は、最終的に病気を再発する。これらの患者は、白金感受性グループ又は白金抵抗性グループに細分化することができる（１２）。白金感受性の患者において、病気の再発は、白金を含む初回化学療法終了後６ヶ月以降に起こる（１２）。白金を用いた治療法は、白金を用いた２回目の治療後にこれらの患者において認められる臨床的に意義のある反応を考慮して、これらの患者を再治療するために一般に用いられる（１３）。現在のところ、白金を用いた初回化学療法終了後６ヶ月以内に病気が再発する白金抵抗性の患者のための最適な治療戦略はない（１２，１４）。利用可能な広範囲の治療法にもかかわらず、このセッティングにおいて生存期間の延長は示されておらず、ＯＲＲは一般に２０％未満である（１２，１５）。抵抗性の病気は治療不可能であるので、これらの患者のための治療の目標は、症状の緩和、生存期間の延長及び生活の質の改善を含む（１３，１５，１６）。
【０００４】
それゆえ、白金抵抗性は、治療レジメンの改善が必要な重要な臨床問題である。特に、血管新生を促進する血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）を標的としたモノクローナル抗体であるベバシズマブ（アバスチン（登録商標））は、著しい治療上の可能性を有する。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、以前に２回又はそれより少ない抗癌レジメンを受けた患者に有効量の抗ＶＥＧＦ抗体及び化学療法剤を投与することを含む、白金抵抗性（プラチナ抵抗性）卵巣癌と診断された患者を治療する方法を意図し、ここで前記治療法は、前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、前記患者の無増悪生存期間の中央値を延長する。一実施態様では、前記白金抵抗性卵巣癌は、上皮性卵巣癌（ＥＯＣ）、卵管癌（ＦＴＣ）又は原発性腹膜癌（ＰＰＣ）である。他の実施態様では、患者は、以前の白金（プラチナ）治療に対して難治性ではなく、及び／又はＲＥＣＩＳＴ１．０により測定可能な疾患又はＧＣＩＧ基準によりＣＡ−１２５で評価可能な疾患を持つ。別の実施態様では、患者は、ＥＣＯＧパフォーマンスステータスが０−２であり、余命は少なくとも１２週間である。
【０００６】
本発明は、上記の通り、白金抵抗性卵巣癌と診断された患者を治療する方法であって、前記患者に有効量の抗ＶＥＧＦ抗体及び化学療法剤を投与することを含む方法を意図しており、ここで前記化学療法剤は、パクリタキセル、トポテカン又はペグ化リポソームドキソルビシン（ＰＬＤ）からなる群から選択される。別の実施態様では、前記パクリタキセルの有効量は、４週毎に１、８、１５及び２２日目に１時間の静脈注入として８０ｍｇ／ｍ２で投与される。
【０００７】
上記方法における他の実施態様では、前記トポテカンの有効量は、４週毎に１、８及び１５日目に３０分の静脈注入として４ｍｇ／ｍ２で投与される。上記方法における代替実施態様では、前記トポテカンの有効量は、３週毎に１日目から５日目まで３０分の静脈注入として１．２５ｍｇ／ｍ２で投与される。
【０００８】
上記方法における他の実施態様では、前記ＰＬＤの有効量は、４週毎に１日目のみ１ｍｇ／分の静脈注入として、その後は１時間の注入として、４０ｍｇ／ｍ２で投与される。
【０００９】
白金抵抗性卵巣癌と診断された患者を治療する方法であって、前記患者に有効量の抗ＶＥＧＦ抗体及び化学療法剤を投与することを含む方法を意図する上記の本発明において、抗ＶＥＧＦ抗体は、Ａ４．６．１エピトープと結合する。別の実施態様において、抗ＶＥＧＦ抗体はベバシズマブである。更に別の実施態様において、抗ＶＥＧＦ抗体は、可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）を含み、ここで前記ＶＨは配列番号：２のアミノ酸配列を有し、前記ＶＬは配列番号：１のアミノ酸配列を有する。
【００１０】
白金抵抗性卵巣癌と診断された患者を治療する方法であって、前記患者に有効量の抗ＶＥＧＦ抗体及び化学療法剤を投与することを含む方法を意図する上記の本発明において、前記抗ＶＥＧＦ抗体の有効量は２週毎に静脈内に１０ｍｇ／ｋｇであり、前記抗ＶＥＧＦ抗体の有効量は初回は静脈内に９０分間かけて投与され、その後は６０分間で、その後は３０分間で注入される。別の実施態様において、前記抗ＶＥＧＦ抗体の有効量は３週毎に静脈内に１５ｍｇ／ｋｇであり、ここで抗ＶＥＧＦ抗体は初回は静脈内に９０分間かけて投与され、その後は６０分間で、その後は３０分間で注入される。
【００１１】
上記の本発明において、抗ＶＥＧＦ抗体は初回サイクルでは前記患者に最初に投与され、前記抗ＶＥＧＦ抗体の次回以降の投与は前記化学療法剤の前又は後のいずれかになされる。他の実施態様では、抗ＶＥＧＦ抗体は前記化学療法剤と同時に投与される。
【００１２】
白金抵抗性卵巣癌と診断された患者を治療する方法であって、前記患者に有効量の抗ＶＥＧＦ抗体及び化学療法剤を投与することを含む方法を意図する上記の本発明において、上述のように、前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、無増悪生存期間の中央値は約３ヶ月延長され、ハザード比（ＨＲ）は０．４８に等しい。他の実施態様では、前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、無増悪生存期間の中央値は少なくとも３ヶ月又はそれ以上延長され、ハザード比（ＨＲ）は０．４８に等しい。他の実施態様では、前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、無増悪生存期間の中央値は少なくとも３ヶ月又はそれ以上延長され、ハザード比（ＨＲ）は約０．３２から約０．５７までである。他の実施態様では、前記化学療法剤のみを受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、無増悪生存期間の中央値は約３ヶ月延長され、ハザード比（ＨＲ）は約０．３２から約０．５７までである。更に他の実施態様では、上記方法において、前記化学療法剤はパクリタキセルであり、前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、前記患者の無増悪生存期間の中央値は少なくとも６ヶ月又はそれ以上延長され、ハザード比（ＨＲ）は約０．４６である。更に他の実施態様では、上記方法において、前記化学療法剤はペグ化リポソームドキソルビシン（ＰＬＤ）であり、前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、前記患者の無増悪生存期間の中央値は少なくとも２ヶ月又はそれ以上延長され、ハザード比は約０．５７である。更に他の実施態様では、上記方法において、前記化学療法剤はトポテカンであり、前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、前記患者の無増悪生存期間の中央値は少なくとも３ヶ月又はそれ以上延長され、ハザード比（ＨＲ）は約０．３２である。上記方法における更に他の実施態様では、患者は６５歳未満である。上記方法における更に他の実施態様では、患者は６５歳又はそれ以上である。上記方法における一実施態様では、患者の白金無投薬期間（ＰＦＩ）は３ヶ月未満である。上記方法における代替実施態様では、患者のＰＦＩは３ヶ月から６ヶ月である。上記方法における一実施態様では、患者は腹水である。上記方法における代替実施態様では、患者は腹水でない。
【００１３】
上記方法における更に他の実施態様では、前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、更に前記治療法は前記患者の奏効率（ＯＲＲ）を改善する。一実施態様では、前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、ＯＲＲは少なくとも１．５倍又は少なくとも２倍改善される。更に他の実施態様では、前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、ＯＲＲは約３０．９％に改善される。前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、ＯＲＲが少なくとも１．５倍改善される上記方法における他の実施態様では、化学療法剤はパクリタキセル又はペグ化リポソームドキソルビシン（ＰＬＤ）である。前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して、ＯＲＲが少なくとも２倍改善される上記方法における他の実施態様では、化学療法剤はトポテカンである。
【００１４】
本発明はまた、本質的にエピトープＡ４．６．１に結合する抗ＶＥＧＦ抗体、化学療法剤、及び白金抵抗性卵巣癌と診断された患者に有効量の抗ＶＥＧＦ抗体及び化学療法剤を投与することを含む前記患者を治療するための説明書を伴った添付文書又はラベルを含むキットを意図し、ここで前記患者は以前に２回またはそれ以下の抗癌レジメンを受けており、前記治療法は、前記化学療法剤単独を受けている白金抵抗性卵巣癌患者と比較して前記患者の無増悪生存期間の中央値を延長する。上記キットの一実施態様では、白金抵抗性卵巣癌は、上皮性卵巣癌（ＥＯＣ）、卵管癌（ＦＴＣ）又は原発性腹膜癌（ＰＰＣ）である。上記キットの他の実施態様では、抗ＶＥＧＦ抗体はベバシズマブであり、前記化学療法剤はパクリタキセル、トポテカン又はペグ化リポソームドキソルビシン（ＰＬＤ）からなる群から選択される。
【００１５】
本発明は、患者において白金抵抗性卵巣癌を治療するために、本質的にエピトープＡ４．６．１に結合する抗ＶＥＧＦ抗体及び化学療法剤の投与を促進する方法を更に意図し、ここで前記促進は書類による。記述された促進方法の一実施態様では、抗ＶＥＧＦ抗体はベバシズマブであり、前記化学療法剤はパクリタキセル、トポテカン又はペグ化リポソームドキソルビシン（ＰＬＤ）からなる群から選択される。記述された促進方法の他の実施態様では、書類は前記抗ＶＥＧＦ抗体及び前記化学療法剤の市販製剤に伴う添付文書又はラベルである。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】実施例１により詳細に開示されている、２群第３相試験計画治療順序を示す。群１及び群２の両方において、化学療法剤、すなわちパクリタキセル、トポテカン又はＰＬＤのいずれかの選択が存在する。群２において、ベバシズマブについて、化学療法剤トポテカンが選択され、３週毎に１日目から５日目までのスケジュールで１．２５ｍｇ／ｍ２の服用量で投与される場合は、代替的な服用量は３週毎に１５ｍｇ／ｋｇである。
【図２】種々の危険因子に基づき患者をサブグループに細分化し、どの患者サブグループにおいてベバシズマブ及び化学療法の併用療法が化学療法単独と比べて良好な無増悪生存期間（ＰＦＳ）の治療成績をもたらすかを比較する第３相ＡＵＲＥＬＩＡ試験からのＰＦＳ治療成績の患者階層化分析を示す。ＣＴ＝化学療法；ＢＥＶ＋ＣＴ＝ベバシズマブ＋化学療法；ＨＲ＝未調整ハザード比；ＰＦＩ＝月で測定された白金無投薬期間、ただし合計８患者の情報が欠落している。
【図３】スハウテン補正した両側カイ二乗検定により測定された最良の奏効率（ＯＲＲ）の要約を示し、ＲＥＣＩＳＴ及び／又はＣＡ−１２５応答者、ＲＥＣＩＳＴ応答者のみ、及びＣＡ−１２５応答者のみにより測定された患者のパーセントを２つの治療群の間で比較しており、ここで化学療法単独（ＣＴ）は各事例において灰色の点模様の棒で示され、ベバシズマブ及び化学療法の併用（ＢＥＶ＋ＣＴ）は各事例において灰色の棒で示されている。Ｎは各試験集団における患者数を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
定義
「抗血管新生剤」又は「血管新生阻害剤」は、直接に又は間接にのいずれかで血管新生、脈管形成、又は望ましくない血管透過性を抑制する低分子物質、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、分離タンパク質、組換タンパク質、抗体、又はコンジュゲート若しくはそれの融合タンパク質を指す。抗血管新生剤は血管新生因子又はそのレセプターと結合しその血管新生作用をブロックする薬剤を含むということが理解されるべきである。例えば、抗血管新生剤は、本明細書の至る所に定義されているか又は当技術分野で周知であるような血管新生物質に対する抗体又は他の拮抗薬であり、例えば、限定されないが、ＶＥＧＦ−ＡまたはＶＥＧＦ−Ａレセプター（例えば、ＫＤＲレセプター又はＦｌｔ−１レセプター）に対する抗体、ＶＥＧＦトラップ、Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標）（メシル酸イマチニブ）等の抗ＰＤＧＦＲ阻害剤である。抗血管新生剤はまた天然の血管新生阻害剤、例えば、アンギオスタチン、エンドスタチン等も含む。例えば、Ｋｌａｇｓｂｒｕｎ と Ｄ’Ａｍｏｒｅ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，５３：２１７−３９（１９９１）；Ｓｔｒｅｉｔ と Ｄｅｔｍａｒ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２２：３１７２−３１７９（２００３）（例えば, 悪性黒色腫における抗血管新生療法をリストアップしている表３); Ｆｅｒｒａｒａ と Ａｌｉｔａｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ５：１３５９−１３６４（１９９９）；Ｔｏｎｉｎｉ 等，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２２：６５４９−６５５６（２００３）（例えば、既知の抗血管新生因子をリストアップしている表２); 及び Ｓａｔｏ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．，８：２００−２０６（２００３）(例えば、臨床試験において用いられている抗血管新生剤をリストアップしている表１)を参照。
【００１８】
用語「抗体」は本明細書において最も広い意味で用いられ、様々な抗体構造を包含し、限定されないが、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多特異性抗体(例えば二重特異性抗体)、及び、所望の抗原結合活性を示す限り、抗体フラグメントを含む。
【００１９】
用語「腹水」又は腹部の腹水は、腹部に過剰な量が蓄積した流体を指す。卵巣癌があるところでは、腹水は癌腫から離脱した浮遊癌細胞をしばしば含む。腹部の腹水の症状は、一般に、腹部の腹水のない患者と比較して、症候性の疾患及び予後不良を示す。
【００２０】
用語「ベバシズマブ」は、「ｒｈｕＭＡｂ  ＶＥＧＦ」又は「アバスチン（登録商標）」としても知られている、Ｐｒｅｓｔａ他（１９９７）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５７：４５９３−４５９９に従って作製される組換え抗ＶＥＧＦヒト化モノクローナル抗体を指す。これは、変異したヒトＩｇＧ１フレームワーク領域及びヒトＶＥＧＦのそのレセプターへの結合をブロックするマウス抗ヒトＶＥＧＦモノクローナル抗体Ａ４.６.１由来の抗原結合相補性決定領域を含む。フレームワーク領域の大部分を含む、ベバシズマブのアミノ酸配列のおよそ９３％はヒトＩｇＧ１由来であり、配列のおよそ７％はマウス抗体Ａ４.６.１由来である。ベバシズマブは、ハイブリドーマＡＴＣＣ ＨＢ １０７０９によって産生される抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体Ａ４.６.１と同じエピトープに結合する。
【００２１】
「ＣＡ−１２５」は癌抗原１２５又は炭水化物抗原１２５を意味し、治療に対する反応を追跡し、治療後の予後を予測するための臨床的に承認された血液検査である。それは特に卵巣癌の再発を発見するために役立つ。それは卵巣癌のマーカーとして最もよく知られているが、子宮内膜癌、卵管癌、肺癌、乳癌及び胃腸癌を含む他の癌においても上昇しうる。
【００２２】
用語「癌」及び「癌性の」は、制御されない細胞増殖によって一般に特徴付けられる、哺乳動物における生理学的状態を指す又は記述する。潜伏腫瘍又は微小転移と同様に良性癌及び悪性癌も、この定義に含まれる。癌の例としては、限定されないが、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫及び白血病が含まれる。そのような癌のより特別の例として、限定されないが、上皮性卵巣癌（ＥＯＣ）、卵管癌（ＦＴＣ）、又は原発性腹膜癌（ＰＰＣ）又は白金抵抗性卵巣癌を含む卵巣癌が含まれる。他の癌としては、例えば、乳癌、扁平上皮癌、肺癌(小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、及び肺扁平上皮癌を含む)、腹膜癌、肝細胞癌、胃癌(消化器癌を含む)、膵臓癌、神経膠芽細胞腫、子宮頸癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞癌、結腸癌、大腸癌、子宮内膜又は子宮癌、唾液腺癌、腎臓又は腎癌、肝臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝臓癌、及び様々なタイプの頭頸部癌、並びにＢ細胞リンパ腫(低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫(ＮＨＬ)；小リンパ球性(ＳＬ)ＮＨＬ；中悪性度／濾胞性ＮＨＬ；中悪性度びまん性ＮＨＬ；高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ；高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ；高悪性度小型非分割細胞ＮＨＬ；巨大腫瘤病変ＮＨＬ；マントル細胞リンパ腫；エイズ関連リンパ腫；及びワルデンシュトレームマクログロブリン血症を含む)；慢性リンパ性白血病(ＣＬＬ)；急性リンパ芽球性白血病(ＡＬＬ)；ヘアリー細胞白血病；慢性骨髄芽球性白血病；及び移植後リンパ増殖性疾患(ＰＴＬＤ)、並びに、母斑症と関係する異常な血管増殖、浮腫(脳腫瘍と関係するものなど)、及びメイグス症候群が含まれる。
【００２３】
「化学療法剤」は、癌の治療に有用な化学化合物である。化学療法剤の例は、癌の治療に有用な化学化合物を含む。化学療法剤の例は、例えば、パクリタキセル又はトポテカン又はペグ化リポソームドキソルビシン（ＰＬＤ）を含む。化学療法剤の他の例は、チオテパ及びＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）シクロホスファミド等のアルキル化剤；ブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファン等のスルホン酸アルキル類；ベンゾドーパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、カルボコン、メツレドーパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）、及びウレドーパ（ｕｒｅｄｏｐａ）等のアジリジン類；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホルアミド及びトリメチロールメラミンを含むエチレンイミン類及びメチラメラミン類；アセトゲニン(特にブラタシン及びブラタシノン（ｂｕｌｌａｔａｃｉｎｏｎｅ））；カンプトテシン；ブリオスタチン；カリスタチン（ｃａｌｌｙｓｔａｔｉｎ）；ＣＣ-１０６５(そのアドゼレシン、カルゼレシン及びビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン(特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ−２１８９及びＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコディクチン（ｓａｒｃｏｄｉｃｔｙｉｎ）；スポンジスタチン；クロランブシル、クロルナファジン、クロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベンビチン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード等のナイトロジェンマスタード；カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン等のニトロソウレア；エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケアマイシンガンマ１Ｉ及びカリケアマイシンオメガＩ１（例えば、Agnew Chem. Intl. Ed. Engl., 33：183-186(1994)を参照のこと）；ダイネミシンＡを含むダイネミシン；クロドロネート等のビスフォスフォネート；エスペラマイシン；並びにネオカルジノスタチン発色団及び関連する色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アントラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カルビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６-ジアゾ-５-オキソ-Ｌ-ノルロイシン、アドリアマイシン（登録商標)ドキソルビシン(モルフォリノ−ドキソルビシン、シアノモルフォリノ-ドキソルビシン、２-ピロリノ-ドキソルビシン及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン（ｅｓｏｒｕｂｉｃｉｎ）、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣ等のマイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン等の抗生物質；メトトレキサー��及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）等の代謝拮抗物質；デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート等の葉酸類似体；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン等のプリン類似体；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン等のピリミジン類似体；カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン等のアンドロゲン；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン等の抗副腎剤（ａｎｔｉ−ａｄｒｅｎａｌｓ）；フォリン酸等の葉酸補充物質（ｒｅｐｌｅｎｉｓｈｅｒ）；アセグラトン；アルドホスファミド配糖体；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル（ｂｅｓｔｒａｂｕｃｉｌ）；ビスアントレン；エダトレキサート；デフォファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）；デメコルチン；ジアジコン；エルホルミチン（ｅｌｆｏｒｍｉｔｈｉｎｅ）；エリプチニウム酢酸塩；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダミン；メイタンシン及びアンサマイトシン等のマイタンシノイド；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメト（ｐｈｅｎａｍｅｔ）；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸（ｐｏｄｏｐｈｙｌｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖類複合体（ＪＨＳ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，Ｏｒｅｇ．）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテシン（特に Ｔ−２毒素、ベルカリンＡ、ロリジンＡ及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、ＴＡＸＯＬ（登録商標）パクリタキセル（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ.Ｊ．）、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）クレモホールを含有しないアルブミン操作ナノ粒子パクリタキセル製剤（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ，Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ，Ｉｌｌ．）、及びＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）ドセタキセル（Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ Ｒｏｒｅｒ，Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ）；クロラムブシル；ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；シスプラチン、オキサリプラチン及びカルボプラチン等の白金類似体；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標）ビノレルビン；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロネート；イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ，ＣＰＴ−１１）（５−Ｆ��及びロイコボリンを伴ったイリノテカンの治療レジメンを含む）；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸等のレチノイド；カペシタビン；コンブレタスタチン；ロイコボリン（ＬＶ）；オキサリプラチン治療レジメン（ＦＯＬＦＯＸ）を含むオキサリプラチン；ラパチニブ（Ｔｙｋｅｒｂ（登録商標）)；細胞増殖を減少させるＰＫＣ−ａｌｐｈａ，Ｒａｆ，Ｈ−Ｒａｓ，ＥＧＦＲ (例えば、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標）））及びＶＥＧＦ−Ａの阻害剤、及び任意の上記の薬剤的に許容される塩、酸又は誘導体を含む。
【００２４】
用語「同時に」は、本明細書において、少なくともその一部が時間的に重なる２つ又はそれ以上の治療薬の投与を指すために使われる。従って、同時投与は、１つ又はそれ以上の他の薬剤の投与を中止した後に１つ又はそれ以上の薬剤の投与が続く投薬レジメンを含む。
【００２５】
用語「有効量」は、哺乳動物における疾患又は障害を治療するために有効な薬剤の量を指す。癌の場合、治療上有効量の薬剤は、癌細胞の数を減少させ；腫瘍の大きさを減少させ；末梢器官への癌細胞の浸潤を阻害し（即ち、ある程度遅延させ、好ましくは停止させ）；腫瘍の転移を阻害し（即ち、ある程度遅延させ、また好ましくは停止させ）；腫瘍の増殖をある程度阻害し；及び／又は障害に関連した一つ又はそれ以上の症状をある程度和らげることがありうる。薬剤が増殖を妨げ、及び／又は存在している癌細胞を死滅させうるという点で、それは細胞増殖抑制性及び／又は細胞毒性でありうる。癌治療にとって、生体内での効果は、例えば、生存期間、無増悪生存期間（ＰＦＳ）、奏効率（ＲＲ）、奏効期間、及び／又は生活の質を評価することによって測定できる。
【００２６】
「エピトープＡ４．６．１」は、抗ＶＥＧＦ抗体ベバシズマブ（アバスチン（登録商標））によって認識されるエピトープを指す(Muller Y 他, Structure 15 September 1998, 6:1153-1167 を参照)。本発明の幾つかの実施態様において、抗ＶＥＧＦ抗体は、限定されないが、Ｐｒｅｓｔａ他（１９９７）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５７：４５９３−４５９９ に従って作製される組換え抗ＶＥＧＦヒト化モノクローナル抗体である、ハイブリドーマＡＴＣＣ ＨＢ １０７０９によって産生される抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体Ａ４．６．１と同じエピトープに結合するモノクローナル抗体を含む。
【００２７】
「ヒト抗体」は、ヒト若しくはヒト細胞により産生されるか、又はヒト抗体のレパートリー若しくは他のヒト抗体をコードする配列を利用する非ヒト起源に由来する抗体のアミノ酸配列に相当するアミノ酸配列を有する抗体である。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を特に除外する。
【００２８】
「ヒト化」抗体は、非ヒトＨＶＲ由来のアミノ酸残基、及びヒトＦＲ由来アミノ酸残基を含むキメラ抗体を指す。幾つかの実施態様において、ヒト化抗体は、少なくとも一つ、一般には二つの可変ドメインの実質的に全てを含むであろうし、ここでＨＶＲ（例えば、ＣＤＲ）の全て又は実質的に全てが非ヒト抗体のものに対応し、ＦＲの全て又は実質的に全てがヒト抗体のものに対応する。ヒト化抗体は、任意で、ヒト抗体由来の抗体定常領域の少なくとも一部を含んでもよい。抗体、例えば、非ヒト抗体の「ヒト化型」は、ヒト化を遂げた抗体を指す。
【００２９】
本明細書で使用される用語「超可変領域」又は「ＨＶＲ」は、配列が超可変であり、及び／又は構造的に定義されたループ（ 「超可変ループ」）を形成する、抗体可変ドメインの各領域を指す。一般的に、天然型４鎖抗体は、ＶＨ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）に３つ、及びＶＬ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）に３つの６つのＨＶＲを含む。ＨＶＲは、一般的に、超可変ループ由来及び／又は「相補性決定領域」（ＣＤＲ）由来のアミノ酸残基を含み、後者は最高の配列可変性を有し、及び／又は抗原認識に関与している。典型的な超可変ループは、アミノ酸残基２６−３２（Ｌ１）、５０−５２（Ｌ２）、９１−９６（Ｌ３）、２６−３２（Ｈ１）、５３−５５（Ｈ２）、及び９６−１０１（Ｈ３）で生じる。  (Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987).) 典型的なＣＤＲ（ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、及びＣＤＲ−Ｈ３）は、アミノ酸残基Ｌ１の２４−３４、Ｌ２の５０−５６、Ｌ３の８９−９７、Ｈ１の３１−３５Ｂ、Ｈ２の５０−６５、及びＨ３の９５−１０２に生じる。(Kabat, 他, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 第5版, Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991).) ＶＨにおけるＣＤＲ１は例外だが、ＣＤＲは一般に、超可変ループを形成するアミノ酸残基を含む。ＣＤＲはまた、抗原に接触する残基である「特異性決定残基」又は「ＳＤＲ」を含む。ＳＤＲは、短縮型（ａｂｂｒｅｖｉａｔｅｄ−）ＣＤＲ、又はａ−ＣＤＲと呼ばれる、ＣＤＲの領域内に含まれている。典型的なａ-ＣＤＲ（ａ−ＣＤＲ−Ｌ１、ａ−ＣＤＲ−Ｌ２、ａ−ＣＤＲ−Ｌ３、ａ−ＣＤＲ−Ｈ１、  ａ−ＣＤＲ−Ｈ２、及びａ−ＣＤＲ−Ｈ３）は、アミノ酸残基Ｌ１の３１−３４、Ｌ２の５０−５５、Ｌ３の８９−９６、Ｈ１の３１−３５Ｂ、Ｈ２の５０−５８、及びＨ３の９５−１０２に生じる。(Almagro と Fransson, Front. Biosci. 13:1619-1633 (2008)を参照) 特に断らない限り、可変ドメイン内のＨＶＲ残基及び他の残基（例えば、ＦＲ残基）は、上掲のＫａｂａｔ等に従い、本明細書において番号が付けられる。
【００３０】
「個体」又は「被験体」は、哺乳動物である。哺乳動物は、限定されないが、家畜動物（例えば、ウシ、ヒツジ、ネコ、イヌ、及びウマ）、霊長類（例えば、ヒト、及びサルなどの非ヒト霊長類）、ウサギ、及びげっ歯類（例えば、マウス及びラット）を含む。幾つかの実施態様において、個体又は被験体はヒトである。
【００３１】
本発明の方法にとって、被験体に「指示する」という用語は、任意の手段で、好ましくは、添付文書又は他の促進資料の形態など、書面で、適用可能な治療法、薬物治療、治療、治療レジメン等のための指示を与えることを意味する。
【００３２】
用語「静脈注入」は、約５分より長く、好ましくは約３０分から９０分の間の時間にわたって、動物又はヒト被験体の静脈への薬剤の挿入を指すが、本発明によれば、静脈注入は代替方法として１０時間又はそれ未満の時間で投与される。
【００３３】
用語「静脈内大量投与」又は「静注」は、約１５分またはそれ未満で、好ましくは５分又はそれ未満で身体が薬剤を受け入れるような、動物又はヒトの静脈への薬剤投与を指す。
【００３４】
「単離された」抗体は、その自然の環境の成分から分離されたものである。幾つかの実施態様において、抗体は、例えば、電気泳動（例えば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、等電点電気泳動（ＩＥＦ）、キャピラリー電気泳動）又はクロマトグラフィー（例えば、イオン交換又は逆相ＨＰＬＣ）により決定されるように、９５％超又は９９％超の純度に精製される。抗体純度の評価方法の概観のために、例えば、Ｆｌａｔｍａｎ等、Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ｂ８４８：７９−８７（２００７）を参照のこと。  
【００３５】
「維持」投与量は、本明細書において、治療期間中又は治療期間後に被験体に投与される１回分またはそれ以上の治療薬の投与量を指す。通常、維持投与量は、ほぼ１週間ごと、ほぼ２週間ごと、ほぼ３週間ごと、又はほぼ４週間ごとなど、治療間隔をあけて投与される。
【００３６】
「維持療法」は、疾患の再発又は進行の可能性を減少させるために与えられる治療レジメンを意味する。維持療法は、被験体の寿命まで延長された期間を含む、任意の長さの時間にわたり提供されうる。維持療法は、初期治療後に又は初期若しくは追加の治療と併せて提供されうる。維持療法のために用いられる投与量は変動しうるし、また、他の種類の治療のために用いられる投与量と比べ少ない投与量を含みうる。本明細書中の「維持」も参照のこと。
【００３７】
用語「マーケティング」は、本明細書において、製品（例えば、薬剤）の販売促進、販売又は流通を記述するために使用される。マーケティングは、包装、広告、及び製品を商品化する目的を持った任意の事業活動を特に含む。
【００３８】
「転移（ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ）」又は「転移（ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ）」は、原発部位から身体の他の場所への癌の広まりを意味する。癌細胞は、原発腫瘍から離脱し、リンパ管及び血管の中へ浸透し、血流によって循環し、身体の他の遠い場所の正常組織の中で増殖（転移）しうる。転移は局所的又は遠隔的でありうる。転移は、逐次プロセスであり、原発腫瘍から離脱し、血流を通って進み、遠くの場所で止まる腫瘍細胞に左右される。新たな場所で、細胞は、血液供給を確立し、増殖して致命的な塊を形成しうる。腫瘍細胞内の刺激性分子と阻害性分子の両経路がこの挙動を調節し、腫瘍細胞と遠くの場所にある宿主細胞との間の相互作用もまた重要である。
【００３９】
「単剤療法」とは、癌又は腫瘍の治療のために治療期間中に単一の治療薬のみを含む治療レジメンを意味する。ＶＥＧＦ特異拮抗薬を用いた単剤療法は、ＶＥＧＦ特異拮抗薬が治療期間中に追加の抗癌療法なしに投与されることを意味する。
【００４０】
本明細書で使用される用語「モノクローナル抗体」とは、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を意味し、すなわち、例えば、天然に生じる又はモノクローナル抗体調整物の作製時に発生する突然変異を含む、一般に少量で存在している、起こりうる変異体抗体は別にして、集団を構成する個々の抗体は同一であり、及び/又は同じエピトープに結合する。異なる決定基（エピトープ）に対する異なる抗体を一般に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対するものである。従って、修飾語「モノクローナル」は、実質的に均一な抗体の集団から得られるものとしての抗体の特徴を示しており、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とすると解釈されるべきではない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、限定されないが、ハイブリドーマ法、組換えＤＮＡ法、ファージディスプレイ法、及び、ヒト免疫グロブリン遺伝子座の全部又は一部を含むトランスジェニック動物を利用する方法を含む様々な技術によって作製されうるのであり、モノクローナル抗体を作製するためのそのような方法及び他の例示的な方法は、本明細書に記載されている。
【００４１】
用語「薬学的製剤」は、その中に含有される活性成分の生物学的活性を有効とするような形態であって、製剤が投与される被験体にとって許容できない毒性を有する追加成分を含まない調製物を指す。
【００４２】
「薬学的に許容される担体」は、活性成分以外の、被験体にとって非毒性である、薬学的製剤中の成分を指す。 薬学的に許容される担体は、限定されないが、緩衝剤、賦形剤、安定剤、又は保存剤を含む。
【００４３】
「白金抵抗性」とは、最低４サイクルの白金治療の終了から６ヶ月未満での卵巣癌疾患進行を意味する。日付は、白金治療の最後の投与から計算される。  
【００４４】
用語「白金無投薬期間」（ＰＦＩ）は、白金系治療終了後の経過時間を意味する。一般に、白金無投薬期間が長くなるほど、再治療に対する反応が高くなる。
【００４５】
本発明の方法にとって、用語「促進する」とは、添付文書の形態等の、文書を含む任意の方法で、特定の薬剤、薬剤の組合せ又は治療法を申し出る、宣伝する、販売する、又は説明することを意味する。本明細書中で、促進するとは、乳癌治療等の適応症のためにＶＥＧＦ拮抗薬、例えば、抗ＶＥＧＦ抗体又は化学療法剤、等の治療薬の促進を指し、そのような促進は、被験体の母集団において統計的に有意な治療効果と容認可能な安全性との関連が証明されたものとしてアメリカ食品医薬品局（ＦＤＡ）によって認められている。
【００４６】
「無増悪生存期間（ＰＦＳ）」とは、治療（又は無作為化）から最初の疾病進行又は死亡までの期間を指す。例えば、それは、治療開始又は初回診断から、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、約６ヶ月、約７ヶ月、約８ヶ月、約９ヶ月、約１年、約２年、約３年、等の、例えば、ある限定された期間、癌が再発せずに被験体が生き続けている期間である。本発明の一態様において、ＰＦＳは固形癌の治療効果評価基準（ＲＥＣＩＳＴ）によって評価できる。
【００４７】
被験体の「母集団」とは、臨床試験におけるような、又は乳癌治療等のある特定の適応症に対するＦＤＡの承認に従っていると腫瘍学者が見るような、癌を有する被験体の集団を指す。
【００４８】
「被験体」とは、限定されないが、ヒト又は、ウシ、ウマ、イヌ、ヒツジ若しくはネコ等の非ヒト哺乳動物を含む哺乳動物を意味する。好ましくは、被験体はヒトである。患者もまた本明細書中において被験体である。
【００４９】
「生存期間」とは、生き続けている被験体のことを指し、無増悪生存期間（ＰＦＳ）及び全生存期間（ＯＳ）を含む。生存期間はカプランマイヤー法によって評価でき、また生存期間の任意の差は層別化した対数順位検定を用いて計算される。  
【００５０】
「全生存期間」とは、治療開始又は初回診断から、約１年、約２年、約３年、約４年、約５年、約１０年等のある限定された期間生き続けている被験体のことを指す。本発明の基礎となる研究において、生存期間分析のために用いられるイベントは、死因を問わない死亡であった。
【００５１】
「奏効率（Ｏｖｅｒａｌｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｒａｔｅ）」又は「奏効率（Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｒａｔｅ）」（ＯＲＲ）― ある最小の時間で癌の大きさ（又は血液の癌の場合は量）の減少を経験した人の割合；ＯＲＲは完全奏効率と部分奏効率の合計である。
【００５２】
「生存期間の延長」又は「生存可能性の上昇」は、治療されていない被験体と比べて（すなわち、ＶＥＧＦ抗体を用いて治療されていない被験体と比べて）、又は、例えばパクリタキセル、トポテカン、若しくはＰＬＤ等の、卵巣癌のための標準の治療において用いられるような化学療法剤のみを用いた治療等の対照治療プロトコールと比べて、治療された被験体におけるＰＦＳ及び／又はＯＳを増加させることを意味する。生存期間は、治療開始後又は初回診断後、少なくとも約１ヶ月、約２ヶ月、約４ヶ月、約６ヶ月、約９ヶ月、又は少なくとも約１年、又は少なくとも約２年、又は少なくとも約３年、又は少なくとも約４年、又は少なくとも約５年、又は少なくとも約１０年等の間、監視される。
【００５３】
ハザード比（ＨＲ）は、イベント発生率についての統計的定義である。本発明の目的のために、ハザード比は、任意の特定の時点で、実験群におけるイベントの確率を対照群におけるイベントの確率で除したものを表していると定義される。無増悪生存期間分析における「ハザード比」は、経過観察期間中の２本の無増悪生存曲線の間の差の要約であり、対照と比べた治療の場合の死亡リスクの減少を表している。
【００５４】
本明細書で用いられるように、「治療」（及び「治療する（ｔｒｅａｔ）」又は「治療している（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」など、それの文法上の変形）は、治療されている個体の自然経過を変えようと試みる臨床的介入を指し、予防のために又は臨床病理の過程においてのいずれかで実行されうる。治療の望ましい効果は、限定されないが、疾患の発症又は再発を予防すること、症状の緩和、疾患の任意の直接的又は間接的な病理学的結果の縮小、転移を予防すること、疾患の進行の速度を遅らせること、疾患状態の改善又は緩和、及び寛解又は予後の改善を含む。幾つかの実施態様において、本発明の抗体は、疾患の発症を遅延させるか又は疾患の進行を遅くするために使用される。  
【００５５】
用語 「可変領域」又は「可変ドメイン」は、抗体を抗原に結合させることに関与する、抗体の重鎖又は軽鎖のドメインを指す。天然型抗体の重鎖及び軽鎖（それぞれＶＨ及びＶＬ）の可変ドメインは、一般に類似の構造を有しており、各ドメインが４つの保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）と３つの超可変領域（ＨＶＲ）を含んでいる。（例えば、Kindt 他 Kuby Immunology, 第6版, W.H. Freeman and Co., 91ページ (2007) を参照。）単一のＶＨ又はＶＬドメインは、抗原結合特異性を付与するのに十分であり得る。更に、特定の抗原に結合する抗体は、抗原に結合する抗体由来のＶＨ又はＶＬドメインを用い、それぞれ相補的なＶＬ又はＶＨドメインのライブラリをスクリーニングして、単離されうる。例えば、Ｐｏｒｔｏｌａｎｏ 他，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：８８０−８８７（１９９３）；Ｃｌａｒｋｓｏｎ 他，Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４−６２８（１９９１）を参照。
【００５６】
用語「ＶＥＧＦ」又は「ＶＥＧＦ−Ａ」は、例えば、Ｌｅｕｎｇ 他 Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４６：１３０６（１９８９），及び Ｈｏｕｃｋ 他 Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎ．，５：１８０６（１９９１）により記載されているように、アミノ酸１６５個のヒト血管内皮細胞増殖因子、及び関連するアミノ酸１２１個、１４５個、１８９個及び２０６個のヒト血管内皮細胞増殖因子、並びに、それの自然発生する対立遺伝子の形態及び加工された形態、を指すために用いられる。ＶＥＧＦ−Ａは、ＶＥＧＦ−Ｂ、ＶＥＧＦ−Ｃ、ＶＥＧＦ−Ｄ、ＶＥＧＦ−Ｅ、ＶＥＧＦ−Ｆ及びＰｌＧＦを含む遺伝子ファミリーの一部である。ＶＥＧＦ−Ａは、二つの高親和性レセプターチロシンキナーゼである、ＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）及びＶＥＧＦＲ−２（Ｆｌｋ−１／ＫＤＲ）に主に結合し、後者はＶＥＧＦ−Ａの血管内皮細胞分裂促進シグナルの主要な伝達物質である。更に、ニューロピリンー１は、ヘパリン結合性ＶＥＧＦ−Ａアイソフォームのレセプターと同定されており、血管発生において役割を果たしうる。用語「ＶＥＧＦ」又は「ＶＥＧＦ−Ａ」はまた、マウス、ラット又は霊長類等の非ヒト種由来のＶＥＧＦをも指す。時折、特定種由来のＶＥＧＦは、例えばヒトＶＥＧＦはｈＶＥＧＦ又はマウスＶＥＧＦはｍＶＥＧＦ等の用語により表される。一般に、ＶＥＧＦはヒトＶＥＧＦを指す。用語ＶＥＧＦはまた、１６５個のアミノ酸のヒト血管内皮細胞増殖因子の中の８から１０９までのアミノ酸、又は１から１０９までのアミノ酸を含むポリペプチドの切断形態又はフラグメントを指すためにも用いられる。任意のそのような形態のＶＥＧＦへの参照は、本願において例えば、「ＶＥＧＦ（８−１０９）」、「ＶＥＧＦ（１−１０９）」又は「ＶＥＧＦ１６５」によって特定されうる。「切断型」天然ＶＥＧＦについてのアミノ酸位置は、天然ＶＥＧＦ配列において示されるように番号付けされる。例えば、切断型天然ＶＥＧＦにおけるアミノ酸１７位（メチオニン）は、天然ＶＥＧＦにおける１７位（メチオニン）でもある。切断型天然ＶＥＧＦは、ＫＤＲ及びＦｌｔ−１レセプターに対して天然ＶＥＧＦに匹敵する結合親和性を有する。
【００５７】
「抗ＶＥＧＦ抗体」は、十分な親和性及び特異性でＶＥＧＦに結合する抗体である。選択された抗体は通常ＶＥＧＦに対し結合親和性を有し、例えば、Ｋｄ値が１００ｎＭから１ｐＭの間でｈＶＥＧＦに結合しうる。抗体の親和性は、例えば、表面プラズモン共鳴に基づくアッセイ（例えば国際公開第２００５／０１２３５９号に記載されているようなＢＩＡｃｏｒｅアッセイなど）；酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）；及び競合アッセイ（例えばＲＩＡ）により決定されうる。幾つかの実施態様において、本発明の抗ＶＥＧＦ抗体は、ＶＥＧＦ活性が関与している疾患又は症状を標的とし、また干渉することにおいて、治療剤として使用することができる。また、抗体は、例えば治療としての有効性を評価するために、他の生物学的活性アッセイを施してもよい。このようなアッセイは、当技術分野で周知であり、標的抗原、及び抗体に対する意図された使用法に依存する。例として、ＨＵＶＥＣ阻害アッセイ；腫瘍細胞増殖阻害アッセイ（例えば、国際公開第８９／０６６９２号に記載）；抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）及び補体媒介性細胞傷害（ＣＤＣ）アッセイ（米国特許第５５００３６２号）；及びアゴニスト活性又は造血アッセイ（国際公開第９５／２７０６２号を参照）が含まれる。 抗ＶＥＧＦ抗体は通常、ＶＥＧＦ−Ｂ又はＶＥＧＦ−Ｃなどの他のＶＥＧＦホモログにも、ＰｌＧＦ、ＰＤＧＦ又はｂＦＧＦなどの他の増殖因子にも結合しないであろう。
【００５８】
「ＶＥＧＦ拮抗薬」は、１つ又はそれ以上のＶＥＧＦレセプターに結合することを含むＶＥＧＦ活性を無力化し、妨げ、阻害し、抑制し、減少させ、又は干渉する能力のある分子を指す。ＶＥＧＦ拮抗薬は、抗ＶＥＧＦ抗体及びその抗原結合フラグメント、特異的にＶＥＧＦに結合することによりそれが１つまたはそれ以上のレセプターに結合することから隔離するレセプター分子及び誘導体、抗ＶＥＧＦレセプター抗体、及びＶＥＧＦＲチロシンキナーゼの低分子阻害剤などのＶＥＧＦレセプター拮抗薬を含む。
【００５９】
「キメラＶＥＧＦレセプタータンパク質」とは、少なくとも２つの異なるタンパク質に由来し、そのうちの少なくとも１つがＶＥＧＦレセプタータンパク質であるようなアミノ酸配列を持つＶＥＧＦレセプター分子である。幾つかの実施態様において、キメラＶＥＧＦレセプタータンパク質は、ＶＥＧＦに結合し、その生物学的活性を阻害することができる。
【００６０】
キメラ及びヒト化抗体
ある実施態様において、本明細書で提供される抗体は、キメラ抗体である。幾つかのキメラ抗体は、例えば、米国特許第４８１６５６７号、及び Ｍｏｒｒｉｓｏｎ 他，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１−６８５５（１９８４）に記載されている。一実施例において、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、又はサル等の非ヒト霊長類由来の可変領域）及びヒト定常領域を含む。更なる実施例において、キメラ抗体は、クラス又はサブクラスが親抗体のものから変更された「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体は、その抗原結合フラグメントを含む。
【００６１】
ある実施態様において、キメラ抗体は、ヒト化抗体である。通常、非ヒト抗体は、親の非ヒト抗体の特異性と親和性を保持したまま、ヒトに対する免疫原性を低減するために、ヒト化される。一般に、ヒト化抗体は、ＨＶＲ、例えば、ＣＤＲ（またはその一部）が非ヒト抗体から由来し、ＦＲ（またはその一部）がヒト抗体配列に由来する、一又はそれ以上の可変ドメインを含む。ヒト化抗体はまた、任意で、ヒト定常領域の少なくとも一部をも含むであろう。幾つかの実施態様において、ヒト化抗体の幾つかのＦＲ残基は、例えば、抗体特異性又は親和性を回復もしくは改善するめに、非ヒト抗体（例えば、ＨＶＲ残基が由来する抗体）由来の対応する残基で置換されている。
【００６２】
ヒト化抗体及びそれらを作製する方法が、例えば、Ａｌｍａｇｒｏ と Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３（２００８）で概観されており、また、例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ 等，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３−３２９（１９８８）；Ｑｕｅｅｎ 等，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：１００２９−１００３３（１９８９）；米国特許第５８２１３３７号、第７５２７７９１号、第６９８２３２１号、及び第７０８７４０９号; Ｋａｓｈｍｉｒｉ 等，Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：２５−３４（２００５）（ＳＤＲ（ａ−ＣＤＲ）グラフティングを記載している）；Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９−４９８（１９９１）（「リサーフェシング」を記載している）；Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａｅｔ 等，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：４３−６０（２００５）（「ＦＲシャッフリング」を記載している）；及び Ｏｓｂｏｕｒｎ  等，Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：６１−６８（２００５）及び Ｋｌｉｍｋａ 等，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，８３：２５２−２６０（２０００）（ＦＲシャッフリングに対する「誘導選択」アプローチを記載している）に更に記載されている。
【００６３】
ヒト化のために用いられうるヒトフレームワーク領域は、限定されないが、最良適合法を用いて選択されたフレームワーク領域 (例えば、Sims 等、J. Immunol. 151:2296 (1993)参照)；軽鎖又は重鎖可変領域のある特別のサブグループのヒト抗体のコンセンサス配列に由来するフレームワーク領域 (例えば、Carter 等 Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:4285 (1992); 及び Presta 等 J. Immunol., 151:2623 (1993)参照)；ヒト成熟（体細胞変異）フレームワーク領域又はヒト生殖細胞系フレームワーク領域(例えば、Almagro と Fransson, Front. Biosci. 13:1619-1633 (2008)参照)；及びＦＲライブラリをスクリーニングすることから得られるフレームワーク領域 (例えば、Baca 等、J. Biol. Chem. 272:10678-10684 (1997) 及び Rosok 等、 J. Biol. Chem. 271:22611-22618 (1996)参照) を含む。
【００６４】
ヒト抗体
幾つかの実施態様において、本明細書で提供される抗体は、ヒト抗体である。ヒト抗体は、当技術分野で周知の様々な技術を用いて生産することができる。ヒト抗体は、ｖａｎ Ｄｉｊｋ と ｖａｎ  ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８−７４（２００１）  及び Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：４５０−４５９（２００８）  に概して記述されている。
【００６５】
ヒト抗体は、インタクトなヒト抗体を又はヒト可変領域を持つインタクトな抗体を抗原チャレンジに応答して産生するように改変されたトランスジェニック動物に免疫原を投与することにより、調製されうる。このような動物は、通常、ヒト免疫グロブリン遺伝子座の全て又は一部を含んでおり、それらは内因性免疫グロブリン遺伝子座を置換しているか、又は染色体外に存在するか若しくはその動物の染色体にランダムに統合されている。このようなトランスジェニックマウスでは、内因性免疫グロブリン遺伝子座は、一般に不活性化されている。トランスジェニック動物からヒト抗体を得るための方法の総説については、Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３：１１１７−１１２５  （２００５）を参照。また、例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術を記載している米国特許第６０７５１８１号及び第６１５０５８４号；ＨＵＭＡＢ（登録商標）技術を記載している米国特許第５７７０４２９号; Ｋ−Ｍ  ＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を記載している米国特許第７０４１８７０号、及びＶＥＬＯＣＩＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を記載している米国特許出願公開第２００７／００６１９００号を参照。このような動物によって産生されたインタクトな抗体に由来するヒト可変領域は、例えば、異なるヒト定常領域と結合させることにより、更に改変される可能性がある。
【００６６】
ヒト抗体はまた、ハイブリドーマベース法によっても作製することができる。ヒトモノクローナル抗体の産生のためのヒト骨髄腫及びマウス-ヒトヘテロ骨髄腫細胞株が記載されてきた。(例えば、Kozbor J. Immunol., 133: 3001 (1984); Brodeur 等, Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, pp. 51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987);及びBoerner 等, J. Immunol., 147: 86 (1991)を参照) ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術により作製されるヒト抗体はまた、Ｌｉ等，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７−３５６２（２００６）に記載されている。更なる方法は、例えば、米国特許第７１８９８２６号 (ハイブリドーマ細胞株からのモノクローナルヒトＩｇＭ抗体の産生を記載している)及び Ｎｉ，Ｘｉａｎｄａｉ  Ｍｉａｎｙｉｘｕｅ，２６（４）：２６５−２６８（２００６）(ヒト-ヒトハイブリドーマを記載している)に記載されたものを含む。ヒトハイブリドーマ技術（トリオーマ技術）はまた、Ｖｏｌｌｍｅｒｓ と Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０（３）：９２７−９３７（２００５）及びＶｏｌｌｍｅｒｓ と Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｆｉｎｄｉｎｇｓ ｉｎ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２７（３）：１８５−９１（２００５）にも記載されている。
【００６７】
ヒト抗体はまた、ヒト由来のファージディスプレイライブラリーから選択されたＦｖクローン可変ドメイン配列を単離することによっても作製され得る。このような可変ドメイン配列は、その後、所望のヒト定常ドメインと結合させてもよい。抗体ライブラリーからヒト抗体を選択するための技術が、以下に説明される。
【００６８】
ライブラリー由来の抗体
本発明の抗体は、所望の活性を有する抗体についてコンビナトリアルライブラリーをスクリーニングすることによって単離することができる。例えば、ファージディスプレイライブラリーを生成し、所望の結合特性を有する抗体についてそのようなライブラリーをスクリーニングするための様々な方法が、当該技術分野で知られている。そのような方法が、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ 等、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１−３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ 等，編，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００１）で概観されており、また例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ 等，Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５２−５５４；Ｃｌａｃｋｓｏｎ 等，Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４−６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓ 等，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７（１９９２）；Ｍａｒｋｓ と Ｂｒａｄｂｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８：１６１−１７５（Ｌｏ，編，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３）；Ｓｉｄｈｕ 等，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９−３１０（２００４）；Ｌｅｅ 等，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３−１０９３（２００４）；  Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（３４）：１２４６７−１２４７２（２００４）；及び Ｌｅｅ 等，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４（１−２）：１１９−１３２（２００４）に更に記載されている。
【００６９】
幾つかのファージディスプレイ法において、ＶＨ及びＶＬ遺伝子のレパートリーがポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）により個別にクローニングされ、ファージライブラリーにおいてランダムに組換えられ、それから、Ｗｉｎｔｅｒ 等，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２：４３３−４５５  （１９９４）に記載されているように、抗原結合ファージについてスクリーニングすることができる。ファージは、通常、抗体フラグメントを、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメント、またはＦａｂフラグメントのいずれかとして提示する。免疫された起源に由来するライブラリーは、ハイブリドーマの構築を必要とすることなく免疫原に高親和性抗体を提供する。あるいはまた、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ 等，ＥＭＢＯ Ｊ，１２：７２５−７３４（１９９３）に記載されているように、免疫せずに広範囲の非自己抗原及び自己抗原に単一起源の抗体を提供するように、ナイーブなレパートリーをクローニング（例えば、ヒト由来）することができる。最後に、ナイーブなライブラリはまた、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ と Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１−３８８（１９９２）に記載されているように、非常に可変なＣＤＲ３領域をコードし、インビトロで再構成を達成するために、幹細胞由来の再構成されていないＶ遺伝子セグメントをクローニングし、ランダム配列を含むＰＣＲプライマーを使用することにより、合成することができる。ヒト抗体ファージライブラリーを記述する特許公報は、例えば、米国特許第５７５０３７３号、及び米国特許出願公開第２００５／００７９５７４号、第２００５／０１１９４５５号、第２００５／０２６６０００号、第２００７／０１１７１２６号、 第２００７／０１６０５９８号、第２００７／０２３７７６４号、第２００７／０２９２９３６号及び第２００９／０００２３６０号を含む。
【００７０】
ヒト抗体ライブラリーから単離された抗体または抗体フラグメントは、本明細書でヒト抗体またはヒト抗体フラグメントとみなされる。
【００７１】
抗ＶＥＧＦ抗体及び拮抗薬
ＶＥＧＦ抗体の生産のために用いられるＶＥＧＦ抗原は、例えば、ＶＥＧＦ１６５ 分子、及びＶＥＧＦの他のアイソフォーム、又は所望のエピトープを含むそれのフラグメントでありうる。一つの実施態様において、所望のエピトープは、ベバシズマブによって認識されるものであり、それは、ハイブリドーマＡＴＣＣ ＨＢ １０７０９によって産生される抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体Ａ．４．６．１と同じエピトープに結合する（本明細書中で定義されているエピトープＡ．４．６．１として知られている）。本発明の抗ＶＥＧＦ抗体を作製するために役立つ他の形態のＶＥＧＦは、当業者に明らかであろう。
【００７２】
ウシＶＥＧＦ ｃＤＮＡをハイブリダイゼーションプローブとして用いて、ヒト細胞から作製されたｃＤＮＡライブラリを最初にスクリーニングすることによって、ヒトＶＥＧＦは得られた。Ｌｅｕｎｇ 等（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４６：１３０６。それによって同定された一つのｃＤＮＡは、ウシＶＥＧＦに対して９５％以上のホモロジーを有するアミノ酸数１６５個のタンパク質をコードする。このアミノ酸数１６５個のタンパク質は、通常、ヒトＶＥＧＦ（ｈＶＥＧＦ）又はＶＥＧＦ１６５と呼ばれる。ヒトＶＥＧＦの細胞分裂活性が、哺乳類宿主細胞中でヒトＶＥＧＦ ｃＤＮＡを発現することにより確認された。ヒトＶＥＧＦ ｃＤＮＡを遺伝子導入された細胞によって条件付けられた中膜が、毛細血管内皮細胞の増殖を促進したが、対照細胞は促進しなかった。Ｌｅｕｎｇ 等（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ，上掲。組換えＤＮＡ技術によってＶＥＧＦをクローニングし発現させようとするさらなる努力が企てられた。(例えば、Ferrara, Laboratory Investigation 72:615-618 (1995) 及びそこで引用されている参考文献を参照)。
【００７３】
ＶＥＧＦは、選択的ＲＮＡスプライシングから生ずる多様なホモダイマーの形状（モノマー当たり１２１個、１４５個、１６５個、１８９個及び２０６個のアミノ酸）で様々な組織の中で発現される。ＶＥＧＦ１２１は、ヘパリンと結合しない可溶性のマイトジェンである；長い形状のＶＥＧＦほど、ヘパリンとの結合における親和性が次第に高くなる。ヘパリン結合性形状のＶＥＧＦは、拡散性形状のＶＥＧＦを放出するために、プラスミンによってカルボキシ末端において切断することができる。プラスミン切断後に同定されたカルボキシ末端ペプチドのアミノ酸配列は、Ａｒｇ１１０−Ａｌａ１１１である。アミノ末端の「コア」タンパク質、ホモダイマーとして単離されたＶＥＧＦ（１−１１０）は、インタクトなＶＥＧＦ１６５ホモダイマーと比べて同様の親和性で中和モノクローナル抗体（例えば、４．６．１ や ３．２Ｅ３．１．１と呼ばれている抗体）及び可溶性形状のＶＥＧＦレセプターと結合する。
【００７４】
胎盤増殖因子（ＰＩＧＦ）、ＶＥＧＦ−Ｂ、ＶＥＧＦ−Ｃ、ＶＥＧＦ−Ｄ及びＶＥＧＦ−Ｅを含むＶＥＧＦと構造上関連した幾つかの分子もまた、最近同定された。Ｆｅｒｒａｒａ と Ｄａｖｉｓ−Ｓｍｙｔｈ（１９８７）Ｅｎｄｏｃｒ．Ｒｅｖ．，上掲；Ｏｇａｗａ 等 Ｊ．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍ．２７３：３１２７３−３１２８１（１９９８）；Ｍｅｙｅｒ 等 ＥＭＢＯ Ｊ．，１８：３６３−３７４（１９９９）。レセプターチロシンキナーゼ、Ｆｌｔ−４（ＶＥＧＦＲ−３）が、ＶＥＧＦ−Ｃ及びＶＥＧＦ−Ｄのレセプターとして同定された。Ｊｏｕｋｏｖ 等 ＥＭＢＯ．Ｊ．１５：１７５１（１９９６）；Ｌｅｅ 等 Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９３：１９８８−１９９２（１９９６）；Ａｃｈｅｎ 等（１９９８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９５：５４８−５５３．ＶＥＧＦ−Ｃは、リンパ管新生の調整に関与していることが示された。Ｊｅｌｔｓｃｈ 等 Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７６：１４２３−１４２５（１９９７）。
【００７５】
Ｆｌｔ−１（ＶＥＧＦＲ−１とも言う）及びＫＤＲ（ＶＥＧＦＲ−２とも言う）という二つのＶＥＧＦレセプターが同定された。Ｓｈｉｂｕｙａ等（１９９０）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ８：５１９−５２７；ｄｅ Ｖｒｉｅｓ等（１９９２）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５５：９８９−９９１；Ｔｅｒｍａｎ等  （１９９２）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１８７：１５７９−１５８６．ニューロピリン−１は、ヘパリン結合性ＶＥＧＦアイソフォームと結合することができる選択的ＶＥＧＦレセプターであることが示された（Ｓｏｋｅｒ等（１９９８）Ｃｅｌｌ ９２：７３５−４５）。
【００７６】
本発明の方法において有用な抗ＶＥＧＦ抗体は、ＶＥＧＦと十分な親和性及び特異性をもって結合し、ＶＥＧＦの生物学的活性を減じ又は阻害することのできる任意の抗体又はそれの抗原結合性フラグメントを含む。抗ＶＥＧＦ抗体は通常、ＶＥＧＦ−Ｂ又はＶＥＧＦ−Ｃなどの他のＶＥＧＦホモログにも、ＰＩＧＦ、ＰＤＧＦ又はｂＦＧＦなどの他の増殖因子にも結合しないであろう。
【００７７】
本発明の幾つかの実施態様において、抗ＶＥＧＦ抗体は、限定されないが、ハイブリドーマＡＴＣＣ ＨＢ １０７０９によって作製される抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体Ａ４．６．１；Ｐｒｅｓｔａ  他（１９９７）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５７：４５９３−４５９９に従って作製される遺伝子組換え型抗ＶＥＧＦヒト化モノクローナル抗体と同じエピトープに結合するモノクローナル抗体を含む。一つの実施態様において、抗ＶＥＧＦ抗体は、「ｒｈｕＭＡｂ ＶＥＧＦ」又は「アバスチン（登録商標）」としても知られている「ベバシズマブ（ＢＶ）」である。これは、変異したヒトＩｇＧ１フレームワーク領域及びヒトＶＥＧＦのそのレセプターへの結合をブロックするマウス抗ｈＶＥＧＦモノクローナル抗体Ａ４.６.１由来の抗原結合相補性決定領域を含有する。フレームワーク領域の大部分を含む、ベバシズマブのアミノ酸配列のおよそ９３％は、ヒトＩｇＧ１由来であり、配列のおよそ７％はマウス抗体Ａ４.６.１由来である。
【００７８】
ベバシズマブ（アバスチン（登録商標））は、ＦＤＡによって認可された最初の血管新生阻害療法であり、転移性結腸直腸癌（静脈内５−ＦＵベース化学療法と併用した第一選択治療及び第二選択治療）、進行非扁平上皮非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）（カルボプラチン及びパクリタキセルと併用した、切除不能、局所進行性、再発性、又は転移性ＮＳＣＬＣの第一選択治療）及び転移性ＨＥＲ２陰性乳癌（パクリタキセルと併用した、これまで治療されていない転移性ＨＥＲ２陰性乳癌）の治療について認可されている。
【００７９】
ベバシズマブ及び他のヒト化抗ＶＥＧＦ抗体は、２００５年２月２６日発行の米国特許第６８８４８７９号に更に記載されている。 国際公開第２００５／０１２３５９号、国際公開２００５／０４４８５３号、及び米国特許出願６０／９９１３０２に記載されているように、更なる抗体にはＧ６又はＢ２０シリーズの抗体（例えば、Ｇ６−３１、Ｂ２０−４．１）が含まれ、これらの特許出願の内容は参照により本明細書に明示的に組み込まれる。更なる抗体については、米国特許第７０６０２６９号、同第６５８２９５９号、同第６７０３０２０号；同第６０５４２９７号；国際公開第９８／４５３３２号；国際公開第９６／３００４６号；国際公開第９４／１０２０２号；欧州特許第０６６６８６８号；米国特許出願公開第２００６００９３６０号、第２００５０１８６２０８号、第２００３０２０６８９９号、第２００３０１９０３１７号、第２００３０２０３４０９号及び第２００５０１１２１２６号；及びＰｏｐｋｏｖ等、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８８：１４９−１６４（２００４）を参照のこと。他の抗体には、残基Ｆ１７、Ｍ１８、Ｄ１９、Ｙ２１、Ｙ２５、Ｑ８９、Ｉ１９１、Ｋ１０１、Ｅ１０３及びＣ１０４を含むか、あるいは残基Ｆ１７、Ｙ２１、Ｑ２２、Ｙ２５、Ｄ６３、Ｉ８３及びＱ８９を含むヒトＶＥＧＦ上の機能的エピトープに結合するものを含む。
【００８０】
本発明の一実施態様において、抗ＶＥＧＦ抗体は、以下のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳ  ＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴ  ＩＴＣＳＡＳＱＤＩＳ  ＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰ  ＧＫＡＰＫＶＬＩＹＦ  ＴＳＳＬＨＳＧＶＰＳ  ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤ  ＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰ  ＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱ  ＹＳＴＶＰＷＴＦＧＱ  ＧＴＫＶＥＩＫＲ．（配列番号：１）  
及び以下のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を有する：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧ  ＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬ  ＳＣＡＡＳＧＹＴＦＴ  ＮＹＧＭＮＷＶＲＱＡ  ＰＧＫＧＬＥＷＶＧＷ  ＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹ  ＡＡＤＦＫＲＲＦＴＦ  ＳＬＤＴＳＫＳＴＡＹ  ＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤ  ＴＡＶＹＹＣＡＫＹＰ  ＨＹＹＧＳＳＨＷＹＦ  ＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴ  ＶＳＳ （配列番号：２）
【００８１】
本発明による「Ｇ６シリーズ抗体」は、開示全体が出典明示により本明細書に明示的に援用される国際公開第２００５／０１２３５９号の図７、２４−２６、及び３４−３５の任意の一つによるＧ６抗体又はＧ６由来抗体の配列に由来する抗ＶＥＧＦ抗体である。 開示全体が出典明示により本明細書に明示的に援用される国際公開第２００５／０４４８５３号も参照のこと。一実施態様において、Ｇ６シリーズ抗体は、残基Ｆ１７，Ｙ２１，Ｑ２２，Ｙ２５，Ｄ６３，Ｉ８３及びＱ８９を含むヒトＶＥＧＦ上の機能的エピトープに結合する。
【００８２】
本発明による「Ｂ２０シリーズ抗体」は、開示全体が出典明示により本明細書に明示的に援用される国際公開第２００５／０１２３５９号の図２７−２９の任意の一つによるＢ２０抗体又はＢ２０由来抗体の配列に由来する抗ＶＥＧＦ抗体である。国際公開第２００５／０４４８５３号及び米国特許出願第６０／９９１３０２号も参照のこと。これら特許出願の内容は出典明示により本明細書に明示的に援用される。一実施態様において、Ｂ２０シリーズ抗体は、残基Ｆ１７，Ｍ１８，Ｄ１９，Ｙ２１，Ｙ２５，Ｑ８９，Ｉ９１，Ｋ１０１，Ｅ１０３，及びＣ１０４を含むヒトＶＥＧＦ上の機能的エピトープに結合する。
【００８３】
本発明による「機能的エピトープ」は、抗体の結合に活動的に寄与する抗原のアミノ酸残基を指す。抗原の活動的に寄与する残基の任意の一つの突然変異（例えば、アラニン又はホモログ突然変異による野生型ＶＥＧＦの突然変異）は、抗体の相対的親和性比（ＩＣ５０変異型ＶＥＧＦ／ＩＣ５０野生型ＶＥＧＦ）が５より大きくなるように、抗体の結合を阻害するであろう（国際公開第２００５／０１２３５９号の例２を参照）。一実施態様において、相対親和性比率は溶液結合ファージディスプレイＥＬＩＳＡによって決定される。簡潔に言うと、９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐイムノプレート（ＮＵＮＣ）を２μｇ／ｍｌの濃度の試験すべきＦａｂ形状の抗体を有するＰＢＳにて４℃で一晩コーティングし、ＰＢＳ、０．５％ＢＳＡ 及び ０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０（ＰＢＴ）にて室温で２時間ブロッキングした。ＰＢＴにて段階希釈したファージディスプレイｈＶＥＧＦアラニン点突然変異体（残基８−１０９型）又は野生型ｈＶＥＧＦ（８−１０９）を、Ｆａｂコートプレート上で室温で１５分間最初にインキュベートし、ＰＢＳ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０（ＰＢＳＴ）にてプレートを洗浄した。結合したファージを、ＰＢＴにて１：５０００に希釈した抗Ｍ１３モノクローナル抗体西洋わさびペルオキシダーゼ（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ）コンジュゲートにて検出し、３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン (TMB, Kirkegaard & Perry Labs, Gaithersburg, Md.) 基質でおよそ５分間現像し、１．０ＭのＨ３ＰＯ４にて急冷し、４５０ｎｍにおいて分光光度法で読む。ＩＣ５０値（ＩＣ５０，ａｌａ／ＩＣ５０，ｗｔ）の比率は、結合親和性における減少の倍率（相対的結合親和性）を表す。
【００８４】
ＶＥＧＦレセプター分子
２つの最も良く特徴付けられたＶＥＧＦレセプターは、ＶＥＧＦＲ１(別名Ｆｌｔ−１)及びＶＥＧＦＲ２(別名マウスホモログのＫＤＲ及びＦＬＫ−１)である。各ＶＥＧＦファミリーメンバーの各レセプターの特異性は変化するが、ＶＥＧＦ−ＡはＦｌｔ−１及びＫＤＲの両方に結合する。Ｆｌｔ−１及びＫＤＲの両方が、レセプターチロシンキナーゼ（ＲＴＫ）のファミリーに属する。ＲＴＫは、多様な生物学的活性を持った膜貫通レセプターの大きなファミリーを含む。少なくとも１９個の別個のＲＴＫサブファミリーが同定された。レセプターチロシンキナーゼ（ＲＴＫ）のファミリーは、種々の細胞型の増殖及び分化にとって重要なレセプターを含む (Yarden と Ullrich (1988) Ann. Rev. Biochem. 57:433-478; Ullrich と Schlessinger (1990) Cell 61:243-254)。ＲＴＫの固有の機能はリガンド結合で活性化され、それはレセプター及び多数の細胞基質のリン酸化を生じ、次に種々の細胞反応を生ずる(Ullrich & Schlessinger (1990) Cell 61:203-212)。このように、レセプターチロシンキナーゼを介するシグナル伝達は、特異的増殖因子（リガンド）との細胞外相互作用によって開始され、通常、続いて、レセプターの二量体化、固有のタンパク質チロシンキナーゼ活性の刺激及びレセプタートランスリン酸化が起こる。それによって、細胞内シグナル伝達分子のための結合部位が生成され、適切な細胞応答を容易にするある範囲の細胞質内シグナル伝達分子との複合体の形成をもたらす。（例えば細胞分裂、分化、代謝効果、細胞外微小環境の変化）Ｓｃｈｌｅｓｓｉｎｇｅｒ と Ｕｌｌｒｉｃｈ（１９９２）Ｎｅｕｒｏｎ ９：１−２０を参照。構造的には、Ｆｌｔ-１とＫＤＲの両方共、細胞外ドメインに７個の免疫グロブリン様ドメイン、単一の膜貫通領域、及びキナーゼインサートドメインによって中断されているコンセンサスチロシンキナーゼ配列を有している。Ｍａｔｔｈｅｗｓ等（１９９１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８８：９０２６−９０３０；Ｔｅｒｍａｎ等（１９９１）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ６：１６７７−１６８３。細胞外ドメインはＶＥＧＦの結合に関与しており、細胞内ドメインはシグナル伝達に関与している。
【００８５】
ＶＥＧＦに特異的に結合するＶＥＧＦレセプター分子又はそのフラグメントは、ＶＥＧＦタンパク質に結合してこれを隔離し、それによってそのシグナル伝達を妨げるために本発明の方法において用いられうる。ある実施態様では、ＶＥＧＦレセプター分子又はそのＶＥＧＦ結合フラグメントは、可溶型、例えばｓＦｌｔ−１である。レセプターの可溶型は、ＶＥＧＦに結合して標的細胞の表面上に存在する天然のレセプターへのその結合を妨げることによって、ＶＥＧＦタンパク質の生物活性に対して阻害作用を及ぼす。また、ＶＥＧＦレセプター融合タンパク質も含まれ、以下にその例を記述する。
【００８６】
キメラＶＥＧＦレセプタータンパク質は、少なくとも２つの異なるタンパク質由来のアミノ酸配列を有するレセプター分子であり、そのうちの少なくとも１つはＶＥＧＦレセプタータンパク質(例えば、ｆｌｔ−１又はＫＤＲレセプター)であり、ＶＥＧＦに結合してＶＥＧＦの生物活性を阻害することができる。ある実施態様では、本発明のキメラＶＥＧＦレセプタータンパク質は、２つの異なるＶＥＧＦレセプター分子だけに由来するアミノ酸配列からなるが、ｆｌｔ−１及び／又はＫＤＲレセプターの細胞外リガンド結合領域の１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ又は７つ全てのＩｇ様ドメインを含むアミノ酸配列は、他の無関係なタンパク質のアミノ酸配列、例えば免疫グロブリン配列、に連結されうる。Ｉｇ様ドメインが結合される他のアミノ酸配列は、当業者に容易に明らかであろう。キメラＶＥＧＦレセプタータンパク質の例は、例えば、可溶性Ｆｌｔ−１／Ｆｃ、ＫＤＲ／Ｆｃ、又はＦｌｔ−１／ＫＤＲ／Ｆｃ（ＶＥＧＦ Ｔｒａｐとしても知られている）を含む（例えば、国際公開第９７／４４４５３号を参照）。
【００８７】
本発明の可溶性ＶＥＧＦレセプタータンパク質又はキメラＶＥＧＦレセプタータンパク質には、膜貫通ドメインによって細胞の表面に固定されていないＶＥＧＦレセプタータンパク質が含まれる。よって、キメラレセプタータンパク質を含むＶＥＧＦレセプターの可溶型は、ＶＥＧＦに結合してＶＥＧＦを不活性化することができるが、膜貫通領域を含んでおらず、したがって一般に、この分子が発現される細胞の細胞膜に結合したものとならない。
【００８８】
治療用途及び組成物
本発明は、腫瘍増殖を維持する栄養分の供給に必要な腫瘍血管の発達を阻害することを目的とした新規な癌治療戦略である抗血管新生療法を含む。血管新生は、原発腫瘍の増殖および転移の両方に関与しているので、本発明によって提供される抗血管新生治療は、原発部位での腫瘍の新生物性増殖を阻害し二次部位での腫瘍の転移を防止することができ、従って、他の治療薬による腫瘍の攻撃を可能にする。
【００８９】
具体的に言うと、白金抵抗性卵巣癌と診断された被験体を治療する方法が本明細書中で提供され、これは、有効量の化学療法剤と抗ＶＥＧＦ抗体を併用した治療レジメンを被験体に投与することを含む。更に、被験体は、卵巣癌の以前の治療に対して難治性ではなく、これまで２回又はそれ以下の抗癌レジメンしか受けていない。化学療法と抗ＶＥＧＦ抗体の投与を併用した治療レジメンは、被験体の無増悪生存期間（ＰＦＳ）を延長する。
【００９０】
併用療法
本発明は、抗ＶＥＧＦ抗体と１つ又はそれ以上の更なる抗癌療法との併用の使用又は組成物を特徴とする。抗癌療法の例としては、限定されないが、手術、放射線療法、生物療法、免疫療法、化学療法、又はこれらの治療法の併用が含まれる。加えて、細胞毒性薬、抗血管新生及び抗増殖剤は、抗ＶＥＧＦ抗体と併用して使用することができる。
【００９１】
方法および使用のいずれかのある態様において、本発明は、有効量の抗ＶＥＧＦ抗体と化学療法剤を白金抵抗性卵巣癌と診断された被験体に投与することによって、乳癌の治療を提供する。様々な化学療法剤が、本発明の併用治療方法及び用法において用いられうる。意図されている化学療法剤の代表的な及び非限定のリストが、本明細書中「定義」の中で提供され、又は本明細書中に記載されている。一実施態様では、化学療法剤はパクリタキセルである。別の実施態様では、化学療法剤はトポテカンである。更に別の実施態様では、化学療法剤はペグ化リポソームドキソルビシン（ＰＬＤ）である。
【００９２】
一実施例において、上記で意図された併用治療は、別々の製剤又は単一の医薬製剤を使用する同時投与、及び、好ましくは両方の（または全ての）活性剤が同時に生物学的活性を発揮する期間のある、いずれかの順序での連続投与を含む投与を伴う。そのような化学療法剤のための製剤及び投薬のスケジュールは、製造業者の説明書に従って、又は当業者によって経験的に決定され、使用されうる。化学療法のための製剤及び投薬のスケジュールはまた、Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｍ．Ｃ．Ｐｅｒｒｙ編，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍｄ．（１９９２）にも記載されている。化学療法剤は、抗ＶＥＧＦ抗体の投与に先行することもあれば、又はその後に続くこともありうるし、又はそれと同時に与えられることもありうる。
【００９３】
本方法及び用法のいずれかの他の幾つかの実施態様において、本発明の抗体との併用腫瘍療法にとって有益な他の療法剤は、ＥＧＦＲ，ＥｒｂＢ３，ＥｒｂＢ４，又はＴＮＦなどの腫瘍増殖に関与する他の因子の拮抗薬を含む。時には、一つ又はそれ以上のサイトカインを被験体に投与することも有益でありうる。一つの実施態様において、ＶＥＧＦ抗体は増殖阻害剤とともに同時投与される。例えば、増殖阻害剤が最初に投与され、次がＶＥＧＦ抗体であってもよい。しかしながら、同時投与又は最初にＶＥＧＦ抗体を投与することもまた、意図されている。増殖阻害剤の適切な投薬が現在用いられており、増殖阻害剤及び抗ＶＥＧＦ抗体の組合せ作用（相乗作用）により引き下げられうる。
【００９４】
本明細書の製剤はまた、治療を受けている特定の適応症のために必要な一以上の活性化合物、好ましくは、互いに悪影響を及ぼさない相補的活性を持つものを含みうる。例えば、ＥＧＦＲ、ＶＥＧＦ（例えば、ＶＥＧＦ上の異なるエピトープ又は同じエピトープに結合する抗体）、ＶＥＧＦＲ又は  ＥｒｂＢ２（例えば、ハーセプチン（登録商標））に結合する抗体を一つの製剤において更に提供することが、望ましい場合がある。代替方法として、又は、加えて、前記組成物は化学療法剤又は細胞毒性薬を含みうる。そのような分子は、意図された目的にとって有効な量で適切に組み合されて存在している。
【００９５】
本方法及び用法のいずれかのある実施態様において、本発明の抗体との併用癌治療にとって有益な他の療法剤は、他の抗血管新生薬を含む。多くの抗血管新生薬が同定されており、当該技術分野において周知であり、ＣａｒｍｅｌｉｅｔとＪａｉｎ（２０００）によってリストアップされたものを含む。一実施態様において、本発明の抗ＶＥＧＦ抗体は、別のＶＥＧＦ拮抗薬又はＶＥＧＦレセプター拮抗薬、例えば、ＶＥＧＦ変異体、可溶性ＶＥＧＦレセプターフラグメント、ＶＥＧＦ又はＶＥＧＦＲをブロックする能力のあるアプタマー、中和抗ＶＥＧＦＲ抗体、ＶＥＧＦＲチロシンキナーゼの低分子量阻害剤、及びその任意の組合せと併用される。代替方法として、又は、加えて、２つ又はそれ以上の抗ＶＥＧＦ抗体が被験体に同時投与されうる。
【００９６】
疾患の予防又は治療のためには、ＶＥＧＦ特異拮抗薬の適切な用量は、上記で定義されているように、治療すべき疾患の種類、疾患の重症度及び経過、ＶＥＧＦ特異拮抗薬を予防又は治療目的のいずれにおいて投与するか、以前の治療、患者の臨床上の病歴及びＶＥＧＦ特異拮抗薬に対する応答性、及び主治医の裁量に依存するであろう。ＶＥＧＦ特異拮抗薬は、患者に対して、単回、又は一連の治療にわたって適切に投与される。併用療法レジメンにおいて、ＶＥＧＦ特異拮抗薬及び本発明の一つ又はそれ以上の抗癌療法剤が治療上有効な又は相乗的な量で投与される。本明細書で使用されているように、治療上の有効量とは、ＶＥＧＦ特異拮抗薬及び一つ又はそれ以上の他の治療薬の同時投与、又は本発明の組成物の投与が、上述のように癌の縮小又は抑制をもたらすようなものである。治療上相乗的な量とは、ある特定の疾患と関連した状態又は症状を相乗的に又は著しく縮小又は除去するために必要なＶＥＧＦ特異拮抗薬及び一つ又はそれ以上の他の治療薬の量である。
【００９７】
ＶＥＧＦ特異拮抗薬及び一つ又はそれ以上の他の治療薬は、腫瘍、休眠腫瘍、又は微小転移の発生又は再発を縮小又は除去するのに十分な量及び時間で同時に又は経時的に投与されうる。ＶＥＧＦ特異拮抗薬及び一つ又はそれ以上の他の治療薬は、腫瘍の再発の可能性を妨げる又は減少させる維持療法として投与されうる。
【００９８】
当業者によって理解されるように、化学療法剤又は他の抗癌剤の適切な服用量とは、一般に、例えば、化学療法剤が単独で又は他の化学療法剤と併用して投与されるような臨床治療法においてすでに用いられている量に近い量であろう。治療されている症状に依存して、投与量の変動が起こりうるであろう。治療を管理している医師が、個々の患者にとって適切な服用量を決定することができるであろう。
【００９９】
上記の治療レジメンに加えて、患者は放射線治療を受けてもよい。
【０１００】
任意の方法、用法及び組成物の幾つかの実施態様において、投与されたＶＥＧＦ抗体はインタクトなネイキッド（ｎａｋｅｄ）抗体である。しかしながら、ＶＥＧＦ抗体は細胞毒性薬とコンジュゲートしうる。任意の方法及び用法の幾つかの実施態様において、コンジュゲートした抗体及び／又はそれが結合した抗原が、細胞によりインターナライズされ、それが結合する癌細胞を消すことにおけるコンジュゲートの治療効果の上昇をもたらす。一実施態様において、細胞毒性薬は癌細胞内の核酸を標的にするか又は干渉する。そのような細胞毒性薬の例は、マイタンシノイド、カリチアマイシン、リボヌクレアーゼ及びＤＮＡエンドヌクレアーゼを含む。
【０１０１】
本発明はまた、無増悪生存期間を延長させる、又は被験体の癌再発リスクを低下させる、又は被験体の生存可能性を増加させるために、化学療法剤及び一つ又はそれ以上の他の療法剤と併用した抗ＶＥＧＦ抗体を用いた治療を受けるための説明書を提供することによって、白金抵抗性卵巣癌を有するヒト被験体又は医療提供者に指示する方法を特徴とする。幾つかの実施態様において、本方法は、少なくとも一つの化学療法剤を用いた治療を受けるための説明書を提供することを更に含む。抗ＶＥＧＦ抗体を用いた治療は、化学療法剤を用いた治療と同時の場合もあれば、又はそれに引き続いての場合もある。幾つかの実施態様において、被験体は、指示する方法によって指示されるようにして治療される。化学療法と併用する又は併用しない抗ＶＥＧＦ抗体の投与による白金抵抗性卵巣癌の治療は、癌の再発又は死亡まで継続しうる。
【０１０２】
本発明は、ヒト被験体における白金抵抗性卵巣癌の治療のための抗ＶＥＧＦ抗体と一つ又はそれ以上の療法剤の投与を促進することを含む促進方法を更に提供する。幾つかの実施態様において、本方法は、少なくとも一つの化学療法剤の投与を促進することを更に含む。抗ＶＥＧＦ抗体の投与は、化学療法剤の投与と同時の場合もあるし、又はそれに引き続いての場合もある。促進は利用可能な任意の方法で行われうる。幾つかの実施態様において、促進は、抗ＶＥＧＦ抗体の市販製剤に伴う添付文書による。促進はまた、化学療法剤の市販製剤に伴う添付文書によることもありうる。促進は、医師又は医療提供者への書面又は口頭での伝達による場合もある。幾つかの実施態様において、促進は、一つ又はそれ以上の他の療法剤と併用して抗ＶＥＧＦ抗体を用いた白金抵抗性卵巣癌治療を受けるための説明書を提供する添付文書による。更なる実施態様において、添付文書は実施例１での結果の幾つか又は全てを含む。幾つかの実施態様において、促進の後に、化学療法剤と併用して抗ＶＥＧＦ抗体を用いた被験体の治療が続く。
【０１０３】
本発明は、被験体の無増悪生存期間を延長させる、又は被験体の癌再発の可能性を減少させる、又は被験体の生存可能性を増加させるために、ヒト被験体における白金抵抗性卵巣癌の治療のための一つ又はそれ以上の他の療法剤と併用した抗ＶＥＧＦ抗体を販売することを含むビジネス方法を提供する。幾つかの実施態様において、本方法は、抗ＶＥＧＦ抗体と併用する用途のために化学療法剤を販売することを更に含む。幾つかの実施態様において、販売の後に、化学療法剤と併用して抗ＶＥＧＦ抗体を用いた被験体の治療が続く。
【０１０４】
被験体の無増悪生存期間を延長させる、又は被験体の癌再発の可能性を減少させる、又は被験体の生存可能性を増加させるために、ヒト被験体における卵巣癌、特に白金抵抗性卵巣癌の治療のために抗ＶＥＧＦ抗体と併用した化学療法剤を販売することを含むビジネス方法もまた提供される。幾つかの実施態様において、販売の後に、化学療法剤と抗ＶＥＧＦ抗体との併用での被験体の治療が続く。
【０１０５】
投与量と期間
本発明は良好な医療行為に合致した方法で処方され、投薬され、投与されるであろう。この観点において考慮すべき要因は、治療されている特定の障害、治療されている特定の被験体、個々の被験体の臨床症状、障害の原因、薬剤送達部位、投与方法、投与日程及び医師が知る他の要因を包含する。投与されるべき本発明の「治療有効量」は、そのような考慮によって決定されるであろうし、また、癌を防ぎ、改善し、又は治療し、又は安定化させるため；増悪までの時間（無増悪生存期間）を延長する、又は、腫瘍、休眠腫瘍又は微小転移の発生又は再発を治療する又は防ぐために必要な最小量である。ＶＥＧＦ特異拮抗薬は、必要ではないが任意で、癌又は癌になるリスクを予防又は治療するために現在使用されている一つ又はそれ以上の薬剤と併用して処方される。そのような他の薬剤の有効量は、製剤中に存在するＶＥＧＦ特異拮抗薬の量、障害又は治療の種類、及び上で論じた他の要因に依存する。これらは、従来と同じ用量でかつ上記で用いられた投与経路により、又は従来用いられた用量の約１％から９９％で、一般的に使用される。
【０１０６】
例えば、一回又はそれ以上の別々の投与によるか、又は連続注入によるかにかかわらず、被験体への投与のための初回用量候補として抗ＶＥＧＦ抗体の約１μｇ／ｋｇから１００ｍｇ／ｋｇまで（例えば、０．１−２０ｍｇ／ｋｇ）が、疾患の種類及び重症度に依る。一実施態様において、望ましい用量は、例えば、６ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ及び１５ｍｇ／ｋｇを含む。上記の又は当業者に周知の方法により評価されるように、症状に応じて、数日又はそれ以上にわたる反復投与又はサイクルのため、癌が治療されるまで治療が続けられる。しかしながら、他の用量レジメンは有益でありうる。一実施例において、抗ＶＥＧＦ抗体は、毎週１回、２週間に１回、又は３週間に１回、６ｍｇ／ｋｇ，８ｍｇ／ｋｇ，１０ｍｇ／ｋｇ又は１５ｍｇ／ｋｇを含むが限定されない、約６ｍｇ／ｋｇから約１５ｍｇ／ｋｇの用量範囲で投与される。本発明の治療の進行は、従来技術及びアッセイにより容易にモニターされる。他の実施態様において、そのような投薬レジメンは、白金抵抗性卵巣癌において化学療法レジメンと併用して用いられる。適切な用量についての更なる情報が、以下の実施例１において提供される。
【０１０７】
治療の期間は、医学的に必要とされる限り、又は望まれる治療効果（例えば、本明細書に記載されているもの）が達成されるまで、続くであろう。幾つかの実施態様において、請求された治療は、１ヶ月間、２ヶ月間、４ヶ月間、６ヶ月間、８ヶ月間、１０か月間、１年間、２年間、３年間、４年間、５年間、又は被験体の寿命までの期間、続けられる。
【０１０８】
本発明のＶＥＧＦ特異拮抗薬は、ボーラスとしての静脈内投与、又はある時間にわたっての持続注入により、又は筋肉内の、腹腔内の、脳脊髄内の、皮下の、関節内の、関節滑液嚢内の、髄腔内の、経口の、局所的な、又は吸入の経路などによる周知の方法に従って、被験体、例えばヒト被験体に投与される。広範な副作用又は毒性がＶＥＧＦ拮抗薬と関連している場合には、局所投与は特に好ましい。エクスビボ戦略もまた治療応用のために用いることができる。エクスビボ戦略は、ＶＥＧＦ拮抗薬をコードしているポリヌクレオチドを被験体から得られた細胞に遺伝子導入又は形質導入することを含む。遺伝子導入又は形質導入された細胞は、その後で被験体に戻される。細胞は、限定されないが、造血細胞（例えば、骨髄細胞、マクロファージ、単球、樹状細胞、Ｔ細胞又はＢ細胞）、線維芽細胞、上皮細胞、内皮細胞、角化細胞、又は筋細胞を含む、広範な種類のうちの任意のものでありうる。
【０１０９】
例えば、もしＶＥＧＦ特異拮抗薬が抗体である場合には、抗体は任意の適切な手段によって投与することができ、これには、非経口、皮下、腹腔内、肺内、及び鼻腔内、及び、もし局所免疫抑制治療が所望される場合には病巣内投与が含まれる。非経口注入には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、又は皮下投与が含まれる。更に、抗体は、特に用量を減少させながら、パルス注入により適切に投与される。好ましくは、投薬は、その投与が短時間か又は長期にわたるかどうかにある程度依存し、注射により、最も好ましくは静脈内又は皮下注射により行われる。
【０１１０】
別の実施例において、腫瘍の異常又は位置が許す場合には、ＶＥＧＦ抗体は局所的に、例えば直接注射により投与され、注射は定期的に繰り返すことができる。ＶＥＧＦ抗体はまた、例えば休眠腫瘍又は微小転移の局所的再発又は転移を防ぐ又は減らすために、全身的に被験体に又は直接腫瘍細胞に、例えば、腫瘍の外科的切除に続いて腫瘍又は腫瘍母地に届けることができる。
【０１１１】
医薬製剤
本発明に従って使用される本明細書に記載の抗体の治療用製剤は、所望の程度の純度を有する抗体と任意の薬学的に許容される担体、賦形剤、又は安定化剤 (Remington's Pharmaceutical Sciences 第16版, Osol, A. 編 (1980)) とを凍結乾燥製剤又は水性溶液の形態で混合することによって保管用に調製される。 許容される担体、賦形剤、又は安定化剤は、使用される投薬量および濃度でレシピエントに毒性でなく、そしてこれには、リン酸塩、クエン酸塩及び他の有機酸のような緩衝剤；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（例えば、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロライド；ヘキサメトニウムクロライド；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、フェノール、ブチル又はベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えば、メチルまたはプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；及び ｍ−クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン又はリジン；マンノサッカライド、ジサッカライド、及びグルコース、マンノース又はデキストリンを含む他の炭水化物；キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ；糖、例えば、スクロース、マンニトール、トレハロース又はソルビトール；塩形成対イオン、例えば、ナトリウム；金属錯体（例えば、Ｚｎ−タンパク質錯体）；及び／又はＴＷＥＥＮ（登録商標）, ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（登録商標）又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等の非イオン性界面活性剤が挙げられる。凍結乾燥抗ＶＥＧＦ抗体製剤が、国際公開第９７／０４８０１号に記載されており、出典明示により本明細書に援用される。
【０１１２】
任意だが、好ましくは、製剤は、薬学的に許容できる塩、一般に例えば塩化ナトリウムで、好ましくはほぼ生理的濃度で含む。任意に、本発明の製剤は、薬学的に許容できる防腐剤を含みうる。幾つかの実施態様において、防腐剤濃度は０．１から２．０％、一般にはｖ／ｖ、の範囲である。適当な防腐剤は、製薬分野で周知のものを含む。ベンジルアルコール、フェノール、ｍ−クレゾール、メチルパラベン、及びプロピルパラベンが、防腐剤の例である。任意に、本発明の製剤は、０．００５から０．０２％の濃度で薬学的に許容できる界面活性剤を含みうる。
【０１１３】
一般に、ベバシズマブは、４ｍｌ又は１６ｍｌのベバシズマブを届けるために１００ｍｇ及び４００ｍｇの防腐剤無添加の頓用バイアルで治療用途に供給される（２５ｍｇ／ｍｌ）。１００ｍｇの製品が、２４０ｍｇのα、α−トレハロース無水物、２３．２ｍｇのリン酸ナトリウム（一塩基、一水和物）、４．８ｍｇのリン酸ナトリウム（二塩基、無水）、１．６ｍｇのポリソルベート２０及びＷａｔｅｒ ｆｏｒ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ，ＵＳＰで処方される。４００ｍｇの製品が、９６０ｍｇのα、α−トレハロース無水物、９２．８ｍｇのリン酸ナトリウム（一塩基、一水和物）、１９．２ｍｇのリン酸ナトリウム（二塩基、無水）、６．４ｍｇのポリソルベート２０及びＷａｔｅｒ ｆｏｒ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ，ＵＳＰで処方される。ベバシズマブのラベルも参照のこと。
【０１１４】
本明細書の製剤はまた、治療を受けている特定の適応症のために必要な一以上の活性化合物、好ましくは、互いに悪影響を及ぼさない相補的活性を持つものを含みうる。例えば、ＶＥＧＦに結合する抗体（例えば、ＶＥＧＦ上の異なるエピトープに結合する抗体）、ＶＥＧＦＲに結合する抗体を一つの製剤において更に提供することが、望ましい場合がある。代替方法として、又は、加えて、前記組成物は細胞毒性薬、サイトカイン、増殖阻害剤及び／又はＶＥＧＦＲ拮抗薬を含みうる。そのような分子は、意図された目的にとって有効な量で組み合されて適切に存在している。
【０１１５】
活性成分はまた、例えばコアセルベーション技術又は界面重合法により調製したマイクロカプセル、例えば、それぞれ、コロイド薬物送達系（例えばリポソーム、アルブミン微小球体、ミクロエマルジョン、ナノ粒子及びナノカプセル）において又はマクロエマルジョンにおいて、ヒドロキシメチルセルロース又はゼラチン-マイクロカプセル及びポリ-（メチルメタクリラート）マイクロカプセルに封入しうる。このような技術は、Remington's Pharmaceutical Sciences 第16版, Osol, A. 編 (1980) に開示されている。
【０１１６】
徐放性製剤が調製されてもよい。徐放性製剤の好適な例は、抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリクスを含み、そのマトリックスが成形品、例えばフィルムまたはマイクロカプセルの形をしている。徐放性マトリックスの例は、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２-ヒドロキシエチルメタクリレート）、又はポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許第３７７３９１９号）、L‐グルタミン酸及びｙエチル-Ｌ-グルタミン酸塩のコポリマー、非分解性エチレン酢酸ビニル、ＬＵＰＲＯＮ  ＤＥＰＯＴ（登録商標）（乳酸グリコール酸コポリマー及び酢酸リュープロリドから構成される注射用ミクロスフェア）などの分解性乳酸グリコール酸コポリマー、及びポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸を含む。 エチレン酢酸ビニル及び乳酸グリコール酸などのポリマーは、１００日以上にわたって分子の放出を可能にするが、いくつかのヒドロゲルはより短い期間タンパク質を放出する。カプセルに包まれた抗体が長期間体内に残る場合、３７℃で湿気にさらされた結果として変性又は凝集する可能性があり、生物活性の喪失及び免疫原性の起こり得る変化に帰着する。関係するメカニズムに依存して安定化のために合理的な戦略を考案することができる。例えば、もし凝集機構が、チオ−ジスルフィド交換による分子間Ｓ−Ｓ結合形成であることが発見されるならば、スルフヒドリル残基を修飾し、酸性溶液から凍結乾燥し、含水量を制御し、適切な添加物を用い、特有のポリマーマトリックス組成物を開発することにより、安定化を達成しうる。
【０１１７】
インビボ投与に使用される製剤は、無菌でありうる。これは、滅菌濾過膜を通して濾過することにより、容易に達成することができる。
【０１１８】
治療の効果
本明細書で提供される任意の方法、用法及び組成物の主要な利点は、著しい毒性又は副作用を引き起こさずにヒト被験体に著しい抗癌効果を生ずる能力であり、その結果、被験体は治療全体から利益を得た。任意の方法、用法、又は組成物の一実施態様において、安全プロフィールは以前のベバシズマブ第三相試験と同等である。本発明の治療の効果は、限定されないが、腫瘍退縮、腫瘍重量又は大きさの縮小、進行までの時間、生存期間、無増悪生存期間、全体的な奏効率、応答期間、及び生活の質を含む癌治療を評価する際に一般に用いられる様々なエンドポイントにより評価することができる。
【０１１９】
キット
本発明の他の実施態様では、上記の疾患の治療に有用な物質を含む製造品が提供される。製造品は、容器、ラベル及び添付文書を含む。適切な容器は、例として、ボトル、バイアル、シリンジ等を含む。容器はガラス又はプラスチックなどの様々な物質から形成されうる。容器は、症状を治療するために有効な組成物を保持しており、かつ無菌のアクセスポートを有し得る（例えば、容器は皮下注射針により突き通すことができるストッパーを有する静脈内溶液バッグ又はバイアルであってよい）。組成物中の少なくとも一の活性剤は、抗ＶＥＧＦ抗体である。容器上又はそれに伴うラベルは、組成物が特定の症状の治療のために使用されることを示している。製造品は、リン酸緩衝化塩水、リンガー溶液及びデキストロース溶液等の、薬学的に許容されるバッファーを含む第二の容器を更に含んでもよい。それは、他のバッファー、希釈剤、フィルター、針、及びシリンジを含む、商業的及び使用者の立場から望まれる他の物質を更に含んでもよい。加えて、製造品は、例えば、抗ＶＥＧＦ抗体組成物及び化学療法剤、例えば、パクリタキセル、トポテカン又はＰＬＤ又はその組合せを被験体に投与することを組成物の使用者に指示することを含む使用説明書の付いた添付文書を含む。添付文書は、実施例１で見出された結果の幾つか又は全てを任意に含んでよい。
【０１２０】
抗ＶＥＧＦ抗体は、単独で又はキットとして他の抗癌療法化合物と組合わせて包むことができる。キットは、被験体への単位服用量の投与を助ける任意の構成要素、例えば、粉末状を再構成するためのバイアル、注射のためのシリンジ、カスタム対応の静脈内送達系、吸入器その他を含むことができる。加えて、単位服用量キットは、組成物の製剤及び投与のための使用説明書を含むことができる。幾つかの実施態様において、使用説明書は、例えば、抗ＶＥＧＦ抗体組成物及び化学療法剤、例えば、パクリタキセル、トポテカン又はＰＬＤ又はその組合せを被験体に投与することを組成物の使用者に指示することを含む使用説明書を含む。使用説明書は、実施例１で見出された結果の幾つか又は全てを任意に含んでよい。キットは、一つの被験体のための屯用単位服用量、特定の被験体のための多数回使用（一定の服用量で、又は治療が進むにつれ、個々の化合物が有効性において変化しうる）として、製造しうる。又は、キットは、多数の被験体への投与に適した多回投与を含んでよい（「バルク包装」）。キット構成要素は、カートン、ブリスター包装、ボトル、チューブ等で組合せることができる。
【実施例】
【０１２１】
以下は本発明の方法および組成物の例である。上記提供される一般的な説明を前提として、他の様々な実施態様が実施され得ることが理解される。
【０１２２】
実施例１−白金抵抗性、卵巣上皮癌、卵管癌、又は原発性腹膜癌の患者における、ベバシズマブと化学療法との併用  対  化学療法単独の多施設、非盲検、無作為、２群第３相試験 （ＡＵＲＥＬＩＡ）
【０１２３】
ＡＵＲＥＬＩＡ試験は、白金抵抗性卵巣癌について化学療法と併用したベバシズマブの有効性と安全性を評価した。この研究は、ベバシズマブと化学療法との併用 対 化学療法単独の期待される非盲検、無作為、２群３相評価として計画された。適格であるためには、患者は、前回の白金系治療からの経過が６ヶ月以内である卵巣癌でなければならない。パクリタキセル、トポテカン又はペグ化リポソームドキソルビシン（ＰＬＤ）が、白金抵抗性疾患の治療のために一般に用いられているので、化学療法の組合せパートナーとして選択された。ベバシズマブを化学療法に加えることにより、AURELIA試験は、治療選択肢が限定されており、特に悪い予後に直面する患者の集団のためにＰＦＳを改善することを目指した。主要な目標は、選択された化学療法単独又は選択された化学療法とベバシズマブとの併用に対して無作為化された患者の無増悪生存期間（ＰＦＳ）を比較することであった。
【０１２４】
試験計画−この試験は２つの治療群：化学療法単独（群１）及び化学療法とベバシズマブとの併用（群２）から構成される。患者は無作為にいずれかの群に割り当てられた（１：１）。図１を参照。
【０１２５】
群１（化学療法単独）：適格な患者は、研究者の裁量で４週間サイクルで以下の化学療法の一つを受けた。
ａ． ４週毎に１日目、８日目、１５日目、及び２２日目に１時間の静脈内注入としてパクリタキセル８０ｍｇ／ｍ２。
ｂ． ４週毎に１日目、８日目、及び１５日目に３０分の静脈内注入としてトポテカン４ｍｇ／ｍ２。あるいは、１．２５ｍｇ／ｍ２の服用量を３週毎に１日目から５日目に３０分にわたり投与することができる。
ｃ． ４週毎に１日目だけ１ｍｇ／分の静脈内注入としてペグ化リポソームドキソルビシン４０ｍｇ／ｍ２。サイクル１の後、薬剤は１時間注入として送り込むことができる。
【０１２６】
選択された化学療法に依存して、現地の習慣に従って前投薬が実施された。疾患の進行にあたり、群１の患者は、以下のいずれかを受ける選択肢を有した。（ａ）ベバシズマブ単独（３週毎に静脈内に１５ｍｇ／ｋｇ）；又は（ｂ）標準治療。
【０１２７】
群２（化学療法とベバシズマブとの併用）：研究者の裁量で、化学療法が、群１に記載されているものの一つから選択された。選択された化学療法は、最初に、２週毎に静脈内ベバシズマブ１０ｍｇ／ｋｇと併用された（又は、３週毎のスケジュールの１日目から５日目にトポテカン１．２５ｍｇ／ｍ２と併用して用いられる場合には、３週毎に１５ｍｇ／ｋｇ）。初回のベバシズマブ注入は、９０分にわたるものであり、その後の注入は６０分にわたり、その後は３０分であり、これらは許容されている。最初のサイクルでベバシズマブは化学療法の前に投与され、その後のサイクルでは化学療法の前又は後に投与された。化学療法が進行性疾患の診断前に終了した場合には、患者は以下のいずれかでベバシズマブを受け続けた。（ａ）２週毎に静脈内に１０ｍｇ／ｋｇ；又は（ｂ）トポテカンが選択され、３週間スケジュールの１日目から５日目に１．２５ｍｇ／ｍ２の服用量で投与される場合には、３週毎に１５ｍｇ／ｋｇ。疾患進行後、患者は標準治療を受けた。
【０１２８】
ＰＦＳ及びＯＲＲの分析は、骨盤及び腹部及び（Ｘ線又は好ましくはＣＴスキャンによる）胸の断面画像（造影アレルギーの場合には好ましくはＣＴ又はＭＲＩによる）を用いた腫瘍の評価（ＲＥＣＩＳＴ基準に基づく）に基づいたものであった。ある特定の障害を評価するための研究を通じて、同じ評価技術が用いられた。
【０１２９】
腫瘍の評価がベースラインで、その後８週毎に行われた（３週毎のサイクルの１日目から５日目にトポテカン１．２５ｍｇ／ｍ２で治療される患者については９週毎に）。奏効基準が最初に満足されてから４週間後以降に行われた２回目のＣＴスキャンにより奏効が確認された。
【０１３０】
ＣＡ-１２５の反応及び生物学的無増悪生存期間（ＰＦＩｂｉｏ）を決定するために、血清ＣＡ-１２５の進行性連続評価が用いられた。無作為化の日から任意の原因による死亡の日までの全生存期間が測定された。
【０１３１】
研究対象集団−参入基準
１８歳以上の患者及び組織学的に確認され記録された疾患以下の組織学的な型が適格である：腺癌ＮＯＳ；明細胞腺癌；類子宮内膜腺癌；悪性ブレンナー腫瘍；混合型上皮癌；粘液性腺癌；漿液性腺癌；移行上皮癌；未分化癌。
【０１３２】
患者は白金抵抗性疾患でなければならない（最低４回の白金治療サイクルの終了から６ヶ月未満の進行と定義される。日付は、白金治療の最後の投与から計算されるべきである。
【０１３３】
患者は、ＲＥＣＩＳＴに従って測定可能な又は婦人科癌群間（ＧＣＩＧ）ＣＡ−１２５基準に従って評価可能な疾患であり、化学療法を必要としなければならず、またＥＣＯＧ ＰＳ ０−２であり、余命１２週間以上である。
【０１３４】
研究対象集団−除外基準
関連する癌：以前の白金治療に対して難治性であった疾患を有する患者。難治性疾患は、先行する白金治療中に病状悪化した患者と定義される；悪性ミュラー管混合腫瘍を含む非上皮性；低悪性度の卵巣腫瘍（すなわち境界腫瘍）；登録から５年以内の他の臨床的に活性な悪性腫瘍の病歴。ただし、適切に管理された基底細胞癌又は皮膚の扁平上皮癌又は頸部上皮内癌若しくは乳癌などの、転移又は死亡のリスクが無視できる腫瘍は除く。
【０１３５】
以前の、現在の、又は計画された治療：２回より多い抗癌レジメンを伴う以前の治療；骨盤又は腹部に対する任意の以前の放射線療法；研究開始前４週間以内の手術（切開生検を含む）、又は研究治療中の大手術の必要性の予想；初回研究治療前２４時間以内の小外科手術；マウスＣＡ−１２５抗体への過去の接触（ＲＥＣＩＳＴによる評価が不可能な疾患を有する患者にのみ当てはまる）；現在の又は最近の（初回の研究薬剤投与前１０日以内）長期にわたる毎日のアスピリンによる治療（＞３２５ｍｇ／日）；初回の研究治療投薬又は本研究への以前の参加から３０日以内での別の治験薬を用いた現在又は最近の治療；吸入ステロイドを除く副腎皮質ステロイドによる長期にわたる毎日の治療（服用量＞１０ｍｇ／日メチルプレドニゾロン同等物）。
【０１３６】
実験室：
不十分な骨髄機能：例えば、ＡＮＣ：＜１．５Ｘ１０９／ｌ、又は血小板数＜１００Ｘ１０９／ｌ、又はヘモグロビン＜９ｇ／ｄｌ。ヘモグロビン値＞９ｇ／ｄｌを維持するために、患者は輸血される場合もある。除外はまた、不十分な凝固パラメータも含む：ａＰＴＴ＞１．５Ｘ ＵＬＮ（ヘパリン治療を受けている患者は、ａＰＴＴが１．５−２．５Ｘ ＵＬＮでなければならない。）、又はＩＮＲ＞１．５。（抗凝固薬(ワルファリンなど）を投与されている患者において、ＩＮＲは、１日から４日の間を空けて２回の連続検査で２．０から３．０の間でなければならない。除外は、次のように定義される不十分な肝機能を含む：血清（総）ビリルビン＞１．５Ｘ施設ＵＬＮ；アルカリフォスファターゼ、ＡＳＴ／ＳＧＯＴ 又は ＡＬＴ／ＳＧＰＴ＞２．５Ｘ ＵＬＮ（又は、肝臓転移がある場合は５Ｘ ＵＬＮ ）。除外は、次のように定義される不十分な腎機能を含む。トポテカンで治療されることが意図されている患者について、血清クレアチニン＞２．０ｍｇ／ｄｌ若しくは ＞１７７μｍｏｌ／ｌ 又は計算されたクレアチニンクリアランス ＜４０ｍｌ／分（ＣｏｃｋｒｏｆｔとＧａｕｌｔの式による)；又はタンパク尿試験紙 ＞２＋ 。基準試験紙分析でタンパク尿 ≧２＋ である患者は、２４時間採尿を受けるべきであり、２４時間尿中のタンパク質が ≦１ｇ であることを証明しなければならない。あるいは、ローカル基準に従って、タンパク尿試験を行うことができる。
【０１３７】
以前の又は随伴する症状又は処置：
標準的な医学療法で適切に治療されない場合には、癌との関連はないＣＮＳ疾患の身体的／神経学的検査に関する病歴又は証拠（例えば、管理されていない発作）；症候性のＣＮＳ転移；パクリタキセルを受けるように計画された患者について先在する末梢神経障害 ≧ＣＴＣ グレード 2；妊娠中または授乳中の女性。研究治療開始前７日以内又は１４日以内で評価される血清妊娠試験（研究治療開始前７日以内での妊娠確認尿検査を伴う）；研究中及び研究薬物治療の最後の投薬後６ヶ月間ホルモン性の又は非ホルモン性の効果の高い避妊手段（すなわち子宮内避妊具）を用いていない出産可能性のある女性（最後の月経後２年未満であり、外科的に不妊ではないと定義される）；初回研究治療前６ヶ月以内の血栓性又は出血性疾患の病歴又は証拠；脳血管障害（ＣＶＡ）／発作又は一過性脳虚血発作（ＴＩＡ）又は、くも膜下出血；管理されていない高血圧（降圧治療にもかかわらず、持続性収縮期 ＞１５０ｍｍＨｇ 及び／又は拡張期 ＞１００ｍｍＨｇ ）又は臨床上重要な（すなわち活性な）心血管疾患で、初回の研究治療前６ヶ月以内の心筋梗塞又は不安定狭心症、又はニューヨーク心臓協会（ＮＹＨＡ）グレード２又は重大なうっ血性心不全（ＣＨＦ）又は薬物治療を必要とする深刻な不整脈（心房細動又は発作性上室頻拍を除く）又は末梢血管疾患グレード３超（すなわち症候性であり、日々の生活の活動に支障を及ぼし、修復又は修正が必要である）を含む。除外はまた、ＭＵＧＡ／ＥＣＨＯによって定義される機関の正常下限未満の左室駆出分画（ペグ化リポソームドキソルビシンで治療することが意図されている患者にのみ適用される）；腹瘻、消化管穿孔又は腹腔内膿瘍の原疾患及び病歴に関連した半閉塞性疾患を含む腸閉塞の病歴を含む。内診による直腸S状部の併発若しくはＣＴスキャンでの腸の併発の証拠又は腸閉塞の臨床症状；非治癒性の創傷、潰瘍又は骨折；研究登録時に静脈内抗生物質及び／又は入院を必要とする重大で活発な感染症；任意の研究薬剤又は賦形剤に対する既知の過敏症；任意の他の医学的状態の証拠（精神病、消化性潰瘍、その他）、計画された治療を妨げ、患者コンプライアンスに影響を及ぼし、又は治療に関連した合併症からの高い危険に患者をさらす可能性のある身体検査又は検査所見。
【０１３８】
結果：
適格な患者は、４サイクル以上の白金系療法後の進行が６ヶ月以内である卵巣癌（ＲＥＣＩＳＴ１．０により測定可能又は評価可能）を有していた。難治性の卵巣癌であるか、腸閉塞の病歴があるか、又は以前に２回より多い抗癌レジメンを受けている患者は不適格であった。化学療法の選択（ペグ化リポソームドキソルビシン［ＰＬＤ］、トポテカン[ＴＯＰ]又は毎週のパクリタキセル[ＰＡＣ]）の後に、患者は、増悪、容認できない毒性又は同意の撤回までの化学療法単独又はベバシズマブ（化学療法に依存して、２週毎に１０ｍｇ／ｋｇ又は３週毎に１５ｍｇ／ｋｇ）との併用のいずれかに無作為化された。化学療法単独群の患者は、増悪時にベバシズマブ単独療法に移ることができた。第一のエンドポイントは、ＲＥＣＩＳＴによるＰＦＳであった。第二のエンドポイントは、奏効率（ＯＲＲ）、全生存期間、安全性及び生活の質を含んでいた。計画は、ＰＦＳ中央値が化学療法では４．０ヶ月、化学療法とベバシズマブとの併用では５．７ヶ月であることを仮定して、２４７個のイベントの後、両側ログランク検定、α＝０．０５でＰＦＳハザード比（ＨＲ）が０．７であることを発見するための８０％の力を提供した。ＩＤＭＣにより提案されたように、標本サイズが増やされた；３６１人中２９１人の患者におけるイベントの後に主要な分析が計画された。
【０１３９】
２００９年１０月から２０１１年４月の間に、３６１人の患者が、選択された化学療法（ＰＬＤ：１２６；ＰＡＣ：１１５；ＴＯＰ：１２０）単独療法又はベバシズマブとの併用療法に無作為化された。経過観察の中央値は、１３．５ヶ月である。
2018193380.tif 000003
【０１４０】
図２は、様々な危険因子、例えば、年齢、６５歳より上か又は等しいか又は下か；白金無投薬期間（ＰＦＩ）が３ヶ月未満の患者か（これらは、他の患者と比較して一般に悪い予後因子を持つ患者である）又は３ヶ月から６ヶ月の間の患者かにより；示されているようにセンチメートルで測定された測定可能な疾患又は腫瘍を有する患者；腹水を有する患者、これは、腹腔に流体があることを意味し、そうでない患者と比較して、一般に、より症候的な疾患及びより悪い結果を有する；及び、患者の主治医により選択された３つの化学療法レジメンの一つ、パクリタキセル、ＰＬＤ又はトポテカンのいずれかを受ける患者；により患者をサブグループに細分化することにより試験参加者の患者階層化を示す。どの患者サブグループが治療されたかにかかわらず、ベバシズマブと化学療法との併用は、全症例におけるように有効性及び患者便益の増大を示す。各サブグループにおけるハザード比は０．５の近くに一列に並べられている。
【０１４１】
図３は、治療法に対する応答を評価するための２つの最も一般的な方法、血液検査、ＣＡ−１２５を用いるか、又はＸ線撮影法（ＲＥＣＩＳＴ）によるか、又は両者の併用（ＲＥＣＩＳＴ＋ＣＡ１２５）、を比較している。   全ての方法を用いて、データは、ベバシズマブの付加は化学療法単独で治療された患者を比較して奏効率（ＯＲＲ）を上昇させたことを示しており、併用療法により患者の卵巣腫瘍は化学療法単独よりも縮小したように見えたことを示している。
【０１４２】
化学療法コーホートによる分析は、以下の表２において要約されている。白金抵抗性卵巣癌において、単剤化学療法にベバシズマブを付加することにより得られるＰＦＳ及びＯＲＲの改善が、全ての化学療法コーホートにわたり観察された。
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【０１４３】
白金抵抗性卵巣癌において、単剤化学療法にベバシズマブを付加することにより得られるＰＦＳ及びＯＲＲの改善が、全ての化学療法コーホートにわたり観察された。ＰＦＳの延長と関連した化学療法投与の増加が、累積的な化学療法毒性の増加のいくらかを説明する。
【０１４４】
ＡＵＲＥＬＩＡは、白金抵抗性卵巣癌におけるベバシズマブの最初の無作為化試験である。ベバシズマブ及び化学療法は、化学療法単独に対して、統計的に有意であり臨床的に意味のあるＯＲＲ及びＰＦＳの改善を提供する。注意深い患者スクリーニングが、ベバシズマブの有害事象のリスクを最小化する。これは、標的療法での利益及び単独療法に対する併用療法での治療成績の改善を示す、白金抵抗性卵巣癌の最初の第３相試験である。
【図１】
2018193380.tif 000005
【図２】
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【図３】
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【配列表】
2018193380000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成30年8月10日(2018.8.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書に記載の発明。
【外国語明細書】
2018193380000001.pdf