(57)【要約】【課題】メタボリックシンドロームの予防、改善又は治療に有効な組成物を提供する。【解決手段】６７ｋＤａラミニンレセプター（６７ＬＲ）アゴニストと、ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物とを有効成分として含有する、メタボリックシンドロームの予防又は改善用食品組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
６７ｋＤａラミニンレセプター（６７ＬＲ）アゴニストと、ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物とを有効成分として含有する、メタボリックシンドロームの予防又は改善用食品組成物。
【請求項２】
前記ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物が、アリイン、アリシン、ジアリルジスルフィド、ジアリルトリスルフィド又はジアリルテトラスルフィドを含む、請求項１に記載のメタボリックシンドロームの予防又は改善用食品組成物。
【請求項３】
前記６７ＬＲアゴニストが、エピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）、ウーロン茶重合ポリフェノール、プロシアニジンＣ１又はこれらの誘導体を含む、請求項１又は２に記載のメタボリックシンドロームの予防又は改善用食品組成物。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の食品組成物をヒト又は動物に摂取させる工程を備える、メタボリックシンドロームの予防又は改善方法（但し、ヒトに対する医療行為を除く。）。
【請求項５】
６７ＬＲアゴニストと、ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物とを有効成分として含有する、メタボリックシンドロームの予防又は治療用医薬組成物。
【請求項６】
前記ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物が、アリイン、アリシン、ジアリルジスルフィド、ジアリルトリスルフィド又はジアリルテトラスルフィドを含む、請求項５に記載のメタボリックシンドロームの予防又は治療用医薬組成物。
【請求項７】
前記６７ＬＲアゴニストが、ＥＧＣＧ、ウーロン茶重合ポリフェノール、プロシアニジンＣ１、これらの誘導体又は６７ＬＲアゴニスト抗体を含む、請求項５又は６に記載のメタボリックシンドロームの予防又は治療用医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メタボリックシンドロームの予防又は改善用食品組成物及び医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
メタボリックシンドロームとは、下記（１）に該当し、更に下記（２）〜（４）のうちの２以上に該当する状態と定義されている。
（１）ウエスト周囲径が、男性の場合で８５ｃｍ以上、女性の場合で９０ｃｍ以上（内臓脂肪面積１００ｃｍ２以上に相当する。）
（２）血中トリグリセリドが１５０ｍｇ／ｄＬ以上、且つ／又は、血中ＨＤＬコレステロールが４０ｍｇ／ｄＬ以下
（３）収縮期血圧が１３０ｍｍＨｇ以上、且つ／又は、拡張期血圧が８５ｍｍＨｇ以上
（４）空腹時血糖値が１１０ｍｇ／ｄＬ以上
【０００３】
メタボリックシンドロームの状態であると、心筋梗塞や脳梗塞の原因となる動脈硬化が急速に進行することが知られている。このため、メタボリックシンドロームに対する消費者の関心は高く、抗メタボリックシンドロームを謳った様々なサプリメント等が市販されている。
【０００４】
ところで、６７ｋＤａラミニンレセプター（以下、「６７ＬＲ」という場合がある。）は、基底膜の主要な構成成分であるラミニンと結合する細胞膜タンパク質である（例えば、非特許文献１を参照。）。発明者らは、緑茶に含まれる主要なカテキンの一種であるエピガロカテキンガレート（Ｅｐｉｇａｌｌｏｃａｔｅｃｈｉｎ−Ｏ−ｇａｌｌａｔｅ、以下、「ＥＧＣＧ」という場合がある。）が細胞膜上の６７ＬＲに結合し、抗癌作用を発揮することを明らかにしてきた（例えば、非特許文献２を参照。）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Nelson J., et al., The 67 kDa laminin receptor: structure, function and role in disease., Biosci. Rep. 28 (1), 33-48, 2008.
【非特許文献２】Tachibana H, et al., A receptor for green tea polyphenol EGCG., Nat. Struct. Mol. Biol., 11 (4), 380-381, 2004.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、メタボリックシンドロームの予防、改善又は治療に有効な組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は以下の態様を含む。
［１］６７ＬＲアゴニストと、ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物とを有効成分として含有する、メタボリックシンドロームの予防又は改善用食品組成物。
［２］前記ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物が、アリイン、アリシン、ジアリルジスルフィド、ジアリルトリスルフィド又はジアリルテトラスルフィドを含む、［１］に記載のメタボリックシンドロームの予防又は改善用食品組成物。
［３］前記６７ＬＲアゴニストが、ＥＧＣＧ、ウーロン茶重合ポリフェノール、プロシアニジンＣ１又はこれらの誘導体を含む、［１］又は［２］に記載のメタボリックシンドロームの予防又は改善用食品組成物。
［４］［１］〜［３］のいずれかに記載の食品組成物をヒト又は動物に摂取させる工程を備える、メタボリックシンドロームの予防又は改善方法（但し、ヒトに対する医療行為を除く。）。
［５］６７ＬＲアゴニストと、ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物とを有効成分として含有する、メタボリックシンドロームの予防又は治療用医薬組成物。
［６］前記ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物が、アリイン、アリシン、ジアリルジスルフィド、ジアリルトリスルフィド又はジアリルテトラスルフィドを含む、［５］に記載のメタボリックシンドロームの予防又は治療用医薬組成物。
［７］前記６７ＬＲアゴニストが、ＥＧＣＧ、ウーロン茶重合ポリフェノール、プロシアニジンＣ１、これらの誘導体又は６７ＬＲアゴニスト抗体を含む、［５］又は［６］に記載のメタボリックシンドロームの予防又は治療用医薬組成物。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、メタボリックシンドロームの予防、改善又は治療に有効な組成物を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】（ａ）は、実験例１において、各群のマウスの体重の推移を測定した結果を示すグラフである。（ｂ）は、実験例１において、各群のマウスのカロリー摂取量の推移を測定した結果を示すグラフである。
【図２】（ａ）は、実験例２において、各群のマウスの白色脂肪組織の質量を測定した結果を示すグラフである。（ｂ）は、実験例２において、各群のマウスの腎臓周辺脂肪組織の質量を測定した結果を示すグラフである。（ｃ）は、実験例２において、各群のマウスの睾丸周辺脂肪組織の質量を測定した結果を示すグラフである。
【図３】（ａ）は、実験例３において、各群のマウスの血清中のトリグリセリドを測定した結果を示すグラフである。（ｂ）は、実験例３において、各群のマウスの肝臓組織中のトリグリセリドを測定した結果を示すグラフである。
【図４】実験例４において、各群のマウスの血清中のコレステロールを測定した結果を示すグラフである。
【図５】（ａ）〜（ｈ）は、実験例５において、脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した結果を示すグラフである。
【図６】（ａ）〜（ｉ）は、実験例６において、脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した結果を示すグラフである。
【図７】（ａ）〜（ｆ）は、実験例７において、脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した結果を示すグラフである。
【図８】（ａ）〜（ｊ）は、実験例８において、脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した結果を示すグラフである。
【図９】（ａ）〜（ｆ）は、実験例９において、脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した結果を示すグラフである。
【図１０】実験例１０において、各群のマウスの血清中のグルコース濃度（血糖値）を測定した結果を示すグラフである。
【図１１】実験例１１において、各群のマウスの血清中の遊離脂肪酸を測定した結果を示すグラフである。
【図１２】（ａ）は、実験例１２において、各群のマウスの血中インスリン濃度を測定した結果を示すグラフである。（ｂ）は、実験例１２において、各群のマウスのＨＯＭＡ−ＩＲ値を算出した結果を示すグラフである。
【図１３】（ａ）は、実験例１３において、腸間膜脂肪組織におけるＭＣＰ１遺伝子の発現を測定した結果を示すグラフである。（ｂ）は、実験例１３において、腎臓周辺脂肪組織におけるＭＣＰ１遺伝子の発現を測定した結果を示すグラフである。
【図１４】（ａ）は、実験例１４において、各群のマウスの血清中のＡｓｐａｒｔａｔｅ  Ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＡＳＴ）活性を測定した結果を示すグラフである。（ｂ）は、実験例１４において、各群のマウスの血清中のＡｌａｎｉｎｅ  ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＡＬＴ）活性を測定した結果を示すグラフである。
【図１５】（ａ）〜（ｃ）は、実験例１５において、脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
［メタボリックシンドロームの予防又は改善用食品組成物］
１実施形態において、本発明は、６７ＬＲアゴニストと、ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物とを有効成分として含有する、メタボリックシンドロームの予防又は改善用食品組成物を提供する。
【００１１】
実施例において後述するように、発明者らは、高脂肪高ショ糖食を摂取させるとともに、本実施形態の食品組成物を摂取させたマウスは、体重増加の抑制、体脂肪蓄積の抑制、血清中及び肝臓における中性脂肪の低下、血中コレステロールの低下、遺伝子レベルでの脂質代謝の改善、血糖値上昇抑制、血清中の遊離脂肪酸の低下、インスリン抵抗性の改善、白色脂肪組織における炎症関連遺伝子の発現抑制、肝傷害の抑制等の有意な効果を示すことを明らかにした。
【００１２】
したがって、本実施形態の食品組成物は、メタボリックシンドロームの予防又は改善の用途に好適に用いることができる。
【００１３】
また、実施例において後述するように、発明者らは、上記のメタボリックシンドロームの予防又は改善の効果は、６７ＬＲアゴニスト単独、又はネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物単独の摂取では認められず、６７ＬＲアゴニストとネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物とを併用して摂取させた場合にのみ認められることを明らかにした。
【００１４】
本明細書において、「有効成分として含有する」とは、組成物が、６７ＬＲアゴニストとネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物とを、本発明の効果が得られるのに十分な量で含有することを意味し、具体的な含有量は組成（他の成分）に応じて適宜設定することができる。
【００１５】
（６７ＬＲアゴニスト）
本実施形態の食品組成物において、６７ＬＲアゴニストとしては、６７ｋＤａラミニンレセプター（６７ＬＲ）にシグナルを伝達することができる物質であれば特に制限なく用いることができる。６７ＬＲアゴニストは食品への添加が認められるものであることが好ましい。
【００１６】
より具体的な６７ＬＲアゴニストとしては、例えば、ＥＧＣＧ、ウーロン茶重合ポリフェノール、プロシアニジンＣ１、これらの誘導体等が挙げられる。
【００１７】
ＥＧＣＧは、エピガロカテキンと没食子酸のエステルであり、カテキンの一種である。ＥＧＣＧは、植物の中でも特に茶に豊富に含まれているカテキンである。
【００１８】
ＥＧＣＧの誘導体としては、例えばＥＧＣＧを基本骨格として、一部の官能基を変更する等した化合物が挙げられる。より具体的には、例えばメチル化ＥＧＣＧが挙げられる。具体的なメチル化ＥＧＣＧとしては、例えば、下記式（１）で表される（−）−エピガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート等が挙げられる。下記式（１）で表される化合物は、緑茶の品種の１種である「べにふうき」等に含まれる化合物であり、食品に添加しても安全である。
【００１９】
【化１】
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【００２０】
ウーロン茶重合ポリフェノールは、半発酵というウーロン茶の独特の製造方法において、酵素反応や熱重合反応により形成される、カテキン類が複雑に結合した化合物の総称である。ウーロン茶重合ポリフェノールには、例えばカテキン類の２量体、カテキン類の３量体等が含まれる。カテキン類の２量体としては、例えば、ウーロンホモビスフラバンＡ、モノデスガロイルウーロンホモビスフラバンＡ、ウーロンホモビスフラバンＢ、ウーロンホモビスフラバンＣ等のウーロンホモビスフラバン類等が挙げられる。
【００２１】
ウーロン茶重合ポリフェノールの誘導体としては、例えばウーロン茶重合ポリフェノールを基本骨格として、一部の官能基を変更する等した化合物が挙げられる。
【００２２】
プロシアニジンＣ１は、りんごやブドウ等の植物中に多く含まれるエピカテキンの３量体である。プロシアニジンＣ１の誘導体としては、例えばプロシアニジンＣ１を基本骨格として、一部の官能基を変更する等した化合物が挙げられる。
【００２３】
ＥＧＣＧ、ウーロン茶重合ポリフェノール、プロシアニジンＣ１等を誘導体化することにより、例えば、これらの化合物の水溶性、脂溶性等の物理的な性質や、６７ＬＲアゴニスト活性、血中滞留性、生体毒性等の生物学的な活性等を所望の範囲に調節することができる。
【００２４】
６７ＬＲアゴニストは、ＥＧＣＧ、ウーロン茶重合ポリフェノール、プロシアニジンＣ１又はこれらの誘導体の溶媒和物であってもよく、薬学的に許容される塩であってもよく、薬学的に許容される塩の溶媒和物であってもよい。
【００２５】
薬学的に許容される塩としては、例えば、無機酸塩、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、金属塩、アンモニウム塩、有機アミン付加塩、アミノ酸付加塩等が挙げられる。より具体的には、例えば、塩酸塩、硫酸塩、臭化水素酸塩、硝酸塩、リン酸塩等の無機酸塩；酢酸塩、メシル酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩等の有機酸塩；ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩；マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩、亜鉛塩等の金属塩；アンモニウム塩、テトラメチルアンモニウム塩等のアンモニウム塩；モルホリン、ピペリジン等の有機アミン付加塩；グリシン、フェニルアラニン、リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸等のアミノ酸付加塩等が挙げられる。
【００２６】
また、ＥＧＣＧ、ウーロン茶重合ポリフェノール、プロシアニジンＣ１又はこれらの誘導体の溶媒和物の溶媒和物、薬学的に許容される塩の溶媒和物としては、薬学的に許容される溶媒和物であれば特に制限されず、例えば、水和物、有機溶媒和物等が挙げられる。
【００２７】
６７ＬＲアゴニストは、化学的に合成されたものであってもよく、天然物から精製されたものであってもよい。あるいは、６７ＬＲアゴニストを含む天然物を食品組成物の原料に用いることにより含有させてもよい。６７ＬＲアゴニストを含有する天然物としては、例えば、緑茶、緑茶抽出物、ウーロン茶、ウーロン茶抽出物、紅茶、紅茶抽出物、りんご、りんご抽出物、ぶどう、ぶどう抽出物、ぶどう種子、ぶどう種子抽出物、カカオ豆、カカオ豆抽出物、アプリコット、アプリコット抽出物、キウイ、キウイ抽出物、さくらんぼ、さんらんぼ抽出物、いちご、いちご抽出物、クランベリー、クランベリー抽出物、ブルーベリー、ブルーベリー抽出物、びわ、びわ抽出物、黒大豆、黒大豆抽出物、シナモン、シナモン抽出物、松樹皮、松樹皮抽出物、ピーナッツ、ピーナッツ抽出物等が挙げられる。
【００２８】
本実施形態の食品組成物は、上述した６７ＬＲアゴニストの１種を単独で含有していてもよいし、２種以上を混合して含有していてもよい。
【００２９】
（ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物）
本実施形態の食品組成物において、ネギ属植物としては、ニンニク、ネギ、ニラ、タマネギ、ラッキョウ等が挙げられる。
【００３０】
また、ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物としては、例えば、アリイン、アリシン、ジアリルジスルフィド、ジアリルトリスルフィド、ジアリルテトラスルフィド等が挙げられる。
【００３１】
ここで、アリインは、例えばニンニクに約１質量％含まれる含硫化合物である。アリインは無臭の化合物であり、鱗茎の葉肉貯蔵細胞の細胞質に貯蔵されている。一方、アリインに作用する酵素であるアリイナーゼは、維管束鞘細胞の液胞に貯蔵されている。
【００３２】
無傷のニンニクでは、酵素と基質が異なる部位に存在するため臭いは検出されない。しかしながら、ニンニクの鱗茎組織が損傷を受けると、酵素のアリイナーゼと基質のアリインが反応し、アリシンが生成される。アリシンはニンニク特有の臭いを有する化合物である。
【００３３】
アリシンは反応性が高いため、他の化合物やアリシン自身と反応する。その結果、アリシンからジアリルジスルフィド等が生成される。また、ジアリルジスルフィドは硫黄の数が異なるジアリルトリスルフィド、ジアリルテトラスルフィド等へと変化する。これらのアリシン由来の含硫化合物もニンニク特有の臭いを有している。
【００３４】
本明細書において、「ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物」とは、ネギ属植物に由来する含硫化合物には限定されず、ネギ属植物を破砕して得られた抽出物中に存在する含硫化合物を意味し、その由来は問わない。「ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物」は、例えば、ネギ属植物から抽出された含硫化合物であってもよいし、ネギ属植物以外の天然物から抽出された含硫化合物であってもよいし、化学的に合成された、アリイン、アリシン、ジアリルジスルフィド、ジアリルトリスルフィド、ジアリルテトラスルフィド等であってもよい。
【００３５】
ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物は、精製された化合物を含有させてもよいし、上述したネギ属植物の破砕物等を食品組成物の原料に用いることにより含有させてもよい。本実施形態の食品組成物は、ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物の１種を単独で含有していてもよいし、２種以上を混合して含有していてもよい。
【００３６】
本実施形態の食品組成物は、１日あたり、０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重の６７ＬＲアゴニスト及び０．０５〜５０ｍｇ／ｋｇ体重のネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物を摂取するように用いられてもよい。また、食品組成物は、１日１回又は２〜４回程度に分けて摂取するように用いられてもよい。
【００３７】
本実施形態の食品組成物は、例えば、サプリメントの形態であってもよいし、飲料の形態であってもよいし、固形状、半固形状又はゲル状食品の形態であってもよいし、任意の調理済み食品の形態等であってもよい。サプリメントの形状としては、例えば、カプセル等の形状が挙げられる。
【００３８】
本実施形態の食品組成物は、機能性表示食品であってもよい。「機能性表示食品」とは、科学的根拠を基に商品パッケージに機能性を表示するものとして、消費者庁に届け出られた食品を意味する。当該表示として、例えば、「メタボリックシンドロームを予防又は改善する」、「体重増加を抑制する」、「体脂肪蓄積を抑制する」、「中性脂肪を低下させる」、「血中コレステロールを低下させる」、「脂質代謝を改善する」、「血糖値上昇を抑制する」、「遊離脂肪酸を低下させる」、「インスリン抵抗性を改善する」等が挙げられるが、これらに限定されない。また、機能性表示のない食品組成物であっても、機能性をチラシ、広告等に記載又は音声等で表示して製造、販売することも考えらえる。
【００３９】
本実施形態の食品組成物は、特別用途食品であってもよい。特別用途食品とは、国の許可を受けて、乳児、幼児、妊産婦、病者等の発育、健康の保持・回復等に適するという特別の用途について表示する食品を意味する。本実施形態の食品組成物は、特別用途食品のうちの病者用食品であってもよい。あるいは、本実施形態の食品組成物は、特別用途食品のうちの特定保健用食品であってもよい。特定保健用食品とは、健康の維持増進に役立つことが科学的根拠に基づいて認められ、その効果の表示が許可されている食品を意味する。表示されている効果や安全性については国が審査を行い、食品ごとに消費者庁長官により許可される。
【００４０】
［メタボリックシンドロームの予防又は改善方法］
１実施形態において、本発明は、上述した食品組成物をヒト又は動物に摂取させる工程を備える、メタボリックシンドロームの予防又は改善方法（但し、ヒトに対する医療行為を除く。）を提供する。本実施形態のメタボリックシンドロームの予防又は改善方法において、医療行為とは、医師（医師の指示を受けた者を含む。）がヒトに対して治療を実施する行為を意味する。
【００４１】
本実施形態のメタボリックシンドロームの予防又は改善方法において、ヒト又は動物に摂取させる食品組成物の量としては、１日あたり、０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重の６７ＬＲアゴニスト及び０．０５〜５０ｍｇ／ｋｇ体重のネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物を摂取する量が挙げられる。食品組成物は、１日１回又は２〜４回程度に分けて摂取させてもよい。
【００４２】
［メタボリックシンドロームの予防又は治療用医薬組成物］
１実施形態において、本発明は、６７ＬＲアゴニストと、ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物とを有効成分として含有する、メタボリックシンドロームの予防又は治療用医薬組成物を提供する。
【００４３】
本実施形態の医薬組成物において、６７ＬＲアゴニストとしては、上述したＥＧＣＧ、ウーロン茶重合ポリフェノール、プロシアニジンＣ１、ＥＧＣＧ誘導体、ウーロン茶重合ポリフェノール誘導体、プロシアニジンＣ１誘導体のほか、例えば、抗６７ＬＲ抗体（６７ＬＲアゴニスト抗体）、化学的に合成されたメチル化ＥＧＣＧである下記式（２）で表される化合物等を用いることができる。
【００４４】
【化２】
2018143110.tif 000003
【００４５】
また、ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物としては上述したものと同様のものを用いることができ、アリイン、アリシン、ジアリルジスルフィド、ジアリルトリスルフィド、ジアリルテトラスルフィド等であってよい。
【００４６】
本実施形態の医薬組成物は、例えば、錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、マイクロカプセル剤等の形態で経口的に、あるいは、注射剤、坐剤、皮膚外用剤等の形態で非経口的に投与することができる。皮膚外用剤としては、より具体的には、軟膏剤、貼付剤等の剤型が挙げられる。
【００４７】
本実施形態の医薬組成物は、薬学的に許容可能な担体を含んでいてもよい。薬学的に許容される担体としては、通常医薬組成物の製剤に用いられるものを特に制限なく用いることができる。より具体的には、例えば、ゼラチン、コーンスターチ、トラガントガム、アラビアゴム等の結合剤；デンプン、結晶性セルロース等の賦形剤；アルギン酸等の膨化剤；水、エタノール、グリセリン等の注射剤用溶剤；ゴム系粘着剤、シリコーン系粘着剤等の粘着剤等が挙げられる。
【００４８】
医薬組成物は添加剤を含んでいてもよい。添加剤としては、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム等の潤滑剤；ショ糖、乳糖、サッカリン、マルチトール等の甘味剤；ペパーミント、アカモノ油等の香味剤；ベンジルアルコール、フェノール等の安定剤；リン酸塩、酢酸ナトリウム等の緩衝剤；安息香酸ベンジル、ベンジルアルコール等の溶解補助剤；酸化防止剤；防腐剤等が挙げられる。
【００４９】
医薬組成物は、上述した６７ＬＲアゴニスト、ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物、上述した薬学的に許容される担体及び添加剤を適宜組み合わせて、一般に認められた製薬実施に要求される単位用量形態で混和することによって製剤化することができる。
【００５０】
医薬組成物の投与量は、患者の症状、体重、年齢、性別等によって異なり、一概には決定できないが、経口投与の場合には、例えば、投与単位形態あたり、０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重の６７ＬＲアゴニスト及び０．０５〜５０ｍｇ／ｋｇ体重のネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物を投与すればよい。また、注射剤の場合には、例えば、投与単位形態あたり、０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重の６７ＬＲアゴニスト及び０．０５〜５０ｍｇ／ｋｇ体重のネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物を投与すればよい。
【００５１】
また、医薬組成物の１日あたりの投与量は、患者の症状、体重、年齢、性別等によって異なり、一概には決定できないが、例えば、成人１日あたり、０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重の６７ＬＲアゴニスト及び０．０５〜５０ｍｇ／ｋｇ体重のネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物となる量を、１日１回又は２〜４回程度に分けて投与すればよい。
【００５２】
［その他の実施形態］
１実施形態において、本発明は、６７ＬＲアゴニスト及びネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物の有効量を、治療を必要とする患者に投与することを含む、メタボリックシンドロームの予防又は治療方法を提供する。ここで、６７ＬＲアゴニスト、ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物としては、医薬組成物について上述したものと同様である。
【００５３】
１実施形態において、本発明は、メタボリックシンドロームの予防又は治療のための組成物であって、６７ＬＲアゴニスト及びネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物を有効成分として含有する組成物を提供する。ここで、６７ＬＲアゴニスト、ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物としては、医薬組成物について上述したものと同様である。
【００５４】
１実施形態において、本発明は、メタボリックシンドロームの予防又は治療薬を製造するための、６７ＬＲアゴニスト及びネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物の使用を提供する。ここで、６７ＬＲアゴニスト、ネギ属植物抽出物中に見出される含硫化合物としては、医薬組成物について上述したものと同様である。
【実施例】
【００５５】
次に実験例を示して本発明を更に詳細に説明するが、本発明は以下の実験例に限定されるものではない。
【００５６】
［実験例１］
（緑茶抽出物及びジアリルジスルフィドの併用摂取による抗肥満作用）
マウスに高脂肪高ショ糖食、緑茶抽出物、ジアリルジスルフィド（以下、「ＤＡＤＳ」という場合がある。）を組み合わせて摂取させ、肥満に対する影響を検討した。
【００５７】
具体的には、１２週齢のオスのＣ５７ＢＬ／６Ｊマウスを１週間予備飼育したのち、平均体重が等しくなるように、通常食（ＡＩＮ−９３Ｇ準拠食）を摂取させる「対照群」、高脂肪高ショ糖（Ｈｉｇｈ  Ｆａｔ  Ｈｉｇｈ  Ｓｕｇａｒ、ＨＦ／ＨＳ）食を摂取させる「ＨＦ／ＨＳ群」、高脂肪高ショ糖食及び緑茶抽出物を併用摂取させる「緑茶抽出物群」、高脂肪高ショ糖食及びＤＡＤＳを併用摂取させる「ＤＡＤＳ群」、及び高脂肪高ショ糖食、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用摂取させる「緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群」の５群に分けた。続いて、各群のマウスにそれぞれ各飼料を４ｇ／日で与え、自由飲水で１０週間飼育した。
【００５８】
その後、１０時間絶食後イソフルラン麻酔下で、腹部大動脈採血により屠殺した。屠殺まで１週間おきに体重及び摂食量を測定した。
【００５９】
緑茶抽出物は次のようにして調製した。まず、やぶきた種の茶葉を蒸し葉乾燥して得られた、やぶきた乾燥茶葉をミルで５ｍｍ程度に粉砕した。続いて、粉砕した茶葉にその２０倍量（ｗ／ｗ）の７０℃の温水を加えた。７０±２℃で１０分間撹拌後、１００メッシュの金網で固液分離して抽出液を得た。続いて、抽出液を７００×ｇで１０分間遠心分離し、上清を回収した。続いて、回収した上清を真空凍結乾燥機（型式「ＦＺ−１２ＣＳ」、ＬＡＢＣＯＮＣＯ社製）で処理してフリーズドライ後、粉末の緑茶抽出物を得た。粉末の緑茶抽出物は、１１．９質量％のＥＧＣＧを含有していた。下記表１に、調製した緑茶抽出物（粉末）の成分分析の結果を示す。
【００６０】
【表１】
2018143110.tif 000004
【００６１】
調製した緑茶抽出物を、「緑茶抽出物群」及び「緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群」の飼料に０．１質量％となるように添加した。また、ＤＡＤＳを、「ＤＡＤＳ群」及び「緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群」の飼料に０．０１８９ｇ／ｋｇ飼料となるように添加した。下記表２に各群の飼料の組成を示す。
【００６２】
【表２】
2018143110.tif 000005
【００６３】
図１（ａ）は、各群のマウスの体重の推移を測定した結果を示すグラフである。本実験例及び以下の実験例において、実験結果の統計処理にはＴｕｋｅｙ’ｓ  ｔｅｓｔを用い、ｐ値０．０５未満を有意とした。
【００６４】
その結果、緑茶抽出物群、ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される体重の増加への有意な影響は認められなかった。これに対し、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用して摂取させた緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される体重の増加が有意に抑制されたことが明らかとなった。
【００６５】
図１（ｂ）は、各群のマウスのカロリー摂取量の推移を測定した結果を示すグラフである。その結果、いずれの群のマウスも、カロリー摂取量は同程度であることが明らかとなった。なお、対照群のカロリー摂取量が低いのは、通常食を与えたためである。
【００６６】
以上の結果より、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用摂取させることにより、抗肥満作用が奏されることが明らかとなった。
【００６７】
［実験例２］
（緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用摂取による体脂肪蓄積抑制作用）
実験例１で屠殺した各群のマウスから、白色脂肪組織、腎臓周辺脂肪組織及び睾丸周辺脂肪組織を摘出し、それぞれ質量を測定した。図２（ａ）は、白色脂肪組織の質量を測定した結果を示すグラフである。図２（ｂ）は、腎臓周辺脂肪組織の質量を測定した結果を示すグラフである。図２（ｃ）は、睾丸周辺脂肪組織の質量を測定した結果を示すグラフである。
【００６８】
その結果、緑茶抽出物群、ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される体脂肪の蓄積に対する有意な影響は認められなかった。これに対し、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用して摂取させた緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される体脂肪の蓄積が有意に抑制されたことが明らかとなった。
【００６９】
［実験例３］
（緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用摂取による中性脂肪低下作用）
実験例１で屠殺した各群のマウスから採血した血液を３７℃で２時間静置して凝固させた後、４℃、２，０００×ｇで１５分間遠心して血清を採取した。続いて、得られた血清中の中性脂肪を、市販のトリグリセリド測定キット（和光純薬工業社製）を用いて測定した。また、実験例１で各群のマウスから採取した肝臓組織中の中性脂肪を、市販のトリグリセリド測定キット（和光純薬工業社製）を用いて測定した。
【００７０】
図３（ａ）は、各群のマウスの血清中のトリグリセリドの測定結果を示すグラフである。また、図３（ｂ）は、各群のマウスの肝臓組織中のトリグリセリドの測定結果を示すグラフである。
【００７１】
その結果、緑茶抽出物群、ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される中性脂肪の増加に対する有意な影響は認められなかった。これに対し、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用して摂取させた緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される中性脂肪の増加が有意に抑制されたことが明らかとなった。
【００７２】
［実験例４］
（緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用摂取による血清コレステロール低下作用）
実験例３で調製した各群のマウスの血清中の総コレステロールを、市販のコレステロール測定キット（和光純薬工業社製）を用いて測定した。
【００７３】
図４は、各群のマウスの血清中のコレステロールの測定結果を示すグラフである。その結果、緑茶抽出物群、ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される血清コレステロールの増加に対する有意な影響は認められなかった。これに対し、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用して摂取させた緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される血清コレステロールの増加が有意に抑制されたことが明らかとなった。
【００７４】
［実験例５］
（緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用摂取による脂質代謝関連遺伝子の発現に対する効果）
実験例１で屠殺した各群のマウスから採取した肝臓組織からｃＤＮＡを調製し、リアルタイムＰＣＲにより、下記表３に示す各脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した。表３には、各遺伝子のＰＣＲに用いたプライマーの塩基配列の配列番号も示す。
【００７５】
【表３】
2018143110.tif 000006
【００７６】
ここで、ＳＲＥＢＰ−１ｃは、脂肪酸制御に関わるタンパク質である。また、ＡＣＣ１は、脂肪酸合成と脂肪酸β酸化の制御に関わる酵素である。また、ＦＡＳは、マロニルＣｏＡとアセチルＣｏＡから脂肪酸を合成する複活性ドメイン酵素である。また、ＳＣＤ１は、飽和脂肪酸を不飽和脂肪酸へ変換する酵素である。また、ＡＣＯＸ１は脂肪酸β酸化系酵素である。また、ＲＸＲα、ＲＸＲβ及びＲＸＲγは、それぞれ、糖・脂質代謝に関与する種々の標的遺伝子を調節している転写因子であるｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｌｐｈａ（ＰＰＡＲ）とヘテロ二量体を形成し、リガンド誘導性の転写因子として機能する核内受容体である。
【００７７】
図５（ａ）〜（ｈ）は、それぞれ、表３に示す各脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した結果を示すグラフである。その結果、緑茶抽出物群、ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される脂質代謝関連遺伝子発現の変化に対する有意な影響は認められなかった。これに対し、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用して摂取させた緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される脂質代謝関連遺伝子発現の変化を有意に抑制することが明らかとなった。すなわち、ＨＦ／ＨＳ食により発現が上昇する脂質代謝関連遺伝子の発現変動を抑制し、ＨＦ／ＨＳ食により発現が低下する脂質代謝関連遺伝子の発現変動を抑制することが明らかとなった。
【００７８】
この結果から、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用して摂取させることにより、ＨＦ／ＨＳ食により誘導される脂質代謝関連遺伝子の発現変動を抑制し、脂質代謝が改善されることが明らかになった。
【００７９】
［実験例６］
（緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用摂取による、白色脂肪組織における脂質代謝関連遺伝子の発現に対する効果）
実験例１で屠殺した各群のマウスから採取した白色脂肪組織からｃＤＮＡを調製し、リアルタイムＰＣＲにより、下記表４に示す各脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した。表４には、各遺伝子のＰＣＲに用いたプライマーの塩基配列の配列番号も示す。
【００８０】
【表４】
2018143110.tif 000007
【００８１】
ここで、ＰＧＣ１αはＰＰＡＲの転写調節因子である。エネルギー代謝とミトコンドリアのバイオジェネシスに関与する様々な遺伝子の発現を促進し、また、脂質分解に関わる。また、ＰＰＡＲγ及びＰＰＡＲδは、糖・脂質代謝に関与する種々の標的遺伝子を調節している転写因子である。また、ＵＣＰ１及びＵＣＰ２は、ＰＰＡＲの標的遺伝子にコードされるタンパク質である。ミトコンドリア内膜での酸化的リン酸化反応を脱共役させ、エネルギーを熱として散逸する機能を持つ。ＵＣＰ１は褐色脂肪細胞に多く存在し、ＵＣＰ２は白色脂肪細胞、骨格筋、脾臓、小腸等に存在する。また、ＣＰＴ１αは脂質分解に関わる酵素である。また、ＲＸＲα、ＲＸＲβ及びＲＸＲγは上述した通りである。
【００８２】
図６（ａ）〜（ｉ）は、それぞれ、表４に示す各脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した結果を示すグラフである。その結果、緑茶抽出物群、ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される、白色脂肪組織における脂質代謝関連遺伝子発現の低下に対する有意な影響は認められなかった。これに対し、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用して摂取させた緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される、白色脂肪組織における脂質代謝関連遺伝子発現の低下を有意に抑制することが明らかとなった。
【００８３】
特に、ＵＣＰ１は、脂肪の燃焼に直接関与するタンパク質であり、ＵＣＰ２にも同様の機能がある。このため、緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用がこれらのタンパク質の発現低下を有意に抑制することは、緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用が直接的に脂質代謝を改善することを示す。
【００８４】
［実験例７］
（緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用摂取による、腎臓周辺脂肪組織織における脂質代謝関連遺伝子の発現に対する効果）
実験例１で屠殺した各群のマウスから採取した腎臓周辺脂肪組織からｃＤＮＡを調製し、リアルタイムＰＣＲにより、下記表５に示す各脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した。表５には、各遺伝子のＰＣＲに用いたプライマーの塩基配列の配列番号も示す。
【００８５】
【表５】
2018143110.tif 000008
【００８６】
ここで、ＰＰＡＲγ、ＰＰＡＲδ、ＰＧＣ１α、ＵＣＰ１、ＵＣＰ２は上述した通りである。また、ＵＣＰ３は、ＵＣＰ１及びＵＣＰ２と同様にＰＰＡＲの標的遺伝子にコードされるタンパク質であり、ミトコンドリア内膜での酸化的リン酸化反応を脱共役させ、エネルギーを熱として散逸する機能を持つ。ＵＣＰ３は、主に骨格筋、心臓等の筋組織に多く存在する。
【００８７】
図７（ａ）〜（ｆ）は、それぞれ、表５に示す各脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した結果を示すグラフである。その結果、緑茶抽出物群、ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される、腎臓周辺脂肪組織における脂質代謝関連遺伝子発現の低下に対する有意な影響は認められなかった。これに対し、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用して摂取させた緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される、腎臓周辺脂肪組織における脂質代謝関連遺伝子発現の低下を有意に抑制することが明らかとなった。
【００８８】
［実験例８］
（緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用摂取による、褐色脂肪組織における脂質代謝関連遺伝子の発現に対する効果）
実験例１で屠殺した各群のマウスから採取した褐色脂肪組織からｃＤＮＡを調製し、リアルタイムＰＣＲにより、下記表６に示す各脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した。表６には、各遺伝子のＰＣＲに用いたプライマーの塩基配列の配列番号も示す。
【００８９】
【表６】
2018143110.tif 000009
【００９０】
ここで、ＵＣＰ１、ＵＣＰ２、ＵＣＰ３、ＰＧＣ１α、ＰＰＡＲγ、ＰＰＡＲδ、ＣＰＴ１α、ＲＸＲα及びＲＸＲβは上述した通りである。また、ＣＤ３６は、血小板、単核食細胞、脂肪細胞、肝細胞、筋細胞及び一部の上皮に存在する膜糖タンパク質であり、脂肪酸輸送に関与する。
【００９１】
図８（ａ）〜（ｊ）は、それぞれ、表６に示す各脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した結果を示すグラフである。その結果、緑茶抽出物群、ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される、褐色脂肪組織における脂質代謝関連遺伝子発現の低下に対する有意な影響は認められなかった。これに対し、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用して摂取させた緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される、褐色脂肪組織における脂質代謝関連遺伝子発現の低下を有意に抑制する傾向があることが明らかとなった。
【００９２】
特に、緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用により、脂肪燃焼に直接関与するＵＣＰ１の発現が有意に増加することが明らかとなった。この結果は、緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用が直接的に脂質代謝を改善することを示す。
【００９３】
［実験例９］
（緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用摂取による、骨格筋における脂質代謝関連遺伝子の発現に対する効果）
実験例１で屠殺した各群のマウスから採取した骨格筋からｃＤＮＡを調製し、リアルタイムＰＣＲにより、下記表７に示す各脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した。表７には、各遺伝子のＰＣＲに用いたプライマーの塩基配列の配列番号も示す。
【００９４】
【表７】
2018143110.tif 000010
【００９５】
ここで、ＵＣＰ２、ＵＣＰ３、ＰＧＣ１α及びＣＤ３６は上述した通りである。また、ＬＰＬは、脂肪組織等で合成・分泌され、毛細血管の血管内皮細胞表面に存在する酵素である。ＬＰＬは、細胞外で血液中の中性脂肪を遊離脂肪酸及びグリセロールに分解し、遊離脂肪酸を細胞内に取り込ませる機能を有する。また、ＰＤＫ４はピルビン酸からのアセチルＣｏＡの合成を阻害することで細胞内でのエネルギー源を糖質から脂質へと変換する酵素である。
【００９６】
図９（ａ）〜（ｆ）は、それぞれ、表７に示す各脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した結果を示すグラフである。その結果、緑茶抽出物群、ＤＡＤＳ群では、骨格筋における脂質代謝関連遺伝子発現の変動に対する有意な影響は認められなかった。これに対し、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用して摂取させた緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群では、骨格筋における脂質代謝関連遺伝子の発現を有意に上昇させることが明らかとなった。
【００９７】
［実験例１０］
（緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用摂取による血糖値上昇抑制効果）
実験例３で調製した各群のマウスの血清中のグルコース濃度（血糖値）を、市販のグルコース測定キット（和光純薬工業社製）を用いて測定した。
【００９８】
図１０は、各群のマウスの血清中のグルコース濃度（血糖値）の測定結果を示すグラフである。その結果、緑茶抽出物群、ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される血糖値の上昇に対する有意な影響は認められなかった。これに対し、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用して摂取させた緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される血糖値の上昇が有意に抑制されたことが明らかとなった。
【００９９】
［実験例１１］
（緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用摂取による血清遊離脂肪酸低下作用）
実験例３で調製した各群のマウスの血清中の遊離脂肪酸濃度を、市販の遊離脂肪酸測定キット（和光純薬工業社製）を用いて測定した。
【０１００】
図１１は、各群のマウスの血清中の遊離脂肪酸の測定結果を示すグラフである。その結果、緑茶抽出物群、ＤＡＤＳ群では、血清中の遊離脂肪酸濃度に対する有意な影響は認められなかった。これに対し、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用して摂取させた緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群では、血清中の遊離脂肪酸濃度が有意に低下したことが明らかとなった。
【０１０１】
［実験例１２］
（緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用摂取によるインスリン抵抗性改善効果）
実験例３で調製した各群のマウスの血清中のインスリン濃度をＥＬＩＳＡ法により測定した。また、測定したインスリン濃度と、実験例１０で測定した血糖値に基づいて、インスリン抵抗性の指標であるＨＯＭＡ−ＩＲ値を算出した。ＨＯＭＡ−ＩＲ値は、下記式（Ｆ１）にしたがって算出した。
ＨＯＭＡ−ＩＲ値＝（空腹時の血中インスリン濃度（μＵ／ｍＬ）×空腹時血糖値（ｍｇ／ｄＬ））／４０５  …（Ｆ１）
【０１０２】
図１２（ａ）は、各群のマウスの血中インスリン濃度の測定結果を示すグラフである。その結果、緑茶抽出物群、ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される血中インスリン濃度の上昇に対する有意な影響は認められなかった。これに対し、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用して摂取させた緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される血中インスリン濃度の上昇が有意に抑制されたことが明らかとなった。なお、血中インスリン濃度の上昇は、インスリンの感受性が低下することにより生じる。
【０１０３】
また、図１２（ｂ）は、各群のマウスのＨＯＭＡ−ＩＲ値を示すグラフである。ＨＯＭＡ−ＩＲ値が高いことは、インスリン抵抗性が高いこと、すなわちインスリンの感受性が低いことを示す。
【０１０４】
その結果、緑茶抽出物群、ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によるインスリン抵抗性の上昇に対する有意な影響は認められなかった。これに対し、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用して摂取させた緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によるインスリン抵抗性の上昇が有意に改善したことが明らかとなった。
【０１０５】
［実験例１３］
（緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用摂取による、白色脂肪組織における炎症関連遺伝子の発現抑制効果）
脂肪組織における慢性的な炎症が肥満の一因であるといわれている。そこで、実験例１で屠殺した各群のマウスから採取した白色脂肪組織からｃＤＮＡを調製し、リアルタイムＰＣＲにより、炎症関連タンパク質であるｍｏｎｏｃｙｔｅ  ｃｈｅｍｏｔａｃｔｉｃ  ｐｒｏｔｅｉｎ  １（ＭＣＰ１）をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した。プライマーとしては、センスプライマー（配列番号３７）及びアンチセンスプライマー（配列番号３８）を使用した。ＭＣＰ１は、各種炎症性疾患において単球及びＴ細胞の組織浸潤に関与するタンパク質である。
【０１０６】
図１３（ａ）は、腸間膜脂肪組織におけるＭＣＰ１遺伝子の発現を測定した結果を示すグラフである。また、図１３（ｂ）は、腎臓周辺脂肪組織におけるＭＣＰ１遺伝子の発現を測定した結果を示すグラフである。
【０１０７】
その結果、緑茶抽出物群、ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導されるＭＣＰ１遺伝子の発現の上昇に対する有意な影響は認められなかった。これに対し、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用して摂取させた緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導されるＭＣＰ１遺伝子の発現の上昇を有意に抑制又は低下させることが明らかとなった。
【０１０８】
［実験例１４］
（緑茶抽出物及びＤＡＤＳの併用摂取による、肝傷害の評価）
実験例３で調製した各群のマウスの血清中のＡｓｐａｒｔａｔｅ  Ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＡＳＴ）活性及びＡｌａｎｉｎｅ  ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＡＬＴ）活性を市販のキット（和光純薬工業社製）を用いて測定した。ＡＳＴ活性及びＡＬＴ活性は肝傷害の指標である。
【０１０９】
図１４（ａ）は、各群のマウスの血清中のＡＳＴ活性の測定結果を示すグラフである。また、図１４（ｂ）は、各群のマウスの血清中のＡＬＴ活性の測定結果を示すグラフである。
【０１１０】
その結果、緑茶抽出物群、ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される肝傷害に対する有意な影響は認められなかった。これに対し、緑茶抽出物及びＤＡＤＳを併用して摂取させた緑茶抽出物＋ＤＡＤＳ群では、ＨＦ／ＨＳ食によって誘導される肝傷害が有意に抑制されたことが明らかとなった。
【０１１１】
［実験例１５］
（ＥＧＣＧ及びＤＡＤＳの併用処理による、脂肪細胞における脂質代謝関連遺伝子の発現に対する効果）
まず、前駆脂肪細胞株を成熟脂肪細胞に分化させた。具体的には、マウス前駆脂肪細胞株である３Ｔ３−Ｌ１細胞を、２ｍＬディッシュに１×１０５個／ｍＬとなるように播種し、３７℃、水蒸気飽和した５％ＣＯ２条件下で培養した。培地には１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）を添加したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）を用いた。続いて、細胞がコンフルエントの状態になってから４８時間後に、培地を、デキサメタゾン（１μＭ）、インスリン（１０μｇ／ｍＬ）、３−イソブチル−１−メチルキサンチン（ＩＢＭＸ、０．５μＭ）を添加した１０％ＦＣＳ−ＤＭＥＭに置換した。更に４８時間培養後に、培地を、インスリン（１０ｍｇ／ｍＬ）を添加した１０％ＦＣＳ−ＤＭＥＭに置換した。その後、４８時間毎に培地を１０％ＦＣＳ−ＤＭＥＭに２回置換し、細胞を成熟脂肪細胞へと分化させた。
【０１１２】
続いて、成熟脂肪細胞に分化させた３Ｔ３−Ｌ１細胞に、ＥＧＣＧ（５μＭ）、ＤＡＤＳ（１０μＭ）、又は、ＥＧＣＧ（５μＭ）及びＤＡＤＳ（１０μＭ）をそれぞれ添加し、２４時間培養した。また、ＥＧＣＧもＤＡＤＳも添加しなかった細胞を対照に用いた。その後、各細胞をそれぞれ回収してＲＮＡを抽出し、ｃＤＮＡを合成後、リアルタイムＰＣＲにより下記表８に示す各脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した。表８には、各遺伝子のＰＣＲに用いたプライマーの塩基配列の配列番号も示す。
【０１１３】
【表８】
2018143110.tif 000011
【０１１４】
ここで、ＰＧＣ１α、ＰＰＡＲγ、ＬＰＬは上述した通りである。図１５（ａ）〜（ｃ）は、それぞれ、表８に示す各脂質代謝関連タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現量を測定した結果を示すグラフである。
【０１１５】
図１５中、「ＥＧＣＧ」はＥＧＣＧを添加したＥＧＣＧ群の結果を示し、「ＤＡＤＳ」はＤＡＤＳを添加したＤＡＤＳ群の結果を示し、「ＥＧＣＧ＋ＤＡＤＳ」はＥＧＣＧ及びＤＡＤＳを併用して添加したＥＧＣＧ＋ＤＡＤＳ群の結果を示す。
【０１１６】
その結果、ＥＧＣＧ群、ＤＡＤＳ群では、脂肪細胞における脂質代謝関連遺伝子発現の変化に対する有意な影響は認められなかった。これに対し、ＥＧＣＧ及びＤＡＤＳを併用して添加したＥＧＣＧ＋ＤＡＤＳ群では、脂肪細胞における脂質代謝関連遺伝子の発現が有意に上昇したことが明らかとなった。
【０１１７】
この結果は、ＥＧＣＧ及びＤＡＤＳの併用が直接的に脂質代謝を改善することを更に支持するものである。
【産業上の利用可能性】
【０１１８】
本発明によれば、メタボリックシンドロームの予防、改善又は治療に有効な組成物を提供することができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
2018143110.tif 000023
【図１３】
2018143110.tif 000024
【図１４】
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【図１５】
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【配列表】
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