(57)【要約】【課題】本発明は、高血糖抑制作用を発揮することができる剤又はこれを含む組成物を提供することを目的とする。【解決手段】本発明は、フコキサンチノール含有卵、その少なくとも一部及びそれらの加工品からなる群より選ばれる少なくとも１つ有効成分とする高血糖抑制剤、及びこれを含有する高血糖抑制用食品組成物を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
フコキサンチノール含有卵黄粉末を有効成分とする高血糖抑制剤。
【請求項２】
フコキサンチノール含有卵黄油を有効成分とする高血糖抑制剤。
【請求項３】
フコキサンチノール含有生卵を有効成分とする高血糖抑制剤。
【請求項４】
フコキサンチノール含有卵黄液を有効成分とする高血糖抑制剤。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の剤を含有する、高血糖抑制用食品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、高血糖抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
我が国の糖尿病患者は、約８９０万人、糖尿病予備軍は、約１，３２０万人であると推定され、更にその数は年々増加している。日本人は糖尿病になりやすい体質、即ち、食べた物を消費しにくく貯め込み易い体質を有し、倹約遺伝子保有率は、欧米人の２〜５倍といわれている。糖尿病は、動脈硬化性疾患の重大なリスクファクターであることから、その予防及び治療方法の確立は重大な課題となっている。
【０００３】
現在、糖尿病治療薬としては、インスリンの分泌を促進するスルホニル尿素剤（ＳＵ剤）、フェニルアラニン誘導体や、糖の吸収を抑制するα−グリコシダーゼ阻害剤、肝臓での糖の産生を抑制するビクアナイド（ＢＧ）薬、インスリン抵抗性を改善するチアゾリジン誘導体などが知られている。糖尿病は完治可能なものではなく、糖尿病患者はこれらの医薬品を継続して使用し続けなければならないため、患者の負担は非常に大きい。また、これらの医薬品が処方されるのは糖尿病と診断された場合のみであり、糖尿病予備軍に属する者は食事療法や運動療法に頼るしかないのが現状である。これらのことから、日常生活を大きく変えることなく、糖尿病の発症を予防または改善可能な技術の開発が切望されている。
【０００４】
フコキサンチンは、渇藻類等の海草や微細藻類に高濃度含有されているカロテノイドの一種である。フコキサンチンを含有した渇藻抽出物が、ヒトにおいて体重の有意な減少と共に、高血糖を有意に改善すること、また、その作用機序として、フコキサンチン含有褐藻抽出物がエネルギー消費を有意に増加させることが報告されている（非特許文献１）。また、細胞や動物での検討により、フコキサンチンが筋肉細胞や筋肉組織において糖取り込みを促進するＧＬＵＴ４の膜移行を増加することが明らかになったことも報告されている（特許文献１、非特許文献２）。一方、フコキサンチンは、吸収時には７〜８割程度がフコキサンチノールに変換されることが報告されており、フコキサンチンの高血糖抑制作用の主たる活性本体は、フコキサンチノールであると考えられている（非特許文献３、４）。こうした背景を踏まえ、フコキサンチノールを用いた抗肥満活性剤及び肥満抑制方法に関しても既に報告されている（特許文献２）。
【０００５】
糖尿病による高血糖状態の改善は、一過性ではなく体質を含めて根本的なものであることが望まれる。体内に取り込まれた余分なグルコースは、血中から肝臓や筋肉に取り込まれ、グリコーゲンとして貯蔵される。このグルコース取り込みを促進することができれば、高血糖状態を改善できると考えられる。糖代謝の７０％以上は筋肉で行われているため、グルコースの筋肉への取り込みを促進することにより、高血糖状態の改善が期待できる。
【０００６】
非特許文献５には、ニワトリにフコキサンチンを含む海藻脂質を添加した飼料を与えると、卵黄中にフコキサンチノールが検出されたことが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特許第５０９９８１２号公報
【特許文献２】特許第５０１２５０５号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ａｂｉｄｏｖ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｏｂｅｓ  Ｍｅｔａｂ（２０１０）１２、７２−８１．
【非特許文献２】Ｎｉｓｈｉｋａｗａ  Ｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｈｙｔｏｍｅｄｉｃｉｎｅ（２０１２）１９、３８９−３９４．
【非特許文献３】Ｈｏｓｏｋａｗａ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．Ａｒｃｈ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ（２０１０）５０４、１７−２５．
【非特許文献４】Ｗｕ  ＦＣ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｎｕｔｒ（２００２）１３２、７２−８１．
【非特許文献５】北水試だより（２００９）７７、２２−２５．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
しかしながら、フコキサンチン及びフコキサンチノールは脂溶性物質であることによる製剤化の難しさがあり、様々な食事場面にて汎用的に使用するには課題があった。また、フコキサンチノールを含む鶏卵の用途については知られていなかった。本発明は、フコキサンチノールの高血糖抑制作用を体内で十分に発揮できる剤の提供を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、フコキサンチンまたはフコキサンチノール含有試料を鶏に摂取させることにより、卵黄にフコキサンチノールを集積させ、フコキサンチノール含有卵黄粉末を入手した。機能性食品成分の評価には、一般的に動物、特にげっ歯類が用いられ、フコキサンチンやフコキサンチノールに関する有効性も動物でも評価されている。フコキサンチンは、試料中に０．０５％含有された濃度が高血糖に関して有効性が報告されている最下限の濃度であり、フコキサンチノールに関しては、０．２％含有された濃度が最下限である（非特許文献５、特許文献２）。本発明者らは、作製した卵黄粉末を用いて上記文献等を参考に鋭意検討を進めた結果、驚くべきことに、フコキサンチノール含有卵が、これまでに知られているフコキサンチンやフコキサンチノールの効果を発揮する摂取用量よりもはるかに低用量でも高血糖抑制作用を示すことを見出した。
【００１１】
本発明は、下記の〔１〕〜〔５〕を提供する。
〔１〕フコキサンチノール含有卵黄粉末を有効成分とする高血糖抑制剤。
〔２〕フコキサンチノール含有卵黄油を有効成分とする高血糖抑制剤。
〔３〕フコキサンチノール含有生卵を有効成分とする高血糖抑制剤。
〔４〕フコキサンチノール含有卵黄液を有効成分とする高血糖抑制剤。
〔５〕〔１〕〜〔４〕のいずれか１項に記載の剤を含有する、高血糖抑制用食品組成物。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、良好な高血糖抑制作用を発揮することができる高血糖抑制剤が提供される。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明において、フコキサンチノール含有卵は、トリの体内から移行したフコキサンチノールを含有する卵である。フコキサンチノール含有卵が卵黄粉末の場合、卵黄粉末におけるフコキサンチノールの含有量は、通常は０．０１ｐｐｍ以上、好ましくは０．１ｐｐｍ以上、より好ましくは１．０ｐｐｍ以上、更に好ましくは３ｐｐｍ以上である。上限は、通常は３０ｐｐｍ以下、好ましくは２０ｐｐｍ以下、より好ましくは９．８ｐｐｍ以下である。
【００１４】
フコキサンチノール含有卵黄粉末の製法は特に限定されないが、例えば、フコキサンチンまたはフコキサンチノールを摂取したトリが産卵した卵の卵黄を粉末化することにより製造する方法が挙げられる。
【００１５】
トリは、メスの鳥類であればよく特に限定されないが、例えば、ニワトリ、シチメンチョウ、ウズラ、アヒル、ガチョウ等の家禽である。トリの月齢は特に限定されないが、産卵能力を有するのであれば特に限定されない。
【００１６】
トリにフコキサンチンまたはフコキサンチノールを摂取させる方法（投与方法）は特に限定されず、例えば、経口投与、（例えば、口腔内投与、舌下投与など）、非経口投与（静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、経皮投与、経鼻投与、経肺投与など）などが挙げられる。これらの中でも侵襲性の少ない投与形態が好ましく、通常は経口投与である。
【００１７】
フコキサンチンおよびフコキサンチノールの由来は特に限定されず、天然物（例えば、渇藻類等の海草、微細藻類）由来でもよいし、化学合成されたものでもよい。また、天然物由来の場合、その抽出程度は特に限定されず、粗抽出物、抽出物、精製物のいずれでもよい。
【００１８】
経口投与による場合、フコキサンチンまたはフコキサンチノールを飼料に混合して投与することが好ましい。飼料におけるフコキサンチンまたはフコキサンチノールの含有量は、通常は０．０００６質量％以上であり、好ましくは０．００３質量％以上であり、より好ましくは０．００６質量％以上である。上限は、通常は０．１５質量％以下であり、好ましくは０．０３質量％以下であり、より好ましくは０．０１８質量％以下である。
【００１９】
飼料は、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールの他に他の成分を含んでいてもよい。他の成分は、トリの飼料に通常含まれる成分であればよく、特に限定されない。
【００２０】
飼料は、フコキサンチンまたはフコキサンチノールを含ませる、又は配合することができればよく、剤形は特に限定されないが、液状（液剤）、シロップ状（シロップ剤）、錠剤（錠剤、タブレット）、カプセル状（カプセル剤、ハードカプセル剤）、粉末状（顆粒、細粒）、ソフトカプセル状（ソフトカプセル剤）、通常は粉末である。飼料は、通常の配合飼料に含まれる成分を含んでいてもよい。
【００２１】
トリのフコキサンチンまたはフコキサンチノールの１日当たり摂取量は、摂取期間、トリの種類、健康状態等にもよるため特に限定されないが、通常は０．２ｎｇ／体重ｇ以上、好ましくは０．６ｎｇ／体重ｇ以上、より好ましくは１．２ｎｇ／体重ｇ以上である。上限は、通常は５００ｎｇ／体重ｇ以下、好ましくは３００ｎｇ／体重ｇ以下、より好ましくは１００ｎｇ／体重ｇ以下である。
【００２２】
トリがフコキサンチンまたはフコキサンチノールを摂取する期間は、摂取量、トリの種類、健康状態等にもよるため特に限定されないが、通常は１０日以上、好ましくは２０日以上、より好ましくは２９日以上である。上限は、通常は６０日以下、好ましくは５０日以下、より好ましくは４０日以下である。
【００２３】
本発明において、フコキサンチノール含有卵は、そのままで（生卵）、少なくとも一部（好ましくは、卵黄）を、または、フコキサンチノール含有卵もしくは／およびその少なくとも一部の加工品を利用してもよい。加工品としては例えば、粉末、油、溶液が挙げられ、好ましくは、卵黄粉末、卵黄油、卵黄液である。加工の方法は特に限定されない。卵黄粉末は、凍結乾燥より製造できる。卵黄油は、卵黄を加熱して固形分を除くことにより製造できる。卵黄液は、卵黄に水又は食塩水を適量添加することで製造できる。
【００２４】
フコキサンチノール含有卵は、生体が摂取することにより、高血糖抑制作用を発揮することができる。フコキサンチノール含有卵の成人における１日当たり摂取量（２種以上の組み合わせの場合合計量）は、卵黄粉末の場合、好ましくは０．１ｇ以上であり、より好ましくは、０．２ｇ以上であり、更に好ましくは０．３ｇ以上である。上限は、好ましくは２６ｇ以下であり、より好ましくは１２ｇ以下であり、更に好ましくは５．２５ｇ以下である。
【００２５】
フコキサンチノール含有卵は、単独で、又は他の成分と組み合わせて、剤として利用できる。上記のとおりフコキサンチノール含有卵は高血糖抑制作用を有することから、フコキサンチノール含有卵を含む剤は、高血糖抑制剤として利用できる。高血糖抑制作用は、糖尿病、メタボリックシンドローム、高血糖症、耐糖能異常症、肥満症等の疾患の予防又は抑制に役立つことから、本発明の剤はこれらの疾患の予防又は抑制剤としても有用である。
【００２６】
本発明の剤は、フコキサンチノール含有卵を少なくとも１種含んでいればよく、製法、組成の異なる２種以上のフコキサンチノール含有卵の組み合わせを含んでいてもよい。
【００２７】
本発明の剤は、フコキサンチノール含有卵を有効成分としていればよく、必要に応じて他の成分を含有してよい。他の成分としては、本発明の効果を損なわない限り特に制限はなく、例えば、薬理学的に許容される担体が挙げられる。
【００２８】
薬理学的に許容される担体は、剤形などに応じて適宜選択してよく、例えば、エタノール、水、デンプンなどが挙げられる。
【００２９】
本発明においては、フコキサンチノール含有卵及び薬理学的に許される担体のほかに、他の成分を含んでいてもよい。他の成分としては、例えば、油性成分、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、コーティング剤、着色剤、発色剤、矯味剤、着香剤、酸化防止剤、防腐剤、呈味剤、酸味剤、甘味剤、強化剤、膨張剤、増粘剤、界面活性剤、フコキサンチノール含有卵及び薬理学的に許される担体以外の高血糖抑制作用を有する成分などが挙げられる。任意成分は、食品組成物の剤形、種類等に応じて選択すればよく、１種でもよいし２種以上の組み合わせでもよい。
【００３０】
油性成分としては、例えば、脂肪酸エステル、炭化水素、高級脂肪酸、高級アルコール等が挙げられる。
【００３１】
賦形剤としては、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、結晶セルロース、エチルセルロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース等のセルロース及びその薬理学的に許容される誘導体、ポリビニルピロリドン、部分けん化ポリビニルアルコール等の合成高分子、ゼラチン、アラビアゴム末、プルラン、寒天、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、キタンサンガム等の多糖類、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、α化デンプン、ヒドロキシプロピルスターチ等のスターチおよびその薬理学的に許容される誘導体、乳糖、果糖、ブドウ糖、白糖、トレハロース、パラチノース、マンニトール、ソルビトール、エリスリトール、キシリトール、還元パラチノース、粉末還元麦芽糖水飴、マルチトール等の糖類および糖アルコール類、軽質無水ケイ酸、微粒酸化ケイ素、微粒二酸化ケイ素、酸化チタン、水酸化アルミニウムゲル等の無機賦形剤等が挙げられる。剤全量に対する賦形剤の含有量は、０．０１質量％以上が好ましい。上限は、７０質量％以下が好ましい。
【００３２】
崩壊剤としては、例えば、クロスポビドン、カルメロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルスターチナトリウム、ヒドロキシプロピルスターチ、部分α化デンプン等が挙げられる。
【００３３】
結合剤としては、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、デキストリン、デンプン、アルファー化デンプン等が挙げられる。
【００３４】
滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ショ糖脂肪酸エステル、軽質無水ケイ酸、フマル酸ステアリルナトリウム、ポリエチレングリコール、タルク、ステアリン酸等が挙げられる。剤全量に対する滑沢剤の含有量は、０．０１質量％以上が好ましい。上限は、２５質量％以下が好ましい。
【００３５】
フコキサンチノール含有卵、及びこれを含む剤の投与形態は特に限定されない。例えば、経口投与（例えば、口腔内投与、舌下投与など）、非経口投与（静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、経皮投与、経鼻投与、経肺投与など）などが挙げられる。これらの中でも侵襲性の少ない投与形態が好ましく、経口投与（内服）がより好ましい。
【００３６】
経口投与剤（内服剤）又は経口投与用組成物（内服用組成物）の剤形としては、例えば、液状（液剤）、シロップ状（シロップ剤）、錠剤（錠剤、タブレット）、カプセル状（カプセル剤）、粉末状（顆粒、細粒）、ソフトカプセル状（ソフトカプセル剤）、固形状、半液体状、クリーム状、ペースト状が挙げられる。
【００３７】
剤におけるフコキサンチノール含有卵の投与量は、上述のフコキサンチノール含有卵の摂取量の目安を参照して適宜決定すればよい。
【００３８】
フコキサンチン含有卵、及びこれを含む剤の投与対象は、ヒトを含む動物であればよく、通常はヒトである。投与対象は健常者でもよいが、高血糖者であることが好ましい。高血糖者とは、通常、空腹時の血糖値が以下の２）正常高値、３）境界域、４）糖尿病域のいずれかにある者であり、空腹時の血糖値が上記の２）正常高値、３）境界域のいずれかにある者が好適である。
１）正常域  ：１００ｍｇ／ｄＬ未満
２）正常高値：１００ｍｇ／ｄＬ以上１１０ｍｇ／ｄＬ未満
３）境界域  ：１１０ｍｇ／ｄＬ以上１２６ｍｇ／ｄＬ未満
４）糖尿病域：１２６ｍｇ／ｄＬ以上
【００３９】
投与対象はまた、糖尿病、メタボリックシンドローム、高血糖症、耐糖能異常症、肥満症等の疾患の患者でもよい。
【００４０】
高血糖を抑制するとは、高血糖状態となるのを抑制すること、高血糖状態を緩和する（血糖値を正常値に近づける）こと、高血糖状態となることを予防すること、又は正常な血糖値を維持することを意味する。
【００４１】
対象者は、ヒトに限定されず、ヒト以外の動物（例えば、マウス、ラット、ハムスター、イヌ、ネコ、ヒツジ、ヤギ、ウシ、ブタ、サルなどの哺乳類）であってもよい。
【００４２】
フコキサンチノール含有卵、およびこれを含む剤は、そのまま、又はさらに他の成分と組み合わせて、食品組成物、医薬、医薬部外品として利用できる。食品組成物としては例えば、飲料（清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、粉末飲料、果実飲料、乳飲料、ゼリー飲料など）、菓子類（クッキー、ケーキ、ガム、キャンディー、タブレット、グミ、饅頭、羊羹、プリン、ゼリー、アイスクリーム、シャーベットなど）、水産加工品（かまぼこ、ちくわ、はんぺんなど）、畜産加工品（ハンバーグ、ハム、ソーセージ、ウィンナー、チーズ、バター、ヨーグルト、生クリーム、チーズ、マーガリン、発酵乳など）、スープ（粉末状スープ、液状スープなど）、主食類（ご飯類、麺（乾麺、生麺）、パン、シリアルなど）、調味料（マヨネーズ、ショートニング、ドレッシング、ソース、たれ、しょうゆなど）が挙げられる。
【００４３】
食品組成物としては例えば、健康食品、機能性食品、健康補助食品（サプリメント）、栄養補助食品、特定保健用食品、医療用食品、病者用食品、乳児用食品、介護用食品、高齢者用食品等も挙げられる。
【００４４】
フコキサンチノール含有卵、およびこれを含む剤の投与時期は、特に限定されないが、好ましくは非空腹時であり、より好ましくは食後である。一般に、脂質系の成分は腸管に食物が存在しているほうが吸収され易いため、投与時期が上記の時期であることにより吸収が促進され得る。
【００４５】
フコキサンチノール含有卵、これを含む剤の高血糖抑制作用の確認方法としては例えば、実施例に示すとおり、高血糖モデル動物を用いる方法が挙げられる。高血糖モデル動物により評価する方法としては、例えば、通常食にサンプルを配合した餌を高血糖モデル動物に与えつつ一定期間飼育し、飼育後の血糖値を測定する方法が挙げられる。高血糖モデル動物としては、例えば、ＫＫＡｙマウスが挙げられる。通常食としてはＣＥ−２（日本クレア株式会社）などの市販品を用いてもよい。高血糖モデル動物の飼育期間は、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択してよい。
【００４６】
フコキサンチノール含有卵を含む剤の製造方法は、特に限定されず、剤型、組成等に応じて任意の方法にて製造すればよい。
【実施例】
【００４７】
以下、本発明を実施例により詳細に説明する。下記実施例は、本発明を好適に説明するためのものであって、本発明は、下記実施例に限定されるものではない。
【００４８】
［製造例１］フコキサンチノール含有卵黄粉末の作製
実施例で用いるフコキサンチノール含有卵黄粉末を以下の手順で製造した。
５％フコキサンチン溶液（オリザ油化製）を鶏用の餌に０．１％となるように混合し、４週間摂取させた。その間に生まれた鶏卵の卵黄を定法に従って粉末化を行った。卵黄粉末中のフコキサンチノール濃度は６ｐｐｍであった。
【００４９】
卵黄粉末中のフコキサンチノール濃度の確認は、高速液体クロマトグラフィー法により行った。測定条件は以下のとおりとした。
【００５０】
卵黄粉末５００ｍｇを１５ｍＬチューブに採り、エタノール５ｍＬを加え、高速振とう機（Ｃｕｔｅｍｉｘｅｒ、ＥＹＥＬＡ）で２０分間攪拌しながら室温で抽出した。１５００ｒｐｍで５分間遠心分離の後、上澄みを回収した。上澄みが透明になるまで前記工程を繰り返し（通常３回）、回収した上澄みを留去した。
【００５１】
イソプロピルアルコールで５ｍＬにメスアップし、下記条件にて高速液体クロマトグラフィー分析を行った。
【００５２】
ＨＰＬＣ条件
・カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−３（ＧＬ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  ４．６×１５０ｍｍ）
・移動相：ＭｅＯＨ／Ｈ2Ｏ＝８５／１５、流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
・カラムオーブン：４０℃
【００５３】
［製造例２］コンブ由来フコキサンチンの製造
比較例で用いるコンブ由来フコキサンチン（ＦＸ）を以下の手順で製造した。
１）抽出工程（粗製フコキサンチンの調製）
分液漏斗に、フコキサンチン１％オイル（株式会社サウスプロダクト製、コンブ由来）５００ｇ、ヘキサン５００ｇ、メタノール５００ｇおよび飽和食塩水５０ｇを入れ、１分間混合後、１０分間静置し、下層（濃赤色）を回収した。残った上層（濃緑色）に対し、メタノール２５０ｇおよび飽和食塩水２５ｇを入れて同様の操作を行い、下層を回収した。これら回収した下層とヘキサン２５０ｇとを分液漏斗にて混合し１０分間静置後、下層を回収してエバポレーターで濃縮乾固させ、固形分を得た。得られた固形分をジエチルエーテル２５０ｇに溶解して分液漏斗に入れ、水１００ｇを混合し１０分間静置した。上層（濃赤色）を集め、硫酸ナトリウムで乾燥させて濾紙で濾過後、得られる濾液をエバポレーターで濃縮乾固し、粗製フコキサンチンを得た（１７ｇ、フコキサンチン純度：２８％、フコキサンチン回収率：９５％）。粗製フコキサンチンを下記２の工程に供した。
【００５４】
２）クロマトグラフィー精製工程（精製フコキサンチンの調製）
粗製フコキサンチン（９ｇ）をヘキサン／アセトン＝５０／５０（ｖ／ｖ）  ５０ｍＬに溶解し、シリカゲルクロマトグラフィー（φ５０ｍｍ×Ｈ５００ｍｍ）にて精製した。展開はヘキサン／アセトン比率＝７０／３０で開始し、最終比率を５０／５０とした。濃赤色の画分を集め、エバポレーターにて濃縮乾固し、精製フコキサンチンを得た（３．５ｇ、フコキサンチン純度：６５％、フコキサンチン回収率：９２％）。精製フコキサンチンを下記３の工程に供した。
【００５５】
３）再結晶工程（高純度フコキサンチンの調製）
精製フコキサンチン（３．５ｇ）を最小量のアセトンに溶解させ、水を適量添加し、エバポレーターを用いて結晶が析出しない程度にアセトンを留去した。その後、溶液を氷冷して結晶が生成するまで静置した。ヘキサンを洗浄液として吸引濾過を行い、結晶を集乾燥させ、高純度フコキサンチン（２ｇ、フコキサンチン純度：９９％、フコキサンチン回収率：８３％）を得た。
【００５６】
各工程の結果物におけるフコキサンチンの純度の確認は、下記条件にて高速液体クロマトグラフィー法により行った。
【００５７】
ＨＰＬＣ条件
・試料：２０ｍｇを精秤し、エタノールで５０ｍＬまで希釈して得られた溶液を１０μＬ導入した。
・カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−３  (５μｍ，４．６ｍｍ（Ｉ．Ｄ．）×１５０ｍｍ）
・移動相：メタノール／水＝８５／１５（０分〜）、１００／０（８分〜）、１００／０（３５分〜）
・流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
・オーブン：６０℃
・検出器：ＵＶ−ＶＩＳ（４４０ｎｍ）
【００５８】
各工程におけるフコキサンチンの回収率は、以下の式により算出した：
【００５９】
回収率＝各工程の結果物におけるフコキサンチン重量／各工程の処理前の試料におけるフコキサンチン重量
【００６０】
フコキサンチン重量は、試料の重量に、上記のとおり測定されたフコキサンチンの純度を乗じて算出した。なお、各精製工程における処理前の試料とは、それぞれフコキサンチン１％オイル、粗製フコキサンチン、精製フコキサンチンである。
【００６１】
［実施例１および２］
市販餌（商品名：ＣＥ−２、日本クレア株式会社製）に対し、フコキサンチノール含有卵黄粉末（製造例１）を１％、５％配合した餌を用い、全個体の摂食量を均一とし、一日の摂食量を５ｇ〜５．５ｇとして、高血糖モデルマウス（ＫＫＡｙマウス（日本クレア株式会社）、４週齢♂、７匹／群）を１６日間飼育した（ＦＸｎｏｌ含有卵黄粉末１％群（実施例１）、ＦＸｎｏｌ含有卵黄粉末５％群（実施例２））。コントロールとして、上記市販餌にフコキサンチンを摂取させていない鶏由来の卵黄粉末を５％配合した餌を用いた（Ｂｌａｎｋ卵黄粉末群）。ＦＸｎｏｌ含有卵黄粉末を１％配合した餌には、各群間の卵黄粉末としての配合量を揃えるため、Ｂｌａｎｋ卵黄粉末を重量比で４％配合した。
【００６２】
各群について、飼育前（投与前、０日目）の血糖値と飼育後（投与後１６日）の血糖値を、ワンタッチウルトラ（ジョンソン・エンド・ジョンソン(株)製）により測定した。測定は、午前１０時に実施し、平均値を各群の血糖値として採用した。Ｂｌａｎｋ卵黄粉末群の各測定値を１００％とした際の各実施例の各測定値の割合から、Ｂｌａｎｋ卵黄粉末群の各測定値に対する減少率（％）を算出した（表１）。
【００６３】
［比較例１］
実施例で用いた餌の代わりに、上記市販餌にＢｌａｎｋ卵黄粉末を重量比で５％配合したのに加え、質量比０．０００００６質量％のフコキサンチン（製造例２）を添加した餌を用いた。本添加濃度は、餌中のフコキサンチノール含有濃度がＦＸｎｏｌ含有卵黄粉末１％群と同等となるように設定した。そのほかは、実施例１と同様に評価を行った（ＦＸ０．０００００６％群、Ｎ＝７）。
【００６４】
［比較例２］
実施例で用いた餌の代わりに、上記市販餌にＢｌａｎｋ卵黄粉末を重量比で５％配合したのに加え、質量比０．０００００６質量％のフコキサンチノール（和光純薬、純度９４％）を添加した餌を用いた。本添加濃度は、餌中のフコキサンチノール含有濃度がＦＸｎｏｌ含有卵黄粉末１％群と同等となるように設定した。そのほかは、実施例１と同様に評価を行った（ＦＸｎｏｌ０．０００００６％群、Ｎ＝７）。
【００６５】
［比較例３］
実施例で用いた餌の代わりに、上記市販餌にＢｌａｎｋ卵黄粉末を重量比で５％配合したのに加え、質量比０．００００３質量％のフコキサンチン（製造例２）を添加した餌を用いた。本添加濃度は、餌中のフコキサンチノール含有濃度がＦＸｎｏｌ含有卵黄粉末５％群と同等となるように設定した。そのほかは、実施例１と同様に評価を行った（ＦＸ０．００００３％群、Ｎ＝７）。
【００６６】
［比較例４］
実施例で用いた餌の代わりに、上記市販餌にＢｌａｎｋ卵黄粉末を重量比で５％配合したのに加え、質量比０．００００３質量％のフコキサンチノール（和光純薬、純度９４％）を添加した餌を用いた。本添加濃度は、餌中のフコキサンチノール含有濃度がＦＸｎｏｌ含有卵黄粉末５％群と同等となるように設定した。そのほかは、実施例１と同様に評価を行った（ＦＸｎｏｌ０．００００３％群、Ｎ＝７）。
【００６７】
【表１】
2018008893.tif 000002
【００６８】
表１から明らかなとおり、卵黄粉末とフコキサンチンまたはフコキサンチノールを摂取したマウスでは血糖減少率が不十分であったのに対し（比較例１〜４）、フコキサンチノール含有卵黄粉末を摂取したマウス（実施例１および２）は、高い血糖減少率を示した。これらの結果は、フコキサンチノール含有卵が高血糖抑制効果を有することを示している。
【００６９】
処方例１（錠剤）
以下の組成にて常法に従い錠剤を製造した。
フコキサンチノール含有卵黄粉末  ４０質量％
ステアリン酸カルシウム  ５質量％
結晶セルロース  １０質量％
乳糖  ４３質量％
微粒二酸化ケイ素  ２質量％
【００７０】
処方例２（ソフトカプセル）
以下の組成にて常法に従いソフトカプセル剤を製造した。
［固形製剤／１個］
−外層−
ゼラチン・・・１３０ｍｇ
グリセリン・・・７０ｍｇ
パラオキシ安息香酸エチル・・・０．５ｍｇ
−内層−
フコキサンチノール含有卵黄油・・・１００ｍｇ