(57)【要約】【課題】薬剤耐性菌の出現のおそれが少なく、副作用の少ない新規な感染性肺炎の予防及び治療用組成物を提供する。【解決手段】アスコフィラム・ノドサム（Ascophyllum  nodosum）から抽出されるアスコフィラン（ascophyllan）をはじめとする水溶性多糖等のアスコフィラム・ノドサム又はそれに含有される１若しくは複数の化合物を有効成分として含む、肺炎球菌（Streptococcus  pneumoniae）感染性肺炎等の感染性肺炎の予防及び治療用組成物並びにそれを含む食品及び飼料。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
アスコフィラム・ノドサム（Ascophyllum  nodosum）又はそれに含有される１若しくは複数の化合物を有効成分として含む感染性肺炎の予防及び治療用組成物。
【請求項２】
前記肺炎が、肺炎球菌（Streptococcus  pneumoniae）の感染によるものである請求項１に記載の感染性肺炎の予防及び治療用組成物。
【請求項３】
前記有効成分が、アスコフィラム・ノドサムの水抽出物である請求項１又は２に記載の感染性肺炎の予防及び治療用組成物。
【請求項４】
前記有効成分が、水溶性多糖を含む請求項３に記載の感染性肺炎の予防及び治療用組成物。
【請求項５】
前記有効成分が、アスコフィラン（ascophyllan）を含む請求項４に記載の感染性肺炎の予防及び治療用組成物。
【請求項６】
請求項１から５のいずれか１項に記載の感染性肺炎の予防及び治療用組成物を含む食品。
【請求項７】
請求項１から５のいずれか１項に記載の感染性肺炎の予防及び治療用組成物を含む飼料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な感染性肺炎の予防及び治療用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
肺炎は肺の炎症性疾患の総称であり、各種病原体の感染による感染性肺炎、誤嚥性肺炎等の機械性肺炎、インターフェロンによる間質性肺炎等の薬剤性肺炎、リウマチ肺等の膠原病性肺炎等、原因に応じ様々に分類されているが、一般には急性感染症として理解されている。肺炎は、２０１５年における日本人の死亡原因の約９．４％を占めている。
【０００３】
感染性肺炎の原因病原体は、肺炎球菌、黄色ブドウ球菌、レジオネラ菌、インフルエンザ桿菌、モラクセラ等の細菌類、インフルエンザウィルス、麻疹ウィルス等のウィルス、ニューモシスチス等の真菌類、マイコプラズマ、クラミジア等の非定型細胞内寄生体等、多岐にわたる。感染性肺炎の場合、病原体の種類に応じ、抗生物質、抗ウィルス剤、抗真菌剤等の投与が主な治療方法になるが、喀痰培養による病原体の同定や投与薬剤に対する感受性検査は、時間を要するため、緊急時には行われないことが多く、原因菌の種類を推定し、抗生物質の選択が行われることが多い。
【０００４】
細菌性肺炎の主要な原因病原体である肺炎球菌（Streptococcus  pneumoniae）は、グラム陽性菌の一種で、肺炎や急性中耳炎等の局所感染症、細菌性髄膜炎や播種性血管内凝固等の全身性感染症の原因となる。菌体の表面に多糖類からなる莢膜を有しており、これが病原性に重要な役割を果たすと共に、多核白血球による貪食作用に対する抵抗性を示す。
【０００５】
肺炎球菌の治療には、ペニシリン系抗生物質が第１選択となっているが、耐性菌の出現や、ごく稀であるが、アナフィラキシー・ショック等の副作用をおこすおそれがある。その他、セフェム系抗生物質等が用いられることがあるが、やはり耐性菌の出現が問題になっている。
【０００６】
一方、例えば、マイコプラズマ肺炎の場合には、エリスロマイシン、クラリスロマイシン、アジスロマイシン等のマクロライド系抗生物質が主に用いられている。このように、原因病原菌の種類に応じ、抗生物質の種類は異なっている。また市中感染と院内感染による薬剤耐性の違いを考慮して、使用する抗生物質の選択を行う必要がある等、感染性肺炎の薬剤治療において、薬剤の選択が困難を伴う場合がある。更に、多剤投与に伴う薬剤耐性菌の出現の問題もある。
【０００７】
感染性肺炎の予防においては、ワクチンの投与が主な選択肢である。例えば、肺炎球菌の予防には、莢膜を抗原として作製されたワクチンが有効であり、２３価不活化ワクチンであるニューモバックス（登録商標）ＮＰは、高齢者への定期接種の対象に指定され、公費補助の対象にもなっている。それ以外にも、肺炎球菌に対する免疫を誘導するための免疫原性組成物が提案されている（例えば、特許文献１、２参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２０１６−１３２６６７号公報
【特許文献２】特開２０１６−４７８４２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
以上述べたように、感染性肺炎の薬剤治療において、広範な抗菌スペクトラムを示し、薬剤耐性菌の出現のおそれが少なく、副作用の少ない予防薬及び治療薬は、今のところ提案されていないのが現状である。
【００１０】
本発明はかかる事情に鑑みてなされたもので、薬剤耐性菌の出現のおそれが少なく、副作用の少ない新規な感染性肺炎の予防及び治療用組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、海藻の一種であるアスコフィラム・ノドサム又はそれに含有される１若しくは複数の化合物が、各種病原体の感染によって引き起こされる肺炎に対する治療及び予防効果を有することを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、前記目的に沿う本発明の第１の態様は、アスコフィラム・ノドサム（Ascophyllum  nodosum）又はそれに含有される１若しくは複数の化合物を有効成分として含む肺炎の予防及び治療用組成物を提供することにより上記課題を解決するものである。
【００１２】
本発明の第１の態様に係る感染性肺炎の予防及び治療用組成物において、前記肺炎が、肺炎球菌（Streptococcus  pneumoniae）の感染によるものであってもよい。
【００１３】
本発明の第１の態様に係る感染性肺炎の予防及び治療用組成物において、前記有効成分が、アスコフィラム・ノドサムの水抽出物であってもよい。
【００１４】
本発明の第１の態様に係る感染性肺炎の予防及び治療用組成物において、前記有効成分が、水溶性多糖を含んでいてもよい。
【００１５】
本発明の第１の態様に係る感染性肺炎の予防及び治療用組成物において、前記有効成分が、アスコフィラン（ascophyllan）を含んでいてもよい。
【００１６】
本発明の第２の態様は、本発明の第１の態様に係る感染性肺炎の予防及び治療用組成物を含む食品を提供することにより上記課題を解決するものである。
【００１７】
本発明の第３の態様は、本発明の第１の態様に係る感染性肺炎の予防及び治療用組成物を含む飼料を提供することにより上記課題を解決するものである。
【発明の効果】
【００１８】
本発明によると、肺炎の原因病原体の感染予防効果と感染性肺炎の治療効果を併せ持ち、薬剤耐性菌の出現のおそれが少なく、副作用の少ない新規な感染性肺炎の予防及び治療用組成物が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】肺炎球菌を経鼻投与したマウスの肺内における肺炎球菌の増殖に、実施例１で調製したアスコフィラム・ノドサム抽出物が及ぼす効果を示すグラフである。
【図２】肺炎球菌を経鼻投与した肺炎モデルマウスの生存率に、実施例１で調製したアスコフィラム・ノドサム抽出物が及ぼす効果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
続いて、本発明を具体化した実施の形態につき説明し、本発明の理解に供する。本発明の一実施の形態に係る感染性肺炎の予防及び治療用組成物（以下、「予防及び治療用組成物」と略称される場合がある。）は、アスコフィラム・ノドサム（Ascophyllum  nodosum）又はそれに含有される１若しくは複数の化合物を有効成分として含んでいる。
【００２１】
＜アスコフィラム・ノドサム＞
アスコフィラム・ノドサムは、北欧の海岸地帯に繁殖する大型の褐藻類の一種であり、家畜の飼料や植物の生長促進剤として用いられている。アスコフィラム・ノドサムは、アミノ酸、ビタミン類、灰分、ポリフェノール、各種ミネラルに加え、アルギン酸、フコイダン、マンニット、ラミナリン、アスコフィラン等の水溶性多糖類を含んでいる。アスコフィランは、アスコフィラム・ノドサムに特有の多糖類であり、Ｌ−フコース及び硫酸基を含む点でフコイダンと類似するが、糖残基の組成が異なっており、アポトーシス誘導能やある種のガン細胞に対する抗腫瘍活性を有することが知られている。
【００２２】
＜アスコフィラム・ノドサムに含有される化合物の分離＞
予防及び治療用組成物は、アスコフィラム・ノドサムそのものを、乾燥粉末等の任意の形態で含んでいてもよいが、それに含有される１又は複数の化合物を分離したものを含んでいてもよい。アスコフィラム・ノドサムに含有される化合物を分離する手段として、任意の公知の方法を用いることができるが、好ましい方法としては、溶媒抽出が挙げられ、特に好ましくは水を溶媒として用いる溶媒抽出が挙げられる。抽出原料であるアスコフィラム・ノドサムとしては、任意の産地のものを用いることができる。なお、生のままの藻体は水分含量が高いため、水洗により塩分を除去した藻体を乾燥し、粉末化したものを抽出原料として用いることが好ましい。抽出原料として用いられるアスコフィラム・ノドサム乾燥粉末の平均的な組成は、蛋白質５〜１０％、炭水化物４５〜６０％、灰分１７〜２０％、脂質２〜４％、水分１０〜１２％である。なお、前処理として、アスコフィラム・ノドサム乾燥粉末を酸水溶液で処理し、酸可溶分を除去しておいてもよい。
【００２３】
アスコフィラム・ノドサムからの化合物の抽出は、例えば、アスコフィラム・ノドサム乾燥粉末の１０〜１００倍（質量比）の水を用いて行う。アスコフィラム・ノドサム乾燥粉末を加えた水を室温で１２〜２４時間撹拌すると、アスコフィランがアルギン酸等とともに水中に抽出される。必要ならば、水を新たに加え、１００℃でさらに１２〜２４時間抽出を行ってもよい。このようにして得られる粗抽出物は、他の多糖、タンパク質、炭水化物、脂質、灰分、ミネラル、色素、ポリフェノール等を含んでいる。これらは、いずれも人体および動物に対して何ら害を及ぼさないため、アスコフィラム・ノドサム抽出物を食品や飼料に添加する場合には、分離することなくそのまま用いてもよい。
【００２４】
＜アスコフィラン＞
予防及び治療用組成物の原料として用いることができる、純度の高いアスコフィランを得るためには、以下に述べるような方法で精製を行うことができる。抽出液に含まれるアルギン酸は、塩酸等を加えて抽出液のｐＨを低下させ、生成した沈殿をろ過することにより除去することができる。あるいは、アルギン酸リアーゼを添加し、アルギン酸のみを選択的に加水分解し、アルギン酸の加水分解物を透析により除去してもよい。抽出液にエタノールを添加すると得られる沈殿を水に溶解し、透析により脱塩した後凍結乾燥すると、ほぼ純粋なアスコフィランが得られる。さらに精製が必要な場合は、水−エタノールから再沈殿を行ってもよい。
【００２５】
硫酸基およびＤ−グルクロン酸基を含み、ポリアニオンであるアスコフィランは、水溶性で、肺炎球菌の感染予防及び肺炎球菌感染症の治療活性を阻害しない任意のカチオンと塩を形成していてもよい。そのようなカチオンの一例としては、ナトリウムイオン、カリウムイオン、マグネシウムイオン、カルシウムイオン、アンモニウムイオン等が挙げられる。
【００２６】
予防及び治療用組成物の有効成分として用いることのできるアスコフィランは、アスコフィラム・ノドサムより抽出され、Ｌ−フコースおよびＤ−キシロースの他にＤ−グルクロン酸を主な構成成分とする任意の硫酸化多糖であればよく、分子量等に特に制限はない。硫酸基含量およびウロン酸含量についても特に制限はないが、硫酸バリウムによる比濁法で測定された硫酸基含量が１８〜２２重量％であるものが好ましく、また、カルバゾール硫酸法で測定されたウロン酸含量が１８〜２２重量％であるものが好ましい。
【００２７】
＜予防及び治療用組成物＞
アスコフィラム・ノドサム又はそれに含有される１若しくは複数の化合物を、医薬として許容される担体等と混合することにより、予防及び治療用組成物の一例である医薬組成物として用いることができる。医薬組成物のヒトあるいは動物に対する投与形態としては、経口投与、非経口投与（例えば、静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、吸入投与）等が挙げられ、投与量は、医薬組成物の製剤形態、投与方法、使用目的およびこれに適用される投与対象の年齢、体重、症状によって適宜設定され一義的に決定することは困難であるが、マウス成体への経口投与の場合、一般には製剤中に含有される有効成分（アスコフィラム・ノドサム抽出物）の量で、好ましくは１日当り１００〜２０００ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは１日当り５００〜２０００ｍｇ／ｋｇである。投与回数及び間隔は、マウス成体への経口投与の場合、１日１回（２４時間間隔）である。もちろん投与量及び投与間隔は、種々の条件によって変動するので、上記投与量より少ない量で十分な場合もあるし、あるいは範囲を超えて必要な場合もある。
【００２８】
経口投与製剤として調製する場合は、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、コーティング剤、液剤、懸濁剤等の形態に調製することができ、非経口投与製剤にする場合には、注射剤、点滴剤、座薬等の形態に調製することができる。製剤化には、任意の公知の方法を用いることができる。例えば、アスコフィラム・ノドサム抽出物と、製薬学的に許容し得る担体または希釈剤、安定剤、およびその他の所望の添加剤を配合して、上記の所望の剤形とすることができる。
【００２９】
予防及び治療用組成物は、食品であってもよい。予防及び治療用組成物を含む食品としては、アスコフィラム・ノドサム抽出物をそのまま食品として調製したもの、他の食品に添加したもの、あるいは、カプセル、錠剤等、食品または健康食品に通常用いられる任意の形態をとることができる。食品中に配合して摂取あるいは投与する場合には、適宜、賦形剤、増量剤、結合剤、増粘剤、乳化剤、着色料、香料、食品添加物、調味料等と混合し、用途に応じて、粉末、顆粒、錠剤等の形に成形することができる。また、適宜、食品原料中に混合して食品を調製し、肺炎球菌の感染予防活性及び肺炎球菌感染症の治療活性を有する機能性食品として用いることができる。
【００３０】
予防及び治療用組成物は、飼料であってもよい。予防及び治療用組成物を含む飼料としては、アスコフィラム・ノドサム抽出物をそのまま調製したもの、あるいは飼料に配合したもの等、様々な形態をとることができる。飼料中に混合して、家畜などの動物に投与する場合には、予め飼料の原料中に混合して、機能性を付与した飼料として調製することができる。また、飼料に添加して投与することもできる。すなわち、アスコフィラム・ノドサム抽出物を有効成分として含む予防及び治療用組成物は、豚、鶏、牛、馬、羊等の家畜や、魚類、ペット（犬、猫、鳥）等の飼料に添加することにより、肺炎球菌の感染予防活性及び肺炎球菌感染症の治療活性を有する機能性飼料として用いることができる。
【００３１】
＜治療及び予防の対象となる肺炎＞
治療及び予防の対象となる肺炎は、各種病原体の感染を原因とする感染性肺炎であるが、後述するように、アスコフィラム・ノドサム抽出物は、肺炎感染モデル動物の肺胞内における肺炎球菌の増殖を抑制し、肺炎感染モデル動物の致死率を顕著に増大させる活性を有している。したがって、アスコフィラム・ノドサム抽出物は、肺炎球菌の感染の予防及び肺炎球菌感染性の肺炎の治療のための有効成分として用いることができる。
【実施例】
【００３２】
次に、本発明の作用効果を確認するために行った実施例について説明する。
実施例１：アスコフィラム・ノドサム抽出物の調製
アスコフィラム・ノドサムをクエン酸水で洗浄した後、熱水抽出（９０℃）を行った。次に、遠心分離とろ過によって不溶物を取り除いた後、中和した。その後、活性炭を添加し加熱（９０℃）した。ろ過により活性炭を除去し、ろ液を濃縮後、噴霧乾燥を行い、主な成分としてアスコフィランを含む、粉末のアスコフィラム・ノドサム抽出物（図１及び２において「アスコフィランＨＳ」と記載。）を得た。
【００３３】
実施例２：肺炎球菌を経鼻投与したマウスの肺内における肺炎球菌の増殖試験
マウス（ＣＢＡ／Ｊ  ５週齢）３０匹を（１）対照群、（２）アスコフィラム・ノドサム抽出物低用量群、（３）アスコフィラム・ノドサム抽出物高用量群の３群（各群１０匹ずつ）に分け、それぞれに、（１）水、（２）１６７ｍｇ／１ｋｇ／日のアスコフィラム・ノドサム抽出物、（３）５００ｍｇ／１ｋｇ／日のアスコフィラム・ノドサム抽出物を１日１回経口投与した。７日間の事前投与後、肺炎球菌（Streptococcus  pneumoniae）を経鼻投与し、その後４日間、アスコフィラム・ノドサム抽出物の投与を継続した。肺炎球菌の投与から４日後に、マウスの肺を摘出し、培地上で培養することにより、肺内に存在する肺炎球菌の生菌数を調べた。結果を表１及び図１に示す。表１における数値の単位はｌｏｇ１０ｃｆｕ（コロニー形成単位）である。
【００３４】
【表１】
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【００３５】
これらの結果より、アスコフィラム・ノドサム抽出物の用量依存的な、統計上有意な肺炎球菌の生菌数の減少が観測された。
【００３６】
実施例３：肺炎球菌を経鼻投与した肺炎モデルマウスにおける生存率の経時変化試験
マウス（ＣＢＡ／Ｊ  ５週齢）３０匹を（１）対照群、（２）アスコフィラム・ノドサム抽出物低用量群、（３）アスコフィラム・ノドサム抽出物高用量群の３群（各群１０匹ずつ）に分け、それぞれに、（１）水、（２）１６７ｍｇ／１ｋｇ／日のＣＢＡ／Ｊ  ５週齢、（３）５００ｍｇ／１ｋｇ／日のアスコフィラム・ノドサム抽出物を１日１回経口投与した。７日間の事前投与後、肺炎球菌（Streptococcus  pneumoniae）を経鼻投与し、その後１４日間、アスコフィラム・ノドサム抽出物の投与を継続した。併せて、肺炎球菌の経鼻投与の４日前及び１日後に、シクロホスファミドを腹腔内投与した。生存率の経時変化（日単位）を図２に示す。この結果から明らかなように、アスコフィラム・ノドサム抽出物の用量依存的に生存率の改善が観測され、特に、アスコフィラム・ノドサム抽出物高用量群については、１４日後の生存率が、対照群の２０％から１００％へと大幅に改善されていることが確認された。
【図１】
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【図２】
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