(57)【要約】      （修正有）【課題】脱毛防止または発毛促進用組成物の提供【解決手段】ソホロリピッドを有効成分として含有する脱毛防止または発毛促進用組成物。ソホロリピッドは、無毒性および生分解性の微生物由来の天然界面活性剤であり、環境にやさしく、ソホロリピッドを毛乳頭細胞に処理したとき、毛乳頭細胞の成長促進効果を示すのみならず、脱落毛髪本数を著しく減少させ、発毛促進効果を示すので、脱毛予防、脱毛改善、脱毛治療または発毛促進のための化粧料または皮膚外用剤として有用に使用できる発毛促進用化粧料組成物。【選択図】図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ソホロリピッド（ｓｏｐｈｏｒｏｌｉｐｉｄ）を有効成分として含有する脱毛防止または発毛促進用化粧料組成物。
【請求項２】
前記ソホロリピッドは、植物性油由来の脂肪酸を含有する培地で酵母を培養して生産されたソホロリピッドであることを特徴とする、請求項１に記載の脱毛防止または発毛促進用化粧料組成物。
【請求項３】
前記植物性油は、アルガン油、ツバキ油、ホホバ油、アボカド油、ヒマワリ種子油、菜種油、ココナッツオイル、パーム油、およびブドウ種子油の中から選択された一つ以上であることを特徴とする、請求項２に記載の脱毛防止または発毛促進用化粧料組成物。
【請求項４】
前記酵母は、カンジダ・ボンビコラ（Ｃａｎｄｉｄａ  ｂｏｍｂｉｃｏｌａ）、カンジダ・アピコラ（Ｃ．ａｐｉｃｏｌａ）、カンジダ・バチステ（Ｃ．ｂａｔｉｓｔａｅ）、ウィッカーハミーラ・ドメルキー（Ｗｉｃｋｅｒｈａｍｉｅｌｌａ  ｄｏｍｅｒｉｃｑｉａｅ）またはロドトルラ・ボゴリエンシス  （Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ  ｂｏｇｏｒｉｅｎｓｉｓ）であることを特徴とする、請求項２に記載の脱毛防止または発毛促進用化粧料組成物。
【請求項５】
前記酵母を培養して生産されたソホロリピッドは、酵母培養液から精製する、または精製しないソホロリピッドであることを特徴とする、請求項２に記載の脱毛防止または発毛促進用化粧料組成物。
【請求項６】
前記ソホロリピッドは、下記化学式１〜３で表されるソホロリピッドのいずれか一つ以上であることを特徴とする、請求項１に記載の脱毛防止または発毛促進用化粧料組成物。
【化１】
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（式中、Ｒ１およびＲ２はそれぞれアセチル基または水素基を示す。）
【化２】
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（式中、Ｒ１およびＲ２はそれぞれアセチル基または水素基を示す。）
【化３】
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（式中、Ｒ１およびＲ２はそれぞれアセチル基または水素基を示し、Ｒはメチル基またはエチル基を示す。）
【請求項７】
前記組成物は、毛乳頭細胞の成長を促進することを特徴とする、請求項１に記載の脱毛防止または発毛促進用化粧料組成物。
【請求項８】
前記組成物は、ヘアトニック、ヘアコンディショナー、ヘアエッセンス、ヘアローション、ヘア栄養ローション、ヘアシャンプー、ヘアリンス、ヘアトリートメント、ヘアクリーム、ヘア栄養クリーム、ヘアモイスチャークリーム、ヘアマッサージクリーム、ヘアワックス、ヘアエアロゾル、ヘアパック、ヘア栄養パック、ヘアソープ、ヘアクレンジングフォーム、毛髪乾燥剤、毛髪保存処理剤、毛髪染色剤、毛髪用ウェーブ剤、毛髪脱色剤、ヘアジェル、ヘアグレーズ、ヘアドレッシンガー、ヘアラッカー、ヘアモイスチャーライザー、ヘアムースまたはヘアスプレーの剤形で製造されることを特徴とする、請求項１に記載の脱毛防止または発毛促進用化粧料組成物。
【請求項９】
ソホロリピッド（ｓｏｐｈｏｒｏｌｉｐｉｄ）を有効成分として含有する脱毛防止または発毛促進用皮膚外用剤。
【請求項１０】
前記皮膚外用剤は、クリーム、ジェル、パッチ、軟膏、硬膏剤、ローション剤、液剤、乳濁液、パウダー剤またはスプレーの剤形で製造されることを特徴とする、請求項９に記載の脱毛防止または発毛促進用皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ソホロリピッドを有効成分として含有する脱毛防止または発毛促進用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
人体の毛髪は約１０万〜１５万本程度であり、それぞれの毛髪は互いに異なる毛周期を有し、成長期（ａｎａｇｅｎ）、退行期（ｃａｔａｇｅｎ）および休止期（ｔｅｌｏｇｅｎ）を繰り返して生成、成長および脱落するが、その結果、全体の毛髪の約１５％に該当する毛髪が休止期と退行期に置かれており、一日平均５０〜１００本の毛髪が正常に脱落して再生産される。このような毛髪の生長周期は約３〜６年のサイクルで繰り返される。一般的に、脱毛症とは、毛髪の周期の成長期（ａｎａｇｅｎ）に該当する期間が複数の原因によって短くなり退行期と休止期の毛髪の割合が相対的に多くなって、毛髪が脱落する数が平均値よりも多くなることをいい、原因としては、遺伝的アンドロゲンホルモンの作用、局所血流障害による栄養障害、自律神経系障害、自己免疫疾患、内分泌障害があるが、現在まで脱毛に関する明確な原因は明らかにされていない状態であり、前述した原因が複合的に作用して発生するものと知られている。毛髪が育つ毛根の根部分は毛球（ｈａｉｒ  ｂｕｌｂ）といい、その下の部分のへこんだ部分を毛乳頭という。毛乳頭は毛髪の発生において最も重要な部分であり、毛乳頭には血管や神経があり、すぐその上にある毛母細胞に栄養分を供給して毛髪の成長を促進するようになる。このような毛乳頭の数は生まれたときに決定されるが、毛乳頭がなくなりその数が減少すればするほど、毛髪の数も減少するようになる。
【０００３】
最近、食生活の変化、生活習慣の変化、社会環境による過剰なストレスの増加などで、異常な脱毛を誘発している人口が徐々に増加する傾向にあり、特に青年および壮年と女性の脱毛人口が増加している状況である。一方、髪の毛や体毛がある原因によって、通常よりも少ないか、ない状態を意味する脱毛は毛髪が休止期状態で抜ける一般的な脱毛現象（休止期脱毛、ｔｅｌｏｇｅｎ  ｅｆｆｌｕｖｉｕｍ）と異常な脱毛現象である成長期脱毛現象（ａｎａｇｅｎ  ｅｆｆｌｕｖｉｕｍ）とに区別することができるが、一般的に脱毛症とは、後者を指す。脱毛の形態には、円形脱毛症（ａｌｏｐｅｃｉａ  ａｒｅａｔａ）、早期脱毛症、女性脱毛症（ａｎｄｒｏｇｅｎ  ａｌｏｐｅｃｉａ  ｉｎ  ｗｏｍｅｎ）、梅毒性脱毛症、壮年性脱毛症（ｍａｌｅ  ｐａｔｔｅｒｎ  ｂａｌｄｎｅｓｓ）などがある。
【０００４】
男性の形質発現において、男性性衝動、骨格筋の増加、男性の外部生殖器の発達、陰嚢の成長、精子形成などはテストステロンが関与し、にきび、皮脂の増加、脱毛および前立腺肥大症などは、ジヒドロテストステロンが当該組織で関与するものとして知られている。そのうち男性ホルモン依存性疾患中の男性型脱毛は、美容を重視する現代社会の男性たちに深刻な精神的苦痛を与えているので、脱毛の機転を明らかにし、これを改善するための研究が活発に進められている。５α還元酵素（５α−ｒｅｄｕｃｔａｓｅ）は皮脂腺、毛包、前立腺または副睾丸などの男性ホルモン反応性組織に存在し、精巣で生合成される男性ホルモンであるテストステロン（ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ）を活性男性ホルモンであるジヒドロテストステロン（ｄｉｈｙｄｒｏｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ、ＤＨＴ）に転換させるのに関与する還元酵素であり、このような変換過程には、ＮＡＤＰＨが補助酵素として利用されるものと知られている。思春期以降に過量分泌されたジヒドロテストステロンは皮脂細胞（ｓｅｂｏｃｙｔｅ）で皮脂を過剰生成する主な原因物質として作用し、にきびおよび男性型脱毛を誘発する。特に、複数の毛包細胞でもテストステロンに比べジヒドロテストステロンがホルモン受容体にさらによく結合するため、脱毛を引き起こす原因を提供する。
【０００５】
そこで、ジヒドロテストステロンの生成を促進する５α還元酵素の活性および生成を抑制する物質を開発し、発毛剤または脱毛防止剤として利用するための研究が活発に行われている。男性型脱毛の治療のために、従来は、エストロゲンなどの女性ホルモンを利用してきたが、女性ホルモン剤などは、その効果に比べて、皮膚炎症の発生、ホルモン投与による副作用の発生などの報告があり、現在では使用を中止したり、非常に極微量を使用しているのが実情である。最近では、米国のメルク社から５α還元酵素の作用を阻害してジヒドロテストステロンの生成を抑制する薬剤であるフィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ、ｐｒｏｓｃａｒ）を合成し、これを経口投与用の発毛剤として市販しているが、高価であり、頭皮塗布用に製造して直接塗布した場合、効果が落ち経口投与によるその他の副作用が発生するなど、使用に制限があるのが実情である。また、発毛促進のために、今まで使用されている代表的な発毛促進用薬物としてアップジョン社（Ｕｐｊｏｈｎ  Ｃｏ．、Ｌｔｄ．）のミノキシジル（Ｍｉｎｏｘｉｄｉｌ）があるが、ミノキシジルは、抗高血圧剤として使用されていたもので、使用時の副作用として、体毛が増加することに着目して発毛促進剤化したもので、毛包が位置する頭皮の血流を増加させて発毛を促進するものである。しかし、ミノキシジルを発毛促進剤として長期間使用した場合、その効果が半減して化学的血管拡張作用による副作用で無力症、皮脂の増加などが報告されているなどの問題点を有している。
【０００６】
一方、ソホロリピッド（Ｓｏｐｈｏｒｏｌｉｐｉｄ）はカンジダ・ボンビコラ（Ｃａｎｄｉｄａ  ｂｏｍｂｉｃｏｌａ）、カンジダ・アピコラ（Ｃ．ａｐｉｃｏｌａ）、カンジダ・バチステ（Ｃ．ｂａｔｉｓｔａｅ）、ウィッカーハミーラ・ドメルキー（Ｗｉｃｋｅｒｈａｍｉｅｌｌａ  ｄｏｍｅｒｉｃｑｉａｅ）およびロドトルラ・ボゴリエンシス  （Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ  ｂｏｇｏｒｉｅｎｓｉｓ）のような、一部酵母種によって合成されるグリコリピッド（ｇｌｙｃｏｌｉｐｉｄ）形態の界面活性（ｓｕｒｆａｃｅ−ａｃｔｉｖｅ）物質である。ソホロリピッドの年間消費量は約１０００万トンと推算され、主に家庭用／洗濯用洗剤として使用されるが、化学製品、織物、食品、紙および化粧品産業でもいくつかの潜在的な適用性を有する。ソホロリピッドは、界面活性剤の特性だけでなく、プロピオニバクテリウム・アクネス（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ）およびコリネバクテリウム・キセロシス（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｘｅｒｏｓｉｓ）に対する抗菌活性と低細胞毒性を示すため、化粧品剤形において他の界面活性剤よりさらに良い乳化剤となる。また、ソホロリピッドの抗がん、真皮線維芽細胞（ｄｅｒｍａｌ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ）の代謝促進、フリーラジカルの除去、表皮層の剥離および美白のような様々な利点は、ソホロリピッドを化粧品および皮膚用医薬品（ｐｈａｒｍａｃｏｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ  ｐｒｏｄｕｃｔ）のための魅力的な成分にする。
【０００７】
一方、特許文献１はソホロリピッドを含む化粧料組成物を開示しており、特許文献２は抗炎症性ソホロリピッドの生産方法を開示している。しかしながら、本発明のソホロリピッドを有効成分として含有する脱毛防止または発毛促進用組成物については、まだ開示されたものはない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】韓国公開特許第２００４−００３３３７６号公報
【特許文献２】韓国登録特許第１１２５１８９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、前記のような要求によって導き出されたものであり、本発明ではソホロリピッドをヒト毛乳頭細胞（ｈｕｍａｎ  ｄｅｒｍａｌ  ｐａｐｉｌｌａ  ｃｅｌｌ、ｈＤＰＣ）に処理したとき、毛乳頭細胞の成長促進効果を示し、Ｃ５７ＢＬ／６マウスにソホロリピッドを経皮投与した場合、毛髪成長の促進効果を示した。また、臨床実験の結果、脱落毛髪数が著しく減少して発毛現象が肉眼で観察されることを確認することにより、本発明を完成した。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
前記課題を解決するために、本発明は、ソホロリピッド（ｓｏｐｈｏｒｏｌｉｐｉｄ）を有効成分として含有する脱毛防止または発毛促進用化粧料組成物を提供する。
【００１１】
また、本発明は、ソホロリピッド（ｓｏｐｈｏｒｏｌｉｐｉｄ）を有効成分として含有する脱毛防止または発毛促進用皮膚外用剤を提供する。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によると、ソホロリピッドは、無毒性および生分解性の微生物由来の天然界面活性剤であり、環境にやさしく、ソホロリピッドを毛乳頭細胞に処理したとき、毛乳頭細胞の成長促進効果を示すのみならず、臨床実験の結果、脱落毛髪数を著しく減少させ、発毛促進効果を示すので、脱毛予防、脱毛改善、脱毛治療または発毛促進のための化粧料または皮膚外用剤として有用に使用できる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】本発明のソホロリピッドをＣ５７ＢＬ／６マウスに経皮投与したとき、毛髪再成長効果を示す写真であり、ミノキシジルは、陽性対照群であり、ＳＬはソホロリピッドを意味し、ＳＨＭは市販されている脱毛防止シャンプーを意味する。
【図２】本発明のソホロリピッドをＣ５７ＢＬ／６マウスに経皮投与したとき、マウス毛包の形態学的変化を示した写真である。
【図３】本発明のソホロリピッドを含有する毛髪シャンプーおよび毛髪トニックを１３日（Ａ）、２８日（Ｂ）および６５日（Ｃ）の間使用した臨床結果を示した写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明の目的を達成するために、本発明は、ソホロリピッド（ｓｏｐｈｏｒｏｌｉｐｉｄ）を有効成分として含有する脱毛防止または発毛促進用化粧料組成物を提供する。
【００１５】
本発明の一実施例による脱毛防止または発毛促進用化粧料組成物において、前記ソホロリピッドは植物性油由来の脂肪酸を含有する培地で酵母を培養して生産されたソホロリピッドであってもよいが、これに限定されない。
【００１６】
また、前記植物性油は、アルガン油、ツバキ油、ホホバ油、アボカド油、ヒマワリ種子油、菜種油、ココナッツオイル、パーム油、およびブドウ種子油の中から選択された一つ以上のものであってもよいが、これに限定されない。
【００１７】
また、前記酵母は、カンジダ・ボンビコラ（Ｃａｎｄｉｄａ  ｂｏｍｂｉｃｏｌａ）、カンジダ・アピコラ（Ｃ．ａｐｉｃｏｌａ）、カンジダ・バチステ（Ｃ．ｂａｔｉｓｔａｅ）、ウィッカーハミーラ・ドメルキー（Ｗｉｃｋｅｒｈａｍｉｅｌｌａ  ｄｏｍｅｒｉｃｑｉａｅ）またはロドトルラ・ボゴリエンシス（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ  ｂｏｇｏｒｉｅｎｓｉｓ）であってもよく、好ましくはカンジダ・ボンビコラであってもよいが、これに限定されない。
【００１８】
また、前記酵母を培養して生産されたソホロリピッドは、酵母培養液から精製する、または精製しないソホロリピッドであってもよいが、これに限定されない。前記精製しないソホロリピッドは、ソホロリピッドを生産する酵母培養液を含んでもよい。
【００１９】
本発明のソホロリピッドは精製の有無にかかわらず、脱毛防止および発毛促進効果に対して同じ効果を示す。
【００２０】
前記ソホロリピッドは、下記化学式１〜３で表されるソホロリピッドのいずれか一つ以上であってもよいが、これに限定されない。
【００２１】
【化１】
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【００２２】
式中、Ｒ１およびＲ２はそれぞれアセチル基または水素基を示す。
【００２３】
【化２】
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【００２４】
式中、Ｒ１およびＲ２はそれぞれアセチル基または水素基を示す。
【００２５】
【化３】
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【００２６】
式中、Ｒ１およびＲ２はそれぞれアセチル基または水素基を示し、Ｒはメチル基またはエチル基を示す。
【００２７】
また、前記組成物は、毛乳頭細胞の成長を促進させるものであってもよいが、これに限定されない。
【００２８】
また、前記化粧料組成物は、ヘアトニック、ヘアコンディショナー、ヘアエッセンス、ヘアローション、ヘア栄養ローション、ヘアシャンプー、ヘアリンス、ヘアトリートメント、ヘアクリーム、ヘア栄養クリーム、ヘアモイスチャークリーム、ヘアマッサージクリーム、ヘアワックス、ヘアエアロゾル、ヘアパック、ヘア栄養パック、ヘアソープ、ヘアクレンジングフォーム、毛髪乾燥剤、毛髪保存処理剤、毛髪染色剤、毛髪用ウェーブ剤、毛髪脱色剤、ヘアジェル、ヘアグレーズ、ヘアドレッシンガー、ヘアラッカー、ヘアモイスチャーライザー、ヘアムースまたはヘアスプレーの剤形で製造されてもよいが、これに限定されない。
【００２９】
また、前記化粧料組成物は、本発明のソホロリピッドにさらに脂肪物質、有機溶媒、溶解剤、濃縮剤およびゲル化剤、軟化剤、抗酸化剤、懸濁化剤、安定化剤、発泡剤（ｆｏａｍｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、芳香剤、界面活性剤、水、イオン型または非イオン型乳化剤、充填剤、金属イオン封鎖剤およびキレート化剤、保存剤、ビタミン、遮断剤、湿潤化剤、エッセンシャルオイル、染料、顔料、親水性または親油性活性剤、脂質小胞または化粧品に通常に使用される任意の他の成分のような化粧品学分野で一般的に使用される補助剤を含有してもよい。
【００３０】
また、本発明は、ソホロリピッド（ｓｏｐｈｏｒｏｌｉｐｉｄ）を有効成分として含有する脱毛防止または発毛促進用皮膚外用剤を提供する。
【００３１】
本発明の脱毛防止または発毛促進用皮膚外用剤は、クリーム、ジェル、パッチ、軟膏、硬膏剤、ローション剤、液剤、乳濁液、パウダー剤またはスプレーの剤形で製造されてもよいが、これに限定されない。
【００３２】
本発明の剤形がクリームまたはジェルである場合には、担体成分として動物繊維、植物繊維、ワックス、パラフィン、デンプン、トラカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、シリカ、タルク、または酸化亜鉛などが利用されてもよい。
【００３３】
本発明の剤形がパウダーまたはスプレーである場合には、担体成分としてラクトース、タルク、シリカ、アルミニウムヒドロキシド、カルシウムシリケートまたはポリアミドパウダーが使用されてもよく、特にスプレーの場合には、さらにクロロフルオロハイドロカーボン、プロパン／ブタンまたはジメチルエーテルのような推進体を含んでもよい。
【００３４】
本発明の剤形が液剤または乳濁液の場合には、担体成分として溶媒、溶媒化剤または乳濁化剤が用いられ、例えば、水、エタノール、イソプロパノール、エチルカーボネート、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチルグリコールオイル、グリセロール脂肪族エステル、ポリエチレングリコールまたはソルビタンの脂肪酸エステルがある。
【００３５】
以下、実施例を用いて本発明をさらに詳細に説明する。これらの実施例は、ひたすら本発明をより具体的に説明するためのものであり、本発明の範囲がこれらによって限定されないことは、当該技術分野における通常の知識を有する者にとっては自明のことである。
【００３６】
製造例１．本発明のソホロリピッドの製造
１）植物性油の混合物を用いた脂肪酸（メチルエステル化）の製造
メチルエステル化された脂肪酸を製造するために、通常、当業界の一般的な製造工程によって炭素の長さが異なる脂肪酸でヒマワリ種子油、ツバキ油およびパーム油の混合物を使用し、前記混合物（１０ｇ）に５００ｍｌのメタノールおよび８．２ｍｌの硫酸を添加した後、滅菌器を用いて、１００℃および高圧状態（０．３ｋｇｆ／ｃｍ２）で２時間反応させ、その後メチルエステル化された脂肪酸だけを得るために、ヘキサンを添加して層を分離した後、回転蒸発器を用いて溶媒を除去して、メチルエステル化された基質を得た。
【００３７】
２）ココナッツオイルを用いた脂肪酸（メチルエステル化）の製造
メチルエステル化された脂肪酸を製造するために、脂肪酸としてココナッツオイルを使用し、ココナッツオイル（１０ｇ）に５００ｍｌのメタノールおよび８．２ｍｌの硫酸を添加した後、滅菌器を用いて、１００℃および高圧状態（０．３ｋｇｆ／ｃｍ２）で２時間反応させ、その後メチルエステル化された脂肪酸だけを得るために、ヘキサンを添加して層を分離した後、回転蒸発器を用いて溶媒を除去して、メチルエステル化された基質を得た。
【００３８】
３）ソホロリピッドの生産
カンジダ・ボンビコラ（Ｃａｎｄｉｄａ  ｂｏｍｂｉｃｏｌａ  ＡＴＣＣ２２２１４）酵母菌をＹＭ培地にて２５℃で２００ｒｐｍで１０日間振とう培養器（ｓｈａｋｉｎｇ  ｉｎｃｕｂａｔｏｒ）を用いて、前培養した。前記ヒマワリ種子油、ツバキ油、およびパーム油の混合物を用いて製造した脂肪酸（メチルエステル化形態）とココナッツオイルを用いて製造した脂肪酸（メチルエステル化形態）のそれぞれからソホロリピッドを生成するために、前記培養上清液１．５％（ｗ／ｖ）を１Ｌの酵母培養用培地が入った２．５Ｌのｊａｒ発酵器（Ｋｏｂｉｏｔｅｃｈ、Ｋｏｒｅａ）にそれぞれ接種した後、２５℃で５００ｒｐｍおよび好気性条件で１０日間培養した。前記酵母培養用培地の具体的な成分および含量は、下記表１に示した。
【００３９】
【表１】
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【００４０】
酵母菌の培養が終わった後、ヒマワリ種子油、ツバキ油、およびパーム油の混合物由来の脂肪酸を用いた酵母培養液とココナッツオイル由来の脂肪酸を用いた酵母培養液をそれぞれ酢酸エチルで３回繰り返し抽出し、還流蒸発装置（ｒｏｔａｒｙ  ｖａｃｃｕｍ  ｅｖａｐｏｒａｔｏｒ）を用いて、抽出に使用された酢酸エチルを除去して、それぞれの未精製のソホロリピッドを得た（下記表２の１番および２番サンプル）。前記未精製のココナッツオイルを用いて抽出したソホロリピッドに再びヘキサンを添加して残留オイルを除去し、クロロホルムで溶液中のソホロリピッドを抽出して、最終的に精製されたソホロリピッドを得た（下記表２の３番サンプル）。
【００４１】
実施例１．本発明のソホロリピッド処理によるヒト毛乳頭細胞の成長促進効果
前記製造例１で製造したヒマワリ種子油、ツバキ油、およびパーム油の混合物由来の脂肪酸を用いて培養した酵母培養液から抽出して精製しないソホロリピッドおよびココナッツオイル由来の脂肪酸を用いて培養した酵母培養液から抽出して精製しないソホロリピッドおよび精製したソホロリピッドをそれぞれ培養されたヒト毛乳頭細胞（ｈｕｍａｎ  ｄｅｒｍａｌ  ｐａｐｉｌｌａ  ｃｅｌｌ、ｈＤＰＣ）に４８時間処理した後、ＷＳＴ−１分析（ｗａｔｅｒ−ｓｏｌｕｂｌｅ  ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ  ｓａｌｔ−１  ａｓｓａｙ）を用いて、細胞の成長を測定した。正常群はヒト毛乳頭細胞に何も処理しないことを意味し、陽性対照群には現在の脱毛防止および毛髪生長効能が実証されて市販されているミノキシジル成分を使用した。その結果、表２に開示したように、精製したソホロリピッド（３番サンプル）と未精製のソホロリピッド（１番および２番サンプル）のすべてが正常群に比べて細胞成長促進効果を示し、陽性対照群であるミノキシジルよりも優れた効果を示し、２番サンプルを下記の実施例２および３に使用した。
【００４２】
【表２】
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【００４３】
１番サンプル：前記製造例１でヒマワリ種子油、ツバキ油、およびパーム油の混合物由来の脂肪酸を用いて培養した酵母培養液から抽出して精製しないソホロリピッド。
【００４４】
２番サンプル：前記製造例１でココナッツオイル由来の脂肪酸を用いて培養した酵母培養液から抽出して精製しないソホロリピッド。
【００４５】
３番サンプル：前記製造例１でココナッツオイル由来の脂肪酸を用いて培養した酵母培養液から抽出して精製したソホロリピッド。
【００４６】
実施例２．本発明のソホロリピッドの毛髪成長効果に対する動物モデル実験
本発明のソホロリピッドの脱毛症状の改善効果を確認するために、動物モデルとして多く使用される自発的脱毛の遺伝的特性を有する６週齢の雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスを用いた。雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスを対象に、エレクトリッククリッパーカット（ｅｌｅｃｔｒｉｃ  ｃｌｉｐｐｅｒ  ｃｕｔ）を用いて、１次除毛後、シェービングフォーム（ｓｈａｖｉｎｇ  ｆｏｒｍ）を塗って、かみそりの刃（ｓｈａｖｉｎｇ  ｒａｚｏｒ）を用いて、横に背面頸部から尾起始部までの長さと縦に背面正中線を基準として左右それぞれ１ｃｍ以上の幅に対して２次除毛を実施して背面皮膚色が均質なピンク色に見える個体のみを選別して、実験に使用した。除毛部位に筆を当てた後、試験物質２００μｌをマイクロピペット（ｍｉｃｒｏｐｉｐｅｔｔｅ）を用いて、筆先に分注した後、上下方向に除毛全体に均質に、１日１回、２１日間塗布した。ソホロリピッドは塗布後１〜２分間放置した後、水でシャンプーし、紙タオルで水気を除去した。
【００４７】
すべての実験の結果は、平均値±標準偏差で表示して、すべてのデータについて分散の同質性の比較分析は、テューキー検定（Ｔｕｒｋｅｙ  ｔｅｓｔ）およびＡＮＯＶＡ（ｏｎｅ−ｗａｙ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｖａｒｉａｎｃｅ）を実施し、正常群との有意的差異がある実験群に対してダネットの検証（Ｄｕｎｎｅｔｔ’ｓ  ｔ−ｔｅｓｔ）を実施した。
【００４８】
（１）養毛面積の分析
本発明のソホロリピッドを雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスに経皮投与した後、０、７、１４、および２１日目の合計４回にわたって経時的な毛髪成長周期（ｈａｉｒ  ｇｒｏｗｔｈ  ｃｙｃｌｅ）の変化を肉眼で確認した。その結果、下記表３および図１に開示したように、初期７日から毛が尾側などの部位と首側などの部位に毛髪の成長を示し、１４日から何も処理しない正常群に比べて、陽性対照群であるミノキシジルを処理したとき、試験物質の中で最も早い毛髪再成長効果を示したが、２１日目に０．４％および０．８％ソホロリピッドを処理した場合にも、陽性対照群と同様の効果を示した。
【００４９】
【表３】
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【００５０】
単位はパーセント（％）であり、ＳＬはソホロリピッドであり、ＳＨＭは市販されている脱毛防止シャンプーである。
【００５１】
（２）組織病理学的分析
雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスの毛包の形態学的な変化を確認するために、経皮投与２１日目に採取した皮膚組織をヘマトキシリン・エオシン（ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ−ｅｏｓｉｎ）で染色して光学顕微鏡で観察した。この結果、図２に開示したように、何も処理しない正常群において除毛後１４日目に毛包が形成されたが、他の実験群に比べて上皮組織層で多く育たなかった状態であり、それ以降になってようやく毛根が成長し、皮膚の外に突出してくることが確認できた。一方、本発明のソホロリピッドを処理したとき、１４日目に正常群に比べて、皮膚の厚さが厚く、毛包の数が増加し、毛包組織の長さが長くなって皮毛が皮膚の表面に育ってきたことを確認することができ、陽性対照群と同様の効果を示した。
【００５２】
また、２１日目に皮膚組織の休止期にある毛包の数を測定した結果、正常群（６．８±０．８）に比べて、本発明の０．４％ＳＬ処理群（７．８±０．８）および０．８％ＳＬ処理群（８．８±２．８）で多く、陽性対照群と同様の結果を示した。これは０．４％および０．８％ＳＬ処理によって毛髪成長周期（ｈａｉｒ  ｇｒｏｗｔｈ  ｃｙｃｌｅ）を早めるものと判断される（表４）。
【００５３】
【表４】
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【００５４】
実施例３．本発明のソホロリピッド処理による脱毛防止および発毛促進効果に対する臨床試験
本実施例３では、優れた毛髪成長効果を示した０．８％のソホロリピッドを含有する化粧料組成物を毛髪シャンプーおよび毛髪トニック剤形で製造して脱毛防止および発毛促進効果を臨床で確認した。試験対象者は、円形脱毛症および男性型脱毛症を示す４０歳以上の成人男女１０人を対象に実施し、０．８％のソホロリピッドを含有する毛髪シャンプーを３ｍｌで、１日１回１分間毛髪および頭皮をマッサージして約２分間放置した後すすぎ、完全に乾燥して、０．８％のソホロリピッドを含有する１ｍｌの毛髪トニックを毛髪にまんべんなく噴射した。シャンプーの使用前に脱毛状態を写真撮影し、使用日から１週間の間隔で２ヶ月の間に同一の部位を写真撮影して脱毛の進行および発毛状態を肉眼で比較してソホロリピッドの効果を確認した。その結果、図３に開示したように、本発明の０．８％のソホロリピッドを含有する毛髪シャンプーおよび毛髪トニックを使用した後、使用前の脱落した毛髪の数が１０９本から徐々に減少して２ヶ月使用後、平均３０本程度に著しく減少し、発毛促進効果を肉眼で確認できた。  
【図１】
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【図２】
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【図３】
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