(57)【要約】【課題】吸入ガスの人体に対する効能を簡便に検証することのできる吸入ガスの効能検証方法を提供すること。【解決手段】吸入ガスの効能検証方法は、一次唾液採取ステップと、二次唾液採取ステップと、濃度検査ステップと、判定ステップとを有する。一次唾液採取ステップは、吸入ガスを吸入させる前の被験者の唾液を採取し、二次唾液採取ステップは、吸入ガスを吸入させた後、遅くとも３０分以内に被験者の唾液を採取する早期唾液採取ステップを含む。濃度検査ステップは、一次唾液採取ステップおよび二次唾液採取ステップで採取した各唾液中のインターロイキン−1βの濃度を検査する。判定ステップは、一次唾液採取ステップおよび二次唾液採取ステップでそれぞれ採取した唾液における第１インターロイキン1β濃度と第２インターロイキン1β濃度とを比較し、比較結果に基づき吸入ガスによる免疫能の活性化を判定する。【選択図】図１
2018025405.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体バイオマーカーの動態を解析することにより、吸入ガスの人体への効能を検証する吸入ガスの効能検証方法であって、
前記吸入ガスを吸入させる前の被験者の唾液を採取する一次唾液採取ステップと、
前記吸入ガスを吸入させた後の前記被験者の唾液を採取する二次唾液採取ステップと、
前記一次唾液採取ステップおよび前記二次唾液採取ステップで採取した各唾液中のインターロイキン−1βの濃度を検査する濃度検査ステップと、
前記一次唾液採取ステップで採取した前記唾液における第１インターロイキン1β濃度と、前記二次唾液採取ステップで採取した前記唾液における第２インターロイキン1β濃度とを比較し、比較結果に基づき吸入ガスによる免疫能の活性化を判定する判定ステップと、
を有し、
前記二次唾液採取ステップは、前記被験者に前記吸入ガスを吸入させた後、遅くとも３０分以内に実行される早期唾液採取ステップを含む
ことを特徴とする吸入ガスの効能検証方法。
【請求項２】
前記早期唾液採取ステップは、前記被験者に前記吸入ガスを吸入させた後、１０〜２０分の間に実行される
ことを特徴とする請求項１に記載の吸入ガスの効能検証方法。
【請求項３】
前記吸入ガスは、
原水を加熱して発生させた過熱蒸気をさらに加熱して生成した水素ガスを含む蒸気混合ガスであり、当該蒸気混合ガスに含まれる前記水素ガスの濃度が４．２Ｖｏｌ％未満である
ことを特徴とする請求項１または２に記載の吸入ガスの効能検証方法。
【請求項４】
前記水素ガスの濃度は、０．１〜０．３Ｖｏｌ％である
ことを特徴とする請求項３に記載の吸入ガスの効能検証方法。
【請求項５】
前記濃度検査ステップでは、酵素抗体法を用いて前記インターロイキン−1βの濃度を検査する
ことを特徴とする請求項１〜４のいずれか一つに記載の吸入ガスの効能検証方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
開示の実施形態は、吸入ガスの効能検証方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、水素を人体内に取り込むことは、病変や機能障害を引き起こす原因となるとされる活性酸素種を除去するのに有効であるとされていた。そこで、飽和蒸気から水素ガスを発生させ、この水素ガスを吸入ガスとして人体内に取り込むことを可能にする水素ガス発生装置が提案された（例えば、特許文献１を参照）。
【０００３】
また、近年では、例えば水素ガスを含む蒸気混合ガスに対し、生体の免疫力を高めることや、動脈硬化や急性心筋梗塞の発症を抑制する効能が期待されており、その検証も行われてきている。
【０００４】
検証に際しては、吸入ガスの吸入前後で生体内バイオマーカーの動態がどのように変化するかについて検査するのであるが、かかる検査に際しては、被験者から採取した血液から分離回収した血清を用いることが一般的であった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２０１５／０４５１１８号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、採血に関しては、医師などの指導の下、所定の医療施設にて行う必要があるため、吸入ガスの人体に対する効能を検証するには、多くの時間と手間がかかっていた。
【０００７】
実施形態の一態様は、上記に鑑みてなされたものであって、吸入ガスの人体に対する効能を簡便に検証することのできる吸入ガスの効能検証方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
（１）実施形態の一態様に係る吸入ガスの効能検証方法は、生体バイオマーカーの動態を解析することにより、吸入ガスの人体への効能を検証する方法であって、一次唾液採取ステップと、二次唾液採取ステップと、濃度検査ステップと、判定ステップとを有する。前記一次唾液採取ステップは、前記吸入ガスを吸入させる前の被験者の唾液を採取し、前記二次唾液採取ステップは、前記吸入ガスを吸入させた後の前記被験者の唾液を採取する。前記濃度検査ステップは、前記一次唾液採取ステップおよび前記二次唾液採取ステップで採取した各唾液中のインターロイキン−1βの濃度を検査する。前記判定ステップは、前記一次唾液採取ステップで採取した前記唾液における第１インターロイキン1β濃度と、前記二次唾液採取ステップで採取した前記唾液における第２インターロイキン1β濃度とを比較し、比較結果に基づき吸入ガスによる免疫能の活性化を判定する。そして、前記二次唾液採取ステップは、前記被験者に前記吸入ガスを吸入させた後、遅くとも３０分以内に実行される早期唾液採取ステップを含む。
【０００９】
（２）また、実施形態の一態様に係る吸入ガスの効能検証方法は、上記（１）において、前記早期唾液採取ステップは、前記被験者に前記吸入ガスを吸入させた後、１０〜２０分の間に実行されることを特徴とする。
【００１０】
（３）また、実施形態の一態様に係る吸入ガスの効能検証方法は、上記（１）または（２）において、前記吸入ガスは、原水を加熱して発生させた過熱蒸気をさらに加熱して生成した水素ガスを含む蒸気混合ガスであり、当該蒸気混合ガスに含まれる前記水素ガスの濃度が４．２Ｖｏｌ％未満であることを特徴とする。
【００１１】
（４）また、実施形態の一態様に係る吸入ガスの効能検証方法は、上記（３）において、前記水素ガスの濃度は、０．１〜０．３Ｖｏｌ％であることを特徴とする。
【００１２】
（５）また、実施形態の一態様に係る吸入ガスの効能検証方法は、上記（１）〜（４）のいずれか一つの構成において、前記濃度検査ステップでは、酵素抗体法を用いて前記インターロイキン−1βの濃度を検査することを特徴とする。
【発明の効果】
【００１３】
実施形態の一態様によれば、規制の厳しい採血などを行うことなく、水素ガスや水素ガスが含まれる吸入ガスの人体に対する効能を簡便に検証することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１は、実施形態に係る吸入ガスの効能検証方法の手順を示す説明図である。
【図２】図２は、同上の吸入ガスの効能検証方法に用いられる水素ガス発生装置の使用状態を示す説明図である。
【図３】図３は、同上の水素ガス発生装置の一構成例を示す説明図である。
【図４】図４は、実施形態における吸入ガスが唾液中のインターロイキン−1βに与える影響および期待される効能を表す説明図である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
以下、本願の開示する吸入ガスの効能検証方法について、実施形態を通して詳細に説明する。なお、以下に示す実施形態によりこの発明が限定されるものではない。
【００１６】
図１は、実施形態に係る吸入ガスの効能検証方法の手順を示す説明図である。図２は、同上の吸入ガスの効能検証方法に用いられる水素ガス発生装置１０の使用状態を示す説明図、図３は、同上の水素ガス発生装置１０の一構成例を示す説明図である。また、図４は、実施形態における吸入ガスが唾液中のインターロイキン−1βに与える影響および期待される効能を表す説明図である。
【００１７】
ところで、本実施形態における吸入ガスは、原水を加熱して発生させた過熱蒸気をさらに加熱して生成した水素ガスを含む蒸気混合ガスを指す。かかる蒸気混合ガスに含まれる水素ガスの濃度は、４．２Ｖｏｌ％未満としており、より詳しくは、水素ガスの濃度を０．１〜０．３Ｖｏｌ％としている。
【００１８】
かかる蒸気混合ガスは、図２および図３に示す水素発生装置１０により生成することができる。
【００１９】
すなわち、水素ガス発生装置１０は、水素ガス（Ｈ2）が含まれる蒸気混合ガスを生成し、これを適切な濃度にして人体内に取り込み可能としたものであって、図２に示すように、被験者を含む使用者Ｄは、ケーシング１１から伸延するガス吸入管１４の先端を鼻や口に装着して、生成された水素ガスが適切な濃度で含まれる蒸気混合ガスを吸引することができる。
【００２０】
また、矩形箱状に形成されたケーシング１１の一側周壁には前部点検口を覆う扉１３が開閉自在に取付けられるとともに、底部にはキャスタ１２が取付けられている。
【００２１】
また、図３に示すように、ケーシング１１の内部には、給水部２と、過熱蒸気加熱部３と、ガス取出部５と、冷却部６とが設けられている。そして、給水部２から供給された原水を過熱蒸気加熱部３により加熱して蒸気を生成するとともに、その蒸気をさらに加熱して過熱蒸気を生成し、さらなる加熱によって水素ガスを含む蒸気混合ガスを生成することができる。
【００２２】
次いで、蒸気混合ガスと過熱蒸気とを含む混合流体から気液分離し、分離された蒸気混合ガスを冷却部６によって人体に吸引可能な温度まで低下させてガス取出部５から取り出し、蒸気混合ガスに含まれる水素ガスを吸入可能としている。
【００２３】
給水部２は、図３に示すように、原水を貯留する給水タンク２１と、過熱蒸気加熱部３に供給される原水の液面を調整する調整タンク２２とを備える。給水タンク２１内には、原水の水量を検出するレベルスイッチ（不図示）が配設され、調整タンク２２には、給水レベル計（不図示）が設けられる。
【００２４】
かかる給水タンク２１と調整タンク２２とを、電磁弁２３を介して給水管４０により連通している。電磁弁２３の開閉動作は、給水レベル計の値に応じて、ケーシング１１内に設けられた図示しない制御ユニットにより制御される。
【００２５】
過熱蒸気加熱部３は、調整タンク２２からの原水が流入する加熱パイプ３１と、その略全長に亘って周りを巻回するコイルヒータ７とを加熱装置として備える。すなわち、過熱蒸気加熱部３は、給水部２より連通管５０を介して加熱パイプ３１に供給された原水をコイルヒータ７で加熱して過熱蒸気を発生させ、この過熱蒸気をさらに６００℃〜７００℃まで加熱して、水素ガス（Ｈ2）が１．２〜２．３％程度含まれる蒸気混合ガスを生成する。なお、コイルヒータ７の周りは所定の厚みを有する断熱材３２で被覆される。
【００２６】
加熱パイプ３１に供給される原水の量は、調整タンク２２によって一定に保たれる。すなわち、調整タンク２２における液面と加熱パイプ３１内の液面は同レベルとなる。なお、加熱パイプ３１内の液面よりも上部は蒸気が発生する空間であり、かかる空間内の蒸気がさらに加熱されることで過熱蒸気となり、これをさらに高温加熱することで、常圧下であっても低濃度（例えば１．２〜２．３％）の水素ガス（Ｈ2）が含まれる蒸気混合ガスが発生する。したがって、加熱パイプ３１の内部には、蒸気混合ガスと過熱蒸気とが高温状態で混在することになる。
【００２７】
ガス取出部５は、図３に示すように、放熱管８０と、ガス送出ケース８と、ガス吸入管１４とを備える。すなわち、一端が加熱パイプ３１の上部に連通する放熱管８０の他端にガス送出ケース８が接続され、このガス送出ケース８にガス吸入管１４が連通する。
【００２８】
ガス送出ケース８には、送気ファン（不図示）が収納される。この送気ファンの作動により、水素ガスを含む蒸気混合ガスが、ガス吸入管１４（例えばカニューレ）から円滑に系外へと送り出される。
【００２９】
ところで、ガス取出部５の一部を構成する放熱管８０は、コイル状に構成して放熱しやすくしており、冷却部６の一部を構成する。すなわち、冷却部６は、ガス取出部５に含まれるとも言える。かかる冷却部６は、放熱管８０と、放熱管８０に向けて送風できるように配設された冷却ファン６２とを備える。
【００３０】
上述した構成により、給水タンク２１から過熱蒸気加熱部３の加熱パイプ３１に供給された原水は、コイルヒータ７により加熱され、沸騰して蒸気となる。そして、かかる蒸気がコイルヒータ７によりさらに加熱されて過熱蒸気となり、さらに、大気圧下で温度が６００℃〜７００℃に達すると、低濃度ではあるが、酸素と分離した水素ガスが含まれる蒸気混合ガスが生成される。
【００３１】
こうして、水素ガスを含む蒸気混合ガスを、ガス吸入管１４を介して人体に供給することができる（図２参照）。本水素ガス発生装置１０を用いる場合、水素ガスのみならず酸素ガスも人体に取り込まれるが、蒸気混合ガスに含まれる水素ガスの濃度は、４．２Ｖｏｌ％未満である。また、蒸気混合ガスは、冷却部６によって、十分に冷却されているため（例えば２０〜２５℃程度）、容易かつ安全に吸引することができる。
【００３２】
上述の水素発生装置１０により生成される本実施形態に係る吸入ガス、すなわち、濃度が０．１〜０．３Ｖｏｌ％の水素ガスを含む蒸気混合ガスは、人体に対して生体免疫機能の活性化作用を奏すると考えられている。
【００３３】
ところで、免疫反応に関与するサイトカインの一つ、すなわち、免疫システムの細胞から分泌されるタンパク質の一つとして、インターロイキン−１β（以下、「ＩＬ−１β」と表記する）がある。
【００３４】
ＩＬ−１βは、主に、白血球の中で最も大きい単球や、かかる単球から分化するマクロファージ（組織球とも呼ばれる）から産出される糖タンパク質であり、分子量は約１７ＫＤａ（ダルトン）である。
【００３５】
かかるＩＬ−１βによる免疫反応の誘導は、自然免疫系活性化における重要な機能である。他方、ＩＬ−１βは、獲得免疫系においても免疫原性（免疫源性）を増強するアジュバンド作用を有することが知られている。
【００３６】
また、ＩＬ−１βの生理活性は極めて多彩であり、獲得免疫の中心となるＴ細胞、リンパ球の２０〜３０％を占める抗体産生細胞であるＢ細胞、また、自然免疫の主用因子として働く細胞傷害性リンパ球の一種であるＮＫ細胞、さらには、白血球の接着・通過を制御する血管内皮細胞を活性化することが知られている。
【００３７】
また、ＩＬ−１βは、白血球の一種である好中球増加、細胞接着を担う接着分子の発現促進に加え、ＩＬ−１〜ＩＬ−８、サイトカインの一種である腫瘍壊死因子（ＴＮＦ：Tumor  Necrosis  Factor）やインターフェロン（ＩＦＮ：Interferon）、および、リンパ球以外の白血球系幹細胞を刺激して成長を促進させる作用を有するコロニー刺激因子（ＣＳＦ：Colony  Stimulating  Factor）の誘導が知られている。
【００３８】
さらに、ＩＬ−１βは、白血球の一種であるマクロファージからの一酸化窒素（Ｎ０）産出の誘導なども知られている。なお、一酸化窒素は、血管内皮細胞から産出され、血管内皮機能を調節する。
【００３９】
特に、ＩＬ−１βの免疫系における最も重要な機能は、Ｂ細胞が抗体産生細胞へ分化することを補助するヘルパーＴ細胞からのインターロイキン２（以下「ＩＬ−２」と表記する）産出の誘導であり、さらには、かかるＩＬ−２を介してＴ細胞の分化・増殖を促進し、生体防御能、特に感染防御能を発動させることであると言われている。
【００４０】
このように、ＩＬ−１βは、自然免疫系活性化における重要な機能を有するものであり、かかるＩＬ−１βを生体バイオマーカーとして、その動態を解析することにより、例えば、前述した水素発生装置１０（図２および図３を参照）で生成される吸入ガスの効能を検証することが可能であると考えられる。なお、ここで、生体バイオマーカーとは、所定の疾病の存在や進行度をその濃度に応じて反映するタンパク質などの物質を指す。
【００４１】
そこで、０．１〜０．３Ｖｏｌ％濃度の水素ガスを含む蒸気混合ガスからなる吸入ガスの人体に対する効能について検証することとした。
【００４２】
本実施形態に係る吸入ガスの効能検証方法は、生体バイオマーカーとして、ＩＬ−１βの動態を解析することにより、水素ガスが含まれる吸入ガスの人体への効能を検証する方法であって、図１に示すように、一次唾液採取ステップＳ１１と、吸入ステップＳ１２と、二次唾液採取ステップＳ１３と、濃度検査ステップＳ１４と、判定ステップＳ１５とを有する。
【００４３】
すなわち、一次唾液採取ステップＳ１１として、先ず、吸入ガスを吸入する前の被験者の唾液を採取する。
【００４４】
次いで、吸入ステップＳ１２として、水素発生装置１０（図２および図３を参照）を用い、この水素発生装置１０で生成される吸入ガスを吸入させる。ここでは、被験者に６０分間吸入させることとした。
【００４５】
次に、二次唾液採取ステップＳ１３として、水素ガスを含む蒸気混合ガスである吸入ガスを吸入させた後、所定時間ごとに被験者から唾液を採取する。この二次唾液採取ステップには、吸入ガスを吸入させた後、１５分後に唾液を採取する早期唾液採取ステップＳ１３１と、３０分後に唾液を採取する中期唾液採取ステップＳ１３２と、６０分後に唾液を採取する後期唾液採取ステップＳ１３３とが含まれる。
【００４６】
二次唾液採取ステップＳ１３の早期唾液採取ステップＳ１３１は、被験者に吸入ガスを吸入させた後、遅くとも３０分以内に実行されることとしている。ここでは、ガス吸入後１５分に実行した。
【００４７】
そして、濃度検査ステップＳ１４として、二次唾液採取ステップＳ１３における各ステップＳ１３１，Ｓ１３２，Ｓ１３３で採取した唾液中のＩＬ−１βの濃度を検査する。ここで、濃度検査ステップＳ１４におけるＩＬ−１βの濃度の検査は、酵素抗体法（ＥＩＡ法：Enzyme  Immunoassay）を用いて行うこととした。
【００４８】
さらに、判定ステップＳ１５として、早期唾液採取ステップＳ１３１、中期唾液採取ステップＳ１３２、および後期唾液採取ステップＳ１３３で採取した唾液中のＩＬ−１βの濃度の検査結果から、吸入ガスにおける免疫能の活性化を判定する。
【００４９】
本実施形態では、上述の方法を用いて、吸入ガスの効能に関する検証を９人の被験者に対して行った。表１に、本実施形態に係る濃度検査ステップＳ１４における検査結果を示す。
【００５０】
【表１】
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【００５１】
表１から明らかなように、０．１〜０．３Ｖｏｌ％濃度の水素ガスを含む蒸気混合ガスである吸入ガスを吸引した場合、ＩＬ−１βの濃度は、ガス吸入後は遍く増加している。しかも、吸入から１５分後には、すべての被験者においてＩＬ−１βの濃度が増加していることが分かった。なお、表中、升目に「−」と記されているのは完全な検査ができず、ＩＬ−１βの濃度が検出されていないことを示す。
【００５２】
なお、吸引ガスを吸引後のＩＬ−１βの濃度が、吸入前に比べて有意に増加したことを表すｐ値は、吸入１５分後では０．００１８（ｐ＜０．０１）であり、吸入３０分後では０．０１２（ｐ＜０．０５）であった。
【００５３】
前述したように、ＩＬ−１βの濃度の増加は、自然免疫系、さらには獲得免疫系の活性化を意味するものである。したがって、濃度が０．１〜０．３Ｖｏｌ％の水素ガスを含む蒸気混合ガスを吸入した場合、生体免疫機能の活性化作用が生起されると考えられる。
【００５４】
すなわち、図４に示すように、本実施形態に係る吸入ガスとして、水素発生装置１０により生成されるところの、濃度が０．１〜０．３Ｖｏｌ％の水素ガスを含む蒸気混合ガスを吸入した場合、唾液中の、ＩＬ−１βの濃度が増加し、適度な局所免疫反応の誘導がなされると考えらえる。
【００５５】
その結果、生体免疫機能の活性化作用が生起され、生体免疫機能の調節誘導、感染防御免疫の増強、癌（腫瘍）免疫の増強が期待されると考えられる。
【００５６】
しかも、本実施形態に係る吸入ガスの効能検証方法では、被験者から採取した血液を用いるのではなく、被験者から採取した唾液を用い、その唾液中のＩＬ−１βを生体バイオマーカーとして、その濃度の動態を解析するようにしている。そのため、吸入ガスの吸入後、わずか１５分であっても有意な濃度変化が確認された。したがって、医師などの指導の下、所定の医療施設にて行う必要がある採血を行う場合に比べ、きわめて簡便に吸入ガスの人体への効能を検証することができる。
【００５７】
ここで、ＩＬ−１βをバイオマーカーとすることの優位性を確認するために、比較例として、他のバイオマーカーを用い、７人の被験者に対して吸入ガスの効能を検証した。
【００５８】
表２は、吸入ガスの効能検証方法において、比較例として、ＩＬ−１βに代えて唾液中のｓＣＤ４４の濃度を検査した結果を示す。
【００５９】
【表２】
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【００６０】
比較例として採用したｓＣＤ４４について、以下に簡単に説明する。
【００６１】
ＣＤ４４には多数のアイソフォームが存在し、白血球、赤血球、上皮細胞、線維芽細胞など、生体の細胞に広く分布する。また、ＣＤ４４は、リンパ球・顆粒球などの造血系細胞以外にも組織マクロファージ、線維芽細胞などに発現している。
【００６２】
ＣＤ４４は、膜型コラーゲンとも呼ばれるタイプＩＶコラーゲン、巨大な糖タンパク質で細胞接着分子であるファイブロネクチン、ヒアルロン酸への接着がその基本的機能である標準型（ＣＤ４４ｖ）、上皮細胞、マクロファージ、白血病細胞、血管内皮細胞、特に炎症部位やリンパ節の内皮細胞に高発現する上皮型（ＣＤ４４E）、さらには、血清・血漿および関節滑液中に認められる可溶性型（ｓＣＤ４４）がある。
【００６３】
上述した中で、特に可溶性ＣＤ４４であるｓＣＤ４４は、活動期の関節リウマチ患者の滑液や悪性腫瘍患者の血清中で極めて高値を示すことがあり、炎症の強度、疾患活動性、腫瘍の悪性度・転移性に相関する。循環血中や組織液中のｓＣＤ４４の動態解析は、炎症反応および炎症性病態の疾患活動性の生体バイオマーカーとなるとされている。
【００６４】
比較例においても、先ず、吸入ガスを吸入する前の被験者の唾液を採取し、次いで、水素発生装置１０（図２および図３を参照）で生成される吸入ガスを吸入させ、その後、１５分後、３０分後、６０分後に唾液を採取する。そして、ここでは、採取した唾液中のｓＣＤ４４の濃度を、オリジナル構築酵素抗体法で検査した。
【００６５】
表２に示すように、この例では、ガス吸入前と吸入後とで、唾液中のｓＣＤ４４の濃度は有意な変化は認められない。なお、この場合のｐ値は、吸入１５分後では０．１１６９であり、吸入３０分後では０．２３１５であることから、吸引ガスの吸引前後でのｓＣＤ４４の濃度の変化には有意性がないと認められる。
【００６６】
このように、濃度が０．１〜０．３Ｖｏｌ％の水素ガスを含む蒸気混合ガスは、これを吸引しても唾液中のｓＣＤ４４の動態には特に影響を与えるものではないことが分かる。
【００６７】
他の比較例として、特異的ＩｇＡ抗体をバイオマーカーとして、９人の被験者に対して吸入ガスの効能を検証した。
【００６８】
表３は、他の比較例として、吸入ガスの効能検証方法において唾液中の特異的ＩｇＡ抗体（以下「ＢＧ−ＩｇＡ」と表記する）の濃度を検査した結果を示す。
【００６９】
【表３】
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【００７０】
比較例として採用したＢＧ−ＩｇＡについて、以下に簡単に説明する。
【００７１】
ヒトや動物には、外的から身体を守るための免疫系が備わっている。特に、ウイルスや細菌など、多くの微生物の侵入口である粘膜には「粘膜免疫」が存在し、抗原特異的分泌型ＩｇＡ抗体が誘導される。
【００７２】
粘膜組織で誘導されたＩｇＡ抗体産生細胞は、共通粘膜機構（ＣＭＩＳ：Common  Mucosal  Immune  System）によって、別の粘膜組織にもホーミングすることができる。特に、泌型ＩｇＡ抗体産生細胞は、腸管関連リンパ組織、鼻咽頭関連リンパ組織および気管支関連リンパ組織などで誘導され、その後、腸管粘膜固有層、呼吸器粘膜固有層、乳腺、涙腺、唾液腺、泌尿生殖器にホーミングし、生体防御機能を発動する。
【００７３】
真菌由来の細胞壁構成成分であるβ−グルカン（ＢＧ）特異的ＩｇＡ抗体（ＢＧ−ＩｇＡ）の動態解析は、生体の粘膜免疫機構を把握・考察する上で、重要な情報を提供すると考えられる。特に、唾液中のＢＧ−ＩｇＡはインフルエンザウイルスなどに対する感染防御として威力を発揮するとされている。
【００７４】
本比較例においても、先ず、吸入ガスを吸入する前の被験者の唾液を採取し、次いで、水素発生装置１０（図２および図３を参照）で生成される吸入ガスを吸入させる。その後、１５分後、３０分後、６０分後に唾液を採取し、採取した唾液中の真菌細胞壁β−グルカン（ＢＧ）特異的ＩｇＡ抗体（ＢＧ−ＩｇＡ）の濃度を、オリジナル構築酵素抗体法で検査した。
【００７５】
表３に示すように、この例でも、ガス吸入前と吸入後とで、唾液中のＢＧ−ＩｇＡの濃度は有意な変化は認められなかった。この場合のｐ値は、吸入１５分後では０．８１５であり、吸入３０分後では０．７４５であることから、吸引ガスの吸引前後において、比較的短時間（３０分以内程度）では、ＢＧ−ＩｇＡの濃度の変化には有意性がないと認められる。なお、吸入６０分後では、ｐ値は０．０２６＜０．０５であったことから、長時間吸引すれば、ＢＧ−ＩｇＡの濃度は有意的に増加することが認められた。
【００７６】
上述してきた吸入ガスの人体に対する効能の検証結果から、唾液から採取できる複数のバイオマーカーのうち、ＩＬ−１βであれば、その濃度の動態が短時間（例えば、ガス吸引後１０〜２０分）で優位的に増加することが分かった。
【００７７】
したがって、本実施形態に係る吸入ガスの効能検証方法であれば、採血に際しては医師などの指導の下、所定の医療施設にて行う必要がある血液を用いることなく、被験者の唾液を採取するだけでよく、しかも、唾液の採取タイミングは、ガス吸入後１５分程度で良いため、水素ガスや水素ガスが含まれる吸入ガスの人体に対する効能を簡便に検証することができる。
【００７８】
そして、唾液の採取タイミングをガス吸入後１５分程度の短時間に設定できるため、例えば、濃度が０．１〜０．３Ｖｏｌ％の水素ガスを含む蒸気混合ガスを生成可能な水素発生装置１０（図２および図３を参照）の購入などを予定しているユーザは、当該水素発生装置１０を試用する場合（いわゆる「お試し利用」）、短時間の利用でその効果をバイオマーカーの動態変化で確認することができる。
【００７９】
また、水素ガス発生装置１０の製造側からすれば、濃度が０．１〜０．３Ｖｏｌ％の水素ガスを含む蒸気混合ガスは、短時間の吸入であっても免疫力向上に効果がある点を謳うことが可能となる。
【００８０】
上述したように、濃度が０．１〜０．３Ｖｏｌ％の水素ガスを含む蒸気混合ガスを吸入した後、生体バイオマーカーとして、唾液中のＩＬ−１β、ｓＣＤ４４およびＢＧ−ＩｇＡの濃度を検査した結果、ガス吸入１５分後から唾液中のＩＬ−１βの濃度は有意な増加が認められた。他方、唾液中のｓＣＤ４４およびＢＧ−ＩｇＡでは、そのような短時間（例えば１５分）では有意な変化は認められず、ＩＬ−１βの特異的な動態であるという所見を得た。
【００８１】
このように、水素ガス発生装置１０によって生成された濃度が０．１〜０．３Ｖｏｌ％の水素ガスを含む蒸気混合ガスを吸入することにより、特異的にＩＬ−１βの濃度が短時間（１０〜２０分以内）で増加することが分かった。これは、濃度が０．１〜０．３Ｖｏｌ％の水素ガスを含む蒸気混合ガスが、短時間で生体免疫能増強作用を発動させ、生体防護機能を誘導することを示している。したがって、かかる結果および上述してきた吸入ガスの効能検証方法は、今後、臨床応用にも大いに期待が持てると考えられる。
【００８２】
上述してきた実施形態より、以下の吸入ガスの効能検証方法が実現される。
【００８３】
（１）生体バイオマーカーの動態を解析することにより、吸入ガスの人体への効能を検証する吸入ガスの効能検証方法であって、吸入ガスを吸入させる前の被験者の唾液を採取する一次唾液採取ステップＳ１１と、吸入ガスを吸入させた後の被験者の唾液を採取する二次唾液採取ステップＳ１３と、一次唾液採取ステップＳ１１および二次唾液採取ステップＳ１３で採取した各唾液中のインターロイキン−1βの濃度を検査する濃度検査ステップＳ１４と、一次唾液採取ステップＳ１１で採取した唾液における第１インターロイキン1β濃度と、二次唾液採取ステップＳ１３で採取した唾液における第２インターロイキン1β濃度とを比較し、比較結果に基づき吸入ガスによる免疫能の活性化を判定する判定ステップＳ１５とを有し、二次唾液採取ステップＳ１３は、被験者に吸入ガスを吸入させた後、遅くとも３０分以内に実行される早期唾液採取ステップＳ１３１を含む吸入ガスの効能検証方法。
【００８４】
（２）上記（１）において、早期唾液採取ステップＳ１３１は、被験者に吸入ガスを吸入させた後、１０〜２０分の間に実行される吸入ガスの効能検証方法。
【００８５】
（３）上記（１）または（２）において、吸入ガスは、原水を加熱して発生させた過熱蒸気をさらに加熱して生成した水素ガスを含む蒸気混合ガスであり、当該蒸気混合ガスに含まれる水素ガスの濃度が４．２Ｖｏｌ％未満である吸入ガスの効能検証方法。
【００８６】
（４）上記（３）において、水素ガスの濃度は、０．１〜０．３Ｖｏｌ％である吸入ガスの効能検証方法。
【００８７】
（５）上記（１）〜（４）において、濃度検査ステップＳ１４では、酵素抗体法を用いてインターロイキン−1βの濃度を検査する吸入ガスの効能検証方法。
【００８８】
上述してきた実施形態におけるさらなる効果や変形例は、当業者によって容易に導き出すことができる。このため、本発明のより広範な態様は、以上のように表しかつ記述した特定の詳細および代表的な実施形態に限定されるものではない。したがって、添付の特許請求の範囲およびその均等物によって定義される総括的な発明の概念の精神または範囲から逸脱することなく、様々な変更が可能である。
【符号の説明】
【００８９】
Ｓ１１  一次唾液採取ステップ
Ｓ１３  二次唾液採取ステップ
Ｓ１４  濃度検査ステップ
Ｓ１５  判定ステップ
１０    水素ガス発生装置
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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