(57)【要約】【課題】保存可能な期間が長いワムシ用餌料及びその製造方法を提供すること。【解決手段】微細藻類シュードココミクサ属を含むワムシ用餌料。ワムシ用餌料は、酸性であり、液状であることが好ましい。ワムシ用餌料のｐＨは４以下であることが好ましい。微細藻類シュードココミクサ属を培地において培養し、前記培地に含まれる水の少なくとも一部を除去するワムシ用餌料の製造方法。酸性且つ窒素十分である前記培地を用いて微細藻類シュードココミクサ属を培養することが好ましい。前記培地のｐＨは４以下であることが好ましい。【選択図】図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
微細藻類シュードココミクサ属を含むワムシ用餌料。
【請求項２】
請求項１に記載のワムシ用餌料であって、
酸性であり、液状であるワムシ用餌料。
【請求項３】
請求項２に記載のワムシ用餌料であって、
ｐＨが４以下であるワムシ用餌料。
【請求項４】
微細藻類シュードココミクサ属を培地において培養し、
前記培地に含まれる水の少なくとも一部を除去するワムシ用餌料の製造方法。
【請求項５】
請求項４に記載のワムシ用餌料の製造方法であって、
酸性且つ窒素十分である前記培地を用いて微細藻類シュードココミクサ属を培養するワムシ用餌料の製造方法。
【請求項６】
請求項５に記載のワムシ用餌料の製造方法であって、
前記培地のｐＨが４以下であるワムシ用餌料の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示はワムシ用餌料及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
シオミズツボワムシ(以下、ワムシとする)は、動物プランクトンの一種である。養殖産業において種苗生産対象稚仔を飼育するとき、ワムシは初期餌料として使用される。養殖産業においてワムシは大量に使用されるため、ワムシを大量に培養する必要がある。ワムシの培養において給餌されるワムシ用餌料として、産業用微細藻類濃縮液が使用される。産業用微細藻類をワムシの培養に用いることは特許文献１に開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００２−１２５６０１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
現在、産業用微細藻類濃縮液は、製造後の保存可能な期間が限られるため、さらに長期的な保存が可能になること望まれる。
本開示は、保存可能な期間が長いワムシ用餌料及びその製造方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本開示の一態様は、微細藻類シュードココミクサ属を含むワムシ用餌料である。本開示の一態様であるワムシ用餌料は、ワムシを増殖させる効果が高い。また、本開示の一態様であるワムシ用餌料は、保存可能な期間が長い。
【０００６】
本開示の別の態様は、微細藻類シュードココミクサ属を培地において培養し、前記培地に含まれる水の少なくとも一部を除去するワムシ用餌料の製造方法である。本開示の別の態様であるワムシ用餌料の製造方法によれば、ワムシを増殖させる効果が高く、保存可能な期間が長いワムシ用餌料を製造することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】ワムシ用餌料Ｓ１、Ｓ２におけるα―リノレン酸の量を表す説明図である。
【図２】ワムシ用餌料Ｓ１及び産業用微細藻類濃縮液を給餌した場合におけるワムシ密度の推移を表すグラフである。
【図３】１ヶ月保存後のワムシ用餌料Ｓ１、Ｓ３を給餌した場合におけるワムシ密度の推移を表すグラフである。
【図４】１ヶ月半保存後のワムシ用餌料Ｓ１、Ｓ３を給餌した場合におけるワムシ密度の推移を表すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
本開示の実施形態を説明する。
１．ワムシ用餌料
ワムシ用餌料は、微細藻類シュードココミクサ(Pseudococcomyxa)属を含む。微細藻類シュードココミクサ属として、適宜選択した株を用いることができる。好ましい株として、例えば、シュードココミクサ  ｓｐ.ＫＪ株等が挙げられる。
【０００９】
シュードココミクサ  ｓｐ.ＫＪ株は、２０１３年６月４日付で独立行政法人製品評価技術基盤機構  特許生物寄託センター（ＮＩＴＥ−ＩＰＯＤ）（千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８  １２０号室）に受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−２２２５４として寄託されている。
【００１０】
ワムシ用餌料の剤型は特に限定されず、例えば、液状、粉末状等が挙げられる。ワムシ用餌料は酸性であることが好ましい。酸性である場合、ワムシ用餌料におけるコンタミ微生物の増殖を抑制できる。ワムシ用餌料のｐＨは４以下であることが好ましく、３以上４以下であることが特に好ましい。ｐＨがこの範囲内である場合、ワムシ用餌料におけるコンタミ微生物の増殖を一層抑制できる。
【００１１】
ワムシ用餌料の剤型が液状である場合、ワムシ用餌料における微細藻類シュードココミクサ属の濃度は、１００〜１５０（乾燥重量）ｇ／Ｌの範囲が好ましい。
ワムシ用餌料は中性であってもよい。微細藻類シュードココミクサ属を培養する培地が酸性である場合、例えば、培養終了後の培地に塩基性物質を添加し、中和することで、ワムシ用餌料を中性にすることができる。塩基性物質として、例えば、水酸化ナトリウム等が挙げられる。  
【００１２】
２．ワムシ用餌料の製造方法
ワムシ用餌料の製造方法では、微細藻類シュードココミクサ属を培地において培養し、前記培地に含まれる水の少なくとも一部を除去する。
【００１３】
微細藻類シュードココミクサ属として、適宜選択した株を用いることができる。好ましい株として、例えば、シュードココミクサ  ｓｐ.ＫＪ株等が挙げられる。
培地として、微細藻類の培養に通常使用されているものを使用することができる。培地として、例えば、各種栄養塩、微量金属塩、ビタミン等を含む公知の淡水産微細藻類用の培地、海産微細藻類用の培地等を使用することができる。培地として、例えば、ＡＦ６培地が挙げられる。ＡＦ６培地の組成は以下のとおりである。以下の数値は１００ｍｌの培地に含まれる質量である。
【００１４】
NaNO3：14mg
NH4NO3：2.2mg
MgSO4・7H2O：3mg
KH2PO4：1mg
K2HPO4：0.5mg
CaCl2・2H2O：1mg
CaCO3：1mg
Fe-citrate：0.2mg
Citric acid：0.2mg
Biotin：0.2μg
Thiamine HCl：1μg
Vitamin B6：0.1μg
Vitamin B12：0.1μg
Trace metals：0.5mL
Distilled water：99.5mL
栄養塩として、例えば、ＮａＮＯ３、ＫＮＯ３、ＮＨ４Ｃｌ、尿素等の窒素源；Ｋ２ＨＰＯ４、ＫＨ２ＰＯ４、グリセロリン酸ナトリウム等のリン源が挙げられる。また、微量金属として、例えば、鉄、マグネシウム、マンガン、カルシウム、亜鉛等が挙げられる。ビタミンとして、例えば、ビタミンＢ１、ビタミンＢ１２等が挙げられる。
【００１５】
微細藻類シュードココミクサ属の培養方法は、例えば、通気条件で二酸化炭素の供給とともに攪拌を行う方法である。その際、例えば、明暗サイクルをつけた光照射、又は、連続光照射して培養することができる。明暗サイクルとして、例えば、蛍光灯での１２時間の光照射と、１２時間の暗条件とを繰り返す明暗サイクル等が挙げられる。
【００１６】
培地は酸性であることが好ましい。培地が酸性である場合、培地におけるコンタミ微生物の増殖を抑制できる。培地のｐＨが４以下であることが好ましく、３以上４以下であることが特に好ましい。ｐＨがこの範囲内である場合、培地におけるコンタミ微生物の増殖を一層抑制できる。培養温度は、２０〜３０℃であることが好ましい。
【００１７】
培地は窒素十分の状態であることが好ましい。培地が窒素十分の状態である場合、微細藻類シュードココミクサ属に含まれるα―リノレン酸の量を増すことができる。α―リノレン酸は、種苗生産対象稚仔の必須栄養素の１つであると考えられている。
【００１８】
窒素十分の状態とは、例えば、Ｎ／ＤＷが２質量％以上の状態である。窒素欠乏の状態とは、例えば、Ｎ／ＤＷが２質量％未満の状態である。Ｎ／ＤＷは、藻体の乾燥重量に占める窒素重量の比率である。
【００１９】
微細藻類シュードココミクサ属に含まれるα―リノレン酸の量が増すと、本開示のワムシ用餌料を給餌したワムシに含まれるα―リノレン酸の量が増加する。その結果、ワムシを給餌した種苗生産対象稚仔の生存率を高めることができる。
【００２０】
培地に含まれる水の少なくとも一部を除去する工程は、例えば、遠心分離、膜分離等の方法で行うことができる。培地に含まれる水の少なくとも一部を除去した結果、微細藻類シュードココミクサ属は濃縮される。
【００２１】
３．ワムシ用餌料及びその製造方法が奏する効果
（１Ａ）本開示のワムシ用餌料は、ワムシを増殖させる効果が高い。
（１Ｂ）本開示のワムシ用餌料は、保存可能な期間が長い。
【００２２】
（１Ｃ）本開示のワムシ用餌料の製造方法によれば、微細藻類シュードココミクサ属を含むワムシ用餌料を製造することができる。製造したワムシ用餌料は、ワムシを増殖させる効果が高く、保存可能な期間が長い。
【００２３】
４．実施例
（４−１）ワムシ用餌料の製造
以下の条件で、シュードココミクサ  ｓｐ.ＫＪ株を培養した。培養の具体的な手順は以下のとおりとした。
【００２４】
（i）ＡＦ６培地を調製する。培地は窒素十分条件とする。培地のｐＨは３．５である。
（ii）１２１℃、２０ｍｉｎの条件で培地を滅菌し、シュードココミクサ  ｓｐ.ＫＪ株を植藻する。
【００２５】
（iii）２％Ｃ０２を通気する
（iv）光を照射しながら室温にて培養する。光の強さは約１００μmol/m2/sとする。室温は２５℃である。
【００２６】
培養終了後、培地に含まれる水の一部を遠心分離により除去し、ワムシ用餌料Ｓ１を完成した。ワムシ用餌料Ｓ１におけるシュードココミクサ  ｓｐ.ＫＪ株の濃度は、１４０（乾燥重量）ｇ／Ｌである。
【００２７】
また、基本的にはワムシ用餌料Ｓ１と同様にしてワムシ用餌料Ｓ２を製造した。ただし、ワムシ用餌料Ｓ２の場合、窒素欠乏条件の培地でシュードココミクサ  ｓｐ.ＫＪ株を培養した。
【００２８】
また、基本的にはワムシ用餌料Ｓ１と同様にしてワムシ用餌料Ｓ３を製造した。ただし、ワムシ用餌料Ｓ３の場合、培養終了後に水酸化ナトリウムを適量加えて、中性にした。
（４−２）ワムシ用餌料の分析
ガスクロマトグラフを用いて、ワムシ用餌料Ｓ１、Ｓ２におけるα―リノレン酸の量を測定した。その結果を図１に示す。図１に示す量は、１００ｇのシュードココミクサ  ｓｐ.ＫＪ株に含まれるα―リノレン酸の質量（単位はｇ）である。ワムシ用餌料Ｓ１では、ワムシ用餌料Ｓ２に比べて、α―リノレン酸の量が多かった。
【００２９】
（４−３）ワムシ用餌料の使用と評価（その１）
ワムシ用餌料Ｓ１をワムシに１日１回給餌した。そのときのワムシ密度の推移を図２に示す。比較例として、産業用微細藻類濃縮液をワムシに１日１回給餌した。比較例における給餌量は、ワムシ用餌料Ｓ１の給餌量と同じである。比較例を給餌したときのワムシ密度の推移を図２に示す。
【００３０】
ワムシ用餌料Ｓ１、及び比較例のいずれを給餌した場合でも、ワムシ密度は増加した。培養日数が８日を越えると、ワムシ用餌料Ｓ１を給餌した場合の方が、比較例を給餌した場合よりも、ワムシの増殖が一層顕著であった。
【００３１】
（４−４）ワムシ用餌料の使用と評価（その２）
ワムシ用餌料Ｓ１、Ｓ３を、それぞれ、製造から１ヶ月保存した。１ヶ月保存後のワムシ用餌料Ｓ１をワムシに１日１回給餌した。そのときのワムシ密度の推移を図３に示す。
【００３２】
また、１ヶ月保存後のワムシ用餌料Ｓ３をワムシに１日１回給餌した。そのときのワムシ密度の推移を図３に示す。ワムシ用餌料Ｓ１、Ｓ３のいずれを給餌した場合でも、ワムシ密度は増加した。
【００３３】
保存可能な期間を過ぎた比較例の微細藻類濃縮液をワムシに給餌した場合、ワムシは短期間で全滅した。
（４−５）ワムシ用餌料の使用と評価（その３）
ワムシ用餌料Ｓ１、Ｓ３を、それぞれ、製造から１ヶ月半保存した。１ヶ月半保存後のワムシ用餌料Ｓ１をワムシに１日１回給餌した。そのときのワムシ密度の推移を図４に示す。
【００３４】
また、１ヶ月半保存後のワムシ用餌料Ｓ３をワムシに１日１回給餌した。そのときのワムシ密度の推移を図４に示す。ワムシ用餌料Ｓ１、Ｓ３のいずれを給餌した場合でも、ワムシ密度は増加した。
【００３５】
５．他の実施形態
以上、本開示の実施形態について説明したが、本開示は上述の実施形態に限定されることなく、種々変形して実施することができる。
【００３６】
（１）上記実施形態における１つの構成要素が有する複数の機能を、複数の構成要素によって実現したり、１つの構成要素が有する１つの機能を、複数の構成要素によって実現したりしてもよい。また、複数の構成要素が有する複数の機能を、１つの構成要素によって実現したり、複数の構成要素によって実現される１つの機能を、１つの構成要素によって実現したりしてもよい。また、上記実施形態の構成の一部を省略してもよい。また、上記実施形態の構成の少なくとも一部を、他の上記実施形態の構成に対して付加又は置換してもよい。なお、特許請求の範囲に記載した文言から特定される技術思想に含まれるあらゆる態様が本開示の実施形態である。
【００３７】
（２）上述したワムシ用餌料の他、当該ワムシ用餌料を構成要素とする製品、ワムシの増殖方法、種苗生産対象稚仔の飼育方法等、種々の形態で本開示を実現することもできる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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