(57)【要約】【課題】複数種類の遺伝子のタイプ判別を短時間で実現する遺伝子検査方法を提供する。【解決手段】遺伝子検査方法は、検体を所定の温度範囲での周期的変化を繰り返して加熱する加熱ステップと、検体を一定の昇温速度で加熱しながら検体に波長の異なる複数の励起光を照射し、検体の蛍光変化を検出する蛍光検出ステップと、蛍光検出ステップにより得られる蛍光強度の変化に基づき複数種類の標的遺伝子のタイプ判定を行う判定ステップと、を含み、加熱ステップは、第１の温度範囲での周期的変化を第１の回数繰り返して検体を加熱する第１加熱ステップ（Ｓ１０１）と、第１の温度範囲と異なる、第２の温度範囲での周期的変化を第２の回数繰り返して検体を加熱する第２加熱ステップ（Ｓ１０２）と、を含む。【選択図】図１Ａ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
複数種類の蛍光色素を含む検出試薬と複数種類の標的遺伝子を含む生体試料とを混合し、複数種類の標的遺伝子のそれぞれに前記複数種類の蛍光色素のうち互いに異なる蛍光色素を修飾して得られた検体を、所定の温度範囲での周期的変化を繰り返して加熱する加熱ステップと、
前記検体を一定の昇温速度で加熱しながら前記検体に波長の異なる複数の励起光を照射し、前記検体の蛍光変化を検出する蛍光検出ステップと、
前記蛍光検出ステップにより得られる蛍光強度の変化に基づき前記複数種類の標的遺伝子のタイプ判定を行う判定ステップと、を含み、
前記加熱ステップは、
第１の温度範囲での前記周期的変化を第１の回数繰り返して前記検体を加熱する第１加熱ステップと、
前記第１の温度範囲と異なる、第２の温度範囲での前記周期的変化を第２の回数繰り返して前記検体を加熱する第２加熱ステップと、を含む、
遺伝子検査方法。
【請求項２】
前記第２の温度範囲の上限温度は、前記第１の温度範囲の上限温度よりも高い、
請求項１に記載の遺伝子検査方法。
【請求項３】
前記蛍光検出ステップは、
前記第１加熱ステップ後かつ前記第２加熱ステップの前に、前記蛍光検出ステップにより前記複数種類の標的遺伝子のうち第１標的遺伝子の蛍光強度を検出する第１蛍光検出ステップと、
前記第２加熱ステップ後に、前記蛍光検出ステップにより前記複数種類の標的遺伝子のうち第２標的遺伝子の蛍光強度を検出する第２蛍光検出ステップと、を含む、
請求項１又は２に記載の遺伝子検査方法。
【請求項４】
前記蛍光検出ステップは、前記第１加熱ステップ及び前記第２加熱ステップの後にのみ実施される、
請求項１又は２に記載の遺伝子検査方法。
【請求項５】
前記蛍光検出ステップは、さらに、前記第２蛍光検出ステップ後に、前記加熱ステップにより前記第２の温度範囲の上限よりも高い上限を有する第３の温度範囲での前記周期的変化を第３の回数繰り返して前記検体を加熱した後、前記蛍光検出ステップにより前記複数種類の標的遺伝子のうち第３標的遺伝子の蛍光強度の変化を測定する第３蛍光検出ステップを含み、
前記判定ステップでは、前記第３蛍光検出ステップにおいて得られる蛍光強度の変化に基づき前記複数種類の標的遺伝子のタイプ判定を行う、
請求項３に記載の遺伝子検査方法。
【請求項６】
さらに、前記第１の温度範囲での前記周期的変化を前記第１の回数繰り返して前記検体を加熱する間に、前記複数種類の標的遺伝子の蛍光強度の変化を測定し、前記蛍光強度の変化に基づいて前記第１の回数及び前記第２以降の回数の少なくとも一つを決定する、又は、前記第２の温度範囲での前記周期的変化を前記第２の回数繰り返して前記検体を加熱する間に、前記複数種類の標的遺伝子の蛍光強度の変化を測定し、前記蛍光強度の変化に基づいて前記第２の回数及び前記第２以降の回数の少なくとも一つを決定する、加熱サイクル決定ステップを有する、
請求項１〜５のいずれか１項に記載の遺伝子検査方法。
【請求項７】
前記検体は、前記第１の温度範囲及び前記第１の回数、並びに、前記第２の温度範囲及び前記第２の回数を示す識別子を保持する媒体を備えるチップに保持され、
前記第１蛍光検出ステップでは、前記検体を、前記識別子に対応する前記第１の温度範囲での前記周期的変化を前記第１の回数繰り返して加熱し、
前記第２蛍光検出ステップでは、前記検体を、前記識別子に対応する前記第２の温度範囲での前記周期的変化を前記第２の回数繰り返して加熱する、
請求項１〜６のいずれか１項に記載の遺伝子検査方法。
【請求項８】
所定の温度範囲での周期的変化を繰り返して検体を加熱し、前記検体に含まれる複数種類の標的遺伝子を増幅させるための、前記検体を保持する検体保持部と、
前記複数種類の標的遺伝子を増幅させるための、前記検体の加熱の温度範囲及び加熱の回数に対応付けられる識別子を保持する媒体と、を備える、
遺伝子検査チップ。
【請求項９】
複数種類の蛍光色素を含む検出試薬と複数種類の標的遺伝子を含む生体試料とを混合し、複数種類の標的遺伝子のそれぞれに前記複数種類の蛍光色素のうち互いに異なる蛍光色素を修飾して得られた検体を、所定の温度範囲で周期的変化を繰り返して加熱する加熱部と、
前記検体を一定の昇温速度で加熱しながら前記検体に波長の異なる複数の励起光を照射し、前記検体の蛍光変化を検出する蛍光検出部と、
前記蛍光検出部において得られる蛍光強度の変化に基づき前記複数種類の標的遺伝子のタイプ判定を行う判定部と、を備え、
前記加熱部は、
第１の温度範囲での前記周期的変化を第１の回数繰り返して前記検体を加熱し、さらに、前記第１の温度範囲と異なる、第２の温度範囲での前記周期的変化を第２の回数繰り返して前記検体を加熱する、
遺伝子検査システム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、遺伝子検査方法、遺伝子検査チップ、及び遺伝子検査システムに関する。
【背景技術】
【０００２】
遺伝子多型とは、遺伝子を構成しているＤＮＡの塩基配列の個体差であり、一般には集団の１％以上の頻度で出現するものと定義されている。遺伝子多型としては、ＤＮＡ塩基配列の一塩基のみが変異する一塩基多型（ＳＮＰ：ｓｉｎｇｌｅ  ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）の他、２から４塩基程度の一単位の繰り返し数の差であるマイクロサテライト多型（ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）、塩基の欠損、挿入がある。遺伝子多型には、病気の罹り易さや薬物代謝等に影響を及ぼすものがあることが知られており、病気罹患率の診断や投与薬物の効果、副作用の予測等のためにＳＮＰ部位の塩基の判定が行われている。
【０００３】
特許文献１は、波長の異なる蛍光色素で修飾した３つのプローブを用いて３種類の遺伝子タイプを判定する技術を開示している。また、非特許文献１は、ＰＣＲサイクル中のアニール温度を、回数ごとに段階的に下げることで、増幅性能を改善する、タッチダウンＰＣＲ法を開示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特許第５２７９４９２号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｔｏｕｃｈｄｏｗｎ’ＰＣＲ  ｔｏ  ｃｉｒｃｕｍｖｅｎｔ  ｓｐｕｒｉｏｕｓ  ｐｒｉｍｉｎｇ  ｄｕｒｉｎｇ  ｇｅｎｅ  ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ；  Ｒ．Ｈ．Ｄｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  Ｖｏｌ．１９，  Ｎｏ．１４（１９９１）４００８
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかし、特許文献１に開示される従来技術では、複数種類の遺伝子のタイプ判定を短時間で行うためにＰＣＲの周期を短くすると、遺伝子間で増幅特性の差が徐々に顕著となり、誤判定を生じるという問題がある。また、非特許文献１に開示される従来技術では、単独ＳＮＰに対する遺伝子タイプの判定は可能であるが、複数のＳＮＰに対する遺伝子タイプの判定が難しいという問題がある。
【０００７】
そこで、本開示は、複数種類の遺伝子のタイプ判定を短時間で実現する遺伝子検査方法、遺伝子検査チップ、及び遺伝子検査システムを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記目的を達成するために、本開示の一形態に係る遺伝子検査方法は、複数種類の蛍光色素を含む検出試薬と複数種類の標的遺伝子を含む生体試料とを混合し、複数種類の標的遺伝子のそれぞれに複数種類の蛍光色素のうち互いに異なる蛍光色素を修飾して得られた検体を、所定の温度範囲での周期的変化を繰り返して加熱する加熱ステップと、検体を一定の昇温速度で加熱しながら検体に波長の異なる複数の励起光を照射し、検体の蛍光変化を検出する蛍光検出ステップと、蛍光検出ステップにより得られる蛍光強度の変化に基づき複数種類の標的遺伝子のタイプ判定を行う判定ステップと、を含み、加熱ステップは、第１の温度範囲での周期的変化を第１の回数繰り返して検体を加熱する第１加熱ステップと、第１の温度範囲と異なる、第２の温度範囲での周期的変化を第２の回数繰り返して検体を加熱する第２加熱ステップと、を含む。
【０００９】
また、上記目的を達成するために、本開示の一形態に係る遺伝子検査チップは、所定の温度範囲での周期的変化を繰り返して検体を加熱し、検体に含まれる複数種類の標的遺伝子を増幅させるための、検体を保持する検体保持部と、複数種類の標的遺伝子を増幅させるための、検体の加熱の温度範囲及び加熱の回数に対応付けられる識別子を保持する媒体と、を備える。
【００１０】
さらに、上記目的を達成するために、本開示の一形態に係る遺伝子検査システムは、複数種類の蛍光色素を含む検出試薬と複数種類の標的遺伝子を含む生体試料とを混合し、複数種類の標的遺伝子のそれぞれに複数種類の蛍光色素のうち互いに異なる蛍光色素を修飾して得られた検体を、所定の温度範囲で周期的変化を繰り返して加熱する加熱部と、検体を一定の昇温速度で加熱しながら検体に波長の異なる複数の励起光を照射し、検体の蛍光変化を検出する蛍光検出部と、蛍光検出部において得られる蛍光強度の変化に基づき複数種類の標的遺伝子のタイプ判定を行う判定部と、を備え、加熱部は、第１の温度範囲での周期的変化を第１の回数繰り返して検体を加熱し、さらに、第１の温度範囲と異なる、第２の温度範囲での周期的変化を第２の回数繰り返して検体を加熱する。
【発明の効果】
【００１１】
本開示によれば、複数種類の遺伝子のタイプ判定を短時間で実現する遺伝子検査方法、遺伝子検査チップ、及び遺伝子検査システムを提供できる。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１Ａ】第１実施形態における第１態様に係る遺伝子検査方法を示すフローチャート
【図１Ｂ】第１実施形態における第１態様に係る遺伝子検査方法のタイミングチャート
【図２Ａ】第１実施形態における第２態様に係る遺伝子検査方法を示すフローチャート
【図２Ｂ】第１実施形態における第２態様に係る遺伝子検査方法のタイミングチャート
【図３Ａ】第１実施形態における第３態様に係る遺伝子検査方法を示すフローチャート
【図３Ｂ】第１実施形態における第３態様に係る遺伝子検査方法のタイミングチャート
【図４】第２実施形態に係る遺伝子検査方法を示すフローチャート
【図５Ａ】第２実施形態に係る遺伝子検査方法における複数種類の標的遺伝子の１つ（ＳＮＰ１）の蛍光強度の変化点を検出するためのグラフ
【図５Ｂ】第２実施形態に係る遺伝子検査方法における複数種類の標的遺伝子の１つ（ＳＮＰ２）の蛍光強度の変化点を検出するためのグラフ
【図５Ｃ】第２実施形態に係る遺伝子検査方法における複数種類の標的遺伝子の１つ（ＳＮＰ３）の蛍光強度の変化点を検出するためのグラフ
【図６Ａ】第２実施形態に係る遺伝子検査方法における標的遺伝子の１つ（ＳＮＰ３）の蛍光強度の変化点を検出するためのグラフ
【図６Ｂ】第２実施形態に係る遺伝子検査方法における標的遺伝子の１つ（ＳＮＰ３）の蛍光強度の変化点を検出するためのグラフ
【図７】第３実施形態に係る遺伝子検査チップの一例を示す斜視図
【図８】第３実施形態に係る遺伝子検査チップを用いた遺伝子検査方法の一例を示すフローチャート
【図９】第４実施形態に係る遺伝子検査システムを示すブロック図
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、本開示の実施の形態について、図面を参照しながら説明する。なお、以下に説明する実施の形態は、いずれも本開示の好ましい一具体例を示すものである。したがって、以下の実施の形態で示される、数値、形状、材料、構成要素、構成要素の配置位置及び接続形態、並びに、ステップ及びステップの順序などは、一例であって本開示を限定する趣旨ではない。よって、以下の実施の形態における構成要素のうち、本開示の最上位概念を示す独立請求項に記載されていない構成要素については、任意の構成要素として説明される。
【００１４】
なお、各図は、模式図であり、必ずしも厳密に図示されたものではない。また、各図において、実質的に同一の構成に対しては同一の符号を付しており、重複する説明は省略又は簡略化する。
【００１５】
（実施の形態）
［Ａ．遺伝子検査方法］
以下、本開示に係る遺伝子検査方法について、図１Ａ〜図６Ｂを用いて説明する。
【００１６】
本開示に係る遺伝子検査方法は、複数種類の蛍光色素を含む検出試薬と複数種類の標的遺伝子を含む生体試料とを混合し、複数種類の標的遺伝子のそれぞれに複数種類の蛍光色素のうち互いに異なる蛍光色素を修飾して得られた検体を、所定の温度範囲での周期的変化を繰り返して加熱する加熱ステップ（いわゆる、ＰＣＲ：Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  ｃｈａｉｎ  ｒｅａｃｔｉｏｎ）と、検体を一定の昇温速度で加熱しながらこの検体に波長の異なる複数の励起光を照射し、検体の蛍光変化を検出する蛍光検出ステップと、を含む。
【００１７】
加熱ステップ（ＰＣＲ）においては、予め、複数種類の標的遺伝子のそれぞれに異なる蛍光色素を修飾して調製した検体を、目的のＳＮＰ部位を含む、複数種類の標的遺伝子を増幅させ、それらの遺伝子のＰＣＲ増幅産物を得る。
【００１８】
その後の蛍光検出ステップにおいては、加熱ステップ後の検体を一定の昇温速度で加熱しながら蛍光色素で標識されたプローブが標的遺伝子のＰＣＲ増幅産物から離れる解離温度の違いにより遺伝子型を判定する。
【００１９】
ここで、本開示の遺伝子検査方法は、複数種類の標的遺伝子の分析条件が予め決められた遺伝子検査方法（第１実施形態）と、複数種類の標的遺伝子の蛍光強度を測定しながら分析条件（具体的には、ＰＣＲでの加熱の温度範囲、ＰＣＲでの加熱サイクルの数、ＰＣＲの実施回数等）を決定する遺伝子検査方法（第２実施形態）とに分類することができる。
【００２０】
以下、第１実施形態及び第２実施形態に係る遺伝子検査方法について詳細に説明する。
【００２１】
［Ａ−１．第１実施形態］
本実施形態に係る遺伝子検査方法は、上述のとおり、複数種類の標的遺伝子の分析条件が予め決められた遺伝子検査方法である。
【００２２】
本実施形態では、上記の加熱ステップが、第１の温度範囲での周期的変化を第１の回数繰り返して検体を加熱する第１加熱ステップと、第１の温度範囲と異なる第２の温度範囲での周期的変化を第２の回数繰り返して検体を加熱する第２加熱ステップとを含む。
【００２３】
また、本実施形態では、第２の温度範囲の上限温度は、第１の温度範囲の上限温度よりも高くてもよい。
【００２４】
また、本実施形態では、蛍光検出ステップは、第１加熱ステップ後であって第２加熱ステップの前に、蛍光検出ステップにより複数種類の標的遺伝子のうち第１標的遺伝子の蛍光強度を検出する第１蛍光検出ステップと、第２加熱ステップ後に、蛍光検出ステップにより前記複数種類の標的遺伝子のうち第２標的遺伝子の蛍光強度を検出する第２蛍光検出ステップとを含んでもよい。又は、蛍光検出ステップは、第１加熱ステップ及び第２加熱ステップの後にのみ実施されてもよい。
【００２５】
また、本実施形態に係る遺伝子検査方法では、さらに、第２蛍光検出ステップ後に、上記の加熱ステップにより第２の温度範囲の上限よりも高い上限を有する第３の温度範囲での周期的変化を第３の回数繰り返して検体を加熱した後、前記蛍光検出ステップにより前記複数種類の標的遺伝子のうち第３標的遺伝子の蛍光強度の変化を測定する第３蛍光検出ステップを含み、判定ステップでは、第３蛍光検出ステップにおいて得られる蛍光強度の変化に基づき複数種類の標的遺伝子のタイプ判定が行われてもよい。
【００２６】
なお、本明細書では、第１、第２、又は第３標的遺伝子とは、個別の標的遺伝子の１種類ではなく、遺伝子検査方法の一連の手順に含まれる各蛍光検出ステップでの蛍光検出対象である１種類以上の標的遺伝子を意味する。また、一連の手順に含まれる蛍光検出ステップが１回のみであるか、又は複数回の蛍光検出ステップを区別しない場合には、蛍光検出対象である１種類以上の標的遺伝子は単に標的遺伝子という。
【００２７】
以下、本実施形態に係る遺伝子検査方法を３つの態様に分けて、例を用いて説明する。これらの態様は、加熱ステップ（ＰＣＲ）における所定の温度範囲での周期的変化を繰り返して加熱をする回数（加熱サイクル数）、当該所定の温度範囲、加熱ステップ（ＰＣＲ）の実施回数、蛍光検出ステップで蛍光変化検出の対象とする標的遺伝子、及び遺伝子型判定のタイミングに基づいて分けられている。なお、以下の例では、ＳＮＰ１、ＳＮＰ２、及びＳＮＰ３の３種類の標的遺伝子が検出対象である。また、各態様に係る遺伝子検査方法は、上記の各ステップを実施可能であり、ＳＮＰ１、ＳＮＰ２、及びＳＮＰ３をそれぞれ検出するための第１、第２、及び第３蛍光検出回路を備えるよう構成された遺伝子検査システムを用いて実施される。このシステムの詳細は、第４実施形態として後述する。
【００２８】
［Ａ−１−１．第１態様］
第１態様に係る遺伝子検査方法について、図１Ａ及び図１Ｂを用いて説明する。図１Ａは、第１態様に係る遺伝子検査方法の例を示すフローチャートであり、図１Ｂは、第１態様に係る遺伝子検査方法の例のタイミングチャートである。
【００２９】
図１Ａに示すように、第１態様では、まず、検体を注入した遺伝子検査チップを遺伝子検査システムにセットする（Ｓ１００）。
【００３０】
次に、標的遺伝子を増幅させるために、１回目の加熱ステップである第１加熱ステップ（ＰＣＲ１）を実施し（Ｓ１０１）、続いて、さらに標的遺伝子を増幅させるために、２回目の加熱ステップである第２加熱ステップ（ＰＣＲ２）を実施する（Ｓ１０２）。
【００３１】
次に、蛍光検出ステップにおいて標的遺伝子（ＳＮＰ１、ＳＮＰ２、及びＳＮＰ３）の蛍光強度を測定する（Ｓ１０３）。なお、蛍光検出ステップＳ１０３では、遺伝子検査システムが備える上記の蛍光検出回路が用いられる。各蛍光検出回路について第４実施形態についての説明で後述する。
【００３２】
次に、蛍光強度のグラフからＴｍ値（Ｔｍ１、Ｔｍ２、及びＴｍ３）を算出する（Ｓ１０４）。
【００３３】
最後に、標的遺伝子（ＳＮＰ１、ＳＮＰ２、及びＳＮＰ３）の遺伝子型を判定する（Ｓ１０５）。
【００３４】
ステップＳ１０１からＳ１０５までの一連の手順の詳細を、図１Ｂに示す第１態様の具体例のタイミングチャートを参照して説明する。
【００３５】
ステップＳ１０１は、図１ＢにおいてＰＣＲ１のラベルで示される区間に相当する。ステップＳ１０１では、所定の温度範囲である第１の温度範囲での周期的変化を第１の回数繰り返して検体を加熱する。より具体的には、Ｔ１からＴ３ａまでの温度範囲の２０秒周期の周期的変化を２０回繰り返して検体を加熱する。すなわち、Ｔ１からＴ３ａまでの温度範囲は、第１態様における第１の温度範囲の例であり、２０回は、第１態様における第１の回数の例である。
【００３６】
ステップＳ１０２は、図１ＢにおいてＰＣＲ２のラベルで示される区間に相当する。ステップＳ１０２では、所定の温度範囲である第２の温度範囲での周期的変化を第２の回数繰り返して検体を加熱する。より具体的には、Ｔ１からＴ３ｂまでの温度範囲の２０秒周期の周期的変化を４０回繰り返して検体を加熱する。すなわち、Ｔ１からＴ３ｂまでの温度範囲は、第１態様における第２の温度範囲の例であり、４０回は、第１態様における第２の回数の例である。ここで、Ｔ３ｂは、Ｔ３ａよりも高い。つまり、第１の温度範囲と第２の温度範囲とは異なり、この例では、より後に実施される加熱ステップであるＰＣＲ２で適用される第２の温度範囲の上限温度が第１の温度範囲の上限温度よりも高い。
【００３７】
ステップＳ１０３は、図１ＢにおいてＳＮＰ−１、ＳＮＰ−２、及びＳＮＰ−３のラベルで示される区間に相当する。ステップＳ１０３では、検体を一定の昇温速度で定速加熱する。図１Ｂのこの区間における、Ｔ１より低い温度からＴ３ａに近い温度までの２００秒間の加熱がこの定速加熱の例である。この区間では、検体に含まれる複数種類の標的遺伝子のＰＣＲ増幅産物に結合した蛍光色素（蛍光色素で標識されたプローブ）が、温度の上昇に伴い解離し、蛍光を発する。
【００３８】
この蛍光変化を連続的に測定すると、蛍光色素で標識されたプローブは、完全には相補的でない配列（例えば、１塩基のみ異なる配列）を有する遺伝子型（１）では、完全に相補的な配列を有する遺伝子型の場合に比べて低い温度でＰＣＲ増幅産物から解離し発光する。一方、完全に相補的な配列を有する遺伝子型（２）では、蛍光色素で標識されたプローブは、完全には相補的でない配列を有する遺伝子型（１）の場合に比べて高い温度で解離し発光する。また、完全に相補的な配列を有する遺伝子型（２）と完全には相補的でない配列を有する遺伝子型（１）との両方の配列を有する遺伝子型（ヘテロ型）では、前記の低い温度と高い温度の両方の温度で解離し発光する。このような遺伝子型によるプローブの解離温度Ｔｍ値を算出し（Ｓ１０４）、その解離温度の違いから遺伝子型を判定する（Ｓ１０５）。
【００３９】
このように、本実施形態の第１態様に係る遺伝子検査方法は、加熱ステップが、第１の温度範囲での周期的変化を第１の回数繰り返して検体を加熱する第１加熱ステップと、第１の温度範囲と異なる第２の温度範囲での周期的変化を第２の回数繰り返して検体を加熱する第２加熱ステップとを含む。
【００４０】
このように、異なる温度範囲での周期的変化で検体を加熱することで、検体に含まれる複数種類の標的遺伝子のそれぞれの標的遺伝子を、より適切な条件で増幅させることができる。これにより、複数の標的遺伝子のタイプ（遺伝子型）判定に要する時間を短縮しつつ、その確度を確保（向上又は低下の防止、以下同じ）することができる。
【００４１】
また、本実施形態の第１態様に係る遺伝子検査方法は、第２の温度範囲の上限温度は、第１の温度範囲の上限温度よりも高い。
【００４２】
これにより、標的遺伝子は種類ごとの適切な条件で増幅され、タイプ（遺伝子型）判定に要する時間を短縮しつつ、その確度を確保することができる。
【００４３】
また、蛍光検出ステップは、第１加熱ステップ及び第２加熱ステップの後にのみ実施される。
【００４４】
これにより、標的遺伝子は種類ごとの適切な条件で増幅され、その後に複数種類の標的遺伝子の蛍光強度を並行して測定するため、複数種類の標的遺伝子のタイプ（遺伝子型）判定の確度を確保しつつ、その所要時間をさらに短縮することができる。
【００４５】
［Ａ−１−２．第２態様］
第２態様に係る遺伝子検査方法について、図２Ａ及び図２Ｂを用いて説明する。図２Ａは、第２態様に係る遺伝子検査方法の例を示すフローチャートであり、図２Ｂは、第２態様に係る遺伝子検査方法の例のタイミングチャートである。なお、図２Ａでは、第１態様のフローチャートと共通のステップは、図１Ａと共通の参照符号で示す。
【００４６】
第２態様は、加熱の温度範囲が異なる第１加熱ステップと第２加熱ステップとを含む点、及び第１加熱ステップの後に実施される第２加熱ステップでの加熱の温度範囲の上限が第１加熱ステップでの加熱の温度範囲の上限より高い点は第１態様と共通である。以下、第１態様と異なる点を示しながら第２態様の一連の手順を説明する。
【００４７】
図２Ａに示すように、第２態様では、まず、検体を注入した遺伝子検査チップを遺伝子検査システムにセットする（Ｓ１００）。
【００４８】
次に、標的遺伝子を増幅させるために、１回目の加熱ステップである第１加熱ステップ（ＰＣＲ１）を実施する（Ｓ１１１）。
【００４９】
次に、第２態様では、第１加熱ステップに続けて実施されるのは第２加熱ステップではなく、標的遺伝子のうち第１標的遺伝子の蛍光強度を測定するための蛍光検出ステップである第１蛍光検出ステップである（Ｓ１１２）。第２態様における第１標的遺伝子はＳＮＰ１及びＳＮＰ２であり、第１蛍光検出回路及び第２蛍光検出回路を用いて実施される。
【００５０】
次に、蛍光強度のグラフからＴｍ値（Ｔｍ１及びＴｍ２）を算出する（Ｓ１１３）。
【００５１】
次に、第１標的遺伝子（ＳＮＰ１及びＳＮＰ２）の遺伝子型を判定する（Ｓ１１４）。
【００５２】
ステップＳ１１１からＳ１１４までのフローの詳細を、図２Ｂに示す第２態様の具体例のタイミングチャートを参照して説明する。
【００５３】
ステップＳ１１１は、図２ＢにおいてＰＣＲ１のラベルで示される区間に相当する。ステップＳ１１１では、所定の温度範囲である第１の温度範囲での周期的変化を第１の回数繰り返して検体を加熱する。より具体的には、Ｔ１からＴ３ａまでの温度範囲の２０秒周期の周期的変化を５０回繰り返して検体を加熱する。すなわち、Ｔ１からＴ３ａまでの温度範囲は、第２態様における第１の温度範囲の例であり、５０回は、第２態様における第１の回数の例である。
【００５４】
ステップＳ１１２は、図２ＢにおいてＳＮＰ−１及びＳＮＰ−２のラベルで示される区間に相当する。ステップＳ１１２では、検体を一定の昇温速度で定速加熱する。図２Ｂのこの区間における、Ｔ１より低い温度からＴ３ａに近い温度までの２００秒間の加熱がこの定速加熱の例である。この区間では、検体に含まれる複数種類の標的遺伝子のうち、第１標的遺伝子のＰＣＲ増幅産物に結合した蛍光色素（蛍光色素で標識されたプローブ）が、温度の上昇に伴い解離し、蛍光を発する。この蛍光の強度の変化に基づく遺伝子型の判定は、第１態様についてした説明のとおりであるため、ここでは説明を省略する。
【００５５】
図２Ａを再び参照して第２態様の手順の続きを説明する。
【００５６】
第２態様では、２回目の加熱ステップである第２加熱ステップ（ＰＣＲ２）は、第１標的遺伝子の遺伝子型の判定の実施後に実施する（Ｓ２１１）。第２加熱ステップは、第１標的遺伝子と異なる標的遺伝子である第２標的遺伝子（ＳＮＰ３）をさらに増幅させるための手順である。
【００５７】
次に、標的遺伝子のうち第２標的遺伝子（ＳＮＰ３）の蛍光強度を測定するための蛍光検出ステップである第２蛍光検出ステップを、第３蛍光検出回路を用いて実施する（Ｓ２１２）。
【００５８】
次に、蛍光強度のグラフからＴｍ値（Ｔｍ３）を算出する（Ｓ２１３）。
【００５９】
次に、第２標的遺伝子（ＳＮＰ３）の遺伝子型を判定して（Ｓ２１４）、第２態様の一連の手順は完了する。
【００６０】
ステップＳ２１１からＳ２１４までの一連の手順の詳細を、図２Ｂに示す第２態様の具体例のタイミングチャートを参照して説明する。
【００６１】
ステップＳ２１１は、図２ＢにおいてＰＣＲ２のラベルで示される区間に相当する。ステップＳ２１１では、所定の温度範囲である第２の温度範囲での周期的変化を第２の回数繰り返して検体を加熱する。より具体的には、Ｔ１からＴ３aまでの温度範囲の２０秒周期の周期的変化を１０回繰り返して検体を加熱する。すなわち、Ｔ１からＴ３ｂまでの温度範囲は、第２態様における第２の温度範囲の例であり、１０回は、第２態様における第２の回数の例である。ここで、第２態様でも第１態様と同じく、Ｔ３ｂは、Ｔ３ａよりも高い。つまり、第１の温度範囲と第２の温度範囲とは異なり、この例でも、より後に実施される加熱ステップであるＰＣＲ２で適用される第２の温度範囲の上限温度が第１の温度範囲の上限温度よりも高い。
【００６２】
ステップＳ２１２は、図２ＢにおいてＳＮＰ−３のラベルで示される区間に相当する。ステップＳ２１２では、検体を一定の昇温速度で定速加熱する。図２Ｂのこの区間における、Ｔ１より低い温度からＴ３ａに近い温度までの２００秒間の加熱がこの定速加熱の例である。この区間では、検体に含まれる複数種類の標的遺伝子のＰＣＲ増幅産物に結合した蛍光色素（蛍光色素で標識されたプローブ）が、温度の上昇に伴い解離し、蛍光を発する。この蛍光の強度の変化に基づく遺伝子型の判定は、第１態様についてした上記の説明のとおりであるため、ここでは説明を省略する。
【００６３】
このように第２態様では、第１態様と異なり、蛍光検出ステップは２回実施される。より具体的には、蛍光検出ステップは、第１加熱ステップ後かつ第２加熱ステップの前に実施される、複数種類の標的遺伝子のうち第１標的遺伝子の蛍光強度を検出する第１蛍光検出ステップと、第２加熱ステップ後に実施される、蛍光検出ステップにより複数種類の標的遺伝子のうち第２標的遺伝子の蛍光強度を検出する第２蛍光検出ステップとを含む。
【００６４】
これにより、標的遺伝子は種類ごとの適切な条件で増幅され、タイプ（遺伝子型）判定に要する時間を短縮しつつ、その確度を確保することができる。
【００６５】
［Ａ−１−３．第３態様］
第３態様に係る遺伝子検査方法について、図３Ａ及び図３Ｂを用いて説明する。図３Ａは、第３態様に係る遺伝子検査方法の例を示すフローチャートであり、図３Ｂは、第３態様に係る遺伝子検査方法の例のタイミングチャートである。なお、図３Ａでは、第１態様又は第２態様のフローチャートと共通のステップは、図１Ａ又は図２Ｂと共通の参照符号で示す。
【００６６】
第３態様は、加熱の温度範囲が異なる第１加熱ステップと第２加熱ステップとを含む点、及び第１加熱ステップの後に実施される第２加熱ステップでの加熱の温度範囲の上限が第１加熱ステップでの加熱の温度範囲の上限がより高い点は第１態様と共通である。また、第３態様は、蛍光検出ステップは、第１加熱ステップ後かつ第２加熱ステップの前に実施される第１蛍光検出ステップと、第２加熱ステップ後に実施される第２蛍光検出ステップとを含む点、及び第１標的遺伝子と第２標的遺伝子とは異なる点が第２態様と共通である。以下、第１態様又は第２態様と異なる点を示しながら第３態様の一連の手順を説明する。
【００６７】
図３Ａに示すように、第３態様では、まず、検体を注入した遺伝子検査チップを遺伝子検査システムにセットする（Ｓ１００）。
【００６８】
次に、標的遺伝子を増幅させるために、１回目の加熱ステップである第１加熱ステップ（ＰＣＲ１）を実施する（Ｓ１２１）。
【００６９】
次に、第３態様では、第１加熱ステップに続けて実施されるのは第２加熱ステップではなく、標的遺伝子のうち第１標的遺伝子である蛍光強度を測定する蛍光検出ステップである第１蛍光検出ステップを実施する（Ｓ１２２）。第３態様における第１標的遺伝子はＳＮＰ１であり、第１蛍光検出回路を用いて実施される。
【００７０】
次に、蛍光強度のグラフからＴｍ値（Ｔｍ１）を算出する（Ｓ１２３）。
【００７１】
次に、第１標的遺伝子（ＳＮＰ１）の遺伝子型を判定する（Ｓ１２４）。
【００７２】
ステップＳ１２１からＳ１２４までの一連の手順の詳細を、図３Ｂに示す第３態様の具体例のタイミングチャートを参照して説明する。
【００７３】
ステップＳ１２１は、図３ＢにおいてＰＣＲ１のラベルで示される区間に相当する。ステップＳ１２１では、所定の温度範囲である第１温度範囲での周期的変化を第１の回数繰り返して検体を加熱する。より具体的には、Ｔ１からＴ３ａまでの温度範囲の２０秒周期の周期的変化を５０回繰り返して検体を加熱する。すなわち、Ｔ１からＴ３ｂまでの温度範囲は、第３態様における第１の温度範囲の例であり、５０回は、第３態様における第１の回数の例である。
【００７４】
ステップＳ１２２は、図２ＢにおいてＳＮＰ−１のラベルで示される区間に相当する。ステップＳ１２２では、検体を一定の昇温速度で定速加熱する。図３Ｂのこの区間における、Ｔ１より低い温度からＴ３ａに近い温度までの２００秒間の加熱がこの定速加熱の例である。この区間では、検体に含まれる複数種類の標的遺伝子のＰＣＲ増幅産物に結合した蛍光色素（蛍光色素で標識されたプローブ）が、温度の上昇に伴い解離し、蛍光を発する。この蛍光の強度の変化に基づく遺伝子型の判定は、第１態様についてした説明のとおりであるため、ここでは説明を省略する。
【００７５】
図３Ａを再び参照して第３態様の手順の続きを説明する。
【００７６】
第３態様では、２回目の加熱ステップである第２加熱ステップ（ＰＣＲ２）は、第１標的遺伝子の遺伝子型の判定の実施後に実施する（Ｓ２２１）。第２加熱ステップは、第１標的電子と異なる標的遺伝子である第２標的遺伝子（ＳＮＰ２）と第３標的遺伝子（ＳＮＰ３）をさらに増幅させるための手順である。
【００７７】
次に、第２標的遺伝子（ＳＮＰ２）の蛍光強度を測定する蛍光検出ステップである第２蛍光検出ステップを、第２蛍光検出回路を用いて実施する（Ｓ２２２）。
【００７８】
次に、蛍光強度のグラフからＴｍ値（Ｔｍ２）を算出する（Ｓ２２３）。
【００７９】
次に、第２標的遺伝子（ＳＮＰ２）の遺伝子型を判定する（Ｓ２２４）。
【００８０】
ステップＳ２２１からＳ２２４までの一連の手順の詳細を、図３Ｂに示す第３態様の具体例のタイミングチャートを参照して説明する。
【００８１】
ステップＳ２２１は、図３ＢにおいてＰＣＲ２のラベルで示される区間に相当する。ステップＳ２２１では、所定の温度範囲である第２の温度範囲での周期的変化を第２の回数繰り返して検体を加熱する。より具体的には、Ｔ１からＴ３ｂまでの温度範囲の２０秒周期の周期的変化を７回繰り返して検体を加熱する。すなわち、Ｔ１からＴ３ｂまでの温度範囲は、第３態様における第２の温度範囲の例であり、７回は、第３態様における第２の回数の例である。ここで、第３態様でも第１態様及び第２態様と同じく、Ｔ３ｂは、Ｔ３ａよりも高い。つまり、第１の温度範囲と第２の温度範囲は異なり、第３態様でも、より後に実施される加熱ステップであるＰＣＲ２で適用される第２の温度範囲の上限温度が第１の温度範囲の上限温度よりも高い。
【００８２】
ステップＳ２２２は、図３ＢにおいてＳＮＰ−２のラベルで示される区間に相当する。ステップＳ２２２では、検体を一定の昇温速度で定速加熱する。図３Ｂのこの区間における、Ｔ１より低い温度からＴ３ａに近い温度までの２００秒間の加熱がこの定速加熱の例である。この区間では、検体に含まれる複数種類の標的遺伝子のＰＣＲ増幅産物に結合した蛍光色素（蛍光色素で標識されたプローブ）が、温度の上昇に伴い解離し、蛍光を発する。この蛍光の強度の変化に基づく遺伝子型の判定は、第１態様についてした上記の説明のとおりであるため、ここでは説明を省略する。
【００８３】
図３Ａを三たび参照して第３態様の手順の続きを説明する。
【００８４】
第３態様では、３回目の加熱ステップである第３加熱ステップ（ＰＣＲ３）が、第２標的遺伝子の遺伝子型の判定の実施後にさらに実施される（Ｓ３２１）点が第１態様又は第２態様と異なる。第３加熱ステップは、第１標的電子及び第２標的電子のいずれとも異なる標的遺伝子である第３標的遺伝子（ＳＮＰ３）をさらに増幅させるための手順である。
【００８５】
次に、第３標的遺伝子（ＳＮＰ３）の蛍光強度を測定する蛍光検出ステップである第３蛍光検出ステップを、第３蛍光検出回路を用いて実施する（Ｓ３２２）。
【００８６】
次に、蛍光強度のグラフからＴｍ値（Ｔｍ３）を算出する（Ｓ３２３）。
【００８７】
次に、第３標的遺伝子（ＳＮＰ３）の遺伝子型を判定して（Ｓ３２４）、第３態様の一連の手順は完了する。
【００８８】
ステップＳ３２１からＳ３２４までの一連の手順の詳細を、図３Ｂに示す第３態様の具体例のタイミングチャートを参照して説明する。
【００８９】
ステップＳ３２１は、図３ＢにおいてＰＣＲ３のラベルで示される区間に相当する。ステップＳ３２１では、所定の温度範囲である第３の温度範囲での周期的変化を第３の回数繰り返して検体を加熱する。より具体的には、Ｔ１からＴ３ｃまでの温度範囲の２０秒周期の周期的変化を５回繰り返して検体を加熱する。すなわち、Ｔ１からＴ３ｂまでの温度範囲は、第３態様における第３の温度範囲の例であり、５回は、第３態様における第３の回数の例である。ここで、Ｔ３ｃは、Ｔ３ａよりも高いＴ３ｂよりもさらに高い。つまり、第３の温度範囲は第１の温度範囲及び第２の温度範囲とは異なり、第２加熱ステップより後に実施される加熱ステップであるＰＣＲ３で適用される第３の温度範囲の上限温度が第２の温度範囲の上限温度よりも高い。
【００９０】
ステップＳ３２２は、図３ＢにおいてＳＮＰ−３のラベルで示される区間に相当する。ステップＳ３２２では、検体を一定の昇温速度で定速加熱する。図３Ｂのこの区間における、Ｔ１より低い温度からＴ３ａに近い温度までの２００秒間の加熱がこの定速加熱の例である。この区間では、検体に含まれる複数種類の標的遺伝子のＰＣＲ増幅産物に結合した蛍光色素（蛍光色素で標識されたプローブ）が、温度の上昇に伴い解離し、蛍光を発する。この蛍光の強度の変化に基づく遺伝子型の判定は、第１態様についてした上記の説明のとおりであるため、ここでは説明を省略する。
【００９１】
このように第３態様では、第１態様及び第２態様と異なり、蛍光検出ステップは３回実施される。より具体的には、蛍光検出ステップは、第２態様に加えてさらに、第２蛍光検出ステップ後に、加熱ステップにより第２の温度範囲の上限よりも高い上限を有する第３の温度範囲での前記周期的変化を第３の回数繰り返して検体を加熱した後、複数種類の標的遺伝子のうち第３標的遺伝子の蛍光強度の変化を測定する第３蛍光検出ステップを含む。
【００９２】
これにより、ＰＣＲの実施の段階が増し、タイプ（遺伝子型）判定に要する時間を短縮しつつ、その確度をより確実に確保することができる。
【００９３】
［Ａ−１−４．実施例］
ここで、上記の実施形態に係る遺伝子検査方法による、蛍光波形による遺伝子型の判定の実施例を示す。この判定は、肥満に関する３遺伝子（ＡＤＢＲ２遺伝子、ＡＤＢＲ３遺伝子、及びＵＣＰ１遺伝子）を対象として実施された。また、この例では、ＡＤＢＲ２遺伝子はＳＮＰ１として、ＡＤＢＲ３遺伝子はＳＮＰ２として、ＵＣＰ１遺伝子はＳＮＰ３として扱った。
【００９４】
まず、比較例として、ＰＣＲにおいて一定の温度範囲（Ｔ１＝６２℃、Ｔ３＝９２℃）での周期的な加熱を繰り返した場合の判定の良否を表１に示す。表中の加熱サイクルの回数とは、ＰＣＲで実行されたこの周期的な加熱の繰り返しの回数である。また、表１では、誤判定があった場合が×、判定可能であった場合が〇、確度よく判定可能であった場合が◎で示されている。
【００９５】
【表１】
2018157801.tif 000003
【００９６】
このように、複数種類の標的遺伝子を含む検体に対して一定の温度範囲で、かつ２０秒と試薬の標準条件よりも短い周期での加熱によるＰＣＲを実施した場合、確度よく判定が可能な加熱サイクルの数には標的遺伝子の種類により差があり、３種類すべての標的遺伝子が確度よく判定できる加熱サイクル数がない。したがって、３種類すべてについての確度よく判定結果を得るための加熱条件がない。
【００９７】
次に、表２は、上記の第１態様に係る遺伝子検査方法での判定の良否を、ＰＣＲ２における加熱サイクルの回数ごとに示す。ＰＣＲ１の温度はＴ１＝６２℃、Ｔ３ａ＝９２℃、ＰＣＲ２の温度はＴ１＝６２℃、Ｔ３ｂ＝９５℃であり、それぞれの周期の条件は、図１Ｂに示されるとおりである。
【００９８】
【表２】
2018157801.tif 000004
【００９９】
表２から分かるように、第１態様に係る遺伝子検査方法では、ＰＣＲ２での加熱サイクルを４０回とした場合に、いずれの標的遺伝子についても確度よく判定できた。このことから、３種類すべてについての判定結果を得るための判定の実行時間は上記の比較例よりも短い時間で済むことが分かる。つまり、第１態様に係る遺伝子検査方法は、短い時間で効率よく実施することができる。
【０１００】
次に、表３は、上記の第２態様に係る遺伝子検査方法での判定の良否を、ＰＣＲ２における加熱サイクルの回数ごとに示す。ＰＣＲ１の温度はＴ１＝６２℃、Ｔ３ａ＝９３℃、ＰＣＲ２の温度はＴ１＝６２℃、Ｔ３ｂ＝９５℃であり、それぞれの周期の条件は、図２Ｂに示されるとおりである。
【０１０１】
【表３】
2018157801.tif 000005
【０１０２】
表３から分かるように、第２態様に係る遺伝子検査方法では、ＰＣＲ２での加熱サイクルを１０回とした場合に、いずれの標的遺伝子についても判定可能であるか、又は確度よく判定できた。このことから、３種類すべてについての判定結果を得るための判定の実行時間は上記の比較例よりも短い時間で済むことが分かる。つまり、第２態様に係る遺伝子検査方法も、短い時間で効率よく実施することができる。
【０１０３】
なお、上記のような短時間での判定に適した加熱サイクルの回数は、新たな種類の標的遺伝子については通常は未知である。第２実施形態では、このような加熱サイクルの回数を決定するための手順を含む遺伝子検査方法について説明する。
【０１０４】
Ａ−２．第２実施形態
本実施形態に係る遺伝子検査方法は、上述のとおり、複数種類の標的遺伝子の蛍光強度を測定しながら分析条件（具体的には、ＰＣＲでの加熱の温度範囲、この温度範囲での周期的変化（加熱サイクル）を実施する回数、ＰＣＲの実施回数等）を決定する遺伝子検査方法である。
【０１０５】
なお、本実施形態に係る遺伝子検査方法は、以下に示す各ステップを実施可能であり、ＳＮＰ１、ＳＮＰ２、及びＳＮＰ３をそれぞれ検出するための第１〜第３蛍光検出回路を備えるよう構成された遺伝子検査システムを用いて実施される。この遺伝子検査システムの構成は、第１実施形態で用いられる遺伝子検査システムの構成と基本的に共通であり、詳細は第４実施形態として後述する。
【０１０６】
以下、本実施形態に係る遺伝子検査方法について、図４〜図６Ｂを用いて説明する。図４は、本実施形態に係る遺伝子検査方法を示すフローチャートである。図５Ａ〜図５Ｃは、それぞれ、第２実施形態における複数種類の標的遺伝子（ＳＮＰ１、ＳＮＰ２、及びＳＮＰ３）の蛍光強度の変化点の検出に用いるグラフの例である。
【０１０７】
なお、図５Ａ、図５Ｂ、図５Ｃは、それぞれＳＮＰ１としてのＡＤＢＲ２遺伝子、ＳＮＰ２としてのＡＤＢＲ３遺伝子、ＳＮＰ３としてのＵＣＰ１遺伝子の、後述する予備ＰＣＲにおいて測定された蛍光変化を示す。例えば図５Ａを参照すると、加熱サイクルの２５回目近傍で蛍光変化の傾向が大きく変化したことを示す。本実施形態は、この加熱サイクルの回数とＰＣＲ増幅の最適回数との間に一定の関係があることが確認されたことに基づく。
【０１０８】
図４に示すように、まず、検体を注入した遺伝子検査チップを遺伝子検査システムにセットする（Ｓ１００）。
【０１０９】
次に、第１、第２、及び第３蛍光検出回路を起動する（Ｓ１３０）。
【０１１０】
次に、所定の温度範囲（例えば、下限値Ｔ１＝６２℃、上限値Ｔ３ａ＝９２℃）及び所定の加熱サイクルの数Ｐｎ−０（例えば、５０回）に設定されたＰＣＲ（以下、「予備ＰＣＲ」と称する。）を実施しながら、複数種類の標的遺伝子（ＳＮＰ１、ＳＮＰ２、及びＳＮＰ３）の蛍光強度の変化を測定する（Ｓ１４１）。
【０１１１】
次に、それぞれの標的遺伝子の蛍光強度の変化点（変曲点ともいう）Ｐｔｈ−１、Ｐｔｈ−２、及びＰｔｈ−３を検出する（Ｓ１４２）。上述の図５Ａにおいて蛍光変化の傾向が変化した加熱サイクルの２５回目は、この変化点の一例である。
【０１１２】
次に、ステップＳ１４２で検出されたそれぞれの標的遺伝子の蛍光強度の変化点における予備ＰＣＲでの加熱サイクル数に所定の係数を乗じ、ＰＣＲ１、ＰＣＲ２、及びＰＣＲ３でのそれぞれが完了するまでに実施される加熱サイクルの累積数であるＰｎ−１、Ｐｎ−２、及びＰｎ−３を算出する（Ｓ１４３）。
【０１１３】
次に、算出されたＰｎ−１のサイクル数から、実施済みの加熱サイクルの数であるＰｎ−０を減算することでＰＣＲ１の完了までに実施されるべき残りの加熱サイクルの数を算出する（Ｓ１４４）。
【０１１４】
ステップＳ１４１からＳ１４４までのフローについて、具体例を用いてより詳細に説明する。
【０１１５】
図５Ａ〜図５Ｃに示すように、予備ＰＣＲ（Ｐｎ−０＝５０）を実施する間（Ｓ１４１）、継続して複数種類の標的遺伝子（ＳＮＰ１、ＳＮＰ２、及びＳＮＰ３）の蛍光強度の変化を測定する（Ｓ１４２）。この例では、複数種類の標的遺伝子のうち、ＳＮＰ１は２５サイクル目（Ｐｔｈ−１＝２５）、ＳＮＰ２は２５サイクル目（Ｐｔｈ−２＝２５）、ＳＮＰ３は３５サイクル目（Ｐｔｈ−３＝３５）に変化点が見られる（Ｓ１４２）。
【０１１６】
次に、これらの変化点に、各標的遺伝子について予め定めた係数を乗じ、ＰＣＲ１、ＰＣＲ２及びＰＣＲ３のそれぞれを完了するまでに実施する加熱サイクルの累積数Ｐｎ−１、Ｐｎ−２、及びＰｎ−３を算出する（Ｓ１４３）。この係数は、例えば、発明者らが確認した、上述の加熱サイクルの回数とＰＣＲ増幅の最適回数との間にある一定の関係に基づいて決定される。
【０１１７】
その後、予備ＰＣＲの加熱サイクルの数Ｐｎ−０をステップＳ１４３で算出したＰｎ−１から減算して、ＰＣＲ１で実施する残サイクル数を算出する（Ｓ１４４）。残サイクル数が０である場合は、予備ＰＣＲ（Ｓ１４１）を実施することでＰＣＲ１（Ｓ１５１）が完了したものとする。残サイクル数が０より大きい場合は、加熱サイクルをその残サイクル数繰り返してＰＣＲ１を完了させる（Ｓ１５１）。
【０１１８】
その後、Ｔｍ値（Ｔｍ１）を算出し（Ｓ１５２）、第１標的遺伝子（ＳＮＰ１）の遺伝子型を判定する（Ｓ１５３）。
【０１１９】
また、ステップＳ１４３で算出したＰｎ−２のサイクル数からＰｎ−１を減算することにより、ＰＣＲ２を完了するための加熱サイクルの残サイクル数を算出する（Ｓ１４４）。ＰＣＲ２では、所定の温度範囲（第２の温度範囲）で残サイクル数の加熱サイクルを実施し（Ｓ２５１）、Ｔｍ値（Ｔｍ２）を算出し（Ｓ２５２）、第２標的遺伝子（ＳＮＰ２）の遺伝子型を判定する（Ｓ２５３）。
【０１２０】
また、ステップＳ１４３で算出されたＰｎ−３のサイクル数からＰｎ−２を減算することにより、ＰＣＲ３を完了するための加熱サイクルの残サイクル数を算出する（Ｓ１４４）。ＰＣＲ３では、所定の温度範囲（第３の温度範囲）で残サイクル数の加熱サイクルを実施し（Ｓ３５１）、Ｔｍ値（Ｔｍ３）を算出し（Ｓ３５２）、第３標的遺伝子（ＳＮＰ３）の遺伝子型を判定する（Ｓ３５３）。
【０１２１】
ステップＳ１３１からＳ３５３までのフローが完了（すべての複数種類の標的遺伝子についての遺伝子型の判定が終了）した後、第１〜第３蛍光検出回路２７〜２９を停止して（Ｓ１９０）、第２実施形態に係る遺伝子検査方法は完了する。
【０１２２】
なお、本実施形態に係る遺伝子検査方法は、第１実施形態の第３態様に係る遺伝子検査方法において、ステップＳ１００とステップＳ１２１との間に、本実施形態における加熱サイクルの決定のための一連の手順（ステップＳ１３０〜Ｓ１４４）が組み込まれているともいえる。この一連の手順は、第１実施形態の第１態様又は第２態様に係る遺伝子検査方法に組み込まれてもよい。
【０１２３】
より具体的には、例えば第１実施形態の第１態様に係る遺伝子検査方法では、図１ＡのフローチャートにおけるステップＳ１００とステップＳ１０１との間に、本実施形態におけるステップＳ１３０〜Ｓ１４４が実施されてもよい。これにより、ステップＳ１０１でＰＣＲ１を完了するための残サイクル数及びステップＳ１０２でＰＣＲ２を完了するための残サイクル数が算出される。また、例えば第１実施形態の第２態様に係る遺伝子検査方法では、図１ＢのフローチャートにおけるステップＳ１００とステップＳ１１１との間に、本実施形態におけるステップＳ１３０〜Ｓ１４４が実施されてもよい。これにより、ステップＳ１１１でＰＣＲ１を完了するための残サイクル数及びステップＳ２１１でＰＣＲ２を完了するための残サイクル数が算出される。なお、これらの場合、蛍光検出ステップでの各蛍光検出回路のＯＮ／ＯＦＦは適宜省略される。
【０１２４】
また、上述の説明では、ＰＣＲ１で用いられる第１の温度範囲での周期的変化（加熱サイクル）を繰り返したときの標的遺伝子の蛍光強度に基づいて、ＰＣＲ１及びＰＣＲ２以降で加熱サイクルを繰り返す回数の少なくとも一つが決定されたが、本実施形態に係る遺伝子検査方法はこれに限定されない。ＰＣＲ２で用いられる第２の温度範囲での周期的変化（加熱サイクル）を繰り返したときの標的遺伝子の蛍光強度に基づいて、ＰＣＲ２以降で加熱サイクルを繰り返す回数の少なくとも一つが決定されてもよい。この例を図６Ａ及び図６Ｂを用いて説明する。
【０１２５】
図６Ａ及び図６Ｂは、本実施形態における加熱サイクル数の決定のための一連の手順を第１実施形態の第１態様に係る遺伝子検査方法に組み込んで実行した際に測定された、ＳＮＰ３としてのＵＣＰ１遺伝子の蛍光変化を示す。
【０１２６】
図６Ａは、この遺伝子検査方法において予備ＰＣＲの一部として実行されたＰＣＲ１での蛍光変化を示す。ＰＣＲ１は、Ｔ１＝６２℃、Ｔ２＝７２℃、Ｔ３ａ＝９２℃、加熱サイクル数は２０回の条件で実行された。しかしながら、ＰＣＲ１が終わるまでに、変化点は検出されなかった。
【０１２７】
図６Ｂは、この遺伝子検査方法において予備ＰＣＲの一部として実行されたＰＣＲ２での蛍光変化を示す。ＰＣＲ２は、Ｔ１＝６２℃、Ｔ２＝７２℃、Ｔ３ｂ＝９５℃、加熱サイクル数は２０回の条件で実行された。ＰＣＲ２では、ＰＣＲ１での加熱サイクル数とあわせて３３回目近傍で変化点が検出された（Ｐｔｈ−２＝３３）。この場合、３３に所定の係数を乗じて加熱サイクル数Ｐｎ−２が算出され、残サイクル数がさらに算出される。残サイクル数が４０以下であれば、遺伝子検査方法は完了する。残サイクル数が４０よりも大きければ、さらにＰＣＲ２における加熱サイクルが実行される。
【０１２８】
また、上述の説明では、ステップＳ１４４において、ＰＣＲ１について算出された残サイクル数が０の場合にはＰＣＲ１は完了したものとされたが、ＰＣＲ２又はＰＣＲ３についても同様である。言い換えると、ＰＣＲ１〜ＰＣＲ３は、算出された残サイクル数が０である場合に実施されない。このように、第２実施形態に係る遺伝子検査方法によって、ＰＣＲの実施回数（ＰＣＲ１〜ＰＣＲ３のうち、実施されるもの）が決定される場合もある。
【０１２９】
このように、本実施形態に係る遺伝子検査方法は、第１の温度範囲での周期的変化を第１の回数繰り返して検体を加熱する間に、複数種類の標的遺伝子の蛍光強度の変化を測定し、蛍光強度の変化に基づいて第１の回数及び第２以降の回数の少なくとも一つを決定する、又は、第２の温度範囲での周期的変化を第２の回数繰り返して検体を加熱する間に、複数種類の標的遺伝子の蛍光強度の変化を測定し、蛍光強度の変化に基づいて第２の回数及び第２以降の回数の少なくとも一つを決定する、加熱サイクル決定ステップを有してもよい。
【０１３０】
これにより、既存の分析データ（分析条件等）を有しない新たな種類の標的遺伝子に対しても、より短時間での遺伝子型の判定を実現するための加熱条件の設定が可能となる。また、検体間での個体差に応じて加熱サイクル数を、遺伝子検査方法を実行しながら変化させることができるため、遺伝子型判定の確度を向上させることができる。
【０１３１】
［Ｂ．遺伝子検査チップ及び遺伝子検査チップを用いた遺伝子検査方法］
以下、本開示における遺伝子検査チップ及びこの遺伝子検査チップを用いた遺伝子検査方法について、第３実施形態として図７及び図８を用いて説明する。図７は、本実施形態に係る遺伝子検査チップの一例を示す斜視図である。また、図８は、本実施形態に係る遺伝子検査チップを用いた遺伝子検査方法の一例である。
【０１３２】
図７に示すように、本実施形態に係る遺伝子検査チップ１０は、チップ部１とチップフォルダー２とを備える。チップ部１は、所定の温度範囲での周期的変化を繰り返して検体を加熱し、検体に含まれる複数種類の標的遺伝子を増幅させるための、検体を保持する検体保持部３と、チップフォルダー２には複数種類の標的遺伝子を増幅させるための、検体の加熱の温度範囲及び加熱の回数に対応付けられる識別子を保持する媒体４と、を備える。
【０１３３】
本実施形態に係る遺伝子検査チップ１０が上述した識別子を有することにより、検体ごとの遺伝子検査の条件設定等の操作が不要となり、検査を自動化することができる。そのため、複数種類の標的遺伝子の遺伝子型（タイプ）の判定を短時間で実現することができる。また、識別子に対応付けられる他の情報（例えば、サンプルＩＤ、ＰＣＲサイクル数の決定に必要な係数等）により、複数種類の標的遺伝子に適した条件設定等の煩雑な操作も不要となり、遺伝子検査を自動化できる。さらに、複数種類の標的遺伝子の遺伝子型の判定の確度を向上させることができる。
【０１３４】
また、識別子を保持する媒体４は、例えば、二次元バーコード、ＩＣチップ等を挙げることができる。
【０１３５】
媒体４による識別子と検体の加熱の回数との対応付けの態様の例を挙げると、例えば媒体４が、遺伝子検査システムが読み取り可能な各検体の加熱の回数等が直接示してもよい。又は、媒体４はサンプルＩＤを示し、遺伝子検査システムは各検体のサンプルＩＤと加熱の回数等を関連付けたテーブル等のデータを記憶装置に保持しており、媒体４から読み取ったサンプルＩＤに基づいて該当する検体の加熱の回数を取得してもよい。なお、この遺伝子検査システムの詳細は第４実施形態として後述する。
【０１３６】
なお、遺伝子検査チップ１０は、検体注入口５及び検体注入口５と検体保持部３とを連通する流路（図示せず）を備えてもよい。
【０１３７】
遺伝子検査チップ１０を用いた遺伝子検査の一例は、図８に示すように、まず、遺伝子検査チップに検体を注入し、チップを装置にセットした後（Ｓ１００）、識別子に対応付けられた第１の温度範囲（ＰＣＲ１での加熱の温度範囲）及び第１の回数（ＰＣＲ１の加熱サイクル数）、並びに第２の温度範囲（ＰＣＲ２での加熱の温度範囲）及び第２の回数（ＰＣＲ２の加熱サイクル数）等の情報を読み取る（Ｓ１７０）。次に、１回目の加熱ステップ（ＰＣＲ１）において標的遺伝子を増幅させ、（Ｓ１７１）、続いて、さらに標的遺伝子を増幅させるために２回目の加熱ステップ（ＰＣＲ２）を実施する（Ｓ１７２）。次に、蛍光検出ステップにおいて標的遺伝子（ＳＮＰ１、ＳＮＰ２、ＳＮＰ３）の蛍光強度を測定する（Ｓ１７３）。次に、蛍光強度のグラフからＴｍ値（Ｔｍ１、Ｔｍ２、Ｔｍ３）を算出する（Ｓ１７４）。次に、標的遺伝子（ＳＮＰ１、ＳＮＰ２、ＳＮＰ３）の遺伝子型を判定する（Ｓ１７５）。
【０１３８】
すなわち、本実施形態に係る遺伝子検査方法は、検体は、第１の温度範囲及び第１の回数、並びに第２の温度範囲及び第２の回数を示す識別子を保持する媒体４を備える遺伝子検査チップ１０に保持され、第１蛍光検出ステップでは、検体を、識別子に対応する第１の温度範囲での周期的変化を第１の回数繰り返して加熱し、第２蛍光検出ステップでは、検体を、識別子に第２の温度範囲での対応する周期的変化を第２の回数繰り返して加熱してもよい。このように、検体に含まれる複数種類の標的遺伝子に適した分析条件等の識別子を読み込み、遺伝子検査を実施することにより、複数種類の標的遺伝子の遺伝子型の判定を短時間で実現することができる。
【０１３９】
なお、本実施形態に係る遺伝子検査方法は、第１実施形態の第１態様に係る遺伝子検査方法において、ステップＳ１００の直後に、本実施形態における識別子読み取りの手順（ステップＳ１７０）が組み込まれているともいえる。この手順は、第１実施形態の第２態様又は第３態様に係る遺伝子検査方法において、ステップＳ１００の直後に組み込まれてもよい。
【０１４０】
［Ｃ．遺伝子検査システム］
以下、本開示における遺伝子検査システムについて、第４実施形態として図８及び図９を用いて説明する。図９は、本実施形態に係る遺伝子検査システムを示すブロック図である。
【０１４１】
本実施形態に係る遺伝子検査システムは、複数種類の蛍光色素を含む検出試薬と複数種類の標的遺伝子を含む生体試料とを混合し、複数種類の標的遺伝子のそれぞれに複数種類の蛍光色素のうち互いに異なる蛍光色素を修飾して得られた検体を、所定の温度範囲で周期的変化を繰り返して加熱する加熱部（ペルチェ素子２５）と、検体を一定の昇温速度で加熱しながら検体に波長の異なる複数の励起光を照射し、検体の蛍光変化を検出する蛍光検出部３０（第１蛍光検出部３１、第２蛍光検出部３２、及び第３蛍光検出部３３）と、蛍光検出部において得られる蛍光強度の変化に基づき前記複数種類の標的遺伝子のタイプ判定を行う判定部とを備える。蛍光検出部３０は、加熱部（ペルチェ素子２５）は、第１の温度範囲での周期的変化を第１の回数繰り返して検体を加熱し、さらに、第１の温度範囲と異なる、第２の温度範囲での前記周期的変化を第２の回数繰り返して検体を加熱する。
【０１４２】
これにより、複数種類の標的遺伝子のタイプ（遺伝子型）判定を短時間で実現することができる。さらに、遺伝子検査を自動化でき、迅速に、かつ、正確に、複数種類の標的遺伝子の遺伝子型を判定できる。
【０１４３】
図９に示すように、本実施形態に係る遺伝子検査システムは、例えば、上述の識別子を保持する媒体４を備える遺伝子検査チップ１０から識別子リーダー２１で識別子を読み取り（Ｓ１７０）、パソコン２２ａ内部のコントローラ２２に識別子の情報が伝達される。コントローラ２２からの伝達により、温度設定回路２３を通じてペルチェ駆動回路２４が起動し、ペルチェ素子２５が検体保持部３を加熱又は冷却する。これにより、図８に示すＰＣＲ１（Ｓ１７１）、ＰＣＲ２（Ｓ１７２）、及び定速加熱（Ｓ１７３）を実行する。
【０１４４】
蛍光検出は、遺伝子検査方法が複数回の蛍光検出ステップを含む場合には、蛍光検出ステップのたびに実施される。各ステップで駆動する蛍光検出部３０は、そのステップで判定する標的遺伝子の種類により異なるが、例えば、１種類の標的遺伝子の遺伝子型を判定する場合について説明する。
【０１４５】
第１蛍光検出部３１は、例えば、コントローラ２２からの指示により、蛍光検出器切替回路２６を通じて第１蛍光検出回路２７を起動させる。そして、第１蛍光検出部３１のＬＥＤから射出された所定の波長を有する光がフィルタを通過することにより光の波長帯域が絞られ、ダイクロイックミラーで反射されて検体保持部３に照射される（励起光）。検体保持部３からの蛍光を、ダイクロイックミラーを通じてフォトダイオード（ＰＤ）で受光する。ＰＤで蛍光を受光すると、ＰＤから受光信号がＰＣＲ蛍光検出回路３４を通じてコントローラ２２に送信される。第１蛍光検出ステップが終了した後、コントローラ２２からの指示によりＴｍ算出回路３５でＴｍ値が算出され、Ｔｍ値がコントローラ２２に送信される。そして、この信号を基にコントローラ２２の判定部が、第１標的遺伝子の遺伝子型の判定を行う。
【０１４６】
なお、第２蛍光検出部３２、及び第３蛍光検出部３３についても上述した内容と同様であるため、詳細な説明を省略する。
【０１４７】
（まとめ）
以上のように、上記実施の形態に係る遺伝子検査方法は、複数種類の蛍光色素を含む検出試薬と複数種類の標的遺伝子を含む生体試料とを混合し、複数種類の標的遺伝子のそれぞれに複数種類の蛍光色素のうち互いに異なる蛍光色素を修飾して得られた検体を、所定の温度範囲での周期的変化を繰り返して加熱する加熱ステップと、検体を一定の昇温速度で加熱しながら検体に波長の異なる複数の励起光を照射し、検体の蛍光変化を検出する蛍光検出ステップと、蛍光検出ステップにより得られる蛍光強度の変化に基づき複数種類の標的遺伝子のタイプ判定を行う判定ステップと、を含む。加熱ステップは、第１の温度範囲での周期的変化を第１の回数繰り返して検体を加熱する第１加熱ステップと、第１の温度範囲と異なる、第２の温度範囲での周期的変化を第２の回数繰り返して検体を加熱する第２加熱ステップと、を含む。
【０１４８】
このように、異なる温度範囲での周期的変化で検体を加熱することで、検体に含まれる複数種類の標的遺伝子のそれぞれの標的遺伝子を、より適切な条件で増幅させることができる。これにより、複数の標的遺伝子のタイプ（遺伝子型）判定に要する時間を短縮しつつ、その確度を確保することができる。
【０１４９】
例えば上記実施の形態に係る遺伝子検査方法では、第２の温度範囲の上限温度は、第１の温度範囲の上限温度よりも高くてもよい。
【０１５０】
これにより、標的遺伝子は種類ごとの適切な条件で増幅され、タイプ（遺伝子型）判定に要する時間を短縮しつつ、その確度を確保することができる。
【０１５１】
例えば、上記実施の形態に係る遺伝子検査方法では、蛍光検出ステップは、第１加熱ステップ後かつ第２加熱ステップの前に、蛍光検出ステップにより複数種類の標的遺伝子のうち第１標的遺伝子の蛍光強度を検出する第１蛍光検出ステップと、第２加熱ステップ後に、蛍光検出ステップにより複数種類の標的遺伝子のうち第２標的遺伝子の蛍光強度を検出する第２蛍光検出ステップと、を含んでもよい。
【０１５２】
これにより、標的遺伝子は種類ごとの適切な条件で増幅され、タイプ（遺伝子型）判定に要する時間を短縮しつつ、その確度を確保することができる。
【０１５３】
また、上記実施の形態に係る遺伝子検査方法では、蛍光検出ステップは、第１加熱ステップ及び第２加熱ステップの後にのみ実施されてもよい。
【０１５４】
これにより、標的遺伝子は種類ごとの適切な条件で増幅され、その後に複数種類の標的遺伝子の蛍光強度を並行して測定するため、複数種類の標的遺伝子のタイプ（遺伝子型）判定の確度を確保しつつ、その所要時間をさらに短縮することができる。
【０１５５】
また、上記実施の形態に係る遺伝子検査方法では、蛍光検出ステップは、さらに、第２蛍光検出ステップ後に、加熱ステップにより第２の温度範囲の上限よりも高い上限を有する第３の温度範囲での周期的変化を第３の回数繰り返して検体を加熱した後、蛍光検出ステップにより複数種類の標的遺伝子のうち第３標的遺伝子の蛍光強度の変化を測定する第３蛍光検出ステップを含み、判定ステップでは、第３蛍光検出ステップにおいて得られる蛍光強度の変化に基づき複数種類の標的遺伝子のタイプ判定を行ってもよい。
【０１５６】
これにより、ＰＣＲの実施の段階が増し、タイプ（遺伝子型）判定に要する時間を短縮しつつ、その確度をより確実に確保することができる。
【０１５７】
また、上記実施の形態に係る遺伝子検査方法は、さらに、第１の温度範囲での周期的変化を第１の回数繰り返して検体を加熱する間に、複数種類の標的遺伝子の蛍光強度の変化を測定し、蛍光強度の変化に基づいて第１の回数及び第２以降の回数の少なくとも一つを決定する、又は、第２の温度範囲での周期的変化を第２の回数繰り返して検体を加熱する間に、複数種類の標的遺伝子の蛍光強度の変化を測定し、蛍光強度の変化に基づいて第２の回数及び第２以降の回数の少なくとも一つを決定する、加熱サイクル決定ステップを有してもよい。
【０１５８】
これにより、既存の分析データ（分析条件等）を有しない新たな種類の標的遺伝子に対しても、遺伝子型の判定が可能となる。また、サンプル間での個体差に応じて加熱サイクル数を変化させることができるため、遺伝子型判定の確度を向上させることができる。
【０１５９】
上記実施の形態に係る遺伝子検査方法では、検体は、第１の温度範囲及び第１の回数、並びに、第２の温度範囲及び第２の回数を示す識別子を保持する媒体を備える遺伝子検査チップ１０に保持され、第１蛍光検出ステップでは、検体を、識別子に対応する第１の温度範囲での周期的変化を第１の回数繰り返して加熱し、第２蛍光検出ステップでは、検体を、識別子に対応する第２の温度範囲での周期的変化を第２の回数繰り返して加熱してもよい。
【０１６０】
これにより、検体に含まれる標的遺伝子の種類ごとに適した分析条件が用いられる場合も、各検体の分析条件を示す識別子を用いて遺伝子検査を実施することにより、複数種類の標的遺伝子の遺伝子型の判定の長時間化を抑え、又は時間の短縮を図ることができる。
【０１６１】
上記実施の形態に係る遺伝子検査チップ１０は、所定の温度範囲での周期的変化を繰り返して検体を加熱し、検体に含まれる複数種類の標的遺伝子を増幅させるための、検体を保持する検体保持部３と、複数種類の標的遺伝子を増幅させるための、検体の加熱の温度範囲及び加熱の回数に対応付けられる識別子を保持する媒体４と、を備える。
【０１６２】
上記実施の形態に係る遺伝子検査チップが上述した識別子を有することにより、遺伝子検査の条件設定等の操作が不要となり、検査を自動化することができる。そのため、複数種類の標的遺伝子の遺伝子型（タイプ）の判定を短時間で実現することができる。また、識別子に対応付けられる他の情報（例えば、サンプルＩＤ、ＰＣＲサイクル数の決定に必要な係数等）により、複数種類の標的遺伝子に適した条件設定等の煩雑な操作も不要となり、遺伝子検査を自動化できる。さらに、複数種類の標的遺伝子の遺伝子型の判定の確度を向上させることができる。
【０１６３】
上記実施の形態に係る遺伝子検査システムは、複数種類の蛍光色素を含む検出試薬と複数種類の標的遺伝子を含む生体試料とを混合し、複数種類の標的遺伝子のそれぞれに複数種類の蛍光色素のうち互いに異なる蛍光色素を修飾して得られた検体を、所定の温度範囲で周期的変化を繰り返して加熱する加熱部と、検体を一定の昇温速度で加熱しながら検体に波長の異なる複数の励起光を照射し、検体の蛍光変化を検出する蛍光検出部３０と、蛍光検出部３０において得られる蛍光強度の変化に基づき複数種類の標的遺伝子のタイプ判定を行う判定部と、を備える。加熱部は、第１の温度範囲での周期的変化を第１の回数繰り返して検体を加熱し、さらに、第１の温度範囲と異なる、第２の温度範囲での周期的変化を第２の回数繰り返して検体を加熱する。
【０１６４】
これにより、複数種類の標的遺伝子のタイプ（遺伝子型）判定を短時間で実現することができる。さらに、遺伝子検査を自動化でき、迅速に、かつ、正確に、複数種類の標的遺伝子の遺伝子型の判定ができる。
【０１６５】
以上、本開示に係る遺伝子検査方法、遺伝子検査チップ、及び遺伝子検査システムについて、実施の形態に基づいて説明したが、本開示は、これらの実施の形態に限定されるものではない。本開示の趣旨を逸脱しない限り、当業者が思いつく各種変形を実施の形態に施したものや、実施の形態における一部の構成要素を組み合わせて構築される別の形態も、本開示の範囲内に含まれる。
【産業上の利用可能性】
【０１６６】
本開示に係る遺伝子検査方法、遺伝子検査チップ、及び遺伝子検査システムは、例えば、得られる遺伝子情報に基づいて個人の体質に合った食品、化粧品、サプリメント、トレーニングの提案、又は、病気罹患率の診断、投与薬剤の種類と効果及び副作用の予測等に応用できる。
【符号の説明】
【０１６７】
４  媒体
１０  遺伝子検査チップ（チップ）
２５  ペルチェ素子（加熱部）
３０  蛍光検出部
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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