(57)【要約】【課題】高い透明性を有し、生体分子の蛍光観察に適した積層体、積層体の製造方法及び分析用器材の提供。高い透明性を有し、生体分子の蛍光観察に適した積層体の製造に利用可能な表面処理液及び生体分子吸着層の提供。【解決手段】本発明の積層体は、基材１と、前記基材１上に、生体分子吸着層２とを備え、前記生体分子吸着層２は、ポリ（ビニリデンフルオリド）（ＰＶＤＦ）層である。本発明の積層体の製造方法は、基材に密着剤を塗布し、密着層を形成する工程と、前記密着層に生体分子吸着溶液を塗布し、生体分子吸着層を形成する工程と、を備える。本発明の表面処理液は、ＰＶＤＦ溶液を備える。本発明の生体分子吸着層は、ＰＶＤＦ層からなる。本発明の分析用器材は、少なくとも一部の面上に、前記積層体を備える。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
基材と、前記基材上に、生体分子吸着層とを備え、前記生体分子吸着層は、ポリ（ビニリデンフルオリド）（ＰＶＤＦ）層であることを特徴とする積層体。
【請求項２】
全光線透過率が９０％以上である請求項１に記載の積層体。
【請求項３】
前記ＰＶＤＦ層は、フッ化ビニリデンの重合体、又は、フッ化ビニリデンとエチレン、プロピレン、フッ化ビニル、トリフルオロエチレン、トリフルオロクロロエチレン、テトラフルオロエチレン、ヘキサフルオロプロピレン、及びフルオロアルキルビニルエーテルからなる群より選ばれる少なくとも１種との共重合体を含む請求項１又は２に記載の積層体。
【請求項４】
前記ＰＶＤＦ層は、更に、フッ化ビニリデンと酸性基を有する重合性不飽和化合物との共重合体、又は、フッ化ビニリデンと、エチレン、プロピレン、フッ化ビニル、トリフルオロエチレン、トリフルオロクロロエチレン、テトラフルオロエチレン、ヘキサフルオロプロピレン、及びフルオロアルキルビニルエーテルからなる群より選ばれる少なくとも１種と、酸性基を有する重合性不飽和化合物との共重合体を含む請求項３に記載の積層体。
【請求項５】
前記酸性基を有する重合性不飽和化合物が、炭素数４〜８の不飽和二塩基酸、メタクリル酸、及びアクリル酸からなる群より選ばれる少なくとも１種である請求項４に記載の積層体。
【請求項６】
前記基材と前記生体分子吸着層との間に密着層を備えた請求項１〜５のいずれか一項に記載の積層体。
【請求項７】
基材に密着剤を塗布し、密着層を形成する工程と、
前記密着層に生体分子吸着溶液を塗布し、生体分子吸着層を形成する工程と、を備えることを特徴とする請求項１〜６のいずれか一項に記載の積層体の製造方法。
【請求項８】
ＰＶＤＦ溶液を備えたことを特徴とする表面処理液。
【請求項９】
請求項８に記載の表面処理液を基材に塗布する工程を備えることを特徴とする表面処理方法。
【請求項１０】
ＰＶＤＦ層からなることを特徴とする生体分子吸着層。
【請求項１１】
全光線透過率が９０％以上であることを特徴とする生体分子吸着層。
【請求項１２】
少なくとも一部の面上に、請求項１〜６のいずれか一項に記載の積層体を備えたことを特徴とする分析用器材。
【請求項１３】
スクリーニング用である請求項１２に記載の分析用器材。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、積層体、積層体の製造方法、表面処理液、表面処理方法、生体分子吸着層、及び分析用器材に関する。
【背景技術】
【０００２】
ポリ（ビニリデンフルオリド）（ＰＶＤＦ）膜は、ウェスタンブロットでのタンパク質吸着や、ＥＬＩＳｐｏｔでのサイトカイン吸着で広く使われている。
【０００３】
特許文献１には、ポリフッ化ビニリデンからなる多孔質膜に結合する検体センサ分子を用いた検体の濃度を決定する方法が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特表２００９−５４５７３９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
特許文献１に記載のポリフッ化ビニリデンからなる多孔質膜を用いた微小アレイでは、タンパク質の吸着量は多いが、アレイ自体の透明性が低く、明視野での顕微鏡観察及びマーカーとして蛍光物質を用いた場合の観察が難しい。
【０００６】
本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであって、高い透明性を有し、蛍光観察に適した積層体、積層体の製造方法及び分析用器材を提供する。また、本発明は、高い透明性を有し、蛍光観察に適した積層体の製造に利用可能な表面処理液、及び表面処理方法、並びに生体分子吸着層を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の第１の態様は、基材と、前記基材上に、生体分子吸着層とを備え、前記生体分子吸着層は、ポリ（ビニリデンフルオリド）（ＰＶＤＦ）層であることを特徴とする積層体である。
【０００８】
本発明の第２の態様は、基材に密着剤を塗布し、密着層を形成する工程と、前記密着層に生体分子吸着溶液を塗布し、生体分子吸着層を形成する工程と、を備えることを特徴とする前記積層体の製造方法である。
【０００９】
本発明の第３の態様は、ＰＶＤＦ溶液を備えたことを特徴とする表面処理液である。
【００１０】
本発明の第４の態様は、前記表面処理液を基材に塗布する工程を有することを特徴とする表面処理方法である。
【００１１】
本発明の第５の態様は、ＰＶＤＦ層からなることを特徴とする生体分子吸着層である。
【００１２】
本発明の第６の態様は、全光線透過率が９０％以上であることを特徴とする生体分子吸着層である。
【００１３】
本発明の第７の態様は、少なくとも一部の面上に、前記積層体を備えたことを特徴とする分析用器材である。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、高い透明性を有し、生体分子の蛍光観察に適した積層体、積層体の製造方法及び分析用器材を提供することができる。また、本発明によれば、高い透明性を有し、生体分子の蛍光観察に適した積層体の製造に利用可能な表面処理液、及び表面処理方法、並びに生体分子吸着層を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】本発明の積層体の一実施形態を模式的に示す断面図である。
【図２】本発明の積層体の他の実施形態を模式的に示す断面図である。
【図３】本発明の分析用器材の一実施形態を模式的に示す断面図である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下、本発明を実施するための形態（以下、単に「本実施形態」と称する場合がある。）について詳細に説明する。以下に示す本実施形態は、本発明を説明するための例示であり、本発明を以下の内容に限定する趣旨ではない。本発明は、その要旨の範囲内で適宜に変形して実施できる。
【００１７】
≪積層体≫
一実施形態において、本発明は、基材と、前記基材上に、生体分子吸着層とを備え、前記生体分子吸着層は、ポリ（ビニリデンフルオリド）（ＰＶＤＦ）層である積層体を提供する。
【００１８】
本実施形態の積層体は、高い透明性を有し、生体分子の蛍光観察等に適した分析用器材等を提供することができる。
【００１９】
なお、本明細書における「生体分子」としては、例えば、ＤＮＡ、ｍＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、人工核酸（例えば、ＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ）、ＢＮＡ（Ｂｒｉｄｇｅｄ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ））等の核酸（天然由来であってもよく、化学合成したものであってもよい。）；リガンド、サイトカイン、ホルモン等のペプチド；受容体、酵素、抗原、抗体等のタンパク質；細胞、ウイルス、細菌、真菌等が挙げられ、タンパク質が好ましい。
生体分子を含む試料としては、例えば、血液、血清、血漿、尿、パフィーコート、唾液、精液、胸部滲出液、脳脊髄液、涙液、痰、粘液、リンパ液、腹水、胸水、羊水、膀胱洗浄液、気管支肺胞洗浄液、細胞抽出液、細胞培養上清等が挙げられる。
【００２０】
＜構造＞
本実施形態の積層体の構造について、以下に詳細に説明する。
図１は、本発明の積層体の一実施形態を模式的に示す断面図である。図１では、基材１及び生体分子吸着層２がこの順で積層されている。
【００２１】
積層体１０は、全光線透過率が９０％以上であることが好ましく、９３％以上であることが特に好ましい。
また、積層体１０は、ヘーズが３０％以下であることが好ましく、１５％以下であることがより好ましく、５％以下であることが特に好ましい。
なお、本明細書における「全光線透過率」（ｔｏｔａｌ  ｌｕｍｉｎｏｕｓ  ｔｒａｎｓｍｉｔｔａｎｃｅ）及び「ヘーズ」（曇り度）は、日本工業規格（ＪＩＳ  Ｋ７１３６）により測定することができる。全光線透過率を高くし、さらにヘーズを低くすることにより、本実施形態の積層体を用いた場合における生体分子の観察性を確保することができる。
【００２２】
図１に示す積層体１０は、例えば、生体分子吸着層２の表面に生体分子を含む溶液等を添加し、該生体分子を捕捉するために、使用される。
【００２３】
図２は、本発明の積層体の他の実施形態を模式的に示す断面図である。なお、図２において、既に説明済みの図に示すものと同じ構成要素には、その説明済みの図の場合と同じ符号を付し、その詳細な説明は省略する。
【００２４】
ここに示す積層体２０は、密着層３を備えている点以外は、図１に示す積層体１０と同じものである。すなわち、積層体２０においては、基材１、密着層３、及び生体分子吸着層２がこの順で積層されている。
【００２５】
図２に示す積層体２０は、例えば、生体分子吸着層２の表面に生体分子を含む溶液等を添加し、該生体分子を捕捉するために、使用される。
【００２６】
本発明の積層体は、図１、２に示すものに限定されず、本発明の効果を損なわない範囲内において、図１、２に示すものの一部の構成が変更又は削除されたものや、これまでに説明したものにさらに他の構成が追加されたものであってもよい。
【００２７】
例えば、図１及び２に示す積層体においては、生体分子吸着層が基材上に部分的に積層された構造であってもよい。
次に、積層体を構成する各層の構成材料について、さらに詳細に説明する。
【００２８】
＜構成材料＞
（基材）
基材は、生体分子を蛍光顕微鏡等により観察を行う観点から、透明性を有することが好ましい。また、透明性を高めるために、フィラー（アンチブロッキング剤）を含まないことが好ましい。
基材の材料としては、透明な低自家蛍光物質が好ましい。透明な低自家蛍光性物質の好適な例としては、ガラス、ポリエチレンテレフタレート、ポリカーボネート、シクロオレフィンポリマー、ポリジメチルシロキサン、ポリスチレン、及びポリアクリレート（アクリル樹脂）等が挙げられる。
【００２９】
前記ポリアクリレート（アクリル樹脂）としてより具体的には、例えば、ポリ（メタクリル酸メチル）、ポリ（メタクリル酸エチル）、ポリ（メタクリル酸ブチル）、ポリ（メタクリル酸イソブチル）、ポリ（メタクリル酸ヘキシル）、ポリ（メタクリル酸イソデシル）、ポリ（メタクリル酸ラウリル）、ポリ（メタクリル酸フェニル）、ポリ（アクリル酸メチル）、ポリ（アクリル酸イソプロピル）、ポリ（アクリル酸イソブチル）、ポリ（アクリル酸オクタデシル）等が挙げられる。
【００３０】
基材を構成する材料は、１種のみでもよいし、２種以上でもよく、２種以上である場合、それらの組み合わせ及び比率は任意に選択できる。
【００３１】
基材は１層（単層）からなるものでもよいし、２層以上の複数層からなるものでもよく、複数層からなる場合、これら複数層の構成材料及び厚さは、互いに同一でも異なっていてもよく、これら複数層の組み合わせは、本発明の効果を損なわない限り、特に限定されない。
なお、本明細書においては、基材の場合に限らず、「複数層が互いに同一でも異なっていてもよい」とは、「すべての層が同一であってもよいし、すべての層が異なっていてもよく、一部の層のみが同一であってもよい」ことを意味し、さらに「複数層が互いに異なる」とは、「各層の構成材料及び厚さの少なくとも一方が互いに異なる」ことを意味する。
【００３２】
基材の厚さは、例えば５０μｍ以上１５００μｍ以下であればよく、例えば１００μｍ以上１２００μｍ以下であればよく、例えば２００μｍ以上１０００μｍ以下であればよい。
ここで、「基材の厚さ」とは、基材全体の厚さを意味し、例えば、複数層からなる基材の厚さとは、基材を構成するすべての層の合計の厚さを意味する。
基材は、厚さの精度が高いもの、すなわち、部位によらず厚さのばらつきが抑制されたものが好ましい。
【００３３】
基材は、上述の主たる構成材料以外に、帯電防止剤、酸化防止剤、有機滑剤、触媒、軟化剤（可塑剤）等の公知の各種添加剤を含有していてもよい。
【００３４】
基材は、その上に設けられる生体分子吸着層等の他の層との密着性を向上させるために、サンドブラスト処理、溶剤処理等による凹凸化処理や、コロナ放電処理、電子線照射処理、プラズマ処理、オゾン・紫外線照射処理、火炎処理、クロム酸処理、熱風処理等の酸化処理等が表面に施されたものであってもよい。
【００３５】
基材は、公知の方法で製造できる。例えば、樹脂を含有する基材は、前記樹脂を含有する樹脂組成物を成形することで製造できる。
【００３６】
（生体分子吸着層）
本実施形態における生体分子吸着層は、ポリ（ビニリデンフルオリド）（ＰｏｌｙＶｉｎｙｌｉｄｅｎｅ  ＤｉＦｌｕｏｒｉｄｅ；ＰＶＤＦ）層である。
【００３７】
前記ＰＶＤＦ層は、フッ化ビニリデンの重合体、又は、フッ化ビニリデンとエチレン、プロピレン、フッ化ビニル、トリフルオロエチレン、トリフルオロクロロエチレン、テトラフルオロエチレン、ヘキサフルオロプロピレン、及びフルオロアルキルビニルエーテルからなる群（以下、「フッ化ビニリデンと共重合可能な単量体」と称する場合がある。）より選ばれる少なくとも１種との共重合体を含むことが好ましい。
前記ＰＶＤＦ層が、フッ化ビニリデンと、フッ化ビニリデンと共重合可能な単量体との共重合体を含む場合、該共重合体は、フッ化ビニリデンを８０質量％以上と、前記フッ化ビニリデンと共重合可能な単量体を２０質量％以下とを含有する単量体を共重合させて得ることができる。
【００３８】
前記ＰＶＤＦ層は、更に、フッ化ビニリデンと酸性基を有する重合性不飽和化合物との共重合体、又は、フッ化ビニリデンと、前記フッ化ビニリデンと共重合可能な単量体より選ばれる少なくとも１種と、酸性基を有する重合性不飽和化合物との共重合体を含んでいてもよい。
【００３９】
前記酸性基を有する重合性不飽和化合物としては、例えば、炭素数４〜８の不飽和二塩基酸、メタクリル酸、アクリル酸等が挙げられる。
【００４０】
前記炭素数４〜８の不飽和二塩基酸としては、例えば、マレイン酸、フマル酸、シトラコン酸、メサコン酸、２−ペンテン二酸、メチレンコハク酸、アリルマロン酸、イソプロピリデンコハク酸、２，４−ヘキサジエン二酸、アセチレンジカルボン酸等が挙げられる。
【００４１】
ＰＶＤＦ層を構成する材料がフッ化ビニリデンと酸性基を有する重合性不飽和化合物との共重合体、又は、フッ化ビニリデンと、前記フッ化ビニリデンと共重合可能な単量体より選ばれる少なくとも１種と、酸性基を有する重合性不飽和化合物との共重合体である場合、該共重合体は、フッ化ビニリデンを８０質量％以上と、必要に応じて、前記フッ化ビニリデンと共重合可能な単量体を２０質量％未満と、を含有する単量体を１００質量部と、酸性基を有する重合性不飽和化合物を０．１質量部以上３質量部以下と、を共重合して得られるものが好ましい。
【００４２】
フッ化ビニリデン、及び、必要に応じて、前記フッ化ビニリデンと共重合可能な単量体より選ばれる少なくとも１種の単量体１００質量部に対して、酸性基を有する重合性不飽和化合物の割合は、０．１質量％以上３質量％以下であり、０．３質量％以上２質量％以下であることが好ましい。上記下限値以上であることにより、得られる共重合体の基材との接着性等の酸性基導入効果が十分に発揮される。一方、上記上限値以下であることにより、得られる共重合体の耐薬品性が高く保たれる。
また、同様の理由により、得られる共重合体は、１×１０−５モル／ｇ以上５×１０−４モル／ｇ以下の酸性基を含有することが好ましい。
【００４３】
ＰＶＤＦ層を構成する材料は、１種のみでもよいし、２種以上でもよく、２種以上である場合、それらの組み合わせ及び比率は任意に選択できる。
【００４４】
ＰＶＤＦ層は１層（単層）からなるものでもよいし、２層以上の複数層からなるものでもよく、複数層からなる場合、これら複数層は、互いに同一でも異なっていてもよく、これら複数層の組み合わせは特に限定されない。
【００４５】
ＰＶＤＦ層の厚さは、１０ｎｍ以上１０μｍ以下であることが好ましく、５０ｎｍ以上５μｍ以下であることがより好ましく、１００ｎｍ以上１μｍ以下であることがさらに好ましく、１００ｎｍ以上５００ｎｍ以下であることが特に好ましい。
上記下限値以上であることにより、生体分子を充分に吸着することができ、一方、上記上限値以下であることにより、高い全光線透過率、すなわち高い透明性を保つことができる。
【００４６】
ここで、「ＰＶＤＦ層の厚さ」とは、ＰＶＤＦ層全体の厚さを意味し、例えば、複数層からなるＰＶＤＦ層の厚さとは、ＰＶＤＦ層を構成するすべての層の合計の厚さを意味する。
ＰＶＤＦ層は、厚さの精度が高いもの、すなわち、部位によらず厚さのばらつきが抑制されたものが好ましい。
【００４７】
基材上に生体分子吸着層を形成する方法は特に限定されず、例えば、所定量の材料を基材上に滴下する方法や、ロールコータ、リバースコータ、バーコータ等の接触転写型塗布装置を用いる方法や、スピンナー（回転式塗布装置）、カーテンフローコータ等の非接触型塗布装置を用いる方法等が挙げられる。
【００４８】
（密着層）
密着層の構成材料は、無機化合物又は有機化合物と反応可能な官能基を有するものを用いることにより、基材と生体分子吸着層との接着性及び密着性を向上させることができる。
【００４９】
密着層の構成材料は、基材構成材料、又は生体分子吸着層を構成する重合体若しくは共重合体等が有する官能基と反応可能な官能基を有する化合物であることが好ましく、シランカップリング剤であることがより好ましい。
【００５０】
前記シランカップリング剤としては、例えば、３−グリシジルオキシプロピルトリメトキシシラン、３−グリシジルオキシプロピルメチルジエトキシシラン、３−グリシジルオキシプロピルトリエトキシシラン、３−グリシジルオキシメチルジエトキシシラン、２−（３，４−エポキシシクロヘキシル）エチルトリメトキシシラン、３−メタクリロイルオキシプロピルトリメトキシシラン、３−アミノプロピルトリメトキシシラン、３−（２−アミノエチルアミノ）プロピルトリメトキシシラン、３−（２−アミノエチルアミノ）プロピルメチルジエトキシシラン、３−（フェニルアミノ）プロピルトリメトキシシラン、３−アニリノプロピルトリメトキシシラン、３−ウレイドプロピルトリエトキシシラン、３−メルカプトプロピルトリメトキシシラン、３−メルカプトプロピルメチルジメトキシシラン、ビス（３−トリエトキシシリルプロピル）テトラスルファン、メチルトリメトキシシラン、メチルトリエトキシシラン、ビニルトリメトキシシラン、ビニルトリアセトキシシラン、イミダゾールシラン等が挙げられる。
【００５１】
密着層を構成する材料は、１種のみでもよいし、２種以上でもよく、２種以上である場合、それらの組み合わせ及び比率は任意に選択できる。
【００５２】
密着層は１層（単層）からなるものでもよいし、２層以上の複数層からなるものでもよく、複数層からなる場合、これら複数層は、互いに同一でも異なっていてもよく、これら複数層の組み合わせは特に限定されない。
【００５３】
密着層の厚さは、例えば１ｎｍ以上１μｍ以下であればよく、例えば１ｎｍ以上０．５μｍ以下であればよい。
【００５４】
ここで、「密着層の厚さ」とは、密着層全体の厚さを意味し、例えば、複数層からなる密着層の厚さとは、密着層を構成するすべての層の合計の厚さを意味する。
密着層は、厚さの精度が高いもの、すなわち、部位によらず厚さのばらつきが抑制されたものが好ましい。
【００５５】
基材上に密着層を形成する方法は特に限定されず、例えば、所定量の材料を基材上に滴下する方法や、ロールコータ、リバースコータ、バーコータ等の接触転写型塗布装置を用いる方法や、スピンナー（回転式塗布装置）、カーテンフローコータ等の非接触型塗布装置を用いる方法等が挙げられる。
【００５６】
≪積層体の製造方法≫
一実施形態において、本発明は、基材に密着剤を塗布し、密着層を形成する工程と、前記密着層に生体分子吸着溶液を塗布し、生体分子吸着層を形成する工程と、を備える前記積層体の製造方法を提供する。
【００５７】
本実施形態の製造方法によれば、高い透明性を有し、生体分子の蛍光観察に適した積層体を得ることができる。
本実施形態の製造方法の各工程について、以下に詳細に説明する。
【００５８】
＜密着層形成工程＞
まず、基材に密着剤を塗布する。前記密着剤としては、上述の≪積層体≫の＜構成材料＞の（密着層）に記載された構成材料と同様のものが挙げられる。
【００５９】
密着剤は、溶媒を含有していてもよい。密着剤は、溶媒を含有していることで、塗布対象面への塗布適性が向上する。
前記溶媒は有機溶媒であることが好ましく、前記有機溶媒としては、例えば、メチルエチルケトン、アセトン等のケトン；酢酸エチル等のエステル（カルボン酸エステル）；テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル；シクロヘキサン、ｎ−ヘキサン等の脂肪族炭化水素；トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素；エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール等のアルコール等が挙げられる。
【００６０】
また、密着層の形成方法としては、上述の≪積層体≫の＜構成材料＞の（密着層）に記載された方法と同様の方法が挙げられる。
【００６１】
密着剤が溶媒を含有している場合、加熱乾燥させることが好ましく、この場合、例えば、７０℃以上１３０℃以下で１０秒以上５分以下の条件で乾燥させることが好ましい。
【００６２】
＜生体分子吸着層形成工程＞
次いで、密着層に生体分子吸着溶液を塗布する。前記生体分子吸着溶液としては、上述の≪積層体≫の＜構成材料＞の（生体分子吸着層）に記載された構成材料を溶媒で希釈したもの等が挙げられる。
前記溶媒としては、有機溶媒であることが好ましく、前記有機溶媒としては、例えば、ジメチルアセトアミド（Ｎ，Ｎ−Ｄｉｍｅｔｈｙｌａｃｅｔａｍｉｄｅ；ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（Ｄｉｍｅｔｈｙｌ  ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ；ＤＭＳＯ）、アセトニトリル、Ｎ−メチル−２−ピロリドン  （Ｎ−ｍｅｔｈｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｏｎｅ；ＮＭＰ）等の非プロトン性極性溶媒等が挙げられる。
【００６３】
また、生体分子吸着層の形成方法としては、上述の≪積層体≫の＜構成材料＞の（生体分子吸着層）に記載された方法と同様の方法が挙げられる。
【００６４】
形成された生体分子吸着層は溶媒を含むため、加熱乾燥させることが好ましく、この場合、例えば、温度としては７０℃以上２００℃以下の条件で乾燥させることが好ましく、７０℃以上１３０℃以下の条件で乾燥させることがより好ましい。時間としては１０秒以上５分以下の条件で乾燥させることが好ましい。
【００６５】
≪表面処理液≫
一実施形態において、本発明は、ＰＶＤＦ溶液を備えた表面処理液を提供する。
【００６６】
本実施形態の表面処理液によれば、高い透明性を有し、生体分子の蛍光観察に適した積層体を製造することができる。
【００６７】
＜ＰＶＤＦ溶液＞
ＰＶＤＦ溶液は、上述の≪積層体≫の＜構成材料＞の（生体分子吸着層）に記載されたＰＶＤＦ系重合体又は共重合体と、上述の≪積層体の製造方法≫の＜生体分子吸着層形成工程＞に記載された溶媒とを含む。
【００６８】
ＰＶＤＦ溶液に含まれるＰＶＤＦ系重合体又は共重合体の含有量は、高い透明性を有し、生体分子の蛍光観察に適した生体分子吸着層を形成可能な濃度であればよく、例えば１質量％以上２５質量％以下であればよく、例えば１質量％以上１０質量％以下であればよい。
【００６９】
本実施形態の表面処理液を基材等に塗布し、乾燥させて生体分子吸着層を形成させることで、高い透明性を有し、生体分子の蛍光観察に適した積層体を製造することができる。
【００７０】
本実施形態の表面処理液は、さらに、密着剤を備えていてもよい。密着剤を備えていることにより、基材とＰＶＤＦ溶液により形成される生体分子吸着層との接着性及び密着性を向上させることができる。
密着剤としては、上述の≪積層体≫の＜構成材料＞の（密着層）に記載された構成材料と同様のものが挙げられる。
【００７１】
本実施形態の表面処理液は、さらに、密着剤を希釈するための溶媒を備えていてもよい。溶媒としては、上述の≪積層体の製造方法≫の＜密着層形成工程＞に記載されたものと同様のものが挙げられる。
【００７２】
≪表面処理方法≫
一実施形態において、本発明は、上述の表面処理液を基材に塗布する工程を備える表面処理方法を提供する。
【００７３】
本実施形態の表面処理方法によれば、高い透明性を有し、生体分子の蛍光観察に適した積層体を製造することができる。
【００７４】
＜塗布工程＞
まず、基材に上述の≪表面処理液≫に記載のものと同様の組成の溶液を塗布する。
使用する基材としては、上述の≪積層体≫の＜構成材料＞の（基材）に記載のものと同様のものが挙げられる。
また、基材に表面処理液を塗布する方法としては、上述の≪積層体≫の＜構成材料＞の（生体分子吸着層）に記載された生体分子吸着層の形成方法と同様の方法が挙げられる。
【００７５】
本実施形態の表面処理方法は、さらに、塗布工程の後に乾燥工程を備えていてもよい。
乾燥工程では、表面処理液を塗布して形成された生体分子吸着層は溶媒を含むため、該生体分子吸着層を加熱乾燥させる。この場合、例えば、温度としては７０℃以上２００℃以下の条件で乾燥させることが好ましく、７０℃以上１３０℃以下の条件で乾燥させることがよりこのましい。時間としては１０秒以上５分以下の条件で乾燥させることが好ましい。
【００７６】
また、本実施形態の表面処理方法において、表面処理液が密着剤も備える場合、まず、溶媒等で適当な濃度に希釈した密着剤を基材等に塗布し、加熱乾燥させ、密着層を形成させる。密着層の形成方法及び加熱乾燥方法は、上述の≪積層体の製造方法≫の＜密着層形成工程＞に記載の方法と同様の方法を用いればよい。
次いで、上述の＜塗布工程＞により、ＰＶＤＦ溶液を密着層上に塗布し、加熱乾燥させ、生体分子吸着層を形成させればよい。
【００７７】
≪生体分子吸着層≫
＜第一実施形態＞
一実施形態において、本発明は、ＰＶＤＦ層からなる生体分子吸着層を提供する。
【００７８】
本実施形態の生体分子吸着層によれば、高い透明性を有し、生体分子の蛍光観察に適した積層体又は分析用器材等を得ることができる。
【００７９】
（ＰＶＤＦ層）
本実施形態の生体分子吸着層は、ＰＤＶＦ層からなる。本実施形態におけるＰＶＤＦ層は、上述の≪積層体≫の＜構成材料＞の（ＰＶＤＦ層）と同様の構成材料からなる。
【００８０】
ＰＶＤＦ層を構成する材料は、１種のみでもよいし、２種以上でもよく、２種以上である場合、それらの組み合わせ及び比率は任意に選択できる。
【００８１】
ＰＶＤＦ層は１層（単層）からなるものでもよいし、２層以上の複数層からなるものでもよく、複数層からなる場合、これら複数層は、互いに同一でも異なっていてもよく、これら複数層の組み合わせは特に限定されない。
【００８２】
ＰＶＤＦ層の厚さは、１０ｎｍ以上１０μｍ以下であることが好ましく、５０ｎｍ以上５μｍ以下であることがより好ましく、１００ｎｍ以上１μｍ以下であることがさらに好ましく、１００ｎｍ以上５００ｎｍ以下であることが特に好ましい。
上記下限値以上であることにより、生体分子を充分に吸着することができ、一方、上記上限値以下であることにより、高い全光線透過率、すなわち高い透明性を保つことができる。
【００８３】
ＰＶＤＦ層は、厚さの精度が高いもの、すなわち、部位によらず厚さのばらつきが抑制されたものが好ましい。
【００８４】
ＰＶＤＦ層を形成する方法は特に限定されず、例えば、所定量の材料を基材等の上に滴下する方法や、ロールコータ、リバースコータ、バーコータ等の接触転写型塗布装置を用いる方法や、スピンナー（回転式塗布装置）、カーテンフローコータ等の非接触型塗布装置を用いる方法等が挙げられる。
【００８５】
＜第二実施形態＞
一実施形態において、本発明は、全光線透過率が９０％以上である生体分子吸着層を提供する。
【００８６】
本実施形態の生体分子吸着層によれば、高い透明性を有し、生体分子の蛍光観察に適した積層体又は分析用器材等を得ることができる。
【００８７】
本実施形態の生体分子吸着層は、全光線透過率が９０％以上であり、９３％以上であることが特に好ましい。
また、生体分子吸着層は、ヘーズが３０％以下であり、１５％以下であることが好ましく、５％以下であることが特に好ましい。
全光線透過率を高くし、ヘーズを低くすることにより、本実施形態の積層体を用いた場合における生体分子の観察性を確保することができる。
【００８８】
本実施形態の生体分子吸着層の構成材料としては、全光線透過率が上記範囲となるものであればよく、特別な限定はない。具体的には、上述の≪積層体≫の＜構成材料＞の（ＰＶＤＦ層）と同様の構成材料が挙げられる。
【００８９】
生体分子吸着層を構成する材料は、１種のみでもよいし、２種以上でもよく、２種以上である場合、それらの組み合わせ及び比率は任意に選択できる。
【００９０】
生体分子吸着層は１層（単層）からなるものでもよいし、２層以上の複数層からなるものでもよく、複数層からなる場合、これら複数層は、互いに同一でも異なっていてもよく、これら複数層の組み合わせは特に限定されない。
【００９１】
生体分子吸着層の厚さは、１０ｎｍ以上１０μｍ以下であることが好ましく、５０ｎｍ以上５μｍ以下であることがより好ましく、１００ｎｍ以上１μｍ以下であることがさらに好ましく、１００ｎｍ以上５００ｎｍ以下であることが特に好ましい。
上記下限値以上であることにより、生体分子を充分に吸着することができ、一方、上記上限値以下であることにより、高い全光線透過率、すなわち高い透明性を保つことができる。
【００９２】
生体分子吸着層は、厚さの精度が高いもの、すなわち、部位によらず厚さのばらつきが抑制されたものが好ましい。
【００９３】
生体分子吸着層を形成する方法は特に限定されず、例えば、所定量の材料を基材等の上に滴下する方法や、ロールコータ、リバースコータ、バーコータ等の接触転写型塗布装置を用いる方法や、スピンナー（回転式塗布装置）、カーテンフローコータ等の非接触型塗布装置を用いる方法等が挙げられる。
【００９４】
≪分析用器材≫
一実施形態において、本発明は、少なくとも一部の面上に、前記積層体を備えた分析用器材を提供する。
【００９５】
本実施形態の分析用器材は、高い透明性を有し、生体分子の蛍光観察等に好適である。
まず、本実施形態の分析用器材の構造について、以下に詳細に説明する。
【００９６】
＜構造＞
図３は、本発明の分析用器材の一実施形態を模式的に示す断面図である。図３では、支持体５及び積層体２０（基材１、密着層３、及び生体分子吸着層２からなる）がこの順で積層されている。さらに、分析用器材Ａは、積層体２０と孔を有する天面部材７とに挟まれ、側面部材６で区切られた空間を有する。生体分子を含む試料を添加した場合に、前記空間に生体分子が入り込み、生体分子吸着層２に捕捉される。
【００９７】
また、分析用器材Ａは、積層体を少なくとも一部の面上に備えていればよく、全面に備えていてもよい。
【００９８】
図３に示す分析用器材Ａは、例えば、生体分子吸着層２の表面に生体分子４を含む溶液等を添加すると、該生体分子４を捕捉し、さらに生体分子４に特異的に結合する蛍光物質８ｂが結合した抗体８ｂ（すなわち、蛍光物質結合抗体８）を添加し、蛍光物質結合抗体８が捕捉された生体分子４に特異的に結合することにより該生体分子４を検出する。
【００９９】
本発明の分析用器材は、図３に示すものに限定されず、本発明の効果を損なわない範囲内において、図３に示すものの一部の構成が変更又は削除されたものや、これまでに説明したものにさらに他の構成が追加されたものであってもよい。
【０１００】
例えば、図３に示す分析用器材においては、図１に示す密着層を含まない積層体であってもよい。
次に、分析用器材を構成する各層の構成材料について、さらに詳細に説明する。
【０１０１】
＜構成材料＞
（積層体）
本実施形態の分析用器材が備える積層体は、上述の≪積層体≫において記載されたものと同様のものが挙げられる。蛍光観察等では、主に下面から観察及び撮像されるため、積層体の全光線透過率が９０％以上であり、９３％以上であることが好ましく、９５％以上であることがより好ましく、９７％以上であることがさらに好ましく、９９％以上であることが特に好ましい。
光線透過率を高くすることにより、本実施形態の分析用器材による生体分子の観察性を充分に確保することができる。
【０１０２】
（支持体）
本実施形態の分析用器材が備える支持体は、生体分子を蛍光観察等する観点から、透明性を有することが好ましい。
支持体の材料としては、透明な低自家蛍光物質が好ましい。透明な低自家蛍光性物質の好適な例としては、ガラス、ポリエチレンテレフタレート、ポリカーボネート、シクロオレフィンポリマー、ポリジメチルシロキサン、ポリスチレン、及びポリアクリレート等が挙げられ、特別な限定はない。
【０１０３】
（側面部材）
本実施形態の分析用器材が備える側面部材は、生体分子を蛍光観察等する観点から、透明性を有することが好ましい。
側面部材の材料としては、上述の（支持体）と同様のものが挙げられる。
【０１０４】
（天面部材）
本実施形態の分析用器材が備える天面部材は、生体分子を蛍光観察等する観点から、透明性を有することが好ましい。
天面部材の材料としては、上述の（支持体）と同様のものが挙げられる。
【０１０５】
＜形態＞
本実施形態の分析用器材の形態は特別な限定はなく、例えば、細胞培養用器材、プレパラート、マイクロデバイス等が挙げられる。細胞培養用器材としては、任意の数のウェルが配置されたマルチウェルプレート、シャーレ等が挙げられる。ウェルの数としては、プレート１枚当たり、たとえば、６、１２、２４、９６、３８４、１，５３６個等が挙げられる。
【０１０６】
＜その他＞
本実施形態の分析用器材は、さらに、生体分子の懸濁若しくは溶解、又は分析用器材の洗浄等に用いられる緩衝剤を備えていてもよい。
前記緩衝剤としては、例えば、ＨＥＰＥＳ−ＫＯＨ、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、酢酸−酢酸ナトリウム、クエン酸−クエン酸ナトリウム、リン酸、ホウ酸、ＭＥＳ、ＰＩＰＥＳＨＥＰＥＳ−ＫＯＨ、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、酢酸−酢酸ナトリウム、クエン酸−クエン酸ナトリウム、リン酸、ホウ酸、ＭＥＳ、ＰＩＰＥＳ等が挙げられ、これらに限定されない。
【０１０７】
また、本実施形態の分析用器材は、さらに、生体分子の検出試薬を備えていてもよい。
前記検出試薬としては、特別な限定はなく、例えば、目的の生体分子に特異的に結合する抗体等であればよい。
目的の生体分子に特異的に結合する抗体は、１種類であってもよく、２種類以上であってもよい。
また、目的の生体分子に特異的に結合する抗体は、ポリクローナル抗体であっても、モノクローナル抗体であってもよく、さらに抗体の機能的断片であってもよい。なお、ここでいう「抗体」には、免疫グロブリンのすべてのクラス及びサブクラスが含まれる。
【０１０８】
本明細書中において、「特異的に結合」とは、抗体が標的タンパク質（抗原）にのみ結合することを意味し、例えば試験管内におけるアッセイ、好ましくは精製した野生型抗原を用いたプラズモン共鳴アッセイ（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ、ＧＥ−Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｕｐｐｓａｌａ，  Ｓｗｅｄｅｎ等）における抗体の抗原のエピトープへの結合等により定量することができる。結合の親和性は、ｋａ（抗体−抗原複合体からの抗体結合に関する速度定数）、ｋＤ（解離定数）、及びＫＤ（ｋＤ／ｋａ）によって規定することができる。抗体が抗原に特異的に結合している場合の結合親和性（ＫＤ）は、１０−８ｍｏｌ／Ｌ以下であることが好ましく、１０−９Ｍ〜１０−１３ｍｏｌ／Ｌであることがより好ましい。
【０１０９】
本実施形態において、「ポリクローナル抗体」とは、異なるエピトープに対する異なる抗体を含む抗体調製物を意味する。すなわち、本実施形態の抗体がポリクローナル抗体である場合、Ｏ結合型ＧｌｃＮＡｃ化したセリン４０残基を含み、且つ、異なるアミノ酸配列からなるエピトープに対し、特異的に結合する異なる抗体を含み得る。
また、「モノクローナル抗体」とは、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体（抗体断片を含む）を意味する。
また、ポリクローナル抗体とは対照的に、モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基を認識するものを意味する。すなわち、本実施形態の抗体がモノクローナル抗体である場合、自然環境の成分から単離された抗体である。
【０１１０】
本実施形態において、抗体の「機能的断片」とは、抗体の一部分（部分断片）であって、標的タンパク質を特異的に認識するものを意味する。具体的には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、可変領域断片（Ｆｖ）、ジスルフィド結合Ｆｖ、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、ｓｃ（Ｆｖ）２、ダイアボディー、多特異性抗体、及びこれらの重合体等が挙げられる。
【０１１１】
また、目的の生体分子に特異的に結合する抗体は、標識物質が結合していてもよい。
前記抗体の標識物質としては、例えば、安定同位体、放射性同位体、蛍光物質、酵素、磁性体等が挙げられる。
【０１１２】
安定同位体としては、例えば１３Ｃ、１５Ｎ、２Ｈ、１７Ｏ、１８Ｏが挙げられ、これらに限定されない。
放射性同位体としては、例えば３Ｈ、１４Ｃ、１３Ｎ、３２Ｐ、３３Ｐ、３５Ｓが挙げられ、これらに限定されない。
蛍光物質としては、例えばシアニン色素（例えばＣｙ３、Ｃｙ５等）、ローダミン６Ｇ試薬、その他公知の蛍光色素（例えば、ＧＦＰ、ＦＩＴＣ（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ）、ＴＡＭＲＡ等）等が挙げられ、これらに限定されない。
【０１１３】
酵素としては、例えばアルカリホスファターゼ、ペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）等が挙げられる。
また、標識物質が酵素である場合、酵素基質を使用することが好ましい。酵素基質としては、アルカリホスファターゼの場合、ｐ−ニトロフェニルリン酸（ｐ−ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙ  ｐｈｏｓｐｈａｓｅ；ｐＮＰＰ）、４−メチルウンベリフェリルリン酸（４−ＭＵＰ）等を用いることができ、酵素がペルオキシダーゼの場合、３，３’−ｄｉａｍｉｎｏｂｅｎｚｉｄｉｎｅ（ＤＡＢ）、３，３’，５，５’−ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｉｄｉｎｅ（ＴＭＢ）、ｏ−ｐｈｅｎｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅ（ＯＰＤ）、２，２−アジノ−ジ−（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）、１０−アセチル−３，７−ジヒドロキシフェノキサジン（ＡＤＨＰ）等を用いることができる。
【０１１４】
磁性体としては、例えばガドリニウム、Ｇｄ−ＤＴＰＡ、Ｇｄ−ＤＴＰＡ−ＢＭＡ、Ｇｄ−ＨＰ−ＤＯ３Ａ、ヨード、鉄、酸化鉄、クロム、マンガン、又はその錯体、或いはキレート錯体等が挙げられ、これらに限定されない。
【０１１５】
また、検出試薬は、目的の生体分子に特異的に結合する抗体に加えて、さらに、前記目的の生体分子に特異的に結合する抗体に対する抗体に標識物質が結合したものを２次抗体として備えていてもよい。
前記目的の生体分子に特異的に結合する抗体に対する抗体に標識物質が結合したものを２次抗体として備える場合、抗体測定系によるＥＬＩＳＡ法、間接蛍光抗体法、抗体測定系によるＣＬＥＩＡ法等を用いて、目的の生体分子を検出及び定量することができる。
【０１１６】
前記目的の生体分子に特異的に結合する抗体に対する抗体に標識物質が結合したものとしては、前記目的の生体分子に特異的に結合する抗体の由来動物（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、サル、ヤギ等）に対する抗体であることが好ましい。例えば、前記目的の生体分子に特異的に結合する抗体の由来がマウスである場合、抗マウス抗体であることが好ましい。また、前記目的の生体分子に特異的に結合する抗体に対する抗体に標識物質が結合したものには、免疫グロブリンのすべてのクラス及びサブクラスが含まれる。
標識物質としては、上述の「前記目的の生体分子に特異的に結合する抗体」の説明において、例示されたものと同様のものが挙げられる。
【０１１７】
＜用途＞
本実施形態の分析用器材は、例えば、目的の疾患に有効な薬剤のスクリーニング等に用いることができる。
また、本実施形態の分析用器材は、生体分子吸着層が細胞表面の膜タンパク質等を吸着する性質を有することから、接着性細胞の培養等に用いることができる。
また、本実施形態の分析用器材は、例えば、ＲＩＡ法、ＥＩＡ法（ＥＣＬＩＡ法、ＥＬＩＳＡ法を含む）、ＣＩＡ法（ＣＬＩＡ法、ＣＬＥＩＡ法を含む）、ＦＩＡ等の抗原抗体反応を用いたタンパク質検出及び定量系等に用いることができる。
【実施例】
【０１１８】
以下、実施例及び比較例等を挙げて本発明をさらに詳述するが、本発明はこれらの実施例等に限定されるものではない。
【０１１９】
［製造例１］積層体１ａ〜１ｅの製造
（１）ＰＶＤＦ溶液の作製
まず、ポリ（ビニリデンフルオリド）（ＰＶＤＦ、分子量２．８×１０５）（Ａｌｄｒｉｃｈ社製）を３．３、５．０、６．７、１０、及び１４．０質量％となるようにＮ−メチル−２−ピロリドン  （Ｎ−ｍｅｔｈｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｏｎｅ；ＮＭＰ）を用いて、５種類の濃度のＰＶＤＦ溶液を調製した。
【０１２０】
（２）ＰＶＤＦ層の形成
次いで、ガラス基板（Ｅａｇｌｅ−ＸＧ（登録商標）、０．７ｍｍ、Ｃｏｒｎｉｎｇ社製）に各濃度のＰＶＤＦ溶液をスピンコートした（条件：回転数は規定膜厚になるよう設定、２０秒）。次いで、１２０℃で１分間加熱し、ＰＶＤＦ層を形成し、膜厚の異なる積層体１ａ〜１ｅを製造した。各積層体の膜厚を以下の表１に示す。
【０１２１】
（３）全光線透過率及びヘーズ値の測定
次いで、（２）で製造された積層体１ａ〜１ｅについて、ヘーズメーター（スガ試験機株式会社製、ＨＺ−２Ａ）及び光源としてＤ６５を用いて、ＪＩＳ  Ｋ７１３６の方法に準じて、全光線透過率及びヘーズ値の測定を行った。結果を以下の表１に示す。
【０１２２】
（４）細胞観察
次いで、（２）で製造された積層体１ａ〜１ｅに、ナマルバ細胞（リンパ芽球の細胞株）をカルセイン−ＡＭで染色したものを上面（ＰＶＤＦ層が形成されている面）から滴下し、下面（ガラス基板）より顕微鏡観察を行った。また、対照として、ＰＶＤＦ多孔膜（メルクミリポア社製、膜厚１３０μｍ）上に細胞を滴下し、下面より顕微鏡観察を行った。結果を以下の表１に示す。
また、細胞観察における評価の観点は以下のとおり行った。
○：顕微鏡による細胞観察への影響なし
△：基板の凹凸が観察される
×：顕微鏡による細胞観察不可
【０１２３】
［製造例２］積層体２ａ〜２ｅの製造
（１）ＰＶＤＦ溶液の作製
ＰＶＤＦ（Ａｌｄｒｉｃｈ社製）の代わりに、ポリ（ビニリデンフルオリド−ｃｏ−ヘキサフルオロプロピレン）（ＰＶＤＦ／ＨＦＰ、分子量４．６×１０５）（Ａｌｄｒｉｃｈ社製）を用いたこと以外は、製造例１の（１）と同様の方法を用いて、５種類の濃度のＰＶＤＦ溶液を調製した。
【０１２４】
（２）ＰＶＤＦ層の形成
次いで、製造例１の（２）と同様の方法を用いて、膜厚の異なる積層体２ａ〜２ｅを製造した。各積層体の膜厚を以下の表１に示す。
【０１２５】
（３）全光線透過率及びヘーズ値の測定
次いで、（２）で製造された積層体２ａ〜２ｅについて、製造例１の（３）と同様の方法を用いて、全光線透過率及びヘーズ値の測定を行った。結果を以下の表１に示す。
【０１２６】
［製造例３］積層体３ａ〜３ｅの製造
（１）ＰＶＤＦ溶液の作製
ＰＶＤＦ（Ａｌｄｒｉｃｈ社製）の代わりに、ＫＦポリマー＃９１３０（カルボン酸変性ＰＶＤＦ、分子量２．８×１０５）（クレハ社製）を用いたこと以外は、製造例１の（１）と同様の方法を用いて、５種類の濃度のＰＶＤＦ溶液を調製した。
【０１２７】
（２）ＰＶＤＦ層の形成
次いで、製造例１の（２）と同様の方法を用いて、膜厚の異なる積層体３ａ〜３ｅを製造した。各積層体の膜厚を以下の表１に示す。
【０１２８】
（３）全光線透過率及びヘーズ値の測定
次いで、（２）で製造された積層体３ａ〜３ｅについて、製造例１の（３）と同様の方法を用いて、全光線透過率及びヘーズ値の測定を行った。結果を以下の表１に示す。
【０１２９】
【表１】
2018118415.tif 000003
【０１３０】
表１から、ＰＶＤＦ、ＰＶＤＦ／ＨＦＰ、及びカルボン酸変性ＰＶＤＦのいずれを用いた積層体においても、全光線透過率は９０％を超えていた。また、ヘーズ値は膜厚の上昇と共に上昇する傾向が見られた。
また、ＰＶＤＦを用いた積層体と比較して、ＰＶＤＦ／ＨＦＰ、及びカルボン酸変性ＰＶＤＦを用いた積層体は、ヘーズ値が低い傾向が見られた。
【０１３１】
［試験例１］タンパク質吸着試験
（１）積層体の準備
製造例１〜３で製造された膜厚０．２μｍの積層体１ａ、２ａ、及び３ａを用いて、タンパク質吸着試験を行った。また、対照として、ガラス基板（Ｅａｇｌｅ−ＸＧ（登録商標）、０．７ｍｍ、Ｃｏｒｎｉｎｇ社製）を用いた。
【０１３２】
（２）タンパク質の吸着
次いで、各積層体、及びガラス基板に、２０μｇ／ｍＬのＡｌｅｘａ４８８標識ヤギ抗マウスＩｇＧ抗体（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製、＃Ａ１１００１）を１０μＬ滴下し、１時間静置した。次いで、ＰＢＳ（−）で３回洗浄し、その後純水で洗浄した。次いで、吸着したタンパク質量を、Ｔｙｐｈｏｏｎ  ＴＲＩＯ（ＧＥヘルスケア・ジャパン社製、励起光４８８ｎｍ、フィルター５２０ｎｍ）で蛍光強度を測定した。次いで、各蛍光強度に対し、各積層体、ガラス基板、又はポリスチレンディッシュの自家蛍光強度を差し引き、その値を用いて、ガラス基板との相対強度を算出した。結果を以下の表２に示す。
【０１３３】
【表２】
2018118415.tif 000004
【０１３４】
表２から、いずれの積層体においても高い蛍光強度が観察された。また、ＰＶＤＦを用いた積層体と比較して、ＰＶＤＦ／ＨＦＰを用いた積層体では、タンパク質吸着量が低下し、カルボン酸変性ＰＶＤＦを用いた積層体では、タンパク質吸着量が増加する傾向が見られた。
【産業上の利用可能性】
【０１３５】
本発明によれば、高い透明性を有し、生体分子の蛍光観察に適した積層体、積層体の製造方法及び分析用器材を提供することができる。また、本発明によれば、高い透明性を有し、生体分子の蛍光観察に適した積層体の製造に利用可能な表面処理液及び生体分子吸着層を提供することができる。
【符号の説明】
【０１３６】
１…基材、２…生体分子吸着層、３…密着層、４…生体分子、５…支持体、６…側面部材、７…孔を有する天面部材、８…蛍光物質結合抗体、８ａ…抗体、８ｂ…蛍光物質、１０，２０…積層体、Ａ…分析用器材。
【図１】
2018118415.tif 000005
【図２】
2018118415.tif 000006
【図３】
2018118415.tif 000007