(57)【要約】      （修正有）【課題】ＩＬ−３３の発現を正または負に制御する薬剤の提供。【解決手段】Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、EP2アゴニスト、EP4アゴニスト、COX-2、COX-2活性化剤、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H等から選択される有効成分を含有する薬剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、EP2アゴニスト、EP4アゴニスト、COX-2、COX-2活性化剤、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つ；若しくは、これらの発現ベクター；または、
抗Putative hydrolase RBBP9抗体、抗PGE1抗体、抗PGE2抗体、抗EP2抗体、抗EP4抗体、EP2アンタゴニスト、EP4アンタゴニスト、抗COX-2抗体、COX-2阻害剤、抗Centrosomal protein of 170kDa抗体、抗Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3抗体、抗Tight junction protein ZO-2抗体、抗Guanylate kinase抗体、抗Myotubularin-related protein 10抗体、抗Eukaryotic translation initiation factor 4H抗体、抗UMP-CMP kinase抗体、抗Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2抗体、抗Protein S100-A13抗体、抗Rho GDP-dissociation inhibitor 2抗体、抗Selenoprotein M、Protein S100-A11抗体、抗Eukaryotic translation initiation factor 4B抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1抗体、抗Transgelin-2抗体、抗THO complex subunit 4抗体、抗Keratin type I cytoskeletal 19抗体、抗Keratin type II cytoskeletal 75抗体、抗Microtubule-associated protein RP/EB family member 3抗体、抗Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2抗体、抗CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1抗体、抗Adenylate kinase isoenzyme 1抗体、抗Ubiquitin-like protein 3抗体、抗Calcium-regulated heat stable protein 1抗体、抗Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1抗体、抗Glia maturation factor beta抗体、抗Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2抗体、抗Phosphatidylethanolamine-binding protein 1抗体、抵抗Annexin A4抗体、抗Afadin抗体、抗Retinol-binding protein 1抗体、抗D-dopachrome decarboxylase抗体、抗Apolipoprotein M抗体、および、抗BolA-like protein 1抗体からなる群より選択される少なくとも１つ、を有効成分として含有していることを特徴とするＩＬ−３３の発現制御剤。
【請求項２】
Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、EP2アゴニスト、EP4アゴニスト、COX-2、COX-2活性化剤、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つ；若しくは、これらの発現ベクター、を有効成分として含有していることを特徴とするアジュバント。
【請求項３】
Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、COX-2、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質；若しくは当該タンパク質をコードしているｍＲＮＡからなる、アレルギー炎症検出用バイオマーカー。
【請求項４】
Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、COX-2、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質；若しくは当該タンパク質をコードしているｍＲＮＡの発現を検出する工程を有する、アレルギー炎症を診断するためのデータの取得方法。
【請求項５】
Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、COX-2、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質；若しくは当該タンパク質をコードしているｍＲＮＡの発現を検出する工程を有する、アレルギー疾患患者の鑑別方法。
【請求項６】
採取された細胞に、被検物質を接触させる工程と、
上記細胞における、Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、COX-2、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質；若しくは当該タンパク質をコードしているｍＲＮＡの発現を検出する工程と、を有する、ＩＬ−３３の発現誘導因子のスクリーニング方法。
【請求項７】
採取された細胞に、被検薬剤を接触させる工程と、
上記細胞における、Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、COX-2、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質；若しくは当該タンパク質をコードしているｍＲＮＡの発現を検出する工程と、を有する、被検薬剤の有効性および副作用の評価方法。
【請求項８】
（Ａ）Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、EP2アゴニスト、EP4アゴニスト、COX-2、COX-2活性化剤、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つ；若しくは、これらの発現ベクター；または、
（Ｂ）抗Putative hydrolase RBBP9抗体、抗PGE1抗体、抗PGE2抗体、抗EP2抗体、抗EP4抗体、EP2アンタゴニスト、EP4アンタゴニスト、抗COX-2抗体、COX-2阻害剤、抗Centrosomal protein of 170kDa抗体、抗Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3抗体、抗Tight junction protein ZO-2抗体、抗Guanylate kinase抗体、抗Myotubularin-related protein 10抗体、抗Eukaryotic translation initiation factor 4H抗体、抗UMP-CMP kinase抗体、抗Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2抗体、抗Protein S100-A13抗体、抗Rho GDP-dissociation inhibitor 2抗体、抗Selenoprotein M、Protein S100-A11抗体、抗Eukaryotic translation initiation factor 4B抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1抗体、抗Transgelin-2抗体、抗THO complex subunit 4抗体、抗Keratin type I cytoskeletal 19抗体、抗Keratin type II cytoskeletal 75抗体、抗Microtubule-associated protein RP/EB family member 3抗体、抗Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2抗体、抗CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1抗体、抗Adenylate kinase isoenzyme 1抗体、抗Ubiquitin-like protein 3抗体、抗Calcium-regulated heat stable protein 1抗体、抗Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1抗体、抗Glia maturation factor beta抗体、抗Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2抗体、抗Phosphatidylethanolamine-binding protein 1抗体、抵抗Annexin A4抗体、抗Afadin抗体、抗Retinol-binding protein 1抗体、抗D-dopachrome decarboxylase抗体、抗Apolipoprotein M抗体、および、抗BolA-like protein 1抗体からなる群より選択される少なくとも１つ、を有効成分として含有し、
（Ａ）の有効成分を含有している場合には、炎症性腸疾患用、クローン病用、臓器特異性自己免疫疾患用、関節リウマチ用、全身性エリテマトーデス用、多発性筋炎用、全身性自己免疫疾患用、または、感染症による組織損傷用として用いられ、
（Ｂ）の有効成分を含有している場合には、アトピー性皮膚炎用として用いられる、治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＩＬ−３３の発現制御剤、アジュバント、アレルギー炎症検出用バイオマーカー、アレルギー炎症を診断するためのデータの取得方法、アレルギー疾患患者の鑑別方法、ＩＬ−３３の発現誘導因子のスクリーニング方法、被検薬剤の有効性および副作用の評価方法、並びに、治療剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＩＬ−３３は、上皮細胞などの核内に活性型分子として蓄えられているタンパク質であって、上皮細胞などが傷害を受けると当該上皮細胞の外へ放出されるタンパク質である。
【０００３】
上皮細胞の外へ放出されたＩＬ−３３は、Ｔｈ２細胞、ＩＬＣ２細胞（グループ２自然リンパ球）、肥満細胞、好塩基球および好酸球などを刺激して、これらの細胞におけるＩＬ−４、ＩＬ−５およびＩＬ−１３などの生産を誘導する。それ故に、ＩＬ−３３は、アレルギー炎症の誘導因子として機能する（例えば、特許文献１参照）。
【０００４】
アレルギー炎症は、動物にとって好ましくない影響を及ぼすことがある反面、動物における生体防御機構の１つとしても機能する。例えば、動物が腸管寄生虫に感染すると、好酸球性肺炎を発症する。肺に浸潤した好酸球は肺の寄生虫を排除するので、好酸球性肺炎は、動物における生体防御機構として機能する。
【０００５】
それ故に、アレルギー炎症に関わるＩＬ−３３の活性を制御する方法の開発に、注目が集まっている（例えば、特許文献２、３、４および５参照）。
【０００６】
一方、ＩＬ−３３は、ＩＬ−３３受容体を発現する制御性Ｔ細胞を活性化できるので、様々な組織の炎症（例えば、炎症性腸疾患）を抑制することができる。さらに、ＩＬ−３３は、インフルエンザ等の感染が原因で傷害された組織（例えば、肺組織）の修復や再生にも関与する。従って、ＩＬ−３３は、感染症に伴う組織の修復因子として利用することも可能である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特表２０１３−５４４０７５      （２０１３年１２月１２日公開）
【特許文献２】特表２０１６−５１５１３０      （２０１６年  ５月２６日公開）
【特許文献３】特表２００７−５２３０８９      （２００７年  ８月１６日公開）
【特許文献４】ＵＳ２０１２／０２０７７５２Ａ１（２０１２年  ８月１６日公開）
【特許文献５】ＵＳ２０１０／０２６０７７０Ａ１（２０１０年１０月１４日公開）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
生体内におけるＩＬ−３３の発現制御機構については、現在、不明な点が多く残されている。当該発現制御機構に関する理解が深まれば、ＩＬ−３３の活性を制御する方法の開発が飛躍的に進むものと期待される。
【０００９】
本発明の一態様は、ＩＬ−３３の発現を正または負に制御するための技術（新たに見出されたＩＬ−３３の発現誘導因子の場合は、例えば、アレルギー炎症検出用バイオマーカーにもなる）、当該発現誘導因子の量的変動を指標とした様々な技術（例えば、アレルギー炎症を診断するためのデータの取得方法、ＩＬ−３３の発現誘導因子のスクリーニング方法、アレルギー疾患患者の鑑別方法、並びに、被検薬剤の有効性および副作用の評価方法などを含む）、および、様々な疾患用の治療剤、特に組織の炎症抑制と組織の修復を可能とする治療剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記の課題を解決するために、本発明の一態様に係るＩＬ−３３の発現制御剤は、Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、EP2アゴニスト、EP4アゴニスト、COX-2、COX-2活性化剤、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つ；若しくは、これらの発現ベクター；または、抗Putative hydrolase RBBP9抗体、抗PGE1抗体、抗PGE2抗体、抗EP2抗体、抗EP4抗体、EP2アンタゴニスト、EP4アンタゴニスト、抗COX-2抗体、COX-2阻害剤、抗Centrosomal protein of 170kDa抗体、抗Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3抗体、抗Tight junction protein ZO-2抗体、抗Guanylate kinase抗体、抗Myotubularin-related protein 10抗体、抗Eukaryotic translation initiation factor 4H抗体、抗UMP-CMP kinase抗体、抗Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2抗体、抗Protein S100-A13抗体、抗Rho GDP-dissociation inhibitor 2抗体、抗Selenoprotein M、Protein S100-A11抗体、抗Eukaryotic translation initiation factor 4B抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1抗体、抗Transgelin-2抗体、抗THO complex subunit 4抗体、抗Keratin type I cytoskeletal 19抗体、抗Keratin type II cytoskeletal 75抗体、抗Microtubule-associated protein RP/EB family member 3抗体、抗Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2抗体、抗CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1抗体、抗Adenylate kinase isoenzyme 1抗体、抗Ubiquitin-like protein 3抗体、抗Calcium-regulated heat stable protein 1抗体、抗Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1抗体、抗Glia maturation factor beta抗体、抗Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2抗体、抗Phosphatidylethanolamine-binding protein 1抗体、抵抗Annexin A4抗体、抗Afadin抗体、抗Retinol-binding protein 1抗体、抗D-dopachrome decarboxylase抗体、抗Apolipoprotein M抗体、および、抗BolA-like protein 1抗体からなる群より選択される少なくとも１つ、を有効成分として含有していることを特徴としている。
【００１１】
上記の課題を解決するために、本発明の一態様に係るアジュバントは、Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、EP2アゴニスト、EP4アゴニスト、COX-2、COX-2活性化剤、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つ；若しくは、これらの発現ベクター、を有効成分として含有していることを特徴としている。
【００１２】
上記の課題を解決するために、本発明の一態様に係るアレルギー炎症検出用バイオマーカーは、Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、COX-2、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質；若しくは当該タンパク質をコードしているｍＲＮＡからなる、ことを特徴としている。
【００１３】
上記の課題を解決するために、本発明の一態様に係るアレルギー炎症を診断するためのデータの取得方法は、Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、COX-2、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質；若しくは当該タンパク質をコードしているｍＲＮＡの発現を検出する工程を有する、ことを特徴としている。
【００１４】
上記の課題を解決するために、本発明の一態様に係るアレルギー疾患患者の鑑別方法は、Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、COX-2、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質；若しくは当該タンパク質をコードしているｍＲＮＡの発現を検出する工程を有する、ことを特徴としている。
【００１５】
上記の課題を解決するために、本発明の一態様に係るＩＬ−３３の発現誘導因子のスクリーニング方法は、採取された細胞に、被検物質を接触させる工程と、上記細胞における、Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、COX-2、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質；若しくは当該タンパク質をコードしているｍＲＮＡの発現を検出する工程と、を有する、ことを特徴としている。
【００１６】
上記の課題を解決するために、本発明の一態様に係る被検薬剤の有効性および副作用の評価方法は、採取された細胞に、被検薬剤を接触させる工程と、上記細胞における、Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、COX-2、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質；若しくは当該タンパク質をコードしているｍＲＮＡの発現を検出する工程と、を有する、ことを特徴としている。
【００１７】
上記の課題を解決するために、本発明の一態様に係る治療剤は、（Ａ）Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、EP2アゴニスト、EP4アゴニスト、COX-2、COX-2活性化剤、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つ；若しくは、これらの発現ベクター；または、
（Ｂ）抗Putative hydrolase RBBP9抗体、抗PGE1抗体、抗PGE2抗体、抗EP2抗体、抗EP4抗体、EP2アンタゴニスト、EP4アンタゴニスト、抗COX-2抗体、COX-2阻害剤、抗Centrosomal protein of 170kDa抗体、抗Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3抗体、抗Tight junction protein ZO-2抗体、抗Guanylate kinase抗体、抗Myotubularin-related protein 10抗体、抗Eukaryotic translation initiation factor 4H抗体、抗UMP-CMP kinase抗体、抗Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2抗体、抗Protein S100-A13抗体、抗Rho GDP-dissociation inhibitor 2抗体、抗Selenoprotein M、Protein S100-A11抗体、抗Eukaryotic translation initiation factor 4B抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1抗体、抗Transgelin-2抗体、抗THO complex subunit 4抗体、抗Keratin type I cytoskeletal 19抗体、抗Keratin type II cytoskeletal 75抗体、抗Microtubule-associated protein RP/EB family member 3抗体、抗Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2抗体、抗CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1抗体、抗Adenylate kinase isoenzyme 1抗体、抗Ubiquitin-like protein 3抗体、抗Calcium-regulated heat stable protein 1抗体、抗Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1抗体、抗Glia maturation factor beta抗体、抗Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2抗体、抗Phosphatidylethanolamine-binding protein 1抗体、抵抗Annexin A4抗体、抗Afadin抗体、抗Retinol-binding protein 1抗体、抗D-dopachrome decarboxylase抗体、抗Apolipoprotein M抗体、および、抗BolA-like protein 1抗体からなる群より選択される少なくとも１つ、を有効成分として含有し、（Ａ）の有効成分を含有している場合には、炎症性腸疾患用、クローン病用、臓器特異性自己免疫疾患用、関節リウマチ用、全身性エリテマトーデス用、多発性筋炎用、全身性自己免疫疾患用、または、感染症による組織損傷用として用いられ、（Ｂ）の有効成分を含有している場合には、アトピー性皮膚炎用として用いられる、ことを特徴としている。
【発明の効果】
【００１８】
本発明の一態様によれば、ＩＬ−３３の発現を制御することができる。
【００１９】
本発明に一態様によれば、ＩＬ−３３の発現を制御することによって、生体防御機構を制御することができる。
【００２０】
本発明に一態様によれば、ＩＬ−３３の発現を制御することによって、アレルギー炎症の症状を制御することができる。
【００２１】
本発明の一態様によれば、（ｉ）新たに見出されたＩＬ−３３の発現誘導因子に基づくアレルギー炎症検出用バイオマーカー、および、（ｉｉ）当該発現誘導因子の量的変動を指標とした様々な技術（例えば、アレルギー炎症を診断するためのデータの取得方法、ＩＬ−３３の発現誘導因子のスクリーニング方法、アレルギー疾患患者の鑑別方法、並びに、被検薬剤の有効性および副作用の評価方法などを含む）を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】（Ａ）は、実施例において、免疫染色法にて染色されたＩＬ−３３の像であり、（Ｂ）は、実施例において、定量的ＰＣＲ法にて定量されたＩＬ−３３のグラフである。
【図２】（Ａ）は、実施例において、肺組織抽出液を用いた刺激によって、核内にＩＬ−３３を発現する肺線維芽細胞の数が増加することを示す像であり、（Ｂ）は、肺組織抽出液を用いた刺激によって、肺線維芽細胞におけるＩＬ−３３の産生量が増加することを示すグラフである。
【図３】（Ａ）および（Ｂ）は、実施例において、様々な処理を施した肺組織抽出液に残存するＩＬ−３３の発現誘導活性を示すグラフである。
【図４】実施例における、ＩＬ−３３の発現誘導因子の精製方法の概略を示すフローチャートである。
【図５】実施例における、ゲル濾過によって得られた各画分に存在するＩＬ−３３の発現誘導活性を示す図である。
【図６】（Ａ）および（Ｂ）は、実施例における、疎水性相互作用クロマトグラフィーによって得られた各画分に存在する、タンパク質およびＩＬ−３３の発現誘導活性を示す図である。
【図７】（Ａ）および（Ｂ）は、実施例における、陰イオン交換クロマトグラフィーによって得られた各画分に存在する、タンパク質およびＩＬ−３３の発現誘導活性を示す図である。
【図８】実施例において、ｉＴＲＡＱ法によるプロテオミクス解析によって見出されたタンパク質を示す図である。
【図９】実施例において、ｉＴＲＡＱ法によるプロテオミクス解析によって見出されたタンパク質を示す図である。
【図１０】（Ａ）は、実施例において、融合タンパク質が有するＩＬ−３３の発現誘導活性を示す図であり、（Ｂ）は、実施例において、融合タンパク質の発現を確認した図である。
【図１１】（Ａ）および（Ｂ）は、実施例において、リコンビナントタンパク質が有するＩＬ−３３の発現誘導活性を示す図である。
【図１２】実施例において、抗体が有するＩＬ−３３の発現抑制活性を示す図である。
【図１３】実施例において、肺組織で発現されているＲＢＢＰ９を示す像である。
【図１４】（Ａ）は、実施例において、肺組織抽出液および腎組織抽出液のゲル濾過分画（♯７１−８０）で発現されているＲＢＢＰ９を示す像であり、（Ｂ）は、実施例において、肺組織抽出液および腎組織抽出液のゲル濾過分画（♯７１−８０）に存在するＩＬ−３３の誘導活性を示す図であり、（Ｃ）は、実施例において、様々な組織にて発現しているＲＢＢＰ９を示す図である。
【図１５】（Ａ）および（Ｂ）は、実施例において、アジュバント効果を示すグラフである。
【図１６】（Ａ）および（Ｂ）は、実施例において、アジュバント効果を示すグラフである。
【図１７】（ａ）〜（ｈ）は、ＩＬ−３３の発現制御機構の解析結果を示す図である。
【図１８】（ａ）〜（ｄ）は、ＩＬ−３３の発現制御機構の解析結果を示す図である。
【図１９】（ａ）〜（ｆ）は、ＩＬ−３３の発現制御機構の解析結果を示す図であり、より具体的に、（ｄ）〜（ｆ）は、ＲＢＢＰ９のアジュバント効果を示す図である。
【図２０】（ａ）〜（ｅ）は、ＩＬ−３３の発現制御機構の解析結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
本発明の一実施形態について以下に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。本発明は、以下に説明する各構成に限定されるものではなく、特許請求の範囲に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態や実施例にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態や実施例についても本発明の技術的範囲に含まれる。また、本明細書中に記載された学術文献および特許文献の全てが、本明細書中において参考文献として援用される。また、本明細書中に数値ＡおよびＢに関して「Ａ〜Ｂ」と記載した場合には、「Ａ以上Ｂ以下」を意図する。
【００２４】
〔１．アレルギー炎症検出用バイオマーカー〕
本実施の形態のバイオマーカーは、ＩＬ−３３の発現を誘導するものであり、ＩＬ−３３の発現が誘導されると、アレルギー炎症（例えば、自然型アレルギーによる炎症）が誘導される。それ故に、本実施の形態のバイオマーカーは、アレルギー炎症検出用バイオマーカーであるが、ＩＬ−３３検出用バイオマーカーでもあり得る。
【００２５】
本実施形態のバイオマーカーの発現を検出することによって、アレルギー炎症の発生の有無を知ることができる。例えば、アレルギー炎症が発生していないヒトに由来するサンプルＡ中に存在するバイオマーカーの量と、被験者に由来するサンプルＢ中に存在するバイオマーカーの量とが略同じであれば、当該被検者ではアレルギー炎症が発生していないことが判る。一方、アレルギー炎症が発生していないヒトに由来するサンプルＡ中に存在するバイオマーカーの量に比べて、被験者に由来するサンプルＢ中に存在するバイオマーカーの量が多ければ、当該被検者ではアレルギー炎症が発生していることが判る。
【００２６】
アレルギー炎症を引き起こすアレルゲンとしては、寄生虫、微生物、ウイルス、花粉、キチン、水酸化アルミニウム、ＰＭ２．５および大気中に含まれる汚染物質（例えば、微粒子状物質）などを挙げることができるが、これらのアレルゲンに限定されない。
【００２７】
より具体的に、本実施の形態のバイオマーカーは、（ｉ）Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、COX-2、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質、若しくは、（ｉｉ）当該タンパク質をコードしているｍＲＮＡからなるものである。
【００２８】
本実施の形態のバイオマーカーは、（ｉ）に記載のタンパク質の全長であってもよく、（ｉ）に記載のタンパク質の部分長であってもよく、（ｉｉ）に記載のｍＲＮＡの全長であってもよく、（ｉｉ）に記載のｍＲＮＡの部分長であってもよい。
【００２９】
上記（ｉ）に記載のタンパク質、および、上記（ｉｉ）に記載のｍＲＮＡの具体例としては、例えば、公知のデータベースなどに記載のものを挙げることができる。また、上記（ｉ）に記載のタンパク質、および、上記（ｉｉ）に記載のｍＲＮＡが由来する生物種は、特に限定されない。
【００３０】
以下に、ヒトタンパク質に関して、データベースに登録された番号を列挙する。
【００３１】
【表１】
2018118965.tif 000002
【００３２】
【表２】
2018118965.tif 000003
【００３３】
以下に、ヒトｍＲＮＡに関して、データベースに登録された番号を列挙する。
【００３４】
【表３】
2018118965.tif 000004
【００３５】
【表４】
2018118965.tif 000005
【００３６】
上記（ｉ）に記載の各タンパク質は、例えば、以下の（ａ）〜（ｃ）の何れかのポリペプチドであり得る：
（ａ）ヒトタンパク質に対応するアミノ酸配列からなるポリペプチド；
（ｂ）ヒトタンパク質に対応するアミノ酸配列において、１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、かつ、ＩＬ−３３の発現誘導活性を有するポリペプチド；
（ｃ）ヒトタンパク質に対応するアミノ酸配列と９０％以上、好ましくは９１％以上、より好ましくは９２％以上、より好ましくは９３％以上、より好ましくは９４％以上、より好ましくは９５％以上、より好ましくは９６％以上、より好ましくは９７％以上、より好ましくは９８％以上、最も好ましくは９８％以上の同一性を有するポリペプチドからなり、かつ、ＩＬ−３３の発現誘導活性を有するポリペプチド。
【００３７】
上記（ｉｉ）に記載の各ｍＲＮＡは、例えば、以下の（ｄ）〜（ｇ）の何れかのポリヌクレオチドであり得る：
（ｄ）ヒトｍＲＮＡに対応する塩基配列からなるポリヌクレオチド；
（ｅ）ヒトｍＲＮＡに対応する塩基配列において、１若しくは数個の塩基が欠失、置換若しくは付加された塩基配列からなり、かつ、ＩＬ−３３の発現誘導活性を有するポリヌクレオチド；
（ｆ）ヒトｍＲＮＡに対応する塩基配列と９０％以上、好ましくは９１％以上、より好ましくは９２％以上、より好ましくは９３％以上、より好ましくは９４％以上、より好ましくは９５％以上、より好ましくは９６％以上、より好ましくは９７％以上、より好ましくは９８％以上、最も好ましくは９８％以上の同一性を有するポリヌクレオチドからなり、かつ、ＩＬ−３３の発現誘導活性を有するポリヌクレオチド。
（ｇ）ヒトｍＲＮＡに対応する塩基配列からなるポリヌクレオチドと相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチドとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつ、ＩＬ−３３の発現誘導活性を有するポリヌクレオチド；
本明細書における「１若しくは数個のアミノ酸（または、塩基）が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸（または塩基）」では、欠失、置換若しくは付加が生じる位置は特に限定されない。
【００３８】
また、「１若しくは数個のアミノ酸（または塩基）」が意図するアミノ酸（または塩基）の数は特に限定されないが、２０個以内、１９個以内、１８個以内、１７個以内、１６個以内、１５個以内、１４個以内、１３個以内、１２個以内、１１個以内、１０個以内、９個以内、８個以内、７個以内、６個以内、５個以内、４個以内、３個以内、２個以内、または、１個のアミノ酸（または塩基）であり得る。
【００３９】
アミノ酸配列および塩基配列の相同性および同一性は、BLASTN（核酸レベル）やBLASTX（アミノ酸レベル）のプログラム(Altschul et al. J. Mol. Biol., 215: 403-410, 1990) を利用して決定することができる。該プログラムは、KarlinおよびAltschulによるアルゴリズムBLAST (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87:2264-2268, 1990, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90: 5873-5877, 1993) に基づいている。BLASTNによって塩基配列を解析する場合には、パラメーターは例えばscore ＝１００、wordlength ＝１２とする。また、BLASTXによってアミノ酸配列を解析する場合には、パラメーターは例えばscore ＝５０、wordlength ＝３とする。また、Gapped BLASTプログラムを用いて、アミノ酸配列を解析する場合は、Altschulら（Nucleic Acids Res. 25: 3389-3402, 1997）に記載されているように行うことができる。BLASTとGapped BLASTプログラムを用いる場合には、各プログラムのデフォルトパラメーターを用いる。これらの解析方法の具体的な手法は公知である。比較対象の塩基配列またはアミノ酸配列を最適な状態にアラインメントするために、付加または欠失（例えば、ギャップ等）を許容してもよい。
【００４０】
本明細書中で使用される場合、用語「ストリンジェントな条件」は、いわゆる塩基配列に特異的な２本鎖のポリヌクレオチドが形成され、非特異的な２本鎖のポリヌクレオチドが形成されない条件をいう。換言すれば、相同性が高い核酸同士、例えば完全にマッチしたハイブリッドの融解温度（Ｔｍ値）から１５℃、好ましくは１０℃、更に好ましくは５℃低い温度までの範囲の温度でハイブリダイズする条件ともいえる。
【００４１】
例えば、一例を示すと、０．２５Ｍ  Ｎａ２ＨＰＯ４、ｐＨ７．２、７％ＳＤＳ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１×デンハルト溶液からなる緩衝液中で温度が６０〜６８℃、好ましくは６５℃、さらに好ましくは６８℃の条件下で１６〜２４時間ハイブリダイズさせ、さらに２０ｍＭ  Ｎａ２ＨＰＯ４、ｐＨ７．２、１％ＳＤＳ、１ｍＭ  ＥＤＴＡからなる緩衝液中で温度が６０〜６８℃、好ましくは６５℃、さらに好ましくは６８℃の条件下で１５分間の洗浄を２回行う条件を挙げることができる。
【００４２】
他の例としては、２５％ホルムアミド、より厳しい条件では５０％ホルムアミド、４×ＳＳＣ（塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム）、５０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ  ｐＨ７．０、１０×デンハルト溶液、２０μｇ／ｍＬ変性サケ精子ＤＮＡを含むハイブリダイゼーション溶液中、４２℃で一晩プレハイブリダイゼーションを行った後、標識したプローブを添加し、42℃で一晩保温することによりハイブリダイゼーションを行う。その後の洗浄における洗浄液および温度条件は、「１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、３７℃」程度で、より厳しい条件としては「０．５×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、４２℃」程度で、さらに厳しい条件としては「０．２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃」程度で実施することができる。このようにハイブリダイゼーションの洗浄の条件が厳しくなるほど、特異性の高いハイブリダイズとなる。ただし、上記ＳＳＣ、ＳＤＳおよび温度の条件の組み合わせは例示であり、当業者であれば、ハイブリダイゼーションのストリンジェンシーを決定する上記若しくは他の要素（例えば、プローブ濃度、プローブの長さ、ハイブリダイゼーション反応時間等）を適宜組み合わせることにより、上記と同様のストリンジェンシーを実現することが可能である。このことは、例えば、Sambrookら、Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 3rd Ed., Cold Spring Harbor Laboratory（2001）等に記載されている。
【００４３】
「ＩＬ−３３の発現誘導活性を有するポリペプチド」であるか否かは、例えば、マウス初代培養肺線維芽細胞に所望のポリペプチドを作用させて、当該マウス初代培養肺線維芽細胞がＩＬ−３３の発現を誘導するか否かを、ウェスタンブロット法またはＲＴ−ＰＣＲ法にて確認することによって判定することができる。マウス初代培養肺線維芽細胞がＩＬ−３３の発現を誘導すれば、当該ポリペプチドは「ＩＬ−３３の発現誘導活性を有するポリペプチド」である、と判定することができる。
【００４４】
一方、「ＩＬ−３３の発現誘導活性を有するポリヌクレオチド」であるか否かは、例えば、マウス初代培養肺線維芽細胞に所望のポリヌクレオチドの翻訳産物を作用させて、当該マウス初代培養肺線維芽細胞がＩＬ−３３の発現を誘導するか否かを、ウェスタンブロット法またはＲＴ−ＰＣＲ法にて確認することによって判定することができる。マウス初代培養肺線維芽細胞がＩＬ−３３の発現を誘導すれば、当該ポリヌクレオチドは「ＩＬ−３３の発現誘導活性を有するポリヌクレオチド」である、と判定することができる。
【００４５】
アレルギー炎症検出用バイオマーカーの発現を検出する具体的な方法は、特に限定されず、周知のタンパク質検出方法（例えば、ウェスタンブロット法、免疫染色法、アレイ法、ショットガン法、および、ｉＴＲＡＱ法など）、および、周知のｍＲＮＡ検出方法（例えば、ＲＴ−ＰＣＲ法、アレイ法、ｉｎ  ｓｉｔｕハイブリダイゼーション法、および、ノザンブロット法など）を用いることができる。
【００４６】
例えば、本実施の形態のアレルギー炎症検出用バイオマーカーが、タンパク質である場合には、当該タンパク質に対する抗体が固定化されたアレイを用いて、アレルギー炎症検出用バイオマーカーの発現を検出すればよい。当該アレイ上に固定化されている抗体の種類は、限定されないが、別々の抗原を認識する抗体が、１種類以上、好ましくは３種類以上、より好ましくは５種類以上、最も好ましくは１０種類以上であることが好ましい。当該抗体の具体的な構成は、特に限定されず、例えば、後述する〔３〕の欄で説明する抗体を用いることができる。
【００４７】
例えば、本実施の形態のアレルギー炎症検出用バイオマーカーが、ｍＲＮＡである場合には、当該ｍＲＮＡに相補的なプライマーが固定化されたアレイを用いて、アレルギー炎症検出用バイオマーカーの発現を検出すればよい。当該アレイ上に固定化されているプライマーの種類は、限定されないが、別々のｃＤＮＡを増幅するプライマーが、１種類以上、好ましくは３種類以上、より好ましくは５種類以上、最も好ましくは１０種類以上であることが好ましい。当該プライマーの具体的な構成は、特に限定されず、公知の方法にしたがって適宜設計すればよい。
【００４８】
なお、上述したアレイ（アレルギー炎症検出用アレイ）も発明の一態様として包含される。
【００４９】
〔２．アレルギー炎症を診断するためのデータの取得方法〕
本実施の形態のアレルギー炎症を診断するためのデータの取得方法は、Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、COX-2、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質；若しくは当該タンパク質をコードしているｍＲＮＡの発現を検出する工程を有している。
【００５０】
つまり、本実施の形態のアレルギー炎症を診断するためのデータの取得方法は、上述したアレルギー炎症検出用バイオマーカーの発現を検出する工程を有している。
【００５１】
アレルギー炎症検出用バイオマーカーの具体的な構成については既に説明したので、ここでは、その説明を省略する。
【００５２】
本実施形態のバイオマーカーの発現を検出することによって、アレルギー炎症の発生の有無を知ることができる。例えば、アレルギー炎症が発生していないヒトに由来するサンプルＡ中に存在するバイオマーカーの量と、被験者に由来するサンプルＢ中に存在するバイオマーカーの量とが略同じであれば、当該被検者ではアレルギー炎症が発生していないことが判る。一方、アレルギー炎症が発生していないヒトに由来するサンプルＡ中に存在するバイオマーカーの量に比べて、被験者に由来するサンプルＢ中に存在するバイオマーカーの量が多ければ、当該被検者ではアレルギー炎症が発生していることが判る。
【００５３】
アレルギー炎症検出用バイオマーカーの発現を検出する対象としては、採取された細胞、非ヒト動物（例えば、イヌ、ネコ、ヒツジ、ヤギ、マウス、ラット、ウサギ、ウシ、ウマ、ブタなどの哺乳動物）、および、ヒトなどを挙げることができるが、これらに限定されない。
【００５４】
アレルギー炎症検出用バイオマーカーの発現を検出する具体的な方法は、特に限定されず、周知のタンパク質検出方法（例えば、ウェスタンブロット法、免疫染色法、ショットガン法、および、ｉＴＲＡＱ法など）、および、周知のｍＲＮＡ検出方法（例えば、ＲＴ−ＰＣＲ法、ｉｎ  ｓｉｔｕハイブリダイゼーション法、および、ノザンブロット法など）を用いることができる。
【００５５】
例えば、本実施の形態のアレルギー炎症検出用バイオマーカーが、タンパク質である場合には、当該タンパク質に対する抗体が固定化されたアレイを用いて、アレルギー炎症検出用バイオマーカーの発現を検出すればよい。当該アレイ上に固定化されている抗体の種類は、限定されないが、別々の抗原を認識する抗体が、１種類以上、好ましくは３種類以上、より好ましくは５種類以上、最も好ましくは１０種類以上であることが好ましい。当該抗体の具体的な構成は、特に限定されず、例えば、後述する〔３〕の欄で説明する抗体を用いることができる。
【００５６】
例えば、本実施の形態のアレルギー炎症検出用バイオマーカーが、ｍＲＮＡである場合には、当該ｍＲＮＡに相補的なプライマーが固定化されたアレイを用いて、アレルギー炎症検出用バイオマーカーの発現を検出すればよい。当該アレイ上に固定化されているプライマーの種類は、限定されないが、別々のｃＤＮＡを増幅するプライマーが、１種類以上、好ましくは３種類以上、より好ましくは５種類以上、最も好ましくは１０種類以上であることが好ましい。当該プライマーの具体的な構成は、特に限定されず、公知の方法にしたがって適宜設計すればよい。
【００５７】
なお、上述したアレイ（アレルギー炎症検出用アレイ）も発明の一態様として包含される。
【００５８】
〔３．アレルギー疾患患者の鑑別方法〕
本実施の形態のアレルギー疾患患者の鑑別方法は、Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、COX-2、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質；若しくは当該タンパク質をコードしているｍＲＮＡの発現を検出する工程を有している。
【００５９】
つまり、本実施の形態のアレルギー疾患患者の鑑別方法は、上述したアレルギー炎症検出用バイオマーカーの発現を検出する工程を有している。
【００６０】
アレルギー炎症検出用バイオマーカーの具体的な構成については既に説明したので、ここでは、その説明を省略する。
【００６１】
バイオマーカーの発現を検出することによって、アレルギー疾患を患っているか否かを鑑別することができる。例えば、アレルギー疾患を患っていないヒトに由来するサンプルＡ中に存在するバイオマーカーの量と、被験者に由来するサンプルＢ中に存在するバイオマーカーの量とが略同じであれば、当該被検者はアレルギー疾患を患っていないことが判る。一方、アレルギー炎症を患っていないヒトに由来するサンプルＡ中に存在するバイオマーカーの量に比べて、被験者に由来するサンプルＢ中に存在するバイオマーカーの量が多ければ、当該被検者はアレルギー疾患を患っていることが判る。
【００６２】
アレルギー炎症検出用バイオマーカーの発現を検出する対象としては、採取された細胞、非ヒト動物（例えば、イヌ、ネコ、ヒツジ、ヤギ、マウス、ラット、ウサギ、ウシ、ウマ、ブタなどの哺乳動物）、および、ヒトなどを挙げることができるが、これらに限定されない。
【００６３】
アレルギー炎症検出用バイオマーカーの発現を検出する具体的な方法は、特に限定されず、周知のタンパク質検出方法（例えば、ウェスタンブロット法、免疫染色法、ショットガン法、および、ｉＴＲＡＱ法など）、および、周知のｍＲＮＡ検出方法（例えば、ＲＴ−ＰＣＲ法、ｉｎ  ｓｉｔｕハイブリダイゼーション法、および、ノザンブロット法など）を用いることができる。
【００６４】
〔４．ＩＬ−３３の発現誘導因子のスクリーニング方法〕
本実施の形態のＩＬ−３３の発現誘導因子のスクリーニング方法は、
採取された細胞（例えば、採取された、肺細胞（例えば、肺線維芽細胞）または腎細胞など）に、被検物質を接触させる工程と、
上記細胞における、Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、COX-2、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質；若しくは当該タンパク質をコードしているｍＲＮＡの発現を検出する工程と、を有している。
【００６５】
つまり、本実施の形態のＩＬ−３３の発現誘導因子のスクリーニング方法は、採取された細胞（例えば、採取された、肺細胞（例えば、肺線維芽細胞）または腎細胞など）に、被検物質を接触させる工程と、当該細胞におけるアレルギー炎症検出用バイオマーカーの発現を検出する工程を有している。
【００６６】
バイオマーカーの発現を検出することによって、被検物質がＩＬ−３３の発現誘導因子であるか否かを知ることができる。例えば、被検物質を接触させない細胞におけるバイオマーカーの発現量に比べて、被検物質を接触させた細胞におけるバイオマーカーの発現量が多ければ、当該被検物質がＩＬ−３３の発現誘導因子であることが判る。
【００６７】
採取された細胞に被検物質を接触させる具体的な方法は、特に限定されない。例えば、細胞に、被検物質を１ｎｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬ、好ましくは１ｎｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬ、より好ましくは１ｎｇ／ｍＬ〜１ｍｇ／ｍＬの濃度にて含む培地を接触させればよい。
【００６８】
アレルギー炎症検出用バイオマーカーの発現を検出する具体的な方法は、特に限定されず、周知のタンパク質検出方法（例えば、ウェスタンブロット法、免疫染色法、ショットガン法、および、ｉＴＲＡＱ法など）、および、周知のｍＲＮＡ検出方法（例えば、ＲＴ−ＰＣＲ法、ｉｎ  ｓｉｔｕハイブリダイゼーション法、および、ノザンブロット法など）を用いることができる。
【００６９】
〔５．被検薬剤の有効性および副作用の評価方法〕
本実施の形態の被検薬剤の有効性および副作用の評価方法は、
採取された細胞（例えば、被検薬剤の投与対象に由来する細胞（例えば、被検薬剤の投与対象に由来する、肺細胞（例えば、肺線維芽細胞）または腎細胞など））に、被検薬剤を接触させる工程と、
上記細胞における、Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、COX-2、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質；若しくは当該タンパク質をコードしているｍＲＮＡの発現を検出する工程と、を有している。
【００７０】
つまり、本実施の形態の被検薬剤の有効性および副作用の評価方法は、採取された細胞（例えば、被検薬剤の投与対象に由来する細胞（例えば、被検薬剤の投与対象に由来する、肺細胞（例えば、肺線維芽細胞）または腎細胞など））に、被検薬剤を接触させる工程と、当該細胞におけるアレルギー炎症検出用バイオマーカーの発現を検出する工程を有している。
【００７１】
バイオマーカーの発現を検出することによって、被検薬剤の有効性、および、被検薬剤がアレルギー炎症を引き起こす副作用を有しているか否かを知ることができる。例えば、被検薬剤を接触させない細胞におけるバイオマーカーの発現量に比べて、被検薬剤を接触させた細胞におけるバイオマーカーの発現量が多ければ、当該被検薬剤がアレルギー炎症を引き起こす副作用を有していることが判る。一方、被検薬剤を接触させない細胞におけるバイオマーカーの発現量に比べて、被検薬剤を接触させた細胞におけるバイオマーカーの発現量が少なければ、当該被検薬剤がアレルギー炎症を鎮静化させる作用を有していることが判る。
【００７２】
採取された細胞に被検薬剤を接触させる具体的な方法は、特に限定されない。例えば、細胞に、被検薬剤を１ｎｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬ、好ましくは１ｎｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬ、より好ましくは１ｎｇ／ｍＬ〜１ｍｇ／ｍＬの濃度にて含む培地を接触させればよい。
【００７３】
アレルギー炎症検出用バイオマーカーの発現を検出する具体的な方法は、特に限定されず、周知のタンパク質検出方法（例えば、ウェスタンブロット法、免疫染色法、ショットガン法、および、ｉＴＲＡＱ法など）、および、周知のｍＲＮＡ検出方法（例えば、ＲＴ−ＰＣＲ法、ｉｎ  ｓｉｔｕハイブリダイゼーション法、および、ノザンブロット法など）を用いることができる。
【００７４】
〔６．ＩＬ−３３の発現制御剤、および、治療剤〕
本実施の形態のＩＬ−３３の発現制御剤は、
（Ａ）Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、EP2アゴニスト（例えば、treprostinil、misoprostol、butaprost、および、carbacyclin）、EP4アゴニスト（例えば、L902688、misoprostol、cicaprost、および、enprostil）、COX-2活性化剤（例えば、LPS、IL-1）、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つ；若しくは、これらの発現ベクター；または、
（Ｂ）抗Putative hydrolase RBBP9抗体、抗PGE1抗体、抗PGE2抗体、抗EP2抗体、抗EP4抗体、EP2アンタゴニスト（例えば、PF04418948、TG4-155、TG7-171、TG6-129、および、AH6809）、EP4アンタゴニスト（例えば、ONO-AE3-208、MF 498、MK-2894、ER819762、および、grapiprant）、抗COX-2抗体、COX-2阻害剤（例えば、インドメタシン、benzquinamide、diclofenac、celecoxib、および、resveratrol）、抗Centrosomal protein of 170kDa抗体、抗Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3抗体、抗Tight junction protein ZO-2抗体、抗Guanylate kinase抗体、抗Myotubularin-related protein 10抗体、抗Eukaryotic translation initiation factor 4H抗体、抗UMP-CMP kinase抗体、抗Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2抗体、抗Protein S100-A13抗体、抗Rho GDP-dissociation inhibitor 2抗体、抗Selenoprotein M、Protein S100-A11抗体、抗Eukaryotic translation initiation factor 4B抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1抗体、抗Transgelin-2抗体、抗THO complex subunit 4抗体、抗Keratin type I cytoskeletal 19抗体、抗Keratin type II cytoskeletal 75抗体、抗Microtubule-associated protein RP/EB family member 3抗体、抗Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2抗体、抗CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1抗体、抗Adenylate kinase isoenzyme 1抗体、抗Ubiquitin-like protein 3抗体、抗Calcium-regulated heat stable protein 1抗体、抗Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1抗体、抗Glia maturation factor beta抗体、抗Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2抗体、抗Phosphatidylethanolamine-binding protein 1抗体、抵抗Annexin A4抗体、抗Afadin抗体、抗Retinol-binding protein 1抗体、抗D-dopachrome decarboxylase抗体、抗Apolipoprotein M抗体、および、抗BolA-like protein 1抗体からなる群より選択される少なくとも１つ、を有効成分として含有していることを特徴としている。
【００７５】
上記（Ａ）に記載の物質およびこれらの発現ベクターは、ＩＬ−３３の発現を誘導するものであり、ＩＬ−３３の発現が誘導されると、アレルギー炎症が誘導される。それ故に、本実施の形態のＩＬ−３３の発現制御剤が、（Ａ）に記載の物質またはこれらの発現ベクターを有効成分として含有している場合には、本実施の形態のＩＬ−３３の発現制御剤は、ＩＬ−３３の発現誘導剤またはアレルギー炎症誘導剤であり得る。
【００７６】
ＩＬ−３３の発現誘導剤は、ＩＬ−３３受容体を発現する制御性Ｔ細胞を活性化できる。それ故に、ＩＬ−３３の発現誘導剤は、炎症性腸疾患、クローン病、臓器特異性自己免疫疾患、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、多発性筋炎、全身性自己免疫疾患、および、感染症（例えば、インフルエンザ等）によって傷害された組織損傷の治療に用いられ得る。つまり、本実施の形態のＩＬ−３３の発現制御剤が、（Ａ）に記載の物質またはこれらの発現ベクターを有効成分として含有している場合には、本実施の形態のＩＬ−３３の発現制御剤は、炎症性腸疾患の治療剤、クローン病の治療剤、臓器特異性自己免疫疾患の治療剤、関節リウマチの治療剤、全身性エリテマトーデスの治療剤、多発性筋炎の治療剤、または、全身性自己免疫疾患の治療剤であり得る。さらに、ＩＬ-３３は、組織の炎症抑制作用と、組織の修復作用とを有するので、インフルエンザ等の感染が原因で傷害された組織（例えば、肺組織）の修復や再生にも関与する。即ち、本実施の形態のＩＬ-３３の発現制御剤は、感染症に伴う組織損傷の修復剤として利用できる。
【００７７】
一方、上記（Ｂ）に記載の抗体（例えば、中和抗体）、アンタゴニストおよび阻害剤は、ＩＬ−３３の発現を抑制するものであり、ＩＬ−３３の発現が抑制されると、アレルギー炎症が抑制される。それ故に、本実施の形態のＩＬ−３３の発現制御剤が、（Ｂ）に記載の物質を有効成分として含有している場合には、本実施の形態のＩＬ−３３の発現制御剤は、ＩＬ−３３の発現抑制剤またはアレルギー炎症抑制用の治療剤（例えば、アトピー性皮膚炎抑制用の治療剤）であり得る。
【００７８】
つまり、ＩＬ−３３の発現誘導剤の別の態様は、（Ａ）Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、EP2アゴニスト、EP4アゴニスト、COX-2、COX-2活性化剤、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つ；若しくは、これらの発現ベクター；または、（Ｂ）抗Putative hydrolase RBBP9抗体、抗PGE1抗体、抗PGE2抗体、抗EP2抗体、抗EP4抗体、EP2アンタゴニスト、EP4アンタゴニスト、抗COX-2抗体、COX-2阻害剤、抗Centrosomal protein of 170kDa抗体、抗Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3抗体、抗Tight junction protein ZO-2抗体、抗Guanylate kinase抗体、抗Myotubularin-related protein 10抗体、抗Eukaryotic translation initiation factor 4H抗体、抗UMP-CMP kinase抗体、抗Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2抗体、抗Protein S100-A13抗体、抗Rho GDP-dissociation inhibitor 2抗体、抗Selenoprotein M、Protein S100-A11抗体、抗Eukaryotic translation initiation factor 4B抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1抗体、抗Transgelin-2抗体、抗THO complex subunit 4抗体、抗Keratin type I cytoskeletal 19抗体、抗Keratin type II cytoskeletal 75抗体、抗Microtubule-associated protein RP/EB family member 3抗体、抗Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2抗体、抗CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1抗体、抗Adenylate kinase isoenzyme 1抗体、抗Ubiquitin-like protein 3抗体、抗Calcium-regulated heat stable protein 1抗体、抗Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1抗体、抗Glia maturation factor beta抗体、抗Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2抗体、抗Phosphatidylethanolamine-binding protein 1抗体、抵抗Annexin A4抗体、抗Afadin抗体、抗Retinol-binding protein 1抗体、抗D-dopachrome decarboxylase抗体、抗Apolipoprotein M抗体、および、抗BolA-like protein 1抗体からなる群より選択される少なくとも１つ、を有効成分として含有し、（Ａ）の有効成分を含有している場合には、炎症性腸疾患用、クローン病用、臓器特異性自己免疫疾患用、関節リウマチ用、全身性エリテマトーデス用、多発性筋炎用、全身性自己免疫疾患用、または、感染症による組織損傷用として用いられ、（Ｂ）の有効成分を含有している場合には、アトピー性皮膚炎用として用いられる、治療剤、である。
【００７９】
上記（Ａ）に記載の発現ベクターは、例えば、上記（Ａ）に記載のタンパク質のｃＤＮＡが発現可能に挿入されているものである。ベクターの具体的な例としては、特に限定されず、例えば、プラスミド、ウイルスベクター（例えば、ヘルペスウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター、および、レトロウイスルベクター）、または、ウイルス粒子を挙げることができる。当該ベクターに挿入されるプロモーターの具体的な例としては、特に限定されず、上述したベクターに応じて適宜選択すればよい。
【００８０】
上記（Ｂ）に記載の抗体の抗体は、ポリクローナル抗体であってもよいし、モノクローナル抗体であってもよい。また、上記（Ｂ）に記載の抗体の抗体は、あらゆるタイプのイムノグロブリンであり得、具体的には、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤまたはＩｇＥであり得る。また、上記（Ｂ）に記載の抗体の抗体は、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントまたはＦｃフラグメントであってもよい。
【００８１】
上記（Ｂ）に記載の抗体の抗体は、種々の公知の方法（例えば、ＨａｒＬｏｗら、「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８８）」、岩崎ら、「単クローン抗体  ハイブリドーマとＥＬＩＳＡ、講談社（１９９１）」）に従って作製され得る。また、上記（Ｂ）に記載の抗体の抗体は、市販の抗体であってもよい。
【００８２】
モノクローナル抗体は、当該分野において周知の方法（例えば、ハイブリドーマ法（Ｋｏｈｌｅｒ，Ｇ．およびＭｉｌｓｔｅｉｎ，Ｃ．，  Ｎａｔｕｒｅ  ２５６，４９５−４９７（１９７５））、トリオーマ法、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ法（Ｋｏｚｂｏｒ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ  ４，７２（１９８３））およびＥＢＶ−ハイブリドーマ法（Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，  Ａｌａｎ  Ｒ  Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．，７７−９６（１９８５））などを参照）を用いて作製され得る。
【００８３】
Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントおよびＦｃフラグメントは、パパイン（Ｆａｂフラグメントを生じる）、または、ペプシン（Ｆ（ａｂ’）２フラグメントを生じる）のような酵素を用いて抗体を切断することによって、作製され得る。
【００８４】
上記（Ｂ）に記載の抗体の抗体は、中和抗体であることが好ましい。上記（Ｂ）に記載の抗体の抗体がポリクローナル抗体である場合には、ポリクローナル抗体に含まれる多様な抗体のうち、一部の抗体が中和活性であればよい。なお、本明細書において「中和抗体」とは、抗原タンパク質の機能のうち、ＩＬ−３３の発現誘導活性を低下させる抗体を意図する。
【００８５】
抗体が中和抗体であるか否かは、例えば、マウス初代培養肺線維芽細胞に、（１）所望の抗原のみ、または、（２）所望の抗原および当該抗原に対する抗体を作用させて、当該マウス初代培養肺線維芽細胞がＩＬ−３３の発現を誘導するか否かを、ウェスタンブロット法またはＲＴ−ＰＣＲ法にて確認することによって判定することができる。上記（１）にて誘導されるマウス初代培養肺線維芽細胞におけるＩＬ−３３の発現が、上記（２）によって抑制（例えば、９／１０以下、好ましくは８／１０以下、より好ましくは７／１０以下、より好ましくは６／１０以下、より好ましくは５／１０以下、より好ましくは４／１０以下、より好ましくは３／１０以下、より好ましくは２／１０以下、最も好ましくは１／１０以下に抑制）されれば、当該抗体が、「中和抗体」であると判定することができる。
【００８６】
また、EP2アゴニスト、EP4アゴニスト、COX-2活性化剤、EP2アンタゴニスト、EP4アンタゴニスト、および、COX-2阻害剤としては、特に限定されず、適宜、市販のもの等を用いることができる。
【００８７】
本実施の形態のＩＬ−３３の発現制御剤における有効成分の量は、特に限定されず、例えば、発現制御剤に対して、０．００１重量％〜１００重量％であってもよく、０．０１重量％〜１００重量％であってもよく、０．１重量％〜１００重量％であってもよく、０．１重量％〜９５重量％であってもよく、０．１重量％〜９０重量％であってもよく、０．１重量％〜８０重量％であってもよく、０．１重量％〜７０重量％であってもよく、０．１重量％〜６０重量％であってもよく、０．１重量％〜５０重量％であってもよく、０．１重量％〜４０重量％であってもよく、０．１重量％〜３０重量％であってもよく、０．１重量％〜２０重量％であってもよく、０．１重量％〜１０重量％であってもよい。
【００８８】
本実施の形態のＩＬ−３３の発現制御剤は、有効成分以外の成分（薬学的に受容可能なキャリア）を含んでいてもよい。有効成分以外の成分としては、本実施の形態のＩＬ−３３の発現制御剤が固形製剤である場合には、賦形剤、滑沢剤、結合剤および崩壊剤を挙げることができ、実施の形態のＩＬ−３３の発現制御剤が液状製剤である場合には、溶剤、溶解補助剤、懸濁剤、等張化剤、緩衝剤および無痛化剤を挙げることができる。その他、有効成分以外の成分として、防腐剤、抗酸化剤および安定化剤も挙げることができる。
【００８９】
上記「賦形剤」としては、例えば、乳糖、白糖、Ｄ−マンニトール、キシリトール、ソルビトール、エリスリトール、デンプンおよび結晶セルロースを挙げることが、これらに限定されない。
【００９０】
上記「滑沢剤」としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ワックス、タルクおよびコロイドシリカを挙げることが、これらに限定されない。
【００９１】
上記「結合剤」としては、例えば、α化デンプン、メチルセルロース、結晶セルロース、白糖、Ｄ−マンニトール、トレハロース、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびポリビニルピロリドンを挙げることが、これらに限定されない。
【００９２】
上記「崩壊剤」としては、例えば、デンプン、カルボキシメチルセルロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウムおよびカルボキシメチルスターチナトリウムを挙げることが、これらに限定されない。
【００９３】
上記「溶剤」としては、例えば、注射用水、アルコール、プロピレングリコール、マクロゴール、ゴマ油、トウモロコシ油およびトリカプリリンを挙げることが、これらに限定されない。
【００９４】
上記「溶解補助剤」としては、例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、Ｄ−マンニトール、トレハロース、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウムおよびクエン酸ナトリウムを挙げることが、これらに限定されない。
【００９５】
上記「懸濁剤」としては、例えば、界面活性剤（例えば、ステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸グリセリン）および親水性高分子（例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース）を挙げることが、これらに限定されない。
【００９６】
上記「等張化剤」としては、例えば、塩化ナトリウム、グリセリンおよびＤ−マンニトールを挙げることが、これらに限定されない。
【００９７】
上記「緩衝剤」としては、例えば、リン酸塩、酢酸塩、炭酸塩およびクエン酸塩を挙げることが、これらに限定されない。
【００９８】
上記「無痛化剤」としては、例えば、ベンジルアルコールを挙げることが、これに限定されない。
【００９９】
上記「防腐剤」としては、例えば、パラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸およびソルビン酸を挙げることが、これらに限定されない。
【０１００】
上記「抗酸化剤」としては、例えば、亜硫酸塩およびアスコルビン酸を挙げることが、これらに限定されない。
【０１０１】
上記「安定化剤」としては、製薬分野において通常用いられるものであればよく、特に限定されない。
【０１０２】
本実施の形態のＩＬ−３３の発現制御剤における有効成分以外の成分の量は、特に限定されず、例えば、発現制御剤に対して、０重量％〜９９．９９９重量％であってもよく、０重量％〜９９．９９重量％であってもよく、０重量％〜９９．９重量％であってもよく、５重量％〜９９．９重量％であってもよく、１０重量％〜９９．９重量％であってもよく、２０重量％〜９９．９重量％であってもよく、３０重量％〜９９．９重量％であってもよく、４０重量％〜９９．９重量％であってもよく、５０重量％〜９９．９重量％であってもよく、６０重量％〜９９．９重量％であってもよく、７０重量％〜９９．９重量％であってもよく、８０重量％〜９９．９重量％であってもよく、９０重量％〜９９．９重量％であってもよい。
【０１０３】
本実施の形態のＩＬ−３３の発現制御剤の投与方法は、特に限定されず、経口的に投与されてもよいし、非経口的に、静脈内、直腸内、腹腔内、筋肉内、鼻内または皮下に投与されてもよい。
【０１０４】
本実施の形態のＩＬ−３３の発現制御剤は、製剤分野における一般的な方法によって製造することができる。
【０１０５】
〔７．アジュバント〕
本実施の形態のアジュバントは、Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、EP2アゴニスト、EP4アゴニスト、COX-2、COX-2活性化剤、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つ；若しくは、これらの発現ベクター、を有効成分として含有していることを特徴としている。
【０１０６】
EP2アゴニスト、EP4アゴニスト、COX-2活性化剤、EP2アンタゴニスト、EP4アンタゴニスト、および、COX-2阻害剤の具体例としては、〔６．ＩＬ−３３の発現制御剤、および、治療剤〕の欄に挙げたものを用いることができる。
【０１０７】
本実施の形態のアジュバントは、上記物質およびこれらの発現ベクター以外に、キチン、水酸化アルミニウム、尿酸、ＤｅｒＰ１、パパインの少なくとも一つ以上を有効成分として含んでいてもよいし、上記物質およびこれらの発現ベクターの代わりに、キチン、水酸化アルミニウム、尿酸、ＤｅｒＰ１、パパインの少なくとも一つ以上を有効成分として含んでいてもよい。
【０１０８】
上記物質、これらの発現ベクター、キチンおよび水酸化アルミニウムは、ＩＬ−３３の発現を誘導し、ＩＬ−３３は、ＩＬＣ２（グループ２自然リンパ球）および好酸球を誘導および活性化する。それ故に、本実施の形態のアジュバントであれば、ＩＬＣ２（グループ２自然リンパ球）および好酸球を誘導および活性化することができる。
【０１０９】
上記物質、および、これらの発現ベクターについては既に説明したので、ここでは、その説明を省略する。
【０１１０】
本実施の形態のアジュバントにおける有効成分の量は、特に限定されず、例えば、アジュバンに対して、０．００１重量％〜１００重量％であってもよく、０．０１重量％〜１００重量％であってもよく、０．１重量％〜１００重量％であってもよく、０．１重量％〜９５重量％であってもよく、０．１重量％〜９０重量％であってもよく、０．１重量％〜８０重量％であってもよく、０．１重量％〜７０重量％であってもよく、０．１重量％〜６０重量％であってもよく、０．１重量％〜５０重量％であってもよく、０．１重量％〜４０重量％であってもよく、０．１重量％〜３０重量％であってもよく、０．１重量％〜２０重量％であってもよく、０．１重量％〜１０重量％であってもよい。
【０１１１】
本実施の形態のアジュバントは、有効成分以外の成分を含んでいてもよい。有効成分以外の成分としては、抗サイトカイン抗体、抗サイトカイン受容体抗体、抗病原体成分（ＴＬＲリガンドを含む）抗体および抗ＴＬＲ抗体を挙げることができる。本実施の形態のアジュバントが、これらの成分のうちサイトカイン作用阻害剤および／または病原体作用阻害剤を含んでいれば、ＩＬ−３３の発現を特異的に誘導するという有利な効果を奏する。
【０１１２】
本実施の形態のアジュバントにおける有効成分以外の成分の量は、特に限定されず、例えば、発現制御剤に対して、０重量％〜９９．９９９重量％であってもよく、０重量％〜９９．９９重量％であってもよく、０重量％〜９９．９重量％であってもよく、５重量％〜９９．９重量％であってもよく、１０重量％〜９９．９重量％であってもよく、２０重量％〜９９．９重量％であってもよく、３０重量％〜９９．９重量％であってもよく、４０重量％〜９９．９重量％であってもよく、５０重量％〜９９．９重量％であってもよく、６０重量％〜９９．９重量％であってもよく、７０重量％〜９９．９重量％であってもよく、８０重量％〜９９．９重量％であってもよく、９０重量％〜９９．９重量％であってもよい。
【０１１３】
〔８．ＩＬ−３３の発現制御方法〕
本実施の形態のＩＬ−３３の発現制御方法は、
（Ａ）Putative hydrolase RBBP9、PGE1、PGE2、EP2、EP4、EP2アゴニスト、EP4アゴニスト、COX-2、COX-2活性化剤、Centrosomal protein of 170kDa、Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3、Tight junction protein ZO-2、Guanylate kinase、Myotubularin-related protein 10、Eukaryotic translation initiation factor 4H、UMP-CMP kinase、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2、Protein S100-A13、Rho GDP-dissociation inhibitor 2、Selenoprotein M、Protein S100-A11、Eukaryotic translation initiation factor 4B、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1、Transgelin-2、THO complex subunit 4、Keratin type I cytoskeletal 19、Keratin type II cytoskeletal 75、Microtubule-associated protein RP/EB family member 3、Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2、CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1、Adenylate kinase isoenzyme 1、Ubiquitin-like protein 3、Calcium-regulated heat stable protein 1、Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1、Glia maturation factor beta、Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase、Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2、Phosphatidylethanolamine-binding protein 1、Annexin A4、Afadin、Retinol-binding protein 1、D-dopachrome decarboxylase、Apolipoprotein M、および、BolA-like protein 1からなる群より選択される少なくとも１つ；若しくは、これらの発現ベクター；または、
（Ｂ）抗Putative hydrolase RBBP9抗体、抗PGE1抗体、抗PGE2抗体、抗EP2抗体、抗EP4抗体、EP2アンタゴニスト、EP4アンタゴニスト、抗COX-2抗体、COX-2阻害剤、抗Centrosomal protein of 170kDa抗体、抗Cathepsin S、NADH-cytochrome b5 reductase 3抗体、抗Tight junction protein ZO-2抗体、抗Guanylate kinase抗体、抗Myotubularin-related protein 10抗体、抗Eukaryotic translation initiation factor 4H抗体、抗UMP-CMP kinase抗体、抗Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2抗体、抗Protein S100-A13抗体、抗Rho GDP-dissociation inhibitor 2抗体、抗Selenoprotein M、Protein S100-A11抗体、抗Eukaryotic translation initiation factor 4B抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1抗体、抗Transgelin-2抗体、抗THO complex subunit 4抗体、抗Keratin type I cytoskeletal 19抗体、抗Keratin type II cytoskeletal 75抗体、抗Microtubule-associated protein RP/EB family member 3抗体、抗Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 2抗体、抗CB1 cannabinoid receptor-interacting protein 1抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1抗体、抗Adenylate kinase isoenzyme 1抗体、抗Ubiquitin-like protein 3抗体、抗Calcium-regulated heat stable protein 1抗体、抗Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme 1抗体、抗Glia maturation factor beta抗体、抗Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase抗体、抗Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins C1/C2抗体、抗Phosphatidylethanolamine-binding protein 1抗体、抵抗Annexin A4抗体、抗Afadin抗体、抗Retinol-binding protein 1抗体、抗D-dopachrome decarboxylase抗体、抗Apolipoprotein M抗体、および、抗BolA-like protein 1抗体からなる群より選択される少なくとも１つ、を投与する工程を有している。
【０１１４】
EP2アゴニスト、EP4アゴニスト、COX-2活性化剤、EP2アンタゴニスト、EP4アンタゴニスト、および、COX-2阻害剤の具体例としては、〔６．ＩＬ−３３の発現制御剤、および、治療剤〕の欄に挙げたものを用いることができる。
【０１１５】
上記（Ａ）に記載の物質およびこれらの発現ベクターは、ＩＬ−３３の発現を誘導するものであり、ＩＬ−３３の発現が誘導されると、アレルギー炎症が誘導される。それ故に、上記（Ａ）に記載のタンパク質または当該タンパク質の発現ベクターを投与する場合には、本実施の形態のＩＬ−３３の発現制御方法は、ＩＬ−３３の発現誘導方法またはアレルギー炎症誘導方法であり得る。
【０１１６】
一方、上記（Ｂ）に記載の抗体（例えば、中和抗体）、アンタゴニストおよび阻害剤は、ＩＬ−３３の発現を抑制するものであり、ＩＬ−３３の発現が抑制されると、アレルギー炎症が抑制される。それ故に、上記（Ｂ）に記載の抗体を投与する場合には、本実施の形態のＩＬ−３３の発現制御方法は、ＩＬ−３３の発現抑制方法またはアレルギー炎症抑制方法であり得る。
【０１１７】
上記（Ａ）および（Ｂ）に記載の物質を投与する対象は、特に限定されず、採取された細胞、非ヒト動物（例えば、イヌ、ネコ、ヒツジ、ヤギ、マウス、ラット、ウサギ、ウシ、ウマ、ブタなどの哺乳動物）、および、ヒトなどを挙げることができるが、これらに限定されない。
【実施例】
【０１１８】
＜１．肺組織の抽出液の調製＞
経皮的に感染した腸管寄生性蠕虫は、肺に移動する。そして感染後５日頃に肺組織内で出血が起こる。これは、寄生虫の侵入による物理的組織傷害が原因と考えられる。この頃からＩＬ−３３を発現する２型肺胞上皮細胞の数が増え始め、それに伴いＩＬＣ２の数が増加する様になる。さらに、ＩＬ−３３で刺激されたＩＬＣ２が、ＩＬ−５とＩＬ−１３とを産生するため、好酸球の浸潤が顕著になってくる。
【０１１９】
そこで、肺組織の傷害が原因でＩＬ−３３の誘導因子が産生されるとの推測のもとに、ＩＬ３３誘導因子の精製を目指した。
【０１２０】
具体的には、「５０％硫安沈殿」→「Ｓｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−１００」→「Ｐｈｅｎｙｌ  ｓｅｐｈａｒｏｓｅ」→「Ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ  ＳＤＳ」→「陰イオン交換カラム」の順番で、正常なマウス肺の成分を分離し、肺組織抽出液を得た。
【０１２１】
＜２．肺組織抽出液の経鼻投与によるＩＬ−３３の発現誘導＞
Ｃ５７ＢＬ／６マウスを二群に分け、一群に５０μｌのＰＢＳ（phosphate-buffered saline）を投与し、他の一群に＜１＞にて得られた肺組織抽出液（５０ｍｇ−タンパク質／ｍｌに調整したもの）５０μｌを、経鼻的に投与した。
【０１２２】
肺組織抽出液を投与後、経時的にマウスを頸椎脱臼により安楽死させて、当該マウスから肺を摘出した。摘出した肺におけるＩＬ−３３の発現を、免疫染色法（図１の（Ａ）参照）、または、定量的ＰＣＲ法（図１の（Ｂ）参照）によって測定した。
【０１２３】
図１の（Ａ）および（Ｂ）に示すように、肺組織抽出液を経鼻的にマウスへ投与すると、ＩＬ−３３を発現する２型肺胞上皮細胞の数が増加することが明らかになった。
【０１２４】
＜３．肺組織抽出液のマウス初代培養肺線維芽細胞におけるＩＬ−３３の発現誘導＞
本実施例では、＜１＞にて得られた肺組織抽出液がマウス初代培養肺線維芽細胞に作用してＩＬ−３３の発現を誘導することを示す。
【０１２５】
具体的に、図２の（Ａ）は、肺組織抽出液を用いた刺激によって、核内にＩＬ−３３を発現する肺線維芽細胞の数が増加することを示し、図２の（Ｂ）は、肺組織抽出液を用いた刺激によって、肺線維芽細胞におけるＩＬ−３３の産生量が増加することを示している。
【０１２６】
尚、マウス初代培養肺線維芽細胞は、８週齢の正常Ｃ５７ＢＬ／６マウス（ＷＴ）またはＩＬ−３３ＫＯマウスの肺から作製した。以下、マウス初代培養肺線維芽細胞の作製法について説明する。
【０１２７】
頸椎脱臼によって安楽死させたマウスの肺を取り出し、ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅを４００Ｕ／ｍｌ含有しているＲＰＭＩ１６４０培地中で、３７℃、１時間、当該肺を消化した。次に、パスツールピペットを用いて肺由来の細胞を単離し、当該細胞を細胞培養用ディッシュにて１０日間培養した。
【０１２８】
トリプシン−ＥＤＴＡを用いて、細胞培養用ディッシュから細胞をはがし、１．０×１０４／ｗｅｌｌの細胞濃度にてスライドチャンバーに、または、７．５×１０３／ｗｅｌｌの細胞濃度にて９６ｗｅｌｌプレートに当該細胞を播き、２〜３日後に、当該細胞をアッセイに使用した。
【０１２９】
スライドチャンバー内または９６ｗｅｌｌプレート内の培養上清中に、＜１＞にて得られた肺組織抽出液、または、ＰＢＳを加えて６時間培養した。
【０１３０】
スライドチャンバー上の細胞をＰＢＳで洗浄し、４％ホルマリン含有ＰＢＳを用いて３０分間固定し、洗浄した後、ウサギ抗マウスＩＬ−３３ポリクローナル抗体、抗ウサギＩｇＧビオチン結合ヤギ抗体、アビジン−ＦＩＴＣ、および、ＤＡＰＩ（4’,6-diamidino-2-phenylindole）を用いて染色した（図２の（Ａ）参照）。
【０１３１】
９６ｗｅｌｌプレート上の細胞をＰＢＳで洗浄した後、凍結融解を２回繰り返し、１５０００ｒｐｍで遠心し、上清中のＩＬ−３３濃度をＥＬＩＳＡ法にて測定した（図２の（Ｂ）参照）。
【０１３２】
＜４．ＩＬ−３３の発現誘導因子の特性＞
上記＜１＞にて得られた肺組織抽出液に対して、（ｉ）加熱処理（肺組織抽出液を５６℃にて３０分間加熱した）、（ｉｉ）タンパク分解酵素処理（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌに懸濁させた肺組織抽出液にＰｒｏｔｅｉｎａｓｅＫ−ａｇａｒｏｓｅビーズを加え、３７℃にて３時間反応させた後、当該懸濁液を１３０００ｒｐｍで遠心し、上清を回収した）、または、（ｉｉｉ）ＤＮＡ分解酵素処理（肺組織抽出液にＤＮＡｓｅ１  ５０μｇを加え、３７℃にて４５分間反応させた）を行った。
【０１３３】
中皮細胞株ＭｅＴ−５Ａを１．０×１０５／ｗｅｌｌ（１２ｗｅｌｌプレート）にて２４時間前培養した後、培養用の培地を、１０％ＦＣＳを含有しているＲＰＭＩ１６４０培地に換え、中皮細胞株ＭｅＴ−５Ａに対して、（ｉ）〜（ｉｉｉ）の各々の処理を施した肺組織抽出液（１０ｍｇ相当）を加えた。６時間後、ＩＬ−３３の発現を定量ＰＣＲにて評価した。
【０１３４】
図３の（Ａ）および（Ｂ）に示すように、（ｉ）および（ｉｉ）の処理を施した肺組織抽出液は、ＩＬ−３３の発現誘導活性が有意にて低下していた。このことから、肺組織抽出液中に存在するＩＬ−３３の発現誘導因子は、タンパク質であることが明らかになった。
【０１３５】
＜５．ＩＬ−３３の発現誘導因子の精製方法＞
上記＜４＞にて存在が確認されたＩＬ−３３の発現誘導因子を精製した。精製方法の概略を図４に示す。
【０１３６】
＜６．ゲル濾過によって得られた画分に関する検討＞
図４に示す精製方法に関して、ゲル濾過までの工程について説明する。
【０１３７】
まず、正常マウス肺のホモジェネートを、１１０，０００ｇにて１時間、超遠心分離して、上清（肺組織抽出液）を回収した。
【０１３８】
回収した上清について、飽和度５０％の硫酸アンモニウムを用いてタンパク質を沈殿させた。
【０１３９】
沈殿したタンパク質をＰＢＳに再懸濁し、当該懸濁液を、ポアサイズ１５〜５０Å（ＭＷＣＯ：１４０００）のセルロースチューブを用いて４℃で１８時間、ＰＢＳに対して透析した。
【０１４０】
透析後の懸濁液を、φ０．４５μｍのフィルターを通した後、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−１００を用いたゲル濾過クロマトグラフィーに供した。
【０１４１】
ゲル濾過クロマトグラフィーにて得られた各画分を限外濾過（Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａ４）した後、当該画分をマウス初代培養肺線維芽細胞の培養上清に加えた。６時間培養した後、肺線維芽細胞のＩＬ−３３の発現を定量ＰＣＲにて評価した。
【０１４２】
図５に示すように、１０〜３０ｋＤａのタンパク質を含む画分に、ＩＬ−３３の発現誘導因子が存在することが明らかになった。
【０１４３】
＜７．疎水性相互作用クロマトグラフィーによって得られた画分に関する検討＞
図４に示す精製方法に関して、疎水性相互作用クロマトグラフィーの工程について説明する。
【０１４４】
ゲル濾過によって得られた１０〜３０ｋＤａのタンパク質を含む分画（＃７０〜８０）をさらに限外濾過し、バッファーの置換（Start buffer）を行った。
【０１４５】
１０〜３０ｋＤａのタンパク質を含む分画をＰｈｅｎｙｌ  ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ｃｏｌｕｍｎ  ＨＰ（疎水性相互作用クロマトグラフィーカラム）にインジェクトした。Ｓｔａｒｔｉｎｇ  ｂｕｆｆｅｒとしては、Ｎａ２ＨＰＯ４  ５０ｍＭおよび（ＮＨ４）２ＳＯ４  １Ｍを含む水溶液を用い、Ｅｌｕｔｉｏｎ  ｂｕｆｆｅｒとしては、Ｎａ２ＨＰＯ４  ５０ｍＭを含む水溶液を用いた。ＵＶ２８０ｎｍで溶出物をモニタリングしながら、各画分を回収した。それぞれの画分を限外濾過した後、当該画分を、マウス初代培養肺線維芽細胞の培養上清に加えた。６時間培養した後、肺線維芽細胞のＩＬ−３３の発現を定量ＰＣＲにて評価した。
【０１４６】
図６の（Ａ）および（Ｂ）に示すように、「♯５」の画分に、ＩＬ−３３の発現誘導因子が存在することが明らかになった。
【０１４７】
＜８．陰イオン交換クロマトグラフィーによって得られた画分に関する検討＞
図４に示す精製方法に関して、陰イオン交換クロマトグラフィーの工程について説明する。
【０１４８】
疎水性相互作用クロマトグラフィーによって得られた、ＩＬ−３３の発現誘導活性が高い「♯５」の画分を限外濾過し、バッファーの置換（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−Ｈｃｌ  ｐＨ８．０）を行った。
「♯５」の画分をＭｏｎｏＱ（陰イオン交換クロマトグラフィー）カラムにインジェクトした。Ｓｔａｒｔｉｎｇ  ｂｕｆｆｅｒとしては、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−Ｈｃｌ  ｐＨ８．０を用い、Ｅｌｕｔｉｏｎ  ｂｕｆｆｅｒとしては、ＮａＣｌ  １Ｍを含む水溶液を用いた。ＵＶ２８０ｎｍで溶出物をモニタリングしながら、各画分を回収した。それぞれの画分を限外濾過した後、当該画分を、マウス初代培養肺線維芽細胞の培養上清に加えた。６時間培養した後、肺線維芽細胞のＩＬ−３３の発現を定量ＰＣＲにて評価した。
【０１４９】
図７の（Ａ）および（Ｂ）に示すように、「♯２」および「♯３」の画分に、ＩＬ−３３の発現誘導因子が存在することが明らかになった。
【０１５０】
＜９．ｉＴＲＡＱ法によるプロテオミクス解析＞
陰イオン交換クロマトグラフィーによって得られた、ＩＬ−３３の発現誘導活性が低い「＃１」の画分、ＩＬ−３３の発現誘導活性が高い「＃２」の画分、ＩＬ−３３の発現誘導活性が中程度である「＃３」の画分の各々を限外濾過し、バッファーの置換（ＰＢＳ）を行った。
【０１５１】
各画分について、脱塩および精製を行った後、ＢＣＡ法によってタンパク質を定量し、各々１０μｇのタンパク質をｉＴＲＡＱ（isobaric tags for relative and absolute quantitation）法によるプロテオミクス解析に供した。なお、ｉＴＲＡＱ法は、周知の方法にしたがって行った。
【０１５２】
各々のサンプルを還元、システインブロック、および、トリプシン処理し、その後、遠心分離によって濃縮した。ｉＴＲＡＱ試薬（株式会社Applied Biosystems製）を用いて、各々のサンプルをラベルした。
【０１５３】
ラベルしたサンプルを一つにまとめ、Ｃ１８（ＯＤＳ）カラムを用いて脱塩を行った。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳでタンデム質量分析を行い、網羅的な比較定量解析を行った。なお、ＩＬ−３３の発現誘導活性が低い「＃１」の画分をリファレンスとして用いた。
【０１５４】
ｉＴＲＡＱ法によるプロテオミクス解析の結果、図８および図９に示すタンパク質を見出すことに成功した。
【０１５５】
＜１０．ＩＬ−３３の発現誘導活性に関する試験（融合タンパク質）＞
ＨＥＫ−２９３細胞を５．０×１０４/ｗｅｌｌ（２４ｗｅｌｌプレート）にて前培養し、２４時間後、市販のトランスフェクション試薬を用いて、ＨＥＫ−２９３細胞にＦＬＡＧタグ融合タンパク質（ＲＢＢＰ９−ＦＬＡＧ、ＵＢ２ｖ１−ＦＬＡＧ）の発現プラスミドを導入した。なお、「ＲＢＢＰ９−ＦＬＡＧ」は、Putative hydrolase RBBP9とＦＬＡＧタグとの融合タンパク質であり、「ＵＢ２ｖ１−ＦＬＡＧ」は、Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 1とＦＬＡＧタグとの融合タンパク質である。
【０１５６】
抗ＦＬＡＧマウスモノクローナル抗体、または、抗マウスＲＢＢＰ９ウサギポリクローナル抗体を用いたウェスタンブロッティング法にしたがって、融合タンパク質の発現を確認した（図１０の（Ｂ）参照）。
【０１５７】
発現プラスミドが導入されたＨＥＫ−２９３細胞を凍結融解して溶解物を作製し、当該溶解物をマウス初代培養肺線維芽細胞の培養上清に加えた。マウス初代培養肺線維芽細胞を６時間培養した後、マウス初代培養肺線維芽細胞のＩＬ−３３の発現を定量ＰＣＲにて評価した。
【０１５８】
図１０の（Ａ）に示すように、「ＲＢＢＰ９−ＦＬＡＧ」を過剰発現させたＨＥＫ−２９３細胞から得られる溶解物は、マウス初代培養肺線維芽細胞に作用してＩＬ−３３の発現を誘導することが明らかになった。
【０１５９】
＜１１．ＩＬ−３３の発現誘導活性に関する試験（リコンビナントタンパク質）＞
マウス初代培養肺線維芽細胞の培養上清にリコンビナントタンパク質（ヒトＢＬＶＲＢ（株式会社R&D Systems製）、ヒトＲＢＢＰ９（株式会社Abcam製））を加えた。マウス初代培養肺線維芽細胞を６時間培養した後、マウス初代培養肺線維芽細胞のＩＬ−３３の発現を定量ＰＣＲにて評価した（図１１の（Ａ）参照）。
【０１６０】
８週齢のＣ５７ＢＬ／６のナイーブマウスに、リコンビナントタンパク質（ヒトＲＢＢＰ９）を４μｇ／匹で、または、ＰＢＳ（コントロール群）をマウスに経鼻投与した。６時間後、マウスを頸椎脱臼により安楽死させ、肺を取り出し、ＩＬ−３３のｍＲＮＡの発現を定量ＰＣＲで用いて評価した（図１１の（Ｂ）参照）。
【０１６１】
図１１の（Ａ）に示すように、ヒトＲＢＢＰ９は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて、マウス初代培養肺線維芽細胞を刺激してＩＬ−３３の発現を誘導することが明らかになった。また、図１１の（Ｂ）に示すように、ヒトＲＢＢＰ９は、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、経鼻投与によって肺におけるＩＬ−３３の発現を誘導することが明らかになった。
【０１６２】
＜１２．ＩＬ−３３の発現誘導活性に関する試験（抗体）＞
上記＜６＞にて説明した、ゲル濾過によって得られた１０〜３０ｋＤａのタンパク質を含む画分と、抗マウスＢＬＶＲＢ抗体または抗マウスＲＢＢＰ９抗体を含むＰＢＳ−１％ＢＳＡとを混合した。当該混合物に、更に、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａ結合  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ｂｅａｄｓを加えた。
【０１６３】
上記混合物を１００００ｒｐｍにて遠心分離し、上清を回収し、当該上清をマウス初代培養肺線維芽細胞の培養上清に加えた。当該マウス初代培養肺線維芽細胞を６時間培養した後、マウス初代培養肺線維芽細胞のＩＬ−３３の発現を定量ＰＣＲにて評価した。
【０１６４】
図１２に示すように、抗ＲＢＢＰ９抗体は、ＩＬ−３３の発現誘導を抑制することが明らかになった。
【０１６５】
＜１３．肺組織におけるＲＢＢＰ９の発現＞
８週齢のＣ５７ＢＬ／６のナイーブマウスを頸椎脱臼により安楽死させ、肺を取り出し、凍結切片にした。凍結切片を、抗マウスＲＢＢＰ９ウサギポリクローナル抗体、抗ウサギＩｇＧビオチン結合ヤギ抗体、アビジン−ＦＩＴＣ、抗マウスＰｏｄｏｐｌａｎｉｎ  Ｃｙ５結合シリアンハムスター抗体、および、ＤＡＰＩを用いて染色した。
【０１６６】
図１３に示すように、ＲＢＢＰ９は、定常状態の肺組織で発現されていることが明らかになった。
【０１６７】
＜１４．腎組織におけるＲＢＢＰ９の発現＞
正常マウス肺、および、正常マウス腎臓の抽出液を、１１０，０００ｇにて１時間超遠心し、上清を回収した。飽和度５０％の硫酸アンモニウムを用いて、回収した上清中のタンパク質を沈殿させた。沈殿したタンパク質をＰＢＳに再懸濁し、ポアサイズ１５〜５０Å（ＭＷＣＯ：１４０００）のセルロースチューブを用いて４℃で１８時間透析し、懸濁液の溶液をＰＢＳに置換した。透析後の懸濁液を、φ０．４５μｍのフィルターを通した後、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−１００ゲル濾過クロマトグラフィーに供した。
【０１６８】
肺に由来する１０〜３０ｋＤａのタンパク質を含む複数の画分（＃７０〜８０）を混ぜ合わせて、１つの画分とした。また、腎臓に由来する１０〜３０ｋＤａのタンパク質を含む複数の画分（＃７０〜８０）を混ぜ合わせて、１つの画分とした。これらの画分を、限外ろ過した後、マウス初代培養肺線維芽細胞の培養上清に加えた。マウス初代培養肺線維芽細胞を６時間培養した後、マウス初代培養肺線維芽細胞のＩＬ−３３の発現を定量ＰＣＲにて評価した（図１４の（Ｂ）参照）。また、抗マウスＲＢＢＰ９ウサギポリクローナル抗体を用いて、これらの画分中のＲＢＢＰ９をウェスタンブロットにより検出した（図１４の（Ａ）参照）。
【０１６９】
図１４に示すように、ＲＢＢＰ９は、腎組織でも発現されていることが明らかになった。
【０１７０】
Ｃ５７ＢＬ／６野生型マウスの様々な組織中のＲＢＢＰ９をウェスタンブロットにより検出した。図１４の（Ｃ）に示すように、Ｃ５７ＢＬ／６野生型マウスでは、様々な組織にてＲＢＢＰ９が発現していた。
【０１７１】
＜１５．アジュバント効果＞
一群３匹のＣ５７ＢＬ／６マウスの腹腔内に水酸化アルミニウム１０ｍｇを投与した後、経時的に細胞が多数付着した水酸化アルミニウムを回収した。水酸化アルミニウムと共に回収した細胞からｍＲＮＡを得、ＲＢＢＰ９のｍＲＮＡ発現とＩＬ−３３のｍＲＮＡ発現とを定量ＰＣＲ法にて評価した。
【０１７２】
図１５に示すように、ＩＬ−３３とＲＢＢＰ９とは、腹腔内に投与した水酸化アルミニウムの近傍に集積した細胞内で誘導されることが明らかになった。
【０１７３】
同様の試験を再度繰り返し、試験結果の信頼性を確認した。つまり、
一群３匹のＣ５７ＢＬ／６マウスの腹腔内に水酸化アルミニウム１０ｍｇを投与した後、経時的に細胞が多数付着した水酸化アルミニュウムを回収した。水酸化アルミニウムと共に回収した細胞からｍＲＮＡを得、ＲＢＢＰ９のｍＲＮＡ発現とＩＬ−３３のｍＲＮＡ発現とを定量ＰＣＲ法にて評価した。
【０１７４】
図１６に示すように、ＩＬ−３３とＲＢＢＰ９とは、腹腔内に投与した水酸化アルミニウムの近傍に集積した細胞内で誘導されることが明らかになった。
【０１７５】
＜１６．ＩＬ−３３の発現制御機構に関する解析−１＞
マウス初代培養肺線維芽細胞を、５０μｇ／ｍＬの肺抽出物、または、１０μｇ／ｍＬのヒトＲＢＢＰ９を用いて刺激した。刺激してから６時間後に、周知のq-PCR法にしたがって、COX-2（Ptgs2）、および、PGE2 synthase 1（Ptges1）のｍＲＮＡの発現量を調べた。図１７の（ａ）に示すように、ネガティブコントロール（図中None）と比較して、肺抽出物（図中IL-33IF）およびヒトＲＢＢＰ９は、COX-2、および、PGE2の発現を誘導した。
【０１７６】
マウス線維芽細胞を、５０μｇ／ｍＬの肺抽出物を用いて刺激した。刺激してから６時間後に、周知のELISA法にしたがって、マウス線維芽細胞から放出されるPGE2の量を調べた。図１７の（ｂ）に示すように、ネガティブコントロールと比較して、肺抽出物は、PGE2の発現を誘導した。
【０１７７】
マウス線維芽細胞を、５μＭのPGE2を用いて刺激した。刺激してから６時間後に、周知のq-PCR法にしたがって、IL-33のｍＲＮＡの発現量を調べた。図１７の（ｃ）に示すように、ネガティブコントロールと比較して、PGE2は、IL-33の発現を誘導した。
【０１７８】
マウス線維芽細胞を、所定の濃度のインドメタシンによって処理し、当該処理から１時間後に、マウス線維芽細胞を、５０μｇ／ｍＬの肺抽出物を用いて刺激した。刺激してから７時間後に、周知のELISA法にしたがって、培養液中のPGE2の量を調べ、かつ、周知のq-PCR法にしたがって、マウス線維芽細胞中のIL-33のｍＲＮＡの発現量を調べた。図１７の（ｄ）および（ｅ）に示すように、インドメタシンによって、培養液中のPGE2の量、および、マウス線維芽細胞中のIL-33のｍＲＮＡの発現量が減少することが明らかになった。
【０１７９】
本発明者が確認したところ、マウス線維芽細胞は、PGE2受容体である、EP2およびEP4を発現していた（図示せず）。そこで、これらの受容体のアンタゴニストに関して試験を行った。なお、EP2のアンタゴニスト（図中aEP2）としては、PF04418948を用い、EP4のアンタゴニスト（図中aEP4）としては、ONO-AE3-208を用いた。
【０１８０】
マウス線維芽細胞を、１μＭのアンタゴニストによって処理し、当該処理から１時間後に、マウス線維芽細胞を、５０μｇ／ｍＬの肺抽出物を用いて刺激した。刺激してから７時間後に、周知のq-PCR法にしたがって、マウス線維芽細胞中のIL-33のｍＲＮＡの発現量を調べた。図１７の（f）に示すように、アンタゴニストによって、肺抽出物によるIL-33のｍＲＮＡの発現量の増加が、抑制された。
【０１８１】
マウス線維芽細胞を、１μＭのアンタゴニストによって処理し、当該処理から１時間後に、マウス線維芽細胞を、１０μｇ／ｍＬのヒトＲＢＢＰ９、または、１００ｎｇ／ｍＬのIL-1αを用いて刺激した。刺激してから７時間後に、周知のq-PCR法にしたがって、マウス線維芽細胞中のIL-33のｍＲＮＡの発現量を調べた。図１７の（ｇ）に示すように、アンタゴニストによって、ヒトＲＢＢＰ９およびIL-1αによるIL-33のｍＲＮＡの発現量の増加が、抑制された。
【０１８２】
C57BL/6野生型マウス（n=6）に対して、ヒトＲＢＢＰ９（５μｇ／５０μＬ／マウス）、または、ＰＢＳを、鼻腔内投与した。鼻腔内投与してから６時間後に、各マウスから、肺を採取した。周知のq-PCR法にしたがって、肺中のIL-33、COX-2（Ptgs2）、および、PGE2synthase 1（Ptges1）のｍＲＮＡの発現量を調べた。図１７の（ｈ）に示すように、ヒトＲＢＢＰ９の鼻腔内投与によって、肺中のIL-33、COX-2（Ptgs2）、および、PGE2 synthase 1（Ptges1）のｍＲＮＡの発現量が増加した。
【０１８３】
＜１７．ＩＬ−３３の発現制御機構に関する解析−２＞
マウス初代培養肺線維芽細胞、および、ヒト線維芽細胞の各々を、所定の濃度のインドメタシンによって処理し、当該処理から１時間後に、各細胞を、１０μｇ／ｍＬのヒトＲＢＢＰ９を用いて刺激した。刺激してから７時間後に、周知のq-PCR法にしたがって、各細胞中のIL-33のｍＲＮＡの発現量を調べた。図１８の（ａ）に示すように、インドメタシンによって、マウス初代培養肺線維芽細胞中のIL-33のｍＲＮＡの発現量が減少すること、および、図１８の（ｂ）に示すように、インドメタシンによって、ヒト線維芽細胞中のIL-33のｍＲＮＡの発現量が減少することが明らかになった。
【０１８４】
野生型マウス、および、Myd88-/-マウスに由来するマウス肺線維芽細胞の各々を、５０μｇ／ｍＬの組み換えＲＢＢＰ９を用いて、６時間刺激した。その後、周知のq-PCR法にしたがって、各細胞中のIL-33のｍＲＮＡの発現量、および、IL-6のｍＲＮＡの発現量を調べた。図１８の（ｃ）および（ｄ）に示すように、ＲＢＢＰ９は、Myd88非依存的にIL-33のｍＲＮＡの発現量を制御することが明らかになった。一方、ＲＢＢＰ９は、Myd88依存的にIL-6のｍＲＮＡの発現を制御することが明らかとなった。
【０１８５】
＜１８．ＩＬ−３３の発現制御機構に関する解析−３＞
C57BL/6野生型マウス（n=3）に対して、Th2アジュバントである水酸化アルミニウムを、１０ｍｇ／マウスにて、腹腔内投与した。腹腔内投与してから１日後、３日後、および、７日後の各々にて、腹腔内の水酸化アルミニウム粒子の周辺に集まった細胞群を回収した。その後、周知のq-PCR法にしたがって、細胞群中における、IL-33のｍＲＮＡの発現量、および、ＲＢＢＰ９のｍＲＮＡの発現量を調べた。図１９の（ａ）に示すように、水酸化アルミニウムの腹腔内投与によって、ＲＢＢＰ９、および、IL-33のｍＲＮＡの発現量が増加した。
【０１８６】
C57BL/6野生型マウス（n=5）に対して、Th2アジュバントである水酸化アルミニウムを、１０ｍｇ／マウスにて、腹腔内投与した。腹腔内投与してから６時間後または７日後に、腹腔内の水酸化アルミニウム粒子の周辺に集まった細胞群を回収した。当該細胞群をコラゲナーゼにて処理した後、MACS isolation kitを用いて、細胞群をCD45-細胞群、および、CD45+細胞群に分離した。その後、周知のq-PCR法にしたがって、CD45-細胞群、および、CD45+細胞群中における、IL-33のｍＲＮＡの発現量、および、ＲＢＢＰ９のｍＲＮＡの発現量を調べた。図１９の（ｂ）に示すように、水酸化アルミニウムの腹腔内投与によって、特にCD45-細胞群において、ＲＢＢＰ９、および、IL-33のｍＲＮＡの発現量が増加した。
【０１８７】
C57BL/6野生型マウス（n=3）に対して、Th2アジュバントである水酸化アルミニウムを、１０ｍｇ／マウスにて、腹腔内投与した。その後、当該マウスに対して、５日間にわたって毎日、１日あたり５μＭのインドメタシンを０．２ｍＬ、または、１日あたりＰＢＳを０．２ｍＬ、腹腔内投与した。最後の腹腔内投与の翌日に、腹腔内の水酸化アルミニウム粒子の周辺に集まった細胞群を回収した。その後、周知のq-PCR法にしたがって、細胞群中における、IL-33のｍＲＮＡの発現量を調べた。図１９の（ｃ）に示すように、インドメタシンの腹腔内投与によって、水酸化アルミニウムの投与によるIL-33のｍＲＮＡの発現量の増加が、抑制された。
【０１８８】
C57BL/6野生型マウス（n=5）に対して、組み換えＲＢＢＰ９、または、ＰＢＳを腹腔内投与した。当該マウスの血清を所定のタイミング（pre：腹腔内投与の１日前、d8：腹腔内投与の８日後、d12：腹腔内投与の１２日後）にて回収し、周知のELISA法にしたがって、血清内のIgGの濃度、および、投与から１２日後における腹腔内のIL-33の濃度を調べた。図１９の（ｄ）に示すように、組み換えＲＢＢＰ９の腹腔内投与によって、血清内のIgGの濃度が増加した。また、図１９の（ｅ）に示すように、組み換えＲＢＢＰ９の腹腔内投与によって、腹腔内のIL-33の濃度が増加した。
【０１８９】
C57BL/6野生型マウス（n=4-5）に対して、OVA（ovalbumin）のみ、または、OVAと組み換えＲＢＢＰ９との混合物、を腹腔内投与した。腹腔内投与してから７日後に、各マウスに対して、OVAのみを、再度、腹腔内投与した。再度の腹腔内投与から７日後に、各マウスの血清を回収し、周知のELISA法にしたがって、OVA特異的なIgG1の濃度を調べた。図１９の（ｆ）に示すように、組み換えＲＢＢＰ９の腹腔内投与によって、OVA特異的なIgG1の濃度が増加した。
【０１９０】
＜１９．ＩＬ−３３の発現制御機構に関する解析−４＞
マウスに、S. venezuelensisを感染させた。感染させてから、１日後、７日後および１０日後の各々において、周知のq-PCR法にしたがって、当該マウスの肺組織におけるIL-33のｍＲＮＡの発現量、および、ＲＢＢＰ９のｍＲＮＡの発現量を調べた。図２０の（ａ）に示すように、S. venezuelensisの感染は、ＲＢＢＰ９のｍＲＮＡの発現量を変化させること無く、IL-33のｍＲＮＡの発現量を増加させた。
【０１９１】
マウスに対して、Th2アジュバントである水酸化アルミニウムを、１０ｍｇ／マウスにて腹腔内投与した。腹腔内投与してから７日後に、腹腔内の水酸化アルミニウム粒子の周辺に集まった細胞群を回収した。当該細胞群を、更に、CD45-細胞群、および、CD45+細胞群に分離した。分離された細胞群を、図２０（ｂ）から、CD45-細胞群（培養皿に付着性を示す）では、まず水酸化アルミニウムの腹腔内投与によってＲＢＢＰ９の発現量が増加し、次いでPGE2の生産が誘導され、最後にIL-33の生産が誘導される、と考えられる。
【０１９２】
ll1r1-/-マウス由来の肺線維芽細胞を、肺抽出物（５０μｇ／ｍＬ）、または、水酸化アルミニウム粒子の周辺に集まった細胞群の抽出物（５０μｇ／ｍＬ）を用いて、６時間刺激した。周知のq-PCR法にしたがって、当該肺線維芽細胞におけるIL-33のｍＲＮＡの発現量を調べた。図２０の（ｃ）に示すように、上記抽出物は、共に、肺線維芽細胞におけるIL-33のｍＲＮＡの発現量を増加させた。
【０１９３】
ll1r1-/-マウス由来の肺線維芽細胞を、インドメタシンを用いて１時間処理した。その後、当該肺線維芽細胞を、水酸化アルミニウム粒子の周辺に集まった細胞群の抽出物（５０μｇ／ｍＬ）を用いて、６時間刺激した。周知のq-PCR法にしたがって、当該肺線維芽細胞におけるIL-33のｍＲＮＡの発現量を調べた。図２０の（ｄ）に示すように、インドメタシンによって、IL-33のｍＲＮＡの発現量の増加が抑制された。
【０１９４】
マウスに対して、Th2アジュバントである水酸化アルミニウムを、１０ｍｇ／マウスにて腹腔内投与した。腹腔内投与してから７日後に、水酸化アルミニウム粒子の周辺に集まった細胞群の抽出物中におけるPGE2の濃度を、周知のELISA法にしたがって調べた。図２０の（ｅ）に示すように、抽出物中にPGE2が存在していることを確認することができた。
【産業上の利用可能性】
【０１９５】
本発明は、アレルギー炎症を診断および／または治療する分野に広く利用することができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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