(57)【要約】      （修正有）【課題】アペリンの機能を模倣するが、半減期が延長されており、自然に存在するアペリンと同等またはそれ以上の生物活性を示す、ペプチドおよびポリペプチドの提供【解決手段】特定の１３または12アミノ酸からなるＡＰＪ受容体のアゴニストである合成ポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩であって、急性代償不全心不全（ＡＤＨＦ）、慢性心不全、肺高血圧、心房細動、Ｂｒｕｇａｄａ症候群、心室性頻拍、アテローム性動脈硬化症、高血圧、再狭窄、虚血性心血管疾患、心筋症、心臓線維症、不整脈、水分貯留、糖尿病（妊娠糖尿病を含める）、肥満、末梢動脈疾患、脳血管発作、一過性脳虚血発作、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、熱傷（日焼けを含める）、および子癇前症の治療または予防などの、その治療に使用できる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式Ｉ’：
【化３９】
2018048157.tif 000063
［式中、
Ｘ１は、ポリペプチドのＮ末端であり、存在しないか、またはｐＥ、Ｒ、ｌｓｎ、Ｑ、Ａ、Ｋ、および５−アミノ−吉草酸から選択され、
Ｘ２は、Ｒ、Ａ、ｒ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、Ｋ、Ｈ、ｈＦ、ｈＫ、Ｆ、Ｅ、またはＯｒｎであり、
Ｘ３は、Ｐ、Ａ、ａ、ｐ、４−ＰｈＰ、Ｋ、Ｄ、ピペコリン酸、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ７位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ４は、Ｒ、Ａ、ｒ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、Ｆ、Ｅ、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ７位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ５は、Ｌ、Ｃｈａ、Ａ、Ｄ−Ｌ、Ｎ−Ｍｅ−Ｌ、Ｋ、Ｄ、４−ＰｈＦ、またはＦであり、
Ｘ６およびＸ１２は、独立して、Ｃ、ｃ、ｈＣ、Ｄ−ｈＣ、Ｋ、Ｄ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＥから選択される天然または天然でないアミノ酸であり、Ｘ６とＸ１２の側鎖は、共有結合によって互いに連結して、モノスルフィド（−Ｓ−）、ジスルフィド（−Ｓ−Ｓ−）、もしくはアミド結合（−ＮＨＣ（Ｏ）−もしくは−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−）、または式−Ｓ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｚ）−ＣＨ２−Ｓ−の連結部のいずれかを形成しており、Ｚは、Ｏ、Ｎ−Ｏ−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−Ｌ１−Ｒ１、またはＮ−ＮＨ−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−Ｌ１−Ｒ１であり、Ｒ１は、脂肪酸誘導体であり、Ｌ１は、１つまたは複数のアミノ酸および／または１つまたは複数の−ＮＨ−Ｃ２〜６−アルキレン−ＮＨ−単位を含んだリンカーであり、
または代わりに、Ｘ６はＫであり、Ｘ１３は存在せず、Ｘ１２はＦまたはｆであり、Ｘ１２のＣ末端は、Ｘ６のアミノ側鎖とアミド結合を形成しており、
Ｘ７は、Ｈ、ｈ、Ａ、Ｎ−Ｍｅ−Ａ、ａ、Ａｉｂ、Ｋ、Ｎａｌ、Ｆ、Ｐ、Ｄａｐ、Ｎ、Ｅ、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ３位のシステインの側鎖またはＸ４位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ８は、Ｋ、ｋ、Ｆ、ｆ、Ａ、ｈＦ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、Ｅ、または４−アミノ−ｌｓｎであり、
Ｘ９は、Ｇ、Ｎ−Ｍｅ−Ｇ、Ａ、Ｄ、Ｌ、Ｒ、またはＡｉｂであり、
Ｘ１０は、Ｐ、Ａ、ｐ、４−ＰｈＰ、またはピペコリン酸であり、
Ｘ１１は、Ｍ、Ｄ−Ｎｌｅ、Ｎｌｅ、Ｎ−Ｍｅ−Ｎｌｅ、Ｍ（Ｏ）、Ａ、Ｆ、Ｙ、Ｌ、Ｋ、３−ＰｙＡ、またはＣｈａであり、
Ｘ１３は、Ｃ末端であり、存在しないか、またはＦ、ｆ、Ｎ−Ｍｅ−Ｆ、Ｎａｌ、Ｄ−Ｎａｌ、３−Ｂｒ−Ｆ、（Ｓ）−β−３−Ｆ、Ｉ、Ａ、ａ、Ｋ、Ｄａｐ、Ｈ、およびＥから選択され、
Ｎｌｅは、Ｌ−ノルロイシンであり、
Ｄ−ｈＣは、Ｄ−ホモシステインであり、
ｈＣは、Ｌ−ホモシステインであり、
ｈＦは、Ｌ−ホモフェニルアラニンであり、
ｈＫは、Ｌ−リシンであり、
Ｎａｌは、Ｌ−ナファタリンであり、
Ｏｒｎは、オルニチンであり、
Ａｉｂは、α−アミノイソ酪酸であり、
Ｄａｂは、（Ｓ）−ジアミノ酪酸であり、
Ｄａｐは、（Ｓ）−２，３−ジアミノプロピオン酸であり、
Ｍ（Ｏ）は、メチオニンスルホンであり、
Ｃｈａは、（Ｓ）−β−シクロヘキシルアラニンであり、
４−アミノ−ｌｓｎは、４−アミノピペリジン−４−カルボン酸であり、
ｌｓｎは、イソニペコチノイルであり、
ｐＥは、Ｌ−ピログルタミン酸であり、
３−ＰｙＡは、３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニンであり、
４−ＰｈＦは、４−フェニル−Ｌ−フェニルアラニンであり、
Ｎ末端およびＣ末端は、場合により、１、２、３または４個のグリシンアミノ酸と一緒になって環を形成しており、
Ｋ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、Ｄａｐ、ｈＫ、または４−アミノ−Ｉｓｎの側鎖中のアミノ基は、場合により、親油性基にアミド結合によって連結している］
を有するポリペプチド、またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩、またはこれらと実質的に同等なポリペプチド。
【請求項２】
次式：
【化４０】
2018048157.tif 000064
を有し、
Ｘ１が、不存在、ｐＥ、Ｒ、Ｑ、またはＩｓｎであり、
Ｘ５が、ＬまたはＣｈａであり、
Ｘ７が、Ｈ、Ａｉｂ、Ｆ、Ｋ（ラウロイル）、またはＫ（パルミトイル）であり、
Ｘ８が、Ｋ、Ｆ、または４−アミノ−ｌｓｎであり、
Ｘ９が、ＧまたはＡｉｂであり、
Ｘ１１が、ＮｌｅまたはＣｈａであり、
Ｘ１３が、存在しないか、またはＦ、ｆ、Ｋ（ラウロイル）、Ｋ（パルミトイル）であり、
Ｘ６およびＸ１２が、独立して、Ｃ、ｃ、ｈＣ、Ｄ−ｈＣ、Ｋ、Ｄ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＥから選択される天然または天然でないアミノ酸であり、Ｘ６とＸ１２の側鎖が、共有結合によって互いに連結して、ジスルフィド結合またはアミド結合を形成しており、Ｎ末端およびＣ末端が、場合により、１、２、３または４個のグリシンアミノ酸と一緒になって環を形成している、
ポリペプチド、またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩、またはこれらと実質的に同等なポリペプチド。
【請求項３】
Ｘ６およびＸ１２が、Ｋ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、Ｅ、およびＤから独立して選択され、Ｘ６とＸ１２の側鎖が、一緒になってアミド結合を形成している、請求項１または２に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項４】
Ｘ６およびＸ１２が、独立してＣであり、Ｘ６とＸ１２の側鎖が、一緒になってジスルフィド結合を形成している、請求項１または２に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項５】
式ＩＩＩ：
【化４１】
2018048157.tif 000065
を有する請求項１、２または４に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項６】
式ＩＶ：
【化４２】
2018048157.tif 000066
を有する、請求項１から５のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項７】
式Ｖ：
【化４３】
2018048157.tif 000067
を有する、請求項１、２、および４から６のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項８】
式ＶＩ：
【化４４】
2018048157.tif 000068
を有する、請求項１に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項９】
式ＶＩＩ：
【化４５】
2018048157.tif 000069
を有する、請求項１に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項１０】
式ＶＩＩＩ：
【化４６】
2018048157.tif 000070
［式中、Ｘ１のＮ末端およびＸ１３のＣ末端が、リンカーＬと一緒になって環を形成しており、
Ｌが（Ｇ）ｒであり、Ｇがグリシンであり、ｒが１、２、３または４である］
を有する、請求項１、２、５、６または７に記載のポリペプチドまたはポリペプチドの塩。
【請求項１１】
Ｘ１がＱであり、Ｘ１３がＦであり、ｒが２である、請求項１０に記載のポリペプチドまたはポリペプチドの塩。
【請求項１２】
Ｘ６がＫであり、Ｘ１３が存在せず、Ｘ１２がＦまたはｆであり、Ｘ１２のＣ末端が、Ｘ６のアミノ側鎖とアミド結合を形成しており、式ＩＸ：
【化４７】
2018048157.tif 000071
を有する、請求項１に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのエステル、アミド、もしくは塩。
【請求項１３】
Ｘ１がｐＥである、請求項１から９および１２のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項１４】
Ｘ１が存在しない、請求項１から９および１２のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項１５】
Ｎ末端がアミドである、請求項１４に記載のポリペプチドまたはポリペプチドの塩。
【請求項１６】
Ｎ末端が、式−ＮＨＲのアミドであり、Ｒが、アセチル、ベンゾイル、フェナシル、スクシニル、オクタノイル、４−フェニルブタノイル、４−Ｃｌ−Ｐｈ−（ＣＨ２）３Ｃ（Ｏ）−、またはＰｈ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−である、請求項１５に記載のポリペプチドまたはポリペプチドの塩。
【請求項１７】
Ｎ末端が、式ＮＨＲ１のアミドであり、Ｒ１が、ＣＨ３Ｃ（Ｏ）−、ＣＨ３−（Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２）ｍ−Ｃ（Ｏ）−、パルミトイル（Ｏ２Ｏｃ）ｐ、ミリストイル（Ｏ２Ｏｃ）ｐ、ラウロイル（Ｏ２Ｏｃ）ｐ、またはＰｈ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−であり、
ｐは、１〜４の整数であり、
ｍは、１〜１２の整数であり、
ラウロイル（Ｏ２Ｏｃ）は、Ｃ１１Ｈ２３Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−であり、
ミリストイル（Ｏ２Ｏｃ）は、Ｃ１３Ｈ２７Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−であり、
パルミトイル（Ｏ２Ｏｃ）は、Ｃ１５Ｈ３１Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−である、請求項１から９および１２のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドの塩。
【請求項１８】
Ｘ１３がＦである、請求項１から９のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項１９】
Ｘ１３が存在しない、請求項１から９のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項２０】
Ｃ末端がアミドである、請求項１９に記載のポリペプチドまたはポリペプチドの塩。
【請求項２１】
Ｃ末端が、式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ２のアミドであり、Ｒ２が、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｍｅ、−ＮＨ−ＮＨＢｎ、または−ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｐｈである、請求項２０に記載のポリペプチドまたはポリペプチドの塩。
【請求項２２】
Ｘ５がＬである、請求項１から２１のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項２３】
Ｘ７がＨである、請求項１から７および１０から２２のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項２４】
Ｘ８がＫである、請求項１から５および８から２３のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項２５】
Ｘ９がＧである、請求項１から５および８から２４のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項２６】
Ｘ１１がＮｌｅである、請求項１から２５のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項２７】
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｋ＊−Ｈ−Ｆ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｄ＊−フェネチルアミン，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｋ＊−Ｈ−Ｆ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｅ＊−フェネチルアミン，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｏｒｎ＊−Ｈ−Ｆ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｄ＊−フェネチルアミン，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｄａｂ＊−Ｈ−Ｆ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｄ＊−フェネチルアミン，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｋ＊−Ｆ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｆ＊，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｋ＊−Ｆ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−ｆ＊，
＊＊Ｑ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｆ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−Ｇ−Ｇ＊＊，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ａｉｂ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ａｉｂ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ｆ−ＯＨ，
Ｈ−Ｉｓｎ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ａｉｂ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ｆ−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−フェネチルアミン，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ｆ−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｃｈａ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｃｈａ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｆ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
Ｈ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
Ｈ−Ｒ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
Ｈ−Ｉｓｎ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｆ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−フェネチルアミン，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ａｉｂ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−（４−ＮＨ−Ｉｓｎ）−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｋ（パルミトイル）−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｋ（パルミトイル）−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
パルミトイル−Ｏ２Ｏｃ−Ｑ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
ラウロイル−Ｏ２Ｏｃ−Ｑ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｋ（ラウロイル）−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｋ（ラウロイル）−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｃ＊＊−Ｌ−Ｃ＊−Ｃ＊＊−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ、
ｐＥ−Ｒ−Ｃ＊＊−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｃ＊＊−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｆ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｅ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｋ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｄ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｆ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｋ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｅ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｄ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｅ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−（４−ＰｈＦ）−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｄ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｅ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｌ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｒ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−（ピペコリン酸）−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−（３−ＰｙＡ）−Ｃ−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｈ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｅ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ＮＨ２；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＮＨ２；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−ｈＣ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−ｈＣ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−ｈＣ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−（Ｄ−ｈＣ）＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−（Ｄ−ｈＣ）＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−（Ｄ−ｈＣ）＊−Ｆ−ＯＨ；
ミリストイルＯ２ＯｃＯ２ＯｃＱ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ｆ−ＯＨ；
ミリストイルＯ２ＯｃＯ２ＯｃＯ２ＯｃＱ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ｆ−ＯＨ；
ミリストイルＯ２ＯｃＯ２ＯｃＯ２ＯｃＯ２ＯｃＱ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ−ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−ｃ＊−Ｆ−ＯＨ；および
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ（Ｍｙｒ）−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ。
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊＊＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊＊＊−Ｆ−ＯＨ
から選択され、「＊」の付いた２つのアミノ酸は、それぞれその側鎖または末端を介して、ジスルフィド結合またはアミド結合を形成しているアミノ酸を表し、「＊＊」の付いた２つのアミノ酸は、その側鎖を介したジスルフィド結合またはその末端を介したアミド結合を形成しているアミノ酸を表し、「＊＊＊」の付いた２つのアミノ酸は、その側鎖を介してモノスルフィド結合または−Ｓ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｓ−連結部を形成しているアミノ酸を表す、請求項１に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項２８】
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ａｉｂ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ａｉｂ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ｆ−ＯＨ，
Ｈ−Ｉｓｎ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ａｉｂ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ｆ−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−フェネチルアミン，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ｆ−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｃｈａ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｃｈａ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｆ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
Ｈ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
Ｈ−Ｒ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，
Ｈ−Ｉｓｎ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ，および
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｆ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−フェネチルアミン；
から選択され、２つのシステインアミノ酸Ｃ＊の側鎖は、一緒になって、ジスルフィド結合を形成している、請求項２７に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項２９】
その必要のある対象において、ＡＰＪ受容体のアゴニズムに反応を示す疾患または障害を治療または予防する方法であって、治療有効量の請求項１から２８のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩を対象に投与することを含む方法。
【請求項３０】
疾患または障害が、急性代償不全心不全（ＡＤＨＦ）、慢性心不全、肺高血圧、心房細動、Ｂｒｕｇａｄａ症候群、心室性頻拍、アテローム性動脈硬化症、高血圧、再狭窄、虚血性心血管疾患、心筋症、心臓線維症、不整脈、水分貯留、糖尿病（妊娠糖尿病を含める）、肥満、末梢動脈疾患、脳血管発作、一過性脳虚血発作、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、熱傷（日焼けを含める）、および子癇前症から選択される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
医薬として使用するための、請求項１から２８のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩。
【請求項３２】
ＡＰＪ受容体のアゴニズムに反応を示す疾患または障害の治療または予防において使用するための、請求項１から２８のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはそのアミド、塩のエステル。
【請求項３３】
急性代償不全心不全（ＡＤＨＦ）、慢性心不全、肺高血圧、心房細動、Ｂｒｕｇａｄａ症候群、心室性頻拍、アテローム性動脈硬化症、高血圧、再狭窄、虚血性心血管疾患、心筋症、心臓線維症、不整脈、水分貯留、糖尿病（妊娠糖尿病を含める）、肥満、末梢動脈疾患、脳血管発作、一過性脳虚血発作、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、熱傷（日焼けを含める）、または子癇前症の治療において使用するための、請求項１から２８のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはそのアミド、塩のエステル。
【請求項３４】
治療有効量の請求項１から２８のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩と、治療活性のある１種または複数の共薬剤（co-agent）とを含む組合せ。
【請求項３５】
共薬剤が、イノトロープ、βアドレナリン受容体遮断薬、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害薬、アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、エンドセリンアンタゴニスト、レニン阻害薬、利尿薬、ＡｐｏＡ−Ｉ模倣薬、抗糖尿病薬、抗肥満薬、アルドステロン受容体遮断薬、エンドセリン受容体遮断薬、アルドステロンシンターゼ阻害薬（ＡＳＩ）、ＣＥＴＰ阻害薬、抗凝血薬、リラキシン、ＢＮＰ（ネシリチド）、およびＮＥＰ阻害薬から選択される、請求項３４に記載の組合せ。
【請求項３６】
治療有効量の請求項１から２８のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩と、１種または複数の薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、投与を受ける対象において心血管疾患が治療されるように設計され、その野生型の対応物より高い耐分解性、およびそれと同等以上の生物活性を示す、修飾ペプチドおよびポリペプチド配列を含む新規組成物に関する。本発明はまた、前記組成物の製造方法、および前記組成物を心血管疾患治療のために薬学的活性剤として使用する方法に関する。
配列表
本願はEFS-Webを通じてASCIIフォーマットで提出された配列表を含み、同配列表は参照によりそのすべてが本明細書に取り込まれるものとする。前記ASCIIのコピーは2013年6月28日にPAT054961-WO-PCT_SL.txtという名称で作成され、そのサイズは85,581バイトである。
【背景技術】
【０００２】
西欧諸国における心不全の発生率は、６５才を過ぎた成人のおよそ１００人に１人である。最も一般的な病態は、心収縮性、したがって、心拍出量、すなわち、どちらかの心室によって排出される有効血液量が徐々に慢性的に不足することである。慢性心不全の患者は、代償不全、すなわち、心臓が十分な血液循環を維持できないという急性エピソードを伴う場合があり、その場合、心収縮性はさらに低下する。米国だけで、「急性代償不全心不全」（ＡＤＨＦ）での入院は、毎年約５０万件である。
【０００３】
ＡＤＨＦの現行の療法としては、利尿薬、血管拡張薬、およびイノトロープが挙げられ、これらは、心収縮性を直接増大させる。現用の静脈内イノトロープ（ドブタミン、ドーパミン、ミルリノン、レボシメンダン）は、不整脈などの有害事象および長期死亡率の増大と関連付けられているにもかかわらず、急性の状況で使用される。こうした傾向があることは、これらを慢性心不全に適用する妨げとなっている。ジゴキシンは、経口イノトロープ（oral inotrope）であるが、狭い治療指数、潜在的な催不整脈性の増大、および腎不全における禁忌による制約がある。
【０００４】
催不整脈性または死亡の傾向なしに心収縮性を増大させる心不全の療法は、ＡＤＨＦ用に差し迫って求められてはいるが、慢性心不全における未対応の膨大な医学的要求にも対処できるはずである。
【０００５】
アペリンは、アペリン受容体、アンジオテンシン様１受容体、アンジオテンシンＩＩ様１受容体などとも呼ばれる、以前はオーファンであったＧタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）ＡＰＪの、内因性リガンドである。アペリン／ＡＰＪ経路は、心血管系において広く発現され、アペリンは、前臨床モデルにおいて、有益な主要な心血管効果を示している。ヒトにおける急性アペリン投与は、末梢および冠動脈の血管拡張を引き起こし、心拍出量を増加させる（Circulation. 2010; 121:1818-1827）。結果として、ＡＰＪアゴニズムは、心不全患者にとっての重要な治療ターゲットとして浮上している。アペリン受容体ＡＰＪの活性化は、現行の療法の傾向を伴わずに、心収縮性を増大させ、心臓保護になると考えられている。しかし、自然のアペリンは、ｉｎ  ｖｉｖｏでの半減期および作用持続期間が非常に短い。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
したがって、アペリンの機能を模倣するが、半減期が延長されており、自然に存在するアペリンと同等またはそれ以上の生物活性を示す、ペプチドおよびポリペプチドを特定することが望ましい。さらに、立体配座の拘束、すなわち、ペプチドおよびポリペプチドが、追加のフォールディングまたは再配置（repositioning）の必要なしに、その受容体および／または他の経路ターゲットと相互作用し得るような活性立体配座状態を実現および維持する能力の増大を示す、アペリン類似体ペプチドおよびポリペプチドを特定することが望ましい。そのようなペプチドおよびポリペプチド類似体、前記類似体を含む組成物の使用、ならびに心血管疾患などの疾患を治療するために前記組成物を薬学的活性剤として製造し、使用する方法が求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の目的は、ＡＰＪアゴニストとして有用であり、また、野生型アペリンおよび他の既知のアペリン類似体に優る次の改良点、すなわち、半減期の延長、投与後および／または可溶化後の分解に対するより強い免疫性、ならびに立体配座拘束の増強のうちの少なくとも１つを、すべて、野生型アペリンと同等またはそれ以上の生物学的活性を示しながら保持する、新規のペプチドおよびポリペプチドを提供することである。したがって、本発明のペプチドおよびポリペプチドは、心不全などの心血管疾患、心不全と関連する障害および状態、ならびにＡＰＪ受容体活性の活性化に反応を示す障害および状態の治療または予防に特に有用である。
【０００８】
一実施形態では、本発明のペプチドおよびポリペプチドは、心不全と関連する障害もしくは状態、またはＡＰＪ受容体活性の活性化（もしくはアゴニズム）に反応を示す障害の治療または予防に特に有用である。別の実施形態では、本発明のペプチドおよびポリペプチドは、急性代償不全心不全（ＡＤＨＦ）、慢性心不全、肺高血圧、心房細動、Ｂｒｕｇａｄａ症候群、心室性頻拍、アテローム性動脈硬化症、高血圧、再狭窄、虚血性心血管疾患、心筋症、心臓線維症、不整脈、水分貯留、糖尿病（妊娠糖尿病を含める）、肥満、末梢動脈疾患、脳血管発作、一過性脳虚血発作、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、熱傷（日焼けを含める）、および子癇前症の治療において特に有用である。
【０００９】
本発明は、本明細書に記載するとおりの、ペプチドおよびポリペプチド、医薬組成物、ならびにその製造および使用の方法に関する。本発明のペプチドおよびポリペプチドの例としては、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つに従うペプチドおよびポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩、ならびに、限定はしないが実験実施例を始めとする、本明細書において詳細に列挙するいずれかのペプチドまたはポリペプチドが挙げられる。
【００１０】
したがって、本発明は、ペプチドまたはポリペプチド式（Ｉ’）：
【００１１】
【化１】
2018048157.tif 000002
［式中、
Ｘ１は、ポリペプチドのＮ末端であり、存在しないか、またはｐＥ、Ｒ、ｌｓｎ、Ｑ、Ａ、Ｋ、および５−アミノ−吉草酸から選択され、
Ｘ２は、Ｒ、Ａ、ｒ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、Ｋ、Ｈ、ｈＦ、ｈＫ、Ｆ、Ｅ、またはＯｒｎであり、
Ｘ３は、Ｐ、Ａ、ａ、ｐ、４−ＰｈＰ、Ｋ、Ｄ、ピペコリン酸、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ７位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ４は、Ｒ、Ａ、ｒ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、Ｆ、Ｅ、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ７位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ５は、Ｌ、Ｃｈａ、Ａ、Ｄ−Ｌ、Ｎ−Ｍｅ−Ｌ、Ｋ、Ｄ、４−ＰｈＦ、またはＦであり、
Ｘ６およびＸ１２は、独立して、Ｃ、ｃ、ｈＣ、Ｄ−ｈＣ、Ｋ、Ｄ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＥから選択される天然または天然でないアミノ酸であり、Ｘ６とＸ１２の側鎖は、共有結合によって互いに連結して、モノスルフィド（−Ｓ−）、ジスルフィド（−Ｓ−Ｓ−）、もしくはアミド結合（−ＮＨＣ（Ｏ）−もしくは−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−）、または式−Ｓ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｚ）−ＣＨ２−Ｓ−の連結部のいずれかを形成しており、Ｚは、Ｏ、Ｎ−Ｏ−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−Ｌ１−Ｒ１、またはＮ−ＮＨ−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−Ｌ１−Ｒ１であり、Ｒ１は、脂肪酸誘導体であり、Ｌ１は、１つまたは複数のアミノ酸および／または１つまたは複数の−ＮＨ−Ｃ２〜６−アルキレン−ＮＨ−単位を含んだリンカーであり、
または代わりに、Ｘ６はＫであり、Ｘ１３は存在せず、Ｘ１２はＦまたはｆであり、Ｘ１２のＣ末端は、Ｘ６のアミノ側鎖とアミド結合を形成しており、
Ｘ７は、Ｈ、ｈ、Ａ、Ｎ−Ｍｅ−Ａ、ａ、Ａｉｂ、Ｋ、Ｎａｌ、Ｆ、Ｐ、Ｄａｐ、Ｎ、Ｅ、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ３位のシステインの側鎖またはＸ４位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ８は、Ｋ、ｋ、Ｆ、ｆ、Ａ、ｈＦ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、Ｅ、または４−アミノ−ｌｓｎであり、
Ｘ９は、Ｇ、Ｎ−Ｍｅ−Ｇ、Ａ、Ｄ、Ｌ、Ｒ、またはＡｉｂであり、
Ｘ１０は、Ｐ、Ａ、ｐ、４−ＰｈＰ、またはピペコリン酸であり、
Ｘ１１は、Ｍ、Ｄ−Ｎｌｅ、Ｎｌｅ、Ｎ−Ｍｅ−Ｎｌｅ、Ｍ（Ｏ）、Ａ、Ｆ、Ｙ、Ｌ、Ｋ、３−ＰｙＡ、またはＣｈａであり、
Ｘ１３は、Ｃ末端であり、存在しないか、またはＦ、ｆ、Ｎ−Ｍｅ−Ｆ、Ｎａｌ、Ｄ−Ｎａｌ、３−Ｂｒ−Ｆ、（Ｓ）−β−３−Ｆ、Ｉ、Ａ、ａ、Ｋ、Ｄａｐ、Ｈ、およびＥから選択され、
Ｎｌｅは、Ｌ−ノルロイシンであり、
Ｄ−ｈＣは、Ｄ−ホモシステインであり、
ｈＣは、Ｌ−ホモシステインであり、
ｈＦは、Ｌ−ホモフェニルアラニンであり、
ｈＫは、Ｌ−リシンであり、
Ｎａｌは、Ｌ−ナファタリン（L-naphathaline）であり、
Ｏｒｎは、オルニチンであり、
Ａｉｂは、α−アミノイソ酪酸であり、
Ｄａｂは、（Ｓ）−ジアミノ酪酸であり、
Ｄａｐは、（Ｓ）−２，３−ジアミノプロピオン酸であり、
Ｍ（Ｏ）は、メチオニンスルホンであり、
Ｃｈａは、（Ｓ）−β−シクロヘキシルアラニンであり、
４−アミノ−ｌｓｎは、４−アミノピペリジン−４−カルボン酸であり、
ｌｓｎは、イソニペコチノイルであり、
ｐＥは、Ｌ−ピログルタミン酸であり、
３−ＰｙＡは、３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニンであり、
４−ＰｈＦは、４−フェニル−Ｌ−フェニルアラニンであり、
Ｎ末端およびＣ末端は、場合により、１、２、３または４個のグリシンアミノ酸と一緒になって環を形成しており、
Ｋ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、Ｄａｐ、ｈＫ、または４−アミノ−Ｉｓｎの側鎖中のアミノ基は、場合により、親油性基にアミド結合によって連結している］
またはこのポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩、またはこれらと実質的に同等なポリペプチドを提供する。
【００１２】
本明細書においてさらに説明するとおり、本発明のペプチドおよびポリペプチドを構成するアミノ酸残基を表すのには、当業界で受け入れられている３文字または１文字略語を使用する。「Ｄ」が前に付く場合を除き、アミノ酸は、Ｌ−アミノ酸である。１文字略語が大文字であるとき、略語はＬ−アミノ酸を指す。１文字略語が小文字であるとき、略語はＤ−アミノ酸を指す。
【００１３】
上で挙げた式Ｉ’のアミノ酸残基のいずれか、または本明細書に記載のその関連式、たとえば、式Ｉ、ＩＩ〜ＩＸは、本発明のペプチドまたはポリペプチドが、機能活性および構造特性（たとえば、半減期の延長、分解からの保護、立体配座拘束）を依然として保持するという前提で、保存的に置換されていてもよい。許容される保存的なアミノ酸置換の原理および例は、本明細書でさらに説明する。
【００１４】
本発明のポリペプチドは、ＡＰＪ受容体を活性化することにより、急性代償不全心不全（ＡＤＨＦ）、慢性心不全、肺高血圧、心房細動、Ｂｒｕｇａｄａ症候群、心室性頻拍、アテローム性動脈硬化症、高血圧、再狭窄、虚血性心血管疾患、心筋症、心臓線維症、不整脈、水分貯留、糖尿病（妊娠糖尿病を含める）、肥満、末梢動脈疾患、脳血管発作、一過性脳虚血発作、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、熱傷（日焼けを含める）、および子癇前症の治療において有用である。
【００１５】
好ましい実施形態では、本発明のポリペプチドは、急性代償不全心不全（ＡＤＨＦ）の治療において有用である。
【００１６】
別の実施形態では、本発明は、そのような治療の必要のある対象において、ＡＰＪ受容体の活性化に反応を示す障害または疾患を治療する方法であって、対象におけるＡＰＪ受容体の活性化に反応を示す障害または疾患が治療されるような有効量の式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つに従うポリペプチドまたはそのアミド、塩のエステルを対象に投与することを含む方法に関する。
【００１７】
さらに別の実施形態では、本発明は、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つに従うポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩と、１種または複数の薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物に関する。
【００１８】
さらに別の実施形態では、本発明は、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つに従うポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩と、１種または複数の治療活性薬剤の医薬合剤とを含む組合せに関する。
【００１９】
別の実施形態では、本発明は、その必要のある対象においてＡＰＪ受容体を活性化させる方法であって、治療有効量の式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つに従うポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩を対象に投与することを含む方法に関する。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本出願を説明する目的のために、別段指定しない限り、また相応しい場合は常に、以下の定義が適用され、単数形で使用する用語は、複数形の語も包含し、逆の場合も同様である。
【００２１】
本明細書で使用するとき、「ＡＰＪ受容体の変調に反応を示す障害または疾患」、「ＡＰＪの変調に反応を示す障害および状態」、「ＡＰＪ受容体活性の変調に反応を示す障害および状態」、「ＡＰＪ受容体活性の活性化（またはアゴニズム）に反応を示す障害」および同様の用語は、急性代償不全心不全（ＡＤＨＦ）、慢性心不全、肺高血圧、心房細動、Ｂｒｕｇａｄａ症候群、心室性頻拍、アテローム性動脈硬化症、高血圧、再狭窄、虚血性心血管疾患、心筋症、心臓線維症、不整脈、水分貯留、糖尿病（妊娠糖尿病を含める）、肥満、末梢動脈疾患、脳血管発作、一過性脳虚血発作、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、熱傷（日焼けを含める）、および子癇前症を包含する。
【００２２】
本明細書で使用するとき、「ＡＰＪ受容体活性の活性化」または「ＡＰＪ受容体の活性化」とは、ＡＰＪ受容体活性の増大を指す。ＡＰＪ受容体活性の活性化は、たとえば、本発明のペプチドおよびポリペプチドの投与による、ＡＰＪ受容体の「アゴニズム」とも呼ぶ。
【００２３】
本明細書で使用するとき、用語「ポリペプチド」および「ペプチド」は、互いに連結した２個以上のアミノ酸を指すのに、互換的に使用する。以下で表１に示す、珍しいまたは自然でないアミノ酸の略語を除き、当業界で受け入れられている３文字または１文字略語を使用して、本発明のペプチドおよびポリペプチドを構成するアミノ酸残基を表す。「Ｄ」が前に付く場合を除き、アミノ酸は、Ｌ−アミノ酸である。１文字略語が大文字であるとき、略語は、Ｌ−アミノ酸を指す。１文字略語が小文字であるとき、略語は、Ｄ−アミノ酸を指す。集まりまたは連なりまたはアミノ酸略語を使用して、ペプチドを表す。ペプチドは、Ｎ末端を左側にして示し、配列は、Ｎ末端からＣ末端に向かって記す。
【００２４】
本発明のペプチドは、非天然アミノ酸（すなわち、自然界では発生しない化合物）を含んでおり、当業界で知られているような他のアミノ酸類似体をその代わりとして用いてもよい。
【００２５】
ある特定の非天然アミノ酸は、Deiters et al., J Am Chem Soc 125:11782-11783, 2003、Wang and Schultz, Science 301:964-967, 2003、Wang et al., Science 292:498-500, 2001、Zhang et al., Science 303:371-373, 2004、または米国特許第７，０８３，９７０号に記載の技術によって導入することができる。簡潔に述べると、こうした発現系の一部には、部位特異的突然変異誘発が関与して、本発明のポリペプチドをコードするオープンリーディングフレームに、アンバーＴＡＧなどのナンセンスコドンが導入される。次いで、このような発現ベクターは、導入されたナンセンスコドンに特異的なｔＲＮＡを利用することのできる宿主に導入され、選択された非天然アミノ酸を積み込んでいる。本発明のポリペプチドに諸部分をコンジュゲートさせる目的で有益な特定の非天然アミノ酸として、アセチレン側鎖およびアジド側鎖を有するものが挙げられる。
【００２６】
本発明のペプチド中の天然または天然でないアミノ酸の１つまたは複数は、コンジュゲーション、機能付与、または他の修飾などのために、たとえば、炭水化物基、ホスフェート基、ファルネシル基、イソファルネシル基、脂肪酸基（ＣｑＨｑ＋１Ｃ（Ｏ）２Ｈ［ｑは、３〜２０である］）、リンカーなどの化学的エンティティを付加して修飾してもよい。前記修飾は、部位特異的に行っても、または部位特異的でなく行ってもよい。好ましい実施形態では、ペプチドの修飾により、より安定したペプチド（たとえば、より長いｉｎ  ｖｉｖｏ半減期を示すもの）が得られる。こうした修飾として、追加のＤ−アミノ酸の組み込みなどを挙げることができる。いかなる修飾も、ペプチドの所望の生物学的活性の実質的妨げとなるべきでなく、このような修飾により、ペプチドに対して、望ましい特性、たとえば、生物学的活性の増強を付与することができる。
【００２７】
前記修飾は、本発明のタンパク質の生物学的特性を、野生型タンパク質に比べて強化するだけでなく、場合によっては、たとえば、標識およびタンパク質半減期延長剤用に、また前記変異体を固体支持体の表面に固定する目的で、付着点として役立つ。
【００２８】
ある特定の実施形態では、たとえば、半減期を延長し、または前記ポリペプチドおよび／またはペプチドの生物学的特性を別な形で改善する目的で、このような修飾、たとえば、部位特異的な修飾を使用して、本発明のポリペプチドおよび／またはペプチドに、コンジュゲート、たとえば、ＰＥＧ基を付着させる。前記技術については、本明細書でさらに記載する。
【００２９】
他の実施形態では、このような修飾、たとえば、部位特異的修飾を使用して、本発明のポリペプチドの半減期を延長する他のポリマー、小分子、および組換え型タンパク質配列を付着させる。このような一実施形態として、ポリペプチドおよび／またはペプチドに、脂肪酸または特定のアルブミン結合化合物を付着させるものが挙げられる。他の実施形態では、修飾は、特定のアミノ酸タイプにおいてなされ、ポリペプチド上の１つまたは複数の部位において付着させることができる。
【００３０】
他の実施形態では、このような修飾、たとえば、部位特異的修飾を、野生型および／または変異体の多量体、たとえば、二量体（ホモ二量体またはヘテロ二量体）、三量体、または四量体を生成するための付着手段として使用する。こうした多量体タンパク質分子は、アミノ末端またはカルボキシ末端のいずれかにおいて、Ｆｃ、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）などの他のタンパク質に付着または縮合した、ＰＥＧ、糖、および／またはＰＥＧ−コレステロールコンジュゲートなどの基をさらに有する場合もある。
【００３１】
他の実施形態では、このような部位特異的修飾を使用して、部位特異的に組み込まれたピロリシンもしくはピロリシン類似体または自然に存在しないアミノ酸（ｐａｒａ−アセチル−Ｐｈｅ、ｐａｒａ−アジド−Ｐｈｅ）の位置により、配向の制御および固体支持体表面へのそのようなタンパク質、ポリペプチドおよび／またはペプチドの付着、またはＰＥＧ、糖、および／もしくはＰＥＧ−コレステロールコンジュゲートなどの基を付着させることが可能になる、タンパク質、ポリペプチド、および／またはペプチドを生成する。
【００３２】
他の実施形態では、このような部位特異的修飾を使用して、タンパク質、ポリペプチド、および／またはペプチドを部位特異的に架橋し、それによって、限定はしないが、ヘテロ二量体およびヘテロ三量体を始めとするヘテロオリゴマーを生成する。他の実施形態では、このような部位特異的修飾を使用して、タンパク質、ポリペプチド、および／またはペプチドを部位特異的に架橋し、それによって、タンパク質−タンパク質コンジュゲート、タンパク質−ポリペプチドコンジュゲート、タンパク質−ペプチドコンジュゲート、ポリペプチド−ポリペプチドコンジュゲート、ポリペプチド−ペプチドコンジュゲート、またはペプチド−ペプチドコンジュゲートを生成する。他の実施形態では、部位特異的な修飾として、１種類を越えるタイプの分子が、タンパク質、ポリペプチド、またはペプチドの単一部位において付着するのを可能にする分岐点を挙げることができる。
【００３３】
他の実施形態では、本明細書で列挙する修飾は、部位特異的でなく行われ、本発明のタンパク質−タンパク質コンジュゲート、タンパク質−ポリペプチドコンジュゲート、タンパク質−ペプチドコンジュゲート、ポリペプチド−ポリペプチドコンジュゲート、ポリペプチド−ペプチドコンジュゲート、またはペプチド−ペプチドコンジュゲートを得ることができる。
【００３４】
一部の実施形態では、本発明は、本明細書で開示するペプチドまたはポリペプチドを特異的に結合する抗体などの抗体に結合した、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つの少なくとも１種のペプチドまたはポリペプチドを含む複合体を提供する。
【００３５】
当業者なら、本明細書に記載のポリペプチドのいずれかの配列において、その活性を必然的に低下させることなく、種々のアミノ酸置換、たとえば、保存的アミノ酸置換がなされてもよいことは理解されよう。本明細書で使用するとき、「その置換基として一般に使用されるアミノ酸」は、保存的置換（すなわち、化学的特徴が同等であるアミノ酸での置換）を包含する。保存的置換の目的で、非極性（疎水性）アミノ酸としては、アラニン、ロイシン、イソロイシン、バリン、グリシン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファン、およびメチオニンが挙げられる。極性（親水性）天然アミノ酸としては、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、およびグルタミンが挙げられる。正電荷を有する（塩基性）アミノ酸としては、アルギニン、リシン、およびヒスチジンが挙げられる。負電荷を有する（酸性）アミノ酸としては、アスパラギン酸およびグルタミン酸が挙げられる。アミノ酸置換の例としては、その対応するＤ−アミノ酸の代わりにＬ−アミノ酸を用いるもの、ホモシステインもしくは含チオール側鎖を有する他の非天然アミノ酸の代わりにシステインを用いるもの、ホモリシン、ジアミノ酪酸、ジアミノプロピオン酸、オルニチン、もしくは含アミノ側鎖を有する他の非天然アミノ酸の代わりにリシンを用いるもの、またはノルバリンの代わりにアラニンを用いるものなどが挙げられる。
【００３６】
本明細書で使用する用語「アミノ酸」とは、その構造でそうした立体異性体型が可能である場合、すべて、そのＤおよびＬ立体異性体の、自然に存在するアミノ酸、天然でないアミノ酸、アミノ酸類似体、および、自然に存在するアミノ酸と同様にして機能するアミノ酸模倣物を指す。アミノ酸は、本明細書では、その名称、一般に知られているその３文字記号、またはＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎが推奨する１文字記号のいずれかで呼ぶ。
【００３７】
用語「自然に存在する」とは、自然界で見出され、人の手で操作されていない材料を指す。同様に、「自然に存在しない」や「自然でない」などは、本明細書で使用するとき、自然界で見出されない、または人の手で構造が改変されもしくは合成されている材料を指す。アミノ酸に関連して使用するとき、用語「自然に存在する」とは、２０種の通常のアミノ酸（すなわち、アラニン（ＡまたはＡｌａ）、システイン（ＣまたはＣｙｓ）、アスパラギン酸（ＤまたはＡｓｐ）、グルタミン酸（ＥまたはＧｌｕ）、フェニルアラニン（ＦまたはＰｈｅ）、グリシン（ＧまたはＧｌｙ）、ヒスチジン（ＨまたはＨｉｓ）、イソロイシン（ＩまたはＩｌｅ）、リシン（ＫまたはＬｙｓ）、ロイシン（ＬまたはＬｅｕ）、メチオニン（ＭまたはＭｅｔ）、アスパラギン（ＮまたはＡｓｎ）、プロリン（ＰまたはＰｒｏ）、グルタミン（ＱまたはＧｌｎ）、アルギニン（ＲまたはＡｒｇ）、セリン（ＳまたはＳｅｒ）、トレオニン（ＴまたはＴｈｒ）、バリン（ＶまたはＶａｌ）、トリプトファン（ＷまたはＴｒｐ）、およびチロシン（ＹまたはＴｙｒ）を指す。
【００３８】
本明細書で使用する用語「非天然アミノ酸」および「天然でないアミノ酸」は、同じであろうと異なっていようと、任意の生物中で、任意の生物からの未改変または改変遺伝子を使用して、生合成によって生成することのできないアミノ酸構造を、互換的に表すものである。これら用語は、自然に存在する（野生型）アペリンタンパク質配列または本発明の配列中に存在しないアミノ酸残基を指す。これらの用語は、限定はしないが、２０種の自然に存在するアミノ酸の１つ、セレノシステイン、ピロリシン（Ｐｙｌ）、またはピロリン−カルボキシ−リシン（Ｐｃｌ、たとえば、ＰＣＴ特許公開ＷＯ２０１０／４８５８２に記載のとおり）でない、改変アミノ酸および／またはアミノ酸類似体を包含する。このような非天然アミノ酸残基は、自然に存在するアミノ酸の置換によって、および／または自然に存在する（野生型）アペリンタンパク質配列もしくは本発明の配列への非天然アミノ酸の挿入によって導入することができる。非天然アミノ酸残基は、アペリン分子に所望の機能性、たとえば、機能性部分（たとえば、ＰＥＧ）を連結する能力が付与されるように組み込むこともできる。アミノ酸に関連して使用するとき、記号「Ｕ」は、本明細書で使用される「非天然アミノ酸」および「天然でないアミノ酸」を意味するものとする。
【００３９】
加えて、このような「天然でないアミノ酸」をタンパク質に組み込むのに、改変ｔＲＮＡおよび改変ｔＲＮＡシンセターゼ（ＲＳ）が必要であることも理解される。こうした「選択された」ｔＲＮＡ／ＲＳ直交対は、Ｓｃｈｕｌｔｚらが開発した選定方法によって、またはランダムもしくは標的突然変異によって生み出される。例として、ピロリン−カルボキシ−リシンは、ある生物から宿主細胞に移された遺伝子によって生合成で生成され、また天然のｔＲＮＡおよびｔＲＮＡシンセターゼ遺伝子を使用してタンパク質に組み込まれるので、「天然アミノ酸」であるが、ｐ−アミノフェニルアラニン（Generation of a bacterium with a 21 amino acid genetic code, Mehl RA, Anderson JC, Santoro SW, Wang L, Martin AB, King DS, Horn DM, Schultz PG. J Am Chem Soc. 2003 Jan 29;125(4):935-9を参照されたい）は、生合成で生成されるとはいえ、「選択された」ｔＲＮＡ／ｔＲＮＡシンセターゼ直交対によってタンパク質に組み込まれるので、「天然でないアミノ酸」である。
【００４０】
改変コードアミノ酸としては、限定はしないが、ヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタメート、Ｏ−ホスホセリン、アゼチジンカルボン酸、２−アミノアジピン酸、３−アミノアジピン酸、ｂｅｔａ−アラニン、アミノプロピオン酸、２−アミノ酪酸、４−アミノ酪酸、６−アミノカプロン酸、２−アミノヘプタン酸、２−アミノイソ酪酸、３−アミノイソ酪酸、２−アミノピメリン酸、第三級−ブチルグリシン、２，４−ジアミノイソ酪酸、デスモシン、２，２’−ジアミノピメリン酸、２，３−ジアミノプロプリオン酸、Ｎ−エチルグリシン、Ｎ−メチルグリシン、Ｎ−エチルアスパラギン、ホモプロリン、ヒドロキシリシン、ａｌｌｏ−ヒドロキシリシン、３−ヒドロキシプロリン、４−ヒドロキシプロリン、イソデスモシン、ａｌｌｏ−イソロイシン、Ｎ−メチルアラニン、Ｎ−メチルグリシン、Ｎ−メチルイソロイシン、Ｎ−メチルペンチルグリシン、Ｎ−メチルバリン、ナフトアラニン、ノルバリン、ノルロイシン、オルニチン、ペンチルグリシン、ピペコリン酸およびチオプロリンが挙げられる。用語「アミノ酸」は、ある特定の生物における代謝産物であるが、タンパク質への組み込みについては遺伝暗号によってコードされていない、自然に存在するアミノ酸も包含する。このようなアミノ酸として、限定はしないが、オルニチン、Ｄ−オルニチン、およびＤ−アルギニンが挙げられる。
【００４１】
本明細書で使用する用語「アミノ酸類似体」とは、自然に存在するアミノ酸と同じ基礎化学構造、すなわち、単なる例として、水素、カルボキシル基、アミノ基、およびＲ基に結合したα−炭素を有する化合物を指す。アミノ酸類似体には、可逆的もしくは不可逆的に化学的ブロックがなされ、またはそのＣ末端カルボキシ基、そのＮ末端アミノ基、および／もしくはその側鎖官能基が化学的に修飾されている、天然および天然でないアミノ酸が含まれる。そのような類似体として、限定はしないが、メチオニンスルホキシド、メチオニンスルホン、Ｓ−（カルボキシメチル）−システイン、Ｓ−（カルボキシメチル）−システインスルホキシド、Ｓ−（カルボキシメチル）−システインスルホン、アスパラギン酸−（β−メチルエステル）、Ｎ−エチルグリシン、アラニンカルボキサミド、ホモセリン、ノルロイシン、およびメチオニンメチルスルホニウムが挙げられる。
【００４２】
【表１Ａ】
2018048157.tif 000003
【表１Ｂ】
2018048157.tif 000004
【表１Ｃ】
2018048157.tif 000005
Ｎａｌは、１−ナフトアラニンと２−ナフトアラニンの両方、好ましくは２−ナフトアラニンを指す。
４−フェニルプロリンは、ｃｉｓとｔｒａｎｓ両方の４−フェニルプロリン、好ましくはｔｒａｎｓ−４−フェニルプロリンを指す。
【００４３】
本明細書で使用するとき、用語「アミド」とは、Ｃ末端におけるカルボン酸基のアミド誘導体（たとえば、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ１−２アルキルフェニル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−ＮＨＢｎ、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜６アルキル）２）を指す。
【００４４】
用語「アミド」は、Ｎ末端におけるアミノ基の誘導体（たとえば、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１〜１６アルキル、−ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＰｈ（ｎは、１〜６の整数である）、−ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）２ＣＯ２Ｈ、４−Ｃｌ−Ｐｈ−（ＣＨ２）３Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、Ｃ１１Ｈ２３Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、Ｃ１３Ｈ２７Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、Ｃ１５Ｈ２７Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、Ｐｈ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−ＮＨ−、またはＣＨ３（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＮＨ−（ｍは、１〜１２の整数である）も指す。
【００４５】
本明細書で使用するとき、用語「エステル」とは、Ｃ末端におけるカルボン酸基のエステル誘導体（たとえば、−ＣＯＯＲ）形態を指し、エステルのＲは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチルなどのＣ１〜６アルキル基、シクロペンチルやシクロヘキシルなどのＣ３〜８シクロアルキル基、フェニルやα−ナフチルなどのＣ６〜１０アリール基、Ｃ６〜１０アリール−Ｃ１〜６アルキル基、たとえば、ベンジル、フェネチル、ベンズヒドリルなどのフェニル−Ｃ１〜２アルキル基、およびα−ナフチルメチルなどのα−ナフチル−Ｃ１〜２アルキル基などを指す。経口投与用のエステルとして一般に使用されるピバロイルオキシメチルエステルなども挙げることができる。本発明のポリペプチドが、Ｃ末端以外の位置に追加のカルボキシル基またはカルボキシレート基を有するとき、こうした基がアミド化またはエステル化されているポリペプチドも、本発明のポリペプチドの範疇に入る。そうした場合において、エステルは、たとえば、上述のＣ末端エステルと同じ種類のエステルでよい。
【００４６】
用語「ＡＰＪ」（「アペリン受容体」、「アンジオテンシン様１受容体」、「アンジオテンシンＩＩ様１受容体」などとも呼ばれる）とは、３８０残基、７回膜貫通ドメインのＧｉ共役型受容体を指し、その遺伝子は、ヒトの１１番染色体の長腕上に位置する（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿００５１５２．１、ＮＣＢＩ参照配列：ＮＭ＿００５１６１によってコードされる）。ＡＰＪは、１９９３年に、変性オリゴヌクレオチドプライマーを使用して、ヒトゲノムＤＮＡから初めてクローン化され（O’Dowd et al. Gene, 136:355-60、1993）、１型アンジオテンシンＩＩ受容体と有意に相同的である。しかし、この相同性にもかかわらず、アンジオテンシンＩＩは、ＡＰＪを結合しない。この内因性リガンドは、長年の間オーファンであったが、単離され、アペリンと命名された（Tatemoto et al., Biochem Biophys Res Commun 251, 471-6 (1998)）。
【００４７】
用語「アペリン」は、７７残基のプレタンパク質（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿００５９１０９．３、ＮＣＢＩ参照配列：ＮＭ＿０１７４１３．３によってコードされる）を指し、これがプロセシングを受けて、生物学的活性型のアペリンペプチド、たとえば、アペリン−３６、アペリン−１７、アペリン−１６、アペリン−１３、アペリン−１２になる。「アペリン−３６」と呼ばれる全長成熟ペプチドは、３６アミノ酸を含むが、最も強力なアイソフォームは、「Ｐｙｒ−１−アペリン−１３またはＰｙｒ１−アペリン−１３」と呼ばれる、ピログルタミン酸化型のアペリン１３量体（アペリン−１３）である。種々のアペリン型は、たとえば、米国特許６，４９２，３２４Ｂ１に記載されている。
【００４８】
本発明のポリペプチド：
本発明の種々の実施形態を本明細書に記載する。各実施形態において明記する特色を、明記された他の特色と組み合わせて、別の実施形態としてもよいことは、認識されるであろう。
【００４９】
したがって、実施形態１において、本発明は、ペプチドまたはポリペプチド式（Ｉ’）：
【００５０】
【化２】
2018048157.tif 000006
［式中、
Ｘ１は、ポリペプチドのＮ末端であり、存在しないか、またはｐＥ、Ｒ、ｌｓｎ、Ｑ、Ａ、Ｋ、および５−アミノ−吉草酸から選択され、
Ｘ２は、Ｒ、Ａ、ｒ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、Ｋ、Ｈ、ｈＦ、ｈＫ、Ｆ、Ｅ、またはＯｒｎであり、
Ｘ３は、Ｐ、Ａ、ａ、ｐ、４−ＰｈＰ、Ｋ、Ｄ、ピペコリン酸、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ７位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ４は、Ｒ、Ａ、ｒ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、Ｆ、Ｅ、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ７位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ５は、Ｌ、Ｃｈａ、Ａ、Ｄ−Ｌ、Ｎ−Ｍｅ−Ｌ、Ｋ、Ｄ、４−ＰｈＦ、またはＦであり、
Ｘ６およびＸ１２は、独立して、Ｃ、ｃ、ｈＣ、Ｄ−ｈＣ、Ｋ、Ｄ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＥから選択される天然または天然でないアミノ酸であり、Ｘ６とＸ１２の側鎖は、共有結合によって互いに連結して、ジスルフィド結合またはアミド結合のいずれかを形成しており、
または代わりに、Ｘ６はＫであり、Ｘ１３は存在せず、Ｘ１２はＦまたはｆであり、Ｘ１２のＣ末端は、Ｘ６のアミノ側鎖とアミド結合を形成しており、
Ｘ７は、Ｈ、ｈ、Ａ、Ｎ−Ｍｅ−Ａ、ａ、Ａｉｂ、Ｋ、Ｎａｌ、Ｆ、Ｐ、Ｄａｐ、Ｎ、Ｅ、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ３位のシステインの側鎖またはＸ４位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ８は、Ｋ、ｋ、Ｆ、ｆ、Ａ、ｈＦ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、Ｅ、または４−アミノ−ｌｓｎであり、
Ｘ９は、Ｇ、Ｎ−Ｍｅ−Ｇ、Ａ、Ｄ、Ｌ、Ｒ、またはＡｉｂであり、
Ｘ１０は、Ｐ、Ａ、ｐ、４−ＰｈＰ、またはピペコリン酸であり、
Ｘ１１は、Ｍ、Ｄ−Ｎｌｅ、Ｎｌｅ、Ｎ−Ｍｅ−Ｎｌｅ、Ｍ（Ｏ）、Ａ、Ｆ、Ｙ、Ｌ、Ｋ、３−ＰｙＡ、またはＣｈａであり、
Ｘ１３は、Ｃ末端であり、存在しないか、またはＦ、ｆ、Ｎ−Ｍｅ−Ｆ、Ｎａｌ、Ｄ−Ｎａｌ、３−Ｂｒ−Ｆ、（Ｓ）−β−３−Ｆ、Ｉ、Ａ、ａ、Ｋ、Ｄａｐ、Ｈ、およびＥから選択され、
Ｎｌｅは、Ｌ−ノルロイシンであり、
Ｄ−ｈＣは、Ｄ−ホモシステインであり、
ｈＣは、Ｌ−ホモシステインであり、
ｈＦは、Ｌ−ホモフェニルアラニンであり、
ｈＫは、Ｌ−リシンであり、
Ｎａｌは、Ｌ−ナファタリンであり、
Ｏｒｎは、オルニチンであり、
Ａｉｂは、α−アミノイソ酪酸であり、
Ｄａｂは、（Ｓ）−ジアミノ酪酸であり、
Ｄａｐは、（Ｓ）−２，３−ジアミノプロピオン酸であり、
Ｍ（Ｏ）は、メチオニンスルホンであり、
Ｃｈａは、（Ｓ）−β−シクロヘキシルアラニンであり、
４−アミノ−ｌｓｎは、４−アミノピペリジン−４−カルボン酸であり、
ｌｓｎは、イソニペコチノイルであり、
ｐＥは、Ｌ−ピログルタミン酸であり、
３−ＰｙＡは、３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニンであり、
４−ＰｈＦは、４−フェニル−Ｌ−フェニルアラニンであり、
Ｎ末端およびＣ末端は、場合により、１、２、３または４個のグリシンアミノ酸と一緒になって環を形成しており、
Ｋ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、Ｄａｐ、ｈＫ、または４−アミノ−Ｉｓｎの側鎖中のアミノ基は、場合により、親油性基にアミド結合によって連結している］
またはこのポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩、またはこれらと実質的に同等なポリペプチドを提供する。
【００５１】
したがって、実施形態２において、本発明は、ペプチドまたはポリペプチド式（Ｉ）：
【００５２】
【化３】
2018048157.tif 000007
［式中、
Ｘ１は、ポリペプチドのＮ末端であり、存在しないか、またはｐＥ、Ｒ、Ｑ、Ａ、Ｋ、５−アミノ−吉草酸、およびｌｓｎから選択され、
Ｘ２は、Ｒ、Ａ、ｒ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、Ｋ、Ｈ、ｈＦ、ｈＫ、またはＯｒｎであり、
Ｘ３は、Ｐ、Ａ、ａ、ｐ、４−ＰｈＰ、ピペコリン酸、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ７位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ４は、Ｒ、Ａ、ｒ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ７位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ５は、Ｌ、Ｃｈａ、Ａ、Ｄ−Ｌ、Ｎ−Ｍｅ−Ｌ、またはＦであり、
Ｘ６およびＸ１２は、独立して、Ｃ、ｃ、ｈＣ、Ｄ−ｈＣ、Ｋ、Ｄ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＥから選択される天然または天然でないアミノ酸であり、Ｘ６とＸ１２の側鎖は、共有結合によって互いに連結しており、
または代わりに、Ｘ６はＫであり、Ｘ１３は存在せず、Ｘ１２はＦまたはｆであり、Ｘ１２のＣ末端は、Ｘ６のアミノ側鎖とアミド結合を形成しており、
Ｘ７は、Ｈ、ｈ、Ａ、Ｎ−Ｍｅ−Ａ、ａ、Ａｉｂ、Ｋ、Ｎａｌ、Ｆ、Ｐ、Ｄａｐ、Ｎ、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ３位のシステインの側鎖またはＸ４位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成しており、
Ｘ８は、Ｋ、ｋ、Ｆ、ｆ、Ａ、ｈＦ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、または４−アミノ−ｌｓｎであり、
Ｘ９は、Ｇ、Ｎ−Ｍｅ−Ｇ、Ａ、またはＡｉｂであり、
Ｘ１０は、Ｐ、Ａ、ｐ、４−ＰｈＰ、またはピペコリン酸であり、
Ｘ１１は、Ｍ、Ｄ−Ｎｌｅ、Ｎｌｅ、Ｎ−Ｍｅ−Ｎｌｅ、Ｍ（Ｏ）、Ａ、Ｆ、Ｙ、Ｌ、Ｋ、またはＣｈａであり、
Ｘ１３は、Ｃ末端であり、存在しないかか、またはＦ、ｆ、Ｎ−Ｍｅ−Ｆ、Ｎａｌ、Ｄ−Ｎａｌ、３−Ｂｒ−Ｆ、（Ｓ）−β−３−Ｆ、Ｉ、Ａ、ａ、Ｋ、Ｄａｐから選択され、
Ｎｌｅは、Ｌ−ノルロイシンであり、
Ｄ−ｈＣは、Ｄ−ホモシステインであり、
ｈＣは、Ｌ−ホモシステインであり、
ｈＦは、Ｌ−ホモフェニルアラニンであり、
ｈＫは、Ｌ−リシンであり、
Ｎａｌは、Ｌ−ナファタリンであり、
Ｏｒｎは、オルニチンであり、
Ａｉｂは、α−アミノイソ酪酸であり、
Ｄａｂは、（Ｓ）−ジアミノ酪酸であり、
Ｄａｐは、（Ｓ）−２，３−ジアミノプロピオン酸であり、
Ｍ（Ｏ）は、メチオニンスルホンであり、
Ｃｈａは、（Ｓ）−β−シクロヘキシルアラニンであり、
４−アミノ−ｌｓｎは、４−アミノピペリジン−４−カルボン酸であり、
ｌｓｎは、イソニペコチノイルであり、
ｐＥは、Ｌ−ピログルタミン酸であり、
Ｎ末端およびＣ末端は、場合により、１、２、３または４個のグリシンアミノ酸と一緒になって環を形成しており、
Ｋ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、Ｄａｐ、ｈＫ、または４−アミノ−Ｉｓｎの側鎖中のアミノ基は、場合により、親油性基にアミド結合によって連結している］
またはこのポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩、またはこれらと実質的に同等なポリペプチドを提供する。
【００５３】
実施形態１または２の一態様において、本発明は、Ｋ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、Ｄａｐ、ｈＫ、または４−アミノ−ｌｓｎの側鎖中のアミノ基が、場合により、アミド結合によって脂肪酸に連結している、式ＩまたはＩ’のペプチドまたはポリペプチドに関する。この実施形態の別の態様では、脂肪酸は、ラウロイル、ミリストイル、またはパルミトイルから選択され、ラウロイルは、Ｃ１１Ｈ２３Ｃ（Ｏ）−であり、ミリストイルは、Ｃ１３Ｈ２７Ｃ（Ｏ）−であり、パルミトイルは、Ｃ１５Ｈ３１Ｃ（Ｏ）−である。代わりに、脂肪酸（ラウロイル、ミリストイル、パルミトイルなど）の末端ＣＨ３部分が、その対応するカルボン酸に酸化されていてもよい。
【００５４】
実施形態１または２の一態様において、本発明は、Ｋ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、Ｄａｐ、ｈＫ、または４−アミノ−ｌｓｎの側鎖中のアミノ基が、場合により、アミド結合によって親油性基に連結しており、親油性基は、上述のとおりの脂肪酸、ならびにラウロイル（Ｏ２Ｏｃ）、ミリストイル（Ｏ２Ｏｃ）、およびパルミトイル（Ｏ２Ｏｃ）から選択され、ラウロイル（Ｏ２Ｏｃ）は、Ｃ１１Ｈ２３Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−であり、ミリストイル（Ｏ２Ｏｃ）は、Ｃ１３Ｈ２７Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−であり、パルミトイル（Ｏ２Ｏｃ）は、Ｃ１５Ｈ３１Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−である、式ＩまたはＩ’のペプチドまたはポリペプチドに関する。代わりに、脂肪酸（ラウロイル、ミリストイル、パルミトイルなど）の末端ＣＨ３部分が、その対応するカルボン酸に酸化されていてもよい。
【００５５】
実施形態３において、本発明は、式ＩまたはＩ’のペプチドまたはポリペプチド
【００５６】
【化４】
2018048157.tif 000008
［式中、
Ｘ１は、ポリペプチドのＮ末端であり、存在しないか、またはｐＥ、Ｒ、Ｑ、Ａ、Ｋ（パルミトイル）、Ｋ（ミリストイル）、Ｋ（ラウロイル）、５−アミノ−吉草酸、およびｌｓｎから選択され、
Ｘ２は、Ｒ、Ａ、ｒ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、Ｋ、Ｈ、ｈＦ、ｈＫ、またはＯｒｎであり、
Ｘ３は、Ｐ、Ａ、ａ、ｐ、４−ＰｈＰ、ピペコリン酸、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ７位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ４は、Ｒ、Ａ、ｒ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ７位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ５は、Ｌ、Ｃｈａ、Ａ、Ｄ−Ｌ、Ｎ−Ｍｅ−Ｌ、またはＦであり、
Ｘ６およびＸ１２は、独立して、Ｃ、ｃ、ｈＣ、Ｄ−ｈＣ、Ｋ、Ｄ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＥから選択される天然または天然でないアミノ酸であり、Ｘ６とＸ１２の側鎖は、共有結合によって互いに連結しており、
または代わりに、Ｘ６はＫであり、Ｘ１３は存在せず、Ｘ１２はＦまたはｆであり、Ｘ１２のＣ末端は、Ｘ６のアミノ側鎖とアミド結合を形成しており、
Ｘ７は、Ｈ、ｈ、Ａ、Ｎ−Ｍｅ−Ａ、ａ、Ａｉｂ、Ｋ（ラウロイル）、Ｋ（パルミトイル）、Ｎａｌ、Ｆ、Ｐ、Ｄａｐ、Ｎ、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ３位のシステインの側鎖またはＸ４位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ８は、Ｋ、ｋ、Ｆ、ｆ、Ａ、ｈＦ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、または４−アミノ−ｌｓｎであり、
Ｘ９は、Ｇ、Ｎ−Ｍｅ−Ｇ、Ａ、またはＡｉｂであり、
Ｘ１０は、Ｐ、Ａ、ｐ、４−ＰｈＰ、またはピペコリン酸であり、
Ｘ１１は、Ｍ、Ｄ−Ｎｌｅ、Ｎｌｅ、Ｎ−Ｍｅ−Ｎｌｅ、Ｍ（Ｏ）、Ａ、Ｆ、Ｙ、Ｌ、Ｋ（パルミトイル）、またはＣｈａであり、
Ｘ１３は、Ｃ末端であり、存在しないか、またはＦ、ｆ、Ｎ−Ｍｅ−Ｆ、Ｎａｌ、Ｄ−Ｎａｌ、３−Ｂｒ−Ｆ、（Ｓ）−β−３−Ｆ、Ｉ、Ａ、ａ、Ｋ（ラウロイル）、Ｋ（ミリストイル）、Ｋ（パルミトイル）、Ｋ（Ｏ２Ｏｃ−パルミトイル）、Ｄａｐ（パルミトイル）から選択され、
Ｋ（ラウロイル）は、Ｎ−ε−ラウロイル−Ｌ−リシンであり、
Ｋ（パルミトイル）は、Ｎ−ε−パルミトイル−Ｌ−リシンであり、
Ｋ（ミリストイル）は、Ｎ−ε−ミリストイル−Ｌ−リシンであり、
Ｋ（Ｏ２Ｏｃ−パルミトイル）は、Ｎ−ε−（Ｏ２Ｏｃ−パルミトイル）−Ｌ−リシンであり、パルミトイル（Ｏ２Ｏｃ）は、Ｃ１５Ｈ３１Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−であり、
Ｎｌｅは、Ｌ−ノルロイシンであり、
Ｄ−ｈＣは、Ｄ−ホモシステインであり、
ｈＣは、Ｌ−ホモシステインであり、
ｈＦは、Ｌ−ホモフェニルアラニンであり、
ｈＫは、Ｌ−リシンであり、
Ｎａｌは、Ｌ−ナファタリンであり、
Ｏｒｎは、オルニチンであり、
Ａｉｂは、α−アミノイソ酪酸であり、
Ｄａｂは、（Ｓ）−ジアミノ酪酸であり、
Ｄａｐは、（Ｓ）−２，３−ジアミノプロピオン酸であり、
Ｍ（Ｏ）は、メチオニンスルホンであり、
Ｃｈａは、（Ｓ）−β−シクロヘキシルアラニンであり、
４−アミノ−ｌｓｎは、４−アミノピペリジン−４−カルボン酸であり、
ｌｓｎは、イソニペコチノイルであり、
ｐＥは、Ｌ−ピログルタミン酸であり、
Ｎ末端およびＣ末端は、場合により、１、２、３または４個のグリシンアミノ酸と一緒になって環を形成している］
またはこのポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩に関する。
【００５７】
実施形態４において、本発明は、式ＩＩ（配列番号１）：
【００５８】
【化５】
2018048157.tif 000009
［Ｘ１は、不存在、ｐＥ、Ｒ、Ｑ、またはＩｓｎであり、
Ｘ５は、ＬまたはＣｈａであり、
Ｘ７は、Ｈ、Ａｉｂ、Ｆ、Ｋ（ラウロイル）、またはＫ（パルミトイル）であり、
Ｘ８は、Ｋ、Ｆ、または４−アミノ−ｌｓｎであり、
Ｘ９は、ＧまたはＡｉｂであり、
Ｘ１１は、ＮｌｅまたはＣｈａであり、
Ｘ１３は、存在しないか、またはＦ、ｆ、Ｋ（ラウロイル）、Ｋ（パルミトイル）であり、
Ｘ６およびＸ１２は、独立して、Ｃ、ｃ、ｈＣ、Ｄ−ｈＣ、Ｋ、Ｄ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＥから選択される天然または天然でないアミノ酸であり、Ｘ６とＸ１２の側鎖は、共有結合によって互いに連結しており、または代わりに、Ｘ６はＫであり、Ｘ１３は存在せず、Ｘ１２はＦまたはｆであり、Ｘ１２のＣ末端は、Ｘ６のアミノ側鎖とアミド結合を形成しており、
Ｎ末端およびＣ末端は、場合により、１、２、３または４個のグリシンアミノ酸と一緒になって環を形成している］
を有する、実施形態１、２または３に従うペプチドもしくはポリペプチド、またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩、またはこれらと実質的に同等なポリペプチドに関する。
【００５９】
実施形態５において、本発明は、
Ｘ１が、不存在、ｐＥ、Ｒ、Ｑ、またはＩｓｎであり、
Ｘ５が、ＬまたはＣｈａであり、
Ｘ７が、Ｈ、Ａｉｂ、Ｆ、Ｋ（ラウロイル）、またはＫ（パルミトイル）であり、
Ｘ８が、Ｋ、Ｆ、または４−アミノ−ｌｓｎであり、
Ｘ９が、ＧまたはＡｉｂであり、
Ｘ１１が、ＮｌｅまたはＣｈａであり、
Ｘ１３が、存在しないか、またはＦ、ｆ、Ｋ（ラウロイル）、Ｋ（パルミトイル）であり、
Ｘ６およびＸ１２が、独立して、Ｃ、Ｋ、Ｄ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＥから選択される天然または天然でないアミノ酸であり、Ｘ６とＸ１２の側鎖が、共有結合によって互いに連結しており、または代わりに、Ｘ６がＫであり、Ｘ１３が存在せず、Ｘ１２がＦまたはｆであり、Ｘ１２のＣ末端は、Ｘ６のアミノ側鎖とアミド結合を形成しており、
Ｎ末端およびＣ末端が、場合により、１、２、３または４個のグリシンアミノ酸と一緒になって環を形成している、実施形態４に従うペプチドもしくはポリペプチド、またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩、またはこれらと実質的に同等なポリペプチドに関する。
【００６０】
実施形態４の別の態様である実施形態６において、本発明は、
Ｘ１が、不存在、ｐＥ、Ｒ、Ｑ、またはＩｓｎであり、
Ｘ５が、ＬまたはＣｈａであり、
Ｘ７が、Ｈ、Ａｉｂ、Ｆ、Ｋ（ラウロイル）、またはＫ（パルミトイル）であり、
Ｘ８が、Ｋ、Ｆ、または４−アミノ−ｌｓｎであり、
Ｘ９が、ＧまたはＡｉｂであり、
Ｘ１１が、ＮｌｅまたはＣｈａであり、
Ｘ１３が、存在しないか、またはＦ、ｆ、Ｋ（ラウロイル）、Ｋ（パルミトイル）であり、
Ｘ６およびＸ１２が、独立して、Ｃ、ｃ、ｈＣ、Ｄ−ｈＣ、Ｋ、Ｄ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＥから選択される天然または天然でないアミノ酸であり、Ｘ６とＸ１２の側鎖が、共有結合によって互いに連結しており、Ｎ末端およびＣ末端が、場合により、１、２、３または４個のグリシンアミノ酸と一緒になって環を形成している、式ＩＩのペプチドもしくはポリペプチド、またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩、またはこれらと実質的に同等なポリペプチドに関する。
【００６１】
先行する実施形態のいずれか一形態、より詳細には実施形態１〜６のいずれか一形態のさらに別の態様において、本発明は、Ｘ６およびＸ１２が、独立して、Ｃ、Ｋ、Ｄ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＥから選択される天然または天然でないアミノ酸であり、Ｘ６とＸ１２の側鎖が、共有結合によって互いに連結している、式Ｉ、Ｉ’もしくはＩＩのペプチドおよびポリペプチド、またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩、またはこれらと実質的に同等なポリペプチドに関する。
【００６２】
実施形態７において、本発明は、Ｘ６およびＸ１２が、独立して、Ｋ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、Ｅ、およびＤから選択され、Ｘ６とＸ１２の側鎖が、互いにアミド結合を形成している、先行する実施形態のいずれか一形態、より詳細には実施形態１〜６のいずれか一形態に従う式Ｉ、Ｉ’もしくはＩＩのペプチドもしくはポリペプチド、またはペプチドもしくはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩に関する。この実施形態の別の態様では、Ｘ６は、Ｋ、Ｏｒｎ、またはＤａｂであり、Ｘ１２は、ＥまたはＤであり、Ｘ６とＸ１２の側鎖は、アミド結合を形成している。この実施形態のさらに別の態様では、Ｘ６はＫであり、Ｘ１２はＥまたはＤである。
【００６３】
実施形態８において、本発明は、Ｘ６およびＸ１２が、独立して、Ｃ、ｃ、Ｄ−ｈＣ、またはｈＣであり、Ｘ６とＸ１２の側鎖が、一緒になってジスルフィド結合を形成している、先行する実施形態のいずれか一形態、より詳細には実施形態１〜６のいずれか一形態に従う式Ｉ、Ｉ’もしくはＩＩのペプチドもしくはポリペプチド、またはペプチドもしくはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩に関する。この実施形態の別の態様では、Ｘ６およびＸ１２は、Ｃである。
【００６４】
実施形態８Ａにおいて、本発明は、Ｘ６およびＸ１２が、独立して、Ｃ、ｃ、Ｄ−ｈＣ、またはｈＣであり、Ｘ６とＸ１２の側鎖が、一緒になってモノスルフィド（−Ｓ−）結合を形成している、先行する実施形態のいずれか一形態、より詳細には実施形態１〜６のいずれか一形態に従う式Ｉ、Ｉ’もしくはＩＩのペプチドもしくはポリペプチド、またはペプチドもしくはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩に関する。この実施形態の別の態様では、Ｘ６およびＸ１２は、Ｃである。
【００６５】
実施形態８Ｂにおいて、本発明は、Ｘ６およびＸ１２が、独立して、Ｃ、ｃ、Ｄ−ｈＣ、またはｈＣであり、Ｘ６とＸ１２の側鎖が、一緒になって式−Ｓ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｚ）−ＣＨ２−Ｓ−［式中、＝Ｚは、＝Ｏ、＝Ｎ−Ｏ−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−Ｌ１−Ｒ１、または＝Ｎ−ＮＨ−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−Ｌ１−Ｒ１であり、Ｒ１は、脂肪酸誘導体であり、Ｌ１は、１つまたは複数のアミノ酸および／または１つまたは複数の−ＮＨ−Ｃ２〜６−アルキレン−ＮＨ−単位を含んでいるリンカーである］の連結部分を形成している、先行する実施形態のいずれか一形態、より詳細には実施形態１〜６のいずれか一形態に従う式Ｉ、Ｉ’もしくはＩＩのペプチドもしくはポリペプチド、またはペプチドもしくはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩に関する。この実施形態の別の態様では、Ｘ６およびＸ１２は、Ｃである。
【００６６】
Ｌ１は、脂肪酸誘導体をエステル結合またはアミド結合によってポリペプチドに接続する適切な有機リンカーである。通常、リンカーは、たとえば（Ｏ２Ｏｃ）単位やグルタミン酸などの１つまたは複数のアミノ酸部分または−ＮＨ−Ｃ２〜６アルキレン−ＮＨ−ジアミノ単位またはこれらの組合せを含んでいる。Ｒ１は、ポリペプチドの半減期を延長するために加えることのできる、脂肪酸誘導体などの特性変更基である。この実施形態の一態様では、Ｒ１は、式ＣｑＨｑ＋１Ｃ（Ｏ）２Ｈ［式中、ｑは３〜２０である］の脂肪酸である。場合により、末端ＣＨ３単位は、その対応するカルボン酸に酸化されていてもよい。
【００６７】
特定の一実施形態において、−Ｌ１−Ｒ１は、次式である。
【００６８】
【化６】
2018048157.tif 000010
ｑは、３〜２０の整数である。好ましくは、ｑは、１２〜１８の整数である。
【００６９】
Ｘ６およびＸ１２が、独立して、Ｃ、ｃ、Ｄ−ｈＣ、またはｈＣであり、Ｘ６とＸ１２の側鎖が、一緒になって、式−Ｓ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｚ）−ＣＨ２−Ｓ−［式中、＝Ｚは、＝Ｏ、＝Ｎ−Ｏ−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−Ｌ１−Ｒ１、または＝Ｎ−ＮＨ−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−Ｌ１−Ｒ１である］の連結部分を形成している式Ｉ、Ｉ’もしくはＩＩのペプチドまたはポリペプチドは、スキーム１に従って合成することができる。
【００７０】
【化７】
2018048157.tif 000011
【００７１】
（１Ａ）のポリペプチドジスルフィド結合を還元した後、二求電子性化合物（１Ｂ）との求核反応によって、ポリペプチド（１Ｃ）を生成する。ポリペプチド（１Ｃ）のケトン官能性がオキシアミンまたはヒドラジンと容易に縮合して、ポリペプチド１Ｄが生じた。
【００７２】
実施形態９において、本発明のある特定のポリペプチドとして、式ＩＩＩ（配列番号２）：
【００７３】
【化８】
2018048157.tif 000012
を有する、実施形態１〜６および８のいずれか一形態に従うペプチドもしくはポリペプチド、またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩が挙げられる。実施形態９Ａにおいて、本発明は、６位および１２位の２つのシステインが、ジスルフィド結合（−Ｓ−Ｓ−）、モノスルフィド結合（−Ｓ−）、または式−Ｓ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｚ）−ＣＨ２−Ｓ−［式中、Ｚは上で規定したとおりである］の連結部を形成している、式ＩＩＩのペプチドおよびポリペプチドに関する。実施形態９または９Ａの別の態様では、本発明は、６位および１２位にある２つのシステインが、ジスルフィド結合（−Ｓ−Ｓ−）を形成している式ＩＩＩのペプチドまたはポリペプチドを包含する。
【００７４】
実施形態１０において、本発明のある特定のペプチドおよびポリペプチドとして、式ＩＶ（配列番号３）：
【００７５】
【化９】
2018048157.tif 000013
を有する、実施形態１〜９のいずれか一形態に従うペプチドおよびポリペプチド、またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩が挙げられる。
【００７６】
実施形態１１において、本発明のある特定のポリペプチドとして、式Ｖ（配列番号４）：
【００７７】
【化１０】
2018048157.tif 000014
を有する、実施形態１〜６および８〜１０のいずれか一形態に従うポリペプチド、またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩が挙げられる。実施形態１１Ａにおいて、本発明は、６位および１２位の２つのシステインが、ジスルフィド結合（−Ｓ−Ｓ−）、モノスルフィド結合（−Ｓ−）、または式−Ｓ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｚ）−ＣＨ２−Ｓ−［式中、Ｚは上で規定したとおりである］の連結部を形成している、式Ｖのペプチドおよびポリペプチドに関する。実施形態１１または１１Ａの別の態様では、本発明は、６位および１２位の２つのシステインがジスルフィド結合（−Ｓ−Ｓ−）を形成している式Ｖのペプチドまたはポリペプチドを包含する。
【００７８】
実施形態１２において、本発明は、Ｘ３がシステインであり、システインの側鎖が、Ｘ７位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している、（実施形態１、２または３に従う）式ＩまたはＩ’の二環式ペプチドまたはポリペプチドに関する。この実施形態は、式ＶＩ（配列番号５）のペプチドおよびポリペプチド
【００７９】
【化１１】
2018048157.tif 000015
またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩で表される。
【００８０】
実施形態１３において、本発明は、Ｘ４がシステインであり、システインの側鎖が、Ｘ７位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している、（実施形態１、２または３に従う）式ＩまたはＩ’の二環式ペプチドまたはポリペプチドに関する。この実施形態は、式ＶＩＩ（配列番号６）のペプチドおよびポリペプチド
【００８１】
【化１２】
2018048157.tif 000016
またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩で表される。
【００８２】
実施形態１４において、本発明は、Ｎ末端およびＣ末端が、場合により、１、２、３または４個のグリシンアミノ酸と一緒になって環を形成している、実施形態１〜１１のいずれか一形態に従う式Ｉ〜Ｖのいずれか１つのペプチドもしくはポリペプチド、またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩、またはこれらと実質的に同等なポリペプチドに関する。この実施形態は、式ＶＩＩＩ：
【００８３】
【化１３】
2018048157.tif 000017
［式中、Ｌは（Ｇ）ｒであり、Ｇはグリシンであり、ｒは、１、２、３または４である］を有するペプチドもしくはポリペプチドまたはポリペプチドの塩で表される。
【００８４】
実施形態１４の別の態様である実施形態１５において、本発明は、Ｘ１がＱであり、Ｘ１３がＦであり、ｒが２である式ＶＩＩＩのペプチドもしくはポリペプチド、またはそのエステル、アミド、もしくは塩に関する。
【００８５】
実施形態１６において、本発明は、Ｘ６がＫであり、Ｘ１３が存在せず、Ｘ１２がＦまたはｆであり、Ｘ１２のＣ末端が、Ｘ６のアミノ側鎖とアミド結合を形成している、実施形態１、２もしくは３に従う式ＩまたはＩ’によるペプチドまたはポリペプチドに関する。この実施形態は、式ＩＸのペプチドもしくはポリペプチド
【００８６】
【化１４】
2018048157.tif 000018
またはポリペプチドのエステル、アミド、もしくは塩で表される。
【００８７】
上または下で列挙する式Ｉ’のアミノ酸残基のいずれか、または本明細書に記載するその関連式およびすべての実施形態、たとえば、式Ｉ、ＩＩ〜ＩＸは、本発明のペプチドまたはポリペプチドが、機能活性および構造特性（たとえば、半減期の延長、分解からの保護、立体配座拘束）を依然として保持するという前提で、保存的に置換されていてもよい。許容される保存的なアミノ酸置換の原理および例は、本明細書でさらに説明する。
【００８８】
以下の実施形態は、独立して、まとめて、またはいずれかの組合せもしくは部分的組合せ（sub-combination）にして使用することができる。
【００８９】
実施形態１７において、本発明は、Ｘ１がｐＥである、式Ｉ’、Ｉ〜ＶＩＩ、およびＩＸのいずれか１つ、または上述した他のいずれかのクラスおよびサブクラスのいずれかに従う（すなわち、実施形態１〜１３および１６のいずれか一形態に従う）ペプチドおよびポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩に関する。
【００９０】
実施形態１８において、本発明は、Ｘ１が存在しない、式Ｉ〜ＶＩＩおよびＩＸのいずれか１つ、または上述した他のいずれかのクラスおよびサブクラスのいずれかに従う（すなわち、実施形態１〜１３および１６のいずれか一形態に従う）ペプチドおよびポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩、またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩に関する。この実施形態の一態様では、ペプチドのＮ末端は、アミドである。実施形態１８の別の態様である実施形態１９において、本発明は、Ｘ１が存在せず、Ｎ末端が式−ＮＨＲのアミドであり、Ｒが、ＣＨ３Ｃ（Ｏ）−、ＣＨ３−（Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２）ｍ−Ｃ（Ｏ）−、パルミトイル（Ｏ２Ｏｃ）ｐ、ミリストイル（Ｏ２Ｏｃ）ｐ、ラウロイル（Ｏ２Ｏｃ）ｐもしくはＰｈ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、アセチル、ベンゾイル、フェナシル、スクシニル、オクタノイル、４−フェニルブタノイル、４−Ｃｌ−Ｐｈ−（ＣＨ２）３Ｃ（Ｏ）−、またはＰｈ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−であり、
ｐは、１〜４の整数であり、
ｍは、１〜１２の整数であり、
ラウロイル（Ｏ２Ｏｃ）ｐは、Ｃ１１Ｈ２３Ｃ（Ｏ）［ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）］ｐ−であり、
ミリストイル（Ｏ２Ｏｃ）ｐは、Ｃ１３Ｈ２７Ｃ（Ｏ）［ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）］ｐ−であり、
パルミトイル（Ｏ２Ｏｃ）ｐは、Ｃ１５Ｈ３１Ｃ（Ｏ）［ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）］ｐ−である、式Ｉ〜ＶＩＩおよびＩＸのいずれか１つ、または上述した他のいずれかのクラスおよびサブクラスのいずれかに従うペプチドおよびポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩に関する。この実施形態の特定の一態様では、Ｒは、アセチル、ベンゾイル、フェナシル、スクシニル、オクタノイル、４−フェニルブタノイル、４−Ｃｌ−Ｐｈ−（ＣＨ２）３Ｃ（Ｏ）−、またはＰｈ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−である。
【００９１】
実施形態２０において、本発明は、Ｎ末端が、式ＮＨＲ１のアミドであり、Ｒ１は、ＣＨ３Ｃ（Ｏ）−、ＣＨ３−（Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２）ｍ−Ｃ（Ｏ）−、パルミトイル（Ｏ２Ｏｃ）、ミリストイル（Ｏ２Ｏｃ）、ラウロイル（Ｏ２Ｏｃ）、またはＰｈ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−であり、ｍ、ラウロイル（Ｏ２Ｏｃ）、ミリストイル（Ｏ２Ｏｃ）、およびパルミトイル（Ｏ２Ｏｃ）は、上で規定している、式Ｉ〜ＶＩＩおよびＩＸのいずれか１つ、または上述した他のいずれかのクラスおよびサブクラスに従う（すなわち、実施形態１〜１３および１６のいずれか一形態に従う）ペプチドもしくはポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩に関する。
【００９２】
実施形態２１において、本発明は、Ｘ１３がＦである、式Ｉ〜ＶＩＩのいずれか１つ、または上述した他のいずれかのクラスおよびサブクラスのいずれかに従う（すなわち、実施形態１〜１３のいずれか一形態に従う）ペプチドおよびポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩、またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩に関する。
【００９３】
実施形態２２において、本発明は、Ｘ１３が存在しない、式Ｉ〜ＶＩＩのいずれか１つ、または上述した他のいずれかのクラスおよびサブクラスのいずれかに従う（すなわち、実施形態１〜１３のいずれか一形態に従う）ペプチドおよびポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩、またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩に関する。実施形態２２の一態様である実施形態２３において、Ｃ末端は、アミドである。実施形態２３の別の態様である実施形態２４において、本発明は、Ｃ末端が、式−Ｃ（Ｏ）Ｒ２のアミドであり、Ｒ２が、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｍｅ、−ＮＨ−ＮＨＢｎ、または−ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｐｈである、式Ｉ〜ＶＩＩのいずれか１つ、または上述した他のいずれかのクラスおよびサブクラスのいずれかに従うペプチドおよびポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩に関する。実施形態２３の好ましい態様では、本発明は、Ｃ末端が、式−Ｃ（Ｏ）Ｒ２のアミドであり、Ｒ２が−ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｐｈである、式Ｉ〜ＶＩＩのいずれか１つ、または上述した他のいずれかのクラスおよびサブクラスのいずれかに従うペプチドおよびポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩に関する。
【００９４】
実施形態２５において、本発明は、Ｘ５がＬである、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つ、または上述した他のいずれかのクラスおよびサブクラスのいずれかに従う（すなわち、実施形態１〜２５のいずれか一形態に従う）ペプチドおよびポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩に関する。
【００９５】
実施形態２６において、本発明は、Ｘ７がＨである、式Ｉ〜Ｖ、ＶＩＩＩおよびＩＸのいずれか１つ、または上述した他のいずれかのクラスおよびサブクラスのいずれかに従う（すなわち、実施形態１〜１１および１４〜２５のいずれか一形態に従う）ペプチドおよびポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩に関する。
【００９６】
実施形態２７において、本発明は、Ｘ８が、ＫまたはＦである、式Ｉ〜ＩＩＩおよびＶＩ〜ＩＸのいずれか１つ、または上述した他のいずれかのクラスおよびサブクラスのいずれかに従う（すなわち、実施形態１〜９および１２〜２６のいずれか一形態に従う）ペプチドおよびポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩に関する。この実施形態の別の態様では、Ｘ８はＫである。
【００９７】
実施形態２８において、本発明は、Ｘ９がＧである、式Ｉ〜ＩＩＩおよびＶＩ〜ＩＸのいずれか１つ、または上述した他のいずれかのクラスおよびサブクラスのいずれかに従う（すなわち、実施形態１〜９および１２〜２７のいずれか一形態に従う）ペプチドおよびポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩に関する。
【００９８】
実施形態２９において、本発明は、Ｘ１１がＮｌｅである、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つ、または上述した他のいずれかのクラスおよびサブクラスのいずれかに従う（すなわち、実施形態１〜２８のいずれか一形態に従う）ペプチドおよびポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩に関する。
【００９９】
したがって、実施形態３０において、本発明は、ペプチドまたはポリペプチド式（Ｉ’）：
【０１００】
【化１５】
2018048157.tif 000019
［式中、
Ｘ１は、ポリペプチドのＮ末端であり、存在しないか、またはｐＥ、Ｒ、ｌｓｎ、およびＱから選択され、
Ｘ２は、Ｒ、ｒ、Ｆ、またはＥであり、
Ｘ３は、Ｐ、ｐ、Ｋ、Ｄ、４−ＰｈＦ、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ７位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ４は、Ｒ、Ｆ、Ｅ、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ７位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ５は、Ｌ、Ｋ、Ｄ、または４−ＰｈＦであり、
Ｘ６およびＸ１２は、独立して、Ｃ、ｃ、ｈＣ、Ｄ−ｈＣ、Ｋ、Ｄ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＥから選択される天然または天然でないアミノ酸であり、Ｘ６とＸ１２の側鎖は、共有結合によって互いに連結して、ジスルフィド結合またはアミド結合のいずれかを形成しており、
または代わりに、Ｘ６はＫであり、Ｘ１３は存在せず、Ｘ１２はＦまたはｆであり、Ｘ１２のＣ末端は、Ｘ６のアミノ側鎖とアミド結合を形成しており、
Ｘ７は、Ｈ、Ａｉｂ、Ｋ、Ｅ、Ｆ、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ３位のシステインの側鎖またはＸ４位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ８は、Ｋ、Ｅ、Ｆ、または４−アミノ−ｌｓｎであり、
Ｘ９は、Ｇ、Ｄ、Ｌ、Ｒ、またはＡｉｂであり、
Ｘ１０は、Ｐまたはピペコリン酸であり、
Ｘ１１は、Ｎｌｅまたは３−ＰｙＡであり、
Ｘ１３は、Ｃ末端であり、存在しないか、またはＦ、ｆ、Ｋ、Ｈ、およびＥから選択され、
Ｎ末端およびＣ末端は、場合により、１、２、３または４個のグリシンアミノ酸と一緒になって環を形成しており、
Ｋ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、Ｄａｐ、ｈＫ、または４−アミノ−Ｉｓｎの側鎖中のアミノ基は、場合により、親油性基にアミド結合によって連結している］
またはこのポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩、またはこれらと実質的に同等なポリペプチドを提供する。
【０１０１】
実施形態３１において、本発明は、アミノ酸Ｘ１〜Ｘ１３のうち３つが、Ｐｙｒ−１−アペリン−１３に存在する対応するアミノ酸と異なっている、実施形態１、２または３のペプチドまたはポリペプチドに関する。実施形態３２において、本発明は、アミノ酸Ｘ１〜Ｘ１３のうち４つが、Ｐｙｒ−１−アペリン−１３に存在する対応するアミノ酸と異なっている、実施形態１、２または３のペプチドまたはポリペプチドに関する。
【０１０２】
別の実施形態において、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７、Ｘ８、Ｘ９、Ｘ１０、Ｘ１１、Ｘ１２、およびＸ１３アミノ酸は、以下の実施例の部におけるＸ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７、Ｘ８、Ｘ９、Ｘ１０、Ｘ１１、Ｘ１２、およびＸ１３アミノ酸によって規定されるものである。
【０１０３】
別の実施形態において、本発明による個々のポリペプチドは、以下の実施例の部において挙げるもの、またはそれらの薬学的に許容される塩である。
【０１０４】
別段指定しない限り、用語「本発明のポリペプチド」とは、式（Ｉ’）およびその下位式（式Ｉ、ＩＩ〜ＩＸ）のポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩を指す。
【０１０５】
別段指定しない限り、用語「本発明のポリペプチド」、「本発明のペプチド」、「アペリンペプチドアゴニスト」などは、式Ｉ’およびその下位式（式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩまたはＩＸ）のペプチドおよびポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩を指す。本発明のペプチドおよびポリペプチドは、限定はしないが、野生型アペリン、アペリン−１３、およびｐｙｒ−１−アペリン−１３を含めた、本明細書に記載の既知のアペリンペプチドおよびポリペプチドと比べて、実質的に同等または改善された活性および／または血漿安定性を示す。
【０１０６】
本発明のペプチドおよびポリペプチドは、式Ｉ’、Ｉ〜ＩＸのいずれか１つに従うペプチドおよびポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩、ならびに、限定はしないが実験実施例を含めた、本明細書において詳細に列挙するいずれかのペプチドまたはポリペプチドに対する同一性が少なくとも約９５％であるペプチドおよびポリペプチドも包含する。
【０１０７】
本明細書で使用するとき、語句「相同アミノ酸配列」またはその変形形態は、アミノ酸レベルでの相同性が少なくとも指定されたパーセンテージであることを特徴とする配列を指し、「配列同一性」と互換的に使用する。相同アミノ酸配列には、保存的アミノ酸置換を含んでおり、そのポリペプチドが、同じ結合および／または活性を有する、アミノ酸配列が含まれる。一部の実施形態では、アミノ酸配列は、比較配列との同一性が、９９％までの少なくとも６０％以上であれば、相同である。一部の実施形態では、アミノ酸配列は、比較配列と、６０までの１以上のアミノ酸置換、付加、または欠失が共通していれば、相同である。一部の実施形態では、相同アミノ酸配列は、５以下または３以下の保存的アミノ酸置換を有する。
【０１０８】
相同性は、ポリペプチドレベルでもよい。本発明のペプチドもしくはポリペプチドまたはその一部分と、異なるアミノ酸配列との同一性の程度またはパーセンテージは、２つの配列の配列比較における正確な一致の数を、「発明配列」または「外来配列」のいずれか短い方の長さで割ったものとして算出される。結果は、同一性パーセントとして示す。
【０１０９】
詳細な実施例に記載するアミノ酸配列との相同性が約８０〜９９．９％、好ましくは９０〜９９．９％であり、アペリン−１３またはｐｙｒ−１−アペリン−１３を凌ぐ血漿安定性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドは、本発明のポリペプチドの範疇に入る。一実施形態では、血漿安定性の改善は、少なくとも２倍である。一実施形態では、本発明のポリペプチドは、血漿安定性が少なくとも３０分である。別の実施形態では、本発明のポリペプチドは、血漿安定性が少なくとも６０分、好ましくは少なくとも１００分、より好ましくは少なくとも１５０分である。
【０１１０】
用語「実質的に同等」とは、受容体結合活性やシグナル伝達活性などの性質が同等であることを意味する。したがって、受容体結合活性の強度やポリペプチドの分子量などの度合いに差が存在しても差し支えない。
【０１１１】
本明細書に記載のポリペプチド、または１または複数のアミノ酸の置換、欠失、付加、もしくは挿入によるその実質的同等物は、上の意味でのアミノ酸配列実質的同等物（複数可）を含んだポリペプチドとして挙げることができる。本明細書に記載のポリペプチド、または１〜５、好ましくは１〜３、より好ましくは１もしくは２アミノ酸の天然もしくは天然でないアミノ酸での置換によるその実質的同等物は、上の意味でのアミノ酸配列実質的同等物（複数可）を含んだポリペプチドとして挙げることができる。別の改変および変更として、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩまたはＩＸのペプチドまたはポリペプチドのアペリンアゴニスト活性が維持され、血漿安定性がピログルタミン酸化型のアペリン−１３より改善されている限り、Ｌ−アミノ酸のＤ−アミノ酸での置き換え、または、限定はしないが、リン酸化、カルボキシル化、アルキル化などを含めた他の変形形態を挙げることができる。たとえば、Ｄ−アミノ酸は、ポリペプチドの活性および安定性に関して、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩまたはＩＸの環状ペプチドおよびポリペプチドの２（Ｘ２）位、３（Ｘ３）位、５、６、７および８（Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７およびＸ８）位、１０（Ｘ１０）位、ならびに１３（Ｘ１３）位において、良好な認容性を示す。
【０１１２】
本明細書で使用するとき、用語「薬学的に許容される塩」とは、本発明のポリペプチドの生物学的有効性および特性を保持し、通常は生物学的または別な意味で望ましい塩を指す。多くの場合、本発明のポリペプチドは、アミノ基および／もしくはカルボキシル基またはそれと同様の基が存在するおかげで、酸および／または塩基の塩を形成することができる。
【０１１３】
薬学的に許容される酸付加塩、たとえば、酢酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、臭化物／臭化水素酸塩、炭酸水素塩／炭酸塩、硫酸水素塩／硫酸塩、カンファースルホン酸塩、塩化物／塩酸塩、クロルテオフィリン酸塩（chlortheophyllonate）、クエン酸塩、エタンジスルホン酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、馬尿酸塩、ヨウ化水素酸塩／ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフトエ酸塩、ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オクタデカン酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩／リン酸水素塩／リン酸二水素塩、ポリガラクツロン酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、スルホサリチル酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、およびトリフルオロ酢酸塩は、無機酸および有機酸に対して生成することができる。
【０１１４】
塩を導くことのできる無機酸としては、たとえば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などが挙げられる。
【０１１５】
塩を導くことのできる有機酸としては、たとえば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、スルホサリチル酸などが挙げられる。薬学的に許容される塩基付加塩は、無機塩基および有機塩基に対して生成することができる。
【０１１６】
塩を導くことのできる無機塩基としては、たとえば、アンモニウム塩、および周期表のＩ〜ＸＩＩ列の金属が挙げられる。ある特定の実施形態では、塩は、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、銀、亜鉛、および銅から導かれ、特に適切な塩として、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、カルシウム、およびマグネシウム塩が挙げられる。
【０１１７】
塩を導くことのできる有機塩基としては、たとえば、第一級、第二級、および第三級アミン、自然に存在する置換アミンを始めとする置換アミン、環状アミン、塩基性イオン交換樹脂などが挙げられる。ある特定の有機アミンとして、イソプロピルアミン、ベンザチン、コリネート（cholinate）、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、リシン、メグルミン、ピペラジン、およびトロメタミンが挙げられる。
【０１１８】
本発明の薬学的に許容される塩は、従来の化学的方法によって、親化合物、塩基性または酸性部分から合成することができる。一般に、そのような塩は、遊離酸形態のこうした化合物を化学量論量の相応しい塩基（Ｎａ、Ｃａ、Ｍｇ、またはＫの水酸化物、炭酸塩、炭酸水素塩など）と反応させる、または遊離塩基形態のこうした化合物を化学量論量の相応しい酸と反応させることにより調製できる。こうした反応は通常、水もしくは有機溶媒中または二者の混合物中で実施される。一般に、実用可能な場合、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルのような非水性媒質の使用が望ましい。追加の適切な塩の一覧は、たとえば、“Remington’s Pharmaceutical Sciences”, 20th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985)ならびにStahlおよびWermuthによる“Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use” (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002)で見ることができる。
【０１１９】
本明細書で使用するとき、用語「薬学的に許容される担体」は、当業者に知られているであろうが、ありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング剤、界面活性剤、酸化防止剤、保存剤（たとえば、抗菌剤、抗真菌剤）、等張化剤、吸収遅延剤、塩、保存剤、薬物、薬物安定剤、結合剤、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、着香剤、色素など、およびこれらの組合せを包含する（たとえば、Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. Mack Printing Company, 1990, pp. 1289- 1329を参照されたい）。従来のいかなる担体も、活性成分と相容れない範囲にあるものを除き、治療組成物または医薬組成物におけるその使用を企図する。
【０１２０】
本発明のポリペプチドの「治療有効量」という用語は、対象の生物学的または医学的反応、たとえば、症状の寛解、状態の緩和、疾患の進行の緩慢化もしくは遅延、または疾患の予防などを惹起する、本発明のポリペプチドの量を指す。非限定的な一実施形態では、用語「治療有効量」は、対象に投与されたとき、（１）（ｉ）ＡＰＪ受容体の活性化によって寛解し、（ｉｉ）ＡＰＪ受容体の活性と関連し、または（ｉｉｉ）ＡＰＪ受容体の異常な活性を特徴とする状態、障害、もしくは疾患、またはその症状の少なくとも部分的な緩和、抑制、予防、および／または寛解をなす、または（２）ＡＰＪ受容体を活性化するのに有効である、本発明のポリペプチドの量を指す。
【０１２１】
非限定的な別の実施形態では、用語「治療有効量」とは、細胞、組織、細胞でない生物材料、または培地に投与したとき、ＡＰＪ受容体を少なくとも部分的に活性化するのに有効である、本発明のポリペプチドの量を指す。当業者の認めるところとなるとおり、特定の薬剤の、有効である絶対量は、所望の生物学的終点、送達する薬剤、ターゲット組織などの要因に応じて様々となり得る。当業者には、「治療有効量」を、単一用量にして投与してもよいし、または複数回の用量の投与によって実現してもよいことは理解される。たとえば、心不全治療のための薬剤の場合、有効量は、患者の臨床的改善、たとえば、運動耐性／能力の向上、血圧の上昇、体液停留の減少、および／または心臓機能性、たとえば、駆出率、運動能力（消耗までの時間）などの定量試験に関する結果の改善をもたらすのに十分な量でよい。
【０１２２】
本明細書で使用するとき、用語「対象」とは、動物を指す。通常、動物は哺乳動物である。対象は、たとえば、霊長類（たとえば、ヒト）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス、魚、鳥なども指す。ある特定の実施形態では、対象は霊長類である。さらに他の実施形態では、対象はヒトである。
【０１２３】
本明細書で使用するとき、用語「抑制する」、「抑制」、または「抑制すること」とは、所与の状態、症状、障害、もしくは疾患の軽減もしくは抑止、または生物学的活性もしくは過程のベースライン活性の有意な低下をいう。
【０１２４】
本明細書で使用するとき、任意の疾患または障害を「治療する」、「治療すること」、またはその「治療」という用語は、一実施形態では、疾患または障害を寛解させる（すなわち、疾患またはその臨床症状の少なくとも１つの発生を緩慢にし、阻止し、または軽減する）ことをいう。別の実施形態では、「治療する」、「治療すること」、または「治療」は、患者によって識別されない場合があるものを含めて、少なくとも１つの身体的パラメータを緩和し、または寛解させることをいう。さらに別の実施形態では、「治療する」、「治療すること」、または「治療」は、疾患または障害を、身体的に（たとえば、識別可能な症状の安定化）、生理的に（たとえば、身体的パラメータの安定化）、または両方において、変調することをいう。さらに別の実施形態では、「治療する」、「治療すること」、または「治療」は、疾患または障害の発症、発生、または進行を防ぎ、または遅らせることをいう。
【０１２５】
本明細書で使用するとき、用語「予防する」、「予防すること」、および「予防」とは、療法（たとえば、治療薬）の投与または療法の組合せ（たとえば、治療薬の組合せ）の投与の結果として生じる、対象における障害の１つまたは複数の症状の再発、発症、または発生の予防をいう。
【０１２６】
本明細書で使用するとき、対象が、生物学的に、医学的に、または生活の質において治療の恩恵を受けることになる場合、その対象は、そのような治療の「必要がある」。
【０１２７】
本明細書で使用するとき、本発明の文脈で（特に特許請求の範囲の文脈で）使用する用語「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」、および同様の用語は、本明細書で別段指摘しない限り、また文脈と明らかに矛盾しない限り、単数と複数の両方を包含すると解釈される。
【０１２８】
本明細書に記載の方法はすべて、本明細書で別段指摘しない限り、またはそうでなくとも文脈と明らかに矛盾しない限り、適切などんな順序で実施してもよい。本明細書において提供される、ありとあらゆる例または例示的な言い回し（たとえば、「など」）の使用は、単に本発明をより明解にするためのものであり、別途特許請求する本発明の範囲を限定するものでない。
【０１２９】
本発明のペプチドおよびポリペプチドは、ペプチド合成のための、それ自体が知られている手順によって生成することができる。ペプチド合成の方法は、固相合成および液相合成のいずれかのものでよい。すなわち、問題のペプチドおよびポリペプチドは、タンパク質を構成し得る部分的なペプチドまたはアミノ酸をその残部と縮合させ、生成物が保護基を有するとき、保護基を外し、その後、所望のペプチドを製造することができる。縮合および脱保護の既知の方法としては、以下の文献（１）〜（５）に記載の手順が挙げられる。
（１）M. Bodanszky and M. A. Ondetti, Peptide Synthesis, Interscience Publishers, New York, 1966、
（２）Schroeder and Luebke, The Peptide, Academic Press, New York, 1965、
（３）Nobuo Izumiya et al. Fundamentals and Experiments in Peptide Synthesis, Maruzen, 1975、
（４）Haruaki Yajima and Shumpei Sakakibara, Biochemical Experiment Series 1, Protein Chemistry IV, 205, 1977、および
（５）Haruaki Yajima (ed.), Development of Drugs-Continued, 14, Peptide Synthesis, Hirokawa Shoten
【０１３０】
反応後、ペプチドは、溶媒抽出、カラムクロマトグラフィー、液体クロマトグラフィー、再結晶などの従来の精製技術を組み合わせて、精製および単離することができる。上述のように単離したペプチドが遊離化合物である場合、既知の方法によってペプチドを適切な塩に変換することができる。逆に、単離された生成物が塩である場合、既知の方法によってペプチドを遊離ペプチドに変換することができる。
【０１３１】
ポリペプチドのアミドは、アミド化に適した、ペプチド合成用の樹脂を使用して得ることができる。樹脂としては、クロロメチル樹脂、ヒドロキシメチル樹脂、ベンズヒドリルアミン樹脂、アミノメチル樹脂、４−ベンジルオキシベンジルアルコール樹脂、４−メチルベンズヒドリルアミン樹脂、ＰＡＭ樹脂、４−ヒドロキシメチルメチルフェニルアセトアミドメチル樹脂、ポリアクリルアミド樹脂、４−（２’，４’−ジメトキシフェニル−ヒドロキシメチル）フェノキシ樹脂、４−（２’，４’−ジメトキシフェニル−Ｆｍｏｃ−アミノメチル）フェノキシ樹脂、塩化２−クロロトリチル樹脂などが挙げられる。このような樹脂を使用して、α−アミノ基および側鎖の官能基が適切に保護されているアミノ酸を、目的のペプチドの配列に従い、それ自体が知られている種々の縮合技術によって樹脂上で縮合させる。一連の反応の終盤に、ペプチドまたは保護されたペプチドを樹脂から外し、必要に応じて保護基を除去し、ジスルフィド結合を形成させて、目的のポリペプチドを得る。
【０１３２】
上述の保護されたアミノ酸の縮合には、ＨＡＴＵ、ＨＣＴＵ、またはたとえばカルボジイミドなどの、ペプチド合成用の様々な活性化試薬を使用することができる。カルボジイミドとしては、ＤＣＣ、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド、およびＮ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドが挙げられる。このような試薬を用いた活性化には、ラセミ化防止添加剤、たとえば、ＨＯＢｔまたはＯｘｙｍａ  Ｐｕｒｅを使用することができる。保護されたアミノ酸は、活性化試薬およびラセミ化防止剤と共に、樹脂にそのまま加えてもよいし、または対称酸無水物、ＨＯＢｔエステル、またはＨＯＯＢｔエステルとして予め活性化し、次いで樹脂に加えてもよい。保護されたアミノ酸の活性化または樹脂との縮合のための溶媒は、ペプチド縮合反応に有用であることがわかっている溶媒の中から適正に選択することができる。たとえば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、クロロホルム、トリフルオロエタノール、ジメチルスルホキシド、ＤＭＦ、ピリジン、ジオキサン、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、酢酸エチル、またはこれらの適切な混合物を挙げることができる。
【０１３３】
反応温度は、ペプチド結合形成に有用であることがこれまでにわかっている範囲から選択することができ、普通は、約−２０℃〜５０℃の範囲から選択する。活性化型アミノ酸誘導体は、一般に、１．５〜４倍過剰の割合で使用する。ニンヒドリン反応を利用した試験によって、縮合が不十分であるとわかったなら、十分な縮合を実現するために、保護基を除去せずに、縮合反応を繰り返すことができる。繰り返した縮合によって、それでも十分な程度の縮合がなされない場合、未反応のアミノ基を、無水酢酸またはアセチルイミダゾールでアセチル化することができる。
【０１３４】
出発材料アミノ酸のアミノ基の保護基としては、Ｚ、Ｂｏｃ、第三級アミルオキシカルボニル、イソボルニルオキシカルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、ＣＩ−Ｚ、Ｂｒ−Ｚ、アダマンチルオキシカルボニル、トリフルオロアセチル、フタリル、ホルミル、２−ニトロフェニルスルフェニル、ジフェニルホスフィノチオイル、またはＦｍｏｃが挙げられる。使用することのできるカルボキシ保護基としては、限定はしないが、上述のＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、およびＣ６〜１０アリール−Ｃ１〜２アルキル、ならびに２−アダマンチル、４−ニトロベンジル、４−メトキシベンジル、４−クロロベンジル、フェナシル、ベンジルオキシカルボニルヒドラジド、第三級ブトキシカルボニルヒドラジド、およびトリチルヒドラジドが挙げられる。
【０１３５】
セリンおよびトレオニンのヒドロキシ基は、エステル化またはエーテル化によって保護することができる。前記エステル化に適した基としては、炭素から導かれる基、たとえば、低級アルカノイル基、たとえばアセチルなど、アロイル基、たとえばベンゾイルなど、ベンジルオキシカルボニル、およびエトキシカルボニルが挙げられる。前記エーテル化に適した基としては、ベンジル、テトラヒドロピラニル、および第三級ブチルが挙げられる。チロシンのフェノール性ヒドロキシル基の保護基としては、Ｂｚｌ、Ｃｌ２−Ｂｚｌ、２−ニトロベンジル、Ｂｒ−Ｚ、および第三級ブチルが挙げられる。
【０１３６】
ヒスチジンのイミダゾールの保護基としては、Ｔｏｓ、４−メトキシ−２，３，６−トリエチルベンゼンスルホニル、ＤＮＰ、ベンジルオキシメチル、Ｂｕｍ、Ｂｏｃ、Ｔｒｔ、およびＦｍｏｃが挙げられる。
【０１３７】
出発アミノ酸の活性化型カルボキシル基には、対応する酸無水物、アジ化物、および活性エステル、たとえば、ペンタクロロフェノール、２，４，５−トリクロロフェノール、２，４−ジニトロフェノール、シアノメチルアルコール、ｐ−ニトロフェノール、ＨＯＮＢ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、ＨＯＢｔなどのアルコールとのエステルなどが含まれる。出発アミノ酸の活性化型アミノ基には、対応するホスホルアミドが挙げられる。
【０１３８】
保護基の脱離方法としては、パラジウムブラックやパラジウム炭素などの触媒の存在下で水素ガスを使用する触媒還元、無水フッ化水素、メタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、またはこうした酸の混合物での酸処理、ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミン、ピペリジン、ピペラジンでの塩基処理、液体アンモニア中でのナトリウム金属による還元が挙げられる。上述の酸処理による脱離反応は、一般に、−２０℃〜４０℃の温度で実施され、アニソール、フェノール、チオアニソール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、硫化ジメチル、１，４−ブタンジチオール、１，２−エタンジチオールなどのカチオンアクセプターを加えて、有利に行うことができる。ヒスチジンのイミダゾール基の保護に使用した２，４−ジニトロフェニル基は、チオフェノールでの処理によって脱離させることができ、トリプトファンのインドール基の保護に使用したホルミル基は、希水酸化ナトリウム溶液または希アンモニア水溶液でのアルカリ処理、ならびに１，２−エタンジチオール、１，４−ブタンジチオール存在下での上述の酸処理によって脱離させることができる。
【０１３９】
出発材料の反応に関与すべきでない官能基の保護方法、使用することのできる保護基、保護基の除去方法、および反応に関与すべき官能基を活性化する方法は、すべて、既知の基および方法の中から公正に選択することができる。
【０１４０】
アミド型のポリペプチドを得る別の方法は、Ｃ末端アミノ酸の−カルボキシル基を最初にアミド化するステップと、次いでペプチド鎖を所望の鎖長までＮ側に伸長し、次いで、Ｃ末端ペプチドのα−アミノ基、および目的ポリペプチドの残部を形成することになるアミノ酸またはペプチドのα−カルボキシ基を選択的に脱保護するステップと、α−アミノ基および側鎖官能基が上述の適切な保護基で保護されている２つの断片を、上で挙げたものなどの混合溶媒中で縮合させるステップとを含む。この縮合反応のパラメータは、上述したのと同じものでよい。縮合によって得られた保護ペプチドから、上述の方法によってすべての保護基を除去して、その結果、所望の粗製ペプチドが得られる。この粗製ペプチドを、既知の精製手順によって精製し、主画分を凍結乾燥して、目的のアミド化ポリペプチドを得ることができる。ポリペプチドのエステルを得るには、Ｃ末端アミノ酸のａ−カルボキシル基を所望のアルコールと縮合させて、アミノ酸エステルを得、次いで、アミド生成について上述した手順に従う。
【０１４１】
本発明のポリペプチドまたはそのアミド、塩のエステルは、皮下、筋肉内、静脈内、腹腔内、吸入などを始めとする様々な手段のいずれかにおいて投与することができる。本発明の特に好ましい実施形態では、本発明のポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩の連続的な静脈内投与を用いる。本発明におけるポリペプチドは、ボーラスとして、または一定期間にわたる連続注入として投与することができる。移植可能なポンプを使用してもよい。本発明のある特定の実施形態では、断続的または連続的なポリペプチド投与を、１日〜数日間（たとえば、２〜３日間以上）またはより長期間、たとえば、数週間、数か月、もしくは数年間継続する。一部の実施形態では、断続的または連続的なポリペプチド投与を少なくとも約３日間施す。別の実施形態では、断続的または連続的なポリペプチド投与を少なくとも約１週間施す。他の実施形態では、断続的または連続的なポリペプチド投与を少なくとも約２週間施す。投与中または複数回の投与の合間に、特定の閾値を上回る平均血漿ポリペプチド濃度を維持することが望ましい場合もある。望ましい濃度は、たとえば、対象の生理的状態、疾患重症度などに基づき決定することができる。そのような望ましい値（複数可）は、標準の臨床試験を実施して割り出すことができる。
【０１４２】
別の態様では、本発明は、本発明のポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩と、１種または複数の薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。医薬組成物は、経口投与、非経口投与、直腸投与などの特定の投与経路用に製剤化することができる。加えて、本発明の医薬組成物は、固体形態（限定はせず、カプセル剤、錠剤、丸剤、顆粒、凍結乾燥物、粉末、または坐剤を含める）、または液体形態（限定はせず、溶液、懸濁液、または乳濁液を含める）に仕立てることができる。医薬組成物は、無菌製造、滅菌などの従来の製薬業務にかけることができ、かつ／または、従来の不活性希釈剤、ケーク形成剤、張性剤（tonicity agent）、滑沢剤、または緩衝剤、ならびに保存剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、緩衝液などの佐剤を含有してよい。
【０１４３】
注射用途に適する医薬組成物は、通常、滅菌注射溶液または分散液を即座に調製するための、滅菌水溶液（水溶性の場合）または分散液と滅菌粉末を含む。
【０１４４】
静脈内の投与については、適切な担体として、生理食塩水、静菌水、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬＴＭ（ＢＡＳＦ、ニュージャージー州Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ）、またはリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）が挙げられる。すべての場合において、組成物は、滅菌とすべきであり、容易な注射適用性（syringability）が存在する程度に流動的にすべきである。好ましい医薬製剤は、製造および貯蔵の条件下で安定しており、細菌や真菌などの微生物による汚染作用に対抗して保存しなければならない。一般に、妥当な担体は、たとえば、水、エタノール、ポリオール（たとえば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコールなど）、およびこれらの適切な混合物を含有する溶媒または分散媒でよい。適正な流動度は、たとえば、レシチンなどのコーティング剤の使用、分散液の場合では必要な粒径の維持、および界面活性剤の使用によって維持することができる。微生物による作用の予防は、種々の抗菌剤および抗真菌剤、たとえば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなどによって実現することができる。多くの場合、等張化剤、たとえば、糖、マンニトールなどのポリアルコール、アミノ酸、ソルビトール、塩化ナトリウムを組成物に含めることが好ましい。注射用組成物の吸収の延長は、吸収を遅らせる薬剤、たとえば、モノステアリン酸アルミニウムやゼラチンを組成物に含めることにより実現できる。
【０１４５】
ある特定の注射用組成物は、水性の等張性溶液または懸濁液であり、坐剤は、脂肪質の乳濁液または懸濁液から調製することが有利である。前記組成物は、滅菌され、かつ／または保存剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、溶解促進剤（solution promoter）、浸透圧調節用の塩、および／または緩衝液などの佐剤を含有するものでよい。加えて、前記組成物は、治療上価値のある他の物質も含有してよい。前記組成物は、従来の混合、造粒、またはコーティング法に従って調製され、それぞれ、約０．１〜７５％、または約１〜５０％の活性成分を含有する。
【０１４６】
滅菌注射溶液は、必要に応じて、上で列挙した成分の１つまたは組合せを含有する適切な溶媒に、必要な量の活性化合物を混ぜた後、濾過滅菌することにより調製できる。分散液は、一般に、基礎の分散媒、および上で列挙したものからの他の必要な成分を含有する滅菌ビヒクルに、活性化合物を混ぜることにより調製される。滅菌注射溶液を調製するための滅菌粉末の場合、好ましい調製方法は、真空乾燥および凍結乾燥であるが、この方法では、活性成分の粉末と、所望の任意の追加成分が、予め滅菌濾過されたその溶液から得られる。
【０１４７】
経口組成物は、一般に、不活性希釈剤または可食担体を含む。治療的経口投与の目的では、活性化合物は、賦形剤と混ぜ、錠剤、トローチ剤、またはカプセル剤、たとえばゼラチンカプセル剤の形で使用することができる。経口組成物は、含嗽液として使用するために流動性担体を使用して調製することもできる。薬学的に適合する結合剤、および／または佐剤材料を、組成物の一部として含めることができる。錠剤、丸剤、カプセル剤、トローチ剤などは、次の成分、すなわち、微結晶性セルロース、トラガカントゴム、ゼラチンなどの結合剤、デンプンやラクトースなどの賦形剤、アルギン酸、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ、コーンスターチなどの崩壊剤、ステアリン酸マグネシウムやＳｔｅｒｏｔｅｓなどの滑沢剤、コロイド状二酸化ケイ素などの流動促進剤、スクロースやサッカリンなどの甘味剤、またはハッカ、サリチル酸メチル、オレンジ香料などの着香剤のいずれか、または同様の性質の化合物を含有してよい。経口送達用の製剤は、消化管内での安定性を向上させ、かつ／または吸収を強化するための薬剤が組み込まれていると有利な場合もある。
【０１４８】
吸入による投与について、発明治療薬は、適切な噴射剤、たとえば、二酸化炭素などの気体を含有する加圧容器もしくは計量分配装置、またはネブライザーから、エアロゾルスプレーの形で送達することが好ましい。治療薬の全身送達のために、肺が広い表面積を備えていることは注目される。
【０１４９】
薬剤は、たとえば、米国公開２００４００９６４０３に記載のものなどのポリマー系微小粒子に、または当業界で知られている他の広範な薬物送達ビヒクルのいずれかと共同して、カプセル封入することができる。本発明の他の実施形態では、たとえば、米国公開２００４００６２７１８に記載されているように、薬剤を荷電脂質と共同して送達する。後者の系は、治療用ポリペプチドであるインスリンの投与に使用されており、ペプチド剤の投与についてこの系の実益を示していることが注目される。
【０１５０】
全身投与は、経粘膜的または経皮的手段によるものでもよい。
【０１５１】
経皮的適用に適する組成物は、有効量の本発明のポリペプチドを適切な担体と共に含む。経皮送達に適する担体として、ホストの皮膚を介した透過を手助けする薬理学的に許容される被吸収性溶媒が挙げられる。経皮的デバイスは、たとえば、裏部材と、化合物を場合により担体と共に含有するレザバーと、場合により、ホストの皮膚の化合物を、長期間にわたって、制御され、予め決められた速度で送達するための速度制御バリアと、デバイスを皮膚に固定するための手段とを備えた絆創膏の形態である。
【０１５２】
たとえば皮膚および眼への局所適用に適する組成物には、水溶液、懸濁液、軟膏、クリーム、ゲル、または、たとえばエアロゾルなどによる送達のためのスプレー製剤が含まれる。このような局所送達系は、特に、皮膚への適用に相応しくなる。すなわち、こうした局所送達系は、当業界でよく知られている美容製剤を含めた局所的使用に特に適する。このような組成物は、可溶化剤、安定剤、張性増強剤（tonicity enhancing agent）、緩衝剤、および保存剤を含有してもよい。
【０１５３】
本明細書で使用するとき、局所適用は、吸入または鼻腔内適用にも関連することがある。こうした適用は、乾燥粉末吸入器から乾燥粉末（単独、混合物、たとえばラクトースとの乾燥ブレンドとして、またはたとえばリン脂質との混合型要素粒子としてのいずれか）の形で、または加圧容器、ポンプ、スプレー、アトマイザー、もしくはネブライザーからエアロゾルスプレー体裁の形で、適切な噴射剤を使用しまたは使用せずに、好都合に送達することができる。
【０１５４】
本発明はさらに、活性成分としての本発明の化合物が分解する速度を減速する１種または複数の薬剤を含む医薬組成物および剤形を提供する。本明細書では「安定剤」と呼ぶ、そのような薬剤として、限定はしないが、アスコルビン酸などの酸化防止剤、ｐＨ緩衝液、または塩緩衝液などが挙げられる。
【０１５５】
本発明の方法：
アペリンファミリーのペプチドは、Ｇタンパク質共役型ＡＰＪ受容体の、知られている唯一の天然リガンドファミリーである。アペリン遺伝子は、７７アミノ酸のポリペプチドをコードし、このポリペプチドがプロセシングを受けて、生物学的活性型のアペリンペプチド、たとえば、アペリン−３６、アペリン−１７、アペリン−１６、アペリン−１３、アペリン−１２、およびピログルタミン酸修飾型のアペリン−１３（Ｐｙｒ１−アペリン−１３）になる。これらアペリンペプチドのいずれでも１種が、ＡＰＪ受容体に結合すると、ＧｉおよびＧｑタンパク質を介してシグナルを伝達する。心筋細胞では、ＧｉまたはＧｑとの共役によって、細胞内ｐＨが変化し、ＰＬＣが活性化され、ＩＰ３が産生され、それにより筋フィラメントのカルシウム感受性が増強され、最終的に心収縮性が増大する。Ｇｉ共役により、活性化型Ｇｓ、アデニリルシクラーゼ、およびｃＡＭＰの産生が抑制され、ｐＡｋｔレベルが上昇して、心臓保護につながる。血管内皮細胞では、Ｇｉを介したＡＰＪ活性化、ｐＡＫＴによって、一酸化窒素（ＮＯ）産生が増大し、これにより平滑筋弛緩が増進される結果、全体として血管が拡張する。
【０１５６】
慢性安定心不全の患者は、心収縮性がさらに低下し、症状が悪化する、不定期の急性代償不全エピソードを伴う。こうした増悪は、急性代償不全心不全（ＡＤＨＦ）と呼ばれる。ＡＤＨＦの現行の療法としては、利尿薬、血管拡張薬、およびイノトロープが挙げられ、これらは、心収縮性を直接増大させる。現用の静脈内イノトロープ（ドブタミン、ドーパミン、ミルリノン、レボシメンダン）は、不整脈などの有害事象を伴い、長期死亡率を増大させることでよく知られている。本発明の合成アペリンポリペプチド類似体は、催不整脈性または死亡の傾向なしに心収縮性を増大させるＡＤＨＦ療法となり、慢性心不全における未対応の膨大な医学的要求に対処するものである。
【０１５７】
実際に、ヒトにおける急性アペリン治療（５分）の結果、冠血管は拡張し、心拍出量は改善される。しかし、天然のアペリンは、ｉｎ  ｖｉｖｏでのｔ１／２（秒）および作用持続時間（数分）が非常に短い。本発明の強力な合成アペリンペプチドアゴニストは、天然のアペリンに比べて半減期が長い。
【０１５８】
心筋細胞におけるＡＰＪ受容体の活性化により、ａ）Ｇｉ／Ｇｑ、ＰＬＣ、およびＣａ２＋を介した心収縮性が向上し、ｂ）Ｇｉ、ｐＡｋｔ活性化を介した心臓保護が講じられるが、（他のイノトロープで見られるような）ｃＡＭＰの漸増は伴わない。加えて、内皮細胞におけるＡＰＪアゴニズムによって、動脈の血管は拡張され、これが、左心室の仕事量を軽減することにより、さらに心不全のためになる。まとめると、合成アペリンポリペプチド類似体は、全体としての心機能を向上させ、催不整脈を減少させ、生存利益をもたらし得る。
【０１５９】
より最近では、アペリンの糖尿病およびインスリン抵抗性への潜在的な関与に焦点を当てた前臨床研究がいくつか発表されている。アペリンは、１）筋肉、脂肪、および心臓におけるグルコースの取込みを改善することによって血糖レベルを下げ、２）膵臓β細胞をＥＲストレスおよび後続のアポプトーシスから保護し、３）β細胞におけるインスリン分泌を減少させ、４）脂肪組織において、カテコールアミンによって誘発される脂肪分解を調節することが示されている。ｐＡＫＴ経路の活性化は、こうした過程と関連付けられている。
【０１６０】
式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つに従うポリペプチドまたは薬学的に許容されるその塩は、遊離の形態または薬学的に許容される塩の形態で、たとえば次の部で示すとおりのｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏ試験において示されるような、価値のある薬理学的特性、たとえば、ＡＰＪ受容体アゴニズム特性を示し、したがって、療法に必要となる。
【０１６１】
本発明のポリペプチドまたは薬学的に許容されるその塩は、急性代償不全心不全（ＡＤＨＦ）、慢性心不全、肺高血圧、心房細動、Ｂｒｕｇａｄａ症候群、心室性頻拍、アテローム性動脈硬化症、高血圧、再狭窄、虚血性心血管疾患、心筋症、心臓線維症、不整脈、水分貯留、糖尿病（妊娠糖尿病を含める）、肥満、末梢動脈疾患、脳血管発作、一過性脳虚血発作、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、熱傷（日焼けを含める）、および子癇前症から選択される適応症の治療において有用となり得る。
【０１６２】
したがって、別の実施形態として、本発明は、ＡＰＪ受容体活性と関連する疾患を治療するための、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩の使用を提供する。別の実施形態では、療法は、ＡＰＪ受容体のアゴニズムに反応を示す疾患から選択される。別の実施形態では、疾患は、前述の一覧から選択され、急性代償不全心不全が適切である。この実施形態のさらに別のサブセットにおいて、本発明は、ＡＰＪ受容体活性と関連する疾患を治療するための医薬の製造における、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩の使用を提供する。
【０１６３】
したがって、別の実施形態として、本発明は、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩の、療法における使用を提供する。別の実施形態では、療法は、ＡＰＪ受容体の活性化（アゴニズム）によって治療することのできる疾患から選択される。
【０１６４】
別の実施形態では、本発明は、治療上許容される量の式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、塩のエステルの投与を含む、ＡＰＪ受容体のアゴニズムに反応を示す疾患の治療方法を提供する。別の実施形態では、疾患は、上述の一覧から選択され、急性代償不全心不全が適切である。
【０１６５】
この実施形態のさらに別のサブセットにおいて、本発明は、治療上許容される量の式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩の投与を含む、ＡＰＪ受容体の活性と関連する疾患の治療方法を提供する。
【０１６６】
治療に用いることになる、本発明の医薬組成物または組合せの有効量は、たとえば、治療の状況および目的に左右される。当業者には、したがって、治療に相応しい投薬量レベルが、幾分、送達される分子、融合タンパク質変異体を使用する適応症、投与経路、ならびに患者の大きさ（体重、体表面、または臓器サイズ）および状態（年齢および全般的健康状態）に応じて様々となることは理解されよう。それに応じて、臨床医は、最適な治療効果を得るために、投薬量を設定し、投与経路を変更することができる。典型的な投薬量は、上述の要因に応じて、約０．１μｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇまでの範囲またはそれ以上となり得る。他の実施形態では、投薬量は、０．１μｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇまで、または１μｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇまでの範囲となり得る。
【０１６７】
投薬の頻度は、使用する製剤中の二重機能タンパク質の薬動学的パラメータに応じて決まる。通常、臨床医は、所望の効果を実現する投薬量に到達するまで組成物を投与する。したがって、組成物は、単一用量として、一定期間にわたる（同量の所望の分子を含有するかどうかは定かでない）２回以上の用量として、または移植デバイスもしくはカテーテルによる連続的な注入として、投与することができる。適切な投薬量のさらなる微調整は、当業者によって型通りになされ、当業者によって型通りに行われる作業領域の範囲内である。適切な投薬量は、適切な用量反応データを使用して突き止めることができる。
【０１６８】
本発明によるポリペプチドの活性は、以下に記載する次のｉｎ  ｖｉｔｒｏ法によって評価することができる。
【０１６９】
ｈＡＰＪカルシウムフラックスアッセイ：
３８４ウェルフォーマットにおいて、２５ｕｌ成長培地に、Ｃｈｅｍ−５  ＡＰＪ安定細胞（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ＃ＨＴＳ０６８Ｃ）を１０，０００細胞／ウェルで播き、次いで、３７℃の組織培養インキュベーターにおいて２４時間成長させた。アッセイの１時間前に、２．５ｍＭのプロベネシドを含有する２５ｕｌ／ウェルのＦＬＩＰＲ  Ｃａｌｃｉｕｍ  ４色素（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  Ｒ８１４２）を加え、３７℃の組織培養インキュベーターにおいて細胞を１時間インキュベートした。ペプチドをＨＢＳＳ、ＨＥＰＥＳ、および０．１％ＢＳＡ緩衝液に可溶化し、三通りに５０ｕＭから５ｐＭまで１０倍ずつ連続希釈した。ＦＬＩＰＲ  Ｔｅｔｒａを使用して、色素を有する細胞にペプチドを加えた（１：５、１０ｕＭ〜１ｐＭの範囲の最終ペプチド濃度にする）。細胞の内側のＦＬＩＰＲ色素は、カルシウムに結合後に蛍光を発光し、細胞の外側からの蛍光は遮蔽された。ＦＬＩＰＲ  Ｔｅｔｒａにおいて４７０〜４９５の励起波長および５１５〜５７５の発光波長を使用して、蛍光を測定した。読取りは、ペプチドを加える１０秒前に開始して、合計３分間行った。最大−最小値を算出し、各ペプチド濃度に対してプロットし、ＧｒａｐｈＰａｄ  ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、ペプチドによるカルシウムフラックス刺激について、曲線変曲点におけるＥＣ５０値を算出した。
【０１７０】
血漿安定性アッセイ：
材料：
作業溶液：１ｍｇ／ｍＬの試験物をＭｉｌｌｉ−Ｑ水中に調製する。
抽出溶液：０．１％のギ酸および４００ｎｇ／ｍＬのグリブリドを含有するメタノール：アセトニトリル：水（１：１：１）
血漿：Ｂｉｏｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ  ＬＬＣ（ニューヨーク州Ｌｉｖｅｒｐｏｏｌ）から購入した雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット血漿（ヘパリンナトリウム添加）
全血：Ｂｉｏｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ  ＬＬＣ（ニューヨーク州Ｌｉｖｅｒｐｏｏｌ）から購入した雄Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ全血（ヘパリンナトリウム添加）
肺ホモジネート：Ｂｉｏｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ  ＬＬＣ（ニューヨーク州Ｌｉｖｅｒｐｏｏｌ）から雄のＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットの肺を購入した。肺は、５倍体積の１倍ＰＢＳを加えた後、ポリトロンホモジナイザーを使用してホモジナイズした。ホモジネートを４℃にて９０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。上清を３０００ｒｐｍで３０分間再び遠心分離して、澄んだ上清を作った。タンパク質濃度は、市販のキット（Ｐｉｅｒｃｅ、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して求めた。
【０１７１】
サンプル調製手順：
試験物は、次の生物学的材料、すなわち、ヘパリン処置ラット血漿、ヘパリン処置ラット全血、または肺ホモジネートのうちの１つにおいて調製した。血漿および全血サンプルは、９９５ｕＬのラット血漿または全血に１ｍｇ／ｍＬの作業溶液５ｕＬを加えることにより、５０００ｎｇ／ｍＬで調製した。肺ホモジネートサンプルは、肺ホモジネートをリン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）で１ｍｇ／ｍｌのタンパク質濃度に希釈した後、５ｕＬの作業溶液を加えて、９９５ｕＬの希釈された肺ホモジネートとすることにより調製した。サンプルは、水浴インキュベーターにおいて、穏やかに振盪（６５〜７５ｒｐｍ）しながら３７℃でインキュベートした。０分、５分、１５分、３０分、６０分、１２０分、および２４０分の時点で、インキュベートサンプルの２５ｕＬのアリコートを９６ウェルプレートに移し、１５０ｕＬの抽出溶液を使用して、直ちにタンパク質を沈殿させた。インキュベート実験が完了した後、サンプルプレートを４℃にて４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。その後、ピペット操作装置（Ｔｅｃａｎ  Ｔｅｍｏ）を使用して、上清を別のプレートに移し、すべてのサンプルに５０ｕＬの水を加えた。プレートは、ＬＣ−ＭＳ分析の前にボルテックスした。
【０１７２】
ＬＣ−ＭＳ安定性分析のサンプル
ＨＰＬＣ：オートサンプラーを備えたＡｇｉｌｅｎｔ  １２９０  ＨＰＬＣ
カラム：ＭＡＣ−ＭＯＤ  ＡＣＥ  Ｃ１８、３μｍ、３０ｍｍ×内径２．１ｍｍ
移動相Ａ：０．１％のギ酸アセトニトリル溶液
移動相Ｂ：０．１％のギ酸水溶液
【０１７３】
勾配プログラム：
【０１７４】
【表２】
2018048157.tif 000020
【０１７５】
質量分析計：Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｑ−ＴＯＦ６５３０
データ取得モード：１００〜１０００ｍ／ｚの質量範囲での完全走査
データ取得および分析ソフトウェア：ＭａｓｓＨｕｎｔｅｒ
【０１７６】
データ分析：
安定性アッセイ：安定性半減期（ｔ１／２）の値は、各時点におけるピーク面積を、初期（ｔ＝０）ピーク面積を基準とした残存パーセントに変換することにより求めた。
残存パーセント＝１００×（サンプルピーク面積）÷（ｔ＝０ピーク面積）
【０１７７】
残存パーセント値の自然対数を算出し、サンプル時間に対してプロットした（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌ）。この直線の傾きｋを、線形回帰によって求めた（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌ）。
【０１７８】
次いで、安定性半減期を、式ｔ１／２＝０．６９３÷ｋによって算出した。
【０１７９】
代替活性ベースの血漿安定性アッセイ：
次の変更を加えて、上述のカルシウムフラックスプロトコールに従った。ペプチドは、ここでも５％ラット血漿（Ｂｉｏｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ  ＃ＲＡＴＰＬＮＡＨＰ−Ｍ、ヘパリンＮａ処置したもの）と共にインキュベートした。３７℃の組織培養インキュベーターでインキュベートした後、ｔ０およびｔ２４時間の時点で読み取った。分単位のペプチド血漿半減期を、次の計算によって推定した。
１）ＬＮ（（ｔ０時点のＥＣ５０）／（ｔ２４時間時点のＥＣ５０））
２）上の値の傾きを算出
３）ｔ１／２＝０．６９３／（傾き２）
【０１８０】
（上述のとおりの）試験アッセイを使用すると、本発明のポリペプチドは、以下に示す表２および表３に従う有効性および安定性を示した。
【０１８１】
【表３Ａ】
2018048157.tif 000021
【表３Ｂ】
2018048157.tif 000022
【０１８２】
【表４】
2018048157.tif 000023
【０１８３】
本発明のポリペプチドは、アペリン−１３またはｐｙｒ−１−アペリン−１３と同様のＡＰＪ受容体効力を備え得る。一実施形態では、本発明のポリペプチドは、ＥＣ５０が１００ｎＭ未満である。別の実施形態では、本発明のポリペプチドは、ＥＣ５０が５０ｎＭ未満、好ましくは２５ｎＭ未満、より好ましくは１５ｎＭ未満である。さらに別の実施形態では、本発明のポリペプチドは、ＥＣ５０が１０ｎＭ未満である。
【０１８４】
本発明のポリペプチドは、アペリン−１３またはｐｙｒ−１−アペリン−１３に優る血漿安定性を有することもある。一実施形態では、血漿安定性の改善は、少なくとも２倍である。一実施形態では、本発明のポリペプチドは、血漿安定性が少なくとも３０分である。別の実施形態では、本発明のポリペプチドは、血漿安定性が少なくとも１０分、少なくとも４０分、より好ましくは少なくとも６０分である。
【０１８５】
本発明のポリペプチドは、他の１種または複数の治療薬と同時に投与してもよいし、またはその前もしくは後に投与してもよい。本発明のポリペプチドは、同じもしくは異なる投与経路で別々に投与してもよいし、または他の薬剤と同じ医薬組成物にして一緒に投与してもよい。
【０１８６】
一実施形態では、本発明は、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、塩のエステルと、少なくとも１種の他の治療薬とを含む、療法において同時、別個、または順次使用するための一体型調製物としての製品を提供する。一実施形態では、療法は、ＡＰＪ受容体の活性化に反応を示す疾患または状態の治療である。
【０１８７】
一体型調製物として提供される製品としては、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、塩のエステルと、他の治療薬（複数可）とを同じ医薬組成物中に一緒に、または式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩と、他の治療薬（複数可）とを別個の形態で、たとえば、キットの形で含む組成物が挙げられる。
【０１８８】
一実施形態では、本発明は、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩と、別の治療薬（複数可）とを含む医薬組成物を提供する。場合により、医薬組成物は、上述のとおりの薬学的に許容される賦形剤を含んでもよい。
【０１８９】
一実施形態では、本発明は、２種以上の別個の医薬組成物を含み、その少なくとも１種が、式Ｉ’およびＩ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩を含有する、キットを提供する。一実施形態では、キットは、容器、隔てられたボトル、分包ホイルなどの、前記組成物を別個に保持する手段を含む。このようなキットの一例は、錠剤、カプセル剤などの包装に一般に使用されるようなブリスターパックである。
【０１９０】
本発明のキットは、たとえば経口と非経口の、異なる剤形を投与する、別個の組成物を異なる投薬間隔で投与する、または別個の組成物を互いに合わせて漸増するのに使用することもできる。服薬遵守を支援するために、本発明のキットは通常、投与の説明書を含む。
【０１９１】
本発明の併用療法では、本発明の化合物と他の治療薬は、同じまたは異なる製造業者によって製造および／または製剤化されたものでよい。さらに、本発明の化合物と他の治療薬は、（ｉ）（たとえば、本発明の化合物と他の治療薬を含むキットの場合において）組合せ製品が医師に渡る前に、（ｉｉ）投与のすぐ前に医師自身によって（または医師の指導のもとで）、（ｉｉｉ）たとえば、本発明のポリペプチドと他の治療薬が順次投与される際、患者自身で、併用療法に一体化されるものでよい。
【０１９２】
したがって、本発明は、医薬が別の治療薬との投与用に調製される、ＡＰＪ受容体のアゴニズムに反応を示す疾患または状態を治療するための、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩の使用を提供する。本発明はまた、医薬が、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩と投与される、アペリン受容体のアゴニズムに反応を示す疾患または状態を治療するための別の治療薬の使用も提供する。
【０１９３】
本発明はまた、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩が、別の治療薬との投与用に調製される、ＡＰＪ受容体のアゴニズムに反応を示す疾患または状態の治療方法において使用するための、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたは薬学的に許容されるその塩を提供する。本発明はまた、他の治療薬が、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩との投与用に調製される、ＡＰＪ受容体のアゴニズムに反応を示す疾患または状態の治療方法において使用するための、別の治療薬を提供する。本発明はまた、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩を別の治療薬と投与する、ＡＰＪ受容体のアゴニズムに反応を示す疾患または状態の治療方法において使用するための、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチド、またはそのアミド、エステル、もしくは塩を提供する。本発明はまた、他の治療薬を式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩と投与する、ＡＰＪ受容体のアゴニズムに反応を示す疾患または状態の治療方法において使用するための、別の治療薬を提供する。
【０１９４】
本発明はまた、患者が、別の治療薬で（たとえば、２４時間以内に）予め治療を受けている、ＡＰＪ受容体のアゴニズムに反応を示す疾患または状態を治療するための、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩の使用を提供する。本発明はまた、患者が、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つのポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩で（たとえば、２４時間以内に）予め治療を受けている、ＡＰＪ受容体のアゴニズムに反応を示す疾患または状態を治療するための、別の治療薬の使用を提供する。
【０１９５】
一実施形態では、他の治療薬は、イノトロープ、βアドレナリン性受容体遮断薬、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害薬、アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、エンドセリン拮抗薬、レニン阻害薬、利尿薬、ＡｐｏＡ−Ｉ模倣薬、抗糖尿病薬、抗肥満薬（obesity-reducing agent）、アルドステロン受容体遮断薬、エンドセリン受容体遮断薬、アルドステロンシンターゼ阻害薬（ＡＳＩ）、ＣＥＴＰ阻害薬、抗凝血薬、リラキシン、ＢＮＰ（ネシリチド）、およびＮＥＰ阻害薬から選択される。
【０１９６】
第２の薬剤または治療と「組み合わせて」という用語は、本発明のポリペプチド（たとえば、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つに従うポリペプチドまたは本明細書に別な形で記載するポリペプチド）を第２の薬剤または治療と同時投与すること、最初に本発明の化合物を投与した後、第２の薬剤または治療を投与すること、および最初に第２の薬剤または治療を投与した後、本発明の化合物を投与することを包含する。
【０１９７】
用語「第２の薬剤」は、本明細書に記載の疾患または障害、たとえば、ＡＰＪ受容体の活性化に反応を示す障害または疾患、たとえば、急性代償不全心不全（ＡＤＨＦ）、慢性心不全、肺高血圧、心房細動、Ｂｒｕｇａｄａ症候群、心室性頻拍、アテローム性動脈硬化症、高血圧、再狭窄、虚血性心血管疾患、心筋症、心臓線維症、不整脈、水分貯留、糖尿病（妊娠糖尿病を含める）、肥満、末梢動脈疾患、脳血管発作、一過性脳虚血発作、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、熱傷（日焼けを含める）、および子癇前症の症状を治療、予防、または軽減することが当業界で知られている任意の薬剤を包含する。
【０１９８】
第２の薬剤の例としては、イノトロープ、βアドレナリン性受容体遮断薬、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害薬、アンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、エンドセリン拮抗薬、レニン阻害薬、利尿薬、ＡｐｏＡ−Ｉ模倣薬、抗糖尿病薬、抗肥満薬、アルドステロン受容体遮断薬、エンドセリン受容体遮断薬、アルドステロンシンターゼ阻害薬（ＡＳＩ）、ＣＥＴＰ阻害薬、抗凝血薬、リラキシン、ＢＮＰ（ネシリチド）、および／またはＮＥＰ阻害薬が挙げられる。
【０１９９】
本明細書で使用するイノトロープとしては、たとえば、ドブタミン、イソプロテレノール、ミルリノン、アミリノン（amirinone）、レボシメンダン、エピネフリン、ノルエピネフリン、イソプロテレノール、およびジゴキシンが挙げられる。
【０２００】
本明細書で使用するβアドレナリン性受容体遮断薬としては、たとえば、アセブトロール、アテノロール、ベタキソロール、ビソプロロール、カルテオロール、メトプロロール、ナドロール、プロプラノロール、ソタロール、およびチモロールが挙げられる。
【０２０１】
本明細書で使用する抗凝血薬としては、ダルテパリン、ダナパロイド、エノキサパリン、ヘパリン、チンザパリン、ワルファリンが挙げられる。
【０２０２】
用語「ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害薬」（β−ヒドロキシ−β−メチルグルタリル−補酵素Ａ還元酵素阻害薬とも呼ばれる）は、血中コレステロールを始めとする脂質レベルを下げるのに使用することのできる活性薬剤を包含する。例としては、アトルバスタチン、セリバスタチン、コンパクチン、ダルバスタチン、ジヒドロコンパクチン、フルインドスタチン（fluindostatin）、フルバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチン、メバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、リバスタチン（rivastatin）、シンバスタチン、およびベロスタチン（velostatin）、またはこれらの薬学的に許容される塩が挙げられる。
【０２０３】
用語「ＡＣＥ阻害薬」（アンジオテンシン変換酵素阻害薬とも呼ばれる）は、アンジオテンシンＩをアンジオテンシンＩＩにする酵素的分解を妨げる分子を包含する。このような化合物は、血圧の調節およびうっ血性心不全の治療に使用することができる。例としては、アラセプリル、ベナゼプリル、ベナゼプリラート、カプトプリル、セロナプリル（ceronapril）、シラザプリル、デラプリル、エナラプリル、エナプリラート（enaprilat）、ホシノプリル、イミダプリル、リシノプリル、モエキシプリル、モベルトプリル（moveltopril）、ペリンドプリル、キナプリル、ラミプリル、スピラプリル、テモカプリル、およびトランドラプリル、またはこれらの薬学的に許容される塩が挙げられる。
【０２０４】
用語「エンドセリン拮抗薬」は、ボセンタン（ＥＰ５２６７０８Ａを参照のこと）、テゾセンタン（ＷＯ９６／１９４５９を参照のこと）、またはこれらの薬学的に許容される塩を包含する。
【０２０５】
用語「レニン阻害薬」は、ジテキレン（ditekiren）（化学名：［１Ｓ−［１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊（１Ｒ＊，２Ｒ＊）］］−１−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−Ｌ−プロリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−５−メチル−１−（２−メチルプロピル）−４−［［［２−メチル−１−［［（２−ピリジニルメチル）アミノ］カルボニル］ブチル］アミノ］カルボニル］ヘキシル］−Ｎ−α−メチル−Ｌ−ヒスチジンアミド）；テルラキレン（化学名：［Ｒ−（Ｒ＊，Ｓ＊）］−Ｎ−（４−モルホリニルカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−［１−（シクロヘキシルメチル）−２−ヒドロキシ−３−（１−メチルエトキシ）−３−オキソプロピル］−Ｓ−メチル−Ｌ−システイネアミド）；アリスキレン（化学名：（２Ｓ，４Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−５−アミノ−Ｎ−（２−カルバモイル−２，２−ジメチルエチル）−４−ヒドロキシ−７−｛［４−メトキシ−３−（３−メトキシプロポキシ）フェニル］メチル｝−８−メチル−２−（プロパン−２−イル）ノナンアミド）およびザンキレン（化学名：［１Ｓ−［１Ｒ＊［Ｒ＊（Ｒ＊）］，２Ｓ＊，３Ｒ＊］］−Ｎ−［１−（シクロヘキシルメチル）−２，３−ジヒドロキシ−５−メチルヘキシル］−α−［［２−［［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］メチル］−１−オキソ−３−フェニルプロピル］−アミノ］−４−チアゾールプロパンアミド）、もしくはこれらの塩酸塩、またはＳｐｅｅｄｅｌが開発したＳＰＰ６３０、ＳＰＰ６３５、およびＳＰＰ８００、または式（Ａ）および（Ｂ）：
【０２０６】
【化１６】
2018048157.tif 000024
のＲＯ６６−１１３２およびＲＯ６６−１１６８、または
これらの薬学的に許容される塩を包含する。
【０２０７】
用語「アリスキレン」は、詳細に定義しない場合、遊離塩基とその塩の両方、特に薬学的に許容されるその塩、最も好ましくはその半フマル酸塩であると理解される。
【０２０８】
用語「カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）」は、ジヒドロピリジン（ＤＨＰ）および非ＤＨＰ（たとえば、ジルチアゼム型およびベラパミル型ＣＣＢ）を包含する。例としては、アムロジピン、ベプリジル、ジルチアゼム、フェロジピン、リオシジン（ryosidine）、イスラジピン、ラシジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニグルジピン、ニルジピン（niludipine）、ニモジピン、ニソルジピン、ニトレンジピン、ベラパミル、およびニバルジピン（nivaldipine）が挙げられ、フルナリジン、プレニラミン、ジルチアゼム、フェンジリン、ガロパミル、ミベフラジル、アニパミル（anipamil）、チアパミル、およびベラパミル、またはこれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される代表的非ＤＨＰであることが好ましい。ＣＣＢは、降圧薬、抗狭心症薬、または抗不整脈薬として使用することができる。
【０２０９】
用語「利尿薬」は、チアジド誘導体（たとえば、クロロチアジド、ヒドロクロロチアジド、メチルクロチアジド（methylclothiazide）、およびクロロタリドン（chlorothalidon））を包含する。
【０２１０】
用語「ＡｐｏＡ−Ｉ模倣薬」は、Ｄ４Ｆペプチド（たとえば、式Ｄ−Ｗ−Ｆ−Ｋ−Ａ−Ｆ−Ｙ−Ｄ−Ｋ−Ｖ−Ａ−Ｅ−Ｋ−Ｆ−Ｋ−Ｅ−Ａ−Ｆ）（配列番号７）を包含する。
【０２１１】
アンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬または薬学的に許容されるその塩は、アンジオテンシンＩＩ受容体のＡＴ１受容体サブタイプに結合するが、結果として受容体を活性化しない活性成分であると理解される。ＡＴ１受容体が抑制される結果として、こうした拮抗薬は、たとえば、降圧薬として、またはうっ血性心不全の治療に用いることができる。
【０２１２】
ＡＴ１受容体拮抗薬のクラスは、構造上の特色が異なっている化合物を含み、実用上好ましいのは、非ペプチド性化合物である。たとえば、バルサルタン、ロサルタン、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、サプリサルタン（saprisartan）、タソサルタン、テルミサルタン、次式
【０２１３】
【化１７】
2018048157.tif 000025
のＥ−１４７７という呼称の化合物、次式
【０２１４】
【化１８】
2018048157.tif 000026
のＳＣ−５２４５８という呼称の化合物、および次式
【０２１５】
【化１９】
2018048157.tif 000027
のＺＤ−８７３１という呼称の化合物、または、各場合において、薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される化合物を挙げることができる。
【０２１６】
好ましいＡＴ１受容体拮抗薬は、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、テルミサルタン、バルサルタンである。他にも好ましいのは、市販されている薬剤であり、最も好ましいのは、バルサルタンまたは薬学的に許容されるその塩である。
【０２１７】
用語「抗糖尿病薬」は、膵臓β細胞からのインスリンの分泌を促進するインスリン分泌増強剤を包含する。例としては、ビグアナイド誘導体（たとえば、メトホルミン）、スルホニル尿素（ＳＵ）（たとえば、トルブタミド、クロルプロパミド、トラザミド、アセトヘキサミド、４−クロロ−Ｎ−［（１−ピロリジニルアミノ）カルボニル］−ベンゼンスルホンアミド（グリコピルアミド（glycopyramide））、グリベンクラミド（グリブリド）、グリクラジド、１−ブチル−３−メタニリル尿素、カルブタミド（carbutamide）、グリボヌリド（glibonuride）、グリピジド、グリキドン、グリソキセピド、グリブチアゾール（glybuthiazole）、グリブゾール（glibuzole）、グリヘキサミド（glyhexamide）、グリミジン、グリピンアミド（glypinamide）、フェンブタニド（phenbutanide）、およびトリルシクラミド（tolylcyclamide））、またはこれらの薬学的に許容される塩が挙げられる。別の例としては、フェニルアラニン誘導体（たとえば、式
【０２１８】
【化２０】
2018048157.tif 000028
のナテグリニド［Ｎ−（ｔｒａｎｓ−４−イソプロピルシクロヘキシルカルボニル）−Ｄ−フェニルアラニン］（ＥＰ１９６２２２およびＥＰ５２６１７１を参照のこと）、レパグリニド［（Ｓ）−２−エトキシ−４−｛２−［［３−メチル−１−［２−（１−ピペリジニル）フェニル］ブチル］アミノ］−２−オキソエチル｝安息香酸］（ＥＰ５８９８７４、ＥＰ１４７８５０Ａ２、詳細には、６１頁の実施例１１、およびＥＰ２０７３３１Ａ１を参照のこと）、カルシウム（２Ｓ）−２−ベンジル−３−（ｃｉｓ−ヘキサヒドロ−２−イソインドリンリカルボニル）−プロピオネート二水和物（たとえば、ミチグリニド（ＥＰ５０７５３４を参照のこと））、およびグリメピリド（ＥＰ３１０５８を参照のこと）が挙げられる。
【０２１９】
本発明のペプチドおよびポリペプチドと組み合わせて使用することのできる第２の薬剤の別の例として、ＤＰＰ−ＩＶ阻害薬、ＧＬＰ−１およびＧＬＰ−１アゴニストが挙げられる。
【０２２０】
ＤＰＰ−ＩＶは、ＧＬＰ−１の不活性化を担う。より詳細には、ＤＰＰ−ＩＶは、ＧＬＰ−１受容体アンタゴニストを発生させ、それによってＧＬＰ−１に対する生理的反応が短縮される。ＧＬＰ−１は、膵臓のインスリン分泌の主要な刺激物質であり、グルコース処理に直接有益な影響を及ぼす。
【０２２１】
ＤＰＰ−ＩＶ（ジペプチジルペプチダーゼＩＶ）阻害薬は、ペプチド性でも、または好ましくは、非ペプチド性でもよい。ＤＰＰ−ＩＶ阻害薬は、各場合につき、たとえば、ＷＯ９８／１９９９８、ＤＥ１９６１６４８６Ａ１、ＷＯ００／３４２４１、およびＷＯ９５／１５３０９において、各場合につき、特に、化合物請求項および作業実施例の最終生成物において全般かつ詳細に開示されており、最終生成物、医薬調製物、および特許請求の範囲の主題は、これら刊行物を参照することにより、本明細書に援用される。好ましいのは、それぞれ、ＷＯ９８／１９９９８の実施例３およびＷＯ００／３４２４１の実施例１において詳細に開示されている化合物である。
【０２２２】
ＧＬＰ−１（グルカゴン様ペプチド１）は、たとえば、W.E. SchmidtらによるDiabetologia, 28, 1985, 704-707およびＵＳ５，７０５，４８３に記載されているインスリン分泌性タンパク質である。
【０２２３】
用語「ＧＬＰ−１アゴニスト」は、特にＵＳ５，１２０，７１２、ＵＳ５，１１８６６６、ＵＳ５，５１２，５４９、ＷＯ９１／１１４５７、およびC. OrskovらによるJ. Biol. Chem. 264 (1989) 12826において開示されているＧＬＰ−１（７−３６）ＮＨ２の変異体および類似体を包含する。別の例としては、化合物中ＧＬＰ−１（７−３６）ＮＨ２分子の第３７位においてＡｒｇ３６のカルボキシ末端側アミド官能基がＧｌｙで置換されているＧＬＰ−１（７−３７）、ならびにＧＬＮ９−ＧＬＰ−１（７−３７）、Ｄ−ＧＬＮ９−ＧＬＰ−１（７−３７）、アセチルＬＹＳ９−ＧＬＰ−１（７−３７）、ＬＹＳ１８−ＧＬＰ−１（７−３７）、特にＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨ、ＶＡＬ８−ＧＬＰ−１（７−３７）、ＧＬＹ８−ＧＬＰ−１（７−３７）、ＴＨＲ８−ＧＬＰ−１（７−３７）、ＭＥＴ８−ＧＬＰ−１（７−３７）、および４−イミダゾプロピオニル−ＧＬＰ−１を含めたその変異体および類似体が挙げられる。GreigらによるDiabetologia 1999, 42, 45-50に記載されているＧＬＰアゴニスト類似体エキセンディン−４も、特に好まれる。
【０２２４】
定義「抗糖尿病薬」には、損なわれたインスリン受容体機能を回復させて、インスリン抵抗性を減らし、その結果としてインスリン感受性を増強するインスリン感受性増強剤も含まれる。例としては、血糖降下性チアゾリジンジオン誘導体（たとえば、グリタゾン、（Ｓ）−（（３，４−ジヒドロ−２−（フェニル−メチル）−２Ｈ−１−ベンゾピラン−６−イル）メチル−チアゾリジン−２，４−ジオン（エングリタゾン）、５−｛［４−（３−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）−１−オキソプロピル）−フェニル］−メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ダルグリタゾン）、５−｛［４−（１−メチル−シクロヘキシル）メトキシ）−フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（シグリタゾン）、５−｛［４−（２−（１−インドリル）エトキシ）フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＤＲＦ２１８９）、５−｛４−［２−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）−エトキシ）］ベンジル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＢＭ−１３．１２４６）、５−（２−ナフチルスルホニル）−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＡＹ−３１６３７）、ビス｛４−［（２，４−ジオキソ−５−チアゾリジニル）メチル］フェニル｝メタン（ＹＭ２６８）、５−｛４−［２−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）−２−ヒドロキシエトキシ］ベンジル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＡＤ−５０７５）、５−［４−（１−フェニル−１−シクロプロパンカルボニルアミノ）−ベンジル］−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＤＮ−１０８）５−｛［４−（２−（２，３−ジヒドロインドール−１−イル）エトキシ）フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン、５−［３−（４−クロロ−フェニル］）−２−プロピニル］−５−フェニルスルホニル）チアゾリジン−２，４−ジオン、５−［３−（４−クロロフェニル］）−２−プロピニル］−５−（４−フルオロフェニル−スルホニル）チアゾリジン−２，４−ジオン、５−｛［４−（２−（メチル−２−ピリジニル−アミノ）−エトキシ）フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ロシグリタゾン）、５−｛［４−（２−（５−エチル−２−ピリジル）エトキシ）フェニル］−メチル｝チアゾリジン−２，４−ジオン（ピオグリタゾン）、５−｛［４−（（３，４−ジヒドロ−６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチル−２Ｈ−１−ベンゾピラン−２−イル）メトキシ）−フェニル］−メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（トログリタゾン）、５−［６−（２−フルオロ−ベンジルオキシ）ナフタレン−２−イルメチル］−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＭＣＣ５５５）、５−｛［２−（２−ナフチル）−ベンゾオキサゾール−５−イル］−メチル｝チアゾリジン−２，４−ジオン（Ｔ−１７４）および５−（２，４−ジオキソチアゾリジン−５−イルメチル）−２−メトキシ−Ｎ−（４−トリフルオロメチル−ベンジル）ベンズアミド（ＫＲＰ２９７））が挙げられる。
【０２２５】
これ以外の抗糖尿病薬としては、タンパク質チロシンホスファターゼ（ＰＴＰアーゼ）の阻害薬、抗糖尿病性非小分子模倣化合物、グルタミン−フルクトース−６−リン酸アミドトランスフェラーゼ（ＧＦＡＴ）の阻害薬のような、インスリンシグナル伝達経路モジュレーター；グルコース−６−ホスファターゼ（Ｇ６Ｐアーゼ）の阻害薬、フルクトース−１，６−ビスホスファターゼ（Ｆ−１，６−Ｂｐアーゼ）の阻害薬、グリコーゲンホスホリラーゼ（ＧＰ）の阻害薬、グルカゴン受容体拮抗薬、ホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ（ＰＥＰＣＫ）の阻害薬のような、肝臓グルコース産生の調節不全に影響を及ぼす化合物；ピルビン酸脱水素酵素キナーゼ（ＰＤＨＫ）阻害薬；胃内容排出の阻害薬；インスリン；ＧＳＫ−３の阻害薬；レチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）アゴニスト；β−３ＡＲのアゴニスト；脱共役タンパク質（ＵＣＰ）のアゴニスト；非グリタゾン型ＰＰＡＲγアゴニスト；ＰＰＡＲα／ＰＰＡＲγ二重アゴニスト；抗糖尿病性含バナジウム化合物；グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）やＧＬＰ−１アゴニストのようなインクレチンホルモン；β細胞イミダゾリン受容体アンタゴニスト；ミグリトール；α２−アドレナリンアンタゴニスト；ならびにこれらの薬学的に許容される塩が挙げられる。
【０２２６】
一実施形態では、本発明は、治療有効量の式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つの定義に従うポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩と、アセブトロール、アテノロール、ベタキソロール、ビソプロロール、メトプロロール、ナドロール、プロプラノロール、ソタロール、チモロールなどのβ−アドレナリン受容体遮断薬；ＡＴ１遮断薬などのアンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト；ＤＰＰＩＶ阻害薬（たとえば、ビルダグリプチン）やＧＬＰ１ペプチドアゴニストなどの抗糖尿病薬から選択される１種または複数の治療活性薬剤とを含む組合せ、詳細には医薬合剤を提供する。
【０２２７】
用語「抗肥満薬」は、リパーゼ阻害薬（たとえば、オーリスタット）および食欲抑制薬（たとえば、シブトラミンおよびフェンテルミン）を包含する。
【０２２８】
アルドステロンシンターゼ阻害薬または薬学的に許容されるその塩は、アルドステロンの産生を抑制する特性を有する活性成分であると理解される。アルドステロンシンターゼ（ＣＹＰ１１Ｂ２）は、副腎皮質におけるアルドステロン産生の最後のステップ、すなわち、１１−デオキシコルチコステロンのアルドステロンへの変換を触媒する、ミトコンドリアのシトクロムＰ４５０酵素である。いわゆるアルドステロンシンターゼ阻害薬によるアルドステロン産生の抑制は、低カリウム血症、高血圧、うっ血性心不全、心房細動、または腎不全の治療に奏効する変異形態であることが知られている。このようなアルドステロンシンターゼ抑制活性は、当業者によって、標準のアッセイ（たとえば、ＵＳ２００７／００４９６１６）に従い、容易に見極められる。
【０２２９】
アルドステロンシンターゼ阻害薬のクラスは、ステロイド性および非ステロイド性両方のアルドステロンシンターゼ阻害薬を含み、後者が最も好ましい。
【０２３０】
市販品として入手可能なアルドステロンシンターゼ阻害薬または保健当局によって承認されているアルドステロンシンターゼ阻害薬が好ましい。
【０２３１】
アルドステロンシンターゼ阻害薬のクラスは、構造上の特色が異なっている化合物を含む。非ステロイド性アルドステロンシンターゼ阻害薬の例は、式
【０２３２】
【化２１】
2018048157.tif 000029
のファドロゾールの塩酸塩（米国特許４６１７３０７および４８８９８６１）の（＋）鏡像異性体、または適切な場合、薬学的に許容されるその塩である。
【０２３３】
前記組合せにおいて有用なアルドステロンシンターゼ阻害薬は、たとえば、ＵＳ２００７／００４９６１６において、特に、化合物請求項および作業実施例の最終生成物において全般かつ詳細に開示されている化合物および類似体であり、最終生成物、医薬調製物、および特許請求の範囲の主題は、この刊行物を参照することにより、本明細書に援用される。本発明における使用に適する好ましいアルドステロンシンターゼ阻害薬としては、限定はせず、４−（６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−５−イル）−３−メチルベンゾニトリル；５−（２−クロロ−４−シアノフェニル）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−５−カルボン酸（４−メトキシベンジル）メチルアミド；４’−フルオロ−６−（６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］アゼピン−５−イル）ビフェニル−３−カルボニトリル；５−（４−シアノ−２−メトキシフェニル）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−５−カルボン酸ブチルエステル；４−（６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−５−イル）−２−メトキシベンゾニトリル；５−（２−クロロ−４−シアノフェニル）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−５−カルボン酸４−フルオロベンジルエステル；５−（４−シアノ−２−トリフルオロメトキシフェニル）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−５−カルボン酸メチルエステル；５−（４−シアノ−２−メトキシフェニル）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−５−カルボン酸２−イソプロポキシエチルエステル；４−（６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−５−イル）−２−メチルベンゾニトリル；４−（６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−５−イル）−３−フルオロベンゾニトリル；４−（６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−５−イル）−２−メトキシベンゾニトリル；３−フルオロ−４−（７−メチレン−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−５−イル）ベンゾニトリル；ｃｉｓ−３−フルオロ−４−［７−（４−フルオロ−ベンジル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−５−イル］ベンゾニトリル；４’−フルオロ−６−（９−メチル−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］アゼピン−５−イル）ビフェニル−３−カルボニトリル；４’−フルオロ−６−（９−メチル−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］アゼピン−５−イル）ビフェニル−３−カルボニトリル、または各場合において、その（Ｒ）もしくは（Ｓ）鏡像異性体、または適切な場合、薬学的に許容されるその塩が挙げられる。
【０２３４】
用語アルドステロンシンターゼ阻害薬は、ＷＯ２００８／０７６８６０、ＷＯ２００８／０７６３３６、ＷＯ２００８／０７６８６２、ＷＯ２００８／０２７２８４、ＷＯ２００４／０４６１４５、ＷＯ２００４／０１４９１４、ＷＯ２００１／０７６５７４で開示されている化合物および類似体も包含する。
【０２３５】
さらに、アルドステロンシンターゼ阻害薬は、米国特許出願ＵＳ２００７／０２２５２３２、ＵＳ２００７／０２０８０３５、ＵＳ２００８／０３１８９７８、ＵＳ２００８／００７６７９４、ＵＳ２００９／００１２０６８、ＵＳ２００９００４８２４１、およびＰＣＴ出願ＷＯ２００６／００５７２６、ＷＯ２００６／１２８８５３、ＷＯ２００６１２８８５１、ＷＯ２００６／１２８８５２、ＷＯ２００７０６５９４２、ＷＯ２００７／１１６０９９、ＷＯ２００７／１１６９０８、ＷＯ２００８／１１９７４４、および欧州特許出願ＥＰ１８８６６９５において開示されている化合物および類似体も包含する。本発明における使用に適する好ましいアルドステロンシンターゼ阻害薬として、限定はせず、Ｓｐｅｅｄｅｌが開発した８−（４−フルオロフェニル）−５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［５，１−ｃ１［１，４１オキサジン；４−（５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［５，１−ｃ］［１，４］オキサジン−８−イル）−２−フルオロベンゾニトリル；４−（５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［５，１−ｃ］［１，４］オキサジン−８−イル）−２，６−ジフルオロベンゾニトリル；４−（５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［５，１−ｃ］［１，４］オキサジン−８−イル）−２−メトキシベンゾニトリル；３−（５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［５，１−ｃ］［１，４］オキサジン−８−イル）ベンゾニトリル；４−（５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［５，１−ｃ］［１，４］オキサジン−８−イル）フタロニトリル；４−（８−（４−シアノフェニル）−５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［５，１−ｃ］［１，４］オキサジン−８−イル）ベンゾニトリル；４−（５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［５，１−ｃ］［１，４］オキサジン−８−イル）ベンゾニトリル；４−（５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［５，１−ｃ］［１，４］オキサジン−８−イル）ナフタレン−１−カルボニトリル；８−［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル１−５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［５，１−ｃ］［１，４］オキサジン、または各場合において、その（Ｒ）もしくは（Ｓ）鏡像異性体、または適切な場合、薬学的に許容されるその塩が挙げられる。
【０２３６】
前記組合せにおいて有用なアルドステロンシンターゼ阻害薬は、たとえば、ＷＯ２００９／１５６４６２およびＷＯ２０１０／１３０７９６において、特に、化合物請求項および作業実施例の最終生成物において全般かつ詳細に開示されている化合物および類似体、最終生成物、医薬調製物、および特許請求の範囲の主題である。本発明における組合せに適する好ましいアルドステロンシンターゼ阻害薬としては、３−（６−フルオロ−３−メチル−２−ピリジン−３−イル−１Ｈ−インドール−１−イルメチル）−ベンゾニトリルヒドロクロリド、１−（４−メタンスルホニル−ベンジル）−３−メチル−２−ピリジン−３−イル−１Ｈ−インドール、２−（５−ベンジルオキシ−ピリジン−３−イル）−６−クロロ−１−メチル−１Ｈ−インドール、５−（３−シアノ−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−ニコチン酸エチルエステル、Ｎ−［５−（６−クロロ−３−シアノ−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−ピリジン−３−イルメチル］−エタンスルホンアミド、ピロリジン−１−スルホン酸  ５−（６−クロロ−３−シアノ−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−ピリジン−３−イルエステル、Ｎ−メチル−Ｎ−［５−（１−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−ピリジン−３−イルメチル］−メタンスルホンアミド、６−クロロ−１−メチル−２−｛５−［（２−ピロリジン−１−イル−エチルアミノ）−メチル］−ピリジン−３−イル｝−１Ｈ−インドール−３−カルボニトリル、６−クロロ−２−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−ピリジン−３−イル］−１−メチル−１Ｈ−インドール−３−カルボニトリル、６−クロロ−１−メチル−２−｛５−［（１−メチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−メチル］−ピリジン−３−イル｝−１Ｈ−インドール−３−カルボニトリル、モルホリン−４−カルボン酸［５−（６−クロロ−３−シアノ−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−ピリジン−３−イルメチル］−アミド、Ｎ−［５−（６−クロロ−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−ピリジン−３−イルメチル］−エタンスルホンアミド、Ｃ，Ｃ，Ｃ−トリフルオロ−Ｎ−［５−（１−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−ピリジン−３−イルメチル］−メタンスルホンアミド、Ｎ−［５−（３−クロロ−４−シアノ−フェニル）−ピリジン−３−イル］−４−トリフルオロメチル−ベンゼンスルホンアミド、Ｎ−［５−（３−クロロ−４−シアノ−フェニル）−ピリジン−３−イル］−１−フェニル−メタンスルホンアミド、Ｎ−（５−（３−クロロ−４−シアノフェニル）ピリジン−３−イル）ブタン−１−スルホンアミド、Ｎ−（１−（５−（４−シアノ−３−メトキシフェニル）ピリジン−３−イル）エチル）エタンスルホンアミド、Ｎ−（（５−（３−クロロ−４−シアノフェニル）ピリジン−３−イル）（シクロプロピル）メチル）エタンスルホンアミド、Ｎ−（シクロプロピル（５−（１Ｈ−インドール−５−イル）ピリジン−３−イル）メチル）エタンスルホンアミド、Ｎ−（シクロプロピル（５−ナフタレン−１−イル−ピリジン−３−イル）メチル）エタンスルホンアミド、エタンスルホン酸［５−（６−���ロロ−１−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イル）−ピリジン−３−イルメチル］−アミドおよびエタンスルホン酸｛［５−（３−クロロ−４−シアノ−フェニル）−ピリジン−３−イル］−シクロプロピル−メチル｝−エチル−アミドが挙げられる。
【０２３７】
用語「エンドセリン受容体遮断薬」は、ボセンタンおよびアンブリセンタンを包含する。
【０２３８】
用語「ＣＥＴＰ阻害薬」とは、コレステリルエステル転送タンパク質（ＣＥＴＰ）を媒介とする、種々のコレステリルエステルおよびトリグリセリドのＨＤＬからＬＤＬおよびＶＬＤＬへの輸送を抑制する化合物を指す。このようなＣＥＴＰ抑制活性は、当業者によって、標準のアッセイ（たとえば、米国特許第６，１４０，３４３号）に従い、容易に見極められる。例として、米国特許第６，１４０，３４３号および米国特許第６，１９７，７８６号で開示されている化合物（たとえば、［２Ｒ，４Ｓ］４−［（３，５−ビス−トリフルオロメチル−ベンジル）−メトキシカルボニル−アミノ］−２−エチル−６−トリフルオロメチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−キノリン−１−カルボン酸エチルエステル（トルセトラピブ）、米国特許第６，７２３，７５２号で開示されている化合物（たとえば、（２Ｒ）−３−｛［３−（４−クロロ−３−エチル−フェノキシ）−フェニル］−［［３−（１，１，２，２−テトラフルオロ−エトキシ）−フェニル］−メチル］−アミノ｝−１，１，１−トリフルオロ−２−プロパノール）、米国特許出願第１０／８０７，８３８号で開示されている化合物、米国特許第５，５１２，５４８号で開示されているポリペプチド誘導体、それぞれJ. Antibiot., 49(8): 815- 816 (1996)およびBioorg. Med. Chem. Lett.; 6:1951-1954 (1996)で開示されているロセノノラクトン誘導体およびコレステリルエステルの含リン酸類似体が挙げられる。さらに、ＣＥＴＰ阻害薬として、ＷＯ２０００／０１７１６５、ＷＯ２００５／０９５４０９、ＷＯ２００５／０９７８０６、ＷＯ２００７／１２８５６８、ＷＯ２００８／００９４３５、ＷＯ２００９／０５９９４３、およびＷＯ２００９／０７１５０９で開示されているものも挙げられる。
【０２３９】
用語「ＮＥＰ阻害薬」とは、中性エンドペプチダーゼ（ＮＥＰ）ＥＣ３．４．２４．１１を抑制する化合物を指す。例として、カンドキサトリル、カンドキサトリラート、デキセカドトリル（Dexecadotril）、エカドトリル（Ecadotril）、ラセカドトリル、サンパトリラート（Sampatrilat）、ファシドトリル、オマパトリラート、ゲモパトリラート（Gemopatrilat）、ダグルトリル（Daglutril）、ＳＣＨ−４２４９５、ＳＣＨ−３２６１５、ＵＫ−４４７８４１、ＡＶＥ−０８４８、ＰＬ−３７、および（２Ｒ，４Ｓ）−５−ビフェニル−４−イル−４−（３−カルボキシ−プロピオニルアミノ）−２−メチル−ペンタン酸エチルエステル、またはこれらの薬学的に許容される塩が挙げられる。ＮＥＰ阻害薬には、米国特許第ＵＳ５，１５５，１００号で開示されているようなホスホノ／ビアリール置換ジペプチド誘導体も含まれる。ＮＥＰ阻害薬には、ＰＣＴ出願第ＷＯ２００３／１０４２００号で開示されているようなＮ−メルカプトアシルフェニルアラニン誘導体も含まれる。ＮＥＰ阻害薬には、ＰＣＴ出願第ＷＯ２００８／１３３８９６、ＷＯ２００９／０３５５４３、またはＷＯ２００９／１３４７４１で開示されているような二重作用性降圧薬も含まれる。他の例としては、ＵＳ出願第１２／７８８，７９４号、第１２／７８８，７６６号、および第１２／９４７，０２９号で開示されている化合物が挙げられる。ＮＥＰ阻害薬として、ＷＯ２０１０／１３６４７４、ＷＯ２０１０／１３６４９３、ＷＯ２０１１／０６１２７１、ならびにＵＳ仮出願第６１／４１４１７１号および第６１／４１４１６３号で開示されている化合物も挙げられる。
【０２４０】
一実施形態では、本発明は、対象においてＡＰＪ受容体を活性化する方法であって、治療有効量の、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つの定義に従うポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩を対象に投与することを含む方法を提供する。
【０２４１】
一実施形態では、本発明は、対象において、ＡＰＪ受容体の活性化に反応を示す障害または疾患を治療する方法であって、治療有効量の、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つの定義に従うポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩を対象に投与することを含む方法を提供する。
【０２４２】
一実施形態では、本発明は、対象において、ＡＰＪ受容体の活性化（アゴニズム）に反応を示す障害または疾患を治療する方法であって、障害または疾患が、急性代償不全心不全（ＡＤＨＦ）、慢性心不全、肺高血圧、心房細動、Ｂｒｕｇａｄａ症候群、心室性頻拍、アテローム性動脈硬化症、高血圧、再狭窄、虚血性心血管疾患、心筋症、心臓線維症、不整脈、水分貯留、糖尿病（妊娠糖尿病を含める）、肥満、末梢動脈疾患、脳血管発作、一過性脳虚血発作、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、熱傷（日焼けを含める）、および子癇前症から選択される方法を提供する。
【０２４３】
一実施形態では、本発明は、医薬として使用するための、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つの定義に従うポリペプチドを提供する。
【０２４４】
一実施形態では、本発明は、ＡＰＪ受容体の活性化に反応を示す障害または疾患を治療するための医薬の製造における、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つの定義に従うポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩の使用を提供する。別の実施形態では、本発明は、ＡＰＪ受容体の活性化に反応を示す障害または疾患を治療するための医薬の製造における、式Ｉ〜ＩＸのいずれか１つの定義に従うポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩の使用であって、前記障害または疾患が、詳細には、急性代償不全心不全（ＡＤＨＦ）、慢性心不全、肺高血圧、心房細動、Ｂｒｕｇａｄａ症候群、心室性頻拍、アテローム性動脈硬化症、高血圧、再狭窄、虚血性心血管疾患、心筋症、心臓線維症、不整脈、水分貯留、糖尿病（妊娠糖尿病を含める）、肥満、末梢動脈疾患、脳血管発作、一過性脳虚血発作、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、熱傷（日焼けを含める）、および子癇前症から選択される、使用を提供する。
【実施例】
【０２４５】
本発明の例示：ペプチドおよびポリペプチド合成
【０２４６】
【表５Ａ】
2018048157.tif 000030
【表５Ｂ】
2018048157.tif 000031
【０２４７】
ペプチドは、標準の固相Ｆｍｏｃ化学によって合成した。ペプチドは、Ｐｒｅｌｕｄｅ（商標）ペプチド合成装置（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．、米国トゥーソン）において組み立てた。Ｃ末端上に遊離カルボン酸を有するペプチドは、２−クロロトリチルクロリド−ＰＳ樹脂（ＡＢＣＲ、ドイツ国カールスルーエ）から合成した。Ｃ末端上に非置換カルボキサミドを有するペプチドは、Ｆｍｏｃ保護されたＲｉｎｋ−Ａｍｉｄｅ−ＡＭ−ＰＳ樹脂（Ｍｅｒｃｋ、ドイツ国ダルムシュタット）から合成した。Ｃ末端上にＮで一置換されているカルボキサミドを有するペプチドは、アミンが導入されたＢＡＬ−ＡＭ−ＰＳ樹脂（ＥＭＣ  Ｍｉｃｒｏｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎｓ、ドイツ国チュービンゲン）から合成した。
【０２４８】
ペプチドは、分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。次のカラムを使用した。
−  Ｗａｔｅｒｓ  ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム、５μｍ、３０×１００ｍｍ、部品番号１８６００２５７２（カラム１本または連続したカラム２本）
−  Ｗａｔｅｒｓ  ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム、５μｍ、３０×１５０ｍｍ、部品番号１８６００２７９７
−  Ｗａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｐｒｅｐ  ＯＢＤ  Ｔ３カラム、５μｍ、３０×１５０ｍｍ、部品番号１８６００３７０３
−  Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ８  ＯＢＤカラム、５μｍ、３０×１５０ｍｍ、部品番号１８６００３０８３
−  Ｍａｃｈｅｒｙ−Ｎａｇｅｌ  Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ（登録商標）１００−５  Ｃ１８、５μｍ、２５０×４０ｍｍ、部品番号７１５３４０．４００
【０２４９】
移動相は、溶離液Ａ（０．１％ＴＦＡ  Ｈ２Ｏ水溶液）と溶離液Ｂ（ＡＣＮ）からなるものとした。勾配は、分離の問題の特定の要件に基づき設計した。純粋な生成物をＡＣＮ／Ｈ２Ｏから凍結乾燥した。
【０２５０】
生成物は、λ＝２１４ｎｍでのＵＶ検出を使用する分析ＨＰＬＣ（カラム：Ｂｉｓｃｈｏｆｆ  ＵＨＣ−６４０、５３×４．０ｍｍ、ＰｒｏｎｔｏＳｉｌ  １２０−３−Ｃ１８−Ｈ、３μｍ、部品番号０６０４Ｆ１８５ＰＳ０３０）によって分析した。移動相は、溶離液Ａ（０．０７％ＴＦＡ  Ｈ２Ｏ溶液）と溶離液Ｂ（０．１％ＴＦＡ  ＡＣＮ溶液）からなるものとした。生成物の追加の特性決定は、エレクトロスプレーイオン化を使用するＵＰＬＣ−ＭＳ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ（登録商標）ＢＥＨ  Ｃ１８、１．７μｍ、２．１×５０ｍｍ、部品番号１８６００２３５０）によって行った。
【０２５１】
表４において例示するペプチドは、以下に記載する一般手順を使用して合成した。非置換のＮ末端またはＣ末端は、それぞれ、細いイタリック体のＨ−または−ＯＨで示す。
【０２５２】
【表６Ａ】
2018048157.tif 000032
【表６Ｂ】
2018048157.tif 000033
【０２５３】
分析方法
１）ＨＰＬＣ−分析方法Ａ
−  カラム：ＰｒｏｎｔｏＳｉｌ  １２０−３−Ｃ１８−Ｈ、３μｍを備えたＢｉｓｃｈｏｆｆ  ＵＨＣ−６４０（５３×４．０ｍｍ）、部品番号：０６０４Ｆ１８５ＰＳ０３０
−  溶離液Ａ：０．０７％ＴＦＡ水溶液／溶離液Ｂ：０．１％ＴＦＡ  ＡＣＮ溶液
−  流量：１．５ｍｌ／分
−  温度：４０℃
−  勾配：
【０２５４】
【表７】
2018048157.tif 000034
【０２５５】
２ａ）ＵＰＬＣ−ＭＳ−分析方法Ｂ
−  Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ（登録商標）ＢＥＨ  Ｃ１８、１．７μｍ、２．１×５０ｍｍ、部品番号：１８６００２３５０
−  溶離液Ａ：０．１％ＦＡ水溶液、溶離液Ｂ：０．１％ＦＡ  ＡＣＮ溶液
−  流量：０．７ｍｌ／分
−  温度：４０℃
−  勾配：
【０２５６】
【表８】
2018048157.tif 000035
【０２５７】
２ｂ）ＵＰＬＣ−ＭＳ−分析方法Ｃ
−  Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ（登録商標）ＢＥＨ  Ｃ１８、１．７μｍ、２．１×５０ｍｍ、部品番号：１８６００２３５０
−  溶離液Ａ：０．１％ＦＡ水溶液、溶離液Ｂ：０．１％  ＦＡ  ＡＣＮ溶液
−  流量：０．７ｍｌ／分
−  温度：４０℃
−  勾配：
【０２５８】
【表９】
2018048157.tif 000036
【０２５９】
実施例１〜６３のペプチドの分析データは、表５にまとめて示すが、上述の分析方法を使用して生成したものである。
【０２６０】
【表１０Ａ】
2018048157.tif 000037
【表１０Ｂ】
2018048157.tif 000038
【０２６１】
一般合成手順
１）最初のアミノ酸の２−クロロトリチルクロリド樹脂への導入およびＦｍｏｃ除去
２−クロロトリチルクロリド樹脂（１当量、１．０〜１．６ｍｍｏｌ／ｇ）をＤＣＭで十分に洗浄した。所望のアミノ酸（通常、１．６ｍｍｏｌ／ｇの導入を考えて、樹脂に対して０．５〜２当量）を、ＤＣＭ（樹脂１グラムあたり約１０ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（１．６ｍｍｏｌ／ｇの導入を考えて、樹脂に対して４当量）に溶解させた。溶液を樹脂に加え、懸濁液を室温で１９時間振盪した。樹脂を排出し、次いで、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＤＩＰＥＡ（１７：２：１）、ＤＣＭ、ＤＭＡ、ＤＣＭで順次、十分に洗浄した。
【０２６２】
Ｆｍｏｃ除去および導入量の算定については、樹脂をピペリジン／ＤＭＡ（１：４）または４−メチルピペリジン／ＤＭＡ（１：４）（最初の樹脂１グラムあたり１２×１０ｍＬ）と共に繰り返し振盪し、ＤＭＡ（最初の樹脂１グラムあたり２×１０ｍＬ）で洗浄した。合わせた溶液をＭｅＯＨで希釈して、体積Ｖを最初の樹脂１グラムあたり２５０ｍＬとした。この溶液の２ｍＬのアリコート（Ｖａ）をＭｅＯＨでさらに希釈して２５０ｍＬ（Ｖｔ）とした。ＵＶ吸収を、ＭｅＯＨを基準として２９９．８ｎｍで測定して、吸収Ａを得た。樹脂を、順次ＤＭＡ、ＤＣＭ、ＤＭＡ、ＤＣＭで十分に洗浄し、高真空中にて４０℃で乾燥させて、ｍ  ｇの樹脂を得た。
【０２６３】
樹脂への導入量は、式：
導入量［ｍｏｌ／ｇ］＝（Ａ×Ｖｔ×Ｖ）／（ｄ×ε×Ｖａ×ｍ）
（ｄ：セルの幅、ε＝７８００Ｌ  ｍｏｌ−１ｃｍ−１）
に従って算出した。
【０２６４】
２）Ｐｒｅｌｕｄｅ（商標）合成装置における固相ペプチド合成
２ａ）合成サイクルＡ
樹脂をＤＭＡで洗浄した。４−メチルピペリジン／ＤＭＡ（１：４）で繰り返し処理して、Ｆｍｏｃを除去した。樹脂をＤＭＡで洗浄した。Ｆｍｏｃ−アミノ酸（３当量、０．２Ｍ  ＮＭＰ溶液）、ＨＣＴＵ（３当量、０．３Ｍ  ＮＭＰ溶液）、およびＤＩＰＥＡ（３．３当量、０．６６Ｍ  ＮＭＰ溶液）を加えた後、懸濁液を、窒素中にて、特定の要件に応じて通常は１５分〜４時間、室温で混合することにより、カップリングを行った。ＤＭＡで洗浄した後、カップリングステップを、特定の要件に応じて通常は１〜３回繰り返した。ＤＭＡで洗浄した後、Ａｃ２Ｏ／ピリジン／ＤＭＡ（１：１：８）の混合物を加え、引き続いて懸濁液を室温で混合することにより、キャッピングを行った。樹脂をＤＭＡで洗浄した。
【０２６５】
２ｂ）合成サイクルＢ
樹脂をＤＭＡで洗浄した。ピペリジン／ＤＭＡ（１：４）で繰り返し処理して、Ｆｍｏｃを除去した。樹脂をＤＭＡで洗浄した。Ｆｍｏｃ−アミノ酸（３当量、０．３Ｍ  ＮＭＰ溶液）、ＨＣＴＵ（３当量、０．３Ｍ  ＮＭＰ溶液）、およびＤＩＰＥＡ（４．５当量、０．９Ｍ  ＮＭＰ溶液）を加えた後、懸濁液を、窒素中にて、特定の要件に応じて通常は１５分〜４時間、室温で混合することにより、カップリングを行った。ＤＭＡで洗浄した後、カップリングステップを、特定の要件に応じて通常は１〜３回繰り返した。ＤＭＡで洗浄した後、Ａｃ２Ｏ／ピリジン／ＤＭＡ（１：１：８）の混合物を加え、引き続いて懸濁液を室温で混合することにより、キャッピングを行った。樹脂をＤＭＡで洗浄した。
【０２６６】
２ｃ）合成サイクルＣ
樹脂をＤＭＡで洗浄した。ピペリジン／ＤＭＡ（１：４）で繰り返し処理して、Ｆｍｏｃを除去した。樹脂をＤＭＡで洗浄した。Ｆｍｏｃ−アミノ酸（３当量、０．３Ｍ  ＮＭＰ溶液）、ＨＣＴＵ（３当量、０．３Ｍ  ＮＭＰ溶液）、およびＤＩＰＥＡ（６当量、０．９Ｍ  ＮＭＰ溶液）を加えた後、懸濁液を、窒素中にて、特定の要件に応じて通常は１５分〜４時間、室温で混合することにより、カップリングを行った。ＤＭＡで洗浄した後、カップリングステップを、特定の要件に応じて通常は１〜３回繰り返した。ＤＭＡで洗浄した後、Ａｃ２Ｏ／ピリジン／ＤＭＡ（１：１：８）の混合物を加え、引き続いて懸濁液を室温で混合することにより、キャッピングを行った。樹脂をＤＭＡで洗浄した。
【０２６７】
２ｄ）合成サイクルＤ
樹脂をＤＭＡで洗浄した。４−メチルピペリジン／ＤＭＡ（１：４）で繰り返し処理して、Ｆｍｏｃを除去した。樹脂をＤＭＡで洗浄した。Ｆｍｏｃ−アミノ酸とＯｘｙｍａ  Ｐｕｒｅの混合物（各３当量、両方の０．２Ｍ  ＮＭＰ溶液）およびＤＩＣ（３当量、０．３Ｍ  ＮＭＰ溶液）を加えた後、懸濁液を、窒素中にて、特定の要件に応じて通常は１５分〜４時間、室温で混合することにより、カップリングを行った。ＤＭＡで洗浄した後、カップリングステップを、特定の要件に応じて通常は１〜３回繰り返した。ＤＭＡで洗浄した後、Ａｃ２Ｏ／ピリジン／ＤＭＡ（１：１：８）の混合物を加え、引き続いて懸濁液を室温で混合することにより、キャッピングを行った。樹脂をＤＭＡで洗浄した。
【０２６８】
３）保護基の除去を伴うまたは伴わない樹脂からの切断
３ａ）切断方法Ａ
樹脂（０．１ｍｍｏｌ）を、９５％のＴＦＡ／ＥＤＴ／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）水溶液（３ｍＬ）と共に室温で２時間振盪した。切断溶液を濾別し、新鮮な溶液を加えた（３ｍＬ）。懸濁液を室温で１時間振盪し、次いで切断溶液を濾別した。新鮮な溶液を加え（３ｍＬ）、懸濁液を室温で１時間振盪した。切断溶液を濾別した。合わせた切断溶液を冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）の混合物（３５ｍＬ）上にゆっくりと注いで、沈殿を得た。懸濁液を遠心分離し、上清を廃棄した。残渣を冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）（１０ｍＬ）で洗浄し、懸濁液を遠心分離し、上清を廃棄した。固体を高真空中で乾燥させた。
【０２６９】
３ｂ）切断方法Ｂ
樹脂（０．１ｍｍｏｌ）を９５％のＴＦＡ／ＥＤＴ（４：１）水溶液（０．７５ｍＬ）で処理し、懸濁液を室温で１時間振盪した。９５％ＴＦＡ水溶液（２．１８ｍＬ）とＴＩＳ（７５μＬ）の混合物を加え、室温での振盪を１時間再開した。切断溶液を濾別し、次いで、樹脂に９５％のＴＦＡ／ＥＤＴ／ＴＩＳ水溶液（９５：２．５：２．５）（３ｍＬ）を加え、懸濁液を室温で１時間振盪した。切断溶液を濾別し、収集し、新鮮な溶液を加えた（３ｍＬ）。懸濁液を室温で１時間振盪し、次いで切断溶液を濾別した。合わせた切断溶液を冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）（３５ｍＬ）中に注いだ。そうして生成した沈殿を放置して沈降させ、遠心分離し、次いで上清を慎重に廃棄した。沈殿を冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）（１０ｍＬ）で１回洗浄し、懸濁液を遠心分離し、上清を廃棄した。残渣を高真空中で乾燥させた。
【０２７０】
３ｃ）切断方法Ｃ
樹脂（０．１ｍｍｏｌ）にＨＦＩＰ／ＤＣＭ（３０：７０）（５ｍＬ）を加え、懸濁液を室温で１．５時間撹拌した。切断溶液を濾別し、収集し、新鮮なＨＦＩＰ／ＤＣＭ（３０：７０）（５ｍＬ）を加えた。懸濁液を室温で３０分間撹拌した。切断溶液を濾別し、収集した。樹脂をＤＣＭ（２×５ｍＬ）で洗浄し、これも収集した。合わせた切断溶液と洗浄溶液を高真空中で濃縮乾燥した。残渣をｔＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１）から凍結乾燥した。
【０２７１】
４）環化方法
４ａ）環化方法Ａ（ジスルフィド形成）
完全に脱保護された線状前駆体ペプチドをＨ２Ｏ／ＤＭＳＯ（９：１）または（４：１）に溶解させて、通常は１〜１５ｍｇ／ｍＬの濃度とした。次いで、反応混合物を、要件に応じて通常は４０時間、室温で撹拌し、次いで高真空中で濃縮乾燥した。
【０２７２】
４ｂ）環化方法Ｂ（ジスルフィド形成）
完全に脱保護された線状前駆体ペプチド（１当量）をＨ２Ｏに溶解させて、通常は１０ｍｇ／ｍＬの濃度とした。撹拌した溶液に、５０ｍＭのＩ２  ＡｃＯＨ溶液（１．２当量）を１回で加え、反応液を室温で１０分間撹拌した。０．５Ｍのアスコルビン酸Ｈ２Ｏ溶液（１．５当量）を加えて、過剰のＩ２をクエンチさせた。溶液を真空中で濃縮してほぼ乾燥させた。
【０２７３】
４ｃ）環化方法Ｃ（２つのジスルフィドの選択的な形成）
部分的に保護された線状前駆体ペプチド（１当量）（２つのシステインはＡｃｍで保護され、２つのシステインは保護されていない）をＡｃＯＨ／Ｈ２Ｏ（４：１）に溶解させて、通常は１ｍｇ／ｍＬの濃度とした。５０ｍＭのＩ２  ＡｃＯＨ溶液（２当量）を加え、反応混合物を室温で１時間撹拌した。さらなる５０ｍＭのＩ２  ＡｃＯＨ溶液（１０当量）を４時間かけて少量ずつ加えた。２１時間後、反応混合物を真空中で濃縮してほぼ乾燥させ、１Ｍのアスコルビン酸Ｈ２Ｏ溶液を過剰に加えて、未反応のＩ２をクエンチさせた。
【０２７４】
４ｄ）環化方法Ｄ（側鎖間のラクタム形成）
完全に脱保護された線状前駆体ペプチド（１当量）およびＨＡＴＵ（１．５当量）をＮＭＰに溶解させた（ペプチド濃度：通常は１ｍｍｏｌ／Ｌ）。ＤＩＰＥＡ（３当量）を加え、溶液を室温で９０分間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮乾燥した。
【０２７５】
４ｅ）環化方法Ｅ（側鎖とＣ末端間のラクタム形成）
ペプチド（１当量）、ＨＡＴＵ（１．３当量）、およびＨＯＡｔ（１．３当量）をＤＭＦに溶かした溶液（ペプチド濃度：２．６ｍｍｏｌ／Ｌ）を２，６−ルチジン（２０当量）で処理し、反応液を室温で２時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮乾燥した。
【０２７６】
以下では、代表的な実施例の合成について記載する。
[実施例１]
【０２７７】
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｋ−Ｈ−Ｆ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｄ−フェネチルアミン（配列番号８）（ラクタムＫ６−Ｄ１２）の合成  以下の実施例１は配列番号８を開示する。
【０２７８】
【化２２】
2018048157.tif 000039
【０２７９】
−  中間体１ａの調製
（線状ペプチドの組み立て）
フェネチルアミン−ＢＡＬ−ＰＳ樹脂（１６７ｍｇ、０．１００ｍｍｏｌ）を、Ｐｒｅｌｕｄｅ（商標）ペプチド合成装置での固相ペプチド合成にかけた。カップリングを以下のとおりに実施した。
【０２８０】
【表１１】
2018048157.tif 000040
【０２８１】
−  中間体１ｂの調製
（保護基の除去を伴う樹脂からの切断、次いで精製）
中間体１ａ（０．１ｍｍｏｌ）に、９５％のＴＦＡ／ＥＤＴ／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）水溶液の混合物（２ｍＬ）を加え、懸濁液を室温で２．５時間振盪した。切断溶液を濾別し、新鮮な切断溶液（２ｍＬ）を加えた。懸濁液を室温で４５分間振盪し、次いで切断溶液を濾別した、新鮮な溶液（２ｍＬ）を加え、懸濁液を室温で４５分間振盪した。切断溶液を濾別し、樹脂を９５％ＴＦＡ水溶液（１ｍＬ）で洗浄した。合わせた切断溶液を、冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）の混合物（３５ｍＬ）中に注いで、沈殿を得た。懸濁液を遠心分離し、上清を廃棄した、残渣を冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）（２０ｍＬ）で洗浄し、懸濁液を遠心分離し、上清を廃棄した。固体を高真空中で乾燥させた。粗生成物を分取ＨＰＬＣによって精製し、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏから凍結乾燥して、中間体１ｂを、品質の異なる２回分で、白色の固体として得た。回分Ａ（３５．９ｍｇ（純度９８％）、０．０１８ｍｍｏｌ）および回分Ｂ（５２．９ｍｇ（純度８０％）、０．０２１ｍｍｏｌ）。
【０２８２】
−  実施例１の調製
（環化および精製）
以前のステップからの両方の回分を、同じプロトコールに従って別々に処理した。
回分Ａ：ペプチド（３５．９ｍｇ（純度９８％）、０．０１８ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１０．０ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）をＮＭＰ（１８ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（９．２μＬ、０．０５３ｍｍｏｌ）に溶かした溶液を、室温で２時間撹拌した。
回分Ｂ：ペプチド（５２．９ｍｇ（純度８０％）、０．０２１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１４．５ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）をＮＭＰ（２６ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（１３．０μＬ、０．０７６ｍｍｏｌ）に溶かした溶液を、室温で２時間撹拌した。
回分それぞれを真空中で濃縮乾燥した。生成物を分取ＨＰＬＣによって単離した。両方の精製の純粋な画分を合わせ、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏから凍結乾燥して、実施例１を白色の固体（５２．０ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）として得た。
【０２８３】
純粋な生成物を、分析ＨＰＬＣ（分析方法Ａ：ｔＲ＝４．１６分）およびＵＰＬＣ−ＭＳ（分析方法Ｃ、測定値：［Ｍ＋３］３＋＝５１１．２、計算値：［Ｍ＋３］３＋＝５１１．３）によって分析した。
[実施例５]
【０２８４】
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｋ−Ｆ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｆ（配列番号１２）（ラクタムＫ６−Ｃ末端）合成  以下の実施例５は配列番号１２を開示する。
【０２８５】
【化２３】
2018048157.tif 000041
【０２８６】
−  中間体５ａの調製
（２−クロロトリチルクロリド樹脂へのＦｍｏｃ−Ｆ−ＯＨの導入、Ｆｍｏｃ除去、樹脂への導入量の算定）
２−クロロトリチルクロリド樹脂（１０．０ｇ、１６．０ｍｍｏｌ）を、Ｆｍｏｃ−Ｆ−ＯＨ（６．２４ｇ、３２．０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１００ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（１１．２ｍＬ、６４．０ｍｍｏｌ）に溶かした溶液と、上述の一般手順と似たようにして反応させて、中間体５ａ（１２．８ｇ、導入量＝０．７９ｍｍｏｌ／ｇ）を得た。
【０２８７】
−  中間体５ｂの調製
（線状ペプチドの組み立て）
中間体５ａ（０．１００ｍｍｏｌ）を、Ｐｒｅｌｕｄｅ（商標）ペプチド合成装置での固相ペプチド合成にかけた。カップリングを以下のとおりに実施した。
【０２８８】
【表１２】
2018048157.tif 000042
【０２８９】
−  中間体５ｃの調製
（ｉｖＤｄｅの除去および樹脂からの切断）
中間体５ｂ（０．１００ｍｍｏｌ）を、ヒドラジン一水和物（０．０８１ｍＬ、１．６７ｍｍｏｌ）のＤＭＡ（４ｍＬ）溶液で１０分間６回処理した。次いで、樹脂をヒドラジン一水和物（０．０８１ｍＬ、１．６７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍＬ）溶液で２０分間３回処理した。樹脂をＤＣＭ（３回）で洗浄した。樹脂（０．１００ｍｍｏｌ）にＨＦＩＰ／ＤＣＭ（３０：７０）（５ｍＬ）を加え、懸濁液を室温で１．５時間撹拌した。切断溶液を濾別し、新鮮なＨＦＩＰ／ＤＣＭ（３０：７０）（５ｍＬ）を加えた。懸濁液を室温で３０分間撹拌した。切断溶液を濾別した。樹脂をＤＣＭ（２×５ｍＬ）で洗浄した。合わせた切断溶液と洗浄溶液を真空中で濃縮乾燥した。残渣をｔＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１）から凍結乾燥して、中間体５ｃ（１８７ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）を得た。
【０２９０】
−  実施例５の調製
（環化および保護基の除去）
中間体５ｃ（１８７ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（４４．６ｍｇ、０．１１７ｍｍｏｌ）、およびＨＯＡｔ（１６．０ｍｇ、０．１１７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３５ｍＬ）に溶かした溶液を、２，６−ルチジン（０．２１０ｍＬ、１．８０ｍｍｏｌ）で処理し、反応液を室温で２時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮乾燥した。残渣を９５％のＴＦＡ／ＥＤＴ／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）水溶液（５ｍＬ）に溶解させ、溶液を室温で２．５時間撹拌した。切断溶液を冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）（３０ｍＬ）中に注いで、沈殿を得た。懸濁液を遠心分離し、上清を廃棄した。残渣を冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）（１０ｍＬ）で洗浄し、懸濁液を遠心分離し、上清を廃棄した。洗浄ステップを１回繰り返した。残渣を高真空中で乾燥させた。生成物を分取ＨＰＬＣによって単離し、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏから凍結乾燥して、実施例５を白色の固体（４１．４ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）として得た。
【０２９１】
純粋な生成物を、分析ＨＰＬＣ（分析方法Ａ：ｔＲ＝３．７０分）およびＵＰＬＣ−ＭＳ（分析方法Ｃ、測定値：［Ｍ＋３］３＋＝４８４．５、計算値：［Ｍ＋３］３＋＝４８４．６）によって分析した。
[実施例７]
【０２９２】
Ｑ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ−Ｆ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ−Ｆ−Ｇ−Ｇ（配列番号１４）（ラクタムＮ末端−Ｃ末端）合成  以下の実施例７は配列番号１４を開示する。
【０２９３】
【化２４】
2018048157.tif 000043
【０２９４】
−  中間体７ａの調製
（２−クロロトリチルクロリド樹脂へのＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨの導入、Ｆｍｏｃ除去、および樹脂への導入量の算定）
２−クロロトリチルクロリド樹脂（２．００ｇ、３．２０ｍｍｏｌ）を、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（０．４７６ｇ、１．６０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２０ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（２．２４ｍＬ、１２．８ｍｍｏｌ）に溶かした溶液と、上述の一般手順と似たようにして反応させて、中間体７ａ（２．２２ｇ、導入量＝０．６８ｍｍｏｌ／ｇ）を得た。
【０２９５】
−  中間体７ｂの調製
（線状ペプチドの組み立ておよびＦｍｏｃ除去）
中間体７ａ（１４７ｍｇ、０．１００ｍｍｏｌ）を、Ｐｒｅｌｕｄｅ（商標）ペプチド合成装置での固相ペプチド合成にかけた。カップリングを以下のとおりに実施した。
【０２９６】
【表１３】
2018048157.tif 000044
【０２９７】
ペプチドを組み立てた後、ピペリジン／ＤＭＡ（１：４）で繰り返し処理することにより、Ｆｍｏｃを除去した。樹脂をＤＭＡで洗浄して、中間体７ｂ（０．１００ｍｍｏｌ）を得た。
【０２９８】
−  中間体７ｃの調製
（樹脂からのＨＦＩＰ切断）
中間体７ｂ（０．１００ｍｍｏｌ）にＨＦＩＰ／ＤＣＭ（３０：７０）（３ｍＬ）を加え、懸濁液を室温で１．５時間振盪した。切断溶液を濾別し、新鮮なＨＦＩＰ／ＤＣＭ（３０：７０）（３ｍＬ）を加えた。懸濁液を室温で３０分間振盪した。切断溶液を濾別した。樹脂をＤＣＭ（２×３ｍＬ）で洗浄した。合わせた切断溶液と洗浄溶液を真空中で濃縮乾燥した。残渣をｔＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１）から凍結乾燥して、中間体７ｃ（２０３ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）を得た。
【０２９９】
−  中間体７ｄの調製
（主鎖環化）
中間体７ｃ（２０３ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（３３．３ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）、およびＨＯＡｔ（１１．９ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（４０ｍＬ）に溶かした溶液を、２，６−ルチジン（０．１５７ｍｌ、１．３５ｍｍｏｌ）で処理し、反応液を室温で２時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮乾燥して、中間体７ｄ（０．０６７ｍｍｏｌ）を得た。
【０３００】
−  中間体７ｅの調製
（保護基の除去、次いで精製）
中間体７ｄ（０．０６７ｍｍｏｌ）に、９５％のＴＦＡ／ＥＤＴ／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）水溶液の混合物（３ｍＬ）を加え、懸濁液を室温で２．５時間振盪した。溶液を冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）の混合物（３０ｍＬ）中に注いで、沈殿を得た。懸濁液を遠心分離し、上清を廃棄した。残渣を冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）（１０ｍＬ）で洗浄し、懸濁液を遠心分離し、上清を廃棄した。洗浄ステップを１回繰り返した。固体を高真空中で乾燥させた。粗生成物を分取ＨＰＬＣによって精製し、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏから凍結乾燥して、中間体７ｅを白色の固体（３３．６ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）として得た。
【０３０１】
−  実施例７の調製
（環化および精製）
中間体７ｅ（３３．６ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）をＨ２Ｏ／ＤＭＳＯ（９：１）（３０ｍＬ）に溶解させた。反応混合物を室温で４０時間撹拌し、次いで真空中で濃縮乾燥した。粗生成物を分取ＨＰＬＣによって精製し、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏから凍結乾燥して、実施例７を白色の固体（２１．０ｍｇ、０．０１０ｍｍｏｌ）として得た。
【０３０２】
純粋な生成物を、分析ＨＰＬＣ（分析方法Ａ：ｔＲ＝３．８５分）およびＵＰＬＣ−ＭＳ（分析方法Ｃ、測定値：［Ｍ＋３］３＋＝５５３．６、計算値：［Ｍ＋３］３＋＝５５３．６）によって分析した。
[実施例８]
【０３０３】
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ−Ｆ−ＯＨ（配列番号１５）（ジスルフィドＣ６−Ｃ１２）の合成  以下の実施例８は配列番号１５を開示する。
【０３０４】
【化２５】
2018048157.tif 000045
【０３０５】
−  中間体８ａの調製
（２−クロロトリチルクロリド樹脂へのＦｍｏｃ−Ｆ−ＯＨの導入、Ｆｍｏｃ除去、および樹脂への導入量の算定）
２−クロロトリチルクロリド樹脂（４０．０ｇ、６４．０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（３回）で洗浄した。Ｆｍｏｃ−Ｆ−ＯＨ（２４．８ｇ、６４．０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（４００ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（４４．７ｍＬ、２５６ｍｍｏｌ）に溶かした溶液を加え、懸濁液を室温で２２時間振盪した。樹脂をＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＤＩＰＥＡ（１７：２：１）（３回）、ＤＣＭ（３回）、ＤＭＡ（３回）、ＤＣＭ（３回）で十分に洗浄した。
【０３０６】
次いで、樹脂をピペリジン／ＤＭＡ（１：４）の混合物（４００ｍＬ）で１０分間４回処理した後、ＤＭＡ（２×１８０ｍｌ）で洗浄した。ピペリジン／ＤＭＡ溶液およびＤＭＡ洗浄溶液を集めて、樹脂への導入量を求めた。合わせた溶液１ｍＬをＭｅＯＨで５００ｍＬに希釈し、２９９．８ｎｍでのＵＶ吸収を測定して、Ａ＝０．３６８となった。これは、４６．２ｍｍｏｌのＦｍｏｃ量に相当する。
【０３０７】
樹脂を、ＤＣＭ（３回）、ＤＭＡ（３回）、ＤＣＭ（３回）で十分に洗浄し、真空乾燥して、中間体８ａ（５０．７ｇ、導入量＝０．９１ｍｍｏｌ／ｇ）を得た。
【０３０８】
−  中間体８ｂの調製
（線状ペプチドの組み立て）
中間体８ａ（２．６４ｇ、２．４０ｍｍｏｌ）を、Ｐｒｅｌｕｄｅ（商標）ペプチド合成装置での固相ペプチド合成にかけた。カップリングを以下のとおりに実施した。
【０３０９】
【表１４】
2018048157.tif 000046
【０３１０】
−  中間体８ｃの調製
（保護基の除去を伴う樹脂からの切断）
中間体８ｂ（２．４０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（４回）で慎重に洗浄した。９５％のＴＦＡ／ＥＤＴ／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）水溶液の混合物（５０ｍＬ）を加え、懸濁液を室温で１時間振盪した。切断溶液を濾別し、新鮮な切断溶液（３５ｍＬ）を加えた。懸濁液を室温で１時間振盪し、次いで切断溶液を濾別した。新鮮な溶液（３５ｍＬ）を加え、懸濁液を室温で１時間振盪した。切断溶液を濾別した。合わせた切断溶液を、撹拌した冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）の混合物（５００ｍＬ）上にゆっくりと注いで、沈殿を得た。懸濁液を室温で２時間撹拌し、沈殿を沈降させた。上清をフリットで吸い出した。残渣を冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）（２×１００ｍＬ）で洗浄し、上清をフリットで吸い出した。固体を高真空中で乾燥させて、中間体８ｃをオフホワイト色の固体（３．７５ｇ、１．８８ｍｍｏｌ）として得た。
【０３１１】
−  実施例８の調製
（環化および精製）
中間体８ｃ（３．７５ｇ、１．８８ｍｍｏｌ）をＨ２Ｏ（３７５ｍＬ）に溶解させた。撹拌した溶液に、５０ｍＭのＩ２  ＡｃＯＨ溶液（４５．１ｍＬ、２．２６ｍｍｏｌ）を１回で加え、溶液を室温で１０分間撹拌した。０．５Ｍアスコルビン酸Ｈ２Ｏ溶液（５．６４ｍＬ、２．８２ｍｍｏｌ）を加えて、過剰のＩ２をクエンチさせた。溶液を濃縮してほぼ乾燥させた。反応は、０．１８８ｍｍｏｌスケールと１．６９ｍｍｏｌスケールの２部で実施した。粗生成物を精製のために合わせた。粗生成物を分取ＨＰＬＣによって精製し、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏから凍結乾燥して、実施例８を白色の固体（１．５３ｇ、０．７６７ｍｍｏｌ）として得た。
【０３１２】
純粋な生成物を、分析ＨＰＬＣ（分析方法Ｃ：ｔＲ＝３．４３分）およびＵＰＬＣ−ＭＳ（分析方法Ｂ、測定値：［Ｍ＋３］３＋＝５１２．４、計算値：［Ｍ＋３］３＋＝５１２．６）によって分析した。
【０３１３】
代わりに、実施例８の粗製ポリペプチドを水に溶解させ（水５００ｍＬ／ポリペプチド１ｍｍｏｌ）、イオン交換樹脂（すなわち、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ  ＩＲＡ−６７（アセテート型）（２００ｇ／ポリペプチド１ｍｍｏｌ）を活用して酢酸塩に変換し、分取ＨＰＬＣ（ＤａｉｓｏｇｅｌのＣ８修飾型逆相シリカゲル、勾配：ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ：３％のＡＣＮと９７％の［０．３％酢酸／水混合物］から１２％のＡＣＮと８８％の［０．３％酢酸／水混合物］）によって精製し、凍結乾燥して、実施例８の酢酸塩を白色の固体（収率６０〜１００％）として得た。
【０３１４】
酢酸含有量（イオンクロマトグラフィー）および水含有量の分析に基づき、塩の化学量論性を評価し、１：３と１：４（ポリペプチド：アセテート）の間の範囲にあることが明らかになった。
[実施例２６]
【０３１５】
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ−Ｋ（ラウロイル）−ＯＨ（配列番号３３）（ジスルフィドＣ６−Ｃ１２）の合成  以下の実施例２６は配列番号３３を開示する。
【０３１６】
【化２６】
2018048157.tif 000047
【０３１７】
−  中間体２６ａの調製
（２−クロロトリチルクロリド樹脂へのＦｍｏｃ−Ｋ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨの導入、Ｆｍｏｃ除去、および樹脂への導入量の算定）
２−クロロトリチルクロリド樹脂（１．００ｇ、１．６０ｍｍｏｌ）を、Ｆｍｏｃ−Ｋ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨ（１．８４ｇ、３．２０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（１．１２ｍＬ、６．４０ｍｍｏｌ）に溶かした溶液と、上述の一般手順と似たようにして反応させて、中間体２６ａ（１．３９ｇ、導入量＝０．７５ｍｍｏｌ／ｇ）を得た。
【０３１８】
−  中間体２６ｂの調製
（線状ペプチドの組み立て）
中間体２６ａ（１３４ｍｇ、０．１００ｍｍｏｌ）を、Ｐｒｅｌｕｄｅ（商標）ペプチド合成装置での固相ペプチド合成にかけた。カップリングを以下のとおりに実施した。
【０３１９】
【表１５】
2018048157.tif 000048
【０３２０】
−  中間体２６ｃの調製
（ｉｖＤｄｅの除去およびラウリン酸のカップリング）
中間体２６ｂ（０．１００ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３回）で洗浄した。ヒドラジン一水和物（０．２４５ｍｌ、５．００ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１２ｍＬ）溶液を加え、懸濁液を室温で１時間振盪した。溶液を濾過した。このステップをもう２回行った。樹脂をＤＭＡ（３回）、ＤＣＭ（３回）、ＤＭＡ（２回）、ＤＣＭ（５回）、およびＤＭＡ（３回）で洗浄した。ラウリン酸（１００ｍｇ、０．５００ｍｍｏｌ）およびＨＣＴＵ（２０７ｍｇ、０．５００ｍｍｏｌ）をＮＭＰ（３ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（０．０８７ｍｌ、０．５００ｍｍｏｌ）に溶解させた。５分間活性化させた後、溶液を樹脂に加え、懸濁液を室温で１６時間振盪した。反応混合物を濾過し、樹脂をＤＭＡ（３回）、ＤＣＭ（３回）、ＤＭＡ（３回）、ＤＣＭ（５回）で洗浄して、中間体２６ｃを得た。
【０３２１】
−  中間体２６ｄの調製
（保護基の除去を伴う樹脂からの切断、次いで精製）
中間体２６ｃ（０．１００ｍｍｏｌ）に、９５％のＴＦＡ／ＥＤＴ／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）水溶液の混合物（３ｍＬ）を加え、懸濁液を室温で２時間振盪した。切断溶液を濾別し、新鮮な切断溶液（３ｍＬ）を加えた。懸濁液を室温で１時間振盪し、切断溶液を濾別した。新鮮な溶液（３ｍＬ）を加え、懸濁液を室温で１時間振盪した。切断溶液を濾別した。合わせた切断溶液を冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）の混合物（３５ｍＬ）中に注いで、沈殿を得た。懸濁液を遠心分離し、上清を廃棄した。残渣を冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）（１０ｍＬ）で洗浄し、懸濁液を遠心分離し、上清を廃棄した。固体を高真空中で乾燥させた。粗生成物を分取ＨＰＬＣによって精製し、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏから凍結乾燥して、中間体２６ｄを白色の固体（７４．１ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）として得た。
【０３２２】
−  実施例２６の調製
（環化および精製）
中間体２ｄ（７４．１ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）をＨ２Ｏ／ＤＭＳＯ（９：１）（７４ｍＬ）に溶解させた。反応混合物を室温で４０時間撹拌し、次いで真空中で濃縮乾燥した。粗生成物を分取ＨＰＬＣによって精製し、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏから凍結乾燥して、実施例２６を白色の固体（６０．０ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）として得た。
【０３２３】
純粋な生成物を、分析ＨＰＬＣ（分析方法Ａ：ｔＲ＝５．１１分）およびＵＰＬＣ−ＭＳ（分析方法Ｂ、測定値：［Ｍ＋３］３＋＝５６７．０、計算値：［Ｍ＋３］３＋＝５６７．０）によって分析した。
[実施例２８]
【０３２４】
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｃ−Ｌ−Ｃ−Ｃ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ−Ｆ−ＯＨ（配列番号３５）（ジスルフィドＣ４−Ｃ７およびＣ６−Ｃ１２）合成  以下の実施例２８は配列番号３５を開示する。
【０３２５】
【化２７】
2018048157.tif 000049
【０３２６】
−  中間体２８ａの調製
（２−クロロトリチルクロリド樹脂へのＦｍｏｃ−Ｆ−ＯＨの導入、Ｆｍｏｃ除去、および樹脂への導入量の算定）
２−クロロトリチルクロリド樹脂（１０．０ｇ、１６．０ｍｍｏｌ）を、Ｆｍｏｃ−Ｆ−ＯＨ（６．２０ｇ、１６．０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１００ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（１１．２ｍＬ、６４．０ｍｍｏｌ）に溶かした溶液と、上述の一般手順と似たようにして反応させて、中間体２８ａ（１１．６ｇ、導入量＝０．８７ｍｍｏｌ／ｇ）を得た。
【０３２７】
−  中間体２８ｂの調製
（線状ペプチドの組み立て）
中間体２８ａ（１１５ｍｇ、０．１００ｍｍｏｌ）を、Ｐｒｅｌｕｄｅ（商標）ペプチド合成装置での固相ペプチド合成にかけた。カップリングを以下のとおりに実施した。
【０３２８】
【表１６】
2018048157.tif 000050
【０３２９】
−  中間体２８ｃの調製
（部分的な保護基の除去を伴う樹脂からの切断）
中間体２８ｂ（０．１００ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（４回）で慎重に洗浄した。９５％のＴＦＡ／ＥＤＴ（４：１）水溶液の混合物（０．７５０ｍＬ）を加え、懸濁液を室温で１時間振盪した。懸濁液に、ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ（９５：５）の混合物（２．１８ｍＬ）およびＴＩＳ（７５μＬ）を加え、室温での振盪を１時間続けた。切断溶液を濾別し、樹脂に９５％のＴＦＡ／ＥＤＴ／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）水溶液の混合物（３ｍＬ）を加えた。懸濁液を室温で１時間振盪し、切断溶液を濾別した。新鮮な溶液を加え（３ｍＬ）、懸濁液を室温で１時間振盪した。切断溶液を濾別した。合わせた切断溶液を冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）（３５ｍＬ）中に注いで、沈殿を得た。懸濁液を遠心分離し、上清を廃棄した。残渣を冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）（１０ｍＬ）で洗浄し、懸濁液を遠心分離し、上清を廃棄した。洗浄ステップを１回繰り返した。残渣を高真空中で乾燥させた。粗生成物を分取ＨＰＬＣによって精製し、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏから凍結乾燥して、中間体２８ｃを白色の固体（５１．１ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）として得た。
【０３３０】
−  実施例２８の調製
（２つのジスルフィドのワンポット形成）
中間体２８ｃ（５１．１ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）をＡｃＯＨ（４８ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１２ｍＬ）に溶解させた。５０ｍＭのＩ２  ＡｃＯＨ溶液（１．１２ｍＬ、５６μｍｏｌ）を加え、黄色の溶液を室温で撹拌した。さらなる５０ｍＭのＩ２  ＡｃＯＨ溶液（５．６１ｍＬ、０．２８１ｍｍｏｌ）を４時間かけて少量ずつ加えた。２１時間後、反応混合物を真空中で２ｍＬに濃縮し、１Ｍアスコルビン酸Ｈ２Ｏ溶液（６ｍＬ）を加えて、過剰のＩ２をクエンチさせた。生成物を分取ＨＰＬＣによって単離し、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏから凍結乾燥して、実施例２８を白色の固体（１９．３ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）として得た。
【０３３１】
純粋な生成物を、分析ＨＰＬＣ（分析方法Ａ：ｔＲ＝４．１６分）およびＵＰＬＣ−ＭＳ（分析方法Ｃ、測定値：［Ｍ＋２］２＋＝７２３．７、計算値：［Ｍ＋２］２＋＝７２３．８）によって分析した。
[実施例６２]
【０３３２】
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ−Ｆ−ＮＨ２（配列番号６９）（ジスルフィドＣ６−Ｃ１２）の合成  以下の実施れ６２は配列番号６９を開示する。
【０３３３】
【化２８】
2018048157.tif 000051
【０３３４】
−  中間体６２ａの調製
（線状ペプチドの組み立て）
Ｆｍｏｃ保護されたＲｉｎｋ−Ａｍｉｄｅ−ＡＭ−ＰＳ樹脂（２１７ｍｇ、０．１００ｍｍｏｌ）を、Ｐｒｅｌｕｄｅ（商標）ペプチド合成装置での固相ペプチド合成にかけた。カップリングを以下のとおりに実施した。
【０３３５】
【表１７】
2018048157.tif 000052
【０３３６】
−  中間体６２ｂの調製
（保護基の除去を伴う樹脂からの切断）
中間体６２ａ（０．１ｍｍｏｌ）に、９５％のＴＦＡ／ＥＤＴ／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５）水溶液の混合物（３ｍＬ）を加え、懸濁液を室温で１．５時間振盪した。切断溶液を濾別し、新鮮な切断溶液（２ｍＬ）を加えた。懸濁液を室温で４５分間振盪し、次いで切断溶液を濾別した。新鮮な溶液（２ｍＬ）を加え、懸濁液を室温で４５分間振盪した。合わせた切断溶液を冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）の混合物（３５ｍＬ）中に注いで、沈殿を得た。懸濁液を遠心分離し、上清を廃棄した。残渣を冷ヘプタン／ジエチルエーテル（１：１）（１０ｍＬ）で洗浄し、懸濁液を遠心分離し、上清を廃棄した。固体を高真空中で乾燥させた。粗生成物の中間体６２ｂを精製せずに次のステップで使用した。
【０３３７】
−  実施例６２の調製
（環化および精製）
中間体６２ｂ（０．１００ｍｍｏｌ）をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）に溶解させた。撹拌した溶液に、５０ｍＭのＩ２  ＡｃＯＨ溶液（２．４ｍＬ、０．１２０ｍｍｏｌ）を１回で加え、溶液を室温で３０分間撹拌した。０．５Ｍアスコルビン酸Ｈ２Ｏ溶液（０．３０ｍＬ、０．３００ｍｍｏｌ）を加えて、過剰のＩ２をクエンチさせた。溶液を濃縮してほぼ乾燥させた。粗生成物を分取ＨＰＬＣによって精製し、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏから凍結乾燥して、実施例６２を白色の固体（５０．５ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）として得た。
【０３３８】
純粋な生成物を、分析ＨＰＬＣ（分析方法Ｃ：ｔＲ＝３．２２分）およびＵＰＬＣ−ＭＳ（分析方法Ｃ、測定値：［Ｍ＋３］３＋＝５１２．３、計算値：［Ｍ＋３］３＋＝５１２．３）によって分析した。
【０３３９】
他の実施例は、似たようにして合成した。
−  実施例２〜４は、実施例１と似たようにして合成した。
−  実施例６は、実施例５と似たようにして合成した。
−  実施例９〜２５および２７は、実施例２６と似たようにして合成した。
−  実施例２９は、実施例２８と似たようにして合成した。
−  実施例３０〜６１は、実施例８と似たようにして合成した。
−  実施例６３は、実施例６２と似たようにして合成した。
[実施例６４]
【０３４０】
６位と１２位のシステイン間［Ｃ６−Ｃ１２］に−Ｓ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−Ｓ−連結部を有するｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ−Ｆ−ＯＨ（配列番号７１）
分析方法
方法Ｄ（ＨＲＭＳ）、
溶離液Ａ：水＋０．０５％ギ酸＋３．７５ｍＭ酢酸アンモニウム、溶離液Ｂ：アセトニトリル＋０．０４％ギ酸。
勾配：４．４分で２％から９８％のＢ−流量１．０ｍｌ／分。カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ  ＣＳＨ  １．７μｍ  ２．１＊５０ｍｍ  ５０℃
【０３４１】
【化２９】
2018048157.tif 000053
実施例８の（（Ｓ）−２−（（３Ｓ，６Ｒ，１１Ｒ，１４Ｓ，１７Ｓ，２５ａＳ）−１４−（（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）メチル）−１７−（４−アミノブチル）−３−ブチル−１１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−５−グアニジノ−２−（（Ｓ）−１−（（Ｓ）−５−グアニジノ−２−（（Ｓ）−５−オキソピロリジン−２−カルボキサミド）ペンタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）ペンタンアミド）−４−メチルペンタンアミド）−１，４，１２，１５，１８，２１−ヘキサオキソドコサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｊ］［１，２，５，８，１１，１４，１７，２０］ジチアヘキサアザシクロトリコシン−６−カルボキサミド）−３−フェニルプロパン酸）（１２ｍｇ、６．７６μｍｏｌ）を５０ｍＭのリン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ６．５（１．５ｍｌ）に溶解させ、これにＴＣＥＰ  ＨＣｌ（（トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン）（２．９１ｍｇ、１０．１３μｍｏｌ）を室温で加えた。この反応混合物を室温で１時間撹拌した。上記溶液に、１，３−ジクロロプロパン−２−オン（４．２９ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）を室温で加え、これを室温で３０分間撹拌した。０．１％ＴＦＡを含有する１５〜６０％のＭｅＣＮ／水を溶離液とするＲＰ−ＨＰＬＣにかけると、実施例６４の（（Ｓ）−２−（（３Ｓ，６Ｒ，１４Ｒ，１７Ｓ，２０Ｓ，２８ａＳ）−１７−（（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）メチル）−２０−（４−アミノブチル）−３−ブチル−１４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−５−グアニジノ−２−（（Ｓ）−１−（（Ｓ）−５−グアニジノ−２−（（Ｓ）−５−オキソピロリジン−２−カルボキサミド）ペンタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）ペンタンアミド）−４−メチルペンタンアミド）−１，４，１０，１５，１８，２１，２４−ヘプタオキソヘキサコサヒドロピロロ［２，１ｉ］［１，２３，４，７，１０，１３，１６，１９］ジチアヘキサアザシクロヘキサコシン−６−カルボキサミド）−３−フェニルプロパン酸）（６ｍｇ、２．９３μｍｏｌ、収率４３．４％）が得られた。ＨＲＭＳ（方法Ｄ）［Ｍ＋１］：１５９０．７９１１（実測値）、１５９０．７９１２（予測値）。保持時間：３．０８分。
[実施例６５]
【０３４２】
６位と１２位の２つのシステイン間［Ｃ６−Ｃ１２］にモノスルフィド連結部を有するｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ−Ｆ−ＯＨ（配列番号７２）
【０３４３】
【化３０】
2018048157.tif 000054
実施例８の（Ｓ）−２−（（３Ｓ，６Ｒ，１１Ｒ，１４Ｓ，１７Ｓ，２５ａＳ）−１４−（（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）メチル）−１７−（４−アミノブチル）−３−ブチル−１１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−５−グアニジノ−２−（（Ｓ）−１−（（Ｓ）−５−グアニジノ−２−（（Ｓ）−５−オキソピロリジン−２−カルボキサミド）ペンタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）ペンタンアミド）−４−メチルペンタンアミド）−１，４，１２，１５，１８，２１−ヘキサオキソドコサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｊ］［１，２，５，８，１１，１４，１７，２０］ジチアヘキサアザシクロトリコシン−６−カルボキサミド）−３−フェニルプロパン酸ＴＦＡ塩（３０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’−ヘキサメチルホスフィントリアミン（１２．３ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）をＰＢＳ  ｐＨ９．２緩衝液（１ｍＬ）に混ぜた混合物を、室温で３日間撹拌した。反応混合物を分取ＨＰＬＣ（Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８、０．１％のＴＦＡ  水／ＭｅＣＮ溶液）によって２回精製し、生成物画分を凍結乾燥して、白色の粉末（実施例６５：４ｍｇ、１３．４％）を得た。［Ｍ＋２Ｈ］２＋（計算値）＝７５２．８８、［Ｍ＋２Ｈ］２＋（測定値）＝７５２．４０、［Ｍ＋３Ｈ］３＋（計算値）＝５０２．２６、［Ｍ＋３Ｈ］３＋（測定値）＝５０１．９４。ＨＰＬＣ（分析方法Ｃ）、Ｔｒ分＝６．９３。
[実施例６６]
【０３４４】
６位と１２位の２つのシステイン間［Ｃ６−Ｃ１２］に−Ｓ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｚ）−ＣＨ２−Ｓ−連結部を有し、Ｚが
【０３４５】
【化３１】
2018048157.tif 000055
である、ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ−Ｆ−ＯＨ（配列番号７３）
分析方法
方法Ｄ（ＨＲＭＳ）、
溶離液Ａ：水＋０．０５％ギ酸＋３．７５ｍＭ酢酸アンモニウム、溶離液Ｂ：アセトニトリル＋０．０４％ギ酸。
勾配：４．４分で２％から９８％のＢ−流量１．０ｍｌ／分。カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ  ＣＳＨ  １．７μｍ  ２．１＊５０ｍｍ  ５０℃
【０３４６】
【化３２】
2018048157.tif 000056
実施例６４の（（Ｓ）−２−（（３Ｓ，６Ｒ，１４Ｒ，１７Ｓ，２０Ｓ，２８ａＳ）−１７−（（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）メチル）−２０−（４−アミノブチル）−３−ブチル−１４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−５−グアニジノ−２−（（Ｓ）−１−（（Ｓ）−５−グアニジノ−２−（（Ｓ）−５−オキソピロリジン−２−カルボキサミド）ペンタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）ペンタンアミド）−４−メチルペンタンアミド）−１，４，１０，１５，１８，２１，２４−ヘプタオキソヘキサコサヒドロピロロ［２，１−ｉ］［１，２３，４，７，１０，１３，１６，１９］ジチアヘキサアザシクロヘキサコシン−６−カルボキサミド）−３−フェニルプロパン酸）（１１．５ｍｇ、５．６２μｍｏｌ）、および（Ｓ）−１−（アミノオキシ）−１９−カルボキシ−２，７，１６，２１−テトラオキソ−９，１２−ジオキサ−３，６，１５，２０−テトラアザオクタトリアコンタン−３８−酸化合物と２，２，２−トリフルオロ酢酸（１：１）（９．１９ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）を１００ｎＭのリン酸Ｎａ緩衝液ｐＨ６．０（１ｍｌ）に溶かした溶液に、室温でアニリン（２．０５１μｌ、０．０２２ｍｍｏｌ）を加えた。ＤＭＳＯ（５０μｌ）を加えると、均質な溶液が得られた。この反応混合物を室温で２時間撹拌した。０．１％ＴＦＡを含有する１５〜６０％のＭｅＣＮ／水を溶離液とするＲＰ−ＨＰＬＣにかけると、実施例６６の（１−（（Ｚ）−（（３Ｓ，６Ｒ，１４Ｒ，１７Ｓ，２０Ｓ，２８ａＳ）−１７−（（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）メチル）−２０−（４−アミノブチル）−３−ブチル−６−（（Ｓ）−１−カルボキシ−２−フェニルエチルカルバモイル）−１４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−５−グアニジノ−２−（（Ｓ）−１−（（Ｓ）−５−グアニジノ−２−（（Ｓ）−５−オキソピロリジン−２−カルボキサミド）ペンタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）ペンタンアミド）−４−メチルペンタンアミド）−１，４，１５，１８，２１，２４−ヘキサオキソドコサヒドロピロロ［２，１−ｉ］［１，２３，４，７，１０，１３，１６，１９］ジチアヘキサアザシクロヘキサコシン−１０（１Ｈ，９Ｈ，１１Ｈ）−イリデン）アミノオキシ）−１９−カルボキシ−２，７，１６，２１−テトラオキソ−９，１２−ジオキサ−３，６，１５，２０−テトラアザオクタトリアコンタン−３８−酸）（４．５ｍｇ、１．６４６μｍｏｌ、収率２９．３％）が得られた。ＨＲＭＳ（方法Ｄ）［（Ｍ＋３）／３］：７５９．７４８７（実測値）、７５９．７４６２（予測値）。保持時間：４．１２分。
【０３４７】
２，２，２−トリフルオロ酢酸を伴う（Ｓ）−１−（アミノオキシ）−１９−カルボキシ−２，７，１６，２１−テトラオキソ−９，１２−ジオキサ−３，６，１５，２０−テトラアザオクタトリアコンタン−３８−酸化合物（１：１）の合成
【０３４８】
【化３３】
2018048157.tif 000057
１００ｍＬのガラス器具に入った１−クロロトリチルクロリド樹脂（１．５５ｍｍｏｌ／ｇ）（０．５００ｇ、０．７７５ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２０ｍｌ）中で３０分間膨張させ、液体を排出した。樹脂に、２−（アミノオキシ）酢酸半塩酸塩（０．３３８ｇ、３．１０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．３５４ｍｌ、７．７５ｍｍｏｌ）をＮＭＰ（７ｍｌ）／ＤＣＭ（４ｍｌ）に懸濁させた懸濁液を加え、これを５時間振盪した。溶媒を排出した。樹脂をＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＤＩＰＥＡ（１７／２／１、４０ｍＬ）、ＤＣＭ（５０ｍＬ）、ＮＭＰ（５０ｍＬ）、ＤＣＭ（５０ｍＬ）でそれぞれすすいだ。得られる樹脂をＫＯＨ／ＮａＯＨと共に終夜乾燥させた。
【０３４９】
【化３４】
2018048157.tif 000058
１００ｍＬのガラス器具に入った樹脂（０．７７５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２０ｍｌ）中で３０分間膨張させ、液体を排出した。（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル２−アミノエチルカルバメート塩酸塩（０．０８１ｇ、０．７７５ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（０．４２２ｇ、３．１０ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（１．３５４ｍｌ、７．７５ｍｍｏｌ）をＮＭＰ（８ｍｌ）に懸濁させた懸濁液に、ＨＢＴＵ（１．１７６ｇ、３．１０ｍｍｏｌ）を含有するＮＭＰ（２．５ｍｌ）を加え、これを室温で２時間振盪した。溶媒を排出した。樹脂をＮＭＰ（１０ｍＬ）、ＤＣＭ（１０ｍＬ）でそれぞれすすいだ。得られる樹脂を終夜乾燥させた。
【０３５０】
【化３５】
2018048157.tif 000059
反応器に樹脂（０．７７５ｍｍｏｌ）を装入した。樹脂に１０ｍＬの２０％ピペリジン／ＮＭＰを加え、その懸濁液を室温で５分間撹拌した。溶媒を排出した後、追加の１０ｍＬの２０％ピペリジン／ＮＭＰを加え、室温で２０分間撹拌した。樹脂に、ＨＯＡｔ（０．３１６ｇ、２．３２５ｍｍｏｌ）および１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−３−オキソ−２，７，１０−トリオキサ−４−アザドデカン−１２−酸（０．８９６ｇ、２．３２５ｍｍｏｌ）をＮＭＰ（８ｍｌ）に溶かした溶液を加え、ＤＩＣ（０．３６２ｍｌ、２．３２５ｍｍｏｌ）を含有するＮＭＰ（１ｍｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。樹脂を濾別し、ＮＭＰ（１０ｍｌ）で４回すすいだ。得られる樹脂を終夜乾燥させた。
【０３５１】
【化３６】
2018048157.tif 000060
反応器に樹脂（０．７７５ｍｍｏｌ）を装入した。樹脂に１０ｍＬの２０％ピペリジン／ＮＭＰを加え、その懸濁液を室温で５分間撹拌した。溶媒を排出した後、追加の１０ｍＬの２０％ピペリジン／ＮＭＰを加え、室温で２０分間撹拌した。樹脂に、ＨＯＡｔ（０．３１６ｇ、２．３２５ｍｍｏｌ）およびＦｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（０．９８９ｇ、２．３２５ｍｍｏｌ）をＮＭＰ（８ｍｌ）に溶かした溶液を加え、ＤＩＣ（０．３６２ｍｌ、２．３２５ｍｍｏｌ）を含有するＮＭＰ（２．００ｍｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。樹脂を濾別し、ＮＭＰ（１０ｍｌ）で４回すすいだ。得られる樹脂を終夜乾燥させた。
【０３５２】
【化３７】
2018048157.tif 000061
反応器に樹脂（０．７７５ｍｍｏｌ）を装入した。樹脂に１０ｍＬの２０％ピペリジン／ＮＭＰ（０．７７５ｍｍｏｌ）を加え、その懸濁液を室温で５分間撹拌した。溶媒を排出した後、追加の１０ｍＬの２０％ピペリジン／ＮＭＰ（０．７７５ｍｍｏｌ）（０．７７５ｍｍｏｌ）を加え、室温で２０分間撹拌した。樹脂に、１８−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１８−オキソオクタデカン酸（０．８６２ｇ、２．３２５ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（０．３１６ｇ、２．３２５ｍｍｏｌ）をＮＭＰ（８ｍｌ）に溶かした溶液を加え、ＤＩＣ（０．３６２ｍｌ、２．３２５ｍｍｏｌ）を含有するＮＭＰ（２．００ｍｌ）を加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌した。樹脂を濾別し、ＮＭＰ（１０ｍｌ）で４回すすいだ。得られる樹脂を終夜乾燥させた。
【０３５３】
【化３８】
2018048157.tif 000062
室温において樹脂（０．７７５ｍｍｏｌ）を２０ｍＬの切断カクテル（ＴＦＡ／ＴＩＰＳ／水＝９５／２．５／２．５）で１．５時間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡですすいだ。濾液を真空中で濃縮した。０．１％ＴＦＡを含有する１５〜５０％のＭｅＣＮ／水を溶離液とするＣ１８カラムでのＲＰ−ＨＰＬＣにかけると、２，２，２−トリフルオロ酢酸を伴う（Ｓ）−１−（アミノオキシ）−１９−カルボキシ−２，７，１６，２１−テトラオキソ−９，１２−ジオキサ−３，６，１５，２０−テトラアザオクタトリアコンタン−３８−酸（１：１）（２０７ｍｇ、０．２９４ｍｍｏｌ、収率３７．９％）が得られた。ＨＲＭＳ（方法Ｄ）［Ｍ＋１］：７０４．４４５９（実測値）、７０４．４４８６（予測値）。保持時間：２．６３分。
【０３５４】
実施例１〜６６のポリペプチドは、上述のとおりに、および／または溶媒抽出、カラムクロマトグラフィー、液体クロマトグラフィー、再結晶などの従来の精製技術を組み合わせて、精製および単離することができる。上記実施例において単離されたポリペプチドが遊離化合物である場合、ポリペプチドは、既知の方法によって適切な塩に変換することができる。したがって、実施例１〜６６のペプチドは、１：１〜１：４の範囲のポリペプチド：塩比率で、その対応する塩（たとえば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、または注入に適する別の薬学的塩）に変換することができる。たとえば、実施例１〜６６のポリペプチドを水に溶解させ、イオン交換樹脂を使用して塩に変換することができる。逆に、単離されたペプチドが塩である場合、ペプチドは、既知の方法によって遊離ペプチドに変換することも、またはイオン交換樹脂を活用して異なる塩に直接変換することもできる。
【０３５５】
以下の実施例のポリペプチドは、ＡＰＪ受容体効力について、ＥＣ５０値が約０．０１ｎＭ〜約１１００ｎＭの範囲にあることがわかった。以下の実施例のポリペプチドは、血漿安定性が２分より長い、５分より長い、１０分より長い、２０分より長い、５０分より長い、６０分より長いことがわかった。
【０３５６】
本発明のポリペプチドは、ＡＰＪ受容体のアゴニストとして有用であり、したがって、本明細書で開示する疾患などの、ＡＰＪ受容体の活性化に反応を示す疾患および状態の治療において有用であるとみなすことができる。
【０３５７】
こうして本発明の例示的な実施形態について述べてきたが、当業者は、内部の開示が例示的なものに過ぎないこと、ならびに本発明の範囲内で他の種々の代替形態、改造形態、および変更形態を案出してもよいことを留意すべきである。したがって、本発明は、本明細書で例示するような詳細な実施形態に限定されない。
【手続補正書】
【提出日】平成29年11月6日(2017.11.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
本願明細書に記載の発明。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３５７】
こうして本発明の例示的な実施形態について述べてきたが、当業者は、内部の開示が例示的なものに過ぎないこと、ならびに本発明の範囲内で他の種々の代替形態、改造形態、および変更形態を案出してもよいことを留意すべきである。したがって、本発明は、本明細書で例示するような詳細な実施形態に限定されない。
本発明は以下を提供する。
［１］
次式Ｉ’（配列番号７４）：
【化３９】
2018048157.tif 000072
［式中、
Ｘ１は、ポリペプチドのＮ末端であり、存在しないか、またはｐＥ、Ｒ、ｌｓｎ、Ｑ、Ａ、Ｋ、および５−アミノ−吉草酸から選択され、
Ｘ２は、Ｒ、Ａ、ｒ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、Ｋ、Ｈ、ｈＦ、ｈＫ、Ｆ、Ｅ、またはＯｒｎであり、
Ｘ３は、Ｐ、Ａ、ａ、ｐ、４−ＰｈＰ、Ｋ、Ｄ、ピペコリン酸、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ７位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ４は、Ｒ、Ａ、ｒ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、Ｆ、Ｅ、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ７位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ５は、Ｌ、Ｃｈａ、Ａ、Ｄ−Ｌ、Ｎ−Ｍｅ−Ｌ、Ｋ、Ｄ、４−ＰｈＦ、またはＦであり、
Ｘ６およびＸ１２は、独立して、Ｃ、ｃ、ｈＣ、Ｄ−ｈＣ、Ｋ、Ｄ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＥから選択される天然または天然でないアミノ酸であり、Ｘ６とＸ１２の側鎖は、共有結合によって互いに連結して、モノスルフィド（−Ｓ−）、ジスルフィド（−Ｓ−Ｓ−）、もしくはアミド結合（−ＮＨＣ（Ｏ）−もしくは−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−）、または式−Ｓ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｚ）−ＣＨ２−Ｓ−の連結部のいずれかを形成しており、Ｚは、Ｏ、Ｎ−Ｏ−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−Ｌ１−Ｒ１、またはＮ−ＮＨ−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−Ｌ１−Ｒ１であり、Ｒ１は、脂肪酸誘導体であり、Ｌ１は、１つまたは複数のアミノ酸および／または１つまたは複数の−ＮＨ−Ｃ２〜６−アルキレン−ＮＨ−単位を含んだリンカーであり、
または代わりに、Ｘ６はＫであり、Ｘ１３は存在せず、Ｘ１２はＦまたはｆであり、Ｘ１２のＣ末端は、Ｘ６のアミノ側鎖とアミド結合を形成しており、
Ｘ７は、Ｈ、ｈ、Ａ、Ｎ−Ｍｅ−Ａ、ａ、Ａｉｂ、Ｋ、Ｎａｌ、Ｆ、Ｐ、Ｄａｐ、Ｎ、Ｅ、またはシステイン［システインの側鎖は、Ｘ３位のシステインの側鎖またはＸ４位のシステインの側鎖とジスルフィド結合を形成している］であり、
Ｘ８は、Ｋ、ｋ、Ｆ、ｆ、Ａ、ｈＦ、Ｎ−Ｍｅ−Ｒ、Ｅ、または４−アミノ−ｌｓｎであり、
Ｘ９は、Ｇ、Ｎ−Ｍｅ−Ｇ、Ａ、Ｄ、Ｌ、Ｒ、またはＡｉｂであり、
Ｘ１０は、Ｐ、Ａ、ｐ、４−ＰｈＰ、またはピペコリン酸であり、
Ｘ１１は、Ｍ、Ｄ−Ｎｌｅ、Ｎｌｅ、Ｎ−Ｍｅ−Ｎｌｅ、Ｍ（Ｏ）、Ａ、Ｆ、Ｙ、Ｌ、Ｋ、３−ＰｙＡ、またはＣｈａであり、
Ｘ１３は、Ｃ末端であり、存在しないか、またはＦ、ｆ、Ｎ−Ｍｅ−Ｆ、Ｎａｌ、Ｄ−Ｎａｌ、３−Ｂｒ−Ｆ、（Ｓ）−β−３−Ｆ、Ｉ、Ａ、ａ、Ｋ、Ｄａｐ、Ｈ、およびＥから選択され、
Ｎｌｅは、Ｌ−ノルロイシンであり、
Ｄ−ｈＣは、Ｄ−ホモシステインであり、
ｈＣは、Ｌ−ホモシステインであり、
ｈＦは、Ｌ−ホモフェニルアラニンであり、
ｈＫは、Ｌ−リシンであり、
Ｎａｌは、Ｌ−ナファタリンであり、
Ｏｒｎは、オルニチンであり、
Ａｉｂは、α−アミノイソ酪酸であり、
Ｄａｂは、（Ｓ）−ジアミノ酪酸であり、
Ｄａｐは、（Ｓ）−２，３−ジアミノプロピオン酸であり、
Ｍ（Ｏ）は、メチオニンスルホンであり、
Ｃｈａは、（Ｓ）−β−シクロヘキシルアラニンであり、
４−アミノ−ｌｓｎは、４−アミノピペリジン−４−カルボン酸であり、
ｌｓｎは、イソニペコチノイルであり、
ｐＥは、Ｌ−ピログルタミン酸であり、
３−ＰｙＡは、３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニンであり、
４−ＰｈＦは、４−フェニル−Ｌ−フェニルアラニンであり、
Ｎ末端およびＣ末端は、場合により、１、２、３または４個のグリシンアミノ酸と一緒になって環を形成しており、
Ｋ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、Ｄａｐ、ｈＫ、または４−アミノ−Ｉｓｎの側鎖中のアミノ基は、場合により、親油性基にアミド結合によって連結している］
を有するポリペプチド、またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩、またはこれらと実質的に同等なポリペプチド。
［２］
次式（配列番号７５）：
【化４０】
2018048157.tif 000073
を有し、
Ｘ１が、不存在、ｐＥ、Ｒ、Ｑ、またはＩｓｎであり、
Ｘ５が、ＬまたはＣｈａであり、
Ｘ７が、Ｈ、Ａｉｂ、Ｆ、Ｋ（ラウロイル）、またはＫ（パルミトイル）であり、
Ｘ８が、Ｋ、Ｆ、または４−アミノ−ｌｓｎであり、
Ｘ９が、ＧまたはＡｉｂであり、
Ｘ１１が、ＮｌｅまたはＣｈａであり、
Ｘ１３が、存在しないか、またはＦ、ｆ、Ｋ（ラウロイル）、Ｋ（パルミトイル）であり、
Ｘ６およびＸ１２が、独立して、Ｃ、ｃ、ｈＣ、Ｄ−ｈＣ、Ｋ、Ｄ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、またはＥから選択される天然または天然でないアミノ酸であり、Ｘ６とＸ１２の側鎖が、共有結合によって互いに連結して、ジスルフィド結合またはアミド結合を形成しており、Ｎ末端およびＣ末端が、場合により、１、２、３または４個のグリシンアミノ酸と一緒になって環を形成している、
ポリペプチド、またはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩、またはこれらと実質的に同等なポリペプチド。
［３］
Ｘ６およびＸ１２が、Ｋ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、Ｅ、およびＤから独立して選択され、Ｘ６とＸ１２の側鎖が、一緒になってアミド結合を形成している（配列番号７６）、前記［１］または［２］に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［４］
Ｘ６およびＸ１２が、独立してＣであり、Ｘ６とＸ１２の側鎖が、一緒になってジスルフィド結合を形成している（配列番号７７）、前記［１］または［２］に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［５］
式ＩＩＩ（配列番号７８）：
【化４１】
2018048157.tif 000074
を有する前記［１］、［２］または［４］に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［６］
式ＩＶ（配列番号７９）：
【化４２】
2018048157.tif 000075
を有する、前記［１］から［５］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［７］
式Ｖ（配列番号８０）：
【化４３】
2018048157.tif 000076
を有する、前記［１］、［２］、および［４］から［６］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［８］
式ＶＩ（配列番号８１）：
【化４４】
2018048157.tif 000077
を有する、前記［１］に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［９］
式ＶＩＩ（配列番号８２）：
【化４５】
2018048157.tif 000078
を有する、前記［１］に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［１０］
式ＶＩＩＩ（配列番号８３）：
【化４６】
2018048157.tif 000079
［式中、Ｘ１のＮ末端およびＸ１３のＣ末端が、リンカーＬと一緒になって環を形成しており、
Ｌが（Ｇ）ｒであり、Ｇがグリシンであり、ｒが１、２、３または４である］
を有する、前記［１］、［２］、［５］、［６］または［７］に記載のポリペプチドまたはポリペプチドの塩。
［１１］
Ｘ１がＱであり、Ｘ１３がＦであり、ｒが２である（配列番号８４）、前記［１０］に記載のポリペプチドまたはポリペプチドの塩。
［１２］
Ｘ６がＫであり、Ｘ１３が存在せず、Ｘ１２がＦまたはｆであり、Ｘ１２のＣ末端が、Ｘ６のアミノ側鎖とアミド結合を形成しており、式ＩＸ（配列番号８５）：
【化４７】
2018048157.tif 000080
を有する、前記［１］に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのエステル、アミド、もしくは塩。
［１３］
Ｘ１がｐＥである（配列番号８６）、前記［１］から［９］および［１２］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［１４］
Ｘ１が存在しない（配列番号８７）、前記［１］から［９］および［１２］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［１５］
Ｎ末端がアミドである、前記［１４］に記載のポリペプチドまたはポリペプチドの塩。
［１６］
Ｎ末端が、式−ＮＨＲのアミドであり、Ｒが、アセチル、ベンゾイル、フェナシル、スクシニル、オクタノイル、４−フェニルブタノイル、４−Ｃｌ−Ｐｈ−（ＣＨ２）３Ｃ（Ｏ）−、またはＰｈ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−である、前記［１５］に記載のポリペプチドまたはポリペプチドの塩。
［１７］
Ｎ末端が、式ＮＨＲ１のアミドであり、Ｒ１が、ＣＨ３Ｃ（Ｏ）−、ＣＨ３−（Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２）ｍ−Ｃ（Ｏ）−、パルミトイル（Ｏ２Ｏｃ）ｐ、ミリストイル（Ｏ２Ｏｃ）ｐ、ラウロイル（Ｏ２Ｏｃ）ｐ、またはＰｈ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−であり、
ｐは、１〜４の整数であり、
ｍは、１〜１２の整数であり、
ラウロイル（Ｏ２Ｏｃ）は、Ｃ１１Ｈ２３Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−であり、
ミリストイル（Ｏ２Ｏｃ）は、Ｃ１３Ｈ２７Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−であり、
パルミトイル（Ｏ２Ｏｃ）は、Ｃ１５Ｈ３１Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−である、前記［１］から［９］および［１２］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドの塩。
［１８］
Ｘ１３がＦである（配列番号８８）、前記［１］から［９］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［１９］
Ｘ１３が存在しない（配列番号８９）、前記［１］から［９］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［２０］
Ｃ末端がアミドである、前記［１９］に記載のポリペプチドまたはポリペプチドの塩。
［２１］
Ｃ末端が、式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ２のアミドであり、Ｒ２が、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｍｅ、−ＮＨ−ＮＨＢｎ、または−ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｐｈである、前記［２０］に記載のポリペプチドまたはポリペプチドの塩。
［２２］
Ｘ５がＬである（配列番号９０）、前記［１］から［２１］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［２３］
Ｘ７がＨである（配列番号９１）、前記［１］から［７］および［１０］から［２２］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［２４］
Ｘ８がＫである（配列番号９２）、前記［１］から［５］および［８］から［２３］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［２５］
Ｘ９がＧである（配列番号９３）、前記［１］から［５］および［８］から［２４］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［２６］
Ｘ１１がＮｌｅである（配列番号９４）、前記［１］から［２５］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［２７］
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｋ＊−Ｈ−Ｆ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｄ＊−フェネチルアミン（配列番号８），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｋ＊−Ｈ−Ｆ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｅ＊−フェネチルアミン（配列番号９），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｏｒｎ＊−Ｈ−Ｆ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｄ＊−フェネチルアミン（配列番号１０），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｄａｂ＊−Ｈ−Ｆ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｄ＊−フェネチルアミン（配列番号１１），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｋ＊−Ｆ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｆ＊（配列番号１２），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｋ＊−Ｆ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−ｆ＊（配列番号１３），
＊＊Ｑ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｆ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−Ｇ−Ｇ＊＊（配列番号１４），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号１５），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ａｉｂ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号１６），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ａｉｂ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ｆ−ＯＨ（配列番号１７），
Ｈ−Ｉｓｎ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ａｉｂ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ｆ−ＯＨ（配列番号１８），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−フェネチルアミン（配列番号１９），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ｆ−ＯＨ（配列番号２０），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｃｈａ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｃｈａ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号２１），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｆ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号２２），
Ｈ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号２３），
Ｈ−Ｒ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号２４），
Ｈ−Ｉｓｎ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号２５），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｆ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−フェネチルアミン（配列番号２６），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ａｉｂ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号２７），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−（４−ＮＨ−Ｉｓｎ）−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号２８），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｋ（パルミトイル）−ＯＨ（配列番号２９），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｋ（パルミトイル）−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号３０），
パルミトイル−Ｏ２Ｏｃ−Ｑ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号３１），
ラウロイル−Ｏ２Ｏｃ−Ｑ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号３２），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｋ（ラウロイル）−ＯＨ（配列番号３３），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｋ（ラウロイル）−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号３４），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｃ＊＊−Ｌ−Ｃ＊−Ｃ＊＊−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号３５）、
ｐＥ−Ｒ−Ｃ＊＊−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｃ＊＊−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号３６）；
ｐＥ−ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号３７）；
ｐＥ−Ｆ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号３８）；
ｐＥ−Ｅ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号３９）；
ｐＥ−Ｒ−ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号４０）；
ｐＥ−Ｒ−Ｋ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号４１）；
ｐＥ−Ｒ−Ｄ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号４２）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｆ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号４３）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｋ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号４４）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｅ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号４５）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｄ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号４６）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｅ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号４７）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−（４−ＰｈＦ）−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号４８）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｄ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号４９）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｅ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号５０）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｌ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号５１）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｒ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号５２）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−（ピペコリン酸）−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号５３）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−（３−ＰｙＡ）−Ｃ−Ｆ−ＯＨ（配列番号５４）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｈ−ＯＨ（配列番号５５）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｅ−ＯＨ（配列番号５６）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ＮＨ２（配列番号７０）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＮＨ２（配列番号６９）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ＯＨ（配列番号５７）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−ｈＣ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号５８）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−ｈＣ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−ｈＣ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号５９）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号６０）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−（Ｄ−ｈＣ）＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号６１）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−（Ｄ−ｈＣ）＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−（Ｄ−ｈＣ）＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号６２）；
ミリストイルＯ２ＯｃＯ２ＯｃＱ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ｆ−ＯＨ（配列番号６５）；
ミリストイルＯ２ＯｃＯ２ＯｃＯ２ＯｃＱ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ｆ−ＯＨ（配列番号６６）；
ミリストイルＯ２ＯｃＯ２ＯｃＯ２ＯｃＯ２ＯｃＱ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ−ｆ−ＯＨ（配列番号６７）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号６３）；
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号６４）；および
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ（Ｍｙｒ）−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号６８）
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊＊＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊＊＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号７１）
から選択され、「＊」の付いた２つのアミノ酸は、それぞれその側鎖または末端を介して、ジスルフィド結合またはアミド結合を形成しているアミノ酸を表し、「＊＊」の付いた２つのアミノ酸は、その側鎖を介したジスルフィド結合またはその末端を介したアミド結合を形成しているアミノ酸を表し、「＊＊＊」の付いた２つのアミノ酸は、その側鎖を介してモノスルフィド結合または−Ｓ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｓ−連結部を形成しているアミノ酸を表す、前記［１］に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［２８］
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号１５），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ａｉｂ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号１６），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ａｉｂ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ｆ−ＯＨ（配列番号１７），
Ｈ−Ｉｓｎ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ａｉｂ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ｆ−ＯＨ（配列番号１８），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−フェネチルアミン（配列番号１９），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−ｆ−ＯＨ（配列番号２０），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｃｈａ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｃｈａ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号２１），
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｆ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号２２），
Ｈ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号２３），
Ｈ−Ｒ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号２４），
Ｈ−Ｉｓｎ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｋ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−Ｆ−ＯＨ（配列番号２５），および
ｐＥ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｃ＊−Ｈ−Ｆ−Ｇ−Ｐ−Ｎｌｅ−Ｃ＊−フェネチルアミン（配列番号２６）；
から選択され、２つのシステインアミノ酸Ｃ＊の側鎖は、一緒になって、ジスルフィド結合を形成している、前記［２７］に記載のポリペプチドまたはポリペプチドのアミド、エステル、もしくは塩。
［２９］
その必要のある対象において、ＡＰＪ受容体のアゴニズムに反応を示す疾患または障害を治療または予防する方法であって、治療有効量の前記［１］から［２８］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩を対象に投与することを含む方法。
［３０］
疾患または障害が、急性代償不全心不全（ＡＤＨＦ）、慢性心不全、肺高血圧、心房細動、Ｂｒｕｇａｄａ症候群、心室性頻拍、アテローム性動脈硬化症、高血圧、再狭窄、虚血性心血管疾患、心筋症、心臓線維症、不整脈、水分貯留、糖尿病（妊娠糖尿病を含める）、肥満、末梢動脈疾患、脳血管発作、一過性脳虚血発作、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、熱傷（日焼けを含める）、および子癇前症から選択される、前記［２９］に記載の方法。
［３１］
医薬として使用するための、前記［１］から［２８］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩。
［３２］
ＡＰＪ受容体のアゴニズムに反応を示す疾患または障害の治療または予防において使用するための、前記［１］から［２８］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはそのアミド、塩のエステル。
［３３］
急性代償不全心不全（ＡＤＨＦ）、慢性心不全、肺高血圧、心房細動、Ｂｒｕｇａｄａ症候群、心室性頻拍、アテローム性動脈硬化症、高血圧、再狭窄、虚血性心血管疾患、心筋症、心臓線維症、不整脈、水分貯留、糖尿病（妊娠糖尿病を含める）、肥満、末梢動脈疾患、脳血管発作、一過性脳虚血発作、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、熱傷（日焼けを含める）、または子癇前症の治療において使用するための、前記［１］から［２８］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはそのアミド、塩のエステル。
［３４］
治療有効量の前記［１］から［２８］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩と、治療活性のある１種または複数の共薬剤（co-agent）とを含む組合せ。
［３５］
共薬剤が、イノトロープ、βアドレナリン受容体遮断薬、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害薬、アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬、カルシウムチャネル遮断薬（ＣＣＢ）、エンドセリンアンタゴニスト、レニン阻害薬、利尿薬、ＡｐｏＡ−Ｉ模倣薬、抗糖尿病薬、抗肥満薬、アルドステロン受容体遮断薬、エンドセリン受容体遮断薬、アルドステロンシンターゼ阻害薬（ＡＳＩ）、ＣＥＴＰ阻害薬、抗凝血薬、リラキシン、ＢＮＰ（ネシリチド）、およびＮＥＰ阻害薬から選択される、前記［３４］に記載の組合せ。
［３６］
治療有効量の前記［１］から［２８］のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはそのアミド、エステル、もしくは塩と、１種または複数の薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【外国語明細書】
2018048157000001.pdf