(57)【要約】【課題】  ビタミンK及びカテキンを高濃度に含有すると共に、生体の吸収率が良好な茶粉末及びその製造方法を提供すること。【解決手段】  1g乾燥質量あたり20μg以上のビタミンK及び60mg以上のエピガロカテキンガレート（EGCg）を含有し、1μm〜100μmの大きさである高濃度ビタミンK及びカテキン含有茶葉粉末によって達成される。この茶葉粉末をヒト一人あたり、少なくとも3.6g／日以上摂取できるように含有した健康食品が提供される。また、この茶葉粉末は、（１）70％〜90%の遮光を施した状態で3日間〜8日間に渡って栽培を行う第一遮光工程、（２）前記第一遮光工程の後に90％〜99.9％の遮光を施した状態で4日間〜14日間に渡って栽培を行う第二遮光工程、（３）前記第一及び第二遮光工程後に採取した茶葉を1μm〜100μmに粉砕する粉砕工程によって製造できる。【選択図】          図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
1g乾燥質量あたり20μg以上のビタミンK及び60mg以上のエピガロカテキンガレート（EGCg）を含有し、1μm〜100μmの大きさである高濃度ビタミンK及びカテキン含有茶葉粉末。
【請求項２】
請求項１に記載の高濃度ビタミンK及びカテキン含有茶葉粉末をヒト一人あたり、少なくとも3.6g／日以上摂取できるように含有した食品。
【請求項３】
請求項１に記載の高濃度ビタミンK及びカテキン含有茶葉粉末の製造方法であって、（１）70％〜90%の遮光を施した状態で3日間〜8日間に渡って栽培を行う第一遮光工程、（２）前記第一遮光工程の後に90％〜99.9％の遮光を施した状態で4日間〜14日間に渡って栽培を行う第二遮光工程、（３）前記第一及び第二遮光工程後に採取した茶葉を1μm〜100μmに粉砕する粉砕工程を備えることを特徴とする高濃度ビタミンK及びカテキン含有茶粉末の製造方法。
【請求項４】
前記茶葉は、二番茶である請求項３に記載の高濃度ビタミンK及びカテキン含有茶粉末の製造方法。
【請求項５】
（３）粉砕工程を実施する前に、（３−ａ）色彩選別機によって、茎部分を取り除く選別工程を設けた請求項３または４に記載の高濃度ビタミンK及びカテキン含有茶粉末の製造方法。
【請求項６】
前記（３）粉砕工程において、茶葉を1μm〜50μmに粉砕することを特徴とする請求項３〜５のいずれか一つに記載の高濃度ビタミンK及びカテキン含有茶粉末の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、高濃度ビタミンK及びカテキン含有茶粉末並びにその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
日本全国には、1,000万人以上の骨粗鬆症患者が存在すると推定されている。骨粗鬆症を患った高齢者が骨折すると、寝たきりにつながるリスクが高まるため、骨の健康維持は非常に重要である。骨を強くするには、基本的に食事と運動が大切である。骨強化に貢献する食品因子として知られているものとして、カルシウム・マグネシウム・ビタミンD・ビタミンKなどの機能性成分がある。
ビタミンKについては、光制御によって農産物中の含有量を増加させようとする研究開発が行われている（特許文献１）。特許文献１には、農産物の栽培中の光量を制限することにより、ビタミンK濃度を向上させる技術が開示されている。
また、茶中には、カテキン（エピガロカテキンなど）やビタミンDが含まれており、これらの成分が生体に及ぼす影響が調べられている（特許文献２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２０１６−１３６８５９号公報
【特許文献２】特開２０１３−０５１９２０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、高濃度ビタミンK及びカテキンを含有すると共に生体の吸収率を向上させる技術については、十分に研究開発が行われていなかった。
本発明は、上記した事情に鑑みてなされたものであり、その目的は、ビタミンK及びカテキンを高濃度に含有すると共に、生体の吸収率が良好な茶粉末及びその製造方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者の検討によれば、単位質量あたり所定量のビタミンK及びエピガロカテキンガレート（EGCg）を含有し、所定の大きさを備えた茶葉粉末は、生体への吸収率が良好であることが分かった。また、そのような茶粉末を製造するためには、（ア）二段階で遮光工程を実施することにより、茶葉中のビタミンK及びカテキンの含量を高めると共に、（イ）所定の範囲の茶粉末とすることが重要であることを見出し、基本的には本発明を完成するに至った。
こうして、第一の発明に係る高濃度ビタミンK及びカテキン含有茶粉末は、1g乾燥質量あたり20μgのビタミンK及び60mgエピガロカテキンガレート（EGCg）を含有し、1μm〜100μmの大きさであることを特徴とする。このとき、茶粉末の大きさは、1μm〜50μmであることが好ましく、1μm〜20μmであることが、更に好ましい。
ビタミンKとして、K1〜K5の5種類が知られている。天然のビタミンKは、2-メチル-1,4-ナフトキノンを基本骨格とし、3位に結合した側鎖の構造に違いがある。このうち、ビタミンK1は、フィロキノン、ファイトメナジオンなどと称され、光合成に使うために合成している。本発明において、ビタミンKとしては、ビタミンK1〜ビタミンK5のいずれを用いても良いが、これらのうちビタミンK1を用いることが好ましい。
動物実験の結果によれば、本発明に係る高濃度ビタミンK及びカテキン含有茶葉粉末は、ヒト一人あたり、少なくとも3.6g／日以上摂取することにより、効果を認め得ることが分かった。このとき、本発明の茶葉粉末は、適当な添加剤を加えて加工することにより、液剤、ゼリー飲料、飲料、粉末、顆粒、カプセル錠、グミ及びドリンク剤などとして、いわゆる健康食品として提供できる。また、本発明の茶葉粉末は、そのまま又は上記健康食品を含む菓子として提供できる。
【０００６】
また、高濃度ビタミンK及びカテキン含有茶葉粉末の製造方法は、（１）70％〜90%の遮光を施した状態で3日間〜8日間に渡って栽培を行う第一遮光工程、（２）前記第一遮光工程の後に90％〜99.9％の遮光を施した状態で4日間〜14日間に渡って栽培を行う第二遮光工程、（３）前記第一及び第二遮光工程後に採取した茶葉を（直射日光の当たらない通常の室内の光条件、温度条件で）1μm〜100μm（好ましくは1μm〜50μm、更に好ましくは1μm〜20μm）に粉砕する粉砕工程を備えることを特徴とする。
本発明において、前記茶葉は二番茶であることが好ましい。
また、（３）粉砕工程を実施する前に、（３−ａ）色彩選別機によって、茎部分を取り除く選別工程を設けることが好ましい。
また、第二の発明に係る茶粉末は、上記第一の発明によって製造されたことを特徴とする。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、ビタミンK及びカテキンを高濃度に含有すると共に、生体の吸収率が良好な茶粉末及びその製造方法を提供できる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】遮光率・被覆期間の違いによるビタミンK含有量の推移を示すグラフである。（A)一番茶、(B)二番茶、（C)秋番茶の結果をそれぞれ示す。
【図２】各茶葉中のビタミンKおよびエピガロカテキンガレート(EGCg)含有量を示すグラフである。左：茶期の比較、中：被覆方法の検討、右：色彩選別機による茎除去の効果をそれぞれ示す。
【図３】各種ミルで調製した茶粉末の可溶化率を示すグラフである。(A)カッティングミル及びサイクロンミルの結果を示すグラフ、(B)ジェットミル及びハンマーミルの結果を示すグラフをそれぞれ示す。
【図４】可溶化率と体積平均径との関係を示すグラフである。
【図５】高ビタミンK／EGCg茶粉末（ALTL）がモデルマウスに与える影響を調べた結果を示すグラフである。グラフ中、「＊」は、5%で有意差（p<0.05）が認められたことを示す。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
次に、本発明を実施するための形態について、更に詳細に説明する。但し、本発明は、下記実施形態によって限定されるものではなく、本発明の要旨を変更することなく、様々に変形して実施できる。
１．茶葉の栽培方法の検討
（１）試験方法
茶葉中のビタミンK、エピガロカテキンガレートに注目し、これらの含有量を高める栽培技術の開発を行った。エピガロカテキンガレートの茶葉中含有量についてはすでに多くの研究報告があるが、ビタミンK含有量の変動についてはほとんど知見がなく、系統的にデータを収集した研究は見あたらなかった。
本試験においては、試験圃場にて、以下のスケジュールで茶葉の被覆を行いながら栽培を行い、経時的に新芽を採取した。
(i)遮光率と被覆期間の違いによる茶葉成分含有量の変動
まず、遮光率と被覆期間の違いにより、茶葉中の成分含量の変動を検討するために、茶期及び遮光率・被覆期間を下記のように変化させて検討した。
茶期として、一番茶期、二番茶期及び秋番茶期を検討した。
また、遮光率・被覆期間として、無被覆、60％遮光8日間（短期）、85%遮光8日間、60％遮光14日間及び85％遮光14日間の条件を検討した。
(ii)二段階被覆の検討
次に、二段階被覆の条件を検討するために、茶期及び遮光率・被覆期間を変化させて検討した。
茶期として、一番茶期、二番茶期及び秋番茶期を検討した。
また、遮光率・被覆期間として、無被覆、85％遮光15日間、85%遮光9日間、85％遮光6日間＋98％遮光9日間、85％遮光9日間＋98％遮光6日間及び98％遮光9日間の条件を検討した。
【００１０】
（２）試験結果
表１及び図１には、遮光率・被覆期間の違いによるビタミンK（ビタミンK1）含有量の推移を示した。また、図２には、各種被覆を及ぼして茶葉を栽培した後の茶葉中のビタミンK及びカテキン（EGCg）の含量を調べた結果を示した。
【表１】
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【００１１】
一番茶、二番茶及び秋番茶のそれぞれにおいて、ビタミンKの含有量は、遮光率が高く被覆期間が長いほど高くなった（図１）。ビタミンKは、茶期別では二番茶が一番多くなることが明らかになった（図２左）。また、遮光方法別では、85％６日間＋98％９日間遮光で特にビタミンK含有量が高まり、一方、エピガロカテキンガレート含有量は遮光によって変動が少なく、被覆による影響は少ないと考えられた（図２中央）。
また、部位別ではビタミンK・エピガロカテキンガレートともに茎の含有量は少ないので、色彩選別機によって茎を避けることで、両方の含有量が高まることが明らかになった（図２右）。
上記結果により、生体試験を行うための茶葉として、「二番茶・85％６日間＋98％９日間遮光・色彩選別有り」を用いるのが良いと考えた。
【００１２】
２．茶粉末の粒度と可溶化率の検討
（１）試験方法
次に、ビタミンK等を効率よく吸収できる茶の形態を明らかにするための検討を行った。
茶葉の粉砕には、カッティングミル、サイクロンミル、ハンマーミル及びジェットミルを用いた。カッティングミルとサイクロンミルで粉砕した粉末については、それぞれ目開き500μmの篩に供し、篩上を500μm上のサンプルとした。この篩下を更に250μmの篩に供し、この篩上を500μm下のサンプルとした。この篩下を更に100μmの篩に供し、この篩上を250μm下のサンプルとした。また、篩下を100μm下のサンプルとした。それぞれのサンプルについて、日本食品標準成分表分析マニュアルに準じた方法でビタミンKを抽出し、含有量を測定した。
また、各サンプルに対し、人工消化試験を実施し、メンブレンフィルターを通した後の消化液からビタミンKを抽出した（Nagao A et al, Biosci. Biotechnol. Biocem. 77(5), 1055-1060, 2013）。この方法によって、腸管からの吸収が可能な形態、すなわち可溶化されたビタミンK量を測定できる。測定結果から、ビタミンK試薬の消化液中量／添加量＝可溶化率を100％としたときの各茶粉末の可溶化率を算出した。一方、各茶粉末をレーザー回折・散乱式粒子径分布測定装置に供し、粒子径分布を測定した。
【００１３】
（２）試験結果
表２には、茶葉をサイクロンミル、ジェットミル及びハンマーミルで粉砕処理したときの体積平均径、面積平均径及びメディアン径を示した。
【表２】
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また、表３には、粒子径分布の代表的な指標である体積平均径、面積平均径及びメディアン径と可溶化率の相関係数を示した。各指標と可溶化率とは、非常に高い相関を示した。
【表３】
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【００１４】
また、図３には、各種ミルで茶粉末を調製したときの可溶化率を示した。カッティングミルとサイクロンミルを用いた場合には、茶粉末の粒子径が小さい方が可溶化率が高くなった（図3(A)）。また、ジェットミルとハンマーミルでは、ジェットミルは63％、ハンマーミルは55%の可溶化率を示した（図3(B)）。図４には、可溶化率と体積平均径の関係を示したグラフを示した。
上記結果より、茶粉末は体積平均径として、4.9μm〜100μmの粒子径において、ビタミンKの腸管からの吸収効率が50％以上に高くなることが分かった。
【００１５】
３．動物実験による検討
（１）試験方法
次に、高ビタミンK／EGCg茶（「抗ロコモ緑茶」。二番茶、85％６日間＋98％９日間遮光・色彩選別有り。）をグラインダーで粉末化し、1μm〜100μmの粉末としたALTLがモデルマウスに与える影響を調べた。
ALTL中に含まれるビタミンK1及びカテキン類の含量をHPLCで測定した後、卵巣摘出術（OVX）を施した12週齢C57BL/6系雌性マウスに投与し、骨密度に対する影響を調べた。
試験飼料として、AIN-93配合飼料にALTLを混合したものを用い、卵巣摘出群（CNT）、卵巣疑似手術群（Sham）、0.1, 0.03% ALTL投与群及び0.03％の抗ロコモ緑茶粉末と同量のビタミンK1試薬を添加した群（0.03％VK1）及び0.03％の抗ロコモ緑茶粉末と同量のエピガロカテキンガレートを含む茶煎出液凍結乾燥物を添加した群（0.03％ ALTE）の各群を4週間飼育後、マイクロCTを用いて骨解析を行った。
【００１６】
（２）試験結果
ALTLには、ビタミンKが34.7μg/g、エピガロカテキンガレートが79.8mg/g、その他のカテキン類EC・EGC・ECgがそれぞれ9.1・36.6・14.4mg/g、カフェインが38.1mg/g含まれていた。
図５には、動物実験の結果を示した。骨密度が低下する閉経後女性モデルの卵巣摘出マウスにおいて、餌に重量比0.1％の抗ロコモ緑茶粉末を添加した群（0.1％ALTL）及び0.03％の抗ロコモ緑茶粉末を添加した群（0.03％ALTL）では、卵巣を摘出せず骨密度が低下しない群（Sham）と同等の骨密度が維持された。一方、0.03％の抗ロコモ緑茶粉末と同量のビタミンK試薬を添加した群（0.03％VK1）及び0.03％の抗ロコモ緑茶粉末と同量のエピガロカテキンガレートを含む茶煎出液凍結乾燥物を添加した群（0.03％ALTE、ビタミンKは親油性のため煎出液には含まれない）では、茶粉末ほどは骨密度の低下が抑制できなかった。このため、ビタミンK・エピガロカテキンガレートの両方が骨密度低下抑制に貢献していると考えられた。
また、0.03％の茶粉末を添加した群（0.03％ALTL）では、骨密度の低下が抑制できたことから、ヒトにおける抗ロコモ緑茶粉末の摂取量は、一日当たり1g〜10g程度（好ましくは、2g〜6g程度）であると考えられた（なお、最終的な抗ロコモ緑茶の成分量によっては、多少変動する可能性があり得る）。
【００１７】
４．高濃度ビタミンK及びカテキン含有茶粉末を用いた食品の製造
本実施形態により生産された高濃度ビタミンK及びカテキン含有茶粉末（以下、単に「茶粉末」という）については、そのまま或いは次のようにして食品として提供できる。
茶粉末をそのまま、或いは適当な添加剤（ショ糖、乳糖、結合剤、果汁、香料など）を添加したものを打錠機で圧縮成形することにより、タブレットを製造できる。タブレットを作製するときの用量として、動物実験の結果から、ヒトでは１日あたり3.6gと計算できる。この数値に基づき、タブレットを作製する場合には、１錠〜５錠／回×３回／日として、３錠〜１５錠／日の用量とすることができる。
その他、茶粉末に適当な試料を添加することにより、液剤、ゼリー飲料、飲料、粉末、顆粒、カプセル錠、グミ及びドリンク剤など、並びにこれらを含む菓子などの食物を提供できる。
このように、本実施形態によれば、ビタミンK及びカテキンを高濃度に含有すると共に、生体の吸収率が良好な茶粉末及びその製造方法を提供できた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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