(57)【要約】      （修正有）【課題】特段の原料を追加することなく、冷蔵保存中における乳酸菌の生残率を向上させた発酵乳を製造できる発酵乳の製造方法の提供。【解決手段】原料乳を調製Ｓ１し、必要に応じて均質化Ｓ２した後に、原料乳を殺菌Ｓ３してから、発酵温度の近くまで冷却Ｓ４し、原料乳に乳酸菌スターターを接種Ｓ５して、原料乳を発酵Ｓ７させ、発酵乳を得る。そして、この発酵乳を２０〜３０℃、５分間以上で保持Ｓ８してから、冷蔵保存温度（１〜１０℃）まで冷却Ｓ９する発酵乳の製造方法。好ましくは乳酸菌スターターがブルガリア菌を含み、更に好ましくは、サーモフィルス菌を含む、発酵乳の製造方法。【選択図】図１
2018033415.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
原料乳に乳酸菌スターターを接種して発酵させて得た発酵乳を、２０〜３０℃、５分間以上で保持してから、１〜１０℃に冷却することを特徴とする、発酵乳の製造方法。
【請求項２】
乳酸菌スターターがブルガリア菌を含むことを特徴とする、請求項１に記載の発酵乳の製造方法。
【請求項３】
乳酸菌スターターがサーモフィルス菌を含むことを特徴とする、請求項１または２に記載の発酵乳の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、発酵乳の製造方法に関し、特に、ブルガリア菌およびサーモフィルス菌を含む発酵乳の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヨーグルトは、原料乳に乳酸菌スターター加えて発酵させることにより製造される。乳酸菌スターターには、ブルガリア菌（ラクトバチルス・ブルガリクス）とサーモフィルス菌（ストレプトコッカス・サーモフィルス）が併用されることが多く、これらに加えて、ビフィズス菌等が添加される場合もある。なお、ブルガリア菌とサーモフィルス菌を混合接種（添加）すると、サーモフィルス菌がブルガリア菌の生育に必要な蟻酸を生成し、ブルガリア菌がサーモフィルス菌の増殖を促進するアミノ酸やペプチドを生成するため、これらの共生作用により、乳酸発酵を短時間で進行させることができる。
【０００３】
発酵後のヨーグルトは冷蔵保存されるが、一般的にブルガリア菌に代表されるように、低温耐性が高くない乳酸菌が存在するため、ヨーグルトの冷蔵保存中において、乳酸菌の生菌数が減少することがある。これに対して、ヨーグルトの冷蔵保存中において、乳酸菌の生菌数が減少しにくいことが要求されることがあり、乳酸菌の生残率を向上させる方法が種々で検討されている。
【０００４】
例えば、特許文献１には、乳酸菌による発酵前または発酵後にオレイン酸またはその塩若しくはそのエステルを添加することによって、保存後においても生菌数の減少が少ない低脂肪ヨーグルトを製造できることが記載されている。また、特許文献２には、発酵食品の製造段階においてグァバ葉エキスを添加した培地で乳酸菌を培養することにより、乳酸菌の増殖活性を向上させ、製品化後の生菌数を維持し得ることが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００１−０４５９６８号公報
【特許文献２】特開２０１１−１１９３０５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、特許文献１および２のように、通常の発酵乳の製造には使用しない特定の原料を添加することにより、乳酸菌の生残率を向上させる方法では、実際に添加する原料自体に特有の風味や物性があると、発酵乳の風味や物性の調整が困難であり、また、実際に添加する原料の分だけ、製造費が上昇してしまうという問題がある。
【０００７】
それ故に、本発明は、特段の原料を追加（添加）することなく、冷蔵保存中におけるブルガリア菌等の乳酸菌の生残率を向上させた発酵乳を製造できる発酵乳の製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明に係る発酵乳の製造方法は、原料乳に乳酸菌スターターを接種して、所定の発酵温度、所定の発酵時間で発酵させて得た発酵乳を、２０〜３０℃、５分間以上で保持してから、所定の冷蔵（保存）温度まで冷却することを特徴とするものである。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、特段の原料を追加することなく、冷蔵保存中におけるブルガリア菌等の乳酸菌の生残率を向上させた発酵乳を製造できる発酵乳の製造方法を提供できる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】実施形態に係る発酵乳の製造方法の一例を示す図
【図２】実施形態に係る発酵乳の製造方法の他の一例を示す図
【発明を実施するための形態】
【００１１】
図１は、実施形態に係る発酵乳の製造方法の一例を示す図である。図１に示す製造方法は、乳酸菌スターターを接種した原料乳を容器に充填して密封してから発酵させるものであり、ハード（セット）タイプ（固形状）やプレーンタイプの発酵乳（ヨーグルト）の製造に適している。
【００１２】
まず、撹拌機能とジャケット付のタンク等を用いて、生乳、脱脂乳、クリーム、水等の原料を混合して、原料乳（ヨーグルトミックス）を調製（調合）する（ステップＳ１）。生乳および脱脂乳では、これらの両方を使用しても良いし、これらの何れかのみを使用しても良い。ここで、脱脂乳とは、生乳からクリーム成分（乳脂肪分）を分離した脱脂乳そのものの形態と、脱脂乳そのものから水分を除去して濃縮させた脱脂濃縮乳の形態と、脱脂乳そのものから水分を除去して濃縮・乾燥させた脱脂粉乳の形態とを含むものとする。そして、脱脂乳、脱脂濃縮乳および脱脂粉乳では、これらの全部を使用しても良いし、これらの一部や何れかのみを使用しても良い。また、脱脂乳、脱脂濃縮乳および脱脂粉乳では、通常の脱脂乳、脱脂濃縮乳および脱脂粉乳の他に、ナトリウムやカリウム等のミネラル類を低減した脱塩脱脂乳、脱塩脱脂濃縮乳および脱塩脱脂粉乳を使用しても良い。なお、クリームでは、例えば、発酵乳に滑らかさを付与するため、原料乳に配合され、生クリームの他に、コンパウンドクリーム等を使用しても良い。
【００１３】
次に、ホモミキサーやホモジナイザー等を用いて、原料乳を均質化する（ステップＳ２）。このステップでは、生乳やクリームに含まれる乳脂肪分の分離や浮上を防止や抑制するため、脂肪球を細かく砕いて微粒化させ、原料乳に分散させる。ただし、生乳やクリームを配合しない場合には、このステップを省略してもよい。
【００１４】
次に、間接加熱装置や直接加熱装置や通電加熱装置等を用いて、原料乳を所定の殺菌温度まで加熱し、所定の殺菌時間で保持して、原料乳を殺菌する（ステップＳ３）。ここで、必要に応じて、間接加熱装置やタンク等を用いて、原料乳を所定の予熱温度まで加熱し、所定の予熱時間で保持してから、原料乳を殺菌する。このステップでは、原料乳を殺菌する前に、必要に応じて、原料乳のｐＨを調整しても良い。そして、原料乳を殺菌した後には、例えば、原料乳を発酵温度の近くまで冷却する（ステップＳ４）。
【００１５】
次に、原料乳に乳酸菌スターターを接種して攪拌（混合）する（ステップＳ５）。乳酸菌スターターでは、何れの乳酸菌を含むものを使用しても良いが、好ましくは、ブルガリア菌を含むものを使用し、より好ましくは、ブルガリア菌およびサーモフィルス菌を含むものを使用する。なお、これらの乳酸菌に加えて、例えば、ガゼリ菌、カゼイ菌、アシドフィルス菌、ビフィズス菌、プロピオン酸菌等を追加して使用しても良い。
【００１６】
次に、原料乳を容器に充填し、この容器を蓋等で密封する（ステップＳ６）。なお、原料乳を容器に充填する前に、タンク（回分式）や配管（インライン式）等を用いて、副原料（糖液、果肉、野菜、果汁、野菜汁、ソース、プレパレーション等）を発酵乳に追加（混合）しても良いし、原料乳を容器に充填する際に、個々の容器で、副原料を発酵乳に追加しても良い。その後、恒温室等を用いて、原料乳を所定の発酵温度、所定の発酵時間で発酵させる（ステップＳ７）。ここで、乳酸菌スターターの種類にもよるが、発酵温度では、例えば３２〜４５℃であり、好ましくは３５〜４５℃であり、より好ましくは３７〜４３℃であり、さらに好ましくは４０〜４３℃である。そして、発酵時間では、例えば１〜３６時間であり、好ましくは１〜２４時間であり、より好ましくは２〜１２時間であり、さらに好ましくは２〜８時間であり、さらに好ましくは３〜６時間であり、さらに好ましくは３〜４時間である。また、発酵を終了する時の酸度（乳酸酸度）では、無脂乳固形分が９〜１０重量％の原料乳（ヨーグルトミックス）の場合に、例えば０．６％であり、好ましくは０．６５％であり、より好ましくは０．６７％であり、さらに好ましくは０．７％であり、さらに好ましくは０．７２％である。
【００１７】
発酵を終了した後には、恒温室等を用いて、発酵乳を２０〜３０℃まで冷却し、２０〜３０℃、５分間以上で保持する（ステップＳ８）。このステップでは、発酵乳の保持温度が３０℃超であると、発酵が更に進行して酸度が高くなるため、好ましくは、発酵温度から３０℃以下まで短時間で冷却（急冷）する。ここで、発酵乳の保持温度では、例えば２０〜３０℃であり、好ましくは２０〜２８℃であり、より好ましくは２０〜２６℃であり、さらに好ましくは２２〜２６℃である。そして、発酵乳の保持時間では、例えば５分間以上であり、好ましくは５分間〜５時間であり、より好ましくは１０分間〜５時間であり、さらに好ましくは２０分間〜５時間であり、さらに好ましくは０．５〜５時間であり、さらに好ましくは１〜５時間であり、さらに好ましくは１．５〜４時間であり、さらに好ましくは１．５〜３．５時間であり、さらに好ましくは１．７〜３．５時間であり、さらに好ましくは１．７〜３時間である。その後、冷蔵室等を用いて、発酵乳を冷蔵（保存）温度まで短時間で冷却して保管する（ステップＳ９）。ここで、発酵乳の冷蔵（保存）温度では、例えば１〜１０℃であり、好ましくは１〜８℃であり、より好ましくは３〜８℃であり、３〜５℃である。なお、短時間とは、例えば１〜２０分間であり、好ましくは１〜１５分間であり、より好ましくは２〜１０分間であり、さらに好ましくは２〜５分間である。
【００１８】
また、発酵を終了した後には、恒温室等を用いて、それぞれの発酵乳の至適の発酵温度に比べて１０〜２５℃の何れかの低い温度差に冷却し、それぞれの発酵乳の至適の発酵温度に比べて１０〜２５℃の何れかの高い温度差、１分間以上で保持する（ステップＳ８）。ここで、それぞれの発酵乳の至適の発酵温度に比べて冷却する温度差では、例えば１０〜２３℃であり、好ましくは１０〜２０℃であり、より好ましくは１０〜１８℃であり、さらに好ましくは１０〜１５℃である。そして、発酵乳の保持時間では、例えば５分間以上であり、好ましくは５分間〜５時間であり、より好ましくは１０分間〜５時間であり、さらに好ましくは２０分間〜５時間であり、さらに好ましくは０．５〜５時間であり、さらに好ましくは１〜５時間であり、さらに好ましくは１．５〜４時間であり、さらに好ましくは１．５〜３．５時間であり、さらに好ましくは１．７〜３．５時間であり、さらに好ましくは１．７〜３時間である。
【００１９】
図２は、実施形態に係る発酵乳の製造方法の他の一例を示す図である。図２に示す製造方法は、乳酸菌スターターを接種した原料乳をタンク等に充填して密封してから発酵させるものであり、ソフトタイプ（糊状）やドリンクタイプ（液状）の発酵乳の製造に適している。
【００２０】
まず、原料を混合して、原料乳を調製し（ステップＳ１）、原料乳を均質化（ステップＳ２）してから、原料乳を殺菌する（ステップＳ３）。そして、原料乳を殺菌した後には、例えば、原料乳を発酵温度の近くまで冷却（ステップＳ４）してから、乳酸菌スターターを接種して攪拌する（ステップＳ５）。なお、これらのステップＳ１〜Ｓ５は、図１で説明したものと同じである。
【００２１】
次に、タンク等を用いて、原料乳を所定の発酵温度、所定の発酵時間で発酵させる（ステップＳ６’）。ここで、発酵温度、発酵時間、発酵を終了する時の酸度等は、図１で説明したものと同じである。
【００２２】
発酵を終了した後には、間接加熱装置やタンク等を用いて、発酵乳を２０〜３０℃まで冷却し、２０〜３０℃で保持する（ステップＳ７’）。ここで、発酵乳の保持温度、発酵乳の保持時間等は、図１で説明したものと同じである。その後、間接加熱装置やタンク等を用いて、発酵乳を冷蔵温度まで急冷する（ステップＳ８’）。ここで、発酵乳の冷蔵温度等は、図１で説明したものと同じである。
【００２３】
次に、発酵乳を容器に充填し、この容器を蓋等で密閉する（ステップＳ９’）。なお、発酵乳を容器に充填する前に、タンク（回分式）や配管（インライン式）等を用いて、副原料（糖液、果肉、野菜、果汁、野菜汁、ソース、プレパレーション等）を発酵乳に追加（混合）しても良いし、発酵乳を容器に充填する際に、個々の容器で、副原料を発酵乳に追加しても良い。
【００２４】
一般的な発酵乳の製造方法では、発酵が終了すると、発酵乳を冷蔵保存温度まで短時間で（速やかに）冷却（急冷）して保管する。これに対して、本発明に係る発酵乳の製造方法では、発酵が終了してから、発酵乳を冷蔵保存温度まで冷却する間に、発酵乳を発酵温度（３２〜４５℃）から中温保持温度（２０〜３０℃）まで冷却して、この温度域に５分間以上で保持する工程（図１のステップＳ８、図２のステップＳ７’）が設けられる。この工程を設けることにより、本発明に係る発酵乳の製造方法で製造した発酵乳では、一般的な発酵乳の製造方法で製造した発酵乳と比べて、冷蔵保存中（冷蔵保存後）におけるブルガリア菌等の乳酸菌の生残率を向上させることができる。
【００２５】
従来技術（技術常識）では、１０℃以下で、乳酸菌の活性が低下し、乳酸菌が増殖しにくいことが知られている。しかしながら、本発明の発明者らは、本発明に係る発酵乳の製造方法のように、発酵を終了した後に、発酵乳を発酵温度（３２〜４５℃）から中温保持温度（２０〜３０℃）まで冷却して、発酵乳を中温保持温度（２０〜３０℃）の温度域において、乳酸菌の活性が低下しすぎない程度の時間（期間）で保持して、乳酸菌に適度な冷却ストレス（コールドショック）を与えると、ブルガリア菌等の乳酸菌の低温耐性が発現や向上されることを見出した。また、本発明の発明者らは、一般的な発酵乳の製造方法のように、発酵温度（３２〜４５℃）から冷蔵（低温）保存温度（１〜１０℃）まで急冷すると、ブルガリア菌等の乳酸菌の低温耐性が十分に発現や向上されていないことを見出した。すなわち、本発明に係る発酵乳の製造方法のように、発酵を終了した後に、発酵乳を発酵温度（３２〜４５℃）から中温保持温度（２０〜３０℃）まで冷却して、発酵乳を中温保持温度（２０〜３０℃）の温度域において、乳酸菌の活性が低下しすぎない程度の時間（期間）で保持して、乳酸菌に適度な冷却ストレスを与えると、冷蔵保存中におけるブルガリア菌等の乳酸菌の生残率を向上させることができることを見出した。
【００２６】
また、本発明に係る発酵乳の製造方法では、ブルガリア菌等の乳酸菌の生残率を向上させる目的において、特段の原料を追加（添加）する必要がないので、実際に添加した原料により、風味や物性が損なわれることがなく、また、実際に添加した原料の分だけ、製造費が上昇（増加）することもない。
【００２７】
また、本発明に係る発酵乳の製造方法では、ブルガリア菌等の乳酸菌の生残率を向上させることができるため、冷蔵保存中におけるブルガリア菌等の乳酸菌数（生菌数）を所定の数値以上で維持することができる。すなわち、ブルガリア菌等の乳酸菌数を規格値に設けている発酵乳等の商品（特定保健用食品等）では、冷蔵保存中におけるブルガリア菌等の乳酸菌数を所定の数値以上で維持しながら、賞味期限を効果的に延長することができる。このとき、本発明に係る発酵乳の製造方法で製造した発酵乳では、一般的な発酵乳の製造方法で製造した発酵乳と比べて、賞味期限の延長時間（延期の日数）が例えば２日間以上であり、好ましくは３日間以上であり、より好ましくは５日間以上であり、さらに好ましくは７日間以上であり、さらに好ましくは１０日間以上であり、さらに好ましくは１４日間以上である。
【００２８】
また、本発明に係る発酵乳の製造方法では、ブルガリア菌等の乳酸菌の生残率を向上させることができるため、冷蔵保存中におけるブルガリア菌等の乳酸菌数（生菌数）を所定の数値以上で維持することができる。すなわち、ブルガリア菌等の乳酸菌数を規格値に設けている発酵乳等の商品（特定保健用食品等）では、冷蔵保存中におけるブルガリア菌等の乳酸菌数を所定の数値以上で維持しながら、乳酸菌スターターの接種量（添加濃度）を効果的に低減して、製造費も効果的に低減することができる。このとき、本発明に係る発酵乳の製造方法では、一般的な発酵乳の製造方法と比べて、乳酸菌スターターの接種量の低減率（減少分の割合）が例えば１０％以上であり、好ましくは２０％以上であり、より好ましくは３０％以上であり、さらに好ましくは５０％以上であり、さらに好ましくは７０％以上であり、さらに好ましくは９０％以上である。
【００２９】
本発明に係る発酵乳の製造方法で製造した発酵乳では、一般的な発酵乳の製造方法で製造した発酵乳と比べて、冷蔵保存中（冷蔵保存後）におけるブルガリア菌等の乳酸菌のいずれかの生残率が冷蔵保存の１６日目において、好ましくは１．１倍以上であり、より好ましくは１．２倍以上であり、さらに好ましくは１．３倍以上であり、さらに好ましくは１．５倍以上であり、さらに好ましくは１．８倍以上であり、さらに好ましくは２倍以上である。また、本発明に係る発酵乳の製造方法で製造した発酵乳では、一般的な発酵乳の製造方法で製造した発酵乳と比べて、冷蔵保存中におけるブルガリア菌等の乳酸菌のいずれかの生残率が冷蔵保存の１７日目において、好ましくは１．１倍以上であり、より好ましくは１．２倍以上であり、さらに好ましくは１．３倍以上であり、さらに好ましくは１．５倍以上であり、さらに好ましくは１．８倍以上であり、さらに好ましくは２倍以上である。また、本発明に係る発酵乳の製造方法で製造した発酵乳では、一般的な発酵乳の製造方法で製造した発酵乳と比べて、冷蔵保存中におけるブルガリア菌等の乳酸菌のいずれかの生残率が冷蔵保存の２５日目において、好ましくは１．１倍以上であり、より好ましくは１．２倍以上であり、さらに好ましくは１．３倍以上であり、さらに好ましくは１．５倍以上であり、さらに好ましくは１．８倍以上であり、さらに好ましくは２倍以上である。また、本発明に係る発酵乳の製造方法で製造した発酵乳では、一般的な発酵乳の製造方法で製造した発酵乳と比べて、冷蔵保存中におけるブルガリア菌等の乳酸菌のいずれかの生残率が冷蔵保存の３５日目において、好ましくは１．１倍以上であり、より好ましくは１．２倍以上であり、さらに好ましくは１．３倍以上であり、さらに好ましくは１．５倍以上であり、さらに好ましくは１．８倍以上であり、さらに好ましくは２倍以上である。なお、生残率では、製造日の乳酸菌数に対する冷蔵保存した後の乳酸菌数の割合（％）として算出した。
【００３０】
一方、本発明は、原料乳に乳酸菌スターターを接種して、所定の発酵温度、所定の発酵時間で発酵させて得た発酵乳を、２０〜３０℃、５分間以上で保持してから、所定の冷蔵（保存）温度まで冷却することを特徴とする、冷蔵保存中における乳酸菌数（生菌数）の維持方法でもある。また、本発明は、原料乳に乳酸菌スターターを接種して、所定の発酵温度、所定の発酵時間で発酵させて得た発酵乳を、２０〜３０℃、５分間以上で保持してから、所定の冷蔵（保存）温度まで冷却することを特徴とする、冷蔵保存中における乳酸菌の生残率（生残性）の向上方法でもある。このとき、本発明に係る発酵乳の製造方法の操作条件や処理条件等を適宜採用することができる。なお、発酵乳について、製造日の乳酸菌数に対する冷蔵保存した後の乳酸菌数の割合（％）を生残率として定義した。
【実施例】
【００３１】
以下、本発明を具体的に実施した実施例を説明する。
【００３２】
（実施例１）
実施例１では、発酵を終了した後に、発酵乳を２５℃（１０〜２０℃）、２時間（１時間以上）で保持してから、冷蔵保存温度まで冷却した。
【００３３】
まず、生乳：５００ｇ、脱脂粉乳：４９．８ｇ、生クリーム：２２ｇ、水：３９８．２ｇを混合して、原料乳（ヨーグルトミックス）を調製した。原料乳を９５℃、５分間で加熱（殺菌）した後に、４３℃に冷却した。次に、乳酸菌スターター（明治ブルガリアヨーグルトＬＢ８１（商品名、株式会社 明治）から分離したバルクスターター）を３０ｇ（原料乳の合計の３重量％）接種した後に、プラスチック製のカップ容器（容量：１００ｇ）へ原料乳（乳酸菌スターターを含む）を充填し、４３℃の発酵室に静置して発酵させた。そして、乳酸酸度が０．７％に到達した時点で発酵を終了した。
【００３４】
発酵を終了した後に、カップ容器を冷水浴させて、中温保持温度である２５℃まで短時間で冷却してから、２５℃の恒温室を用いて、２時間で保持した。その後、カップ容器を冷水浴させて、冷蔵保存温度である５℃まで短時間で冷却し、実施例１に係るセット（ハード）タイプ（かつプレーンタイプ）の発酵乳（ヨーグルト）を製造した。そして、５℃の冷蔵室を用いて、この製造した後の発酵乳を５℃で保管した。
【００３５】
（比較例１）
比較例１では、発酵を終了した後に、発酵乳を冷蔵保存温度まで（一気に）冷却した。
【００３６】
実施例１と同じ原料乳および製造方法で発酵させた。発酵を終了した後に、カップ容器を冷水浴させて、冷蔵保存温度である５℃まで短時間で冷却し、比較例１に係るセット（ハード）タイプ（かつプレーンタイプ）の発酵乳（ヨーグルト）を製造した。そして、５℃の冷蔵室を用いて、この製造した後の発酵乳を５℃で保管した。
【００３７】
実施例１に係る発酵乳および比較例１に係る発酵乳について、製造日の乳酸菌数（生菌数）と、製造日から１７日間で冷蔵保存（５℃で保管）した後の乳酸菌数を測定した。また、製造日の乳酸菌数に対する冷蔵保存した後の乳酸菌数の割合（％）を生残率として算出した。
【００３８】
表１に、実施例１および比較例１に係る発酵乳の乳酸菌数および生残率を示す。なお、表１に示す乳酸菌数の測定値は、それぞれ３個の試料の測定値の平均値である。
【００３９】
【表１】
2018033415.tif 000003
【００４０】
５℃の冷蔵室を用いて、実施例１に係る発酵乳を５℃、１７日間で保管したところ、ブルガリア菌の菌数は、１８．７×１０７ｃｆｕ／ｇから５．０×１０７ｃｆｕ／ｇに減少し、発酵乳の製造日から１７日間で冷蔵保存した後に、ブルガリア菌の生残率は、２６．７％であった。また、サーモフィルス菌の菌数は、２５．０×１０８ｃｆｕ／ｇから３９．０×１０８ｃｆｕ／ｇに増加し、発酵乳の製造日から１７日間で冷蔵保存した後に、サーモフィルス菌の生残率は、１５６．０％であった。また、発酵乳の製造日から１７日間で冷蔵保存した後に、酸度は、０．９３％であった。
【００４１】
一方、５℃の冷蔵室を用いて、比較例１に係る発酵乳を５℃、１７日間で保管したところ、ブルガリア菌の菌数は、１６．７×１０７ｃｆｕ／ｇから２．２×１０７ｃｆｕ／ｇに減少し、発酵乳の製造日から１７日間で冷蔵保存した後に、ブルガリア菌の生残率は、１３．２％であった。また、サーモフィルス菌の菌数は、２２．７×１０８ｃｆｕ／ｇから４２．０×１０８ｃｆｕ／ｇに増加し、発酵乳の製造日から１７日間で冷蔵保存した後に、サーモフィルス菌の生残率は、１８５．０％であった。また、発酵乳の製造日から１７日間で冷蔵保存した後に、酸度は、０．８６％であった。
【００４２】
以上より、発酵乳を冷蔵（５℃）にて、所定の期間（発酵乳の製造日から１７日間）で保管した場合、実施例１に係る発酵乳では、比較例１に係る発酵乳と比べて、ブルガリア菌の生残率が約２倍に増加した。なお、実施例１に係る発酵乳では、比較例１に係る発酵乳と比べて、サーモフィルス菌の生残率は増加していなかったが、サーモフィルス菌の生残率は十分な数値であった。
【００４３】
（実施例２）
実施例２では、発酵を終了した後に、発酵乳を２５℃、２時間で保持してから、冷蔵保存温度まで冷却した。
【００４４】
まず、生乳：５００ｇ、脱脂粉乳：４９．８ｇ、生クリーム：２２ｇ、水：３９８．２ｇを混合して、原料乳（ヨーグルトミックス）を調製した。原料乳を９５℃、５分間で加熱（殺菌）した後に、４３℃に冷却した。次に、乳酸菌スターター（明治十勝ヨーグルト（商品名、株式会社 明治）から分離したバルクスターター）を３０ｇ（原料乳の合計の３重量％）接種した後に、プラスチック製のカップ容器（容量：１００ｇ）へ原料乳（乳酸菌スターターを含む）を充填し、４３℃の発酵室に静置して発酵させた。そして、乳酸酸度が０．７％に到達した時点で発酵を終了した。
【００４５】
発酵を終了した後に、カップ容器を冷水浴させて、中温保持温度である２５℃まで短時間で冷却してから、２５℃の恒温室を用いて、２時間で保持した。その後、カップ容器を冷水浴させて、冷蔵保存温度である５℃まで短時間で冷却し、実施例２に係るセット（ハード）タイプの発酵乳（ヨーグルト）を製造した。そして、５℃の冷蔵室を用いて、この製造した後の発酵乳を５℃で保管した。
【００４６】
（比較例２）
比較例２では、発酵を終了した後に、発酵乳を冷蔵保存温度まで（一気に）冷却した。
【００４７】
実施例２と同じ原料乳および製造方法で発酵させた。発酵を終了した後に、カップ容器を冷水浴させて、冷蔵保存温度である５℃まで短時間で冷却し、比較例２に係るセット（ハード）タイプの発酵乳（ヨーグルト）を製造した。そして、５℃の冷蔵室を用いて、この製造した後の発酵乳を５℃で保管した。
【００４８】
実施例２に係る発酵乳および比較例２に係る発酵乳について、製造日の乳酸菌数（生菌数）と、製造日から１６日間で冷蔵保存（５℃で保管）した後の乳酸菌数と、製造日から２５日間で冷蔵保存（５℃で保管）した後の乳酸菌数と、製造日から３５日間で冷蔵保存（５℃で保管）した後の乳酸菌数を測定した。また、製造日の乳酸菌数に対する冷蔵保存した後の乳酸菌数の割合（％）を生残率として算出した。
【００４９】
表２に、実施例２および比較例２に係る発酵乳の乳酸菌数および生残率を示す。なお、表２に示す乳酸菌数の測定値は、それぞれ２個の試料の測定値の平均値である。
【００５０】
【表２】
2018033415.tif 000004
【００５１】
５℃の冷蔵室を用いて、実施例２に係る発酵乳を５℃、１６日間で保管したところ、ブルガリア菌の菌数は、１５．５×１０７ｃｆｕ／ｇから１６．０×１０７ｃｆｕ／ｇに増加し、発酵乳の製造日から１６日間で冷蔵保存した後に、ブルガリア菌の生残率は、１０３．２％であった。また、発酵乳の製造日から１６日間で冷蔵保存した後に、サーモフィルス菌の菌数は、１２．６×１０８ｃｆｕ／ｇから９．８×１０８ｃｆｕ／ｇに減少し、サーモフィルス菌の生残率は、７７．８％であった。
【００５２】
そして、５℃の冷蔵室を用いて、実施例２に係る発酵乳を５℃、２５日間で保管したところ、ブルガリア菌の菌数は、１１．５×１０７ｃｆｕ／ｇであり、発酵乳の製造日から２５日間で冷蔵保存した後に、ブルガリア菌の生残率は、７４．２％であった。また、サーモフィルス菌の菌数は、１１．６×１０８ｃｆｕ／ｇであり、発酵乳の製造日から２５日間で冷蔵保存した後に、サーモフィルス菌の生残率は、９２．１％であった。
【００５３】
そして、５℃の冷蔵室を用いて、実施例２に係る発酵乳を５℃、３５日間で保管したところ、ブルガリア菌の菌数は、９．０×１０７ｃｆｕ／ｇであり、発酵乳の製造日から３５日間で冷蔵保存した後に、ブルガリア菌の生残率は、５８．１％であった。また、サーモフィルス菌の菌数は、９．２×１０８ｃｆｕ／ｇであり、発酵乳の製造日から３５日間で冷蔵保存した後に、サーモフィルス菌の生残率は、７３．０％であった。
【００５４】
一方、５℃の冷蔵室を用いて、比較例２に係る発酵乳を５℃、１６日間で保管したところ、ブルガリア菌の菌数は、１１．５×１０７ｃｆｕ／ｇから４．５×１０７ｃｆｕ／ｇに減少し、発酵乳の製造日から１６日間で冷蔵保存した後に、ブルガリア菌の生残率は、３９．１％であった。また、サーモフィルス菌の菌数は、１１．８×１０８ｃｆｕ／ｇから１２．０×１０８ｃｆｕ／ｇに増加し、発酵乳の製造日から１６日間で冷蔵保存した後に、サーモフィルス菌の生残率は、１０１．７％であった。
【００５５】
そして、５℃の冷蔵室を用いて、比較例２に係る発酵乳を５℃、２５日間で保管したところ、ブルガリア菌の菌数は、４．０×１０７ｃｆｕ／ｇであり、発酵乳の製造日から２５日間で冷蔵保存した後に、ブルガリア菌の生残率は、３４．８％であった。また、サーモフィルス菌の菌数は、９．２×１０８ｃｆｕ／ｇであり、発酵乳の製造日から２５日間で冷蔵保存した後に、サーモフィルス菌の生残率は、７８．０％であった。
【００５６】
そして、５℃の冷蔵室を用いて、比較例２に係る発酵乳を５℃、３５日間で保管したところ、ブルガリア菌の菌数は、３．５×１０７ｃｆｕ／ｇであり、発酵乳の製造日から３５日間で冷蔵保存した後に、ブルガリア菌の生残率は、３０．４％であった。また、サーモフィルス菌の菌数は、８．０×１０８ｃｆｕ／ｇであり、発酵乳の製造日から３５日間で冷蔵保存した後に、サーモフィルス菌の生残率は、６７．８％であった。
【００５７】
以上より、発酵乳を冷蔵（５℃）にて、所定の期間（発酵乳の製造日から１６日間、２５日間および３５日間）で保管した場合、実施例２に係る発酵乳では、比較例２に係る発酵乳と比べて、それぞれのブルガリア菌の生残率が２．６倍（１６日間）、２．１倍（２５日間）および１．９倍（３５日間）に増加した。また、実施例２に係る発酵乳では、比較例２に係る発酵乳と比べて、それぞれのサーモフィルス菌の生残率が０．８倍（１６日間）に減少した一方で、１．２倍（２５日間）および１．１倍（３５日間）に増加した。なお、実施例２に係る発酵乳では、比較例２に係る発酵乳と比べて、必ずしもサーモフィルス菌の生残率は増加していなかったが、それぞれのサーモフィルス菌の生残率は十分な数値であった。
【００５８】
（実施例３）
実施例３では、発酵を終了した後に、発酵乳を２５℃、２時間で保持してから、冷蔵保存温度まで冷却した。
【００５９】
まず、生乳：５００ｇ、脱脂粉乳：４９．８ｇ、生クリーム：２２ｇ、水：３９８．２ｇを混合して、原料乳（ヨーグルトミックス）を調製した。原料乳を９５℃、５分間で加熱（殺菌）した後に、４３℃に冷却した。次に、乳酸菌スターター（明治プロビオヨーグルトＲ−１（商品名、株式会社 明治）から分離したバルクスターター）を３０ｇ（原料乳の合計の３重量％）接種した後に、プラスチック製のカップ容器（容量：１００ｇ）へ原料乳（乳酸菌スターターを含む）を充填し、４３℃の発酵室に静置して発酵させた。そして、乳酸酸度が０．７％に到達した時点で発酵を終了した。
【００６０】
発酵を終了した後に、カップ容器を冷水浴させて、中温保持温度である２５℃まで短時間で冷却してから、２５℃の恒温室を用いて、２時間で保持した。その後、カップ容器を冷水浴させて、冷蔵保存温度である５℃まで短時間で冷却し、実施例３に係るセット（ハード）タイプの発酵乳（ヨーグルト）を製造した。そして、５℃の冷蔵室を用いて、この製造した後の発酵乳を５℃で保管した。
【００６１】
（比較例３）
比較例３では、発酵を終了した後に、発酵乳を冷蔵保存温度まで（一気に）冷却した。
【００６２】
実施例３と同じ原料乳および製造方法で発酵させた。発酵を終了した後に、カップ容器を冷水浴させて、冷蔵保存温度である５℃まで短時間で冷却し、比較例３に係るセット（ハード）タイプの発酵乳（ヨーグルト）を製造した。そして、５℃の冷蔵室を用いて、この製造した後の発酵乳を５℃で保管した。
【００６３】
実施例３に係る発酵乳および比較例３に係る発酵乳について、製造日の乳酸菌数（生菌数）と、製造日から１６日間で冷蔵保管（５℃で保管）した後の乳酸菌数と、製造日から２５日間で冷蔵保管（５℃で保管）した後の乳酸菌数と、製造日から３５日間で冷蔵保管（５℃で保管）した後の乳酸菌数を測定した。また、製造日の乳酸菌数に対する冷蔵保存した後の乳酸菌数の割合（％）を生残率として算出した。
【００６４】
表３に、実施例３および比較例３に係る発酵乳の乳酸菌数および生残率を示す。なお、表３に示す乳酸菌数の測定値は、それぞれ２個の試料の測定値の平均値である。
【００６５】
【表３】
2018033415.tif 000005
【００６６】
５℃の冷蔵室を用いて、実施例３に係る発酵乳を５℃、１６日間で保管したところ、ブルガリア菌の菌数は、１２．２×１０７ｃｆｕ／ｇから１３．７×１０７ｃｆｕ／ｇに増加し、発酵乳の製造日から１６日間で冷蔵保存した後に、ブルガリア菌の生残率は、１１２．３％であった。また、発酵乳の製造日から１６日間で冷蔵保存した後に、サーモフィルス菌の菌数は、８．９×１０８ｃｆｕ／ｇから９．９×１０８ｃｆｕ／ｇに減少し、サーモフィルス菌の生残率は、１１１．２％であった。
【００６７】
そして、５℃の冷蔵室を用いて、実施例３に係る発酵乳を５℃、２５日間で保管したところ、ブルガリア菌の菌数は、７．９×１０７ｃｆｕ／ｇであり、発酵乳の製造日から２５日間で冷蔵保存した後に、ブルガリア菌の生残率は、６４．８％であった。また、サーモフィルス菌の菌数は、９．６×１０８ｃｆｕ／ｇであり、発酵乳の製造日から２５日間で冷蔵保存した後に、サーモフィルス菌の生残率は、１０７．９％であった。
【００６８】
そして、５℃の冷蔵室を用いて、実施例３に係る発酵乳を５℃、３５日間で保管したところ、ブルガリア菌の菌数は、２．３×１０７ｃｆｕ／ｇであり、発酵乳の製造日から３５日間で冷蔵保存した後に、ブルガリア菌の生残率は、１８．９％であった。また、サーモフィルス菌の菌数は、５．８×１０８ｃｆｕ／ｇであり、発酵乳の製造日から３５日間で冷蔵保存した後に、サーモフィルス菌の生残率は、６５．２％であった。
【００６９】
一方、５℃の冷蔵室を用いて、比較例３に係る発酵乳を５℃、１６日間で保管したところ、ブルガリア菌の菌数は、１４．７×１０７ｃｆｕ／ｇから０．３×１０７ｃｆｕ／ｇに減少し、発酵乳の製造日から１６日間で冷蔵保存した後に、ブルガリア菌の生残率は、２．０％であった。また、サーモフィルス菌の菌数は、１０．２×１０８ｃｆｕ／ｇから８．２×１０８ｃｆｕ／ｇに増加し、発酵乳の製造日から１６日間で冷蔵保存した後に、サーモフィルス菌の生残率は、８０．４％であった。
た。
【００７０】
そして、５℃の冷蔵室を用いて、比較例３に係る発酵乳を５℃、２５日間で保管したところ、ブルガリア菌の菌数は、１０７ｃｆｕ／ｇ未満であった。また、サーモフィルス菌の菌数は、８．９×１０８ｃｆｕ／ｇであり、発酵乳の製造日から２５日間で冷蔵保存した後に、サーモフィルス菌の生残率は、８７．３％であった。
【００７１】
そして、５℃の冷蔵室を用いて、比較例３に係る発酵乳を５℃、３５日間で保管したところ、ブルガリア菌の菌数は、１０７ｃｆｕ／ｇ未満であった。また、サーモフィルス菌の菌数は、４．６×１０８ｃｆｕ／ｇであり、発酵乳の製造日から３５日間で冷蔵保存した後に、サーモフィルス菌の生残率は、４５．１％であった。
【００７２】
以上より、発酵乳を冷蔵（５℃）にて、所定の期間（発酵乳の製造日から１６日間、２５日間および３５日間）で保管した場合、実施例３に係る発酵乳では、比較例３に係る発酵乳と比べて、それぞれのブルガリア菌の生残率が５５倍以上に増加した。また、実施例３に係る発酵乳では、比較例３に係る発酵乳と比べて、それぞれのサーモフィルス菌の生残率が１．３倍（１６日間）、１．２倍（２５日間）および１．４倍（３５日間）に増加した。
【００７３】
実施例１〜３および比較例１〜３の結果より、発酵を終了した後に、発酵乳を２０〜３０℃まで冷却して、１時間以上で保持してから、冷蔵保存温度まで冷却することにより、乳酸菌スターターに含まれるブルガリア菌およびサーモフィルス菌の菌種にかかわらず、冷蔵保存中におけるブルガリア菌やサーモフィルス菌の生残率を有意に向上できることが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００７４】
本発明は、冷蔵保存中におけるブルガリア菌等の乳酸菌の生残数が向上した発酵乳の製造方法に利用できる。
【図１】
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【図２】
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