(57)【要約】【課題】本発明の課題は、腰痛や膝関節の炎症から起こり得る負の連鎖を解決することであり、この課題を解決するには、腰痛および膝関節の炎症を予防および、または改善する抗炎症作用を有し、日常的に摂取することができる抗炎症剤組成物を開発し提供することである。【解決手段】キランソウ属に属する植物からなる群より選ばれる少なくとも１種または２種以上の植物の粉末、抽出物または該抽出物の粗精製物もしくは精製物を有効成分として含む抗炎症剤組成物を提供する。本発明の抗炎症剤組成物を日常的に継続して摂取することにより腰痛および膝関節の炎症を予防または改善し、日常生活の質の向上に極めて有用である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
キランソウ属抽出物を含有することを特徴とする抗炎症剤組成物。
【請求項２】
炎症性メディエーターが一酸化窒素、ＴＮＦ−α、プロスタグランジンからなる群より選択される１種もしくは２種以上の炎症性メディエーター産生抑制能を有する、請求項１記載の抗炎症剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は抗炎症剤組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
今日の我が国は世界に類を見ない超高齢化社会に突入しており、医療費削減の努力は行われているものの、年々増加の一途をたどっている。国民皆保険制度を維持していくためにも健康寿命の延伸が望まれており、ロコモティブシンドロームやサルコペニアといった健康寿命を脅かす疾病に対して予防することは医療費削減に寄与できると考えられる。
【０００３】
例えば、腰痛や膝関節の炎症は活動量が減る原因の一つである。活動量が減ると体重が増加する可能性が高まる。体重増加により膝関節への負担が増し、炎症が起きると更に活動量が減る可能性が高くなる。このような負の連鎖が循環するようになると、最終的に要支援、要介護、寝たきりといった段階へ進行する。
【０００４】
膝などの関節の炎症は軟骨が摩耗したり、関節の変形などにより惹起され、付随して痛みや運動障害が起こる。その際に、マクロファージなどの炎症細胞からはプロスタグランジン、サイトカイン、活性酸素、一酸化窒素（ＮＯ）などの炎症性メディエーターが産生されることが知られている。
【０００５】
炎症を起こした膝関節の滑膜組織や炎症部分へ浸潤したマクロファージなどの炎症細胞から産生される炎症性メディエーターの一種であるプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）やＴＮＦ−αは、アラキドン酸カスケードやＮＦ−κＢを介して、末梢血管を弛緩させることにより血流が増加し発熱や痛みを生じる。また、これらの産生量が多いほど痛みが強くなっていく。
【０００６】
同じく、炎症性メディエーターの一種であり活性酸素種の一種でもあるＮＯは生体内において極めて重要な生理活性分子であり、神経系における伝達物質や免疫系での異物攻撃の役割を担っていることが知られているが、高濃度のＮＯは細胞傷害性を有することや人体の病態に悪影響を及ぼすことが示唆されている（非特許文献１）。
【０００７】
また、炎症反応は、先天的または後天的な様々な原因により、誘発、進行、収束までの一連の反応のバランスが崩れると炎症が過度となったり、遷延化し、様々な疾患の発症につながることが報告されている（非特許文献２）。
【０００８】
そのため、炎症性メディエーターの産生が過剰にならないように日常的な食品摂取を通じて達成することができれば、腰痛や膝関節の炎症を改善または予防することができ、日常生活の質の向上を享受することとなり有意義である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開平５−１１２４４８号公報
【特許文献２】特開２０１１−２４６３８７号公報
【特許文献３】特開２０１２−２２９１７０号公報
【特許文献４】特開２０１４−２１４１１１号公報
【特許文献５】特開２０１５−１９６６５６号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】岡村富夫編：別冊「医学のあゆみ」  ＮＯと病態、２００４年、医歯薬出版社
【非特許文献２】村田幸久：日本薬理学会誌、２０１５年、１４６巻、ｐ．２０１−ｐ．２０７
【非特許文献３】ＯＮＯ  Ｙ．  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．２００８，３１（６），１１９９−１２０４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
先に述べた腰痛や膝関節の炎症から起こり得る負の連鎖を解決することが課題であり、この課題を解決するには、腰痛および膝関節の炎症を予防および、または改善する抗炎症作用を有し、日常的に摂取することができる抗炎症剤組成物を開発し提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、抗炎症剤組成物を開発すべく種々検討した結果、キランソウ属抽出物にＮＯのみならず、ＰＧＥ２、ＴＮＦ−αといった炎症性メディエーターにも作用して抗炎症作用を発現するという新しい知見を得て、前記課題を解決したものである。
【発明の効果】
【００１３】
本発明により、日常的に継続して摂取することができ、腰痛および膝関節の炎症を予防および、または改善し、日常生活の質の向上に極めて有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】試験例１で実施した誘導型一酸化窒素合成酵素（ｉＮＯＳ）  ｍＲＮＡ発現量比較の結果である。
【図２】試験例１で実施したシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）  ｍＲＮＡ発現量比較の結果である。
【図３】試験例１で実施したＴＮＦ−α  ｍＲＮＡ発現量比較の結果である。
【図４】試験例２で実施したＮＯ産生抑制作用の結果である。
【図５】試験例３で実施したＰＧＥ２産生抑制作用の結果である。
【図６】試験例４で実施したＴＮＦ−α産生抑制作用の結果である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
以下に本発明を説明する。前述のように本発明は抗炎症剤組成物に関する。
【００１６】
本発明におけるキランソウは、キランソウ属に属する植物として抗炎症作用を発現する活性成分を含むものであればいかなる種類のものであってもよく、例えばキランソウ（Ａｊｕｇａ  ｄｅｃｕｍｂｅｎｓ)、オウギカズラ（Ａ．ｊａｐｏｎｉｃａ)、ツルカコウソウ（Ａ．ｓｈｉｋｏｔａｎｅｎｓｉｓ)、ヒメキランソウ（Ａ．ｐｙｇｍａｅａ) 、ヒイラギソウ( Ａ．ｉｎｃｉｓａ)、カイジンドウ（Ａ．ｃｉｌｉａｔａ) 、ニシキゴロモ（Ａ．ｙｅｚｏｅｎｓｉｓ）、ジュウニヒトエ（Ａ．ｎｉｐｐｏｎｅｎｓｉｓ）、ハイキランソウ（Ａ．ｒｅｐｔａｎｓ）等の１ 種または２種以上を使用することができ、中でもキランソウ（Ａ．ｄｅｃｕｍｂｅｎｓ）を使用することが好ましい。
【００１７】
上記植物の粉末化や抽出は常法によって行えばよい。抽出は、例えば上記植物の１種または２種以上を乾燥して刻み、または粉末状にして抽出溶媒を加え、冷浸または加熱することによって行うことができる。抽出溶媒としては、水、アルコール類、エーテル類、エステル類、ケトン類、ニトリル類、芳香族炭化水素類、ハロゲン化脂肪族炭化水素類等の１種または２種以上の混合溶媒を使用することができる。
【００１８】
尚、本発明における抽出物とは、抽出液、該抽出液の希釈液もしくは濃縮液、該抽出物を乾燥して得られる乾燥物、または抽出エキスのいずれをも意味するものとする。上記抽出物の粗精製および精製は常法によって行えばよく、例えば吸着剤による吸着および溶出、クロマトグラフィー等を適当に組合わせて実施することができる。
【００１９】
以上のようにして得られる上記植物の１種または２種以上の粉末、抽出物、該抽出物の粗精製物および精製物は、後述する実施例から明らかなように、抗炎症作用を有するため、抗炎症剤組成物の有効成分として使用することができる。本発明の抗炎症剤組成物は、食品由来のものを有効成分としているため、日常的な摂取が可能であると考えられる。
【００２０】
本発明の抗炎症剤組成物は、経口摂取可能な形態、例えば、粉末、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤等の剤型にすることができ、またそれ以外常法に従い、例えば菓子や清涼飲料水や主食に添加する等様々な使用形態の食品とすることができる。本発明の抗炎症剤組成物が添加される食品には、上記抗炎症剤組成物である有効成分のほか、ローヤルゼリー、アスタキサンチン等の動植物由来成分、Ｌ−システイン、グルタミンペプチド等のアミノ酸類、ビタミンＣ、ビタミンＥ等の抗酸化ビタミン類、ヨクイニン、ベニバナ等の生薬などの従来公知の抗炎症作用を有する成分を同時に配合してよく、更に必要に応じて通常食品に用いられる賦形剤、増量剤、甘味剤、香味剤、着色剤等の添加物を本発明の効果を損なわない範囲で適宜配合することができる。更に本発明の抗炎症剤組成物は、外用薬として軟膏や化粧品に配合しても問題ない。
【実施例】
【００２１】
以下に実施例を示して、本発明およびその効果を具体的に説明するが、本発明の技術的範囲はこれに限定されるものではない。
【００２２】
〔キランソウ抽出物の製造〕
キランソウ(Ａ．ｄｅｃｕｍｂｅｎｓ)の乾燥した根を５ｍｍ程度に刻んだものに７０％エタノールを加えて加熱し、３０分沸騰抽出を行った。その後、熱時抽出液を金網（３８０メッシュ）でろ過し、ろ液を得た。これを減圧濃縮、賦形剤添加後、噴霧乾燥により乾燥物とし、キランソウ抽出物を得た。
【００２３】
試験例１：ｍＲＮＡ発現量比較
マウスマクロファージ様細胞ＲＡＷ２６４．７（ＥＣＡＣＣ標準株）を１０％牛胎児血清（ＦＢＳ）、ペニシリン（１００ｕｎｉｔｓ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）を含むＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ’ｓ Ｍｅｄｉｕｍ（ＤＭＥＭ）培地（シグマ−アルドリッチ社）に懸濁して２．０×１０６ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌとなるように６ウェルプレートに播種し、２４時間後に被験物を添加した。その後、３０分後にＩＦＮ−γ（５０ｕｎｉｔｓ／ｍｌ）を添加した。さらに３時間後に培地交換によりＬＰＳ（０．５μｇ／ｍｌ）を添加の後、ＣＯ２インキュベーター内（３７℃、ＣＯ２濃度５％）で４時間培養し、培養上清除去後、ＰＢＳで２回洗浄した。その後、ＲＮＡｉｓｏ  ｐｌｕｓ（タカラバイオ社）を用いてＴｏｔａｌ  ＲＮＡを抽出した。抽出したＴｏｔａｌ  ＲＮＡからＲＴ−ＰＣＲ法により、ｉＮＯＳ、ＴＮＦ−α、ＣＯＸ−２  ｍＲＮＡ発現量を比較した（図１、図２、図３）。尚、ＩＦＮ−γとＬＰＳ無処理時の発現量を差し引き、β−ａｃｔｉｎで補正した後、Ｃｏｎｔｒｏｌを１とした相対比で表した。
【００２４】
試験例２：ＮＯ産生抑制作用
マウスマクロファージ様細胞ＲＡＷ２６４．７（ＥＣＡＣＣ標準株）を１０％ＦＢＳ、ペニシリン（１００ｕｎｉｔｓ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）を含むＤＭＥＭ培地（シグマ−アルドリッチ社）に懸濁して１．０×１０５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌとなるように９６ウェルプレートに播種し、２４時間後に被験物を添加した。その後、３０分後にＩＦＮ−γ（５０ｕｎｉｔｓ／ｍｌ）を添加した。さらに３時間後に培地交換によりＬＰＳ（０．５μｇ／ｍｌ）を添加の後、ＣＯ２インキュベーター内（３７℃、ＣＯ２濃度５％）で１８時間培養し、培養上清を回収してＧｒｉｅｓｓ法によりＮＯを測定した（図４，ｎ＝４、平均±ＳＤ）。尚、一酸化窒素合成酵素の基質であるＬ−ａｒｇｉｎｉｎｅのアナログとして競合的に結合し、阻害作用を示すＮＧ−Ｍｏｎｏｍｅｔｈｙｌ−Ｌ−ａｒｇｉｎｉｎｅ（Ｌ−ＮＭＭＡ、同仁化学研究所）を陽性対照（終濃度１００μＭ）として設定した。
【００２５】
試験例３：ＰＧＥ２産生抑制作用
マウスマクロファージ様細胞ＲＡＷ２６４．７（ＥＣＡＣＣ標準株）を１０％ＦＢＳ、ペニシリン（１００ｕｎｉｔｓ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μg／ｍｌ）を含むＤＭＥＭ培地（シグマ−アルドリッチ社）に懸濁して５．０×１０４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌとなるように９６ウェルプレートに播種し、２４時間後に被験物を添加した。その後、３０分後にＩＦＮ−γ（５０ｕｎｉｔｓ／ｍｌ）を添加した。さらに３時間後に培地交換によりＬＰＳ（０．５μｇ／ｍｌ）を添加の後、ＣＯ２インキュベーター内（３７℃、ＣＯ２濃度５％）で１８時間培養し、培養上清を回収してＰａｒａｍｅｔｅｒ  Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ  Ｅ２  Ａｓｓａｙ  ＥＬＩＳＡ  ｋｉｔ（Ｒ＆Ｄ社）を用いてＰＧＥ２を測定した（図５、ｎ＝４、平均±ＳＤ）。尚、陽性対照として、終濃度４０μＭのＩｎｄｏｍｅｔｈａｃｉｎ（ワコー社）を添加した。
【００２６】
試験例４：ＴＮＦ−α産生抑制作用
マウスマクロファージ様細胞ＲＡＷ２６４．７（ＥＣＡＣＣ標準株）を１０％ＦＢＳ、ペニシリン（１００ｕｎｉｔｓ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μg／ｍｌ）を含むＤＭＥＭ培地（シグマ−アルドリッチ社）に懸濁して５．０×１０３ｃｅｌｌｓ／ｍｌとなるように９６ウェルプレートに播種し、２４時間後に被験物を添加した。その後、３０分後にＩＦＮ-γ（５０ｕｎｉｔｓ／ｍｌ）を添加した。さらに３時間後に培地交換によりＬＰＳ（０．５μｇ／ｍｌ）を添加の後、ＣＯ２インキュベーター内（３７℃、ＣＯ２濃度５％）で１８時間培養し、培養上清を回収してＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ  ＴＮＦ−α  Ｍｏｕｓｅ  ＥＬＩＳＡ  ｋｉｔ（Ｒ＆Ｄ社）用いてＴＮＦ-αを測定した（図６、ｎ＝４、平均±ＳＤ）。尚、陽性対照として、終濃度１μＭのＤｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ（シグマ−アルドリッチ社）を添加した。
【００２７】
試験例１より、キランソウ抽出物はｉＮＯＳ、ＴＮＦ−α、ＣＯＸ−２  ｍＲＮＡ発現量を濃度依存的に抑制することが示された。また、試験２〜４により、ＮＯ、ＰＧＥ２、ＴＮＦ−αといった炎症性メディエーターについても産生抑制作用が示され、ｉＮＯＳ、ＴＮＦ−α、ＣＯＸ−２といった炎症性メディエーターの関与遺伝子のみならず、ＮＯ、ＰＧＥ２、ＴＮＦ−α産生量も抑制することが示された。
【産業上の利用可能性】
【００２８】
キランソウ属植物は、日本及び中国に潤沢に存在する資源であり、その抽出・精製は常法により行うことができるので、日常的に継続して摂取することが可能となり産業上の利用が十分に可能である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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