(57)【要約】【課題】より安価に、且つ大量に製造でき、尚かつ種々の有用な用途が期待できる新規なコンドロイチン硫酸と、その製造方法を提供する。【解決手段】本発明に係るコンドロイチン／デルマタン硫酸は、非硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：２．６４±０．３４  Ｃ６位一硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：９．８５±３．６３  Ｃ４位一硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：７７．６±３．４５、Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：１．５５±０．９、Ｃ２，  Ｃ６位二硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：４．１４±１．７０、Ｃ２，  Ｃ４位二硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：４．２９±１．３５、および主鎖にイズロン酸（％）：１７．６±５．３４を含んで成るコンドロイチン／デルマタン硫酸となる。【選択図】図１
2018035281.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
非硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：２．６４±０．３４、
Ｃ６位一硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：９．８５±３．６３、
Ｃ４位一硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：７７．６±３．４５、
Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：１．５５±０．９、
Ｃ２，Ｃ６位二硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：４．１４±１．７０、
Ｃ２，Ｃ４位二硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：４．２９±１．３５、及び、
主鎖にイズロン酸（％）：１７．６±５．３４を含んでなるコンドロイチン／デルマタン硫酸。
【請求項２】
非硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンを含む二糖単位、
Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンを含む二糖単位、
Ｃ４位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンを含む二糖単位、
Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミン、及び、
Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化−Ｄ−グルクロン酸を含む二糖単位がランダムに並んだ構造を有する請求項１に記載のコンドロイチン／デルマタン硫酸。
【請求項３】
スズキから得られたものである請求項１に記載のコンドロイチン／デルマタン硫酸。
【請求項４】
凍結乾燥したスズキのヒレ、骨及び目の少なくともいずれかを低温粉砕し、脱脂した後、プロナーゼ及びアルカリで処理し、得られた消化液を遠心分離後エタノール沈殿させることを特徴とする請求項１に記載のコンドロイチン／デルマタン硫酸の製造方法。
【請求項５】
請求項１に記載のコンドロイチン／デルマタン硫酸を含んでなる抗炎症剤。
【請求項６】
請求項１に記載のコンドロイチン／デルマタン硫酸を含んでなる保湿剤。
【請求項７】
請求項１に記載のコンドロイチン／デルマタン硫酸を含んでなる抗血液凝固剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、コンドロイチン／デルマタン硫酸に関し、より具体的には、医薬品、化粧品、食品添加物等の分野において種々の用途が期待される新規なコンドロイチン／デルマタン硫酸に関する。
【背景技術】
【０００２】
コンドロイチン／デルマタン硫酸は、動物の関節や皮膚の細胞外マトリックスに多く含まれる酸性ムコ多糖である。これは、硫酸化されたあるいは硫酸化されていないウロン酸（Ｄ−グルクロン酸：ＧｌｃＡあるいはＬ−イズロン酸：ＩｄｏＡ）と、硫酸化されたあるいは硫酸化されていないＮ−アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）の二糖繰り返し構造から成り、構成糖の水酸基の硫酸化により多種多様な異性体が存在する。硫酸化されうる部位はグルクロン酸の２位及び３位の水酸基、あるいはイズロン酸の２位の水酸基、及びＮ−アセチルガラクトサミンの４位及び６位の水酸基である。従ってコンドロイチン／デルマタン硫酸は、ＧｌｃＡ−ＧａｌＮＡｃ：Ｏ−ｕｎｉｔ、ＧｌｃＡ−ＧａｌＮＡｃ（４Ｓ）：Ａ−ｕｎｉｔ、ＧｌｃＡ−ＧａｌＮＡｃ（６Ｓ）：Ｃ−ｕｎｉｔ、ＧｌｃＡ（２Ｓ）−ＧａｌＮＡｃ（６Ｓ）：Ｄ−ｕｎｉｔ、ＧｌｃＡ−ＧａｌＮＡｃ（４Ｓ，６Ｓ）：Ｅ−ｕｎｉｔ、ＩｄｏＡ−ＧａｌＮＡｃ：ｉＯ−ｕｎｉｔ、ＩｄｏＡ−ＧａｌＮＡｃ（４Ｓ）：ｉＡ−ｕｎｉｔ、ＩｄｏＡ（２Ｓ）−ＧａｌＮＡｃ（４Ｓ）：Ｂ−ｕｎｉｔ、ＩｄｏＡ−ＧａｌＮＡｃ（６Ｓ）：ｉＣ−ｕｎｉｔ、ＩｄｏＡ（２Ｓ）−ＧａｌＮＡｃ（６Ｓ）：ｉＤ−ｕｎｉｔ、ＩｄｏＡ−ＧａｌＮＡｃ（４Ｓ，６Ｓ）：ｉＥ−ｕｎｉｔから構成される。デルマタン硫酸の定義は主鎖にイズロン酸を一つでも含んだコンドロイチン硫酸とされるが、その組成は生物種および臓器によって異なるため、イズロン酸が８０％近く含まれる糖鎖をデルマタン硫酸とし、イズロン酸を少量含む糖鎖をコンドロイチン／デルマタン硫酸とすることが多い。コンドロイチン／デルマタン硫酸鎖は、分子量１０４〜１０５の直鎖状の多糖で、コア蛋白質に共有結合したプロテオグリカンとして存在する。
【０００３】
一般に、天然に存在するコンドロイチン／デルマタン硫酸鎖は１種類の硫酸化二糖の繰り返しのみから成るものは少なく、通常、様々な種類の硫酸化、あるいは非硫酸化二糖を異なる割合で含む。１８８６年、ＦｉｓｃｈｅｒとＢｏｅｄｅｋｅｒによって軟骨から分離され、最初はｃｈｏｎｄｒｏｉｔ  ａｃｉｄと命名された。その後、硫酸エステルを持つことがわかりｃｈｏｎｄｒｏｉｔｉｎ  ｓｕｌｆａｔｅと呼ばれるようになった。さらに１９５１年、Ｍｅｙｅｒらによって、コンドロイチン硫酸には３種類有り（Ａ−ｕｎｉｔ，Ｂ−ｕｎｉｔ，Ｃ−ｕｎｉｔ）軟骨中にはＡ−ｕｎｉｔとＣ−ｕｎｉｔが存在することが明らかにされた。コンドロイチン硫酸鎖を持つプロテオグリカンとしてはアグリカン、コンドロイチン／デルマタン硫酸プロテオグリカンとしてはバ−シカン、デコリンなどがあるが、これらの機能は不明なものも多い。しかしながら、アグリカンの軟骨組織機能を制御する活性や、バーシカンの抗細胞接着活性は、コンドロイチナ−ゼ処理により完全に消失するので、コンドロイチン／デルマタン硫酸鎖がそれらの活性を担っていると考えられる。さらに、網膜神経細胞に対する神経栄養因子や、神経突起伸張因子としてコンドロイチン硫酸プロテオグリカンが単離されたが、これらの活性もコンドロイチナーゼ処理により消失した。また、コンドロイチン硫酸又はデルマタン硫酸は即時型アレルギーに対して抑制的な効果があるとされる他、ヘパリンコファクターＩＩ依存性の血液抗凝固活性が報告されている。このように、コンドロイチン硫酸又はデルマタン硫酸は多様な生理活性や物性が認められることから、抗炎症剤などの医薬品をはじめ、保湿剤として化粧品あるいは目薬に、ゲル化剤・ゼリー化剤等の食品添加物として、また最近では関節炎に有効な健康食品として利用されており、日常生活において広い範囲で見かけることができる。また、これら通常の用途以外にも、その特性から様々な目的の医薬品などとして潜在的な利用価値が期待されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
ところで医薬品・健康食品として販売されているコンドロイチン硫酸は、豚軟骨から抽出したコンドロイチン４硫酸、又は鮫の鰭や鮭の鼻軟骨から抽出したコンドロイチン６硫酸である。最近では、鮭日軟骨から抽出したプロテオグリカンが注目されている。サメが原料として好まれる理由として、原材料に対する消費者のイメージ、および軟骨調達が簡便であることが挙げられるが自然保護の問題がある。一方、豚軟骨由来コンドロイチン４硫酸はヒト軟骨と似ているが、人畜共通感染症の恐れがある。そのため、より安価で安全に、且つ大量にコンドロイチン硫酸を取得できる原材料及び方法が求められている。
【０００５】
従って、本発明の目的は、より安価に、且つ大量に取得でき、尚かつ種々の有用な用途が期待できる新規なコンドロイチン／デルマタン硫酸と、その取得方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記課題を解決する本発明の一観点に係るコンドロイチン／デルマタン硫酸は、非硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンを含む二糖単位（以下、非硫酸化ＧａｌＮＡｃと略す。）：（２．６４±０．３４）％、Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンを含む二糖単位（以下、Ｃ６位一硫酸化ＧａｌＮＡｃと略す。）：（９．８５±３．６３）％、Ｃ４位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンを含む二糖単位（以下、Ｃ４位一硫酸化ＧａｌＮＡｃと略す。）：（７７．６±３．４５）％、Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンを含む二糖単位（以下、Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化ＧａｌＮＡｃと略す。）：（１．５５±０．９）％、Ｃ２，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミン、Ｃ２位グルクロン酸を含む二糖単位（以下、Ｃ２，Ｃ６位二硫酸化ＧａｌＮＡｃＣ２位一硫酸化ＧｌｃＡと略す。）：（４．１４±１．７０）％、Ｃ２，Ｃ４位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミン、Ｃ２位イズロン酸を含む二糖単位（以下、Ｃ２，Ｃ４位二硫酸化ＧａｌＮＡｃＣ２位一硫酸化ＩｄｏＡと略す。）：（４．２９±１．３５）％、および主鎖にイズロン酸（％）：１７．６±５．３４を含んで成るものである。
【発明の効果】
【０００７】
以上、本発明によって、より安価に、且つ大量に取得でき、尚かつ種々の有用な用途が期待できる新規なコンドロイチン／デルマタン硫酸及びその取得方法を提供することができる。
【０００８】
特に、本発明のコンドロイチン／デルマタン硫酸は、市販のコンドロイチン硫酸又はデルマタンとは二糖組成が異なった構造であるため、新しい生理活性が期待でき、幅広い範囲に応用できる可能性が高く、従来のものと同様、抗炎症剤などの医薬品をはじめ、保湿剤として化粧品あるいは目薬に、また、ゲル化剤・ゼリー化剤等の食品添加物として利用しうる。また角膜コラ−ゲン繊維の安定化を促進し、目の組織の機能保持に有効であることが報告されていることから、牛皮・豚皮などから抽出されるコラ−ゲンとのブレンドによって組織修復材料としての応用も考えられる。さらに生理・薬理活性だけではなく、高分子電解質としての特性を示すことから工業的応用も期待できる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】スズキのヒレ、骨、目から抽出した粗酸性糖鎖画分の１Ｈ−ＮＭＲを示す図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
以下、本発明の実施形態について図面を用いて詳細に説明する。ただし、本発明は多くの異なる形態による実施が可能であり、以下に示す実施形態、実施例の例示にのみ限定されるわけではない。
【００１１】
本実施形態に係るコンドロイチン／デルマタン硫酸は、非硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンを含む二糖単位（以下、非硫酸化ＧａｌＮＡｃと略す。）：（２．６４±０．３４）％、Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンを含む二糖単位（以下、Ｃ６位一硫酸化ＧａｌＮＡｃと略す。）：（９．８５±３．６３）％、Ｃ４位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンを含む二糖単位（以下、Ｃ４位一硫酸化ＧａｌＮＡｃと略す。）：（７７．６±３．４５）％、Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンを含む二糖単位（以下、Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化ＧａｌＮＡｃと略す。）：（１．５５±０．９）％、Ｃ２，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミン、Ｃ２位グルクロン酸を含む二糖単位（以下、Ｃ２，Ｃ６位二硫酸化ＧａｌＮＡｃＣ２位一硫酸化ＧｌｃＡと略す。）：（４．１４±１．７０）％、Ｃ２，Ｃ４位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミン、Ｃ２位イズロン酸を含む二糖単位（以下、Ｃ２，Ｃ４位二硫酸化ＧａｌＮＡｃＣ２位一硫酸化ＩｄｏＡと略す。）：（４．２９±１．３５）％、および主鎖にイズロン酸（％）：１７．６±５．３４を含んでなるものである。
【００１２】
本実施形態に係るコンドロイチン／デルマタン硫酸は、例えばスズキから大量に得られる。当該方法の概略は以下の通りである。即ち、先ず、スズキそのものあるいはスズキの加工工程中すなわち剥き身に出るヒレ、骨や目などを原料とする。その際、肉や内臓が多少含まれていても良い。低温粉砕することで、粉砕熱の発生による物質の変性及び酸化を防ぐことができる。また、常温粉砕では不可能なサイズへの微粉砕が可能となり、粒度も揃えられる。この粉体から酸性ムコ多糖を抽出し、コンドロイチン／デルマタン硫酸画分を得る。操作方法等は、鯨及び鮫軟骨からのコンドロイチン硫酸抽出法のそれを参考にすることができる。なお、本実施形態に係るコンドロイチン／デルマタン硫酸は、スズキ以外に限られず、セイゴ、フッコからも同様に得ることができる。
【００１３】
また、粉体から精製コンドロイチン／デルマタン硫酸を製造するまでを更に詳しく記すと大略以下のようになる。即ち、先ず、粉体をアセトン等の有機溶剤により脱脂し、アチナーゼＥ等のプロナーゼで消化する。次いで、これを例えば苛性ソーダ水溶液等のアルカリ水溶液で処理し蛋白質から糖鎖を切り離した後、酢酸等で中和し、過塩素酸でｐＨを酸性にして遠心分離により不溶性画分を除いた後、上澄みにエタノールを加えて沈殿を生じさせる。生じた沈殿を遠心分離操作で分取し、エタノールで洗浄した後、これを減圧乾燥する。
【００１４】
本実施形態に係るコンドロイチン／デルマタン硫酸を構成している二糖の存在比は、通常、非硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：２．６４±０．３４、Ｃ６位一硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：９．８５±３．６３、Ｃ４位一硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：７７．６±３．４５、Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：１．５５±０．９、Ｃ２，Ｃ６位二硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：４．１４±１．７０、Ｃ２，Ｃ４位二硫酸化ＧａｌＮＡｃ（％）：４．２９±１．３５であり、主鎖にイズロン酸（％）：１７．６±５．３４を含む。
【００１５】
これに対し、これまで、コンドロイチン硫酸を構成している二糖の存在比がこのような割合のものは知られていない。因みに、従来から知られている鯨軟骨由来のコンドロイチン硫酸では、Ｃ４位一硫酸化ＧａｌＮＡｃが約７０％と多い反面、Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化ＧａｌＮＡｃは１％以下と少なく、同じく従来から知られている鮫軟骨由来のコンドロイチン硫酸ではＣ６位一硫酸化ＧａｌＮＡｃが約７０％と多いが、Ｃ４位一硫酸化ＧａｌＮＡｃは１０数％と少ない。豚皮膚由来のデルマタン硫酸の二糖組成はＣ４位一硫酸化ＧａｌＮＡｃが約８０％、Ｃ６位一硫酸化ＧａｌＮＡｃは約２％、Ｃ２，Ｃ４位二硫酸化ＧａｌＮＡｃが約９％とスズキ由来コンドロイチン／デルマタン硫酸と似ているが、Ｃ２，  Ｃ６位二硫酸化ＧａｌＮＡｃ、Ｃ４，  Ｃ６位二硫酸化ＧａｌＮＡｃは含まれず、主鎖のイズロン酸は約８０％と高い。
【００１６】
また、本実施形態に係るコンドロイチン／デルマタン硫酸は、硫酸基分布が従来のものよりもランダムな構造となっている。即ち、非硫酸化ＧａｌＮＡｃを含む二糖単位、Ｃ６位一硫酸化ＧａｌＮＡｃを含む二糖単位、Ｃ４位一硫酸化ＧａｌＮＡｃを含む二糖単位、Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化ＧａｌＮＡｃを含む二糖単位及びＣ２，Ｃ６位二硫酸化ＧａｌＮＡｃ、Ｃ２，Ｃ４位二硫酸化ＧａｌＮＡｃを含む二糖単位がランダムに並んだ構造を有する。
【００１７】
また、本実施形態に係るコンドロイチン／デルマタン硫酸は、従来のものと同様、抗炎症剤や抗血液凝固剤などの医薬品をはじめ、保湿剤として化粧品あるいは目薬に、また、ゲル化剤・ゼリー化剤等の食品添加物として利用しうる。また角膜コラーゲン繊維の安定化を促進し、目の組織の機能保持に有効であることが報告されていることから、牛皮・豚皮などから抽出されるコラーゲンとのブレンドによって組織修復材料としての応用も考えられる。さらに生理・薬理活性だけではなく、高分子電解質としての特性を示すことから工業的応用も可能である。本実施形態に係るコンドロイチン／デルマタン硫酸は、鯨由来のコンドロイチン硫酸や鮫由来のコンドロイチン硫酸とは全く異なる非常に高い硫酸化度を持った構造を取るため、抗アレルギー活性など新しい範囲に応用できる。
【００１８】
以上、本実施形態に係るコンドロイチン／デルマタン硫酸は、より安価に、且つ大量に取得でき、尚かつ種々の有用な用途が期待できる新規なものとなる。
【実施例】
【００１９】
以下に、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、上記の通り、本発明はこれらの実施例により何ら限定されるものではない。
【００２０】
まず、スズキのヒレ、骨、目を粉砕・乾燥したものを原料とした。具体的には、下記手順に従い処理を行った。
（１）約５ｇの粉体を１００ｍｌの三角フラスコに入れ、アセトン５０ｍｌを加え、１０分間攪拌した。
（２）５分間放置し上澄み液を除去した。
（３）上記（１）〜（２）の操作をさらに３回繰り返した。
（４）残った沈殿を減圧デシケーターで乾燥した。
【００２１】
次に、プロナーゼ消化を下記手順に従い行った。
（１）脱脂済粉体約５ｇに５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ酢酸緩衝液を４０ｍＬおよびアクチナ−ゼＥを５０ｍｇ加えた。
（２）４５℃の湯浴中で、４８時間ゆっくりと攪拌した。
【００２２】
次に、アルカリ処理を、下記手順に従い行った。
（１）０．５Ｍ  ＮａＯＨ／０．３Ｍ  ＮａＢＨ４を１００ｍＬ添加した。
（２）４℃の低温室で、一昼夜静置した。
（３）酢酸でｐＨ７．０に中和した。
（４）過塩素酸を最終濃度が５％になるように添加した後、８，０００ｒｐｍ×３０分間、４℃にて遠心分離した。
（５）得られた上澄みを透析膜（ＭＷＣＯ３０００）を用いて透析した。
【００２３】
次に、塩化セチルピリジニウム（ＣＰＣ）沈殿を、下記手順に従い行った。
（１）上澄みにＣＰＣ液を最終濃度が０．１％になるように添加した。
（２）４℃の低温室で、一昼夜静置した。
（３）８，０００ｒｐｍ×３０分間、４℃にて遠心分離した。
（４）上記（１）〜（３）の操作を１回繰り返した。
（５）遠心分離により得られた沈殿物を２．５ＭＮａＣｌを８ｍＬ添加し攪拌した。
（６）４倍量のエタノ−ルに加えて、４℃の低温室で、一昼夜静置した。
【００２４】
次に、沈殿の洗浄・乾燥を下記手順に従い行った。
（１）エタノ−ル液を８，０００ｒｐｍ×３０分間、４℃にて遠心分離した。
（２）得られた沈殿物をＨ２Ｏ  １０ｍＬに溶かし、透析膜（ＭＷＣＯ３０００）を用いて透析した。
（３）透析後、凍結乾燥により乾燥したものを粗酸性糖鎖画分とした。
【００２５】
（分析結果）
次に、上で得られたコンドロイチン／デルマタン硫酸（以下、ＣＳ／ＤＳと略記する。）に関する分析結果及び考察を以下に示す。なお、二糖組成分析はコンドロイチナーゼＡＢＣ処理により完全に不飽和二糖に分解した後、蛍光ＨＰＬＣにより分離・検出を行った。また、イズロン酸の含量は、１Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ）によりイズロン酸のＨ−１ピークとグルクロン酸のＨ−２ピークの面積比から算出した。また、分子量はゲルろ過カラムを用い、ＵＶ２０４ｎｍで検出した。対照サンプルとしては市販のデルマタン硫酸（ＤＳ、豚皮膚由来）、コンドロイチン６硫酸（ＣＳ−Ｃ、サメ由来）（生化学工業（株）製）、およびコンドロイチン４硫酸  （ＣＳ−Ａ、ウシ又はブタ気管支軟骨由来）（新日本薬業を使用した。
【００２６】
粗酸性糖鎖画分は、乾燥粉末サンプル１ｇあたり、０．８２ｍｇ（ヒレ）、０．３２ｍｇ（骨）、１．３８ｍｇ（目）、０．２８ｍｇ（内臓）および１．３３ｍｇ（肉）を得ることができた。スズキＣＳ／ＤＳの二糖組成および粗酸性糖鎖に含まれるＣＳ／ＤＳの含量を表１に、１Ｈ−ＮＭＲのデ−タを図１にそれぞれ示す。この結果、スズキ由来のコンドロイチン硫酸は、ΔＤｉ−ｄｉＳＢが２．５〜６．０％  （表１）、イズロン酸が１３．８〜１５．３％（図１）含まれていることから、ＣＳ／ＤＳであることが明らかとなった。また、ヒレ、骨、目から得られた酸性糖鎖画分では内臓や肉に比べＣＳ／ＤＳの含量が５０％以上と高く、本法により非常に高純度のコンドロイチン硫酸を得られることがわかった。また、内臓や肉ではΔＤｉ−ｄｉＳＥやヒレや骨に比べが高いことがわかった。
【００２７】
【表１】
2018035281.tif 000003
【００２８】
つぎに、粗酸性糖鎖に含まれるヘパラン硫酸の二糖組成と含量について確認を行った。ヘパラン硫酸はグルクロン酸とＮ−セチルグルコサミンの二糖繰り返し配列から成る直鎖の酸性多糖であり、コンドロイチン硫酸と同じくグリコサミノグリカンに属する。ＣＳ／ＤＳと同様にヘパラン硫酸も抽出されるので、粗酸性糖鎖画分に含まれるヘパラン硫酸の含量も調べた。この結果を表２に示す。ヒレ、骨、目および肉におけるヘパラン硫酸の含量は約１％であり、ほとんど含まれていないことから、ＣＳ／ＤＳの資源として有用であることがわかった。また、内臓ではヘパラン硫酸量１１．３％と多く、ＣＳ／ＤＳ含量も２７．９％と低いため、ヒレ、骨、目に比べ資源に適さないことが考えられた。
【表２】
2018035281.tif 000004
【００２９】
次に、分子量測定各サンプルの平均分子量と分子量分布を表３に示す。本実施例において、コンドロイチン硫酸の数平均分子量は２８〜４１ｋＤａであった。この値はブタやウシと比べるとやや大きいが、サメと比べるとやや小さい。一般にコンドロイチン硫酸の分子量は、抽出方法により１０，０００〜３００，０００の値をとることが知られている。今回得られたコンドロイチン硫酸の分子量分布は、これに一致した。
【００３０】
【表３】
2018035281.tif 000005
【００３１】
以上、本実施例により、本発明の効果について確認することができた。
【産業上の利用可能性】
【００３２】
本発明は、コンドロイチン／デルマタン硫酸として産業上の利用可能性がある。より具体的にコンドロイチン／デルマタン硫酸は、抗炎症剤などの医薬品をはじめ、保湿剤として化粧品あるいは目薬に、また、ゲル化剤・ゼリー化剤等の食品添加物として利用しうる。さらには、組織修復材料や、高分子電解質特性を利用した工業的応用が期待できる。
【図１】
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