(57)【要約】      （修正有）【課題】哺乳動物の口腔感受性を下げ、全身的健康状態を上げ、哺乳動物の歯の象牙細管を閉塞し、かつ／または哺乳動物の歯の表面に沈殿物を沈着させるための組成物および方法の提供。【解決手段】ａ）単離テオブロミン、またはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含む共結晶；ｂ）塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；ｃ）リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源；を含んでなる口腔ケア組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）単離テオブロミン、またはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含む共結晶；
ｂ）塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；
ｃ）リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源；
を含んでなる口腔ケア組成物。
【請求項２】
哺乳動物の歯の表面に：
ａ）単離テオブロミン、またはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含む共結晶；
ｂ）塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；
ｃ）リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源；
を含んでなる口腔ケア組成物を適用することを含んでなる、口腔感受性を下げる方法。
【請求項３】
哺乳動物の口腔面に、ある期間持続して少なくとも１日１回、組成物を適用することを含んでなる、哺乳動物の全身的健康状態を維持するか、または上げる方法であって、組成物が：
ａ）単離テオブロミン、またはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含む共結晶；
ｂ）塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；
ｃ）リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源；
を含んでなる、上記方法。
【請求項４】
哺乳動物の歯の表面に：
ａ）単離テオブロミン、またはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含む共結晶；
ｂ）塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；
ｃ）リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源；
を含んでなる組成物を適用することを含んでなる、哺乳動物の歯の象牙細管を閉塞する方法。
【請求項５】
哺乳動物の歯の表面に：
ａ）単離テオブロミン、またはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含む共結晶；
ｂ）塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；
ｃ）リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素
ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源；
を含んでなる組成物を適用することを含んでなる、哺乳動物の歯の表面に沈殿物を沈着させる方法。
【請求項６】
哺乳動物の歯の口腔感受性の低下に使用するための請求項１に記載の口腔ケア組成物。
【請求項７】
哺乳動物の全身的健康状態または該哺乳動物の口腔面の維持または向上に使用するための請求項１に記載の口腔ケア組成物。
【請求項８】
哺乳動物の歯の象牙細管の閉塞に使用するための請求項１に記載の口腔ケア組成物。
【請求項９】
哺乳動物の歯の表面に沈殿物を沈着させることに使用するための請求項１に記載の口腔ケア組成物。
【発明の詳細な説明】
【関連出願との関係】
【０００１】
本出願は２０１２年６月２０日に出願された米国特許仮出願番号６１／６６２，１８１の国際段階であり、これは引用により全部、本明細書に編入される。
【技術分野】
【０００２】
１．分野
本開示は、テオブロミン（３，７−ジメチルキサンチン、カカオ（Ｔｈｅｏｂｒｏｍａ
ｃａｃａｏ）の主アルカロイド）を含む歯科感受性（ｄｅｎｔａｌ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ）を処置する組成物、およびそれらの使用に関する。使用には象牙質の感受性または知覚過敏（ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ）の処置、および歯の細管の効果的閉塞を含む。
【背景技術】
【０００３】
２．関連技術の記載
齲蝕は人類を悩ます最も広く流行っている疾患である。歯のエナメル質の酸蝕病は、痛い象牙質知覚過敏の第一原因である。歯茎退縮も象牙質の露出の要因である。エナメル質の酸蝕病は、柑橘類またはワインのような酸性食品から生じる可能性があり、これらは外側のエナメル質を酷く害し、そして開いた象牙細管の露出を起こす恐れある。知覚過敏になった歯は、冷気、熱、空気および砂糖が多い食品に対しても感受性が高い。
【０００４】
象牙質は、エナメル質、セメント質および歯髄と共に歯の四つの主要構成要素の一つである。これは石灰化組織であり、そして通常はエナメル質（歯冠上）およびセメント質（歯根上）で覆われ、そして歯髄を完全に囲んでいる。象牙質は、中心の歯髄腔から象牙質の周囲（外部セメント質またはエナメル質境界）へ象牙質を通って外側放射状に伸びる多数の微細管（象牙細管）により、形態学的には放射状の線条構造である。この細管は基部（歯髄付近）で直径が大体２ミクロン（２μｍ）、そして周囲で（歯茎に向かって）より狭くなり（約０．５μｍ）、そして流体および細胞構造が含まれる（かつて象牙質を形成し、そしてそれを維持している象牙芽細胞の細胞質の広がり；象牙芽細胞の細胞体が象牙前質の層に対して象牙質の内側面に沿って並び、ここで歯の歯髄の周囲境界も形成する）。象牙細管により、象牙質は幾らかの透過性を有し、これが痛みの感受性および齲蝕率を上げることになる。健康な口腔では、これらの細管はエナメル質およびセメント質に覆われる（これは次いで歯肉組織／歯茎により覆われる）。
【０００５】
米国では、単独で、の知覚過敏におよそ４０００万人の成人が冒され、そしてその約２５％が慢性的に患っている（非特許文献１）。歯の知覚過敏の発症のほとんどが３０〜３９歳頃の年齢で始まり、そして年齢と共に悪化する。露出した歯の細管は、歯髄の神経終末を興奮させることができる流体力学的流動および直接的圧力勾配を上昇させる。この流体力学的流動は、限定するわけではないが冷気、熱、気圧、乾燥、糖、酸っぱさもしくは酸性の刺激、または歯に作用する機械的力（例えば歯磨き）を含む様々な環境的因子により上昇し得る。さらに研磨剤入りの歯磨き剤は、象牙質の表面を削り、そして腐食剤と合わされば象牙細管を開く可能性がある。歯髄の露出した神経終末の興奮は非常に痛くなる恐れがあり、そして象牙質の知覚過敏の根本原因となる。当該技術分野で知られている組成物は、処置として硝酸カリウム、生体活性ガラス組成物、塩化ストロンチウム、酢酸ストロンチウムまたは非晶質リン酸カルシウムを使用するが、それでもそれらの効力に対する疑問が残る。伝えられるところによると、これらの化合物は象牙細管の管腔内および露出した象牙質上に無機質の沈着を促進し、それにより侵害刺激の伝達を防いでいる。しか
し少なくとも一つの論評によれば、歯の知覚過敏のためにカリウム塩の有効性を支持する強力な証拠はない。Ｐｏｕｌｓｅｎ  Ｓ、ｅｔ  ａｌ．象牙質知覚過敏のための硝酸カリウム入り歯磨き剤。Ｏｒｃｈａｒｄｓｏｎ  Ｒ、Ｇｉｌｌａｍ  ＤＧ．象牙質知覚過敏を処置するための作用物質としてのカリウム塩の効力。非特許文献２。テオブロミンをほぼ即座の、しかも完全な象牙細管閉塞用触媒として使用した、または使用すること示唆した組成物は当該技術分野では知られていない。
【０００６】
この技術的問題に対する解決策が請求の範囲で特徴付けられる態様により提供される。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｋａｎａｋｐｋａ  ＪＡ、Ｄｅｎｔ．Ｃｌｉｎ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍ．１９９０；３４（３）：５４５−６０
【非特許文献２】Ｊ  Ｏｒｏｆａｃ  Ｐａｉｎ．２０００；１４（１）：９−１９．
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本開示は象牙質知覚過敏を処置および／または減らすための組成物および方法に関し、ならびに齲蝕を処置および／または防止するための方法および組成物に関する。
【０００９】
より詳細には、本開示は自然な処置としてテオブロミン（市販の歯科用製品および食品への添加物）の使用に関し、この処置は現在利用可能な象牙質知覚過敏の処置法よりも有意に短い処置期間で象牙細管を完全に閉塞することができる。この化合物の安全性プロファイルにより、このテオブロミンは様々な歯科用、食品および飲料関連製品に対して特に有用な添加物となる。
【００１０】
象牙質知覚過敏を処置および／または減らすためにテオブロミンを含む本開示による組成物は、限定するわけではないが：歯磨き剤、口内洗浄液、デンタルフロス、店頭で買えるトレイ、被覆ストリップ、ゲル、歯科矯正用および小児用ワニス、歯科用セメントまたは接着剤、研磨／予防ペースト、歯の漂白剤、虫歯の穴の充填材および樹脂（双方ともＵＶおよび非‐ＵＶ反応性）、およびグッタペルカを含む歯内材料を含む。
【００１１】
象牙質知覚過敏の減少に特に興味深い食品には、限定するわけではないが：ガム、ミント、歯に優しい飴、チュー（ｃｈｅｗ）、パン、インスタントシリアル、オートミール、スポーツおよびアイソトニック飲料、栄養ドリンク、食事に代わる飲料（ミルクを含まない、およびミルクに基づく）、ビタミンまたは成分調整ボトル詰め水（ｅｎｈａｎｃｅｄ
ｂｏｔｔｌｅｄ  ｗａｔｅｒ）、お茶、豆乳、ゼラチン、ヨーグルト、ヨーグルト飲料、フルーツスムージー、粉末のまたは液体の風味付ドリンクおよびカルシウムチューがある。
【００１２】
一つの態様では口腔ケア用組成物が提供され、それらは単離テオブロミンまたはその塩もしくは複塩；塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源を含む。
【００１３】
一つの態様では、口腔感受性を下げる方法が提供され、この方法は哺乳動物の歯の表面に：単離テオブロミンまたはその塩もしくは複塩；塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせか
らなる群から選択されるカルシウム源；リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源を含んでなる口腔ケア組成物を適用することを含む。
【００１４】
一つの態様では哺乳動物の全身的健康状態を維持し、または向上させる方法を提供し、この方法はある期間継続して、少なくとも１日１回、哺乳動物の口腔表面に組成物を適用することを含んでなり、ここでこの組成物は：単離テオブロミンまたはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含んでなる共結晶；塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源を含む。
【００１５】
一つの態様では、哺乳動物の歯の表面内の象牙細管を閉塞する方法を提供し、この方法は歯の表面に：単離テオブロミンまたはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含んでなる共結晶；塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源を含んでなる組成物を適用することを含む。
【００１６】
一つの態様では、哺乳動物の歯の表面に沈殿物を沈着させる方法を提供し、この方法は歯の表面に：単離テオブロミンまたはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含んでなる共結晶；塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源を含んでなる組成物を適用することを含む。
【００１７】
この組成物は約３〜約１１、約４〜約１０、約５〜約９、約６〜約８．５、約６〜約８、約６．５〜約７．５、約７、約７〜約１１、約８〜約１１、約８〜約１０、約８．５〜約９．５、約９、約３〜約７、約３〜約６、約３〜約５、好ましくは約４〜約５、より好ましくは約４．５〜約４．８、そしてさらに一層好ましくは約４．８のｐＨを有することができる。
【００１８】
また組成物は、さらに少なくとも一つの等張化剤を含んでなることができる。等張化剤は多価アルコールでよい。多価アルコールはキシリトール、ソルビトール、マンニトール、マルチトール、ラクチトール、イソマルト、エリスリトール、アラビトール、グリセロール、およびそれらの組み合わせからなる群から選択することができる。該方法の組成物は、さらに少なくとも一つの増粘剤を含んでよい。増粘剤はメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、およびそれらの組み合わせからなる群から選択することができる。組成物はさらに抗バクテリア剤、抗微生物剤、またはそれらの組み合わせを含んでなることができる。抗バクテリア剤は、トリクロサン、過酸化水素、メチル−４−ヒドロキシベンゾエート、丁子油およびそれらの組み合わせからなる群から選択することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
本開示の性質、目的および利点をさらに理解するために、以下の図面に関連して読むべき以下の詳細な説明に対する参照がなされるべきであり、ここで同じ符号は同じ要素を表
す。
【図１】対照歯検体に由来する開存象牙細管を表す。
【図２】テオブロミン含有歯磨き剤で処置した試験歯検体に由来する閉塞した象牙細管を示す。
【図３】臨床試験データを示す：対照歯検体に由来する開存象牙細管。
【図４】臨床試験データを示す：テオブロミン含有歯磨き剤で処置した試験歯検体に由来する閉塞した象牙細管。
【図５】代表的なヒトの臼歯を表し、そして挿入したボックスは本明細書に記載した実験のための象牙ブロック調製に使用した象牙質領域を示す。
【図６】臨床試験データを示す：４種の歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を、１、２、３および７日間使用（それぞれ２、４、６および１４回使用）した後に完全に閉塞した細管の割合。カラム（１、２、３および７日目）の各群について（Ｔ１−Ｔ４）、“１日目”は最も左のカラムであり、続いて“２日目”、次に“３日目”そして“７日目”が最も右のカラムである。
【図７】臨床試験データを示す：４種の歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を、１、２、３および７日間使用（それぞれ２、４、６および１４回使用）した後に完全に開いた細管の割合。カラム（１、２、３および７日目）の各群について（Ｔ１−Ｔ４）、“１日目”は最も左のカラムであり、続いて“２日目”、次に“３日目”そして“７日目”が最も右のカラムである。
【図８】臨床試験データを示す：４種の歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を、１、２、３および７日間使用（それぞれ２、４、６および１４回使用）した後の部分的に閉塞した細管の割合。カラム（１、２、３および７日目）の各群について（Ｔ１−Ｔ４）、“１日目”は最も左のカラムであり、続いて“２日目”、次に“３日目”そして“７日目”が最も右のカラムである。
【図９】臨床試験データを示す：４種の歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を、１、２、３および７日間使用（それぞれ２、４、６および１４回使用）した後に、沈着したスミア層に覆われた表面積の割合。カラム（１、２、３および７日目）の各群について（Ｔ１−Ｔ４）、“１日目”は最も左のカラムであり、続いて“２日目”、次に“３日目”そして“７日目”が最も右のカラムである。
【図１０】臨床試験データを示す：処置前（ｂｆ）、および４種の歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を、２回（１日）、４回（２日）、６回（３日）または１４回（７日）間使用した後（それぞれ図１０Ａ、１０Ｂ、１０Ｃおよび１０Ｄで）、細管を含む象牙質ブロック表面の典型的なＳＥＭ画像。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
詳細な説明
主題の開示をさらに記載する前に、本開示は、特定の態様の変形を作成でき、そしてそれでも添付する請求項の範囲内にあるので、以下に記載する本開示の特定態様に限定されないと理解すべきである。また使用する用語は特定の態様を説明することを目的とし、限定することを意図しないと理解されるべきである。それよりも本開示の範囲は添付する特許請求の範囲により確立されることになる。
【００２１】
本明細書および添付する特許請求の範囲では、単数形である“ａ、”、“ａｎ、”および“ｔｈｅ”には、文脈が明らかにそうでないことを示さない限り、複数の意味を示すことを含む。別に定めない限り、本明細書で使用するすべての技術的および科学的用語は、
本開示が属する分野の当業者が通常に理解している意味と同じ意味を有する。
【００２２】
象牙細管の閉塞を評価するための現在の方法は：１）露出した／開いた歯の細管の数；２）部分的に閉塞した歯の細管の数；および３）完全に閉塞した歯の細管の数を測定するために、組成物である期間処理される象牙質ブロックサンプルの調製に依存する。
【００２３】
サンプルの予備データは、本請求のテオブロミン含有製剤が以前に提案された象牙細管閉塞処置よりも有意に、そして驚くことにより効果的であることを示す。本明細書に提示する結果は、本製剤を１回、指向的に使用した後、全ての象牙細管の９５％より多くが部分的、または完全に閉塞されたことを示す（図１および３  対  図２および４を比較する）。
【００２４】
テオブロミン含有組成物および製剤は、製剤に依存して約０．０１％〜約０．１％、〜約１．０％、〜約２．５％、〜約５％、〜約１０％、〜約２０％、〜約５０％、または〜約９９重量％、好ましくは約０．０１％〜約０．１％、〜約１．０％、〜約２．５％、〜約５％、〜約１０％、〜約２０％、または〜約５０重量％、そしてより好ましくは約０．１％〜約０．１％、〜約１．０％、〜約２．５％、〜約５％、〜約１０％、〜約２０％、〜約５０％の単離テオブロミンを含むことができる。
【００２５】
テオブロミン含有組成物および製剤は、結合剤（例えばコーンシロップのようなシロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ワックスおよび他の脂肪、カカオ脂、カカオバター代替物、水素化獣脂、水素化植物油、水素化綿実油、パーム核油、大豆油、スタノールエステル、グリセロールエステル、ポリアルコールエステル、親水性および疎水性のバランスが０．５から２０より上のポリオキシエチレンエステルおよびポリエチレングリコール、モノサッカライド、オリゴサッカライド（デキストロース、デキストロース一水和物、ラクトース、マンノース、フルクトース、およびそれらの誘導体および混合物）、ポリサッカライド、ガム溶液、水素化澱粉ハイドレート、グリセリン、およびそれらの混合物；充填剤（例えば二酸化ケイ素、糖、澱粉、ラクトース、スクロース、ソルビトール、フルクトース、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、リン酸二カルシウム、エリスリトール（ｅｒｙｔｈｉｔｏｌ）、キシリトール、マンニトール、マルチトール、イソマルト、デキストロース、マルトース、ラクトース、微晶質セルロース、メイズ−澱粉、グリシンおよびそれらの混合物）；潤滑剤（例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、澱粉、二酸化ケイ素、およびそれらの混合物）；崩壊剤（例えば澱粉、ポリビニルピロリドン、澱粉グリコール酸ナトリウム、微晶質セルロース、およびそれらの混合物）；接着剤（例えば固体状態のポリエチレングリコール、モノグリセリド（植物または動物脂肪の４０−９０％グリセリド）、アセチル化モノグリセリド、ヒドロコロイド状ガム、他の乳化剤または脂肪およびそれらの混合物）；または製薬学的に許容され得る湿潤剤（例えばラウリル硫酸ナトリウム）のような通例の賦形剤を含むことができる。
【００２６】
本方法に有用なテオブロミン含有組成物および製剤は、米国特許仮出願第６１／３０３，７７４号明細書の優先権を主張する国際公開第２０１１／１００６７１号パンフレットに記載され、これらの開示は引用により全部、本明細書に編入される。
【００２７】
材料および方法
歯根象牙質の選択および象牙質ブロックの調製
２−イソプロピル−５−メチルフェノール（ＩＰＭＰ、またはチモール）殺菌剤に保存された新たに摘出したヒトの臼歯を集め、破片を除き、そして滑らかな象牙領域（図５参照）を調査した。水冷ダイヤモンドワイヤーソー（Ｗｅｌｌ  Ｄｉａｍｏｎｄ  Ｗｉｒｅ
Ｓａｗｓ，Ｉｎｃ．Ｎｏｒｃｒｏｓｓ  ＧＡ，ＵＳＡ）を使用して象牙質ブロックを約６−７ｍｍ  ｘ  １．５ｍｍの寸法に割断した。約０．７５ｍｍの高さおよび滑らか作業面を有するブロックは、ＭｕｌｔｉＰｒｅｐ精密研磨機（Ａｌｌｉｅｄ  Ｈｉｇｈ  Ｔｅｃｈ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｉｎｃ．ＣＡ，ＵＳＡ）でダイヤモンドラッピングフィルムを使用して、サンプルを最初に３０μｍのダイヤモンド砥粒で研ぎ、そして滑らかな仕上がりを得るために１μｍの砥粒で仕上げることにより得た。得られたブロックを「サンプル」と呼ぶ。最終的なサンプルサイズは、長さ６−７ｍｍ  ｘ  幅１．５ｍｍ  ｘ  高さ０．７５ｍｍであった。非作業面領域は、作業面と識別するために消えないペンで印を付けた。少なくとも１または２つの垂直または水平の象牙質ブロックを各臼歯の根から得た。分岐点およびセメント−エナメル連結部は避けた。
【００２８】
対照および試験検体の作成
各サンプル（長さ６−７ｍｍ  ｘ  幅１．５ｍｍ  ｘ  高さ０．７５ｍｍ）は、水冷ダイヤモンドワイヤーソーを使用して二分割し、長さ３．５ｍｍ  ｘ  幅１．５ｍｍ  ｘ  高さ０．７５ｍｍの寸法の二つのブロックを作成し、一つを試験サンプルとし、そしてもう一つを対照とした（すなわち対になる対照および試験サンプルを得た）。換言すると各試験サンプルは対応する対照サンプルを有する。両検体の切断エッヂもペンで印を付けた。
【００２９】
スミア層の除去
酸エッチングおよび超音波処理を行って、スミア層およびサンプル調製中に形成された破片を除去し、そして開存象牙細管を得た。各サンプルの両半分（対照および試験）を、６％クエン酸、ｐＨ２．０（重量による：粒状／粉末クエン酸を蒸留水に加えた）を含有する２００ｍｌのビーカー中で同時に、最大２分間（電力設定１）、超音波処理した（Ｂｒａｎｓｏｎ  Ｓｏｎｉｆｉｅｒ  ４５０，Ｄａｎｂｕｒｙ，ＣＴ，ＵＳＡ）。クエン酸でエッチングした後、検体を蒸留水、ｐＨ７．０中で２分間（電力設定２）、超音波処理した。超音波処理後、サンプルを慎重に以下のように乾燥した。サンプルは最初にキムワイプで乾燥し、次いで清潔なペトリ皿に作業面を上にして置いた（ペトリ皿の底から離して）。ペトリ皿は低密有孔パラフィルムで覆ってほこりの混入を避け、次いでラミナーフローフード内で一晩（１６時間以下）、風乾した。
【００３０】
対照象牙質ブロックのＳＥＭ検査
実験前に、対照サンプルは走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）を介して調査して検体調製および開存象牙細管の品質を確認した。検体表面の均一性および完全性を確立したら、各検体から無作為に選択した三つの領域の走査電子顕微鏡写真を記録した。表面に人工産物および閉塞した象牙細管があるサンプルは捨てた。選択したサンプルのＳＥＭ画像を記録し、そして後の比較分析に役立てた。サンプル全体に均一な開いた象牙細管を持つ対照の象牙質ブロックに対応するエッチング試験象牙質ブロックを実験に選択した。
【００３１】
予備的インビトロ実験
以下に記載する臨床試験に先立ち、二つの試験サンプルは毛先の柔らかい歯ブラシおよびテオブロミン含有歯磨き剤組成物を使用して１分間ブラッシングした。この歯磨き剤をさらに１分間、試験サンプル上に残るようにし、その後、それらを１０ｍｌの水で１０秒間、すすいだ。次いで試験サンプルを人工唾液に、二つの対の対照サンプルのように浸した。続いて二つの試験および二つの対照サンプルを、カルシウムおよびリン酸塩源を含有する人工唾液（例えば米国特許仮出願第６１／３０３，７７４号明細書の優先権を主張する国際公開第２０１１／１００６７１号パンフレットを参照にされたい。これらは引用により全部、本明細書に編入する）から取り出し、そしてペトリ皿中で２４時間、風乾しておいた。風乾後、サンプルを金／パラジウム合金でスパッタコーティングした。次いでスパッタコーティングしたサンプルは、ＳＥＭ（ＪＥＯＬ  ＵＳＡ  Ｉｎｃ．；Ｍｏｄｅｌ
Ｎｏ．ＪＳＭ−６６１０ＬＶ）で視覚化そして分析した。各象牙質ブロックの表面上に定めた領域は、走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）を使用して１５００ｘの倍率で調査した（図１−４を参照）。
【００３２】
臨床試験
対照象牙質ブロックの走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）調査
臨床試験に先立ち、対照サンプルをＳＥＭで調査して検体調製および開存象牙細管の品質を確認した。検体表面の均一性および完全性を確立したら、無作為に選択した三つの領域の走査電子顕微鏡写真を記録した。表面に人工産物および閉塞した象牙細管があるサンプルは捨てた。選択したサンプルのＳＥＭ画像の読みを記録し、そして後の分析に役立てた。サンプル全体に十分に開いた象牙細管を持つ「対照」の象牙質ブロックに対応する「試験」ブロックを実験に選択した。
【００３３】
サンプルの保存および生体位用具（ｉｎ  ｓｉｔｕ  ａｐｐｌｉａｎｃｅ）の構築
口腔内に暴露する前および後に、試験サンプル（生体位用具内の）は作業面を上にして（ペトリ皿の底から離して）ペトリ皿内に乾燥状態で保存した。さらなる手順の間に作業面に接触しないように注意した。ブロックの生体位用具への挿入は、臨床試験の二日前以前には行わなかった。この用具は、象牙質ブロックを健康な臼歯に付けることができるように各ヒト個体用に構築した。各用具は歯科矯正処置で使用するブランケットに基づいた。各用具は、保持用メッシュ裏材を備えた歯科矯正臼歯用パッド（Ｄｅｎｔａｒｉｕｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）からなり、リングが各象牙質試験ブロックを緊密に囲むようにパッドに溶接された０．７ｍｍの歯科矯正用ワイヤーのリングを有した。象牙質ブロックは、インターメディエート  レストレイティブ  マテリアル（Ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ  Ｒｅｓｔｏｒａｔｉｖｅ  Ｍａｔｅｒｉａｌ（ＩＲＭ  フッ化物を含まない一過性の修復セメント））を使用したブラケット内に保持され、ブロックの一面のみを口腔に暴露した。次いで用具はエチレンオキシドを使用して殺菌した。
【００３４】
被験者の選択
この実験は、観察者盲検、無作為化、並行群間、単施設、比較臨床試験であった。必要な組み入れ／除外基準を満たす約８０名の全般的に健康な成人を登録した（処置群あたり２０名）。調査来院は基準測定を集める５−７日前であった。調査来院時に、各個体は医学的／歯科学的病歴を報告し、そして同意書を読み、そして署名した。同意後、各個体は休薬期間を開始し、そして渡された試験歯磨き剤および毛先の柔らかい歯ブラシで１日２回、彼らの通常の様式でブラッシングを開始するように指導された。治療計画が適切と考えられる個体を選択するために、以下の適格基準を設定した。
【００３５】
一般的な組み入れ基準
個体は、試験に登録するために、以下の全ての組み入れ基準を満たすことが必要とされた：
・市販されている歯科用製品または化粧品に対して既往のアレルギーが無い全身および口腔の健康状態が良好な１８歳以上の男女；
・個体（または法的に許された代表者）に試験の全ての関連局面を知らせたことを示す、個人の署名および日付のある同意書の証明；および
・指導に従い割り当てられた製品を使用する意思、約束を守れること、および臨床試験を完了する見込みがあること。
【００３６】
口腔調査の組み入れ基準
・口内環境に露出された最低１８本の健康な歯。人工歯冠または広範囲に修復された歯は歯の数に含めなかった；
・二つの生体位用具を保持するための歯として選択された両下顎第一永久大臼歯（歯＃１
８，１９および３０，３１）の頬側面上の未修復および健全なエナメル質；
・歯科医の肉眼調査および治験担当者（ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒ）の判断に基づき、重要な口腔軟組織病変が無いこと；
・抜ける可能性がある局部義歯が無いこと
・十分な口内衛生度（すなわち毎日の歯磨き、そして歯の手入れを怠る兆候がないこと）；および
・広範囲な歯肉縁上歯石がないこと
【００３７】
一般的な除外基準
以下の事項を表す個体は試験から除外した：
・腎臓疾患または腎臓結石、クローン病または他の吸収不良症候群の病歴または存在；
・歯磨き剤および口内洗浄液のような衛生製品の使用後にかなりの副作用の病歴；
・標準的な口内衛生手法（すなわち歯磨き、うがいなど）の行為を不可能にし得る身体的限界または制約；
・唾液の流れる速度に悪影響を及ぼす可能性がある抗生物質または投薬を現在受けている；
・試験に使用する薬剤または化学品に対して報告されたアレルギー；
・処方箋または大衆薬のいずれであっても調査来院前４週間以内に抗生物剤の使用；
・口腔清掃のような参加に影響を及ぼす可能性がある歯科処置を受けるか、受けることを計画していること（しかし緊急の処置は認めた）；
・歯科処置前に準備投薬の必要性；
・過去３０日以内に口腔ケア製品が関与する歯科臨床試験の参加；
・妊娠中である、看護を受けている、または試験中に妊娠することを計画（自己申告）；および
・試験参加に関連して危険性が上がる可能性があるか、または試験結果の解釈を妨害する可能性があり、そして治験担当者がその個体の試験への参加が不適切と判断できる他の重篤、急性または慢性の医学的または精神的状態または実験室での異常性。
【００３８】
個体が投薬を受け、アレルギーの病歴および／または慢性疾患があると報告した場合に、治験担当者の意見でこれが実験または個体の安全性で評価される臨床的パラメータ（１もしくは複数）に影響を及ぼさなければ、個体は実験に登録され、そして治験担当者からの文書に記録された。
【００３９】
口腔試験除外基準
・酷い虫歯、歯科矯正的に束ねられた歯、固定または除去可能な補綴のための支台歯、または第三大臼歯は実験に含めなかった；
・直前３ヵ月以内の歯周外科手術および歯科矯正処置；
・歯科治験責任者（ｄｅｎｔａｌ  ｅｘａｍｉｎｅｒ）の肉眼検査および治験担当者の判断に基づく重大な口腔軟組織病変の病歴または現在の証拠；
・臨床検査および治験担当者の判断に基づく重篤な辺縁歯肉炎の存在；および
・中程度／進行した歯周炎の肉眼的証拠（ＩＩＩ，ＩＶ型ＡＤＡ）。
【００４０】
試験から個体の排除
治験担当者は以下の事象で調査処置から個体を終了させることができた：
・有害事象；
・合併症の問題；
・プロトコールの適正または実験上の重大な違反；
・個体の撤回の決定；
・同意の撤回；および
・プロトコールに特異的な基準。
【００４１】
試験処置
個体は４種の処置群のうちの１つに無作為に割り当てられた：
・Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ―フッ化物を含まないＴｈｅｏｄｅｎｔ歯磨き剤（Ｔｈｅｏｄｅｎｔ（登録商標）  ｃｌａｓｓｉｃ；Ｔｈｅｏｃｏｒｐ  Ｈｏｌｄｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｍｅｔａｉｒｉｅ，ＬＡ，ＵＳＡ）；
・Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ―Ｎｏｖａｍｉｎ含有抗感（ａｎｔｉｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ）歯磨き剤（Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ  ５０００  Ｎｕｐｒｏ（登録商標）；ＤＥＮＴＳＰＬＹ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ；Ｙｏｒｋ，ＰＡ，ＵＳＡ）；
・Ｃｏｌｇａｔｅ―標準フッ化物歯磨き剤（Ｃｏｌｇａｔｅ  ｒｅｇｕｌａｒTM  Ｃｏｌｇａｔｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ，ＵＳＡ）；または
・Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ―フッ化物含有Ｔｈｅｏｄｅｎｔ歯磨き剤（フッ化物を含むＴｈｅｏｄｅｎｔ（登録商標）；Ｔｈｅｏｃｏｒｐ  Ｈｏｌｄｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｍｅｔａｉｒｉｅ，ＬＡ，ＵＳＡ）。
【００４２】
４種の歯磨き剤、Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ，Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ，ＣｏｌｇａｔｅおよびＴｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆの効力は、１日目（２回製品を使用）、２日目（４回製品を使用）、３日目（６回製品を使用）、そして７日目（１４回製品を使用）の時点で比較した。２，４，６および１４回製品を使用した後の各製品の効力も長期効果を定めるために比較した。
【００４３】
臨床手順
すべての個体が毛先の柔らかい手動歯ブラシおよび実験期間を通して使用するためのそれぞれの歯磨き剤を受け取った。彼らは休薬期間を開始し、そして１日２回、朝と就寝前に彼らの通常の様式でブラッシングするよう指導された。それぞれの場合で、個体はそれぞれの歯磨き剤を少なくとも１インチのストリップで使用して１分間ブラッシングし、そしてさらに１分間待った後に１０ｍｌの水で１０秒間すすいだ。１回目のブラッシングは研究所の施設で行い、そして実験コーディネーターによる指導を受けた。個体はブラッシング後、少なくとも３０分間、何も飲まないように依頼された。各個体には、毎日ブラッシングした回数を記録しておくために日記が与えられた。全ての個体が彼らの通常の食習慣を維持するように依頼された。口内洗浄液、処方された製品などの他のいかなる口腔衛生製品の使用も禁止された。
【００４４】
７日間の休薬期間の後、摘出したヒトの歯に由来する象牙質ブロックで作った生体位用具（上記の「サンプルの保存および生体位用具の構築」を参照にされたい）を割り当て、そして各個体に基準来院時（来院２−１日目）に装着した。各個体は４つの象牙質検体を装着して１日（２回製品を使用）、２日（４回製品を使用）、６日（１２回製品を使用）、そして７日（１４回製品を使用）後に効力を評価できるようにした。この用具は有資格の歯科医師により装着され、この医師は後に処理し、そしてサンプルを分析して最終データを作成する研究室のアシスタントとは異なった。この用具を保持するために選択された各個体の下顎第一および第二永久大臼歯の頬側面は、現在の歯科プラクティスの理論に従い３０秒間、慎重に酸エッチングし、洗浄し、そしてさらに３０秒間乾燥し、次いでコットンロールを使用して隔離した。用具の底は慎重に配置して咬合性の妨害が生じることを回避し、そして軟組織の炎症を回避した。
【００４５】
個体は彼らの歯を１日２回、朝および就寝前にブラッシングするように指導された。個体は各回１分間ブラッシングし、ついでさらに１分間待った後に１０ｍｌの水で１０秒間すすぐように指導された。個体はブラッシング後、少なくとも３０分間、何も飲まないように指導された。各個体には、毎日ブラッシングした回数を記録しておくために日記が与
えられた。全ての個体が彼らの通常の食習慣を維持するように依頼された。口内洗浄液、処方された製品などの他のいかなる口内衛生製品の使用も禁止された。
【００４６】
用具を付けた直後に（１日目）、各個体は実験コーディネーターの指導の元で彼らの製品を初めて使用した。各個体は２日目の朝、割り当てられた製品を使用する前に医院に来るように指導され、ここで４つの用具のうちの１つが外され、そして分析のために研究所へ送られた。用具を外した直後に、個体は実験コーディネーターにより指導された製品の使用を許可された。このプロセスを３日目（２日間の製品の使用）、４日目（３日間の製品の使用）、および８日目（７日間の製品の使用）に繰り返し、この時に残る象牙質含有用具を１４回の製品の使用後に外した。外した象牙質ブロックは、外した直後に分析のためにラボへ送られた。歯の表面に残った接着剤は、慎重かつ完全にコンポジット除去用錐（ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ−ｒｅｍｏｖｉｎｇ  ｂｕｒｒ）で除去した。
【００４７】
対照象牙質ブロックのＳＥＭ調査
試験象牙質ブロックをそれらの用具から外した後、試験象牙質ブロックを上記のように風乾するためにペトリ皿に置いた。２４時間乾燥した後、ブロックを金パラジウムでスパッタコーティングし、次いでＳＥＭ（ＪＥＯＬ  ＵＳＡ  Ｉｎｃ．；Ｍｏｄｅｌ：ＪＳＭ−６６１０ＬＶ）を介して視覚化し、そして分析した。
【００４８】
細管閉塞の評価
完全に―、部分的に―、そして非―閉塞化象牙細管の数を測定するために、各対照ブロックの画像を処置したブロックと並べて調査した。各象牙質ブロックの表面の中心を、ＳＥＭを使用して調査し、そして画像を１５００ｘの倍率で得た（図１０Ｂおよび１０Ｃ）。得られた各ＳＥＭ画像は、２名の調整（ｃａｌｉｂｒａｔｅｄ）盲検化治験責任者により、細管閉塞の程度を十分に−開いた、部分的に−および完全に−閉塞した象牙細管の数、ならびに各１５００ｘ画像上のスミア層により覆われた象牙質表面の百分率に基づき評価された。治験責任者は２０画像の標準組に対して調整した。標準の組に対する一致は、カッパー分析（ｋａｐｐａ  ａｎａｌｙｓｉｓ）により定量した。フリー−マージンカッパースコア（ｆｒｅｅ−ｍａｒｇｉｎ  Ｋａｐｐａ  ｓｃｏｒｅ）は０．８１および０．８７であった（０．７０より高いスコアは十分な一致として受け入れられると考えた）。各検体について二つの評価の平均を算出した。
【００４９】
スミア層沈着／沈殿評価
完全に―、部分的に―、そして非―閉塞化細管の数を測定することに加えて、計数技術者はスミア層の沈着および／または沈殿についても各処理ブロックの画像を調査した。スミア層沈着／沈殿により覆われた領域の割合を各画像ついて評価し、そして報告した。
【００５０】
安全性評価
安全性は、事前の来院以来、および副作用の表作成を通して、新たな、または持続する症状について、実験中の各来院時に各個体の観察および質問を通して評価した。悪い出来事は報告されなかった。
【００５１】
統計学的方法
データの統計分析は、統計ソフトウェア（ＰＡＳＷ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ  １８．０，ＩＢＭ）を使用して、有意性のレベルとして設定したα＝０．０５を用いて行った。各ブロック中の十分に開いた、部分的に、および完全に閉じた細管の数を計数し、そして対応する対照ブロックの細管の数の百分率として表した。十分に開いた、部分的に、および完全に閉じた細管の百分率の平均を個々の製品について算出した。また沈着したスミア層により覆われた表面積の百分率の平均を、各製品について算出した。１元反復ＡＮＯＶＡ、続いてＴｕｋｅｙ’ｓ  ＨＳＤ試験を使用したｐｏｓｔ  ｂｏｃ  マルチ−ステップ比
較で、象牙細管の閉塞における４種の歯磨き剤の効力を、十分に―開いた細管、部分的に―閉じた細管、完全に−閉じた細管、およびスミア層により覆われた表面の割合に基づき比較した。
【実施例１】
【００５２】
予備インビトロデータ
予備インビトロ実験に由来するサンプルからの予備データは、テオブロミン含有製剤が予期せずに、しかも驚くほど従来から利用されている象牙細管閉塞処置よりも効果的であることを示す。本明細書の結果は、テオブロミン含有製剤の１回の指向的使用後に、９５％より高いか、または全ての象牙細管が、テオブロミン含有歯磨き剤に暴露した表面に沈着した沈殿物で部分的または完全に閉塞されることを示す（図１対図２、および図３対図４を参照されたい）。
【００５３】
図１および３は、テオブロミン含有歯磨き剤で処置しなかった対照サンプルを示すＳＥＭ顕微鏡写真である。開存象牙細管は、各画像全体にわたって明らかに示されている。図２および４は、上で説明したようにテオブロミン含有歯磨き剤で処置した対の試験サンプル（それぞれ図１および３の対照サンプルと同じブロックに由来した）を示すＳＥＭ顕微鏡写真である。図２および４に示されるように、全ての象牙細管はテオブロミン含有歯磨き剤で１回処置しただけでほとんどまたは完全に閉塞される。また図２および４は、テオブロミン含有歯磨き剤に暴露された歯の表面に沈着した無機質層も示す。
【実施例２】
【００５４】
臨床試験の結果
臨床試験に集めた８０名の個体は脱落者なしに試験を終了した。上述のように、歯磨き剤の効力は４つの変数、すなわち（ａ）完全に閉塞した細管、（ｂ）十分に開いた細管、（ｃ）部分的に閉塞した細管、および（ｄ）スミア層により覆われた表面領域の百分率に基づき比較した。
【００５５】
図６は、４つの歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を１，２，３および７日間使用した後（それぞれ２，４，６および１４回使用）に完全に閉塞した細管の割合を示す。文字は各使用時点（１，２，３および７日目）での４つの歯磨き剤の効力を比較した。異なる文字（すなわちａ，ｂ，ｃ，ｄ）は完全に閉塞した細管の割合における統計的有意差（ｐ＜０．０５）を表すが、同じ文字は有意に異ならないことを示す。記号（*，**，γ，β）は、同じ歯磨き剤で異なる使用期間後（１，２，３および７日間）の効力を比較した。カラム間で異なる記号は、完全に閉塞した細管の割合における統計的有意差（ｐ＜０．０５）を示すが、同じ記号は有意に異ならないことを意味する。
【００５６】
図７は、４つの歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を１，２，３および７日間使用した後（それぞれ２，４，６および１４回使用）に十分に開いた細管の割合を示す。文字は各使用時点（１，２，３および７日目）での４つの歯磨き剤の効力を比較した。カラム間の異なる文字（すなわちａ，ｂ，ｃ）は十分に開いた細管の割合における統計的有意差（ｐ＜０．０５）を表すが、同じ文字は有意に異ならないことを示す。記号（*，**，β）は、同じ歯磨き剤で異なる使用期間後（１，２，３および７日間）の効力を比較した。カラム間で異なる記号は、十分に開いた細管の割合における統計的有意差（ｐ＜０．０５）を示すが、同じ記号は有意に異ならないことを示す。
【００５７】
図８は、４つの歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を１，２，３および７日
間使用した後（それぞれ２，４，６および１４回使用）に部分的に閉塞した細管の割合を示す。文字は各使用時点（１，２，３および７日目）での４つの歯磨き剤の効力を比較した。カラム間の異なる文字（すなわちａ，ｂ，ｃ，ｄ）は部分的に閉塞した細管における統計的有意差（ｐ＜０．０５）を表すが、同じ文字は有意に異ならないことを示す。記号（*，**，β）は、同じ歯磨き剤で異なる使用期間後（１，２，３および７日間）の効力を比較した。カラム間で異なる記号は、部分的に閉塞した細管における統計的有意差（ｐ＜０．０５）を示すが、同じ記号は有意に異ならないことを示す。
【００５８】
図９は、４つの歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を１，２，３および７日間使用した後（それぞれ２，４，６および１４回使用）に沈着したスミア層により覆われた表面領域の割合を示す。文字は各使用時点（１，２，３および７日目）で４つの歯磨き剤の効力を比較した。カラム間の異なる文字（すなわちａ，ｂ，ｃ，ｄ）は完全に閉塞した細管における統計的有意差（ｐ＜０．０５）を表すが、同じ文字は有意に異ならないことを示す。記号（*，**，β）は、同じ歯磨き剤で異なる使用期間（１，２，３および７日間）後の効力を比較した。カラム間で異なる記号は、完全に閉塞した細管における統計的有意差（ｐ＜０．０５）を示すが、同じ記号は有意に異ならないことを示す。
【００５９】
図１０Ａ，１０Ｂ，１０Ｃおよび１０Ｄは、処置前（ｂｆ）、および４つの歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を使用した後の細管を含む象牙質ブロック表面の典型的なＳＥＭ画像を表す。図１０Ａは２回使用後（１日目）に得た結果を示し、図１０Ｂは４回使用後（２日目）に得た結果を示し、図１０Ｃは６回使用後（３日目）に得た結果を示し、そして図１０Ｄは１４回使用後（７日目）に得た結果を示す。画像は、Ｃｏｌｇａｔｅではない歯磨き剤Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ、ＳｅｎｓｏｄｙｎｅおよびＴｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆの使用が増すと、象牙細管の閉塞およびスミア層の沈着が上昇することを示している。Ｃｏｌｇａｔｅ  Ｒｅｇｕｌａｒ  Ｔｏｏｔｈｐａｓｔｅは、１４回の製品の使用で沈着したスミア層の量は無視できた。
【００６０】
この臨床試験の結果は、歯磨き剤であるＴｈｅｏｄｅｎｔ  Ｃｌａｓｓｉｃ、フッ化物含有ＴｈｅｏｄｅｎｔおよびＳｅｎｓｏｄｙｎｅ  Ｎｕｐｒｏ  ５０００（登録商標）が象牙細管の閉塞ならびに象牙質表面へのスミア層の沈着に有効であり、Ｔｈｅｏｄｅｎｔ
Ｃｌａｓｓｉｃおよびフッ化物含有Ｔｈｅｏｄｅｎｔが同等に有効であることを示している。
【００６１】
本明細書で引用した全ての文献は、各文献が具体的かつ個別に引用により編入されたことを示したように、引用により本明細書に編入される。任意の文献の引用は、出願日前のその開示に関するものであり、本開示が先行発明によりその文献より日時が前であるとは主張しないことを認めると解釈されるべきではない。
【００６２】
上記の各要素、またはその２つ以上は一緒に、上記とは異なる種類の他の種類の方法に有用な応用を見出すことができるかもしれないと理解されよう。さらに分析しなくても、これまでの記載は本開示の要点を十分に明らかにしているので、他の人々は現在の知識を応用することにより、従来技術の立観点から、添付の請求の範囲で説明する本開示の一般的または具体的局面の本質的特徴を十分に構成する特徴を省くことなく様々な応用に容易に適合させることができる。前記態様は例示のためだけに提示したものであり、本開示の範囲は、以下の特許請求の範囲によってのみ限定されるべきである。
【図１】
2018030866.tif 000002
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０Ａ】
2018030866.tif 000011
【図１０Ｂ】
2018030866.tif 000012
【図１０Ｃ】
2018030866.tif 000013
【図１０Ｄ】
2018030866.tif 000014
【手続補正書】
【提出日】平成29年9月29日(2017.9.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
１．分野
本開示は、テオブロミン（３，７−ジメチルキサンチン、カカオ（Ｔｈｅｏｂｒｏｍａ
ｃａｃａｏ）の主アルカロイド）を含む歯科感受性（ｄｅｎｔａｌ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ）を処置する組成物、およびそれらの使用に関する。使用には象牙質の感受性または知覚過敏（ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ）の処置、および歯の細管の効果的閉塞を含む。
【背景技術】
【０００２】
２．関連技術の記載
齲蝕は人類を悩ます最も広く流行っている疾患である。歯のエナメル質の酸蝕病は、痛い象牙質知覚過敏の第一原因である。歯茎退縮も象牙質の露出の要因である。エナメル質の酸蝕病は、柑橘類またはワインのような酸性食品から生じる可能性があり、これらは外側のエナメル質を酷く害し、そして開いた象牙細管の露出を起こす恐れある。知覚過敏になった歯は、冷気、熱、空気および砂糖が多い食品に対しても感受性が高い。
【０００３】
象牙質は、エナメル質、セメント質および歯髄と共に歯の四つの主要構成要素の一つである。これは石灰化組織であり、そして通常はエナメル質（歯冠上）およびセメント質（歯根上）で覆われ、そして歯髄を完全に囲んでいる。象牙質は、中心の歯髄腔から象牙質の周囲（外部セメント質またはエナメル質境界）へ象牙質を通って外側放射状に伸びる多数の微細管（象牙細管）により、形態学的には放射状の線条構造である。この細管は基部（歯髄付近）で直径が大体２ミクロン（２μｍ）、そして周囲で（歯茎に向かって）より狭くなり（約０．５μｍ）、そして流体および細胞構造が含まれる（かつて象牙質を形成し、そしてそれを維持している象牙芽細胞の細胞質の広がり；象牙芽細胞の細胞体が象牙前質の層に対して象牙質の内側面に沿って並び、ここで歯の歯髄の周囲境界も形成する）。象牙細管により、象牙質は幾らかの透過性を有し、これが痛みの感受性および齲蝕率を上げることになる。健康な口腔では、これらの細管はエナメル質およびセメント質に覆われる（これは次いで歯肉組織／歯茎により覆われる）。
【０００４】
米国では、単独で、の知覚過敏におよそ４０００万人の成人が冒され、そしてその約２５％が慢性的に患っている（非特許文献１）。歯の知覚過敏の発症のほとんどが３０〜３９歳頃の年齢で始まり、そして年齢と共に悪化する。露出した歯の細管は、歯髄の神経終末を興奮させることができる流体力学的流動および直接的圧力勾配を上昇させる。この流体力学的流動は、限定するわけではないが冷気、熱、気圧、乾燥、糖、酸っぱさもしくは酸性の刺激、または歯に作用する機械的力（例えば歯磨き）を含む様々な環境的因子により上昇し得る。さらに研磨剤入りの歯磨き剤は、象牙質の表面を削り、そして腐食剤と合わされば象牙細管を開く可能性がある。歯髄の露出した神経終末の興奮は非常に痛くなる恐れがあり、そして象牙質の知覚過敏の根本原因となる。当該技術分野で知られている組成物は、処置として硝酸カリウム、生体活性ガラス組成物、塩化ストロンチウム、酢酸ストロンチウムまたは非晶質リン酸カルシウムを使用するが、それでもそれらの効力に対する疑問が残る。伝えられるところによると、これらの化合物は象牙細管の管腔内および露出した象牙質上に無機質の沈着を促進し、それにより侵害刺激の伝達を防いでいる。しかし少なくとも一つの論評によれば、歯の知覚過敏のためにカリウム塩の有効性を支持する強力な証拠はない。Ｐｏｕｌｓｅｎ  Ｓ、ｅｔ  ａｌ．象牙質知覚過敏のための硝酸カリウム入り歯磨き剤。Ｏｒｃｈａｒｄｓｏｎ  Ｒ、Ｇｉｌｌａｍ  ＤＧ．象牙質知覚過敏を処置するための作用物質としてのカリウム塩の効力。非特許文献２。テオブロミンをほぼ即座の、しかも完全な象牙細管閉塞用触媒として使用した、または使用すること示唆した組成物は当該技術分野では知られていない。
【０００５】
この技術的問題に対する解決策が請求の範囲で特徴付けられる態様により提供される。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｋａｎａｋｐｋａ  ＪＡ、Ｄｅｎｔ．Ｃｌｉｎ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍ．１９９０；３４（３）：５４５−６０
【非特許文献２】Ｊ  Ｏｒｏｆａｃ  Ｐａｉｎ．２０００；１４（１）：９−１９．
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本開示は象牙質知覚過敏を処置および／または減らすための組成物および方法に関し、ならびに齲蝕を処置および／または防止するための方法および組成物に関する。
【０００８】
より詳細には、本開示は自然な処置としてテオブロミン（市販の歯科用製品および食品への添加物）の使用に関し、この処置は現在利用可能な象牙質知覚過敏の処置法よりも有意に短い処置期間で象牙細管を完全に閉塞することができる。この化合物の安全性プロファイルにより、このテオブロミンは様々な歯科用、食品および飲料関連製品に対して特に有用な添加物となる。
【０００９】
象牙質知覚過敏を処置および／または減らすためにテオブロミンを含む本開示による組成物は、限定するわけではないが：歯磨き剤、口内洗浄液、デンタルフロス、店頭で買えるトレイ、被覆ストリップ、ゲル、歯科矯正用および小児用ワニス、歯科用セメントまたは接着剤、研磨／予防ペースト、歯の漂白剤、虫歯の穴の充填材および樹脂（双方ともＵＶおよび非‐ＵＶ反応性）、およびグッタペルカを含む歯内材料を含む。
【００１０】
象牙質知覚過敏の減少に特に興味深い食品には、限定するわけではないが：ガム、ミント、歯に優しい飴、チュー（ｃｈｅｗ）、パン、インスタントシリアル、オートミール、スポーツおよびアイソトニック飲料、栄養ドリンク、食事に代わる飲料（ミルクを含まない、およびミルクに基づく）、ビタミンまたは成分調整ボトル詰め水（ｅｎｈａｎｃｅｄ
ｂｏｔｔｌｅｄ  ｗａｔｅｒ）、お茶、豆乳、ゼラチン、ヨーグルト、ヨーグルト飲料、フルーツスムージー、粉末のまたは液体の風味付ドリンクおよびカルシウムチューがある。
【００１１】
一つの態様では口腔ケア用組成物が提供され、それらは単離テオブロミンまたはその塩もしくは複塩；塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源を含む。
【００１２】
一つの態様では、口腔感受性を下げる方法が提供され、この方法は哺乳動物の歯の表面に：単離テオブロミンまたはその塩もしくは複塩；塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源を含んでなる口腔ケア組成物を適用することを含む。
【００１３】
一つの態様では哺乳動物の全身的健康状態を維持し、または向上させる方法を提供し、この方法はある期間継続して、少なくとも１日１回、哺乳動物の口腔表面に組成物を適用することを含んでなり、ここでこの組成物は：単離テオブロミンまたはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含んでなる共結晶；塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源を含む。
【００１４】
一つの態様では、哺乳動物の歯の表面内の象牙細管を閉塞する方法を提供し、この方法は歯の表面に：単離テオブロミンまたはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含んでなる共結晶；塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源を含んでなる組成物を適用することを含む。
【００１５】
一つの態様では、哺乳動物の歯の表面に沈殿物を沈着させる方法を提供し、この方法は歯の表面に：単離テオブロミンまたはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含んでなる共結晶；塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源を含んでなる組成物を適用することを含む。
【００１６】
この組成物は約３〜約１１、約４〜約１０、約５〜約９、約６〜約８．５、約６〜約８、約６．５〜約７．５、約７、約７〜約１１、約８〜約１１、約８〜約１０、約８．５〜約９．５、約９、約３〜約７、約３〜約６、約３〜約５、好ましくは約４〜約５、より好ましくは約４．５〜約４．８、そしてさらに一層好ましくは約４．８のｐＨを有することができる。
【００１７】
また組成物は、さらに少なくとも一つの等張化剤を含んでなることができる。等張化剤は多価アルコールでよい。多価アルコールはキシリトール、ソルビトール、マンニトール、マルチトール、ラクチトール、イソマルト、エリスリトール、アラビトール、グリセロール、およびそれらの組み合わせからなる群から選択することができる。該方法の組成物は、さらに少なくとも一つの増粘剤を含んでよい。増粘剤はメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、およびそれらの組み合わせからなる群から選択することができる。組成物はさらに抗バクテリア剤、抗微生物剤、またはそれらの組み合わせを含んでなることができる。抗バクテリア剤は、トリクロサン、過酸化水素、メチル−４−ヒドロキシベンゾエート、丁子油およびそれらの組み合わせからなる群から選択することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
本開示の性質、目的および利点をさらに理解するために、以下の図面に関連して読むべき以下の詳細な説明に対する参照がなされるべきであり、ここで同じ符号は同じ要素を表す。
【図１】対照歯検体に由来する開存象牙細管を表す。
【図２】テオブロミン含有歯磨き剤で処置した試験歯検体に由来する閉塞した象牙細管を示す。
【図３】臨床試験データを示す：対照歯検体に由来する開存象牙細管。
【図４】臨床試験データを示す：テオブロミン含有歯磨き剤で処置した試験歯検体に由来する閉塞した象牙細管。
【図５】代表的なヒトの臼歯を表し、そして挿入したボックスは本明細書に記載した実験のための象牙ブロック調製に使用した象牙質領域を示す。
【図６】臨床試験データを示す：４種の歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を、１、２、３および７日間使用（それぞれ２、４、６および１４回使用）した後に完全に閉塞した細管の割合。カラム（１、２、３および７日目）の各群について（Ｔ１−Ｔ４）、“１日目”は最も左のカラムであり、続いて“２日目”、次に“３日目”そして“７日目”が最も右のカラムである。
【図７】臨床試験データを示す：４種の歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を、１、２、３および７日間使用（それぞれ２、４、６および１４回使用）した後に完全に開いた細管の割合。カラム（１、２、３および７日目）の各群について（Ｔ１−Ｔ４）、“１日目”は最も左のカラムであり、続いて“２日目”、次に“３日目”そして“７日目”が最も右のカラムである。
【図８】臨床試験データを示す：４種の歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を、１、２、３および７日間使用（それぞれ２、４、６および１４回使用）した後の部分的に閉塞した細管の割合。カラム（１、２、３および７日目）の各群について（Ｔ１−Ｔ４）、“１日目”は最も左のカラムであり、続いて“２日目”、次に“３日目”そして“７日目”が最も右のカラムである。
【図９】臨床試験データを示す：４種の歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を、１、２、３および７日間使用（それぞれ２、４、６および１４回使用）した後に、沈着したスミア層に覆われた表面積の割合。カラム（１、２、３および７日目）の各群について（Ｔ１−Ｔ４）、“１日目”は最も左のカラムであり、続いて“２日目”、次に“３日目”そして“７日目”が最も右のカラムである。
【図１０】臨床試験データを示す：処置前（ｂｆ）、および４種の歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を、２回（１日）、４回（２日）、６回（３日）または１４回（７日）間使用した後（それぞれ図１０Ａ、１０Ｂ、１０Ｃおよび１０Ｄで）、細管を含む象牙質ブロック表面の典型的なＳＥＭ画像。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
詳細な説明
主題の開示をさらに記載する前に、本開示は、特定の態様の変形を作成でき、そしてそれでも添付する請求項の範囲内にあるので、以下に記載する本開示の特定態様に限定されないと理解すべきである。また使用する用語は特定の態様を説明することを目的とし、限定することを意図しないと理解されるべきである。それよりも本開示の範囲は添付する特許請求の範囲により確立されることになる。
【００２０】
本明細書および添付する特許請求の範囲では、単数形である“ａ、”、“ａｎ、”および“ｔｈｅ”には、文脈が明らかにそうでないことを示さない限り、複数の意味を示すことを含む。別に定めない限り、本明細書で使用するすべての技術的および科学的用語は、本開示が属する分野の当業者が通常に理解している意味と同じ意味を有する。
【００２１】
象牙細管の閉塞を評価するための現在の方法は：１）露出した／開いた歯の細管の数；２）部分的に閉塞した歯の細管の数；および３）完全に閉塞した歯の細管の数を測定するために、組成物である期間処理される象牙質ブロックサンプルの調製に依存する。
【００２２】
サンプルの予備データは、本請求のテオブロミン含有製剤が以前に提案された象牙細管閉塞処置よりも有意に、そして驚くことにより効果的であることを示す。本明細書に提示する結果は、本製剤を１回、指向的に使用した後、全ての象牙細管の９５％より多くが部分的、または完全に閉塞されたことを示す（図１および３  対  図２および４を比較する）。
【００２３】
テオブロミン含有組成物および製剤は、製剤に依存して約０．０１％〜約０．１％、〜約１．０％、〜約２．５％、〜約５％、〜約１０％、〜約２０％、〜約５０％、または〜約９９重量％、好ましくは約０．０１％〜約０．１％、〜約１．０％、〜約２．５％、〜約５％、〜約１０％、〜約２０％、または〜約５０重量％、そしてより好ましくは約０．１％〜約０．１％、〜約１．０％、〜約２．５％、〜約５％、〜約１０％、〜約２０％、〜約５０％の単離テオブロミンを含むことができる。
【００２４】
テオブロミン含有組成物および製剤は、結合剤（例えばコーンシロップのようなシロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ワックスおよび他の脂肪、カカオ脂、カカオバター代替物、水素化獣脂、水素化植物油、水素化綿実油、パーム核油、大豆油、スタノールエステル、グリセロールエステル、ポリアルコールエステル、親水性および疎水性のバランスが０．５から２０より上のポリオキシエチレンエステルおよびポリエチレングリコール、モノサッカライド、オリゴサッカライド（デキストロース、デキストロース一水和物、ラクトース、マンノース、フルクトース、およびそれらの誘導体および混合物）、ポリサッカライド、ガム溶液、水素化澱粉ハイドレート、グリセリン、およびそれらの混合物；充填剤（例えば二酸化ケイ素、糖、澱粉、ラクトース、スクロース、ソルビトール、フルクトース、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、リン酸二カルシウム、エリスリトール（ｅｒｙｔｈｉｔｏｌ）、キシリトール、マンニトール、マルチトール、イソマルト、デキストロース、マルトース、ラクトース、微晶質セルロース、メイズ−澱粉、グリシンおよびそれらの混合物）；潤滑剤（例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、澱粉、二酸化ケイ素、およびそれらの混合物）；崩壊剤（例えば澱粉、ポリビニルピロリドン、澱粉グリコール酸ナトリウム、微晶質セルロース、およびそれらの混合物）；接着剤（例えば固体状態のポリエチレングリコール、モノグリセリド（
植物または動物脂肪の４０−９０％グリセリド）、アセチル化モノグリセリド、ヒドロコロイド状ガム、他の乳化剤または脂肪およびそれらの混合物）；または製薬学的に許容され得る湿潤剤（例えばラウリル硫酸ナトリウム）のような通例の賦形剤を含むことができる。
【００２５】
本方法に有用なテオブロミン含有組成物および製剤は、米国特許仮出願第６１／３０３，７７４号明細書の優先権を主張する国際公開第２０１１／１００６７１号パンフレットに記載され、これらの開示は引用により全部、本明細書に編入される。
【００２６】
材料および方法
歯根象牙質の選択および象牙質ブロックの調製
２−イソプロピル−５−メチルフェノール（ＩＰＭＰ、またはチモール）殺菌剤に保存された新たに摘出したヒトの臼歯を集め、破片を除き、そして滑らかな象牙領域（図５参照）を調査した。水冷ダイヤモンドワイヤーソー（Ｗｅｌｌ  Ｄｉａｍｏｎｄ  Ｗｉｒｅ
Ｓａｗｓ，Ｉｎｃ．Ｎｏｒｃｒｏｓｓ  ＧＡ，ＵＳＡ）を使用して象牙質ブロックを約６−７ｍｍ  ｘ  １．５ｍｍの寸法に割断した。約０．７５ｍｍの高さおよび滑らか作業面を有するブロックは、ＭｕｌｔｉＰｒｅｐ精密研磨機（Ａｌｌｉｅｄ  Ｈｉｇｈ  Ｔｅｃｈ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｉｎｃ．ＣＡ，ＵＳＡ）でダイヤモンドラッピングフィルムを使用して、サンプルを最初に３０μｍのダイヤモンド砥粒で研ぎ、そして滑らかな仕上がりを得るために１μｍの砥粒で仕上げることにより得た。得られたブロックを「サンプル」と呼ぶ。最終的なサンプルサイズは、長さ６−７ｍｍ  ｘ  幅１．５ｍｍ  ｘ  高さ０．７５ｍｍであった。非作業面領域は、作業面と識別するために消えないペンで印を付けた。少なくとも１または２つの垂直または水平の象牙質ブロックを各臼歯の根から得た。分岐点およびセメント−エナメル連結部は避けた。
【００２７】
対照および試験検体の作成
各サンプル（長さ６−７ｍｍ  ｘ  幅１．５ｍｍ  ｘ  高さ０．７５ｍｍ）は、水冷ダイヤモンドワイヤーソーを使用して二分割し、長さ３．５ｍｍ  ｘ  幅１．５ｍｍ  ｘ  高さ０．７５ｍｍの寸法の二つのブロックを作成し、一つを試験サンプルとし、そしてもう一つを対照とした（すなわち対になる対照および試験サンプルを得た）。換言すると各試験サンプルは対応する対照サンプルを有する。両検体の切断エッヂもペンで印を付けた。
【００２８】
スミア層の除去
酸エッチングおよび超音波処理を行って、スミア層およびサンプル調製中に形成された破片を除去し、そして開存象牙細管を得た。各サンプルの両半分（対照および試験）を、６％クエン酸、ｐＨ２．０（重量による：粒状／粉末クエン酸を蒸留水に加えた）を含有する２００ｍｌのビーカー中で同時に、最大２分間（電力設定１）、超音波処理した（Ｂｒａｎｓｏｎ  Ｓｏｎｉｆｉｅｒ  ４５０，Ｄａｎｂｕｒｙ，ＣＴ，ＵＳＡ）。クエン酸でエッチングした後、検体を蒸留水、ｐＨ７．０中で２分間（電力設定２）、超音波処理した。超音波処理後、サンプルを慎重に以下のように乾燥した。サンプルは最初にキムワイプで乾燥し、次いで清潔なペトリ皿に作業面を上にして置いた（ペトリ皿の底から離して）。ペトリ皿は低密有孔パラフィルムで覆ってほこりの混入を避け、次いでラミナーフローフード内で一晩（１６時間以下）、風乾した。
【００２９】
対照象牙質ブロックのＳＥＭ検査
実験前に、対照サンプルは走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）を介して調査して検体調製および開存象牙細管の品質を確認した。検体表面の均一性および完全性を確立したら、各検体から無作為に選択した三つの領域の走査電子顕微鏡写真を記録した。表面に人工産物および閉塞した象牙細管があるサンプルは捨てた。選択したサンプルのＳＥＭ画像を記録し、
そして後の比較分析に役立てた。サンプル全体に均一な開いた象牙細管を持つ対照の象牙質ブロックに対応するエッチング試験象牙質ブロックを実験に選択した。
【００３０】
予備的インビトロ実験
以下に記載する臨床試験に先立ち、二つの試験サンプルは毛先の柔らかい歯ブラシおよびテオブロミン含有歯磨き剤組成物を使用して１分間ブラッシングした。この歯磨き剤をさらに１分間、試験サンプル上に残るようにし、その後、それらを１０ｍｌの水で１０秒間、すすいだ。次いで試験サンプルを人工唾液に、二つの対の対照サンプルのように浸した。続いて二つの試験および二つの対照サンプルを、カルシウムおよびリン酸塩源を含有する人工唾液（例えば米国特許仮出願第６１／３０３，７７４号明細書の優先権を主張する国際公開第２０１１／１００６７１号パンフレットを参照にされたい。これらは引用により全部、本明細書に編入する）から取り出し、そしてペトリ皿中で２４時間、風乾しておいた。風乾後、サンプルを金／パラジウム合金でスパッタコーティングした。次いでスパッタコーティングしたサンプルは、ＳＥＭ（ＪＥＯＬ  ＵＳＡ  Ｉｎｃ．；Ｍｏｄｅｌ
Ｎｏ．ＪＳＭ−６６１０ＬＶ）で視覚化そして分析した。各象牙質ブロックの表面上に定めた領域は、走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）を使用して１５００ｘの倍率で調査した（図１−４を参照）。
【００３１】
臨床試験
対照象牙質ブロックの走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）調査
臨床試験に先立ち、対照サンプルをＳＥＭで調査して検体調製および開存象牙細管の品質を確認した。検体表面の均一性および完全性を確立したら、無作為に選択した三つの領域の走査電子顕微鏡写真を記録した。表面に人工産物および閉塞した象牙細管があるサンプルは捨てた。選択したサンプルのＳＥＭ画像の読みを記録し、そして後の分析に役立てた。サンプル全体に十分に開いた象牙細管を持つ「対照」の象牙質ブロックに対応する「試験」ブロックを実験に選択した。
【００３２】
サンプルの保存および生体位用具（ｉｎ  ｓｉｔｕ  ａｐｐｌｉａｎｃｅ）の構築
口腔内に暴露する前および後に、試験サンプル（生体位用具内の）は作業面を上にして（ペトリ皿の底から離して）ペトリ皿内に乾燥状態で保存した。さらなる手順の間に作業面に接触しないように注意した。ブロックの生体位用具への挿入は、臨床試験の二日前以前には行わなかった。この用具は、象牙質ブロックを健康な臼歯に付けることができるように各ヒト個体用に構築した。各用具は歯科矯正処置で使用するブランケットに基づいた。各用具は、保持用メッシュ裏材を備えた歯科矯正臼歯用パッド（Ｄｅｎｔａｒｉｕｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）からなり、リングが各象牙質試験ブロックを緊密に囲むようにパッドに溶接された０．７ｍｍの歯科矯正用ワイヤーのリングを有した。象牙質ブロックは、インターメディエート  レストレイティブ  マテリアル（Ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ  Ｒｅｓｔｏｒａｔｉｖｅ  Ｍａｔｅｒｉａｌ（ＩＲＭ  フッ化物を含まない一過性の修復セメント））を使用したブラケット内に保持され、ブロックの一面のみを口腔に暴露した。次いで用具はエチレンオキシドを使用して殺菌した。
【００３３】
被験者の選択
この実験は、観察者盲検、無作為化、並行群間、単施設、比較臨床試験であった。必要な組み入れ／除外基準を満たす約８０名の全般的に健康な成人を登録した（処置群あたり２０名）。調査来院は基準測定を集める５−７日前であった。調査来院時に、各個体は医学的／歯科学的病歴を報告し、そして同意書を読み、そして署名した。同意後、各個体は休薬期間を開始し、そして渡された試験歯磨き剤および毛先の柔らかい歯ブラシで１日２回、彼らの通常の様式でブラッシングを開始するように指導された。治療計画が適切と考えられる個体を選択するために、以下の適格基準を設定した。
【００３４】
一般的な組み入れ基準
個体は、試験に登録するために、以下の全ての組み入れ基準を満たすことが必要とされた：
・市販されている歯科用製品または化粧品に対して既往のアレルギーが無い全身および口腔の健康状態が良好な１８歳以上の男女；
・個体（または法的に許された代表者）に試験の全ての関連局面を知らせたことを示す、個人の署名および日付のある同意書の証明；および
・指導に従い割り当てられた製品を使用する意思、約束を守れること、および臨床試験を完了する見込みがあること。
【００３５】
口腔調査の組み入れ基準
・口内環境に露出された最低１８本の健康な歯。人工歯冠または広範囲に修復された歯は歯の数に含めなかった；
・二つの生体位用具を保持するための歯として選択された両下顎第一永久大臼歯（歯＃１８，１９および３０，３１）の頬側面上の未修復および健全なエナメル質；
・歯科医の肉眼調査および治験担当者（ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒ）の判断に基づき、重要な口腔軟組織病変が無いこと；
・抜ける可能性がある局部義歯が無いこと
・十分な口内衛生度（すなわち毎日の歯磨き、そして歯の手入れを怠る兆候がないこと）；および
・広範囲な歯肉縁上歯石がないこと
【００３６】
一般的な除外基準
以下の事項を表す個体は試験から除外した：
・腎臓疾患または腎臓結石、クローン病または他の吸収不良症候群の病歴または存在；
・歯磨き剤および口内洗浄液のような衛生製品の使用後にかなりの副作用の病歴；
・標準的な口内衛生手法（すなわち歯磨き、うがいなど）の行為を不可能にし得る身体的限界または制約；
・唾液の流れる速度に悪影響を及ぼす可能性がある抗生物質または投薬を現在受けている；
・試験に使用する薬剤または化学品に対して報告されたアレルギー；
・処方箋または大衆薬のいずれであっても調査来院前４週間以内に抗生物剤の使用；
・口腔清掃のような参加に影響を及ぼす可能性がある歯科処置を受けるか、受けることを計画していること（しかし緊急の処置は認めた）；
・歯科処置前に準備投薬の必要性；
・過去３０日以内に口腔ケア製品が関与する歯科臨床試験の参加；
・妊娠中である、看護を受けている、または試験中に妊娠することを計画（自己申告）；および
・試験参加に関連して危険性が上がる可能性があるか、または試験結果の解釈を妨害する可能性があり、そして治験担当者がその個体の試験への参加が不適切と判断できる他の重篤、急性または慢性の医学的または精神的状態または実験室での異常性。
【００３７】
個体が投薬を受け、アレルギーの病歴および／または慢性疾患があると報告した場合に、治験担当者の意見でこれが実験または個体の安全性で評価される臨床的パラメータ（１もしくは複数）に影響を及ぼさなければ、個体は実験に登録され、そして治験担当者からの文書に記録された。
【００３８】
口腔試験除外基準
・酷い虫歯、歯科矯正的に束ねられた歯、固定または除去可能な補綴のための支台歯、または第三大臼歯は実験に含めなかった；
・直前３ヵ月以内の歯周外科手術および歯科矯正処置；
・歯科治験責任者（ｄｅｎｔａｌ  ｅｘａｍｉｎｅｒ）の肉眼検査および治験担当者の判断に基づく重大な口腔軟組織病変の病歴または現在の証拠；
・臨床検査および治験担当者の判断に基づく重篤な辺縁歯肉炎の存在；および
・中程度／進行した歯周炎の肉眼的証拠（ＩＩＩ，ＩＶ型ＡＤＡ）。
【００３９】
試験から個体の排除
治験担当者は以下の事象で調査処置から個体を終了させることができた：
・有害事象；
・合併症の問題；
・プロトコールの適正または実験上の重大な違反；
・個体の撤回の決定；
・同意の撤回；および
・プロトコールに特異的な基準。
【００４０】
試験処置
個体は４種の処置群のうちの１つに無作為に割り当てられた：
・Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ―フッ化物を含まないＴｈｅｏｄｅｎｔ歯磨き剤（Ｔｈｅｏｄｅｎｔ（登録商標）  ｃｌａｓｓｉｃ；Ｔｈｅｏｃｏｒｐ  Ｈｏｌｄｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｍｅｔａｉｒｉｅ，ＬＡ，ＵＳＡ）；
・Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ―Ｎｏｖａｍｉｎ含有抗感（ａｎｔｉｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ）歯磨き剤（Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ  ５０００  Ｎｕｐｒｏ（登録商標）；ＤＥＮＴＳＰＬＹ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ；Ｙｏｒｋ，ＰＡ，ＵＳＡ）；
・Ｃｏｌｇａｔｅ―標準フッ化物歯磨き剤（Ｃｏｌｇａｔｅ  ｒｅｇｕｌａｒTM  Ｃｏｌｇａｔｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ，ＵＳＡ）；または
・Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ―フッ化物含有Ｔｈｅｏｄｅｎｔ歯磨き剤（フッ化物を含むＴｈｅｏｄｅｎｔ（登録商標）；Ｔｈｅｏｃｏｒｐ  Ｈｏｌｄｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｍｅｔａｉｒｉｅ，ＬＡ，ＵＳＡ）。
【００４１】
４種の歯磨き剤、Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ，Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ，ＣｏｌｇａｔｅおよびＴｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆの効力は、１日目（２回製品を使用）、２日目（４回製品を使用）、３日目（６回製品を使用）、そして７日目（１４回製品を使用）の時点で比較した。２，４，６および１４回製品を使用した後の各製品の効力も長期効果を定めるために比較した。
【００４２】
臨床手順
すべての個体が毛先の柔らかい手動歯ブラシおよび実験期間を通して使用するためのそれぞれの歯磨き剤を受け取った。彼らは休薬期間を開始し、そして１日２回、朝と就寝前に彼らの通常の様式でブラッシングするよう指導された。それぞれの場合で、個体はそれぞれの歯磨き剤を少なくとも１インチのストリップで使用して１分間ブラッシングし、そしてさらに１分間待った後に１０ｍｌの水で１０秒間すすいだ。１回目のブラッシングは研究所の施設で行い、そして実験コーディネーターによる指導を受けた。個体はブラッシング後、少なくとも３０分間、何も飲まないように依頼された。各個体には、毎日ブラッシングした回数を記録しておくために日記が与えられた。全ての個体が彼らの通常の食習慣を維持するように依頼された。口内洗浄液、処方された製品などの他のいかなる口腔衛生製品の使用も禁止された。
【００４３】
７日間の休薬期間の後、摘出したヒトの歯に由来する象牙質ブロックで作った生体位用具（上記の「サンプルの保存および生体位用具の構築」を参照にされたい）を割り当て、
そして各個体に基準来院時（来院２−１日目）に装着した。各個体は４つの象牙質検体を装着して１日（２回製品を使用）、２日（４回製品を使用）、６日（１２回製品を使用）、そして７日（１４回製品を使用）後に効力を評価できるようにした。この用具は有資格の歯科医師により装着され、この医師は後に処理し、そしてサンプルを分析して最終データを作成する研究室のアシスタントとは異なった。この用具を保持するために選択された各個体の下顎第一および第二永久大臼歯の頬側面は、現在の歯科プラクティスの理論に従い３０秒間、慎重に酸エッチングし、洗浄し、そしてさらに３０秒間乾燥し、次いでコットンロールを使用して隔離した。用具の底は慎重に配置して咬合性の妨害が生じることを回避し、そして軟組織の炎症を回避した。
【００４４】
個体は彼らの歯を１日２回、朝および就寝前にブラッシングするように指導された。個体は各回１分間ブラッシングし、ついでさらに１分間待った後に１０ｍｌの水で１０秒間すすぐように指導された。個体はブラッシング後、少なくとも３０分間、何も飲まないように指導された。各個体には、毎日ブラッシングした回数を記録しておくために日記が与えられた。全ての個体が彼らの通常の食習慣を維持するように依頼された。口内洗浄液、処方された製品などの他のいかなる口内衛生製品の使用も禁止された。
【００４５】
用具を付けた直後に（１日目）、各個体は実験コーディネーターの指導の元で彼らの製品を初めて使用した。各個体は２日目の朝、割り当てられた製品を使用する前に医院に来るように指導され、ここで４つの用具のうちの１つが外され、そして分析のために研究所へ送られた。用具を外した直後に、個体は実験コーディネーターにより指導された製品の使用を許可された。このプロセスを３日目（２日間の製品の使用）、４日目（３日間の製品の使用）、および８日目（７日間の製品の使用）に繰り返し、この時に残る象牙質含有用具を１４回の製品の使用後に外した。外した象牙質ブロックは、外した直後に分析のためにラボへ送られた。歯の表面に残った接着剤は、慎重かつ完全にコンポジット除去用錐（ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ−ｒｅｍｏｖｉｎｇ  ｂｕｒｒ）で除去した。
【００４６】
対照象牙質ブロックのＳＥＭ調査
試験象牙質ブロックをそれらの用具から外した後、試験象牙質ブロックを上記のように風乾するためにペトリ皿に置いた。２４時間乾燥した後、ブロックを金パラジウムでスパッタコーティングし、次いでＳＥＭ（ＪＥＯＬ  ＵＳＡ  Ｉｎｃ．；Ｍｏｄｅｌ：ＪＳＭ−６６１０ＬＶ）を介して視覚化し、そして分析した。
【００４７】
細管閉塞の評価
完全に―、部分的に―、そして非―閉塞化象牙細管の数を測定するために、各対照ブロックの画像を処置したブロックと並べて調査した。各象牙質ブロックの表面の中心を、ＳＥＭを使用して調査し、そして画像を１５００ｘの倍率で得た（図１０Ｂおよび１０Ｃ）。得られた各ＳＥＭ画像は、２名の調整（ｃａｌｉｂｒａｔｅｄ）盲検化治験責任者により、細管閉塞の程度を十分に−開いた、部分的に−および完全に−閉塞した象牙細管の数、ならびに各１５００ｘ画像上のスミア層により覆われた象牙質表面の百分率に基づき評価された。治験責任者は２０画像の標準組に対して調整した。標準の組に対する一致は、カッパー分析（ｋａｐｐａ  ａｎａｌｙｓｉｓ）により定量した。フリー−マージンカッパースコア（ｆｒｅｅ−ｍａｒｇｉｎ  Ｋａｐｐａ  ｓｃｏｒｅ）は０．８１および０．８７であった（０．７０より高いスコアは十分な一致として受け入れられると考えた）。各検体について二つの評価の平均を算出した。
【００４８】
スミア層沈着／沈殿評価
完全に―、部分的に―、そして非―閉塞化細管の数を測定することに加えて、計数技術者はスミア層の沈着および／または沈殿についても各処理ブロックの画像を調査した。スミア層沈着／沈殿により覆われた領域の割合を各画像ついて評価し、そして報告した。
【００４９】
安全性評価
安全性は、事前の来院以来、および副作用の表作成を通して、新たな、または持続する症状について、実験中の各来院時に各個体の観察および質問を通して評価した。悪い出来事は報告されなかった。
【００５０】
統計学的方法
データの統計分析は、統計ソフトウェア（ＰＡＳＷ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ  １８．０，ＩＢＭ）を使用して、有意性のレベルとして設定したα＝０．０５を用いて行った。各ブロック中の十分に開いた、部分的に、および完全に閉じた細管の数を計数し、そして対応する対照ブロックの細管の数の百分率として表した。十分に開いた、部分的に、および完全に閉じた細管の百分率の平均を個々の製品について算出した。また沈着したスミア層により覆われた表面積の百分率の平均を、各製品について算出した。１元反復ＡＮＯＶＡ、続いてＴｕｋｅｙ’ｓ  ＨＳＤ試験を使用したｐｏｓｔ  ｂｏｃ  マルチ−ステップ比較で、象牙細管の閉塞における４種の歯磨き剤の効力を、十分に―開いた細管、部分的に―閉じた細管、完全に−閉じた細管、およびスミア層により覆われた表面の割合に基づき比較した。
【実施例１】
【００５１】
予備インビトロデータ
予備インビトロ実験に由来するサンプルからの予備データは、テオブロミン含有製剤が予期せずに、しかも驚くほど従来から利用されている象牙細管閉塞処置よりも効果的であることを示す。本明細書の結果は、テオブロミン含有製剤の１回の指向的使用後に、９５％より高いか、または全ての象牙細管が、テオブロミン含有歯磨き剤に暴露した表面に沈着した沈殿物で部分的または完全に閉塞されることを示す（図１対図２、および図３対図４を参照されたい）。
【００５２】
図１および３は、テオブロミン含有歯磨き剤で処置しなかった対照サンプルを示すＳＥＭ顕微鏡写真である。開存象牙細管は、各画像全体にわたって明らかに示されている。図２および４は、上で説明したようにテオブロミン含有歯磨き剤で処置した対の試験サンプル（それぞれ図１および３の対照サンプルと同じブロックに由来した）を示すＳＥＭ顕微鏡写真である。図２および４に示されるように、全ての象牙細管はテオブロミン含有歯磨き剤で１回処置しただけでほとんどまたは完全に閉塞される。また図２および４は、テオブロミン含有歯磨き剤に暴露された歯の表面に沈着した無機質層も示す。
【実施例２】
【００５３】
臨床試験の結果
臨床試験に集めた８０名の個体は脱落者なしに試験を終了した。上述のように、歯磨き剤の効力は４つの変数、すなわち（ａ）完全に閉塞した細管、（ｂ）十分に開いた細管、（ｃ）部分的に閉塞した細管、および（ｄ）スミア層により覆われた表面領域の百分率に基づき比較した。
【００５４】
図６は、４つの歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を１，２，３および７日間使用した後（それぞれ２，４，６および１４回使用）に完全に閉塞した細管の割合を示す。文字は各使用時点（１，２，３および７日目）での４つの歯磨き剤の効力を比較した。異なる文字（すなわちａ，ｂ，ｃ，ｄ）は完全に閉塞した細管の割合における統計的有意差（ｐ＜０．０５）を表すが、同じ文字は有意に異ならないことを示す。記号（*，**，γ，β）は、同じ歯磨き剤で異なる使用期間後（１，２，３および７日間）の効力を比較した。カラム間で異なる記号は、完全に閉塞した細管の割合における統計的有意差（ｐ
＜０．０５）を示すが、同じ記号は有意に異ならないことを意味する。
【００５５】
図７は、４つの歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を１，２，３および７日間使用した後（それぞれ２，４，６および１４回使用）に十分に開いた細管の割合を示す。文字は各使用時点（１，２，３および７日目）での４つの歯磨き剤の効力を比較した。カラム間の異なる文字（すなわちａ，ｂ，ｃ）は十分に開いた細管の割合における統計的有意差（ｐ＜０．０５）を表すが、同じ文字は有意に異ならないことを示す。記号（*，**，β）は、同じ歯磨き剤で異なる使用期間後（１，２，３および７日間）の効力を比較した。カラム間で異なる記号は、十分に開いた細管の割合における統計的有意差（ｐ＜０．０５）を示すが、同じ記号は有意に異ならないことを示す。
【００５６】
図８は、４つの歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を１，２，３および７日間使用した後（それぞれ２，４，６および１４回使用）に部分的に閉塞した細管の割合を示す。文字は各使用時点（１，２，３および７日目）での４つの歯磨き剤の効力を比較した。カラム間の異なる文字（すなわちａ，ｂ，ｃ，ｄ）は部分的に閉塞した細管における統計的有意差（ｐ＜０．０５）を表すが、同じ文字は有意に異ならないことを示す。記号（*，**，β）は、同じ歯磨き剤で異なる使用期間後（１，２，３および７日間）の効力を比較した。カラム間で異なる記号は、部分的に閉塞した細管における統計的有意差（ｐ＜０．０５）を示すが、同じ記号は有意に異ならないことを示す。
【００５７】
図９は、４つの歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を１，２，３および７日間使用した後（それぞれ２，４，６および１４回使用）に沈着したスミア層により覆われた表面領域の割合を示す。文字は各使用時点（１，２，３および７日目）で４つの歯磨き剤の効力を比較した。カラム間の異なる文字（すなわちａ，ｂ，ｃ，ｄ）は完全に閉塞した細管における統計的有意差（ｐ＜０．０５）を表すが、同じ文字は有意に異ならないことを示す。記号（*，**，β）は、同じ歯磨き剤で異なる使用期間（１，２，３および７日間）後の効力を比較した。カラム間で異なる記号は、完全に閉塞した細管における統計的有意差（ｐ＜０．０５）を示すが、同じ記号は有意に異ならないことを示す。
【００５８】
図１０Ａ，１０Ｂ，１０Ｃおよび１０Ｄは、処置前（ｂｆ）、および４つの歯磨き剤（Ｔ１＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ；Ｔ２＝Ｓｅｎｓｏｄｙｎｅ；Ｔ３＝Ｃｏｌｇａｔｅ；およびＴ４＝Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆ）を使用した後の細管を含む象牙質ブロック表面の典型的なＳＥＭ画像を表す。図１０Ａは２回使用後（１日目）に得た結果を示し、図１０Ｂは４回使用後（２日目）に得た結果を示し、図１０Ｃは６回使用後（３日目）に得た結果を示し、そして図１０Ｄは１４回使用後（７日目）に得た結果を示す。画像は、Ｃｏｌｇａｔｅではない歯磨き剤Ｔｈｅｏｄｅｎｔ−ＮＦ、ＳｅｎｓｏｄｙｎｅおよびＴｈｅｏｄｅｎｔ−Ｆの使用が増すと、象牙細管の閉塞およびスミア層の沈着が上昇することを示している。Ｃｏｌｇａｔｅ  Ｒｅｇｕｌａｒ  Ｔｏｏｔｈｐａｓｔｅは、１４回の製品の使用で沈着したスミア層の量は無視できた。
【００５９】
この臨床試験の結果は、歯磨き剤であるＴｈｅｏｄｅｎｔ  Ｃｌａｓｓｉｃ、フッ化物含有ＴｈｅｏｄｅｎｔおよびＳｅｎｓｏｄｙｎｅ  Ｎｕｐｒｏ  ５０００（登録商標）が象牙細管の閉塞ならびに象牙質表面へのスミア層の沈着に有効であり、Ｔｈｅｏｄｅｎｔ
Ｃｌａｓｓｉｃおよびフッ化物含有Ｔｈｅｏｄｅｎｔが同等に有効であることを示している。
【００６０】
本明細書で引用した全ての文献は、各文献が具体的かつ個別に引用により編入されたこ
とを示したように、引用により本明細書に編入される。任意の文献の引用は、出願日前のその開示に関するものであり、本開示が先行発明によりその文献より日時が前であるとは主張しないことを認めると解釈されるべきではない。
【００６１】
上記の各要素、またはその２つ以上は一緒に、上記とは異なる種類の他の種類の方法に有用な応用を見出すことができるかもしれないと理解されよう。さらに分析しなくても、これまでの記載は本開示の要点を十分に明らかにしているので、他の人々は現在の知識を応用することにより、従来技術の立観点から、添付の請求の範囲で説明する本開示の一般的または具体的局面の本質的特徴を十分に構成する特徴を省くことなく様々な応用に容易に適合させることができる。前記態様は例示のためだけに提示したものであり、本開示の範囲は、以下の特許請求の範囲によってのみ限定されるべきである。
【００６２】
本発明の主たる特徴及び態様は、次のとおりである。
態様１：  ａ）単離テオブロミン、またはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含む共結晶；
ｂ）塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；
ｃ）リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源；
を含んでなる口腔ケア組成物。
態様２：哺乳動物の歯の表面に：
ａ）単離テオブロミン、またはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含む共結晶；
ｂ）塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；
ｃ）リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源；
を含んでなる口腔ケア組成物を適用することを含んでなる、口腔感受性を下げる方法。
態様３：  哺乳動物の口腔面に、ある期間持続して少なくとも１日１回、組成物を適用することを含んでなる、哺乳動物の全身的健康状態を維持するか、または上げる方法であって、組成物が：
ａ）単離テオブロミン、またはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含む共結晶；
ｂ）塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；
ｃ）リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源；
を含んでなる、上記方法。
態様４：  哺乳動物の歯の表面に：
ａ）単離テオブロミン、またはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含む共結晶；
ｂ）塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；
ｃ）リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源；
を含んでなる組成物を適用することを含んでなる、哺乳動物の歯の象牙細管を閉塞する方
法。
態様５:  哺乳動物の歯の表面に：
ａ）単離テオブロミン、またはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含む共結晶；
ｂ）塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；
ｃ）リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源；
を含んでなる組成物を適用することを含んでなる、哺乳動物の歯の表面に沈殿物を沈着させる方法。
態様６：  哺乳動物の歯の口腔感受性の低下に使用するための態様１に記載の口腔ケア組成物。
態様７：  哺乳動物の全身的健康状態または該哺乳動物の口腔面の維持または向上に使用するための態様１に記載の口腔ケア組成物。
態様８：  哺乳動物の歯の象牙細管の閉塞に使用するための態様１に記載の口腔ケア組成物。
態様８：  哺乳動物の歯の表面に沈殿物を沈着させることに使用するための態様１に記載の口腔ケア組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）単離テオブロミン、またはその塩もしくは複塩、またはテオブロミンを含む共結晶；
ｂ）塩化カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、酢酸カルシウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるカルシウム源；
ｃ）リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるリン酸塩源；
を含んでなる口腔ケア組成物。
【外国語明細書】
2018030866000001.pdf