(57)【要約】【課題】効果が優れ、しかも安全性が高い免疫賦活剤を提供する。【解決手段】フコイダンと酵母を含む免疫賦活剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
フコイダンまたはフコイダン含有素材および酵母を含む免疫賦活剤。
【請求項２】
フコイダンの分子量が３００ｋＤａ以上である請求項１記載の剤。
【請求項３】
フコイダンがモズク由来のものである請求項１または２記載の剤。
【請求項４】
フコイダン含有素材がモズクである請求項１〜３のいずれか１項記載の剤。
【請求項５】
酵母がSaccharomyces cerevisiaeである請求項１〜４のいずれか１項記載の剤。
【請求項６】
食品組成物である請求項１〜５のいずれか１項記載の剤。
【請求項７】
医薬組成物である請求項１〜５のいずれか１項記載の剤。
【請求項８】
分子量が３００ｋＤａ以上のモズク由来の精製フコイダンを含む免疫賦活剤。
【請求項９】
食品組成物である請求項８記載の剤。
【請求項１０】
医薬組成物である請求項８記載の剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は免疫賦活剤に関する。詳細には、フコイダンと酵母を含む免疫賦活剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
免疫機能の賦活化は、疾病の治療および予防ならびに健康増進にとり重要である。これまで様々な免疫賦活物質が見出され、合成され、研究され、利用されている。しかしながら、免疫賦活作用が優れている物質は副作用が大きい等の問題がある場合が少なくない。
【０００３】
かかる状況下において、天然由来の免疫賦活物質の探求が行われており、そのなかには海藻に含まれる多糖類であるフコイダン（特許文献１等参照）や酵母菌体（特許文献２等参照）などが含まれている。しかしながら、これらの免疫賦活物質は効果の面で満足なものとはいえない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特許第３９８４４０２号明細書
【特許文献２】特許第５３１５２５５号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
効果が優れ、しかも安全性が高い免疫賦活剤を提供することが、本発明が解決しようとする課題であった。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、フコイダンと酵母を共存させた場合に、免疫賦活効果が相乗的に高められること、および分子量の大きいフコイダンほど免疫賦活活性が高いことを見出し、本発明を完成するに至った。したがって、本発明は、以下のものを提供する：
（１）フコイダンまたはフコイダン含有素材および酵母を含む免疫賦活剤。
（２）フコイダンの分子量が３００ｋＤａ以上である（１）記載の剤。
（３）フコイダンがモズク由来のものである（１）または（２）記載の剤。
（４）フコイダン含有素材がモズクである（１）〜（３）のいずれかに記載の剤。
（５）酵母がSaccharomyces cerevisiaeである（１）〜（４）のいずれかに記載の剤。
（６）食品組成物である（１）〜（５）のいずれかに記載の剤。
（７）医薬組成物である（１）〜（５）のいずれかに記載の剤。
（８）分子量が３００ｋＤａ以上のモズク由来の精製フコイダンを含む免疫賦活剤。
（９）食品組成物である（８）の剤。
（１０）医薬組成物である（８）の剤。
【発明の効果】
【０００７】
本発明において、フコイダンと酵母を共存させることにより相乗的に強力な免疫賦活作用が見られる。しかも分子量の大きいフコイダンほど免疫賦活活性が高い。フコイダンはモズク、ワカメ、コンブ、ヒバマタなどの食用海藻に含まれる多糖類であり、安全性が高い。酒類やパンなどの飲食物の製造に用いられる酵母についても安全性が高い。従って、本発明の免疫賦活剤は、効果が優れ、しかも安全性が高いものである。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】図１は、マクロファージにフコイダンおよび酵母菌体を添加した際のマクロファージの活性化を示す。図１ＡはＣＯＸ２タンパク質のレベルを示すイムノブロットであり、図１ＢはＧＡＰＤＨ（ローディングコントロール）の量により補正したＣＯＸ２タンパク質レベルを示すグラフである。
【図２】図２は、マクロファージに分子量の異なるフコイダンおよび酵母菌体を添加した際のマクロファージの活性化を示す。図２ＡはＣＯＸ２タンパク質のレベルを示すイムノブロットであり、図２ＢはＧＡＰＤＨ（ローディングコントロール）の量により補正したＣＯＸ２タンパク質レベルを示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明者らは、フコイダンおよび酵母が相乗的に免疫賦活作用を増強すること、および分子量の大きいフコイダンほど免疫賦活活性が高いことを今回初めて見出した。したがって、本発明は、１の態様において、フコイダンおよび酵母を含む免疫賦活用の剤に関する。フコイダンは、天然界に見出される含硫多糖で、モズク、メカブなどの海藻類に多く含まれている。
【００１０】
本発明の剤中の有効成分たるフコイダンの由来は限定されず、海藻類、とりわけ褐藻類が挙げられる。褐藻類としては、モズク（沖縄モズク、糸モズク、太モズク、石モズクなど）、メカブ（ワカメの胞子葉）、ワカメ、アラメ、ガゴメ、マコンブ、クロメ、カジメ、ミツイシコンブ、ヨレモク、ヒジキ、ホンダワラ、ヤツマタモク、アカモク、ヒバマタ、ウミトラノオなどが例示されるが、これらに限定されない。本発明の食品組成物に用いられる好ましいフコイダンはモズク由来である。特に沖縄モズクまたは糸モズク由来のフコイダンが好ましい。なお、本明細書において「モズク」という場合にはあらゆる種類のモズクを包含する。
【００１１】
フコイダンは精製品であってもよく、粗精製品、例えばモズクなどの海藻からの抽出物であってもよい。好ましくは、本発明の食品組成物中の有効成分たるフコイダンは精製品である。フコイダンの精製方法は公知であり、いずれの方法を用いてもよい。フコイダンの精製は、熱水や有機酸溶液での抽出、および限外濾過などの濾過を含むプロセスを経て行われるのが一般的である。本明細書において、精製されたフコイダンとは、少なくとも１回の抽出工程および少なくとも１回の分画工程（濾過、クロマトグラフィー等）を経て得られたフコイダンをいう。
【００１２】
本発明の剤に使用されるフコイダンは様々な形態のものが用いられ、固体（例えば、粉末、顆粒など）、液体（例えば、フコイダン水溶液、フコイダン懸濁液、海藻からの抽出液など）、半固体（例えば、ペーストなど）のいずれであってもよい。
【００１３】
本発明の剤中のフコイダンは高分子であるほど免疫賦活作用が大きい。本発明の剤中のフコイダンの分子量は、好ましくは約２００ｋＤａ以上、より好ましくは約２５０ｋＤａ以上、さらにより好ましくは約３００ｋＤａ以上である。所望の分子量のフコイダンを得る方法も公知である。例えば適切なポアサイズのフィルターを用いてフコイダン抽出液を限外濾過することによって、所望の分子量のフコイダンを得ることができる。あるいはゲル濾過クロマトグラフィーを用いて所望の分子量のフコイダンを得ることができる。フコイダンの分子量は公知の方法、例えばゲルろ過クロマトグラフィーを用いて測定することができる。通常は、分子量測定の際に既知分子量を有するプルランをマーカーとして用いる。高分子化合物の分子量は平均分子量、数平均分子量あるいは重量平均分子量で表されることが一般的であるが、本明細書において、特に断らないかぎり、分子量というときは重量平均分子量を意味する。重量平均分子量は、公知の手段・方法により計算することができ、例えばゲルろ過クロマトグラフィーのパターンから計算することができる。
【００１４】
フコイダン含有素材を本発明の剤の有効成分として用いてもよい。フコイダン含有素材は、フコイダンを含有し、ヒトに対して無毒のものであればいずれの素材であってもよい。本発明において好ましいフコイダン含有素材としては、海藻類、とくに褐藻類が挙げられる。フコイダン含有褐藻類しては、モズク（沖縄モズク、糸モズク、太モズク、石モズクなど）、メカブ（ワカメの胞子葉）、ワカメ、アラメ、ガゴメ、マコンブ、クロメ、カジメ、ミツイシコンブ、ヨレモク、ヒジキ、ホンダワラ、ヤツマタモク、アカモク、ヒバマタ、ウミトラノオなどが例示されるが、これらに限定されない。本発明の剤に用いる好ましいフコイダン含有素材はモズクである。モズクのなかでも沖縄モズクまたは糸モズクが特に好ましい。これらの海藻類をそのまま本発明の剤に使用してもよく、あるいはこれらの海藻類に切断、細断、破砕等の適当な処理を施して本発明の剤に用いてもよい。
【００１５】
本発明の剤の有効成分として用いられる酵母の種類は特に限定されないが、ヒトや動物に対して無害なものが好ましい。本発明の剤に用いられる好ましい酵母の例としては、酒類やパンの製造に用いられるSaccharomyces cerevisiaeが挙げられる。酵母は生菌であってもよく、死菌であってもよい。また、酵母は、生菌または死菌の破砕物であってもよく、あるいは生菌または死菌の抽出物であってもよい。公知の方法を用いて酵母の破砕物や抽出物を得ることができる。本発明の剤に用いられる酵母の形態は、粉末、顆粒などの固体、細胞懸濁液などの液体、あるいはパスタ、クリームなどの半固体であってもよい。
【００１６】
本発明の剤の形態や用法は特に限定されない。本発明の剤は固形、液体、半固形に成形することができる。これらの剤形の種類や製造方法は公知である。本発明の剤を味噌汁、スープ、めんつゆ、あるいは練り製品などの飲食物に添加して用いてもよい。本発明の剤を凍結乾燥等の処理をして粉末あるいは顆粒などの形態とし、適当な包装や容器に入れる等の処理加工を施して、調味料やふりかけのような形態とし、利用者が自ら任意の飲食物に添加して摂取できるようにしてもよい。あるいは本発明の剤を医薬あるいは医薬に準じる形態として使用してもよい。
【００１７】
本発明の剤の摂取量または投与量は特に制限はなく、例えば成人１日あたりフコイダンが約０．８ｇ（乾燥重量として）以上、酵母が約１ｇ（乾燥重量として）以上摂取されるような量であってもよい。
【００１８】
本発明の剤を公知の免疫賦活剤と併用してもよい。
【００１９】
本発明の剤の典型的な形態は食品組成物である。本発明の剤が食品組成物である場合、その形態は限定されず、味噌汁、スープ、めんつゆ、練り製品、パック詰めモズク、ふりかけ、調味料など、あらゆる飲食物の形態であってよい。本発明の食品組成物は、食品の原料にフコイダンまたはフコイダン含有素材および酵母を添加することにより、食品の製造工程においてフコイダンまたはフコイダン含有素材および酵母を添加することにより、あるいは製品である食品にフコイダンまたはフコイダン含有素材および酵母を添加することにより製造することができる。
【００２０】
また本発明の剤は、サプリメントとして提供されてもよい。本明細書において、サプリメントは食品組成物に含められる。サプリメントの形態としては、粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤などの固形であってもよく、溶液、懸濁液、抽出液などの液体であってもよく、パスタ、クリームなどの半固体であってもよい。これらの形態のサプリメントの製造方法は当業者によく知られている。本発明の剤は機能性食品としても有用である。
【００２１】
本発明の剤のさらなる典型的な形態は医薬組成物である。その投与方法は特に限定されず、経口投与、注射による投与、経皮投与などのいずれの方法であってもよいが、経口投与が好ましい。本発明の剤の形態も特に限定されない。経口投与の場合、粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤、ドリンク剤などの様々な経口用剤形に処方することができる。これらの剤形の製法は公知であり、混合、溶解、粉砕、打錠、乾燥等のプロセスを適宜用いることができ、目的に応じた担体や賦形剤を使用することができる。本発明の経口投与剤に香料、甘味料、着色料などを適宜添加してもよい。本発明の経口投与剤はそのまま投与することもできるが、例えばみそ汁、スープ、麺類、その他の食品に本発明の経口投与剤を随意に添加して投与してもよい。
【００２２】
本発明の剤は獣医薬組成物であってもよい。その投与方法は特に限定されず、経口、注射、経皮等いずれの方法であってもよいが、経口投与が好ましい。経口投与剤の場合、濃縮液、粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤、ドリンク剤、飼料などの様々な経口用剤形に処方することができる。これらの剤形の製法は公知であり、混合、溶解、粉砕、打錠、乾燥等のプロセスを適宜用いることができ、獣医薬上許容される担体や賦形剤を使用することができる。本発明の経口投与剤に香料、着色料などを適宜添加してもよい。本発明の剤を獣医役組成物として用いる場合も、その投与量には特に制限はない。
【００２３】
本発明は、さらなる態様において、分子量が３００ｋＤａ以上のモズク由来の精製フコイダンを含む免疫賦活用の剤を提供するものである。このような剤もまた、食品組成物、医薬組成物、獣医薬組成物などとして用いることができる。
【００２４】
以下に実施例を示して本発明をより詳細かつ具体的に説明するが、実施例は本発明を限定するものと解してはならない。
【実施例１】
【００２５】
フコイダンと酵母を同時にマクロファージに作用させてマクロファージを活性化させ、活性化の程度を調べた。マクロファージはマウス由来のＪ７７４．１細胞を用いた。フコイダンは分子量３３２ｋＤａの精製品を用いた。酵母はSaccharomyces cerevisiae NBW5株を用いた。活性化は、２０マイクロリットルのフコイダン及び酵母を懸濁した蒸留水（フコイダン濃度は２０ｍｇ／ｍｌ、酵母は１２ｍｇ／ｍｌ（酵母菌は湿重量））を１ｍｌの細胞培養液に加えることにより行った。
【００２６】
活性化後、ＣＯＸ２およびＧＡＰＤＨ（ローディングコントロール）に関してイムノブロットを行った結果を図１Ａに示す。さらに、ＧＡＰＤＨ（ローディングコントロール）の量により補正したＣＯＸ２タンパク質の量を図１Ｂに示す。
【００２７】
図１からわかるように、フコイダンおよび酵母を加えていないサンプル（レーン１）では、ほどんど活性化が見られなかった。酵母を加えずにフコイダンの量を増やしていくと活性化が増強された。フコイダンを単独で０．１ｍｇ／ｍｌの濃度で作用させた場合（レーン３）、フコイダンおよび酵母を加えていないサンプル（レーン１）の７倍の活性化がみられた。酵母を単独で０．２４ｍｇ／ｍｌ作用させた場合（レーン４）、フコイダンおよび酵母を加えていないサンプル（レーン１）と同等の活性化しか見られなかった。酵母を０．２４ｍｇ／ｍｌとしてフコイダンの量を増加させていくと、活性化がさらに増強され、フコイダンを０．１ｍｇ／ｍｌとした場合（レーン６）、フコイダンおよび酵母を加えていないサンプル（レーン１）の２４倍の活性化が見られた。レーン６の効果は、レーン３とレーン４の効果の和よりも３．３倍多く、フコイダンと酵母との相乗効果であるといえる。
【実施例２】
【００２８】
さまざまな分子量のフコイダン（６０ｋＤａ、１３５ｋＤａ、３３２ｋＤａ（３３２ｋＤａのみ２サンプル））を用いて、マクロファージの活性化を行った。実験は実施例１と同様にして行った。
【００２９】
活性化後、ＣＯＸ２およびＧＡＰＤＨ（ローディングコントロール）に関してイムノブロットを行った結果を図２Ａに示す。さらに、ＧＡＰＤＨ（ローディングコントロール）の量により補正したＣＯＸ２タンパク質の量を図２Ｂに示す。
【００３０】
レーン１〜４は、フコイダンのみでマクロファージを活性化した結果である。分子量の大きなフコイダンのほうがマクロファージの活性化が強く起こり、分子量３３２ｋＤａのフコイダンの活性化作用が最大であった。
【００３１】
レーン５〜８は、フコイダン（終濃度４００μｇ／ｍｌと酵母（終濃度２４０μｇ／ｍｌ）を同時に作用させた結果である。フコイダン単独で作用させた場合よりも、活性化が増強された。フコイダンの分子量を増加させていくと、活性化も増強された。最も強い活性化が観察されたのは分子量３３２ｋＤａのフコイダンであった。６０ｋＤａ、１３５ｋＤａのフコイダンは、酵母と共存させていても（レーン５、レーン６）、３３２ｋＤａのフコイダンを単独で作用させた場合（レーン４）と同程度の活性化しか観察されなかった。このことから、酵母とフコイダンを共存させてマクロファージを活性化させる場合、フコイダンの分子量が大きいほど活性化が増強され、分子量約３０万以上のフコイダンが好ましいことがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００３２】
本発明の免疫賦活剤は、効果が優れ、しかも安全性が高いものであるから、食品や医薬品の分野において利用可能である。
【図１】
2018090522.tif 000002
【図２】
2018090522.tif 000003