(57)【要約】【課題】ボルテゾミブを含有する医薬製剤は、ボルテゾミブの分解に伴う類縁物質の生成及びその増加、凍結乾燥製剤の濡れ性の悪さによる再溶解性が課題となっている。すなわち、保存安定性が高く、再溶解性が良好な製剤を提供することが課題となっている。【解決手段】（Ａ）ボルテゾミブ又はその医薬的に許容される塩、若しくはボルテゾミブの誘導体、（Ｂ）グリセリン、及び必要に応じて、医薬用添加剤を含有する医薬製剤とすることによって、上記の目的を達成するものであり、好ましい該医薬用添加剤としては、（Ｃ）ニコチン酸アミド及び（Ｄ）ｐＨ調整剤から選択される１種類以上の添加剤を含有しても良く、ｐＨが４．０〜７．０である医薬製剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）ボルテゾミブ又はその医薬的に許容される塩、若しくはボルテゾミブの誘導体、及び（Ｂ）グリセリンを含有する医薬製剤。
【請求項２】
（Ｃ）ニコチン酸アミドを含有する請求項１に記載の医薬製剤。
【請求項３】
（Ｄ）ｐＨ調整剤を含み、その（Ｄ）ｐＨ調整剤が塩基性化合物と酸性化合物からなり、塩基性化合物が１当量のとき酸性化合物の当量が１〜４当量である請求項１又は２に記載の医薬製剤。
【請求項４】
（Ｄ）ｐＨ調整剤を含み、（Ａ）ボルテゾミブ濃度として１〜２．５ｍｇ／ｍＬとしたときの医薬製剤水溶液のｐＨが４．０〜７．０である、請求項１〜３に記載の医薬製剤。
【請求項５】
凍結乾燥製剤である、請求項１〜４の何れか一項に記載の医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ボルテゾミブを含有する医薬製剤について、ボルテゾミブの安定性を保持し、再溶解性を良好にした医薬製剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ボルテゾミブは、化学名（Ｎ‐（２‐ピラジンカルボニル）‐Ｌ‐フェニルアラニン‐Ｌ‐ロイシンボロン酸）とするプロテアソーム阻害作用を有する抗悪性腫瘍剤であり、現在、多発性骨髄腫及びマントル細胞リンパ腫の治療剤として用いられている。臨床に供されているボルテゾミブの医薬製剤は、有効成分であるボルテゾミブと添加剤のＤ−マンニトールを含む凍結乾燥製剤であって、ボルテゾミブ注射用製剤（ベルケイド（Ｖｅｌｃａｄｅ）（登録商標））として提供されている。該製剤は、静脈内投与と皮下投与で承認がなされており、その投与方法によって溶解液の量が異なる。静脈内投与を行う場合は生理食塩水３ｍＬに、皮下投与を行う場合は生理食塩水１．２ｍＬに溶解して用いられている。
【０００３】
アミノアルキルボロン酸であるボルテゾミブは、酸化や化学的な分解を受けやすく、不安定な物性であることが知られている。また、ボロン酸自体が脱水的に反応して酸無水物化をして多量体化する物性である。このため、ボルテゾミブを有効成分とする医薬製剤を調製する場合、酸化や分解に対する安定化、酸無水物化による多量体化を抑制するための対策が必要である。
例えば、特許文献１には、ボルテゾミブのボロン酸とマンニトール等の糖類とのボロン酸エステル誘導体を開示しており、これを用いた医薬製剤が教唆されている。これは、ボルテゾミブ及びマンニトールのｔｅｒｔ−ブタノール溶液又はｔｅｒｔ−ブタノール含水溶液を凍結乾燥することで調製されている。また、特許文献２には、ボルテゾミブとトロメタミンを含む凍結乾燥製剤が記載されている。これは、強いＢ−Ｎ結合を有するボルテゾミブのトロメタミン塩であることが記載されている。特許文献３には、ボルテゾミブ誘導体の凍結乾燥製剤であって、シクロデキストリン及び単糖を有する増量剤と界面活性剤とからなる群から選択される医薬製剤が記載されている。
ボルテゾミブは安定性に問題があるため、通常は凍結乾燥製剤を検討されているが、特許文献４には、プロピレングリコールを添加することにより安定化された水溶液製剤が開示されている。また、特許文献５には、クエン酸等のα‐ヒドロキシ‐β‐カルボン酸とボルテゾミブとの酸無水物‐エステル誘導体が開示されており、それを医薬製剤にできることが記載されている。
このように、ボロン酸はアルコールやカルボン酸と反応してボロン酸エステルや酸無水物を形成することが知られている。このようなボロン酸エステルや酸無水物は、水溶液中で加水分解を受けてボルテゾミブが再構成される。また現在販売されているボルテゾミブ凍結乾燥製剤は凍結乾燥ケーキの濡れ性が悪く、非特許文献１には溶解に最大120秒程度要することが記載されている。そのため安定であり、再溶解性が良好である医薬製剤が望まれている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特許第４１６２４９１号公報
【特許文献２】特許第５６８９８１６号公報
【特許文献３】特許第５７２２８７１号公報
【特許文献４】特許第５６６１９１２号公報
【特許文献５】国際公開ＷＯ２００９／１５４７３７号
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】医薬品インタビューフォーム  抗悪性腫瘍剤（プロテアソーム阻害剤）ベルケイド注射用３ｍｇ  ２０１６年１月（第１０版）６頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、類縁物質の生成が抑制され、更に再溶解性が良好であるボルテゾミブを含む医薬製剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、ボルテゾミブ又はその医薬的に許容される塩、若しくはボルテゾミブの誘導体と共に、グリセリンを用いることで、類縁物質の生成が抑制され、更に再溶解性が良好であるボルテゾミブを含む医薬製剤を提供できることを見出した。本願は、以下の［１］〜［５］に記載の発明を要旨とする。
［１］  （Ａ）ボルテゾミブ又はその医薬的に許容される塩、若しくはボルテゾミブの誘導体、及び（Ｂ）グリセリン、を含有する医薬製剤。
［２］  （Ｃ）ニコチン酸アミドを含有する、［１］に記載の医薬製剤。
［３］  （Ｄ）ｐＨ調整剤を含み、その（Ｄ）ｐＨ調整剤が塩基性化合物と酸性化合物からなり、塩基性化合物が１当量のとき酸性化合物の当量が１〜４当量である［１］又は［２］に記載の医薬製剤。
［４］  （Ｄ）ｐＨ調整剤を含み、（Ａ）ボルテゾミブ濃度として１〜２．５ｍｇ／ｍＬとしたときの医薬製剤水溶液のｐＨが４．０〜７．０である、［１］〜［３］に記載の医薬製剤。
［５］  凍結乾燥製剤である、［１］〜［４］の何れか一項に記載の医薬製剤。
【発明の効果】
【０００８】
本発明のボルテゾミブ又はその医薬的に許容される塩、若しくはボルテゾミブの誘導体を有効成分とする医薬製剤は、ボルテゾミブの安定性を保持し再溶解性が良好なボルテゾミブの医薬製剤を提供することができる。したがって、ボルテゾミブの効能および安全性を長期に亘って保持することができ、凍結乾燥製剤の再溶解が容易である医薬製剤を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明は、（Ａ）ボルテゾミブ又はその医薬的に許容される塩、若しくはボルテゾミブの誘導体、（Ｂ）グリセリンを含有する医薬製剤である。以下に、その詳細について説明する。
【００１０】
本発明は、ボルテゾミブ又はその誘導体を有効成分とする医薬製剤に関する。ボルテゾミブは、プロテアソーム阻害活性を有する化学名（Ｎ‐（２‐ピラジンカルボニル）‐Ｌ‐フェニルアラニン‐Ｌ‐ロイシンボロン酸）である。当該化合物は、特許第３７１７９３４号にて開示されるボロン酸誘導体であって、それに記載の方法により入手可能である。
本発明のボルテゾミブは、医薬的に許容される適当な塩であっても良い。医薬的に許容される塩とは、例えば、アルカリ金属塩（ナトリウム、カリウムなど）、アルカリ土類金属塩（マグネシウム、カルシウムなど）、アンモニウム塩及び医薬的に許容可能なアミンの塩（テトラメチルアンモニウム、トリエチルアミン、メチルアミン、ジエチルアミン、シクロペンチルアミン、ベンジルアミン、フェネチルアミン、ピペリジンモノエタノールアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミン、リジン、アルギニン及びＮ−メチル−Ｄ−グルカン）が含まれる。
【００１１】
また、本発明は有効成分としてボルテゾミブの誘導体であっても良い。当該誘導体とは、ボルテゾミブのボロン酸官能基とのエステル誘導体、酸無水物誘導体、酸無水物‐エステル混合誘導体であって、水溶液中で、加水分解的に開裂してボルテゾミブを再生する物性である誘導体である。すなわち、１，２−ジオールを含むポリオール化合物、α‐ヒドロキシ‐β‐カルボン酸化合物、ジカルボン酸化合物とボルテゾミブとの反応生成物が挙げられる。例えば、ボルテゾミブとグリセリン、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、グルコース、マルトース、スクロース、トレハロース、ラクトース、フルクトース、メグルミン、イノシトール、グルコン酸ナトリウム、シクロデキストリン等のポリオール化合物とのボロン酸エステル誘導体。クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、サリチル酸、マンデル酸、３−ヒドロキシ酪酸等のα‐ヒドロキシ‐β‐カルボン酸とボルテゾミブとの酸無水物‐エステル混合誘導体、シュウ酸、マロン酸、コハク酸等のジカルボン酸との酸無水物等が挙げられる。
本発明において、ボルテゾミブ又はその医薬的に許容される塩、若しくはボルテゾミブの誘導体（Ａ）は、ボルテゾミブ、ボルテゾミブの塩、又はボルテゾミブの誘導体の何れか１種の化学種であっても良く、２種以上の混合物であっても良い。また、一部が、ボルテゾミブの３量体等の自己脱水縮合体を含んでいても良い。しかしながら、該３量体は難溶性であり、水溶液として投与する際に不溶性異物となるため、該３量体等の自己脱水縮合物は含まないことが好ましい。当該（Ａ）成分としては、医薬品用の有効成分として用いることができる品質レベルである事が好ましい。
【００１２】
本発明における（Ａ）ボルテゾミブ又はその医薬的に許容される塩、若しくはボルテゾミブの誘導体とは、少なくともボルテゾミブを含有していることが好ましく、ボルテゾミブの含有量が５０質量％以上であることがより好ましい。（Ａ）成分がボルテゾミブであることが殊更好ましい。
【００１３】
本発明の医薬製剤は（Ｂ）グリセリンを含有する。グリセリンは有効成分である（Ａ）ボルテゾミブ又はその医薬的に許容される塩、若しくはボルテゾミブの誘導体の溶解性を向上させることができる。例えば、本発明の医薬製剤が凍結乾燥製剤の態様であって、投与時に例えば生理食塩水を用いて水溶液を再構成する場合、該グリセリン（Ｂ）を含む製剤は水溶性が向上しているため、凍結乾燥製剤の濡れ性が向上し速やかに溶解して投与用の水溶液を容易に調製することができる。
本発明の医薬製剤にグリセリン（Ｂ）を用いる場合、有効成分である（Ａ）ボルテゾミブ又はその医薬的に許容される塩、若しくはボルテゾミブの誘導体が１質量部に対し、（Ｂ）グリセリンが０．０１〜１０質量部を含有することが好ましい。好ましくは、（Ａ）成分が１質量部に対して、（Ｂ）グリセリンは０．１〜２質量部である。
【００１４】
本明細書における濡れ性とは、固体表面に対する液体の親和性のことを示す。固体表面とは例えば凍結乾燥ケーキの表面であり、液体とは凍結乾燥製剤を再溶解する際に用いる液体であり例えば生理食塩水等が挙げられる。この液体が生理食塩水である場合、凍結乾燥ケーキの親水性が向上することで濡れ性が向上することが考えられる。
【００１５】
本発明の医薬製剤はニコチン酸アミド（Ｃ）を含有することが好ましい。ニコチン酸アミドは有効成分である（Ａ）ボルテゾミブ又はその医薬的に許容される塩、若しくはボルテゾミブの誘導体の溶解性を向上させることができる。例えば、本発明の医薬製剤が凍結乾燥製剤の態様であって、投与時に例えば生理食塩水を用いて水溶液を再構成する場合、該ニコチン酸アミド（Ｃ）を含む製剤は水溶性が向上しているため、速やかに溶解して投与用の水溶液を容易に調製することができる。
本発明の医薬製剤にニコチン酸アミド（Ｃ）を用いる場合、有効成分である（Ａ）ボルテゾミブ又はその医薬的に許容される塩、若しくはボルテゾミブの誘導体が１質量部に対し、（Ｃ）ニコチン酸アミドが０．１〜３０質量部を含有することが好ましい。好ましくは、（Ａ）成分が１質量部に対して、（Ｃ）ニコチン酸アミドは１〜１５質量部である。
【００１６】
本発明の医薬製剤は、（Ｄ）ｐＨ調整剤を含み、そのｐＨ調整剤が塩基性化合物と酸性化合物からなることが好ましい。
該（Ｄ）ｐＨ調整剤に使用される塩基性化合物及び酸性化合物は、医薬製剤において一般的に使用されているものであり、本発明の医薬製剤に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されない。塩基性化合物としては水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属の水酸化物、リン酸二水素ナトリウム、リン酸一水素二ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等の無機酸のアルカリ土類金属塩等を挙げることができる。また塩基性化合物として添加剤を使用してもよく、その添加剤としてはグアニジノ基を有する化合物、例えばグアニジン又はその塩、クレアチン、クレアチニン、アルギニン等を挙げることができる。酸性化合物としては、塩酸、リン酸、ホウ酸、炭酸等の無機酸、クエン酸、酒石酸、アスコルビン酸、乳酸及び酢酸等の有機酸が挙げられる。また、前記塩基性化合物と酸性化合物を混合してｐＨ調整した緩衝剤を用いても良い。緩衝剤としては、リン酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、クエン酸緩衝剤、酒石酸緩衝剤、乳酸緩衝剤、コハク酸緩衝剤、ＴＲＩＳ緩衝剤、グリシン緩衝剤及びヒスチジン緩衝剤等が挙げられる。これらのｐＨ調整剤は単独で用いても良く、また二種以上を組み合わせて用いても良い。
本発明における（Ｄ）ｐＨ調整剤としては、好ましくは水酸化ナトリウム、アルギニン、塩酸、リン酸又はその塩（リン酸二水素ナトリウム、リン酸一水素二ナトリウム等）である。
（Ｄ）ｐＨ調整剤は、医薬製剤を製造する際に、溶液のｐＨを目的のｐＨに調整することができればよく、適量で使用される。本発明の医薬製剤の製造に使用されるｐＨ調整剤の配合量は、ｐＨを上記の範囲に調整できれば特に限定されない。通常、ｐＨ調整剤はｐＨを目的の範囲に調整できるように適量使用される。
【００１７】
前記塩基性化合物と酸性化合物からなるｐＨ調整剤は、塩基性化合物が１当量のとき酸性化合物の当量が１〜４当量であることが好ましく、塩基性化合物が１当量のとき酸性化合物の当量が１〜３．５当量であることがより好ましい。
【００１８】
当量とは、ある物質が過不足なく反応する時の物質量であり、化学当量、電気化学当量、熱の仕事当量がある。通常化学当量を意味する。化学当量には、元素の当量、酸−塩基の当量、酸化−還元の当量がある。本明細書における当量とは、酸−塩基の当量のことである。すなわち、塩基性化合物が１当量で酸性化合物が１当量のときそれぞれのＨ＋及びＯＨ−の数が等しいことを意味し、塩基性化合物が１当量で酸性化合物が２当量のときＨ＋の数がＯＨ−の数の２倍であることを意味する。
【００１９】
本発明の医薬製剤は、ｐＨ調整剤を含み、有効成分であるボルテゾミブ又はボルテゾミブの誘導体の（Ａ）濃度として１．０〜２．５ｍｇ／ｍＬとした本発明の医薬製剤水溶液において、ｐＨが４．０〜７．０である、医薬製剤であることが好ましい。該ボルテゾミブの誘導体は、水溶液中にてボルテゾミブが再生される物性であることから、有効成分であるボルテゾミブの濃度として１．０〜２．５ｍｇ／ｍＬの水溶液において、ｐＨが４．０〜７．０である、医薬製剤であることが好ましい。好ましくは、前記水溶液としてｐＨ４．５〜６．５である医薬製剤である。更に好ましく、ｐＨ５．０〜６．０の範囲に調整するのが特に好ましい。
【００２０】
本発明の（Ａ）ボルテゾミブ又はその医薬的に許容される塩、若しくはボルテゾミブの誘導体を有効成分とする医薬製剤は、（Ｂ）グリセリン、並びに任意の添加成分である（Ｃ）ニコチン酸アミド、（Ｄ）ｐＨ調整剤以外に、通常の医薬製剤に用いられる他の添加剤を含有していても良い。他の添加剤としては、ボルテゾミブの安定性を維持する範囲において通常の医薬製剤に用いられる等張化剤、賦形剤、溶解補助剤、抗酸化剤等を添加しても良い。
等張化剤としては塩化ナトリウム等の塩類、マンニトール、ラクトース、スクロース、マルトース、トレハロース、キシリトール、ソルビトール、イノシトール、グルコン酸ナトリウム、メグルミン、シクロデキストリン等の糖又は糖アルコール及び尿素等が挙げられる。
また、賦形剤としても、塩化ナトリウム等の塩類、マンニトール、ラクトース、スクロース、マルトース、トレハロース、キシリトール、ソルビトール、イノシトール、グルコン酸ナトリウム、メグルミン、シクロデキストリン等の糖又は糖アルコールを用いることができる。
溶解補助剤としては、チオグリセリン、プロピレングリコール等のポリオール類、ポリソルベート、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリオキシエチレンヒマシ油等のポリエーテル系化合物等を挙げることができる。
抗酸化剤としては、没食子酸プロピル、アスコルビン酸、トコフェロールポリエチレングリコールスクシナート、Ｌ‐システイン等が挙げられる。
他の添加剤の含有量は、ボルテゾミブの安定性を考慮して適切な量を適宜設定して用いられるが、有効成分であるボルテゾミブ又はその誘導体（Ａ）１質量部に対し、それぞれ３０質量部以下で添加して用いることが好ましい。より好ましくは、ボルテゾミブ１質量部に対し、それぞれ１５質量部以下の適用量である。
【００２１】
本発明は、医薬製剤に関する。ボルテゾミブを有効成分とする医薬品は、注射剤の製剤形で静脈内投与又は皮下投与にて抗腫瘍剤として提供されていることから、本発明の医薬製剤も注射用製剤であることが好ましい。すなわち凍結乾燥製剤若しくは注射液製剤等の製剤型であることが好ましい。
【００２２】
本発明の医薬製剤は、所定量の（Ａ）ボルテゾミブ又はその医薬的に許容される塩、若しくはボルテゾミブの誘導体、（Ｂ）グリセリン、並びに任意の添加成分である（Ｃ）ニコチン酸アミド、（Ｄ）ｐＨ調整剤、その他の添加剤を含有する溶液を調製し、これをメンブランフィルターにて濾過し、ガラス製バイアルに分注することで調製できる。注射液製剤の場合は、これを無菌的に封止することで調製することができ、凍結乾燥製剤の場合は、溶液を分注したバイアルを凍結乾燥して無菌的に封止すれば良い。
前記成分（Ａ）及び（Ｂ）、並びに任意の成分（Ｃ）、（Ｄ）及びその他の添加剤を含有する溶液を調製するための溶剤は、これらの成分を溶解できて、医薬的に許容される溶剤であれば特に限定されるものではなく、適宜選択して適当な溶剤を用いて良い。例えば、水、エタノール、イソプロパノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、グリセリン、プロピレングリコール、Ｎ−メチルピロリドン、ジメチルスルホキシド、ポリエチレングリコール（マクロゴール）、ポリソルベート（Ｔｗｅｅｎ）、クレモホール等が挙げられ、これらの単独使用若しくは、２種以上の混合溶剤として用いても良い。
【００２３】
本発明の医薬製剤は、凍結乾燥製剤であることを含む。
凍結乾燥製剤を調製する場合、本発明の医薬製剤を含む溶液を調製するための前記溶剤は、製剤調製工程を考慮すると融点−４０℃以上であることが好ましい。例えば、水、ｔｅｒｔ−ブタノール、グリセリン、Ｎ−メチルピロリドン、ジメチルスルホキシド等を用いることが好ましい。水又は水と有機溶剤の水系混合溶剤を用いることがより好ましい。この溶剤を用いた当該溶液を凍結乾燥し、無菌的に封止することで凍結乾燥製剤を調製することができる。
【００２４】
本発明の医薬製剤は、ボルテゾミブの自己縮合による多量体形成が抑制されている。したがって、当該医薬製剤を投与のために溶液調製しても、ボルテゾミブ三量体といった不溶性成分の生成の問題を解決できている。したがって、投与時の溶液調製の課題を解決した安全な医薬製剤を提供することができる。
【００２５】
本発明の医薬製剤は、ボルテゾミブを有効成分とする医薬として使用することができる。ボルテゾミブ製剤は、プロテアソーム阻害作用に基づく多発性骨髄腫やマントル細胞リンパ腫といった悪性腫瘍治療剤として用いられていることから、同様に抗腫瘍剤として適用することができる。
【実施例】
【００２６】
以下に、本発明を実施例により更に説明する。ただし、本発明がこれらの実施例に限定されるものではない。
【００２７】
［実施例１］
グリセリン１８ｍｇ、ニコチン酸アミド４６０ｍｇを２４ｍＬの注射用水に溶解し、アルギニン４０ｍｇを加えて溶解し、水溶液のｐＨを約１０．５としたものにボルテゾミブ６０ｍｇを加えて溶解した。０．５Ｍのリン酸溶液を４８０μＬ加えてｐＨ５．６に調整し、注射用水を加えて全量を６０ｍＬとした。その溶液はｐＨ５．６であった。
この溶液を孔径０．２２μｍのメンブレンフィルターを用いて無菌ろ過を行い、バイアルにろ過した液を３ｍＬ充填し、凍結乾燥を行い、実施例１に係る凍結乾燥製剤を調製した。
【００２８】
［実施例２］
グリセリン１８ｍｇ、尿素１０００ｍｇを２４ｍＬの注射用水に溶解し、５Ｍの水酸化ナトリウムを１００μＬ加えて水溶液のｐＨを１１．０とした液にボルテゾミブ６０ｍｇを加えて溶解した。この水溶液を０．５Ｍのリン酸溶液を４００μＬ加えてｐＨ５．３に調整し、注射用水を加えて全量を６０ｍＬとした。その溶液はｐＨ５．３であった。
この溶液を孔径０．２２μｍのメンブレンフィルターを用いて無菌ろ過を行い、バイアルにろ過した液を３ｍＬ充填し、凍結乾燥を行い、実施例２に係る凍結乾燥製剤を調製した。
【００２９】
［比較例１］
ニコチン酸アミド５００ｍｇを２４ｍＬの注射用水に溶かし、アルギニン４０ｍｇを加えて溶解し、水溶液のｐＨを１０．５とした液にボルテゾミブ６０ｍｇを加えて溶解した。この水溶液を０．５Ｍのリン酸溶液を４８０μＬ加えてｐＨ５．５に調整し、注射用水を加えて全量を６０ｍＬとした。その溶液はｐＨ５．５であった。
この溶液を、孔径０．２２μｍのメンブランフィルターを用いて無菌ろ過を行い、バイアルにろ過した液を３ｍＬ充填し、凍結乾燥を行い、比較例１に係る凍結乾燥製剤を調製した。
【００３０】
［比較例２］
ＰＥＧ４０００  ８００ｍｇとニコチン酸アミド４２０ｍｇを２４ｍＬの注射用水に溶解し、アルギニン４０ｍｇを加えて溶解し、水溶液のｐＨを約１０．５とした液にボルテゾミブ６０ｍｇを加え溶解した。この水溶液を０．５Ｍのリン酸溶液を４５０μＬ加えてｐＨ５．６に調整し、注射用水を加えて全量を６０ｍＬとした。その溶液はｐＨ５．６であった。
この溶液を孔径０．２２μｍのメンブレンフィルターを用いて無菌ろ過を行い、バイアルにろ過した液を３ｍＬ充填し、凍結乾燥を行い、比較例２に係る凍結乾燥製剤を調製した。
【００３１】
［比較例３］
ＥＤＴＡ２Ｎａ１８０ｍｇ、ニコチン酸アミド４２０ｍｇを２４ｍＬの注射用水に溶解し、アルギニン４０ｍｇを加えて溶解し、５Ｍの水酸化ナトリウム溶液を２００μＬ加えてｐＨ１１．５とした液にボルテゾミブ６０ｍｇを加え溶解した。この溶液を０．５Ｍのリン酸溶液を１．５ｍＬ加えてｐＨ５．０に調整し、注射用水を加えて全量を６０ｍＬとした。その溶液はｐＨ５．０であった。
この溶液を孔径０．２２μｍのメンブレンフィルターを用いて無菌ろ過を行い、バイアルにろ過した液を３ｍＬ充填し、凍結乾燥を行い、比較例３に係る凍結乾燥製剤を調製した。
【００３２】
［比較例４］
安息香酸Ｎａ６ｍｇ、ニコチン酸アミド４２０ｍｇを２４ｍＬの注射用水に溶解し、アルギニン４０ｍｇを加えて溶解し、ｐＨ１０．５とした液にボルテゾミブ６０ｍｇを加え溶解した。この溶液を０．５Ｍのリン酸溶液を４８０μＬ加えてｐＨ５．２に調整し、注射用水を加えて全量を６０ｍＬとした。その溶液はｐＨ５．６であった。
この溶液を孔径０．２２μｍのメンブレンフィルターを用いて無菌ろ過を行い、バイアルにろ過した液を３ｍＬ充填し、凍結乾燥を行い、比較例４に係る凍結乾燥製剤を調製した。
【００３３】
［比較例５］
ポリソルベート８０  ６０ｍｇ、ニコチン酸アミド４２０ｍｇを２４ｍＬの注射用水に溶解し、アルギニン４０ｍｇを加えて溶解し、ｐＨ１０．５とした液にボルテゾミブ６０ｍｇを加え溶解した。この溶液を０．５Ｍのリン酸溶液を４８０μＬ加えてｐＨ５．６に調整し、注射用水を加えて全量を６０ｍＬとした。その溶液はｐＨ５．７であった。
この溶液を孔径０．２２μｍのメンブレンフィルターを用いて無菌ろ過を行い、バイアルにろ過した液を３ｍＬ充填し、凍結乾燥を行い、比較例５に係る凍結乾燥製剤を調製した。
【００３４】
実施例１及び実施例２、比較例１〜５に係る医薬製剤１バイアル当たりの各成分組成を表１にまとめた。
［表１］
2018024584.tif 000002
＊１；生理食塩水１．２ｍＬで再溶解したときのｐＨ値。
【００３５】
［試験例１］（溶解性試験）
実施例１、比較例１〜５で得られた凍結乾燥製剤を用いて溶解性試験を行った。
それぞれのサンプルに生理食塩水１．２ｍＬをバイアルに加え、凍結乾燥ケーキが液になじむように優しく振り混ぜ、静置し、完全に溶解するまでの時間を測定した。結果を表２に示す。
［表２］
2018024584.tif 000003
【００３６】
グリセリンを含有する実施例１の凍結乾燥製剤は、グリセリンを含有しない比較例１、他の添加剤を含有する比較例２〜５の凍結乾燥製剤と比べて、濡れ性が良く、溶解時間が４分以上短縮した。この試験結果から、グリセリンの添加によりボルテゾミブを有効成分とする医薬製剤の再溶解性が良好になることが認められた。
【００３７】
［試験例２］６０℃保存安定性試験
実施例１及び実施例２、比較例１〜５の注射用凍結乾燥製剤を、６０℃の条件下にて１週間保存した。各製剤について、ボルテゾミブ由来の類縁物質をＨＰＬＣにて分析した。ボルテゾミブ類縁物質のＨＰＬＣ分析条件を下に示した。
【００３８】
［ボルテゾミブ由来の類縁物質の分析条件］
実施例及び比較例のボルテゾミブ分解由来の類縁物質を、以下の液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）条件にて分析した。
カラム：Waters Symmetry Shield RP18  5μm，4.6mm×250mm
カラム温度：３５℃
移動相Ａ：水／アセトニトリル／ギ酸混液（７１５：２８５：１）
移動相Ｂ：メタノール／水／ギ酸混液（８００：２００：１）
送液量：１．０ｍＬ／ｍｉｎ．
波長：２７０ｎｍ
移動相の送液：表３に示す条件で送液した。
【００３９】
［表３］
2018024584.tif 000004
【００４０】
実施例１〜２、及び比較例１〜５の凍結乾燥製剤の６０℃保存安定性試験における、各類縁物質含量を表４にまとめた。
［表４］
2018024584.tif 000005
＊２  不純物Ａ、Ｂ、Ｅ以外の個々の類縁物質の最大値。
【００４１】
実施例１及び実施例２は類縁物質Ａ及びＥの生成量が初期値でも少なく、製剤調製工程において類縁物質の生成が抑制されていた。更に、６０℃で１週間保存しても総類縁物質が０．５％（ｗ／ｗ）以下であり、保存条件下においても類縁物質の生成を抑制した。これに対し、比較例１も類縁物質の生成量が初期値でも、６０℃１週間保存しても総類縁物質が０．５％（ｗ／ｗ）以下であり、安定であることが分かった。しかしながら、再溶解に要する時間が５分以上のため、製剤としては適さないと考えられた。また、比較例２〜５は、初期においても総類縁物質が実施例１を超える量で含有しており、製剤製造工程中でも類縁物質の明らかな増加が認められた。更に６０℃で１週間保存すると、総類縁物質を１％以上含有し、保存条件下において類縁物質の生成を抑制することができなかった。以上の結果を比較すると、本発明の医薬製剤は、製剤製造工程中から製剤保存期間中に亘り、ボルテゾミブ類縁物質の生成を抑制することができることが明らかになった。