(57)【要約】      （修正有）【課題】カルシトニン遺伝子関連ペプチドに対するアンタゴニスト抗体を投与することによって内臓痛を治療するための方法の提供。【解決手段】個体における内臓痛および／または内臓痛の症状を予防および／または治療するための方法を提供し、当該方法は、治療有効量の抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体を、内臓痛に罹患しているかまたは内臓痛のリスクがある個体に投与することを含む。治療有効量の抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体を、内臓痛に罹患しているかまたは内臓痛のリスクがある個体に投与することを含む、個体における内臓痛および／または内臓痛の１つもしくは複数の症状を治療する方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療有効量の抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体を含む、個体における内臓痛および／または内臓痛の１つもしくは複数の症状を治療するための医薬組成物。
【請求項２】
前記内臓痛が機能性腸障害（ＦＢＤ）に関連する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記ＦＢＤが、胃食道逆流、消化不良、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、および機能性腹痛症候群（ＦＡＰＳ）からなる群から選択される、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記内臓痛が炎症性腸疾患（ＩＢＤ）に関連する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記ＩＢＤが、クローン病、回腸炎、および潰瘍性大腸炎からなる群から選択される、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記内臓痛が、腎疝痛、月経困難症、膀胱炎、月経期間、陣痛、閉経、前立腺炎、または膵炎に関連する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記内臓痛が間質性膀胱炎（ＩＣ）に関連する、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体が、５０ｎＭ以下のＫＤ（３７℃で表面プラズモン共鳴によって測定される）でＣＧＲＰに結合し、かつ／または少なくとも７日間のインビボでの半減期を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体が、ＣＧＲＰのＣ末端領域に特異的に結合する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体が、配列ＧＳＫＡＦ（配列番号３９）により規定されるエピトープを特異的に認識する、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記抗ＣＧＲＰ抗体が、配列番号１または１９に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記抗ＣＧＲＰ抗体が、配列番号２または２０に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記抗ＣＧＲＰ抗体が、
（ａ）配列番号３、２１、３３、３４、３６、または３７で示されるＣＤＲ  Ｈ１、
（ｂ）配列番号４、２２、３５、または３８で示されるＣＤＲ  Ｈ２、
（ｃ）配列番号５または２３で示されるＣＤＲ  Ｈ３、
（ｄ）配列番号６または２４で示されるＣＤＲ  Ｌ１、
（ｅ）配列番号７または２５で示されるＣＤＲ  Ｌ２、および
（ｆ）配列番号８または２６で示されるＣＤＲ  Ｌ３
からなる群から選択される少なくとも１つのＣＤＲを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記抗ＣＧＲＰ抗体が、配列番号１に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインと、配列番号２に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインとを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記抗ＣＧＲＰ抗体が、ＡＴＣＣ受託番号がＰＴＡ−６８６７および／またはＰＴＡ−６８６６の発現ベクターにより産生される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記抗ＣＧＲＰ抗体が、
Ｃ末端のリジンを有するかまたは有さない、配列番号１１に示される、抗体Ｇ１の重鎖の完全な抗体アミノ酸配列と、
配列番号１２に示される、抗体Ｇ１の軽鎖の完全な抗体アミノ酸配列と
を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記抗ＣＧＲＰ抗体が、
配列番号２９に示される、抗体Ｇ２の重鎖の完全な抗体アミノ酸配列と、
配列番号３０に示される、抗体Ｇ２の軽鎖の完全な抗体アミノ酸配列と
を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
薬学的に許容できる担体をさらに含み、末梢に投与するために調製される、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本願は、２００９年８月２８日に出願された米国仮特許出願第６１／２３７，９０１号の優先権の利益を主張するものであり、前記出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
配列表の参照
本願は電子的に出願されるものであり、電子的に提出された、テキストフォーマットの配列表を含む。テキストファイルは、２０１０年８月１１日に作製され２８ＫＢのサイズを有する、「ＰＣ３３９２０Ａ＿ＳｅｑＬｉｓｔ．ｔｘｔ」というタイトルの配列表を含有する。このテキストファイルに含有される配列表は明細書の一部であり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００３】
分野
本発明は、抗ＣＧＲＰ抗体を用いて内臓痛および／または内臓痛の症状を治療および／または予防する方法、ならびに内臓痛および／または内臓痛の症状の予防および／または治療において使用するための抗ＣＧＲＰ抗体に関する。
【背景技術】
【０００４】
内臓痛は、患者が病院を訪れる主な原因であるが、それにも関わらず、内臓痛の有効な治療は限られている。内臓痛は、臨床的に管理することが困難であり、鎮痛剤の使用を必要とすることが多い。鎮痛剤は広く用いられているが、用量を制限するその重篤な副作用により、有効性が低下することが多い。さらに、鎮痛剤は、中毒および身体的依存性のリスクを有し、便秘および多くの場合において禁忌であり生活の質を低下させる他の望ましくない副作用を誘発する。
【０００５】
内臓痛は、身体の内部器官を包含する内臓に関連する痛みである。これらの器官には、例えば、心臓、肺、生殖器、膀胱、尿管、消化器、肝臓、膵臓、脾臓、および腎臓が含まれる。例えば脾炎、陣痛、腸閉塞に関連する腹部手術、膀胱炎、月経期間、または月経困難症などの、内臓痛が存在し得る様々な状態がある。同様に、腎臓痛、上腹部痛、胸膜痛、および痛みを伴う胆石疝痛、虫垂炎痛は全て、内臓痛とみなされ得る。胸骨下痛または初期の心筋梗塞による圧力もまた内臓性のものである。胃、十二指腸、または結腸の疾患は、内臓痛の原因となり得る。内臓痛の原因となる、一般に遭遇する胃腸（ＧＩ）障害には、機能性腸障害（ＦＢＤ）および炎症性腸疾患（ＩＢＤ）が含まれる。これらのＧＩ障害には、現在では中程度にしか制御されていない広範な疾患状態が含まれ、この疾患状態には、ＦＢＤに関しては、胃食道逆流、消化不良、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、および機能性腹痛症候群（ＦＡＰＳ）が含まれ、ＩＢＤに関しては、クローン病、回腸炎、および潰瘍性大腸炎が含まれ、これらの全ては通常、内臓痛をもたらす。
【０００６】
ＩＢＳは、世界中の成人および若年者の１０〜２０％が罹患している（Ｌｏｎｇｓｔｒｅｔｈら、２００６、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １３０（５）：１４８０〜９１）。これらの患者が治療を模索する主な理由は、内臓の感受性が増強したことによると考えられている慢性的な内臓痛である（Ａｚｉｚ、２００６、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １３１（２）：６６１〜４）。ＩＢＳを有する患者は、結腸直腸の膨張に対する内臓の感覚的閾値が低いことが示されており、このことは、内臓痛の症状に大きく相関している（Ｄｅｌａｆｏｙら、２００６、Ｇｕｔ  ５５（７）：９４０〜５）。ラットにおける、トリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）により誘発された大腸炎の後の結腸直腸の膨張は、内臓過敏のメカニズムを研究するために多くの研究者により用いられている動物モデルである（Ｇａｙら、２００６、Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ２３；１３（２）：１１４〜１２１、Ｄｅｌａｆｏｙら、２００６、Ａｄａｍら、２００６、Ｐａｉｎ  １２３（１〜２）：１７９〜８６）。
【０００７】
間質性膀胱炎（ＩＣ）は、臨床において尿意逼迫、頻尿、および慢性的な骨盤痛に特徴を有する、痛みを伴う膀胱症候群である。臨床研究により、これが内臓の求心性感覚神経の過敏を伴うことが示されており、前記過敏においては、膀胱充満感の発生が、膀胱の粘膜下層における神経密度の増大、および神経性炎症のさらなる標準的な容積の痕跡を示す患者よりも少なく、かつ膀胱充満感が、痛みを伴うものとして認識される。ＩＣの組織病理像から、内臓性求心路の関与が示唆される。
【０００８】
内臓痛は、例えば炎症、膨張、または圧力の増大に応じて生じ得る。内臓痛は内臓の損傷により常に引き起こされるわけではない。さらに、内臓痛は広範性のものであり、他の箇所に移行し得、かつ他の自律神経系および運動系の反射（例えば、吐き気、腎疝痛からの腰部筋肉の緊張）に関連し得る（Ｌａｎｃｅｔ  １９９９、３５３、２１４５〜４８）。
【０００９】
ＣＧＲＰ（カルシトニン遺伝子関連ペプチド）は、カルシトニン、アドレノメデュリン、およびアミリンを含むペプチドファミリーに属する、３７個のアミノ酸からなる神経ペプチドである。ヒトにおいて、２つの形態のＣＧＲＰ（α−ＣＧＲＰおよびβ−ＣＧＲＰ）が存在し、それらは類似の活性を有する。それらは３つのアミノ酸が異なり、分布の差異を示す。少なくとも２つのＣＧＲＰ受容体サブタイプもまた、活性の差異の原因となり得る。ＣＧＲＰは中枢神経系における神経伝達物質であり、ＣＧＲＰを含有する神経突起が血管と密接に関連している末梢における、強力な血管拡張物質であることが示されている。ＣＧＲＰ介在性の血管拡張もまた、血漿の溢出および微小血管系の血管拡張をもたらし、かつ片頭痛に存在する、一連の事象の一部として、神経性炎症に関連する。
【００１０】
脊髄に投与した低分子の選択的ＣＧＲＰアンタゴニストは、神経障害性および侵害受容性の痛みの状態の治療において有用であることが示されており（Ａｄｗａｎｉｋａｒら、Ｐａｉｎ、２００７、１３２（１〜２）：５３〜６６）、このことは、脊髄における内因性のＣＧＲＰシグナル伝達の除去が抗侵害受容性効果を有することを示唆している。報告によると、ＣＧＲＰシグナル伝達の遮断は、ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストであるＣＧＲＰ８−３７を全身に注射することにより内臓過敏（ＶＨ）を回復に向かわせることにおいて有効であることが実証されている（Ｄｅｌａｆｏｙら、２００６；Ｐｌｏｕｒｄｅら、１９９７、Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２７３（１  Ｐｔ  １）：Ｇ１９１〜６；ＪｕｌｉａおよびＢｕｅｎｏ、１９９７、Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２７２（１  Ｐｔ  １）：Ｇ１４１〜６）。しかし、ＣＧＲＰ８−３７はインビボでの半減期が非常に短く、したがって、有用な治療法ではない。したがって、内臓痛を治療および予防するための新たな治療法を同定する重大な医学的必要が存在する。
【００１１】
本願を通して、様々な刊行物（特許および特許出願を含む）が参照される。これらの刊行物の開示の全体は、参照により本明細書に組み込まれる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】米国仮特許出願第６１／２３７，９０１号
【特許文献２】ＷＯ２００７／０５４８０９
【特許文献３】米国特許第４，８１６，５６７号
【特許文献４】ＷＯ９９／５８５７２
【特許文献５】米国特許第５，５４５，８０７号
【特許文献６】米国特許第５，５４５，８０６号
【特許文献７】米国特許第５，５６９，８２５号
【特許文献８】米国特許第５，６２５，１２６号
【特許文献９】米国特許第５，６３３，４２５号
【特許文献１０】米国特許第５，６６１，０１６号
【特許文献１１】米国特許第５，７５０，３７３号
【特許文献１２】米国特許第５，５００，３６２号
【特許文献１３】米国特許第５，８２１，３３７号
【特許文献１４】ＷＯ２００７／０７６３３６
【特許文献１５】ＰＣＴ／ＩＢ２００９／０５０８４９
【特許文献１６】ＰＣＴ／ＩＢ２００９／０５０８５２
【特許文献１７】ＰＣＴ／ＧＢ９９／０１４４１
【特許文献１８】英国特許出願第９８０９９５１．８号
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Ｌｏｎｇｓｔｒｅｔｈら、２００６、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １３０（５）：１４８０〜９１
【非特許文献２】Ａｚｉｚ、２００６、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １３１（２）：６６１〜４
【非特許文献３】Ｄｅｌａｆｏｙら、２００６、Ｇｕｔ  ５５（７）：９４０〜５
【非特許文献４】Ｇａｙら、２００６、Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ２３；１３（２）：１１４〜１２１
【非特許文献５】Ａｄａｍら、２００６、Ｐａｉｎ  １２３（１〜２）：１７９〜８６
【非特許文献６】Ｌａｎｃｅｔ  １９９９、３５３、２１４５〜４８
【非特許文献７】Ａｄｗａｎｉｋａｒら、Ｐａｉｎ、２００７、１３２（１〜２）：５３〜６６
【非特許文献８】Ｐｌｏｕｒｄｅら、１９９７、Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２７３（１  Ｐｔ  １）：Ｇ１９１〜６
【非特許文献９】ＪｕｌｉａおよびＢｕｅｎｏ、１９９７、Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２７２（１  Ｐｔ  １）：Ｇ１４１〜６
【非特許文献１０】Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、ｓｅｃｏｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９８９）Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ
【非特許文献１１】Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｍ．Ｊ．Ｇａｉｔ編、１９８４）
【非特許文献１２】Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ
【非特許文献１３】Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｎｏｔｅｂｏｏｋ（Ｊ．Ｅ．Ｃｅｌｌｉｓ編、１９９８）Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ
【非特許文献１４】Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ編、１９８７）
【非特許文献１５】Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｊ．Ｐ．ＭａｔｈｅｒおよびＰ．Ｅ．Ｒｏｂｅｒｔｓ、１９９８）Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ
【非特許文献１６】Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ：Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（Ａ．Ｄｏｙｌｅ、Ｊ．Ｂ．Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ、およびＤ．Ｇ．Ｎｅｗｅｌｌ編、１９９３〜１９９８）Ｊ．ＷｉｌｅｙおよびＳｏｎｓ
【非特許文献１７】Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）
【非特許文献１８】Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｄ．Ｍ．ＷｅｉｒおよびＣ．Ｃ．Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ編）
【非特許文献１９】Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  Ｖｅｃｔｏｒｓ  ｆｏｒ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｃｅｌｌｓ（Ｊ．Ｍ．ＭｉｌｌｅｒおよびＭ．Ｐ．Ｃａｌｏｓ編、１９８７）
【非特許文献２０】Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌら編、１９８７）
【非特許文献２１】ＰＣＲ：Ｔｈｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ（Ｍｕｌｌｉｓら編、１９９４）
【非特許文献２２】Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｊ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎら編、１９９１）
【非特許文献２３】Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（ＷｉｌｅｙおよびＳｏｎｓ、１９９９）
【非特許文献２４】Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ（Ｃ．Ａ．ＪａｎｅｗａｙおよびＰ．Ｔｒａｖｅｒｓ、１９９７）
【非特許文献２５】Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｐ．Ｆｉｎｃｈ、１９９７）
【非特許文献２６】Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｄ．Ｃａｔｔｙ編、ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ、１９８８〜１９８９）
【非特許文献２７】Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｐ．ＳｈｅｐｈｅｒｄおよびＣ．Ｄｅａｎ編、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ、２０００）
【非特許文献２８】Ｕｓｉｎｇ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｍａｎｕａｌ（Ｅ．ＨａｒｌｏｗおよびＤ．Ｌａｎｅ（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ、１９９９）
【非特許文献２９】Ｔｈｅ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｍ．ＺａｎｅｔｔｉおよびＪ．Ｄ．Ｃａｐｒａ編、Ｈａｒｗｏｏｄ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、１９９５）
【非特許文献３０】ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ、１９７５、Ｎａｔｕｒｅ、２５６：４９５
【非特許文献３１】ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、１９９０、Ｎａｔｕｒｅ、３４８：５５２〜５５４
【非特許文献３２】Ｖａｕｇｈａｎら、１９９６、Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１４：３０９〜３１４
【非特許文献３３】Ｓｈｅｅｔｓら、１９９８、ＰＮＡＳ（ＵＳＡ）９５：６１５７〜６１６２
【非特許文献３４】ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＷｉｎｔｅｒ、１９９１、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２７：３８１
【非特許文献３５】Ｍａｒｋｓら、１９９１、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２２：５８１
【非特許文献３６】Ｃｏｌｅら、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ、Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ、ｐ．７７、１９８５
【非特許文献３７】Ｂｏｅｒｎｅｒら、１９９１、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４７（１）：８６〜９５
【非特許文献３８】Ｗｏｎｇ  ＨＣら、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  １２：９３〜１０６、１９９３
【非特許文献３９】Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、（５ｔｈ  ｅｄ．、１９９１、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ  ＭＤ）
【非特許文献４０】Ａｌ−ｌａｚｉｋａｎｉら、（１９９７）Ｊ．Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．２７３：９２７〜９４８）
【非特許文献４１】Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．、１９９１
【非特許文献４２】ＲａｖｅｔｃｈおよびＫｉｎｅｔ、１９９１、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、９：４５７〜９２
【非特許文献４３】Ｃａｐｅｌら、１９９４、Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ、４：２５〜３４
【非特許文献４４】ｄｅ  Ｈａａｓら、１９９５、Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．、１２６：３３０〜４１
【非特許文献４５】Ｇｕｙｅｒら、１９７６、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１１７：５８７
【非特許文献４６】Ｋｉｍら、１９９４、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２４：２４９
【非特許文献４７】Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ、２０２：１６３（１９９６）
【非特許文献４８】Ｃｌｙｎｅｓら、１９９８、ＰＮＡＳ（ＵＳＡ）、９５：６５２〜６５６
【非特許文献４９】Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１８ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ、Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ編、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ、１９９０
【非特許文献５０】Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ、Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ２０ｔｈ  Ｅｄ．Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、２０００
【非特許文献５１】Ｋａｔｚら、Ｓｕｒｇ  Ｃｌｉｎ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍ．、１９９９、７９（２）：２３１〜５２
【非特許文献５２】Ｃａｒａｃｅｎｉら、Ｊ  Ｐａｉｎ  Ｓｙｍｐｔｏｍ  Ｍａｎａｇｅ、２００２、２３（３）：２３９〜５５
【非特許文献５３】Ｄｒｏｓｓｍａｎら、１９９５、Ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ  ａｎｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ４０（５）：９８６〜９９５
【非特許文献５４】Ｆｒａｎｃｉｓら、１９９７、Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ．、１１（２）：３９５〜４０２
【非特許文献５５】Ｔａｎら、Ｃｌｉｎ．Ｓｃｉ．（Ｌｏｎｄ）．８９：５６５〜７３、１９９５
【非特許文献５６】Ｐｌｏｕｒｄｅら、Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  １４：１２２５〜１２２９、１９９３
【非特許文献５７】Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１９９９、２９：２６１３〜２６２４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
本発明は、個体における内臓痛および／または内臓痛の症状を予防および／または治療するための方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
当該方法は、治療有効量の抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体を、内臓痛に罹患しているかまたは内臓痛のリスクがある個体に投与することを含む。
【００１６】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は末梢に投与される。他の実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、経口で、舌下に、吸入を介して、経皮で、皮下に、静脈内に、動脈内に、関節内に、関節周辺に、局所的に、かつ／または筋肉内に投与される。
【００１７】
いくつかの実施形態において、内臓痛は、機能性腸障害（ＦＢＤ）に関連する。ＦＢＤは、胃食道逆流、消化不良、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、および機能性腹痛症候群（ＦＡＰＳ）であり得る。いくつかの実施形態において、内臓痛は、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）に関連する。ＩＢＤは、クローン病、回腸炎、または潰瘍性大腸炎であり得る。いくつかの実施形態において、内臓痛は、腎疝痛、月経困難症、膀胱炎、月経期間、陣痛、閉経、前立腺炎、または膵炎に関連する。いくつかの実施形態において、内臓痛は、間質性膀胱炎（ＩＣ）に関連する。
【００１８】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体はＣＧＲＰに結合し、ＣＧＲＰがその受容体に結合することを遮断し、ＣＧＲＰ受容体の活性化を遮断するかもしくは低減させ、ＣＧＲＰの生物学的活性を阻害するか、遮断するか、抑制するか、もしくは低減させ、ＣＧＲＰのクリアランスを増大させ、かつ／またはＣＧＲＰの合成、産生、もしくは放出を阻害する。
【００１９】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、ヒト抗体またはヒト化抗体である。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、５０ｎＭ以下のＫＤ（３７℃で表面プラズモン共鳴によって測定される）でＣＧＲＰに結合し得、かつ／または少なくとも７日間のインビボでの半減期を有する。
【００２０】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、ＣＧＲＰのＣ末端領域に特異的に結合する。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、配列ＧＳＫＡＦ（配列番号３９）により規定されるエピトープを特異的に認識する。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、配列番号１または１９にアミノ酸配列が少なくとも９０％同一であるＶＨドメインを含む。
【００２１】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、配列番号２または２０にアミノ酸配列が少なくとも９０％同一であるＶＬドメインを含む。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体はさらに、配列番号１または１９にアミノ酸配列が少なくとも９０％同一であるＶＨドメインを含む。他の実施形態において、抗ＣＧＲＰ抗体は、（ａ）配列番号３、２１、３３、３４、３６、または３７で示されるＣＤＲＨ１、（ｂ）配列番号４、２２、３５、または３８で示されるＣＤＲ  Ｈ２、（ｃ）配列番号５または２３で示されるＣＤＲ  Ｈ３、（ｄ）配列番号６または２４で示されるＣＤＲ  Ｌ１、（ｅ）配列番号７または２５で示されるＣＤＲ  Ｌ２、（ｆ）配列番号８または２６で示されるＣＤＲ  Ｌ３、ならびに（ｇ）Ｌ１、Ｌ２、およびＨ２の変異体からなる群から選択される、少なくとも１つのＣＤＲを含む。
【００２２】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰ抗体は、Ｃ末端のリジンを有するかまたは有さない、配列番号１１で示される、抗体Ｇ１の重鎖の完全な抗体アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰ抗体は、配列番号１２で示される、抗体Ｇ１の軽鎖の完全な抗体アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰ抗体は、Ｃ末端のリジンを有するかまたは有さない、配列番号１１で示される、抗体Ｇ１の重鎖の完全な抗体アミノ酸配列と、配列番号１２で示される、抗体Ｇ１の軽鎖の完全な抗体アミノ酸配列とを含む。
【００２３】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰ抗体は、Ｃ末端のリジンを有するかまたは有さない、配列番号２９で示される、抗体Ｇ２の重鎖の完全な抗体アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰ抗体は、配列番号３０で示される、抗体Ｇ２の軽鎖の完全な抗体アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰ抗体は、配列番号２９で示される、抗体Ｇ２の重鎖の完全な抗体アミノ酸配列と、配列番号３０で示される、抗体Ｇ２の軽鎖の完全な抗体アミノ酸配列とを含む。
【００２４】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、配列番号１にアミノ酸配列が少なくとも９０％同一であるＶＨドメインと、配列番号２にアミノ酸配列が少なくとも９０％同一であるＶＬドメインとを含む。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、ＡＴＣＣ受託番号がＰＴＡ−６８６７の発現ベクターにより産生される重鎖を含む。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、ＡＴＣＣ受託番号がＰＴＡ−６８６６の発現ベクターにより産生される軽鎖を含む。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、ＡＴＣＣ受託番号がＰＴＡ−６８６７およびＰＴＡ−６８６６の発現ベクターにより産生される。
【００２５】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰは、１カ月当たり１回、２回、３回、または４回の間で、皮下または静脈内注射により投与される。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、５〜１００ｍｇ／ｍｌの濃度で投与される。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重の濃度で投与される。
【００２６】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、運動協調または注意のＣＮＳ機能低下をもたらさない。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、中枢、脊髄、または髄腔内には投与されない。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、中枢、脊髄、または髄腔内に浸透する分子ではない。
【００２７】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、１つまたは複数のさらなる薬理学的に活性な化合物との組み合わせにおいて、別々に、連続して、または同時に投与される。いくつかの実施形態において、１つまたは複数のさらなる薬理学的に活性な化合物は、オピオイド系鎮痛薬、例えば、モルヒネ、ヘロイン、ヒドロモルホン、オキシモルホン、レボルファノール、レバロルファン、メタドン、メペリジン、フェンタニル、コカイン、コデイン、ジヒドロコデイン、オキシコドン、ヒドロコドン、プロポキシフェン、ナルメフェン、ナロルフィン、ナロキソン、ナルトレキソン、ブプレノルフィン、ブトルファノール、ナルブフィン、またはペンタゾシン、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、例えば、アスピリン、ジクロフェナク、ジフルシナル、エトドラク、フェンブフェン、フェノプロフェン、フルフェニサル、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、ケトロラック、メクロフェナム酸、メフェナム酸、ナブメトン、ナプロキセン、オキサプロジン、フェニルブタゾン、ピロキシカム、スリンダク、トルメチン、またはゾメピラック、またはその薬学的に許容できる塩、バルビツール系鎮静薬、例えば、アモバルビタール、アプロバルビタール、ブタバルビタール、ブタビタール、メフォバルビタール、メタルビタール、メトヘキシタール、ペントバルビタール、フェノバルビタール、セコバルビタール、タルブタール、チアミラール、またはチオペンタール、またはその薬学的に許容できる塩、鎮静作用を有するベンゾジアゼピン、例えば、クロルジアゼポキシド、クロラゼプ酸、ジアゼパム、フルラゼパム、ロラゼパム、オキサゼパム、テマゼパム、またはトリアゾラム、またはその薬学的に許容できる塩、鎮静作用を有するＨ１アンタゴニスト、例えば、ジフェンヒドラミン、ピリラミン、プロメタジン、クロルフェニラミン、またはクロルシクリジン、またはその薬学的に許容できる塩、グルテチミド、メプロバメート、メタカロン、またはジクロラルフェナゾン、またはその薬学的に許容できる塩などの鎮静薬、骨格筋弛緩薬、例えば、バクロフェン、カリソプロドール、クロルゾキサゾン、シクロベンザプリン、メトカルバモール、またはオルフェナジン、またはその薬学的に許容できる塩、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト、例えば、デキストロメトルファン（（＋）−３−ヒドロキシ−Ｎ−メチルモルフィナン）もしくはその代謝産物であるデキストロルファン（（＋）−３−ヒドロキシ−Ｎ−メチルモルフィナン）、ケタミン、メマンチン、ピロロキノリンキノン、またはシス−４−（ホスホノメチル）−２−ピペリジンカルボン酸、またはその薬学的に許容できる塩、α−アドレナリン作動薬、例えば、ドキサゾシン、タムスロシン、クロニジン、または４−アミノ−６，７−ジメトキシ−２−（５−メタンスルホンアミド−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノール−２−イル）−５−（２−ピリジル）キナゾリン、三環系抗鬱薬、例えば、デシプラミン、イミプラミン、アミトリプチリン、またはノルトリプチリン、抗けいれん薬、例えば、カルバマゼピン、またはバルプロエート、タキキニン（ＮＫ）アンタゴニスト、とりわけ、ＮＫ−���、ＮＫ−２、またはＮＫ−１アンタゴニスト、例えば、（αＲ，９Ｒ）−７−［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル］−８，９，１０，１１−テトラヒドロ−９−メチル−５−（４−メチルフェニル）−７Ｈ−［１，４］ジアゾシノ［２，１−ｇ］［１，７］ナフチリジン−６−１３−ジオン（ＴＡＫ−６３７）、５−［［（２Ｒ，３Ｓ）−２−［（１Ｒ）−１−［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］エトキシ−３−（４−フルオロフェニル）−４−モルホリニル］メチル］−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−オン（ＭＫ−８６９）、ラネピタント、ダピタント、または３−［［２−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］メチルアミノ］−２−フェニル−ピペリジン（２Ｓ，３Ｓ）、ムスカリン性アンタゴニスト、例えば、オキシブチン、トルテロジン、プロピベリン、塩化トロスピウム、またはダリフェナシン、ＣＯＸ−２阻害剤、例えば、セレコキシブ、ロフェコキシブ、またはバルデコキシブ、非選択的ＣＯＸ阻害剤（好ましくはＧＩ保護を有する）、例えば、ニトロフルルビプロフェン（ＨＣＴ−１０２６）、コールタール鎮痛薬、とりわけパラセタモール、ドロペリドールなどの神経遮断薬、バニロイド受容体アゴニスト（例えば、レジニフェラトキシン）またはアンタゴニスト（例えば、カプサゼピン）、プロプラノロールなどのβ−アドレナリン作動薬、メキシレチンなどの局所的麻酔薬、デキサメタゾンなどのコルチコステロイド、セロトニン受容体アゴニストまたはアンタゴニスト、コリン作用性（ニコチン性）鎮痛薬、Ｔｒａｍａｄｏｌ（登録商標）、シルデナフィル、バルデナフィル、またはタダラフィルなどのＰＤＥＶ阻害剤、ガバペンチンまたはプレガバリンなどのα−２−δリガンド、およびカンナビノイドから選択される。
【００２８】
本発明はさらに、内臓痛および／または内臓痛の症状を予防および／または治療するための医薬品の製造のための抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体の使用を提供する。いくつかの実施形態において、医薬品は末梢に投与するために調製される。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、投与されると末梢に作用する。
【００２９】
本発明はさらに、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体および薬学的に許容できる担体を含む、個体における内臓痛および／または内臓痛の症状を治療および／または予防するための医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態において、組成物は末梢に投与するために調製される。
【００３０】
本発明はさらに、個体における内臓痛および／または内臓痛の症状を治療および／または予防するための医薬組成物と、内臓痛および／または内臓痛の症状を治療および／または予防するための、治療有効量の前記医薬組成物を個体に末梢投与するための指示とを含むキットを提供する。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】図１Ａは、内臓痛モデルを示す図である。抗体４９０１（「４９０１」）またはＰＢＳ対照（「ビークル（vehicle）」）を、開腹術の後にトリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）を注射した動物に静脈内投与した。動物における内臓痛の閾値を、バルーン拡張を用いて試験した。痛みの閾値はｍｍＨｇで示す（ｙ軸）。Shamは、開腹後にＴＮＢＳの代わりに対照（３０％エタノール）溶液を注射した動物を表す。図１Ｂは、内臓痛モデルを示す図である。ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストであるＣＧＲＰ８−３７またはＰＢＳ対照（「ビークル（vehicle）」）を、腹式術の後に、ＴＮＢＳ処理した動物に静脈内投与した。（Ａ）と同様に、動物における内臓痛の閾値を、バルーン拡張を用いて試験し、痛みの閾値はｍｍＨｇで示す（ｙ軸）。
【図２】内臓痛モデルを示す図である。抗体４９０１（「４９０１」）またはＰＢＳ対照（「ビークル（vehicle）」）を、動物に静脈内投与した。収縮の数（ｙ軸）として測定される膀胱の運動性を、テルペンチン誘発性の膀胱炎症の１時間後、３時間後、および５時間後に試験した。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
本明細書において開示される発明は、治療有効量の抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体を個体に投与することにより個体における内臓痛を治療および／または予防するための方法を提供する。
【００３３】
本明細書において開示される発明はまた、Ｇ１に由来する抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体およびポリペプチドまたはＷＯ２００７／０５４８０９の表６に示されるその変異体を提供し、前記文献は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。本発明はまた、これらの抗体およびポリペプチドを作製および使用する方法を提供する。
【００３４】
一般的な技術
本発明の実施は、別段の指示がない限り、分子生物学（組換え技術を含む）、微生物学、細胞生物学、生化学、および免疫学の従来の技術を採用し、これらは当分野の技術の範囲内である。このような技術は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、ｓｅｃｏｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９８９）Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ；Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｍ．Ｊ．Ｇａｉｔ編、１９８４）；Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ；Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｎｏｔｅｂｏｏｋ（Ｊ．Ｅ．Ｃｅｌｌｉｓ編、１９９８）Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ編、１９８７）；Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｊ．Ｐ．ＭａｔｈｅｒおよびＰ．Ｅ．Ｒｏｂｅｒｔｓ、１９９８）Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ；Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ：Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（Ａ．Ｄｏｙｌｅ、Ｊ．Ｂ．Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ、およびＤ．Ｇ．Ｎｅｗｅｌｌ編、１９９３〜１９９８）Ｊ．ＷｉｌｅｙおよびＳｏｎｓ；Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）；Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｄ．Ｍ．ＷｅｉｒおよびＣ．Ｃ．Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ編）；Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  Ｖｅｃｔｏｒｓ  ｆｏｒ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｃｅｌｌｓ（Ｊ．Ｍ．ＭｉｌｌｅｒおよびＭ．Ｐ．Ｃａｌｏｓ編、１９８７）；Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌら編、１９８７）；ＰＣＲ：Ｔｈｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ（Ｍｕｌｌｉｓら編、１９９４）；Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｊ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎら編、１９９１）；Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（ＷｉｌｅｙおよびＳｏｎｓ、１９９９）；Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ（Ｃ．Ａ．ＪａｎｅｗａｙおよびＰ．Ｔｒａｖｅｒｓ、１９９７）；Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｐ．Ｆｉｎｃｈ、１９９７）；Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｄ．Ｃａｔｔｙ編、ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ、１９８８〜１９８９）；Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｐ．ＳｈｅｐｈｅｒｄおよびＣ．Ｄｅａｎ編、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ、２０００）；Ｕｓｉｎｇ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｍａｎｕａｌ（Ｅ．ＨａｒｌｏｗおよびＤ．Ｌａｎｅ（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ、１９９９）；Ｔｈｅ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｍ．ＺａｎｅｔｔｉおよびＪ．Ｄ．Ｃａｐｒａ編、Ｈａｒｗｏｏｄ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、１９９５）などの文献において全て説明されている。
【００３５】
定義
「抗体」は、炭水化物、ポリヌクレオチド、脂質、ポリペプチドなどの標的に特異的に結合することができる免疫グロブリン分子であり、前記結合は、免疫グロブリン分子の可変領域に位置する少なくとも１つの抗原認識部位を介して行われる。本明細書において用いられる場合、この用語はインタクトなポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体だけではなく、その断片（Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖなど）、一本鎖（ＳｃＦｖ）、その突然変異体、抗体部分（ドメイン抗体など）を含む融合タンパク質、および、抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子の任意の他の修飾立体構造を包含する。抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、またはＩｇＭ（またはそのサブクラス）などの任意のクラスの抗体を含み、抗体は何らかの特定のクラスのものである必要はない。抗体の重鎖の定常ドメインの抗体アミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンは異なるクラスに属し得る。ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭという、免疫グロブリンの５つの主なクラスが存在し、これらのいくつかはさらに、サブクラス（アイソタイプ）、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２に分類され得る。異なるクラスの免疫グロブリンに対応する、重鎖の定常ドメインは、それぞれアルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ、およびミューと呼ばれる。異なるクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造および３次元立体構造は周知である。
【００３６】
本明細書において用いられる場合、「モノクローナル抗体」は、実質的に同種の抗体の集団から得られる抗体を言い、すなわち、その集団を含む個々の抗体は、少量で存在し得る、起こり得る自然に生じる突然変異を除いて、同一である。モノクローナル抗体は高度に特異的であり、単一の抗原部位に対するものである。さらに、異なる抗原決定基（エピトープ）に対する異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは異なり、それぞれのモノクローナル抗体は、抗原上の単一の抗原決定基に対するものである。「モノクローナル」という修飾語は、実質的に同種の抗体集団から得られるという抗体の特徴を示し、何らかの特定の方法による抗体の産生を必要とするとは解釈されない。例えば、本発明に従って用いられるモノクローナル抗体は、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ、１９７５、Ｎａｔｕｒｅ、２５６：４９５に最初に記載されたハイブリドーマ法によって作製され得るか、または、米国特許第４，８１６，５６７号に記載されているような組換えＤＮＡ法によって作製され得る。モノクローナル抗体はまた、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、１９９０、Ｎａｔｕｒｅ、３４８：５５２〜５５４に記載されている技術を用いて形成されるファージライブラリーから単離することができる。
【００３７】
本明細書において用いられる場合、「ヒト化」抗体は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含有する、特異的なキメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、またはその断片（Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、もしくは抗体の他の抗原結合部分配列）である、非ヒト（例えばマウス）抗体の形態を言う。ほとんどの部分で、ヒト化抗体は、レシピエントの相補性決定領域（ＣＤＲ）の残基が、所望の特異性、親和性、および生物学的活性を有するマウス、ラット、またはウサギなどのヒト以外の種（ドナー抗体）のＣＤＲの残基で置換されている、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。いくつかの場合において、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）の残基は、対応する非ヒト残基で置換されている。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体でも取り込まれたＣＤＲまたはフレームワーク配列でも見られないが抗体の性能をさらに改良し最適化するために含まれる残基を含み得る。通常、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメイン（例えば、重鎖可変領域および軽鎖可変領域）の実質的に全てを含み、この可変領域において、ＣＤＲ領域の全てまたは実質的に全ては、非ヒト免疫グロブリンのＣＤＲ領域に対応し、ＦＲ領域の全てまたは実質的に全ては、ヒト免疫グロブリンのコンセンサス配列のＦＲ領域である。最適には、ヒト化抗体はまた、典型的にはヒト免疫グロブリンのものである、免疫グロブリンの定常領域または定常ドメイン（Ｆｃ）の少なくとも一部を含んでもよい。抗体は、ＷＯ９９／５８５７２に記載されているように修飾されたＦｃ領域を有し得る。他の形態のヒト化抗体は、元の抗体に対して改変された１つまたは複数のＣＤＲ（１個、２個、３個、４個、５個、６個）を有し、このＣＤＲはまた、元の抗体から得られる１つまたは複数のＣＤＲ「に由来する」１つまたは複数のＣＤＲとも呼ばれる。
【００３８】
本明細書において用いられる場合、「ヒト抗体」は、ヒトにより産生される抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体、および／または当技術分野において知られているかもしくは本明細書において開示されているヒト抗体を作製するための何らかの技術を用いて作製されている抗体を意味する。ヒト抗体のこの定義には、少なくとも１つのヒト重鎖ポリペプチドまたは少なくとも１つのヒト軽鎖ポリペプチドを含む抗体が含まれる。１つのこのような例は、マウス軽鎖ポリペプチドおよびヒト重鎖ポリペプチドを含む抗体である。ヒト抗体は、当技術分野において知られている様々な技術を用いて産生することができる。１つの実施形態において、ヒト抗体は、ヒト抗体を発現するファージライブラリーから選択される（Ｖａｕｇｈａｎら、１９９６、Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１４：３０９〜３１４、Ｓｈｅｅｔｓら、１９９８、ＰＮＡＳ（ＵＳＡ）９５：６１５７〜６１６２、ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＷｉｎｔｅｒ、１９９１、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２７：３８１、Ｍａｒｋｓら、１９９１、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２２：５８１）。ヒト抗体はまた、ヒト免疫グロブリン遺伝子座をトランスジェニック動物、例えば、内因性の免疫グロブリン遺伝子が部分的にまたは完全に不活性化されているマウスに導入することにより作製することができる。このアプローチは、米国特許第５，５４５，８０７号、米国特許第５，５４５，８０６号、米国特許第５，５６９，８２５号、米国特許第５，６２５，１２６号、米国特許第５，６３３，４２５号、および米国特許第５，６６１，０１６号に記載されている。あるいは、ヒト抗体は、標的抗原に対する抗体を産生するヒトＢリンパ球を不死化することにより調製することができる（このようなＢリンパ球は、個体から回収することができるか、または、インビトロで免疫化されているものであり得る）。例えば、Ｃｏｌｅら、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ、Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ、ｐ．７７、１９８５、Ｂｏｅｒｎｅｒら、１９９１、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４７（１）：８６〜９５、および米国特許第５，７５０，３７３号を参照されたい。
【００３９】
本明細書において用いられる場合、「カルシトニン遺伝子関連ペプチド」および「ＣＧＲＰ」という用語は、任意の形態のカルシトニン遺伝子関連ペプチド、およびＣＧＲＰの活性の少なくとも一部を維持しているその変異体を言う。例えば、ＣＧＲＰは、α−ＣＧＲＰまたはβ−ＣＧＲＰであり得る。本明細書において用いられる場合、ＣＧＲＰには、全ての哺乳動物種、例えば、ヒト、イヌ科、ネコ科、ウマ科、およびウシ科の天然のＣＧＲＰ配列が含まれる。
【００４０】
本明細書において用いられる場合、「抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体」（ほぼ同じ意味で「抗ＣＧＲＰ抗体」とも呼ばれる）は、ＣＧＲＰに結合し得、かつＣＧＲＰの生物学的活性、および／またはＣＧＲＰシグナル伝達により仲介される（１つもしくは複数の）下流の経路を阻害する抗体を言う。抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、受容体結合および／またはＣＧＲＰに対する細胞応答の誘出などの、ＣＧＲＰシグナル伝達により仲介される下流の経路を含む、ＣＧＲＰの生物学的活性を（場合によっては顕著に）遮断するか、それに拮抗するか、抑制するか、または低減させる抗体を包含する。本発明の目的では、「抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体」という用語が、全てのこれまでに同定された用語と、表題と、ＣＧＲＰ自体、ＣＧＲＰの生物学的活性（限定はしないが、任意の態様の内臓痛を仲介するその能力を含む）、または生物学的活性の結果を任意の有意義な程度で実質的に取り消すか、低減させるか、または中和する機能的状態および特徴とを包含することが明確に理解されよう。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体はＣＧＲＰに結合し、ＣＧＲＰがＣＧＲＰ受容体に結合することを防ぐ。他の実施形態において、抗ＣＧＲＰ抗体はＣＧＲＰに結合し、ＣＧＲＰ受容体の活性化を防ぐ。抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体の例が本明細書において提供される。
【００４１】
本明細書において用いられる場合、「Ｇ１」および「抗体Ｇ１」という用語は、寄託番号ＡＴＣＣ−ＰＴＡ−６８６７およびＡＴＣＣ−ＰＴＡ−６８６６を有する発現ベクターにより産生される抗体を言うためにほぼ同じ意味で用いられる。重鎖および軽鎖の可変領域のアミノ酸配列は、配列番号１および２に示される。抗体Ｇ１のＣＤＲ部分（Ｃｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲおよびＫａｂａｔ  ＣＤＲを含む）は、ＷＯ２００７／０５４８０９の図５に図示されており、前記文献の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。重鎖および軽鎖の可変領域をコードするポリヌクレオチドは、配列番号９および１０に示される。抗体Ｇ１の特徴付けは、ＷＯ２００７／０５４８０９の実施例において記載されている。
【００４２】
本明細書において用いられる場合、「Ｇ２」および「抗体Ｇ２」という用語は、Ｗｏｎｇ  ＨＣら、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  １２：９３〜１０６、１９９３に記載されている抗ラットＣＧＲＰマウスモノクローナル抗体を言うためにほぼ同じ意味で用いられる。重鎖および軽鎖の可変領域のアミノ酸配列は、配列番号１９および２０に示される。重鎖および軽鎖の可変領域をコードするポリヌクレオチドは、配列番号２７および２８に示される。抗体Ｇ２のＣＤＲ部分は、配列番号２１から２６において提供される。
【００４３】
「ポリペプチド」、「オリゴペプチド」、「ペプチド」、および「タンパク質」という用語は、任意の長さの、好ましくは比較的短い（例えば、１０〜１００アミノ酸）のアミノ酸鎖を言うために本明細書においてほぼ同じ意味で用いられる。この鎖は直鎖状または分枝鎖状であり得、この鎖は修飾アミノ酸を含み得、かつ／または非アミノ酸によって中断され得る。この用語はまた、天然にまたは中断により修飾されているアミノ酸鎖を包含し、この修飾は、例えば、ジスルフィド結合の形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、ホスホリル化、または任意の他の操作もしくは修飾、例えば標識構成要素との結合である。また、定義には、例えば、アミノ酸の１つまたは複数の類似体（例えば、非天然アミノ酸などを含む）および当技術分野において知られている他の修飾を含有するポリペプチドも含まれる。ポリペプチドが一本鎖または結び付いた鎖として生じ得ることが理解される。
【００４４】
当技術分野において知られているように、本明細書においてほぼ同じ意味で用いられる「ポリヌクレオチド」または「核酸」は、任意の長さのヌクレオチド鎖を言い、ＤＮＡおよびＲＮＡを含む。ヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、修飾ヌクレオチドもしくは修飾塩基、および／またはその類似体、またはＤＮＡもしくはＲＮＡポリメラーゼにより鎖内に組み込まれ得る任意の基質であり得る。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチドおよびその類似体などの修飾ヌクレオチドを含み得る。ヌクレオチド構造に対する修飾は、存在する場合には、鎖の会合の前または後に付与され得る。ヌクレオチドの配列は、非ヌクレオチド構成要素によって中断され得る。ポリヌクレオチドは、標識構成要素との結合などにより、重合の後にさらに修飾され得る。他のタイプの修飾には、例えば、「キャップ」と、天然に生じるヌクレオチドの１つまたは複数を類似体で置換することと、ヌクレオチド間の修飾、例えば非荷電性の結合（例えば、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホアミデート、カルバメートなど）および荷電性の結合（例えば、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエートなど）での修飾、例えばタンパク質（例えば、ヌクレアーゼ、毒素、抗体、シグナルペプチド、ポリ−Ｌ−リジンなど）などの釣り下がり部分を含有する修飾、挿入剤（例えば、アクリジン、プソラレンなど）での修飾、キレート剤（例えば、金属、放射性金属、ホウ素、酸化金属など）を含有する修飾、アルキル化剤を含有する修飾、修飾された結合（例えば、αアノマー核酸など）での修飾と、修飾されていない形態の（１つまたは複数の）ポリヌクレオチドとが含まれる。さらに、糖内に通常存在する任意のヒドロキシル基は、例えばホスホン酸基、リン酸基により置換され得るか、標準的な保護基により保護され得るか、もしくは、さらなるヌクレオチドへのさらなる結合を準備するために活性化され得るか、または、固体担体に結合し得る。５’および３’末端のＯＨは、１から２０個の炭素原子からなるアミンまたは有機キャップ基部分でホスホリル化または置換することができる。他のヒドロキシルはまた、標準的な保護基に誘導体化することができる。ポリヌクレオチドはまた、例えば２’−Ｏ−メチル−リボース、２’−Ｏ−アリル−リボース、２’−フルオロ−リボース、または２’−アジド−リボース、炭素環式糖類似体、α−またはβ−アノマー糖、アラビノース、キシロース、またはリキソースなどのエピマー糖、ピラノース糖、フラノース糖、セドヘプツロース、非環式類似体、およびメチルリボシドなどの脱塩基ヌクレオシド類似体などを含む、当技術分野において一般的に知られているリボース糖またはデオキシリボース糖の類似形体を含有し得る。１つまたは複数のホスホジエステル結合は、代替的な結合基によって置き換えることができる。これらの代替的な結合基には、限定はしないが、リン酸がＰ（Ｏ）Ｓ（「チオエート」）、Ｐ（Ｓ）Ｓ（「ジチオエート」）、（Ｏ）ＮＲ２（「アミデート」）、Ｐ（Ｏ）Ｒ、Ｐ（Ｏ）ＯＲ’、ＣＯ、またはＣＨ２（「ホルムアセタール」）（これらにおいて、それぞれのＲまたはＲ’は独立して、Ｈであるか、または置換されているかもしくは置換されていないアルキル（１〜２０Ｃ）であり、これらのアルキルは、エーテル（−Ｏ−）結合、アリール、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、もしくはアラルキルを含有していてもよい）によって置き換えられる実施形態が含まれる。ポリヌクレオチドにおける全ての結合が同一である必要はない。これまでの記載は、ＲＮＡおよびＤＮＡを含む、本明細書において参照される全てのポリヌクレオチドに適用される。
【００４５】
抗体の「可変領域」は、単独の、または組み合わされた、抗体軽鎖の可変領域または抗体重鎖の可変領域を言う。重鎖および軽鎖の可変領域はそれぞれ、超可変領域としても知られる3つの相補性決定領域（CDR）によって連結されている、4つのフレームワーク（FR）から成る。それぞれの鎖におけるＣＤＲは、ＦＲによって非常に接近して共に固定されており、他の鎖のＣＤＲと共に、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する。ＣＤＲを決定するために、少なくとも２つの技術、すなわち、（１）種間の配列多様性に基づいたアプローチ（すなわち、Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、（５ｔｈ  ｅｄ．、１９９１、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ  ＭＤ））、および（２）抗原抗体複合体の結晶学的研究に基づいたアプローチ（Ａｌ−ｌａｚｉｋａｎｉら、（１９９７）Ｊ．Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．２７３：９２７〜９４８））が存在する。本明細書において用いられる場合、ＣＤＲは、いずれかのアプローチまたは両方のアプローチの組み合わせによって規定されるＣＤＲを言い得る。
【００４６】
抗体の「定常領域」は、単独の、または組み合わされた、抗体軽鎖の定常領域または抗体重鎖の定常領域を言う。
【００４７】
本明細書において用いられる場合、抗体の「免疫特異的」結合は、抗体の抗原結合部位と、その抗体によって認識される特異的抗原との間で生じる、抗原特異的な結合相互作用を言う（すなわち、抗体は、ＥＬＩＳＡまたは他の免疫アッセイにおいてタンパク質と反応し、非関連タンパク質とは検出可能に反応しない）。
【００４８】
抗体またはポリペプチドに「選択的に結合する」または「特異的に結合する」（本明細書においてほぼ同じ意味で用いられる）エピトープは、当技術分野において良く理解されている用語であり、このような特異的または選択的な結合を決定する方法もまた、当技術分野において周知である。分子は、別の細胞または物質とよりも、特定の細胞もしくは物質と、頻繁に、より迅速に、優れた継続時間で、かつ／または優れた親和性で反応するかまたは結び付く場合、「特異的な結合」または「選択的な結合」を示すと言われる。抗体は、他の物質に対する結合よりも優れた親和性で、優れた結合力で、より容易に、かつ／または優れた継続時間で結合する場合、標的に「特異的に結合」または「選択的に結合」する。例えば、ＣＧＲＰエピトープに特異的または選択的に結合する抗体は、他のＣＧＲＰエピトープまたは非ＣＧＲＴエピトープに結合する場合よりも優れた親和性で、優れた結合力で、より容易に、かつ／または優れた継続時間でこのエピトープに結合する抗体である。この定義を読むことによって、例えば、第１の標的に特異的または選択的に結合する抗体（または部分もしくはエピトープ）が、第２の標的に特異的にまたは選択的に結合し得るかまたは結合し得ないことも理解される。したがって、「特異的な結合」または「選択的な結合」は、排他的な結合を（含み得るが）必ずしも必要とするわけではない。通常、結合に対する言及は選択的な結合を意味するが、必ずしもそうであるわけではない。
【００４９】
本明細書において用いられる場合、「実質的に純粋な」は、少なくとも５０％純粋な（すなわち汚染していない）、より好ましくは少なくとも９０％純粋な、より好ましくは少なくとも９５％純粋な、より好ましくは少なくとも９８％純粋な、より好ましくは少なくとも９９％純粋な物質を言う。
【００５０】
「宿主細胞」は、ポリヌクレオチドインサートを組み込むための（１つまたは複数の）ベクターのレシピエントであり得るかまたはレシピエントとなっている個別の細胞または細胞培養物を含む。宿主細胞は、単一の宿主細胞の後代を含み、その後代は、自然な、偶発的な、または意図的な突然変異のため、元の親細胞に（形態またはゲノムＤＮＡの相補体において）完全に同一である必要はない可能性がある。宿主細胞は、本発明の（１つまたは複数の）ポリヌクレオチドでトランスフェクトされた細胞を含む。
【００５１】
「Ｆｃ領域」という用語は、免疫グロブリンの重鎖のＣ末端領域を規定するために用いられる。「Ｆｃ領域」は、天然配列のＦｃ領域または変異Ｆｃ領域であり得る。免疫グロブリンの重鎖のＦｃ領域の境界は変化し得るが、ヒトＩｇＧの重鎖のＦｃ領域は通常、Ｃｙｓ２２６位にあるアミノ酸残基またはＰｒｏ２３０から、重鎖のカルボキシル末端までのストレッチと定義される。Ｆｃ領域における残基の番号付けは、ＫａｂａｔにおけるＥＵインデックスのものである。Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．、１９９１。免疫グロブリンのＦｃ領域は通常、２つの定常ドメインＣＨ２およびＣＨ３を含む。
【００５２】
本明細書において用いられる場合、「Ｆｃ受容体」および「ＦｃＲ」は、抗体のＦｃ領域に結合する受容体を説明する。好ましいＦｃＲは、天然配列のヒトＦｃＲである。さらに、好ましいＦｃＲは、ＩｇＧ抗体に結合するもの（γ受容体）であり、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、およびＦｃγＲＩＩＩサブクラスの受容体を含み、これには、これらの受容体の対立遺伝子変異体および選択的スプライシングをされた形態が含まれる。ＦｃγＲＩＩ受容体には、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）およびＦｃγＲＩＩＢ（「阻害受容体」）が含まれ、これらは、その細胞質ドメインが主に異なる類似のアミノ酸配列を有する。ＦｃＲは、ＲａｖｅｔｃｈおよびＫｉｎｅｔ、１９９１、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、９：４５７〜９２、Ｃａｐｅｌら、１９９４、Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ、４：２５〜３４、およびｄｅ  Ｈａａｓら、１９９５、Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．、１２６：３３０〜４１において概説されている。「ＦｃＲ」にはまた、胎児への母親のＩｇＧの移動を生じさせる新生児受容体であるＦｃＲｎも含まれる（Ｇｕｙｅｒら、１９７６、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１１７：５８７、およびＫｉｍら、１９９４、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２４：２４９）。
【００５３】
「補体依存性細胞傷害性」および「ＣＤＣ」は、補体の存在下で標的を溶解することを言う。補体の活性化経路は、補体系の第１の構成要素（Ｃ１ｑ）が、同種抗原と複合体化した分子（例えば抗体）に結合することにより開始される。補対の活性化を判定するために、例えばＧａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ、２０２：１６３（１９９６）に記載されているようなＣＤＣアッセイを実施することができる。
【００５４】
「機能的Ｆｃ領域」は、天然の配列のＦｃ領域の少なくとも１つのエフェクター機能を有する。典型的な「エフェクター機能」には、Ｃ１ｑの結合、補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）、Ｆｃ受容体の結合、抗体依存性細胞介在性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）、貪食作用、細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体、ＢＣＲ）の下方調節などが含まれる。このようなエフェクター機能には通常、Ｆｃ領域が結合ドメイン（例えば、抗体の可変ドメイン）と結合していることが必要であり、前記機能は、このような抗体のエフェクター機能を評価するための、当技術分野において知られている様々なアッセイを用いて判定することができる。
【００５５】
「天然の配列のＦｃ領域」は、自然に見られるＦｃ領域のアミノ酸配列に同一のアミノ酸配列を含む。「変異Ｆｃ領域」は、少なくとも１つのアミノ酸修飾によって天然の配列のＦｃ領域のアミノ酸配列とは異なるが天然の配列のＦｃ領域の少なくとも１つのエフェクター機能を保持しているアミノ酸配列を含む。好ましくは、変異Ｆｃ領域は、天然の配列のＦｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域と比較して少なくとも１つのアミノ酸置換を有し、例えば、天然の配列のＦｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域において約１個から約１０個のアミノ酸置換、好ましくは約１個から約５個のアミノ酸置換を有する。本明細書における変異Ｆｃ領域は、好ましくは、天然の配列のＦｃ領域および／または親ポリペプチドのＦｃ領域と少なくとも約８０％の配列同一性を有し、最も好ましくはそれと少なくとも約９０％の配列同一性を有し、より好ましくは、それと少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％の配列同一性を有する。
【００５６】
本明細書において用いられる場合、「抗体依存性細胞介在性細胞傷害性」および「ＡＤＣＣ」は、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）を発現する非特異的な細胞傷害性細胞（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好中球、およびマクロファージ）が、標的細胞に結合した抗体を認識し、その後その標的細胞の溶解を生じさせる、細胞介在性の反応を言う。目的の分子のＡＤＣＣ活性は、米国特許第５，５００，３６２号または米国特許第５，８２１，３３７号に記載されているようなインビトロでのＡＤＣＣアッセイを用いて判定することができる。このようなアッセイに有用なエフェクター細胞には、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）およびＮＫ細胞が含まれる。あるいは、またはさらに、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、例えばＣｌｙｎｅｓら、１９９８、ＰＮＡＳ（ＵＳＡ）、９５：６５２〜６５６において開示されているような動物モデルにおいて、インビボで判定することができる。
【００５７】
本明細書において用いられる場合、「治療」は、有益なまたは所望の臨床結果を得るためのアプローチである。本発明の目的では、有益なまたは所望の臨床結果には、限定はしないが、重症度を低下させることを含む、内臓痛の任意の態様における改良、痛みの強さおよび他の関連する症状の軽減、再発の頻度の低減、内臓痛に罹患している人の生活の質の向上、ならびに内臓痛を治療するために必要な他の投薬の用量の減少の１つまたは複数が含まれる。他の関連する症状には、限定はしないが、けいれん、うずき、拡散痛、圧力、膨満感、締め付け感、吐き気、嘔吐、ならびに光、音、および／または動きに対する敏感さが含まれる。
【００５８】
内臓痛の「発症の低減」は、重症度（例えば鎮痛剤（例えば、オキシコドン、モルヒネ、ブトルファノール、ナルブフィンなど）を含む、この症状に通常用いられる他の薬剤および／もしくは治療法に対する要求および／もしくはそれらの量（例えばそれに対する曝露）の低減を含み得る）、継続時間、ならびに／または頻度の低減のいずれかを意味する。当業者に理解されているように、個体は、治療に対する応答に関して多様であり得、したがって、例えば「個体における内臓痛の発症を低減させる方法」は、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体の投与がその特定の個体における発症のこのような低減を生じさせると考えられるという合理的な予想に基づいた、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体の投与を反映する。
【００５９】
内臓痛および／または内臓痛に関連する症状を「改善する」は、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体を投与していないものと比較して、内臓痛の１つもしくは複数の症状および／または内臓痛に関連する症状が減少または向上することを意味する。「改善」にはまた、症状の継続時間の短縮または低減も含まれる。
【００６０】
内臓痛および／または内臓痛に関連する症状を「緩和する」は、本発明に従った抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体で治療した個体または個体集団において内臓痛の１つまたは複数の望ましくない臨床的兆候の程度が減少することを意味する。
【００６１】
本明細書において用いられる場合、「内臓痛を制御する」は、治療前のレベルと比較して、内臓痛の１つもしくは複数の症状の重症度もしくは継続時間または内臓痛の頻度を維持するかまたは低減させることを言う。例えば、内臓痛の継続時間もしくは重症度または内臓痛の頻度は、治療前のレベルと比較して、個体において少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、または７０％のいずれかで低減させることができる。
【００６２】
本明細書において用いられる場合、内臓痛の進展を「遅延させる」は、内臓痛の進行を先延ばしにすること、妨げること、遅くすること、遅らせること、安定化させること、および／または先送りにすることを意味する。この遅延は、治療される疾患および／または個体の前歴に応じて、様々な長さの時間のものであり得る。当業者には明らかであるように、十分なまたは顕著な遅延は、実際、個体が内臓痛を進展させないという点で、予防も包含し得る。症状の進展を「遅延させる」方法は、その方法を用いない場合と比較して、所与の時間枠で症状の進展の可能性を低減させる、および／または所与の時間枠で症状の程度を低減させる方法である。このような比較は、典型的には、治療された対象と治療されていない対象との間の統計上有意な差を示すために十分な対象数を用いた臨床研究に基づくものである。
【００６３】
内臓痛の「進展」または「進行」は、障害の初期兆候および／またはその後の進行を意味する。内臓痛の進展は検出可能であり得、当技術分野において周知の標準的な臨床技術を用いて判定される。しかし、進展はまた、検出不可能な進行についても言う。本発明の目的では、進展または進行は、症状の生物学的経路を言う。「進展」には、発生、再発、および発病が含まれる。本明細書において用いられる場合、内臓痛の「発病」または「発生」には、最初の発病および／または再発が含まれる。
【００６４】
「生物学的試料」は、個体から得られる様々な試料タイプを包含し、診断アッセイまたは観察アッセイにおいて用いることができる。この定義は、生物由来の血液および他の液体試料、生検標本または組織培養物またはそれに由来する細胞などの固体組織試料、およびその後代を包含する。この定義にはまた、試薬での処理、可溶化、またはタンパク質もしくはポリヌクレオチドなどの特定の構成要素の濃縮、または切片化の目的のための半固体もしくは固体マトリクスへの包埋などによって、それらの調達後に何らかの方法で操作されているサンプルも含まれる。「生物学的試料」という用語は臨床試料を包含し、また、培養中の細胞、細胞上清、細胞溶解物、血清、血漿、生体液、および組織試料も含む。
【００６５】
本明細書において用いられる場合、「有効用量」または「有効量」の薬剤、化合物、または医薬組成物は、有益なまたは所望の結果をもたらすために十分な量である。予防用途では、有益なまたは所望の結果には、リスクの排除もしくは低減、重症度の低下、または、疾患、その合併症、および疾患の進展の間に見られる中間的な病理学的表現型の、生化学的、組織学的、および／もしくは行動的症状を含む疾患の発病の遅延などの結果が含まれる。治療的用途では、有益なまたは所望の結果には、内臓痛の発作の痛みの強度、継続時間、もしくは頻度の低減、ならびに、その合併症および痛みの進展の間に見られる中間的な病理学的表現型を含む、内臓痛により生じる１つもしくは複数の（生化学的、組織学的、および／もしくは行動的な）症状の減少、痛みを有する人の生活の質の向上、痛みを治療するために必要な他の投薬の用量の減少、別の投薬の効果の増強、ならびに／または患者の痛みの進行の遅延などの臨床結果が含まれる。有効用量は、１つまたは複数の投与で投与することができる。本発明の目的では、有効用量の薬剤、化合物、または医薬組成物は、直接的または間接的に予防的または治療的処置を達成するために十分な量である。臨床的な状況において理解されるように、有効用量の薬剤、化合物、または医薬組成物は、別の薬剤、化合物、または医薬組成物と組み合わせて行ってもよいし、そうでなくてもよい。したがって、「有効用量」は、１つまたは複数の治療用作用物質を投与する状況において考慮され得、単一の作用物質は、１つまたは複数の他の作用物質と組み合わせて所望の結果が得られ得るかまたは得られる場合には、有効量で提供されると考えられ得る。
【００６６】
「個体」または「対象」は哺乳動物であり、より好ましくはヒトである。哺乳動物にはまた、限定はしないが、家畜、運動用の動物、ペット、霊長類、馬、犬、猫、マウス、およびラットが含まれる。
【００６７】
本明細書において用いられる場合、「ベクター」は、宿主細胞において１つまたは複数の目的の遺伝子または配列を運び得る、好ましくは発現し得る構築物を意味する。ベクターの例には、限定はしないが、ウイルスベクター、裸ＤＮＡまたはＲＮＡ発現ベクター、プラスミドベクター、コスミドベクター、またはファージベクター、カチオン濃縮剤に関連するＤＮＡまたはＲＮＡ発現ベクター、リポソームにカプセル化されたＤＮＡまたはＲＮＡ発現ベクター、および産生細胞などの特定の真核細胞が含まれる。
【００６８】
本明細書において用いられる場合、「発現制御配列」は、核酸の転写を指示する核酸配列を意味する。発現制御配列は、構成的もしくは誘導性プロモーターなどのプロモーター、またはエンハンサーであり得る。発現制御配列は、転写される核酸配列に作動可能に連結する。
【００６９】
本明細書において用いられる場合、「薬学的に許容できる担体」または「薬学的に許容できる賦形剤」には、活性成分と組み合わせた場合に、その成分により生物学的活性が保持されることを可能にし、かつ対象の免疫系と反応しない、任意の物質が含まれる。例には、限定はしないが、リン酸緩衝溶液、水、油／水エマルジョンなどのエマルジョン、および様々なタイプの湿潤剤などの、標準的な薬学的担体のいずれかが含まれる。エアロゾルまたは非経口投与のための好ましい希釈剤は、リン酸緩衝溶液または標準的な（０．９％）生理食塩水である。このような担体を含む組成物は、周知の従来の方法により製剤される（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１８ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ、Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ編、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ、１９９０、およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ、Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ２０ｔｈ  Ｅｄ．Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、２０００を参照されたい）。
【００７０】
「ｋｏｎ」という用語は、本明細書において用いられる場合、抗原に対する抗体の結び付きについての速度定数を言うことを意図したものである。
【００７１】
「ｋｏｆｆ」という用語は、本明細書において用いられる場合、抗体／抗原複合体からの抗体の解離についての速度定数を言うことを意図したものである。
【００７２】
「ＫＤ」という用語は、本明細書において用いられる場合、抗体−抗原相互作用の平衡解離定数を言うことを意図したものである。
【００７３】
内臓痛を予防または治療するための方法
本明細書において、内臓痛および／または内臓痛の症状を予防および／または治療するための方法と、個体における内臓痛および／または内臓痛の１つもしくは複数の症状を予防および／または治療するための医薬品が開示される。
【００７４】
いくつかの実施形態において、本発明は、有効量の抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体を個体に末梢投与することを含む、個体における内臓痛および／または内臓痛の１つもしくは複数の症状を予防および／または治療する方法を提供する。
【００７５】
他の実施形態において、本発明は、有効量の抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体を個体に末梢投与することを含む、個体における内臓痛および／または内臓痛の１つもしくは複数の症状を改善するか、制御するか、その発症を低減させるか、またはその進展もしくは進行を遅延させる方法を提供する。
【００７６】
いくつかの実施形態において、本発明は、内臓痛および／または内臓痛の１つもしくは複数の症状を予防および／または治療するための医薬品を製造するための抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体の使用を提供し、ここで、医薬品は末梢投与のために調製されるか、または医薬品は末梢に投与される。
【００７７】
他の実施形態において、本発明は、内臓痛および／または内臓痛の症状の予防および／または治療において用いるための抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体を提供し、ここで、抗体は末梢投与のために調製されるか、または抗体は末梢に投与される。
【００７８】
他の実施形態において、本発明は、内臓痛および／または内臓痛の症状を改善するか、制御するか、その発症を低減させるか、またはその進展もしくは進行を遅延させるための医薬品を製造するための抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体の使用を提供し、ここで、医薬品は末梢投与のために調製されるか、または医薬品は末梢に投与される。
【００７９】
いくつかの実施形態において、個体は好ましくは哺乳動物、例えば、馬、猫、もしくは犬などのコンパニオンアニマル、または羊、牛、もしくは豚などの家畜である。最も好ましくは、哺乳動物はヒトである。
【００８０】
いくつかの実施形態において、医薬品および／または抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、経口、舌下、口腔内、局部的、直腸内、吸入を介した、経皮、皮下、静脈内、動脈内、筋肉内、心臓内、骨内、皮内、腹腔内、経粘膜的、膣内、硝子体内、関節内、関節周辺、中枢、局所的、または皮膚上投与のために調製される。
【００８１】
いくつかの実施形態において、医薬品は、内臓痛の進展の前および／または間および／または後の末梢投与のために調製される。
【００８２】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、投与されると末梢で作用する。１つの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、中枢に、脊髄に、または髄腔内には投与されない。
【００８３】
いくつかの実施形態において、内臓痛は、例えば機能性腸障害（ＦＢＤ）または炎症性腸疾患（ＩＢＤ）などの疾患に関連し、かつ／または前記疾患により生じる。内臓痛がＦＢＤに関連する実施形態において、ＦＢＤは、例えば、限定はしないが、胃食道逆流、消化不良、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、または機能性腹痛症候群（ＦＡＰＳ）であり得る。最も好ましくは、この疾患はＩＢＳである。内臓痛がＩＢＤに関連する実施形態において、ＩＢＤは、例えば、限定はしないが、クローン病、回腸炎、または潰瘍性大腸炎であり得る。他のタイプの内臓痛には、例えば、癌、腎疝痛、月経困難症、間質性膀胱炎（ＩＣ）を含む膀胱炎、腸閉塞に関連する手術、月経期間、陣痛、閉経、骨折、憩室炎、腹膜炎、心膜炎、肝炎、虫垂炎、大腸炎、胆嚢炎、子宮内膜症、慢性および／または急性膵炎、心筋梗塞、腎臓痛、胸膜痛、前立腺炎、骨盤痛、ならびに臓器への外傷に関連する痛みが含まれる。
【００８４】
いくつかの実施形態において、本発明の方法および使用は、ＦＢＤ、ＩＢＤ、またはＩＣを有する個体における内臓痛および／または内臓痛に関連する１つもしくは複数の症状を改善するためのものであり得る。
【００８５】
内臓痛の診断または判定は、当技術分野において良く確立されている。判定は、痛みの様々な尺度を用いた痛みについての患者の特徴付けなどの、当技術分野において知られている測定に基づいて実施され得る。例えば、Ｋａｔｚら、Ｓｕｒｇ  Ｃｌｉｎ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍ．、１９９９、７９（２）：２３１〜５２、Ｃａｒａｃｅｎｉら、Ｊ  Ｐａｉｎ  Ｓｙｍｐｔｏｍ  Ｍａｎａｇｅ、２００２、２３（３）：２３９〜５５を参照されたい。例えば、言語記述尺度（ＶＤＳ）、視覚的アナログ尺度（ＶＡＳ）、プリンスヘンリー病院の痛み尺度（ＰＨＨＰＳ）、数値化尺度（ＮＲＳ）、および顔の痛み尺度、およびその変形を、痛みを判定するため、および治療に対する応答を評価するために採用することができる。また、機能性腸障害の重症度指数（ＦＢＤＳＩ）（Ｄｒｏｓｓｍａｎら、１９９５、Ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ  ａｎｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ４０（５）：９８６〜９９５）およびＩＢＳの重症度スコアリング系（Ｆｒａｎｃｉｓら、１９９７、Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ．、１１（２）：３９５〜４０２）などの、疾患の状態を測定するために一般に用いられる尺度が存在する。このような尺度は、治療に対する応答を評価するために採用することができる。
【００８６】
いくつかの実施形態において、ＦＢＤの痛みおよび／またはＦＢＤの痛みの症状の改善、制御、その発症の低減、またはその進展もしくは進行の遅延は、ＦＢＤＳＩ、ＶＤＳ、ＶＡＳ、ＰＨＨＰＳ、ＮＲＳ、および顔の痛み尺度の１つまたは複数によって測定される。別の実施形態において、ＩＢＳの痛みおよび／またはＩＢＳの痛みの症状の改善、制御、その発症の低減、またはその進展もしくは進行の遅延は、ＩＢＳの重症度スコアリング系、ＶＤＳ、ＶＡＳ、ＰＨＨＰＳ、ＮＲＳ、および顔の痛み尺度の１つまたは複数によって測定される。
【００８７】
いくつかの実施形態において、ＩＣの痛みおよび／またはＩＣの痛みの症状の改善、制御、その発症の低減、または進展もしくは進行の遅延は、ＶＤＳ、ＶＡＳ、ＰＨＨＰＳ、ＮＲＳ、および顔の痛み尺度の１つまたは複数によって測定される。
【００８８】
抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体はＣＧＲＰに結合する。好ましくは、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体はＣＧＲＰに結合し、ＣＧＲＰがＣＧＲＰ受容体に結合する能力を阻害する。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、ヒトおよび齧歯動物のＣＧＲＰの両方、好ましくはヒトおよびラットのＣＧＲＰに結合する。より好ましくは、抗体はヒトＣＧＲＰに結合する。好ましい実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、ヒトα−ＣＧＲＰに結合するか、またはヒトα−ＣＧＲＰおよび／もしくはβ−ＣＧＲＰに結合する。最も好ましくは、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、（ａ）ＣＧＲＰに結合すること、（ｂ）ＣＧＲＰが（１つまたは複数の）その受容体に結合することを遮断すること、（ｃ）ｃＡＭＰの活性化を含むＣＧＲＰ受容体の活性化を遮断するかまたは低下させること、（ｄ）受容体結合および／またはＣＧＲＰに対する細胞応答の誘出などの、ＣＧＲＰシグナル伝達により仲介される下流の経路を含む、ＣＧＲＰの生物学的活性を阻害するか、遮断するか、抑制するか、または低減させること、（ｅ）内臓痛の任意の態様を予防、改善、または治療すること、（ｆ）ＣＧＲＰのクリアランスを増大させること、ならびに（ｇ）ＣＧＲＰの合成、産生、または放出を阻害する（低減させる）ことという機能的特徴のいずれか１つまたは複数を示す抗体である。
【００８９】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、ＣＧＲＰの断片に結合し、より好ましくは、完全長ＣＧＲＰと同様にＣＧＲＰの断片に結合する。好ましくは、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、ＣＧＲＰの断片のＣ末端領域または断片に結合する。ＣＧＲＰのＣ末端領域または断片は、好ましくは、ＣＧＲＰのアミノ酸１９〜３７または２５〜３７または２９〜３７を、あるいはアミノ酸３０〜３７を、さらにあるいは、アミノ酸３１〜３７を含む。さらなる実施形態において、ＣＧＲＰのＣ末端領域または断片は、好ましくはＣＧＲＰのアミノ酸３２〜３７を、最も好ましくはアミノ酸３３〜３７を含む。好ましくは、ＣＧＲＰはα−ＣＧＲＰまたはβ−ＣＧＲＰであり、さらに好ましくは、ヒトまたは齧歯動物のものであり、さらに好ましくはヒトまたはラットのものであり、さらに好ましくはヒトのものであり、さらに好ましくはヒトα−ＣＧＲＰまたはβ−ＣＧＲＰであり、最も好ましくはヒトα−ＣＧＲＰである。
【００９０】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、アミノ酸配列ＧＳＫＡＦ（配列番号３９）に特異的に結合する。好ましくは、ＣＧＲＰの配列ＧＳＫＡＦ（配列番号３９）は、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体が結合するエピトープである。
【００９１】
いくつかの実施形態において、ＣＧＲＰのアミノ酸Ｇ３３からＦ３７により規定されるエピトープに特異的に結合する抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体が提供される。抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、アミノ酸配列ＧＳＫＡＦ（配列番号３９）により規定されるエピトープに特異的に結合し得る。いくつかの実施形態において、本発明は、本発明の様々な態様において規定される使用および方法におけるこのような抗体の使用を提供する。
【００９２】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、ＣＧＲＰ受容体の活性化を阻害または予防する。好ましくは、抗ＣＧＲＰ抗体は、約０．０００１（０．１ｎＭ）から約５００μＭのＩＣ５０を有する。いくつかの好ましい実施形態において、ＩＣ５０は、インビトロでの結合アッセイで測定すると、約０．０００１μＭから、約２５０μＭ、１００μＭ、５０μＭ、１０μＭ、１μＭ、５００ｎＭ、２５０ｎＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭ、２０ｎＭ、１５ｎＭ、１０ｎＭ、５ｎＭ、１ｎＭ、または０．５ｎＭのいずれかの間である。いくつかのさらに好ましい実施形態において、ＩＣ５０は、インビトロでの結合アッセイで測定すると、約５００ｐＭまたは約１００ｐＭまたは約５０ｐＭのいずれか未満である。さらにより好ましい実施形態において、ＩＣ５０は約１．２ｎＭまたは３１ｎＭである。
【００９３】
いくつかの実施形態において、用いられる抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、ＣＧＲＰの結合もしくはＣＧＲＰの断片に対する結合、またはＣＧＲＰの断片および完全長ＣＧＲＰに対する結合、好ましくはＣＧＲＰのＣ末端領域もしくは断片に対する結合について、本明細書において上記に記載した抗体と競合し得る。好ましい実施形態において、ＣＧＲＰのＣ末端領域または断片は、ＣＧＲＰのアミノ酸１９〜３７、２５〜３７、２９〜３７、３０〜３７、または３１〜３７を含む。さらなる実施形態において、ＣＧＲＰのＣ末端領域または断片は、好ましくは、ＣＧＲＰのアミノ酸３２〜３７を、最も好ましくは３３〜３７を含む。
【００９４】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、約０．００００１μＭ（０．０１ｎＭ）から約５００μＭの結合親和性（ＫＤ）で、ＣＧＲＰ、ＣＧＲＰの領域、またはＣＧＲＰの断片に結合する。いくつかの実施形態において、結合親和性（ＫＤ）は、インビトロでの結合アッセイで測定すると、約０．００００１μＭから、約２５０μＭ、１００μＭ、５０μＭ、１０μＭ、１μＭ、５００ｎＭ、２５０ｎＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭ、２０ｎＭ、１５ｎＭ、１０ｎＭ、５ｎＭ、１ｎＭ、０．５ｎＭ、１ｎＭ、０．０５ｎＭ、または０．０１ｎＭのいずれかの間である。いくつかの実施形態において、結合親和性（ＫＤ）は、インビトロでの結合アッセイで測定すると、約５００ｐＭまたは１００ｐＭ、５０ｐＭ、または１０ｐＭのいずれか未満である。さらにより好ましい実施形態において、結合親和性（ＫＤ）は、約０．０４ｎＭまたは１６ｎＭである。
【００９５】
本発明において用いられる抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆｃ、ＳｃＦｖなど）、キメラ抗体、二重特異性抗体、ヘテロ結合抗体、一本鎖（ＳｃＦｖ）抗体、その突然変異体、抗体部分（例えばドメイン抗体）を含む融合タンパク質、ヒト化抗体、ならびに、抗体のグリコシル化変異体、抗体のアミノ酸配列変異体、および共有結合により修飾された抗体を含む、所望の特異性の抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子の任意の他の修飾立体構造からなる群から選択され得る。抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、マウス、ラット、ヒト、または任意の他のものに由来したものであり得る（キメラ抗体またはヒト化抗体を含む）。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体はヒト化され得るが、より好ましくはヒトのものである。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は単離されている。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体はほぼ純粋である。抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体が抗体断片である場合、断片は好ましくは、元の抗体の機能的特徴、すなわち、上記の機能的特徴において記載されているＣＧＲＰ結合および／またはアンタゴニストの活性を保持している。
【００９６】
抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体の例は当技術分野において知られている。したがって、本発明の好ましい実施形態によれば、本発明において用いられる抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、好ましくは、一般に記載されているかもしくは（ｉ）ＷＯ２００７／０５４８０９、（ｉｉ）ＷＯ２００７／０７６３３６、（ｉｉｉ）Ｔａｎら、Ｃｌｉｎ．Ｓｃｉ．（Ｌｏｎｄ）．８９：５６５〜７３、１９９５、（ｉｖ）Ｓｉｇｍａ（Ｍｉｓｓｏｕｒｉ、ＵＳ）、製品番号Ｃ７１１３（ｃｌｏｎｅ  ＃４９０１）、（ｖ）Ｐｌｏｕｒｄｅら、Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  １４：１２２５〜１２２９、１９９３のいずれかにおいて具体的に記載されている抗ＣＧＲＰ抗体であるか、または、
（ａ）前記抗体の断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆｃ、ＳｃＦｖなど）、
（ｂ）前記抗体の軽鎖、
（ｃ）前記抗体の重鎖、
（ｄ）前記抗体の軽鎖および／もしくは重鎖の１つもしくは複数の可変領域、
（ｅ）前記抗体の１つもしくは複数のＣＤＲ（１個、２個、３個、４個、５個、もしくは６個のＣＤＲ）、
（ｆ）前記抗体の重鎖のＣＤＲ  Ｈ３、
（ｇ）前記抗体の軽鎖のＣＤＲ  Ｌ３、
（ｈ）前記抗体の軽鎖の３つのＣＤＲ、
（ｉ）前記抗体の重鎖の３つのＣＤＲ、
（ｊ）前記抗体の軽鎖の３つのＣＤＲおよび重鎖の３つのＣＤＲ、
（ｋ）（ａ）から（ｊ）のいずれか１つまたは複数
を含むか、もしくはこれからなるものである。
【００９７】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は抗体Ｇ２または抗体Ｇ１である。本発明の最も好ましい実施形態によれば、用いられる抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、ＰＣＴ特許出願の公開番号ＷＯ２００７／０５４８０９において具体的に記載されている抗ＣＧＲＰ抗体Ｇ１であるか、または、Ｇ１に機能的に等しい抗体も含む、すなわち、アミノ酸残基の保存的置換、または、それらの機能的特徴、例えばＣＧＲＰ結合もしくはアンタゴニスト活性に顕著に影響しないアミノ酸の１つもしくは複数の欠失もしくは付加を含む、ＷＯ２００７／０５４８０９の表６に示されているその変異体と、活性および／または結合が増強または低下した変異体とを含む。本明細書において用いられる場合、「Ｇ１」および「抗体Ｇ１」という用語は、出願ＷＯ２００７／０５４８０９において開示されている寄託番号ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−６８６７およびＡＴＣＣ  ＰＴＡ−６８６６を有する発現ベクターにより産生される抗体を言うためにほぼ同じ意味で用いられる。抗体Ｇ１の機能的特徴は、ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＩＢ２００９／０５０８４９およびＰＣＴ／ＩＢ２００９／０５０８５２において記載されており、これらは両方とも２００９年３月３日に出願されており、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００９８】
本発明のさらなる実施形態によれば、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、（ａ）抗体Ｇ１またはＷＯ２００７／０５４８０９の表６に示されているその変異体、（ｂ）抗体Ｇ１の断片もしくは領域またはＷＯ２００７／０５４８０９の表６に示されているその変異体、（ｃ）抗体Ｇ１の軽鎖またはＷＯ２００７／０５４８０９の表６に示されているその変異体、（ｄ）抗体Ｇ１の重鎖またはＷＯ２００７／０５４８０９の表６に示されているその変異体、（ｅ）抗体Ｇ１の軽鎖および／もしくは重鎖の１つもしくは複数の可変領域またはＷＯ２００７／０５４８０９の表６に示されているその変異体、（ｆ）抗体Ｇ１の１つもしくは複数のＣＤＲ（１個、２個、３個、４個、５個、もしくは６個のＣＤＲ）またはＷＯ２００７／０５４８０９の表６に示されているその変異体、（ｇ）抗体Ｇ１の重鎖のＣＤＲ  Ｈ３またはＷＯ２００７／０５４８０９の表６に示されているその変異体、（ｈ）抗体Ｇ１の軽鎖のＣＤＲ  Ｌ３またはＷＯ２００７／０５４８０９の表６に示されているその変異体、（ｉ）抗体Ｇ１の軽鎖の３つのＣＤＲまたはＷＯ２００７／０５４８０９の表６に示されているその変異体、（ｊ）抗体Ｇ１の重鎖の３つのＣＤＲまたはＷＯ２００７／０５４８０９の表６に示されているその変異体、（ｋ）抗体Ｇ１の軽鎖の３つのＣＤＲおよび／もしくは重鎖のＣＤＲまたはＷＯ２００７／０５４８０９の表６に示されているその変異体、ならびに（ｉ）（ｂ）から（ｋ）のいずれか１つを含む抗体から選択されるポリペプチドを含むか、またはこれからなる。本発明はまた、上記のいずれか１つまたは複数を含むポリペプチドも提供する。いくつかの実施形態において、少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、または６個のＣＤＲは、Ｇ１の少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、もしくは６個のＣＤＲまたはＷＯ２００７／０５４８０９の表６に示されているその変異体に少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である。ＣＤＲ領域の決定は、当業者の能力内に十分にある。いくつかの実施形態においてＣＤＲがＫａｂａｔ  ＣＤＲとＣｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲとの組み合わせであり得ることが理解される。いくつかの実施形態において、ＣＤＲはＫａｂａｔ  ＣＤＲである。他の実施形態において、ＣＤＲはＣｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲである。
【００９９】
抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、好ましくは、抗体Ｇ１の断片もしくは領域（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆｃ、ＳｃＦｖなど）、またはＷＯ２００７／０５４８０９の表６に示されているその変異体を含むか、またはこれからなる。好ましくは、前記断片または領域は、例えばＣＧＲＰ結合活性および／またはアンタゴニスト活性などの抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体の機能的特徴を有し、（ｉ）軽鎖、（ｉｉ）重鎖、（ｉｉｉ）軽鎖および／または重鎖の１つまたは複数の可変領域を含有する断片、ならびに（ｉｖ）抗体Ｇ１の軽鎖および／または重鎖の１つまたは複数のＣＤＲの１つまたは複数を含むか、またはこれからなる。
【０１００】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、特許出願ＷＯ２００７／０７６３３６の配列番号２８〜３２からなる群から選択される配列を有するペプチドを含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）および／または配列番号３４〜３８からなる群から選択される配列を有するペプチドを含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を含む。
【０１０１】
さらに好ましくは、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、特許出願ＷＯ２００７／０７６３３６の表１に示されている配列番号のＬＣＶＲポリペプチドを含み、さらに、特許出願ＷＯ２００７／０７６３３６の表１に示されている配列番号のＨＣＶＲポリペプチドを含む。
【０１０２】
本発明のさらなる実施形態によれば、用いられる抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、特許出願ＷＯ２００７／０７６３３６の配列番号８〜１３からなる群から選択される軽鎖ＣＤＲ（ＣＤＲＬ）および／または配列番号１４〜２２からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ（ＣＤＲＨ）を含む。
【０１０３】
出願ＷＯ２００７／０７６３３６の抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体を作製および単離する方法、ならびに前記抗体のＣＧＲＰ結合およびアンタゴニストの特徴付けを示すデータは、出願ＷＯ２００７／０７６３３６に記載されている。
【０１０４】
いくつかの実施形態において、本発明において用いるための抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、本明細書において示される配列番号１または配列番号１９にアミノ酸配列が少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％同一であるＶＨドメインを含む。
【０１０５】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、本明細書において示される配列番号２または配列番号２０にアミノ酸配列が少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％同一であるＶＬドメインを含む。
【０１０６】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、本明細書において示されるそれぞれ配列番号１および２またはそれぞれ配列番号１９および２０にアミノ酸配列が少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％同一であるＶＨドメインおよびＶＬドメインを含む。
【０１０７】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、本明細書において示される配列番号１にアミノ酸配列が少なくとも９０％同一であるＶＨドメインと、配列番号２にアミノ酸配列が少なくとも９０％同一であるＶＬドメインとを含む。
【０１０８】
あるいは、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、本明細書において示される配列番号１９にアミノ酸配列が少なくとも９０％同一であるＶＨドメインと、配列番号２０にアミノ酸配列が少なくとも９０％同一であるＶＬドメインとを含み得る。
【０１０９】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、（ａ）配列番号３、２１、３３、３４、３６、または３７で示されるＣＤＲ  Ｈ１、（ｂ）配列番号４、２２、３５、または３８で示されるＣＤＲ  Ｈ２、（ｃ）配列番号５または２３で示されるＣＤＲ  Ｈ３、（ｄ）配列番号６または２４で示されるＣＤＲ  Ｌ１、（ｅ）配列番号７または２５で示されるＣＤＲ  Ｌ２、（ｆ）配列番号８または２６で示されるＣＤＲ  Ｌ３、ならびに（ｇ）ＷＯ２００７／０５４８０９の表６に示されているＣＤＲ  Ｌ１、ＣＤＲ  Ｌ２、およびＣＤＲ  Ｈ２の変異体からなる群から選択される少なくとも１つのＣＤＲを含む。
【０１１０】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体の重鎖の定常領域は、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、およびＩｇＥなどの任意のタイプの定常領域、ならびにＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４などの任意のアイソタイプのものであり得る。
【０１１１】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、ＡＴＣＣ受託番号がＰＴＡ−６８６７の発現ベクターにより産生される重鎖を含む。さらに好ましくは、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、ＡＴＣＣ受託番号がＰＴＡ−６８６６の発現ベクターにより産生される軽鎖を含む。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、Ｃ末端のリジンを有するかまたは有さない、配列番号１１に示される、抗体Ｇ１の重鎖の完全な抗体アミノ酸配列（本明細書において記載される修飾ＩｇＧ２を含む）を含む。抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体はまた、重鎖の末端のリジンを欠いている抗体も含むが、それは、前記リジンが通常、製造の間に一部の抗体において失われるためである。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、配列番号１２に示される、抗体Ｇ１の軽鎖の完全な抗体アミノ酸配列を包含する。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、配列番号２９に示される、抗体Ｇ２の重鎖の完全な抗体アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、配列番号３０に示される、抗体Ｇ２の軽鎖の完全な抗体アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、ＡＴＣＣ受託番号がＰＴＡ−６８６７およびＰＴＡ−６８６６の発現ベクターにより産生される。
【０１１２】
いくつかの実施形態において、本発明において用いるための抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、本明細書において規定される抗体Ｇ１または抗体Ｇ２である。好ましい実施形態において、本発明において用いるための抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、抗体Ｇ１またはその抗原結合断片である。
【０１１３】
本発明のさらなる実施形態によれば、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、例えばＷＯ２００７／０５４８０９において記載されている修飾定常領域を含む。好ましくは、修飾定常領域は、部分的に免疫学的に不活性であるなど、免疫学的に不活性であり、したがって、補体介在性の溶解を引き起こさず、抗体依存性細胞介在性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を刺激せず、小膠細胞を活性化しない。好ましくは、修飾定常領域は、これらの活性の１つまたは複数が低減している。最も好ましくは、定常領域は、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１９９９、２９：２６１３〜２６２４、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＧＢ９９／０１４４１、および／または英国特許出願第９８０９９５１．８号において記載されているように修飾されている。いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、Ａ３３０、Ｐ３３１からＳ３３０、Ｓ３３１（野生型のＩｇＧ２配列に準拠したアミノ酸の番号付け）という突然変異を含むヒト重鎖のＩｇＧ２定常領域を含む。Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１９９９、２９：２６１３〜２６２４。
【０１１４】
出願ＷＯ２００７／０５４８０９の抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体を作製および単離する方法、ならびに前記抗体のＣＧＲＰ結合およびアンタゴニストの特徴付けを示すデータは、出願ＷＯ２００７／０５４８０９に記載されている。前記出願の配列番号１から１４の配列は、それぞれ配列番号１から１４として本明細書において提供される。
【０１１５】
用量および投与
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、例えば１週間に約１回から約７回、さらに好ましくは１カ月に約１回から約４回、さらに好ましくは６カ月間に約１回から約６回、さらに好ましくは１年に約１回から約１２回、末梢に投与される。好ましくは、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、１日約１回、２、３、４、５、もしくは６日ごとに１回、１週間に１回、２週間ごとに２回、３週間ごとに１回、１カ月に１回、２カ月ごとに１回、３カ月ごとに１回、４カ月ごとに１回、５カ月ごとに１回、６カ月ごとに１回、７カ月ごとに１回、８カ月ごとに１回、９カ月ごとに１回、１０カ月ごとに１回、１１カ月ごとに１回、または１年に１回から選択される期間内で末梢に投与される。好ましい実施形態によれば、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、経口、舌下、口腔内、局部的、直腸内、吸入を介して、経皮、皮下、静脈内、動脈内もしくは筋肉内、心臓内投与を介して、骨内、皮内、腹腔内、経粘膜的、膣内、硝子体内、皮膚上、関節内、関節周辺、または局所的の１つまたは複数から選択される経路を介して投与される。
【０１１６】
本発明のさらなる実施形態によれば、医薬品は、１週間に約１回から約７回、さらに好ましくは１カ月に約１回から約４回、さらに好ましくは６カ月間に約１回から約６回、さらに好ましくは１年に約１回から約１２回の末梢投与のために調製される。好ましくは、医薬品は、１日約１回、２、３、４、５、もしくは６日ごとに１回、１週間に１回、２週間ごとに２回、３週間ごとに１回、１カ月に１回、２カ月ごとに１回、３カ月ごとに１回、４カ月ごとに１回、５カ月ごとに１回、６カ月ごとに１回、７カ月ごとに１回、８カ月ごとに１回、９カ月ごとに１回、１０カ月ごとに１回、１１カ月ごとに１回、または１年に１回から選択される期間内で末梢に投与するために調製される。好ましい実施形態によれば、医薬品は、経口、舌下、口腔内、局部的、直腸内、吸入を介して、経皮、皮下、静脈内、動脈内もしくは筋肉内、心臓内投与を介して、骨内、皮内、腹腔内、経粘膜的、膣内、硝子体内、皮膚上、関節内、関節周辺、または局所的の１つまたは複数から選択される経路を介して末梢に投与するために調製される。
【０１１７】
本発明のさらなる実施形態によれば、抗体の濃度は、約０．１から約２００ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約０．５、１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、または２００ｍｇ／ｍｌのいずれか１つ±１０％の誤差、最も好ましくは約５０ｍｇ／ｍｌである。
【０１１８】
本発明のさらなる実施形態によれば、医薬品は、約０．１から２００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは約０．５、１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、または２００ｍｇ／ｋｇ体重のいずれか１つ±１０％の誤差、最も好ましくは約１０ｍｇ／ｋｇの抗体濃度で末梢投与するために調製される。
【０１１９】
本発明の好ましい実施形態によれば、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、約２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、１４８、１５０、１５２、１５４、１５６、１５８、１６０、１６２、１６４、１６６、１６８、１７０、１７２、１７４、１７６、１７８、１８０、１８２、１８４、１８６、１８８、１９０、１９２、１９４、１９６、１９８、２００、２０２、２０４、２０６、２０８、または２１０日のいずれか１つ±１日を超える、さらに好ましくは、約７、８、９、１０、１１、または１２カ月のいずれか１つを超える、インビボでの半減期を有する。
【０１２０】
好ましくは、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、６日を超えるインビボでの半減期を有する。
【０１２１】
本発明のさらに好ましい実施形態によれば、医薬品および／または抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、中枢神経系の影響および／または認識機能障害を生じさせない。好ましくは、医薬品および／または抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、健忘、混乱、離人症、感覚鈍麻、思考障害、開口障害、定型的目まい、静座不能、無気力、運動失調、口囲の感覚異常、ＣＮＳ刺激、情緒不安定、陶酔感、幻覚、敵意、知覚過敏、運動過敏、低血圧、協調不全、性欲亢進、躁反応、ミオクローヌス、神経痛、神経障害、精神病、発作、異常発語、昏迷、自殺念慮、非定型的目まい、傾眠、不眠症、不安神経症、振戦、鬱、または感覚異常のいずれか１つまたは複数を誘発しない。最も好ましくは、医薬品および／または抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、運動協調または注意の機能低下を誘発しない。
【０１２２】
本発明のさらなる実施形態によれば、医薬品および／または抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、呼吸器、肝臓、腎臓、または胃腸の機能低下をもたらさない。
【０１２３】
本発明のさらなる実施形態によれば、医薬品および／または抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、身体的および／または心理的依存の効果をもたらさない。好ましくは、医薬品および／または抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、鎮痛剤、ベンゾジアゼピン、フェンシクリジン（ＰＣＰ）、もしくはＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）の受容体、またはＣＮＳ刺激物質への親和性を示さないか、いずれの鎮静または陶酔効果ももたらさない。
【０１２４】
いくつかの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、投与されると、中枢の痛み感覚を改善するか、制御するか、その発症を低減させるか、またはその進展または進行を遅延させる。
【０１２５】
他の実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体の効果は、内臓痛の同一モデルにおけるＮＳＡＩＤＳおよび／または鎮痛剤の効果と等しく、かつ／またはそれよりも優れている。１つの実施形態において、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体は、難治性の痛みを有する集団の治療において有効である。
【０１２６】
本発明のさらなる実施形態によれば、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体が、１つまたは複数のさらなる薬理学的に活性な化合物または作用物質、好ましくは、内臓痛を治療するために有用な化合物または作用物質との組み合わせにおいて、別々に、連続して、または同時に投与される、本発明の任意の他の態様によった使用または方法が提供される。好ましくは、（１つまたは複数の）さらなる作用物質は、
（ｉ）オピオイド系鎮痛薬、例えばモルヒネ、ヘロイン、ヒドロモルホン、オキシモルホン、レボルファノール、レバロルファン、メタドン、メペリジン、フェンタニル、コカイン、コデイン、ジヒドロコデイン、オキシコドン、ヒドロコドン、プロポキシフェン、ナルメフェン、ナロルフィン、ナロキソン、ナルトレキソン、ブプレノルフィン、ブトルファノール、ナルブフィン、またはペンタゾシン、
（ｉｉ）非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、例えば、アスピリン、ジクロフェナク、ジフルシナル、エトドラク、フェンブフェン、フェノプロフェン、フルフェニサル、フルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、ケトロラック、メクロフェナム酸、メフェナム酸、ナブメトン、ナプロキセン、オキサプロジン、フェニルブタゾン、ピロキシカム、スリンダク、トルメチン、またはゾメピラック、シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）阻害剤、セレコキシブ、ロフェコキシブ、メロキシカム、ＪＴＥ−５２２、Ｌ−７４５，３３７、ＮＳ３９８、またはその薬学的に許容できる塩、
（ｉｉｉ）バルビツール系鎮静薬、例えば、アモバルビタール、アプロバルビタール、ブタバルビタール、ブタビタール、メフォバルビタール、メタルビタール、メトヘキシタール、ペントバルビタール、フェノバルビタール、セコバルビタール、タルブタール、チアミラール、またはチオペンタール、またはその薬学的に許容できる塩、
（ｉｖ）鎮静活性を有するベンゾジアゼピン、例えば、クロルジアゼポキシド、クロラゼプ酸、ジアゼパム、フルラゼパム、ロラゼパム、オキサゼパム、テマゼパム、またはトリアゾラム、またはその薬学的に許容できる塩、
（ｖ）鎮静活性を有するＨ１アンタゴニスト、例えば、ジフェンヒドラミン、ピリラミン、プロメタジン、クロルフェニラミン、またはクロルシクリジン、またはその薬学的に許容できる塩、
（ｖｉ）グルテチミド、メプロバメート、メタカロン、またはジクロラルフェナゾン、またはその薬学的に許容できる塩などの鎮痛薬、
（ｖｉｉ）骨格筋弛緩薬、例えば、バクロフェン、カリソプロドール、クロルゾキサゾン、シクロベンザプリン、メトカルバモール、またはオルフェナジン、またはその薬学的に許容できる塩、
（ｖｉｉｉ）ＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト、例えば、デキストロメトルファン（（＋）−３−ヒドロキシ−Ｎ−メチルモルフィナン）もしくはその代謝産物であるデキストロルファン（（＋）−３−ヒドロキシ−Ｎ−メチルモルフィナン）、ケタミン、メマンチン、ピロロキノリンキノン、またはシス−４−（ホスホノメチル）−２−ピペリジンカルボン酸、またはその薬学的に許容できる塩、
（ｉｘ）α−アドレナリン作動薬、例えば、ドキサゾシン、タムスロシン、クロニジン、または４−アミノ−６，７−ジメトキシ−２−（５−メタンスルホンアミド−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノール−２−イル）−５−（２−ピリジル）キナゾリン、
（ｘ）三環系抗鬱薬、例えば、デシプラミン、イミプラミン、アミトリプチリン、またはノルトリプチリン、
（ｘｉ）抗けいれん薬、例えば、カルバマゼピン、またはバルプロエート、
（ｘｉｉ）タキキニン（ＮＫ）アンタゴニスト、とりわけ、ＮＫ−３、ＮＫ−２、またはＮＫ−１アンタゴニスト、例えば、（αＲ，９Ｒ）−７−［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル］−８，９，１０，１１−テトラヒドロ−９−メチル−５−（４−メチルフェニル）−７Ｈ−［１，４］ジアゾシノ［２，１−ｇ］［１，７］ナフチリジン−６−１３−ジオン（ＴＡＫ−６３７）、５−［［（２Ｒ，３Ｓ）−２−［（１Ｒ）−１−［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］エトキシ−３−（４−フルオロフェニル）−４−モルホリニル］メチル］−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−オン（ＭＫ−８６９）、ラネピタント、ダピタント、または３−［［２−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］メチルアミノ］−２−フェニル−ピペリジン（２Ｓ，３Ｓ）、
（ｘｉｉｉ）ムスカリン性アンタゴニスト、例えば、オキシブチン、トルテロジン、プロピベリン、塩化トロスピウム、またはダリフェナシン、
（ｘｉｖ）ＣＯＸ−２阻害剤、例えば、セレコキシブ、ロフェコキシブ、またはバルデコキシブ、
（ｘｖ）非選択的ＣＯＸ阻害剤（好ましくはＧＩ保護を有する）、例えば、ニトロフルルビプロフェン（ＨＣＴ−１０２６）、
（ｘｖｉ）コールタール鎮痛薬、とりわけパラセタモール、
（ｘｖｉｉ）ドロペリドールなどの神経遮断薬、
（ｘｖｉｉｉ）バニロイド受容体アゴニスト（例えば、レジニフェラトキシン）またはアンタゴニスト（例えば、カプサゼピン）、
（ｘｉｘ）プロプラノロールなどのβ−アドレナリン作動薬、
（ｘｘ）メキシレチンなどの局所的麻酔薬、
（ｘｘｉ）デキサメタゾンなどのコルチコステロイド、
（ｘｘｉｉ）セロトニン受容体アゴニストまたはアンタゴニスト、
（ｘｘｉｉｉ）コリン作用性（ニコチン性）鎮痛薬、
（ｘｘｉｖ）ｔｒａｍａｄｏｌ、
（ｘｘｖ）シルデナフィル、バルデナフィル、またはタダラフィルなどのＰＤＥＶ阻害剤、
（ｘｘｖｉ）ガバペンチンまたはプレガバリンなどのα−２−δリガンド、
（ｘｘｖｉｉ）カンナビノイド、ならびに
（ｘｘｖｉｉｉ）アミトリプチリン（Ｅｌａｖｉｌ（登録商標））、トラゾドン（Ｄｅｓｙｒｅｌ（登録商標））、およびイミプラミン（Ｔｏｆｒａｎｉｌ（登録商標））などの抗鬱剤、またはフェニトイン（Ｄｉｌａｎｔｉｎ（登録商標））もしくはカルバマゼピン（Ｔｅｇｒｅｔｏｌ（登録商標））などの抗けいれん剤
の１つまたは複数から選択される。
【０１２７】
本発明のさらなる態様によれば、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体と薬学的に許容できる担体および／または賦形剤とを含む、内臓痛および／もしくは内臓痛の症状を予防および／もしくは治療するため、または個体における内臓痛および／もしくは内臓痛の症状を改善するか、制御するか、その発症を低減させるか、その進展もしくは進行を遅延させるための医薬組成物が提供され、この組成物は末梢に投与するために調製される。
【０１２８】
キット
本発明のさらなる態様によれば、上記に規定した医薬組成物と、内臓痛および／もしくは内臓痛の症状を予防および／もしくは治療するため、または内臓痛および／もしくは内臓痛の症状を改善するか、制御するか、その発症を低減させるか、その進展もしくは進行を遅延させるための、有効量の前記医薬組成物を個体に末梢投与するための指示とを含むキットが提供される。
【０１２９】
キットは、本明細書において記載される抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体またはポリペプチドと、本発明の方法および使用のいずれかに従った使用のための指示とを含有する、１つまたは複数の容器を含み得る。キットはさらに、個体が内臓痛を有しているかまたは内臓痛を有するリスクを有するかどうかの同定に基づく、治療に適した個体の選択の説明も含む。医薬組成物を末梢投与するための指示は、意図した治療のための用量、投与スケジュール、および投与経路についての情報を含み得る。
【０１３０】
本発明のそれぞれの態様の好ましい特徴は、変更すべきところは変更して、互いの態様に等しく適用される。
【実施例】
【０１３１】
以下の実施例は、例示的な目的のみで提示されるものであり、いかなる様式でも本発明の範囲を限定することを意図したものではない。実際、本明細書において示され記載されるものに加えた本発明の様々な変更が、以下の記載から当業者に明らかとなり、添付の特許請求の範囲内にある。
【０１３２】
（実施例１）内臓痛モデル
この実施例は、内臓痛モデルにおける抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体治療の効果を例示する。
【０１３３】
ＩＢＳを有する患者は、結腸直腸の膨張に対する内臓の感覚的閾値が低いことが示されており、このことは、内臓痛の症状に大きく相関している（Ｄｅｌａｆｏｙら、２００６）。ラットにおける、ＴＮＢＳにより誘発された大腸炎の後の結腸直腸の膨張は、内臓過敏のメカニズムを研究するために多くの研究者により用いられている動物モデルである（Ｇａｙら、２００６、Ｄｅｌａｆｏｙら、２００６、Ａｄａｍら、２００６）。この実施例において、ラットＴＮＢＳ大腸炎モデルを用いて、ＣＧＲＰに対する機能遮断抗体の効果を試験した。このモデルにおいて、ヒトＩＢＳ研究と同様に、内臓痛の閾値は、結腸のバルーン拡張に対する応答によって測定する。
【０１３４】
一晩絶食させた後、ラットを１ｍｌ／ｋｇの用量のケタミン（８０ｍｇ／ｍｌ）／キシラジン（１２ｍｇ／ｍｌ）で麻酔した。開腹術を実施し、ＴＮＢＳ溶液（３０％エタノール内に１．５ｍｌ／ｋｇで５０ｍｇ、「ＴＮＢＳ処理群」）または３０％エタノール溶液（「Sham群」）を、盲腸から１ｃｍ遠位の近位結腸内に注射した。Sham群は、非大腸炎対照として用いた。手術後５日目に、ＴＮＢＳ処理群を２つの群にさらに分けた。一方の群には、１０ｍｇ／ｋｇの抗ＣＧＲＰアンタゴニストモノクローナル抗体４９０１（Ｓｉｇｍａ（Ｍｉｓｓｏｕｒｉ、ＵＳ）で市販されている、商品番号Ｃ７１１３、クローン＃４９０１）を静脈内に投与した。他方の群には、陰性対照としてビークル（vehicle）（ＰＢＳ、０．０１％ｔｗｅｅｎ２０）を投与した。
【０１３５】
手術後７日目に、２回目の一晩の絶食の後、１１％以下の体重減少を維持しているＴＮＢＳ処理したラットを、バルーン拡張を用いて内臓痛の閾値について試験した。カテーテルに取り付けた５ｃｍのラテックスバルーンを、バルーンの基底が肛門から５ｃｍになるようにして、遠位結腸内に挿入した。カテーテルを尾部にテープで固定し、バルーンが動くのを防いだ。３０分の順応期間の後、バルーンを３０秒間隔で５ｍｍＨｇから８０ｍｍＨｇまで連続的に膨張させた。バルーンの膨張を、α位として知られている画一的な齧歯動物の内臓痛の態勢を引き起こすために必要な閾値圧力で停止させ（後肢の内側への回転を伴う斜筋の筋肉組織の収縮の繰り返しの波）、これを内臓痛の閾値として記録した。
【０１３６】
Sham手順を受けているラットは、手術後７日目に３６．８±２．６（Ｎ＝５、平均±標準誤差）の閾値を有していた（図１Ａ）。５日目に抗体４９０１（１０ｍｇ／ｋｇ）を投与した、ＴＮＢＳ処理したラットは、７日目に３２．３±４．１（Ｎ＝９）の閾値を有しており、５日目にビークル（vehicle）を投与した、ＴＮＢＳ処理したラットの７日目の閾値（２１．０±３．０、Ｎ＝１０）と統計上有意に異なっていた（一元配置ＡＮＯＶＡおよびＤｕｎｎｅｔ多重比較事後検定）（図１Ａ）。４９０１の効果は、ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストであるＣＧＲＰ８−３７に匹敵するものであった（図１Ｂ）。この結果は、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体が、内臓痛モデルにおいて内臓痛の閾値をSham閾値の方へ顕著に変えること、すなわち痛みを回復に向かわせることにおいて有効であることを示すものであった。
【０１３７】
（実施例２）相互作用分析および結合アッセイ
相互作用分析を、標準的なＢｉａｃｏｒｅランニングバッファー（ＨＢＳ−ＰまたはＨＢＳ−ＥＰ）を用いて、ストレプトアビジンで被覆した（ＳＡ）センサーチップを備えたＢｉａｃｏｒｅ  ３０００（商標）システム（Ｂｉａｃｏｒｅ  ＡＢ、Ｕｐｐｓａｌａ、Ｓｗｅｄｅｎ）で、２５℃および３７℃で実施した。Ｎ−ＬＣ−ビオチニル化したヒトおよびラットのα−およびβ−ＣＧＲＰを、低レベル（典型的には１００応答単位）で個別のフローセル上に捕捉して反応表面を作製し、一方、修飾されていないフローセルは参照チャネルとして用いた。精製された、抗体Ｇ１およびＧ２のＦａｂ断片が作製された。典型的には、Ｆａｂは、０．５μＭを最高濃度として用いて２倍の連続希釈として調製し、最大２時間の解離時間が可能となるよう、１００μｌ／分で１分間注射した。表面を、Ｇ１のＦａｂについては５０％ｖ／ｖのエタノールと２５ｍＭのＮａＯＨとの混合物で、Ｇ２のＦａｂについては２：１ｖ／ｖのＰｉｅｒｃｅ  Ｇｅｎｔｌｅ溶出緩衝液／４ＭのＮａＣｌで再生した。Ｆａｂの注射は、アッセイが再現可能であることを実証するために２回行った。結合応答は二重参照され、ＢｉａＥｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｖ．４．０ソフトウェアを用いた単純モデルに全体的に適合した。親和性は、動態速度定数の商から推定した（ＫＤ＝ｋｏｆｆ／ｋｏｎ）。
【０１３８】
抗体Ｇ１についての結果を以下の表１に示す。抗体Ｇ１は、類似のおよび高い親和性でヒトα−およびβ−ＣＧＲＰに結合する（２０分の解離時間が可能となるよう、３７℃で同一のチップ上で比較分析したところ、それぞれＫＤ＝１６３および１５５ｐＭであった）。ヒトおよびカニクイザルは同一の配列を有しており、したがって、ヒトのデータもカニクイザルに適用される。Ｇ１はまた、ラットのＣＧＲＰも結合するが、α−アイソフォームとβ−アイソフォームとを区別する（３７℃でそれぞれＫＤ＝２．５７ｎＭおよび＜１５０ｐＭ）。
【０１３９】
【表１】
2018024661.tif 000002
【０１４０】
α−ヒト、β−ヒト、およびβ−ヒトＣＧＲＰからのＧ１のＦａｂの解離は非常に緩やかに生じる。したがって、解離速度（ｋｏｆｆ）は、解離相が非常に長時間にわたり観察されない限り、正確には測定され得ない。通常の経験則から、結合反応は、正確な解離速度の報告で認められた解離時間よりも、少なくとも５％減衰する。しかし、Ｂｉａｃｏｒｅでの長期の解離時間の観察は、動態分析に必要な低い表面能力で作業する場合に特に困難となるベースラインの推移により妨げられる。この研究において、解離相を、α−ＣＧＲＰについては２時間追跡したが、β−ＣＧＲＰについては２０分しか追跡しなかった。結果として、β−ＣＧＲＰの解離速度は、α−ＣＧＲＰの解離速度ほどには正確には明らかにされ得ない。しかし、同一の条件下で２０分の解離時間を用いて、同一のチップ上で比較アッセイすると、Ｇ１は、α−ヒト／カニクイザルＣＧＲＰ、β−ヒト／カニクイザルＣＧＲＰ、およびβ−ラットＣＧＲＰについて事実上同一の結合動態を有した（３７℃でＫＤ＝１５０ｐＭ）。
【０１４１】
抗体Ｇ２についての結果を表２に示す。抗体Ｇ２は、類似のおよび高い親和性でα−およびβ−ヒトＣＧＲＰ（２５℃でそれぞれＫＤ＝１９ｎＭおよび２０ｎＭ）よりも高い親和性でα−ラットＣＧＲＰに結合する（２５℃でＫＤ＝０．９ｎＭ）。β−ラットＣＧＲＰに結合するＧ２は、このアッセイフォーマットにおいては調べなかったが、逆方向のアッセイフォーマットにおいて、α−およびβ−ヒトＣＧＲＰに対して同程度の結合特性を示した（データは示していない）。
【０１４２】
【表２】
2018024661.tif 000003
【０１４３】
結合アッセイを、ヒトα−ＣＧＲＰのＣＧＲＰ１受容体への結合の遮断における抗ＣＧＲＰ  Ｇ１抗体のＩＣ５０を測定するために実施した。ＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞から得られる膜（２５μｇ）を、全容積が１ｍｌの、１０ｐＭの１２５Ｉ−ヒトα−ＣＧＲＰおよび様々な濃度の抗ＣＧＲＰ抗体（０．０１５ｎＭ〜３３ｎＭ）を含有するインキュベーションバッファー（５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ＝７．４、５ｍＭのＭｇＣｌ２、０．１％ＢＳＡ）内で、２５℃で９０分間インキュベートした。インキュベーションを、０．５％ポリエチレンイミンで遮断されているガラス製のマイクロフィルター（ＧＦ／Ｂ、１μｍ）を介した濾過によって停止させた。タンパク質に結合した放射能をガンマカウンターで決定した。用量反応曲線をプロットし、Ｋｉ値を、Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋［リガンド］／ＫＤ）という方程式を用いて決定し、前記方程式において、平衡解離定数ＫＤは、ＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞内に存在するＣＧＲＰ１受容体に対するヒトα−ＣＧＲＰでは８ｐＭである。報告されたＩＣ５０値（ＩｇＧ分子に関して）を結合部位に変換して（それに２をかけてＢｉａｃｏｒｅがＦａｂ断片の分析であったという事実を可能にすることによる）、それにより、それをＢｉａｃｏｒｅによって決定された親和性（ＫＤ）と比較することが可能となった。観察されたＩＣ５０（１．８ｎＭ）は、等しい温度でＢｉａｃｏｒｅによって観察されたＫＤ（４２ｐＭ）よりも２３倍高かった。このミスマッチは、結合アッセイの感度が不足している可能性を反映している。
【０１４４】
（実施例３）内臓痛モデル
この実施例は、内臓痛モデルにおける抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体治療の効果を例示する。
【０１４５】
この実施例において、ラット間質性膀胱炎モデルを用いて、ＣＧＲＰに対する機能遮断抗体の効果を試験した。このモデルにおいて、内臓の過敏を、膀胱のテルペンチン刺激に応じた膀胱の運動性によって測定した。
【０１４６】
メスのラットを、膀胱内圧測定の間、ウレタン麻酔下に維持し、回復しないようにした。温度制御した加熱パッドに恒温的に接続した直腸プローブを用いて、体温を３７℃に維持した。一方の群のラット（ｎ＝７）には、１０ｍｇ／ｋｇの抗ＣＧＲＰアンタゴニストモノクローナル抗体４９０１（Ｓｉｇｍａ（Ｍｉｓｓｏｕｒｉ、ＵＳ）で市販されている、商品番号Ｃ７１１３、クローン＃４９０１）を静脈内に投与した。別の群（ｎ＝７）には、陰性対照としてビークル（vehicle）（ＰＢＳ、０．０１％ｔｗｅｅｎ２０）を投与した。
【０１４７】
４９０１またはビークル（vehicle）を投与した２４時間後、ラットを麻酔し、膀胱を、ＰＥ５０管（１ｍｍのＯＤ）を用いて経尿道的にカテーテル挿入し、（シリンジポンプを用いて）０．０６ｍｌ／分で膀胱を標準的な生理食塩水で満たすことを可能にした。管は膀胱の近位にＴ型の接合部を有しており、それにより、圧力変換器での膀胱の圧力の観察が可能となる。圧力および収縮を１４分間隔の間に観察して（０．８４ｍｌの全容積）、膀胱の運動性を決定した。ベースラインの膀胱内圧測定図が作成された後、０．５ｍｌの５０％テレビン油を１時間にわたり注入することによって膀胱を刺激した。次に膀胱を空にし、膀胱の運動性の次の試験を、テルペンチンの直後（１時間）、３時間、および５時間後に実施した。
【０１４８】
膀胱内圧測定手順の２４時間前に抗体４９０１（１０ｍｇ／ｋｇ）を投与したラットは、ビークル（vehicle）を投与したラットと比較して、測定した全ての時点で膀胱収縮が小さかった（図２）。この結果は、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体が、内臓痛モデルにおいてテルペンチン刺激に応じて膀胱の運動性を低減させること、すなわち痛みを回復に向かわせることにおいて有効であることを示すものであった。
【０１４９】
生物学的材料の寄託
以下の材料は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、１０８０１  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｂｏｕｌｅｖａｒｄ、Ｍａａｓｓａｓ、Ｖｉｒｇｉｎｉａ  ２０１１０−２２０９、ＵＳＡ（ＡＴＣＣ）に寄託されている。
【０１５０】
【表３】
2018024661.tif 000004
【０１５１】
ベクターｐＥｂ．ＣＧＲＰ．ｈＫＧＩは、Ｇ１軽鎖の可変領域および軽鎖のκ定常領域をコードするポリヌクレオチドであり、ベクターｐＤｂ．ＣＧＲＰ．ｈＦｃＧＩは、Ｇ１重鎖の可変領域と、Ａ３３０Ｐ３３１からＳ３３０Ｓ３３１の突然変異を含有する、重鎖のＩｇＧ２定常領域とをコードするポリヌクレオチドである（野生型ＩｇＧ２配列に準拠したアミノ酸の番号付け、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１９９９、２９：２６１３〜２６２４を参照されたい）。
【０１５２】
これらの寄託は、特許手続きのための微生物寄託の国際認識に関するブダペスト条約およびその規則（ブダペスト条約）の規定下で行ったものである。これは、寄託日から３０年間にわたり、寄託された生存培養物の維持を保証するものである。寄託物は、ブダペスト条約の定めに従って、かつＲｉｎａｔ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  Ｃｏｒｐ．とＡＴＣＣとの間の同意を条件として、ＡＴＣＣにより利用可能とされ、このことにより、関連する米国特許の発行に基づいて、または何らかの米国もしくは他国の特許出願の公衆への公開に基づいて、いずれが先であっても、寄託された培養物の後代の永続的かつ無制限の利用可能性が公衆に対して保証され、かつ、３５  ＵＳＣ  第１２２条およびそれに準ずる長官の規範に従って（特に８８６  ＯＧ  ６３８に関連する、３７  ＣＦＲ  第１．１４条を含む）、米国特許商標庁長官によりそれに対する資格が与えられると決定された者への、後代の利用可能性が保証される。
【０１５３】
本願の譲受人は、適切な条件下で培養されている場合に、寄託される材料の培養物が死んでいるかまたは失われているかまたは破壊されている場合には、その材料は、通知され次第、別のその材料と速やかに交換されるということに同意している。寄託された材料の利用可能性は、何らかの政府の特許法に従ってその政府の権限の下で認められた権利に違反して本発明を実施するためのライセンスであるとは解釈されない。
【０１５４】
以下に、本明細書において開示される様々な実施形態に有用な抗体の配列を示す。
【０１５５】
抗体の配列
抗体Ｇ１の重鎖可変領域のアミノ酸配列（配列番号１）
【０１５６】
【表４】
2018024661.tif 000005
【０１５７】
抗体Ｇ１の軽鎖可変領域のアミノ酸配列（配列番号２）
【０１５８】
【表５】
2018024661.tif 000006
【０１５９】
抗体Ｇ１のＣＤＲ  Ｈ１（伸長ＣＤＲ）（配列番号３）
ＧＦＴＦＳＮＹＷＩＳ
【０１６０】
抗体Ｇ１のＣＤＲ  Ｈ２（Ｋａｂａｔ  ＣＤＲと同様の伸長ＣＤＲ）（配列番号４）
ＥＩＲＳＥＳＤＡＳＡＴＨＹＡＥＡＶＫＧ
【０１６１】
抗体Ｇ１のＣＤＲ  Ｈ３（配列番号５）
ＹＦＤＹＧＬＡＩＱＮＹ
【０１６２】
抗体Ｇ１のＣＤＲ  Ｌ１（配列番号６）
ＫＡＳＫＲＶＴＴＹＶＳ
【０１６３】
抗体Ｇ１のＣＤＲ  Ｌ２（配列番号７）
ＧＡＳＮＲＹＬ
【０１６４】
抗体Ｇ１のＣＤＲ  Ｌ３（配列番号８）
ＳＱＳＹＮＹＰＹＴ
【０１６５】
抗体Ｇ１の重鎖可変領域のヌクレオチド配列（配列番号９）
【０１６６】
【表６】
2018024661.tif 000007
【０１６７】
抗体Ｇ１の軽鎖可変領域のヌクレオチド配列（配列番号１０）
【０１６８】
【表７】
2018024661.tif 000008
【０１６９】
抗体Ｇ１の重鎖の完全な抗体アミノ酸配列（本明細書において記載される修飾ＩｇＧ２を含む）（配列番号１１）
【０１７０】
【表８】
2018024661.tif 000009
【０１７１】
抗体Ｇ１の軽鎖の完全な抗体アミノ酸配列（配列番号１２）
【０１７２】
【表９】
2018024661.tif 000010
【０１７３】
抗体Ｇ１の重鎖の完全な抗体ヌクレオチド配列（本明細書において記載される修飾ＩｇＧ２を含む）（配列番号１３）
【０１７４】
【表１０】
2018024661.tif 000011
【０１７５】
抗体Ｇ１の軽鎖の完全な抗体ヌクレオチド配列（配列番号１４）
【０１７６】
【表１１】
2018024661.tif 000012
【０１７７】
ヒトおよびラットのＣＧＲＰ（ヒトα−ＣＧＲＰ（配列番号１５）、ヒトβ−ＣＧＲＰ（配列番号１６）、ラットα−ＣＧＲＰ（配列番号１７）、およびラットβ−ＣＧＲＰ（配列番号１８））のアミノ酸配列の比較。
ＮＨ２−ＡＣＤＴＡＴＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ−ＣＯＮＨ２（配列番号１５）
ＮＨ２−ＡＣＮＴＡＴＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ−ＣＯＮＨ２（配列番号１６）
ＮＨ２−ＳＣＮＴＡＴＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＤＮＦＶＰＴＮＶＧＳＥＡＦ−ＣＯＮＨ２（配列番号１７）
ＮＨ２−ＳＣＮＴＡＴＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＤＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ−ＣＯＮＨ２（配列番号１８）
【０１７８】
抗体Ｇ２の重鎖可変領域のアミノ酸配列（配列番号１９）
【０１７９】
【表１２】
2018024661.tif 000013
【０１８０】
抗体Ｇ２の軽鎖可変領域のアミノ酸配列（配列番号２０）
【０１８１】
【表１３】
2018024661.tif 000014
【０１８２】
抗体Ｇ２のＣＤＲ  Ｈ１（Ｋａｂａｔ  ＣＤＲ）（配列番号２１）
ＳＳＶＭＨ
【０１８３】
抗体Ｇ２のＣＤＲ  Ｈ２（伸長ＣＤＲ）（配列番号２２）
ＹＩＮＰＹＮＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧ
【０１８４】
抗体Ｇ２のＣＤＲ  Ｈ３（配列番号２３）
ＧＧＮＤＧＹ
【０１８５】
抗体Ｇ２のＣＤＲ  Ｌ１（配列番号２４）
ＳＡＳＳＳＩＳＳＩＹＬＨ
【０１８６】
抗体Ｇ２のＣＤＲ  Ｌ２（配列番号２５）
ＲＡＳＮＬＡＳ
【０１８７】
抗体Ｇ２のＣＤＲ  Ｌ３（配列番号２６）
ＱＱＧＳＴＩＰＦＴ
【０１８８】
抗体Ｇ２の重鎖可変領域のヌクレオチド酸配列（配列番号２７）
【０１８９】
【表１４】
2018024661.tif 000015
【０１９０】
抗体Ｇ２の軽鎖可変領域のヌクレオチド酸配列（配列番号２８）
【０１９１】
【表１５】
2018024661.tif 000016
【０１９２】
抗体Ｇ２の重鎖の完全な抗体アミノ酸配列（Ｆｃドメインを含まない）（配列番号２９）
【０１９３】
【表１６】
2018024661.tif 000017
【０１９４】
抗体Ｇ２の軽鎖の完全な抗体アミノ酸配列（配列番号３０）
【０１９５】
【表１７】
2018024661.tif 000018
【０１９６】
抗体Ｇ２の重鎖の完全な抗体ヌクレオチド配列（Ｆｃドメインを含まない）（配列番号３１）
【０１９７】
【表１８】
2018024661.tif 000019
【０１９８】
抗体Ｇ２の軽鎖の完全な抗体ヌクレオチド配列（配列番号３２）
【０１９９】
【表１９】
2018024661.tif 000020
【０２００】
抗体Ｇ１のＣＤＲ  Ｈ１（Ｃｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲ）（配列番号３３）
ＧＦＴＦＳＮＹ
【０２０１】
抗体Ｇ１のＣＤＲ  Ｈ１（Ｋａｂａｔ  ＣＤＲ）（配列番号３４）
ＮＹＷＩＳ
【０２０２】
抗体Ｇ１のＣＤＲ  Ｈ２（Ｃｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲ）（配列番号３５）
ＲＳＥＳＤＡＳＡ
【０２０３】
抗体Ｇ２のＣＤＲ  Ｈ１（伸長ＣＤＲ）（配列番号３６）
ＧＹＴＦＴＳＳＶＭＨ
【０２０４】
抗体Ｇ２のＣＤＲ  Ｈ１（Ｃｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲ）（配列番号３７）
ＧＹＴＦＴＳＳ
【０２０５】
抗体Ｇ２のＣＤＲ  Ｈ２（Ｃｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲ）（配列番号３８）
ＮＰＹＮＤＧ
【０２０６】
開示された教示は様々な適用、方法、キット、および組成物に関して記載されているが、本明細書における教示および以下の特許請求の範囲において記載される発明から逸脱することなく様々な変更および修飾を行い得ることが理解されよう。前述の実施例は、開示された教示をより良好に例示するために提供されるものであり、本明細書において示される教示の範囲を限定することを意図したものではない。本教示はこれらの典型的な実施形態に関して記載されているが、当業者には、過度の実験を伴うことなくこれらの典型的な実施形態の多くの変形および修飾が可能であることが容易に理解されよう。全てのこのような変形および修飾は、本教示の範囲内にある。
【０２０７】
本明細書において用いられる節の見出しは、構成的な目的のためのものにすぎず、記載された内容を限定するものと解釈されるものでは全くない。本教示において論じられている温度、濃度、時間などの前には黙示的な「約」が存在すること、したがってわずかなおよび実体的ではない偏差が本明細書における本教示の範囲内にあることが理解されよう。本願において、単数形の使用は、別段の具体的な記載がない限り、複数形を含む。また、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含有する（ｃｏｎｔａｉｎ）」、「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｓ）」、「含有している（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、および「含んでいる（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」の使用は、限定することを意図したものではない。前述の全体的な記載および以下の詳細な記載の両方が典型的および説明的なものにすぎず、本発明を制限するものではないことを理解されたい。
【０２０８】
特許、特許出願、書類、テキストブックなどを含む、本明細書において引用される全ての参考文献、およびそれらにおいて引用される参考文献は、それらがまだ本明細書に組み込まれていない場合に限り、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。限定はしないが、定義された用語、用語の使用法、記載された技術などを含む、組み込まれた文献および類似の材料の１つまたは複数が本願と異なるかまたは本願と矛盾する場合、本願が優先される。
【０２０９】
前述の記載および実施例は、本発明の特定の具体的な実施形態を詳述するものであり、本発明者らが意図する最良の態様を記載するものである。しかし、文章において見られ得る前述のものがいかに詳述されていても、本発明が多くの方法で実施され得ること、ならびに本発明が添付の特許請求の範囲およびその任意の同等物に従って解釈されるべきであることが理解されよう。本発明は以下をも提供する。
（項目１）  治療有効量の抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体を、内臓痛に罹患しているかまたは内臓痛のリスクがある個体に投与することを含む、個体における内臓痛および／または内臓痛の１つもしくは複数の症状を治療する方法。
（項目２）  内臓痛が機能性腸障害（ＦＢＤ）に関連する、項目１に記載の方法。
（項目３）  ＦＢＤが、胃食道逆流、消化不良、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、および機能性腹痛症候群（ＦＡＰＳ）からなる群から選択される、項目２に記載の方法。
（項目４）  内臓痛が炎症性腸疾患（ＩＢＤ）に関連する、項目１に記載の方法。
（項目５）  ＩＢＤが、クローン病、回腸炎、および潰瘍性大腸炎からなる群から選択される、項目４に記載の方法。
（項目６）  内臓痛が、腎疝痛、月経困難症、膀胱炎、月経期間、陣痛、閉経、前立腺炎、または膵炎に関連する、項目１に記載の方法。
（項目７）  内臓痛が間質性膀胱炎（ＩＣ）に関連する、項目６に記載の方法。
（項目８）  抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体が、５０ｎＭ以下のＫＤ（３７℃で表面プラズモン共鳴によって測定される）でＣＧＲＰに結合し、かつ／または少なくとも７日間のインビボでの半減期を有する、項目１に記載の方法。
（項目９）  抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体が、ＣＧＲＰのＣ末端領域に特異的に結合する、項目１に記載の方法。
（項目１０）  抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体が、配列ＧＳＫＡＦ（配列番号３９）により規定されるエピトープを特異的に認識する、項目９に記載の方法。
（項目１１）  抗ＣＧＲＰ抗体が、配列番号１または１９に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む、項目１に記載の方法。
（項目１２）  抗ＣＧＲＰ抗体が、配列番号２または２０に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む、項目１に記載の方法。
（項目１３）  抗ＣＧＲＰ抗体が、
（ａ）配列番号３、２１、３３、３４、３６、または３７で示されるＣＤＲ  Ｈ１、
（ｂ）配列番号４、２２、３５、または３８で示されるＣＤＲ  Ｈ２、
（ｃ）配列番号５または２３で示されるＣＤＲ  Ｈ３、
（ｄ）配列番号６または２４で示されるＣＤＲ  Ｌ１、
（ｅ）配列番号７または２５で示されるＣＤＲ  Ｌ２、および
（ｆ）配列番号８または２６で示されるＣＤＲ  Ｌ３
からなる群から選択される少なくとも１つのＣＤＲを含む、項目１に記載の方法。
（項目１４）  抗ＣＧＲＰ抗体が、配列番号１に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインと、配列番号２に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインとを含む、項目１に記載の方法。
（項目１５）  抗ＣＧＲＰ抗体が、ＡＴＣＣ受託番号がＰＴＡ−６８６７および／またはＰＴＡ−６８６６の発現ベクターにより産生される、項目１に記載の方法。
（項目１６）  抗ＣＧＲＰ抗体が、
Ｃ末端のリジンを有するかまたは有さない、配列番号１１に示される、抗体Ｇ１の重鎖の完全な抗体アミノ酸配列と、
配列番号１２に示される、抗体Ｇ１の軽鎖の完全な抗体アミノ酸配列とを含む、項目１に記載の方法。
（項目１７）  抗ＣＧＲＰ抗体が、
配列番号２９に示される、抗体Ｇ２の重鎖の完全な抗体アミノ酸配列と、
配列番号３０に示される、抗体Ｇ２の軽鎖の完全な抗体アミノ酸配列と
を含む、項目１に記載の方法。
（項目１８）  個体における内臓痛および／または内臓痛の症状を治療および／または予防するための医薬組成物であって、抗ＣＧＲＰアンタゴニスト抗体および薬学的に許容できる担体を含み、末梢に投与するために調製される医薬組成物。
【図１】
2018024661.tif 000021
【図２】
2018024661.tif 000022
【配列表】
2018024661000001.app
【外国語明細書】
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