(57)【要約】      （修正有）【課題】哺乳類対象における心不全の予防もしくは治療、心不全に関連したリスク因子の減少、及び／又は、心不全の可能性もしくは心不全の重篤度を減少させる方法の提供。哺乳類対象におけるＬＶリモデリングの予防もしくは治療、及び／又は、ＬＶリモデリングの可能性もしくは重篤度を減少させる方法の提供。【解決手段】治療有効量の芳香族カチオン性ペプチド、例えばＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ２又はその薬学的に受容可能な塩を含む組成物。Ｃ反応性タンパク質、腫瘍壊死因子α、インターロイキン６、活性酸素種、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰ、心臓トロポニンＩ、ＭＬＣＬ  ＡＴ１発現及びＡＬＣＡＴ  １発現のうちの１つ以上のレベルを減少させるための、Ｔａｚ１の発現を増加させるための、及び／又は、ｍＫ  ＡＴＰ活性を増加させるための、前記組成物。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｃ反応性タンパク質のレベルを減少させる必要のある哺乳類対象における、Ｃ反応性タンパク質のレベルを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を、前記対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項２】
前記対象が、心不全を有すると診断されている、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、請求項３に記載の方法。
【請求項４】
前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
Ｃ反応性タンパク質のレベルが増加した哺乳類対象における心不全を予防、治療または改善する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項９】
前記対象が、高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、糖尿病治療薬のロシグリタゾンまたはピオグリタゾンの摂取、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、喫煙、座りがちなライフスタイル、高コレステロール、心不全の家族歴、ストレス、および腎疾患からなる群から選択される、心不全と関連したリスク因子を少なくとも１つ有する、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、請求項８〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項８〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
ＴＮＦαのレベルを減少させる必要のある哺乳類対象においてＴＮＦαのレベルを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項１４】
前記対象が、心不全を有すると診断されている、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、請求項１３〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項１３〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
ＴＮＦαのレベルが増加した哺乳類対象における心不全を予防、治療または改善する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項２１】
前記対象が、高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、糖尿病治療薬のロシグリタゾンまたはピオグリタゾンの摂取、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、喫煙、座りがちなライフスタイル、高コレステロール、心不全の家族歴、ストレス、および腎疾患からなる群から選択される、心不全と関連したリスク因子を少なくとも１つ有する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、請求項２０〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項２０〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
インターロイキン６のレベルを減少させる必要のある哺乳類対象においてインターロイキン６のレベルを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項２６】
前記対象が、心不全を有すると診断されている、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、請求項２５〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、請求項２５〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項２５〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
インターロイキン６のレベルが増加した哺乳類対象における心不全を予防、治療または改善する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項３３】
前記対象が、高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、糖尿病治療薬のロシグリタゾンまたはピオグリタゾンの摂取、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、喫煙、座りがちなライフスタイル、高コレステロール、心不全の家族歴、ストレス、および腎疾患からなる群から選択される、心不全と関連したリスク因子を少なくとも１つ有する、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、請求項３２〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項３２〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
活性酸素種のレベルを減少させる必要のある哺乳類対象において活性酸素種のレベルを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項３８】
前記対象が、心不全を有すると診断されている、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、請求項３７〜３９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４１】
前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、請求項３７〜４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４２】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項３７〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
活性酸素種のレベルが増加した哺乳類対象における心不全を予防、治療または改善する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項４５】
前記対象が、高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、糖尿病治療薬のロシグリタゾンまたはピオグリタゾンの摂取、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、喫煙、座りがちなライフスタイル、高コレステロール、心不全の家族歴、ストレス、および腎疾患からなる群から選択される、心不全と関連したリスク因子を少なくとも１つ有する、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、請求項４４〜４５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４７】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項４４〜４７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４９】
Ｃ反応性タンパク質、活性酸素種、インターロイキン６、ＴＮＦα、および心臓トロポニンＩのうちの１つ以上のレベルを減少させる必要のある哺乳類対象において、Ｃ反応性タンパク質、活性酸素種、インターロイキン６、ＴＮＦα、および心臓トロポニンＩのうちの１つ以上のレベルを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項５０】
前記対象が、心不全を有すると診断されている、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、請求項４９〜５１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５３】
前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、請求項４９〜５２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５４】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項４９〜５４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５６】
Ｃ反応性タンパク質、活性酸素種、インターロイキン６、ＴＮＦα、および心臓トロポニンＩのうちの１以上のレベルが増加した哺乳類対象における心不全を予防、治療または改善する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項５７】
前記対象が、高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、糖尿病治療薬のロシグリタゾンまたはピオグリタゾンの摂取、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、喫煙、座りがちなライフスタイル、高コレステロール、心不全の家族歴、ストレス、および腎疾患からなる群から選択される、心不全と関連したリスク因子を少なくとも１つ有する、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、請求項５６〜５７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５９】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項５６〜５９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６１】
Ｃ反応性タンパク質、活性酸素種、インターロイキン６、ＴＮＦα、および心臓トロポニンＩのうちの１つ以上のレベルが増加した哺乳類対象におけるＬＶリモデリングを予防、改善、または治療する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項６２】
Ｃ反応性タンパク質、活性酸素種、インターロイキン６、ＴＮＦα、および心臓トロポニンＩのうちの１つ以上のレベルが増加した哺乳類対象におけるＬＶ機能を改善する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項６３】
前記対象が、心不全、心筋梗塞、もしくは他の狭窄事象または血管事象に罹患している、または罹患する可能性がある、請求項６１〜６２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６４】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項６１〜６３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６５】
Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰおよび／または心臓トロポニンＩのレベルを減少させる必要のある哺乳類対象において、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰおよび／または心臓トロポニンＩのレベルを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項６６】
前記対象が、急性心筋梗塞に罹患している、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰおよび／または心臓トロポニンＩの減少は、ＬＶリモデリングの効果的な予防、治療または改善の指標である、請求項６５に記載の方法。
【請求項６８】
心臓トロポニンＩのレベルを減少させる必要のある哺乳類対象において、心臓トロポニンＩのレベルを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項６９】
前記対象が、心不全を有すると診断されている、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、請求項６８〜７０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７２】
前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、請求項６８〜７１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７３】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項６８〜７３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７５】
心臓トロポニンＩのレベルが増加した哺乳類対象における心不全を予防、治療または改善する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項７６】
前記対象が、高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、糖尿病治療薬のロシグリタゾンまたはピオグリタゾンの摂取、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、喫煙、座りがちなライフスタイル、高コレステロール、心不全の家族歴、ストレス、および腎疾患からなる群から選択される、心不全と関連したリスク因子を少なくとも１つ有する、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、請求項７５〜７６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７８】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項７７に記載の方法。
【請求項７９】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項７５〜７８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８０】
ＭＬＣＬ  ＡＴ１またはＡＬＣＡＴ１の発現を減少させる必要のある哺乳類対象において、ＭＬＣＬ  ＡＴ１またはＡＬＣＡＴ１の発現を減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項８１】
前記対象が、心不全を有すると診断されている、請求項８０に記載の方法。
【請求項８２】
前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、請求項８１に記載の方法。
【請求項８３】
前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、請求項８０〜８２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８４】
前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、請求項８０〜８３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８５】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項８４に記載の方法。
【請求項８６】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項８０〜８６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８７】
Ｔａｚ１の発現を増加させる必要のある哺乳類対象において、Ｔａｚ１の発現を増加させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項８８】
前記対象が、心不全を有すると診断されている、請求項８７に記載の方法。
【請求項８９】
前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、請求項８８に記載の方法。
【請求項９０】
前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、請求項８７〜８９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９１】
前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、請求項８７〜９０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９２】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項９１に記載の方法。
【請求項９３】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項８７〜９２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９４】
ＭＬＣＬ  ＡＴ１またはＡＬＣＡＴ１の発現が増加した哺乳類対象、および／または、Ｔａｚ１の発現が減少した哺乳類対象における心不全のリスクを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項９５】
心不全を有する、または有すると疑われる哺乳類対象における、カルジオリピンリモデリングを安定化させる方法。
【請求項９６】
前記哺乳類対象が、ＭＬＣＬ  ＡＴ１またはＡＬＣＡＴ１の増加した発現、および／または、Ｔａｚ１の減少した発現を有する、請求項９５に記載の方法。
【請求項９７】
前記カルジオリピンが、１８：２種のカルジオリピンである、請求項９５に記載の方法。
【請求項９８】
心臓トロポニンＩの発現を減少させる必要のある哺乳類対象において、心臓トロポニンＩの発現を減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項９９】
前記対象が、心不全を有すると診断されている、請求項９８に記載の方法。
【請求項１００】
前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０１】
前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、請求項９８〜１００のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０２】
前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、請求項９８〜１０１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０３】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項１０２に記載の方法。
【請求項１０４】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項９８〜１０２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０５】
心臓トロポニンＩのレベルが増加した哺乳類対象における心不全を予防、治療、または改善する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項１０６】
前記対象が、高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、糖尿病治療薬のロシグリタゾンまたはピオグリタゾンの摂取、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、喫煙、座りがちなライフスタイル、高コレステロール、心不全の家族歴、ストレス、および腎疾患からなる群から選択される、心不全と関連したリスク因子を少なくとも１つ有する、請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０７】
前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、請求項１０５〜１０６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０８】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項１０７に記載の方法。
【請求項１０９】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項１０５〜１０８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１０】
ミトコンドリアＡＴＰ感受性カリウムチャンネル（ｍＫ  ＡＴＰ）の活性を増加させる必要のある対象における、ミトコンドリアＡＴＰ感受性カリウムチャンネル（ｍＫ  ＡＴＰ）の活性を増加させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項１１１】
前記対象が、心不全を有すると診断されている、請求項１１０に記載の方法。
【請求項１１２】
前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１３】
前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、請求項１１０〜１１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１４】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項１１０〜１１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１５】
ｍＫ  ＡＴＰ活性が減少している哺乳類対象における心不全のリスクを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
【請求項１１６】
心不全を有する、または有すると疑われる哺乳類対象における、ミトコンドリアを安定化させる方法。
【請求項１１７】
前記哺乳類対象が、ｍＫ  ＡＴＰの減少した活性を有する、請求項１１５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１２年１０月２２日に出願された米国特許出願第６１／７１６，８６７号および、２０１３年５月１３日に出願された米国特許出願第６１／８２２，７５２号および、２０１３年６月２６日に出願された米国特許出願第６１／８３９，７４３号、２０１３年６月２６日に出願された米国特許出願第６１／８３９，７５０号の優先権を主張する。上述の出願の全内容は、参照により、全体として本明細書に援用される。
【０００２】
技術分野
本発明は、概して、心不全を予防もしくは治療する、心不全と関連したリスク因子を減少させる、および／または、心不全の可能性（リスク）もしくは重篤度を減少させる、および／または、左室リモデリングを予防もしくは治療する組成物および方法に関するものである。特に、本発明は、哺乳類の対象において、有効量の芳香族カチオン性ペプチドを投与し、Ｃ反応性タンパク質、ＴＮＦα、ＩＬ−６、もしくは活性酸素種（ＲＯＳ）、脳性ナトリウム利尿ペプチド、心臓トロポニンＩのレベルを減少または正常化させる、および／または、ＡＬＣＡＴ  １、ＭＬＣＬ  ＡＴ１の発現を減少させることに関する。本発明はまた、有効量の芳香族カチオン性ペプチドを投与し、Ｔａｚ１の発現を増加および／もしくは正常化、ならびに／または、ミトコンドリアＡＴＰ感受性カリウムチャンネル活性の発現を増加および／もしくは正常化させることに関する。
【背景技術】
【０００３】
以下の記述は、読者の理解を補助するために提示されるものである。提示される情報または引用される参照文献のいずれに対しても、本発明の先行技術であることを認めるものではない。
【０００４】
心不全は、死亡の主因であり、世界中に罹病者がいる。米国においては、およそ５００万人の人々が罹患しており、上昇傾向にある唯一の主要な心血管系疾患である。米国において毎年、新たに４００，０００〜７００，０００人が心不全と診断されており、この疾患に起因する米国における死亡者の数は１９７９年以降、二倍以上に増加しており、近年では平均して毎年２５０，０００人となっている。心不全はすべての年齢の人々が罹患するが、心不全のリスクは加齢と共に増加し、老齢者の間では最も普遍的なものとなっている。従って、心不全を伴いながら生きる人々の数は、高齢者が今後数十年にわたり増加するにつれ、著しく増加することが予測されている。心不全の原因は、冠動脈疾患、アテローム性動脈硬化症、心筋炎の既往歴、高血圧、心臓弁の異常、心筋症もしくは心筋炎、先天性の心疾患、重篤な肺疾患、糖尿病、重篤な貧血、甲状腺機能亢進症、不整脈または律動不整を含む、様々な疾患と関連している。
【０００５】
心不全（ＨＦ）（うっ血性心不全ともまた呼称される）は、通常、心拍出量の低下、心筋収縮能の低下、異常な拡張期コンプライアンス、１回拍出量の減少、および肺のうっ血により特徴付けられる。心不全の臨床症状は、心筋収縮状態の減少および心拍出量の低下を反映している。心筋収縮能力の障害とは別に、ＨＦ疾患の状態は、左心室不全、右心室不全、両心室不全、収縮機能障害、拡張機能障害、および肺の作用からも生じうるものである。心疾患と関連した心筋の収縮機能における進行性の減退により、多くの場合、重要な臓器の循環不全が引き起こされる。
【０００６】
心筋梗塞の後に、動力学的および進行性のＬＶリモデリングが生じ、左心室（ＬＶ）拡張、心不全および死亡の原因となる。ＬＶリモデリングは、ＬＶ壁の圧力を増加させ、それにより、酸素要求量が増加する。心筋の消失および１回拍出量の低下を補うために、ＬＶは、全体的に拡張し、ＬＶの非梗塞壁は遠心性に肥大する。心室が拡張するため、当初は、拡張プロセスにより１回拍出量の低下が補われる。しかしながら、進行性の拡張および肥大により、最終的には、うっ血性の心不全がもたらされる。心筋梗塞後１年の、最も強い予測因子の１つは、左心室の容積である。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、概して、心不全を治療または予防するための、芳香族カチオン性ペプチドの使用に関する。本発明はまた、その必要のある対象において、芳香族カチオン性ペプチドの治療有効量またはその薬学的に受容可能な塩（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’、６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）の治療有効量を投与することにより、Ｃ反応性タンパク質、ＴＮＦα、ＩＬ−６、または活性酸素種（ＲＯＳ）、脳性ナトリウム利尿ペプチド、および心臓トロポニンＩのレベルを減少させることに関する。一部の実施態様において、Ｃ反応性タンパク質、ＴＮＦα、ＩＬ−６、ＲＯＳ、または心臓トロポニンＩのレベルを減少させることは、対象における、心不全の治療もしくは予防、心不全に関連したリスク因子の減少、および／または、心不全の可能性（リスク）もしくは重篤度の減少に有用である。
【０００８】
本発明はまた、その必要のある対象に芳香族カチオン性ペプチドの治療有効量を投与することによる、哺乳類における左室リモデリングの治療または予防に関する。一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドは、心臓組織におけるミトコンドリア生合成を安定化させる。一部の実施態様において、その必要のある対象に芳香族カチオン性ペプチドを投与することにより、ＬＶリモデリングの減少に相互関連性を有する脳性ナトリウム利尿ペプチドの減少がもたらされる（ＮＴ−ｐｒｏ  ＢＭＰにおける減少により測定される）。一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドをその必要のある対象に投与することにより、ＬＶリモデリングの減少に相互関連性を有する心臓トロポニンＩの減少がもたらされる。
【０００９】
１つの態様において、本発明により、芳香族カチオン性ペプチドまたはその薬学的に受容可能な塩（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’、６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）の治療有効量を哺乳類対象に投与することを含む、心不全を治療または予防が開示される。一部の実施態様において、当該芳香族カチオン性ペプチドは以下を有するペプチドである：
少なくとも１つの正味の正電荷；
最小で４アミノ酸；
最大で約２０アミノ酸；
正味正電荷の最小数（ｐm）と、アミノ酸残基の総数（ｒ）の間の関係性（ここで、３ｐmは最大数であり、ｒ＋１未満か、または等しい）；および、芳香族基の最小数（ａ）と正味正電荷の総数（ｐt）の間の関係性（ここで、２ａは最大数であり、ｐt＋１未満か、または等しい（ａが１であり、ｐtもまた１でありうる場合を除く））。特定の実施態様において、哺乳類対象は、ヒトである。
【００１０】
一部の実施態様において、２ｐmは、ｒ＋１未満か、または等しい最大数であり、ｐtと等しくてもよい。芳香族カチオン性ペプチドは、最小で２、または最小で３の正荷電を有する、水溶性ペプチドであっても良い。
【００１１】
一部の実施態様において、ペプチドは、１以上の非天然型アミノ酸（たとえば、１以上のＤ−アミノ酸）を含有する。一部の実施態様において、Ｃ末端アミノ酸のＣ末端カルボキシル基は、アミド化されている。ある実施態様において、ペプチドは、最小で４アミノ酸を有する。ペプチドは、最大で約６、最大で約９、または最大で約１２のアミノ酸を有しても良い。
【００１２】
一部の実施態様において、ペプチドは、チロシンまたは２’、６’−ジメチルチロシン（ジメチルチロシンは、Ｄｍｔと表される）残基をＮ末端に含有している。たとえば、ペプチドは、Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2または、２’，６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2の化学式を有していても良い。他の実施態様において、ペプチドは、フェニルアラニンまたは２’，６’−ジメチルフェニルアラニン残基をＮ末端に含有している。たとえば、ペプチドは、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2または、２’，６’−Ｄｍｐ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2の化学式を有しても良い。特定の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドは、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の化学式を有している。
【００１３】
一部の実施態様において、ペプチドは、以下の化学式Ｉにより定義される：
【化１】
2018109012.tif 000003
【００１４】
ここで、Ｒ1およびＲ2は、それぞれ、
（ｉ）水素；
（ｉｉ）直鎖型Ｃ1−Ｃ6アルキルまたは分枝型Ｃ1−Ｃ6アルキル；
【化２】
2018109012.tif 000004
【化３】
2018109012.tif 000005
【化４】
2018109012.tif 000006
から独立して選択され、
Ｒ3およびＲ4は、それぞれ、
（ｉ）水素；
（ｉｉ）直鎖型Ｃ1−Ｃ6アルキルまたは分枝型Ｃ1−Ｃ6アルキル；
（ｉｉｉ）Ｃ1−Ｃ6アルコキシ；
（ｉｖ）アミノ；
（ｖ）Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ；
（ｖｉ）Ｃ1−Ｃ4ジアルキルアミノ；
（ｖｉｉ）ニトロ；
（ｖｉｉｉ）ヒドロキシル；
（ｉｘ）ハロゲンであり、ここで、「ハロゲン」には、クロロ、フルオロ、ブロモ、およびヨードが包含される、
から独立して選択され、
Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、およびＲ9は、それぞれ、
（ｉ）水素；
（ｉｉ）直鎖型Ｃ1−Ｃ6アルキルまたは分枝型Ｃ1−Ｃ6アルキル；
（ｉｉｉ）Ｃ1−Ｃ6アルコキシ；
（ｉｖ）アミノ；
（ｖ）Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ；
（ｖｉ）Ｃ1−Ｃ4ジアルキルアミノ；
（ｖｉｉ）ニトロ；
（ｖｉｉｉ）ヒドロキシル；
（ｉｘ）ハロゲンであり、ここで、「ハロゲン」には、クロロ、フルオロ、ブロモ、およびヨードが包含され；
および、ｎは、１〜５の整数である、
から独立して選択される。
【００１５】
一部の実施態様において、Ｒ1およびＲ2は、水素であり；Ｒ3およびＲ4は、メチルであり；Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、およびＲ9は、すべて水素であり；ｎは、４である。
【００１６】
一部の実施態様において、ペプチドは、以下の化学式ＩＩにより定義される：
【化５】
2018109012.tif 000007
ここで、Ｒ1およびＲ2は、それぞれ、
（ｉ）水素；
（ｉｉ）直鎖型Ｃ1−Ｃ6アルキルまたは分枝型Ｃ1−Ｃ6アルキル；
【化６】
2018109012.tif 000008
【化７】
2018109012.tif 000009
【化８】
2018109012.tif 000010
から独立して選択され、
Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11、およびＲ12は、それぞれ、
（ｉ）水素；
（ｉｉ）直鎖型Ｃ1−Ｃ6アルキルまたは分枝型Ｃ1−Ｃ6アルキル；
（ｉｉｉ）Ｃ1−Ｃ6アルコキシ；
（ｉｖ）アミノ；
（ｖ）Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ；
（ｖｉ）Ｃ1−Ｃ4ジアルキルアミノ；
（ｖｉｉ）ニトロ；
（ｖｉｉｉ）ヒドロキシル；
（ｉｘ）ハロゲンであり、ここで、「ハロゲン」には、クロロ、フルオロ、ブロモ、およびヨードが包含され；
ならびに、ｎは、１〜５の整数である、
から独立して選択される。
【００１７】
一部の実施態様において、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11、およびＲ12は、すべて水素であり；および、ｎは４である。他の実施態様において、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、およびＲ11は、すべて水素であり；Ｒ8およびＲ12は、メチルであり；Ｒ10は、ヒドロキシルであり；および、ｎは４である。
【００１８】
１つの態様において、本発明により、その必要のある哺乳類対象における、Ｃ反応性タンパク質、ＴＮＦα、インターロイキン６、活性酸素種、および心臓トロポニンＩのうちの１以上のレベルを減少させる方法が提示される。一部の実施態様において、当該方法には、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することが含まれる。
【００１９】
さらに、あるいは別の態様において、本発明により、Ｃ反応性タンパク質、ＴＮＦα、インターロイキン６、活性酸素種、および心臓トロポニンＩのうちの１以上のレベルが増加した哺乳類対象における心不全を予防、治療または改善する方法が提示される。一部の実施態様において、当該方法には、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することが含まれる。
【００２０】
一部の実施態様において、当該対象は、心不全に罹患していると診断されている。一部の実施態様において、心不全は、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する。
【００２１】
一部の実施態様において、対象は、高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、糖尿病治療薬のロシグリタゾンまたはピオグリタゾンの摂取、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、喫煙、座りがちなライフスタイル、高コレステロール、心不全の家族歴、ストレス、および腎疾患からなる群から選択される、心不全と関連したリスク因子を少なくとも１つ、有している。
【００２２】
一部の実施態様において、ペプチドは、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される。
【００２３】
さらに、またはあるいは、一部の実施態様において、ペプチドは、対象に対して、心血管系剤とは別々に投与され、心血管系剤と連続して投与され、または、心血管系剤と同時に投与される。一部の実施態様において、心血管系剤は、以下の剤のうちの１以上である：抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体（ｃａｒｄｉｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅ）、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬。
【００２４】
一部の実施態様において、ペプチドは、薬学的に受容可能な塩の形態の、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2である。一部の実施態様において、当該塩は、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する。
【００２５】
さらに、またはあるいは、一部の態様において、哺乳類におけるＬＶ機能を改善するための方法が提示される。一部の実施態様において、対象は、Ｃ反応性タンパク質、活性酸素種、インターロイキン６、ＴＮＦα、および心臓トロポニンＩのうちの１以上のレベルが増加している。一部の実施態様において、当該方法は、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含む。
【００２６】
一部の実施態様において、哺乳類対象は、心不全、心筋梗塞、または、他の狭窄事象もしくは血管事象に罹患しているか、または罹患している可能性がある。
【００２７】
一部の実施態様において、ペプチドは、薬学的に受容可能な塩の形態の、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2である。一部の実施態様において、当該塩は、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する。
【００２８】
１つの態様において、本発明により、その必要のある哺乳類対象における、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰ、および／または、心臓トロポニンＩのレベルを減少させる方法が提示され、当該方法には、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することが含まれる。一部の実施態様において、対象は、急性心筋梗塞に罹患している。一部の実施態様において、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰ、および／または心臓トロポニンＩは、ＬＶリモデリングの予防、治療または改善の有効性の指標である。
【００２９】
１つの態様において、本発明により、その必要のある哺乳類対象における、ＭＬＣＬ  ＡＴ１またはＡＬＣＡＴ１の発現を減少させる方法が提示される。一部の実施態様において、当該方法には、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することが含まれる。一部の実施態様において、対象は、心不全を有すると診断されている。
【００３０】
他の態様において、本発明により、その必要のある哺乳類対象におけるＴａｚ１の発現を増加させる方法が提示される。一部の実施態様において、当該方法には、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することが含まれる。一部の実施態様において、対象は、心不全を有すると診断されている。
【００３１】
他の態様において、本発明により、ＭＬＣＬ  ＡＴ１もしくはＡＬＣＡＴ１の発現が増加した、および／または、Ｔａｚ１の発現が減少した、哺乳類対象における心不全のリスクを減少させる方法が提示される。一部の実施態様において、当該方法には、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することが含まれる。
【００３２】
他の態様において、本発明により、心不全を有する哺乳類対象、または心不全を有すると疑われる哺乳類対象におけるカルジオリピンリモデリングを安定化させる方法が提示される。一部の実施態様において、哺乳類対象は、ＭＬＣＬ  ＡＴ１もしくはＡＬＣＡＴ１の発現が増加している、および／または、Ｔａｚ１の発現が減少している。一部の実施態様において、カルジオリピンは、１８：２種のカルジオリピンである。
【００３３】
１つの態様において、本発明により、その必要のある哺乳類対象における心臓トロポニンＩのレベルを減少させる方法が提示される。一部の実施態様において、当該方法には、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することが含まれる。
【００３４】
さらに、またはあるいは、他の態様において、本発明により、心臓トロポニンＩのレベルが増加した哺乳類対象における心不全を予防、治療、または改善する方法が提示される。一部の実施態様において、当該方法には、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することが含まれる。
【００３５】
一部の実施態様において、対象は、心不全を有すると診断されている。一部の実施態様において、心不全は、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する。
【００３６】
一部の実施態様において、対象は、高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、糖尿病治療薬のロシグリタゾンまたはピオグリタゾンの摂取、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、喫煙、座りがちなライフスタイル、高コレステロール、心不全の家族歴、ストレス、および腎疾患からなる群から選択される、心不全と関連したリスク因子を少なくとも１つ、有している。
【００３７】
一部の実施態様において、ペプチドは、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される。
【００３８】
さらに、またはあるいは、一部の実施態様において、ペプチドは、対象に対して、心血管系剤とは別々に投与され、心血管系剤と連続して投与され、または、心血管系剤と同時に投与される。一部の実施態様において、心血管系剤は、以下の剤のうちの１以上である：抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬。
【００３９】
一部の実施態様において、ペプチドは、薬学的に受容可能な塩の形態の、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2である。一部の実施態様において、当該塩は、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する。
【００４０】
他の態様において、本発明により、その必要のある対象における、ミトコンドリアＡＴＰ感受性カリウムチャンネル（ｍＫ  ＡＴＰ）活性を増加させる方法が提示され、当該方法には、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することが含まれる。
【００４１】
さらに、またはあるいは、一部の態様において、本発明により、ｍＫ  ＡＴＰ活性が低下した哺乳類対象における心不全のリスクを減少させる方法が提示され、当該方法には、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することが含まれる。
【００４２】
一部の実施態様において、対象は、心不全を有すると診断されている。一部の実施態様において、心不全は、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する。一部の実施態様において、ペプチドは、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される。一部の実施態様において、薬学的に受容可能な塩は、当該塩は、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する。
【００４３】
他の態様において、本発明により、心不全を有する哺乳類対象、または心不全を有すると疑われる哺乳類対象における、ミトコンドリアを安定化させる方法が提示される。一部の実施態様において、哺乳類対象は、ｍＫ  ＡＴＰの活性が減少している。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】図１は、基準レベルおよび未処置対照と比較した、芳香族カチオン性Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置した６週後、または１２週後に行われた高感受性アッセイにより測定された、Ｃ反応性タンパク質のレベルを示すグラフである。
【図２】図２は、基準レベルおよび未処置対照と比較した、芳香族カチオン性Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置した６週後、または１２週後のＲＯＳのレベルを示すグラフである。
【図３】図３は、基準レベルおよび未処置対照と比較した、芳香族カチオン性Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置した６週後、または１２週後のインターロイキン６（ＩＬ−６）のレベルを示すグラフである。
【図４】図４は、基準レベルおよび未処置対照と比較した、芳香族カチオン性Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置した６週後、または１２週後の腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）のレベルを示すグラフである。
【図５】図５は、基準レベルおよび未処置対照と比較した、芳香族カチオン性Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置した６週後、または１２週後のＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰ（Ｎ末端ｐｒｏ−脳性ナトリウム利尿ペプチド）のレベルを示すグラフである。
【図６】図６は、心不全モデルにおける、カルジオリピン種１８：２−１８：２−１８：２−１８：２のカルジオリピン内容に対する、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果を示すチャートである。
【図７Ａ】図７Ａは、心不全モデルにおける、Ｔａｚ１発現に対する、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果を示すチャートである。
【図７Ｂ】図７Ｂは、心不全モデルにおける、ＭＬＣＬ  ＡＴ１発現に対する、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果を示すチャートである。
【図７Ｃ】図７Ｃは、心不全モデルにおける、ＡＬＣＡＴ１発現に対する、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果を示すチャートである。
【発明を実施するための形態】
【００４５】
本発明のある態様、方法、実施態様、バリエーション、および特性が、本発明が十分に理解されるよう、様々なレベルの詳細により以下に記述されることを理解されたい。本明細書において用いられている、ある用語の定義を、以下に記載する。他で定義されない限り、通常、本明細書に用いられる全ての技術的用語および科学的用語は、本発明が属する当分野の当業者により普遍的に理解されるものと同じ意味を有する。
【００４６】
本明細書および添付の請求項において、単数形の「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」には、他で明確に指定されない限り、複数の指示対象を含む。たとえば、「ある細胞（ａ  ｃｅｌｌ）」という場合、２以上の細胞の組み合わせ等を含む。
【００４７】
本明細書において、剤、薬物、またはペプチドの対象への「投与」とは、その意図される機能を発揮するために、任意の経路で化合物を対象に導入または送達することを含む。投与は、任意の適切な経路（経口、鼻内、非経口（静脈内、筋肉内、腹腔内、または皮下）、または局所を含む）により行われても良い。投与には、自己投与、および他者による投与が含まれる。
【００４８】
本明細書において、「アミノ酸」という用語には、天然型アミノ酸および合成アミノ酸、ならびに、天然型アミノ酸に類似した様式で機能するアミノ酸アナログおよびアミノ酸模倣物が含まれる。天然型アミノ酸とは、遺伝子コードによりコードされるもの、ならびに、後に修飾されるそれらアミノ酸（たとえば、ヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタミン酸およびＯ−ホスホセリン）である。アミノ酸アナログとは、天然型アミノ酸と同じ基礎化学構造（すなわち、水素、カルボキシル基、アミノ基、およびＲ基（たとえば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニン、スルホキシド、メチオニンメチルスルホニウム等）に結合されたα炭素）を有する化合物を指す。そのようなアナログは、修飾Ｒ基（たとえば、ノルロイシン）または修飾ペプチド主鎖を有するが、天然型アミノ酸と同じ基礎化学構造を維持している。アミノ酸模倣物とは、アミノ酸の一般的な構造とは異なる構造を有するが、天然型アミノ酸と類似した様式で機能する化合物を指す。アミノ酸は、本明細書において、普遍的に知られている３文字のシンボル、または１文字のシンボル（IUPAC-IUB Biochemical Nomenclature Commissionにより推奨されている）のいずれかにより表されても良い。
【００４９】
本明細書において、投与への言及と共に用いられる「長期の」という用語は、約３日、約４日、約５日、約６日、約１週、約２週、約３週、４週、５週、６週、約２か月、約３か月、約６か月、約９か月、約１年かそれ以上の間、治療剤（たとえば、芳香族カチオン性ペプチド等）を投与することを指す。一部の実施態様において、長期投与には、１日に１回、１日に２回、１日に３〜４回、１日おき、２日おき、週に１度、または月に１度が含まれる。
【００５０】
本明細書において、「有効量」または「治療有効量」という用語は、所望される治療効果および／または予防効果を得るために十分な量（たとえば、対象におけるＣ反応性タンパク質、インターロイキン６、ＲＯＳ、ＴＮＦα、心臓トロポニンＩ、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰ、ＭＬＣＬ  ＡＴ１、またはＡＬＣＡＴ１等のうちの１以上のレベルの減少をもたらす量、ならびに／または、左心室（ＬＶ）リモデリングを予防、改善もしくは治療するために、またはＬＶ機能を改善するために十分な量、ならびに／または、たとえばその必要のある対象における、Ｔａｚ１の発現の増加（たとえば正常化）および／もしくはｍＫ  ＡＴＰの増加をもたらす量を指す。治療応用または予防応用の場合において、一部の実施態様の場合、対象に投与される組成物の量は、対象における、Ｃ反応性タンパク質、インターロイキン６、ＲＯＳ、ＴＮＦα、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰもしくは心臓トロポニンのレベル、ＭＬＣＬ  ＡＴ１、ＡＬＣＡＴ１もしくはＴａｚ１の発現、ならびに／または、ｍＫ  ＡＴＰの活性、疾患のタイプおよび重篤度、ならびに、個人の特徴（たとえば、一般健康状態、年齢、性別、体重および薬剤耐容性等）に依存する。一部の実施態様においてはまた、疾患の程度、重篤度およびタイプにも依存する。当業者であれば、これらの要素および他の要素により、適切な投与量を決定することができるであろう。組成物はまた、１以上の追加の治療化合物と組み合わせて投与されても良い。本明細書に記述される方法において、芳香族カチオン性ペプチドは、心不全の兆候、症状、またはリスク因子（たとえば、心肥大、多呼吸、肝腫脹、および心筋梗塞等）を１つ以上有する対象に投与されても良い。たとえば、一部の実施態様において、本芳香族カチオン性ペプチドの治療有効量は、投与後に、対象におけるＣ反応性タンパク質、インターロイキン６、ＲＯＳ、ＴＮＦα、および／または心臓トロポニンＩのレベルが減少するレベルを含む。さらに、またはあるいは、一部の実施態様において、治療有効量により、ＬＶリモデリングが予防、改善もしくは治療され、および／または、ＬＶ機能が改善される。さらに、またはあるいは、一部の実施態様において、本芳香族カチオン性ペプチドの治療有効量には、投与後に、その必要のある対象におけるＭＬＣＬ  ＡＴ１またはＡＬＣＡＴ１の発現が減少するレベルが含まれる。さらに、またはあるいは、一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドの治療有効量には、投与後に、その必要のある対象において、Ｔａｚ１の発現が増加するレベルが含まれる。さらに、またはあるいは、一部の実施態様において、本芳香族カチオン性ペプチドの治療有効量には、ｍＫ  ＡＴＰの活性が増加するレベルが含まれる。一部の実施態様において、治療有効量により、心不全の生理学的な影響、および／もしくは、心不全のリスク因子、および／もしくは心不全の可能性が減少または改善される。一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドの有効量は、対象における脳性ナトリウム利尿ペプチドのレベルが（たとえば、その対象に対する正常なレベル、または対照レベルにまで）減少する十分な量である。
【００５１】
本明細書において、「うっ血性心不全（ＣＨＦ）」、「慢性心不全」、「急性心不全」、および、「心不全」という用語は、相互交換可能に用いられ、および、心臓が適切な速度または適切な量で血液を押し出すことが出来ないような、異常に低い心拍出量により特徴付けられる任意の状態を指す。心臓が、身体の他の部分に適切に血液を送り出すことが出来ない場合、または、心臓の弁のうちの１以上が狭窄もしくは機能不全となった場合、血液が肺へと戻ってしまう可能性があり、それにより、肺がうっ血してしまう。もしこの逆流が長期間発生した場合、心不全が生じうる。心不全の典型的な症状としては、息切れ（呼吸困難）、疲労、衰弱、横になった際に呼吸が困難となる、および、脚、足首または腹部のむくみ（浮腫）が挙げられる。心不全の原因は、冠状動脈疾患、全身性の高血圧、心筋症または心筋炎、先天性心疾患、心臓弁の異常または心臓弁膜症、重篤な肺疾患、糖尿病、重篤な貧血、甲状腺機能亢進症、不整脈または律動不整、および心筋梗塞を含む、様々な疾患に関連している。うっ血性心不全の初期の兆候は、心肥大（拡張心）、多呼吸（急速な呼吸；左側の不全の場合に発生）、および肝腫脹（拡張肝臓；右側の不全の場合に発生）である。
【００５２】
本明細書において、「高血圧性心筋症」という用語は、高血圧（高い血圧）の影響に起因し、脆弱化した心臓を指す。徐々に、制御できなくなった高血圧により、心筋が脆弱化する。高血圧性心筋症が悪化するにつれ、うっ血性心不全が発生する。高血圧性心筋症の早期の兆候は、咳、衰弱、および疲労が挙げられる。高血圧性心筋症のさらなる症状としては、足のむくみ、体重増加、横になった際の呼吸の困難性、動いた際の息切れの増加、および、真夜中に息切れして目覚めることが挙げられる。
【００５３】
本明細書において、「左室（ＬＶ）リモデリング」という用語は、当業者に公知の意味を有し、および、多くの場合、心筋梗塞の後の状態を指す。心筋梗塞の後、ＬＶの拡張、心不全、および死亡をもたらす、動力学的で進行性のＬＶリモデリングが発生する。心筋梗塞（ＭＩ）の最初の週のうちに、壊死した領域が薄くなり、引き伸ばされ（梗塞拡張）、それによって、梗塞領域の局所的な拡張がもたらされる。この現象により、ＬＶ壁の圧力が増加し、それによって、酸素要求量が増加する。心筋の消失と拍出量の減少を補うために、ＬＶは全体的に拡張し、ＬＶの非梗塞壁は遠心性に肥大し、それによって、筋節が、縦方向に周囲に加えられる。心室が拡張するにつれ、当初はこのプロセスにより拍出量の減少が補われるが、最終的には、進行性の拡張および肥大により、うっ血性の心不全がもたらされる。ＭＩ後１年の、最も強い死亡予測因子の１つは、左心室の容積であり、拡張が大きくなるにつれ、死の確率も大きくなる。非梗塞域の心筋および梗塞境界域の心筋の代謝異常ならびに機能異常も、ＬＶリモデリング現象に寄与する可能性がある。ミトコンドリアの構造と機能の異常により、弱った心臓をサポートするために必要とされる筋肉そのものにおける、ＡＴＰ産生の減少が発生しうる。それゆえ、一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）が、ＬＶリモデリングの治療、改善および／もしくは予防に有用であり、ならびに／または、心不全の対象における、生き残った心筋の機能の安定化および／もしくは増強に有用である。限定の目的ではなく、例示の目的で、一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドが、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰおよび／または心臓トロポニンＩを減少させており、ここで、当該Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰおよび／または心臓トロポニンＩの減少は、ＬＶリモデリングの減少または逆転と相関している。
【００５４】
本明細書において、ＣＲＰ、もしくはＴＮＦα、もしくはＩＬ−６、もしくはＲＯＳ、もしくはＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰ、もしくは心臓トロポニンＩのレベルの「正常化された」レベル、および／または、ＭＬＣＬ  ＡＴ１、ＡＬＣＡＴ１、もしくはＴａｚ１の発現の「正常化された」レベル、および／または、ｍＫ  ＡＴＰの活性が「正常化された」レベルとは、対象の基準レベルまたは基準範囲にまで、対象のＣＲＰレベル、もしくはＴＮＦαレベル、もしくはＩＬ−６レベル、もしくはＲＯＳレベル、もしくはＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベル、もしくは心臓トロポニンＩ、もしくはＭＬＣＬ  ＡＴ１、もしくはＡＬＣＡＴ１レベルが減少すること、および／または、Ｔａｚ１の発現もしくはｍＫ  ＡＴＰの活性が増加すること、または、たとえば、対照実験、および／または、対象もしくは適切な群（たとえば、年齢、民族、疾患状態、薬剤治療レジメン、体重、性別等を合致させた群）からの経時的な対照試料採取を介して、「正常」もしくは「対照」レベルとして決定されているレベルまたは範囲にまで、対象のレベルが減少すること、を指す。本明細書において、「対照レベル」とは、その対象に対して、もしくは、対象の適切な群に対して、平均または正常と見なされているレベルを指す。
【００５５】
本明細書において、対象のＣＲＰレベル、またはＴＮＦαレベル、またはＩＬ−６レベル、またはＲＯＳレベル、またはＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベル、または心臓トロポニンＩレベル、またはＭＬＣＬ  ＡＴ１発現レベル、またはＡＬＣＡＴ１発現レベルの「減少」とは、対象におけるＣＲＰのレベル、またはＴＮＦα、またはＩＬ−６、またはＲＯＳ、またはＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰ、または心臓トロポニンＩ、またはＭＬＣＬ  ＡＴ１、またはＡＬＣＡＴ１の発現のレベルが低下することを意味する（たとえば、対象の血液ＣＲＰレベル）。一部の実施態様において、ＣＲＰレベル、またはＴＮＦαレベル、またはＩＬ−６レベル、またはＲＯＳレベル、またはＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベル、または心臓トロポニンＩレベル、またはＭＬＣＬ  ＡＴ１レベル、またはＡＬＣＡＴ１レベルの減少は、約１％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％かそれ以上による減少である。
【００５６】
本明細書において、対象のＴａｚ１発現レベルまたはｍＫ  ＡＴＰ活性の「増加」とは、対象におけるＴａｚ１レベル（たとえば、左心室心筋における対象のＴａｚ１発現のレベル）の増加、またはｍＫ  ＡＴＰ活性の増加を意味する。一部の実施態様において、Ｔａｚ１発現レベルの増加、および／または、ｍＫ  ＡＴＰ活性の増加は、たとえば、基準または対照レベルからの、約１％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約１００％、または約１１０％かそれ以上による増加である。あるいは、またはさらには、一部の実施態様において、Ｔａｚ１発現レベルの増加は、たとえば、基準または対照レベルと比較して、約０．２５倍〜約０．５倍、または約０．５倍〜約０．７５倍、または約０．７５倍〜約１．０倍、または約１．０倍〜約１．５倍の減少の低下として測定される。
【００５７】
「単離された」もしくは「精製された」ポリペプチドまたはペプチドは、細胞性物質または、当該剤が由来する細胞もしくは細胞源からの他の混入ポリペプチドから実質的に遊離しているか、または、化学合成された際の化学前駆体もしくは他の化学物質から実質的に遊離している。たとえば、単離された芳香族カチオン性ペプチドは、当該剤の診断的使用または治療的使用と干渉しうる物質から遊離している。そのような干渉物質としては、酵素、ホルモン、ならびに、他のタンパク質性溶質および非タンパク質性溶質が挙げられる。
【００５８】
本明細書において、「ポリペプチド」、「ペプチド」、および「タンパク質」という用語は、相互交換可能に用いられ、ペプチド結合または修飾ペプチド結合により互いに結合された２以上のアミノ酸を含有するポリマーを意味する（すなわち、ペプチドアイソスター）。ポリペプチドとは、短鎖（通常、ペプチド、糖ペプチドまたはオリゴマーと呼称される）および、長鎖（通常、タンパク質と呼称される）の両方を指す。ポリペプチドは、２０の遺伝子にコードされたアミノ酸以外のアミノ酸を含有しても良い。ポリペプチドには、天然のプロセス（たとえば、翻訳後プロセス）または当分野公知の化学修飾技術のいずれかにより修飾されたアミノ酸配列が含有される。
【００５９】
本明細書において、「同時」の治療的使用という用語は、同時に、または実質的に同時に、同じ経路により、少なくとも２つの活性成分を投与することを指す。
【００６０】
本明細書において、「別々の」治療的使用という用語は、同時に、または実質的に同時に、異なる経路により、少なくとも２つの活性成分を投与することを指す。
【００６１】
本明細書において、「連続的な」治療上の使用という用語は、異なる時間に、同一または異なる投与経路で、少なくとも２つの活性成分を投与することを指す。より具体的には、連続的な使用とは、他（複数含む）を投与が開始される前に、活性成分のうちの１つを投与すること全体を指す。ゆえに、他の活性成分（複数含む）を投与する数分、数時間、または数日以上前に、活性成分のうちの１つを投与することができる。このケースにおいて、同時に処置することは無い。
【００６２】
本明細書において、「治療すること」または「治療」または「緩和」という用語は、治療的処置を指し、ここで、その目的は、標的とされた病的な状態または疾患を予防または減速させる（減少させる）ことである。もし本明細書に記述される方法に従う芳香族カチオン性ペプチドの治療有効量を受けた後、対象が、１以上の観察可能な、および／もしくは測定可能な心不全の兆候ならびに症状（たとえば、心拍出量、心筋収縮力、心肥大、息切れ（ｔａｃｈｏｎｅａ）および／または肝肥大）の減少または消失を示した場合、対象は、心不全に対し成功裏に「治療されている」。また、本明細書において、心不全の治療とは、心不全が潜在する任意の１以上の状態（限定されないが、心筋収縮能の減少、異常な拡張期コンプライアンス、拍出量の減少、肺のうっ血、および心拍出量の低下を含む）を治療することを指す。また、当該用語は、対照レベルまたは「正常な」レベルのＣ反応性タンパク質、インターロイキン６、ＲＯＳ、ＴＮＦα、心臓トロポニンＩレベル、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰ、ＭＬＣＬ  ＡＴ１および／またはＡＬＣＡＴ１よりも高い、対象における、Ｃ反応性タンパク質、インターロイキン６、ＲＯＳ、ＴＮＦα、心臓トロポニンＩレベル、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰ、ＭＬＣＬ  ＡＴ１および／またはＡＬＣＡＴ１の減少に適用される。また、当該用語は、対照レベルまたは「正常な」レベルのＴａｚ１よりも低い対象、および／または、低いｍＫ  ＡＴＰ活性を有する対象における、Ｔａｚ１の発現の増加、および／または、ｍＫ  ＡＴＰ活性の増加に適用される。さらに、またはあるいは、当該用語は、ＬＶリモデリングに関連する１以上の観察可能な、および／または、測定可能な兆候ならびに症状の減少または消失に適用される（たとえば、ＬＶ拍出量、ＬＶ駆出率の改善、短縮率の改善、梗塞拡大の減少、血流動態の改善、ＬＶ心筋における瘢痕形成の減少、および肺容積の減少等）。また、記述される医学的状態の治療または予防の様々な方法は、「実質的に」を意味することが意図され、それには、完全な治療または予防のみならず、完全ではない治療または予防も含まれ、この場合においては、いくらかの生物学的または医学的に関連のある結果が得られることを認識されたい。
【００６３】
本明細書において、疾患または状態を「予防」または「予防すること」は、統計試料において、未処置の対照試料と比較し、処置された試料における疾患または状態の発生を減少させる複合語、または、未処置対照試料と比較して、疾患もしくは状態の１以上の症状の発生を遅延させ、または、重篤度を減少させる複合語を指す。本明細書において、心不全の予防には、心不全の発生を予防すること、心不全の発生を遅延させること、心不全の進行または増進を予防すること、心不全の進行または増進を減速させること、心不全の進行または増進を遅延させること、および、心不全の進行を、進行した状態から、あまり進行していない状態へと逆行させること、が含まれる。本明細書において、心不全の予防にはまた、心不全の再発を予防することが含まれる。本明細書において、ＬＶリモデリングの予防には、ＬＶリモデリングの発生を予防すること、ＬＶリモデリングの発生を遅延させること、ＬＶリモデリングの進行または増進を予防すること、ＬＶリモデリングの進行または増進を減速させること、ＬＶリモデリングの進行または増進を遅延させること、および、ＬＶリモデリングの進行を、進んだ状態から、あまり進んでいない状態に逆行させること、が含まれる。
【００６４】
本明細書において、「正味荷電」とは、本ペプチド中に存在するアミノ酸により持ち込まれる正荷電の数と、負荷電の数のバランスを指す。本明細書において、正味荷電は、生理学的なｐＨで測定されることを理解されたい。生理学的なｐＨで正に荷電する天然型アミノ酸としては、Ｌ−リシン、Ｌ−アルギニン、およびＬ−ヒスチジンが挙げられる。生理学的なｐＨで負に荷電する天然型アミノ酸としては、Ｌ−アスパラギン酸、およびＬ−グルタミン酸が挙げられる。
【００６５】
本明細書において、「薬学的に受容可能な塩」という用語は、たとえば哺乳類等の患者に対する投与が許容できる、塩基または酸から調製された塩を指す（たとえば、所与の投与レジメに対し、哺乳類の受容可能な安全性を有する塩）。しかしながら、当該塩は、必ずしも薬学的に受容可能な塩であることを必要とされないことを理解されたい（たとえば、患者に対する投与が意図されない中間体化合物の塩等）。薬学的に受容可能な塩は、薬学的に受容可能な無機塩基または有機塩基から誘導されても良く、および、薬学的に受容可能な無機酸または有機酸から誘導されても良い。さらに、ペプチドが塩基性部分（たとえば、アミン、ピリジンまたはイミダゾール等）および酸性部分（たとえば、カルボキシル酸またはテトラゾール等）の両方を含有する場合、両性イオンが形成され得、および、両性イオンは、本明細書に用いられる「塩」の用語の範囲内に含まれる。
【００６６】
Ｃ反応性タンパク質
本明細書において、「Ｃ反応性タンパク質」（ＣＲＰ）とは、５つの同一なサブユニットから構成される五量体のポリペプチドを指し、タンパク質のペントラキシンファミリーに属する。ＣＲＰサブユニットは２２４アミノ酸のプロポリペプチドとして発現され、１８アミノ酸のリーダー配列が除去され、成熟型の２０６アミノ酸のＣＲＰユニットが形成される。例示として、２２４アミノ酸のＣＲＰ前駆体の非限定的な配列を、以下の表１に示す（アクセッション番号は、それぞれ、NP_000558、および、CAA39671）。
【表１】
2018109012.tif 000011
【００６７】
ＣＲＰは、急性期反応物質であり、炎症刺激に応答して肝臓により産生され、血液中を循環する。ＣＲＰのレベルは、たとえば、限定されないが、感染による炎症（たとえば、細菌、ウイルスまたは真菌）、リウマチおよび他の炎症性疾患、悪性腫瘍、組織損傷またはネクローシス等の、急性炎症または慢性炎症に応答して、上昇する。血漿ＣＲＰのレベルは、重篤な外傷、細菌感染、炎症、外科手術、または新生物増殖の後で増加する（たとえば、１００倍以上）。ＣＲＰのレベルは、組織損傷の後、数時間以内で急速に増加するため、ＣＲＰは、自然免疫システムの一部であり、宿主防御を担うことが示唆されている。ＣＲＰ機能および免疫システムに関して、ＣＲＰは、マクロファージへのＬＤＬ取り込みを増加させ、および、マクロファージの能力を増強させ、泡沫細胞を形成させること；内皮細胞における内皮一酸化窒素合成酵素を阻害すること；プラスミノーゲン活性化因子阻害物質１の発現および活性を増加させること；マクロファージを活性化し、組織因子を分泌させること；内皮細胞において付着分子の発現をアップレギュレートさせ、損傷部位に単球を引き寄せること、が示されている。ゆえに、ＣＲＰレベルは、炎症および免疫応答のマーカーとして利用される。
【００６８】
さらに、ＣＲＰレベルは、血管硬化および心血管系疾患または心血管系事象（たとえば、心不全および心筋梗塞等）と相関している。心血管系疾患は、少なくとも一部は炎症プロセスであり、ＣＲＰは、たとえば、動脈硬化症およびそれに引き続く血管疾患との関連で研究がなされている。たとえば、慢性的なＣＲＰの低レベルの増加は、将来的な心血管系事象（心筋梗塞、虚血性脳梗塞、末梢血管障害および突然の心臓死を含む）のリスクの予測因子であることが判明している。複数の疫学調査および介入調査に基づくと、小規模なＣＲＰの上昇（高感受性のＣＲＰアッセイ「ｈｓＣＲＰ」により測定される）は、将来的な心血管系のリスクと関連していることが示されている。ｈｓＣＲＰは、以下により詳細に検討する。
【００６９】
心血管系リスクマーカーとしての役割に加え、ＣＲＰはまた、アテローム発生に直接的に関与することが示されており、および、高レベルのＣＲＰ  ｍＲＮＡがアテローム斑において発見されている。ＣＲＰは、炎症性サイトカインに応答し、アテローム性動脈硬化症の病変部位のヒト動脈平滑筋細胞により産生されること；ゆえに、局所的に産生されたＣＲＰは、アテローム発生に直接関与し、心血管系合併症の発生を促進することが示されている。
【００７０】
一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）を用いた処置により、心不全を有する、または心不全を有するリスクのある哺乳類対象における心筋中のＣ反応性タンパク質のレベルが減少する。
【００７１】
一部の実施態様において、Ｃ反応性タンパク質のレベルは、約０．２５倍〜約０．５倍、または約０．５倍〜約０．７５倍、または約０．７５倍〜約１．０倍、または約１．０倍〜約１．５倍、または約１．５倍〜約２．０倍、または約２．０倍〜約３．０倍、または約３．０倍〜約５．０倍、または約５．０倍〜約６．０倍まで減少する。
【００７２】
ＣＲＰレベルの測定
米国食品医薬品局（ＦＤＡ）により評価されているＣＲＰアッセイには、３つの広いカテゴリーがある：（１）標準的なＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）アッセイ；（２）高感受性Ｃ反応性タンパク質（ｈｓＣＲＰ）アッセイ；および、（３）心臓Ｃ反応性タンパク質（ｃＣＲＰ）アッセイ。
【００７３】
標準的なＣＲＰアッセイ
標準的なＣＲＰアッセイには通常、定量、半定量、および定性的なアッセイが含まれ、感染、組織損傷および炎症性疾患の評価のための使用が指定されている。これらのアッセイにより、炎症性疾患の診断、治療およびモニタリングに関する情報が得られる。上述のように、ＣＲＰは、感染性炎症プロセスおよび非感染性炎症プロセスに対する、様々で非特異的な反応の間に血液レベルが上昇する、サイトカイン誘導性の「急性」タンパク質のうちの１つである。標準的なＣＲＰアッセイに対しては、検証値は通常、１０ｍｇ／Ｌを超えるレベルで臨床的に意味があるとみなされる。明らかに健常なヒトの血液ＣＲＰレベルは５ｍｇ／Ｌより低く、様々な疾患で、多くの場合、急性炎症の発生後４〜８時間以内にこの閾値を超え、ＣＲＰ値はおよそ２０〜５００ｍｇ／Ｌに達する。ＣＲＰは、赤血球沈降速度（ＥＳＲ）および白血球数よりも、より感受性が高く、信頼性がある、急性炎症性プロセスの指標である。血液ＣＲＰレベルは、ＥＳＲよりも急速に上昇し、疾患が治まった後、ＣＲＰ値は急速に落ち、多くの場合、ＥＳＲが正常に戻る数日前に基準範囲に戻る。
【００７４】
高感受性ＣＲＰアッセイ
高感受性ＣＲＰアッセイは、ほとんどの標準的なＣＲＰアッセイの一般的な測定範囲を下回る範囲にまで達する測定範囲を有している。この、より低い測定範囲により、限定されないが、外見的には健常に見える個人における、炎症に関連していると考えられる状態の評価、および、心不全に罹患している対象または心不全のリスクがある対象における心臓リスクの評価を含む用途にまで適応が広がっている。通常、ｈｓＣＲＰは、１ｍｇ／Ｌ未満（たとえば、０．０４ｍｇ／ｍｌの低さ）〜１０ｍｇ／Ｌ以上のＣＲＰレベルを測定する。本明細書において、および当分野では普遍的に、本アッセイおよびｈｓＣＲＰアッセイにより測定されたＣＲＰレベルも、「高感受性ＣＲＰ」または「ｈｓＣＲＰ」と呼称する。ゆえに、「対象のｈｓＣＲＰレベルが１ｍｇ／Ｌ未満である」と述べた場合、高感受性ＣＲＰアッセイにより測定された対象のＣＲＰレベルが、１ｍｇ／Ｌ未満であることを意味する。
【００７５】
心臓Ｃ反応性タンパク質（ｃＣＲＰ）アッセイ
ＦＤＡのガイドラインによると、心臓ＣＲＰアッセイは、将来的に心血管系疾患のリスクがある個人の特定および層別化の補助としての使用に適用されている。従来的な臨床検査室による急性冠不全症候群の評価と併せて用いられる場合、ｃＣＲＰは、固定された冠動脈疾患または急性の冠症候群を有する患者における、再発に対する独立した予後診断マーカーとして有用である。心臓ＣＲＰアッセイは、ｈｓＣＲＰアッセイのように、ほとんどの標準的なＣＲＰアッセイの通常の測定範囲を下回る測定範囲を有する。ｈｓＣＲＰとｃＣＲＰの違いは、検体またはアッセイの方法ではなく、冠動脈疾患の評価における適用拡大をサポートするために、ＦＤＡにより要求される追加の性能評価である。従って、ｃＣＲＰアッセイは、ｈｓＣＲＰアッセイの一種である。ｈｓＣＲＰアッセイが心臓リスクの相互関係を示すのに有用であり、そのように当分野で用いられている一方、それら単体では、ＦＤＡにその用途で認められていない。
【００７６】
Ｃ反応性タンパク質の試料源
Ｃ反応性タンパク質のレベルが通常、対象の血液試料（たとえば、全血、血漿、血清等）を介して検査されている一方、本発明では、試料のタイプに限定されることは無い。たとえば、一部の実施態様において、Ｃ反応性タンパク質のレベルは、Ｃ反応性タンパク質を含有することが知られている、または推定されている、対象の任意の液体試料または組織試料を評価することにより測定されている。非限定的な例としては、血漿、血清、全血、尿、唾液精液、脳脊髄液、心膜液、腹水、胸膜液、滑液、糞便試料および鼻吸引物が挙げられる。
【００７７】
インターロイキン６
インターロイキン６（ＩＬ−６）は、幹細胞、造血、血小板産生、マクロファージ機能、神経機能、急性応答、骨代謝、および心臓肥大の制御に関与する、多様で、進化的に保存されたサイトカインのファミリーに属する。ＩＬ−６の他に、当該ファミリーには、サイトカインＩＬ−１１、カルジオトロフィン１、オンコスタチンＭ、白血病抑制因子、および網様体神経栄養因子が含まれ、それらはすべて、それらのサイトカイン特異的な受容体とは別に、ｇｐ１３０と名付けられた普遍的なシグナル伝達因子を利用する。最近になって、可溶性ＩＬ−６受容体（ＩＬ‐６Ｒ）のレベルが心不全において上昇することが報告されている。循環ＩＬ−６は、ハムスターモデルの単離乳頭筋調製物、およびヒトの心房ストリップに対し、陰性変力作用を与えることから、一酸化窒素、βアドレナリン受容体経路、およびセラミド−スフィンゴミエリン経路により調節されている可能性がある。血清ＩＬ−６の上昇は、左心室機能が低下した患者における収縮性の減少、心臓前負荷の上昇、心拍の上昇、および後負荷と相関している。
【００７８】
ＩＬ−６産生の源に関して、最近のマウス遺伝子導入データおよびノックアウトデータから、心臓内にＩＬ−６／ｇｐ１３０システムが存在し、血流過負荷に対する補償応答における肝要部分であることが推測されている。ヒト心筋が、心筋梗塞、虚血、再灌流、拒絶および心不全の間のＩＬ−６の源であることが推測されている（Wollert, K. and Drexler, H., “The role of interleukin-6 in the failing heart”, Heart Fail Rev., 6(2): 95-103 (2001)を参照のこと）。
【００７９】
一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）で処置することにより、心不全に罹患している、または心不全に罹患するリスクのある哺乳類対象における心筋中のＩＬ−６のレベルが減少する。
【００８０】
一部の実施態様において、ＩＬ−６のレベルは、約０．２５倍〜約０．５、または約０．５倍〜約０．７５倍、または約０．７５倍〜約１．０倍、または約１．０倍〜約１．５倍、または約１．５倍〜約２．０倍、または約２．０倍〜約３．０倍、または約３．０倍〜約５．０倍、または約５．０倍〜約８．０倍まで減少する。
【００８１】
腫瘍壊死因子α
腫瘍壊死因子α（ＴＮＦαまたはＴＮＦアルファ）は、全身性の炎症に関与するサイトカインであり、急性反応を刺激するサイトカイン群の１つである。活性化されたマクロファージにより主に産生されるが、ＣＤ４＋リンパ球、ＮＫ細胞および神経のような多くの他の細胞型からも産生されうる。
【００８２】
進行したうっ血性心不全（ＣＨＦ）を有する患者において、循環ＴＮＦαおよび可溶性ＴＮＦ受容体のレベルが上昇していることが判明している。ＣＨＦにおけるＴＮＦシステムの活性化の病態生理学的な意義は、心臓および内皮に対する効果が主であると思われる。ＴＮＦαは、直接、および間接的に陰性変力作用を与え、間接的な作用は一酸化窒素の産生の増強により調節される。さらに、ＴＮＦαは心筋細胞においてアポトーシスプロセスを誘導すると推測されている。ＣＨＦにおけるＴＮＦαの有害な作用に関するコンセンサスは、ＴＮＦ活性化と、ＣＨＦの無症状から症状発現への推移の間に時間的な関連性があるという証拠によりさらにサポートされている。Ceconi et al., “Tumor necrosis factor in congestive heart failure: a mechanism of disease for the new millennium?” Proq. Cardiovasc. Dis., 41(Suppl 1): 25-30 (1998)を参照のこと。
【００８３】
一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）を用いた処置により、心不全に罹患している、または心不全に罹患するリスクのある哺乳類対象における心筋中のＴＮＦαのレベルが減少する。
【００８４】
一部の実施態様において、ＴＮＦαのレベルは、約０．２５倍〜約０．５倍、または約０．５倍〜約０．７５倍、または約０．７５倍〜約１．０倍、または約１．０倍〜約１．５倍、または約１．５倍〜約２．０倍、または約２．０倍〜約３．０倍、または約３．０倍〜約５．０倍、または約５．０倍〜約８．０倍まで減少する。
【００８５】
活性酸素種
活性酸素種（ＲＯＳ）は、酸素を含有する化学的に反応性の分子である。例としては、酸素イオンおよびペルオキシドが挙げられる。ＲＯＳは酸素の正常な代謝から派生する自然の副産物として形成され、細胞シグナル伝達およびホメオスタシスにおいて重要な役割を有している。しかしながら、環境ストレス時に、ＲＯＳレベルは劇的に増加しうる。ＲＯＳの増加により、酸素ストレスとして知られる、細胞構造に対する深刻なダメージが累積的にもたらされる。
【００８６】
酸素由来のフリーラジカルは、ＣＨＦの病態に関与していることを示す証拠がある。研究により、高度に毒性のあるラジカル種により、オルガネラ膜がダメージを受け、興奮収縮連関の崩壊がもたらされ、最終的には、心筋の機能不全となる。さらに、これらラジカルにより、心血管系の調子を維持するために重要な、強力なシグナル伝達物質である一酸化窒素が破壊される。抗酸化物質は、虚血／再灌流損傷およびＣＨＦの間の過剰なフリーラジカル産生の結果として発生するダメージを最小限とするためにかなり有望である。
【００８７】
一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）を用いた処置により、心不全に罹患している、または心不全に罹患するリスクのある哺乳類対象における心筋中のＲＯＳのレベルが減少する。
【００８８】
一部の実施態様において、ＲＯＳは、約０．２５倍〜約０．５倍、または約０．５倍〜約０．７５倍、または約０．７５倍〜約１．０倍、または約１．０倍〜約１．５倍、または約１．５倍〜約２．０倍、または約２．０倍〜約３．０倍、または約３．０倍〜約５．０倍、または約５．０倍〜約８．０倍まで減少する。
【００８９】
脳性ナトリウム利尿ペプチド
脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）は、心筋の過度な伸長に応答して心室により分泌される３２アミノ酸のポリペプチドである。ＢＮＰの放出はカルシウムイオンにより調節されている。ヒトにおいて、ＢＮＰは、主に心室で産生される。
【００９０】
ＢＮＰは、ヒト遺伝子ＮＰＰＢによりコードされる１３４アミノ酸のプレプロホルモン（ｐｒｅｐｒｏＢＮＰ）として合成される。２５残基のＮ末端シグナルペプチドの除去により、プロホルモン（ｐｒｏＢＮＰ）が産生され、Ｏ結合型糖タンパク質として細胞内に貯蔵される。次いでＰｒｏＢＮＰは、特異的転換酵素（すなわち、フリンまたはコリン）により、７６アミノ酸の生物学的に不活性のポリペプチドであるＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰと、生物学的に活性な３２アミノ酸ポリペプチドであるＢＮＰへと開裂される。Ｐｒｏ  ＢＮＰおよびＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰは、等モル量で血液中へと分泌される。
【００９１】
ＢＮＰは、心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）と似た様式で、ただし１０倍低いアフィニティーで心房性ナトリウム利尿因子に結合し、および活性化する。しかしＢＮＰの生物学的半減期は、ＡＮＰよりも２倍長く、および、ＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰはさらに長く、そのため、これらのペプチドは、診断的血液検査に対し、ＡＮＰよりも良い標的となる。
【００９２】
ＢＮＰの生理学的な作用は、ＡＮＰと似ており、全身的な血管抵抗性および中心静脈圧の低下、ならびに、ナトリウム利尿の増加が含まれる。ＢＮＰとＡＮＰの正味の影響は、血液量の減少であり、全身の血圧および後負荷を減少させ、それにより、部分的には高い駆出率のために、心拍出量が増加する。
【００９３】
ＢＮＰまたはＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰは、心不全のスクリーニングおよび予後診断に用いることができる。ＢＮＰまたはＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベルが上昇すると、心不全のリスクまたは急性心不全の発生が示唆される。さらに、両方ともが、左心室機能不全を有する患者で通常増加しており、治療後（たとえばＡＣＥ阻害物質またはβブロッカー等を用いた治療）にＢＮＰ濃度が低下すると、ＬＶリモデリングプロセスが逆転または予防したことを反映している。
【００９４】
一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）を用いた処置により、心不全に罹患している、または心不全に罹患するリスクのある哺乳類対象における心筋中のＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰが減少する。
【００９５】
一部の実施態様において、ＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰは、約０．２５倍〜約０．５倍、または約０．５倍〜約０．７５倍、または約０．７５倍〜約１．０倍、または約１．０倍〜約１．５倍、または約１．５倍〜約２．０倍まで減少する。
【００９６】
心臓トロポニンＩ
トロポニンは、３つの調節タンパク質（トロポニンＣ、トロポニンＩ、およびトロポニンＴ）の複合体であり、骨格筋および心筋における筋肉の収縮に必須である（平滑筋においては必須ではない）。心筋由来のトロポニンＴおよびトロポニンＩのアイソフォームは、骨格筋に存在する、対応するアイソフォームとは構造的に異なっている。
【００９７】
トロポニンＴはトロポミオシンに結合し、それらを連結させ、トロポニン−トロポミオシン複合体を形成させる。トロポニンＩは細い筋フィラメントに結合し、トロポニン−トロポミオシン複合体を所定の位置に保持し、カルシウムに対するトロポニンＣのアフィニティーを低下させ、それによって、トロポニン−トロポミオシンの相互作用を阻害する。トロポニンＣはカルシウムイオンに結合し、Ｃａ2+依存性の筋肉収縮の制御に主要な役割を果たす。
【００９８】
心臓トロポニン（ｃＴｎ）は、骨格トロポニンと構造的に異なっているため、ｃＴｎサブユニットを、心筋損傷に対する特異的なバイオマーカーとして測定することができる。筋細胞のネクローシス、筋細胞のアポトーシス、または心臓トロポニンの分解の結果としてｃＴｎが放出され、それらすべては、心臓の機能不全および／または心不全の進行の悪化を示唆する。複数の研究により、様々なＨＦ群において、循環ｃＴｎの上昇と、臨床転帰の悪化の間の関連性が評価されている。実験デザイン、患者群、およびアッセイの特徴のバリエーションにもかかわらず、ｃＴｎ上昇と、転帰の悪化の間の関連性は一致している。Kociol et al., Journal of the American College of Cardiology, 56(14): 1071-78 (Sept. 2010)。
【００９９】
さらに、実験により、心臓トロポニンＩレベルの上昇は、心不全の進行に寄与する可能性があることが示された。たとえば、Goeser et al., Circulation, 114: 1693-1702 (2006)を参照のこと。心臓トロポニンＩレベルの上昇により、心臓トロポニンの自己抗体の形成がもたらされる。心臓トロポニン自己抗体の増加により、心臓の炎症が増加し、炎症性サイトカインの発現が増加する。増加した心臓トロポニン自己抗体により、心筋線維症、左心室拡張、および心臓機能の低下により特徴付けられる心筋症の表現型が現れる。
【０１００】
一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）を用いた処置により、心不全に罹患している、または心不全に罹患するリスクのある哺乳類対象における心筋中の心臓トロポニンＩが減少する。
【０１０１】
一部の実施態様において、心臓トロポニンＩは、約０．２５倍〜約０．５倍、または約０．５倍〜約０．７５倍、または約０．７５倍〜約１．０倍、または約１．０倍〜約１．５倍、または約１．５倍〜約２．０倍まで減少する。
【０１０２】
ミトコンドリアＡＴＰ感受性カリウムチャンネル（ｍＫ  ＡＴＰ）
ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（ＮＡＤＰＨ）の還元型は、心不全において増加し、ミトコンドリアＡＴＰ感受性カリウムチャンネル（ｍＫ  ＡＴＰ）の活性低下をもたらす。ｍＫ  ＡＴＰの活性が低下すると、ミトコンドリア環境内のイオンの脱制御がもたらされ、それに引き続きマトリックスの収縮とＡＴＰ産生の低下がもたらされる。活性の増加、またはｍＫ  ＡＴＰの「開口」は、マトリックス膨張を促進することにより酸化的リン酸化を改善し、ミトコンドリア内膜の構造を維持し、ミトコンドリア外膜のＡＤＰに対する低い透過性を保護し、および、ミトコンドリアＡＴＰａｓｅと筋細線維の間の「効率的な」エネルギー転移を可能にする。
【０１０３】
一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）を用いた処置により、心不全に罹患している、または心不全に罹患するリスクのある哺乳類対象における心筋中のｍＫ  ＡＴＰの活性が増加する。
【０１０４】
一部の実施態様において、ｍＫ  ＡＴＰの活性は、約０．２５倍〜約０．５倍、または約０．５倍〜約０．７５倍、または約０．７５倍〜約１．０倍、または約１．０倍〜約１．５倍、または約１．５倍〜約２．０倍まで増加する。
【０１０５】
カルジオリピン
カルジオリピンは、ミトコンドリア内膜の重要な構成要素であり、総脂質組成の約２０％を構成する。哺乳類細胞においては、カルジオリピンはミトコンドリア内膜においてほぼ独占的に存在し、ミトコンドリア代謝に関与する酵素の最適機能に必須となっている。
【０１０６】
カルジオリピンは、グリセロール主鎖と連結して二量体構造を形成する２つのホスファチジルグリセロールを含有するジホスファチジルグリセロール脂質の１種である。４つのアルキル基を有し、潜在的に、２の負荷電を担持する。カルジオリピン中には４つの明白に異なるアルキル鎖があるため、当該分子は、非常に複雑である可能性がある。しかしながら、ほとんどの動物組織において、カルジオリピンは、それらの各々上に、２つの不飽和結合を伴う１８炭素脂肪アルキル鎖を含有する。４つのアシル鎖構造中の（１８：２）は、哺乳類のミトコンドリアにおいて、カルジオリピンがミトコンドリア内膜タンパク質に対し高度なアフィニティーを有するために、構造上、重要な必須要素である。しかしながら、単離された酵素調製物を用いた研究により、その重要性は、検証したタンパク質に依存して変化し得ることが示唆されている。
【０１０７】
当該分子中の２つのリン酸のそれぞれは、１つのプロトンを捕捉することができる。対称的な構造を有しているが、異なるレベルの酸性度では、両方のイオン化よりも、１つのリン酸のイオン化が発生する（ｐＫ１＝３およびｐＫ２＞７．５）。ゆえに、正常な生理学的条件の下では（ｐＨはおよそ７．０）、当該分子は１の負荷電のみを担持しうる。リン酸上のヒドロキシル基（−ＯＨおよび、−Ｏ−）は、安定した分子内水素結合を形成し、二環式の共鳴構造を形成する。この構造は、酸化的リン酸化に対し伝導性のある、１つのプロトンをトラップする。
【０１０８】
ＣｏｍｐｌｅｘＩＶにより触媒される酸化的リン酸化のプロセスの間に、大量のプロトンが膜の一方から他方に移送され、それによりｐＨの大きな変化がもたらされる。学説に拘束されることを望まないが、カルジオリピンは、厳密にプロトンプールを限局させ、ミトコンドリアの膜間腔のｐＨを最小化する、ミトコンドリア膜内でのプロトントラップとして機能することが提唱されている。この機能は、上述のように、負荷電を担持しながら、二環式の構造内でプロトンをトラップすることができるという、カルジオリピンのユニークな構造によるものであると考えられている。ゆえに、カルジオリピンは、ミトコンドリア膜近くのｐＨを維持するために、プロトンを放出または吸着する、電子緩衝プールとして機能することができる。
【０１０９】
さらに、カルジオリピンは、アポトーシスにおいて重要な役割を果たすことが示されている。アポトーシスカスケードの早期において、カルジオリピンが関与している。以下に詳細に検討されるように、カルジオリピン特異的オキシゲナーゼが、脂質に立体構造変化をもたらすカルジオリピン−ヒドロペルオキシドを産生する。次いで、酸化カルジオリピンは、ミトコンドリア内膜からミトコンドリア外膜へと位置を変え、そこで、細胞質ゾルへのチトクロームｃの放出を介して孔を形成すると考えられている。チトクロームｃはＩＰ３受容体に結合し、カルシウム放出を刺激することができ、それによってさらにチトクロームｃの放出が促進される。細胞質のカルシウム濃度が毒性レベルにまで達すると、細胞は死ぬ。さらに、余剰なミトコンドリアのチトクロームｃは、アポトーシス活性化因子と相互作用し、それによりアポトーシス複合体の形成およびタンパク質分解性カスパーゼのカスケード活性化がもたらされる。
【０１１０】
他に提唱されているカルジオリピンの役割は、以下である：１）たとえば、膜流動性および浸透圧安定性等の、膜の物理学的特性の安定化への寄与（Schlame et al., 2000; Koshkin and Greenberg, 2002; Ma et al., 2004）、および、２）膜タンパク質との直接的な相互作用を介した、タンパク質機能への寄与（Schlame et al., 2000; Palsdottir and Hunte, 2004）。カルジオリピンは、たとえばチトクロームｂｃ１複合体（複合体ＩＩＩ）等の内膜タンパク質複合体との緊密な結合の中に含まれている。同様に、カルジオリピンは二量体チトクロームｃオキシダーゼの接触部位に位置づけられており、カルジオリピン結合部位は、ＡＤＰ／ＡＴＰ担体（ＡＡＣ；概要は、Palsdottir and Hunte, 2004を参照のこと）にも見出されている。最近の研究により、呼吸鎖スーパー複合体（レスピラソーム（ｒｅｓｐｉｒａｓｏｍｅｓ））形成における、カルジオリピンの機能についても提唱されている。
【０１１１】
カルジオリピン分子の４つの脂肪アシル位のそれぞれにおいて、主要なテトラ−アシル分子種は、１８：２である（１８：２−１８：２−１８：２−１８：２カルジオリピン種と呼称される）。カルジオリピン生成酵素は、シチジン−５’−ジホスフェート−１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロールに対する分子種基質特異性を有していないため、リノール酸塩を有するカルジオリピンのこの富化を得るためには、カルジオリピンのリモデリングは必須である。さらに、カルジオリピン前駆体の種のパターンは、カルジオリピン生成経路の酵素が分子種選択的ではないことを暗示するのに十分なほど、類似している。カルジオリピンの分子組成における変化は、様々な疾患状態と関連している。
【０１１２】
カルジオリピンのリモデリングは、少なくとも３つの酵素を介して発生する。ミトコンドリアのカルジオリピンは、脱アシル化−再アシル化のサイクルによりリモデリングされ、そこで新たに生成されたカルジオリピンは、速やかにモノリゾカルジオリピン（ｍｏｎｏｌｙｓｏｃａｒｄｉｏｌｉｐｉｎ（ＭＬＣＬ））へ脱アシル化され、次いで、カルジオリピンへ再アシル化されて戻される。ＭＬＣＬ  ＡＴ１は、脱アシル化をもたらし、ＡＬＣＡＴ１は、再アシル化をもたらす。これらのミトコンドリアの、およびミクロソームのアシルトランスフェラーゼの活性に加え、ミトコンドリアのカルジオリピンは、ミトコンドリアのカルジオリピントランスアシラーゼによりリモデリングされうる。タファジン（Ｔａｆａｚｚｉｎ（ＴＡＺ１））は、リノール酸を有するミトコンドリアのカルジオリピンを特異的にリモデリングするカルジオリピントランスアシラーゼである。
【０１１３】
Ｔａｚ１
タファジン（Ｔａｚ１）は、ヒトにおいて、ＴＡＺ遺伝子によりコードされるタンパク質である。Ｔａｚ１は、リン脂質−リゾリン脂質トランスアシラーゼとして機能する。Ｔａｚ１は、心筋および骨格筋において高度に発現されており、カルジオリピンの代謝に関与している。
【０１１４】
Ｔａｚ１は、ミトコンドリア内膜の維持に関与している。これらのタンパク質は、カルジオリピンの維持に関与しており、ミトコンドリアにおけるエネルギー産生に必須である。
【０１１５】
ＴＡＺ遺伝子においていくつかの変異が発生すると、Ｘ連鎖性拡張型心筋症と呼ばれる疾患が生じる。これは、心臓が非常に脆弱化し、効率的に血液を送り出すことができないほど拡張され、それにより心不全がもたらされる疾患である。心機能の低下により、負の影響が多くの身体システムに及び、脚と腹部が膨張し、肺に液体が貯留し、血液凝固のリスクが増加する。
【０１１６】
ＴＡＺ遺伝子における他の変異により、左心室心筋の孤立性緻密化（ＩＮＶＭ）と呼ばれる疾患をもたらす。この疾患は、心臓の下部左心室（左室）が正しく発達しなかった場合に発生する。心筋は脆弱化し、血液を効率的に押し出すことができず、多くの場合、心不全に至る。時折、異常な心リズム（不整脈）も発生しうる。
【０１１７】
一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）を用いた処置により、心不全に罹患している、または心不全に罹患するリスクのある哺乳類対象における心筋中のＴａｚ１の発現が増加する。
【０１１８】
一部の実施態様において、Ｔａｚ１の発現は、約０．２５倍〜約０．５倍、または約０．５倍〜約０．７５倍、または約０．７５倍〜約１．０倍、または約１．０倍〜約１．５倍まで増加する。
【０１１９】
ＭＬＣＬ  ＡＴ１
モノリゾカルジオリピンアシルトランスフェラーゼ（ＭＬＣＬ  ＡＴ１）は、哺乳類組織中の、ＭＬＣＬのカルジオリピンへのアシル化を触媒する。
【０１２０】
一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）を用いた処置により、心不全に罹患している、または心不全に罹患するリスクのある哺乳類対象における心筋中のＭＬＣＬ  ＡＴ１の発現が減少する。
【０１２１】
一部の実施態様において、ＭＬＣＬ  ＡＴ１の発現レベルの減少は、約０．２５倍〜約０．５倍の減少、または約０．５倍〜約０．７５倍の減少、または約０．７５倍〜約１．０倍の減少、または約１．０倍〜約１．５倍の減少、または約１．５倍〜約２．０倍の減少、または約２．０倍〜約２．５倍の減少、または約２．５倍〜約３．０倍の減少により測定される減少である。
【０１２２】
ＡＬＣＡＴ  １
アシル−ＣｏＡリゾカルジオリピンアシルトランスフェラーゼ１（ＡＬＣＡＴ１）は、当初、ミクロソームのリゾカルジオリピンアシルトランスフェラーゼとして同定された。ＡＬＣＡＴ１は、リゾホスファチジルイノシトール（ＬＰＩ）およびリゾホスファチジルグリセロール（ＬＰＧ）に対するアシルトランスフェラーゼ活性を有している。
【０１２３】
ＡＬＣＡＴ１は、アシルドナーとしてリノレオイル−ＣｏＡおよびオレオイル−ＣｏＡを優先し、モノリゾカルジオリピンおよびジリゾカルジオリピンの両方を基質として認識している。ＡＬＣＡＴ１は、カルジオリピンに対するリモデリング酵素として作用する。
【０１２４】
一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）を用いた処置により、心不全に罹患している、または心不全に罹患するリスクのある哺乳類対象における心筋中のＡＬＣＡＴ１の発現が減少する。
【０１２５】
一部の実施態様において、ＡＬＣＡＴ１の発現レベルの減少は、約０．２５倍〜約０．５倍の減少、または約０．５倍〜約０．７５倍の減少、または約０．７５倍〜約１．０倍の減少、または約１．０倍〜約１．５倍の減少、または約１．５倍〜約２．０倍の減少、または約２．０倍〜約２．５倍の減少、または約２．５倍〜約３．０倍の減少により測定される減少である。
【０１２６】
芳香族カチオン性ペプチド
本発明は、その必要のある対象における、本明細書に記述される芳香族カチオン性ペプチドを投与することによる、ＣＲＰ、ＴＮＦα、ＩＬ−６、ＲＯＳ、心臓トロポニンＩ、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰ、ＭＬＣＬ  ＡＴ１、およびＡＬＣＡＴ１のうちの１以上のレベルの減少方法、ならびに／または、Ｔａｚ１発現および／もしくはｍＫ  ＡＴＰ活性の増加方法に関する。一部の実施態様において、ＣＲＰ、ＴＮＦα、ＩＬ−６、ＲＯＳ、心臓トロポニンＩ、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰ、ＭＬＣＬ  ＡＴ１、およびＡＬＣＡＴ１のうちの１以上のレベルの減少、ならびに／または、Ｔａｚ１発現および／もしくはｍＫ  ＡＴＰ活性の増加は、対象における心不全および関連疾患の治療もしくは予防、心不全に関連したリスク因子の減少、ならびに／または、心不全の可能性（リスク）もしくは重篤度の減少に有用である。
【０１２７】
本発明はまた、その必要のある対象における、本明細書に記述される芳香族カチオン性ペプチドを投与することによる、ＬＶリモデリングを予防、改善、または治療する方法に関する。一部の実施態様において、対象は、ＣＲＰ、ＴＮＦα、ＩＬ−６、ＲＯＳ、心臓トロポニンＩ、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰ、ＭＬＣＬ  ＡＴ１、およびＡＬＣＡＴ１のうちの１以上のレベルが増加している。一部の実施態様において、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰおよび／または心臓トロポニンＩの減少は、ＬＶリモデリングの減少または予防を示唆するバイオマーカーとして用いられる。一部の実施態様において、対象は、ｍＫ  ＡＴＰ活性のレベルが減少しているか、または、Ｔａｚ１の発現が減少している。
【０１２８】
本発明はまた、その必要のある対象における、本明細書に記述される芳香族カチオン性ペプチドを投与することによる、ミトコンドリアＡＴＰ感受性カリウムチャンネル（ｍＫ  ＡＴＰ）の活性を増加させる方法、またはＴａｚ１の発現を増加させる方法に関する。一部の実施態様において、Ｔａｚ１発現またはｍＫ  ＡＴＰ活性の増加は、対象における心不全および関連疾患の治療もしくは予防、心不全に関連したリスク因子の減少、ならびに／または、心不全の可能性（リスク）もしくは重篤度の減少に有用である。
【０１２９】
芳香族カチオン性ペプチドは、水溶性であり、高度な極性を有している。これらの特性にもかかわらず、当該ペプチドは容易に細胞膜に浸透する。芳香族カチオン性ペプチドは通常、ペプチド結合により共有結合された、最小で３アミノ酸、または最小で４アミノ酸を含有する。当該芳香族カチオン性ペプチド中に存在する最大のアミノ酸数は、約２０のアミノ酸であり、ペプチド結合により共有結合されている。好ましくは、最大のアミノ酸数は約１２であり、より好ましくは約９であり、最も好ましくは約６である。
【０１３０】
当該芳香族カチオン性ペプチドのアミノ酸は、任意のアミノ酸であっても良い。本明細書において、「アミノ酸」という用語は、少なくとも１つのアミノ基と少なくとも１つのカルボキシル基を含有する任意の有機分子を指すために用いられる。通常、少なくとも１つのアミノ基は、カルボキシル基に対しα位にある。アミノ酸は、天然型であっても良い。天然型のアミノ酸としては、たとえば、哺乳類のタンパク質に存在する、２０の最も普遍的な左旋性（Ｌ）のアミノ酸（すなわち、アラニン（Ａｌａ）、アルギニン（Ａｒｇ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、システイン（Ｃｙｓ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、リシン（Ｌｙｓ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、プロリン（Ｐｒｏ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、およびバリン（Ｖａｌ））が挙げられる。他の天然型アミノ酸としては、たとえば、タンパク質合成とは関連の無い代謝プロセスにおいて合成されるアミノ酸が挙げられる。たとえば、アミノ酸のオルニチンおよびシトルリンは、尿素産生の間に、哺乳類の代謝において合成される。他の天然型アミノ酸の例としては、ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）が挙げられる。
【０１３１】
ペプチドは、任意選択的に、１以上の非天然型アミノ酸を含有する。好ましくは、当該ペプチドは、天然型であるアミノ酸を有さない。非天然型のアミノ酸は、左旋性（Ｌ−）、右旋性（Ｄ−）、またはそれらの混合であっても良い。非天然型アミノ酸は、通常、生きた生物体の正常な代謝プロセスでは合成されないアミノ酸であり、タンパク質中に天然には存在しない。さらに、非天然型アミノ酸は、好ましくは、普遍的なプロテアーゼにより認識されない。非天然型アミノ酸は、ペプチドの任意の位置に存在しても良い。たとえば、天然型アミノ酸は、Ｎ末端、Ｃ末端、またはＮ末端とＣ末端の間の任意の位置にあっても良い。
【０１３２】
非天然型アミノ酸は、たとえば、天然アミノ酸には存在しないアルキル、アリール、またはアルキルアリール基を含有しても良い。非天然型アルキルアミノ酸の一部の例としては、αアミノ酪酸、βアミノ酪酸、γアミノ酪酸、δアミノ吉草酸、およびεアミノカプロン酸が挙げられる。非天然型アリールアミノ酸の一部の例としては、オルト−、メタ、およびパラ−アミノ安息香酸が挙げられる。非天然型アルキルアリールアミノ酸の一部の例としては、オルト−、メタ−、およびパラ−アミノフェニル酢酸、ならびに、γ−フェニル−β−アミノ酪酸が挙げられる。非天然型アミノ酸には、天然型アミノ酸の誘導体が含まれる。天然型アミノ酸の誘導体は、たとえば、天然型アミノ酸への１以上の化学基の付加を含む。
【０１３３】
たとえば、１以上の化学基が、フェニルアラニンまたはチロシン残基の芳香族環の２’、３’、４’、５’、または６’位のうちの１以上に付加されても良く、または、トリプトファン残基のベンゾ環の４’、５’、６’または７’位のうちの１以上に付加されても良い。当該基は、芳香族環に付加することができる任意の化学基であっても良い。そのような基の一部の例としては、たとえば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、またはｔ−ブチル、Ｃ1−Ｃ4アルキルオキシ（すなわち、アルコキシ）、アミノ、Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ、およびＣ1−Ｃ4ジアルキルアミノ（たとえば、メチルアミノ、ジメチルアミノ）、ニトロ、ヒドロキシル、ハロ（すなわち、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨード）等の、分枝型、または非分枝型のＣ1−Ｃ4アルキルが挙げられる。天然型アミノ酸の非天然型の誘導体のいくつかの具体的な例としては、ノルバリン（Ｎｖａ）およびノルロイシン（Ｎｌｅ）が挙げられる。
【０１３４】
ペプチド中のアミノ酸修飾の他の例は、ペプチドのアスパラギン酸またはグルタミン酸残基のカルボキシル基の誘導体化である。誘導体化の一例は、アンモニアを用いたアミド化、または１級アミンもしくは２級アミンを用いたアミド化（たとえば、メチルアミン、エチルアミン、ジメチルアミン、またはジエチルアミン等）である。誘導体化の他の例としては、たとえば、メチルまたはエチルアルコールを用いたエステル化が挙げられる。そのような修飾の他の例としては、リシン、アルギニン、またはヒスチジン残基の誘導体化が挙げられる。たとえば、そのようなアミノ基は、アシル化されても良い。適切なアシル基のいくつかとしては、ベンゾイル基、または、たとえば、アセチル基またはプロピニル基等の上述の任意のＣ1−Ｃ4アルキル基を含有するアルカノイル基が挙げられる。
【０１３５】
非天然型アミノ酸は、通常のプロテアーゼに対してはやはり抵抗性または非感受性である。プロテアーゼに対して抵抗性または非感受性の非天然型アミノ酸としては、上述の天然型Ｌ−アミノ酸の右旋性（Ｄ−）形態、ならびに、Ｌ−および／またはＤ−の非天然型アミノ酸が挙げられる。Ｄ−アミノ酸は通常、タンパク質中に存在しないが、細胞の通常のリボソームタンパク質合成機構以外の方法により合成された、あるペプチド抗生物質中に見出される。本明細書において、Ｄ−アミノ酸は、非天然型アミノ酸であるとみなされる。
【０１３６】
プロテアーゼ感受性を最小とするために、ペプチドは、アミノ酸が天然型または非天然型のいずれであるかに関わらず、一般的なプロテアーゼにより認識される５未満、好ましくは４未満、より好ましくは３未満、および最も好ましくは２未満の連続したＬ−アミノ酸を有する。好ましくは、ペプチドは、Ｄ−アミノ酸のみを有し、Ｌ−アミノ酸は有さない。もしペプチドがプロテアーゼ感受性のアミノ酸配列を含有している場合、当該アミノ酸の内の少なくとも１つは、好ましくは非天然型のＤ−アミノ酸であり、それにより、プロテアーゼ抵抗性が与えられる。プロテアーゼ感受性配列の例としては、一般的なプロテアーゼ（たとえば、エンドペプチダーゼおよびトリプシン等）により容易に開裂されてしまう２以上の連続した塩基性アミノ酸が挙げられる。塩基性アミノ酸の例としては、アルギニン、リシンおよびヒスチジンが挙げられる。
【０１３７】
芳香族カチオン性ペプチドは、ペプチドのアミノ酸残基の総数と比較して、生理学的なｐＨで、最小数の正味正荷電を有していなければならない。生理学的なｐＨでの最小数の正味正荷電は、以下、（ｐm）と呼称される。ペプチド中のアミノ酸残基の総数は、以下、（ｒ）と呼称される。以下に検討される最小数の正味正荷電はすべて、生理学的なｐＨでのものである。本明細書において、「生理学的なｐＨ」という用語は、哺乳類の身体の組織および器官の細胞中の正常なｐＨを指す。たとえば、ヒトの生理学的なｐＨは、通常、およそ７．４であるが、哺乳類の正常な生理学的ｐＨは、約７．０〜約７．８の間のいずれかのｐＨであってもよい。
【０１３８】
通常、ペプチドは、正荷電のＮ末端アミノ基と、負荷電のＣ末端カルボキシル基を有している。荷電は、生理学的なｐＨで互いに打ち消されている。正味荷電の算出の例として、ペプチドＴｙｒ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ａｒｇは、１つの負荷電アミノ酸（すなわち、Ｇｌｕ）および４つの正荷電アミノ酸（すなわち、２つのＡｒｇ残基、１つのＬｙｓ、および１つのＨｉｓ）を有している。それゆえ、前述のペプチドの正味正荷電は３である。
【０１３９】
１つの実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドは、生理学的なｐＨでの最小数の正味正荷電（ｐm）と、アミノ酸残基の総数（ｒ）の間に関連性を有しており、ここで、３ｐmは最も大きい数であり、ｒ＋１に等しいか、それ未満である。この実施態様において、最小数の正味正荷電（ｐm）と、アミノ酸残基の総数（ｒ）の間の関係性は、以下である：
【表２】
2018109012.tif 000012
【０１４０】
他の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドは、最小数の正味正荷電（ｐm）と、アミノ酸残基の総数（ｒ）の間に関連性を有しており、ここで、２ｐmは最も大きい数であり、ｒ＋１に等しいか、それ未満である。この実施態様において、最小数の正味正荷電（ｐm）と、アミノ酸残基の総数（ｒ）の間の関係性は、以下である：
【表３】
2018109012.tif 000013
【０１４１】
１つの実施態様において、最小数の正味正荷電（ｐm）と、アミノ酸残基の総数（ｒ）は等しい。他の実施態様において、ペプチドは、３または４のアミノ酸残基および１の最小正味正荷電を有し、好ましくは、２の最小正味正荷電、より好ましくは３の最小正味正荷電を有している。
【０１４２】
芳香族カチオン性ペプチドが、正味正荷電の総数（ｐt）と比較して、最小数の芳香族基を有していることも重要である。最小数の芳香族基は、以下、（ａ）と呼称される。芳香族基を有する天然型アミノ酸としては、アミノ酸のヒスチジン、トリプトファン、チロシンおよびフェニルアラニンが挙げられる。たとえば、ヘキサペプチドのＬｙｓ−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐは、２の正味正荷電（リシンおよびアルギニン残基による）、および、３の芳香族基（チロシン、フェニルアラニンおよびトリプトファン残基による）を有している。
【０１４３】
芳香族カチオン性ペプチドもまた、芳香族基の最小数（ａ）と生理学的なｐＨでの正味正荷電の総数（ｐt）の間に関連性を有していなければならず、ここで、３ａが最も大きい数であり、ｐt＋１と等しいか、それ未満である（ｐtが１、ａもまた１でありうる場合を除く）。この実施態様において、芳香族基の最小数（ａ）と正味正荷電の総数（ｐt）の間の関連性は、以下である：
【表４】
2018109012.tif 000014
【０１４４】
他の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドは、芳香族基の最小数（ａ）と生理学的なｐＨでの正味正荷電の総数（ｐt）の間に関連性を有しており、ここで、２ａが最も大きい数であり、ｐt＋１と等しいか、それ未満である。この実施態様において、芳香族アミノ酸残基の最小数（ａ）と正味正荷電の総数（ｐt）の間の関連性は、以下である：
【表５】
2018109012.tif 000015
【０１４５】
他の実施態様において、芳香族基の数（ａ）および正味正荷電の総数（ｐt）は、等しい。
【０１４６】
カルボキシル基、特にＣ末端アミノ酸の末端カルボキシル基は、好ましくは、たとえばアンモニアとアミド化され、Ｃ末端アミドを形成する。あるいは、Ｃ末端アミノ酸の末端カルボキシル基は、任意の１級アミンまたは２級アミンとアミド化されていても良い。１級アミンまたは２級アミンは、たとえば、アルキル、特に分子型もしくは非分枝型のＣ1−Ｃ4アルキル、またはアリールアミンであっても良い。従って、ペプチドＣ末端のアミノ酸は、アミド、Ｎ−メチルアミド、Ｎ−エチルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミド、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミド、Ｎ−メチル−Ｎ−エチルアミド、Ｎ−フェニルアミド、またはＮ−フェニル−Ｎ−エチルアミド基に転換されていても良い。芳香族カチオン性ペプチドのＣ末端に存在しないアスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、およびグルタミン酸の遊離カルボキシレート基もまた、ペプチド内のどこに存在していようとも、アミド化されていても良い。これら内部の位置でのアミド化は、アンモニア、または上述の任意の１級アミンもしくは２級アミンを用いたものであっても良い。
【０１４７】
１つの実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドは、２の正味正荷電、および少なくとも１つの芳香族アミノ酸を有するトリペプチドである。特定の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドは、２の正味正荷電および２の芳香族アミノ酸を有するトリペプチドである。
【０１４８】
芳香族カチオン性ペプチドとしては、限定されないが、以下のペプチド例が挙げられる：
【表６】
2018109012.tif 000016
【０１４９】
１つの実施態様において、ペプチドは、ｍｕ−オピオイド受容体アゴニスト活性を有している（すなわち、ｍｕ−オピオイド受容体を活性化する）。ｍｕ−オピオイド受容体アゴニスト活性を有しているペプチドは、通常、Ｎ末端（すなわち、第一のアミノ酸位）にチロシン残基またはチロシン誘導体を有しているペプチドである。チロシンの適切な誘導体としては、２’−メチルチロシン（Ｍｍｔ）；  ２’，６’−ジメチルチロシン（２’６’−Ｄｍｔ）；３’，５’−ジメチルチロシン（３’５’Ｄｍｔ）；Ｎ，２’，６’−トリメチルチロシン（Ｔｍｔ）；および、２’ヒドロキシ−６’−メチルチロシン（Ｈｍｔ）が挙げられる。
【０１５０】
１つの実施態様において、ｍｕ−オピオイド受容体アゴニスト活性を有しているペプチドは、化学式Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2を有している。Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2は、アミノ酸のチロシン、アルギニンおよびリシンにより、３の正味正荷電を有しており、および、アミノ酸のフェニルアラニンおよびチロシンにより、２の芳香族基を有している。Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2のチロシンは、化学式２’，６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2を有する化合物を生成するために、たとえば２’，６’−ジメチルチロシン等のチロシンの修飾誘導体であっても良い。２’，６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2は、６４０の分子量を有し、生理学的なｐＨで３の正味正荷電を担持している。２’，６’−Ｄｍｔ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2は、エネルギー非依存的な様式で、いくつかのタイプの哺乳類細胞の細胞膜に素早く浸透する（Zhao et al., J. Pharmacol Exp Ther., 304:425-432, 2003）。
【０１５１】
あるいは、他の例において、芳香族カチオン性ペプチドは、ｍｕ−オピオイド受容体アゴニスト活性を有していない。たとえば、慢性的な症状または状態における長期治療の間に、ｍｕ−オピオイド受容体を活性化する芳香族カチオン性ペプチドを使用することは禁忌である場合がある。これらの例においては、芳香族カチオン性ペプチドの潜在的な副作用または追加的な効果により、ヒト患者または他の哺乳類の治療レジメン中に、ｍｕ−オピオイド受容体を活性化する芳香族カチオン性ペプチドが使用できない場合がある。潜在的な副作用としては、鎮静、便秘および呼吸抑制が挙げられる。そのような例においては、ｍｕ−オピオイド受容体を活性化しない芳香族カチオン性ペプチドでの処置が、適切である可能性がある。ｍｕ−オピオイド受容体アゴニスト活性を有しないペプチドは通常、Ｎ末端（すなわち、１位のアミノ酸）にチロシン残基またはチロシンの誘導体を有さない。Ｎ末端のアミノ酸は、チロシン以外の、天然型アミノ酸または非天然型アミノ酸であってもよい。１つの実施態様において、Ｎ末端のアミノ酸は、フェニルアラニンまたはその誘導体である。フェニルアラニンの例示的な誘導体としては、２’−メチルフェニルアラニン（Ｍｍｐ）、２’，６’−ジメチルフェニルアラニン（２’，６’−Ｄｍｐ）、Ｎ，２’，６’−トリメチルフェニルアラニン（Ｔｍｐ）、および、２’−ヒドロキシ−６’−メチルフェニルアラニン（Ｈｍｐ）が挙げられる。
【０１５２】
ｍｕ−オピオイド受容体アゴニスト活性を有していない芳香族カチオン性ペプチドの一例は、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2の化学式を有する。あるいは、Ｎ末端フェニルアラニンは、２’，６’−ジメチルフェニルアラニン（２’，６’−Ｄｍｐ）等のフェニルアラニンの誘導体であっても良い。アミノ酸の１位に２’，６’−ジメチルフェニルアラニンを含有するＴｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2は、化学式２’，６’−Ｄｍｐ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2を有している。１つの実施態様において、２’，６’−Ｄｍｐ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ2のアミノ酸配列は、ＤｍｔがＮ末端にないように再配置される。ｍｕ−オピオイド受容体アゴニスト活性を有しない芳香族カチオン性ペプチドの一例は、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の化学式を有している。
【０１５３】
本明細書に列記されるペプチドの適切な置換変異体としては、保存的なアミノ酸置換が挙げられる。アミノ酸は、以下の物理化学的特性により、群に分けられうる：
（ａ）非極性アミノ酸：Ａｌａ（Ａ）Ｓｅｒ（Ｓ）Ｔｈｒ（Ｔ）Ｐｒｏ（Ｐ）  Ｇｌｙ（Ｇ）Ｃｙｓ（Ｃ）；
（ｂ）酸性アミノ酸：Ａｓｎ（Ｎ）Ａｓｐ（Ｄ）Ｇｌｕ（Ｅ）Ｇｌｎ（Ｑ）；
（ｃ）塩基性アミノ酸：Ｈｉｓ（Ｈ）Ａｒｇ（Ｒ）Ｌｙｓ（Ｋ）；
（ｄ）疎水性アミノ酸：Ｍｅｔ（Ｍ）Ｌｅｕ（Ｌ）Ｉｌｅ（Ｉ）Ｖａｌ（Ｖ）；および、
（ｅ）芳香族性アミノ酸：Ｐｈｅ（Ｆ）Ｔｙｒ（Ｙ）Ｔｒｐ（Ｗ）Ｈｉｓ（Ｈ）。
【０１５４】
同じ群の他のアミノ酸による、ペプチド中のアミノ酸の置換は、保存的置換と呼称され、元のペプチドの物理化学的特性を保存しうる。対照的に、異なる群の他のアミノ酸による、ペプチド中のアミノ酸の置換は、通常、元のペプチドの特性を変える可能性が高い。
【０１５５】
ｍｕ−オピオイド受容体を活性化するペプチドの例としては、限定されないが、以下の表７に示される芳香族カチオン性ペプチドが挙げられる。
【表７−１】
2018109012.tif 000017
【表７−２】
2018109012.tif 000018
【表７−３】
2018109012.tif 000019
【表７−４】
2018109012.tif 000020
【０１５６】
ｍｕ−オピオイド受容体を活性化しないペプチドの例としては、限定されないが、表８に示される芳香族カチオン性ペプチドが挙げられる。
【表８】
2018109012.tif 000021
【０１５７】
表７および表８に示されるペプチドのアミノ酸は、Ｌ−構造またはＤ−構造のいずれであっても良い。
【０１５８】
ペプチドは、当分野に公知の任意の方法により合成されても良い。タンパク質の適切な化学合成法としては、たとえば、Stuart and Young in Solid Phase Peptide Synthesis, Second Edition, Pierce Chemical Company (1984)、および、Methods Enzymol., 289, Academic Press, Inc., New York (1997)に記述されるものが挙げられる。
【０１５９】
芳香族カチオン性ペプチドの予防用途および治療用途
概説
本明細書に記述される芳香族カチオン性ペプチドは、疾患の予防または治療に有用である。具体的には、ＣＲＰレベルの上昇（たとえば、ｈｓＣＲＰにより測定される）、ＴＮＦαレベルの上昇、ＩＬ−６レベルの上昇、もしくはＲＯＳレベルの上昇、心臓トロポニンＩレベルの上昇、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベルの上昇、ＭＬＣＬ  ＡＴ１発現レベルの上昇、ＡＬＣＡＴ１発現レベルの上昇、および／または、ｍＫ  ＡＴＰ活性の減少および／またはＴａ１発現の減少のうちの１以上を有する対象、または有すると疑われる対象を治療する治療法および予防法の両方が提示される。たとえば、一部の実施態様において、本開示により、心不全を有する対象または心不全のリスク（心不全に罹りやすい）を有する対象、ならびに、ＣＲＰレベルの上昇（たとえば、ｈｓＣＲＰにより測定される）、ＴＮＦαレベルの上昇、ＩＬ−６レベルの上昇、ＲＯＳレベルの上昇、心臓トロポニンＩレベルの上昇、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベルの上昇、ＭＬＣＬ  ＡＴ１発現レベルの上昇、ＡＬＣＡＴ１発現レベルの上昇、および／または、ｍＫ  ＡＴＰ活性の減少および／またはＴａ１発現の減少を有する対象または有すると疑われる対象、を治療する治療法および予防法の両方が開示される。従って、本方法により、対象のＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、ＲＯＳレベル、心臓トロポニンＩレベル、ＭＬＣＬ  ＡＴ１発現レベル、ＡＬＣＡＴ１発現レベル、および／もしくは、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰのうちの１以上を減少または正常化させるための、ならびに／または、Ｔａｚ１発現レベルおよび／もしくはｍＫ  ＡＴＰ活性を増加させるまたは正常化させるための、その必要のある対象に芳香族カチオン性ペプチドの有効量を投与することによる、対象における心不全の予防および／または治療が開示される。
【０１６０】
ゆえに、本発明により、ＣＲＰ、ＴＮＦα、ＩＬ−６、ＲＯＳ、心臓トロポニンＩ、ＭＬＣＬ  ＡＴ１、もしくはＡＬＣＡＴ１の上昇、および／または、ｍＫ  ＡＴＰ活性の減少および／もしくはＴａｚ１発現の減少により、ＬＶリモデリングのリスクがある対象を、またはＬＶリモデリングに罹患している対象を治療する治療法および予防法の両方が開示される。従って、本発明により、その必要のある対象に芳香族カチオン性ペプチドの有効量を投与することによる、対象におけるＬＶリモデリングの予防および／または治療が開示される。
【０１６１】
一部の実施態様において、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、またはＲＯＳレベル、またはＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベル、または心臓トロポニンＩレベル、またはＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、またはＡＬＣＡＴ１発現のうちの１以上の上昇は、心血管系疾患の既往歴のない対象における、将来的な血管系事象の指標となる。さらに、またはあるいは、一部の実施態様において、ｍＫ  ＡＴＰ活性の減少、またはＴａｚ１発現の減少は、心血管系疾患の既往歴のない対象における、将来的な血管系事象の指標となる。一部の実施態様において、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、またはＲＯＳ、またはＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベル、または心臓トロポニンＩレベル、またはＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、またはＡＬＣＡＴ１発現、ｍＫ  ＡＴＰ活性またはＴａｚ１発現のうちの１以上を測定することにより、神経系疾患予防における、リスク評価および治療転帰が増強される。一部の実施体お湯において、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、またはＲＯＳレベル、またはＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベル、または心臓トロポニンＩレベル、またはＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、またはＡＬＣＡＴ１発現、またはＴａｚ１発現、またはｍＫ  ＡＴＰ活性のうちの１以上が、たとえば、経皮冠動脈インターベンション後の心筋梗塞または再狭窄等の、心臓事象の再発可能性の評価のための独立したマーカーとして役立つ。一部の実施態様において、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、またはＲＯＳレベル、またはＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベル、または心臓トロポニンＩレベル、またはｍＫ  ＡＴＰ活性、またはＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、またはＡＬＣＡＴ１発現、またはＴａｚ１発現のうちの１以上が、心臓リスクの層別化および評価に用いられ、ならびに、たとえば、急性冠動脈症候群、脳卒中、末梢動脈疾患、および、たとえば心不全等の心筋梗塞後の合併症等の症状における予後因子となる。一部の実施態様において、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、およびＲＯＳレベル、またはＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベル、または心臓トロポニンＩレベル、またはｍＫ  ＡＴＰ活性、またはＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、またはＡＬＣＡＴ１発現、またはＴａｚ１発現のうちの１以上が、固定された冠動脈性心疾患および／または急性冠動脈症候群を有する患者における心臓事象の再発可能性を測定するために用いられる。一部の実施態様において、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、またはＲＯＳレベル、またはＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベル、または心臓トロポニンＩレベル、またはｍＫ  ＡＴＰ活性、またはＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、またはＡＬＣＡＴ１発現、またはＴａｚ１発現のうちの１以上が、経皮冠動脈インターベンションを受けた対象における、早期合併症および後期臨床狭窄および死亡率の予測因子である。一部の実施態様において、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、またはＲＯＳレベル、またはＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベル、または心臓トロポニンＩレベル、またはｍＫ  ＡＴＰ活性、またはＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、またはＡＬＣＡＴ１発現、またはＴａｚ１発現のうちの１以上が、急性冠動脈症候群、安定狭心症、不安定狭心症、および急性心筋梗塞における予後���に加わる。一部の実施態様において、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、またはＲＯＳレベル、またはＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベル、または心臓トロポニンＩレベル、またはｍＫ  ＡＴＰ活性、またはＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、またはＡＬＣＡＴ１発現、またはＴａｚ１発現のうちの１以上が、ＬＶリモデリングにおける予後値に加わる。
【０１６２】
従って、一部の実施態様において、本明細書に開示される芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩（たとえば、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩））を用いた、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、ＲＯＳレベル、心臓トロポニンＩレベル、またはＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、および／もしくは、Ｔａｚ１発現のうちの１以上が上昇した対象の治療的処置および／または予防的処置により、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、ＲＯＳレベル、心臓トロポニンＩレベル、ＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、ＡＬＣＡＴ１発現、および／または、Ｔａｚ１発現が減少し、それにより、上述の任意の心臓、狭窄／血管事象（たとえば、ＬＶリモデリング）のリスクが減少する。さらに、またはあるいは、一部の実施態様において、本明細書に開示される芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩（たとえば、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩））を用いた、ｍＫ  ＡＴＰ活性が増加した、および／もしくは、Ｔａｚ１発現が減少した、対象の治療的処置、ならびに／または、予防的処置により、ｍＫ  ＡＴＰ活性が増加し、および／または、Ｔａｚ１発現が増加し、それにより、上述の任意の心臓、狭窄／血管事象（たとえば、ＬＶリモデリング）のリスクが減少する。一部の実施態様において、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、またはＲＯＳレベル、またはＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベル、または心臓トロポニンＩレベル、またはＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベル、またはｍＫ  ＡＴＰ活性、またはＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、またはＡＬＣＡＴ１発現、またはＴａｚ１発現が、芳香族カチオン性ペプチドを用いた処置後に正常化される。
【０１６３】
治療法
以下の記述は、例示の目的のためのみであり、本開示方法および組成物を特定の疾患または疾患状態に限定する意図は無い。対象における、対象のＣＲＰレベル、またはＴＮＦαレベル、またはＩＬ−６レベル、またはＲＯＳレベル、心臓トロポニンＩレベル、ＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、またはＡＬＣＡＴ１発現のうちの１以上の低下、および／または、ｍＫ  ＡＴＰ活性の増加、および／または、Ｔａｚ１発現の増加は、ネガティブな心臓、狭窄または血管事象（たとえばＬＶリモデリング）のうちのいくつものリスクを減少させる。一部の実施態様において、本発明には、治療目的のために、ＣＲＰレベル、もしくはＴＮＦαレベル、もしくはＩＬ−６レベル、もしくはＲＯＳレベル、心臓トロポニンＩレベル、もしくはＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、もしくはＡＬＣＡＴ１発現が上昇した、および／または、ｍＫ  ＡＴＰ活性が減少した、および／または、Ｔａｚ１発現が減少した、または減少が疑われる対象における、ＬＶリモデリングを治療するための方法が含まれる。治療応用において、そのような疾患が疑われる対象、またはすでに罹患している対象に、当該疾患の進行における合併症および中間病理学的表現型を含む、当該疾患の症状を治癒するために、または少なくとも部分的に阻むために組成物または薬剤が十分な量で投与される。従って、一部の実施態様において、本発明により、心不全またはＬＶリモデリングに罹患した、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、ＲＯＳレベル、心臓トロポニンＩレベル、ＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、および／もしくはＡＬＣＡＴ１発現が上昇した、ならびに／または、ｍＫ  ＡＴＰが減少した、ならびに／または、Ｔａｚ１発現が減少した、または減少が疑われる個人を治療する方法が開示される。
【０１６４】
心不全に罹患している対象は、当分野に公知の診断アッセイまたは予測アッセイのいずれか、または組み合わせにより特定することができる。たとえば、典型的な心不全の症状としては、息切れ（呼吸困難）、疲労、衰弱、横になった際に呼吸が困難となる、および脚、足首または腹部のむくみ（浮腫）が挙げられる。一部の実施態様において、当該対象はまた、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、ＲＯＳレベル、ＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベル、心臓トロポニンＩレベル、ＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、および／もしくはＡＬＣＡＴ１発現の上昇、ならびに／または、ｍＫ  ＡＴＰの減少、ならびに／または、Ｔａｚ１発現の減少を示しうる。当該対象はまた、冠状動脈疾患、全身性高血圧、心筋症または心筋炎、先天性心疾患、心臓弁の異常または心臓弁膜症、重篤な肺疾患、糖尿病、重篤な貧血、甲状腺機能亢進症、不整脈または律動不整、および心筋梗塞を含む、様々な疾患に罹患しうる。うっ血性心不全の初期の兆候は、心肥大（拡張心）、多呼吸（急速な呼吸；左側の不全の場合に発生）、および肝腫脹（拡張肝臓；右側の不全の場合に発生）である。冠状動脈の閉塞による急性心筋梗塞（ＡＭＩ）は、最終的には心不全をもたらしうる、普遍的な起因事象である。しかしながら、ＡＭＩを有する対象が、必ずしも心不全を発症するとは限らない。同様に、心不全に罹患している対象が、必ずしもＡＭＩに罹患していたとは限らない。
【０１６５】
ＬＶリモデリングに罹患している対象は、当分野に公知の診断アッセイまたは予測アッセイのいずれか、または組み合わせにより特定することができる。たとえば、典型的なＬＶリモデリングの症状としては、ＬＶ１回拍出量の低下、ＬＶ駆出率の低下、不十分な短縮率、梗塞拡大の増加、不十分な血液動態、ＬＶ心筋における瘢痕形成の増加、および肺容量の増加が挙げられる。ＬＶリモデリングの症状としてはまた、心不全に関連した症状（たとえば、息切れ、疲労および四肢のむくみ）が挙げられる。一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドの「治療有効量」は、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、ＲＯＳレベル、心臓トロポニンＩレベル、ＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、および／またはＡＬＣＡＴ１発現の上昇の生理学的影響が、少なくとも改善されるレベルを含む。さらに、またはあるいは、一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドの治療有効量は、ｍＫ  ＡＴＰレベルの減少および／またはＴａｚ１発現の低下の生理学的影響が、少なくとも改善されるレベルを含む。さらに、またはあるいは、一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドの治療有効量は、ＬＶリモデリングの生理学的影響が少なくとも改善されるレベルを含む。
【０１６６】
予防法
一部の態様において、本発明により、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、もしくはＩＬ−６レベル、もしくはＲＯＳレベル、心臓トロポニンＩレベル、ＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、および／もしくはＡＬＣＡＴ１発現の上昇、ならびに／または、ｍＫ  ＡＴＰの低下、ならびに／または、Ｔａｚ１発現の低下のうちの１以上を有する対象、または有すると疑われる対象における、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、ＲＯＳレベル、心臓トロポニンＩレベル、ＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、ＡＬＣＡＴ１発現のうちの１以上を減少させる（たとえば、正常化させる）、ならびに／または、ｍＫ  ＡＴＰを増加させる（たとえば、正常化させる）、ならびに／または、Ｔａｚ１発現を低下させる、芳香族カチオン性ペプチドを対象に投与することによる、心不全の可能性もしくは重篤度を予防または治療する方法が開示される。心不全のリスクがある対象は、たとえば、本明細書に記述される診断アッセイもしくは予測アッセイのいずれか、または組み合わせにより特定することができる。予防的応用において、芳香族カチオン性ペプチドの医薬組成物または薬剤は、疾患、その合併症、および疾患の進行中に現れる中間病理学的表現型の生化学的症状、組織学的症状、および／または行動上の症状を含む、疾患の除去、または疾患リスクの減少、重篤度の低減、または疾患発症の遅延のために十分な量で、疾患もしくは状態に罹りやすい対象、またはリスクのある対象に投与される。芳香族カチオンの予防的投与は、当該疾患または障害が予防されるように、あるいはその進行が遅れるように、当該疾患または障害の特徴的な症状の兆候の前に行われても良い。適切な化合物は、上述のスクリーニングアッセイに基づいて決定されても良い。
【０１６７】
心不全を有する、またはリスクがあると診断された対象は、以下の非限定的なリスク因子のうちの１以上を示す可能性がある：高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、一部の糖尿病薬（たとえば、ロシグリタゾンおよびピオグリタゾンが、心不全のリスクを増加させることが判明している）、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、ライフスタイル（たとえば、喫煙、座りがちなライフスタイル）、高コレステロール、家族歴、ストレスおよび腎疾患。
【０１６８】
左心室機能の改善
ＨＦを有する患者は多くの場合、有害な左心室（ＬＶ）リモデリング、神経ホルモン、自律神経系の緊張および血管緊張の障害、ならびに、冠状動脈アテローム性動脈硬化に関与する化合物である、炎症促進性サイトカインおよびケモカインのレベルが増加している（Sola et al. “Atorvastatin Improves Left Ventricular Systolic Function and Serum Markers of Inflammation in Nonischemic Heart Failure.” J. Am. Coll. Cardiol. 47(2): 332-337 (2006)）。高レベルのこれら炎症性マーカー（ＴＮＦα、ＩＬ−６、およびＣＲＰを含む）は、心血管系疾患の罹病率および死亡率にもまた関連している。一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）による、炎症促進性サイトカイン（たとえば、ＴＮＦα、ＩＬ−６、およびＣＲＰ）の減少により、ＬＶリモデリングが減少する。
【０１６９】
一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）による、炎症促進性サイトカイン（たとえば、ＴＮＦα、ＩＬ−６、およびＣＲＰ）の減少により、ＨＦのリスクがある対象、または、ＨＦもしくは他の狭窄事象もしくは血管事象に罹患している対象におけるＬＶ機能が改善される。一部の実施態様において、（未処置対象と比較した場合の）ＬＶ機能の改善は、ＬＶ１回拍出量の減少、ＬＶ駆出率の増加、短縮率の改善、梗塞拡大の減少、良好な血液動態、ＬＶ心筋における瘢痕形成の減少、肺容量の減少、またはそれらの組み合わせにより測定される。
【０１７０】
急性心筋梗塞およびＨＦにおいて、ＲＯＳは、虚血心筋において、特に再灌流後に発生する。ＲＯＳは細胞膜を直接、損傷し、細胞死をもたらす。ＲＯＳはまた、宿主反応として、虚血領域および周辺心筋において、たとえば、ＴＮＦα、ＩＬ−１β、およびＩＬ−６等の炎症性サイトカインを合成させるシグナル伝達を刺激する。炎症性サイトカインはまた、ＲＯＳを伴う鎖反応において、細胞生存と細胞死を制御する。
【０１７１】
一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）により、心筋梗塞後のＬＶ機能、またはＨＦのリスクのある対象におけるＬＶ機能が改善する。一部の実施態様において、（未処置対象と比較した）ＬＶ機能の改善は、ＬＶ１回拍出量の低下、ＬＶ駆出率の増加、短縮率の改善、梗塞拡大の減少、良好な血流動態、ＬＶ心筋における瘢痕形成の低下、肺容量の低下、またはそれらの組み合わせにより測定される。
【０１７２】
急性心筋梗塞およびＨＦにおいて、心臓トロポニンＩは、虚血状態の心筋において生成される。心臓トロポニンＩは、心臓トロポニン自己抗体の増加をもたらしうる。心臓トロポニン自己抗体が増加すると、心臓の炎症が増加し、および、炎症性サイトカインの発現が増加する。
【０１７３】
一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）により、心筋梗塞後のＬＶ機能、またはＨＦのリスクのある対象におけるＬＶ機能が改善する。一部の実施態様において、（未処置対象と比較した）ＬＶ機能の改善は、ＬＶ１回拍出量の低下、ＬＶ駆出率の増加、短縮率の改善、梗塞拡大の減少、良好な血流動態、ＬＶ心筋における瘢痕形成の低下、肺容量の低下、またはそれらの組み合わせにより測定される。
【０１７４】
急性心筋梗塞およびＨＦにおいて、ＮＡＤＰＨの還元型の減少により、ｍＫ  ＡＴＰ活性の減少がもたらされる。ｍＫ  ＡＴＰ活性の減少により、ミトコンドリア環境におけるイオンの脱制御がもたらされ、それに引き続き、マトリックスの収縮およびＡＴＰ産生の低下がもたらされる。
【０１７５】
一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）によるｍＫ  ＡＴＰ活性の増加によって、心筋梗塞後のＬＶ機能、またはＨＦのリスクのある対象におけるＬＶ機能が改善する。一部の実施態様において、（未処置対象と比較した）ＬＶ機能の改善は、ＬＶ１回拍出量の低下、ＬＶ駆出率の増加、短縮率の改善、梗塞拡大の減少、良好な血流動態、ＬＶ心筋における瘢痕形成の低下、肺容量の低下、またはそれらの組み合わせにより測定される。
【０１７６】
芳香族カチオン性ペプチドを基にした治療剤の生物学的効果の測定
様々な実施態様において、適切なｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏのアッセイを、芳香族カチオン性ペプチドを基にした治療剤の効果を測定するために実施し、その投与が治療に適応されるか否かを決定する。様々な実施態様において、所与の芳香族カチオン性ペプチドを基にした治療剤が、ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、ＲＯＳレベル、心臓トロポニンレベル、ＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、および／もしくはＡＬＣＡＴ１発現のうちの１以上の減少、ならびに／または、ｍＫ  ＡＴＰ活性の増加、ならびに／または、Ｔａｚ１発現の増加において、所望される効果を発揮し、それによって、心不全またはＬＶリモデリングが予防または治療されるか否かを測定するために、代表的な動物モデルを用いて、ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを行っても良い。治療に用いられる化合物は、ヒト対象において検証する前に、限定されないが、ラット、マウス、ニワトリ、ウシ、サル、ウサギ等を含む適切な動物モデルシステムにおいて検証されても良い。同様に、ｉｎ  ｖｉｖｏ検証に対しては、ヒト対象への投与の前に、当分野公知の動物モデルのいずれかを用いてもよい。
【０１７７】
ＨＦは、容積過負荷、圧力過負荷、ファストペーシング、心筋虚血、心毒性薬物、または遺伝子改変モデルを用いて、様々な種で誘導されている。圧力過負荷を用いたモデルが、最も広く用いられている。高血圧は、ＨＦ発症のリスク増加と関連している。１つのマウスモデルにおいて、アンギオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）は、血圧を増加させ、心筋細胞の肥大を誘導し、心臓線維化を増加させ、および、心筋細胞の弛緩を損ねる。ミニ浸透圧ポンプによるマウスへのアンギオテンシンの点滴により、収縮期および拡張期血圧が増加し、心重量および左心室の厚さ（ＬＶＭＩ）が増加し、ならびに、心筋パフォーマンス指標（ＭＰＩ）が損なわれる。ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、ＲＯＳレベル、および／または、心臓トロポニンＩレベル、ＭＬＣＬ  ＡＴ１、ＡＬＣＡＴ１、および／または、Ｔａｚ１発現レベル、および／または、ｍＫ  ＡＴＰ活性を、ＨＦ誘導の前、ＨＦ誘導の間、ＨＦ誘導の後の様々な時点でモニターする。
【０１７８】
第二の例証的なマウスモデルにおいて、Ｇαｑの持続的な高レベル発現により、筋細胞の著しいアポトーシスがもたらされ、それにより、１６週齢までに心臓肥大、および心不全がもたらされる（D’Angelo et al., 1998）。βアドレナリン受容体（βＡＲ）は、主にヘテロ三量体Ｇタンパク質（Ｇｓ）に連結され、アデニルイルシクラーゼ活性を刺激する。この関連性により、細胞内ｃＡＭＰが生成され、タンパク質キナーゼＡが活性化し、それにより、心臓収縮能および心拍数が制御される。Ｇαｑの過剰発現により、βアドレナリンアゴニストに対する反応性の減少がもたらされ、ＨＦが発生する。ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、ＲＯＳレベル、および／または、心臓トロポニンＩレベル、ＭＬＣＬ  ＡＴ１、ＡＬＣＡＴ１、および／または、Ｔａｚ１発現レベル、および／または、ｍＫ  ＡＴＰ活性を、ＨＦ誘導の前、ＨＦ誘導の間、ＨＦ誘導の後の様々な時点でモニターする。
【０１７９】
ＨＦのモデルとして、外科的結紮による大動脈の実験的な狭窄もまた広く用いられている。大動脈狭窄（ＴＡＣ）により圧力過負荷誘導性ＨＦがもたらされ、左心室（ＬＶ）の質量が増加する。ＴＡＣは、Tamavski O et al. (2004)に記述されるように行われ、７−０絹糸のダブルノット縫合を用いて上行大動脈が狭窄される。ＴＡＣの後、マウスは４週間以内にＨＦを発症する。ＣＲＰレベル、ＴＮＦαレベル、ＩＬ−６レベル、ＲＯＳレベル、および／または、心臓トロポニンＩレベル、ＭＬＣＬ  ＡＴ１、ＡＬＣＡＴ１、および／または、Ｔａｚ１発現レベル、および／または、ｍＫ  ＡＴＰ活性を、ＨＦ誘導の前、ＨＦ誘導の間、ＨＦ誘導の後の様々な時点でモニターする。
【０１８０】
ＣＲＰに対する予防的使用および治療的使用
上述のように、多くの実験において、高感受性アッセイで測定されたＣＲＰレベルが心臓リスクに関連付けられている。１つの例示的なリスク評価スケールを表９に示す。
【表９】
2018109012.tif 000022
【０１８１】
一部の実施態様において、正常な、正常化された、または対照のＣＲＰレベルは、約１ｍｇ／Ｌ未満である。一部の実施態様において、対照の、正常な、または正常化されたＣＲＰレベルは、約１〜３ｍｇ／Ｌの間である。
【０１８２】
一部の実施態様において、低レベルのＣＲＰは、ｈｓＣＲＰアッセイにより測定される。一部の実施態様において、減少した、または低下したＣＲＰレベルは、高心臓リスクレベル（たとえば、３ｍｇ／Ｌまたはそれ以上）から低リスクレベル（たとえば、１〜３ｍｇ／Ｌまたは１ｍｇ／Ｌ未満）までである。一部の実施態様において、ＣＲＰレベルの減少は、約１ｍｇ／Ｌ、約２ｍｇ／Ｌ、約３ｍｇ／Ｌ、約  ４ｍｇ／Ｌ、約５ｍｇ／Ｌ、約６ｍｇ／Ｌ、約７ｍｇ／Ｌ、約８ｍｇ／Ｌ、または約９ｍｇ／Ｌによる減少である。
【０１８３】
ＲＯＳに対する予防的使用および治療的使用
一部の実施態様において、正常な、正常化された、または対照のＲＯＳレベルは、約３ＲＬＵｘ１０5／ｍｌ未満である。一部の実施態様において、正常な、正常化された、または対照のＲＯＳレベルは、約３ＲＬＵｘ１０5／ｍｌ〜約１３ＲＬＵｘ１０5／ｍｌの間である。
【０１８４】
一部の実施態様において、ＲＯＳレベルの減少は、約１ＲＬＵｘ１０5／ｍｌ〜約５ＲＬＵｘ１０5／ｍｌの間、約５ＲＬＵｘ１０5／ｍｌ〜約１０ＲＬＵｘ１０5／ｍｌの間、約１０ＲＬＵｘ１０5／ｍｌ〜約１５ＲＬＵｘ１０5／ｍｌの間、約１５ＲＬＵｘ１０5／ｍｌ〜約２０ＲＬＵｘ１０5／ｍｌの間、または約２０ＲＬＵｘ１０5／ｍｌ〜約２５ＲＬＵｘ１０5／ｍｌの間の減少である。
【０１８５】
ＩＬ−６に対する予防的使用および治療的使用
一部の実施態様において、正常な、正常化された、または対照のＩＬ−６レベルは、約１０ｐｇ／ｍｌ未満である。一部の実施態様において、正常な、正常化された、または対照のＩＬ−６レベルは、約５ｐｇ／ｍｌ〜約１３ｐｇ／ｍｌの間である。
【０１８６】
一部の実施態様において、ＩＬ−６レベルの減少は、約１ｐｇ／ｍｌ〜約５ｐｇ／ｍｌの間、約５ｐｇ／ｍｌ〜約１０ｐｇ／ｍｌの間、約１０ｐｇ／ｍｌ〜約１５ｐｇ／ｍｌ、または、約１５ｐｇ／ｍｌ〜約２０ｐｇ／ｍｌの間の減少である。
【０１８７】
ＴＮＦαに対する予防的使用および治療的使用
一部の実施態様において、正常な、正常化された、または対照のＴＮＦαレベルは、約１．５ｐｇ／ｍｌ未満である。一部の実施態様において、正常な、正常化された、または対照のＩＬ−６レベルは、約１ｐｇ／ｍｌ〜約２ｐｇ／ｍｌの間である。
【０１８８】
一部の実施態様において、ＴＮＦαレベルの減少は、約１ｐｇ／ｍｌ、または約２ｐｇ／ｍｌ、または約３ｐｇ／ｍｌ、または約４ｐｇ／ｍｌ、または約５ｐｇ／ｍｌの減少である。
【０１８９】
ＭＬＣＬ  ＡＴ１、ＡＬＣＡＴ１、およびＴａｚ１に対する予防的使用および治療的使用  治療法：
以下の記述は、例示の目的のためのみであり、本開示方法および組成物を特定の疾患または疾患状態に限定する意図は無い。対象における、ＭＬＣＬ  ＡＴ１発現またはＡＬＣＡＴ１発現の低下、および／または、Ｔａｚ１発現の増加は、ネガティブな心臓、狭窄または血管の事象のうちの任意のリスクを減少させる。本発明の１つの態様には、治療目的のための、ＭＬＣＬ  ＡＴ１またはＡＬＣＡＴ１の発現が上昇した対象もしくは上昇が疑われる対象、および／または、Ｔａｚ１の発現が低下した対象もしくは低下が疑われる対象の、心不全を治療する方法が含まれる。治療応用において、そのような疾患が疑われる対象、またはすでに罹患している対象に、合併症および、当該疾患の進行における中間病理学的表現型を含む、当該疾患の症状を治癒するために、または少なくとも部分的に阻むために組成物または薬剤が十分な量で投与される。従って、一部の実施態様において、本発明により、心不全に罹患した、ＭＬＣＬ  ＡＴ１、および／もしくはＡＬＣＡＴ１発現レベルが上昇した、または上昇が疑われる個人を治療する方法が開示される。さらに、またはあるいは、一部の実施態様において、本発明により、心不全に罹患した、Ｔａｚ１発現が減少した、または減少が疑われる個人を治療する方法が開示される。
【０１９０】
心不全に罹患している対象は、当分野に公知の診断アッセイまたは予測アッセイのいずれか、または組み合わせにより特定することができる。たとえば、典型的な心不全の症状としては、息切れ（呼吸困難）、疲労、衰弱、横になった際に呼吸が困難となる、および脚、足首または腹部のむくみ（浮腫）が挙げられる。一部の実施態様において、当該対象はまた、ＭＬＣＬ  ＡＴ１もしくはＡＬＣＡＴ１発現の上昇、ならびに／または、Ｔａｚ１発現の低下を示しうる。当該対象はまた、冠状動脈疾患、全身性高血圧、心筋症または心筋炎、先天性心疾患、心臓弁の異常または心臓弁膜症、重篤な肺疾患、糖尿病、重篤な貧血、甲状腺機能亢進症、不整脈または律動不整、および心筋梗塞を含む、様々な疾患に罹患しうる。うっ血性心不全の初期の兆候は、心肥大（拡張心）、多呼吸（急速な呼吸；左側の不全の場合に発生）、および肝腫脹（拡張肝臓；右側の不全の場合に発生）である。冠状動脈の閉塞による急性心筋梗塞（ＡＭＩ）は、最終的には心不全をもたらしうる、普遍的な起因事象である。しかしながら、ＡＭＩを有する対象が、必ずしも心不全を発症するとは限らない。同様に、心不全に罹患している対象が、必ずしもＡＭＩに罹患していたとは限らない。
【０１９１】
予防法
１つの態様において、本発明により、ＭＬＣＡ  ＡＴ１、ＡＬＣＡＴ１、またはＴａｚ１発現レベルのうちの１以上を正常化する芳香族カチオン性ペプチドを対象に投与することによる、ＭＬＣＬ  ＡＴ１またはＡＬＣＡＴ１発現の上昇、および／または、Ｔａｚ１発現の減少のうちの１以上を有する対象、または有すると疑われる対象における、心不全を予防する方法が開示される。心不全のリスクがある対象は、たとえば、本明細書に記述される診断アッセイまたは予測アッセイのいずれか、または組み合わせにより特定することができる。予防応用において、芳香族カチオン性ペプチドの医薬組成物または薬剤は、疾患または状態に罹りやすい対象、またはリスクがある対象に、当該疾患、その合併症、および、当該疾患の進行中に現れる中間病理学的表現型の生化学的、組織学的、ならびに／または、行動上の症状を含む、当該疾患の当該リスクを排除する、もしくは減少させる、重篤度を低下させる、または発症を遅延させるのに十分な量で投与される。芳香族カチオンの予防的投与は、当該疾患または障害が予防される、または、その進行が遅延されるように、当該疾患または障害の特徴的な症状の兆候の前に行われても良い。適切な化合物は、上述のスクリーニングアッセイに基づいて決定されても良い。
【０１９２】
心不全を有する、またはリスクがあると診断された対象は、以下の非限定的なリスク因子のうちの１以上を示しても良い：高血圧、冠動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、一部の糖尿病薬（たとえば、ロシグリタゾンおよびピオグリタゾンが、心不全のリスクを増加させることが判明している）、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、ライフスタイル（たとえば、喫煙、座りがちなライフスタイル）、高コレステロール、家族歴、ストレスおよび腎疾患。
【０１９３】
ペプチド投与量に対するバイオマーカーとしてのＣ反応性タンパク質
一部の実施態様において、Ｃ反応性タンパク質のレベルを用いて、対象に投与する芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）の投与量を決定する。例えば、一部の実施態様において、もし対象におけるＣ反応性タンパク質のレベルが約１ｍｇ／Ｌ未満である場合、対象に投与される本発明の芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）はゼロ、または低レベルである。一部の実施態様において、もし対象のＣ反応性タンパク質のレベルが約１〜３ｍｇ／Ｌの間である場合、中間レベルの本発明の芳香族カチオン性ペプチドが投与され、および、もし対象のＣ反応性タンパク質のレベルが約３〜１０ｍｇ／Ｌの間である場合、高レベルの本発明の芳香族カチオン性ペプチドが対象に投与される。一部の実施態様においては、少ない投与量の芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）により、約５０ｎｇ／ｍｌ未満の血漿濃度がもたらされる。一部の実施態様においては、少ない量の芳香族カチオン性ペプチドにより、約１、約５、約１０、約２０、約３０、または約４０ｎｇ／ｍｌの血漿濃度がもたらされる。一部の実施態様において、少ない量の芳香族カチオン性ペプチドにより、約１０−４０ｎｇ／ｍｌの間、約１０−３０ｎｇ／ｍｌの間、約１０−２０ｎｇ／ｍｌの間、約２０−４０ｎｇ／ｍｌの間、約２０−３０ｎｇ／ｍｌの間、約３０−４０ｎｇ／ｍｌの間、約３０−５０ｎｇ／ｍｌの間、または、約４０−５０ｎｇ／ｍｌの間の血漿濃度がもたらされる。一部の実施態様において、中間の投与量の芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）により、約５０〜５００ｎｇ／ｍｌの血漿濃度がもたらされる。一部の実施態様において、中間の投与量の芳香族カチオン性ペプチドにより、約５０ｎｇ／ｍｌ、約１００ｎｇ／ｍｌ、約１５０ｎｇ／ｍｌ、約２００ｎｇ／ｍｌ、約２５０ｎｇ／ｍｌ、約３００ｎｇ／ｍｌ、約３５０ｎｇ／ｍｌ、約４００ｎｇ／ｍｌ、または約４５０ｎｇ／ｍｌの血漿濃度がもたらされる。一部の実施態様において、中間の投与量の芳香族カチオン性ペプチドにより、約５０−１００ｎｇ／ｍｌの間、約５０−２００ｎｇ／ｍｌの間、約５０−３００ｎｇ／ｍｌの間、約５０−４００ｎｇ／ｍｌの間、約１００−２００ｎｇ／ｍｌの間、約１００−３００ｎｇ／ｍｌの間、約１００−４００ｎｇ／ｍｌの間、約１００−５００ｎｇ／ｍｌの間、約２００−３００ｎｇ／ｍｌの間、約２００−４００ｎｇ／ｍｌの間、約２００−５００ｎｇ／ｍｌの間、約３００−４００ｎｇ／ｍｌの間、約３００−５００ｎｇ／ｍｌの間、または約４００−５００ｎｇ／ｍｌの間の血漿濃度が得られる。一部の実施態様において、高い投与量の芳香族カチオン性ペプチドにより、約５００〜５０００ｎｇ／ｍｌの間の血漿濃度がもたらされる。一部の実施態様において、高い投与量の芳香族カチオン性ペプチドにより、約１０００ｎｇ／ｍｌ、約１５００ｎｇ／ｍｌ、約２０００ｎｇ／ｍｌ、約２５００ｎｇ／ｍｌ、約３０００ｎｇ／ｍｌ、約３５００ｎｇ／ｍｌ、約４０００ｎｇ／ｍ��、または約４５００ｎｇ／ｍｌの血漿濃度がもたらされる。一部の実施態様において、高い投与量の芳香族カチオン性ペプチドにより、約５００−１０００ｎｇ／ｍｌの間、約５００−２０００ｎｇ／ｍｌの間、約５００−３０００ｎｇ／ｍｌの間、約５００−４０００ｎｇ／ｍｌの間、約１０００−２０００ｎｇ／ｍｌの間、約１０００−３０００ｎｇ／ｍｌの間、約１０００−４０００ｎｇ／ｍｌの間、約１０００−５０００ｎｇ／ｍｌの間、約２０００−３０００ｎｇ／ｍｌの間、約２０００−４０００ｎｇ／ｍｌの間、約２０００−５０００ｎｇ／ｍｌの間、約３０００−４０００ｎｇ／ｍｌの間、約３０００−５０００ｎｇ／ｍｌの間、または約４０００−５０００ｎｇ／ｍｌの間の血漿濃度がもたらされる。一部の実施態様において、高い投与量の芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）により、５０００ｎｇ／ｍｌを超える血漿濃度がもたらされる。例えば、一部の実施態様において、高い投与量の芳香族カチオン性ペプチドにより、約６０００ｎｇ／ｍｌ、約７０００ｎｇ／ｍｌ、約８０００ｎｇ／ｍｌ、約９０００ｎｇ／ｍｌ、または約１０，０００  ｎｇ／ｍｌの血漿濃度がもたらされる。一部の実施態様において、高い投与量の芳香族カチオン性ペプチドにより、約５０００−１０，０００ｎｇ／ｍｌの間、約５０００−９０００ｎｇ／ｍｌの間、約５０００−８０００ｎｇ／ｍｌの間、約５０００−７０００ｎｇ／ｍｌの間、約５０００−６０００ｎｇ／ｍｌの間、約６０００−７０００ｎｇ／ｍｌの間、約６０００−８０００ｎｇ／ｍｌの間、約６０００−９０００ｎｇ／ｍｌの間、約６０００−１０，０００ｎｇ／ｍｌの間、約７０００−８０００ｎｇ／ｍｌの間、約７０００−９０００ｎｇ／ｍｌの間、約７０００−１０，０００ｎｇ／ｍｌの間、約８０００−９０００ｎｇ／ｍｌの間、または約９０００−１００００ｎｇ／ｍｌの間の血漿濃度がもたらされる。以下に記述されるように、当業者であれば、本明細書に記述される芳香族カチオン性ペプチドの投与量、毒性および治療有効性は、細胞培養または実験動物における標準的な製薬手順により測定することができる。
【０１９４】
ペプチド投与量の情報、予防的処置または治療的処置に関し、ＣＲＰレベルは、当分野に公知の方法のいずれか、または組み合わせにより測定することができる。例えば、一部の実施態様においては、ｈｓＣＲＰまたはｃＲＰアッセイが行われる。一部の実施態様においては、対象のＣＲＰレベルは、ペプチド投与前は約１〜３ｍｇ／Ｌの間である。一部の実施態様においては、対象のＣＲＰレベルは、ペプチド投与前は約３〜１０ｍｇ／Ｌの間である。一部の実施態様においては、対象のＣＲＰレベルは、ペプチド投与前は１０ｍｇ／Ｌ超である。一部の実施貸与うにおいては、対象のＣＲＰレベルは、ペプチド投与前は、対照レベルよりも約２倍高い。一部の実施態様においては、対象のＣＲＰレベルは、ペプチド投与前は、対照レベルよりも約３倍高い。一部の実施態様においては、対象のＣＲＰレベルは、ペプチド投与前は、対照よりも約４、５、または６倍高い。
【０１９５】
ペプチド投与量に対するバイオマーカーとしてのＲＯＳ、ＴＮＦαまたはＩＬ−６
血漿中のＴＮＦαおよびＩＬ−６のレベルは、通常、ｐｇ／ｍｌとして報告されており、連動する病態生理学的状態に基づいて、約０．１ｐｇ／ｍｌ〜約２０００ｐｇ／ｍｌの範囲でありうる。血漿中のＲＯＳの総量は、通常、ＲＬＵ（相対光単位／ｍｌ）で報告されている。ＲＯＳレベルの範囲は、連動する生理学的状態に基づいて、約１．０ＲＬＵｘ１０5／ｍｌ〜約２００ＲＬＵｘ１０5／ｍｌであっても良い。ゆえに、一部の実施態様において、ＲＯＳレベル、ＴＮＦαおよび／またはＩＬ−６レベルを用いて、対象に投与する芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）の投与量が決定される。たとえば、一部の実施態様において、対象におけるＲＯＳ、ＴＮＦα、またはＩＬ−６タンパク質のレベルが低い（たとえば、ＴＮＦαもしくはＩＬ−６に関しては約０．１〜５００ｐｇ／ｍｌ、または、ＲＯＳに関しては約１〜７０ＲＬＵｘ１０5／ｍｌ）場合、低用量の芳香族カチオン性ペプチドが投与される。さらに、またはあるいは、一部の実施態様において、対象におけるＲＯＳ、ＴＮＦα、またはＩＬ−６タンパク質のレベルが中間範囲にある（たとえば、ＴＮＦαもしくはＩＬ−６に関しては約５００〜１０００ｐｇ／ｍｌ、または、ＲＯＳに関しては約７０〜１３０ＲＬＵｘ１０5／ｍｌ）場合、中間の投与量の芳香族カチオン性ペプチドが投与される。さらに、またはあるいは、一部の実施態様において、対象におけるＲＯＳ、ＴＮＦα、またはＩＬ−６タンパク質のレベルが高い場合（たとえば、ＴＮＦαもしくはＩＬ−６に関しては約１０００〜２０００ｐｇ／ｍｌ、またはＲＯＳに対しては約１３０〜２００ＲＬＵｘ１０5／ｍｌ）、高い投与量の芳香族カチオン性ペプチドが投与される。
【０１９６】
ペプチド投与量に関する情報、予防的処置、または治療的処置に対して、ＲＯＳレベルは、当分野公知の方法のいずれか、または組み合わせにより測定することができる。たとえば、一部の実施態様において、吸光度、蛍光、または発光アッセイが行われる。一部の実施態様において、ペプチド投与前の対象のＲＯＳのレベルは、約１ＲＬＵｘ１０5／ｍｌ〜約５ＲＬＵｘ１０5／ｍｌの間である。一部の実施態様において、ペプチド投与前の対象のＲＯＳレベルは、約５ＲＬＵｘ１０5／ｍｌ〜約１０ＲＬＵｘ１０5／ｍｌの間、または約１０ＲＬＵｘ１０5／ｍｌ〜約２０ＲＬＵｘ１０5／ｍｌの間、または約２０ＲＬＵｘ１０5／ｍｌ〜約３０ＲＬＵｘ１０5／ｍｌの間である。一部の実施態様において、ペプチド投与前の対象のＲＯＳレベルは、３０ＲＬＵｘ１０5／ｍｌ超である。一部の実施態様において、ペプチド投与前の対象のＲＯＳレベルは、対照レベルよりも約１．５超高い。一部の実施態様において、ペプチド投与前の対象のＲＯＳレベルは、対照レベルよりも約２倍高い。一部の実施態様において、ペプチド投与前の対象のＲＯＳレベルは、対照よりも約３、４、５、６、７、８倍以上高い。
【０１９７】
ペプチド投与量情報、予防的処置または治療的処置に関して、ＩＬ−６レベルは、当分野公知の方法のいずれか、または組み合わせにより測定することができる。たとえば、一部の実施態様において、ＥＬＩＳＡまたはＨＰＬＣアッセイが行われる。一部の実施態様において、対象のＩＬ−６レベルは、ペプチド投与前は約８ｐｇ／ｍｌである。一部の実施態様において、対象のＩＬ−６レベルは、ペプチド投与前は約５〜１３ｐｇ／ｍｌの間である。一部の実施態様において、対象のＩＬ−６レベルは、ペプチド投与前は約１３ｐｇ／ｍｌ超である。一部の実施態様において、対象のＩＬ−６レベルは、ペプチド投与前は対照レベルよりも約１．５倍高い。一部の実施態様において、対象のＩＬ−６レベルは、ペプチド投与前は、対照レベルよりも約２倍高い。一部の実施態様において、ペプチド投与前の対象のＩＬ−６レベルは、対照よりも約３、４、５、６、７、８倍以上高い。
【０１９８】
ペプチド投与量情報、予防的処置または治療的処置に関して、ＴＮＦαレベルは、当分野公知の方法のいずれか、または組み合わせにより測定することができる。たとえば、一部の実施態様において、ＥＬＩＳＡまたはＨＰＬＣアッセイが行われる。一部の実施態様において、対象のＴＮＦαレベルは、ペプチド投与前は約１ｐｇ／ｍｌである。一部の実施態様において、対象のＴＮＦαレベルは、ペプチド投与前は約１．０〜１．５ｐｇ／ｍｌの間である。一部の実施態様において、対象のＴＮＦαレベルは、ペプチド投与前は約１．５ｐｇ／ｍｌ超である。一部の実施態様において、対象のＴＮＦαレベルは、ペプチド投与前は対照レベルよりも約２倍高い。一部の実施態様において、対象のＴＮＦαレベルは、ペプチド投与前は、対照レベルよりも約３倍高い。一部の実施態様において、ペプチド投与前の対象のＴＮＦαレベルは、対照よりも、約４、５、６、７、または８倍以上高い。
【０１９９】
ペプチド投与量に対するバイオマーカーとしてのＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰ
血漿中のＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰは、ｐｇ／ｍｌで報告されていてもよく、および、連動する病態生理学的状態に基づいて、約１ｐｇ／ｍｌ〜約３０００ｐｇ／ｍｌの範囲であってもよい。ゆえに、一部の実施態様において、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰを用いて、対象に投与する芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）の投与量が決定される。たとえば、一部の実施態様において、対象におけるＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰのレベルが低い場合（たとえば、約１〜１０００ｐｇ／ｍｌ）、低用量の芳香族カチオン性ペプチドが投与される。さらに、またはあるいは、一部の実施態様において、もし対象におけるＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰのレベルが中程度の範囲である場合（たとえば、約１０００〜２０００ｐｇ／ｍｌ）、中用量の芳香族カチオン性ペプチドが投与される。さらに、またはあるいは、一部の実施態様において、対象におけるＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰのレベルが高い場合（たとえば、約２０００〜３０００ｐｇ／ｍｌ）、高用量の芳香族カチオン性ペプチドが投与される。
【０２００】
ペプチド投与量情報に関して、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰのレベルは、当分野公知の方法のいずれか、または組み合わせにより測定することができる。たとえば、一部の実施態様において、ＥＬＩＳＡまたはＨＰＬＣアッセイが行われる。一部の実施態様において、対象のＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰのレベルは、ペプチド投与前は約２５０ｐｇ／ｍｌである。一部の実施態様において、対象のＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰのレベルは、ペプチド投与前は約１５０〜４００ｐｇ／ｍｌの間である。一部の実施態様において、対象のＴＮＦαレベルは、ペプチド投与前は４００ｐｇ／ｍｌ超である。一部の実施態様において、対象のＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰのレベルは、ペプチド投与前は対照レベルよりも約５倍高い。一部の実施態様において、対象のＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰのレベルは、ペプチド投与前は、対照レベルよりも約６倍高い。一部の実施態様において、対象のＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰのレベルは、対照よりも、約３、４、５、６、７、８倍以上高い。
【０２０１】
一部の実施態様において、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰのレベルは、その必要のある対象に対し芳香族カチオン性ペプチドが投与された後の、ＬＶリモデリングの減少または予防に対するバイオマーカーとして測定される。たとえば、一部の実施態様において、本明細書に開示される芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）を用いた投与により、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰが、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、または約８０％まで減少する。一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドを用いた投与により、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰは、基準レベルか、基準レベルに近いところまで戻る。
【０２０２】
ペプチド投与量に対するバイオマーカーとしての心臓トロポニンＩ
一部の実施態様において、対象のＮｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰのレベルは、ペプチド投与前の対照よりも約３、４、５、６、７、８倍以上高い。
【０２０３】
一部の実施態様において、心臓トロポニンＩのレベルは、その必要のある対象に対し芳香族カチオン性ペプチドが投与された後の、ＬＶリモデリングの減少または予防に対するバイオマーカーとして測定される。たとえば、一部の実施態様において、本明細書に開示される芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）を用いた投与により、心臓トロポニンＩが、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、または約９０％まで減少する。一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドを用いた投与により、心臓トロポニンＩは、基準レベルか、基準レベルに近いところまで戻る。
【０２０４】
投与様式および効果的な投与量
細胞、器官、または組織にペプチドを接触させるための、当業者公知の方法を用いても良い。適切な方法としては、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｅｘ  ｖｉｖｏ、またはｉｎ  ｖｉｖｏの方法が挙げられる。ｉｎ  ｖｉｖｏの方法は通常、たとえば上述の芳香族カチオン性ペプチドを哺乳類（適切には、ヒト）に対し投与することを含む。治療のためにｉｎ  ｖｉｖｏで用いられる場合、当該芳香族カチオン性ペプチドは、効果的な量（すなわち、所望される治療効果を有する量）で対象に投与される。投与量および投与レジメンは、対象における影響の程度、用いられる特定の芳香族カチオン性ペプチドの特徴（たとえば、その治療指数、対象、および対象の既往歴）に基づく。
【０２０５】
効果的な量は、前臨床試験および臨床試験の間に、内科医および臨床医に良く知られた方法により決定されても良い。医薬品の投与に関する多くの公知方法のうちの任意の方法により、その必要のある哺乳類に対し、当該方法に有用なペプチドの効果的な量が投与されても良い。当該ペプチドは、全身または局所に投与されても良い。
【０２０６】
当該ペプチドは、薬学的に受容可能な塩として製剤化されても良い。薬学的に受容可能な無機塩基から誘導された塩としては、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン、亜マンガン、カリウム、ナトリウム、および亜鉛の塩等が挙げられる。薬学的に受容可能な有機塩から誘導された塩としては、１級アミン、２級アミン、および３級アミン（置換アミン、環状アミン、天然型アミン（たとえば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン（ｐｉｐｅｒａｚｉｎｅ）、ピペラジン（ｐｉｐｅｒａｄｉｎｅ）、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミン）等を含む）の塩が挙げられる。薬学的に受容可能な無機酸から誘導された塩としては、ホウ酸、炭酸、ハロゲン化水素酸（臭化水素酸、塩酸、フッ化水素酸、またはヨウ化水素酸）、硝酸、リン酸、スルファミン酸、および硫酸の塩が挙げられる。薬学的に受容可能な有機酸から誘導された塩としては、脂肪族ヒドロキシル酸（たとえば、クエン酸、グルコン酸、乳酸、ラクトビオン酸、リンゴ酸、および酒石酸）、脂肪族モノカルボキシル酸（たとえば、酢酸、酪酸、ギ酸、プロピオン酸およびトリフルオロ酢酸）、アミノ酸（たとえば、アスパラギン酸およびグルタミン酸）、芳香族カルボン酸（たとえば、安息香酸、ｐ−クロロ安息香酸、ジフェニル酢酸、ゲンチシン酸、馬尿酸、およびトリフェニル酢酸）、脂肪族ヒドロキシル酸（たとえば、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、１−ヒドロキシナフタレン−２−カルボン酸、および３−ヒドロキシナフタレン−２−カルボン酸）、アスコルビン酸、ジカルボン酸（たとえば、フマル酸、マレイン酸、シュウ酸、コハク酸）、グルクロン酸、マンデル酸、粘液酸、ニコチン酸、オロチン酸、パモ酸、パントテン酸、スルホン酸（たとえば、ベンゼンスルホン酸、カンホスルホン酸（ｃａｍｐｈｏｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、エジシル酸、エタンスルホン酸、イセチオン酸、メタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２，６−ジスルホン酸、およびｐ−トルエンスルホン酸）、キシナホイン酸（ｘｉｎａｆｏｉｃ  ａｃｉｄ）等）が挙げられる。一部の実施態様において、塩は、酢酸またはトリフルオロ酢酸である。
【０２０７】
本明細書に記述される疾患の治療または予防のために、本明細書に記述される芳香族カチオン性ペプチドは、単独で、または組み合わせて、対象への投与用医薬組成物へと組み込まれても良い。そのような組成物は通常、活性剤と薬学的に受容可能な担体を含有する。本明細書において、「薬学的に受容可能な担体」という用語には、医薬品投与と適合性のある、生理食塩水、溶媒、分散媒、コーティング、抗細菌剤および抗真菌剤、等張剤ならびに吸収遅延剤等を含む。補足的な活性化合物もまた、当該組成物に組み込まれても良い。
【０２０８】
医薬組成物は通常、意図される投与経路と適合するように製剤化される。投与経路の例としては、非経口（たとえば、静脈内、皮内、腹腔内、または皮下）、経口、吸入、経皮（局所）、眼内、イオントフォレーシス、および経粘膜投与が挙げられる。非経口、皮内、もしくは皮下適用に用いられる溶液または懸濁液には、以下の成分が含まれても良い：注入用の水等の滅菌希釈物質、生理食塩水溶液、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、または他の合成溶媒；たとえばベンジルアルコールまたはメチルパラベン等の抗細菌剤；たとえばアスコルビン酸または重硫酸ナトリウム等の抗酸化剤；たとえばエチレンジアミンテトラ酢酸等のキレート剤；たとえば酢酸、クエン酸、またはリン酸等の緩衝物質、および、たとえば塩化ナトリウムまたはデキストロース等の張力調整のための剤。
【０２０９】
ｐＨは、酸または塩基（たとえば塩酸または水酸化ナトリウム等）を用いて調節しても良い。非経口調製物は、アンプル、ディスポーザブルのシリンジ、または、ガラスもしくはプラスチックで作製された複数回投与用のバイアルに内包されていても良い。患者または治療医師の利便性のために、投与製剤は、治療過程（たとえば、７日間の治療）で必要とされる全ての備品（たとえば、薬剤のバイアル、希釈物質のバイアル、シリンジおよび針）を含むキットで提供されてもよい。
【０２１０】
注射用途に適切な医薬組成物には、滅菌水溶液（水溶性の場合には）、または、滅菌注射溶液もしくは分散液の即時調製のための、分散液および滅菌粉末を含んでも良い。静脈内投与に対しては、適切な担体として、生理学的食塩水、静菌性水、ＣｒｅｍｏｐｈｏｒＥＬ（登録商標）（BASF, Parsippany, N.J.）、またはリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）が挙げられる。全てのケースにおいて、非経口投与のための組成物は滅菌されていなければならず、および、シリンジ注入が容易に行える程度に流動性でなければならない。製造および保存条件下で安定でなければならず、および、たとえば細菌や真菌等の微生物のコンタミネーションに対し、防御されていなければならない。
【０２１１】
芳香族カチオン性ペプチド組成物は、たとえば、水、エタノール、ポリオール（たとえば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール等）および、それらの適切な混合物等を含有する溶媒または分散媒である、担体を含んでも良い。たとえば、レシチン等のコーティングの使用により、分散液の場合には必要とされる粒子サイズを維持することにより、および界面活性剤の使用により、適切な流動性が維持されていても良い。微生物活動の防御は、たとえばパラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チオメラソール等の様々な抗細菌剤および抗真菌剤により行われても良い。酸化を防ぐためにグルタチオンおよび他の抗酸化剤が含有されても良い。多くの場合、当該組成物中に、たとえば糖類、ポリアルコール（たとえば、マンニトール、ソルビトール、または塩化ナトリウム等）等の等張剤を含有することが好ましい。注射組成物の持続的吸収は、たとえばモノステアリン酸アルミニウム、またはゼラチン等の吸収を遅延させる剤を組成物中に含有させることにより行うことができる。
【０２１２】
滅菌注射溶液は、適切な溶媒中に、上述の成分のうちの１つ、またはそれらの組み合わせと、必要とされる量の活性化合物を組み込むことにより調製することができ、必要に応じて、その後にろ過滅菌を行う。一般的に、分散液は、基本的な分散媒と、上述の必要とされる他の成分を含有する滅菌ビヒクルへ活性化合物を組み合わせることにより調製される。滅菌注射溶液の調製のための滅菌粉末の場合においては、典型的な調製方法として真空乾燥および凍結乾燥が含まれ、それにより、活性成分に、任意の追加の所望される成分（従前にその溶液からろ過滅菌されている）が添加された粉末が得られる。
【０２１３】
経口組成物は通常、不活性な希釈物質または食用担体を含む。経口治療剤投与の目的に対し、活性化合物は、賦形剤と組み合わされても良く、および、錠剤、トローチ、またはカプセル（たとえばゼラチンカプセル等）の形態で用いられても良い。経口組成物はまた、口内洗浄液としての使用のために、流動的な担体を用いて調製されてもよい。薬学的に混合可能な結合剤および／またはアジュバント物質が、組成物の一部として含まれていても良い。錠剤、丸薬、カプセル、トローチ等は、以下の成分、または同様の性質の化合物のいずれかを含有してもよい：たとえば微結晶性セルロール、トラガカントゴムまたはゼラチン；たとえばデンプンまたはラクトース等の賦形剤、たとえばアルギン酸、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ、またはコーンスターチ等の崩壊剤；たとえばステアリン酸マグネシウムまたはＳｔｅｒｏｔｅｓ等の潤滑剤；たとえばコロイド状二酸化ケイ素等の流動促進剤；たとえばスクロースまたはサッカリン等の甘味剤；または、たとえばペパーミント、サリチル酸メチル、またはオレンジフレーバー等の香味剤。
【０２１４】
吸入による投与に対しては、化合物は、適切な推進剤（たとえば、二酸化炭素等のガスまたはネブライザー等）を含有する加圧容器またはディスペンサーからのエアロゾルスプレーの形態で送達されても良い。そのような方法としては、米国特許第６，４６８，７９８号に記述されているものが挙げられる。
【０２１５】
また、経粘膜手段または経皮手段による本明細書に記述される治療用化合物の全身投与であっても良い。経粘膜投与または経皮投与に対して、透過されるバリアーに対し適切な浸透剤を製剤中に用いる。そのような浸透剤は当分野に公知であり、たとえば、経粘膜投与に対しては、合成洗剤、胆汁塩およびフシジン酸誘導体が挙げられる。経粘膜投与は、鼻スプレーの使用を介して行われても良い。経皮投与に対しては、活性化合物は当分野に公知の軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ、ｓａｌｖｅｓ）、ゲル、またはクリーム中に処方される。１つの実施態様において、経皮投与は、イオントフォレーシスにより行われても良い。
【０２１６】
治療用タンパク質またはペプチドは、担体システム中に処方されても良い。担体は、コロイドシステムであっても良い。コロイドシステムは、リポソーム、リン脂質二重層ビヒクルであっても良い。１つの実施態様において、治療用ペプチドは、ペプチドの完全性を維持しながら、リポソームに内包化される。当業者であれば、リポソーム調製の様々な方法を認識している（Lichtenberg et al., Methods Biochem. Anal., 33:337-462 (1988); Anselem et al., Liposome Technology, CRC Press (1993)、を参照のこと）。リポソーム製剤は、クリアランスを遅延させ、細胞取込を増加させることができる（Reddy, Ann. Pharmacother., 34(7-8):915-923 (2000)、を参照のこと）。活性剤はまた、薬学的に受容可能な成分から調製された粒子（限定されないが、可溶性、不溶性、浸透性、非浸透性、生分解性、または胃滞留性（ｇａｓｔｒｏｒｅｔｅｎｔｉｖｅ）なポリマーまたはリポソームを含む）内にロードされても良い。そのような粒子としては、限定されないが、ナノ粒子、生分解性ナノ粒子、微粒子、生分解性微粒子、ナノスフィア、生分解性ナノスフィア、ミクロスフィア、生分解性ミクロスフィア、カプセル、乳濁液、リポソーム、ミセル、およびウイルスベクターシステムが挙げられる。
【０２１７】
担体は、ポリマー（たとえば、生分解性、生体適合性ポリマーマトリックス）であっても良い。１つの実施態様において、治療用ペプチドは、タンパク質の完全性を維持しながらポリマーマトリックス内に組み込まれても良い。ポリマーは、たとえばポリペプチド、タンパク質、または多糖等の天然であってもよく、または、たとえばポリα−ヒドロキシ酸等の合成であっても良い。例としては、たとえばコラーゲン、フィブロネクチン、エラスチン、酢酸セルロース、硝酸セルロース、多糖、フィブリン、ゼラチン、およびそれらの組み合わせ等から作製された担体が挙げられる。１つの実施態様において、ポリマーは、ポリ乳酸（ＰＬＡ）またはコポリ乳酸／グリコール酸（ＰＧＬＡ）である。ポリマーマトリックスは、様々な形態およびサイズ（ミクロスフィアおよびナノスフィアを含む）で調製され、および単離されてもよい。ポリマー製剤は、治療有効期間の延長をもたらしうる（Reddy, Ann. Pharmacother., 34(7-8):915-923 (2000)を参照のこと）。ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）に対するポリマー製剤が、臨床試験で用いられている（Kozarich and Rich, Chemical Biology, 2:548-552 (1998)を参照のこと）。
【０２１８】
徐放製剤ポリマーミクロスフィアの例は、ＰＣＴ公開ＷＯ９９／１５１５４（Ｔｒａｃｙ  ｅｔ  ａｌ．）、米国特許第５，６７４，５３４号および第５，７１６，６４４号（両方とも、Ｚａｌｅ  ｅｔ  ａｌ．）、ＰＣＲ公開ＷＯ９６／４００７３（Ｚａｌｅ  ｅｔ  ａｌ．）、および、ＰＣＴ公開ＷＯ００／３８６５１（Ｓｈａｈ  ｅｔ  ａｌ．）に記述されている。米国特許第号５，６７４，５３４および第５，７１６，６４４号およびＰＣＲ公開ＷＯ９６／４００７３は、塩を用いた凝集に対して安定化されたエリスロポエチンの粒子を含有するポリマーマトリックスを記述している。
【０２１９】
一部の実施態様において、治療用化合物は、たとえば放出制御製剤（インプラントおよびマイクロカプセル送達システムを含む）のような、身体からの急速な排出に対し治療用化合物を保護する担体を用いて調製される。生分解性で、生体適合性を有するポリマーを用いることもできる（たとえば、エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸）。また、原料は市販されていてもよい（たとえば、Alza Corporation and Nova Pharmaceuticals, Incから入手）。リポソーム懸濁液（細胞特異的抗原に対するモノクローナル抗体を用いて、特定の細胞に標的化されたリポソームを含む）もまた、薬学的に受容可能な担体として用いることができる。これらは、たとえば米国特許第４，５２２，８１１号に記述される、当業者公知の方法に従い、調製することができる。
【０２２０】
治療用化合物はまた、細胞内送達を増強するために処方されても良い。たとえば、リポソームの送達システムが当分野に公知である（たとえば、Chonn and Cullis, “Recent Advances in Liposome Drug Delivery Systems,” Current Opinion in Biotechnology 6:698-708 (1995); Weiner, “Liposomes for Protein Delivery: Selecting Manufacture and Development Processes,” Immunomethods, 4(3):201-9 (1994);および、Gregoriadis, “Engineering Liposomes for Drug Delivery: Progress and Problems,” Trends Biotechnol., 13(12):527-37 (1995)を参照のこと）。Mizguchi et al., Cancer Lett., 100:63-69 (1996)は、ｉｎ  ｖｉｖｏおよびｉｎ  ｖｉｔｒｏの両方で細胞にタンパク質を送達するための融合性リポソームの使用について開示している。
【０２２１】
治療剤の投与量、毒性および治療効果は、細胞培養または実験動物における標準的な製薬手順により測定することができる（たとえば、ＬＤ５０（群の５０％に対する致死量）の測定、およびＥＤ５０（群の５０％における治療有効量））。毒性と治療効果の間の用量比は治療指標であり、ＬＤ５０／ＥＤ５０の比率として表すことができる。高い治療指標を示す化合物が好ましい。毒性のある副作用を示す化合物を用いてもいいが、そのような化合物を作用組織部位に標的化させる送達システムを設計する際には注意を払い、無関係な細胞に対する潜在的なダメージを最小化し、副作用を低減させなければならない。
【０２２２】
細胞培養アッセイおよび動物実験から得られたデータを、ヒトにおける使用のための用量域の策定に用いることができる。そのような化合物の投与量は、好ましくは、毒性がわずかである、または毒性のないＥＤ５０を含む循環濃度範囲内にある。投与量は、用いられる剤型、および利用される投与経路に依存し、この範囲内で変化しても良い。当該方法に用いられる任意の化合物に対し、治療有効量は、当初は、細胞培養アッセイから推定されても良い。投与量は、細胞培養において測定されたＩＣ５０（すなわち、症状の最大阻害の半分を達成する検証化合物の濃度）を含む循環血漿濃度範囲を得るために、動物モデルにおいて策定されても良い。そのような情報を用いて、ヒトにおいて有用な投与量を正確に決定することができる。血漿におけるレベルは、たとえば、高速液体クロマトグラフィーにより測定されてもよい。
【０２２３】
通常、治療的効果または予防的効果を得るために十分な芳香族カチオン性ペプチドの有効量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重／日〜約１０，０００ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲である。適切には、投与量範囲は、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲である。たとえば、投与量は、１日毎、２日毎、もしくは３日毎に１ｍｇ／ｋｇ体重または１０ｍｇ／ｋｇ体重であってもよく、または、１週毎、２週毎、もしくは３週毎に１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲内であってもよい。１つの実施態様において、ペプチドの単回投与量は、０．００１〜１０，０００μｇ／ｋｇ体重の範囲である。１つの実施態様において、担体中の芳香族カチオン性ペプチドの濃度は、０．２〜２０００μｇ／送達ｍｌの範囲である。例示的な治療レジメは、１日に１回、または１週に１回の投与を必要とする。治療応用において、疾患の進行が低下または停止するまで、および好ましくは、対象が、部分的または完全な疾患症状の改善を示すまで、比較的短い間隔で、比較的高い投与量が必要とされることもある。その後、当該患者は、予防的レジメを投与されても良い。
【０２２４】
一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドの治療有効量は、標的組織で１０-12〜１０-6モル濃度（たとえば、およそ１０-7モル濃度）のペプチド濃度として定義されてもよい。この濃度は、０．００１〜１００ｍｇ／ｋｇの全身投与、または身体表面域で同等の投与量により、送達されても良い。投与スケジュールは、治療濃度が標的組織で維持されるよう最適化され、最も望ましくは１日１回、または週に１回の投与である（しかし、たとえば非経口の点滴または経皮投与等の継続的な投与もまた含まれる）。
【０２２５】
当業者であれば、対象を効果的に治療するために必要とされる投与量およびタイミングに、ある因子（限定されないが、疾患または障害の重篤度、従前の治療、一般健康状態および／または対象の年齢、ならびに他の疾患の存在等を含む）が影響を与えうることを認識しているであろう。さらに、本明細書に記述される治療用組成物の治療有効量で対象を治療することには、単回治療または連続的な治療が含まれても良い。
【０２２６】
本方法に従い治療される哺乳類は、たとえば、家畜動物（たとえばヒツジ、ブタ、ウシおよびウマ等）、ペット動物（たとえばイヌおよびネコ）、実験動物（たとえばラット、マウスおよびウサギ）を含む、任意の哺乳類であっても良い。好ましい実施態様において、当該哺乳類はヒトである。
【０２２７】
芳香族カチオン性ペプチドと他の治療剤を用いた併用療法
一部の実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドは、心不全の予防または治療のための１以上の追加の剤と組み合わされてもよい。心不全に対する薬剤治療には通常、利尿薬、ＡＣＥ阻害剤、ジゴキシン（ジギタリスともまた呼ばれる）、カルシウムチャンネル阻害剤、およびβ阻害剤が含まれる。軽度な場合においては、たとえばヒドロクロロチアジド（２５〜５０ｍｇ／日）またはクロロチアジド（２５０〜５００ｍｇ／日）等のチアジド系利尿剤が有用である。しかしながら、追加的な塩化カリウムが必要とされる場合、利尿薬の長期投与により低カリウム血症のアルカローシスが誘発される。さらに、チアジド系利尿薬は通常、心不全の症状が進行した患者には有効ではない。ＡＣＥ阻害剤の典型的な投薬は、カプトプリル（２５〜５０ｍｇ／日）およびキナプリル（１０ｍｇ／日）が挙げられる。
【０２２８】
１つの実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドは、アドレナリンβ２アゴニストと組み合わされる。「アドレナリンβ２アゴニスト」とは、アドレナリンβ２アゴニストならびにそのアナログおよび誘導体を指し、たとえば、アドレナリンβ２アゴニストの生物活性を有する天然の、または合成の機能性変異体が含まれ、ならびに、アドレナリンβ２アゴニストの生物活性を有するアドレナリンβ２アゴニストの断片が含まれる。「アドレナリンβ２アゴニストの生物活性」とは、対象におけるアドレナリンおよびノルアドレナリンの効果を模倣する活性を指し、それにより、心不全を有する患者における心筋収縮が改善される。一般的に知られているアドレナリンβ２アゴニストとしては、限定されないが、クレンブテロール、アルブテロール、ホルメオテロール、レバルブテロール、メタプロテレノール、ピルブテロール、サルメテロールおよびテルブタリンが挙げられる。
【０２２９】
１つの実施態様において、芳香族カチオン性ペプチドは、アドレナリンβ１アンタゴニストと組み合わされる。アドレナリンβ１アンタゴニストおよびアドレナリンβ１阻害剤とは、アドレナリンβ１アンタゴニストならびにそのアナログおよび誘導体を指し、たとえば、アドレナリンβ１アンタゴニストの生物活性を有する天然の、または合成の機能性変異体が含まれ、ならびに、アドレナリンβ１アンタゴニストの生物活性を有するアドレナリンβ１アンタゴニストの断片が含まれる。アドレナリンβ１アンタゴニストの生物活性とは、アドレナリンのβ受容体に対する効果を阻害する活性をする。一般的に知られているアドレナリンβ１アンタゴニストとしては、限定されないが、アセブトロール、アテノロール、ベタキソロール、ビソプロロール、エスモロールおよびメトプロロールが挙げられる。
【０２３０】
クレンブテロールは、たとえば、Ｓｐｉｒｏｐｅｎｔ（登録商標）（Ｂｏｅｈｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ），  Ｂｒｏｎｃｏｄｉｌ（登録商標）（Ｖｏｎ  Ｂｏｃｈ  Ｉ），  Ｂｒｏｎｃｏｔｅｒｏｌ（登録商標）（Ｑｕｉｍｅｄｉｃａｌ  ＰＴ），  Ｃｅｓｂｒｏｎ（登録商標）（Ｆｉｄｅｌｉｓ  ＰＴ），  ａｎｄ  Ｃｌｅｎｂｕｔｅｒ（登録商標）（Ｂｉｏｍｅｄｉｃａ  Ｆｏｓｃａｍａ）を含む、多くの商標名の下、入手可能である。同様に、たとえばメトプロロールならびにそのアナログおよび誘導体等の、アドレナリンβ１アンタゴニストを調製する方法は、当分野に公知である。メトプロロールは特に、Ｎｏｖａｒｔｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｏｎｅ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｐｌａｚａ，  Ｅａｓｔ  Ｈａｎｏｖｅｒ，  Ｎ．Ｊ．  ０７９３６−１０８０）により製造され、商標名Ｌｏｐｒｅｓｓｏｒ（登録商標）（メトプロロール酒石酸塩）として市販されている。Ｌｏｐｒｅｓｓｏｒ（登録商標）のジェネリックもまた、Ｍｙｌａｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｉｎｃ．（１５００  Ｃｏｒｐｏｒａｔｅ  Ｄｒｉｖｅ，  Ｓｕｉｔｅ  ４００，  Ｃａｎｏｎｓｂｕｒｇ，  Ｐａ．  １５３１７）、および、Ｗａｔｓｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，  Ｉｎｃ．（３６０  Ｍｔ．  Ｋｅｍｂｌｅ  Ａｖｅ．  Ｍｏｒｒｉｓｔｏｗｎ，  Ｎ．Ｊ．  ０７９６２）から入手可能である。また、メトプロロールは、Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ，ＬＰでも製造され、商標名Ｔｏｐｒｏｌ  ＸＬ（登録商標）として市販されている。
【０２３１】
１つの実施態様において、追加の治療剤は、相乗的な治療効果が得られるよう、芳香族カチオン性ペプチドと組み合わせて対象に投与される。それゆえ、心不全の治療において、治療剤のうちの１つ、または両方を低い投与量で用いても良く、それにより、治療効果を増加させ、副作用を減少させることができる。
【０２３２】
いずれの場合においても、複数の治療剤を、任意の順番で、または同時に投与しても良い。もし同時である場合、当該複数の治療剤は、単一の、統一的な形式で、または多数の形式で、提供されても良い（例として、１つの錠剤または２つの別々の錠剤としてのいずれかで）。治療剤のうちの１つが複数回の投与で与えられても良く、または両方とも複数回の投与で与えられても良い。もし同時ではない場合、当該複数投与の間のタイミングは、ゼロ週〜４週未満で変化してもよい。さらに、併用療法は、組成物および剤型が、２つの剤の使用のみに限定されるものではない。
【実施例】
【０２３３】
本発明は以下の実施例によりさらに解説されるが、それらは決して限定とはみなされないものとする。
【０２３４】
実施例１  心不全のイヌモデルにおける、芳香族カチオン性ペプチドのＣ反応性タンパク質に対する効果
本実施例においては、冠状動脈微小塞栓術により誘導された心不全を有するイヌにおける、Ｃ反応性タンパク質レベルの減少に対する芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果を調べた。
【０２３５】
方法
複数の連続的な冠状動脈内微小塞栓術（Sabbah, et al., Am J Physiol. (1991) 260:H1379-84に記述され、本明細書に、参照によりその全体が援用される）を介して、イヌに心不全を誘導した。
【０２３６】
半数のイヌに、ミトコンドリアペプチドで連続的に処置を行い、他の半数のイヌは薬剤ビヒクルで処置し、対照とした。ペプチド処置は、心不全（ＨＦ）の誘導（左室駆出率がおよそ３０％と定義づけられた）で開始された。末梢静脈血試料を、以下の時点ですべてのイヌから採取した：１）イヌが正常であるとき（基準であり、心不全の誘導前）；２）イヌに心不全が誘導されたとき；３）ミトコンドリアペプチドまたはビヒクル（ＨＦ＋ペプチド、またはＨＦ＋ビヒクル）（両方とも、１日に１度、皮下注射として投与された）を用いて治療を開始した６週後；４）ミトコンドリアペプチドまたはビヒクルを用いた治療を開始した１２週後。ペプチドの１日用量は、０．５ｍｇ／ｋｇ／日が静脈内に投与された。血液試料はＥＤＴＡ抗凝固剤で処置され、２，５００ｒｐｍで遠心され、血漿を抽出し、１ｍｌ量でクリオスタットチューブに分注し、アッセイまで−７０℃で保存した。すべてのイヌに対する追跡調査が完了した時点で、血漿試料を室温で溶解させ、イヌ科特異的ＥＬＩＳＡキット（ALPCO: Cat# 41-CRPCA-E01）を用いてＣＲＰを分析した。熱量測定法を用いて、血漿中のＣＲＰの量を評価した。ＣＲＰ濃度は、μｇ／ｍｌとして表された。
【０２３７】
結果
結果を、以下の表１０および表１１および図１に示す。表において、「ＢＬ」は基準であり、「ＨＦ」は治療開始前の心不全であり、「６Ｗｋ」は治療開始の６週後であり、「１２Ｗｋ」は治療開始の１２週後であり、実験の終わりを示し、「ＳＥＭ」は、平均の標準誤差である。表中の値は、μｇ／ｍｌＣＲＰである。表に示されるように、ビヒクルで処置されたイヌにおいて、血漿ＣＲＰは、基準と比較してＨＦにおいて増加し、ビヒクルを用いた皮下注射を開始した６週後および１２週後でさらに増加する傾向があった。ミトコンドリアペプチドで処置されたイヌにおいてもまた、イヌにＨＦを誘導した時点ではＣＲＰが高かったが、ミトコンドリアペプチドで処置したことにより、６週でＣＲＰが減少し、１２週でその血漿濃度は減少または正常化されていた。
【表１０】
2018109012.tif 000023
【表１１】
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【０２３８】
図１に示されるように、高感受性アッセイを用いて測定された血漿ＣＲＰレベルは、心不全対照において約３倍増加していた。６週間、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置することによりＣＲＰレベルが減少し、１２週間処置することによって、処置された心不全対象におけるＣＲＰのレベルは、正常または正常に近いレベルにまで減少した。
【０２３９】
結果から、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2が心不全対象においてＣＲＰのレベルを低下させることに有用であることが示され、それにより、将来的な心不全発生もしくは心不全再発のリスクが減少し、将来的な心不全の重篤度が減少し、および／または、未診断対象における心不全が予防される。従って、芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2は、ＣＲＰレベルの減少に有用であり、それによって、哺乳類対象における心不全が予防または治療される。
【０２４０】
実施例２  人における心不全の治療または予防
心不全と診断され、ＣＲＰのレベルが３〜１０ｍｇ／Ｌ（ｈｓＣＲＰまたはｃＣＲＰアッセイのいずれかで測定）の範囲に上昇した４０人のヒト対象を、ランダムに４つの群に分け、ビヒクル（対照群）、または芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2（１ｍｇ／ｋｇ／日、３ｍｇ／ｋｇ／日、または５ｍｇ／ｋｇ／日の投与量）で処置する。ペプチドまたはビヒクルは、１日当たり、８時間毎、３回の別々の投与で、皮下に投与される。ＣＲＰのレベルは、１２週の処置の過程において評価される。
【０２４１】
結果
Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2での処置により、処置群においてＣＲＰのレベルが減少することが予測される。Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置することにより、ＣＲＰのレベルが正常な範囲（たとえば、１ｍｇ／Ｌ未満）にまで減少し、および／または、高リスクのレベル（たとえば、３〜１０ｍｇ／Ｌ）から中間リスクのレベル（たとえば、１〜３ｍｇ／Ｌ）にまでＣＲＰのレベルが減少し、それにより、将来的な心不全の発生もしくは再発のリスクが減少すること、心不全の重篤度が減少すること、および／または、未診断の対象もしくは心不全のリスクのある対象における心不全が予防されることが予測される。従って、これら結果から、ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2が、ヒトにおいてＣＲＰのレベルを減少させる方法、および、ヒト対象において心不全を予防または治療する方法に有用であることが示されることが予測される。
【０２４２】
実施例３  心不全のイヌモデルにおける、ＲＯＳに対する芳香族カチオン性ペプチドの効果
本実施例において、冠状動脈の微小塞栓術により誘導された心不全を有するイヌにおける、ＲＯＳに対する芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果を調べた。
【０２４３】
方法
心不全は、実施例１に記述されるように誘導した。１０匹のイヌを本実験に用いて、ＲＯＳレベルに対するＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果を測定した。半数のイヌは、ペプチドで処置され、残りの半数は、薬剤ビヒクルで処置され、対照として供した。ペプチド処置は、心不全（ＨＦ）の誘導（左室駆出率がおよそ３０％と定義づけられた）で開始された。ペプチドの１日用量は、０．５ｍｇ／ｋｇ／日で静脈内に投与された。血液試料はＥＤＴＡ抗凝固剤で処置され、２，５００ＲＰＭで遠心され、血漿を抽出し、１ｍｌ量でクリオスタットチューブに分注し、アッセイまで−７０℃で保存した。すべてのイヌに対する追跡調査が完了した時点で、血漿試料を室温で溶解させ、ＲＯＳを分析した。血漿中のＲＯＳレベルを分析するために、ルミノール（５−アミノ−２,３ジヒドロ−１，４フタラジンジオン）を試料に加えた。次いで、ＲＯＳレベルを化学発光活性により分析した。
【０２４４】
結果
結果を、以下の表１２および表１３、および図２に示す。表において、「ＢＬ」は基準であり、「ＰＲＥ」は治療開始前の心不全であり、「６Ｗｋ」は治療開始の６週後であり、「１２Ｗｋ」は治療開始の１２週後であり、実験の終わりを示し、および、「ＳＥＭ」は、平均の標準誤差である。「ＮＤ」は、分析された血漿がなかったことを示す。表中の値は、ＲＬＵ×１０5／ｍｌ  ＲＯＳであり、ここで、ＲＬＵは、相対光単位を表す。表に示されるように、ビヒクルで処置されたイヌにおいて、血漿ＲＯＳは、基準と比較してＨＦにおいて増加し、ビヒクルを用いた皮下注射を開始した６週後および１２週後でさらに増加する傾向があった。ミトコンドリアペプチドで処置されたイヌにおいてもまた、イヌにＨＦを誘導した時点ではＲＯＳが高かったが、ミトコンドリアペプチドで処置したことにより、６週でＲＯＳが減少し、１２週でその血漿濃度は減少または正常化されていた。
【表１２】
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【表１３】
2018109012.tif 000026
【０２４５】
図２に示されるように、血漿ＲＯＳレベルは、心不全対照において、４倍を超えて増加していた。６週間、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置することによりＲＯＳのレベルが減少し、１２週間処置することによって、処置された心不全対象におけるＲＯＳのレベルは、正常または正常に近いレベルにまで減少した。
【０２４６】
結果から、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2が心不全対象においてＲＯＳのレベルを低下させることに有用であることが示され、それにより、将来的な心不全発生もしくは心不全再発のリスクが減少し、将来的な心不全の重篤度が減少し、および／または、未診断対象における心不全が予防される。従って、芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2は、ＲＯＳレベルの減少、および、哺乳類対象における心不全の予防または治療に有用である。
【０２４７】
実施例４  心不全のイヌモデルにおける、ＩＬ−６に対する芳香族カチオン性ペプチドの効果
本実施例において、冠状動脈の微小塞栓術により誘導された心不全を有するイヌにおける、インターロイキン６（ＩＬ−６）のレベルに対する芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果を調べた。
【０２４８】
方法
実施例１の方法を用いて心不全を誘導し、ペプチドまたはビヒクルを投与し、血漿を採取した。１４匹のイヌを本実験に用いた。半数のイヌは、ミトコンドリアペプチドで処置され、残りの半数は、薬剤ビヒクルで処置され、対照として供した。ペプチド処置は、心不全（ＨＦ）の誘導（左室駆出率がおよそ３０％と定義づけられた）で、両群において開始された。
【０２４９】
ＩＬ−６は、二重抗体サンドイッチＥＬＩＳＡ法を用いて、ＥＤＴＡ血漿中で定量された。簡潔に述べると、ＩＬ−６（Canine IL-6 Duo Set, Cat#DY1609）をＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓから購入した。アッセイは、メーカーの説明書を基に、微細な改変を加えて行われた。抗体プレートとインキュベートしたＥＤＴＡ血漿の量は１５０μｌであり、１８時間、４℃でインキュベートした。標準曲線およびソフトウェアを用いて、ＩＬ−６の濃度は、ｐｇ／ｍｌとして表された。
【０２５０】
結果
結果を以下の表１４および表１５、ならびに図３に示す。表において、「ＢＬ」は基準であり、「ＰＲＥ」は治療開始前の心不全であり、「６Ｗｋ」は治療開始の６週後であり、「１２Ｗｋ」は治療開始の１２週後であり、実験の終わりを示し、および、「ＳＥＭ」は、平均の標準誤差である。表中の値は、ｐｇ／ｍｌ  ＩＬ−６である。表に示されるように、ビヒクルで処置されたイヌにおいて、血漿ＩＬ−６は、基準と比較してＨＦにおいて増加し、ビヒクルを用いた皮下注射を開始した６週後および１２週後でさらに増加する傾向があった。ミトコンドリアペプチドで処置されたイヌにおいてもまた、イヌにＨＦを誘導した時点ではＩＬ−６が高かったが、ミトコンドリアペプチドで処置したことにより、６週でＩＬ−６が減少し、１２週でその血漿濃度は減少または正常化されていた。
【表１４】
2018109012.tif 000027
【表１５】
2018109012.tif 000028
【０２５１】
図３に示されるように、高感受性アッセイを用いて測定された血漿ＩＬ−６レベルは、心不全対象において、約３倍、増加していた。６週間、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置することによりＩＬ−６のレベルが減少し、１２週間処置することによって、処置された心不全対象におけるＩＬ−６のレベルは、正常に近いレベルにまで減少した。
【０２５２】
結果から、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2が心不全対象においてＩＬ−６のレベルを低下させることに有用であることが示され、それにより、将来的な心不全発生もしくは心不全再発のリスクが減少し、将来的な心不全の重篤度が減少し、および／または、未診断対象における心不全が予防される。従って、芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2は、ＩＬ−６レベルの減少、および、哺乳類対象における心不全の予防または治療に有用である。
【０２５３】
実施例５  心不全のイヌモデルにおける、ＴＮＦαに対する芳香族カチオン性ペプチドの効果
本実施例において、冠状動脈の微小塞栓術により誘導された心不全を有するイヌにおける、腫瘍壊死因子αのレベルに対する芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果を調べた。
【０２５４】
方法
実施例１の方法を用いて心不全を誘導し、ペプチドまたはビヒクルを投与し、および、分析のために血漿試料を採取した。１４匹のイヌを本実験に用いた。半数のイヌは、ペプチドで処置され、残りの半数は、薬剤ビヒクルで処置され、対照として供した。ペプチド処置は、心不全（ＨＦ）の誘導（左室駆出率がおよそ３０％と定義づけられた）で、両群において開始された。
【０２５５】
ＴＮＦαは、二重抗体サンドイッチＥＬＩＳＡを用いて、ＥＤＴＡ血漿中で定量された。簡潔に述べると、ＴＮＦα（Canine TNFa Duo Sett, Cat# DY1507）をＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓから購入した。アッセイは、メーカーの説明書を基に、微細な改変を加えて行われた。抗体プレートとインキュベートしたＥＤＴＡ血漿の量は１５０μｌであり、１８時間、４℃でインキュベートした。標準曲線およびソフトウェアを用いて、ＴＮＦαの濃度は、ｐｇ／ｍｌとして表された。
【０２５６】
結果
結果を以下の表１６および表１７、ならびに図４に示す。表において、「ＢＬ」は基準であり、「ＰＲＥ」は治療開始前の心不全であり、「６Ｗｋ」は治療開始の６週後であり、「１２Ｗｋ」は治療開始の１２週後であり、実験の終わりを示し、および、「ＳＥＭ」は、平均の標準誤差である。表中の値は、ｐｇ／ｍｌ  ＴＮＦαである。表に示されるように、ビヒクルで処置されたイヌにおいて、血漿ＴＮＦαは、基準と比較してＨＦにおいて増加し、ビヒクルを用いた皮下注射を開始した６週後および１２週後でさらに増加する傾向があった。ペプチドで処置されたイヌにおいてもまた、イヌにＨＦを誘導した時点ではＴＮＦαが高かったが、ミトコンドリアペプチドで処置したことにより、６週でＴＮＦαが減少し、１２週でその血漿濃度は減少または正常化されていた。
【表１６】
2018109012.tif 000029
【表１７】
2018109012.tif 000030
【０２５７】
図４に示されるように、血漿ＴＮＦαレベルは、心不全対象において、約４倍、増加していた。６週間、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置することによりＴＮＦαのレベルが減少し、１２週間処置することによって、処置された心不全対象におけるＴＮＦαのレベルは、正常に近いレベルにまで減少した。
【０２５８】
結果から、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2が心不全対象においてＴＮＦαのレベルを低下させることに有用であることが示され、それにより、将来的な心不全発生もしくは心不全再発のリスクが減少し、将来的な心不全の重篤度が減少し、および／または、未診断対象における心不全が予防される。従って、芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2は、ＴＮＦαのレベルの減少、および、哺乳類対象における心不全の予防または治療に有用である。
【０２５９】
実施例６  心筋梗塞後に投与されたＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2が、ＬＶ機能を改善する
本実験により、ラットにおける、貫壁性の、非再灌流性梗塞による、心不全誘導の２時間後に開始された、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を用いた長期治療により、転帰が改善できることが示される。Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2処置は、永続的な冠状動脈閉塞の２時間後に開始されるため、たとえば、非再流性悪化等の現象とは無関係な利益がある。冠状動脈閉塞の２時間後、ラットモデルにおいて、虚血性ネクローシスにより死ぬ運命にある全ての細胞、またはほぼ全ての細胞は、死ぬ。本実験により、ＬＶ容積を減少させ、短縮率および駆出率を改善し、梗塞の拡大を減少させ、生存率を改善し、血行動態を改善し、ならびに、肺容量を減少させる、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の能力を測定する。
【０２６０】
方法
ラットに麻酔をかけ、酸素を供給し、左側第四肋間において開胸術を行った。その過程中、ラットを加熱パッドに置くことにより、温度を３６℃に維持する。心膜を切除し、左前冠状動脈を単離し、縫合することにより永続的に閉塞させる。冠状動脈閉塞は、心室の前壁のチアノーゼおよび無動により確認される。胸郭を閉じ、空気を抜き、ラットを回復させる。獣医により鎮痛剤を投与する。冠状動脈閉塞のおよそ１５分後に心エコーを取る。２時間後にラットをランダムに分類し、毎日、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2（Ａｌｚｅｔ浸透圧ポンプにより皮下送達させる。３ｍｇ／ｋｇ／日）、または水を長期投与する。浸透圧ポンプにより、およそ０．１５μｌ／時で、６週間、送達される。ラットに麻酔をかけている間に、Ａｌｚａｔポンプを、肩甲骨の間の皮下に移植する。６週後にラットを再度、麻酔し、体重を測り、第二の心エコーを麻酔下で計測する。切開を行い、冠状動脈および頚静脈を単離する。心拍数および血圧を測定する。Ｍｉｌｌａｒカテーテルを左心室に挿入し、ＬＶ収縮期圧、拡張終期圧、＋ｄＰ／ｄｔ、および−ｄＰ／ｄｔを測定する。ＬＶ拍出量およびＬＶ駆出率を測定するために、ＩＶ透視コントラストを用いて左心室造影を行う。深い麻酔の下で、心臓を切除し、重量を測定し、ホルマリンで１１ｍｍＨｇに圧力固定する。肺もまた切除し、重量を測定する。解剖後のＬＶ容積を、液体でＬＶの内腔を埋め、総液量を測定することにより測定する。心臓を、４つの横断切片にスライスし、組織スライドを作製し、ヘマトキシリンおよびエオジン、ならびにコラーゲンを染めるピクロシリウスレッドで染色する。定量的組織分析としては、全周、瘢痕辺縁、非梗塞壁の辺縁、総ＬＶ面積、総ＬＶ内腔面積、ＬＶ壁の厚さ（いくつかのポイントでの）、非梗塞壁の厚さ、心筋梗塞拡大の指標が挙げられる。
【０２６１】
結果
心エコーによるＬＶ短縮率
左心室短縮率（ＬＶＦＳ）は、未処置群と比較して、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2処置群において改善されることが予測される。
【０２６２】
ＬＶ心室撮影によるＬＶ拍出量および駆出率
未処置群と比較して、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2処置群において、ＬＶ拍出量およびＬＶ駆出率がより高くなることが予測される。
【０２６３】
血液動態
処置後、６週での２つの群の間に、心拍、収縮期血圧、拡張期血圧に有意差は無いことが予測される。
【０２６４】
死亡後ＬＶ容積
対照群と比較して、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2処置群において、死亡後ＬＶ容積が低下することが予測される。
【０２６５】
瘢痕の辺縁、瘢痕の厚さ、および拡張の指標
ＬＶの非瘢痕の辺縁は、水処置群と比較し、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2処置群において、より長いことが予測される。さらに、瘢痕の辺縁は、水処置群と比較して、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2処置群において、より小さいことが予測される。総ＬＶ周囲のパーセンテージとして表される、瘢痕辺縁は、水と比較し、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2処置群において、より小さくなることが予測される。瘢痕の厚さ、中隔の厚さ、および、［ＬＶ内腔面積／総ＬＶ面積ｘ中隔の厚さ／瘢痕の厚さ］として表される拡張の指標は、２群間で同等であることが予想される。
【０２６６】
肺の重量（液体オーバーロードの測定）
肺の乾重量および湿重量を測定し、乾／湿の比率は、２群間で類似していることが予測される。
【０２６７】
これらの結果から、本発明の芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）またはその薬学的に受容可能な塩（たとえば、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩）は、ＬＶリモデリングの予防およびＬＶ機能の改善に有用であることが示されるであろう。特に、これらの結果から、本発明の芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）またはその薬学的に受容可能な塩（たとえば、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩）は、左心室リモデリングの減少およびＬＶ機能の改善の必要がある対象に対し、当該ペプチドを投与することを含む方法に有用であることが示されるであろう。
【０２６８】
実施例７  心不全のげっ歯類モデルにおける、梗塞後リモデリング、および、心臓機能に対するに対するＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果
本実験では、心不全の梗塞後モデルにおいて、心臓機能が改善されるかどうか、および、有益なミトコンドリア遺伝子の発現がもたらされるかどうかを確認するために、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2が検証される。
【０２６９】
方法
実施例６に記述されるように、ラットに対し、永続的な冠状動脈結紮を施す。そのラットを２群に分け、６週間、２００〜３００ｎｇ／ｍｌ  Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2、または０．９％  ＮａＣｌ（生理食塩水）のいずれかを、ミニ浸透圧ポンプ（各動物に移植されている）を用いて継続的に処置する。
【０２７０】
６週間後、ＬＶ機能を、心エコーを用いて評価する。さらに、心臓を切除し、心臓組織を、テトラゾリウム塩染色を用いてＬＶ容積について分析する。梗塞周囲の境界領域および遠隔領域の心臓組織もまた採取し、ミトコンドリア代謝に関与する遺伝子の発現レベルを測定するために遺伝子アレイ分析を行う。
【０２７１】
結果
Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の長期投与により、心不全の梗塞後モデルにおけるＬＶ拡張が減少することが予測される。
【０２７２】
これらの結果から、芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）またはその薬学的に受容可能な塩（たとえば、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩）は、ＬＶリモデリングおよび心不全の治療に有用であることが示されるであろう。従って、当該ペプチドは、心不全に罹患している対象または、心筋梗塞後の対象に芳香族カチオン性ペプチドを投与することを含む方法に有用である。
【０２７３】
実施例８  心不全のイヌモデルにおけるＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベルに対する芳香族カチオン性ペプチドの効果
本実施例において、冠状動脈微小塞栓術により誘導された心不全を有するイヌにおける、ＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰのレベル減少に対する芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果を調べた。
【０２７４】
方法
複数の連続的な冠状動脈内微小塞栓術（Sabbah, et al., Am J Physiol. (1991) 260:H1379-84に記述され、本明細書に、参照によりその全体が援用され、実施例１に概要がある）を介して、イヌに心不全を誘導した。
【０２７５】
心不全は、実施例１に記述されるように誘導された。１０匹のイヌを本実験に用いて、ＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベルに対する、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果を測定した。半数のイヌは、ペプチドで処置され、残りの半数は、薬剤ビヒクルで処置され、対照として供した。ペプチド処置は、心不全（ＨＦ）の誘導（左室駆出率がおよそ３０％と定義づけられた）で、開始された。ペプチドの１日用量は、０．５ｍｇ／ｋｇ／日で静脈内に投与された。血液試料はＥＤＴＡ抗凝固剤で処置され、２，５００ＲＰＭで遠心され、血漿を抽出し、１ｍｌ量でクリオスタットチューブに分注し、アッセイまで−７０℃で保存した。すべてのイヌに対する追跡調査が完了した時点で、血漿試料を室温で溶解させ、ＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰを分析した。
【０２７６】
ＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰ（ｐｇ／ｍｌ）は、二重抗体サンドイッチ酵素結合免疫吸着測定法に基づいて、ＥＤＴＡ血漿で測定された。アッセイは、アッセイキット（ＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰ、Kamiya Biomedical Company, Cat# KT-23770）に添付されていた説明書に基づいて行われた。ソフトウェア（Master Plex-2010）の助けを借りた標準曲線を用いて、各バイオマーカーの濃度を測定した。
【０２７７】
結果
結果を、以下の表１８および表１９、および図５に示す。表において、正常は、心不全前の基準であり、「ＨＦ−Ｐｒｅ」は治療開始前の心不全であり、「６Ｗｋ」は治療開始の６週後であり、「１２Ｗｋ」は治療開始の１２週後であり、実験の終わりを示し、「ＡＶＧ」は平均であり、「ＳＤ」は標準偏差であり、「ＳＥＭ」は、平均の標準誤差であり、および、「ＮＳ」は、有意ではない。表中の値は、ｐｇ／ｍｌ  ＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰである。表に示されるように、ビヒクルで処置されたイヌにおいて、血漿ＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰは、平均して、基準と比較してＨＦにおいて増加し、ビヒクルを用いた皮下注射を開始した６週後および１２週後でさらに増加する傾向があった。ミトコンドリアペプチドで処置されたイヌにおいてもまた、イヌにＨＦを誘導した時点ではＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰが高かったが、ミトコンドリアペプチドで処置したことにより、６週でＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰが減少し、１２週でその血漿濃度は減少または正常化されていた。
【表１８】
2018109012.tif 000031
【表１９】
2018109012.tif 000032
【０２７８】
図５に示されるように、二重抗体ＥＬＩＳＡを用いて測定された血漿ＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰレベルは、心不全対象において、約４倍、増加していた。６週間、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置することによりＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰのレベルが減少し、１２週間処置することによって、処置された心不全対象におけるＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰのレベルは、正常または正常に近いレベルにまで減少した。
【０２７９】
結果から、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2が心不全対象においてＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰのレベルを低下させることが示された。ｐｒｏＢＮＰの開裂後、両方が等モル濃度で放出されるため、ＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰの減少は、ＢＮＰの減少と相関し、それにより、心筋細胞の拡張における減少が示される。そのため、芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2は、哺乳類対象におけるＬＶリモデリングの予防および治療に有用である。
【０２８０】
実施例９  心不全のイヌモデルにおけるミトコンドリアＡＴＰ感受性カリウムチャンネル（ｍＫ  ＡＴＰ）に対する芳香族カチオン性ペプチドの効果
本実施例において、冠状動脈微小塞栓術により誘導された心不全を有するイヌにおける、ｍＫ  ＡＴＰ活性の増加に対する芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果を調べた。
【０２８１】
方法
複数の連続的な冠状動脈内微小塞栓術（Sabbah, et al., Am J Physiol. (1991) 260:H1379-84に記述され、本明細書に、参照によりその全体が援用される）を介して、イヌに心不全を誘導した。
【０２８２】
心不全は、実施例１に記述されるように誘導された。１０匹のイヌを本実験に用いて、ｍＫ  ＡＴＰに対する、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果を測定した。半数のイヌは、ペプチドで処置され（ｎ＝５）、残りの半数は、薬剤ビヒクルで処置され、対照として供した（ｎ＝５）。ペプチド処置は、心不全（ＨＦ）の誘導（左室駆出率がおよそ３０％と定義づけられた）で、開始された。ペプチドの１日用量は、０．５ｍｇ／ｋｇ／日で３か月間、静脈内に投与された。対照には生理食塩水の皮下注射を毎日投与した。左心室組織を３か月の処置の最後に採取した。ミトコンドリアを組織から単離した。ＭＫ  ＡＴＰ活性を、タリウム感受性フルオロフォアアッセイキットを用いて測定し、相対蛍光単位（ＲＦＵ）／タンパク質ｍｇで定量した。ミトコンドリアＡＴＰとＡＤＰの比率は、生物発光Apo SENSOR（登録商標）アッセイキット（Enzo Life Sciences, Farmingdale, NY）を用いて測定した。
【０２８３】
結果
Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の処置により、ＡＴＰ／ＡＤＰに有意な増加がもたらされた（０．３８±０．０４対１．１６±０．１５、ｐ＜０．０５）。Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の処置により、ｍＫ  ＡＴＰ活性の有意な増加もまたもたらされた（１３７２±１１２対２７７５±２５４、ｐ＜０．０５）。
【０２８４】
結果から、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2は、心不全対象においてｍＫ  ＡＴＰ活性を増加させ、それにより、将来的な心不全発生もしくは再発のリスクを減少させ、将来的な心不全の重篤度を減少させ、および／または、未診断対象における心不全を予防することが示された。それゆえ、芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2は、ｍＫ  ＡＴＰ活性の増加、および、哺乳類対象における心不全の予防または治療に有用である。
【０２８５】
実施例１０  心不全のイヌモデルにおける心臓トロポニンＩレベルに対する芳香族カチオン性ペプチドの効果
本実施例において、冠状動脈微小塞栓術により誘導された心不全を有するイヌにおける、心臓トロポニンＩレベルに対する芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果を調べた。
【０２８６】
方法
心不全は、実施例１に記述されるように誘導する。１０匹のイヌを本実験に用いて、心臓トロポニンＩレベルに対する、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果を測定する。半数のイヌは、ペプチドで処置され、残りの半数は、薬剤ビヒクルで処置され、対照として供する。ペプチド処置は、心不全（ＨＦ）の誘導（左室駆出率がおよそ３０％と定義づけられた）で、開始する。ペプチドの１日用量は、０．５ｍｇ／ｋｇ／日で３か月間、静脈内に投与される。血液試料はＥＤＴＡ抗凝固剤で処置され、２，５００ＲＰＭで遠心され、血漿を抽出し、１ｍｌ量でクリオスタットチューブに分注し、アッセイまで−７０℃で保存する。心臓トロポニンＩレベルは、処置後６週、および処置後１２週で、基準に対して測定される。すべてのイヌにおいてアッセイが完了した時点で、血漿試料を室温で溶解させ、心臓トロポニンＩを分析する。基準、６週処置、および１２週処置を、正常対照に対して比較する。
【０２８７】
結果
Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を用いた処置により、未処置と比較し、処置６週後で心臓トロポニンＩレベルが減少することが予測され、および、処置の１２週後で、心臓トロポニンＩレベルが正常に近いレベルになることが予測される。
【０２８８】
結果から、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2が、心不全対象において心臓トロポニンＩレベルを減少させることに有用であり、それにより、将来的な心不全発生もしくは再発のリスクを減少させる、将来的な心不全の重篤度を減少させる、および／または、未診断対象における心不全を予防することが示される。それゆえ、芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2は、心臓トロポニンＩレベルの減少に有用であり、および、哺乳類対象における心不全の予防または治療に有用である。
【０２８９】
実施例１１  心不全のイヌモデルにおけるカルジオリピンに対する芳香族カチオン性ペプチドの効果
本実施例において、冠状動脈微小塞栓術により誘導された心不全を有するイヌにおける、カルジオリピンレベルに対する芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）の効果を調べた。
【０２９０】
方法
複数の連続的な冠状動脈内微小塞栓術（Sabbah, et al., Am J Physiol. (1991) 260:H1379-84に記述され、本明細書に、参照によりその全体が援用される）を介して、イヌに心不全を誘導した。半数のイヌは、次いで、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置され、残りの半数は、薬剤ビヒクルで処置され、対照として供した。ペプチド処置は、心不全（ＨＦ）の誘導（左室駆出率がおよそ３０％と定義づけられた）で、開始された。Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の１日用量（０．５ｍｇ／ｋｇ／日）は、静脈内に投与された。
【０２９１】
処置フェーズ（１２週）の終わりに、ビヒクル群および処置群の両方のイヌを殺し、左心室由来の心筋試料を回収し、生理食塩水で洗浄し、ただちに−８０℃で凍結保存した。
【０２９２】
カルジオリピン分析のために、脂質を、クロロホルム／メタノール溶液（Bligh Dyer抽出）を用いて心臓組織試料から抽出した。個々の脂質抽出物を、クロロホルム：メタノール（１：１）を用いて再構成させ、Ｎ2でフラッシュし、次いで、−２０℃で保存し、その後、自動ナノスプレー装置を備えた三連四重極質量分析計を用いた電子スプレーイオン化質量分光法を介して分析した。カルジオリピンに対する、高度多次元質量分析を基にしたショットガン脂質科学を、Han, et al. (2006) J Lipid Res 47(4): 864-879に記述されるように実施した。
【０２９３】
結果
正常イヌ（ＮＬ）由来の正常な心臓組織と比較し、未処置ＨＦイヌ（ＨＦ−ＣＯＮ）において、１８：２カルジオリピン種が減少していた（ｐ＜０．０５）。図１。しかしながら、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置されたＨＦイヌ（ＨＦ−ＡＰ）は、ＮＬイヌと類似であり、ＨＦ−ＣＯＮよりも高い１８：２カルジオリピンのレベルを有していた（ｐ＜０．０５）。図６。
【０２９４】
１８：２カルジオリピン種は、ＨＦにおいて減少する。１８：２カルジオリピンの減少により、酸化的リン酸化反応が不十分となり、それに続き、ＬＶの機能障害がもたらされる。Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を用いた長期治療により、１８：２カルジオリピンが正常化され、ＬＶ機能の改善、ミトコンドリアＡＴＰ合成率の改善がもたらされる。
【０２９５】
これらの結果から、本発明の芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）またはその薬学的に受容可能な塩（たとえば、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩）が、異常なカルジオリピンレベルに関連した疾患および状態の予防ならびに治療に有用であることが示される。特に、これらの結果から、本発明の芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）またはその薬学的に受容可能な塩（たとえば、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩）が、カルジオリピンレベルの増加、ならびに、心不全および関連疾患の治療に有用であることが示される。
【０２９６】
実施例１２  心不全のイヌモデルにおける、ＭＬＣＬ  ＡＴ１、ＡＬＣＡＴ１、およびＴａｚ１発現に対する芳香族カチオン性ペプチドの効果
本実施例において、冠状動脈微小塞栓術により誘導された心不全を有するイヌにおける、カルジオリピンリモデリング酵素である、ＭＬＣＬ  ＡＴ１、ＡＬＣＡＴ１、およびＴａｚ１に対する、芳香族カチオン性ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2の効果を調べた。
【０２９７】
方法
複数の連続的な冠状動脈内微小塞栓術（Sabbah, et al., Am J Physiol. (1991) 260:H1379-84に記述され、本明細書に、参照によりその全体が援用される）を介して、イヌに心不全を誘導した。
【０２９８】
１２匹のイヌを、実施例１に記述されるように、冠状動脈内微小塞栓術に供した（ＬＶ駆出率は約３０％）。３か月の試験のために、対象を、ランダムに、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2群と対照群に分けた。対象は、３か月間、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2（０．５ｍｇ／ｋｇ／１日に１度、ｎ＝６）または生理食塩水（未処置ＨＦ対照、ｎ＝６）の皮下注射による治療を受けた。ＲＮＡは、処置フェーズの最後に、１２匹全てのイヌのＬＶ組織、および、比較のために６匹の正常（ＮＬ）なイヌのＬＶ組織から調製した。Ｔａｚ１、ＭＬＣＬ  ＡＴ１およびＡＬＣＡＴ１のｍＲＮＡレベルは、リアルタイムＰＣＲにより測定した。ｍＲＮＡ発現における変化は、内部対照としてグリセルアルデヒド１，３ジホスフェートデヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）に対して標準化するＣＴ法を用いて、倍数変化として表された。
【０２９９】
結果
正常レベル（ＮＬ）と比較して、未処置ＨＦイヌにおけるＴａｚ１のｍＲＮＡレベルは、２．２５倍減少し（図７Ａ）、一方で、ＭＬＣＬ  ＡＴ１およびＡＬＣＡＴ１はそれぞれ、２．６０倍および３．５６倍増加した（図７Ｂ〜Ｃ）。Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置することにより、Ｔａｚ１の減少が１．２３倍に減り、ＭＬＣＬ  ＡＴ１およびＡＬＣＡＴ１の増加がそれぞれ１．１８倍および１．５４倍に減少した（図７Ａ〜Ｃ）。
【０３００】
ＨＦは、カルジオリピンの病的なリモデリングならびに、構造的および機能的なミトコンドリア異常をもたらす、カルジオリピンリモデリング酵素の脱制御に関連している。Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2を用いて長期治療することにより、これらの不適応状態が部分的に回復され、それにより、カルジオリピンの生理学的な生合成リモデリング後の回復が可能となる。
【０３０１】
これらの結果から、本発明の芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）またはその薬学的に受容可能な塩（たとえば、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩）が、異常なカルジオリピンリモデリング酵素レベル（たとえば、ＭＬＣＬ  ＡＴ１、ＡＬＣＡＴ１、およびＴａｚ１）に関連した疾患および状態の予防ならびに治療に有用であることが示される。特に、これらの結果から、本発明の芳香族カチオン性ペプチド（たとえば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2）またはその薬学的に受容可能な塩（たとえば、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩）が、カルジオリピンリモデリング酵素レベルを正常化させる方法（ＭＬＣＬ  ＡＴ１、ＡＬＣＡＴ１を減少させ、および、Ｔａｚ１を増加させる）、ならびに、心不全および関連疾患を治療する方法に有用であることが示される。
【０３０２】
均等
本発明は、本明細書に記述される特定の実施態様に関して限定されることはなく、それらは、本発明の個々の態様の単なる解説である。本発明の主旨および範囲から逸脱することなく、本発明の多くの改変および変化が可能であることが当分野の当業者には明らかである。本明細書に列挙されるものに加えて、本発明の範囲内にある、機能的に均等な方法および装置が、前述の記載から当業者には明らかである。そのような改変および変化は、添付の請求項の範囲内にあることが意図される。本発明は、添付の請求項の構成要件によってのみ限定され、そのような請求項は、均等の完全な範囲と共に権利化される。本発明は特定の方法、試薬、化合物、組成物、または生物学的システムに限定されず、もちろん、変化し得ることを理解されたい。また、本明細書に用いられている専門用語は、特定の実施態様を表す目的のためにあり、限定の意図はないことを理解されたい。
【０３０３】
さらに、本開示の特性または態様が、マーカッシュ形式により記述される場合、当業者はまた、本開示が、当該マーカッシュ形式の任意の個々の要素、または要素の亜群により記述されていると認識するであろう。
【０３０４】
当業者により理解されているように、任意の、および全ての目的、特に記載要件を満たすという点で、本明細書に開示される全ての範囲はまた、任意の、および全ての可能性のある副次的な範囲および、その副次的な範囲の組み合わせを包含する。列挙されている範囲はいずれも、十分に記述され、および、少なくとも等しい半分、３分の１、４分の１、５分の１、１０分の１等へと同範囲を分解することができると、容易に認識されうる。非限定的な例示として、本明細書に検討される各範囲は、容易に、下３分の１、中３分の１、および上３分の１等へと分解されることができる。また、当分野の当業者に理解されるように、たとえば「〜までの」、「少なくとも」、「より大きい」、「未満」等の文言はすべて、列挙された数字を含み、および、上述のように続いて副次的な範囲へと分解されうる範囲を指す。最後に、当業者に理解されるように、範囲には、各個の数字が含まれる。ゆえに、たとえば、１〜３の細胞を有する群とは、１、２、または３の細胞を有する群を指す。同様に、１〜５の細胞を有する群とは、１、２、３、４または５の細胞等を有する群を指す。
【０３０５】
本明細書に言及される、または列挙される全ての特許、特許出願、仮出願、および公表文献は、本明細書の明白な教示と矛盾しない範囲で、全ての図表を含み、参照によりその全体で援用される。
【０３０６】
他の実施態様は、以下の請求項内に明記される。
【図１】
2018109012.tif 000033
【図２】
2018109012.tif 000034
【図３】
2018109012.tif 000035
【図４】
2018109012.tif 000036
【図５】
2018109012.tif 000037
【図６】
2018109012.tif 000038
【図７Ａ】
2018109012.tif 000039
【図７Ｂ】
2018109012.tif 000040
【図７Ｃ】
2018109012.tif 000041
【配列表】
2018109012000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成30年3月7日(2018.3.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｃ反応性タンパク質、活性酸素種、インターロイキン６、ＴＮＦα、心臓トロポニンＩ、ＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰ、ＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、およびＡＬＣＡＴ１発現のうちの１つ以上のレベルを減少させる必要のある、および／または、Ｔａｚ１発現を増加させる必要のある哺乳類対象において、Ｃ反応性タンパク質、活性酸素種、インターロイキン６、ＴＮＦα、心臓トロポニンＩ、ＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰ、ＭＬＣＬ  ＡＴ１発現、およびＡＬＣＡＴ１発現のうちの１つ以上のレベルを減少させるため、および／または、Ｔａｚ１発現を増加させるための、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を含む組成物。
【請求項２】
前記対象が、心不全を有すると診断されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
前記対象に対して、心血管系剤が、別々に、連続して、または同時に投与される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
前記対象が、急性心筋梗塞に罹患している、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
ＮＴ−ｐｒｏ  ＢＮＰおよび／または心臓トロポニンＩの減少は、ＬＶリモデリングの効果的な予防、治療または改善の指標である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
心不全を有する、または有すると疑われる哺乳類対象においてカルジオリピンレベルを増加させるための、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を含む組成物。
【請求項１１】
前記哺乳類対象が、ＭＬＣＬ  ＡＴ１またはＡＬＣＡＴ１の増加した発現、および／または、Ｔａｚ１の減少した発現を有する、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記カルジオリピンが、１８：２種のカルジオリピンである、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１３】
前記対象が、心不全を有すると診断されており、前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１４】
前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１５】
前記対象に対して、心血管系剤が、別々に、連続して、または同時に投与され、前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、請求項１０に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３０６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３０６】
本発明のまた別の態様は、以下のとおりであってもよい。
〔１〕Ｃ反応性タンパク質のレベルを減少させる必要のある哺乳類対象における、Ｃ反応性タンパク質のレベルを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を、前記対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔２〕前記対象が、心不全を有すると診断されている、前記〔１〕に記載の方法。
〔３〕前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、前記〔３〕に記載の方法。
〔４〕前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、前記〔１〕〜〔３〕のいずれか１項に記載の方法。
〔５〕前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、前記〔１〕〜〔４〕のいずれか１項に記載の方法。
〔６〕前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、前記〔５〕に記載の方法。
〔７〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔１〕〜〔６〕のいずれか１項に記載の方法。
〔８〕Ｃ反応性タンパク質のレベルが増加した哺乳類対象における心不全を予防、治療または改善する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔９〕前記対象が、高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、糖尿病治療薬のロシグリタゾンまたはピオグリタゾンの摂取、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、喫煙、座りがちなライフスタイル、高コレステロール、心不全の家族歴、ストレス、および腎疾患からなる群から選択される、心不全と関連したリスク因子を少なくとも１つ有する、前記〔８〕に記載の方法。
〔１０〕前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、前記〔８〕〜〔９〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１１〕前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、前記〔１０〕に記載の方法。
〔１２〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔８〕〜〔１１〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１３〕ＴＮＦαのレベルを減少させる必要のある哺乳類対象においてＴＮＦαのレベルを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔１４〕前記対象が、心不全を有すると診断されている、前記〔１３〕に記載の方法。
〔１５〕前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、前記〔１４〕に記載の方法。
〔１６〕前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、前記〔１３〕〜〔１５〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１７〕前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、前記〔１３〕〜〔１７〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１８〕前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、前記〔１７〕に記載の方法。
〔１９〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔１３〕〜〔１８〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２０〕ＴＮＦαのレベルが増加した哺乳類対象における心不全を予防、治療または改善する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔２１〕前記対象が、高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、糖尿病治療薬のロシグリタゾンまたはピオグリタゾンの摂取、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、喫煙、座りがちなライフスタイル、高コレステロール、心不全の家族歴、ストレス、および腎疾患からなる群から選択される、心不全と関連したリスク因子を少なくとも１つ有する、前記〔２０〕に記載の方法。
〔２２〕前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、前記〔２０〕〜〔２１〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２３〕前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、前記〔２２〕に記載の方法。
〔２４〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔２０〕〜〔２３〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２５〕インターロイキン６のレベルを減少させる必要のある哺乳類対象においてインターロイキン６のレベルを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔２６〕前記対象が、心不全を有すると診断されている、前記〔２５〕に記載の方法。
〔２７〕前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、前記〔２６〕に記載の方法。
〔２８〕前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、前記〔２５〕〜〔２７〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２９〕前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、前記〔２５〕〜〔２８〕のいずれか１項に記載の方法。
〔３０〕前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、前記〔２９〕に記載の方法。
〔３１〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔２５〕〜〔３０〕のいずれか１項に記載の方法。
〔３２〕インターロイキン６のレベルが増加した哺乳類対象における心不全を予防、治療または改善する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔３３〕前記対象が、高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、糖尿病治療薬のロシグリタゾンまたはピオグリタゾンの摂取、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、喫煙、座りがちなライフスタイル、高コレステロール、心不全の家族歴、ストレス、および腎疾患からなる群から選択される、心不全と関連したリスク因子を少なくとも１つ有する、前記〔３２〕に記載の方法。
〔３４〕前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、前記〔３２〕〜〔３３〕のいずれか１項に記載の方法。
〔３５〕前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、前記〔３４〕に記載の方法。
〔３６〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔３２〕〜〔３６〕のいずれか１項に記載の方法。
〔３７〕活性酸素種のレベルを減少させる必要のある哺乳類対象において活性酸素種のレベルを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔３８〕前記対象が、心不全を有すると診断されている、前記〔３７〕に記載の方法。
〔３９〕前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、前記〔３８〕に記載の方法。
〔４０〕前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、前記〔３７〕〜〔３９〕のいずれか１項に記載の方法。
〔４１〕前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、前記〔３７〕〜〔４０〕のいずれか１項に記載の方法。
〔４２〕前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、前記〔４１〕に記載の方法。
〔４３〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔３７〕〜〔４２〕のいずれか１項に記載の方法。
〔４４〕活性酸素種のレベルが増加した哺乳類対象における心不全を予防、治療または改善する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔４５〕前記対象が、高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、糖尿病治療薬のロシグリタゾンまたはピオグリタゾンの摂取、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、喫煙、座りがちなライフスタイル、高コレステロール、心不全の家族歴、ストレス、および腎疾患からなる群から選択される、心不全と関連したリスク因子を少なくとも１つ有する、前記〔４４〕に記載の方法。
〔４６〕前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、前記〔４４〕〜〔４５〕のいずれか１項に記載の方法。
〔４７〕前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、前記〔４６〕に記載の方法。
〔４８〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔４４〕〜〔４７〕のいずれか１項に記載の方法。
〔４９〕Ｃ反応性タンパク質、活性酸素種、インターロイキン６、ＴＮＦα、および心臓トロポニンＩのうちの１つ以上のレベルを減少させる必要のある哺乳類対象において、Ｃ反応性タンパク質、活性酸素種、インターロイキン６、ＴＮＦα、および心臓トロポニンＩのうちの１つ以上のレベルを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔５０〕前記対象が、心不全を有すると診断されている、前記〔４９〕に記載の方法。
〔５１〕前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、前記〔５０〕に記載の方法。
〔５２〕前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、前記〔４９〕〜〔５１〕のいずれか１項に記載の方法。
〔５３〕前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、前記〔４９〕〜〔５２〕のいずれか１項に記載の方法。
〔５４〕前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、前記〔５３〕に記載の方法。
〔５５〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔４９〕〜〔５４〕のいずれか１項に記載の方法。
〔５６〕Ｃ反応性タンパク質、活性酸素種、インターロイキン６、ＴＮＦα、および心臓トロポニンＩのうちの１以上のレベルが増加した哺乳類対象における心不全を予防、治療または改善する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔５７〕前記対象が、高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、糖尿病治療薬のロシグリタゾンまたはピオグリタゾンの摂取、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、喫煙、座りがちなライフスタイル、高コレステロール、心不全の家族歴、ストレス、および腎疾患からなる群から選択される、心不全と関連したリスク因子を少なくとも１つ有する、前記〔５６〕に記載の方法。
〔５８〕前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、前記〔５６〕〜〔５７〕のいずれか１項に記載の方法。
〔５９〕前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、前記〔５８〕に記載の方法。
〔６０〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔５６〕〜〔５９〕のいずれか１項に記載の方法。
〔６１〕Ｃ反応性タンパク質、活性酸素種、インターロイキン６、ＴＮＦα、および心臓トロポニンＩのうちの１つ以上のレベルが増加した哺乳類対象におけるＬＶリモデリングを予防、改善、または治療する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔６２〕Ｃ反応性タンパク質、活性酸素種、インターロイキン６、ＴＮＦα、および心臓トロポニンＩのうちの１つ以上のレベルが増加した哺乳類対象におけるＬＶ機能を改善する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔６３〕前記対象が、心不全、心筋梗塞、もしくは他の狭窄事象または血管事象に罹患している、または罹患する可能性がある、前記〔６１〕〜〔６２〕のいずれか１項に記載の方法。
〔６４〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔６１〕〜〔６３〕のいずれか１項に記載の方法。
〔６５〕Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰおよび／または心臓トロポニンＩのレベルを減少させる必要のある哺乳類対象において、Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰおよび／または心臓トロポニンＩのレベルを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔６６〕前記対象が、急性心筋梗塞に罹患している、前記〔６５〕に記載の方法。
〔６７〕Ｎｔ−ｐｒｏ  ＢＮＰおよび／または心臓トロポニンＩの減少は、ＬＶリモデリングの効果的な予防、治療または改善の指標である、前記〔６５〕に記載の方法。
〔６８〕心臓トロポニンＩのレベルを減少させる必要のある哺乳類対象において、心臓トロポニンＩのレベルを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔６９〕前記対象が、心不全を有すると診断されている、前記〔６８〕に記載の方法。
〔７０〕前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、前記〔６９〕に記載の方法。
〔７１〕前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、前記〔６８〕〜〔７０〕のいずれか１項に記載の方法。
〔７２〕前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、前記〔６８〕〜〔７１〕のいずれか１項に記載の方法。
〔７３〕前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、前記〔７２〕に記載の方法。
〔７４〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔６８〕〜〔７３〕のいずれか１項に記載の方法。
〔７５〕心臓トロポニンＩのレベルが増加した哺乳類対象における心不全を予防、治療または改善する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔７６〕前記対象が、高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、糖尿病治療薬のロシグリタゾンまたはピオグリタゾンの摂取、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、喫煙、座りがちなライフスタイル、高コレステロール、心不全の家族歴、ストレス、および腎疾患からなる群から選択される、心不全と関連したリスク因子を少なくとも１つ有する、前記〔７５〕に記載の方法。
〔７７〕前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、前記〔７５〕〜〔７６〕のいずれか１項に記載の方法。
〔７８〕前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、前記〔７７〕に記載の方法。
〔７９〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔７５〕〜〔７８〕のいずれか１項に記載の方法。
〔８０〕ＭＬＣＬ  ＡＴ１またはＡＬＣＡＴ１の発現を減少させる必要のある哺乳類対象において、ＭＬＣＬ  ＡＴ１またはＡＬＣＡＴ１の発現を減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔８１〕前記対象が、心不全を有すると診断されている、前記〔８０〕に記載の方法。
〔８２〕前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、前記〔８１〕に記載の方法。
〔８３〕前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、前記〔８０〕〜〔８２〕のいずれか１項に記載の方法。
〔８４〕前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、前記〔８０〕〜〔８３〕のいずれか１項に記載の方法。
〔８５〕前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、前記〔８４〕に記載の方法。
〔８６〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔８０〕〜〔８６〕のいずれか１項に記載の方法。
〔８７〕Ｔａｚ１の発現を増加させる必要のある哺乳類対象において、Ｔａｚ１の発現を増加させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔８８〕前記対象が、心不全を有すると診断されている、前記〔８７〕に記載の方法。
〔８９〕前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、前記〔８８〕に記載の方法。
〔９０〕前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、前記〔８７〕〜〔８９〕のいずれか１項に記載の方法。
〔９１〕前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、前記〔８７〕〜〔９０〕のいずれか１項に記載の方法。
〔９２〕前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、前記〔９１〕に記載の方法。
〔９３〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔８７〕〜〔９２〕のいずれか１項に記載の方法。
〔９４〕ＭＬＣＬ  ＡＴ１またはＡＬＣＡＴ１の発現が増加した哺乳類対象、および／または、Ｔａｚ１の発現が減少した哺乳類対象における心不全のリスクを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔９５〕心不全を有する、または有すると疑われる哺乳類対象における、カルジオリピンリモデリングを安定化させる方法。
〔９６〕前記哺乳類対象が、ＭＬＣＬ  ＡＴ１またはＡＬＣＡＴ１の増加した発現、および／または、Ｔａｚ１の減少した発現を有する、前記〔９５〕に記載の方法。
〔９７〕前記カルジオリピンが、１８：２種のカルジオリピンである、前記〔９５〕に記載の方法。
〔９８〕心臓トロポニンＩの発現を減少させる必要のある哺乳類対象において、心臓トロポニンＩの発現を減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔９９〕前記対象が、心不全を有すると診断されている、前記〔９８〕に記載の方法。
〔１００〕前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、前記〔９９〕に記載の方法。
〔１０１〕前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、前記〔９８〕〜〔１００〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１０２〕前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、前記〔９８〕〜〔１０１〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１０３〕前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、前記〔１０２〕に記載の方法。
〔１０４〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔９８〕〜〔１０２〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１０５〕心臓トロポニンＩのレベルが増加した哺乳類対象における心不全を予防、治療、または改善する方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔１０６〕前記対象が、高血圧、冠状動脈疾患、心臓発作、不整脈、糖尿病、糖尿病治療薬のロシグリタゾンまたはピオグリタゾンの摂取、睡眠時無呼吸、先天性心臓欠陥、ウイルス感染、アルコールの使用、肥満、喫煙、座りがちなライフスタイル、高コレステロール、心不全の家族歴、ストレス、および腎疾患からなる群から選択される、心不全と関連したリスク因子を少なくとも１つ有する、前記〔１０５〕に記載の方法。
〔１０７〕前記対象に対して、心血管系剤を、別々に、連続して、または同時に投与することをさらに含む、前記〔１０５〕〜〔１０６〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１０８〕前記心血管系剤が、抗不整脈剤、血管拡張剤、抗狭心症薬、コルチコステロイド、強心配糖体、利尿薬、鎮静薬、アンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害物質、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト、血栓溶解剤、カルシウムチャンネルブロッカー、トロンボキサン受容体アンタゴニスト、ラジカルスカベンジャー、抗血小板薬、βアドレナリン受容体阻害剤、α受容体阻害剤、交感神経阻害剤、ジギタリス製剤、循環作動薬、および抗脂質異常症薬からなる群から選択される、前記〔１０７〕に記載の方法。
〔１０９〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔１０５〕〜〔１０８〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１１０〕ミトコンドリアＡＴＰ感受性カリウムチャンネル（ｍＫ  ＡＴＰ）の活性を増加させる必要のある対象における、ミトコンドリアＡＴＰ感受性カリウムチャンネル（ｍＫ  ＡＴＰ）の活性を増加させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔１１１〕前記対象が、心不全を有すると診断されている、前記〔１１０〕に記載の方法。
〔１１２〕前記心不全が、高血圧、虚血性心疾患、心毒性化合物への曝露、心筋炎、甲状腺疾患、ウイルス感染、歯肉炎、薬物乱用、アルコール依存症、心膜炎、アテローム性動脈硬化症、血管系疾患、肥大型心筋症、急性心筋梗塞、左室の収縮機能障害、冠状動脈バイパス手術、飢餓、摂食障害、または遺伝的欠陥に起因する、前記〔１１１〕に記載の方法。
〔１１３〕前記ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内に投与される、前記〔１１０〕〜〔１１２〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１１４〕前記薬学的に受容可能な塩が、酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を含有する、前記〔１１０〕〜〔１１３〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１１５〕ｍＫ  ＡＴＰ活性が減少している哺乳類対象における心不全のリスクを減少させる方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に受容可能な塩を対象に投与することを含むことを特徴とする、方法。
〔１１６〕心不全を有する、または有すると疑われる哺乳類対象における、ミトコンドリアを安定化させる方法。
〔１１７〕前記哺乳類対象が、ｍＫ  ＡＴＰの減少した活性を有する、前記〔１１５〕に記載の方法。
他の実施態様は、以下の請求項内に明記される。
【外国語明細書】
2018109012000001.pdf