(57)【要約】【課題】抗生物質化合物の塩酸塩を提供すること。【解決手段】本発明は、式Ｉの化合物に関する。こうした化合物は、塩酸と２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］−カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンとの酸付加塩である。式Ｉの化合物では、特に示さない限り、塩酸によりプロトン化されることが可能な任意の原子（アミノ基またはカルボン酸基）は、そのようにプロトン化されて塩を形成することができ、こうしたすべての形態が、本発明の範囲内に含まれる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗生物質化合物の塩酸塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、架橋グリコペプチド−セファロスポリン抗生物質化合物の新規な塩酸塩、およびこうした塩酸塩を含有する医薬組成物に関する。本発明はまた、こうした塩酸塩および組成物を調製するプロセス、および使用する方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
架橋グリコペプチド−セファロスポリン抗生物質は、当分野で公知である。例えば、こうした抗生物質は米国特許第６，８７８，８６８（Ｂ２）号、同第６，９７４，７９７（Ｂ２）号、同第７，０６７，４８１（Ｂ２）号、同第７，０６７，４８２（Ｂ２）号、同第７，６０１，６９０（Ｂ２）号、およびＬｏｎｇら、Ｊ．  Ａｎｔｉｂｉｏｔ．  ６１巻（１０号）：５９５〜６０２頁（２００８年）、およびＬｏｎｇら、Ｊ．  Ａｎｔｉｂｉｏｔ．  ６１巻（１０号）：６０３〜６１４頁（２００８年）に記載されている。これらの抗生物質は、メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ  ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ）感染症を含むグラム陽性細菌感染症の処置に有用であることが報告されている。例えば、Ｌｅｕｔｈｎｅｒら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．
２０１０年、５４巻（９号）：３７９９頁、Ｈｅｇｄｅら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ２０１２年、５６巻（３号）：１５７８頁、Ｂｌａｉｓら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ２０１２年、５６巻（３号）：１５８４頁、およびＴｙｒｅｌｌら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ２０１２年、５６巻（４号）：２１９４頁を参照されたい。
【０００３】
こうした架橋グリコペプチド−セファロスポリン抗生物質の１つは、２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］−カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンであり、これは化学構造：
【化１】
2018177817.tif 000002
を有する。
【０００４】
この化合物は、ＴＤ−１７９２としても知られ、三（トリフルオロ酢酸）塩または三塩酸塩として以前に開示された。例えば米国特許第６，９７４，７９７（Ｂ２）号のカラム３４、６０行目からカラム３５、２０行目までを参照されたい。しかし、開示されているこの塩形態は、いくつの欠点を有する。
【０００５】
第１に、トリフルオロ酢酸などのパーフルオロカルボン酸は、ラットに投与した場合、肝臓で有害作用を生じることが報告されている。例えば、Ｊｕｓｔら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、９巻（４号）、５７０〜５８１頁（１９８９年）を参照されたい。したがって、この化合物のトリフルオロ酢酸塩は、患者に投与するのに薬学的に許容することができない。
【０００６】
さらに、この化合物の三塩酸塩は、室温でも、または冷蔵温度（約２〜約８℃）で貯蔵した場合でさえも、かなり分解することが見いだされている。したがって、医薬製剤は、使用前にかなりの期間貯蔵されることが多いので、この三塩酸塩は、市販製剤における使用には許容することができない。
【０００７】
したがって、貯蔵安定性を改善する、この化合物の新規な薬学的に許容される塩の形態の必要性が存在している。
【０００８】
こうした塩を含有する新規な医薬組成物も興味深い。この化合物の貯蔵安定性をさらに改善する新規な医薬組成物が特に興味深い。しかし、医薬品に貯蔵安定性の向上をもたらすのにどの添加剤が有用であるかという点に関しては、既存の科学文献はしばしば矛盾がある。
【０００９】
例えば、ＥＰ０３２５１１２（Ａ１）は、セファロスポリンは、これをラクトース、グ
ルコース、スクロースまたはガラクトース（および、場合によりグリシン）に溶解し、次にこの溶液を乾燥することによって、安定化されると教示している。
【００１０】
対照的に、米国特許第５，２５４，５４５号は、ＥＰ０３２５１１２（Ａ１）の医薬調製物は、特定のセファロスポリン化合物を安定化するのは不満足であること、および、代わりに、セファロスポリンを（ｉ）ラクトース、（ｉｉ）クエン酸またはそのナトリウム塩、および（ｉｉｉ）アルギニンもしくはその塩酸塩または塩化ナトリウムと共に製剤化すると、安定な調製物が得られると教示している。
【００１１】
さらに、炭水化物の使用に関して、Ｂｕｒｇｅｓｓら、Ｊ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．  ２、９７巻（１９９４年）は、ある種のセファロスポリンの分解が、ｐＨ９〜１１の水溶液中で、グルコース、ガラクトース、マルトース、スクロース、マンニトールおよびα−メチルグルコシドにより触媒されると教示している。
【００１２】
さらに最近では、米国特許出願公開第２０１０／０１０２７８（Ａ１）号は、セファロスポリンのフリーズドライ製剤を調製するために使用されている、ポリオールおよびアミノ酸などの、様々な添加剤の利点および欠点を議論しており（頁１、段落００４〜００１９）、科学文献は矛盾があること、およびどの製剤が、フリーズドライ製品に安定性をもたらすかを予期することは可能ではないと結論づけている（頁１、段落００２０）。この文献は、炭水化物、多価アルコールおよびポリビニルピロリドンから選択される、少なくとも１種の安定化剤を含有するセファロスポリン誘導体のフリーズドライ製剤を記載している。
【００１３】
グリコペプチドのための医薬組成物に関すると、ＥＰ０４３８７４７（Ａ１）は、１種または複数のサッカライドを０．０５重量部またはそれ超含有している、オリエンチシンＡ〜Ｄ、クロロオリエンチシンＡ〜Ｅ、およびバンコマイシンなどのグリコペプチドの安定化フリーズドライ組成物を開示している。
【００１４】
ＪＰ４１４２４９Ｂ２は、アルギニン、アラニン、アスパラギン酸、ヒスチジンおよびグリシンから選択されるアミノ酸を含有するバンコマイシンのフリーズドライ調製物を開示している。
【００１５】
さらに、ＪＰ２０１０１０５９６５Ａは、ニコチンアミドなどの水溶性アミノ酸のアミドを含有するバンコマイシンの調製物を開示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１６】
【特許文献１】米国特許第６，８７８，８６８号明細書
【特許文献２】米国特許第６，９７４，７９７号明細書
【特許文献３】米国特許第７，０６７，４８１号明細書
【特許文献４】米国特許第７，０６７，４８２号明細書
【特許文献５】米国特許第７，６０１，６９０号明細書
【特許文献６】欧州特許０３２５１１２号明細書
【特許文献７】米国特許第５，２５４，５４５号明細書
【特許文献８】米国特許出願公開第２０１０／０１０２７８号明細書
【特許文献９】欧州特許０４３８７４７号明細書
【特許文献１０】特許第４１４２４９号広報
【特許文献１１】特開２０１０−１０５９６５号広報
【非特許文献】
【００１７】
【非特許文献１】Ｌｏｎｇら、Ｊ．  Ａｎｔｉｂｉｏｔ．  ６１巻（１０号）：５９５〜６０２頁（２００８年）
【非特許文献２】Ｌｏｎｇら、Ｊ．  Ａｎｔｉｂｉｏｔ．  ６１巻（１０号）：６０３〜６１４頁（２００８年）
【非特許文献３】Ｌｅｕｔｈｎｅｒら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ２０１０年、５４巻（９号）：３７９９頁
【非特許文献４】Ｈｅｇｄｅら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ２０１２年、５６巻（３号）：１５７８頁
【非特許文献５】Ｂｌａｉｓら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ２０１２年、５６巻（３号）：１５８４頁
【非特許文献６】Ｔｙｒｅｌｌら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ２０１２年、５６巻（４号）：２１９４頁
【非特許文献７】Ｊｕｓｔら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、９巻（４号）、５７０〜５８１頁（１９８９年）
【非特許文献８】Ｂｕｒｇｅｓｓら、Ｊ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．  ２、９７巻（１９９４年）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１８】
こうして、セファロスポリンおよびグリコペプチドを製剤化する際に使用するための、広範囲にわたる添加剤が開示されている。しかし、科学文献は、特定の医薬品と一緒に使用するための添加剤に関して、矛盾があることが多い。その結果、架橋セファロスポリン−グリコペプチドの貯蔵安定性を改善する添加剤またはその組合せの特定は、こうした化合物が、同一分子内にセファロスポリンおよびグリコペプチド部位の両方を含有するので、特に難題である。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
本発明は、式Ｉ
【化２】
2018177817.tif 000003
（式中、ｘは約１〜約２の範囲にある）
の化合物を提供する。
【００２０】
こうした塩酸塩は、対応する三塩酸塩と比べると、室温および冷蔵温度において貯蔵安定性がかなり改善されることを発見した。さらに、こうした塩酸塩の貯蔵安定性は、スクロースおよびグリシンを含有する組成物において、さらに改善されることが見いだされた。
【００２１】
一実施形態では、ｘは約１であり、すなわち式Ｉの化合物は一塩酸塩である。別の実施形態では、ｘは約２であり、すなわち式Ｉの化合物は二塩酸塩である。
【００２２】
別の態様では、本発明は、式Ｉの化合物を含む医薬組成物を提供する。一実施形態では、医薬組成物は、薬学的に許容される担体および式Ｉの化合物を含む。特定の実施形態では、医薬組成物は、スクロースおよびグリシンを含有する。
さらに別の実施形態では、医薬組成物は、
（ａ）式Ｉの化合物、
（ｂ）約０．５〜約２．０重量部のスクロース、および
（ｃ）約０．５〜約２．０重量部のグリシン（遊離塩基当量として）
を含み、
スクロースおよびグリシンの重量部は、式Ｉの化合物の重量部（遊離塩基当量として）に基づく。
【００２３】
特定の実施形態では、医薬組成物は、凍結乾燥組成物である。別の特定の実施形態では、医薬組成物は、スクロースを約１．０重量部およびグリシンを約１．５重量部含む。さらに別の特定の実施形態では、医薬組成物中の式Ｉの化合物の純度の変化は、約１８℃〜約２５℃の範囲の温度で１２か月間貯蔵した後に高速液体クロマトグラフィーにより測定すると、約１０％未満である。
【００２４】
別の態様では、本発明は、式Ｉの化合物を使用して患者における細菌感染症を処置する方法を提供する。一実施形態では、方法は、患者に式Ｉの化合物を投与するステップを含む。別の実施形態では、方法は、患者に、薬学的に許容される担体および式Ｉの化合物を含む医薬組成物を投与するステップを含む。
【００２５】
別の態様では、本発明は、治療に使用するための式Ｉの化合物を提供する。一実施形態では、治療における使用は、細菌感染症を処置するためのものである。
【００２６】
別の態様では、本発明は、医薬の製造に使用するための式Ｉの化合物を提供する。一実施形態では、医薬は、細菌感染症を処置するためのものである。
【００２７】
別の態様では、本発明は、式Ｉの化合物を調製するプロセスを提供する。一実施形態では、プロセスは、
（ａ）２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］−カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンおよび塩酸を約１：１〜約１：２のモル比で含む水性組成物を形成させるステップ、
（ｂ）この水性組成物を凍結乾燥して式Ｉの化合物を得るステップ
を含む。
【００２８】
別の態様では、本発明は、本明細書に記載されているプロセスにより生成される生成物を提供する。
【００２９】
別の態様では、本発明は、貯蔵中に、２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］−アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］−カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンが分解するのを低減する方法を提供する。一実施形態では、方法は、（ａ）式Ｉの化合物を形成させるステップ、および（ｂ）約−２５℃〜約２５℃の範囲の温度で、式Ｉの化合物を貯蔵するステップを含む。別の実施形態では、式Ｉの化合物は、約２℃〜約８℃で貯蔵される。
【００３０】
さらに別の実施形態では、方法は、約−２５℃〜約２５℃の範囲の温度で、（ａ）式Ｉの化合物、（ｂ）約０．５〜約２．０重量部のスクロース、および（ｃ）約０．５〜約２．０重量部のグリシン（遊離塩基当量として）を含む医薬組成物を貯蔵するステップであって、スクロースおよびグリシンの重量部が、式Ｉの化合物（遊離塩基当量として）の重量部あたりである、ステップを含む。別の実施形態では、医薬組成物は、約２℃〜約８℃で貯蔵される。
【００３１】
本発明の別の態様および実施形態は、本明細書において開示されている。
本発明は、例えば、以下を提供する：
（項目１）
式Ｉ
【化６】
2018177817.tif 000004
（式中、ｘは約１〜約２の範囲にある）の化合物。
（項目２）
ｘが約１である、項目１に記載の化合物。
（項目３）
ｘが約２である、項目１に記載の化合物。
（項目４）
薬学的に許容される担体および項目１、２または３に記載の化合物を含む医薬組成物。（項目５）
（ａ）項目１、２または３に記載の化合物、（ｂ）スクロースおよび（ｃ）グリシンまたは薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物。
（項目６）
凍結乾燥組成物である、項目５に記載の医薬組成物。
（項目７）
（ａ）項目１、２または３に記載の化合物、
（ｂ）約０．５〜約２．０重量部のスクロース、および
（ｃ）約０．５〜約２．０重量部のグリシン（遊離塩基当量として）
を含み、
スクロースおよびグリシンの重量部が、項目１、２または３に記載の化合物（遊離塩基当量として）の重量部に基づく、医薬組成物。
（項目８）
約１．０重量部のスクロースおよび約１．５重量部のグリシンを含む、項目６に記載の医薬組成物。
（項目９）
前記医薬組成物中の項目１、２または３に記載の化合物（遊離塩基当量として）の純度の変化が、約１８℃〜約２５℃の範囲の温度で１２か月間貯蔵した後に高速液体クロマトグラフィーにより測定するとき、約１０％未満である、項目８に記載の医薬組成物。
（項目１０）
患者における細菌感染症を処置する方法であって、項目１、２または３に記載の化合物を前記患者に投与するステップを含む方法。
（項目１１）
患者における細菌感染症を処置する方法であって、薬学的に許容される担体および項目１、２または３に記載の化合物を含む医薬組成物を該患者に投与するステップを含む方法。
（項目１２）
治療に使用するための、項目１、２または３に記載の化合物。
（項目１３）
医薬の製造に使用するための、項目１、２または３に記載の化合物。
（項目１４）
（ａ）２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］−カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンおよび塩酸を約１：１〜約１：２のモル比で含む水性組成物を形成させるステップ、
（ｂ）前記水性組成物を凍結乾燥して項目１に記載の化合物を提供するステップ
を含む、項目１に記載の化合物を調製するプロセス。
（項目１５）
前記モル比が約１：１である、項目１４に記載のプロセス。
（項目１６）
前記モル比が約１：２である、項目１４に記載のプロセス。
（項目１７）
貯蔵中の２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾ
リル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］−アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］−カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンの分解を低減する方法であって、（ａ）項目１、２または３に記載の化合物を形成させるステップ、および（ｂ）項目１、２または３に記載の化合物を約−２５℃〜約２５℃の範囲の温度で貯蔵するステップを含む方法。
（項目１８）
前記温度が、約２℃〜約８℃の範囲にある、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
貯蔵中の２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］−アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］−カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンの分解を低減する方法であって、（ａ）項目８に記載の医薬組成物を形成させるステップ、および（ｂ）該医薬組成物を約−２５℃〜約２５℃の範囲の温度で貯蔵するステップを含む、方法。
（項目２０）
前記温度が、約２℃〜約８℃の範囲にある、項目１９に記載の方法。
【００３２】
本発明の様々な態様は、添付図面を参照することにより例示される。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】図１は、冷蔵温度で貯蔵した、２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンの一、二および三塩酸塩について、純度の変化（％）対時間（月数）を示すグラフである。
【００３４】
【図２】図２は、室温で貯蔵した、２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンの一、二および三塩酸塩について、純度の変化（％）対時間（月数）を示すグラフである。
【００３５】
【図３】図３は、２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］−カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンの一、二、または三塩酸塩、（ｂ）スクロース、および（ｃ）グリシンを含有する組成物について、純度の変化（％）対時間（月数）を示すグラフである。この組成物は、室温で貯蔵された。
【００３６】
【図４】図４は、２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシン一塩酸塩、ならびに（ａ）一塩酸塩、（ｂ）スクロース、および（ｃ）グリシンを含有する組成物について、純度の変化（％）対時間（月数）を示すグラフである。これらの一塩酸塩および組成物は、室温で貯蔵された。
【００３７】
【図５】図５は、２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシン二塩酸塩、ならびに（ａ）二塩酸塩、（ｂ）スクロース、および（ｃ）グリシンを含有する組成物について、純度の変化（％）対時間（月数）を示すグラフである。これらの二塩酸塩および組成物は、室温で貯蔵された。
【発明を実施するための形態】
【００３８】
本発明は、式Ｉの化合物に関する。こうした化合物は、塩酸と２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］−カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンとの酸付加塩である。式Ｉの化合物では、特に示さない限り、塩酸によりプロトン化されることが可能な任意の原子（アミノ基またはカルボン酸基）は、そのようにプロトン化されて塩を形成することができ、こうしたすべての形態が、本発明の範囲内に含まれる。
定義
【００３９】
本発明を記載する場合、特に示さない限り、以下の用語は、以下の意味を有する。
【００４０】
用語「薬学的に許容される塩」とは、ヒトなどの患者または哺乳動物に投与するのに適した塩（例えば、所与の投与レジメに対して、哺乳動物への許容される安全性を有する塩）を意味する。代表的な薬学的に許容される塩には、酢酸、アスコルビン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸性、エジシル（ｅｄｉｓｙｌｉｃ）酸、フマル酸、ゲンチシン酸、グルコン酸、グルクロン酸性、グルタミン酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、ナフタレンスルホン酸、ナフタレン−１，５−二スルホン酸、ナフタレン−２，６−二スルホン酸、ニコチン酸、硝酸、オロチン酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸、およびキシナホ酸などの塩が含まれる。
【００４１】
用語「冷蔵温度」は、約２℃〜約８℃の温度を意味する。
【００４２】
用語「室温」は、化学実験室の周囲温度、通常、約１８℃〜約２５℃を意味する。
【００４３】
用語「治療有効量」は、処置を必要とする患者に投与した場合、処置を行うのに十分な量を意味する。
用語「処置する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、
（ａ）疾患状態または病状が発生するのを防止すること、すなわち、患者または対象の予防的処置、
（ｂ）疾患状態または病状の改善、すなわち、患者における疾患状態または病状を除去し、または退行を引き起こすこと、
（ｃ）疾患状態または病状の抑制、すなわち、患者におおける疾患状態または病状の発症を遅延させるか、もしくは抑止すること、または
（ｄ）患者における疾患状態または病状の症状を緩和すること
を意味する。
一般的合成手順
【００４４】
式Ｉの化合物は、２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンおよび約１〜約２モル当量の塩酸を含有する、水性組成物を最初に用意するまたは形成させることにより、通常調製される。この水性組成物は、次に凍結乾燥されて式Ｉの化合物が得られる。
【００４５】
この水性組成物は、通常、２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンの水性組成物に適量の水性希塩酸（１Ｎ水性塩酸など）を加えることにより調製される。一般に、本化合物を含有する水性組成物は、例えばＨＰＬＣにより分析されて、水溶液中に存在している該化合物の量が決定される。この化合物の量が既知になると、適量の塩酸を加え、その結果、得られた水性組成物は、化合物１モル当量あたり約１〜約２モル当量の塩酸を含有する。通常、塩酸は約−１０℃〜約２５℃の範囲の温度で加えられる。
【００４６】
一部の場合、この水溶液は、塩酸を一部（例えば、１モル当量未満）既に含有することがあり、こうした場合、該水溶液中に既に存在している塩酸の量は、追加の塩酸を加える場合、考慮に入れられる。あるいは、２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］−アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンを含有する水溶液が、約２当量を超える塩酸を含有する場合、この水溶液は、炭酸水素アルカリ塩、炭酸アルカリ塩などの塩基により中和して、上記の化合物に対する塩酸のモル比を約１〜約２の範囲に調節することができる。例として、炭酸水素ナトリウムを塩基として使用することができる。塩基は、通常、例えば、５％炭酸水素ナトリウム水溶液などの希釈水溶液の形態で加えられる。塩基は、通常、約−１０℃〜約２５℃の範囲の温度で水溶液に加えられる。
【００４７】
こうした水性組成物を記載する場合、塩酸はこの化合物をプロトン化し、その結果、この水性組成物は、塩酸および該化合物の酸付加塩を含有することが理解されよう。すなわち、化合物と塩酸とのモル比を言ういかなる場合も、酸付加塩の形態にある構成成分のモル比を指すことが理解されよう。
【００４８】
化合物および約１〜約２モル当量の塩酸を含有する水性組成物が形成されると、この水性組成物は通常、凍結乾燥されて、式Ｉの化合物が凍結乾燥粉末として得られる。凍結乾燥は、一般に、約−６０℃〜約−２０℃の範囲の温度、約２０ｔｏｒｒ（ｍｍＨｇ）〜約１００ｔｏｒｒ（約４０ｔｏｒｒ〜６０ｔｏｒｒなど）の範囲の減圧下で行われる。凍結乾燥は、一般に、揮発性構成成分が実質的に除去されるまで、約４８時間〜約２００時間行われる。凍結乾燥により、式Ｉの化合物が凍結乾燥粉末として得られる。
【００４９】
あるいは、式Ｉの化合物は、沈殿して、ろ過または遠心分離により単離することができる。例えば、過剰の有機希釈剤を使用して、水性組成物から式Ｉの化合物を沈殿させることができる。適切な有機希釈剤には、例示として、アセトニトリル、メタノール、エタノール、アセトンなどが含まれる。所望の場合、この沈殿物は、場合により、適切な有機希釈剤で洗浄することができる。例えば、アセトンが式Ｉの化合物を沈殿させるために使用
される場合、得られた沈殿物は、場合により、アセトンで洗浄されて、次に乾燥される。通常、単離手順は、約０℃〜約３０℃、通常、約５℃〜約２０℃の間の範囲の温度で行われ、ろ過、洗浄、および乾燥ステップのすべてが、窒素、アルゴンなどの不活性雰囲気下で行われる。
【００５０】
２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンを調製するための手順は、当分野で公知である。例えば、この化合物の調製は、米国特許第６，９７４，７９７（Ｂ２）号、およびＬｏｎｇら、Ｊ．  Ａｎｔｉｂｉｏｔ．６１巻（１０号）：６０３〜６１４頁（２００８年）に記載されている。
【００５１】
例示として、バンコマイシンまたはその塩は以下の式
【化３】
2018177817.tif 000005
を有する化合物Ａまたはその塩と、ペプチドカップリング試薬の存在下で反応させると、２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］−カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンまたはその塩が得られる。
【００５２】
通常、この反応は、バンコマイシンまたはその塩を、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、またはそれらの混合物などの希釈剤中、約１〜約１．１モル当量のペプチドカップリング試薬に接触させることにより行われる。この反応は、通常、約−１０℃〜約１０℃の範囲の温度で、約１０分間〜約６０分間、またはこの反応が実質的に完了するまで行われる。次に、上記の活性化されたバンコマイシン誘導体に、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、またはそれらの混合物などの希釈剤中の約０．９〜約１．１モル当量の化合物Ａまたはその塩の溶液を加える。化合物Ａの添加後、ジイソプロピルエチルアミンなどのアミンが、約２〜約１０モル当量（約５モル当量など）の範囲の量で加えられる。アミンは、通常、反応温度が約−１０℃〜約５℃の範囲を維持する速度で加えられる。次に、この反応混合物は、通常、約０．５〜約３時間、またはこの反応が実質的に完了するまで約−１０℃〜約５℃の範囲の温度に維持される。
【００５３】
様々なペプチドカップリング試薬をこの反応に使用することができる。代表的な例には、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）と一緒または一緒ではないベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）、Ｏ−（６−クロロ−１−ヒドロシベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ）、Ｏ
−（６−クロロベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＣＴＵ）、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモリホルニウムクロリド（ＤＭＴＭＭ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣＩ）とＨＯＡｔ、ジエチルシアノホスホネート（ＤＥＣＰ）などが含まれる。一実施形態では、このペプチドカップリング試薬は、４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリドである。
【００５４】
カップリング反応が完了した後、沈殿およびろ過、カラムクロマトグラフィー、ＨＰＬＣなどの従来的な手順を使用して、反応生成物が単離および精製される。
【００５５】
化合物Ａは、当分野で公知である。例えば、化合物Ａは、米国特許第６，９７４，７９７（Ｂ２）号（実施例Ａ、カラム２７の５１行目からカラム３０の５６行目まで）またはＬｏｎｇら、Ｊ．  Ａｎｔｉｂｉｏｔ．６１巻（１０号）：６０３〜６１４頁（２００８年）（６１１〜６１２頁のＣｏｘ  Ｓｙｎｔｈｏｎ  １８）に記載されている通り調製することができる。化合物Ａを調製する手順もこの実施例に記載されている。
【００５６】
バンコマイシンも、当分野で公知である。例えば、バンコマイシン塩酸塩は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ６３１０３）およびＨａｏｒｕｉ  Ｐｈａｒｍａ−Ｃｈｅｍ  Ｉｎｃ．（Ｉｒｖｉｎｅ、ＣＡ９２６１８）から市販されている。
【００５７】
調製後、本発明において使用される２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンは、逆相ＨＰＬＣまたは他のクロマトグラフィー法を使用して精製することができる。
【００５８】
例えば、この化合物は、ポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）（ＰＳ−ＤＶＢ）樹脂を使用して精製することができる。通常、この化合物を精製するために使用されるＰＳ−ＤＶＢ樹脂は、約１００オングストローム〜約１，０００オングストロームの範囲の細孔サイズ、および約１０μｍ〜約５０μｍの範囲の粒子サイズを有する、剛直なマクロ多孔質型樹脂である。使用に適した代表的な樹脂は、細孔サイズ約１００オングストロームおよび粒子サイズ約５０μｍを有するＰＬＲＰ−Ｓ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ  ＣＡ９５０５１）である。
【００５９】
一般に、精製のために使用される溶離液は、様々な量の極性有機溶媒を含有する、酸性水溶液を含む。代表的な極性有機溶媒には、アセトニトリル、エタノール、イソプロパノール、メタノールなどが含まれる。適切な酸には、酢酸、トリフルオロ酢酸、塩酸などが含まれる。溶離液は、酢酸緩衝液またはリン酸緩衝液などの緩衝液を含有することもできる。一実施形態では、溶離液は、約２％ｖ／ｖ〜約１３％ｖ／ｖの範囲の量のアセトニトリルを含有する、水性酢酸緩衝液（１００ｍＭ）を含む。
【００６０】
使用される精製手順に応じて、精製後に塩交換を行い、該化合物の塩酸塩を得ることができる。例えば、精製手順に使用される酸が、塩酸以外の酸（すなわち、酢酸またはトリフルオロ酢酸）である場合、塩交換が通常行われ、塩酸塩を形成させる。
【００６１】
この塩交換は一般に、本明細書に記載されている精製用のＰＳ−ＤＶＢ樹脂を使用して
行われる。化合物の塩は、通常、ＰＳ−ＤＶＢ樹脂上に担持し、次にこの樹脂を様々な量の極性有機溶媒を含有する塩酸水溶液を用いて溶出する。代表的な極性有機溶媒には、アセトニトリル、エタノール、イソプロパノール、メタノールなどが含まれる。一般に、使用される極性有機溶媒の量は、約１０％ｖ／ｖ〜約２０％ｖ／ｖなどの、約１０％ｖ／ｖ〜約５０％ｖ／ｖを含めた、約１０％ｖ／ｖ〜約８０％ｖ／ｖの範囲となろう。一実施形態では、塩交換に使用される溶離液は、約２０％ｖ／ｖアセトニトリルを含有する約１０ｍＭ水性塩酸を含む。
医薬組成物
【００６２】
式Ｉの化合物は、通常、医薬組成物の形態で患者に投与される。こうした医薬組成物は、任意の許容される担体または添加剤を含有してもよい。特定の担体、または担体の組合せの選択は、投与形式、構成成分の適合性、組成物の安定性などの様々な要素によって決まることになろう。
【００６３】
医薬組成物を調製するための従来の技法は、当分野で公知であり、例えば、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ：  ＴＨＥ  ＳＣＩＥＮＣＥ  ＡＮＤ  ＰＲＡＣＴＩＣＥ  ＯＦ  ＰＨＡＲＭＡＣＹ  （ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ：  ＴＨＥ  ＳＣＩＥＮＣＥ  ＆  ＰＲＡＣＴＩＣＥ  ＯＦ
ＰＨＡＲＭＡＣＹ）、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ；第２１版（２０１１年１０月７日）に記載されている。さらに、こうした組成物に必要な従来的な成分は、例えば、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ６３１７８、および他の商業的供給業者から市販されている。
【００６４】
医薬組成物は、通常、式Ｉの化合物と薬学的に許容される担体および任意選択の成分とを、完全におよびしっかりと混合またはブレンドすることにより調製される。
【００６５】
一実施形態では、医薬組成物は、非経口投与、特に静脈内投与に適している。こうした医薬組成物は、通常、式Ｉの化合物を含有する、生理的に許容される滅菌水溶液の担体を含む。一実施形態では、本組成物は発熱性物質を含有しない。場合により、この担体溶液は、糖、アミノ酸、電解質などの他の構成成分を含んでもよい。
【００６６】
代表的な生理的に許容される水性担体には、例として、注射用滅菌水（米国薬局方）；デキストロース注射液（米国薬局方）（例えば、５％デキストロース液（Ｄ５／Ｗ）を含む、２．５、５．０、１０、２０％デキストロース）、デキストロースおよび塩化ナトリウム注射液（米国薬局方）（例えば、２．５〜１０％の範囲のデキストロースおよび０．１２（１９ｍＥｑナトリウム）〜０．９％（１５４ｍＥｑナトリウム）の範囲の塩化ナトリウム）、マンニトール注射液（米国薬局方）（例えば、５、１０、１５、２０および２５％マンニトール）、リンゲル注射液（米国薬局方）（例えば、１リットルあたり、１４７ｍＥｑナトリウム、４ｍＥｑカリウム、４．５ｍＥｑカルシウム、および１５６ｍＥｑ塩化物）、乳酸リンゲル注射液（米国薬局方）（例えば、１リットルあたり、２．７ｍＥｑカルシウム、４ｍＥｑカリウム、１３０ｍＥｑナトリウム、および２８ｍＥｑ乳酸塩）、塩化ナトリウム注射液（米国薬局方）（例えば、０．９％塩化ナトリウム）などが含まれる。
【００６７】
患者に投与する場合、式Ｉの化合物は、通常、式Ｉの化合物１ｍｇあたり、約０．５ｍＬ〜約１０ｍＬ（１ｍｇあたり約０．６〜約８ｍＬなど）の水性担体で希釈されることになろう。
【００６８】
あるいは、医薬組成物は、復元およびその後の非経口投与に適した固体形態であってもよい。こうした組成物は、通常、使用前に、生理的に許容される滅菌の水性担体で復元される、滅菌凍結乾燥組成物の形態である。この実施形態では、医薬組成物は、通常、式Ｉ
の化合物および薬学的に許容される担体を含む。こうした医薬組成物に使用するための代表的な担体には、例として、スクロース、マンニトール、デキストロース、デキストラン、ラクトース、グリシンまたはそれらの組合せが含まれる。
【００６９】
一実施形態では、医薬組成物は、（ａ）式Ｉの化合物、（ｂ）スクロースおよび（ｃ）グリシンまたは薬学的に許容されるその塩を含む。こうした組成物は、通常、式Ｉの化合物（遊離塩基当量として）の重量部あたり、約１．０重量部を含めて約０．５〜約２．０重量部のスクロース、および式Ｉの化合物（遊離塩基当量として）の重量部あたり、約１．５重量を含む、約０．５〜約２．０重量のグリシン（遊離塩基当量として）を含有する。一実施形態では、医薬組成物は、式Ｉの化合物（遊離塩基当量として）の重量部あたり、約１．０重量部のスクロースおよび約１．５重量部のグリシン（遊離塩基当量として）を含有する。例えば、こうした医薬組成物は、式Ｉの化合物１ミリグラム（遊離塩基当量として）あたり、約０．５ｍｇ〜約２．０ｍｇのスクロースおよび約１．０ｍｇ〜約２．０ｍｇのグリシン（遊離塩基当量として）（式Ｉの化合物１ミリグラム（遊離塩基当量として）あたり、約１．０ｍｇのスクロースおよび約１．５ｍｇのグリシン（遊離塩基当量として）など）を含有することができる。
【００７０】
別の実施形態では、医薬組成物は、（ａ）約１０ｗｔ．％〜約６０ｗｔ．％の式Ｉの化合物（遊離塩基当量）、（ｂ）約１０ｗｔ．％〜約６０ｗｔ．％のスクロース、および（ｃ）約１０ｗｔ．％〜約８０ｗｔ．％のグリシン（遊離塩基当量）を含む。例えば、この実施形態は、該組成物の総重量に対して、（ａ）約２０ｗｔ．％〜５０ｗｔ．％の式Ｉの化合物（遊離塩基当量）、（ｂ）約２０ｗｔ．％〜５０ｗｔ．％のスクロース、および（ｃ）約２０ｗｔ．％〜約７０ｗｔ．％のグリシン（遊離塩基当量）を含む医薬組成物（（ａ）約２５ｗｔ．％〜３５ｗｔ．％の式Ｉの化合物（遊離塩基当量）、（ｂ）約２５ｗｔ．％〜３５ｗｔ．％のスクロース、および（ｃ）約３０ｗｔ．％〜約５０ｗｔ．％のグリシン（遊離塩基当量）を含む医薬組成物など）を含む。
【００７１】
一実施形態では、医薬組成物は、凍結乾燥粉末である。通常、凍結乾燥粉末は滅菌であり、気密シールしたバイアル、またはアンプル、または類似の容器中に包装される。
貯蔵安定性
【００７２】
式Ｉの化合物は、対応する三塩酸塩と比べると、貯蔵安定性がかなり改善されることが発見された。さらに、式Ｉの化合物の貯蔵安定性は、スクロースおよびグリシンを含有する組成物において、さらに改善されることが見いだされた。
【００７３】
２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンの三塩酸塩は、当分野で公知である。例えば、三塩酸塩は米国特許第６，９７４，７９７（Ｂ２）号のカラム３５の１６〜２０行に記載されている。しかし、貯蔵時に、三塩酸塩の純度は、かなり低下することが見いだされた。例えば、室温で１２か月貯蔵した場合、三塩酸塩は、純度が３０％超で低下することが見いだされた（図２に示されている通りである）。
【００７４】
こうした分解は、親分子と比べて、分解生成物の生物活性または治療効果が異なり得るので、懸念される。例えば、バンコマイシンの不純物を議論している、Ｊ．  Ｄｉａｎａら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  Ａ、９９６巻：１１５〜１３１頁（２００３年）を参照されたい。
【００７５】
三塩酸塩の分解生成物の１つは、式ＩＩ、
【化４】
2018177817.tif 000006
の化合物またはその塩であると考えられている。この化合物は、分解物Ｂとも呼ばれる。式ＩＩの化合物は、セファロスポリン部位のＡ環における二重結合が、Δ３位からΔ２位に異性化している、二重結合異性体である。セファロスポリン酸のΔ２異性体は、不活性であることが報告されている。例えば、Ｃｒｏｃｋｅｒら、Ｊ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．（Ｃ）、１１４２頁（１９６６年）；およびＳａａｂら、Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．、７７巻（１０号）、９０６頁（１９８８年）を参照されたい。したがって、本化合物の貯蔵の間に、Δ２異性体の形成を最小化することが重要である。
【００７６】
別の分解物は、式ＩＩＩ
【化５】
2018177817.tif 000007
を有する加水分解生成物またはその塩であると考えられる。式ＩＩＩの化合物は、分解物Ａとも呼ばれる。
【００７７】
式Ｉの化合物は、室温または冷蔵温度で１２か月間貯蔵した場合、三塩酸塩と比べて、より安定であることが今や発見された。例えば、図１および２を参照されたい。
【００７８】
さらに、式Ｉの化合物は、これをスクロースおよびグリシンと共に製剤化すると、室温でより安定である。例えば、図３、４および５を参照されたい。
【００７９】
一実施形態では、医薬組成物中の式Ｉの化合物の純度の変化（または低下）が、約１８℃〜約２５℃（室温）の範囲の温度で１２か月間貯蔵した後に高速液体クロマトグラフィー（「ＨＰＬＣ」）により測定すると、約１０％未満である。
【００８０】
別の実施形態では、式Ｉの化合物の曲線下面積（ＡＵＣ）が、約１８℃〜約２５℃（室温）の範囲の温度で、この医薬組成物を１２か月間貯蔵した後に高速液体クロマトグラフィー（「ＨＰＬＣ」）により決定すると、約１０％未満しか低下しない。
【００８１】
特定の実施形態では、本発明は、
（ａ）式Ｉの化合物、
（ｂ）約１．０重量部のスクロース、および
（ｃ）約１．５重量部のグリシン（遊離塩基当量として）
を含む医薬組成物であって、
スクロースおよびグリシンの重量部が、式Ｉの化合物（遊離塩基当量として）の重量部に基づき、医薬組成物中の式Ｉの化合物の純度の変化が、約１８℃〜約２５℃の範囲の温度で１２か月間貯蔵した後に高速液体クロマトグラフィーにより測定すると、約１０％未満である、
医薬組成物を提供する。
利用性
【００８２】
２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］−アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンおよびその塩は、メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ）およびバンコマイシン中間耐性Ｓ．ａｕｒｅｕｓ（ＶＩＳＡ）などの多剤耐性菌を含む、グラム陽性細菌に対する抗生物質または殺菌剤としての利用性を有する。例えば、Ｌｅｕｔｈｎｅｒら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ２０１０年、５４巻（９号）：３７９９頁、Ｈｅｇｄｅら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ２０１２年、５６巻（３号）：１５７８頁、Ｂｌａｉｓら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ２０１２年、５６巻（３号）：１５８４頁、およびＴｙｒｅｌｌら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ２０１２年、５６巻（４号）：２１９４頁を参照されたい。
【００８３】
様々な細菌および細菌株に対する式Ｉの化合物の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）は、米国臨床検査標準化協会（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）（ＣＬＳＩ）（Ｗａｙｎｅ、ＰＡ１９０８７）により公開されているものなどの、標準的手順を使用して決定することができる。例えば、ＣＬＳＩ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｄｉｌｕｔｉｏｎ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｓ  ｆｏｒ  Ｂａｃｔｅｒｉａ  Ｔｈａｔ  Ｇｒｏｗ  Ａｅｒｏｂｉｃａｌｌｙ；  Ａｐｐｒｏｖｅｄ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  −  Ｎｉｎｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ．  ＣＬＳＩ  ｄｕｃｕｍｅｎｔ  Ｍ０７−Ａ９．  Ｗａｎｙｅ，  ＰＡ  ：  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ
Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ；２０１２年を参照されたい。
【００８４】
式Ｉの化合物は、通常、任意の許容される投与経路により、治療有効量で投与される。通常、本化合物は、静脈内など、非経口投与される。本化合物は、１日あたり、単回１日用量または多回用量で投与することができる。この処置レジメンは、長期間、例えば、数日間、または１〜６週間、またはそれ超にわたる投与を必要とすることがある。用量あたりの投与される化合物の量または投与される総量は、通常、患者の医師により決定されることになり、感染の性質および重症度、患者の年齢および総合的な健康、患者の本化合物に対する耐性、感染を引き起こした微生物、投与経路などの因子に依存することになろう。
【００８５】
代表的な用量は、式Ｉの化合物が約１〜約２ｍｇ／ｋｇ／日を含め、約０．２５〜約２．５ｍｇ／ｋｇ／日（遊離塩基当量）の範囲である。一実施形態では、式Ｉの化合物は、約２ｍｇ／ｋｇ／日（遊離塩基当量）の用量で投与される。代表的な処置レジメンは、約７〜約１４日の期間に、約２ｍｇ／ｋｇ／日（遊離塩基当量）の用量で、１日１回、式Ｉの化合物を投与することからなる。
【００８６】
生理的に許容される水性担体中で投与される場合、式Ｉの化合物は、通常、約１ｈなどの、約０．５ｈ〜約２ｈにわたり、患者に静脈内投与される。
【００８７】
式Ｉの化合物により処置または防止され得る代表的な感染症または細菌に関連する病状には、例として、皮膚および皮膚組織感染症、肺炎、心内膜炎、髄膜炎、敗血症、尿路感染症、血流感染、骨髄炎などを含む、グラム陽性細菌により引き起こされる感染症が含まれる。こうした状態を処置する場合、患者が、処置される微生物に既に感染していること
があり、または抗生剤が予防的に投与される場合において、感染を受けやすいことがある。
【実施例】
【００８８】
本発明の様々な代表的な実施形態および態様を例示するために以下の実施例が提示されており、具体的に示されない限り、本発明の範囲を決して限定する意図はない。
【００８９】
バンコマイシン塩酸塩は、Ｈａｏｒｕｉ  Ｐｈａｒｍａ−Ｃｈｅｍ  Ｉｎｃ．、Ｉｒｖｉｎｅ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、米国から購入した。４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリド（ＤＭＴＭＭ）は、Ｕｂｉｃｈｅｍ  Ｐｌｃ、Ｈａｍｐｓｈｉｒｅ、英国から購入した。１−［［（６Ｒ，７Ｒ）−７−アミノ−２−カルボキシ−８−オキソ−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−３−イル］メチル］ピリジニウムクロリド一塩酸塩（７−ＰＹＣＡ）は、Ｚｈｅｊｉａｎｇ  Ｈｅｎｇｄｉａｎ  Ａｐｅｌｏａ  Ｉｍｐ．＆Ｅｘｐ．Ｃｏ．，Ｌｔｄ．、Ｚｈｅｊｉａｎｇ、中国およびＡｕｒｉｓｃｏ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｌｉｍｉｔｅｄ、Ｓｈａｎｇｈａｉ、中国から購入したか、またはこれは、例えば米国特許第４，２５８，０４１号における手順により、もしくは他の公開されている手順により調製することができる。以下の実施例において使用される、他の試薬、出発原料および溶媒はすべて、商業的な供給業者（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯなど）から購入し、特に示さない限り、さらに精製することなく使用した。
【００９０】
以下の略語を使用した。ＤＭＦ＝Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド；ｈ＝時間、およびｍｉｎ＝分。
（実施例１）
２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシン試料の純度を決定するためのＨＰＬＣ法
【００９１】
試験試料は、クロマトグラフィーデータソフトウェア（Ｅｍｐｏｗｅｒ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ０１７５７）により制御された、光ダイオードアレイ検出器を備えたＨＰＬＣシステム（Ａｇｉｌｅｎｔ１１００または１２００  ＨＰＬＣ  Ｓｙｓｔｅｍ；Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．、Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ、ＣＡ９５０５１）を使用して、２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］−オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンおよびその分解生成物についてアッセイした。溶媒はすべて、ＨＰＬＣグレードであり、Ｈｏｎｅｙｗｅｌｌ  Ｂｕｒｄｉｃｋ＆Ｊａｃｋｓｏｎ（Ｍｕｓｋｅｇｏｎ、ＭＩ４９４４２）から購入した。リン酸（８５％ｗ／ｗ）およびリン酸二水素ナトリウムはＨＰＬＣグレードであり、Ｆｌｕｋａ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ６３１０３）から購入した。試薬はすべてさらに精製することなく使用した。
【００９２】
分析前に、試験試料を０．２μｍポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）フィルターによりろ過し、最初の１ｍＬを廃棄した。ＨＰＬＣ分析条件を表Ａにまとめる。
【表Ａ】
2018177817.tif 000008
【００９３】
特定の試料の構成成分の保持時間は、表Ｂに示されている。
【表Ｂ】
2018177817.tif 000009
【００９４】
試験試料の純度は、積分されたピークすべての割合として、化合物に関して積分されたピーク面積（曲線下面積またはＡＵＣ）に基づいて決定した。試験試料中の化合物の濃度（アッセイ値）は、参照標準品と比較することにより決定した。
（実施例２）
残留溶媒を決定するためのＧＣ法
【００９５】
２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］−オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンの試験試料中の残留溶媒は、ヘッドスペースオートサンプラー（Ａｇｉｌｅｎｔ７６９４  Ｈｅａｄｓｐａｃｅ  Ｓａｍｐｌｅｒ）を装備したガスクロマトグラフィーシステム（Ａｇｉｌｅｎｔ  ＧＣ６８９０、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ  ＣＡ９５０５）を使用して決定した。ＤＢ−６２
４ＧＣカラム（３０ｍ（長さ）×０．５３ｍｍ（ＩＤ）×３μｍ）を使用した（Ａｇｉｌｅｎｔ、部品番号１２５−１３３４）。
【００９６】
内部標準溶液は、１Ｌメスフラスコに１−ブタノール（４ｍＬ）を加えることにより調製した。ＤＭＳＯ（８００ｍＬ）を加えて、この混合物を完全に混合し、次に追加のＤＭＳＯを加えて、全容積を１Ｌにした。
【００９７】
各試験試料（５０ｍｇ）を２０ｍＬのヘッドスペースバイアルに移送し、内部標準溶液（１ｍＬ）を加え、試料が溶解するまで得られた混合物を激しく掻き混ぜた。
【００９８】
既知の純度の市販の溶媒から、内部標準溶液中、濃度２ｍｇ／ｍＬを有する参照標準品を調製した。参照標準用溶媒はすべて、通常、三連で調製した１つの参照標準溶液と一緒にした。参照標準品の各反復に関して、溶液１ｍＬを２０ｍＬのヘッドスペースバイアルに加えて、クリンプシールした。
【００９９】
ＧＣ分析条件を表Ｃにまとめる。
【表Ｃ】
2018177817.tif 000010
【０１００】
内部標準の１−ブタノールに対する、典型的な溶媒のＧＣ保持時間を表Ｄに示す。１−ブタノールは、通常、約１９．０ｍｉｎに溶出する。
【表Ｄ】
2018177817.tif 000011
【０１０１】
試験試料中の残留溶媒の量は、試料のピーク面積と参照標準品のそれとを比較すること
により決定した。
（実施例３）
３−ブロモプロピルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの調製
【０１０２】
１０℃またはわずかにそれより低い温度に維持した水酸化ナトリウム（１０５ｇ、２．６２５ｍｏｌ）水（１．１５Ｌ）溶液に、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２２９ｇ、１．０５ｍｏｌ）のヘプタン（１．０３Ｌ）溶液を加えた。二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルの溶液を含有していたフラスコをヘプタン（１２５ｍＬ）ですすぎ、すすいだ液を上記の反応混合物に加えた。得られた混合物を１０℃またはそれよりわずかに低い温度まで冷却し、内部温度が約２０℃未満を維持する速度で、３−ブロモプロピルアミン臭化水素酸塩（２５１ｇ、１．１５ｍｏｌ）の水（２５０ｍＬ）溶液を滴下添加した。３−ブロモプロピルアミン臭化水素酸塩の溶液を含有していたフラスコを水（２０ｍＬ）ですすぎ、すすいだ液を上記の反応混合物に加えた。添加の終了後、この反応混合物をゆっくり室温（約２２℃）まで温め、室温で約２ｈ、撹拌を継続した。撹拌を停止し、この混合物を３０ｍｉｎ放置した。下部の水層を有機層から分離し、廃棄した。有機層に飽和塩化ナトリウム水溶液（２５０ｍＬ）を加え、得られた混合物を５ｍｉｎ撹拌した。この混合物を３０ｍｉｎ放置し、下部の水層を分離して廃棄した。有機層を容積約３５０ｍＬまで濃縮し、この濃縮溶液を５℃に冷却して、５℃で４ｈ撹拌した。得られた沈殿物を吸引ろ過により集めると、表題化合物が白色結晶性固体として得られた（２１１ｇ、８４％収率）。このろ液を濃縮し、この濃縮溶液を５℃まで冷却して、５℃で４ｈ撹拌した。得られたさらなる沈殿物を吸引ろ過により集めると、さらなる量の表題化合物（１７ｇ、６．８％収率）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ３．５０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．０３  （ｑ，  Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．９１  （ｍ，  Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．３８  （ｓ，  ９Ｈ）．
（実施例４）
エチル（２Ｚ）−２−（２−アミノチアゾール−４−イル）−２−（３−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロポキシイミノ）アセテートの調製
【０１０３】
エチル２−アミノ−α−（ヒドロキシイミノ）−４−チアゾールアセテート（１３９．９ｇ、６５０ｍｍｏｌ）、３−ブロモプロピルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２０９．０ｇ、８７７．５ｍｍｏｌ）および粉末にした炭酸カリウム（１５７．２ｇ、１１３７．５ｍｍｏｌ）の混合物に、ＤＭＦ（５５０ｍＬ）および水（２４．４ｍＬ）を加えた。得られた混合物を３０℃で約１１ｈ撹拌した。この反応混合物を室温まで冷却し、酢酸エチル（２．３Ｌ）および水（１．７Ｌ）を加えて、得られた混合物を５ｍｉｎ撹拌した。この混合物を６０ｍｉｎ放置し、下層（水層）を分離して廃棄した。炭酸水素ナトリウム水溶液（１０ｗｔ．％、６００ｍＬ）を加え、得られた混合物を５ｍｉｎ撹拌した。この混合物を６０ｍｉｎ放置し、下層（水層）を分離して廃棄した。塩化ナトリウム水溶液（１０ｗｔ．％、６００ｍＬ）を加え、得られた混合物を５ｍｉｎ撹拌した。この混合物を６０ｍｉｎ放置し、下層（水層）を分離して廃棄した。有機層を容積約６００ｍＬまで濃縮した。０℃で１ｈ、穏やかに撹拌しながら、上記の濃縮物にヘキサン（２５０ｍＬ）を滴下添加すると、沈殿物が形成した。この沈殿物を吸引ろ過により集めると、表題化合物（２３２ｇ、９６％収率）がオフホワイトの結晶性固体として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ７．２５  （ｓ，  ２Ｈ），  ６．８９  （ｓ，  １Ｈ），  ６．８２  （ｂｒｓ，  １Ｈ），  ４．２６  （ｑ，  Ｊ  ＝  ８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．０８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．９７  （ｑ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．７２  （ｍ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，
２Ｈ），  １．３７  （ｓ，  ９Ｈ），  １．２６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８  Ｈｚ，  ３Ｈ）．
【０１０４】
所望の場合、生成物を再結晶することができる。いくつかの回分からの粗製物質（１．０ｋｇ、９１．２％純度）を６０℃で酢酸エチル（２Ｌ）に溶解し、ヘプタン（１Ｌ）をゆっくりと加えた。得られた溶液を、撹拌しながら１ｈ、６０℃に加熱し、この間に沈殿物が形成した。次に、この混合物をゆっくり冷却して室温にした。乾燥窒素下、沈殿物を吸引ろ過により集め、ヘプタンおよびＥｔＯＡｃ（１Ｌ、３：１）の混合物で洗浄し、真空下で一晩乾燥すると、表題化合物（７７０ｇ、９８．３％純度）が得られた。
（実施例５）
（２Ｚ）−２−（２−アミノチアゾール−４−イル）−２−（３−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロポキシイミノ）酢酸の調製
【０１０５】
エチル（２Ｚ）−２−（２−アミノチアゾール−４−イル）−２−（３−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロポキシイミノ）アセテート（２３２．０ｇ、６２２．９ｍｍｏｌ）の無水エタノール（１．６３Ｌ）溶液に、水酸化ナトリウム（２９．９ｇ、７４７．４ｍｍｏｌ）の水（７４８ｍＬ）溶液を滴下添加した。得られた混合物を３５℃で約８ｈ加熱した。次に、この混合物を約−５℃まで冷却し、この混合物のｐＨが約６．０になるまで、トリフルオロ酢酸（約１０ｍＬ）を滴下添加した。次に、この混合物を真空下で濃縮して、揮発性構成成分の大部分を除去し、無水エタノール（５００ｍＬ）を加えた。得られた混合物を再度濃縮して、共沸により水を除去した。無水エタノール（５００ｍＬ）を加えることにより、再度この手順を繰り返し、次いで濃縮すると表題化合物が得られ、これをさらになんら単離または精製することなく、次工程で使用した。
（実施例６）
（２Ｚ）−２−（２−アミノ−５−クロロチアゾール−４−イル）−２−（３−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロポキシイミノ）酢酸トリエチルアミン塩の調製
【０１０６】
メタノール（２００ｍＬ）中の（２Ｚ）−２−（２−アミノチアゾール−４−イル）−２−（３−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロポキシイミノ）酢酸（約２１３ｇ、６２７ｍｍｏｌ）の混合物に、酢酸エチル（２．０Ｌ）を加えると、スラリーが形成した。Ｎ−クロロスクシンイミド（１０８．０ｇ、８１５ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を室温で３ｈ撹拌した。水（２．５Ｌ）、塩化ナトリウム（５１４ｇ）およびトリフルオロ酢酸（９３ｍＬ、１２５４ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を１５ｍｉｎ撹拌した。この混合物を１ｈ放置し、次に、下部の水層を分離して廃棄した。真空下で、有機層を容積約５００ｍＬまで濃縮した。アセトニトリル（１．０Ｌ）を加え、この混合物を真空下で濃縮した。再度アセトニトリル（１．０Ｌ）を加えてこの混合物を真空下で濃縮することにより、上記を繰り返し、容積約６００ｍＬにした。次に、この混合物を珪藻土（セライト）によりろ過した。トリエチルアミン（３５０ｍＬ、２５０８ｍｍｏｌ）を加えてこの混合物をこの０℃まで冷却し、この時点で沈殿物が形成した。この沈殿物を吸引ろ過により集め、アセトニトリル（１６５ｍＬ）ですすぎ、真空下、室温で乾燥すると、表題化合物（２２４ｇ、７９％収率）が、薄茶色の結晶性固体として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＭｅＯＨ−ｄ４）  δ  ４．１５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．１８  （ｍ，  ８Ｈ），  １．８６  （ｍ，  ２Ｈ），  １．４３  （ｓ，  ９Ｈ），  １．３０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．９Ｈｚ，  ９Ｈ）．
（実施例７）
１−［［（６Ｒ，７Ｒ）−７−［［（２Ｚ）−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）［（３−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロポキシ）イミノ］アセチル］アミノ］−２−カルボキシ−８−オキソ−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−３−イル（３−ｌ）］メチル］ピリジニウム塩酸塩の調製
【０１０７】
２０℃のジメチルアセトアミド（３００ｍＬ）中の（２Ｚ）−２−（２−アミノ−５−クロロチアゾール−４−イル）−２−（３−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロポキシイミノ）酢酸トリエチルアミン塩（４４．８８ｇ、９３．５ｍｍｏｌ）の混合物
に、ジチオビス（ベンゾチアゾール）（３２．７ｇ、９８．２ｍｍｏｌ）を加えた。トリフェニルホスフィン（２５．８ｇ、９８．２ｍｍｏｌ）を加え（わずかに、発熱）、得られた混合物を室温で３０ｍｉｎ撹拌し、この間に、反応混合物は赤茶色の濁りのない溶液になった。この反応混合物を０℃に冷却し、ジイソプロピルエチルアミン（１４．８ｍＬ、８５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を約５ｍｉｎ撹拌し、次に、１−［［（６Ｒ，７Ｒ）−７−アミノ−２−カルボキシ−８−オキソ−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−３−イル］メチル］ピリジニウムクロリド一塩酸塩（７−ＰＹＣＡ）（３４．００ｇ、８５．０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を０℃で１６ｈ撹拌し、次に、この反応混合物の内部温度を約０℃〜約５℃の間に維持しながら、塩酸の１，４−ジオキサン（４．０Ｍ、４４．６ｍＬ、１７８．５ｍｍｏｌ）溶液をゆっくりと加えた。得られた混合物を約２０ｍｉｎ撹拌し、次にろ紙によりろ過した。次に、室温で、このろ液を酢酸エチル（２．５Ｌ）に３０ｍｉｎかけてゆっくりと添加すると、沈殿物が形成した。得られたスラリーを室温で約１ｈ撹拌し、次に沈殿物を乾燥窒素雰囲気下、ろ過により集めた。湿潤ケーキを酢酸エチル（１×３００ｍＬ）およびメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１×３００ｍＬ）で洗浄し、次に、乾燥窒素の気流下、約２５ｍｉｎ乾燥した。この物質を次に、真空オーブン中、室温で４ｈ乾燥すると、表題化合物（５６．６ｇ、約８５％純度）が得られた。
（実施例８）
１−［［（６Ｒ，７Ｒ）−７−［［（２Ｚ）−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）［（３−アミノプロポキシ）イミノ］アセチル］アミノ］−２−カルボキシ−８−オキソ−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−３−イル］メチル］ピリジニウム二塩酸塩の調製
【０１０８】
−１０℃のメタノール（１８７．５ｍＬ、４７５１．９ｍｍｏｌ）に、内部温度を１５℃またはそれ未満に維持するのに十分な速度で、塩化アセチル（１３８．８ｍＬ、１９５２．１ｍｍｏｌ）を滴下添加した。添加後、この反応混合物を室温まで温め、１ｈ撹拌した。次に、この反応混合物を、−１０℃に冷却したメタノール（１８７．５ｍＬ）中の１−［［（６Ｒ，７Ｒ）−７−［［（２Ｚ）−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）［（３−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロポキシ）イミノ］アセチル］アミノ］−２−カルボキシ−８−オキソ−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−３−イル］メチル］ピリジニウム塩酸塩（５０．０ｇ、６５．１ｍｍｏｌ）の混合物に滴下添加した。反応混合物の内部温度を０℃またはそれ未満に維持するのに十分な速度で、上記の添加を行った。得られた混合物を０℃で約６ｈ撹拌し、次に、これをアセトン（１．５０Ｌ）に滴下添加した。得られた混合物を室温で１ｈ撹拌し、次に沈殿物を乾燥窒素雰囲気下、ろ過により集めた。この湿潤ケーキをイソプロピルアルコールと酢酸イソプロピル（１×６００ｍＬ）との混合物１：１ｖ／ｖにより、次に、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１×６００ｍＬ）で洗浄した。この物質を次に、真空オーブン中（窒素ブリードにより）室温で約４ｈ乾燥すると、表題化合物（３３．３４ｇ、約９３．１％純度）が得られた。表題化合物の２番目の収穫物を、同様の方法でろ液からも単離した（２．６ｇ、約９０．６％純度）。
（実施例９）
２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシン三塩酸塩の調製
【０１０９】
ＤＭＳＯ（２８０．０ｍＬ）とＤＭＦ（２１８．４ｍＬ）との混合物中の、バンコマイシン塩酸塩（５６．５６ｇ、３８．０７ｍｍｏｌ）の０℃の撹拌溶液に、ＤＭＳＯ（３０．８０ｍＬ）およびＤＭＦ（３０．８０ｍＬ）中の４−（４，６−ジメトキシ−１，３，
５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリド（１２．０４ｇ、４３．５１ｍｍｏｌ）のスラリーを加えた。得られた混合物を０℃で約２０分間撹拌し、次に、ＤＭＳＯ（３０．８０ｍＬ）およびＤＭＦ（９２．４０ｍＬ）中の１−［［（６Ｒ，７Ｒ）−７−［［（２Ｚ）−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）［（３−アミノプロポキシ）イミノ］アセチル］アミノ］−２−カルボキシ−８−オキソ−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−３−イル］メチル］ピリジニウム二塩酸塩（２８．００ｇ、３１．４ｍｍｏｌ）の混合物を加えた。得られた混合物を−１０℃に冷却し、１０分間撹拌した。反応温度を−５℃未満に維持する速度で、この混合物に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）（２７．５８ｍＬ、１５８．３４ｍｍｏｌ）を加えた。ＤＩＰＥＡを完全に添加した後、この反応混合物を−１０℃で約１時間撹拌した（この時点で、ＨＰＬＣ分析により、反応は実質的に完了したことが示された）。反応温度を０℃未満に維持する速度で、この反応混合物に、１Ｎ水性塩酸（１８６．７６ｍＬ）を加えた。塩酸をすべて添加した後、この反応混合物を１０℃まで温め、アセトニトリル（５６０．０ｍＬ）および水（９２．４０ｍＬ）の混合物を加えた。次に、約１時間かけて、この反応混合物にアセトン（１．４０Ｌ）を加え、得られたスラリーを約３０分間撹拌した。次に、このスラリーを窒素下でろ過し、固体（湿潤ケーキ）を集めた。この湿潤ケーキをアセトン（６２１．６０ｍＬ）で洗浄し、乾燥するまで窒素でパージした。アセトン（６２１．６０ｍＬ）をこの湿潤ケーキに加え、得られた混合物を撹拌してスラリーを形成させ、次に窒素下でろ過して固体を集め、この固体を約２０分間窒素でパージした。次に、この固体を真空下、室温で約１８ｈ乾燥すると、表題化合物が三塩酸塩（８１．９ｇ、３９．１２ｍｍｏｌ、９２．２％収率）として得られた。
（実施例１０）
２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシンの精製
【０１１０】
１５０ｍＬの実験室用ガラスカラムにポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）コポリマー（ＰＬＲＰ−Ｓ、１００Å、５０μＭ）を詰め、９８：２ｖ／ｖ酢酸緩衝液（１００ｍＭ）／アセトニトリル溶液により、約４０分間、流速１５ｍＬ／ｍｉｎで平衡にした。次に、９８：２ｖ／ｖ酢酸緩衝液／アセトニトリル溶液（１２０ｍＬ）中の、２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシン三塩酸塩（９．０ｇ、４．３０ｍｍｏｌ）の溶液を、上記の平衡にしたカラムに担持した。このカラムを９８：２ｖ／ｖ酢酸緩衝液／アセトニトリル溶液により、約１０分間、流速１５ｍＬ／ｍｉｎ、次に９３：７ｖ／ｖ酢酸緩衝液／アセトニトリル溶液により、約６２分間、流速１５ｍＬ／ｍｉｎ（この時点で、不純物の溶出が止まった）で溶出した。次に、このカラムを、（ｉ）９２：８ｖ／ｖ酢酸緩衝液／アセトニトリル溶液により、約８０分間、（ｉｉ）９１：９ｖ／ｖ酢酸緩衝液／アセトニトリル溶液により約１５分間、（ｉｉｉ）８９：１１ｖ／ｖ酢酸緩衝液／アセトニトリル溶液により、約２０分間、および（ｉｖ）８７：１３ｖ／ｖ酢酸緩衝液／アセトニトリル溶液により、２０〜３０分間（すべて、流速は１５ｍＬ／ｍｉｎ）、連続的に溶出した。溶出中、溶離液は、２５４ｎＭのＵＶ検出器を使用してモニタリングし、表題化合物を含有するフラクションを集めた。表題化合物を含有するフラクションを合わせると、表題化合物の溶液が、約１，５００ｍＬの酢酸緩衝液／アセトニトリル溶液中の三酢酸塩として得られた。
（実施例１１）
塩交換による２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チア
ゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシン二塩酸塩の形成。
【０１１１】
１５０ｍＬの実験室用ガラスカラムにポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）コポリマー（ＰＬＲＰ−Ｓ、１００Å、５０μＭ）を詰め、９８：２ｖ／ｖ酢酸緩衝液（１００ｍＭ）／アセトニトリル溶液により、約２．２５ｈ、流速１５ｍＬ／ｍｉｎで平衡にした。酢酸緩衝液／アセトニトリル溶液（約１５００ｍＬ）中の三酢酸塩としての表題化合物の溶液を水（４．６Ｌ）により希釈し、得られた溶液を４．６５ｈかけて、流速１５〜３０ｍＬ／ｍｉｎでカラム上に担持した。カラムを９８：２ｖ／ｖ２０ｍＭ水性塩酸／アセトニトリル溶液（６００ｍＬ）により、流速１０〜１５ｍＬ／ｍｉｎ（約４８ｍｉｎ）で溶出した。次に、カラムを８０：２０ｖ／ｖ１０ｍＭ水性塩酸／アセトニトリル溶液により、流速１５ｍＬ／ｍｉｎ、２５ｍｉｎで溶出した。溶出中、溶離液は、２５４ｎＭのＵＶ検出器を使用してモニタリングし、表題化合物を含有する溶離液を集めた。表題化合物を含有する溶液のｐＨは２．２（１３℃で）であった。この溶液のｐＨを、５ｗｔ．％炭酸水素ナトリウム水溶液を添加することにより４．２７（１４℃で）に調節した。得られた、表題化合物の二塩酸塩を主に含有する溶液は、全容積２１２ｍＬを有した。ＨＰＬＣにより、この溶液は、２６．０ｍｇ／ｍＬの表題化合物（遊離塩基当量として）を含有していると求められた。この溶液を冷水（２１２ｍＬ）により希釈すると、全容積４２４ｍＬを有しており、かつ１３ｍｇ／ｍＬの表題化合物（遊離塩基当量として）を含有する溶液が得られた。
（実施例１２）
安定試料の調製
Ａ．  一塩酸塩（ｘが約１である式Ｉ）
【０１１２】
５ｗｔ．％炭酸水素ナトリウム水溶液を添加することにより、２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］−カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシン二塩酸塩（ｄｉｈｙｄｒｏｃｈｏｌｏｒｉｄｅ）（１２４ｍＬ、１３．０ｍｇ／ｍＬ遊離塩基）の塩交換溶液のｐＨをｐＨ６．５に調節した。
【０１１３】
この溶液の試料（それぞれ２ｍＬ）を、通気穴付きゴム栓を備えた２１個のバイアルに入れた。このバイアルを真空下（４０〜６０ｍＴｏｒｒ）、−４０℃で約５日間、凍結乾燥すると、一塩酸塩（遊離塩基当量として２６ｍｇ）（ｘが約１である式Ｉ）を含有する２１個のバイアルが、凍結乾燥粉末として得られた。
【０１１４】
代表的なバイアルの分析により、この試料は水分含量が１．７％（カールフィッシャー）、残留溶媒（アセトニトリル）が０．６％（ＧＣ分析）、および純度が９０．４％（ＨＰＬＣ分析）を有することが示された。
Ｂ．一塩酸塩（ｘが約１である式Ｉ）、スクロースおよびグリシン
【０１１５】
２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシン一塩酸塩（７５ｍＬ、１３．０ｍｇ／ｍＬ、９７５ｍｇ）の溶液に、スクロース（９７５ｍｇ）およびグリシン（１．４６ｇ）を加えた。これらの物質が溶解
するまでこの混合物を掻き混ぜた。得られた溶液のｐＨは、６．７であった。
【０１１６】
この溶液の試料（それぞれ２ｍＬ）を、通気穴付きゴム栓を備えた２１個のバイアルに入れた。このバイアルを真空下（４０〜６０ｍＴｏｒｒ）、−４０℃で約５日間、凍結乾燥すると、一塩酸塩（遊離塩基当量として２６ｍｇ）、スクロース（２６ｍｇ）およびグリシン（３９ｍｇ）を含有する２１個のバイアルが凍結乾燥粉末として得られた。
【０１１７】
代表的なバイアルの分析により、この試料は水分含量が０．５％（カールフィッシャー）、残留溶媒（アセトニトリル）が０．６％（ＧＣ分析）、および純度が９０．４％（ＨＰＬＣ分析）を有することが示された。
Ｃ．  二塩酸塩（ｘが約２である式Ｉ）
【０１１８】
ｐＨ４．４を有する２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］−カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシン二塩酸塩（１２４ｍＬ、１３．０ｍｇ／ｍＬ）の塩交換溶液の試料（それぞれ２ｍＬ）を、通気穴付きゴム栓を備えた２１個のバイアルに入れた。このバイアルを真空下（４０〜６０ｍＴｏｒｒ）、−４０℃で約６日間、凍結乾燥すると、二塩酸塩（遊離塩基当量として２６ｍｇ）を含有する２１個のバイアルが凍結乾燥粉末として得られた。
【０１１９】
代表的なバイアルの分析により、この試料は水分含量が１．１％（カールフィッシャー）、残留溶媒（アセトニトリル）が０．３％（ＧＣ分析）、および純度が９０．１％（ＨＰＬＣ分析）を有することが示された。
Ｄ．  二塩酸塩（ｘが約２である式Ｉ）、スクロースおよびグリシン
【０１２０】
ｐＨ４．２７の２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシン二塩酸塩（１５０ｍＬ、１３．０ｍｇ／ｍＬ、１．９５ｇ）の塩交換溶液にスクロース（１．９５ｇ）を加えスクロースが溶解するまで、この混合物を撹拌した。この溶液（１０４ｍＬ）にグリシン（２．０３ｇ）を加えた。グリシンが溶解するまでこの混合物を掻き混ぜた。
【０１２１】
この溶液の試料（それぞれ２ｍＬ）を、通気穴付きゴム栓を備えた２１個のバイアルに入れた。このバイアルを真空下（４０〜６０ｍＴｏｒｒ）、−４０℃で約６日間、凍結乾燥すると、二塩酸塩（遊離塩基当量として２６ｍｇ）、スクロース（２６ｍｇ）およびグリシン（３９ｍｇ）を含有する２１個のバイアルが凍結乾燥粉末として得られた。
【０１２２】
代表的なバイアルの分析により、この試料は水分含量が０．５％（カールフィッシャー）、残留溶媒（アセトニトリル）が０．８％（ＧＣ分析）、および純度が９０．６％（ＨＰＬＣ分析）を有することが示された。
Ｅ．  三塩酸塩（ｘが約３である式Ｉ）
【０１２３】
１Ｎ水性塩酸を添加することにより、２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］ア
ミノ］−カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシン二塩酸塩の塩交換溶液のｐＨをｐＨ２．０に調節した。
【０１２４】
この溶液の試料（それぞれ２ｍＬ）を、通気穴付きゴム栓を備えた２１個のバイアルに入れた。このバイアルを真空下（４０〜６０ｍＴｏｒｒ）、−４０℃で約６日間、凍結乾燥すると、三塩酸塩（遊離塩基当量として２６ｍｇ）を含有する２１個のバイアルが凍結乾燥粉末として得られた。
【０１２５】
代表的なバイアルの分析により、この試料は水分含量が＜０．８％（カールフィッシャー）、残留溶媒（アセトニトリル）が０．３％（ＧＣ分析）、および純度が８４．５％（ＨＰＬＣ分析）を有することが示された。
Ｆ．  三塩酸塩（ｘが約３である式Ｉ）、スクロースおよびグリシン
【０１２６】
１Ｎ水性塩酸を滴下添加することにより、２６−［［［３−［［（Ｚ）−［１−（２−アミノ−５−クロロ−４−チアゾリル）−２−［［（６Ｒ，７Ｒ）−２−カルボキシ−８−オキソ−３−（ピリジニオメチル）−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクタ−２−エン−７−イル］アミノ］−２−オキソエチリデン］アミノ］オキシ］プロピル］アミノ］カルボニル］−２６−デカルボキシバンコマイシン二塩酸塩（１３．０ｍｇ／ｍＬ）、スクロース（１３．０ｍｇ／ｍＬ）およびグリシン（１９．５ｍｇ／ｍＬ）の溶液のｐＨをｐＨ２．０に調節した。
【０１２７】
この溶液の試料（それぞれ２ｍＬ）を、通気穴付きゴム栓を備えた２１個のバイアルに入れた。このバイアルを真空下（４０〜６０ｍＴｏｒｒ）、−４０℃で約５日間、凍結乾燥すると、三塩酸塩（遊離塩基当量として２６ｍｇ）、スクロース（２６ｍｇ）およびグリシン（３９ｍｇ）を含有する２１個のバイアルが凍結乾燥粉末として得られた。
【０１２８】
代表的なバイアルの分析により、この試料は水分含量が０．５％（カールフィッシャー）、残留溶媒（アセトニトリル）が０．１％（ＧＣ分析）、および純度が９１．３％（ＨＰＬＣ分析）を有することが示された。
（実施例１３）
安定試料の貯蔵および分析
【０１２９】
各タイプの安定試料（実施例１２Ａ〜Ｆ；６×６＝３６個のバイアル）を６個含有する２つのラックを用意した。１つのラックは、室温で引き出しの中で光から保護して貯蔵し、もう一方のラックは、冷蔵庫中、２〜８℃で貯蔵した。純度を決定するため、各タイプの安定試料の代表的なバイアルを、１、３、６および１２か月間の貯蔵後、ＨＰＬＣにより分析した。結果を表１〜６に示す。
【表１】
2018177817.tif 000012
【０１３０】
表１中のデータにより、塩を２〜８℃で１２か月間貯蔵した場合、三塩酸塩（ｘが約３である式Ｉ）の純度は、一塩酸塩または二塩酸塩のいずれよりもかなり低下したことが示される。三塩酸塩は、一塩酸塩および二塩酸塩の場合にそれぞれ３．０％および２．９％であるのと比較して、８．６％、純度が低下した。これらの結果を図１に示す。
【表２】
2018177817.tif 000013
【０１３１】
表２中のデータにより、塩を室温で１２か月間貯蔵した場合、三塩酸塩（ｘが約３である式Ｉ）の純度は、一塩酸塩または二塩酸塩のいずれよりもかなり低下したことが示される。三塩酸塩は、一塩酸塩および二塩酸塩の場合にそれぞれ２３．４％および２０．５％であるのと比較して、３４．２％、純度が低下した。これらの結果を図２に示す。
【表３】
2018177817.tif 000014
【０１３２】
表３中のデータにより、塩をスクロースおよびグリシンと共に製剤化して、２〜８℃で１２か月間貯蔵した場合、一塩酸塩、二塩酸、および三塩酸塩（ｘが、それぞれ約１、２および３である式Ｉ）の純度は、類似した％の低下があることが示される。一塩酸塩、二塩酸塩および三塩酸塩は、それぞれ１．９％、２．９％および１．２％純度が低下した。
【表４】
2018177817.tif 000015
【０１３３】
表４中のデータにより、塩をスクロースおよびグリシンと共に製剤化して、室温で１２か月間貯蔵した場合、三塩酸塩（ｘが約３である式Ｉ）の純度は、一塩酸塩または二塩酸塩のいずれよりもかなり低下したことが示される。三塩酸塩は、一塩酸塩および二塩酸塩の場合にそれぞれ８．９％および６．８％であるのと比較して、２６．３％、純度が低下した。これらの結果を図３に示す。
【表５】
2018177817.tif 000016
【０１３４】
表５中のデータにより、塩をスクロースおよびグリシンと共に製剤化して、室温で１２か月間貯蔵した場合、一塩酸塩（ｘが約１である式Ｉ）の純度は、ほとんど低下しなかったことが示される。一塩酸塩は、スクロースおよびグリシンと共に製剤化した一塩酸塩の場合に８．９％であるのと比較して、純度が２３．４％低下した。これらの結果を図４に示す。
【表６】
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【０１３５】
表６中のデータにより、塩をスクロースおよびグリシンと共に製剤化して、室温で１２か月間貯蔵した場合、二塩酸塩（ｘが約２である式Ｉ）の純度は、ほとんど低下しなかったことが示される。二塩酸塩は、スクロースおよびグリシンと共に製剤化した二塩酸塩の場合に６．８％であるのと比較して、純度が２０．５％低下した。これらの結果を図５に示す。
【０１３６】
まとめると、ｘが約１および約２である式Ｉの化合物、すなわち一塩酸塩および二塩酸塩は、塩を室温または２〜８℃のどちらかで１２か月間貯蔵すると、三塩酸塩よりもかなり安定である。さらに、一塩酸塩および二塩酸塩は、こうした塩をスクロースおよびグリシンと共に製剤化した場合、室温で１２か月間貯蔵すると、より安定である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【外国語明細書】
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