(57)【要約】【課題】多価アルコールと併用し易い保湿成分、および多価アルコールを含む組成物を提供すること。【解決手段】下記式（１）：    【化１】2018177768.tif 000033〔式中、  Ａは、炭素原子数１〜１７の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基であり、  Ｂは、炭素原子数２〜１８の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基であり、  Ｘは、水素原子、または炭素原子数１〜５の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基である。〕で表される化合物、および多価アルコールを含む、組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）：
【化１】
2018177768.tif 000031
〔式中、
Ａは、炭素原子数１〜１７の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基であり、
Ｂは、炭素原子数２〜１８の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基であり、
Ｘは、水素原子、または炭素原子数１〜５の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基である。〕で表される化合物、および多価アルコールを含む、組成物。
【請求項２】
前記式（１）で表される化合物が、下記式（２）〜（６）：
【化２】
2018177768.tif 000032
〔式中、
Ａは、炭素原子数１〜１７の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基であり、
Ｂは、炭素原子数２〜１８の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基である。〕のいずれか一つで表される化合物である、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
Ａが、炭素原子数１〜１１の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基である、請求項１または２記載の組成物。
【請求項４】
Ｂが、炭素原子数２〜８の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基である、請求項１〜３のいずれか一項記載の組成物。
【請求項５】
Ｂが、炭素原子数２もしくは３の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基である、請求項４記載の組成物。
【請求項６】
Ａ、ＢおよびＸにおける炭化水素基がアルキル基である、請求項１〜５のいずれか一項記載の組成物。
【請求項７】
多価アルコールが２価アルコールまたは３価アルコールである、請求項１〜６のいずれか一項記載の組成物。
【請求項８】
多価アルコールが、前記化合物１重量部に対して０．５重量部以上で組成物中に含まれる、請求項１〜７のいずれか一項記載の組成物。
【請求項９】
前記化合物の濃度が０．０１〜１０００ｍＭの濃度である、請求項１〜８のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１０】
前記組成物が保湿剤である、請求項１〜９のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１１】
前記組成物が皮膚バリア機能の向上能を有する、請求項１〜１０のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１２】
前記組成物が皮膚外用剤である、請求項１〜１１のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１３】
前記組成物が化粧料である、請求項１〜１１のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１４】
化粧料がリーブオン化粧料である、請求項１３記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｎ−アシルアミノ酸エステル、および多価アルコールを含む組成物などに関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚における水分の保持は、皮膚の健康を守るために重要である。皮膚における水分の保持のため、エモリエント剤、多価アルコール等の保湿剤が用いられている。例えば、より優れた保湿性を実現するために、エモリント剤および多価アルコールを併用する技術が報告されている（特許文献１）。
【０００３】
角層は、内部で水分を保持する保湿能と、外界からの外来物（例、異物、ウイルスおよび細菌）の侵入を抑制するバリア能を角層機能として備えている。このような角層機能に作用する物質として、皮脂、細胞間脂質、天然保湿因子等が知られている。
【０００４】
皮膚組織の顆粒層内に貯蔵されているプロフィラグリンは、角化の際に脱リン酸化を経てフィラグリンに分解される。フィラグリンは、顆粒層から角層に移動して、ケラチン繊維と結合及び凝集し、ケラチンパターンを形成する。その後、フィラグリンは、ウロカニン酸等の低分子に分解されて、保水、紫外線吸収に関与する天然保湿因子となる。そのため、フィラグリンの産生が促進されるほど、その分解物である天然保湿因子の量が増えて、肌の保湿能が向上すると考えられる。
【０００５】
角層を構成する角質細胞と角質細胞間に存在する細胞間脂質等により、外界からの外来物の侵入が抑制されている。そのため、角質細胞の数や大きさ等が不十分であると、角層に隙間が生じ、バリア能が低下する。
【０００６】
ケラチン１０等のケラチンとフィラグリンとが凝集した構造体を包含する角質細胞の周辺には、角質細胞の細胞膜を裏打ちするきわめて強靭で巨大な不溶性構造物である周辺帯が存在している。周辺帯の主な構造要素は、有棘細胞で産生されるインボルクリン、顆粒細胞で産生されるロリクリン等のタンパク質であり、これらがトランスグルタミナーゼ（ＴＧ）１等の酵素により架橋されている。そのため、フィラグリン、インボルクリン、トランスグルタミナーゼ１、ケラチン１０、ロリクリンは、角質細胞の形成に強く影響し、肌のバリア能と関連すると考えられる。
【０００７】
フィラグリン、インボルクリン、トランスグルタミナーゼ１、ケラチン１０、及びロリクリンの発現は、グリシルプロリン等の特定のペプチドにより促進されることが報告されている（特許文献２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２０００−５３５２４号公報
【特許文献２】国際公開第２０１４／１７５００１号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
エモリント剤および多価アルコールを併用する技術では、これらの成分の混合のため、肌への刺激の原因となる乳化剤を利用する必要があった。また、アシルアミノ酸エステルのように極性が高い油剤を安定的に配合するには、多量の乳化剤が必要となる（例、国際公開第９３/０５１２９号の実施例（表Ｉ、ＩＩ）を参照）。多量の乳化剤は、肌への刺激を一層高めることになり、また、皮膚のバリア機能を低下させる懸念があった。
【００１０】
また、グリシルプロリン等の特定のペプチドは、皮膚内のバリア組織を構成するタンパク質の発現促進作用は弱いだけでなく、保湿性やエモリエント性がないため、水分量の保持を改善するアプローチに利用できないという課題があった。
【００１１】
本発明の目的は、多価アルコールと併用し易い保湿成分、および多価アルコールを含む組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、鋭意検討した結果、特定のＮ−アシルアミノ酸エステルが保湿成分として有望であることを見出した。本発明者らはまた、このような特定のＮ−アシルアミノ酸エステルが多価アルコールと併用し易い優れた成分であることを見出した。かかる知見に基づき、本発明者らは、特定のＮ−アシルアミノ酸エステルおよび多価アルコールを含む組成物を提供することに成功し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
すなわち、本発明は、以下のとおりである。
〔１〕下記式（１）：
【００１４】
【化１】
2018177768.tif 000002
【００１５】
〔式中、
Ａは、炭素原子数１〜１７の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基であり、
Ｂは、炭素原子数２〜１８の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基であり、
Ｘは、水素原子、または炭素原子数１〜５の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基である。〕で表される化合物、および多価アルコールを含む、組成物。
〔２〕前記式（１）で表される化合物が、下記式（２）〜（６）：
【００１６】
【化２】
2018177768.tif 000003
【００１７】
〔式中、
Ａは、炭素原子数１〜１７の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基であり、
Ｂは、炭素原子数２〜１８の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基である。〕のいずれか一つで表される化合物である、〔１〕の組成物。
〔３〕Ａが、炭素原子数１〜１１の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基である、〔１〕または〔２〕のいずれかの組成物。
〔４〕Ｂが、炭素原子数２〜８の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基である、〔１〕〜〔３〕のいずれかの組成物。
〔５〕Ｂが、炭素原子数２もしくは３の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基である、〔４〕の組成物。
〔６〕Ａ、ＢおよびＸにおける炭化水素基がアルキル基である、〔１〕〜〔５〕のいずれかの組成物。
〔７〕多価アルコールが２価アルコールまたは３価アルコールである、〔１〕〜〔６〕のいずれかの組成物。
〔８〕多価アルコールが、前記化合物１重量部に対して０．５重量部以上で組成物中に含まれる、〔１〕〜〔７〕のいずれかの組成物。
〔９〕前記化合物の濃度が０．０１〜１０００ｍＭの濃度である、〔１〕〜〔８〕のいずれかの組成物。
〔１０〕前記組成物が保湿剤である、〔１〕〜〔９〕のいずれかの組成物。
〔１１〕前記組成物が皮膚バリア機能の向上能を有する、〔１〕〜〔１０〕のいずれかの組成物。
〔１２〕前記組成物が皮膚外用剤である、〔１〕〜〔１１〕のいずれかの組成物。
〔１３〕前記組成物が化粧料である、〔１〕〜〔１１〕のいずれかの組成物。
〔１４〕化粧料がリーブオン化粧料である、〔１３〕の組成物。
【発明の効果】
【００１８】
本発明の組成物は、有効量の濃度範囲内において、多価アルコールと安定的に配合することができる。
本発明の組成物はまた、多価アルコールを含むことにより濡れ性が良くなり、肌馴染みを改善することができる。
本発明の組成物はさらに、皮膚における水分量の保持を顕著に改善することができる。例えば、皮膚における水分量の保持の改善は、多価アルコールの保湿作用、およびＮ−アシルアミノ酸エステルによる保湿作用により、皮膚の外から、もしくは皮膚内において、またはその双方により、実現することができる。
本発明の組成物はまた、Ｎ−アシルアミノ酸エステルにおけるアシル鎖長が長い場合であっても細胞毒性が認められ得ないため、皮膚に対する安全性の観点から優れている。
本発明の組成物はさらに、疎水性有機溶媒（油）および／または親水性有機溶媒を含む場合であっても透明の性状を呈することができるため、外観的に高級感を付与することができ、更に肌への視覚上の影響を回避できる。したがって、本発明の組成物は、例えば、塗布による白残りを軽減できるという利点がある。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】図１は、オクタノイルバリン（実施例３：Ｃ８Ｖａｌ）、オクタノイルアラニン（実施例４：Ｃ８Ａｌａ）、グリシルプロリン（比較例２：Ｇｌｙ−Ｐｒｏ）およびバリン（比較例３：Ｖａｌ）の各保湿関連タンパク質遺伝子の増幅量（コントロールの増幅量に対する相対値）を示す図である。試験した保湿関連タンパク質遺伝子は、左から、フィラグリン、インボルクリン、トランスグルタミナーゼ１（ＴＧ１）、ケラチン１０、およびロリクリンをコードする遺伝子である（図２も同様）。
【図２】図２は、オクタノイルロイシン（実施例５：Ｃ８Ｌｅｕ）、オクタノイルイソロイシン（実施例６：Ｃ８Ｉｌｅ）、オクタノイルグリシン（実施例７：Ｃ８Ｇｌｙ）、グリシルプロリン（比較例２：Ｇｌｙ−Ｐｒｏ）およびバリン（比較例３：Ｖａｌ）の各保湿関連タンパク質遺伝子の増幅量（コントロールの増幅量に対する相対値）を示す図である。
【図３】図３は、ブタノイルバリン（実施例８：Ｃ４Ｖａｌ）、ヘキサノイルバリン（実施例９：Ｃ６Ｖａｌ）、オクタノイルバリン（実施例１０：Ｃ８Ｖａｌ）、デカノイルバリン（実施例１１：Ｃ１０Ｖａｌ）、ドデカノイルバリン（実施例１２：Ｃ１２Ｖａｌ）およびメタノイルバリン（実施例１３：Ｃ２Ｖａｌ）の各保湿関連タンパク質遺伝子の増幅量（コントロールの増幅量に対する相対値）を示す図である。試験した保湿関連タンパク質遺伝子は、左から、フィラグリン、インボルクリン、およびトランスグルタミナーゼ１（ＴＧ１）をコードする遺伝子である。
【図４】図４は、ラウロイルバリン（実施例１４：Ｃ１２Ｖａｌ）、デカノイルバリン（実施例１５：Ｃ１０Ｖａｌ）、オクタノイルバリン（実施例１６：Ｃ８Ｖａｌ）、ヘキサノイルバリン（実施例１７：Ｃ６Ｖａｌ）、ブタノイルバリン（実施例１８：Ｃ４Ｖａｌ）、およびアセチルバリン（実施例１９：Ｃ２Ｖａｌ）のフィラグリン遺伝子の増幅量（コントロールの増幅量に対する相対値）を示す図である。
【図５】図５は、ラウロイルアラニン（実施例２０：Ｃ１２Ａｌａ）、デカノイルアラニン（実施例２１：Ｃ１０Ａｌａ）、オクタノイルアラニン（実施例２２：Ｃ８Ａｌａ）、ヘキサノイルアラニン（実施例２３：Ｃ６Ａｌａ）、ブタノイルアラニン（実施例２４：Ｃ４Ａｌａ））のフィラグリン遺伝子の増幅量（コントロールの増幅量に対する相対値）を示す図である。
【図６】図６は、ラウロイルバリン（比較例４：Ｃ１２Ｖａｌ）、デカノイルバリン（実施例２５：Ｃ１０Ｖａｌ）、オクタノイルバリン（実施例２６：Ｃ８Ｖａｌ）、ヘキサノイルバリン（実施例２７：Ｃ６Ｖａｌ）、ブタノイルバリン（実施例２８：Ｃ４Ｖａｌ）、およびアセチルバリン（実施例２９：Ｃ２Ｖａｌ）の細胞（コントロールの吸光度に対する百分率）を示す図である。
【図７】図７は、エステラーゼの存在または非存在の条件下における、Ｃ８Ａｌａ−ｉＰＡの加水分解によるＮ−オクタノイルアラニン産出のＨＰＬＣ（島津社製）クロマトグラム（測定波長  ２１０ｎｍ）を示す図である。クロマトグラム上、溶出時間０．６分にＮ−オクタノイルアラニンのピークが認められ、溶出時１．７分にＣ８Ａｌａ−ｉＰＡのピークが認められる。Ｃ８Ａｌａ−ｉＰＡをエステラーゼと反応させた場合、１．７分のピークが減少し、０．６分に新たなピークが現れる。
【図８】図８は、エステラーゼの存在または非存在の条件下における、Ｃ８Ａｌａ−Ｅｔの加水分解によるＮ−オクタノイルアラニン産出のＨＰＬＣ（島津社製）クロマトグラム（測定波長  ２１０ｎｍ）を示す図である。クロマトグラム上、溶出時間０．６分にＮ−オクタノイルアラニンのピークが認められ、溶出時１．２分にＣ８Ａｌａ−Ｅｔのピークが認められる。Ｃ８Ａｌａ−Ｅｔをエステラーゼと反応させた場合、１．２分のピークが減少し、０．６分に新たなピークが現れる。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本発明は、上記式（１）で表される化合物、および多価アルコールを含む組成物を提供する。
【００２１】
（Ｉ）上記式（１）で表される化合物
Ａは、炭素原子数１〜１７の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基である。Ａにおける炭化水素基の炭素原子数は、好ましくは１６以下であり、より好ましくは１５以下であり、さらにより好ましくは１３以下であり、なおさらにより好ましくは１１以下であってもよい。Ａにおける炭化水素基の炭素原子数はまた、２以上、３以上、４以上、５以上、または６以上であってもよい。より具体的には、Ａにおける炭化水素基の炭素原子数は、好ましくは２〜１６、より好ましくは３〜１５、さらにより好ましくは４〜１３、なおさらにより好ましくは５〜１１であってもよい。Ａにおける炭化水素基は、飽和もしくは不飽和である。このような炭化水素基としては、例えば、アルキル、アルケニル、およびアルキニルが挙げられる。
【００２２】
Ａがアルキルである場合、アルキルは、炭素原子数１〜１７の直鎖もしくは分岐鎖のアルキルである。Ａにおけるアルキルの炭素原子数の例および好ましい例は、Ａにおける上述した炭化水素基の炭素原子数と同様である。Ａにおけるアルキルとしては、例えば、メチル、エチル、プロピル（例、ｎ−プロピル、イソプロピル）、ブチル（例、ｎ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル）、ペンチル（例、ｎ−ペンチル、ｉｓｏ−ペンチル、ｎｅｏ−ペンチル、１−エチルプロピル）、ヘキシル（例、ｎ−ヘキシル、ｉｓｏ−ヘキシル、１，１−ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、３，３−ジメチルブチル、２−エチルブチル）、ヘプチル（例、ｎ−ヘプチル、１−メチルヘキシル、２−メチルヘキシル、３−メチルヘキシル、１，１−ジメチルペンチル、２，２−ジメチルペンチル、３，３−ジメチルペンチル、２−エチルペンチル）、オクチル（例、ｎ−オクチル、１−メチルヘプチル、２−メチルヘプチル、３−メチルヘプチル、１，１−ジメチルヘキシル、２，２−ジメチルヘキシル、３，３−ジメチルヘキシル、２−エチルヘキシル）、ノニル（例、ｎ−ノニル、３，５，５−トリメチルヘキシル）、デカニル（例、ｎ−デカニル）、ウンデカニル（例、ｎ−ウンデカニル）、ドデカニル（例、ｎ−ドデカニル）、トリデカニル（例、ｎ−トリデカニル）、テトラデカニル（例、ｎ−テトラデカニル）、ペンタデカニル（例、ｎ−ペンタデカニル）、ヘキサデカニル（例、ｎ−ヘキサデカニル）、およびヘプタデカニル（例、ｎ−ヘプタデカニル）が挙げられる。
【００２３】
Ａがアルケニルである場合、アルケニルは、炭素原子数２〜１７の直鎖もしくは分岐鎖のアルケニルである。Ａにおけるアルケニルの炭素原子数の例および好ましい例は、Ａにおける上述した炭化水素基の炭素原子数と同様である。Ａにおけるアルケニルとしては、例えば、エテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、へキセニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル、ウンデセニル、ドデセニル、トリデセニル、テトラデセニル、ペンタデセニル、ヘキサデセニル、およびヘプタデセニルが挙げられる。
【００２４】
Ａがアルキニルである場合、アルキニルは、炭素原子数２〜１７の直鎖もしくは分岐鎖のアルキニルである。Ａにおけるアルキニルの炭素原子数の例および好ましい例は、Ａにおける上述した炭化水素基の炭素原子数と同様である。Ａにおけるアルキニルとしては、例えば、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、へキシニル、ヘプチニル、オクチニル、ノニニル、デシニル、ウンデシニル、ドデシニル、トリデシニル、テトラデシニル、ペンタデシニル、ヘキサデシニル、およびヘプタデシニルが挙げられる。
【００２５】
好ましくは、Ａは、炭素原子数１〜１７の直鎖もしくは分岐鎖のアルキルである。Ａにおけるアルキルの炭素原子数の例および好ましい例は、Ａにおける上述した炭化水素基の炭素原子数と同様である。このようなアルキルの具体例は、上述したとおりである。
【００２６】
特定の実施形態では、Ａにおける基の炭素原子数は、７〜１７（好ましくは７〜１１、より好ましくは８〜１１）であってもよい。Ａにおける基の炭素原子数が７以上である場合、上記式（１）で表される化合物は、角層機能の改善に関連する各種タンパク質をコードする遺伝子の発現を顕著に誘導でき、しかも細胞毒性が認められ得ないという利点がある。このようなタンパク質としては、例えば、皮膚組織内で天然保湿因子を生成し得るタンパク質（例、フィラグリン、プロフィラグリン）、および皮膚バリア能に関与し得るタンパク質（例、フィラグリン、インボルクリン、トランスグルタミナーゼ１、ケラチン１０、ロリクリン）が挙げられる。
【００２７】
別の特定の実施形態では、Ａにおける基の炭素原子数は、６以下であってもよい。Ａにおける基の炭素原子数が６以下である場合、上記式（１）で表される化合物は、分配係数（ＬｏｇＰ）が１〜４の範囲内にあり、更に分子量が５００Ｄａ以下であるため、経皮吸収性に優れ、角層中に高濃度で提供することができるという利点がある。
【００２８】
Ｂは、炭素原子数２〜１８の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基である。Ｂにおける炭化水素基の炭素原子数は、好ましくは２〜１５であり、より好ましくは２〜１２であり、さらにより好ましくは２〜８であり、なおさらにより好ましくは２〜６であり、特に好ましくは２または３であってもよい。Ｂにおける炭化水素基は、飽和もしくは不飽和である。このような炭化水素基としては、例えば、アルキル、アルケニル、およびアルキニルが挙げられる。
【００２９】
Ｂがアルキルである場合、アルキルは、炭素原子数２〜１８の直鎖もしくは分岐鎖のアルキルである。Ｂにおけるアルキルの炭素原子数の例および好ましい例は、Ｂにおける上述した炭化水素基の炭素原子数と同様である。Ｂにおけるアルキルとしては、例えば、エチル、プロピル（例、ｎ−プロピル、イソプロピル）、ブチル（例、ｎ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル）、ペンチル（例、ｎ−ペンチル、ｉｓｏ−ペンチル、ｎｅｏ−ペンチル、１−エチルプロピル）、ヘキシル（例、ｎ−ヘキシル、ｉｓｏ−ヘキシル、１，１−ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、３，３−ジメチルブチル、２−エチルブチル）、ヘプチル（例、ｎ−ヘプチル、１−メチルヘキシル、２−メチルヘキシル、３−メチルヘキシル、１，１−ジメチルペンチル、２，２−ジメチルペンチル、３，３−ジメチルペンチル、２−エチルペンチル）、オクチル（例、ｎ−オクチル、１−メチルヘプチル、２−メチルヘプチル、３−メチルヘプチル、１，１−ジメチルヘキシル、２，２−ジメチルヘキシル、３，３−ジメチルヘキシル、２−エチルヘキシル）、ノニル（例、ｎ−ノニル、３，５，５−トリメチルヘキシル）、デカニル（例、ｎ−デカニル）、ウンデカニル（例、ｎ−ウンデカニル）、ドデカニル（例、ｎ−ドデカニル）、トリデカニル（例、ｎ−トリデカニル）、テトラデカニル（例、ｎ−テトラデカニル）、ペンタデカニル（例、ｎ−ペンタデカニル）、ヘキサデカニル（例、ｎ−ヘキサデカニル）、ヘプタデカニル（例、ｎ−ヘプタデカニル）、およびオクタデカニル（例、ｎ−オクタデカニル）が挙げられる。
【００３０】
Ｂがアルケニルである場合、アルケニルは、炭素原子数２〜１８の直鎖もしくは分岐鎖のアルケニルである。Ｂにおけるアルケニルの炭素原子数の例および好ましい例は、Ｂにおける上述した炭化水素基の炭素原子数と同様である。Ｂにおけるアルケニルとしては、例えば、エテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、へキセニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル、ウンデセニル、ドデセニル、トリデセニル、テトラデセニル、ペンタデセニル、ヘキサデセニル、ヘプタデセニル、およびオクタデセニルが挙げられる。
【００３１】
Ｂがアルキニルである場合、アルキニルは、炭素原子数２〜１８の直鎖もしくは分岐鎖のアルキニルである。Ｂにおけるアルキニルの炭素原子数の例および好ましい例は、Ｂにおける上述した炭化水素基の炭素原子数と同様である。Ｂにおけるアルキニルとしては、例えば、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、へキシニル、ヘプチニル、オクチニル、ノニニル、デシニル、ウンデシニル、ドデシニル、トリデシニル、テトラデシニル、ペンタデシニル、ヘキサデシニル、ヘプタデシニル、およびオクタデシニルが挙げられる。
【００３２】
好ましくは、Ｂは、炭素原子数２〜１８の直鎖もしくは分岐鎖のアルキルである。Ｂにおけるアルキルの炭素原子数の例および好ましい例は、Ｂにおける上述した炭化水素基の炭素原子数と同様である。このようなアルキルの具体例は、上述したとおりである。
【００３３】
Ｘは、水素原子、または炭素原子数１〜５の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基である。Ｘにおける炭化水素基の炭素原子数は、例えば１〜４であってもよい。Ｘにおける炭化水素基は、飽和もしくは不飽和である。このような炭化水素基としては、例えば、アルキル、アルケニル、およびアルキニルが挙げられる。
【００３４】
Ｘがアルキルである場合、アルキルは、炭素原子数１〜５の直鎖もしくは分岐鎖のアルキルである。Ｘにおけるアルキルの炭素原子数の例および好ましい例は、Ｘにおける上述した炭化水素基の炭素原子数と同様である。Ｘにおけるアルキルとしては、例えば、メチル、エチル、プロピル（例、ｎ−プロピル、イソプロピル）、ブチル（例、ｎ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル）、およびペンチル（例、ｎ−ペンチル、ｉｓｏ−ペンチル、ｎｅｏ−ペンチル、１−エチルプロピル）が挙げられる。
【００３５】
Ｘがアルケニルである場合、アルケニルは、炭素原子数２〜５の直鎖もしくは分岐鎖のアルケニルである。Ｘにおけるアルケニルの炭素原子数の例および好ましい例は、Ｘにおける上述した炭化水素基の炭素原子数と同様である。Ｘにおけるアルケニルとしては、例えば、エテニル、プロペニル、ブテニル、およびペンテニルが挙げられる。
【００３６】
Ｘがアルキニルである場合、アルキニルは、炭素原子数２〜５の直鎖もしくは分岐鎖のアルキニルである。Ｘにおけるアルキニルの炭素原子数の例および好ましい例は、Ｘにおける上述した炭化水素基の炭素原子数と同様である。Ｘにおけるアルキニルとしては、例えば、エチニル、プロピニル、ブチニル、およびペンチニルが挙げられる。
【００３７】
好ましくは、Ｘは、炭素原子１〜５の直鎖もしくは分岐鎖のアルキルである。Ｘにおけるアルキルの炭素原子数の例および好ましい例は、Ｘにおける上述した炭化水素基の炭素原子数と同様である。このようなアルキルの具体例は、上述したとおりである。
【００３８】
特定の実施形態では、本発明の組成物は、上記式（１）〔式中、Ａは、炭素原子数２〜１０の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基であり、Ｂは、炭素原子数２〜１８の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基であり、Ｘは、炭素原子数１〜５の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基である。〕で表される化合物を含んでいてもよい。
【００３９】
好ましくは、上記式（１）で表される化合物は、上記式（２）〜（６）のいずれか一つで表される化合物である。上記式（２）〜（６）で表される化合物におけるＡおよびＢについて、炭化水素基（例、アルキル、アルケニル、アルキニル）および炭素原子数の定義、例、好ましい例および具体例は、式（１）において上述したものと同様である。
【００４０】
特定の実施形態では、上記式（２）〜（６）で表される化合物におけるＡおよびＢは、それぞれ独立して、異なる炭素原子数および異なる炭化水素基を有していてもよい。例えば、上記（２）〜（４）で表される化合物におけるＡが、炭素原子数２〜１７の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基であり、上記（５）および（６）で表される化合物におけるＡが、炭素原子数６以下、または７〜１７（好ましくは７〜１１、より好ましくは８〜１１）の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基であってもよい。また、上記（２）〜（４）で表される化合物におけるＡが、炭素原子数２〜１１の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基であり、上記（５）および（６）で表される化合物におけるＡが、炭素原子数７〜１１（好ましくは８〜１１）の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基であってもよい。さらに、上記（２）〜（４）で表される化合物におけるＡが、炭素原子数５〜１１の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基であり、上記（５）および（６）で表される化合物におけるＡが、炭素原子数７〜１１（好ましくは８〜１１）の直鎖もしくは分岐鎖の炭化水素基であってもよい。
【００４１】
式（１）〜（６）で表される化合物は、Ｎ−アシル中性アミノ酸エステル（中性アミノ酸誘導体）に対応する。式（１）〜（６）で表される化合物は、窒素原子、カルボニル基の炭素原子およびＸのいずれもが結合する炭素原子について光学異性体（Ｌ体もしくはＤ体）であってもよく、またはそれらの混合物であってもよい。好ましくは、式（１）〜（６）で表される化合物は、Ｌ体である。
【００４２】
本発明の組成物に含まれる化合物の調製は、Ｎ−アシル中性アミノ酸およびアルコールを反応させることにより適宜行うことができる。Ｎ−アシル中性アミノ酸およびアルコールの反応は、カルボン酸化合物およびアルコールからのエステルの生成のための一般的な方法により行うことができる。このような反応は、当該分野において周知である。例えば、反応は、触媒を適宜添加することにより行うことができる。反応はまた、適温（例、１５〜２００℃）で数時間（例、０．５〜８時間）行うことができる。より具体的には、本発明の組成物に含まれる化合物の調製は、後述する製造例Ａの方法により行うことができる。本発明の化合物の調製はまた、特開平１１−２４０８２８号に記載される方法においてＮ−アシル中性アミノ酸およびアルコールの種類を変更することを除き、特開平１１−２４０８２８号に記載される方法と同様にして行われてもよい。本発明の組成物に含まれる化合物は、有機合成分野で用いられる任意の精製方法（例、抽出）により適宜精製することができる。
【００４３】
（ＩＩ）多価アルコール
多価アルコールとしては、例えば、２価アルコール（例、エチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−プロパンジオール、１，２−ブチレングリコール、１，３−ブチレングリコール、２，３−ブチレングリコール、１，４−ブタンジオール、２−ブテン−１，４−ジオール、１，５−ペンタンジオール、１，２−ペンタンジオール、イソプレングリコール、ヘキシレングリコール、ジエチレングリコール、ジプロピレングリコール、モノグリセリド（モノアシルグリセロール））、３価アルコール（例、グリセリン、トリメチロールプロパン）、４価アルコール（例、ジグリセリン、ペンタエリスリトール、１，２，６−ヘキサントリオール）、より高い価数のアルコール、ならびにそれらの塩（例、後述するような塩）が挙げられる。より高い価数のアルコールとしては、例えば、置換されていてもよい糖アルコール（例、ソルビトール、マンニトール、スクロース、グルコース、マンノース等の単糖アルコール、トレハロース等の二糖アルコール、およびヒアルロン酸、キサンタンガム等の多糖アルコール）、ならびに上述したような２〜４価アルコールの重合物（例、ポリグリコール、ポリグリセリン）、ならびにそれらの塩（例、後述するような塩）が挙げられる。多価アルコールは、好ましくは、２〜４価アルコールであってもよく、より好ましくは、２価または３価アルコールであってもよい。
【００４４】
（ＩＩＩ）組成物の詳細
本発明の組成物における式（１）で表される化合物の含量は、式（１）で表される化合物単独により、または式（１）で表される化合物と他の成分との組合せにより多価アルコールを含む組成物の保湿性を改善できる限り特に限定されない。このような成分としては、例えば、ゲル化剤（例、ジブチルラウロイルグルタミド）、増粘剤（例、カルボキシビニルポリマー等の後述の増粘剤）が挙げられる。本発明の組成物では、式（１）で表される化合物を他の成分と組み合わせて用いる場合、他の成分の含量を低減させつつ組成物の保湿性を改善することができる。式（１）で表される化合物を他の成分と組み合わせて用いる場合、式（１）で表される化合物の含量は、保湿性の改善のために他の成分の含量の低減に貢献できる量である限り特に限定されない。例えば、式（１）で表される化合物と他の成分とを組み合わせて用いる場合、本発明の組成物における式（１）で表される化合物と他の成分との重量比は、特に限定されるものではないが、式（１）で表される化合物１重量部に対して、他の成分が例えば４重量部未満、好ましくは２重量部未満、より好ましくは１重量部未満、さらにより好ましくは０．７５重量部未満、特に好ましくは０．５重量部未満または０．２５重量部未満であってもよい。
【００４５】
より具体的には、式（１）で表される化合物単独による、または式（１）で表される化合物と他の成分との組合せによる、本発明の組成物における式（１）で表される化合物の含量は、他の成分の有無、ならびに式（１）で表される化合物、多価アルコール、および他の成分の種類および量等によっても変動するが、例えば０．０１％（ｗｔ）以上、好ましくは０．０５％（ｗｔ）以上、より好ましくは０．１０％（ｗｔ）以上、さらにより好ましくは０．２０％（ｗｔ）以上であってもよい。含量はまた、例えば９０％（ｗｔ）以下、好ましくは８０％（ｗｔ）以下、より好ましくは７０％（ｗｔ）以下、さらにより好ましくは６０％（ｗｔ）以下であってもよい。より具体的には、含量は、例えば０．０１〜９０％（ｗｔ）、好ましくは０．０５〜８０％（ｗｔ）、より好ましくは０．１０〜７０％（ｗｔ）、さらにより好ましくは０．２０〜６０％（ｗｔ）であってもよい。本発明の組成物は、式（１）で表される化合物を１種または２種以上（例、２種、３種、４種）含んでいてもよい。
【００４６】
本発明の組成物における多価アルコールの含量は、例えば０．１％（ｗｔ）以上、好ましくは０．５％（ｗｔ）以上、より好ましくは１．０％（ｗｔ）以上、さらにより好ましくは２．０％（ｗｔ）以上であってもよい。含量はまた、例えば９９％（ｗｔ）以下、好ましくは９８％（ｗｔ）以下、より好ましくは９６％（ｗｔ）以下、さらにより好ましくは９５％（ｗｔ）以下であってもよい。より具体的には、含量は、例えば０．１〜９９％（ｗｔ）、好ましくは０．５〜９８％（ｗｔ）、より好ましくは１．０〜９６％（ｗｔ）、さらにより好ましくは２．０〜９５％（ｗｔ）であってもよい。本発明の組成物は、多価アルコールを１種または２種以上（例、２種、３種、４種）含んでいてもよい。
【００４７】
本発明の組成物では、他の成分の有無、ならびに式（１）で表される化合物、多価アルコール、および他の成分の種類および量等によっても変動するが、式（１）で表される化合物１重量部に対する多価アルコールの量は、例えば０．５重量部以上、好ましくは０．７５重量部以上、より好ましくは１．０重量部以上、さらにより好ましくは２．０重量部以上、特に好ましくは５．０重量部以上であってもよい。このような量はまた、例えば２００重量部以下、好ましくは１００重量部以下、より好ましくは８０重量部以下、さらにより好ましくは６０重量部以下、特に好ましくは４０重量部以下であってもよい。より具体的には、式（１）で表される化合物１重量部に対する多価アルコールの量は、例えば０．５〜２００重量部、好ましくは０．７５〜１００重量部、より好ましくは１．０〜８０重量部、さらにより好ましくは２．０〜６０重量部、特に好ましくは５．０〜４０重量部であってもよい。
【００４８】
本発明の組成物は、水分をさらに含んでいてもよい。本発明の組成物における水分は、式（１）で表される化合物、および多価アルコールに対して、水溶液を添加することにより付与され得る。水溶液は、緩衝能を有していてもいなくてもよい。水溶液としては、例えば、水（例、蒸留水、滅菌蒸留水、精製水、生理食塩水）、リン酸水溶液（緩衝液）、Ｔｒｉｓ−塩酸緩衝液、ＴＥ（Ｔｒｉｓ−ＥＤＴＡ）緩衝液、炭酸−重炭酸緩衝液、ホウ酸水溶液（緩衝液）、酒石酸水溶液（緩衝液）、塩酸−塩化カリウム緩衝液、グリシン−塩酸緩衝液、グリシン−水酸化ナトリウム緩衝液、クエン酸水溶液（緩衝液）、クエン酸−リン酸緩衝液、酢酸水溶液（緩衝液）が挙げられる。本発明の組成物における水分は、１種または２種以上（例、２種、３種、４種）の水溶液に由来するものであってもよい。
【００４９】
本発明の組成物における水分含量は、特に限定されず、本発明の組成物の処方によっても変動するが、例えば１０％（ｗｔ）以上、好ましくは２０％（ｗｔ）以上、より好ましくは２５％（ｗｔ）以上、さらにより好ましくは３０％（ｗｔ）以上であってもよい。水分含量はまた、例えば９５％（ｗｔ）以下、好ましくは９０％（ｗｔ）以下、より好ましくは８５％（ｗｔ）以下、さらにより好ましくは８０％（ｗｔ）以下であってもよい。より具体的には、水分含量は、例えば１０〜９５％（ｗｔ）、好ましくは２０〜９０％（ｗｔ）、より好ましくは２５〜８５％（ｗｔ）、さらにより好ましくは３０〜８０％（ｗｔ）であってもよい。
【００５０】
本発明の組成物では、他の成分の有無、ならびに式（１）で表される化合物、多価アルコール、および他の成分の種類および量、ならびに本発明の組成物の処方等によっても変動するが、水分に対する式（１）で表される化合物の重量百分率は、例えば０．１％以上、好ましくは０．１５％以上、より好ましくは０．２％以上、さらにより好ましくは０．２５％以上、特に好ましくは０．３％以上であってもよい。重量百分率はまた、例えば９９％以下、好ましくは９８％以下、より好ましくは９７％以下、さらにより好ましくは９６％以下、特に好ましくは９５％以下であってもよい。より具体的には、重量百分率は、例えば０．１〜９９％、好ましくは０．５〜９８％、より好ましくは１．０〜９７％、さらにより好ましくは１．５〜９６％、特に好ましくは２．０〜９５％であってもよい。
【００５１】
本発明の組成物は、上述した成分に加えて、任意の作用（例、生物学的作用、または化学的作用）を有する１種または２種以上（例、２種、３種、４種）の有効成分をさらに含んでいてもよい。このような有効成分としては、例えば、低分子化合物が挙げられる。
【００５２】
用語「低分子化合物」とは、分子量１５００以下の化合物をいう。低分子化合物は、天然化合物または合成化合物である。低分子化合物の分子量は、１２００以下、１０００以下、９００以下、８００以下、７００以下、６００以下、５００以下、４００以下、または３００以下であってもよい。低分子化合物の分子量はまた、３０以上、４０以上、または５０以上であってもよい。低分子化合物としては、例えば、アミノ酸、オリゴペプチド、ビタミン、ヌクレオシド、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、単糖、オリゴ糖、脂質、脂肪酸、およびそれらの代謝物、ならびにそれらの塩が挙げられる。このような低分子化合物は、保湿剤、美白剤、または育毛剤であってもよい。
【００５３】
塩としては、例えば、無機酸との塩、有機酸との塩、無機塩基との塩、有機塩基との塩、およびアミノ酸との塩が挙げられる。無機酸との塩としては、例えば、塩化水素、臭化水素、リン酸、硫酸、硝酸との塩が挙げられる。有機酸との塩としては、例えば、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、乳酸、酒石酸、フマル酸、シュウ酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ピロリドンカルボン酸との塩が挙げられる。無機塩基との塩としては、例えば、アルカリ金属（例、ナトリウム、カリウム）、アルカリ土類金属（例、カルシウム、マグネシウム）、および亜鉛、アルミニウム等の他の金属、ならびにアンモニウムとの塩が挙げられる。有機塩基との塩としては、例えば、トリメチルアミン、トリエチルアミン、プロピレンジアミン、エチレンジアミン、ピリジン、エタノールアミン、モノアルキルエタノールアミン、ジアルキルエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミンとの塩が挙げられる。アミノ酸との塩としては、例えば、塩基性アミノ酸（例、アルギニン、ヒスチジン、リジン、オルニチン）、および酸性アミノ酸（例、アスパラギン酸、グルタミン酸）との塩が挙げられる。
【００５４】
本発明の組成物はまた、増粘剤、安定化剤、ｐＨ調整剤、保存剤、紫外線防止剤、香料、色素等の他の成分を含んでいてもよい。これらの成分の具体的な種類および量は、適宜設定することができる。
【００５５】
増粘剤としては、例えば、カラギーナン、デキストリン、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、カルボキシビニルポリマー（カルボマー）、（アクリル酸／アクリル酸アルキル（Ｃ１０−３０））コポリマー、キサンタンガムが挙げられる。
【００５６】
安定化剤としては、例えば、アスコルビン酸、ピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡが挙げられる。
【００５７】
ｐＨ調整剤としては、例えば、上述したような水溶液（緩衝液）、塩酸等の酸性物質、水酸化ナトリウム等の塩基性物質が挙げられる。
【００５８】
保存剤としては、例えば、パラオキシ安息香酸エチル、安息香酸ナトリウム、サリチル酸、ソルビン酸、パラベン（例、メチルパラベン、プロピルパラベン）、亜硫酸水素ナトリウムが挙げられる。
【００５９】
紫外線防止剤としては、例えば、紫外線吸収剤（例、ｔ−ブチルメトキシジベンゾイルメタン、メトキシケイヒ酸エチルヘキシル、オキシベンゾン−３）、および紫外線散乱剤（例、酸化チタン、酸化亜鉛）が挙げられる。
【００６０】
香料としては、例えば、リモネン、シトラール、メントール、バラ油、ローズ油が挙げられる。
【００６１】
色素としては、例えば、有機顔料（例、赤色２０１号等の赤色顔料、青色４０４号等の青色顔料、橙色２０３号等の橙色顔料、黄色２０５号等の黄色顔料、緑色３号等の緑色顔料、ジルコニウムレーキ等の有機レーキ顔料、クロロフィル等の天然色素）、および無機顔料（例、酸化チタン等の白色顔料、酸化鉄等の有色顔料、タルク等の体質顔料、マイカ等のパール顔料）が挙げられる。
【００６２】
本発明の組成物は、任意の状態の組成物として調製することができる。このような組成物としては、例えば、液状組成物、クリーム状組成物、乳化状組成物、粉状組成物、スティック状組成物、シート含浸型組成物が挙げられる。本発明の組成物は、例えば、化粧料、医薬品、医薬部外品、雑貨等の製品、およびそれらの原料として有用である。
【００６３】
本発明の組成物はまた、被験体（例、ヒト等の哺乳動物、鳥類、爬虫類等の動物）の所望の部位（例、皮膚、毛髪、体毛、頭皮）に有効量（例、１ｍｇ〜１００ｇ）を塗布することにより、用いることができる。好ましくは、本発明の組成物は、ヒトに適用される。本発明の組成物が適用される被験体の状態は、上記部位が健常な状態を有するものであってもよく、または上記部位が異常な状態（例、疾患）を有するものであってもよい。このような異常な状態としては、例えば、肌荒れ、皮膚の乾燥、鱗屑、ターンオーバーの乱れ、皮膚疾患（例、アトピー性皮膚炎等の皮膚炎）が挙げられる。
【００６４】
本発明の組成物はまた、角層機能の改善に関連する上述の各種タンパク質をコードする遺伝子の発現を誘導する有効量の化合物を含むことができる。このような有効量は、遺伝子の発現を誘導できる量である限り特に限定されないが、遺伝子発現の誘導に十分な量が好ましい。このような十分な量は、例えば０．０１〜１０００ｍＭの濃度であってもよい。このような十分な量はまた、化合物の使用量を低減する観点から、５００ｍＭ以下、１００ｍＭ以下、５０ｍＭ以下、１０ｍＭ以下、５ｍＭ以下、または１ｍＭ以下であってもよい。
【００６５】
好ましくは、本発明の組成物は、保湿剤であってもよい。本発明の組成物が保湿剤である場合、本発明の保湿剤は、保湿作用を通じて、肌荒れ等の状態の予防、抑制、もしくは治療に優れた効果を発揮することができ、また、抗しわ、抗しみ、もしくは抗そばかす効果も発揮することができる。
【００６６】
本発明の組成物はまた、化粧料または外用剤である。本発明の化粧料または外用剤は、常法に従って、例えば所望の部位（例、皮膚、毛髪、頭皮）に適用可能な任意の形態の製剤とすることができる。
【００６７】
本発明の化粧料または外用剤は、好ましくは、皮膚、毛髪、または頭皮に対する化粧料または外用剤として用いることができる。皮膚に対する化粧料または外用剤としては、例えば、乳液、化粧水、クリーム、ジェル、美容液、フェイスマスクが挙げられる。毛髪に対する化粧料または外用剤としては、例えば、毛髪用乳液、ヘアトリートメント、ヘアコンディショナー、シャンプー、ヘアローションが挙げられる。頭皮に対する化粧料または外用剤としては、例えば、育毛剤が挙げられる。好ましい化粧料としては、例えば、リーブオン化粧料、化粧水、乳液、クリーム、フェイスマスクが挙げられる。好ましい外用剤としては、例えば、軟膏剤、クリーム剤、ムース剤が挙げられる。
【実施例】
【００６８】
次に実施例を示して本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。以下の製造例において原料として用いたＮ−アシル中性アミノ酸は全てＬ体である。
【００６９】
製造例Ａ：アルコールおよびＮ−アシル中性アミノ酸からのＮ−アシル中性アミノ酸エステルの合成
エタノール（３２０ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）またはイソプロピルアルコール（４１８ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）にＮ−アシル中性アミノ酸（０．１４ｍｏｌ）を添加し、混合した。混合物にｐ−トルエンスルホン酸一水和物（５．３ｇ、０．０３ｍｏｌ）を添加し、アルコールが蒸発されないように還流管を付け、バス温１２５℃で３時間撹拌した。生成物を真空減圧により濃縮した後、生成物を酢酸エチル（６００ｍＬ）で希釈し、飽和重曹水（２４０ｍＬ）で４回洗浄した。有機相をさらに超純水（４８０ｍＬ）で２回洗浄した。硫酸ナトリウムによって有機層から水を除去した。更に、酸ナトリウムをろ過して除去した後、有機層を真空減圧により濃縮して生成物（アシル中性アミノ酸エステル）を得た。
【００７０】
製造例１：Ｎ−オクタノイルアラニンイソプロピルエステル（Ｃ８Ａｌａ−ｉＰＡ）の製造
【００７１】
【化３】
2018177768.tif 000004
【００７２】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−オクタノイルアラニン（Ｃ８Ａｌａ、３０．００ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはイソプロピルアルコール（４１８ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って反応させることによりＣ８Ｖａｌ−ｉＰＡを得た（収率９７％）。
【００７３】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｒ．ｔ．）：δ６．０７７−６．０９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），５．０１５−５．０７８（１Ｈ，ｓｅｐ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），４．５１１−４．５８３（１Ｈ，ｑｕｉｎｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），２．１８４−２．２２２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），１．５９９−１．６６９（２Ｈ，ｑｕｉｎｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．３７２−１．３９０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）１．２４４−１．２９８（１４Ｈ，ｍ），０．８５９−０．８９２（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）ｐｐｍ．
【００７４】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）  ｍ／ｚ  ２５８．２［Ｍ＋Ｈ］＋，２８０．１［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００７５】
製造例２：Ｎ−オクタノイルバリンイソプロピルエステル（Ｃ８Ｖａｌ−ｉＰＡ）の製造
【００７６】
【化４】
2018177768.tif 000005
【００７７】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−オクタノイルバリン（Ｃ８Ｖａｌ、３４．０６ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはイソプロピルアルコール（４１８ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って８時間反応されることによりＣ８Ｖａｌ−ｉＰＡを得た（収率９３％）。
【００７８】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｒ．ｔ．）：δ５．９５５−５．９７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），５．０２４−５．０８７（１Ｈ，ｓｅｐ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），４．５２８−４．５６１（１Ｈ，ｄｄ），２．２１６−２．２５４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），２．１３５−２．１８２（１Ｈ，ｓｅｘ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．６１０−１．７６５（２Ｈ，ｑｕｉｎｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．２５６−１．３１４（１４Ｈ，ｍ），０．８６０−０．９４９（９Ｈ，ｍ）ｐｐｍ．
【００７９】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）  ｍ／ｚ  ２８６．２［Ｍ＋Ｈ］＋，３０８．１［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００８０】
製造例３：Ｎ−オクタノイルグリシンイソプロピルエステル（Ｃ８Ｇｌｙ−ｉＰＡ）の製造
【００８１】
【化５】
2018177768.tif 000006
【００８２】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−オクタノイルグリシン（Ｃ８Ｇｌｙ、２８．１８ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはイソプロピルアルコール（４１８ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って反応させることによりＣ８Ｇｌｙ−ｉＰＡを得た（収率９７％）。
【００８３】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）  ｍ／ｚ  ２４４．１［Ｍ＋Ｈ］＋，２６６．１［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００８４】
製造例４：Ｎ−オクタノイルイソロイシンイソプロピルエステル（Ｃ８Ｉｌｅ−ｉＰＡ）の製造
【００８５】
【化６】
2018177768.tif 000007
【００８６】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−オクタノイルイソロイシン（Ｃ８Ｉｌｅ、３６．０３ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはイソプロピルアルコール（４１８ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って反応させることによりＣ８Ｉｌｅ−ｉＰＡを得た（収率７１％）。
【００８７】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）  ｍ／ｚ  ３００．２［Ｍ＋Ｈ］＋，３２２．２［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００８８】
製造例５：Ｎ−オクタノイルロイシンイソプロピルエステル（Ｃ８Ｌｅｕ−ｉＰＡ）の製造
【００８９】
【化７】
2018177768.tif 000008
【００９０】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−オクタノイルロイシン（Ｃ８Ｌｅｕ、３６．０３ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはイソプロピルアルコール（４１８ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って反応させることによりＣ８Ｌｅｕ−ｉＰＡを得た（収率９７％）。
【００９１】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）  ｍ／ｚ  ３００．２［Ｍ＋Ｈ］＋，３２２．２［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００９２】
製造例６：Ｎ−ラウロイルイソロイシンイソプロピルエステル（Ｃ１２Ｉｌｅ−ｉＰＡ）の製造
【００９３】
【化８】
2018177768.tif 000009
【００９４】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−ラウロイルイソロイシン（Ｃ１２Ｉｌｅ、４３．８９ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはイソプロピルアルコール（４１８ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って反応させることによりＣ１２Ｉｌｅ−ｉＰＡを得た（収率８５％）。
【００９５】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）  ｍ／ｚ  ３５６．３［Ｍ＋Ｈ］＋，３７８．２［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００９６】
製造例７：Ｎ−オクタノイルアラニンエチルエステル（Ｃ８Ａｌａ−Ｅｔ）の製造
【００９７】
【化９】
2018177768.tif 000010
【００９８】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−オクタノイルアラニン（Ｃ８Ａｌａ、３０．００ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはエタノール（３２０ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って反応させることによりＣ８Ｖａｌ−Ｅｔを得た（収率９０％）。
【００９９】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｒ．ｔ．）：δ６．０６３−６．０７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），４．５５２−４．６２４（１Ｈ，ｑｕｉｎｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），４．１７６−４．２３０（２Ｈ，q，Ｊ＝７．２Ｈｚ），２．１８６−２．２２４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），１．５９９−１．６７０（２Ｈ，ｑｕｉｎｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．３８９−１．４０７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）１．２６７−１．３０２（１１Ｈ，ｍ），０．８６０−０．８９２（３Ｈ，ｍ）ｐｐｍ．
【０１００】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）  ｍ／ｚ  ２４４．２［Ｍ＋Ｈ］＋，２６６．１［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０１０１】
製造例８：Ｎ−オクタノイルバリンエチルエステル（Ｃ８Ｖａｌ−Ｅｔ）の製造
【０１０２】
【化１０】
2018177768.tif 000011
【０１０３】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−オクタノイルバリン（Ｃ８Ｖａｌ、３４．０６ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはエタノール（３２０ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って８時間反応させることによりＣ８Ｖａｌ−Ｅｔを得た（収率９３％）。
【０１０４】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｒ．ｔ．）：δ５．９５２−５．９７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），４．５５７−４．５９１（１Ｈ，ｄｄ），４．１５９−４．２４１（２Ｈ，ｍ），２．２１７−２．２５５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），２．１２１−２．２０２（１Ｈ，ｓｅｘ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．６１０−１．６８１（２Ｈ，ｑｕｉｎｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．２６８−１．３０３（１１Ｈ，ｍ），０．８６０−０．９５２（９Ｈ，ｍ）ｐｐｍ．
【０１０５】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）  ｍ／ｚ  ２７２．２［Ｍ＋Ｈ］＋，２９４．１［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０１０６】
製造例９：Ｎ−オクタノイルグリシンエチルエステル（Ｃ８Ｇｌｙ−Ｅｔ）の製造
【０１０７】
【化１１】
2018177768.tif 000012
【０１０８】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−オクタノイルグリシン（Ｃ８Ｇｌｙ、２８．１８ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはエタノール（３２０ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って反応させることによりＣ８Ｇｌｙ−Ｅｔを得た（収率９６％）。
【０１０９】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）  ｍ／ｚ  ２３０．２［Ｍ＋Ｈ］＋，２５２．１［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０１１０】
製造例１０：Ｎ−オクタノイルイソロイシンエチルエステル（Ｃ８Ｉｌｅ−Ｅｔ）の製造
【０１１１】
【化１２】
2018177768.tif 000013
【０１１２】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−オクタノイルイソロイシン（Ｃ８Ｉｌｅ、３６．０３ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはエタノール（３２０ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って反応させることによりＣ８Ｉｌｅ−Ｅｔを得た（収率９７％）。
【０１１３】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）  ｍ／ｚ  ２８６．２［Ｍ＋Ｈ］＋，３０８．２［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０１１４】
製造例１１：Ｎ−オクタノイルロイシンエチルエステル（Ｃ８Ｌｅｕ−Ｅｔ）の製造
【０１１５】
【化１３】
2018177768.tif 000014
【０１１６】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−オクタノイルロイシン（Ｃ８Ｌｅｕ、３６．０３ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはエタノール（３２０ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って反応させることによりＣ８Ｇｌｙ−Ｅｔを得た（収率９８％）。
【０１１７】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）  ｍ／ｚ  ２８６．２［Ｍ＋Ｈ］＋，３０８．２［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０１１８】
製造例１２：Ｎ−ラウロイルイソロイシンエチルエステル（Ｃ１２Ｉｌｅ−Ｅｔ）の製造
【０１１９】
【化１４】
2018177768.tif 000015
【０１２０】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−ラウロイルイソロイシン（Ｃ１２Ｉｌｅ、４３．８９ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはエタノール（３２０ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って反応させることによりＣ１２Ｉｌｅ−Ｅｔを得た（収率９１％）。
【０１２１】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）  ｍ／ｚ  ３４２．３［Ｍ＋Ｈ］＋，３６４．３［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０１２２】
製造例１３：Ｎ−ラウロイルロイシンエチルエステル（Ｃ１２Ｌｅｕ−Ｅｔ）の製造
【０１２３】
【化１５】
2018177768.tif 000016
【０１２４】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−ラウロイルロイシン（Ｃ１２Ｌｅｕ、４３．８９ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはエタノール（３２０ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って反応させることによりＣ１２Ｌｅｕ−Ｅｔを得た（収率８８％）。
【０１２５】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）  ｍ／ｚ  ３４２．３［Ｍ＋Ｈ］＋，３６４．３［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０１２６】
製造例１４：Ｎ−ラウロイルバリンエチルエステル（Ｃ１２Ｖａｌ−Ｅｔ）の製造
【０１２７】
【化１６】
2018177768.tif 000017
【０１２８】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−ラウロイルバリン（Ｃ１２Ｖａｌ、４１．９２ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはエタノール（３２０ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って８時間反応させることによりＣ１２Ｖａｌ−Ｅｔを得た（収率８７％）。
【０１２９】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）  ｍ／ｚ  ３２８．３［Ｍ＋Ｈ］＋，３５０．２［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０１３０】
製造例１５：Ｎ−デカノイルバリンイソプロピルエステル（Ｃ１０Ｖａｌ−ｉＰＡ）の製造
【０１３１】
【化１７】
2018177768.tif 000018
【０１３２】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−デカノイルバリン（Ｃ１０Ｖａｌ、３８ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはイソプロピルアルコール（４１８ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って反応させることによりＣ１０Ｖａｌ−ｉＰＡを得た（収率９８％）。
【０１３３】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）ｍ／ｚ  ３１４．５［Ｍ＋Ｈ］＋，３３６．４［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０１３４】
製造例１６：Ｎ−デカノイルアラニンイソプロピルエステル（Ｃ１０Ａｌａ−ｉＰＡ）の製造
【０１３５】
【化１８】
2018177768.tif 000019
【０１３６】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−デカノイルアラニン（Ｃ１０Ａｌａ、３４．６ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはイソプロピルアルコール（４１８ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って反応させることによりＣ１０Ａｌａ−ｉＰＡを得た（収率９７％）。
【０１３７】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）ｍ／ｚ  ２８５．４［Ｍ＋Ｈ］＋，３０７．４［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０１３８】
製造例１７：Ｎ−デカノイルロイシンイソプロピルエステル（Ｃ１０Ｌｅｕ−ｉＰＡ）の製造
【０１３９】
【化１９】
2018177768.tif 000020
【０１４０】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−デカノイルロイシン（Ｃ１０Ｌｅｕ、３９．９ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはイソプロピルアルコール（４１８ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って反応させることによりＣ１０Ｌｅｕ−ｉＰＡを得た（収率９７％）。
【０１４１】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）ｍ／ｚ  ３２８．５［Ｍ＋Ｈ］＋，３５０．３［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０１４２】
製造例１８：Ｎ−ヘキサノイルバリンエチルエステル（Ｃ６Ｖａｌ−Ｅｔ）の製造
【０１４３】
【化２０】
2018177768.tif 000021
【０１４４】
Ｎ−アシルアミノ酸としてＮ−ヘキサノイルバリン（Ｃ６Ｖａｌ、３０．１４ｇ、０．１４ｍｏｌ）、アルコールとしてはエタノール（３２０ｍＬ、５．４８ｍｏｌ）を使用し、製造例Ａの合成法に従って８時間反応させることによりＣ６Ｖａｌ−Ｅｔを得た（収率８２％）。
【０１４５】
ＥＳＩ−ＭＳ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）  ｍ／ｚ  ２４４．３［Ｍ＋Ｈ］＋，２６６．２［Ｍ＋Ｎａ］＋
【０１４６】
参考製造例１〜３：Ｎ−ラウリルバリンイソプロピルエステル（Ｃ１２Ｖａｌ−ｉＰＡ）、Ｎ−ラウリルアラニンイソプロピルエステル（Ｃ１２Ａｌａ−ｉＰＡ）、およびＮ−ラウリルアラニンエチルエステル（Ｃ１２Ａｌａ−Ｅｔ）の製造
Ｎ−ラウリルバリンイソプロピルエステル（Ｃ１２Ｖａｌ−ｉＰＡ）、Ｎ−ラウリルアラニンイソプロピルエステル（Ｃ１２Ａｌａ−ｉＰＡ）、およびＮ−ラウリルアラニンエチルエステル（Ｃ１２Ａｌａ−Ｅｔ）の製造は、特開平１１−２４０８２８号公報の記載に従って行った。
【０１４７】
実施例１：アシル中性アミノ酸エステルの評価
（１）疎水性有機溶媒（油）との相溶性の評価
１ｇの各種サンプルを測り取り、５ｇの流動パラフィンに添加し、２５℃で１０分間撹拌して混合した。撹拌停止後、２５℃で１０分静置し、目視により各種サンプルおよび流動パラフィンの分離状態を確認し、下記の基準によって評価を行った。
とても好ましい（Ａ）：全く分離が確認されず透明な溶液
好ましい（Ｂ）：ほとんど分離が確認されず透明な溶液
あまり好ましくない（Ｃ）：局所的に分離し濁りが生じた
全く好ましくない（Ｄ）：明確に分離が起きた
【０１４８】
（２）親水性有機溶媒との相溶性の評価
０．５ｇの各種サンプルを測り取り、１０ｇの１，３−ブチレングリコールに添加し、２５℃で１０分間撹拌して混合した。撹拌停止後、２５℃で１０分静置し、目視により各種サンプルおよび１，３−ブチレングリコールの分離状態を確認し、下記の基準によって評価を行った。
とても好ましい（Ａ）：全く分離が確認されず透明な溶液
好ましい（Ｂ）：ほとんど分離が確認されず透明な溶液
あまり好ましくない（Ｃ）：局所的に分離し濁りが生じた
全く好ましくない（Ｄ）：明確に分離が起きた
【０１４９】
（３）性状評価
各化合物を４℃に一日冷却した後、室温（２５℃）で３日間放置した。３日後、各化合物の性状を室温（２５℃）で確認した。
好ましい（Ａ）：性状が室温（２５℃）で液状である。したがって、加熱せずに他の液状成分と室温で混ぜるだけで処方を作製することが容易である。
好ましくない（Ｂ）：性状が室温（２５℃）で固形または結晶形であり、加熱せずに他の液状成分と室温で混ぜるだけで処方を作製することが困難である。
【０１５０】
【表１】
2018177768.tif 000022
【０１５１】
その結果、アシル中性アミノ酸エステルは、疎水性有機溶媒（油）および親水性有機溶媒と安定的に配合することができた（表１）。したがって、アシル中性アミノ酸エステルは、油剤として優れることが示された。
アシル中性アミノ酸エステルはまた、処方の作製を容易にした（表１）。したがって、アシル中性アミノ酸エステルは、ハンドリング性に優れることが示された。
【０１５２】
実施例２：アシル中性アミノ酸エステルのエステラーゼによる加水分解の評価
５ｍｇのアシル中性アミノ酸エステルを１ｘＰＢＳバッファーに添加し、Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００（Ａｌｄｒｉｃｈ社製）を２．１５μｌ（０．２ｗｔ％）添加した後超音波照射によって均一に混合した。混合物にエステラーゼ（Ｅｓｔｅｒａｓｅ  ｆｒｏｍ  ｐｏｒｃｉｎｅ  ｌｉｖｅｒ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社製）のバッファー溶液をアシルアミノ酸１分子対してエステラーゼが５Ｕｎｉｔになるように添加し、撹拌して混合した。この混合物を３０℃に加温した振とう機において２４時間振とう・撹拌し反応させた。反応物を１２０００ｘｇの遠心分離器によって遠心し、上澄みを高速液体クロマトグラフィー（島津社製）に分析した。コントロールとしてはエステラーゼ溶液の代わりにバッファーのみを添加した。使用したエステラーゼ（Ｅｓｔｅｒａｓｅ  ｆｒｏｍ  ｐｏｒｃｉｎｅ  ｌｉｖｅｒ）は、ヒト皮膚中に存在するエステラーゼ酵素のモデルとして使用した〔Ｂｏｎｉｎａ，Ｆ．Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１４，１２３−１３４（２００１）；Ｗｏｎｇ，Ｏ．ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．，５２，１９１−２０２（１９８９）；Ｖａｖｒｏｖａ  Ｋ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ．１０４，４１−４９（２００５）〕。
【０１５３】
アシル中性アミノ酸エステルのエステル結合がエステラーゼによって加水分解されると、ＨＰＬＣクロマトグラム上では、アシル中性アミノ酸エステルのピーク面積が減少し、アシル中性アミノ酸と同一溶出時間に新しいピークが確認される。このピークの出現によってアシル中性アミノ酸エステルがエステラーゼによって加水分解され、アシル中性アミノ酸が生成されたと結論付けることができる。
【０１５４】
試験物質としては、製造例１〜１８、および参考製造例１〜３により製造した化合物を用いた。
【０１５５】
エステラーゼの存在下では、Ｃ６Ｖａｌ−Ｅｔ、Ｃ８Ａｌａ−ｉＰＡ、Ｃ８Ｖａｌ−ｉＰＡ、Ｃ８Ｇｌｙ−ｉＰＡ、Ｃ８Ｉｌｅ−ｉＰＡ、Ｃ８Ｌｅｕ−ｉＰＡ、Ｃ８Ａｌａ−Ｅｔ、Ｃ８Ｖａｌ−Ｅｔ、Ｃ８Ｇｌｙ−Ｅｔ、Ｃ８Ｉｌｅ−Ｅｔ、Ｃ８Ｌｅｕ−Ｅｔ、Ｃ１２Ｉｌｅ−Ｅｔ、Ｃ１０Ａｌａ−ｉＰＡ、Ｃ１０Ｖａｌ−ｉＰＡ、Ｃ１０Ｌｅｕ−ｉＰＡ、Ｃ１２Ａｌａ−Ｅｔ、Ｃ１２Ａｌａ−ｉＰＡ、Ｃ１２Ｖａｌ−Ｅｔ、Ｃ１２Ｖａｌ−ｉＰＡ、Ｃ１２Ｉｌｅ−ｉＰＡ、Ｃ１２Ｌｅｕ−Ｅｔのすべてが加水分解され、Ｃ６ＶＡｌ、Ｃ８Ａｌａ、Ｃ８Ｖａｌ、Ｃ８Ｇｌｙ、Ｃ８Ｉｌｅ、Ｃ８Ｌｅｕ、Ｃ１０Ａｌａ、Ｃ１０Ｖａｌ、Ｃ１０Ｌｅｕ、Ｃ１２Ａｌａ、Ｃ１２Ｖａｌ、Ｃ１２Ｉｌｅ、Ｃ１２Ｌｅｕが生成された。
【０１５６】
実施例３〜７および比較例２〜３：オクタノイル中性アミノ酸による保湿関連タンパク質等の遺伝子の増幅量の比較
ヒト正常表皮角化細胞ＮＨＥＫ（ＮＢ）（クラボウ社製）をＨｕＭｅｄｉａ−ＫＧ２（クラボウ社製）で前培養し、３０ｘ１０４細胞／ｍＬの濃度となるよう調整し、調整後の培養液２ｍＬ（すなわち、６０ｘ１０４細胞／ｗｅｌｌ）を６ｗｅｌｌプレートに添加して３７℃で１日培養した。サンプル（オクタノイルバリン（実施例３：Ｃ８Ｖａｌ）、オクタノイルアラニン（実施例４：Ｃ８Ａｌａ）、オクタノイルロイシン（実施例５：Ｃ８Ｌｅｕ）、オクタノイルイソロイシン（実施例６：Ｃ８Ｉｌｅ）、オクタノイルグリシン（実施例７：Ｃ８Ｇｌｙ）、グリシルプロリン（比較例２：Ｇｌｙ−Ｐｒｏ）、およびバリン（比較例３：Ｖａｌ））を各図に示す濃度となるように添加し、４８時間反応させた。反応後、細胞より全ＲＮＡを抽出し、逆転写を行い、リアルタイムＰＣＲにて標的遺伝子（フィラグリン、インボルクリン、卜ランスグルタミナーゼ（ＴＧ）１、ケラチン１０、およびロリクリン）の増幅量を測定し（ｎ＝２）、コントロール（無添加）の増幅量と比較した。補正遺伝子としてＧＡＰＤＨを用いた。計算は比較ＣＴ法を用い、プライマーおよびプロ一ブはＴａｑＭａｎ（登録商標）  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎを用い、蛍光色素はＦＡＭを用いた。結果を図１〜２に示す。
【０１５７】
図１〜２から明らかなとおり、実施例３〜７の各標的遺伝子の増幅量は、比較例２および３と比べて高かった。これらの結果は、アシル中性アミノ酸が保湿関連タンパク質の産生を促進できることを示している。
【０１５８】
実施例８〜１３：アシルバリンによる保湿関連タンパク質等の遺伝子の増幅量の比較
サンプルとして、ブタノイルバリン（実施例８：Ｃ４Ｖａｌ）、ヘキサノイルバリン（実施例９：Ｃ６Ｖａｌ）、オクタノイルバリン（実施例１０：Ｃ８Ｖａｌ）、デカノイルバリン（実施例１１：Ｃ１０Ｖａｌ）、ラウロイルバリン（実施例１２：Ｃ１２Ｖａｌ）およびアセチルバリン（実施例１３：Ｃ２Ｖａｌ）を用いたこと、および、標的遺伝子をフィラグリン、インボルクリン、および卜ランスグルタミナーゼ（ＴＧ）１としたことのほかは、実施例３と同様に行った。結果を図３に示す。
【０１５９】
図３から明らかなとおり、実施例８〜１３のいずれにおいても、各標的遺伝子の増幅量がコントロールと比較して高かった。これらの結果は、炭素原子数２〜１２のアシル基を有するアシル中性アミノ酸またはその塩は、アシル基の種類に拘らず保湿関連タンパク質の産生を促進できることを示している。
【０１６０】
実施例１４〜２４：アシルバリンまたはアシルアラニンによるフィラグリン遺伝子増幅量の比較
ヒト正常表皮角化細胞ＮＨＥＫ（ＮＢ）（クラボウ社製）をＨｕＭｅｄｉａ−ＫＧ２（クラボウ社製）で前培養し、１５ｘ１０４細胞／ｍＬの濃度となるよう調整し、調整後の培養液２ｍＬ（すなわち、３０ｘ１０４細胞／ｗｅｌｌ）を６ｗｅｌｌプレートに添加して３７℃で１日培養した。サンプル（ラウロイルバリン（実施例１４：Ｃ１２Ｖａｌ）、デカノイルバリン（実施例１５：Ｃ１０Ｖａｌ）、オクタノイルバリン（実施例１６：Ｃ８Ｖａｌ）、ヘキサノイルバリン（実施例１７：Ｃ６Ｖａｌ）、ブタノイルバリン（実施例１８：Ｃ４Ｖａｌ）、アセチルバリン（実施例１９：Ｃ２Ｖａｌ）、ラウロイルアラニン（実施例２０：Ｃ１２Ａｌａ）、デカノイルアラニン（実施例２１：Ｃ１０Ａｌａ）、オクタノイルアラニン（実施例２２：Ｃ８Ａｌａ）、ヘキサノイルアラニン（実施例２３：Ｃ６Ａｌａ）、ブタノイルアラニン（実施例２４：Ｃ４Ａｌａ））を各図に示す濃度となるように添加し、２４時間反応させた。反応後、細胞より全ＲＮＡを抽出し、逆転写を行い、リアルタイムＰＣＲにて標的遺伝子（フィラグリン）の増幅量を測定し（ｎ＝２）、コントロール（無添加）の増幅量を１００％とし、この値と比較した。補正遺伝子としてＧＡＰＤＨを用いた。計算は比較ＣＴ法を用い、プライマーおよびプロ一ブはＴａｑＭａｎ（登録商標）  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎを用い、蛍光色素はＦＡＭを用いた。
【０１６１】
増幅量に応じて、以下の評価を行った。結果を表２〜３および図４〜５に示す。
とても好ましい（Ａ）：２００％以上
好ましい（Ｂ）：１００％以上２００％未満
あまり好ましくない（Ｃ）：５０％以上１００％未満
全く好ましくない（Ｄ）：５０％未満
【０１６２】
【表２】
2018177768.tif 000023
【０１６３】
【表３】
2018177768.tif 000024
【０１６４】
以上の実施例２〜２４の結果（表１、２、図１〜５）を考慮すると、アシル中性アミノ酸エステルは、保湿関連タンパク質の発現を向上させることができたことから、角層内部で水分を保持する保湿能を改善することができると考えられる。また、これらの結果に加えて実施例１の結果も考慮すると、アシル中性アミノ酸エステルは、角層内部での作用、および皮膚からの水分蒸散を防止してうるおいを保持するエモリエント作用の双方により皮膚における水分保持を改善することができると考えられる。
【０１６５】
実施例２５〜３１：アシルバリンとアシルバリンエステルの細胞毒性の比較
ヒト正常表皮角化細胞ＮＨＥＫ（ＮＢ）（クラボウ社製）をＨｕＭｅｄｉａ−ＫＧ２（クラボウ社製）で前培養し、１５ｘ１０４細胞／ｍＬの濃度となるよう調整し、調整後の培養液２ｍＬ（すなわち、３０ｘ１０４細胞／ｗｅｌｌ）を６ｗｅｌｌプレートに添加して３７℃で１日培養した。サンプル（ラウロイルバリン（比較例４：Ｃ１２Ｖａｌ）、デカノイルバリン（実施例２５：Ｃ１０Ｖａｌ）、オクタノイルバリン（実施例２６：Ｃ８Ｖａｌ）、ヘキサノイルバリン（実施例２７：Ｃ６Ｖａｌ）、ブタノイルバリン（実施例２８：Ｃ４Ｖａｌ）、アセチルバリン（実施例２９：Ｃ２Ｖａｌ）、ラウロイルバリン−ｉＰＡ（実施例３０：Ｃ１２Ｖａｌ−ｉＰＡ）、ラウロイルバリン−Ｅｔ（実施例３１：Ｃ１２Ｖａｌ−Ｅｔ）を各図に示す濃度となるように添加し、２４時間反応させた。その後、培地を捨ててＮｅｕｔｒａｌ  Ｒｅｄ溶液２ｍＬ／ｗｅｌｌに置換し、さらに２時間培養した。Ｎｅｕｔｒａｌ  Ｒｅｄ溶液はＮｅｕｔｒａｌ  Ｒｅｄ（クラボウ社）をＨｕＭｅｄｉａ−ＫＧ２培地／生理食塩水（２：１）混合溶液で１／１００に希釈したものを使用した。Ｎｅｕｔｒａｌ  Ｒｅｄ溶液で染色した細胞は、ＰＢＳ（−）で一回洗浄した後、１％ＣａＣｌ２／１％ホルマリン溶液１．５ｍＬ／ｗｅｌｌで１分固定し、１％酢酸／５０％エタノール溶液１．５ｍＬ／ｗｅｌｌを添加して室温で２０分抽出を行い、プレートリーダーで吸光度５４０／６３０ｎｍを測定した。
【０１６６】
細胞生存率に応じて、以下の評価を行った。結果を表４および図６に示す。
とても好ましい（Ａ）：９５％以上
好ましい（Ｂ）：７５％以上９５％未満
あまり好ましくない（Ｃ）：５０％以上７５％未満
全く好ましくない（Ｄ）：５０％未満
【０１６７】
【表４】
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【０１６８】
実施例１４〜２４の結果は、各アシル中性アミノ酸がフィラグリン遺伝子を増幅することができることを示す。また、実施例２５〜３１、比較例４の結果は、実施例２５〜３１の各アシル中性アミノ酸およびアシル中性アミノ酸エステルの細胞毒性が低いのに対し、比較例４のアシル中性アミノ酸の細胞毒性が高いことを示す。興味深いことに、アシル鎖長が長いＮ−アシルアミノ酸エステルは、同じくアシル鎖長が長いＮ−アシル−アミノ酸と異なり、細胞毒性が認められなかった。以上の細胞毒性の評価をまとめると、アシル中性アミノ酸エステルはアシル中性アミノ酸よりも好ましいことが理解できる。
【０１６９】
実施例３２：アシル中性アミノ酸エステルと親水性有機溶媒の相溶性試験
表５に記載の成分を、１．５ｍＬエッペンドルフチューブに秤量し、ボルテックスミキサー（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ  Ｖｏｒｔｅｘ  Ｇｅｎｉｅ  ２）による撹拌と、手を用いてサンプルを上下に激しく振とうすることにより均一撹拌し、撹拌後の様子を目視観察した。判断基準は、均一に透明溶解するものをＡ、油滴が分散し散乱光が確認できるものをＢとした。評価は、２５℃、−５℃、および４５℃で一日保存した条件下で行った。
【０１７０】
【表５−１】
2018177768.tif 000026
【０１７１】
【表５−２】
2018177768.tif 000027
【０１７２】
その結果、アシル中性アミノ酸エステルは、有効量の濃度範囲内において親水性有機溶媒に対して溶状安定性が高かった（表５−１、５−２）。したがって、アシル中性アミノ酸エステルは、乳化剤を使用せずとも、有効量の濃度範囲内において親水性有機溶媒と安定的に配合できることが示された。
【０１７３】
実施例３３：アシル中性アミノ酸エステルと親水性有機溶媒の馴染み改善試験
上記相溶性試験に用いたサンプルを使い評価した（表６）。ポリスポイトを用いて、スライドガラス上に、サンプルを１滴、滴下し、５分間静置後のサンプルの広がりを、定規を用いて測定した。サンプルの広がりが大きい程、塗布時に馴染みやすいと考えられ、実使用上好ましい。アシル中性アミノ酸エステルまたは油剤を添加した多価アルコールの測定値をａ、多価アルコールのみの測定値をｂとして、次式により広がり度を評価した。広がり度は４段階評価を行った。
【０１７４】
広がり度：（ａ／ｂ）ｘ１００
Ａ：１５０％以上
Ｂ：１３０％以上１５０％未満
Ｃ：１００％以上１３０％未満
Ｄ：１００％未満
【０１７５】
【表６】
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【０１７６】
その結果、アシル中性アミノ酸エステルは、親水性有機溶媒との馴染みを改善することができた（表６）。したがって、アシル中性アミノ酸エステルは、親水性有機溶媒との配合により、処方の濡れ性が良くなり、肌馴染みを改善できることが示された。
【０１７７】
実施例３４：オクタノイルバリン（Ｃ８Ｖａｌ）によるプロフィラグリン産生率の向上
まず、ヒト正常表皮角化細胞ＮＨＥＫ（ＮＢ）（クラボウ社製）をＨｕＭｅｄｉａ−ＫＧ２（クラボウ社製）にて３７℃、５％ＣＯ２、飽和水蒸気下で培養した。コンフルエント状態になった細胞を、６ウェルプレートに１５×１０４（細胞／ウェル）で播種した。３７℃で１日培養後、１００μＭのオクタイノイルバリン（Ｃ８Ｖａｌ）と１．３ｍＭのＣａＣｌ２を添加したＨｕＭｅｄｉａ−ＫＧ２培地に交換し、１〜２日毎に同様の培地交換を行い、６日間培養した。培養後、培地を取り除き、冷ＰＢＳ（−）にて２回洗浄し、プロテアーゼインヒビターとフォスファターゼインヒビター(ＥｚＲＩＰＡ  Ｌｙｓｉｓ（ＡＴＴＯ社製）)を添加した抽出液（Ｍ−ＰＥＲ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製））を２００μＬ／ウェルで各ウェルに添加し、振とう機（ＴＡＩＴＥＣ社製）にて２００ｒｐｍで５分間振とうさせた。スクレーパーで細胞をかき集め、沈殿物を含めた液体全量に２００μＬの変性剤（ＥｚＡｐｐｌｙ（ＡＴＴＯ社製））を添加後、振とう機（Ｂｉｏｅｒ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社製）にて１１００ｒｐｍ、１００℃で５分間、加熱振とうした。得られた溶液を遠心分離機（トミー精工社製）１００００Ｇにて４℃で１０分間遠心処理し、上澄みをウェスタンブロット用サンプルとした。
【０１７８】
つぎに、ゲル１レーンあたり各ウェスタンブロット用サンプル２０μＬ（プロフィラグリン）、または（１）で調製したウェスタンブロット用サンプルを５０倍希釈した溶液５μＬ（ＧＡＰＤＨ）をｅ−ＰＡＧＥＬ  ７．５％（ＡＴＴＯ社製）にアプライし、電気泳動装置（ＡＴＴＯ社製）にて２１ｍＡの定電流で１時間泳動した。電気泳動後のゲルからＰＶＤＦ膜に転写し、ＴＢＳ−Ｔ（ＡＴＴＯ社製）にて洗浄後、ＥｚＢｌｏｃｋ  ＢＳＡ（ＡＴＴＯ社製）を用いてブロッキングした。次に、１次抗体液（Ａｎｔｉ  Ｆｉｌａｇｇｒｉｎ  （ＡＫＨ１）抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社製）（プロフィラグリン）、Ａｎｔｉ  ＧＡＰＤＨ（６Ｃ５）抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社製）（ＧＡＰＤＨ））にて抗原抗体反応を行った。２次抗体（Ａｎｔｉ−ＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ），Ｍｏｕｓｅ，Ｇｏａｔ−ｐｏｌｙ，ＨＲＰ（ＫＰＬ社製））にて標識化し、化学発光法によりイメージアナライザー（Ａｍｅｒｓｈａｍ社製）でバンド強度(２５０−４００ｋＤａ（プロフィラグリン），３７ｋＤａ（ＧＡＰＤＨ）)を数値化した（ｎ＝２）。プロフィラグリンの発現量はＧＡＰＤＨの発現量にて規格化し、コントロール（オクタイノイルバリン（Ｃ８Ｖａｌ）無添加）の産生量を１００％として比較した。
【０１７９】
得られた結果を以下のとおり評価した。結果を表７に示す。
とても好ましい（Ａ）：２５０％以上
好ましい（Ｂ）：１５０％以上２５０％未満
あまり好ましくない（Ｃ）：１００％以上１５０％未満
全く好ましくない（Ｄ）：１００％未満
【０１８０】
【表７】
2018177768.tif 000029
【０１８１】
以上より、オクタノイルバリン（Ｃ８Ｖａｌ）がプロフィラグリンタンパク質の産生を向上させることが明らかとなった。
【０１８２】
実施例３５：アシル中性アミノ酸エステルの分配係数の評価
アシル中性アミノ酸エステルの分配係数（ＬｏｇＰ）の値をＣｈｅｍＳｋｅｔｃｈ（Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｉｎｃ．，（ＡＣＤ／Ｌａｂｓ）社製）という化学構造式用計算ソフトを用いて計算した。
【０１８３】
【表８】
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【０１８４】
表８からはＣ６Ａｌａ−iＰＡ、Ｃ６Ｖａｌ−Ｅｔ、Ｃ６Ｉｌｅ−Ｅｔ等のアシル中性アミノ酸エステルのＬｏｇＰ値が１〜4の範囲内であり、より経皮吸収性に優れている性質を持っていることが理解できる（Ｍａｒｃ  Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｄｅｒｍａｔｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．，１，１９７−２０６（２００９））。
【産業上の利用可能性】
【０１８５】
本発明の組成物は、例えば、リーブオン化粧料等の化粧料および外用剤、ならびにそれらの原料として有用である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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