(57)【要約】【課題】構造が単純で、コンパクトであり、簡易に取り扱うことができ、かつ内容物を汚染または状態悪化させにくいガス供給機能付き容器；ガス供給機能付き容器からなる細胞培養容器、運搬用容器および保存用容器；ならびにガス供給機能付き容器を用いた細胞培養方法、内容物運搬方法および内容物保存方法を提供する。【解決手段】容器本体１０と、容器本体１０内に収納されたガス供給体５０とを備え、ガス供給体５０が、ゲル化剤と液状媒体とを含む液状組成物、およびゲル化剤から形成された網目構造と液状媒体とを含むゲル状組成物のいずれか一方または両方からなる基材内に気泡状態のガスを包含したガス含有マテリアルを有する、ガス供給機能付き容器１。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
容器本体と、前記容器本体内に収納されたガス供給体とを備え、
前記ガス供給体が、下記ガス含有マテリアルを有する、ガス供給機能付き容器。
ガス含有マテリアル：ゲル化剤と液状媒体とを含む液状組成物、および前記ゲル化剤から形成された網目構造と液状媒体とを含むゲル状組成物のいずれか一方または両方からなる基材内に気泡状態のガスを包含したもの。
【請求項２】
前記容器本体が、前記容器本体の内部空間を、前記ガス供給体が収納されるガス供給室と、内容物が収納される内容物収納室とに分割するガス透過性の間仕切り部を有する、請求項１に記載のガス供給機能付き容器。
【請求項３】
前記間仕切り部が、前記内容物収納室側に面したガス透過膜を有する、請求項２に記載のガス供給機能付き容器。
【請求項４】
前記間仕切り部が、前記ガス透過膜を支持するガス透過性の支持層を有する、請求項３に記載のガス供給機能付き容器。
【請求項５】
前記ガスが、水素、酸素、窒素、アルゴン、ヘリウム、二酸化炭素、メタン、エタン、プロパンおよびブタンからなる群から選ばれる少なくとも１種のガスを含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載のガス供給機能付き容器。
【請求項６】
前記ガス含有マテリアル中のガスの含有量が、前記ガス含有マテリアルの体積／質量％（ｖ／ｗ％）換算で、６〜８０体積％である、請求項１〜５のいずれか一項に記載のガス供給機能付き容器。
【請求項７】
前記ガス含有マテリアルに包含される気泡状態のガスの気泡径が、マイクロバブルサイズ以下である、請求項１〜６のいずれか一項に記載のガス供給機能付き容器。
【請求項８】
前記ゲル化剤が、ゼラチン、寒天、カラギーナン、ペクチン、グルコマンナン、プルラン、アルギン酸ナトリウム、およびカルボキシビニルポリマーまたはその誘導体からなる群から選ばれる少なくとも１種である、請求項１〜７のいずれか一項に記載のガス供給機能付き容器。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載のガス供給機能付き容器からなる、細胞培養容器。
【請求項１０】
請求項１〜８のいずれか一項に記載のガス供給機能付き容器からなる、運搬用容器。
【請求項１１】
請求項１〜８のいずれか一項に記載のガス供給機能付き容器からなる、保存用容器。
【請求項１２】
請求項１〜８のいずれか一項に記載のガス供給機能付き容器を用いて細胞を培養する、細胞培養方法。
【請求項１３】
請求項１〜８のいずれか一項に記載のガス供給機能付き容器を用いて内容物を運搬する、内容物運搬方法。
【請求項１４】
請求項１〜８のいずれか一項に記載のガス供給機能付き容器を用いて内容物を保存する、内容物保存方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ガスを容器内に供給する機能を、容器内に有するガス供給機能付き容器；ガス供給機能付き容器からなる細胞培養容器、運搬用容器および保存用容器；ならびにガス供給機能付き容器を用いた細胞培養方法、内容物運搬方法および内容物保存方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞を効率よく培養するために、細胞培養容器に酸素、二酸化炭素等のガスを供給することがある（特許文献１）。
また、培養された細胞を運搬する際に細胞の状態を悪化させないために、細胞運搬容器に酸素、二酸化炭素、窒素等のガスを供給することがある（特許文献２）。
【０００３】
しかし、従来の細胞培養容器および細胞運搬容器においては、ガスを容器の外部から供給する必要があるため、高圧ガスボンベ等を別途用意する必要がある。そのため、容器および高圧ガスボンベを含めた装置全体が複雑かつ大型になるという問題がある。また、高圧ガスの使用には規制が多く、高圧ガスボンベは簡易に取り扱えないという問題がある。
【０００４】
高圧ガスボンベ等が不要な運搬用容器および保存用容器としては、容器内に雰囲気調整剤を収納したものが提案されている（特許文献３）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２０１６−０７７１６４号公報
【特許文献２】特開２００５−１２４５５６号公報
【特許文献３】特開２０１４−０８３００２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかし、雰囲気調整剤は、化学反応を利用したものであるため、熱や副生物が発生しやすい。熱や副生物は、細胞等の内容物を汚染または状態悪化させるおそれがある。また、複数のガスからなるガス雰囲気が必要な場合には、雰囲気調整剤の構成が複雑になり、実用性に乏しい。
【０００７】
本発明は、構造が単純で、コンパクトであり、簡易に取り扱うことができ、かつ内容物を汚染または状態悪化させにくいガス供給機能付き容器；ガス供給機能付き容器からなる細胞培養容器、運搬用容器および保存用容器；ならびにガス供給機能付き容器を用いた細胞培養方法、内容物運搬方法および内容物保存方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、下記の態様を有する。
＜１＞容器本体と、前記容器本体内に収納されたガス供給体とを備え、前記ガス供給体が、下記ガス含有マテリアルを有する、ガス供給機能付き容器。
ガス含有マテリアル：ゲル化剤と液状媒体とを含む液状組成物、および前記ゲル化剤から形成された網目構造と液状媒体とを含むゲル状組成物のいずれか一方または両方からなる基材内に気泡状態のガスを包含したもの。
＜２＞前記容器本体が、前記容器本体の内部空間を、前記ガス供給体が収納されるガス供給室と、内容物が収納される内容物収納室とに分割するガス透過性の間仕切り部を有する、前記＜１＞のガス供給機能付き容器。
＜３＞前記間仕切り部が、前記内容物収納室側に面したガス透過膜を有する、前記＜２＞のガス供給機能付き容器。
＜４＞前記間仕切り部が、前記ガス透過膜を支持するガス透過性の支持層を有する、前記＜３＞のガス供給機能付き容器。
＜５＞前記ガスが、水素、酸素、窒素、アルゴン、ヘリウム、二酸化炭素、メタン、エタン、プロパンおよびブタンからなる群から選ばれる少なくとも１種のガスを含む、前記＜１＞〜＜４＞のいずれかのガス供給機能付き容器。
＜６＞前記ガス含有マテリアル中のガスの含有量が、前記ガス含有マテリアルの体積／質量％（ｖ／ｗ％）換算で、６〜８０体積％である、前記＜１＞〜＜５＞のいずれかのガス供給機能付き容器。
＜７＞前記ガス含有マテリアルに包含される気泡状態のガスの気泡径が、マイクロバブルサイズ以下である、前記＜１＞〜＜６＞のいずれかのガス供給機能付き容器。
＜８＞前記ゲル化剤が、ゼラチン、寒天、カラギーナン、ペクチン、グルコマンナン、プルラン、アルギン酸ナトリウム、およびカルボキシビニルポリマーまたはその誘導体からなる群から選ばれる少なくとも１種である、前記＜１＞〜＜７＞のいずれかのガス供給機能付き容器。
＜９＞前記＜１＞〜＜８＞のいずれかのガス供給機能付き容器からなる、細胞培養容器。
＜１０＞前記＜１＞〜＜８＞のいずれかのガス供給機能付き容器からなる、運搬用容器。
＜１１＞前記＜１＞〜＜８＞のいずれかのガス供給機能付き容器からなる、保存用容器。
＜１２＞前記＜１＞〜＜８＞のいずれかのガス供給機能付き容器を用いて細胞を培養する、細胞培養方法。
＜１３＞前記＜１＞〜＜８＞のいずれかのガス供給機能付き容器を用いて内容物を運搬する、内容物運搬方法。
＜１４＞前記＜１＞〜＜８＞のいずれかのガス供給機能付き容器を用いて内容物を保存する、内容物保存方法。
【発明の効果】
【０００９】
本発明のガス供給機能付き容器は、構造が単純で、コンパクトであり、簡易に取り扱うことができ、かつ内容物を汚染または状態悪化させにくい。
本発明の細胞培養容器、運搬用容器および保存用容器は、ガスを容器内に供給する機能を有しながら、構造が単純で、コンパクトであり、簡易に取り扱うことができ、かつ内容物を汚染または状態悪化させにくい。
本発明の細胞培養方法によれば、複雑かつ大型な装置を用意することなく、必要なガスを簡易に供給しつつ細胞を培養でき、かつ細胞を汚染または状態悪化させにくい。
本発明の内容物運搬方法によれば、複雑かつ大型な装置を用意することなく、必要なガスを簡易に供給しつつ内容物を運搬でき、かつ内容物を汚染または状態悪化させにくい。
本発明の内容物保存方法によれば、複雑かつ大型な装置を用意することなく、必要なガスを簡易に供給しつつ内容物を保存でき、かつ内容物を汚染または状態悪化させにくい。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】本発明のガス供給機能付き容器の一例を示す断面図である。
【図２】図１のガス供給機能付き容器の容器本体を分解した様子を示す断面図である。
【図３】本発明のガス供給機能付き容器の他の例を示す断面図である。
【図４】本発明のガス供給機能付き容器の他の例を示す断面図である。
【図５】本発明のガス供給機能付き容器の他の例を示す断面図である。
【図６】図５のガス供給機能付き容器において容器本体内を吸引脱気した様子を示す断面図である。
【図７】実施例１の液状組成物（Ｘ１）および実施例１、３〜５、７のガス含有マテリアルの外観写真である。
【図８】実施例１のガス含有マテリアルの断面マイクロスコープ観察の写真である。
【図９】実施例２における、ガス供給機能付き容器を用いたガス含有マテリアルからのガス放出試験による気相中の水素ガス濃度の時間変化を示すグラフである。
【図１０】実施例３のガス含有マテリアルの断面マイクロスコープ観察の写真である。
【図１１】実施例４のガス含有マテリアルの断面マイクロスコープ観察の写真である。
【図１２】実施例５のガス含有マテリアルの断面マイクロスコープ観察の写真である。
【図１３】実施例６のガス含有マテリアルの断面マイクロスコープ観察の写真である。
【図１４】実施例７のガス含有マテリアルの断面マイクロスコープ観察の写真である。
【図１５】実施例１、３〜７における、２５℃密閉容器内でのガス含有マテリアル中のガスの含有量の時間変化を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下の用語の定義は、本明細書および特許請求の範囲にわたって適用される。
「ゲル」とは、水素結合等によるゲル化剤の物理的凝集または共有結合等によるゲル化剤の架橋によって形成された網目構造に液状媒体が保持されたものをいう。
「物理ゲル」とは、水素結合等によるゲル化剤の物理的凝集によって形成された網目構造に液状媒体が保持されたものをいう。
「化学ゲル」とは、共有結合等によるゲル化剤の架橋によって形成された網目構造に液状媒体が保持されたものをいう。
「ゲル化」とは、ゲル化剤と液状媒体とを含む液状組成物がゲル化剤から形成された網目構造と液状媒体とを含むゲル状組成物に変化することをいう。
「ゲル融解」とは、ゲル化剤から形成された網目構造と液状媒体とを含むゲル状組成物がゲル化剤と液状媒体とを含む液状組成物に変化することをいう。
「ゲル化剤」とは、水素結合等による物理的凝集または共有結合等による架橋によって液状媒体を保持できる網目構造を形成し得る化合物をいう。
「マイクロバブルサイズ以下の気泡」とは、直径がミクロンオーダー以下の気泡をいう。該気泡は、直径がナノオーダーの気泡を含んでいてもよい。
「基材に対するガスの飽和溶解度」とは、基材をすべて液状組成物としたときの該液状組成物に対するガスの大気圧下での飽和溶解度をいう。なお、飽和溶解度を規定する「ガスの溶解」は、ヘンリーの法則が成立し、ガスが圧力に応じて分子状で溶解している状態である。
【００１２】
基材に対するガスの飽和溶解度は、ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）によって測定できる。飽和溶解度を測定する温度は、基材がすべて液状組成物となる温度である必要があり、液状組成物の場合はゲル化温度よりも高い温度であればよく、液状組成物に可逆的に変化し得るゲル状組成物の場合はゲル融解温度より高い温度であればよい。
ガス含有マテリアル中のガスの含有量（ガス含有マテリアルの体積／質量％（ｖ／ｗ％）換算）は、大気圧、１０℃の条件下でガス含有マテリアルから採取したサンプルを秤量し、サンプルを７０℃に加熱してサンプルに含まれるガスを気相に放出させ、気相中のガスをガスクロマトグラフィー（ＧＣ）によって定量し、ガス含有マテリアルの所定質量（１００ｇ）あたりから放出されたガスの体積（ｃｍ３）の割合を算出することによって求められる。ただし、二酸化炭素および炭化水素については、後述する実施例の記載の方法によって求める。
ゲル化温度は、次のようにして求める。５０ｍＬのガラス製スクリュー瓶に、該スクリュー瓶の容量の約半分の液状組成物を入れて密栓したものを恒温水槽に浸し、７５℃まで加温した後、恒温水槽を徐々に降温し、スクリュー瓶を４５°および９０°傾けても液状組成物が流動しなくなったときの温度をゲル化温度とする。
【００１３】
数値範囲を示す「〜」は、その前後に記載された数値を下限値および上限値として含むことを意味する。
図１〜図５における寸法比は、説明の便宜上、実際のものとは異なったものも含む。また、図２〜図５においては、図１と同じ構成要素には同一の符号を付して、その説明を省略する。
【００１４】
＜＜ガス供給機能付き容器＞＞
図１は、本発明のガス供給機能付き容器の一例を示す断面図である。
ガス供給機能付き容器１は、内部空間をガス供給体５０が収納されるガス供給室１０２と内容物２００が収納される内容物収納室１０４とに分割するガス透過性の間仕切り部１２を有する容器本体１０と；容器本体１０のガス供給室１０２内に収納されたガス供給体５０とを備える。
【００１５】
＜容器本体＞
図２は、容器本体１０を分解した様子を示す断面図である。
容器本体１０は、蓋体２０と；蓋体２０が螺合によって取り付けられる上容器３０と；上容器３０が螺合によって取り付けられる下容器４０とを有する。
【００１６】
蓋体２０は、筒状部２２と；筒状部２２の上端を封止する天蓋部２４とを有する。蓋体２０の内周壁には、上容器３０の上部おねじ部３６と螺合するめねじ部２８が設けられている。
【００１７】
上容器３０は、筒状部３２と；筒状部３２の内部空間を上下に分割するガス透過性の間仕切り部１２とを有する。筒状部２２の外周壁の上部には、蓋体２０のめねじ部２８と螺合する上部おねじ部３６が設けられている。筒状部２２の内周壁の下部には、下容器４０の上部おねじ部４６と螺合する下部めねじ部３８が設けられている。
【００１８】
下容器４０は、筒状部４２と；筒状部４２の内部空間を上下に分割する底部４４とを有する。筒状部４２の外周壁の上部には、上容器３０の下部めねじ部３８と螺合する上部おねじ部４６が設けられている。筒状部４２の内周壁の下部には、他の容器を取り付ける際に、他の容器の上部おねじ部と螺合する下部めねじ部４８が設けられている。
【００１９】
間仕切り部１２は、内容物収納室１０４側に面したガス透過膜１４と；ガス透過膜１４を支持するガス透過性の支持層１６を有する。支持層１６は、上容器３０の筒状部３２と一体に成形されており、支持層１６には、複数の貫通孔１８が形成されている。
【００２０】
ガス透過膜１４は、ガス透過性の材質からなる層である。ガス透過膜は、ガス供給体５０から放出されたガスをガス供給室１０２から内容物収納室１０４へと透過し、内容物収納室１０４の内容物２００をガス供給室１０２に透過しないものであればよい。ガス透過膜の材質としては、ポリジメチルシロキサン、二軸延伸ポリスチレン、エチレン−酢酸ビニル共重合体、ポリスチレン、ポリエチレン等が挙げられる。ガス透過膜の材質としては、細胞接着性に優れる点から、ポリジメチルシロキサンが好ましい。
【００２１】
容器本体１０（ただし、ガス透過膜１４を除く。）の材料としては、樹脂、ガラス、金属（アルミニウム、鉄、これらを含む合金等）等が挙げられる。
ガス供給体５０および内容物２００を目視確認する必要がある場合、容器本体１０の材料としては、樹脂またはガラスが好ましく、容器本体１０を製造しやすい点から、樹脂がより好ましい。樹脂としては、ポリエチレンテレフタレート、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリプロピレン等が挙げられる。
一方、容器強度が必要な場合や容器本体１０からのガス透過ロスを低減したい場合、容器本体１０の材料としては、ステンレス、アルミニウムおよびその合金等が好ましく、軽量で加工しやすい点から、アルミニウム、ジュラルミン等がより好ましい。
【００２２】
＜ガス供給体＞
ガス供給体５０は、後述するガス含有マテリアルを有する。ガス供給体５０は、ガス含有マテリアルを収納したマテリアル用容器（シャーレ、ビン、ガス透過性フィルム、またはガス通気口のような穴付き加工した金属シートもしくは樹脂シートからなる袋体等）をさらに有していてもよい。また、ガス供給体５０は、ガス含有マテリアルを担持した担体をさらに有していてもよい。
【００２３】
（ガス含有マテリアル）
ガス含有マテリアルは、後述する液状組成物および後述するゲル状組成物のいずれか一方または両方からなる基材（ベースマテリアル）内に気泡状態のガスを包含したものである。
【００２４】
ガス含有マテリアルは、基材中に溶解したガスと、基材内に包含された気泡状態のガスとを含む。ガス含有マテリアルは、気泡状態のガスを包含していることから、基材中には、基材をすべて液状組成物としたときの該液状組成物に対するガスの飽和溶解度（以下、基材に対するガスの飽和溶解度とも記す。）と等しい量のガスが溶解していることになる。すなわち、基材中に溶解したガスと気泡状態のガスとの合計量は、基材に対するガスの飽和溶解度を超える量となる。ガス含有マテリアル中のガスの量が、基材に対するガスの飽和溶解度を超える量であれば、ガス含有マテリアルは、基材に対するガスの飽和溶解度を超えた分のガスを外部に放出できる。
【００２５】
ガス含有マテリアル中のガスの含有量は、基材が保持できる範囲内において、ガスの種類、ガス含有マテリアルの用途等に応じて適宜選択できる。
ガス含有マテリアル中のガスの含有量は、後述するガス含有マテリアルの製造方法によればガス含有マテリアルの体積／質量％（ｖ／ｗ％）換算で、６〜８０体積％の広い範囲とすることが可能となる。ガスの含有量が前記範囲の下限値以上であれば、例えば、水に対する水素ガスの飽和溶解度が１．６ｐｐｍ（１．７体積％）であることから、基材に対するガスの飽和溶解度をはるかに超える量のガスを保持していることになり、多量のガスを放出できる。ガスの含有量が前記範囲の上限値を超えることは物理的に難しく、得られるガス含有マテリアルの強度低下が懸念されるため好ましくない。
【００２６】
気泡状態のガスの気泡径は、ガスの均一分散およびガス含有マテリアル中のガス保持安定性の点から、マイクロバブルサイズ以下が好ましく、２００μｍ以下がより好ましい。気泡状態のガスの気泡径が２００μｍ以下であれば、基材内に気泡状態のガスを確実に包含でき、基材中のガス保持安定性が向上する。気泡径が２００μｍを超える場合は、ガス含有マテリアルの作製時にガス自身の浮力が大きくなり、ガスの系外ロスが増し、ガスの含有量が多いガス含有マテリアルの作製が難しくなる。本発明における気泡状態のガスは、マイクロバブルサイズよりもさらに小さなナノバブルサイズ（１〜１００ｎｍ）の気泡を含んでも構わない。ナノバブルサイズの気泡は、液状組成物中での保存安定性が向上する。
【００２７】
ガス含有マテリアル中のガスの含有量および気泡状態のガスの気泡径は、後述する組成物の成分、後述するガス含有マテリアルの製造方法において液状組成物中にガスを分散させる方法等によって調整できる。
【００２８】
（ガス）
ガス含有マテリアルに含まれ、ガス含有マテリアルから放出されるガスは、細胞培養、医療、食品、化粧品等の分野で有用な機能を発現できるガスであればよく、特に限定されない。
【００２９】
有用な機能を発現できるガスとしては、水素、酸素、窒素、アルゴン、ヘリウム、二酸化炭素、メタン、エタン、プロパンおよびブタンからなる群から選ばれる少なくとも１種のガスが挙げられる。ガスは、混合ガスであってもよい。混合ガスにおける各ガスの割合は任意である。空気は、混合ガスに含まれる。
【００３０】
ガスとしては、水素、酸素、窒素、アルゴン、ヘリウムおよび二酸化炭素からなる群から選ばれる少なくとも１種のガスがより好ましく、水素を含むガスが特に好ましい。
水素は、潜在的に有する還元性、抗酸化性を利用した食品、化粧品、医療等の分野で利用されている。また、水素は、細胞培養において細胞の増殖能の発現や、細胞の各種機能の発現が期待できる。
酸素は、細胞培養、医療、健康医療機器等の分野で利用されている。
窒素、アルゴン、ヘリウムについては、その性質が不活性ガスであることから、酸化防止が求められる細胞培養、食品、化粧品等の分野での利用が考えられる。
二酸化炭素は、細胞培養、食品、化粧品等の分野で利用されている。
【００３１】
水素は、基材中に高濃度に溶解させることが困難であるが、後述するガス含有マテリアルの製造方法によって、気泡状態のガスとして基材内に高濃度で包含させることができる。
【００３２】
（基材）
ガス含有マテリアルの基材（ベースマテリアル）は、後述する液状組成物および後述するゲル状組成物のいずれか一方または両方からなるものである。
基材は、気泡状態のガスを多く包含できる点、および気泡状態のガスを長時間保持できることによって、ガスを長時間放出できる点から、ゲル状組成物を含むものが好ましく、ゲル状組成物のみからなるものがより好ましい。
【００３３】
（組成物）
液状組成物は、ゲル化剤と液状媒体とを含む。
ゲル状組成物は、液状組成物がゲル化したものであり、ゲル化剤から形成された網目構造と液状媒体とを含む。
液状組成物およびゲル状組成物（以下、これらをまとめて単に「組成物」とも記す。）は、本発明の効果を損なわない範囲において、必要に応じて充填材、添加剤を含んでいてもよい。
【００３４】
組成物は、液状組成物からゲル状組成物に、かつゲル状組成物から液状組成物に可逆的に変化し得る組成物（Ｘ）と、液状組成物からゲル状組成物に変化し得るが、ゲル状組成物から液状組成物に変化できない組成物（Ｙ）とに分類できる。
以下、組成物（Ｘ）および組成物（Ｙ）のそれぞれについて説明する。
【００３５】
（組成物（Ｘ））
組成物（Ｘ）における液状組成物（Ｘ１）としては、冷却によるゲル化剤の物理的凝集によって液状媒体を保持できる網目構造を形成し得る組成物が挙げられる。
組成物（Ｘ）におけるゲル状組成物（Ｘ２）としては、ゲル化剤の物理的凝集によって形成された網目構造に液状媒体が保持された、いわゆる物理ゲルが挙げられる。物理ゲルであるゲル状組成物（Ｘ２）においては、網目構造がゲル化剤の物理的凝集によって形成されているため、加熱によって網目構造が解消されやすい。そのため、ゲル状組成物（Ｘ２）は加熱によって元の液状組成物（Ｘ１）に戻り得る。
このように、組成物（Ｘ）は、冷却によって液状組成物（Ｘ１）からゲル状組成物（Ｘ２）に、かつ加熱によってゲル状組成物（Ｘ２）から液状組成物（Ｘ１）に可逆的に変化し得る。
【００３６】
液状組成物（Ｘ１）は、冷却によって液状組成物（Ｘ１）からゲル状組成物（Ｘ２）に変化するゲル化温度を有する。
ゲル状組成物（Ｘ２）は、加熱によってゲル状組成物（Ｘ２）から液状組成物（Ｘ１）に変化するゲル融解温度を有する。
液状組成物（Ｘ１）のゲル化温度は、０．５〜６５℃が好ましく、１０〜６０℃がより好ましい。
ゲル化温度が、前記範囲内であれば、ガス供給機能付き容器１の通常の使用温度領域において、組成物（Ｘ）をゲル状組成物（Ｘ２）の状態に維持しやすい。そのため、組成物（Ｘ）からなる基材が気泡状態のガスを多く包含できる。また、基材が気泡状態のガスを長時間保持できることによって、ガスを長時間放出できる。
【００３７】
組成物（Ｘ）に含まれる各成分の選定は、ガス供給機能付き容器１の用途、使用温度領域（求められるゲル化温度に応じて適宜行えばよい。ガス供給機能付き容器１を、細胞培養、医療、食品、化粧品等の分野に利用する場合には、組成物（Ｘ）からなる基材のガスの保持性能、保存安定性、組成物（Ｘ）のゲル化温度の他に、組成物（Ｘ）の生体に対する安全性、細胞培養時の細胞への悪影響等を考慮して組成物（Ｘ）に含まれる各成分を適宜選択すればよい。
【００３８】
組成物（Ｘ）におけるゲル化剤としては、例えば、ゼラチン、寒天、カラギーナン、ペクチン、グルコマンナン、プルラン、アルギン酸ナトリウム等の天然物由来の蛋白類または多糖類；水素結合性基を有するポリマー；凝集性の疎水性基を有するポリマー等が挙げられる。ゲル化剤は、１種を単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
ゲル化剤としては、ゼラチン、寒天、カラギーナン、ペクチン、グルコマンナン、プルランおよびアルギン酸ナトリウムからなる群から選ばれる少なくとも１種が好ましい。
【００３９】
液状媒体は、ガス供給機能付き容器１の用途、組成物（Ｘ）の各成分（特にゲル化剤）の種類によって適宜選択される。例えば、ガス供給機能付き容器１を、細胞培養、医療、食品、化粧品等の分野に利用する場合には、液状媒体としては、水、エタノール等を用いる。ヒトに対する安全性が求められない用途においては、任意の有機溶剤等を用いてもよい。
【００４０】
（組成物（Ｙ））
組成物（Ｙ）における液状組成物（Ｙ１）としては、ゲル化剤の架橋によって液状媒体を保持できる網目構造を形成し得る組成物が挙げられる。
組成物（Ｙ）におけるゲル状組成物（Ｙ２）としては、ゲル化剤の架橋によって形成された網目構造に液状媒体が保持された、いわゆる化学ゲルが挙げられる。化学ゲルであるゲル状組成物（Ｙ２）においては、網目構造がゲル化剤の架橋によって形成されているため、網目構造が解消されにくい。そのため、ゲル状組成物（Ｙ２）は加熱等によって元の液状組成物（Ｙ１）に変化しない。
このように、組成物（Ｙ）は、ゲル化剤の化学反応によって液状組成物（Ｙ１）からゲル状組成物（Ｙ２）に変化し得るが、ゲル状組成物（Ｙ２）から液状組成物（Ｙ１）に変化できない。
【００４１】
液状組成物（Ｙ１）のゲル化は、架橋によって網目構造が形成されて化学ゲルができるような変化であればよい。液状組成物（Ｙ１）のゲル化の方法は、使用する液状組成物（Ｙ１）に適した方法を選択すればよい。ゲル化の方法としては、例えば、架橋剤添加、中和、加熱等の方法が挙げられる。
【００４２】
組成物（Ｙ）は、ゲル状組成物（Ｙ２）から液状組成物（Ｙ１）に変化できないことから、通常、ゲル状組成物（Ｙ２）のみからなるものとして用いられる。組成物（Ｙ）がゲル状組成物（Ｙ２）のみからなる場合、組成物（Ｙ）からなる基材が気泡状態のガスを多く包含できる。また、基材が気泡状態のガスを長時間保持できることによって、ガスを長時間放出できる。
【００４３】
組成物（Ｙ）に含まれる各成分の選定は、ガス供給機能付き容器１の用途に応じて適宜行えばよい。ガス供給機能付き容器１を、細胞培養、医療、食品、化粧品等の分野に利用する場合には、組成物（Ｙ）からなる基材のガスの保持性能、保存安定性の他に、組成物（Ｙ）の生体に対する安全性、細胞培養時の細胞への悪影響等を考慮して組成物（Ｙ）に含まれる各成分を適宜選択すればよい。
【００４４】
組成物（Ｙ）におけるゲル化剤としては、例えば、架橋性官能基を有するポリマー、多官能モノマー、単官能モノマー、シリコーン系ポリマー、カルボキシビニルポリマーまたはその誘導体等が挙げられる。ゲル化剤は、１種を単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
ゲル化剤としては、中和、濃度調整等の簡単な操作でゲル化をコントロールしやすい点から、カルボキシビニルポリマーまたはその誘導体が好ましい。
【００４５】
液状媒体は、ガス供給機能付き容器１の用途、組成物（Ｙ）の各成分（特にゲル化剤）の種類によって適宜選択される。例えば、ガス供給機能付き容器１を、細胞培養、医療、食品、化粧品等の分野に利用する場合には、液状媒体としては、水、エタノール等を用いる。ヒトに対する安全性が求められない用途においては、任意の有機溶剤等を用いてもよい。
【００４６】
（添加剤）
組成物に添加できる添加剤としては、ガス供給機能付き容器１を細胞培養、医療、食品、化粧品等の分野に利用する場合に、その効能の相乗効果の発現または新たな効能付与の目的で、組成物に含まれる各成分と併用できる成分であれば、公知の添加剤のいずれも用いることができる。
【００４７】
添加剤としては、食品添加剤、化粧品添加剤、抗酸化剤、培地添加剤、飼料添加剤等が挙げられる。具体的には、下記のものが挙げられる。
殺菌剤：次亜塩素酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、高度サラシ粉等。
乳化剤：グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ステアリロイル乳酸カルシウム、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル等。
増粘安定剤：アルギン酸ナトリウム、アルギン酸プロピレングリコールエステル、プロポキシメチルセルロースナトリウム、プロポキシメチルセルロースカルシウム、デンプングリコール酸ナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、天然物系多糖類等。
保水乳化安定剤：コンドロイチン硫酸ナトリウム等。
結着剤、品質改質剤：ポリリン酸カリウム、ポリリン酸ナトリウム、メタリン酸カリウム、メタリン酸ナトリウム等。
粘着防止剤：Ｄ−マンニトール等。
保存料：安息香酸、安息香酸塩、ソルビン酸、ソルビン酸塩、パラオキシ安息香酸エステル類、デヒドロキシ酢酸ナトリウム、プロピオン酸、プロピオン酸塩、白子蛋白、ポリリジン、ペクチン分解物等。
酸化防止剤：エリソルビン酸、エリソルビン酸塩、クエン酸イソプロピル、ジブチルヒドロキシトルエン、ｄｌ−αトコフェロール、ノルジヒドログアヤレチック酸、ブチルヒドロキシアニソール、没食子酸プロピル等。
強化剤：ビタミン類等。
その他：アミノ酸誘導体類、核酸類、脂質類、抗酸化剤類、抗糖化剤類、油脂、界面活性剤等。
添加剤は、所望とする効能によって、１種を単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
【００４８】
（ガス含有マテリアルの製造方法）
組成物（Ｘ）からなる基材内に気泡状態のガスを包含したガス含有マテリアルを例にとり、ガス含有マテリアルの製造方法について説明する。
ガス含有マテリアルは、例えば、下記の工程（１）〜工程（３）を有する方法によって製造できる。
工程（１）：液状組成物（Ｘ１）をゲル化温度よりも高い温度で保持しながら、液状組成物（Ｘ１）にガスを供給することによって、気泡状態のガスを包含した液状組成物（Ｘ１）を得る工程。
工程（２）：気泡状態のガスを包含した液状組成物（Ｘ１）を充填容器に充填し、密閉する工程。
工程（３）：充填容器内にて、気泡状態のガスを包含した液状組成物（Ｘ１）を、ゲル化温度以下に冷却してゲル化させることによって、ゲル状組成物（Ｘ２）からなる基材内に気泡状態のガスを包含したガス含有マテリアルを得る工程。
【００４９】
工程（１）〜工程（３）を有する方法は、ガス含有マテリアルの好適な製造方法である。工程（１）〜工程（３）を有する方法によれば、以下に説明するように、ガスの含有量の多いガス含有マテリアルを安定的に製造できる。
通常、ガスは、液状組成物（Ｘ１）の粘度が低いほど液状組成物（Ｘ１）中を移動しやすく、微細気泡として分散しやすい。しかし、ガスが液状組成物（Ｘ１）中を移動しやすいということは、液状組成物（Ｘ１）中に留まりにくく、気相中へ揮散する可能性も高いといえる。逆に、液状組成物（Ｘ１）の粘度が高いとガスが分散しにくく、微細気泡の形成には好ましくない。無論、液状組成物（Ｘ１）がゲル化したゲル状組成物（Ｘ２）には、ガスの分散は実質的に不可能となる。
工程（１）〜工程（３）を有する方法によれば、液状組成物（Ｘ１）中にガスを微細気泡として高濃度に均一分散させた後、速やかに液状組成物（Ｘ１）を冷却してゲル化させることによって、ゲル状組成物（Ｘ２）からなる基材内に気泡状態のガスを高濃度に包含させることができる。
【００５０】
（液状組成物（Ｘ１）の調製）
液状組成物（Ｘ１）は、例えば、溶解槽に常温で液状媒体を仕込み、撹拌下でゲル化剤を仕込んだ後、ゲル化剤が溶解できる温度まで昇温して液状媒体に溶解させることによって調製できる。
【００５１】
液状組成物（Ｘ１）の調製に用いられる装置としては、撹拌機付きの槽または釜が挙げられる。装置の材料は、本発明の効果を損なわない範囲内で、ゲル化剤、液状媒体、ガス等に対する耐食性；使用温度における耐熱性；液状組成物（Ｘ１）への溶出等を考慮して選択できる。装置の材料としては、ステンレス鋼材、ガラスライニング、フッ素樹脂ライニング、プラスチック等が挙げられる。
【００５２】
（工程（１））
液状組成物（Ｘ１）をゲル化温度よりも高い温度で保持しながら、液状組成物（Ｘ１）にガスを供給することによって、気泡状態のガスを包含した液状組成物（Ｘ１）を得る。
【００５３】
ガス供給時の液状組成物（Ｘ１）の粘度は、５〜１０００ｍＰａ・ｓが好ましく、１０〜８００ｍＰａ・ｓがより好ましい。液状組成物（Ｘ１）の粘度が前記範囲の下限値未満では、液状組成物（Ｘ１）中にガスを微細気泡として分散しやすいが、ガスが浮上しやすく液中に留まりにくい。液状組成物（Ｘ１）の粘度が前記範囲の上限値を超えると、液状組成物（Ｘ１）中にガスを微細気泡として分散しにくく、ガスの均一分散が困難となる。
一方、ガス供給時の液状組成物（Ｘ１）の温度については、前記した液状組成物（Ｘ１）の粘度範囲が達成できる温度であればよく、適時選択すればよい。
【００５４】
ガスの供給量は、液状組成物（Ｘ１）中に溶解したガスと気泡状態のガスとの合計量が、液状組成物（Ｘ１）に対するガスの飽和溶解度を超える量となる量であり、最終的に得られるガス含有マテリアル中のガスの含有量が、ガス含有マテリアルの体積／質量％（ｖ／ｗ％）換算で、６〜８０体積％となる量が好ましい。
【００５５】
ゲル化剤および液状媒体の仕込量、ガスの供給量は、所望とするガス含有マテリアル中のガスの含有量に応じて適宜設定すればよい。また、液状組成物（Ｘ１）の温度および粘度についても、ゲル化剤、液状媒体およびガスの種類、所望とするガス含有マテリアル中のガスの含有量に応じて適宜設定すればよい。
【００５６】
工程（１）に用いられる装置としては、液状組成物（Ｘ１）にガスを微細気泡として均一に分散できる装置であれば、公知の気液分散操作に用いられる装置、設備を用いることができる。装置の材料は、本発明の効果を損なわない範囲内で、ゲル化剤、液状媒体、ガス等に対する耐食性；使用温度における耐熱性；液状組成物（Ｘ１）への溶出等を考慮して選択できる。
【００５７】
工程（１）においては、液状組成物（Ｘ１）を撹拌した状態で、液状組成物（Ｘ１）にガスを供給する；または、液状組成物（Ｘ１）を撹拌せずに、液状組成物（Ｘ１）にガスを供給した後、振とうすることが好ましい。
撹拌方法としては、撹拌機を用いる方法、ラインミキサを用いる方法等が挙げられる。
振とう方法としては、振とう機を用いる方法等が挙げられる。
【００５８】
撹拌機を用いる方法によれば、液状組成物（Ｘ１）を撹拌しながら撹拌翼下部からガスを導入して、撹拌によってガスを液状組成物（Ｘ１）中に微細分散できる。
撹拌機を備えた装置としては、液中の気体分散に適したタービン翼、フルゾーン翼等の撹拌翼を備えた釜、槽等の容器が挙げられる。
【００５９】
ラインミキサを用いる方法によれば、ラインミキサに液状組成物（Ｘ１）およびガスを導入して、ラインミキシングによってガスを液状組成物（Ｘ１）中に微細分散できる。
ラインミキサとしては、公知のターボミキサ、スタティックミキサ、エゼクタ等の気液の微細混合に適した装置が挙げられる。
【００６０】
振とう機を用いる方法においては、振とう時に内容物が漏れにくい、密閉型の振とう機を用いることができる。
振とう機に液状組成物（Ｘ１）を振とう機容積の約１／２容量ほど仕込む。振とう機の気相部をガスで置換するために、振とう機の気相容積の１〜５倍量のガスを、液状組成物（Ｘ１）中にバブリングまたは気相中に導入した後、蓋をして密閉する。密閉された振とう機を気相中のガスが液状組成物（Ｘ１）中に微細分散するまで振とうする。
【００６１】
（工程（２））
気泡状態のガスを包含した液状組成物（Ｘ１）を充填容器に充填し、密閉する。
気泡状態のガスの気相中への揮散ロスを抑制するために、充填および密閉はできる限り速やかに行うことが好ましい。
【００６２】
充填時の液状組成物（Ｘ１）温度は、ゲル化温度よりも５〜２０℃高い温度が好ましい。充填時の液状組成物（Ｘ１）の温度が前記範囲の下限値以上であれば、液状組成物（Ｘ１）中に包含される気泡状態のガスの含有量を多くしやすい。充填時の液状組成物（Ｘ１）の温度が前記範囲の上限値以下であれば、液状組成物（Ｘ１）中に包含された気泡状態のガスが気相中へ揮散しにくい。
【００６３】
充填時の液状組成物（Ｘ１）の粘度は、１００〜１００００ｍＰａ・ｓが好ましい。充填時の液状組成物（Ｘ１）の粘度が前記範囲の下限値未満では、液状組成物（Ｘ１）中の微細気泡のガスが工程（３）においてゲル化するまでの間に浮上しやすく、ガス含有量の低下が懸念される。充填時の液状組成物（Ｘ１）の粘度が前記範囲の上限値を超えると、液状組成物（Ｘ１）の移送がしずらくなり、充填容器への充填が困難となる。
一方、充填時の液状組成物（Ｘ１）の温度については、前記した液状組成物（Ｘ１）の粘度範囲が達成できる温度であればよく、適時選択すればよい。通常は、液状組成物（Ｘ１）のゲル化温度よりも５〜２０℃高い温度が、前述の粘度範囲を達成できる温度範囲と受け止めて構わない。
【００６４】
充填容器としては、ガスの透過ロスを抑制するために、ガスを透過しにくい材料からなるものが好ましい。充填容器としては、例えば、アルミニウム製パウチ、ガス透過性の低いフィルムからなる袋体、金属容器等が挙げられる。
【００６５】
充填方法としては、気泡状態のガスの気相中への揮散ロスを抑制する点から、充填容器に液状組成物（Ｘ１）を極力気相空間がないように充填して、速やかに密封できる方法が好ましい。
密封方法としては、充填容器の種類にもよるが、例えば、ヒートシール、内蓋付きの蓋による密封等の公知のシール方法が挙げられる。
【００６６】
（工程（３））
充填容器内にて、気泡状態のガスを包含した液状組成物（Ｘ１）を、ゲル化温度以下に冷却してゲル化させることによって、ゲル状組成物（Ｘ２）からなる基材内に気泡状態のガスを包含したガス含有マテリアルを得る。
【００６７】
冷却はできる限り速やかに行うことが好ましい。充填容器内の気泡状態のガスを包含した液状組成物（Ｘ１）を速やかに充填容器ごとゲル化温度以下に急冷することによって、充填容器に充填した液状組成物（Ｘ１）中に包含された気泡状態のガスの揮散ロスを極力低減できる。
【００６８】
冷却方法は、気泡状態のガスを包含した液状組成物（Ｘ１）が充填された充填容器を速やかにゲル化温度以下に冷却できる方法であれば、特に限定されない。冷却方法としては、例えば、気泡状態のガスを包含した液状組成物（Ｘ１）が充填された充填容器を、速やかにゲル化温度以下に冷却された水浴中に充填容器ごと浸漬して急冷する方法；充填容器をあらかじめ冷媒浴中で冷却しておき、これに気泡状態のガスを包含した液状組成物（Ｘ１）を充填して密閉する方法等が挙げられる。
【００６９】
＜内容物＞
ガス供給機能付き容器１の内容物収納室１０４に収納される内容物２００は、ガス供給機能付き容器１の用途によって異なる。
細胞培養容器および運搬用容器の場合、内容物２００としては、細胞、臓器、培地（培養液等）、これらの組み合わせ等が挙げられる。
保存用容器の場合、内容物２００としては細胞培養容器および運搬用容器の内容物の他に、食品、化粧品等が挙げられる。
【００７０】
＜ガス供給機能付き容器の組み立て＞
ガス供給体５０が収納された下容器４０に上容器３０と取り付け、内容物２００が収納された上容器３０に蓋体２０を取り付けることによって、間仕切り部１２によって内部空間がガス供給室１０２と内容物収納室１０４とに分割された容器本体１０と、容器本体１０のガス供給室１０２内に収納されたガス供給体５０とを備えるガス供給機能付き容器１が得られる。
【００７１】
下容器４０の下方にさらに追加の上容器３０を取り付け、追加の上容器３０の下方にさらに追加の下容器４０を取り付け、必要に応じてこれを繰り返すことによって、ガス供給室１０２と内容物収納室１０４とを交互に有する多段のガス供給機能付き容器としてもよい。
【００７２】
＜作用機序＞
１．以上説明したガス供給機能付き容器１にあっては、容器本体１０と、容器本体１０内に収納されたガス供給体５０とを備え、ガス供給体５０がガス含有マテリアルを有するため、ガスを供給するための高圧ガスボンベ等を別途用意する必要がない。そのため、構造が単純で、コンパクトであり、かつ簡易に取り扱うことができる。また、ガス含有マテリアルは、気泡状態のガスを物理的に保持したものであるため、従来の化学反応を利用した雰囲気調整剤とは異なり、ガスを放出する際に熱や副生物が発生しない。そのため、熱や副生物によって内容物を汚染または状態悪化させることがない。
２．また、容器本体１０が、容器本体１０の内部空間を、ガス供給体５０が収納されるガス供給室１０２と、内容物２００が収納される内容物収納室１０４とに分割するガス透過性の間仕切り部１２を有するため、ガス供給体５０と内容物２００が接触することがなく、ガス供給体５０に含まれるガス以外の成分が内容物２００に移行しにくい。
３．また、間仕切り部１２が、内容物収納室１０４側に面したガス透過膜１４を有するため、ガス供給体５０から放出されたガスが、ガス透過膜１４を透過した後、ガス透過膜１４に接する内容物２００に強制的に通過させられることになるため、ガスを確実に内容物２００に供給できる。
４．また、間仕切り部１２が、ガス透過膜１４を支持するガス透過性の支持層１６を有するため、ガス透過膜１４とともに内容物２００を確実に支持できる。
【００７３】
＜他の実施形態＞
本発明のガス供給機能付き容器は、容器本体と、容器本体内に収納されたガス供給体とを備え、ガス供給体が特定のガス含有マテリアルを有するものであればよく、図１のガス供給機能付き容器１に限定されない。
【００７４】
図３は、本発明のガス供給機能付き容器の他の例を示す断面図である。
ガス供給機能付き容器２は、容器本体６０と；容器本体６０内に収納されたガス供給体５０と；容器本体６０内に収納された内容物用容器７０とを備える。
容器本体６０は、蓋体２０と；蓋体２０が螺合によって取り付けられる有底円筒状の主容器６２とを有する。主容器６２の外周壁の上部には、蓋体２０のめねじ部２８と螺合するおねじ部６６が設けられている。
内容物用容器７０は、内容物２００を収納する有底円筒状の主容器７２と；主容器７２の開口端を封止する隔離膜７４とを有する。
隔離膜７４は、ガスを透過し、内容物２００を透過しない膜である。隔離膜７４としては、紙、不織布、マイクロポーラスフィルム、微多孔膜、開孔樹脂フィルム等が挙げられる。
【００７５】
図４は、本発明のガス供給機能付き容器の他の例を示す断面図である。
ガス供給機能付き容器３は、袋体からなる容器本体８０と；容器本体８０内に収納されたガス供給体５０と；容器本体８０内に収納された内容物用容器７０とを備える。
容器本体８０は、重ねられた２枚のフィルムの四方をヒートシールして作製された袋体である。フィルムとしては、ガス透過性が低いものが好ましい。
【００７６】
図５は、本発明のガス供給機能付き容器の他の例を示す断面図である。
ガス供給機能付き容器４は、内容物２００が収納された、袋体からなる容器本体８０と；容器本体８０内に収納され、その上に内容物２００が載置されたガス供給体５０とを備える。
容器本体８０は、重ねられた２枚のフィルムの四方をヒートシールして作製された袋体である。フィルムとしては、ガス透過性が低いものが好ましい。
ガス供給体５０は、ガス含有マテリアル５２と、ガス含有マテリアル５２の表面を覆うガス透過膜５４とを有する。
ガス供給機能付き容器４は、内容物２００が容器本体８０内に残留した酸素によって劣化することを防止する点から、容器本体８０をヒートシールして密閉する前に、図６に示すように容器本体８０内をあらかじめ吸引脱気して、空間部を極力少なくすることが好ましい。
【００７７】
＜用途＞
本発明のガス供給機能付き容器は、細胞培養容器、運搬用容器、保存用容器等として用いることができる。
【００７８】
（細胞培養容器）
細胞培養容器としては、図１のガス供給機能付き容器１のような、間仕切り部にガス透過膜を有するものが好適である。
ガス供給機能付き容器１は、間仕切り部１２が、内容物収納室１０４側に面したガス透過膜１４を有するため、ガス供給体５０から放出されたガスが、ガス透過膜１４を透過した後、ガス透過膜１４に接する内容物２００に強制的に通過させられることになるため、ガスを確実に内容物２００に供給できる。そのため、細胞を効率よく培養できる。
【００７９】
一方、図３のガス供給機能付き容器２および図４のガス供給機能付き容器３では、内容物２００は、容器本体内のガスの雰囲気にさらされるだけであり、ガス供給機能付き容器１に比べ、内容物２００に供給できるガスの量は少ない。
【００８０】
（運搬用容器、保存用容器）
運搬用容器または保存用容器としては、ガス供給機能付き容器１、ガス供給機能付き容器２、ガス供給機能付き容器３、ガス供給機能付き容器４等の本発明のガス供給機能付き容器のいずれも好適に用いることができる。
【００８１】
（細胞培養方法）
本発明のガス供給機能付き容器を用いた細胞の培養については、公知の細胞培養容器を本発明の細胞培養容器に変更する以外は、公知の方法と同様に実施できる。
ガス供給機能付き容器１を用いて細胞を培養する際には、蓋体２０と上容器３０との螺合を緩くしておく、または蓋体２０を取り外すことにより、内容物収納室１０４のガスを外部に放出できるようにすることが好ましい。内容物収納室１０４のガスを外部に放出できるようにすることによって、ガス供給体５０から絶えずガスが発生しているガス供給室１０２の圧力Ｐと、内容物収納室１０４の圧力Ｐ’とがＰ＞Ｐ’の関係となる。そのため、ガス供給体５０から放出されたガスがガス透過膜１４を透過しやすくなり、ガスをより確実に内容物２００に供給できる。
【００８２】
（内容物運搬方法、内容物保存方法）
本発明のガス供給機能付き容器を用いた内容物の運搬または保存については、雰囲気調整剤を、本発明における特定のガス供給体に変更する以外は、公知の方法と同様に実施できる。なお、内容物が容器本体内に残留した酸素によって劣化することを防止するために、容器本体を密閉する前に容器本体内を窒素等の不活性ガスで置換してもよい。
【実施例】
【００８３】
以下、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００８４】
＜測定＞
実施例における各物性の測定方法を以下に示す。
【００８５】
（ゲル化温度）
ゲル化温度は、次のようにして求めた。
５０ｍＬのガラス製スクリュー瓶に、該スクリュー瓶の容量の約半分の液状組成物（Ｘ１）を入れて密栓したものを恒温水槽に浸し、７５℃まで加温した後、恒温水槽を徐々に降温し、スクリュー瓶を４５°および９０°傾けても液状組成物が流動しなくなったときの温度をゲル化温度とした。温度測定は、スクリュー瓶の外壁に標準水銀温度計を添えて行った。
【００８６】
（粘度）
粘度は、Ｅ型粘度計（東機産業社製、低粘度用：ＲＥ−１０５Ｌ、高粘度用：ＲＥ−２１５Ｕ）を用いて測定した。
【００８７】
（ガス含有マテリアル中の気泡の分散状態の観察）
ガス含有マテリアルを鋭利なナイフで切断した。マイクロスコープ（キーエンス社製、デジタルマイクロスコープ  ＶＨＸ−９００Ｆ）を用いて断面を観察することにより気泡の分散状態を観察した。
【００８８】
（ガス含有マテリアル中の水素ガスの含有量）
大気圧、１０℃の条件下でガス含有マテリアルから採取したサンプルを、ガスクロマトグラフ分析（以下、ＧＣ分析と記す。）で用いるヘッドスペースＧＣ分析用サンプル瓶に精秤して密閉した。サンプル瓶を７０℃の恒温水槽に入れ、サンプルが気泡を包含しない液状組成物（Ｘ１）になるまで加温し、気相中に水素ガスを放出させた。サンプル瓶内の気相ガスを採取して、ＧＣ分析（ＴＣＤ検出器）にて水素ガスを定量し、ガス含有マテリアル中の水素ガスの含有量（ガス含有マテリアルの体積／質量％（ｖ／ｗ％）換算）を算出した。
【００８９】
（ガス含有マテリアル中の窒素ガス、酸素ガス、アルゴンガスの含有量）
「ガス含有マテリアル中の水素ガスの含有量」の測定方法と同様の方法で、ガス含有マテリアル中の各種ガスの含有量（ガス含有マテリアルの体積／質量％（ｖ／ｗ％）換算）を算出した。
【００９０】
（ガス含有マテリアル中のプロパンガスの含有量）
ＧＣ分析のＴＣＤ検出器をＦＩＤ検出器に変更して、「ガス含有マテリアル中の水素ガスの含有量」の測定方法と同様の方法で、ガス含有マテリアル中のプロパンガスの含有量（ガス含有マテリアルの体積／質量％（ｖ／ｗ％）換算）を算出した。
【００９１】
（ガス含有マテリアル中の二酸化炭素ガスの含有量）
大気圧、１０℃の条件下でガス含有マテリアルから採取したサンプルを、全有機炭素分析（以下、ＴＯＣ分析と記す。）で用いるヘッドスペースＴＯＣ分析用サンプル瓶に精秤して密閉した。サンプル瓶を７０℃の恒温水槽に入れ、サンプルが気泡を包含しない液状組成物（Ｘ１）になるまで加温し、気相中に二酸化炭素ガスを放出させた。サンプル瓶内の気相ガスを採取して、ＴＯＣ分析にて気相に放出された二酸化炭素ガスを定量した。一方、７０℃で加温した後に液状組成物（Ｘ１）中に残存している二酸化炭素ガスを定量するために、気相ガスを採取した後のサンプル瓶に０．１規定の水酸化カリウム水溶液を添加して塩基性にした後、サンプル瓶を振って瓶中の二酸化炭素の全量をアルカリ塩として液中に溶解させた。この溶解液をＴＯＣ分析することにより、液状組成物（Ｘ１）中の二酸化炭素総量を求めて、ガス含有マテリアル中の二酸化炭素ガスの含有量（ガス含有マテリアルの体積／質量％（ｖ／ｗ％）換算）を算出した。
【００９２】
（２５℃密閉容器内でのガス含有マテリアル中のガスの含有量の時間変化（ガス放出特性））
大気圧、１０℃の条件下で前述の各種ガス含有マテリアルから採取したサンプルを、ＧＣ分析で用いるヘッドスペースＧＣ分析用サンプル瓶（２１．７５ｍＬ）に０．８〜１．５ｇの範囲で精秤して密閉した。このサンプル瓶を２５℃恒温機中に静置して、時間経過毎にサンプル瓶内の気相ガスを採取して、ＧＣ分析にて２５℃におけるガス含有マテリアル中から気相中に放出されたガス量を定量し、ガス含有マテリアル作製時のガス含有量から減算することでガス含有マテリアル中の各種ガスの含有量（ガス含有マテリアルの体積／質量％（ｖ／ｗ％）換算）の時間変化を求めた。
【００９３】
＜＜実施例１＞＞
＜ガス含有マテリアルの製造＞
（液状組成物（Ｘ１）の調製）
１Ｌの樹脂製蓋付容器に、魚鱗由来のゼラチン粉および上水（北九州市水道局）を、ゼラチン濃度が３５質量％になるように入れ、室温下で放置してゼラチンを膨潤させた。容器を７０℃の温水バス中に浸してゼラチンを溶解させて、液状組成物（Ｘ１）（ゼラチン水溶液）を調製した。
液状組成物（Ｘ１）のゲル化温度は、２６℃であった。
【００９４】
（工程（１））
１Ｌのポリ容器に、液状組成物（Ｘ１）（ゼラチン水溶液）を５００ｇ仕込み、７０℃恒温水槽中に浸し、昇温して保持した。ポリ容器の底部に水素ガスを１００ｍＬ／分で約１５分間、バブリングした。ポリ容器に密栓をして恒温水槽より取り出して、速やかに手振りにより振とうを内温が３０〜３５℃になるまで継続することで気泡状態の水素ガスを包含した液状組成物（Ｘ１）を得た。
【００９５】
（工程（２））
気泡状態の水素ガスを包含した液状組成物（Ｘ１）を、内温が３０〜３５℃でアルミ製パウチに気相空間がないように直ちに充填し、密閉した。
【００９６】
（工程（３））
気泡状態の水素ガスを包含した液状組成物（Ｘ１）が充填されたアルミ製パウチを直ちに５℃の水中に浸漬して、液状組成物（Ｘ１）を冷却してゲル化させて、ゲル状組成物（Ｘ２）からなる基材内に気泡状態の水素ガスを包含したガス含有マテリアルを得た。
【００９７】
得られたガス含有マテリアル中の水素ガスの含有量をＧＣ分析法で測定したところ、ガス含有マテリアルの体積／質量％（ｖ／ｗ％）換算で、２８体積％であった。
水素ガスを供給する前の液状組成物（Ｘ１）（ゼラチン水溶液）およびガス含有マテリアルの１０℃での外観写真を図７に示す。水素ガスを供給する前は透明であるが、微細なガスが分散したガス含有マテリアルは白色不透明となることが判る。
また、ガス含有マテリアルの断面マイクロスコープ観察の写真を図８に示す。２００μｍ以下の微細気泡が高濃度に分散していることが確認された。
また、２５℃密閉容器内でのガス含有マテリアル中の水素ガスの含有量の時間変化を図１５に示す。水素ガスの含有量が１時間後で１４体積％、５時間後で８体積％に減少しており、水素ガスが気相放出されていることが確認された。
【００９８】
＜＜実施例２＞＞
＜ガス供給機能付き容器を用いたガス含有マテリアルからのガス放出試験＞
図１に示すガス供給機能付き容器１におけるガス供給室１０２（容量：１４．５ｃｍ３）に、実施例１のガス含有マテリアル３．９ｇを収納した。内容物収納室１０４に２．５ｇの超純水を収納した。蓋体２０を上容器３０から取り外し、ガス供給機能付き容器１ごと３７℃に保持したインキュベータ内に放置した。所定時間ごとにガス供給室１０２の気相ガスを採取して、気相中の水素ガス濃度をＧＣ分析で測定した。気相中の水素ガス濃度の時間変化を図９に示す。水素ガス含有マテリアルからの水素ガスの放出により、数時間にわたってガス供給室１０２が水素ガス雰囲気に維持できることが確認された。
【００９９】
＜＜実施例３＞＞
＜ガス含有マテリアルの製造＞
水素ガスを酸素ガスに変更した以外は、実施例１と同様の操作を行って、気泡状態の酸素ガスを包含したガス含有マテリアルを得た。
得られたガス含有マテリアル中の酸素ガスの含有量をＧＣ分析法で測定したところ、ガス含有マテリアルの体積／質量％（ｖ／ｗ％）換算で、３２体積％であった。
ガス含有マテリアルの１０℃での外観写真を図７に示す。微細な酸素ガスが分散したガス含有マテリアルは白色不透明となることが判る。
また、ガス含有マテリアルの断面マイクロスコープ観察の写真を図１０に示す。２００μｍ以下の微細気泡が高濃度に分散していることが確認された。
また、２５℃密閉容器内でのガス含有マテリアル中の酸素ガスの含有量の時間変化を図１５に示す。酸素ガスの含有量が３時間後で１２体積％、５時間後で８体積％に減少しており、酸素ガスが気相放出されていることが確認された。
【０１００】
＜＜実施例４＞＞
＜ガス含有マテリアルの製造＞
水素ガスを窒素ガスに変更した以外は、実施例１と同様の操作を行って、気泡状態の窒素ガスを包含したガス含有マテリアルを得た。
得られたガス含有マテリアル中の窒素ガスの含有量をＧＣ分析法で測定したところ、ガス含有マテリアルの体積／質量％（ｖ／ｗ％）換算で、４６体積％であった。
ガス含有マテリアルの１０℃での外観写真を図７に示す。微細な窒素ガスが分散したガス含有マテリアルは白色不透明となることが判る。
また、ガス含有マテリアルの断面マイクロスコープ観察の写真を図１１に示す。２００μｍ以下の微細気泡が高濃度に分散していることが確認された。
また、２５℃密閉容器内でのガス含有マテリアル中の窒素ガスの含有量の時間変化を図１５に示す。窒素ガスの含有量が１時間後で２７体積％、３時間後で２１体積％、５時間後で１７体積％に減少しており、窒素ガスが気相放出されていることが確認された。
【０１０１】
＜＜実施例５＞＞
＜ガス含有マテリアルの製造＞
水素ガスをアルゴンガスに変更した以外は、実施例１と同様の操作を行って、気泡状態のアルゴンガスを包含したガス含有マテリアルを得た。
得られたガス含有マテリアル中のアルゴンガスの含有量をＧＣ分析法で測定したところ、ガス含有マテリアルの体積／質量％（ｖ／ｗ％）換算で、２８体積％であった。
ガス含有マテリアルの１０℃での外観写真を図７に示す。微細なアルゴンガスが分散したガス含有マテリアルは白色不透明となることが判る。
また、ガス含有マテリアルの断面マイクロスコープ観察の写真を図１２に示す。２００μｍ以下の微細気泡が高濃度に分散していることが確認された。
また、２５℃密閉容器内でのガス含有マテリアル中のアルゴンガスの含有量の時間変化を図１５に示す。アルゴンガスの含有量が１時間後で１９体積％、３時間後で１１体積％、５時間後で８体積％に減少しており、アルゴンガスが気相放出されていることが確認された。
【０１０２】
＜＜実施例６＞＞
＜ガス含有マテリアルの製造＞
水素ガスをプロパンガスに変更した以外は、実施例１と同様の操作を行って、気泡状態のプロパンガスを包含したガス含有マテリアルを得た。
得られたガス含有マテリアル中のプロパンガスの含有量をＧＣ分析法で測定したところ、ガス含有マテリアルの体積／質量％（ｖ／ｗ％）換算で、２７体積％であった。
また、ガス含有マテリアルの断面マイクロスコープ観察の写真を図１３に示す。２００μｍ以下の微細気泡が高濃度に分散していることが確認された。
また、２５℃密閉容器内でのガス含有マテリアル中のプロパンガスの含有量の時間変化を図１５に示す。プロパンガスの含有量が１時間後で１８体積％、３時間後で１４体積％、５時間後で１１体積％に減少しており、プロパンガスが気相放出されていることが確認された。
【０１０３】
＜＜実施例７＞＞
＜ガス含有マテリアルの製造＞
水素ガスを二酸化炭素ガスに変更した以外は、実施例１と同様の操作を行って、気泡状態の二酸化炭素ガスを包含したガス含有マテリアルを得た。
得られたガス含有マテリアル中の二酸化炭素のガス含有量をＧＣ分析法で測定したところ、ガス含有マテリアルの体積／質量％（ｖ／ｗ％）換算で、７２体積％であった。
ガス含有マテリアルの１０℃での外観写真を図７に示す。微細な二酸化炭素ガスが分散したガス含有マテリアルは白色不透明となることが判る。
また、ガス含有マテリアルの断面マイクロスコープ観察の写真を図１４に示す。２００μｍ以下の微細気泡が高濃度に分散していることが確認された。
また、２５℃密閉容器内でのガス含有マテリアル中の二酸化炭素ガスの含有量の時間変化を図１５に示す。二酸化炭素ガスの含有量が１時間後で９体積％、３時間後で３体積％に減少しており、二酸化炭素ガスが気相放出されていることが確認された。
【産業上の利用可能性】
【０１０４】
本発明のガス供給機能付き容器は、細胞培養容器、運搬用容器、保存用容器等として有用である。
【符号の説明】
【０１０５】
１  ガス供給機能付き容器、
２  ガス供給機能付き容器、
３  ガス供給機能付き容器、
４  ガス供給機能付き容器、
１０  容器本体、
１２  間仕切り部、
１４  ガス透過膜、
１６  支持層、
１８  貫通孔、
２０  蓋体、
２２  筒状部、
２４  天蓋部、
２８  めねじ部、
３０  上容器、
３２  筒状部、
３６  上部おねじ部、
３８  下部めねじ部、
４０  下容器、
４２  筒状部、
４４  底部、
４６  上部おねじ部、
４８  下部めねじ部、
５０  ガス供給体、
５２  ガス含有マテリアル、
５４  ガス透過膜、
６０  容器本体、
６２  主容器、
６６  おねじ部、
７０  内容物用容器、
７２  主容器、
７４  隔離膜、
８０  容器本体、
１０２  ガス供給室、
１０４  内容物収納室、
２００  内容物。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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