(57)【要約】【課題】新規な二次胆汁酸抑制剤を提供することを課題とする。【解決手段】当該剤を、霊芝及び／又は霊芝の発酵物から選択される霊芝成分の抽出物（又は抽出エキス）で構成する。このような剤は、二次胆汁酸に起因する疾患、例えば、大腸疾患の予防及び／又は治療用途に使用するための剤であってもよい。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
霊芝及び／又は霊芝の発酵物から選択される霊芝成分の抽出物を含有する二次胆汁酸抑制剤。
【請求項２】
霊芝及び／又は霊芝の発酵物から選択される霊芝成分の抽出物を含有する二次胆汁酸抑制用組成物。
【請求項３】
霊芝の発酵物を含む霊芝成分の抽出物を含有する請求項１に記載の剤又は請求項２記載の組成物を製造する方法であって、霊芝を３０〜４０℃で発酵させる発酵工程を含む製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、霊芝及び／又は霊芝の発酵物から選択される霊芝成分の抽出物（又はエキス）を含有する、二次胆汁酸抑制剤及び二次胆汁酸に起因する疾患又は症状（例えば、大腸疾患、肝臓障害）の予防及び／又は治療剤に関する。
また、本発明は、霊芝及び／又は霊芝の発酵物から選択される霊芝成分の抽出物（又はエキス）を含有する組成物（例えば、飲食品、医薬品など）に関する。
【背景技術】
【０００２】
二次胆汁酸は、一次胆汁酸（コール酸など）が微生物（腸内細菌）により代謝されて得られる代謝物である。
【０００３】
近年、二次胆汁酸と大腸疾患（大腸癌など）との関連が報告されており、二次胆汁酸を低減しようとする試みがなされつつある。
【０００４】
例えば、特開２００９−２２７６０９号公報（特許文献１）には、植物由来のポリフェノールに二次胆汁酸低下作用があるとする発明が記載されており、当該文献の実施例では、カフェ酸、カテキン、クルクミン又はエラグ酸の摂取により、ラットの糞における、リトコール酸やデオキシコール酸の量が有意に低減されたことを報告している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００９−２２７６０９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、二次胆汁酸の抑制（又は低減）に有用な、新規な剤及び組成物を提供することにある。
【０００７】
本発明の他の目的は、二次胆汁酸に起因する疾患又は症状（大腸疾患、肝臓障害など）の予防及び／又は治療に有用な、新規な剤及び組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、霊芝及び／又はその発酵物から選択される霊芝成分の抽出物（又は抽出エキス）が、二次胆汁酸（腸又は腸管内における二次胆汁酸）の抑制又は低減作用を有することを見出した。本発明者らは、上記以外にもさらに鋭意検討を重ねて本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、本発明の剤は、霊芝及び／又は霊芝の発酵物から選択される霊芝成分の抽出物（又はエキス）を含有する二次胆汁酸抑制剤（二次胆汁酸低減剤、二次胆汁酸を抑制又は低減するための剤）である。
【００１０】
このような剤は、二次胆汁酸を抑制又は低減できるため、二次胆汁酸に起因する疾患（又は疾病又は症状）を予防及び／又は治療（又は改善）できる。
【００１１】
そのため、本発明には、霊芝及び／又は霊芝の発酵物から選択される霊芝成分の抽出物（又はエキス）を含有する、二次胆汁酸に起因（関連）する疾患（又は疾病又は症状）を予防及び／又は治療（又は改善）するための剤も包含する。
【００１２】
また、本発明には、前記剤（二次胆汁酸抑制剤等）又は前記霊芝成分を含有する組成物（飲食品、医薬又は医薬組成物など）を包含する。このような組成物は、霊芝成分を含んでおり、上記のように、例えば、二次胆汁酸抑制機能や、二次胆汁酸に起因する疾患の予防及び／又は治療（改善）機能を有している。
【００１３】
そのため、本発明の組成物は、例えば、二次胆汁酸を抑制（又は低減）するための組成物（二次胆汁酸抑制用組成物）であってもよく、二次胆汁酸に起因する疾患の予防及び／又は改善するための組成物（二次胆汁酸に起因する疾患の予防及び／又は治療用組成物）であってもよい。
【００１４】
本発明の剤及び組成物において、霊芝成分は、特に少なくとも霊芝の発酵物を含んでいてもよく、抽出物は、水抽出物であってもよい。
【００１５】
また、本発明の剤及び組成物において、二次胆汁酸は、リトコール酸、デオキシコール酸、及びヒオデオキシコール酸から選択された少なくとも１種を含んでいてもよく、特に、少なくともヒオデオキシコール酸を含んでいてもよい。
【００１６】
本発明の剤及び組成物において、二次胆汁酸に起因（関連）する疾患（又は疾病又は症状）は、例えば、大腸疾患（例えば、大腸癌、大腸炎など）及び肝臓障害（又は肝障害）から選択された少なくとも１種であってもよい。
【００１７】
本発明の剤は、前記のように、霊芝成分の抽出物を有効成分としているため、二次胆汁酸の抑制又は低減機能や二次胆汁酸に起因する疾患の予防及び／又は治療（改善）機能のみならず、従来の二次胆汁酸低減機能を有する成分にはない、他の機能も有している。
【００１８】
そのため、本発明の剤又は組成物は、さらに、このような他の機能を付与するための剤又は組成物［例えば、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）を阻害するための剤又は組成物］であってもよい。
【００１９】
具体的には、本発明の剤又は組成物は、さらに、血圧の降下、血流改善、及び体温調節機能の向上からなる群から選択される少なくとも１以上の用途に使用するための剤又は組成物であってもよい。
【００２０】
また、本発明には、前記剤又は組成物を製造する方法も含まれる。例えば、前記剤又は前記組成物が霊芝の発酵物を含む霊芝成分の抽出物を含有する場合、このような剤又は組成物の製造方法は、霊芝の発酵物を含む霊芝成分の抽出物を含有する前記剤又は前記組成物を製造する方法であって、霊芝を所定の温度（例えば、３０〜４０℃）で発酵（又は熟成）させる発酵工程を含む製造方法であってもよい。
さらに、本発明には、以下の方法を包含する。
【００２１】
前記剤（又は霊芝成分）又は前記組成物を、動物（ヒト、非ヒト動物）に投与（摂取）し、二次胆汁酸を抑制（又は低減）する方法。
【００２２】
前記剤（又は霊芝成分）又は前記組成物を、動物（ヒト、非ヒト動物）に投与（摂取）し、二次胆汁酸に起因する疾患（又は疾病又は症状）（大腸疾患、肝臓障害など）を予防及び／又は治療（改善）する方法。
【００２３】
これらの方法では、前記のように、さらに、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）を阻害してもよく、これに関連又は起因する疾患（又は疾病又は症状）を予防及び／又は治療（改善）してもよい。
【発明の効果】
【００２４】
本発明の剤又は組成物によれば、二次胆汁酸を抑制又は低減できる。そのため、本発明では、二次胆汁酸に起因する、種々の疾患（又は症状）の予防や治療（改善）のための剤及び組成物も提供できる。
【００２５】
より具体的な態様では、本発明の剤及び組成物は、大腸疾患（大腸癌、大腸炎など）及び肝臓障害（又は肝障害）から選択された少なくとも１種の予防又は治療（又は改善）のために使用できる。
【００２６】
また、本発明の剤又は組成物は、二次胆汁酸の中でも、特許文献１において確認されていないヒオデオキシコール酸に対する抑制又は低減効果も有しており、選択性なく、二次胆汁酸を抑制又は低減できる。
【００２７】
さらに、本発明の剤又は組成物は、一次胆汁酸（コール酸）を抑制又は低減しないため、一次胆汁酸による機能又は作用（例えば、脂肪の乳化促進、コレステロールの排出など）を損なうことなく、二次胆汁酸を低減できる。
【００２８】
さらにまた、本発明の剤又は組成物は、霊芝成分の抽出物（又は抽出エキス）で構成されているため、二次胆汁酸の抑制又は低減作用に加えて、従来の二次胆汁酸の低減作用を有する物質にない作用［例えば、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）の阻害作用など］を有している。そのため、本発明の剤又は組成物は、二次胆汁酸の抑制又は低減作用とともに、血圧降下作用、血流改善作用、体温調節機能向上作用なども有している。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００３０】
本発明の剤（及び組成物）は、霊芝及び／又はその発酵物から選択される霊芝成分の抽出物（エキス又は抽出エキス）を含有することを特徴とする。
【００３１】
霊芝（Ｇａｎｏｄｅｒｕｍａ  ｌｉｎｇｚｈｉ）は、ヒダナシタケ目マンネンタケ科マンネンタケ属に属するきのこである。
【００３２】
霊芝としては、特に限定されず、例えば、赤霊芝、青霊芝、黄霊芝、黒霊芝、白霊芝、紫霊芝、鹿角霊芝等が挙げられる。これらは、１種又は２種以上を使用することができる。また、霊芝は、天然品であっても、栽培品であってもよく、従来公知の取得方法により得られるものを使用することができる。
【００３３】
霊芝の部位は、特に限定されず、どの部位でも使用することができる。霊芝の部位としては、例えば、傘、ヒダ、ツバ、柄、ツボ等が挙げられる。これらは１種又は２種以上を使用することができる。
【００３４】
霊芝の発酵物としては、特に限定されるものではないが、代表的には、霊芝の自己消化物等である。
【００３５】
霊芝の自己消化物は、例えば、霊芝を所定の温度（例えば、３０〜４０℃、好ましくは３５〜４０℃程度）で発酵又は熟成させることにより、得ることができる。発酵時間は、特に限定されず、例えば１〜４８時間、好ましくは１〜３０時間である。なお、発酵は、霊芝の発酵に寄与する菌等の存在下で行ってもよい。
【００３６】
発酵は、水の存在下で行ってもよい。水を存在させる態様としては、特に限定されず、噴霧、浸漬などが挙げられる。
なお、発酵後、必要に応じて、滅菌処理（例えば、加熱滅菌、高圧滅菌、濾過滅菌等）を行ってもよい。
【００３７】
霊芝成分の抽出物としては、例えば、霊芝成分の溶媒抽出物等が挙げられる。
抽出溶媒としては、特に限定されないが、例えば、水（例えば、蒸留水、イオン交換水、生理食塩水等）、有機溶媒［例えば、低級アルコール（例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｔ−ブタノール等）、多価アルコール（例えば、グリセリン、プロピレングリコール等）、ケトン類（例えば、アセトン等）、エステル類（例えば、酢酸エチルエステル等）、エーテル類（例えば、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン等）等］等が挙げられ、好ましくは、水、低級アルコール等であり、より好ましくは、水、エタノール等である。これらは１種単独で又は２種以上を組合せて使用することができる。
【００３８】
霊芝成分の溶媒抽出物の製造方法は、特に限定されず、植物の溶媒抽出物の製造において使用される従来公知の方法に従ってよい。
【００３９】
霊芝成分の溶媒抽出物は、例えば、霊芝成分と抽出溶媒の混合物を、必要に応じて撹拌することにより得ることができる。
なお、溶媒抽出に供する霊芝成分としては、霊芝及び／又はその発酵物をそのまま使用してもよいし、霊芝及び／又はその発酵物を粉砕物、粉末、ペースト等として使用してもよい。
【００４０】
霊芝成分の溶媒抽出物の製造において、霊芝成分と抽出溶媒の配合割合は、特に限定されないが、例えば、霊芝成分／抽出溶媒の重量比が、好ましくは１／２〜１／１００、より好ましくは１／２〜１／５０、さらに好ましくは１／５〜１／２０である。
【００４１】
溶媒抽出の温度は、霊芝成分と抽出溶媒の混合物の重量等により適宜選択され得るが、例えば１５〜１５０℃である。
溶媒抽出の時間は、前記混合物の重量や処理温度等により適宜選択され得るが、例えば、０．１〜４８時間である。
【００４２】
霊芝成分の溶媒抽出物の中でも、霊芝成分の水抽出物が好ましく、熱水抽出物（例えば、霊芝成分と水の混合物を９０〜１３０℃で加熱した物等）が好ましい。
【００４３】
霊芝成分の抽出物は、必要に応じて、さらに、粗精製又は精製（例えば、ろ過、遠心分離等）、滅菌（例えば、加熱滅菌、高圧滅菌、濾過滅菌等）、希釈、濃縮、乾燥（凍結乾燥等）、結晶化、再結晶等の処理を行ったものであってもよい。これらの処理方法は、特に限定されず、常法に従ってよい。
【００４４】
また、本発明は、霊芝成分（又は本発明の剤）を含む組成物も含有する。
このような組成物は、例えば、飲食品（食品組成物）、医薬組成物等であってよい。
【００４５】
なお、飲食品には、健康食品、サプリメントなども含まれる。健康食品としては、例えば、保健、健康維持及び増進等を目的とした食品（例えば、認可された特定機能性食品、特定機能性食品の認可のないいわゆる健康食品等）、特定保健用食品等である。また、サプリメントとしては、例えば、栄養素等を補うための栄養補助食品、栄養機能食品、健康の保持、回復、増進等のために役立つ機能等を有する健康補助食品、健康機能食品等である。
【００４６】
本発明の剤又は組成物は、添加剤を含んでいてもよい。添加剤（他の添加剤）としては、特に限定されず、通常の食品や医薬品に使用される添加剤（例えば、賦形剤、滑沢剤、崩壊剤、結合剤、溶解補助剤、甘味料、着色料、保存料、増粘剤、酸化防止剤、香料、酸味料、調味料、乳化剤、ｐＨ調整剤、ビタミン類、ミネラル類、アミノ酸類、色素等）を使用することができる。添加剤は、単独で又は２種以上組み合わせてもよい。
【００４７】
本発明の剤又は組成物の投与形態は、特に限定されず、例えば、経口投与、非経口投与、外用等であるが、好ましくは、経口投与である。
【００４８】
本発明の剤又は組成物の剤型は、特に限定されないが、経口投与の場合は、例えば、固形剤（例えば、錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、丸剤、トローチ剤、カプセル剤等）、液剤（例えば、エリキシル、シロップ、懸濁液等）等が挙げられる。非経口投与の場合の剤型としては、特に限定されないが、例えば、注射剤、経皮剤、経腸剤、点滴剤、外用剤、坐剤等が挙げられる。
【００４９】
本発明の剤又は組成物の投与量（又は摂取量）は、特に限定されないが、例えば、成人１日当たり、剤又は組成物に含有される霊芝成分の抽出物の乾燥重量に換算して、好ましくは約１〜１０００ｍｇ／ｋｇ（体重）であり、より好ましくは約１０〜１００ｍｇ／ｋｇ（体重）程度であってもよい。
【００５０】
また、本発明の剤又は組成物の投与回数（又は摂取回数）は、剤型、投与対象等に応じて適宜選択され、１回投与であってもよいし、ある間隔をおいて持続投与してもよい。持続投与の場合、投与間隔は１日１回から数ヶ月に１回でもよい。
【実施例】
【００５１】
以下、実施例によって本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されず、本発明の技術的範囲を逸脱しない範囲において様々な変更や修正が可能である。
【００５２】
［霊芝抽出物］
霊芝（赤霊芝、子実体）を粉砕した霊芝粉末２５ｇに水５００ｍＬを加え、１２１℃で２時間加熱し、霊芝を水中に抽出した。抽出後の液を濾過した後、凍結させて粉末とし、霊芝の溶媒抽出物を得た。
【００５３】
［発酵霊芝抽出物］
霊芝粉末８００ｇに水１２Ｌを添加し、３７度で２４時間撹拌処理した後、１２１℃で１５分間加熱減菌し、フィルター濾過した後、得られたエキスを凍結乾燥させて粉末とし、霊芝の発酵物を得た。この霊芝の発酵物２５ｇに水５００ｍＬを加え、１２１℃で２時間加熱し、霊芝の発酵物を水中に抽出した。抽出後の液を濾過した後、凍結乾燥させて粉末とし、霊芝の発酵物の溶媒抽出物を得た。
【００５４】
得られた霊芝抽出物及び発酵霊芝抽出物を用いて、以下のように、二次胆汁酸抑制作用を検討した。
【００５５】
実験動物はＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｙラット（雄、５週齢）を用いた。各個体は２３−２４℃、１２時間の明暗サイクル条件下にてステンレス製の個別ケージ中にて飼育した。予備飼育期間中はオリエンタル酵母社製の固形飼料（ＭＦ）を、水は脱イオン水を自由摂取にて与えた。予備飼育終了後、各群の平均体重がほぼ均一となるよう、対照群８匹、霊芝抽出物摂取群８匹、発酵霊芝抽出物摂取群７匹の３群に分けた。
【００５６】
試験期間中の飼料は、牛脂３０％、カゼイン２０％、Ｌ−シスチン０．３％、ＡＩＮ９３ビタミン混合１％、ＡＩＮ９３Ｇミネラル混合３．５％、セルロース５％、ショ糖２０％、コーンスターチ２０．２％を含む高脂肪食とし、２１日間摂取させた。霊芝摂取群、発酵霊芝摂取群には、高脂肪食（コンスターチのみ１５．２％）にそれぞれ霊芝の熱水抽出物５％、発酵霊芝熱水抽出物５％を添加した飼料を摂取させた。なお、対照（コントロール）群には、霊芝及び発酵霊芝抽出物を添加しない同一試料を摂取させた。飼料は毎日一定量を与え、翌日に残量を測定して摂取量を求めた。試験終了の３日前から、各個体の糞を採取した。
【００５７】
ラットから採取した糞便は凍結乾燥した後、エタノールを加えてホモジナイズを行った。糞中の胆汁酸は、エタノールで２回処理して抽出した。胆汁酸のアルカリ加水分解は１１０℃で１８時間行い、その後、１２０℃で１時間加熱した後、塩酸でｐＨ１とし、５ｍｌのジエチルエーテル処理を２回行い、胆汁酸を抽出した。
【００５８】
得られた胆汁酸のメチル化、及びトリメチルシリル誘導体化を行った後、ガスクロマトグラフィーにて分析を行った。ガスクロマトグラフィーはＧＬＳｃｉｅｎｃｅ  ＧＣ−３８０、カラムはＴＣ−１column（３０ｍ×０．２５ｍｍ）を用い、温度を２５０℃から２９０℃まで上昇させて分析を行った。
【００５９】
なお、飼料の抽出の段階から、一定量のノルデオキシコール酸を加え、内部標準とした。胆汁酸量は、ガスクロマトグラフィー分析を行った結果を基に、コール酸、リトコール酸、デオキシコール酸、ヒオデオキシコール酸の濃度を求めた。動物試験は広島大学の実験動物取扱規定に準じて行った。
【００６０】
結果を下記表に示す。
【００６１】
【表１】
2018043955.tif 000002
【００６２】
上記表の結果から明らかなように、霊芝抽出物、発酵霊芝抽出物のいずれについても、二次胆汁酸の抑制効果（減少効果）が得られることがわかった。
【００６３】
しかも、このような抑制効果は、二次胆汁酸のうち、リトコール酸、デオキシコール酸、ヒオデオキシコール酸のすべてで確認でき、ヒオデオキシコール酸については検出限界未満まで低減された。
【００６４】
また、コール酸濃度は、低減するよりも、むしろ増えていたことから、コール酸生成量を抑制することなく、二次胆汁酸を低減できることが示唆された。
【産業上の利用可能性】
【００６５】
本発明の剤及び組成物は、二次胆汁酸を抑制（又は低減）できる。また、本発明の剤及び組成物は、二次胆汁酸の抑制効果により、大腸疾患（例えば、大腸癌など）や肝臓障害の予防や治療用途に使用できる。