(57)【要約】【課題】アンデローバの種子油、またはアンデローバの種子油もしくは花油などに含有されるリモノイド成分を有効成分として含み、優れたコラーゲン産生促進効果を奏するコラーゲン産生促進剤、及び当該コラーゲン産生促進剤を配合し、コラーゲン産生促進効果を奏する外用組成物および内服組成物を提供する。【解決手段】アンデローバの種子油又はアンデローバの種子油若しくは花油から得ることができるリモノイド成分を有効成分として含むことを特徴とするコラーゲン産生促進剤並びに前記コラーゲン産生促進剤を配合することを特徴とする外用組成物または内服組成物。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アンデローバの種子油を有効成分として含むことを特徴とするコラーゲン産生促進剤。
【請求項２】
下記の構造式（１）で表される化合物：
【化１】
2018140947.tif 000012
下記の構造式（２）で表される化合物：
【化２】
2018140947.tif 000013
下記の構造式（３）で表される化合物：
【化３】
2018140947.tif 000014
下記の構造式（４）で表される化合物またはその塩：
【化４】
2018140947.tif 000015
下記の構造式（５）で表される化合物：
【化５】
2018140947.tif 000016
下記の構造式（６）で表される化合物：
【化６】
2018140947.tif 000017
および、下記の構造式（７）で表される化合物：
【化７】
2018140947.tif 000018
からなる群の中から選ばれる１又は２以上を有効成分として含むことを特徴とするコラーゲン産生促進剤。
【請求項３】
請求項１又は請求項２に記載のコラーゲン産生促進剤を配合する外用組成物または内服組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アンデローバ（学名：Ｃａｒａｐａ  ｇｕｉａｎｅｎｓｉｓ）の種子を圧搾して得られる油（種子油）を、又はアンデローバの種子油もしくは花油中から得ることができるリモノイド成分を有効成分（活性成分）として含有するコラーゲン産生促進剤、ならびに前記コラーゲン産生促進剤を配合する化粧料および医薬に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
アンデローバとは、センダン科（Ｍｅｌｉａｃｅａｅ）の植物Ｃａｒａｐａ  ｇｕｉａｎｅｎｓｉｓの通称であり、主にアマゾン地域に分布する植物である。アンデローバの種子は、民間薬として、防虫剤、殺虫剤、解熱剤、駆虫剤や肝炎やリウマチの治療剤などとして使用されている。
【０００３】
アンデローバの利用については、これまでにも樹皮からの抽出物が、外用組成物として使用でき、生体組織に対する障害防御作用および賦活作用を有することが開示されている（特許文献１）。また、アンデローバの種子油については、抗アレルギー、抗炎症、鎮痛および免疫調節に有用であることも開示されている（特許文献２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００１−１５１６３４公報
【特許文献２】特表２００８−５０６７１８公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかし、アンデローバや、アンデローバの種子油等の本植物から得られる成分、化合物と、コラーゲン産生促進効果との関係は、これまで知られていなかった。本発明は、アンデローバの種子油、またはアンデローバの種子油もしくは花油などに含有されるリモノイド成分を有効成分として含み、優れたコラーゲン産生促進効果を奏する製剤（コラーゲン産生促進剤）、及び当該コラーゲン産生促進剤を配合し、コラーゲン産生促進効果を奏する医薬組成物、医薬部外品および化粧料を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者は、アンデローバの種子油について、およびアンデローバの種子油や花油の含有成分について、種々の生物活性の検討を鋭意行った結果、アンデローバの種子油、および、アンデローバの種子油および／または花油に含まれる一部のリモノイド成分が、ヒト新生児皮膚由来細胞（ＮＨＤＦ）からのコラーゲン産生を有意に促進することを見いだし、以下に示す態様の発明を完成するに至った。
【０００７】
本発明は、その第１の態様として、アンデローバ（Ｃａｒａｐａ  ｇｕｉａｎｅｎｓｉｓ）の種子油を有効成分（活性成分）として含むことを特徴とするコラーゲン産生促進剤（請求項１）を提供する。
【０００８】
「種子油」とは、アンデローバの種子に含まれる油成分を意味する。この種子油は、アンデローバの種子を圧搾して得ることができる。種子油には、さらに、アンデローバの種子を圧搾して得る油成分に含まれる沈殿物や、この油成分から、層分離や分画等により分離された液体成分なども含まれる。
【０００９】
コラーゲン産生促進剤とは、ヒトや動物の細胞のコラーゲンの産生を亢進する作用を有する製剤である。コラーゲン産生促進剤を、ヒト等に投与することにより、コラーゲンの産生の減少または分解の亢進による生体内のコラーゲン量の減少を、予防や改善することができる。そして、生体内のコラーゲン量の減少により顕在化する障害（疾病）や加齢変化、例えば、骨粗鬆症、変形性関節症、動脈硬化、脳溢血、歯周病や皮膚の皺などの予防・改善に使用することができる。
【００１０】
本発明は、その第２の態様として、
下記の構造式（１）で表される化合物（ｇｅｄｕｎｉｎ）：
【００１１】
【化１】
2018140947.tif 000002
【００１２】
下記の構造式（２）で表される化合物（６α−ａｃｅｔｏｘｙｇｅｄｕｎｉｎ）：
【００１３】
【化２】
2018140947.tif 000003
【００１４】
下記の構造式（３）で表される化合物（７−ｄｅａｃｅｔｏｘｙ−７−ｏｘｏｇｅｄｕｎｉｎ）：
【００１５】
【化３】
2018140947.tif 000004
【００１６】
下記の構造式（４）で表される化合物（７−ｄｅａｃｅｔｏｘｙ−７−ｈｙｄｒｏｘｙｇｅｄｕｎｉｎ）：
【００１７】
【化４】
2018140947.tif 000005
【００１８】
下記の構造式（５）で表される化合物（６α−ｈｙｄｒｏｘｙｇｅｄｕｎｉｎ）：
【００１９】
【化５】
2018140947.tif 000006
【００２０】
下記の構造式（６）で表される化合物（ｃａｒａｐａｎｏｌｉｄｅ  Ｃ）：
【００２１】
【化６】
2018140947.tif 000007
【００２２】
および、下記の構造式（７）で表される化合物（ｍｅｔｈｙｌ  ａｎｇｏｌｅｎｓａｔｅ）：
【００２３】
【化７】
2018140947.tif 000008
【００２４】
からなる群の中から選ばれる１又は２以上を有効成分として含むことを特徴とするコラーゲン産生促進剤を提供する。
【００２５】
上記の構造式（１）〜（７）で表される化合物は、アンデローバの種子油および／または花油に含まれる化合物であり、種子油および／または花油から得られる化合物である。花油とは、アンデローバの花に含まれる油成分を意味する。この花油は、例えばアンデローバの花を圧搾して得ることができ、さらに、圧搾して得る油成分に含まれる沈殿物や、この油成分から、層分離や分画等により分離された液体成分なども含まれる。
【００２６】
第１の態様のコラーゲン産生促進剤または第２の態様のコラーゲン産生促進剤を、ヒトまたは動物に投与することにより、ヒトまたは動物の細胞のコラーゲン産生を促進することができる。例えば、これらをヒトに投与することにより、ヒトの細胞のコラーゲン産生を促進し、コラーゲンの体内での含量低下から導かれる種々の健康障害、疾患又は老化の徴候を予防・改善することができる。
【００２７】
また、アンデローバの種子油は、民間薬としての使用歴が長く、人体に作用させた場合、安全性が高いと判断される。さらにアンデローバの種子油または花油に含有される成分についても、その使用歴から安全性が確保されているものである。従って、第１の態様のコラーゲン産生促進剤または第２の態様のコラーゲン産生促進剤は、外用組成物または内服組成物として、医薬品、医薬部外品、化粧品などに好適に使用することができる。
【００２８】
そこで、本発明は、その第３の態様として、前記第１の態様のコラーゲン産生促進剤および／または第２の態様のコラーゲン産生促進剤を含有することを特徴とする外用組成物または内服組成物を提供する。
【００２９】
本発明の外用組成物または内服組成物は、ヒトや動物の細胞のコラーゲンの産生を促進することにより、コラーゲンの体内での含量低下から導かれる種々の健康障害又は老化の徴候を予防・改善することに寄与する。従って、医薬品、医薬部外品、化粧品などとして好適に使用することができる。
【００３０】
例えば、本発明の外用組成物は、皮膚や毛髪などに適用され、皮膚や毛髪のコラーゲンの産生を促進することができる。そして、クリーム、ハンドクリーム、乳液、化粧水、ローション、石けん、ハンドソープ、ボディソープ、貼付剤などの皮膚外用剤および皮膚化粧料、シャンプー、リンス、トニック、育毛剤などの毛髪化粧料として好適に使用できる。
【００３１】
一方、本発明の内服組成物は、コラーゲンの体内での含量低下から導かれる疾患や健康障害である骨粗鬆症、変形性関節症、動脈硬化、脳溢血、歯周病や皮膚の皺などの予防・改善を目的とする医薬品、医薬部外品などとして使用できる。
【発明の効果】
【００３２】
本発明のコラーゲン産生促進剤は、ヒトや動物の細胞、例えばヒト皮膚線維芽細胞のコラーゲンの産生を亢進させる。従って、ヒトに投与することにより、環境ストレスや加齢、種々の疾病の発症、増悪に関与する生体内のコラーゲン含量の低下を予防または改善すると考えられる。また、民間薬としての使用歴が長いアンデローバから得られるので、人体などに作用させた場合、安全性が高いと判断される。そこで、コラーゲンの体内での含量低下から導かれる種々の健康障害又は老化の徴候を予防・改善することに寄与する、医薬品、医薬部外品、化粧品などとして好適に使用することができ、さらに健康食品等への応用も考えられ、応用範囲がきわめて広いものである。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
以下、発明を実施するための形態を説明する。また、実施例を挙げて本発明を具体的に説明する。しかし、本発明は、下記の形態や実施例に制限されるものではない。
【００３４】
上記構造式（１）〜（７）で表される化合物は、アンデローバの種子油または花油などから得られる。具体的には、構造式（１）、（５）または（７）で表される化合物は、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ６８，３６６９−３６７７（２０１２）に記載されている化合物であり、構造式（２）または（３）で表される化合物は、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ６７，７８２−７９２（２０１１）に記載されている化合物であり、構造式（４）で表される化合物は、Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａ  １００，８１−８７（２０１５）に記載されている化合物であり、構造式（６）で表される化合物は、Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａ  ９６，５６−６４（２０１４）に記載されている化合物であり、それぞれ前記文献に記載されている方法、又は前記文献が引用する文献に記載されている方法により、アンデローバの種子油または花油より製造することができる。
【００３５】
本発明の外用組成物および内服組成物は、前記第１の態様のコラーゲン産生促進剤および／または第２の態様のコラーゲン産生促進剤と、その組成物の種類、用途、剤形などに応じた公知の配合成分を用いて定法により調整できる。前記第１の態様のコラーゲン産生促進剤および／または第２の態様のコラーゲン産生促進剤の配合量は、有効量であり組成物の用途、剤形により適宜選定されるが、通常０．００００１〜２０質量％配合され、好ましくは、０．０００１〜１０質量％配合される。
【００３６】
実施例１
クラボウ社より購入したＮｏｒｍａｌ  Ｈｕｍａｎ  Ｄｅｒｍａｌ  Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ（ＮＨＤＦ：正常ヒト新生児包皮皮膚線維芽細胞）を、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）、１００ｕｎｉｔｓ／ｍＬ  ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ  Ｇおよび１００μｇ／ｍＬ  ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ（和光純薬社）を含有するＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ’ｓ  Ｍｅｄｉｕｍ（ＤＭＥＭ、ｇｌｕｃｏｓｅ１０００ｍｇ／Ｌ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈｉ社）で培養（５％ＣＯ２、３７℃）して実験に使用した。培養容器には、ファルコン社製７５ｃｍ２培養フラスコを使用した。
【００３７】
コラーゲン産生促進作用の検討は、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｎａｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，２８４，ｐ２４３−２５２（２００３）に記載された方法に準じて行った。即ち、ＮＨＤＦを、９６穴プレート（住友ベークライト社）に、２．５×１０４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ（１００μＬ／ｗｅｌｌ）で播種し、３７℃、５％ＣＯ２存在下、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭで培養した。２４時間後、培養液（ＤＭＥＭ）を除去し、アンデローバの種子を圧搾して得た被験物質の種子油を、表１に記載の種子油濃度（ＤＭＥＭの１ｍＬに対する種子油の質量μｇ）となるように含有させたＦＢＳ不含のＤＭＥＭ１００μＬ／ｗｅｌｌを、各ｗｅｌｌに添加して、さらに培養を継続した。
【００３８】
４８時間後、培養上清２０μＬ／ｗｅｌｌを下記の市販キットに添付のｓａｍｐｌｅ  ｄｉｌｕｅｎｔで１８倍希釈した。この希釈した培養上清中のＰｒｏｃｏｌｌａｇｅｎ  ｔｙｐｅ  Ｉ  Ｃ−ｐｅｐｔｉｄｅ（ＰＩＰ）濃度を市販キットＰＩＰ  ＥＩＡ  Ｋｉｔ（タカラバイオ社）を用いて定量した。定量されたＰＩＰ濃度の、対照群（ｃｏｎｔｒｏｌ）のＰＩＰ濃度に対する比率（％）を算出した。
【００３９】
上記の実験を、各群についてＮ＝４で実施し、比率の平均値およびＳ．Ｅ．Ｍ．（標準誤差）を算出し、下記の表１に示した。対照群との有意差の検定には、Ｄｕｎｎｅｔｔの多重比較検定を使用して、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１を有意とし、種子油のコラーゲン産生促進作用を評価した。  
【００４０】
【表１】
2018140947.tif 000009
【００４１】
上記の表に示すように、アンデローバの種子油を培養液中に添加することにより、種子油の濃度１０μｇ／ｍＬ以上において、コラーゲンの産生が有意に亢進した。
【００４２】
実施例２
アンデローバの種子を圧搾して得た種子油またはアンデローバの花油から、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ６８，３６６９−３６７７（２０１２）、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ６７，７８２−７９２（２０１１）、Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａ  １００，８１−８７（２０１５）もしくはＦｉｔｏｔｅｒａｐｉａ  ９６，５６−６４（２０１４）に記載されている方法またはこれらの文献が引用する文献に記載されている方法より、前記構造式（１）〜（７）で表される化合物を、単離して実験に使用した。また、単離された化合物について、１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲのケミカルシフト値およびＭＳスペクトルデータの測定を行い、前記文献またはこれらの文献が引用する文献に記載されている数値と比較することにより化合物の同定を行った。
【００４３】
実施例１と同様にして、ＮＨＤＦを培養して実験に使用した。実施例１と同様にして、ＮＨＤＦを、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭで２４時間培養した後、培養液（ＤＭＥＭ）を除去し、前記の単離された化合物（構造式（１）〜（７）で表される化合物）を、表２に記載の濃度（ＤＭＥＭ中の化合物の濃度μＭ）となるように含有させたＦＢＳ不含のＤＭＥＭ１００μＬ／ｗｅｌｌを、各ｗｅｌｌに添加して、さらに培養を４８時間継続した後、実施例１と同様にして、培養上清の希釈、ＰＩＰ濃度の定量を行い、定量されたＰＩＰ濃度の、対照群（ｃｏｎｔｒｏｌ）のＰＩＰ濃度に対する比率（％）を算出した。
【００４４】
上記の実験を、各群についてＮ＝４で実施し、比率の平均値およびＳ．Ｅ．Ｍ．（標準誤差）を算出し、下記の表２に示した。対照群との有意差の検定には、Ｄｕｎｎｅｔｔの多重比較検定を使用して、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１を有意とし、種子油のコラーゲン産生促進作用を評価した。  
【００４５】
【表２】
2018140947.tif 000010
【００４６】
上記の表２に示すように、構造式（１）〜（７）で表される化合物は、それぞれ濃度域は異なるが、ＮＨＤＦ細胞からのコラーゲンの産生を（対照群に対して）有意に亢進することがわかる。
【００４７】
表１および表２に示した実験結果より、アンデローバの種子油および構造式（１）〜（７）で表される化合物は、ＮＨＤＦ細胞からのコラーゲンの産生を有意に亢進することが示された。
【００４８】
以下、本発明の組成物を配合した処方例を示す。下記の例は、外用組成物（スキンケアクリーム）としての一例を示すものであり、本発明の組成物の利用の一形態を示す例であり、これにより本発明の組成物の利用が限定されるものではない。
【００４９】
【表３】
2018140947.tif 000011