(57)【要約】      （修正有）【課題】再生または治癒を促進または刺激するか、または上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルを減少させ、感染、炎症、炎症性障害、酸化障害、アテローム硬化症、心疾患、胃、腸、または肝臓の炎症状態またはその合併症の予防または治療における組成物の提供。【解決手段】真菌細胞および胞子、そのいずれかの抽出物の提供。真菌細胞または胞子は真菌発酵チーズまたはその他の食材または飲料物、具体的には青カビまたは白カビチーズの製造において用いられるものである。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
組成物であって：
（ｉ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団；
（ｉｉ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団を含む食品基質；および／または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）の抽出物、発酵生成物または代謝物を含み、
再生または治癒を促進または刺激するかまたは上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルを減少させ、感染、炎症、炎症性障害、酸化障害、アテローム硬化症、心疾患、胃、腸、または肝臓の炎症状態またはその合併症の予防または治療において使用する前記組成物。
【請求項２】
請求項１の前記組成物であって：
（ａ）前記感染がＣｈｌａｍｙｄｉａ、またはＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ感染であるか；
（ｂ）前記炎症性障害がリソゾーム障害、酸性障害、ＳＯＤ障害、免疫グロブリン媒介性障害、ペルオキシダーゼ媒介性障害、過酸化水素媒介性障害、または酸化性障害であるか；
（ｃ）前記組成物が創傷、熱傷、潰瘍の再生、またはその他の形態の障害または加齢組織の再生を促進または刺激するか；
（ｄ）前記組成物、または基質が、乳製品または乳製品ベースの飲料物であるか；
（ｅ）前記組成物、または基質が、真菌発酵チーズであるか、またはこれを含むか；または
（ｆ）前記組成物、または基質が、真菌発酵食材または飲料物であるか、またはこれを含み；かつ／または
（ｇ）前記組成物が強化食品または飲料物、食品添加物、サプリメント食品、ニュートラシューティカル製品、医薬品、局所皮膚科製剤または局所化粧品である前記組成物。
【請求項３】
請求項１または２の前記組成物であって、前記組成物が上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリドを低下、またはアテローム硬化症、心疾患、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ感染またはＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ感染を治療または予防する際の使用を目的としかつ前記組成物が：（ｉ）真菌発酵チーズ；（ｉｉ）真菌発酵食材または飲料物、（ｉｉｉ）そのようなチーズ、または食材に由来する抽出物、発酵産物または代謝物；または（ｉｉｉ）であるか、またはこれを含む前記組成物。
【請求項４】
請求項１または２の前記組成物であって、前記真菌細胞および／または胞子が、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ属の真菌；Ｒｈｉｚｏｐｕｓ属の真菌；Ｆｕｓａｒｉｕｍ属の真菌；またはＭｏｎａｓｃｕｓ属の真菌；またはＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ属の真菌から選択される真菌に由来するか、または前記抽出物、発酵生成物または代謝物がこれから得られる前記組成物。
【請求項５】
請求項３の前記組成物であって、前記Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ属の真菌がＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｒｏｑｕｅｆｏｒｔｉ；Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃａｍｅｍｂｅｒｔｉ；Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃａｎｄｉｄｕｍ；Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｇｌａｕｃｕｍ；およびＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｎａｌｇｉｏｖｅｎｓｅから選択される前記組成物。
【請求項６】
前記の請求のいずれか１つの前記組成物であって：
（ａ）前記組成物が上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリド、アテローム硬化症、冠動脈心疾患を有するか、または心臓発作または卒中を少なくとも１回経験した対象に投与されようとしており
（ｂ）前記対象がＣｈｌａｍｙｄｉａまたはＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ感染を有しており；
（ｃ）前記組成物が再生または治癒を刺激するかまたはその障害を予防し、好ましくは前記組成物が再生反応およびプロセス、および／または創傷、熱傷、潰瘍、またはその他の形態の障害または加齢組織の治癒を刺激するかまたは活性化するかまたは促進し；
（ｄ）前記個体が自己免疫疾患、高血圧、アテローム硬化症、心病変、血管病変、脳病変；メタボリックシンドローム、肥満、２型糖尿病、サルコペニア、悪液質、胃炎、胃または十二指腸潰瘍、癌（具体的には胃または十二指腸癌）、転移性癌、関節炎または関節疾患、皮膚炎、乾癬、座そう、皮膚、口またはその他の臓器組織の慢性潰瘍化、加齢関連または非加齢関連皮膚障害；皮膚またはその他の臓器または組織の熱傷および創傷；損傷（スポーツ、外傷、手術およびその他の損傷を含む）；化学療法の副作用、放射線療法、および放射線被曝から選択される状態を有するかまたは前記対象が体重過多であることを特徴とする前記組成物。
【請求項７】
前記の請求項のいずれか１つの前記組成物であって：
前記組成物が個体におけるアレルギープロセス、内皮障害、炎症；酸化障害、炎症性障害、リソゾーム障害、酸性障害、ＳＯＤまたはＩｇＧまたはその他の免疫グロブリン媒介性障害、ペルオキシダーゼ障害、過酸化水素誘導性酸化障害、臓器疾患の発症における炎症、または炎症促進性サイトカインの動員のうち１つまたはそれ以上を減少させるかまたは阻害する前記組成物；
【請求項８】
前記の請求項のいずれか１つの前記組成物であって：
（ａ）前記組成物が青カビまたは白カビ発酵チーズ、食材または飲料物、またはそのようなチーズの抽出物であるか、またはこれを含み；
（ｂ）前記組成物がロックフォール、カマンベール、クリーミーブルー、スティルトン、カブラレス、カンボゾーラ、フルム・ダンベール、ゴルゴンゾーラ、ブルー・ドーベルニュ、チボサノから選択されるチーズであるか、これを含むか、またはこれに由来する抽出物であるか；または
（ｃ）前記組成物がロックフォールチーズであるか、これを含むか、またはこれに由来する抽出物である前記組成物。
【請求項９】
前記請求項のいずれか１つに記載の組成物であって、前記抽出物が前記食品基質を液相と混合することおよび前記液相を分離することにより生成される前記組成物。
【請求項１０】
請求項９に記載の組成物であって：
（ａ）前記液相が水性または非水性溶媒であり；
（ｂ）前記液相がリン酸緩衝化食塩水（ＰＢＳ）、メタノール、エタノール、塩酸、および塩酸を含有するエタノールから選択され；
（ｃ）前記液相が遠心分離または濾過によって分離され；かつ／または
（ｄ）前記液相が分離後に滅菌または低温殺菌される前記組成物。
【請求項１１】
前記の請求項のうちいずれか１つに記載の組成物であって前記組成物が個体における食後およびその他の形態の炎症性および酸化ストレス、食後またはその他の形態のコレステロールまたはトリグリセリド血症、食後の直径２００〜６００ｎｍおよびそれ以上の大型または巨大カイロミクロン形成、食後およびその他の形態の肝臓および膵臓脂肪症、食後およびその他の形態のこれらの臓器の一過性および持続性炎症および／または障害を抑制するか、減少させるかまたは阻害することを特徴とする前記組成物。
【請求項１２】
前記の請求項のいずれか１つに記載の組成物であって前記組成物が前記状態を減少させるかまたは予防するための活性のレベルを示す付与された点数または等級を有する包装で前記組成物が包装される前記組成物。
【請求項１３】
（ｉ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団；
（ｉｉ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団を含む食品基質；および／または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）の抽出物、発酵生成物または代謝物を含む組成物の、
再生または治癒を促進または刺激するかまたは上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルを減少させ、感染、炎症、炎症性障害、酸化障害、アテローム硬化症、心疾患、胃、腸、または肝臓の炎症状態またはその合併症の予防または治療用の医薬品の製造における使用。
【請求項１４】
再生または治癒を促進または刺激するかまたは上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルを減少させ、感染、炎症、炎症性障害、酸化障害、アテローム硬化症、心疾患、胃、腸、または肝臓の炎症状態またはその合併症の予防または治療のための方法であって、前記方法がそれを必要とする個体に対して：
（ｉ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団；
（ｉｉ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団を含む食品基質；および／または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）の抽出物、発酵生成物または代謝物を含む組成物を投与することを含む前記方法。
【請求項１５】
再生または治癒を促進または刺激するかまたは上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルを減少させ、感染、炎症、炎症性障害、酸化障害、アテローム硬化症、心疾患、胃、腸、または肝臓の炎症状態またはその合併症の予防または治療における使用を目的とした、カビチーズ、そのようなチーズに由来する抽出物、またはそのようなチーズまたは抽出物のいずれかを含む食品または飲料物またはサプリメント。
【請求項１６】
個体において再生または治癒を促進または刺激しながらまたは上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルを減少させる際に、感染、炎症、炎症性障害、酸化障害、アテローム硬化症、心疾患、胃、腸、または肝臓の炎症状態またはその合併症の予防または治療における使用を目的とした抽出物を生成するための方法であって：
（ａ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団を含む食品基質を提供すること；
（ｂ）前記食品基質を液相に混合することおよび；
（ｃ）前記液相を分離して前記抽出物を生成することを含む前記方法。
【請求項１７】
炎症性障害、リソゾーム障害、酸性障害、ＳＯＤまたはＩｇＧまたはその他の免疫グロブリン投与障害、ペルオキシダーゼまたは過酸化水素誘導性障害、またはその他の形態の酸化障害を阻害することのできる分子、化合物または生成物の活性をスクリーニング、同定または評価する方法であって、前記方法が：
（ａ）ｐＨ４．０〜４．５と６．０〜６．５未満の間の酸性環境において、プロトンが電子生成に対して過剰な状態にある電子伝達複合体を形成することのできるグリークキードメインを有する、１つまたは複数のタンパク質を提供すること；および
（ｂ）過酸化水素の生成および／または過酸化水素の生成による酸化を監視することを含む前記方法。
【請求項１８】
請求項１６の前記スクリーニングの方法であって、前記方法が物理的、化学的、生化学または免疫化学的、細胞的、生物学的方法またはそのいずれかの組み合わせである方法。
【請求項１９】
炎症性酸化障害（ＩＯＤ）を評価するためのアッセイであって：
（ａ）ヒト組織サンプル、組織サンプルホモジネート、血清または血漿を提供すること；
（ｂ）スーパーオキシドディスムターゼの基質として作用することのできる水素イオン源を添加すること；
（ｃ）サンプルを６から２４時間インキュベートすること；および
（ｄ）酸化のレベルを判定するためにＭＤＡ試験を実施することを含む前記アッセイ。
【請求項２０】
請求項１９の前記方法であって、得られた結果が前記水素イオン源が添加されていない同じ組織、ホモジネート、血清または血漿の同等な対照サンプルについてのそれと比較される前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、食用真菌、発酵生成物およびその抽出物の栄養的、化粧品向け、予防的および治療的応用に関する。本発明は、具体的には上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルを低下させること、さらには感染、炎症、炎症性障害、アテローム硬化症、心疾患、胃、腸および肝臓の炎症状態およびその合併症を治療または予防すること、および創傷、熱傷、潰瘍、またはその他の形態の障害または加齢組織の再生または治癒を促進または刺激することに関する。
【背景技術】
【０００２】
肝臓および脂肪組織における慢性炎症プロセスは脂質異常およびメタボリックシンドロームをもたらす。その他の組織の慢性炎症も、アテローム硬化症、心血管疾患、肥満、２型糖尿病、癌、サルコペニア、胃炎、胃または十二指腸潰瘍、関節炎、皮膚科疾患および皮膚およびその他の臓器の加齢を含む数多くの臨床的影響がある。それらの病状の発症をＣｈｌａｍｙｄｉａ感染の存在と関連付ける報告は数多くある。Ｃｈｌａｍｙｄｉａ感染がどのようにして肝臓に到達し、脂質代謝を変化させさらに酸化カスケードを引き起こすことができるかというメカニズムが、最近報告されている［５〜１０］。
【０００３】
サイトカイン、および具体的にはインターロイキン、リンフォカイン、およびインターフェロンは炎症性反応および感染プロセスを制御する上で重要である。
【０００４】
炎症性酸化障害は細菌感染、または自己抗体、またはその他の毒性因子の存在によって、または炎症が臨界レベルに達したときにもたらされることがある。細胞膜への障害は、細胞内容物の細胞外環境への放出をもたらすことがある。細胞内容物はプロテアーゼ、その他の分解酵素、および酸性細胞内成分を含むことがある。細胞内成分の細胞外環境への放出は、細胞膜および細胞内マトリクスに対するさらなる障害を引き起こすことがある。さらに、局所的ｐＨの酸性シフトによって、スーパーオキシドディスムターゼ、および構造および触媒的特性の類似した他のタンパク質のペルオキシダーゼ活性が変化することがある。
【０００５】
炎症および炎症性障害を包含する病状の重要性は常に高まっている。心疾患および糖尿病のレベルは一定して上昇し、部分的には高度の肥満によって決定付けられている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｐｅｔｙａｅｖ  Ｉ．Ｍ．，Ｈｕｎｔ  Ｊ．Ｖ．（１９９６），Ｒｅｄｏｘ  ｒｅｐｏｒｔ，  ｖ．２，Ｎｏ．６，３６５−３７２．
【非特許文献２】Ｐｅｔｙａｅｖ  Ｉ．Ｍ．他（１９９８），Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓ．，ｖ．２６，Ｓ４３
【非特許文献３】Ｐｅｔｙａｅｖ  Ｉ．Ｍ．（１９９９）『スーパーオキシドディスムターゼ：最近の進歩および臨床応用』、パリ、４０−４４より．
【非特許文献４】Ｐｅｔｙａｅｖ  Ｉ．Ｍ．，Ｃｏｕｓｓｏｎｓ  Ｐ．Ｊ．（１９９９）『スーパーオキシドディスムターゼ：最近の進歩および臨床応用』、パリ、５１−５４より．
【非特許文献５】Ｂａｓｈｍａｋｏｖ  ＹＫ，他（２０１０），Ｃｏｍｐ  Ｈｅｐａｔｏｌ．，Ｊａｎ  ２８；９：３．
【非特許文献６】Ｙｕｒｉｙ  Ｋ  Ｂａｓｈｍａｋｏｖ，他（２０１０）Ｗｏｒｌｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，Ｆｅｂ  ２７；２（２）：７４−８０．
【非特許文献７】Ｐｅｔｙａｅｖ  ＩＭ，他（２０１０），Ｉｎｔ  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｓｃｉ．２０１０  Ｊｕｎ  １０；７（４）：１８１−９０
【非特許文献８】Ｉｖａｎ  Ｍ．  Ｐｅｔｙａｅｖ，他（２０１１）ＨＹＢＲＩＤＯＭＡ，Ｖｏｌｕｍｅ  ３０，Ｎｕｍｂｅｒ  ２：１３１−１３６．
【非特許文献９】Ｃｈａｌｙｋ  ＮＥ，ｅｔ  ａ；．  （２００９），  Ｋｌｉｎ  Ｌａｂ  Ｄｉａｇｎ．  ２００９  Ａｕｇ；（８）：７−８．
【非特許文献１０】Ｐｅｔｙａｅｖ  Ｉ．『心疾患における進歩−第１２回心疾患に関する世界会議−研究および治療における新しい傾向』論文集、カナダ、バンクーバー２００５年７月１６〜１９日：２７７−２８３．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
発明者らは、食用真菌およびその発酵生成物が、抗感染、抗炎症、および抗酸化を含むこれまで特性解析されたことのない有用な幅広い生物学的特性を有し、さらに組織再生を刺激することができることを発見している。その効果は、具体的には青カビおよび白カビ発酵チーズまたはそのような真菌を用いたその他の食材の生産において用いられる真菌に見られる。
【０００８】
本願に記載された組成物は、たとえば、個体において炎症性酸化障害を含む感染、炎症または酸化を減少させるかまたは阻害するか、個体において感染、炎症または酸化に関連する１つまたはそれ以上の症状の発生、持続期間、または重症度を減少させるかまたは阻害するか、または個体が感染、炎症または酸化またはそれと関連する１つまたはそれ以上の症状を患うリスクを減少しうる。組成物はコレステロールを低下させ、かつそれにより心疾患の発生率を低下させるか、またはその発生を遅延させ、さらには心疾患において、具体的には心臓発作後の回復を促進するよう促すために用いてもよい。本発明は、具体的には個体における上昇したコレステロールレベルおよび／またはトリグリセリドレベルを低下させるために用いてもよい。
【０００９】
１つの好ましい場合において、本発明は、アテローム硬化症および／または心疾患を有することが知られている対象を含めるが、健康な対象も含めて、コレステロールおよび／またはトリグリセリドを低下または減少させるために、かつ具体的には上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルを低下させるために用いてもよい。チーズは脂肪含有量が高い食品と認識されているので、このような所見は予想外である。本発明の組成物および方法は、感染を予防、減少または治療するために用いてもよい。
【００１０】
したがって本発明は、再生または治癒を促進または刺激するかまたは上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルを減少させ、感染、炎症、炎症性障害、酸化障害、アテローム硬化症、心疾患、胃、腸、または肝臓の炎症状態またはその合併症の予防または治療における使用に対して提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
したがって、本発明は：
（ｉ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団；
（ｉｉ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団を含む食品基質；および／または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）の抽出物、発酵生成物または代謝物を含み、
再生または治癒を促進または刺激するかまたは上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルを減少させ、感染、炎症、炎症性障害、酸化障害、アテローム硬化症、心疾患、胃、腸、または肝臓の炎症状態またはその合併症の予防または治療における使用を目的とする組成物を提供する。
【００１２】
さらに本発明は：（ｉ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団；（ｉｉ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団を含む食品基質；および／または（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）の抽出物、発酵生成物または代謝物を含む組成物の、再生または治癒を促進または刺激するかまたは上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルを減少させ、感染、炎症、炎症性障害、酸化障害、アテローム硬化症、心疾患、胃、腸、または肝臓の炎症状態またはその合併症の予防または治療を目的とした医薬品の製造における使用を提供する。
【００１３】
本発明は、再生または治癒を促進または刺激するかまたは上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルを減少させ、感染、炎症、炎症性障害、酸化障害、アテローム硬化症、心疾患、胃、腸、または肝臓の炎症状態またはその合併症の予防または治療のための方法であって、方法がそれを必要とする個体に対して：（ｉ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団；（ｉｉ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団を含む食品基質；および／または（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）の抽出物、発酵生成物または代謝物を含む組成物を含む組成物を投与することを含む方法を追加的に提供する。
【００１４】
本発明は、再生または治癒を促進または刺激するかまたは上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルを減少させ、感染、炎症、炎症性障害、酸化障害、アテローム硬化症、心疾患、胃、腸、または肝臓の炎症状態またはその合併症の予防または治療における使用を目的としたカビチーズ、そのようなチーズの抽出物、またはそのようなチーズまたは抽出物のいずれかを含む食品または飲料物またはサプリメントをさらに提供する。
【００１５】
さらなる実施形態において、本発明は、個体において再生または治癒を促進または刺激しながらまたは上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルを減少させ、感染、炎症、炎症性障害、酸化障害、アテローム硬化症、心疾患、胃、腸、または肝臓の炎症状態またはその合併症の予防または治療における使用を目的とした抽出物を生成するための方法であって：（ａ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団を含む食品基質を提供すること；（ｂ）前記食品基質を液相に混合することおよび；（ｃ）抽出物を生成するために液相を分離することを含む方法を提供する。
【００１６】
本発明は、炎症性障害、リソゾーム障害、酸性障害、ＳＯＤまたはＩｇＧまたはその他の免疫グロブリン投与（媒介：mediated）障害、ペルオキシダーゼまたは過酸化水素誘導性障害、またはその他の形態の酸化障害を阻害することのできる分子、化合物または生成物の活性をスクリーニング、同定または評価する方法であって、方法が：（ａ）ｐＨ４．０〜４．５と６．０〜６．５未満の間の酸性環境において、プロトンが電子生成に対して過剰な状態にある電子伝達複合体を形成することのできるグリークキードメインを有する１つまたは複数のタンパク質を提供すること；および（ｂ）過酸化水素の生成および／または過酸化水素の生成による酸化を監視することを含む方法も提供する。
【００１７】
本発明は：（ａ）ヒト組織サンプル、組織サンプルホモジネート、血清または血漿を提供すること；（ｂ）スーパーオキシドディスムターゼの基質として作用することのできる水素イオン源を添加すること；（ｃ）サンプルを６〜２４時間インキュベートすること；および（ｄ）酸化レベルを判定するためにＭＤＡ試験を実施することを含む炎症性酸化障害（ＩＯＤ）を評価するためのアッセイを追加的に提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】活性抽出物の抽出元の１つとして用いられたロックフォールチーズ（上）および対照非カビチーズとしてのオソー・イラティチーズ（Ossau-Iraty）（下）の例を示す。
【図２】カステロ（登録商標）チーズ（ａ）および２種類のカマンベールチーズ（ｂ）および（ｃ）の例を示す。
【図３】抽出物を作製するためにそこから一部分を選択したロックフォールおよびオッセイ・イラティチーズの領域を示す。左−ロックフォール：ａ）表面から約５ｍｍかつ直近の真菌コロニーの縁より１０〜１５ｍｍ以上；ｂ）真菌コロニーの縁より５ｍｍ；およびｃ）真菌コロニー内で最も発育が集中した領域−真菌の核。右−オッセイ−イラティ：ａ）表皮より５〜１０ｍｍ；ｂ）チーズの中央部分より。
【図４】ＳＤＳポリアクリルアミドゲルにおけるタンパク質電気泳動を示す。Ｍ−分子量（タンパク質標品）。１〜３溶離分画。４  ＰＢＳチーズ初回抽出物。
【図５】ＬＰＳ腹腔内（ｉ．ｐ．）攻撃に反応して腹腔に動員された総細胞数を示す：ｃｏｎｔｒｏｌ−生理食塩水のみ；ＬＰＳ−ＬＰＳｉ．ｐ．攻撃のみ；ＲＳ１−ロックフォール給餌マウス；Ｃａｓｔ−カステロ給餌マウス。
【図６】ＬＰＳｉ．ｐ．攻撃に反応して動員されたＢ細胞数を示す。
【図７】ＬＰＳｉ．ｐ．攻撃に反応して動員されたＢ−１細胞数を示す。
【図８】ＬＰＳｉ．ｐ．攻撃に反応して動員されたＴ細胞数を示す。
【図９】ＬＰＳｉ．ｐ．攻撃に反応して動員された好中球およびマクロファージの数を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
前述の「発明の概要」は本発明の全ての態様を定義することを意図せず、追加的な態様は「発明を実施するための具体的な形態」などのその他の節に記載される。本全文は、一体化した開示として関連付けることを意図し、かつ本願に記載の全ての特性の組み合わせは、その特性の組み合わせが本願の同じ文、段落、または節に同時に認められない場合であっても意図されることを理解すべきである。「１つの」または「１つの」を用いて記載または請求されている本発明の態様については、文脈が疑いなくより制限された意味を求めていない限り、これらの用語が「１つまたはそれ以上」を意味することを理解しなければならない。用語「または」は、文脈が疑いなくその他のことを要求しない限り、その他の選択肢の項目を包含するかまたは共に包含すると理解しなければならない。本発明の態様がある特性を「含む」と記載されている場合、実施形態もその特性「からなる」かまたは「本質的に」その特性「からなる」ことを意図する。用語「約」が用いられる場合、明細書も指定された正確な数値を用いて開示する。
【００２０】
本発明は、食品、具体的にはチーズ製品に用いられる真菌に由来する真菌細胞および胞子が、感染を治療または予防、炎症および炎症性障害を軽減およびコレステロールレベルを減少させることなどの、幅広い用途においてそれらが有用であることを意味する数多くの予想外の性質を有するという所見に基づいている。
【００２１】
（真菌および組成物）
本発明には任意の適切な真菌を用いることができる。食用真菌は、たとえば、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｒｏｑｕｅｆｏｒｔｉ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃａｍｅｍｂｅｒｔｉ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃａｎｄｉｄｕｍ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｇｌａｕｃｕｍまたはＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｎａｌｇｉｏｖｅｎｓｅなどのＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ属の真菌またはカビ；Ｒｈｉｚｏｐｕｓ  ｏｌｉｇｏｓｐｏｒｏｕｓなどのＲｈｉｚｏｐｕｓ属の真菌またはカビ；Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｖｅｎｅｎａｔｕｍなどのＦｕｓａｒｉｕｍ属の真菌またはカビ；Ｍｏｎａｓｃｕｓ  ｐｉｌｏｓｕｓまたはＭｏｎａｓｃｕｓ  ｐｕｒｐｕｒｅｕｓまたはＭｏｎａｓｃｕｓ  ｒｕｂｅｒなどのＭｏｎａｓｃｕｓ属の真菌またはカビ；またはＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅまたはＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｔｅｒｒｅｕｓなどのＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ属の真菌またはカビから選択されてもよい。
【００２２】
チーズの製造に用いられる任意の食用真菌、具体的には、本願で論じるチーズを製造するために用いられる真菌のうちいずれかを含む、青カビまたは白カビチーズの製造に用いられるものを本発明において用いうる。真菌はソフトチーズ、具体的にはソフト青カビまたは白カビチーズの製造に用いられるものであってもよい。本発明では真菌細胞、真菌胞子、またはそのいずれかの抽出物を用いてもよい。好ましい食用真菌はＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｒｏｑｕｅｆｏｒｔｉおよびＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃａｍｅｍｂｅｒｔｉを含む。一部の好ましい実施態様においては、食用真菌はペニシリンを生成せず、かつＰｅｎｉｃｉｌｌｉｎ  ｎｏｔａｔｕｍまたはＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍではない。
【００２３】
真菌細胞、胞子、抽出物、およびそのような真菌の代謝物は、本願に概要を記載するその予想外の性質により、多様な組成物に使用しうる。１つの例においては、本発明の真菌細胞、胞子、抽出物、代謝物および組成物は、ヒトまたは動物の身体の治療の方法における使用に提供される。
【００２４】
本発明の組成物は食品、食品添加物、サプリメント食品、局所塗布化粧品またはニュートラコスメティック、ニュートラシューティカル製品医薬品または個体が摂取するのに適したその他の組成物であってもよい。組成物は、たとえば錠剤の形態であっても、または液状物として提供されてもよい。１つの好ましい実施形態においては、本発明は本発明の真菌細胞または胞子、またはその抽出物を含むサプリメントを提供する。サプリメントはドリンクの形態であってもよい。
【００２５】
適切な食品はチーズなどの乳製品；塩漬け肉などの肉類；その他の食品、飲料物、および動物、海生生物、植物、酵母または微生物バイオマスを含む。１つの例においては、組成物はヨーグルトまたは健康ドリンクの形態にある。組成物はミルクシェークまたはその他の健康ドリンクであってもよい。組成物はアイスクリームであってもよい。組成物はソースまたはマヨネーズであってもよい。その他の適切な食品は当業者に明らかとなるであろう。一部の例においては、真菌細胞、胞子、またはその抽出物は、たとえばパンなどの食品に添加されるか、またはこれを被覆するであろう。
【００２６】
一部の好ましい実施形態においては、食品または食品基質はチーズである。１つの好ましい例においては、チーズはブルーチーズまたはソフトチーズ、具体的には、本明細書に言及されたもののうちいずれかを含めて、真菌をその調製物の一部として添加されたか、または調製のある段階でそこに添加されたチーズである。したがって、１つの好ましい例においてチーズはカビチーズである。１つの好ましい例においては、チーズは青カビまたは白カビチーズである。チーズはベインドチーズであってもよい。適切なチーズはロックフォール；カマンベール；ダニッシュブルーチーズ；クリーミーブルー；スティルトン；カブレラス；ブルーブリー、カンボゾーラ；フルム・ダンベール；ゴルゴンゾーラ；ブルー・ドーベルニュおよびチボサノおよびその他のカビ含有チーズを含む。チーズは、通常は真菌を用いて製造されないが、チーズを強化するために本発明の真菌を添加されたチーズであってもよい。チーズは、一部の場合には、フレンチチーズであってもよく、かつその他の場合においてはダニッシュチーズであってもよい。
【００２７】
チーズは、たとえば、ウシ、ヒツジ、ヤギ、またはスイギュウの乳から製造されるかまたはこれを含むチーズであってもよい。チーズは低温殺菌されていても、またはされていなくてもよい。チーズはＵＨＴ処理に付してもよい。本願で論じられる組成物はいずれも低温殺菌またはＵＨＴ処理されていても、または低温殺菌されていなくてもよい。一部の場合には、本発明のチーズの真菌細胞または胞子、またはその他の組成物は生きていてもよく、その他の場合には処理によって真菌細胞および／または胞子を死滅させてもよい。１つの好ましい場合には、食品または本発明のその他の製品はチーズの製造に用いられる真菌、またはそのような真菌の抽出物を含む。
【００２８】
（抽出および活性の測定）
食品基質または食用真菌集団の抽出物を使用または提供し、かつタンパク質、糖タンパク質、リポタンパク質、多糖類、および副次的代謝物を含む、食用真菌によって生成される１つまたはそれ以上の分子または組成物を含んでもよい。分子または組成物は、食用真菌による食品基質の代謝によって製造されてもよい。抽出物は、一部の例においては、チーズ全体に由来、またはチーズの調製に用いられる真菌の培養に由来する抽出物であってもよい。
【００２９】
食品基質または真菌集団の適切な抽出物は、基質または集団を液相と混合し、かつ液相を分離することによって生成されてもよい。たとえば、本願に記載されるような使用を目的とした抽出物を生成するための方法は：（ａ）食用真菌の細胞または胞子の集団を含む食品基質を提供すること；（ｂ）食品基質を液相と混合すること；および（ｃ）液相を分離して抽出物を生成することを含んでもよい。
【００３０】
適切な液相は、リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）などの水性緩衝液；メタノールおよびエタノールなどの有機溶媒；塩酸などの酸；およびエタノールと塩酸などの酸／アルコール混液を含む。その他の適切な水性緩衝液、有機溶媒、酸およびその組み合わせは当業者にとって明らかとなるであろう。本発明の活性のうち１つまたはそれ以上を示す抽出物をもたらす任意の液相を本発明に用いてもよい。たとえば、抽出物または代謝物は抗菌、抗炎症、および／または抗酸化活性を示しうる。抽出物または代謝物は、本願に言及される組織障害の種類のいずれかの再生などの組織再生を含む再生を刺激または促進する能力を示してもよい。
【００３１】
一部の実施形態においては、食品基質または真菌集団および液相は、たとえばボルテキシング、超音波処理、またはその他の簡便な混合技術などによってホモジナイズしてもよい。液相は、遠心分離、ゲルまたは膜濾過、またはその他の任意の簡便な分離技術などの任意の簡便な技術によって混合物から分離または単離してもよい。１つの場合においては、遠心分離後に生成する上清を用いてもよい。
【００３２】
一部の場合においては、抽出物はチーズから、またはチーズの製造の段階から得てもよい。一部の場合においては、チーズを調整するのではなく真菌を単純に発酵させ、さらに培地、好ましくは真菌から得られる抽出物がチーズの調製に用いられるものとなるであろう。
【００３３】
抽出物は低温殺菌するか、またはたとえば濾過などの、またはその他の任意の簡便な滅菌技術によって滅菌してもよい。
【００３４】
一部の実施形態においては、抽出物は、たとえば電気泳動、またはゲルまたは膜濾過、ＨＰＬＣまたはその他の簡便な技術によってさらに分画化し、糖タンパク質またはリポタンパク質を含む１つまたはそれ以上のタンパク質、ポリペプチド、（リポ）ポリ多糖またはその他の有機分子または抽出物の成分が強化された分画を生成してもよい。セファデックスを用いる濾過を用いてもよい。
【００３５】
抽出物の１つまたはそれ以上の分画を、たとえばＨＰＬＣまたは質量分析などのさらなる分析に付してもよい。
【００３６】
たとえば所望の抗菌、抗炎症、または抗酸化活性などの所望の活性を保持する任意の抽出物または分画を本発明において用いてもよい。抽出物または分画は、再生を刺激または促進する能力を示しうる／抽出物の１つまたはそれ以上の分画の抗酸化、抗炎症、抗感染または再生活性は、分画化後に測定してもよい。１つの場合においては、抽出物または分画は、抗細菌または抗真菌活性および好ましい場合には抗Ｃｈｌａｍｙｄｉａなどの抗菌活性を示すものであってもよい。分画または抽出物は、本発明のアッセイにおいて、具体的には以下に記載する炎症性酸化障害を評価するためのアッセイのいずれかにおいて抗酸化活性を示してもよい。
【００３７】
その他の実施形態においては、真菌細胞／胞子、その抽出物、代謝物または発酵生成物は、コレステロールレベル、具体的にはＬＤＬコレステロールを低下させることができるものであってもよく、かつ／またはトリグリセリドレベルを低下させることができてもよい。それらのレベルが健康な対象について予測できるものと比較して上昇した場合にこれを低下させることができてもよい。
【００３８】
（ｉ）食用真菌の細胞の集団、（ｉｉ）食用真菌の細胞の集団を含む食品基質、または（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）の抽出物、発酵生成物または代謝物を含む組成物は、個体における炎症、感染または酸化に関連する１つまたはそれ以上のパラメーターを減少させるかまたは阻害しうる。たとえば組成物は、個体において、アレルギープロセス；内皮障害；たとえば臓器疾患の発症における炎症；酸化障害；炎症性酸化障害；脂質過酸化、肝臓のＡＳＴおよびＡＬＴ酵素濃度；血清コレステロールレベルまたはコレステロールＬＤＬ粒子レベル；肝脂質およびトリグリセリド；炎症；ＬＰＳを介した腹腔内への細胞動員および炎症促進性サイトカインの生成および動員のうち１つまたはそれ以上を減少させるかまたは阻害しうる。
【００３９】
本願に記載する組成物または抽出物は、血清グルタミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼ、血清グルタミン酸オキザロ酢酸トランスアミナーゼ、アルカリホスファターゼおよびその他のリポソーム酵素、メタロプロテイナーゼ、コラゲナーゼ、グルクロニダーゼ、および細胞被覆物、細胞外マトリクス、架橋コラーゲン、シアル酸および細胞被覆物およびマトリクスに対する障害のその他のマーカーのうち１つまたはそれ以上に影響するその他の酵素または因子のうち１つまたはそれ以上の活性を減少させるかまたは阻害しうる。１つの好ましい場合においては、調節された酵素またはマーカーは疾患または状態、具体的には本願に言及されたものの１つと関連するものであろう。
【００４０】
（対象および投与）
本発明は、たとえば任意の適切な哺乳類対象などの任意の適切な対象を治療するために用いてもよい。１つの好ましい場合においては、対象はヒトである。本発明は、たとえばウマ、ウシ、ヒツジ、イヌおよびネコなどの畜産動物および愛玩動物といった動物を治療するために用いてもよい。
【００４１】
個体は、感染、自己免疫疾患；アレルギー状態；高血圧；アテローム硬化症；冠動脈心疾患などの心病変；心内膜炎、心筋炎、心不全、心弁膜疾患、不整脈、アテローム硬化症、高血圧、血管炎、動脈内膜炎、静脈瘤、静脈内膜炎、内皮障害などの血管病変；脳病変；肥満；２型糖尿病；癌、サルコペニア；代謝機能障害；メタボリックシンドローム；セルライトおよび加齢性組織変性；胃炎；胃または十二指腸潰瘍；または関節炎；または皮膚炎、乾癬、座そう、慢性皮膚潰瘍化、または皮膚またはその他の組織の熱傷および創傷を含むその他の加齢関連または非関連皮膚状態；スポーツ、外傷、手術およびその他の損傷；悪液質、化学療法および放射線治療の副作用、または放射線被曝；からなる群から選択される状態を有してもよく；そのような状態のリスクを有してもよい。
【００４２】
１つの好ましい場合において、治療しようとする対象はコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルが上昇していてもよい。
【００４３】
１つの場合において、対象は心疾患および／またはアテローム硬化症を有する者であっても、またはそのような状態に由来するリスクがあると特定された群の中の対象であってもよい。対象はコレステロールが上昇していてもよく、かつ／またはスタチン薬を服用していてもよい。対象は、心疾患の予防を助けるためにアスピリンを服用していてもよい。対象は心臓発作を少なくとも１回経験していてもよい。対象は卒中を経験した者であってもよい。対象は健康な対象であってもよいが、アテローム硬化症および／または心疾患の率、重症度、または発生を低下させることを促すために本発明の組成物を投与されてもよい。
【００４４】
さらなる好ましい場合においては、本発明は感染を治療または予防するために用いてもよい。
【００４５】
したがって対象は、本願に言及される微生物のいずれか、かつ具体的にはＣｈｌａｍｙｄｉａによる感染などの感染を有する者であってもよい。１つの場合においては、対象はコレステロールが上昇しているかまたは高い者であってもよい。対象はコレステロールが上昇していてもよく、かつ試験がＣｈｌａｍｙｄｉａ陽性であってもよい。対象は過体重または肥満である者であってもよい。対象は、たとえば年齢が３０、４０、４５、５０、６０、６７または７０歳を上回る者であってもよい。
【００４６】
本発明は、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ感染を治療または予防するためにも用いてもよい。本発明は、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ感染と関連する潰瘍を治療または予防するために用いてもよい。本発明を用いて治療しようとする対象は潰瘍および／または潰瘍の病歴を有する者であってもよい。
【００４７】
本発明は、組織再生を刺激または促進するために用いてもよい。たとえば、本発明は創傷、熱傷、潰瘍またはその他の組織障害を治療するために用いてもよい。本発明は、炎症性障害および／または酸化障害を治療または予防するために用いてもよい。本発明は、リソゾーム、酸性、ＳＯＤ、過酸化、免疫グロブリンまたはその他の形態の障害を治療するために用いてもよい。
【００４８】
本発明は、胃、腸または肝臓の状態、具体的には炎症性障害によってもたらされるような状態を治療するために用いてもよい。１つの場合においては、状態は潰瘍である。
【００４９】
本願に記載の組成物は、本願で論じる状態の治療または１つまたはそれ以上の症状の軽減において有用となりうる。たとえば、本発明はコレステロールの減少、感染の低下または消散、炎症性酸化障害の低下をもたらしうる。１つの場合において、本発明を用いた治療は上昇したコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルを低下、かつ具体的には対象にとって正常と分類されるであろう水準まで低下させうる。本願に記載の組成物のいずれかを用いて心疾患、アテローム硬化症および／または心臓発作、さらには卒中のリスク、率を低下させてもよい。１つの場合において、本願に記載のチーズまたは食材のいずれかをそのような目的、具体的にはＣｈｌａｍｙｄｉａ感染と関連するか、または対象がそのような感染を有するような状態のために用いてもよい。
【００５０】
対象は感染を有する者であってもよい。感染は、たとえばＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓなどのＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉを含むグラム陽性細菌、およびＥ．ｃｏｌｉ  ０１５７などのＥ．ｃｏｌｉ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓおよびＣｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅなどのＣｈｌａｍｙｄｉａを含むグラム陰性細菌などの細菌による感染；たとえばＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓなどのＣａｎｄｉｄａなどの真菌による感染、原虫類による感染；リケッチアによる感染；またはウイルスによる感染を含んでもよい。本発明はＳ  ａｕｒｅｕｓに対して用いてもよい。対象は、たとえば感染に起因、および具体的にはＣｈｌａｍｙｄｉａ感染による状態などの肺炎または敗血症を有しうる。対象はＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ感染、および具体的にはＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ感染を有しうる。対象は潰瘍または潰瘍の病歴も有してよい。
【００５１】
対象は感染、および熱傷、創傷またはその他の形態の組織障害などの組織障害を有してもよい。
【００５２】
（ｉ）食用真菌の細胞の集団、（ｉｉ）食用真菌の細胞の集団を含む食品基質、または（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）の抽出物、発酵生成物または代謝物を含む組成物は、任意の簡便な形態または製剤として投与してもよい。たとえば、そのような組成物および製剤は、医薬品として、化粧品としてまたは栄養的に許容できる１つまたはそれ以上の担体、アジュバント、賦形剤、希釈剤、充填剤、緩衝化剤、安定化剤、乳化剤、保存料、滑沢剤、または当業者に周知の他の材料、および任意にその他の活性成分を共に含む化粧品、ニュートラシューティカルまたは医薬組成物として投与してもよい。適切な材料は、米国ＦＤＡ基準に従って一般的に安全と認識され（ＧＲＡＳ）てもよく、かつ以下に記載のステープル食材を含んでもよい。組成物は、対象の食餌に添加してもよい。
【００５３】
一部の場合において本発明の組成物は、本発明の用途および利点を強調するラベル表示または指示と共に包装されてもよい。たとえば本発明は、本稿に論じる組成物のいずれかを、組成物の抗感染、抗炎症および／またはコレステロール低下性の表示、具体的には組成物のコレステロール低下性の表示などの、本願に概要を記載した活性のいずれかの表示と共に含む。１つの例においては、本発明は、たとえば本願に言及されたチーズのいずれか、具体的にはロックフォールを含む本願に言及されたブルーチーズについて、その方法で包装されたチーズまたはチーズベースの製品などの食品を提供する。そのような包装は、白カビチーズ、さらには青カビチーズを含む本願に言及されたカビチーズのいずれかについても存在しうる。
【００５４】
一部の実施形態においては、本願に記載の組成物は個体に対する局所投与を目的として製剤化することもできる。適切な製剤および局所投与法は技術上周知である。一部の場合においては、本発明の組成物は組織障害の、たとえば創傷または熱傷の部位に投与してもよい。組成物は、たとえば包帯、湿布、インプラント、または障害部位への送達を限局化するその他の手段などによって適用してもよい。組成物はゲル、軟膏の形態であっても、またはスプレーとして投与してもよい。
【００５５】
好ましい実施形態においては、本発明の組成物および方法は経口投与または消費を包含する。一部の場合においては、本発明の組成物は食餌の一部として摂取される。
【００５６】
正しい医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、またはその他の問題または合併症を伴うことなく対象（例：ヒト）の組織と接触した使用に適しており、合理的な利益／リスク比に見合った化合物、材料、組成物および／または剤型を使用することができる。各担体、賦形剤などは、製剤のその他の成分と適合するという意味でも「許容でき」なければならない。
【００５７】
本発明はサプリメントまたは健康食品の形態を取ってもよい。１つの場合においては、真菌細胞または胞子、またはその抽出物または代謝物を含む錠剤、ヨーグルトまたはドリンクを提供してもよい。通常は真菌細胞または胞子、または少なくともチーズに使用される真菌細胞または胞子を含まない食品に、そのような細胞または胞子またはいずれかの抽出物を添加してもよい。
【００５８】
一部の例においては、本発明の組成物は、通常は本発明の真菌細胞、胞子、抽出物または代謝物を含有するが、高含有量で強化されているものであってもよい。たとえば、本発明の食材、そのようなチーズは、食材がそのような強化チーズであるか、またはこれを含む１つの好ましい例において、より高レベルの真菌細胞、胞子、抽出物または代謝物を有してもよい。たとえばチーズは、本発明の真菌細胞、胞子、抽出物または代謝物を少なくとも１０％、２０％、５０％、１００％、２００％、３００％またはそれ以上含有してもよい。製品のための包装は、真菌細胞、胞子、抽出物または代謝物のレベル上昇が存在するので強化したまたは改善した製品であると表示してもよい。
【００５９】
（アッセイ）
本発明のその他の態様は、抗感染、抗炎症および／または抗酸化性を有する食品、さらには再生能力を有する食品の特定および特性解析に関する。たとえば、食品を特定および特性解析する方法は：食用真菌の細胞または胞子の集団を含む食品を提供することおよび；感染、炎症または酸化を減少させる際の食品のサンプルまたは抽出物の活性を測定することを含んでもよい。組織再生を促進する能力を測定してもよい。
【００６０】
方法は、食用真菌の細胞の集団を含む食品を選別または特定する最初の手順を含む。適切な食用真菌は上に記載されている。
【００６１】
抽出物またはサンプルが、インビトロまたはインビボモデル系で、アレルギープロセス；内皮障害；たとえば臓器疾患の発症などにおける炎症；酸化障害；炎症性酸化障害；炎症；または炎症促進性サイトカインの動員を減少させるかまたは阻害する能力を判定してもよい。
【００６２】
抽出物またはサンプルが血清グルタミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼ、血清グルタミン酸オキザロ酢酸トランスアミナーゼ、アルカリホスファターゼおよびその他のリポソーム酵素、メタロプロテイナーゼ、コラゲナーゼ、グルクロニダーゼ、および細胞被覆物、細胞外マトリクス、架橋コラーゲン、シアル酸および／または細胞被覆物およびマトリクスに対する障害のその他のマーカーのうち１つまたはそれ以上に影響するその他の酵素または因子のうち１つまたはそれ以上の活性を減少させるかまたは阻害する能力を判定してもよい。
【００６３】
サンプルまたは抽出物が感染を減少させる活性を判定してもよい。たとえば、細菌、または真菌、または原虫細胞、またはリケッチアなどの１つまたはそれ以上の病原細胞、またはウイルス粒子に対するサンプルまたは抽出物の効果を判定してもよい。方法は、サンプルまたは抽出物を病原細胞と接触させること、および病原細胞の数、成長、生存率および感染性に対するサンプルまたは抽出物の効果を判定することを含む。サンプルまたは抽出物と接触させた病原細胞の、対象と比較した個数、成長、生存率または感染性の低下は食品が抗感染性を有することを示す。抗感染性についてのその他の適切なインビトロまたはエックスビボまたはインビボ試験は技術上周知である。したがって１つの例においては、本発明の組成物およびその他の物質は、具体的にはそのようなアッセイにおいて、特にＣｈｌａｍｙｄｉａに対し抗感染活性を示すであろう。
【００６４】
サンプルまたは抽出物が炎症を低下させる活性を判定してもよい。たとえば、哺乳類細胞におけるサイトカインの発現または産生に対するサンプルまたは抽出物の効果を判定してもよい。１つの方法は、サンプルまたは抽出物を哺乳類細胞と接触させること、および哺乳類細胞によるサイトカインの発現、産生および分泌に対するサンプルまたは抽出物の効果を判定することを含む。サンプルまたは抽出物との接触後の、サンプルまたは抽出物と接触させない対照と比較したサイトカインの発現、産生、または分泌の低下は、食品が抗炎症性を有することを示す。
【００６５】
その他の実施形態においては、ＲＡＷ２４６．７細胞などのリポポリ多糖（ＬＰＳ）刺激哺乳類細胞による一酸化窒素（ＮＯ）およびＰＧＥ２の産生を判定してもよい。
【００６６】
サンプルまたは抽出物が炎症を低下させる活性は、たとえばカラゲナン誘発足部浮腫モデルなどの足部浮腫誘発モデルといった急性炎症げっ歯類モデル、または綿ペレット肉芽腫および空気嚢誘発モデルなどの慢性炎症げっ歯類モデルで判定してもよい。抗炎症性についてのその他の適切なインビトロ、エックスビボ、またはインビボ試験は技術上周知である（たとえばＲｕｂｉｎｃｈｉｋ他  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．２０１０；６１８：３４９−５８などを参照されたい）。
【００６７】
方法はサイトカインの濃度を測定してもよい。適切なサイトカインは技術上周知でありかつＩＬ−１Ｂ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＢＭ−ＣＳＦ（ウシマクロファージコロニー刺激因子）、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦ−α、またはその他のサイトカインまたはシグナル伝達分子を含む。サイトカインを測定する方法は技術上周知である。本発明の組成物は、一部の場合においてサイトカインレベルを低下させることがあり、たとえば上述のサイトカインのうちＢＭ−ＣＳＦまたはＩＮＦＮ−γを除くいずれかを減少させることがある。
【００６８】
その他の実施形態においては、哺乳類モデルにおけるＬＰＳ媒介細胞動員に対するサンプルまたは抽出物の効果を判定してもよい。たとえば、溶媒のみの対照と比較した試験系における抽出物溶液の用量依存的力価測定を実施してもよい。
【００６９】
サンプルまたは抽出物が酸化および／または炎症性酸化障害を低下させる活性を判定してもよい。たとえば、溶媒のみの対象と比較した試験系の抽出物溶液の用量依存的滴定を実施してもよい。
【００７０】
抗酸化性を測定するための適切な方法は、共役ジエンアッセイ（Ｂｅｒｉｓ，Ｈ．Ｄｒｕｇｓ，４２，１９９１，５６９−６０５）；ＤＰＰＨアッセイ（Ｖａｎｉ他  Ｉｎｔｅｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｇｎｏｓｙ  ３５，１９９７，３１３−３１７）；スーパーオキシドまたはヒドロキシルラジカルスカベンジング活性（Ｂａｂｕ他  Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａ，７２，２００１，２７２−２７７）；ＡＢＴＳアッセイ；ＤＭＰＤアッセイ（Ｒｉｃｅ−Ｅｖａｎｓ，Ｃ他  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ，２４３，１９９４，２７９−２９３）；酸素ラジカル吸収能（ＯＲＡＣ）（Ｆｒｅｉ他『医学実験および生物学の進歩』２６４，１９９０，１５５−６３）；ＦＲＡＰ（Ｂｅｎｚｉｅ他  Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２３９，１９９６，７０−７６）；ＴＲＡＰ（Ｇｈｉｓｅｌｌｉ他  Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．，１８，１９９５，２９−３６）；赤血球ゴーストアッセイ（Ｃｈｉａｋｉ他  Ｊ．Ａｇｒｉｃ  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ：４６：４５４−５７）およびミクロソーム脂質過酸化またはチオバルビツール酸（ＴＢＡ）アッセイ（Ｋｉｍｕｒａ，Ｙ他（１９８４）Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄ：５０：４７３−７６）を含む。抗酸化性についてのその他の適切なインビトロまたはエックスビボまたはインビボ試験は技術上周知である。
【００７１】
上述の方法はインビトロで、たとえば細胞培養などで実施してもよい。上述の方法はインビボで、たとえば宿主またはモデル生物を用いて実施してもよい。方法はエックスビボサンプルを用いてもよい。
【００７２】
１つ、２つ、３つまたはそれ以上の試験において上記の通りに測定した活性に基づき、食品に点数または等級を付与してもよい。たとえば、食品について測定した抗感染、抗炎症または抗酸化活性の高さに応じて、点数または等級が２、３、４または５またはそれ以上上昇する増加尺度による点数または等級をその食品に付与するかまたは割り付けてもよい。点数または等級は、数値（例：１，２または３）、記述的等級（例：高、中または低活性）または複合（例：１つ星、２つ星、または３つ星の活性）で表してもよい。再生能力の点数を付与してもよい。
【００７３】
一部の実施形態においては、点数または等級はロックフォールチーズなどの参照食品と比較して定義してもよい。たとえば、３段階増加尺度は、参照製品よりも低い活性が測定された場合に付与される第１の増加、参照製品とほぼ同じ活性が測定された場合に付与される第２の増加、および参照製品よりも高い活性が測定された場合に割り当てられる第３の増加を含んでもよい。その他の適切なスケールの提供は、十分に当業者の能力の範囲内にある。
【００７４】
一部の実施形態においては、点数または等級を食品の包装上に表示してもよい。たとえば、付与された点数または等級を食品または包装にラベル表示してもよい。典型的には、食品の包装または表面は付与された点数または等級を示す記号またはその他の識別子を含んでもよい。食品のラベル表示および包装の適切な方法は技術上周知である。
【００７５】
上記の方法は、相異なる食品、または食品の抽出物を比較するために用いてもよい。たとえば、点数または等級は、食品が炎症を阻害、抗酸化障害を阻害、または病原体感染を阻害する、その他の食品と比較した相対的能力に応じて食品に付与してもよい。
【００７６】
一部の例においては、本発明の組成物の投与はコレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルの減少をもたらしてもよい。たとえば一部の例においては、本発明はコレステロールの３００ｍｇ／ｄＬ未満、具体的には２５０ｍｇ／ｄＬおよび好ましくは２００ｍｇ／ｄＬまたはそれ以下への低下をもたらしてもよい。ＡＬＴまたはＡＳＴなどの肝酵素値の低下をもたらしてもよい。
【００７７】
さらなる場合においては、本発明の組成物が、本願の「実施例」に用いられたものを含む、本願に言及される感染因子のうちいずれかによる感染を減少させるかまたは予防する能力を示してもよい。組成物はＣｈｌａｍｙｄｉａに対して、かつ具体的にはＣｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓに対して活性を示してもよい。そのような活性はインビトロで、たとえば培養中の設定した量のＣｈｌａｍｙｄｉａに対して組成物を添加することにより試験してもよい。活性は動物モデルにおいて、たとえばＭｏＰｎ株を含むＣｈｌａｍｙｄｉａ  ｍｕｒｉｄａｒｕｍなどのＣｈｌａｍｙｄｉａに感染したマウスにおいて試験してもよい。アッセイは、組成物を投与していない感染マウスと比較した生存期間の延長を調べてもよい。
【００７８】
１つの好ましい場合においては、本発明の組成物は、たとえば本願に記載のアッセイを用いて測定されるようなＩＯＤ（炎症性酸化障害）の低下を示しうる。
【００７９】
本発明は、好ましくは慢性炎症性または酸化ストレス状態を有する患者に由来する組織サンプルまたは組織サンプルのホモジネート、または血清／血症を提供し、サンプルを酸性化し、スーパーオキシドディスムターゼ（ＳＯＤ）の１つまたは複数の基質を使用し、サンプルをインキュベートし、その後マロンジアルデヒド（ＭＤＡ）試験またはその他の適切なアッセイを実施して過酸化生成物を測定することを含むアッセイも提供する。好ましい場合においては、本発明の組成物が添加されていた場合の結果を対照サンプルと比較する。
【００８０】
組織は、たとえば手術より回収した組織などの任意のヒト組織であってもよく、任意のそのような組織のホモジネートを同様にアッセイに用いてもよい。１つの好ましい例においては、組織または組織ホモジネートはヒト由来である。さらに好ましい場合においては、アッセイは血漿または血清を用いて実施される。一部の場合においては、使用されるサンプルは血漿、血清、血漿または血清分画、動脈壁サンプル、肝組織サンプル、骨格筋サンプル、脂肪組織、皮膚組織サンプル、胃または腸壁サンプル、またはそのような組織のいずれかのホモジネートから選択される。
【００８１】
１つの場合においては、組織、ホモジネート、血清、または血漿は、たとえばアテローム硬化症または関節炎などの、本願に言及される任意のそのような状態を含む、慢性炎症性または酸化ストレス状態を有する個体に由来する。そのような組織、ホモジネート、血清および血漿は、たとえば炎症性腸障害、冠動脈心疾患、高血圧、高コレステロール血症またはＳＬＥを有する対象に由来してもよい。
【００８２】
アッセイの一部の場合においては、初回サンプルは、サンプル中のタンパク質のレベルが１から１０ｍｇタンパク質／ｍＬサンプル、たとえば２から８ｍｇ／ｍＬ、好ましくは３から７ｍｇ／ｍＬ、たとえば４から６ｍｇ／ｍＬ、またはほぼそのような数値となるよう調節される。一部の場合においては、タンパク質のレベルは約５から６ｍｇ／ｍＬである。さらなる好ましい場合においては、被験サンプルの添加は、全体的なサンプル体積を約２０％、１５％、１０％または５％を超えて希釈せず、かつ好ましくはサンプル全体のタンパク質のレベルを上に規定する範囲内に維持するであろう。
【００８３】
さらに好ましい場合においては、ＳＯＤの基質として作用する水素イオン源として酢酸または塩酸を提供する。一部の場合においては、水素イオンの濃度は、対照サンプルにおけるこのようなイオンのレベルの少なくとも約１０、２５、５０、７５、１００、１２５、１５０、１７５または２００倍であるか、またはそのようなレベルまでである。たとえば、一部の例においては、添加した水素イオンのレベルは対照サンプルの約５０から１５０倍、好ましくは７５から１２５倍、具体的には１００倍高くてもよい。１つの場合においては、等体積の液状物を対照サンプルに添加するが水素イオン源は含まれず、たとえば対照の体積が被験サンプルのそれと確実に同等となるようにＰＢＳを添加してもよい。
【００８４】
水素イオン源を添加した後、サンプルは、約６から２４時間たとえば、６から１６、または８から１２時間インキュベートしてもよい。１つの好ましい場合においては、サンプルは一晩インキュベートする。インキュベーションは、たとえば３７℃であってもよい。インキュベーション後、たとえばトリクロロ酢酸を用いて、たとえば約０．５から１Ｍトリクロロ酢酸を添加することによって反応を停止させてもよい。
【００８５】
その後ＭＤＡ試験を実施して酸化のレベルを分析してもよい。被験サンプルが添加されているサンプルを、水素イオン源が添加されていないネガティブコントロールと比較してもよい。たとえば、水素イオンの添加以外は同等な２つの反応を実施してもよい。一部の場合においては、炎症性酸化障害（ＩＯＤ）を阻害することが知られている被験サンプルなどの、ＩＯＤを変化させることが知られているものを含むものなどのポジティブコントロールも実施してよい。１つの場合においては、ＭＤＡがチオバルビツール酸（ＴＢＡ）と反応する能力を用い、その後分光光度または蛍光（ｆｌｕｏｍｅｔｒｉｃ）定量法により定量することによってＭＤＡの量を定量する。
【００８６】
１つの場合においては、本発明で用いられるか、または本発明が提供する真菌細胞または胞子、真菌抽出物またその他の組成物は、上述のアッセイで測定されるＩＯＤなどのＩＯＤを阻害するであろう。たとえば、対照と比較した阻害のレベルは、少なくとも１０、２０、３０、５０または４０％またはそのようなレベルまでであってもよい。一部の場合において、阻害のレベルは、そこで言及されるロックフォールチーズの任意の種類またはその抽出物などの、ロックフォールチーズが示すレベルの少なくとも１０、１５、２５、３０、４０、５０、６０、７５、または１００％であってもよい。阻害のレベルは、本願で言及されるカステロまたはカマンベールチーズまたはその抽出物の具体的形態のいずれかといった、それらのチーズが示すレベルと比較して、少なくともそのようなレベルにあってもよい。一部の場合においては、オッセイ・イラティまたはその他の非カビチーズを、ＩＯＤの阻害を示さないかまたはわずかな阻害しか示さないネガティブコントロールとして用いてもよい。１つの場合においては、炎症性酸化障害の阻害のレベルを判定するために用いるアッセイはサンプルとしてヒト血清を用い、かつ具体的には、本願の表６に記載された結果をもたらすために用いられるものと同じアッセイとなるであろう。
【００８７】
（調製）
上述の（ｉ）食用真菌の細胞の集団、（ｉｉ）食用真菌の細胞の集団を含む食品基質、または（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）の抽出物、発酵生成物または代謝物を含む組成物は、食品に含まれてもよい。たとえばパン、シリアル、ビスケット、バター、スプレッド（例：マーガリン）、チーズ、ヨーグルト、飲料物またはたとえば缶入りドライキャットフードまたはドッグフードなどのペットフードに含まれてもよい。その他の適切な食品は当業者に明らかとなるであろう。
【００８８】
製剤は、調理する（例：焼く）前に食品の材料と混合、および／または調理後の食品に添加してもよい。本願に説明する結果は、食品の品質を損なうことなく食品に製剤を混合し、調理されて食品となった後でも活性を維持しうることを示す。
【００８９】
好ましくは、１つの場合において、組成物は食品に対して異種起源または外因性であり、すなわち組成物は自然の状態で食品中に存在しない。１つの実施形態においては、組成物は、たとえば本願に言及されるもののようなブルーチーズまたはソフトチーズに用いられるものなどの、通常であれば真菌細胞または胞子を含まない組成物である。１つの場合においては、組成物は通常であれば真菌細胞または胞子を含むが、たとえば通常レベルと比較して少なくとも２倍、３倍、４倍、またはそれ以上のレベルなどの上昇したレベルで存在する。
【００９０】
したがって、本発明のさらなる態様は、たとえば個体における感染、炎症または酸化を減少させる際の使用などを目的とした、上述の（ｉ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団；（ｉｉ）食用真菌の細胞の集団を含む食品基質または（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）の抽出物、発酵生成物または代謝物を含む食品であって、集団基質または抽出物が自然の状態では食品中に存在しない食品である。食品はリソゾーム障害、酸性、ＳＯＤまたはＩｇペルオキシダーゼ障害、過酸化水素に起因する障害、またはその他の形態の酸化障害を減少させる際にも用いてよい。食品は、一般的には酸化障害、および具体的には炎症性酸化障害を減少させるために用いてもよい。食品は、再生または治癒を刺激または促進するために用いてもよい。
【００９１】
個体における感染、炎症または酸化を減少または遅延させるかまたは予防するための食品を製造する方法も提供され、前記方法は：（ｉ）食品の材料を提供し；（ｉｉ）（ａ）食用真菌の細胞の集団、（ｂ）食用真菌の細胞の集団を含む食品基質またはその発酵生成物、または（ｃ）上記の（ａ）または（ｂ）の抽出物、発酵生成物または代謝物を前記材料と混合し；（ｉｉｉ）前記混合物を食品に配合することを含む。
【００９２】
生成された食品も、炎症性、リゾゾーム性（ｌｙｓｏｍａｌ）、酸性、ＳＯＤ、Ｉｇペルオキシダーゼまたは過酸化水素媒介性障害を減少または遅延させるために用いうる。組成物はその他の形態の酸化障害を減少または消失させるために、さらには再生および／または治癒の刺激において使用してもよい。組成物は熱傷またはその他の皮膚障害の治療において用いてもよい。
【００９３】
食品材料は、食品を製造するために用いられる小麦粉、肉、卵、ゼラチン、ミルク、塩、保存料、および水などのステープル食材を含む。砂糖を含めてもよい。本方法に従った使用に適した食品材料は技術上周知である。本発明の組成物はそのような構成成分のいずれかを含むことができる。
【００９４】
個体において感染、炎症または酸化を減少または遅延させるかまたは予防するための食品を製造する方法も提供され、前記方法は：（ｉ）食品の材料を提供すること、および（ｉｉ）（ａ）食用真菌の細胞の集団、（ｂ）食用真菌の細胞の集団を含む食品基質、または（ｃ）上記の（ａ）または（ｂ）の抽出物、発酵生成物または代謝物を前記食品に混合することを含む。好ましくは、（ａ）、（ｂ）および／または（ｃ）は食品に対して異種起源または外因性である、すなわち（ａ）、（ｂ）および（ｃ）は自然の状態で食品中に存在しない。
【００９５】
以下はさらに数えられる本発明の実施形態の一部のリストである：
【００９６】
（１）
個体における感染、炎症または酸化の減少または阻害における使用を目的とした（ｉ）食用真菌の細胞の集団、（ｉｉ）食用真菌の細胞の集団を含む食品基質、または（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）の抽出物、発酵生成物または代謝物を含む組成物。
【００９７】
（２）
個体における感染、炎症または酸化の減少または阻害における使用を目的とした調合物の製造における（ｉ）食用真菌の細胞の集団、（ｉｉ）食用真菌の細胞の集団を含む食品基質、または（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）の抽出物、発酵生成物または代謝物を含む組成物の使用。
【００９８】
（３）
（ｉ）食用真菌の細胞の集団、（ｉｉ）食用真菌の細胞の集団を含む食品基質、または（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）の分画、抽出物、発酵生成物または代謝物を含む組成物を；それを必要とする個体に投与することを含む；個体における感染、炎症または酸化を減少させるかまたは阻害する方法。
【００９９】
（４）
請求項１から３のいずれか１つに記載の組成物、方法または使用であって、組成物が個体における感染、炎症、または酸化またはそのリスクを減少させるかまたは阻害する組成物、方法、または使用。
【０１００】
（５）
（１）から（４）のうちいずれか１つに記載の組成物、方法または使用であって、食用真菌がＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ属の真菌；Ｒｈｉｚｏｐｕｓ属の真菌；Ｆｕｓａｒｉｕｍ属の真菌；またはＭｏｎａｓｃｕｓ属の真菌；またはＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ属の真菌から選択される組成物、方法または使用。
【０１０１】
（６）
（１）から（５）のうちいずれか１つに記載の組成物、方法または使用であって、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ属の真菌がＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｒｏｑｕｅｆｏｒｔｉ；Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃａｍｅｍｂｅｒｔｉ；Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃａｎｄｉｄｕｍ；Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｇｌａｕｃｕｍ；およびＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｎａｌｇｉｏｖｅｎｓｅから選択される組成物、方法または使用
【０１０２】
（７）
（１）から（６）のうちいずれか１つに記載の組成物、方法または使用であって、組成物が強化食品；食品添加物；サプリメント食品；ニュートラシューティカル製品；医薬品；局所皮膚科製剤または局所化粧品である組成物、方法、または使用。
【０１０３】
（８）
（１）から（６）のいずれか１つに記載の組成物、方法または使用であって、組成物が食品または飲料物である組成物、方法または使用。
【０１０４】
（９）
（１）から（８）のいずれか１つに記載の組成物、方法または使用であって、食品基質が乳製品；肉；または飲料物；またはその他の生物学的基質から選択される組成物、方法または使用。
【０１０５】
（１０）
（９）に記載の組成物、方法または使用であって、食品基質がチーズである組成物、方法または使用。
【０１０６】
（１１）
（１０）に記載の組成物、方法または使用であって、チーズが：ロックフォール；カマンベール；クリーミーブルー；スティルトン；カブラレス；カンボゾーラ；フルム・ダンベール；ゴルゴンゾーラ；ブルー・ドーベルニュ；チボサノからなる群から選択される組成物、方法または使用。
【０１０７】
（１２）
（１）から（１１）のいずれか１つに記載の組成物、方法または使用であって、抽出物が食品基質を液相と混合することおよび液相を分離することにより生成される組成物、方法または使用。
【０１０８】
（１３）
（１２）に記載の組成物、方法または使用であって、液相が水性または非水性溶媒である組成物、方法または使用。
【０１０９】
（１４）
（１３）に記載の組成物、方法または使用であって、液相が：リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）；メタノール；エタノール；塩酸；およびエタノールおよび塩酸からなる群から選択される組成物、方法または使用。
【０１１０】
（１５）
（１２）から（１４）のいずれか１つに記載の組成物、方法または使用であって、液相が遠心分離または濾過によって分離される組成物、方法または使用。
【０１１１】
（１６）
（１２）から（１４）のいずれか１つに記載の組成物、方法または使用であって、液相が前記分離後に滅菌または低温殺菌される組成物、方法または使用。
【０１１２】
（１７）
（１）から（１６）のうちいずれか１つに記載の組成物、方法または使用であって、組成物が個体におけるアレルギープロセス；内皮障害；炎症；酸化障害；炎症性酸化障害；臓器疾患の発症における炎症；および炎症促進性サイトカインの動員のうち１つまたはそれ以上を低下させるかまたは阻害する組成物、方法または使用。
【０１１３】
（１８）
（１）から（１７）のうちいずれか１つに記載の組成物、方法または使用であって、個体が自己免疫疾患；高血圧；アテローム硬化症；心病変；血管病変；脳病変；肥満；２型糖尿病；癌；サルコペニア；代謝障害；胃炎；胃または十二指腸潰瘍；関節炎または関節疾患；皮膚炎；乾癬；座そう；慢性皮膚潰瘍化；加齢関連または非加齢関連皮膚状態；皮膚およびその他の組織の熱傷および創傷；スポーツ、外傷、手術およびその他の損傷を含む損傷；悪液質；化学療法および放射線治療の副作用；および放射線被曝からなる群から選択される状態を有する組成物、方法または使用。
【０１１４】
（１９）
（１）から（１８）のいずれか１つに記載の組成物、方法または使用であって、組成物が感染、炎症または酸化の減少または阻害の活性を示す等級を付与されている組成物、方法または使用。
【０１１５】
（２０）
（１９）に記載の組成物、方法または使用であって、付与された等級または点数が組成物またはその包装上に表示される組成物、方法または使用。
【０１１６】
（２１）
食品を特定および／または特性解析する方法であって
（ｉ）食用真菌の細胞の集団を含む食品を提供することおよび；
（ｉｉ）食品またはその抽出物が感染、炎症または酸化を減少させる活性を測定することを含む方法。
【０１１７】
（２２）
（２１）に記載の方法であって、手順（ｉ）の前に、食用真菌の細胞の集団を含む食品を選別または特定する手順を含む方法。
【０１１８】
（２３）
（２１）または（２２）に記載の方法であって、前記の測定された活性を示す食品に点数または等級を付与することを含む方法。
【０１１９】
（２４）
（２３）に記載の方法であって、食品またはその包装に付与された点数または等級を表示またはラベル表示することを含む方法。
【０１２０】
（２５）
個体の感染、炎症、または酸化を減少させる際に使用するための抽出物を生成するための方法であって：ａ）食用真菌の細胞の集団を含む食品基質を提供すること；（ｂ）前記食品基質を液相に混合することを含みかつ；
【０１２１】
本発明のさらなる多様な態様および実施形態は、本開示の観点より当業者に明らかとなるであろう。本明細書に言及された全ての文書はその全文を参照文献として本明細書に援用する。
【０１２２】
本発明は、上に開示された特徴の各々および全ての組み合わせおよびサブコンビネーションを包含する。
【０１２３】
本発明の若干の態様および実施形態は、ここに以下に示す実施例によってかつ図面および表を参照して例示されるであろう。
【実施例】
【０１２４】
（被験チーズ）
提示する試験の大半については、本願ではチーズ抽出物の主要な抽出元はヒツジの乳から製造したロックフォール（Roquefort）チーズであった。ロックフォールはミディ＝ピレネーで生産される。予備実験では２銘柄（図１、上）を試験した。いずれも同様の抗細菌および抗酸化特性を示した。以下に示す結果については、抽出物は「レギュラー」ロックフォール（図１、上左）から抽出し、「ゴールデンメダル」ロックフォール（図１、上右）からは抽出しなかった。抽出物を得たロックフォールは、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｒｏｑｕｅｆｏｒｔｉを用いて非低温殺菌未処理ヒツジ全乳から製造した。オッセイ・イラティを対照チーズとして用いた（図１下）。このチーズは、ミディ＝ピレネーに隣接する地方であるフランスのバスク地方に由来する。オッセイ・イラティチーズも非低温殺菌未処理ヒツジ全乳から製造されるが、食用真菌は含有しない。
【０１２５】
観察された効果がヒツジ乳から製造されたチーズに特有であるか否か評価するため、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｒｏｑｕｅｆｏｒｔｉを含有する牛乳チーズも試験した（例：ダニッシュブルーチーズ；カステロ（Castello）、デンマーク）（図２ａ）。観察された効果が特定の真菌に固有のものであるか否か評価するため、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃａｍｅｍｂｅｒｔｉを用いて製造されるカマンベールチーズも試験した。非低温殺菌カマンベール・ル・メダイヨン・クレミエ（図２ｂ）および低温殺菌済カマンベール・プレジダン（図２ｃ）を試験した。
【０１２６】
（チーズ抽出物の調製）
ロックフォールの抽出物は、チーズの相異なる３つの部分：（ａ）チーズの表面から約５ｍｍかつ直近のカビコロニーの縁より１０〜１５ｍｍ以上；（ｂ）カビコロニーの縁より約５ｍｍ；および（ｃ）本願でカビの核と記載されるカビコロニー内で最も発育が集中した領域より得た（図３）。
【０１２７】
カステロ（登録商標）チーズの抽出物も同じ領域から得た。カマンベールの抽出物は、チーズの相異なる３つの領域：（ａ）チーズの中央部分；（ｂ）表面から５〜１０ｍｍの部分；および（ｃ）表皮から得た。
【０１２８】
オッセイ・イラティの抽出物は、相異なる２つの領域：（ａ）表皮から５〜１０ｍｍ；および（ｂ）チーズの中央部分から得た（図３）。
【０１２９】
（抽出物および分画の調製）
食用真菌抽出物は、チーズの各部分に等体積のＰＢＳを添加して生成し、たとえば、各チーズ１０〜１５ｇにＰＢＳ１０〜１５ｍＬを添加した。次にサンプルを温度調節ボルテックスで１０分間ホモジナイズした。
【０１３０】
ホモジナイズした懸濁液を４℃で１時間インキュベートした後、サンプルをＥｐｐｅｄｏｒｆ５８１０Ｒで１５分間３，５００ｒｐｍで遠心分離した。さらに上清をＥｐｐｅｎｄｏｒｆ  ５１１５Ｄで１５分間１６，０００ｒｐｍで遠心分離した。上清をさらなる分画化に用いた。
【０１３１】
Ｓｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５  Ｍｅｄｉｕｍを充填したカラム（１．５×９．０ｃｍ）上でＰＢＳに溶解してゲル濾過することにより抽出物を分画化した。カラムは、ＤｅｘｃｔｒａｎＢｌｕｅおよびＤＮＰ−Ｌ−Ａｌａを用いて事前に較正し、自由体積および総体積を測定した。各実験につきチーズ抽出物３ｍＬをカラムに導入し、その後溶離分画を以下の体積で捕集した：分画“１”６ｍＬ；分画“２”４ｍＬ；および分画“３”１０ｍＬ。タンパク質濃度は、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＵＶ−１，８００を用いて吸光度２８０ｎｍで測定した。代表的な実験の結果を表１に示す。
【０１３２】
（電気泳動）
各分画のタンパク質プロフィールを判定するために、レムリ法を用いたＳＤＳにおけるポリアクリルゲルでの電気泳動に付した。全ての分画はＰＢＳで１０倍に希釈した。次に、分画をさらに希釈し；カステロ（登録商標）の分画“１”は２倍に希釈し、カマンベール・メダイヨンの分画“１”およびカマンベール・プレジダン（President）の分画“１”はそれぞれ５倍に希釈し、ロックフォールの分画“１”は希釈せずに用いた。その他の分画も希釈せずに用いた。次に、全てのサンプルを２−メルカプトエタノールを含有するレムリ緩衝液で希釈し、さらに１００℃で５分間加熱した。分析には各サンプル１０μＬを用いた。電気泳動にはＭｉｎｉＰｒｏｔｅａｎ  ＩＩＩを２００Ｗで用いた。市販のタンパク質標品が有する分子量は１０，０００と２００，０００ｋＤの間であった。タンパク質バンドを確認するためにゲルＣＢＢ  Ｇ−２５０を用いた。電気泳動の結果を図４に示す。
【０１３３】
（エタノール分画）
等体積の９９％エタノールをチーズの一部分に加え、たとえば９９％エタノール１０〜１５ｍＬをチーズ１０〜１５ｇに加えた。サンプルをホモジナイズした。ホモジナイズした懸濁液を４℃で１時間インキュベートした後、サンプルをＥｐｐｅｎｄｏｒｆ  ５８１０Ｒで１５分間３，５００ｒｐｍで遠心分離した。上清をＥｐｐｅｎｄｏｒｆ  ５１１５Ｄでさらに繰り返し１５分間１６，０００ｒｐｍで遠心分離した。この上清をさらなる実験に用いた。
【０１３４】
チーズの一部分をエタノール：０．０１Ｍ塩酸５０：５０でホモジナイズしてさらにエタノール：ＨＣｌ分画を得た。これは、消化時の胃の酸性度を模倣するためであった。ホモジナイズした懸濁液を４℃で１時間インキュベートした後、サンプルをＥｐｐｅｎｄｏｒｆ  ５８１０Ｒで１５分間３，５００ｒｐｍで遠心分離した。上清をＥｐｐｅｎｄｏｒｆ  ５１１５Ｄでさらに繰り返し１５分間１６，０００ｒｐｍで遠心分離した。この上清をさらなる実験に用いた。
【０１３５】
最後に、分画を遠心分離して目視可能なあらゆるチーズ粒子を除去したのち、さらにサンプルを孔径０．２２μｍの膜で濾過して滅菌した。
【０１３６】
（抗菌および抗真菌活性）
抗菌および抗真菌特性を試験するために、一般的な細菌３種類および真菌１種類を実験に用いた：
−  Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、ＡＴＣＣ２５９２２株、
−  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ、ＡＴＣＣ１５３０５株、
−  Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｌ２／４３／Ｂｕ株、
−  Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ、ＡＴＣＣ１０２３１株。
Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓおよびＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓを、ペトリ皿でチーズ抽出物を含有する寒天培地および含有しない寒天培地上で２４時間培養した。Ｈｅｌａ細胞培地中のＣｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓを、チーズ抽出物の存在下または非存在下で２４時間培養した。
【０１３７】
タンパク質濃度が２μｇと２００μｇの間にあるオッセイ・イラティ（Ossay-Iraty）チーズ抽出物（ａ）および（ｂ）は、いずれの微生物の成長にも全く影響を示さなかった。ロックフォール抽出物はいずれも活性である一方、最も顕著な効果は領域（ｂ）から得られた抽出物に観察された。結果を表２に示す。
【０１３８】
有意な抗細菌および抗真菌性を示したものの、チーズ抽出物は被験微生物を完全に阻害しなかった。しかし、このデータはチーズ抽出物が感染の治療および／または予防に有用となりうることを示す。
【０１３９】
（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓに対する活性（インビトロ））
男性のびまん性組織球性リンパ腫に由来する細胞株Ｕ−９３７上で発育させたＣｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ  Ｌ２／４３／Ｂｕ株を用いて、チーズ抽出物の効果を試験した。細胞培養フラスコ（コーニング）において、５％ＣＯ２雰囲気中３７℃未満で１０％ウシ胎児血清を含有するＲＰＭＩ−１６４０  ７ｍＬ中で細胞懸濁液を培養した。細胞培養は２日毎に継代培養した。細胞懸濁液は１ｍＬにつき６×１０６個の細胞を含有した。実験は２４ウェルプレートで実施した。細胞懸濁液を各ウェルに分注した直後に、各ウェルにＣ．ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ  Ｌ２／４３／Ｂｕを１０  ＭＯＩ（感染多重度）で接種した。同時に、相異なる用量のチーズ抽出物を各ウェルに導入した。非感染細胞懸濁液を対照として用いた。接種およびチーズ抽出物の添加後、全てのプレートを２５℃で２０分間３，０００ｇ（１，８００ｒｐｍ）で遠心分離した後、５％ＣＯ２雰囲気下３７℃で２４時間培養した。
【０１４０】
オッセイ・イラティ抽出物は、２から２００μｇ／ｍＬのいずれの試験濃度の細胞培地でもＣｈｌａｍｙｄｉａの発育を阻害しなかった。ロックフォール抽出物はＣｈｌａｍｙｄｉａ細菌の発育に対して有意な阻害効果を示した。結果を表３に示す。
【０１４１】
（インビボＣｈｌａｍｙｄｉａ感染に対する活性）
体重２４〜２５ｇの雌性ＢＡＬＢ／ｃマウス１２匹を３群に分けた。対照群にはオッセイ・イラティチーズを給餌し、第１群にはロックフォールチーズ、第２群にはダニッシュブルーチーズ（クリーミーチーズ、カステロ（登録商標））を給餌した。
【０１４２】
始めにマウスを観察下におき、チーズを給餌した。マウスはロックフォールまたはダニッシュブルーチーズを食べ、またその体重は維持された。対照群のマウスは、観察可能な問題なくオッセイ・イラティを消費した。１週間観察した後、全てのマウスにＣｈｌａｍｙｄｉａ  ｍｕｒｉｄａｒｕｍ  ＭｏＰｎ株、旧名Ｎｉｇｇを経鼻的に接種した。各マウスに５〜１０４個の細菌を接種した。各群でチーズ食餌を維持した。
【０１４３】
接種より３日目には、対照群の全てのマウスが肺炎および敗血症で死亡した。４日目には、他の２群でそれぞれ２匹のマウスが死亡した。その後、生存動物を全て屠殺して剖検を実施した。
【０１４４】
剖検により、対照群の動物の肺はＣｈｌａｍｙｄｉａ細菌によって重度に感染した病巣クラスタを多数含んでいたことが判明した。ロックフォールおよびダニッシュブルーチーズを給餌した第１群および第２群のマウスの肺は、対照群と比較してＣｈｌａｍｙｄｉａ感染レベルの有意な低下を示した。第１群および第２群の死亡マウスに認められた唯一の認識可能な異常は有意に拡大した肺であり、これは致死的転帰を説明すると思われる。したがって、ロックフォールおよびダニッシュブルーチーズは、急性Ｃｈｌａｍｙｄｉａ肺炎の発症を予防および／または阻害することのできるものを含む。
【０１４５】
（抗炎症性）
（サイトカイン産生に対するチーズ抽出物の効果）
Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｒｏｑｕｅｆｏｒｔｉおよび／またはヒツジ乳または牛乳基質上で発育するＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｒｏｑｕｅｆｏｒｔｉが産生する分子は、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ感染をインビトロおよびインビボで阻害することが上記に示されている。領域（ａ）および（ｂ）に由来するロックフォール抽出物が、Ｃｈｌａｍｙｄｉａを接種した細胞の培養時における重要なサイトカインの産生を抑制または阻害する能力を試験した。
【０１４６】
細胞株、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ株およびプロトコルは上記の通りである。
【０１４７】
細胞を５％ＣＯ２雰囲気下３７℃で２４時間培養した後、各懸濁液を１５０μＬずつエッペンドルフ試験管（０．５ｍＬ）に移したのち、さらに３，０００ｇ（１，８００ｒｐｍ）で５分間遠心分離した。その後、上清１００μＬを新たな試験管に移し、ＰＢＳで１，０００倍希釈した。サンプルは、Ｂｉｏ−Ｐｌｅｘ（バイオラド）およびＭ５００００００７Ａ  Ｈｕｍａｎ  ８−Ｐｌｅｘ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｐａｎｅｌで以下のサイトカインについて分析した：ＩＬ−１Ｂ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＢＭ−ＣＳＦ（ウシマクロファージコロニー刺激因子）、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦ−α。
【０１４８】
結果を表４に示す。ロックフォールチーズの抽出物（ａ）および（ｂ）は、いずれもＢＭ−ＣＳＦおよびＩＮＦ−γ以外の全ての被験サイトカインの産生を有意に抑制することができた。領域（ｂ）から得られた抽出物は、領域（ａ）から得られた抽出物よりも有意に効果が高いことが観察された。これは、２０μｇの低いタンパク質濃度で特に顕著であった。この濃度においては、領域（ｂ）から得られた抽出物は、領域（ａ）から得られた抽出物よりもＴＮＦ−α産生抑制効果が３倍高かった。ＩＬ−１βについての差は４倍であった。
【０１４９】
領域（ａ）から得られた抽出物では、サイトカイン産生の阻害は８０〜８５％のＣｈｌａｍｙｄｉａ発育の阻害を伴い、その一方領域（ｂ）からの抽出物はＣｈｌａｍｙｄｉａ感染の蔓延を完全に阻止した（表４）。
【０１５０】
（ロックフォールおよびダニッシュブルーチーズは、ＬＰＳの媒介による腹腔への細胞動員を調節する）
ロックフォール（ＲＳ）およびカステロ（Ｃａｓｔ）チーズの抗炎症性を、ＬＰＳ誘導性炎症を有するマウスにより分析した。
【０１５１】
マウスには、ＬＰＳ  Ｅ．ｃｏｌｉ（シグマ）０．５ｍｇ／ｋｇを腹腔内（ｉ．ｐ．）注射する前に、チーズ抽出物０．２ｍＬを強制給餌針で２日間給餌した（１日２回）。２日後、チーズ抽出物を給餌したマウスおよびチーズ抽出物を給餌していない（ＬＰＳまたは生理食塩水のみ）対照マウスより腹腔洗浄液を採取した。計数および動員した細胞集団（好中球、マクロファージ、ＴおよびＢ細胞）をフローサイトメトリー（フローサイトメーター−ＦＡＣＳ  Ｃａｌｉｂｕｒ（ＢＤ）、ソフトウェア−ＣｅｌｌＱｕｅｓｔ（ＢＤ）およびＦＣＳ  ｅｘｐｒｅｓｓ（ＤｅＮｏｖｏソフトウェア））で分析した。
【０１５２】
ＬＰＳ攻撃に反応して腹腔内に動員された細胞の総数は、２日目に増加していた（図５）。カステロ（登録商標）チーズから得た抽出物を給餌したマウスは、ＬＰＳ誘導性炎症性細胞動員の減少を示した。これも炎症の重症度に影響するかもしれない。
【０１５３】
Ｂ細胞数はＬＰＳに反応して投与より２日後に減少した（図６）。チーズ抽出物の投与によりＬＰＳ処理後のＢ細胞減少は緩和され、これは炎症に対する抵抗性の向上をもたらす可能性がある。Ｂ−１細胞サブポピュレーションは、多様な感染および炎症性障害の一部に対する生得的抵抗性に関与する非特異的Ｂ細胞集団である。Ｂ−１細胞（ＣＤ１９＋ＣＤ５＋）の個数は、ＬＰＳおよびＲＳ＋ＬＰＳ処理群で増加し、Ｃａｓｔ＋ＬＰＳ投与群ではほぼ正常であった（図７）。チーズ抽出物を給餌したマウスではＴ細胞数の増加も観察された（図８）。
【０１５４】
ＬＰＳ処理マウスでは腹腔内の在住マクロファージ数も減少したものの、チーズ抽出物を給餌したマウスでは増加した（図９）。対照マウスには好中球がほとんどなかったが、ＬＰＳ処理後はこれらの細胞の数に増加があった。チーズ抽出物を給餌されたマウスでは、これらの細胞数のレベルがわずかに上昇した。
【０１５５】
チーズ抽出物の短期間（２日間）の給餌であっても、炎症性攻撃に反応したＢ、Ｔおよびマクロファージサブポピュレーションの低下の修復傾向を伴う、ｉ．ｐ．ＬＰＳ攻撃に反応した細胞動員を調節する明らかな能力を示す。この能力は先天免疫および獲得免疫の両者に関与する細胞に影響し、炎症の長期的調節が可能であることを示唆する。
【０１５６】
（炎症性酸化障害の阻害）
（１．食用真菌生成物またはその抽出物の炎症性酸化障害に対する効果のエックスビボアッセイ）
手術より回収したヒト組織のホモジネート、またはヒト血漿または血清、具体的には炎症状態を有する個人に由来するサンプルが提供され、ＰＢＳによりタンパク質濃度５または６ｍｇ／ｍＬに調節される。その後、添加によって組織ホモジネートが５％超希釈されないように被験サンプルを導入する。
【０１５７】
次にサンプルを２つの部分に分ける。１つのサンプルに対し、スーパーオキシドディスムターゼの基質である水素イオンを、たとえば硫酸などではなく、酢酸または塩酸の形態で、等体積のＰＢＳのみを添加した対照サンプルの１００倍の濃度で添加する。両サンプルを、１晩または６時間以上かつ２４時間以下の標準化した時間インキュベートする。その後、０．５〜１Ｍのトリクロロ酢酸を添加して反応を停止させ、さらに標準ＭＤＡ試験を実施して酸化された組織のレベルを測定した。
【０１５８】
（２．食用真菌生成物またはその抽出物のＳＯＤ−ペルオキシダーゼ活性に対する効果のインビトロアッセイ）
試験系は、Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋−ＳＯＤ  ０．１〜１００ｎｇおよびその基質である１〜１，０００μＭヒトＬＤＬの０．０１〜０．０５Ｍ酢酸またはリン酸またはその組み合わせｐＨ４．０〜５．４〜６．５〜７．０緩衝液の溶液を含有した。
【０１５９】
反応を促進するために、一部の例では、生化学的または電気化学的スーパーオキシド生成系を添加してもよい。たとえば、チトクロームＣ  １μＭ〜１ｍＭおよび０．１ｎｇから０．１ｍｇのチトクロームＣオキシダーゼ、またはキサンチン０．１μＭ〜１０ｍＭおよび０．１ｎｇ〜０．１ｍｇのキサンチンオキシダーゼなど。
【０１６０】
被験サンプルは０．１ｎｇから１０ｍｇのタンパク質濃度で加え、さらに３７℃で１時間、２〜４時間または一晩インキュベートしてもよい。その後、ジエンコンジュゲートまたはヒドロキシルペルオキシダーゼ、またはＭＤＡまたはその他の分子またはラジカル基のいずれかを過酸化生成物として測定した。
【０１６１】
これらの過酸化生成物の濃度を、真菌生成物の代わりにＰＢＳまたはその他の抽出または希釈溶媒を用いた対照サンプルと比較する。
【０１６２】
以下の実験は、上述のアッセイを用いて測定した、炎症によりもたらされる酸化障害に対するチーズ抽出物の効果を示す。方法論の科学的根拠は他稿に譲る［１〜３］。
【０１６３】
相異なるチーズ抽出物の抗ＩＯＤ性を検討した。オッセイ・イラティチーズは、試験系において炎症性酸化障害（ＩＯＤ）のレベルに対する有意な効果がなかった。その一方で、その他の３種類のチーズの抽出物はこのプロセスを阻害することができた（表６）。最も有意な結果は、チーズの領域ｂに由来する抽出物を用いて観察された。カステロチーズから得られた抽出物の結果は、ＰＢＳでホモジナイズされた抽出物がＩＯＤの有効な阻害物質であることを示し、分子量がより高い抽出物が最も有効であった。カマンベール・プレジダンから得られた抽出物の低分子量抽出物が最も有効であった。カマンベール・ル・メダイヨンから得られた抽出物の低分子量および高分子量抽出物は共に有効であった。ロックフォールから得られＰＢＳに溶解した抽出物は、カステロ、カマンベール・プレジダン、およびカマンベール・ル・メダイヨンから得られた抽出物ほど有効ではなかった。
【０１６４】
電気泳動データによると、ＰＢＳでホモジナイズしたカステロおよびロックフォールから得られた抽出物、およびこれらの抽出物の分画は、２種類のカマンベールチーズよりもタンパク質の含有量が有意に少なかった（図４）。したがって抗ＩＯＤ活性は、このチーズを熟成させる際の特定の条件で発育するＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｒｏｑｕｅｆｏｒｔｉの代謝物および／またはその一部である可能性のある多糖類によることを示唆することが可能である。
【０１６５】
全４種類の被験チーズのエタノール抽出物はＩＯＤの有効な阻害物質であった。ロックフォールから得られた抽出物に塩酸（ＨＣＬ）を添加するとＩＯＤ阻害のレベルが上昇した。結果を表７に示す。
【０１６６】
（臨床治験）
冠動脈心疾患（ＣＨＤ）を有する患者の一部に対するロックフォールチーズの消費の影響を評価した。ＣＨＤ患者はＣｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  ＩｇＧ抗体検査（ＥＬＩＳＡ、Ｍｅｄａｃ）も陽性であり、かつ／または総コレステロールの上昇を示していた。
【０１６７】
３０例の患者を勧誘し、男性は１６例、女性は１４例、年齢は４５〜６６歳であった。これらの患者を２つの等しい群に無作為に割り付けた。３例の患者は治験を完了しなかったので、試験より除外した。対照群はオソー・イラティチーズを消費した。試験群はロックフォールチーズを消費した。患者らには、いずれのチーズも軽い食事と共に約２５ｇの量で１日２回消費するよう推奨した。
【０１６８】
治験開始時およびチーズ食療法の８週目に血液を採取した。血液の分析は盲検化した。この治験の結果を表８に示す。
【０１６９】
ロックフォールチーズを消費した群においては、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ特異抗体価の減少があり、さらにＣｈｌａｍｙｄｉａ陽性患者数も減少した。治験前にＣｈｌａｍｙｄｉａ陰性であった患者は３例に過ぎなかったが、８週間後には６例がＣｈｌａｍｙｄｉａ陰性であった。対照群の患者のうちＣｈｌａｍｙｄｉａ陰性となった患者はいなかった。
【０１７０】
同様の傾向は総コレステロール濃度で観察された。治験前には、ロックフォールコホートの１４例中４例がコレステロールレベルの上昇を示していた。治験後、全ての患者において、棒グラフ１において、コレステロールが２００ｍｇ／ｄＬおよびそれ以下に減少した。ＬＤＬコレステロール粒子の有意な減少が認められることも重要である。
【０１７１】
脂質、トリグリセリドの主要な群の減少があり、かつ肝臓酵素であるＡＬＴおよびＡＳＴの減少傾向が顕著であった（脂質はｍｇ／ｄＬ単位で、酵素はＵ／ｍＬ単位で表示した）。後者は治験開始時には上昇しなかったものの、この傾向は肝臓における何らかの好ましい変化を示すかもしれない。これらの効果は対照群には認められなかった。肝臓の炎症は、おそらくはＣｈｌａｍｙｄｉａの存在に対する反応と思われ、かつ炎症性酸化障害のレベルはロックフォール食を摂取した患者で減少した。ＭＤＡ濃度（μＭ）で示されるこの傾向は血液にまで拡張された。対照チーズ群にはこのパラメーターの変化は認められなかった。
【０１７２】
【表１】
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【０１７３】
【表２】
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【０１７４】
【表３】
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【０１７５】
【表４】
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【０１７６】
【表５】
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【０１７７】
【表６】
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【０１７８】
【表７】
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【０１７９】
【表８Ａ】
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【０１８０】
【表８Ｂ】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【手続補正書】
【提出日】平成30年6月14日(2018.6.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
炎症性酸化障害の予防もしくは治療用の組成物であって： 
（ｉ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団を含む食品基質、又は、食用真菌の細胞および／または胞子の集団を含む培養物；
（ｉｉ）（ｉ）の食品基質又は培養物から得られる抽出物、および／または
（ｉｉｉ）（ｉ）の食品基質若しくは培養物又は（ｉｉ）の抽出物を含む食品、飲料物又はサプリメント、
を含む前記組成物。
【請求項２】
請求項１の組成物であって：
（ａ）前記炎症性酸化障害が酸性障害であるか；
（ｂ）前記組成物が真菌発酵食品または飲料物であるか；および／または
（ｃ）前記組成物が強化食品または飲料物、食品添加物、サプリメント食品、ニュートラシューティカル製品、医薬品、局所皮膚科製剤または局所化粧品である、前記組成物。
【請求項３】
請求項１または２の組成物であって、前記真菌細胞および／または胞子が、フザリウム属；モナスカス属；アスペルギルス属；リゾプス属；又はペニシリウム属の真菌から選択される真菌に由来するか、または前記抽出物がこれら真菌から得られる、前記組成物。
【請求項４】
請求項３の組成物であって、
（ｉ）フザリウム属の真菌がフザリウム・ベネナタム；
（ｉｉ）モナスカス属の真菌がモナスカス・ピロサス若しくはモナスカス・プルプレアスまたはモナスカス・ルバー；
（ｉｉｉ）アスペルギルス属の真菌がアスペルギルス・オリゼ若しくはアスペルギルス・テレウス；または
（ｉｖ）ペニシリウム属の真菌がペニシリウム・ロックフォルチ、ペニシリウム・カマンベルチ、ペニシリウム・カンジダム、ペニシリウム・グラウカム若しくはペニシリウム・ナルジオベンスである、前記組成物。
【請求項５】
前記請求項のいずれか１つに記載の組成物であって、前記抽出物が前記食品基質を液相と混合することおよび前記液相を分離することにより生成される前記組成物。
【請求項６】
請求項５に記載の組成物であって：
（ａ）前記液相が水性または非水性溶媒であり；
（ｂ）前記液相がリン酸緩衝化食塩水（ＰＢＳ）、メタノール、エタノール、塩酸、および塩酸を含有するエタノールから選択され；
（ｃ）前記液相が遠心分離または濾過によって分離され；かつ／または
（ｄ）前記液相が分離後に滅菌または低温殺菌される前記組成物。
【請求項７】
前記の請求項のいずれか１つに記載の組成物であって前記組成物が前記状態を減少させるかまたは予防するための活性のレベルを示す付与された点数または等級を有する包装で前記組成物が包装される前記組成物。
【請求項８】
（ｉ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団を含む食品基質； 
（ｉｉ）（ｉ）の食品基質から得られる抽出物、および／または
（ｉｉｉ）（ｉ）の食品基質又は（ｉｉ）の抽出物を含む食品、飲料物又はサプリメント、を含む組成物の、
炎症性酸化障害の予防または治療用の医薬品の製造における使用。
【請求項９】
炎症性酸化障害の予防または治療における使用を目的とした抽出物を生成するための方法であって：
（ａ）食用真菌の細胞および／または胞子の集団を含む食品基質、又は、食用真菌の細胞および／または胞子の集団を含む培養物を提供すること；
（ｂ）前記食品基質又は培養物を液相に混合すること；および
（ｃ）前記液相を分離して前記抽出物を生成すること、を含む前記方法。
【請求項１０】
炎症性障害、リソゾーム障害、酸性障害、ＳＯＤまたはＩｇＧまたはその他の免疫グロブリン投与障害、ペルオキシダーゼまたは過酸化水素誘導性障害、またはその他の形態の酸化障害を阻害することのできる分子、化合物または生成物の活性をスクリーニング、同定または評価する方法であって、前記方法が：
（ａ）ｐＨ４．０〜４．５と６．０〜６．５未満の間の酸性環境において、プロトンが電子生成に対して過剰な状態にある電子伝達複合体を形成することのできるグリークキードメインを有する、１つまたは複数のタンパク質を提供すること；および
（ｂ）過酸化水素の生成および／または過酸化水素の生成による酸化を監視することを含む前記方法。
【請求項１１】
請求項１０のスクリーニングの方法であって、前記方法が物理的、化学的、生化学または免疫化学的、細胞的、生物学的方法またはそのいずれかの組み合わせである前記方法。
【請求項１２】
炎症性酸化障害（ＩＯＤ）を評価するためのアッセイであって：
（ａ）ヒト組織サンプル、組織サンプルホモジネート、血清または血漿を提供すること；
（ｂ）スーパーオキシドディスムターゼの基質として作用することのできる水素イオン源を添加すること；
（ｃ）サンプルを６から２４時間インキュベートすること；および
（ｄ）酸化のレベルを判定するためにＭＤＡ試験を実施することを含む前記アッセイ。
【請求項１３】
請求項１２の方法であって、得られた結果が前記水素イオン源が添加されていない同じ組織、ホモジネート、血清または血漿の同等な対照サンプルについてのそれと比較される前記方法。
【手続補正書】
【提出日】平成30年6月14日(2018.6.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００２】
肝臓および脂肪組織における慢性炎症プロセスは脂質異常およびメタボリックシンドロームをもたらす。その他の組織の慢性炎症も、アテローム硬化症、心血管疾患、肥満、２型糖尿病、癌、サルコペニア、胃炎、胃または十二指腸潰瘍、関節炎、皮膚科疾患および皮膚およびその他の臓器の加齢を含む数多くの臨床的影響がある。それらの病状の発症をＣｈｌａｍｙｄｉａ（クラミジア）感染の存在と関連付ける報告は数多くある。Ｃｈｌａｍｙｄｉａ感染がどのようにして肝臓に到達し、脂質代謝を変化させさらに酸化カスケードを引き起こすことができるかというメカニズムが、最近報告されている［５〜１０］。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
（真菌および組成物）
本発明には任意の適切な真菌を用いることができる。食用真菌は、たとえば、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｒｏｑｕｅｆｏｒｔｉ（ペニシリウム・ロックフォルチ）、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃａｍｅｍｂｅｒｔｉ（ペニシリウム・カマンベルチ）、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃａｎｄｉｄｕｍ（ペニシリウム・カンジダム）、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｇｌａｕｃｕｍ（ペニシリウム・グラウカム）またはＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｎａｌｇｉｏｖｅｎｓｅ（ペニシリウム・ナルジオベンス）などのＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ（ペニシリウム）属の真菌またはカビ；Ｒｈｉｚｏｐｕｓ  ｏｌｉｇｏｓｐｏｒｏｕｓ（リゾプス・オリゴスポラウス）などのＲｈｉｚｏｐｕｓ（リゾプス）属の真菌またはカビ；Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｖｅｎｅｎａｔｕｍ（フザリウム・ベネナタム）などのＦｕｓａｒｉｕｍ（フザリウム）属の真菌またはカビ；Ｍｏｎａｓｃｕｓ  ｐｉｌｏｓｕｓ（モナスカス・ピロサス）またはＭｏｎａｓｃｕｓ  ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ（モナスカス・プルプレアス）またはＭｏｎａｓｃｕｓ  ｒｕｂｅｒ（モナスカス・ルバー）などのＭｏｎａｓｃｕｓ（モナスカス）属の真菌またはカビ；またはＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ（アスペルギルス・オリゼ）またはＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｔｅｒｒｅｕｓ（アスペルギルス・テレウス）などのＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ（アスペルギルス）属の真菌またはカビから選択されてもよい。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４６】
本発明は、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ（ヘリコバクター・ピロリ）感染を治療または予防するためにも用いてもよい。本発明は、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ（ヘリコバクター・ピロリ）感染と関連する潰瘍を治療または予防するために用いてもよい。本発明を用いて治療しようとする対象は潰瘍および／または潰瘍の病歴を有する者であってもよい。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５０】
対象は感染を有する者であってもよい。感染は、たとえばＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ（スタフィロコッカス・サプロフィチカス）などのＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ（スタフィロコッサイ）を含むグラム陽性細菌、およびＥ．ｃｏｌｉ  ０１５７などのＥ．ｃｏｌｉ（大腸菌）、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ（クラミジア・トラコマチス）およびＣｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ（クラミジア・ニューモニエ）などのＣｈｌａｍｙｄｉａ（クラミジア）を含むグラム陰性細菌などの細菌による感染；たとえばＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ（カンジダ・アルビカンス）などのＣａｎｄｉｄａ（カンジダ）などの真菌による感染、原虫類による感染；リケッチアによる感染；またはウイルスによる感染を含んでもよい。本発明はＳ  ａｕｒｅｕｓ（スタフィロコッカス・アウレウス）に対して用いてもよい。対象は、たとえば感染に起因、および具体的にはＣｈｌａｍｙｄｉａ（クラミジア）感染による状態などの肺炎または敗血症を有しうる。対象はＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ（ヘリコバクター）感染、および具体的にはＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ（ヘリコバクター・ピロリ）感染を有しうる。対象は潰瘍または潰瘍の病歴も有してよい。