(57)【要約】      （修正有）【課題】低侵襲的かつ簡便に、効果的に身体の脂肪を低減する方法の提供。【解決手段】皮膚に対して１３５０ｎｍから１４００ｎｍまでの連続する波長域を含む光を照射するための光照射部を備える、脂肪低減装置である。使用される近赤外光は、従来脂肪低減に使用されていたレーザー光と比べて、皮膚透過性が高いため脂肪組織にまで到達しやすく、低出力であるため生体への負荷が小さい。したがって、簡便な手法で、より低侵襲的で安全に、かつ脂肪低減が望まれる身体の部位で選択的に脂肪を低減することができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮膚に対して１３５０ｎｍから１４００ｎｍまでの連続する波長域を含む光を照射するための光照射部を備える、脂肪低減装置。
【請求項２】
前記光照射部が、１３００ｎｍから１４５０ｎｍまでの連続する波長域を含む光を照射する、請求項１記載の脂肪低減装置。
【請求項３】
前記光照射部が、１１５０ｎｍから１４５０ｎｍまでの連続する波長域を含む光を照射する、請求項１記載の脂肪低減装置。
【請求項４】
前記光照射部が、１２００ｎｍから１９００ｎｍまでの連続する波長域を含む光を照射する、請求項１記載の脂肪低減装置。
【請求項５】
前記光照射部が、９９０ｎｍから１９００ｎｍまでの連続する波長域を含む光を照射する、請求項１記載の脂肪低減装置。
【請求項６】
前記光照射部が、光源、及び該光源からの光の波長域を調整するフィルタを備える、請求項１〜５のいずれか１項記載の脂肪低減装置。
【請求項７】
前記光照射部が、外部光源からの採光部、及び該採光した光の波長域を調整するフィルタを備える、請求項１〜５のいずれか１項記載の脂肪低減装置。
【請求項８】
前記脂肪が皮下脂肪である、請求項１〜７のいずれか１項記載の脂肪低減装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、身体の脂肪を低減する方法、及びそのための装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
過食、運動不足、老化等により体内で摂取エネルギーが過剰になると、全身または局所に脂肪が蓄積し、蓄積した脂肪は肥満や生活習慣病の原因となる。健康及び美容の両面において脂肪蓄積の抑制が望まれている。
【０００３】
身体の余分な脂肪を低減するためには、一般的には食事制限や運動療法が選択される。しかし、これらの方法は、長期的に実施してはじめて効果が表れるものであり、また、効果は全身的であって、腹部や臀部などの一般に脂肪低減が望まれる特定の部位に選択的に効果を及ぼすことはできない。食事制限や運動療法以外の脂肪低減のための手法としては、特に美容分野では、外科的処置やマッサージなどの物理的な手法が取られている。中でも脂肪吸引法は、部位選択的に皮下脂肪を除去することができる効果的な方法であるが、反面、侵襲的な手法であること、術後の回復期間が必要なこと、副作用の危険性があること、高額であることなど問題点も多い。
【０００４】
近年、レーザー光を用いたより低侵襲的な脂肪低減技術が開発された。例えば、非特許文献１には、脂肪組織に吸収されやすい１２１０ｎｍのレーザー光を用いた脂肪低減法が提案されている。さらに非特許文献２には、６５０ｎｍの低出力レーザー照射により脂肪を溶解させ、低減させる方法が報告されている。さらに、安全性をより高めたレーザー光照射法が提案されている。特許文献１には、含脂肪細胞に著しい熱または著しい損傷を生成することなく、該細胞内の脂質レベルを低下させるための方法が記載されており、当該方法では、約０．０１５〜１Ｗ／ｃｍ2の線量で、約８５０ｎｍから約８７９ｎｍの第１の波長及び／又は約９０５ｎｍから約９４５ｎｍの第２に波長を有する光学的放射で、皮膚上の標的部位を照射する。特許文献２には、８００ｎｍ〜１２００ｎｍの範囲の波長、特に１０６４ｎｍの波長を有するレーザー放射線により、上皮組織又は血管組織に実質的な損傷を与えずに脂肪細胞に損傷を与え、皮下脂肪組織を破壊する方法が記載されている。しかしながら、これらの方法は、基本的には脂肪細胞に傷害を与えることで脂肪を低減する技術であるため、周辺の皮膚組織にも傷害を引き起こすリスクを排除できない。より安全、効果的であり、かつ安価な脂肪低減手法が求められている。
【０００５】
脂肪低減以外の目的で皮膚に光照射する技術も開示されている。特許文献３には、発光強度が最大となる波長が７５０〜１２００ｎｍの範囲にあり、かつ、その発光スペクトルの半値幅が７０〜２００ｎｍである光の照射により生体組織の内皮型一酸化窒素合成酵素を活性化することで、血管新生を促進して血流障害を治療する方法が記載されている。特許文献４には、皮膚に９００ｎｍから１５００ｎｍの間の発散電波放射線源を照射することで、皮膚の皺や弾性を改善し、又は皮膚を美化する方法が記載され、特に１０７２ｎｍの光は８８０ｎｍの光と比べて細胞毒性が低いことが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特表２００９−５２４４８７号公報
【特許文献２】特表２０１４−５０３２５５号公報
【特許文献３】特開２０１３−１２３５８６号公報
【特許文献４】特表２００８−５０３２９５号公報
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｌａｓｅｒｓ  Ｓｕｒｇ．Ｍｅｄ．，２００９，４１，４０１−４０７
【非特許文献２】Ｌａｓｅｒｓ  Ｓｕｒｇ．Ｍｅｄ．，２０１３，４５，３４９−３５７
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、より低侵襲的かつ簡便に、効果的に身体の脂肪を低減する方法、及びそのための装置を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、皮膚に特定の波長域の近赤外光を照射することで、従来のレーザー照射と比べて、より低侵襲的、安全、簡便、かつ安価に身体の脂肪を低減することができることを見出した。
【００１０】
したがって、本発明は、皮膚に対して１３５０ｎｍから１４００ｎｍまでの連続する波長域を含む光を照射するための光照射部を備える、脂肪低減装置を提供する。
【発明の効果】
【００１１】
本発明では、脂肪低減が望まれる部位の皮膚に対して、特定の波長域の近赤外光を照射する。本発明で用いる近赤外光は、従来脂肪低減に使用されていたレーザー光と比べて、皮膚透過性が高く脂肪組織にまで到達しやすいうえ、低出力で生体への負荷が小さい。したがって本発明によれば、簡便な手法で、より低侵襲的で安全に、かつ脂肪低減が望まれる部位に選択的に、身体の脂肪を低減することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明は、対象の身体の脂肪低減が望まれる部位に対して、体外から特定の波長域の近赤外光を照射することによって、該対象の脂肪を低減する方法を提供する。
【００１３】
本発明の方法が施される対象としては、ヒト及び非ヒト動物が挙げられ、非ヒト動物としては、イヌ、ネコ等のコンパニオン動物、競走馬等の競技用動物などが挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、対象はヒトである。
【００１４】
本発明の方法で対象に照射される近赤外光は、少なくとも１３５０ｎｍから１４００ｎｍまでの連続する波長域を含む光である。本明細書において、「ＸｎｍからＹｎｍまでの連続する波長域」とは、ＸｎｍからＹｎｍまでの波長を全て含む連続スペクトルを意味する。本発明の方法で用いられる近赤外光は、１３５０ｎｍ未満の波長の光又は１４００ｎｍより長い波長の光を含んでいてもよい。一実施形態において、本発明の方法で用いられる近赤外光は、１３００ｎｍから１４５０ｎｍまでの連続する波長域を含む光である。一実施形態において、本発明の方法で用いられる近赤外光は、１１５０ｎｍから１４５０ｎｍまでの連続する波長域を含む光である。一実施形態において、本発明の方法で用いられる近赤外光は、１２００ｎｍから１９００ｎｍまでの連続する波長域を含む光である。一実施形態において、本発明の方法で用いられる近赤外光は、９９０ｎｍから１９００ｎｍまでの連続する波長域を含む光である。
【００１５】
本発明の方法で対象に照射される近赤外光においては、９９０ｎｍ未満の波長の光、及び１９００ｎｍより長い波長の光の割合は少ないことが望ましい。好ましくは、本発明の方法で用いられる照射光における９９０ｎｍ未満の波長の光及び１９００ｎｍより長い波長の光の割合は、合わせて２％以下である。より好ましくは、本発明の方法で用いられる照射光における１２００ｎｍ未満の波長の光及び１９００ｎｍより長い波長の光の割合は、合わせて４％以下である。さらに好ましくは、本発明の方法で用いられる照射光における１１５０ｎｍ未満の波長の光及び１４５０ｎｍより長い波長の光の割合は、合わせて９％以下である。さらにより好ましくは、本発明の方法で用いられる照射光における１３００ｎｍ未満の波長の光及び１４５０ｎｍより長い波長の光の割合は、合わせて１３％以下である。なお好ましくは、本発明の方法で用いられる照射光における１３５０ｎｍ未満の波長の光及び１４００ｎｍより長い波長の光の割合は、合わせて３０％以下である。
【００１６】
本発明の方法においては、上述した特定の波長域の近赤外光を、対象の身体の脂肪低減が望まれる部位の皮膚に照射する。該脂肪低減が望まれる部位は、局所であっても全身であってもよい。局所としては、腹部、臀部、腰部、胸部、背部、腕、脚、顔、顎などが挙げられるが、特に制限されない。本発明の方法においては、全身に近赤外光照射を施してもよく、１ヶ所の局所部位に近赤外光照射を施してもよく、又は２ヶ所以上の局所部位に順次又は並行して近赤外光照射を施してもよい。当該近赤外光の照射によって、照射された皮膚の下にある脂肪が分解され、低減する。したがって好ましくは、本発明の方法において低減される脂肪は皮下脂肪である。
【００１７】
好ましくは、本発明の脂肪低減方法は、審美目的での痩身やスタイル維持のための局所的なもしくは全身の皮下脂肪の減少の目的で実施される。好ましくは、本発明の脂肪低減方法は、エステティシャンなどの医師以外の者によって実施される非治療的方法である。
【００１８】
本発明の方法において、上記近赤外光の照射量、ならびに照射の時間及び間隔は、対象における脂肪低減が望まれる部位、脂肪の蓄積状態などに基づいて設定することができる。例えば、照射量は、光源の光強度として０．３６〜５０ｍＷ／ｃｍ2、又は皮下組織でのエネルギー密度として２ｍＪ／ｃｍ2〜４５Ｊ／ｃｍ2に設定することが好ましい。照射の時間は、好ましくは１０〜６０分間／回、より好ましくは２０〜３０分間／回であり、好ましくは１週間に１回以上、より好ましくは３日に１回以上、さらに好ましくは２日に１回以上、なお好ましくは毎日照射する。
【００１９】
本発明の方法において、上記対象の皮膚への近赤外光の照射は、上述した特定の波長域の近赤外光を含む光を照射するための光照射部を備える装置によって実施され得る。したがって本発明において、当該装置は脂肪低減装置として提供される。
【００２０】
一実施形態において、本発明の脂肪低減装置における光照射部は、外部光源からの光を採り入れるための採光部を備える。該外部光源の例としては、キセノンランプ、水銀ランプ、メタルハライドランプ、ナトリウムランプ、蛍光ランプ、ハロゲンランプ、クリプトンランプ、タングステンランプ、炭素アークランプ、ネオン管、発光ダイオード、有機エレクトロルミネッセンス、人工太陽照明灯などの、上述した特定の波長域の近赤外光を含む光を発生することができる人工光源、及び太陽光などの自然光、ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。発光ダイオード、有機エレクトロルミネッセンスなどの波長域の狭い光源を使用する場合、異なる波長の光を発するそれらの光源を複数組み合わせることによって、上述した特定の波長域を含む光を作りだしてもよい。本実施形態の光照射部は、さらに該外部光源から採光した光の波長域を調整するフィルタを備える。該外部光源から該装置に採光された光は、該フィルタに通されて、上述した特定の波長域を主に含む光へと調整される。次いで、該フィルタを通った光は、該装置から照射され、皮膚に適用される。
【００２１】
別の一実施形態において、本発明の脂肪低減装置における光照射部は、光源、及び該光源からの光の波長域を調整するフィルタを備える。該光源は、上述した特定の波長域の近赤外光を含む光を発生することができる人工光源であればよい。該光源からの光は、該フィルタに通されて、上述した特定の波長域を主に含む光へと調整される。次いで、該フィルタを通った光は、該装置から照射され、皮膚に適用される。
【００２２】
本発明の脂肪低減装置で使用される上記内部光源または外部光源からの光の波長域を調整するフィルタは、少なくとも１３５０ｎｍから１４００ｎｍまでの波長域の光を通過させ、その他の波長域の光を減衰させるフィルタである。該フィルタの例としては、ショートパスフィルタ、ロングパスフィルタ、バンドパスフィルタ、ＮＤフィルタ、赤外透過フィルタ、紫外線透過可視吸収フィルタ、ブルー・グリーンフィルタ、熱線吸収フィルタ、色温度変換フィルタ、色補正フィルタ、ダイクロイックフィルタ、ダイクロイックミラー、コールドフィルタ、紫外赤外ミラー、干渉フィルタ、ノッチフィルタ、ポリマーノッチフィルタ、偏光フィルタ、エアマスフィルタなどが挙げられる。本発明の装置において、これらのフィルタは単独で使用されてもよいが、２種以上の組み合わせで使用されてもよい。組み合わせの例としては、１種又は２種以上のロングパスフィルタと１種又は２種以上のショートパスフィルタとの組み合わせ、２種以上の異なるロングパスフィルタの組み合わせ、２種以上の異なるショートパスフィルタの組み合わせ、などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２３】
一実施形態において、本発明の装置で使用されるフィルタは、１３５０ｎｍから１４００ｎｍまでの波長域の光を通過させ、スロープファクターは±３％の範囲であり、その他の波長域の光を３０％以下に減衰させる。一実施形態において、該フィルタは、１３００ｎｍから１４５０ｎｍまでの波長域の光を通過させ、スロープファクターは±３％の範囲であり、その他の波長域の光を１３％以下に減衰させる。一実施形態において、該フィルタは、少なくとも１１５０ｎｍから１４５０ｎｍまでの波長域の光を通過させ、スロープファクターは±３％の範囲であり、その他の波長域の光を９％以下に減衰させる。一実施形態において、該フィルタは、少なくとも１２００ｎｍから１９００ｎｍまでの波長域の光を通過させ、スロープファクターは±３％の範囲であり、その他の波長域の光を４％以下に減衰させる。一実施形態において、該フィルタは、少なくとも９９０ｎｍから１９００ｎｍまでの波長域の光を通過させ、スロープファクターは±３％の範囲であり、その他の波長域の光を２％以下に減衰させる。
【００２４】
一実施形態において、本発明の脂肪低減装置の光照射部は、上記光源もしくは採光部からの光を集める集光部、該光源もしくは採光部からの光を増幅する光増幅部、該光源もしくは採光部からの光を上記フィルタに送る光路、上記フィルタを通した光を装置外部に照射する照射口、などをさらに備えていてもよい。該集光部、光増幅部、光路はミラーや光ファイバーなどから構築することができる。本発明の脂肪低減装置において、上記フィルタは上記光源又は採光部と近接して配置されていてもよいが、該装置が該集光部や、光増幅部、光路を備える場合、上記フィルタと上記光源又は採光部は離れて配置されていてもよい。
【００２５】
一実施形態において、本発明の脂肪低減装置の光照射部は、上記フィルタを通っていない光が装置外部に漏れることを防ぐ遮蔽体で覆われていてもよい。一実施形態において、該遮蔽体は、該光照射部全体を収納する筐体であり得る。
【００２６】
一実施形態において、本発明の脂肪低減装置は、装置もしくは光源のオン及びオフ、又は光源からの光の強さを制御するための操作部を備えていてもよい。
【００２７】
好ましい実施形態において、本発明の脂肪低減装置の光照射部は可動のユニットとして構成されており、該装置の使用者は、対象の皮膚に対する光照射部や照射口の位置や角度を調節可能である。一実施形態において、本発明の脂肪低減装置は、使用者が該装置を手に持って支持するための把持部を備え、光照射部は該把持部に傾動可能に接続されたユニットである。使用者が該把持部を持って照射口を皮膚に向けるとき、該ユニットは傾動して該使用者による本発明の装置の把持を容易にする。別の一実施形態において、本発明の脂肪低減装置の光照射部ユニットは３次元的に可動なアームに接続されており、該アームを調節することによって、照射口を対象の皮膚に対して適切な位置や角度に配置することができる。
【００２８】
本発明はまた、例示的実施形態として以下の装置、製造方法、用途または方法を包含する。但し、本発明はこれらの実施形態に限定されない。
【００２９】
〔１〕皮膚に対して１３５０ｎｍから１４００ｎｍまでの連続する波長域を含む光を照射するための光照射部を備える、脂肪低減装置。
〔２〕好ましくは、上記光照射部が、１３００ｎｍから１４５０ｎｍまでの連続する波長域を含む光を照射する、〔１〕記載の脂肪低減装置。
〔３〕好ましくは、上記光照射部が、１１５０ｎｍから１４５０ｎｍまでの連続する波長域を含む光を照射する、〔１〕記載の脂肪低減装置。
〔４〕好ましくは、上記光照射部が、１２００ｎｍから１９００ｎｍまでの連続する波長域を含む光を照射する、〔１〕記載の脂肪低減装置。
〔５〕好ましくは、上記光照射部が、９９０ｎｍから１９００ｎｍまでの連続する波長域を含む光を照射する、〔１〕記載の脂肪低減装置。
〔６〕好ましくは、上記光照射部が、光源、及び該光源からの光の波長域を調整するフィルタを備える、〔１〕〜〔５〕のいずれか１項記載の脂肪低減装置。
〔７〕好ましくは、上記光照射部が、外部光源からの採光部、及び該採光した光の波長域を調整するフィルタを備える、〔１〕〜〔５〕のいずれか１項記載の脂肪低減装置。
〔８〕好ましくは、上記光源が１３５０ｎｍから１４００ｎｍまでの連続する波長域を含む光を発生することができる人工光源である、〔６〕記載の脂肪低減装置。
〔９〕好ましくは、上記外部光源が１３５０ｎｍから１４００ｎｍまでの連続する波長域を含む光を発生することができる人工光源であるか、又は太陽光である、〔７〕記載の脂肪低減装置。
〔１０〕上記フィルタが、
好ましくは、少なくとも１３５０ｎｍから１４００ｎｍまでの波長域の光を通過させ、その他の波長域の光を減衰させるフィルタであり、より好ましくは、
１３５０ｎｍから１４００ｎｍまでの波長域の光を通過させ、１３５０ｎｍ未満の波長の光及び１４００ｎｍより長い波長の光を合わせて３０％以下に減衰させるフィルタであるか、
１３００ｎｍから１４５０ｎｍまでの波長域の光を通過させ、１３００ｎｍ未満の波長の光及び１４５０ｎｍより長い波長の光を合わせて１３％以下に減衰させるフィルタであるか、
１１５０ｎｍから１４５０ｎｍまでの波長域の光を通過させ、１１５０ｎｍ未満の波長の光及び１４５０ｎｍより長い波長の光を合わせて９％以下に減衰させるフィルタであるか、
１２００ｎｍから１９００ｎｍまでの波長域の光を通過させ、１２００ｎｍ未満の波長の光及び１９００ｎｍより長い波長の光を合わせて４％以下に減衰させるフィルタであるか、又は
９９０ｎｍから１９００ｎｍまでの波長域の光を通過させ、９９０ｎｍ未満の波長の光及び１９００ｎｍより長い波長の光を合わせて２％以下に減衰させるフィルタである、
〔１〕〜〔７〕のいずれか１項記載の脂肪低減装置。
〔１１〕好ましくは、上記脂肪が皮下脂肪である、〔１〕〜〔１０〕のいずれか１項記載の脂肪低減装置。
【００３０】
〔１２〕対象の脂肪低減が望まれる部位の皮膚に対して、１３５０ｎｍから１４００ｎｍまでの連続する波長域を含む光を照射することを含む、対象の脂肪低減方法。
〔１３〕好ましくは、上記照射光における９９０ｎｍ未満の波長の光及び１９００ｎｍより長い波長の光の割合が合わせて２％以下である、〔１２〕記載の方法。
〔１４〕好ましくは、上記照射光における１２００ｎｍ未満の波長の光及び１９００ｎｍより長い波長の光の割合が合わせて４％以下である、〔１２〕記載の方法。
〔１５〕好ましくは、上記照射光における１１５０ｎｍ未満の波長の光及び１４５０ｎｍより長い波長の光の割合が合わせて９％以下である、〔１２〕記載の方法。
〔１６〕好ましくは、上記照射光における１３００ｎｍ未満の波長の光及び１４５０ｎｍより長い波長の光の割合が合わせて１３％以下である、〔１２〕記載の方法。
〔１７〕好ましくは、上記照射光における１３５０ｎｍ未満の波長の光及び１４００ｎｍより長い波長の光の割合が合わせて３０％以下である、〔１２〕記載の方法。
〔１８〕好ましくは、上記脂肪が皮下脂肪である、〔１２〕〜〔１７〕のいずれか１項記載の方法。
〔１９〕好ましくは、上記皮膚が局所又は全身の皮膚である、〔１２〕〜〔１８〕のいずれか１項記載の方法。
〔２０〕好ましくは、上記照射が１０〜６０分間行われる、〔１２〕〜〔１９〕のいずれか１項記載の方法。
〔２１〕少なくとも１３５０ｎｍから１４００ｎｍまでの連続する波長域を含む光を通過させる、脂肪低減用フィルタ。
〔２２〕好ましくは、
１３５０ｎｍから１４００ｎｍまでの波長域の光を通過させ、１３５０ｎｍ未満の波長の光及び１４００ｎｍより長い波長の光を合わせて３０％以下に減衰させるフィルタであるか、
１３００ｎｍから１４５０ｎｍまでの波長域の光を通過させ、１３００ｎｍ未満の波長の光及び１４５０ｎｍより長い波長の光を合わせて１３％以下に減衰させるフィルタであるか、
１１５０ｎｍから１４５０ｎｍまでの波長域の光を通過させ、１１５０ｎｍ未満の波長の光及び１４５０ｎｍより長い波長の光を合わせて９％以下に減衰させるフィルタであるか、
１２００ｎｍから１９００ｎｍまでの波長域の光を通過させ、１２００ｎｍ未満の波長の光及び１９００ｎｍより長い波長の光を合わせて４％以下に減衰させるフィルタであるか、又は
９９０ｎｍから１９００ｎｍまでの波長域の光を通過させ、９９０ｎｍ未満の波長の光及び１９００ｎｍより長い波長の光を合わせて２％以下に減衰させるフィルタである、
〔２１〕記載の脂肪低減用フィルタ。
【実施例】
【００３１】
実施例１  光照射による脂肪細胞における脂肪分解促進
（１）光源
光源は、人工太陽照明灯ＳＯＬＡＸ  １００Ｗシリーズ（ＸＣ−１００ＢＦＳＳ、セリック）を使用した。下記表４及び表９の１１５０−１４５０ｎｍでの照射には、ソーラーシミュレータ（ＨＡＬ−３２０Ｗ、朝日分光）を使用した。該光源に各種ロングパスフィルタ、ショートパスフィルタ（朝日分光（株）又はＥｄｍｕｎｄ  ｏｐｔｉｃｓ  Ｉｎｃ．）を組み合わせることで、表１に示すとおりに照射波長を調整した。
【００３２】
【表１】
2018000342.tif 000002
【００３３】
（２）試料
正常ヒト前駆脂肪細胞（凍結ＨＭＳＣ（ＰＡ）；クラボウ）は、専用の増殖培地（ＳｔｅｍＬｉｆｅ  ＰＡ  Ｃｏｍｐ  ｋｉｔ；クラボウ）、分化開始培地、又は分化維持培地（ＡｄｉｐｏＬｉｆｅ  Ｃｏｍｐ  ｋｉｔ；クラボウ）を用いて、３７℃、５％ＣＯ2の環境下で常法に従って培養した。具体的には、増殖培地を含む２４穴プレートに正常ヒト前駆脂肪細胞を１．０×１０4ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの密度で播種し、２日間培養した後、分化開始培地に置き換え２日間培養した。その後分化維持培地に置換し、さらに１１日間培養することで、細胞を成熟脂肪細胞へと分化させた。分化維持培地は３〜４日おきに交換した。
【００３４】
（３）光照射
（２）で調製した成熟脂肪細胞に、（１）で調整した各照射波長の光を、表２〜６記載の条件で、蓋をした状態の培養プレートの上側から１回照射した。なお、培地による光吸収はないことを照射光のスペクトル計測より確認した。照射のエネルギー量は、照射光のスペクトルを計測して単位時間当たりの照射強度（ｍＷ／ｃｍ2）を求め、これに照射時間を掛けることで算出した。細胞を４８時間培養した後、培養上清を回収し、上清中に分泌されたグリセロール量をＡｄｉｐｏｌｙｓｉｓ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ（Ｃａｙｍａｎ）を用いて定量した。脂肪細胞からのグリセロール分泌の増加は、該細胞中の脂肪の分解が促進されたことを表す。測定データから、非照射群の値を１００％としたときの相対グリセロール分泌量を求めた。結果を表２〜６に示す。
【００３５】
９９０ｎｍから１９００ｎｍまでの連続する波長域を含む光の照射は、陽性対照よりもグリセロール分泌を増加させた（表２）。より限定された波長域１２００〜１９００ｎｍ、及び１１５０〜１４５０ｎｍの光も、陽性対照と同等又はより高いグリセロール分泌増加効果をもたらした（表３〜５）。一方、９９０ｎｍより短い波長域を含む光（表２）、及び比較的短い又は長い波長域のみを含む光（表５）では、グリセロール分泌は増加しなかった。また表６の結果より、少なくとも１３５０ｎｍから１４００ｎｍまでの連続する波長域を含む光を照射することで、脂肪分解が促進されることが示された。
【００３６】
【表２】
2018000342.tif 000003
【００３７】
【表３】
2018000342.tif 000004
【００３８】
【表４】
2018000342.tif 000005
【００３９】
【表５】
2018000342.tif 000006
【００４０】
【表６】
2018000342.tif 000007
【００４１】
実施例２  光照射による脂肪分解関連遺伝子発現の向上
実施例１と同様の手順で光源及び成熟脂肪細胞を準備した。該成熟脂肪細胞に表７及び８記載の条件で１回光照射した。細胞を４８時間培養した後、ＲＮｅａｓｙ  ｍｉｃｒｏ  ｋｉｔ  （ＱＩＡＧＥＮ）を用いて、添付のプロトコールに従って細胞からトータルＲＮＡを回収した。得られたトータルＲＮＡを、Ｈｉｇｈ  ｃａｐａｃｉｔｙ  ＲＮＡ  ｔｏ  ｃＤＮＡ  ｋｉｔ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて、添付のプロトコールに従ってｃＤＮＡへと逆転写した後、該ｃＤＮＡを鋳型として、Ｔａｑｍａｎ  ｇｅｎｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｓｓａｙｓ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて各種遺伝子発現量の定量を行った。得られた発現量の値をｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ−３−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎｅｓｅ（ＧＡＰＤＨ）の遺伝子発現量で補正した後、非照射群の値を１００％としたときの相対値を求めた。結果を表７〜８に示す。
【００４２】
９９０ｎｍから１９００ｎｍまでの連続する波長域を含む光の照射は、脂肪分解関連遺伝子であるＨＳＬ（ホルモン感受性リパーゼ）遺伝子の発現量を顕著に増加させた（表７）。より限定された波長域１２００〜１９００ｎｍの光も、ＨＳＬ遺伝子の発現量を顕著に増加させた（表８）。脂肪合成関連遺伝子（脂質合成転写因子ＳＲＥＢＰ１ｃ遺伝子、脂肪酸合成酵素ＦＡＳ遺伝子）についても、９９０ｎｍから１９００ｎｍまでの連続する波長域を含む光の照射により発現の増加が見られたが、脂肪分解関連遺伝子に比べるとその増加は小さかった。
【００４３】
【表７】
2018000342.tif 000008
【００４４】
【表８】
2018000342.tif 000009
【００４５】
実施例３  光照射後の細胞増殖能
実施例１と同様の手順で光源及び成熟脂肪細胞を準備した。該成熟脂肪細胞に表９記載の条件で１回光照射した。細胞を４８時間培養した後、１０％ａｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅ（ＡｂＤ  Ｓｅｒｏｔｅｃ）を含む培地に置換して、３７℃、５％ＣＯ2の環境下で１２０分間静置した後、プレートリーダーを用いて蛍光強度（５４４ｎｍ／５９０ｎｍ）を測定し、非照射群の値を１００％としたときの相対細胞増殖能（細胞毒性）を求めた。結果を表９に示す。９９０〜１９００ｎｍの近赤外光照射は細胞に有害な影響を与えなかった。
【００４６】
【表９】
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