(57)【要約】【課題】呼吸によって体内に取り込まれた有害物質によって引き起こされる呼吸機能の低下を抑制することが可能な新たな手段を提供することを目的とする。【解決手段】オイゲノールとクルクミンとを含み、クルクミン１重量部に対して、オイゲノールを０．０１３重量部超え、かつ１．３重量部未満の量の割合で含む、呼吸機能低下を抑制するための組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
オイゲノールとクルクミンとを含み、クルクミン１重量部に対して、オイゲノールを０．０１３重量部超え、かつ１．３重量部未満の量の割合で含む、呼吸機能低下を抑制するための組成物。
【請求項２】
オイゲノールがクローブ抽出物に由来する、ならびに／あるいは、クルクミンがウコン抽出物に由来する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
オイゲノールがクローブのスパイスに由来する、ならびに／あるいは、クルクミンがウコンのスパイスに由来する、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物を含む、呼吸機能低下を抑制するための飲食品。
【請求項５】
飲食品がカレーである、請求項４に記載の呼吸機能低下を抑制するための飲食品。
【請求項６】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物を含む、呼吸機能低下を抑制するための医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はオイゲノールとクルクミンとを特定の割合で含んでなる、呼吸によって体内に取り込まれた有害物質によって引き起こされる呼吸機能の低下を抑制するための組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
大気やタバコの煙中に含まれる有害物質（例えば、微小粒子状物質（ＰＭ２．５）、ディーゼル排気微粒子（ＤＥＰ）、花粉、黄砂、ハウスダスト、化学物質）等の有害物質は、呼吸によって体内に取り込まれると呼吸器官の奥深くまで入りこみ、そこで炎症等を引き起こし、呼吸機能の低下、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）等を生じることが知られている。
【０００３】
これまでに、カレーを摂取することにより、喫煙による影響から呼吸機能を保護できることが確認され、特にカレー中に含まれるクルクミンが、抗酸化作用及び抗炎症作用を有し、喫煙による影響から呼吸機能を保護し得ることが示唆されている（非特許文献１）。また、マウスにおいてＤＥＰへの曝露によって生じる炎症反応を、クルクミンの投与によって抑えられることが確認されている（非特許文献２）。さらに、マウスにおいてＤＥＰへの曝露によって生じる肺障害を、オイゲノールの投与によって抑えられることが確認されている（非特許文献３）。
【０００４】
しかしながら、当該分野においては依然として、呼吸によって体内に取り込まれた有害物質から、呼吸機能をより効果的に保護することを可能とする、新たな手段が切望されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｔｚｅ  Ｐｉｎ  Ｎｇ  ｅｔ  ａｌ．ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ．２０１２；７（１２）：ｅ５１７５３．
【非特許文献２】Ａｂｄｅｒｒａｈｉｍ  Ｎｅｍｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ．２０１２；７（６）：ｅ３９５５４．
【非特許文献３】Ｗａｌｔｅｒ  Ａ．Ｚｉｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ａｐｐｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２０１２；１１２（５）：９１１−７．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、呼吸によって体内に取り込まれた有害物質によって引き起こされる呼吸機能の低下を抑制することが可能な新たな手段を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討を重ねた結果、オイゲノールとクルクミンとを特定の割合で含む組成物が、有害物質によって引き起こされる呼吸機能の低下を顕著に抑制できることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
すなわち、本発明は以下の発明を包含する。
［１］  オイゲノールとクルクミンとを含み、クルクミン１重量部に対して、オイゲノールを０．０１３重量部超え、かつ１．３重量部未満の量の割合で含む、呼吸機能低下を抑制するための組成物。
［２］  オイゲノールがクローブ抽出物に由来する、ならびに／あるいは、クルクミンがウコン抽出物に由来する、［１］の組成物。
［３］  オイゲノールがクローブのスパイスに由来する、ならびに／あるいは、クルクミンがウコンのスパイスに由来する、［１］の組成物。
［４］  ［１］〜［３］のいずれかの組成物を含む、呼吸機能低下を抑制するための飲食品。
［５］  飲食品がカレーである、［４］の呼吸機能低下を抑制するための飲食品。
［６］  ［１］〜［３］のいずれかの組成物を含む、呼吸機能低下を抑制するための医薬組成物。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、呼吸によって体内に取り込まれた有害物質によって引き起こされる呼吸機能の低下を抑制することが可能な、呼吸機能低下を抑制するための組成物を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１は、ウコン抽出物（ＴＣ）の添加量を１０μｇ／ｍＬに固定し、クローブ抽出物（ＣＣ）の添加量を変化させた場合の、ヒト気道上皮細胞（ＢＥＡＳ−２Ｂ細胞）におけるＩＬ−６の産生量を示すグラフ図である。
【図２】図２は、クローブ抽出物（ＣＣ）の添加量を０．２２μｇ／ｍＬに固定し、ウコン抽出物（ＴＣ）の添加量を変化させた場合の、ヒト気道上皮細胞（ＢＥＡＳ−２Ｂ細胞）におけるＩＬ−６の産生量を示すグラフ図である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明は、オイゲノールとクルクミンとを含む、呼吸機能低下を抑制するための組成物に関する。
【００１２】
本明細書において「呼吸機能低下を抑制する」とは、呼吸によって体内に取り込まれた有害物質が原因で生じる呼吸器官の組織や細胞における障害や症状（例えば、炎症等）を改善、治療、防止、又は予防することを意味する。「有害物質」としては、呼吸器官の組織や細胞において障害や症状を引き起こす物質であればよく、特に限定はされないが、例えば、微小粒子状物質（ＰＭ２．５）、ディーゼル排気微粒子（ＤＥＰ）、花粉、黄砂、ハウスダスト等の空気中に存在する物質や、タバコの煙中に含まれる化学物質等が挙げられる。「呼吸器官」とは、一般に上気道及び下気道に含まれる部分を意味し、鼻腔、咽頭、喉頭、気管、気管支、肺を挙げることができる。
【００１３】
本発明において、オイゲノール及びクルクミンはそれぞれ、植物原料に含まれるもの、あるいは植物原料から抽出又は精製されたものであってもよいし、人為的に合成されたものや医薬品及び飲食品において許容可能なそれらの塩であってもよいが、安全性の観点から、植物原料に含まれるもの、あるいは植物原料から抽出又は精製されたものを用いることが好ましい。
【００１４】
オイゲノールを含有する植物原料としては、特に限定はされないが、クローブ、ピメント（オールスパイス）、ローリエ、シナモン等を挙げることができ、好ましくは、クローブである。クローブは学名Syzygium aromaticumとする植物を指す。本発明に用いられるクローブの品種は特に限定されない。クローブは、スパイスや漢方薬として一般的に用いられている開花前の花蕾部を利用することができる。
【００１５】
クルクミンを含有する植物原料としては、特に限定はされないが、ショウガ科植物が好ましい。ショウガ科植物としては、Curcuma longa（以下、「ウコン」と記載する）、Curcuma aromatica、Curcuma zedoaria、Curcuma phaeocaulis、Curcuma kwangsiensis、Curcuma wenyujin、Curcuma xanthorrhizaが挙げられ、特に好ましくは、ウコンである。ウコンは、スパイスや漢方薬として一般的に用いられている根茎部を利用することができる。
【００１６】
本発明の組成物には、オイゲノール及びクルクミンをそれぞれ、各成分を含む植物原料の形態や抽出物の形態で含めることができる。
【００１７】
「植物原料の形態」とは、オイゲノール又はクルクミンを含有する植物原料の適当な部位を原型のまま、あるいは適当な寸法又は形状にカットもしくは破砕した形態、あるいは、それらの乾燥物の形態であってもよい。乾燥物は凍結乾燥、減圧乾燥、風乾、加熱乾燥等の通常の乾燥手段を用いて調製することができる。例えば、このような乾燥物としては、一般的にスパイスや漢方薬として用いられる形態、及び／又はその破砕物を利用することができる。本明細書において、このような乾燥物を、単に「スパイス」と呼ぶ場合がある。
【００１８】
「抽出物の形態」とは、植物原料よりオイゲノール又はクルクミンを含む画分を分離・取得したものを意味する。例えば、「抽出物」として、搾汁、抽出液、又はそれら混合物、あるいは前記搾汁、抽出液又はそれら混合物を濃縮又は乾燥した濃縮物又は乾燥物を挙げることができる。
【００１９】
「搾汁」は、各植物原料を破砕・圧搾して、液体画分と細胞壁等の固体画分とを分離し、液体画分を取得することにより調製することができる。液体画分と固体画分との分離は遠心分離、ろ過（例えば珪藻土ろ過）等の通常の固液分離手段により行うことができる。
【００２０】
「抽出液」は、各植物原料より目的の成分を抽出媒体により抽出することにより調製することができる。抽出媒体としては、有機溶媒、水等の溶媒、超臨界二酸化炭素等の超臨界流体が挙げられ、溶媒が特に好ましい。溶媒としては水や、エタノール等のアルコール、ヘキサン、アセトン等の有機溶媒、あるいはそれらの混合溶媒を用いることができる。溶媒抽出により抽出液を製造する場合には、各植物原料を適量の溶媒（例えば各植物原料に対して重量基準で０．５〜２０倍量）中に浸漬し、適宜撹拌又は静置して溶媒中に溶媒可溶性成分を溶出させる。抽出時間は特に限定されないが、５分間〜１２０分間、例えば、１５分間〜３０分間とすることができる。抽出温度は特に限定されないが、０℃〜１２５℃、例えば２５℃〜１２５℃とすることができる。抽出後、溶媒可溶性成分を含む溶媒画分と細胞壁等の固体画分とを上述の固液分離手段により分離し、溶媒画分を抽出液として取得する。得られた抽出液を必要に応じてさらに、溶媒分画、クロマトグラフィー（カラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）等）及び／又は再結晶等の精製手段に付して、目的の成分を分離又は精製してもよい。抽出に用いる各植物原料の形状は、原型のまま、あるいは適当な寸法又は形状にカットした状態、あるいは乾燥物、破砕物、又は搾汁の形状とすることができる。
【００２１】
「濃縮物又は乾燥物」は、前記搾汁又は抽出液あるいはそれら混合物を濃縮又は乾燥することにより製造することができる。ここで濃縮とは搾汁又は抽出液あるいはこれらの混合物中の液体（水及び／又は抽出溶媒）を減少させて最終糖濃度を５０％以上とすることを指す。糖濃度は市販の糖度計で測定することができる。濃縮の方法としては、例えば真空蒸発濃縮、膜濃縮が採用できる。真空蒸発濃縮は一般的に減圧濃縮と呼ばれる。濃縮時の真空度は最終品を糖度５０％以上とすることができる範囲で選択でき、特に限定されない。膜濃縮は、例えば逆浸透膜（ＲＯ）、限外ろ過膜（ＵＦ）等の膜を使用して行うことができる。使用する膜の種類は糖度５０％以上とすることができる範囲で選択でき、特に限定されない。乾燥は前記搾汁又は抽出液あるいはそれら混合物を前記通常の乾燥手段を用いて乾燥することにより実施することができる。濃縮又は乾燥に際して、前記搾汁、前記抽出液、又は前記濃縮物と賦形剤等の他の成分とを組み合わせて濃縮又は乾燥を行ってもよい。
【００２２】
本発明の組成物には、オイゲノールとクルクミンを、クルクミン１重量部に対して、オイゲノールを０．０１３重量部超え、かつ１．３重量部未満の量、好ましくは０．０２４重量部以上、かつ０．８重量部以下の量、より好ましくは０．１３重量部以上、かつ０．８重量部以下の量、さらに好ましくは０．１５重量部以上、かつ０．８重量部以下の量、よりさらに好ましくは０．１５重量部以上、かつ０．３２重量部以下の量、の割合で含めることができる。オイゲノール及びクルクミンが、上記植物原料の形態や抽出物の形態である場合には、オイゲノールとクルクミンの量が上記の割合となる用量にて各植物原料や抽出物を含めることができる。
【００２３】
下記実施例にて詳述されるとおり、オイゲノールとクルクミンとが上記特定の用量比で作用する場合、本発明の組成物は特に高い呼吸機能低下の抑制効果をもたらす。
【００２４】
本発明の組成物に含まれるオイゲノール及びクルクミンの量は、上記の割合となる量であればよく、特に限定されることなく、当該組成物の形態に応じて適宜決定することができる。
【００２５】
なお、組成物中のオイゲノール又はクルクミンの量は、組成物を分析サンプルとして、それぞれガスクロマトグラフ質量分析(ＧＣＭＳ)又は高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）に付すことにより求めることができる。
【００２６】
本発明の組成物には、上記オイゲノール及びクルクミンに加えて、医薬又は飲食品として許容可能な賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、酸化防止剤、着色剤、凝集防止剤、吸収促進剤、溶剤、溶解補助剤、等張化剤、安定化剤、矯味矯臭剤、ｐＨ調整剤等のその他の成分を、当該組成物において所望される形態に応じて適宜選択、配合することができる。
【００２７】
本発明の組成物は、医薬品（医薬部外品を含む）又は飲食品の形態で提供することができる。
【００２８】
医薬品は、その形態に特に制限はないが、経口に適した形態であることが好ましい。例えば、経口投与用固体組成物（固形医薬製剤）としては、錠剤（糖衣錠を含む）、丸剤、カプセル剤、細粒剤、顆粒剤、トローチ剤、チュアブル剤、ドロップ剤等の形態を、また経口投与用液状組成物（液状医薬製剤）としては、乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤などの形態をとることができる。これらの製剤には、上記オイゲノール及びクルクミンに加えて、上記その他の成分をその剤形に応じて、適宜配合し、常法に従って製剤化することができる。
【００２９】
飲食品は、その形態に特に制限はないが、カレー、ミックススパイス（カレー粉、ガラムマサラ等）、ふりかけ、調味料、スープ、洋風煮込み料理（シチュー、チャウダー、ハヤシ、ハッシュドビーフ、ブイヤベース等）、ソース、ドレッシング、スナック、麺（ラーメン、うどん等）、デザート、ジュース、お茶、お酒、タブレット等が挙げられ、好ましくはカレーである。
【００３０】
飲食品がカレーの場合、カレーソース（具材を除く）中には一般的に、クルクミンを１０μｇ／ｍｌ〜５００μｇ／ｍｌの量、１０μｇ／ｍｌ〜４００μｇ／ｍｌの量、１０μｇ／ｍｌ〜３００μｇ／ｍｌの量、１０μｇ／ｍｌ〜２００μｇ／ｍｌの量、１０μｇ／ｍｌ〜１００μｇ／ｍｌの量、又は、１０μｇ／ｍｌ〜５０μｇ／ｍｌの量で含めることができ、オイゲノールの量は当該クルクミンの量に基づいて決定することができる。
【００３１】
飲食品には、一般的な飲食品に加えて、健康食品、機能性表示食品、特定保健用食品、病者用食品等が含まれ、これらの飲食品には、呼吸機能低下を抑制する効果を有する旨表示することができる。
【００３２】
本発明の組成物は、呼吸機能低下を抑制する効果を有する。呼吸機能低下を抑制するとは、上記したとおりであり、当該効果は、有害物質に曝された呼吸器官の組織や細胞（疾患部）における炎症の程度を測定することにより確認することができる。
【００３３】
炎症の程度は、疾患部の検診、ならびに／あるいは、疾患部にて発現される炎症マーカー（例えば、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）等）量の測定によって判断することができる。炎症マーカーの測定は、タンパク質の検出・定量に一般的に用いられる手法を用いて行うことができ、例えば、酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ法）、ウェスタンブロット法、フローサイトメトリー法等を利用することができる。測定に用いるサンプルは、疾患部における組織、細胞、粘膜、鼻水、痰、唾液等を用いることができる。本発明の組成物の投与前及び投与後で、測定された炎症マーカーの量が減少している場合、炎症の程度が抑制されていること、すなわち、呼吸機能低下が抑制されていることを示す。
【００３４】
本発明の組成物の投与、又は摂取により、呼吸によって体内に取り込まれた有害物質が原因で生じる呼吸機能低下を抑制する効果を得ることができる。本発明の組成物の投与量又は摂取量は、受容者、受容者の年齢及び体重、症状、投与時間、組成物の形態、投与方法等の要因に応じて適宜決定することができる。
【００３５】
以下に実施例及び試験例を示し、本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれら実施例に制限されるものではない。
【実施例】
【００３６】
呼吸機能低下抑制効果の分析
１．材料・方法
（細胞）
Ｉ型コラーゲンをコートした１２穴プレートにＬＨＣ−９培地（Ｌｉｆｅ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製）を０．７ｍＬずつ加え、ヒト気道上皮細胞（ＢＥＡＳ−２Ｂ細胞）を播種し、セミコンフルエントになるまで培養した。得られた細胞培養物を実験に用いた。
【００３７】
（ウコン抽出物及びクローブ抽出物）
ウコン抽出物及びクローブ抽出物は、以下の方法によりそれぞれ調製した。
【００３８】
ウコンの根茎部分の粉砕物又はクローブの花蕾部分の粉砕物に、それぞれ５倍（Ｖ／Ｗ）量のアセトンを加え、一晩撹拌した。次いで、遠心分離（１，６７０ｇにて１０分間）して上清を回収し、フィルター（ろ紙、５種Ｂ）を用いてろ過した。
【００３９】
得られたろ液よりエバポレーターにてアセトンを除去し、ウコン抽出物及びクローブ抽出物をそれぞれ得た。このようにして得られたウコン抽出物にはクルクミンがおよそ１１重量％含まれ、また、クローブ抽出物にオイゲノールがおよそ４０重量％含まれる。
【００４０】
（実験方法）
１２穴プレートで培養して得られた細胞培養物に対し、超音波処理によって分散させたディーゼル排気微粒子（ＤＥＰ）を曝露し、同時に下記表に記載される量比にてクローブ抽出物（ＣＣ）及びウコン抽出物（ＴＣ）を添加した。
【００４１】
その後、２４時間培養した後に培地を回収し、培地中に含まれるＩＬ−６の量をＥＬＩＳＡ法にて測定した。
【００４２】
２．結果
（１）ウコン抽出物（ＴＣ）の添加量を１０μｇ／ｍＬに固定した場合
下記表１に、ウコン抽出物（ＴＣ）の添加量を１０μｇ／ｍＬに固定し、クローブ抽出物（ＣＣ）の添加量を変化させた場合の、ウコン抽出物に対するクローブ抽出物の重量比（ＣＣ／ＴＣ）、クルクミンに対するオイゲノールの重量比（Ｅｕｇ／Ｃｕｒ）、及び各培地中のＩＬ−６量の測定結果を示す。なお、Ｅｕｇ／Ｃｕｒの値は、上述したとおり、ウコン抽出物にはクルクミンがおよそ１１重量％含まれ、また、クローブ抽出物にオイゲノールがおよそ４０重量％含まれるため、ＣＣ／ＴＣの値に３．６３６（＝４０％／１１％）を乗算することにより求めた。以下、同様にしてＥｕｇ／Ｃｕｒの値を求めた。
【００４３】
また、図１に、ウコン抽出物（ＴＣ）の添加量を１０μｇ／ｍＬに固定し、クローブ抽出物（ＣＣ）の添加量を変化させた場合のＩＬ−６産生量を示す。
【００４４】
【表１】
2018043937.tif 000002
【００４５】
図１から明らかなように、ＩＬ−６産生量はクローブ抽出物（ＣＣ）の添加量の増大に伴い単調減少するのではなく、近似曲線が示すように、ウコン抽出物（ＴＣ）とクローブ抽出物（ＣＣ）との相乗効果により、より減少することが確認された。さらに、図１より上記相乗効果は、少なくとも、組成２〜４、すなわち、ウコン抽出物に対するクローブ抽出物の重量比（ＣＣ／ＴＣ）が０．００６５以上、かつ０．０４２以下の範囲、クルクミンに対するオイゲノールの重量比（Ｅｕｇ／Ｃｕｒ）が０．０２４以上、かつ０．１５以下の範囲で確認された。
【００４６】
（２）クローブ抽出物（ＣＣ）の添加量を０．２２μｇ／ｍＬに固定した場合
下記表２に、クローブ抽出物（ＣＣ）の添加量を０．２２μｇ／ｍＬに固定し、ウコン抽出物（ＴＣ）の添加量を変化させた場合の、ウコン抽出物に対するクローブ抽出物の重量比（ＣＣ／ＴＣ）、クルクミンに対するオイゲノールの重量比（Ｅｕｇ／Ｃｕｒ）、及び各培地中のＩＬ−６量の測定結果を示す。
【００４７】
また、図２に、クローブ抽出物（ＣＣ）の添加量を０．２２μｇ／ｍＬに固定し、ウコン抽出物（ＴＣ）の添加量を変化させた場合のＩＬ−６産生量を示す。
【００４８】
【表２】
2018043937.tif 000003
【００４９】
図２から明らかなように、ＩＬ−６産生量はウコン抽出物（ＴＣ）の添加量の増大に伴い単調減少するのではなく、近似曲線が示すように、ウコン抽出物（ＴＣ）とクローブ抽出物（ＣＣ）との相乗効果により、より減少することが確認された。さらに、図２より上記相乗効果は、少なくとも、組成ｂ〜ｄ、すなわち、ウコン抽出物に対するクローブ抽出物の重量比（ＣＣ／ＴＣ）が０．０３５以上、かつ０．２２以下の範囲、クルクミンに対するオイゲノールの重量比（Ｅｕｇ／Ｃｕｒ）が０．１３以上、かつ０．８０以下の範囲で確認された。
【００５０】
以上（１）、（２）の結果より、ウコン抽出物に対するクローブ抽出物の重量比（ＣＣ／ＴＣ）が０．００６５以上、かつ０．２２以下の範囲、クルクミンに対するオイゲノールの重量比（Ｅｕｇ／Ｃｕｒ）が０．０２４以上、かつ０．８０以下の範囲で、ウコン抽出物（ＴＣ）とクローブ抽出物（ＣＣ）との相乗効果が確認された。
【００５１】
以上の結果は、特定の比率でオイゲノール及びクルクミンを含む組成物を用いることによって、ヒト気道上皮細胞の炎症反応をより効率的に抑制できることを示し、有害物質が原因で生じる呼吸機能低下を抑制できることを示す。
【図１】
2018043937.tif 000004
【図２】
2018043937.tif 000005