(57)【要約】      （修正有）【課題】β−セクレターゼ（β部位アミロイド前駆体タンパク質切断酵素；ＢＡＣＥ）の阻害剤である特定の新規化合物およびアルツハイマー病を治療する方法の提供。【解決手段】Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド2018140987.tif 000053またはその薬学的に許容可能な塩、およびこの化合物を投与することを含む方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物：
【化１】
2018140987.tif 000047
またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
前記化合物が
【化２】
2018140987.tif 000048
である、請求項１に記載の化合物またはその塩。
【請求項３】
前記化合物が
【化３】
2018140987.tif 000049
である、請求項１または２のいずれか一項に記載の化合物またはその塩。
【請求項４】
【化４】
2018140987.tif 000050
である、請求項３に記載の塩。
【請求項５】
【化５】
2018140987.tif 000051
である、請求項３に記載の塩。
【請求項６】
【化６】
2018140987.tif 000052
である、請求項３に記載の塩。
【請求項７】
前記化合物が、Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−
ジフルオロエチル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チ
アジン−７ａ−イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボ
キサミドである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物またはその塩。
【請求項８】
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミドである
、請求項３に記載の化合物。
【請求項９】
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド４−メ
チルベンゼンスルホネートである、請求項４に記載の塩。
【請求項１０】
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド４−メ
チルベンゼンスルホネート半水和物である、請求項５に記載の塩。
【請求項１１】
０．２°の回折角についての許容誤差で１９．７°、１４．９°および１０．３°から
なる群から選択されるピークの１つ以上と組み合わせて６．８°の回折角２θにてＸ線回
折スペクトルにおける実質的なピークによって特徴付けられる、請求項１０に記載の塩。
【請求項１２】
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミドメタン
スルホネートである、請求項６に記載の塩。
【請求項１３】
患者におけるアルツハイマー病を治療する方法であって、このような治療を必要とする
患者に有効量の請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容
可能な塩を投与することを含む、方法。
【請求項１４】
患者におけるアルツハイマー病への軽度認知障害の進行を治療する方法であって、この
ような治療を必要とする患者に有効量の請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物、
またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む、方法。
【請求項１５】
療法に使用するための請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的
に許容可能な塩。
【請求項１６】
アルツハイマー病の治療に使用するための請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合
物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１７】
アルツハイマー病への軽度認知障害の進行を治療するのに使用するための請求項１〜１
２のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１８】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、１
種以上の薬学的に許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤とを含む、医薬組成物。
【請求項１９】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、１
種以上の薬学的に許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤とを混合することを含む、医薬
組成物を調製するためのプロセス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規選択的ＢＡＣＥ１阻害剤、その化合物を含む医薬組成物、生理的障害を
治療するためにその化合物を使用する方法、ならびにその化合物の合成に有用な中間体お
よびプロセスに関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明は、アルツハイマー病ならびにアミロイドβ（Ａベータ）ペプチド、アミロイド
前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の神経毒および高い凝集性のペプチド断片に関する他の疾患
および障害の治療の分野である。アルツハイマー病は、世界中で数百万人の患者に影響を
与える破壊的な神経変性障害である。現在、疾患を停止、遅延または反転すること以外に
患者に対する症状の有益性を一時的にのみ与える市販されている承認されている薬剤を考
慮しても、アルツハイマー病の治療において重要で満たされていない必要性が存在する。
【０００３】
アルツハイマー病は、脳におけるＡベータの生成、凝集、および沈着によって特徴付け
られる。β−セクレターゼ（β部位アミロイド前駆体タンパク質切断酵素；ＢＡＣＥ）の
完全または部分的な阻害は、マウスモデルにおいてプラークに関連したおよびプラークに
依存した病理に対する顕著な効果を有することが示されており、Ａベータペプチドレベル
の少しの減少さえも、プラーク負荷およびシナプス欠損の長期間の顕著な減少を生じ得る
ので、特にアルツハイマー病の治療において顕著な治療効果を与えることが示唆される。
さらに、ＢＡＣＥの２つの同族体が同定されており、それらはＢＡＣＥ１およびＢＡＣＥ
２と称され、ＢＡＣＥ１がアルツハイマー病の発症に対して最も臨床的に重要であると考
えられている。ＢＡＣＥ１はニューロンにおいて主に発現されるのに対して、ＢＡＣＥ２
は主に末梢において発現することが示されている（非特許文献１を参照のこと）。さらに
、ＢＡＣＥ２は色素沈着に対して重要であり得る。なぜならそれは色素細胞特異的メラノ
サイトタンパク質のプロセシングにおいて役割を果たすことが同定されているからである
（非特許文献２を参照のこと）。中枢神経系（ＣＮＳ）浸透を有するＢＡＣＥ阻害剤、特
にＢＡＣＥ２よりＢＡＣＥ１に対して選択的である阻害剤が、アルツハイマー病などのＡ
ベータペプチド媒介性障害についての治療を提供するために望まれる。
【０００４】
特許文献１は、ＢＡＣＥ１阻害活性を有する縮合アミノジヒドロチアジン誘導体を開示
しており、これはさらに、アルツハイマー型認知症などのＡベータペプチドによって引き
起こされる神経変性疾患のための有用な治療剤として開示されている。さらに、特許文献
２は、アルツハイマー型認知症などの特定の神経変性疾患を治療するのに有用なＢＡＣＥ
１阻害効果を有する縮合アミノジヒドロチアジン誘導体を開示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許第８，１５８，６２０号明細書
【特許文献２】米国特許第８，３３８，４０７号明細書
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｄ．Ｏｅｈｌｒｉｃｈ、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．、２４、２０３３−２０４５（２０１４）
【非特許文献２】Ｌ．Ｒｏｃｈｉｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１１０（２６）、１０６５８−１０６６３（２０１３）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、ＢＡＣＥの阻害剤である特定の新規化合物を提供する。さらに、本発明は、
ＢＡＣＥ２よりＢＡＣＥ１の選択的阻害剤である特定の新規化合物を提供する。さらに、
本発明は、ＣＮＳを浸透する特定の新規化合物を提供する。本発明はまた、例えば、ＢＡ
ＣＥ２よりＢＡＣＥ１の選択的阻害剤を介して改善された副作用プロファイルについての
可能性を有する特定の新規化合物を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
したがって、本発明は、式Ｉの化合物：
【化１】
2018140987.tif 000002
またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【０００９】
さらに、本発明は、式Ｉａの化合物：
【化２】
2018140987.tif 000003
またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００１０】
本発明はまた、患者におけるアルツハイマー病を治療する方法であって、式Ｉもしくは
Ｉａの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩の有効量を、そのような治療を必要とす
る患者に投与することを含む、方法を提供する。
【００１１】
本発明は、患者における軽度認知障害からアルツハイマー病への進行を治療する方法で
あって、式ＩもしくはＩａの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩の有効量を、その
ような治療を必要とする患者に投与することを含む、方法をさらに提供する。本発明はま
た、患者におけるＢＡＣＥを阻害する方法であって、式ＩもしくはＩａの化合物、または
その薬学的に許容可能な塩の有効量を、そのような治療を必要とする患者に投与すること
を含む、方法を提供する。本発明はまた、アミロイド前駆体タンパク質のＢＡＣＥ媒介性
切断を阻害する方法であって、式ＩもしくはＩａの化合物、またはその薬学的に許容可能
な塩の有効量を、そのような治療を必要とする患者に投与することを含む、方法を提供す
る。本発明は、Ａベータペプチドの産生を阻害する方法であって、式ＩもしくはＩａの化
合物、またはその薬学的に許容可能な塩の有効量を、そのような治療を必要とする患者に
投与することを含む、方法をさらに提供する。
【００１２】
さらに、本発明は、療法に使用するため、特にアルツハイマー病の治療のためまたは軽
度認知障害からアルツハイマー病への進行の予防のための式ＩもしくはＩａの化合物また
はその薬学的に許容可能な塩を提供する。なおさらに、本発明は、アルツハイマー病の治
療のための医薬の製造のための式ＩもしくはＩａの化合物、またはその薬学的に許容可能
な塩の使用を提供する。
【００１３】
本発明は、式ＩもしくはＩａの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を、１種以上の
薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤と共に含む、医薬組成物をさらに提供する
。本発明は、式ＩもしくはＩａの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を、１種以上の
薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤と混合することを含む、医薬組成物を調製
するプロセスをさらに提供する。本発明はまた、式ＩおよびＩａの化合物の合成のための
新規中間体およびプロセスも包含する。
【００１４】
軽度認知障害は、臨床所見および時間と共に軽度認知障害からアルツハイマー認知症を
示す患者の進行に基づいたアルツハイマー病に関連する認知症の潜在的な前駆期と定義さ
れる（Ｍｏｒｒｉｓら、Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．、５８、３９７−４０５（２００１）
；Ｐｅｔｅｒｓｅｎら、Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．、５６、３０３−３０８（１９９９）
）。「軽度認知障害からアルツハイマー病への進行の予防」という用語は、患者における
軽度認知障害からアルツハイマー病への進行を抑制、遅延、停止または反転することを含
む。
【００１５】
本明細書で使用される場合、「治療」または「治療すること」という用語は、既存の症
状または障害の進行または重症度を抑性、遅延、停止、または反転することを含む。
【００１６】
本明細書で使用される場合、「患者」という用語は、ヒトを指す。
【００１７】
「Ａベータペプチドの産性の阻害」という用語は、患者におけるＡベータペプチドのイ
ンビボレベルの減少を意味する。
【００１８】
本明細書において使用される場合、「有効量」という用語は、患者への単一用量または
複数用量投与に際して、診断または治療下で患者において所望される効果を提供する、本
発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の量または用量を指す。
【００１９】
有効量は、公知の技法の使用によって、および類似の状況下で得られた結果を観察する
ことによって、当業者としての担当診断医により容易に決定することができる。患者のた
めの有効量の決定において、多数の要因が担当診断医によって考慮され、それらには、患
者の種；そのサイズ、年齢および全体的な健康；関与する特定の疾患または障害；疾患ま
たは障害の程度または関与または重症度；個々の患者の応答；投与された特定の化合物；
投与様式；投与された調製物の生物学的利用特性；選択された用量レジメン；併用医薬物
の使用；ならびに他の関連する状況が含まれるが、これらに限定されない。
【００２０】
本発明の化合物は全体的に広範囲の投薬量にわたって効果的である。例えば、１日当た
りの投薬量は、通常、約０．０１〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲内である。一部の場合、
上述の範囲の下限値未満の用量レベルが十分以上であってもよく、一方、他の場合、さら
に高い用量が許容可能な副作用で利用されてもよく、したがって、上記の投薬量範囲は本
発明の範囲を決して限定することを意図していない。
【００２１】
本発明の化合物は、好ましくは、化合物を生物学的に利用可能にする、経口および非経
口経路を含む、任意の経路によって投与される医薬組成物として製剤化される。最も好ま
しくは、このような組成物は経口投与用である。このような医薬組成物およびそれを調製
するためのプロセスは当該分野において周知である（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈ
ｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、Ｌ．Ｖ．Ａ
ｌｌｅｎ編、第２２版、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ、２０１２を参照の
こと）。
【００２２】
式ＩおよびＩａの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は本発明の治療方法に特に
有用であるが、特定の基、置換基および構造が好ましい。以下の段落は、このような好ま
しい基、置換基および構造を記載する。これらの選択は本発明の治療方法および新規化合
物の両方に適用可能であることは理解されるであろう。
【００２３】
したがって、縮合二環がｃｉｓ構造である式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能
な塩が好ましい。例えば、当業者は、式Ｉａの化合物が、以下のスキームＡに示されるよ
うに４ａおよび７ａと標識した中心についてｃｉｓ相対配置であることを理解するであろ
う。さらに、式Ｉａの３つのキラル中心についての好ましい相対配置はスキームＡに示さ
れ、５位のジフルオロエチル置換基が４ａ位の水素および７ａ位の置換されたフェニル置
換基に対してｃｉｓ配置である。
【化３】
2018140987.tif 000004
【００２４】
本発明のさらなる化合物は
【化４】
2018140987.tif 000005
ならびにそれらの薬学的に許容可能な塩を含む。
【００２５】
本発明は、全ての個々の鏡像異性体およびジアステレオマー、ならびにラセミ体を含む
前記化合物の鏡像異性体の混合物を意図するが、以下に記載される絶対配置を有する化合
物が特に好ましい：
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド、およ
びその薬学的に許容可能な塩。
【００２６】
さらに、Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフル
オロエチル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン
−７ａ−イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミ
ド；
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミドメタン
スルホネート；
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド４−メ
チルベンゼンスルホネート；および
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド４−メ
チルベンゼンスルホネート半水和物が特に好ましい。
【００２７】
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド４−メ
チルベンゼンスルホネート；および
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド４−メ
チルベンゼンスルホネート半水和物が最も特に好ましい。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
当業者は、本発明の化合物が、以下のスキームＢに示されるように互変異性型で存在し
得ることを理解するであろう。本発明の化合物の特定の互変異性体のものに対する本出願
における任意の参照が与えられる場合、互変異性型およびその全ての混合物の両方を包含
することが理解される。
【化５】
2018140987.tif 000006
【００２９】
さらに、以下の調製例に記載される特定の中間体は１つ以上の窒素保護基を含有しても
よい。保護基は、実施される特定の反応条件および特定の変換に応じて当業者によって理
解されるように変化してもよいことは理解される。保護および脱保護条件は当業者に周知
であり、文献に記載されている（例えば、「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  
Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、第４版、Ｐｅｔｅｒ  Ｇ
．Ｍ．ＷｕｔｓおよびＴｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａ
ｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．２００７を参照のこと）。
【００３０】
個々の異性体、鏡像異性体、およびジアステレオマーは、選択的結晶化技術またはキラ
ルクロマトグラフィーなどの方法によって本発明の化合物の合成において任意の都合の良
い点で当業者により分離または分割され得る（例えば、Ｊ．Ｊａｃｑｕｅｓら、「Ｅｎａ
ｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ，ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ」、Ｊｏｈｎ
Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、１９８１、ならびにＥ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌお
よびＳ．Ｈ．Ｗｉｌｅｎ、「Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  
Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、１９９４を参照のこと
）。
【００３１】
塩酸塩などの本発明の化合物の薬学的に許容可能な塩は、例えば、当該分野において周
知の標準的な条件下で、ジエチルエーテルなどの適切な溶媒中で、本発明の化合物の適切
な遊離塩基と、塩酸などの適切な薬学的に許容可能な酸との反応によって形成できる。さ
らに、このような塩の形成は窒素保護基の脱保護と同時に起こり得る。このような塩の形
成は周知であり、当該分野において理解される。例えば、Ｇｏｕｌｄ，Ｐ．Ｌ．、「Ｓａ
ｌｔ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｂａｓｉｃ  ｄｒｕｇｓ」、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏ
ｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ、３３：２０１−２１７（
１９８６）；Ｂａｓｔｉｎ，Ｒ．Ｊ．ら、「Ｓａｌｔ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｏ
ｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ  ｆｏｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａ
ｌ  Ｎｅｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｅｎｔｉｔｉｅｓ」、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｏｃｅｓｓ
Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、４：４２７−４３５（２０００
）；およびＢｅｒｇｅ，Ｓ．Ｍ．ら、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」、
Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、６６：１−
１９（１９７７）を参照のこと。
【００３２】
特定の略語は以下のように定義される：「ＡＰＰ」はアミロイド前駆体タンパク質を指
し、「ＢＳＡ」はウシ血清アルブミンを指し、「ＣＤＩ」は１，１’−カルボニルジイミ
ダゾールを指し、「ｃＤＮＡ」は相補デオキシリボ核酸を指し、「ＤＡＳＴ」はジエチル
アミノサルファートリフルオリドを指し、「ＤＣＣ」は１，３−ジシクロヘキシルカルボ
ジイミドを指し、「ＤＩＣ」は１，３−ジイソプロピルカルボジイミドを指し、「ＤＩＰ
ＥＡ」はＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを指し、「ＤＭＡＰ」は４−ジメチルアミ
ノピリジンを指し、「ＤＭＳＯ」はジメチルスルホキシドを指し、「ＥＢＳＳ」はアール
平衡塩溶液（Ｅａｒｌｅ’ｓ  Ｂａｌａｎｃｅｓ  Ｓａｌｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ）を指し
、「ＥＤＣＩ」は１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸
塩を指し、「ＥＬＩＳＡ」は酵素結合免疫吸着測定法を指し、「Ｆ１２」はＨａｍ’ｓ  
Ｆ１２培地を指し、「ＦＢＳ」はウシ胎仔血清を指し、「Ｆｃ」は結晶化可能断片を指し
、「ＦＬＵＯＬＥＡＤ（商標）」は４−ｔｅｒｔ−ブチル−２，６−ジメチルフェニルサ
ルファートリフルオリドを指し、「ＦＲＥＴ」は蛍光共鳴エネルギー移動を指し、「ＨＡ
ＴＵ」は（ジメチルアミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル（３Ｈ−［１，２，３］トリアゾロ［４
，５−ｂ］ピリジン−３−イルオキシ）メタンイミニウムヘキサフルオロホスフェートを
指し、「ＨＢＴＵ」は（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ
）−Ｎ，Ｎ−ジメチルメタンイミニウムヘキサフルオロホスフェートを指し、「ＨＥＫ」
はヒト胚腎臓を指し、「ＨＦ−ピリジン」はフッ化水素ピリジンまたはオラー試薬または
ポリ（フッ化ピリジン）を指し、「ＨＯＢＴ」は１−ヒドロキシルベンゾトリアゾール水
和物を指し、「ＩＣ５０」は薬剤について可能な５０％の最大阻害反応を生じるその薬剤
の濃度を指し、「ＨＲＰ」は西洋ワサビペルオキシダーゼを指し、「ＩｇＧ１」は免疫グ
ロブリン様ドメインＦｃ−ガンマ受容体を指し、「ＭＢＰ」はマルトース結合タンパク質
を指し、「ＭＥＭ」は最小必須培地を指し、「ＰＢＳ」はリン酸緩衝生理食塩水を指し、
「ＰＤＡＰＰ」は血小板由来アミロイド前駆体タンパク質を指し、「ＰｙＢＯＰ」は（ベ
ンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフ
ェート）を指し、「ＰｙＢｒＯＰ」はブロモ（トリ−ピロリジニル）ホスホニウムヘキサ
フルオロホスフェートを指し、「ＲＦＵ」は相対蛍光単位を指し、「ＲＴ−ＰＣＲ」は逆
転写ポリメラーゼ連鎖反応を指し、「ＳＤＳ−ＰＡＧＥ」はドデシル硫酸ナトリウムポリ
アクリルアミドゲル電気泳動を指し、「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランを指し、「ＴＭＢ
」はテトラメチルベンジジンを指し、「ＴＭＥＭ」は膜貫通タンパク質を指し、「Ｔｒｉ
ｓ」はトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンを指し、「トリチル」は式「（Ｐｈ）３
Ｃ−」の基を指し、「ＸＲＤ」は粉末Ｘ線回折を指し、「ＸｔａｌＦｌｕｏｒ−Ｅ（登録
商標）またはＤＡＳＴジフルオロスルフィニウム塩」は（ジエチルアミノ）ジフルオロス
ルホニウムテトラフルオロボレートまたはＮ，Ｎ−ジエチル−Ｓ，Ｓ−ジフルオロスルフ
ィルイミニウムテトラフルオロボレートを指し、「ＸｔａｌＦｌｕｏｒ−Ｍ（登録商標）
またはモルホ−ＤＡＳＴジフルオロスルフィニウム塩」はジフルオロ（モルホリノ）スル
ホニウムテトラフルオロボレートまたはジフルオロ−４−モルホリニルスルホニウムテト
ラフルオロボレートを指す。
【００３３】
「トシレート」、「トルエンスルホン酸」、「ｐ−トルエンスルホン酸」、および「４
−メチルベンゼンスルホン酸」という用語は以下の構造：
【化６】
2018140987.tif 000007
の化合物を指すことは当業者により理解される。
【００３４】
本発明の化合物またはその塩は当業者に公知の様々な手順によって調製でき、それらの
いくつかは以下のスキーム、調製例および実施例に例示される。当業者は、記載される経
路の各々についての特定の合成工程が、本発明の化合物またはその塩を調製するために異
なる手段で、または異なるスキームからの工程と共に組み合わされてもよいことを認識す
る。以下のスキームにおける各工程の生成物は、抽出、蒸発、沈殿、クロマトグラフィー
、濾過、粉砕および結晶化を含む、当業者に周知の従来の方法によって回収できる。以下
のスキームにおいて、他に示されない限り、全ての置換基は以前に定義されている通りで
ある。試薬および開始物質は当業者に容易に利用可能である。本発明の範囲を限定せずに
、以下のスキーム、調製例および実施例は本発明をさらに例示するために提供される。
【００３５】
【化７】
2018140987.tif 000008
スキーム１、工程Ａにおいて、ヨウ化トリメチルスルホニウムをＴＨＦなどの溶媒中で
約−５０℃の温度にてｎ−ブチルリチウムなどの有機塩基で処理する。次いでトリチル基
などの適切な保護基で保護された、保護オキシメチルオキシランを−１０℃にて塩基溶液
に加え、約２時間撹拌してスキーム１、工程Ａの保護生成物を得る。「ＰＧ」はアミノ基
または酸素基、例えばカルバミン酸塩、アミドまたはエーテルのために開発された保護基
である。そのような保護基は周知であり、当該分野において理解される。工程Ａの保護さ
れた生成物を、およそ室温にてトルエンなどの溶媒および水酸化ナトリウムなどの水性無
機塩基中でテトラ−Ｎ−ブチルアンモニウムサルフェートまたは他の第四級アンモニウム
塩相間移動触媒を使用してｔｅｒｔ−ブトキシブロモアセテートなどのα−ハロエステル
と反応させて、スキーム１、工程Ｂの化合物を得る。このようなアルキル化は当該分野に
おいて周知である。あるいは、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドまたはＴＨＦなどの溶媒と
共に油中の６０％水素化ナトリウムなどの塩基および０〜１００℃の温度範囲を使用して
、工程Ｂの保護された生成物を得ることができる。ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアセテ
ートを２工程手順にわたってオキシムに変換する。ヘキサン中の水素化イソブチルアルミ
ニウムなどの還元剤を約−７０℃の温度にて滴下して加え、続いて約−６０℃の温度にて
塩酸などの酸水溶液を滴下して加える。ワークアップを有機相抽出により達成して中間体
物質を得る。この物質をジクロロメタンなどの有機溶媒に溶解し、酢酸ナトリウム、続い
てヒドロキシルアミン塩酸塩により処理して、工程Ｃのオキシム生成物を得る。スキーム
１、工程Ｃのオキシム生成物は、約１０〜１５℃の温度にて、または加熱しながら次亜塩
素酸ナトリウム水溶液またはＮ−クロロスクシンイミドなどの代替の酸化剤およびｔｅｒ
ｔ−ブチルメチルエーテル、トルエン、ジクロロメタンまたはキシレンなどの溶媒を使用
することなどのいくつかの方法によって３＋２環化において工程Ｄの二環式４，５−ジヒ
ドロイソオキサゾール生成物に変換できる。２−フルオロ、５−ブロモフェニル基は有機
金属試薬を生成することによってジヒドロイソオキサゾールに加えることができる。有機
金属試薬は、ｎ−ブチルリチウムまたはイソプロピルマグネシウム−塩化リチウム錯体な
どの試薬と共にハロゲン−金属交換を使用して４−ブロモ−１−フルオロ−２−ヨード−
ベンゼンから生成でき、ＴＨＦなどの溶媒中で約−７８℃〜１５℃の温度範囲にて滴下し
て加える。次いでボロントリフルオリドジエチルエーテルなどのルイス酸を加えて、スキ
ーム１、工程Ｅの生成物を得る。得られた二環式テトラヒドロイソオキサゾールを酢酸中
で亜鉛で処理して、スキーム１、工程Ｆの開環生成物を形成できる。イソオキサゾール環
を開く代替の方法は水素化条件での圧力下でエタノールなどの極性溶媒中でラネーニッケ
ルを使用する。次いで工程Ｆの生成物を、約５℃から室温の温度にてジクロロメタンまた
はＴＨＦなどの溶媒中でベンゾイルイソチオシアネートと反応させて、工程Ｇのチオ尿素
化合物を得ることができる。チアジン環は、約−２０℃の温度にてジクロロメタンなどの
溶媒中でトリフルオロメタンスルホン酸無水物およびピリジンなどの有機塩基を使用して
形成して、工程Ｈの生成物を得ることができる。トリチル基などのヒドロキシメチル保護
基は室温にてギ酸などの当該分野において周知の方法を使用してスキーム１、工程Ｉにお
いて除去して、工程Ｉの化合物を得ることができる。ヒドロキシメチルを、ＤＭＳＯなど
の溶媒中で室温にて２−ヨードキシ安息香酸（ＩＢＸ）などの酸化剤を使用するか、また
は約５℃の温度にて撹拌しながらアセトニトリルなどの溶媒中で（ジアセトキシヨード）
ベンゼンを少しずつ滴下してカルボン酸に酸化して、スキーム１、工程Ｊの化合物を得る
ことができる。ワインレブアミドを、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩、トリ
エチルアミンなどの有機塩基、およびＨＡＴＵなどのカップリング試薬を添加して工程Ｊ
の酸生成物からスキーム１、工程Ｋにおいて調製する。混合物を室温にて撹拌して工程Ｋ
の生成物を得る。使用できる他のカップリング試薬としては、ＣＤＩ、カルボジイミド、
例えばＤＣＣ、ＤＩＣ、もしくはＥＤＣＩまたは非求核性アニオンの他のウロニウムもし
くはホスホニウム塩、例えばＨＢＴＵ、ＰｙＢＯＰ、およびＰｙＢｒＯＰが挙げられる。
次いでワインレブアミドは、ＴＨＦなどの溶媒中で工程Ｌにおいてグリニャール試薬など
の有機金属試薬または有機リチウム試薬を使用してケトンに変換する。具体的には、エー
テルまたは２−メチルテトラヒドロフランなどの溶媒中の溶液としてメチルマグネシウム
ブロリドを、約−７８℃〜−４０℃の温度にてワインレブアミドに加えて、工程Ｌのケト
ンを得ることができる。スキーム１、工程Ｍにおいて、工程Ｌの化合物のメチルケトン基
は約０℃にてジクロロメタンなどの溶媒中でジフルオロ（モルホリノ）スルホニウムテト
ラフルオロボレートを使用してジフルオロエチル基に変換し、続いてトリエチルアミント
リヒドロフルオリドを滴下して加えて、０℃から室温で撹拌して、スキーム１、工程Ｍの
化合物を得る。あるいは、当該分野において周知である使用できる他のフッ素化剤は、ト
リエチルアミントリ（フッ化水素）などの添加剤と共にＤｅｏｘｏ−Ｆｌｕｏｒ（登録商
標）、ＤＡＳＴ、ＸｔａｌＦｌｕｏｒ−Ｅ（登録商標）もしくはＸｔａｌＦｌｕｏｒ−Ｍ
（登録商標）、またはＨＦ−ピリジンなどの添加剤を使用するＦＬＵＯＬＥＡＤ（商標）
である。フェニルの５−ブロモはエタノールなどの溶媒中で（１Ｒ，２Ｒ）−Ｎ，Ｎ’−
ジメチル−１，２−シクロヘキサンジアミンを使用してアミンに変換し、アジ化ナトリウ
ム、続いてアスコルビン酸ナトリウムおよび硫酸銅を添加する。反応物を約８０℃で数時
間加熱し、次いで酢酸エチルなどの溶媒を使用する抽出によりワークアップする。次いで
中間体を約５０ｐｓｉの水素の圧力にてエタノールおよびＴＨＦなどの溶媒中で１０％パ
ラジウムなどのパラジウム炭素を使用して水素化条件下で還元して、スキーム１、工程Ｎ
のアニリン生成物を得る。
【００３６】
【化８】
2018140987.tif 000009
あるいはスキーム１ａにおいて、スキーム１、工程Ａの保護生成物を、約５℃の温度に
てトルエンなどの溶媒中で４−（２−クロロアセチル）モルホリノおよび硫酸水素テトラ
ブチルアンモニウムなどの塩基で処理して、スキーム１ａ、工程Ａの生成物を得ることが
できる。次いでモルホリノ基をスキーム１ａ、工程Ｂにおける脱離基として使用できる。
例えば、スキーム１ａ、工程Ａの生成物は、イソプロピルマグネシウムクロリド−塩化リ
チウム錯体および４−ブロモ−１−フルオロ−２−ヨードベンゼンからインサイチュで調
製できる適切なグリニャール試薬で処理するか、または適切なグリニャール試薬が利用可
能である場合、その試薬を約５℃の温度にてスキーム１ａ、工程Ａの生成物に直接加えて
、スキーム１ａ、工程Ｂの生成物を得ることができる。酢酸カルボニル（ｃａｒｂｏｎｙ
ｌ  ａｃｅｔａｔｅ）は約５０℃にて加熱しながらヒドロキシルアミン塩酸塩および酢酸
ナトリウムによりオキシムに変換して、スキーム１ａ、工程Ｃの生成物を得ることができ
る。次いでスキーム１ａ、工程Ｃのオキシム生成物は、トルエンなどの溶媒中のヒドロキ
ノンを使用し、加熱還流してスキーム１ａ、工程Ｄの生成物（スキーム１、工程Ｅと同じ
生成物）に変換する。スキーム１ａ、工程Ｄのアミン生成物は、約０〜５℃の温度にてジ
クロロメタンなどの溶媒中でＤＭＡＰおよびピリジンなどの有機塩基を使用して塩化アセ
チルによりアシル化して、スキーム１ａ、工程Ｅの生成物を得ることができる。次いでス
キーム１ａ、工程Ｅの生成物は以下に説明するようにスキーム２、工程Ａの生成物に変換
できる。
【００３７】
【化９】
2018140987.tif 000010
代替の経路において、スキーム２に記載されるように、スキーム１、工程Ｅの化合物の
イソオキサゾール窒素をアセチル基で保護し、ヒドロキシメチルの保護基を２工程手順で
除去する。例えば、テトラヒドロイソオキサゾールをジクロロメタンなどの溶媒中でＤＭ
ＡＰおよびピリジンなどの有機塩基で処理し、塩化アセチルを加える。温度は約１０℃未
満に維持し、次いでおよそ室温にて撹拌する。反応物を水で希釈し、ジクロロメタンなど
の溶媒で抽出する。有機抽出物を１Ｎの塩酸などの酸水溶液で洗浄し、水相をジクロロメ
タンなどの溶媒で再び抽出し、続いて水洗浄する。有機溶媒を部分的に除去し、ギ酸など
の酸を加えてヒドロキシメチルを脱保護する。混合物を室温にて撹拌するかまたはヒドロ
キシの脱保護が完了するまで約４０℃の温度で加熱して、スキーム２、工程Ａの化合物を
得ることができる。スキーム２、工程Ａのヒドロキシメチル生成物は、スキーム１、工程
Ｊに記載される手順と同様の方法でスキーム２、工程Ｂのカルボン酸生成物に酸化でき、
ワインレブアミドは、ジクロロメタンなどの溶媒と共に少しずつ添加するＣＤＩなどのカ
ップリング剤を使用し、−２０℃に冷却し、約１時間撹拌し、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキ
シルアミン塩酸塩を少しずつ加えて、スキーム１、工程Ｋに記載される手順と同様の方法
でさらに調製できる。完全な反応が観察されるまで、ＣＤＩのさらなる添加およびＮ，Ｏ
−ジメチルヒドロキシルアミンを添加して、スキーム２、工程Ｃのワインレブアミド生成
物を得ることができる。スキーム２、工程Ｄのケトンは、スキーム１、工程Ｌに記載され
る手順と同様の方法でワインレブアミドから形成できる。工程Ｄのケトンは、スキーム１
、工程Ｍに記載される手順と同様の方法でジフルオロエチル基に変換して、スキーム２、
工程Ｅの生成物を得ることができる。アセチルテトラヒドロイソオキサゾールは、塩酸を
使用し、約１００℃に加熱することなどの当該分野において周知の酸性条件下で脱保護し
て、スキーム２、工程Ｆの生成物を得ることができる。二環式テトラヒドロイソオキサゾ
ールを酢酸中の亜鉛で処理して、スキーム１、工程Ｆに記載される手順と同様の方法でス
キーム２、工程Ｇの開環生成物を形成することができる。スキーム２、工程Ｈのチアジン
生成物は、スキーム１、工程ＧおよびＨに記載される手順と同様の方法でベンゾイルイソ
チオシアネートを使用してワンポット２工程反応において調製できる。混合物を残渣に蒸
発させて、シクロヘキサンを加える。混合物を約６０℃で加熱し、メチルｔｅｒｔ−ブチ
ルエーテルを加えて残渣を溶解する。溶液を濾過し、濃縮乾固する。次いでチアジン環を
スキーム１、工程Ｈに記載される手順と同様の方法において形成して、スキーム２、工程
Ｈの生成物を得ることができる。
【００３８】
【化１０】
2018140987.tif 000011
スキーム３、工程Ａにおいて、スキーム１、工程Ｎのアニリン生成物は、当該分野にお
いて周知のカップリング条件を利用してヘテロ芳香族カルボン酸とカップリングできる。
当業者は、カルボン酸およびアミンの反応から得られるアミド形成についての多くの方法
および試薬が存在することを認識するであろう。例えば、カップリング試薬およびＤＩＰ
ＥＡまたはトリエチルアミンなどのアミン塩基の存在下で適切なアニリンと適切な酸との
反応により、スキーム３、工程Ａの化合物が得られる。カップリング試薬としては、ＤＣ
Ｃ、ＤＩＣ、ＥＤＣＩなどのカルボジイミド、ならびにＨＯＢｔおよびＨＯＡｔなどの芳
香族オキシムが挙げられる。さらに、ＨＢＴＵ、ＨＡＴＵ、ＰｙＢＯＰ、およびＰｙＢｒ
ＯＰなどの非求核性アニオンのウロニウムもしくはホスホニウム塩、またはプロピルホス
ホン酸無水物（Ｔ３Ｐ（登録商標））などの環状無水リン酸を多くの従来のカップリング
試薬の代わりに使用してもよい。反応を高めるためにＤＭＡＰなどの添加剤を使用しても
よい。あるいは、アニリンアミンはトリエチルアミンまたはピリジンなどの塩基の存在下
で置換塩化ベンゾイルを使用してアシル化できる。スキーム３、工程Ｂにおいて、次いで
保護されたチアジンアミンは、ＴＨＦおよびエタノールなどの溶媒中でピリジンおよびＯ
−メチルヒドロキシルアミン塩酸塩などの有機塩基ならびにピリジンなどの有機塩基で脱
保護して式Ｉａの化合物を得ることができる。あるいは、メタノール中の水酸化リチウム
などの無機塩基を使用して、チアジンを脱保護して、式Ｉａの化合物を得ることができる
。
【００３９】
【化１１】
2018140987.tif 000012
あるいは、スキーム４、工程Ａにおいて、スキーム１、工程Ｎのアニリン生成物を、当
該分野において周知の標準的な条件下、例えばＴＨＦおよびエタノールなどの溶媒中でピ
リジンおよびＯ−メチルヒドロキシルアミン塩酸塩などの有機塩基を用いて脱保護して、
脱保護ジアミノ化合物を得ることができる。あるいは、メタノール中の水酸化リチウムな
どの無機塩基を脱保護のために使用して、脱保護ジアミン化合物を得ることができる。
【００４０】
スキーム４、工程Ｂにおいて、次いで脱保護ジアミノ化合物を、当該分野において周知
のカップリング条件を利用するヘテロ芳香族カルボン酸とアニリンアミノ基において選択
的にカップリングして、式Ｉａの化合物を得ることができる。当業者は、カルボン酸およ
びアミンの反応から得られるアミド形成について多くの方法および試薬が存在することを
認識するであろう。例えば、カップリング試薬およびＤＩＰＥＡまたはトリエチルアミン
などのアミン塩基の存在下での適切なアミンと適切な酸との反応により、式Ｉａの化合物
が得られる。カップリング試薬としては、ＤＣＣ、ＤＩＣ、ＥＤＣＩなどのカルボジイミ
ドならびにＨＯＢｔおよびＨＯＡｔなどの芳香族オキシムが挙げられる。さらに、ＨＢＴ
Ｕ、ＨＡＴＵ、ＰｙＢＯＰおよびＰｙＢｒＯＰなどの非求核性アニオンのウロニウムもし
くはホスホニウム塩またはプロピルホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ（登録商標））などの環状
無水リン酸を多くの従来のカップリング試薬の代わりに使用してもよい。反応を高めるた
めにＤＭＡＰなどの添加剤を使用してもよい。
【００４１】
【化１２】
2018140987.tif 000013
あるいは、スキーム５において、スキーム１、工程Ｍの臭化物生成物を、約１００〜１
３０℃に加熱しながら、トリフルオロアセトアミド、ヨウ化銅、トランス、ラセミ体−Ｎ
，Ｎ’−ジメチル−１，２−シクロヘキサンジアミンなどのジアミン、炭酸カリウムなど
の無機塩基およびヨウ化ナトリウムを使用して保護アニリンに変換して、スキーム５、工
程Ａの保護アニリン生成物を得る。次いで保護アニリンおよびチアジンアミンを段階的に
脱保護できる。メタノール中の７Ｎのアンモニアなどの塩基を使用してトリフルオロアセ
トアミドを加水分解して、アニリンおよび保護チアジン、スキーム１、工程Ｎの同じ生成
物を得ることができる。次いで当該分野において周知で、ピリジンなどの有機塩基と共に
エタノールおよびＴＨＦなどの溶媒中でＯ−メチルヒドロキシルアミン塩酸塩を使用し、
続いて約５５℃で加熱するか、または室温にて撹拌し、続いて濃縮し、精製するスキーム
４、工程Ａに記載される条件下でチアジンを脱保護して、スキーム５、工程Ｂの生成物を
得ることができる。あるいは、脱保護の順序を逆にして、チアジン脱保護を最初にし、ア
ニリン脱保護を最後にしてもよい。
【実施例】
【００４２】
以下の調製例および実施例は本発明をさらに例示する。
調製例１
（２Ｓ）−１−トリチルオキシブト−３−エン−２−オール
【化１３】
2018140987.tif 000014
スキーム１、工程Ａ：周囲温度にて７５分間、ＴＨＦ（１２６４ｍＬ）中でトリメチル
スルホニウムヨージド（１９３．５ｇ、９４８．２ｍｍｏｌ）を撹拌する。混合物を−５
０℃に冷却し、３０分の時間にわたってカニューレを介してｎ−ブチルリチウム（ヘキサ
ン中２．５ｍｏｌ／Ｌ、３７９ｍＬ、９４８．２ｍｍｏｌ）を加える。反応物を徐々に−
３０℃に加温し、６０分間撹拌する。温度を−１０℃未満に維持しながら、（２Ｓ）−２
−トリチルオキシメチルオキシラン（１００ｇ、３１６．１ｍｍｏｌ）を少しずつ加える
。添加が完了した後、反応混合物を室温に加温し、２時間撹拌する。反応物を飽和塩化ア
ンモニウムに注ぎ、相を分離し、水相を酢酸エチルで抽出する。有機層を合わせ、硫酸マ
グネシウムで乾燥させる。濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得る。メチルｔ−ブチルエー
テル：ヘキサン（１０〜１５％勾配）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより残
渣を精製して、標題化合物（５６．２２ｇ、５４％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３５
３（Ｍ＋Ｎａ）。
【００４３】
代替調製例１
（２Ｓ）−１−トリチルオキシブト−３−エン−２−オール
スキーム１ａ、工程Ａ開始物質：トリフェニルメチルクロリド（２８７ｇ、９４７．１
ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（７．７１ｇ、６３．１ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１４
０ｇ、１３８３．５ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（８５０ｍＬ）中の（２Ｓ）−ブト−
２−エン−１，２−ジオール（ＪＡＣＳ、１９９９、１２１、８６４９のように調製した
）（６４．５ｇ、６３１ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。２４℃にて２４時間撹拌する。１Ｎ
のクエン酸水溶液（４２５ｍＬ）を加える。層を分離し、減圧下で有機抽出物を濃縮して
乾燥させる。メタノール（９００ｍＬ）を加え、１時間５℃で冷却する。濾過により固体
を回収し、５℃のメタノール（５０ｍＬ）で洗浄する。固体を捨て、減圧下で母液を濃縮
して乾燥させる。トルエン（８００ｍＬ）を加え、２６８ｇの塊に濃縮して、４８ｗｔ％
のトルエン溶液中の標題化合物（１２９ｇ、６７％）を得る。
【００４４】
調製例２
１−モルホリノ−２−［（１Ｓ）−１−（トリチルオキシメチル）アリルオキシ］エタ
ノン
【化１４】
2018140987.tif 000015
スキーム１ａ、工程Ａ：硫酸水素テトラブチルアンモニウム（８３．２ｇ、２４５．０
ｍｍｏｌ）および４−（２−クロロアセチル）モルホリン（６３８．５０ｇ、３９０２．
７ｍｍｏｌ）を、０〜５℃であるトルエン（５８００ｍＬ）中の１−トリチルオキシブト
−３−エン−２−オール（８３２．４、２５１９ｍｍｏｌ）の溶液に加える。水（１０４
１ｍＬ）中の水酸化ナトリウム（１００８．０ｇ、２５２０２ｍｍｏｌ）を加える。０〜
５℃で１９時間撹拌する。水（２５００ｍＬ）およびトルエン（２５００ｍＬ）を加える
。層を分離し、有機抽出物を水（２×３５００ｍＬ）で洗浄する。減圧下で有機抽出物を
濃縮して乾燥させる。トルエン（２５００ｍＬ）を残渣に加え、次いでｎ−ヘプタン（７
５００ｍＬ）をゆっくり加える。１６時間撹拌する。濾過により得られた固体を回収し、
ｎ−ヘプタン（１２００ｍＬ）で洗浄する。固体を真空下で乾燥させて標題化合物（１０
７５．７ｇ、９８％）を得る。
【００４５】
調製例３
１−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−２−［（１Ｓ）−１−（トリチルオキ
シメチル）アリルオキシ］エタノン
【化１５】
2018140987.tif 000016
スキーム１ａ、工程Ｂ：ＴＨＦ中の１．３Ｍのイソプロピルマグネシウムクロリド−塩
化リチウム錯体（３０７９ｍＬ、２０００ｍｍｏｌ）の溶液を、５℃未満の反応温度を維
持する速度でトルエン（２５００ｍＬ）中の４−ブロモ−１−フルオロ−２−ヨードベン
ゼン（６７３．２ｇ、２２３７．５ｍｍｏｌ）の溶液に加える。１時間撹拌する。得られ
たグリニャール溶液（５１５０ｍＬ）を、５℃未満の反応温度を維持する速度でトルエン
（５０００ｍＬ）中の１−モルホリノ−２−［（１Ｓ）−１−（トリチルオキシメチル）
アリルオキシ］エタノン（５００ｇ、１０９３ｍｍｏｌ）の溶液に加える。５℃未満に温
度を維持しながら３時間撹拌する。さらに調製したグリニャール溶液（４２９ｍＬ）を加
え、１時間撹拌する。５℃未満の温度を維持する速度で１Ｎのクエン酸水溶液（５０００
ｍＬ）を加える。層を分離し、有機抽出物を水（５０００ｍＬ）で洗浄する。溶液を減圧
下で濃縮して乾燥させる。メタノール（２０００ｍＬ）を残渣に加え、濃縮して残渣とし
て標題化合物（７９３ｇ、７３．４％有効性、８３％）を得る。
【００４６】
調製例４
１−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−２−［（１Ｓ）−１−（トリチルオキ
シメチル）アリルオキシ］エタノンオキシム
【化１６】
2018140987.tif 000017
スキーム１ａ、工程Ｃ：ヒドロキシルアミン塩酸塩（９８．３ｇ）をメタノール（３８
００ｍＬ）中の１−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−２−［（１Ｓ）−１−（
トリチルオキシメチル）アリルオキシ］エタノン（４５０ｇ、７０７ｍｍｏｌ）および酢
酸ナトリウム（１７４ｇ）に加える。溶液を５０℃で２時間加熱する。２４℃に冷却し、
濃縮する。水（１０００ｍＬ）およびトルエン（１５００ｍＬ）を残渣に加える。層を分
離し、水相をトルエン（５００ｍＬ）で抽出する。有機抽出物を合わせ、水（２×４００
ｍＬ）で洗浄する。溶液を減圧下で濃縮して残渣として標題化合物（５６７ｇ、６１．４
％有効性、８８％）を得る。
【００４７】
調製例５
ｔｅｒｔ−ブチル２−［（１Ｓ）−１−（トリチルオキシメチル）アリルオキシ］アセ
テート
【化１７】
2018140987.tif 000018
スキーム１、工程Ｂ：（２Ｓ）−１−トリチルオキシブト−３−エン−２−オール（７
４．６７ｇ、２２６．０ｍｍｏｌ）をトルエン（３７６ｍＬ）中の硫酸テトラ−Ｎ−ブチ
ルアンモニウム（１３．２６ｇ、２２．６ｍｍｏｌ）の溶液に加える。水（１１９ｍＬ）
中の水酸化ナトリウム（５０％質量）、続いてｔｅｒｔ−ブチル−２−ブロモアセテート
（１１０．２０ｇ、５６５．０ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を周囲温度にて１８時間
撹拌する。水に注ぎ、相を分離し、水相を酢酸エチルで抽出する。有機層を合わせ、硫酸
マグネシウムで乾燥させる。混合物を濾過し、減圧下で濃縮して標題化合物（７７．８６
ｇ、７７％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４６７（Ｍ＋Ｎａ）。
【００４８】
調製例６
（１Ｅ）−２−［（１Ｓ）−１−（トリチルオキシメチル）アリルオキシ］アセトアル
デヒドオキシム
【化１８】
2018140987.tif 000019
スキーム１、工程Ｃ：ジクロロメタン（５８２．２ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−［
（１Ｓ）−１−（トリチルオキシメチル）アリルオキシ］アセテート（７７．６６ｇ、１
７４．７ｍｍｏｌ）の溶液を−７８℃に冷却する。ヘキサン（１ｍｏｌ／Ｌ、１７４．７
ｍＬ）中の水素化ジイソブチルアルミニウムの溶液を３５分の時間にわたって滴下して加
え、温度を−７０℃未満に維持する。−７８℃にて５時間撹拌する。−６０℃未満の温度
を維持しながら、水中の塩酸（２ｍｏｌ／Ｌ、１９２．１ｍＬ）を反応混合物に滴下して
加える。反応物を周囲温度に徐々に加温し、６０分間撹拌する。有機抽出物を分離し、飽
和炭酸水素ナトリウムで洗浄する。溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下
で濃縮して残渣を得る。残渣をジクロロメタンに溶解する。酢酸ナトリウム（２８．６６
ｇ、３４９．３ｍｍｏｌ）、続いてヒドロキシルアミン塩酸塩（１８．２１ｇ、２６２．
０ｍｍｏｌ）を加える。周囲温度にて１８時間撹拌する。水に注ぎ、相を分離し、水相を
ジクロロメタンで抽出する。有機層を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させる。混合物を
濾過し、減圧下で濃縮して標題化合物（６８．３８ｇ、１０１％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  
ｍ／ｚ  ３８６（Ｍ−Ｈ）。
【００４９】
調製例７
（３ａＲ，４Ｓ）−４−（トリチルオキシメチル）−３，３ａ，４，６−テトラヒドロ
フロ［３，４−ｃ］イソオキサゾール
【化１９】
2018140987.tif 000020
スキーム１、工程Ｄ：ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（７１７ｍＬ）中の（１Ｅ）−
２−［（１Ｓ）−１−（トリチルオキシメチル）アリルオキシ］アセトアルデヒドオキシ
ム（５５．５７ｇ、１４３．４ｍｍｏｌ）の溶液を５℃に冷却する。１０℃未満の温度を
維持しながら、次亜塩素酸ナトリウム（水中５％、５９１ｍＬ、４３０．２ｍｍｏｌ）を
滴下して加える。１０℃にて３０分間撹拌する。反応物を１５℃に加温する。１５℃にて
１８時間撹拌する。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄す
る。相を分離し、有機相を５％の亜硫酸水素ナトリウム溶液およびブラインで洗浄する。
溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得る。５０％のメ
チルｔｅｒｔ−ブチルエーテル／ジクロロメタン：ヘキサン（２０〜２７％勾配）で溶出
するシリカゲルクロマトグラフィーにより残渣を精製して標題化合物（３５．８４ｇ、６
５％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４０８（Ｍ＋Ｎａ）。
【００５０】
調製例８
（３ａＲ，４Ｓ，６ａＲ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−４−（
トリチルオキシメチル）−３，３ａ，４，６−テトラヒドロフロ［３，４−ｃ］イソオキ
サゾール
【化２０】
2018140987.tif 000021
スキーム１、工程Ｅ：ＴＨＦ（１４４．５ｍＬ）およびトルエン（１４４５ｍＬ）中の
４−ブロモ−１−フルオロ−２−ヨード−ベンゼン（８６．９４ｇ、２８８．９ｍｍｏｌ
）の溶液を−７８℃に冷却する。−７０℃未満の温度を維持しながら、ｎ−ブチルリチウ
ム（ヘキサン中２．５Ｍ、１２０ｍＬ、２８８．９ｍｍｏｌ）を滴下して加える。−７８
℃にて３０分間撹拌する。−７０℃未満の温度を維持しながら、三フッ化ホウ素ジエチル
エーテル（３６．５ｍＬ、２８８．９ｍｍｏｌ）を滴下して加える。溶液を−７８℃にて
３０分間撹拌する。ＴＨＦ（４８２ｍＬ）中の（３ａＲ，４Ｓ）−４−（トリチルオキシ
メチル）−３，３ａ，４，６−テトラヒドロフロ［３，４−ｃ］イソオキサゾール（５５
．６９ｇ、１４４．５ｍｍｏｌ）の溶液を、−６５℃未満の温度を維持しながら３０分の
時間にわたって反応物に滴下して加える。−７８℃にて９０分間撹拌する。−６０℃未満
の温度を維持しながら飽和塩化アンモニウムを急速に加える。ブラインに注ぎ、水相を酢
酸エチルで抽出する。有機抽出物を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させる。濾過し、減
圧下で濃縮して残渣を得る。１００％ヘキサン〜３０％ヘキサン／７０％ジエチルエーテ
ルの勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより残渣を精製して、標題化合物（
３６．５２ｇ、４５％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｅ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）５６０／５
６２［Ｍ＋Ｈ］。
【００５１】
代替調製例８
スキーム１ａ、工程Ｄ：トルエン（４０００ｍＬ）中の１−（５−ブロモ−２−フルオ
ロ−フェニル）−２−［（１Ｓ）−１−（トリチルオキシメチル）アリルオキシ］エタノ
ンオキシム（４５８ｇ、５０２ｍｍｏｌ）およびヒドロキノン（５６．３ｇ、５１１ｍｍ
ｏｌ）の溶液を窒素下で２７時間加熱還流する。溶液を２４℃に冷却し、炭酸ナトリウム
水溶液（８００ｍＬ）を加える。層を分離し、水相をトルエン（３００ｍＬ）で抽出する
。有機抽出物を合わせ、水（２×５００ｍＬ）で洗浄する。溶液を減圧下で濃縮して残渣
を得る。イソプロピルアルコール（１５００ｍＬ）を加え、加熱還流する。２４℃に冷却
し、固体を濾過により回収する。真空下で固体を乾燥させて標題化合物（２１２ｇ、７５
％）を得る。
【００５２】
調製例９
１−［（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−
４−（トリチルオキシメチル）−３，３ａ，４，６−テトラヒドロフロ［３，４−ｃ］イ
ソオキサゾール−１−イル］エタノン
【化２１】
2018140987.tif 000022
スキーム１ａ、工程Ｅ：塩化アセチル（３５．５６ｇ、５０３．９ｍｍｏｌ）を、５℃
未満の内部温度を維持しながら窒素下で、ジクロロメタン（７２０ｍＬ）中の（３ａＲ，
４Ｓ，６ａＲ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−４−（トリチルオキ
シメチル）−３，３ａ，４，６−テトラヒドロフロ［３，４−ｃ］イソオキサゾール（２
３５．３ｇ、４２０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（５．１３ｇ、４２．０ｍｍｏｌ）およびピリ
ジン（６６．４５ｇ、８４０．１ｍｍｏｌ）の溶液に加える。１時間撹拌し、次いで水（
３００ｍＬ）および１Ｍの硫酸（３００ｍＬ）を加える。混合物を１０分間撹拌し、層を
分離する。有機抽出物を回収し、飽和炭酸ナトリウム（５００ｍＬ）および水（５００ｍ
Ｌ）で洗浄する。溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させる。濾過し、減圧下で濃縮して、１
−［（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−４−
（トリチルオキシメチル）−３，３ａ，４，６−テトラヒドロフロ［３，４−ｃ］イソオ
キサゾール−１−イル］エタノン（２３５ｇ、９３％）を灰色の固体として得る。
【００５３】
調製例１０
１−［（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４
−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−１Ｈ，３Ｈ−フロ［３，４−ｃ］［１，２］オキ
サゾール−１−イル］エタノン
【化２２】
2018140987.tif 000023
スキーム２、工程Ａ：２０Ｌのジャケット形反応器において塩化アセチル（２９０ｍＬ
、４０７５ｍｍｏｌ）を、１０℃未満の内部温度を維持しながら窒素下で、ジクロロメタ
ン（１０Ｌ）中の（３ａＲ，４Ｓ，６ａＲ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェ
ニル）−４−（トリチルオキシメチル）−３，３ａ，４，６−テトラヒドロフロ［３，４
−ｃ］イソオキサゾール（１９９６ｇ、３３８４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（５６．０ｇ、４
５８ｍｍｏｌ）、ピリジン（５００ｍＬ、６１８０ｍｍｏｌ）の溶液に加える。添加が完
了した（１時間）後、２０℃に加温し、一晩撹拌する。反応が不完全である場合、完全な
反応が観察されるまで塩化アセチル、ＤＭＡＰ、ピリジンおよびジクロロメタンを加える
。反応混合物を０℃に冷却し、水（５Ｌ）をゆっくり加え、反応混合物を１０℃にて３０
分間撹拌し、層を分離する。有機抽出物を回収し、水相をジクロロメタン（１Ｌ）で洗浄
する。合わせた有機抽出物を１Ｎの塩酸水溶液（２×４Ｌ）で洗浄し、水相をジクロロメ
タン（２×１Ｌ）で抽出する。合わせた有機抽出物を水（４Ｌ）で洗浄し、溶媒を減圧下
で除去して全量約５Ｌを得る。９０％のギ酸（１８００ｍＬ）を加え、周囲温度にて３日
間静置する。２時間、４０℃で加温し、次いで減圧下で溶媒を除去する。残渣をメタノー
ル（４Ｌ）で希釈し、飽和炭酸ナトリウム水溶液（３Ｌ）をゆっくり加える。固体の炭酸
ナトリウム（３７５ｇ）を加えてｐＨを８〜９に調整する。４５℃にて１時間撹拌し、次
いで周囲温度に冷却する。固体を濾過により除去し、メタノール（４×５００ｍＬ）で洗
浄し、次いで２Ｎの水酸化ナトリウム（１００ｍＬ）で処理し、周囲温度にて１時間静置
する。固体を濾過により除去し、メタノール（２×１００ｍＬ）で洗浄する。減圧下で溶
媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチル（５Ｌ）と水（２Ｌ）との間で分配する。水相を酢酸エ
チル（２Ｌ）で抽出し、合わせた有機抽出物をブライン（２×１Ｌ）で洗浄する。減圧下
で溶媒を除去し、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２．５Ｌ）を加え、蒸発乾固する。
メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（４Ｌ）を加え、６５℃にて１時間撹拌し、周囲温度に
冷却し、固体を濾過により回収し、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（３×５００ｍＬ）
で洗浄する。真空下でベージュ色の固体に乾燥させる。この固体を完全に溶解するまでト
ルエン（７．５Ｌ）中で１１０℃に加熱し、１時間にわたって１８℃に冷却し、この温度
にて１時間撹拌する。４０℃に加温し、沈殿が形成すると再び１８℃に冷却する。４５分
間撹拌し、次いで固体を濾過により回収し、トルエン（２×５００ｍＬ）で洗浄する。固
体を真空下で乾燥させて標題化合物（４４３．１ｇ、３６％、ＬＣＭＳにより９５％純度
）を得る。濾液を真空下で蒸発させて残渣を得る。イソヘキサン中の２０％〜１００％の
酢酸エチルで溶出するシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーにより残渣を精製する。
６０℃にて３０分間、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２Ｌ）中の生成物を含有する画
分をスラリーにし、周囲温度に冷却し、固体を濾過により回収し、メチルｔｅｒｔ−ブチ
ルエーテル（２×２００ｍＬ）で洗浄する。固体を真空下で乾燥させてベージュ色の結晶
固体（３０４ｇ、２４％、ＬＣＭＳにより８８％純度）として標題化合物を得る。濾液を
真空下で残渣に蒸発させる。イソヘキサン中の２０％〜１００％の酢酸エチルで溶出する
シリカゲルフラッシュクロマトグラフィーにより残渣を精製して標題化合物（５７．８ｇ
、５％、ＬＣＭＳにより８８％純度）を得る。ＥＳ／ＭＳ：ｍ／ｚ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ
）３６０．０／３６２．０［Ｍ＋Ｈ］。
【００５４】
代替調製例１０
スキーム２、工程Ａ：１５℃で１−［（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−６ａ−（５−ブロモ
−２−フルオロ−フェニル）−４−（トリチルオキシメチル）−３，３ａ，４，６−テト
ラヒドロフロ［３，４−ｃ］イソオキサゾール−１−イル］エタノン（６９ｇ、１１４．
５ｍｍｏｌ）を、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（２．２ｇ、１１．４５ｍｍｏｌ）、
ジクロロメタン（２８０ｍＬ）およびメタノール（７００ｍＬ）の溶液に加える。１８時
間撹拌し、次いで溶媒を減圧下で除去する。残渣をジクロロメタン（３５０ｍＬ）で希釈
し、１Ｍの炭酸ナトリウム水溶液（１４０ｍＬ）および水（１４０ｍＬ）を加える。層を
分離し、減圧下で有機層を蒸発させる。トルエン（３５０ｍＬ）を残渣に加え、１時間加
熱還流する。１０℃／時間の速度で１０〜１５℃に冷却する。固体を濾過により回収し、
トルエン（７０ｍＬ）で洗浄する。真空下で固体を乾燥させて灰色の固体として標題化合
物（３０ｇ、６５％）を得る。
【００５５】
調製例１１
（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−１−アセチル−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェ
ニル）−３，３ａ，４，６−テトラヒドロフロ［３，４−ｃ］イソオキサゾール−４−カ
ルボン酸
【化２３】
2018140987.tif 000024
スキーム２、工程Ｂ：２０Ｌのジャケット形反応器においてアセトニトリル（４．５Ｌ
）中の１−［（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）
−４−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−１Ｈ，３Ｈ−フロ［３，４−ｃ］［１，２］
オキサゾール−１−イル］エタノン（８０４．９ｇ、２１７７ｍｍｏｌ）、（２，２，６
，６−テトラメチル−ピペリジン−１−イル）オキシル（４０．０ｇ、２５１ｍｍｏｌ）
の懸濁液に水（２Ｌ）を加え、５℃の内部温度に冷却する。（ジアセトキシヨード）ベン
ゼン（１６９３ｇ、４９９３．４３ｍｍｏｌ）を３０分にわたって少しずつ加える。反応
器の冷却を使用して発熱を制御し、次いでＬＣＭＳが完全な反応を示すまで２０℃に保持
する。２５℃未満の内部温度を維持しながら、周囲温度にて水（３００ｍＬ）中の亜硫酸
水素ナトリウム（７０ｇ、６７２．６８ｍｍｏｌ）の懸濁液をゆっくり加える。３０分間
撹拌し、次いで５℃に冷却する。水（２Ｌ）を加え、次いで１０℃未満の内部温度を維持
しながら、１時間の時間にわたって４７ｗｔ％の水酸化ナトリウム水溶液（７８０ｍＬ）
をゆっくり加える。酢酸エチル（２Ｌ）およびイソヘキサン（５Ｌ）を加え、激しく撹拌
し、層を分離する。二相の有機層を水（１Ｌ）で抽出し、合わせた水相をメチルｔｅｒｔ
−ブチルエーテル（２．５Ｌ）で洗浄する。水相抽出物を５℃に冷却し、内部温度を約５
℃に維持しながら３０分にわたって３７％の塩酸（１．４Ｌ）をゆっくり加える。酢酸エ
チル（５Ｌ）を加え、層を分離し、有機相をブライン（３×１Ｌ）で洗浄する。合わせた
水性抽出物を酢酸エチル（２．５Ｌ）で抽出し、合わせた有機相をブライン（１Ｌ）で洗
浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過する。有機相をヘプタン（２．５Ｌ）で希
釈し、減圧下で蒸発乾固する。メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１．５Ｌ）およびヘプ
タン（１．５Ｌ）を加え、蒸発乾固する。ヘプタン（２．５Ｌ）を加え、２回蒸発乾固す
る。ヘプタン（５００ｍＬ）およびメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（５００ｍＬ）を加
え、４０℃にて３０分間撹拌し、次いで濾過により沈殿物を回収し、ヘプタン／メチルｔ
ｅｒｔ−ブチルエーテル（１：１、１Ｌ）、次いでメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（３
×３００ｍＬ）で洗浄し、空気乾燥させてベージュ色の結晶固体（７７９ｇ、９１％）と
して標題化合物を得る。ＥＳ／ＭＳ：ｍ／ｚ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）３７４．０／３７６
．０［Ｍ＋Ｈ］。［α］Ｄ２０＝−１９．０°（Ｃ＝１．００４、クロロホルム）。
【００５６】
代替調製例１１
スキーム２、工程Ｂ：水（１５０ｍＬ）およびアセトニトリル（１５０ｍＬ）を１−［
（４Ｓ，６ａＳ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−４−（ヒドロキシ
メチル）−３，３ａ，４，６−テトラヒドロフロ［３，４−ｃ］イソオキサゾール−１−
イル］エタノン（３０ｇ、７３．３ｍｍｏｌ）、ＴＥＭＰＯ（１．１４ｇ、７．３０ｍｍ
ｏｌ）および（ジアセトキシヨード）ベンゼン（５１．９ｇ、１６１ｍｍｏｌ）に加える
。１５℃に冷却し、２時間撹拌する。周囲温度にて水（１５０ｍＬ）中のチオ硫酸ナトリ
ウム（２１ｇ）および炭酸カリウム（２２ｇ）をゆっくり加える。１時間撹拌し、次いで
メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１５０ｍＬ）を加える。層を分離し、濃硫酸で水層の
ｐＨを２〜３に調整する。酢酸エチル（１５０ｍＬ）を加え、層を分離する。減圧下で有
機層を蒸発乾固する。ｎ−ヘプタン（９０ｍＬ）を加え、１時間加熱還流する。１５℃に
冷却し、次いで沈殿物を濾過により回収し、ｎ−ヘプタン（９０ｍＬ）で洗浄する。真空
下で乾燥させて白色固体（２７ｇ、９８％）として標題化合物を得る。
【００５７】
調製例１２
（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−１−アセチル−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニ
ル）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルテトラヒドロ−１Ｈ，３Ｈ−フロ［３，４−ｃ］［１，
２］オキサゾール−４−カルボキサミド
【化２４】
2018140987.tif 000025
スキーム２、工程Ｃ：１０Ｌのジャケット形反応器において、ジクロロメタン（７．０
Ｌ）中の（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−１−アセチル−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ
−フェニル）−３，３ａ，４，６−テトラヒドロフロ［３，４−ｃ］イソオキサゾール−
４−カルボン酸（７７１ｇ、２０１９ｍｍｏｌ）の溶液を窒素下で０℃に冷却し、４０分
にわたってＣＤＩ（４００ｇ、２４２１ｍｍｏｌ）を少しずつ加える。ジャケット形反応
器を−２０℃に冷却し、１時間撹拌し、次いで約３０分にわたってＮ，Ｏ−ジメチルヒド
ロキシルアミン塩酸塩（２６０．０ｇ、２６１２ｍｍｏｌ）を少しずつ加える。−２０℃
にて１時間、０℃にて２時間、および１０℃にて７時間撹拌する。ＣＤＩ（１７５ｇ、１
０５８ｍｍｏｌ）を加え、１０℃にて一晩撹拌する。さらにＣＤＩ（１８０ｇ、１０８８
ｍｍｏｌ）を１０℃にて加え、１時間撹拌し、次いでＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミ
ン塩酸塩（１４０ｇ、１４０７ｍｍｏｌ）を加え、１０℃にて撹拌を継続する。反応が不
完全である場合、ＣＤＩをさらに入れ、続いて完全な反応が観察されるまで、Ｎ，Ｏ−ジ
メチルヒドロキシルアミン塩酸塩を生成できる。反応混合物を５℃に冷却し、１Ｎの塩酸
水溶液（５Ｌ）、次いで２Ｎの塩酸水溶液（５Ｌ）で洗浄する。合わせた水溶液をジクロ
ロメタン（１Ｌ）で抽出し、有機抽出物を合わせ、水（２．５Ｌ）、１Ｎの水酸化ナトリ
ウム水溶液（２．５Ｌ）、および水（２．５Ｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ
、濾過し、減圧下で蒸発させて残渣を得る。メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（３Ｌ）を
加え、減圧下で蒸発させる。さらなるメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２Ｌ）を加え、
５０℃にて１時間撹拌し、２５℃に冷却し、３０分間撹拌する。得られた固体を濾過によ
り回収し、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２×５００ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥
させて白色固体として標題化合物（７６０ｇ、８８％）を得る。ＥＳ／ＭＳ：ｍ／ｚ（７
９Ｂｒ／８１Ｂｒ）４１７．０／４１９．０［Ｍ＋Ｈ］。
【００５８】
代替調製例１２
スキーム２、工程Ｃ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１３５ｍＬ）中の（３ａＲ，４
Ｓ，６ａＳ）−１−アセチル−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−３，３
ａ，４，６−テトラヒドロフロ［３，４−ｃ］イソオキサゾール−４−カルボン酸（２７
ｇ、７０．７ｍｍｏｌ）の溶液を窒素下で０℃に冷却し、ＣＤＩ（１４．９ｇ、９１．９
ｍｍｏｌ）を加える。１時間撹拌し、次いでＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩
（９．０ｇ、９２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１４．３ｇ、１４１ｍｍｏｌ）を
加える。１５℃にて１６時間撹拌する。反応混合物を０℃に冷却し、０．５Ｍの硫酸水溶
液（６７５ｍＬ）を加える。１時間撹拌する。得られた固体を濾過により回収する。メチ
ルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（９０ｍＬ）中で固体を１時間スラリーにする。固体を濾過
により回収し、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（３０ｍＬ）で洗浄する。真空下で乾燥
させて標題化合物（２３ｇ、７８％）を固体として得る。
【００５９】
調製例１３
１−［（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−１−アセチル−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ
−フェニル）−３，３ａ，４，６−テトラヒドロフロ［３，４−ｃ］イソオキサゾール−
４−イル］エタノン
【化２５】
2018140987.tif 000026
スキーム２、工程Ｄ：２０Ｌのジャケット形反応器において、ＴＨＦ（１０Ｌ）中の（
３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−１−アセチル−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）
−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルテトラヒドロ−１Ｈ，３Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，２］
オキサゾール−４−カルボキサミド（６５４．０ｇ、１５３６ｍｍｏｌ）の溶液を−６０
℃に冷却し、−４０℃未満の内部温度を維持しながら、２−メチルテトラヒドロフラン（
６６０ｍＬ、２１１０ｍｍｏｌ）中の３．２Ｍの臭化メチルマグネシウムの溶液を滴下し
て加える。反応混合物を−４０℃にて３０分間撹拌し、次いで−５０℃に冷却し、−３８
℃未満の内部温度を維持しながらＴＨＦ（２Ｌ）中の１Ｎの塩酸水溶液（２Ｌ）を加える
。温度を１０℃に増加させ、酢酸エチル（５Ｌ）および水（１Ｌ）を加え、撹拌し、内部
温度を５℃に到達させ、層を分離する。水層を酢酸エチル（１Ｌ）で抽出し、有機抽出物
を合わせる。有機抽出物を水（２Ｌ）で洗浄し、水層を酢酸エチル（１Ｌ）で抽出する。
有機抽出物を合わせ、ブライン（３×２Ｌ）で洗浄し、次いで硫酸マグネシウムで乾燥さ
せ、濾過し、減圧下で残渣に蒸発させる。シクロヘキサン（２．５Ｌ）を加え、６０℃に
て１時間、次いで２０℃にて３０分間撹拌し、固体を濾過により回収し、シクロヘキサン
（５００ｍＬ）で洗浄する。固体を真空下で乾燥させて白色固体（５６５ｇ、９９％）と
して標題化合物を得る。ＥＳ／ＭＳ：ｍ／ｚ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）３７２．０／３７４
．０［Ｍ＋Ｈ］，［α］Ｄ２０＝−５８．０°（Ｃ＝１．０００、クロロホルム）。
【００６０】
代替調製例１３
スキーム２、工程Ｄ：ＴＨＦ（６０ｍＬ）中の（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−１−アセチ
ル−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルテトラヒ
ドロ−１Ｈ，３Ｈ−フロ［３，４−ｃ］［１，２］オキサゾール−４−カルボキサミド（
４．０ｇ、９．５９ｍｍｏｌ）の溶液を−５℃に冷却し、内部温度を−５から０℃に維持
しながら、２−メチルテトラヒドロフラン（５．０ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）中の３．０Ｍの
臭化メチルマグネシウムの溶液を滴下して加える。反応混合物を６０分間−５から０℃で
撹拌し、次いで飽和塩化アンモニウム溶液（２０ｍＬ）を加える。メチルｔｅｒｔ−ブチ
ルエーテル（４０ｍＬ）を加え、内部温度を５℃に到達させ、層を分離する。有機層を減
圧下で残渣に蒸発させる。ｎ−ヘプタン（５０ｍＬ）を加え、撹拌し、固体を濾過により
回収する。固体を真空下で乾燥させて固体（３．０ｇ、７７％）として標題化合物を得る
。
【００６１】
調製例１４
１−［（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４
−（１，１−ジフルオロエチル）テトラヒドロ−１Ｈ，３Ｈ−フロ［３，４−ｃ］［１，
２］オキサゾール−１−イル］エタノン
【化２６】
2018140987.tif 000027
スキーム２、工程Ｅ：１−［（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−１−アセチル−６ａ−（５−
ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−３，３ａ，４，６−テトラヒドロフロ［３，４−ｃ
］イソオキサゾール−４−イル］エタノン（５．０８ｇ、１３．６ｍｍｏｌ）を、０〜５
℃にて無水ジクロロメタン（１００ｍＬ）中のジフルオロ（モルホリノ）スルホニウムテ
トラフルオロボレート（１０．０２ｇ、３９．１８ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に一度に加え
る。混合物を１０分間撹拌し、１０分にわたってトリエチルアミントリヒドロフルオリド
（４．５ｍＬ、２７ｍｍｏｌ）を滴下して加える。反応混合物を氷浴中で８時間撹拌し、
次いで周囲温度に加温し、一晩撹拌する。飽和炭酸ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）を加
え、１時間撹拌する。層を分離し、水相をジクロロメタン（２×５０ｍＬ）で抽出する。
有機抽出物を合わせ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）、２Ｎの塩酸水溶液
（２×１００ｍＬ）、およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄する。淡褐色の固体に蒸発乾
固して、６０℃にてメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（３００ｍＬ）に溶解する。高温溶
液を濾過し、濾液を蒸発させて茶色の固体（５．３ｇ、８１％、ＬＣＭＳにより８２％純
度）を得、それをさらに精製せずに使用する。ＥＳ／ＭＳ：ｍ／ｚ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ
）３９３．８／３９５．８［Ｍ＋Ｈ］。
【００６２】
代替調製例１４
スキーム２、工程Ｅ：ＸｔａｌＦｌｕｏｒ−Ｍ（登録商標）（１．２１ｋｇ、４．７３
ｍｏｌ）を、−１４℃にて無水ジクロロメタン（５Ｌ）中の１−［（３ａＲ，４Ｓ，６ａ
Ｓ）−１−アセチル−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−３，３ａ，４，
６−テトラヒドロフロ［３，４−ｃ］イソオキサゾール−４−イル］エタノン（５６５ｇ
、１．５１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に少しずつ加える。混合物を１０分間撹拌し、２０分に
わたってトリエチルアミントリヒドロフルオリド（５５０ｇ、３．３４ｍｏｌ）を滴下し
て加える。反応混合物を−１０℃にて約１０時間撹拌し、次いで周囲温度に加温し、一晩
撹拌する。１０℃未満の内部温度を維持しながら、５０％の水酸化ナトリウム水溶液（７
５０ｍＬ）をゆっくり加え、次いで水（１．５Ｌ）および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液
（１Ｌ）を加え、３０分間撹拌する。層を分離し、水相をジクロロメタン（１Ｌ）で抽出
する。有機抽出物を合わせ、ブライン（３Ｌ）、２Ｎの塩酸水溶液（５Ｌ）、およびブラ
イン（３Ｌ）で洗浄する。蒸発させて残渣を得、イソ−ヘキサン中の５０〜１００％のジ
クロロメタン、次いでジクロロメタン中の１０％のメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで溶
出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、白色粉末（４６７ｇ、７３％、Ｌ
ＣＭＳにより９４％純度）として標題化合物を得る。ＥＳ／ＭＳ：ｍ／ｚ（７９Ｂｒ／８
１Ｂｒ）３９３．８／３９５．８［Ｍ＋Ｈ］。
【００６３】
調製例１５
（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−４−（
１，１−ジフルオロエチル）−３，３ａ，４，６−テトラヒドロ−１Ｈ−フロ［３，４−
ｃ］イソオキサゾール
【化２７】
2018140987.tif 000028
スキーム２、工程Ｆ：１０Ｌのジャケット形反応器において、３７ｗｔ％の塩酸水溶液
（１．３Ｌ、１６ｍｏｌ）を、１，４−ジオキサン（５Ｌ）中の１−［（３ａＲ，４Ｓ，
６ａＳ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４−（１，１−ジフルオロエ
チル）テトラヒドロ−１Ｈ，３Ｈ−フロ［３，４−ｃ］［１，２］オキサゾール−１−イ
ル］エタノン（５７０ｇ、１．４５ｍｏｌ）の溶液に加え、１００℃にて約３時間または
ＬＣＭＳが完全な反応を示すまで撹拌する。反応混合物を１０℃に冷却し、水（１Ｌ）で
希釈し、２０℃未満の内部温度を維持しながら、５０ｗｔ％の水酸化ナトリウム水溶液（
８００ｍＬ）および水（１Ｌ）の混合物をゆっくり加える。酢酸エチル（２．５Ｌ）を加
え、激しく撹拌し、その後、層を分離し、有機相をブライン（２Ｌ）、さらなるブライン
（１Ｌ）および水（１Ｌ）で洗浄する。硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で
濃縮乾固して残渣を得る。シクロヘキサン（２．５Ｌ）を加え、蒸発乾固し、次いで繰り
返して茶色の油（５２７ｇ、８９％、ＬＣＭＳにより８６％純度）として標題化合物を得
る。ＥＳ／ＭＳ：ｍ／ｚ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）３５１．８／３５３．８［Ｍ＋Ｈ］。
【００６４】
調製例１６
［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−４−アミノ−４−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−
２−（１，１−ジフルオロエチル）テトラヒドロフラン−３−イル］メタノール
【化２８】
2018140987.tif 000029
スキーム２、工程Ｇ：亜鉛粉末（６．０ｇ、９２ｍｍｏｌ）を、周囲温度にて酢酸（１
００ｍＬ）中の（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニ
ル）−４−（１，１−ジフルオロエチル）−３，３ａ，４，６−テトラヒドロ−１Ｈ−フ
ロ［３，４−ｃ］イソオキサゾール（５．０６ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）の溶液に加え、一
晩撹拌する。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）および水（３００ｍＬ）で希釈し、炭酸
ナトリウム（９７ｇ、９１５ｍｍｏｌ）を加えながら激しく撹拌する。層を分離し、有機
層をブライン（２×２００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮
して残渣を得る。イソヘキサン中の０％〜１００％のメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで
溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより残渣を精製して、ろう状の固体（４．６７
ｇ、８９％、ＬＣＭＳにより９０％純度）として標題化合物を得る。ＥＳ／ＭＳ：ｍ／ｚ
（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）３５４．０／３５６．０［Ｍ＋Ｈ］。
【００６５】
代替調製例１６
スキーム２、工程Ｇ：亜鉛粉末（２００ｇ、３．０６ｍｏｌ）を、２０℃にて酢酸（２
Ｌ）および水（２Ｌ）中の（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオ
ロ−フェニル）−４−（１，１−ジフルオロエチル）−３，３ａ，４，６−テトラヒドロ
−１Ｈ−フロ［３，４−ｃ］イソオキサゾール（３０４ｇ、７５％純度、６４７ｍｍｏｌ
）の溶液に少しずつ加え、次いで４０℃に加温し、一晩撹拌する。混合物を水（２Ｌ）で
希釈し、炭酸ナトリウム（４ｋｇ、４３．４ｍｏｌ）を加えながら激しく撹拌し、次いで
さらなる炭酸ナトリウムでｐＨ８〜９に調整する。酢酸エチル（５Ｌ）および水（２．５
Ｌ）を加え、３０分間撹拌し、珪藻土で濾過し、２：１のアセトニトリル／水で洗浄する
。層を分離し、水相を酢酸エチル（２×２．５Ｌ）で抽出し、合わせた有機抽出物をブラ
イン（２×２．５Ｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して残渣を
得る。残渣をＳＦＣ、カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ（５）、５０×２５０ｍｍ
；溶出液：１２％エタノール（ＣＯ２中の０．２％ジエチルメチルアミン；流速：ＵＶ２
２０ｎｍにて３４０ｇ／分）により精製して白色固体（１９７．７ｇ、８４％）として標
題化合物を得る。［α］Ｄ２０＝−６．９３°（Ｃ＝０．６７８、クロロホルム）。ＥＳ
／ＭＳ：ｍ／ｚ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）３５４．０／３５６．０［Ｍ＋Ｈ］。
【００６６】
調製例１７
［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−４−アミノ−４−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）
−２−（トリチルオキシメチル）テトラヒドロフラン−３−イル］メタノール
【化２９】
2018140987.tif 000030
スキーム１、工程Ｆ：（３ａＲ，４Ｓ，６ａＲ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ
−フェニル）−４−（トリチルオキシメチル）−３，３ａ，４，６−テトラヒドロフロ［
３，４−ｃ］イソオキサゾール（３１．３０ｇ、５５．９ｍｍｏｌ）を酢酸（１８６ｍＬ
）に加えて懸濁液を得る。亜鉛（２５．６ｇ、３９１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１
８時間激しく撹拌する。混合物をトルエンで希釈し、珪藻土で濾過する。減圧下で濾液を
濃縮する。残渣を酢酸エチルで可溶化し、ブラインおよび飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄
する。相を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して標題化合物
（３１．３５ｇ、９９％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｅ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）５６２／
５６４［Ｍ＋Ｈ］。
【００６７】
調製例１８
Ｎ−［［（３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−３−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−４−
（ヒドロキシメチル）−５−（トリチルオキシメチル）テトラヒドロフラン−３−イル］
カルバモチオイル］ベンズアミド
【化３０】
2018140987.tif 000031
スキーム１、工程Ｇ：［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−４−アミノ−４−（５−ブロモ−２−
フルオロ−フェニル）−２−（トリチルオキシメチル）テトラヒドロフラン−３−イル］
メタノール（３１．３５ｇ、５５．７３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５５７ｍＬ）に溶
解し、５℃に冷却する。ベンゾイルイソチオシアネート（９．７４ｍＬ、７２．４５ｍｍ
ｏｌ）を加える。添加が完了した後、反応混合物を室温に加温し、２時間撹拌する。飽和
炭酸水素ナトリウムに注ぎ、相を分離し、水相をジクロロメタンで抽出する。有機抽出物
を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させる。溶液を濾過し、減圧下で濃縮して標題化合物
（４２．９５ｇ、１０６％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｅ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）  ７４
７／７４９［Ｍ＋Ｎａ］。
【００６８】
調製例１９
Ｎ−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−
５−（１，１−ジフルオロエチル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ
］［１，３］チアジン−２−イル］ベンズアミド
【化３１】
2018140987.tif 000032
スキーム２、工程Ｈ：ＬＣＭＳにより反応の完了が示されるまで、ベンゾイルイソチオ
シアネート（１．８０ｍＬ、１３．３ｍｍｏｌ）を、周囲温度にて１時間、ジクロロメタ
ン（２０ｍＬ）中の［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−４−アミノ−４−（５−ブロモ−２−フル
オロフェニル）−２−（１，１−ジフルオロエチル）テトラヒドロフラン−３−イル］メ
タノール（４．６７ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）の溶液に加える。反応混合物を真空下で残渣
に蒸発させる。シクロヘキサン（５０ｍＬ）を加え、６０℃に加温し、沈殿が完全に溶解
する（１００ｍＬ）までメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを加える。高温溶液を濾過し、
室温に冷却し、白色沈殿が形成するまで減圧下でゆっくり蒸発させる。溶媒を減圧下で除
去し、残渣を無水ジクロロメタン（３０ｍＬ）に溶解し、ピリジン（２．４ｍＬ、３０ｍ
ｍｏｌ）を加え、溶液を−２５℃に冷却する。トリフルオロメタンスルホン酸無水物（２
．２ｍＬ、１３ｍｍｏｌ）を３０分にわたって滴下して加え、１時間にわたって０℃に加
温する。反応混合物を水（２５ｍＬ）、２Ｎの塩酸水溶液（２５ｍＬ）、水（２５ｍＬ）
、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２５ｍＬ）、および水（２５ｍＬ）で洗浄し、硫酸マ
グネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固する。ジクロロメタン中の５％のメチルｔｅｒ
ｔ−ブチルエーテルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより残渣を精製して、淡
黄色の泡状物として標題化合物（５．０ｇ、７６％、ＬＣＭＳにより９０％純度）を得る
。ＥＳ／ＭＳ：ｍ／ｚ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）４９９．０／５０１．０［Ｍ＋Ｈ］。
【００６９】
代替調製例１９
スキーム２、工程Ｈ：ベンゾイルイソチオシアネート（９８ｍＬ、７２４．９ｍｍｏｌ
）を、３０℃にて１時間、ジクロロメタン（１．２Ｌ）中の［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−４
−アミノ−４−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−２−（１，１−ジフルオロエチ
ル）テトラヒドロフラン−３−イル］メタノール（１９７．６ｇ、５４６．７ｍｍｏｌ）
の溶液に加える。ＣＤＩ（１０１ｇ、６１０．４ｍｍｏｌ）を加え、周囲温度にて３時間
撹拌する。ＣＤＩのさらなる添加により、チオ尿素中間体の完全な消費が確実にできる。
９０℃で４２時間加熱し、溶液を周囲温度に冷却する。反応混合物を酢酸エチル（２Ｌ）
で希釈し、２Ｎの塩酸水溶液（２Ｌ）を加え、撹拌し、ブライン（１Ｌ）を加え、層を分
離する。有機層を２Ｎの塩酸水溶液（０．５Ｌ）、ブライン（２×１Ｌ）および飽和炭酸
水素ナトリウム水溶液（１Ｌ）で洗浄する。硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮
して残渣を得る。イソ−ヘキサン中の０〜１００％の酢酸エチルで溶出するシリカゲルク
ロマトグラフィーにより残渣を精製して、淡黄色の固体として標題化合物（２３４ｇ、８
３％）を得る。ＥＳ／ＭＳ：ｍ／ｚ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）４９９．０／５０１．０［Ｍ
＋Ｈ］。
【００７０】
調製例２０
Ｎ−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−
５−（トリチルオキシメチル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［
１，３］チアジン−２−イル］ベンズアミド
【化３２】
2018140987.tif 000033
スキーム１、工程Ｈ：Ｎ−［［（３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−３−（５−ブロモ−２−フルオ
ロ−フェニル）−４−（ヒドロキシメチル）−５−（トリチルオキシメチル）テトラヒド
ロフラン−３−イル］カルバモチオイル］ベンズアミド（４２．９５ｇ、５９．１８ｍｍ
ｏｌ）をジクロロメタン（５９１ｍＬ）に溶解し、−２０℃に冷却する。ピリジン（１２
．０ｍＬ、１４８．０ｍｍｏｌ）、続いてトリフルオロメタンスルホン酸無水物（１０．
９７ｍＬ、６５．１０ｍｍｏｌ）を加える。−２０℃未満の温度を維持しながら添加をモ
ニターする。反応混合物を−２０℃にて３０分間撹拌する。反応混合物を室温に加温する
。飽和塩化アンモニウムに注ぎ、相を分離し、水相をジクロロメタンで抽出する。有機抽
出物を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させる。溶液を濾過し、減圧下で濃縮して標題化
合物（４５．２４ｇ、１０８％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｅ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）  
７０７／７０９［Ｍ＋Ｈ］。
【００７１】
調製例２１
Ｎ−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−
５−（ヒドロキシメチル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，
３］チアジン−２−イル］ベンズアミド
【化３３】
2018140987.tif 000034
スキーム１、工程Ｉ：Ｎ−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−７ａ−（５−ブロモ−２−フ
ルオロ−フェニル）−５−（トリチルオキシメチル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロ
フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル］ベンズアミド（４５．２４ｇ、６３
．９３ｍｍｏｌ）をギ酸（１６０ｍＬ）に溶解し、周囲温度にて１時間撹拌する。水（２
９ｍＬ）を５分の時間にわたって加える。５０分間撹拌する。減圧下で混合物を残渣に濃
縮する。残渣をメタノール（６３９ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（２６．７ｍＬ、
１９１．８ｍｍｏｌ）を加え、周囲温度にて一晩撹拌する。ブラインに注ぎ、相を分離し
、水相をクロロホルムで抽出する。有機抽出物を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させる
。濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得る。アセトン：ヘキサン（２５〜３８％の勾配）で
溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより残渣を精製して標題化合物（１６．０４ｇ
、５４％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｅ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）４６５／４６７［Ｍ＋Ｈ
］。
【００７２】
調製例２２
（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−ベンズアミド−７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−
フェニル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−
５−カルボン酸
【化３４】
2018140987.tif 000035
スキーム１、工程Ｊ：Ｎ−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−７ａ−（５−ブロモ−２−フ
ルオロ−フェニル）−５−（ヒドロキシメチル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ
［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル］ベンズアミド（１６．０４ｇ、３４．４
７ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（１７２ｍＬ）に加える。２−ヨードキシ安息香酸（３５．５６
ｇ、１２０．７０ｍｍｏｌ）を加え、周囲温度にて３時間撹拌する。反応混合物をクロロ
ホルム（３００ｍＬ）で希釈し、飽和塩化アンモニウム（４００ｍＬ）に注ぐ。有機相を
分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させる。溶液を濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得る。
残渣を酢酸エチル（４００ｍＬ）に溶解し、飽和塩化アンモニウム（２×２５０ｍＬ）で
洗浄する。有機相を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残
渣を得る。残渣をジクロロメタン：メタノール混合物に溶解し、固体が沈殿するまでジエ
チルエーテルを加える。固体を濾過により回収し、減圧下で乾燥させて標題化合物（５．
７８ｇ、３５％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｅ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）４７９／４８１［
Ｍ＋Ｈ］。
【００７３】
調製例２３
（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−ベンズアミド−７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−
フェニル）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４
−ｄ］［１，３］チアジン−５−カルボキサミド
【化３５】
2018140987.tif 000036
スキーム１、工程Ｋ：（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−ベンズアミド−７ａ−（５−ブ
ロモ−２−フルオロ−フェニル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］
［１，３］チアジン−５−カルボン酸（５．７８ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）をジクロロメタ
ン（２０１ｍＬ）およびＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（１．７６ｇ、１８
．１ｍｍｏｌ）に溶解する。トリエチルアミン（５．２９ｍＬ、３６．２ｍｍｏｌ）、続
いてＨＡＴＵ（７．０２ｇ、１８．１ｍｍｏｌ）を加える。周囲温度にて３日間撹拌する
。飽和塩化アンモニウムに注ぎ、相を分離し、水相を酢酸エチルで抽出する。有機抽出物
を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させる。濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得る。酢酸
エチル：ジクロロメタン（０〜５０％の勾配）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィー
により残渣を精製して標題化合物（４．１５ｇ、６６％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｅ（
７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）  ５２２／５２４［Ｍ＋Ｈ］。
【００７４】
調製例２４
Ｎ−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−５−アセチル−７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ
−フェニル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン
−２−イル］ベンズアミド
【化３６】
2018140987.tif 000037
スキーム１、工程Ｌ：ＴＨＦ（５７．８ｍＬ）中の（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−ベ
ンズアミド−７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチ
ル−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−５−カル
ボキサミド（１．５１ｇ、２．８９ｍｍｏｌ）の−７８℃の溶液に臭化メチルマグネシウ
ム（ジエチルエーテル中に３．０ｍｏｌ／Ｌ、４．８ｍＬ、１４．５ｍｍｏｌ）を滴下し
て加える。反応物を−７８℃にて５分間撹拌し、周囲温度に徐々に加温する。３０分間撹
拌する。反応物をメタノール（４ｍＬ）でクエンチし、飽和塩化アンモニウムで希釈し、
酢酸エチルで抽出する。有機抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させる。濾過し、減
圧下で濃縮して残渣を得る。酢酸エチル：ヘキサン（０〜１００％の勾配）で溶出するシ
リカゲルクロマトグラフィーにより残渣を精製して標題化合物（１．２８ｇ、９３％）を
得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｅ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）  ４７７／４７９［Ｍ＋Ｈ］。
【００７５】
調製例２５
Ｎ−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−
５−（１，１−ジフルオロエチル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ
］［１，３］チアジン−２−イル］ベンズアミド
【化３７】
2018140987.tif 000038
スキーム１、工程Ｍ：ジクロロメタン（３４ｍＬ）、ビス（２−メトキシエチル）アミ
ノサルファートリフルオリド（１．５２ｍＬ、６．８８ｍｍｏｌ）および三フッ化ホウ素
ジエチルエーテル（０．８９ｍＬ、６．８８ｍｍｏｌ）を一緒に加える。周囲温度にて２
時間撹拌する。Ｎ−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−５−アセチル−７ａ−（５−ブロモ−
２−フルオロ−フェニル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，
３］チアジン−２−イル］ベンズアミド（０．８２１ｇ、１．７２ｍｍｏｌ）、続いてト
リエチルアミントリヒドロフルオリド（１．１３ｍＬ、６．８８ｍｍｏｌ）を一度に加え
る。周囲温度にて１８時間撹拌する。飽和塩化アンモニウムに注ぎ、相を分離し、水相を
酢酸エチルで抽出する。有機抽出物を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させる。濾過し、
減圧下で濃縮して残渣を得る。ジクロロメタン：ヘキサン（８０〜１００％の勾配）で溶
出するシリカゲルクロマトグラフィーにより残渣を精製して標題化合物（０．５５２ｇ、
６４％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｅ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）  ４９９／５０１［Ｍ＋Ｈ
］。
【００７６】
調製例２６
Ｎ−［（５Ｓ，７ａＳ）−５−（１，１−ジフルオロエチル）−７ａ−｛２−フルオロ
−５−［（トリフルオロアセチル）アミノ］フェニル｝−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒ
ドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル］ベンズアミド
【化３８】
2018140987.tif 000039
スキーム５、工程Ａ：Ｎ−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−７ａ−（５−ブロモ−２−フ
ルオロフェニル）−５−（１，１−ジフルオロエチル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒ
ドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル］ベンズアミド（２３４
ｇ、４５４．６ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（２Ｌ）に溶解し、４Å分子篩（３７ｇ
）、２，２，２−トリフルオロアセトアミド（９１ｇ、７８０．９ｍｍｏｌ）を加え、窒
素流下で炭酸カリウム（１１４ｇ、８２４．９ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（１１７ｇ
、７８０．６ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（１７．５ｇ、９１．９ｍｍｏｌ）およびラセ
ミ体ｔｒａｎｓ−Ｎ，Ｎ’−ジメチル−１，２−シクロヘキサンジアミン（２０ｇ、１４
０．６ｍｍｏｌ）を細かく粉砕した。３回の真空窒素切り替えで容器をパージし、１２３
℃で１８時間加熱する。周囲温度に冷却し、溶液を珪藻土で濾過し、酢酸エチルで洗浄す
る。飽和塩化アンモニウム水溶液（２Ｌ）を加え、４５分間激しく撹拌する。層を分離し
、有機層を飽和塩化アンモニウム水溶液（３×１Ｌ）、ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し
、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて残渣を得る。イソヘキサン中の０〜
１００％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより残渣を精製して、淡
黄色の固体（２９７．９ｇ、９５％、８１％純度）として標題化合物を得る。ＥＳ／ＭＳ
：ｍ／ｚ  ５３２．０［Ｍ＋Ｈ］。
【００７７】
調製例２７
Ｎ−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−７ａ−（５−アミノ−２−フルオロ−フェニル）−
５−（１，１−ジフルオロエチル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ
］［１，３］チアジン−２−イル］ベンズアミド
【化３９】
2018140987.tif 000040
スキーム１、工程Ｎ：エタノール（３０ｍｌ）中にＮ−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−
７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−５−（１，１−ジフルオロエチル）−
４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル］ベ
ンズアミド（０．３７２ｇ、０．７４ｍｍｏｌ）および（１Ｒ，２Ｒ）−Ｎ，Ｎ’−ジメ
チル−１，２−シクロヘキサンジアミン（０．０３７ｍＬ、０．２２ｍｍｏｌ）を合わせ
る。アジ化ナトリウム（０．１９４ｇ、２．９８ｍｍｏｌ）、続いてアスコルビン酸ナト
リウム（０．６６Ｍ溶液、０．５０ｍｌ、０．３３ｍｍｏｌ）を加える。フラスコの上部
を窒素でパージし、硫酸銅（０．３３Ｍ溶液、０．６８ｍｌ、０．２２ｍｍｏｌ）を加え
る。反応混合物を８０℃に加熱し、５時間撹拌する。反応物を冷却し、冷水を加える。混
合物を酢酸エチルで抽出する。有機抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させる。濾過
し、減圧下で濃縮して残渣を得る。残渣をエタノール（５０ｍｌ）およびＴＨＦ（１０ｍ
ｌ）中のパラジウム（炭素上１０質量％、０．３５ｇ、０．１６ｍｍｏｌ）と合わせる。
混合物を窒素および水素でパージする。周囲温度にて５０ｐｓｉの水素下で１時間撹拌す
る。触媒を濾過し、酢酸エチルで洗浄する。溶液を減圧下で濃縮して残渣を得る。酢酸エ
チル：ジクロロメタン（０〜２０％の勾配）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーに
より残渣を精製して標題化合物（０．２１８４ｇ、６７％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ
４３６（Ｍ＋Ｈ）。
【００７８】
代替調製例２７
スキーム５、工程Ｂ：メタノール（６００ｍＬ、４．２ｍｏｌ）中の７Ｎのアンモニア
を、室温にてメタノール（２００ｍＬ）中のＮ−［（５Ｓ，７ａＳ）−５−（１，１−ジ
フルオロエチル）−７ａ−｛２−フルオロ−５−［（トリフルオロアセチル）アミノ］フ
ェニル｝−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チ
アジン−２−イル］ベンズアミド（２５０ｇ、８０％純度、３７６．３ｍｍｏｌ）の撹拌
懸濁液に加え、周囲温度にて１８時間撹拌する。蒸発乾固して茶色のゴム状物として標題
化合物（１９０ｇ、３７５．２ｍｍｏｌ、８６％純度）を得る。ＥＳ／ＭＳ：ｍ／ｚ  ４
３６．０［Ｍ＋Ｈ］。
【００７９】
調製例２８
（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−７ａ−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５−（１
，１−ジフルオロエチル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−
ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン
【化４０】
2018140987.tif 000041
スキーム４、工程Ａ：Ｎ−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−７ａ−（５−アミノ−２−フ
ルオロ−フェニル）−５−（１，１−ジフルオロエチル）−４，４ａ，５，７−テトラヒ
ドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル］ベンズアミド（２１６．４ｇ、
８８％純度、４３５．９ｍｍｏｌ）を、ピリジン（４００ｍＬ）、エタノール（１００ｍ
Ｌ）およびＴＨＦ（３００ｍＬ）に溶解する。Ｏ−メチルヒドロキシルアミン塩酸塩（１
９０ｇ、２２７５．０ｍｍｏｌ）を加え、周囲温度にて１８時間撹拌する。２−メチルテ
トラヒドロフラン（１Ｌ）で希釈し、水（２×３００ｍＬ）で洗浄する。有機層を単離し
、３５％の水酸化アンモニウム水溶液（１００ｍＬ）を水相に加える。２−メチルテトラ
ヒドロフラン（３００ｍＬ）で抽出し、次いで塩化ナトリウムで飽和させ、２−メチルテ
トラヒドロフラン（２×３００ｍＬ）で抽出する。有機抽出物を合わせ、ブライン（３０
０ｍＬ）で洗浄し、残渣に蒸発させる。メタノール（２００ｍＬ）に溶解し、メタノール
（１００ｍＬ、７００ｍｍｏｌ）中の７Ｎのアンモニアを加え、室温にて１８時間撹拌す
る。トリフルオロアセトアミド不純物が残っているならばさらなるアンモニアを加えるこ
とができる。溶媒を減圧下で除去し、残渣を２Ｎの塩酸水溶液（１．５Ｌ）に溶解する。
ジクロロメタン（６×５００ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせ、全量約１Ｌまで減圧下で
溶媒を除去する。２Ｎの塩酸水溶液（３００ｍＬ）で洗浄し、全ての水性洗浄物を合わせ
る。２−メチルテトラヒドロフラン（１Ｌ）を加え、ガスの発生が観察されなくなるまで
炭酸水素ナトリウムでｐＨを塩基性に調整しながら激しく撹拌する。層を分離し、水相を
２−メチルテトラヒドロフラン（２×５００ｍＬ）で抽出する。合わせた有機抽出物を硫
酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて茶色の固体を得る。ＴＨＦ中の０〜１０
０％のジクロロメタンで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより残渣を精製する。
酢酸エチル／ヘプタンで生成物を含有する画分を蒸発させて、微細なベージュ色の粉末と
して標題化合物（１０６ｇ、７０％、９５％純度）を得る。ＥＳ／ＭＳ：ｍ／ｚ３３２．
０［Ｍ＋Ｈ］，［α］Ｄ２０＝＋４２．１１°（Ｃ＝０．５３２、クロロホルム）。
【００８０】
調製例２９
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−ベンズアミド−５−（１，１−ジフルオ
ロエチル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−
７ａ−イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド
【化４１】
2018140987.tif 000042
スキーム３、工程Ａ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０３２ｍＬ、０．１
８３７ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２ｍｌ）およびジメチルホルムアミド（０．５ｍ
Ｌ）中のＮ−［（４ａｓ，５ｓ，７ａｓ）−７ａ−（５−アミノ−２−フルオロ−フェニ
ル）−５−（１，１−ジフルオロエチル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，
４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル］ベンズアミド（０．０４０ｇ、０．０９１８５
ｍｍｏｌ）、５−シアノピリジン−２−カルボン酸（０．０２０３ｇ、０．１３７８ｍｍ
ｏｌ）および１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（０．０１９１ｇ、０．１３
７８ｍｍｏｌ）の混合物に加える。１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカ
ルボジイミド塩酸塩（０．０２６ｇ、０．１３７８ｍｍｏｌ）を一度に加える。反応混合
物を周囲温度にて１８時間撹拌する。酢酸エチルで希釈し、水およびブラインで洗浄する
。酢酸エチルで抽出する。有機抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させる。濾過し、
減圧下で濃縮して残渣を得る。メチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル：ジクロロメタン（０
〜１０％の勾配）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより残渣を精製して標題化
合物（０．０４６５ｇ、９０％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ５６６（Ｍ＋１）。
【００８１】
実施例１
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド
【化４２】
2018140987.tif 000043
スキーム３、工程Ｂ；ＴＨＦ（１．５ｍＬ）およびエタノール（１．５ｍＬ）中のＮ−
［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−ベンズアミド−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド（０．
０４６５ｇ、０．０８２２ｍｍｏｌ）、Ｏ−メチルヒドロキシルアミン塩酸塩（０．０６
８７ｇ、０．８２２０ｍｍｏｌ）およびピリジン（０．０６６ｍｌ、０．８２２０ｍｍｏ
ｌ）の混合物を５０℃にて１８時間加熱する。混合物を減圧下で濃縮して残渣を得る。メ
タノール：ジクロロメタン（０〜２％の勾配）中の７ＮのＮＨ３で溶出するシリカゲルク
ロマトグラフィーにより残渣を精製して標題化合物（０．０２６ｇ、６８％）を得る。Ｅ
Ｓ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４６２（Ｍ＋１）。
【００８２】
実施例１ａ
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド４−メ
チルベンゼンスルホネート半水和物（１：１：０．５）
【化４３】
2018140987.tif 000044
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド（１５
０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（２ｍＬ）を一緒に加え、室温にて撹拌して溶
解する。ｐ−トルエンスルホン酸水和物（０．０９５ｇ、０．５ｍｍｏｌ）を加え、溶液
を５０℃で加熱する。２００マイクロリットルのアリコートで水を加え、合計約２ｍＬの
添加後、沈殿を観察する。５０℃にて数時間撹拌して濃厚懸濁物を得る。さらなるＴＨＦ
（１ｍＬ）を加えて混合を改善する。数時間にわたって室温に冷却し、真空濾過により濾
過する。最小量のＴＨＦで洗浄する。一晩空気乾燥させて標題化合物を得る。
【００８３】
代替調製実施例１ａ
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド４−メ
チルベンゼンスルホネート半水和物（１：１：０．５）
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド（１．
５ｇ、３．３ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（１２ｍＬ）を一緒に加え、室温にて撹拌して溶解
する。６０℃で加熱し、ｐ−トルエンスルホン酸水和物（０．７５ｇ、３．９６ｍｍｏｌ
）および水（５ｍＬ）を加える。５分の撹拌後、白色沈殿物が形成する。６０℃にて数時
間撹拌して濃厚な懸濁液を得る。数時間にわたって室温に冷却し、真空濾過によって濾過
する。一晩空気乾燥させて標題化合物を得る。
【００８４】
粉末Ｘ線回折（ＸＲＤ）
結晶性固形物のＸＲＤパターンを、３５ｋＶおよび５０ｍＡで作動する、ＣｕＫａ源（
λ＝１．５４０６０Å）およびＶａｎｔｅｃ検出器を備えたＢｒｕｋｅｒ  Ｄ４  Ｅｎｄ
ｅａｖｏｒ粉末Ｘ線回折装置上で得る。サンプルを、２θでの４〜４０°で、２θでのス
テップサイズ０．００９°および走査速度０．５秒／ステップを用い、ならびに０．６ｍ
ｍの発散、５．２８ｍｍの固定抗散乱、および９．５ｍｍの検出器スリットを用いて走査
する。乾燥粉末を石英サンプルホルダに詰めて、滑面をスライドガラスを用いて得る。結
晶形回折パターンを周囲温度および相対湿度で得る。結晶学技術分野において周知なのは
、任意の所与の結晶形に関して、回折ピークの相対強度が、結晶形態および晶癖などの因
子から生じる優先配向に起因して異なる可能性があることである。優先配向の効果が存在
する場所では、ピーク強度が変化するが、多形体の特徴的ピーク位置は変化しない。例え
ば、米国薬局方＃２３、国民医薬品集＃１８、１８４３〜１８４４頁、１９９５年を参照
のこと。さらに、任意の所与の結晶形に関して、ピーク角度位置が若干変化する場合があ
るということも結晶学技術分野では周知である。例えば、サンプルを解析する温度もしく
は湿度の変動、サンプル変位、または内部標準の存在もしくは非存在に起因して、ピーク
位置はシフト可能である。この場合、２θでの±０．２のピーク位置変動は、示される結
晶形の明白な同定を妨げることなく、これらの潜在的変動を考慮にいれることにする。結
晶形の確認は、区別可能なピーク（°２θ単位での）、典型的にはより顕著なピークの任
意の特有の組み合わせに基づいてなされ得る。周囲温度および相対湿度で得られる結晶形
回折パターンを、８．８５３および２６．７７４°２θでのＮＩＳＴ６７５標準ピークに
基づいて調整する。
【００８５】
結晶性Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオ
ロエチル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−
７ａ−イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド
４−メチルベンゼンスルホネート半水和物（１：１：０．５）の好ましいサンプルは、Ｃ
ｕＫａ放射を使用してＸＲＤパターンによって、表１に記載される回折ピーク（２−θ値
）を有し、特に０．２°の回折角についての許容誤差で１９．７°、１４．９°、および
１０．３°からなる群から選択されるピークの１つ以上と組み合わせて６．８°にてピー
クを有すると特徴付けられる。
【００８６】
【表１】
2018140987.tif 000045
【００８７】
実施例１ｂ
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミドメタン
スルホネート
【化４４】
2018140987.tif 000046
Ｎ−［３−［（４ａＳ，５Ｓ，７ａＳ）−２−アミノ−５−（１，１−ジフルオロエチ
ル）−４，４ａ，５，７−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−
イル］−４−フルオロ−フェニル］−５−シアノ−ピリジン−２−カルボキサミド（１５
０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（２ｍＬ）を一緒に加え、室温にて撹拌して溶
解する。メタンスルホン酸（０．０９５ｇ、０．５ｍｍｏｌ）を加え、溶液を５０℃で加
熱する。２００マイクロリットルアリコートにおいて合計で最大２ｍＬの添加で水を加え
る。２５℃にて撹拌すると、沈殿は観察されない。窒素下で１／２体積に濃縮すると、沈
殿が観察される。懸濁液を６０℃で加熱すると、約１０分後に透明な溶液が観察される。
６０℃で１時間加熱する。室温に冷却して白色懸濁物を得、混合物を数時間撹拌する。真
空濾過により固体を単離し、最小量の水で洗浄する。一晩空気乾燥させて結晶性固体とし
て標題化合物を得る。
【００８８】
インビトロアッセイ手順：
ＢＡＣＥ２に対するＢＡＣＥ１の選択性を評価するために、以下に記載されるようにＢ
ＡＣＥ１およびＢＡＣＥ２に対する特異的基質を使用してＦＲＥＴおよび免疫学的検定検
出ベースの酵素アッセイにおいて試験化合物を評価する。インビトロでの酵素および細胞
アッセイについて、試験化合物をＤＭＳＯ中で調製して１０ｍＭのストック溶液を作製す
る。ストック溶液をＤＭＳＯ中で連続希釈して、インビトロ酵素および全細胞アッセイを
実施する前に９６ウェル丸底プレートにおいて１０μＭ〜０．０５ｎＭの範囲の最終化合
物濃度で１０点希釈曲線を得る。
【００８９】
インビトロプロテアーゼ阻害アッセイ：
ｈｕＢＡＣＥ１：ＦｃおよびｈｕＢＡＣＥ２：Ｆｃの発現
ヒトＢＡＣＥ１（アクセッション番号：ＡＦ１９０７２５）およびヒトＢＡＣＥ２（ア
クセッション番号：ＡＦ２０４９４４）を、ＲＴ−ＰＣＲによって全脳ｃＤＮＡからクロ
ーニングする。アミノ酸配列＃１〜４６０に対応するヌクレオチド配列を、ヒトＩｇＧ１
（Ｆｃ）ポリペプチドをコードするｃＤＮＡに挿入する（Ｖａｓｓａｒら、Ｓｃｉｅｎｃ
ｅ、２８６、７３５−７４２（１９９９））。ｈｕＢＡＣＥ１：ＦｃおよびｈｕＢＡＣＥ
２：Ｆｃとそれぞれ命名される、ＢＡＣＥ１（１〜４６０）またはＢＡＣＥ２（１〜４６
０）およびヒトＦｃのこの融合タンパク質をｐＪＢ０２ベクター内に構築する。ヒトＢＡ
ＣＥ１（１〜４６０）：Ｆｃ（ｈｕＢＡＣＥ１：Ｆｃ）およびヒトＢＡＣＥ２（１〜４６
０）：Ｆｃ（ｈｕＢＡＣＥ２：Ｆｃ）をＨＥＫ２９３細胞において一過的に発現する。各
構築物のｃＤＮＡ（２５０μｇ）をＦｕｇｅｎｅ６と混合し、１リットルのＨＥＫ２９３
細胞に加える。トランスフェクションの４日後、馴化培地を精製のために収集する。ｈｕ
ＢＡＣＥ１：ＦｃおよびｈｕＢＡＣＥ２：Ｆｃを以下に記載されるようにプロテインＡク
ロマトグラフィーによって精製する。酵素を少しのアリコートにおいて−８０℃にて保存
する（Ｙａｎｇら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、９１（６）１２４９−５９（２
００４）を参照のこと）。
【００９０】
ｈｕＢＡＣＥ１：ＦｃおよびｈｕＢＡＣＥ２：Ｆｃの精製
ｈｕＢＡＣＥ１：ＦｃまたはｈｕＢＡＣＥ２：Ｆｃ  ｃＤＮＡで一過的にトランスフェ
クトしたＨＥＫ２９３細胞の馴化培地を収集する。０．２２μｍの滅菌フィルタを通して
馴化培地を濾過することによって細胞残屑を除去する。５ｍｌのプロテインＡ−アガロー
ス（ベッド体積）を４リットルの馴化培地に加える。この混合物を４℃にて一晩穏やかに
撹拌する。プロテインＡ−アガロース樹脂を収集し、低圧クロマトグラフィーカラム内に
詰める。カラムを流速２０ｍｌ／時間にてＰＢＳの２０倍のベッド体積で洗浄する。結合
したｈｕＢＡＣＥ１：ＦｃまたはｈｕＢＡＣＥ２：Ｆｃタンパク質を、流速２０ｍｌ／時
間にて５０ｍＭの酢酸、ｐＨ３．６で溶出する。溶出液の１ｍｌ画分を酢酸アンモニウム
（０．５ｍｌ、２００ｍＭ）、ｐＨ６．５ですぐに中和する。４〜２０％のＴｒｉｓ−グ
リシンＳＤＳ−ＰＡＧＥにおける電気泳動によって最終生成物の純度を評価する。酵素を
少しのアリコートにおいて−８０℃にて保存する。
【００９１】
ＢＡＣＥ１  ＦＲＥＴアッセイ
試験化合物の連続希釈を上記のように調製する。化合物をＫＨ２ＰＯ４緩衝液中でさら
に２０倍に希釈する。１０μＬの各希釈物を、反応混合物（２５μＬの５０ｍＭ  ＫＨ２
ＰＯ４、ｐＨ４．６、１ｍＭのＴＲＩＴＯＮ（登録商標）Ｘ−１００、１ｍｇ／ｍＬのＢ
ＳＡ、およびＡＰＰの配列に基づいて１５μＭのＦＲＥＴ基質）を含有する、列Ａ〜Ｈの
対応する低いタンパク質結合ブラックプレートで各ウェルに加える（Ｙａｎｇら、Ｊ．Ｎ
ｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、９１（６）１２４９−５９（２００４）を参照のこと）。
内容物を、プレートシェーカーで１０分間、十分に混合する。ＫＨ２ＰＯ４緩衝液中の１
５μＬの２００ｐＭのヒトＢＡＣＥ１（１〜４６０）：Ｆｃ（Ｖａｓｓｅｒら、Ｓｃｉｅ
ｎｃｅ、２８６、７３５−７４１（１９９９）を参照のこと）を基質および試験化合物を
含有するプレートに加えて反応を開始する。０時における混合物のＲＦＵを、プレートシ
ェーカーで簡単に混合した後、励起波長３５５ｎｍおよび放射波長４６０ｎｍにて記録す
る。反応プレートをアルミニウム箔で覆い、１６〜２４時間、室温にて暗い加湿オーブン
内に維持する。インキュベーションの終わりにＲＦＵを、０時において使用した同じ励起
および放射設定で記録する。０時およびインキュベーションの終了時におけるＲＦＵの相
違は、化合物処理下でのＢＡＣＥ１の活性を表す。ＲＦＵの相違を阻害剤濃度に対してプ
ロットし、曲線を４パラメータロジスティック式に適合してＩＣ５０値を得る（Ｍａｙら
、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ、３１、１６５０７−１６５１６（
２０１１）を参照のこと）。
【００９２】
実施例１の化合物を本質的に上記のように試験すると、ＢＡＣＥ１について０．５０９
ｎＭ±０．１０４のＩＣ５０、ｎ＝４（平均±平均値の標準偏差）を示す。このデータに
より、実施例１の化合物はインビトロで精製組換えＢＡＣＥ１酵素活性を阻害することが
実証される。
【００９３】
ＢＡＣＥ２  ＭＢＰ−Ｃ１２５Ｓｗｅアッセイ
試験化合物の１０点連続希釈を適切な範囲で調製する。酢酸アンモニウムアッセイ緩衝
液（５０ｍｍｏｌの酢酸アンモニウム、ｐＨ４．６、１ｍＭのＴｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００
、１ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ）中で化合物をさらに６倍に希釈する。各希釈の１０μＬを列Ａ
〜Ｈの対応する低いタンパク質結合プレートで各ウェルに加え、それにＢＡＣＥ２活性に
ついて１０μＬのアフィニティー精製した大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）
由来の基質（ＭＢＰＣ１２５ｓｗｅ、１μｇ／ｍＬ）を予め加える。内容物をプレートシ
ェーカーで１０分間十分に混合する。上記の同じ反応緩衝液中の２００ピコモルのヒトＢ
ＡＣＥ２（１〜４６０）：Ｆｃ、１０μＬを、基質および試験化合物を含有するプレート
に加えて反応を開始する。４時間後、停止緩衝液（４０μＬ）を加えることによって反応
を停止させる。生成物の量を、ＭＢＰ−Ｃ２６ｓｗｅ標準物を使用してＥＬＩＳＡによっ
て測定する。抗ＭＢＰ抗体を高結合ポリスチレンプレートの表面上に固定し、カゼイン／
ＰＢＳ遮断緩衝液を使用して遮断する。サンプルまたは標準物（４０μＬ）をＥＬＩＳＡ
プレートに加え、４℃にて一晩インキュベートする。次いでプレートを洗浄し、４０μＬ
の切断特異的検出抗体（ＧＮ４０５）を加え、室温にて１時間静置させる。次いで未結合
のＧＮ４０５を洗浄することによって除去し、４０μＬのヤギ抗ウサギ−ＨＲＰコンジュ
ゲート（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、４０１０−０５）をプレートに加え、室温
にて１時間静置させる。プレートを再び洗浄し、ＴＭＢ基質（４０μＬ）を加える。放出
した生成物の対応する量は任意の試験濃度の阻害剤での溶液中のＢＡＣＥ２活性の尺度で
ある。１０点阻害曲線をプロットし、４パラメータロジスティック式に適合させてＥＣ５
０およびＩＣ５０値を得る（Ｓｉｎｈａら、Ｎａｔｕｒｅ、４０２、５３７−５４０（２
０００）を参照のこと）。
【００９４】
実施例１の化合物を本質的に上記のように試験すると、ＢＡＣＥ２について１７．６ｎ
Ｍ±７．４のＩＣ５０、ｎ＝６（平均±平均値の標準偏差）を示す。ＢＡＣＥ２（ＭＢＰ
−Ｃ１２５Ｓｗｅ細胞アッセイ）に対するＢＡＣＥ１（ＦＲＥＴ  ＩＣ５０酵素アッセイ
）の割合は約３５倍であり、ＢＡＣＥ１酵素の阻害に対する機能的選択性を示す。上記の
データにより、実施例１の化合物がＢＡＣＥ２よりＢＡＣＥ１に対して選択的であること
が実証される。
【００９５】
ＳＨ−ＳＹ５ＹＡＰＰ６９５Ｗｔ全細胞アッセイ
ＢＡＣＥ１活性の阻害を測定するための慣例の全細胞アッセイは、ヒトＡＰＰ６９５Ｗ
ｔ  ｃＤＮＡを安定に発現するヒト神経芽腫細胞株ＳＨ−ＳＹ５Ｙ（ＡＴＣＣアクセッシ
ョン番号ＣＲＬ２２６６）を利用する。細胞は慣例的に最大で６回の継代を使用し、その
後捨てる。
【００９６】
ＳＨ−ＳＹ５ＹＡＰＰ６９５Ｗｔ細胞を、２００μＬの培養培地（５０％のＭＥＭ／Ｅ
ＢＳＳおよびＨａｍ’ｓ  Ｆ１２、１倍の各ピルビン酸ナトリウム、非必須アミノ酸およ
び１０％ＦＢＳを含有するＮａＨＣＯ３）中の５．０×１０４細胞／ウェルにて９６ウェ
ル組織培養プレートに播種する。翌日、培地を細胞から除去し、新鮮な培地を加え、次い
で所望の濃度範囲で試験化合物の存在／非存在下で３７℃にて２４時間インキュベートす
る。
【００９７】
インキュベーションの終わりに、特定のサンドイッチＥＬＩＳＡによるＡベータペプチ
ド１〜４０および１〜４２の分析によりベータ−セクレターゼ活性の証拠について馴化培
地を分析する。これらのＡベータの特定のアイソフォームを測定するために、モノクロー
ナル２Ｇ３をＡベータ１〜４０についての捕捉抗体およびモノクローナル２１Ｆ１２をＡ
ベータ１〜４２についての捕捉抗体として使用する。Ａベータ１〜４０およびＡベータ１
〜４２の両方のＥＬＩＳＡは報告抗体としてビオチン化３Ｄ６を使用する（抗体の詳細に
ついては、Ｊｏｈｎｓｏｎ−Ｗｏｏｄら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳ
Ａ９４、１５５０−１５５５（１９９７）を参照のこと）。化合物処理後に馴化培地中に
放出されるＡベータの濃度はこのような条件下でのＢＡＣＥ１の活性に対応する。１０点
阻害曲線をプロットし、４パラメータロジスティック式に適合して、Ａベータ低下効果に
ついてＩＣ５０値を得る。
【００９８】
実施例１の化合物を本質的に上記のように試験すると、ＳＨ−ＳＹ５ＹＡＰＰ６９５Ｗ
ｔ  Ａ−ベータ（１〜４０）ＥＬＩＳＡについて０．１５７ｎＭ±０．０４８のＩＣ５０
、ｎ＝４、およびＳＨ−ＳＹ５ＹＡＰＰ６９５Ｗｔ  Ａ−ベータ（１〜４２）ＥＬＩＳＡ
について０．１７７ｎＭ±０．０５０のＩＣ５０、ｎ＝４を示す（平均±平均値の標準誤
差）。上記のデータにより、実施例１の化合物は全細胞アッセイにおいてＢＡＣＥ１を阻
害することが実証される。
【００９９】
ベータ−セクレターゼのインビボでの阻害
マウス、モルモット、イヌ、およびサルを含む、いくつかの動物モデルを、化合物処理
後のインビボでのベータ−セクレターゼ活性の阻害についてスクリーニングするために使
用できる。本発明に使用した動物は、野生型、トランスジェニック、または遺伝子ノック
アウト動物であってもよい。例えば、Ｇａｍｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ  ３７３、５２３−５
２７（１９９５）に記載されるように準備したＰＤＡＰＰマウスモデル、および他の非ト
ランスジェニックまたは遺伝子ノックアウト動物は、阻害化合物の存在下で、Ａベータお
よびｓＡＰＰベータ産生のインビボでの阻害を分析するのに有用である。一般に、２ヶ月
齢のＰＤＡＰＰマウス、遺伝子ノックアウトマウスまたは非トランスジェニック動物に、
コーンオイル、ベータ−シクロデキストラン、リン酸緩衝剤、ＰＨＡＲＭＡＳＯＬＶＥ（
登録商標）などのビヒクル、または他の適切なビヒクル中で製剤化した化合物を、経口、
皮下、静脈内、給餌または他の投与経路により投与する。化合物の投与の１〜２４時間後
、動物を屠殺し、脳をＡベータ１〜ｘの分析のために除去する。本明細書で使用される場
合、「Ａベータ１〜ｘ」とは、残基１で開始し、残基２８より多いＣ末端で終了するＡベ
ータ種の合計を指す。これはＡベータ種の大部分を検出し、しばしば「全Ａベータ」と呼
ばれる。全Ａベータペプチド（Ａベータ１〜ｘ）レベルは、捕捉抗体としてモノクローナ
ル２６６および報告抗体としてビオチン化３Ｄ６を使用してサンドイッチＥＬＩＳＡによ
って測定する（Ｍａｙら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ、３１、１
６５０７−１６５１６（２０１１）を参照のこと）。
【０１００】
急性試験に関して、化合物または適切なビヒクルを投与し、投与の約３時間後に動物を
屠殺する。脳組織を選択した動物から得、Ａベータ１〜ｘの存在について分析する。長期
間投与の後、高齢のＡＰＰトランスジェニック動物の脳組織もまた、化合物処理後のベー
タ−アミロイド斑の量について分析できる。
【０１０１】
阻害化合物を投与した動物（ＰＤＡＰＰまたは他のＡＰＰトランスジェニックもしくは
非トランスジェニックマウス）は、ビヒクル処置した対照またはゼロ時の対照と比較して
、脳組織内のＡベータの減少を示し得る。例えば、若いメスのＰＤＡＰＰマウスへの実施
例１の０．１、０．３および１ｍｇ／ｋｇ経口投与はそれぞれ、Ａベータ１〜ｘペプチド
レベルを脳海馬内で３２％、４０％および５５％減少させた（全ての値ｐ＜０．０１）。
大脳皮質組織において、実施例１の０．１、０．３および１ｍｇ／ｋｇの投与は、Ａベー
タ１〜ｘレベルを、投与の３時間後、ビヒクルで処置したマウスと比較して３８％、５０
％および６７％減少させた（全ての値ｐ＜０．０１）。
【０１０２】
インビトロでのＢＡＣＥ１酵素に対する実施例１の化合物の活性を考慮して、これらの
Ａベータ低下効果はインビボでのＢＡＣＥ１阻害と一致し、実施例１の化合物のＣＮＳ浸
透をさらに実証する。
【０１０３】
これらの研究は、本発明の化合物がＢＡＣＥ１を阻害するので、Ａベータレベルを低下
させるのに有用であることを示す。
【外国語明細書】
2018140987000001.pdf