(57)【要約】本発明は、誘導型ＮＯシンターゼの阻害剤としての、式（Ｉ）：  【化１】2005526005.tif 000022で示される２−アミノ−チアゾリン誘導体またはそれらの製薬上許容できる塩の使用に関する［式中、Ｙはメチレン（ＣＨ2）であり、Ｘは以下の基：Ｏ、ＮＨ、Ｃ1〜Ｃ4のＮ−アルキル、Ｎ−Ｂｎ、Ｎ−Ｐｈ、Ｎ−（２−Ｐｙ）、Ｎ−（３−Ｐｙ）、Ｎ（４−Ｐｙ）、Ｎ−２−ピリミジル、Ｎ−５−ピリミジル、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ2、ＣＨ2もしくはＣＨＰｈから選択されるか、または、Ｙはカルボキシ（Ｃ＝Ｏ）であり、Ｘは以下の基：ＮＨ、Ｎ−Ｐｈ、Ｎ−（２−Ｐｙ）、Ｎ−（３−Ｐｙ）、Ｎ（４−Ｐｙ）、Ｎ−２−ピリミジル、Ｎ−５−ピリミジルから選択される］。
2005526005.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2005526005.tif 000016
［式中、
Ｙはメチレン（ＣＨ2）であり、Ｘは以下の基：Ｏ、ＮＨ、Ｎ−アルキル（Ｃ1〜Ｃ4）、Ｎ−Ｂｎ、Ｎ−Ｐｈ、Ｎ（２−Ｐｙ）、Ｎ−（３−Ｐｙ）、Ｎ−（４−Ｐｙ）、Ｎ−２−ピリミジル、Ｎ−５−ピリミジル、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ2、ＣＨ2もしくはＣＨＰｈから選択されるか、または、
Ｙはカルボキシ（Ｃ＝Ｏ）であり、Ｘは以下の基：ＮＨ、Ｎ−Ｐｈ、Ｎ−（２−Ｐｙ）、Ｎ−（３−Ｐｙ）、Ｎ−（４−Ｐｙ）、Ｎ−２−ピリミジルもしくはＮ−５−ピリミジルから選択されるかのいずれかであり、ここで、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルおよび（Ｃ1〜Ｃ4）アルコキシ基は直鎖または分岐鎖の１〜４個の炭素原子を含み、略語Ｂｎ、Ｐｙ、Ｐｈは、それぞれベンジル、ピリジル、フェニルを意味する］
で示される化合物、ならびにそれらのラセミ体、光学異性体、ジアステレオ異性体およびそれらの混合物、それらの互変異性体、ならびにそれらの製薬上許容できる塩。
【請求項２】
式（Ｉ）で示される化合物は、以下の化合物：
４−（モルホリン−４−イルメチル）−４,５−ジヒドロ−１,３−チアゾール−２−イルアミン、
４−（ピペラジン−１−イルメチル）−４,５−ジヒドロ−１,３−チアゾール−２−イルアミン、
４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−４,５−ジヒドロ−１,３−チアゾール−２−イルアミン
から選択される、請求項１に記載の化合物、それらのラセミ体、光学異性体、ジアステレオ異性体およびそれらの混合物、それらの互変異性体、ならびにそれらの製薬上許容できる塩。
【請求項３】
式（Ｉ）で示される化合物は、以下の化合物：
４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−４,５−ジヒドロ−１,３−チアゾール−２−イルアミン
から選択される、請求項１または２に記載の化合物、それらのラセミ体、光学異性体、互変異性体、ならびにそれらの製薬上許容できる塩。
【請求項４】
医薬品用途で用いるための、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
製薬上許容できる溶媒中に、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項６】
誘導型ＮＯシンターゼ（ＮＯＳ−２）の誘導による酸化窒素（ＮＯ）の異常な生産が関与する疾患の治療において、治療用途のために請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物を少なくとも１つ含む、請求項４に記載の医薬品。
【請求項７】
パーキンソン病の治療において、治療用途のために請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物を少なくとも１つ含む、請求項４に記載の医薬品。
【請求項８】
式：
【化２】
2005526005.tif 000017
（式中、ＸおよびＹは、請求項１での定義と同義である）で示される誘導体を環化する工
程、および、場合により、生成物を製薬上許容できる塩に変換する工程を含む、請求項１で定義される式（Ｉ）で示される化合物の製造方法。
【請求項９】
環化は、酸溶媒中で約１００℃の温度で行われる、請求項８に記載の製造方法。
【請求項１０】
酸溶媒は、好ましくは６Ｎ塩酸である、請求項９に記載の製造方法。
【請求項１１】
請求項８で定義される式（II）で示される化合物（式中、ＸおよびＹは、請求項１での定義と同義である）の製造方法であって、
式（IIａ）：
【化３】
2005526005.tif 000018
（式中、Ｒａは、アミン官能基の保護基であり、Ｒｂは、酸官能基の保護基である）で示される化合物を、還元剤と作用させ、式（IIｂ）：
【化４】
2005526005.tif 000019
で示される化合物を得、
この化合物を、脱保護剤と作用させ、式（IIｃ）：
【化５】
2005526005.tif 000020
で示される化合物を得、
この化合物を、ｔｅｒｔ−ブチルイソチオシアネートと作用させ、式（II）：
【化６】
2005526005.tif 000021
で示される化合物を得る
工程を含む、上記方法。
【請求項１２】
請求項１１で定義された中間体化合物としての化合物II、IIａ、IIｂ、IIｃ、ただし以下を除く：
Ｎ−［２−ヒドロキシ−１−（４−フェニル−ピペラジン−１−イルメチル）エチル］チオベンズアミド、
メチル２−（Ｎ−ＣＢＺ−アミノ）−３−モルホリノ−プロピオネート、
ｂｏｃ−ＤＬ−（β−４−モルホリニル）アラニンメチルエステル、
メチル２−アセトアミド−３−ピペリジノプロピオネート、
メチル２−アセトアミド−３−モルホリノプロピオネート、
エチル２−（Ｎ−ベンジル−アミノ）−３−ピペリジノプロピオネート、
エチル２−（Ｎ−ベンジル−アミノ）−３−モルホリノプロピオネート。
【請求項１３】
中間体化合物としてのＮ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｎ’−［２−ヒドロキシ−１−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）エチル］−チオ尿素；Ｎ−［２−ヒドロキシ−１−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）エチル］アセトアミド；２−（アセチルアミノ）−３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）プロピオン酸メチル。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、誘導型ＮＯシンターゼの阻害剤としての、式（Ｉ）：
【化１】
2005526005.tif 000003
で示される２−アミノ−チアゾリン誘導体の使用、またはそれらの製薬上許容できる塩に関する。本発明の主題は、誘導型ＮＯシンターゼ（ＮＯＳ−２またはｉＮＯＳ）の誘導による一酸化窒素（ＮＯ）の異常な生産が関与する病気を予防および治療することを目的とした医薬組成物を製造するための、式（Ｉ）で示される２−アミノ−チアゾリン誘導体およびそれらの製薬上許容できる塩の使用、新規の２−アミノ−チアゾリン誘導体およびそれらの製薬上許容できる塩を含む医薬組成物、ならびに、新規の２−アミノ−チアゾリン誘導体およびそれらの製薬上許容できる塩である。
【背景技術】
【０００２】
一酸化窒素（ＮＯ）は、多くの生理学的および病的プロセスに関与する拡散性のラジカルである。ＮＯは、Ｌ−アルギニンの酸化、一酸化窒素シンターゼまたはＮＯシンターゼ（ＮＯＳ）として知られる酵素ファミリーが触媒する反応により合成される（国際的な酵素命名法の番号Ｅ.Ｃ.１.１４.１３.３９を参照）。
【０００３】
以下の３種のＮＯＳアイソフォームが知られており、そのうち２種は構成型であり、１種は誘導型である：
神経型ＮＯＳ（ＮＯＳ−１またはｎＮＯＳ）は、もともとは神経組織から単離され、クローニングされたものであり、構成型酵素である。ＮＯＳ−１は様々な生理学的な刺激、例えばカルシウムおよびカルモジュリンへ依存したメカニズムによる膜受容体の活性化に反応してＮＯを産生する。
誘導型ＮＯＳ（ＮＯＳ−２またはｉＮＯＳ）は、免疫学的な刺激に反応して誘導される可能性があり、このような免疫学的な刺激としては、例えば様々な細胞、例えばマクロファージ、内皮細胞、肝細胞、グリア細胞、およびその他様々なタイプの細胞におけるサイトカインまたは細菌性抗原がある。このアイソフォーム活性は、カルシウムでは調節されない。その結果、一度誘導されれば、長期間にわたりより大量のＮＯを産生する。
内皮型ＮＯＳ（ＮＯＳ−３またはｅＮＯＳ）は構成型であり、カルシウム／カルモジュリン依存性である。これはもともと血管内皮細胞で同定されたものであり、生理学的な刺激、例えば膜受容体の活性化に反応してＮＯを産生する。
【０００４】
神経型および内皮型構成型アイソフォーム（ＮＯＳ−１およびＮＯＳ−３）により産生されたＮＯは、一般的に、細胞内シグナル伝達機能に関与する。例えば血管の内壁に並ぶ内皮細胞は、ＮＯ産生により下層の平滑筋細胞の弛緩を誘発する。従って、ＮＯは動脈圧の調節に役立つ。
【０００５】
誘導型アイソフォームＮＯＳ−２で大量に産生されたＮＯは、特に多種多様な組織および臓器において、急性および慢性の炎症性プロセスに関連する病的な徴候に関与する。
【０００６】
従って、ＮＯＳ−２の誘導による過剰なＮＯ産生は、退行性の神経系の病状、例えば多発性硬化症、局所脳虚血または全脳虚血、脳または脊髄の外傷、パーキンソン病、ハンチントン病、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、片頭痛、うつ、統合失調症、不安、てんかんに関与する。同様に、中枢神経系のほかにも、ＮＯＳ−２の誘導は炎症性要素を伴う多くの病状、例えば糖尿病、アテローム性動脈硬化症、心筋炎、関節炎、関節症、喘息、炎症性腸疾患、クローン病、腹膜炎、胃食道逆流、ブドウ膜炎、ギヤン−バレー症候群、糸球体腎炎、紅斑性狼瘡および乾癬に関与する。ＮＯＳ−２はまた、特定の形態の腫瘍、例えば上皮腫、腺ガンまたは肉腫の増殖、ならびにグラム陽性またはグラム陰性の細胞内または細胞外の細菌による感染に関与する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
従って、過剰なＮＯ産生が有毒であるあらゆる状況において、ＮＯＳ−２阻害が可能な物質を投与することによりＮＯ産生を減少させることが望ましいと考えられる。しかしながら、構成型アイソフォームＮＯＳ−３によりなされる、特に動脈圧を調節するような重要な生理学的な役割を考慮すると、アイソフォームＮＯＳ−２を阻害しても、考えられる作用がアイソフォームＮＯＳ−３に対しては最小であることが非常に重要である。実際には、ＮＯＳアイソフォームの非選択的な阻害剤を投与すると、血管収縮および動脈圧の上昇が起こることがわかっている（Ｍｏｎｃａｄａ，Ｓ.，Ｐａｌｍｅｒ，Ｒ.Ｍ.Ｊ.およびＨｉｇｇｓ，Ｅ.Ａ.，Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｆｒｏｍ  Ｌ−ａｒｇｉｎｉｎｅ：ａ  ｐａｔｈｗａｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｅｌｌ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ.，１９８９年，３８：１７０９〜１７１５）。心臓血管系における上記作用は、組織への栄養素の供給を減少させるために有毒である。従って本発明は、ＮＯＳ−２に関する阻害活性がＮＯＳ−３に関する阻害活性に比べて極めて高い化合物に関する。
チアゾリン系ＮＯＳ阻害剤が、特に特許出願ＷＯ９４／１２１６５、ＷＯ９５／１１２３１およびＷＯ９６／１４８４２に開示されている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、誘導型ＮＯシンターゼ（ＮＯＳ−２またはｉＮＯＳ）の誘導による一酸化窒素（ＮＯ）の異常な生産が関与する病気を予防および治療するための医薬品を製造するための、式（Ｉ）で示される２−アミノ−チアゾリン誘導体の使用に関し、式中、
Ｙはメチレン（ＣＨ2）であり、Ｘは以下の基：Ｏ、ＮＨ、（Ｃ1〜Ｃ4）Ｎ−アルキル、Ｎ−Ｂｎ、Ｎ−Ｐｈ、Ｎ−（２−Ｐｙ）、Ｎ−（３−Ｐｙ）、Ｎ−（４−Ｐｙ）、Ｎ−２−ピリミジル、Ｎ−５−ピリミジル、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ2、ＣＨ2もしくはＣＨＰｈから選択されるか、または、
Ｙはカルボキシ（Ｃ＝Ｏ）であり、Ｘは以下の基：ＮＨ、Ｎ−Ｐｈ、Ｎ−（２−Ｐｙ）、Ｎ−（３−Ｐｙ）、Ｎ−（４−Ｐｙ）、Ｎ−２−ピリミジル、Ｎ−５−ピリミジルから選択される。
【０００９】
上記の定義および下記の定義において、アルキル基は直鎖または分岐鎖の１〜４個の炭素原子を含む。略語Ｂｎ、Ｐｙ、Ｐｈは、それぞれベンジル、ピリジル、フェニルを意味する。
式（Ｉ）で示される化合物は、１またはそれ以上の不斉炭素を含むため、ラセミ体の形態、または光学異性体およびジアステレオ異性体の形態が可能であり、これら形態およびそれらの混合物も本発明の一部を形成する。
【００１０】
その上、式（Ｉ）で示される化合物は、互変異性型（Ｉａ）：
【化２】
2005526005.tif 000004
でもよく、これら互変異性体も本発明の一部を形成する。
本発明に係る有用な式（Ｉ）で示される化合物のなかでも、以下の化合物：
４−（モルホリン−４−イルメチル）−４,５−ジヒドロ−１,３−チアゾール−２−イルアミン、
４−（ピペラジン−１−イルメチル）−４,５−ジヒドロ−１,３−チアゾール−２−イルアミン、および
４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−４,５−ジヒドロ−１,３−チアゾール−２−イルアミン、
それらのラセミ混合物、光学異性体、ジアステレオ異性体、互変異性体、およびそれらの製薬上許容できる塩を特に挙げることができる。
【００１１】
本発明に係る有用で特に好ましい化合物のなかでも、以下の化合物：
４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−４,５−ジヒドロ−１,３−チアゾール−２−イルアミン、
それらのラセミ混合物、光学異性体、互変異性体、およびそれらの製薬上許容できる塩を特に挙げることができる。
【００１２】
本発明はまた、活性成分として式（Ｉ）で示される誘導体、ならびに、それらのラセミ混合物、光学異性体、ジアステレオ異性体、互変異性体、およびそれらの製薬上許容できる塩を含む医薬組成物に関し、式中、Ｙはメチレン（ＣＨ2）であり、Ｘは以下の基：Ｏ、ＮＨ、（Ｃ1〜Ｃ4）Ｎ−アルキル、Ｎ−Ｂｎ、Ｎ−Ｐｈ、Ｎ−（２−Ｐｙ）、Ｎ−（３−Ｐｙ）、Ｎ−（４−Ｐｙ）、Ｎ−２−ピリミジル、Ｎ−５−ピリミジル、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ2、ＣＨ2もしくはＣＨＰｈから選択されるか、または、Ｙはカルボニル（Ｃ＝Ｏ）であり、Ｘは以下の基：ＮＨ、Ｎ−Ｐｈ、Ｎ−（２−Ｐｙ）、Ｎ−（３−Ｐｙ）、Ｎ−（４−Ｐｙ）、Ｎ−２−ピリミジル、Ｎ−５−ピリミジルから選択されるかのいずれかである。
【００１３】
式（Ｉ）で示される化合物は、式（II）；
【化３】
2005526005.tif 000005
で示される誘導体（式中、ＸおよびＹは式（Ｉ）における定義と同義である）の環化により製造することができる。
この環化は、一般的に、約１００℃で水性溶媒中で酸（例えば塩酸）を用いることにより行われる。一般的には、６Ｎ塩酸が用いられる。
【００１４】
式（II）の誘導体を以下の反応スキームに従って得ることができる：
【化４】
2005526005.tif 000006
【００１５】
上記式において、ＸおよびＹは式（Ｉ）での定義と同義であり、Ｒａは、アミン官能基の保護基であり、例えばＴ.Ｗ.ＧＲＥＥＮＥ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊ.Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ（１９９１年）で説明されたものが挙げられ、好ましくはアセチルまたはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基であり、Ｒｂは、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルまたはアルコキシカルボニル基であり、好ましくはメチル、エチルまたはイソブトキシカルボニルである。
【００１６】
該反応は、一般的に、ルイス酸、例えば三塩化鉄（III）の存在下で、不活性溶媒、例えばジクロロメタンまたはアセトニトリル中で、１０℃〜反応溶媒の沸点の温度で行われる。Ｘが、ＮＨを示す場合、Ｘは、アミン官能基の保護基で保護されてもよく、このような保護基としては、Ｔ.Ｗ.ＧＲＥＥＮＥ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊ.Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ（１９９１年）で説明されたものが挙げられ、好ましくはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を用いることである。
【００１７】
還元反応ｂは、好ましくは、水素化物、例えば水素化硼素ナトリウムまたは水素化リチウムアルミニウムを用いて、（Ｃ1〜Ｃ4）脂肪族アルコールまたはテトラヒドロフラン中で、０℃〜３０℃で行われる。
【００１８】
Ｒａがアミン官能基の保護基である化合物の脱保護反応ｃは、当業者既知のあらゆる脱保護法で行われ、特に、Ｔ.Ｗ.ＧＲＥＥＮＥ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊ.Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ
Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ（１９９１年）で説明された方法で行われる。好ましくは、保護基がアセチル基の場合、この反応は、塩酸水溶液を用いて、約１００℃で行われる。保護基がｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基の場合、この反応は塩酸を用いてジオキサン中で、約２０℃で行われる。
【００１９】
反応ｄは、ｔｅｒｔ−ブチルイソチオシアネートの作用により、不活性溶媒、例えば（Ｃ1〜Ｃ4）脂肪族アルコール（好ましくはメタノールまたはエタノール）中で、場合により、第三級アミン、例えばトリエチルアミンの存在下で、２０℃〜反応溶媒の沸点の温度で行われる。
【００２０】
式（Ｉ）で示される化合物（Ｘが、ＳＯまたはＳＯ2のいずれかを示す）は、式（Ｉ）で示される化合物（ＸがＳを示す）の直接的な酸化により得ることができる。この酸化は、既知の有機硫黄系化合物の酸化方法により行われ、このような方法としては、例えばＭ．ＨＵＤＬＩＣＫＹ，Ｏｘｉｄａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＡＣＳ  Ｍｏｎｏｇｒａｐｈ，１８６，２５２〜２６３（１９９０年）で説明されている。例えば、酸化は、有機過酸または有機過酸塩（過カルボン酸または過スルホン酸、特に過安息香酸、３−クロロ−過安息香酸、４−ニトロ過安息香酸、過酢酸、過トリフルオロ酢酸、過ギ酸、モノ過フタル酸）の作用により、または、鉱物系の過酸もしくは鉱物系の過酸塩（例えば、過ヨウ素酸または過硫酸）の作用により、不活性溶媒、例えば塩素溶媒（例えば、トリクロロエタンまたはジクロロメタン）中で、０℃〜２０℃で行われる。過酸化水素または過ヨウ素酸塩（例えば過ヨウ素酸ナトリウム）は、不活性溶媒、例えば（Ｃ1〜Ｃ4）脂肪族アルコール、水またはこれら溶媒の混合物中で、０℃〜２０℃で用いることもできる。これら成分は、以下の反応スキームで製造される対応する式（II）で示される化合物から製造することもできる：
【００２１】
【化５】
2005526005.tif 000007
【００２２】
酸化反応は、上述の有機硫黄系化合物の既知の酸化方法に従って行われる。
Ｒａがアミン官能基の保護基である化合物の脱保護反応ｂは、当業者既知のあらゆる脱保護法で行われ、特にＴ.Ｗ.ＧＲＥＥＮＥ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ
Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊ．Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ（１９９１年）で説明された方法により行われる。好ましくは、保護基がアセチル基の場合、この反応は塩酸水溶液を用いて約１００℃で行われる。保護基がｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基の場合、この反応は塩酸を用いてジオキサン中で、約２０℃で行われる。
【００２３】
反応ｃは、ｔｅｒｔ−ブチルイソチオシアネートの作用により、不活性溶媒、例えば（Ｃ1〜Ｃ4）脂肪族アルコール（好ましくはメタノールまたはエタノール）中で、場合により第三アミン（例えばトリエチルアミン）の存在下で、２０℃〜反応溶媒の沸点の温度で行われる。
【００２４】
式（Ｉ）で示される化合物は、一般的に知られた方法、例えば結晶化、クロマトグラフィーまたは抽出により単離、精製することができる。
式（Ｉ）で示される化合物の光学異性体は、例えばＰＩＲＣＫＬＥ  Ｗ.Ｈ.等，Ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第１巻，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ（１９８３年）に記載のキラルカラムを用いたクロマトグラフィーによるラセミ混合物からの分離、または塩の形成、またはキラル前駆体からの合成により得ることができる。ジアステレオ異性体を、既知の一般的な方法（結晶化、クロマトグラフィーまたはキラル前駆体から）により製造することができる。
【００２５】
式（Ｉ）で示される化合物は、場合により、鉱酸または有機酸と共に塩を添加し、有機溶媒（例えばアルコール、ケトン、エーテルまたは塩素化溶剤）中でこのような酸が作用することにより変換させてもよい。これら塩もまた本発明の一部を形成する。
製薬上許容できる塩の例としては、以下の塩：ベンゼンスルホン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、クエン酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、ヨウ素酸塩、イセチオン酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、メチレンビス−β−オキシナフトエ酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、リン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、酢酸テオフィリンおよびｐ−トルエンスルホン酸塩が挙げられる。
【００２６】
式（Ｉ）で示される化合物は、誘導型ＮＯシンターゼまたは２型ＮＯシンターゼ（ＮＯＳ−２）の阻害剤であり、従って、過剰なＮＯ生産に関連する疾患、例えば多発性硬化症、局所脳虚血または全脳虚血、脳または脊髄の外傷、パーキンソン病、ハンチントン病、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、片頭痛、うつ、統合失調症、不安、てんかん、糖尿病、アテローム性動脈硬化症、心筋炎、関節炎、関節症、喘息、炎症性腸疾患、クローン病、腹膜炎、胃食道逆流、ブドウ膜炎、ギヤン−バレー症候群、糸球体腎炎、紅斑性狼瘡および乾癬、特定の形態の腫瘍の増殖、例えば上皮腫、腺ガンまたは肉腫、ならびにグラム陽性またはグラム陰性の細胞内または細胞外の細菌による感染の予防および治療に有用である。
【００２７】
ＮＯＳ−２およびＮＯＳ−３阻害剤としての上記化合物の活性の測定は、リポ多糖類で前処理（組織採取の６時間前に１０mg／kgを腹腔内注射）したラットまたはマウスの肺から抽出されたＮＯＳ−２酵素分画および組換えウシＮＯＳ−３の市販の調製物をそれぞれ用いた[3Ｈ]−Ｌ−アルギニンの[3Ｈ]−Ｌ−シトルリンへの変換を測定することによりなされた。上記化合物を、ＨＥＰＥＳ緩衝液（５０ｍＭ、ｐＨ６.７）（ＮＯＳ−３活性を測定する場合、１０μg／mlカルモジュリンおよび１.２５ｍＭのＣａＣｌ2を含む）中、５μＭ（ＮＯＳ−２活性の場合）または１０μＭ（ＮＯＳ−３活性の場合）の[3Ｈ]−Ｌ−アルギニン、１ｍＭのＮＡＤＰＨ、１５μＭテトラビオプテリン、１μＭのＦＡＤ、０.１ｍＭのＤＴＴの存在下で、３７℃で２０〜３０分間インキュベートした。１０ｍＭのＥＧＴＡおよび陽イオン交換樹脂（ＡＧ５０Ｗ−Ｘ８、対イオン：Ｎａ+）５００mgを含む冷ＨＥＰＥＳ緩衝液（１００ｍＭ、ｐＨ５.５）を加えることによりインキュベートを停止し、[3Ｈ]−Ｌ−シトルリンから[3Ｈ]−Ｌ−アルギニンを分離した。５分間置いて相分離させた後、適切なシンチレーション液の存在下で液相に残存する放射能をシンチレーションカウンターで測定した。形成されたＬ−[3Ｈ]シトルリンの回収量は、外部標準としてＬ−[ウレイド−14Ｃ]−シトルリンを用いることにより予測可能である。
【００２８】
ＮＯＳ−２またはＮＯＳ−３活性は、１分あたり、および反応溶媒に含まれるタンパク質１ミリグラムあたり形成された[3Ｈ]−Ｌ−シトルリンのピコモルで示された。
この酵素ＮＯＳ−２に関する試験において、式（Ｉ）で示される化合物のＩＣ50値は、１０μＭ以下である。
ＮＯＳ−３のＩＣ50／ＮＯＳ−２のＩＣ50の比により選択性を測定する。この選択性は４５より大きい。
式（Ｉ）で示される化合物の毒性は低い。それらのＬＤ50は、経皮の場合、マウスにおいて４０mg／kgより大きい。
以下の実施例で本発明を説明する。
【実施例】
【００２９】
〔実施例１〕
４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−４,５−ジヒドロ−チアゾール−２−イルアミン三塩酸塩
【化６】
2005526005.tif 000008
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｎ’−［２−ヒドロキシ−１−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）エチル］−チオ尿素０.４２ｇの６Ｎ塩酸（３.９mL）懸濁液を約１００℃で５時間加熱した。冷却した後、次にこの反応溶媒を減圧下（２ｋＰａ）で約５５℃で濃縮した。得られた残留物を、オーブンで、減圧下（２ｋＰａ）で、４時間乾燥した。４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−４,５−ジヒドロ−チアゾール−２−イルアミン三塩酸塩約０.４７ｇを、極めて吸湿性のオフホワイト色のペースト状で得た。［1Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ，(ＣＤ3)2ＳＯ ｄ６、数滴のＣＤ3ＣＯＯＤｄ４を添加、δ値、ｐｐｍ）：２.５５〜２.９０（ｍｆ，４Ｈ）；２.８０（ｓ，３Ｈ）；２.９５〜３.３０（ｍｆ，４Ｈ）；３.３０〜３.６０（ｍｆ，２Ｈ）；３.４０（ｄｄ，Ｊ＝１１.５および５.５Ｈｚ，１Ｈ）；３.６９（ｄｄ，Ｊ＝１１.５および７.５Ｈｚ，１Ｈ）；４.５１（ｍｔ，１Ｈ）］。
【００３０】
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｎ’−［２−ヒドロキシ−１−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）エチル］−チオ尿素
【化７】
2005526005.tif 000009
２−アミノ−３−（４−メチル−ピペラジン−ｌ−イル）−１−プロパノール塩酸塩１ｇの無水エタノール２０ｍＬおよびトリエチルアミン１.４３ｍＬの溶液に、ｔｅｒｔ−ブチルイソチオシアネート約０.７８ｍＬを加えた。この反応混合物を、不活性雰囲気下で、約２０℃で４２時間撹拌し、次に、約５０℃で１時間３０分間加熱した。約２０℃に冷却した後、この反応溶媒を減圧下（２ｋＰａ）で、約３０℃で蒸発させた。蒸発後の残留物を、水１０ｍＬおよびジクロロメタン４０ｍＬで処理した。水相をジクロロメタン３０ｍＬで２回抽出した。有機相を回収し、水１５ｍＬで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、次に減圧下（２ｋＰａ）で約２０℃で濃縮した。Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｎ’−［２−ヒドロキシ−１−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）エチル］チオ尿素約０.４２ｇを白色のペースト状で得た。［ＫＢｒ層間の赤外スペクトル：３２７９；３０７５；２９３９；２８０６；１５３３；１４５９；１３５９；１２９５；１２０４；１０１０および８２１ｃｍ-1］。
【００３１】
２−アミノ−３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−１−プロパノール塩酸塩
【化８】
2005526005.tif 000010
Ｎ−［２−ヒドロキシ−１−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）エチル］アセトアミド０.８９ｇの６Ｎ塩酸（１０.３ｍＬ）懸濁液を、約１００℃で３時間加熱する。約６０℃に冷却した後、この反応溶媒をろ過し、ろ過物を減圧下（２ｋＰａ）で、約６０℃で濃縮した。２−アミノ−３−（４−メチル−ピペラジニル）−１−プロパノール塩酸塩約１ｇを、粘着性のベージュ色のペースト状で得た。［赤外スペクトル（ＫＢｒ）３３３７；２９５５；２６３７；２５２２；１６１７；１４５７；１０６２；１００９および９６２cm-1］。
【００３２】
Ｎ−［２−ヒドロキシ−１−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）エチル］アセトアミド
【化９】
2005526005.tif 000011
不活性雰囲気下で、メチル（アセチルアミノ）−３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）プロピオネート３.２７ｇの無水メタノール（１００ｍＬ）溶液を約１０℃に冷却し、次に、スパーテルを用いて水素化硼素ナトリウム０.７６ｇを加えた。この反応溶媒を、約２０℃で５時間撹拌し、次に水素化硼素ナトリウム０.２６ｇを再度加え、３８時間撹拌した。続いて、水５ｍＬを反応液に滴下し、これを加熱し、減圧下（２ｋＰａ）
で約３０℃で濃縮した。得られた残留物をジクロロメタンで処理し、不溶性物質をろ過により除去した。ろ過物を減圧下（２ｋＰａ）で、約２０℃で濃縮した。残留物を、アルゴン圧力（６０ｋＰａ）下で、シリカゲルカラム（粒度４０〜６３μｍ；直径５ｃｍ；高さ１９ｃｍ）を用いたクロマトグラフィーで、２０％ジクロロメタン／メタノール／アンモニア水溶液の連続混合液（体積で９８／２／０、９５／５／０.１、９０／１０／０.２、８０／２０／０.２５、５０／５０／０.２５）で溶出させることにより精製した。所望の生成物を含む分画を合わせ、減圧下（２ｋＰａ）で、約４０℃で濃縮した。Ｎ−［２−ヒドロキシ−１−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）エチル］アセトアミド約０.９２ｇを黄色の液体状で得た。［赤外スペクトルＣＨ2Ｃｌ2：３６２１；３４２９；３３５２；２９４４；２８０３；１６５７；１５１３；１４６０；１２８４；１０５０；１０１１および８１６cm-1］。
【００３３】
２−（アセチルアミノ）−３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）プロピオン酸メチル
【化１０】
2005526005.tif 000012
メチル２−アセトアミドアクリレート８.５７ｇのジクロロメタン（５００mL）溶液を不活性雰囲気下で撹拌し、Ｎ−メチルピペラジン約６.６５ｍＬを加え、次に三塩化鉄０.９７ｇを加え、この混合物を約２０℃で６６時間撹拌した。続いて、硫酸ナトリウム水溶液３００ｍＬを反応混合物を撹拌しながら反応溶媒に滴下し、この混合物をセライトでろ過した。放置して相分離した後、有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、ろ過し、次に減圧下（２ｋＰａ）で約４０℃で濃縮し、オレンジ色の液体を得た。水相をジクロロメタン１５０ｍＬで３回抽出し、全有機抽出物を回収し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、次に減圧下（２ｋＰａ）で約２０℃で濃縮し、黄色の油を得た。上述の有機抽出物両方を合わせ、これを、アルゴン圧力（５０ｋＰａ）下で、シリカゲルカラム（粒度４０〜６３μm；直径５cm；高さ２５cm）を用いたクロマトグラフィーで、２０％ジクロロメタン／メタノール／アンモニア水溶液の連続混合液（体積で９９／１／０、９７／３／０、９０／１０／０.２５、８０／２０／０.２５）で溶出することにより精製した。所望の生成物を含む分画を合わせ、減圧下（２ｋＰａ）で、約３０℃で濃縮した。メチル２−（アセチルアミノ）−３−（４−メチル−ピペラジニル）プロピオネート約３.３ｇを黄色の液体状で得た。［赤外スペクトルＣＣｌ4：３４３７；３３１８；２９４１；２７９８；１７４９；１６８５；１４９９；１４５８；１３７４；１２８６；１２０４；１１６８および１０１４cm-1］。
【００３４】
本発明に係る医薬組成物は、式（Ｉ）で示される化合物、または異性体もしくは互変異性体、またはこのような化合物の塩からなり、該組成物は、これら単独でもよいし、不活性または生理学的に活性なあらゆるその他の製薬上許容できる成分を共に含む組成物の形態でもよい。本発明に係る医薬品は、経口的、非経口的、直腸または局所に用いることができる。
【００３５】
使用可能な経口投与用の固形組成物としては、錠剤、丸剤、粉末（ゼラチンカプセル、カシェ剤）または顆粒が挙げられる。これら組成物において、本発明に係る活性成分は、アルゴン流下で、１またはそれ以上の不活性な希釈剤、例えばスターチ、セルロース、スクロース、ラクトースまたはシリカと混合される。これら組成物はまた、希釈剤以外の物質を含んでもよく、例えば、１またはそれ以上の潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウムもしくはタルク、染料、コーティング（糖衣）またはワニスを含んでもよい。
使用可能な経口投与用の液体組成物としては、製薬上許容できる溶液、懸濁液、乳濁液、シロップおよびエリキシルが挙げられ、これらは不活性な希釈剤、例えば水、エタノール、グリセロール、植物油または液体パラフィンに含む。これら組成物は希釈剤以外の物質を含んでもよい、例えば湿潤剤、甘味料、増粘剤、矯味矯臭薬剤または安定剤。
【００３６】
非経口投与用の滅菌組成物は、好ましくは、水溶液または非水溶液、懸濁液または乳濁液であり得る。使用可能な溶媒または基剤としては、水、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油、特に、オリーブ油、注射可能な有機エステル、例えばオレイン酸エチル、またはその他の適切な有機溶媒が挙げられる。これら組成物はまた、アジュバント、特に、湿潤剤、溶媒を含んでもよい。これら組成物はまた、アジュバント、特に、湿潤剤、等張剤、乳化剤、分散剤および安定剤を含んでもよい。滅菌は、いくつかの方法で行うことができ、例えば、無菌ろ過、滅菌剤の組成物への添加、放射線照射、または加熱により行うことができる。該組成物はまた、使用時に、滅菌水またはあらゆるその他の注射可能な滅菌溶媒に溶解させることができる滅菌固形組成物の形態に製造することができる。
【００３７】
直腸内投与用の組成物は、活性成分に加えて、添加剤、例えばカカオバター、半合成グリセリドまたはポリエチレングリコールを含む坐剤または直腸用カプセルでもよい。
局所投与用の組成物としては、例えば、クリーム、ローション、点眼剤、口内洗浄剤、点鼻剤またはエアロゾルが可能である。
【００３８】
ヒトの治療において、本発明に係る化合物は、多発性硬化症、局所脳虚血または全脳虚血、脳または脊髄の外傷、パーキンソン病、ハンチントン病、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、片頭痛、うつ、統合失調症、不安、てんかん、糖尿病、アテローム性動脈硬化症、心筋炎、関節炎、関節症、喘息、炎症性腸疾患、クローン病、腹膜炎、胃食道逆流、ブドウ膜炎、ギヤン−バレー症候群、糸球体腎炎、紅斑性狼瘡，乾癬、特定の形態の腫瘍、例えば、上皮腫、腺ガンまたは肉腫の増殖、ならびに、グラム陽性またはグラム陰性の細胞内または細胞外の細菌による感染を治療および／または予防するのに特に有用である。
用量は、望ましい効果、治療期間、および、用いられる投与経路により、一般的には、成人に対しては経口経路で１日あたり１mg〜１００mgであり、単位用量中、活性物質０.５mg〜５０mgを含む。
【００３９】
以下の実施例で本発明に係る組成物を説明する。
実施例Ａ
活性成分５０mgを含み、以下の組成を有するゲルカプセルを一般的な技術で製造した。
【表１】
2005526005.tif 000013
【００４０】
実施例Ｂ
活性成分５０mgを含み、以下の組成を有する錠剤を一般的な技術で製造した。
【表２】
2005526005.tif 000014
フィルム糖コーティング錠剤に仕上げ、総量２４５mgであった。
【００４１】
実施例Ｃ
活性成分１０mgを含み、以下の組成を有する注射可能な溶液である：
【表３】
2005526005.tif 000015
【００４２】
本発明はまた、式（Ｉ）で示される化合物、それらのラセミ混合物、光学異性体、ジアステレオ異性体およびそれらの混合物、それらの互変異性体、ならびに、それらの製薬上許容できる塩の投与による、誘導型ＮＯシンターゼ（ＮＯＳ−２またはｉＮＯＳ）の誘導による一酸化窒素（ＮＯ）の異常な生産が関与する病気の予防および治療方法に関する。
【国際調査報告】
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2005526005.tif 000025
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