(57)【要約】（要約の式）【化１】2005533825.tif 000147  本発明は、カスパーゼインヒビターとして有用な式（Ｉ）の化合物に関する。本発明はまた、該化合物を含有する薬学的に受容可能な組成物、該化合物を調製する方法、および種々の疾患、病気または障害の治療で該化合物および組成物を使用する方法を提供する。本発明は、以下を含有する薬学的組成物を提供する：ａ）上で定義した式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩；およびｂ）薬学的に受容可能なキャリア、アジュバントまたはビヒクル。好ましい実施態様によれば、本発明の薬学的組成物は、以下を含有する：ａ）式ＩＡ、式ＩＢまたは式ＩＣの化合物；およびｂ）薬学的に受容可能なキャリア、アジュバントまたはビヒクル。
2005533825.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物：
【化１】
2005533825.tif 000137
Ｘは、ＣＨまたはＮである；
Ｙは、ハロ、トリフルオロフェノキシまたはテトラフルオロフェノキシである；
Ｒ２は、Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキルである；
Ｒ３は、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＣＮまたはＣＦ３である；そして
Ｒ４は、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＳＲ、ＣＮ、ＣＦ３、ＡｒまたはＴ−Ａｒである；
ここで：
Ｔは、ＯまたはＳである；
Ｒは、Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキルである；
Ａｒは、フェニル環であり、該フェニル環は、必要に応じて、ハロ、ＣＨ３、ＣＦ３、ＣＮ、ＯＭｅ、ＯＣＦ３およびＮＲ５Ｒ６から選択される１個〜３個の基で置換されている；そして
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ別個に、ＨまたはＣ１〜６直鎖または分枝アルキルであるか、またはＲ５およびＲ６は、一緒になって、５〜７員環を形成し、該環は、必要に応じて、３個までのヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、Ｓ、ＮＨおよびＮ（Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキル）から選択される；
但し、Ｙがハロのとき、Ｒ３およびＲ４の両方が同時に水素になることはない、
化合物。
【請求項２】
Ｒ２が、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｙが、Ｆ、トリフルオロフェノキシまたはテトラフルオロフェノキシである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
式ＩＡを有する、請求項１に記載の化合物：
【化２】
2005533825.tif 000138
ここで：
Ｒ２は、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルである；そして
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ別個に、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＣＮ、ＣＦ３またはＡｒであるが、但し、Ｒ３およびＲ４の両方が同時に水素になることはない、
化合物。
【請求項５】
Ｒ２が、エチルである、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ３が、水素である、請求項４または５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ３が、Ｈであり、そしてＲ４が、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、ＡｒまたはＣＦ３である、請求項４〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ４が、ＣｌまたはＣＦ３である、請求項４〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
式ＩＢを有する、請求項１に記載の化合物：
【化３】
2005533825.tif 000139
ここで：
Ｘは、ＣＨまたはＮである；
Ｒ２は、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルである；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ別個に、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＣＮまたはＣＦ３である；そして
Ａｒ２は、トリフルオロフェニルまたはテトラフルオロフェニルである、
化合物。
【請求項１０】
Ａｒ２が、２，３，５，６−テトラフルオロフェニルである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ２が、エチルである、請求項９または１０に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｘが、ＣＨである、請求項９〜１１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ３が、Ｈであり、そしてＲ４が、Ｆ、ＣｌまたはＣＦ３である、請求項９〜１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ４が、ＣｌまたはＣＦ３である、請求項１２または１３に記載の化合物。
【請求項１５】
式ＩＣを有する、請求項１に記載の化合物：
【化４】
2005533825.tif 000140
ここで：
Ｒ２は、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルである；
Ｒ３は、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＣＮまたはＣＦ３である；
Ｒ４は、ハロ、ＯＣＦ３、ＣＮ、ＣＦ３、ＳＲまたはＴ−Ａｒである；
Ｔは、ＯまたはＳである；
Ｒは、Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキルである；
Ａｒは、フェニル環であり、該フェニル環は、必要に応じて、ハロ、ＣＨ３、ＣＦ３、ＣＮ、ＯＭｅ、ＯＣＦ３およびＮＲ５Ｒ６から選択される１個〜３個の基で置換されている；そして
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ別個に、ＨまたはＣ１〜６直鎖または分枝アルキルであるか、またはＲ５およびＲ６は、一緒になって、５〜７員環を形成し、該環は、必要に応じて、３個までのヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、Ｓ、ＮＨおよびＮ（Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキル）から選択される、
化合物。
【請求項１６】
Ｒ２が、エチルである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ３が、水素である、請求項１５または１６に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｔが、Ｏである、請求項１５〜１７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ４が、Ｔ−Ａｒである、請求項１５〜１８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２０】
以下：
【化５】
2005533825.tif 000141
【化６】
2005533825.tif 000142
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項２１】
以下：
ａ）請求項１〜２０のいずれか１項に記載の化合物；および
ｂ）薬学的に受容可能なキャリア、アジュバントまたはビヒクル、
を含有する、薬学的組成物。
【請求項２２】
患者の疾患を処置する方法であって、ここで、該疾患は、ＩＬ−１媒介疾患、アポトーシス媒介疾患、炎症性疾患、自己免疫性疾患、破壊性骨障害、増殖性障害、感染症疾患、変性疾患、細胞死に関連する疾患、過剰な食用アルコール摂取疾患、ウイルス媒介疾患、腎疾患、ブドウ膜炎、炎症性腹膜炎、骨関節炎、膵炎、喘息、成人性呼吸窮迫症候群、糸球体腎炎、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、硬皮症、慢性甲状腺炎、グレーヴス病、自己免疫性胃炎、糖尿病、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性好中球減少症、血小板減少症、慢性活性肝炎、重症筋無力症、炎症性腸疾患、クローン病、乾癬、アトピー性皮膚炎、瘢痕、移植片対宿主病、臓器移植拒絶反応、火傷後臓器アポトーシス、骨粗鬆症、白血病および関連疾患、脊髄形成異常症候群、多発性骨髄腫関連骨障害、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、転移性メラノーマ、カポジ肉腫、多発性骨髄腫、出血性ショック、敗血症、敗血症ショック、火傷、志賀菌赤痢、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン舞踏病、ケネディ病、プリオン病、脳虚血、癲癇、心筋虚血、急性および慢性心臓病、心筋梗塞、鬱血性心不全、アテローム性動脈硬化症、冠状動脈バイパス移植、脊椎筋萎縮症、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、ＨＩＶ関連脳炎、老化、脱毛症、脳卒中による神経学的損傷、潰瘍性大腸炎、外傷性脳傷害、脊髄傷害、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｇ型肝炎、黄熱病、デング熱または日本脳炎、種々の形態の肝臓病、腎臓病、多嚢胞性腎臓病、Ｈ幽門関連胃潰瘍および十二指腸潰瘍、ＨＩＶ感染、結核、髄膜炎、臓器不全、冠状動脈バイパス移植に関連した合併症の処置、および種々の形態の癌治療用の免疫療法から選択され、
該患者に、請求項２１に記載の薬学的組成物を投与する工程を包含する、方法。
【請求項２３】
前記疾患が、アポトーシス媒介疾患、炎症性疾患、自己免疫性疾患、破壊性骨障害、増殖性障害、感染症疾患、変性疾患、細胞死に関連する疾患、過剰な食用アルコール摂取疾患、ウイルス媒介疾患、炎症性腹膜炎、骨関節炎、糸球体腎炎、関節リウマチ、糖尿病、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性好中球減少症、血小板減少症、慢性活性肝炎、瘢痕、移植片対宿主病、臓器移植拒絶反応、火傷後臓器アポトーシス、骨粗鬆症、白血病および関連疾患、脊髄形成異常症候群、転移性メラノーマ、出血性ショック、敗血症、敗血症ショック、火傷、志賀菌赤痢、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン舞踏病、ケネディ病、プリオン病、脳虚血、癲癇、心筋虚血、急性および慢性心臓病、心筋梗塞、鬱血性心不全、アテローム性動脈硬化症、冠状動脈バイパス移植、脊椎筋萎縮症、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、ＨＩＶ関連脳炎、老化、脱毛症、脳卒中による神経学的損傷、外傷性脳傷害、脊髄傷害、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｇ型肝炎、種々の形態の肝臓病、腎臓病、多嚢胞性腎臓病、Ｈ幽門関連胃潰瘍および十二指腸潰瘍、ＨＩＶ感染、結核、髄膜炎、冠状動脈バイパス移植に関連した合併症の処置、および種々の形態の癌治療用の免疫療法である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記疾患が、冠状動脈バイパス移植に関連した合併症である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
患者におけるカスパーゼ媒介機能を阻害する方法であって、該患者に、請求項２１に記載の薬学的組成物を投与する工程を包含する、方法。
【請求項２６】
患者におけるＩＧＩＦ産生またはＩＦＮ−γ産生を減少させる方法であって、該患者に、請求項２１に記載の薬学的組成物を投与する工程を包含する、方法。
【請求項２７】
細胞を保存する方法であって、該方法が、細胞を、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の化合物またはそれらの薬学的に受容可能な誘導体の溶液に浸す工程を包含する、方法。
【請求項２８】
前記細胞が、以下：
ａ）移植しようとする臓器；または
ｂ）血液産物
に存在している、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
免疫療法を使用して癌を処置する方法であって、ここで、該免疫療法は、その成分として、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の化合物を含有する、方法。
【請求項３０】
前記組成物、溶液または免疫療法が、追加治療薬を含有する、請求項２２〜２９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
式Ｉの化合物を調製する方法であって、
【化７】
2005533825.tif 000143
該方法は、以下の工程を包含する：
式ＩＩの酸または酸誘導体と、
【化８】
2005533825.tif 000144
式Ｂのアミノアルコールとを反応させて、式ＩＩＩの化合物を提供する工程；
【化９】
2005533825.tif 000145
および中間体ＩＩＩを化合物Ｉに変換する工程であって、ここで：
Ｘは、ＣＨまたはＮである；
Ｙは、ハロ、トリフルオロフェノキシまたはテトラフルオロフェノキシである；
Ｒ２は、Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキルである；
Ｒ３は、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＣＮまたはＣＦ３である；そして
Ｒ４は、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＳＲ、ＣＮ、ＣＦ３、ＡｒまたはＴ−Ａｒである；
ここで：
Ｔは、ＯまたはＳである；
Ｒは、Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキルである；
Ａｒは、フェニル環であり、該フェニル環は、必要に応じて、ハロ、ＣＨ３、ＣＦ３、ＣＮ、ＯＭｅ、ＯＣＦ３およびＮＲ５Ｒ６から選択される１個〜３個の基で置換されている；そして
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ別個に、ＨまたはＣ１〜６直鎖または分枝アルキルであるか、またはＲ５およびＲ６は、一緒になって、５〜７員環を形成し、該環は、必要に応じて、３個までのヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、Ｓ、ＮＨおよびＮ（Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキル）から選択される；そして
Ｒ７は、適当な保護基である；
但し、Ｙがハロのとき、Ｒ３およびＲ４の両方が同時に水素になることはない、
方法。
【請求項３２】
式ＩＩＡの化合物：
【化１０】
2005533825.tif 000146
Ｘは、ＣＨまたはＮである；
Ｒ２は、Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキルである；
Ｒ３は、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＣＮまたはＣＦ３である；そして
Ｒ４は、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＳＲ、ＣＮ、ＣＦ３、ＡｒまたはＴ−Ａｒである；
ここで：
Ｔは、ＯまたはＳである；
Ｒは、Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキルである；
Ａｒは、フェニル環であり、該フェニル環は、必要に応じて、ハロ、ＣＨ３、ＣＦ３、ＣＮ、ＯＭｅ、ＯＣＦ３およびＮＲ５Ｒ６から選択される１個〜３個の基で置換されている；そして
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ別個に、ＨまたはＣ１〜６直鎖または分枝アルキルであるか、またはＲ５およびＲ６は、一緒になって、５〜７員環を形成し、該環は、必要に応じて、３個までのヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、Ｓ、ＮＨおよびＮ（Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキル）である、
化合物。
【請求項３３】
Ｒ２が、エチルまたはイソプロピルである、請求項３２に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本願は、２００２年６月２８日に出願された米国仮特許出願第６０／３９２，５９２号および２００２年１２月２０日に出願された米国仮特許出願第６０／４３５，０７３号から優先権を主張しており、両方の文献の内容は、本明細書中で参考として援用されている。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、医薬品化学の分野であり、細胞アポトーシスおよび炎症を媒介するカスパーゼを阻害する化合物およびそれらの薬学的組成物に関する。本発明はまた、これらの化合物を調製する方法に関し、また、本発明の化合物および薬学的組成物を使用してカスパーゼ活性が関係した疾患を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
（発明の背景）
アポトーシス、すなわち、プログラム化細胞死は、生物体が不要な細胞を排除する主な機構である。アポトーシスの調節解除は、過剰なアポトーシスまたはそれを受けることの減退のいずれであれ、多くの疾患（例えば、癌、急性炎症性および自己免疫性障害、虚血性疾患および特定の神経変性障害）に関係している（一般に、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８１，１２８３〜１３１２（１９９８）；Ｅｌｌｉｓら、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，７，６６３（１９９１）を参照）。
【０００４】
カスパーゼは、システインタンパク質分解酵素の系統であり、アポトーシスおよび細胞分解の情報伝達経路における重要な媒介物である（Ｔｈｏｒｎｂｅｒｒｙ，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．，５，Ｒ９７〜Ｒ１０３（１９９８））。これらの情報伝達経路は、細胞型および刺激物に依存して変わるが、全てのアポトーシス経路は、重要なタンパク質の分解を引き起こす共通エフェクター経路に集中すると思われる。カスパーゼは、この情報伝達経路のエフェクター相およびその開始時におけるさらに上流の両方に関与している。開始事象に関与している上流カスパーゼは、活性化し、次に、後のアポトーシス相に関与している他のカスパーゼを活性化する。
【０００５】
カスパーゼ−１は、最初に同定されたカスパーゼであるが、また、インターロイキン変換酵素（すなわち、「ＩＣＥ」）としても知られている。カスパーゼ−１は、前駆体であるインターロイキン−１β（「ｐＩＬ−１β」）をＡｓｐ−１１６とＡｌａ−１１７との間で特異的に開裂することにより、ｐＩＬ−１βをそのプロ炎症性活性形状に変換する。カスパーゼ−１の他にも、また、１１種の他の公知のカスパーゼがあり、それらの全ては、アスパルチル残基において特異的に開裂する。それらはまた、その開裂部位のＮ−末端側にある少なくとも４個のアミノ酸残基に対する厳しい要件を有することが観察されている。
【０００６】
これらのカスパーゼは、好ましいか最初に認識されたアミノ酸配列に依存して、３つの群に分類されている。１つのカスパーゼ群は、カスパーゼ１、４、５および１３を含み、その開裂部位のＮ−末端側の４位置にある疎水性芳香族アミノ酸を好むことが明らかとなっている。カスパーゼ２、３および７を含む他の群は、その開裂部位のＮ−末端側の１位置および４位置の両方にあるアスパルチル残基を認識し、好ましくは、Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｘ−Ａｓｐの配列である。第三の群は、カスパーゼ６、８、９および１０を含み、その主要認識配列にある多くのアミノ酸に耐性であるが、分枝脂肪族側鎖（例えば、４位置にあるバリンおよびロイシン）を備えた残基を好むと思われる。
【０００７】
これらのカスパーゼはまた、それらの認知機能に従って分類されている。第一の亜科は、カスパーゼ−１（ＩＣＥ）、４、５および１３からなる。これらのカスパーゼは、プロ炎症性サイトカインプロセシングに関与しており、従って、炎症で重要な役割を果たすことが示されている。カスパーゼ−１は、この種類の最も研究された酵素であるが、タンパク質分解性の開裂によって、ＩＬ−１β前駆体を活性化する。この酵素は、従って、炎症性応答において重要な役割を果たす。カスパーゼ−１はまた、インターフェロン−γ誘発因子（ＩＧＩＦ）のプロセシングに関与しており、これは、インターフェロン−γ（抗原提示、Ｔ−細胞活性化および細胞接着を調節する重要な免疫調節物）を刺激する。
【０００８】
残りのカスパーゼは、第二および第三の亜科を構成する。これらの酵素は、アポトーシスを引き起こす細胞内情報伝達経路の中枢にあって重要である。一方の亜科は、このアポトーシス経路での開始事象（これには、原形質膜からの信号の伝達が含まれる）に関与している酵素からなる。この亜科の構成要素には、カスパーゼ−２、８、９および１０が挙げられる。他の亜科は、エフェクターカスパーゼ３、６および７からなるが、最終下流開裂事象に関与しており、その結果、アポトーシスにより、その細胞の全身的な分解および死が起こる。この上流信号伝達に関与しているカスパーゼは、その下流カスパーゼを活性化し、次いで、ＤＮＡ修復機構を無効にし、ＤＮＡを細分化し、その細胞の細胞骨格を解体し、最終的に、その細胞を細分化する。
【０００９】
これらのカスパーゼで主に認識される４つのアミノ酸配列の知見は、カスパーゼインヒビターを設計するのに使用されている。ＣＨ３ＣＯ−［Ｐ４］−［Ｐ３］−［Ｐ２］−ＣＨ（Ｒ）ＣＨ２ＣＯ２Ｈの構造を有する可逆性テトラペプチドインヒビターが調製されており、ここで、Ｐ２〜Ｐ４は、最適アミノ酸認識配列を表わし、そしてＲは、そのカスパーゼシステインスルフヒドリルに結合できるアルデヒド、ニトリルまたはケトンである。Ｒａｎｏ  ａｎｄ  Ｔｈｏｒｎｂｅｒｒｙ，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．４，１４９〜１５５（１９９７）；Ｍｊａｌｌｉら、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．３，２６８９〜２６９２（１９９３）；Ｎｉｃｈｏｌｓｏｎら、Ｎａｔｕｒｅ  ３７６，３７〜４３（１９９５）を参照。類似のテトラペプチド認識配列に基づいた不可逆性インヒビターが調製されており、ここで、Ｒは、アシルオキシメチルケトン−ＣＯＣＨ２ＯＣＯＲ’である。Ｒ’は、必要に応じて置換されたフェニル（例えば、２，６−ジクロロベンジルオキシ）によって例示され、ここで、Ｒは、ＣＯＣＨ２Ｘであり、ここで、Ｘは、脱離基（例えば、ＦまたはＣｌ）である。Ｔｈｏｒｎｂｅｒｒｙら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３３，３９３４（１９９４）；Ｄｏｌｌｅら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３７，５６３〜５６４（１９９４）。
【００１０】
細胞性アポトーシスの増大に関連した種々の哺乳動物疾患を治療するカスパーゼインヒビターの有用性は、ペプチドカスパーゼインヒビターを使用して証明されている。例えば、齧歯類モデルでは、カスパーゼインヒビターは、梗塞のサイズを小さくして心筋梗塞後の心筋細胞アポトーシスを阻止すること、卒中から生じる傷害容量および神経欠陥を少なくすること、外傷性脳傷害における外傷後アポトーシスおよび神経欠陥を少なくすること、劇症肝炎破壊を治療する際に有効にすること、および内毒素ショック後の生存率を改善することが明らかとなっている。Ｙａｏｉｔａら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，９７，２７６（１９９８）；Ｅｎｄｒｅｓら、Ｊ  Ｃｅｒｅｂｒａｌ  Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏｗ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，１８，２３８，（１９９８）；Ｃｈｅｎｇら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１０１，１９９２（１９９８）；Ｙａｋｏｖｌｅｖら、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１７，７４１５（１９９７）；Ｒｏｄｒｉｑｕｅｚら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８４，２０６７（１９９６）；Ｇｒｏｂｍｙｅｒら、Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．，５，５８５（１９９９）。
【００１１】
一般に、上記ペプチド性インヒビターは、カスパーゼ酵素の一部に対して非常に有効である。しかしながら、この効力は、細胞モデルのアポトーシスで常に反映されている訳ではない。それに加えて、ペプチド性インヒビターは、典型的には、望ましくない薬理学的特性（例えば、乏しい経口吸収、乏しい安定性および急速な代謝）により、特徴付けられている。Ｐｌａｔｔｎｅｒ  ａｎｄ  Ｎｏｒｂｅｃｋ，ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｃｌａｒｋ  ａｎｄ  Ｍｏｏｓ著、（Ｅｌｌｉｓ  Ｈｏｒｗｏｏｄ，Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ，Ｅｎｇｌａｎｄ，１９９０）。
【００１２】
これらのペプチド性カスパーゼインヒビターの薬理学的特性を改善する必要性を認識して、擬ペプチドインヒビターが報告されている。これらのうちで、以下の一般式が関与したインヒビター（ここで、そのＰ３アミノ酸は、３−アミノピリジン−２−オンおよび５−アミノピリミジン−４−オンの誘導体で置き換えられている）は、多くの注目を集めている（米国特許第５，７５６，４６６号（Ｂｅｍｉｓら、）；Ｄｏｌｌｅら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３９，２４３８，（１９９６）；Ｇｏｌｅｃら、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．７，２１８１，（１９９７）；Ｓｅｍｐｌｅら、Ｂｉｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．７，１３３７，（１９９７））：
【００１３】
【化１１】
2005533825.tif 000003
ここで、Ｒ１〜Ｒ４およびＸは、種々の基である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
ペプチド性インヒビターに固有の問題があるために、インビボでアポトーシスの有効な阻害を生じる強力で安定かつ膜を浸透する小分子非ペプチドカスパーゼインヒビターが引き続いて必要とされている。このような化合物は、カスパーゼ酵素が重要な役割を果たす上記疾患を治療する際に、非常に有用である。ＷＯ０１／４２２１６は、カスパーゼインヒビターおよびその用途を開示している。本発明は、ＷＯ０１／４２２１６の開示に選択肢を与える。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
（発明の要旨）
本発明は、式Ｉの化合物を提供する：
【００１６】
【化１２】
2005533825.tif 000004
ここで：
Ｘは、ＣＨまたはＮである；
Ｙは、ハロ、トリフルオロフェノキシまたはテトラフルオロフェノキシである；
Ｒ２は、Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキルである；
Ｒ３は、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＣＮまたはＣＦ３である；そして
Ｒ４は、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＳＲ、ＣＮ、ＣＦ３、ＡｒまたはＴ−Ａｒである；
ここで：
Ｔは、ＯまたはＳである；
Ｒは、Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキルである；
Ａｒは、フェニル環であり、該フェニル環は、必要に応じて、ハロ、ＣＨ３、ＣＦ３、ＣＮ、ＯＭｅ、ＯＣＦ３およびＮＲ５Ｒ６から選択される１個〜３個の基で置換されている；そして
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ別個に、ＨまたはＣ１〜６アルキルであるか、またはＲ５およびＲ６は、一緒になって、５〜７員環を形成し、該環は、必要に応じて、３個までのヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、Ｓ、ＮＨおよびＮ（Ｃ１〜６アルキル）である；
但し、Ｙがハロのとき、Ｒ３およびＲ４の両方が同時に水素になることはない。
【００１７】
本発明はまた、薬学的組成物およびこのような薬学的組成物を使用してカスパーゼ媒介疾患を治療する方法を提供する。
【００１８】
（発明の詳細な説明）
本発明は、式Ｉの化合物を提供する：
【００１９】
【化１３】
2005533825.tif 000005
ここで：
Ｘは、ＣＨまたはＮである；
Ｙは、ハロ、トリフルオロフェノキシまたはテトラフルオロフェノキシである；
Ｒ２は、Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキルである；
Ｒ３は、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＣＮまたはＣＦ３である；そして
Ｒ４は、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＳＲ、ＣＮ、ＣＦ３、ＡｒまたはＴ−Ａｒである；
ここで：
Ｔは、ＯまたはＳである；
Ｒは、Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキルである；
Ａｒは、フェニル環であり、該フェニル環は、必要に応じて、ハロ、ＣＨ３、ＣＦ３、ＣＮ、ＯＭｅ、ＯＣＦ３およびＮＲ５Ｒ６から選択される１個〜３個の基で置換されている；そして
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ別個に、ＨまたはＣ１〜６直鎖または分枝アルキルであるか、またはＲ５およびＲ６は、一緒になって、５〜７員環を形成し、該環は、必要に応じて、３個までのヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、Ｓ、ＮＨおよびＮ（Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキル）から選択される；
但し、Ｙがハロのとき、Ｒ３およびＲ４の両方が同時に水素になることはない。
【００２０】
式Ｉの他の実施態様では、Ｒ４は、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＣＮ、ＣＦ３またはＴ−Ａｒである；ここで、Ｔ、Ａｒおよび他の変数は、上で定義したとおりである。
【００２１】
本発明の化合物は、国際ＰＣＴ公開ＷＯ０１／４２２１６の属にわたる選択肢を提示し、その全開示内容は、本明細書中で参考として援用されている。具体的には、本発明の化合物は、アポトーシスを阻害しおよび／または活性化した細胞からのＩｌ−１βの放出を阻害する予想外の驚くべき性能を有する。
【００２２】
好ましい実施態様によれば、式ＩのＲ２は、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルである。
【００２３】
さらに好ましい実施態様によれば、式ＩのＲ２は、エチルである。
【００２４】
さらにより好ましい実施態様によれば、式ＩのＲ２は、（Ｓ）−エチルである。
【００２５】
好ましい実施態様によれば、式ＩのＲ３は、水素である。
【００２６】
好ましい実施態様によれば、式ＩのＹは、Ｆ、トリフルオロフェノキシまたはテトラフルオロフェノキシである。
【００２７】
他の好ましい実施態様によれば、本発明は、式ＩＡの化合物を提供する：
【００２８】
【化１４】
2005533825.tif 000006
ここで：
Ｒ２は、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルである；そして
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ別個に、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＣＮ、ＣＦ３またはＡｒであるが、但し、Ｒ３およびＲ４の両方が同時に水素になることはない；
Ａｒは、フェニル環であり、該フェニル環は、必要に応じて、ハロ、ＣＨ３、ＣＦ３、ＣＮ、ＯＭｅ、ＯＣＦ３およびＮＲ５Ｒ６から選択される１個〜３個の基で置換されている；そして
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ別個に、ＨまたはＣ１〜６直鎖または分枝アルキルであるか、またはＲ５およびＲ６は、一緒になって、５〜７員環を形成し、該環は、必要に応じて、３個までのヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、Ｓ、ＮＨおよびＮ（Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキル）から選択される；
式ＩＡの別の実施態様によれば、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ別個に、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＣＮまたはＣＦ３であるが、但し、Ｒ３およびＲ４の両方が同時に水素になることはない；そしてＲ２は、式ＩＡについて上で定義したとおりである。
【００２９】
好ましい実施態様によれば、式ＩＡの化合物のＲ２は、エチルである。
【００３０】
さらに好ましい実施態様によれば、式ＩＡのＲ２は、（Ｓ）−エチルである。
【００３１】
別の好ましい実施態様によれば、式ＩＡの化合物のＲ２は、イソプロピルである。
【００３２】
好ましい実施態様によれば、式ＩＡの化合物のＲ３は、水素である。
【００３３】
好ましい実施態様によれば、式ＩＡの化合物のＲ４は、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、ＡｒまたはＣＦ３である。
【００３４】
さらに好ましい実施態様によれば、式ＩＡの化合物のＲ４は、Ｃｌである。
【００３５】
別のさらに好ましい実施態様によれば、式ＩＡの化合物のＲ４は、ＣＦ３である。
【００３６】
別の好ましい実施態様によれば、式ＩＡの化合物のＲ３は、水素であり、そしてＲ４は、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、ＡｒまたはＣＦ３である。
【００３７】
別の好ましい実施態様によれば、式ＩＡの化合物のＲ３は、水素であり、そしてＲ４は、Ｃｌである。
【００３８】
別の好ましい実施態様によれば、式ＩＡの化合物のＲ３は、水素であり、そしてＲ４は、ＣＦ３である。
【００３９】
別の好ましい実施態様によれば、式ＩＡの化合物のＲ３は、水素であり、そしてＲ４は、Ａｒである。
【００４０】
別の好ましい実施態様によれば、本発明は、式ＩＢの化合物を提供する：
【００４１】
【化１５】
2005533825.tif 000007
ここで：
Ｘは、ＣＨまたはＮである；
Ｒ２は、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルである；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ別個に、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＣＮまたはＣＦ３である；そして
Ａｒ２は、トリフルオロフェニルまたはテトラフルオロフェニルである。
【００４２】
好ましい実施態様によれば、式ＩＢの化合物のＡｒ２は、２，３，５，６−テトラフルオロフェニルである。
【００４３】
好ましい実施態様によれば、式ＩＢの化合物のＲ２は、エチルである。
【００４４】
さらに好ましい実施態様によれば、式ＩＢの化合物のＲ２は、（Ｓ）−エチルである。
【００４５】
好ましい実施態様によれば、式ＩＢの化合物のＸは、ＣＨである。
【００４６】
好ましい実施態様によれば、式ＩＢの化合物のＲ３は、水素である。
【００４７】
好ましい実施態様によれば、式ＩＢの化合物のＲ４は、Ｆ、ＣｌまたはＣＦ３である。
【００４８】
さらに好ましい実施態様によれば、式ＩＢの化合物のＲ４は、Ｃｌである。
【００４９】
さらに好ましい実施態様によれば、式ＩＢの化合物のＲ４は、ＣＦ３である。
【００５０】
好ましい実施態様によれば、式ＩＢの化合物のＲ３は、水素であり、そしてＲ４は、Ｆ、ＣｌまたはＣＦ３である。
【００５１】
別の好ましい実施態様によれば、式ＩＢの化合物のＡｒ２は、２，３，５，６−テトラフルオロフェニルであり、Ｒ３は、水素であり、そしてＲ４は、Ｃｌである。
【００５２】
別の好ましい実施態様によれば、本発明は、式ＩＣの化合物を提供する：
【００５３】
【化１６】
2005533825.tif 000008
ここで：
Ｒ２は、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルである；
Ｒ３は、水素、ハロ、ＯＣＦ３、ＣＮまたはＣＦ３である；
Ｒ４は、ハロ、ＯＣＦ３、ＣＮ、ＣＦ３、ＳＲまたはＴ−Ａｒである；
Ｔは、ＯまたはＳである；
Ｒは、Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキルである；
Ａｒは、フェニル環であり、該フェニル環は、必要に応じて、ハロ、ＣＨ３、ＣＦ３、ＣＮ、ＯＭｅ、ＯＣＦ３およびＮＲ５Ｒ６から選択される１個〜３個の基で置換されている；そして
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ別個に、ＨまたはＣ１〜６直鎖もしくは分枝アルキルであるか、あるいはＲ５およびＲ６は、一緒になって、５〜７員環を形成し、該環は、必要に応じて、３個までのヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、Ｓ、ＮＨおよびＮ（Ｃ１〜６直鎖または分枝アルキル）である。
【００５４】
式ＩＣの化合物の好ましい実施態様によれば、Ｒ４は、Ｔ−Ａｒである。
【００５５】
好ましい実施態様によれば、式ＩＣの化合物のＲ２は、エチルである。
【００５６】
さらに好ましい実施態様によれば、式ＩＣの化合物のＲ２は、（Ｓ）−エチルである。
【００５７】
好ましい実施態様によれば、式ＩＣの化合物のＲ３は、水素である。
【００５８】
好ましい実施態様によれば、式ＩＣの化合物のＲ４は、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮまたはＣＦ３である。
【００５９】
さらに好ましい実施態様によれば、式ＩＣの化合物のＲ４は、Ｃｌである。
【００６０】
好ましい実施態様によれば、式ＩＣの化合物のＴは、Ｏである。
【００６１】
好ましい実施態様によれば、式ＩＣの化合物のＡｒは、存在する場合、必要に応じて、ＣＦ３またはハロ（好ましくは、このハロは、クロロまたはフルオロである）で置換されている。
【００６２】
本明細書中で使用する「Ｃ１〜６」は、１個、２個、３個、４個、５個または６個の炭素原子（またはそれを置換した任意のヘテロ原子）が存在していることを意味する。
【００６３】
さらに好ましい実施態様によれば、本発明は、以下の表１から選択される式Ｉの化合物を提供する：
（表１）
【００６４】
【化１７】
2005533825.tif 000009
【００６５】
【化１８】
2005533825.tif 000010
別の実施態様によれば、本発明は、以下を含有する薬学的組成物を提供する：
ａ）上で定義した式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩；および
ｂ）薬学的に受容可能なキャリア、アジュバントまたはビヒクル。
【００６６】
好ましい実施態様によれば、本発明の薬学的組成物は、以下を含有する：
ａ）式ＩＡ、式ＩＢまたは式ＩＣの化合物；および
ｂ）薬学的に受容可能なキャリア、アジュバントまたはビヒクル。
【００６７】
さらに好ましい実施態様によれば、本発明の薬学的組成物は、上記表１から選択される化合物を含有する。
【００６８】
本発明の化合物は、溶液中にて、開放形状１または環化ヘミケタール形状２のいずれかで存在し得る。いずれかの異性体形状の本明細書中での描写は、他方を含むことを意味する。
【００６９】
【化１９】
2005533825.tif 000011
本発明の特定の化合物が互変異性形状または水和形状で存在し得ることは当業者に明らかであり、これらの化合物のこのような形状の全ては、本発明の範囲内である。他に述べられていなければ、本明細書中で描写した構造はまた、その構造の全ての立体化学形状（すなわち、各非対称中心のＲ配置およびＳ配置）を含むことを意味している。従って、本発明の化合物の単一の立体化学的異性体だけでなく、鏡像異性体およびジアステレオマーの混合物もまた、本発明の範囲内である。他に述べられていなければ、本明細書中で描写した構造はまた、１個またはそれ以上の同位体に富んだ原子の存在だけが異なる化合物を含むことを意味する。例えば、水素を重水素または三重水素と交換するか、あるいは、炭素を１３Ｃまたは１４Ｃに富んだ炭素と交換すること以外は本発明の構造を有する化合物は、本発明の範囲内である。
【００７０】
本発明の化合物は、一般に、類似の化合物について当業者に公知の方法により、調製され得る。本発明の化合物の合成経路は、一般的に、ＷＯ０１／４２２１６で記述されている。例示の目的のために、本発明の化合物を合成するための以下のスキームＩ〜ＩＶを提供する。
【００７１】
（スキームＩ）
【００７２】
【化２０】
2005533825.tif 000012
試薬：（ａ）ＥＤＣ／ＤＭＡＰ／ＨＯＢｔ／ＴＨＦ；（ｂ）Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ過ヨージナン（ｐｅｒｉｏｄｉｎａｎｅ）；（ｃ）ＴＦＡ／ＤＣＭ
上記スキームＩにて、以下の略語を使用する：ＥＤＣは、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドである；ＨＯＢｔは、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールである；ＴＨＦは、テトラヒドロフランである；ＴＦＡは、トリフルオロ酢酸である；ＤＣＭは、ジクロロメタンである；ＤＭＡＰは、４−ジメチルアミノピリジンである。酸ＡをアミノアルコールＢとカップリングして、アミドＣを得る。化合物Ｃ中の水酸基を酸化して、ケトンを得、続いて、その第三級ブチルエステルを酸加水分解して、遊離酸として、Ｉ’を得る。
【００７３】
フルオロメチルケトン（ここで、ＣＨ２Ｙは、ＣＨ２Ｆである）の場合、アミノアルコールＢは、Ｒｅｖｅｓｚら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３５，９６９３（１９９４）の方法に従って、得ることができる。フルオロ置換フェノキシケトン（ここで、ＣＨ２ＹのＹは、２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ、２，４，６−トリフルオロフェノキシまたは２，３，６−トリフルオロフェノキシである）の場合、アミノアルコールＢは、Ｓｅｍｐｌｅら、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，７，１３３７（１９９７）（スキームＩＩ）の方法と類似の方法により、得ることができる。
【００７４】
（スキームＩＩ）
【００７５】
【化２１】
2005533825.tif 000013
試薬：（ａ）ＫＦ／ＤＭＦ／Ａｒ２ＯＨ；（ｂ）ＮａＢＨ４／ＴＨＦ；（ｃ）Ｈ２／Ｐｄ／Ｃ／ＭｅＯＨ。
【００７６】
上記スキームＩＩでは、以下の略語を使用する：ＫＦは、フッ化カリウムである；ＤＭＦは、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドである；Ａｒ２ＯＨは、２，３，５，６−テトラフルオロフェノール、２，４，６−トリフルオロフェノールまたは２，３，６−トリフルオロフェノールのいずれかである；ＴＨＦは、テトラヒドロフランである；ＭｅＯＨは、メタノールである。市販のブロモケトンＤを、適切に置換したフルオロフェノールおよびフッ化カリウムと反応させて、フェノキシケトンＥを得る。次いで、このケトンをホウ水素化ナトリウムで還元して、アルコールＦを得、これを、触媒として炭素上のパラジウムを使用して水素化して、アミノアルコールＢ’（Ａｒ２＝フルオロ置換フェニルである）を得る。
【００７７】
（スキームＩＩＩ）
【００７８】
【化２２】
2005533825.tif 000014
試薬：（ａ）加熱；（ｂ）濃ＨＣｌ／ＩＰＡ；（ｃ）ＴＦＡ／ＤＣＭ。
【００７９】
上記スキームＩＩＩでは、以下の略語を使用する：ＩＰＡは、イソプロピルアルコールである；ＴＦＡは、トリフルオロ酢酸であり、そしてＤＣＭは、ジクロロメタンである。イソキノリン−１−オン酸誘導体（式Ｉにて、Ｘ＝Ｃ）は、スキームＩＩＩで示した合成手順を使用して、キラル形状で調製できる。出発物質であるイソクマリンＧは、特に明記しない限り、Ｎａｒａｓｉｍｈａｎら、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，７９７（１９７５）およびＭａｒｇａｒｅｔｈａら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ５６，６７６３（２０００）と類似の方法により、調製される。イソクマリンＧを、まず、市販の（Ｓ）−２−アミノ酪酸第三級ブチルエステルと共に、加熱する。得られた化合物を、イソプロパノール中にて、濃塩酸と反応させて、イソキノリン−１−オン第三級ブチルエステルを得、これを、トリフルオロ酢酸を使用して脱保護して、酸Ｈを得る。次いで、この酸をアミノアルコールＢとカップリングする（スキームＩ）。
【００８０】
（スキームＩＶ）
【００８１】
【化２３】
2005533825.tif 000015
試薬：（ａ）ＬｉＯＨ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ；（ｂ）（Ｓ）−２−アミノ酪酸第三級ブチルエステル／ＥＤＣ／ＨＯＢｔ／ＤＭＡＰ／ＴＨＦ；（ｃ）ＳｎＣｌ２／ＭｅＯＨ；（ｄ）オルトギ酸トリメチル／ＡｃＯＨ／還流；（ｅ）ＴＦＡ／ＤＣＭ；（ｆ）Ｒ４−ＴＨ／Ｋ２ＣＯ３／ＤＭＦ。
【００８２】
上記スキームＩＶでは、以下の略語を使用する：ＡｃＯＨは、酢酸であり、そしてＲ４−ＴＨは、２−クロロフェノール、３−クロロフェノール、３−フルオロフェノールまたは２，４−ジクロロフェノールまたは、チオフェノールまたは３−フルオロチオフェノールであり得る。（４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）酸誘導体Ａ（Ｘ＝Ｎ）は、Ｍａｋｉｎｏら、Ｓｙｎｌｅｔｔ，１１，１６７０（２０００）と類似の方法を使用して、キラル形状で調製される。市販の５−クロロ−２−ニトロ安息香酸メチルエステルＪを、水酸化リチウムを使用して酸に加水分解し、得られた酸を市販の（Ｓ）−２−アミノ酪酸第三級ブチルエステルとカップリングして、アミドＫを得る。そのニトロ基を塩化スズ（ＩＩ）を使用して還元し、続いて、オルトギ酸トリメチルと酸触媒シクロ縮合すると、そのキナゾリンが得られ、これを、トリフルオロ酢酸で脱保護して、４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル酸Ｌを得る。次いで、この酸をアミノアルコールＢとカップリングする（スキームＩ）。あるいは、５−クロロ−２−ニトロ安息香酸メチルエステルＪは、ＤＭＦ中にて炭酸カリウムと共に加熱することにより、適切に置換したフェノールまたはチオフェノールと反応でき、対応する６−フェノキシ（Ｙ＝Ｏ）誘導体または６−フェニルスルファニル（Ｙ＝Ｓ）誘導体が得られる。水酸化リチウムで処理すると、酸Ｍが得られ、これは、さらに生成でき（スキームＩＶ、工程ｂ〜ｅ）、４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル酸Ｎが得られ、これを、次いで、先に記述したようにして、アミノアルコールＢとカップリングする。また、２−ニトロ安息香酸は、類似の様式で生成され得、非置換４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル酸が得られる。
【００８３】
従って、本発明の１局面は、式Ｉの化合物を調製する一般方法に関し、該方法は、以下の工程を包含する：式ＩＩの酸または酸誘導体と、
【００８４】
【化２４】
2005533825.tif 000016
式Ｂのアミノアルコールとを反応させて、式ＩＩＩの化合物を得る工程；
【００８５】
【化２５】
2005533825.tif 000017
および中間体ＩＩＩを化合物Ｉに変換する工程であって、ここで；Ｒ７は、適切な保護基であり、そしてＹ、Ｘ、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、本明細書中の実施態様のいずれかで記述したとおりである。適切な保護基は、当業者に公知である（例えば、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、第３版、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．およびＷｕｔｓ，Ｐ．Ｇ．著、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：１９９９を参照；その全内容は、本明細書中で参考として援用されている）。好ましくは、Ｒ７はＣ１〜６直鎖または分枝アルキルである。より好ましくは、Ｒ７はｔ−ブチルである。
【００８６】
式ＩＩの化合物と式Ｂの化合物とは、アミノ化合物と酸化合物とをカップリングする任意の条件下にて、反応され得る。このような条件は、当業者に周知である。好ましいカップリング条件には、本明細書中のスキームおよび実施例で記述したものがある。
【００８７】
式ＩＩＩの化合物は、水酸基をカルボニル基に変換し保護酸を遊離酸に変換する任意の条件下にて、式Ｉの化合物に変換され得る。このような条件は、当業者に周知である。水酸基からカルボニル基を調製する好ましい条件には、本明細書中のスキームおよび実施例で記述した酸化条件がある。Ｒ７がｔ−ブチルである場合の保護した酸を脱保護する好ましい条件には、本明細書中のスキームおよび実施例で記述した加水分解条件がある。
【００８８】
この方法は、本発明のキラル化合物（ここで、炭素を有するＲ２置換基は、立体化学的に補強されている）を調製するのに、特に有用である。以下で例示するように（例えば、実施例１〜２２を参照）、式ＩＩの中間体酸または酸誘導体は、キラル形状で得ることができる。これは、キナゾリン−４−オン（ここで、Ｘは、窒素である）（例えば、実施例５〜８、１２〜１８、２０および２２を参照）について、そして、イソキノリン−１−オン（ここで、Ｘは、ＣＨである）（例えば、実施例１〜４、９〜１１、１９および２１を参照）について、本明細書中で例示されている。ＩＩおよびＢをカップリングしてＩＩＩを得ることは、任意の適当な方法に従って、実行され得る。ＩＩＩを変換してＩを得ることは、本明細書中で記述したようにして、または当業者によく知られている他の方法に従って、実行され得る。
【００８９】
ＩＩのある種のキラル中間体は、本発明の化合物を調製する方法で、有用である。好ましい中間体は、化合物ＩＩＡにより表される：
【００９０】
【化２６】
2005533825.tif 000018
ここで、Ｘ、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、本明細書中の実施態様のいずれかについて記述したとおりである。
【００９１】
式ＩＩおよびＩＩＡの化合物のさらに好ましい実施態様によれば、Ｒ２は、エチルまたはイソプロピルである。
【００９２】
本発明の化合物を、それらがアポトーシスを阻害する性能、ＩＬ−１βまたはカスパーゼ活性の直接的な放出について、アッセイできる。これらの活性の各々についてのアッセイは、当該技術分野で公知であり、そして実施例２３〜２５にて、以下で詳細に記述されている。
【００９３】
本発明の化合物の薬学的に受容可能な塩が、これらの組成物中で使用されるなら、それらの塩は、好ましくは、有機または無機の酸および塩基から誘導される。このような酸性塩には、以下が挙げられる：酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、パモエート、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシレートおよびウンデカン酸塩。塩基性塩には、アンモニウム塩、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩およびカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム塩およびマグネシウム塩）、有機塩基を有する塩（例えば、ジシクロヘキシルアミン塩）、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、およびアミノ酸（例えば、アルギニン、リシン）を有する塩などが挙げられる。
【００９４】
また、この塩基性窒素含有基は、低級アルキルハロゲン化物（例えば、塩化、臭化およびヨウ化メチル、エチル、プロピル、およびブチル）；硫酸ジアルキル（例えば、硫酸ジメチル、硫酸ジエチル、硫酸ジブチルおよび硫酸ジアミル）；長鎖ハロゲン化物（例えば、塩化、臭化およびヨウ化デシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリル）、ハロゲン化アラルキル（例えば、臭化ベンジルおよび臭化フェネチル）などのような試薬で四級化できる。それにより、水溶性もしくは油溶性または水分散性もしくは油分散性の生成物が得られる。
【００９５】
本発明の組成物および方法で使用する化合物はまた、選択的な生体特性を高める適当な官能性を付加することにより、変性され得る。このような変性は、当該技術分野で公知であり、所定の生体系（例えば、血液、リンパ系、中枢神経系）への生体貫入を高めること、経口利用可能性を高めること、注射による投与ができるように溶解性を高めること、代謝を変えることおよび排出速度を変えることを含む。
【００９６】
これらの組成物で使用され得る薬学的に受容可能なキャリアには、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク（例えば、ヒト血清アルブミン）、緩衝液基質（例えば、リン酸塩）、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質（例えば、硫酸プロタミン）、リン酸二ナトリウム水素、リン酸カリウム水素、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの基質、ポリエチレングリコール、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリアクリル酸塩、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレンブロック重合体、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９７】
好ましい実施態様によれば、本発明の組成物は、哺乳動物（好ましくは、ヒト）に薬学的投与するために製剤される。
【００９８】
本発明のこのような薬学的組成物は、経口的、非経口的、吸入スプレーにより、局所的、経直腸的、経鼻的、経頬的、経膣的、あるいは移植されたレザバを介して、投与され得る。本明細書中で使用する「非経口」との用語は、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑液内、胸骨内、骨膜内、肝臓内、病巣内および頭蓋内の注射あるいは注入技術を含む。好ましくは、これらの組成物は、経口的または静脈内に投与される。本発明にのこの組成物の、無菌の注射可能な形状は、水性懸濁液または油性懸濁液として、無菌の注射可能な製剤の形状であり得る。ここで使用する「非経口的」との用語は、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、関節内、滑液内、胸骨内、鞘内、病巣内および頭蓋内の注射方法または注入方法を含む。好ましくは、これらの組成物は、経口的または静脈内で、投与される。
【００９９】
本発明の組成物の無菌の注射可能な形状は、水性または油性の懸濁液であり得る。これらの懸濁液は、適当な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を用いて、当該技術分野で公知の方法に従って、製剤され得る。この無菌の注射可能な製剤はまた、例えば、１，３−ブタノール中の溶液として、非毒性の非経口的に受容可能な希釈剤または溶媒中の無菌の注射可能な溶液または懸濁液であり得る。使用され得る受容可能な賦形剤および溶媒には、水、リンガー溶液および等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに、従来、溶媒または懸濁媒体として、無菌の固定油が使用されている。この目的には、いずれかのブランドの固定油が使用され得、これには、合成のモノグリセリドまたはジグリセリドが含まれる。脂肪酸（例えば、オレイン酸）およびそのグリセリド誘導体は、天然の薬学的に受容可能なオイル（例えば、オリーブ油またはひまし油、特に、それらのポリオキシエチレン化した型）と同様に、注射可能物の調製に有用である。これらのオイル溶液または懸濁液はまた、長鎖アルコール希釈剤または分散剤（例えば、カルボキシメチルセルロースまたは類似の分散剤（これらは、通例、乳濁液および懸濁液を含有する薬学的に受容可能な投薬形態の製剤で、使用される））を含有し得る。他の一般に使用される界面活性剤（例えば、Ｔｗｅｅｎｓ、Ｓｐａｎおよび他の乳化剤または生体利用能向上剤（これらは、通例、薬学的に受容可能な固体、液体または他の投薬形態の製造で使用される））もまた、この製剤目的に使用され得る。
【０１００】
本発明の薬学的組成物は、任意の経口的に受容可能な投薬形態（これにはカプセル、錠剤、水性懸濁液または溶液が挙げられるが、これらに限定されない）で経口投与され得る。経口用途の錠剤の場合、通常使用されるキャリアには、ラクトースおよびコーンスターチが挙げられる。ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤もまた、典型的には、添加される。カプセル形態での経口投与のために有用な希釈剤には、ラクトースおよび乾燥コーンスターチが挙げられる。水性懸濁液が経口投与のために必要とされる場合には、活性成分は乳化剤および懸濁剤と組み合わされる。所望であれば、特定の甘味剤、香味料または着色剤が添加され得る。
【０１０１】
他方、本発明の薬学的組成物は、直腸投与用の座剤の形状で、投与され得る。これらは、この試薬と、適当な非刺激性の賦形剤（これは、室温で固体であるが、直腸温度では液体であり、従って、直腸で融けて薬物を放出する）とを混合することにより、調製できる。このような物質には、ココアバター、密ろうおよびポリエチレングリコールが挙げられる。
【０１０２】
本発明の薬学的組成物はまた、特に、治療の標的が、局所的な適用により容易にアクセスできる領域または器官（目、皮膚または下部腸道の疾患を含めて）を包含する場合、局所的に投与され得る。これらの領域または器官のそれぞれに適当な局所製剤は、容易に調製される。
【０１０３】
下部腸道に対する局所適用は、直腸座剤製剤（上記）により、または適当な浣腸製剤にて、行なうことができる。局所的な皮膚間パッチもまた、使用され得る。
【０１０４】
局所的に適用するためには、この薬学的組成物は、１種またはそれ以上のキャリアに懸濁するかまたは溶解した活性成分を含む適当な軟膏で、製剤され得る。本発明の化合物の局所投与用のキャリアには、鉱油、液状石油、白色鉱油、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ワックスおよび水が挙げられるが、これらに限定されない。他方、この薬学的組成物は、１種またはそれ以上の薬学的に受容可能なキャリアに懸濁するかまたは溶解した活性化合物を含む適当なローションまたはクリームで製剤できる。適当なキャリアには、鉱油、ソルビタンモノステアレート、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリールアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０５】
眼科用途には、この薬学的組成物は、防腐剤（例えば、ベンジルアルコニウムクロライド）と共にまたはそれなしで、ｐＨを調整したアイソトニック無菌生理食塩水の微細化懸濁液として、または、好ましくは、ｐＨを調整したアイソトニック無菌生理食塩水の溶液として、製剤され得る。他方、眼科用途には、この薬学的組成物は、軟膏（例えば、ペトロラタム）に製剤され得る。
【０１０６】
本発明の薬学的組成物はまた、鼻エアロゾルまたは鼻吸入により、投与できる。このような組成物は、製薬製剤の当該技術分野で周知の技術に従って、調製され、生理食塩水中の溶液として、ベンジルアルコールまたは他の適当な防腐剤、生体利用能を高めるための吸収促進剤、フルオロカーボン、および／または他の通常の可溶化剤または分散剤を使用して、調製され得る。
【０１０７】
上記組成物は、ＩＬ−１媒介疾患、アポトーシス媒介疾患、炎症性疾患、自己免疫性疾患、破壊性骨障害、増殖性障害、感染症疾患、変性疾患、細胞死に関する疾患、過剰な食用アルコール摂取疾患、ウイルス媒介疾患、腎疾患、ブドウ膜炎、炎症性腹膜炎、骨関節炎、膵炎、喘息、成人性呼吸窮迫症候群、糸球体腎炎、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、硬皮症、慢性甲状腺炎、グレーヴス病、自己免疫性胃炎、糖尿病、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性好中球減少症、血小板減少症、慢性活性肝炎、重症筋無力症、炎症性腸疾患、クローン病、乾癬、アトピー性皮膚炎、瘢痕、移植片対宿主病、臓器移植拒絶反応、火傷後臓器アポトーシス、骨粗鬆症、白血病および関連疾患、脊髄形成異常症候群、多発性骨髄腫関連骨障害、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、転移性メラノーマ、カポジ肉腫、多発性骨髄腫、出血性ショック、敗血症、敗血症ショック、火傷、細菌性赤痢、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン舞踏病、ケネディ病、プリオン病、脳虚血、癲癇、心筋虚血、急性および慢性心臓病、心筋梗塞、鬱血性心不全、アテローム性動脈硬化症、冠状動脈バイパス移植、脊椎筋萎縮症、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、ＨＩＶ関連脳炎、老化、脱毛症、脳卒中による神経学的損傷、潰瘍性大腸炎、外傷性脳傷害、脊髄傷害、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｇ型肝炎、黄熱病、デング熱または脳炎、種々の形態の肝臓病、腎臓病、多嚢胞性腎臓病、Ｈ幽門関連胃潰瘍および十二指腸潰瘍、ＨＩＶ感染、結核、種々の形態の癌治療用の免疫療法、臓器不全、および髄膜炎に関連した治療用途で、特に有用である。これらの化合物および組成物はまた、冠状動脈バイパス移植に関連した合併症の治療で有用である。上記組成物中に存在する化合物の量は、当該分野で公知の任意のアッセイによって測定されるような、疾患の重篤度、またはカスパーゼ活性および／または細胞アポトーシスの検出可能な減少を引き起こすのに十分であるべきである。
【０１０８】
他の実施態様によれば、本発明の組成物は、さらに、他の治療剤を含有する。このような治療剤には、血栓溶解剤（例えば、組織プラスミノーゲン活性剤およびストレプトキナーゼ）が挙げられるが、これらに限定されない。第二の試薬を使用する場合、この第二の試薬は、別の投薬形態として、または本発明の化合物または組成物との単一投薬形態の一部として、いずれかで投与され得る。この化合物および追加薬剤の両方は、単独療法レジメンで通常投与される投薬量の１０〜１００％の間、より好ましくは、約１０〜８０％の間の投薬レベルで、存在すべきである。
【０１０９】
任意の特定の患者に対する特定の投薬量および治療レジメンは、種々の要因に依存し、これには、使用する特定の化合物の活性、その患者の年齢、体重、一般的な健康状態、性別および常食、この化合物の投与時間、排泄の割合、特定の薬剤の組合せ、および治療する医師の判断および治療すべき特定の疾患の発病度が含まれることも、当然理解できるはずである。活性成分の量はまた、組成物中の特定の化合物および他の治療剤（存在する場合）に依存する。
【０１１０】
ある実施態様では、本発明の化合物は、所望の治療効果を得るために、１日１回またはそれ以上にわたって、１日あたり、被験体の体重１ｋｇあたり、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは、約１ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇの投薬レベルで、経口または非経口的に投与され得る。
【０１１１】
好ましい実施態様では、本発明は、前記疾患の１つに罹った哺乳動物を治療する方法を提供し、該方法は、該哺乳動物に、上記薬学的に受容可能な組成物を前記哺乳動物に投与する工程を包含する。この実施態様では、もし、患者に別の治療薬またはカスパーゼインヒビターも投与するなら、それは、単一投薬形態で、または別個の投薬形態として、本発明の化合物と共に送達され得る。別個の投薬形態として投与するとき、他のカスパーゼインヒビターまたは薬剤は、本発明の化合物を含有する薬学的に受容可能な組成物の投与前、投与と同時または投与後に、投与され得る。
【０１１２】
本発明の化合物またはそれらの薬学的に受容可能な組成物はまた、移植可能医療デバイス（例えば、補綴物、人工弁、血管移植片、ステントおよカテーテル）を被覆する組成物に取り込まれ得る。従って、本発明は、別の局面では、移植可能デバイスを被覆する組成物を包含し、該組成物は、本明細書中のクラスおよびサブクラスで上で一般に記述した本発明の化合物と、該移植可能デバイスを被覆するのに適当なキャリアとを含有する。さらに別の局面では、本発明は、移植可能デバイスを包含し、該移植可能デバイスは、本明細書中のクラスおよびサブクラスで上で一般に記述した本発明の化合物と該移植可能デバイスを被覆するのに適当なキャリアとを含有する組成物で被覆されている。
【０１１３】
本発明の別の局面は、生体試料または患者のカスパーゼ活性を阻害する方法に関し、該方法は、式Ｉの化合物または該化合物を含有する組成物を、該患者に投与するかまたは該生体試料と接触させる工程を包含する。本明細書中で使用する「生体試料」との用語は、細胞培養物またはそれらの抽出物；哺乳動物またはその抽出物から得られる生検材料；および血液、唾液、尿、糞便、精液、涙液、または他の体液またはそれらの抽出物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１４】
生体試料でのカスパーゼ活性の阻害は、当業者に公知の種々の目的のために有用である。このような目的の例には、輸血、臓器移植、生体試料の保存および生物検定が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１５】
本発明の化合物はまた、臓器移植で必要とされ得るような細胞を保存する方法、または血液産物を保存する方法に有用である。カスパーゼインヒビターの同様の用途は、Ｓｃｈｉｅｒｌｅら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，５，９７（１９９９）で報告されている。この方法は、このカスパーゼインヒビターを含有する溶液で保存される細胞または組織を処置する工程を包含する。必要なカスパーゼインヒビターの量は、所定細胞型に対するそのインヒビターの有効性および細胞をアポトーシス細胞死から保護するのに必要な時間の長さに依存している。
【０１１６】
本発明をさらに十分に理解するために、以下の調製および試験実施例を示す。これらの実施例は、例示の目的だけのものであり、いずれの様式でも、本発明の範囲を限定するものとして解釈すべきではないことが理解できるはずである。
【実施例】
【０１１７】
（実施例１）
（（Ｓ）−３−［２−（７−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−ブチリルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸）
【０１１８】
【化２７】
2005533825.tif 000019
方法Ａ：
５−クロロ−２（２−メトキシビニル）−安息香酸
【０１１９】
【化２８】
2005533825.tif 000020
ジエチルエーテル（２００ｍｌ）および第三級ブタノール（５０ｍｌ）の混合物中の塩化メトキシメチルトリフェニルホスホニウム（３９ｇ）の冷却（０℃）スラリーに、カリウム第三級ブトキシド（１２．８ｇ）を滴下した。得られた混合物を、０℃で、１時間攪拌し、次いで、１５分間にわたって、２−ホルミル−５−クロロ安息香酸（これは、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６１，３４０２（１９９６）で記述のようにして調製した）（１０ｇ）のジエチルエーテル（５０ｍｌ）溶液を滴下した。得られた混合物を、０℃で、１時間攪拌し、次いで、室温まで温め、さらに９０分間攪拌した。この混合物を水（２００ｍｌ）で希釈し、その有機相を除去した。その水相を１Ｍ  ＨＣｌでｐＨ１まで酸性化し、そして酢酸エチル（３×５０ｍｌ）で抽出した。合わせた抽出物をブラインで洗浄し、乾燥し（硫酸マグネシウム）、濾過し、そして濃縮した。その残留物をフラッシュクロマトグラフィー（５０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、黄色固形物（９．１３ｇ、８０％）として、副題化合物を得た。
【０１２０】
【化２９】
2005533825.tif 000021
方法Ｂ：
７−クロロ−イソクロメン−１−オン
【０１２１】
【化３０】
2005533825.tif 000022
５−クロロ−２（２−メトキシビニル）−安息香酸（４．４３ｇ）に、０℃で、濃硫酸（１５ｍｌ）を加えた。その混合物を２時間攪拌し、次いで、氷／水で希釈した。その生成物を酢酸エチル（３×ｌ５ｍｌ）で抽出し、そして合わせた抽出物を飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄した。その溶液を乾燥し（硫酸マグネシウム）、濾過し、そして濃縮した。その残留物をフラッシュクロマトグラフィー（０〜５％酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、白色固形物（３．０４ｇ、８１％）として、副題化合物を得た。
【０１２２】
【化３１】
2005533825.tif 000023
方法Ｃ：
（Ｓ）−２−［３−（１−第三級ブトキシカルボニル−プロピルアミノ）−７−クロロ−１−オキソ−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル］−酪酸第三級ブチルエステル
【０１２３】
【化３２】
2005533825.tif 000024
７−クロロ−イソクロメン−１−オン（１０ｇ）および（Ｓ）−２−アミノ酪酸第三級ブチルエステル（２２ｇ）の混合物を、８５℃で、２４時間加熱した。次いで、この混合物を冷却し、そしてフラッシュクロマトグラフィー（５〜２５％酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、黄色オイル（１７．１ｇ、６４％）として、副題化合物を得た。
【０１２４】
【化３３】
2005533825.tif 000025
方法Ｄ：
（Ｓ）−２−（７−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−酪酸第三級ブチルエステル
【０１２５】
【化３４】
2005533825.tif 000026
２−［３−（１−第三級ブトキシカルボニル−プロピルアミノ）−７−クロロ−１−オキソ−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル］−酪酸第三級ブチルエステル（８．５８ｇ）のイソプロパノール（１８０ｍｌ）攪拌溶液に、０℃で、濃塩酸（２０ｍｌ）を加えた。得られた混合物を室温まで温め、そして１８時間攪拌した。次いで、この混合物を酢酸エチル（５００ｍｌ）および水（１５０ｍｌ）で希釈した。その有機相を分離し、そして水に次いでブラインで洗浄し、乾燥し（硫酸マグネシウム）、濾過し、そして濃縮した。黄色固形物（５．５７ｇ、９７％）として、副題生成物を得た。
【０１２６】
【化３５】
2005533825.tif 000027
方法Ｅ：
（Ｓ）−２−（７−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−酪酸
【０１２７】
【化３６】
2005533825.tif 000028
（Ｓ）−２−（７−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−酪酸第三級ブチルエステル（３２２ｍｇ）のジクロロメタン（１４ｍｌ）溶液を、０℃まで冷却した。トリフルオロ酢酸（３．５ｍｌ）を加え、得られた混合物を室温まで温め、そして２時間攪拌した。次いで、この混合物を減圧下にて濃縮し、その残留物をジクロロメタンに再溶解した。過剰のトリフルオロ酢酸を除去するために、このプロセスを数回繰り返した。得られた固形物をジエチルエーテルでスラリー化し、濾過し、そしてさらに多くのジエチルエーテルで洗浄した。次いで、この固形物を、真空下にて、一定重量まで乾燥した。これにより、白色固形物（２３６ｍｇ、８９％）として、副題生成物が得られた。
【０１２８】
【化３７】
2005533825.tif 000029
方法Ｆ：
（Ｓ）−３−［２−（７−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキン−２−イル）−ブチリルアミノ］−５−フルオロ−４−ヒドロキシ−ペンタン酸第三級ブチルエステル
【０１２９】
【化３８】
2005533825.tif 000030
（Ｓ）−２−（７−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−酪酸（１５ｇ）、３−アミノ−５−フルオロ−４−ヒドロキシ−ペンタン酸第三級ブチルエステル（これは、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３５、９６９３（１９９４）で記述のようにして、調製した）（１２．９ｇ）、ＨＯＢｔ（８．４ｇ）、ＤＭＡＰ（７．２ｇ）およびＴＨＦ（４５０ｍｌ）の攪拌混合物を０℃まで冷却し、次いで、ＥＤＣ（１１．９ｇ）を加えた。この混合物を１６時間にわたって室温まで温め、次いで、減圧下にて濃縮した。その残留物をフラッシュクロマトグラフィー（３０〜６０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、白色発泡体（２４．６ｇ、９６％）として、副題化合物を得た。
【０１３０】
【化３９】
2005533825.tif 000031
方法Ｇ：
（Ｓ）−３−［２−（７−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキン−２−イル）−ブチリルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸第三級ブチルエステル
【０１３１】
【化４０】
2005533825.tif 000032
３−［２−（７−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキン−２−イル）−ブチリルアミノ］−５−フルオロ−４−ヒドロキシ−ペンタン酸第三級ブチルエステル（４７．８ｇ）の無水ＤＣＭ（１．２Ｌ）攪拌溶液を、０℃で、１，１，１−トリアセトキシ−１，１−ジヒドロ−１，２−ベンズヨードキソール（ｂｅｎｚｉｏｄｏｘｏｌ）−３（１Ｈ）−オン（５３．５ｇ）で処理した。得られた混合物を、０℃で、２時間保持し、酢酸エチルで希釈し、次いで、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液およびチオ硫酸ナトリウム飽和水溶液の１：１混合物に注いだ。その有機層を除去し、その水層を酢酸エチルで再抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥し（硫酸マグネシウム）、濾過し、そして濃縮した。その残留物をフラッシュクロマトグラフィー（２０〜４０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、白色固形物（４１．９ｇ、８８％）として、副題化合物を得た。
【０１３２】
【化４１】
2005533825.tif 000033
（Ｓ）−３−［２−（７−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−ブチリルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸
【０１３３】
【化４２】
2005533825.tif 000034
これは、方法Ｅで記述した手順と類似の手順を使用して、調製した。その生成物を、白色固形物（９８％）として、単離した。
【０１３４】
【化４３−１】
2005533825.tif 000035
【０１３５】
【化４３−２】
2005533825.tif 000036
（実施例２）
（Ｓ）−３−［２−（７−トリフルオロメチル−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−ブチリルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸
【０１３６】
【化４４】
2005533825.tif 000037
これは、方法Ａ〜Ｇで記述した手順と類似の手順を使用して、調製した（２−ホルミル−５−トリフルオロメチル安息香酸は、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６１，３４０２（１９９６）で記述した手順と類似の手順を使用して、調製した）。その生成物を、白色固形物（最終工程で９３％）として、単離した。
【０１３７】
【化４５】
2005533825.tif 000038
（実施例３）
（Ｓ）−３−［２−（６−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−ブチリルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸
【０１３８】
【化４６】
2005533825.tif 000039
方法Ｈ：
４−クロロ−Ｎ−メチル−ベンズアミド
【０１３９】
【化４７】
2005533825.tif 000040
塩化４−クロロベンゾイル（４．５０ｇ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）０℃溶液に、メチルアミンの８Ｍエタノール溶液を滴下した。その溶液を１６時間攪拌し、次いで、乾燥状態まで蒸発させた。その残留物を炭酸水素ナトリウム飽和溶液（１０ｍＬ）で希釈し、そして酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で３回抽出し、それらの有機物をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、そして真空中で濃縮して、白色固形物（４．３３ｇ；９７％）として、副題化合物を得た。
【０１４０】
【化４８】
2005533825.tif 000041
方法Ｉ：
２−ホルミル−４−クロロ−Ｎ−メチルベンズアミド
【０１４１】
【化４９】
2005533825.tif 000042
４−クロロ−Ｎ−メチル−ベンズアミド（３．１ｇ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液に、ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍヘキサン溶液３０．１ｍＬ）を加え、そして、その溶液を４５分間還流した。次いで、その溶液を０℃まで冷却し、そして２分間にわたって、Ｎ−メチルホルムアニリン（９．２７ｍＬ）を滴下した。次いで、この溶液を２時間還流し、次いで、室温まで冷却し、水（８０ｍＬ）を加え、その溶液を２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ１まで酸性化した。次いで、この溶液を酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で３回抽出し、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、そして真空中で濃縮した。得られた褐色オイルをシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製して、淡黄色固形物（２．１３ｇ；５９％）として、副題生成物を得た。
【０１４２】
【化５０】
2005533825.tif 000043
方法Ｊ：
２−ホルミル−４−クロロ安息香酸
【０１４３】
【化５１】
2005533825.tif 000044
２−ホルミル−４−クロロ−Ｎ−メチルベンズアミド（３．１９ｇ）および１０Ｍ塩酸（３０ｍｌ）の混合物を、還流状態で、１８時間加熱した。この混合物を冷却し、そして飽和炭酸水素ナトリウム溶液で塩基化した。次いで、その溶液を酢酸エチルで洗浄し、次いで、２Ｍ塩酸で酸性化した。その生成物を酢酸エチルで抽出し、そして合わせた抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥した。次いで、その溶液を濾過し、そして濃縮した。これにより、黄色固形物（２．２２ｇ、７５％）として、２−ホルミル−４−クロロ安息香酸が得られた。
【０１４４】
【化５２】
2005533825.tif 000045
（Ｓ）−３−［２−（６−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−ブチリルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸
【０１４５】
【化５３】
2005533825.tif 000046
これは、方法Ａ〜Ｇで記述した手順と類似の手順を使用して、２−ホルミル−４−クロロ安息香酸（これは、方法Ｈ〜Ｊで記述したようにして、調製した）から調製した。この表題化合物を分取ＨＰＬＣで単離し、そして白色固形物として得た。
【０１４６】
【化５４】
2005533825.tif 000047
（実施例４）
（Ｓ）−３−［２−（６−トリフルオロメチル−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−ブチリルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸
【０１４７】
【化５５】
2005533825.tif 000048
これは、方法Ａ〜Ｇで記述した手順と類似の手順を使用して、２−ホルミル−４−トリフルオロメチル安息香酸（これは、方法Ｈ〜Ｊで記述した方法と類似の方法を使用して、４−トリフルオロメチル安息香酸から調製した）から調製した。この表題化合物を、白色固形物（最終工程で９５％）として、単離した。
【０１４８】
【化５６】
2005533825.tif 000049
（実施例５）
（Ｓ，Ｓ）−３−［２−（６−クロロ−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−ブチリルアミノ］−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）ペンタン酸
【０１４９】
【化５７】
2005533825.tif 000050
方法Ｋ：
（Ｓ）−２−（５−クロロ−２−ニトロ−ベンゾイルアミノ）−酪酸−第三級ブチルエステル
【０１５０】
【化５８】
2005533825.tif 000051
５−クロロ−２−ニトロ−安息香酸（４．６８ｇ）の無水テトラヒドロフラン（１００ｍｌ）攪拌溶液に、０℃で、（Ｓ）−２−アミノ−酪酸−第三級ブチルエステル塩酸塩（５ｇ）、ＨＯＢｔ（３．４５ｇ）、ＤＭＡＰ（２．９８ｇ）を加え、続いて、ＥＤＣ（４．８８ｇ）およびジイソプロピルエチルアミン（３．３０ｇ）を加えた。その反応混合物を１０分間攪拌し、次いで、室温まで温め、そして１６時間攪拌した後、減圧下で濃縮した。得られた残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）と炭酸水素ナトリウム飽和溶液（１００ｍｌ）との間で分配し、その有機層を分離し、そして１Ｍ塩酸および飽和ブライン溶液でさらに洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして濃縮して、淡黄色オイル（６．８２ｇ、収率６８％）として、副題化合物を得た。
【０１５１】
【化５９】
2005533825.tif 000052
方法Ｌ：
（Ｓ）−２−（２−アミノ−５−クロロ−ベンゾイルアミノ）−酪酸−第三級ブチルエステル
【０１５２】
【化６０】
2005533825.tif 000053
（Ｓ）−２−（５−クロロ−２−ニトロ−ベンゾイルアミノ）−酪酸−第三級ブチルエステル（５．７２ｇ、）のエタノール（２５０ｍｌ）攪拌溶液に、室温で、塩化スズ（ＩＩ）二水和物（１８．８ｇ）を加えた。その混合物を、室温で、１６時間攪拌した。減圧下にて容量を約５０ｍｌまで減らし、次いで、形成された沈殿物が再溶解するまで、反応混合物を１Ｍ  ＮａＯＨで希釈した（４００ｍｌ）。次いで、その水溶液をジエチルエーテル（３×１００ｍｌ）で抽出した。それらの有機抽出物を合わせ、そしてブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、そして濃縮して、黄色固形物（４．６０ｇ、収率８８％）として、副題化合物を得た。
【０１５３】
【化６１】
2005533825.tif 000054
方法Ｍ：
（Ｓ）−２−（６−クロロ−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酪酸−第三級ブチルエステル
【０１５４】
【化６２】
2005533825.tif 000055
２−（２−アミノ−５−クロロ−ベンゾイルアミノ）−酪酸−第三級ブチルエステル（２．８２ｇ）をオルトギ酸トリメチル（５０ｍｌ）に溶解した。酢酸（１０ｍｌ）を加え、その反応混合物を４８時間還流した。この後、溶媒を除去し、その残留物を酢酸エチと飽和炭酸水素ナトリウム溶液との間で分配した。その水層を酢酸エチルでさらに抽出し、そして合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、そして減圧下にて濃縮して、黄色オイルを得た。これを、フラッシュクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ：Ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ）で精製して、オイル（１．２３ｇ、収率４２％）として、副題化合物を得た。
【０１５５】
【化６３】
2005533825.tif 000056
【０１５６】
【化６４】
2005533825.tif 000057
２−（６−クロロ−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酪酸
【０１５７】
【化６５】
2005533825.tif 000058
方法Ｅで記述した手順と類似の手順を使用して、これを調製した。この副題化合物は、灰白色固形物として得た。
【０１５８】
【化６６】
2005533825.tif 000059
方法Ｎ：
（Ｓ）−３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０１５９】
【化６７】
2005533825.tif 000060
（Ｓ）−３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−５−ブロモ−４−オキソ−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１８．６ｇ）および２，３，５，６−テトラフルオロフェノール（９．３ｇ）の無水ＤＭＦ（２５０ｍＬ）攪拌溶液に、窒素下にて、室温で、フッ化カリウム（２．８ｇ）を少しずつ加えた。次いで、その混合物を１８時間攪拌した後、酢酸エチルおよび水でクエンチした。その有機層を除去し、そして炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、乾燥し（硫酸マグネシウム）、そして濃縮して、灰白色固形物（２１．１ｇ、９６％）として、副題生成物を得た。
【０１６０】
【化６８】
2005533825.tif 000061
方法Ｏ：
（３Ｓ）−３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−４−ヒドロキシ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０１６１】
【化６９】
2005533825.tif 000062
３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２１．１ｇ）の無水ＴＨＦ（２２０ｍＬ）攪拌溶液に、−２０℃で、窒素下にて、ＮａＢＨ４（１．６５ｇ）を少しずつ加えた。この温度で３時間攪拌した後、その反応物を、飽和塩化アンモニウム溶液を加えることによりクエンチし、そしてＤＣＭで希釈した。その有機層を除去し、その水層をＤＣＭで再抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥し（硫酸マグネシウム）、そして濃縮した。その残留物をカラムクロマトグラフィー（１０％〜２０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製した。白色固形物（１４．６ｇ、７３％）として、副題化合物を得た。
【０１６２】
【化７０】
2005533825.tif 000063
方法Ｐ：
（３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０１６３】
【化７１】
2005533825.tif 000064
３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−４−ヒドロキシ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１４．６ｇ）の無水ＭｅＯＨ（３５０ｍＬ）溶液（これは、窒素下（５×）にて、脱気した）に、炭素上１０％Ｐｄ（２．９２ｇ）を加えた。その反応物を、窒素下（３×）および水素下（５×）にて、さらに脱気し、そして室温で、２０分間攪拌した。このパラジウム触媒を濾過により除去し、その濾液を濃縮して、白色固形物（９．５ｇ、９０％）として、副題化合物を得た。
【０１６４】
【化７２−１】
2005533825.tif 000065
【０１６５】
【化７２−２】
2005533825.tif 000066
（Ｓ，Ｓ）−３−［２−（６−クロロ−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−ブチリルアミノ］−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸
【０１６６】
【化７３】
2005533825.tif 000067
この化合物は、方法Ｆ、ＧおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、調製した。白色固形物（ＴＦＡ塩）（９４％、最終工程）として、表題化合物を得た。
【０１６７】
【化７４】
2005533825.tif 000068
（実施例６）
（Ｓ，Ｓ）−４−オキソ−３−［２−（４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−ブチリルアミノ］−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）ペンタン酸
【０１６８】
【化７５】
2005533825.tif 000069
この化合物は、方法Ｆ、ＧおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、２−（４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酪酸（これは、方法Ｋ〜ＭおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、２−ニトロ安息香酸から合成した）および（３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（これは、方法Ｎ〜Ｐで記述したようにして、調製した）を使用して、調製した。白色固形物（ＴＦＡ塩）（８５％、最終工程）として、表題化合物を得た。
【０１６９】
【化７６】
2005533825.tif 000070
（実施例７）
（Ｓ，Ｓ）−４−オキソ−３−［２−（４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−ブチリルアミノ］−５−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸
【０１７０】
【化７７】
2005533825.tif 000071
この化合物は、方法Ｆ、ＧおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、２−（４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酪酸（これは、方法Ｋ〜ＭおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、２−ニトロ安息香酸から合成した）および（３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（これは、方法Ｎ〜Ｐで記述した手順と類似の手順を使用して、２，４，６−トリフルオロフェノールから調製した）を使用して、調製した。白色固形物（ＴＦＡ塩）（７１％、最終工程）として、表題化合物を得た。
【０１７１】
【化７８】
2005533825.tif 000072
（実施例８）
（Ｓ，Ｓ）−４−オキソ−３−［２−（４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−ブチリルアミノ］−５−（２，５，６−トリフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸
【０１７２】
【化７９】
2005533825.tif 000073
この化合物は、方法Ｆ、ＧおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、２−（４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酪酸（これは、方法Ｋ〜ＭおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、２−ニトロ安息香酸から合成した）および（３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−（２，３，６−トリフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（これは、方法Ｎ〜Ｐで記述した手順と類似の手順を使用して、２，３，６−トリフルオロフェノールから調製した）を使用して、調製した。白色固形物（ＴＦＡ塩）（８７％、最終工程）として、表題化合物を得た。
【０１７３】
【化８０】
2005533825.tif 000074
（実施例９）
（Ｓ，Ｓ）−３−［２−（１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−ブチリルアミノ］−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸
【０１７４】
【化８１】
2005533825.tif 000075
この化合物は、方法Ｆ、ＧおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、（Ｓ）−２−（１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−酪酸（これは、方法Ａ〜Ｅで記述した手順と類似の手順を使用して、２−ホルミル安息香酸から合成した）および（３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（これは、方法Ｎ〜Ｐで記述したようにして、調製した）を使用して、調製した。分取ＨＰＬＣにより、表題化合物を単離した。
【０１７５】
【化８２】
2005533825.tif 000076
（実施例１０）
（Ｓ，Ｓ）−３−［２−（７−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−ブチリルアミノ］−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸
【０１７６】
【化８３】
2005533825.tif 000077
この化合物は、方法Ｆ、ＧおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、（Ｓ）−２−（７−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−酪酸（これは、方法Ａ〜Ｅで記述したようにして、調製した）および（３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（これは、方法Ｎ〜Ｐで記述したようにして、調製した）を使用して、調製した。白色固形物（９４％、最終工程）として、生成物を単離した。
【０１７７】
【化８４−１】
2005533825.tif 000078
【０１７８】
【化８４−２】
2005533825.tif 000079
（実施例１１）
（Ｓ，Ｓ）−３−［２−（６、７−ジクロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−ブチリルアミノ］−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）ペンタン酸
【０１７９】
【化８５】
2005533825.tif 000080
方法Ｑ：
５，６−ジクロロ−３Ｈ−イソベンゾフラン−１−オン
【０１８０】
【化８６】
2005533825.tif 000081
無水４，５−ジクロロフタル酸（２０ｇ）の無水ＤＭＦ（１００ｍＬ）攪拌溶液に、０℃で、窒素下にて、１時間にわたって、ＮａＢＨ４（５．２ｇ）を少しずつ加えた。その反応物を、さらに２時間にわたって、室温まで温め、そして氷／１Ｍ  ＨＣｌに注いだ。得られた白色沈殿物（４，５−ジクロロ−２−ヒドロキシメチル−安息香酸）を濾過により集め、そして真空下にて乾燥した。この沈殿物を、触媒ｐ−トルエンスルホン酸と共にトルエン（２００ｍＬ）に懸濁し、そしてＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋ条件（沈殿物を加熱して溶解する）下にて、１８時間にわたって、加熱還流した。その反応物を室温まで冷却し、得られた白色沈殿物を濾過により集めて、白色固形物（１４．０ｇ、７５％）として、副題化合物を得た。
【０１８１】
【化８７】
2005533825.tif 000082
方法Ｒ：
３−ブロモ−５，６−ジクロロ−３Ｈ−イソベンゾフラン−１−オン
【０１８２】
【化８８】
2005533825.tif 000083
５，６−ジクロロ−３Ｈ−イソベンゾフラン−１−オン（１．４５ｇ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．２７ｇ）および触媒である過酸化ベンゾイルのクロロホルム（３０ｍＬ）懸濁液を、１時間にわたって、加熱還流した。冷却後、その反応混合物を水、ブラインで洗浄し、乾燥し（硫酸マグネシウム）、濾過し、そして濃縮して、白色固形物（１．８２ｇ、９１％）として、副題化合物を得た。
【０１８３】
【化８９】
2005533825.tif 000084
方法Ｓ：
４，５−ジクロロ−２−ホルミル−安息香酸
【０１８４】
【化９０】
2005533825.tif 000085
３−ブロモ−５、６−ジクロロ−３Ｈ−イソベンゾフラン−１−オン（２．０ｇ）の５％ＨＣｌ水溶液（１０ｍＬおよび８０％ジオキサン水溶液（２５ｍＬ）の懸濁液を、２時間にわたって、加熱還流した。溶媒を除去し、得られた残留物を酢酸エチルで再溶解し、乾燥し（硫酸マグネシウム）、そして濃縮した。得られた黄色固形物をＤＣＭ／ヘキサンで再結晶して、白色固形物（１．１３ｇ、７３％）として、副題化合物を得た。
【０１８５】
【化９１】
2005533825.tif 000086
（Ｓ，Ｓ）−３−［２−（６、７−ジクロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−ブチリルアミノ］−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸
【０１８６】
【化９２】
2005533825.tif 000087
この化合物は、方法Ｆ、ＧおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、（Ｓ）−２−（６，７−ジクロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−酪酸（これは、（Ｓ）−２−（６、７−ジクロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−酪酸（これは、方法Ａ〜Ｅで記述した手順と類似の手順を使用して、４，５−ジクロロ−２−ホルミル−安息香酸［これは、方法Ｑ〜Ｓで記述したようにして、調製した］から合成した）および（３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（これは、方法Ｎ〜Ｐで記述したようにして、調製した）を使用して、調製した。白色固形物（９４％、最終工程）として、表題化合物を単離した。
【０１８７】
【化９３−１】
2005533825.tif 000088
【０１８８】
【化９３−２】
2005533825.tif 000089
（実施例１２）
３−［（２Ｓ）−２−［６−（２−クロロ−フェノキシ）−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−ブチリルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸
【０１８９】
【化９４】
2005533825.tif 000090
方法Ｔ：
安息香酸２−ニトロ−５−（２−クロロフェノキシ）メチル
【０１９０】
【化９５】
2005533825.tif 000091
５−クロロ−２−ニトロ安息香酸メチルエステル（１ｇ、４．６ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（１５ｍｌ）攪拌溶液に、炭酸カリウム（０．９６ｇ）および２−クロロフェノール（０．６６ｇ）を加えた。その反応混合物を、９０℃で、１６時間攪拌した。この後、その反応混合物を酢酸エチル（５０ｍｌ）に注ぎ、そして水（５０ｍｌ）、ブライン（５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、そして蒸発させた。その残留物をフラッシュクロマトグラフィー（１：９の酢酸エチル：ペット（ｐｅｔ）エーテル）で精製して、黄色固形物（１．２２ｇ、収率８５％）として、副題化合物を得た。
【０１９１】
【化９６】
2005533825.tif 000092
方法Ｕ：
２−ニトロ−５−（２−クロロフェノキシ）安息香酸
【０１９２】
【化９７】
2005533825.tif 000093
安息香酸２−ニトロ−５−（２−クロロフェノキシ）メチル（１．２２ｇ）のＴＨＦ（８ｍＬ）攪拌溶液に、水（２ｍｌ）中の水酸化リチウム（０．３３３ｇ）を加えた。その反応混合物を、室温で、１６時間攪拌した。この後、この反応混合物を１Ｍ  ＨＣｌ水溶液で酸性化した。その水層を酢酸エチル（２×５０ｍＬ）で抽出した。それらの有機物を合わせ、そして飽和ブライン溶液で洗浄し、そして乾燥した（ＭｇＳＯ４）。真空下にて溶媒を除去して、灰白色固形物（０．６３ｇ、収率５４％）として、副題化合物を得た。
【０１９３】
【化９７Ａ】
2005533825.tif 000094
３−［（２Ｓ）−２−［６−（２−クロロ−フェノキシ）−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−ブチリルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸
【０１９４】
【化９８】
2005533825.tif 000095
この化合物は、方法Ｆ、ＧおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、２−（６−［２−クロロフェノキシ］−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酪酸（これは、方法Ｔ〜Ｕ、Ｋ〜ＭおよびＥで記述したようにして、５−クロロ−２−ニトロ安息香酸メチルエステルおよび２−クロロフェノールから合成した）から調製した。白色固形物（ＴＦＡ塩）（８２％、最終工程）として、表題化合物を得た。
【０１９５】
【化９９】
2005533825.tif 000096
（実施例１３）
３−［（２Ｓ）−２−［６−（３−クロロフェノキシ）−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−ブチリルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸
【０１９６】
【化１００】
2005533825.tif 000097
この化合物は、方法Ｆ、ＧおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、２−（６−［３−クロロフェノキシ］−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酪酸（これは、方法Ｔ〜Ｕ、Ｋ〜ＭおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、５−クロロ−２−ニトロ安息香酸メチルエステルおよび３−クロロフェノールから合成した）から調製した。白色固形物（ＴＦＡ塩）（８５％、最終工程）として、生成物を得た。
【０１９７】
【化１０１】
2005533825.tif 000098
（実施例１４）
５−フルオロ−３−｛（２Ｓ）−２［６−（３−フルオロフェノキシ）−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル］−ブチリルアミノ｝−４−オキソ−ペンタン酸
【０１９８】
【化１０２】
2005533825.tif 000099
この化合物は、方法Ｆ、ＧおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、２−［６−（３−フルオロフェノキシ）−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル］−酪酸（これは、方法Ｔ〜Ｕ、Ｋ〜ＭおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、５−クロロ−２−ニトロ安息香酸メチルエステルおよび３−フルオロフェノールから合成した）から調製した。白色固形物（ＴＦＡ塩）（９５％、最終工程）として、生成物を得た。
【０１９９】
【化１０３】
2005533825.tif 000100
（実施例１５）
３−｛（２Ｓ）−２−［６−（２，４−ジクロロ−フェノキシ）−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル］−ブチリルアミノ｝−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸
【０２００】
【化１０４】
2005533825.tif 000101
この化合物は、方法Ｆ、ＧおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、２−［６−（２，４−ジクロロフェノキシ）−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル］−酪酸（これは、方法Ｔ〜Ｕ、Ｋ〜ＭおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、２−ニトロ−５−２，４−ジクロロフェノキシ安息香酸メチルエステルから合成した）から調製した。白色固形物（ＴＦＡ塩）（９５％、最終工程）として、生成物を得た。
【０２０１】
【化１０５−１】
2005533825.tif 000102
【０２０２】
【化１０５−２】
2005533825.tif 000103
（実施例１６）
５−フルオロ−４−オキソ−３−［（２Ｓ）−２−（４−オキソ−６−フェニルスルファニル−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−ブチリルアミノ］−ペンタン酸
【０２０３】
【化１０６】
2005533825.tif 000104
この化合物は、方法Ｆ、ＧおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、（Ｓ）−２（４−オキソ−６−フェニルスルフェニル−４Ｈ−キナゾリン−３イル）−酪酸（これは、方法Ｔ〜Ｕ、Ｋ〜ＭおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、５−クロロ−２−ニトロ安息香酸メチルエステルおよびチオフェノールから合成した）から調製した。白色固形物（ＴＦＡ塩）（９６％、最終工程）として、生成物を得た。
【０２０４】
【化１０７−１】
2005533825.tif 000105
【０２０５】
【化１０７−２】
2005533825.tif 000106
（実施例１７）
５−フルオロ−３｛（２Ｓ）−２［６−（３−フルオロ−フェニルスルフェニル）−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル］−ブチリルアミノ｝−４−オキソ−ペンタン酸
【０２０６】
【化１０８】
2005533825.tif 000107
この化合物は、方法Ｆ、ＧおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、（Ｓ）−２［６−（３−フルオロ−フェニルスルファニル）−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル］−酪酸（これは、方法Ｔ〜Ｕ、Ｋ〜ＭおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、５−クロロ−２−ニトロ安息香酸メチルエステルおよび３−フルオロチオフェノールから合成した）から調製した。白色固形物（ＴＦＡ塩）（９５％、最終工程）として、生成物を得た。
【０２０７】
【化１０９−１】
2005533825.tif 000108
【０２０８】
【化１０９−２】
2005533825.tif 000109
（実施例１８）
（Ｓ）−３−［２−（７−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−３−メチルブチリルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸
【０２０９】
【化１１０】
2005533825.tif 000110
これは、方法Ａ〜Ｇで記述した手順と類似の手順を使用して、調製した（Ｓ−バリンｔｅｒｔ−ブチルエステルは、方法Ｃで使用した）。白色固形物（９１％、最終工程）として、生成物を得た。
【０２１０】
【化１１１】
2005533825.tif 000111
（実施例１９）
（Ｓ，Ｓ）−３−［２−（７−トリフルオロメチル−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−ブチリルアミノ］−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）ペンタン酸
【０２１１】
【化１１２】
2005533825.tif 000112
この化合物は、方法Ｆ、ＧおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、（Ｓ）−２−（７−トリフルオロメチル−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−酪酸（これは、方法Ａ〜Ｅで記述したようにして、調製した（実施例２を参照））および（３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（これは、方法Ｎ〜Ｐで記述したようにして、調製した）を使用して、調製した。白色固形物（９０％、最終工程）として、生成物を単離した。
【０２１２】
【化１１３】
2005533825.tif 000113
（実施例２０）
（Ｓ，Ｓ）−３−［２−（７−トリフルオロメチル−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−ブチリルアミノ］−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸
【０２１３】
【化１１４】
2005533825.tif 000114
方法Ｖ：
（Ｓ）−２−（２−ベンジルアミノ−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０２１４】
【化１１５】
2005533825.tif 000115
（Ｓ）−２−（２−クロロ−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（これは、方法Ｆで記述した手順と類似の手順で、２−クロロ５−トリフルオロメチル安息香酸および（Ｓ）−２−アミノ酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルから調製した）（３ｇ）およびベンジルアミン（１．１ｍｌ）のＮ−メチルピロリジン（４０ｍｌ）溶液に、炭酸カリウム（１．６ｇ）、銅（３０ｍｇ）および臭化銅（Ｉ）（１５ｍｇ）を加えた。その混合物を、１６０℃で、３時間加熱し、次いで、室温まで冷却し、そして飽和塩化アンモニウム溶液で希釈した。この混合物を酢酸エチルで抽出し、その有機溶液を乾燥し（硫酸マグネシウム）、濾過し、そして濃縮した。その残留物をシリカゲル（これは、１５％酢酸エチル／ヘキサンで溶出する）で精製した。白色固形物（９５０ｍｇ、２７％）として、副題生成物を得た。
【０２１５】
【化１１６】
2005533825.tif 000116
（Ｓ）−２−（６−トリフルオロメチル−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酪酸
【０２１６】
【化１１７】
2005533825.tif 000117
この化合物は、方法Ｐ、ＭおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、（Ｓ）−２−（２−ベンジルアミノ−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルから調製した。白色固形物として、副題化合物を得た。
【０２１７】
【化１１８】
2005533825.tif 000118
（Ｓ，Ｓ）−３−［２−（７−トリフルオロメチル−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−ブチリルアミノ］−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸
【０２１８】
【化１１９】
2005533825.tif 000119
この化合物は、方法Ｆ、ＧおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、２−（６−トリフルオロメチル−４−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酪酸および（３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロ−フェノキシ）−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（これは、方法Ｎ〜Ｐで記述したようにして、調製した）から調製した。白色固形物（ＴＦＡ塩）（９０％、最終工程）として、表題化合物を得た。
【０２１９】
【化１２０】
2005533825.tif 000120
（実施例２１）
（Ｓ）−３−［２−（７−フェニル−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−ブチリルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸
【０２２０】
【化１２１】
2005533825.tif 000121
方法Ｗ：
（Ｓ）−２−（７−フェニル−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−酪酸
【０２２１】
【化１２２】
2005533825.tif 000122
（Ｓ）−２−（７−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−酪酸（これは、方法Ａ〜Ｅで記述したようにして、調製した）（２００ｍｇ）およびフェニルボロン酸（２７６ｍｇ）のＴＨＦ（２ｍｌ）溶液に、酢酸パラジウム（ＩＩ）（１．７ｍｇ）、２−（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ）ビフェニル（４．５ｍｇ）およびフッ化カリウム（２６２ｍｇ）を加えた。得られた混合物を１８時間加熱還流し、次いで、冷却し、そして１Ｍ  ＨＣｌ（５ｍｌ）および酢酸エチル（１５ｍｌ）で希釈した。その有機相を分離し、そして水相を酢酸エチル（２×１５ｍｌ）で抽出した。合わせた有機物を乾燥し（硫酸マグネシウム）、濾過し、そして濃縮した。その残留物をシリカゲルプラグで精製し、次いで、放射状クロマトグラフィー（これは、酢酸エチル中の１％酢酸で溶出する）でさらに精製した。これにより、褐色固形物（１５３ｍｇ、６６％）として、副題化合物が得られた。
【０２２２】
【化１２３】
2005533825.tif 000123
（Ｓ）−３−［２−（７−フェニル−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−ブチリルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸
【０２２３】
【化１２４】
2005533825.tif 000124
この化合物は、方法Ｆ、ＧおよびＥで記述した手順と類似の手順を使用して、（Ｓ）−２−（７−フェニル−１−オキソ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−酪酸から調製した。白色固形物（５８％、最終工程）として、表題化合物を得た。
【０２２４】
【化１２５】
2005533825.tif 000125
（実施例２２）
５−フルオロ−４−オキソ−３−［（２Ｓ）−２−（４−オキソ−６−プロピルスルファニル−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−ブチリルアミノ］−ペンタン酸
【０２２５】
【化１２６】
2005533825.tif 000126
（Ｓ）−２−（４−オキソ−６−プロピルスルファニル−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０２２６】
【化１２７】
2005533825.tif 000127
この化合物は、方法Ｔ〜ＵおよびＫ〜Ｍで記述した手順と類似の手順を使用して、５−クロロ−２−ニトロ安息香酸メチルエステルおよびプロパンチオールから調製した。固形物として、副題化合物を得た。
【０２２７】
【化１２８】
2005533825.tif 000128
５−フルオロ−４−オキソ−３−［（２Ｓ）−２−（４−オキソ−６−プロピルスルファニル−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−ブチリルアミノ］−ペンタン酸
【０２２８】
【化１２９】
2005533825.tif 000129
この化合物は、方法Ｆで記述した手順と類似の手順を使用して、（Ｓ）−２−（４−オキソ−６−プロピルスルファニル−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酪酸（これは、ＴＦＡ／ＤＣＭを使用して、ｔｅｒｔ−ブチルエステルから合成した）から調製した。得られたアルコールを、過ルテニウム酸テトラ−ｎ−プロピルアンモニウム（ＶＩＩ）／Ｎ−メチルモルホリン−Ｎ−オキシド（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、６３９（１９９４））およびｔｅｒｔ−ブチルエステル（これは、方法Ｅで記述したようにして、脱保護した）を使用して、酸化した。白色固形物（９０％、最終工程）（ＴＦＡ塩）として、表題化合物を得た。
【０２２９】
【化１３０】
2005533825.tif 000130
（実施例２３）
（酵素アッセイ）
カスパーゼ阻害アッセイは、精製した組換えヒトカスパーゼ−１、−３、−７または−８による蛍光発生基質の開裂に基づいている。これらのアッセイは、各酵素に特異的な基質を使用して、Ｇａｒｃｉａ  Ｃａｌｖｏら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７３，３２６０８〜３２６１３（１９９８））が報告した様式とほぼ同じ様式で、実行される。カスパーゼ−１用の基質は、アセチル−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−アミノ−４−メチルクマリンである。カスパーゼ−３、−７および−８用の基質は、アセチル−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−アミノ−４−メチルクマリンであり、両方とも、Ｇａｒｃｉａ−Ｃａｌｖｏら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．で開示されている。
【０２３０】
特定のインヒビター濃度で観察された酵素不活性化速度（ｋｏｂｓ）は、非線形最小二乗分析コンピュータープログラム（ＰＲＩＳＭ  ２．０；ＧｒａｐｈＰａｄソフトウェア）を使用して、Ｔｈｏｒｎｂｅｒｒｙら（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３３，３９４３〜３９３９（１９９４））により誘導された等式にデータを直接当てはめることにより、算出される。二次速度定数ｋｉｎａｃｔを得るために、ｋｏｂｓ値を、それらの各インヒビター濃度に対してプロットし、そしてｋｉｎａｃｔ値を、引き続いて、算出した線形回帰により、計算する。
【０２３１】
表２は、上記方法により決定した本発明の選択した化合物についてのカスパーゼ−１、−３および−８活性の阻害を示す。ｋｉｎａｃｔ（Ｍ−１ｓ−１）＞５０００００を有する化合物は、「Ａ」と記入されている。１０００００と５０００００の間のｋｉｎａｃｔ（Ｍ−１ｓ−１）を有する化合物は、「Ｂ」と記入されている。ｋｉｎａｃｔ（Ｍ−１ｓ−１）＜１０００００を有する化合物は、「Ｃ」と記入されている。
【０２３２】
（表２．カスパーゼ−１、−３および−８の阻害）
【０２３３】
【化１３１−１】
2005533825.tif 000131
【０２３４】
【化１３１−２】
2005533825.tif 000132
（実施例２４）
（全血からのＩＬ−１β分泌の阻害）
ヒト血液を、健常なドナーから新たに採血し、ＰＢＳで１：２希釈する。５００μｌの希釈血液に、予めＲＰＭＩ培地に希釈した試験化合物５０ｍｌおよびＬＰＳ  １０ｍｌ（プレート上での最終濃度５ｎｇ／ｍｌ）を添加する（ＬＰＳ，Ｓｅｒｏｔｙｐｅ  ０１１１：Ｂ４，Ｓｉｇｍａ  Ｌ３０１２）。１８時間刺激した後、上清を収集し、適切なＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ）を用いてＩＬ−１βレベルをアッセイした。
【０２３５】
以下の表３は、上記方法により決定した場合の、本発明の選択された化合物についての、ヒト全血からのＩＬ−１β分泌の阻害を示す。ＩＣ５０＞１０μＭの化合物を「Ａ」として列挙する。ＩＣ５０が１μＭ〜１０μＭの化合物を、「Ｂ」として列挙する。ＩＣ５０＜１μＭの化合物を、「Ｃ」として列挙する。
【０２３６】
（表３．ＩＬ−１β分泌の阻害）
【０２３７】
【化１３２−１】
2005533825.tif 000133
【０２３８】
【化１３２−２】
2005533825.tif 000134
（実施例２５）
（ラット皮質ニューロンの低酸素誘導アポトーシス）
皮質神経を、Ｒｏｇｅｒｓら，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．Ｂｕｌｌｅｔｉｎ，４４：１３１（１９９８）の改良手順により、Ｗｉｓｔａｒラットの胚（Ｅ１７）から切除する。簡単に言うと、１５〜２０個のＷｉｓｔａｒラットの胚から大脳皮質を無菌的に隔離する。大脳皮質を刻み、パパイン消化することによって、細胞懸濁物を調製する。細胞を、オボムコイド酵素インヒビターおよびＤＮａｓｅＩで洗浄し、そして１０％熱不活性化ウシ胎仔血清、Ｌ−グルタミン、ペニシリン、およびストレプトマイシンを含有する高グルコースＤＭＥＭ中の、ポリ−Ｄリジンコートプレート上にプレーティングする。ニューロンの収率は、１０×７／胚であり、トリパンブルー除去法により評価した場合、それらは８０〜９０％生存率である。
【０２３９】
このニューロンを、低酸素実験前に、３７℃、通常大気中で、４８時間、完全培地中で培養する。低酸素のために、通常の細胞培地を、酸素枯渇無血清培地で置換する。細胞を、異なる時間、９５％  Ｎ２／５％  ＣＯ２の雰囲気下でインキュベートする。化合物を、ＤＭＳＯ中に１００ｍＭに溶解し、次いで、培地中で希釈し、そして時間＝０から培養物に添加する。アポトーシスレベルを、ＤＮＡの断片化を検出するＣｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ＥＬＩＳＡキット（Ｒｏｃｈｅ）を用いて測定する。プレートを、４０５ｎｍで読み取る。コントロールは、血清含有培地（＋血清）中、有酸素条件下で培地した細胞、および血清枯渇培地（−血清）中、有酸素条件下で培養した細胞を含んだ。
【０２４０】
表４は、ラット皮質ニューロンの低酸素誘導アポトーシスにおける、本発明の選択された化合物の活性の結果を示す。ＩＣ５０＞０．５μＭの化合物を「Ａ」として列挙する。ＩＣ５０が０．１μＭ〜０．５μＭの化合物を、「Ｂ」として列挙する。ＩＣ５０＜０．１μＭの化合物を、「Ｃ」として列挙する。
【０２４１】
（表４．低酸素誘導アポトーシスアッセイにおける活性）
【０２４２】
【化１３３−１】
2005533825.tif 000135
【０２４３】
【化１３３−２】
2005533825.tif 000136
本発明者らは、本発明の多数の実施態様を記述したものの、本発明の基本的な構成は、本発明の化合物および方法を使用する他の実施態様を提供するために、変更し得ることが明らかである。従って、本発明の範囲は、上記例として先に提示した特定の実施態様ではなく、添付した請求の範囲により規定されることが分かる。
【国際調査報告】
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2005533825.tif 000149
2005533825.tif 000150