(57)【要約】光ピンセットの静止したアレイを用いて、粒子の流れを横方向に偏向及び／又は分離する方法及び装置を提供する。格子定数が対象とする粒子の寸法よりも大きい光ピンセットのアレイでは、外力によりアレイを通って駆動される粒子はアレイのトラップと別の相互作用を受ける。外力に対してトラップのアレイの角度を変更することによって、粒子のアレイ内でのトラップからトラップへ移動は外力の方向から離れるようにバイアスを加えることができ、これにより、粒子の選択的な偏向及び／又は分離を行うことができる。
2005502482.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
粒子を制御して偏向する装置であって、
複数の粒子のソースと、
前記複数の粒子に加えられる力のソースからの外部の力と、
前記ソースからの力の方向に関連した傾斜角に向けられた光ピンセットのアレイと、
を備えることを特徴とする装置。
【請求項２】
請求項１に記載の装置であって、前記傾斜角が粒子の流速を最適にするように選択されることを特徴とする装置。
【請求項３】
請求項１に記載の装置であって、前記光ピンセットのアレイが、それぞれが電位の深さを有し、前記外部の力に対して選択された不整合を確立するためのパターンで配列される複数の光学的電位井戸を含むことを特徴とする装置。
【請求項４】
請求項３に記載の装置であって、前記光ピンセットのアレイが、前記複数の光ピンセットのために少なくとも２つの異なる電位井戸の深さを含むことを特徴とする装置。
【請求項５】
請求項１に記載の装置であって、前記傾斜角が粒子の偏向方向を選択するために調整可能であることを特徴とする装置。
【請求項６】
請求項５に記載の装置であって、前記偏向角度が粒子の寸法、粒子が処理された媒体の屈折率、粒子の形状、粒子の濃度及び粒子の界面化学の少なくとも１つにより変化することを特徴とする装置。
【請求項７】
請求項１に記載の装置であって、前記外部の力が、前記外部の力の方向から粒子の偏向角度を修正するように調整されることを特徴とする装置。
【請求項８】
請求項１に記載の装置であって、粒子の運動の制御が前記光ピンセットのためにレーザ光の輝度を変化させるレーザビームの光源によって得られることを特徴とする装置。
【請求項９】
請求項８に記載の装置であって、適当なレーザ光の輝度を選択することによって、大きな粒子を小さい粒子から選択的に分離することができることを特徴とする装置。
【請求項１０】
請求項１に記載の装置が、前記粒子をさらに偏向するために前記光ピンセットの別の段階をさらに含むことを特徴とする装置。
【請求項１１】
請求項１に記載の装置であって、前記粒子がコロイド粒子、高分子、生物学的細胞、生物学的小器官、染色体、及びその混合体から成るグループから選択されることを特徴とする装置。
【請求項１２】
粒子の動きを制御する方法であって、
粒子に流れを与えるステップと、
前記粒子に外部の力を加えるステップと、
前記外部の力の方向に関連した角度で傾斜した光ピンセットのアレイを作るステップと、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１３】
請求項１２に記載の方法が、前記光ピンセットのアレイを作るために使用されるレーザビームの輝度を変化させるステップをさらに含み、これにより、前記粒子の流れを制御することを特徴とする方法。
【請求項１４】
請求項１２に記載の方法が、前記外部の力の強度を変更するステップをさらに含み、これにより、前記粒子の流れを制御することを特徴とする方法。
【請求項１５】
請求項１２に記載の方法であって、前記粒子が寸法、形状、濃度、電荷、磁化率、磁化能率、誘電率、及び前記外部の力、レーザビームの輝度及び光ピンセットのアレイの少なくとも１つに対応して変化できる非線形の光学特性の少なくとも１つに対して範囲を有し、これにより、前記粒子に対する偏向角度の範囲を作ることを特徴とする方法。
【請求項１６】
請求項１２に記載の方法であって、前記角度が前記粒子の流速を変化するように調整されることを特徴とする方法。
【請求項１７】
請求項１２に記載の方法であって、偏向が連続的に発生することを特徴とする方法。
【請求項１８】
請求項１２に記載の方法であって、レーザ光が前記光ピンセットのアレイを形成するために提供され、前記レーザ光の波長が粒子の動きを制御するように調整されることを特徴とする方法。
【請求項１９】
請求項１２に記載の方法であって、前記光ピンセットのアレイ、前記外部の力及び傾斜角の少なくとも１つが粒子が流れるときに動的に変更されることを特徴とする方法。
【請求項２０】
請求項１２に記載の方法であって、前記粒子がコロイド粒子、高分子、生物学的細胞、生物学的小器官、染色体、及びその混合体から成るグループから選択されることを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、国立科学財団によって与えられた交付番号ＤＭＲ−９７３０１８９のもとで、また交付番号ＤＭＲ−９８８０５９５のもとで国立科学財団のＭＲＳＥＣプログラムを通して、米国政府の支援によりなされたものである。米国政府も本発明に対して一定の権利を有している。
【０００２】
［発明の分野］
本発明は、全体的に、粒子の分別を実現するシステム及び方法に関する。より詳細には、本発明は光トラップの静止したアレイを使用して粒子の横方向の分別及び／又は分離を実現するシステム及び方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
限定された環境の中で粒子を分別することができる多数の技術が、従来から知られている。例えば、そのような技術の１つには、ＤＮＡを分離するための二次元格子の障害物又は障壁から成る微細加工されたふるいを使用することが含まれる。障害物又は障壁を非対称的に配置することにより、ふるいを通過するＤＮＡ分子のブラウン運動が修正され、その結果として粒子は存在するＤＮＡのそれぞれの拡散係数に依存する経路を流れるようにされる。この技術は適度に効率的ではあるが、多数の制約がある。例えば、格子が微細加工されているため、全体的な構造は分別される粒子の種類及び寸法を調整することができない。さらに、そのような格子は詰まる傾向があるため、システムを水で洗い流して再始動させる必要がある。
【０００４】
さらに、粒子を分別するための多くの従来の技術は、印加された力の方向に沿って様々な断片を物理的に分離してしまう。このため、それらの技術はサンプルを不連続に一括処理することになり、連続的に動作しない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従って、本発明の目的は、調整可能で連続的な流れている粒子を横方向に偏向するための改良されたシステム及び方法を提供することである。
【０００６】
本発明の別の目的は、粒子が容易に詰まることがない、横方向に偏向する粒子に対する改良されたシステム及び方法を提供することである。
【０００７】
本発明のさらに別の目的は、粒子を精製及び分離するために使用できる改良されたシステム及び方法を提供することである。
【０００８】
本発明のさらに別の目的は、蛋白質を精製及び分離するために使用できる、粒子を横方向に偏向するための改良されたシステムを提供することである。
【０００９】
本発明の別の目的は、寸法、形状、誘電率、面電荷密度、磁化率、非線形の光学的特性、及び屈折率によって、小さい粒子を物理的に分離できる改良されたシステムを提供することである。
【００１０】
本発明のさらに別の目的は、流れている粒子を横方向に偏向するための、可動部品の数を最小にした改良されたシステム及び方法を提供することである。
【００１１】
本発明のさらに別の目的は、染色体を分離するために使用できる、粒子を横方向に偏向するための改良されたシステム及び方法を提供することである。
【００１２】
本発明のさらに別の目的は、ＤＮＡを大きさで分類するために使用できる、粒子を横方向に偏向するための改良されたシステム及び方法を提供することである。
【００１３】
本発明の別の目的は、高分子及び／又はナノクラスタ（nanocluster）又は多のナノサイズの材料を精製及び／又は分離するために使用することもできる、粒子を横方向に偏向するための改良されたシステム及び方法を提供することである。
【００１４】
本発明のさらなる利点及び特徴は、下記の明細書、特許請求の範囲及び本発明の好ましい実施形態を示している図面から明らかになるであろう。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明の実施形態を明らかにするために、本発明の１つの実施形態の方法論及び機能が説明される。この実施形態を説明する方法は、当業者に本発明の動作を説明する１つの厳密な方法であるが、別の説明を使用して本発明の実施形態を特徴付ける同じ結果を説明することもできる。従って、本発明は下記の明細書及び図面によるその動作の説明に限定されるものではない。
【００１６】
本発明を包括的に理解するために、図１Ａに示すようなホログラフィック光ピンセットシステム１０及び結果として生ずる個々の光ピンセット１１２の正方形のアレイ１１０を考えることが役に立つ。システム１０はレーザビーム２０を含む。このレーザビーム２０は、回折光学素子３０を通過し、次にリレーレンズ４０により処理され、ダイクロイックミラー５０で反射される。次にレーザビーム２０は対物レンズ６０によって光トラップの中に集束される。この光トラップ（図示せず）はサンプルチャンバ７０の中に形成され、トラップされた粒子のアレイ（図示せず）は、コンデンサレンズ８０、対物レンズ６０、ビデオアイピース（video eyepiece）８５及び電荷結合素子のカメラ９０を含む従来の光顕微鏡システムによって観察される。
【００１７】
このようにして光ピンセットシステム１０は、図１Ｂに示すように、個別の光ピンセット１１２の正方形のアレイ１１０を生成する。これらの光ピンセット１１２は、これに限定されるわけではないが、光ピンセット１１２間の距離が対象とする粒子１１３の大きさよりも一般にいくらか大きな格子定数を示す。バイアス源１１７からの外力によってアレイ１１０を通過するように駆動された粒子１１３は、アレイ１１０の個々のトラップ１１２との別の相互作用を受ける。トラッピング力が外部の駆動力よりもかなり大きい場合は、粒子１１３は拘束されることになる。他方、外力の方が大きい場合は、粒子１１３はほとんど攪乱されることなく粒子の軌跡に沿ってアレイ１１０を通って流れる。好ましい実施形態は、外力がサンプル内の全ての粒子１１３に対してトラッピング力を超えるが、サンプルの異なる断片に対しては程度が異なるような、中間の方式で動作する。
【００１８】
これらの条件のもとで、外力により粒子１１３はトラップ１１２の１つから別のトラップに移動され、特定の粒子１１３の特性の場合には、光トラップ１１２と外力との相対的な強弱度によって、時折ある期間停止する。外力がトラッピングアレイ１１０の主軸と整列する場合、結果として生ずる移動の軌跡はこの外力と整列される。他方、トラップの軸が外力の方向に対して回転される場合は、粒子の移動を外力の方向から離れるようにバイアスすることができる。そのような偏向は、タイプＩＩ形の超伝導体を通って流れる磁束量子についてのコンピュータシミュレーションの中で示されており、周期的なジョセフソン接合のアレイにおいて横方向の電圧の勾配が現れることから間接的に推論されてきた。２つの理由、すなわち、（１）正及び負の変位は等しい確率で起こり得ること又は（２）粒子はアレイを通って斜めにジャンプし、［１１］方向に固定されること、の１つのために、アレイが４５°まで回転すると、正味の偏向はゼロに戻る。
【００１９】
図３及び図４は、外部のバイアス力の方向１１６に対して傾斜角θを有する（図１Ｃも参照のこと）トラップ１１２のアレイ１１０を通って移動する個々の粒子を図示又は説明する全般的な図面である。図３及び図４から分かるように、アレイ１１０の相対的な傾斜角θに基づいて、個々の粒子１１３を正及び負の両方の横方向に偏向することができる。
【００２０】
図２Ａは、光トラップすなわち光ピンセット１１２の各々の間隔が約２．４μｍの、光ピンセット１１２の１０×１０のアレイ１１０を通過する、直径が１．５μｍの球形のシリカ粒子１１３の軌跡１１５を有するシステム１０を使用する場合の実施例を示す。「ｙ」軸は約５３μｍ、「ｘ」軸は約７８μｍを表示する。この図面では、圧力勾配により、粒子１１３が左から右に約３０μｍ／秒の速度で駆動されている。アレイ１１０の傾斜角がほぼゼロ度の場合は、粒子１１３はほとんど横方向に移動せずに軌跡（左から右）の中に固定される。図２Ａ〜図２Ｄに示す測定された粒子の軌跡も、左から右に方向付けられた印加された流れの方向に向けられている。
【００２１】
このため、図２Ａは、流れが［１０］の格子方向に沿って整列した約１０００個の球体（粒子１１３）の軌跡を示す。粒子１１３はアレイの境界を約３μｍ超えて伸びる領域からピンセット１１２の行の中に引かれて、その後［１０］の行に最後まで従う。横方向の変動はトラッピング電位によって大いに抑制され、一方粒子の長手方向の動きは、個々の光電位井戸の中での短い不規則な休止によってのみ中断される。粒子１１３が横方向のジャンプを行うために必要な時間は、粒子１１３が［１０］の行をほとんど離れない縦方向のジャンプの間隔よりもはるかに大きい。この粒子の軌跡に対する個別のトラッピング電位の影響により、運動的に固定された状態が構成される。粒子１１３がピンセット１１２の配列を通って移動すると、それらは大きな流れに戻り、それらの軌跡は最終的には拡散を通して互いの中に不明確になってしまう。
【００２２】
回折光学素子３０を角度θ回転させると、トラップの特性を変えることなく、流れの方向に対してピンセット１１２のパターンも回転する。図２Ｂは、流れに対してθ＝５°に向けられた光ピンセット１１２を使用した同じサンプルを示す。図２Ａと同様に、粒子の軌跡は、アレイの［１０］の行に接近して固定されたままである。しかしながら、図２Ａの実施例とは異なり、この場合、軌跡は流れの方向から離れるように整然と偏向される。この偏向はアレイの下流側にはっきりした影を残す。このアレイでは、横にそれる粒子１１３はわずかである。
【００２３】
さらに回転すると、アレイの影響が著しく変化する。図２Ｃは、他の条件は変えずに、θ＝３７°まで回転させたアレイを示す。正の偏向に対する下記の［１０］格子の行ではなく、粒子１１３はここでは［１１］格子の方向に固定されて、後退する偏向を受ける。この［１０］から［１１］への固定された状態の交差は、異なる局所的な電位エネルギーのランドスケープ（potential energy landscape）を反映し、粒子１１３は異なる方向に沿うような強制を受ける。２２．５°の幾何学的に決定された交差点を超える或るしきい値の角度では、［１１］移動に対するジャンプ比率は、粒子１１３が斜めの軌跡に固定されるような十分大きなマージンによって［１０］移動の比率を超える。図２Ｄに示すように、なおさらにθ＝４５°まで回転させると偏向の程度が減少し、一方［１１］格子方向に対する軌跡の整列が向上される。
【００２４】
運動学的に固定された状態は、回転が大きくなると移動特性に対する影響が長手方向の移動におけるプラトーのデビルの階段（Devil's staircase）を形成すると予想されるような階層を形成すると信じられている。［１０］及び［１１］方向に固定された状態に対する発明者らの観察は、これらの階層の主要なプラトーに対応する。
【００２５】
発明者らは、回転角度θを単調に増加することにより変化する横方向の偏向のサインも観察する。このことは、磁界が増加すると周期的に変調される二次元の電子ガスのホール係数（Hall coefficient）に対するサインの変化が予測されないような他のシステムとは異なっている。実際にそのようなサインの逆転が電子システムの簡単なパターンニングによって得られるならば、その効果は有利なものであり、磁気データの検索の中で広範にわたるアプリケーションを持つことができるであろう。
【００２６】
図５のデータ点及び接続する実線は、システム１０の中で粒子１１３が受ける加えられたトラッピング力が比較的強い場合に粒子１１３が得た相対的な横方向の速度を示している。他方、点線は、加えられた力１１７がトラッピング力よりも強い場合に、同じ粒子１１３に対して期待される横方向の偏向がない場合を示す。図５は、所定のレーザパワー及び外部の駆動力１１７に対して回転角度θを変えることによって、横方向の偏向の量及び方向を最適化することができることも示している。レーザパワーを減少させると、得ることができる最大の偏向を減らすことになり、レーザ２０をオフにすると（図１Ａを参照のこと）偏向は起きなくなる。図５からも分かるように、傾斜角θが約０°又は約２２．５°の場合は横方向の偏向は事実上ほとんどなく、またθが約４５°の場合も偏向はない。しかしながら、傾斜角が約２２．５°の場合には横方向の偏向がないことにも注意されたい。実験に基づいたデータは、所定の粒子の寸法及びパワーの大きさに対して、最大量の横方向の偏向は傾斜角が約１７°に近付いたときに発生することを示している。傾斜角が約２２．５°を通過すると、粒子１１３の横方向の偏向方向は完全に変えられる。実験に基づいたデータは、この反対方向の最大の偏向は傾斜角が３０°に近付くときに発生することを示しているが、この最大の偏向は１７°で発生する最大の偏向よりもかなり小さい。向きに対して横方向の偏向が非単調的に依存することは明らかに消されている。中間及びより小さな角度における他の可能な固定の向きは、現在の寸法のシステムでは消散させることは難しい。基本的には、光ピンセット１１２のより大きなアレイを通って移動することは、他のシステムに対して予想されたデビルの階段に恐らく似通った、より広い範囲の固定された状態の階層を示すであろう。
【００２７】
後で提供される実施例の中でより詳細に説明するが、本発明による受動的で光学的に誘導された横方向の偏向が、デモナイズドウォーター（demonized water）の中に分散された直径が１．５μｍのコロイド状のシリカの球体の懸濁液の中で観察された。光ピンセット１１２の１０×１０のアレイが、標準的なホログラフィック光ピンセット（ＨＯＴ）の光学縦列（optical train）の中で、波長が５３２ｎｍで７３ｍＷのレーザ光によって照射された固定したコンピュータで作った回折グレーティングを用いて作成された。粒子１１３は、密閉されたサンプルチャンバ７０の中の平行なガラスの壁の間に収容された。流れは、サンプルチャンバ７０を横切る圧力差を用いて作られた。７８ｘ５３μｍ2の視野全体の粒子の軌跡はディジタル化される前にビデオテープに記録され、従来から知られている画像分析技術を用いて分析された。
【００２８】
横方向に偏向された粒子１１３は、本発明に基づいて様々な方法で収集することができる。これらの方法には、マイクロ流体チャネル（microfluidics channel）を使用する方法が含まれる。アレイによって偏向されない粒子１１３は、恐らく光トラップと強く相互に作用しないため又は外力とより強く相互作用し合うために偏向されず、このため収集されない。この区別する動作により、大きさ、対称性、長さ、及び光トラップのアレイの強度を含む制御パラメータを用いる、粒子の物理的な特性の非常に一般的な考えに基づいて、粒子１１３を分別することができる。図２Ａ〜図２Ｄに示した実施例では、外力が流体力学の抵抗によって与えられた。さらに、粒子の分離は、駆動力、レーザビームの強度、及び光の傾斜状態に対する感度に基づいて達成することができる。この場合、粒子の感度変数（particle sensitive variable）は粒子の寸法、粒子の形状、誘電率、表面上の変化密度、磁化率、非線形光学特性、及び屈折率である。
【００２９】
レーザの輝度を減らすこと又は外部の駆動力を増加することのいずれかによってトラップの抗力を低下することにより、何らかの方法で固定された粒子１１３は、ある行のピンセット１１２から次の行のピンセットへ一層容易に渡ることができる。これにより、所定の角度、従って、最大偏向の角度及び最大偏向それ自体に対して固定するモードの程度が、最後に何も残らなくなるまで減少される。このしきい値は、アレイの範囲とは無関係でなければならない。
【００３０】
ディピニング（depinning）時の偏向の損失は、極めて一般的で連続的な分別技術に対する基礎を提供する。ピンセット１１２のアレイによってより強く影響された粒子１１３は、外力によってより強く駆動された粒子１１３よりも大きな角度で偏向することができた。例えば、半径ａだけが異なるコロイド状の球体の粒子１１３を検討する。波長以下の寸法の球体に加えられる光の傾斜力（optical gradient force）は、約ａ3として変化する。他方、周知のストークスの抗力（Stokes drag）は、「ａ」として変化する。このため、粒子１１３を具体化するより大きな球体は、光ピンセット１１２によって不相応に影響されるが、より小さい粒子１１３は小さい偏向で通過することができる。従って、光ピンセット１１２のアレイ１１２をほぼ最適な偏向角度に向けて、移動状態の中に最大の粒子１１３を配置するように輝度を調整することにより、その最大の断片は何らかの方法で混合された流れから外れた横方向に偏向される。偏向された断片は、例えば、分離された断片を別個のマイクロ流体チャネルに流し込むことによって連続的に収集することができる。偏向されない断片は、第１の段階の後に設けた別の光ピンセット１１２の段階によって、さらに分別することができる。これらの別の段階は、段階的に変化する特性を有する１つのホログラフィック光ピンセットのアレイの中に一体化することさえもできる。
【００３１】
印加した力の線に沿ってサンプルの断片を分離し、これにより、一度に別個の量の材料にのみ動作することができる連続的な分別により、ゲルの電気泳動法などの従来の方法に対して明白な利点が得られる。
【００３２】
背景の中で説明したように、心合わせがずれた力の間の競合は、微細加工されたポストのアレイを通る電気泳動及び非対称の絡み合った電極から作られた二重電気泳動式ブラウンラチェット（dielectrophoretic Brownian ratchet）を通過する流れを含む、他の連続的な分別方式に適用されている。光学的な分別には、幾つかの利点がある。光ピンセット１１２のアレイは、レーザの輝度及びアレイの向きを変えることによって動的に再構成することができる。格子の定数及び対称性を調整して、当面の分離の問題に適合させることもできる。全ての粒子１１３に対して一定の障壁を示すポストとは異なり、光ピンセット１１２は様々な材料に対して著しく異なった影響を与えることができる。このため、波長を選択することにより、連続的な光学的分別に対する別の可能性が開かれる。さらに、これらの性能を決定する特性の全ては、動作中に連続的に変更することができる。目詰まりのような共通の故障モードは、同様に、トラップのアレイを機能停止することによって修復することができる。また、微細加工されたサンプルのチャンバによるシステムとは異なり、光学的分別はサンプルの取扱いが極めて簡単である、すなわち全ての分類は物質を分配するのではなく、光のパターンによって行われる。光の勾配によって媒介された分子の移動に対する最近の観察により、光ピンセット１１２のアレイ１１０を通る移動に基づいた分別は高分子の大きさに至るまで適用することができると結論付けることができる。本願で説明された受動的で光学的にもたらされた横方向の偏向を実現する場合の力を率直に検討すると、その力は高い選択的な分別の能力を示している。
【００３３】
前述した原理は、粒子１１３を２つの異なる流れのストリームの中に分離する方法として使用することができる。図６は、第１のサブチャネル１２２及び第２のサブチャネル１２４に分岐するマイクロ流体チャネル１２０の実施例を示す。このマイクロ流体チャネル１２０が第１及び第２のサブチャネル１２２及び１２４に分かれる前に、光ピンセット１２８のアレイ１２６が外力からの流れｕに対して角度をずらして配置される。大きな粒子１３０及び小さい粒子１３２の両方がアレイ１２６を通過する場合、大きい粒子１３０は粒子の半径が大きいため、小さい粒子１３２よりも大きな横方向の偏向を受ける。この作用の結果、小さい粒子１３２は第２のサブチャネル１２４の中にほぼ直線的に移動し、一方大きな粒子１３０は部分的にずれた第１のサブチャネル１２２の中に移動する。
【００３４】
このように、本発明の方法は各種の用途に使用することができる。これらの用途には、染色体の分離、粒子の種類や蛋白質の精製、及びＤＮＡのサイジング処理が含まれるが、これらに限定されることはない。さらに、高分子及びナノクラスタを同様の方法で扱うことができる。その上、多数の角度をずらしたピンセット１１２のアレイを互いに直列に組み込むこともできる。そのような配列では、粒子１１３をさらに分離することができる。
【００３５】
以下の実施例は全体的に本発明の幾つかの主要な内容を示すが、本発明はこれに限定されるものではない。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３６】
［実施例］
図１に概略的に示された１つの好ましいシステムには、脱イオン化した水中に分散され、平行なガラス面の間の厚さ１５μｍの水平な層に閉じ込められた直径が１．５μｍのシリカの球体（Bangs Labs）が含まれる。これらの球体の濃度は水よりもかなり高く、サンプル用コンテナの下側の壁の上の約２μｍの単一層内に容易に沈殿する。サンプルの容器の端部は密閉されて、流路を形成する。上側のガラスの壁を通る穴に接続された２つのガラスのチューブは、サンプルの体積へのアクセスを行うと共に、コロイド、水及び清浄な混合ベッド（clean mixed-bed）のイオン交換樹脂に対するリザーバとしての働きをする。チューブの端部は、加湿されたアルゴンガスの連続した流れに接続される。流れの一方を閉鎖することにより圧力の不均衡が発生し、これによりコロイドはサンプルチャンバを通過し、Olympus社のIMT-2形の顕微鏡のベース上に設置された１００ｘＮＡ１．４のオイルに浸漬された対物レンズの７５×５８μｍ2の視野を通過するように駆動される。アルゴンの流れを制御することにより、１時間以上にわたって最大１００μｍ／秒の速度でコロイドを移動させることができる。
【００３７】
個々の球体の面内の動きは、精密なディジタルビデオ顕微鏡技術を用いて、間隔が１／６０秒で１０ｎｍの分解能で追跡される。その結果として生じる軌跡データにより、光を用いて作られた電位エネルギーのランドスケープを通して球体の進行をモニタすることができる。
【００３８】
光学的な位置ランドスケープは、ホログラフィック光ピンセット技術に基づいている。この技術では、１つの光ビームがコンピュータで作成した回折ビームスプリッタを用いて、光トラップの任意の構成の中に形成される。この回折光学素子（ＤＯＥ）によって作られた各ビームは、対物レンズによってシリカの球体の１つを安定してトラップすることができる回折限界のスポットの中に集束される。ホログラフィック光ピンセットは三次元の中に任意に配置することができるが、発明者らは格子定数が２．４μｍの平面の１０ｘ１０の正方形のアレイを選択して、類似の物理的なシステムの理論的及び数値の処理の中で概ね説明された自由エネルギーの変調を作る。トラップは単一層の面の中に集束されて、球体がそばを流れるときに縦方向に移動することを避けるようにする。
【００３９】
流れる流体によるストークスの効力が光ピンセットの最大トラッピング力を大きく超える場合、コロイド粒子は軌跡が乱されずにアレイのそばを流れる。逆に、トラッピング力の方が大きい場合は、粒子は遭遇する第１のトラップに逆らえずに落ちる。発明者らの観察は、トラッピング力及び粘性力がほぼ一致する中間の条件のもとで行われた。これらの条件のもとでは、粒子の軌跡に対するトラッピングアレイの影響は、流れに対するその向きに依存する。トラッピング力が粘性の抗力よりも大きい対称性が制約された方向（symmetry-hindered direction）では、流れは粒子を個々のトラップの端部に向かって十分遠くに、次の井戸に向かって熱的に支援された移動を行うことができるように押すことができる。対称性が有利に働く方向（symmetry-favored direction）の低い電位の障壁は、通過する粒子の速度を変調するだけである。これらの環境のもとで井戸から井戸へ移動する粒子は、幾何学的に近いこととエネルギー的に都合が良いこととの間のトレードオフに基づいて、電位エネルギーのランドスケープを通る経路を選択する。これらのトレードオフにより、トラッピング電位に対する駆動力の関係が変化するとき、関心のある動的な変化が発生する。
【００４０】
シリカの球体は、流速が３０±３μｍ／秒及びレーザの輝度が１００±１０μＷ／トラップの場合に移動状態になる。マインレイヤー（minelayer）における球体の真の濃度は、たかだか５％のトラップしか同時に占有されないぐらい十分に低い。移動する粒子の間で衝突が起こるときもあるが、そのようなことは比較的まれである。図２Ａ〜図２Ｄに示したデータは、この方法で得られた。
【００４１】
本発明の好ましい実施形態を図示し説明してきたが、様々な変更及び修正を、その広い態様の中で本発明から逸脱せずに行うことができることは当業者には明白であろう。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１Ａ】光ピンセットのアレイを流れているコロイド状粒子の懸濁液上に投影するホログラフィック光ピンセットシステムの概略図である。
【図１Ｂ】図１ＡのＣＣＤカメラの概略図である。
【図１Ｃ】本発明に基づいて流れている粒を横方向に偏向するための、１０×１０の光ピンセットのアレイの斜視図である。
【図２Ａ】整列した１０×１０の光ピンセットのアレイによる粒子のチャネリングを示すプロットである。
【図２Ｂ】流れの方向に対して５°の傾斜角に向けられた１０ｘ１０の光ピンセットのアレイの軸に沿って流れる粒子の軌跡を示すプロットである。
【図２Ｃ】流れの方向に対して３７°の傾斜角に向けられたトラップのアレイによって横方向に偏向された粒子の軌跡を示すプロットである。
【図２Ｄ】流れの方向に対して４５°の傾斜角に向けられたトラップのアレイを通って流れる粒子のほとんど偏向されない軌跡を示すプロットである。
【図３】傾斜角θで外力の方向からオフセットされた光トラップのアレイを通る個々の粒子の動きの第１の表示である。
【図４】外力の方向からオフセットされた光トラップのアレイを通る個々の粒子の動きの第２の表示である。
【図５】比較可能な条件のもとで、２つの異なる実験的な走行に対するトラップアレイの角度方向に関連する前方向の速度に対する横方向の速度の比率を示すプロットである。
【図６】粒子を分離するためにマイクロフルーイディックスチャネル（microfluidics channel）と共に使用される光ピンセットの静止したアレイを示す図である。
【図１Ａ】
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【図５】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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