(57)【要約】  本発明は心臓血管障害を治療するためのPDE9阻害剤に関する。好適なPDE9阻害剤は式Ｉの化合物である（式中、Ｒ1はＨまたはＣ1-6アルキルであり、ここでＲ1はＮ1またはＮ2のいずれかに結合し；Ｒ2はヒドロキシもしくはアルコキシで場合により置換されたＣ1-6アルキル；アルキル、ヒドロキシもしくはアルコキシで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキル；アルキル、ヒドロキシまたはアルコキシにより場合により置換された飽和５−６員複素環；ｈｅｔ1またはＡｒ1であり；Ｒ3はＡｒ2；Ｃ1-6アルキルで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキル；ＯＡｒ2；ＳＡｒ2；ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ1-6アルキル；ｈｅｔ2；キサンチン；およびナフタレンから独立して選択される１または２つの基で場合により置換されたＣ1-6アルキルである）。  【化１】2005511575.tif 000060
2005511575.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2005511575.tif 000055
［式中、
Ｒ1はＨまたはＣ1-6アルキルであり、ここでＲ1はＮ1またはＮ2に結合し；
Ｒ2はヒドロキシまたはアルコキシで場合により置換されたＣ1-6アルキル；
アルキル、ヒドロキシまたはアルコキシで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキル；アルキル、ヒドロキシまたはアルコキシで場合により置換された飽和５−６員複素環；ｈｅｔ1またはＡｒ1であり；
Ｒ3はＡｒ2；Ｃ1-6アルキルで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキル；ＯＡｒ2；ＳＡｒ2；ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ1-6アルキル；ｈｅｔ2；キサンチン；およびナフタレンから独立して選択される１または２つの基で場合により置換されたＣ1-6アルキルであり；
ここでＡｒ1およびＡｒ2は以下の式、
【化２】
2005511575.tif 000056
（式中、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6は水素、ハロ、フェノキシ、フェニル、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｒ7、ＳＲ7およびＯＲ7（ここでＲ7は、ｈｅｔ3で、またはハロ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｃ1-6アルキルおよびＣ1-6アルコキシから独立して選択される１、２もしくは３つの基で場合により置換されたフェニル基で場合により置換されたＣ1-6アルキルである）から独立して選択されるか；または式中、Ｒ4およびＲ5は合わされて３または４原子連結を形成し、ここで該連結はＯ、ＳおよびＮから独立して選択される１または２つのヘテロ原子を組み込んでもよい）の独立した基であり；そして、
ここでｈｅｔ1、ｈｅｔ2およびｈｅｔ3は同一であるかまたは異なっていてよく、Ｏ、ＳおよびＮから独立して選択される１、２、または３つのヘテロ原子を含む芳香族５−６員複素環であり、該複素環はＣ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシ、ハロならびにハロおよびＣ1-6アルキルから独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換されたフェニル、から独立して選択される１、２または３つの置換基で場合により置換され；
但し、
ａ）Ｒ1がＮ1に連結し、Ｒ1がＣ1-3アルキルであり、そしてＲ2がプロピルである場合は、Ｒ3はＡｒ1で置換されたメチルではなく、そして
ｂ）Ｒ1がＮ1に結合し、Ｒ1がＣ1-6アルキルであり、そしてＲ2がメチルである場合は、Ｒ3はＡｒ1により置換されたＣ1-4アルキルではないものとする］
の化合物、その製薬上許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグ。
【請求項２】
化合物が式Ｉａ：
【化３】
2005511575.tif 000057
［式中、
Ｒ1はＨまたはＣ1-6アルキルであり；
Ｒ2はヒドロキシもしくはアルコキシで場合により置換されたＣ1-6アルキル；
アルキル、ヒドロキシもしくはアルコキシで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキル；アルキル、ヒドロキシもしくはアルコキシで場合により置換された飽和５−６員複素環；ｈｅｔ1またはＡｒ1であり；
Ｒ3はＡｒ2；Ｃ1-6アルキルで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキル；ＯＡｒ2；ＳＡｒ2；ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ1-6アルキル；ｈｅｔ2；キサンチン；およびナフタレンから独立して選択される１または２つの基で場合により置換されたＣ1-6アルキルであり；
ここでＡｒ1およびＡｒ2は以下の式、
【化４】
2005511575.tif 000058
（式中、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6は水素、ハロ、フェノキシ、フェニル、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｒ7、ＳＲ7およびＯＲ7（ここでＲ7は、ｈｅｔ3で、またはハロ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｃ1-6アルキルおよびＣ1-6アルコキシから独立して選択される１、２もしくは３つの基で場合により置換されたフェニル基で場合により置換されたＣ1-6アルキルである）から独立して選択されるか；または式中、Ｒ4およびＲ5は合体して３または４原子連鎖を形成し、ここで該連鎖はＯ、ＳおよびＮから独立して選択される１または２つのヘテロ原子を組み込んでもよい）の独立した基であり；そして
ここでｈｅｔ1、ｈｅｔ2およびｈｅｔ3は同一であるかまたは異なっていてよく、Ｏ、ＳおよびＮから独立して選択される１、２、または３つのヘテロ原子を含む芳香族５−６員複素環であり、該複素環はＣ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシ、ハロならびにハロおよびＣ1-6アルキルから独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換されたフェニル、から独立して選択される１、２または３つの置換基で場合により置換され；
但し、
ａ）Ｒ1がＣ1-3アルキルでありそしてＲ2がプロピルである場合は、Ｒ3はＡｒ1により置換されたメチルではなく、そして
ｂ）Ｒ1がＣ1-6アルキルでありそしてＲ2がメチルである場合は、Ｒ3はＡｒ1により置換されたＣ1-4アルキルではないものとする］
の化合物、その製薬上許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグである請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ1が水素またはＣＨ3である請求項１または２記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ1が水素である請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ2がＣ3-4アルキル、シクロペンチルまたはピリジルである請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ2が３−ピリジルである請求項１〜５記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ3がＡｒ2；Ｃ1-6アルキルで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキル；およびｈｅｔ2から独立して選択される１または２つの基で場合により置換されたＣ1-3アルキルである請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ3がＡｒ2で場合により置換されたＣ1-3アルキルである請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ3がＡｒ2で置換されたメチルである請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ4、Ｒ5およびＲ6が、水素、ハロ、フェノキシ、フェニル、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｒ7、ＳＲ7およびＯＲ7（ここでＲ7は、ｈｅｔ3基で、またはハロ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｃ1-6アルキルおよびＣ1-6アルコキシから独立して選択される１、２もしくは３つの基で場合により置換されたフェニル基で、場合により置換されたＣ1-6アルキルである）から独立して選択されるか；またはＲ4およびＲ5は、合体して１つの酸素原子を含む３原子連鎖を形成する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ4、Ｒ5およびＲ6が、水素、ハロ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、フェノキシ、およびハロ、ＣＦ3、ＯＣＦ3またはＣ1-6アルキルにより場合により置換されたフェニルで場合により置換されたＯＣ1-6アルキルから独立して選択される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ4、Ｒ5およびＲ6が水素、クロロ、ＯＣＦ3、ＣＦ3、フェノキシおよびフェニルで置換されたＯＣ1-6アルキルから独立して選択される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ4、Ｒ5およびＲ6が水素、クロロ、ＯＣＦ3およびフェニルで置換されたＯＣ1-3アル
キルから独立して選択される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１４】
ｈｅｔ2が芳香族５−６員複素環であって、該複素環は１または２つの窒素原子を含み、場合によりさらにヘテロ原子を含み、該複素環は１、２または３つの置換基で場合により置換され、該置換基はＣ1-6アルキル、ハロならびにハロおよびＣ1-6アルキルから独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換されたフェニルから各々独立して選択される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１５】
ｈｅｔ2が芳香族５−６員複素環であって、該複素環は１または２つの窒素原子を含み（場合によりさらにヘテロ原子を含む）、該複素環は１つの置換基で場合により置換され、該置換基はＣ1-6アルキル、ハロならびにハロおよびＣ1-6アルキルから独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換されたフェニルから選択される、請求項１４記載の化合物。
【請求項１６】
ｈｅｔ2が芳香族５員複素環であって、該複素環が１または２つの窒素原子を含み（場合によりさらにヘテロ原子を含む）かつハロで場合により置換されたフェニルで場合により置換される請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
ｈｅｔ2がイミダゾリルまたはオキサジアゾリルである請求項１６記載の化合物。
【請求項１８】
化合物が以下である請求項１記載の化合物：
５−（３−クロロベンジル）−３−イソプロピル−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物１）；
３−イソプロピル−５−（２−フェノキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物５２）；
３−（３−ピリジニル）−５−（２−ベンジルオキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物１３８）；
３−イソプロピル−５−（２−トリフルオロメトキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物１５６）；
３−シクロペンチル−５−（２−ベンジルオキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物２０４）；
３−（３−ピリジニル）−５−（２−トリフルオロメチルベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物２１５）；
３−シクロペンチル−５−（２−トリフルオロメトキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物２５８）；および
３−（３−ピリジニル）−５−（２−トリフルオロメトキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物２６０）。
【請求項１９】
心臓血管障害、疾患または状態を治療または予防するための医薬の製造における、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の化合物、その製薬上許容される塩または溶媒和物の使用。
【請求項２０】
障害、疾患または状態が全身性高血圧である、請求項１９記載の化合物、その製薬上許容される塩または溶媒和物の使用。
【請求項２１】
医薬としての使用のための請求項１〜１８のいずれか１項に記載の化合物、その製薬上許容される塩または溶媒和物。
【請求項２２】
請求項１〜１８のいずれか１項に記載の化合物、その製薬上許容される塩または溶媒和物を、製薬上許容される賦形剤、希釈剤または担体と共に含有する医薬組成物。
【請求項２３】
式II：
【化５】
2005511575.tif 000059
の化合物を適当な試薬と反応させて環化を行うことからなる、請求項１〜１８のいずれか１項に定義される式Ｉの化合物の製造方法。
【請求項２４】
心臓血管障害、疾患または状態を治療または予防するための医薬の製造におけるPDE9阻害剤の使用。
【請求項２５】
PDE9阻害剤が１マイクロモルの濃度でPDE9に対して４０％より大きい阻害作用を有する、請求項２４記載の使用。
【請求項２６】
PDE9阻害剤がPDE1よりPDE9に１０倍を超える選択性を有する、請求項２５記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、種々の疾患特に心臓血管疾患を治療するための環状グアニル酸モノホスフェート（cGMP）特異的ホスホジエステラーゼ９型阻害剤（以下PDE9阻害剤と称する）の新規な使用に関する。さらに、本発明は、新規なPDE9阻害剤、その製造方法、製造に使用される中間体、およびそれらを含有する組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ホスホジエステラーゼ酵素ファミリーは環状ヌクレオチドcGMPおよび環状アデノシン1リン酸（cAMP）を加水分解する。cGMPおよびcAMPは多数の細胞事象、生理学的および病理学的両方の制御および調節の中心となる。
【０００３】
D A Fisher他 [J.Biol.Chemistry, vol 273, No 25,15559-15564 (1998)]は、cAMPよりｃGMPを選択的に加水分解するPDE酵素ファミリーの新規なメンバーとしてPDE9酵素を同定した。PDE9は種々のヒト組織、すなわち精巣、脳、小腸、骨格筋、心臓、肺、胸腺および脾臓に存在することが見出された。ヒト脈管構造中の平滑筋細胞は、PDE9の存在について分析されていなかった。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明者らはここで種々の組織のヒト脈管構造中の平滑筋細胞においてPDE9の存在を見出した。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
従って、第一の態様によれば、本発明は、心臓血管障害、疾患または状態を治療または予防するための医薬の製造におけるPDE9阻害剤の使用を提供するものである。
【０００６】
好ましくは心臓血管障害、疾患または状態は、全身性（または本態性）高血圧、肺高血圧（例えば肺動脈性高血圧、新生児の肺高血圧）、鬱血性心不全、冠動脈疾患、アテローム性動脈硬化症、卒中、血栓症、血管開放度が低下した状態（例えば経皮的冠動脈形成術後）、末梢血管疾患、腎臓病（特に糖尿病を伴なって生じる）、狭心症（安定、不安定および異型(Prinzmetal)狭心症を含む）、心筋虚血および血流の改善が終末器官機能の改善をもたらす任意の状態から選択される。より好ましくは心臓血管疾患は全身性高血圧である。
【０００７】
あるいは心臓血管疾患は他の状態特に糖尿病と関連した高血圧と関連があり得る。
【０００８】
さらなる態様によれば、以下から選択される状態を治療するための医薬の製造におけるPDE9阻害剤の使用を提供する：男性性的機能不全(特にインポテンスとも別途知られる男性勃起障害)；女性性的機能不全(FSD)(特に女性自発運動抑制性性的衝動障害（female hypoactive sexual desire disorder）、女性性的刺激障害（female sexual arousal disorder）、女性性的苦痛障害（female sexual pain disorder）、女性オルガズム機能不全（female orgasmic dysfunction）、陰核機能不全（clitoral dysfunction）、脊髄損傷により生じる機能不全および選択的セロトニン再取り込み阻害剤により誘導される性的機能不全）、早産、月経困難症（dysmenorrhoea）、良性前立腺過形成、膀胱排出障害（bladder outlet obstruction）、失禁、ナイトレート誘導耐性（nitrate induced tolerance）、気管支炎、アレルギー喘息、慢性喘息、アレルギー性鼻炎、目の疾患および状態(例えば緑内障および視神経症、黄斑変性、眼圧の上昇、網膜または動脈の閉塞)、腸運動の障害により特徴付けられる疾患（例えば過敏性腸症候群）、子癇前症、川崎病、ナイトレート耐性、多発性硬化症、神経障害(自律性神経障害および末梢神経障害を含む)、アルツハイマー病、急性呼吸不全、乾癬、皮膚壊死、癌、転移,、脱毛症、ナッツクラッカーイソファガス（nutcracker oesophagus）、裂肛、出血（haemorrhoids）、低酸素血管収縮（hypoxic vasoconstriction）および血液透析の際の血圧の安定化。
【０００９】
いずれの理論に拘束されるものではないが、本発明者らは、PDE9阻害剤が、一酸化窒素／cGMP経路に対して作用し、血管平滑筋の弛緩を仲介し、それによって低血圧を引き起こし、血流を増大させ、従って血流が適当に通じて疾患状態にある終末器官を保護することにより、心臓血管疾患を治療すると考える。
【００１０】
好ましくは（以下に記載されるアッセイを使用して)、PDE9阻害剤は１μMの濃度でPDE9に対して４０％より大きい阻害作用を有する。より好ましくは、PDE9阻害剤は５００nM未満のＩＣ50を有し、最も好ましくは５０nM未満のＩＣ50を有する。好ましくはPDE9阻害剤は、PDE1よりPDE9に対して、１０倍、好ましくは５０倍、もっとも好ましくは１００倍大きな選択性を有する。
【００１１】
好ましくは本発明のPDE9阻害剤は、経口で摂取した場合に生物学的利用能を有する。経口の生物学的利用能とは、体循環に達する経口投与された薬物の割合をいう。薬物の経口の生物学的利用能を決定する因子は、溶解、膜透過性および代謝安定性である。典型的には経口の生物学的利用能を決定するために、第１にインビトロおよび次いでインビボ技術のスクリーニングカスケードが使用される。
【００１２】
胃腸管（GIT）の水性内容物による薬物の分解性、可溶化を、GIT を模して適当なpHにおいて実施されるインビトロの溶解性実験から予測し得る。好ましくは、PDE9阻害剤は最小の溶解性５０μg／mlを有する。溶解性は、例えばLipinski CA他; Adv. Drug Deliv. Rev.23 (1-3), 3-25, 1997に記載される公知の標準的手順により決定し得る。
【００１３】
膜透過性は、GITの細胞を通る化合物の通過をいう。親油性がこれを予測する場合における鍵となる特性であり、そして有機溶媒および緩衝剤を使用してインビトロLogD7.4測定により定義される。好ましくは、PDE9阻害剤は−２〜＋４、より好ましくは−１〜＋３のLogD7.4を有する。Log Dは例えばStopher, D and McClean, S; J.Pharm.Pharmacol.42 (2), 144,1990に記載される当該分野で公知の標準手順により決定され得る。
【００１４】
細胞単層アッセイ例えばCaco2が、流出トランスポーター例えばＰ−グリコプロテインの存在下での有利な膜透過性の予測に実質的に追加され、いわゆるCaco2フラックスと言われている。好ましくは、PDE9阻害剤は２×１０-6cms-1より大きい、より好ましくは５×１０-6cms-1より大きいCaco2フラックスを有する。
【００１５】
Caco2フラックス値は、例えばArtursson, P and Magnusson, C; J.Pharm.Sci, 79 (7),
595-600,1990に記載の当該分野で公知の標準的手順により決定され得る。
【００１６】
代謝安定性は、吸収プロセス：第１の通過効果（pass effect）の際に化合物を代謝するGITまたは肝臓の能力に呼応する。アッセイ系例えばミクロソーム、肝細胞等は、代謝能を予測し得る。好ましくは、PDE9阻害剤は０．５未満の肝臓の摘出と相応のアッセイ系における代謝安定性を示す。アッセイ系およびデータ処理の実施例は、Obach、RS; Curr.
Opin. Drug Disc. Devel. 4(1), 36-44, 2001およびShibata, Y 他.; Drug Met. Disp. 28 (12), 1518-1523, 2000に記載されている。
【００１７】
上記プロセスの相互作用のために、薬物がヒトにおいて経口的に生物学的利用能を有することの更なる支持が、動物におけるインビボ実験により得ることができる。絶対的な生
物学的利用能が、経口経路で、別々または混合物で化合物を投与することによるこれらの研究において決定される。絶対的測定(％吸収率）のために、静脈経路もまた使用される。動物の経口生物学的利用能の評価の例は、Ward, KW他; Drug Met.Disp.29(1), 82-87,2001 ; Berman, J他; J.Med.Chem.40 (6), 827-829,1997およびHan KS and Lee, MG; Drug Met.Disp.27 (2), 221-226,1999において見られる。
【００１８】
好適なPDE9阻害剤は、式Ｉの化合物、その製薬上許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグである：
【化１】
2005511575.tif 000003
（式中、Ｒ1はＨまたはＣ1-6アルキルであり、ここでＲ1はＮ1またはＮ2に結合し；
Ｒ2はヒドロキシまたはアルコキシで場合により置換されたＣ1-6アルキル；
アルキル、ヒドロキシまたはアルコキシで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキル；アルキル、ヒドロキシまたはアルコキシで場合により置換された飽和５−６員複素環（好ましくはテトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、ピロリジンまたはピペリジン）；ｈｅｔ1またはＡｒ1であり；
Ｒ3はＣ1-6アルキルであって、該アルキルはＡｒ2；Ｃ1-6アルキルで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキル；ＯＡｒ2；ＳＡｒ2；ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ1-6アルキル；ｈｅｔ2；キサンチン；およびナフタレンから独立して選択される１または２つの基で場合により置換され；
【００１９】
ここでＡｒ1およびＡｒ2は以下の式の独立した基であり：
【化２】
2005511575.tif 000004
（式中、
Ｒ4、Ｒ5およびＲ6は水素、ハロ、フェノキシ、フェニル、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｒ7、ＳＲ7およびＯＲ7（ここでＲ7はｈｅｔ3で、またはハロ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｃ1-6アルキルおよびＣ1-6アルコキシから独立して選択される１、２もしくは３つの基で場合により置換されたフェニル基で、場合により置換されたＣ1-6アルキルである）から独立して選択されるか；または式中、Ｒ4およびＲ5は合体して３または４原子連鎖を形成し、ここで該連鎖はＯ、ＳおよびＮから独立して選択される１または２つのヘテロ原子を組み込んでもよい）；そして、
【００２０】
ここでｈｅｔ1、ｈｅｔ2およびｈｅｔ3は同一であるかまたは異なり、Ｏ、ＳおよびＮから独立して選択される１、２、または３つのヘテロ原子を含む芳香族５−６員複素環であり、該複素環はＣ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシ、ハロならびにハロおよびＣ1-6アルキルから独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換されたフェニル、から独立して選択される１、２または３つの置換基で場合により置換され；
但し、
ａ）Ｒ1がＮ1に連結し、Ｒ1がＣ1-3アルキルであり、そしてＲ2がプロピルである場合
、このときＲ3はＡｒ1により置換されたメチルではなく、そして
ｂ）Ｒ1がＮ1に結合し、Ｒ1がＣ1-6アルキルであり、そしてＲ2がメチルである場合、このときＲ3はＡｒ1により置換されたＣ1-4アルキルではないものとする）。
【００２１】
一般式Ｉにより示される化合物が式ＩａおよびＩｂ両方の化合物を包含することは、熟練した化学者により理解されるであろう。
【化３】
2005511575.tif 000005
【００２２】
より好適なPDE9阻害剤は、式Ｉａの化合物、その製薬上許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグである：
【化４】
2005511575.tif 000006
（式中、
Ｒ1はＨまたはＣ1-6アルキルであり；
Ｒ2はヒドロキシもしくはアルコキシで場合により置換されたＣ1-6アルキル；
アルキル、ヒドロキシもしくはアルコキシで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキル；アルキル、ヒドロキシもしくはアルコキシで場合により置換された飽和５−６員複素環（好ましくはテトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、ピロリドンもしくはピペリジン）；ｈｅｔ1またはＡｒ1であり；
Ｒ3はＣ1-6アルキルであって、該アルキルはＡｒ2；Ｃ1-6アルキルで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキル；ＯＡｒ2；ＳＡｒ2；ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ1-6アルキル；ｈｅｔ2；キサンチン；およびナフタレンから独立して選択される１または２つの基で場合により置換され；
【００２３】
ここでＡｒ1およびＡｒ2は以下の式の独立した基であり：
【化５】
2005511575.tif 000007
（式中、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6は水素、ハロ、フェノキシ、フェニル、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｒ7、ＳＲ7およびＯＲ7（ここでＲ7はｈｅｔ3で、またはハロ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｃ1-6アルキルおよびＣ1-6アルコキシから独立して選択される１、２もしくは３つの基で場合により置換されたフェニル基で、場合により置換されたＣ1-6アルキルである）から独立して選択されるか；または式中、Ｒ4およびＲ5は合体して３または４原子連鎖を形成し、ここで該連鎖はＯ、ＳおよびＮから独立して選択される１または２つのヘテロ原子を組み込んでもよく；そして
【００２４】
ここでｈｅｔ1、ｈｅｔ2およびｈｅｔ3は同一であるかまたは異なり、Ｏ、ＳおよびＮから独立して選択される１、２、または３つのヘテロ原子を含む芳香族５−６員複素環であり、該複素環はＣ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシ、ハロならびにハロおよびＣ1-6アルキルから独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換されたフェニル、から独立して選択される１、２または３つの置換基で場合により置換され；
但し、
ａ）Ｒ1がＣ1-3アルキルでありそしてＲ2がプロピルである場合、このときＲ3はＡｒ1により置換されたメチルではなく、そして
ｂ）Ｒ1がＣ1-6アルキルでありそしてＲ2がメチルである場合、このときＲ3はＡｒ1により置換されたＣ1-4アルキルではないものとする）。
【００２５】
更なる実施態様において、本発明は式Ｉａの化合物またはその製薬上許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグを提供するもので、式中、Ｒ1はＨまたはＣ1-6アルキルであり；Ｒ2は直鎖または分枝鎖のＣ1-6アルキル、Ｃ3-7シクロアルキルおよびヘテロアリールであり；Ｒ3は直鎖または分枝鎖のＣ1-6アルキルであって、これはＡｒ、Ｃ3-7シクロアルキル、ＯＡｒ、ＳＡｒ、ＮＣ（Ｏ）Ｃ1-6アルキル、ヘテロアリール、キサンチンおよびナフタレンから各々独立して選択される１〜２つの基で場合により置換され、ここでＡｒは以下の式の基である：
【化６】
2005511575.tif 000008
（式中、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6はＨ、ハロ、ＯＰｈ、Ｐｈ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、ＳＣ1-6アルキル、Ｃ1-6アルキル、ＯＣ1-6アルキル（該アルキルはヘテロアリール基またはＰｈ基で場合により置換され、ここで該Ｐｈ基はハロ、ＣＦ3、ＯＣＦ3およびＣ1-6アルキルから選択される１〜３つの基で場合により置換される）から各々独立して選択されるか；または式中、Ｒ4およびＲ5は合体してＣ1-3アルキル連鎖を形成することができ、ここで該連鎖はＯ、ＳおよびＮから選択される１または２つのヘテロ原子を場合により組み込んでもよく、ここでヘテロアリールはＯ、ＳおよびＮから各々独立して選択される１〜３つのヘテロ原子を含む５−６員芳香族複素環であり、該複素環はＣ1-6アルキル、ハロおよびＰｈから各々独立して選択される１〜３つの置換基で場合により置換され、該ＰｈはハロおよびＣ1-6アルキルから選択される１〜３つの基で場合により置換され；但しＲ1が−ＣＨ3
である場合、Ｒ2は−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ3であることはできないものとする）。
【００２６】
特に明記しない限り、任意のアルキル基は直鎖または分枝鎖であってよく、そして１〜６つの炭素原子、好ましくは１〜４つ、および特に１〜３つの炭素原子である。
【００２７】
ハロは、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードを意味する。
【００２８】
好ましくはＲ1は水素またはＣＨ3である。より好ましくはＲ1は水素である。
【００２９】
好ましくはＲ2はＣ3-4アルキル、シクロペンチルまたはピリジルである。より好ましくはＲ2は３−ピリジルである。
【００３０】
好ましくはＲ3はＣ1-3アルキルであり、これはＡｒ2、Ｃ1-6アルキルで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキルおよびｈｅｔ2から独立して選択される１または２つの基で場合により置換される。より好ましくはＲ3はＡｒ2で場合により置換されたＣ1-3アルキル
である。最も好ましくはＲ3はＡｒ2により置換されたメチルである。
【００３１】
好ましくはＲ4、Ｒ5およびＲ6は水素、ハロ、フェノキシ、フェニル、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｒ7、ＳＲ7、およびＯＲ7から独立して選択され：ここでＲ7はＣ1-6アルキルであって、これはｈｅｔ3基で、またはハロ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｃ1-6アルキルおよびＣ1-6アルコキシから独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換されたフェニル基で、場合により置換されるか；またはここでＲ4およびＲ5は合体して１つの酸素原子を含む３原子連鎖を形成する。
【００３２】
より好ましくはＲ4、Ｒ5およびＲ6は水素、ハロ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、フェノキシ、およびＯＣ1-6アルキルから独立して選択され、該アルキルはハロ、ＣＦ3、ＯＣＦ3またはＣ1-6アルキルで場合により置換されたフェニルで場合により置換される。
【００３３】
さらにより好ましくはＲ4、Ｒ5およびＲ6は水素、クロロ、ＯＣＦ3、ＣＦ3、フェノキシおよびフェニルで置換されたＯＣ1-6アルキルから独立して選択される。
【００３４】
最も好ましくはＲ4、Ｒ5およびＲ6は水素、クロロ、ＯＣＦ3およびフェニルにより置換されたＯＣ1-3アルキルから独立して選択される。
【００３５】
好ましくはｈｅｔ2は芳香族５−６員複素環であって、該複素環は１または２つの窒素原子を含み、場合によりさらにヘテロ原子を含み、該複素環は１、２または３つの置換基で場合により置換され、該置換基はＣ1-6アルキル、ハロならびにハロおよびＣ1-6アルキルから独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換されたフェニルから各々独立して選択される。
【００３６】
より好ましくはｈｅｔ2は芳香族５員複素環であって、該複素環は１または２つの窒素原子を含み、場合によりさらにヘテロ原子を含み、該複素環は１つの置換基で場合により置換され、該置換基はＣ1-6アルキル、ハロならびにハロおよびＣ1-6アルキルから独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換されたフェニルから選択される。
【００３７】
さらにより好ましくはｈｅｔ2は芳香族５員複素環であって、該複素環は１または２つの窒素原子を含み、場合によりさらにヘテロ原子を含み、かつハロで場合により置換されたフェニルで場合により置換される。
【００３８】
最も好ましくはｈｅｔ2はイミダゾリルまたはオキサジアゾリルである。
【００３９】
好ましい化合物は以下である：
５−（３−クロロベンジル）−３−イソプロピル−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物１）；
３−イソプロピル−５−（２−フェノキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物５２）；
３−（３−ピリジニル）−５−（２−ベンジルオキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物１３８）；
３−イソプロピル−５−（２−トリフルオロメトキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物１５６）；
３−シクロペンチル−５−（２−ベンジルオキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物２０４）；
３−（３−ピリジニル）−５−（２−トリフルオロメチルベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物２１５）；
３−シクロペンチル−５−（２−トリフルオロメトキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物２５８）；および
３−（３−ピリジニル）−５−（２−トリフルオロメトキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物２６０）。
【００４０】
第一の態様の種々の実施形態において上記で定義される式Ｉの化合物は新規である。従って第２の態様に係る本発明は、第一の態様の種々の実施態様において上記で定義された式Ｉの化合物、その製薬上許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグの化合物を提供する。
【００４１】
疑問の回避のために、特に明記しない限り、用語「置換された」は、１またはそれ以上の定義された基により置換されることを意味する。
【００４２】
疑問の回避のために、用語「独立して」は、２つ以上の置換基が複数の可能な置換基から選択される場合、それらの置換基は同じかまたは異なってもよいことを意味する。
【００４３】
塩基性中心を含む式Ｉの化合物の製薬上許容される塩は、例えば、無機酸例えば塩化水素酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸およびリン酸と、カルボン酸と、または有機スルホン酸とで形成される非毒性酸付加塩である。その実例には、ＨＣｌ塩、ＨＢｒ塩、ＨＩ塩、硫酸または重硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩もしくはリン酸水素塩、酢酸塩、安息香酸塩、琥珀酸塩、糖酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、乳酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、グルコン酸塩、カムシラート（camsylate）、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩およびパモエート塩が含まれる。酸性中心を含む式Ｉの化合物は、塩基との製薬上許容される金属塩、特に非毒性のアルカリ金属およびアルカリ土類金属塩を提供し得る。実例には、ナトリウム、カリウム、アルミニウム、カルシウム、マグネシウムおよび亜鉛の塩が含まれる。あるいはまた有機塩、例えばジエタノールアミン塩を製造することができる。適当な製薬上の塩に関する検討のためには、Berge他, J.Pharm, Sci., 66, 1-19, 1977; P L Gould, International Journal of Pharmaceutics, 33 (1986), 201-217;およびBighley他, ncyclopaedia of Pharmaceutical Technology, Marcel Dekker Inc, New York 1996, 第13巻, 頁453-497を参照のこと。
【００４４】
式Ｉの化合物の製薬上許容される溶媒和物はその水和物を含む。
【００４５】
本発明の化合物および本発明の種々の塩はそれらの多形もまた本発明の範囲に含まれる。
【００４６】
以下において、式Ｉの化合物、その製薬上許容される塩、その溶媒和物または多形体を、「本発明の化合物」という。
【００４７】
本発明の化合物は、一つまたはそれ以上のキラル中心を有することができ、従って多数の立体異性体形態で存在し得る。全ての立体異性体およびその混合物が本発明の範囲内に含まれる。ラセミ化合物は、分取HPLCおよびキラル固定相を有するカラムを使用するか、または当業者に公知の方法を使用して分割し個々のエナンチオマーを収集するかのいずれかで分離される。更に、キラル中間体化合物を分割し、そしてそれを使用して本発明のキラル化合物を製造し得る。
【００４８】
本発明の化合物は、一つまたはそれ以上の互変異性形態で存在してもよい。全ての互変異性体およびその混合物が、本発明の範囲内に含まれる。例えば２−ヒドロキシピリジニルに対する請求は、その互変異性形態、α−ピリドニルを包含する。
【００４９】
最後の脱保護工程の前に作られ得る本発明の化合物の特定の保護された誘導体は、それほどの薬理学的活性は有しないだろうが、ある場合には経口または非経口投与することが
でき、その後体内で代謝されて薬理学的に活性である本発明の化合物を形成し得る。従ってかかる誘導体は「プロドラッグ」と記述することができる。更に、本発明の特定の化合物は、本発明の他の化合物のプロドラッグとして作用することができる。本発明の化合物の全ての保護された誘導体およびプロドラッグは、本発明の範囲内に含まれる。本発明の化合物について適当なプロドラッグの例は、Drugs of Today, 第19章, Number 9,1983, 頁499-538およびTopics in Chemistry, 第31章, 頁306-316および“Design of Prodrugs”by H.Bundgaard, Elsevier, 1985, 第1章に記載される（この開示における文献は参照により本願明細書に加入される）。例えばH.Bundgaard in“Design of Prodrugs”（この開示における文献は参照により本願明細書に加入される）により記載される「プロ成分（pro-moieties）」として当業者に公知の部分は、適当な官能基が本発明の化合物上に存在する場合、当該官能基上に配置され得ることは、当業者に更に理解される。本発明の化合物のための好適なプロドラッグは、エステル、炭酸エステル、ヘミ-エステル、リン酸エステル、ニトロエステル、硫酸エステル、スルホキシド、アミド、カルバメート、アゾ化合物、ホスファミド、グリコシド、エーテル、アセタールおよびケタールを含む。
【００５０】
本発明はまた、本発明の化合物の全ての適当なアイソトープバリエーションを含む。本発明の化合物のアイソトープバリエーションは、少なくとも一つの原子が同じ原子番号を有するが通常自然に見られる原子質量とは異なる原子質量を有する原子と取り替えられたものとして定義される。本発明の化合物に組み込まれることができる同位元素の例は、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素および塩素（それぞれ、例えば2Ｈ、3Ｈ、13Ｃ、14Ｃ、15Ｎ、17Ｏ、18Ｏ、31Ｐ、32Ｐ、35Ｓ、18Ｆおよび36Ｃｌ）の同位元素を含む。本発明の特定のアイソトープバリエーション、例えば放射性同位元素、例えば3Ｈまたは14Ｃが取り込まれているものが、薬物および／または物質の組織分布研究において有用である。トリチウム化された、すなわち3Ｈ、および炭素−１４、すなわち14Ｃ、の同位元素は製造および検出性の容易さのために特に好まれる。更に、同位元素、例えば重水素、すなわち2Ｈによる置換は、より大きな代謝安定性から生じる特定の治療的な効果、例えばインビボでの半減期の増加または必要な投薬量の減少を与えることができ、それゆえにいくつかの状況において好まれ得る。本発明の化合物のアイソトープバリエーションは、従来の方法によって、例えば例示方法によってまたは以下の「実施例」および「調製物」に記載される製造方法により、適当な試薬の適当なアイソトープバリエーションを使用して一般に製造することができる。
【００５１】
本発明の化合物は、以下の反応スキームによって製造することができる。以下の反応スキームにおいておよびこの後、特に明記しない限り、Ｒ1〜Ｒ7は第１の態様において定義される通りである。これらの工程は本発明のさらなる態様を形成する。
【００５２】
本願明細書の全体にわたって、一般式はローマ数字Ｉ、II、III、IV等により示される。これらの一般式のサブセットはＩa、Ｉb、Ｉc等・・・IVa、IVb、IVc等として定義される。
【００５３】
一般式Ｉの化合物は反応スキーム１に係る一般式IIの化合物から製造され得る。適当な条件が当業者に公知であり、そして該条件にはアルコール溶媒、例えばエタノールまたはイソプロパノールまたはアルコール／水中の試薬、例えばカリウムtert−ブトキシド、水酸化ナトリウムおよび炭酸カリウムを使用して、塩基触媒作用による環化を含む。この反応は、室温と溶媒の還流温度との間の温度で、場合により過酸化水素の存在下において実施することができる。
【００５４】
【化７】
2005511575.tif 000009
【００５５】
一般式IIの化合物は反応スキーム２に従って、式IVの化合物を式IIIの化合物と反応させることにより製造することができる。このようなアミド結合形成反応は当業者に周知の広範な種々の条件下で実施することができる。例えば式IVの化合物は薬剤、例えば１，１−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）もしくはフルオロ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート（ＴＦＦＨ）または薬剤の組合せ、例えばアザベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ピロリジノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＡＯＰ）および１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）による処理の後、式IIIの化合物の添加により活性され得る。
【００５６】
別法として、反応スキーム２に示される反応は、ペプチドカップリング剤、例えばＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）の、式IIIおよびIVの化合物の混合物への添加により実施することができる。この反応は適当な溶媒、例えばジクロロメタン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）または１−メチル−２−ピロリジノン中、０℃と溶媒の還流温度との間の温度で実施される。この反応は還流条件下でピリジン中、式IVの化合物のＣＤＩによる活性化により優先的に実施される。
【００５７】
【化８】
2005511575.tif 000010
【００５８】
一般式IIIの化合物は以下の製造例に記載され、そして欧州特許EP0463756に記載される工程を用いて、容易に得られる出発物質から製造することができる。
【００５９】
一般式IVの化合物は以下の製造例に記載される工程と同様の工程を使用して容易に得られる出発物質から製造することができる。さらに一般式IVの多くの化合物が市販されてい
る。
【００６０】
式Ｉの化合物の製薬上許容される塩は、一般式Ｉの化合物の溶液と所望の酸または塩基を適当に一緒に混合することにより容易に製造することができる。その塩は溶液から沈殿し、濾過によって集めても、または溶媒の蒸発によって回収してもよい。
【００６１】
本発明の化合物は、単独で投与されてもよいが、一般に、投与の意図される経路および標準的な医薬プラクティスを考慮して選択される適当な医薬賦形剤、希釈剤または担体と混合して投与される。
【００６２】
例えば本発明の化合物は、即効性放出、遅延性放出、修飾された放出、持続性放出、律動的放出または制御放出適用のために、錠剤、カプセル、多粒子（multi-particulates）、ゲル剤、フィルム、オブル（ovules）、エリキシル、溶液または懸濁液の形態で、経口、口腔または舌下で投与することができ、これらは矯味剤または着色剤を含んでもよい。本発明の化合物はまた、速く分散もしくは速く溶解する剤形としてまたは高いエネルギー分散の形態で、またはコートされた粒子としても投与することができる。所望の場合、本発明の化合物の適当な処方物は、コーティングされるかまたはコーティングされていない形態であってもよい。
【００６３】
かかる固体の医薬組成物、例えば錠剤は、賦形剤、例えば微晶性セルロース、ラクトース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、二塩基リン酸カルシウム、グリシンおよびデンプン（好ましくはトウモロコシ、ジャガイモまたはタピオカデンプン）、崩壊剤、例えばナトリウムデンプングリコレート、クロスカルメロースナトリウム（croscarmellose sodium)および特定の複合体シリケート、ならびに顆粒結合剤、例えばポリビニルピロリドン、ヒドロキシメチルセルロース（HPMC）、ヒドロキシプロピルセルロース（HPC）、スクロース、ゼラチンおよびアカシアを含むことができる。さらに、潤滑剤、例えばマグネシウムステアレート、ステアリン酸、グリセリルベヘネートおよびタルクを含んでもよい。
【実施例】
【００６４】
一般実施例
錠剤の処方物は約0.01mg〜500mgの活性化合物を典型的に含み、それに対して錠剤の充填物質の重量は50mg〜1000mgの範囲にすることができる。１0mg錠剤の処方の例が以下に例示される：
成分                            ％w/w
式Ｉの化合物                        10.000*
ラクトース                          64.125
デンプン                            21.375
クロスカルメロースナトリウム        3.000
マグネシウムステアレート            1.500
*  薬物活性に従って調整された量
【００６５】
錠剤は、標準工程、例えば直接圧縮または湿式もしくは乾式造粒工程によって製造される。錠剤コアは適当なオーバーコートでコーティングされてもよい。
【００６６】
類似した型の固形組成物もまた、ゼラチンまたはHPMCカプセルの充填剤として使用することができる。好適な賦形剤は、この点に関してはラクトース、デンプン、セルロース、乳糖または高分子量のポリエチレングリコールを含む。水性懸濁液および／またはエリキシルに関して、本発明の化合物は薬剤を乳化および／または懸濁させて、種々の甘味料もしくは香味料、着色剤物質もしくは色素と組み合わせてもよく、そして希釈剤、例えば水
、エタノール、プロピレングリコールおよびグリセリンならびにその組み合わせと組み合わせてもよい。
【００６７】
修飾された放出および拍動性放出剤形は、賦形剤、例えば放出速度調節剤として作用するさらなる賦形剤と共に即時の放出剤形を示すものを含んでもよく、これらはデバイスの本体上にコーティングされているか、および／またはその中に含まれている。放出速度調節剤は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、酢酸セルロース、ポリエチレンオキシド、キサンタンガム、カルボマー、アンモニオメタクリレートコポリマー、水素化されたひまし油、カルナゥバワックス、パラフィンワックス、フタル酸酢酸セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メタクリル酸コポリマーおよびその混合物を含むがこれに限定されるものではない。修飾された放出および拍動性放出剤形は、放出速度修飾賦形剤の１つまたはその組み合わせを含んでもよい。放出速度修飾賦形剤は剤形の内部、すなわちマトリックス内部に、および／または剤形上、すなわち表面またはコーテンィグ上の両方に存在してもよい。
【００６８】
速い分散または溶解性の投薬処方物（FDDFs）は、以下の成分を含んでもよい：アスパルテーム、アセスルファムカリウム、クエン酸、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ジアスコリビン酸、エチルアクリレート、エチルセルロース、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、マンニトール、メタクリル酸メチル、ミント香味料、ポリエチレングリコール、ヒュームド・シリカ、二酸化ケイ素、ナトリウムデンプングリコレート、ナトリウムステアリルフマレート、ソルビトール、キシリトール。FDDSを説明するために本願明細書中に使用される用語「分散」または「溶解」は、使用される薬物物質の溶解性に依存し、すなわち薬物物質が不溶性である場合、速く分散する剤形が製造され、そして薬物物質が可溶性である場合速く溶解する剤形が製造され得る。
【００６９】
本発明の化合物はまた非経口的、例えば、空洞内に（intracavernousily）、静注で、動脈内に、腹膜内に、髄膜下に、心室内に、尿道内に、胸骨内に、頭蓋内に、筋肉内または皮下に投与してもよく、またはそれらは輸液またはニードルレス注入技術により投与してもよい。かかる非経口投与のために本発明の化合物は、他の物質、例えば血液と等張の溶液を作るのに十分な塩またはグルコースを含んでもよい滅菌水溶液の形で使用されるのが最も良い。この水溶液は、必要に応じて適切に緩衝化されるべきである（好ましくはpH３〜９）。滅菌条件下の適当な非経口処方物の製造は、当業者に周知の標準的医薬技術によって容易に達成される。
【００７０】
以下の投薬量レベルおよび本願明細書中の他の投薬量レベルは、約65〜70kgの範囲の体重を有する平均的なヒト被検者に対するものである。当業者は、この範囲外の体重の被検者、例えば小児および年輩者に必要とされる投薬量レベルを容易に決定することができる。
【００７１】
ヒト患者への経口および非経口投与のために、本発明の化合物の１日の投薬量レベルは、通常0.01mg〜500mg（１回または分割された用量で）である。
【００７２】
このように、本発明の化合物の錠剤またはカプセルは、単独または同時に２もしくはそれ以上の投与のために、0.01mg〜500mg（例えば10mg〜250mg）の活性化合物を含みうる。医師はいずれにしても任意の個体患者のために最も適当である実質の投薬量を決め、そしてそれは特定の患者の年齢、体重および反応によって変化する。上記の投薬量は、例示的な平均的ケースである。もちろん、より高いかまたはより低い投薬量の範囲に値する個々の例が存在し、そのようなものも本発明の範囲内にある。当業者は、本発明の化合物が必
要に応じてまたは所望の場合、一回量として摂取され得ることを認識するであろう。
【００７３】
本発明の化合物はまた鼻腔内にまた吸入によって投与されることができ、そして乾燥粉末吸入器または加圧容器、ポンプ、スプレー、噴霧器もしくはネブライザからのエアロゾルスプレープレゼンテーションの形で、適切な噴射剤、例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、ヒドロフルオロアルカン例えば１，１，１，２，−テトラフルオロエタン（HFA 134A [商標]）もしくは１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパン（HFA 227EA [商標]）、二酸化炭素または適当な他のガスを使用してまたは使用することなく都合よく送達されうる。加圧されたエアロゾルの場合、投薬単位は計量された量を送達するバルブを用意することで決定してもよい。加圧されたコンテナ、ポンプ、スプレー、噴霧器またはネブライザは、例えば溶媒としてのエタノールと噴射剤（これは潤滑剤例えばソルビタントリオレアートをさらに含んでもよい）との混合物を使用した。活性化合物の溶液または懸濁液を含んでもよい。吸入器または通気器の使用のためにカプセルおよびカートリッジ（例えばゼラチンから作られる）を、本発明の化合物の粉末ミックスおよび適当な粉末ベース例えばラクトースまたはデンプンを含ませて処方することができる。
【００７４】
各々計量された用量または「一吹き（puff）」が患者への送達のために１μg〜50mgの本発明の化合物を含むように、エアロゾルまたは乾燥粉末製剤が好ましくは準備される。エアロゾルによる１日の全用量は、１μg〜50mgの範囲であり、これは一回量またはより通常には１日の間を通して分割された用量で投与され得る。
【００７５】
あるいは、本発明の化合物は坐薬またはペッサリの形で投与されてもよいし、またはそれらはゲル剤、ヒドロゲル、ローション剤、溶液、乳剤、軟膏または散粉剤の形で局所的に適用されてもよい。本発明の化合物はまた、例えば皮ふパッチの使用により、皮膚にまたは経皮的に投与されてもよい。本発明の化合物はまた、肺または直腸経路によって投与されてもよい。
【００７６】
本発明の化合物はまた、眼経路によって投与されてもよい。眼への使用のために当該化合物は、等張性、ｐＨ調整された滅菌生理食塩水中に微粉にされた懸濁液として、または好ましくは、等張性、ｐＨ調整された滅菌生理食塩水中の溶液として、場合により保存料、例えばベンジルアルコニウムクロリドと組み合わせて処方することができる。あるいは、本発明の化合物はペトロラタムのような軟膏において処方されてもよい。
【００７７】
皮ふへの局所的適用のために、本発明の化合物は、１またはそれ以上の鉱油、流動ペトロラタム、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン化合物、乳化しているワックスおよび水との混合物中に懸濁されるかまたは溶解された活性化合物を含む適当な軟膏として処方することができる。あるいは、本発明の化合物は、例えば以下：鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリエチレングリコール、流動パラフィン、ポリソルベート60、セチルエステルワックス、セテアリールアルコール（cetearyl alcohol）、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水、の１またはそれ以上の混合物中に懸濁されるかまたは溶解された適当なローション剤またはクリームとして処方することができる。
【００７８】
本発明の化合物はまたシクロデキストリンと組み合わせて使用することができる。シクロデキストリンは、薬物分子との包接および非包接複合体を形成することが知られている。薬物−シクロデキストリン複合体の形成は、薬物分子の可溶性、溶解速度、生物学的利用能および／または安定度特性を修飾することができる。薬物−シクロデキストリン複合体は、大部分の剤形および投与経路のために一般に有用である。薬物との直接的複合体生成を目的とする代わりとして、シクロデキストリンは補助添加物例えば担体、希釈剤または可溶化剤として使用することができる。α−、β−およびγ−シクロデキストリンが最も一般的に使用され、そして適当な例がWO-A-91/11172、WO-A-94/02518およびWO-A-98/55148に記載されている。
【００７９】
本発明はさらに、PDE9阻害剤（特に第一の態様の種々の実施形態において定義される式Ｉの化合物）および以下から選択される１またはそれ以上の追加の活性薬剤の組み合わせを含む：
ａ）PGl2プロスタグランジン、例えばプロスタサイクリンまたはイロプロスト）;
ｂ）α−アドレノ受容器アンタゴニスト、α−受容体アンタゴニストまたはα−遮断薬として公知のα−アドレナリン受容体アンタゴニスト化合物；本願明細書における使用のための適当な化合物は、1998年6月14日に発行されたＰＣＴ出願W099/30697に記載されるα−アドレナリン受容体アンタゴニストを含み（α−アドレナリン受容体アンタゴニストに関するこの開示は、本願明細書中に参照により加入される）、そして選択的α1−アドレノ受容器アンタゴニストまたはα2−アドレノ受容器アンタゴニストおよび非選択的アドレノ受容器アンタゴニストを含み、適当なα1−アドレノ受容器アンタゴニストは、フェントラミン、フェントラミンメシラート、トラゾドン、アルフゾシン、インドラミン、ナフトピジル（naftopidil）、タムスロシン（tamsulosin）、ダピプラゾール、フェノキシベンズアミン、イダゾキサン、エファラキサン（efaraxan）、ヨヒンビン、ラウウォルファ（rauwolfa）、アルカロイド、Recordati 15/2739、SNAP 1069、SNAP 5089、RS17053、SL 89.0591、ドキサゾシン、テラゾシン、アバノキル（abanoquil）およびプラゾシンを含み;ＵＳ 6,037,346［2000年3月14日］のα2−遮断薬、ジベナルニン（dibenarnine）、トラゾリン、トリマゾシンおよびジベナルニン;以下のＵＳ特許：4,188,390；4,026,894；3,511,836；4,315,007；3,527,761；3,997,666；2,503,059； 4,703,063；3,381,009；4,252,721および2,599,000（それらの各々が本願明細書に参照により加入される）に記載されるα−アドレナリン受容体；α2−アドレノ受容器アンタゴニストは場合によりピルキサミン（pirxamine）のようなカリオトニック（cariotonic）薬剤の存在下にある、クロニジン、パパベリン、塩酸パパバリンを含み;
【００８０】
ｃ）NO−ドナー（NO−アゴニスト）化合物;本願明細書における使用のための適当なNO−ドナー化合物は以下を含む：有機ニトラート、例えばモノ−ジもしくはトリ−ニトラートまたはグリセリルトリニトラート（別名ニトログリセリン）を含む硝酸エステル、イソソルビド5−モノニトラート、イソソルビドジニトラート、ペンタエリスリトールテトラニトラート、エリスリチルテトラニトラート、ニトロプルシドナトリウム（SNP）、3−モルホリノシドノニミンモルシドミン（3−morpholinosydnonimine molsidomine）、S−ニトロソ−N−アセチルペニシリアミン（acetylpenicilliamine ）（SNAP）、S−ニトロソ−N−グルタチオン（SNO−GLU）、N−ヒドロキシ−L−アルギニン、アミルニトラート（amylnitrate）、リンシドミン（linsidomine）、リンシドミンクロロヒドレート、（SIN−1）S−ニトロソ−N−システイン、ジアゼニウムジオレート（diazenium diolates）、（NONOates）、1,5−ペンタンジニトラート、Ｌ−アルギニン（L−arginene）、ヤクヨウニンジン、ジズフィフルクタス（zizphi fructus）、モルシドミン、Re-2047、公開さたPCT出願WO 0012075に記載されたニトロシル化マキシライト(nitrosylated maxisylyte)誘導体、例えばNMI-678-11およびNMI-937;
ｄ）カリウムチャネルオープナー；本願明細書中の使用のための適当なカリウムチャネルオープナーは、ニコランジル、クロモカリム（cromokalim）、レブクロマカリム（levcromakalim）、レマカリム（lemakalim）、ピナシジル、クリアゾキシド（cliazoxide）、ミノキシジル、カリブドトキシン、グリブリド、4−アミノピリジン、バリウムクロリド;
【００８１】
ｅ）心房性ナトリウム排泄増加ファクター（atrial natruretic factor）（別名心房性ナトリウム排泄（naturetic）ペプチド）の作用を調節する化合物、例えば中性エンドペ
プチダーゼ（NEP）の阻害剤;
ｆ）アンギオテンシン変換酵素（ACE）を抑制する化合物（例えばアサラセプリル（alacepril）、アリンダプリル（alindapril）、アルチオプリル（altiopril）、ベナゼプリル（benazepril）、ベナゼプリラート（benazeprilat）、カプトプリル、セロナプリル（ceronapril）、シラザプリル、シラザプリラート（cilazaprilat）、デラプリル、エナラプリル、エナラプリラート、フォシノプリル（fosinopril）、イミダプリル（imidapril）、インドラプリル（indolapril）、リベンザプリル（libenzapril）、リシノプリル、モエキセプリル（moexepril）、モベルチプリル（moveltipril）、ペントプリル、ペリンドプリル（perindopril）、キナプリル（quinapril）、キナプリラート（quinaprilat）、ラミプリル（ramipril）、レンチアプリル（rentiapril）、スピラプリル（spirapril）、テモカプリル（temocapril）、テプロチド（teprotide）、トランドラプリル（trandolapril）およびゾフェノプリル（zofenopril））、または二重のACE／NEP阻害剤、すなわちACEおよびNEP両方を阻害する化合物（例えばオマプリラート（omapatrilat）、ファシドトリル（fasidotril）、ミキサプリル（mixanpril）、BMS-189921、MDL-100240およびZ13752A）。
ｇ）アンギオテンシンIIレセプタ遮断薬（ARB）、例えばカンデサルタン（candesartan）、エプロサルタン（eprosartan）、イルベサルタン（irbesartan）、ロサルタン（losartan）、オルメサルタン（olmesartan）、オルメサルタンメドキソミル（olmesartan medoxomil）、サララシン、テルミサルタン（telmisartan）およびバルサルタン（valsartan）。
ｈ）NO−シンターゼに対する基質（例えばL−arginine）;
【００８２】
ｉ）カルシウムチャネル拮抗薬例えばアムロジピン、ベラパミル、プラニジピン（pranidipine）、アゼルニジピン（azelnidipine）およびバタニジピン（vatanidipine）;
ｊ）エンドセリン受容体のアンタゴニストまたはエンドセリン−変換酵素の阻害剤;
ｋ）スタチンのようなコレステロール低下薬（スタチンの例は、アトルバスタチンカルシウム（Lipitor）、セリバスタチンナトリウム（Baycol）、フルバスタチンナトリウム（Lescol）、ロバスタチン（Mevacor）、プラバスタチンナトリウム(Pravachol)およびシンバスタチン（Zocor)である）;
ｌ）抗血小板または抗血栓薬剤、例えばtPA、uPA、ワルファリン、ヒルジンおよびその他トロンビン阻害剤、アスピリン、プラビックス、シラストゾール（cilastozol）、ヘパリン、トロンボプラスチン活性化因子阻害剤;
ｍ）PDE5阻害剤（例えば５−［２−エトキシ５−（４−メチル−１−ピペラジニルスルホニル）フェニル］−１−メチル−３−ｎ−プロピル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ]ピリミジン−７−オン（シルデナフィル）；（６Ｒ，１２ａＲ）−２，３，６，７，１２，１２ａ−ヘキサヒドロ−２−メチル−６−（３、４−メチレンジオキシフェニル）ピラジノ［２l，１l：６，１］ピリド［３，４−ｂ］インドール−１，４−ジオン（タダラフィル（tadalafil）、IC-351）；２−［２−エトキシ−５−（４−エチル−ピペラジン−１−イル−１−スルホニル）−フェニル］−５−メチル−７−プロピル−３Ｈ−イミダゾ［５，１ｆ]［１，２、４］トリアジン−４−オン（バルデナフィル（vardenafil））；５−［２−エトキシ−５（４−エチルピペラジン−１−イルスルホニル）−ピリジン−３−イル］−３−エチル−２−［２−メトキシエチル］−２，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ]ピリミジン−７−オン；および５−（５−アセチル−２−ブトキシ−３−ピリジニル）−３−エチル−２−（１−エチル−３−アゼチジニル）−２，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ]ピリミジン−７−オン）；ならびに
ｎ）β−遮断薬、利尿剤またはアルドステロンアンタゴニスト。
【００８３】
活性薬剤の組み合わせが投与される場合、それらは同時にか、別々にかまたは順番に投与されてもよい。
【００８４】
治療に対する本願明細書中の全ての言及は、治癒的、対症的および予防的治療を含むと
理解されるべきである。
【００８５】
更なる態様において哺乳動物の心血管障害を治療する方法が提供され、ここで哺乳動物は有効量のPDE9阻害剤により治療される。第一の態様のために本願明細書中の上記で特定された好ましい実施形態がこの態様に及ぶ。
以下の実施例は、式Ｉの化合物の製造を例示する。
【００８６】
実施例１
式Ｉの化合物１〜126（表３を参照のこと）を、以下のように製造し、分離し、そして精製した。各々の化合物は、ａ)下記の条件下で測定されたそのHPLC保持時間（rt）によ
り、およびｂ)下記の条件下でまた測定された質量分析によって特徴付けられた。
【化９】
2005511575.tif 000011
【００８７】
一般式IVの一連のカルボン酸（式中、Ｒ3は表３に定義される) (80μmol）を、ジメチルアセトアミド（400μl）中のトリエチルアミン3.75％の溶液に各々溶解し、そして96ウェルプレートに添加した。次いでピリジン（212μl）中に溶解されたカルボニルジイミダゾール（13mg、80μmol)を各ウェルに添加し、そしてプレートをそのまま室温に２時間放置した。次いで、ジメチルアセトアミド（100μl）中に溶解した調製物６からの生成物（13.5mg、80μmol）の溶液を添加した。このプレートを密閉し、そしてオーブンにおいて窒素下、18時間、70℃に加熱した。このプレートを取り出して、２時間にわたり室温まで冷ました。この溶媒をGENEVAC（45℃、0.15mbar）を使用して5.5時間にわたり除去した。イソプロピルアルコール（0.5mol）中のカリウムｔ−ブトキシド（268mg、240μmol）の溶液を各ウェルに添加し、そしてこのプレートを密閉し、そして窒素下、110℃のオーブンに15時間移した。このプレートを取り出して、そして２時間にわたり室温まで冷ました。この溶媒をGENEVAC（45℃、0.15mbar）を使用して5.5時間にわたり除去し、そしてイソプロピルアルコール（0.5ml）中のp−トルエンスルホン酸 (30mg、160μl）の溶液を各ウェルに添加した。このプレートをそのままにして室温に18時間放置し、次いで溶媒をGENEVAC（45℃、0.15mbar）を使用して5.5時間にわたり除去した。この残留物をジメチルスルホキシド：水(ウェル当たり0.5 ml、９：１ v/v)中に溶解し、そして各化合物を分取高速液体クロマトグラフィー (HPLC）により精製し、そして所望の化合物を液体クロマトグラフィー質量分析（LC−MS）により特徴付けた。
【００８８】
【表１】
2005511575.tif 000012
【００８９】
【表２】
2005511575.tif 000013
【００９０】
【表３】
2005511575.tif 000014
【００９１】
【表４】
2005511575.tif 000015
【００９２】
【表５】
2005511575.tif 000016
【００９３】
【表６】
2005511575.tif 000017
【００９４】
【表７】
2005511575.tif 000018
【００９５】
実施例２
式Ia2の化合物127〜255（表４を参照のこと）を、適当なカルボン酸IVを式IIIの適当な化合物と反応させることにより、GENEVAC条件は全てのケースにおいて30℃、0.15mbar、１１時間に調整することを除く、大体実施例１と同じ手順により、製造し、分離し、そして精製した。各化合物は、ａ）上記の条件下で測定されたそのHPLC保持時間（rt）により、およびｂ）上記条件下の質量分析によって特徴付けられた。
【００９６】
【表８】
2005511575.tif 000019
【００９７】
【表９】
2005511575.tif 000020
【００９８】
【表１０】
2005511575.tif 000021
【００９９】
【表１１】
2005511575.tif 000022
【０１００】
【表１２】
2005511575.tif 000023
【０１０１】
実施例３
３−シクロペンチル−５−（２−トリフルオロメトキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物256）
【化１０】
2005511575.tif 000024
製造例２８からの生成物（120mg、0.303mmol）およびカリウムtert−ブトキシド（102mg、0.909mmol）を、イソプロピルアルコール（５ml）中に懸濁し、そして反応物を窒素下で１８時間還流加熱した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物を酢酸エチル（20ml）と水（20ml）の間に分割した。この水相を除去し、２Ｎ HClでpH２まで酸性化し、そして酢酸エチル（２×15ml）で抽出した。合わせた有機抽出物を飽和炭酸ナトリウム溶液（３×10ml）で洗浄し、MgS04により乾燥させ、減圧下で濃縮し、そして残留物をシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって、ジクロロメタン：メタノール（体積で95：５）で溶離して精製し、オフホワイト固体として表題生成物（21mg）を与えた：1H NMR（400MHz, DMSO-d6): δ = 7.36-7.41 (2H, m), 7.29-7.36 (2H, m), 3.97-4.03 (2H, brs), 2.39-2.45 (1H, m, 溶媒により部分的にマスクされる), 1.82-1.94 (2H, m), 1.66-1.79 (2H, m), 1.58-1.65 (2H, m), 1.49-1.58 (2H, m) ppm; LRMS(エレクトロスプレー) : m/z [M-H]+ 377.
【０１０２】
式Ia2の化合物257〜261を以下の表５に示される出発物質から実施例３に類似の方法により製造した。
【表１３】
2005511575.tif 000025
【０１０３】
【表１４】
2005511575.tif 000026
【０１０４】
実施例４
５−３−クロロベンジル−３−イソプロピル−２−メチル−２、６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４、３ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物262）
【化１１】
2005511575.tif 000027
イソプロピルアルコール（６ml）中の製造例３１からの生成物（0.2ｇ）の混合物に、カリウムtert−ブトキシド（2.2ｇ）を添加し、そして85℃で24時間、次いで室温で３日間攪拌した。生じた不均質混合物を真空中で濃縮した。水（10ml）を残留物に添加し、その後３滴の濃塩酸を添加した。生じた沈降物を酢酸エチル（150ml）中に取り上げ、そして水（×２）で洗浄した。有機抽出物を（MgS04）で乾燥させ、そして濃縮して固体を与え、これをシリカゲルを用いたカラムクロマトグラフィによりジクロロメタン：メタノール（100：0から99：1に変化して、98：２に変化する）の溶媒勾配で溶離して精製し、表題生成物を与えた;1H NMR(400MHz,-CD3OD) : δ = 7.39 (1H, s), 7.28 (1H, s), 7.12 (2H, m), 4.01 (3H, s), 3.96 (2H, s), 3.26(1H, m), 1.45 (6H, d)。
【０１０５】
実施例５
５−（２−トリフルオロメトキシベンジル）−３−フェニル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物263）
【化１２】
2005511575.tif 000028
パラジウムテトラキストリフェニルホスフィン（22mg、５モル％）を、エチレングリコールジメチルエーテル（３ml）中の製造例３６からの生成物（164mg、0.376mmol）、フェニルボロン酸（69mg、0.56mmol）、炭酸ナトリウム（119mg、0.8mlの水における溶液として1.13mmol）の、窒素除去された溶液に添加した。この混合物を18時間、83℃で加熱した。冷却において、この混合物を酢酸エチル／テトラヒドロフランで希釈しそしてブラインで洗浄し、乾燥させ(MgS04)、ろ過してそして真空内で濃縮した。この残留物を分取HPLC（アセトニトリル−水勾配）によって精製し、無色固体として表題生成物（15mg）を与えた。1H NMR(400MHz, CD3OD) : δ = 8.2 (bs, 2H);7.4 (m, 9H); 4.1 (s, 2H); LCMS: m/z [M+H]+ 387.
【０１０６】
以下の「製造例」は、前述の実施例で用いられた特定の中間体の調製物を記載する。
製造例１
５−メチル−２，４−ジオキソ−ヘキサン酸エチルエステル
ナトリウムペレット（3.39ｇ、148mmol）を室温で窒素下、エタノール（100ml）中に溶解し、そして３−メチル−２−ブタノン（18.9ml、177mmol）中のジエチルオキサレート（20ml、147mmol）の溶液を、室温で30分にわたり滴下により添加した。この反応をエタノール（100ml）で希釈し、60℃まで加熱し、そしてこの温度で２時間撹拌した。室温に冷ました後、この反応物を氷冷２Ｎ HCl(200mｌ)に注ぎ、そしてジエチルエーテル（300ml）および酢酸エチル（300ml）で抽出した。合体したこの有機抽出物をMgSO4上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、そしてこの残留物をシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィにより、ペンタン：酢酸エチル（体積で99：１から９５：５に変化する）の溶媒勾配で溶離して精製し、黄色油状物として表題生成物（23.8ｇ）を得た；1H NMR(400MHz,CDCl3) : δ = 14.40-14.80 (1H, brs), 6.40 (1H, s), 4.30-4.39 (2H, quart), 2.60-2.71 (1H, quin), 1.35-1.40 (3H, t), 1.15-1.20 (6H, d) ppm; LRMS(エレクトロスプレー) : m/z [M-H]+ 185.
【０１０７】
製造例２
５−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸エチルエステル
【化１３】
2005511575.tif 000029
ヒドラジン水和物（6.6ml、134mmol）をエタノール（100ml）中の製造例１からの生成物（23.8g、188mmol）の溶液に、窒素下、室温で添加した。この反応を18時間、室温で進行させ、そして溶媒を減圧下で除去した。この残留物をジクロロメタン（300ml）と水(300ml)との間に分割し、そして水相を除去した。有機相を水（２×200ml）で洗浄し、MgS04上で乾燥させ、そして減圧下で濃縮した。この残留物をシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによってペンタン：酢酸エチル（体積で４：１から２：1に変化する）の溶媒勾配で溶離して精製し、白色固体として表題生成物(18.9g）を得た; 1H NMR(400MHz,CDCl3) : δ = 10.80-10.95 (1H, brs), 6.61 (1H, s), 4.33-4.40 (2H, quart), 2.98-3.08 (1H, quin), 1.35-1.41 (3H, t), 1.24-1.32 (6H, d) ppm; LRMS (エレクトロスプレー) : m/z[M-H]+ 181.
【０１０８】
製造例３
５−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸
【化１４】
2005511575.tif 000030
製造例２からの生成物（18.9ｇ、104mmol）および１M NaOH溶液（260ml、259mmol）を、1,4−ジオキサン（300ml）中に溶解し、この反応物を窒素下で50℃まで加熱し、そして３時間撹拌した。この反応混合物を冷却し、濃塩酸を用いてpH２に調整し、そして溶媒を減圧下で除去した。残った固体をトルエン（２×30ml）と共沸させ、酢酸エチル（500ml）中に溶解し、そして水（200ml）で洗浄した。水相を除去し、酢酸エチル（２×200ml）で抽出し、そして合体した有機抽出物をMgS04上で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、そして残留物をジクロロメタン（２×50ml）と共沸させ、白色固体として表題生成物（14.7ｇ）を得た; 1H NMR(400MHz, DMSO-D6): δ = 12.50-13.30 (2H, brs), 6.42 (1H, s), 2.84-2.94 (1H, quin), 1.15-1.19 (6H, d) ppm; LRMS(エレクトロスプレー) : m/z[M-H]+ 153。
【０１０９】
製造例４
５−イソプロピル−４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸
【化１５】
2005511575.tif 000031
製造例３からの生成物（５ｇ、32.5mmol）を濃硫酸（25ml）に、室温で攪拌しながら一部ずつ添加した。次いでこの反応混合物を60℃に加熱し、濃硝酸（70％、6ml、90mmol） を滴下により添加する一方、温度を60℃に維持した。この反応物を60℃で３時間攪拌し、室温に冷まし、次いで攪拌しながら氷50mlに注いだ。１５分後、白色沈殿をろ過により分離し、水で洗浄しそして減圧下で乾燥させて白色固体として表題生成物（5.2ｇ）を得た；1H NMR(400MHz, DMSO-D6): δ = 13.86-13.93 (1H, brs), 13.50-13.80 (1H, brs), 3.39-3.52 (1H, m), 1.18-1.30 (6H, d) ppm; LRMS (エレクトロスプレー) : m/z [M-H]+ 198.
【０１１０】
製造例５
５−イソプロピル−４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸アミド
【化１６】
2005511575.tif 000032
塩化オキサリル（6.8m1, 77.6mmol） をジメチルホルムアミド（0.1ml）を含むジクロロメタン（80ml) 中の製造例４からの生成物（5.15ｇ、25.9mmol）の懸濁液に、窒素下、０℃で滴下により添加した。反応物を０℃で１時間攪拌し、室温まで温めてさらに２時間
攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、残留物をトルエン（100ml）に溶解し、そしてアンモニアガスを溶液に２時間泡立てて導入した。この反応物を、室温で、窒素下、18時間撹拌し、減圧下で濃縮してそして残留物を熱したメタノール（300ml）中に溶解した。生じた沈殿物をろ過し、そして濾液を減圧下で濃縮した。この残留物を水（300ml）と共沸し、減圧下で約80mlまで濃縮し、そして沈殿物をろ過により分離した。濾液を水で洗浄し、真空中で乾燥させ、オレンジ固体として表題生成物（3.1ｇ）を得た; 1H NMR(400MHz, DMSO-D6): δ = 7.94-7.99 (1H, brs), 7.68-7.72 (1H, brs), 3.45-3.55(1H, m), 1.24-1.30 (6H, d) ppm; LRMS (エレクトロスプレー) : m/z[M+Na]+ 221, [M-H]+ 197。
【０１１１】
製造例６
４−アミノ−５−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸アミド
【化１７】
2005511575.tif 000033
エタノール（30ml）中の製造例５からの生成物（３ｇ、15.1mmol）および炭素上の10％パラジウム（500mg）を、水素下（50psi）、室温で18時間撹拌した。この反応混合物をろ過し、そしてその固体をメタノール（50ml）、ジクロロメタン（50ml）、エタノール(50mol)および酢酸エチル（50ml）で洗浄した。この濾液を減圧下で濃縮し、そして残留物をシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって、ジクロロメタン：メタノール（体積で９：１）で溶離して精製し、オフホワイト固体として表題生成物（2.6ｇ）を得た；1H NMR(400MHz, DMSO-D6): δ = 12.20-12.30 (1H, brs), 7.02-7.14 (1H, brs), 6.85-6.95 (1H, brs), 4.30-4.46 (2H, brs), 2.90-3.00 (1H, m), 1.15-1.21 (6H, d) ppm; LRMS (エレクトロスプレー) : m/z[M-H]+ 167, [2M-H]+ 335 ; 分析値 C, 49.86 ; H, 7.21 ; N, 33.07。C7H12N4OはC, 49.99 ; H, 7.19 ; N, 33.31％を要する。
【０１１２】
一般式IIIaの製造例７〜１０の生成物を、製造例１〜６に類似の方法により表６で示される出発物質から製造した。
【表１５】
2005511575.tif 000034
【０１１３】
製造例１１
４−アミノ−５−イソプロピル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド
【化１８】
2005511575.tif 000035
エタノール中の製造例１２からの生成物を、50℃および50p.s.i、２時間、チャコール上の10％パラジウムの存在下で水素化した。この反応混合物をろ過し、真空中で濃縮し、そしてジクロロメタンと共沸させ、固体として表題生成物（0.16ｇ）を得た；1H NMR(400MHz,CDCl3) : δ = 6.99(1H, br.s), 6.86(1H, br.s), 4.41 (2H, br.s), 3.66 (3H, s), 3.02 (1H, m), 1.19 (6H, d)。
【０１１４】
製造例１２
５−イソプロピル−１−メチル−４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド
【化１９】
2005511575.tif 000036
アセトニトリル(６ml)中の製造例５からの生成物 (150mg) の混合物に、炭酸セシウム（107mg）、その後ヨードメタン（40μl）を添加した。この混合物を77℃で一晩加熱した。この混合物を真空中で濃縮し、そして残留物を酢酸エチル（200ml）中に取り上げ、そしてブラインで洗浄した。この有機抽出物を乾燥させ（MgS04)、溶媒を除去し、そして残留物をシリカゲルを使用してクロマトグラフィにより、ペンタン: 酢酸エチル(100：０ 〜15：１〜１：１） で溶離して精製した；1H NMR(400MHz,CDCl3):δ = 6.50 (1H, br.s), 5.65 (1H, br.s), 3.89 (3H, s), 3.43(1H, m), 1.36 (6H, d).
【０１１５】
製造例１３
４−アミノ−５−（３−ピリジル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド
【化２０】
2005511575.tif 000037
0.88Ｍアンモニア（100ml）中の製造例１４からの生成物 （１ｇ)の溶液を、100℃でボンベ中一晩加熱した。この混合物を真空中で濃縮し、そしてこの残留物をシリカゲルを使用してクロマトグラフィにより、ジクロロメタン：メタノール（９：１）で溶離して精製し、表題生成物（709mg）を得た。
【０１１６】
製造例１４
エチル−４−アミノ−５−（３−ピリジル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート
【化２１】
2005511575.tif 000038
エタノール(50 ml)中のナトリウム・エトキシド（34ml、21％ w/w）の氷冷溶液に、３−（シアノメチル）ピリジン (10 ml)を３０分間にわたり滴下により添加した。この反応混合物を30分間、０℃で攪拌し、そしてジアゾ酢酸 (9.9 ml）を15分間にわたり滴下により添加した。この反応混合物を室温まで温め、一晩攪拌した。水を添加し、この溶液を二酸化炭素で中和した。酢酸エチルおよびジクロロメタン（約1000ml）で混合物を抽出し、固体を沈殿させた。固体のろ過により表題生成物（13.6ｇ）を得た。
【０１１７】
製造例１５
４−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸アミド
【化２２】
2005511575.tif 000039
この表題生成物を、製造例１６の生成物から出発する製造例６に類似の方法により製造した。
【０１１８】
製造例１６
４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸アミド
【化２２】
2005511575.tif 000040
表題生成物を４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（Sigma-Aldrich Chemical Co.）から出発する製造例５に類似した方法によって製造した。
【０１１９】
製造例１７
(３−ベンジルオキシ−フェニル)−酢酸ベンジルエステル
【化２３】
2005511575.tif 000041
３−ヒドロキシ-フェニル酢酸（15.3ｇ、101mmol）、臭化ベンジル（36.2ｇ、202mmol）および炭酸カリウム（29.2ｇ、202mmol）をジメチルホルムアミド（300ml）中に懸濁し、そしてこの反応物を44時間、窒素下で還流加熱した。この反応物を冷まし、ろ過し、そして濾液を減圧下で濃縮した。この残留物を酢酸エチル（200ml）と水（200ml）との間に分割し、そして水相を酢酸エチル（２×200ml）で抽出した。合体した有機抽出物をブライン（200ml）で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、そして溶媒を減圧下で除去した。この残留物をシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによってペンタン：酢酸エチル（体積で95：５）で溶離して精製し、白色固体として表題生成物（10.7ｇ）を得た。
【０１２０】
製造例１８
３−ベンジルオキシ−フェニル）−酢酸
【化２５】
2005511575.tif 000042
１Ｎ 水酸化ナトリウム溶液（35ml、35mmol）を室温で窒素下、メタノール（350ml）中の製造例１７からの生成物（5.3ｇ、16mmol）の溶液に添加した。この反応物を２時間還流加熱し、そして溶媒を減圧下で除去した。この残留物を水（500ml）中に溶解し、そしてエーテル（３×350ml）で抽出した。この水相を濃塩酸でpH１まで酸性化し、そして残留沈殿物をろ過により分離して、そして真空下で乾燥させ、白色固体として表題生成物（3.08ｇ）を得た。m.p.127-129℃ ; 1H NMR(400MHz,CDCl3) : δ = 7.26-7.43 (5H, m), 7.20-7.26 (1 H, m, 溶媒により部分的にマスクされている), 6.84-6.96 (3H, m + s), 5.04 (2H, s), 3.62 (2H, s) ppm; LRMS (エレクトロスプレー) : m/z [M-H]+ 241 ; 分析値 C, 74.21 ; H, 5.82。C15H140はC, 74.36 ; H, 5.82％を要する。
【０１２１】
製造例１９
（４−ヒドロキシ−３−メトキシ−フェニル）−酢酸メチルエステル
【化２６】
2005511575.tif 000043
濃硫酸（12ml）を、室温でメタノール（450m1）中の（４−ヒドロキシ−３−メトキシ-フェニル）−酢酸（22.5ｇ、123mmol）の溶液に添加し、そして反応物を90℃で2.45時間加熱した。次いでこの反応物を室温に冷やし、そして18時間撹拌し、そして溶媒を減圧下で除去した。この残留物を氷水（300ml）中に懸濁し、そしてジエチルエーテル（２×300ml）で抽出した。合体した有機抽出物を飽和重炭酸ナトリウム溶液（２×100ml）、ブライン（100ml）で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、そして減圧下で濃縮した。この残留物をシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによってシクロヘキサン：酢酸エチル（体積で80：20〜70：30、60: 40および最終的に１：１に変化する）の溶媒勾配で溶離して精製し、黄色油状物として表題生成物（23g）を得た; 1H NMR(400MHz,CDCl3) : δ = 6.82-6.85 (1 H, d), 6.80 (1 H, s), 6.76-6.79 (1 H, d), 5.49 (1 H, s), 3.86 (3H, s), 3.66 (3H, s), 3.53 (2H, s) ppm; LRMS (エレクトロスプレー) : m/z [M+Na]+ 219。
【０１２２】
製造例２０
４−シクロペンチルオキシ−３−メトキシ−フェニル）−酢酸メチルエステル
【化２７】
2005511575.tif 000044
シクロペンタノール（7.7ml、85mmol）およびトリフェニルホスフィン（28ｇ、107mmol）を、窒素下、０℃でテトラヒドロフラン（280ml）中の製造例１９からの生成物(14ｇ、71mmol）の溶液に添加した。次いで、ジエチルアゾジカルボキシレート（15.7ml、100mmol）を滴下して添加し、そして反応物を室温に温め、そして44時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、ペンタン（200ml）を加え、そして懸濁液をろ過した。濾液を減圧下で濃縮し、そしてシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによってシクロヘキサン：酢酸エチル（体積で90：10〜85：15に変化する）の溶媒勾配で溶離して精製し、無色油状物として表題生成物(12.4g）を得た; 1H NMR(400MHz, CD3OD) : δ = 6.79-6.85 (2H, m), 6.73-6.79 (1H, d), 4.73-4.79 (1H, brs), 3.79 (3H, s), 3.64 (3H, s), 3.53 (2H, s), 1.74-1.89 (6H, m), 1.56-1.67 (2H, m) ppm; LRMS (エレクトロスプレー) : m/z [M+Na]+ 287 ; 分析値 C, 68.01 ; H, 7.74。C15H20O4 はC, 68.16; H, 7.63％を要する。
【０１２３】
製造例２１
（４−シクロペンチルオキシ−３−メトキシ−フェニル）−酢酸
【化２８】
2005511575.tif 000045
水酸化ナトリウム（4.75ｇ、119mmol）をメタノール（100ml）／水（100ml）中の製造例２０からの生成物（12.4ｇ、46.9mmol）の溶液に添加し、反応物を3.5時間、室温で撹拌した。メタノールを減圧下で除去し、そして水相をジエチルエーテル（100ml）で洗浄し、次いで濃塩酸を使用してpH２に酸性化した。次いでこれを酢酸エチル（２×200ml）で抽出し、そして合体した有機抽出物をブライン(100ml)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、そして減圧下で濃縮し、白色固体として表題生成物（11.1g）を得た；1H NMR(400MHz, CD3OD) : δ = 6.87(1 H, s), 6.81-6.86 (1 H, d), 6.76-6.80 (1 H, d), 4.75-4.79 (1 H, brs), 3.78 (3H, s), 3.49 (2H, s), 1.71-1.89 (6H, m), 1.56-1.64 (2H, m) ppm; LRMS (エレクトロスプレー) : m/z[M-H] +249, [2M-H]+ 499; 分析値 C, 67.15 ; H, 7.25。C14H1804 はC, 67.18 ; H, 7.25％を要する。
【０１２４】
製造例２２
２，４−ジメチルフェニル−酢酸
２，４−ジメチルベンジルシアニド（70ｇ、0.48mol）を水（134ml）と混合し、そして濃硫酸（106ml、1.98mol）をゆっくり添加した。この反応物を３時間還流加熱し、次いで
室温まで18時間にわたり冷却した。この混合物を砕いた氷（500ml）上に注ぎ、１時間攪
拌し、そして生じた沈降物をろ過により分離した。水で洗浄後、固体を1.2M水酸化ナトリウム溶液（500ml）中に溶解し、ジクロロメタン（２×250ml)で抽出し、そして水相を還流温度で10分間、脱色炭素（decolourising carbon）（２ｇ）で処理し、そしてハイフロスパーセル（hyflo supercel）を通して熱ろ過（filtered hot）した。次いで、濾液を濃塩酸で酸性化し、そして生じた沈降物をろ過によって分離し、水で洗い、減圧下で乾燥させ、白色固体として表題生成物（52.6ｇ）を得た；1H NMR(250MHz,CD3OD/D2O) : δ = 6.88-7.03 (3H, m), 3.48-3.68 (2H, s), 2.23 (6H, s) ppm。
【０１２５】
製造例２３
ベンゼンスルホン酸２−クロロ−エチルエステル
２−クロロエタノール（1168g、14.5mol）およびベンゼンスルフォニルクロリド（2780ｇ、15.7mol）を−５℃で一緒に攪拌し、そしてピリジン（2158ｇ、27.2mol）を３時間にわたり添加し、温度を０℃以下に維持した。反応物をさらに３時間、−５℃で攪拌し、次いで室温まで18時間にわたり温めた。氷（10L）および水（10L）の混合物に注いだ後、反応物を１５分間撹拌し、エーテル（10L）で抽出し、そして有機相を５Ｎ HCl（２×２L）および水（２×４L）で洗浄した。次いで、MgS04上で乾燥させ、そして減圧下で濃縮し、オレンジ油状物として表題生成物（1921ｇ）を得た；1H NMR(250MHz, CDCl3) : δ = 7.78-8.02 (2H, m), 7.58-7.78 (3H, m), 4.20-4.45 (2H, t), 3.60-3.81 (2H, t) ppm.
【０１２６】
製造例２４
２−ヒドロキシ−フェニル−酢酸エチルエステル
２−ヒドロキシ−フェニル−酢酸（30.4ｇ、0.2mol）をクロロホルム（200ml）中に溶解し、そしてチオニルクロリド（50ml、0.2mol）に添加した。反応物を２時間穏やかに還流し、そこで混合物を減圧下で濃縮した。残留物をゆっくりエタノール（200ml）中に注ぎ、温度を10−20℃に維持した。この溶媒を減圧下で除去し、そして残留物を熱蒸留により精製し、黄色油状物として表題生成物（31.6ｇ）を得た。b.p.146-150℃；νmax(薄いフィルム）1710cm-1（C＝O、エステル）。
【０１２７】
製造例２５
[２−（２−クロロ−エトキシ）−フェニル]−酢酸エチルエステル
【化２９】
2005511575.tif 000046
鉱油中の50％水素化ナトリウム（8.11ｇ、169mmol）をジメチルホルムアミド(100ml)中の製造例２４からの生成物（30.4ｇ、169mmol）の溶液に添加した。初めの発泡が終わった後、反応物を100℃まで10分間加熱し、そして室温に冷やした。次いでジメチルホルムアミド（５ml）中のベンゼンスルホン酸２−クロロエチルエステル（37.2ｇ、169mmol）の溶液を添加し、そして反応物を100℃まで１時間加熱し、そして18時間以上、室温に冷やした。反応混合物をジエチルエーテル（300ml）と水（300ml）との間に分割し、そして有機相を除去しそして水(100ml)で洗浄し、MgS04上で乾燥させ、そして溶媒を減圧下で除去した。この残留物を熱蒸留により精製し、淡い黄色油状物として表題生成物（22.0ｇ）を与えた；b.p.170-180℃; νmax (薄いフィルム) 1735cm-1 (C=O, エステル); no O-H ストレッチ; 分析値 C, 59.35 ; H, 6.29。C12H15CIO3 はC, 59.38 ; H, 6.23％を要する。
【０１２８】
製造例２６
[２−（２−イミダゾール−１−イル−エトキシ）−フェニル]−酢酸エチルエステル
【化３０】
2005511575.tif 000047
室温の乾燥ジメチルホルムアミド（80ml）中のイミダゾール（4.5ｇ）の溶液に、水素化ナトリウム（50％の懸濁液3.17ｇ）を添加した。混合物を100℃で10分間加熱し、室温に冷ました。製造例２５からの生成物（16ｇ）を乾燥ジメチルホルムアミド（５ml）中に添加し、次いで100℃で4.5時間加熱した。反応混合物を冷やし、そして水を添加した。この混合物をクロロホルムで抽出し、合わせた抽出物を乾燥させ(MgS04)そして溶媒を除去して粗生成物を得た。この粗生成物を塩酸塩に変え、イソプロピルアルコール／酢酸エチルからの再結晶により精製し、その塩酸塩として表題生成物を得た。m.p.129.5-130.5 ℃.
【０１２９】
製造例２７
[２−（２−イミダゾール−１−イル−エトキシ−フェニル]−酢酸
【化３１】
2005511575.tif 000048
製造例２６からの生成物（3.5ｇ、113mmol）を50％塩酸水溶液（20ml）中に、100℃で６時間撹拌した。室温に冷却した後、溶媒を減圧下で除去し、そして残留物をイソプロピルアルコールから再結晶化させ、白色固体として表題生成物（2.73ｇ）を得た；m.p.146-147℃; vmax (薄いフィルム) 3410(O-H), 1722cm-1 (C=O, 酸); 分析値 C, 54.89 ; H, 5,25 ; N, 9.80。C13H14N203.1mol HClはC, 55.22 ; H, 5.35 ; N, 9.91％を要する。
【０１３０】
製造例２８
５−シクロペンチル−４−［２−（２−トリフルオロメトキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸アミド
【化３２】
2005511575.tif 000049
カルボニルジイミダゾール（84mg、0.515mmol）を窒素下、室温でテトラヒドロフラン（４ml）中の２−トリフルオロメトキシフェニル酢酸（113mg、0.515mmol）の溶液に加え、そして混合物を３時間攪拌した。次いで製造例１０からの生成物（100mg、0.515mmol）を添加し、反応物を18時間撹拌した。反応液混合物を水（20ml）で希釈し、２Ｎ HClでpH２に酸性化し、そして酢酸エチル（２×20ml)で抽出した。合体した有機抽出物をMgS04上で乾燥させ、そして減圧下で濃縮し、オフホワイトの固体として表題生成物（120mg）を得た；LRMS(エレクトロスプレー) : m/z [M+H]+ 397, [M-H]+ 395。
【０１３１】
一般式IIの製造例２９〜３４の生成物を、表７に示される出発物質から、製造例２８に類似の方法によって製造した。
【０１３２】
【表１６】
2005511575.tif 000050
【０１３３】
製造例３５
４−｛[（２−ベンジルオキシ−５−クロロ−フェニル）アセチル]アミノ｝−５−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド
【化３３】
2005511575.tif 000051
１−プロピルホスホン酸環状無水物（酢酸エチル中の50％溶液0.39ml、0.57mmol）を、ジメチルホルムアミド（４ml）中の２−ベンジルオキシ−５−クロロフェニル酢酸（132mg、0.475mmol）、製造例６からの生成物（80mg、0.475mmol）およびトリエチルアミン（0.132ml、0.95mmol）の溶液に、窒素下、室温で添加し、そして反応物を１８時間撹拌した。この反応混合物をブライン（20ml）で希釈し、そして酢酸エチル（２×20ml）で抽出した。合体した有機抽出物をMgS04上で乾燥させ、そして減圧下で濃縮し、オフホワイトの固体として表題生成物（191mg）を得た；LCMS: m/z 427 [M+H]+.
【０１３４】
製造例３６
５−（２−トリフルオロメトキシベンジル）−３−ヨード−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ]ピリミジン−７−オン
【化３４】
2005511575.tif 000052
Ｎ−ヨードスクシンイミド（326mg、1.45mmol）を、室温で、乾燥ジメチルホルムアミド（５ml）中の製造例３７からの生成物（300mg、0.967mmol）の溶液に添加した。この混合物を18時間、55℃で加熱し、冷却し、そして真空内で濃縮した。残留物を酢酸エチル／テトラヒドロフラン中に溶解し、そして水およびブラインで洗浄し、乾燥させ（MgS04）、ろ過してそして濃縮した。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィ（１→２％ MeOH／CH2Cl2によって精製し、オフホワイトの固体として表題生成物（169mg）を得た；1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.35 (m, 4H); 4.1 (s, 2H); LCMS：m/z 437 [M+H]+.
【０１３５】
製造例３７
５−（２−トリフルオロメトキシ−ベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン
【化３５】
2005511575.tif 000053
この表題生成物を製造例３４の生成物から出発する実施例３の工程と類似の工程により製造した；MS：m/z [M+H]+ 311。
【０１３６】
アッセイ
PDE9酵素を阻害する本発明の化合物の能力を以下のインビトロアッセイを使用して決定した。このアッセイは精製された組換えヒトPDE9を使用した。
【０１３７】
このアッセイは、PDE9酵素によって5’−ヌクレオチド[3H] GMPに加水分解される［3Ｈ］ｃGMPを使用する。［3Ｈ］GMPはイットリウムシリケートシンチレーションプロキシミティーアッセイ（SPA）ビーズに結合し、そしてシンチレーション計測法により検出される。活性の阻害は、非阻害の対照の活性と比較して決定される。
【０１３８】
物質／試薬
・組換え型ヒトPDE-9酵素（Flag-タグされている）は、バキュロウイルス／Sf9細胞系
の発現によって得られ、そして抗−FLAGモノクローナル抗体アフィニティークロマトグラフィによって精製された（D A Fisher, J F Smith, J S Pillar, S H Denis, J B Cheng (1998), J.Biol.Chem., 273: 15559-15564)。
・ホスホジエステラーゼシンチレーションプロキシミティーアッセイ（SPA）ビーズ（イットリウムシリケート）は、Amersham Biotechから得られた。
・[3H] グアノシン3’,5’−環状ホスフェート([3H]-cGMP)）、アンモニウム塩は、Amersham Biotechから得られた。
【０１３９】
アッセイ緩衝剤および溶液の調製
・水中にTris.HCl（20mM）、MgCl2.6H20（５mM）を含む緩衝剤Ａを調製した。生じた溶液を30℃で用い、そしてこれはpH＝7.4のpHを有した。
・緩衝剤Ａ中にウシ血清アルブミン（２mg／ml）（BSA）を含む緩衝剤Ｂを調製した。それを新たに調製し、そしてフィルタで滅菌した。
・PDE9酵素溶液を緩衝剤Ｂ中に調製した（生じる基質の分解が30％未満だけであるように決定した希釈比、典型的には１：35,000)。
・cGMP基質は、25nMの最終アッセイ濃度を与えるために調製されたグアノシン３：５'−環状一リン酸（cGMP）50nMストックから調製した（16.0Ci／mmolの標識された基質の特異的活性に基づく５mlを調製するため; １mCi／mlは４μl[3H]cGMPを緩衝剤Ａ 4.996mlに添加する)。
・SPAビーズを、効果的に反応をクエンチするために３mM冷cGMPを含む水（20mg／ml）（パック当たり28ml）中のビーズ懸濁液を作製することにより調製した。
【０１４０】
化合物の調製
本発明の化合物を、最終アッセイミックスに構成する場合、50倍に希釈した（すなわち100μl中２μl）。化合物ストックをDMSO中に４mMで調製した。DMSOで1／8に希釈し、500μMの溶液を与えた。
【０１４１】
基準阻害剤の４mMストックを、DMSO中に調製した。選択された標準阻害剤は、５−（３−ブロモベンジル）−３−ｎ−プロピル−１（６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３ｄ］ピリミジン−７−オンである。この溶液をＤＭＳＯによりさらに希釈し、500M溶液を与えた。
【０１４２】
10−ポイント1／2対数希釈のためには、200μlの化合物および標準溶液を96−ウェルＶ−底プレートに分配し、そしてその化合物を１：3.16のステップでDMSOで更に希釈した。段階希釈の後、２μlの化合物希釈物を２つ全く同一にマイクロタイタープレートに分配し、２μl DMSOを以下に示すように対照に添加した。
【０１４３】
【表１７】
2005511575.tif 000054
【０１４４】
アッセイ手順
本発明の化合物の溶液（２μl）を含むマイクロタイタープレートに対し、全てのウェルに緩衝剤Ａ（25μl）を添加した。緩衝剤Ｂ（25μl）をブランクウェルに添加した。酵素溶液（25μl）をブランクウェルを除く全てのウェルに添加した。基質溶液（50μl）を各ウェルに添加した。このプレートを密閉し、そして１５分間、プレート−シェーカ上に30℃でインキュベートした。SPAビーズ溶液（50μl）を反応を止めるために各ウェルに添加した（過剰なcGMPを含む）（注：イットリウムシリケートビーズを各プレートに添加するが、それは濃く、一定の攪拌を必要とする）。このプレートを15分間振り、ビーズをGMP生成物に結合させ、次いで30分間静置させる。
【０１４５】
次いでこのプレートをシンチレーションカウンタ（例えばNXT TopCount）TMを使用して分析した。
【０１４６】
各化合物について、百分率阻害を以下の式によって算出した：
（平均最大−化合物値）／（平均最大−平均最小）×１００
ＩＣ50値を酵素活性対化合物濃度のシグモイド用量応答曲線から決定した。基準のＩＣ50は３０〜５０nMの範囲に入ると予想された。
【０１４７】
PDE1酵素を阻害する化合物の能力は、PDE9に関する上記のアッセイ手順と概ね類似のアッセイ手順により測定された。違いは次の通りである：i)ヒトPDE1酵素を高速遠心上澄画分のクロマトグラフィ分離によりヒト心室のホモジェネートから分離し；ii) cGMP基質（１μM）を、標識されていないグアノシン3’：5’環状一リン酸（cGMP）の10μMストック0.436mlと10μM [3H] cGMP（15.6Ci／mmol）および緩衝剤Ａ 4.554 mlとを合わせることにより調製し、アッセイ中のｃGMPの最終アッセイ濃度を0.5μMとし、iii）基準として使用されるPDE１阻害剤は５−［４−（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）ベンジル］−１−メチル−３−ｎ−プロピル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オンであり、そしてiv）その手順の間プレートを３０分間インキュベートした。
【０１４８】
本発明の化合物を上記アッセイを使用して試験し、そしてこれがPDE9酵素を阻害することを見出した。
【０１４９】
化合物１〜21、23〜31、33〜77、118、127〜208、213、214、224および256〜263は、濃度１μMにおいてPDE9に対し40％を超える阻害作用を有することがわかった。
【０１５０】
特に、化合物５２はPDE9に対するＩＣ50、126nMを有することがわかり；化合物204は、PDE9に対するＩＣ50、143nMを有することがわかり；そして化合物258は、PDE9に対するＩＣ50、141nMを有することがわかった。化合物52、204および258は全て、PDE1よりPDE9に10倍を超える選択性を示した。
【手続補正書】
【提出日】平成15年9月30日(2003.9.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2005511575.tif 000061
［式中、
Ｒ1はＨまたはＣ1-6アルキルであり、ここでＲ1はＮ1またはＮ2に結合し；
Ｒ2はヒドロキシまたはアルコキシで場合により置換されたＣ1-6アルキル；
アルキル、ヒドロキシまたはアルコキシで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキル；アルキル、ヒドロキシまたはアルコキシで場合により置換された飽和５−６員複素環；ｈｅｔ1またはＡｒ1であり；
Ｒ3はＡｒ2；Ｃ1-6アルキルで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキル；ＯＡｒ2；ＳＡｒ2；ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ1-6アルキル；ｈｅｔ2；キサンチン；およびナフタレンから独立して選択される１または２つの基で場合により置換されたＣ1-6アルキルであり；
ここでＡｒ1およびＡｒ2は以下の式、
【化２】
2005511575.tif 000062
（式中、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6は水素、ハロ、フェノキシ、フェニル、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｒ7、ＳＲ7およびＯＲ7（ここでＲ7は、ｈｅｔ3で、またはハロ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｃ1-6アルキルおよびＣ1-6アルコキシから独立して選択される１、２もしくは３つの基で場合により置換されたフェニル基で場合により置換されたＣ1-6アルキルである）から独立して
選択されるか；または式中、Ｒ4およびＲ5は合わされて３または４原子連結を形成し、ここで該連結はＯ、ＳおよびＮから独立して選択される１または２つのヘテロ原子を組み込んでもよい）の独立した基であり；そして、
ここでｈｅｔ1、ｈｅｔ2およびｈｅｔ3は同一であるかまたは異なっていてよく、Ｏ、ＳおよびＮから独立して選択される１、２、または３つのヘテロ原子を含む芳香族５−６員複素環であり、該複素環はＣ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシ、ハロならびにハロおよびＣ1-6アルキルから独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換されたフェニル、から独立して選択される１、２または３つの置換基で場合により置換され；
但し、
ａ）Ｒ1がＮ1に連結し、Ｒ1がＣ1-3アルキルであり、そしてＲ2がプロピルである場合は、Ｒ3はＡｒ2により置換されたメチルではなく、
ｂ）Ｒ1がＮ1に結合し、Ｒ1がＣ1-6アルキルであり、そしてＲ2がメチルである場合は、Ｒ3はＡｒ2により置換されたＣ1-4アルキルではなく、そして
ｃ）Ｒ1がＮ1に結合し、Ｒ1がメチルであり、そしてＲ2がメチルである場合は、Ｒ3は（４−クロロフェノキシ）メチルではないものとする］
の化合物、その製薬上許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグ。
【請求項２】
化合物が式Ｉａ：
【化３】
2005511575.tif 000063
［式中、
Ｒ1はＨまたはＣ1-6アルキルであり；
Ｒ2はヒドロキシもしくはアルコキシで場合により置換されたＣ1-6アルキル；
アルキル、ヒドロキシもしくはアルコキシで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキル；アルキル、ヒドロキシもしくはアルコキシで場合により置換された飽和５−６員複素環；ｈｅｔ1またはＡｒ1であり；
Ｒ3はＡｒ2；Ｃ1-6アルキルで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキル；ＯＡｒ2；ＳＡｒ2；ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ1-6アルキル；ｈｅｔ2；キサンチン；およびナフタレンから独立して選択される１または２つの基で場合により置換されたＣ1-6アルキルであり；
ここでＡｒ1およびＡｒ2は以下の式、
【化４】
2005511575.tif 000064
（式中、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6は水素、ハロ、フェノキシ、フェニル、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｒ7、ＳＲ7およびＯＲ7（ここでＲ7は、ｈｅｔ3で、またはハロ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｃ1-6アルキルおよびＣ1-6アルコキシから独立して選択される１、２もしくは３つの基で場合により置換されたフェニル基で場合により置換されたＣ1-6アルキルである）から独立して選択されるか；または式中、Ｒ4およびＲ5は合体して３または４原子連鎖を形成し、ここで該連鎖はＯ、ＳおよびＮから独立して選択される１または２つのヘテロ原子を組み込んでもよい）の独立した基であり；そして
ここでｈｅｔ1、ｈｅｔ2およびｈｅｔ3は同一であるかまたは異なっていてよく、Ｏ、
ＳおよびＮから独立して選択される１、２、または３つのヘテロ原子を含む芳香族５−６員複素環であり、該複素環はＣ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシ、ハロならびにハロおよびＣ1-6アルキルから独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換されたフェニル、から独立して選択される１、２または３つの置換基で場合により置換され；
但し、
ａ）Ｒ1がＣ1-3アルキルでありそしてＲ2がプロピルである場合は、Ｒ3はＡｒ2により置換されたメチルではなく、
ｂ）Ｒ1がＣ1-6アルキルでありそしてＲ2がメチルである場合は、Ｒ3はＡｒ2により置換されたＣ1-4アルキルではなく、そして
ｃ）Ｒ1がＮ1に結合し、Ｒ1がメチルであり、そしてＲ2がメチルである場合は、Ｒ3は（４−クロロフェノキシ）メチルではないものとする］
の化合物、その製薬上許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグである請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ1が水素またはＣＨ3である請求項１または２記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ1が水素である請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ2がＣ3-4アルキル、シクロペンチルまたはピリジルである請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ2が３−ピリジルである請求項１〜５記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ3がＡｒ2；Ｃ1-6アルキルで場合により置換されたＣ3-7シクロアルキル；およびｈｅｔ2から独立して選択される１または２つの基で場合により置換されたＣ1-3アルキルである請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ3がＡｒ2で場合により置換されたＣ1-3アルキルである請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ3がＡｒ2で置換されたメチルである請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ4、Ｒ5およびＲ6が、水素、ハロ、フェノキシ、フェニル、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｒ7、ＳＲ7およびＯＲ7（ここでＲ7は、ｈｅｔ3基で、またはハロ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｃ1-6アルキルおよびＣ1-6アルコキシから独立して選択される１、２もしくは３つの基で場合により置換されたフェニル基で、場合により置換されたＣ1-6アルキルである）から独立して選択されるか；またはＲ4およびＲ5は、合体して１つの酸素原子を含む３原子連鎖を形成する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ4、Ｒ5およびＲ6が、水素、ハロ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、フェノキシ、およびハロ、ＣＦ3、ＯＣＦ3またはＣ1-6アルキルにより場合により置換されたフェニルで場合により置換されたＯＣ1-6アルキルから独立して選択される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ4、Ｒ5およびＲ6が水素、クロロ、ＯＣＦ3、ＣＦ3、フェノキシおよびフェニルで置換されたＯＣ1-6アルキルから独立して選択される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ4、Ｒ5およびＲ6が水素、クロロ、ＯＣＦ3およびフェニルで置換されたＯＣ1-3アル
キルから独立して選択される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１４】
ｈｅｔ2が芳香族５−６員複素環であって、該複素環は１または２つの窒素原子を含み、場合によりさらにヘテロ原子を含み、該複素環は１、２または３つの置換基で場合により置換され、該置換基はＣ1-6アルキル、ハロならびにハロおよびＣ1-6アルキルから独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換されたフェニルから各々独立して選択される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１５】
ｈｅｔ2が芳香族５−６員複素環であって、該複素環は１または２つの窒素原子を含み（場合によりさらにヘテロ原子を含む）、該複素環は１つの置換基で場合により置換され、該置換基はＣ1-6アルキル、ハロならびにハロおよびＣ1-6アルキルから独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換されたフェニルから選択される、請求項１４記載の化合物。
【請求項１６】
ｈｅｔ2が芳香族５員複素環であって、該複素環が１または２つの窒素原子を含み（場合によりさらにヘテロ原子を含む）かつハロで場合により置換されたフェニルで場合により置換される請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
ｈｅｔ2がイミダゾリルまたはオキサジアゾリルである請求項１６記載の化合物。
【請求項１８】
化合物が以下である請求項１記載の化合物：
５−（３−クロロベンジル）−３−イソプロピル−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物１）；
３−イソプロピル−５−（２−フェノキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物５２）；
３−（３−ピリジニル）−５−（２−ベンジルオキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物１３８）；
３−イソプロピル−５−（２−トリフルオロメトキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物１５６）；
３−シクロペンチル−５−（２−ベンジルオキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物２０４）；
３−（３−ピリジニル）−５−（２−トリフルオロメチルベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物２１５）；
３−シクロペンチル−５−（２−トリフルオロメトキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物２５８）；および
３−（３−ピリジニル）−５−（２−トリフルオロメトキシベンジル）−１，６−ジヒドロ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（化合物２６０）。
【請求項１９】
心臓血管障害、疾患または状態を治療または予防するための医薬の製造における、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の化合物、その製薬上許容される塩または溶媒和物の使用。
【請求項２０】
障害、疾患または状態が全身性高血圧である、請求項１９記載の化合物、その製薬上許容される塩または溶媒和物の使用。
【請求項２１】
医薬としての使用のための請求項１〜１８のいずれか１項に記載の化合物、その製薬上許容される塩または溶媒和物。
【請求項２２】
請求項１〜１８のいずれか１項に記載の化合物、その製薬上許容される塩または溶媒和物を、製薬上許容される賦形剤、希釈剤または担体と共に含有する医薬組成物。
【請求項２３】
式II：
【化５】
2005511575.tif 000065
の化合物を適当な試薬と反応させて環化を行うことからなる、請求項１〜１８のいずれか１項に定義される式Ｉの化合物の製造方法。
【請求項２４】
心臓血管障害、疾患または状態を治療または予防するための医薬の製造におけるPDE9阻害剤の使用。
【請求項２５】
PDE9阻害剤が１マイクロモルの濃度でPDE9に対して４０％より大きい阻害作用を有する、請求項２４記載の使用。
【請求項２６】
PDE9阻害剤がPDE1よりPDE9に１０倍を超える選択性を有する、請求項２５記載の使用。
【国際調査報告】
2005511575.tif 000066
2005511575.tif 000067
2005511575.tif 000068
2005511575.tif 000069
2005511575.tif 000070
2005511575.tif 000071