(57)【要約】  本発明は、生きている細胞における細胞損傷の予防を目的とする難溶解性物質の水溶液を製造するためのエトキシル化フィトステロールまたはフィトスタノールの使用に関するものである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
生きている細胞での細胞損傷の予防を目的とする難溶解性物質の水溶液を製造するためのエトキシル化フィトステロールまたはフィトスタノールの使用。
【請求項２】
ステロールまたはスタノールに結合したエトキシレート鎖が５〜１００のエチレングリコール単位から構成される、請求項１記載の使用。
【請求項３】
ステロールまたはスタノールに結合したエトキシレート鎖が１０〜５０のエチレングリコール単位から構成される、請求項２記載の使用。
【請求項４】
フィトステロールが、シトステロール、カンペステロール、スチグマステロール、ブラッシカステロール(brassicasterol)、アベナステロール(avenasterol)、エルゴステロールおよびそれらの混合物から成る群から選択される、請求項１〜３のいずれか１項記載の使用。
【請求項５】
フィトスタノールが、シトスタノール、カンペスタノール、スチグマスタノール、ブラッシカスタノール(brassicastanol)、アベナスタノール(avenastanol)、エルゴステロールおよびそれらの混合物から成る群から選択される、請求項１〜３のいずれか１項記載の使用。
【請求項６】
水溶液に難溶解性である物質が、薬剤、栄養補助食品、および別の医薬用物質である、請求項１〜３のいずれか１項記載の使用。
【請求項７】
水溶液に難溶解性である物質が薬剤である、請求項６記載の使用。
【請求項８】
水溶液に難溶解性である物質が、フェロジピン、プロブコール、オキサゼパム、グリベンクラミド、トルブタミドまたはグリセオフルビンである、請求項７記載の使用。
【請求項９】
水溶液に難溶解性である物質が、栄養補助食品または別の医薬用物質である、請求項６記載の使用。
【請求項１０】
水溶液に難溶解性である物質が、ビタミン、脂質、タンパク質、ペプチド、脂肪酸、酸化防止剤または植物または動物からの抽出物である、請求項９記載の使用。
【請求項１１】
生きている細胞の損傷が細胞の溶解または血液中での溶血を含むものである、請求項１記載の使用。
【請求項１２】
エトキシル化フィトステロールまたはフィトスタノールが単なる可溶化剤として使用される、請求項１〜１１のいずれか１項記載の使用。
【請求項１３】
水に難溶解性である少なくとも１種の物質および少なくとも１種のエトキシル化フィトステロールまたはフィトスタノールを含む、生きている細胞に損傷を与える可能性が低い水性製剤。
【請求項１４】
エトキシル化フィトステロールまたはフィトスタノールの濃度が１０×１０−６〜１００×１０−３Ｍである、請求項１３記載の製剤。
【請求項１５】
水に難溶解性である少なくとも１種の物質および少なくとも１種のエトキシル化フィトステロールまたはフィトスタノールを含む製剤を、ヒトを含む哺乳類に投与することによる、生きている細胞における細胞損傷の予防方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
技術分野
本発明は、生きている細胞における細胞損傷の予防を目的とする難溶解性物質の水溶液を製造するためのエトキシル化フィトステロール(植物ステロール)またはフィトスタノール(植物スタノール)の使用に関するものである。さらに、本発明は、生きている細胞への損傷を最小限にする難溶解性物質の送達方法を提供する。
【０００２】
背景技術
溶液は、例えば薬剤の経口、非経口または経鼻投与に広く使用されている薬剤送達系である。全ての市販薬剤の大部分は溶液として製剤化されるが、この用量形態は、初期毒性、代謝性、生物学的利用能および臨床試験においてより重要なものとなっている。上記試験では、正確な薬剤および用量沈積を保証するために溶液が常に必要とされる、S.H.Yalkowsky、Techniques of Solubilization of Drugs(S.H.Yalkowsky編著、マーセル・デッカー、ニューヨーク、１９８１)。溶液は均一系であるため、薬剤は調製物全体に均一に分配される。
【０００３】
薬剤の溶解度が乏しいとその効力が厳しく制限され得ることは公知の事実である。投与溶液中における薬剤濃度が不十分であると、治療効果についての下限に到達し得ない。さらに、薬剤が吸収され得るためには、それは溶解状態でなくてはならない。従って、溶液に溶かされた薬剤は、即座に利用吸収され得る。すなわち、治療応答は、固体用量形態の場合よりも迅速である。また、薬剤の溶解度の乏しいことが、初期薬剤試験における実質的な障害の構成要因となることもよく知られている。これは、薬剤溶解度が薬剤の毒物学的特性、代謝経路または生物学的利用能の測定に必要とされる濃度に満たないときに起こる。
【０００４】
薬剤の中には副作用がそれらの乏しい溶解度の結果であることが判明しているものもある。適切な溶媒を選択する際には、その毒性、刺激性および感作可能性を考慮しなければならない。従って、特に非経口投与用の溶液については、溶媒の選択が非常に制限される。医薬製品用賦形剤として使用される最も一般的な溶媒は、毒性が無く、生理学的適合性が良好であることから、水である、M.R.Billany、Pharmaceutics - The Science of Dosage Form Design(M.E.Aulton編著、チャーチル・リビングストン、ニューヨーク、１９８８)。
【０００５】
水に難溶解性である物質の場合、その物質も溶解し得る水混和性溶媒を加えることにより溶解度が改善され得る、S.H.Yalkowsky およびT.J.Roseman、Techniques of Solubilization of Drugs(S.H.Yalkowsky編著、マーセル・デッカー、ニューヨーク、１９８１)。上記溶媒は共溶媒と呼ばれ、この混合系における溶解度の方が個々の溶媒における場合より高いことが多い。しかしながら、共溶媒の選択は２つの理由により制限されている。第一に、共溶媒は、水と混和性であると同時にかなりの量の薬剤を溶かすものでなくてはならない。この組合わせは、たいていの実践的状況では達成し難い。また、水溶性の低い薬剤は、水と混和し得る溶媒にも難溶解性であり得る。第二に、水以外の溶媒はその毒性および刺激性故に、医薬適用についての共溶媒の使用に制限をもたらす。この制限は経口または非経口用の共溶媒にとって特に重要である、A.J.SpiegalおよびM.M.Noseworthy(J.Pharm.Sci.１９６３、５２、９１７)。
【０００６】
薬剤の溶解度を改良する別の方法は、表面活性剤、界面活性剤の使用である。界面活性剤が凝集体またはミセルを形成し、そこに薬剤が溶かされる。このため、薬剤は水相に実際に溶けるのではなく、凝集体の内部へ分配されるのであり、有機溶媒と類似している。この方法は薬剤の可溶化と呼ばれ、表面活性剤はまた可溶化剤とも呼ばれ得る。ミセル可溶化は、溶液の製剤に広く使用されている、A.T.Florence、Techniques of Solubilization of Drugs(S.H.Yalkowsky編著、マーセル・デッカー、ニューヨーク、１９８１)。この方法は、有機溶媒での溶解度は高いが、水に対する溶解性が制限されているかまたは非溶解性である物質にとって非常に有効である。
【０００７】
可溶化方法の主たる不利点は、界面活性剤の潜在的毒性である、D.AttwoodおよびA.T.Florence、Surfactant Systems− Their chemistry, pharmacy and biology,１０章、Toxicity aspects(チャップマン・アンド・ホール、ロンドン、１９８３)。多くの界面活性剤は、優れた可溶化剤であり得るが、この理由のため除外され得る。
【０００８】
界面活性剤の毒性は、ほとんどの場合、界面活性剤の膜傷害特性に因るものである。界面活性剤が凝集体を形成し、難溶解性物質をそれらの凝集体へ可溶化する能力はまた、生物膜の成分にも適用される。上記成分は、極性脂質、例えばリン脂質またはコレステロールであり得、それらは凝集体へ可溶化されるかまたは界面活性剤との共凝集体を形成し、それによって膜の破壊、すなわち溶解が誘発される。特に、非経口投与用溶液は、溶血、すなわち赤血球の破壊を誘発し得る。
【０００９】
界面活性剤には、可溶化剤としてのそれらの使用に関して本質的に相容れない状態がある。可溶化能が高い界面活性剤はまた膜への傷害性も高いと一般的に考えられる。
【００１０】
先行技術
エトキシル化ステロールまたはスタノールを可溶化剤として使用したという報告はほとんど存在しない。エトキシル化フィトステロールまたはフィトスタノールは、医薬製剤における安定性向上剤として使用されている。
【００１１】
ＪＰ６１−５０１１号では、ビタミンＥ含有エトキシル化フィトステロールの安定した製剤が報告されている。ビタミンＥおよびエトキシル化フィトステロールは、安定性向上剤であると述べられており、硬化ヒマシ油ポリオキシエチレン誘導体およびソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、およびポリグリセリン脂肪酸エステルから選択される１種またはそれ以上の安定剤と併用して処方される。製剤には例えば溶血などの問題が一切無いことが要求される。これらの安定剤の幾つかは僅かな溶血作用しか誘発しないことが、OhnishiおよびSagitani (J.Am.Oil Chem.Soc．１９９３、７０、６７９)により示された。このため、低い溶血活性がエトキシル化フィトステロールの存在に起因するとは考えられない。
【００１２】
ＷＰＩ(ワールド・パテント・インデックス)抄録ＪＰ５４１２９１１４のＡＮ１９７９−８３３４１Ｂは、フィトスタノールアルキレンオキシド付加物を含む脂溶性ビタミンＢ６エステルの安定した製剤について報告している。同様に、ビタミンＢ６エステルおよびエトキシル化フィトスタノールは、ソルビタン脂肪酸エステルと併用処方される。ソルビタン脂肪酸エステルは公知であり、難溶解性物質を可溶化し、水溶液の安定性を増すための医薬賦形剤として広く使用されている。このため、報告された製剤の安定性は、エトキシル化フィトスタノールの存在に起因するとは考えられない。
【００１３】
コレステロールおよびこれスタノールエトキシレートの溶血活性は、Miyajima et al(Coll.Polym.Sci.１９８７、２６５、９４３)により提示されている。
【００１４】
ＵＳ２００１／００２５０５８は、親油性化合物および、ステロールであり得る一疎水性部分およびポリアルキレングリコールであり得る一親水性部分を有する新規可溶化剤を含む水溶性組成物を報告している。これら２部分の間には、アルカン二酸または炭酸のエステルが存在する。すなわち、これらの可溶化剤は、新規であり、本発明に従って使用される可溶化剤とは全く異なる。
【００１５】
コレステロールエトキシレートおよびコレスタノールエトキシレートの使用には、これらの可溶化剤が動物起源を有するという欠点が伴う。一つには伝染病、例えば口蹄疫、伝染性海綿状脳症(ＴＳＥ)およびウイルスについての危険性故に、および一つには世論故に医薬業界内では動物起源の製品に対する抵抗が大きい。
【００１６】
発明の目的
本発明は、難溶解性物質の水溶液の製造における生きている細胞での細胞損傷を予防するためのエトキシル化フィトステロール(植物ステロール)またはフィトスタノール(植物スタノール)の使用に関するものである。すなわち、本発明の目的は、エトキシル化フィトステロールまたはフィトスタノールの使用により水に難溶解性である物質についての水性製剤を提供することである。
【００１７】
「予防」の語は、生きている細胞に対してほとんど損傷を与えないことまたは細胞に対する損傷を最小限にとどめることを意味する。
【００１８】
本発明の別の目的は、生きている細胞にほとんど損傷を与えない物質の水性製剤を提供することである。さらに別の目的は、細胞に対する損傷を最小限にとどめる水に難溶解性である物質の送達方法を提供することである。この明細書において、細胞に対する損傷には、細胞の溶解および血中での溶血が含まれる。すなわち、本発明の別の目的は、溶血現象を最小限にとどめる薬剤の非経口送達方法を提供することである。
【００１９】
発明の開示
驚くべきことに、エトキシル化フィトステロールおよびフィトスタノール、すなわち植物由来のステロールおよびスタノールは、水に難溶解性である物質の優れた可溶化剤であること以外に、細胞傷害活性が非常に低い、すなわち生きている細胞において細胞損傷を予防することが見出された。特に、細胞の溶解、例えば溶血現象を誘発する活性は非常に低い。それらはコレステロールエトキシレートおよびコレスタノールエトキシレートと同等またはそれらより高い可溶化能を有するが、細胞溶解性はかなり低い。それらは、特に赤血球に対し、典型的な非イオン系界面活性剤と同等またはそれらより低い細胞溶解性を呈するが、かなり高い薬剤可溶化能を有する。
【００２０】
生きている細胞、例えば赤血球に損傷を与える可能性が低い難溶解性物質の水溶液の一般的一製造方法は、エトキシル化フィトステロールまたはフィトスタノールを含む溶液に物質を溶かすことである。
【００２１】
フィトステロールは、植物由来のステロールであり(F.D.GunstoneおよびB.G.Herslof、A Lipid Glossary、ジ・オイリー・プレス、エアー、１９９２)、限定はされないが、シトステロール、カンペステロール、スチグマステロール、ブラッシカステロール(brassicasterol)、アベナステロール(avenasterol)、エルゴステロール等およびそれらの混合物であり得る。フィトスタノールは、フィトステロールの水素化または飽和対応物質、例えばシトスタノール、カンペスタノール、スチグマスタノール、ブラッシカスタノール(brassicastanol)、アベナスタノール(avenastanol)、エルゴスタノール等およびそれらの混合物である。
【００２２】
ステロールまたはスタノール骨格構造に結合されたエトキシレート(ポリオキシエチレンまたはポリエチレングリコール)鎖は、限定されるわけではないが、５〜１００個のエチレングリコール単位により構成され得る。エトキシレート鎖の末端ヒドロキシル基は、低級Ｃ１−Ｃ６アルキル基、例えばメチルまたはエチルによりアルキル化され得る。
【００２３】
本発明における可溶化剤は、限定されるわけではないが、５〜１００個のエチレングリコール単位をもつエトキシル化フィトステロール、またはそれらの混合物であり得る。好ましい範囲は、１０〜５０個のエチレングリコール単位である。可溶化剤はまた、限定されるわけではないが、５〜１００個のエチレングリコール単位をもつエトキシル化フィトスタノールまたはそれらの混合物であり得る。好ましい範囲は、１０〜５０個のエチレングリコール単位である。可溶化剤はまた、エトキシル化フィトステロールおよびエトキシル化フィトスタノールの混合物により構成され得る。
【００２４】
機能的目的、例えば、限定されるわけではないが、製造パラメーター、イオン強度、ｐＨ、安定性等のため、最終製剤は、賦形剤、例えば限定されるわけではないが、緩衝液、塩、酸化防止剤、香味料などを含み得る。
【００２５】
医薬用途
本発明による物質の水溶液は、あらゆるタイプの投与経路、例えば経口、非経口、鼻、肺、局所、眼または直腸経路による物質の送達に利用され得る。
【００２６】
水溶液が望ましいあらゆるタイプの物質が製剤に組込まれ得る。すなわち、本発明は、薬剤、栄養補助食品(nutritional supplement)および他の医薬用物質に適用される。製剤は、水溶性の乏しい物質に特に有用である。上記薬剤物質の例には、フェロジピン、プロブコール、オキサゼパム、グリベンクラミド、トルブタミド、グリセオフルビン、ブデソニド、アテノロール、アナストロゾール、ビカルタミド、カンデサルタン シレキセチル、ラミプリル、フルベストラント(fulvestrant)、リドカイン、プリロカインおよびプロポフォールがある。栄養補助食品および他の医薬用物質の典型例には、ビタミン、脂質、タンパク質、ペプチド、脂肪酸、酸化防止剤および植物または動物からの抽出物がある。
【００２７】
医薬調製物
本明細書に開示されている製剤はあらゆるタイプの水溶液であり得る。
エトキシル化フィトステロールまたはフィトスタノールの濃度は、限定されるわけではないが、１０×１０−６〜１００×１０−３Ｍであり得る。
【実施例】
【００２８】
以下の実施例は、本発明により達成されなければならない２つの基準、すなわち本発明の範囲内および発明外における可溶化剤／界面活性剤の両方に関する、可溶化および生きている細胞に対する低い傷害可能性について説明している。
【００２９】
実施例１:
Ｅ１５／Ｅ２５／Ｅ５０シトステロールエトキシレートによるフェロジピンの可溶化
３種の異なるエトキシル化シトステロール類の製品、Ｅ１５、Ｅ２５およびＥ５０シトステロールエトキシレートは、フィンランド国、ラッペンランタ、ＵＰＭ−キメーネ・カウカスにより提供された。製造業者によると、各製品のステロール成分を最大割合で占めたのはシトステロールであった。しかしながら、他のフィトステロール類も存在していた。フィトステロール類の分布は以下の通りであった：
【表１】
2005511586.tif 000002
【００３０】
また、各製品にはエトキシル化の度合に変動があった、すなわち各製品における１分子あたりのエチレングリコール単位の数は分布を示していた。製品におけるエチレングリコール単位の平均数は、Ｅ１５、Ｅ２５およびＥ５０についてそれぞれ１５、２５および５０であった。製造業者によると、平均分子量は、１０２０(Ｅ１５)、１６３３(Ｅ２５)および２１００(Ｅ５０)ｇ／ｍｏｌであった。
【００３１】
１４Ｃ標識および非標識フェロジピンは両方とも、アストラゼネカＡＢにより供給された。標識および非標識フェロジピンの分子均一混合物を得るため、両成分をクロロホルムに溶かした。澄明溶液が得られた後、溶媒を蒸発させた。かくして得られたフェロジピン混合物は、ａ＝６６６.７ＭＢｑ／ｍｏｌの比活性を有しており、実験全体を通じて使用した。界面活性剤(Ｅ１５／Ｅ２５／Ｅ５０シトステロールエトキシレート)の各々について、界面活性剤濃度が異なる４種の試料を調製した。界面活性剤を、水中０.９％(ｗ／ｗ)のＮａＣｌにおいて溶解および希釈した。フェロジピンを過剰に加え、試料を室温で４８時間にわたって十分な攪拌下で平衡状態に保った。試料を４ｍｍデュラポアフィルター(０.４５μｍ、ミリポア)を用いて濾過し、未溶解フェロジピンを除去した。水中０.９％(ｗ／ｗ)のＮａＣｌにおけるフェロジピンの溶解度を測定するために、界面活性剤を全く含まない追加試料を調製した。各試料から、０.５ｍｌ溶液を抜き取り、３.５ｍｌのシンチレーション液と混合した。ベックマンＬＳ６５００シンチレーション計数管を用いたシンチレーション検出手段により溶解したフェロジピンの濃度を測定した。
【００３２】
【表２】
2005511586.tif 000003
†  分析法についての検出限界は約０.０７ｍＭである。
【００３３】
界面活性剤Ｅ１５／Ｅ２５／Ｅ５０シトステロールエトキシレートを加えることにより、フェロジピンの溶解度が実質的に高められることは表から明らかである。
【００３４】
実施例２:
２０〜３０のエチレングリコール単位をもつエトキシル化フィトステロールによるフェロジピンの可溶化
エトキシル化フィトステロールの２種の異なる製品ＢＰＳ−２０およびＢＰＳ−３０は、日本国東京、日光ケミカルズ株式会社により提供された。製造業者によると、２製品におけるフィトステロールは大豆に由来するもので、フィトステロールの平均的組成は以下の通りであると述べられた：
【表３】
2005511586.tif 000004
【００３５】
各製品について、各分子に結合されたエチレングリコール単位の数に分布が見られた。２分布についてのエチレングリコール単位の平均数は、ＢＰＳ−２０およびＢＰＳ−３０についてそれぞれ２０および３０であった。平均分子量は、１２９８ｇ／ｍｏｌ(ＢＰＳ−２０)および１７３８ｇ／ｍｏｌ(ＢＰＳ−３０)であると算出された。可溶化実験を実施例１に記載した要領で実施した。
【００３６】
【表４】
2005511586.tif 000005
†  分析法についての検出限界は約０.０７ｍＭである。
【００３７】
フィトステロールエトキシレートＢＰＳ−２０およびＢＰＳ−３０を加えることにより、フェロジピンの溶解度が実質的に高められることは表から明らかである。
【００３８】
実施例３：(部分比較例)
２５のエチレングリコール単位をもつエトキシル化シトステロールおよびエトキシル化コレステロールによるフェロジピンの可溶化
エトキシル化コレステロールまたはエトキシル化シトステロールの溶液におけるフェロジピンの溶解度を試験した。ウルトラシトステロール、すなわちβ‐シトステロールに富むステロールフラクションを、フィンランド国、ラッペンランタ、ＵＰＭ−キメーネ・カウカスから入手した。製造業者によると、組成は以下の通りである：
【表５】
2005511586.tif 000006
【００３９】
医薬品質のコレステロールを、イギリス国グール、クローダ・オレオケミカルズから入手した。シトステロールおよびコレステロールは、スウェーデン国ステヌングスンド、アクゾノーベル・サーフィス・ケミストリーＡＢによりエトキシル化された。
【００４０】
各製品について、各分子に結合されたエチレングリコール単位の数に分布が見られた。エチレングリコール単位の平均数は、コレステロールエトキシレートおよびシトステロールエトキシレートの両方について２５であった。平均分子量は、１４８８ｇ／ｍｏｌ(コレステロールエトキシレート)および１５１６ｇ／ｍｏｌ(シトステロールエトキシレート)であると算出された。可溶化実験を実施例１に記載した要領で実施した。
【００４１】
【表６】
2005511586.tif 000007
†  分析方法についての検出限界は約０.０７ｍＭである。
【００４２】
コレステロールエトキシレートおよびシトステロールエトキシレートを加えることにより、フェロジピンの溶解度が実質的に高められることは表から明らかである。
【００４３】
実施例４：(部分比較例)
２５〜３０のエチレングリコール単位をもつエトキシル化フィトスタノールおよびエトキシル化コレスタノールによるフェロジピンの可溶化
フィトスタノールのエトキシレート、すなわち水素化フィトステロール、(ＢＰＳＨ−２５)およびコレスタノールのエトキシレート、すなわち水素化コレステロール、(ＤＨＣ−３０)は、日本国東京、日光ケミカルズ株式会社により提供された。両製品とも、各分子に結合されたエチレングリコール単位の数は固定されておらず、ある分布に従う。フィトスタノールエトキシレート(ＢＰＳＨ−２５)についてのエチレングリコール単位の平均数は２５であり、コレスタノールエトキシレート(ＤＨＣ−３０)については３０であった。対応する平均分子量は、１５１８ｇ／ｍｏｌ(ＢＰＳＨ−２５)および１７１０ｇ／ｍｏｌ(ＤＨＣ−３０)であると算出された。可溶化実験を実施例１記載の要領で実施した。
【００４４】
【表７】
2005511586.tif 000008
†  分析方法についての検出限界は約０.０７ｍＭである。
【００４５】
エトキシル化フィトスタノール(ＢＰＳＨ−２５)およびエトキシル化コレスタノール(ＤＨＣ−３０)を加えることにより、フェロジピンの溶解度が実質的に高められることは表から明らかである。
【００４６】
実施例５：
２５〜５０のエチレングリコール単位をもつエトキシル化シトスタノールによるフェロジピンの可溶化
シトスタノール製品、すなわち水素化シトステロールは、フィンランド国、ラッペンランタ、ＵＰＭ−キメーネ・カウカスにより提供された。製造業者によると、ウルトラシトステロール、すなわちシトステロールに富むフラクションを水素化して、提供したシトスタノールを製造した。シトスタノールのエトキシル化は、スウェーデン国ステヌングスンド、アクゾノーベル・サーフィス・ケミストリーＡＢにより実施された。
【００４７】
エトキシル化の度合が異なる３種のシトスタノールエトキシレート製品、ＳＨ−ＥＯ２５、ＳＨ−ＥＯ３５およびＳＨ−ＥＯ５０について研究した。各々別々の製品について、各分子に結合されたエチレングリコール単位の数は固定されておらず、ある分布に従う。３製品についてのエチレングリコール単位の平均数は、それぞれ２５(ＳＨ−ＥＯ２５)、３５(ＳＨ−ＥＯ３５)、および５０(ＳＨ−ＥＯ５０)であった。対応する平均分子量は、１５１８ｇ／ｍｏｌ(ＳＨ−ＥＯ２５)、１９５９ｇ／ｍｏｌ(ＳＨ−ＥＯ３５)、および２６１９ｇ／ｍｏｌ(ＳＨ−ＥＯ５０)であると算出された。
可溶化実験を実施例１記載の要領で実施した。
【００４８】
【表８】
2005511586.tif 000009
†  分析方法についての検出限界は約０.０７ｍＭである。
【００４９】
エトキシル化シトスタノールＳＨ−ＥＯ２５、ＳＨ−ＥＯ３５およびＳＨ−ＥＯ５０を加えることにより、フェロジピンの溶解度が実質的に高められることは表から明らかである。
【００５０】
実施例６：(比較例)
エトキシル化脂肪族アルコールフェロジピンの可溶化
２種の異なるポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン(２３)ラウリルエーテル(ブリージ(登録商標)３５)およびポリオキシエチレン(２０)ステアリルエーテル(ブリージ(登録商標)７８)を、フェロジピンの可溶化に関して試験した。界面活性剤を、スウェーデン国ストックホルム、シグマ‐アルドリッチ・スウェーデンＡＢから入手した。供給者によると、平均分子量は１１９８ｇ／ｍｏｌ(ブリージ(登録商標)３５)および１１５２ｇ／ｍｏｌ(ブリージ(登録商標)７８)である。
可溶化実験を実施例１記載の要領で実施した。
【００５１】
【表９】
2005511586.tif 000010
†  分析方法についての検出限界は約０.０７ｍＭである。
【００５２】
エトキシル化脂肪族アルコールのブリージ(登録商標)３５およびブリージ(登録商標)７８を加えることにより、フェロジピンの溶解度が高められることは表から明らかである。
【００５３】
実施例７：(比較例)
ソルトール(登録商標)ＨＳ１５によるフェロジピンの可溶化
ソルトール(登録商標)ＨＳ１５を、ドイツ国ルートヴィヒスハーフェン、ＢＡＳＦから入手した。供給者は、ソルトール(登録商標)ＨＳ１５が１２−ヒドロキシステアリン酸のポリエチレングリコールエステルの複合混合物であると述べている。この製品は、約３０％(ｗ／ｗ)遊離ポリエチレングリコールおよび７０％(ｗ／ｗ)１２−ヒドロキシステアリン酸のポリエチレングリコールエステルにより構成される。ポリエチレングリコール鎖におけるエチレングリコール単位の数は、平均数１５前後に分布されている。ポリエチレングリコール鎖の平均サイズを考えると、分子量は、製品の活性成分であるポリエチレングリコール１２−ヒドロキシステアレートについて９６１ｇ／ｍｏｌまでであると見積もられる。溶液中の界面活性剤濃度の計算において、遊離ポリエチレングリコールの量については説明がつく。
可溶化実験を実施例１の要領で実施した。
【００５４】
【表１０】
2005511586.tif 000011
†  分析方法についての検出限界は約０.０７ｍＭである。
【００５５】
ソルトール(登録商標)ＨＳ１５を加えることにより、フェロジピンの溶解度が高められることは表から明らかである。
【００５６】
実施例８：
界面活性剤によるフェロジピンの可溶化能の測定
図において溶解したフェロジピンの濃度対界面活性剤濃度をプロットすることにより、実施例１〜７での全界面活性剤について可溶化曲線を作成した。実施例における全界面活性剤について、溶解したフェロジピンの量は、一次関数的に界面活性剤濃度の増加と共に増加した。フェロジピンに関する各界面活性剤の可溶化能を、可溶化曲線の傾きαを考慮することにより測定した。各曲線の傾きαは、少量の界面活性剤を加えたときに溶液に溶解され得るフェロジピンの追加量を表しており、また可溶化能の定義でもある。
【数１】
2005511586.tif 000012
［式中、[Ｆ]＝溶解フェロジピンの濃度
[Ｓ]＝界面活性剤の濃度］
実験データに一次式を当てはめ、傾きαを導き出すことにより可溶化能を計算した。
【００５７】
【表１１】
2005511586.tif 000013
【００５８】
表からは、エトキシル化ステロールおよびエトキシル化スタノールの可溶化能は、典型的アルキル界面活性剤、例えばブリージ(登録商標)３５およびソルトール(登録商標)ＨＳ１５の可溶化能より高いことが導き出され得る。ほとんどのエトキシル化ステロール およびエトキシル化スタノールはまた、ブリージ(登録商標)７８よりも高い可溶化能を有する。
【００５９】
実施例９：
Ｅ１５／Ｅ２５／Ｅ５０シトステロールエトキシレートによるグリセオフルビンの可溶化
グリセオフルビンを、スウェーデン国ストックホルム、シグマ−アルドリッチ・スウェーデンＡＢから入手した。界面活性剤は、実施例１のと同じであった。
【００６０】
界面活性剤の各々について、界面活性剤濃度が異なる４試料を調製した。界面活性剤を純粋な濾過水に溶解および希釈した。グリセオフルビンを過剰に加え、試料を４５℃で４時間、次いで室温で２０時間平衡状態に保った。全平衡期間中試料を十分に振とうした。それに続いて、試料を遠心分離に掛けて未溶解グリセオフルビンを除去した。ＵＶ吸収分光計により溶解したグリセオフルビンの濃度を測定した。最大吸収λｍａｘ＝２９５ｎｍについての波長で吸光度を記録した。
【００６１】
純水中でのグリセオフルビンの溶解度は、２３×１０−３ｍＭであると記録されている(M.MosharrafおよびC.Nystrom Int.J.Pharm.１９９５、１２２、３５)。
【００６２】
【表１２】
2005511586.tif 000014
【００６３】
表に与えられたグリセオフルビンについての溶解度データおよび水におけるグリセオフルビンの記録された溶解度の比較結果は、Ｅ１５／Ｅ２５／Ｅ５０シトステロールエトキシレートを加えることにより、グリセオフルビンの溶解度が実質的に高められることを示している。
【００６４】
実施例１０：
３０のエチレングリコール単位をもつエトキシル化フィトステロールによるグリセオフルビンの可溶化
本実施例におけるエトキシル化フィトステロール、ＢＰＳ−３０は、実施例２のと同一であった。
実施例９記載の要領でグリセオフルビンの溶解度を測定した。
【００６５】
【表１３】
2005511586.tif 000015
【００６６】
表に与えられたグリセオフルビンについての溶解度データおよび水におけるグリセオフルビンの記録された溶解度の比較結果は、ＢＰＳ−３０を加えることにより、グリセオフルビンの溶解度が実質的に高められることを示している。
【００６７】
実施例１１：
１０〜２５のエチレングリコール単位をもつエトキシル化シトステロールによるグリセオフルビンの可溶化
実施例３記載のものと同じシトステロールフラクションから本実施例における界面活性剤を製造した。シトステロールフラクションのエトキシル化は、スウェーデン国ステヌングスンド、アクゾノーベル・サーフィス・ケミストリーＡＢにより実施された。エトキシル化に使用した方法により、多分散のポリエチレングリコール鎖長が生じた。各製品について、各ステロール部分に結合したエチレングリコール単位の数は、平均数の前後に分布している。３製品についてのエチレングリコール単位の平均数は、それぞれ１０(シトステロールエトキシレートＥＯ１０)、１５(シトステロールエトキシレートＥＯ１５)および２５(シトステロールエトキシレートＥＯ２５)であった。対応する平均分子量を計算すると、８５５ｇ／ｍｏｌ(シトステロールエトキシレートＥＯ１０)、１０７５ｇ／ｍｏｌ(シトステロールエトキシレートＥＯ１５)および１５１６ｇ／ｍｏｌ(シトステロールエトキシレートＥＯ２５)であった。
実施例９記載の要領で可溶化実験を実施した。
【００６８】
【表１４】
2005511586.tif 000016
【００６９】
表からは、純水におけるグリセオフルビンの溶解度と比べて、この実施例における全シトステロールエトキシレートを加えることによりグリセオフルビンの溶解度が実質的に高められるという結論が得られる。
【００７０】
実施例１２：(比較例)
２５〜３０のエチレングリコール単位をもつエトキシル化コレステロールおよびエトキシル化コレスタノールによるグリセオフルビンの可溶化
エトキシル化コレステロール(コレステロールエトキシレートＥＯ２５)は、実施例３のものと同一であった。エトキシル化コレスタノール(コレスタノールエトキシレートＥＯ３０、ＤＨＣ−３０)は、実施例４の場合と同じであった。
実施例９記載の要領でグリセオフルビン可溶化実験を実施した。
【００７１】
【表１５】
2005511586.tif 000017
【００７２】
表からは、純水におけるグリセオフルビンの溶解度と比べて、コレステロールエトキシレートＥＯ２５およびコレスタノールエトキシレートＥＯ３０を加えることによりグリセオフルビンの溶解度が実質的に高められるという結論が得られる。
【００７３】
実施例１３：
１０〜５０のエチレングリコール単位をもつエトキシル化シトスタノールによるグリセオフルビンの可溶化
この実施例での界面活性剤は、実施例５の場合と同じシトスタノールフラクションから製造された。スタノールフラクションのエトキシル化は、スウェーデン国ステヌングスンド、アクゾノーベル・サーフィス・ケミストリーＡＢにより実施された。得られた製品は、様々な数のエチレングリコール単位をもつシトスタノールエトキシレートであった。各製品についてのエチレングリコール単位の平均数は、１０(ＳＨ−ＥＯ１０)、１５(ＳＨ−ＥＯ１５)、３５(ＳＨ−ＥＯ３５)および５０(ＳＨ−ＥＯ５０)であった。界面活性剤のうちの２種ＳＨ−ＥＯ３５およびＳＨ−ＥＯ５０は、実施例５に記載されたものである。他の２界面活性剤の平均分子量は、８５７ｇ／ｍｏｌ(ＳＨ−ＥＯ１０)および１０７７ｇ／ｍｏｌ(ＳＨ−ＥＯ１５)であった。
実施例９記載の要領で可溶化実験を実施した。
【００７４】
【表１６】
2005511586.tif 000018
【００７５】
表からは、純水におけるグリセオフルビンの溶解度と比べると、この試験におけるエトキシル化シトスタノールは全て、グリセオフルビンの溶解度を実質的に高めるという結論が得られる。
【００７６】
実施例１４：(比較例)
糖質界面活性剤によるグリセオフルビンの可溶化
グリセオフルビン可溶化能を３種の異なる糖質界面活性剤について測定した：ｎ−オクチル−β−Ｄ−マルトピラノシド(オクチルマルトシド)、ｎ−ドデシル−β−Ｄ−マルトピラノシド(ドデシルマルトシド)、およびシクロヘキシル−ｎ−ヘキシル−β−Ｄ−マルトピラノシド(シクロヘキシル−ヘキシルマルトシド)。界面活性剤は全て米国カリフォルニア、ラジョラ、カルビオケム‐ノババイオケムから入手された。
実施例９記載の要領で可溶化実験を実施した。
【００７７】
【表１７】
2005511586.tif 000019
【００７８】
表は、かなりの量のグリセオフルビンを溶かすには多量の糖質界面活性剤が必要とされることを示している。
【００７９】
実施例１５：(比較例)
ソルトール(登録商標)ＨＳ１５によるグリセオフルビンの可溶化
ソルトール(登録商標)ＨＳ１５は、実施例７に記載されたものである。実施例９記載の要領でグリセオフルビン可溶化実験を実施した。
【００８０】
【表１８】
2005511586.tif 000020
【００８１】
ソルトール(登録商標)ＨＳ１５が、僅かに過ぎないがグリセオフルビンの溶解度を改善することは、表から明らかである。
【００８２】
実施例１６：
界面活性剤によるグリセオフルビン可溶化能の測定
実施例８記載の方法に従って、実施例９〜１５における界面活性剤の可溶化能を測定した。全実施例で、界面活性剤濃度は、可溶化能測定についての先行条件である、臨界ミセル濃度より高かった。全実施例で、溶解したグリセオフルビンの量は、一次関数的に界面活性剤濃度の増加と共に増加することが見出された。実施例８における定義に従って、可溶化能は以下の通りとなる：
【数２】
2005511586.tif 000021
［式中、[Ｇ]＝溶解グリセオフルビンの濃度
[Ｓ]＝界面活性剤の濃度］
【００８３】
【表１９】
2005511586.tif 000022
【００８４】
グリセオフルビンに関するエトキシル化ステロールおよびスタノールの可溶化能は、典型的非イオン系界面活性剤、例えば糖質界面活性剤およびソルトール(登録商標)ＨＳ１５の可溶化能より高いことがこの表で明らかに示されている
【００８５】
実施例１７：
Ｅ１５／Ｅ２５／Ｅ５０シトステロールエトキシレートにより誘発される溶血の測定
本実施例における界面活性剤は実施例１の場合と同じであった。０.９％(ｗ／ｗ)ＮａＣｌ水溶液中で適量の界面活性剤を溶解および希釈することにより、様々な界面活性剤濃度の界面活性剤溶液を製造した。１００μｌの界面活性剤溶液を、ビーグル犬から採取した新鮮な血液４００μｌに添加した。血液および界面活性剤混合物を、添加直後２〜３秒間静かに攪拌した後、静かに振とうしながら３７℃で１０分間インキュベーションした。混合物を３０００ｇおよび５℃で６分間遠心分離にかけた。遠心分離中、試料は、赤血球の沈降物および上清に分離した。上清の小フラクションを除去し、コーバス・バイオ(Cobas Bio)分光光度計でヘモグロビン含有量に関して分析した。各測定をトリプリケイトの試料について実施した。
【００８６】
１００μｌの規定食塩水を新鮮なビーグル犬血液４００μｌに加えることにより、陰性対照試料、すなわち基礎溶血測定用試料を製造した。血液および界面活性剤混合物について記載したのと同じ方法でそれらの試料を処理および分析した。
【００８７】
４００μｌの血液を３６００μｌの蒸留水に加えることにより、陽性対照試料、すなわち全ヘモグロビン含有量測定用試料を製造した。３０分後、かくして得られた溶液の４００μｌを１００μｌの規定食塩水と混合した。生成した溶液から、小フラクションを除去し、コーバス・バイオ分光光度計でヘモグロビン含有量に関して分析した。
【００８８】
以下の式に従って、溶血度を計算した：
【数３】
2005511586.tif 000023
［式中、％Ｈは溶血度(％)であり、[Ｈｂ]は、血液および界面活性剤混合物において放出されたヘモグロビンの濃度であり、[Ｈｂ]０は、陰性対照において放出されたヘモグロビンの濃度(基礎溶血)であり、そして[Ｈｂ]ｔｏｔは、血液および界面活性剤混合物におけるヘモグロビンの全濃度である］
【００８９】
血液および界面活性剤溶液の混合物における界面活性剤濃度の関数として、溶血度を測定した。
【００９０】
【表２０】
2005511586.tif 000024
【００９１】
実施例１８：(比較例)
２５〜３０のエチレングリコール単位をもつエトキシル化コレステロールおよびエトキシル化コレスタノールにより誘発される溶血の測定
本実施例における界面活性剤、コレステロールエトキシレートＥＯ２５およびコレスタノールエトキシレートＥＯ３０は、実施例１２のものと同一であった。溶血の測定は、実施例１７記載の要領で実施された。
【００９２】
【表２１】
2005511586.tif 000025
【００９３】
実施例１９：
３５のエチレングリコール単位をもつエトキシル化シトスタノールにより誘発される溶血の測定
本実施例における界面活性剤、３５のエチレングリコール単位をもつシトスタノールエトキシレート(ＳＨ−ＥＯ３５)は、実施例５記載の界面活性剤と同一であった。溶血の測定は、実施例１７記載の要領で実施された。
【００９４】
【表２２】
2005511586.tif 000026
【００９５】
実施例２０：(比較例)
糖質界面活性剤により誘発される溶血の測定
２種の異なる糖質界面活性剤、ドデシルマルトシドおよびスクロースラウレートにより誘発される溶血を測定した。ドデシルマルトシドは実施例１４に記載されたものであった。スクロースラウレートは、フルカ・ヘミー・アクチエンゲセルシャフトから入手された。溶血の測定は、実施例１７記載の要領で実施された。
【００９６】
【表２３】
2005511586.tif 000027
【００９７】
実施例２１：(比較例)
エトキシル化脂肪族アルコールにより誘発される溶血の測定
本実施例における２種の界面活性剤、ポリオキシエチレン(２３)ラウリルエーテル(ブリージ(登録商標)３５)およびポリオキシエチレン(２０)ステアリルエーテル(ブリージ(登録商標)７８)は、実施例６に記載されたものであった。溶血の測定は、実施例１７記載の要領で実施された。
【００９８】
【表２４】
2005511586.tif 000028
【００９９】
実施例２２：
界面活性剤の溶血活性の測定
実施例１７〜２１における全界面活性剤について、％Ｈ対界面活性剤および血液混合物における界面活性剤濃度をプロットすることにより溶血曲線を作成した。かかる図表においては濃度軸に沿った溶血曲線の位置により、溶血活性が決定される。界面活性剤の溶血性が高いとき、ある程度の溶血を達成するのに要求される濃度は低くなる。溶血活性を定量するために、５％溶血が達成される濃度を判断基準にした。濃度が高いとき、活性は低くなる。全界面活性剤について少なくとも１回この手順を反復した。
【０１００】
【表２５】
2005511586.tif 000029
【０１０１】
植物起源のエトキシル化ステロールおよびスタノールの方がエトキシル化コレステロール、エトキシル化コレスタノール、および若干の非ステロイド非イオン系界面活性剤よりも溶血性が低いことは、表から明らかである。さらに、この実施例において最も溶血性に低い界面活性剤は、Ｅ１５シトステロールエトキシレートである。
【０１０２】
実施例２３：
Ｅ１５／Ｅ２５／Ｅ５０シトステロールエトキシレートにより誘発される赤血球の溶解の測定
本実施例での界面活性剤は、実施例１のものと同一であった。遠心分離‐再懸濁手順によりイヌ血液から赤血球を抽出した。新鮮な血液を１０分間２０００×ｇでの緩い遠心分離にかけた。過剰の血漿を除去し、かくして生じた赤血球の沈降物を規定食塩水(０.９％ＮａＣｌ水溶液)に再懸濁した。この手順を２回反復した。赤血球懸濁液の最終量は、新鮮な血液の初期量と等しかった。０.９％(ｗ／ｗ)ＮａＣｌ水溶液で適量の界面活性剤を溶解および希釈することにより、様々な界面活性剤濃度である界面活性剤溶液を調製した。１００μｌの界面活性剤溶液を４００μｌの赤血球懸濁液に添加した。添加直後５秒間試料を激しく攪拌し、その後静かに振とうしながら３７℃で２０分間インキュベーションした。試料を６分間３０００ｇおよび５℃で遠心分離にかけた。遠心分離により、試料は無傷の赤血球の沈降物および上清に分離された。上清の小フラクションを除去し、ヘモグロビン含有量に関して分析した。ヘモグロビンに対しＨ２Ｏ２、アミノフェナゾンおよびフェノールとの化学反応を行わせた。この反応の結果、濃度が分光測光法により測定され得る赤く着色した生成物が生じた。この濃度から、ヘモグロビンの初期濃度を算出した。各測定を、トリプリケイトの試料について実施した。
【０１０３】
１００μｌの規定食塩水を４００μｌの赤血球懸濁液に加えることにより、陰性対照試料、すなわちバックグラウンド溶解測定用試料を製造した。上記と同じ方法でこれらの試料を処理し、分析した。
【０１０４】
赤血球懸濁液を蒸留水で５００倍に希釈することにより、陽性対照試料、すなわち総ヘモグロビン含有量測定用試料を製造した。希釈により赤血球は全て完全溶解され、放出されたヘモグロビン濃度は上記と同様にして測定され得る。
【０１０５】
以下の式に従って溶解度を計算した：
【数４】
2005511586.tif 000030
［式中、％Ｌは溶解度を％で表したものであり、[Ｈｂ]は、赤血球および界面活性剤の混合物において放出されたヘモグロビンの濃度であり、[Ｈｂ]０は、陰性対照において放出されたヘモグロビンの濃度であり(基礎溶血)、そして[Ｈｂ]ｔｏｔは、赤血球および界面活性剤の混合物におけるヘモグロビンの総濃度である］
【０１０６】
溶解度は、赤血球および界面活性剤の混合物における界面活性剤濃度の関数として測定された。
【０１０７】
【表２６】
2005511586.tif 000031
【０１０８】
実施例２４：
１０〜２５のエチレングリコール単位をもつエトキシル化シトステロールにより誘発される赤血球の溶解の測定
本実施例における界面活性剤(シトステロールエトキシレートＥＯ１０、ＥＯ１５およびＥＯ２５)は、実施例１１のものと同じであった。赤血球の溶解の測定は、実施例２３記載の要領で実施された。
【０１０９】
【表２７】
2005511586.tif 000032
【０１１０】
実施例２５：
１５〜５０のエチレングリコール単位をもつエトキシル化シトスタノールにより誘発される赤血球の溶解の測定
本実施例における界面活性剤、１５〜５０のエチレングリコール単位をもつシトスタノールエトキシレート(ＳＨ−ＥＯ１５、ＳＨ−ＥＯ２５、ＳＨ−ＥＯ３５およびＳＨ−ＥＯ５０)は、実施例５および１３記載のものと同じであった。赤血球の溶解の測定は、実施例２３記載の要領で実施された。
【０１１１】
【表２８】
2005511586.tif 000033
【０１１２】
実施例２６：(比較例)
２５〜３０のエチレングリコール単位をもつエトキシル化コレステロールおよびエトキシル化コレスタノールにより誘発される赤血球の溶解の測定
本実施例における界面活性剤、コレステロールエトキシレートＥＯ２５およびコレスタノールエトキシレートＥＯ３０は、実施例１８のものと同じであった。赤血球の溶解の測定は、実施例２３記載の要領で実施された。
【０１１３】
【表２９】
2005511586.tif 000034
【０１１４】
実施例２７：(比較例)
糖質界面活性剤により誘発される赤血球の溶解の測定
本実施例における界面活性剤、ドデシルマルトシドおよびシクロヘキシル‐ヘキシルマルトシドは、実施例１４記載のものと同じであった。赤血球の溶解の測定は、実施例２３記載の要領で実施された。
【０１１５】
【表３０】
2005511586.tif 000035
【０１１６】
実施例２８：
赤血球の溶解を誘発する界面活性剤の活性の測定
実施例２３〜２７における全界面活性剤について、％Ｌ対赤血球および界面活性剤の水性混合物における界面活性剤濃度をプロットすることにより、溶解曲線を作成した。各界面活性剤が赤血球溶解を誘発する活性は、図表における溶解曲線の位置により示されている。低活性の界面活性剤の場合、ある程度の溶解を達成するには高い濃度が要求される。ここで、１０％溶解が達成される濃度を判断基準にすることにより、活性を定量する。濃度が高いとき、活性は低くなる。
【０１１７】
【表３１】
2005511586.tif 000036
【０１１８】
植物由来のエトキシル化ステロールの方が、同起源のスタノールよりも低い赤血球溶解活性を有することは、表から明らかである。さらに、植物由来のエトキシル化ステロールおよびスタノールの溶解活性の方が、エトキシル化コレステロール、エトキシル化コレスタノール、および糖質界面活性剤の活性よりも低いという結論に達し得る。
【０１１９】
結論
本明細書で示された結果は、エトキシル化フィトステロールまたはフィトスタノールの使用により、水に難溶解性である物質の溶解度が改善されることに加えて、生きている細胞に与える損傷が低減化され得ることを明白に示している。
【手続補正書】
【提出日】平成16年7月13日(2004.7.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生きている細胞での細胞損傷の予防を目的とする難溶解性物質の水溶液を製造するためのエトキシル化フィトステロールまたはフィトスタノールの使用。
【請求項２】
ステロールまたはスタノールに結合したエトキシレート鎖が５〜１００のエチレングリコール単位から構成される、請求項１記載の使用。
【請求項３】
ステロールまたはスタノールに結合したエトキシレート鎖が１０〜５０のエチレングリコール単位から構成される、請求項２記載の使用。
【請求項４】
フィトステロールが、シトステロール、カンペステロール、スチグマステロール、ブラッシカステロール(brassicasterol)、アベナステロール(avenasterol)、エルゴステロールおよびそれらの混合物から成る群から選択される、請求項１〜３のいずれか１項記載の使用。
【請求項５】
フィトスタノールが、シトスタノール、カンペスタノール、スチグマスタノール、ブラッシカスタノール(brassicastanol)、アベナスタノール(avenastanol)、エルゴスタノールおよびそれらの混合物から成る群から選択される、請求項１〜３のいずれか１項記載の使用。
【請求項６】
水溶液に難溶解性である物質が、薬剤、栄養補助食品、および別の医薬用物質である、請求項１〜３のいずれか１項記載の使用。
【請求項７】
水溶液に難溶解性である物質が薬剤である、請求項６記載の使用。
【請求項８】
水溶液に難溶解性である物質が、フェロジピン、プロブコール、オキサゼパム、グリベンクラミド、トルブタミドまたはグリセオフルビンである、請求項７記載の使用。
【請求項９】
水溶液に難溶解性である物質が、栄養補助食品または別の医薬用物質である、請求項６記載の使用。
【請求項１０】
水溶液に難溶解性である物質が、ビタミン、脂質、タンパク質、ペプチド、脂肪酸、酸化防止剤または植物または動物からの抽出物である、請求項９記載の使用。
【請求項１１】
生きている細胞の損傷が細胞の溶解または血液中での溶血を含むものである、請求項１記載の使用。
【請求項１２】
エトキシル化フィトステロールまたはフィトスタノールが単なる可溶化剤として使用される、請求項１〜１１のいずれか１項記載の使用。
【請求項１３】
水に難溶解性である少なくとも１種の物質および少なくとも１種のエトキシル化フィトステロールまたはフィトスタノールを含む、生きている細胞に損傷を与える可能性が低い水性製剤。
【請求項１４】
エトキシル化フィトステロールまたはフィトスタノールの濃度が１０×１０−６〜１００×１０−３Ｍである、請求項１３記載の製剤。
【請求項１５】
水に難溶解性である少なくとも１種の物質および少なくとも１種のエトキシル化フィトステロールまたはフィトスタノールを含む製剤を、ヒトを含む哺乳類に投与することによる、生きている細胞における細胞損傷の予防方法。
【国際調査報告】
2005511586.tif 000037
2005511586.tif 000038
2005511586.tif 000039
2005511586.tif 000040
2005511586.tif 000041