(57)【要約】本発明は一般に、薬学的に活性なラクトン、その薬学的処方物およびその使用方法、ならびに抗癌剤および抗感染剤として有用な化学的に官能化されたラクトンの合成的調製のための方法の分野に関する。ラクトン構造およびこのラクトン構造のα位にメチレン基を有する式ＩａおよびＩｃの化合物を発見した。このラクトン化合物は、求核剤と反応して、そのラクトン環が開環して、式Ｉｂの化合物になり得る。式Ｉａのラクトンおよびその官能化誘導体が、Ｓｅｃｕｒｉｄａｃａ  ｖｉｒｇａｔａから単離される。その精製された化合物は、抗細菌活性および抗真菌活性についてのアッセイ、および癌のような増殖障害を処置するためのアッセイにおいて、活性を示した。インビトロアッセイに基づいて、このラクトンは、増殖障害を処置するために有用である。これらのラクトンはまた、細菌感染および真菌感染の処置のために有効である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の構造：
【化１】
2005500289.tif 000014
のいずれか一つによって規定される単離された化合物であって、ここで、
Ｒ１−Ｒ７は、独立して、またはＲ３−Ｒ６は、一緒になって、水素原子であるか、またはアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ、置換アロキシ、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ１−Ｃ２０環、置換Ｃ１−Ｃ２０環、複素環、置換複素環、アミノ酸、ペプチド、およびポリペプチド基からなる群から選択される基または群であり；
Ｚは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子であり；
Ｚ’は、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基であるか、または、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子を含む、１〜８個の炭素原子を有する有機基であり；そして
Ｘは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子である、
化合物、あるいは
以下の構造：
【化２】
2005500289.tif 000015
によって規定される単離されたラクトンであって、ここで、
Ｒ１−Ｒ９は、独立して、またはＲ５およびＲ６は、一緒になって、水素原子であり得るか、またはアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ、置換アロキシ、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ１−Ｃ２０環、置換Ｃ１−Ｃ２０環、複素環、置換複素環、アミノ酸、ペプチド、およびポリペプチド基からなる群から選択される、任意の他の基または群であり得；
Ｙ１、Ｙ２、およびＹ３は、独立して、またはＹ１およびＹ２は、一緒になって、水素であり得るか、またはアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ、置換アロキシ、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ１−Ｃ２０環、置換Ｃ１−Ｃ２０環、複素環、置換複素環、アミノ酸、ペプチド、およびポリペプチド基からなる群から選択される任意の他の基または群であり得；
Ｚは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子であり；そして
Ｘは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子である、
ラクトン。
【請求項２】
式Ｉａによって規定される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘが、酸素である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ５が、環外メチレンである、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
式Ｉｂによって規定される、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
以下の構造：
【化３】
2005500289.tif 000016
のいずれか一つを有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
請求項１に記載の化合物であって、式Ｉａの前記ラクトンが、Ｓｅｃｕｒｉｄａｃａ  ｖｉｒｇａｔａから単離される、化合物。
【請求項８】
請求項１に記載の化合物であって、式Ｉａが、非経口投与、腸内投与、または局所投与のための薬学的に受容可能なキャリアをさらに含む、化合物。
【請求項９】
処置を必要とする患者を処置する方法であって、該方法は、以下の構造：
【化４】
2005500289.tif 000017
のうちの一つによって規定された有効量の化合物であって、ここで、
Ｒ１−Ｒ７は、独立して、またはＲ３−Ｒ６は、一緒になって、水素原子であるか、またはアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ、置換アロキシ、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ１−Ｃ２０環、置換Ｃ１−Ｃ２０環、複素環、置換複素環、アミノ酸、ペプチド、およびポリペプチド基からなる群から選択される基または群であり；
Ｚは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子であり；
Ｚ’は、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基であるか、または、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子を含む、１〜８個の炭素原子を有する有機基であり；そして
Ｘは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子である、
化合物、あるいは
以下の構造：
【化５】
2005500289.tif 000018
によって規定される単離されたラクトンであって、ここで、
Ｒ１−Ｒ９は、独立して、またはＲ５およびＲ６は、一緒になって、水素原子であり得るか、またはアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ、置換アロキシ、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ１−Ｃ２０環、置換Ｃ１−Ｃ２０環、複素環、置換複素環、アミノ酸、ペプチド、およびポリペプチド基からなる群から選択される、任意の他の基または群であり得；
Ｙ１、Ｙ２、およびＹ３は、独立して、またはＹ１およびＹ２は、一緒になって、水素であり得るか、またはアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ、置換アロキシ、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ１−Ｃ２０環、置換Ｃ１−Ｃ２０環、複素環、置換複素環、アミノ酸、ペプチド、およびポリペプチド基からなる群から選択される任意の他の基または群であり得；
Ｚは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子であり；そして
Ｘは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子である、
ラクトンを投与する工程を包含する、方法。
【請求項１０】
Ｘが、酸素である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
Ｒ５が、環外メチレンである、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
前記化合物が、以下の構造：
【化６】
2005500289.tif 000019
のいずれか一つを有する、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
前記式Ｉａの化合物が、経口、非経口、局所、または経皮的に投与される、請求項８に記載の方法。
【請求項１４】
前記患者が、増殖障害を有する、請求項９に記載の方法。
【請求項１５】
前記増殖障害が、癌である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記患者が、感染を有する、請求項９に記載の方法。
【請求項１７】
前記感染が、細菌性である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記感染が、真菌性である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記患者が、消化性潰瘍疾患を有する、請求項９に記載の方法。
【請求項２０】
前記消化性潰瘍疾患が、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉの存在に関連している、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記患者が、疼痛である、請求項９に記載の方法。
【請求項２２】
薬学的に受容可能なキャリア中の式Ｉａの化合物を投与する工程をさらに包含する、請求項９に記載の方法。
【請求項２３】
請求項２２に記載の方法であって、経口投与のための前記キャリアが、うがい薬、ロゼンジ、錠剤、カプセル、溶液、懸濁液、粒剤、またはそれらの任意の組み合わせである、方法。
【請求項２４】
請求項２２に記載の方法であって、局所投与のための前記キャリアが、坐薬、軟膏、クリーム、ゲル、ペースト、コロジオン、グリセロゼラチン、リニメント、ローション、ペースト、プラスター、粉末、テープ、パッチ、エアロゾル、溶液、チンキ剤、またはそれらの任意の組み合わせである、方法。
【請求項２５】
植物由来のラクトンを単離するプロセスであって、該プロセスは、植物材料から該ラクトンを抽出する工程を包含し、該ラクトンは、以下の構造：
【化７】
2005500289.tif 000020
によって規定され、ここで、
Ｒ１−Ｒ７は、独立して、またはＲ３−Ｒ６は、一緒になって、水素原子であるか、またはアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ、置換アロキシ、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ１−Ｃ２０環、置換Ｃ１−Ｃ２０環、複素環、置換複素環、アミノ酸、ペプチド、およびポリペプチド基からなる群から選択される基または群であり；
Ｚは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子であり；そして
Ｘは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子である、
プロセス。
【請求項２６】
前記植物が、Ｓｅｃｕｒｉｄａｃａ  ｖｉｒｇａｔａである、請求項２５に記載のプロセス。
【請求項２７】
前記単離方法が、クロマトグラフィーに従う抽出である、請求項２５に記載のプロセス。
【請求項２８】
以下の構造：
【化８】
2005500289.tif 000021
のいずれか一つによって規定される合成化合物であって、ここで、
Ｒ１−Ｒ７は、独立して、またはＲ３−Ｒ６は、一緒になって、水素原子であるか、またはアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ、置換アロキシ、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ１−Ｃ２０環、置換Ｃ１−Ｃ２０環、複素環、置換複素環、アミノ酸、ペプチド、およびポリペプチド基からなる群から選択される基または群であり；
Ｚは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子であり；
Ｚ’は、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基であるか、または、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子を含む、１〜８個の炭素原子を有する有機基であり；そして
Ｘは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子である、
化合物、あるいは
以下の構造：
【化９】
2005500289.tif 000022
によって規定される単離されたラクトンであって、ここで、
Ｒ１−Ｒ９は、独立して、またはＲ５およびＲ６は、一緒になって、水素原子であり得るか、またはアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ、置換アロキシ、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ１−Ｃ２０環、置換Ｃ１−Ｃ２０環、複素環、置換複素環、アミノ酸、ペプチド、およびポリペプチド基からなる群から選択される、任意の他の基または群であり得；
Ｙ１、Ｙ２、およびＹ３は、独立して、またはＹ１およびＹ２は、一緒になって、水素であり得るか、またはアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ、置換アロキシ、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ１−Ｃ２０環、置換Ｃ１−Ｃ２０環、複素環、置換複素環、アミノ酸、ペプチド、およびポリペプチド基からなる群から選択される任意の他の基または群であり得；
Ｚは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子であり；そして
Ｘは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態の、酸素、硫黄、および窒素群からなる群から選択されるヘテロ原子である、
合成化合物。
【請求項２９】
以下の構造：
【化１０】
2005500289.tif 000023
のいずれかによって規定される、請求項２８に記載の化合物。
【請求項３０】
式ＩａおよびＩｃの化合物を作製する方法であって、該方法が、以下：
ａ）ラクトン構造を有する前駆体を提供する工程、および
ｂ）該ラクトン構造のα位にメチレン基を有する生成物を提供するために、該前駆体と１つ以上の化学試薬を反応させる工程、
を包含する、方法。
【請求項３１】
式Ｉｂの化合物を作製するための方法であって、該方法は、以下：
ａ）ラクトン構造を有する前駆体を提供する工程、
ｂ）該ラクトン構造のα位にメチレン基を有する生成物を提供するために、該前駆体と１つ以上の化学試薬を反応させる工程、および
ｃ）該生成物を求核剤と反応させる工程、
を包含する、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は一般に、薬学的に活性なラクトン、その薬学的処方物およびその使用方法、ならびに抗癌剤および抗感染剤として有用な化学的に官能化されたラクトンの合成的調製のための方法の分野に関する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
感染、癌および他の障害の処置において有用な多くの異なる化合物の開発にもかかわらず、低投薬量で効果的であり得るか、より選択的であり得るか、少ない副作用を有し得るか、または既知の化合物に対する耐性が発生した疾患または障害を処置し得る、新たな化合物の開発の必要性が残っている。
【０００３】
化学療法剤は、感染、癌、異常な増殖障害（子宮内膜症、再狭窄、乾癬）、および他の障害の処置のために使用される、ほとんどの化学療法剤は、特異性を欠くので、副作用を有する。例えば、癌は、主な死亡原因の１つである。癌を処置する主な様式の１つである化学療法は、細胞の増殖および複製を特異的に制限するために使用される。ほとんどの化学療法剤はまた、正常な組織の新形成細胞および迅速に増殖する細胞（例えば、骨髄、毛包など）に影響を与え、これは、いくつかのネガティブな副作用（脱毛、吐気、嘔吐および骨髄機能の抑制を含む）を生じる。さらに、これらの薬剤の効力は、しばしば、耐性の発生に起因して、時間の経過と共に減少する。
【０００４】
従って、抗感染剤および／または抗増殖剤として有効な新規な種類の化合物を提供することが、本発明の目的である。
【０００５】
副作用を最小限にするために、特異的細胞傷害性を有する有効な抗腫瘍剤を提供することが、本発明の別の目的である。
【０００６】
特異的であり、かつ現在使用されている多くの他の薬剤とは異なる抗感染剤を提供し、薬物耐性生物のための代替の処置方法を提供することが、本発明のさらなる目的である。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
（発明の要旨）
ラクトン構造およびこのラクトン構造のα位にメチレン基を有する式ＩａおよびＩｃの化合物が、発見された。このラクトン化合物は、求核剤と反応して、そのラクトン環が開環して、式Ｉｂの化合物になり得る。式Ｉａのラクトンおよびその官能化誘導体が、Ｓｅｃｕｒｉｄａｃａ  ｖｉｒｇａｔａから単離されている。これらの化合物は、ＬＭＳＶ−６またはＳｅｃｕｒｏｌｉｄｅＴＭと称される。その精製された化合物は、抗細菌活性および抗真菌活性についてのアッセイ、および癌のような増殖障害を処置するためのアッセイにおいて、活性を示した。インビトロアッセイに基づいて、このラクトンは、増殖障害（例えば、乳癌、結腸癌、直腸癌、胃癌、膵臓癌、肺癌、肝臓癌、卵巣癌、食道癌、および白血病などを含む）を処置するために有用である。これらのラクトンはまた、細菌感染および真菌感染の処置（消化性潰瘍疾患、歯肉炎および歯周炎の処置を含む）のために有効である。
【０００８】
式ＩａおよびＩｃの化合物を作製するための方法は、一般に、以下を包含する：ａ）ラクトン構造を有する前駆体を提供する工程、およびｂ）この前駆体を１つ以上の化学試薬と反応させて、このラクトン構造のα位にメチレン基を有する生成物を提供する工程。この生成物を、求核剤（例えば、アルコール、アルコキシド、アミンまたは任意の他の中性もしくは陰イオン性の求核試薬）で処理して、式Ｉｂの化合物を生成し得る。
【０００９】
（発明の詳細な説明）
（Ｉ．ラクトン組成物）
（Ａ．Ｓｅｃｕｒｉｄａｃａ  ｖｉｒｇａｔａから単離されたラクトン）
環外メチレン基を有するラクトンおよびγ位にヒドロキシルを有するそのそれぞれの誘導体が開示される。このラクトンおよびその誘導体は、合成され得るか、または天然の供給源から単離され得る。一実施形態において、このラクトンおよびその誘導体はクロマトグラフィー方法によって、植物（その分類上の科学名はＳｅｃｕｒｉｄａｃａ  ｖｉｒｇａｔａであり、これはその植物科としてＰｏｌｙｇａｌａｃｅａｅに属する）から単離され得る。本明細書中で使用される場合、用語「ラクトン」は、Ｃ＝Ｏ基の酸素原子がイオウ原子または窒素器で置換され得る５員環のラクトン構造を有する任意の有機化学物質を包含する。本明細書中で使用される場合、用語「誘導体」とは、ラクトンと１つ以上の化学試薬とを反応させることによってラクトンから生成される任意の化合物をいう。この用語はまた、このラクトンを有機求核剤または無機求核剤を用いて開環して、例えば、酸、エステルアミドまたはその任意の他の生成物を形成することによって得られ得る任意の生成物をいう。
【００１０】
一実施形態において、ラクトンは、以下の化学構造を有する：
【００１１】
【化１１】
2005500289.tif 000002
ここで、
Ｒ１〜Ｒ６は、独立して、またはＲ３〜Ｒ６は、一緒になって、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、または任意の他の直鎖、分枝鎖もしくは環状構造形態の有機基（任意の数の炭素原子、好ましくは１〜８個の炭素原子を含み、そして必要に応じてヘテロ原子（例えば、酸素、イオウまたは窒素基）を含む）であり、それぞれのＲ１〜Ｒ６基は、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ（ａｒｏｘｙ）、置換アロキシ、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ１−Ｃ２０環式、置換Ｃ１−Ｃ２０環式、複素環式、置換複素環式、アミノ酸、ペプチド、およびポリペプチド基であり；
Ｚは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態のヘテロ原子（例えば、酸素、硫黄、および窒素基）であり；そして
Ｘは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態のヘテロ原子（例えば、酸素、硫黄、および窒素基）である。
【００１２】
別の実施形態において、この化合物は、以下の化学構造を有する：
【００１３】
【化１２】
2005500289.tif 000003
ここで、
Ｒ１〜Ｒ７は、独立して、またはＲ３〜Ｒ６は、一緒になって、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、または任意の他の直鎖、分枝鎖もしくは環状構造形態の有機基（任意の数の炭素原子、好ましくは１〜８個の炭素原子を含み、そして必要に応じてヘテロ原子（例えば、酸素、イオウまたは窒素基）を含む）であり得、それぞれのＲ１〜Ｒ６基は、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ、置換アロキシ、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ１−Ｃ２０環式、置換Ｃ１−Ｃ２０環式、複素環式、置換複素環式、アミノ酸、ペプチド、およびポリペプチド基であり；
Ｘは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態のヘテロ原子（例えば、酸素、硫黄、および窒素基）であり；
Ｚは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態のヘテロ原子（例えば、酸素、硫黄、および窒素基）であり；そして
Ｚ’は、水素原子、ハロゲン原子、もしくはヒドロキシル基であるか、または、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態のヘテロ原子（例えば、酸素、硫黄、および窒素基）を必要に応じて含み、１〜８個の炭素原子を有する有機基であり得る。
【００１４】
さらに別の実施形態において、α−メチレン基を有するラクトンは、以下に示されるような構造を有する：
【００１５】
【化１３】
2005500289.tif 000004
ここで、
Ｒ１〜Ｒ９は、独立して、またはＲ３またはＲ６は、一緒になって、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、または任意の他の直鎖、分枝鎖もしくは環状構造形態の有機基（任意の数の炭素原子、好ましくは１〜８個の炭素原子を含み、そして必要に応じてヘテロ原子（例えば、酸素、イオウまたは窒素基）を含む）であり得、それぞれのＲ１〜Ｒ６基は、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ、置換アロキシ、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ１−Ｃ２０環式、置換Ｃ１−Ｃ２０環式、複素環式、置換複素環式、アミノ酸、ペプチド、およびポリペプチド基であり；
Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３は、独立して、またはＹ１およびＹ２は、一緒になって、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、または任意の他の直鎖、分枝鎖もしくは環状構造形態の有機基（任意の数の炭素原子、好ましくは１〜８個の炭素原子を含み、そして必要に応じてヘテロ原子（例えば、酸素、イオウまたは窒素基）を含む）であり得、それぞれのＲ１〜Ｒ６基は、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ、置換アロキシ、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ１−Ｃ２０環式、置換Ｃ１−Ｃ２０環式、複素環式、置換複素環式、アミノ酸、ペプチド、およびポリペプチド基であり；
Ｚは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態のヘテロ原子（例えば、酸素、硫黄、および窒素基）であり；そして
Ｘは、直鎖、分枝鎖、または環状構造形態のヘテロ原子（例えば、酸素、硫黄、および窒素基）である。
【００１６】
一実施形態において、このラクトンは、セクロリド（ｓｅｃｕｒｏｌｉｄｅ）であり、これは、以下の構造を有するα−メチレン−ラクトン（１）である：
【００１７】
【化１４】
2005500289.tif 000005
別の実施形態において、このエステルは、以下の構造で示されるメチルα−メチレン−γ−ヒドロキシ−ブタノエート（２）である：
【００１８】
【化１５】
2005500289.tif 000006
さらに別の実施形態において、このラクトンは、以下の構造を有する二環式化合物である：
【００１９】
【化１６】
2005500289.tif 000007
（Ｂ．賦形剤）
ラクトンおよび官能性誘導体は、経腸投与、非経口投与または局所投与のための標準的な技術を使用して処方され得る。有効投薬量は、当業者に公知のインビトロアッセイ（例えば、実施例で記載されるアッセイ）に基づいて決定され得る。
【００２０】
経口送達のための適切な薬学的に受容可能なビヒクルとしては、滅菌生理食塩水、リン酸緩衝化生理食塩水および注射用の標準的な微粒子処方物（ポリマーマイクロスフェア、マイクロカプセル、リポソームおよびエマルジョンを含む）が挙げられる。これには、分解性ポリマー（例えば、ポリ乳酸およびポリグリコール酸、ならびにそれらのコポリマー、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリヒドロキシアルカノエート）が挙げられ得る。注射のために、このラクトンは、代表的に、液体キャリア中の溶液または懸濁液として処方される。
【００２１】
局所送達のためのこのラクトンは、軟膏、ローション、ゲル、スプレー、または制御放出処方物もしくは徐放性処方物の形態（例えば、経皮パッチ）の形態で処方され得る。
【００２２】
経腸送達のためのこのラクトンは、錠剤の形態、カプセル剤の形態、賦形剤（例えば、ラクトースのような糖）不活性化合物（例えば、ステアリン酸マグネシウム）、パラフィン誘導体、グリコールまたはアラビアゴム中に溶解またはカプセル化された、懸濁液もしくは溶液の形態で処方され得る。この処方物は、色素、香味剤、保存剤、分散剤もしくは乳化剤、またはこの処方物の放出特性もしくは安定性を改変する物質をさらに含み得る。
【００２３】
活性化合物は、第２の薬学的に受容可能な抗菌剤（例えば、ニトロイミダゾール抗生物質（例えば、チニダゾールおよびメトロニダゾール）；テトラサイクリン（例えば、テトラサイクリン、ドキシサイクリンおよびミノサイクリン）；ペニシリン（例えば、アモキシシリンおよびメジオシリン（ｍｅｚｉｏｃｉｌｌｉｎ）；セファロスポリン（例えば、セラクロール、セファドロキシル、セファドリン、セフロキシム、セフロキシムアキセチル（ａｘｅｔｉｌ）、セファレキシン、セフポドキシムプロキセチル（ｐｒｏｘｅｔｉｌ）、セフタジジムおよびセファトリアキソン（ｃｅｆａｔｒｉａｘｏｎｅ）；カルバペネム（ｃａｒｂａｐｅｎｅｍ）（例えば、イミペネムおよびメロペネム（ｍｅｒｏｐｅｎｅｍ））；アミノグリコシド（例えば、パロモマイシン）；マクロライド抗生物質（例えば、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシン）；リンコサミド（ｌｉｎｃｏｓａｍｉｄｅ）抗生物質（例えば、クリンダマイシン）；リファマイシン（ｒｉｆａｎｙｃｉｎ）（例えば、リファンピシンおよびニトロフラントイン））と組み合わせて使用され得る。
【００２４】
これらの化合物と薬学的な酸低下剤（例えば、酸ポンプインヒビター（例えば、オメプラゾールおよびランゾプラゾール）またはＨ２アンタゴニスト（例えば、ラニチジン、シメチジンおよびファモチジン））との組合せは、酸関連障害の処置において使用され得る。
【００２５】
（ＩＩ．ラクトンの合成）
ラクトンおよびそのそれぞれの誘導体の合成は、α−メチレン基を形成する工程を包含する。一般に、式ＩａおよびＩｃの化合物を作製する方法は、以下を包含する：ａ）ラクトン構造を有する前駆体を提供する工程、およびｂ）この前駆体と１つ以上の化学試薬とを反応させて、このラクトン構造のα位にメチレン基を有する生成物を提供する工程。この生成物を、求核剤（例えば、アルコール、アルコキシド、アミンまたは任意の他の中性求核試薬もしくはアニオン性求核試薬）で処理して、式Ｉｂの化合物を生成し得る。
【００２６】
メチレン基を形成する方法は、合成有機化学に十分に示される標準的な技術である。例えば、Ｍａｒｃｈ，「Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、第４版、１９９２，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを参照のこと）。これらのラクトンを、例えば、５員環のラクトンから始め、次いでα位を誘導体化して、この分子にメチレン基を付加することによって、合成し得る。
【００２７】
例えば、スキーム１によって示されるように、構造（１）を有する化合物を塩基、アルコール、およびエステルと反応させることによって、エノレートが生成され、このエノレートは、構造（４）のラクトンに対する前駆体である（スキーム１を参照のこと）。
【００２８】
【化１７】
2005500289.tif 000008
ラクトン（４）は、有機合成の分野において利用可能な標準的な合成技術を使用してさらに誘導体化され得る（例えば、Ｍａｒｃｈ、上記を参照のこと）。例えば、カルボキシル基官能基化ラクトン（４）は、例えば、構造（１）を有する化合物を、ラクトンのαカルボキシル化のための薬剤（ＭＭＣ、メチル−Ｍｇ−カルボネート）、およびトリエチルアミンのような塩基の存在下でアルデヒドと反応させることによって調製され得、構造（４）のラクトンを生じ、これは、単離された天然に存在するラクトンである（スキーム２）。
【００２９】
【化１８】
2005500289.tif 000009
スキーム２において、官能基化メチレン基ラクトン（４）は、構造（１）を有する化合物をメチル−Ｍｇ−カルボネート（ＭＭＣ）、アルデヒドと、塩基ＮＮ−ジメチルホルムアミド［ＤＭＦ−ＨＣＯＮ（ＣＨ３）２］を有する緩衝液中で反応させることによって調製されて、カルボン酸官能基化ラクトン（１Ｂ）を生成し、次いでラクトン（１Ｂ）は、アルデヒドおよびジエチルアミン、酢酸ナトリウム、酢酸で処理されて、ラクトン（４）を生じる。
【００３０】
他の官能基化ラクトン誘導体は、容易に調製され得る。例えば、官能基化誘導体ラクトン（９）は、構造（５）を有する化合物を、無機酸およびアルコールと、加熱還流することによって反応させることにより調製して、エノール−ラクトンを生成し得、次いで、このエノール−ラクトンは、塩基で還元されて、構造（７）の生成物を生成する。（７）と塩基、アルコールおよびエステルとの反応によって、エノレートが生成し、これは、化合物（９）の官能基化ラクトンに対する前駆体である（スキーム３）。
【００３１】
【化１９】
2005500289.tif 000010
より官能基化されたラクトンは、当該分野の容易に利用可能な合成方法によって調製され得る（例えば、Ｍａｒｃｈ、「Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第４版、１９９２、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを参照のこと）。例えば、官能基化ラクトン（４）は、構造（１）を有する化合物を、塩基、アルコールおよびエステルと反応させることによって調製されて、エノレートを生成し得、これは、構造（４）のラクトンに対する前駆体である（スキーム４）。
【００３２】
【化２０】
2005500289.tif 000011
式Ｉａ〜ｃのラクトン化合物の薬学的に受容可能な塩は、酸または塩基（例えば、アミン）の形態の場合、式Ｉａ〜ｃの化合物の溶液または懸濁液を、約１化学当量の薬学的に受容可能な塩基または酸を用いて処理することによって、従来の方法で調製され得る。従来の濃縮および再結晶化技術は、塩を単離する際に使用される。
【００３３】
（ＩＩＩ．処置方法）
（Ａ．処置されるべき障害）
実施例に記載されるように決定される活性に基づいて、ラクトンは、抗感染性剤および抗増殖性剤として有用である。特に、ラクトンは、細菌または真菌の増殖、ウイルス疾患を阻害するか、あるいは細菌疾患または真菌疾患を処置するのに有効な量で投与され得る。処置されるべき好ましい細菌障害の例としては、消化性潰瘍疾患、胃炎、消化不良、歯周疾患、および歯肉炎が挙げられる。殺真菌組成物は、殺真菌的に有効量の式の化合物またはその塩、ならびに不活性な薬学的キャリアから構成される。薬学的組成物の例は、単純な（ｐｌａｉｎ）または糖でコーティングした錠剤、ゼラチンカプセル、顆粒、坐剤、注射可能調製物、軟膏、クリームまたはゲルであり得る。
【００３４】
殺真菌組成物は、特に、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓおよび他のＣａｎｄｉｄａ（例えば、Ｃａｎｄｉｄａ  ｇｌａｂｒａｔａ、ｋｒｕｓｅｉ、ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ、ｐｓｅｕｄｏｔｒｏｐｉｃａｌｉｓおよびｐａｒａｐｓｉｌｏｓｉｓ）、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｕｍｉｇａｔｕｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｌａｖｕｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ  ｃａｎｉｓ、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ  ｒｕｂｒｕｎ、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ  ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅに対して、そして特に免疫抑制系の消化性、尿性、膣性または皮膚性のカンジダ症、クリプトコックス症（例えば、神経髄膜性、肺性または皮膚性のクリプトコックス症）、気管支肺アスペルギルス症、肺アスペルギルス症および侵入性アスペルギルス症と闘うのに有用である。この組成物はまた、先天的なまたは後天的な免疫学的抑制において真菌疾患の予防において使用され得る。
【００３５】
ラクトンはまた、増殖性障害（癌を含む）を処置するために投与され得る。細胞増殖（ｇｒｏｗｔｈ）または細胞増殖（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）の阻害を示した代表的な型の癌としては、乳癌、肺癌、卵巣癌、食道癌、および白血病が挙げられる。このラクトンが処置において有用であり得る、他の型の異常増殖障害としては、血管形成術に続いて内皮組織の異常な過剰増殖によって引き起こされる、子宮内膜症および再狭窄が挙げられる。
【００３６】
上記官能基化ラクトン（９）は、アスパラギン酸プロテアーゼインヒビターとして特に有用であり、そしてＨＩＶ−１のアスパラギン酸プロテアーゼを阻害し、それによって、ウイルスプロセシング、特にウイルス遺伝子産物の翻訳後プロセシング（ｇａｇ／ｇａｇ−ｐｏｌ）を制限することが示されている。
【００３７】
これらのラクトンはまた、神経伝達物質としてその活性を介する疼痛応答を調節する際に有用である。
【００３８】
（Ｂ．投薬量）
有効量は、処置される疾患または障害、投与および処方の様式に基づいて決定される。有効投薬量は、実施例に記載されるようなインビトロアッセイを使用して決定される有効投薬量に基づいて慣用的に決定され得る。
【００３９】
Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ  ａｅｒｏｇｉｎｏｓａ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓに対するＳｅｃｕｒｏｌｉｄｅ（ＬＭＳＶ−６）の高い活性、およびその低分子量は、有利である。Ｓｅｃｕｒｏｌｉｄｅの利点としては、薬理学的応答を促進するその能力および速度；細胞膜障壁を越えるその能力（高分子量は、主要な妨害である）、およびＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ（これは、より薬物耐性な微生物の１つである）に対するその潜在的活性が挙げられる。
【００４０】
真菌感染と闘うための方法は、殺真菌的有効量の式Ｉの化合物またはその酸付加塩を、頬経路、直腸経路、非経口経路によって、または皮膚および粘膜上での局所適用としての局所経路によって、投与する工程を包含するが、好ましい経路は、頬経路である。通常の毎日の投薬量は、投与の方法、処置条件および特定の化合物に依存して、１〜５ｍｇ／ｋｇである。
【００４１】
この化合物は、単独で投与され得るが、一般的に、意図される投与の経路および標準的な薬物学的実施に関して選択された薬学的キャリアと混合して投与される。例えば、これらは、経口的にまたはデンプンもしくはラクトースのような賦形剤を含む錠剤の形態で、あるいは単独もしくは賦形剤と混合したかのいずれかのカプセルで、あるいは芳香剤もしくは着色剤を含むエリキシル剤または坐剤の形態で、投与され得る。動物の場合に、これらは、約５〜５０００ｐｐｍ、好ましくは、約２５〜約５００ｐｐｍの濃度で、動物飼料または飲料液体に有利に含まれる。これらは、非経口的に、例えば、粘膜内に、静脈内にまたは皮下的に注射され得る。非経口的投与について、これらは、溶液を等張性にするために、他の溶質（例えば、十分な塩またはグルコース）を含み得る滅菌水溶液の形態で最良に使用される。動物の場合、化合物は、単回の毎日の用量でまたは４回までの分割された用量で与えられる、約０．１〜約５０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは、約０．２〜約１０ｍｇ／ｋｇ／日の投薬レベルで粘膜内にまたは皮下的に投与され得る。
【００４２】
化合物は、経口経路または非経口経路のいずれかによってＨ．ｐｙｌｏｒｉ感染の処置のためにヒトに投与され得、そして単回の用量でまたは４回までの分割された用量で与えられる、約０．１〜約５０ｍｇ／ｋｇ／日、有利には、約０．５〜５０ｍｇ／ｋｇ／日の投薬レベルで経口的に投与され得る。粘膜内投与または静脈内投与のために、用量レベルは、約０．１〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは、約０．５〜約５０ｍｇ／ｋｇ／日である。粘膜内投与は、単回用量または４回までの用量であり得るが、静脈内投与は、連続点滴を含み得る。当業者に公知であるように、処置される被験体の体重および状態、ならびに選択される特定の投与経路に依存して、改変は、必然的に生じる。
【００４３】
第２の抗微生物剤および酸低下剤は、本発明の化合物について上記されるのと同じ様式で化合物とともに投与され得る。従って、特定の薬剤に依存して、投与は、経口的に、約０．１〜約５００ｍｇ／ｋｇ、例えば、１日当たり約１〜３ｇの第２の抗微生物剤、および約４０〜８０ｍｇ／日の酸低下剤、または約０．１〜約２００ｍｇ／ｋｇ／日の注射であり得る。
【００４４】
本発明は、さらに、以下の非限定的な実施例を参照してさらに理解される。
【実施例】
【００４５】
（実施例１：Ｓｅｃｕｒｉｄａｃａ  ｖｉｒｇａｔａからのラクトンの単離）
Ｓｅｃｕｒｉｄａｃａ  ｖｉｒｇａｔａの根を、Ｓａｎ  Ｃｒｉｓｔｏｂａｌ  Ｄｏｍｉｎｉｃａｎ  Ｒｅｐｕｂｌｉｃで収集した。空港のサンプル証書を、識別されるためにＮａｔｉｏｎａｌ  Ｂｏｔａｎｉｃ  Ｇａｒｄｅｎに送った。空気乾燥し、チョップしそして製粉した根（２５３ｇ）を、ソックスレー装置で抽出した。冷抽出物を濾過し、次いで、減圧下（５５℃）で濃縮して、シロップ状の液体（２９．７６ｇ）を得、これは、１１．７６％の収率を意味する。このシロップ（２８ｇ、微生物学的に試験される）を、３００ｍｌのスルホン酸０．５Ｍで処理し、そして４時間攪拌し、次いで、シロップが酸クロロホルム可溶性物質から分離されるまで、クロロホルムで連続的に、液−液抽出で抽出した。次いで、水溶性（ｈｙｄｒｏｓｏｌｕｂｌｅ）相を、水酸化アンモニウム２０％で塩基性化（ｐＨ＝８〜９）し、そして再びクロロホルムを用いて水溶性相を抽出した。クロロホルム抽出物を、減圧下で濃縮（５０℃）して、５．９２ｇの抽出物を得た（粗収率抽出物に関して、収率＝２１．１４％および抽出された根に関して、２．３３％）。５．９２ｇは、９５．３４％の純度のＬＭＳＶ−６（ＳｅｃｕｒｏｌｉｄｅＴＭ）を有した。最終クロロホルム抽出物（５．９２ｇ）を、塩基性アルミナ（ａｌｕｍｎａ）（６３〜１５０μｍ）中でクロマトグラフにかけ、そして石油エーテル−酢酸エチル混合物（３０：７０）で溶出した。収集された画分を濃縮して、純粋な透明な液体物質（ＳｅｃｕｒｏｌｉｄｅＴＭ）（１）を有した。（１）が単離される液体クロマトグラフカラムからのクロマトグラフ画分７２〜９７（６７４ｍｇ）を再びクロマトグラフィーにかけて、琥珀色液体（２）を得た。次いで、化合物（１）および（２）をバイオアッセイで試験した。
【００４６】
分光的分析は、化合物（１）についての以下のデータを生じた：
（物理的データ）
相対密度：１．０７０ｇ／ｍＬ  ｐＨ＝５．８５３
屈折率＝１．４７１
（スペクトルデータ）
質量分光法：ＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）：分子イオン９８．０［Ｍ＋］、（５４）、６８
（１００）、分子式Ｃ５Ｈ６Ｏ２。
赤外分光法（ＩＲ）：１７６１．６ｃｍ−１（ラクトン）、１６６７ｃｍ−１（Ｃ＝Ｃ）
、８１０ｃｍ−１ｎ（Ｃ＝ＣＨ２）。
プロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ  １Ｈ、２００ＭＨｚ、ＣＤＣＩ３：δ２．９８ｐｐｍ（２Ｈマルチプレット）、４．３７ｐｐｍ（１Ｈ  トリプレット、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、５．６５（１Ｈ  トリプレット、Ｊ＝２，６Ｈｚ）、６．２２（１Ｈ  トリプレット、Ｊ＝２．６）
炭素１３核磁気共鳴（ＮＭＲ  １３Ｃ  ２００ＭＨｚ、ＣＤＣＩ３）：δ１７０．７（Ｃ−１）、１３３．３（Ｃ−２）、２７．４（Ｃ−３）、６５．５（Ｃ−４）、１２２．２（Ｃ−５）
２重核磁気共鳴プロトン実験（照射）２重核磁気共鳴プロトン実験は、存在するプロトンについて互いの間でカップリングを示した。メチレン性環外プロトンδ（５．６５および６．２２）、Ｃ−３の照射は、Ｃ−４とのカップリングを示し、この方法で、（１）の全てのプロトンの結合性（ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ）を決定した。
【００４７】
分光学的分析は、化合物（２）について以下のデータを生じた：
質量分光法：１３０．０（Ｍ＋、３）、１１３（Ｍ＋−ＯＨ、１２）、Ｃ６Ｈ１０Ｏ３。
赤外分光法（ＩＲ）：３６１４．６ｃｍ−１（ＯＨ）、１６２９ｃｍ−１（Ｃ＝Ｃ）、１１５０．９（−ＣＯ−ＯＣＨ３）、８１０ｃｍ−１（Ｃ＝ＣＨ２）。
プロトン核磁気共鳴分光法（２００ＭＨｚ、ＣＤＣＩ３）：δ２．５４ｐｐｍ（２Ｈ  ｔｄ  Ｊ＝６．２６Ｈｚ）、３．７３（ｓ）、３．７２（２Ｈ  ｔ、Ｊ＝６．２６Ｈｚ）、５．６５（１Ｈ  ｔ、Ｊ＝１．２Ｈｚ）、６．２１（１Ｈ  ｔ、Ｊ＝１．２Ｈｚ）
炭素１３核磁気共鳴分光法（２００ＭＨｚ、ＣＤＣＩ３）：δ１６７．８（Ｃ−１）、１３７．２（Ｃ−２）、３５．４（Ｃ−３）、６１．３（Ｃ−４）、１２７．３（Ｃ−５）、５１．９３（Ｃ−６）。
【００４８】
式１の化合物（Ｓｅｃｕｒｏｌｉｄｅ）を含む薬学的化合物からなるアンプルは、以下の成分を有した：
【００４９】
【表１】
2005500289.tif 000012
（実施例２：抗細菌活性についてのアッセイ）
実施例１で得られた物質を、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｏｇｉｎｏｓａ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、およびＫｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅに対する抗生物質活性についてスクリーニングした。
【００５０】
（材料および方法）：
（溶媒）：リン酸緩衝液０．１Ｎ、ｐＨ＝８．０
（抗生物質）：ＬＭＳＶ−６（純粋、Ｓｅｃｕｒｏｌｉｄｅ）
（培地コート）：２ｍＬ／１００ｍＬ
（播種）：４ｍＬ／ペトリ皿
培養培地の調製：
（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓについての培養培地（ＵＳＰ  ２３＜８１＞））
ペプトン              １．０ｇ
消化性膵臓カゼイン    ４．０ｇ
酵母抽出物            ３．０ｇ
ビーフ抽出物          １．５ｇ
デキストロース        １．０ｇ
寒天                  １５．０ｇ
滅菌後のｐＨ          ６６±．０１
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｏｇｉｎｏｓａについての培養培地（ＵＳＰ  ２３＜８１＞））
膵臓消化性カゼイン          １７．０ｇ
ダイズパパイン消化剤        ３．０ｇ
塩化ナトリウム              ５．０ｇ
二塩基性リン酸カリウム      ２．５ｇ
デキストロース              ２．５ｇ
寒天                        ２０．０ｇ
約１．０リットルにするための水
滅菌後のｐＨ７．２±０．１
（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉおよびＫｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅについての培養培地（ＵＳＰ  ２３＜８１＞））
ペプトン                    ５．０ｇ
酵母抽出物                  １．５ｇ
ビーフ抽出物                １．５ｇ
塩化ナトリウム              ３．５ｇ
デキストロース              １．０ｇ
二塩基性リン酸カリウム      ３．６８ｇ
一塩基性リン酸カリウム      １．３２ｇ
約１．０リットルにするための水
滅菌後のｐＨ７．０±０．０５
【００５１】
【表２】
2005500289.tif 000013
阻害の領域を測定するための単位は、ミリメートル（ｍｍ）である。
【００５２】
Ｃｉｐｒｏｆ＝シプロフロキサシン（Ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎａ）５μｇ感受性のディスク
Ｆｏｓｔ＝ホスホマイシン（Ｆｏｓｆｏｍｉｃｉｎａ）５０μｇ感受性のディスク
Ｄｉｓ（−）＝物質を添加なしでの感受性のディスク
Ｄｉｓ（＋）＝２％のＴｗｅｅｎ  ６０の２０μｌでの感受性のディスク
Ｎ／Ａ＝試験せず
使用した微生物を、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）により第一世代を用いて標準化した：
Ｅ．ｃｏｌｉ  ＡＴＣＣ  ３５２  １８；Ｌｏｔ  ２０２６０２，Ｅｘｐ  ０５／２０００（１９−２５８）
＊Ｋｌｅｂ．Ｋｌｅｂｓｉｅｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ，ＡＴＣＣ  １３８８２，Ｌｏｔ  ２０２  １７４，Ｅｘｐ  ０２／２０００（１９−１５２）
＊Ｐｓ．Ａ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ  ａｅｒｏｇｉｎｏｓａ  ＡＴＣＣ  ２７８５３，Ｌｏｔ  ２０２９９２，Ｅｘｐ  ０８／２０００（１９−０６０）
＊Ｓｔ．Ａ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  １２５９８，Ｌｏｔ  ２０２５６４，Ｅｘｐ  ０５／２０００（１９−１３７）
＊＊Ｓｔｒ．Ｐ  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ，ＡＴＣＣ  ２  １５４７，Ｌｏｔｅ  ２０２６９１，Ｅｘｐ  ０６／２０００（１９−１９０）
＊＝大気中の酸素、温度＝３５±２℃
＊＊＝大気中の二酸化炭素、温度３５±２℃
（結果）
５μｌのＬＭＳＶ−６（Ｓｅｃｕｒｏｌｉｄｅ）は、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｏｇｉｎｏｓａおよびＳｔａｐｈｙｌｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓの増殖を阻害する。
【００５３】
（希釈：）
１０ｍＬ  Ｔｗｅｅｎ  ６０−２％中、
１０μｌ／１０ｍＬ、（０．００１μｌ／ｍｌ）
２０μｌ／１０ｍＬ、（０．００２μｌ／ｍｌ）
３０μｌ／１０ｍＬ（０．００３μｌ／ｍｌ）
および４０μｌ／１０ｍＬ（０．００４μｌ／ｍｌ）
のＬＭＳＶ−６は、細菌の増殖の阻害を示さなかった。このことは，これらの濃度が、最小限阻害濃度（ＭＣＩ）未満であることを示す。
【００５４】
（実施例３：最小細菌（Ｓａｒｃｉｎａ  ｌｕｔｅａ）阻害濃度（ＭＩＣ）（ＬＭＳＶ−６（Ｓｅｃｕｒｏｌｉｄｅ））の決定）
（材料および方法）
（方法：）
プレートに、以下：培地Ｍｕｅｌａｒ  Ｈｉｎｔｏｎ  ｐＨ＝８
セフトリアキソンパターン希釈のための緩衝液  ｐＨ＝８
ＬＭＳＶ−６（Ｓｅｃｕｒｏｌｉｄｅ）希釈のための２％のＴｗｅｅｎ  ２０
微生物：Ｓａｒｃｉｎａ  ｌｕｔｅａ
サンプル：ＬＭＳＶ−６（１６．０μｌ／１００ｍＬそして１０μｌを感受性ディスクに添加する）
を注ぐ。
【００５５】
（方法：）
プレートに、以下：培地Ｍｕｅｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ  ｐＨ＝８
セフトリアキソンパターン希釈のための緩衝液  ｐＨ＝８
ＬＭＳＶ−６（Ｓｅｃｕｒｏｌｉｄｅ）希釈のための２％のＴｗｅｅｎ  ２０
使用した微生物：Ｓａｒｃｉｎａ  ｌｕｔｅａ
サンプル：ＬＭＳＶ−６（１０μｌ／ｍＬそして２０μｌを感受性ディスクに添加する）
コントロールパターン（Ｐ）：セフトリアキソン（１０ｍｃｇのディスク）
を注ぐ。
【００５６】
（結果：）
（ディスクに添加した容量    阻害の領域）
５μｌ                  ４２．０ｍｍ
１．６μｌ              ２０．０ｍｍ
有意な阻害領域は、存在しなかった。従って、最小阻害濃度は、約０．２μｌのＬＭＳＶ−６である。おおよそのＭＩＣは、０．２μｌのＬＭＳＶ−６  ３．３ｍｍ阻害である。
【００５７】
（実施例４：細菌感染のインビボでの処理）
ラットを、外科的に感染し、次いでセフトリアキソンとの比較に基づき計算された容量を用いてＳｅｃｕｒｏｌｉｄｅで好首尾に処理した。
【００５８】
（実施例５：抗新生物活性についてのアッセイ）
（材料および方法：）
哺乳動物の生存または増殖の測定を必要とする多数の生物学的アッセイが存在する。これは、異なる方法（例えば、色素を排除するかまたは含む細胞を計数する方法；細胞溶解後に放出された５１Ｃｒ標識タンパク質を測定する方法；および細胞増殖の間の放射活性ヌクレオチド（放射活性［３Ｈ］チミジンまたは［１２５Ｉ］ヨードデオキシウリジン）の取りこみを測定する方法）により達成され得る。生きた細胞は、任意の複数の染色方法を用いることによって測定され得るが、より正確な方法は、マルチウェル走査分光光度計（ＥＬＩＳＡリーダー）であり、これは、多数のサンプルを高い程度の精度で測定し得る。
【００５９】
生きた細胞により有色の生成物に改変されるが、死細胞および組織培養培地により改変されない無色の基質を使用する、生きた細胞を検出するための比色アッセイを用いた。このアッセイは、種々のデヒドロゲナーゼ酵素の活性を測定するためにＭＴＴ［３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド］テトラゾリウム塩を用いる（Ｓｌａｔｅｒら、１９６３）。このテトラゾリウム環は、活性ミトコンドリアにより切断され、その結果、この反応は、生きた細胞にのみにおいて生じる。ミトコンドリアの酵素であるスクシネートデヒドロゲナーゼによるＭＴＴのホルマザンへ（Ｆｏｒｍａｚａｎ）の切断により、暗青色化合物（ホルマザン）が生成し、その量は、存在する細胞の数に比例する。セクロリド濃度の勾配におけるホルマザン濃度を、マルチウェル走査分光光度計（ＥＬＩＳＡリーダー）により測定した。次いで、データ分析を使用して、抗新生物活性の定量的パラメーターである阻害濃度５０（ＩＣ５０）を確立した。ＬＭＳＶ−６（セクロリド）の細胞傷害性活性または抗新生物活性（生存する細胞）を間接的に測定するために、種々の癌細胞株を試験した。試験された癌細胞株としては、ＨＥＰ２（喉頭（Ｌａｒｉｎｇｅ）癌）およびＨＥＬＡ（頸部癌）が挙げられる。
【００６０】
（材料：）
培養培地（ＤＭＥＮ＋全て）
ＥＤＴＡ
トリプシン−ＥＤＴＡ
ＤＭＥＭ＋全ておよび１０％ＴＥＲＮＥＲＯ  ＲＥＣＥＮＴＡＬ  ＳＥＲＵＭ
ジメチルスルホキシド
ＭＴＴ［３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド］
マルチウェル走査分光光度計（ＥＬＩＳＡリーダー）
（方法：）
細胞を、標準的な技術を用いて培養した。例えば、Ｒ．Ｉａｎ  Ｆｒｅｓｈｎｅｙ「Ｃｕｌｔｕｒｅ  ｏｆ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌｓ」  Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｂａｓｉｃ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ（Ａｌａｎ  Ｒ  Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ）ｐ．２４５−２５６を参照のこと。
【００６１】
細胞増殖阻害の評価を、Ｓｋｅｈａｎら、Ｊ．Ｎａｔ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．８２，１１０７（１９９０）に従って決定した。細胞を９６ウェルプレート中で４００〜１２００細胞／ウェルの間でプレートし、そして薬物添加の前に３７℃で１５〜１８時間インキュベートし、そして細胞の付着を可能にした。試験する化合物を、１００％ＤＭＳＯに溶解し、そして１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳを含むＲＰＭｌ−１６４０中にさらに希釈した。各々の細胞株を、１０の濃度の化合物（５ｌｏｇの範囲）で処理した。７２時間のインキュべーションの後、各々のウェルに１００ｍｌの氷冷５０％ＴＣＡを添加し、そして４℃で１時間インキュベートした。次いで、プレートを、水道水で５回洗浄して，ＴＣＡ、低分子量の代謝物および血清タンパク質を除去した。スルホローダミンＢ（ＳＲＢ）（０．４％、５０ｍＬ）を、各々のウェルに添加した。室温での５分間のインキュベーションの後、プレートを、０．１％の酢酸で５回リンスし、そして風乾した。結合した色素を、旋回振盪機で１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  Ｂａｓｅ（ｐＨ  １０．５）で５分間にわたり溶解した。光学密度を、５７０ｎｍで測定した。
【００６２】
Ｇｅｒｌｉｅｒら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．９４，５７−６３（１９８６）；Ｓｌａｔｅｒら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，７７、３８３−３９３（１９６３）；Ｋａｓｕｇａｉら、Ｊａｐａｎ  Ｊ：Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５２、９５−１００（１９９０）；Ｍｏｓｍａｎｎ  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ、６５、５５−６３（１９８３）；Ｄｅｎｉｚｏｔら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ、８９、２７１−２７７（１９８６）もまた参照のこと。
【００６３】
データを、予想される応答の平方の逆数により加重値を与えた非線型回帰を用いるシグモイド−Ｅｍａｘ濃度効果モデル（Ｈｏｌｆｏｒｄ、Ｎ．Ｈ．Ｇ：Ｓｃｈｅｉｎｅｒ、Ｌ．Ｂ．「Ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ  ｔｈｅ  ｄｏｓｅ−ｅｆｆｅｃｔ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ：Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｐｈａｒｍａｃｏ−ｋｉｎｅｔｉｃ−ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃ  ｍｏｄｅｌｓ」、Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｉｍｉａｃｏｋｉｎ．１９８１、６、４２９−４５３を参照のこと）を用いてフィッティングした。このフィッティングソフトウェアは、Ｒｏｓｗｅｌｌ  Ｐａｒｋ  ＩｎｓｔｉｔｕｔｅによりＭｉｃｒｏｓｏｆｔ  ＦＯＲＴＲＡＮを用いて開発され、そして非線型回帰についてＮａｓｈにより採用されるように（Ｎａｓｈ  Ｊ．Ｃ．、「Ｃｏｍｐａｃｔ  ｎｕｍｅｒｉｃａｌ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｃｏｍｐｕｔｅｒｓ：Ｌｉｎｅａｒ  ａｌｇｅｂｒａ  ａｎｄ  ｆｕｎｔｉｏｎ  ｍｉｎｉｍｉｚａｔｉｏｎ」．Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９７９を参照のこと）Ｍａｒｑｕａｒｄｔ  アルゴリズム（Ｍａｒｑｕａｒｄｔ，Ｄ．Ｗ．「Ａｎ  ａｌｇｏｒｉｔｈｍ  ｆｏｒ  ｌｅａｓｔ  ｓｑｕａｒｅｓ  ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｏｎｌｉｎｅａｒ  ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ」、Ｊ．Ｓｏｃ．Ｉｎｄ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．１９６３、１１、４３１−４４１）を使用した。５０％の増殖阻害（ＩＣ５０）を生じる薬物の濃度を計算した。
【００６４】
（結果：）
（１０５細胞／ｍＬのＨＥＰ−２細胞集団（喉頭癌）におけるＬＭＳＶ−６の細胞傷害性アッセイ）
ｒ＝０．９８７８
ＩＣ５０＝１０．３８μ／ｍＬ
（１０６細胞／ｍＬのＨＥＰ−２細胞集団（喉頭癌）におけるＬＭＳＶ−６の細胞傷害性アッセイ）
ｒ＝０．９９４１
ＩＣ５０＝３７．３７μｇ／ｍＬ
（１０５細胞／ｍＬのＨＥＬＡ細胞集団（頸部癌）におけるＬＭＳＶ−６の細胞傷害性アッセイ）
ｒ＝０．９９５０
ＩＣ５０＝７．３７μｇ／ｍＬ
（１０６細胞／ｍＬのＨＥＬＡ細胞集団（頸部癌）におけるＬＭＳＶ−６の細胞傷害性アッセイ）
ｒ＝０．９９４１
ＩＣ５０＝２７．３０μｇ／ｍＬ
（実施例６：Ｈ．ｐｙｅｌｏｒｉについての試験）
（材料および方法：）
抗菌性化合物の寒天希釈：評価する６ｍｇの化合物を、０．６ｍｌの１００％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中に溶解し、次いで滅菌ブルセラブロス（ｂｒｕｃｅｌｌａ  ｂｒｏｔｈ）培地で６ｍｌまでにした。ＤＭＳＯの最終濃度は、総容量の１０％である。次いで、連続する２倍希釈（３ｍｌ  Ｓｅｃｕｒｏｌｉｄｅと３ｍｌブルセラブロス培地）を滅菌ブルセラブロス培地中で行った。一連のブロス培地希釈の各々の２ｍｌのアリコートを、別々のペトリ皿に置き、その皿に、７％のウマ血液を補充した１８ｍｌの溶解および冷却（約５０℃）ブルセラ寒天を添加した。これは、寒天中の最も高い濃度の薬物が１００μｇ／ｍｌである場合、最終的にセクロリドの１：１０希釈を生じ、そして１％のＤＭＳＯの最終濃度を生じる。寒天プレートは、接種の１日前に調製し、そして１晩冷却し得る。
【００６５】
（接種調製物）
Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉの培養物を、トリプチケース寒天培地−５％ヒツジ血寒天プレート上に維持し、そして４８時間毎に植え継いだ。Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｍｕｓｔｅｌａｅ培養物を、同じ寒天上に維持し、そして以前の植継物の増殖の程度に依存して、４８〜６０時間毎に植え継いだ。プレートを、パラジウム触媒を有する水活性化（１０ｍｌ）ＣａｍｐｙＰａｋ  Ｐｌｕｓ（ＢＢＬ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏ．Ｓｙｓｔｅｍｓ）エンベロープを補充されたＧａｓＰａｋジャー中、３７℃でインキュベートする。
【００６６】
Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒの培養物を、深ペトリ皿中で、１０ｍｌ体積中１０％のウシ胎仔血清を補充したｂｒｕｃｅｌｌａブロス中で、増殖し得る。このプレートを、パラジウム触媒を有する水活性化（１０ｍｌ）ＣａｍｐｙＰａｋ  Ｐｌｕｓエンベロープを補充されたＧａｓＰａｋジャー中、振盪培養器において５０ｒｐｍで、３７℃で１８〜２０時間インキュベートする。
【００６７】
一晩培養物（約１０８ＣＦＵ／ｍｌ）を、標準的な接種としての用途のために、スクリューキャップ付きチューブ中、ｂｒｕｃｅｌｌａ（ｂｒｕｃｅｌＩａ）ブロス（ＦＣＳ無）中で１０倍希釈する。ステア複製器（Ｓｔｅｅｒ  ｒｅｐｌｉｃａｔｏｒ）のウェルを０．８ｍｌの希釈された生物体で充填し、そして、０．００２ｍｌ中の約２ｘ１０４細胞を、寒天表面上に配置する。接種されたプレートを、パラジウム触媒を有する水活性化（１０ｍｌ）ＣａｍｐｙＰａｋ  Ｐｌｕｓエンベロープを添加されたＧａｓＰａｋジャーに配置し、そして３７℃で４８時間インキュベートする。
【００６８】
（結果）
インキュベーション後、全ての試験プレートを、セクロリド（Ｓｅｃｕｒｏｌｉｄｅ）フリーの増殖コントロールプレートと比較する。ＭＩＣは、コントロールプレートに比べて増殖を阻害する濃度である。増殖の薄膜は、高い濃度で可視であるが、これは差し引かれており、真のＭＩＣとは考えられていない。コントロールの生物体をまた、各プレートに接種し、そしてこれらは、接種物としての用途のために１０００倍希釈される。コントロールの生物体としては、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉならびにＥ．ｃｏｌｉ［ＡＴＣＣ  ３５２１８，Ｌｏｔ  ２０２６０２，Ｅｘｐ  ０５／２０００（１９−２５８）］、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ  ａｅｒｏｇｉｎｏｓａ［ＡＴＣＣ  ２７８５３、Ｌｏｔ  ２０２９９２，Ｅｘｐ  ０８／２０００（１９−０６０）］、Ｅ．ｃｌｏａｃａｅ，Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ  ｓｔｕａｒｔｉｉおよびＰ．ｒｅｔｔｇｅｒｉのスクリーニング培養物が挙げられる。プレートおよび／または接種植継物は、２時間より長く微好気性環境の外にあるべきではない。Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ培養に関する全ての操作を、層流フード中で実施し、糸状菌で培養物を汚染する機会を減少した。
【００６９】
Ｌｅｅら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，９９，１３１５−２３（１９９０）のマウスモデルを使用して、ヒト中のＨ．ｐｙｌｏｒｉに対する化合物のインビボ活性を予想する。
【００７０】
Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｆｅｌｉｓを、１０％ウシ胎仔血清を補充したｂｕｃｅｌｌａブロス中で増殖する。凍結培養物を迅速に解凍し；この培養物を、運動性についてチェックし、そして０．５ｍＬの解凍された凍結培養物を、９．５ｍＬのｂｒｕｃｅｌｌａ／血清混合物を含有する組織培養深皿に播種する。この皿を、Ｃａｐｙ  Ｐａｋジャー［ＢＢＬ］に置き、微好気性雰囲気を確実にする。このジャーを、３７℃の培養器中、６０ＲＰＭの回転式振盪培養器に配置した。１８時間後、可視の混濁が存在するはずである。培養物を、（位相差）顕微鏡下で純度および運動性についてチェックし、次いで、フラスコ中にプールする。Ｓｗｉｓｓ−Ｗｅｂｓｔｅｒ雌性マウス（１８−２０ｇ）を、接種前１８時間、絶食させた。マウスを、１週間の間１日おきに３回感染した。投与を、生物の最後の投与の２週間後に開始する。処置を、連続する１４日間、１日に１回施与する。治療完了約３週間後に、屠殺する。各マウスについて、胃を摘出し、そして大弯に沿って切開する。栓（３ｍｍの組織断片）を、胃の空洞領域から採取する。表面に現れた栓を洗浄し、切り刻み、そして１００μｌのウレアーゼを有する試験管中に入れる。このウレアーゼ試薬（ｐＨ６．３−６．５）は、尿素およびフェノールレッドを含む。Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒが存在する場合、ウレアーゼは、尿素を分解し、ｐＨの変化を生じる。紫（アルカリ性）は、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒについて陽性であり；赤／黄（変化無し）は陰性である。任意の色変化を、１８時間後に記録する。１つの群の処置当たり通常２０のマウスが存在し；各群について、陽性のパーセントを記録する。
【００７１】
Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉがヒト被験体に存在するかどうかを決定するために臨床的に使用されるいくつかの方法がある。これらは、処置前の初期感染の診断および患者由来の生物体を撲滅にする処置の成功を決定するために使用される。
【００７２】
尿素口臭試験は、放射標識尿素の摂取を含む。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉは、尿素を分解するウレアーゼ酵素を生成し；哺乳動物の胃細胞は、この酵素を含まない。従って、標識二酸化炭素の呼気（使用される同位体に依存して、質量分析または放射能によって分析される）は、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉが存在することを示す。
【００７３】
血清学はまた、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉを用いる感染を評価するために使用され得る。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉに対する血清抗体（例えば、ＩｇＧおよびＩｇＡ）の検出を、酵素結合イムノソルベント検定法（ＥＬＩＳＡ）を使用して実施する。多くの異なるＨ．ｐｙｌｏｒｉタンパク質を、抗原として使用し得る。
【００７４】
患者の内視鏡検査は、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ感染を診断するために微好気性環境で培養し得る組織サンプルを提供する。あるいは、サンプルを、ギムザ染色またはヘマトキシリン−エオシン染色のような多くの染色の１つを使用することによって組織学的に試験し得る。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉによるウレアーゼの産生を利用する尿素試験をまた、適用し得る。この試験は、尿素の加水分解に由来するアンモニアの形成に依存し、この加水分解は、観測可能なｐＨの変化を生じ、このｐＨ変化は、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉの撲滅の指標である
（結果）
実施例１の化合物での処置前および処置後で内視鏡検査による、患者の状態の比較は、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉの減少または非存在を示した。
【００７５】
（実施例７：真菌活性の決定）
（材料および方法）
（方法）
生成物の抗真菌活性を、以下のように決定し得る。１８〜２２ｇの体重の雌性マウスを使用し、そして多量のＣａｎｄｉｄａ  Ａｌｂｉｃａｎｓ  ４４８５８を、マウス１匹当たり１０６ＣＦＵの割合で尾静脈に投与した（ＣＦＵ：コロニー形成単位）。マウスを５匹の５バッチに分離し、そしてこれらを以下の様式で処置した：
（感染１時間後）
群１：マウスを、２５ｍｇ／ｋｇの生成物で、経口処理した
群２：マウスを、２５ｍｇ／ｋｇの用量の生成物で、腹腔内処置した。
【００７６】
群３：マウスを、２５ｍｇ／ｋｇのＫｅｔｏｃｏｎａｚｏｌｅで経口処置した。
【００７７】
群４：マウスを、２５ｍｇ／ｋｇの用量のＫｅｔｏｃｏｎａｚｏｌｅで、腹腔内処置した。
【００７８】
群５：マウスは、いずれの抗真菌処置も受けなかった。
致死マウスを、２２日の期間にわたってカウントした。
【００７９】
（結果）
生成物の活性は、２回の投与方法において使用される用量で優良であった。同じ処置はまた、皮膚の真菌（例えば、白癬菌属）を用いる「局所的モデル」において、および致死量以下モデルにおいて効果的であった。
【００８０】
（最小阻害濃度（ＭＩＣ））
Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ細胞を、Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ３８，５７９−５８７に示されるように調製し、０．１Ｍリン酸溶液で３回洗浄し、そして最小阻害濃度（ＭＩＣ）を決定するために即座に使用した。ＭＩＣを、Ｃｏｍｉｔｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌの実験的臨床的標準物質の標準的な方法に従って、マイクロタイタープレートの改変によって決定した。
【００８１】
ＲＰＭＩ−１６４０、およびＬ−グルタミンは、０．１５ＭのＭＯＰＳ（３−［Ｎ−モルホリノ］プロパンスルホン酸）でｐＨ７に緩衝した。Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ細胞（１．５×１０３細胞／ｍｌ）を、ＲＰＭＩ−１６４０および抗真菌剤の希釈物を含む９６ウェルプレートのウェルに添加した。結果を、３５℃でのインキュベーション後４８時間読み取り、そしてＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ細胞の増殖を阻害するＭＩＣ（最小阻害濃度）を、決定した。
【００８２】
（最小抗真菌濃度）
４８時間でＭＩＣを読み取った後、プレートを振盪し、１０μｌのウェルアリコートを、グルコース糖を含む長方形板上に配置されたウェルから除去した。今プレートを、コロニー形成単位が存在しない最小抗真菌濃度および抗真菌剤の濃度で、３５℃で４８時間インキュベートした。
【００８３】
ＬＭＳＶ−６がＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓに対して高い活性を示す場合、共同アッセイがなされる。
【００８４】
（実施例８：歯周病の処置）
変質した歯肉に局所適用される場合、セクロリドは，歯肉炎に関連する特定の嫌気性グラム陰性生物体に対して、選択的に有効であることが見出された。
【００８５】
Ｗａｌｋｅｒら（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，第１６巻，４５２頁〜４５７頁，（１９７９））の手順に従って決定される、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ａｓｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ（Ｆｏｒｓｙｔｈ株）を殺傷するために必要とされる最小阻害濃度（ＭＩＣ）は、１ｍｌ当たり６μｇと６０μｇとの間である。Ｂ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓに対するＭＩＣ値は、１ｍｌ当たり６μｇである。Ｂ．ｇｒａｃｉｌｉｓおよびＦｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ（他のグラム陰性生物体）に対するＭＩＣ値は、各々に対して約２５であり、そしてグラム陽性生物体（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｓｃｏｓｕｓ）に対するＭＩＣ値は、好気性株については６０であり、嫌気性株については６０である。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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