(57)【要約】  本発明は、微生物マイコバクテリウム  ｗ（Mycobacterium w）を含有する、気管支喘息(閉塞性肺疾患)の管理用の製剤の調製方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
マイコバクテリウム  ｗ（Mycobacterium w）の細胞を製薬上許容される担体および場合によって保存剤とともに、単一の製剤中に組み入れることを含む、喘息(閉塞性肺疾患)管理用の医薬組成物の製造方法。
【請求項２】
単位投与形態中にマイコバクテリウム  ｗ の細胞が1x105個以上、より好ましくは単位投与形態中にマイコバクテリウム  ｗ の細胞が1x107個以上、最も好ましくは単位投与形態中にマイコバクテリウム  ｗ の細胞が1x108個から1x109個の間になるように、製薬上許容される担体を添加する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
保存剤がチオメルソール(Thiomersol)であって、最終濃度が0.01％w/vになるように添加する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
マイコバクテリウム  ｗ の破壊細胞を製薬上許容される担体および場合によって保存剤とともに組み入れる工程を含む、喘息(閉塞性肺疾患)管理用の医薬組成物の製造方法。
【請求項５】
マイコバクテリウム  ｗ の破壊を超音波処理または高圧フラクショノメーターで実施する、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
マイコバクテリウム  ｗ の溶媒抽出物を製薬上許容される担体および場合によって保存剤とともに組み入れる工程を含む、喘息(閉塞性肺疾患)管理に有用な医薬組成物の製造方法。
【請求項７】
溶媒抽出を、クロロホルム、エタノール、メタノール、アセトン、フェノール、イソプロピルアルコール、酢酸、尿素、その他から選択される溶媒を使用して実施する、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
マイコバクテリウム  ｗ の酵素的抽出物を製薬上許容される担体および場合によって保存剤とともに組み入れる工程を含む、喘息(閉塞性肺疾患)管理用の医薬組成物の製造方法。
【請求項９】
マイコバクテリウム  ｗ の細胞の酵素的抽出に使用する酵素がリチカーゼおよび／またはプロナーゼから選択される 、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
請求項１の方法の生産物を請求項４および／または６および／または８の方法の生産物と混合することを含む、喘息(閉塞性肺疾患)管理用の医薬組成物の製造方法。
【請求項１１】
請求項１、４、６、８または１０の方法の生産物にアジュバントを添加することを含む、喘息(閉塞性肺疾患)管理用の医薬組成物の製造方法。
【請求項１２】
アジュバントが、鉱物油、鉱物油と界面活性剤、Ribiアジュバント、Titer-max、Syntaxアジュバント製剤、アルミニウム塩アジュバント、ニトロセルロース吸着抗原、免疫刺激性複合体、Gebruアジュバント、スーパー担体、Elvax 40w、L-チロシン、Monatanide(Manide-オレイン酸配合剤)、Adju prime、スクアレン、フタル酸ナトリウムリポポリサッカライド、リン酸カルシウム、サポニン、メラノーマ抗原、ムラミルジペプチド(MDP)などから選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法にしたがって調製した、喘息(閉塞性肺疾患)管理に有用な医薬組成物。
【請求項１４】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法にしたがって調製した、投与したとき喘息(閉塞性肺疾患)の発作を予防する医薬組成物。
【請求項１５】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法にしたがって調製した、投与したとき喘息(閉塞性肺疾患)の発作を遅延させる医薬組成物。
【請求項１６】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法にしたがって調製した、投与したとき喘息(閉塞性肺疾患)管理において使用する薬剤の必要性を低減する医薬組成物。
【請求項１７】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法にしたがって調製した、投与したとき他の薬剤の存在下／非存在下における肺機能を改善する医薬組成物。
【請求項１８】
製薬上許容される担体が界面活性剤を含有する、請求項１、４、６、８、１０および１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
界面活性剤がTween80またはTritonX100から選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２０】
界面活性剤の濃度が0.4％まで、好ましくは0.1％までである、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２１】
マイコバクテリウム  ｗ が死滅した微生物である、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は気管支喘息(閉塞性肺疾患)の管理用の微生物 マイコバクテリウム  ｗ （Mycobacterium w）を含む製剤の調製方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
閉塞性肺疾患は通気が制限されることを特徴とする。通気の制限は、腫瘍、浮腫または気管支平滑筋収縮による機械的閉塞が原因となり得る。機械的閉塞は、１回毎の管理が必要である。
【０００３】
別の閉塞性肺疾患は、自然状態で進行性および／または発作性である。
【０００４】
気管支喘息は、閉塞性肺疾患群として定義される病態である。これは、子供および大人の両方において、臨床医学的に出会う最も一般的な疾患の一つである。単一の疾患というよりは、喘息は現在のところ、
１．様々な程度の通気閉塞
２．気道の炎症
３．気管支過敏性（broncho-hyperresponsiveness）
を特徴とする、種々の疾患の群(多くの臨床的表現型をもつ複合的症候群)であると考えられている。
【０００５】
この症候群は、複数の遺伝的および環境的因子の間の相互作用の結果引き起こされる。患者の中には、アレルゲンとして知られている、一般的な吸入されたタンパク質に対して、急性過敏症反応を示す者もいる。それらはごく少量で肥満細胞の脱顆粒を誘発する。しかし、多くの患者は、アレルギーの個人歴または家族歴をもたず、皮膚テストが陰性である。
【０００６】
慢性的炎症は、喘息の臨床的な症候群における根本的な病状であることがわかっている。肺の組織病理学によって、過膨張、気道の粘膜の角栓、剥がれ落ちた上皮細胞の塊および好酸球誘導タンパク質の結晶性沈殿が示される。気管支の粘膜は浮腫状になり、杯細胞の数が増加し、基底膜が厚くなり、平滑筋が肥大する。
【０００７】
気管支喘息にみられる気管支平滑筋の収縮は、再発性の現象である。これは、発作的もしくは慢性的病状として、または慢性疾患の発作的増悪として起こる。
【０００８】
この疾患を特定するために、様々な定義が与えられている。
【０００９】
喘息は、気管支拡張治療後に、閉塞性機能障害の完全または部分的な可逆性がある状態として定義される。
【００１０】
喘息はまた、遺伝的素因をもつ個体を、気道上皮の破壊（disruption）、炎症細胞の浸潤、基底膜の厚化、並びに平滑筋の痙攣および肥大を引き起こす適当な誘発因子に曝露すると起こる、気道の慢性炎症性疾患として定義される。
【００１１】
喘息は、自発的に、または治療の結果として回復し得る気道閉塞を起こすような様々な刺激に対する気管および気管支の反応性の上昇を特徴とする疾患である。
【００１２】
喘息は、気道の可逆的閉塞を特徴とする慢性炎症性肺疾患である。
【００１３】
喘息は発作性の気道狭窄に到る気管−気管支の過剰反応性を特徴とする慢性閉塞性疾患であり、この気道狭窄は、自発的に、または治療の結果として回復し得る。喘息は、臨床的には喘鳴、呼吸困難および咳を特徴とする。アレルギー性喘息は、最も一般的な形態である。その他の増悪因子として、例えば感染、運動、職業的および環境的曝露、薬剤、空気汚染ならびに感情的因子が挙げられる。
【００１４】
喘息は、肺から鼻および口への通路(気道)が狭くなって呼吸困難を引き起こす、肺に関係する慢性状態である。これらの変化は一般に、気候などの環境の変化、アレルゲン(犬やネコ等のふけ、カビまたは埃等)、食物または呼吸器感染(風邪)に応答して引き起こされる。
【００１５】
喘息はまた、肺障害に起因する発作性または慢性の呼吸困難としても定義される。
【００１６】
気管支喘息はまた、様々な刺激に対する気管および気管支の反応性の上昇を特徴とし、自発的に、または治療の結果として重症度が変化する、広範囲にわたる気道狭窄を呈する疾患としても定義される。
【００１７】
臨床的には、気管支喘息は：
・発作性または慢性喘鳴、呼吸困難、咳および胸部のフェリング(felling)または圧迫感
・身体検査における長い呼息および散発性喘鳴
・肺機能試験における通気の制限または気管支誘発試験における陽性
・気管支拡張治療後の閉塞性機能障害の完全な、または部分的な可逆性
を特徴とする。
【００１８】
現在のところ、このような状態に対する好ましい最初に行うべき治療は、コルチコステロイドの吸入である。気管支拡張薬(例えばサルムブトール(salmbutol)等のβアゴニスト等)が適していない場合は、メチルキサンチン(例えばテオフィリン）や抗コリン薬（例えばイプラトロピウム)を吸入または経口薬の形態で添加する。グルココルチコイドのような直接的な気管支拡張活性はないが、ロイコトリエンアンタゴニストを添加することもできる。
【００１９】
発作の管理は、気管支拡張薬、コルチコステロイドおよびロイコトレインアンタゴニストの使用を含む。これらは、疾患の重篤度およびその他の因子に応じて、経口的、非経口的またはエアロゾルの形態で用いることができる。コルチコステロイドおよびクロモリンナトリウムのような肥満細胞安定剤を、続いて起こる発作を予防するためにも用いられる。しかし、発作毎に気管支拡張薬で治療したり、または慢性閉塞性肺疾患を患っている各患者を気管支拡張薬により治療したりする必要はない。
【００２０】
慢性疾患の重症急性発作または急性増悪の管理は、発作をコントロールするために、大量の非経口グルココルチコイドの投与を必要とし得る。
【００２１】
喘息は、慢性肺疾患である。喘息は、治癒させることはできず、コントロールするだけである。喘息では、気道が炎症を起こしている。すなわち、気道上皮が腫れて赤くなっている。気道が狭窄し、呼吸が苦しくなってくる。この狭窄は、時には自然に、時には治療により改善する(しかし患者によっては完全ではない)。気道は非常に敏感である。気道は、例えばタバコの煙、花粉または冷気などの多くのものに反応する。せき、喘鳴、胸の締め付け、呼吸困難または喘息発作は、アレルゲンへの曝露の後に起こり得る。
【００２２】
発作の防止には「誘引因子」を減少させることが含まれる。これには、例えばハウスダストダニ抗原、動物の鱗屑をコントロールするための方法、仕事または住居の場所を変更するなど環境因子への曝露の回避、上気道および肺感染症の早期治療などが挙げられる。
【００２３】
喘息の管理に必要なのは、肺機能の改善である。
【００２４】
本発明は、このような製剤およびその製造方法および使用方法を開示する。本発明により製造される医薬組成物の投与により、疾患の重篤度および喘息発作の頻度が下がることがわかっている。薬剤への依存が減少し、生活の質が向上する。
【００２５】
マイコバクテリウム  ｗは、ハンセン病の管理において有用であることがわかっている。マイコバクテリウム  ｗは、レプロミン陰性の個体をレプロミン陽性状態に変換する。マイコバクテリウム  ｗは、多菌型ハンセン病の治癒に必要な治療期間も短縮する。
【発明の開示】
【００２６】
本発明により製造される医薬組成物は、喘息(閉塞性肺疾患)の管理において有用であることがわかっている。
【００２７】
本発明によれば、「マイコバクテリウム  ｗ」(Mw)から製造した医薬組成物が喘息(閉塞性肺疾患)の管理において有用であることがわかる。
【００２８】
本発明で使用するマイコバクテリウム  ｗは非病原性で培養可能な異型マイコバクテリウムであって、代謝および増殖特性の点でマイコバクテリアのRunyons群IVクラスに属するものに類似した生化学的性質および急速増殖特性を持つが、この群に現在掲載されている菌株とは同一ではない。したがって、Mwは完全に新しい菌株であるものと考えられる。
【００２９】
Mwの種独自性をポリメラーゼ連鎖反応でのDNA配列決定によって確定し、マイコバクテリアのその他の30種との異同を判別した。しかし、これはこの群に現在掲載されているもののどれとも異なっている。パターン分析の多型領域の塩基配列分析によって、Mwが試験した以下のその他の多くの既知のマイコバクテリア種とは区別される独自性がある種であることが確定された: M.avium、M.intracellulare、M.scrofulaceum、M.kansasii、M.gastri、M.gordonae、M.shimoidei、M.malmoense、M.haemophilum、M.terrae、M.nonchromogenicum、M.triviale、M.marinum、M.flavescens、M.simian、M.szulgai、M.xenopi、M.asciaticum、M.aurum、M.smegmatis、M.vaccae、M.fortuitum subsp fortuitum、M.fortuitum subsp. Peregrinum、M.chelonae subsp. Chelonae、M.chelonae subsp. Abscessus、M.genavense、M.tuberculosis、M.tuberculosis H37Rv、M.paratuberculosis。
【００３０】
本発明の目的は、「マイコバクテリウム  ｗ」(Mw)を含有し、Mwから取得した構成成分を含むか含まない、喘息(閉塞性肺疾患)の管理用の医薬組成物を提供することである。
【００３１】
さらに別の本発明の目的は、「マイコバクテリウム  ｗ」(Mw)を含有し、Mwから取得した構成成分を含むか含まない、喘息(閉塞性肺疾患)の発作の予防のための医薬組成物を提供することである。
【００３２】
さらに別の本発明の目的は、「マイコバクテリウム  ｗ」(Mw)を含有し、Mwから取得した構成成分を含むか含まない、気管支喘息(閉塞性肺疾患)の発作を遅延させるための医薬組成物を提供することである。
【００３３】
さらに別の本発明の目的は、「マイコバクテリウム  ｗ」(Mw)を含有し、Mwから取得した構成成分を含むか含まない、喘息(閉塞性肺疾患)の管理において肺機能を改善するために用いる薬剤の必要性を低減させる医薬組成物を提供することである。
【００３４】
さらに別の本発明の目的は、「マイコバクテリウム  ｗ」(Mw)を含有し、Mwから取得した構成成分を含むか含まない、喘息(閉塞性肺疾患)において他の薬剤の存在下／非存在下における肺機能を改善する医薬組成物を提供することである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３５】
本発明にしたがう、マイコバクテリウム  ｗを含有する組成物、調製方法、HPLC特性、安全性および許容度、使用方法、ならびに治療成果を以下の実施例で記載する。以下は本発明を説明するための例であって、本発明の範囲がこれらによって限定されるべきものではない。
【実施例１】
【００３６】
医薬組成物
A. 治療薬の単位投与量0.1 mlについての含有量:
マイコバクテリウム  ｗ.,(熱滅菌)    0.50x109個
塩化ナトリウムI.P.                  0.90％w/v
Tween80                              0.1％w/v
チオメロサールI.P.                  0.01％w/v
(保存剤として)
注射用水I.P.                   q.s. - 0.1 ml 
B. 治療薬の単位投与量0.1 mlについての含有量:
マイコバクテリウム  ｗ.,(熱滅菌)    0.50x109個
塩化ナトリウムI.P.                  0.90％w/v
Triton x 100                         0.1％w/v
チオメロサールI.P.                  0.01％w/v
(保存剤として)
注射用水I.P.                   q.s. - 0.1 ml 
C. 治療薬の単位投与量0.1 mlについての含有量:
マイコバクテリウム  ｗ.,(熱滅菌)    0.50x109個
塩化ナトリウムI.P.                  0.90％w/v
チオメロサールI.P.                  0.01％w/v
(保存剤として)
注射用水I.P.                   q.s. - 0.1 ml 
D. 治療薬の単位投与量0.1 mlについての含有量:
マイコバクテリウム  ｗ 1x1010個の超音波処理後のマイコバクテリウム  ｗ. 抽出物
塩化ナトリウムI.P.                  0.90％w/v
チオメロサールI.P.                  0.01％w/v
(保存剤として)
注射用水I.P.                   q.s. - 0.1 ml 
E. 治療薬の単位投与量0.1 mlについての含有量:
マイコバクテリウム  ｗ 1x1010個のメタノール抽出物
塩化ナトリウムI.P.                  0.90％w/v
チオメロサールI.P.                  0.01％w/v
(保存剤として)
注射用水I.P.                   q.s. - 0.1 ml 
F. 治療薬の単位投与量0.1 mlについての含有量:
マイコバクテリウム  ｗ 1x1010個のクロロホルム抽出物
塩化ナトリウムI.P.                  0.90％w/v
チオメロサールI.P.                  0.01％w/v
(保存剤として)
注射用水I.P.                   q.s. - 0.1 ml 
G. 治療薬の単位投与量0.1 mlについての含有量:
マイコバクテリウム  ｗ 1x1010個のアセトン抽出物
塩化ナトリウムI.P.                  0.90％w/v
チオメロサールI.P.                  0.01％w/v
(保存剤として)
注射用水I.P.                   q.s. - 0.1 ml 
H. 治療薬の単位投与量0.1 mlについての含有量:
マイコバクテリウム  ｗ 1x1010個のエタノール抽出物
塩化ナトリウムI.P.                  0.90％w/v
チオメロサールI.P.                  0.01％w/v
(保存剤として)
注射用水I.P.                   q.s. - 0.1 ml 
I. 治療薬の単位投与量0.1 mlについての含有量:
マイコバクテリウム  ｗ 1x1010個のリチカーゼ(liticase)抽出物
塩化ナトリウムI.P.                  0.90％w/v
チオメロサールI.P.                  0.01％w/v
(保存剤として)
注射用水I.P.                   q.s. - 0.1 ml 
J. 治療薬の単位投与量0.1 mlについての含有量:
マイコバクテリウム  ｗ.,(熱滅菌)    0.5x107個
マイコバクテリウム  ｗ 1x103個の破壊、溶媒抽出または酵素的抽出によるマイコバクテリウム  ｗ. 抽出物
塩化ナトリウムI.P.                  0.90％w/v
チオメロサールI.P.                  0.01％w/v
(保存剤として)
注射用水I.P.                   q.s. - 0.1 ml 
【実施例２】
【００３７】
医薬組成物の調製方法
Ａ．マイコバクテリウム  ｗ の培養
i)  培養用培地の調製
マイコバクテリウム  ｗ をLJ培地などの固体培地またはMiddle Brook 培地もしくはSauton液体培地などの液体培地で培養する。収量をさらによくするため、Middle Brook 培地を富化する。グルコース、バクトトリプトンおよびBSAの添加によって富化するのが好ましい。これらを好ましくは20:30:2の比率で使用する。
【００３８】
富化用培地をMiddle Brook 培地に添加する。これは好ましくは15:1から25:1の比率、さらに好ましくは20:1の比率とする。
【００３９】
ii)  バイオリアクター操作
a) 容器の準備
容器の内部接触部品(ジョイント、メカニカルシール、O-リング/ガスケット溝、その他)は適正に洗浄して、あらゆる汚染を回避しなければならない。容器を0.1N NaOHで満たし、24時間そのまま放置して、発熱物質およびその他の汚染を排除する。次に容器を最初に酸性化した水で、その後普通の水で洗浄する。最後に、培地を調製する前に、容器を蒸留水で（3回）濯ぐ。
【００４０】
b) バイオリアクターの滅菌
蒸留水 9 Lを含有するバイオリアクターを生蒸気で滅菌する(間接)。同様にMiddlebrook培地を含むバイオリアクターをもう一度滅菌する。その他の添加用ビン、入/出空気フィルターその他は、121℃で15分、高圧滅菌(2回)する。使用前に、これらを50℃のオーブンで乾燥する。
【００４１】
c) 環境パラメーター
i.  温度: 37±0.5℃
ii. pH: 6.7 - 6.8(当初)
Ｂ．収穫および濃縮
これは典型的には、無菌条件下で培養後、6日目の最後に実施する。細胞の濃縮(ペレット化)は遠心分離によって実施する。
【００４２】
Ｃ．細胞の洗浄
こうして取得したペレット（pallet）を通常の生理食塩水で最低3回洗浄する。好ましくは等張性の、その他のどんな液体で洗浄してもよい。
【００４３】
Ｄ． 製薬上許容される担体の添加
ペレットに発熱物質を含まない通常の生理食塩水を添加する。製薬用担体として、発熱物質を含まないその他の任意の等張液を使用することができる。担体は、最終形態中に所望の活性成分濃度が得られるような量を添加する。
【００４４】
Ｅ．保存剤の添加
製品をその使用期間中他の細菌の汚染なしに維持するため、保存剤を添加する。好ましい保存剤は最終濃度 0.01％w/vで使用するチオメソールである。
【００４５】
Ｆ．最終滅菌
最終滅菌は加熱またはイオン化放射または滅菌ろ過などの各種の物理的方法によって実施することができる。
【００４６】
加熱は乾燥加熱または湿潤加熱の形態とすることができる。これは煮沸または低温殺菌の形態とすることもできる。
【００４７】
イオン化放射は紫外線またはガンマ線またはマイクロ波または任意のその他のイオン化放射の形態とすることができる。
【００４８】
最終製品を高圧滅菌するのが好ましい。
【００４９】
これは最終梱包容器への充填の前または後に実施することができる。
【００５０】
Ｇ．品質管理
i.   材料を純度、殺菌度について評価する。
【００５１】
ii.  微生物をグラム染色後の酸定着度について検査する。
【００５２】
iii. 不活性化試験：これは製品をLJ培地で培養して、何らかの生存微生物を検出することによって、実施する。
【００５３】
iv.  病原性および／または病原体による汚染。
【００５４】
培養した微生物をBalb/cマウスに感染させる。
【００５５】
どのマウスも死亡してはならず、また全部が健康で体重増加がなければならない。動物を治療後8週目までに絶命させたとき、肝臓、肺、脾臓またはその他のどの器官でも、何らかの巨視的または微視的病変があってはならない。
【００５６】
v.   生化学的試験：
微生物を以下の生化学的試験に供する：
a) ウレアーゼ
b) Tween80加水分解
c) ナイアシン試験
d) 硝酸塩還元試験
微生物はウレアーゼ、Tween80加水分解およびナイアシン試験で陰性結果となる。硝酸塩還元試験では陽性となる。
【００５７】
Ｈ．マイコバクテリウム  ｗ の構成成分の調製
本発明の目的のため、マイコバクテリウム  ｗ の構成成分を以下によって調製することができる：
I.   細胞の破壊
II.  溶媒抽出
III. 酵素的抽出
細胞の破壊は、超音波処理法または高圧フラクショノメーター(fractionometer)の使用によるか、あるいは浸透圧成分の適用によって、実施することができる。
【００５８】
溶媒抽出は、以下のような任意の有機溶媒によって実施することができる：クロロホルム、エタノール、メタノール、アセトン、フェノール、イソプロピルアルコール、酢酸、尿素、ヘキサン  その他。
【００５９】
酵素的抽出は、細胞壁／膜を消化することができる酵素によって実施することができる。これらは典型的には特性としてタンパク質分解性である。酵素リチカーゼおよびプロナーゼは好ましい酵素である。本発明の目的のため、マイコバクテリウム  ｗ 微生物に代えて、マイコバクテリウム  ｗ の細胞構成成分のみを使用するか、またはこれをマイコバクテリウム  ｗ を含有する製品に添加することができる。
【００６０】
細胞構成成分の添加の結果、製品の効力の改善となる。
【実施例３】
【００６１】
HPLC分析による、マイコバクテリウム  ｗ の構成成分の特性決定
本発明の目的のために使用するマイコバクテリウム  ｗ.の構成成分は、HPLC分析に供したとき、11分の位置に単一のピークを与える。その外に有意なピークは見られない。そのピークは均質で、何らのノッチがなく、取得した物質の均質性を示唆している。
【００６２】
水系高速液体クロマトグラフィー装置を使用して、HPLC分析を実施した。
【００６３】
カラム：                  Novapak c1860A、4μm、3.9 x 150 mm
ガードカラム：            Novapak c18
カラム温度：              30℃
流速：                    2.5 ml／分
注入容量：                25μL
移動相：                  
溶媒Ａ：HPLC等級メタノール
溶媒Ｂ：HPLC等級メチレンクロライド
2成分勾配：
HPLC勾配は当初は98％(v/v)メタノールを含むものとした(溶媒Ｂ)。
【００６４】
その勾配を直線的に1分間で80％Ａおよび20％Ｂ、10分間で35％Ａおよび65％Ｂまで増加させ、5秒間維持し、その後10秒間で98％Ａおよび2％Ｂまで戻した。
【実施例４】
【００６５】
医薬組成物の効果および使用方法
重篤な喘息の症状がある患者。該患者の息切れは、喘息のための最大薬物療法を施したにもかかわらずコントロールすることができなかったが、1週間間隔でマイコバクテリウム  ｗを皮内に投与した。4週間後までに、患者は無症候性となり、薬剤の数を徐々に減らしていった。それにもかかわらず、患者は無症候のままであった。したがって、最大薬物療法が喘息の管理を成し遂げられない場合でも、マイコバクテリウム  ｗは患者を無症候にし、喘息の管理に有用であることがわかった。
【００６６】
マイコバクテリウム  ｗは、患者が服用している薬剤の数を減らすのにも有用である。
【実施例５】
【００６７】
医薬組成物の効果および使用方法
定期的に疾患が増悪していた患者の一群にマイコバクテリウム  ｗを投与した。患者の中で疾患が増悪した者はみられなかった。
【００６８】
したがって、マイコバクテリウム  ｗは疾患の増悪の減少／遅延に有用であることがわかった。
【実施例６】
【００６９】
医薬組成物の効果および使用方法
気管支喘息であると診断された患者の一群において、気管支拡張薬およびステロイドという従来の治療を受けさせた。この結果、FEV1およびPEFRに関して肺活量により測定した肺機能が改善した。治療による改善は、3ヶ月にわたる観察で、基準から15〜20％の範囲であり、それ以上は改善しなかった。3ヶ月の終わりに、患者にマイコバクテリウム  ｗ含有医薬組成物を投与した。該医薬組成物は、1週間間隔で0.1ml投与した。これらの組成物は、抗炎症活性または気管支拡張活性を有することは知られていないが、これらの投与によりさらにFEV1およびPEFR値により測定される肺機能が改善した。この改善は、15〜20％の範囲を超え、従来の治療によりすでに達成されている最大値を上回った。
【００７０】
肺機能の改善は、主観的な健康感および生活の質の向上と関連する。肺機能の改善はまた動作の度合い（performance scale）も向上させる。肺機能の改善により、息切れすることなくできる身体活動の量も多くなる。
【００７１】
したがってマイコバクテリウム  ｗは、肺機能、生活の質および動作の向上に有用である。
【実施例７】
【００７２】
医薬組成物の効果および使用方法
閉塞性肺疾患を患っており、従来の治療によりコントロールされている患者の一群を3ヶ月間観察し、次にマイコバクテリウム  ｗ含有医薬組成物を治療に加え、さらに3ヶ月観察した。感染および関連する疾患の増悪を治療するのに抗生物質を必要とした平均回数は、最初の3ヶ月で3.71回であった。マイコバクテリウム  ｗを同時に投与してから次の3ヶ月で、必要回数は3.71回から2回に下がった。併用療法の最後の月は、抗生物質を必要とする患者はいなかった。したがって、マイコバクテリウム  ｗは抗生物質の必要量を減少させるのに有用である。
【実施例８】
【００７３】
医薬組成物の効果および使用方法
閉塞性肺疾患を患っており、従来の治療によりコントロールされているが、急性増悪の管理のために時々入院が必要である患者の一群を3ヶ月間観察し、次にマイコバクテリウム  ｗ含有組成物を治療に加え、さらに3ヶ月観察した。増悪の回数は、研究の第1部において、1人当りに3回みられた。第2部においては、1人当り1回に減少した。
【００７４】
したがって、マイコバクテリウム  ｗは、疾患の増悪の回数を減少させるのに有用である。
【国際調査報告】
2005519942.tif 000002
2005519942.tif 000003