(57)【要約】  キラル的に純粋なα−アミノ酸およびＮ−スルホニルα−アミノ酸の生産方法が記載される。アルデヒドおよびシアン化物塩をα−メチルベンジルアミンと反応させて生成物を得る。この生成物を強酸と反応させ、中和し、抽出する。その結果得られる生成物を次いで水素化し、加水分解して生成物を得、これを強酸に溶解してキラル的に純粋なα−アミノ酸の塩を得、これを反応させてキラル的に純粋なα−アミノ酸を得る。別の方法では、エフェドリン半水化物とＮ−スルホニルα−エチルノルバリンをエタノール中でモル比１：１で混合し；混合物を加熱して固体を溶解し；冷却して沈殿を形成させ；有機溶媒で洗浄してジアステレオマーの塩を得；塩を再結晶させ；再結晶した塩を有機溶媒および強酸水溶液に溶解し、層を分離し；有機抽出物を洗浄し；乾燥および濃縮してキラル的に純粋なＮ−スルホニルα−アミノ酸を得る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の工程を含むキラル的に純粋なα−アミノ酸またはその塩の生産方法：
（ａ）アルデヒドおよびシアン化物塩をキラルなα−メチルベンジルアミンまたはその塩と反応させ、ろ過して生成物（ａ）を得る工程；
（ｂ）無機強酸と生成物（ａ）を反応させる工程；
（ｃ）（ｂ）の反応の酸を中和する工程；
（ｄ）生成物（ｂ）を中和された酸から抽出する工程；
（ｅ）生成物（ｂ）を触媒の存在下で水素化して生成物（ｃ）を得る工程；および、
（ｆ）強酸水溶液中で生成物（ｃ）を加水分解してキラル的に純粋なα−アミノ酸の塩を得る工程。
【請求項２】
さらに、キラル的に純粋なα−アミノ酸の塩を中和してキラル的に純粋なα−アミノ酸を得る工程を含む、請求項１の方法。
【請求項３】
反応工程（ａ）を１２から２４時間続ける請求項１の方法。
【請求項４】
反応工程（ａ）の結果、沈殿を含む懸濁液を得、さらに該懸濁液をろ過し、ろ過物を水で洗浄して粉末を得る工程を含む請求項１の方法。
【請求項５】
シアン化物塩が、シアン化ナトリウムおよびシアン化カリウムから選択される請求項１の方法。
【請求項６】
無機強酸が硫酸である請求項１の方法。
【請求項７】
硫酸が生成物（ａ）の添加時に０℃である請求項６の方法。
【請求項８】
中和工程（ｃ）に用いる無機強塩基が水酸化アンモニウムである請求項１の方法。
【請求項９】
抽出工程に酢酸エチルを抽出溶媒として用い、該工程がさらに乾燥、ろ過、および濃縮により生成物（ｂ）を得る工程を含む請求項１の方法。
【請求項１０】
水素化工程（ｅ）において触媒がパラジウムである請求項１の方法。
【請求項１１】
水素化工程（ｅ）において混合物に圧力をかけて３ａｔｍとする請求項１の方法。
【請求項１２】
加水分解工程（ｆ）を温度１００℃で行う請求項１の方法。
【請求項１３】
水素化工程（ｅ）がさらに混合物をろ過し溶媒を除去する工程を含む請求項１の方法。
【請求項１４】
加水分解工程（ｆ）を１６時間行う請求項１の方法。
【請求項１５】
加水分解工程（ｆ）がさらに結果として得られる反応混合物を濃縮してアミノ酸塩酸塩と１当量の塩化アンモニウムからなる生成物を得る工程を含む請求項１の方法。
【請求項１６】
さらにアミノ酸塩酸塩と１当量の塩化アンモニウムからなる生成物を水に溶解し、水酸化ナトリウムを添加して溶液を形成させる工程を含む請求項１５の方法。
【請求項１７】
キラルなα−アミノ酸が式（Ｒ）２ＣＨ（ＣＨ２）ｎＣＨ（ＣＯ２Ｈ）ＮＨＲ’で表され、ここで、ｎが０から約１０であり、Ｒが低級アルキル、置換された低級アルキル、低級アルケニル、置換された低級アルケニル、低級アルキニル、置換された低級アルキニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、フェニル、置換されたフェニル、ベンジル、置換されたベンジル、ＣＨ２シクロアルキル、ＣＨ２−３−インドール、ＣＨ（低級アルキル）−２−フラン、ＣＨ（低級アルキル）−４−メトキシフェニル、ＣＨ（低級アルキル）フェニル、およびＣＨ（ＯＨ）−４−ＳＣＨ３−フェニルからなる群から選択され；Ｒ’がＨ、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級アルケニル、置換された低級アルケニル、低級アルキニル、置換された低級アルキニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、複素環、置換された複素環、フェニル、置換されたフェニル、ベンジル、および置換されたベンジルからなる群から選択される請求項１の方法。
【請求項１８】
以下の工程を含むキラルな２−アミノアルコールの調製方法：
請求項１に従ってキラルなα−アミノ酸を調製する工程；
α−アミノ酸を２−アミノアルコールへと還元する工程；および、
２−アミノアルコールを再結晶させてキラル的に純粋な２−アミノアルコールを得る工程。
【請求項１９】
以下の工程を含むキラル的に純粋なＮ−スルホニルα−アミノ酸の調製に使用するためのβ−分枝アルキル置換基を有するＮ−スルホニルα−アミノ酸の分割方法： 
（ａ）エタノール中にモル比１：１のキラル的に純粋なエフェドリン半水化物とＮ−スルホニルα−アミノ酸の混合物を形成する工程（ここで、Ｎ−スルホニルα−アミノ酸は、Ｎ−スルホニルβ−エチルノルバリン、Ｎ−スルホニルバリン、およびＮ−スルホニルβ−ｎ−プロピルノルロイシンからなる群から選択される）；
（ｂ）（ａ）の混合物を約８０℃に加熱して固体を溶解させる工程；
（ｃ）混合物を冷却して沈殿を形成させる工程；
（ｄ）沈殿をろ過してジアステレオマーの塩を得る工程；
（ｅ）ジアステレオマーの塩を再結晶させる工程；
（ｆ）有機溶媒および強酸水溶液に再結晶した塩を溶解し、層を分離して有機抽出物を得る工程；
（ｇ）有機抽出物を洗浄する工程；および、
（ｈ）有機抽出物を乾燥および濃縮してキラル的に純粋なＮ−スルホニルα−アミノ酸を得る工程。
【請求項２０】
Ｎ−スルホニルエチルノルバリンがＮ−［（５−クロロ−２−チエニル）スルホニル］−３−エチルノルバリンであり；工程（ｄ）において、沈殿をエタノールと酢酸エチルで洗浄してジアステレオマーの塩を得る、請求項１９の方法。
【請求項２１】
冷却工程を５℃で１８時間行う請求項１９の方法。
【請求項２２】
冷却を室温で行う請求項１９の方法。
【請求項２３】
冷却工程の後に、さらに形成された懸濁液をろ過する工程を含む請求項１９の方法。
【請求項２４】
再結晶工程を沸騰した酢酸エチル中で行う請求項１９の方法。
【請求項２５】
さらに再結晶した塩をろ過する工程を含む請求項１９の方法。
【請求項２６】
有機抽出物をＨＣｌで洗浄する請求項１９の方法。
【請求項２７】
有機抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させる請求項１９の方法。
【請求項２８】
以下の工程を含むキラルなＮ−スルホニル２−アミノアルコールの調製方法：
請求項１９にしたがってキラルなＮ−スルホニルα−アミノ酸を調製する工程、
Ｎ−スルホニルα−アミノ酸をＮ−スルホニル２−アミノアルコールへと還元する工程；および、
Ｎ−スルホニル２−アミノアルコールを再結晶させてキラル的に純粋なＮ−スルホニル２−アミノアルコールを得る工程。
【請求項２９】
Ｎ−スルホニルα−アミノアルコールが式（Ｉ）で表されるものであるか、またはその医薬上許容される塩であり、式（Ｉ）が以下の構造を有する請求項２８の方法：
【化１】
2005511727.tif 000024
［式中：
Ｒ１およびＲ２は独立に以下からなる群から選択される：水素、アルキル、置換されたアルキル、ＣＦ３、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、フェニル、置換されたフェニル、および（ＣＨ２）ｎ（１，３）ジオキサン（ｎは２〜５）；
Ｒ３は以下からなる群から選択される：水素、アルキル、および置換されたアルキル；
Ｒ４は以下からなる群から選択される：水素、アルキル、置換されたアルキル、アルキルシクロアルキル、置換されたアルキルシクロアルキル、フェニル（置換された）アルキル、アルキルＯＨ、置換されたアルキルＯＨ、アルキルＯＢｎ、置換されたアルキルＯＢｎ、アルキルピリジル、置換されたアルキルピリジル、アルキルフラニル、置換されたアルキルフラニル、ＣＨ（ＯＨ）フェニル、ＣＨ（ＯＨ）置換されたフェニル、アルケニル、置換されたアルケニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、Ｎ−置換されたピペリジニル、ピペリジニル、置換されたピペリジニル、テトラヒドロチオピラン、置換されたテトラヒドロチオピラン、２−インダン、置換された２−インダン、フェニル、置換されたフェニル、アルキルＮＨＲ７、および置換されたアルキルＮＨＲ７；
（ただし、Ｒ３とＲ４の両方が水素であることはない）；
Ｒ７はアルキル、置換されたアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ベンジル、置換されたベンジル、アルキルＯＨ、置換されたアルキルＯＨ、アルキルＳＲ８、または置換されたアルキルＳＲ８；
Ｒ８はアルキル、置換されたアルキル、ベンジル、または置換されたベンジル；
あるいはＲ３とＲ４はともに環を形成してもよい；
Ｒ５は以下からなる群から選択される：水素、低級アルキル、置換された低級アルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、ＣＨ２シクロアルキル、置換されたＣＨ２シクロアルキル、ベンジル、置換されたベンジル、およびＣＨ２ＣＨ２ＱＲ９；
ＱはＯ、ＮＨまたはＳ；
Ｒ９は低級アルキル、置換された低級アルキル、フェニル、または置換されたフェニル；
Ｒ６は以下からなる群から選択される：水素、ハロゲンおよびＣＦ３；
Ｔは以下からなる群から選択される：
【化２】
2005511727.tif 000025
Ｗ、ＹおよびＺは独立に以下からなる群から選択される：Ｃ、ＣＲ１０およびＮ；
Ｒ１０は以下からなる群から選択される：水素およびハロゲン；
（ただし、Ｗ、ＹおよびＺの少なくも１つはＣでなければならない）；
Ｘは以下からなる群から選択される：Ｏ、Ｓ、ＳＯ２、およびＮＲ１１；
Ｒ１１は以下からなる群から選択される：水素、低級アルキル、置換された低級アルキル、ベンジル、置換されたベンジル、フェニル、および置換されたフェニル；
ただし、化合物が１または複数のキラル中心を含む場合、少なくともα−アミノ酸由来のキラル中心はＳ−立体化学でなければならない］。
【請求項３０】
Ｒ６がハロゲンである請求項２９の方法。
【請求項３１】
Ｒ６が塩素または臭素である請求項２９の方法。
【請求項３２】
ＴがＣ（ＯＨ）Ｒ１Ｒ２でありＲ１およびＲ２がそれぞれ水素である請求項２９の方法。
【請求項３３】
ＷとＺの両方がＣである請求項２９の方法。
【請求項３４】
Ｒ４がＳ−立体化学の低級アルキルである請求項２９の方法。
【請求項３５】
ＸがＳ、ＷがＣ、ＺがＣ、Ｒ６がハロゲン、Ｒ４がＳ−立体化学の低級アルキル、Ｒ３が水素、Ｒ５が水素、そしてＲ１およびＲ２がそれぞれ水素である請求項２９の方法。
【請求項３６】
Ｒ３ＣＲ４がシクロヘキシルである請求項２９の方法。
【請求項３７】
Ｒ３ＣＲ４がピペリジンまたはＮ−置換されたピペリジンである請求項２９の方法。
【請求項３８】
ＸがＳ、そしてＷ、ＹおよびＺが独立にＣまたはＣＲ１０である請求項２９の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、キラル的に(chirally)純粋なα−アミノ酸およびＮ−スルホニルα−アミノ酸の新規な生産方法に関する。本発明の化合物は、医薬組成物における使用を含む、様々な目的のために有用である。
【背景技術】
【０００２】
α−アミノ酸からの好ましいエナンチオマーの生産について様々な技術が記載されている。より効率的なキラル的に純粋な標的化合物の生産手段が望まれている。
【発明の開示】
【０００３】
（発明の概略）
１つの態様において、本発明は、α−アミノ酸のキラル的に純粋なＳ−エナンチオマーの調製方法を含む。
さらなる態様において、２−アミノアルコール、アルデヒドおよびオキシムのキラル的に純粋なＳ−エナンチオマーの調製方法が提供される。
さらに別の態様において、Ｎ−スルホニルα−アミノ酸のキラル的に純粋なＳ−エナンチオマーの調製方法が提供される。
さらなる態様において、キラル的に純粋なＮ−スルホニル２−アミノアルコール、アルデヒドおよびオキシムの調製方法が提供される。
【０００４】
これらのそしてその他の本発明の態様は、以下の発明の詳細な説明を読むことにより、当業者に明らかであろう。
【０００５】
（発明の詳細な説明）
１つの態様において、本発明はキラルなα−アミノ酸の調製方法に関する。
【０００６】
別の態様において、本発明はキラルなＮ−スルホニルα−アミノ酸の分割方法を提供する。
【０００７】
本発明の方法はともに、キラル的に純粋な化合物を提供し、これらは好適な標的化合物に変換されうる。好適な標的化合物としては望ましい標的化合物のなかでもとりわけ、対応する２−アミノアルコールまたはＮ−スルホニル２−アミノアルコール、アルデヒドおよびオキシムが挙げられる。
【０００８】
本明細書において使用される場合、「キラル的に純粋な」という語は、キラル高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって測定して、約９５％、好ましくは約９７％より多くがＳ−エナンチオマー形態である化合物を意味する。キラル純度を測定するその他の方法には常套の分析方法、例えば、比旋光度、および常套の化学的方法が含まれる。しかし、キラル純度を測定するのに用いられる技術は本発明では限定されない。
【０００９】
本明細書において使用される場合、「医薬上有用な」という語は、所望の生物学的効果を有する化合物を意味し、該効果は治療薬、免疫賦活薬または免疫抑制薬、補助剤、またはワクチン剤としてのいずれのものであるかは問わない。同様に、例えば、特に診断剤、マーカーなどの非医薬用途での使用に好適な種々の化合物も本発明の方法によって生産できる。しかし、その他の医薬上有用な化合物も本発明の方法によって生産できる。
【００１０】
本発明により生産される化合物およびそれらが変換されて生じるあらゆる標的化合物は、医薬上または生理上許容される酸または塩基から誘導される塩の形態で使用してもよい。かかる塩には、これらに制限されないが、以下の有機酸および無機酸との塩（例えば、酢酸塩、乳酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、リンゴ（mallic）酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硝酸塩、硫酸塩、メタンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩および同様に公知の許容される酸との塩）およびそれらの混合物が含まれる。その他の塩としては、アルカリ金属またはアルカリ土類金属との塩、例えばナトリウム塩（例えば、水酸化ナトリウム）、カリウム塩（例えば、水酸化カリウム）、カルシウム塩またはマグネシウム塩が挙げられる。
【００１１】
これらの塩、ならびに本発明の方法によって生産されるその他の化合物は、エステル、カーバメートおよびその他の常套の「プロドラッグ」の形態であってもよい。プロドラッグはその形態で投与された後にインビボで活性部分に変換されるものである。１つの望ましい態様において、プロドラッグはエステルである。例えば、B. Testa and J. Caldwell、”Prodrugs Revisited:  The ”Ad Hoc” Approach as a Complement to Ligand Design”、Medicinal Research Reviews、16(3):233-241、ed.、John Wiley & Sons (1996）を参照されたい。
【００１２】
天然および非天然のα−アミノ酸、天然および非天然の２−アミノアルコール、およびそれらの中間体はともに、本発明によって調製できる。典型的にはα−アミノ酸は式（ＮＨ２）（ＣＨＲ．）（ＣＯＯＨ）によって表され、ここでＲ．は脂肪族ラジカルである。本発明によって調製されるα−アミノ酸はＮ−スルホニルα−アミノ酸およびその他の所望の化合物に変換されうる。その他の所望の化合物としては、これらに限定されるわけではないが、対応する２−アミノアルコール、アルデヒド、オキシム、およびそれらの医薬上許容される塩、水和物およびプロドラッグが挙げられる。同様に、天然および非天然のＮ−スルホニルα−アミノ酸、天然および非天然のＮ−スルホニル２−アミノアルコール、ならびにそれらの中間体も、本発明によって調製することができる。したがって本明細書に記載されるＮ−スルホニルα−アミノ酸は、当業者に周知の技術を用いて容易に２−アミノアルコールへと還元され得、あるいは対応するアルデヒド、オキシム、およびそれらの医薬上許容される塩、水和物ならびにプロドラッグへと変換されうる。
【００１３】
例えば、本発明の方法によって生産され、式（Ｒ）２ＣＨ（ＣＨ２）ｎＣＨ（ＣＯ２Ｈ）ＮＨ−Ｒ’で表されるキラル的に純粋なα−アミノ酸は、容易にキラル的に純粋な２−アミノアルコールへと変換できる。別の例において、本発明によって生産され、式（Ｒ）２ＣＨ（ＣＨ２）ｎＣＨ（ＣＯ２Ｈ）ＮＨ−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’で表されるキラル的に純粋なＮ−スルホニルα−アミノ酸は、容易に式（Ｒ）２ＣＨ（ＣＨ２）ｎＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）ＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ’で表されるＮ−スルホニル２−アミノアルコールへと変換される。好ましくは、上記の各式において、ｎは、０から約１０；Ｒは、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級アルケニル、置換された低級アルケニル、低級アルキニル、置換された低級アルキニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、フェニル、置換されたフェニル、ベンジル、置換されたベンジル、ＣＨ２シクロアルキル、ＣＨ２−３−インドール、ＣＨ（低級アルキル）−２−フラン、ＣＨ（低級アルキル）−４−メトキシフェニル、ＣＨ（低級アルキル）フェニル、またはＣＨ（ＯＨ）−４−ＳＣＨ３−フェニル；そしてＲ’は、以下から選択される：Ｈ、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級アルケニル、置換された低級アルケニル、低級アルキニル、置換された低級アルキニル、複素環、置換された複素環、フェニル、置換されたフェニル、ベンジル、置換されたベンジル、シクロアルキル、および置換されたシクロアルキル、その他の好適な基。別の例において、式（Ｒ）２ＣＨ（ＣＨ２）ｎＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）ＮＨ−Ｓ（Ｏ）２−２−Ｃ４Ｈ２Ｓ−５−Ｃｌを有するＮ−スルホニル２−アミノアルコールも、本発明の方法によって調製される。しかし本発明の方法によって生産されるキラル的に純粋な化合物は上記各式に限定されない。
【００１４】
本明細書において用いられる「アルキル」の語は、炭素原子数１〜１０、好ましくは炭素原子数１〜８、もっとも好ましくは、炭素原子数１〜６の直鎖状および分枝鎖状の飽和脂肪族炭化水素基を意味する；「アルケニル」とは、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有し、炭素原子数２〜８、好ましくは炭素原子数２〜６の直鎖状および分枝鎖状アルキル基を意味する；「アルキニル」基とは、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有し、炭素原子数２〜８、好ましくは炭素原子数２〜６の直鎖状および分枝鎖状アルキル基を意味する。本明細書において使用される場合、「低級」の語は、炭素原子数１〜６の上記の基を意味する。
【００１５】
「置換されたアルキル」、「置換されたアルケニル」、「置換されたアルキニル」、「置換された低級アルキル」、「置換された低級アルケニル」、「置換された低級アルキニル」の語は、ハロゲン、ＣＮ、ＯＨ、ＮＯ２、アミノ、アリール、複素環、置換されたアリール、置換された複素環、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アリールオキシ、置換されたアルキルオキシ、アルキルカルボニル、アルキルカルボキシ、アルキルアミノ、およびアリールチオを含む基から選択される１〜３の置換基を有する上記のアルキル、アルケニル、アルキニル、低級アルキル、低級アルケニル、および低級アルキニルを意味する。かかる置換基はアルキル、アルケニル、またはアルキニル基のいずれの炭素に結合していてもよいが、ただし、結合は安定な化学的部分を構成するものとする。
【００１６】
本明細書において用いられる「アリール」の語は、炭素環芳香族系を意味し、単環式でもよく、縮合または連結による多環式芳香族環でもよく、少なくとも縮合環または連結環の一部が共役芳香族系を形成するものとする。アリール基としては、これらに限定されないが、フェニル、ナフチル、ビフェニル、アントリル、テトラヒドロナフチル、フェナントリル、およびインダンが挙げられる。
【００１７】
「置換されたアリール」の語は、１〜４の以下から選ばれる置換基を有する上記のアリールを意味する。置換基としては、ハロゲン、ＣＮ、ＯＨ、ＮＯ２、アミノ、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリールオキシ、置換されたアルキルオキシ、アルキルカルボニル、アルキルカルボキシ、アルキルアミノ、およびアリールチオが挙げられる。
【００１８】
「置換されたベンジル」の語は、ベンゼン環上で１〜５の置換基によって置換されたベンジル（Ｂｎ）基を意味する。置換基としては、ハロゲン、ＣＮ、ＯＨ、ＮＯ２、アミノ、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリールオキシ、置換されたアルキルオキシ、アルキルカルボニル、アルキルカルボキシ、アルキルアミノ、およびアリールチオが挙げられる。
【００１９】
本明細書において用いられる「複素環」の語は、安定な４〜７員環の単環式または安定な多環式複素環を意味し、飽和、部分的に不飽和、または不飽和であり、炭素原子および１〜４のＮ、Ｏ、およびＳ原子からなる群から選択されるヘテロ原子から構成されるものを意味する。ＮおよびＳ原子は酸化されていてもよい。複素環には、上記複素環がアリール環に縮合している多環式環も含まれる。複素環はいかなるヘテロ原子または炭素原子に結合していてもよいが、ただし、結果として得られる構造は化学的に安定なものとする。かかる複素環基としては、例えば、テトラヒドロフラン、ピペリジニル、ピペラジニル、２−オキソピペリジニル、アゼピニル、ピロリジニル、イミダゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、オキサゾリル、イソキサゾリル、モルホリニル、インドリル、キノリニル、チエニル、フリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホキシド、イソキノリニル、およびテトラヒドロチオピランが挙げられる。
【００２０】
本明細書において用いられる「置換された複素環」の語は、上記の複素環基であって１〜４の置換基を有するものを意味する。かかる置換基としては、ハロゲン、ＣＮ、ＯＨ、ＮＯ２、アミノ、アルキル、置換されたアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アリールオキシ、置換されたアリールオキシ、アルキルオキシ、置換されたアルキルオキシ、アルキルカルボニル、置換されたアルキルカルボニル、アルキルカルボキシ、置換されたアルキルカルボキシ、アルキルアミノ、置換されたアルキルアミノ、アリールチオ、または置換されたアリールチオが挙げられる。
【００２１】
本明細書において用いられる「置換されたシクロアルキル」の語は、３以上の炭素原子を有する炭素ベースの環であって、安定な環を形成し、１〜５の置換基を有するものを意味する。かかる置換基としては、ハロゲン、ＣＮ、ＯＨ、ＮＯ２、アミノ、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリールオキシ、置換されたアルキルオキシ、アルキルカルボニル、アルキルカルボキシ、アルキルアミノ、置換されたアルキルアミノ、アリールチオ、複素環、置換された複素環、アミノアルキル、および置換されたアミノアルキルが挙げられる。
【００２２】
「置換されたアルキルシクロアルキル」、「置換されたアルキルＯＢｎ」、「置換されたアルキルピリジル」、「置換されたアルキルフラニル」、「置換されたアルキルＮＨＲ７」、および「フェニル（置換された）アルキル」、「置換されたアルキルＯＨ」、および「置換されたアルキルＳＲ８」の語は以下の式Ｉおよび式Ｉａで用いられている場合、置換はアルキル基または対応する基本化合物におけるものである。
【００２３】
以下の式ＩおよびＩａにおけるＲ４基の定義に用いられるように、Ｎ−置換されたピペリジニル基は、置換された複素環基として定義される。所望の置換基としては特に、Ｎ−アルキル−、Ｎ−アリール−、Ｎ−アシル−、およびＮ−スルホニルピペリジニル基が挙げられる。１つの特に好適なＮ−アシル−ピペリジニル基は、Ｎ−ｔ−ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ）−ピペリジンである。しかし、その他の好適な置換基も当業者によって容易に決定される。
【００２４】
本明細書において用いられる「アルコキシ」の語は、Ｏ（アルキル）基を意味し、結合部分は酸素原子を介するものであり、アルキルは所望により置換されていてもよい。本明細書において用いられる「アリールオキシ」の語は、Ｏ（アリール）基を意味し、結合部分は酸素原子を介するものであり、アリールは所望により置換されていてもよい。本明細書において用いられる「アルキルカルボニル」の語は、ＣＯ（アルキル）基を意味し、アルキルは所望により置換されていてもよく、結合部分はカルボニル基の炭素原子を介するものである。本明細書において用いられる「アルキルカルボキシ」の語は、ＣＯＯ（アルキル）基を意味し、アルキルは所望により置換されていてもよく、結合部分はカルボキシ基の炭素原子を介するものである。「アミノアルキル」の語は、二級および三級アミンであって、炭素原子数１〜８のアルキルまたは置換されたアルキル基（これらは同じであっても異なっていてもよい）を有し、結合部分が窒素原子上のものをいう。
【００２５】
「ハロゲン」の語は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、またはＩを意味する。
【００２６】
「環」構造の語は、例えば、式ＩにおいてＲ３およびＲ４が環構造を形成する場合は、特に環構造のタイプについて断りのない限り、単環式構造、架橋されたシクロ構造、および縮合シクロ構造を意味する。
【００２７】
「非求核性強塩基」の語は、非求核性塩基性試薬であって、求核試薬として作用せず、反応に用いられる試薬と結合しないものを意味する。多くの非求核性塩基は当該技術分野で知られており、水素化ナトリウム、水素化カリウム、リチウムジイソプロピルアミドおよびカリウムヘキサメチルジシラジドが挙げられる。
【００２８】
「塩基水溶液」の語は、少なくとも、塩基と水を含んでなる溶液を意味する。水に容易に溶解する塩基は当該技術分野で多数知られており、例えば、アルカリ金属水酸化物（例えば、水酸化リチウム、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム）が挙げられる。塩基水溶液はさらにその他の本発明の反応に影響を及ぼさない試薬を含んでいてもよく、かかる試薬としては、有機溶媒（例えば、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノールまたは炭化水素溶媒）、塩（例えば、塩化ナトリウム）および、バッファー類が挙げられる。
【００２９】
「酸水溶液」の語は、少なくとも、酸と水を含んでなる溶液を意味する。酸水溶液はさらに、その他の本発明の反応に影響を及ぼさない試薬を含んでいてもよい。
【００３０】
「強酸」または「強塩基」の語は、溶液中で完全にイオン化する酸または塩基を意味する。一般的な強酸としては、ＨＣｌ、ＨＢｒ、ＨＩ、ＨＮＯ３、Ｈ２ＳＯ４、およびＨＣｌＯ４が挙げられ、一般的な強塩基としては、アルカリ金属（Ｌｉ、Ｎａ、Ｋ、Ｒｂ、Ｃｓ）の水酸化物および重アルカリ土類（Ｃａ、Ｓｒ、Ｂａ）の水酸化物が挙げられる。
【００３１】
「無機」酸または「無機」塩基の語には、炭素を含まない酸および塩基が含まれる。
【００３２】
「有機溶媒」の語は、当該技術分野で知られている炭素含有溶媒であって、反応に用いられる試薬と反応しないものであり、例えば、飽和炭化水素溶媒、不飽和炭化水素溶媒が挙げられ、芳香族炭化水素溶媒、アルコール、ハロ炭素、エーテル、およびアセテートが含まれる。
【００３３】
キラル的に純粋な化合物の合成
キラル的に純粋な化合物は以下に記載する方法を用いて調製することができる。常套技術を参照することにより、当業者であれば容易に、有機合成の技術で知られている適当な合成方法および試薬を選択することができ、あるいは以下の方法を改変することができよう。例えば、Comprehensive Organic Synthesis、”Selectivity、Strategy & Efficiency in Modern Organic Chemistry”、ed.、I. Fleming、Pergamon Press、New York (1991); Comprehensive Organic Chemistry、”The Synthesis and Reactions of Organic Compounds”、ed. J.F. Stoddard、Pergamon Press、New York (1979)を参照されたい。
【００３４】
キラル的に純粋なα−アミノ酸の調製
１つの態様において、本発明は、キラル的に不純なα−アミノ酸からのキラル的に純粋なα−アミノ酸の調製方法を提供する。キラル的に純粋なα−アミノ酸ＸＸＸＸＶＩの調製のために、新規なＳｔｒｅｃｋｅｒα−アミノ酸合成の不斉バリアントが用いられる（スキーム１４；J. Org. Chem. 54:1055-1062 (1989)）。この経路（スキームＩ）において、アルデヒドＸＸＸＸＶＩＩをシアン化物塩およびα−メチルベンジルアミンまたはその塩と１：１：１のモル比で好適な溶媒中で反応させて化合物ＸＸＸＸＶＩＩＩを得る。望ましいシアン化物塩としてはシアン化ナトリウムおよびシアン化カリウムが挙げられる。しかし、他の好適なシアン化物塩も本発明の方法において使用するために容易に選択できる。好ましくは、溶媒は１：１のメタノール：水である。好ましくは、反応は約１２〜約２４時間、もっとも好ましくは約１８時間行う。しかし、より長いあるいは短い反応時間も容易に用いることができる。場合により、この反応の後、沈殿を含む懸濁液が生じるが、これをろ過および洗浄（例えば水）して粉末を得てもよい。化合物ＸＸＸＸＶＩＩＩを無機強酸に溶解し、好ましくは化合物との混合時に冷却して（例えば約０℃〜約１０℃）化合物ＸＸＸＸＩＸを得る。好ましくは、無機強酸は硫酸である。しかしその他の無機強酸も容易に選択することができる。反応混合物を無機塩基で中和し、有機溶媒で抽出して化合物ＸＸＸＸＩＸを得る。好ましくは、抽出には酢酸エチルまたはその他の好適な化合物を用い、さらに乾燥および濃縮して化合物ＸＸＸＸＩＸを得る。水素化分解反応を好適な触媒（例えばＰｄまたはＲａＮｉ）の存在下、圧力下（例えば３ａｔｍ）で行い、ろ過して触媒を除いた後、濃縮して溶媒を除いて化合物ＸＸＸＸＸを得る。次いで化合物ＸＸＸＸＸを酸水溶液に溶解して式ＸＸＸＸＶＩの誘導体を得る。ＸＸＸＸＸを乾燥させて粉末形態にした場合、それを無機強酸に高温で溶解してキラル的に純粋なα−アミノ酸の塩を得る。例えば、１００℃で塩酸を用いるとよい。当業者であれば、その他の酸およびその他の好適な温度を容易に選択することができる。もっとも好ましくは、加水分解工程を約１２〜１８時間、あるいはそれ以上行う。１つの好適な態様において、該工程は１６時間行う。場合により、その結果得られる反応混合物を濃縮して、アミノ酸塩および１当量のアンモニウム塩からなる生成物を得てもよい。この例において、生成物はアミノ酸塩酸塩と１当量の塩化アンモニウムである。この生成物を水に溶解し、これに塩基（例えば、水酸化ナトリウムまたは水酸化アンモニウム）を添加し、溶液を形成する。
【００３５】
【化１】
2005511727.tif 000002
【００３６】
本発明の方法により生産されるかかるキラル的に純粋なα−アミノ酸は、生産された形態で、あるいは所望の標的化合物に変換して容易に利用することができる。例えば、キラル的に純粋なα−アミノ酸はキラル的に純粋な２−アミノアルコールに容易に変換することができる。これはα−アミノ酸を２−アミノアルコールに還元し、２−アミノアルコールを再結晶させてキラル的に純粋な２−アミノアルコールを得ることによる。これらおよびその他の本発明のキラル的に純粋なα−アミノ酸の利用は本明細書に記載する情報および周知情報から当業者に明白である。
【００３７】
キラル的に純粋なＮ−スルホニルα−アミノ酸の調製
別の態様において、本発明は、β−分枝したアルキル置換基を有するキラル的に不純なＮ−スルホニルα−アミノ酸を分割して、キラル的に純粋なＮ−スルホニルα−アミノ酸を提供するためのスキームを提供する。好ましくは、Ｎ−スルホニルα−アミノ酸はＮ−スルホニルβ−エチルノルバリンである。別の態様において、ノルバリン化合物の代わりに以下から選択される化合物を用いてもよい：Ｎ−スルホニルβ−エチルノルバリン、Ｎ−スルホニルバリン、およびＮ−スルホニルβ−ｎ−プロピルノルロイシン。あるいは、当業者であれば、対応するキラル的に純粋な化合物の調製のために、β−分枝したアルキル置換基を有するＮ−スルホニルα−アミノ酸を選択して本発明の方法に用いることができる。
【００３８】
好ましくは、Ｎ−スルホニルβ−エチルノルバリン（あるいはその他の選択された化合物）をエタノール中でキラル的に純粋なエフェドリン半水化物とモル比１：１で混合する。次いで混合物を加熱して固体を溶解させる。１つの態様において、混合物を約８０℃に加熱する。しかし、その他の好適な温度を適宜選択してもよい。その後、混合物を冷却して沈殿を形成させる。この冷却工程は、室温あるいは低温（例えば、約５℃）で一晩（約１６〜２０時間）行う。冷却工程の温度および時間は、所望により適宜増減してもよい。所望により懸濁液を冷却後にろ過または洗浄する。塩が再結晶しこれを溶媒および強酸水溶液に溶解する。好ましくは、再結晶工程は、沸騰した酢酸エチル中で行い、再結晶した塩を分離する。これはろ過またはその他の常套方法によってもよい。好ましくは、塩を有機溶媒および強酸水溶液に溶解する。有機抽出物を洗浄し、乾燥させ濃縮してキラル的に純粋なＮ−スルホニルα−アミノ酸を得る。１つの態様において、洗浄工程は強酸水溶液（例えば塩酸）を用い、乾燥は硫酸ナトリウムなどで行う。
【００３９】
好ましくは、かかるキラル的に純粋なα−アミノ酸およびＮ−スルホニルα−アミノ酸は種々の目的に有用なものである。例えばこれらのキラル的に純粋なα−アミノ酸およびＮ−スルホニルα−アミノ酸は本明細書に記載する方法によって、対応するＮ−スルホニル２−アミノアルコールに変換されうる。
【００４０】
したがって１つの態様において本発明によって生産されるキラル的に純粋なα−アミノ酸はキラルなＮ−スルホニルα−アミノ酸の合成に有用なものである。かかるキラルなＮ−スルホニルα−アミノ酸の好適な調製方法を本明細書に記載する。
【００４１】
２−アミノアルコールへの変換
本発明の方法はキラル的に純粋なＳエナンチオマーのα−アミノ酸およびＮ−スルホニルα−アミノ酸の合成の効率的な経路を提供し、これらは様々な目的に有用な２−アミノアルコールまたはＮ−スルホニル２−アミノアルコールおよびそれらの中間体の調製に有用である。
【００４２】
例えば、本明細書に例示する化合物である、Ｎ−スルホニル２−アミノアルコールおよびそれに対応するアルデヒド、オキシムおよび塩は、β−アミロイド生産の調節に有用であり、それは、アミロイド血管障害、脳性アミロイド血管障害、全身性アミロイド症、アルツハイマー病（ＡＤ）、オランダ型アミロイド症を伴う遺伝性脳性出血、封入体筋炎、ダウン症などに関係する。したがって式（Ｉ）の化合物は、ＡＤまたは脳内βアミロイドタンパク質レベルの上昇の結果起こるその他の疾患を患っているか患うおそれのある対象におけるβアミロイド生産の調節のために有用である。かかる化合物およびそれらの使用は同時係属中の米国特許出願第１０／０１４３０４号（２００１年１２月１１日出願）により詳細に記載されており、これを引用により本出願に含める。式（Ｉ）の化合物は、その医薬上許容される塩および／または水和物あるいはプロドラッグも含み、ここで式（Ｉ）は以下の通りである：
【００４３】
【化２】
2005511727.tif 000003
［式中、
Ｒ３は、以下からなる群から選択される：水素、アルキル、および置換されたアルキル；
Ｒ４は、以下からなる群から選択される：水素、アルキル、置換されたアルキル、アルキルシクロアルキル、置換されたアルキルシクロアルキル、フェニル（置換された）アルキル、アルキルＯＨ、置換されたアルキルＯＨ、アルキルＯＢｎ、置換されたアルキルＯＢｎ、アルキルピリジル、置換されたアルキルピリジル、アルキルフラニル、置換されたアルキルフラニル、ＣＨ（ＯＨ）フェニル、ＣＨ（ＯＨ）置換されたフェニル、アルケニル、置換されたアルケニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、Ｎ−置換された−ピペリジニル、ピペリジニル、置換されたピペリジニル、テトラヒドロチオピラン、置換されたテトラヒドロチオピラン、２−インダン、置換された２−インダン、フェニル、置換されたフェニル、アルキルＮＨＲ７、および置換されたアルキルＮＨＲ７；
（ただしＲ３およびＲ４の両方が水素であることはない）；
Ｒ７は、アルキル、置換されたアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ベンジル、置換されたベンジル、アルキルＯＨ、置換されたアルキルＯＨ、アルキルＳＲ８、または置換されたアルキルＳＲ８；
Ｒ８は、アルキル、置換されたアルキル、ベンジル、または置換されたベンジル；
あるいは、Ｒ３およびＲ４は連結して環を形成してもよい；
Ｒ５は、以下からなる群から選択される：水素、低級アルキル、置換された低級アルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、ＣＨ２シクロアルキル、置換されたＣＨ２シクロアルキル、ベンジル、置換されたベンジル、およびＣＨ２ＣＨ２ＱＲ９；
Ｑは、Ｏ、ＮＨまたはＳ；
Ｒ９は、低級アルキル、置換された低級アルキル、フェニル、または置換されたフェニル；
Ｒ６は、以下からなる群から選択される：水素、ハロゲンおよびＣＦ３；
Ｔは、以下からなる群から選択される：
【化３】
2005511727.tif 000004
Ｒ１およびＲ２は、独立に以下からなる群から選択される：水素、アルキル、置換されたアルキル、ＣＦ３、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、フェニル、置換されたフェニル、および（ＣＨ２）ｎ（１，３）ジオキサン（ここで、ｎは、２〜５）；
Ｗ、ＹおよびＺは、独立に以下からなる群から選択される：Ｃ、ＣＲ１０およびＮ（ただし、Ｗ、ＹおよびＺの少なくとも１つはＣでなければならない）；
Ｒ１０は、以下からなる群から選択される：水素およびハロゲン；
Ｘは、以下からなる群から選択される：Ｏ、Ｓ、ＳＯ２、およびＮＲ１１；
Ｒ１１は、以下からなる群から選択される：水素、低級アルキル、置換された低級アルキル、ベンジル、置換されたベンジル、フェニル、および置換されたフェニル］。
【００４４】
Ｗ−Ｘ−Ｙ−Ｚ−Ｃ複素環がＳＯ２基に結合する点は本発明を制限するものではない。しかし１つの好適な態様において、環は炭素原子を介してＳＯ２基に結合する。しかし、環は、Ｏ、Ｓ、またはＮヘテロ原子を介して結合してもよい。
【００４５】
式（Ｉ）の化合物は１または複数の不斉炭素原子を含み、化合物のなかには１または複数の不斉（キラル）中心を有し、光学異性体およびジアステレオマーをもたらすものもある。式（Ｉ）において立体化学については示されていないが、式（Ｉ）の化合物が１または複数のキラル中心を有する場合、少なくともα−アミノ酸由来のキラル中心はＳ−立体化学でなければならない。もっとも好ましくは、Ｎ、Ｔ、Ｒ３およびＲ４が結合している炭素原子はＳ−立体化学のものである。
【００４６】
１つの態様において、本発明は、一般式ＩａのＮ−スルホニル２−アミノアルコールのキラルなＳエナンチオマーの調製方法に関する。
【化４】
2005511727.tif 000005
［式中、Ｒは、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級アルケニル、置換された低級アルケニル、低級アルキニル、置換された低級アルキニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、フェニル、置換されたフェニル、ベンジル、置換されたベンジル、ＣＨ２シクロアルキル、ＣＨ２−３−インドール、ＣＨ（低級アルキル）−２−フラン、ＣＨ（低級アルキル）−４−メトキシフェニル、ＣＨ（低級アルキル）フェニル、またはＣＨ（ＯＨ）−４−ＳＣＨ３−フェニルおよびｎは０から約１０］。
【００４７】
好ましくは、本発明の方法によって調製される化合物は、少なくとも１つのキラルな炭素中心を有し、ここで上記構造におけるＲは同一である。望ましい１つの態様において、Ｒ基は、メチル、エチル、およびｎ−プロピルであり、もっとも好ましくはＲ基はエチルである。しかし、本発明はさらに上記一般式においてＲ基が異なるα−アミノ酸および２−アミノアルコールの生産も含む。かかる化合物においては１または複数のさらなるキラル中心が存在しうる；しかしさらなるキラル中心は光学的に純粋でなければならず、本発明のキラル的に純粋なα−アミノ酸、２−アミノアルコール、および純粋なＳエナンチオマーのＮ−スルホニル２−アミノアルコールの生産を妨げるものであってはならない。
【００４８】
別の好適な態様において、キラルな炭素中心はＳ−立体化学であって、エナンチオマー的に純粋な生成物をもたらすものである。
【００４９】
１つの態様において、本発明の方法は、Ｎ−スルホニルα−アミノ酸へと容易に変換されるキラル的に純粋なα−アミノ酸の生産に用いられる。例えば、本発明によって調製されるキラル的に純粋なα−アミノ酸を式（Ｉ）の化合物の調製に利用することができる。特に望ましい式（Ｉ）の化合物としては、チオフェンスルホンアミド、より好ましくは、５−ハロチオフェンスルホンアミド、もっとも好ましくは、一級アルコールの側鎖においてβ分枝を有する５−ハロチオフェンスルホンアミドが挙げられる。したがって式（Ｉ）について、本発明により生産される化合物は好ましくは以下の構造を有する；ＸはＳ、ＷはＣ、ＹはＣ（またはＣＲ１０）そしてＺはＣ（またはＣＲ１０）であり、スルホンアミドがチオフェン環のＣ２に結合している。より好ましくは、ＸはＳ、ＷはＣ、ＹはＣ（またはＣＲ１０）、ＺはＣ（またはＣＲ１０）そしてＲ６はハロゲンである。もっとも好ましくは、ＸはＳ、ＷはＣ、ＹはＣ、ＺはＣ、Ｒ６はハロゲン、ＴはＣ（ＯＨ）Ｒ１Ｒ２であり、Ｒ１およびＲ２は水素、Ｒ３はＨ、Ｒ４はＳ−立体化学の低級アルキル、そしてＲ５はＨである。別の望ましい式（Ｉ）の化合物はフランスルホンアミドであって、ＸがＯ、ＷがＣ、ＹがＣ、そしてＺがＣのものである。１つの特に望ましい態様において、式（Ｉ）のフランスルホンアミドはさらに一級アルコールの側鎖におけるβ分枝によって特徴づけられる。したがって式（Ｉ）に関して、これら化合物において、ＴはＣ（ＯＨ）Ｒ１Ｒ２、ここでＲ１とＲ２は水素、Ｒ３はＨ、Ｒ４はＳ−立体化学の低級アルキル、Ｒ５はＨ、そしてＲ６はハロゲンである。インビトロおよびインビボでの予備的スクリーニングアッセイにおいて、かかる構造の選択された化合物が予期せず良好なベータ−アミロイド抑制活性を示し、多くの場合において、その他の複素環を有する式（Ｉ）の化合物（例えば、フランであって、ＸがＯのもの）よりも良好な活性を示すことが見いだされた。しかし、その他の式（Ｉ）の化合物も本明細書に記載する目的のために有用である。
【００５０】
さらに、本発明によって調製されるその他のキラル的に純粋なα−アミノ酸およびＮ−スルホニルα−アミノ酸を所望のＮ−スルホニル２−アミノアルコールに変換することができ、それには式（Ｉ）の化合物が含まれる。式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ）のスルホンアミドであり、一級アルコール基の側鎖においてβ分枝を有することによって特徴づけられる。したがって式（Ｉ）に関して、これら化合物においてＴがＣ（ＯＨ）Ｒ１Ｒ２、Ｒ１およびＲ２が水素、Ｒ３がＨ、Ｒ４がＳ−立体化学の低級アルキル、そしてＲ５がＨである。これらおよびキラル的に純粋なＮ−スルホニルα−アミノ酸は本明細書に記載する方法に従って調製することができる。
【００５１】
第一の調製方法は、２−アミノアルコールＩＩと適当なハロゲン化スルホニルとの塩基（例えばトリエチルアミン（ＴＥＡ））の存在下で好適な溶媒中での反応により式ＩＩＩの化合物を得ることからなる。Ｒ２およびＲ１が水素である化合物については、Ｎ−スルホニル一級アルコールのクロロクロム酸ピリジニウム（ＰＣＣ）による酸化またはＳｗｅｒｎ条件下で対応するアルデヒドＩＶを得、これをグリニャール試薬（ＲＭｇＸ、ここでＲは有機ラジカル、Ｘはハロゲン）と反応させて二級アルコールＶをジアステレオマー混合物として得ることができ、これは高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって分離できる（スキーム２）。
【００５２】
【化５】
2005511727.tif 000006
【００５３】
第二の調製方法は、α−アミノ酸またはエステルＩＸと適当なハロゲン化スルホニルとの塩基（例えばトリエチルアミン）の存在下、好適な溶媒中での反応により式Ｘの化合物を得ることからなる（スキーム３）。中間体Ｎ−スルホニル酸Ｘ（Ｒｘ＝Ｈ）を対応する一級アルコールＶＩＩＩ（Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ）に標準方法（例えば、ＬｉＡｌＨ４、Ｂ２Ｈ６または塩化シアヌル／ＮａＢＨ４）を用いて変換することができる。中間体Ｎ−スルホニルエステルＸ（Ｒｘ＝アルキル、Ｂｎ）をＬｉＡｌＨ４などの標準方法を用いて対応する一級アルコールＶＩＩＩ（Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ）へと還元することができる。あるいは中間体Ｎ−スルホニルエステルＸ（Ｒｘ＝アルキル、Ｂｎ）をＤｉＢＡＬによってアルデヒドＩＶに変換することもできる。
【００５４】
【化６】
2005511727.tif 000007
【００５５】
最後に、中間体Ｎ−スルホニルエステルＸ（Ｒｘ＝アルキル、Ｂｎ）を２当量のグリニャール試薬と反応させてＲ１＝Ｒ２＝アルキルである三級アルコールＩＩＩを得ることができる。あるいはＲ１とＲ２とが異なる三級アルコールＩＩＩについては、対応するＮ−スルホニル酸のＷｅｉｎｒｅｂアミド（スキーム１１参照）を調製し、次いでＲ１ＭｇＸおよびＲ２ＭｇＸと反応させる。α−アミノ酸炭素において不斉中心を有する式Ｘの化合物（Ｒｘ＝Ｈ）については、純粋なエナンチオマーは、様々なキラルな塩基と形成される塩の再結晶を行う標準的分割方法によって得ることができる。
【００５６】
一級アルコールの第二の調製方法の改変方法において、α−アミノ酸またはエステル（あるいはそのＮ−保護された誘導体）ＶＩをまず（前述の方法を用いて）対応する一級２−アミノアルコールＶＩＩに変換し、これを、（必要であれば）脱保護の後、適当なハロゲン化スルホニルと反応させて（スキーム４）式ＶＩＩＩの化合物を得る。
【化７】
2005511727.tif 000008
【００５７】
アミノ酸側鎖においてベータ分枝を含む非天然α−アミノ酸由来の化合物の調製については、Hruby (Tet. Lett. 38: 5135-5138 (1997))の研究に基づく調製方法をスキーム５に概説する。この経路にはα，β−不飽和酸ＸＩからのＥｖａｎｓキラル補助基のα，β−不飽和アミドＸＩＩの形成、次いで有機銅塩の共役付加、その結果得られるエノラートアニオンＸＩＩＩのＮ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）による補足が必要であり、ブロミドＸＩＶをアジドアニオン（テトラメチルグアニジウムアジド（ＴＭＧＡ）により提供される）により置換してＸＶを得、その後２−アミノアルコールへと還元し、次いでスルホニル化して標的化合物ＸＶＩを得る。スキーム２から５において、Ｒ５はＨである。
【００５８】
【化８】
2005511727.tif 000009
【００５９】
Ｎ−アルキル化スルホンアミドＶＩＩＩ（Ｒ５＝アルキルなど）の調製については、スルホンアミドエステルＸＶＩＩを以下のいずれかによってＮ−アルキル化する：好適な塩基（例えば炭酸カリウム）、次いでアルキル化剤Ｒ５Ｘによる処理；またはミツノブ条件（Ｒ５ＯＨ／ＤＥＡＤ、ＴＰＰ）の使用。Ｎ−アルキル化スルホンアミドエステルのＬｉＢＨ４還元により一級アルコール類のＮ−アルキル化スルホンアミドＶＩＩＩが得られる（スキーム６）。これら一級アルコールＶＩＩＩを上記の化学合成により二級アルコールＶまたはアルデヒドＩＶに変換することができる。あるいは、Ｎ−アルキル化スルホンアミドエステル、または対応するＷｅｉｎｒｅｂアミドを、グリニャール試薬で処理してＮ−アルキル化三級アルコールＩＩＩを得ることができる。
【化９】
2005511727.tif 000010
【００６０】
上記アルコールにおけるスルホンアミドに結合している複素環がチオフェンの場合、対応するスルホン誘導体ＸＩＸは、チオフェン化合物ＸＶＩＩＩのＭＣＰＢＡによる酸化により得ることができる（スキーム７）。
【００６１】
【化１０】
2005511727.tif 000011
【００６２】
非天然２−アミノアルコールに由来するスルホンアミドの調製の別法には、Ｓｔｒｅｃｋｅｒα−アミノ酸合成のＢｕｃｈｅｒｅｒ改変法を用いる（スキーム８）。この経路において、アルデヒドＸＸをシアン化物アニオンおよび炭酸アンモニウムと反応させてヒダントインＸＸＩを得、これを加水分解してα−アミノ酸ＸＸＩＩを得る。次いでこの化合物をＸＸＩＩＩに還元してスルホニル化して所望の式ＸＸＩＶの化合物を得る。
【００６３】
【化１１】
2005511727.tif 000012
【００６４】
側鎖においてＮまたはＯヘテロ原子を含む２−アミノアルコールに由来するスルホンアミドについては、Ｄ−セリンから出発する経路が考案された（スキーム９）。この経路において、Ｄ−セリンＸＸＶをまずスルホニル化してＸＸＶＩとし、次いでケトンＸＸＶＩＩへと変換し、これを還元的アミノ化して式ＸＸＶＩＩＩの標的化合物を得る。
【００６５】
【化１２】
2005511727.tif 000013
【００６６】
Ｒ１＝ＨかつＲ２＝ＣＦ３である二級アルコール類において２−アミノアルコールに由来するスルホンアミド（化合物ＸＸＩＸ）について、アルデヒドＩＶ（スキーム２により調製される）から出発する調製方法が考案され、これをスキーム１０に示す。
【００６７】
【化１３】
2005511727.tif 000014
【００６８】
スキーム２に関して前述したように、二級アルコール類Ｖにおける２−アミノアルコールに由来するスルホンアミドの調製の結果、ジアステレオマー混合物が形成される。純粋なジアステレオマーの生産を導くかかる化合物の代替調製方法をＬ−イソロイシン由来の化合物についてスキーム１１に概説する。この方法は、Roux (Tetrahedron 50: 5345-5360 (1994)）によって以前に行われた化学合成方法を用いるものであるが、グリニャール試薬のＷｅｉｎｒｅｂアミドＸＸＸ（必要なα−アミノ酸由来）への添加、次いでケトンＸＸＸＩの立体特異的還元により単一のジアステレオマーであるＮ−保護された２−アミノアルコールＸＸＸＩＩを得ることからなる。この化合物の脱保護、次いで塩化スルホニルとの反応により式ＸＸＸＩＩＩの純粋なジアステレオマーのスルホンアミド二級アルコールが得られる。
【００６９】
【化１４】
2005511727.tif 000015
【００７０】
上記アルコールにおいてスルホンアミドに結合している複素環がチオフェンの場合、対応する５−ヨードおよび５−フルオロ−チオフェン誘導体は、５−ブロモ−チオフェン誘導体ＸＸＸＩＶ（スキーム２のようにして得られる）から５−トリアルキルスズ−チオフェン中間体ＸＸＸＶへの変換、次いで中間体ＸＸＸＶをヨウ化ナトリウムおよびクロラミンＴによる処理により５−ヨード−チオフェン（ＸＸＸＶＩＩ）に変換するか、あるいはＳＥＬＥＣＴＦＬＵＯＲ（商標）（Aldrich Chemical Co）による処理により５−フルオロ−チオフェンアナログ（ＸＸＸＶＩ）に変換することにより得られる（スキーム１２）。
【００７１】
【化１５】
2005511727.tif 000016
【００７２】
シクロヘキサン環の４位においてアルコキシおよびアミノ基によって置換されたシクロヘキシルグリシノール由来のスルホンアミドは本明細書に記載の方法に従って調製することができる（スキーム１３）。この経路は、第一に４−Ｌ−ヒドロキシフェニルグリシンＸＸＸＶＩＩＩの水素化、次いでスルホニル化、ジボランによるカルボン酸の還元そしてＮ，Ｏ−アセトニドＸＸＸＩＸの形成を必要とする。４−ヒドロキシアセトニドＸＸＸＩＸを水素化ナトリウムおよびアルキル化剤（例えばアルキルまたはベンジルブロミド）を用いてＯ−アルキル化する。この後、酸水溶液による処理により保護基を除去し、式ＸＸＸＸの４−エーテル誘導体を得る。あるいは、４−ヒドロキシアセトニドＸＸＸＩＸを酸化して４−ケトンとし、これを還元的アミノ化および脱保護して対応する式ＸＸＸＸＩの４−アミノアナログを得る。
【００７３】
【化１６】
2005511727.tif 000017
【００７４】
所望の場合は、オキシムＸＸＸＸＸＩＶをスキーム１４に示す標準的方法により対応するアルデヒドＩＶから導くことができる。
【００７５】
【化１７】
2005511727.tif 000018
【実施例】
【００７６】
以下の実施例により本発明の方法による代表的な化合物の生産について説明する。特定の試薬および条件が以下の実施例において記載されているが、当業者であれば、これらの試薬および条件は本発明を限定するものではないことを理解するであろう。
【００７７】
（実施例１）
方法１
５−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−エチル−１−ホルミルブチル］チオフェン−２−スルホンアミド
【化１８】
2005511727.tif 000019
【００７８】
Ａ．５−（１−エチル−プロピル）−イミダゾリジン−２，４−ジオン
シアン化ナトリウム（１２．０ｇ、２４４．８ｍｍｏｌ）および２−エチルブチルアルデヒド（１０．０ｍＬ、８１．３ｍｍｏｌ）をＨ２Ｏ（３００ｍＬ）中の炭酸アンモニウム（２５．４ｇ、３２５．３ｍｍｏｌ）に添加した。エタノール（３００ｍＬ）を添加し、塩を沈殿させた。反応混合物を９０℃に加熱した。１時間後、混合物は均一となり、９０℃で１８時間撹拌した。２５℃に冷却した後、約５００ｍＬの溶媒を減圧下で除去した。濃ＨＣｌを添加して混合物をｐＨ１−２まで酸性にし、沈殿を形成させた。これをろ過し、沈殿をＥｔＯＡｃから再結晶させて５−（１−エチル−プロピル）−イミダゾリジン−２，４−ジオンを白色固体（１２．９ｇ、９３％）として得た。質量スペクトル（−ＥＳＩ）：１６９（Ｍ−Ｈ）−
【００７９】
Ｂ．Ｎ−［（５−クロロ−２−チエニル）スルホニル］−３−エチルノルバリン
５−（１−エチル−プロピル）−イミダゾリジン−２，４−ジオン（１２．３ｇ、７２．３ｍｍｏｌ）を１５０ｍＬのＮａＯＨ水溶液（１１．６ｇ、２８９．２ｍｍｏｌ）に溶解した。溶液を密封容器中で１時間マイクロ波により加熱した（マイクロ波条件：１５分＠１００％出力、１５０℃、５０ｐｓｉ、次いで５分０％出力、次いで１５分＠１００％出力、１５０℃、５０ｐｓｉ、この順番の繰り返し）。水および水酸化アンモニウムを反応混合物から減圧下で除去し、その結果得られる粗アミノ酸およびＮａＯＨ混合物をさらに精製せずに次の反応に用いた。
【００８０】
粗アミノ酸およびＮａＯＨ混合物を３００ｍＬの水に溶解した。混合物を氷浴中で０℃に冷却した。５−クロロチオフェン−２−塩化スルホニル（１７．３ｇ、７９．５ｍｍｏｌ）を１００ｍＬのＴＨＦに溶解し反応混合物に０．５時間滴下した。１時間後、反応混合物を徐々に２５℃まで昇温し、１６時間撹拌した。ＴＨＦを減圧下で除去し、次いで混合物を１Ｎ  ＨＣｌによりｐＨ１まで酸性にした。約１５分後、沈殿が乳白色溶液から析出し始めた。１時間後、混合物を冷蔵室で１時間冷却し、ろ過した。沈殿を１Ｎ  ＨＣｌで洗浄してＮ−［（５−クロロ−２−チエニル）スルホニル］−３−エチルノルバリンを白色固体（１８．５ｇ、７８％）として得た。質量スペクトル（−ＥＳＩ）：３２５（Ｍ−Ｈ）−
【００８１】
Ｃ．Ｎ−［（５−クロロ−２−チエニル）スルホニル］−３−エチル−Ｌ−ノルバリン
（＋）−（１Ｓ，２Ｒ）−エフェドリン半水化物（１６．７ｇ、９５．６ｍｍｏｌ）を１８５ｍＬのＥｔＯＨ中のＮ−［（５−クロロ−２−チエニル）スルホニル］−３−エチルノルバリン（３１．２ｇ、９５．６ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加した。混合物を弱く加熱して固体および形成した沈殿を溶解した。５℃に１８時間冷却し、その結果得られる懸濁液をろ過し、沈殿を冷ＥｔＯＨおよびＥｔＯＡｃで洗浄して２７％の収率でジアステレオマーの塩を得た。塩を沸騰しているＥｔＯＡｃ（４２０ｍＬ）から再結晶させ、ろ過した。その結果得られる白色固体を３００ｍＬのＥｔＯＡｃおよび３００ｍＬの１Ｎ  ＨＣｌに溶解した。層を分離し、有機抽出物を１Ｎ  ＨＣｌ（２ｘ２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、そして濃縮してＮ−［（５−クロロ−２−チエニル）スルホニル］−３−エチル−Ｌ−ノルバリンを白色固体（５．６ｇ、１８％）として得た。キラルＨＰＬＣ［キラルパックＡＤ（２５ｘ０．４６ｃｍ）、８：２ヘキサン（０．１％ＴＦＡ）：イソプロパノール、Ｌ−異性体は９．６分で溶出し、Ｄ−異性体は１３．１分で溶出した］により９６％キラル純度が示された。［α］Ｄ２５＝＋４．５°（ｃ＝１％溶液、ＭｅＯＨ）。質量スペクトル（−ＥＳＩ）：３２５（Ｍ−Ｈ）−。Ｃ１１Ｈ１６ＣｌＮＯ４Ｓ２についての理論計算値：Ｃ、４０．５５；Ｈ、４．９５；Ｎ、４．３０、実測値：Ｃ、４０．３０；Ｈ、４．７８；Ｎ、４．１６
【００８２】
Ｄ．５−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−エチル−１−（ヒドロキシメチル）ブチル］−２−チオフェンスルホンアミド
ＴＨＦ（１５０ｍＬ）中の０℃のＮ−［（５−クロロ−２−チエニル）スルホニル］−３−エチル−Ｌ−ノルバリン（５．６ｇ、１７．２ｍｍｏｌ）にＴＨＦ中の１Ｍボランテトラヒドロフラン複合物（６９ｍＬ、６９ｍｍｏｌ）の溶液を添加漏斗から滴下した。１５分後、反応混合物を２５℃に昇温させ、１８時間撹拌した。これをゆっくりと９０ｍＬのＭｅＯＨ中の１０％ＡｃＯＨでクエンチした。揮発物を減圧下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）に溶解し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液で洗浄し（３ｘ２００ｍＬ）、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して白色沈殿（５．１ｇ、９６％収率、９６％キラル純度）を得た。沈殿をヘプタン／ＥｔＯＡｃ、４：１で再結晶させ、光学的に純粋な５−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−エチル−１−（ヒドロキシメチル）ブチル］−２−チオフェンスルホンアミドを白色針状物質（４．４ｇ、８１％収率）として得た。ｍｐ１１３−１１４℃、［α］Ｄ２５＝＋４．５°（ｃ＝１％溶液、ＤＭＳＯ）、質量スペクトル（−ＥＳＩ）：３１０（Ｍ−Ｈ）−、Ｃ１１Ｈ１８ＣｌＮＯ３Ｓ２についての理論計算値：Ｃ、４２．３７；Ｈ、５．８２；Ｎ、４．４９、実測値：Ｃ、４２．３７；Ｈ、５．７９；Ｎ、４．３８
【００８３】
Ｅ．５−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−エチル−１−ホルミルブチル］チオフェン−２−スルホンアミド
二クロム酸ピリジニウム（２．４ｇ、６．４ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）中の５−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−エチル−１−（ヒドロキシメチル）ブチル］−２−チオフェンスルホンアミド（０．５ｇ、１．６ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。１８時間後、反応混合物をセライト栓でろ過した。ろ液を濃縮し、その結果得られる残渣シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出液：１：４ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）によって精製して５−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−エチル−１−ホルミルブチル］チオフェン−２−スルホンアミドを白色固体（３０３ｍｇ、６１％）として得た。［α］Ｄ２５＝＋１３６．７６°（ｃ＝１％溶液、ＣＨＣｌ３）、質量スペクトル（−ＥＳＩ）：３０８（Ｍ−Ｈ）−、Ｃ１１Ｈ１６ＣｌＮＯ３Ｓ２についての理論計算値：Ｃ、４２．６４；Ｈ、５．２１；Ｎ、４．５２、実測値：Ｃ、４２．５７；Ｈ、５．２４；Ｎ、４．５２
【００８４】
（実施例２）
方法２
５−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−エチル−１−ホルミルブチル］チオフェン−２−スルホンアミド
Ａ．（２Ｓ）−３−エチル−２−｛［（１Ｓ）−１−フェニルエチル］アミノ｝ペンタンニトリル
８０ｍＬの１：１ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ中の（Ｓ）−（−）−α−メチルベンジルアミン塩酸塩（１．２ｇ、７．６ｍｍｏｌ）に、シアン化カリウム（０．５ｇ、７．６ｍｍｏｌ）および２−メチルブチルアルデヒド（０．９４ｍＬ、７．６ｍｍｏｌ）を添加した。３０分後に沈殿が形成した。２０時間後、懸濁液をろ過しＨ２Ｏで洗浄して（２Ｓ）−３−エチル−２−｛［（１Ｓ）−１−フェニルエチル］アミノ｝ペンタンニトリルを白色粉末（１．２９ｇ、７４％）として得た。質量スペクトル（＋ＥＳＩ）：３１０（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ１５Ｈ２２Ｎ２についての理論計算値：Ｃ、７８．２１；Ｈ、９．６３；Ｎ、１２．１６、実測値：Ｃ、７７．９０；Ｈ、９．７５；Ｎ、１２．３２
【００８５】
Ｂ．３−エチル−Ｎ２−［（１Ｓ）−１−フェニルエチル］−Ｌ−ノルバリンアミド
０℃の２５ｍＬ硫酸に、少しずつ（２Ｓ）−３−エチル−２−｛［（１Ｓ）−１−フェニルエチル］アミノ｝ペンタンニトリル（２．７ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２５℃に昇温した。２日後、反応混合物を約１００ｇの粉砕した氷に注いだ。濃ＮＨ４ＯＨを添加して酸を中和した。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出し（３ｘ１００ｍＬ）、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過および濃縮して３−エチル−Ｎ２−［（１Ｓ）−１−フェニルエチル］−Ｌ−ノルバリンアミド（２．６ｇ、９０％）を得、これをさらに精製せずに次の工程に用いた。質量スペクトル（＋ＥＳＩ）：２４９（Ｍ＋Ｈ）＋、Ｃ１５Ｈ２４Ｎ２Ｏについての理論計算値：Ｃ、７２．５４；Ｈ、９．７４；Ｎ、１１．２８、実測値：Ｃ、７２．２４；Ｈ、１０．０４；Ｎ、１１．０１
【００８６】
Ｃ．３−エチル−Ｌ−ノルバリンアミド
３−エチル−Ｎ２−［（１Ｓ）−１−フェニルエチル］−Ｌ−ノルバリンアミド（２．６ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）および５％Ｐｄ／Ｃ（８００ｍｇ）の混合物を２４時間Ｐａｒｒ装置でＨ２、３ａｔｍ下で振盪した。混合物をセライト栓でろ過し溶媒を減圧下で除去して３−エチル−Ｌ−ノルバリンアミドを白色固体（１．４ｇ、９３％）として得、これをさらに精製せずに次の反応に用いた。質量スペクトル（＋ＥＳＩ）：１４５（Ｍ＋Ｈ）＋
【００８７】
Ｄ．Ｎ−［（５−クロロ−２−チエニル）スルホニル］−３−エチル−Ｌ−ノルバリン
３−エチル−Ｌ−ノルバリンアミド（１．２ｇ、４．８ｍｍｏｌ）を濃ＨＣｌ（１０ｍＬ）に溶解し１００℃で１６時間加熱した。反応混合物を濃縮してアミノ酸塩酸塩と１当量のＮＨ４Ｃｌからなる白色固体を得、これを次の反応に精製せずに用いた。
【００８８】
アミノ酸塩酸塩と１当量のＮＨ４Ｃｌ（０．２８ｇ、１．１９ｍｍｏｌ）を６ｍＬのＨ２Ｏに溶解し、次いでＮａＯＨ（０．２４ｇ、６．００ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を℃に冷却し、６ｍＬのＴＨＦ中の５−クロロチオフェン−２−塩化スルホニル（０．２９ｇ、１．３２ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を２５℃に昇温した。１９時間後、ＴＨＦを減圧下で除き、残った溶液を１０ｍＬのＨ２Ｏで希釈し、ＥｔＯＡｃ（２ｘ１０ｍＬ）で洗浄した。溶液を１Ｎ  ＨＣｌで酸性にして沈殿を形成させた。これをろ過してＮ−［（５−クロロ−２−チエニル）スルホニル］−３−エチル−Ｌ−ノルバリンを白色固体（０．１７ｇ、４４％）として得た。キラルＨＰＬＣにより、Ｓエナンチオマーのみが存在していることが示された。
【００８９】
５−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−エチル−１−（ヒドロキシメチル）ブチル］−２−チオフェンスルホンアミドおよび５−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−エチル−１−ホルミルブチル］チオフェン−２−スルホンアミドを次ぎに実施例１の方法１に従ってＮ−［（５−クロロ２−チエニル）スルホニル］−３−エチル−Ｌ−ノルバリンから調製した。
【００９０】
（実施例３）
５−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−エチル−１−（ヒドロキシメチル）ブチル］−２−チオフェンスルホンアミド
窒素注入管、機械的スターラーおよびストッパー付きの添加漏斗を備えた３Ｌの３首フラスコに水素化ホウ素リチウム（ＴＨＦ中１４５ｍＬの２Ｍ溶液、０．２９ｍｏｌ）を入れた。溶液を窒素下に置き、０℃に冷却した。クロロトリメチルシラン（７３．８ｍＬ、０．５８ｍｏｌ）を３０分間滴下した。氷浴をのぞき、その結果得られるスラリーを２５℃で３０分間撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、米国仮特許出願第６０／３３９２６４号にしたがって調製した３−エチル−Ｌ−ノルバリン（２１．１ｇ、０．１４５ｍｏｌ）を固体として少しずつ１５分添加した。反応混合物をゆっくりと２５℃に昇温し、氷浴を溶かした。２５℃で３日後、反応混合物を０℃に冷却し、メタノール（２１７ｍＬ）を８０分間注意深く添加した。溶液をさらに４０分間２５℃で撹拌し、水浴中６０℃、減圧下で濃縮した。その結果得られたスラリーを２０％水酸化ナトリウム（３７．５ｍＬ）で塩基性にした。水（３７．５ｍＬ）を添加し、すべての水層をメチレンクロリド（３００ｍＬ）で抽出し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。減圧下で濃縮して３−エチル−Ｌ−ノルバリノールを油（１７．３ｇ、９１％）として得、これをすぐに使用するかあるいはフリーザーで一晩保存した：旋光度［α］Ｄ２５＝−３．７°（１％溶液、ＤＭＳＯ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、５００ｍＨｚ）：δ４．３８（ブロードｓ、１Ｈ）、３．３５（ｄｄ、δ３．３２のブロードｓとオーバーラップ、Ｊ＝４．５、１０．３Ｈｚ、３Ｈ）、３．１４（ｄｄ、Ｊ＝７．９、１０．２Ｈｚ、１Ｈ）、２．６３（ｍ、１Ｈ）、１．４５−１．０５（ｍ、５Ｈ）、０．８２および０．８１（２つのオーバーラップするトリプレット、Ｊ＝７．４Ｈｚ、６Ｈ）；ＭＳ（＋ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］＋、１３２（６０％）
【００９１】
３−エチル−Ｌ−ノルバリノール（３４．１ｇ、０．２６ｍｏｌ）とメチレンクロリド（７００ｍＬ）との混合物をアルゴン下に置き、０℃に冷却した。トリエチルアミン（３６．２ｍＬ、０．２６ｍｏｌ）を添加し、メチレンクロリド（４００ｍＬ）中の５−クロロチオフェン−２−塩化スルホニル（５６．４ｇ、０．２６ｍｏｌ）を滴下した。反応混合物をゆっくりと２５℃に昇温させ、氷浴を溶かした。２５℃で３日後、反応混合物を２つの０．６Ｌ部分に分けた。各部分を酢酸エチル（１Ｌ）で希釈し、飽和リン酸カリウム一水和物（２００ｍＬ）で３回、塩水（２００ｍＬ）で１回洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。減圧下での濃縮により白色固体（７４．５ｇ、９２％）を得た。数連からの生成物（８７．９８ｇ）を一緒にし、熱ヘプタン：酢酸エチル（４：１、７７５ｍＬ）から再結晶させ、標題の化合物を結晶（７４．９ｇ、８５％）として得た：ｍｐ１１５−１１７．６℃；旋光度［α］Ｄ２５＝＋１０．８１°（１％溶液、ＭｅＯＨ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、５００ｍＨｚ）：δ７．７１（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．４４（ｄ、Ｊ＝４．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．２２（ｄ、Ｊ＝４．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．５６（ｔ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、ＯＨ）、３．３１−３．１５（ｍ、３Ｈ）、１．４０−１．１５（ｍ、４Ｈ）、１．０７（ｍ、１Ｈ）、０．７９および０．７６（２つのオーバーラップするトリプレット、Ｊ＝７．３Ｈｚ、６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、１００ｍＨｚ）：δ１４１．７５、１３３．７３、１３０．９５、１２７．６０、６０．４１、５６．８９、４１．５７、２１．３１、２０．８０、１１．７９、１１．５１；ＭＳ（−ＥＳＩ）：［Ｍ−Ｈ］−、１塩素アイソトープパターン、３１０（１００％）、３１２（３０％）；Ｃ１１Ｈ１８ＣｌＮＯ３Ｓ２についての理論計算値：Ｃ、４２．３７、Ｈ、５．８２、Ｎ、４．４９、実測値：Ｃ、４２．３４、Ｈ、５．６５、Ｎ、４．４３、キラルＨＰＬＣ（キラルパックＡＤ、２５ｘ０．４６ｃｍ、溶出液８：２ヘキサン／イソプロパノール（０．１％ＴＦＡ含有）、流速０．５ｍＬ／分、２５４ｎｍでＵＶ検出、保持時間、ＳおよびＲ異性体についてそれぞれ１０．９５分および１１．９５分）によりＳ／Ｒ比が１００．０：０．０であることが明らかになった。
【００９２】
（実施例４）
５−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−エチル−１−（１−ヒドロキシエチル）ブチル］チオフェン−２−スルホンアミド
【化１９】
2005511727.tif 000020
トルエン／ＴＨＦ（７５：２５）中のメチルマグネシウムブロミド（１．４Ｍ、７．０ｍＬ、９．７ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃のＴＨＦ（３０ｍＬ）中の５−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−エチル−１−ホルミルブチル］チオフェン−２−スルホンアミド（実施例１または２、１．０ｇ、３．２ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を２５℃に昇温し、２時間後塩化アンモニウム飽和水溶液（２５ｍＬ）で注意深くクエンチした。混合物をＥｔＯＡｃ（３ｘ２５ｍＬ）で抽出した。有機抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過および濃縮して無色油を得た。生成物をカラムクロマトグラフィー（Biotage）（溶出液：１：４ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）により精製し、５−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−エチル−１−（１−ヒドロキシエチル）ブチル］チオフェン−２−スルホンアミドを白色固体（８７６ｍｇ、８３％）として得た。生成物は比３：７のジアステレオマー混合物であった。ｍｐ９５−９８℃、Ｃ１２Ｈ２０ＣｌＮＯ３Ｓ２についての理論計算値：Ｃ、４４．２３；Ｈ、６．１９；Ｎ、４．３０、実測値：Ｃ、４４．２５；Ｈ、６．３５；Ｎ、４．２９、質量スペクトル（−ＥＳＩ）：３２４（Ｍ−Ｈ）−
【００９３】
（実施例５）
アッセイ条件
Ａ．セミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣ条件：
ユニポイント（Unipoint）ソフトウェアを備えたギルソン（Gilson）セミ分取ＨＰＬＣシステム
カラム：Phenomenex C18 Luna  ２１．６ｍｍｘ６０ｍｍ、５μ
溶媒Ａ：水（０．０２％ＴＦＡバッファー）
溶媒Ｂ：アセトニトリル（０．０２％ＴＦＡバッファー）
溶媒グラジエント：時間０：１０％Ｂ；２．５分：１０％Ｂ；１４分：９０％Ｂ
流速：２２．５ｍＬ／分
生成物ピークをＵＶ吸収に基づいて回収し、濃縮した。
【００９４】
Ｂ．分析ＬＣＭＳ条件：
ケムステーション（ChemStation）ソフトウェアを備えたヒューレットパッカード（Hewlett Packard）１１００ＭＳＤ
カラム：ＹＭＣ  ＯＤＳ−ＡＭ  ２．０ｍｍｘ５０ｍｍ  ５μカラム２３℃；
３μＬ注入；
溶媒Ａ：水（０．０２％ＴＦＡバッファー）
溶媒Ｂ：アセトニトリル（０．０２％ＴＦＡバッファー）
グラジエント：時間０：９５％Ａ；０．３分：９５％Ａ；４．７分：１０％Ａ；４．９分：９５％Ａ
流速１．５ｍＬ／分；
検出：２５４ｎｍ  ＤＡＤ；
ＡＰＩ−ＥＳスキャニングモードポジティブ（Scanning Mode Positive）１５０−７００；フラグメンテーター７０ｍＶ
【００９５】
Ｃ．分析ＬＣＭＳ条件：
ＺＭＤ（Waters）またはプラットフォーム（Platform)(Micromass）またはＬＣＺ（Micromass）
カラム：ゾルバックス（Zorbax）ＳＢ−Ｃ８
溶媒：アセトニトリル＋Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡまたは０．１％ＦＡ含有）
グラジエント：２．５分１５％アセトニトリル−９５％アセトニトリル
流速３ｍｌ／分
検出：ＥＬＳＤ検出（SEDEX 55）
ＵＶ２５３検出（Schimadzu）
【００９６】
（実施例６）
リプレッサー・リリース・アッセイ（ＲＲＡ）
実施例１から４に記載のようにして調製した化合物を公表された方法［Shuey、D.J.、Sheiffele、P.、Jones、D.、Cockett、M.I.、and Quinet、E.M. (1999)、”Repressor release: a useful tool for monitoring amyloid precursor protein (APP) proteolysis in mammalian cells”、Society for Neuroscience Abstracts、Vol. 25、29th Annual Meeting of Society for Neuroscience、Miami Beach、Florida、October 23-28、1999］に従ってＲＲＡにて試験した。簡単に説明すると、このアッセイは以下のように行う。
【００９７】
Ａ．細胞培養
ＣＨＯ−Ｋ１細胞を完全ＤＭＥＭ培地（ＤＭＥＭ−高グルコース、１０％ウシ胎児血清、１％非必須アミノ酸、および１％ペニシリン−ストレプトマイシン含有）で３７℃、５％ＣＯ２で培養する。２００万の細胞をトランスフェクションの２４時間前に１０ｃｍシャーレに播く。
【００９８】
一過性トランスフェクションをリポフェクタミンプラスシステム（Lipofectamine Plus system）を用いてGibco BRLによって推奨されているように行う。まず、６μｇのｐＲＳＶＯ−ｌｕｃおよび６μｇのＡＰＰ−ｌａｃＩコンストラクトＤＮＡを４６０μＬのＯｐｔｉ−Ｍｅｍトランスフェクション培地に添加し、３０μＬのプラス（Plus）試薬とともに１５分間インキュベートする。次いで、４０μＬのリポフェクタミン試薬と４６０μＬのＯｐｔｉ−Ｍｅｍトランスフェクション培地の脂質混合物をＤＮＡ−プラス試薬混合物とともに１５分間インキュベートする。ＤＮＡ−脂質インキュベーションの間に、ＣＨＯ−Ｋ１細胞を１回洗浄し、ペニシリン−ストレプトマイシンを含まない５．０ｍＬのＤＭＥＭ培地に入れる。ＤＮＡ−脂質調製物をこれら細胞の上に層置し、３７℃で一晩インキュベートする。
【００９９】
ウェル（１００μＬ総容量）あたり１５０万のトランスフェクションされた細胞を無菌の、不透明なパッカード（Packard）９６−ウェル培養プレートで新鮮なＤＭＥＭ完全培地（ＤＭＥＭ−フェノールレッド不含）に播き、３７℃で５％ＣＯ２下、３−５時間インキュベートする。
【０１００】
Ｂ．化合物の希釈
化合物を２種類のプロトコールを用いて希釈する；１つのプロトコールは固形の化合物（バイアル中の計量された粉末）についてのものであり、もう１つのプロトコールは溶液（ＤＭＳＯ中２０ｍＭ、９６−ウェルプレート）中の化合物についてのものである。両プロトコールについて、２５ｍＭＨｅｐｅｓおよび２５ｍＭＨｅｐｅｓ／１％ＤＭＳＯを希釈液として用いるために新たに調製する。Ｈｅｐｅｓ／ＤＭＳＯをすべての被験プレートに対して希釈コントロールとして用いる。
【０１０１】
以下の表は、化合物希釈段階を示す（最終段階は組織培養プレートにおける細胞／培地への化合物の添加であることを注意されたい）。
【０１０２】
【表１】
2005511727.tif 000021
【０１０３】
９６−ウェル形式においていくつかの化合物が２０ｍＭに達するので、以下にそれらの希釈プロトコールを示す（かかる化合物の平均分子量を用いて希釈を計算し、上記のように最後の段階は組織培養プレート中の細胞／培地への化合物の添加であることを注意されたい）。
【０１０４】
【表２】
2005511727.tif 000022
【０１０５】
化合物を希釈したら、組織培養プレート（上記のように調製）に二連で細胞に与える。細胞を化合物とともに３７℃で５％ＣＯ２下、さらに３６−４８時間インキュベートする。
【０１０６】
Ｃ．アッセイの測定
ルシフェラーゼアッセイ（ＬｕｃＬｉｔｅ試薬、（Packard））を行い、パッカードトップカウント装置（Packard TopCount instrument）で読みを得る。培地を各９６−ウェルプレートからのぞき、ウェルあたり１００μＬのＰＢＳ（Ｍｇ２＋およびＣａ２＋含有）と混合する。等量（１００μＬ）のＬｕｃＬｉｔｅ溶解／基質バッファーを各ウェルに添加し、プレートを密封し、暗黒化でロータリーシェーカーで室温で１５−３０分間混合する。ルシフェラーゼの読みをトップカウント装置によって得る。測定は相対光ユニット（ＲＬＵ）として表し、以下のようにＭＳエクセル（MS Excel）で計算及び分析する。
【０１０７】
Ｄ．データ分析
ここで例証した化合物に関するアッセイ結果を以下の表に表す。化合物は、少なくとも１．５倍のルシフェラーゼ活性の上昇を２０μｇ／ｍＬにおいてもたらし、シグナルの消失（０．７５倍の上昇以下）によって判断して非毒性である場合、ＲＲＡにおいて活性であるとみなす。「倍」の上昇とは、希釈コントロールと比べたルシフェラーゼ活性の量である（相対光ユニットで測定）。ＳＥＭは倍の上昇の平均の標準誤差を表す（ここでは示さない）。すべての被験化合物は非毒性であることが判明した。
【０１０８】
【表３】
2005511727.tif 000023
【０１０９】
本明細書において引用したすべての文献を引用により本出願に含める。本発明を特定の好適な態様に言及して記載したが、本発明の精神から逸脱することなく改変を行うことができることは明らかであろう。かかる改変は添付の請求の範囲の枠内に含まれると考えられる。
【国際調査報告】
2005511727.tif 000026