(57)【要約】【課題】ポリフェノール、アミノ酸及び水溶性ビタミンからなる群より選ばれる１種以上の成分の良好な吸収性を有するカプセル用組成物及びカプセル剤を提供すること。【解決手段】カプセル用組成物は、外相は油相であり、内相は水相であり、両親媒性物質により形成された閉鎖小胞体を含むＷ／Ｏエマルション型であり、さらに、ポリフェノール、アミノ酸及び水溶性ビタミンからなる群より選ばれる１種以上の成分を含み、前記成分の少なくとも一部が水相に含まれている。カプセル剤は、皮膜と、該皮膜に内包された上記カプセル用組成物と、を備える。皮膜は、ゼラチンを含むことが好ましい。【選択図】図１
2018095634.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
外相は油相であり、内相は水相であり、
両親媒性物質により形成された閉鎖小胞体を含むＷ／Ｏエマルション型であり、
さらに、ポリフェノール、アミノ酸及び水溶性ビタミンからなる群より選ばれる１種以上の成分を含み、
前記成分の少なくとも一部が水相に含まれているカプセル用組成物。
【請求項２】
前記油相に含まれる油が、常温常圧下において固形状態である請求項１に記載のカプセル用組成物。
【請求項３】
皮膜と、該皮膜に内包された請求項１又は２に記載のカプセル用組成物と、を備えるカプセル剤。
【請求項４】
前記皮膜がゼラチンを含む、請求項３に記載のカプセル剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カプセル用組成物及びカプセル剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、カプセル剤としては、ポリフェノール、アミノ酸、水溶性ビタミン等の機能性素材の粉末を油溶性界面活性剤により油中に分散させてから、カプセル化させたものが使用されている。
【０００３】
例えば、特許文献１には、（Ａ）アントシアニン、プロアントシアニジン、プロシアニジン及びカテキンよりなる群から選択される少なくとも１種のポリフェノール、並びに（Ｂ）大豆イソフラボン及び／又はその代謝産物を含む内容物が、ゼラチンを含むカプセル皮膜からなるカプセルに充填されているカプセル剤が開示されている。特許文献１には、上記（Ａ）、（Ｂ）成分を油性基剤中に分散させるために、界面活性剤を用いることが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０１６−０６９３３５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、特許文献１に記載されたようなカプセル剤は、吸収性が未だ十分でなく、改善の余地を有する。
【０００６】
本発明は、以上の実情に鑑みてなされたものであり、ポリフェノール、アミノ酸及び水溶性ビタミンからなる群より選ばれる１種以上の成分の良好な吸収性を有するカプセル用組成物及びカプセル剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、両親媒性物質により形成された閉鎖小胞体を用いて乳化されたＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物が、ポリフェノール、アミノ酸及び／又は水溶性ビタミンの良好な吸収性を有することを見出し、本発明を完成するに至った。具体的に、本発明は以下のものを提供する。
【０００８】
（１）  外相は油相であり、内相は水相であり、
両親媒性物質により形成された閉鎖小胞体を含むＷ／Ｏエマルション型であり、
さらに、ポリフェノール、アミノ酸及び水溶性ビタミンからなる群より選ばれる１種以上の成分を含み、
前記成分の少なくとも一部が水相に含まれているカプセル用組成物。
【０００９】
（２）  前記油相に含まれる油が、常温常圧下において固形状態である（１）に記載のカプセル用組成物。
【００１０】
（３）  皮膜と、該皮膜に内包された（１）又は（２）に記載のカプセル用組成物と、を備えるカプセル剤。
【００１１】
（４）  前記皮膜がゼラチンを含む、（３）に記載のカプセル剤。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、ポリフェノール、アミノ酸及び水溶性ビタミンからなる群より選ばれる１種以上の成分の良好な吸収性を有するカプセル用組成物及びカプセル剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】実施例１のカプセル用組成物を水に添加させた直後、添加から１分後、２分後の写真、及び顕微鏡観察の画像である。
【図２】比較例１のカプセル用組成物を水に添加させた直後、添加から１分後、２分後の写真、及び顕微鏡観察の画像である。
【図３】（ａ）実施例２、比較例２のカプセル用組成物を水に分散させた後の写真、及び、（ｂ）実施例３、比較例３のカプセル用組成物を水に分散させた後の写真である。
【図４】実施例５、比較例５〜８のカプセル用組成物における、細胞に対するアントシアニン透過量を示すグラフである。
【図５】実施例５〜７、比較例９、１０のカプセル用組成物における、細胞に対するアントシアニン透過量を示すグラフである。
【図６】実施例８〜１０、比較例１１〜１３のカプセル用組成物における、細胞に対するテクトリゲニン透過量を示すグラフである。
【図７】実施例５のカプセル用組成物における、４０℃で２ヶ月保管後と保管前の、細胞に対するアントシアニン透過量を示すグラフである。
【図８】実施例５のカプセル用組成物における、４０℃で２ヶ月保管後と保管前の顕微鏡による画像、乳化状態、水分量、水分活性を示す図である。
【図９】実施例５のカプセル用組成物、比較例８のカプセル用組成物及び対照例１のビルベリーエキス水溶液をラットに投与してから２時間及び４時間経過後の、ラットにおけるシアニジン  ３−グルコシドの吸収量を示すグラフである。
【図１０】参考例１、２の乳化状態を表す写真である。
【図１１】２５％リゾレシチン閉鎖小胞体の分散液に精製水を加え混合後、さらにビルベリーエキス末を加えて混合した。上記の混合物を油と混合し得たＷ／Ｏ型乳化物を水と油にそれぞれ投入した液体と、ビルベリーエキス末を水に溶かした水溶液を水と油に投入した液体を上方から撮影した写真である。
【図１２】実施例１１、１２の乳化状態を表す写真である。
【図１３】２５％リゾレシチン閉鎖小胞体の分散液、２０％分別レシチン閉鎖小胞体の分散液、又は２０％ショ糖脂肪酸エステル閉鎖小胞体の分散液に精製水を加え混合後、さらに葛の花エキス末を加え混合した。上記の混合物を油と混合し得たＷ／Ｏ型乳化物を水と油にそれぞれ投入した液体を上方から撮影した写真である。
【図１４】実施例１３及び比較例１４のカプセル用組成物を水に混和させ、ろ過を行った後のろ液を撮影した写真である。
【図１５】実施例１４及び比較例１５のカプセル用組成物を水に混和させ、ろ過を行った後のろ液を撮影した写真である。
【図１６】実施例１４、比較例１５のカプセル用組成物における、細胞に対する総アミノ酸透過量を示すグラフである。
【図１７】実施例１５、比較例１６のカプセル用組成物における、細胞に対する総アミノ酸透過量を示すグラフである。
【図１８】実施例１６、１７、比較例１７のカプセル用組成物における、細胞に対するビタミンＢ１透過量を示すグラフである。
【図１９】実施例１８、比較例１８のカプセル用組成物における、細胞に対するビタミンＢ２透過量を示すグラフである。
【図２０】実施例１９、比較例１９のカプセル用組成物における、細胞に対するビタミンＢ６透過量を示すグラフである。
【図２１】実施例２０、比較例２０のカプセル用組成物における、細胞に対するビタミンＣ透過量を示すグラフである。
【図２２】１０％ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液に黒酢粉末、プレセンタエキス末、又はアミノ酸５種を加えた液を油（サフラワー油）と混合したＷ／Ｏ型乳化物を水と油にそれぞれ滴下後、撮影した写真である。
【図２３】１０％ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液にビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、又はビタミンＣを加えた液を油（サフラワー油）と混合したＷ／Ｏ型乳化物を水と油にそれぞれ滴下後、撮影した写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明の実施形態を説明するが、これらに本発明が限定されるものではない。
【００１５】
＜カプセル用組成物＞
本発明のカプセル用組成物は、外相は油相であり、内相は水相であり、両親媒性物質により形成された閉鎖小胞体を含むＷ／Ｏエマルション型であり、さらに、ポリフェノール、アミノ酸及び水溶性ビタミンからなる群より選ばれる１種以上の成分（以下、「機能性成分」ということがある。）を含み、機能性成分の少なくとも一部が水相に含まれている。これにより、カプセル用組成物は機能性成分の良好な吸収性を有する。本発明において、良好な吸収性を有する理由は、以下のとおりと推測される。
【００１６】
特許文献１に記載されるような機能性素材の粉末を油性界面活性剤により油中に分散させたものをカプセル用組成物とした場合、機能性素材の粉末が油膜に覆われた状態であるため、人体内の水系においては分散、吸収されにくい。またカプセル用組成物が水に接触しても油性界面活性剤が親水性にとぼしいため、水へと移行しにくい。これに対し、本発明の閉鎖小胞体は表面親水性を有するものであり、Ｗ／Ｏ型エマルションを水系に展開したときに、水系に高い分散性を有する。このように水に対する高い分散性を有するために、体内に摂取されたときに水相にある機能性成分を良好に水へと放出することができる。これにより、水中に含まれる機能性成分が効率的に吸収されるためであると推測される。
【００１７】
本発明の「カプセル用組成物」とは、カプセルに充填されるために用いられる組成物のことを指す。
【００１８】
閉鎖小胞体は、表面が親水性の粒子であり、ファンデルワールス力によって水相中の油相との界面に介在することで、乳化状態を維持する。この乳化機構は、閉鎖小胞体による三相乳化機構として公知であり、界面活性剤による乳化機構、すなわち親水性部分及び疎水性部分をそれぞれ水相及び油相に向け、油水界面張力を下げることで乳化状態を維持する乳化機構とは全く異なる（例えば特許３８５５２０３号公報参照）。
【００１９】
ポリフェノールの種類は、特に限定されず、例えば、アントシアニン（シアニジン等）、イソフラボン（テクトリゲニン等）、フラボノール、タンニン、カテキン、ケルセチン等が挙げられる。なお、本発明における「ポリフェノール」とは、同一分子内にフェノール性ヒドロキシ基２つ以上を有する化合物のことを指す。
【００２０】
アミノ酸の種類は、特に限定されず、例えば、アラニン、システイン、アスパラギン酸、グルタミン酸、フェニルアラニン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、リジン、ロイシン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、グルタミン、アルギニン、セリン、トレオニン、バリン、トリプトファン、チロシン、ホモセリン、オルニチン、シトルリン、カルニチン、βアラニン等が挙げられる。使用するアミノ酸としては、合成又は精製したアミノ酸を配合してもよいし、アミノ酸を含む食品（黒酢等）や、植物抽出物（野菜の抽出物、植物発酵エキス等）、動物抽出物（プラセンタエキス等）等を配合してもよい。
【００２１】
水溶性ビタミンの種類は、特に限定されず、例えば、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ３（ナイアシン）、ビタミンＢ５（パントテン酸）、ビタミンＢ６、ビタミンＢ７、ビタミンＢ９（葉酸）、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ等が挙げられる。使用する水溶性ビタミンとしては、合成又は精製した水溶性ビタミンを配合してもよいし、水溶性ビタミンを含む食品（黒酢等）や、植物抽出物（野菜の抽出物、植物発酵エキス等）、動物抽出物（プラセンタエキス等）等を配合してもよい。
【００２２】
機能性成分の含有量は、必要とされる吸収の程度に応じて適宜設定されてよく、特に限定されないが、例えばカプセル用組成物に対し０．００１質量％以上５０質量％以下であってよい。本発明においては、機能性成分の含有量が多くても、Ｗ／Ｏ型エマルションの乳化状態を安定に保つことができ、機能性成分を多量に吸収することができる。
【００２３】
この観点で、ポリフェノールの含有量は、カプセル用組成物に対し０．０１質量％以上、０．１質量％以上、１．０質量％以上、３．０質量％以上、５．０質量％以上、８．０質量％以上であることが好ましい。他方、ポリフェノールの含有量が少ないと、一般に体内への吸収量が少なくなるが、本発明においては、ポリフェノールの吸収性が良好であるため、低量であっても、効率的にポリフェノールを取り込むことができる。この観点から、ポリフェノールの含有量は、カプセル用組成物に対し３０質量％以下、２５質量％以下、２０質量％以下、１５質量％以下、１０質量％以下であることが好ましい。
【００２４】
また、アミノ酸の含有量は、カプセル用組成物に対し０．０１質量％以上、０．１質量％以上、１．０質量％以上、３．０質量％以上、５．０質量％以上、８．０質量％以上であることが好ましい。他方、アミノ酸の含有量が少ないと、一般に体内への吸収量が少なくなるが、本発明においては、アミノ酸の吸収性が良好であるため、低量であっても、効率的にアミノ酸を取り込むことができる。この観点から、アミノ酸の含有量は、カプセル用組成物に対し３０質量％以下、２５質量％以下、２０質量％以下、１５質量％以下、１０質量％以下であることが好ましい。
【００２５】
また、ビタミンＢ（ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ３、ビタミンＢ５、ビタミンＢ６、ビタミンＢ７、ビタミンＢ９、ビタミンＢ１２）の含有量は、カプセル用組成物に対し０．００１質量％以上、０．０１質量％以上、０．１質量％以上、０．３質量％以上、０．５質量％以上、０．８質量％以上であることが好ましい。他方、ビタミンＢの含有量が少ないと、一般に体内への吸収量が少なくなるが、本発明においては、ビタミンＢの吸収性が良好であるため、低量であっても、効率的にビタミンＢを取り込むことができる。この観点から、ビタミンＢの含有量は、カプセル用組成物に対し３質量％以下、２．５質量％以下、２質量％以下、１．５質量％以下、１．０質量％以下であることが好ましい。
【００２６】
また、ビタミンＣの含有量は、カプセル用組成物に対し０．０１質量％以上、０．１質量％以上、１．０質量％以上、３．０質量％以上、５．０質量％以上、８．０質量％以上であることが好ましい。他方、ビタミンＣの含有量が少ないと、一般に体内への吸収量が少なくなるが、本発明においては、ビタミンＣの吸収性が良好であるため、低量であっても、効率的にビタミンＣを取り込むことができる。この観点から、ビタミンＣの含有量は、カプセル用組成物に対し３０質量％以下、２５質量％以下、２０質量％以下、１５質量％以下、１０質量％以下であることが好ましい。
【００２７】
本発明のカプセル用組成物は、機能性成分の少なくとも一部が水相に含まれていればよく、油相にも機能性成分が含まれていてもよい。
【００２８】
例えば、機能性成分が水相に含まれることを確認する方法に特に制限はないが、色をもつ機能性成分の場合、例えば、光学顕微鏡によって水相が着色していることを観察することにより確認することができる。色をもたない機能性成分の場合、例えば、イメージング顕微鏡（島津製作所製「ｉＭＳｃｏｐｅ」等）を用いて確認することができる。具体的には、水相中に含まれる成分をイメージング顕微鏡を用いて質量分析計で測定することで確認することができる。
【００２９】
本発明において水相とは、Ｗ／Ｏエマルションにおける内包された滴状の水のことである。本発明において、閉鎖小胞体が高い乳化能を有するため、水の含有量を、カプセル用組成物に対して、０．１〜５０質量％の範囲の幅広い範囲で選択することができる。他方、本発明のカプセル用組成物においては、水の含有量が少なくても、十分な機能性成分の吸収性を得ることができる。この観点から、水の含有量は、カプセル用組成物に対して、３０質量％以下、２０質量％以下、１０質量％以下、７．０質量％以下、６．０質量％以下、５．０質量％以下、４．０質量％以下であることが好ましい。また、界面活性剤の場合、水分量を多くすると、Ｗ／Ｏエマルションを形成することができず分離する可能性があり、また、内相の水によりカプセルの皮膜が溶解し、カプセル形状が崩れてしまうため、水分量を減らさざるを得ない。これに対し、本発明においては、水分を多く含むことができ、機能性成分を多く水に含ませて使用できる。このことから、例えば、水の含有量はカプセル用組成物に対して０．１質量％以上、０．３質量％以上、０．５質量％以上、０．７質量％以上、１．０質量％以上であってよい。
【００３０】
本発明のカプセル用組成物において水分活性は特に限定されないが、保存状態をよくする観点から、例えば、０．９以下、０．８５以下、０．８以下、０．７５以下、０．７以下であってよい。
【００３１】
本発明において油相とは、Ｗ／Ｏエマルションにおいて水相を内包する油性成分のことである。油相は、カプセル用組成物として用い得る任意の油で構成されてよいが、例えば、油脂、ロウ類、炭化水素油、高級アルコール、シリコーン油、エステル類、脂肪酸等を挙げることができる。油脂としては、サフラワー油、オリーブ油、アボガド油、ツバキ油、タートル油、マカデミアナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、ナタネ油、ゴマ油、パーシック油、ヒマシ油、亜麻仁油、ブドウ種子油、シソの実油、ヒマワリ油、エゴマ油、ゴマ油、パーム油、ヤシ油、チアシード油、ココナツ油、ヘンプ油、魚油、クリルオイル、くるみ油、カシューナッツ油、サチャインチ種子油等が挙げられる。ロウ類としては、ミツロウ、カルナウバロウ、ベイベリーロウ、イボタロウ、鯨ロウ、モンタンロウ、ヌカロウ、カポックロウ、サトウキビロウ等が挙げられる。炭化水素油としては、流動パラフィン、スクワラン、スクワレン、イソパラフィン、流動イソパラフィン、α−オレフィンオリゴマー等が挙げられる。高級アルコールとしては、イソステアリルアルコール等が挙げられる。シリコーン油としては、メチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、オクタメチルシクロテトラシロキサン、デカメチルシクロペンタシロキサン、ドデカメチルシクロヘキサシロキサン等が挙げられる。エステル類としては、例えば、パルミチン酸エチルヘキシル、イソノナン酸イソノニル、イソノナン酸イソトリデシル、ミリスチン酸イソプロピル、ラウリル酸メチルヘプチル、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル、トリエチルヘキサノイン、ジカプリン酸ネオペンチルリコール等が挙げられる。脂肪酸としてはポリヒドロキシステアリン酸等が挙げられる。特に、油相は、吸収性が良好となることから、サフラワー油、亜麻仁油、ブドウ種子油、シソの実油、ヒマワリ油、エゴマ油、オリーブオイルを用いることが好ましい。これら油の成分は、１種単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
【００３２】
油相に含まれる油は、閉鎖小胞体がカプセルの皮膜に付着して水が移行するのを防ぐ観点で、常温常圧下において固形状態であることが好ましい。常温常圧とは、２５℃、１気圧の条件のことを指す。
【００３３】
本発明のカプセル組成物は、任意の成分として、融点の高い油を含んでいてもよい。融点の高い油は保存条件下で粘性が高いため、閉鎖小胞体がカプセルの皮膜に付着して水が移行するのを防ぐ効果が期待できる。この観点で、本発明のカプセル組成物は、融点が−６℃以上の油を含んでいてもよい。他方、本発明のカプセル組成物は、体内で溶けて機能性成分の吸収性が上昇する観点から、融点が７０℃以下の油を含んでいてもよい。融点が−６℃以上７０℃以下である油としては、サフラワー油、ミツロウ等が挙げられる。これらの範囲の融点の油を含まなくとも本発明の効果は得られるが、本発明の効果をより高める観点から、油相に含まれる油の少なくとも１つの油がこれらの範囲の融点を有するものであってもよく、油相に含まれる全ての油がこれらの範囲の融点を有するものであってもよい。なお、油の融点は、融点測定装置等により測定する。
【００３４】
これらの油の含有量は、特に限定されないが、油の量が多くなり、水の量が相対的に少なくなっても吸収性を維持できる点で、カプセル用組成物に対して、１０質量％以上、２０質量％以上、２５質量％以上、３０質量％以上、３５質量％以上、４０質量％以上であることが好ましい。他方、本発明では油の量が少なくとも乳化状態を維持できる点で、上記油性成分の含有量は、カプセル用組成物に対して、９５質量％以下、９０質量％以下、８５質量％以下、８０質量％以下、７５質量％以下であることが好ましい。
【００３５】
水相の平均粒子径は、特に限定されないが、０．０５〜１０μｍであってよく、乳化状態の安定性の観点で０．１〜５μｍであることが好ましい。このような大粒子径の水相を有する安定なＷ／Ｏエマルションは、界面活性剤系では構成するのが困難であるのに対し、本発明では容易に構成し得る。水相の平均粒子径は、エマルションの粘度が十分に低い（必要に応じ、希釈する）状態で、レーザー回折散乱式粒度分布計（島津製作所  ＳＡＬＤ２１００）により測定される。
【００３６】
閉鎖小胞体を形成する両親媒性物質としては、特に限定されないが、リン脂質やリン脂質誘導体を採用してもよい。
【００３７】
リン脂質としては、両親媒性物質におけるリン脂質として卵黄レシチン又は大豆レシチン、分別レシチン、リゾレシチン等のレシチン又はそれを水素化したものを採用してもよい。これらのうち、リゾレシチン、分別レシチンが特に好ましい。
【００３８】
両親媒性物質としては、脂肪酸エステルを用いてもよい。脂肪酸エステルとしては、例えば、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル等の食品用途に適したものを使用することが好ましい。これらのうち、ショ糖脂肪酸エステルが特に好ましい。
【００３９】
ショ糖脂肪酸エステルとしては、例えば、ショ糖ミリスチン酸エステル、ショ糖ステアリン酸エステル、ショ糖パルミチン酸エステル、ショ糖オレイン酸エステル、ショ糖ラウリン酸エステル等が挙げられる。これらのうち、ショ糖ミリスチン酸エステルが特に好ましい。
【００４０】
閉鎖小胞体は、エマルション形成前では平均粒子径８ｎｍ〜８００ｎｍ程度であるが、Ｗ／Ｏエマルション構造においては平均粒子径８ｎｍ〜５００ｎｍ程度である。また、閉鎖小胞体の量は、油相の量に応じて適宜設定されてよく、特に限定されないが、カプセル用組成物に対し合計で０．０００１〜５質量％であってよく、具体的には０．１〜３質量％程度の少量で十分である。
【００４１】
本発明の油相及び水相は、その他、カプセル組成物において使用し得る任意の成分を含んでもよい。
【００４２】
例えば、本発明のカプセル組成物は界面活性剤を含んでもよいが、含まない方が好ましい。界面活性剤を含む場合、カプセル組成物に対して、界面活性剤の含有量が１．０質量％以下、０．１質量％以下、０．０１質量％以下であることが好ましい。
【００４３】
以上のエマルションは、両親媒性物質の二分子膜の層状体を水に分散させ、両親媒性物質により形成された閉鎖小胞体を含む乳化剤分散液を形成する工程と、乳化剤分散液と油性成分とを混合することで、Ｗ／Ｏエマルションを形成する工程と、を有する方法により製造される。
【００４４】
また、閉鎖小胞体を十分に形成することで、大きい粒子径を有する水滴が得られやすくなる。このような方法としては、上記の両親媒性物質を分散媒（つまり水）中に添加して撹拌する。
【００４５】
本発明のカプセル用組成物は、ハードカプセル、ソフトカプセルのいずれに用いてもよいが、吸収性に優れることからソフトカプセルに適している。
【００４６】
＜カプセル剤＞
本発明は、皮膜と、該皮膜に内包された上述のカプセル用組成物と、を備えるカプセル剤を包含する。
【００４７】
皮膜を構成する成分としては、カプセル剤として用いられているものを用いることができる。例えば、カプセル剤の皮膜を構成する主成分としては、水溶性の皮膜成分であることが好ましい。水溶性の皮膜成分としては、ゼラチン、プルラン等が挙げられる。また、主成分にグリセリン、水、デンプン等を加えて皮膜を構成してもよい。これらのうち、主成分としての皮膜は、水溶性であるにもかかわらず、カプセル用組成物中の水が移行しにくく、皮膜の形状を保つことができることから、ゼラチンが好ましい。
【００４８】
本発明のカプセル剤の種類は特に限定されず、例えば、ハードカプセル剤、ソフトカプセル剤のいずれでもあってもよい。
【００４９】
皮膜の膜厚は、例えば、０．１〜１．０ｍｍ（０．２〜０．８ｍｍ）（皮膜乾燥後）としてよい。
【００５０】
皮膜には、上記の成分の他、着色剤、保存剤、香料等を配合してもよく、皮膜上にワックス、糖衣、セラック、金、銀箔等をコーティングしてもよい。
【００５１】
本発明のカプセル剤は、常法に従って製造することができる。例えば、ロータリー式カプセル充填機を用いて充填内容物をゼラチンシートに噴射し、ゼラチンシートを打ち抜き成型し、乾燥することにより製造することができる。
【実施例】
【００５２】
以下、ポリフェノールとして、ビルベリーエキス末又は葛の花エキス末を含むカプセル用組成物を調製した例について説明する。
【００５３】
＜実施例１＞
リゾレシチン（ＳＬＰ−ホワイトリゾ（辻製油株式会社製））を精製水に溶解させた溶液（以下、「リゾレシチンの溶液」と略す）から２５％リゾレシチンの閉鎖小胞体の分散液を調製した。２５％リゾレシチンの閉鎖小胞体の分散液に精製水とビルベリーエキス末（アントシアニン３７％含有）を投入して混合し、調合液を得た。次いで、サフラワー油をホモミキサーで撹拌しながら調合液を徐々に加え（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）、実施例１のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【００５４】
＜比較例１＞
サフラワー油にリゾレシチン粉末（ＳＬＰ−ホワイトリゾ（辻製油株式会社製））、ビルベリーエキス末（アントシアニン３７％含有）を投入してからホモミキサーで撹拌（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、比較例１のカプセル用組成物を調製した。
【００５５】
実施例１及び比較例１における各成分の配合量を表１に示す。
【００５６】
【表１】
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【００５７】
＜分散性試験１＞
製造した実施例１、比較例１のカプセル用組成物を水に添加し、分散性を評価した。具体的には、まず、５０ｍＬビーカーに室温の超純水を４５ｍＬ入れ、その上にそれぞれのカプセル用組成物サンプルを５ｍＬ添加した。添加後、添加から１、２、５分後の様子を写真撮影した。
【００５８】
実施例１のカプセル用組成物の添加直後、添加から１分後、２分後の写真、及び顕微鏡観察の画像を図１に示す。比較例１のカプセル用組成物の添加直後、添加から１分後、２分後の写真、及び顕微鏡観察の画像を図２に示す。図１、図２の比較からわかるように、三相乳化を用いて製造された実施例１のカプセル用組成物の方が、分散性が高かった。
【００５９】
＜実施例２＞
リゾレシチン（ＳＬＰ−ホワイトリゾ（辻製油株式会社製））の溶液から２５％リゾレシチンの閉鎖小胞体の分散液を調製した。２５％リゾレシチンの閉鎖小胞体の分散液に精製水と葛の花エキス末（イソフラボンとして、テクトリジン、テクトリゲニン、テクトリゲニン７−Ｏ−キシロシルグルコシドを合計１４．８％含む）を投入し、混合して調合液を得た。サフラワー油をホモミキサーで撹拌しながら調合液を徐々に投入（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、実施例２のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【００６０】
＜実施例３＞
ショ糖脂肪酸エステル（Ｍ−１６９５（三菱化学フーズ株式会社製））を精製水に溶解させた溶液（以下、「ショ糖脂肪酸エステルの溶液」と略す）から２５％ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液を調製した。２５％ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液に精製水と葛の花エキス末を投入し、混合して調合液を得た。サフラワー油をホモミキサーで撹拌しながら調合液を徐々に投入（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、実施例３のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【００６１】
＜実施例４＞
分別レシチン（ＳＬＰ−ＰＩパウダーＡ（辻製油株式会社製））の溶液から２０％分別レシチンの閉鎖小胞体の分散液を調製した。２０％分別レシチンの閉鎖小胞体の分散液に精製水と葛の花エキス末を投入し、混合して調合液を得た。サフラワー油をホモミキサーで撹拌しながら調合液を徐々に投入（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、実施例４のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【００６２】
＜比較例２＞
サフラワー油にリゾレシチン粉末（ＳＬＰ−ホワイトリゾ（辻製油株式会社製））、葛の花エキス末を投入しホモミキサーで撹拌（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、比較例２のカプセル用組成物を調製した。
【００６３】
＜比較例３＞
サフラワー油にショ糖脂肪酸エステル粉末（Ｍ−１６９５（三菱化学フーズ株式会社製））、葛の花エキス末を投入しホモミキサーで撹拌（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、比較例３のカプセル用組成物を調製した。
【００６４】
＜比較例４＞
サフラワー油に分別レシチン粉末（ＳＬＰ−ＰＩパウダーＡ（辻製油株式会社製））、葛の花エキス末を投入しホモミキサーで撹拌（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、比較例４のカプセル用組成物を調製した。
【００６５】
実施例２〜４及び比較例２〜４における各成分の配合量を表２に示す。
【００６６】
【表２】
2018095634.tif 000004
【００６７】
＜分散性試験２＞
製造した実施例２〜４、比較例２〜４のカプセル用組成物について、上述の「分散性試験１」と同様の方法により、分散性を評価した。その結果、三相乳化を用いて製造された実施例２〜４のカプセル用組成物の方が、比較例２〜４より分散性が高かった。これらのうち、実施例２と比較例２、実施例３と比較例３の分散性を比較した写真を図３に示す。図３は、それぞれのカプセル用組成物を水に添加してから、２分後の写真を示す。
【００６８】
＜実施例５＞
リゾレシチン（ＳＬＰ−ホワイトリゾ（辻製油株式会社製））の溶液から２５％リゾレシチンの閉鎖小胞体の分散液を調製した。他方、サフラワー油にミツロウを投入し、７０℃まで昇温した。ミツロウが完全に溶解した後に４０℃まで冷却し、調合液ａを得た。また、ビルベリーエキス末に精製水、リゾレシチンの閉鎖小胞体の分散液を加え混合し、閉鎖小胞体の調合液ｂを得た。調合液ａをホモミキサーで撹拌しながら、調合液ｂを徐々に投入（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、実施例５のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【００６９】
＜実施例６＞
２５％リゾレシチンの閉鎖小胞体の分散液を２５％分別レシチン（ＳＬＰ−ＰＩパウダーＡ（辻製油株式会社製））の閉鎖小胞体の分散液に変更した点以外、実施例５と同様の手順で実施例６のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【００７０】
＜実施例７＞
２５％リゾレシチンの閉鎖小胞体の分散液を２５％ショ糖脂肪酸エステル（Ｍ−１６９５（三菱化学フーズ株式会社製））の閉鎖小胞体の分散液に変更した点以外、実施例５と同様の手順で実施例７のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【００７１】
＜比較例５〜７＞
比較例のカプセル用組成物として、他社品Ａ（ビルベリーエキス末５１％含有）（比較例５）、他社品Ｂ（ビルベリーエキス末５０％含有）（比較例６）、他社品Ｃ（ビルベリーエキス末４０％含有）（比較例７）を準備した。
【００７２】
＜比較例８＞
サフラワー油にミツロウ、リゾレシチン粉末（ＳＬＰ−ホワイトリゾ（辻製油株式会社製））を投入し、７０℃まで昇温し、ミツロウが完全に溶解した後に４０℃まで冷却し、調合液を得た。該調合液をホモミキサーで撹拌しながらビルベリーエキス末を投入（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、比較例８のカプセル用組成物を調製した。
【００７３】
＜比較例９＞
リゾレシチン粉末（ＳＬＰ−ホワイトリゾ（辻製油株式会社製））をグリセリン脂肪酸エステル（ポエムＳ−１００（理研ビタミン株式会社製））に変更した点以外は、比較例８と同様の手順で、比較例９のカプセル用組成物を調製した。
【００７４】
＜比較例１０＞
サフラワー油にミツロウ、油溶性界面活性剤としてショ糖脂肪酸エステル（Ｓ−３７０Ｆ（三菱化学フーズ株式会社製））を投入し、７０℃まで昇温した後、ミツロウが完全に溶解した後に４０℃まで冷却し、混合液ｃを得た。他方、ビルベリーエキス末に精製水、混合し、混合液ｄを得た。調合液ｃをホモミキサーで撹拌しながら、調合液ｄを徐々に投入（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、比較例１０のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【００７５】
実施例５〜７及び比較例８〜１０における各成分の配合量を表３〜４に示す。
【００７６】
【表３】
2018095634.tif 000005
【００７７】
【表４】
2018095634.tif 000006
【００７８】
＜細胞試験１＞
実施例５、比較例５〜８のカプセル用組成物について、細胞に対するアントシアニン透過量を評価した。
【００７９】
具体的には、Ｃａｃｏ−２  ｐ２６（ヒト結腸癌由来細胞）を細胞数４．０ｘ１０４個で２４ｗｅｌｌ  ｐｌａｔｅ用ｉｎｓｅｒｔ  ｗｅｌｌへ播種し、１０−１４日間培養培地（ＤＭＥＭ、１０％  ＦＢＳ、１％ｎｏｎｅｓｓｅｎｔｉａｌ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄ）で培養した。培養後、ＨＢＳＳ−ＨＥＰＥＳ  ｂｕｆｆｅｒ（Ｈａｎｋｓ  ｂａｌａｎｃｅｄ  ｓａｌｔ  ｓｏｌｕｓｉｏｎ、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ）により培地を置換し、１５分間馴化させた。馴化後、実施例５、比較例５〜８のそれぞれのカプセル用組成物をＨＢＳＳ−ＨＥＰＥＳ  ｂｕｆｆｅｒで１０００倍希釈したサンプル１００μＬをｉｎｓｅｒｔ  ｗｅｌｌのａｐｉｃａｌ  ｓｉｄｅへ添加し、６時間培養した。６時間後、ｂａｓａｌ  ｓｉｄｅのｂｕｆｆｅｒを回収し、遠心エバポレーター（ＴＯＭＹ製）で完全に乾燥させた。乾燥後１００μＬの水で溶解し、さらに１００μＬの２Ｍ  クエン酸を加え、溶液を５２０ｎｍの吸光度を測定することでアントシアニン濃度（シアニジン量として）を計測した。その結果を図４に示す。
【００８０】
図４に示すように、三相乳化を用いた実施例５のカプセル用組成物は、比較例５〜８より高いアントシアニンの細胞透過性を有することがわかった。
【００８１】
＜細胞試験２＞
細胞試験１と同様の手順で、実施例５〜７、比較例９、１０について、アントシアニン（シアニジン量として）の細胞に対する透過量を調べた。その結果を図５に示す。
【００８２】
図５に示すように、分別レシチン閉鎖小胞体を用いた実施例６、ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体を用いた実施例７においても、比較例９、１０よりアントシアニンの細胞透過性が高いことがわかり、特に、比較例１０のような界面活性剤乳化を用いたＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物よりアントシアニンの細胞透過性が高いことがわかった。
【００８３】
＜実施例８＞
リゾレシチン（ＳＬＰ−ホワイトリゾ（辻製油株式会社製））の溶液から２５％リゾレシチンの閉鎖小胞体の分散液を調製した。他方、サフラワー油にミツロウを投入し、７０℃まで昇温した。ミツロウが完全に溶解した後に４０℃まで冷却し、調合液ｅを得た。また、葛の花エキス末に精製水、リゾレシチンの閉鎖小胞体の分散液を加え混合し、閉鎖小胞体の調合液ｆを得た。調合液ｅをホモミキサーで撹拌しながら、調合液ｆを徐々に投入（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、実施例８のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【００８４】
＜実施例９＞
２５％リゾレシチンの閉鎖小胞体の分散液を２５％分別レシチン（ＳＬＰ−ＰＩパウダーＡ（辻製油株式会社製））の閉鎖小胞体の分散液に変更した点以外、実施例８と同様の手順で実施例９のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【００８５】
＜実施例１０＞
２５％リゾレシチンの閉鎖小胞体の分散液を２５％ショ糖脂肪酸エステル（Ｍ−１６９５（三菱化学フーズ株式会社製））の閉鎖小胞体の分散液に変更した点以外、実施例８と同様の手順で実施例１０のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【００８６】
＜比較例１１＞
サフラワー油にミツロウ、リゾレシチン粉末（ＳＬＰ−ホワイトリゾ（辻製油株式会社製））を投入し、７０℃まで昇温し、ミツロウが完全に溶解した後に４０℃まで冷却し、調合液を得た。該調合液をホモミキサーで撹拌しながら葛の花エキス末を投入（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、比較例１１のカプセル用組成物を調製した。
【００８７】
＜比較例１２＞
リゾレシチン粉末（ＳＬＰ−ホワイトリゾ（辻製油株式会社製））を分別レシチン粉末（ＳＬＰ−ＰＩパウダーＡ（辻製油株式会社製））に変更した点以外は、比較例１１と同様の手順で、比較例１２のカプセル用組成物を調製した。
【００８８】
＜比較例１３＞
リゾレシチン粉末（ＳＬＰ−ホワイトリゾ（辻製油株式会社製））をショ糖脂肪酸エステル粉末（Ｍ−１６９５（三菱化学フーズ株式会社製））に変更した点以外は、比較例１１と同様の手順で、比較例１３のカプセル用組成物を調製した。
【００８９】
実施例８〜１０及び比較例１１〜１３における各成分の配合量を表５、６に示す。
【００９０】
【表５】
2018095634.tif 000007
【００９１】
【表６】
2018095634.tif 000008
【００９２】
＜細胞試験３＞
細胞試験１と同様の手順で、実施例８〜１０及び比較例１１〜１３について、テクトリゲニンの細胞に対する透過量を調べた。その結果を図６に示す。
【００９３】
図６に示すように、三相乳化を用いた実施例８〜１０は、比較例１１〜１３よりテクトリゲニンの細胞透過性が高かった。この結果より、三相乳化を用いることで、葛の花エキス末を用いた場合でも、細胞透過性が高くなることがわかった。
【００９４】
＜カプセルの製造＞
実施例５のカプセル用組成物から、カプセルを製造した。具体的には、ゼラチン１００質量部にグリセリン３０〜４０質量部、水８０〜９０質量部を加えて８０℃に加温し、撹拌溶解してゼラチン溶液を調製し、ロータリー式カプセル充填機を用いて充填内容物をゼラチンシートに噴射し、ゼラチンシートを打ち抜き成型し、乾燥することにより製造した。
【００９５】
＜細胞試験４＞
実施例５のカプセルを用いて、水分活性の違いによるアントシアニンの細胞透過性の変化を調べた。具体的には、実施例５のカプセルについて、４０℃で２ヶ月保管し、保管前と保管後における水分量、水分活性の変化に対して、アントシアニンの細胞透過性がどのように変化するかを調べた。細胞透過性の変化は、細胞試験１で述べた方法と同様の手順で行った。また、保管前後の乳化状態、水分量、水分活性を測定し、さらに顕微鏡による観察も行った。その結果を図７、８に示す。図７、８中、「０Ｍ」は、保管前の実施例５のカプセルを指し、「４０℃、２Ｍ」は、４０℃で２ヶ月保管後の実施例５のカプセルを指す。図７、８に示すように、水分活性が２ヶ月後に低下しているにもかかわらず、アントシアニンであるシアニジンの細胞透過性はほぼ変わらず、乳化状態も維持されていた。この結果より、水分活性（水分量）が低下しても、吸収性は維持されることがわかった。
【００９６】
＜動物試験＞
実施例５のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物、比較例８のカプセル用組成物に加え、対照例１としてビルベリーエキス水溶液を準備し、これらについてラットに対するアントシアニン（シアニジン量として）の細胞透過性を評価した。
【００９７】
まず、１１週齢の雄性ＳＤラットを１６時間以上絶食した。次いで、平均体重値が均一となるように、３群に群分けした（ビルベリーエキス水溶液：ｎ＝２、三相乳化製法：ｎ＝４、従来製法：ｎ＝４）。また、各被験物質中に含まれるビルベリーエキス濃度が２００ｍｇ／ｍＬとなるようにサフラワー油にて希釈後、１０ｍＬ／ｋｇにて強制経口投与した。投与２時間後及び４時間後に尾静脈より採血を行い、得られた血液を室温で３０分以上静置した後、遠心分離（室温、５分、１２，０００ｒｐｍ；センテック３２００、株式会社久保田製作所）し、血清を採取した。血清の採取後、固相抽出カラム（Ｓｅｐ−Ｐａｋ  Ｃ１８  Ｐｌｕｓ  Ｌｉｇｈｔ  Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ；日本ウォーターズ株式会社）を用いて血清中の夾雑物を除去後、ＨＰＬＣ／ＭＳ（ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ  １２６０  Ｉｎｆｉｎｉｔｙ  ＬＣ；アジレント・テクノロジー株式会社、ＭＳＤ：Ａｇｉｌｅｎｔ  ６１２０  Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ  Ｓｙｓｔｅｍ；アジレント・テクノロジー株式会社）を用いて血清中アントシアニン量（Ｃｙａｎｉｄｉｎ  ３−Ｏ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）を測定した。その結果を図９に示す。
【００９８】
図９に示すように、投与後２時間及び４時間のいずれにおいても、比較例８より三相乳化を利用した実施例５の方が、シアニジンの吸収性が高いことがわかった。
【００９９】
＜三相乳化能の確認１＞
（参考例１）
ビルベリーエキス末を含まない以外は実施例１と同様の手順で、下記の表７の処方のとおりに参考例１のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【０１００】
（参考例２）
ミツロウ及びビルベリーエキス末を用いない以外は、比較例１０と同様の手順で下記の表７の処方のとおりに参考例２のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【０１０１】
【表７】
2018095634.tif 000009
【０１０２】
図１０に示すように、サフラワー油で２０倍希釈した後に、参考例１では乳化状態が維持されていたのに対し、参考例２では乳化状態が維持されていなかった。この結果より、リゾレシチン閉鎖小胞体を用いることで三相乳化が実現されていることが確認できた。
【０１０３】
＜Ｗ／Ｏ型エマルションの確認１＞
２５％リゾレシチン閉鎖小胞体の分散液に精製水を加え混合後、さらにビルベリーエキス末を加え、混合した。上記の混合物を油（サフラワー油）と混合しＷ／Ｏ型乳化物を得た。これを水と油にそれぞれ投入した。他方、ビルベリーエキス末を水に溶かした水溶液を水と油（サフラワー油）にそれぞれ投入した。その結果を図１１に示す。図１１中、上段は、２５％リゾレシチン閉鎖小胞体の分散液に精製水、ビルベリーエキス末を加えて、混合後、この混合物を油と混合し得たＷ／Ｏ型乳化物を水と油にそれぞれ投入した液体についての写真であり、下段は、ビルベリーエキス末のみを水又は油に投入した液体についての写真である。図１１に示すように、２５％リゾレシチン閉鎖小胞体の分散液を用いたものでは、油中に分散できていることから、Ｗ／Ｏ型エマルションが形成されていることが確認できた。
【０１０４】
＜三相乳化能の確認２＞
（実施例１１）
ビルベリーエキス末を葛の花エキス末に変更し、かつ、２５％リゾレシチン閉鎖小胞体の分散液を２０％分別レシチン閉鎖小胞体の分散液に変更した点以外は、実施例１と同様の手順で、下記の表８の処方のとおりに実施例１１のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【０１０５】
（実施例１２）
２０％分別レシチン閉鎖小胞体の分散液を２０％ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液に変更した点以外は、実施例１１と同様の手順で、下記の表８の処方のとおりに実施例１２のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【表８】
2018095634.tif 000010
【０１０６】
図１２に示すように、サフラワー油で８０倍希釈した後に、実施例１１、１２においてともに乳化状態が維持されていた。この結果より、希釈しても三相乳化により安定に乳化されていることが確認できた。
【０１０７】
＜Ｗ／Ｏ型エマルションの確認２＞
２５％リゾレシチン閉鎖小胞体の分散液、２０％分別レシチン閉鎖小胞体の分散液、又は２０％ショ糖脂肪酸エステル閉鎖小胞体の分散液に葛の花エキス末を加え、混合した。上記の混合物を油（サフラワー油）と混合しＷ／Ｏ型乳化物を得た。これを水と油にそれぞれ投入した。その結果を図１３に示す。図１３に示すように、２５％リゾレシチン閉鎖小胞体の分散液、２０％分別レシチン閉鎖小胞体の分散液、又は２０％ショ糖脂肪酸エステル閉鎖小胞体の分散液を用いたものでは、油中に分散できていることから、葛の花エキス末を水相に含んだ状態においてもＷ／Ｏ型エマルションが形成されていることが確認できた。
【０１０８】
以下、黒酢粉末、プラセンタエキス末、又はこれらに含まれるアミノ酸及び水溶性ビタミンを含むカプセル用組成物を調製した例について説明する。
【０１０９】
＜実施例１３＞
ショ糖脂肪酸エステル（Ｍ−１６９５（三菱化学フーズ株式会社製））の溶液から１０％ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液を調製した。他方、サフラワー油にミツロウを投入し、７０℃まで昇温した。ミツロウが完全に溶解した後に４０℃まで冷却し、調合液ｇを得た。また、黒酢粉末（井村屋シーズニング株式会社製）に精製水、ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液を加え混合し、閉鎖小胞体の調合液ｈを得た。調合液ｇをホモミキサーで撹拌しながら、調合液ｈを徐々に投入（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、実施例１３のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【０１１０】
＜実施例１４＞
ショ糖脂肪酸エステル（Ｍ−１６９５（三菱化学フーズ株式会社製））の溶液から１０％ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液を調製した。他方、サフラワー油にミツロウを投入し、７０℃まで昇温した。ミツロウが完全に溶解した後に４０℃まで冷却し、調合液ｇを得た。また、プラセンタエキス末（株式会社公知貿易製）に精製水、ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液を加え混合し、閉鎖小胞体の調合液ｉを得た。調合液ｇをホモミキサーで撹拌しながら、調合液ｉを徐々に投入（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、実施例１４のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【０１１１】
＜比較例１４＞
サフラワー油にミツロウ、グリセリン脂肪酸エステル（ポエムＳ−１００（理研ビタミン株式会社製））を投入し、７０℃まで昇温し、ミツロウが完全に溶解した後に４０℃まで冷却し、調合液を得た。該調合液をホモミキサーで撹拌しながら黒酢粉末（井村屋シーズニング株式会社製）を投入（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、比較例１４のカプセル用組成物を調製した。
【０１１２】
＜比較例１５＞
サフラワー油にミツロウ、グリセリン脂肪酸エステル（ポエムＳ−１００（理研ビタミン株式会社製））を投入し、７０℃まで昇温し、ミツロウが完全に溶解した後に４０℃まで冷却し、調合液を得た。該調合液をホモミキサーで撹拌しながらプラセンタエキス末（株式会社公知貿易製）を投入（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、比較例１５のカプセル用組成物を調製した。
【０１１３】
実施例１３、１４、及び比較例１４、１５における各成分の配合量を表９に示す。
【０１１４】
【表９】
2018095634.tif 000011
【０１１５】
＜分散性試験３＞
製造した実施例１３、１４、及び比較例１４、１５のカプセル用組成物５ｇをチューブに分注し、４０℃の水２０ｍＬを入れて、２０回転倒混和を行った。そして、ろ過を行い、ろ液の色の濃淡を目視で観察した。実施例１３及び比較例１４のろ過液の写真を図１４に示す。実施例１４及び比較例１５のろ過液の写真を図１５に示す。
【０１１６】
図１４に示すように、三相乳化を用いて製造された実施例１３のカプセル組成物では、ろ液が原料の黒酢粉末と同等の色を呈し、比較例１４のカプセル組成物に比べ分散性が高いことがわかった。同様に、図１５の結果に示すように、三相乳化を用いて製造された実施例１４のカプセル組成物では、ろ液が原料のプラセンタエキス末と同等の色を呈し、比較例１５のカプセル組成物に比べ分散性が高いことがわかった。
【０１１７】
＜実施例１５＞
本実施例では、黒酢に特徴的な５種のアミノ酸粉末（アスパラギン酸、グルタミン酸、アラニン、アルギニン、プロリン）を各２％（計１０％）ずつ用いて、細胞試験５を行った。なお、アスパラギン酸及びグルタミン酸は、水に難溶であるため、ナトリウム塩を使用した。
【０１１８】
具体的には、ショ糖脂肪酸エステル（Ｍ−１６９５（三菱化学フーズ株式会社製））の溶液から１０％ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液を調製した。他方、サフラワー油にミツロウを投入し、７０℃まで昇温した。ミツロウが完全に溶解した後に４０℃まで冷却し、調合液ｇを得た。また、５種のアミノ酸粉末に精製水、ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液を加え混合し、閉鎖小胞体の調合液ｊを得た。調合液ｇをホモミキサーで撹拌しながら、調合液ｊを徐々に投入（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、実施例１５のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【０１１９】
＜実施例１６、１８〜２０＞
本実施例では、代表的な水溶性ビタミンである、ビタミンＢ１（チアミン塩酸塩）、ビタミンＢ２（リボフラビンリン酸エステルナトリウム）、ビタミンＢ６（ピリドキシン塩酸塩）、ビタミンＣ（アスコルビン酸ナトリウム）をそれぞれ溶解性に合わせて配合割合を調整して用いた。
【０１２０】
具体的には、ショ糖脂肪酸エステル（Ｍ−１６９５（三菱化学フーズ株式会社製））の溶液から１０％ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液を調製した。他方、サフラワー油にミツロウを投入し、７０℃まで昇温した。ミツロウが完全に溶解した後に４０℃まで冷却し、調合液ｇを得た。また、それぞれの水溶性ビタミン（ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＣ）に精製水、ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液を加え混合し、閉鎖小胞体の調合液ｋ１〜ｋ４を得た。調合液ｇをホモミキサーで撹拌しながら、調合液ｋ１〜ｋ４を徐々に投入（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、実施例１６、１８〜２０のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【０１２１】
＜実施例１７＞
ショ糖脂肪酸エステル（Ｍ−１６９５（三菱化学フーズ株式会社製））の溶液から１０％ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液を調製した。１０％ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液に精製水とビタミンＢ１（チアミン塩酸塩）を投入して混合し、調合液を得た。次いで、サフラワー油をホモミキサーで撹拌しながら調合液を徐々に加え（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）、実施例１７のＷ／Ｏエマルション型のカプセル用組成物を調製した。
【０１２２】
＜比較例１６＞
サフラワー油にミツロウ、グリセリン脂肪酸エステル（ポエムＳ−１００（理研ビタミン株式会社製））を投入し、７０℃まで昇温し、ミツロウが完全に溶解した後に４０℃まで冷却し、調合液を得た。該調合液をホモミキサーで撹拌しながら、５種のアミノ酸粉末（アスパラギン酸、グルタミン酸、アラニン、アルギニン、プロリン）を各２％（計１０％）を投入（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、比較例１６のカプセル用組成物を調製した。
【０１２３】
＜比較例１７〜２０＞
サフラワー油にミツロウ、グリセリン脂肪酸エステル（ポエムＳ−１００（理研ビタミン株式会社製））を投入し、７０℃まで昇温し、ミツロウが完全に溶解した後に４０℃まで冷却し、調合液を得た。該調合液をホモミキサーで撹拌しながら、水溶性ビタミン（ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＣ）をそれぞれ投入（５，０００ｒｐｍ  １０ｍｉｎ）し、比較例１７〜２０のカプセル用組成物を調製した。
【０１２４】
実施例１５〜２０、及び比較例１６〜２０における各成分の配合量を表１０〜１２に示す。
【０１２５】
【表１０】
2018095634.tif 000012
【０１２６】
【表１１】
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【０１２７】
【表１２】
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【０１２８】
＜細胞試験５＞
実施例１４〜２０、比較例１５〜２０のカプセル用組成物について、上述した細胞試験１と同様に細胞試験５を行って、細胞に対する総アミノ酸と各水溶性ビタミンの透過量を評価した。
【０１２９】
具体的には、Ｃａｃｏ−２（ヒト結腸癌由来細胞）を細胞数４．０×１０４個で２４ｗｅｌｌ  ｐｌａｔｅ用ｉｎｓｅｒｔ  ｗｅｌｌへ播種し、約１４日間培養培地（ＤＭＥＭ、１０％ＦＢＳ、１％ｎｏｎｅｓｓｅｎｔｉａｌ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄ）で培養した。培養後、ＨＢＳＳ−ＨＥＰＥＳ  ｂｕｆｆｅｒ（Ｈａｎｋｓ  ｂａｌａｎｃｅｄ  ｓａｌｔ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ）により培地を置換し、３０分間馴化させた。馴化後、実施例１４〜２０、比較例１５〜２０のそれぞれのカプセル用組成物をＨＢＳＳ−ＨＥＰＥＳ  ｂｕｆｆｅｒで適宜希釈したサンプル１００μＬをｉｎｓｅｒｔ  ｗｅｌｌのａｐｉｃａｌ  ｓｉｄｅへ添加し、約３時間培養した。培養後、ｂａｓａｌ  ｓｉｄｅのｂｕｆｆｅｒを回収し、適宜遠心エバポレーター（ＴＯＭＹ製）で濃縮もしくはｂｕｆｆｅｒで希釈した後、Ｌ−Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄ  Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（ＢｉｏＶｉｓｉｏｎ社製）、ＶｉｔａＦａｓｔビタミンＢ１（チアミン）キット（アヅマックス株式会社製）、ＶｉｔａＦａｓｔビタミンＢ２（リボフラビン）キット（アヅマックス株式会社製）、ＶｉｔａＦａｓｔビタミンＢ６（ピリドキシン）キット（アヅマックス株式会社製）、ビタミンＣ定量キット（株式会社シマ研究所製）を用いて、アミノ酸濃度及び各ビタミン濃度を測定した。その結果を図１６〜２１に示す。
【０１３０】
図１６〜２１に示されるように、三相乳化を用いた実施例１４〜２０のカプセル用組成物は、比較例１５〜２０より高い、アミノ酸、又は水溶性ビタミン（ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＣ）の細胞透過性を有し、良好な吸収性を得られることがわかった。また、実施例１６と実施例１７との比較から、ミツロウの有無は、細胞透過性には影響をしないことが確認された。
【０１３１】
＜Ｗ／Ｏ型エマルションの確認３＞
１０％ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液に精製水を加え混合後、さらに黒酢粉末、プラセンタエキス末、アミノ酸５種、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＣを、下記の表１３の処方のとおりに加え、混合した。そして、各混合物を油（サフラワー油）と混合しＷ／Ｏ型乳化物を得た。これを水と油にそれぞれ投入した。その結果を図２２、２３に示す。
【０１３２】
【表１３】
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【０１３３】
図２２、２３に示すように、１０％ショ糖脂肪酸エステルの閉鎖小胞体の分散液を用いた実施例２１〜２７では、いずれも水中では水と分離し、油中では均一に拡散できていることから、黒酢粉末、プラセンタエキス末、アミノ酸５種、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＣを水相に含んだ状態においてもＷ／Ｏ型エマルションが形成されていることが確認できた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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