(57)【要約】本発明は、式：ＸＦＧを有する多糖構造、又は誘導体構造を含む化合物の、非生物的ストレスに対する植物の適応、開花及び結実の制御、並びに病原体に対する防御反応の誘導に関わる使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
−  １つ又は２つのＸ鎖、即ち、α−Ｄ−キシロピラノシル（１，６）−β−Ｄ−グルコピラノシル若しくはα−Ｄ−キシロピラノシル（１，６）−Ｄ−グルコピラノース、又はβ−Ｄ−キシロピラノシル（１，４）−β−Ｄ−グルコピラノシル若しくはβ−Ｄ−キシロピラノシル（１，４）−Ｄ−グルコピラノース鎖、あるいはＸｏｌとも呼ばれるＸの還元型、
−  １つ又は２つのＦ鎖、即ち、α−Ｌ−フコピラノシル（１，２）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１，２）−α−Ｄ−キシロピラノシル（１，６）−β−Ｄ−グルコピラノシル若しくはα−Ｌ−フコピラノシル（１，２）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１，２）−α−Ｄ−キシロピラノシル（１，６）−Ｄ−グルコピラノース鎖、又はα−Ｌ−フコピラノシル（１，２）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１，２）−β−Ｄ−キシロピラノシル（１，４）−β−Ｄ−グルコピラノシル若しくはα−Ｌ−フコピラノシル（１，２）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１，２）−β−Ｄ−キシロピラノシル（１，４）−Ｄ−グルコピラノース鎖、あるいはＦｏｌとも呼ばれるＦの還元型、並びに
−  少なくとも１つのＧ鎖、即ち、４位で置換されているか、又は置換されていない、β−Ｄ−グルコピラノシル又はＤ−グルコピラノース単位、あるいはＧｏｌとも呼ばれるＧの還元型［ここで、
該Ｘ、Ｆ、及びＧ鎖は、ランダムな順で相互に結合しており、適宜、以下の修飾：（ｉ）ヒドロキシル基の修飾、即ち、グルコース残基が末端位で還元されているか、又はされていない、アセチル化又はメトキシル化又はアシル化誘導体、（ii）還元的アミノ化によるような、末端還元性単位の修飾、（iii）接近可能なＧａｌ及びＧｌｃ残基の６位での酸化を含む］
を含むことを特徴とする化合物［ここで、
該化合物は、以下の性質：
−  グルタチオンレダクターゼを刺激する性質、及び／又は
−  植物におけるホスホリパーゼＤを刺激する性質、及び／又は
−  グリコシルヒドロラーゼを刺激する性質、
を有する］の、該化合物の上述の性質に関連した使用、即ち：
−  寒さに対する適応のような非生物的ストレスに対する植物の適応、あるいは渇水、湿気又は塩分のような水に関するストレスに対する適応、
−  開花の制御、
−  結実の制御、
−  細菌、ウイルス、真菌のような病原体に対する防御反応の誘導
の範囲内における使用［ただし、式：ＸＸＦＧの化合物の上述の使用を除く］。
【請求項２】
−  キシロースでは２若しくは３若しくは４位、又はガラクトースでは３若しくは４若しくは６位、又はグルコースでは２若しくは３若しくは４若しくは６位、又はフコースでは２若しくは３若しくは４位でのモノアセチル化型、
−  グルコースでは、２と３、２と４、３と４、２と６、３と６若しくは４と６位、又はキシロースでは２と３、２と４、若しくは３と４位、又はガラクトースでは３と４、３と６、若しくは４と６位、又はフコースでは２と３、２と４、若しくは３と４位でのジアセチル化型、あるいは分子を形成する２つのモノアセチル化糖を考慮した任意の組合せ、
−  キシロースでは２、３及び４位、又はグルコースでは２、３及び４、若しくは２、３及び６位、又はガラクトースでは３、４及び６位、又はフコースでは２、３及び４位でのトリアセチル化型、あるいは分子を形成する３つのモノアセチル化糖又は１つのモノアセチル化糖と１つのジアセチル化糖を考慮した任意の組合せ、
−  テトラアセチル化〜全アセチル化型、あるいは分子を形成するアセチル化されているか又はされていない異なる糖の任意の組合せ
から選択されるアセチル化誘導体に対応する、請求項１記載の化合物の使用。
【請求項３】
糖が、適宜、ピラノース又はフラノース型の、α又はβ型であり、そして１→２、１→３、１→４、又は１→６型の結合により相互連結している化合物の、請求項１又は２記載の使用。
【請求項４】
下記式：
【化１】
2005527532.tif 000008
［式中、
−  Ｇ、Ｘ及びＦは、請求項１と同義であり、
−  ａ、ｂ、及びｃは、相互に独立に、１又は２を表す］で示される構造から選択されるグリコシド構造を含むことを特徴とする化合物の、請求項１〜３のいずれか１項記載の使用。
【請求項５】
グルコース残基が、末端位で還元されているか、又はされていない、式：ＸＦＧのグリコシド構造を含むか、又は式：ＸＧＦ、ＦＸＧ、ＦＧＸ、ＧＦＸ、及びＧＸＦに相当する、ＸＦＧから誘導される構造を含むか、あるいは請求項１と同義の修飾により誘導された構造を含む化合物の、請求項１〜４のいずれか１項記載の使用。
【請求項６】
以下：ＸＧＸＧ、ＸＦＧＸ、ＦＧＸＸ、ＦＸＧＸ、ＦＸＸＧ、ＧＸＸＦ、ＧＸＦＸ、ＧＦＸＸ、ＸＸＧＦ、ＸＧＸＦ、ＸＧＦＸから選択される化合物の、請求項１〜４のいずれか１項記載の使用。
【請求項７】
下記式：
【化２】
2005527532.tif 000009
で示される化合物の、請求項１〜４のいずれか１項記載の使用。
【請求項８】
下記式：
【化３】
2005527532.tif 000010
で示されるＸＦＧ化合物の、請求項１〜４のいずれか１項記載の使用。
【請求項９】
モノマー単位として、請求項１〜８のいずれか１項と同義の化合物を含むポリマー又はオリゴマー（該ポリマー又はオリゴマーは、２〜約３００モノマー単位、特に２〜約１００単位、又は２〜約５０単位、又は２〜約２０単位、特に５〜１２単位を含むことを特徴とする）の、請求項１〜８のいずれか１項記載の使用。
【請求項１０】
植物においてグルタチオンレダクターゼを刺激するプロセスであって、請求項１〜９のいずれか１項記載の少なくとも１つの化合物での植物の処理、特に該化合物を含む組成物でのこれらの植物が栽培される土壌の洗浄による処理、又はこのような組成物での種子のコーティングによる処理、又は圃場における処理すべき植物へのこのような組成物の葉面散布による処理の段階を含むことを特徴とするプロセス。
【請求項１１】
寒さに対する適応のような非生物的ストレスに対する植物の適応、あるいは渇水、湿気又は塩分のような水に関するストレスに対する適応のためのプロセスの履行のための、請求項１０記載のプロセスの適用。
【請求項１２】
植物におけるホスホリパーゼＤ産生の刺激のプロセスであって、請求項１〜９のいずれか１項記載の少なくとも１つの化合物での植物の処理、特に該化合物を含む組成物でのこれらの植物が栽培される土壌の洗浄による処理、又はこのような組成物での種子のコーティングによる処理、又は圃場における処理すべき植物へのこのような組成物の葉面散布による処理の段階を含むことを特徴とするプロセス。
【請求項１３】
開花の制御のためのプロセス、そして特に花の誘導、開花期間、及び落花の制御のためのプロセスの履行のための、並びに／又は結実の制御のためのプロセス、そして特に果実の成熟、落葉及び落果の始動及び期間の制御のためのプロセスの履行のための、請求項１２記載のプロセスの適用。
【請求項１４】
植物におけるグリコシルヒドロラーゼの産生の刺激のためのプロセスであって、請求項１〜９のいずれか１項記載の少なくとも１つの化合物での植物の処理、特に該化合物を含む組成物でのこれらの植物が栽培される土壌の洗浄による処理、又はこのような組成物での種子のコーティングによる処理、又は圃場における処理すべき植物へのこのような組成物の葉面散布による処理の段階を含むことを特徴とするプロセス。
【請求項１５】
細菌、ウイルス、真菌のような病原体に対する防御反応の誘導のプロセスの履行のための、請求項１４記載のプロセスの適用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の主題は、植物衛生分野及び生物肥料の分野における、Ｘ、Ｆ及びＧ鎖を含むグリコシド構造を含む化合物、並びに誘導化合物の、新しい使用法である。
【０００２】
果実及び野菜の細胞壁は、多糖類により形成されるが、主としてペクチン、セルロース及びキシログルカンが、壁を整備することに関係している（Levy Sら, Plant J. 1997, 11(3): 373-86）。キシログルカンはまた、双子葉植物の種子の内乳に大量に見い出される。
【０００３】
キシログルカンは、その起源により異なって置換されている１，４−β−グルカンポリマーである。双子葉植物では、線状１，４−β−Ｄ−グルカン鎖の置換は、ほとんどの場合、１，６−α−Ｄ−キシロシル−、又は１，６−α−Ｄ−キシロース−１，２−β−Ｄ−ガラクトシル型分岐を伴い、そしてフコースは、末端位でガラクトースと会合することができる（即ち、１，６−α−Ｄ−キシロース−１，２−β−Ｄ−ガラクトース−１，２−α−Ｌ−フコシル型側鎖分岐）。双子葉植物では常に、フコース残基は内乳には存在せず、そして例えば、ある種のナス科植物では、α−Ｌ−アラビノース残基により置換することができる。単子葉植物のキシログルカンは、キシロース、ガラクトース残基による置換の比率が低いこと、及びフコースが存在しないことで、双子葉植物のものとは異なる。キシログルカンはセルロースと一緒に、野菜の細胞壁の構造を構成し、かつ柔軟性を確保する橋かけ構造であるミクロフィブリルを形成する（Pauly M, Albersheim P, Darvill A, York WS (1999) Plant J, 20(6): 629-39）。
【０００４】
キシログルカンは、エンドキシログルカナーゼの基質（Vincken JP, Beldman G, Voragen AG, Carbohydr Res (1997) 13, 298(4): 299-310）、又はキシログルカンエンドトランスグリコシラーゼの基質（Steele NM, Fry SC, Biochem J (1999) 15, 340, 1, 207-211）、即ち、例えば、細胞伸長の間、発芽、結実期において細胞壁の構造を修飾することができる酵素活性の基質であり、そしてこれらは、ホルモン類、具体的にはオーキシン（Hetherington PRとFry S. (1993) Plant Physiology, 103, 987-992）、及びジベレリン（Maclachlan GとBrady C (1994) Plant Physiol 105, 965-974）に依存する。
【０００５】
キシログルカン、特にフコシル化オリゴマーである九糖のＸＸＦＧ（Fryら (1993) Physiologia Plantarum, 89, 1-3に報告）は、その抗オーキシン作用（Mac Dougall CJとFry SC (1989) Plant Physiol 89, 883-887）で周知である。逆に、フコースを含まずガラクトースを含む、ＸＸＬＧやＸＬＬＧのようなオリゴマーは、オーキシン作用を有する（Mc Dougall GJとFry SC (1990) Plant Physiology 93, 1042-1048）。
【０００６】
更に、幾つかのシグナルは、活性化酸素種（「酸化バースト」とも呼ばれる）を生成させる。活性酸素種は、植物−病原体相互作用において放出されることで周知である。種々の起源のオリゴ糖（ポリガラクツロン酸、キトサン、Ｏ−グリカンなど）は、酸化バーストを生成させるその能力について記録されている（Low PSとHeinstein PF (1986) Arch. Biochem. Biophys. 249, 472-479；Rogers KR., Albert F, 及びAnderson AJ (1988) Plant Physiol 86, 547-553；Apostol I, Heinstein PF及びLow PS (1989) Plant Physiol 90, 109-116；Vera-Estrella R, Blumwald E及びHiggins VJ (1992) Plant Physiol. 1208-1215；Bolwell GP, Butt VS, Davies DR及びZimmerlin A. (1995) Free Rad. Res. Comm. 23, 517-532；Orozco-Cardenas MとRyan CA (1999) PNAS, 25, 96, 11, 6553-655；Nita-Lazar M, Iwahara S, Takegawa K, Lienart Y (2000) J Plant Physiol, 156, 306-311）。スーパーオキシドアニオンの放出のためのオキシドレダクターゼＮＡＤ（Ｐ）Ｈ酵素（Van Gestelen PV, Asard A, Caubergs RJ (1997) Plant Physiol 115, 543-550）、及びペルオキシド又はスーパーオキシドアニオン又はＯＨラジカルの形成のためのペルオキシダーゼ酵素が関係している（Baker CJとOrlandi EW (1995) Ann. Rev. Phytopathol, 33, 299-321；Chen SXとSchopfer P (1999) Eur Bioch 260, 726-735）。他のシグナル（サリチル酸、ジャスモン酸類、ｃＧＭＰ、ＮＯなど）も、バーストを生成させる（Chen Z, Malamy J, Henning J, Conrath U, Sanchez-Casas P, Silva H, Ricigliano J, Klessig DF (1995) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 92, 4134-4137；Voros K, Feussner I, Kuhn H, Lee, J, Graner A, Lobler M, Parthier B, Wasternack C, Eur J Biochem (1998) 15, 251, 36-44；Durner JとKlessig J, Wedehenne D, Klessig DF (1998) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95, 10328-10333；Durner DとKlessig DF (1999) Current Opinion in Plant Biology, 2, 369-374）。
【０００７】
極度の環境条件（渇水、寒さ、ＵＶ、塩分など）は、同じ作用を引き起こす。
【０００８】
バーストの生成におけるＨ2Ｏ2の主要な役割は、オキシダントストレスの調節におけるのと同様に、以下に基づく：
−  スーパーオキシドアニオンからの不均化によるその形成（Bolwell GP, Davies DR, Gerrish C, Auh CK及びMurphy TM (1998) Plant Physiol 116, 1379-1385）、
−  脂質の過酸化のための（Koch E, Meier BM, Eiben H-G, Slusarenko A (1992) Plant Physiol 99, 571-576）、又はオクタデカノイド及びその誘導体（メチル−ジャスモン酸類のようなその一部は、ホルモン機能を持つ代謝物である）の合成のための、Ｃ18脂肪酸代謝連鎖におけるその使用、
−  ペルオキシダーゼ及びカタラーゼ酵素の基質としてのその機能、即ち、細胞に対して毒性のペルオキシドの蓄積を制限する性質（Baker CJ, Harmon GL, Glazener JA及びOrlandi EW (1995) Plant Physiol, 108, 353-359）。
【０００９】
活性酸素種、特にスーパーオキシドアニオンは、種々の代謝経路を制御する。これらは、以下に関係する：
−  ポリアミン類の生合成：モノアミン類は、ＮＨ3とペルオキシドの産生を伴ってアルデヒドに酸化される。亜硝酸シンターゼによるＬ−アルギニンの酸化によって、ポリアミン前駆体（Ｌ−シトルリン）が形成される、
−  エチレンの合成、
−  ジベレリン類の合成。２０を超えるオキシダーゼが、ジベレリン類の生合成の調節に関係する。
【００１０】
活性酸素種は、シグナルトランスダクション段階に関与するが、それは、これらが受容体結合活性又は変換酵素活性に関連しているためである（Jabs T, Tschoepe M, Colling C, Hahlbrock K及びScheel D (1997) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 29, 94, 9, 4800-4805；Durner J, Wendehenne D, Klessig DF (1998) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95, 10328-10333）。
【００１１】
これらは、チオール基を用いて細胞のレドックス電位の調節に関係している（ＧＳＳＧ−ＧＳＨ、シスチン−システイン変換など）。このように、これらは、種々の生物において一定の開花及び結実相に発現する、老化プロセスを制御する。
【００１２】
酸化バーストは、開花及び結実段階を調節するための最も効率的な可能性である、ホルモンの代謝を妨げる（特にこれらの始動及びこれらの期間は、ホルモンの均衡（例えば、オーキシン／サイトキニン比）によりプログラムされており、そしてペルオキシドを含む活性酸素種は、ポリアミン類の合成を制御する）。
【００１３】
本発明は、式：ＸＦＧのグリコシド構造を含む化合物、並びにここから誘導された化合物が、グルタチオンレダクターゼ酵素、植物におけるホスホリパーゼＤ酵素、並びにグリコシルヒドロラーゼに及ぼす刺激作用を有するという事実を、発明者らが明らかにしたことに由来する。
【００１４】
グルタチオンレダクターゼ酵素を刺激することにより、本発明の化合物は、活性酸素種の毒性作用を制限することによる、特に寒さのような任意のオキシダントストレスへの適応の反応を引き起こし（Allen RD, Webb RP, Schake ITS (1997) Free Radic Biol Med, 23(3): 473-479；O'Kane D, Gill V, Boyd P, Burdon R (1996) Planta, 198(3): 371-377）、そしてこれらは、細胞のレドックス電位を調節し、これによって酵素又はチオール依存性タンパク質、ホスホリパーゼＤ、チオールプロテアーゼ及び特にチオール−プロテアーゼのインヒビターの活性を修飾し（Taher MM, Mahgoub MA, Abd-Elfattah (1998) AS Biochem Mol Biol Int 46 3, 619-28）、これは、チオール依存性プロテアーゼインヒビター誘導作用によるが、これと釣り合って植物に有害な他の酵素系のカスケードを活性化することはない。
【００１５】
ホスホリパーゼＤ活性を刺激することにより、本発明の化合物は、アブシジン酸のホルモン作用を、この酵素の活性化がホスファチジン酸（アブシジン酸の作用を模倣する）の産生を引き起こす程度に増幅する。このように、これらは、ジベレリン類、エチレン又はジャスモン酸類に対する拮抗作用を明らかにすることができる（Grill E., Himmelbach A. (1998) Current Opinion in Plant Biology, 1, 1, 5, 412-418；Ritchie S, Gilroy S (1998) Plant Biology, 95, 5, 3, 2697-2702；Moons A, Prinsen E, Bauw G, Van Montagu M (1997) Plant Cell 9 12, 2243-59）。
【００１６】
目下、化学肥料を別にして、野菜の生育の制御は、主として以下に基づく：
−  微量成分、硝酸塩、リン酸塩及びカリウム化合物、ポリアミン類又はある種のホルモンを強化した農業用組成物の使用、
−  天然又は遺伝子組換え微生物（土壌の品質を改善して、野菜の生長を促進するか、又は収穫量を増大させる）の使用；（これらは、特にＲ．メリローティ（R. meliloti）及びＢ．ジャポニクム（B. japonicum）のようなリゾビウム科（Rhizobiacea）、バチルス属（Bacillus）及びシュードモナス属（Pseudomonas）のような遊離窒素固定細菌、並びにペニシリウム属（Penicillium）のような真菌に属する）、
−  トランスジェニック植物の生育。この技術は、法律問題及び消費者側の強い反対に直面している；更には、生物肥料部門での満足できる利用に至っていない。
【００１７】
本発明の目的の１つは、植物衛生分野及び生物肥料において使用することができる新しい組成物を提供すること、そして更に具体的には植物における非生物ストレスに対抗すること、並びに開花及び結実を制御することである。
【００１８】
本発明の主題は、
−  １つ又は２つのＸ鎖、即ち、α−Ｄ−キシロピラノシル（１，６）−β−Ｄ−グルコピラノシル若しくはα−Ｄ−キシロピラノシル（１，６）−Ｄ−グルコピラノース、又はβ−Ｄ−キシロピラノシル（１，４）−β−Ｄ−グルコピラノシル若しくはβ−Ｄ−キシロピラノシル（１，４）−Ｄ−グルコピラノース鎖、あるいはＸｏｌとも呼ばれるＸの還元型、
−  １つ又は２つのＦ鎖、即ち、α−Ｌ−フコピラノシル（１，２）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１，２）−α−Ｄ−キシロピラノシル（１，６）−β−Ｄ−グルコピラノシル若しくはα−Ｌ−フコピラノシル（１，２）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１，２）−α−Ｄ−キシロピラノシル（１，６）−Ｄ−グルコピラノース鎖、又はα−Ｌ−フコピラノシル（１，２）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１，２）−β−Ｄ−キシロピラノシル（１，４）−β−Ｄ−グルコピラノシル若しくはα−Ｌ−フコピラノシル（１，２）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１，２）−β−Ｄ−キシロピラノシル（１，４）−Ｄ−グルコピラノース鎖、あるいはＦｏｌとも呼ばれるＦの還元型、並びに
−  少なくとも１つのＧ鎖、即ち、４位で置換されているか、又は置換されていない、β−Ｄ−グルコピラノシル又はＤ−グルコピラノース単位、あるいはＧｏｌとも呼ばれるＧの還元型［ここで、
該Ｘ、Ｆ、及びＧ鎖は、ランダムな順で相互に結合しており、適宜、以下の修飾：（ｉ）ヒドロキシル基の修飾、即ち、グルコース残基が末端位で還元されているか、又はされていない、アセチル化又はメトキシル化又はアシル化誘導体、（ii）還元的アミノ化によるような、末端還元性単位の修飾、（iii）接近可能なＧａｌ及びＧｌｃ残基の６位での酸化を含む］
を含むことを特徴とする化合物［ここで、
該化合物は、以下の性質：
−  グルタチオンレダクターゼを刺激する性質、及び／又は
−  植物におけるホスホリパーゼＤを刺激する性質、及び／又は
−  グリコシルヒドロラーゼを刺激する性質、
を有する］の、該化合物の上述の性質に関連した使用、即ち：
−  寒さに対する適応のような非生物的ストレスに対する植物の適応、あるいは渇水、湿気又は塩分のような水に関するストレスに対する適応、
−  開花の制御、
−  結実の制御、
−  細菌、ウイルス、真菌のような病原体に対する防御反応の誘導
の範囲内における使用［ただし、式：ＸＸＦＧの化合物の上述の使用を除く］である。
【００１９】
開花の制御とは、更に具体的には、開花期（Wang M, Hoekstra S, van Bergen S, Lamers GE, Oppedijk BJ, Heijden MW, de Priester W, Schilperoort RA (1999) Plant Mol Biol 39, 3:489-501）のような開花プロセスの重要な相、あるいは花の誘導期又は落花期（Colasanti J, Sundaresan V (2000) Trends Biochem Sci, 25, 5, 236-240）のような花芽の生育（Lim CO, Lee SI, Chung WS, Park SH, Hwang I, Cho MJ (1996), Plant Mol Biol, 30, 2, 373-379）の制御を意味する。
【００２０】
結実の制御とは、更に具体的には、成熟相の始動及び／又は期間の制御（Fan L, Zheng S, Wang X (1997) Plant Cell, 9, 12, 2183-9；Ryan SN, Laing WA, Mc Canus MT (1998), Phytochemistry, 49, 4, 957-963）、糖類及びフェノール類の蓄積に関する細胞壁代謝の制御（Fillion L, Ageorges A, Picaud S, Coutos-Thevenot P, Lemoine R, Romieu C, Delrot S (1999) Plant Physiol 120(4):1083-94）、並びに落葉及び落果の制御（Gomez-Cadenas A, Mehouachi J, Tadeo FR, Primo-Millo E, Talon M (2000), Planta, 210, 4, 636-643）を意味する。
【００２１】
病原体に対する防御反応の誘導は、ＰＲタンパク質、特に酵素の１，３−β−Ｄ−グルカナーゼ及びエンドキチナーゼの惹起に関して、植物の生育にも関係していることが知られている（Munch-Garthoff S, Neuhaus JM, Boller T, Kemmerling B, Kogel KH (1997) Planta 201, 2, 235-44；Buchter R, Stromberg A, Schmelzer E, Kombrink E (1997) Plant Mol Biol 35, 6, 749-61；Robinson SP, Jacobs AK, Dry IB (1997) Plant Physiol 114, 3, 771-8）。
【００２２】
ある組織が分化又は老化期における対象である、代謝及び異化の修飾の制御は、酵素の１，４−β−Ｄ−グルカナーゼ及びβ−Ｄ−キシロシダーゼの惹起による（Trainotti L, Spolaore S, Ferrarese L, Casadoro G (1997) Plant Mol Biol 34(5): 791-802；Kalaitzis P, Hong SB, Solomos T, Tucker ML (1999) Plant Cell Physiol 40(8), 905-8）。
【００２３】
本発明の更に具体的な主題は、下記：
−  キシロースでは２若しくは３若しくは４位、又はガラクトースでは３若しくは４若しくは６位、又はグルコースでは２若しくは３若しくは４若しくは６位、又はフコースでは２若しくは３若しくは４位でのモノアセチル化型、
−  グルコースでは、２と３、２と４、３と４、２と６、３と６若しくは４と６位、又はキシロースでは２と３、２と４、若しくは３と４位、又はガラクトースでは３と４、３と６、若しくは４と６位、又はフコースでは２と３、２と４、若しくは３と４位でのジアセチル化型、あるいは分子を形成する２つのモノアセチル化糖を考慮した任意の組合せ、
−  キシロースでは２、３及び４位、又はグルコースでは２、３及び４、若しくは２、３及び６位、又はガラクトースでは３、４及び６位、又はフコースでは２、３及び４位でのトリアセチル化型、あるいは分子を形成する３つのモノアセチル化糖又は１つのモノアセチル化糖と１つのジアセチル化糖を考慮した任意の組合せ、
−  テトラアセチル化〜全アセチル化型、あるいは分子を形成するアセチル化されているか又はされていない異なる糖の任意の組合せ
から選択されるアセチル化誘導体に対応する、上述の化合物の上述の使用である。
【００２４】
本発明の更に具体的な主題は、糖が、場合により還元型、かつ／又はα若しくはβ型で、適宜、ピラノース又はフラノース型である、（Ｌ）又は（Ｄ）グリコシル残基であり、そして１→２、１→３、１→４、又は１→６型の結合により相互連結しており、そして更に具体的には、フコースからガラクトースの結合の場合にはα１→２型、ガラクトースからキシロースの結合の場合にはβ１→２、グルコースからグルコースの結合の場合にはβ１→４、又はキシロースからグルコースの結合の場合にはα１→６型の結合により相互連結している化合物の上述の使用である。
【００２５】
本発明の更に具体的な主題は、下記式：
【００２６】
【化４】
2005527532.tif 000002
【００２７】
［式中、
−  Ｇ、Ｘ及びＦは、上記と同義であり、
−  ａ、ｂ、及びｃは、相互に独立に、１又は２を表す］で示される構造から選択されるグリコシド構造を含むことを特徴とする化合物の上述の使用である。
【００２８】
本発明の更に具体的な主題は、下記化合物：
−  下記式ＸＦＧ：
【００２９】
【化５】
2005527532.tif 000003
【００３０】
で示されるグリコシド構造を含む化合物、又は
−  下記式：ＸＧＦ、ＦＸＧ、ＦＧＸ、ＧＦＸ、及びＧＸＦ：
【００３１】
【化６】
2005527532.tif 000004
【００３２】
に対応する、ＸＦＧから誘導された構造を含む化合物［該化合物の末端位のグルコース残基は、還元されているか、又はされていないか、あるいは上記と同義の修飾により誘導された構造を含む］の上述の使用である。
【００３３】
本発明はまた、以下：ＸＦＸＧ、ＸＦＧＸ、ＦＧＸＸ、ＦＸＧＸ、ＦＸＸＧ、ＧＸＸＦ、ＧＸＦＸ、ＧＦＸＸ、ＸＸＧＦ、ＸＧＸＦ、ＸＧＦＸから選択される化合物の上述の使用に関する。
【００３４】
本発明は更に具体的には、下記式：
【００３５】
【化７】
2005527532.tif 000005
【００３６】
で示される化合物の上述の使用に関する。
【００３７】
本発明は、更に具体的にはまた、下記式：
【００３８】
【化８】
2005527532.tif 000006
【００３９】
で示される化合物ＸＦＧの上述の使用に関する。
【００４０】
本発明の主題はまた、モノマー単位として、上記と同義の化合物を含むポリマー又はオリゴマー（該ポリマー又はオリゴマーは、２〜約３００モノマー単位、特に２〜約１００単位、又は２〜約５０単位、又は２〜約２０単位、特に５〜１２単位を含むことを特徴とする）の上述の使用である。
【００４１】
本発明の更に具体的な主題は、１２個以下、そして好ましくは５個以下の数の上述のモノマー単位を含むことを特徴とする上述のポリマー（即ち、重合度ＤＰが、１２以下、そして好ましくは５以下であるポリマー）の上述の使用である。
【００４２】
本発明の主題はまた、少なくとも２つの上述のモノマー単位の連続鎖（該鎖の少なくとも１つの単位は、他の単位とは異なる）の上述の使用である。
【００４３】
本発明の更に具体的な主題は、単位の数が、１２個以下、好ましくは５個以下である、上記と同義の単位の鎖の上述の使用である。
【００４４】
本発明の主題はまた、植物におけるグルタチオンレダクターゼの刺激のためのプロセスであって、少なくとも１つの上述の化合物での植物の処理、特に該化合物を含む組成物でのこれらの植物が栽培される土壌の洗浄による処理、又はこのような組成物での種子のコーティングによる処理、又は圃場における処理すべき植物へのこのような組成物の葉面散布による処理の段階を含むことを特徴とするプロセスである。
【００４５】
本発明の主題はまた、寒さに対する適応のような非生物的ストレスに対する植物の適応、あるいは渇水、湿気又は塩分のような水に関するストレスに対する適応のためのプロセスの履行のための、上述のグルタチオンレダクターゼの刺激のためのプロセスの使用である。
【００４６】
本発明はまた、植物におけるホスホリパーゼＤ産生の刺激のためのプロセスであって、少なくとも１つの上述の化合物での植物の処理、特に該化合物を含む組成物でのこれらの植物が栽培される土壌の洗浄による処理、又はこのような組成物での種子のコーティングによる処理、又は圃場における処理すべき植物へのこのような組成物の葉面散布による処理の段階を含むことを特徴とするプロセスに関する。
【００４７】
本発明の更に具体的な主題は、開花の制御のためのプロセス、そして特に花の誘導、開花期間、及び落花の制御のためのプロセスの履行のための、並びに／又は結実の制御のためのプロセス、そして特に果実の成熟、落葉及び落果の始動及び期間の制御のためのプロセスの履行のための、ホスホリパーゼＤ産生の刺激のための上述のプロセスの使用である。
【００４８】
本発明の主題はまた、植物におけるグリコシルヒドロラーゼの産生の刺激のためのプロセスであって、少なくとも１つの上記と同義の化合物での植物の処理、特に該化合物を含む組成物でのこれらの植物が栽培される土壌の洗浄による処理、又はこのような組成物での種子のコーティングによる処理、又は圃場における処理すべき植物へのこのような組成物の葉面散布による処理の段階を含むことを特徴とするプロセスである。
【００４９】
本発明は、更に具体的には、細菌、ウイルス、真菌のような病原体に対する防御反応、及び／又は一定の植物の発生期（発芽、受精、開花又は結実における細胞分化）の制御の誘導のプロセスの履行のための、グリコシルヒドロラーゼの産生の刺激のための上述のプロセスの使用に関する。
【００５０】
有利には、上述され、かつ本発明の範囲において使用される、少なくとも１つの化合物を含む上述の組成物は、固形（特に、粉末、顆粒、ペレット）、又は液状（特に水溶液）の農業投入物として、他の農業投入化合物と組合せて、又は組合せずに提供される。
【００５１】
本発明の範囲において処理することができる植物の中では、ブドウ、果樹（特に、リンゴ、西洋ナシ、クルミ）、穀物（特に、コメ、オオムギ）、油料作物（特に、ダイズ、ナタネ、ヒマワリ）、蛋白作物（特に、エンドウ）、及び市場向け菜園作物（特に、トマト）のような有用な耕種作物に、先ずは言及することができる。
【００５２】
本発明はまた、下記：
−  植物［特に種子、葉、根、果実、特にリンゴ類（リンゴ（Malus malus L.）、バラ科（Rosaceae））の抽出によるが、特にVincken JP, Beldman G, Niessen WMA, Voragen AGJ (1996) Carbohydrate Polymers, 29, 1, 75-85；Spronk BA, Rademaker GJ, Haverkamp  J, Thomas-Oates JE, Vincken JP, Voragen AG, Kamerling JP, Vliegenthart JF (1997) Carbohydrate Research, 305, 2, 233-242に記載された方法による；このプロセスは、３段階で行われる：ａ）アルカリ処理によるバイオマスのキシログルカンポリマーの抽出、及びこれに続く酵素的経路による脱ペクチン化；ｂ）セルラーゼ、そして更に具体的には、トリコデルマ・ビリデ（Trichoderma viride）から単離されたエンド１−４−β−Ｄ−グルカナーゼを用いるポリマーの加水分解；ｃ）バイオ−ゲル（Bio-Gel）Ｐ−２でのゲル浸透クロマトグラフィーとこれに続くダイオネックス（Dionex）システムでのアニオン交換クロマトグラフィーによるオリゴマーの精製］
−  植物細胞懸濁液［特に以下：
・  キイチゴ（Rubus fruticosus L.）（特にJoseleau JP, Cartier N, Chambat G, Faik A, K Ruel (1992), Biochimie, 74, 81-88による）；
・  バラ（Rosa sp.）（特にFry SC (1989) J. Exp. Bot. 40, 1-11；McDougall, G.J. Fry SC (1991) Carbohydrate Research 219, 123-132による）
の植物の懸濁液；このプロセスは、３段階で行われる：ａ）化学経路による脱ペクチン化と併用されたアルカリ処理によるか、又はアルカリ処理と併用されたタンパク質除去による、細胞壁のキシログルカンポリマーの抽出；ｂ）セルラーゼ、そして更に具体的には、トリコデルマ・ビリデから単離されたエンド１−４−β−Ｄ−グルカナーゼを用いるポリマーの加水分解；ｃ）バイオ−ゲルＰ−２でのゲル浸透クロマトグラフィーとこれに続くダイオネックスシステムでのアニオン交換クロマトグラフィーによる分画、あるいはバイオ−ゲルＰ−２でのゲル浸透クロマトグラフィーとこれに続くＣ18カラムでの逆相クロマトグラフィーによるか、又はダイオネックスシステムでのアニオン交換による分画（セルラーゼは、遺伝子組換えか若しくはそうでない細菌株の発酵により得られるか、又は組換え経路により得られる酵素であってよい）］から得られるような、上述の化合物の上述の使用に関する。
【００５３】
本発明の主題はまた、以下：
＊  化学合成法（特にPavlova ZN, Ash AO, Vnuchkova VA, Babakov AV, Torgov VI, Nechaev OA, Usov AI, Shibaev VN (1992) Plant Sciences 85, 131-134に記載された方法によるか、又はWatt D.K., Brasch D.J., Larsen D.S., Melton L.D., Simpson J. Carbohydrate Research, 325, 2000, 300-312の研究に基づく方法による）、
＊  化学酵素的合成法［特に、York, W.S., Harvey L.K., Guillen R., Alberheim P., Darvill A., Carbohydrate Research, 1993, 248, 285-301のエンド−トランスグリコシラーゼ（β−Ｄ−グルコシダーゼ、α−（β）−Ｌ−キシロシダーゼ、β−Ｄ−ガラクトシダーゼ）の活性により、又はG. Maclachlan, C. Brady, Plant Physiology, 105, 1994, 965-974のエンド−トランスキシログルカナーゼの活性により、又はBaydoun E.A.-H., Abdel-Massih R.m., Dani D., Rizk S., Bret C.T., Journal of Plant Physiology, 158, 2000, 145-150；Faik A, Bar Peled M, DeRocher AE, Zeng W, Perinn RM, Wilkerson C, Raikhel NV, Keegstra K J Biol Chem, 2000, 275, 20の野菜若しくは動物由来のフコシルトランスフェラーゼの活性により、修飾されたキシログルカンオリゴマーからの］、
＊  組換え経路
＊  キシログルカンポリマー、又はポリマーから得られるオリゴマー、又は下記１〜５：
１／  果実及び野菜、そして更に具体的には、コショウ、トマト、ジャガイモ、オリーブ及びリンゴ、又は以下：
Spronk B.A., Rademaker G.J., Haverkamp J., Thomas-Oates J.E., Vincken J.P., Voragen A.G., Kamerling J.P., Vliegenthart J.F., Carbohydrate Research, 305, 1997, 233-242、
Renard C.M.G.C., Lomax J.A., Boon J.J., Carbohydrate Research, 232, 1992, 303-320、
Vincken J.P., Beldman G., Niessen W.M.A., Voragen A.G.J., Carbohydrate Polymers, 29 (1996) 75-85
に記載される方法により、これらのバイオマス（「搾りかす」など）によって産生される残渣；
２／  細胞懸濁液（キイチゴ（Rubus fruticosos）、シカモア（sycamore））；以下：
Joseleau J.P., Cartier N., Chambat G., Faik, A., Ruel K., Biochimie, 74 (1992) 81-88、
Augur C., Yu L., Ogawa T., Sinay P., Darvill A.G., Albersheim P., Plant Physiology, 99 (1992) 180-185
による；
３／  遺伝子組換えか又はそうでない微生物（細菌、真菌など）の発酵；
４／  種子（キンレンカ（nasturtium）、ジャトバ（Hymenaea）など）；McDougall G.J., Fry S.C., Plant Physiology, 89 (1989) 883-887による；
５／  葉、そして更に具体的には、ジャトバ（Hymenaea courbaril）の葉、Busato A.P., Vargas-Rechia C.G., Reicher F., Phytochemistry, 58 (2001) 525-531
のようなバイオマス中に存在するキシログルカンの酵素分解由来の糖タンパク質のグリカン部分に相当するグリカンの、以下の酵素：
・  キシログルカナーゼ（Garcia-Garrido J.M., Rejon-Palomares A., Ocampo J.A., Garcia-Romera I., Mycol. Res., 103 (1999) 882-886）、
・  セルラーゼ、そして更に具体的には、トリコデルマ・ビリデ（Vincken JP., de Keiser A., Beldman G., Voragen A.G., J., Plant Physiology, 108, 1995, 1579-1585）の、トリコデルマ・リーセイ（Tricoderma. Reesei）（Hasper A.A., Dekkers E., van Mil M., van de Vondervoort P.J.L., de Graaff L.H., Applied and Environmental Microbiology, 68, 2002, 1556-1560）の、又はコウジ菌（Aspergillus oryzae）（Kato Y, Matsuda K., Agric. Biol. Chem., 44, 1980, 1759-1766）のエンドβ−１，４−グルカナーゼ
・  エキソセルラーゼ（ウスバタケ（Irpex lacteus）のものなど）
［該酵素は、
・  遺伝子組換えか若しくはそうでない細菌若しくは真菌株から単離されたか、又は組換え経路により得られるかのいずれかであり（Pauly M, Andersen LN, Kaupinnen S, Kofod LV, York WS, Albersheim P, Darvill A, Glycobiology 1999, 9, 1, 93-100）、
・  単独で、又は混合物として、好ましくはペクチン分解酵素（ポリガラクツロナーゼ、ペクチンエステラーゼ、ペクチンリアーゼ）（Renard C.M.G.C., Searle-can Leewen M.J.F., Voragen A.G.J., Thibault J.F., Pilnik W., Carbohydrate Polymers, 14, 1991, 295-314）と組合せるか、又はペクチン分解型の広域酵素により置換されて使用される］を用いることによる加水分解
により得られるような、上述の化合物の上述の使用である。
【００５４】
ポリマーの加水分解により得られるオリゴマーの混合物は、バイオ−ゲル（Bio-Gel）カラムでの立体ゲル浸透クロマトグラフィーにより重合度（ＤＰ）で分画して、目的のＤＰのオリゴ糖は、次に高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により構造特性で分離する。
【００５５】
アニオン交換クロマトグラフィー（ＨＰＡＥＣ）又はダイオネックス（DIONEX）カラムでのクロマトグラフィー（Vincken J.P., Beldman G., Niessen W.M.A., Voragen A.G.J., Carbohydrate Polymers, 29, 1996, 1, 75-85）、及び順相（Kakegawa K., Edashige Y., Ishii T., Phytochemistry, 47, 1998, 767-771）又は逆相アフィニティークロマトグラフィー（Watt D.K., Brash D.J., Larsen D.S., Melton L.D., Carbohydrate Polymers, 39, 1999, 165-180）から、幾つかのシステムを利用することができる。
【００５６】
次に各オリゴ糖の構造は、分光法（ＮＭＲ及び質量分析）により確認する（York W.S., van Halbeek H., Darvill A.G., Albersheim P., Carbohydrate Research, 200, 1990, 9-31）。
【００５７】
本発明は、ブドウにおける本発明の化合物のエリシター（elicitor）ポテンシャル、即ち、耐寒性を誘発する作用の以下の詳細な説明により更に例証される。
【００５８】
ピノ・ノワール（Pinot noir）を含む種々のブドウ品種に由来する植物を、本試験用に使用した。５つの植物である各試料は、可変用量で溶液にしたキシログルカンエリシター：七糖ＸＦＧによりＢＢＣＨスケールの異なる生長段階で葉面散布で処理した；ハンドスプレーを用いて１植物当たり溶液２．５mlの噴霧を行った（±１％の偏差）。
【００５９】
エリシターの使用後、植物は、可変の期間及び強度の寒さストレスに曝露した。寒さへの曝露後、植物は、１２時間で昼／夜交替する２０℃の気候室に入れた。葉の外観は、寒さの解除の２４時間、７２時間後に観測した。寒さの効果は、霜により誘導された葉の壊死の観測により評価して、植物は、その後の生育をモニターするために数ヶ月間保持した。
【００６０】
５０植物での１０回反復に関しての結果は、保護指数：ｌf（％）＝１００−Ｐ（Ｐは、葉の壊死の割合である）により表される。水で処理した対照植物Ｃ及び七糖：ＸＦＧ又はＸＦＧｏｌによりエリシター処理した植物に関しての結果は、ストレスの２４時間後に測定された保護指数ｌf（％）により表される。
【００６１】
結果：
ブドウ品種：ＢＢＣＨで１３段階のピノ・ノワール
温度：３．５℃  期間１８０分
【００６２】
【表１】
2005527532.tif 000007
【００６３】
更に、エリシターの使用は、以下：
・  ブドウ品種のシュナン（Chenin）、シャルドネ（Chardonnay）、カベルネ・ソーヴィニヨン（Cabernet sauvignon）、ピノ・ムニエ（Pinot meunier）、メルロー（Merlot）、グロロー（Grolleau）に対する防霜作用をも与えること、
・  ブドウの生育を変化させないこと、
・  数日間続く防霜効果を有すること
を示している。
【００６４】
３．３mg/lの用量のキシログルカンエリシターにより処理した植物は、水で処理した対照の葉を損なう寒さストレスに抵抗した：エリシター処理植物の葉の色は、（水で処理した対照に関して観測されるように）解凍時に暗緑色に変化する代わりに、正常を保ち、そして（水で処理した対照に関して観測されるように）２４時間後に壊死の徴候は出現しなかった。
【００６５】
エリシターの使用は、寒さストレス後のエリシター処理植物の生育が寒さに曝露していない対照植物の生育と同等とすれば、植物の生育に何ら障害を引き起こさないことを意味する。
【国際調査報告】
2005527532.tif 000011
2005527532.tif 000012
2005527532.tif 000013
2005527532.tif 000014
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