(57)【要約】  乳カゼインのαＳ１画分のＮ末端と同じ配列に由来するか、または乳カゼインのαＳ１画分のＮ末端と同じ配列に類似する生物活性ペプチド。これらのペプチドは免疫応答を刺激し増進すること、ウイルス感染を防ぐこと、血清コレステロールレベルを正常化すること、および造血を刺激することができる。本カゼイン由来ペプチドは無毒性であり、免疫病、高コレステロール血症、血液障害およびウイルス関連疾患の処置および予防に使用することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
自己免疫疾患を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項２】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１に記載の方法。
【請求項５】
ウイルス疾患を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項６】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項５に記載の方法。
【請求項９】
ウイルス感染を予防する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項１０】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
造血を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項１４】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１３に記載の方法。
【請求項１７】
造血幹細胞増殖を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項１８】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１７に記載の方法。
【請求項２１】
造血幹細胞の増殖および分化を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項２２】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２１に記載の方法。
【請求項２５】
巨核球産生を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項２６】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
赤血球産生を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項３０】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２７に記載の方法。
【請求項３１】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２７に記載の方法。
【請求項３２】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２７に記載の方法。
【請求項３３】
白血球産生を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項３４】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項３３に記載の方法。
【請求項３７】
血小板産生を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項３８】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項３７に記載の方法。
【請求項４１】
形質細胞増殖を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項４２】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項４１に記載の方法。
【請求項４４】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項４１に記載の方法。
【請求項４５】
樹状細胞増殖を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項４６】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項４５に記載の方法。
【請求項４８】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項４５に記載の方法。
【請求項４９】
マクロファージ増殖を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項５０】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項４９に記載の方法。
【請求項５２】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項４９に記載の方法。
【請求項５３】
血小板減少症を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項５４】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項５３に記載の方法。
【請求項５６】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項５３に記載の方法。
【請求項５７】
汎血球減少症を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項５８】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項５７に記載の方法。
【請求項６０】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項５７に記載の方法。
【請求項６１】
顆粒球減少症を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項６２】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項６１に記載の方法。
【請求項６４】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項６１に記載の方法。
【請求項６５】
高脂血症を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項６６】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項６５に記載の方法。
【請求項６８】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項６５に記載の方法。
【請求項６９】
コレステロール血症を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項７０】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項６９に記載の方法。
【請求項７２】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項６９に記載の方法。
【請求項７３】
糖尿を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項７４】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項７３に記載の方法。
【請求項７６】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項７３に記載の方法。
【請求項７７】
糖尿病を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項７８】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項７７に記載の方法。
【請求項７９】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項７７に記載の方法。
【請求項８０】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項７７に記載の方法。
【請求項８１】
ＡＩＤＳを予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項８２】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項８１に記載の方法。
【請求項８３】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項８１に記載の方法。
【請求項８４】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項８１に記載の方法。
【請求項８５】
ＨＩＶによる感染を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項８６】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項８５に記載の方法。
【請求項８７】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項８５に記載の方法。
【請求項８８】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項８５に記載の方法。
【請求項８９】
自己骨髄もしくは末梢血幹細胞移植（ＡＳＣＴ）または同種骨髄移植（ＢＭＴ）によって補助された骨髄破壊量の化学放射線治療に関係する状態を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項９０】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項８９に記載の方法。
【請求項９１】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項８９に記載の方法。
【請求項９２】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項８９に記載の方法。
【請求項９３】
エリスロポエチン処置可能状態を処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項９４】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項９３に記載の方法。
【請求項９５】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項９３に記載の方法。
【請求項９６】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項９３に記載の方法。
【請求項９７】
エリスロポエチンの効果を強化する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項９８】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項９７に記載の方法。
【請求項９９】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項９７に記載の方法。
【請求項１００】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項９７に記載の方法。
【請求項１０１】
トロンボポエチン処置可能状態を処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項１０２】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０４】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０５】
トロンボポエチンの効果を強化する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することを含む方法。
【請求項１０６】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０７】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０８】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０９】
末梢幹細胞動員を増進する方法であって、その必要がある対象に、有効量のトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含む医薬組成物の有効量を投与することを含む方法。
【請求項１１０】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１１】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１２】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１３】
自己免疫疾患を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１１４】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１１３に記載の医薬組成物。
【請求項１１５】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１１３に記載の医薬組成物。
【請求項１１６】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１１３に記載の医薬組成物。
【請求項１１７】
ウイルス疾患を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１１８】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１１７に記載の医薬組成物。
【請求項１１９】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１１７に記載の医薬組成物。
【請求項１２０】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１１７に記載の医薬組成物。
【請求項１２１】
ウイルス感染を予防するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１２２】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１２１に記載の医薬組成物。
【請求項１２３】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１２１に記載の医薬組成物。
【請求項１２４】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１２１に記載の医薬組成物。
【請求項１２５】
造血を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１２６】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１２５に記載の医薬組成物。
【請求項１２７】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１２５に記載の医薬組成物。
【請求項１２８】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１２５に記載の医薬組成物。
【請求項１２９】
造血幹細胞増殖を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１３０】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１２９に記載の医薬組成物。
【請求項１３１】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１２９に記載の医薬組成物。
【請求項１３２】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１２９に記載の医薬組成物。
【請求項１３３】
造血幹細胞の増殖および分化を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１３４】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１３３に記載の医薬組成物。
【請求項１３５】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１３３に記載の医薬組成物。
【請求項１３６】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１３３に記載の医薬組成物。
【請求項１３７】
巨核球産生を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１３８】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１３７に記載の医薬組成物。
【請求項１３９】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１３７に記載の医薬組成物。
【請求項１４０】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１３７に記載の医薬組成物。
【請求項１４１】
赤血球産生を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１４２】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１４１に記載の医薬組成物。
【請求項１４３】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１４１に記載の医薬組成物。
【請求項１４４】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１４１に記載の医薬組成物。
【請求項１４５】
白血球産生を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１４６】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１４５に記載の医薬組成物。
【請求項１４７】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１４５に記載の医薬組成物。
【請求項１４８】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１４５に記載の医薬組成物。
【請求項１４９】
血小板産生を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１５０】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１４９に記載の医薬組成物。
【請求項１５１】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１４９に記載の医薬組成物。
【請求項１５２】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１４９に記載の医薬組成物。
【請求項１５３】
形質細胞増殖を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１５４】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１５３に記載の医薬組成物。
【請求項１５５】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１５３に記載の医薬組成物。
【請求項１５６】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１５３に記載の医薬組成物。
【請求項１５７】
樹状細胞増殖を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１５８】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１５７に記載の医薬組成物。
【請求項１５９】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１５７に記載の医薬組成物。
【請求項１６０】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１５７に記載の医薬組成物。
【請求項１６１】
マクロファージ増殖を誘導するための医薬組成物であって、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドと医薬的に許容できる担体とを含む医薬組成物。
【請求項１６２】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１６１に記載の医薬組成物。
【請求項１６３】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１６１に記載の医薬組成物。
【請求項１６４】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１６１に記載の医薬組成物。
【請求項１６５】
血小板減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１６６】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１６５に記載の医薬組成物。
【請求項１６７】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１６５に記載の医薬組成物。
【請求項１６８】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１６５に記載の医薬組成物。
【請求項１６９】
汎血球減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１７０】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１６９に記載の医薬組成物。
【請求項１７１】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１６９に記載の医薬組成物。
【請求項１７２】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１６９に記載の医薬組成物。
【請求項１７３】
顆粒球減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１７４】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１７３に記載の医薬組成物。
【請求項１７５】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１７３に記載の医薬組成物。
【請求項１７６】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１７３に記載の医薬組成物。
【請求項１７７】
高脂血症を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１７８】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１７７に記載の医薬組成物。
【請求項１７９】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１７７に記載の医薬組成物。
【請求項１８０】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１７７に記載の医薬組成物。
【請求項１８１】
コレステロール血症を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１８２】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１８１に記載の医薬組成物。
【請求項１８３】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１８１に記載の医薬組成物。
【請求項１８４】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１８１に記載の医薬組成物。
【請求項１８５】
糖尿を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１８６】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１８５に記載の医薬組成物。
【請求項１８７】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１８５に記載の医薬組成物。
【請求項１８８】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１８５に記載の医薬組成物。
【請求項１８９】
糖尿病を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１９０】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１８９に記載の医薬組成物。
【請求項１９１】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１８９に記載の医薬組成物。
【請求項１９２】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１８９に記載の医薬組成物。
【請求項１９３】
ＡＩＤＳを予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１９４】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１９３に記載の医薬組成物。
【請求項１９５】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１９３に記載の医薬組成物。
【請求項１９６】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１９３に記載の医薬組成物。
【請求項１９７】
ＨＩＶによる感染を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１９８】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項１９７に記載の医薬組成物。
【請求項１９９】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項１９７に記載の医薬組成物。
【請求項２００】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項１９７に記載の医薬組成物。
【請求項２０１】
自己骨髄もしくは末梢血幹細胞移植（ＡＳＣＴ）または同種骨髄移植（ＢＭＴ）によって補助された骨髄破壊量の化学放射線治療に関係する状態を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２０２】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２０１に記載の医薬組成物。
【請求項２０３】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２０１に記載の医薬組成物。
【請求項２０４】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２０１に記載の医薬組成物。
【請求項２０５】
トロンボポエチン処置可能状態を処置するための医薬組成物であって、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２０６】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２０５に記載の医薬組成物。
【請求項２０７】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２０５に記載の医薬組成物。
【請求項２０８】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２０５に記載の医薬組成物。
【請求項２０９】
トロンボポエチンの効果を強化するための医薬組成物であって、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２１０】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２０９に記載の医薬組成物。
【請求項２１１】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２０９に記載の医薬組成物。
【請求項２１２】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２０９に記載の医薬組成物。
【請求項２１３】
末梢幹細胞動員を増進するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２１４】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２１３に記載の医薬組成物。
【請求項２１５】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２１３に記載の医薬組成物。
【請求項２１６】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２１３に記載の医薬組成物。
【請求項２１７】
造血を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２１８】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２１７に記載の医薬組成物。
【請求項２１９】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２１７に記載の医薬組成物。
【請求項２２０】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２１７に記載の医薬組成物。
【請求項２２１】
造血幹細胞増殖を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２２２】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２２１に記載の医薬組成物。
【請求項２２３】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２２１に記載の医薬組成物。
【請求項２２４】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２２１に記載の医薬組成物。
【請求項２２５】
造血幹細胞の増殖および分化を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２２６】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２２５に記載の医薬組成物。
【請求項２２７】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２２５に記載の医薬組成物。
【請求項２２８】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２２５に記載の医薬組成物。
【請求項２２９】
巨核球産生を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２３０】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２２９に記載の医薬組成物。
【請求項２３１】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２２９に記載の医薬組成物。
【請求項２３２】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２２９に記載の医薬組成物。
【請求項２３３】
赤血球産生を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２３４】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２３３に記載の医薬組成物。
【請求項２３５】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２３３に記載の医薬組成物。
【請求項２３６】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２３３に記載の医薬組成物。
【請求項２３７】
白血球産生を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２３８】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２３７に記載の医薬組成物。
【請求項２３９】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２３７に記載の医薬組成物。
【請求項２４０】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２３７に記載の医薬組成物。
【請求項２４１】
血小板産生を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２４２】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２４１に記載の医薬組成物。
【請求項２４３】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２４１に記載の医薬組成物。
【請求項２４４】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２４１に記載の医薬組成物。
【請求項２４５】
血小板減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２４６】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２４５に記載の医薬組成物。
【請求項２４７】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２４５に記載の医薬組成物。
【請求項２４８】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２４５に記載の医薬組成物。
【請求項２４９】
汎血球減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２５０】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２４９に記載の医薬組成物。
【請求項２５１】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２４９に記載の医薬組成物。
【請求項２５２】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２４９に記載の医薬組成物。
【請求項２５３】
顆粒球減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２５４】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２５３に記載の医薬組成物。
【請求項２５５】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２５３に記載の医薬組成物。
【請求項２５６】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２５３に記載の医薬組成物。
【請求項２５７】
自己免疫疾患または自己免疫状態、ウイルス疾患、ウイルス感染、血液疾患、血液学的欠乏症、血小板減少症、汎血球減少症、顆粒球減少症、高脂血症、高コレステロール血症、糖尿、高血糖症、糖尿病、ＡＩＤＳ、ＨＩＶ−１、ヘルパーＴ細胞障害、樹状細胞欠乏症、マクロファージ欠乏症、造血幹細胞障害（血小板障害、リンパ球障害、形質細胞障害および好中球障害を含む）、前白血病状態、白血病状態、化学療法または放射線療法により生じる免疫系障害、免疫不全疾患の処置に起因するヒト免疫系障害、および細菌感染症からなる群より選択される適応症を処置または予防するための医薬組成物であって、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２５８】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２５７に記載の医薬組成物。
【請求項２５９】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２５７に記載の医薬組成物。
【請求項２６０】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２５７に記載の医薬組成物。
【請求項２６１】
血液疾患、血液学的欠乏症、血小板減少症、汎血球減少症、顆粒球減少症、樹状細胞欠乏症、マクロファージ欠乏症、造血幹細胞障害（血小板障害、リンパ球障害、形質細胞障害および好中球障害を含む）、前白血病状態、白血病状態、骨髄異形成症候群、再生不良性貧血、および骨髄機能不全からなる群より選択される適応症を処置または予防するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２６２】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２６１に記載の医薬組成物。
【請求項２６３】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２６１に記載の医薬組成物。
【請求項２６４】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２６１に記載の医薬組成物。
【請求項２６５】
配列番号１〜２５からなる群より選択されるアミノ酸配列を持つ精製ペプチド。
【請求項２６６】
配列番号１〜２５からなる群より選択されるアミノ酸配列を持つ精製ペプチドと、医薬的に許容できる担体とを含む医薬組成物。
【請求項２６７】
トロンボポエチンと、配列番号１〜２５からなる群より選択されるアミノ酸配列を持つ精製ペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項２６８】
骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成を増進する方法であって、提供血液幹細胞の提供およびレシピエントへの移植に先だって、提供血液幹細胞のドナーをαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドで処置することを含む方法。
【請求項２６９】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２６８に記載の方法。
【請求項２７０】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２６８に記載の方法。
【請求項２７１】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２６８に記載の方法。
【請求項２７２】
骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成を増進する方法であって、レシピエントへの提供血液幹細胞の移植に先立って、提供血液幹細胞をαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドで処理することを含む方法。
【請求項２７３】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２７２に記載の方法。
【請求項２７４】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２７２に記載の方法。
【請求項２７５】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２７２に記載の方法。
【請求項２７６】
骨髄破壊を受けたレシピエントにおける血液幹細胞のコロニー形成を増進する方法であって、レシピエントへの血液幹細胞の移植に先立って、血液幹細胞をαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドで処理することを含む方法。
【請求項２７７】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２７６に記載の方法。
【請求項２７８】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２７６に記載の方法。
【請求項２７９】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２７６に記載の方法。
【請求項２８０】
骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成を増進する方法であって、提供血液幹細胞の提供およびレシピエントへの移植に先だって、提供血液幹細胞のドナーをαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとトロンボポエチンとで処置することを含む方法。
【請求項２８１】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２８０に記載の方法。
【請求項２８２】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２８０に記載の方法。
【請求項２８３】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２８０に記載の方法。
【請求項２８４】
骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成を増進する方法であって、レシピエントへの提供血液幹細胞の移植に先立って、提供血液幹細胞をαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとトロンボポエチンとで処理することを含む方法。
【請求項２８５】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２８４に記載の方法。
【請求項２８６】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２８４に記載の方法。
【請求項２８７】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２８４に記載の方法。
【請求項２８８】
骨髄破壊を受けたレシピエントにおける血液幹細胞のコロニー形成を増進する方法であって、レシピエントへの血液幹細胞の移植に先立って、血液幹細胞をαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとトロンボポエチンとで処理することを含む方法。
【請求項２８９】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２８８に記載の方法。
【請求項２９０】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２８８に記載の方法。
【請求項２９１】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２８８に記載の方法。
【請求項２９２】
自己免疫疾患を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項２９３】
ウイルス疾患を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項２９４】
ウイルス感染を予防するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項２９５】
造血を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項２９６】
造血幹細胞増殖を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【請求項２９７】
造血幹細胞を増殖および分化の誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項２９８】
巨核球産生を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項２９９】
赤血球産生を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３００】
白血球産生を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３０１】
血小板産生を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３０２】
形質細胞増殖を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３０３】
樹状細胞増殖を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３０４】
マクロファージ増殖を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３０５】
血小板減少症を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３０６】
汎血球減少症を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３０７】
顆粒球減少症を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３０８】
高脂血症を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３０９】
コレステロール血症を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３１０】
糖尿を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３１１】
糖尿病を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３１２】
ＡＩＤＳを予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３１３】
ＨＩＶによる感染を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３１４】
自己骨髄もしくは末梢血幹細胞移植（ＡＳＣＴ）または同種骨髄移植（ＢＭＴ）によって補助された骨髄破壊量の化学放射線治療に関係する状態を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３１５】
トロンボポエチン処置可能状態を処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３１６】
トロンボポエチンの効果を強化するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３１７】
末梢幹細胞動員を増進するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３１８】
骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成を増進するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３１９】
骨髄破壊を受けたレシピエントにおける血液幹細胞のコロニー形成を増進するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用。
【請求項３２０】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、自己免疫疾患の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３２１】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、ウイルス疾患の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３２２】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、ウイルス感染の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３２３】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血の誘導を目的とする使用。
【請求項３２４】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血幹細胞増殖の誘導を目的とする使用。
【請求項３２５】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血幹細胞の増殖および分化の誘導を目的とする使用。
【請求項３２６】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、巨核球産生の誘導を目的とする使用。
【請求項３２７】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、赤血球産生の誘導を目的とする使用。
【請求項３２８】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、白血球産生の誘導を目的とする使用。
【請求項３２９】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、血小板産生の誘導を目的とする使用。
【請求項３３０】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、形質細胞増殖の誘導を目的とする使用。
【請求項３３１】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、樹状細胞増殖の誘導を目的とする使用。
【請求項３３２】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、マクロファージ増殖の誘導を目的とする使用。
【請求項３３３】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、血小板減少症の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３３４】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、汎血球減少症の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３３５】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、顆粒球減少症の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３３６】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、高脂血症の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３３７】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、コレステロール血症の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３３８】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、糖尿の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３３９】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、糖尿病の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３４０】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、ＡＩＤＳの予防または処置を目的とする使用。
【請求項３４１】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、ＨＩＶによる感染の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３４２】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、自己骨髄もしくは末梢血幹細胞移植（ＡＳＣＴ）または同種骨髄移植（ＢＭＴ）によって補助された骨髄破壊量の化学放射線治療に関係する状態の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３４３】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、トロンボポエチン処置可能状態の処置を目的とする使用。
【請求項３４４】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、トロンボポエチンの効果の強化を目的とする使用。
【請求項３４５】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来する医薬的に許容できる担体ペプチドを含む医薬組成物の、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成の増進を目的とする使用。
【請求項３４６】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける血液幹細胞のコロニー形成の増進を目的とする使用。
【請求項３４７】
有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、末梢幹細胞動員の増進を目的とする使用。
【請求項３４８】
有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血の誘導を目的とする使用。
【請求項３４９】
有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血幹細胞増殖の誘導を目的とする使用。
【請求項３５０】
有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血幹細胞の増殖および分化の誘導を目的とする使用。
【請求項３５１】
有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、巨核球産生の誘導を目的とする使用。
【請求項３５２】
有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、赤血球産生の誘導を目的とする使用。
【請求項３５３】
有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、白血球産生の誘導を目的とする使用。
【請求項３５４】
有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、血小板産生の誘導を目的とする使用。
【請求項３５５】
有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、血小板減少症の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３５６】
有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、汎血球減少症の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３５７】
有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、顆粒球減少症の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３５８】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、自己免疫疾患または自己免疫状態、ウイルス疾患、ウイルス感染、血液疾患、血液学的欠乏症、血小板減少症、汎血球減少症、顆粒球減少症、高脂血症、高コレステロール血症、糖尿、高血糖症、糖尿病、ＡＩＤＳ、ＨＩＶ−１、ヘルパーＴ細胞障害、樹状細胞欠乏症、マクロファージ欠乏症、造血幹細胞障害（血小板障害、リンパ球障害、形質細胞障害および好中球障害を含む）、前白血病状態、白血病状態、化学療法または放射線療法により生じる免疫系障害、免疫不全疾患の処置に起因するヒト免疫系障害、および細菌感染症からなる群より選択される適応症の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３５９】
有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、血液疾患、血液学的欠乏症、血小板減少症、汎血球減少症、顆粒球減少症、樹状細胞欠乏症、マクロファージ欠乏症、造血幹細胞障害（血小板障害、リンパ球障害、形質細胞障害および好中球障害を含む）、前白血病状態、白血病状態、骨髄異形成症候群、再生不良性貧血、および骨髄機能不全からなる群より選択される適応症の予防または処置を目的とする使用。
【請求項３６０】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとトロンボポエチンとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成の増進を目的とする使用。
【請求項３６１】
有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとトロンボポエチンとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける血液幹細胞のコロニー形成の増進を目的とする使用。
【請求項３６２】
前記ペプチドがαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である請求項２９２〜３６１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６３】
前記ペプチドが配列番号１〜２５からなる群より選択されるアミノ酸配列を持つ精製ペプチドである請求項２９２〜３６１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６４】
前記ペプチドが合成ペプチドである請求項２９２〜３６１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６５】
前記ペプチドが配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ請求項２９２〜３６１のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は乳カゼインのαＳ１画分のＮ末端と同じ配列に由来するまたは類似する生物活性ペプチドに関する。これらのペプチドは、免疫応答を刺激し増進すること、ウイルス感染から防護すること、血清コレステロールレベルを正常化すること、および造血を刺激することができる。本カゼイン由来ペプチドは無毒性であり、免疫病、高コレステロール血症、血液障害およびウイルス関連疾患の処置および予防に使用することができる。
【０００２】
発明の背景
栄養素由来の生理活性分子：
多くの食品が栄養価を持つことに加えて、消化経路の一定の画分および産物は、生理学的過程に影響を及ぼす能力も持っている。これら「栄養外」成分の一部は、例えば母乳および初乳中の免疫グロブリン、大豆食品に見いだされるフィトエストロゲン、果物由来のポリフェノール系抗酸化物質およびビタミン類のように、滋養分全体のなかに活性型として存在する。他の栄養外成分は、例えばラクトグロビン由来の降圧ペプチドのように、栄養分子内に隠されていて、消化中または食品加工中に活性型として放出される［Ｋｉｔｔｓ，Ｄ．Ｄ．（１９９９）Ｃａｎ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．７２（４）：４２３−４３４］。
【０００３】
乳タンパク質中の生物活性：
主要な乳タンパク質であるカゼインは伝統的には電気泳動移動度に従って３つの画分（すなわちα、βおよびγ）から構成されると定義づけられていた［Ｎ．Ｊ．Ｈｉｐｐら（１９５２）Ｄａｉｒｙ  Ｓｃｉ．，３５：２７２］。現在カゼインはサブグループαＳ１、αＳ２、βおよびκのそれぞれのアミノ酸配列に従って定義されている［Ｗ．Ｎ．Ｅｎｇｅｌら（１９８４）Ｊ．Ｄａｉｒｙ  Ｓｃｉ．６７：１５９９］。
【０００４】
消化の過程でカゼインタンパク質はキモシン（レンニン）、トリプシンおよびペプシンなどの酸性プロテアーゼによるタンパク質分解的切断を受けて、より短いペプチドを生成し、生成したタンパク質断片による凝固およびカルシウム捕捉を引き起す。乳化合物を使ったいくつかの研究により、カゼインに関連する殺菌活性が明らかにされている。米国特許第３７６４６７０号には、微生物に対して抗生物質特性を持つタンパク質分解的カゼイン消化物が開示されている。イスラエル特許第４２８６３号には、カゼインのＮ末端の２３アミノ酸からなり抗菌活性を持つカゼイン由来ペプチドが記載されている。さらに、カゼインまたはその誘導体にはオピオイド様活性および成長因子様活性などの他の生理活性特性もあると言われている［Ｋｉｔｔｓ，Ｄ．Ｄ．（１９９９）（前掲）］。
【０００５】
カゼインペプチドには免疫調節活性も認められている。［Ｃｏｓｔｅら（１９９２，Ｉｍｍｕｎ．Ｌｅｔｔ．３３：４１−４６）］は、βカゼインのＣ末端に由来するペプチドで処理した後のラットリンパ球増殖の増進を観察した。しかしこれらの研究では、それらカゼインペプチド中のどの配列が「栄養外」特性を付与しているのかは決定されていない。
【０００６】
癌治療における造血：
高用量化学治療を受けた患者、特に自己骨髄もしくは末梢血幹細胞移植（ＡＳＣＴ）または同種骨髄移植（ＢＭＴ）によって補助された骨髄破壊量の化学放射線治療を受けた患者は、汎血球減少症による高い危険にさられている。移植直後の期間は、汎血球減少症が、ありふれた細菌、ウイルス、真菌および寄生虫病原体による重篤で時には致命的な感染合併症の発症を招くこともある。同様に、血小板減少症はしばしば出血傾向をもたらし、時には長期間にわたる血小板依存を招く。血小板に対する抵抗性が生じると、出血エピソードは生命を脅かす可能性があり、出血合併症はしばしば致死的である。顆粒球減少症による危険は補充措置によって一部克服することができ、顆粒球の再構築を増進することができる組換えヒトサイトカイン、特に顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）および顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）の投与による措置は最も有効である。これらの薬剤は極めて高価（約＄２００〜４００／日／患者）であり、まれに過敏反応、発熱、骨痛、時として心膜炎および胸膜炎を含む脈管漏出症候群による副作用を引き起すこともある。これら副作用の一部は、これらの造血成長因子によって内因的に放出される他のサイトカインによるのかもしれない。さらに、これら造血成長因子の使用は、急性および慢性骨髄性白血病の場合ならびに骨髄異形成症候群の場合など、Ｇ−ＣＳＦまたはＧＭ−ＣＳＦ受容体を保持する腫瘍細胞を持つ患者には禁忌だろう。汎血球減少症の危険にさらされている患者の処置には造血性サイトカインの使用による大きな進歩があったが、血小板減少症の処置は進歩していない。高用量化学治療後の患者、特にＡＳＣＴ後の患者には、何ヶ月も持続する（長ければ３年に及ぶ）血小板減少症の危険があり、一部の血小板減少症患者は二度と回復しないかもしれない。複数の血液製剤による処置を過去に受けたことがある患者の多くは血小板抵抗性になるので、単一ドナーからの集中的かつ頻繁な血小板輸血を行ったとしても、血小板減少症を克服することが一時的にさえ不可能な場合もあるだろう。血小板に対する抵抗性および長期化した血小板減少症は世界中のＡＳＣＴ施設で共通する死因となっている。
【０００７】
現在、組換えヒトインターロイキン３（ｒｈＩＬ３）および組換えヒトインターロイキン６（ｒｈＩＬ６  ）などのいくつかの新しい組換えサイトカインが、巨核球産生および血小板再構築を増進するための薬剤候補として研究されている。残念なことに、ｒｈＩＬ３およびｒｈＩＬ６は血小板再構築を増進しうるものの、その作用は決して目覚しいものではなく、かなり時間がかかるらしいことが、予備臨床試験によって示されている。
【０００８】
長期化した血小板減少症が現在の臨床的骨髄移植施設において大きな問題となっていることは明らかであり、この問題に対して満足のできる解決策はまだ見つかっていない。
【０００９】
したがって、安全であり、安価であり、即効性があり、しかも上記制限のない、明確な定義を持つ造血、特に巨核球産生の刺激剤の必要性は広く認識されており、またそのような造血、特に巨核球産生の刺激剤があれば極めて有益だろう。
【００１０】
造血および血小板機能の調節におけるトロンボポエチン（ＴＰＯ）：
ＴＰＯは生体内での血小板産生の主要調節因子であると思われる。ただし、血小板欠乏症における腎由来成長因子および肝由来成長因子の増加は、これらの器官におけるＴＰＯ生合成の適応によって起こるわけではない。むしろ、骨髄が血小板産生に利用することのできる循環ＴＰＯの量を、循環血小板数が決定するという、「フィードバックループ」が存在するようである。また、ＴＰＯは重要な多系統作用を持つ初期作用サイトカインであることが証明されている。すなわち、ＴＰＯは単独で、または他の初期作用サイトカインと共同して、（ｉ）前駆細胞の生存性を高め、アポトーシスを抑制すること、（ｉｉ）造血幹細胞の産生および機能を調節すること、（ｉｉｉ）静止多分化能細胞の細胞分化を誘発すること、（ｉｖ）多系統分化を誘導すること、ならびに（ｖ）顆粒球、赤血球、マクロファージおよび巨核球（ＭＫ）を含む多系統コロニー（ＣＦＵ−ＧＥＭＭ）の形成を増進することができる。さらにＴＰＯは、より限定された、顆粒球／単球、巨核球および赤芽球コロニーの前駆体の産生を刺激すると共に、フィブロネクチンおよびフィブリノゲンへの原始ヒト骨髄および巨核球細胞の接着も刺激する。したがってＴＰＯは、臨床血液病専門医／移植医にとって、すなわち自己移植および同種移植のための幹細胞および分化方向が決定した前駆細胞の動員、増殖およびエクスビボ（ｅｘ  ｖｉｖｏ）増殖にとって、重要なサイトカインである［ｖｏｎ  ｄｅｍ  Ｂｏｒｎｅ，Ａ．Ｅ．Ｇ．Ｋｒ．ら（１９９８）「トロンボポエチン：血小板障害における役割および医療における新薬としての役割（Ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ：ｉｔ′ｓ  ｒｏｌｅ  ｉｎ  ｐｌａｔｅｌｅｔ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ  ａｎｄ  ａｓ  ａ  ｎｅｗ  ｄｒｕｇ  ｉｎ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ）」Ｂａｉｌｌｉｅｒｓ  Ｃｌｉｎ．Ｈｅｍａｔｏｌ．Ｊｕｎｅ：１１（２），４２７−４５］。
【００１１】
ＴＰＯの造血作用に加えて、この強力な成長因子は、さまざまなアゴニストに対して血小板を感作し、血小板−細胞外マトリックス相互作用を調整する。ＴＰＯ自体は血小板凝集を引き起こさないが、ＴＰＯはＡＤＰが誘導する凝集、特に凝集の第２波でＡＤＰが誘導する凝集をアップレギュレートし、顆粒（例えばＡＤＰ、ＡＴＰ、セロトニン）放出およびトロンボキサンＢ２の産生をアップレギュレートし、コラーゲンへの血小板付着を増加させ、剪断が誘導する血小板凝集を増強する。またＴＰＯは、ＰＭＮの活性化を刺激して、ＩＬ−８放出を誘発し、酸素代謝産物の産生を誘発し、おそらくは抗微生物防御を増進するようである。
【００１２】
さまざまな血液学的状態の理解と処置におけるＴＰＯの価値は臨床研究によって示唆されている。特発性再生不良性貧血（ＡＡ）患者では、免疫抑制療法後の寛解期でもＴＰＯレベルが上昇した状態が持続して、造血欠陥を示す。ＴＰＯは他の形態の無形成性血小板減少症でも上昇するが、血小板破壊が増加している状態では上昇しない。ＴＰＯ産生の反応性の増加は、破壊性血小板減少症の場合は不十分なようである。したがって、ＴＰＯは無形成性血小板減少症だけでなく、破壊性血小板減少症でも、一つの治療選択肢である。
【００１３】
血小板産生剤は、病的血小板減少症または処置誘発性血小板減少症の予防および／または処置にとって、また血小板輸血の代替物として、臨床的に極めて興味深い。評価されたサイトカインのうち、わずかに有効なＩＬ−１１以外はすべて、臨床用途には容認できないとみなされている。ＴＰＯは血小板減少症の処置に最適なサイトカインになると広く考えられている。最近、組換えヒトＴＰＯ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）を入手できるようになり、正確な薬物動態決定と臨床試験が可能になった。したがってＴＰＯの可能性のある応用例には支援的ケア（化学療法／放射線療法、骨髄および幹細胞移植後）、血液疾患（ＡＡ、脊髄形成異常、先天性および後天性血小板減少症）、肝臓病、輸血（血小板の増殖、収集、動員および貯蔵）ならびに手術（肝臓移植を含む）が包含される。特に興味深いのは、脊髄形成異常に対するＴＰＯ／ＥＰＯ／Ｇ−ＣＳＦカクテルの使用の可能性、末梢幹細胞動員のためのＧ−ＣＳＦとＴＰＯの併用の可能性、ならびにＣＤ３４＋細胞の収集および優れた血小板再構築のための巨核球のエクスビボ（ｅｘ  ｖｉｖｏ）増殖におけるＴＰＯの使用の可能性である。しかし、臨床的応用が検討されている他の造血剤と同様に、ＴＰＯも費用が高く、治療有効レベルでは抗原性である可能性がある。したがって、ＴＰＯ活性を強化することができる血小板産生の刺激因子であって、安全であり、安価であり、かつ入手が容易なものがあれば有益だろう。
【００１４】
カゼインのαＳ１画分：
カゼインのαＳ１画分は様々な方法によって乳タンパク質から得ることができ［Ｄ．Ｇ．ＳｃｈｍｉｄｔｈおよびＴ．Ａ．Ｊ．Ｐａｙｎｅｓ（１９６３）Ｂｉｏｃｈｉｍ．，Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，７８：４９２、Ｍ．Ｐ．ＴｈｏｍｐｓｏｎおよびＣ．Ａ．Ｋｉｄｄｙ（１９６４）Ｊ．Ｄａｉｒｙ  Ｓｃｉ．，４７：６２６、Ｊ．Ｃ．Ｍｅｒｃｉｅｒら（１９６８）Ｂｕｌｌ．Ｓｏｃ．Ｃｈｉｍ．Ｂｉｏｌ．５０：５２１］、カゼインαＳ１画分の全アミノ酸配列はＪ．Ｃ．Ｍｅｒｃｉｅｒら（１９７１）（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２３：４１）によって決定されている。ウシカゼインαＳ１画分のゲノム配列およびコード配列も組換えＤＮＡ技術を使ってクローン化され、配列決定されている［Ｄ．Ｋｏｃｚａｎら（１９９１）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．１９（２０）：５５９１、ＭｃＫｎｉｇｈｔ，Ｒ．Ａ．ら（１９８９）Ｊ．Ｄａｉｒｙ  Ｓｃｉ．７２：２４６４−７３］。カゼインαＳ１画分からのタンパク質分解的切断およびＮ末端断片の同定については文献に記載があり［Ｊ．Ｃ．Ｍｅｒｃｉｅｒら（１９７０）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１６：４３９、Ｐ．Ｌ．Ｈ．ＭｃＳｗｅｅｎｅｙら（１９９３）Ｊ．Ｄａｉｒｙ  Ｒｅｓ．，６０：４０１］、全乳タンパク質の摂取後に起こるこの断片の腸管吸収および哺乳類血漿への出現も文献に記載されている［Ｆｉａｔ，Ａ．Ｍ．ら（１９９８）Ｂｉｏｃｈｉｍｉｅ，８０（２）：２１５５−６５］。Ｍｅｉｓｅｌ，Ｈ．とＢｏｃｋｅｌｍａｎｎ，Ｗ．［（１９９９）Ａｎｔｏｎｉｅ  Ｖａｎ  Ｌｅｅｕｗｅｎｈｏｅｋ，７６：２０７−１５］は、αおよびβカゼイン画分の乳酸菌消化によって放出されるペプチド中に、免疫ペプチドであるカソキニン類（ｃａｓｏｋｉｎｉｎｓ）とカソモルフィン類（ｃａｓｏｍｏｒｐｈｉｎｓ）のアミノ酸配列を検出した。α−およびκ−カゼイン画分のＣ末端部分に関して実証された抗凝集および血栓溶解活性は特に興味深い［Ｃｈａｂａｎｃｅ，Ｂ．ら（１９９７）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｉｎｔ．４２（１）：７７−８４  、Ｆｉａｔ  ＡＭ．ら（１９９３）Ｊ．Ｄａｉｒｙ  Ｓｃｉ．７６（１）：３０１−３１０］。
【００１５】
Ｎ末端αＳ１アミノ酸配列中に隠された潜在的生理活性ペプチドは、先の研究により文献に記載されているが、それらのタンパク質断片、特定配列または明確に規定された合成ペプチドを造血の増進、ウイルス感染の予防または自己免疫疾患の発症の調節に使用することは言及されていない。
【００１６】
発明の要旨
本発明は、自己免疫疾患を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００１７】
さらに本発明は、ウイルス疾患を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００１８】
さらに本発明は、ウイルス感染を予防する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００１９】
さらに本発明は、造血を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００２０】
さらに本発明は、造血幹細胞増殖を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００２１】
さらに本発明は、造血幹細胞の増殖および分化を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００２２】
さらに本発明は、巨核球産生を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００２３】
さらに本発明は、赤血球産生を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００２４】
さらに本発明は、白血球産生を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００２５】
さらに本発明は、血小板産生を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００２６】
さらに本発明は、形質細胞増殖を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００２７】
さらに本発明は、樹状細胞増殖を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００２８】
さらに本発明は、マクロファージ増殖を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００２９】
さらに本発明は、血小板減少症を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００３０】
さらに本発明は、汎血球減少症を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００３１】
さらに本発明は、顆粒球減少症を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００３２】
さらに本発明は、高脂血症を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００３３】
さらに本発明は、コレステロール血症を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００３４】
さらに本発明は、糖尿を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００３５】
さらに本発明は、糖尿病を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００３６】
さらに本発明は、ＡＩＤＳを予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００３７】
さらに本発明は、ＨＩＶによる感染を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００３８】
さらに本発明は、自己骨髄もしくは末梢血幹細胞移植（ＡＳＣＴ）または同種骨髄移植（ＢＭＴ）によって補助された骨髄破壊量の化学放射線治療に関係する状態を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００３９】
さらに本発明は、エリスロポエチン処置可能状態を処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００４０】
さらに本発明は、エリスロポエチンの効果を強化する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００４１】
さらに本発明は、トロンボポエチン処置可能状態を処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００４２】
さらに本発明は、トロンボポエチンの効果を強化する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００４３】
さらに本発明は、末梢幹細胞動員を増進する方法であって、その必要がある対象に、有効量のトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含む医薬組成物の有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【００４４】
さらに本発明は、自己免疫疾患を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００４５】
さらに本発明は、ウイルス疾患を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００４６】
さらに本発明は、ウイルス感染を予防するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００４７】
さらに本発明は、造血を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００４８】
さらに本発明は、造血幹細胞増殖を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００４９】
さらに本発明は、造血幹細胞の増殖および分化を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００５０】
さらに本発明は、巨核球産生を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００５１】
さらに本発明は、赤血球産生を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００５２】
さらに本発明は、白血球産生を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００５３】
さらに本発明は、血小板産生を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００５４】
さらに本発明は、形質細胞増殖を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００５５】
さらに本発明は、樹状細胞増殖を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００５６】
さらに本発明は、マクロファージ増殖を誘導するための医薬組成物であって、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドと医薬的に許容できる担体とを含む医薬組成物を提供する。
【００５７】
さらに本発明は、血小板減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００５８】
さらに本発明は、汎血球減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００５９】
さらに本発明は、顆粒球減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００６０】
さらに本発明は、高脂血症を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００６１】
さらに本発明は、コレステロール血症を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００６２】
さらに本発明は、糖尿を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００６３】
さらに本発明は、糖尿病を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００６４】
さらに本発明は、ＡＩＤＳを予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００６５】
さらに本発明は、ＨＩＶによる感染を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００６６】
さらに本発明は、自己骨髄もしくは末梢血幹細胞移植（ＡＳＣＴ）または同種骨髄移植（ＢＭＴ）によって補助された骨髄破壊量の化学放射線治療に関係する状態を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００６７】
さらに本発明は、トロンボポエチン処置可能状態を処置するための医薬組成物であって、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００６８】
さらに本発明は、トロンボポエチンの効果を強化するための医薬組成物であって、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００６９】
さらに本発明は、末梢幹細胞動員を増進するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００７０】
さらに本発明は、造血を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００７１】
さらに本発明は、造血幹細胞増殖を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００７２】
さらに本発明は、造血幹細胞の増殖および分化を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００７３】
さらに本発明は、巨核球産生を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００７４】
さらに本発明は、赤血球産生を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００７５】
さらに本発明は、白血球産生を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００７６】
さらに本発明は、血小板産生を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００７７】
さらに本発明は、血小板減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００７８】
さらに本発明は、汎血球減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００７９】
さらに本発明は、顆粒球減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００８０】
さらに本発明は、自己免疫疾患または自己免疫状態、ウイルス疾患、ウイルス感染、血液疾患、血液学的欠乏症、血小板減少症、汎血球減少症、顆粒球減少症、高脂血症、高コレステロール血症、糖尿、高血糖症、糖尿病、ＡＩＤＳ、ＨＩＶ−１、ヘルパーＴ細胞障害、樹状細胞欠乏症、マクロファージ欠乏症、造血幹細胞障害（血小板障害、リンパ球障害、形質細胞障害および好中球障害を含む）、前白血病状態、白血病状態、化学療法または放射線療法により生じる免疫系障害、免疫不全疾患の処置に起因するヒト免疫系障害、および細菌感染症からなる群より選択される適応症を処置または予防するための医薬組成物であって、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００８１】
さらに本発明は、血液疾患、血液学的欠乏症、血小板減少症、汎血球減少症、顆粒球減少症、樹状細胞欠乏症、マクロファージ欠乏症、造血幹細胞障害（血小板障害、リンパ球障害、形質細胞障害および好中球障害を含む）、前白血病状態、白血病状態、骨髄異形成症候群、再生不良性貧血、および骨髄機能不全からなる群より選択される適応症を処置または予防するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００８２】
さらに本発明は、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成を増進する方法であって、提供血液幹細胞の提供およびレシピエントへの移植に先だって、提供血液幹細胞のドナーをαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドで処置することによって達成される方法を提供する。
【００８３】
さらに本発明は、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成を増進する方法であって、レシピエントへの提供血液幹細胞の移植に先立って、提供血液幹細胞をαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドで処理することによって達成される方法を提供する。
【００８４】
さらに本発明は、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける血液幹細胞のコロニー形成を増進する方法であって、レシピエントへの血液幹細胞の移植に先立って、血液幹細胞をαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドで処理することによって達成される方法を提供する。
【００８５】
さらに本発明は、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成を増進する方法であって、提供血液幹細胞の提供およびレシピエントへの移植に先だって、前記提供血液幹細胞のドナーをαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとトロンボポエチンとで処置することによって達成される方法を提供する。
【００８６】
さらに本発明は、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成を増進する方法であって、レシピエントへの提供血液幹細胞の移植に先立って、前記提供血液幹細胞をαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとトロンボポエチンとで処理することによって達成される方法を提供する。
【００８７】
さらに本発明は、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける血液幹細胞のコロニー形成を増進する方法であって、レシピエントへの血液幹細胞の移植に先立って、前記血液幹細胞をαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとトロンボポエチンとで処理することによって達成される方法を提供する。
【００８８】
さらに本発明は、自己免疫疾患を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【００８９】
さらに本発明は、ウイルス疾患を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【００９０】
さらに本発明は、ウイルス感染を予防するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【００９１】
さらに本発明は、造血を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【００９２】
さらに本発明は、造血幹細胞増殖を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【００９３】
さらに本発明は、造血幹細胞を増殖および分化の誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【００９４】
さらに本発明は、巨核球産生を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【００９５】
さらに本発明は、赤血球産生を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【００９６】
さらに本発明は、白血球産生を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【００９７】
さらに本発明は、血小板産生を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【００９８】
さらに本発明は、形質細胞増殖の誘導を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【００９９】
さらに本発明は、樹状細胞増殖を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１００】
さらに本発明は、マクロファージ増殖を誘導するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１０１】
さらに本発明は、血小板減少症を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１０２】
さらに本発明は、汎血球減少症を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１０３】
さらに本発明は、顆粒球減少症を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１０４】
さらに本発明は、高脂血症を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１０５】
さらに本発明は、コレステロール血症を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１０６】
さらに本発明は、糖尿を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１０７】
さらに本発明は、糖尿病を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１０８】
さらに本発明は、ＡＩＤＳを予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１０９】
さらに本発明は、ＨＩＶによる感染を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１１０】
さらに本発明は、自己骨髄もしくは末梢血幹細胞移植（ＡＳＣＴ）または同種骨髄移植（ＢＭＴ）によって補助された骨髄破壊量の化学放射線治療に関係する状態を予防または処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１１１】
さらに本発明は、トロンボポエチン処置可能状態を処置するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１１２】
さらに本発明は、トロンボポエチンの効果を強化するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１１３】
さらに本発明は、末梢幹細胞動員を増進するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１１４】
さらに本発明は、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成を増進するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１１５】
さらに本発明は、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける血液幹細胞のコロニー形成を増進するための医薬品の製造を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０１１６】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、自己免疫疾患の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１１７】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、ウイルス疾患の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１１８】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、ウイルス感染の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１１９】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１２０】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血幹細胞増殖の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１２１】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血幹細胞の増殖および分化の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１２２】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、巨核球産生の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１２３】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、赤血球産生の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１２４】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、白血球産生の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１２５】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、血小板産生の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１２６】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、形質細胞増殖の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１２７】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、樹状細胞増殖の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１２８】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、マクロファージ増殖の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１２９】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、血小板減少症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１３０】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、汎血球減少症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１３１】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、顆粒球減少症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１３２】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、高脂血症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１３３】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、コレステロール血症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１３４】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、糖尿の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１３５】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、糖尿病の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１３６】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、ＡＩＤＳの予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１３７】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、ＨＩＶによる感染の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１３８】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、自己骨髄もしくは末梢血幹細胞移植（ＡＳＣＴ）または同種骨髄移植（ＢＭＴ）によって補助された骨髄破壊量の化学放射線治療に関係する状態の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１３９】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、トロンボポエチン処置可能状態の処置を目的とする使用を開示する。
【０１４０】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、トロンボポエチンの効果の強化を目的とする使用を開示する。
【０１４１】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来する医薬的に許容できる担体ペプチドを含む医薬組成物の、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成の増進を目的とする使用を開示する。
【０１４２】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける血液幹細胞のコロニー形成の増進を目的とする使用を開示する。
【０１４３】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、末梢幹細胞動員の増進を目的とする使用を開示する。
【０１４４】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１４５】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血幹細胞増殖の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１４６】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血幹細胞の増殖および分化の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１４７】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、巨核球産生の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１４８】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、赤血球産生の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１４９】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、白血球産生の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１５０】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、血小板産生の誘導を目的とする使用を開示する。
【０１５１】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、血小板減少症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１５２】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、汎血球減少症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１５３】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、顆粒球減少症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１５４】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、自己免疫疾患または自己免疫状態、ウイルス疾患、ウイルス感染、血液疾患、血液学的欠乏症、血小板減少症、汎血球減少症、顆粒球減少症、高脂血症、高コレステロール血症、糖尿、高血糖症、糖尿病、ＡＩＤＳ、ＨＩＶ−１、ヘルパーＴ細胞障害、樹状細胞欠乏症、マクロファージ欠乏症、造血幹細胞障害（血小板障害、リンパ球障害、形質細胞障害および好中球障害を含む）、前白血病状態、白血病状態、化学療法または放射線療法により生じる免疫系障害、免疫不全疾患の処置に起因するヒト免疫系障害、および細菌感染症からなる群より選択される適応症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１５５】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、血液疾患、血液学的欠乏症、血小板減少症、汎血球減少症、顆粒球減少症、樹状細胞欠乏症、マクロファージ欠乏症、造血幹細胞障害（血小板障害、リンパ球障害、形質細胞障害および好中球障害を含む）、前白血病状態、白血病状態、骨髄異形成症候群、再生不良性貧血、および骨髄機能不全からなる群より選択される適応症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０１５６】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとトロンボポエチンとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成の増進を目的とする使用を開示する。
【０１５７】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとトロンボポエチンとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける血液幹細胞のコロニー形成の増進を目的とする使用を開示する。
【０１５８】
後述する本発明の好ましい態様のさらなる特徴によれば、上記ペプチドはαＳ１カゼインの断片化によって得られる断片である。
【０１５９】
後述する好ましい態様のさらなる特徴によれば、上記ペプチドは合成ペプチドである。
【０１６０】
後述する好ましい態様のさらなる特徴によれば、上記ペプチドは配列番号１〜２５の一つに記載の配列を持つ。
【０１６１】
さらに本発明は、配列番号１〜２５からなる群より選択されるアミノ酸配列を持つ精製ペプチドを提供する。
【０１６２】
さらに本発明は、配列番号１〜２５からなる群より選択されるアミノ酸配列を持つ精製ペプチドと、医薬的に許容できる担体とを含む医薬組成物を提供する。
【０１６３】
さらに本発明は、トロンボポエチンと、配列番号１〜２５からなる群より選択されるアミノ酸配列を持つ精製ペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０１６４】
本発明は、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来し、検出しうる毒性がなく高い治療効力を有するヒト疾患処置用のペプチドを提供することにより、現在知られている構成の欠点にうまく対処するものである。
【０１６５】
図面の簡単な説明
本明細書では一例として添付の図面を参照しながら本発明を説明する。図面に示す詳細は一例であって、本発明の好ましい態様の具体例を挙げる目的しかなく、本発明の原理および概念的特徴を最も有効かつ理解しやすいと考えられる形で説明するために記載するものである。この点に関して、本発明の構成上の詳細は、本発明の基本的理解に必要な程度にしか詳しく説明していないが、本明細書と図面を合わせて検討することにより、当業者には、本発明のいくつかの形態を実際に具体化する方法が明らかになるだろう。
【０１６６】
図１は天然カゼイン由来のペプチドによる培養マウス骨髄細胞中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞活性の刺激を表す図である。１００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドの存在下または不在下で培養した培養マウス骨髄細胞による３５Ｓ標識ＹＡＣ標的細胞の溶解を、ＹＡＣ細胞から培養上清に放出された全放射能の割合として表す（３５Ｓ放出百分率）。図１はエフェクター：標的細胞比が２５：１および５０：１である場合のＮＫ活性を表す。
【０１６７】
図２ａおよび２ｂは、天然カゼイン由来のペプチドによる培養ヒト末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ）中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞活性の刺激を表す図である。天然カゼイン由来のペプチドを添加せずに（０μｇ）培養するか、またはさまざまな濃度（５〜５００μｇ／ｍｌ）の天然カゼイン由来ペプチドを添加して培養した顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）処置ドナー由来の培養ヒトＰＢＳＣによる３５Ｓ標識Ｋ５６２標的細胞の溶解を、Ｋ５６２細胞から培養上清中に放出された放射能の全放射能に対する割合として表す（３５Ｓ放出百分率）。図２ａは、同じ患者から採取した２つの血液試料を異なるエフェクター：標的細胞比（１：２５および１：５０）で培養した場合のＮＫ活性を表す。図２ｂは、正常ドナーおよび罹患ドナーから採取した血液試料を同じエフェクター：標的細胞比で培養した場合のＮＫ活性を表す。■は１００：１のエフェクター：標的細胞比を表し、◆は５０：１のエフェクター：標的細胞比を表す。
【０１６８】
図３ａ〜３ｃは、天然カゼイン由来のペプチドによる培養ヒト末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ）からのナチュラルキラー（ＮＫ）およびＴリンパ球（Ｔ）細胞の増殖の刺激を表す図である。天然カゼイン由来ペプチドを添加せずに培養するか、または天然カゼイン由来ペプチドを添加して培養した顆粒球コロニー刺激因子処置ドナー由来の培養ＰＢＳＣにおけるＮＫおよびＴ細胞増殖を、抗ＣＤ３／ＦＩＴＣ蛍光抗Ｔ細胞抗体ＵＣＨＴ１または抗ＣＤ５６／ＲＰＥ蛍光抗ＮＫ細胞抗体ＭＯＣ−１（ＤＡＫＯ  ＡＳ（デンマーク））を結合する細胞のパーセンテージ（％）として表す。対照はＦＩＴＣおよびＲＰＥ結合抗マウスＩｇＧ抗体である。図３ａは、１００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドと共に（ペプチド）または天然カゼイン由来ペプチドなしで（対照）１０日間培養した後の、蛍光抗体ＣＤ５６を結合する培養ヒトＰＢＳＣのパーセンテージ（独立した５つの試料）を表す。図３ｂは、１００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドと共に（ペプチド）または天然カゼイン由来ペプチドなしで（対照）１４日間培養した後の、蛍光抗ＣＤ３（Ｔ細胞）抗体を結合する培養ヒトＰＢＳＣ細胞のパーセンテージを表す。図３ｃは、１００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドと共に（ペプチド）または天然カゼイン由来ペプチドなしで（対照）２８日間培養した後の、蛍光抗ＣＤ３（Ｔ細胞）抗体を結合する培養ヒトＰＢＳＣ細胞のパーセンテージ、ならびにＣＤ３およびＣＤ５６（ＴおよびＮＫ様細胞）抗体の両方を結合する細胞のパーセンテージを表す。
【０１６９】
図４はカゼイン由来の合成ペプチドによる培養ヒト末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ）中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞活性の刺激を表す図である。カゼイン由来の合成ペプチドを添加せず（０μｇ）に培養するか、または様々な濃度（１０〜５００μｇ／ｍｌ）のカゼイン由来合成ペプチドを添加して培養した培養ヒトＰＢＳＣ（乳癌患者由来）による３５Ｓ標識Ｋ５６２標的細胞の溶解を、Ｋ５６２細胞から培養上清中に放出された放射能の全放射能に対する割合として表す（放出百分率）。ペプチドは、αＳ１カゼインのＮ末端部分の最初の１〜１０（１ａ，◆）、１〜１１（２ａ，■）および１〜１２（３ａ，▲）アミノ酸のＮ末端配列に相当する（合成ペプチドの配列については以下の表３を参照されたい）。
【０１７０】
図５ａ−ｃは天然カゼイン由来のペプチドによる、様々な起源を持つ培養ヒト細胞の増殖の刺激を表す図である。様々な濃度の天然カゼイン由来ペプチドと共に１４〜２１日間培養した後の培養ヒト細胞の増殖を、各試料に組み込まれる［３Ｈ］−チミジンの量として表す。図５ａは、５０〜６００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドを添加して培養するか、または天然カゼイン由来ペプチドを添加せずに培養（ｃｔｒｌ）した２つのヒト末梢血幹細胞試料（ＰＢＳＣ１，■，（１５日間培養）およびＰＢＳＣ２，◆，（２０日間培養））へのラベルの取り込みを表す。図５ｂは、５０〜６００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドを添加するかまたは天然カゼイン由来ペプチドを添加せず（ｃｔｒｌ）に２１日間培養した後の培養ヒト骨髄への［３Ｈ］−チミジンの取り込みを表す。骨髄は寛解期の癌患者（ＢＭ自己，■、ＢＭ１，▲およびＢＭ２，□）または健常人（ＢＭ正常，◆）によって提供されたものである。図５ｃは、５０〜１０００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドを添加するかまたは天然カゼイン由来ペプチドを添加せず（ｃｔｒｌ）に１４日間培養した後の培養ヒト臍帯血細胞への［３Ｈ］−チミジンの取り込みを表す。臍帯血細胞は二人の別々のドナーによって提供されたものである（Ｃ．Ｂ．１，▲、Ｃ．Ｂ．２，■）。
【０１７１】
図６は天然カゼイン由来のペプチドとの培養に反応して起こるヒト骨髄および臍帯血からの血球前駆細胞の増殖を示す表である。後述の実施例で説明するように細胞を計数することにより、培養細胞の増殖を表す相対細胞数×１０４／ｍｌを決定した。健常人から得た骨髄（骨髄）および正常出産児から得た臍帯血（臍帯血）を、成長因子およびＡＢ血清の存在下で、様々な濃度（２５〜５００μｇ／ｍｌ）の天然カゼイン由来ペプチドを添加して、または天然カゼイン由来ペプチドを添加せずに、１３日間（臍帯血）または１４日間（骨髄）培養した。
【０１７２】
図７は、カゼイン由来の合成ペプチドを添加して行ったインビトロ培養が、マウス骨髄前駆細胞から得られるＣＦＵ−ＧＥＭＭコロニー中の巨核球、赤血球系細胞、形質細胞および樹状細胞の相対的分布（血液像）に及ぼす効果を示す表である。既述のＣＦＵ−ＧＥＭＭコロニーと同様に調製したマウス骨髄細胞から成長させた肉眼的コロニー中の細胞を評価した。細胞を造血因子および２５μｇまたはそれ以上のカゼイン由来合成ペプチドと共に１４日間培養した。血液像を、個々の細胞タイプが細胞全体に占めるパーセンテージとして表現する。図８は、骨髄破壊を受けた骨髄移植マウスで、天然カゼイン由来のペプチドによる処置に反応して起こる、末梢白血球再構築の刺激を表す。細胞数は白血球の数（×１０４／ｍｌ、血球計算器で計数）を表す。マウス（１群あたりｎ＝６）に亜致死線量を照射し、翌日、同系骨髄移植（１匹あたり１０６細胞）を行い、１日後に、１レシピエントあたり１ｍｇの天然カゼイン由来ペプチド（ペプチド：■）または１レシピエントあたり１ｍｇのヒト血清アルブミン（対照：◆）を静脈内投与した。
【０１７３】
図９は骨髄破壊した骨髄移植マウスにおいて、天然カゼイン由来ペプチドによる処置に反応して起こる血小板再構築の刺激を表す図である。血小板（ＰＬＴ）数は血小板数（×１０６／ｍｌ、血球計算器で計数したもの）を表す。マウス（ｎ＝６０／群）に致死量の放射線を照射し、１日目に同系骨髄移植（１０６細胞／マウス）を行い、１レシピエントあたり１ｍｇ／レシピエントの天然カゼイン由来ペプチド（ペプチド：◆）または１レシピエントあたり１ｍｇのヒト血清アルブミン（対照：■）を静脈内投与した。
【０１７４】
図１０ａ−ｆは培養ヒトＴリンパ球細胞における天然カゼイン由来ＦＩＴＣ結合ペプチドの侵入および核への取り込みを蛍光顕微鏡で記録したものを表す図である。Ｆ１およびＦ２は、天然カゼイン由来ＦＩＴＣ結合ペプチドの同じ画分である。後述の実施例で説明するようにＳｕｐ−Ｔ１細胞を１００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ＦＩＴＣ結合ペプチドと共にインキュベートした。表記の時間後に、細胞を洗浄して遊離のラベルを除去し、ホルマリンで固定し、レーザー走査共焦点顕微鏡による観察および記録を行うために試料を調製した。図１０ａ〜１０ｆは一連のインキュベーション時間の中から選択した細胞の画像であり、天然カゼイン由来のＦＩＴＣ結合ペプチドがＳｕｐ−Ｔ１細胞膜を貫通すること（図１０ａ、１０ｂ）および核内に濃縮されること（図１０ｃ〜１０ｆ）を示している。
【０１７５】
図１１は天然カゼイン由来ペプチドとの培養に反応して起こるＳｕｐ−Ｔ１リンパ球細胞増殖の刺激を示す表である。Ｓｕｐ−Ｔ１細胞（５０００細胞／ウェル）を様々な濃度（５０〜１０００μｇ／ｍｌ）の天然カゼイン由来ペプチドと共に培養し、表記の時点でウェル内をカウントし、［３Ｈ］−チミジンを１８時間パルスした。増殖指数は、天然カゼイン由来ペプチドと共に培養された細胞（３重試料）への［３Ｈ］−チミジン取り込み量の平均値を、天然カゼイン由来ペプチドなしで培養した細胞への取り込み量（対照）で割った比である。
【０１７６】
図１２は、天然カゼイン由来ペプチドによるＣＥＭリンパ球のＨＩＶ−１感染の阻害を示す表である。後述の実施例で説明するように、ＣＥＭ細胞を、天然カゼイン由来ペプチドと共に３時間前培養したＨＩＶ−１ウイルスと接触させるか（３時間）、またはＣＥＭ細胞をさまざまな濃度（５０〜１０００μｇ／ｍｌ）の天然カゼイン由来ペプチドと共に表記の時間（２４および４８時間）前培養した後、ＨＩＶ−１ウイルスと接触させた。後述の実施例で説明するように、感染後１５日目に細胞数を数え、Ｐ２４抗原アッセイにより、ＨＩＶ−１感染の重篤度について細胞をアッセイした。対照培養物は、ＩＦ＝天然カゼイン由来ペプチドによる前処理を行わずにＨＩＶ−１ウイルスと接触させたＣＥＭ細胞と、ＵＩＦ＝天然カゼイン由来ペプチドを添加せず、ＨＩＶ−１ウイルスとも接触させずに、同一の条件で培養したＣＥＭ細胞である。
【０１７７】
図１３は、カゼイン由来の合成ペプチドによるＣＥＭリンパ球のＨＩＶ−１感染の阻害を示す表である。後述の実施例で説明するように、ＣＥＭ細胞を、さまざまな濃度（１０〜５００μｇ／ｍｌ）の天然カゼイン由来の合成ペプチド（１Ｐ、３Ｐおよび４Ｐ）と共に（ペプチドの存在下で）３時間前培養しておいたＨＩＶ−１ウイルスと接触させた。後述の実施例で説明するように、感染後７日目に細胞数を数え、Ｐ２４抗原アッセイにより、ＨＩＶ−１感染の重篤度について細胞をアッセイした。対照培養物は（ＩＦ）は天然カゼイン由来のペプチドによる前処理を行わずにＨＩＶ−１ウイルスと接触させたＣＥＭ細胞である。
【０１７８】
図１４は、雌非肥満性糖尿病（ＮＯＤ）マウスにおけるＩ型（ＩＤＤＭ）糖尿病の天然カゼイン由来ペプチドによる予防を表す図である。天然カゼイン由来ペプチド１００μｇを５週間にわたって毎週１回（▲および□）または毎週２回注射（注射回数合計５回または１０回）した雌ＮＯＤマウスと、処置を施していない対照における糖尿を、処置後３６５日間にわたって、間隔を置いてモニターした。対照マウスはすべて糖尿を発症した後、死亡した。
【０１７９】
図１５は、雌Ｃ５７Ｂｌ／６マウスにおける食餌誘発性高コレステロール／高脂血症の、カゼイン由来合成ペプチドによる予防を表す図である。カゼイン由来ペプチドＢ、Ｃ、２ａまたは３Ｐを投与（ＩＰ）した、または処置を施していない（対照）、高コレステロール／高脂血症マウスから得た１試料あたり２匹のプール血液中の、総コレステロール（ＴＣ）、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）および低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）をアッセイした。「正常」試料は、アテローム発生性飼料を与えていない対照マウスを表す。
【０１８０】
図１６は天然カゼイン由来ペプチドの注射に反応して起こる癌患者における造血の刺激を示す表である。上述のように化学治療を現在受けているか化学治療を受けたことがある５人の女性癌患者から採取した末梢血を、上述のように天然カゼイン由来ペプチドの筋肉内注射前（ｎ）および筋肉内注射後（ｎ＋．．．）に、総白血球数（ＷＢＣ、×１０３）、血小板数（ＰＬＴ、×１０３）、赤血球数（ＲＢＣ、×１０３）およびヘモグロビン濃度（ｇｍ／ｄｌ）について計数した。患者１はＧ．Ｔ．に．、患者２はＥ．Ｃ．に、患者３はＥ．Ｓ．に、患者４はＪ．Ｒ．に、患者５はＤ．Ｍ．に、それぞれ相当する。
【０１８１】
図１７は急性骨髄性白血病を持つ血小板抵抗性患者（Ｍ−１）における血小板産生の天然カゼイン由来ペプチドによる刺激を表す図である。１００μｇの天然カゼイン由来ペプチドを（上記実施例で説明するように）筋肉内注射した後、表記の間隔で上述のように計数した末梢血の血小板含有量（ＰＬＡ、×１０６／ｍｌ）の変化として、血小板再構築を表した。
【０１８２】
図１８は急性骨髄性白血病を持つ血小板抵抗性患者（Ｍ−２）における血小板産生の天然カゼイン由来ペプチドによる刺激を表す図である。１００μｇの天然カゼイン由来ペプチドを（上記実施例で説明するように）筋肉内注射した後に表記の間隔で上述のように計数した末梢血の血小板含有量（ＰＬＡ、×１０６／ｍｌ）の変化として、血小板再構築を表した。
【０１８３】
好ましい態様の説明
本発明は、乳カゼインのαＳ１画分のＮ末端と同じ配列に由来するまたは類似する生物活性ペプチド、前記生物活性ペプチドを含む組成物、ならびに例えば免疫応答の刺激および増進、ウイルス感染からの防護、血清コレステロールレベルの正常化、造血の刺激などに前記生物活性ペプチドを利用する方法の発明である。本カゼイン由来ペプチドは無毒性であり、例えば免疫病、高コレステロール血症、血液障害およびウイルス関連疾患などの処置および予防に使用することができる。
【０１８４】
本発明の原理および作用は、図面および図面の説明を参照すれば、よりよく理解することができるだろう。
【０１８５】
本発明の少なくとも一つの態様を詳細に説明する前に、本発明はその応用にあたって以下の説明に示す詳細または実施例で例示する詳細に限定されないと理解すべきである。本発明には他の態様も可能であり、様々な方法で実施または実行することができる。また、本明細書で使用する表現および用語は説明のために使用しているだけであって、これらを限定とみなしてはならないと理解すべきである。
【０１８６】
本明細書で使用する「処置」という用語は、ある疾患の進行を実質的に阻害し、減速し、または反転させること、ある疾患の臨床症状を実質的に改善することを包含する。
【０１８７】
本明細書で使用する「予防」という用語は、ある疾患の臨床症状の出現を実質的に防止することを包含する。
【０１８８】
本明細書で使用する「ペプチド」という用語は、本来のペプチド（分解産物、合成法によって合成されたペプチド、または組換えペプチド）およびペプチドミメティック（通例、合成法によって合成されたペプチド）（ペプチド類似体であるペプトイドおよびセミペプトイドなど）を包含し、これらのペプチドには、例えばそのペプチドの体内での安定性を高めるような修飾が施されていてもよい。そのような修飾には、例えば環化、Ｎ末端修飾、Ｃ末端修飾、ペプチド結合修飾（例えばＣＨ２−ＮＨ、ＣＨ２−Ｓ、ＣＨ２−Ｓ＝Ｏ、Ｏ＝Ｃ−ＮＨ、ＣＨ２−Ｏ、ＣＨ２−ＣＨ２、Ｓ＝Ｃ−ＮＨ、ＣＨ＝ＣＨまたはＣＦ＝ＣＨ、ただしこれらに限らない）、主鎖修飾、および残基修飾などがあるが、これらに限らない。ペプチドミメティック化合物の製造方法は当技術分野ではよく知られており、例えばＣ．Ａ．Ｒａｍｓｄｅｎ編「Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ」Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ（１９９２）のＣｈａｐｔｅｒ  １７．２（Ｆ．Ｃｈｏｐｌｉｎ）に詳述されている（この文献はその引用を持って本明細書の記載に代える）。この点について以下に詳述する。
【０１８９】
すなわち本発明のペプチドは環状ペプチドであることができる。環化は、例えば主鎖（−ＣＯ−ＮＨまたは−ＮＨ−ＣＯ結合）中の様々な位置にＧｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐ）を組み込んでアミド結合を形成させることなどによって達成することができる。主鎖間の環化は、式：Ｈ−Ｎ（（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ）−Ｃ（Ｒ）Ｈ−ＣＯＯＨまたはＨ−Ｎ（（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ）−Ｃ（Ｒ）Ｈ−ＮＨ２［式中、ｎ＝１〜４、Ｒは任意の天然または非天然アミノ酸側鎖である］の修飾アミノ酸を組み込むことによって達成することもできる。
【０１９０】
２つのＣｙｓ残基を組み込むことにより、Ｓ−Ｓ結合の形成による環化も可能である。さらに側鎖間の環化は式：−（−ＣＨ２−）ｎ−Ｓ−ＣＨ２−Ｃ−［式中、ｎ＝１または２］の相互作用結合の形成によって達成することもできる。これは、例えばＣｙｓまたはホモＣｙｓを組み込み、その遊離ＳＨ基を、ブロモアセチル化したＬｙｓ、Ｏｒｎ、ＤａｂまたはＤａｐと反応させることによって行うことができる。
【０１９１】
ペプチド内のペプチド結合（−ＣＯ−ＮＨ−）は、例えばＮ−メチル化結合（−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＯ−）、エステル結合（−Ｃ（Ｒ）Ｈ−Ｃ−Ｏ−Ｏ−Ｃ（Ｒ）−Ｎ−）、ケトメチレン結合（−ＣＯ−ＣＨ２−）、α−アザ結合（−ＮＨ−Ｎ（Ｒ）−ＣＯ−）［式中、Ｒはアルキル（例えばメチル）である］、カルバ結合（−ＣＨ２−ＮＨ−）、ヒドロキシエチレン結合（−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−）、チオアミド結合（−ＣＳ−ＮＨ−）、オレフィン系二重結合（−ＣＨ＝ＣＨ−）、レトロアミド結合（−ＮＨ−ＣＯ−）、ペプチド誘導体（−Ｎ（Ｒ）−ＣＨ２−ＣＯ−）［式中、Ｒは本来炭素原子上に存在する「通常の」側鎖である］などで置き換えることができる。
【０１９２】
これらの修飾はペプチド鎖に沿ってどの結合で行ってもよく、さらには同時に数カ所（２〜３カ所）で行ってもよい。
【０１９３】
天然芳香族アミノ酸Ｔｒｐ、ＴｙｒおよびＰｈｅは、ＴＩＣ、ナフチルアラニン（Ｎａｌ）、Ｐｈｅの環メチル化誘導体、Ｐｈｅのハロゲン化誘導体、またはｏ−メチル−Ｔｙｒなどの合成非天然酸で置き換えることができる。
【０１９４】
下記表１〜２に全ての天然アミノ酸（表１）と、異常または修飾アミノ酸（表２）とを列挙する。
【表１】
2005511499.tif 000002
【表２】
2005511499.tif 000003
2005511499.tif 000004
2005511499.tif 000005
2005511499.tif 000006
【０１９５】
本発明のペプチドは独立した形で使用するか、タンパク質またはディスプレイ成分（例えばディスプレイ細菌およびディスプレイファージ）などの成分の一部として使用することができる。また、本発明のペプチドを化学的に修飾することにより、１本のポリペプチド鎖または共有結合によって架橋された鎖の形で、活性な二量体または多量体を得ることもできる。
【０１９６】
さらに本発明のペプチドは少なくとも２個、所望により少なくとも３個、所望により少なくとも４個、所望により少なくとも５個、所望により少なくとも６個、所望により少なくとも７個、所望により少なくとも８個、所望により少なくとも９個、所望により少なくとも１０個、所望により少なくとも１１個、所望により少なくとも１２個、所望により少なくとも１３個、所望により少なくとも１４個、所望により少なくとも１５個、所望により少なくとも１６個、所望により少なくとも１７個、所望により少なくとも１８個、所望により少なくとも１９個、所望により少なくとも２０個、所望により少なくとも２１個、所望により少なくとも２２個、所望により少なくとも２３個、所望により少なくとも２４個、所望により少なくとも２５個、所望により少なくとも２６個、所望により少なくとも２７〜６０個またはそれ以上のアミノ酸残基（本明細書では可換的にアミノ酸ともいう）を含む。
【０１９７】
したがって本明細書で使用する「アミノ酸」という用語は、２０種類の天然アミノ酸（これらは生体内でしばしば翻訳後修飾を受ける。例えばヒドロキシプロリン、ホスホセリンおよびホスホスレオニンなど）および他の異常アミノ酸（例えば２−アミノアジピン酸、ヒドロキシリジン、イソデスモシン、ノルバリン、ノルロイシンおよびオルニチンなどがあるが、これらに限らない）を包含すると解釈される。さらに「アミノ酸」という用語はＤ−アミノ酸とＬ−アミノ酸の両方を包含する。
【０１９８】
本明細書で使用する「αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来する」という表現は、本明細書に定義するところのペプチド、例えばαＳ１カゼインの切断産物（本明細書では天然カゼイン由来のペプチドともいう）、αＳ１カゼインのＮ末端部分のアミノ酸配列と一致するように化学的に合成された合成ペプチド（本明細書ではカゼイン由来の合成ペプチドともいう）、αＳ１カゼインのＮ末端部分に類似する（相同な）ペプチド、例えば少なくとも７０％、好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％の類似性が保たれるという条件の下に１または複数のアミノ酸置換（許容的置換（ｐｅｒｍｉｓｓｉｂｌｅ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎ）など、ただしこれに限らない）を特徴とするペプチド、およびその機能的ホモログを指す。本明細書で使用する「ホモログ」および「機能的ホモログ」という用語は、ペプチドの生物活性に影響を及ぼさない任意の挿入、欠失および置換を持つペプチドを意味する。
【０１９９】
本明細書で使用する「αＳ１カゼイン」という用語は、家畜哺乳動物（例えばウシ、ヒツジ、ヤギ、雌ウマ、ラクダ、シカおよび水牛）、ヒトおよび海洋哺乳動物を含む（ただしこれらに限らない）哺乳動物のαＳ１カゼインを指す。以下に、アミノ酸配列がわかっているαＳ１カゼインを、ＧｅｎＢａｎｋ（ＮＣＢＩ）アクセッション番号および由来によって列挙する：ＣＡＡ２６９８２（Ｏｖｉｓ  ａｒｉｅｓ（ヒツジ））、ＣＡＡ５１０２２（Ｃａｐｒａ  ｈｉｒｃｕｓ（ヤギ））、ＣＡＡ４２５１６（Ｂｏｓ  ｔａｕｒｕｓ（ウシ））、ＣＡＡ５５１８５（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ（ヒト））、ＣＡＡ３８７１７（Ｓｕｓ  ｓｃｒｏｆａ（ブタ））、Ｐ０９１１５（ウサギ）およびＯ９７９４３（Ｃａｍｅｌｕｓ  ｄｒｏｍｅｄｕｒｉｕｓ（ラクダ））。
【０２００】
本明細書で使用する「Ｎ末端部分」という用語は、αＳ１カゼインの最初の６０アミノ酸に由来するαＳ１カゼインのＭアミノ酸を指し、ここにＭは２〜６０の任意の整数（２および６０を含む）である。この用語は、好ましくは、αＳ１カゼインの最初のＭアミノ酸を指す。
【０２０１】
本発明のペプチドは既に記載があるように乳からの抽出によって得るか、当業者に知られている標準的な方法である固相ペプチド合成法によって得ることができる。本発明のペプチドの精製は当業者に知られている標準的技術、例えば高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）などによって行われる。乳カゼインの断片化による本発明ペプチドの取得は、様々な酵素的および／または化学的手段を使って達成することができる。
【０２０２】
以下にさらに詳しく説明し下記の実施例で例示するように、本発明のペプチドは様々な治療効果を持つ。実施例には数多くのアッセイを記載するが、当業者はそれらのアッセイを使って、本発明の教示するところに従って設計した特定のペプチドを、特定の治療効果に関して試験することができる。本明細書に記載するペプチドはいずれもそれ自体を投与するか、または疾患の処置または予防に使用することができる医薬組成物に製剤化することができる。そのような組成物は、活性成分として本明細書に記載するペプチドのいずれかを含み、さらに医薬的に許容できる担体を含む。
【０２０３】
本明細書で使用する「医薬組成物」は、本明細書の記載するペプチドの１つまたは複数と、他の化学成分（例えば医薬的に適切な担体および賦形剤）との製剤を指す。医薬組成物の目的は生物への化合物の投与を容易にすることである。
【０２０４】
以下、「医薬的に許容できる担体」という用語は、生物にとって著しい刺激の原因にならず、かつ投与される化合物の生物活性および特性を抑止しない担体または希釈剤を指す。担体の例はプロピレングリコール、生理食塩水、有機溶媒と水とのエマルションおよび混合液であるが、これらに限るわけではない。本明細書において「賦形剤」という用語は、化合物の投与をさらに容易にするために医薬組成物に添加される不活性物質を指す。賦形剤の例には炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖類、様々なタイプのデンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油およびポリエチレングリコールなどがあるが、これらに限るわけではない。
【０２０５】
薬物の製剤および投与に関する技術は「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．（ペンシルバニア州イーストン）の最新版に見いだすことができる。
【０２０６】
適当な投与経路としては、例えば経口送達、直腸送達、経粘膜送達、経皮送達、腸管送達または腸管外送達（筋肉内注射、皮下注射、および骨髄内注射、ならびに髄腔内注射、直接脳室内注射、静脈内注射、腹腔内注射、鼻腔内注入、または眼内注射を含む）などを挙げることができる。
【０２０７】
本発明の医薬組成物は当技術分野で周知の方法により、例えば通常の混合、溶解、造粒、糖衣錠製造、研和、乳化、カプセル化、捕捉または凍結乾燥法などを利用して製造することができる。
【０２０８】
したがって本発明で使用される医薬組成物は、活性ペプチドを医薬として使用できる製剤に加工しやすくする賦形剤および補助剤を含む１つまたは複数の医薬的に許容できる担体を使って、常法により製剤化することができる。適切な製剤は選択した投与経路に依存する。
【０２０９】
注射の場合は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなどの有機溶媒を含むまたは含まない水性溶液（好ましくはハンクス液、リンゲル液または生理食塩水緩衝液などの生体適合緩衝液）に、本発明のペプチドを製剤化することができる。経粘膜投与の場合は、製剤中に浸透剤を使用する。そのような浸透剤は当技術分野では広く知られている。
【０２１０】
経口投与の場合は、活性ペプチドを当技術分野で周知の医薬的に許容できる担体と混合することにより、ペプチドを容易に製剤化することができる。前記担体を使用することにより、本発明のペプチドを、患者による経口摂取用の錠剤、丸剤、糖衣錠、カプセル剤、液剤、ゲル剤、シロップ剤、スラリー、懸濁剤などとして製剤化することができる。経口用医薬品は固形の賦形剤を使用し、随意に、得られた混合物を粉砕し、所望により適当な補助剤を添加してから、顆粒の混合物を加工して、錠剤または糖衣錠の核錠を得ることによって、製造することができる。適切な賦形剤には、充填剤、例えば乳糖、ショ糖、マンニトールまたはソルビトールを含む糖類、セルロース調製物、例えばトウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、バレイショデンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ナトリウムカルボメチルセルロース、および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）などの生理的に許容できるポリマーがある。所望により、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、アルギン酸またはその塩（例えばアルギン酸ナトリウム）などの崩壊剤を添加してもよい。
【０２１１】
糖衣錠の核錠には適当なコーティングが施される。この目的には濃厚な糖溶液を使用することができ、その糖溶液は、所望により、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カーボポールゲル、ポリエチレングリコール、二酸化チタン、ラッカー溶液、および適当な有機溶媒または溶媒混合物を含むことができる。識別のためまたは活性成分量の様々な組合わせを特徴づけるために、錠剤または糖衣錠剤皮に染料または顔料を加えてもよい。
【０２１２】
経口使用が可能な医薬組成物には、ゼラチン製の押込み式カプセル剤ならびにゼラチンと可塑剤（グリセロールまたはソルビトールなど）とでできた軟密封カプセル剤が含まれる。押込み式カプセル剤は、乳糖などの充填剤、デンプンなどの結合剤、タルクまたはステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤、および所望により安定剤と混合した活性成分を含むことができる。軟カプセル剤の場合は、活性ペプチドを適当な液体（脂肪油、液体パラフィンまたは液体ポリエチレングリコールなど）に溶解または懸濁することができる。さらに安定剤を加えてもよい。経口投与用製剤は全て、選択した投与経路に適した投与量でなければならない。
【０２１３】
経口腔粘膜投与の場合、本組成物は常法によって製剤化された錠剤または口中錠の形態をとることができる。
【０２１４】
吸入による投与の場合、本発明のペプチドは、適当な噴射剤（例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、または二酸化炭素）を使って、加圧容器または噴霧器から、エアロゾルスプレーの形で便利に送達される。加圧エアロゾルの場合、投与量単位は、バルブを設けて、計量した量を送達することによって、決定することができる。本化合物と適当な粉末基剤（乳糖またはデンプンなど）との粉末混合物を含む、吸入器または散布器用の（例えばゼラチン製）カプセルおよびカートリッジを処方することもできる。
【０２１５】
本明細書に記載のペプチドは、例えばボーラス注射または持続注入などによる非経口投与用に製剤化することもできる。注射用製剤は、例えばアンプルなどに一回量型として、または多用量容器に入れて、所望により保存剤を添加して提供することができる。本組成物は油性または水性ビヒクル中の懸濁液、溶液またはエマルションであることができ、懸濁化剤、安定剤および／または分散剤などの調剤用薬剤を含んでもよい。
【０２１６】
非経口投与用の医薬組成物として、水溶性活性調製物の水溶液が挙げられる。また、活性ペプチドの懸濁液を適当な油性注射懸濁液として調製することもできる。適切な親油性の溶媒またはビヒクルには、ゴマ油などの脂肪油、オレイン酸エチルなどの合成脂肪酸エステル、トリグリセリドまたはリポソームなどがある。水溶性注射懸濁剤は、懸濁液の粘度を増加させる物質、例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトールまたはデキストランなどを含んでもよい。所望により、本懸濁剤は、高濃度溶液の調製物を得ることができるように、適当な安定化剤または化合物の溶解度を増加させる薬剤をさらに含んでもよい。
【０２１７】
また、活性成分は、使用前に適切なビヒクル（例えば滅菌パイロジェンフリー水）で構成させる粉末の形態をとってもよい。
【０２１８】
本発明のペプチドは、例えば通常の坐剤用基剤（カカオ脂または他のグリセリドなど）を使って、坐剤または停留浣腸剤などの直腸用組成物に製剤化することもできる。
【０２１９】
本明細書に記載する医薬組成物は、適切な固形またはゲル相の担体または賦形剤を含んでもよい。そのような担体または賦形剤の例には、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖類、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、およびポリエチレングリコールなどのポリマーがある。
【０２２０】
当業者は、本発明のペプチドのいずれについても、最適な投与量および投与方法を容易に決定することができる。
【０２２１】
本発明の教示するところに従って使用されるペプチドに関して、治療有効量（治療有効用量ともいう）は、まず細胞培養アッセイまたはインビボ動物アッセイによって推定することができる。例えば、細胞培養で決定されたＩＣ５０またはＩＣ１００を含む循環濃度範囲が達成されるような用量を、動物モデルで策定することができる。そのような情報を使って、ヒトで有効な用量を、より正確に決定することができる。初期投与量もインビボデータから見積もることができる。これらの初期指針を用いることにより、当業者はヒトでの有効投与量を決定することができるだろう。
【０２２２】
さらに、本明細書に記載するペプチドの毒性および治療効力は、標準的な薬学的手法により、細胞培養または実験動物で、例えばＬＤ５０およびＥＤ５０を決定することによって決定することができる。毒性と治療効果の用量比を治療係数といい、ＬＤ５０とＥＤ５０との比として表すことができる。高い治療係数を示すペプチドは好ましい。これらの細胞培養アッセイおよび動物実験で得られたデータは、ヒトに使用しても毒性を示さない用量範囲の策定に利用することができる。そのようなペプチドの投与量は、毒性がほとんどまたは全くなくＥＤ５０を含む循環濃度範囲内にあることが好ましい。投与量は、使用する剤形および利用する投与経路に依存して、この範囲内で変動しうる。個々の医師は患者の状態を考慮して正確な処方、投与経路および投与量を選択することができる（例えば「Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」（１９７５）第１章、第１頁のＦｉｎｇｌらの記事を参照されたい）。
【０２２３】
投与量と投与間隔は、治療効果を維持するのに十分な活性成分の血漿レベルが得られるように、個別に調節することができる。経口投与の場合、通常の患者用量は約１〜１０００ｍｇ／ｋｇ／投与、通例約１０〜５００ｍｇ／ｋｇ／投与、好ましくは約２０〜３００ｍｇ／ｋｇ／投与、最も好ましくは約５０〜２００ｍｇ／ｋｇ／投与である。治療有効血清レベルが、毎日複数回の投与を行うことによって達成される場合もあるだろう。局所投与または選択的取り込みの場合、薬物の有効局所濃度は血漿濃度とは無関係であるかもしれない。当業者は過度の実験を行わずに治療有効局所投与量を最適化することができるだろう。
【０２２４】
処置すべき状態の重症度および反応性に応じて、投与は上記徐放性組成物の単回投与とすることができる。この場合、処置は数日〜数週間または治癒が達成されるか疾患状態の軽減が達成されるまで持続する。
【０２２５】
投与すべき組成物の量は、当然ながら、処置対象、病気の重症度、投与方法、処方医の判断などに依存するだろう。
【０２２６】
本発明の組成物は、所望により、活性成分を含む１つまたは複数の単位剤形を含有するパックまたはディスペンサー装置、例えばＦＤＡ認可キットとして提供することができる。パックは、例えば、ブリスターパックのように金属箔またはプラスチック箔からなってもよい。パックまたはディスペンサー装置には、投与上の注意を添付してもよい。パックまたはディスペンサーには、医薬品の製造、使用または販売を規制する政府機関によって指定された形式で容器に添付された、組成物の形状またはヒトもしくは動物への投与に関する当局の認可を示す通知を添えてもよい。そのような通知は、例えば処方薬に関して米国食品医薬品局によって許可されたラベリング、または許可された添付書類であることができる。また、適合する医薬担体中に調剤された本発明のペプチドからなる組成物を製造し、適当な容器に入れ、表示された状態の処置もしくは予防または望ましい事象の誘導に関する表示をすることができる。ラベル上の適切な表示としては、例えば自己免疫疾患または自己免疫状態、ウイルス疾患、ウイルス感染、細菌感染、血液疾患、血液学的欠乏症、血小板減少症、汎血球減少症、顆粒球減少症、高脂血症、高コレステロール血漿、糖尿、高血糖症、糖尿病、ＡＩＤＳ、ＨＩＶ−１感染、ヘルパーＴ細胞障害、樹状細胞欠乏症、マクロファージ欠乏症、造血幹細胞障害（血小板障害、リンパ球障害、形質細胞障害および好中球障害を含む）、造血幹細胞増殖、造血幹細胞の増殖と分化、前白血病状態、白血病状態、化学療法または放射線療法により生じる免疫系障害、および免疫不全疾患の処置により生じるヒト免疫系障害の処置および／または予防などを挙げることができる。
【０２２７】
本発明の医薬組成物は、血液系構成成分の維持および／または回復、血球数の平衡化、糖、コレステロール、カルシウム、尿酸、尿素などの血中代謝産物レベルおよびアルカリホスファターゼなどの酵素レベルの平衡化に役立ちうる。さらに、本発明の医薬組成物は、血球増殖の誘導、白血球数および／または赤血球数の調節、特に白血球数および／または赤血球数の増加、血中ヘモグロビンレベルの上昇および血小板数の調節に役立ちうる。
【０２２８】
一定の生理学的パラメーターのレベルに関して本明細書で使用する「平衡化」という用語は、それらのパラメーターのレベルを変化させて、正常値に近づけることを意味する。
【０２２９】
生理学的パラメーターに関して本明細書で使用する「正常値」という用語は、健常なヒトまたは動物の値域内にある値を意味する。
【０２３０】
特に好ましい態様として、本発明のペプチドは赤血球、白血球、血小板の数およびホモグロビンレベルを平衡化する。本発明の医薬組成物は血球の増殖を活性化するために使用することができる。
【０２３１】
また、本医薬組成物は、血小板、リンパ球、形質細胞および好中球障害を含む造血幹細胞障害、ならびに前白血病状態、白血病状態および血小板減少症における欠乏症および機能不全の処置および／または予防に使用することができる。
【０２３２】
さらに、本医薬組成物は細胞増殖疾患の処置および／または予防に使用することができる。これに関連して、本発明の医薬組成物が、化学療法または放射線処置に際して免疫応答を刺激し、有害な作用を軽減し、化学療法および放射線照射が誘導する嘔吐を減らし、より迅速な回復を助長するのに有益であることは注目に値する。
【０２３３】
さらにまた、本発明の医薬組成物は免疫不全を伴う疾患（例えばＨＩＶ）および自己免疫疾患の処置に際してヒト免疫応答を刺激するためにも使用することができる。
【０２３４】
本発明の組成物には獣医学的用途も考えることができる。
【０２３５】
本発明の医薬組成物は、例えば血球レベルの異常を伴う障害、造血幹細胞の産生および分化に関係する障害などの処置および／または予防、血小板、リンパ球および／または好中球障害の処置、前白血病および白血病状態の処置、ならびに血小板減少症の処置に使用することができる。本発明の医薬組成物は、細胞増殖疾患、免疫不全を伴う疾患（ＨＩＶなど）および自己免疫疾患の処置にも使用することができる。さらに、本発明の医薬組成物は、化学療法または放射線処置に際して免疫応答を調整するために（例えば化学療法に伴う嘔吐を減少させるために）使用することができる。
【０２３６】
驚いたことに、本発明を実施するにあたって、他の造血成長因子を添加すると、本発明のペプチドは、ヒト造血幹細胞の増殖と分化に対して、相乗的効果を発揮することが観察された。特に重要な作用は、エリスロポエチンによる赤芽球コロニー形成の刺激が本発明のペプチドによって増強されること、およびトロンボポエチン（ＴＰＯ）による巨核球増殖の誘導が本発明のペプチドによって用量依存的に増進されることである。現在、組換えヒト（ｒｈ）ＥＰＯは、腎性貧血、未熟児貧血、癌関連貧血およびＡＩＤＳ関連貧血などの適応症ならびに予定手術前の処置に、治療法として承認されている（Ｓｏｗａｄｅ，Ｂ．ら，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ  １９９８；１：３０５）。
【０２３７】
したがって、本発明は、エリスロポエチン処置可能状態を処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２３８】
さらに本発明は、エリスロポエチンの効果を強化する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２３９】
トロンボポエチンは、重要な多系統作用を持つ初期作用サイトカインである。すなわち、ＴＰＯは単独で、または他の初期作用サイトカインと共同して、（ｉ）前駆細胞の生存性を高め、アポトーシスを抑制すること、（ｉｉ）造血幹細胞の産生および機能を調節すること、（ｉｉｉ）静止多分化能細胞の細胞分化を誘発すること、（ｉｖ）多系統分化を誘導すること、ならびに（ｖ）顆粒球、赤血球、マクロファージおよび巨核球（ＭＫ）を含む多系統コロニー（ＣＦＵ−ＧＥＭＭ）の形成を増進することができる。さらにＴＰＯは、より限定された、顆粒球／単球、巨核球および赤芽球コロニーの前駆体の産生を刺激すると共に、フィブロネクチンおよびフィブリノゲンへの原始ヒト骨髄および巨核球細胞の接着も刺激する。したがってＴＰＯは、臨床血液病専門医／移植医にとって、すなわち自己移植および同種移植のための幹細胞および分化方向が決定した前駆細胞の動員、増殖およびエクスビボ（ｅｘ  ｖｉｖｏ）増殖にとって、重要なサイトカインである。また、フェレーシス収量を向上させる目的で、健常血小板ドナーに対するＴＰＯの投与も行われている。しかし、組換えヒトサイトカインｒｈＴＰＯは比較的高い費用がかかることや、ＴＰＯは反復投与によって抗原性を示す可能性があることなどの理由で、ＴＰＯ療法の臨床応用は困難な状態である。
【０２４０】
ＴＰＯと本発明のペプチドとを併用する処置は、その両者が一つの医薬組成物に含まれている場合も、両者が別々の医薬組成物に含まれている場合も、標的細胞の増殖と機能に対するＴＰＯの作用を強化するための、安価で、確実に無毒性な手段になりうる。このような併用処置では、上述した状態の他にも、例えば骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、再生不良性貧血および肝不全の合併症などの障害の処置に、本発明のペプチドを応用することができる。本発明のペプチド（単独で使用またはＴＰＯと併用）で血小板ドナーを前処置すれば、フェレーシス収量の効率はさらに向上させることができる。
【０２４１】
したがって本発明は、トロンボポエチン処置可能状態を処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２４２】
さらに本発明は、トロンボポエチンの効果を強化する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２４３】
さらに本発明は、末梢幹細胞動員を増進する方法であって、その必要がある対象に、有効量のトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含む医薬組成物の有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２４４】
さらに本発明は、トロンボポエチン処置可能状態を処置するための医薬組成物であって、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０２４５】
さらに本発明は、トロンボポエチンの効果を強化するための医薬組成物であって、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０２４６】
さらに本発明は、末梢幹細胞動員を増進するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０２４７】
さらに本発明は、造血を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０２４８】
さらに本発明は、造血幹細胞増殖を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０２４９】
さらに本発明は、造血幹細胞の増殖および分化を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０２５０】
さらに本発明は、巨核球産生を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０２５１】
さらに本発明は、赤血球産生を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０２５２】
さらに本発明は、白血球産生を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０２５３】
さらに本発明は、血小板産生を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０２５４】
さらに本発明は、血小板減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０２５５】
さらに本発明は、汎血球減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０２５６】
さらに本発明は、顆粒球減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０２５７】
さらに本発明は、血液疾患、血液学的欠乏症、血小板減少症、汎血球減少症、顆粒球減少症、樹状細胞欠乏症、マクロファージ欠乏症、造血幹細胞障害（血小板障害、リンパ球障害、形質細胞障害および好中球障害を含む）、前白血病状態、白血病状態、骨髄異形成症候群、再生不良性貧血、および骨髄機能不全からなる群より選択される適応症を処置または予防するための医薬組成物であって、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０２５８】
さらに本発明は、トロンボポエチンと、配列番号１〜２５からなる群より選択されるアミノ酸配列を持つ精製ペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０２５９】
さらに本発明は、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成を増進する方法であって、提供血液幹細胞の提供およびレシピエントへの移植に先だって、提供血液幹細胞のドナーをαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとトロンボポエチンとで処置することによって達成される方法を提供する。
【０２６０】
さらに本発明は、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成を増進する方法であって、レシピエントへの提供血液幹細胞の移植に先立って、提供血液幹細胞をαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとトロンボポエチンとで処理することによって達成される方法を提供する。
【０２６１】
さらに本発明は、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける血液幹細胞のコロニー形成を増進する方法であって、レシピエントへの血液幹細胞の移植に先立って、血液幹細胞をαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとトロンボポエチンとで処理することによって達成される方法を提供する。
【０２６２】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、トロンボポエチン処置可能状態の処置を目的とする使用を開示する。
【０２６３】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、トロンボポエチンの効果の強化を目的とする使用を開示する。
【０２６４】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来する医薬的に許容できる担体ペプチドを含む医薬組成物の、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成の増進を目的とする使用を開示する。
【０２６５】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける血液幹細胞のコロニー形成の増進を目的とする使用を開示する。
【０２６６】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、末梢幹細胞動員の増進を目的とする使用を開示する。
【０２６７】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血の誘導を目的とする使用を開示する。
【０２６８】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血幹細胞増殖の誘導を目的とする使用を開示する。
【０２６９】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血幹細胞の増殖および分化の誘導を目的とする使用を開示する。
【０２７０】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、巨核球産生の誘導を目的とする使用を開示する。
【０２７１】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、赤血球産生の誘導を目的とする使用を開示する。
【０２７２】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、白血球産生の誘導を目的とする使用を開示する。
【０２７３】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、血小板産生の誘導を目的とする使用を開示する。
【０２７４】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、血小板減少症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０２７５】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、汎血球減少症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０２７６】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、顆粒球減少症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０２７７】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、自己免疫疾患または自己免疫状態、ウイルス疾患、ウイルス感染、血液疾患、血液学的欠乏症、血小板減少症、汎血球減少症、顆粒球減少症、高脂血症、高コレステロール血症、糖尿、高血糖症、糖尿病、ＡＩＤＳ、ＨＩＶ−１、ヘルパーＴ細胞障害、樹状細胞欠乏症、マクロファージ欠乏症、造血幹細胞障害（血小板障害、リンパ球障害、形質細胞障害および好中球障害を含む）、前白血病状態、白血病状態、化学療法または放射線療法により生じる免疫系障害、免疫不全疾患の処置により生じるヒト免疫系障害、および細菌感染症からなる群より選択される適応症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０２７８】
さらに本発明は、有効成分としてトロンボポエチンとαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、血液疾患、血液学的欠乏症、血小板減少症、汎血球減少症、顆粒球減少症、樹状細胞欠乏症、マクロファージ欠乏症、造血幹細胞障害（血小板障害、リンパ球障害、形質細胞障害および好中球障害を含む）、前白血病状態、白血病状態、骨髄異形成症候群、再生不良性貧血、および骨髄機能不全からなる群より選択される適応症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０２７９】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとトロンボポエチンとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成の増進を目的とする使用を開示する。
【０２８０】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドとトロンボポエチンとを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける血液幹細胞のコロニー形成の増進を目的とする使用を開示する。
【０２８１】
さらに本発明は、有効成分として少なくとも１つの本発明のペプチドを含む抗菌医薬組成物、および抗菌剤としての本発明のペプチドの使用に関する。
【０２８２】
下記の実施例で詳述するように、本発明のペプチド、および有効成分として本発明のペプチドを含む医薬組成物は、血球障害、細胞増殖性疾患、免疫不全が関与する疾患および自己免疫疾患の処置および予防に使用することができる。
【０２８３】
したがって本発明は、自己免疫疾患を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２８４】
さらに本発明は、ウイルス疾患を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２８５】
さらに本発明は、ウイルス感染を予防する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２８６】
さらに本発明は、造血を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２８７】
さらに本発明は、造血幹細胞増殖を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２８８】
さらに本発明は、造血幹細胞の増殖および分化を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２８９】
さらに本発明は、巨核球産生を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２９０】
さらに本発明は、赤血球産生を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２９１】
さらに本発明は、白血球産生を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２９２】
さらに本発明は、血小板産生を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２９３】
さらに本発明は、形質細胞増殖を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２９４】
さらに本発明は、樹状細胞増殖を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２９５】
さらに本発明は、マクロファージ増殖を誘導する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２９６】
さらに本発明は、血小板減少症を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２９７】
さらに本発明は、汎血球減少症を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２９８】
さらに本発明は、顆粒球減少症を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０２９９】
さらに本発明は、高脂血症を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０３００】
さらに本発明は、高コレステロール血症を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０３０１】
さらに本発明は、糖尿を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０３０２】
さらに本発明は、糖尿病を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０３０３】
さらに本発明は、ＡＩＤＳを予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０３０４】
さらに本発明は、ＨＩＶによる感染を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０３０５】
さらに本発明は、自己骨髄もしくは末梢血幹細胞移植（ＡＳＣＴ）または同種骨髄移植（ＢＭＴ）によって補助された骨髄破壊量の化学放射線治療に関係する状態を予防または処置する方法であって、その必要がある対象に、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの治療有効量を投与することによって達成される方法を提供する。
【０３０６】
さらに本発明は、自己免疫疾患を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３０７】
さらに本発明は、ウイルス疾患を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３０８】
さらに本発明は、ウイルス感染を予防するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３０９】
さらに本発明は、造血を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３１０】
さらに本発明は、造血幹細胞増殖を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３１１】
さらに本発明は、造血幹細胞の増殖および分化を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３１２】
さらに本発明は、巨核球産生を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３１３】
さらに本発明は、赤血球産生を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３１４】
さらに本発明は、白血球産生を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３１５】
さらに本発明は、血小板産生を誘導するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３１６】
さらに本発明は、形質細胞増殖を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３１７】
さらに本発明は、樹状細胞増殖を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３１８】
さらに本発明は、マクロファージ増殖を誘導するための医薬組成物であって、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３１９】
さらに本発明は、血小板減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３２０】
さらに本発明は、汎血球減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３２１】
さらに本発明は、顆粒球減少症を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３２２】
さらに本発明は、高脂血症を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３２３】
さらに本発明は、高コレステロール血症を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３２４】
さらに本発明は、糖尿を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３２５】
さらに本発明は、糖尿病を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３２６】
さらに本発明は、ＡＩＤＳを予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３２７】
さらに本発明は、ＨＩＶによる感染を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３２８】
さらに本発明は、自己骨髄もしくは末梢血幹細胞移植（ＡＳＣＴ）または同種骨髄移植（ＢＭＴ）によって補助された骨髄破壊量の化学放射線治療に関係する状態を予防または処置するための医薬組成物であって、活性成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３２９】
さらに本発明は、自己免疫疾患の予防または処置を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３３０】
さらに本発明は、ウイルス疾患の予防または処置を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３３１】
さらに本発明は、ウイルス感染の予防を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３３２】
さらに本発明は、造血の誘導を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３３３】
さらに本発明は、造血幹細胞増殖の誘導を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３３４】
さらに本発明は、造血幹細胞の増殖および分化の誘導を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３３５】
さらに本発明は、巨核球産生の誘導を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３３６】
さらに本発明は、赤血球産生の誘導を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３３７】
さらに本発明は、白血球産生の誘導を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３３８】
さらに本発明は、血小板産生の誘導を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３３９】
さらに本発明は、形質細胞増殖の誘導を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３４０】
さらに本発明は、樹状細胞増殖の誘導を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３４１】
さらに本発明は、マクロファージ増殖の誘導を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３４２】
さらに本発明は、血小板減少症の予防または処置を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３４３】
さらに本発明は、汎血球減少症の予防または処置を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３４４】
さらに本発明は、顆粒球減少症の予防または処置を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３４５】
さらに本発明は、高脂血症の予防または処置を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３４６】
さらに本発明は、コレステロール血症の予防または処置を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３４７】
さらに本発明は、糖尿の予防または処置を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３４８】
さらに本発明は、糖尿病の予防または処置を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３４９】
さらに本発明は、ＡＩＤＳの予防または処置を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３５０】
さらに本発明は、ＨＩＶによる感染の予防または処置を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３５１】
さらに本発明は、自己骨髄もしくは末梢血幹細胞移植（ＡＳＣＴ）または同種骨髄移植（ＢＭＴ）によって補助された骨髄破壊量の化学放射線治療に関係する状態の予防または処置を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３５２】
さらに本発明は、トロンボポエチン処置可能状態の処置を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３５３】
さらに本発明は、トロンボポエチンの効果の強化を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３５４】
さらに本発明は、末梢幹細胞動員の増進を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３５５】
さらに本発明は、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける提供血液幹細胞のコロニー形成の増進を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３５６】
さらに本発明は、骨髄破壊を受けたレシピエントにおける血液幹細胞のコロニー形成の増進を目的とする、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドの使用を開示する。
【０３５７】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、自己免疫疾患の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０３５８】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、ウイルス疾患の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０３５９】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、ウイルス感染の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０３６０】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血の誘導を目的とする使用を開示する。
【０３６１】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血幹細胞増殖の誘導を目的とする使用を開示する。
【０３６２】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、造血幹細胞の増殖および分化の誘導を目的とする使用を開示する。
【０３６３】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、巨核球産生の誘導を目的とする使用を開示する。
【０３６４】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、赤血球産生の誘導を目的とする使用を開示する。
【０３６５】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、白血球産生の誘導を目的とする使用を開示する。
【０３６６】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、血小板産生の誘導を目的とする使用を開示する。
【０３６７】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、形質細胞増殖の誘導を目的とする使用を開示する。
【０３６８】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、樹状細胞増殖の誘導を目的とする使用を開示する。
【０３６９】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、マクロファージ増殖の誘導を目的とする使用を開示する。
【０３７０】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、血小板減少症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０３７１】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、汎血球減少症の予防または処置を目的とする使用を開示する。。
【０３７２】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、顆粒球減少症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０３７３】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、高脂血症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０３７４】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、コレステロール血症の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０３７５】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、糖尿の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０３７６】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、糖尿病の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０３７７】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、ＡＩＤＳの予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０３７８】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、ＨＩＶによる感染の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０３７９】
さらに本発明は、有効成分としてαＳ１カゼインのＮ末端部分に由来するペプチドを含み、かつ医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物の、自己骨髄もしくは末梢血幹細胞移植（ＡＳＣＴ）または同種骨髄移植（ＢＭＴ）によって補助された骨髄破壊量の化学放射線治療に関係する状態の予防または処置を目的とする使用を開示する。
【０３８０】
さらに本発明は、配列番号１〜２５からなる群より選択されるアミノ酸配列を持つ精製ペプチドを提供する。
【０３８１】
さらに本発明は、配列番号１〜２５からなる群より選択されるアミノ酸配列を持つ精製ペプチドと、医薬的に許容できる担体とを含む医薬組成物を提供する。
【０３８２】
本発明は、αＳ１カゼインのＮ末端部分に由来し、検出しうる毒性がなく高い治療効力を有するヒト疾患処置用のペプチドを提供することにより、現在知られている構成の欠点にうまく対処するものである。
【０３８３】
本発明のさらなる目的、利点および新規な特徴は、限定を目的としない以下の実施例を検討すれば、当業者には明らかになるだろう。さらに以下の実施例は、上に説明し特許請求の範囲に記載した本発明の様々な態様および特徴の実験的裏付けにもなっている。
【０３８４】
実施例
以下に実施例を挙げる。これらの実施例は、上記の説明と共に、本発明を非限定的に例示するものである。
【０３８５】
材料と実験方法
天然カゼイン由来ペプチドの製造：牛乳のカゼイン画分を、前掲のＨｉｐｐら（１９５２）の文献に記載されているように単離し、３０℃でキモシン（レンニンとも呼ばれる）（２０ｎｇ／ｍｌ）による完全なタンパク質分解消化にかけた。反応が完了したら、溶液を加熱して酵素を不活化し、有機酸（酢酸またはトリクロロ酢酸）で酸性化することにより、消化物をパラカゼイネート（ｐａｒａｃａｓｅｉｎａｔｅ）として沈殿させた。パラカゼイネートを遠心分離によって分離し、目的のペプチド断片を含有する上清画分を酸濃度をさらに上げることによって再沈させた。得られたカゼイシジン（ｃａｓｅｉｃｉｄｉｎ）を、再懸濁、透析および中和後に、凍結乾燥した。得られた粉末品の生物活性を以下に述べるようにアッセイし、ペプチド分析用にＨＰＬＣで分離した。
【０３８６】
天然カゼイン由来ペプチドのＨＰＬＣ分析：上述の天然カゼイン由来ペプチドを二段階のＨＰＬＣで分析した。まず凍結乾燥カゼイン消化物を、Ｃ１８逆相カラムを用いて、０．１％水／トリフルオロ酢酸（ｗ／ｗ）−アセトニトリル勾配によって分離した。検出は２１４ｎｍでのＵＶ吸収に従った。次に、エレクトロスプレーイオン源を装備したＨＰＬＣ−質量分析（ＭＳ）によって試料を分析した。質量計算値は保持時間から導かれるイオン化ペプチド試料の質量を表す。分離後に、ペプチドのアミノ酸組成を気相マイクロシーケンサー（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ４７０Ａ）で決定した。
【０３８７】
以下のデータは典型的データである。通例、８つのペプチドピークが観察され、そのうちの３つは１７．７９、１９．７、２３．０２のＲｔ値を持つ大ピークであり、５つは１２．６８、１４．９６、１６．５０、２１．９および２５．１のＲｔ値を持つ小ピークだった。これらのＲｔ値はそれぞれ２７６４、１６９７、１８８０、２６１６、３２１７、２３３３、１６７７および１６６９Ｄａの分子量に相当する。Ｒｔ値１７．７９（２７６４Ｄａに相当）の大ピークは、ＲＰＫＨＰＩＫＨＱＧＬＰＱＥＶＬＮＥＮＬＬＲＦという配列を持つαＳ１カゼインのアミノ酸１〜２３に相当する２３アミノ酸ペプチドである（配列番号２２。αＳ１カゼインの完全な配列についてはＭｃＳｗｅｅｎｙら，１９９３，ｉｂｉｄを参照）。他のペプチドは、βカゼインの２０８〜２２４位、αＳ１カゼインの１６〜３７位、およびαＳ２様カゼイン前駆体の１９７〜２２２位に由来した。他のペプチドも存在した。
【０３８８】
カゼイン由来の合成ペプチド：ＮｏＶｅｔｉｄｅ  Ｌｔｄ（イスラエル国ハイファ）に委託して、αＳ１カゼインのＮ末端の２〜２６アミノ酸に相当する様々な長さのペプチドを、＞９５％（ＨＰＬＣ）の純度で合成した。品質管理には、ＨＰＬＣ、質量分析（ＥＩ）、アミノ酸分析およびペプチド含量を用いた。下記表３にこれらのペプチドの配列を示す。
【表３】
2005511499.tif 000007
【０３８９】
非肥満糖尿病（ＮＯＤ）マウスにおける若年性（Ｉ型、ＩＤＤＭ）糖尿病：
天然カゼイン由来のペプチド：ＮＯＤマウスは自己免疫疾患およびヒト若年性糖尿病の研究モデルとしてよく使用されている。６週齢の雌ＮＯＤマウスに、毎週１回または２回、合計５回または１０回にわたって、天然カゼイン由来のペプチド１００μｇを注射した。対照マウスには何の処置も施さなかった。コンビ（Ｃｏｍｂｉ）試験片を使って測定した糖尿によって、疾患の重症度を決定した［Ｇｒｏｓｓ，Ｄ．Ｊ．ら（１９９４）Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｙ，３７：１１９５］。結果は、３６５日間にわたって各試料で糖尿を示さなかったマウスのパーセントとして表した。
【０３９０】
カゼイン由来の合成ペプチド：もう一つの実験では、６週齢の雌ＮＯＤマウスに、１００μｇのカゼイン由来合成ペプチドを毎週１回、合計５回注射した。対照マウスには何の処置も施さなかった。結果をさまざまな処置群における健康なマウスの数として表した。
【０３９１】
腹腔内ブドウ糖負荷試験（ＩＰＧＴＴ）：ブドウ糖負荷試験は哺乳動物におけるブドウ糖代謝および糖尿病傾向を調べるための決定的な方法である。カゼイン由来の合成ペプチドを投与した２５週間後に、ブドウ糖負荷に対する反応を、腹腔内ブドウ糖負荷試験で評価した。ブドウ糖注射は１ｇ／ｋｇ体重とした。試験前（０分）と負荷６０分後に採取した血液から血糖値を決定した。Ｇｌｕｃｏｓｅ  Ａｎａｌｙｚｅｒ  ２（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、カリフォルニア州フラートン）で血漿グルコースレベルを決定し、ｍｍｏｌ／Ｌの単位で表した。正常値は１４０ｍｍｏｌ／Ｌ以下である。
【０３９２】
ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の増殖の刺激：
ヒト末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ）からの増殖：Ｇ−ＣＳＦ処置を施した被験者のＰＢＳＣを、フィコール勾配上で分離し、ＲＰＭＩ−１６４０培地で２回洗浄し、１．５ｍｌのウェルに、表記の通り様々な濃度の天然カゼイン由来ペプチドもしくはカゼイン由来の合成ペプチドと共にまたはカゼイン由来ペプチドなしで（０〜５００μｇ／ｍｌ）播種した。２日間のインキュベーション後に３５Ｓ標識Ｋ５６２標的細胞から放出された放射能を測定することによって細胞のナチュラルキラー活性をアッセイした（ＮＥＧ−７０９Ａ、１８５．００ＭＢｑ、２．００ｍＣｉ、ＥａｓｙＴａｇ（商標）メチオニンＬ−［３５Ｓ］、４３．４８ＴＢｑ／ｍｍｏｌ、１１７５．０Ｃｉ／ｍｍｏｌ、０．４８８ｍｌ、米国ボストン）。Ｕ底９６穴組織培養プレートで、２種類の濃度のエフェクター細胞（２．５×１０５および５×１０５細胞／ウェル）を、５×１０３細胞／ウェルの標的細胞と共にインキュベートした（エフェクター：標的細胞比はそれぞれ５０：１および１００：１）。細胞を５％ＣＯ２／９５％空気中３７℃で５時間インキュベートし、１０００ｒｐｍで５分間遠心分離することによって沈殿させた。上清液の試料５０μｌ中の３５Ｓ放出量を測定した。
【０３９３】
マウス骨髄（ＢＭ）細胞からの増殖：４匹の無処置のＢＡＬＢ／ｃおよびＣ５７Ｂｌ／６マウスから骨髄を収集した。骨髄は、２５ゲージ針を使って培地を注入することにより、マウスの前肢および後肢の長骨から収集した。吸引した細胞をＲＰＭＩ１６４０で洗浄し、血球計算器で計数し、生体染色（酢酸−トリパンブルー３８０μｌ中に細胞２０μｌ）した後、１０％ウシ胎仔血清、抗生物質およびグルタミンを含むＲＰＭＩ−１６４０培地１ｍｌにつき２〜５×１０６細胞の密度で、１００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドと共に、または天然カゼイン由来ペプチドなしで、培養ビンに播種した。その細胞培養物を５％ＣＯ２／９５％空気中３７℃で１２〜１５日間培養し、１５００ｒｐｍで１０分間の遠心分離によって収集し、計数し、Ｕ底ウェルに５１Ｃｒ（クロム５１、放射能７４０ＭＢｑ、２．００ｍＣｉ）または３５Ｓ（ＮＥＧ−７０９Ａ、１８５．００ＭＢｑ、２．００ｍＣｉ、ＥａｓｙＴａｇ（商標）メチオニンＬ−［３５Ｓ］、４３．４８ＴＢｑ／ｍｍｏｌ、１１７５．０Ｃｉ／ｍｍｏｌ、０．４８８ｍｌ、米国ボストン）標識マウスリンパ球（ＹＡＣ）細胞と共に、２５：１または５０：１のエフェクター：標的細胞比で播種した。ＮＫ活性を、無細胞上清中の放射能の百分率として表す。
【０３９４】
培養ヒト細胞の増殖：健常者または患者から末梢血（ＰＢ）を採取した。患者にはプラズマフェレーシスに先立ってＧ−ＣＳＦ補充以外の処置を施さなかった。同意を得た健常者、または化学療法後の寛解期にある患者から吸引によって、骨髄（ＢＭ）細胞を採取した。正常出産時に臍帯血を集めた。様々な起源を持つヒト細胞をフィコール勾配上で分離し、ＲＰＭＩ−１６４０培地で２回洗浄し、０．２ｍｌ平底組織培養ウェルに、表示した濃度で、表示の通り、天然カゼイン由来ペプチドまたはカゼイン由来の合成ペプチドと共に、または天然カゼイン由来ペプチドまたはカゼイン由来の合成ペプチドなしで播種した。対照を含めて全ての処置は３重に行った。細胞増殖は３ＨＴ取り組みによって測定した：表示した日数にわたって培養した後、放射性チミジン［チミジン（メチル−［３Ｈ］）、比活性５Ｃｉ／ｍｌ、３７ＭＢｑ／ｍｌ、ＩＣＮ  Ｃｏｒｐ．］を添加した。細胞をラベルと共に１６〜２０時間インキュベートし、収集し、培地で洗浄した。組み込まれた放射能をβシンチレーション計数器で測定した。
【０３９５】
Ｋ５６２白血病細胞株および大腸癌細胞株の増殖：ＣｏｌｏｎおよびＫ５６２は、培養癌細胞の樹立細胞株である。両細胞株を培養ビンにて５％ＣＯ２／９５％空気中３７℃で生育し、収集し、培地で洗浄した後、４×１０５細胞／ウェル（Ｋ５６２）または３×１０３細胞／ウェル（Ｃｏｌｏｎ）の密度で組織培養ウェルに播種した。それらのウェルに、表示した濃度の天然カゼイン由来ペプチドを加え、９日間（Ｋ５６２）または３日間（Ｃｏｌｏｎ）培養した後、標識チミジンを上述のように加えた。収集と放射能取込量の測定は上述のように行った。
【０３９６】
ヒト末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ）におけるＮＫ細胞およびＴ細胞増殖の蛍光抗体検出：
Ｇ−ＣＳＦ処置を受けた被験者からプラズマフェレーシスによって末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ）を採取し、フィコール勾配上で分離し、１０％ウシ胎仔血清を含むＲＰＭＩ−１６４０培地で２回洗浄し、培養ビンにて、表示した濃度の天然カゼイン由来ペプチドと共に、または天然カゼイン由来ペプチドなしで、５％ＣＯ２／９５％空気中、３７℃で培養した。天然カゼイン由来ペプチドと共に１０、１４または２８日間培養した後、Ｔ細胞（ＣＤ３表面抗原）およびＮＫ細胞（ＣＤ５６表面抗原）の存在を、抗ＣＤ３蛍光抗体（ＣＤ３／ＦＩＴＣクローンＵＨＣＴ１）、抗ＣＤ５６蛍光抗体（ＣＤ５６／ＲＰＥクローンＭＯＣ−１）（ＤＡＫＯ  Ａ／Ｓ（デンマーク））ならびに対照としてのマウスＩｇＧ１／ＲＰＥおよびＩｇＧ１／ＦＩＴＣ抗体を用いた直接免疫蛍光法によって検出した。蛍光標識細胞の検出はＦＡＣＳ（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｃｅｌｌ  ｓｏｒｔｉｎｇ）を使って行った。
【０３９７】
培養骨髄（ＢＭ）細胞からの造血の刺激：
マウス骨髄細胞からの多能性コロニー（ＣＦＵ−ＧＥＭＭ）における巨核球の増殖：８〜１２週齢のＣ３Ｈ／ＨｅＪマウスから得た初代骨髄細胞（１×１０５／ｍｌ）を無血清メチルセルロース−ＩＭＤＭ培地中、５％ＣＯ２／９５％空気、３７℃で８〜９日間生育した。培地は、多能性コロニー（ＣＦＵ−ＧＥＭＭ）の生育に適したもので、１％ＢＳＡ（Ｓｉｇｍａ）、１０−４Ｍチオグリセロール（Ｓｉｇｍａ）、２．８×１０−４Ｍヒトトランスフェリン（ＴＦ、Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ（イスラエル））、ＩＬ−３源としての１０％ＷＥＨＩ−ＣＭ、および２単位／ｍｌのエリスロポエチン（ｒｈＥＰＯ、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（ミネアポリス））を含んだ。８〜９日後にオリンパス暗視野顕微鏡を使ってコロニーを算定した。それらをマイクロピペットで拾い、細胞遠心装置にかけ、血液像を調べるためにメイ・グリュンワルド・ギムザ染色を行った。各調製物につき少なくとも７００個の細胞を計数した。
【０３９８】
ＣＦＵ−ＧＥＭＭ中の形質細胞の増殖：巨核球増殖のアッセイに関して上述したように初代骨髄細胞から成長させた多分化能（ＣＦＵ−ＧＥＭＭ）コロニーを収集し、染色し、形質細胞数を数えた。細胞数は各調製物につき少なくとも７００個に達した。
【０３９９】
ＣＦＵ−ＧＥＭＭ中の形質細胞の増殖：巨核球増殖のアッセイに関して上述したように初代骨髄細胞から成長させた多分化能（ＣＦＵ−ＧＥＭＭ）コロニーを収集し、染色し、形質細胞数を数えた。細胞数は各調製物につき少なくとも７００個に達した。
【０４００】
ＣＦＵ−ＧＥＭＭ中のマクロファージ細胞の増殖：巨核球増殖のアッセイに関して上述したように初代骨髄細胞から成長させた多分化能（ＣＦＵ−ＧＥＭＭ）コロニーを収集し、染色し、マクロファージ細胞数を数えた。細胞数は各調製物につき少なくとも７００個に達した。
【０４０１】
ＣＦＵ−ＧＥＭＭ中の赤血球の増殖：巨核球増殖のアッセイに関して上述したように初代骨髄細胞から成長させた多分化能（ＣＦＵ−ＧＥＭＭ）コロニーを収集し、染色し、赤血球数を数えた。細胞数は各調製物につき少なくとも７００個に達した。
【０４０２】
ＣＦＵ−ＧＥＭＭ中の多形核細胞（ＰＭＮ）の増殖：巨核球増殖のアッセイに関して上述したように初代骨髄細胞から成長させた多分化能（ＣＦＵ−ＧＥＭＭ）コロニーを収集し、染色し、多形核細胞数を数えた。細胞数は各調製物につき少なくとも７００個に達した。
【０４０３】
ヒト骨髄および臍帯血細胞からの巨核球および赤血球形成細胞の増殖：外見上健常なヒトから得た骨髄の試料を、ヒストパック１０７（Ｓｉｇｍａ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を用いる密度勾配分離によって処理することにより、精製単核細胞（ＭＮＣ）集団を得た。コロニーアッセイは、３６ｍＭ重炭酸ナトリウム（Ｇｉｂｃｏ）、３０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、０．２９２ｍｇ／ｍｌグルタミン、１００単位／ｍｌペニシリンおよび０．０１ｍｇ／ｍｌストレプトマイシン（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ、Ｂｅｉｔ  Ｈａｅｍｅｋ）を含むイスコフ改良ダルベッコ培地中で再水和した最終濃度０．９２％のメチルセルロース（粉末、４０００センチポアズ、Ｓｉｇｍａ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を含む播種培地で行った。正常出産児から臍帯血を集め、上述のように調製した。
【０４０４】
１０５個／ｍｌのＭＮＣを含むコロニーアッセイ培地を、２４穴組織培養プレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ）のウェルに、１ウェルにつき０．３３ｍｌずつ、三重に播種した。その培養物を５％ＣＯ２／９５％空気中、相対湿度５５％、３７℃で、表示した濃度の天然カゼイン由来ペプチドまたはカゼイン由来合成ペプチドと共に、または天然カゼイン由来ペプチドまたはカゼイン由来合成ペプチドなしで培養した。１４日後に、５０個を超える細胞を含むコロニーについて、プレートを算定した。巨核球は、ヒト血小板糖タンパク質を認識する特異性の高いウサギ抗体とＦＩＴＣ結合ヤギ抗ウサギＩｇＧとを用いる間接免疫蛍光法によって同定した。顆粒球−単球コロニー（ＣＦＵ−ＧＭ）の成長を誘導するために、添加する成長因子には、１５ｎｇ／ｍｌのロイコマックス（ｌｅｕｃｏｍａｘ）（ＧＭ−ＣＳＦ）（Ｓａｎｄｏｚ  Ｐｈａｒｍａ）と、５％（ｖ／ｖ）ヒトフィトヘマグルチニン−ｍ（Ｄｉｆｃｏ  Ｌａｂ）誘導条件培地（ＣＭ）とを含めた。エリスロポエチン（ＥＰＯ）２単位／ｍｌを使って、赤血球コロニーの形成を誘導した(赤血球バースト形成単位ＢＦＵ−Ｅ）。
【０４０５】
あるいは、同意を得たボランティアのドナーまたは自己骨髄移植を受けている患者から採取したヒト骨髄細胞を、１０〜１０００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドを含む培地で前培養し、半流動寒天で生育し、処理の７〜１４日後に、顆粒球−マクロファージ造血コロニー（ＧＭ−ＣＦＵ）について算定した。
【０４０６】
同意を得た健常な提供者から採取した正常骨髄細胞における巨核球産生は、１００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドを含むまたは天然カゼイン由来ペプチドを含まない液体培養（ＲＰＭＩ−１６４０＋１０％ヒトＡＢ血清、グルタミンおよび抗生物質）の試料における巨核球の数を算定するか、メチルセルロースアッセイでコロニー形成を評価することによって測定した。２×１０５個の骨髄細胞を標準的な成長因子の組合わせの存在下に、天然カゼイン由来ペプチドと共にまたは天然カゼイン由来ペプチドなしで播種した。メチルセルロースアッセイでは、播種後１２〜１４日目に、倒立顕微鏡で巨核球を計数した。
【０４０７】
天然カゼイン由来ペプチドを用いた臨床試験：ある一連の治験では、被験者に天然カゼイン由来ペプチド５０ｍｇを含む一回量を３カ所に（ｉｎ  ｔｈｒｅｅ  ｄｅｐｏｔｓ）２時間かけて筋肉内投与した。表示した間隔で臨床パラメーターをモニターした。別の治験では、癌および転移性疾患の様々な処置段階および／または寛解期にある患者に、天然カゼイン由来ペプチドを１回または２回投与し、末梢血中の細胞数の変化をモニターした。
【０４０８】
ヒトリンパ球細胞のインビトロＨＩＶ感染の阻害：
ペプチド：凍結乾燥粉末として供給されたペプチド（天然カゼイン由来ペプチドまたはカゼイン由来の合成ペプチド（２〜２６アミノ酸長、表３参照））をＲＰＭＩ完全培地に再懸濁し、５０〜１０００μｇ／ｍｌの最終濃度で細胞培地に添加した。
【０４０９】
細胞：表面にＣＤ４分子を低レベルでもディスプレイする細胞は基本的にはいずれもＨＩＶ−１感染の潜在的標的であると考えられるが、数タイプの新鮮単離ヒト細胞（初代細胞）および細胞株は、インビトロＨＩＶ−１感染に対して感受性であることが知られている。ＨＩＶ−１感染に対する感受性が高く一般に使用されている２つのヒト細胞株ＣＥＭおよびＳｕｐ−Ｔ１を選択した。
【０４１０】
ＣＥＭは、Ｇ．Ｅ．Ｆｏｌｅｙら［（１９６５）Ｃａｎｃｅｒ  １８：５２２］が、急性リンパ芽球性白血病を持つ４歳の白人女児の末梢血バフィーコートから最初に誘導したヒトＴ４リンパ芽球細胞株である。この細胞は培地中に懸濁した状態で連続的に維持され、感染性、抗ウイルス剤および中和抗体の解析に広く使用されてきた。
【０４１１】
Ｓｕｐ−Ｔ１は、非ホジキンＴ細胞リンパ腫を持つ８歳の男児の胸水から分離されたヒトＴリンパ芽球細胞株である［Ｓｍｉｔｈ，Ｓ．Ｄ．ら（１９８４）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ４４：５６５７］。この細胞は高レベルの表面ＣＤ４を発現し、ＨＩＶ−１の細胞融合、細胞変性効果および感染性の研究に役立つ。Ｓｕｐ−Ｔ１細胞は濃縮培地で懸濁培養される。
【０４１２】
培地：細胞は、１０％ウシ胎仔血清、２ｍＭグルタミンおよび２ｍＭペニシリン−ストレプトマイシンを添加したＲＰＭＩ−１６４０完全培地（ＧＩＢＣＯ）で生育した。
【０４１３】
ウイルス：使用したＨＩＶウイルス株は、当初ＨＴＬＶ−ＩＩＩＢと呼ばれていたＨＩＶ−１ＩＩＩＢである。数人のＡＩＤＳまたは関連疾患患者から得た末梢血の濃縮培養液を使って、Ｈ−９細胞での永続的ウイルス産生性感染を樹立した。このＢサブタイプウイルスは、ヒトＴ細胞株で高い複製能を示す。ストック溶液のウイルス価は５．３８ｎｇ／ｍｌだった。
【０４１４】
ＦＩＴＣ標識ペプチド：それぞれ約４９４／５２０ｎｍの励起／蛍光極大を持つＦＩＴＣ  Ｆ−１３００（フルオレセインイソチオシアネート、アイソマーＩ、Ｓｉｇｍａ（Ｆ２５ｏ−２）（米国ミズーリ州セントルイス））を使用した。アミン反応性フルオレセイン誘導体は、共有結合によるタンパク質の標識におそらく最もよく使用される蛍光誘導体化試薬だろう。天然カゼイン由来のＦＩＴＣ結合ペプチドは、リジンのアミノ基へのＦＩＴＣの共有結合によって製造された。
【０４１５】
ＨＩＶ−１  Ｐ２４抗原捕捉アッセイ：使用したＨＩＶ−１  Ｐ２４抗原捕捉アッセイキットは、細胞内でのウイルス産生の程度と比例関係を示すＨＩＶ−１  Ｐ２４コア抗原を定量する目的で設計されたものである。このキットは、ＳＡＩＣ−ＮＣＩ−Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（米国２１７０２メリーランド州フレデリック私書箱Ｂ）のＡＩＤＳワクチンプログラムから購入したもので、ＨＩＶ−１  Ｐ２４に対するモノクローナル抗体で覆われた９６穴プレート、一次抗体−ウサギ抗ＨＩＶ  Ｐ２４血清、二次抗体−ヤギ抗ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）ペルオキシダーゼ結合抗体、ＴＭＢペルオキシダーゼ基質系および溶解したＨＩＶ−１  Ｐ２４標品が含まれていた。ＨＩＶ−１  Ｐ２４抗原捕捉アッセイは、Ｏｒｇａｎｏｎ−Ｔｅｃｈｎｉｃａ  ＥＬＩＳＡリーダーにより、４５０ｎｍ（参照波長６５０ｎｍ）で分析した。
【０４１６】
ＨＩＶ−１  Ｐ２４抗原捕捉ＥＬＩＳＡ：ＨＩＶ感染は、組織培養培地中のＨＩＶ−１  Ｐ２４コア抗原を検出する間接的酵素免疫アッセイで測定した。組織培養上清をウサギ抗ＨＩＶ−１  Ｐ２４抗原一次抗体と反応させ、ペルオキシダーゼ結合ヤギ抗ウサギＩｇＧで可視化した。４Ｎ  Ｈ２ＳＯ４の添加によって反応を停止した。この場合、発色の強さは組織培養上清中に存在するＨＩＶ−１抗原の量に比例する。
【０４１７】
生物災害レベル（ＢＬ−３）実験室：ウイルスの産生、単離および感染、ＨＩＶ−１感染細胞の組織培養、Ｐ２４抗原含有上清の収集、およびＰ２４抗原捕捉ＥＬＩＳＡは全て、ヘブライ大学ハダーサ医学校のＢＬ−３施設で、ＮＩＨおよびＣＤＣ（米国）が設定したバイオセイフティープラクティスに従って行った。
【０４１８】
フローサイトメトリー：ＦＡＣＳｏｒｔ細胞選別装置（Ｂｅｃｔｏｎ  ＆  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ（米国カリフォルニア州サンホゼ））を使って、（ｉ）各実験で感染の程度が同じになるように、ＨＩＶ−１感染前のＣＤ４陽性ＣＥＭおよびＳｕｐ−Ｔ１細胞バッチのパーセンテージを決定し、（ｉｉ）細胞質および核内に天然カゼイン由来のＦＩＴＣ結合ペプチドを含んでいるＴ細胞を検出した。
【０４１９】
ＣＯ２培養器：ＨＩＶ−１を使ったウイルス培養産生細胞については、天然カゼイン由来ペプチドで前処理した細胞およびウイルス、さらにＨＩＶ−１と共にインキュベートした細胞を全て、実験期間中、湿潤ＣＯ２培養器に保存した。
【０４２０】
ヒト培養ＣＤ４細胞のＨＩＶ感染：長時間培養の場合は、細胞（ＣＥＭ、Ｓｕｐ−Ｔ１）を数種類の濃度の天然カゼイン由来ペプチド（５０〜１０００μｇ／ｍｌ）またはカゼイン由来の合成ペプチド（１０〜５００μｇ／ｍｌ）と共に、２４時間（合成ペプチドおよび天然ペプチドの場合）および４８時間（天然ペプチドの場合のみ）にわたって前培養した後、ＨＩＶ−１ＩＩＩＢ（最終濃度４５ｐｇ／ｍｌ）を各ウェルに加えた。短時間培養（３時間）の場合は、ＨＩＶ−１ＩＩＩＢをペプチドと共に３時間前培養した後、組織培養プレート中の細胞（５０００細胞／ウェル）に加えた。天然カゼイン由来ペプチドまたはカゼイン由来の合成ペプチドが細胞の生存能および成長に及ぼす影響を調べるために、ＩＦ（ＨＩＶ−１有り、ペプチド無しで培養した感染細胞）、ＵＩＦ（ＨＩＶ−１なし、ペプチドなしで培養した非感染細胞）およびＵＩＦ＋Ｃｈ（天然カゼイン由来ペプチド（５０〜１０００μｇ／ｍｌ）の存在下で培養した非感染＋天然カゼイン由来ペプチド細胞）を対照とした。感染後７日目、１０日目および１４日目（Ｐ２４抗原培地上清を収集した日）に、細胞を計数して生存能および増殖率を調べた。細胞および組織培養上清（培地）を収集し、直ちに１／１０体積の１０％トリトンＸ−１００中で溶解した。これらの試料をさらに３７℃で１時間インキュベートし、Ｐ２４抗原の分析を行うまで−８０℃で保存した。
【０４２１】
共焦点顕微鏡：レーザー走査共焦点顕微鏡技術を利用し、ＴＷ  Ｚｅｉｓｓ  Ａｘｉｏｖｅｒｔ  １３５Ｍ倒立顕微鏡に接続したＺｅｉｓｓ  ＬＳＭ  ４１０共焦点レーザー走査システムを使って、細胞内へのＦＩＴＣ結合ペプチドの侵入を検出した。Ｔ細胞を天然カゼイン由来のＦＩＴＣ結合ペプチドと共に、３７℃の５％ＣＯ２／９５％空気培養器で前培養した後、細胞をリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で３回洗浄して、結合していないＦＩＴＣ−ペプチドを除去した。細胞を３．８％ホルマリンで１０分間固定し、ＰＢＳで２回洗浄し、５０〜１００μｌのＰＢＳに再懸濁した後、顕微鏡で細胞を観察した。細胞質および核内に様々な量の天然カゼイン由来ＦＩＴＣペプチドを示す、様々な前培養時点（１５分、３０分、１時間、１．５時間および３時間）の細胞の画像を選んで３．５インチＺｉｐドライブ（２３０ＭＢ）に保存し、ソフトウェアＰｈｏｔｏｓｈｏｐを使って写真用に加工した。
【０４２２】
［３Ｈ］−チミジン取り込み試験：天然カゼイン由来のペプチドがＴ細胞増殖に及ぼす影響を調べるために、Ｓｕｐ−Ｔ１細胞でのＨＩＶ−１感染について上述したように、いくつかの濃度の天然カゼイン由来ペプチド（保存液はＲＰＭＩ中１０ｍｇ／ｍｌ）を、９６穴平底マイウロウェルプレート中のＳｕｐ−Ｔ１細胞培養（５０００細胞／ウェル）に加えた。細胞を計数し、トリパンブルー色素排除法によって生存能を決定した。それらの細胞に各時点（３、７、１０および１４日）で［３Ｈ］−チミジンを１８時間（一晩）パルスし、ガラス繊維フィルター上に収集して、放射能を測定した（細胞ＤＮＡへの［３Ｈ］−チミジンの取り込み量は細胞増殖の程度に比例する）。
【０４２３】
正常、骨髄破壊および移植片受容マウスおよびモルモットにおける天然カゼイン由来ペプチドの毒性：正常な実験動物に、体重１ｋｇあたり５０００ｍｇまでの天然カゼイン由来ペプチドを１回で、または３回に分けて、筋肉内または静脈内注射した。ＢＡＬＢ／ｃ、Ｃ３Ｈ／ＨｅＪおよび非肥満糖尿病（ＮＯＤ）マウスを含む様々な系統を使用した。マウスは１０ヶ月間モニターしてから屠殺して剖検に付すか（毒性アッセイ）、２００日間観察した（生存率）。モルモットには、１匹あたり２０ｍｇの天然カゼイン由来ペプチドを１回筋肉内注射した。１５日後にモルモットを屠殺し、病理学的検査に付した。
【０４２４】
骨髄移植片受容マウスにおける白血球および血小板再構築：ＢＡＬＢ／ｃマウスに、皮膚から７０ｃｍの距離にある線源から、毎分５０ｃＧｙ、合計６００ｃＧｙの線量で、致死線量に近い量の放射線を照射した。照射したマウスを同系骨髄で上述のように再構築し、２４時間後に１匹あたり１ｍｇの天然カゼイン由来ペプチド、カゼイン由来の合成ペプチド（１３〜２６アミノ酸、上記表３参照）またはヒト血清アルブミン（対照）を二重盲検法で静脈内注射した。白血球再構築は、処置後６日から１２日まで表示した間隔で収集した末梢血中の細胞数に基づいて決定した。血小板再構築は、処置後６から１５日まで表示した間隔で後眼窩静脈叢からＥＤＴＡ含有バイアルに収集した血液中の細胞数によって決定した。
【０４２５】
もう一つの実験群では、ＣＢＡマウスに、上述のように、致死線量の放射線（９００ｃＧｙ）を照射し、ＢＭ細胞で再構築し、天然カゼイン由来ペプチドまたはヒト血清アルブミンで処置した。血小板再構築を上述のようにアッセイした。
【０４２６】
第３の実験群では、マウスに放射線（８００ｃＧｙ）を照射し、再構築し、移植後４、５、６および７日目に、１００μｇのカゼイン由来合成ペプチド（ペプチド３ａおよび４Ｐ、それぞれαＳ１カゼインのＮ末端の最初の６アミノ酸および最初の１２アミノ酸に相当する−上記表３参照）を毎日腹腔内注射した。血小板再構築を移植後１０日目および１２日目にアッセイした。
【０４２７】
骨髄移植片受容マウスの再構築：
Ｃ５７／Ｂｌ／６マウスに、皮膚から７０ｃｍの距離にある線源から、毎分５０ｃＧｙ、合計９００ｃＧｙの線量で、致死線量の放射線を照射した。照射したマウスを、骨髄回収の前日に１匹あたり１ｍｇの天然カゼイン由来ペプチドで処置したマウスまたは塩水で処置したマウス（対照）から得た同系骨髄で、二重盲検法により再構築した。一つの実験ではマウスの生存を１８日間モニターした。もう１つの実験では、マウスを８日後に屠殺し、脾臓コロニー形成をモニターした。
【０４２８】
カゼイン由来の合成ペプチドはコレステロールレベルを有意に低下させる：
７週齢雌Ｃ５７Ｂｌ／６ｊマウスにおけるカゼイン由来合成ペプチドのコレステロール低下能力をアテローム発生性飼料を与えた後に評価した。マウスを８匹ずつの群に分けた。一つの対照群には通常飼料を与えた。もう一つの対照群にはコール酸塩を含む改変Ｔｈｏｍａｓ  Ｈａｒｔｒｏｆｔ飼料（＃ＴＤ８８０５１：Ｔｅｋｌａｄ、ウィスコンシン州マディソン）を与えた［Ｇｅｒｂｅｒ，Ｄ．Ｗ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．４２，２００１］。残りの実験群にはすべて改変Ｔｈｏｍａｓ  Ｈａｒｔｒｏｆｔ飼料を与えた。各飼料で１週間飼育したところ、血清コレステロール値は有意に上昇した。この時点で、カゼイン由来の合成ペプチドを１匹につき１ｍｇずつ腹腔内に注射し、１週間後にさらに０．１ｍｇを注射した。
【０４２９】
血中コレステロールレベルはＲｏｅｓｃｈｌｏｕとＡｌｌｉｎの酵素法に基づくＲｏｃｈｅ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  Ａｓｓａｙ（Ｒｏｃｈｅ，Ｉｎｃ．、ドイツ）に従って決定した。
【０４３０】
実験結果
天然カゼイン由来のペプチド：凝固した乳では細菌が成長できない場合があるという観察に端を発して、乳タンパク質から抗菌性を持つカゼイン断片が単離された（Ｋａｔｚｉｒｋａｔｃｈａｌｓｋｙらの米国特許第３７６４６７０号）。カゼインタンパク質分解消化物の可溶性画分の酸沈殿、透析および凍結乾燥によって、天然カゼインのタンパク質分解によって得られる粗製ペプチドを得た。長期間保存した後に生物活性を調べたところ、この粗製品は、凍結乾燥して４℃で保存した場合、少なくとも２４ヶ月間は（インビトロおよびインビボ）活性を保つことがわかった。
【０４３１】
天然カゼイン由来のペプチドに含まれる活性ペプチドを同定するために、凍結乾燥粗製品を、上述のように高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を使って分画した。分析した凍結乾燥試料は全て類似した保持時間プロファイルを示し、内容は上述の通りであった。
【０４３２】
したがって、天然カゼイン調製物から得られる粗製ペプチドの主成分はαＳ１カゼインのＮ末端断片である。
【０４３３】
天然カゼイン由来のペプチドは齧歯類動物およびヒトでは無毒性である：マウス、ラット、モルモットおよびヒトボランティアに対する天然カゼイン由来ペプチドの短期および長期作用を詳細に調べたところ、本調製品には毒性、催奇性または有害な副作用はないことが確認された。ある試験群では、天然カゼイン由来ペプチドの推定有効用量の７０００倍に相当する一回量を、マウスに筋肉内投与した。処置後１４日のマウスを標準的剖検に付したが、内臓に対する毒性または他の異常は認められなかった。同様の毒性試験をモルモットで行ったが、天然カゼイン由来ペプチド２０ｍｇを単回筋肉内投与した２週間後に、異常は認められなかった。もう一つの実験群では、高用量の天然カゼイン由来ペプチドを健常マウスに投与したが、２週間後に測定したいくつかの血液学的パラメーターは、白血球数（ＷＢＣ）、赤血球数（ＲＢＣ）、ヘモグロビン濃度（ＨＧＢ）、電解質、グルコースその他を含めて影響を受けなかった。第３の実験群では、マウスおよびラットに、体重１ｋｇにつき１００ｍｇという高用量を２週間にわたって反復投与したが、アレルギー反応、遅延型皮膚反応、アナフィラキシー反応は見られず、剖検でも病理学的作用は認められなかった。天然カゼイン由来ペプチドが放射線照射骨髄再構築ＢＡＬＢ／ｃおよびＣ３Ｈ／ＨｅＪマウスの長期生存に及ぼす影響を調べたところ、処置マウスの生存率（２７匹のＢＡＢＬ／ｃおよびＣ３Ｈ／ＨｅＪ中１８匹、６６％）は、アルブミン処置対象の生存率（２６匹のＢＡＬＢ／ｃおよびＣ３Ｈ／ＨｅＪ中４匹、１５％）よりも明らかに高かった。天然カゼイン由来ペプチドで処置したマウスにおける標準的な催奇性試験［詳細については例えばＦｏｌｂおよびＤａｋｅｓ「Ｄｒｕｇ  Ｓａｆｅｔｙ  ｉｎ  Ｐｒｅｇｎａｎｃｙ」Ｅｌｓｅｖｉｅｒ（アムステルダム、ニューヨーク、オクスフォード）（１９９０）の３３６頁を参照されたい］では、発生パラメーターに対する本ペプチドの影響は認められなかった。
【０４３４】
齧歯類動物で試験した場合に毒性または副作用が無かったのと同様に、天然カゼイン由来ペプチドはヒトに投与した場合にも安全だった。天然カゼイン由来のペプチドを筋肉注射する前、筋肉注射中および筋肉注射の７日後に、７名の健常人ボランティアから採取した血液試料および尿試料を比較したところ、どの臨床パラメーターにも変化は認められなかった。他の有害な作用も観察されなかった。
【０４３５】
このように、齧歯類動物を高用量の天然カゼイン由来ペプチドで長期間にわたって処置しても、明らかな毒性、病理学的作用、過敏性、催奇性、血清学的作用または他の有害な作用は認められなかった。さらに、短期および長期合併症の危険がある放射線照射マウスに投与した天然カゼイン由来ペプチドは、２００〜３００日にわたって、生存に著しく有利に働いた。これらの事実は、天然カゼイン由来ペプチドを注射した健常人ボランティアでも望ましくない作用が認められなかったことと合わせて、非経口投与における本ペプチドの安全性を明確に実証している。
【０４３６】
骨髄移植片受容マウスの再構築：Ｃ５７Ｂｌ／６マウスに致死線量の放射線を照射し、骨髄回収の前日に１匹あたり１ｍｇの天然カゼイン由来ペプチドで処置したマウスまたはそのような処置を行っていないマウスから採取した同系骨髄で再構築したところ、処置マウスの骨髄を移植した放射線照射マウスの生存率は、非処置マウスの骨髄を移植した放射線照射マウスの生存率をはるかに上回った（処置マウスの骨髄を移植した放射線照射マウスの生存率が照射後１０日で１８匹中１５匹だったのに対し、非処置マウスの骨髄細胞を移植した放射線照射マウスの生存率は照射後１０日で１７匹中４匹だった）。処置マウスの骨髄を移植した放射線照射マウスから得た脾臓には、非処置マウスの骨髄を移植した放射線照射マウスの脾臓と比べて約２倍〜３倍多いコロニーが含まれていた（０〜３コロニーに対して１〜５コロニー）。
【０４３７】
天然カゼイン由来のペプチドはリンパ球の増殖を刺激する：ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞および細胞傷害性Ｔ細胞は、活発な細胞傷害性および免疫調節性リンホカインの分泌による感染性病原体および癌細胞の侵入に対する免疫系の防護能力にとって極めて重要である。ＡＩＤＳまたは化学療法後に見られるような免疫無防備状態は、低下した異常なＴまたはＮＫ細胞活性をもたらす。ＢＡＬＢ／ｃおよびＣ５７Ｂｌ／６マウスから得た正常マウス骨髄細胞を１００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドの存在下で培養したところ、ＮＫ活性の明確な増加がどちらのエフェクター：標的細胞比群でも観察された。さらに、これら２つの群を比較したところ、明らかな用量反応関係が認められた。１：２５エフェクター：標的細胞比では、平均ＮＫ活性は１３．９３％から３０．７７％に増加し、１：５０エフェクター：標的細胞比では、平均ＮＫ活性は１３．６８％から４４．０５％に増加した（図１）。顆粒球コロニー刺激因子で処置したドナーのヒト末梢血幹細胞を用いた同様の実験では、天然カゼイン由来ペプチドで、より一層顕著な標的細胞溶解の濃度依存的刺激が認められた。
【０４３８】
最初の実験群（図２ａ）では、１人の患者から採取して、さまざまな濃度の天然カゼイン由来ペプチドと共に２種類のエフェクター：標的細胞比で培養した血液試料中のＮＫ活性を測定した。対照無処理ＰＢＳＣ培養では４％の３５Ｓ放出しか測定されなかった。最も低いペプチド濃度（５μｇ／ｍｌ）では、ほとんど同じパーセントの放射能（４％）が認められた。しかし、それより高いペプチド濃度では、１０μｇ／ｍｌから１００μｇ／ｍｌまでの範囲で、エフェクター：標的細胞比が１００：１の場合は１０．８〜１４．９％の３５Ｓ放出が、またエフェクター：標的細胞比が５０：１の場合は８．３〜１４．５％の３５Ｓ放出が測定された（図２ａ）。
【０４３９】
正常供血者（患者１）および罹患供血者（患者２〜６）から採取したＰＢＳ細胞をさまざまな濃度の天然カゼイン由来ペプチドと共に培養したところ、罹患患者のＮＫ細胞活性の有意な増大を測定することできた。したがって、天然カゼイン由来のペプチドは正常患者のＮＫ活性にはわずかな効果しか持たなかったが（患者１では１３％３５Ｓ放出から１５％３５Ｓ放出への増加）、乳癌患者および非ホジキンリンパ腫患者（例えば患者３および患者４）のＰＢＳ細胞はどちらも、そのＮＫ活性の劇的な用量依存的増大を示した（それぞれ３．５％３５Ｓから１０．８％３５Ｓ、１２．２％３５Ｓから１９．１％３５Ｓへの増加）（図２ｂ）。
【０４４０】
天然カゼイン由来のペプチドはＣＤ５６表面抗原陽性（ＮＫ）細胞の増殖を刺激する：もう一つの実験群では、ＧＣＳＦ処置を受けている５人の供血者から採取した末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ）を天然カゼイン由来のペプチドと共に１０、１４または２８日間培養した後、ＣＤ５６抗原の存在についてアッセイした。１人（患者１）を除くどの供血者から得たペプチド処置細胞でも、ＣＤ５６抗原の検出に、時として劇的な増加が観察された。代表的な反応を図３ａに示す。天然カゼイン由来のペプチドの存在下または不在下で１０日間培養した後、ＣＤ５６表面抗原陽性（ＮＫ）細胞の存在を、直接免疫蛍光染色によって検出した。総合すると、天然カゼイン由来ペプチドと共に培養することにより、ＣＤ５６に関して陽性に染色される細胞の平均百分率は、対照群での０．６４％から処置後の２．０％まで増加した（図３ａ）。
【０４４１】
天然カゼイン由来のペプチドはＣＤ３表面抗原陽性（Ｔ）細胞の増殖を刺激する：５人の被験者から得たＰＢＳ細胞中のＣＤ３表面抗原陽性（Ｔ）細胞の増殖に対する天然カゼイン由来ペプチドの効果を直接免疫蛍光法によってアッセイした。１人（患者４）を除くすべての被験者で、天然カゼイン由来ペプチドと共に１４日間培養することにより、場合によっては５倍以上も、Ｔ細胞増殖が有意に増加した。総合すると、ＣＤ３に関して陽性に染色される細胞の平均百分率は、対照群での１９．４５％から処置群での３５．５４％まで増加した（図３ｂ）。
【０４４２】
天然カゼイン由来のペプチドはＣＤ５６およびＣＤ３（ＮＫ／Ｔ細胞）陽性細胞の増殖を刺激する：もう一つの実験群では、７人の患者から得たＰＢＳＣを天然カゼイン由来ペプチドと共に２８日間培養し、ＮＫ／Ｔ細胞（ＣＤ５６およびＣＤ３表面抗原陽性）の増殖に対する効果を、直接免疫蛍光法によって検出した。天然カゼイン由来ペプチドと共に培養すると、ある場合（患者６）にはＴ細胞の増殖が５倍以上刺激されたが、ＣＤ３陽性（Ｔ）細胞の平均百分率は対照群での２．０８％から処置群での６．４９％まで増加した。ＣＤ５６およびＣＤ３両表面抗原陽性（ＮＫ／Ｔ）細胞の数は、対照群での１．１％から処置群での４．３％まで増加した（図３ｃ）。したがって、天然カゼイン由来ペプチドは、正常マウスおよびヒト血球前駆体からのＴリンパ球およびナチュラルキラー細胞の両方の増殖を刺激する。重要なことに、天然カゼイン由来ペプチドの最も大きい免疫刺激効果は、最初はＴおよびＮＫ細胞レベルが低かった供血者に認められた（図３ａ〜ｃ）。
【０４４３】
カゼイン由来合成ペプチドはインビトロでヒトリンパ球の増殖を刺激する：αＳ１カゼインの最初の３〜２６残基に相当するカゼイン由来合成ペプチドを、健常者および癌患者（下記参照）から採取したヒトＰＢＳＣ細胞と共にインキュベートしたところ、ＮＫ細胞活性に顕著な増加が認められた。非ホジキンリンパ腫患者および乳癌患者のＰＢＳＣ培養物では、αＳ１カゼインの最初の９残基以上を含むペプチドわずか１０μｇ／ｍｌと共に２日間培養した後に、標的細胞溶解率は最も高くなった（対照の３〜５倍以上）（図４）。同一の条件で試験したペプチドはいずれも、健常人ドナーから得たＰＢＳＣ培養物のＮＫ活性に対して有意な影響を持たなかった。このようにαＳ１カゼインのＮ末端配列の少なくとも最初の１０残基を含むペプチドは、低濃度でも、癌患者から得た細胞におけるインビトロリンパ球増殖を選択的に刺激する能力を持つ。
【０４４４】
造血疾患の供血者から得たＰＢＳ細胞を、αＳ１カゼインの最初の３アミノ酸残基に相当するカゼイン由来の合成ペプチドと共に培養した場合も、同様にＮＫ細胞活性の刺激が観察された。ＰＢＳ細胞をこれらのペプチドと共に培養したところ、標的細胞溶解が無処置対照の２倍〜８倍以上に増加した。試験した５人の患者のうち、３人は２５μｇ／ｍｌのペプチド濃度に反応し、１人は１００μｇ／ｍｌのペプチド濃度に反応し、１人は２５０μｇ／ｍｌに反応した。５人の患者のうち３人は２５μｇ／ｍｌで反応した。健康な供血者由来のＰＢＳＣ培養では、αＳ１カゼインの最初の３アミノ酸に相当する合成ペプチドで処理しても、ＮＫ活性に対する有意な効果は観察されず、カゼイン由来ペプチドのヒトリンパ球刺激特性の選択的な性質が確認された。
【０４４５】
ヒト血球前駆細胞における造血の刺激：血球前駆細胞は様々な血球、すなわちマクロファージ、単球、顆粒球、リンパ球、赤血球および巨核球に分化する。前駆細胞は骨髄に豊富に存在するが、顆粒球コロニー刺激因子処置後の末梢血（ＰＢＳＣ細胞）および新鮮臍帯血にも見いだされる。ヒト骨髄、ＰＢＳＣおよび臍帯血の培養物に添加する天然カゼイン由来ペプチドの濃度を増やすと（５０〜６００μｇ／ｍｌ）、［３Ｈ］−チミジン取り込みによって測定した細胞増殖の増加が認められた（図５ａ〜５ｃ）。ヒトＰＢＳＣ増殖は培養１５日後に３００μｇ／ｍｌで最高に達した（図５ａ）。培養臍帯血細胞では、天然カゼイン由来ペプチド（６００μｇ／ｍｌ）と共に（７日ではなく）１４日間培養した後に、さらに高い作用（［３Ｈ］−チミジン取り込み量が３〜４倍増加）が認められた（図５ｃ）。４人のドナー中３人から得られた培養ヒト骨髄細胞も、天然カゼイン由来のペプチド（３００μｇ／ｍｌ）に対して、２１日間の培養後に、強く反応した（取り込み量が３〜５倍増加）（図５ｂ）。このように天然カゼイン由来のペプチドは、骨髄ならびに他の供給源からのヒト血球前駆細胞の増殖を刺激する。興味深いことに、培養ヒトＫ５６２（慢性骨髄性白血病）およびＣｏｌｏｎ（大腸癌）細胞株を高濃度（５００μｇ／ｍｌまで）の天然カゼイン由来ペプチドと同様の条件で培養しても、［３Ｈ］−チミジン取り込み量には影響がなかった。このように天然カゼイン由来のペプチドは、ヒト血球前駆細胞の増殖を刺激するが、インビトロ癌細胞の成長は刺激しない。
【０４４６】
カゼイン由来のペプチドによる巨核球産生の刺激：
天然カゼイン由来のペプチドは培養マウス骨髄細胞における巨核球前駆細胞増殖を刺激する：多核巨核球は骨髄中で始原幹細胞から発生し、成熟して巨細胞となり、巨核球１つにつき何千もの血小板を生じる。血小板は血塊形成にとって極めて重要であり、血小板減少症は（化学療法または放射線療法後の）骨髄破壊状態における重大な問題である。
【０４４７】
初代骨髄細胞培養は、ＣＦＵ−ＧＭ（顆粒球および単球）コロニーおよびＣＦＵ−ＧＥＭＭ（顆粒球、赤血球、マクロファージおよび巨核球）コロニー（他の血球タイプも含む）を形成するように誘導することができる。コロニー数は特定の前駆細胞の増殖を反映し、細胞数は増殖率を反映し、血液像はどの細胞系統が成長したかを反映する［Ｐａｔｅｎｋｉｎ，Ｄ．ら（１９９０）Ｍｏｌ．Ｃｅｌ．Ｂｉｏｌ．１０，６０４６−５０］。エリスロポエチンおよびＩＬ−３と共に培養した培養マウス骨髄細胞では、２５μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドを８日間添加することにより、ＣＦＵ−ＧＥＭＭの数は対照の２倍半に増加し、ＣＦＵ−ＧＥＭＭ中の１コロニーあたりの相対細胞数は３倍に増加した。同様の一連の実験で、エリスロポエチンおよび条件培地（材料および実験方法の項参照）と共に培養した骨髄細胞に天然カゼイン由来ペプチドを添加したところ、初期および後期巨核球のパーセンテージが濃度依存的に増加した（ペプチドなしの場合の１５％巨核球から、５００μｇ／ｍｌ天然カゼイン由来ペプチドでは５０％に増加）。すなわち、天然カゼイン由来ペプチドで８日間処理すると、マウス初代骨髄培養における巨核球の形成および成長が著しく増加した。
【０４４８】
カゼイン由来の合成ペプチドは培養マウス骨髄細胞における巨核球前駆細胞増殖を刺激する：
上記と同様に、類似の実験条件において、αＳ１カゼインの最初の５〜２４アミノ酸に相当するカゼイン由来合成ペプチドは、合成ペプチドなしの場合の１５％巨核球から、２５μｇ／ｍｌ合成ペプチドでは４０％以上に、初期および後期巨核球のパーセンテージが増加した（図７）。すなわち、最初の５，６，１１，１２，１７，１８，１９，２０，２１および２４アミノ酸に相当するカゼイン由来合成ペプチドで８日間処理すると、マウス初代骨髄培養における巨核球の形成および成長が著しく増加した。他のカゼイン由来合成ペプチドでは、いくらか穏やかではあるが容易に検出できる程度の刺激が観察された。
【０４４９】
天然カゼイン由来ペプチドは培養ヒト骨髄細胞における巨核球産生を刺激する：１００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドを、同様の条件で、健常ドナーから得たヒト骨髄細胞培養に添加したところ、刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ、ＣＭ）を追加してもしなくても、ＣＦＵ−ＧＭコロニー形成が増加した。天然カゼイン由来ペプチドは、エリスロポエチンの存在下で赤血球形成コロニーも刺激した。ヒト骨髄細胞をトロンボポエチン（ＴＰＯ）で処理すると、巨核球（ＭＫ）コロニー形成が刺激される。３００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドをＴＰＯ処理細胞に添加すると、２倍を超えるＭＫコロニー増殖の増加（ペプチドなしの場合は２×１０５細胞につき１６コロニー、天然カゼイン由来ペプチドを添加した場合は２×１０５細胞につき３５コロニー）が起こる。
【０４５０】
エリスロポエチン、ヒトＩＬ−３、ｈＳＣＦおよびＡＢ血清などの追加造血因子の存在下で、天然カゼイン由来ペプチドと共に１４日間培養すると、ヒト骨髄細胞からのＣＦＵ−ＧＥＭＭコロニーは３倍近く増加した（５００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドで１５８コロニー、当該因子のみでは６８コロニー）。しかし、培養臍帯血ＣＦＵ−ＧＥＭＭ形成に対する作用はそれより小さかった（１．５倍）。培養ヒト骨髄および臍帯血コロニー中の相対細胞数は、２５μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドを添加したことに反応して起こる巨核球細胞増殖を反映している（図６に示す表を参照されたい）。したがって、培養ヒト初代骨髄および臍帯血細胞を天然カゼイン由来ペプチドと共に培養すると、分化拘束された巨核球および赤血球コロニーの成長と増殖が刺激される。重要なことに、巨核球産生の刺激に関してＴＰＯと天然カゼイン由来ペプチドとの間に観察される相乗作用は、カゼイン由来ペプチドが示す刺激特性の機序にこの強力な造血成長因子が果たすと思われる役割を示し、さらには天然カゼイン由来ペプチドによる広範なＴＰＯ媒介効果が同様に強化される可能性を示唆している。
【０４５１】
天然カゼイン由来のペプチドおよび天然カゼイン由来の合成ペプチドは培養ヒト骨髄細胞におけるエリスロポエチン（ＥＰＯ）の効果を増強する：培養ヒト骨髄細胞における赤血球系細胞増殖に対するカゼイン由来の天然および合成ペプチドの効果を、巨核球細胞増殖に関して上に概説した条件と同じ条件で評価した。ＥＰＯの存在下で添加した場合、５０〜３００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドまたは１００μｇ／ｍｌのカゼイン由来合成ペプチド（Ｆ、表３、配列番号１８）は、赤血球系細胞前駆体の増殖（ＢＦＵ−Ｅコロニーの出現）を、ＥＰＯのみで処理した骨髄細胞と比較して、１．５倍（合成ペプチド）〜４倍刺激した。このように、天然カゼイン由来のペプチドおよびその合成誘導体は、ＥＰＯの赤血球産生刺激効果を増強するように作用するので、広範囲にわたる臨床的に重要なＥＰＯ媒介効果の強化に使用することができる。
【０４５２】
カゼイン由来の合成ペプチドはマウスＣＦＵ−ＧＥＭＭにおける樹状細胞増殖を刺激する：マウス初代骨髄細胞における樹状細胞増殖に対するカゼイン由来合成ペプチドの効果を、巨核球の刺激に関して概説した条件と同じ条件で評価した。αＳ１カゼインの最初の２、３、５、６、７、９、１１、１２、１６、２３、２４および２６アミノ酸に相当するカゼイン由来の合成ペプチドは、樹状細胞の増殖を、全細胞の２．２％から最高２３％まで刺激した。これに対して、カゼイン由来の合成ペプチドなしで培養した細胞試料の場合、樹状細胞は０．１〜０．２％だった（図７）。
【０４５３】
カゼイン由来の合成ペプチドはマウスＣＦＵ−ＧＥＭＭにおける形質細胞増殖を刺激する：マウス初代骨髄細胞における形質細胞増殖に対するカゼイン由来合成ペプチドの効果を、巨核球の刺激に関して概説した条件と同じ条件で実証した。αＳ１カゼインの最初の２、３、５、７、１１、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４および２６アミノ酸に相当するカゼイン由来の合成ペプチドは、形質細胞の増殖を、全細胞数の１．５％から最高１２．３％まで、有意に刺激した。これに対して、カゼイン由来の合成ペプチドなしで培養した細胞試料の場合は全体の０．３％だった（図７）。
【０４５４】
カゼイン由来の合成ペプチドはＣＦＵ−ＧＥＭＭにおけるマクロファージ増殖を刺激する：マウス初代骨髄細胞におけるマクロファージ増殖に対するカゼイン由来合成ペプチドの効果を、巨核球の刺激に関して概説した条件と同じ条件で実証した。αＳ１カゼインの最初の７、９、１６および２３アミノ酸に相当するカゼイン由来の合成ペプチドと共に細胞を培養したところ、マクロファージの増殖が、対照における全細胞数の約１７％から、カゼイン由来の合成ペプチドと共に培養した細胞における全体のほぼ３０％まで、有意に刺激された（図７）。
【０４５５】
カゼイン由来の合成ペプチドはＣＦＵ−ＧＥＭＭにおける赤血球増殖を刺激する：マウス初代骨髄細胞における赤血球増殖に対するカゼイン由来合成ペプチドの効果を、巨核球の刺激に関して概説した条件と同じ条件で実証した。αＳ１カゼインのＮ末端の最初の４アミノ酸に相当するカゼイン由来の合成ペプチドと共に細胞を培養すると、赤血球の増殖が、対照における全細胞数の約５３％から、カゼイン由来の合成ペプチドと共に培養した細胞における全体の７１％まで、有意に刺激された（図７）。
【０４５６】
カゼイン由来の合成ペプチドはＣＦＵ−ＧＥＭＭにおける多形核（ＰＭＮ）細胞増殖を刺激する：マウス初代骨髄細胞における多形核（ＰＭＮ）細胞の増殖に対するカゼイン由来合成ペプチドの効果を、巨核球の刺激に関して概説した条件と同じ条件で実証した。αＳ１カゼインの最初の３、６、７、９、１６残基またはそれ以上、最高２６アミノ酸まで（２６アミノ酸を含む）に相当するカゼイン由来の合成ペプチドと共に細胞を培養すると、ＰＭＮの増殖が、無培養対照における全細胞数の１．６％から、カゼイン由来の合成ペプチドと共に培養した細胞における全体の２．９〜１４．９％まで、有意に刺激された（図７）。
【０４５７】
天然カゼイン由来ペプチドは、放射線照射および骨髄移植後に、インビボで造血を刺激する：骨髄破壊療法は血小板および白血病の重篤な減少をもたらし、その減少は血球および成長因子の投与にもかかわらず持続する場合がある。以下は、放射線照射および骨髄移植後の天然カゼイン由来ペプチドの作用を実証するものである。
【０４５８】
天然カゼイン由来ペプチドはマウスにおける同系骨髄移植後の白血球および血小板再構築を増進する：致死線量に近い量の放射線照射（６００ｃＧｙ）を行い、骨髄再構築が最小限である時に、ＢＡＬＢ／ｃマウス（ｎ＝１２）に、マウス１匹あたり１ｍｇの天然カゼイン由来ペプチドを、静脈内注射により、骨髄細胞再構築の翌日に与えたところ、ヒト血清アルブミンを与えた対照と比較して、末梢白血球細胞数の著しい増加が、処置後４，６および１５日目に認められた（図８）。末梢血中の血小板数は、処置照射骨髄移植マウスでも対照照射骨髄移植マウスでも処置後８日までは同等に抑制された。しかし１３日目までには、天然カゼイン由来ペプチドで処置したマウスに、明らかな利点が認められ、ヒト血清アルブミン処置対象に対して有意に増加を示し、それは１５日まで顕著であった（図９）。このように天然カゼイン由来のペプチドは、骨髄細胞数が限られている移植後の血小板および白血球再構築を増進する。この作用は、限られた数の骨髄細胞数ではなく最適な骨髄細胞数による再構築ではさらに増大すると予想される。
【０４５９】
カゼイン由来の合成ペプチドはマウスにおける同系骨髄移植後の白血球再構築を増進する：致死線量に近い量の放射線照射（６００ｃＧｙ）を行い、骨髄再構築が最小限である時に、ＢＡＬＢ／ｃマウス（合成ペプチド１種類につきｎ＝５、対象群はｎ＝１０）に、マウス１匹あたり１ｍｇのカゼイン由来合成ペプチド（１３〜２６アミノ酸長、表３参照）を、腹腔内注射により、骨髄移植の翌日に与えたところ、白血球再構築の明らかな増進が観察された。１５アミノ酸（１０日目：１７．２×１０６細胞／ｍｌ；１２日目：６．５４×１０６細胞／ｍｌ）および１７アミノ酸（１０日目：２．７４×１０６細胞／ｄｌ；１２日目：５．２０×１０６細胞／ｍｌ）のペプチド（表３参照）では、ヒト血清アルブミンを与えた対照（１０日目：１．６７×１０６細胞／ｍｌ；１２日目：４．６４×１０６細胞／ｍｌ）と比較して、末梢白血球細胞数の著しい増加が、１０〜１４日間にわたって観察された。このようにカゼイン由来の合成ペプチドは、骨髄細胞数が限られている移植後の白血球再構築を増進する。
【０４６０】
カゼイン由来の合成ペプチドはマウスにおける同系骨髄移植後の血小板再構築を増進する：造血幹細胞培養における巨核球増殖を増進するという、カゼイン由来合成ペプチドについて観察された能力（図６および７参照）を確認するために、インビボでの血小板再構築に対するペプチドの効果を調べた。致死線量の放射線（８００ｃＧｙ）を照射した最小骨髄再構築マウス（各群ｎ＝５）に１匹あたり１００μｇの合成ペプチド４Ｐおよび３ａ（それぞれ６アミノ酸長および１２アミノ酸長−表３参照）を毎日４日間（移植後４〜７日）腹腔内注射したところ、無処置の対照と比較して、血小板再構築の明らかな増進が観察された。移植後１０日および１２日には血小板数の有意な増加がどちらのペプチドでも認められた。ペプチド４Ｐによる処置は、移植後１２日で血小板数を２９％増加させ（対照群での６７６×１０３／ｍｌに対して８７２×１０３／ｍｌ）、ペプチド３ａによる処置は、移植後１０日で血小板数を３５．５％まで（対照群での１６９×１０３／ｍｌに対して２２９×１０３／ｍｌ）、また移植後１２日で１３．５％まで（対照群での４６１×１０３／ｍｌに対して６２２×１０３／ｍｌ）増加させた。このように、インビトロでの巨核球増殖と、インビボでの骨髄移植後の血小板再構築とは、カゼイン由来の同じ合成ペプチドによって増進される。
【０４６１】
天然カゼイン由来のペプチドはＨＩＶ−１ウイルスによるリンパＴ細胞株のインビトロ感染を阻害する
リンパＴ細胞への天然カゼイン由来ペプチドの侵入：天然カゼイン由来ペプチドの免疫刺激作用および抗ウイルス作用の機序を調べるために、感受性のＳｕｐ−Ｔ１およびＣＥＭ培養ヒトＴ細胞を天然カゼイン由来ペプチドで処理した後、ＨＩＶ−１ウイルスによるインビトロ感染に付した。蛍光顕微鏡により、天然カゼイン由来のＦＩＴＣ結合ペプチド（１００μｇ／ｍｌ）は、上述のようにＳｕｐ−Ｔ１細胞と共に培養すると、Ｓｕｐ−Ｔ１細胞内に侵入することが明らかになった（図１０ａ〜ｆ）。１５分後には細胞の細胞質中に少量の標識が観察された（図１０ａ〜ｂ）。３０分の時点では（図１０ｃ〜ｄ）、より多くの標識が細胞質中に観察され、一部は核に取り込まれていた。１時間以上培養した場合は（図１０ｅ〜ｆ）、天然カゼイン由来のＦＩＴＣ標識ペプチドは細胞質中にも観察されたが、ほとんどが細胞核中に濃縮されていた。Ｓｕｐ−Ｔ１細胞をフローサイトメトリーで解析したところ、天然カゼインに由来する標識ペプチドの取り込み量は、培養開始の５分後から増加することが確認された。
【０４６２】
天然カゼイン由来のペプチドはヒトリンパ球増殖を増進する：培養培地中に天然カゼイン由来のペプチドが存在すると、１４日間にわたってＳｕｐ−Ｔ１細胞数の増加が起こった。最も大きい細胞数の増加は培養７日では１ｍｌあたり５０μｇの天然カゼイン由来ペプチド（４２％）、培養１０日では１０００μｇ（３０％）、培養１４日では６００μｇ（３２％）で観察された（図なし）。培養細胞による［３Ｈ］−チミジン取り込み量の測定（これにより増殖指数が得られる）は細胞数の増加を反映し、最も顕著な作用は１０日目に６００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドでおよび１４日目に５０μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドで認められた（図１０）。１４日目に起こった増殖指数の低下はおそらく細胞の過成長および栄養枯渇を反映しているのだろう。
【０４６３】
カゼイン由来の合成ペプチドはヒトリンパ球増殖を増進する：培養培地中にカゼイン由来の合成ペプチド（表３に挙げた全てのペプチド）が存在すると、１０日間にわたってＳｕｐ−Ｔ１細胞数の増加が起こった。増加はどの合成ペプチドについても同様だった。感染細胞中のリンパ球細胞数の最も大きい増加は、２５０μｇ／ｍｌおよび５００μｇ／ｍｌの、最初の９アミノ酸に相当するペプチドで観察された（それぞれ８０％および３３％）。
【０４６４】
天然カゼイン由来のペプチドはヒトリンパ球細胞におけるＨＩＶ−１感染を阻害する：ＨＩＶ−１と共に培養する前に天然カゼイン由来ペプチド（５０〜１０００μｇ／ｍｌ）で２４時間または４８時間前処理した感受性ＣＥＭリンパ球細胞、または天然カゼイン由来のペプチドで３時間前処理したＨＩＶ−１にばく露した感受性ＣＥＭリンパ球細胞は、無処置の対照と比較して、細胞増殖の増進およびウイルス感染レベルの低下を示した。感染１５日後に細胞数およびＨＩＶ−１  Ｐ２４抗原アッセイを行ったところ、６００〜１０００μｇ／ｍｌの天然カゼイン由来ペプチドと共にウイルスを３時間培養することにより、ウイルス感染は１００％阻害され、５０および６００μｇ／ｍｌのペプチドと共に細胞を２４時間培養することにより、それぞれ９８％および９９％阻害されたことが、明らかになった（非感染対照ＵＩＦと細胞数を比較）。培養時間を長くしても有効性は増さないことがわかった（図１２）。天然カゼイン由来ペプチドの濃度を増すと感染３時間後および２４時間後の細胞増殖は増進したが、ウイルス感染はこれらの最も速く成長する培地で最も著しく阻害される。ＨＩＶ−１感染前に天然カゼイン由来ペプチドで前処理したＳｕｐ−Ｔ１細胞では、細胞増殖およびＨＩＶ−１感染阻害のさらに劇的な増進が認められた（ウイルス感染の平均阻害率は３時間のウイルスの前処理、および２４時間および４８時間の細胞の前処理でそれぞれ９６．７％、８８．７％および９５．７％）（図なし）。このように天然カゼイン由来のペプチドは、ヒト培養リンパ球細胞およびその核内に侵入し、細胞成長を増進し、ＨＩＶ−１感染に対するＣＤ４細胞の感受性を有意に低下させる。したがって、天然カゼイン由来のペプチドは、ＨＩＶ感染の防止にも、ＨＩＶ感染患者およびＡＩＤＳ患者の感染後処置にも、役立つと考えられる。
【０４６５】
カゼイン由来の合成ペプチドはヒトリンパ球細胞におけるＨＩＶ−１感染を阻害する：ヒトリンパ球細胞におけるＨＩＶ−１感染を阻害するというカゼイン由来合成ペプチドの能力を、ＣＥＭリンパ球細胞を使って、上に概説した条件と同じ条件で実証した。αＳ１カゼインの最初の３アミノ酸に相当するカゼイン由来合成ペプチドでＣＥＭリンパ球を３時間前処理すると、ＨＩＶ−１と共に培養した後の感染に対して、有意な程度の耐性が付与された。感染ＨＩＶ−１対照の１．０６×１０６に対して、処置細胞におけるリンパ球細胞数は１．２９×１０６（１００μｇ／ｍｌ）および２．０１×１０６（５００μｇ／ｍｌ）であった（図１３）。感染後７日の時点でＨＩＶ−Ｐ２４抗原アッセイによって測定した同じ細胞におけるＨＩＶ−１感染レベルは、無処置対照（０．５２ｎｇ／ｍｌのＰ２４  Ａｇ）と比較して、ペプチド処置細胞では有意に低かった（１００μ／ｍｌおよび５００μｇ／ｍｌでそれぞれ０．１７および０．１４ｎｇ／ｍｌのＰ２４  Ａｇ）。
【０４６６】
また、αＳ１カゼインの最初の５アミノ酸に相当するカゼイン由来合成ペプチドでの前処理（３時間）にかけたＣＥＭ細胞でも、ＨＩＶ−１感染の有意な阻害が観察された。
【０４６７】
１０μｇおよび２５μｇ／ｍｌのペプチド３Ｐと共に培養した培養物における細胞数は、感染ＨＩＶ−１対照の１．０６×１０６と比較して、それぞれ１．１７×１０６および１．２６×１０６であった。
【０４６８】
感染後７日でのＨＩＶ−Ｐ２４抗原アッセイにより、処置培養物では、ＨＩＶ感染レベルの有意な低下が明らかになった（対照の０．５２ｎｇ／ｍｌ  Ｐ２４  Ａｇと比較して、１０μｇ／ｍｌおよび２５μｇ／ｍｌではそれぞれ０．２６ｎｇ／ｍｌおよび０．１８ｎｇ／ｍｌのＰ２４  Ａｇ）。
【０４６９】
また、αＳ１カゼインの最初の６アミノ酸に相当するカゼイン由来の合成ペプチド４Ｐと共にウイルスを３時間前培養することも、ＨＩＶ−１感染に対するＣＥＭリンパ球の感受性に関して、有意義な効果を持っていた。
【０４７０】
細胞数は２５μｇ／ｍｌおよび２５０μｇ／ｍｌで最も大きな影響を受けた（感染対照値の１．０６×１０６と比較して、それぞれ１．２６×１０６および１．５９×１０６）。
【０４７１】
感染後７日で行ったＨＩＶ−Ｐ２４抗原のアッセイにより、無処置感染対照培養物と比較して、ウイルス粒子の用量依存的な減少が観察された（図１３）。このように、天然カゼイン由来ペプチドによってリンパ球細胞に付与されるＨＩＶ−１感染からの保護は、αＳ−１カゼインのＮ末端の最初のわずか５アミノ酸に相当するカゼイン由来合成ペプチドでも保たれている。
【０４７２】
天然カゼイン由来のペプチドは非肥満糖尿病（ＮＯＤ）マウスにおける糖尿の発症を予防する：非肥満糖尿病（ＮＯＤ）マウスは自発的に若年性（Ｉ型、ＩＤＤＭ）糖尿病（膵β細胞の炎症を引き起し最終的には発症し死に至る自己免疫状態）を発症する。雌ＮＯＤマウスは罹病性が極めて高く、５週齢で早くも膵島間質マトリックスのマクロファージ浸潤が起こっている証拠を示す。１００μｇの天然カゼイン由来ペプチドを５週間にわたって毎週１回または２回注射（合計５回または１０回注射）したところ、疾患の発症と経過に関係する糖尿の完全な防止に有効だった。２００日までに無処置対照マウス（ｎ＝５）の１００％が糖尿病になった後に死亡したが、処置マウス（ｎ＝５）は１００％正常血糖であり、３６５日の時点で全てがまだ生きていた（図１４）。このように天然カゼイン由来ペプチドは、遺伝子的に罹病性の高いマウスを、この自己免疫炎症状態の発症から効果的に保護した。
【０４７３】
カゼイン由来の合成ペプチドは非肥満性糖尿病（ＮＯＤ）マウスにおける糖尿の発症を予防する：
ＮＯＤマウスにおける糖尿の発症に対するカゼイン由来の合成ペプチドの予防効果を、１００μｇのカゼイン由来合成ペプチドをマウスに５週間にわたって週に１回だけ注射した点以外は、上に概説した条件と同じ条件で実証した。これらの実験の結果を下記表４に示す。
【表４】
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０分および１ｇ／ｋｇ体重のブドウ糖を腹腔内注射した６０分後に眼窩周囲血管叢から血液を採取した。血漿グルコースレベルをＧｌｕｃｏｓｅ  Ａｎａｌｙｚｅｒ  ２（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、カリフォルニア州フラートン）で決定し、ｍｍｏｌ／Ｌの単位で表した。
健康＝尿中に糖が検出されないこと
糖尿＝＞１０００ｍｇ／ｄＬ
６匹の健康な雌対照マウスで行ったＩＰＧＴＴ：血中グルコース、０分−１１０ｍｍｏｌ／Ｌ；６０分−１０６ｍｍｏｌ／Ｌ
【０４７４】
αＳ１カゼインの最初の９（Ｘ）、１１（２ａ）および１２（３ａ）アミノ酸およびそれ以上の鎖長に相当するカゼイン由来の合成ペプチドは、疾患の発症および経過に関係する糖尿の予防に著しく有効だった。
【０４７５】
カゼイン由来の合成ペプチドによる処置の効果を２５週間後に評価した。この時点で、無処置対照群（ｎ＝５）のマウスは５匹とも糖尿病になっていることが、明白な（＞１０００ｍｇ／ｄｌ）糖尿の存在によって示された（表４）。
【０４７６】
αＳ１カゼインのＮ末端の最初の９アミノ酸に相当する合成ペプチドで処置した５匹のＮＯＤマウスのうち３匹（３／５）には、糖尿が検出されなかった。αＳ１カゼインのＮ末端に由来する１１アミノ酸の合成ペプチドを注射した群では、５匹のＮＯＤマウスのうち４匹（４／５）に糖尿が検出されなかった。
【０４７７】
糖尿が検出されたペプチド処置マウスの群では、無処置対照群での糖尿の発症と比較して、発症が一般に有意に（３〜５週間）遅延したことから、ペプチドの効果が不完全な場合でも、明確な保護効果が認められた。
【０４７８】
さらに短いカゼイン由来合成ペプチドの保護効果もＮＯＤマウスで調べた。上述の実験と同様に行った一連の実験では、αＳ１カゼインのＮ末端の最初の３アミノ酸（１Ｐ）および４アミノ酸（２Ｐ）に相当するペプチドを投与すると、処置マウスにおける糖尿の発症が効果的に予防され（１６週目に測定）、無処置対照ではすべてが糖尿病になっていた（１００％糖尿）（図なし）。
【０４７９】
最初の９アミノ酸であるカゼイン由来合成ペプチドを注射した群の健康なＮＯＤマウスを使って２５週間後にブドウ糖負荷（ＩＰＧＴ）試験を行ったが、ブドウ糖代謝異常を示す証拠は認められなかった（ブドウ糖負荷前と負荷６０分後の血糖値は正常）。
【０４８０】
αＳ１カゼインのＮ末端の最初の１１アミノ酸に相当するカゼイン由来の合成ペプチド（２ａ）で処置した群では、安静時血漿グルコースレベルが５匹のマウスのうち２匹でいくらか上昇し（２１５および１５９ｍｍｏｌ／Ｌ）、負荷６０分後もわずかに上昇したまま（１８３および２０４ｍｍｏｌ／Ｌ）で、軽度の糖尿病傾向を示した。他の２匹は試験期間中は常に正常血糖範囲内にあった（表４）。一般に、正常なＩＰＧＴＴ結果は、生き残った健康なペプチド処置マウスに糖尿が存在しないことを反映していた（表４）。このように、αＳ１カゼインのＮ末端の数アミノ酸のみに相当する合成ペプチドおよび天然カゼイン由来のペプチドは、遺伝的素因を持つＮＯＤマウスの、自己免疫性糖尿病の発症しやすさを、劇的に低下させる。
【０４８１】
カゼイン由来合成ペプチドは総血中コレステロールレベル（ＴＣ）、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）および高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）を有意に低下させる：カゼイン由来の合成ペプチドを腹腔内投与すると、実験的高コレステロール血症マウスの血中脂質（ＨＤＬ、ＬＤＬおよびＴＣ）値に有意な低下が起こった。アテローム発生性Ｔｈｏｍａｓ  Ｈａｒｔｒｏｆｔ飼料で１週間飼育した後、マウスの血中コレステロールレベルは３１８ｍｇ／ｄｌのレベルまで上昇していた。
【０４８２】
マウス１匹につき１ｍｇのカゼイン由来合成ペプチドで処置した１週間後に、αＳ１カゼインの最初の５アミノ酸（３Ｐ）および１１アミノ酸（２ａ）に相当するカゼイン由来合成ペプチドで処置した群では、ＴＣ、ＨＤＬおよびＬＤＬ値が対照群と比較して有意に低かった［食餌誘発性高コレステロール／高脂血症対照群における３９３ｍｇ／ｄｌ（ＴＣ）、５４．５ｍｇ／ｄｌ（ＨＤＬ）および３２６ｍｇ／ｄｌ（ＬＤＬ）と比較して、ＴＣ：それぞれ３０８および２７９ｍｇ／ｄｌ；ＨＤＬ：それぞれ４２．５ｍｇ／ｄｌおよび４１ｍｇ／ｄｌ；ＬＤＬ：それぞれ２４７ｍｇ／ｄｌおよび２２１ｍｇ／ｄｌ］（図１５）。このように、αＳ１カゼインのＮ末端の最初の数アミノ酸に相当する合成ペプチドは、実験的に誘発した高脂血症および高コレステロール血症を、単回腹腔内投与後１週間以内に、有効に低下させた。
【０４８３】
天然カゼイン由来のペプチドを用いた臨床試験：
患者には５０ｍｇの天然カゼイン由来ペプチドを表示の通りそれぞれ３カ所に分割して筋肉内注射した。
【０４８４】
天然カゼイン由来のペプチドは癌患者における造血を刺激する：化学療法を過去に受けたまたは化学治療を受けている６人の癌患者の血液像を、表示のように天然カゼイン由来ペプチドの投与前および投与後に調べた。それぞれ血小板減少症、白血球減少症および赤血球減少症を示す血小板数（ＰＬＴ）、白血球数（ＷＢＣ）、赤血球数（ＲＢＣ）およびヘモグロビン濃度（ＨＧＢ）の変化には特に注意を払った。
【０４８５】
Ｇ．Ｔ．（女性患者、患者１）：この患者は卵巣癌を持ち、子宮摘出の後、化学療法を受けていた。この患者には、手術の２ヶ月後と２ヶ月半後に、天然カゼイン由来ペプチドを２回筋肉内注射した。天然カゼイン由来ペプチドの１回目の投与と２回目の投与の間は、化学治療を施さなかった。１回目の注射の６日後と、２回目の注射の７および１３日後の血液検査は、血小板成分およびＷＢＣ成分のかなりの増加ならびにＲＢＣの増加を示している（図１６）。
【０４８６】
Ｅ．Ｃ．（女性患者、患者２）：この患者は１９８３年に小葉癌のために乳房根治切除を受け、６年後に胃転移を起こした。化学療法を開始する３日前に、天然カゼイン由来ペプチドを１回（３カ所に）筋肉内注射し、化学治療の１０日後に２回目の注射を行った。化学治療の１０日後および１６日後の血球数は、化学治療後に通常見られる抑制された血液像の緩和を示したが、天然カゼイン由来ペプチドの最も顕著な効果は、最初の注射の３日後、化学治療前に認められた（図１６）。
【０４８７】
Ｅ．Ｓ．（女性患者、患者３）：この患者では１９８７年に初めて発見された乳癌が広範な播種転移を起こしていた。２年後に、患者は天然カゼイン由来ペプチドの１回目の筋肉内注射を受け、２３日後に２回目の注射を受けた。この期間中は他の治療を施さなかった。血液検査により、１回目の処置の７日後にＰＬＴの強い増加が認められ、２回目の処置の７日後にはＲＢＣおよびＷＢＣの著しい増加が認められる（図１６）。
【０４８８】
Ｊ．Ｒ．（女性患者、患者４）：患者の診断は骨転移を伴う乳癌である。この患者には、化学療法を開始する８日前に天然カゼイン由来ペプチドを１回筋肉内注射し、１４日後にもう一度注射した。最も顕著な効果は、化学療法による抑制後のＷＢＣレベルの迅速な回復にはっきり認められる（図１６）。
【０４８９】
Ｄ．Ｍ．（女性患者、患者５）：広範な播種転移を伴う肝癌患者。この患者には化学治療を施す１０日前、８日前および６日前に天然カゼイン由来ペプチドを３回筋肉内注射した。２組目の注射は化学療法の処置後１０日、１２日および１４日に開始した。化学療法前の１組目の注射後にも血液像に対する著しい作用は認められるが、最も劇的な改善は、２組目の天然カゼイン由来ペプチド注射後に、細胞数が化学療法後の抑制された値から正常な値まで迅速に回復した点に認められる（図１６）。
【０４９０】
このように癌患者への天然カゼイン由来ペプチドの投与は、血液像の改善、具体的には赤血球産生、白血球産生および血小板産生の増進をもたらし、化学療法による血液成分の抑制を緩和しその持続時間を短縮することができる。
【０４９１】
天然カゼイン由来のペプチドは抵抗性血小板減少症を持つ移植片受容者における血小板産生を刺激する：重篤な出血エピソードを伴う長期輸血抵抗性血小板減少症は（従来の治療法が有効でない場合は特に）骨髄移植の重篤な合併症になりうる。重症な抵抗性血小板減少症を持つ二人の患者を天然カゼイン由来ペプチドで処置した。
【０４９２】
Ｍ−１（女性患者）：自己幹細胞移植を受けて完全寛解状態にある３２歳の急性骨髄性白血病患者。この患者は、肺出血および軟口蓋の大きい閉塞性血腫が関係する重篤な出血エピソードを２回経験していた。移植後１１４日を超えた時点で、血小板数はｒｈＩＬ−３、ｒｈＩＬ−６、静脈内γ−グロブリンおよび組換えエリスロポエチンに対して不応性だった。５０ｍｇの天然カゼイン由来ペプチドを２回筋肉内投与（３カ所に分割された各投与）したところ、患者の状態は直ちに改善した。正常な血小板数の迅速な回復（図１７）に伴って、四肢末端部の労作時出血およびパテキア（ｐａｔｅｃｈｙａｅ）は治まり、歩行を再開することができ、合併症または副作用もなく海外の自宅に戻った。
【０４９３】
Ｍ−２（男性患者）：自己幹細胞移植を受けた後、２回目の完全寛解状態に有り、完全に抵抗性の血小板数および大胃腸出血エピソードを示す３０歳の急性骨髄性白血病患者。この患者はパック細胞の輸注を毎日必要とし、ｒｈＩＬ−３、ｒｈＩＬ−６およびγ−グロブリンによる集中的治療に反応できなかった。輸血の８６日後に各５０ｍｇの天然カゼイン由来ペプチドを３カ所に２回筋肉内投与した後、迅速な血小板再構築（図１８）および出血の段階的停止が観察された。さらなる処置は必要なく、この患者は現在、完全に無症状で血小板数は正常である。
【０４９４】
このように、体重１ｋｇあたり０．７〜１．０ｍｇの天然カゼイン由来ペプチドを３カ所に分割して筋肉内投与を２回行うと、重篤な出血エピソードを伴う長期輸血抵抗性血小板減少症患者における血小板数の迅速な再構築および関連する臨床症状の減少に有効だった。
【０４９５】
天然カゼイン由来ペプチドは家族性高脂血症においてトリグリセリドおよび総コレステロールを低下させる：
Ｍ．Ｓ．（女性患者）：患者は高脂血症の家族歴を持つ３８歳の女性である。天然カゼイン由来ペプチドによる処置を行う前の血液化学プロフィールは、高い総コレステロール値（３２１ｍｇ／ｄｌ）、トリグリセリド値（２１３ｍｇ／ｄｌ、正常範囲４５〜１８５ｍｇ／ｄｌ）および高いＬＤＬ−コレステロール値（２３６．４ｍｇ／ｄｌ、正常範囲７５〜１７４ｍｇ／ｄｌ）を示した。５０ｍｇの天然カゼイン由来ペプチドを（３つの筋肉内デポー剤として）１回投与した１ヶ月後に、高脂血症は安定し、総コレステロール値は２７０ｍｇ／ｄｌに低下し、トリグリセリド値は１６５ｍｇ／ｄｌ、ＬＤＬ−コレステロール値は２０１ｍｇ／ｄｌで、まだ正常範囲よりは高かったが、処置前の値よりはかなり低下していた。さらなる処置は施さなかった。このように、天然カゼイン由来のペプチドによる処理は、他には処置を受けていないヒト高脂血症における著しい低下の迅速な誘導に有効である。
【０４９６】
天然カゼイン由来のペプチドはある潜在出血の症例において正常グロビン血状態（ｎｏｒｍｏｇｌｏｂｉｎｅｍｉａ）を刺激する：
Ｄ．Ｇ．（男性患者）：患者は、潜在出血に関係する貧血および低グロビン血症（ｈｙｐｏｇｌｏｂｉｎｅｍｉａ）（ＲＢＣ、ＨＧＢ、ＨＣＴ、ＭＣＨおよびＭＣＨＣの抑制）を持つ７５歳の男性である。５０ｍｇの天然カゼイン由来ペプチドを（３カ所に）１回筋肉内注射した１ヶ月後に、貧血の著しい軽減が認められた。２ヶ月後には、潜在出血が持続しているにもかかわらず、ＲＢＣは正常値に近づき（３４４万／μｌから４３２万／μｌに改善）、ＨＧＢは増加し（８．９ｇ／ｄｌから１１．３ｇ／ｄｌに改善）、ＨＣＴ、ＭＣＨおよびＭＣＨＣは全てほぼ正常値まで改善した。このように天然カゼイン由来ペプチドは、ヒトにおいて赤血球産生を刺激し、失血に関係する貧血を軽減する能力を持つようだった。
【０４９７】
わかりやすいように個別の態様として説明した本発明のいくつかの特徴を１つの態様に組み合わせて提供できることは理解されるだろう。逆に、簡潔に説明するために１つの態様として説明した本発明の様々な特徴を個別に提供するか、一部を適当に組み合わせて提供することもできる。
【０４９８】
以上、本発明をその特定態様に関して説明したが、多くの代替、変更および変形態様が当業者にとって明白であることは明らかである。したがって、特許請求の範囲の精神およびその広い範囲に包含されるそれらの代替、変更および変形態様は、全て本発明に包含されるものとする。本明細書で言及した刊行物、特許、特許出願およびアクセッション番号によって示した配列は全て、具体的かつ個別的な表示の有無にかかわらず、参照により完全な形で本明細書に組み込まれるものとする。また、本願で行う参考文献の引用および記載は、当該参考文献を本発明に対する先行技術として利用できるとの自認ではないと解釈されるものとする。
【図面の簡単な説明】
【０４９９】
【図１】天然カゼイン由来のペプチドによる培養マウス骨髄細胞中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞活性の刺激を表す図である。
【図２ａ】天然カゼイン由来のペプチドによる培養ヒト末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ）中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞活性の刺激を表す図である。
【図２ｂ】天然カゼイン由来のペプチドによる培養ヒト末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ）中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞活性の刺激を表す図である。
【図３ａ】天然カゼイン由来のペプチドによる培養ヒト末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ）からのナチュラルキラー（ＮＫ）およびＴリンパ球（Ｔ）細胞の増殖の刺激を表す図である。
【図３ｂ】天然カゼイン由来のペプチドによる培養ヒト末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ）からのナチュラルキラー（ＮＫ）およびＴリンパ球（Ｔ）細胞の増殖の刺激を表す図である。
【図３ｃ】天然カゼイン由来のペプチドによる培養ヒト末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ）からのナチュラルキラー（ＮＫ）およびＴリンパ球（Ｔ）細胞の増殖の刺激を表す図である。
【図４】カゼイン由来の合成ペプチドによる培養ヒト末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ）中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞活性の刺激を表す図である。
【図５ａ】天然カゼイン由来のペプチドによる、様々な起源を持つ培養ヒト細胞の増殖の刺激を表す図である。
【図５ｂ】天然カゼイン由来のペプチドによる、様々な起源を持つ培養ヒト細胞の増殖の刺激を表す図である。
【図５ｃ】天然カゼイン由来のペプチドによる、様々な起源を持つ培養ヒト細胞の増殖の刺激を表す図である。
【図６】天然カゼイン由来のペプチドとの培養に反応して起こるヒト骨髄および臍帯血からの血球前駆細胞の増殖を示す表である。
【図７】カゼイン由来の合成ペプチドを添加して行ったインビトロ培養が、マウス骨髄前駆細胞から得られるＣＦＵ−ＧＥＭＭコロニー中の巨核球、赤血球系細胞、形質細胞および樹状細胞の相対的分布（血液像）に及ぼす効果を示す表である。
【図８】骨髄破壊を受けた骨髄移植マウスで、天然カゼイン由来のペプチドによる処置に反応して起こる、末梢白血球再構築の刺激を表す。
【図９】骨髄破壊した骨髄移植マウスにおいて、天然カゼイン由来ペプチドによる処置に反応して起こる血小板再構築の刺激を表す図である。
【図１０ａ】培養ヒトＴリンパ球細胞における天然カゼイン由来ＦＩＴＣ結合ペプチドの侵入および核への取り込みを蛍光顕微鏡で記録したものを表す図である。
【図１０ｂ】培養ヒトＴリンパ球細胞における天然カゼイン由来ＦＩＴＣ結合ペプチドの侵入および核への取り込みを蛍光顕微鏡で記録したものを表す図である。
【図１０ｃ】培養ヒトＴリンパ球細胞における天然カゼイン由来ＦＩＴＣ結合ペプチドの侵入および核への取り込みを蛍光顕微鏡で記録したものを表す図である。
【図１０ｄ】培養ヒトＴリンパ球細胞における天然カゼイン由来ＦＩＴＣ結合ペプチドの侵入および核への取り込みを蛍光顕微鏡で記録したものを表す図である。
【図１０ｅ】培養ヒトＴリンパ球細胞における天然カゼイン由来ＦＩＴＣ結合ペプチドの侵入および核への取り込みを蛍光顕微鏡で記録したものを表す図である。
【図１０ｆ】培養ヒトＴリンパ球細胞における天然カゼイン由来ＦＩＴＣ結合ペプチドの侵入および核への取り込みを蛍光顕微鏡で記録したものを表す図である。
【図１１】天然カゼイン由来ペプチドとの培養に反応して起こるＳｕｐ−Ｔ１リンパ球細胞増殖の刺激を示す表である。
【図１２】天然カゼイン由来ペプチドによるＣＥＭリンパ球のＨＩＶ−１感染の阻害を示す表である。
【図１３】カゼイン由来の合成ペプチドによるＣＥＭリンパ球のＨＩＶ−１感染の阻害を示す表である。
【図１４】雌非肥満性糖尿病（ＮＯＤ）マウスにおけるＩ型（ＩＤＤＭ）糖尿病の天然カゼイン由来ペプチドによる予防を表す図である。
【図１５】雌Ｃ５７Ｂｌ／６マウスにおける食餌誘発性高コレステロール／高脂血症の、カゼイン由来合成ペプチドによる予防を表す図である。
【図１６】天然カゼイン由来ペプチドの注射に反応して起こる癌患者における造血の刺激を示す表である。
【図１７】急性骨髄性白血病を持つ血小板抵抗性患者（Ｍ−１）における血小板産生の天然カゼイン由来ペプチドによる刺激を表す図である。
【図１８】急性骨髄性白血病を持つ血小板抵抗性患者（Ｍ−２）における血小板産生の天然カゼイン由来ペプチドによる刺激を表す図である。
【配列表フリーテキスト】
【０５００】
配列番号１〜２５は合成ペプチドの配列である。
【配列表】
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【図１】
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【図２ａ】
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【図２ｂ】
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【図３ａ】
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【図３ｂ】
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【図３ｃ】
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【図４】
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【図５ａ】
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【図５ｂ】
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【図５ｃ】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０ａ】
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【図１０ｂ】
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【図１０ｃ】
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【図１０ｄ】
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【図１０ｅ】
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【図１０ｆ】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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