(57)【要約】Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3が本発明で定義するとおりである式（Ｉ）の化合物を使用することにより、アルツハイマー病及び他の疾患を治療し、及び／又はβ−セクレターゼ酵素を阻害し、及び／又は哺乳動物でのＡβペプチドの沈着を抑制する方法が開示される。
2005500310.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
その処置を必要とする患者においてアルツハイマー病を治療又は予防する方法であって、治療有効量の次式（Ｉ）の化合物
【化１】
2005500310.tif 000067
［式中、Ｘは、−−Ｏ−−、−−ＮＨ−−、−−ＮＲ４−−、又は−−Ｓ−−であり、
Ｙは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化２】
2005500310.tif 000068
を形成し、
Ｚは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化３】
2005500310.tif 000069
を形成し、
Ｒ１は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）Ｃ３〜７シクロアルキル、
ｄ）非置換であるか、又はヒドロキシで１回又は複数回置換されたアリール、
ｅ）ＣＨ２Ｒ５、あるいは
ｆ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ２は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、又はアリールで置換されたアリール、
ｃ）ＣＨ２Ｒ６、あるいは
ｄ）複素環であり、及び
Ｒ３は、
ａ）ＣＨ（ＯＨ）Ｒ７、又は
ｂ）ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ７であり、及び
Ｒ４は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）Ｃ３〜６シクロアルキル、
ｃ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、
ｄ）ＣＨ２Ｒ１、あるいは
ｅ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ５は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、又は
ｂ）アリールであり、及び
Ｒ６は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、あるいは
ｃ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ７は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）非置換であるか、又はアミノで置換されたアリール、
ｄ）非置換であるか、又はアミノで置換されたＣ１〜３アルキルアリール、あるいは
ｅ）５〜７員複素環である。］又は薬剤として許容可能なその塩を投与することを含む上記方法。
【請求項２】
その治療を必要とする患者においてアルツハイマー病を治療する方法であって、その患者に請求項１で開示した化合物又は薬剤として許容可能なその塩を投与することを含む方法。
【請求項３】
βアミロイドに変換する酵素の活性を調節することによりアルツハイマー病を治療する方法であって、そのような治療を必要とする患者に請求項１で開示した化合物又は薬剤として許容可能なその塩を投与することを含む方法。
【請求項４】
Ｐ−ｇｐ阻害剤又は薬剤として許容可能なその塩を投与することをさらに含む請求項１記載の方法。
【請求項５】
アルツハイマー病の発生を防ぐ又は遅らせるのを助長し；軽度認知障害（ＭＣＩ）の患者を治療し、ＭＣＩからＡＤへと進行するはずの者においてはアルツハイマー病の発生を防ぐ又は遅らせ；ダウン症候群を治療し；オランダ型遺伝性アミロイド性脳出血に罹患したヒトを治療し；脳アミロイド血管障害を治療し、可能性のあるその予後、すなわち単発性及び再発性皮質下出血を防ぎ；血管性変性混合型痴呆、パーキンソン病に随伴する痴呆、進行性核上麻痺に随伴する痴呆、皮質基底核変性症に随伴する痴呆、びまん性レビー小体型アルツハイマー病を含む他の変性痴呆を治療するための、アルツハイマー病からなる群から選択された疾患もしくは状態を有する患者、及びそのような治療を必要とする者を治療する、又は患者においてそのような疾患もしくは状態を予防する方法であって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物
【化４】
2005500310.tif 000070
［式中、Ｘは、−−Ｏ−−、−−ＮＨ−−、−−ＮＲ４−−、又は−−Ｓ−−であり、
Ｙは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化５】
2005500310.tif 000071
を形成し、
Ｚは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化６】
2005500310.tif 000072
を形成し、
Ｒ１は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）Ｃ３〜７シクロアルキル、
ｄ）非置換であるか、又はヒドロキシで１回又は複数回置換されたアリール、
ｅ）ＣＨ２Ｒ５、あるいは
ｆ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ２は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、又はアリールで置換されたアリール、
ｃ）ＣＨ２Ｒ６、あるいは
ｄ）複素環であり、及び
Ｒ３は、
ａ）ＣＨ（ＯＨ）Ｒ７、又は
ｂ）ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ７であり、及び
Ｒ４は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）Ｃ３〜６シクロアルキル、
ｃ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、
ｄ）ＣＨ２Ｒ１、あるいは
ｅ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ５は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、又は
ｂ）アリールであり、及び
Ｒ６は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、あるいは
ｃ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ７は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）非置換であるか、又はアミノで置換されたアリール、
ｄ）非置換であるか、又はアミノで置換されたＣ１〜３アルキルアリール、あるいは
ｅ）５〜７員複素環である。］又は薬剤として許容可能なその塩を投与することを含む上記方法。
【請求項６】
式（Ｉ）の化合物が、
５（ＲＳ）−（（４’）−２”−フラニル）メチルフェニ−９（ＲＳ）−ヒドロキシ−１（ＲＳ）−ヒドロキシ−メチル−３−（２’−メチルプロピル−３−アザビシクロ［３．３．１］ノナン−７−オン、
５（ＲＳ）−メチルフェニル−９（ＲＳ）−ヒドロキシ−１（ＲＳ）−（（１’−ヒドロキシ）−２’−フェニル）−エチル−３−（２”−メチル）プロピル−３−アザビシクロ［３．３．１］ノナン−７−オン、
５（ＲＳ）−メチルフェニ−９（ＲＳ）−ヒドロキシ−１（ＲＳ）−（（１’−ヒドロキシ）−２’−フェニル）−エチル−３−ベンジル−３−アザビシクロ［３．３．１］ノナン−７−オン、
５（ＲＳ）−メチルフェニ−９（ＲＳ）−ヒドロキシ−１（ＲＳ）−（（１’−ヒドロキシ）−２’−（２”’−（テトラ−ヒドロ−１，２−チアジン−１，１−ジオキシド））−エチル−３−ベンジル−３−アザビシクロ［３．３．１］ノナン−７−オン、
５（ＲＳ）−メチルフェニ−９（ＲＳ）−ヒドロキシ−１（ＲＳ）−（（１’−ヒドロキシ）−２’−（２”−アミノ）−フェニル）−エチル−３−ベンジル−３−アザビシクロ［３．３．１］ノナン−７−オン、
【化７】
2005500310.tif 000073
及び
化合物１〜２３又は薬剤として許容可能なその塩
からなる群から選択されている請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
その処置を必要とする患者においてアルツハイマー病を治療又は予防する方法であって、１種又は複数の薬剤として許容可能な担体と、次式（Ｉ）の化合物
【化８】
2005500310.tif 000074
［式中、Ｘは、−−Ｏ−−、−−ＮＨ−−、−−ＮＲ４−−、又は−−Ｓ−−であり、
Ｙは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化９】
2005500310.tif 000075
を形成し、
Ｚは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化１０】
2005500310.tif 000076
を形成し、
Ｒ１は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）Ｃ３〜７シクロアルキル、
ｄ）非置換であるか、又はヒドロキシで１回又は複数回置換されたアリール、
ｅ）ＣＨ２Ｒ５、あるいは
ｆ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ２は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、又はアリールで置換されたアリール、
ｃ）ＣＨ２Ｒ６、あるいは
ｄ）複素環であり、及び
Ｒ３は、
ａ）ＣＨ（ＯＨ）Ｒ７、又は
ｂ）ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ７であり、及び
Ｒ４は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）Ｃ３〜６シクロアルキル、
ｃ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、
ｄ）ＣＨ２Ｒ１、あるいは
ｅ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ５は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、又は
ｂ）アリールであり、及び
Ｒ６は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、あるいは
ｃ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ７は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）非置換であるか、又はアミノで置換されたアリール、
ｄ）非置換であるか、又はアミノで置換されたＣ１〜３アルキルアリール、あるいは
ｅ）５〜７員複素環である。］又は薬剤として許容可能なその塩とを含む治療有効量の組成物を投与することを含む上記方法。
【請求項８】
アルツハイマー病、軽度認知障害（ＭＣＩ）、ダウン症候群、オランダ型遺伝性アミロイド性脳出血、脳アミロイド血管障害；血管性変性混合型痴呆、パーキンソン病に随伴する痴呆、進行性核上麻痺に随伴する痴呆、皮質基底核変性症に随伴する痴呆、又はびまん性レビー小体型アルツハイマー病を含む変性痴呆からなる群から選択された状態を治療するための医薬の製造での次式（Ｉ）の化合物
【化１１】
2005500310.tif 000077
［式中、Ｘは、−−Ｏ−−、−−ＮＨ−−、−−ＮＲ４−−、又は−−Ｓ−−であり、
Ｙは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化１２】
2005500310.tif 000078
を形成し、
Ｚは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化１３】
2005500310.tif 000079
を形成し、
Ｒ１は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）Ｃ３〜７シクロアルキル、
ｄ）非置換であるか、又はヒドロキシで１回又は複数回置換されたアリール、
ｅ）ＣＨ２Ｒ５、あるいは
ｆ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ２は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、又はアリールで置換されたアリール、
ｃ）ＣＨ２Ｒ６、あるいは
ｄ）複素環であり、及び
Ｒ３は、
ａ）ＣＨ（ＯＨ）Ｒ７、又は
ｂ）ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ７であり、及び
Ｒ４は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）Ｃ３〜６シクロアルキル、
ｃ）非置換であるか、ハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、
ｄ）ＣＨ２Ｒ１、あるいは
ｅ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ５は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、又は
ｂ）アリールであり、及び
Ｒ６は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、あるいは
ｃ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ７は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）非置換であるか、又はアミノで置換されたアリール、
ｄ）非置換であるか、又はアミノで置換されたＣ１〜３アルキルアリール、あるいは
ｅ）５〜７員複素環である。］の使用。
【請求項９】
薬剤として許容可能な活性を阻害する方法であって、阻害に有効な量の次式（Ｉ）の化合物
【化１４】
2005500310.tif 000080
［式中、Ｘは、−−Ｏ−−、−−ＮＨ−−、−−ＮＲ４−−、又は−−Ｓ−−であり、
Ｙは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化１５】
2005500310.tif 000081
を形成し、
Ｚは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化１６】
2005500310.tif 000082
を形成し、
Ｒ１は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）Ｃ３〜７シクロアルキル、
ｄ）非置換であるか、又はヒドロキシで１回又は複数回置換されたアリール、
ｅ）ＣＨ２Ｒ５、あるいは
ｆ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ２は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、又はアリールで置換されたアリール、
ｃ）ＣＨ２Ｒ６、あるいは
ｄ）複素環であり、及び
Ｒ３は、
ａ）ＣＨ（ＯＨ）Ｒ７、又は
ｂ）ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ７であり、及び
Ｒ４は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）Ｃ３〜６シクロアルキル、
ｃ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、
ｄ）ＣＨ２Ｒ１、あるいは
ｅ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ５は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、又は
ｂ）アリールであり、及び
Ｒ６は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、あるいは
ｃ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ７は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）非置換であるか、又はアミノで置換されたアリール、
ｄ）非置換であるか、又はアミノで置換されたＣ１〜３アルキルアリール、あるいは
ｅ）５〜７員複素環である。］を接触させることを含む上記方法。
【請求項１０】
アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）アイソタイプが、ＡＰＰアイソタイプ中の切断を受けやすい部位で切断されるのを阻害する方法であって、前記ＡＰＰアイソタイプと、有効な切断阻害量の次式（Ｉ）の化合物
【化１７】
2005500310.tif 000083
［式中、Ｘは、−−Ｏ−−、−−ＮＨ−−、−−ＮＲ４−−、又は−−Ｓ−−であり、
Ｙは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化１８】
2005500310.tif 000084
を形成し、
Ｚは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化１９】
2005500310.tif 000085
を形成し、
Ｒ１は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）Ｃ３〜７シクロアルキル、
ｄ）非置換であるか、又はヒドロキシで１回又は複数回置換されたアリール、
ｅ）ＣＨ２Ｒ５、あるいは
ｆ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ２は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、又はアリールで置換されたアリール、
ｃ）ＣＨ２Ｒ６、あるいは
ｄ）複素環であり、及び
Ｒ３は、
ａ）ＣＨ（ＯＨ）Ｒ７、又は
ｂ）ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ７であり、及び
Ｒ４は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）Ｃ３〜６シクロアルキル、
ｃ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、
ｄ）ＣＨ２Ｒ１、あるいは
ｅ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ５は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、又は
ｂ）アリールであり、及び
Ｒ６は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、あるいは
ｃ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ７は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）非置換であるか、又はアミノで置換されたアリール、
ｄ）非置換であるか、又はアミノで置換されたＣ１〜３アルキルアリール、あるいは
ｅ）５〜７員複素環である。］とを接触させることを含む上記方法。
【請求項１１】
細胞中でのアミロイドβペプチド（Ａβ）の産生を抑制する方法であって、前記細胞に有効な阻害量の次式（Ｉ）の化合物
【化２０】
2005500310.tif 000086
［式中、Ｘは、−−Ｏ−−、−−ＮＨ−−、−−ＮＲ４−−、又は−−Ｓ−−であり、
Ｙは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化２１】
2005500310.tif 000087
を形成し、
Ｚは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化２２】
2005500310.tif 000088
を形成し、
Ｒ１は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）Ｃ３〜７シクロアルキル、
ｄ）非置換であるか、又はヒドロキシで１回又は複数回置換されたアリール、
ｅ）ＣＨ２Ｒ５、あるいは
ｆ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ２は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、又はアリールで置換されたアリール、
ｃ）ＣＨ２Ｒ６、あるいは
ｄ）複素環であり、及び
Ｒ３は、
ａ）ＣＨ（ＯＨ）Ｒ７、又は
ｂ）ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ７であり、及び
Ｒ４は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）Ｃ３〜６シクロアルキル、
ｃ）非置換であるか、ハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、
ｄ）ＣＨ２Ｒ１、あるいは
ｅ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ５は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、又は
ｂ）アリールであり、及び
Ｒ６は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、あるいは
ｃ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ７は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）非置換であるか、又はアミノで置換されたアリール、
ｄ）非置換であるか、又はアミノで置換されたＣ１〜３アルキルアリール、あるいは
ｅ）５〜７員複素環である。］を投与することを含む上記方法。
【請求項１２】
前記細胞が動物細胞である請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
前記動物細胞が哺乳動物細胞である請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
前記哺乳動物細胞がヒトである請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
次式（Ｉ）の化合物
【化２３】
2005500310.tif 000089
［式中、Ｘは、−−Ｏ−−、−−ＮＨ−−、−−ＮＲ４−−、又は−−Ｓ−−であり、
Ｙは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化２４】
2005500310.tif 000090
を形成し、
Ｚは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化２５】
2005500310.tif 000091
を形成し、
Ｒ１は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）Ｃ３〜７シクロアルキル、
ｄ）非置換であるか、あるいはヒドロキシで１回又は複数回置換されたアリール、
ｅ）ＣＨ２Ｒ５、あるいは
ｆ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ２は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、又はアリールで置換されたアリール、
ｃ）ＣＨ２Ｒ６、あるいは
ｄ）複素環であり、及び
Ｒ３は、
ａ）ＣＨ（ＯＨ）Ｒ７、又は
ｂ）ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ７であり、及び
Ｒ４は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）Ｃ３〜６シクロアルキル、
ｃ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、
ｄ）ＣＨ２Ｒ１、あるいは
ｅ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ５は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、又は
ｂ）アリールであり、及び
Ｒ６は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、あるいは
ｃ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ７は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）非置換であるか、又はアミノで置換されたアリール、
ｄ）非置換であるか、又はアミノで置換されたＣ１〜３アルキルアリール、あるいは
ｅ）５〜７員複素環である。］と複合化したβ−セクレターゼを含む組成物。
【請求項１６】
請求項１５の組成物を含むβ−セクレターゼ複合体を生成する方法。
【請求項１７】
動物においてβアミロイド斑の生成を抑制する方法であって、前記動物に有効な抑制量の次式（Ｉ）の化合物
【化２６】
2005500310.tif 000092
［式中、Ｘは、−−Ｏ−−、−−ＮＨ−−、−−ＮＲ４−−、又は−−Ｓ−−であり、
Ｙは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化２７】
2005500310.tif 000093
を形成し、
Ｚは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化２８】
2005500310.tif 000094
を形成し、
Ｒ１は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）Ｃ３〜７シクロアルキル、
ｄ）非置換であるか、又はヒドロキシで１回又は複数回置換されたアリール、
ｅ）ＣＨ２Ｒ５、あるいは
ｆ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ２は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、又はアリールで置換されたアリール、
ｃ）ＣＨ２Ｒ６、あるいは
ｄ）複素環であり、及び
Ｒ３は、
ａ）ＣＨ（ＯＨ）Ｒ７、又は
ｂ）ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ７であり、及び
Ｒ４は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）Ｃ３〜６シクロアルキル、
ｃ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、
ｄ）ＣＨ２Ｒ１、あるいは
ｅ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ５は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、又は
ｂ）アリールであり、及び
Ｒ６は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、あるいは
ｃ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ７は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）非置換であるか、又はアミノで置換されたアリール、
ｄ）非置換であるか、又はアミノで置換されたＣ１〜３アルキルアリール、あるいは
ｅ）５〜７員複素環である。］を投与することを含む上記方法。
【請求項１８】
前記動物がヒトである請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
脳上又は脳中のβアミロイドの沈着を特徴とする疾患を治療又は予防する方法であって、そのような治療又は予防を必要とする患者に有効治療量の次式（Ｉ）の化合物
【化２９】
2005500310.tif 000095
［式中、Ｘは、−−Ｏ−−、−−ＮＨ−−、−−ＮＲ４−−、又は−−Ｓ−−であり、
Ｙは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化３０】
2005500310.tif 000096
を形成し、
Ｚは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化３１】
2005500310.tif 000097
を形成し、
Ｒ１は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）Ｃ３〜７シクロアルキル、
ｄ）非置換であるか、又はヒドロキシで１回又は複数回置換されたアリール、
ｅ）ＣＨ２Ｒ５、あるいは
ｆ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ２は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、又はアリールで置換されたアリール、
ｃ）ＣＨ２Ｒ６、あるいは
ｄ）複素環であり、及び
Ｒ３は、
ａ）ＣＨ（ＯＨ）Ｒ７、又は
ｂ）ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ７であり、及び
Ｒ４は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）Ｃ３〜６シクロアルキル、
ｃ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、
ｄ）ＣＨ２Ｒ１、あるいは
ｅ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ５は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、又は
ｂ）アリールであり、及び
Ｒ６は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、あるいは
ｃ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ７は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）非置換であるか、又はアミノで置換されたアリール、
ｄ）非置換であるか、又はアミノで置換されたＣ１〜３アルキルアリール、あるいは
ｅ）５〜７員複素環である。］を投与することを含む上記方法。
【請求項２０】
抗酸化薬、抗炎症薬、γセクレターゼ阻害剤、神経栄養剤、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、スタチン、Ａβペプチド、及び抗Ａβペプチドからなる群から選択された１種又は複数の治療薬を投与することをさらに含む請求項１〜５のいずれか一項に記載の治療方法。
【請求項２１】
次式（Ｉ）の化合物
【化３２】
2005500310.tif 000098
［式中、Ｘは、−−Ｏ−−、−−ＮＨ−−、−−ＮＲ４−−、又は−−Ｓ−−であり、
Ｙは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化３３】
2005500310.tif 000099
を形成し、
Ｚは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化３４】
2005500310.tif 000100
を形成し、
Ｒ１は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）Ｃ３〜７シクロアルキル、
ｄ）非置換であるか、又はヒドロキシで１回又は複数回置換されたアリール、
ｅ）ＣＨ２Ｒ５、あるいは
ｆ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ２は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、又はアリールで置換されたアリール、
ｃ）ＣＨ２Ｒ６、あるいは
ｄ）複素環であり、及び
Ｒ３は、
ａ）ＣＨ（ＯＨ）Ｒ７、又は
ｂ）ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ７であり、及び
Ｒ４は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）Ｃ３〜６シクロアルキル、
ｃ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、
ｄ）ＣＨ２Ｒ１、あるいは
ｅ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ５は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、又は
ｂ）アリールであり、及び
Ｒ６は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、あるいは
ｃ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ７は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）非置換であるか、又はアミノで置換されたアリール、
ｄ）非置換であるか、又はアミノで置換されたＣ１〜３アルキルアリール、あるいは
ｅ）５〜７員複素環である。］の、アルツハイマー病、軽度認知障害（ＭＣＩ）、ダウン症候群、オランダ型遺伝性アミロイド性脳出血、脳アミロイド血管障害；血管性変性混合型痴呆、パーキンソン病に随伴する痴呆、進行性核上麻痺に随伴する痴呆、皮質基底核変性症に随伴する痴呆、又はびまん性レビー小体型アルツハイマー病を含む変性痴呆からなる群から選択された状態を治療する医薬の製造のための使用。
【請求項２２】
その処置を必要とする患者においてアルツハイマー病を治療又は予防する方法であって、治療有効量の次式（ＩＩ）の化合物
【化３５】
2005500310.tif 000101
［式中、Ｒ２は、Ｃ１〜４アルキレン−アリールであり、及び
Ｒ４は、非置換であるか、又はアリール、Ｃ３〜６シクロアルキル、もしくは５〜７員複素環で置換されたＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ７は、Ｈ、非置換であるか、又はアミノで置換されたベンジルである。］又は薬剤として許容可能なその塩を投与することを含む上記方法。
【請求項２３】
アルツハイマー病の発生を防ぐ又は遅らせるのを助長し；軽度認知障害（ＭＣＩ）の患者を治療し、ＭＣＩからＡＤへと進行するはずの者においてはアルツハイマー病の発生を防ぐ又は遅らせ；ダウン症候群を治療し；オランダ型遺伝性アミロイド性脳出血に罹患したヒトを治療し；脳アミロイド血管障害を治療し、可能性のあるその予後、すなわち単発性及び再発性皮質下出血を防ぎ；血管性変性混合型痴呆、パーキンソン病に随伴する痴呆、進行性核上麻痺に随伴する痴呆、皮質基底核変性症に随伴する痴呆、びまん性レビー小体型アルツハイマー病を含む他の変性痴呆を治療するための、アルツハイマー病からなる群から選択された疾患もしくは状態を有する患者、及びそのような治療を必要とする者を治療する、又は患者においてそのような疾患もしくは状態を予防する方法であって、治療有効量の次式（ＩＩ）の化合物
【化３６】
2005500310.tif 000102
［式中、Ｒ２は、Ｃ１〜４アルキレン−アリールであり、及び
Ｒ４は、非置換であるか、又はアリール、Ｃ３〜６シクロアルキル、もしくは５〜７員複素環で置換されたＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ７は、Ｈ、非置換であるか、又はアミノで置換されたベンジルである。］又は薬剤として許容可能なその塩を投与することを含む上記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００１年６月２５日出願の米国特許仮出願第６０／３００，６７１号明細書に対する優先権を主張するものである。
【０００２】
本発明は、アルツハイマー病及び他の類似疾患の治療、より詳細には、β−セクレターゼ、すなわち、アミロイド前駆体タンパク質を切断して、アルツハイマー病患者の脳中に見られるアミロイド斑の主成分であるＡβペプチドを産生する酵素をその方法で阻害する化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
アルツハイマー病（ＡＤ）は、主に老化と関連した、進行性の脳の変性疾患である。ＡＤの臨床上の症状は、記憶、認知能力、理性、判断力、及び見当識の喪失を特徴とする。疾患が進行するにつれて、運動、感覚、及び言語能力も影響を受け、複合的認知機能の全面的な機能障害がもたらされる。このような認知能力の喪失は徐々に生じるが、通常は重度の機能障害をもたらし、その結果４〜１２年で死に至る。
【０００４】
アルツハイマー病は、脳の主な２つの病理学的所見、すなわち神経原線維変化と、大部分はＡβとして知られているペプチド断片凝集体からなるβアミロイド（もしくは神経突起）斑を特徴とする。ＡＤの個体は、特有の脳でのβアミロイド沈着（βアミロイド斑）及び脳血管でのβアミロイド沈着（βアミロイド血管障害）、並びに神経原線維変化を示す。神経原線維変化は、アルツハイマー病だけでなく、他の痴呆誘発疾患でも起こる。解剖すると、通常記憶及び認知にとって重要なヒトの脳領域にこのような病変が多数見出される。
【０００５】
臨床上ＡＤでない高齢なヒトの大多数の脳内でも、解剖学的分布がより限定された形のこのような病変がそれよりも少数であるが見出される。アミロイド形成的な斑及び血管のアミロイド血管障害は、トリソミー２１（ダウン症候群）、オランダ型遺伝性アミロイド性脳出血（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、及び他の神経形成障害に罹患した個体の脳の特徴でもある。βアミロイドは、ＡＤの定義をなす特徴であり、今や疾患発症の原因となる前駆体又は因子と考えられている。認知活動を担う脳領域でのＡβ沈着は、ＡＤ発症の主要な要因である。βアミロイド斑は、大部分はアミロイドβペプチド（Ａβ、βＡ４とされることもある）からなる。βペプチドは、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）がタンパク質分解されることによって誘導され、３９〜４２個のアミノ酸からなる。ＡＰＰのプロセシングには、セクレターゼと呼ばれる数種のプロテアーゼが関与している。
【０００６】
ＡＰＰのＡβペプチドＮ末端でのβ−セクレターゼによる切断、及びそのＣ末端での１種又は複数のγセクレターゼによる切断がβアミロイド形成経路、すなわちＡβが形成される経路をなす。αセクレターゼによるＡＰＰの切断によって、α−ｓＡＰＰ、すなわちＡＰＰの分泌型が生成するが、これはβアミロイド斑の形成をもたらさない。この交代性の経路が、Ａβペプチドの形成を妨げる。ＡＰＰのタンパク分解性プロセシング断片についての記述は、たとえば、米国特許第５，４４１，８７０号、同第５，７２１，１３０号、及び同第５，９４２，４００号に出ている。
【０００７】
アスパルチルプロテアーゼは、β−セクレターゼ切断部位でのＡＰＰのプロセシングを担う酵素として特定されている。β−セクレターゼ酵素は、ＢＡＣＥ、Ａｓｐ、及びＭｅｍａｐｓｉｎを含むさまざまな名称を用いて開示されている。たとえば、Ｓｉｎｈａ等のＮａｔｕｒｅ第４０２巻：５３７〜５５４（ｐ５０１）、１９９９年、及び公告されたＰＣＴ出願ＷＯ００／１７３６９を参照されたい。
【０００８】
何通りかの証拠は、進行性の大脳βアミロイド・ペプチド（Ａβ）沈着がＡＤの発生において種のような役割を担い、数年又は数十年後に認知に関する症状を発生させることが示唆する。たとえば、ＳｅｌｋｏｅのＮｅｕｒｏｎ第６巻：４８７ページ、１９９１年を参照されたい。正常な個体及びＡＤ患者のどちらにおいても、培養液中で成長させた神経細胞からＡβが遊離すること、及び脳脊髄液（ＣＳＦ）中にＡβが存在することが実証された。たとえば、Ｓｅｕｂｅｒｔ等のＮａｔｕｒｅ第３５９巻：３２５〜３２７ページ、１９９２年を参照されたい。
【０００９】
Ａβペプチドは、β−セクレターゼによるＡＰＰプロセシングの結果として蓄積されるので、ＡＤ治療ではこの酵素の活性を阻害することが望ましいと提言されている。β−セクレターゼ切断部位でのＡＰＰのｉｎ  ｖｉｖｏプロセシングは、Ａβ生成の律速ステップであるので、ＡＤ治療のための治療ターゲットになると考えられている。たとえば、Ｓａｂｂａｇｈ，Ｍ．等のＡｌｚ．Ｄｉｓ．Ｒｅｖ．第３巻、１〜１９ページ１９９７年を参照されたい。
【００１０】
ＢＡＣＥ１ノックアウト・マウスは、Ａβを産生せず、正常な表現型を示した。ＡＰＰを過剰発現するトランスジェニック・マウスと交雑させたると、その子孫では、脳抽出物中のＡβ量が対照動物に比べて減少する（Ｌｕｏ等のＮａｔｕｒｅ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ第４巻：２３１〜２３２ページ、２００１年）。この証拠も、脳においてβ−セクレターゼ活性を阻害し、Ａβを減少させることがＡＤ及び他のβアミロイド障害を治療する治療方法になるという提言を支持する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
現在では、アルツハイマー病の進行を阻止し、予防し、又は後退させる有効な治療はない。したがって、アルツハイマー病の進行を遅らせ、かつ／又は第１にこれを予防できる薬剤が早急に求められている。
【００１２】
β−セクレターゼの有効な阻害剤であり、β−セクレターゼを媒介とするＡＰＰの切断を阻害し、Ａβ産生の有効な阻害剤であり、かつ／又はアミロイドβの沈着又はその斑を減少させるのに有効な、ＡＤなど、アミロイドβの沈着又はその斑を特徴とする疾患を治療及び予防するための化合物が求められている。
【００１３】
米国特許第５，８４６，９７８号は、次式のビシクロ化合物
【化１】
2005500310.tif 000003
［式中、Ｘは、−−Ｏ−−、−−ＮＨ−−、−−ＮＲ４−−、又は−−Ｓ−−であり、
Ｙは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化２】
2005500310.tif 000004
を形成し、
Ｚは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化３】
2005500310.tif 000005
を形成し、
Ｒ１は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）Ｃ３〜７シクロアルキル、
ｄ）非置換であるか、又はヒドロキシで１回又は複数回置換されたアリール、
ｅ）ＣＨ２Ｒ５、あるいは
ｆ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ２は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、又はアリールで置換されたアリール、
ｃ）ＣＨ２Ｒ６、あるいは
ｄ）複素環であり、及び
Ｒ３は、
ａ）ＣＨ（ＯＨ）Ｒ７、又は
ｂ）ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ７であり、及び
Ｒ４は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）Ｃ３〜６シクロアルキル、
ｃ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、
ｄ）ＣＨ２Ｒ１、あるいは
ｅ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ５は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、又は
ｂ）アリールであり、及び
Ｒ６は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、あるいは
ｃ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ７は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）非置換であるか、又はアミノで置換されたアリール、
ｄ）非置換であるか、又はアミノで置換されたＣ１〜３アルキルアリール、あるいは
ｅ）５〜７員複素環である。］又は薬剤として許容可能なその塩を開示している。
【００１４】
米国特許第５，８４６，９７８号は、上の化合物の製造法、及びＡＩＤＳ治療用のＨＩＶプロテアーゼ阻害剤としてのその使用法を開示している。米国特許第５，８４６，９７８号のこの開示全体を参照により本明細書に組み込む。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明は、アルツハイマー病の発生を防ぐ又は遅らせるのを助長し；アルツハイマー病の進行を遅らせるのを助長し；軽度認知障害（ＭＣＩ）の患者を治療し、ＭＣＩからＡＤへと進行するはずの者においてはアルツハイマー病の発生を防ぐ又は遅らせ；ダウン症候群を治療し；オランダ型遺伝性アミロイド性脳出血に罹患したヒトを治療し；脳アミロイド血管障害を治療し、可能性のあるその予後、すなわち単発性及び再発性皮質下出血を防ぎ；血管性変性混合型痴呆、パーキンソン病に随伴する痴呆、パーキンソン病に随伴する前頭側頭型痴呆（ＦＴＤＰ）、進行性核上麻痺に随伴する痴呆、皮質基底核変性症に随伴する痴呆、びまん性レビー小体型アルツハイマー病を含む他の変性痴呆を治療するための、アルツハイマー病からなる群から選択された疾患もしくは状態を有する患者、及びそのような治療を必要とする者を治療する、又は患者においてそのような疾患もしくは状態を予防する方法であって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物
【化４】
2005500310.tif 000006
［式中、Ｘは、−−Ｏ−−、−−ＮＨ−−、−−ＮＲ４−−、又は−−Ｓ−−であり、
Ｙは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化５】
2005500310.tif 000007
を形成し、
Ｚは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化６】
2005500310.tif 000008
を形成し、
Ｒ１は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）Ｃ３〜７シクロアルキル、
ｄ）非置換であるか、又はヒドロキシで１回又は複数回置換されたアリール、
ｅ）ＣＨ２Ｒ５、あるいは
ｆ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ２は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、又はアリールで置換されたアリール、
ｃ）ＣＨ２Ｒ６、あるいは
ｄ）複素環であり、及び
Ｒ３は、
ａ）ＣＨ（ＯＨ）Ｒ７、又は
ｂ）ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ７であり、及び
Ｒ４は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）Ｃ３〜６シクロアルキル、
ｃ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、
ｄ）ＣＨ２Ｒ１、あるいは
ｅ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ５は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、又は
ｂ）アリールであり、及び
Ｒ６は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、あるいは
ｃ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ７は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）非置換であるか、又はアミノで置換されたアリール、
ｄ）非置換であるか、又はアミノで置換されたＣ１〜３アルキルアリール、あるいは
ｅ）５〜７員複素環である。］又は薬剤として許容可能なその塩を投与することを含む方法に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
一態様では、本発明は、アルツハイマー病の発生を防ぐ又は遅らせるのを助長し；アルツハイマー病の進行を遅らせるのを助長し；軽度認知障害（ＭＣＩ）の患者を治療し、ＭＣＩからＡＤへと進行するはずの者においてはアルツハイマー病の発生を防ぐ又は遅らせ；ダウン症候群を治療し；オランダ型遺伝性アミロイド性脳出血に罹患したヒトを治療し；脳アミロイド血管障害を治療し、可能性のあるその予後、すなわち単発性及び再発性皮質下出血を防ぎ；血管性変性混合型痴呆、パーキンソン病に随伴する痴呆、パーキンソン病に随伴する前頭側頭型痴呆（ＦＴＤＰ）、進行性核上麻痺に随伴する痴呆、皮質基底核変性症に随伴する痴呆、びまん性レビー小体型アルツハイマー病を含む他の変性痴呆を治療するための、アルツハイマー病からなる群から選択された疾患もしくは状態を有する患者、及びそのような治療を必要とする者を治療する、又は患者においてそのような疾患もしくは状態を予防する方法であって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物
【化７】
2005500310.tif 000009
［式中、Ｘは、−−Ｏ−−、−−ＮＨ−−、−−ＮＲ４−−、又は−−Ｓ−−であり、
Ｙは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化８】
2005500310.tif 000010
を形成し、
Ｚは、＝Ｏ、又はこれが結合している炭素と共に
【化９】
2005500310.tif 000011
を形成し、
Ｒ１は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）Ｃ３〜７シクロアルキル、
ｄ）非置換であるか、又はヒドロキシで１回又は複数回置換されたアリール、
ｅ）ＣＨ２Ｒ５、あるいは
ｆ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ２は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、又はアリールで置換されたアリール、
ｃ）ＣＨ２Ｒ６、あるいは
ｄ）複素環であり、及び
Ｒ３は、
ａ）ＣＨ（ＯＨ）Ｒ７、又は
ｂ）ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ７であり、及び
Ｒ４は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）Ｃ３〜６シクロアルキル、
ｃ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、
ｄ）ＣＨ２Ｒ１、あるいは
ｅ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ５は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、又は
ｂ）アリールであり、及び
Ｒ６は、
ａ）Ｃ１〜４アルキル、
ｂ）非置換であるか、あるいはハロ、又は非置換であるか、もしくはヒドロキシで１回又は複数回置換されたＣ１〜４アルキルで置換されたアリール、あるいは
ｃ）５〜７員複素環であり、及び
Ｒ７は、
ａ）Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜４アルキル、
ｃ）非置換であるか、又はアミノで置換されたアリール、
ｄ）非置換であるか、又はアミノで置換されたＣ１〜３アルキルアリール、あるいは
ｅ）５〜７員複素環である。］又は薬剤として許容可能なその塩を投与することを含む方法に関する。
【００１７】
好ましい実施形態では、方法は、次式（ＩＩ）の化合物
【化１０】
2005500310.tif 000012
［式中、Ｒ２は、Ｃ１〜４アルキレン−アリールであり、及び
Ｒ４は、非置換であるか、又はアリール、Ｃ３〜６シクロアルキル、もしくは５〜７員複素環で置換されたＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ７は、Ｈ、非置換であるか、又はアミノで置換されたベンジルである。］又は薬剤として許容可能なその塩を投与することを含む。
【００１８】
別の好ましい実施形態では、この方法は、以下に示す化合物ＩＩＩ、すなわち
【化１１】
2005500310.tif 000013
もしくは薬剤として許容可能なその塩と、化合物ＩＶ、すなわち
【化１２】
2005500310.tif 000014
もしくは薬剤として許容可能なその塩を投与することを含む。
【００１９】
本発明の方法において有用な化合物は、不斉中心を有し、ラセミ体、ラセミ混合物、及び個々のジアステレオ異性体もしくは鏡像異性体として生じることがあるが、すべての異性体の形を本発明に含める。
【００２０】
任意の構成成分又は式Ｉの中で可変基（たとえば、アリール、複素環、Ｒ１、Ｒ２、Ｘ、Ｙ、又はＺなど）が複数回出現するとき、各出現時のその定義は、他の各出現時のその定義とは無関係である。また、その組合せが安定な化合物をもたらす場合に限り、置換基及び／又は可変基を組み合わせても差し支えない。
【００２１】
本発明では、別段の指示がない限り、「アルキル」には、規定した数の炭素原子を有する分枝鎖状及び直鎖状の飽和脂肪族炭化水素基（たとえば、Ｍｅはメチル、Ｅｔはエチル、Ｐｒはプロピル、Ｂｕはブチルである）が含まれるものとする。
【００２２】
本発明では、別段の指示がない限り、「アリール」は、たとえばフェニル（Ｐｈ）又はナフチルを意味するものとする。
【００２３】
用語「複素環」又は「複素環の」とは、本明細書では、別段の指示がない限り、その任意の環が飽和でも不飽和でもよく、炭素原子と、Ｎ、Ｏ、及びＳからなる群から選択された１〜３個のヘテロ原子とからなる、安定な５〜７員の単環もしくは二環系、又は安定な７〜１０員二環式複素環系を表し、窒素及び硫黄へテロ原子は、任意選択で酸化していてもよく、窒素へテロ原子は、任意選択で４級化されていてもよく、上で定義した複素環の環のいずれかがベンゼン環に縮合している二環式の基も含まれる。複素環は、任意のヘテロ原子又は炭素原子の所で結合した結果、安定な構造を作り得る。そのような複素環の要素の例には、ピペリジニル、ピペラジニル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロロジニル、２−オキソアゼピニル、アゼピニル、ピロリル、４−ピペリジニル、ピロリジニル、ピラゾリル、ピラゾリジニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、オキサゾリル、オキサゾリジニル、イソキサゾリル、イソキサゾリジニル、モルホリニル、チアゾリル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、キヌクリジニル、イソチアゾリジニル、インドリル、キノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリル、チアジアゾイル、ベンゾピラニル、ベンゾチアゾリル、ベンズオキサゾリル、フリル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロピラニル、チエニル、ベンゾチエニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホキシド、チアモルホリニルスルホン、及びオキサジアゾリルが含まれる。
【００２４】
一態様では、この治療方法は、疾患がアルツハイマー病である場合に使用できる。
【００２５】
別の態様では、この治療方法は、アルツハイマー病の発症を防ぎ又は遅らせるのを助長し得る。
【００２６】
別の態様では、この治療方法は、アルツハイマー病の進行を遅らせるのを助長し得る。
【００２７】
別の態様では、この治療方法は、疾患が軽度認知障害である場合に使用できる。
【００２８】
別の態様では、この治療方法は、疾患がダウン症候群である場合に使用できる。
【００２９】
別の態様では、この治療方法は、疾患がオランダ型遺伝性アミロイド性脳出血である場合に使用できる。
【００３０】
別の態様では、この治療方法は、疾患が脳アミロイド血管障害である場合に使用できる。
【００３１】
別の態様では、この治療方法は、疾患が変性痴呆である場合に使用できる。
【００３２】
別の態様では、この治療方法は、疾患がびまん性レビー小体型アルツハイマー病である場合に使用できる。
【００３３】
別の態様では、この治療方法は、上記したものなどの現存する疾患を治療することができる。
【００３４】
別の態様では、この治療方法は、上記したものなどの疾患が発生又は進行するのを予防することができる。
【００３５】
本発明の方法は、次の治療有効量、すなわち、経口投与では約０．１ｍｇ／日〜約１，０００ｍｇ／日、非経口、舌下、鼻腔内、くも膜下投与では約０．５〜約１００ｍｇ／日、デポー投与及び植込錠では約０．５ｍｇ／日〜約５０ｍｇ／日、局所投与では約０．５ｍｇ／日〜約２００ｍｇ／日、直腸投与では約０．５ｍｇ〜約５００ｍｇを使用することができる。
【００３６】
好ましい態様では、経口投与の治療有効量は約１ｍｇ／日〜約１００ｍｇ／日であり、非経口投与では１日約５〜約５０ｍｇである。
【００３７】
より好ましい態様では、経口投与の治療有効量は約５ｍｇ／日〜約５０ｍｇ／日である。
【００３８】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物又は薬剤として許容可能なその塩の、アルツハイマー病の発生を防ぐ又は遅らせるのを助長する、軽度認知障害（ＭＣＩ）の患者を治療し、ＭＣＩからＡＤへと進行するはずの者においてはアルツハイマー病の発生を防ぐ又は遅らせる、ダウン症候群を治療する、オランダ型遺伝性アミロイド性脳出血に罹患したヒトを治療する、脳アミロイド血管障害を治療し、可能性のあるその予後、すなわち単発性及び再発性皮質下出血を防ぐ、血管性変性混合型痴呆、パーキンソン病に随伴する痴呆、パーキンソン病に随伴する前頭側頭型痴呆（ＦＴＤＰ）、進行性核上麻痺に随伴する痴呆、皮質基底核変性症に随伴する痴呆、びまん性レビー小体型アルツハイマー病を含む他の変性痴呆を治療するための、アルツハイマー病からなる群から選択された疾患もしくは状態を有する患者、及びそのような治療を必要とする者の治療、又は患者におけるそのような疾患もしくは状態の予防に使用する医薬品の製造での使用を含む。
【００３９】
一態様では、式（Ｉ）の化合物のこの使用法は、疾患がアルツハイマー病である場合に用いることができる。
【００４０】
別の態様では、式（Ｉ）の化合物のこの使用法は、アルツハイマー病の発症を防ぐ又は遅らせるのを助長し得る。
【００４１】
別の態様では、式（Ｉ）の化合物のこの使用法は、アルツハイマー病の進行を遅らせるのを助長し得る。
【００４２】
別の態様では、式（Ｉ）の化合物のこの使用法は、疾患が軽度認知障害である場合に用いることができる。
【００４３】
別の態様では、式（Ｉ）の化合物のこの使用法は、疾患がダウン症候群である場合に用いることができる。
【００４４】
別の態様では、式（Ｉ）の化合物のこの使用法は、疾患がオランダ型遺伝性アミロイド性脳出血である場合に用いることができる。
【００４５】
別の態様では、式（Ｉ）の化合物のこの使用法は、疾患が脳アミロイド血管障害である場合に用いることができる。
【００４６】
別の態様では、式（Ｉ）の化合物のこの使用法は、疾患が変性痴呆である場合に用いることができる。
【００４７】
別の態様では、式（Ｉ）の化合物のこの使用法は、疾患がびまん性レビー小体型アルツハイマー病である場合に用いることができる。
【００４８】
好ましい態様では、式（Ｉ）の化合物のこの使用法は、塩化水素酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ＣＨ３−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ（式中、ｎは０〜４）、ＨＯＯＣ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ（式中、ｎは上で定義したとおり）、ＨＯＯＣ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯＯＨ、及びフェニル−ＣＯＯＨからなる群から選択された酸の薬剤として許容可能な塩である。
【００４９】
本発明は、β−セクレターゼ活性を阻害し、反応混合物中で、ＡＰＰ−６９５アミノ酸アイソタイプの番号のＭｅｔ５９６とＡｓｐ５９７の間の部位、又はそのアイソタイプもしくは変異体の対応する部位でのアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の切断を阻害し、細胞中でアミロイドβペプチド（Ａβ）の産生を抑制し、動物においてβアミロイド斑の生成を抑制し、また脳中のβアミロイドの沈着を特徴とする疾患を治療又は予防する諸方法も含む。これらの方法はそれぞれ、治療有効量の式（Ｉ）の化合物又は薬剤として許容可能なその塩を投与することを含む。
【００５０】
本発明は、β−セクレターゼ活性を阻害する方法であって、前記β−セクレターゼを有効阻害量の式（Ｉ）の化合物又は薬剤として許容可能なその塩に曝すことを含む方法も含む。
【００５１】
一態様では、この方法は、前記β−セクレターゼを前記化合物にｉｎ  ｖｉｔｒｏで曝すことを含む。
【００５２】
別の態様では、この方法は、前記β−セクレターゼを前記化合物に細胞中で曝すことを含む。
【００５３】
別の態様では、この方法は、動物の細胞中で前記β−セクレターゼを前記化合物に曝すことを含む。
【００５４】
別の態様では、この方法は、ヒトにおいて前記β−セクレターゼを前記化合物に曝すことを含む。
【００５５】
本発明は、反応混合物中で、ＡＰＰ−６９５アミノ酸アイソタイプの番号のＭｅｔ５９６とＡｓｐ５９７の間の部位、又はそのアイソタイプもしくは変異体の対応する部位でのアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の切断を阻害する方法であって、前記反応混合物を有効阻害量の式（Ｉ）の化合物又は薬剤として許容可能なその塩に曝すことを含む方法も含む。
【００５６】
一態様では、この方法は、次の切断部位、すなわち、ＡＰＰ−７５１アイソタイプの番号のＭｅｔ６５２とＡｓｐ６５３の間、ＡＰＰ−７７０アイソタイプの番号のＭｅｔ６７１とＡｓｐ６７２の間、ＡＰＰ−６９５スウェーデン変異のＬｅｕ５９６とＡｓｐ５９７の間、ＡＰＰ−７５１スウェーデン変異のＬｅｕ６５２とＡｓｐ６５３の間、又はＡＰＰ−７７０スウェーデン変異のＬｅｕ６７１とＡｓｐ６７２の間を使用する。
【００５７】
別の態様では、この方法は、前記反応混合物をｉｎ  ｖｉｔｒｏで曝す。
【００５８】
別の態様では、この方法は、前記反応混合物を細胞中で曝す。
【００５９】
別の態様では、この方法は、動物細胞中で前記反応混合物を曝す。
【００６０】
別の態様では、この方法は、ヒト細胞中で前記反応混合物を曝す。
【００６１】
本発明は、細胞中でアミロイドβペプチド（Ａβ）の産生を阻害する方法であって、前記細胞に有効阻害量の式（Ｉ）の化合物又は薬剤として許容可能なその塩を投与することを含む方法も含む。
【００６２】
一実施形態では、この方法は、動物に投与することを含む。
【００６３】
一実施形態では、この方法は、ヒトに投与することを含む。
【００６４】
本発明は、動物においてβアミロイド斑の生成を阻害する方法であって、前記動物に有効阻害量の式（Ｉ）の化合物又は薬剤として許容可能なその塩を投与することを含む方法も含む。
【００６５】
この態様の一実施形態では、この方法は、ヒトに投与することを含む。
【００６６】
本発明は、脳中のβアミロイドの沈着を特徴とする疾患を治療又は予防する方法であって、患者に有効治療量の式（Ｉ）の化合物又は薬剤として許容可能なその塩を投与することを含む方法も含む。
【００６７】
一態様では、この方法は、約０．１〜約１０００ｍｇ／日の範囲の治療量で化合物を使用する。
【００６８】
別の態様では、この方法は、約１５〜約１５００ｍｇ／日の範囲の治療量で化合物を使用する。
【００６９】
別の態様では、この方法は、約１〜約１００ｍｇ／日の範囲の治療量で化合物を使用する。
【００７０】
別の態様では、この方法は、約５〜約５０ｍｇ／日の範囲の治療量で化合物を使用する。
【００７１】
別の態様では、この方法は、前記疾患がアルツハイマー病である場合に使用することができる。
【００７２】
別の態様では、この方法は、前記疾患が軽度認知障害、ダウン症候群、又はオランダ型遺伝性アミロイド性脳出血である場合に使用することができる。
【００７３】
本発明は、式（Ｉ）の化合物又は薬剤として許容可能なその塩との複合体にしたβ−セクレターゼを含む組成物も含む。
【００７４】
本発明は、β−セクレターゼ複合体を生成する方法であって、前記複合体の生成に適する条件下、反応混合物中でβ−セクレターゼを式（Ｉ）の化合物又は薬剤として許容可能なその塩に曝すことを含む方法も含む。
【００７５】
一実施形態では、この方法は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで曝すことを含む。
【００７６】
一実施形態では、この方法は、反応混合物を細胞として使用する。
【００７７】
本発明は、少なくとも１個の構成要素が、容器に封入された式（Ｉ）の化合物を含んでいる、組み立ての可能な構成要素を含むコンポーネントキットも含む。
【００７８】
一実施形態では、このコンポーネントキットは、凍結乾燥された化合物と、希釈剤を含めた少なくとも１種の別の構成要素とを含む。
【００７９】
本発明は、複数の容器を含み、各容器が式（Ｉ）の化合物又は薬剤として許容可能なその塩の１回分又は複数回分の単位用量を含んでいる容器キットも含む。
【００８０】
一実施形態では、この容器キットは、経口送達向けにできた各容器を含み、かつ錠剤、ゲル剤、又はカプセル剤を含む。
【００８１】
一実施形態では、この容器キットは、非経口送達向けにできた各容器を含み、かつデポー製品、シリンジ、アンプル、又はバイアルを含む。
【００８２】
一実施形態では、この容器キットは、局所送達向けにできた各容器を含み、かつパッチ、メディパッド、軟膏、又はクリームを含む。
【００８３】
本発明は、式（Ｉ）の化合物もしくは薬剤として許容可能なその塩と、抗酸化剤、抗炎症薬、γセクレターゼ阻害剤、神経栄養剤（ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ  ａｇｅｎｔ）、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、スタチン、Ａβペプチド、及び抗Ａβ抗体からなる群から選択された１種又は複数の治療薬とを含む薬品キットも含む。
【００８４】
本発明は、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の、β−セクレターゼを媒介とする切断を阻害する化合物、組成物、キット、及び方法を提供する。より詳細には、本発明の化合物、組成物、及び方法は、Ａβペプチドの産生を抑制し、Ａβペプチドという病理形態に随伴するヒト又は動物の任意の疾患又は状態を治療又は予防するのに有効である。
【００８５】
本発明の化合物、組成物、及び方法は、アルツハイマー病（ＡＤ）に罹患しているヒトの治療、ＡＤの発生の防止又は遅延を助長するため、軽度認知障害（ＭＣＩ）に罹患している患者の治療、及びＭＣＩからＡＤへの進行がさもなければ予想されるはずの患者においてＡＤの発生の防止又は遅延をするため、ダウン症候群を治療するため、オランダ型遺伝性アミロイド性脳出血を治療するため、脳アミロイド血管障害を治療し、単発性及び再発性皮質下出血など、起こり得るその予後を予防するため、血管性変性混合型痴呆を含む他の変性痴呆を治療するため、パーキンソン病に随伴する痴呆、パーキンソニズムを伴う前頭側頭型痴呆（ＦＴＤＰ）、進行性核上麻痺に随伴する痴呆、皮質基底核変性症に随伴する痴呆、及びびまん性レビー小体型ＡＤを治療するために有用である。
【００８６】
本発明の化合物は、β−セクレターゼ阻害活性を有する。本発明の化合物の阻害活性は、たとえば、本明細書に記載の、又は当技術分野で知られている１種又は複数のアッセイを使用して容易に証明される。
【００８７】
式（Ｉ）の化合物は酸と反応した場合塩を形成することがある。該当する式（Ｉ）の化合物の中でも、薬剤として許容可能な塩が一般に好ましい。通常、より水に溶けやすい、安定した、かつ／又はより結晶性の高い化合物をしばしば生じるからである。薬剤として許容可能な塩とは、親化合物の活性を保持し、これを投与する対象及びこれが投与される状況に有害な又は望ましくない影響を与えないいずれかの塩である。薬剤として許容可能な塩には、無機酸の酸付加塩も有機酸の酸付加塩も含まれる。好ましい薬剤として許容可能な塩には、以下の酸、すなわち酢酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、重炭酸塩、重硫酸、重酒石酸、酪酸、エデト酸カルシウム、ｄ−カンファースルホン酸、炭酸、クロロベンゼン酸、クエン酸、エデト酸、エジシル（ｅｄｉｓｙｌｉｃ）酸、エストル（ｅｓｔｏｌｉｃ）酸、エシル（ｅｓｙｌ）酸、エシレン（ｅｓｙｌｉｃ）酸、ギ酸、フマル酸、グルセプト（ｇｌｕｃｅｐｔｉｃ）酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコリルアルサニル酸、ヘキサミン（ｈｅｘａｍｉｃ）酸、ヘキシルレソルシノイン（ｈｅｘｙｌｒｅｓｏｒｃｉｎｏｉｃ）酸、ヒドラバム（ｈｙｄｒａｂａｍｉｃ）酸、臭化水素酸、塩化水素酸、ヨウ化水素酸、ヒドロキシナフトエ酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、メチル硝酸、メチル硫酸、粘液酸、ムコン酸、ナプシル（ｎａｐｓｙｌｉｃ）酸、硝酸、シュウ酸、ｐ−ニトロメタンスルホン酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、一水素リン酸、二水素リン酸、フタル酸、ポリガラクトウロン酸、プロピオン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、コハク酸、スルファミン酸、スルファニル酸、スルホン酸、硫酸、タンニン酸、酒石酸、テオクル酸、及びトルエンスルホン酸の塩が含まれる。他の許容される塩については、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．第３３巻２０１〜２１７ページ（１９８６年）及びＪ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．第６６巻（１）１ページ（１９７７）を参照されたい。
【００８８】
本発明は、β−セクレターゼ酵素活性を阻害し、Ａβペプチド産生を抑制するキット、及び方法を提供する。β−セクレターゼ酵素活性を阻害することによって、ＡＰＰからのＡβの産生を阻止又は低減し、脳のβアミロイド沈着形成物を減少又は消失させるものである。
【００８９】
本発明の方法
本発明の化合物及び薬剤として許容可能なその塩は、βアミロイド斑など、βアミロイド・ペプチドという病理形態を特徴とする状態に罹患したヒト又は動物を治療し、またそのような状態の発生を防ぐ又は遅らせるのを助長するために有用である。たとえば、この化合物は、アルツハイマー病を治療する、アルツハイマー病の発生を防ぐ又は遅らせるのを助長する、ＭＣＩ（軽度認知障害）の患者を治療し、ＭＣＩからＡＤへと進行するはずの者においてはアルツハイマー病の発生を防ぐ又は遅らせる、ダウン症候群を治療する、オランダ型遺伝性アミロイド性脳出血に罹患したヒトを治療する、脳アミロイド血管障害を治療し、可能性のあるその予後、すなわち単発性及び再発性皮質下出血を防ぐ、血管性変性混合型痴呆、パーキンソン病に随伴する痴呆、パーキンソン病に随伴する前頭側頭型痴呆（ＦＴＤＰ）、進行性核上麻痺に随伴する痴呆、皮質基底核変性症に随伴する痴呆、びまん性レビー小体型アルツハイマー病を含む他の変性痴呆を治療するために有用である。本発明の化合物及び組成物は、アルツハイマー病進行の治療、予防、又は遅延に特に有用である。このような疾患を治療又は予防する場合、本発明の化合物は、個別に使用しても、患者にとって最適となるように併用してもよい。
【００９０】
これらの疾患に関して、用語「治療する」とは、本発明の化合物が、現に疾患に罹患しているヒトに使用できることを意味する。本発明の化合物は、疾患に罹っている患者を必ずしも治癒させないが、疾患の進行を遅らせ、又は緩慢化し、あるいは疾患がさらに進行するのを予防し、それによってより有益な人生を個人に与える。
【００９１】
用語「予防する」とは、本発明の化合物が、その時点で疾患に罹っていないが、通常なら疾患を発症し、又は疾患の恐れが高まっているはずの者に投与された場合に、その対象者が疾患を発症しないことを意味する。さらに、「予防する」には、年齢、家族歴、遺伝子もしくは染色体の異常のために、かつ／又は脳の組織もしくは体液中に、ＡＰＰもしくはＡＰＰ切断産物の既知の遺伝子変異など、疾患の１種又は複数の生物マーカーが存在するために、最終的に疾患を発症するか、あるいは疾患の危険にあるはずの個人において、この疾患の発症を遅らせることも含まれる。この疾患の発生を遅らせることにより、本発明の化合物は、通常ならその個人が疾患に罹っているはずの期間中にその個人が疾患に罹らないようにし、あるいは疾患が発達する速度、又は個人が最終的に疾患に罹る時期に至るまで本発明の化合物を投与しなかった場合の結果のいくらかを低減する。予防するには、疾患の素因があると考えられる個人に本発明の化合物を投与することも含まれる。
【００９２】
好ましい態様では、本発明の化合物は、疾患症状の進行を緩慢化するのに有用である。
【００９３】
別の好ましい態様では、本発明の化合物は、疾患症状の更なる進行を予防するのに有用である。
【００９４】
上記の疾患の治療又は予防では、本発明の化合物を治療有効量投与する。治療有効量は、当分野の技術者に知られているように、使用するその化合物及び投与経路に応じてさまざまである。
【００９５】
上記の状態のいずれかが診断されている患者の治療では、医師は、本発明の化合物を直ちに投与し、必要なだけ無期限に投与を続けてよい。アルツハイマー病であると診断されていないが、アルツハイマー病のリスクが有意にあると考えられる患者の治療では、医師は、好ましくは、患者が加齢に伴う記憶又は認知能力の問題など、初期のアルツハイマー予備症状を覚えたときに治療を開始すべきである。さらに、アルツハイマー病の前兆となるＡＰＯＥ４や他の生物学的兆候など、遺伝的標識形質の検出によって、アルツハイマー病発症のリスクがあると確定される患者も存在する。そのような状況では、患者に疾患の症状がなくても、本発明の化合物の投与を症状が現れる前に開始してよく、疾患の発生を予防又は延引するために投与を無期限に続けてよい。
【００９６】
剤形及び量
本発明の化合物は、経口、非経口、（ＩＶ、ＩＭ、デポーＩＭ、ＳＱ、及びデポーＳＱ）、舌下、鼻腔内（吸入）、くも膜下、局所、又は直腸投与することができる。当分野の技術者に知られている剤形は、本発明の化合物の送達に適している。
【００９７】
本発明の化合物を治療有効量含む組成物を提供する。化合物は、経口投与用の錠剤、カプセル剤、もしくはエリキシル剤、又は非経口投与用の無菌溶液もしくは懸濁液など、適切な医薬製剤に処方することが好ましい。通常、当技術分野でよく知られている技術及び手順を使用して、上記で述べた化合物を薬剤組成物へと処方する。
【００９８】
容認されている製薬の慣行によって、本発明の化合物もしくは化合物の混合物又は生理的に許容される塩もしくはエステル約１〜５００ｍｇを、生理的に許容される溶剤、担体、添加剤、賦形剤、保存剤、安定剤、着香剤などと共に、求められる剤形単位の形で配合する。このような組成物又は製剤中の活性物質量は、指示範囲内の適切な用量が得られる量である。組成物は、剤形単位中に処方され、各用量が活性成分を約２〜約１００ｍｇ、より好ましくは約１０〜約３０ｍｇ含有していることが好ましい。用語「単位剤形」とは、ヒトの対象者及び他の哺乳動物に適する投与単位として物理的に分離した単位であって、各単位が適切な薬剤用賦形剤と共同して所望の治療効果を生じるように計算された予め決定された量の活性物質を含有するものを指す。
【００９９】
組成物を調製するには、本発明の１種又は複数の化合物と薬剤として許容可能で適切な担体を混合する。化合物を混合又は添加する際、得られる混合物は、溶液、懸濁液、乳濁液などとしてよい。リポソーム懸濁液も薬剤として許容可能な担体として適切であるといえる。これらは、当分野の技術者に知られている方法に従って調製してよい。得られる混合物の形状は、目的の投与方式、及び選択された担体又は溶剤中での化合物の溶解性を含むいくつかの要因に応じて決める。有効濃度は、治療する疾患、障害、又は状態の少なくとも１種の症状を軽減又は改善するのに十分なものであり、経験的に決定してよい。
【０１００】
本明細書で提示する化合物の投与に適する薬剤用担体又は溶剤には、ある投与方式に適することが当分野の技術者に知られている何らかの担体が含まれる。活性材料はその上、所望の作用を弱めない他の活性材料、又は所望の作用を補うもしくは別の作用を有する材料と混合することもできる。化合物は、組成物中に１種だけの薬剤活性成分として処方してもよく、他の活性材料と合わせてもよい。
【０１０１】
化合物の溶解性が不十分である場合、可溶化する方法を利用してよい。そのような方法は知られており、これには、それだけに限らないが、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）など、共溶媒を使用すること、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）など、界面活性剤を使用すること、及び水性重炭酸塩ナトリウムに溶解させることが含まれる。有効な薬剤組成物を処方するために、塩やプロドラッグなど、化合物の誘導体を使用してもよい。
【０１０２】
化合物濃度は、化合物の投与目的である障害の少なくとも１種の症状を軽減又は改善する投与量の送達に有効なものである。通常、組成物は１回投与用に処方される。
【０１０３】
本発明の化合物は、徐放性の処方やコーティングなど、体からの急速な排泄を防ぐ担体と共に調製してよい。そのような担体には、それだけに限らないが、マイクロカプセル化送達系など、徐放製剤が含まれる。活性化合物は、治療する患者への望ましくない副作用がない状態で治療上有用な作用を発揮するのに十分な量の薬剤として許容可能な担体中に含まれる。治療上有効な濃度は、知られているｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏモデル系で、治療する障害について化合物を試験することによって、経験的に決定してよい。
【０１０４】
本発明の化合物及び組成物は、複数回又は１回分の容器に封入することができる。封入された化合物及び組成物は、たとえば、組み立てて使用できる構成要素を含むキットの形で提供できる。たとえば、凍結乾燥した形の化合物阻害剤と適切な希釈剤を、使用前に合わせるために別々の成分として提供してよい。同時投与用のキットは、化合物阻害剤及び第２の治療薬を含んでいてよい。阻害剤及び第２の治療薬を別々の構成要素として提供してもよい。キットは、複数の容器を含み、各容器が本発明の化合物の１又は複数単位分を収容していてよい。容器は、それだけに限らないが、経口投与では錠剤、ゲルカプセル剤、徐放カプセル剤など、非経口投与ではデポー製品、充填済シリンジ、アンプル、バイアルなど、局所投与ではパッチ、メディパッド、クリームなどを含む所望の投与方式に適合していることが好ましい。
【０１０５】
薬物組成物中の活性化合物濃度は、活性化合物の吸収率、不活性化率、排泄率、投与スケジュール、及び投与量、並びに当分野の技術者に知られている他の要因に応じて決まる。
【０１０６】
活性成分は、一度に投与しても、数回分に小分けして、時間間隔をおいて投与してもよい。厳密な用量及び治療期間は、治療する疾患に応じて変わるものであり、知られている試験プロトコルを使用して経験的に、あるいはｉｎ  ｖｉｖｏ又はｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験データからの補外によって決定してよいことは理解されよう。濃度及び用量の値は、緩和すべき状態の重症度によっても変わり得ることを留意されたい。さらに、時間の経過と共に、各個の必要度、及びこの組成物の投与を管理又は監督する者による専門的判断に従い、特定の投与レジメンを、あるいずれかの対象向けに調整すべきであること、並びに本明細書で述べる濃度範囲は例に過ぎず、特許請求の範囲に記載の組成物の範囲又は実施を限定するものでないことも理解されたい。
【０１０７】
経口投与が望ましい場合、化合物は、それを胃の酸性環境から守る組成物の形で提供すべきである。たとえば、胃ではその完全性を維持し、腸で活性化合物を放出する腸溶コーティング中に組成物を処方することができる。組成物を制酸剤又はそのような他の成分と組み合わせて処方してもよい。
【０１０８】
経口組成物は、一般に不活性希釈剤又は可食担体を含んでおり、錠剤に圧縮し、又はゼラチン・カプセルに封入してよい。経口で治療的に投与する目的では、活性化合物に添加剤を混ぜ、錠剤、カプセル剤、又はトローチ剤の形で使用することができる。組成物の成分として、薬剤として適合する結合剤及び補助材料を含んでいてもよい。
【０１０９】
錠剤、丸剤、カプセル剤、トローチ剤などは、以下の材料、すなわち、それだけに限らないが、トラガカント・ゴム、アカシア、トウモロコシデンプン、ゼラチンなど、結合剤；微結晶性セルロース、デンプン、ラクトースなど、賦形剤；それだけに限らないが、アルギン酸やトウモロコシデンプンなど、崩壊剤；それだけに限らないが、ステアリン酸マグネシウムなど、滑沢剤；それだけに限らないが、コロイド状二酸化ケイ素など、流動促進剤（ｇｉｌｄａｎｔ）；スクロースやサッカリンなど、甘味剤；及びペパーミント、サリチル酸メチル、果実香料など、着香剤；並びに性質が類似の化合物のいずれかを含有してよい。
【０１１０】
単位剤形がカプセル剤である場合、上記のタイプの材料に加えて、脂肪油などの液体担体も含有してよい。さらに、剤形単位は、剤形の物理的形状を改変する他のさまざまな材料、たとえば、糖衣及び他の腸溶性薬品類も含んでよい。化合物は、エリキシル、懸濁液、シロップ、カシェ剤、チューインガムなどの成分として投与することもできる。シロップは、活性化合物に加えて、甘味剤及びある種の保存剤としてのスクロース、色素及び着色剤、着香剤を含んでよい。
【０１１１】
活性材料は、所望の作用を弱めない他の活性材料又は所望の作用を補う材料と混合することもできる。
【０１１２】
非経口、皮内、皮下、又は局所投与に使用する溶液又は懸濁液は、以下の成分、すなわち、注射用水、食塩水、不揮発性油など、無菌希釈剤、ゴマ油、ヤシ油、ラッカセイ油、綿実油など、天然の植物油、又はオレイン酸エチルなど、合成脂肪溶剤；ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、又は他の合成溶媒；ベンジルアルコールやメチルパラベンなど、抗菌剤；アスコルビン酸や亜硫酸水素ナトリウムなど、抗酸化剤；エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）など、キレート剤；酢酸塩、クエン酸塩、リン酸塩など、緩衝剤；及び塩化ナトリウムやデキストロースなど、浸透圧調整剤のいずれかを含んでよい。非経口製剤は、ガラス又はプラスチック製又は他の適切な材料製のアンプル、使い捨てシリンジ、又は複数回分のバイアルに封入することができる。必要に応じて、緩衝剤、保存剤、抗酸化剤などを混ぜてよい。
【０１１３】
静脈内投与する場合、適切な担体には、生理食塩水、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、並びにグルコース、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、これらの混合物など、増粘剤及び可溶化剤を含む溶液が含まれる。組織を標的とするリポソームを含むリポソーム懸濁液も薬剤として許容可能な担体として適切であるといえる。これらは、たとえば、米国特許第４，５２２，８１１号に記載されているような知られている方法に従って調製してよい。
【０１１４】
活性化合物は、徐放性の処方やコーティングなど、化合物が体から急速に排泄されるのを防ぐ担体と共に調製してよい。そのような担体には、それだけに限らないが、植込剤やマイクロカプセル化送達系などの徐放製剤、及びコラーゲン、エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、ポリオルトエステル、ポリ乳酸など、生分解性、生体適合性ポリマーが含まれる。このような処方の調製方法は、当分野の技術者に知られている。
【０１１５】
本発明の化合物は、経口、非経口（ＩＶ、ＩＭ、デポーＩＭ、ＳＱ、及びデポーＳＱ）、舌下、鼻腔内（吸入）、くも膜下、局所、又は直腸投与することができる。当分野の技術者に知られている剤形は、本発明の化合物の送達に適している。
【０１１６】
本発明の化合物は、経腸的又は非経口的に投与してよい。本発明の化合物は、経口投与する場合、当分野の技術者によく知られているような通常の経口投与用剤形で投与することができる。このような剤形には、通常の固体単位剤形である錠剤及びカプセル剤、並びに溶液、懸濁液、エリキシルなど、液体剤形が含まれる。固体剤形を使用する場合、本発明の化合物の投与が１日１回又は２回だけで済むように、徐放タイプのものにすることが好ましい。
【０１１７】
患者への経口用剤形の投与は、１日に１回、２回、３回、又は４回である。本発明の化合物は、１日に３回又はより少ない回数、より好ましくは１日に１回又は２回投与することが好ましい。したがって、本発明の化合物は、経口用剤形で投与することが好ましい。どんな経口用剤形を使用するにしても、それが本発明の化合物を胃の酸性環境から守るように設計されていることが好ましい。腸溶コーティングされた錠剤は、当分野の技術者によく知られている。さらに、それぞれをコーティングして胃の酸から保護した小球を充填したカプセル剤も、当分野の技術者によく知られている。
【０１１８】
経口投与する場合、β−セクレターゼ活性を阻害し、Ａβ産生を抑制し、Ａβ沈着を抑制し、又はＡＤを治療もしくは予防するのに治療的に有効な投与量は、約０．１ｍｇ／日〜約１，０００ｍｇ／日である。経口での用量が約１ｍｇ／日〜約１００ｍｇ／日であることが好ましい。経口での用量が約５ｍｇ／日〜約５０ｍｇ／日であることがより好ましい。患者は同じ用量から始めてよいが、その用量は、患者の状態が変化するにつれて時間の経過と共に変動することが理解されよう。
【０１１９】
また本発明の化合物は、ナノ結晶分散処方の形で送達すると有利である。そのような処方の調製は、たとえば、米国特許第５，１４５，６８４号に記載されている。米国特許第６，０４５，８２９号には、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤のナノ結晶分散系及びその使用方法が記載されている。ナノ結晶性処方は、通常、薬物化合物の生物学的利用能をより高くする。
【０１２０】
本発明の化合物は、非経口的に、たとえば、ＩＶ、ＩＭ、デポーＩＭ、ＳＣ、又はデポーＳＣによって投与できる。非経口投与する場合、約０．５〜約１００ｍｇ／日、好ましくは約５〜約５０ｍｇの治療有効量を毎日送達すべきである。デポー製剤が１カ月に１度又は２週間に１度注射に使用される場合、投与量は、約０．５ｍｇ／日〜約５０ｍｇ／日とする、又は毎月の投与量を約１５ｍｇ〜約１，５００ｍｇとすべきである。アルツハイマー病の患者は、ある程度健忘症であるので、非経口剤形がデポー製剤であることが好ましい。
【０１２１】
本発明の化合物は、舌下投与することができる。本発明の化合物は、舌下で与える場合、１日に１〜４回、ＩＭ投与について上記で述べた量を与えるべきである。
【０１２２】
本発明の化合物は、鼻腔内投与することができる。この経路で与える場合の適切な剤形は、当分野の技術者に知られているように、鼻内噴霧器又は乾燥粉末である。本発明の化合物の鼻腔内投与向け投与量は、上記でＴＭ投与について述べた量である。
【０１２３】
本発明の化合物は、くも膜下投与することができる。この経路で与える場合の適切な剤形は、当分野の技術者に知られているように、非経口剤形とすることができる。本発明の化合物のくも膜下投与向け投与量は、上記でＩＭ投与について述べた量である。
【０１２４】
本発明の化合物は、局所投与することができる。この経路で与える場合の適切な剤形は、クリーム、軟膏、又はパッチである。本発明の化合物の投与すべき量を考慮すると、パッチが好ましい。局所投与する場合の投与量は、約０．５ｍｇ／日〜約２００ｍｇ／日である。パッチによって送達できる量は限られるので、２個以上のパッチを使用してよい。当分野の技術者に知られているように、パッチの数及び大きさは重要でなく、重要なのは本発明の化合物が治療有効量だけ送達されることである。本発明の化合物は、当分野の技術者に知られているように、坐剤によって直腸投与することができる。坐剤によって投与する場合の治療有効量は、約０．５ｍｇ〜約５００ｍｇである。
【０１２５】
本発明の化合物は、当分野の技術者に知られているように、植込錠によって投与することができる。本発明の化合物を植込錠によって投与する場合の治療有効量は、上記でデポー投与について述べた量である。
【０１２６】
本発明は本発明の新規な化合物及び本発明の化合物の新規な使用方法である。当分野の技術者には、本発明の特定の化合物及び所望の剤形を考えて、当該の剤形を調製し、投与する方法がわかるはずである。
【０１２７】
ＭＣＩ（軽度認知障害）を伴う疾患を予防し、又はそれに罹患した患者を治療し、ＭＣＩからＡＤへと進行するはずの者においてはアルツハイマー病の発生を防ぐ又は遅らせる、ダウン症候群を治療する又は予防する、オランダ型遺伝性アミロイド性脳出血に罹患したヒトを治療する、脳アミロイド血管障害を治療し、可能性のあるその予後、すなわち単発性及び再発性皮質下出血を防ぐ、血管と変性に由来する混合型痴呆、パーキンソン病に随伴する痴呆、パーキンソン病に随伴する前頭側頭型痴呆（ＦＴＤＰ）、進行性核上麻痺に随伴する痴呆、皮質基底核変性症に随伴する痴呆、びまん性レビー小体型アルツハイマー病を含む他の変性痴呆を治療するためにも、本発明の各化合物は、上記と同じ投与スケジュールで、同じ製薬上の剤形を使用して、かつ同じ投与経路によって同じ方式で使用される。
【０１２８】
本発明の化合物は、それ同士で、又は上で挙げた状態を治療又は予防するのに使用される他の薬品と共に使用することができる。そうした薬品には、γセクレターゼ阻害剤、塩酸ドネペジル（アリセプト錠）、塩酸タクリン（ＣＯＧＮＥＸカプセル）、他のアセチルコリンエステラーゼ阻害剤などの抗アミロイドワクチン及び薬剤、さらに将来の直接もしくは間接的な向神経薬が含まれる。
【０１２９】
さらに、本発明の化合物は、Ｐ−糖タンパク質（Ｐ−ｇｐ）阻害剤と併用することもできる。Ｐ−ｇｐ阻害剤の使用は、当分野の技術者に知られている。たとえば、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第５３巻、４５９５〜４６０２ページ（１９９３年）；Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、第２巻、７〜１２ページ（１９９６年）；Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第５６巻、４１７１〜４１７９ページ（１９９６年）；国際公開ＷＯ９９／６４００１；及びＷＯ０１／１０３８７を参照されたい。重要なのは、Ｐ−ｇｐ阻害剤の血中濃度が、Ｐ−ｇｐによる本発明の化合物の脳血中濃度の低下を阻止する際にその効果が発揮される程度であることである。そのため、Ｐ−ｇｐ阻害剤及び本発明の化合物は、同じもしくは異なる投与経路によって同時に投与することも、又は別の時間に投与することもできる。投与の時間ではなく、Ｐ−ｇｐ阻害剤の血中濃度が有効であることが重要である。
【０１３０】
適切なＰ−ｇｐ阻害剤には、シクロスポリンＡ、ベラパミル、タモキシフェン、キニジン、ビタミンＥ−ＴＧＰＳ、リトナビル、酢酸メゲステロール、プロゲステロン、ラパマイシン、１０，１１−メタノジベンゾスベラン（１０，１１−ｍｅｔｈａｎｏｄｉｂｅｎｚｏｓｕｂｅｒａｎｅ）、フェノチアジン、ＧＦ１２０９１８などのアクリジン誘導体、ＦＫ５０６、ＶＸ−７１０、ＬＹ３３５９７９、ＰＳＣ−８３３、ＧＦ１０２，９１８及び他のステロイドが含まれる。追加の薬品が同じ機能を有し、有用であるとみなすことも理解される。
【０１３１】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、経口、非経口、（ＩＶ、ＩＭ、ＩＭ−デポー、ＳＱ、ＳＱ−デポー）、局所、舌下、直腸、鼻腔内、及びくも膜下投与、及び植込錠によって投与することができる。
【０１３２】
治療有効量のＰ−ｇｐ阻害剤は、約０．１〜約３００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは１日約０．１〜約１５０ｍｇ／ｋｇである。患者はある用量から開始されるにしても、その用量は、患者の状態が変化するにつれて時間と共にさまざまに変えなければならないであろうと理解される。
【０１３３】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、経口投与する場合には、当分野の技術者に知られているように、経口投与向けの通常の剤形にして投与することができる。そのような剤形には、錠剤及びカプセル剤の通常の固体単位剤形、並びに溶液、懸濁液、エリキシルなどの液体剤形が含まれる。固体剤形を使用する場合には、Ｐ−ｇｐ阻害剤を１日１回又は２回しか投与しなくて済むように徐放型の剤形とすることが好ましい。経口用剤形は、患者に１日１回から４回投与する。Ｐ−ｇｐ阻害剤は、１日に３回又はそれよりも少なく投与することが好ましく、１日に１回又は２回がより好ましい。したがって、Ｐ−ｇｐ阻害剤は、固体剤形にして投与することが好ましく、さらに、固体剤形は、１日１回又は２回の投与を可能にする徐放形態とすることが好ましい。胃の酸性環境からＰ−ｇｐ阻害剤を保護するように設計された剤形ならどんなものを使用することも好ましい。腸溶コーティングを施された錠剤は、当分野の技術者によく知られている。さらに、酸性の胃から保護されるように各々がコーティングされた小球を充填したカプセル剤も、当分野の技術者によく知られている。
【０１３４】
さらに、Ｐ−ｇｐ阻害剤は、非経口的に投与することもできる。非経口的に投与する場合には、この阻害剤は、ＩＶ、ＩＭ、デポーＩＭ、ＳＱ、又はデポーＳＱ投与することができる。Ｐ−ｇｐ阻害剤は、舌下投与することもできる。舌下投与する場合には、Ｐ−ｇｐ阻害剤は、ＩＭ投与と同じ量を１日に１回から４回投与すべきである。
【０１３５】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、鼻腔内投与することもできる。この投与経路によって投与する場合には、適切な剤形は、当分野の技術者に知られているように、点鼻用のスプレー又は乾燥粉末である。Ｐ−ｇｐ阻害剤を鼻腔内投与するための投与量は、ＩＭ投与と同じである。
【０１３６】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、くも膜下投与することもできる。この投与経路によって投与する場合には、適切な剤形は、当分野の技術者に知られているように、非経口剤形とすることができる。
【０１３７】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、局所投与することもできる。この投与経路によって投与する場合には、適切な剤形は、クリーム、軟膏、又はパッチである。投与する必要のあるＰ−ｇｐ阻害剤量を理由としてパッチが好ましい。しかし、パッチによって送達できる量は限られている。したがって、２個以上のパッチが必要になることもある。当分野の技術者に知られているように、パッチの数及び大きさは重要でなく、治療有効量のＰ−ｇｐ阻害剤が送達されることが重要である。Ｐ−ｇｐ阻害剤は、当分野の技術者に知られているように、座薬によって直腸投与することもできる。
【０１３８】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、当分野の技術者に知られているように、植込錠によって投与することもできる。
【０１３９】
Ｐ−ｇｐ阻害剤を投与する投与経路についても剤形についても新規性はない。特定のＰ−ｇｐ阻害剤及び所望の剤形の場合について、当分野の技術者ならば、Ｐ−ｇｐ阻害剤に適する剤形をどのように製剤するかがわかるはずである。
【０１４０】
本発明の方法で使用する各化合物は、相互に、又は上に列挙した状態を治療又は予防するのに使用される他の治療薬もしくは治療手法と併用することができる。そのような薬品又は手法には、タクリン（テトラヒドロアミノアクリジン、ＣＯＧＮＥＸ（登録商標）として市販されている）、塩酸ドネペジル（アリセプト（登録商標）として市販されている）、及びリバスチグミン（Ｅｘｅｌｏｎ（登録商標）として市販されている）などのアセチルコリンエステラーゼ阻害剤；γセクレターゼ阻害剤；シクロオキシゲナーゼＩＩ阻害剤などの抗炎症薬；ビタミンＥ及びギンコリドなどの抗酸化剤；たとえばＡβペプチドによる免疫化や抗Ａβペプチド抗体の投与など、免疫学的手法；スタチン；及びＣｅｒｅｂｒｏｌｙｓｉｎ（登録商標）、ＡＩＴ−０８２（Ｅｍｉｌｉｅｕ、２０００年、Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．第５７巻：４５４ページ）、将来の他の向神経薬など、直接もしくは間接的向神経薬が含まれる。
【０１４１】
当分野の技術者には、厳密な投与量及び投与頻度が、本発明の方法で用いたその投与化合物、治療するその状態、治療する状態の重症度、その患者の年齢、体重、体調全般、及び個体が受け得る他の投薬に応じて変わることがわかるはずであり、同様に、投与を行う当分野に通じた医師にもよく知られているはずである。
【０１４２】
ＡＰＰ切断の阻害
本発明の化合物は、ＡＰＰ６９５アイソフォームもしくはその変異体の番号のＭｅｔ５９５とＡｓｐ５９６の間、又はＡＰＰ７５１やＡＰＰ７７０など、異なるアイソフォームもしくはその変異体の対応する部位（「β−セクレターゼ部位」と呼ぶこともある）でのＡＰＰの切断を阻害する。特定の理論に拘泥しないが、β−セクレターゼ活性の抑制によってβアミロイド・ペプチド（Ａβ）の産生が抑制されると考えられている。β−セクレターゼ切断部位での切断をもたらすのに通常は十分である条件下、β−セクレターゼ酵素存在下でのＡＰＰ基質の切断を阻害化合物の存在下で分析する、さまざまな阻害アッセイの１つで阻害活性が実証されている。未処理又は不活性対照と比較した、ＡＰＰのβ−セクレターゼ切断部位での切断の減少は、阻害活性と関連している。本発明の化合物阻害剤の効力を証明するのに使用できるアッセイ系は、知られている。代表的なアッセイ系は、たとえば、米国特許第５，９４２，４００号、同第５，７４４，３４６号、並びに以下の実施例に記載されている。
【０１４３】
天然、変異、かつ／又は合成ＡＰＰ基質、天然、変異、かつ／又は合成酵素、及び試験化合物を使用して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏでのβ−セクレターゼ酵素活性及びＡβ産生を分析できる。この分析では、天然、変異、かつ／又は合成ＡＰＰ及び酵素を発現する一次細胞又は二次細胞、天然のＡＰＰ及び酵素を発現する動物モデルを要件としてもよく、この基質及び酵素を発現するトランスジェニック動物モデルを利用してもよい。酵素活性は、たとえば、イムノアッセイ、蛍光定量アッセイ、色素生産性アッセイ、ＨＰＬＣ、又は他の検出手段によって１種又は複数の切断産物を分析して検出できる。反応系中のβ−セクレターゼを媒介とする切断が阻害化合物なしで観察され、測定される対照と比較したときに、生成するβ−セクレターゼ切断産物量を低減させる能力のあったものを、阻害化合物として判定する。
【０１４４】
β−セクレターゼ
さまざまな形のβ−セクレターゼ酵素が知られており、酵素活性アッセイ及び酵素活性阻害に利用可能かつ有用である。これらには、天然、組換え型、及び合成の形の酵素が含まれる。ヒトβ−セクレターゼは、β部位ＡＰＰ切断酵素（ＢＡＣＥ）、Ａｓｐ２、及びマメプシン２として知られており、たとえば、米国特許第５，７４４，３４６号、公告されたＰＣＴ特許出願ＷＯ９８／２２５９７、ＷＯ００／０３８１９、ＷＯ０１／２３５３３、及びＷＯ００／１７３６９、並びに文献での公告（Ｈｕｓｓａｉｎ等のＭｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．第１４巻４１９〜４２７ページ、１９９９年；Ｖａｓｓａｒ等のＳｃｉｅｎｃｅ第２８６巻７３５〜７４１ページ、１９９９年；Ｙａｎ等のＮａｔｕｒｅ第４０２巻５３３〜５３７ページ、１９９９年；Ｓｉｎｈａ等のＮａｔｕｒｅ第４０巻５３７〜５４０ページ、１９９９年；及びＬｉｎ等のＰＮＡＳ  ＵＳＡ第９７巻１４５６〜１４６０ページ、２０００年）で特性が述べられている。合成の形の酵素も記載されている（ＷＯ９８／２２５９７及びＷＯ００／１７３６９）。β−セクレターゼは、ヒト脳組織から抽出、精製することができ、細胞中、たとえば、組換え型酵素を発現する哺乳類細胞中で製造することもできる。
【０１４５】
好ましい方法は、約５０マイクロモルより低い濃度、好ましくは約１０マイクロモル未満、より好ましくは約１マイクロモル未満、最も好ましくは約１０ナノモル未満の濃度で、β−セクレターゼ酵素活性を５０％阻害するのに有効な化合物を用いる。
【０１４６】
ＡＰＰ基質
β−セクレターゼを媒介とするＡＰＰ切断の阻害を証明するアッセイでは、Ｋａｎｇ等のＮａｔｕｒｅ第３２５巻７３３〜６ページ、１９８７年に記載されている６９５アミノ酸「正常」アイソタイプ、Ｋｉｔａｇｕｃｈｉ等のＮａｔｕｒｅ第３３１巻５３０〜５３２ページ、１９８１年に記載されている７７０アミノ酸アイソタイプ、及びスウェーデン変異体（ＫＭ６７０−１ＮＬ）（ＡＰＰ−ＳＷ）、ロンドン変異体（Ｖ７１７６Ｆ）、その他などの変異体を含む、知られている形のＡＰＰのいずれかを利用できる。知られている種々の突然変異体の検討には、たとえば、米国特許第５，７６６，８４６号、またＨａｒｄｙのＮａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔ．第１巻２３３〜２３４ページ、１９９２年を参照されたい。それ以外の有用な基質には、たとえばＷＯ００／１７３６９に開示されている二塩基性アミノ酸修飾体のＡＰＰ−ＫＫ、ＡＰＰ断片及びβ−セクレターゼ切断部位を含む合成ペプチド、野生型（ＷＴ）又は、たとえば米国特許第５，９４２，４００号及びＷＯ００／０３８１９に記載の突然変異型、たとえばＳＷが含まれる。
【０１４７】
ＡＰＰ基質は、ＡＰＰのβ−セクレターゼ切断部位（ＫＭ−ＤＡ又はＮＬ−ＤＡ）、たとえば、完全なＡＰＰペプチドもしくは変異体、ＡＰＰ断片、組換え型もしくは合成ＡＰＰ、又は融合ペプチドを含む。融合ペプチドは、酵素アッセイに有用な部分を有する、たとえば、単離及び／又は検出特性を有するペプチドと融合したβ−セクレターゼ切断部位を含むことが好ましい。有用な部位は、抗原結合用抗体エピトープ、標識部分、もしくは他の検出部分、結合基質などであるといえる。
【０１４８】
抗体
産物のＡＰＰ切断特性は、たとえば、Ｐｉｒｔｔｉｌａ等のＮｅｕｒｏ．Ｌｅｔｔ．第２４９巻２１〜４ページ、１９９９年、及び米国特許第５，６１２，４８６号に記載されているさまざまな抗体を使用するイムノアッセイによって測定できる。Ａβの検出に有用な抗体には、たとえば、Ａβペプチドのアミノ酸１〜１６上のエピトープを特異的に認識する単クローン性抗体６Ｅ１０（Ｓｅｎｅｔｅｋ、ミズーリ州セントルイス）；それぞれヒトＡβ１〜４０及び１〜４２に特異的な抗体１６２及び１６４（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  Ｓｔａｔｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  Ｂａｓｉｃ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、ニューヨーク市スタッテンアイランド）；及びβアミロイド・ペプチドの接合区域、すなわち残基１６と残基１７の間の部位を認識する、米国特許第５，５９３，８４６号に記載の抗体が含まれる。米国特許第５，６０４，１０２号及び同第５，７２１，１３０号に記載されているように、ＡＰＰ残基５９１〜５９６の合成ペプチドに対して出現した抗体、及びスウェーデン変異体の５９０〜５９６に対して出現したＳＷ１９２抗体も、ＡＰＰ及びその切断産物のイムノアッセイに有用である。
【０１４９】
アッセイ系
β−セクレターゼ切断部位でのＡＰＰ切断を定量するアッセイは、当技術分野でよく知られている。アッセイの例は、たとえば、米国特許第５，７４４，３４６号及び同第５，９４２，４００号に記載されており、以下の実施例でも述べる。
【０１５０】
細胞未使用アッセイ
本発明の化合物の阻害活性を証明するために使用できるアッセイの例は、たとえば、ＷＯ００／１７３６９、ＷＯ００／０３８１９、及び米国特許第５，９４２，４００号及び同第５，７４４，３４６号に記載されている。そのようなアッセイは、細胞未使用でインキュベートする形で、あるいはβ−セクレターゼ発現細胞及びβ−セクレターゼ切断部位含有ＡＰＰ基質を使用して、細胞をインキュベートする形で実施できる。
【０１５１】
酵素の切断活性に適するインキュベート条件下、β−セクレターゼ酵素、その断片、又はβ−セクレターゼ活性を有し、ＡＰＰのβ−セクレターゼ切断部位の切断に有効な合成もしくは組換え型ポリペプチド変異体の存在下、ＡＰＰβ−セクレターゼ切断部位含有ＡＰＰ基質、たとえば、完全ＡＰＰもしくは変異体、ＡＰＰ断片、又はアミノ酸配列ＫＭ−ＤＡ又はＮＬ−ＤＡを含む組換え型もしくは合成ＡＰＰ基質をインキュベートする。適切な基質は、任意選択で、誘導体を含むが、これらは基質ペプチドとペプチドもしくはそのβ−セクレターゼ切断産物を精製もしくは検出しやすくするのに有用な修飾物とを含む融合タンパク質又は融合ペプチドとされる。有用な修飾には、抗体結合のための知られている抗原エピトープの挿入、標識又は検出可能部分の結合、結合性基質の結合などが含まれる。
【０１５２】
細胞未使用ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイのための適切なインキュベート条件には、たとえば、ｐＨ４〜７付近かつ約３７℃の水溶液中、基質を約２００ナノモル〜１０マイクロモル、酵素を１０〜２００ピコモル、及び阻害化合物を約０．１ナノモル〜１０マイクロモルとし、時間を約１０分間〜３時間とすることが含まれる。このようなインキュベート条件は単に例に過ぎず、特定のアッセイ成分及び／又は所望の測定系の要件に応じて変更できる。特定のアッセイ成分向けにインキュベート条件を最適化するなら、使用する特定のβ−セクレターゼ酵素及びその最適ｐＨ、アッセイで使用するかもしれない追加の酵素及び／又は標識などについて考えるべきである。そのような最適化は、決まりきったものであり、大袈裟な実験は必要ない。
【０１５３】
有用なアッセイの１つでは、マルトース結合タンパク質（ＭＢＰ）とＡＰＰ−ＳＷのＣ末端１２５アミノ酸が融合した融合ペプチドが利用される。ＭＢＰタンパク質は、抗ＭＢＰ捕捉抗体によってアッセイ基質上で捕捉される。β−セクレターゼの存在下、捕捉された融合タンパク質をインキュベートすると、基質のβ−セクレターゼ切断部位が切断される。切断活性は、たとえば、切断産物のイムノアッセイによって分析できる。このようなイムノアッセイの１つでは、たとえば、抗体ＳＷ１９２を使用して、切断された融合タンパク質のカルボキシ末端を露出した独特なエピトープが検出される。このアッセイは、たとえば、米国特許第５，９４２，４００号に記載されている。
【０１５４】
細胞アッセイ
β−セクレターゼ活性及び／又はＡβを遊離させるＡＰＰプロセシングの分析には、非常に多くの細胞系アッセイが使用できる。細胞内、かつ本発明の化合物阻害剤の存在下又は不在下、ＡＰＰ基質にβ−セクレターゼ酵素を接触されることによって、この化合物のβ−セクレターゼ阻害活性を実証することができる。有用な阻害化合物の存在下でのアッセイによって、酵素活性が非阻害対照の少なくとも約３０％、最も好ましくは少なくとも約５０％阻害されることが好ましい。
【０１５５】
一実施形態では、β−セクレターゼを天然に発現する細胞を使用する。あるいは、細胞に手を加えて、上記で論じた組換え型β−セクレターゼ又は合成変異体酵素を発現させる。ＡＰＰ基質は、培地に加えてもよいが、細胞中に発現させることが好ましい。ＡＰＰ、ＡＰＰの変異体もしくは突然変異体を天然に発現する細胞、又はＡＰＰ、突然変異体もしくは変異体のＡＰＰ、組換え型もしくは合成ＡＰＰ、ＡＰＰ断片、β−セクレターゼＡＰＰ切断部位を含む合成ＡＰＰペプチドもしくは融合タンパク質のアイソフォームを発現するように形質転換した細胞を使用するが、ただし、発現したＡＰＰは、酵素との接触が可能であり、酵素による切断活性が分析できるものである。
【０１５６】
ＡＰＰをＡβへと正常にプロセシングするヒト細胞系が、本発明の化合物の阻害活性を検定するための有用な手段となる。たとえば、ウエスタン・ブロット又はＥＬＩＳＡなどの酵素結合イムノアッセイ（ＥＩＡ）など、イムノアッセイによって、Ａβ及び／又は他の切断産物の産生及び培地への遊離を測定する。
【０１５７】
化合物阻害剤の存在下、ＡＰＰ基質及び活性β−セクレターゼを発現する細胞をインキュベートすると、対照と比較した酵素活性の阻害が実証できる。β−セクレターゼ活性は、ＡＰＰ基質の１種又は複数の切断産物を分析することによって測定できる。たとえば、基質ＡＰＰに対するβ−セクレターゼ活性の阻害によって、Ａβなど、特定のβ−セクレターゼ誘発ＡＰＰ切断産物の遊離が減少することが予想されるはずである。
【０１５８】
神経細胞と非神経細胞のどちらもがＡβをプロセシングし、遊離させるが、内在するβ−セクレターゼ活性が低レベルであり、ＥＬＡで検出するのは難しい。したがって、β−セクレターゼ活性がより高く、ＡＰＰのＡβへのプロセシングがより顕著であり、かつ／又はＡβの産生もより顕著であると知られている細胞型の使用が好ましい。たとえば、細胞にスウェーデン変異体の形のＡＰＰ（ＡＰＰ−ＳＷ）、ＡＰＰ−ＫＫ、又はＡＰＰ−ＳＷ−ＫＫを形質移入すると、β−セクレターゼ活性及びＡβ産生量が容易に測定できるまでに向上した細胞が得られる。
【０１５９】
そのようなアッセイでは、たとえば、ＡＰＰ基質のβ−セクレターゼ切断部位でのβ−セクレターゼ酵素活性に適する条件下の培地で、ＡＰＰ及びβ−セクレターゼを発現する細胞がインキュベートされる。細胞に化合物阻害剤を作用させると、培地中に遊離するＡβ量及び／又は細胞可溶化液中のＡＰＰＣＴＦ９９断片量が対照よりも減少する。ＡＰＰの切断産物は、たとえば、上記で論じた特異的な抗体との免疫反応によって分析できる。
【０１６０】
β−セクレターゼ活性の分析に好ましい細胞には、初代ヒト神経細胞、導入遺伝子がＡＰＰである初代トランスジェニック動物神経細胞、及びＡＰＰを発現する安定な２９３細胞系、たとえばＡＰＰ−ＳＷなど、他の細胞が含まれる。
【０１６１】
ｉｎ  ｖｉｖｏアッセイ：動物モデル
上述のとおり、β−セクレターゼ活性及び／又はＡβを遊離させるＡＰＰプロセシングの分析には、さまざまな動物モデルが使用できる。たとえば、ＡＰＰ基質及びβ−セクレターゼ酵素を発現するトランスジェニック動物を利用して、本発明の化合物の阻害剤活性を実証することができる。たとえば、米国特許第５，８７７，３９９号、同第５，６１２，４８６号、同第５，３８７，７４２号、同第５，７２０，９３６号、同第５，８５０，００３号、同第５，８７７，０１５号、同第５，８１１，６３３号、及びＧａｎｅｓ等のＮａｔｕｒｅ第３７３巻５２３ページ、１９９５年に、ある種のトランスジェニック動物モデルが記載されている。ＡＤの病態生理に随伴する特性を示す動物が好ましい。本明細書に記載のトランスジェニック・マウスに本発明の化合物阻害剤を投与すれば、その化合物の阻害活性を実証する代替法となる。また、化合物が薬剤として有効な担体中に含まれ、かつ標的組織に適切な治療量が到達する投与経路によって投与されることが好ましい。
【０１６２】
このような動物では、β−セクレターゼを媒介とする、ＡＰＰのβ−セクレターゼ切断部位での切断の阻害、及びＡβ遊離の抑制が、動物の脳脊髄液などの体液中又は組織中の切断断片を測定することによって分析できる。脳組織のＡβ沈着又はＡβ斑を分析することが好ましい。
【０１６３】
酵素によって媒介されるＡＰＰの切断及び／又は基質からのＡβの遊離が十分可能である条件下、本発明の阻害化合物の存在下でＡＰＰ基質にβ−セクレターゼ酵素を接触させる場合、本発明の化合物は、β−セクレターゼを媒介とする、β−セクレターゼ切断部位でのＡＰＰ切断を低減するのに有効であり、かつ／又はＡβが遊離する量を減少させるのにも有効である。このような接触として、たとえば上述のような動物モデルに、本発明の阻害化合物を投与すれば、この化合物は、動物脳組織でのＡβ沈着を低減し、βアミロイド斑の数を減少させ、かつ／又はその大きさを縮小するのに有効である。その投与をヒトの対象に行えば、Ａβ量の増加を特徴とする疾患の進行を抑制又は緩慢化する、ＡＤの進行を緩慢化する、かつ／又はＡＤの恐れのある患者においてこの疾患の発生又は発症を予防するのに有効である。
【０１６４】
別段の定義づけがない限り、本明細書で使用する科学技術用語はすべて、本発明が属する分野の技術者に一般に理解されているものと同じ意味である。本明細書で参考文献とした特許及び刊行物はすべて、いかなる目的でも参照により本明細書に組み込む。
【０１６５】
定義
別段の規定がない限り、本発明で使用する科学技術用語はすべて、本発明が属する分野の技術者に一般に理解されているものと同じ意味を有する。
【０１６６】
本明細書で言及したすべての特許及び刊行物は、いかようにも参照により本明細書に組み込む。
【０１６７】
ＡＰＰ、すなわちアミロイド前駆体タンパク質は、たとえば米国特許第５，７６６，８４６号に記載されているように、ＡＰＰの変異体、突然変異体、及びアイソフォームを含む任意のＡＰＰポリペプチドであると定義する。
【０１６８】
Ａβ、すなわちアミロイドβペプチドは、３９、４０、４１、４２、及び４３個のアミノ酸からなるペプチドを含み、β−セクレターゼ切断部位からアミノ酸３９、４０、４１、４２、又は４３にまで伸長している、β−セクレターゼを媒介とするＡＰＰの切断の結果として生じた任意のペプチドであると定義する。
【０１６９】
β−セクレターゼ（ＢＡＣＥ１、Ａｓｐ２、メマプシン２）は、ＡＰＰがＡβのアミノ末端側の縁で切断されるのを媒介するアスパルチルプロテアーゼである。ヒトβ−セクレターゼは、たとえばＷＯ００／１７３６９に記載されている。
【０１７０】
薬剤として許容可能とは、組成物、製剤、安定性、患者の忍容性、及び生物学的利用能に関して、薬理学／毒物学の観点から患者に許容され、かつ物理学／化学の観点から製薬化学者に容認される特性及び／又は物質を指す。
【０１７１】
治療有効量とは、治療対象となる疾患の少なくとも１種の症状を低減又は軽減し、あるいはその疾患の１種又は複数の臨床マーカー又は症状の発症を低減又は緩慢化するのに有効な量であると定義する。
【０１７２】
本明細書及び添付の特許請求の範囲では、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」には、その内容によって別段明示されていない限り、複数の指示対象が含まれることを留意すべきである。したがって、たとえば、「ａ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ」を含有する組成物に対する言及には、２種以上の化合物の混合物が含まれる。また用語「又は（もしくは）」が、一般に、その内容によって別段明示されていない限り、「及び／又は（もしくは）」を含む意味で用いられることにも留意すべきである。
【０１７３】
上述のように、本発明の化合物は、不斉炭素原子が存在するかに応じて、異性体混合物、特にラセミ体として、又は純粋な異性体、特に光学対掌体の形で存在し得る。
【０１７４】
塩形成基を有する化合物の塩は、特に、酸の付加塩、塩基との塩であり、又はいくつかの塩形成基が存在する場合では、混合塩又は分子内塩となることができる。
【０１７５】
塩とは、特に、式Ｉの化合物の薬剤として許容可能な塩、又は非毒性の塩である。
【０１７６】
そのような塩は、たとえば、酸性の基、たとえば炭酸基又はスルホ基を有する式Ｉの化合物によって形成され、たとえば、元素の周期表のＩａ、Ｉｂ、ＩＩａ、及びＩＩｂ族の金属から誘導された非毒性の金属塩、たとえばアルカリ金属塩、特に、リチウム、ナトリウム、もしくはカリウム塩、又はアルカリ土類金属塩、たとえば、マグネシウムもしくはカルシウム塩に加え、亜鉛の塩又はアンモニウム塩など、適切な塩基とのその塩、並びに非置換もしくはヒドロキシ置換されたモノ、ジ、もしくはトリアルキルアミン、特にモノ、ジ、もしくはトリ低級アルキルアミンなどの有機アミンと共に、又は第４級アンモニウム塩基、たとえばメチル、エチル、ジエチル、もしくはトリエチル−アミン；エタノール、ジエタノール、もしくはトリエタノールアミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、２−ヒドロキシテトラブチルアミンなどのモノ、ビス、もしくはトリス−（２−ヒドロキシ低級アルキル）−アミン；Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−アミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンなどのＮ，Ｎ−ジ−低級アルキル−Ｎ−（ヒドロキシ−低級アルキル）アミン；又は水酸化テトラブチルアンモニウムなどの第４級水酸化アンモニウムと共に形成された塩である。塩基性の基、たとえばアミノ基を有する式Ｉの化合物は、たとえば、適切な無機の酸、たとえば塩化水素酸、臭化水素酸などのハロゲン化水素酸（ｈｙｄｒｏｈａｌｉｃ  ａｃｉｄ）、あるいは一方又は両方のプロトンが置換された硫酸、１個又は複数のプロトンが置換されたリン酸、たとえばオルトリン酸又はメタリン酸、あるいは１個又は複数のプロトンが置換されたピロリン酸との、あるいは有機のカルボン酸、スルホン酸、スルホ（ｓｕｌｆｏ）酸、又はホスホン酸、又はＮ置換スルファミン酸、たとえば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、コハク酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、メチルマレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、グルコン酸、グルカル酸、グルクロン酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸、２−フェノキシ安息香酸、２−アセトキシ安息香酸、エンボン酸、ニコチン酸、又はイソニコチン酸との、並びに前述のαアミノ酸などのアミノ酸との、及びメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−メチルベンゼンスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、２−もしくは３−ホスホグリセリン酸、グルコース−６−リン酸、（シクラミン酸塩を形成する）Ｎ−シクロヘキシルスルファミン酸との、あるいはアスコルビン酸など、他の酸性有機化合物との酸の付加塩を形成することができる。酸性及び塩基性の基を有する式Ｉの化合物は、分子内塩を形成することもできる。
【０１７７】
単離及び精製する目的には、薬剤として許容されない塩を使用することも可能である。
【０１７８】
（水溶性、油溶性、又は分散性生成物の形の）式Ｉの化合物の薬剤として許容可能な好ましい塩は、たとえば無機又は有機の酸又は塩基から形成された通常の非毒性の塩又は第４級アンモニウム塩を含むものを含む。そのような酸の付加塩の例には、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩（ｇｌｕｃｏｈｅｐｔａｎｏａｔｅ）、グリセロリン酸塩、半硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩化水素酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸、ニコチン酸、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシラート、及びウンデカン酸塩が含まれる。塩基の塩には、アンモニウム塩、ナトリウム及びカリウム塩などのカルシウム及びマグネシウム塩などのアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩；ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンなどの有機塩基との塩；及びアルギニン、リジンなどのアミノ酸との塩が含まれる。メチル、エチル、プロピル、ブチルの塩化物、臭化物、及びヨウ化物など、低級アルキルハロゲン化物；ジメチル、ジエチル、ジブチルのような硫酸ジアルキル、及び硫酸ジアミル；デシル、ラウリル、ミリスチル、ステアリルの塩化物、臭化物、及びヨウ化物など、長鎖ハロゲン化物；臭化ベンジル及びフェネチルのようなアラルキルハロゲン化物他などの薬品によって塩基性の窒素含有基を４級化してもよい。他の薬剤として許容可能な塩としては、硫酸塩のエタノール付加物（ｅｔｈａｎｏｌａｔｅ）及び硫酸塩が含まれる。
【０１７９】
化合物の合成
本発明の方法に有用な化合物を調製するためのスキームＩ及びＩＩを以下に提示する。これらスキームに従う表Ｉ及び表ＩＩは、スキームＩ及びＩＩによって合成できる化合物を例示するものであり、スキームＩ及びＩＩは、表中の化合物によっても、例示目的でスキーム中に用いられた特定の置換基によっても限定されない。実施例では、以下のスキームを特定の化合物に適用した例を具体的に説明する。
【０１８０】
合成の基礎環境についての追加の関連情報は、ＥＰＯ０３３７７１４に含まれている。
【０１８１】
式Ｉの化合物を生成する一方法は、スキームＩによってもたらされる。
【０１８２】
【化１３】
2005500310.tif 000015
【０１８３】
塩基中でＲ２Ｘ’（Ｘ’はハロである）と反応させることによってエステルＩをアルキル化するとＩＩが得られる。ＭｅＯＮａと反応させると、ＩＩが転位し、ＩＩＩが得られる。Ｒ４ＮＨ２を用いて結晶化すると、アザビシクロ（３．３．１）ノナン核の前駆体ＩＶが得られ、これを還元し、酸で加水分解した後にＶが得られる。スキームＩは、一実施形態として実施例１で例示する。
【０１８４】
【化１４】
2005500310.tif 000016
【０１８５】
スキームＩＩは、別の一般的合成方法の概略を述べるものである。ＤＭＳＯ中でＰをＳＯ３・ピリジン錯体で処理することによってアルコールを酸化させた後にシリル化すると、Ｑが得られる。適切なグリニャール試薬を用いてアルキル化してからその後酸で処理すると、Ｒが得られる。スキームＩＩもまた、一実施形態として実施例３で例示する。
【０１８６】
また本発明の方法で有用な化合物を以下の表Ｉ〜ＩＩに図示する。
【０１８７】
【表１】
2005500310.tif 000017
2005500310.tif 000018
【０１８８】
【表２】
2005500310.tif 000019
【０１８９】
上の合成方法は、米国特許第５，８４６，９７８号に詳述されており、その全体を参照により本明細書に組み込む。
【０１９０】
本発明は、以下の実施例を参照しながらより深く理解されるであろう。こうした実施例は、本発明の具体的な実施形態の典型であり、本発明の範囲を限定するものでない。
【実施例】
【０１９１】
実施例Ａ
酵素阻害アッセイ
ＭＢＰ−Ｃ１２５アッセイを利用して、本発明の化合物の阻害活性を分析する。このアッセイでは、β−セクレターゼによるモデルＡＰＰ基質ＭＢＰ−Ｃ１２５ＳＷの切断について、未処理対照と比べ、化合物による相対的阻害を決定する。アッセイ・パラメータの詳細な説明は、たとえば、米国特許第５，９４２，４００号に出ている。簡単に述べれば、基質は、マルトース結合タンパク質（ＭＢＰ）とスウェーデン変異体ＡＰＰ−ＳＷのカルボキシ末端側アミノ酸１２５個とから形成される融合タンパク質である。β−セクレターゼ酵素は、Ｓｉｎｈａ等の１９９９年Ｎａｔｕｒｅ第４０巻５３７〜５４０ページで記載されているように、ヒト脳組織から取り出す、あるいは全長酵素（アミノ酸１〜５０１）として組換えによって作製され、たとえば、ＷＯ００／４７６１８に記載されているように、組換え型ｃＤＮＡを発現する２９３細胞から調製できる。
【０１９２】
酵素の阻害は、たとえば酵素切断産物のイムノアッセイによって分析する。ＥＬＩＳＡの一例では、抗ＭＢＰ捕捉抗体が使用され、予めコートし、ブロックした９６ウェルの高結合プレートにこの抗体を付着させてから、希釈した酵素を、反応上清と共にインキュベートし、特定のレポーター抗体、たとえばビオチン標識抗ＳＷ１９２レポーター抗体と共にインキュベートし、さらにストレプトアビジン／アルカリホスファターゼと共にインキュベートする。このアッセイでは、無傷のＭＢＰ−Ｃ１２５ＳＷ融合タンパク質が切断されると、切断されたアミノ末端断片が生じ、カルボキシ末端に新しいＳＷ−１９２抗体陽性エピトープが露出する。ホスファターゼによる切断の蛍光基質シグナルによって検出を行う。ＥＬＩＳＡは、基質のＡＰＰ−ＳＷ７５１変異部位のＬｅｕ５９６に続く切断だけを検出する。
【０１９３】
具体的なアッセイ手順
１試験化合物につき９６プレートの１列として、６段階濃度曲線（１濃度につき２ウェル）に対して１：１で化合物を連続希釈した。各々の試験化合物をＤＭＳＯ中に調製して、１０ミリモルの保存溶液を作製した。この保存溶液をＤＭＳＯで連続的に希釈して、最終化合物濃度を６段階希釈曲線の高位置にある２００ｍＭにする。５２ｍＭのＮａＯＡｃ、７．９％のＤＭＳＯ、ｐＨ４．５各１９０マイクロリットルを予め加えておいた対応するＶ底プレートの列Ｃ上の、各々の２ウェルに各希釈物１０マイクロリットルを加える。ＮａＯＡｃで希釈した化合物を遠心沈殿させて、沈殿物をペレット状にし、２０マイクロリットル／ウェルを平底プレートに移し、これに３０マクロリットルの氷冷酵素−基質混合物（３０マイクロリットル当たり２．５マイクロリットルのＭＢＰ−Ｃ１２５ＳＷ基質、０．０３マイクロリットルの酵素、及び２４．５マイクロリットルの氷冷０．０９％ＴＸ１００）を加える。曲線最高点である２００ｍＭの化合物の最終反応混合物は、５％のＤＭＳＯ、２０ｍＭのＮａＯＡｃ、０．０６％のＴＸ１００、ｐＨ４．５に含まれる。
【０１９４】
プレートを３７℃に温めて、酵素反応を開始させた。９０分後、３７℃で、２００マイクロリットル／ウェルの冷試料希釈物を加えて、反応を停止し、８０マイクロリットル／ウェルの試料希釈物を含む、対応する抗ＭＢＰ抗体でコートした捕捉用のＥＬＩＳＡプレートに、２０マイクロリットル／ウェルを移した。この反応物を終夜４℃でインキュベートし、翌日、抗１９２ＳＷ抗体、次いでストレプトアビジン−ＡＰ接合物及び蛍光物質と共に２時間インキュベートした後ＥＬＩＳＡを展開する。信号を蛍光プレート・リーダーで読み取る。
【０１９５】
化合物を加えていない対照ウェルでの酵素反応シグナルと比べ、検出されたシグナルが５０％低下した化合物濃度（ＩＣ５０）を算出することによって、化合物の相対的阻害効力を決定する。
【０１９６】
実施例Ｂ
合成ＡＰＰ基質を使用する細胞未使用の阻害アッセイ
β−セクレターゼによって切断でき、Ｎ末端ビオチンを有し、Ｃｙｓ残基にオレゴン・グリーンを共有結合させたために蛍光を発することのできる、合成ＡＰＰ基質を使用して、本発明の阻害化合物の存在下又は不在下でのβ−セクレターゼ活性を検定した。有用な基質には、以下のもの、すなわち、
ビオチン−ＳＥＶＮＬＤＡＥＦＲＣ［オレゴン・グリーン］ＫＫ
［配列番号１］
ビオチン−ＳＥＶＫＭＤＡＥＦＲＣ［オレゴン・グリーン］ＫＫ
［配列番号２］
ビオチン−ＧＬＮＩＫＴＥＥＩＳＥＩＳＹＥＶＥＦＲＣ［オレゴン・グリーン］ＫＫ                                                      ［配列番号３］
ビオチン−ＡＤＲＧＬＴＴＲＰＧＳＧＬＴＮＩＫＴＥＥＩＳＥＶＮＬＤＡＥＦＣ［オレゴン・グリーン］ＫＫ                              ［配列番号４］
ビオチン−ＦＶＮＱＨＬＣｏｘＧＳＨＬＶＥＡＬＹ−ＬＶＣｏｘＧＥＲＧＦＦＹＴＰＫＡＣ［オレゴン・グリーン］ＫＫ                      ［配列番号５］
が含まれる。
【０１９７】
予めブロックした、融和性の低い、黒色プレート（３８４ウェル）中、３７°で、酵素（０．１ｎＭ）及び試験化合物（０．００１〜１００ｍＭ）を３０分間インキュベートする。１５０ｍＭの基質を加えてウェル当たり３０マイクロリットルの最終体積にすることによって、反応を開始する。最終のアッセイ条件は、０．００１〜１００ｍＭの化合物阻害剤、０．１Ｍの酢酸ナトリウム（ｐＨ４．５）、１５０ｎＭの基質、０．１ｎＭの可溶性β−セクレターゼ、０．００１％のＴｗｅｅｎ２０、及び２％のＤＭＳＯである。アッセイ混合物を３７℃で３時間インキュベートし、飽和濃度の免疫的に純粋な（ｉｍｍｕｎｏｐｕｒｅ）ストレプトアビジンを加えて反応を停止した。ストレプトアビジンと共に室温で１５分間インキュベートした後、たとえば、ＬＪＬ  Ａｃｑｕｒｅｓｔ（Ｅｘ４８５ｎｍ／Ｅｍ５３０ｎｍ）を使用して、蛍光偏光を測定する。β−セクレターゼ酵素の活性は、酵素によって基質が切断されたときに起こる蛍光偏光の変化によって検出する。化合物阻害剤の存在下又は不在下でインキュベートすることによって、合成ＡＰＰ基質のβ−セクレターゼ酵素による切断が特異的に阻害されることが実証される。
【０１９８】
実施例Ｃ
β−セクレターゼ阻害：Ｐ２６−Ｐ４’ＳＷアッセイ
ＡＰＰのβ−セクレターゼ切断部位を含む合成基質を使用して、たとえば、公告されたＰＣＴ出願ＷＯ００／４７６１８に記載されている方法を用いる、β−セクレターゼ活性のアッセイを行う。Ｐ２６−Ｐ４’ＳＷ基質は、配列（ビオチン）ＣＧＧＡＤＲＧＬＴＴＲＰＧＳＧＬＴＮＩＫＴＥＥＩＳＥＶＮＬＤＡＥＦ［配列番号６］のペプチドである。Ｐ２６−Ｐ１標準体は、配列（ビオチン）ＣＧＧＡＤＲＧＬＴＴＲＰＧＳＧＬＴＮＩＫＴＥＥＩＳＥＶＮＬ［配列番号７］を有する。
【０１９９】
簡潔に述べれば、このアッセイでは、ビオチン結合合成基質を約０〜約２００ｍＭの濃度でインキュベートする。阻害化合物を試験する場合、約１．０ｍＭの濃度の基質が好ましい。５％の最終ＤＭＳＯ濃度の反応混合物に、ＤＭＳＯで希釈した化合物を加える。対照も、最終ＤＭＳＯ濃度の５％を含有している。反応物中のβ−セクレターゼ酵素の濃度を変えて、ＥＬＩＳＡアッセイの段階的な範囲、すなわち希釈後約１２５〜２０００ピコモルを有する生成物濃度を得る。
【０２００】
反応混合物は、２０ｍＭの酢酸ナトリウム、ｐＨ４．５、０．０６％のトリトンＸ１００も含んでおり、３７℃で約１〜３時間インキュベートされる。次いで、試料をアッセイ緩衝液（たとえば、１４５．４ｎＭの塩化ナトリウム、９．５１ｍＭのリン酸ナトリウム、７．７ｍＭのアジ化ナトリウム、０．０５％のトリトンＸ４０５、６ｇ／リットルのウシ血清アルブミン、ｐＨ７．４）で希釈して、反応を失活させ、次いで切断産物のイムノアッセイに向けてさらに希釈する。
【０２０１】
切断産物は、ＥＬＩＳＡによって検定できる。捕捉抗体、たとえば、ＳＷ１９２をコートしたアッセイ・プレート中で、希釈した試料及び標準物質を４℃で２４時間インキュベートする。ＴＴＢＳ緩衝液（１５０ｍＭの塩化ナトリウム、２５ｍＭのトリス、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０、ｐＨ７．５）で洗浄後、製造者の指示に従って、試料をストレプトアビジンＡＰと共にインキュベートする。室温で１時間インキュベートした後、サンプルをＴＴＢＳで洗浄し、蛍光物質溶液Ａ（３１．２ｇ／リットルの２−アミノ−２−メチル−１−プロパノール、３０ｍｇ／リットル、ｐＨ９．５）と共にインキュベートする。ストレプトアビジン・アルカリリン酸と反応させると、蛍光法での検出が可能になる。β−セクレターゼ活性の有効な阻害剤である化合物では、基質の切断が対照に比べて減少している。
【０２０２】
実施例Ｄ
合成オリゴペプチド基質を使用するアッセイ
知られているβ−セクレターゼ切断部位、及び任意選択で、蛍光性もしくは色素生産性部分など、検出可能なタグを含む合成オリゴペプチドを調製する。このようなペプチドの例、並びにその製造方法及び検出方法は、米国特許第５，９４２，４００号に記載されており、これを参照により本明細書に組み込む。切断産物は、当技術分野でよく知られている方法に従って、検出するペプチドに適する高速液体クロマトグラフィー又は蛍光もしくは色素生産検出法を使用して検出できる。
【０２０３】
例として、あるそのようなペプチドは、配列（ビオチン）−ＳＥＶＮＬＤＡＥＦ［配列番号８］を有し、切断部位が残基５と６の間にある。別の好ましい基質は、配列ＡＤＲＧＬＴＴＲＰＧＳＧＬＴＮＩＫＴＥＥＩＳＥＶＮＬＤＡＥＦ［配列番号９］を有し、切断部位が残基２６と２７の間にある。
【０２０４】
β−セクレターゼを媒介とする基質の切断をもたらすのに十分な条件下、β−セクレターゼの存在下でこのような合成ＡＰＰ基質をインキュベートする。化合物阻害剤が存在下での切断結果を対照の結果と比較すると、その化合物の阻害活性の大きさが明らかとなる。
【０２０５】
実施例Ｅ
β−セクレターゼ活性の阻害−細胞アッセイ
米国特許第５，６０４，１０２号に記載されているように、β−セクレターゼ活性の阻害を分析するアッセイの例は、天然発生の二重突然変異体Ｌｙｓ６５１Ｍｅｔ５２〜Ａｓｎ６５１Ｌｅｕ６５２（ＡＰＰ７５１の番号）を含むＡＰＰ７５１を形質移入した、ヒト胎児腎細胞系ＨＥＫｐ２９３（ＡＴＣＣ受入れ番号ＣＲＬ−１５７３）を利用しているが、これは一般にスウェーデン変異体と呼ばれ、Ａβを過剰産生することが示されている（Ｃｉｔｒｏｎ等のＮａｔｕｒｅ第３６０巻６７２〜６７４ページ、１９９２年）。
【０２０６】
所望の濃度、一般に最高で１０マイクログラム／ｍｌの（ＤＭＳＯで希釈した）阻害剤化合物の存在下／不在下で、細胞をインキュベートする。処理の終わりに、たとえば、切断断片の分析によって、条件を整えた培地のβ−セクレターゼ活性を分析する。Ａβは、特定の検出抗体を使用するイムノアッセイによって分析できる。化合物阻害剤の存在下及び不在下で酵素活性を測定すると、β−セクレターゼを媒介とするＡＰＰ基質の切断が特異的に阻害されることが実証される。
【０２０７】
実施例Ｆ
ＡＤ動物モデルでのβ−セクレターゼの阻害
β−セクレターゼ活性のスクリーニングには、さまざまな動物モデルが使用できる。本発明で使用できる動物モデルの例には、それだけに限らないが、マウス、モルモット、イヌなどが含まれる。使用する動物は、野生型モデル、トランスジェニック・モデル、又はノックアウト・モデルでよい。さらに、哺乳動物モデルも、本明細書に記載のＡＰＰ６９５−ＳＷなど、ＡＰＰの変異体を発現できる。ヒトでない哺乳動物のトランスジェニック・モデルの例は、米国特許第５，６０４，１０２号、同第５，９１２，４１０号、及び同第５，８１１，６３３号に記載されている。
【０２０８】
推定上の阻害剤化合物の存在下、ｉｎ  ｖｉｖｏでＡβ遊離の抑制を分析するには、Ｇａｍｅｓ等のＮａｔｕｒｅ第３７３巻５２３〜５２７ページ、１９９５年に記載されているとおりに準備したＰＤＡＰＰマウスが有用である。米国特許第６，１９１，１６６号に記載されているように、生後４カ月のＰＤＡＰＰマウスに、トウモロコシ油などの溶剤中に処方した化合物を投与する。マウスは化合物（１〜３０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは１〜１０ｍｇ／ｍｌ）を投与される。時間経過後、たとえば３〜１０時間後、動物を屠殺し、分析用に脳を取り出す。
【０２０９】
トランスジェニック動物には、選択した投与方式に適する担体中に処方された、ある量の化合物阻害剤を投与する。対照動物は、未処置とする、担体で処置する、又は不活性化合物で処置する。投与は、急性向け、すなわち１回投与又は複数回投与を１日で行うことも、あるいは、慢性向け、すなわち数日間毎日投与を繰り返すこともできる。０時間から始め、選択した動物から脳組織又は脳脊髄液を得、たとえば、Ａβ検出用の特定の抗体を使用するイムノアッセイを利用して、Ａβを含む、ＡＰＰ切断ペプチドの存在を分析する。試験期間の終わりに動物を屠殺し、脳組織又は脳脊髄液のＡβ及び／又はβアミロイド斑の存在を分析する。組織の壊死についても分析する。
【０２１０】
本発明の化合物阻害剤を投与した動物では、未処置対象に比べ、脳組織又は脳脊髄液中のＡβが減少し、脳組織中のβアミロイド斑が縮小することが予想される。
【０２１１】
実施例Ｇ
ヒト患者でのＡβ産生の阻害
アルツハイマー病（ＡＤ）に罹患した患者は、脳のＡβ量の増加を示す。ＡＤ患者に、選択した投与方式に適する担体中に処方した、ある量の阻害剤を投与する。試験期間中、投与を毎日繰り返す。０日から始め、たとえば１カ月に１度、認知及び記憶能力の試験を実施する。
【０２１２】
化合物阻害剤を投与した患者では、１種又は複数の以下の疾患パラメータ、すなわち、ＣＳＦ又は血漿中に存在するＡβ、脳又は海馬の体積、脳でのＡβ沈着、脳のアミドイド斑、認知及び記憶機能についての成績の変化を分析した場合、対照の未処置の患者と比べ、疾患の進行が緩慢化又は安定化することが予想される。
【０２１３】
実施例Ｈ
ＡＤのリスクのある患者でのＡβ産生の予防
家族性の遺伝パターン、たとえば、スウェーデン変異の存在を見分ける、かつ／又は診断パラメータをモニタすることによって、ＡＤ発生の素因又はリスクのある患者を識別する。ＡＤ発生の素因又はリスクがあると識別された患者に、選択した投与方式に適する担体中に処方した、ある量の化合物阻害剤を投与する。試験期間中、投与を毎日繰り返す。０日から始め、たとえば１カ月に１度、認知及び記憶能力の試験を実施する。
【０２１４】
化合物阻害剤を投与した患者では、１種又は複数の以下の疾患パラメータ、すなわち、ＣＳＦ又は血漿中に存在するＡβ、脳又は海馬の体積、脳のアミロイド斑、認知及び記憶機能についての成績の変化を分析した場合、対照の未処置の患者と比べ、疾患の進行が緩慢化又は安定化することが予想される。
【０２１５】
温度はすべてセ氏温度である。
【０２１６】
実施例１：
【化１５】
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５（ＲＳ）−（（４’）−２”−フラニル）メチルフェニル−９−（ＲＳ）−ヒドロキシ−１−（ＲＳ）−ヒドロキシメチル−３−（２’−メチルプロピル−３−アザビシクロ［３．３．１］ノナン−７−オン（化合物１０、表１）
【化１６】
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【０２１７】
２−カルボメトキシ−４−エチレンジオキシシクロヘキサノンＩ（３．０ｇ、１４．０ミリモル、Ｆｕｃｈｓ，Ｐ．Ｌ．らのＳｙｎ．Ｃｏｍｍ．、第１３巻（３）、２４３ページ、１９８３年）をアセトン１００ｍＬに溶かした溶液に、臭化４−ブロモベンジル（３．６７ｇ、１４．７ミリモル）、Ｋ２ＣＯ３（９．６９ｇ、７０．１ミリモル）、及びＮａＩ（２１０ｍｇ、１．４ミリモル）を加えた。不均質な反応物を、還流しながら１６時間加熱した。反応混合物を冷却し、セライトで濾過した。濾液を２５０ｍＬのＥｔ２Ｏで希釈し、有機物を水（２×２０ｍＬ）、次いでブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、４：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）にかけて、４．８ｇ（８９％）のＡを得た。
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【０２１８】
【化１７】
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【０２１９】
ＮａＨ（３７５ｍｇ、１５．６ミリモル）の０℃のＴＨＦ（１５ｍＬ）中スラリーに、ＭｅＯＨ（０．７６ｍＬ、３０．７ミリモル）を加えた。５分間攪拌した後、ＴＨＦ（３０ｍＬ）中ケトエステルＡ（４．８ｇ、１２．５ミリモル）を滴下し、溶液を室温に温め、１６時間攪拌した。反応混合物を５０ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、次いで過剰のＮａＯＭｅを１０ｍＬの飽和ＮＨ４Ｃｌで失活させた。有機相を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、４：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）にかけて、４．５ｇ（９４％）のＢを得た。
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【０２２０】
【化１８】
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【０２２１】
ケトエステル（２．９ｇ、７．５７ミリモル）ＢのＭｅＯＨ（４５ｍＬ）溶液及びホルムアルデヒド水溶液（３７％、５．６ｍＬ、７５．７ミリモル）に、イソブチルアミン（０．９ｍＬ、９．１ミリモル）及びＨＯＡｃ（０．５２ｍＬ、９．１ミリモル）を加えた。全部を、還流しながら１６時間加熱した。反応物を室温に冷却し、溶媒を除去した。残渣をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）中に溶解させ、得られた溶液を飽和ＮａＨＣＯ３（２×２０ｍＬ）、水（２×２０ｍＬ）、次いでブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２勾配；４：１、２：１、１：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）にかけて、２．５ｇ（７０％）のＣを得た。融点１４２〜１４４℃。
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【０２２２】
【化１９】
2005500310.tif 000027
【０２２３】
ケトン（１．８ｇ、３．７５ミリモル）Ｃを１８ｍＬの１：１：１ＥｔＯＨ、ＣＨ２Ｃｌ２、及びＨ２Ｏに溶かした０℃の溶液に、ＮａＢＨ４（１４２ｍｇ、３．７５ミリモル）を加えた。この溶液を３０分間攪拌し、次いで過剰のＮａＢＨ４を５ｍＬのアセトンで失活させた。溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、水（４×１０ｍＬ）、次いでブライン（１０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を蒸発させ、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、６５：３５ヘキサン／ＥｔＯＡＣ）にかけて、９６４ｍｇ（５３％）のＤを得た。
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【０２２４】
【化２０】
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【０２２５】
Ｄのエステル（９６４ｍｇ、２．０ミリモル）の０℃のＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液に、ＬｉＥｔ３ＢＨ（６．０９ｍＬ、６．０ミリモル）を加えた。この溶液を室温に温め、４時間攪拌した。過剰のＬｉＥｔ３ＢＨを５ｍＬの飽和ＮａＨＣＯ３で失活させた。溶液をＥｔ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（３×１０ｍＬ）、水（４×１０ｍＬ）、及びブライン（１０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を蒸発させると、８００ｍｇ（８８％）の粗ジオールＥが残り、これを精製せずに直接に次のステップで使用した。融点１３６〜１３８℃。
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【０２２６】
【化２１】
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【０２２７】
ケタール（４５３ｍｇ、１．０ミリモル）Ｅの０℃のアセトン（８ｍＬ）溶液に、８ｍＬの水中５０％ＨＣｌを加えた。この溶液を、還流しながら１６時間加熱し、次いで０℃に冷却した。飽和ＮａＨＣＯ３溶液を加えて過剰のＨＣｌを失活させた。次いで、溶液をＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で洗浄し、有機抽出物を合わせてＭｇＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させ、得られた白色個体をＥｔ２Ｏで摩砕すると、３００ｍｇ（７３％）のＦが得られた。融点１５５〜１５６℃。
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【０２２８】
【化２２】
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【０２２９】
臭化アリール（４１ｍｇ、０．１０ミリモル）のＤＭＦ（０．４ｍＬ）溶液に、２−（トリ−ｎ−ブチルスタンニル）フラン（５３．５ｍｇ、０．１５ミリモル）、及びＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（１．５ｍｇ、０．００２０ミリモル）を加えた。得られた黄褐色の溶液を９５℃で４時間攪拌した。反応混合物を冷却し、エーテルで希釈し、セライトで濾過した。濾液を水（７×２ｍＬ）、ブライン（２ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。黄色の油をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、９５：５：０．５  ＣＨＣｌ３／ＩＰＡ／ＮＨ４ＯＨ）にかけると、題名の化合物２５ｍｇ（６３％）が泡として得られた。
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【０２３０】
実施例２：
５（ＲＳ）−メチルフェニル−９（ＲＳ）−ヒドロキシ−１（ＲＳ）−（（１’−ヒドロキシ）−２’−フェニル）−エチル−３−（２”−メチル）プロピル−３−アザビシクロ［３．３．１］ノナン−７−オン（化合物１６）、表ＩＩ
【化２３】
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【０２３１】
【化２４】
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【０２３２】
Ｉ（１２．０ｇ、５６．０ミリモル）、臭化ベンジル（１０．１ｇ、７．０ｍＬ、５８．８ミリモル）、炭酸カリウム（４８．４ｇ、３５０ミリモル）、及びヨウ化ナトリウム（２５０ｍｇ、１．７ミリモル）をアセトン（２００ｍＬ）に混ぜた混合物を、還流しながら１６時間加熱した。次いで、この不均質な混合物を水（１５０ｍＬ）中に注いだ。この水性混合物を酢酸エチル（２×２００ｍＬ）での抽出にかけた。有機層を合わせてＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮すると、Ｇが無色の油（１８．７ｇ）［Ｒｆ＝０．１６（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）］として得られ、これをそれ以上精製せずに使用した。
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【０２３３】
【化２５】
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【０２３４】
水素化ナトリウム（２．４０ｇ、６１ミリモル、鉱油中６０重量％）をヘキサンで洗浄して鉱油を除去し、次いで０℃のテトラヒドロフラン（８０ｍＬ）中に懸濁させた。無水メタノール（２．１５ｇ、２．７２ｍＬ、６７．１ミリモル）を３分間かけて滴下した後、２３℃に温め、３０分間攪拌した。得られた懸濁液を０℃に冷却し、テトラヒドロフラン（４０ｍＬ）中のＧを、滴下漏斗を介し３０分間かけて加えた。反応混合物を１時間かけて２３℃に温まるようにし、次いでその温度で１６時間攪拌した。水性酢酸（１００、１０ｍＬ）を慎重に加え、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２×１５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して、褐色の油を得た。ＭｅＯＨからの再結晶にかけると、Ｈが白色のプリズム（１１．２ｇ）として得られた。母液を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（２０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して無色の油を得、Ｅｔ２Ｏを用いる再結晶によってこれをさらに精製すると、Ｈが白色のプリズムとして得られた。（全体で１１．４ｇ、２ステップの収率６７％）、Ｒｆ＝０．３２（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）、融点＝１１０〜１１５℃。
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【０２３５】
【化２６】
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【０２３６】
イソブチルアミン（４．０７ｍＬ、４０．９ミリモル）、氷酢酸（２．２８ｍＬ、３９．８ミリモル）、水性ホルムアルデヒド（３７％、２５．０ｍＬ、３７３ミリモル）、及び３（１０．３８ｇ、３４．１ミリモル）を、ＭｅＯＨ（２００ｍＬ）中で、還流しながら４８時間加熱した。次いで反応物を濃縮し、ＥｔＯＡｃ（１２５ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）中に注いだ。この二相系を分配し、水層を追加のＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で洗浄した。有機物を合わせて乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮し、Ｅｔ２Ｏ（５０ｍＬ）で溶離し、次いでシリカゲルで濾過し、シリカゲルをＥｔ２Ｏ（５００ｍＬ）で洗浄した。濾液を濃縮すると、４が無色の油として得られた［１３．２ｇ、９６％、Ｒｆ＝０．２７（２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）］。この材料をそれ以上精製せずに使用した。
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【０２３７】
【化２７】
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【０２３８】
Ｉ’のジクロロメタン：水：エタノール（２００ｍＬ、１：２：１）中の懸濁液に、溶液が均質になるまでエタノールを加えた。Ｉが消費されたことがＴＬＣによって示されるまで（７×１．０ｇ）、水素化ホウ素ナトリウムを１グラムずつ加えた。反応混合物を０℃に冷却し、誘発されたガス放出がなくなるまでアセトンをゆっくりと加えた。次いで、得られた混合物を飽和ＮａＣｌ（１５０ｍＬ）中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２×２５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、ＪとＫの混合物を無色の油として得た（９．４９ｇ、収率７２％）、Ｒｆ＝０．２３（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。
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【０２３９】
【化２８】
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【０２４０】
０℃のピリジン（４０ｍＬ）中のＪとＫの混合物（２．１６ｇ、５．３ミリモル、１：１）をクロロトリエチルシラン（４．０３ｇ、４．４８ｍＬ、２６．７ミリモル）で処理した。４−ジメチルアミノピリジン（２ｍｇ）を加え、反応混合物を６０℃で４時間加熱した。次いで、この反応混合物を濃縮し、残渣をＥｔ２Ｏ（１００ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）に分配した。有機層を飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。得られた油をフラッシュクロマトグラフィー（５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製すると、Ｌが無色の油として得られた（１．１４ｇ、所望の異性体の収率４１％）、Ｒｆ＝０．３３（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。
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【０２４１】
【化２９】
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【０２４２】
水素化ジイソブチルアルミニウム（トルエン中１．０Ｍ、２．９１ｍＬ、２．９１ミリモル）を−７８℃に冷却し、カニューレを介してＬ（７５３ｍｇ、１．４５ミリモル）の−７８℃のトルエン（１０ｍＬ）溶液に加えた。反応混合物を２０分間攪拌し、次いで、カニューレを介して−７８℃のアセトン（５ｍＬ）を加えて、過剰の試薬を失活させた。この混合物を２３℃に温まるようにし、飽和酒石酸ナトリウムカリウム（１００ｍＬ）中に注ぎ、得られた懸濁液をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して、ＬとＭの混合物を無色の油として得、これをトルエン（２×４０ｍＬ）と共沸させて乾燥し、それ以上精製せずに使用した（７２０ｍｇ、Ｍ：Ｌの３：１混合物、Ｍの収率７５％）、Ｒｆ＝０．４１（５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）］。
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【０２４３】
【化３０】
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【０２４４】
−７８℃の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のＭとＬの混合物（９５５ｍｇ、３：１、Ｌが１．４５ミリモル）を、塩化ベンジルマグネシウム（４．７５ｍＬ、９．８０ミリモル、ＴＨＦ中２．０６Ｍ）で３分間かけて処理した。反応混合物を０℃に温め、１時間その温度に保った。飽和ＮＨ４Ｃｌを加え（５ｍＬ）、この不均質な混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、所望の異性体Ｎを無色の油として単離した（３７４ｍｇ、４４％）。Ｒｆ＝０．２３（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。
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【０２４５】
【化３１】
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【０２４６】
水性ＨＣｌ（３Ｎ、１０ｍＬ）をＮ（３７４ｍｇ、０．６４ミリモル）のアセトン（１０ｍＬ）溶液に加えた。混合物を６５℃で１６時間加熱した。２３℃に冷却した後、この反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（７５ｍＬ）中にゆっくりと注いだ。この二相系をＥｔＯＡｃ（２×１５０ｍＬ）での抽出にかけ、有機層を合わせて乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して、１６を白色固体として得た（２６５ｍｇ、９９％）。Ｒｆ＝０．１３（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）、融点＝１３８〜１４１℃。
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【０２４７】
実施例３：
５（ＲＳ）−メチルフェニ−９（ＲＳ）−ヒドロキシ−１（ＲＳ）−（（１’−ヒドロキシ）−２’−フェニル）−エチル−３−ベンジル−３−アザビシクロ［３．３．１］ノナン−７−オン（化合物１８）、表ＩＩ
【化３２】
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【０２４８】
【化３３】
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【０２４９】
ジオール（１６２ｍｇ、０．３９６ミリモル）とＳＯ３．ピリジン錯体（１８９ｍｇ、１．１９ミリモル）の混合物を乾燥ＤＭＳＯ（４ｍＬ）中に溶解させた。次いで、トリエチルアミン（０．３４ｍＬ）をシリンジで滴下した。反応を１．５時間進行させ、１．５時間目に飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液中に注いだ。水相をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）での抽出にかけた。有機物を合わせ、Ｈ２Ｏ、ＮａＣｌで洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。抽出物を濾過し、濃縮して油（１４７ｍｇ）にし、これを精製せずに次のステップで使用した。ヒドロキシアルデヒドの粗製混合物をピリジン（６ｍＬ）中に溶解させ、塩化トリエチルシリル（０．３４ｍＬ、２０ミリモル）及び触媒量の４−ジメチルアミノピリジン（１０ｍｇ）で処理した。反応を６０℃で１６時間進行させた。反応物を室温に冷却し、ロータリーエバポレーターによって揮発性物質を除去した。残渣をＥｔ２Ｏ（７５ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３、Ｈ２Ｏ、及びＮａＣｌで次々に洗浄した。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（９：１、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）にかけると、所望の化合物（Ｓ）が油として得られた（６２ｍｇ、２８％）。
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【０２５０】
【化３４】
2005500310.tif 000055
【０２５１】
塩化ベンジルマグネシウムのＴＨＦ（２．０６Ｍ、０．２ｍＬ）溶液を、ステップ１からのアルデヒドＳ（６１ｍｇ、０．１０９ミリモル）の−７８℃の乾燥ＴＨＦ（１ｍＬ）溶液に加えた。反応物を−７８℃で１．５時間攪拌し、次いでゆっくりと室温に温め、過剰のグリニャールを飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液で失活させた。この反応物をＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）で希釈し、ＮＨ４Ｃｌ、ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。その物質をＴＨＦ／１Ｎ  ＨＣｌ（４：１、２．５ｍＬ）中で直ちに加水分解した。所望の化合物をフラッシュクロマトグラフィー１：１ＥｔＯＡｃ／ヘキサンによって精製し、Ｅｔ２Ｏ／ヘキサンから晶出した。融点１４５．５〜１４７℃。
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【０２５２】
実施例４：
５（ＲＳ）−メチルフェニ−９（ＲＳ）−ヒドロキシ−１（ＲＳ）−（（１’−ヒドロキシ）−２’−（２”’−（テトラ−ヒドロ−１，２−チアジン−１，１−ジオキシド））−エチル−３−ベンジル−３−アザビシクロ［３．３．１］ノナン−７−オン（化合物２３）、表ＩＩ
【化３５】
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【０２５３】
【化３６】
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【０２５４】
ヨウ化トリメチルスルホキソニウム（２９８ｍｇ、１．３５ミリモル）、ＮａＨ（３２ｍｇ、１．３５ミリモル）、及びＤＭＦ（４ｍＬ）の溶液を０℃で３０分間攪拌した。上からのアルデヒドＳ（１５２ｍｇ、０．２７０９ミリモル）のＤＭＦ（０．５ｍＬ）溶液をシリンジで加えた。ＤＭＦ（２×０．２５ｍＬ）で２回洗浄して完全に移した。反応物を０℃で１時間攪拌し、ＮＨ４Ｃｌの飽和溶液で失活させた。この反応物をＮａＣｌ中に注ぎ、Ｅｔ２Ｏ（３×３５ｍＬ）での抽出にかけた。有機物を合わせ、Ｈ２Ｏ、ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。８：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃを使用するフラッシュクロマトグラフィーにかけると、一方のジアステレオ異性体６８ｍｇ及び第２のジアステレオ異性体２５ｍｇが得られた（共に油）。
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【０２５５】
【化３７】
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【０２５６】
テトラヒドロ−１，２−チアジン−１，１−ジオキシド（３４ｍｇ、２５０ミリモル）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）溶液にＮａＨ（８ｍｇ、鉱油中に６０重量％、２００ミリモル）を加え、得られた混合物を２３℃で３０分間攪拌した。Ｔ（２７ｍｇ、５０ミリモル）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）溶液を加え、混合物を６５℃で１６時間加熱した。反応物を室温に冷却し、ＮＨ４Ｃｌ溶液（２ｍＬ）を加えた。反応混合物を水（５０ｍＬ）中に注ぎ、得られた水性混合物をＥｔ２Ｏ（２×５０ｍＬ）での抽出にかけた。有機抽出物を合わせて水（２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮すると、出発材料と所望の生成物との混合物が得られ、これをそれ以上精製せずに使用した。
【０２５７】
上からの粗製反応混合物（３０ｍｇ）を含むアセトン（３ｍＬ）溶液を水性塩酸（３Ｎ、３ｍＬ）で処理し、無色の溶液を６５℃で１２時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）中にゆっくりと注いだ。得られた懸濁液をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で洗浄し、有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して粗製の油を得、これをフラッシュクロマトグラフィー（７０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製すると、２３が白色の固体として得られた（１５ｍｇ、２ステップで５８％）。Ｒｆ＝０．１３（７０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）、融点＝１６３〜１６４℃。
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【０２５８】
実施例５
５（ＲＳ）−メチルフェニ−９（ＲＳ）−ヒドロキシ−１（ＲＳ）−（（１’−ヒドロキシ）−２’−（２”−アミノ）−フェニル）−エチル−３−ベンジル−３−アザビシクロ［３．３．１］ノナン−７−オン（化合物２０）、表ＩＩ
【化３８】
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【０２５９】
【化３９】
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【０２６０】
ｔｅｒｔ−ブチルリチウムのペンタン溶液（１．７Ｍ、３．００ｍＬ、５．１０ミリモル、９．６４当量）を１分間かけて２−メチルカルバニル酸ｔｅｒｔ−ブチル（５１５ｍｇ、２．４８ミリモル、４．６９当量）の−４０℃のＴＨＦ（３．５ｍＬ）溶液に加えた。得られた鮮黄色の混合物を−４０℃で１５分間攪拌し、次いで、アルデヒドＵ（３００ｍｇ、０．５２９ミリモル、１当量）のＴＨＦ（４ｍＬ）溶液を加えた。得られた混合物を０℃に温め、１５分間その温度に保った。生成溶液をｐＨ７のリン酸緩衝液（１００ｍＬ）で希釈し、得られた水性混合物をＥｔＯＡｃ（２×７５ｍＬ）での抽出にかけた。有機層を合わせてＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣を（最初のヘキサン中５％ＥｔＯＡｃからヘキサン中２０％酢酸エチルまで勾配をつけた）フラッシュクロマトグラフィーによって精製すると、所望のアルコールが無色の油（８５ｍｇ、２１％）として、並びに所望でないジアステレオ異性体のアルコールが無色の油（８１ｍｇ、２０％）として得られた。
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【０２６１】
ＴＬＣ（２０％ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）、Ｒｆ：所望のアルコール：０．３６（ＵＶ）、所望でないアルコール：０．４４（ＵＶ）
【０２６２】
【化４０】
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【０２６３】
ケタール（８０ｍｇ、０．１１ミリモル）を３ＭのＨＣｌ水溶液（１０ｍＬ）とアセトン（１０ｍＬ）の混合物中に溶かした溶液を６０℃で１６時間加熱した。２３℃に冷却した後、生成溶液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）で慎重に希釈した。得られた水性混合物をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）での抽出にかけた。有機層を合わせてＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（最初はヘキサン中４０％ＥｔＯＡｃ、次いでＥｔＯＡｃ中４０％ヘキサン）にかけるとケトン生成物が無色の油として得られた（３１ｍｇ、６７％）。この油生成物をＥｔ２Ｏで摩砕して、白色の結晶性固体を生成した（融点＝１６４〜１６５℃）。
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【０２６４】
前述の明細書では、例示する目的で示した実施例と共に本発明の原理を教示しているが、本発明の実施には、特許請求の範囲及びそれと等価な事項の範囲に収まる通常の変形、改造、又は変更がすべて含まれることは理解されよう。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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