(57)【要約】      （修正有）【課題】新たなＰＣＳＫ９阻害剤の提供。【解決手段】式（１）で表される化合物又はその塩。2018058791.tif 000009［Ｒ１〜Ｒ６は夫々独立にＣ５、１０若しくは１５のプレニル基、Ｃ１〜１５のアルキルカルボニル基、Ｃ２〜１５のアルケニルカルボニル基、水酸基で置換／非置換のＣ１〜１５のアルキル基、水酸基で置換／非置換のＣ２〜１５のアルケニル基又はＨ、Ｒ１〜Ｒ６のうちの１つ以上はＣ５、１０又は１５のプレニル基；の点線と実線との二重線は夫々独立に単結合又は二重結合］【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）で表される化合物又はその塩を有効成分として含有する、ＰＣＳＫ９阻害剤。
【化１】
2018058791.tif 000007
［式（１）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立に、炭素数５、１０若しくは１５のプレニル基、炭素数１〜１５のアルキルカルボニル基、炭素数２〜１５のアルケニルカルボニル基、水酸基で置換されていてもよい炭素数１〜１５のアルキル基、水酸基で置換されていてもよい炭素数２〜１５のアルケニル基、又は水素原子を示し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６のうちの１つ以上は炭素数５、１０又は１５のプレニル基を示す。Ｒ１又はＲ２、Ｒ３又はＲ４、及びＲ５又はＲ６のうちの１つ以上が、該置換基が結合している炭素原子に隣り合う環上の炭素原子と単結合を形成していてもよい。式中の点線と実線との二重線は、それぞれ独立に、単結合又は二重結合を示す。該二重線が単結合を示す場合は、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９はそれぞれ独立に、水素原子又は単結合を示し、単結合である場合は、Ｒ７はＲ１又はＲ６と、Ｒ８はＲ２又はＲ３と、Ｒ９はＲ４又はＲ５とそれぞれ結合して環を形成する。該二重線が二重結合を示す場合は、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は存在しない。］
【請求項２】
前記化合物が下記一般式（２）で表される化合物である、請求項１に記載のＰＣＳＫ９阻害剤。
【化２】
2018058791.tif 000008
［式（２）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立に、炭素数５、１０若しくは１５のプレニル基、炭素数１〜１５のアルキルカルボニル基、炭素数２〜１５のアルケニルカルボニル基、水酸基で置換されていてもよい炭素数１〜１５のアルキル基、水酸基で置換されていてもよい炭素数２〜１５のアルケニル基、又は水素原子を示し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうちの１つ以上は炭素数５、１０又は１５のプレニル基を示す。Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立に、水素原子又は単結合を示し、単結合である場合は、Ｒ５はＲ１又はＲ４と、Ｒ６はＲ３又はＲ４とそれぞれ結合して環を形成する。］
【請求項３】
前記一般式（２）中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３がそれぞれ独立に、炭素数５、１０又は１５のプレニル基であり、Ｒ４が炭素数１〜１５のアルキルカルボニル基であり、Ｒ５及びＲ６が水素原子である、請求項２に記載のＰＣＳＫ９阻害剤。
【請求項４】
前記一般式（２）で表される化合物が、ルプロンＡ、ルプロンＢ、ルプロンＣ、ルプロンＤ、ルプロンＥ、ルプロン、コルプロン、アドルプロン、ポストルプロン及びプレルプロンからなる群から選ばれる少なくとも１種である、請求項２に記載のＰＣＳＫ９阻害剤。
【請求項５】
前記一般式（２）で表される化合物が、ルプロン、コルプロン、アドルプロン、ポストルプロン及びプレルプロンからなる群から選ばれる少なくとも１種である、請求項２又は３に記載のＰＣＳＫ９阻害剤。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物又はその塩を有効成分として含有する、コレステロール代謝改善用食品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＰＣＳＫ９阻害剤及びコレステロール代謝改善用食品組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
循環器系病疾患の主要因の１つである動脈硬化を防ぐには、過剰な悪玉コレステロール（ＬＤＬコレステロール）を除去することが重要と考えられている。ＬＤＬコレステロール量を制御するために、古くはコレステロール生合成の抑制、すなわちコレステロールの流入量を減らすことが行われてきた。
【０００３】
しかし、近年の研究から、コレステロールの流入量を減らすだけでは、循環器疾患リスクを低減するために不十分であることが分かってきた。最近では、コレステロールの逆転送によって、悪玉コレステロールを排出（クリアランス）する試みが注目されている。肝臓で生合成されたコレステロールはＬＤＬコレステロールとなって体の末梢に運ばれる。コレステロールの逆転送とは、末梢に運ばれた後で不要となったコレステロールが、末梢から高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）によって引き抜かれ、肝臓へと戻っていくことをいう。コレステロールの逆転送の最初のステップを担うのがＨＤＬであり、不要なコレステロールを引き抜く力を引き抜き能という。引き抜き能はＨＤＬの質を示す指標の１つである。コレステロールの逆転送経路は、善玉コレステロール（ＨＤＬコレステロール）の質向上によって活性化され得ると考えられている。
【０００４】
一方、コレステロールの逆転送は、ＬＤＬコレステロールの取り込み向上によっても活性化され得る。ＨＤＬによって末梢から引き抜かれたコレステロールは、ＨＤＬコレステロールとして血中を移動し、その後コレステロール転送作用を受けてＬＤＬによって肝臓に運ばれて取り込まれる。肝臓でのＬＤＬコレステロール取り込みを増やすことができれば、コレステロールを体外への排泄へと向かわせることができる。そのため、ＬＤＬコレステロールの取り込みを担うＬＤＬ受容体の働きが重要である。
【０００５】
近年、ＬＤＬ受容体の代謝に影響する、プロ蛋白転換酵素サブチリシン／ケキシン９型（ＰＣＳＫ９）を阻害することで、ＬＤＬ受容体を増やし、過剰なＬＤＬコレステロールの取り込みを促進するという試みが注目されている。ＰＣＳＫ９はタンパク質分解酵素であり、肝臓表面に発現するＬＤＬ受容体に結合し、これを分解する。ＰＣＳＫ９阻害薬は、ＰＣＳＫ９阻害を介して、ＬＤＬ受容体の分解を抑え、血中ＬＤＬコレステロールの肝細胞内への取り込みを促進する作用を持つ。ＰＣＳＫ９阻害薬は、日本でも医薬品として製造販売が開始されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Dong B et al., J. Biol. Chem. 290, 4047-4058 (2015)
【非特許文献２】Tai etal., Mol. Nutr. Food Res. 58, 2133-2145 (2014)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、製造販売が開始されているＰＣＳＫ９阻害薬は抗体医薬品であり、ＰＣＳＫ９阻害作用に関する低分子化合物又は天然物での報告例は、ベルベリン（非特許文献１）、クルクミン（非特許文献２）等、わずかである。食品成分によって、安価にかつ穏やかにＰＣＳＫ９を阻害することは、消費者にとって大きなメリットである。
【０００８】
本発明は、新たなＰＣＳＫ９阻害剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、下記一般式（１）で表される化合物又はその塩を有効成分として含有する、ＰＣＳＫ９阻害剤を提供する。
【００１０】
【化１】
2018058791.tif 000002
【００１１】
式（１）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立に、炭素数５、１０若しくは１５のプレニル基、炭素数１〜１５のアルキルカルボニル基、炭素数２〜１５のアルケニルカルボニル基、水酸基で置換されていてもよい炭素数１〜１５のアルキル基、水酸基で置換されていてもよい炭素数２〜１５のアルケニル基、又は水素原子を示し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６のうちの１つ以上は炭素数５、１０又は１５のプレニル基を示す。Ｒ１又はＲ２、Ｒ３又はＲ４、及びＲ５又はＲ６のうちの１つ以上が、該置換基が結合している炭素原子に隣り合う環上の炭素原子と単結合を形成していてもよい。式中の点線と実線との二重線は、それぞれ独立に、単結合又は二重結合を示す。該二重線が単結合を示す場合は、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９はそれぞれ独立に、水素原子又は単結合を示し、単結合である場合は、Ｒ７はＲ１又はＲ６と、Ｒ８はＲ２又はＲ３と、Ｒ９はＲ４又はＲ５とそれぞれ結合して環を形成する。該二重線が二重結合を示す場合は、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は存在しない。
【００１２】
本発明に係るＰＣＳＫ９阻害剤は、上記化合物又はその塩を有効成分として含有することにより、高いＰＣＳＫ９阻害作用を有する。
【００１３】
上記化合物は下記一般式（２）で表される化合物であることが好ましい。ＰＣＳＫ９阻害剤が下記構造を有する化合物を有効成分として含有することにより、更に高いＰＣＳＫ９阻害作用を有する。
【００１４】
【化２】
2018058791.tif 000003
【００１５】
式（２）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立に、炭素数５、１０若しくは１５のプレニル基、炭素数１〜１５のアルキルカルボニル基、炭素数２〜１５のアルケニルカルボニル基、水酸基で置換されていてもよい炭素数１〜１５のアルキル基、水酸基で置換されていてもよい炭素数２〜１５のアルケニル基、又は水素原子を示し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうちの１つ以上は炭素数５、１０又は１５のプレニル基を示す。Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立に、水素原子又は単結合を示し、単結合である場合は、Ｒ５はＲ１又はＲ４と、Ｒ６はＲ３又はＲ４とそれぞれ結合して環を形成する。
【００１６】
上記一般式（２）中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３はそれぞれ独立に、炭素数５、１０又は１５のプレニル基であり、Ｒ４が炭素数１〜１５のアルキルカルボニル基であり、Ｒ５及びＲ６が水素原子であることがより好ましい。ＰＣＳＫ９阻害剤が上記構造を有する化合物を有効成分として含有することにより、更に高いＰＣＳＫ９阻害作用を発揮しうる。
【００１７】
上記一般式（２）で表される化合物は、ルプロンＡ、ルプロンＢ、ルプロンＣ、ルプロンＤ、ルプロンＥ、ルプロン、コルプロン、アドルプロン、ポストルプロン及びプレルプロンからなる群から選ばれる少なくとも１種であってよい。ＰＣＳＫ９阻害剤が上記構造を有する化合物を有効成分として含有することにより、更に高いＰＣＳＫ９阻害作用を発揮しうる。
【００１８】
上記一般式（２）で表される化合物は、ルプロン、コルプロン、アドルプロン、ポストルプロン及びプレルプロンからなる群から選ばれる少なくとも１種であることが好ましい。ＰＣＳＫ９阻害剤が上記構造を有する化合物を有効成分として含有することにより、更に高いＰＣＳＫ９阻害作用を発揮しうる。
【００１９】
本発明はまた、上記化合物を有効成分として含有する、コレステロール代謝改善用食品組成物を提供する。該食品組成物は上記化合物を有効成分として含有するため、摂取することにより、摂取者のコレステロール代謝を改善することができる。
【発明の効果】
【００２０】
本発明により、新規なＰＣＳＫ９阻害剤が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】試験例１での被検物質のＰＣＳＫ９阻害作用を示すグラフである。
【図２】試験例２での被検物質のＰＣＳＫ９阻害作用を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
以下、本発明を実施するための形態について詳細に説明する。なお、本発明は、以下の実施形態に限定されるものではない。
【００２３】
本実施形態に係るＰＣＳＫ９阻害剤は、下記一般式（１）で表される化合物又はその塩を有効成分として含む。
【００２４】
【化３】
2018058791.tif 000004
【００２５】
式（１）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立に、炭素数５、１０若しくは１５のプレニル基、炭素数１〜１５のアルキルカルボニル基、炭素数２〜１５のアルケニルカルボニル基、水酸基で置換されていてもよい炭素数１〜１５のアルキル基、水酸基で置換されていてもよい炭素数２〜１５のアルケニル基、又は水素原子を示し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６のうちの１つ以上は炭素数５、１０又は１５のプレニル基を示す。Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６のうちの２つ以上が炭素数５、１０又は１５のプレニル基であることが好ましく、２つ又は３つが炭素数５、１０又は１５のプレニル基であることが好ましい。
【００２６】
式（１）中、Ｒ１又はＲ２、Ｒ３又はＲ４、及びＲ５又はＲ６のうちの１つ以上が、該置換基が結合している炭素原子に隣り合う環上の炭素原子と単結合を形成していてもよい。単結合を形成する場合、結果として環上の炭素原子間で二重結合を形成することとなる。すなわち上記一般式（１）で表される化合物は、骨格である環がシクロヘキサンであってもよく、ベンゼン環であってもよく、その他の不飽和環状化合物であってもよい。
【００２７】
式（１）中の点線と実線との二重線は、それぞれ独立に、単結合又は二重結合を示す。該二重線が単結合を示す場合は、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９はそれぞれ独立に、水素原子又は単結合を示す。Ｒ７が単結合である場合は、Ｒ７はＲ１又はＲ６と結合して環を形成し、Ｒ８が単結合である場合は、Ｒ８はＲ２又はＲ３と結合して環を形成し、Ｒ９が単結合である場合は、Ｒ９はＲ４又はＲ５と結合して環を形成する。式（１）中の二重線が二重結合を示す場合は、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は存在しない。
【００２８】
上記一般式（１）で表される化合物は、下記一般式（２）で表される化合物であることが好ましい。
【００２９】
【化４】
2018058791.tif 000005
【００３０】
式（２）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立に、炭素数５、１０若しくは１５のプレニル基、炭素数１〜１５のアルキルカルボニル基、炭素数２〜１５のアルケニルカルボニル基、水酸基で置換されていてもよい炭素数１〜１５のアルキル基、水酸基で置換されていてもよい炭素数２〜１５のアルケニル基、又は水素原子を示し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうちの１つ以上は炭素数５、１０又は１５のプレニル基を示す。Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立に、水素原子又は単結合を示す。Ｒ５が単結合である場合、Ｒ５はＲ１又はＲ４と結合して環を形成する。Ｒ６が単結合である場合、Ｒ６はＲ３又はＲ４と結合して環を形成する。Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうちの２つ以上が炭素数５、１０又は１５のプレニル基であることが好ましく、２つ又は３つが炭素数５、１０又は１５のプレニル基であることが好ましい。
【００３１】
上記一般式（２）中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３がそれぞれ独立に、炭素数５、１０又は１５のプレニル基であり、Ｒ４が炭素数１〜１５のアルキルカルボニル基であり、Ｒ５及びＲ６が水素原子であることがより好ましい。このような化合物としては、例えば、ルプロン、コルプロン、アドルプロン、ポストルプロン、プレルプロン等が挙げられる。ルプロン、コルプロン、アドルプロン、ポストルプロン、プレルプロンは、いずれも上記一般式（２）において、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が炭素数５のプレニル基、すなわちジメチルアリル基であり、Ｒ６が水素原子であり、Ｒ４がそれぞれ３−メチル−１−オキソブチル基、２−メチル−１−オキソプロピル基、２−メチル−１−オキソブチル基、１−オキソプロピル基、４−メチル−１−オキソペンチル基である。
【００３２】
上記一般式（２）において、Ｒ５又はＲ６が単結合であり環を形成している化合物としては、例えば、ルプロンＡ、ルプロンＢ、ルプロンＣ、ルプロンＤ、ルプロンＥ等が挙げられる。ルプロンＡ、ルプロンＢ、ルプロンＣ、ルプロンＤ、ルプロンＥはそれぞれ下記式（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）で表される化合物である。
【００３３】
【化５】
2018058791.tif 000006
【００３４】
上記一般式（２）で表される化合物は、ルプロンＡ、ルプロンＢ、ルプロンＣ、ルプロンＤ、ルプロンＥ、ルプロン、コルプロン、アドルプロン、ポストルプロン及びプレルプロンからなる群から選ばれる少なくとも１種であることが好ましく、ルプロン、コルプロン、アドルプロン、ポストルプロン及びプレルプロンからなる群から選ばれる少なくとも１種であることがより好ましい。
【００３５】
上記一般式（１）で表される化合物は、天然物に由来するものであっても人為的に合成したものであってもよい。ルプロンＡ、ルプロンＢ、ルプロンＣ、ルプロンＤ、ルプロンＥ、ルプロン、コルプロン、アドルプロン、ポストルプロン及びプレルプロンは、例えば、ホップ抽出物を分画又は精製することによって得ることができる。ホップ抽出物としては、例えば、市販のホップエキスを使用してもよい。
【００３６】
ホップからの抽出を行う場合、抽出に供するホップ組織としては、毬花、茎又は葉が好ましい。ホップは、乾燥、凍結、加工、粉砕、選別等の処理が施されたものであってもよく、例えば、ホップペレットを使用してもよい。
【００３７】
ホップの品種は特に制限されず、例えば、チェコ産ザーツ種、ドイツ産ハラタウ・マグナム種、ドイツ産ハラタウ・トラディション種、ドイツ産ペルレ種等のいずれであってもよい。１種を単独で使用しても、２種以上を組み合わせて使用してもよい。
【００３８】
ホップからの抽出は、例えば、ホップを溶媒に浸漬し、これを濾過することによって行うことができる。溶媒としては、例えば、エタノール、メタノールが好適である。溶媒は、１種を単独で使用しても、２種以上を組み合わせて使用してもよい。浸漬の際には超音波処理を行ってもよい。抽出は、超臨界流体（例えば、二酸化炭素）を用いて行うこともできる。得られた抽出物に対しては、公知の方法（例えば、減圧濃縮、凍結乾燥）により濃縮又は乾燥を行ってもよく、更に粉砕等の処理を行ってもよい。
【００３９】
ホップ抽出物からの分画・精製は、公知の方法（例えば、シリカゲルカラムクロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、フラッシュクロマトグラフィー、ＨＰＬＣ、フィルター濾過、遠心分離）により行うことができる。得られた化合物が所望の化合物かどうかは、公知の方法（例えば、質量分析、元素分析、核磁気共鳴分光法、紫外分光法、赤外分光法）により確認することができる。
【００４０】
本実施形態に係るＰＣＳＫ９阻害剤は、上記一般式（１）で表される化合物の１種を単独で含んでもよく、２種以上を含んでもよい。
【００４１】
本実施形態に係るＰＣＳＫ９阻害剤は、上記有効成分を含有するため、当該ＰＣＳＫ９阻害剤を摂取することにより、ＰＣＳＫ９の発現を抑制することができ、その結果、ＬＤＬ受容体の分解を抑制し、ＬＤＬコレステロールのクリアランスを促し、血中のＬＤＬコレステロールを適切な範囲に調節することができる。したがって、本実施形態に係るＰＣＳＫ９阻害剤は、コレステロール代謝改善、コレステロール値調節、ＬＤＬコレステロール値低減、高ＬＤＬコレステロール症改善等に用いることができる。
【００４２】
本実施形態に係るＰＣＳＫ９阻害剤は、固体（例えば、粉末）、液体（水溶性又は脂溶性の溶液又は懸濁液）、ペースト等のいずれの形状でもよく、また、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳剤、軟膏剤、硬膏剤等のいずれの剤形をとってもよい。また、放出制御製剤の形態をとることもできる。本実施形態に係るＰＣＳＫ９阻害剤は、上述の有効成分のみからなるものであってもよい。
【００４３】
上記各種製剤は、上述の有効成分と、薬学的に許容される添加剤（賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、乳化剤、界面活性剤、基剤、溶解補助剤、懸濁化剤等）とを混和することによって調製することができる。
【００４４】
例えば、賦形剤としては、ラクトース、スクロース、デンプン、デキストリン等が挙げられる。結合剤としては、ポリビニルアルコール、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。滑沢剤としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク等が挙げられる。崩壊剤としては、結晶セルロース、寒天、ゼラチン、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、デキストリン等が挙げられる。乳化剤又は界面活性剤としては、Ｔｗｅｅｎ６０、Ｔｗｅｅｎ８０、Ｓｐａｎ８０、モノステアリン酸グリセリン等が挙げられる。基剤としては、セトステアリルアルコール、ラノリン、ポリエチレングリコール、米糠油、魚油（ＤＨＡ、ＥＰＡ等）、オリーブ油等が挙げられる。溶解補助剤としては、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、Ｔｗｅｅｎ８０等が挙げられる。懸濁化剤としては、Ｔｗｅｅｎ６０、Ｔｗｅｅｎ８０、Ｓｐａｎ８０、モノステアリン酸グリセリン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム等が挙げられる。
【００４５】
本実施形態に係るＰＣＳＫ９阻害剤は、医薬品、医薬部外品、食品組成物、食品添加物、飼料、飼料添加物等の製品の成分として使用することができる。食品としては、例えば、パン類、麺類、米類、豆腐、乳製品、醤油、味噌、菓子類、飲料等が挙げられる。飲料としては例えば、水、清涼飲料水、果汁飲料、乳飲料、アルコール飲料、ノンアルコール飲料、スポーツドリンク、栄養ドリンク等が挙げられる。また、健康食品、機能性表示食品、特別用途食品、栄養補助食品、サプリメント又は特定保健用食品等における関与成分として使用することもできる。
【００４６】
本実施形態に係るＰＣＳＫ９阻害剤からなる、又はＰＣＳＫ９阻害剤を含む上記製品は、コレステロール代謝改善用であってよい。コレステロール代謝改善とは、例えば、コレステロール値の調節、ＬＤＬコレステロール値の低減、高ＬＤＬコレステロール症の改善等を包含する意味である。上記製品には、コレステロールを代謝する力を高める旨、コレステロール値を調節する旨、ＬＤＬコレステロール値を低減する旨、高ＬＤＬコレステロール症を予防する旨、コレステロールクリアランスを高める旨等の表示が付されていてもよい。
【００４７】
本実施形態に係るＰＣＳＫ９阻害剤は、ヒトに摂取されても、非ヒト哺乳動物に摂取されてもよい。本実施形態に係るＰＣＳＫ９阻害剤の投与量（摂取量）は、有効成分として、成人１日あたり、体重１ｋｇあたり例えば０．１ｍｇ〜１ｇであってよく、１〜５００ｍｇであってもよい。投与量は、個体の状態、年齢等に応じて適宜決定することができる。
【００４８】
本実施形態に係るＰＣＳＫ９阻害剤は、経口投与（摂取）されてもよく、非経口投与されてもよいが、経口投与されることが好ましい。ＰＣＳＫ９阻害剤は、１日あたりの有効成分量が上記範囲内にあれば、１日１回投与されてもよく、１日複数回に分けて投与されてもよい。
【００４９】
本発明はまた、上記一般式（１）で表される化合物を有効成分として含有する、コレステロール代謝改善用食品組成物を提供する。コレステロール代謝改善用食品組成物は、上記有効成分の１種を単独で含んでもよく、２種以上を含んでもよい。コレステロール代謝改善用食品組成物は、上記有効成分のＰＣＳＫ９阻害作用に基づいてコレステロール代謝を改善するものであってよい。
【００５０】
コレステロール代謝改善用食品組成物は、飲料又は食品であってよい。飲料としては、例えば、清涼飲料水、果汁飲料、乳飲料、アルコール飲料、ノンアルコール飲料、スポーツドリンク、栄養ドリンク等が挙げられる。食品としては、例えば、パン類、麺類、米類、豆腐、乳製品、醤油、味噌、菓子類等が挙げられる。食品組成物は、健康食品、機能性表示食品、特別用途食品、栄養補助食品、サプリメント又は特定保健用食品であってもよい。
【実施例】
【００５１】
以下、実施例に基づいて本発明をより具体的に説明する。ただし、本発明は、以下の実施例により限定されるものではない。
【００５２】
［試験例１］
被検物質として、ルプロン類混合物、ベルガモチン（ＣｈｒｏｍａＤｅｘ社）及び７−メトキシ−５−ゲラニルオキシクマリンを用いた。また、非特許文献１を参考にして、ポジティブコントロールとして塩化ベルベリン水和物（ＴＣＩ社）を用いた。ルプロン類混合物は、ルプロン、コルプロン及びアドルプロンの混合物である。ルプロン類混合物としては、ホップのヘキサン抽出物を分画して得たものを用いた。７−メトキシ−５−ゲラニルオキシクマリンとしては、レモンのフラベド部のヘキサン抽出物を分画して精製したものを用いた。
【００５３】
ＨｅｐＧ２細胞をＤＭＥＭ＋１０％ＦＢＳ培地中で、３７℃、５％ＣＯ２インキュベーター内で培養した。培養したＨｅｐＧ２細胞に、各サンプルを図１に示す数段階の濃度で添加し、ＣＯ２インキュベーター内で２４時間培養した。培養後、培地を回収して遠心分離し、清澄液を発現解析に供した。培養後の細胞は、０．２ｍＬ  ＲＩＰＡバッファーで回収し、氷中で５分間超音波処理した後に遠心分離した。清澄液を回収し、ＢＳＡを標準物質としたＬｏｗｒｙ法にてタンパク質濃度を測定し、統一化した後に発現解析に供した。
【００５４】
ベルベリン、ルプロン類混合物、ベルガモチン及び７−メトキシ−５−ゲラニルオキシクマリンについて、細胞外に分泌されたＰＣＳＫ９タンパク質量をウエスタンブロッティング法によって評価した。結果を図１に示す。縦軸は対照区を１．０とした相対値を示す。いずれの被検物質においても細胞外に分泌されたＰＣＳＫ９タンパク質量は対照区より減少しており、用量依存的なＰＣＳＫ９発現抑制作用が確認された。また、細胞内のＰＣＳＫ９タンパク質量についてもウエスタンブロッティング法によって評価したところ、細胞外の場合と同様に、いずれの被検物質においてもＰＣＳＫ９発現抑制作用が用量依存的に確認された（図示せず）。
【００５５】
［試験例２］
プレニル基を有する化合物のＰＣＳＫ９阻害試験を行った。被検物質として、試験例１で用いたルプロン類混合物、ベルガモチンに加え、２−メチル−２−ペンテン（ＴＣＩ社）、ファルネソール（異性体混合物、ＴＣＩ社）、スクワレン（ＴＣＩ社）、α−トコトリエノール（Cayman Chemical Co. ）、α−マンゴスチン（和光純薬工業社）、リコペン（LKT Laboratories Inc. ）、４−メチル−２−（２−メチル−１−プロペニル）テトラヒドロピラン（シストランス混合物、ＴＣＩ社）、及び２−メチル−１−フェニルプロペン（ＴＣＩ社）を用いた。対照としてＤＭＳＯを用いた。
【００５６】
上記各種被検物質をそれぞれ５μＭの定濃度で用い、試験例１と同様に、細胞外に分泌されたＰＣＳＫ９タンパク質量を測定した。結果を図２に示す。横軸は対照区を１．０とした相対値を示す。２−メチル−２−ペンテン、スクワレン、α−マンゴスチン、ルプロン類混合物、ベルガモチン添加区においてＰＣＳＫ９分泌抑制作用が確認された。特にルプロン類混合物において、高いＰＣＳＫ９分泌抑制作用が確認された。
【図１】
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【図２】
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