(57)【要約】本発明は、pH-依存性溶解度特性を示す活性成分および薬理的に匹敵するその塩に関する、新規な経口投与用の剤形に係り、これはそこに含まれる活性成分のバイオアベイラビリティーを改善する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
実質的に胃のpHとは独立した、活性物質のバイオアベイラビリティーを持ち、pH-依存性溶解度およびpH>5にて1を越える、ドーズナンバーをもつ、該活性物質を経口投与するための薬理組成物であって、a) コア材料と、b) 随意の絶縁剤と、c) 活性物質層と、d) 随意の被覆とから、各場合において合成される、複数のペレットを含み、
該コア材料が、20℃において1g/250mlを越える水溶性を持つ、1種以上の製薬上許容される有機酸からなり、場合によりバインダまたはテクニカルアジュバントを添加したことを特徴とする、上記薬理組成物。
【請求項２】
該製薬上許容される有機酸が酒石酸、フマール酸、琥珀酸、クエン酸、リンゴ酸、グルタミン酸およびアスパラギン酸またはこれらの水和物もしくは酸性塩である、請求項1記載の薬理組成物。
【請求項３】
該製薬上許容される有機酸が酒石酸、フマール酸、クエン酸または琥珀酸である、請求項2記載の薬理組成物。
【請求項４】
該製薬上許容される有機酸が酒石酸である、請求項2記載の薬理組成物。
【請求項５】
該バインダが、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、N-ビニルピロリドンと酢酸ビニルとのコポリマーまたはこれらポリマーの組み合わせからなる群から選択される、上記請求項の何れか1項に記載の薬理組成物。
【請求項６】
該コア材料が、0.4〜1.5mmなる範囲の平均粒径を持つ、上記請求項の何れか1項に記載の薬理組成物。
【請求項７】
該絶縁層が、水溶性ポリマー、場合により添加された適当な可塑剤、分離剤および顔料からなる、請求項1記載の薬理組成物。
【請求項８】
該水溶性ポリマーが、アラビアガム、またはヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、N-ビニルピロリドンと酢酸ビニルとのコポリマーまたはこれらポリマーの組み合わせからなる群から選択される、部分的にまたは完全に合成されたポリマーからなる、請求項7記載の薬理組成物。
【請求項９】
該被覆が、フィルム-形成剤、可塑剤および場合により顔料からなる、請求項1記載の薬理組成物。
【請求項１０】
該活性物質を含有するペレットが、ハードカプセル中に充填されている、上記請求項の何れか1項に記載の薬理組成物。
【請求項１１】
pH-依存性溶解特性およびpH>5にて、ドーズナンバー>>1をもつ、活性物質または生理的に許容されるその塩の1種を含む、経口投与用の薬理組成物の製法であって、
a) 20℃にて1g/250mlを越える水溶性を持つ、1種以上の製薬上許容される有機酸と、場合により添加されるバインダまたはテクニカルアジュバントとから、ペレット化プレート上で、パン法により、あるいは押出/球状化法により、コア材料を合成する工程、
b) 該コア材料に、1種以上の製薬上許容される水溶性ポリマー、場合により添加された可塑剤、分離剤および顔料からなる絶縁層を適用する工程、
c) バインダおよび場合により分離剤を含む分散体から、該活性物質を適用し、かつ同時にまたはその後に乾燥して、分散剤を除去する工程、
d) フィルム-形成剤、可塑剤および場合により顔料を含む被覆を、場合により適用する工程、および
e) このようにして得た、該活性物質を含むペレットを、ハードカプセルに充填する工程を含むことを特徴とする、上記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、pH-依存性の溶解特性を持つ、塩基性の活性物質およびその塩を、経口投与するための処方物に関するものである。
本発明の目的にとって「活性物質」なる用語は、任意の薬理的に活性な化合物を意味し、該化合物自体またはその製薬上許容される塩は、弱塩基であり、また1〜7.5なる範囲のpHにおいては、pH-依存性の溶解特性(酸性条件下でより高い溶解度を持ち、かつ塩基性条件下でより低い溶解度を持つ)を示す。実際、これら活性物質において、そのバイオアベイラビリティーは、経口投与した場合、胃腸管内のpHに依存する可能性がある。好ましくは、本発明の意味における活性物質は、単一のまたは多数のプロトン化の結果として、低pHレベルでは比較的高い飽和溶解度を持つが、5を越えるpHでは、該中性化合物は、欧州薬局方(European Pharmacopoeia)における定義(飽和溶解度100μg/ml未満)に従えば、見かけ上不溶性である。
【０００２】
本発明による経口処方は、活性物質として、例えばエチル3-[(2-{[4-(ヘキシルオキシカルボニルアミノイミノメチル)-フェニルアミノ]-メチル}-1-メチル-1H-ベンズイミダゾール-5-カルボニル)-ピリジン-2-イル-アミノ]-プロピオネート(WO98/37075)、BIBU 104 (レフラダフィバン(Lefradafiban); (3S,5S)-5-[[4'-(N-メトキシカルボニルアミジノ)-4-ビフェニルイル]-オキシメチル]-3-[(メトキシカルボニル)メチル]-2-ピロリジノン; EP 0 483 667)、(R)-2-[4-(N-フェニルカルボニルアミジノ)-フェニルアミノメチル]-1-メチル-5-[1-(n-プロピルオキシカルボニルメチルアミノ)-1-(ピロリジノカルボニル)-エチル]-ベンズイミダゾール(WO 01/47896)、テルミサルタン(telmisartan)、DTTX 30SE、BIBV 308SE (ターボグレル(terbogrel))、ブロムヘキシン、BIIL 284 (アメルバント(amelubant); 4-((3-((4-(1-(4-ヒドロキシフェニル)-1-メチルエチル)フェノキシ)メチル)ベンジル)-オキシ)ベンゼンカルボキシイミドアミド-N-エチルカルボキシレート; WO 96/02497)、フリバンセリン(flibanserin) (1[2-(4-(3-トリフルオロメチル-フェニル)ピペラジン-1-イル)エチル]-2,3-ジヒドロ-1H-ベンズイミダゾール-2-オン; EP-A-526434)、4-(4-(2-ピロリルカルボニル)-1-ピペラジニル)-3-トリフルオロメチルベンゾイルグアニジン(WO 00/17176)、ピモベンダン(pimobendane)またはこれら化合物の製薬上許容される塩の1種(例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、メシラート、硫酸塩およびリン酸塩)を含むことができる。
【０００３】
ある化合物の溶解度は、周囲温度にて、問題とする媒体中に過剰量の該化合物を分散させ、これを、所定期間(約1〜24時間)に渡り、平衡に達するまで、激しく振ることにより測定できる。濾過後、得られる透明な濾液のpHを測定し、溶解した該物質の濃度を分光光度法または他の適当な分析法によって測定する。
該活性物質の、pH-依存性の溶解度特性は、公知組成物の固体製剤として、経口投与した場合、その用量に依存して、該活性物質が、患者の胃中で、その胃中に存在する液体が、十分に低いpHを持つ場合にのみ、完全に溶解することを意味し得る。該胃の中のpH値が高い場合(これは、正常な生理的変動、疾病または胃のpHを高める医薬組成物の同時投薬の結果であり得る)、該活性物質は、完全には溶解しない可能性がある。
該活性物質の用量が、そのバイオアベイラビリティーに及ぼす作用は、 (次元を持たない)ドーズナンバー(Do)という概念によって、定量的に記載することができる。このドーズナンバーとは、以下のように定義される：
Do = (Mo/Vo)/Cs
ここで、Moは用量(mg)であり、Voは存在する液体の体積(ml)であり、またCsは飽和溶解度(mg/ml)である。
【０００４】
今日では、世間一般に受け入れられている仮説に従えば、ある製剤を摂取した後の胃中の液体体積は、約250mlである(レーベンバーグ(Lobenberg), R.,アミドン(Amidon), G.L.: 最近のバイオアベイラビリティー、生物学的等価性および生体製剤学的分類系、国際的調節基準に対する、新たな科学的研究(Modern bioavailability, bioequivalence and biopharmaceutics classification system, New scientific approaches to international regulatory standards; Eur. J. Pharm. Biopharm., 2000, 50: 3-12)。
1未満のドーズナンバーを与える薬用量においては、何等溶解度の問題は起らない。1という臨界的なドーズナンバーを越えた場合にのみ、溶解度に大幅な低下が見られ、結果的にバイオアベイラビリティーも低下する。概して、実際に問題となる範囲は、1をかなり越えるドーズナンバーを与える用量においてのみ開始する。というのは、吸収過程により、該溶解した物質の少なくとも幾分かが、その平衡から定期的に排除されるからである。
【０００５】
本発明の経口処方物中に含まれる該活性物質は、pH<2(即ち、十分に酸性の胃)におけるその溶解度に基づいて、該ドーズナンバーに関して1未満の値を持ち、またpH>5(即ち、胃酸が全くないか、あるいは殆ど消費された低い胃酸濃度) におけるその溶解度に基づいて、該ドーズナンバーに関して、1を大幅に越える値を持ち、即ち本発明による経口投与処方物に関して、該活性物質の溶解度の、pH-依存性の程度および活性物質の用量の大きさ両者が、興味の対象となる。
従って、この種の溶解度特性を持つ、活性物質の場合における、胃中のpH上昇は、該活性物質の実質的に低下されたバイオアベイラビリティー(全体として有害な吸収
になることさえある)へと導き、これは、幾つかの場合には、治療の失敗をもたらす可能性がある。一般に、高い胃中のpHを持つ患者における、バイオアベイラビリティーの低下を補償するために、該活性物質の用量を高めることは、活性物質の無駄および該患者に対するより大きな負担および関連する副作用、例えば薬物安全性の基礎に及ぼす影響、あるいは全く無にされることさえある薬物の安全性のために、時として望ましからぬことである。
【０００６】
本発明の目的は、pH-依存性溶解度特性を持つ、活性物質を経口投与するための、薬理組成物を提供することにあり、この組成物は該活性物質の、全くpH-独立性のバイオアベイラビリティーを保証する。
驚いたことに、固体の経口投与用の処方物における、20℃にて1g/250mlを越える、好ましくは25℃において1g/160mlを越える、水に対する溶解度を持つ、製薬上許容される有機酸の使用が、高い胃中pHを持つ患者においてさえ、pH-依存性溶解度特性を持つ活性物質の、十分なバイオアベイラビリティーを保証できることを見出した。
本発明の目的にとって、製薬上適当な酸は、例えば酒石酸、フマール酸、琥珀酸、クエン酸、リンゴ酸、グルタミン酸およびアスパラギン酸またはこれらの水和物もしくは酸性塩である。本発明の目的にとって、特に適した製薬上許容される有機酸は酒石酸、フマール酸、クエン酸または琥珀酸であり、特に酒石酸、フマール酸および琥珀酸である。
【０００７】
多くの活性物質が、多かれ少なかれ、酸および痕跡量の水の存在下で、加水分解により分解される傾向を示す。個々の場合において、該活性物質と有機酸との直接的化学的な反応を、例えばエステル形成を生じる可能性がある。保存中に安定性を維持する物質を開発する場合、該処方物中の該活性物質から、該有機酸を、空間的に分離することが有利である。該処方物の投与後においてのみ、該有機酸は溶解し、かつ酸性のマイクロクライメート(microclimate)を生成し、そこでは該活性物質が溶解可能である。
本発明の更なる目的は、溶解度を改善する目的で、酸を使用する代わりに、酸と該活性物質との望ましからぬ相互作用を回避することにある。
個々の粒子が、図1に示すような構造を持つ、多粒子処方物が、活性物質と有機酸との上記の好ましい空間的分離にとって、特に適している。
【０００８】
図1は、ペレットを貫通する断面によって、該薬理的組成物を模式的に示すものであり、該ペレットは、本発明に従う薬理組成物を製造するのに適している。このペレットのほぼビーズ型/球状のコア部分は、該製薬上許容される有機酸を含むか、または該酸からなる。これは、場合によりある層の存在を伴い、該層は、該酸のコアと該活性物質とを分離する、所謂絶縁層である。従って、該絶縁層は、あるいは該絶縁層のない場合の該コア材料は、該活性物質層で覆われ、該活性物質層も球状であり、該ペレットの耐摩耗性および保存寿命を高めるように、それ自体ある被覆で覆われている。
【０００９】
使用する該コア材料は、20℃における水に対する溶解度が>1g/250mlの、製薬上許容される有機酸、例えば酒石酸、フマール酸、琥珀酸、クエン酸、リンゴ酸、グルタミン酸およびアスパラギン酸並びにこれらの水和物もしくは酸性塩であり、これに、場合により1〜10質量％、好ましくは3〜6質量％なる範囲の、少量の適当なバインダを添加する。バインダの使用は、例えば出発物質としての酸が、パン形成法(pan build-up process)により作られる場合に、必要である。使用するこの方法が、押出しまたは球状化である場合、他のテクニカルアジュバント、例えばミクロクリスタリンセルロースが、バインダの代わりに必要とされる。十分に狭い範囲の粒径を持つものとして得られる場合には、純粋な(100％)酸を出発物質として使用することも可能である。使用する該製薬上許容される有機酸は、好ましくは酒石酸、フマール酸、クエン酸または琥珀酸であり、特に酒石酸が好ましい。バインダとしては、アラビアゴム、またはヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、N-ビニルピロリドンと酢酸ビニルとのコポリマーまたはこれらポリマーの組み合わせからなる群から選択される、部分的にまたは完全に合成されたポリマーを使用することができ、アラビアゴムが好ましい。該球状コア材料は、好ましくは0.4〜1.5mmなる範囲の平均粒径を持つ。該製薬上許容される有機酸の含有率は、該コア材料において、30〜100％なる範囲にある。
【００１０】
完成された製品の耐久性を高めるために、該活性物質を適用する前に、水溶性の、製薬上許容されるポリマーを主成分とする絶縁層で、該コア材料を被覆することが有利である。このような水溶性ポリマーの例は、アラビアゴム、またはヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、N-ビニルピロリドンと酢酸ビニルとのコポリマーまたはこれらポリマーの組み合わせからなる群から選択される、部分的にまたは完全に合成されたポリマーを含む。アラビアゴムまたはヒドロキシプロピルメチルセルロースを使用することが好ましい。所望により、該水溶性の、製薬上許容されるポリマーによるこの被覆操作は、適当な可塑剤、分離剤、および顔料、例えばトリエチルシトレート、トリブチルシトレート、トリアセチン、ポリエチレングリコール(可塑剤)、タルク、珪酸(分離剤)、二酸化チタンまたは酸化鉄(顔料)を添加して、実施することができる。
【００１１】
該活性物質層は、該活性物質、並びにバインダおよび場合により分離剤を含む。適当なバインダは、例えばヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、N-ビニルピロリドンと酢酸ビニルとのコポリマーまたはこれらポリマーの組み合わせを含む。好ましくは、ヒドロキシプロピルセルロースまたはN-ビニルピロリドンと酢酸ビニルとのコポリマーを使用する。分離剤、例えばタルク、ステアリン酸マグネシウムまたは珪酸は、この処理中の粒子の凝集を防止するのに役立つ。該好ましい活性物質の含有率は、該薬理組成物の60％以下、好ましくは50％以下である。
【００１２】
カプセルに充填する際の、あらゆる高い磨耗を減じ、および/または保存寿命を高めるように機能する、該最外層は、製薬上公知のフィルム-形成剤、可塑剤および/または場合により顔料からなる。適当なフィルム-形成剤は、例えばヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、アクリル酸およびメタクリル酸およびそのエステルのポリマーまたはコポリマー、またはこれらポリマーの組み合わせを含む。適当な可塑剤は、特にトリエチルシトレート、トリブチルシトレート、トリアセチンまたはポリエチレングリコールを含む。使用する該顔料は、例えば二酸化チタンまたは酸化鉄顔料であり得る。好ましくは、該外側被覆は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよび/またはメチルセルロースからなり、場合により可塑剤としてポリエチレングリコールを添加する。
該ペレットは、以下に記載する方法によって調製することができる。
【００１３】
該酸含有コア材料は、使用する特定の有機酸の結晶、またはより有利には、大量の有機酸を含む、所定のサイズを持つほぼ球形の粒子からなり、これらは公知のおよび製薬技術において確立された方法によって製造できる。該コア材料は、特にパン法(pan methods)により、ペレット化プレート上で、あるいは押出し/球状化技術により製造できる。次いで、このようにして得た該コア材料を、篩別により所定の径を持つ部分に分割することができる。適当なコア材料は、0.4〜1.5mmなる範囲、好ましくは0.6〜0.8mmなる範囲にある。
第一に、該絶縁層を、この酸含有コア材料に適用する。これは、公知の方法、例えば流動床内で、被覆パン内で、または公知のフィルム被覆装置内で、水溶性の製薬上許容されるポリマーを含み、場合により可塑剤、分離剤および/または顔料を添加した水性分散体を適用することにより実施できる。必要ならば、この生成物を、次に再度篩に掛けることもできる。
【００１４】
次いで該活性物質を、バインダおよび場合により分離剤を含む分散体を用いて、適用する。この揮発性分散剤は、乾燥によって、この工程中にまたはその完了後に除去できる。この分散体における適当なバインダは、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、N-ビニルピロリドンと酢酸ビニルとのコポリマーまたはこれらポリマーの組み合わせを含む。好ましくは、ヒドロキシプロピルセルロースまたはN-ビニルピロリドンと酢酸ビニルとのコポリマーを使用する。適当な分離剤は、例えばタルク、ステアリン酸マグネシウムまたは珪酸を含み、好ましくはタルクを使用する。該分散剤は、例えば水、エタノール、2-プロパノール、アセトンまたはこれら溶媒相互の混合物であり得る。該コア材料への、該活性物質の適用は、製薬技術において公知の、確立された方法、例えば被覆パン中で、公知のフィルム被覆装置内で、または流動床技術によって実施できる。次いで、更に篩別を行うことも可能である。
【００１５】
カプセルに移す際のあらゆる高い磨耗を減じ、あるいは保存寿命を高めるために、この系を、最終的に製薬上公知のフィルム形成剤、可塑剤および随意の顔料を含む被膜で覆うことができる。これは、上記の絶縁層の適用に関する説明において、既に述べたような公知の方法で行うことができる。
平均径0.4〜1.5mmのコア材料を使用する場合、上記方法は、活性物質を含むペレットを生成し、該ペレットを、次いで例えばハードカプセルに充填することができる。そのために、所定の薬用量に相当する、これら単位の数を、標準的なカプセル充填装置内で、ハードカプセルに充填する。適当なハードカプセルは、例えば硬質ゼラチンカプセル、またはヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)製のハードカプセルを含む。本発明の薬理組成物の好ましい活性物質の含有率は、60％以下、好ましくは50％以下である。
特に述べない限り、指定した％は、常に質量％である。該活性物質の含有率に関するあらゆるデータは、特に述べない限り、該活性物質塩基に関連する。
【００１６】
既に述べたように、本発明による薬理組成物は、そこに含まれる該活性物質の改善されたバイオアベイラビリティーを示す。例えば、実施例1および2に従う薬理組成物を、このバイオアベイラビリティーに関する改善についてテストした。
臨床実験の結果
この目的で、実施例1に従って製造した処方物を、全体で15名の志願者について、そのバイオアベイラビリティーにつき、臨床的にテストした。該処理の一分岐において、該志願者は、如何なる前処理もなしに、空腹状態にある胃に口(経口)経由で、該組成物を与えた。該処理の別の分岐では、同一の志願者に、該組成物の経口投与前に、口を通して3日間に渡り、40mgのパントプラゾールb.i.d.(1日に2回)を用いて前処理を施し、胃中のpHを高めたが、このパントプラゾールによる処理は、本発明の処方物の投与中も継続した。
【００１７】
この吸収の程度は、尿中に排泄される、活性な代謝物質：3-[(2-{[4-(アミノイミノメチル)-フェニルアミノ]-メチル}-1-メチル-1H-ベンズイミダゾール-5-カルボニル)-ピリジン-2-イル-アミノ]-プロピオン酸の量を測定することにより決定した。
パントプラゾールによる前処理後の相対的なバイオアベイラビリティーは、如何なる前処理も施さずに投与した群と比較して、平均94％であった。
投与の比較条件下では、公知技術に従って開発し、かつ製造した、50mgの活性物質を含み、かつ水溶性の有機酸を含まない錠剤の、対応するパントプラゾールによる前処理後の、相対的なバイオアベイラビリティー(血漿中濃度/時間曲線下の面積に基く)は、18％である。以下のリストが、使用した錠剤の正確な組成を示すものである：
【００１８】
【表１】
2005526738.tif 000002
【００１９】
このように、本発明による処方物を使用することによって、該バイオアベイラビリティーを、約5倍改善した。
実施例2に従って製造した処方物も、全体として15名の志願者について、該処方物のバイオアベイラビリティーにつき、臨床的にテストした。該処理の一分岐において、該志願者は、如何なる前処理もなしに、空腹状態にある胃に口を通して、該組成物を与えた。該処理の別の分岐では、同一の志願者に、該組成物の経口投与前に、口を通して3日間に渡り、40mgのパントプラゾールb.i.d.を用いて前処理を施し、胃中のpHを高めたが、このパントプラゾールによる処理は、本発明の処方物の投与中も継続した。
【００２０】
この吸収の程度は、尿中に排泄される、活性な代謝物質：3-[(2-{[4-(アミノイミノメチル)-フェニルアミノ]-メチル}-1-メチル-1H-ベンズイミダゾール-5-カルボニル)-ピリジン-2-イル-アミノ]-プロピオン酸の量を測定することにより決定した。
パントプラゾールによる前処理後の相対的なバイオアベイラビリティーは、如何なる前処理も施さずに投与した群と比較して、平均76％であった。
投与の比較条件下では、公知技術に従って開発し、かつ製造した、50mgの活性物質を含み、かつ水溶性の有機酸を含まない錠剤の、対応するパントプラゾールによる前処理後の、相対的なバイオアベイラビリティー(血漿中濃度/時間曲線下の面積に基く)は、18％である。以下のリストが、使用した錠剤の正確な組成を示すものである：
【００２１】
【表２】
2005526738.tif 000003
【００２２】
このように、本発明の処方物を使用することによって、該活性物質のバイオアベイラビリティーは、約4倍改善された。
図2は、パントプラゾールを投与し、またはこれを投与せずに、本発明による処方物のバイオアベイラビリティーと、従来の錠剤のそれとを比較して、図式的に示したものである。
1カプセル当たりの活性物質の量は、好ましくは1日あたり1〜2カプセルの摂取が、所定の活性を達成するのに十分であるように選択される。
酸対活性物質の好ましい比は、約1:1〜約20:1である。該系が依然として機能を発揮できる、該比の理論的な下限は、1モルの活性物質に対して、1当量の酸である。約20:1(酸対活性物質)という上限は、所定の薬用量(1カプセル当たりのペレット数)における、該処方物のサイズにより決定される。
【００２３】
性能調節において、インビトロでの放出は、USP法によって測定する。該薬物を、900mlの体積中で放出させ、そのpHを、「シンク条件(sink conditions)」、即ち該活性物質全体が、この900ml中に可溶となるように選択する。このインビトロ法は、ヒトにおける吸収の予測を可能としない。というのは、患者は、一般に約200mlの液体と共に該薬物を摂取しており、また酸性でない胃の中では、その溶解度は、しばしばその用量の一部にとって十分であるに過ぎないからである。酸性でない胃は、より高齢患者の母集団の約25％において見られ、またしばしばH2-ブロッカーまたはプロトンポンプ阻害剤との同時服用により引起される。
【００２４】
従って、本発明の範囲内において、経験的なテスト法が開発され、これはヒト、特に酸性でない胃におけるインビボ性能との良好な相関性を持つ。この手順において、ヒトにおいて使用する最大用量の調剤を、生理的に適切な範囲、即ちpH1〜7における、該活性物質の低溶解度を示すpH条件にあるバッファー中で、200mlの体積(これはヒトにおける用量に相当する)内で放出させる。酸性でない胃のpHレベルにおいても、この方法を利用して、ある程度の正確さで、吸収性を予測できるので、これは調剤を最適化するのに適している。多くの可能なレシピから、各場合における最も好ましい処方を見分けるために、最大の放出および/または時間0から該放出の完了までの、放出曲線(AUC)下部の面積を、関連特性として利用できる。
このことは、処方例C2(酸スターターを用いない基準)およびC5(スターターとして酒石酸を用いた、本発明の実施例)の比較実験から明らかである(図3および表3)。
表3では、本発明による実施例C5(活性物質：フリバンセリン(flibanserin)；表11参照)で観測された、インビトロ放出およびAUCの特徴並びに最大放出を、pH5.0の0.005モルクエン酸バッファー中の、同様な含有率の活性物質を用いた、参考型と比較して示す。
【００２５】
【表３】
2005526738.tif 000004
*: この値は、該放出の終了時点におけるpH値である。
【００２６】
以下の表4では、本発明による実施例C4〜C15(活性物質：フリバンセリン；表11参照)で観測された、インビトロ放出およびAUCの特徴並びに最大放出を、参考型C1〜C3と比較して示す。
【００２７】
【表４】
2005526738.tif 000005
*: この値は、該放出の終了時点におけるpH値である。
【００２８】
結果の解釈
本発明による実施例全てが、参考の処方物よりも優れていることは明白である。
活性物質の含有率が増大するにつれて、該インビトロ放出は、幾分減少する。というのは、酸の量が、活性物質の同様な用量に対して、少なくなるからである。
あらゆる酸および他の賦形剤は、一般的に適当であるが、匹敵する活性物質濃度において、幾分異なる放出特性を示す。実施例C4、C5、C7、C8、C10およびC14は、本発明の目的にとって特に適したものであることが明らかになった。
以下の表5では、本発明による実施例C18〜C31(活性物質：ピモベンダン；表12参照)で観測された、インビトロ放出およびAUCの特徴並びに最大放出を、参考型C16〜C17と比較して示す。pH5.0に調節した、0.005モルのクエン酸バッファーをテスト媒体として用いた。
【００２９】
【表５】
2005526738.tif 000006
*: この値は、該放出の終了時点におけるpH値である。
【００３０】
結果の解釈
本発明による実施例全てが、参考の処方物よりも優れていることは明白である。
活性物質の含有率が増大するにつれて、該インビトロ放出は、幾分減少する。というのは、酸の量が、活性物質の同様な用量に対して、より少なくなるからである。
あらゆる酸および他の賦形剤は、一般的に適当であるが、匹敵する活性物質濃度において、幾分異なる放出特性を示す。実施例C18、C19、C21、C24、C27、C28、C30およびC31は、本発明の目的にとって特に適したものであることが明らかになった。
以下の表6では、本発明による実施例C35〜C52(活性物質：レフラダフィバン(lefradafiban)；表13参照)で観測されたインビトロ放出およびAUCの特徴並びに最大放出を、参考型C32〜C34と比較して示す。pH5.0に調節した、0.005モルのクエン酸バッファーをテスト媒体として用いた。
【００３１】
【表６】
2005526738.tif 000007
*: この値は、該放出の終了時点におけるpH値である。
【００３２】
結果の解釈
本発明による実施例全てが、参考処方物よりも優れていることは明白である。
活性物質の含有率が増大するにつれて、該インビトロ放出は、幾分減少する。というのは、酸の量が、活性物質の同様な用量に対して、より少なくなるからである。
あらゆる酸および他の賦形剤は、一般的に適当であるが、匹敵する活性物質濃度において、幾分異なる放出特性を示す。実施例C35、C36、C38、C41、C42、C44、C45、C47、C48、C50、C51およびC52は、本発明の目的にとって特に適したものであることが明らかになった。
以下の表7では、本発明による実施例C54〜C59(活性物質：アメルバント(amelubant)；表14参照)で観測されたインビトロ放出およびAUCの特徴並びに最大放出を、参考型C53と比較して示す。この活性物質の溶解度は極めて低いので、水/メタノールの混合物をテスト媒体として用いた。
【００３３】
【表７】
2005526738.tif 000008
*: この値は、該放出の終了時点におけるpH値である。
【００３４】
結果の解釈
本発明による実施例全てが、参考処方物よりも優れていることは明白であるが、この場合、琥珀酸スターターペレットは、酒石酸およびフマール酸よりも悪くなっている。
実施例C54~C57は、本発明の目的にとって特に適していることが明らかになった。
以下の表8では、本発明による実施例C60〜C61(活性物質：テルミサルタン(telmisartan)；表15参照)で観測されたインビトロ放出およびAUCの特徴並びに最大放出を、参考型C58およびC59と比較して示す。pH5.0に調節した、0.0005モルのクエン酸バッファーをテスト媒体として用いた。
【００３５】
【表８】
2005526738.tif 000009
*: この値は、該放出の終了時点におけるpH値である。
【００３６】
結果の解釈
本発明による実施例全てが、参考処方物よりも優れていることは明白である。
活性物質の含有率が増大するにつれて、該インビトロ放出は、幾分減少する。というのは、酸の量が、活性物質の同様な用量に対して、より少なくなるからである。
実施例C60およびC61は、本発明の目的にとって特に適したものであることが明らかになった。
【実施例】
【００３７】
以下の実施例は、本発明を例示するものである。
実施例1
【００３８】
【表９】
2005526738.tif 000010
*: 50mgのエチル3-[(2-{[4-(ヘキシルオキシカルボニルアミノイミノメチル)-フェニルアミノ]-メチル}-1-メチル-1H-ベンズイミダゾール-5-カルボニル)-ピリジン-2-イル-アミノ]-プロピオネート(活性物質の塩基型)に相当する。
【００３９】
a) 酒石酸を含むコア材料の調製
組成：1質量部のアラビアゴム；20質量部の酒石酸。
1質量部のアラビアゴムを、50℃にて精製水4質量部中に、撹拌しながら溶解する。次いで、5質量部の酒石酸を、撹拌しつつこの溶液に溶解する。
平均粒径0.4〜0.6mmの、酒石酸結晶8.3質量部を、空気導入口および排気口を備えた、適当な被覆装置内に配置し、該容器を回転可能に取り付ける。空気導入口温度60-80℃にて、該酒石酸結晶に、間欠的な操作で、酒石酸−アラビアゴム溶液を噴霧し、全体として6.7質量部の粉末状の酒石酸を散布して、ほぼ球形の粒子を生成する。
次に、この球状酒石酸コア材料を、空気導入口温度60-80℃にて、回転する容器内で乾燥させる。
このコア材料を、名目上のメッシュサイズ0.6〜0.8mmを持つ、有孔プレートを備えた、タンブラー型篩別装置を用いて分別する。0.6〜0.8mmなる範囲の粒径を持つ、該生成物画分を、後の処理において使用する。
【００４０】
b) 酒石酸を含むコア材料の単離
組成：23質量部の酒石酸含有コア材料；1質量部のアラビアゴム；2質量部のタルク。
1質量部のアラビアゴムを、6.7質量部の96％エタノールと13.5質量部の精製水との混合物に、撹拌しつつ溶解させる。次いで、2質量部のタルクを、撹拌しつつこの溶液に分散させる。
流動床加工プラントにおいて、23質量部の酒石酸−含有コア材料を、下方床(under-bed)噴霧法により、空気導入温度35-40℃にて、該アラビアゴム/タルク分散液で噴霧する。
次いで、単離した酒石酸含有コア材料を、循環空気乾燥機内で、40℃にて8時間乾燥する。
塊状物を除去するために、該乾燥し、単離した酒石酸含有コア材料を、名目上のメッシュサイズ1.0mmを持つスクリーンを通して、篩別する。この材料の画分(粒径1mm未満)を、更に処理する。
【００４１】
c) 活性物質層の調製
組成：91質量部の単離された酒石酸含有コア材料；5質量部のヒドロキシプロピルセルロース；4質量部のタルク；25質量部の活性物質(BIBR 1048のメシラート)。
ヒドロキシプロピルセルロースを、撹拌しつつ168質量部の2-プロパノール中に溶解し、次いで該活性物質およびタルクを、撹拌しながらこの溶液に分散させる。
流動床加工プラントにおいて、91質量部の酒石酸含有コア材料を、下方床(under-bed)噴霧法により、空気導入温度20-30℃にて、該活性物質含有分散液で噴霧する。
次いで、該活性物質を含む生成するペレットを、循環空気乾燥機で、35℃にて、8時間乾燥する。
塊状物を除去するために、該活性物質含有ペレットを、名目上のメッシュサイズ1.25mmを持つスクリーンを通して、篩別する。この製品の画分(粒径1.25mm未満)を、更に処理する。
d) カプセルへの充填
活性物質の塩基50mgに相当する、所定量の活性物質含有ペレットを、カプセル充填装置を用いて、サイズ1のハードゼラチンカプセルに充填する。
実施例2
【００４２】
【表１０】
2005526738.tif 000011
*: 50mgのエチル3-[(2-{[4-(ヘキシルオキシカルボニルアミノイミノメチル)-フェニルアミノ]-メチル}-1-メチル-1H-ベンズイミダゾール-5-カルボニル)-ピリジン-2-イル-アミノ]-プロピオネート(活性物質の塩基型)に相当する。
【００４３】
a) 酒石酸を含むコア材料の調製
組成：1質量部のアラビアゴム；20質量部の酒石酸。
1質量部のアラビアゴムを、50℃にて精製水4質量部中に、撹拌しながら溶解する。次いで、5質量部の酒石酸を、撹拌しつつこの溶液に溶解する。
平均粒径0.4〜0.6mmの、酒石酸結晶8.3質量部を、空気導入口および排気口を備えた、適当な被覆装置内に配置し、該容器を回転可能に取り付ける。空気導入口温度60-80℃にて、該酒石酸結晶に、間欠的な操作で、酒石酸−アラビアゴム溶液を噴霧し、全体として6.7質量部の粉末状の酒石酸を散布して、ほぼ球形の粒子を生成する。
次に、この球状酒石酸コア材料を、空気導入口温度60-80℃にて、回転する容器内で乾燥させる。
このコア材料を、名目上のメッシュサイズ0.6〜0.8mmを持つ、有孔プレートを備えた、タンブラー型篩別装置を用いて分別する。0.6〜0.8mmなる範囲の粒径を持つ、該生成物画分を、後の処理において使用する。
【００４４】
b) 酒石酸を含むコア材料の単離
組成：23質量部の酒石酸含有コア材料；1質量部のアラビアゴム；2質量部のタルク。
1質量部のアラビアゴムを、6.7質量部の96％エタノールと13.5質量部の精製水との混合物に、撹拌しつつ溶解させる。次いで、2質量部のタルクを、撹拌しつつこの溶液に分散させる。
流動床加工プラントにおいて、23質量部の酒石酸−含有コア材料に、下方床噴霧法により、空気導入温度35-40℃にて、該アラビアゴム/タルク分散液を噴霧する。
次いで、単離した酒石酸含有コア材料を、循環式空気乾燥機内で、40℃にて8時間乾燥する。
塊状物を除去するために、該乾燥し、単離した酒石酸含有コア材料を、名目上のメッシュサイズ1.0mmを持つスクリーンを通して、篩別する。この製品の画分(粒径1mm未満)を、更に処理する。
【００４５】
c) 活性物質層の調製
組成：57質量部の単離された酒石酸含有コア材料；10質量部のヒドロキシプロピルセルロース；8質量部のタルク；50質量部の活性物質(BIBR 1048のメシラート)。
ヒドロキシプロピルセルロースを、撹拌しつつ335質量部の2-プロパノール中に溶解し、次いで該活性物質およびタルクを、撹拌しながらこの溶液に分散させる。
流動床加工プラントにおいて、91質量部の単離した酒石酸含有コア材料を、下方床噴霧法により、空気導入温度20-30℃にて、該活性物質含有分散液で噴霧する。
次いで、該活性物質を含む生成するペレットを、循環式空気乾燥機内で、35℃にて、8時間乾燥する。
塊状物を除去するために、該活性物質含有ペレットを、名目上のメッシュサイズ1.25mmを持つスクリーンを通して、篩別する。この製品の画分(粒径1.25mm未満)を、更に処理する。
d) カプセルへの充填
活性物質の塩基50mgに相当する、所定量の活性物質含有ペレットを、カプセル充填装置を用いて、サイズ2のハードゼラチンカプセルに充填する。
【００４６】
更なる実施例
以下の実施例の調製は、5段階で行われる。
a: 酸‐含有コア材料の調製；
b: 該酸‐含有コア材料の単離；
c: 活性物質層の調製；
d: 酸‐含有コアからなるペレットの単離；および
e: カプセルへの充填。
該段階bは、酸と活性物質層との間に何らかの不相溶性がある場合には、全く本質的なものであり、さもないと、この段階を省略して、この製造法を単純化することができる。該段階dは、該活性物質層の機械的安定性が、該活性物質を完全に溶解するには不十分である場合には、必要となる。
a: 酸‐含有コア材料の調製例
実施例a1: 酒石酸含有コア材料の調製
組成：1質量部のアラビアゴム；20質量部の酒石酸。
【００４７】
1質量部のアラビアゴムを、50℃にて精製水4質量部中に、撹拌しながら溶解する。次いで、5質量部の酒石酸を、撹拌しつつこの溶液に溶解する。
平均粒径0.4〜0.6mmの、酒石酸結晶8.3質量部を、空気導入口および排気口を備えた、適当な被覆装置内に配置し、該容器を回転可能に取り付ける。空気導入口温度60-80℃にて、該酒石酸結晶に、間欠的な操作で、酒石酸−アラビアゴム溶液を噴霧し、全体として6.7質量部の粉末状の酒石酸を散布して、ほぼ球形の粒子を生成する。
次に、この球状酒石酸コア材料を、空気導入口温度60-80℃にて、回転する容器内で乾燥させる。
このコア材料を、名目上のメッシュサイズ0.6〜0.8mmを持つ、有孔プレートを備えた、タンブラー型篩別装置を用いて分別する。0.6〜0.8mmなる範囲の粒径を持つ、該生成物画分を、後の処理において使用する。
【００４８】
実施例a2: フマール酸を含むコア材料の調製
組成：3質量部のコリドン(Kollidon) K25；20質量部のアビセル(Avicel) PH101；77質量部のフマール酸。
77質量部のフマール酸、20質量部のアビセルPH 101および3質量部のコリドンK25を、ジャイロホイール式ミキサ中で、15分間混合する。次に、この粉末混合物を、二軸スクリュー計量装置に移す。この混合物を、約1 kg/hなる速度で、プロミネント(ProMinent)計量ポンプで添加される水と共に、ウエルナー＆フレイドラー(Werner & Pfleiderer) 37/18D型の二軸スクリュー押出機(またの適当な型の押出機)に導入する。この水は、該押出機における名目上のトルクを約19％とするように、自動的に調節される。この押出しは、径8mmの内腔を持つダイプレートを用いて、実施する。これら押し出されたストリップを、ワイプロシャロマ(WyPro Spharomat)で、丸めて、ペレットに成型する。この処理は、約850RPMにおいて約3分間を要する。
GPCG1流動床乾燥機で、このペレットを、80℃にて約1.5時間乾燥する。
このコア材料を、名目上のメッシュサイズ0.71〜1.25mmを持つ、様々な有孔プレートを備えた、タンブラー式篩別装置を用いて分画する。0.71〜0.90mmまたは0.90〜1.12mmなる範囲の、該材料の適当な画分を、以下の処理において使用する。
【００４９】
実施例a3：琥珀酸含有コア材料の調製
組成：3質量部のコリドンK25；20質量部のアビセルPH101；77質量部の琥珀酸。
77質量部の琥珀酸、20質量部のアビセルPH 101および3質量部のコリドンK25を、ジャイロホイール式ミキサ中で、15分間混合する。次に、この粉末混合物を、強制ミキサに移す。この混合物に、撹拌しつつ、押出し可能な均一塊状物が得られるまで、水を添加する。次いで、この混合物を、更に同様に処理して、フマール酸を含有するスターターコアを調製する。各場合において適している、0.71〜0.90mmまたは0.90〜1.12mmなる範囲の、該生成物の画分を、以下の処理において使用する。
実施例a4：クエン酸含有コア材料の調製
組成：1質量部のコリドンK90；1質量部のタルク；20質量部のクエン酸。
【００５０】
1質量部のコリドンK90を、撹拌しつつ、6質量部のイソプロパノールに溶解し、1質量部のタルクをこれに懸濁させる。3質量部のクエン酸を、撹拌しつつ、別の6質量部のイソプロパノールに溶解する。流動床処理プラントにおいて、17質量部の、粒径0.5〜0.6mmの、単離したクエン酸含有コア材料に、3-ヘッドノズルを用いた、下方床噴霧法により、空気導入口温度20〜30℃にて、該活性物質を含む該2種の分散液/溶液を噴霧して、実質的に球形の粒子を生成する。
次いで、該活性物質を含むペレットを、循環空気乾燥機内で、35℃にて8時間乾燥する。
次に、この球状の酒石酸を含むコア材料を、空気導入口温度60-80℃にて、回転容器内で、乾燥する。
このコア材料を、名目上のメッシュサイズ0.6〜0.8mmを持つ、有孔プレートを備えた、タンブラー型篩別装置を用いて分別する。0.6〜0.8mmなる範囲の粒径を持つ、該生成物画分を、更に処理するために使用する。
【００５１】
b: 該酸含有コア材料単離の例
組成：23質量部の酸含有コア材料；1質量部のアラビアゴム；2質量部のタルク。
1質量部のアラビアゴムを、6.7質量部の96％エタノールと13.5質量部の精製水との混合物中に、撹拌しつつ溶解する。次いで、2質量部のタルクを、撹拌しながら、この溶液に分散させる。
流動床処理プラントにおいて、23質量部の酸含有コア材料に、下方床噴霧法によって、空気導入口温度35〜40℃にて、該アラビアゴム/タルク分散液を噴霧する。
次に、この単離した酒石酸を含むコア材料を、循環空気乾燥機内で、40℃にて8時間乾燥する。
塊状物を除去するために、該乾燥し、単離した酒石酸含有コア材料を、名目上のメッシュサイズ1.0mmを持つスクリーンを通して、篩別する。この製品の画分(粒径1mm未満)を、更に処理する。
【００５２】
c：活性物質層の製造例
該活性物質層は、一般に同様な方法で調製されるが、該活性物質の性質および量、バインダの性質および量、タルクおよびイソプロパノールの量、またはエタノールの量における変動を伴う。従って、この調製は、実施例C4についてのみ記載し、各活性物質に関する特定の組成は、表として示す。
実施例C4の製造：
組成：74質量部の単離した酒石酸含有コア材料；49質量部のヒドロキシプロピルセルロース；12質量部のタルク；25質量部の活性物質(例えば、フリバンセリン)。
ヒドロキシプロピルセルロースを、492質量部の2-プロパノールに、撹拌しつつ溶解し、次いで該活性物質およびタルクを、撹拌しながらこの溶液に分散させる。
流動床加工プラントで、74質量部の単離した酒石酸含有コア材料に、空気導入口温度20〜30℃にて、下方床噴霧法によって、該活性物質を含む分散液を噴霧する。
次に、該活性物質を含むペレットを、循環空気乾燥機内で、35℃で8時間乾燥する。
塊状物を除去するために、該活性物質を含むペレットを、名目上のメッシュサイズ1.25mmを持つスクリーンを通して、篩別する。この製品の画分(粒径1.25mm未満)を、更に処理する。
【００５３】
以下の表11は、実施例C1〜C15(活性物質：フリバンセリン)の組成を示す。各場合において、質量部が特定されているが、これは実験的に決定された活性物質の含有率に対応している。即ち、バッチ毎に幾分変動する可能性のある噴霧損失を、各場合の計算において補償して、真に比較に適したデータを得た。
実施例C1〜C3は、本発明の酸含有スターターコアの代わりに、市場で入手できる中性コアを含む。これらコアは、インビトロテストにおける参考値として機能する(上記記載を参照)。
以下の表12は、実施例C16〜C31(活性物質：ピモベンダン)の組成を示す。各場合において、質量部が特定されているが、これは実験的に決定された活性物質の含有率に対応している。即ち、バッチ毎に幾分変動する可能性のある噴霧損失を、各場合の計算において補償して、真に比較に適したデータを得た。
実施例C16〜C17は、本発明の酸含有スターターコアの代わりに、市場で入手できる中性コアを含む。これらコアは、インビトロテストにおける参考値として機能する(上記記載を参照)。
以下の表13は、実施例C32〜C52(活性物質：レフラダフィバン)の組成を示す。各場合において、質量部が特定されているが、これは実験的に決定された活性物質の含有率に対応している。即ち、バッチ毎に幾分変動する可能性のある噴霧損失を、各場合の計算において補償して、真に比較に適したデータを得た。
【００５４】
実施例C32〜C34は、本発明の酸含有スターターコアの代わりに、市場で入手できる中性コアを含む。これらコアは、インビトロテストにおける参考値として機能する(上記記載を参照)。
以下の表14は、実施例C53〜C57(活性物質：BIIL 284 = アメルバント)の組成を示す。各場合において、質量部が特定されているが、これは実験的に決定された活性物質の含有率に対応している。即ち、バッチ毎に幾分変動する可能性のある噴霧損失を、各場合の計算において補償して、真に比較に適したデータを得た。
実施例C53は、本発明の酸含有スターターコアの代わりに、市場で入手できる中性コアを含む。このコアは、インビトロテストにおける参考値として機能する(上記記載を参照)。
以下の表15は、実施例C58〜C61(活性物質：ピモベンダン)の組成を示す。各場合において、質量部が特定されているが、これは実験的に決定された活性物質の含有率に対応している。即ち、バッチ毎に幾分変動する可能性のある噴霧損失を、各場合の計算において補償して、真に比較に適したデータを得た。
実施例C58〜C59は、本発明の酸含有スターターコアの代わりに、市場で入手できる中性コアを含む。これらコアは、インビトロテストにおける参考値として機能する(上記記載を参照)。
【００５５】
【表１１】
2005526738.tif 000012
*: クルセル(Klucel) EF; **: 製造用のイソプロパノール。
【００５６】
【表１２】
2005526738.tif 000013
*:製造用のイソプロパノール
【００５７】
【表１３】
2005526738.tif 000014
*:製造用のイソプロパノール; **: 実験的活性物質含有率(％)
【００５８】
【表１４】
2005526738.tif 000015
*:製造用のイソプロパノール
【００５９】
【表１５】
2005526738.tif 000016
【００６０】
d: 該活性物質含有ペレット単離の例
組成：23質量部の活性物質含有ペレット；1質量部のアラビアゴム；および2質量部のタルク。
1質量部のアラビアゴムを、6.7質量部の96％エタノールと13.5質量部の精製水との混合物中に、撹拌しつつ溶解する。次いで、2質量部のタルクを、撹拌しながら、この溶液に分散させる。
流動床処理プラントにおいて、23質量部の活性物質含有コア材料に、下方床噴霧法によって、空気導入口温度35〜40℃にて、該アラビアゴム/タルク分散液を噴霧する。
次に、この単離した酒石酸を含むコア材料を、循環空気乾燥機内で、40℃にて8時間乾燥する。
塊状物を除去するために、該乾燥した活性物質含有ペレットを、名目上のメッシュサイズ1.25mmを持つスクリーンを通して、篩別する。この製品の画分(粒径1.25mm未満)を、更に処理する。
【００６１】
e) カプセルへの充填
各場合において、所定の薬用量に相当する、活性物質を含むペレットを、カプセル充填装置を用いて、適当なサイズのハードゼラチンカプセルに充填する。
【図面の簡単な説明】
【００６２】
【図１】本発明の薬理組成物の模式的な構造を、ペレットの断面図として示すものである。
【図２】パントプラゾールを添加した、または添加してない、本発明の処方物のバイオアベイラビリティーを、従来の錠剤のそれと比較して図式的に示すものである。
【図３】pH5.0の0.005Mクエン酸バッファーにおける、本発明による実施例C5のインビトロ放出を、同様な活性物質含有率を持つ参考処方物C2のそれと比較して示すものである。
【図１】
2005526738.tif 000017
【図２】
2005526738.tif 000018
【図３】
2005526738.tif 000019
【国際調査報告】
2005526738.tif 000020
2005526738.tif 000021
2005526738.tif 000022
2005526738.tif 000023
2005526738.tif 000024
2005526738.tif 000025
2005526738.tif 000026
2005526738.tif 000027
2005526738.tif 000028