(57)【要約】本発明は、虚血性の心筋傷害に対して有用な医薬として、ベンズイソセレンアゾロン化合物、特に一般式（I）によって表される化合物の使用をか維持する。前記化合物は、非常に活性かつ特異的で、低毒性であり、Na／Caの交換を選択的に阻害すること、血管を拡張すること、および心筋組織による酸素消費量を減少することによって特徴付けられる。
2005533798.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
虚血性の心筋傷害に対する薬物の製造におけるベンズイソセレンアゾロンの使用。
【請求項２】
前記薬物がNa+／Ca2+交換体を標的とすることを特徴とする、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記ベンズイソセレンアゾロンが、式（I）によって表されることを特徴とする、請求項１に記載の使用、
【化１】
2005533798.tif 000018
式中、R1は、水素、ハロゲン、直鎖状または分枝のC1-C4アルキル、直鎖状または分枝のC1-C4アルコキシ、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、ニトロ、ジ-（C1-C4アルキル）-アミノ、またはメチレンジオキシ基から選択され、R1の置換部位は、ベンズイソセレノロン（benzisoselenolone）のベンゼン環の3-、4-、5-、または6-位のいずれか1つであってもよく;
R2は、飽和または不飽和のC0-C4アルキルであって、R2がC0であるときは、R2はR3および窒素を接続する結合であり；
R3は、飽和または不飽和の、置換されたかまたは非置換のフェニルもしくは複素環ラジカルであり、前記複素環ラジカルは、酸素、窒素、または硫黄から選択される1〜4のヘテロ原子を有する。
【請求項４】
前記ベンズイソセレンアゾロンが式（I）によって表されることを特徴とする、請求項3に記載の使用、
【化２】
2005533798.tif 000019
式中、R1は、水素、ハロゲン、直鎖状または分枝のC1-C4アルキル、直鎖状または分枝のC1-C4アルコキシ、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、ニトロ、ジ-（C1-C4アルキル）-アミノ、またはメチレンジオキシ基から選択され、R1の置換部位は、ベンズイソセレノロン（benzisoselenolone）のベンゼン環の3-、4-、5-、または6-位のいずれか1つであってもよく;
R2は、飽和または不飽和のC0-C4アルキルであって、R2がC0であるときは、R2はR3および窒素を接続する結合であり；
R3は、飽和または不飽和の、置換されたかまたは非置換のフェニルもしくは複素環ラジカルであり、前記複素環ラジカルは、酸素、窒素、または硫黄から選択される1〜2のヘテロ原子を有し、および前記複素環式ラジカルは、モノ-またはジ-置換されていてもよく、前記置換基は、同一でも、または異なっていてもよく、ハロゲン、直鎖状または分枝のC1-C4アルキル、直鎖状または分枝のC1-C4アルコキシ、直鎖状または分枝のC1-C4アルキルチオ、直鎖状または分枝のC1-C4ケト、直鎖状または分枝のC1-C4ハロアルキル、ヒドロキシ、チオ、ニトロ、シアノ、カルボキシル、およびアルコキシカルボニルからなる群より選択される。
【請求項５】
前記ベンズイソセレンアゾロンが式（I）によって表されることを特徴とする、請求項4に記載の使用、
【化３】
2005533798.tif 000020
式中、R1は、水素、ハロゲン、直鎖状または分枝のC1-C4アルキル、直鎖状または分枝のC1-C4アルコキシ、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、ニトロ、ジ-（C1-C4アルキル）-アミノ、またはメチレンジオキシ基から選択され、R1の置換部位は、ベンズイソセレノロン（benzisoselenolone）のベンゼン環の3-、4-、5-、または6-位のいずれか1つであってもよく;
R2は、R3および窒素を接続する結合であり；
R3は、飽和または不飽和の、置換されたかまたは非置換のフェニルもしくは複素環ラジカルであり、前記複素環ラジカルは、酸素、窒素、または硫黄から選択される1〜2のヘテロ原子を有し、かつモノ-またはジ-置換されていてもよく、前記置換基は、同一でも、または異なってもよく、ハロゲン、C1-C4直鎖状または分枝のアルキル、直鎖状または分枝のC1-C4アルコキシ、直鎖状または分枝のC1-C4アルキルチオ、直鎖状または分枝のC1-C4ケト、直鎖状または分枝のC1-C4ハロアルキル、ヒドロキシ、チオ、ニトロ、シアノ、カルボキシル、およびアルコキシカルボニルからなる群より選択される。
【請求項６】
前記ベンズイソセレンアゾロンが式（I）によって表されることを特徴とする、請求項5に記載の使用、
【化４】
2005533798.tif 000021
式中、R1は、水素、ハロゲン、直鎖状または分枝のC1-C4アルキル、直鎖状または分枝のC1-C4アルコキシ、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、ニトロ、ジ-（C1-C4アルキル）-アミノ、またはメチレンジオキシ基から選択され、R1の置換部位は、ベンズイソセレノロン（benzisoselenolone）のベンゼン環の3-、4-、5-、または6-位のいずれか1つであってもよく;
R2は、R3および窒素を接続する結合であり；
R3は、置換されたかまたは非置換のフェニル、フェニルチオ、チアゾリル、イソチアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、ベンゾチアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、トリアジニル、トリアゾリル、テトラゾリル、キノリニル、イソキノリニル、インドリル、インダゾリル、カルバゾリル、フリルを表し、前記置換基は、同一でも、または異なってもよく、ハロゲン、直鎖状または分枝のC1-C4アルキル、直鎖状または分枝のアC1-C4ルコキシ、直鎖状または分枝のC1-C4アルキルチオ、直鎖状または分枝のC1-C4ケト、直鎖状または分枝のC1-C4ハロアルキル、ヒドロキシ、チオ、ニトロ、シアノ、カルボキシル、およびアルコキシカルボニルからなる群より選択される。
【請求項７】
前記ベンズイソセレンアゾロンが式（I）によって表されることを特徴とする、請求項6に記載の使用、
【化５】
2005533798.tif 000022
式中、R1は、水素、ハロゲン、直鎖状または分枝のC1-C4アルキル、直鎖状または分枝のC1-C4アルコキシ、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、ニトロ、ジ-（C1-C4アルキル）-アミノ、またはメチレンジオキシ基から選択され、R1の置換部位は、ベンズイソセレノロン（benzisoselenolone）のベンゼン環の3-、4-、5-、または6-位のいずれか1つであってもよく;
R2は、R3および窒素を接続する結合であり；
R3は、置換されたかまたは非置換のフェニルまたはピリジルを表し、前記置換基は、同一でも、または異なってもよく、かつフルオロ、クロル、ブロモ、メチル、メトキシ、エトキシ、メチルチオ、ヒドロキシ、チオ、ニトロ、カルボキシル、カルボメトキシル、およびエトキシカルボニルから選択される。
【請求項８】
前記ベンズイソセレンアゾロンが以下の群から選択されることを特徴とする、請求項1に記載の使用：
2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-フルオロ-2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-フルオロ-2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-フルオロ-2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-フルオロ-2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-クロロ-2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-クロロ2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-クロロ2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-クロロ2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-ヒドロキシ2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-ヒドロキシ-2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-ヒドロキシ-2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-ヒドロキシ-2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-クロロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-クロロ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-クロロ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-クロロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-クロロ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-クロロ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-クロロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-クロロ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-クロロ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-クロロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-クロロ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-クロロ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-フルオロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-フルオロ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-フルオロ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-フルオロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-フルオロ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-フルオロ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-フルオロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-フルオロ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-フルオロ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-フルオロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-フルオロ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-フルオロ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-ヒドロキシ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-ヒドロキシ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-ヒドロキシ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-ヒドロキシ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-ヒドロキシ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-ヒドロキシ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-ヒドロキシ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-ヒドロキシ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-ヒドロキシ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-ヒドロキシ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-ヒドロキシ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-ヒドロキシ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-ヒドロキシ-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-クロロ-3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-クロロ-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-メトキシ-3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2,6-ジクロロ3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン
2-（4,6-ジメチル2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-ヒドロキシ-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-ニトロ-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-ニトロ-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-メチル-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-メトキシ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-ニトロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-メトキシ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6,7-メチレンジオキシ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-メチル-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-メチル-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-メチル-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-メチル-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3,5-ジクロロ2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-クロロ-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-カルボキシル-5-クロロ-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-カルボキシル-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-テトラヒドロピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-メチル-2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-ニトロ-2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4,6-ジメチル2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
（2,6-ジメチル-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-エトキシ-2-エチルチオ-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-エトキシカルボニル-2-ヒドロキシ-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-カルボキシル-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-クロロ-2-メチルチオ-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-クロロ-2-メチルチオ-6-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-クロロ-6-メチル-2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-クロロ-3-ニトロ-2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-クロロ-5-ニトロ-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4,6-ジクロロ-2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4,6-ジクロロ-5-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4,6-ジヒドロキシ-2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2,6-ジヒドロキシ-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2,4-ジヒドロキシ-5-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4,6-ジチオ-2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-ヒドロキシ-2-チオ-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-ヒドロキシ-2-メチルメルカプト-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-ヒドロキシ-6-メチル-2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ヒドロキシ-5-メチル-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（1-ベンゾピラゾロ（3,4-d）ピリミジン-4-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（ピラゾロ（3,4-d）ピリミジン-4-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-ヒドロキシピラゾロ（3,4-d）ピリミジン-4-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-チオピラゾロ（3,4-d）ピリミジン-4-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ヒドロキシ-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-クロロ-2-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-メトキシ-2-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-メトキシ-2-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-メチル-2-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-メチル-5-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-ニトロ-2-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-ブロモ-2-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5,6-ジメチル-2-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-エトキシ-2-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-メチル-2-（2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-クロロ-2-（2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-メトキシ-2-（2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-ニトロ-2-（2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-クロロ-2-（2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-メトキシ-2-（2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6,7-メチレンジオキシ-2-（2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-メチル-2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-ニトロ-2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-チアゾリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-クロロ-2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-メチル-5 イソチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-イミダゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-エトキシカルボニル-2-イミダゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-ピラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン
2-（4-シアノ-5-ピラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-エトキシカルボニル-3-ピラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-エトキシカルボニル-2-フェニル-3-ピラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-シアノ-3-ピラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-フェニル-3-ピラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（1-フェニル-5-ピラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（1-フェニル-5-ピラゾリノン-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-ヒドロキシ-3-ピラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（1,3,4-チアジアゾリル-2-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-チオ-1,3,4-チアジアゾリル-2-イル）（1（2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-メチル-1,3,4-チアジアゾリル-2-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-トリフルオロメチル-1,3,4-チアジアゾリル-2-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-tert-ブチル-1,3,4-チアジアゾリル-2-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ピラジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-カルボキシル-3-ピラジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ピリダジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ベンズイミダゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5,6-ジメチル2-ベンズイミダゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-ベンゾトリアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン
2-（7-クロロ-1,2,4-ベンゾトリアジニル-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（1,2,4-ベンゾトリアジニル-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（7-ブロモ-1,2,4-ベンゾトリアジニル-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（7-フルオロ-1,2,4-ベンゾトリアジニル-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（7-ニトロ-1,2,4-ベンゾトリアジニル-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ベンゾチエニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-ベンゾチエニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-チエニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2,1,3-ベンゾチアジアゾリル-4-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン）
2-（1,2,4-トリアジニル-4-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2,6-ジチオ-1,3,5-トリアジニル-4-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5,6-ジメチル-1,2,4-トリアジニル-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5,6-ジフェニル-1,2,4-トリアジニル-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（1,2,4-トリアゾリル-4-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-チオ-1,2,4-トリアゾリル-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-テトラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-キノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-メチル-4-キノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-ニトロ-5-キノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（1,2,3,4-テトラヒドロキノリン-8-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-キノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-キノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（8-キノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2（6-メトキシ-8-キノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（1-イソキノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-イソキノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-インドリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-イソインドリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-インダゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-クロロ-3-インダゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン
2-（6-インダゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（7-インダゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（9-エチル-3-カルバゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-[（3,4-ジヒドロイミダゾール-2-イル）-2-エテニル]-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ピリジルメチル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-フリルメチル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-[4-（2-ヒドロキシイミノ-エチル）]-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-[ 4-（7-n-ブチル-ベンゾ（1,2-c-ジヒドロフラン-2-オン））]-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3）（2H）-オン。
【請求項９】
虚血性の心筋傷害に対する薬物の製造のための、ベンズイソセレンアゾロン化合物を含む組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の技術分野  
本発明は、ベンズイソセレンアゾロンの使用、特に虚血性の心筋傷害に対する薬物としてのこれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
生活状況の増大および加齢の進行により、心臓血管疾患、特に虚血性の心筋傷害の浸潤が増大し、高齢者の生活および生命の質に影響を及ぼす重要な要因となっている。現在臨床的に使用されている硝酸血管拡張薬、ジヒドロピリジン・カルシウムチャンネルアンタゴニスト、並びにβ-アドレナリン作動性遮断薬などの薬物は、全て副作用のために制限がある。
【０００３】
Na+／Ca2+交換体は、興奮性細胞膜上の重要なイオン交換システムであり、その原理機能は、Na+／Ca2+交換によって細胞内のカルシウムを押し出して、細胞内のカルシウムを不活性レベルに戻すことである。Na+／Ca2+交換の間に、1つの（1） Ca2+の押出しにつき3つの（3）Na+が、細胞内に輸送され、したがって、総電荷の膜を通過する移動があり、膜通過電流を誘導する。Na+-Ca2+交換は、心筋の虚血再灌流の初期において二相性のプロセスであり、心筋細胞膜傷害により、膜電位の異常および膜透過性の変化を生じ、大量のNa+が心筋細胞に侵入し、Na+／Ca2+交換体は、逆に活性化されて過剰のNa+を押し出し、細胞内のCa2+過負荷を生じ、心筋細胞の傷害および死滅を悪化させる。病理学的状態下では、このような逆輸送は、重篤な後遺症を生じる可能性がある。したがって、Na+／Ca2+逆交換体は、虚血／再灌流の副作用の重要な機構であると考えられる。現在までに、Na+／Ca2+の逆交換を特異的に遮断することができる薬剤は、世界中に存在しない。
【０００４】
米国特許第4,711,961号は、ベンズイソセレンアゾロンの製造方法を開示しており、免疫系を刺激する感染症の予防および治療のための、セレン欠乏性疾患、動脈硬化、リウマチ病（特に関節症）の治療のための化合物の使用を予測しているが、実験的または使用の証拠は全く提供されていない。ベンズイソセレンアゾロンは、一連の合成化合物であり、グルタチオンペルオキシドレダクターゼの活性を模倣する。化合物の中で、エブセレン（Ebselen）は、代表的な薬物であり、抗炎症効果を示し、クモ膜下出血の治療のために臨床的に使用されている。しかし、Na+／Ca2+交換体に対する阻害作用、並びに筋虚血症に対するこれらの保護作用についての報告は、いまだに報告されていない。
【発明の開示】
【０００５】
本発明の目的は、虚血性の心筋傷害の予防および／または治療のために、ベンズイソセレンアゾロンまたは前述のものを含む組成物の使用を提供することである。
【０００６】
本発明の1つの他の態様は、活性成分としてのベンズイソセレンアゾロン化合物および薬品分野の通常のキャリアを含む薬学的組成物を提供することである。
【０００７】
本発明の別の態様は、虚血性の心筋傷害に対する薬物としてのベンズイソセレンアゾロン化合物またはこれらの薬学的組成物の使用を提供することである。
【０００８】
さらにもう1つの本発明の側面は、虚血性の心筋傷害の予防および／または治療の方法であって、このような状態に罹患しているものに対してベンズイソセレンアゾロン化合物または前述のものを含む薬学的組成物を投与することを含む方法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
Na+／Ca2+交換体は、興奮性細胞膜上に位置している重要な二相性のイオン輸送タンパク質であり、その原理機能は、励起状態の間に細胞内のカルシウムを押し出して、細胞内のカルシウムを不活性レベルに戻すことである。Na+／Ca2+交換の間に、1つのCa2+の押出しにつき3つのNa+が細胞内に輸送され、したがって、総電荷の膜を通過する移動があり、内向き電流を誘導する。心筋の虚血／再灌流の初期には、心筋細胞膜傷害により、膜電位の異常および膜透過性の変化を生じ、大量のNa+が心筋細胞に侵入して、Na+／Ca2+交換体が逆に活性化されて過剰のNa+を押し出し、細胞内のCa2+過負荷を生じ、心筋細胞の傷害および死滅を悪化させる。したがって、Na+／Ca2+逆交換体は、虚血／再灌流の副作用の重要な機構であると考えられる。
【００１０】
それ自体が膜通過タンパク質であるNa+／Ca2+交換体は、薬物作用のための重要な標的である。今までに、心筋細胞のタンパク質に向けられ、心筋細胞に対する保護作用を示すことが報告された薬物はない。したがって、虚血性の心筋傷害（虚血性心疾患）の治療および心臓の保護のために、Na+／Ca2+交換体の選択的な遮断薬を開発することは、大きな利益がある。
【００１１】
本発明の研究により、ベンズイソセレンアゾロン化合物が、有意にNa+／Ca2+交換を遮断することができることを例証する。本化合物は、Na+／Ca2+交換系に対して作用する虚血性の心筋傷害に対する新規の化合物である。
【００１２】
細胞レベルの実験では、アミロライドおよびKB-R7943と比較して、本化合物が標的タンパク質（Na+／Ca2+交換体）に対してより特異的かつ選択的であることを例証する。アミロライド、KB-R7943、および本化合物のNa+／Ca2+交換電流に対する効果の比較研究を行い、結果は、低濃度のアミロライドは、内向きおよび外向き電流に対してほとんど効果を有さないが、高レベルのアミロライドは、外向きのINa-Caに対して阻害作用を示し、KB-R7943は、二相性のNa+／Ca2+交換に対して選択性を伴わずに阻害作用を有し、内向きおよび外向きINa-Caが同時に減少されたことから、選択的に膜がCa2+を押し出す正常な機能に対する阻害効果が示唆され；本化合物は、内向きINa-Caよりも外向きINa-Caに対して強力な阻害を示し、虚血／再灌流プロセスおよび生じた心筋の細胞障害によって生じるCa2+過負荷を阻害するために有益である。本化合物はNa+／Ca2+交換プロセスのリバース・モードに対して全て抑制性であり、強力なものでは、40%を超える抑制率を有し、最も強力なものでは、ほぼ60%である。
【００１３】
本化合物のNa+／Ca2+交換プロセスのリバース・モードに対する阻害効果は、細胞レベルの病理学的モデルを経て例証されており、さらに、化合物の心筋虚血傷害に対する効果もまた、インビトロおよびインビボでの試験を経て確認されている。
【００１４】
プレ電気生理学的な細胞モデルのスクリーニングに基づいて、本発明者らは、Na+／Ca2+交換の逆輸送による外向き電流の抑制率を比較し、虚血-再灌流（IIR）に供した単離されたラット心臓に対してさらなるインビトロ試験を行った。心筋傷害に対する薬物の保護作用を評価するために、心室の不整脈の延長、心室期外収縮の発生率、心室頻拍／心室細動（VT／TF）を記録した。結果は、心臓細胞障害に対する本化合物の有意な保護作用を証明する。
【００１５】
静脈内投与後のラットにおける本化合物の保護作用：本化合物は、心室の不整脈性の虚血-再灌流の潜伏を有意に引き延ばし、VTおよびVFの発病率および期間を減少させることができる。このような結果は、試験化合物が、ラットにおいて冠状動脈の虚血／再灌流で誘導される心筋傷害に対して保護作用を有することを示す。心筋傷害に対する試験化合物の保護を評価するために、抗不整脈能を使用する。試験化合物を経口的に処理したラットにおいて同じ結果が観察された。ラットに経口的に試験化合物を投与し、左冠動脈前下行枝を投与の60分後に結紮し、結紮の15分後に再灌流を行った。本化合物は、虚血-再灌流の心室の不整脈を有意に（P＜0.01）減少させ、VT（P＜0.01）およびVF（P＜0.05）の発病率および期間を減少させることができる。これは、本化合物が、冠状動脈の虚血-再灌流で誘導される傷害に対して保護作用を有することを示す。
【００１６】
本化合物は、イヌにおいて急性心筋虚血および心筋梗塞を有意に改善することができ、心外膜のエレクトログラフィによって明らかにされる心筋虚血症の重篤さ（Σ-ST）および領域（NST）並びにN-BT染色法によって示される梗塞の大きさを全て減少することができる。本化合物は、心筋虚血症の重篤さ（Σ-ST）を明らかに減少させることができ、試験化合物の投与の180分後に、53.90±20.60%まで減少させ、対照および投与の前に観察されるΣ-STとは有意差を有する（P＜0.01）。心外膜エレクトログラフィによって明らかにされた結果では、本化合物が実験的な急性心筋虚血症に供されたイヌを明らかに改善することができ、心筋虚血の重篤さ（Σ-ST）および領域（NST）を有意に減少したことを示した。本化合物は、心筋梗塞の大きさを減少させることができる。定量的組織学的なN-BT染色法によって表される心筋梗塞サイズは、本化合物の投与の後に69.18%および67.94%まで減少され、対照群に対して有意差を有する（P＜0.001）。本化合物は、CKおよびASTの活性の上昇を有意に阻害するが、対照と比較してLDH活性に対してほとんど効果を有さない。
【００１７】
動脈冠状血管の血管拡張に対して効果を示す本化合物は、虚血および心筋梗塞における冠状血流量を有意に増大し、冠動脈血管拡張並びに側副循環を促進し、虚血領域における血液供給を改善することができる。虚血および心筋梗塞における冠状血流量は、投与の30後にベースラインに反し（verce）15.02±22.16%まで有意に増大され、対照群に対して有意差を有した（P＜0.05）。心室の酸素含有量は、本化合物の投与後に有意に増大され、投与前に反して有意差を有した（P＜0.05）。急性心筋虚血および梗塞に供されたイヌの実験から得られた結果は、本化合物によって病理変化が阻害され、心筋虚血および梗塞の重篤さ並びに梗塞の大きさが減少され;一方、投与群において冠状血管拡張が誘導され、並びに冠状血流が増大され、さらに、CK活性の上昇およびASTの放出は全て阻害されたことを示した。これらの結果は、作用機構と一致しており、すなわちNa+／Ca2+交換プロセスのリバース・モードおよび関連した心筋虚血損傷を選択的に阻害して、冠動脈血管拡張を誘導し、心臓血液供給を改善する。
【００１８】
本化合物は、正常ラットの心機能および血行動態に対してほとんど効果を有さない。本化合物によって前処理した麻酔正常ラットから得られる結果から、本化合物がラットの左心室の収縮期圧（LVSP）、左心室の拡張終期圧（LVEDP）、左心室圧の最大数（±dp/dtmax）、動脈の収縮期圧（SP）、動脈の拡張期圧（DP）、平均動脈圧（MAP）、および心拍数に対してほとんど影響を及ぼさないことが明らかとなった。上記の研究項目に対する本化合物の作用は、媒体対照と比較して有意差および統計学的な相違を有さない。
【００１９】
本化合物は、心筋虚血症に供されたラットの心機能および血行胴体を改善することができる。心筋の虚血／再灌流に供されたラットのLVSPsは、化合物投与群においてもよく保たれたが、LVSPsの揺らぎは、モデル対照群よりも大きかった。再灌流により、再灌流の10分後にLVEDPの迅速な増加を誘発し、左心室の膨張機能が障害され、ひどく損害を受けたことを示しており;一方で、本化合物と共に投与されたラットのLVEDPsは、ベースラインのレベルによく保たれ、心筋虚血症に供されたラットの心臓弛緩機能に対して強力な保護効果を示した。+dp/dtmaxに対する本化合物の有意な効果は観察されなかった。モデル群における+dp/dtmaxは、化合物投与群よりも減少し、モデル対照群の+dp/dtmaxの値は、化合物投与群よりも54%低かった。この結果は、虚血／灌流傷害の間の収縮機能の障害が、本化合物の処理によって改善されたことを示唆する。-dp/dtmaxは、心筋の拡張（dilastolization）機能を示すパラメーターであり、寝室の弛緩機能を評価するための最も重要な項目のうちの1つである。結紮後のそれぞれの時点において、化合物投与群と媒体対照群の間には有意差がある。心筋の収縮機能は、本化合物によって低下されるが、弛緩機能は、よく保たれる。血圧は、心機能に対する保護作用のために、本化合物の投与後に安定になる。モデル対照群の血圧は、大規模に減少され、重傷であるためにより大きく上下する。心拍数は、虚血／再灌流傷害に供されたラットにおいて減少し、本化合物は、心拍数に対してほとんど効果を有さず、2つの群の間に相違はない。心機能は、虚血／再灌流の傷害によって障害され、並びに心臓の収縮および弛緩の機能の減少並びに血圧の減少または大きく上下することによって示される。本化合物は、ラットにおいて心臓機能障害に対する保護作用を示し、心臓の弛緩機能の改善に対してより有意な効果を有する。基本的には、化合物投与群における心臓の弛緩機能は、正常レベルに保存される。血圧は、化合物投与群においても安定している。そして、本化合物は、心筋の発作によって誘導される心拍数の減少に対してほとんど効果を有しない。
【００２０】
毒性学的な研究では、本化合物が変異原性でなく、高い安全性並びに低毒性を有することを示す。種々の化合物濃度および多様な細菌株で行ったエイムス（突然変異誘発）試験において、結果は、全て陰性であった。急性毒性研究において、どの用量でも死亡率はなく、LD50（50％致死量）＞5g/kgであった。
【００２１】
本発明のベンズイソセレンアゾロン化合物は、式（I）によって表される化合物を含むが、限定されない、
【化６】
2005533798.tif 000003
【００２２】
式中、R1は、水素、ハロゲン、直鎖状または分枝のC1-C4アルキル、直鎖状または分枝のC1-C4アルコキシ、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、ニトロ、ジ-（C1-C4アルキル）-アミノ、またはメチレンジオキシ基から選択され、R1の置換部位は、ベンズイソセレノロン（benzisoselenolone）のベンゼン環の3-、4-、5-、または6-位のいずれか1つであってもよく;
R2は、飽和または不飽和のC0-C4アルキル（R2は、R3および窒素を接続する結合であるが、R2はC0である）であり、R2がC0であるときは、R2はR3および窒素を接続する結合である。
【００２３】
R3は、飽和または不飽和の、置換されたかまたは非置換のフェニルもしくは複素環ラジカルであり、前記複素環ラジカルは、好ましくは1〜4のヘテロ原子、より好ましくは1〜2のヘテロ原子を有し、前記ヘテロ原子は、酸素、窒素、または硫黄から選択され、前記R3は、フェニル、フェニルチオ、チアゾリル、イソチアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、ベンゾチアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、トリアジニル、トリアゾリル、テトラゾリル、キノリニル、イソキノリニル、インドリル、インダゾリル、カルバゾリル、フリルから選択され、最も好ましくは、R3は、フェニルおよびピリジルから選択され;
前記複素環式ラジカルは、モノ-またはジ-置換されていてもよく、前記置換基は、同一でも、または異なってもよく、ハロゲン、直鎖状または分枝のC1-C4アルキル、直鎖状または分枝のC1-C4アルコキシ、直鎖状または分枝のC1-C4アルキルチオ、直鎖状または分枝のC1-C4ケト、直鎖状または分枝のC1-C4ハロアルキル、ヒドロキシ、チオ、ニトロ、シアノ、カルボキシル、およびアルコキシカルボニルからなる群より選択され;
好ましい置換基は、ハロゲン、直鎖状または分枝のC1-C4アルキル、直鎖状または分枝のC1-C4アルコキシ、直鎖状または分枝のC1-C4アルキルチオ、直鎖状または分枝のC1-C4ハロアルキル、直鎖状または分枝のC1-C4ケト、ヒドロキシ、チオ、ニトロ、シアノ、カルボキシル、およびアルコキシカルボニルからなる群より選択される。
【００２４】
より好ましい置換基は、フルオロ、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、ブチル、メトキシ、エトキシ、メチルチオ、エチルチオ、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、チオ、ニトロ、シアン、カルボキシル、およびアルコキシカルボニルから選択される。
【００２５】
最も好ましい置換基は、フルオロ、クロロ、ブロモ、メチル、メトキシ、エトキシ、メチルチオ、ヒドロキシ、チオ、ニトロ、カルボキシル、カルボメトキシル、およびエトキシカルボニルから選択される。
【００２６】
本発明に記載の最も好ましい化合物は、以下から選択される：
2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-フルオロ-2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-フルオロ-2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-フルオロ-2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-フルオロ-2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-クロロ-2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-クロロ2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-クロロ2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-クロロ2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-ヒドロキシ2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-ヒドロキシ-2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-ヒドロキシ-2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-ヒドロキシ-2-フェニル-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-クロロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-クロロ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-クロロ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-クロロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-クロロ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-クロロ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-クロロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-クロロ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-クロロ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-クロロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-クロロ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-クロロ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-フルオロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-フルオロ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-フルオロ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-フルオロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-フルオロ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-フルオロ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-フルオロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-フルオロ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-フルオロ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-フルオロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-フルオロ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-フルオロ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-ヒドロキシ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-ヒドロキシ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
4-ヒドロキシ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-ヒドロキシ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-ヒドロキシ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-ヒドロキシ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-ヒドロキシ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-ヒドロキシ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-ヒドロキシ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-ヒドロキシ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-ヒドロキシ-2-（3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-ヒドロキシ-2-（4-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-ヒドロキシ-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-クロロ-3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-クロロ-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-メトキシ-3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2,6-ジクロロ3-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン
2-（4,6-ジメチル2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-ヒドロキシ-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-ニトロ-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-ニトロ-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-メチル-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-メトキシ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-ニトロ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-メトキシ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6,7-メチレンジオキシ-2-（2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-メチル-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-メチル-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-メチル-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-メチル-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3,5-ジクロロ2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-クロロ-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-カルボキシル-5-クロロ-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-カルボキシル-2-ピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-テトラヒドロピリジル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-メチル-2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-ニトロ-2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4,6-ジメチル2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
（2,6-ジメチル-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-エトキシ-2-エチルチオ-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-エトキシカルボニル-2-ヒドロキシ-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-カルボキシル-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-クロロ-2-メチルチオ-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-クロロ-2-メチルチオ-6-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-クロロ-6-メチル-2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-クロロ-3-ニトロ-2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-クロロ-5-ニトロ-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4,6-ジクロロ-2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4,6-ジクロロ-5-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4,6-ジヒドロキシ-2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2,6-ジヒドロキシ-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2,4-ジヒドロキシ-5-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4,6-ジチオ-2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-ヒドロキシ-2-チオ-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-ヒドロキシ-2-メチルメルカプト-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-ヒドロキシ-6-メチル-2-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ヒドロキシ-5-メチル-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（1-ベンゾピラゾロ（3,4-d）ピリミジン-4-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（ピラゾロ（3,4-d）ピリミジン-4-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-ヒドロキシピラゾロ（3,4-d）ピリミジン-4-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-チオピラゾロ（3,4-d）ピリミジン-4-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ヒドロキシ-4-ピリミジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-クロロ-2-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-メトキシ-2-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-メトキシ-2-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-メチル-2-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-メチル-5-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-ニトロ-2-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-ブロモ-2-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5,6-ジメチル-2-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-エトキシ-2-ベンゾチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-メチル-2-（2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-クロロ-2-（2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6-メトキシ-2-（2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-ニトロ-2-（2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
5-クロロ-2-（2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
7-メトキシ-2-（2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
6,7-メチレンジオキシ-2-（2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-メチル-2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-ニトロ-2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-チアゾリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-クロロ-2-チアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-メチル-5 イソチアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-イミダゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-エトキシカルボニル-2-イミダゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-ピラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン
2-（4-シアノ-5-ピラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-エトキシカルボニル-3-ピラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-エトキシカルボニル-2-フェニル-3-ピラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（4-シアノ-3-ピラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-フェニル-3-ピラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（1-フェニル-5-ピラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（1-フェニル-5-ピラゾリノン-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-ヒドロキシ-3-ピラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（1,3,4-チアジアゾリル-2-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-チオ-1,3,4-チアジアゾリル-2-イル）（1（2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-メチル-1,3,4-チアジアゾリル-2-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-トリフルオロメチル-1,3,4-チアジアゾリル-2-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-tert-ブチル-1,3,4-チアジアゾリル-2-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ピラジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-カルボキシル-3-ピラジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ピリダジニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ベンズイミダゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5,6-ジメチル2-ベンズイミダゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-ベンゾトリアゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン
2-（7-クロロ-1,2,4-ベンゾトリアジニル-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（1,2,4-ベンゾトリアジニル-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（7-ブロモ-1,2,4-ベンゾトリアジニル-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（7-フルオロ-1,2,4-ベンゾトリアジニル-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（7-ニトロ-1,2,4-ベンゾトリアジニル-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ベンゾチエニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-ベンゾチエニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-チエニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2,1,3-ベンゾチアジアゾリル-4-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン）
2-（1,2,4-トリアジニル-4-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2,6-ジチオ-1,3,5-トリアジニル-4-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5,6-ジメチル-1,2,4-トリアジニル-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5,6-ジフェニル-1,2,4-トリアジニル-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（1,2,4-トリアゾリル-4-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-チオ-1,2,4-トリアゾリル-3-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-テトラゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-キノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-メチル-4-キノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-ニトロ-5-キノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（1,2,3,4-テトラヒドロキノリン-8-イル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-キノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（3-キノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（8-キノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2（6-メトキシ-8-キノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（1-イソキノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-イソキノリニル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-インドリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-イソインドリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（5-インダゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（6-クロロ-3-インダゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン
2-（6-インダゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（7-インダゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（9-エチル-3-カルバゾリル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-[（3,4-ジヒドロイミダゾール-2-イル）-2-エテニル]-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-ピリジルメチル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-（2-フリルメチル）-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-[4-（2-ヒドロキシイミノ-エチル）]-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3（2H）-オン、
2-[ 4-（7-n-ブチル-ベンゾ（1,2-c-ジヒドロフラン-2-オン））]-1,2-ベンズイソセレンアゾール-3）（2H）-オン。
【００２７】
また、本発明は、1つまたは複数の式（I）の化合物および／またはこれらの立体異性体の治療的に有効な量および従来の薬学的に許容される賦形剤またはキャリアを含む薬学的組成物を提供する。
【００２８】
当該技術分野において既知の方法に従って、組み合わせを製造してもよい。この目的ために、一般式（I）の化合物および／またはその立体異性体は、ヒトまたは獣医学の使用に適した適切な投与または用量の形態を得るために、1つまたは複数の固体または液状の薬学的に許容される賦形剤および／またはキャリアと混合される。
【００２９】
本発明の化合物または化合物を含む組成物は、経口、静脈内、筋肉内、皮下、鼻、膜粘膜（tunica mucosa oris）、経皮、腹腔内、または直腸などの経口または非経口的経路を介した剤形で投与することができる。剤形は、タブレット、カプセル、ピル、エアロゾル、ペレット、粉末、溶液、懸濁液、エマルジョン、顆粒、坐薬、または凍結乾燥された粉末、その他であってもよい。製剤は、従来の形態、徐放形態、放出制御形態、または種々の微粒剤デリバリー系であってもよい。
【００３０】
当該技術分野において一般に使用される種々のキャリアを、タブレットを調製するために使用することができる。希釈液および吸収剤などのキャリア、たとえばデンプン、デキストリン、硫酸カルシウム、ラクトース、マンニトール、シュークロース、塩化ナトリウム、グルコース、尿素、炭酸カルシウム、チャイナクレー、微小結晶性セルロース、ケイ酸アルミニウム、その他;湿潤剤および接着剤、たとえば水、グリセリン、ポリエチレングリコール、エタノール、プロパノール、デンプンのり、デキストリン、シロップ、ハチ蜜、グルコース溶液、アラビアゴム、ゼラチン液体、カルボキシメチルセルロースナトリウム、乳、メチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン、その他;崩壊剤、たとえば乾いたデンプン、アルギナート、寒天粉末、アルギンデンプン、炭酸水素ナトリウムおよびクエン酸、炭酸カルシウム、ポリエチレンソルビトール脂肪酸エステル、ドデカニルスルホン酸ナトリウム、メチルセルロース、エチルセルロース、その他;壊変阻害剤、たとえばシュークロース、トリステアリン酸グリセリン、カカオ脂、硬化油、その他;吸収促進剤、たとえば四級アンモニウム塩、ドデカニルスルホン酸ナトリウム、その他;潤滑剤、たとえばタルク、シリカ、コーンスターチ、ステアレート、ホウ酸、流動パラフィン、ポリエチレングリコール、その他。
【００３１】
タブレットは、さらに被覆、たとえば糖被覆、薄膜被覆、腸溶コーティング被覆すること、または2層または多層状のタブレットにすることができる。
【００３２】
希釈液および吸着剤（absorbants）、たとえばグルコース、ラクトース、デンプン、カカオ脂、水素付加した植物油、ポリビニルピロリドン、Gelucire、Kaolin、タルク、その他;接着剤、たとえばアラビアゴム、トラガカントゴム、ゼラチン、エタノール、ハチ蜜、糖液体、米ペースト、または小麦粉ペースト、その他;崩壊剤、たとえば寒天粉末、乾燥デンプン、アルギナート、ドデカニルスルホン酸ナトリウム、メチルセルロース、エチルセルロース、その他などの、当該技術分野において共通に使用されるキャリアは、用量単位からペレットを調製するために使用することができる。
【００３３】
当該技術分野において共通に使用されるキャリア、たとえばポリエチレングリコール、レシチン（lethitin）、カカオ脂、高級アルコールおよびこれらのエステル、ゼラチン、並びに半合成のグリセリン・エステル、その他を用量単位から坐薬を調製するために使用することができる。
【００３４】
用量単位からカプセルを調製するためには、本発明の化合物またはこれらの立体異性体を上述のキャリアと混合し、混合物を硬カプセルまたは軟カプセルに固定する。一般式（I）の活性成分化合物またはこれらの立体異性体は、マイクロカプセルにカプセル化すること、または水溶性媒体に懸濁して懸濁液を調製すること、または硬カプセルに固定すること、または注射剤に調製することができる。
【００３５】
用量単位から溶液、エマルジョンなどの注射剤、注射剤のための凍結乾燥された粉末および懸濁液を製造するために、水、エタノール、ポリエチレングリコール、トリメチレングリコール、エトキシ化されたイソステロール、多酸素化されたイソステロール、ポリエチレンオキシドソルビトールアルカナートなどの当該技術分野において既知の全ての共通に使用される希釈液を使用することができる。加えて、塩化ナトリウム、グルコース、またはグリセロールの適切な量を注射剤に添加して、等張性の注射剤を製造することができる。さらに、従来の溶解剤、緩衝液、およびpHモジュレーターも、添加することができる。
【００３６】
必要であれば、着色剤、防腐剤、芳香剤（fragrants）、香料、甘味料、およびその他の材料を剤形に添加することもできる。
【００３７】
本発明の一般式（I）の化合物またはその立体異性体の投与用量は、いくつかの因子、たとえば予防または治療される障害の特徴および重篤さ、患者の性、年齢、重量、および個々の反応、具体的な化合物、投与経路および頻度、その他に応じて変化させる。通常、約75kgの体重をもつ患者については、１日あたり0.001mg/kg〜100mg/kg体重、好ましくは１日あたり0.01mg/kg〜20mg/kg体重、およびより好ましくは、１日あたり0.1mg/kg〜5mg/kg体重の量で１日１回または何回かに分けて（2回、3回、または4回など）用量を投与することが好ましい。
【実施例】
【００３８】
以下の実施例は、本発明を例証することが企図されるが、これらの実施例は、本発明を例証し、本発明の範囲を限定するために解釈されないことが企図される。
【表１−１】
2005533798.tif 000004
【００３９】
【表１−２】
2005533798.tif 000005
【００４０】
【表１−３】
2005533798.tif 000006
【００４１】
Na+／Ca2+交換体は、興奮性細胞膜上で位置している重要な二相性のイオン輸送タンパク質であり、その原理機能は、励起段階の間に侵入したCa2+を押し出して、細胞内のカルシウムを不活性レベルに戻すことである。Na+／Ca2+交換の間に、1つのCa2+の押出しにつき3つのNa+が、細胞内に輸送され、したがって、総電荷の膜を通過する移動がある。心筋の虚血／再灌流の初期には、心筋細胞膜傷害により、膜電位の異常および膜透過性の変化を生じ、大量のNa+が心筋細胞に侵入して、Na+／Ca2+交換体が逆に活性化されて過剰のNa+を押し出し、細胞内のCa2+過負荷を生じ、心筋細胞の傷害および死滅を悪化させる。したがって、Na+／Ca2+逆交換体は、虚血／再灌流の副作用の重要な機構であると考えられる。現在までに、Na+／Ca2+の逆交換を特異的に遮断することができる薬剤は、世界中に存在しない。本発明者らが採用したスクリーニング系に基づいた細胞レベルの病理学的モデル並びに関連したインビトロおよびインビボの研究により、Na+／Ca2+交換体（薬物作用の潜在的および重要な標的）にターゲットされるガイダンス化合物の開発のための理論的および実用的な指針が提供され、また、心筋細胞発作に対する薬物の開発に有益である。
【００４２】
1.Na+／Ca2+逆交換系における二相性の電流検出のためのアッセイ法の確立  
リバース・モードのNa+／Ca2+交換プロセスは、虚血／再灌流発作に関与する主機構のうちの1つであるので、虚血傷害に対する薬物の開発のためのリバース・モードのNa+／Ca2+交換プロセスを表す細胞モデルを確立することは非常に重要である。したがって、本発明者らは、首尾よく細胞内のNa+透析技術によるリバース・モードのNa+／Ca2+交換系の細胞モデルを確立し、パッチクランプ実験によりNa+／Ca2+交換電流を記録した。
【００４３】
特定の濃度のNaClが含まれた内液をマイクロカテーテル（microcatheter）で満たし、パッチクランプによって細胞全体の電流を記録した後に、細胞と内液の間のイオン交換プロセスを行った。内液に含まれるNa+を細胞に透析し;高い細胞内Na+濃度を生じさせた。その後、細胞を-40mYの保持電位に固定し（champed）、次いで+6OmVに脱分極させ、続いて80mVs-1の速度でかつ2sのコンディショニング・パルスで、逆にランプ刺激を減退させ、次いで-0.05Hzの振動数でlOOmVに再分極させた。刺激プロトコル下で、修正された二相性タイロード液（外向きおよび内向きの電流を同時に記録することができる）を、K+チャネルを遮断するための1mmol・L-1のBaCl2および20mmol・L-1のCsCl、L-タイプCa2+チャネルを遮断するための1μmol・L-1のベラパミル、Na+/K+ATPaseを遮断するためにの20μmol・L-1のウアバイン、並びにカリウムチャンネルを遮断するためのTEAを添加して灌流することによって、外向きからの内向きの方向への電流を記録した。その他の時間依存的な電流を遮断するために、記録される内向きの電流をリニア様式で示した。細胞内のNa+レベルおよび時間延長の増加により、リバース・モードのNa+／Ca2+交換プロセスが活性化された。その結果、外向き電流が有意に増大された。異なる濃度（0、15、25、および35mmol・L-1）の細胞内Na+に供した実験での比較研究では、25mmol・L-1のNaClが透析実験を行うために適切であり、本アッセイ法に適用できることが明らかとなった。このような実験的条件下で、細胞を圧壊したあとに、最大リバース・モード電流を3分記録した。8分の記録期間内では、有意な「減少」は観察されなかった。内向きおよび外向き電流は、5mmol・L-1のNi2+処理によって阻害され、実験では、Ni2+の非存在下および存在下において2つの電流‐電圧曲線を生じた。Ni2+感受性の電流（電気生理学的なNa+／Ca2+交換電流（INa-Ca）とも呼ばれる）は、2つの電流‐電圧曲線のマイナスの結果とした。INa-Caのリバース・モードでの電位は、-2OmVであった。
【００４４】
上記の電気生理学的なモデルにより、本発明の合成された化合物に対してスクリーニング研究を行った。IMM-001と名付けた新規化合物は、細胞内のNa+過負荷によって誘導されるNa+／Ca2+交換のリバース・モードに対して選択的に阻害作用を示す。阻害作用は、通常使用されるNa+／Ca2+交換遮断薬アミロライドよりも強力であった。また、結果は、アミロライドの有効濃度が10-5mol・L-1以上であり、また10-4mol・L-1で明らかとなり、その一方で、10-7〜10-5mol・L-1のIMM-001も有意な阻害作用を示すこととを証明する。
【００４５】
イソチオ尿素に由来する化合物KB-R7943は、Na+／Ca2+交換プロセスの選択的かつ強力な阻害剤であることが1996年に報告された。次いで、KB-R7943は、リバース・モードのNa+／Ca2+交換プロセスの最も新しく、かつ特異的な遮断薬と考えられていたので、薬理学的研究に広く使用された。しかし、実験におけるイオン条件は、内向きおよび外向きの電流のうちの単に一方のみを同時に記録することができるという制御下にあった。したがって、一方向性のイオン条件では、生理学的および病理学的な異常に適合せず、すなわち内向きおよび外向き電流は、同時に観察することができるであろう。上記モデルを介したINa-Caに対するKB-R794の阻害作用の結果は、リバース・モードのNa+／Ca2+交換プロセスに対して有意な阻害作用を示したが、相対する様式のNa+／Ca2+交換プロセスも同時に阻害された。観察では、Na+／Ca2+交換系に対するKB-R794の乏しい選択性を示す。
【００４６】
上記の観察を基礎として、リバース・モードのNa+／Ca2+交換プロセスに対するより特異的かつ選択的な遮断薬を開発したが、IMM-001がリーディング化合物である。
【００４７】
2.手順：
2.1モルモットからの単一の心室筋細胞の調製  
中国医学科学アカデミーの動物センター（the Animal Center of the Chinese Academy of Medical Sciences）によって提供される増量250〜280gの雄モルモットをハンマーで打ち、屠殺した。胸部を切開し、心臓を迅速に取り除いた。脂肪組織および心膜を4℃のCa2+フリーの溶液中で除去し、続いて心臓をランゲンドルフ装置にのせた。まず、残った血液を洗い流すために、Ca2+フリーの溶液で6分間、大動脈を介して心臓を逆に灌流し、次いで心臓が拡大して、その色がピンクに変化すた。次いで、0.lmg/mlのプロナーゼE、0.5mg／mlの脱脂したウシ血清アルブミン（BSA）、および150μM Ca2+を含むCa2+フリーの溶液で2〜3分間、心臓が膨張して軟らかくなるまで心臓を灌流した。心房を取り除き、消化した心臓をはさみで細かく切り刻み、ビーカーにおいて5〜10分間37℃で撹拌した。上清を0.5mg／mlのBSAおよび1.8mMのCa2+を含むCa2+フリーの溶液で希釈した。上清を室温（20〜24℃）で1時間おき、次いで実験に供した。全灌流期間の間において、圧力は、溶液の70cmH2Oに保ち、95%のO2および5%のCO2を有するガスを連続的に供給して温度を37℃に保った。
【００４８】
2.2全細胞のパッチクランプ技術  
明確な条線および無傷の膜を有する棒状の細胞を使用した。単離した単一の心室筋細胞をマイクロマニピュレータ（MO-303）に結合された倒立顕微鏡（IMT-2、オリンパス、日本）に水平にのせた記録チャンバ（1mlの体積）に置き、1〜2ml/分の流速で、タイロード液によって灌流した。吸込みピペットをガラス毛管（Shanghai Cerebral Institute, Academia Sinica）で作製し、二段階の調製方法を介して微小電極プラー（PP-83）に引き入れた。ピペットチップの抵抗は、ピペット溶液で満たした時に2〜4MΩであった。全パッチクランプ法の間に、刺激パルスおよびシグナルを記録し、pCLAMP5.5ソフトウェア（Axon Instrument）のソフトウェア制御下でパッチクランプ増幅器によって増幅し、AD／DAトランジション・プレートによってコンピュータに変換した。
【００４９】
細胞を-4OmVの保持電位で固定し、次いで+60mVに脱分極させ、続いて80mV・S-1の速度でおよび2sのコンディショニング・パルスで、逆にランプ刺激を減退させ、次いで0.05Hzの振動数で-100mVに再分極した。実験の間に、電流（INa-Ca）を記録した。減退ランプ波は、電圧ランプをゆっくりと脱分極する種類のものであるので、一連の抵抗および膜容量を補償することは不要である。その他の時間依存的な電流のために、ピペット溶液には、Na+/K+ATPaseを遮断するための20μmol・L-1のウアバイン、K+チャネルを遮断するための1mmol・L-1のBaCl2および20mmol・L-1のCsCl、L-タイプCa2+チャネルを遮断するための1μmol・L-1のベラパミル、並びにカリウムチャンネルを遮断するためのTEAを含める。Fabiato及びFabiatoの方程式に従って、細胞内の遊離のCa2+濃度（153nM）を、高レベルのEGTA（42mM）および塩化カルシウム（29mM）を含む内液のCa2+レベルから算出した。二相性のNa+／Ca2+交換プロセスによって生じる電流は、高濃度の細胞外Ni2+（2または5mM）によって特異的に阻害された。Ni2+感受性の電流（電気生理学的なNa+／Ca2+交換電流（INa-Ca）とも呼ばれる）は、2つの電流‐電圧曲線のマイナスの結果であった。記録された電流の値に対する種々の細胞サイズの影響を除くために、電流値は、電流密度（pA/pF）として示した。細胞全体の電位固定手順は、31〜32℃で行った。
【００５０】
2.3 試薬  
Ca2+フリーの溶液（mM）：NaCl 90、KCl 10、KH2PO4 1.2、MgSO4 5、NaHCO3 15、タウリン30、グルコース20、1N NaOHによってpHを7.4に調節  
正常タイロード液（mM）：NaCl 150、KCl 5.4、MgCl 2 2、CaCl2 1.8、HEPES 5、グルコース10、1N NaOHによってpH7.35に調節  
Na+／Ca2+交換電流を記録するためのタイロード液（mM）：NaCl 140、MgCl2 2、CaCl2 1.8、HEPES 5、Glucose 10、1N NaOHによってpHを7.4に調節  
正常ピペット溶液（mM）：KCl 140、MgCl2 0.5、EGTA 10、HEPES 10、1N KOHによってpH7.2に調節  
Na+／Ca2+交換電流を記録するためのピペット溶液（mM）：EGTA 42、CaCl2 29、MgCl2 13、アスパラギン酸42、TEA 20、HEPES 5、Na2ATP 5、1N CsOHによってpHを7.4に調節。実験の間に、15、25、および35mMのNa+濃度のピペット溶液において種々の濃度のNa+に従って、それぞれNaCl 5、15、および25mMに添加する。
【００５１】
全ての溶液は、再蒸留水によって調製した。Ca2+フリーの溶液およびタイロード溶液は、実験の前に新たに調製した。ピペット溶液は、調製後に0.22μmマイクロフィルタによってろ過し、エッペンドルフ・パイプでパックして、0℃以下に貯蔵した。
【００５２】
2.4統計学的解析  
オリジナルの電流グラフを測定し、pCLAMP 5.5.1およびpCLAMP 6.0.1ソフトウェアで解析した。全ての値は、平均±SEとして示してあり、nは細胞の数であり;統計解析のためにペアードおよびスチューデントt検定を使用した。0.05未満のP値を有意であるとみなした。
【００５３】
細胞に対するスクリーニング研究  
1. 正常Na+／Ca2+交換電流の記録  
細胞を-4OmVの保持電位で固定し、次いで+60mVに脱分極させ、続いて80mV・S-1の速度でおよび2sのコンディショニング・パルスで、逆にランプ刺激を減退させ、次いで0.05Hzの振動数で-100mVに再分極した。実験の間に、電流‐電圧曲線（I-V曲線）を得た。その他の時間依存的な電流を遮断するため、記録された電流は、ほぼリニアな様式に示した。内向きおよび外向き電流は、5mmol・L-1の細胞外Ni2+処理によって有意に阻害され、実験では、Ni2+の非存在下および存在下において2つの電流‐電圧曲線を生じた。Ni2+感受性の電流（電気生理学的なNa+／Ca2+交換電流（INa-Ca）とも呼ばれる）は、2つの電流‐電圧曲線のマイナスの結果であった。
【００５４】
2.Na+／Ca2+交換電流の阻害に対するアミロライド、KB-R7943、およびIMM-OO1の比較研究  
Na+／Ca2+交換プロセスによって生じる電流に対するアミロライド（Na+／H+交換の遮断薬）、2-[2-[4-（4-ニトロベンジルオキシ）フェニル]]イソチオ尿素（KB-R7943;リバース・モードNa+／Ca2+交換の阻害剤であり、最近では薬理学的ツールとして使用される）、および新規化合物（IMM-001）の阻害可能性を評価することによって、比較研究を行った。+50mVでのINa-Caに対するアミロライドの阻害割合は、10、30、100μMの濃度でそれぞれ15%、23%、および41%であり;-80mVでのINa-Caに対するアミロライドの阻害割合は、それぞれ6%、15%、および23%であった。結果は、外向きINa-Caに対するアミロライドの抑制性効果は、内向きINa-Caに対するものよりも強力であったことを示した。+50mVでのINa-Caに対するKB-R7943の阻害割合は、1および10μMの濃度でそれぞれ29%および61%であり;-80mVでのINa-Caに対するKB-R7943の阻害割合は、それぞれ22および57%であった。結果は、内向き／外向きINa-Caに対するKB-R7943の阻害作用は、イオン・コンディショニング下で選択性がないことを示した。+50mVでのINa-Caに対するIMM-001の阻害割合は、0.1、1、および10μMの濃度でそれぞれ28%、48%、および66%であり;-80mVでのINa-Caに対するIMM-001の阻害割合は、それぞれ18%、24%、および42%であった。外向きINa-Caに対するIMM-001の阻害作用は、内向きINa-Caに対するものよりも強力であった。上記証拠は、低濃度のアミロライドは、内向きおよび外向きINa-Caに対してほとんど効果を有さず；KB-R7943は、内向きおよび外向きの両方の電流に対して同時に阻害作用を示し、Ca2+を押し出す通常の膜機能に対して有意な影響を有することを証明する。IMM-001は、3つの化合物の中で最も強力な阻害剤であり、その阻害作用は、外向き電流に対して選択作用を有する。その他の化合物と比較して、IMM-001は、高い選択作用を有して特異的に標的に作用し、虚血／灌流傷害によって誘導される細胞内のCa2+過負荷の阻害に、および細胞内のCa2+過負荷によって生じる筋細胞損傷の回復に有益である（図1、図2、および図3を参照されたい）。
【００５５】
3. 比較およびスクリーニング研究：Na+／Ca2+交換電流に対する22個の候補化合物の抑制性効果  
KB-R7943およびアミロライドと比較して、外向きNa+／Ca2+交換電流に対するIMM-001の阻害作用は、より強力であり、有意な選択作用を有していた。このような証拠に基づいて、22個の候補化合物（そのリーディング化合物は、IMM-001である）を合成した。INa-Caの活性化に続く細胞内のNa+過負荷の細胞モデルは、パッチクランプ技術を経て確立した。したがって、Na-Ca交換電流に対する22個の候補化合物の阻害作用を評価して、IMM-001（陽性対照）と比較した。現在の研究の目的は、外向きNa+／Ca2+交換電流のより強力な阻害剤を見いだすことであり、これらの作用の選択作用は、IMM-001よりも特異的であった。結果を以下の表に示してある。
【表２】
2005533798.tif 000007
【００５６】
内向き電流よりも外向きINa-Caに対してより強力かつ選択的な阻害作用を有する7つの化合物が、電気生理学的な研究（心筋細胞レベルのもの）によって22個の化合物からスクリーニングされた。これらの化合物は、外向きINa-Caに対して特異的な阻害作用を示した。
【００５７】
実施例1：  
（1）心筋細胞におけるNa+／Ca2+交換電流に対する発明した化合物の阻害作用  
内向きおよび外向きるNa+／Ca2+交換電流に対する上記化合物の効果を評価した。試験した化合物は、リバース・モードのNa／Ca交換プロセスに対して特定の阻害作用を示す。Na+／Ca2+交換電流に対する抑制比は、40%よりも高く;最も強力なものの抑制比は、60%以上である（以下の表を参照されたい）
【表３】
2005533798.tif 000008
【００５８】
（2）虚血／再灌流傷害に供された単離された心臓に対する化合物の保護効果
電気生理学的な研究から得られ上記スクリーニング結果およびリバース・モードNa+／Ca2+交換プロセスに対する化合物の阻害作用の研究における比較研究からの結果に基づいて、7つの有効な化合物をインビトロ実験に供した。その中で、IMM-313、IMM-004、およびIMM-132は、塩素を含む構造を有し；IMM-127、IMM-128、およびIMM-129は、フッ素を含む構造を有し;並びに、IMM-065は、OHを含む構造を有する。実験は、虚血／再灌流傷害に供された単離された心臓で行った。心筋傷害に対する薬物の保護作用を評価するために、心室性不整脈の延長、心室期外収縮の発病率、心室性頻拍／心室細動（VT／VF）を記録した。結果は以下に示してある。
【表４】
2005533798.tif 000009
【００５９】
結論：IMM-313、IMM-004、およびIMM-065は、10-6Mの濃度で心筋の発作に対して有意な保護作用を示す。
【００６０】
実施例2：インビボ研究  
（1）静脈内注射後のラットにおける心筋発作に対する試験化合物の保護作用
1）0.3mg/Kg体重の静脈内（大腿静脈）注射後のラットにおいて、心血管の機能の回復に対するベラパミルの保護作用を検査した。VT、VF、YEの発病率、および不整脈期間は、全て減少し、並びに心室性不整脈の潜時は、薬物処置群において有意に引き延ばされた。
【００６１】
2）3mg/Kg体重の静脈内の（大腿静脈）注射後のラットにおいて、心血管の機能の回復に対するIMM-001の保護作用を検査した。VT、VFの発病率、およびVT、YEの心室性不整脈の期間は、薬物処置群において全く減少しなかった。
【００６２】
3）3mg/Kg体重の静脈内の（大腿静脈）注射後のラットにおいて、心血管の機能の回復に対するIMM-004の保護作用を検査した。VT、YF、およびYEの発病率、およびVTおよびVFの期間は全て減少し、並びに心室性不整脈の潜時は、薬物処置群において有意に引き延ばされた。
【００６３】
4）IMM-313（3mg/Kg）を経静脈（大腿静脈）注射したラットの41.2%（7/17）では、5分（以内に左の冠動脈前下行枝の結紮前に）心拍数が不可逆的に減少した。心拍数の減少したラットは、最終的に死んだ。その他の有効なデータの解析後に観察される有意な効果はない。
【００６４】
5）静脈内（大腿静脈）にIMM-065（3mg/Kg）を注射したラットにでは、有意な効果が観察されない。
【００６５】
6）3mg/Kg体重の静脈内（大腿静脈）注射後のラットにおいて、心血管の機能の回復に対するIMM-127の保護作用を検査した。VTおよびVFの発病率、並びにVTおよびYFの期間は全て減少し、並びに心室性不整脈の潜時は、薬物処置群において有意に引き延ばされた。
【００６６】
虚血／再灌流によって引き起こされる心筋障害に対する前述の化合物の保護作用は、3mg/kgの体重で静脈内に注射されるラットにおいて観察された。心筋の発作によって誘導される不整脈の強度を使用して化合物の潜在的な保護作用を評価した。
【表５】
2005533798.tif 000010
【００６７】
（2）経口投与後のラットにおける心筋の発作に対する試験化合物の保護作用  
IMM-004およびIMIM-127をエタノールおよびPEG（エタノール：PEG（v/v）= 1：9）の溶液に溶解した。ラットには、化合物を10ml/Kgの体積で経口投与した。投与後に15分〜60分間、ラットの左の冠動脈前下行枝を結紮し、再灌流を達成した。
【００６８】
1）IMM-004  
10mg/KgでIMM-004を経口投与したラットでは、保護作用は観察されなかった。30mg/Kg体重の経口投与後のラットにおいて、心血管の機能の回復に対するIMM-004の保護作用が観察された。VT（P＜0.01）、VF（P＜0.05）の発病率およびVTの期間（P＜0.O1）、並びに心室性不整脈の期間（P＜0.01）は全て減少した。
【００６９】
VTの発病率（P＜0.05）およびVT（P＜0.01）の期間、並びに心室性不整脈の期間（P＜0.05）は、100mg/kgの用量で全て減少された。
【００７０】
2）IMM-127  
VT（P＜0.05）の期間は、10mg/Kgの用量で有意に減少された。
【００７１】
VF（P＜0.05）の発病率並びにVT（P＜0.Oi）およびVF（P＜0.05）の期間、並びに心室性不整脈の期間（P＜0.0 1）は、30mg/kgの用量で全て減少された。
【００７２】
VTの発病率（P＜0.05）およびVTの期間（P＜0.01）は、100mg/kgの用量で減少された。
【００７３】
10、30、および100mg/kgの体重で経口投与されたラットにおいて、虚血／再灌流によって引き起こされる心筋障害に対する前述の化合物の保護作用が観察された。心筋発作によって誘導される不整脈の強度を使用して、化合物の潜在的な保護作用を評価した。
【００７４】
結論：上記の実験に基づいて、試験化合物を静脈内および経口的に投与したラットにおいて、心筋の虚血傷害に対する保護作用が観察された。
【表６】
2005533798.tif 000011
【００７５】
実施例3：麻酔イヌににおける心筋虚血症に対する化合物の保護作用
急性の心筋虚血、梗塞に対するIMM-004の効果をイヌにおいて観察した。イヌを十二指腸を経てIMM-004で処理し、心外膜のエレクトログラフィによって表される心筋虚血の重篤さ（ΣーST）および領域（NST）、N-BT染色法によって表される心筋梗塞のサイズ、冠状動脈の流れ、酸素消費、血中のCK、LDH、ASTの活性、および血漿（plasm）ET、TXB2、および6-Keto-PGF1の変化を含むパラメーターを観察した。
【００７６】
イヌを3群に分けた：1、媒体対照群、PEG 1ml/kg、n=5;2、ジルチアゼム（dilthiazem）群、5mg/kg、n=5;3、IMM-004群、30mg/kg、n=5。試験薬物は、蒸留水に1ml/kgの体積で調製した。試験項目は、動物によって十二指腸を経て投与した。
【００７７】
（1）心筋梗塞領域および虚血傷害減少に対する化合物の効果  
1）心筋虚血の重篤さ（Σ-ST）に対する化合物の効果  
心筋虚血の重篤さ（Σ-ST）の変化は、媒体（PEG）対照群では観察されなかった。ジルチアゼム（dilthiazem）（カルシウムチャネルの遮断薬、HERBESSER（登録商標）として商業的に入手可能）群のΣ-STは、投与の90分後に減少し、投与後180分間持続した。心筋虚血（Σ-ST）の有意な減少は、30mg/kgの用量で十二指腸を経てIMM-004で処理した動物において観察された。Σ-STは、IMM-004の投与の180分後に325.20±55.9SmVから146.80±60.25mYに減少した。Σ-STは、53.90±20.60%まで減少した。化合物処理と媒体対照群の間には、有意差があった（P＜0.O1）。図4を参照されたい。
【００７８】
心外膜エレクトログラフィ（EEG）から得られる結果は、イヌにおける実験的急性心筋虚血に対するIMM-004の保護作用の証拠をもたらした。心外膜エレクトログラフィ（EEG）検出から得られる心筋虚血症の重篤さ（Σ-ST）および領域（NST）並びにN-BT染色法によって表わされる心筋梗塞サイズは、化合物の処理によって全て減少された。
【００７９】
2）イヌにおける心筋梗塞領域に対する効果（N-BT方法）  
【表７】
2005533798.tif 000012
【００８０】
*P＜0.05、**：P＜0.01、***：P＜0.001対、対照群
心筋梗塞サイズは、定量的N-BT染色法によって表され、梗塞サイズは、媒体対照群の全心臓の6.62±1.14%およびの心室15.85±1.01%であった。心筋梗塞サイズは、IMM-004およびジルチアゼム（dilthiazem）（陽性対照）によって有意に減少された。心筋梗塞サイズは、30mg/kgの用量でのIMM-004処理によって心臓の2.04±0.93%および心室の5.08±2.00%に減少され、これは媒体対照と比較して69.18%および67.94%まで減少されている。2群の間の有意差を観察した（P＜0.001）。図5を参照されたい。
【００８１】
3）心筋虚血症発作に供されたイヌにおける血液生化学パラメータ（血清CKおよびLDH）の変化に対する効果  
血清CK、LDH、およびAST濃度は、急性心筋虚血発作に供されたイヌにおいて有意に上昇した。IMM-004処理では、有意にCKおよびAST濃度の上昇を阻害したが、媒体対照群と比較してLDH活性の上昇に対した効果を示さなかった。結果は、図6、7、および8に示してある。
【００８２】
結果は、イヌにおける実験的急性心筋虚血および梗塞に対するIMM-004の保護作用の証拠をもたらした。心外膜エレクトログラフィ（EEG）検出から得られる心筋虚血症の重篤さ（Σ-ST）および領域（NST）並びにN-BT染色法によって表わされる心筋梗塞サイズは、化合物の処理によって全て減少された。
【００８３】
クレアチンキナーゼ（CK）は、細胞質、特に心筋細胞の細胞質に広く分配している。心筋細胞のCKは、心血管の傷害後に血液に放出され、血清CK活性の上昇を生じる。したがって、心筋細胞からのサイトゾルCKの放出は、虚血性の細胞障害の信頼性が高い指標となる。心筋梗塞後に、傷害を受けた心筋細胞によってサイトゾルLDHが体液中に放出された。冠状血管静脈洞血液LDH濃度の上昇は、心筋傷害の重篤さを表す。現在の研究では、IMM-004処理が有意に心筋細胞損傷によって誘導されるCK活性の上昇を阻害することを証明した。また、実験では、心筋傷害後に、傷害性の心筋細胞によってサイトゾルASTが放出されること、およびIMM-004処理により有意に血液AST濃度の上昇を阻害したことを証明した。
【００８４】
（2）冠動脈に対する拡張効果  
1）実験的急性心筋虚血に供されたイヌにおける冠血流に対する化合物の効果  
冠血流は、結紮を行ったイヌにおける急性心筋虚血後に、一過性におよび補正的（compensatively）に10%まで増大した。冠血流は、ジルチアゼム（dilthiazem）またはIMM-004処理後に有意に増大した。冠血流は、IMM-004処理の30分後にベースラインに対して（verse）15.02±22.16%まで有意に増大され、対照群に対して有意があった（P＜0.05）。図9を参照されたい。
【００８５】
2）実験的急性心筋虚血に供されたイヌにおける動脈および静脈血酸素含有量に対する効果  
媒体（PEG）対照群においては、投与の前後において、動脈および静脈血酸素含有量および心筋酸素消費の変化が観察されなかった。有意な血液酸素濃度の増大および心筋酸素消費の減少がジルチアゼム（dilthiazem）処置群において観察された。冠血流は、IMM-004処置群において、投与後120分および180分で有意に増大され、投与前に得たベースラインに対してに有意差があった（P＜0.05）。結果は、図10に示してある。
【００８６】
多様な病態生理学的な発作によって誘導される冠動脈狭窄および閉塞は、心筋虚血および梗塞を生じ得る。このような状態において、副行循環は、心筋虚血症および梗塞の重篤さを減少させるために補償的に（compensatively）作りだされる。IMM-004処理は、心筋虚血および梗塞に供されたイヌにおける冠血流を増大した。また、冠動脈に対する化合物の血管拡張効果、副行循環に対する化合物の促進効果、および虚血心筋に供されたイヌに対する血液供給が、薬物処置群において観察された。
【００８７】
上記のデータは、イヌにおいて、急性心筋虚血および梗塞の病理学的徴候がIMM-004処理によって阻害されることを示す。心筋虚血症の重篤さおよび心筋梗塞のサイズは、減少される。加えて、冠動脈に対する化合物の拡張効果を観察し、並びに冠血流は、平均時においてIMM-004処理によって増大された。また、化合物は、虚血傷害によって誘導されるCKおよびASTの放出に対する阻害作用を示す。上記の結果は、本薬物がリバース・モードNa+／Ca2+交換プロセスの選択的遮断薬であるというその作用の薬理学的機構と一致している。虚血傷害に対する保護作用、冠動脈に対する拡張効果、および血液供給の増大を含む薬理作用は、全てその作用機序と一致する。
【００８８】
実施例4：ラットにおける心機能のおよび血行動態（homodynamic）の改善
（1）正常ラットにおける心機能のおよび血行動態（homodynamic）のに対する機能  
方法：300〜35Ogの体重の雄SDラットを12時間絶食させて、20%のウレタン（0.5ml／100g、1g/kg）で腹腔内（i.p.）処理によって麻酔した。ポリエチレンチューブ（PE-50）を左大腿動脈、左大腿静脈、右大腿静脈、および左心室に挿入した。左大腿動脈は、血液採取のためにカニューレ処置し、左大腿静脈は液体を補償するためにカニューレ処置し、右大腿動脈は、血圧検出のためにカニューレ処置し、左心室は心室内圧検出のためにカニューレ処置し、左大腿動脈および心室をカニューレ処置し、およびカテーテルはトリプレットによって圧力トランスジューサーに結合した。シグナルは、圧力トランスジューサーに結合したオシログラフおよびマルチチャネル生物力学レコーダーによって獲得した。薬物処理群のラットには、30mg/kgでIMM-004を経口投与したが、媒体対照群のラットには、同体積の媒体（PEG）を経口処理した。左心室の収縮期圧（LVSP）、左心室の拡張末期圧（LVEDP）、並びに左心室圧（±dp/dtmax）、動脈収縮期圧（SP）、動脈拡張期圧（DP）、平均動脈圧力（MAP）、および心拍数（FIR）の最大率を投与の40分後に記録した。シグナルは、10分毎に連続的に記録した。
【００８９】
結果：左心室の収縮期圧（LVSP）、左心室の拡張末期圧（LYEDP）、並びに左心室圧（±dp/dtmax）、動脈収縮期圧（SP）、動脈拡張期圧（DP）、平均動脈圧力（MAP）、および心拍数（FIR）の最大率は、IMM-004によって有意な影響を受けず、処理をしていないラットにおいてIMM-004が心機能および血行動態に対して全く効果を有さないことを示している。媒体対照群およびIMM-004処置群の間には、有意な統計的な相違がない。
【００９０】
結論：IMM-004は、心機能および血行動態に対して効果を有さない。
【００９１】
（2）心筋虚血症／再灌流発作に供されたラットにおける心機能および血行動態の回復に対する効果  
方法：300〜35Ogの体重の雄SDラットを12時間絶食させて、20%のウレタン（0.5ml／100g、1g/kg）で腹腔内（i.p.）処理によって麻酔した。ポリエチレンチューブ（PE-50）を左大腿動脈、左大腿静脈、右大腿静脈、および左心室に挿入した。左大腿動脈は、血液採取のためにカニューレ処置し、左大腿静脈は液体を補償するためにカニューレ処置し、右大腿動脈は、血圧検出のためにカニューレ処置し、左心室は心室内圧検出のためにカニューレ処置し、左大腿動脈および心室をカニューレ処置し、およびカテーテルはトリプレットによって圧力トランスジューサーに結合した。シグナルは、圧力トランスジューサーに結合したオシログラフおよびマルチチャネル生物力学レコーダーによって獲得した。薬物処理群のラットには、30mg/kgでIMM-004を経口投与したが、媒体対照群のラットには、同体積の媒体（PEG）を経口処理した。気管を解剖し、開胸術の後に人工呼吸器によって人工呼吸を行った（2ml/100g）。第4から第5肋骨を胸骨の左端から2mm切断することによって第4から第5肋間から左の開胸を行い、心膜をあけて心臓を暴露させた。3.0絹結紮糸を左前下腿冠動脈の下に配置した。心臓を胸に戻して、10分間安定にさせた。縫合末端を、ポリエチレンチューブ（3×8mm）を通して縫ってスネアを形成した。縫合の末端をピンと引っ張り、止血鉗子でスネアを固定して冠動脈を閉塞させた。冠動脈閉塞は、心外膜チアノーゼおよびその後の動脈の血圧の減少によって検証した。心臓の再灌流は、止血鉗子をはずしてスネアを15分間ゆるめることによって開始した。左心室の収縮期圧（LVSP）、左心室の拡張末期圧（LYEDP）、並びに左心室圧（±dp/dtmax）、動脈収縮期圧（SP）、動脈拡張期圧（DP）、平均動脈圧力（MAP）、および心拍数（FIR）の最大率を開胸術の前および後に10分ごとに、および虚血（15分間）および再灌流（1時間）の期間に記録した。
【００９２】
結果:LVSPは、IMM-004処理群において120mmHg〜100mmHgにじりじりと減少した。LVSPは、媒体対照群において揺らぎながら60.8mmHgに減少した。LVEDPは、対照群における再灌流の10分後に急速に増大し、左心室（+l5mmHg）の弛緩機能障害および関連した損傷を示した。LVEDPは、着実にIMM-004群のベースラインに匹敵し（約-6mmHg）、心筋の弛緩機能に対するIMM-004の強力な保護作用を証明した。+dp/dtmaxは、心筋の収縮機能を評価するために通常使用されるパラメーターである。IMM-004群の+dp/dtmaxは、約+110mmHg/sであり、有意差なしで減少した。媒体対照群の+dp/dtmaxは、5OmmHg／sに減少して、IMM-004群のものよりも54%低い。-dp/dtmaxは、心筋の弛緩機能を評価するために使用されるパラメーターである。IMM-004群の-dp/dtmax 100mmHgIsから70mmHg／sまで減少し、媒体対照群の-dp/dtmaxは、100mmHg／sから30mmHg／sまで減少した。結果は、IMM-004が心筋の収縮機能障害に対する有意な保護作用を有し、かつ心筋の弛緩機能を正常レベルに保持したことを示した。
【００９３】
IMM-004は、心機能に対して有意な保護作用を示し、したがって、IMM-004群のラットの血圧は、安定していた（SBP 100mmHg、MAP 8OmmHg）。IMM-004群と比較して、媒体対照群の血圧が減少し、大規模（SBP 80mmHg、MAP60 mmHg）に変動し、虚血／再灌流に供されたラットにおいて重篤な心筋障害発症した。図に示したように、虚血／再灌流に供されたラットの心拍数は減少した（461から400beats／最小値まで）。心拍数は、IMM-004処理による影響を受けず、2つの群の間には相違がなかった。図11、12、13、14、および15を参照されたい。
【００９４】
結論：虚血／再灌流発作に供されたラットの心機能は減少され、心筋の弛緩機能および血圧の減少によって表され、または血圧は、大規模に変動する。IMM-004は、虚血／再灌流によって誘導される心臓機能障害に対して有意な保護作用を示し、心臓弛緩機能を正常レベルに回復させることに対してより強力な効果を有する。IMM-004群のラットの血圧は、安定している。加えて、IMM-004は、心筋傷害によって誘導される心拍数の減少に対して効果を有さない。
【００９５】
実施例5：毒性研究  
（1）エイムス（突然変異誘発）試験  
5つの化合物（IMM-004; IMM-065;IMM-127;IMM-128;IMM-313）の変異原性の効果を評価するために、4株（TA97;TA98;TA100;TA1O2）においてエイムス試験を行った。4つの濃度レベル（0.5、5、50、500μg／ディッシュ）の化合物で実験を行った。これらの化合物変異原性の効果についての証拠は見いだされなかった。結果を以下に示してある。
【表８】
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【００９６】
【表９】
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【００９７】
【表１０】
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【００９８】
【表１１】
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【００９９】
（2）急性毒性研究
急性毒性研究は、IMM-004およびIMM-127（本発明者らが合成した）で行った。化合物を粉末として提供し、それを製粉して、使用前に0.5%のカルボキシメチルセルロースナトリウム（CMC-Na）に懸濁した。19±2gの重量の雄KMマウスを使用前に順応のために収容した。マウスをランダムな群に分け、各群10匹の動物からなった。マウスは、試験化合物の投与の14時間前に全て絶食させた。高用量群のマウスの活性は、投与の30分後に減少された。投与の24時間後に、各群のマウスは正常に回復した。マウスは、投与後の7日の期間、毎日観察した。結果を以下に示してある：
【表１２】
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【０１００】
結論：
IMM-004のいずれの用量群においても（経口LD50（50%致死）＞5g/kg）死亡はなく、これらの化合物が低毒性であることを示す。
【図面の簡単な説明】
【０１０１】
【図１】モルモットの心室心筋における順方向および逆方向のNa+／Ca2+交換電流に対するアミロライドの効果。
【図２】モルモットの心室心筋における順方向および逆方向のNa+／Ca2+交換電流に対するKB-R7943の効果。
【図３】モルモットの心室心筋における順方向および逆方向のNa+／Ca2+交換電流に対するIMM-001の効果。
【図４】それぞれの群のイヌにおける心筋虚血の重篤さの比較および心室表面電位の測定。
【図５】それぞれの群のイヌにおける急性心筋虚血領域。
【図６】それぞれの群のイヌにおける血清クレアチンキナーゼ（CK）の比較。
【図７】それぞれの群のイヌにおける血清乳酸脱水素酵素（LDH）の比較。
【図８】それぞれの群のイヌにおける血清グルタミン酸オキサロ酢酸トランスアミナーゼ（AST）の比較。
【図９】それぞれの群のイヌにおける冠血流の比較。
【図１０】それぞれの群のイヌにおける血液酸素の比較。
【図１１】心筋虚血／再灌流ラットの左心室の収縮期圧（LVSP）に対するIMM-001の効果。
【図１２】心筋虚血／再灌流ラットの左心室の拡張終期圧（LVEDP）に対するIMM-001の効果。
【図１３】心筋虚血／再灌流ラットの左動脈収縮期圧（SBP）に対するIMM-001の効果。
【図１４Ａ】心筋虚血／再灌流ラットの左心室圧の最大数（±dp/dtmax）に対するIMM-001の効果。
【図１４Ｂ】心筋虚血／再灌流ラットの左心室圧の最大数（±dp/dtmax）に対するIMM-001の効果。
【図１５】心筋虚血／再灌流ラットの平均動脈圧（MAP）に対するIMM-001の効果。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１５】
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【国際調査報告】
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