(57)【要約】本発明は、（ｉ）表面活性剤の存在下で、親油性化合物の粒径を減少させるステップ、（ｉｉ）アルギン酸アルカリ金属塩の溶液を調製するステップ、（ｉｉｉ）ステップ（ｉ）の溶液とステップ（ｉｉ）の溶液を合わせるステップ、（ｉｖ）Ｃａ２＋を含有する溶液に、ステージ（ｉｉｉ）で得られた溶液を滴下し、ビーズレットを得、この形成されたビーズレットを前記溶液から取り出すステップ、（ｖ）ビーズレットを、酸性溶液ですすぎ、乾燥させるステップ、および（ｖｉ）ステップ（ｖ）で得られたビーズレットをコートし、マイクロカプセルを得るステップを含む、親油性化合物を含有するマイクロカプセル化された組成物を調製するための方法を提供する。本発明は、一態様では、界面活性物質によって包まれ、アルギン酸塩マトリックスでカプセル化され、外層コーティングでさらにコートされた１種または複数の親油性化合物からなり、親油性物質の粒径が２０μｍ以下のマイクロカプセル化された組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）表面活性剤の存在下で、親油性化合物の粒径を減少させるステップ、
（ｉｉ）アルギン酸アルカリ金属塩の溶液を調製するステップ、
（ｉｉｉ）ステップ（ｉ）の溶液とステップ（ｉｉ）の溶液を合わせるステップ、
（ｉｖ）Ｃａ２＋を含有する溶液に、ステージ（ｉｉｉ）で得られた溶液を滴下し、ビーズレットを得、この形成されたビーズレットを前記溶液から取り出すステップ、
（ｖ）ビーズレットを、酸性溶液ですすぎ、乾燥させるステップ、および
（ｖｉ）ステップ（ｖ）で得られたビーズレットをコートし、マイクロカプセルを得るステップ
を含む、親油性化合物を含有するマイクロカプセル化された組成物を調製するための方法。
【請求項２】
親油性化合物の粒径を、２０μｍ以下に減少させる請求項１に記載の方法。
【請求項３】
親油性化合物の粒径を、１０μｍ以下に減少させる請求項２に記載の方法。
【請求項４】
アルギン酸アルカリ金属塩が、アルギン酸ナトリウムまたはアルギン酸カリウムである請求項１に記載の方法。
【請求項５】
ステージ（ｉ）に添加剤が加えられる請求項１に記載の方法。
【請求項６】
親油性化合物が、リコピン、βおよびα−カロチン、ルテイン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＤ、ω３オイル、ω６オイル、およびそれらの混合物からなる群の中から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項７】
ステージ（ｉｉ）に添加剤が加えられる請求項１に記載の方法。
【請求項８】
親油性化合物含有アルギン酸塩ビーズレットのサイズが、１００から４２５μｍの範囲内である請求項１に記載の方法。
【請求項９】
酸性溶液が、クエン酸、アスパラギン酸、酢酸、アスコルビン酸、乳酸、リン酸、または塩酸からなる群の中から選択される酸を含む酸性の水溶液である請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
コーティング材料が、セルロース誘導体、蝋、脂肪、タンパク質、および多糖類からなる群の中から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
セルロース誘導体が、ヒドロキシプロピルセルロースである請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
ステップ（ｉ）のサイズ減少が、液体媒質中で実施され、液体媒質が水または水混和性液体である請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
界面活性剤によって包まれ、アルギン酸塩マトリックスでカプセル化され、外層コーティングでさらにコートされた１種または複数の親油性化合物からなり、親油性物質の粒径が２０μｍ以下であるマイクロカプセル化された組成物。
【請求項１４】
親油性化合物が、リコピン、βおよびα−カロチン、ルテイン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＤ、ω３オイル、ω６オイル、およびそれらの混合物からなる群の中から選択される請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
親油性化合物の粒径が、１０μｍ以下である請求項１３に記載の組成物。
【請求項１６】
粒径が、５μｍ以下である請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
マイクロカプセルのサイズが、５０μｍから９５０μｍの範囲内である請求項１３に記載の組成物。
【請求項１８】
マイクロカプセルのサイズが、１００μｍから４５０μｍの範囲内である請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
０．１％から４０％の親油性化合物またはその混合物を含む請求項１３に記載の組成物。
【請求項２０】
コーティングが、セルロース誘導体、蝋、脂肪、タンパク質、および多糖類からなる群の中から選択される材料である請求項１３に記載の組成物。
【請求項２１】
コーティングが、ヒドロキシプロピルセルロースである請求項１９に記載の組成物。
【請求項２２】
前記組成物が、錠剤グレードである請求項１３に記載の組成物。
【請求項２３】
請求項１の方法に従って親油性化合物をカプセル化すること、およびカプセル化された組成物を食材に加えることを含む、食材に親油性化合物を組み込むための方法。
【請求項２４】
請求項１の方法に従って親油性化合物をカプセル化することを含む、親油性化合物の風味および／または匂いをマスキングするための方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、安定性を向上させた、親油性化合物のマイクロカプセル化された組成物、および前記組成物を調製する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
油および油溶性物質をカプセル化する方法は、当技術分野でよく知られている。
【０００３】
例えば米国特許第４，３８９，４１９号（参照により本明細書に組み込む）は、多区画化された（ｍｕｌｔｉ−ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔａｌｉｚｅｄ）、力学的に安定なマイクロカプセルで、油および油溶性物質をカプセル化するための方法に関する。この方法は、アルギン酸アルカリ金属塩、および場合によっては多糖類などの水溶性かつアルコール不溶性の添加剤（ｆｉｌｌｅｒ）の水溶液を含む連続相と、油に溶解した１種または複数のビタミンなどの親油性物質の分散相とからなるエマルジョンを最初に形成するステップを含む。次いでこのエマルジョンを液滴にし、その後、これを多価カチオンのアルコール溶液に浸して、析出した多糖類で満たされ、複数の油滴を包んだ、形状を維持したアルギン酸塩マトリックスを生じさせる。それによって、ビタミンは、酸化劣化から保護され、通常の結晶固体のように取り扱うことができる。
【０００４】
アルギンは、褐藻類中に見られる多糖類である。アルギン酸塩およびその誘導体は、親水コロイドとして非常に重要になりつつあり、非常に多様な産業分野に適用されている。
【０００５】
アルギンは、構造式Ｉのβ−（１→４）−Ｄ−マンヌロン酸、
【０００６】
【化１】
2005500157.tif 000002
および構造式ＩＩのα−（１→４）−Ｌ−グルロン酸
【０００７】
【化２】
2005500157.tif 000003
を含む多糖類である：
アルギンは、次の３種の分子ブロックで構成される不均一ポリマーである：
ａ）Ｍ−Ｍ結合のみで構成されるＭ−ブロック、
ｂ）Ｇ−Ｇ結合のみで構成されるＧ−ブロック、および
ｃ）ＭとＧがランダムに結合したランダムブロック。
【０００８】
アルギン酸カルシウムゲルビーズは、非常に様々な物質を閉じ込めるために使用される。アルギン酸カルシウムを用いた閉じ込めは、使用する条件が穏和であり、反応物質の毒性も無いので、特に好まれている。通常、その手順は、単に塩化カルシウムの１〜２％溶液に、アルギン酸ナトリウムの１〜２％溶液を滴下することを必要とするだけである。このアルギン酸塩溶液を、針などの小さなオリフィス、または回転板（ｒｏｔａｔｉｎｇ  ｐｌａｔｅ）、または振動液滴フィーダー（ｖｉｂｒａｔｉｎｇ  ｄｒｏｐｌｅｔｓ  ｆｅｅｄｅｒ）を通して送り込み、自由落下させ、球状のビーズを生じることができ、これはカルシウム源と接触するとゲル化する。その後、これらのビーズは、硬化するまでカルシウム浴中に入れておく。
【０００９】
ランゲルハンス島、すなわち膵臓においてインシュリンを産生する細胞を、アルギン酸ポリカチオン（ａｌｇｉｎａｔｅ  ｐｏｌｙｃａｔｉｏｎ）マイクロカプセルに閉じ込め、グルコースおよび他の栄養分などの小さな分子を自由に拡散させ、一方で大きな分子および細胞の通過を妨げることができる。形、サイズ、および透過性など、マイクロカプセルの物理化学的性質は、調節することができる（グーセン（Ｇｏｏｓｅｎ）他、応用生物工学と生体工学（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ）、１０、８７−９８、１９８４年）。
【００１０】
米国特許第４，３８９，４１９号には、「使用される油の量は、概して１％から３０％に近い量の範囲とすることができる。しかし、この範囲の高い側では、水中油型エマルジョンの安定性は低下し、マイクロカプセルの質は低下する。」と記載されている（第３段、５〜９行）。
【００１１】
９７年１０月のＢＡＳＦ健康および栄養部門の刊行物（ＢＡＳＦ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ  ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ）は、ゼラチンを使用するマイクロカプセル化のための方法を報告している。この報告では、最終産物の平均粒径は、約２５０μであり、有効成分の濃度は、最高５０％である。しかし、このＢＡＳＦプロセスは、ゼラチンの使用を必要とし、これは、望ましくない制約である。ゼラチンは主に、狂牛病および口蹄疫に罹りやすいブタおよびウシから精製される。
【００１２】
米国特許第６，１４６，６７１号は、単層コーティング系をもたらすアルギン酸塩および追加の高分子材料の保護マトリックスでカプセル化することによって、熱および／または酸素不安定性の化合物を保護するための方法を開示している。米国特許第６，１４６，６７１号はさらに、好ましい保護ポリマーとしてのゼラチンの使用を提案している。最近、市場では、狂牛病に罹りやすい動物由来ではない材料が求められている。
【００１３】
上記事項を考慮すると、親油性化合物の含有量が多く、粒径が小さく、生物学的利用能が向上された、安定な、遺伝子組み換え体を含まない（ＧＭＯ−ｆｒｅｅ）、植物原料のアルギン酸塩マイクロカプセルが依然として必要である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
したがって、本発明の目的は、含まれる親油性化合物の含有量が比較的多く、生物学的利用能および安定性が向上した、親油性化合物のマイクロカプセル化された調合物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明は、次のステップを含む、親油性化合物を含有するマイクロカプセル化された組成物を調製するための方法を提供する：
（ａ）表面活性剤の存在下で、親油性化合物の粒径を減少させるステップ、
（ｂ）アルギン酸アルカリ金属塩の溶液を調製するステップ、
（ｃ）ステップ（ｉ）の溶液とステップ（ｉｉ）の溶液を合わせるステップ、
（ｄ）Ｃａ２＋を含有する溶液に、ステージ（ｉｉｉ）で得られた溶液を滴下し、ビーズレットを得、この形成されたビーズレットを前記溶液から取り出すステップ、
（ｅ）ビーズレットを、酸性溶液ですすぎ、乾燥させるステップ、
（ｆ）ステップ（ｖ）で得られたビーズレットをコートし、マイクロカプセルを得るステップ。
【００１６】
場合によっては、ステージ（ｉ）および／または（ｉｉ）で調製された溶液に、添加剤を加える。
【００１７】
本発明は、一態様では、界面活性物質によって包まれ、アルギン酸塩マトリックスでカプセル化され、外層コーティングでさらにコートされた１種または複数の親油性化合物を含み、親油性物質の粒径が２０μｍ以下のマイクロカプセル化された組成物に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
以下の説明は、本発明の実施形態を例示するものである。以下の説明は、限定的なものとして解釈されるべきではなく、当分野の技術者であれば、本発明の多くの明白な変形形態を実施できることを理解されたい。
【００１９】
この説明全体を通して、諸成分の百分率は、特に注釈がない限り重量によるものである。また、用語「粒径」は、液体物質の液滴のサイズを意味する。
【００２０】
驚いたことに、親油性化合物が、界面活性物質で処理され、アルギン酸塩マトリックスでマイクロカプセル化され、さらに保護層によってコートされると、親油性化合物の充填体積が比較的大きい、安定なマイクロカプセルとなることが判明した。このコンテキストでは、マイクロカプセルの安定性とは、優れた包含特性、すなわち、親油性化合物が、カプセル化によって、親油性化合物に悪影響を及ぼす可能性がある酸化および他の状態への曝露から保護されることを意味する。本発明のように、３つの保護層で親油性化合物をコートすることは、前記化合物の生物学的利用能に悪影響を与えることが予測される。しかし、さらに驚いたことに、親油性化合物の粒径が、２０μｍ以下であり、アルギン酸塩のビーズレットを、このビーズレットの最終乾燥前に、酸性水溶液ですすぐという、前記化合物の本発明によるカプセル化は、親油性化合物が、生物学的利用能の向上を示すようなマイクロカプセルを提供することが判明した。
【００２１】
本発明に適した親油性化合物は、熱または酸素化条件に敏感な親油性化合物である。親油性化合物の非限定的な例は、カロチノイド（例えばリコピン、βおよびα−カロチン、ルテイン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン）、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＤ、ω３オイル、ω６オイル、およびそれらの混合物である。本発明に適したさらなる親油性化合物は、例えば苦味のあるビタミンや魚油などの、マスキングする必要がある味または匂いを有する親油性化合物である。この説明全体を通して、親油性化合物という用語は、前述の定義および前記化合物の混合物を含む。
【００２２】
本発明の方法のある特定の実施形態によれば、界面活性剤０．０１％〜５％、リコピン、β−カロチン、ルテイン、α−カロチン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＤ、ω３オイルおよびω６オイル、またはそれらの混合物からなる群の中から選択された親油性化合物０．１％〜５％、および添加剤０％〜２０％を含有する溶液が調製される。前記溶液は、親油性化合物の粒子のサイズ減少のために処理される。親油性化合物が、固体状である場合、前記溶液は、粉砕機（ｇｒｉｎｄｅｒ）で加工され、親油性化合物が、液体状である場合、前記溶液は、高剪断ミキサー（ｈｉｇｈ  ｓｈｅａｒ  ｍｉｘｅｒ）で処理される。表面活性剤（界面活性物質）を用いた親油性化合物の処理では、親油性化合物の粒子の周囲に界面活性物質のコーティング、すなわち第１の保護層を作る。サイズ減少の後、アルギン酸アルカリ金属塩を水に溶解することによって、別にアルギン酸アルカリ金属塩溶液を調製し、０．５％〜１０％のアルギン酸アルカリ金属塩、好ましくは１．５％アルギン酸ナトリウムを含有する水溶液を得る。このアルギン酸アルカリ金属塩溶液を、親油性化合物を含有する溶液と混合する。得られた溶液を均質化して実質的に均質なエマルジョンまたは分散液を得、これを０．２％〜５％のＣａ２＋、好ましくは１．５％塩化カルシウムを含有する溶液に滴下する。滴下は、液滴が、１０００μｍより大きくならないように行う。このように、液滴がＣａ２＋溶液と接触すると、親油性化合物を含有するアルギン酸塩のビーズレットが形成される。これは、親油性化合物に対する第２の保護層を成す。ビーズレットのサイズは、液滴のサイズを調節することによって調節できる。液滴のサイズは、約１００μｍ〜約４５０μｍのサイズ範囲のビーズレットが得られるように調節されることが好ましい。その後、例えばふるい分け（ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ）などの従来の分離手段によって、ビーズレットを溶液から分離し、酸性水溶液ですすぐ。この酸性溶液は、クエン酸、アスパラギン酸、酢酸、アスコルビン酸、乳酸、リン酸、または塩酸からなる群の中から選択される酸の０．１％〜１０％溶液であることが好ましい。前記酸性溶液は、より好ましくは、クエン酸またはリン酸の２．５％水溶液である。酸性溶液を用いたすすぎ洗いは、ビーズレットの収縮をもたらし、マイクロカプセル化された親油性化合物の生物学的利用能を向上させる。ビーズレットはその後、当技術分野で知られた乾燥方法に従って、好ましくは流動層乾燥によって乾燥させる。「乾燥」は、含水量を１０％未満に減少させることを意味する。その後、米国特許第４，７１０，３８４号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されたコーティング技術に従って、流動層装置内で、この乾燥ビーズレットをコーティング材料でコートする。したがって、第３のコーティング層がもたらされる。この最終のコーティングステージ用の適切なコーティング材料は、セルロース誘導体、蝋、脂肪、タンパク質、または多糖類である。コーティング材料に適したセルロース誘導体の非限定的な例は、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、およびメチルセルロースである。蝋は、カルナウバ蝋、カンデリラ蝋、および蜜蝋であり得る。脂肪は、例えばダイズ油およびパーム油、モノグリセリドおよびジグリセリド、ステアリン酸、パルミチン酸などの硬化植物油であり得る。タンパク質は、アルブミン、ゼイン、ダイズタンパク質、またはミルクタンパク質であり得る。多糖類は、デンプン、マルトデキストリン、ペクチン、キサンタンガム、アラビアゴム、またはカラギーナンであり得る。本発明のある特定の実施形態によれば、動物由来の生成物の使用に関して制限がない場合は、第３の層コーティングのための適切なタンパク質として、ゼラチンを適用することができる。
【００２３】
本発明のステージ（ｉ）におけるサイズ減少の操作は、液体媒質中で実施できる。この液体媒質は、水または他の水混和性溶媒であり得、適切な液体の非限定的な例は、例えばメタノール、エタノール、イソプロパノール、アセトン、および酢酸エチルなどのアルコールである。したがって、親油性化合物と表面活性剤を含有するステージ（ｉ）の溶液に、この液体を加える。
【００２４】
本発明の他の実施形態によれば、乾燥と最終コーティングは、流動層装置内で、一段階で実施される。
【００２５】
本発明のある特定の実施形態によれば、親油性化合物が液体状である場合、本発明の方法のステージ（ｉ）は、親油性化合物の液滴サイズが２０μｍ以下、好ましくは３μｍ〜７μｍの範囲のサイズに減少されるように実施され、ステージ（ｉ）で得られる溶液は、エマルジョンまたは懸濁液である。
【００２６】
本発明の他の好ましい実施形態では、親油性化合物は、β−カロチン、リコピン、α−カロチン、ルテイン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＤ、ω３オイル、およびω６オイル、またはそれらの混合物からなる群の中から選択される。ただし、マイクロカプセルは、前記親油性化合物を０．１％〜４０％含有する。
【００２７】
本発明の方法のステージ（ｉ）および／または（ｉｉ）で使用するのに適した添加剤は、例えばペクチン、デンプン、カラギーナン、アラビアゴム、キサンタンガム、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなどの多糖類、ダイズ、トウモロコシ、乳、または乳清由来のタンパク質からなる群の中から選択される。
【００２８】
用語「界面活性剤」は、乳化作用、コロイド化作用、安定化作用、または分散作用を有するいずれの物質も指す。適切な界面活性物質の非限定的な例は、例えば、アルコールアルコキシレート；アルコールエトキシレート；アルキルフェノールアルコキシレート；アルキルフェノールエトキシレート；アルキル多糖類；例えばエトキシ化ポリプロピレンオキシド、アルコキシ化エチレンジアミンなどのブロック共重合体；例えばモノおよびジステアリン酸グリセロール、モノおよびジオレイン酸グリセロールなどのエステル；エトキシ化ソルビタンエステルおよびソルビタンエステル、例えばダイズ、トウモロコシ、乳清由来のタンパク質などの種々のタンパク質など、非イオン、陰イオン、または陽イオン界面活性物質であり得る。
【００２９】
本発明の組成物のある特定の実施形態によれば、マイクロカプセル化された親油性化合物を含有する組成物は、粒径が１０μｍ以下、好ましくは２μｍと５μｍとの間であるβ−カロチン、リコピン、α−カロチン、ルテイン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＤ、ω３およびω６オイル、あるいはそれらの混合物の中から選択される親油性化合物を０．１％〜４０％含有する。前記組成物は、界面活性物質、界面活性物質でコートされた親油性化合物を取り込んだアルギン酸塩マトリックス、およびこの親油性化合物を含有するアルギン酸塩マトリックスをコートするコーティングをさらに含む。コーティング材料は、セルロース誘導体、蝋、脂肪、タンパク質、および多糖類からなる群の中から選択される。
【００３０】
本発明によるマイクロカプセル化された組成物は、錠剤調製、ハードシェルカプセル（ｈａｒｄ  ｓｈｅｌｌ  ｃａｐｓｕｌｅ）への充填、および種々の食品への組み込みに適している。本発明のある特定の実施形態によれば、本発明で使用される親油性化合物またはその混合物は、添加剤、賦形剤、または添加物をさらに含んでもよい。適切な添加剤の例は、デンプン、ペクチン、カラジナン、キサンタンガム、タンパク質、ポリエチレングリコール、セルロース誘導体（例えばメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、およびエチルセルロースなど）、ならびに他の多糖類である。
【００３１】
本発明に従って調製されたマイクロカプセルは、親油性化合物を保護する３つの保護層を含む。第１の保護層は、界面活性物質によって作られ、第２の保護層は、アルギン酸塩マトリックスによって作られ、第３の層は、最終のコーティング層である。
【００３２】
本発明の他の態様によれば、本発明の方法は、マスキングされる必要がある味または匂いを有する親油性化合物のカプセル化に適している。これは、親油性化合物が、摂取者にとって不快な味または匂いを有する、あるいは、その食材および飲料の味または匂いに合わない場合の、食材および飲料への前記親油性化合物の導入にとって特に重要である。例えば、親油性化合物が甘味または塩味の食品に加えられる場合、苦味のある前記親油性化合物の味をマスキングする。この効果は、本発明の方法によって、親油性化合物の生物学的利用能を妨げずに実現される。
【００３３】
本発明は、安定性が向上し、親油性化合物の含有量が比較的に多く、親油性化合物の生物学的利用能が向上した、親油性化合物のマイクロカプセルが提供されるという点で好都合である。これらの利点は、親油性化合物をコートする３つの層を提供する方法によって、また、前記化合物の粒径が小さいことで実現する。本発明の組成物の利点は、第３の層コーティングによって実現された、マイクロカプセルの力学的性質の向上にも見られる。したがって、本発明のマイクロカプセルは、錠剤グレードでもある、すなわち、錠剤化における使用に適している。さらに、本発明の組成物は、ゼラチンを含まない。本発明によれば、ゼラチンの通常の使用は、回避されるので、本発明の生成物は、植物起源である。
【００３４】
（実施例）
【実施例１】
【００３５】
本発明によるβ−カロチンのカプセル化を、以下の通りに行った：
第１のステップでは、次の成分を使用した：
（ａ）
１．天然β−カロチン結晶（ＤＳＭ）  −  ３６．６グラム
２．モノオレイン酸塩デカグリセリル  −  １７．４グラム
３．パルミチン酸スクロース          −  １７．４グラム
４．水                              −  ５８０．０グラム
成分をすべて混合し、すり合わせ（ｇｒｉｎｄ  ｔｏｇｅｔｈｅｒ）、粒径が５ミクロン未満の均質な懸濁液とした。
【００３６】
第２のステップでは、次の成分を溶解させた：
（ｂ）
１．アルギン酸ナトリウム          −  １８０．０グラム
２．デンプン（エンドウマメ由来）  −  １２０．０グラム
３．水                            −  １１４２０．０グラム
【００３７】
これらの２つの溶液を混合し、均質な懸濁液とした。この懸濁液をディスペンサーに入れ、１．５％塩化カルシウム水溶液の上に装備した。球状の液滴は、この溶液に入った後、溶液を５〜３０分保持すると、ゲル化してβ−カロチンのアルギン酸塩マトリックスビーズを形成する。これらのビーズレットを、濾過によって収集し、２．５％クエン酸水溶液で洗浄した。ビーズレットを乾燥させ、次いで流動層乾燥機およびコーター内でコートした。コーティング材料は、次の成分であった：
（ｃ）
１．ヒドロキシプロピルセルロース  −  ７０．０グラム
２．メタノール                    −  １７７．０グラム
３．アセトン                      −  ３６９．０グラム
この方法では、β−カロチンを含有する、コートされた乾燥した球状のビーズが得られた。８５％のビーズの粒径は、１５０ミクロンと４２５ミクロンの間であった。
【実施例２】
【００３８】
実施例１の方法を、異なる組成の溶液（ｂ）を用いて繰り返す：
１．アルギン酸ナトリウム    −  １８０．０グラム
２．ペクチン（高エステル）  −  １２０．０グラム
３．水                      −  １１４２０．０グラム
【実施例３】
【００３９】
リコピンのカプセル化を、以下の通りに行った：
次の材料を、リコピンの粒径が、２〜５μｍの範囲になるまで、４０℃ですり合わせ、均質化した：
（ａ）
１．天然トマトオレオレジン（２０％リコピン、Ｌｙｃｏｒｅｄ）＊
−  １３９．０グラム
２．エタノール                                            −  １５０．０グラム
３．モノオレイン酸デカグリセリル                          −  ２２．７グラム
＊リコピンの粒径５０〜１１０μｍ
【００４０】
第２の溶液は、７０℃で作製した：
（ｂ）
１．アルギン酸ナトリウム          −  １８０．０グラム
２．パルミチン酸スクロース        −  ２２．７グラム
３．デンプン（エンドウマメ由来）  −  １２０グラム
４．水                            −  １２０００．０グラム
溶液（ａ）を、溶液（ｂ）に加え、混合して、均質な懸濁液とした。
【００４１】
次の成分を含有するコーティング溶液を用いて、滴下およびコーティングプロセスを、実施例１と同じように繰り返す：
（ｃ）
１．ヒドロキシプロピルセルロース  −  ９５．９グラム
２．メタノール                    −  ２４２．０グラム
３．アセトン                      −  ５０６．０グラム
この調製では、リコピンをカプセル化したコートされた乾燥した球状のビーズレットが得られ、７０％のビーズレットの粒径は、１５０ミクロンと４００ミクロンの間であった。
【実施例４】
【００４２】
以下の方法で、ＤＨＡ（ドコサヘキサエン酸）オイルのカプセル化を実施した：
次の成分を高剪断ミキサーで均質化し、微細なエマルジョンを得た：
（ａ）
１．藻類由来のＤＨＡオイル（４０％  ＤＨＡ）  −  ２２０グラム
２．モノラウリン酸ソルビタン                  −  ８．０グラム
３．水                                        −  １０００．０グラム
【００４３】
次の材料から、第２の溶液を調製した：
（ｂ）
１．アルギン酸ナトリウム          −  ７５．０グラム
２．デンプン（エンドウマメ由来）  −  １５０．０グラム
３．水                            −  ９０００グラム
【００４４】
これらの２つの溶液を混合し、均質な懸濁液とした。実施例１と同じように、滴下  濾過、洗浄、乾燥、およびコーティングを実施した。コーティング溶液は、次の成分であった：
（ｃ）
１．ヒドロキシプロピルセルロース  −  ８５．０グラム
２．メタノール                    −  ２１５グラム
３．アセトン                      −  ４４７．０グラム
この方法では、カプセル化されたＤＨＡのコートされた乾燥した球状のビーズが生じた。
【実施例５】
【００４５】
生物学的利用能および安定性の向上−比較試験
本発明によって調製したマイクロカプセルを、安定性および生物学的利用能について試験した。安定性試験は、マイクロカプセルを、純粋な酸素雰囲気中、室温（２５℃）で１０〜４０日間保温し、その後、このマイクロカプセルを、その親油性化合物含有量について分析することによって行った。生物学的利用能は、ＵＳＰ２型溶出装置（ＵＳＰ  ｔｙｐｅ  ２  ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ  ａｐｐａｒａｔｕｓ）を使用して調べた。マイクロカプセルを、胃液（０．１Ｍ  ＨＣｌ）中で、７５ＲＰＭで回転するパドルを用いて３７℃で１時間インキュベートした。その後、リン酸三ナトリウム０．２Ｍ溶液を加えてｐＨを７に上昇させた。さらに、腸液を模すために、コール酸０．１％とＳＤＳ（ドデシル硫酸ナトリウム）０．１％を加えた。さらに３時間後、溶液を採取し、濾過した。この濾液を、親油性化合物の濃度について分析した。生物学的利用能は、人工腸液に溶解したマイクロカプセルからの親油性化合物のパーセントによって推定した。
【００４６】
実施例１に従って調製されたマイクロカプセルを、生物学的利用能について調べたところ、８６％であることが判明した。β−カロチンが、界面活性物質の存在下ですり合わされなかった場合の同様の調製物では、生物学的利用能は４％であった。これは、親油性化合物の生物学的利用能において、親油性化合物のコーティングの第１の層および粒径が重要であることを示す。
【００４７】
実施例３と同じように作製されたマイクロカプセルを、安定性について試験したところ、マイクロカプセルのリコピン含有量は、酸素雰囲気中、１０日間で７％減少した。酸性溶液中で洗浄しなかったこと以外は同様に調製された同様のマイクロカプセルでは、そのリコピン含有量は、酸素雰囲気中、１０日間で２５％減少した。これは、親油性化合物の安定性および生物学的利用能にとって、酸による洗浄が重要であることを示す。
【実施例６】
【００４８】
マイクロカプセルの錠剤化
錠剤化に対するビーズレットの適性、すなわち錠剤グレードをコルシュＥＫＩＩシングルパンチタブレットプレス（Ｋｏｒｓｃｈ  ＥＫＩＩ  ｓｉｎｇｌｅ  ｐｕｎｃｈ  ｔａｂｌｅｔ  ｐｒｅｓｓ）における錠剤圧縮によって評価した。ビーズレット（３０ｇ）を、１９０ｇの微結晶セルロース、２．２５ｇのステアリン酸マグネシウム、および２．２５ｇのデンプングリコール酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ  ｓｔａｒｃｈ  ｇｌｙｃｏｌａｔｅ）と混合した。この混合物を、１２ｋｇの力で、重量６８０ｍｇの錠剤を生じる１２ｍｍダイを使用して、打錠機（ｔａｂｌｅｔ  ｐｒｅｓｓ）で圧縮した。実施例１および３で生じたビーズレットを使用すると、濃赤色の斑点のある錠剤が得られる。こうした錠剤を酸素雰囲気中に置いたところ、１０日後、上で述べた通り、β−カロチン（実施例１）濃度もリコピン（実施例３）濃度も低下は認められなかった。比較のために、ヒドロキシプロピルセルロースでコートされていないビーズレットを作製した。こうしたビーズレットは、各実施例における溶液（ｃ）でコートされていないこと以外は、実施例１および３で作製されたものと同一であった。これらのビーズレットを、同じ組成で錠剤に圧縮した場合、錠剤は、オレンジに染まり、これは、コートされていないビーズレットから、β−カロチンおよびリコピンが漏出したことを示していた。さらに、これらの錠剤は、酸素雰囲気中で１０日後、β−カロチン濃度の低下（−３０％）およびリコピン濃度の低下（−３６％）を示した。これは、マイクロカプセル化された親油性化合物の安定性、およびその錠剤圧縮に対する適性にとって、第３のコーティング層が重要であることを示す。
【００４９】
本発明の実施形態を、説明のために述べてきたが、本発明が、その趣旨を逸脱する、あるいは特許請求の範囲を超えることなく、多くの改変、変形、および適合を加えて実施できることは明白であろう。
【００５０】
本発明の教示を逸脱せずに、ある種の改変、変更、および代替が、当分野の技術者から予測および期待されることを理解されたい。したがって、以下の特許請求の範囲は、広義に、かつ本発明の趣旨の範囲に適合するように解釈されるのが適当である。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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