(57)【要約】【課題】  【解決手段】  本発明はプレバイオティック及びプロバイオティック成分を有する組成物を提供し、窒素老廃物の上昇したレベルを軽減し、健康な腸内微小環境を促進する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つのプロバイオティック（Ｐｒｏｂｉｏｔｉｃ）成分と、少なくとも1つのプレバイオティック（Ｐｒｅｂｉｏｔｉｃ）成分とを有する組成物。
【請求項２】
請求項１の組成物において、
前記プロバイオティック成分は乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、桿菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、若しくはビフィズス菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ）微生物を有するものである。
【請求項３】
請求項１の組成物において、
前記プレバイオティック成分はオリゴ糖若しくはピロデキストリンを有するものである。
【請求項４】
請求項１の組成物において、さらに
少なくとも１つのウレアーゼ分泌微生物を有するものである。
【請求項５】
窒素老廃物を除去する方法であって、
請求項１の組成物の効果的な量を投与する工程を有するものである。
【請求項６】
腎不全を治療する方法であって、
請求項４の組成物の効果的な量を投与する工程を有するものである。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は窒素老廃物の濃度を減少する組成物及びその方法に関するものである。前記組成物は食品、栄養補助食品、病人向けの特別食若しくは薬剤の形態で良い。
【背景技術】
【０００２】
正常で健康な腎臓の主な機能の１つに、調整、内分泌、及び代謝機能に加えて、老廃物の処理がある。排泄機能の障害は、尿素やクレアチニンや尿酸を含む様々な窒素老廃物の蓄積を引き起こし得る。血流中の老廃物の濃度が高くなると、腎不全が悪化し、腎臓結石が促進される。さらに、循環血液中の窒素性溶質は、腸壁を横切る方向の濃度勾配が原因で管腔内への浸透拡散が促進される。この拡散メカニズムは、窒素老廃物の腸での排除を増強するための経口吸着剤のコンセプトを導いた。吸着剤若しくは微生物は、大腸内の様々な化合物及び窒素老廃物を除去する能力を示す。
【０００３】
尿素特異的吸着剤、例えば合成ポリマーや修飾多糖類などは、尿素や他の窒素老廃物の腸を介した除去が評価されてきた。他の吸着剤、例えば酸化型デンプン、活性化型木炭、イナゴマメ粉末なども尿毒症毒素のｉｎ  ｖｉｖｏ排除に対して調査され、良い結果が得られた。Ｐｒａｋａｓｈ  &  Ｃｈａｎｇ（（１９９６）Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ２：８８３〜８８８）は、マイクロ被包性遺伝子組換えＥ．ｃｏｌｉ（大腸菌）ＤＨ５が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏシステムにおいて尿素及びアンモニアの除去に効果的であることを明らかにした。同研究者らは尿毒症ラット動物モデルにおけるＥ．ｃｏｌｉ  ＤＨ５細胞の経口投与においても同様な結果を得た。Ｂｌｉｓｓら（（１９９６）Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒ．６３：３９２〜３９８）は、補助性アラビアゴム線維が、低タンパク質食を摂取している慢性腎不全患者の糞便窒素排出を増加し、尿素窒素濃度を低減することを明らかにした。Ｒｅｉｎｈａｒｔら（（１９９８）Ｒｅｃ．Ａｄｖ．Ｉｎ  Ｃａｎｉｎｅ  ａｎｄ  Ｆｅｌｉｎｅ  Ｎｕｔｒ．Ｉａｍｓ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ．Ｖｏｌ．ＩＩ：３９５〜４０４）は、発酵性線維混合物を含む食事を与えられたイヌ腎臓患者の臨床末期腎臓病状が改善したことを発見し、このことによって特定の栄養変化は、結腸発酵若しくは付加的細菌増殖によって腎臓から離れて糞便へ窒素排出の再配分を可能にすることを示唆している。
【０００４】
プレバイオティック成分（Ｐｒｅｂｉｏｔｉｃ：原生生物性成分）は消化管中でプロバイオティック成分（Ｐｒｏｂｉｏｔｉｃ：生菌性成分）の作用を増強する食品成分である。この相乗的な若しくは共生の関係においてビフィズス菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ）などのプロバイオティック成分は、消化されなかった食物繊維、オリゴ糖等の炭水化物を代謝し、アセテート、プロピオン酸、酪酸などの短鎖脂肪酸を生産する。これらの短鎖脂肪酸は腸細胞増殖を促進し、水分やミネラルの吸収を増強し、酵母、カビ、病原性バクテリアの増殖を阻害する。加えて、プロバイオティック成分は、サイトカイン、酪酸などの抗菌性（ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ及びａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ）化合物の生産を通じて病原体に直接拮抗し（Ｄｅ  Ｖｕｙｓｔ  ａｎｄ  Ｖａｎｄａｍｍｅ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｏｆ  ｌａｃｔｉｃ  ａｃｉｄ  ｂａｃｔｅｒｉａ．Ｉｎ：Ｄｅ  Ｖｕｙｓｔ  Ｌ，Ｖａｎｄａｍｍｅ  ＥＬ，ｅｄｓ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｓ  ｏｆ  ｌａｃｔｉｃ  ａｃｉｄ  ｂａｃｔｅｒｉａ．Ｇｌａｓｇｏｗ，Ｕｎｉｔｅｄ  Ｋｉｎｇｄｏｍ：Ｂｌａｃｋｉｅ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  ａｎｄ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ；１９９４：９１〜１４２；Ｄｏｄｄ  ａｎｄ  Ｇａｓｓｏｎ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｓ  ｏｆ  ｌａｃｔｉｃ  ａｃｉｄ  ｂａｃｔｅｒｉａ．Ｉｎ：Ｇａｓｓｏｎ  ＭＪ，ｄｅ  Ｖｏｓ  ＷＭ，ｅｄｓ．Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｌａｃｔｉｃ  ａｃｉｄ  ｂａｃｔｅｒｉａ．Ｇｌａｓｇｏｗ，Ｕｎｉｔｅｄ  Ｋｉｎｇｄｏｍ：Ｂｌａｃｋｉｅ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  ａｎｄ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ；１９９４：２１１〜５１；Ｋａｉｌａｓａｐａｔｈｙ  ａｎｄ  Ｃｈｉｎ（２０００）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．７８（１）：８０〜８）、乳酸生産性ミクロフローラを刺激することによって腸ｐＨを減少し（Ｌａｎｇｈｅｎｄｒｉｅｓ，ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｊ．Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．Ｎｕｔｒ．２１：１７７〜８１）、病原体が占める結合部位及び受容体部位を競合し（Ｋａｉｌａｓａｐａｔｈｙ  ａｎｄ  Ｃｈｉｎ（２０００）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．７８（１）：８０〜８；Ｆｕｊｉｗａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．６３：５０６〜１２）、免疫機能を改善して免疫細胞を刺激し（Ｉｓｏｌａｕｒｉ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ８８：９０〜９７；Ｉｓｏｌａｕｒｉ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｖａｃｃｉｎｅ  １３：３１０〜３１２；Ｒｏｌｆｅ（２０００）Ｊ．Ｎｕｆｒ．１３０（２Ｓ）：３９６Ｓ〜４０２Ｓ）、利用可能な栄養分及び他の増殖因子に対する病原体と競合し（Ｒｏｌｆｅ（２０００）Ｊ．Ｎｕｆｒ．１３０（２Ｓ）：３９６Ｓ〜４０２Ｓ）、若しくは乳糖（ラクトース）の消化を助けるラクターゼを生産する。
【０００５】
本発明は、共生産物におけるプレバイオティック及びプロバイオティック成分の有益な効果を組み合わせ、窒素老廃物を効果的に減少する。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の目的は、プレバイオティック及びプロバイオティック成分を有する組成物を提供することである。この組成物は食品、栄養補助食品、病人向けの特別食若しくは薬剤に添加され、摂取によって健康的な腸内微小環境を促進し、循環血液中の濃度を高める窒素老廃物の除去を補助する。前記老廃物の増加した濃度は個人の生理機能にマイナスの影響を及ぼし、減少した健康感及び全身倦怠に寄与することが知られている。これらの生成物を用いて窒素老廃物を減少する方法も提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
血流中の窒素老廃物の蓄積は健康に有害な影響を及ぼす。窒素老廃物を結腸（大腸）へ移すことによる窒素老廃物の除去は実行可能な方法であり、老廃物の蓄積によって個人の生理機能に影響を及ぼすマイナスの影響を減らす。本発明は窒素老廃物の血中濃度を効果的に減少する共生産物においてプロバイオティック及びプレバイオティック成分の特性を組み合わせ、望ましい腸内ミクロフローラの増殖を促進するという付加的な有利な効果を有している。
【０００８】
本発明のプロバイオティック成分は、生きている或いは凍結乾燥された微生物の単一培養若しくは混合培養を指し、ヒト若しくは動物に適用された際、例えば消化されなかった炭水化物を代謝し個人に有益であるビフィオバクテリウム微生物などの腸内ミクロフローラの特性を改善することにより前記宿主に有益な影響を及ぼす。本発明のプロバイオティック成分は、前記宿主に有益な影響を及ぼす、腸管の通過で生存する、腸管上皮細胞内側に接着する、病原体に対する抗菌物質を生産する、及び／若しくは腸内ミクロフローラを安定化する、というそれらの能力によって選択される。さらに、前記プロバイオティック成分は優れた有効期間を有していなくてはならない。本発明の共生産物は消費時に大量の生存可能な細胞を含むべきであり、また非病原性及び非毒性でなくてはならない。プロバイオティック成分の例としては、これに限定されるものではないが、ビフィズス菌ｓｐｐ．（例えばビフィダム（ｂｉｆｉｄｕｍ）、ロンガム（ｌｏｎｇｕｍ）、インファンティス（ｉｎｆａｎｔｉｓ）など）と、乳酸菌ｓｐｐ．（例えばブルガリア菌（ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）、アシドフィルス菌（ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクティス（ｌａｃｔｉｓ）、ヘルベチカス（ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ）、カゼイ（ｃａｓｅｉ）、ロウテリ（ｒｅｕｔｅｒｉ）、ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉなど）と、連鎖球菌ｓｐｐ．（例えばサーモフィルス菌（ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、ジアセチラクチス（ｄｉａｃｅｔｉｌａｃｔｉｓ）、クレモリス（ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、デュランス（ｄｕｒａｎｓ）、フェアカリス（ｆａｅｃａｌｉｓ）など）と、出芽酵母菌ｓｐｐ．（例えばポンベ（ｐｏｍｂｅ）、ボウラージイ（ｂｏｕｌａｒｄｉｉ）など）と、酵母菌ｓｐｐ．（例えばシトロボラム（ｃｉｔｒｏｖｏｒｕｍ）、デックストラニカム（ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍ）など）と、及び桿菌ｓｐｐ．（例えばｐａｓｔｅｕｒｉｉなど）とを含む。好ましい実施形態において、前記プロバイオティック成分は前記ビフィズス菌属若しくは乳酸菌属からの１若しくはそれ以上の微生物を有する。
【０００９】
本発明でも有用である微生物は、自然淘汰（自然選択）を通過した若しくは遺伝子操作のどちらかによって様々な窒素化合物を異化する能力を持ったものであり、この窒素化合物に限定されるものではないが、尿素、クレアチニン、尿酸、及びアンモニアを含む。ウレアーゼ分泌のレベルが上昇した微生物が１つの例として挙げられる。分泌の上昇したレベルはウレアーゼをコード化している遺伝子を、例えば乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、桿菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）或いはビフィドバクテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）などの原核生物微生物、若しくは例えばサッカロマイセスなどの真核生物微生物に挿入することによって得ることができる。前記ウレアーゼ遺伝子は誘導性若しくは恒常性プロモーターの調節制御下にある。組換え原核生物で一般に用いられている発現ベクタープロモーターは、ベータ−ラクタマーゼ（ペニシリナーゼ）及びラクトースプロモーターシステム（Ｃｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（１９７８）Ｎａｔｕｒｅ  ２７５：６１５；ａｎｄ  Ｇｏｅｄｄｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９７９），Ｎａｔｕｒｅ  ２８１：５４４）、トリプトファン（ｔｒｐ）プロモーターシステム（Ｇｏｅｄｄｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９８０）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．８：４０５７  ａｎｄ  ＥＰＯ  Ａｐｐ．Ｐｕｂｌ．Ｎｏ．３６，７６６）、及びタックプロモーター（Ｈ．Ｄｅ  Ｂｏｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９８３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８０：２１）を含む。これらは一般に用いられるが、他の微生物プロモーターも適している。核酸配列に関する詳細の多くは公表されており、当業者にとってプラスミド、若しくはウイルス性ベクター中でそれらを前記タンパク質をコード化しているＤＮＡに実施可能に連結することは可能である（Ｓｉｅｂｅｎｌｉｓｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９８０）Ｃｅｌｌ  ２０：２６９）。前記プロモーターとシャイン−ダルガーノ（Ｓｈｉｎｅ−Ｄａｌｇａｒｎｏ）配列（原核生物宿主発現に対する）は前記目的タンパク質をコード化する前記ＤＮＡに実施可能に連結され、すなわちそれらは前記ＤＮＡから前記タンパク質のメッセンジャーＲＮＡの転写を促進するために配置される。
【００１０】
酵母培養などの真核生物微生物は適切なタンパク質コード化ベクターで形質転換される。例えば、米国特許番号第４，７４５，０５７号を参照のこと。多くの菌株が一般に利用できるが、出芽酵母（サッカロマイセスセレヴィシエ）は低等真核生物宿主微生物の中でも最も一般的に用いられている。酵母ベクターは２ミクロン酵母プラスミドからの複製の開始点若しくは自己複製配列要素（ＡＲＳ）と、プロモーターと、前記目的タンパク質をコード化しているＤＮＡと、ポリアデニル化及び転写終結に対する配列と、選択遺伝子とを含む。例示的なプラスミドはＹＲｐ７である（Ｓｔｉｎｃｈｃｏｍｂ  ｅｔ  ａｌ．（１９７９）Ｎａｔｕｒｅ  ２８２：３９；Ｋｉｎｇｓｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９７９）Ｇｅｎｅ  ７：１４１；Ｔｓｃｈｅｍｐｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９８０）Ｇｅｎｅ  １０：１５７）。このプラスミドは前記ｔｒｐ１遺伝子を含み、例えばＡＴＣＣ番号第４４０７６号若しくはＰＥＰ４−１（Ｊｏｎｅｓ（１９７７）Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ８５：１２）などの、トリプトファン中で増殖する能力を欠いた酵母の変異株に対する選択マーカーを提供する。酵母宿主細胞ゲノム中の前記ｔｒｐ１損傷の存在はトリプトファン非存在下での増殖によって形質転換を検出するための効果的な環境を提供する。
【００１１】
酵母ベクター中の適切な促進配列は、メタロチオネイン、３−ホスホグリセリン酸キナーゼ（Ｈｉｔｚｅｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８０）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５５：２０７３）、若しくは、例えばエノラーゼ、グリセルアルデヒド−３−リン酸脱水素酵素、へキソキナーゼ、ピルビン酸脱炭酸酵素、ホスホフルクトキナーゼ、グルコース−６−リン酸イソメラーゼ、３−ホスホグリセレートムターゼ、ピルビン酸キナーゼ、トリオースリン酸イソメラーゼ、ホスホグルコースイソメラーゼ、及びグルコキナーゼなどの他の解糖酵素（Ｈｅｓｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９６８）Ｊ．Ａｄｖ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｒｅｇ．７：１４９；Ｈｏｌｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９７８）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １７：４９００）に対する前記プロモーターを含む。酵母発現における使用の適切なベクター及びプロモーターは、Ｒ．ＨｉｔｚｅｍａｎらのＥＰＯ  Ｐｕｂｌｎ．番号第７３，６５７号にさらに記載されている。
【００１２】
当業者には明らかなように、ウレアーゼをコード化したポリヌクレオチドを含む発現ベクターは原核生物若しくは真核生物細胞膜を通過してウレアーゼの分泌を指示するシグナル配列を含むように設計される。
【００１３】
前記微生物を本明細書で定義されたように形質転換することは、外来性ＤＮＡを導入しレシピエント細胞を変換することによる過程を説明する。これは従来技術でよく知られた様々な方法を用いて天然若しくは人工条件下で起こる。形質転換は、原核生物若しくは真核生物宿主細胞へ外来核酸配列を挿入するあらゆる既知の方法に依存している。前記方法は、形質転換される宿主細胞の種類に基づいて選択され、限定されるものではないが、ウイルス感染、電気穿孔法（エレクトロポレーション）、熱ショック、リポフェクション及び微粒子銃が含まれる。そのような"形質転換された"細胞は安定した形質転換細胞を含み、その細胞中に挿入されたＤＮＡは自己複製プラスミドとして若しくは前記宿主染色体の一部として複製する能力がある。それらは限定された期間で前記挿入されたＤＮＡ若しくはＲＮＡを一過性に発現する細胞も含む。
【００１４】
結果生じる形質転換された菌株は、高レベルのウレアで形質転換した菌株を増殖することによって高レベルのウレアーゼ分泌用に選択される。ウレアーゼ分泌のレベルは標準的な酵素検定法を用いて検出される。形質転換された菌株は、増加するウレアレベルによって順次継代培養され、ウレアーゼ分泌を増強する。好ましい実施形態において、前記ウレアーゼ分泌微生物は桿菌ｐａｓｔｅｕｒｉｉである。他の好ましい実施形態において、前記ウレアーゼ分泌微生物はサッカロマイセスポンベである。
【００１５】
前記プロバイオティック成分若しくはウレアーゼ分泌微生物は例えばヘルスバー、健康飲料、ヨーグルト若しくはｄａｈｉなどの食品へ、若しくはコーティングされた錠剤、カプセル、粉末、ソフトゲル、ジェルキャップ若しくは液状などへの添加物を有している。従って、本発明の好ましい実施形態において前記プロバイオティック成分若しくはウレアーゼ分泌微生物は、液体で添加される際は１０８ｃｆｕ／ｍＬ、１０９ｃｆｕ／ｍＬ、１０１０ｃｆｕ／ｍＬ、１０１１ｃｆｕ／ｍＬ、或いは１０１２ｃｆｕ／ｍＬの濃度で含まれ、固体で添加される際は１０８ｃｆｕ／ｇ、１０９ｃｆｕ／ｇ、１０１０ｃｆｕ／ｇ、１０１１ｃｆｕ／ｇ、或いは１０１２ｃｆｕ／ｇの濃度で含まれる。
【００１６】
本発明のプロバイオティック成分は、コロン中の１若しくはそれ以上の非病原性細菌の増殖及び／若しくは活性を選択的に刺激することによって、前記宿主に対して有益な影響を及ぼす非消化食品に言及する。本発明のプレバイオティック成分は、抗発癌性、抗菌性、脂質低下性及びブドウ糖調節作用を有していると考えられている。それらはミネラル吸収及び平衡も改良する。さらに、ビフィズス菌及び乳酸菌系統に属している細菌は、前記プレバイオティック成分の存在によって刺激され、増殖する。薬物動態的に、前記プレバイオティック成分は前記コロンに大部分無傷で到達する。好ましい実施形態において、前記プロバイオティック成分はオリゴ糖（例えば、フルクトオリゴ糖或いはイヌリン、イソマルトースオリゴ糖、トランスガラクトオリゴ糖、キシロオリゴ糖、若しくはソイオリゴ糖）、若しくはピロデキストリン（例えば、アラビノガラクタン、ラクチロル（ｌａｃｔｉｌｏｌ）、ラクトスクロース、若しくはラクツロース）である。前記プロバイオティック成分に添加されたプレバイオティック成分の量は１００ミリグラム／１回量、５００ミリグラム／１回量、１グラム／１回量、５グラム／１回量、若しくは１０グラム／１回量である。好ましい実施形態において、前記プレバイオティック成分は少なくとも１００ミリグラム／１回量で、１０グラム／１回量より多くもない。
【００１７】
プロバイオティック及びプレバイオティック成分の有益な特性と組合わせる合成生物性産物は食品、栄養補助食品、病人向けの特別食若しくは薬剤を含む。本発明の文脈において、"合成生物性"は、健康増強効果を促進するためのプロバイオティック成分とプレバイオティック成分との混合物を意味する（Ｇｉｂｓｏｎ  ａｎｄ  Ｒｏｂｅｒｆｒｏｉｄ（１９９５）Ｊ．Ｎｕｔｒ．１２５：１４０１〜１４１２）。前記合成生物性産物の摂取は、循環血液流中に蓄積する窒素老廃物の血中濃度を減少する。本発明のこれら老廃物は、例えば正常若しくは異常代謝経路などの内因性由来の老廃物、若しくは細菌性腐敗の老廃物である。さらに、前記老廃物はタンパク質及びアミノ酸の食事性摂取のような外因性由来の老廃物である。さらに、前記合成生物性産物の連続摂取は健康な腸微小環境を促進することで知られている細菌が大腸に局在若しくは定着することによって腸内ミクロフローラに高い有益な効果をもたらすだろう。
【００１８】
本発明の食品は、限定されるものではないが、ヘルスバー、健康飲料、ヨーグルト若しくはｄａｈｉなどを含む。例えば、ヨーグルト食品は１ガロンの商業的に利用可能な、沸騰するまで加熱され約４５℃まで冷やすためにすぐ放置された、全ホモ殺菌牛乳から準備され得る。これに乳酸桿菌属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、桿菌属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、若しくはビフィズス菌属（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ）の乳酸細菌を含む約１オンスのヨーグルトスタータカルチャーが添加される。この混合物はよくかき混ぜられ、３７℃で１０〜１２時間置いて発酵された。丸ごとの果物添加剤、香料、甘味剤、結合剤、若しくは他の添加剤は組み合わされてヨーグルトに添加し、好みの濃度の食品を得る、若しくは消費者の好みの範囲に合ったものを作ることができる。本発明の好ましい実施形態において、食品は腎不全の人の特別な食事性要求を満たすための成分を有する。
【００１９】
ヘルスバーは、プレバイオティック及びプロバイオティック成分と共に、例えば結合剤、添加物、香料、着色料及び同種のものなど様々な賦形剤との組合わせによって準備され、プラスチック塊粘度までかき混ぜる。この塊は次に押し出され若しくは型に入れられ"キャンディーバー"形になり、次に乾燥若しくは固められて最終製品を形成する。
【００２０】
様々な添加物は本組成物に取り込まれる。本組成物の任意の添加物は、限定されるものではないが、デンプン、糖、脂肪、抗酸化剤、アミノ酸、タンパク質、核酸、電解質、ビタミン、それらの誘導体、若しくはそれらの組合わせを含む。好ましい実施形態において、前記合成生物性産物の添加物はイナゴマメ粉末、例えばイナゴマメゴムである。他の好ましい実施形態において、添加物はハラタケ属（Ａｇａｒｉｃｕｓ）ｂｉｓｐｏｒｕｓからのキノコ抽出物である。
【００２１】
本組成物に任意に添加される香料は薬剤技術でよく知られているものである。例として、これに限定されるものではないが、合成香料油及び／若しくは植物の葉、花、果実、その他からの油、及びそれらの組合わせが有用である。香料油の例として、これに限定されるものではないが、スペアミント油、ペッパーミント油、シナモン油、及びウィンターグリーン油（メチルサリチル酸）を含む。人工、天然若しくは合成果実香料も有用であり、例えばレモン、オレンジ、グレープ、ライム、及びグレープフルーツなどのシトラスオイルと、リンゴ、ストロベリー、チェリー、パイナップル、その他を含む果実エッセンスとを含む。
【００２２】
甘味剤は、これに限定されないが、例えば水溶性甘味剤、水溶性人工甘味料、及びそれらの塩とそれらの混合物を含むジペプチドべース甘味料などの広範囲の物質から選択される。
【００２３】
結合剤は、当業者にはよく知られている従来的な他の結合剤と同様に、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース若しくは他の適切なセルロース誘導体、ポビドン、アクリル酸やメタクリル酸のコポリマー、薬剤シロップ（グレーズ）、粘剤乳清などのミルク誘導体、デンプン、及び誘導体などの広範囲の物質から選択される。溶媒の例として、これに限定されるものではないが、水、エタノール、イソプロピルアルコール、メチレン塩化物、若しくはそれらの混合若しくは組合わせがある。膨張性物質の例としては、これに限定されるものではないが、糖、ラクトース、ゼラチン、デンプン、及びシリコンジオキシドがある。
【００２４】
本発明の栄養補助食品は乳酸桿菌属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、桿菌属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、若しくはビフィズス菌属の乳酸細菌、及びウレアーゼ分泌微生物から準備され得る。前記微生物は無菌的に凍結乾燥され、処理された大量の細菌は次にＫｉｍら（（１９８８）Ｊ．Ｉｎｄｕｓｔ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．３：２５３〜２５７）の方法に従って腸溶性コーティングカプセルとして準備される。８０〜２５０ｍｇの前記凍結乾燥微生物は各カプセルに含まれ、そのカプセルはカプセルの流動床にスプレーされることによりヒドロキシプロピルメチルセルロースフタル酸で腸溶性コーティングされる。結果として生じる少ない表面積を有した栄養補助食品は比較的通気性がなく、胃内環境で見られるような低ｐＨから中身を数時間保護でき、ｐＨが比較的中性若しくは少しアルカリ性である腸内へ前記中身を放出することができる。
【００２５】
前述した制御放出処方に加えて、経口投与用に好ましく開発された制御放出処方が多くある。これらは、限定されるものではないが、浸透圧制御胃腸運搬システム、流体力学的圧力制御胃腸運搬システム、膜透過性制御胃腸運搬システムを含む。また膜透過性制御胃腸運搬システムは小孔膜透過性制御胃腸運搬装置、腸液抵抗性腸標的制御放出胃腸運搬装置、ゲル拡散制御胃腸運搬システム、及びイオン交換制御胃腸運搬システムを含む。さらにイオン交換制御胃腸運搬システムは陽イオン、陰イオン薬剤を含む。制御放出薬剤運搬システムに関する付加的な情報はＹｉｅ Ｗ．Ｃｈｉｅｎ，Ｎｏｖｅｌ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，１９９２(Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．)に記載されている。これらの処方のいくつかはここでさらに詳しく説明する。腸溶性コーティングは胃での薬剤の前記放出を妨げるために錠剤に適用されることにより、望ましくない副作用のリスクを軽減する若しくは胃内環境へさらされ分解の影響を受けやすい前記薬剤の安定性を維持する。この目的で用いられるほとんどのポリマーは多塩基酸であって、水溶液中でそれらの溶解性はｐＨ依存性であることと、通常の胃内ｐＨよりも高いｐＨを必要とする事実により機能する。経口制御放射構造の１つの好ましい種類は固体若しくは液体剤形の腸溶性コーティングである。腸溶性コーティングは、特定期間胃分泌液にさらされ、前記剤形で物質的に組み込まれたままでいることを促進する。しかし前記腸溶性コーティングは吸収できるように腸液中で分解するように設計されている。吸収の遅延は胃腸管の移動率に依存するので、胃内容排出率は重要な要因である。何人かの研究者は、例えば顆粒などの複数ユニットタイプ剤形は単一ユニットタイプより優れていると報告している。
【００２６】
特有の腸溶性コーティング因子は、限定されるものではないが、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタル酸、メタクリル酸−メタクリル酸エステルコポリマー、ポリビニルアセテート−フタル酸、及びセルロースアセテートフタル酸を含む（Ｈａｓｅｇａｗａ，(１９８５)Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．３３：１６１５〜１６１９）。様々な腸溶性コーティング物質は、溶出時間、コーティングの厚さ、及び直径破砕強度の好ましい組み合わせを有するように初めから設計された胃溶性コーティング剤形を達成するための実験に基づいて選択される（Ｐｏｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．(１９７０)Ｊ Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２２：４２ｐ）。
【００２７】
病人向けの特別食は押しオート麦、脱水リンゴ、ハチミツ、イヌリン、イナゴマメ粉、シナモン、砂糖、バニラ抽出物、及びＬ．ｓｐｏｒｏｇｅｎｅｓ、Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ(各１０８Ｂ１０１０ｃｆｕ)の凍結乾燥培養の組み合わせによって準備され得る。これら材料は適切な割合で混合され、長さが約１２．５〜１５センチメートル、幅が３〜４センチメートルで高さが１センチメートルの長方形のバーに形作られ、無菌真空オーブンに１２〜２４時間置いて、好みの堅さの食用に適する食品を得る。腎不全を患っている患者用の薬剤は無菌の凍結乾燥ウレアーゼ分泌微生物から準備され得る。前記処理された大量微生物は次にＫｉｍら（(１９８８)Ｊ．Ｉｎｄｕｓｔ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．３：２５３〜２５７）の方法に従って腸溶性コーティングカプセルとして準備され、例えば８０ｍｇ〜１ｇの前記凍結乾燥微生物が各カプセル中に含まれ、カプセルの流動床にスプレーすることによってヒドロキシ−プロピルメチルセルロースフタル酸で腸溶性コーティングされる。結果として生じる少ない表面積を有する薬剤は比較的通気性がなく、胃内環境で見られるような低ｐＨから中身を数時間保護でき、ｐＨが比較的中性若しくは少しアルカリ性である腸内へ前記中身を放出する。
【国際調査報告】
2005532294.tif 000002