(57)【要約】本発明は、ナフタルイミド、およびミトナフィドアナログ、並びにそれらの塩の新規な製造方法を提供する。本発明はまた、ナフタルイミド、およびナフタルイミド塩、それらのアナログを含有する新規な組成物、並びにそれらの安定な液体投与形態をも提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ニトロナフタルイミドの製造方法であって、
３−ニトロ−１,８−ナフタル酸無水物および脂肪族ジアミンを有機溶媒中で混合して溶液を得て；そして、
該溶液を還流する、
ことを含む、該製造方法。
【請求項２】
ミトナフィドの製造方法であって、
３−ニトロ−１,８−ナフタル酸無水物およびＮ,Ｎ−ジメチルエチレンジアミンを有機溶媒中で混合して溶液を得て；そして、
該溶液を還流する、
ことを含む、該製造方法。
【請求項３】
アモナフィドアナログの製造方法であって、
３−ニトロ基を含有するミトナフィド、ギ酸アンモニウムおよび触媒を有機溶媒中で混合して、該３−ニトロ基を還元する、
ことを含む、該製造方法。
【請求項４】
アモナフィドの製造方法であって、ミトナフィド、ギ酸アンモニウムおよび触媒を有機溶媒中で混合する、
ことを含む、該製造方法。
【請求項５】
ナフタルイミド・ジアンモニウム塩の製造方法であって、
ナフタルイミドを有機溶媒中に溶解し；そして、
該溶解したナフタルイミドを無機酸または有機酸と接触させて、ナフタルイミド・ジアンモニウム塩を得る、
ことを含む、該製造方法。
【請求項６】
該無機酸は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸およびリン酸からなる群から選ばれる、請求項５記載の方法。
【請求項７】
有機酸は、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、ヒドロキシコハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸およびサリチル酸からなる群から選ばれる、請求項５記載の方法。
【請求項８】
ジアンモニウム塩としてのナフタルイミドを含有する、組成物。
【請求項９】
ナフタルイミドは、アモナフィドを無機酸または有機酸と混合することによって得られるジアンモニウム塩としてのアモナフィドを含む、請求項８記載の組成物。
【請求項１０】
無機酸は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸およびリン酸からなる群から選ばれる、請求項９記載の組成物。
【請求項１１】
有機酸は、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、ヒドロキシコハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、およびサリチル酸からなる群から選ばれる、請求項９記載の組成物。
【請求項１２】
ジアンモニウム塩はアモナフィド・ジメシレートである、請求項８記載の組成物。
【請求項１３】
ジアンモニウム塩はアモナフィド・ジ塩酸塩である、請求項８記載の組成物。
【請求項１４】
置換された３−アミノ−ナフタルイミド塩を含有する、組成物。
【請求項１５】
溶解したアモナフィド・ジアンモニウム塩を本質的に含む水溶液であって、該溶液は注射による投与に適当であって、該溶液は１〜２５０ｍｇ／ｍＬの間のアモナフィドを含有し、該溶液はｐＨが４．０〜７．０の間である、該水溶液。
【請求項１６】
非経口、筋肉内、皮下、静脈内、腹腔内または腫瘍内の投与に適当である、請求項１５記載のアモナフィドの水溶液。
【請求項１７】
溶液は注射による投与に適当であって、該溶液は１０〜１００ｍｇ／ｍＬの間のアモナフィドを含有し、そして該溶液はｐＨが５．５〜６．５の間である、アモナフィドの水溶液。
【請求項１８】
溶液は実質的に糖類がない、請求項１７記載の溶液。
【請求項１９】
溶液は更に医薬的に許容し得る担体を含む、請求項１７記載の溶液。
【請求項２０】
担体は濃度が約０．１〜１００ｍｇ／ｍＬの間で供される、請求項１９記載の溶液。
【請求項２１】
溶液は１回投与形態で供される、請求項１７記載の溶液。
【請求項２２】
ヒトへの投与に適当なナフタルイミド・ジアンモニウム塩を含有する減菌医薬組成物の製造方法であって、該方法は、
（ａ）ナフタルイミド・ジアンモニウム塩を水溶液中に可溶化し；
（ｂ）該水溶液を１モル当量の塩基を用いて中和し；
（ｃ）該可溶化したナフタルイミド・ジアンモニウム塩を含有する溶液のｐＨを約６に調節し；そして、
（ｄ）該溶液を減菌する、
ことを含む、該製造方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本出願は、米国特許仮出願番号60/394,558（2002年7月8日出願）の利益を主張する。
【０００２】
(技術分野)
本発明は、ナフタルイミド（これは、アモナフィド、アモナフィド塩およびそれらのアナルグを含む）の製造方法を提供する。本発明はまた、アモナフィド塩または化学的中間体を含有する組成物をも提供する。
【０００３】
（背景技術）
アモナフィド、ナフタルイミドアナログは、公知の抗腫瘍化合物である。米国特許第4,204,063号（本明細書の一部を構成する）は、アモナフィドが３−アミノ−１,８−ナフタルイミド酸無水物と２−ジメチルアミノエチルアミンとをエタノール中で反応させることによって製造することができると記載している。該生成物はろ過し、そしてクロロホルム−ｎ−ヘキサン中で再結晶化する。該生成物は、図１中で示す構造を有する非常に微細な針状様黄色結晶の形態を示す。
【０００４】
しかしながら、出発物質（３−アミノ−１,８−ナフタル酸無水物）は商業的な量で容易に入手不可能であり、そして小スケールおよび大スケールの製造のための更なる製造法を必要とされる。
【０００５】
遊離塩としてのアモナフィドは、水中での溶解性が非常に乏しい。結果として、アモナフィドの経口または注射可能のいずれかの医薬的な投与形態を製造することは困難である。
【０００６】
アモナフィド塩を製造して溶解度を改善し、その結果適当な投与形態を製造することの実行可能性を改善する試みが、科学的な文献および特許文献中で報告されている。米国特許第5,420,137号（本明細書の一部を構成する）中に開示されている通り、モノ塩酸塩およびモノメタンスルホン酸塩は、アモナフィドと計算された量の塩酸またはモノメタンスルホン酸とをアルコール性溶液中で反応させることによって製造することができる。例えば、米国特許第5,420,137号は、アモナフィドおよび塩酸のモル比が約１：１であることを示す。しかしながら、計算された量の塩酸と反応させてアモナフィド・モノ塩酸塩を製造することは、煩わしくそして制御することが困難である。加えて、Rosenberg, J.らによる（独国特許第4023241号（本明細書の一部を構成する））は、脂質塩の生成を示している。従って、アモナフィド塩の改善された製造方法に対する要求が存在する。加えて、アモナフィドおよびアモナフィド塩の改善された医薬的に許容し得る形態が望まれる。
【０００７】
（発明の概要）
本発明の目的は、医薬品の開発に適当なスケールでの、ナフタルイミド（例えば、アモナフィド）の新規な化学的製造法を提供することである。
【０００８】
本発明の別の目的は、医薬的な適合性を改善するために、ナフタルイミド・ジアンモニウム塩の改善された製造方法を提供することである。
【０００９】
別の態様において、本発明はナフタルイミド（例えば、ミトナフィド、アモナフィドおよびそれらの置換された塩形態）の新規な製造方法を提供する。
【００１０】
特に、本発明の１態様は、有機溶媒中の３−ニトロ−１,８−ナフタル酸無水物（ＮＮＡ）を脂肪族ジアミンと混合し、そして還流することを含む、ニトロナフタルイミドの製造方法を含む。本発明の別の態様は、有機溶媒中の３−ニトロ−１,８−ナフタル酸無水物をＮ,Ｎ−ジメチルエチレンジアミン（ＤＭＥＤ）に加え、そして還流することを含む、ミトナフィドの製造方法を含む。
【００１１】
本発明の１態様は、アモナフィドアナログの製造方法を含む。該方法は、有機溶媒中にミトナフィドアナログを溶解し、該溶解したミトナフィドアナログに還元剤および触媒を加え、そして該ミトナフィドアナログの３−ニトロ基を還元することを含む。好ましい態様は、有機溶媒中にミトナフィドを溶解し、そして該溶解したミトナフィドにギ酸アンモニウムおよび触媒を加えることを含む、アモナフィドの製造方法を含む。
【００１２】
本発明の更なる態様は、ナフタルイミド塩の製造方法を含む。本態様によれば、該方法は、有機溶媒（例えば、テトラヒドロフラン）中に少なくとも２個のアミンを有するナフタルイミドを溶解し、そして該溶解したナフタルイミドを無機および／または有機酸と接触させて、モノアンモニウム塩またはジアンモニウム塩のいずれかとして本明細書中に記載するアミンのプロトン化形態を得ることを含む。有機酸としては、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、ヒドロキシコハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、およびサリチル酸を含む。無機酸としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸およびリン酸を含む。
【００１３】
１実施態様において、ＨＣｌガスまたは塩酸を加えて、アモナフィド・ジ塩酸塩を得ることができる。アモナフィド・ジ塩酸塩の溶液を冷却して沈降物を得て、このものを次いでろ過する。該アモナフィド・ジ塩酸塩の沈降物は、場合により水中に溶解し、そして更なる精製のためにアセトンを用いて沈降させることができる。
【００１４】
別の実施態様において、アモナフィド・アンモニウム・アセテートは、アモナフィドを過剰量の酢酸と混合することによって得ることができる。
【００１５】
本発明は、組成物をも包含する。１実施態様は、ジアンモニウム塩としてのナフタルイミドの組成物を含み、ここで、該塩は、遊離塩基を得るために、２モル当量のアルカリを必要とする。別の組成物は、塩として置換された３−アミノ−ナフタルイミドを含む。該置換された３−アミノ−ナフタルイミドは、モノアンモニウム塩またはジアンモニウム塩であり得る。１態様によれば、該ジアンモニウム塩は、アモナフィド・ジ塩酸塩である。別の態様によれば、該ジアンモニウム塩はアモナフィド・ジメシレートである。
【００１６】
本発明はまた、ナフタルイミドの新規な投与形態を含む。１態様は、アモナフィドを本質的に含む水溶液を含む。１態様によれば、該溶液は実質的に糖類がない。該溶液は、注射によって投与するのに適当であり、そしてアモナフィドを１〜２５０ｍｇ／ｍＬの間で含む。別の態様によれば、該溶液はアモナフィドを１０〜１００ｍｇ／ｍＬの間で含む。
【００１７】
ナフタルイミドの水溶液のｐＨは４．０〜７．０の間であり；あるいは、該ｐＨは５．５〜６．５の間であり得る。
【００１８】
いくつかの態様によれば、該溶液は、非経口投与に適当である。該溶液は、筋肉内、皮下、静脈内、腹腔内または腫瘍内の投与のためのものであり得る。
【００１９】
本発明の溶液はまた、医薬的に許容し得る担体をも含み得る。該担体は、濃度が約０．１〜１００ｍｇ／ｍＬの間で供し得る。本発明の液体投与形態は注射可能であり、減菌でありおよび／または安定である。本発明の溶液は、１回投与形態で供し得る。
【００２０】
本発明の更なる態様は、ヒトへの投与に適当なアモナフィド・ジアンモニウム塩を含有する減菌医薬組成物を製造するための方法を含む。該方法は、アモナフィド・ジアンモニウム塩（例えば、アンモニウム・ジ塩酸塩）を水溶液中に溶解し、該溶解したアモナフィド・ジ塩酸塩を１モル当量の水酸化ナトリウムを用いて中和し、該溶解したアモナフィドのｐＨを約６に調節し；そして、該溶解したアモナフィドを減菌することを含む。
【００２１】
（発明の詳細な記載）
（製法方法）
ｉ．ミトナフィドアナログ
本発明は、図２中の構造で示すニトロナフタルイミド、または「ミトナフィドアナログ」の製造方法を含む。１実施態様において、該方法は有機溶媒混合物中で３−ニトロ−１,８−ナフタル酸無水物に脂肪族ジアミンを加え、そして還流して、ニトロナフタルイミドを得ることを含む。該反応を示す一般的な反応式は以下の通りである：
【化１】
2005533088.tif 000002
【００２２】
ニトロナフタルイミドの製造において使用する脂肪族ジアミンは変えることができる。脂肪族ジアミンの選択により、例えば炭素鎖の長さが１〜６個であるミトナフィドアナログの製造が可能となる。好ましい実施態様によれば、使用する脂肪族ジアミンはＮ,Ｎ−ジメチルメチレンジアミンである。
【００２３】
図２中の構造は、置換基Ｑを示す。Ｑは、様々な構造（例えば、図４および５中に示す基を含む）を示す。
【００２４】
本発明の方法によって製造される１クラスの化合物は、図３中に示す構造を有するナフタルイミドを含む。図３中の基Ｑは、様々な置換基（例えば、図４中に示す基）であり得る。例えば、Ｑは、１−Ｒ’−アゼチジン−３−イル（図４ａ）、１−Ｒ’−ピロリジン−３−イル（図４ｂ）、１−Ｒ’−ピペリジン−４−イル（図４ｃ）、１,２−ジＲ’−１,２−ジアゾリジン(diazolid)−４−イル（図４ｄ）、１,２−ジアゾール−１−エン−４−イル（図４ｅ）、１−Ｒ’−ピペリジン−３−イル（図４ｆ）、３−Ｒ’−オキサゾリジン−５−イル（図４ｇ）であり得る。図４中、Ｒ’は、アルキル、不飽和アルキル、アシル、アルコキシ、アリール、アミノ、置換アミノ、スルホ、スルファモイル、カルボキシ、カルバミル、シアノである。
【００２５】
別の実施態様において、図３中の構造は本発明のナフタルイミドであり、ここで、Ｑは、−(ＣＨ２)２ＮＲ２（式中、Ｒはメチル、エチル、プロピル、ブチルなどである）である。本表示におけるＮＲ２は、ヘテロ環基であり得る。従って、Ｑは図５中に示す基のいずれか１つであり得る。
【００２６】
いくつかの実施態様において、Ｒ２は−(ＣＨ２)ｎ（式中、ｎは２〜６である）であるか、あるいはＲ２は−(ＣＨ２)ｍＸ−(ＣＨ２)ｎ−（式中、ｍは０〜５であり得て、そしてＸはＮＲ’’（式中、Ｒ’’は水素、アルキル、不飽和アルキル、アシル、アルコキシ、アリール、アミノ、置換アミノ、スルホ、スルファモイル、カルボキシ、カルバミル、シアノ、またはそれ以外である）、ＯまたはＳであり得る。更に、これらの環状基は不飽和結合を有し得て、そして置換基（例えば、アルキル、アリール、またはヘテロアリール）をも有し得る。
【００２７】
置換基Ｑの更なる例としては、図５中に示すものを含み、これらは１−ピロリジル（５ａ）、３−Ｒ’−１−ピペリジル（図５ｂ）、モルホリノ（図５ｃ）、１−Ｒ’−ピペラジン−４−イル（図５ｄ）、１−ピロリル（図５ｅ）、１−イミダゾリル（図５ｆ）、１,３,５−トリアゾール−１−イル（図５ｇ）、Ｎ−マレイミド（図５ｈ）、２−(Ｒ’−イミノ)ピロリジル（図５ｉ）、ピラジン−２−オン−１−イル（図５ｊ）、３−オキサゾリジル（図５ｋ）、３−オキサゾリル（図５ｌ）、および当該分野において知られるその他（例えば、２−ピロリル、３−クロロ−１−ピロリジル、２−ニトロ−１−イミダゾリル、４−メトキシ−１−イミダゾリル、３−メチル−１−イミダゾリル）を挙げられる。図５中に示す構造中で、Ｒ’は、アルキル、不飽和アルキル、アシル、アルコキシ、アリール、アミノ、置換アミノ、スルホ、スルファモイル、カルボキシ、カルバミル、シアノ、および当該分野における当業者にとって知られる他の官能基である。
【００２８】
本発明の化合物の別の基は、該ナフタルイミド環内の他の位置と結合するアミノ基を有するナフタルイミドである。１実施態様によれば、該ナフタルイミド環は、該ナフタルイミド環の３位以外の位置で１個以上のアミノ基を含むように改変される。別の実施態様によれば、該ナフタルイミド環は、該ナフタルイミド環の３位でのアミノ基に加えて、位置での１個以上のアミノ基を含むように改変される。別の実施態様によれば、３位の該アミノ基は、置換基で置き換える。該基の例としては、アルキル、アリール、ニトロ、置換アミノ、スルファモイル、ハロ、カルボキシ、カルバミル、シアノ、および当該分野における当業者にとって知られる他の官能基を含む。更なる別の実施態様において、該ナフタルイミド環と結合する更なる基はまた、３位でのアミノ基を含む。該置換基の例としては、アルキル、アリール、ニトロ、アミノ、置換アミノ、スルファモイル、ハロ、カルボキシ、カルバミル、シアノ、および当該分野における当業者にとって知られる他の官能基を含む。
【００２９】
あるいは、３位でのアミノ基は、他の置換基によって置き換え得る。置換基の例としては、アルキル、アリール、ニトロ、置換アミノ、スルファモイル、ハロ、カルボキシ、カルバミル、シアノ、および当該分野における当業者にとって知られる他の官能基を含む。
【００３０】
該ナフタレン環は、いずれかのまたは両方の環中に１個以上の窒素原子を有する基で置き換え得る。例えば、イソキノリンアナログ（図６）（ここで、Ｑは上で定義する通りである）が挙げられる。アモナフィドの好ましいイソキノリンアナログは、Ｑが−(ＣＨ２)ｎ−Ｎ(ＣＨ３)２（式中、ｎは１〜１２以上である）である。より好ましい実施態様において、ｎは１〜６である。該イソキノリンアナログはまた１個以上の置換基（これは、本明細書中、他のアナログについて記載する通りである）を有し得て、その結果メチルおよび／またはメチレン基の１個以上の水素が減少する。
【００３１】
有機溶媒を、脂肪族ジアミンおよび３−ニトロ−１,８−ナフタル酸無水物を還流するために、本発明の方法において使用する。１実施態様において、該有機溶媒はエタノールである。別の実施態様において、該有機溶媒はジメチルホルムアミドである。更に別の実施態様において、該有機溶媒はトルエン−エタノールである。好ましい実施態様において、該有機溶媒は４：１の比率のトルエン−エタノールである（実施例１を参照）。
【００３２】
該混合物を還流し、そして例えば、薄層クロマトグラフィーによって追跡する。還流は、１実施態様によれば３０分間行なう。該得られた混合物をろ過し、そして蒸発させて、褐色固体のミトナフィドまたはミトナフィドアナログ（図２を参照）を得る。
【００３３】
これらのナフタルイミドの各々は、上記の通り、モノまたはジアンモニウム塩に変換し得る。
【００３４】
ｉｉ  ナフタルイミド
別の実施態様によれば、本発明は、ナフタルイミドの製造方法を含む。好ましい実施態様において、該ナフタルイミドはアモナフィド（実施例２を参照）である。アモナフィドはまた、５−アミノ−２−[(ジメチルアミン)エチル]−１Ｈ−ベンゾ[デ−]イソキノリン−１,３−(２Ｈ)−ジオンとして知られる。別の実施態様によれば、本発明はナフタルイミドの製造方法を含む。好ましい実施態様において、該ナフタルイミドはアモナフィド（実施例２を参照）を含む。アモナフィドはまた、５−アミノ−２−[(ジメチルアミン)エチル]−１Ｈ−ベンゾ[デ−]イソキノリン−１,３−(２Ｈ)−ジオンとして知られる。
【００３５】
ナフタルイミドの製造方法は、ミトナフィドまたはミトナフィドアナログを有機溶媒中に溶解することを含む。１実施態様によれば、該有機溶媒はジクロロメタン−メタノールである。好ましい実施態様において、ジクロロメタン−メタノールは、２５ｍＬ／ミトナフィドｇで４：１の比率で使用する。
【００３６】
ナフタルイミドの製造方法は更に、触媒と一緒の該溶解したミトナフィドまたはミトナフィドアナログに還元剤（例えば、ギ酸アンモニウム）を加えることを含む。３−ニトロ基の還元に適当な様々な還元剤が当該分野において知られ、例えばヒドラジン、テトラリン、エタノール、アスコルビン酸、ギ酸、ギ酸塩およびリン酸を含む（例えば、Johnstone, R. A. W.らによる、Chemical Reviews 85 (2) 129 (1985)；Entwhistle, I. D.らによる、J. C. Soc. Perkin Trans. 1,443 (1977)を参照）。好ましい実施態様によれば、還元剤はギ酸アンモニウムである。他のギ酸塩としては、置換されたギ酸アンモニウム（例えば、ギ酸２−ヒドロキシエチルメチルアンモニウム、ギ酸メチルアンモニウムおよびモルホリニウム(morpholinium)）を含む。好ましい実施態様によれば、４．５モル当量のギ酸アンモニウムを使用する。
【００３７】
ナフタルイミドの製造方法は、触媒の使用を含む。様々な適当な触媒が当該分野において知られ、例えば貴金属Ｐｄ、Ｐｔ、Ｒｈおよびラネーニッケルを含む（例えば、Johnstone, R. A. W.らによる、(1985), 上記；および、Entwhistle, I. D.らによる、(1977)、上記を参照）。１実施態様において、該触媒はパラジウム−炭素である。好ましい実施態様において、１０％パラジウム−炭素（ミトナフィドの約２０重量％）を加える。該触媒は、窒素下、室温で約１時間混合する。該方法は更に、該混合物をろ過し、そして該混合物を冷水浴（＜１０℃）に加えて沈降させることを含む。ろ過後に、沈降形態を乾燥して、ナフタルイミド（例えば、アモナフィド（Ｃ１６Ｈ１７Ｎ３Ｏ２））を得る。
【００３８】
ｉｉｉ．ナフタルイミド塩
本発明の更なる実施態様は、ナフタルイミド・ジアンモニウム塩の製造方法を含む。
【００３９】
通常、ナフタルイミドは少なくとも２個のアミンを含有する二塩基性化合物であって、そしてほとんどの場合には、アミン基は芳香族基と共有結合する。酸と接触させる場合には、該ナフタルイミド内の少なくとも１個または２個のアミンは、無機酸または有機酸と反応させることによってプロトン化して、塩を得ることができる。該塩は通常、該アモナフィド分子内のアミンのプロトン化によって得られる、第１級、第２級または第３級アンモニウムイオンを含有する弱酸である。それらアンモニウムイオンについての対イオンは、医薬組成物において使用することができるいずれかの適当なアニオンであり得る。いくつかの実施態様において、該酸性塩は、該ナフタルイミドを鉱（無機）酸または有機酸と反応させることによって得る。それら鉱酸としては例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸およびリン酸を含む。改変された塩を得るのに使用することができるいくつかの有機酸としては、例えば酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、ヒドロキシコハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸およびサリチル酸を含む。無機酸としては例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、およびリン酸を含む。
【００４０】
ほとんどの実施態様において、該ナフタルイミド内の２個のアミンはプロトン化されて、ジアンモニウム塩を与える。好ましい実施態様において、該アモナフィド内の２個のアミンの少なくとも１．５モル当量（１．７５がより好ましく、１．９が更に好ましく、１．９５がより一層好ましく、１．９９が更に一層好ましく、２．０モル当量が最も好ましい）がプロトン化される。２個以上のアミンが存在する場合には、該アミンの全てまたは一部のプロトン化の可能性が存在する。例えば、３個のアミンが存在する場合には、該３個のアミンの少なくとも１．５モル当量（１．７５がより好ましく、１．９が更に好ましく、２．０がより一層好ましく、２．５が更に一層好ましく、２．９５が更により一層好ましく、２．９９がなお一層更により好ましく、３．０が最も好ましい）がプロトン化される。
【００４１】
１実施態様において、該ナフタルイミドのアミンはプロトン化のための同程度のｐＫ’ｓを有する。酸を用いる本実施態様の遊離の塩基アミンの滴定において、該アミンは滴定の範囲の間で同様にプロトン化される。好ましい実施態様において、該ナフタルイミドのアミンの少なくとも２個が５０％以上プロトン化される。７５％以上プロトン化されることがより好ましく、９０％以上プロトン化されることが更に好ましく、９５％以上プロトン化されることがより一層好ましく、９９％以上プロトン化されることが更に一層好ましく、そして１００％プロトン化されることが最も好ましい。
【００４２】
本発明の更なる実施態様において、該ナフタルイミドのアミンはプロトン化についての異なるｐＫ’ｓを有する。酸を用いる該アミンの滴定において、該アミンはそれらのｐＫ’ｓに応じて、多相様式でプロトン化される。例えば、該ナフタルイミドの遊離酸形態を酸を用いて滴定する際に、より高いｐＫ値を有するアミンは、より低いｐＫ値を有するアミンよりも先にプロトン化されるであろう。好ましい実施態様において、該ナフタルイミドの少なくとも１個のアミンがプロトン化され、その後に該ナフタルイミドの少なくとも１個のアミンがその後にプロトン化される。５０％以上プロトン化されることが好ましく、７５％以上プロトン化されることがより好ましく、８５％以上プロトン化されることが更に好ましく、９５％以上プロトン化されることがより一層好ましく、９９％以上プロトン化されることが更に一層好ましく、そして１００％プロトン化されることが最も好ましい。
【００４３】
ナフタルイミドのジアンモニウム塩は通常、ナフタルイミド構造を有する、２個のプロトン化されたアミンを含むナフタルイミド塩を意味する。部分的なジアンモニウム塩としては例えば、該アミンの少なくとも１．５モル当量がプロトン化されたナフタルイミドを含む。いくつかの実施態様において、該対イオンは、上記の無機酸および／または有機酸の塩基形態の１個以上の混合物であり得る。
【００４４】
好ましい実施態様において、該ナフタルイミド・ジアンモニウム塩は、アモナフィド・ジ塩酸塩である。
【００４５】
本実施態様によれば、ＨＣｌガスをアモナフィド溶液にバブルして、アモナフィドの塩形態を沈降させる。該方法は強く、そしてスケールアップが容易である。米国特許第5,420,137号によって開示されたアモナフィド・モノ塩酸塩は、計算された量のＨＣｌ溶液と反応させることによって製造される。本方法は、最終生成物中に不正確な量のＨＣｌを与えることがあり、そして本方法はスケールアップが容易でない。
【００４６】
ジ塩酸塩は、モノ塩酸塩と比較してより酸性であって、そして水により可溶である。結果として、広範囲の薬物濃度が達成されて、製造方法（例えば、凍結乾燥）が更に容易となり、そしてより柔軟となって臨床的な要求を満たすことができる。
【００４７】
本発明の好ましい実施態様は、狭い融点の温度範囲を有する、十分に決まった結晶構造を示す、アモナフィド・ジ塩酸塩の改善された製造方法を提供する。本形態の特徴的な物理学的なおよび化学的な性質、並びに安定性は、医薬的な投与形態（例えば、錠剤、カプセル形態を含む経口製品、並びに広範囲の注射可能な投与形態（例えば、液体形態または凍結乾燥形態）の製造中での本細胞毒性薬の取り扱い上の安全性を改善する。
【００４８】
モノおよびジアンモニウム塩形態の創製により、異常な細胞疾患（例えば、癌および前癌性疾患を含む過剰増殖性疾患）の処置に有用な医薬的に関連する投与形態を得ることができる。
【００４９】
（医薬的な投与形態および投与様式）
米国立癌研究所は、凍結乾燥したアモナフィド製品を用いる癌の化学療法において臨床治験を行なっている。その化学およびその医薬製剤に関する情報は、標題「AMONAFIDE」（NSC-308847), NCI Investigational Drugs, Pharmaceutical data (1994)の刊行物中で提示されている。注目すべきは、該投与形態は減菌性の５００ｍｇ（塩基として）のバイアルである。注射用の減菌水（９．６ｍｌ）（ＵＳＰ）または０．９％塩化ナトリウム注射液（ＵＳＰ）を用いて構築することにより、アモナフィドの５０ｍｇ／ｍＬを含有する溶液が得られ、このものは水酸化ナトリウムを用いてｐＨを５〜７に調節する。不適当に行なった場合に、再構築が問題となることがあり得て、よって避ける方がよい。
【００５０】
従って、本発明の１目的は、ナフタルイミドまたはナフタルイミド塩（例えば、アモナフィド）の安定で治療学的に許容し得る静脈内注射可能な投与形態を提供することである。このものは、凍結乾燥および再構築が必要なく、二重バイアルパッケージの代わりに単一バイアルとしてパッケージ、そして船で輸送することができ、また１〜２５０ｍｇ／ｍＬの液体製剤で供給することができる。これらの目的は、以下に詳細に記載する通り、本発明によって達成される。
【００５１】
該組成物は、いずれかの示す場合において最も適当な経路は処置する疾患の性質および激しさ、並びに活性成分の性質に依存するが、経口、直腸、局所、非経口（例えば、皮下、筋肉内、および静脈内を含む）、視覚的（眼）、肺（鼻腔または頬側の吸入）、または鼻腔の投与に適当な組成物を含む。それらは容易に１回投与形態で供することができ、そして薬学の分野においてよく知られる方法のいずれかによって製造することができる。
【００５２】
添加物、担体または賦形剤が当該分野においてよく知られ、そしてこのものは様々な製剤において使用される。例えば、Gilman, A.G.らによる編、The PHARMACOLOGICAL BASIS OF THERAPEUTICS, 8版, Pergamon Press, New York, (1990)（これは、本明細書一部を構成する）を参照。実際の使用において、本発明の組成物は、医薬的な担体または賦形剤と合わせた密な(intimate)混合物中で、活性成分として、通常の製薬な配合技術に従って、混合することができる。該担体は、投与に望まれる製剤の形態によって、広範囲の形態（例えば、経口または非経口（例えば、静脈内を含む））をとり得る。経口投与形態のための組成物を製造する際には、通常の製薬的な媒質のいずれかを使用することができる。例えば、経口液体製剤（例えば、懸濁剤、エリキシル剤、および溶液剤）の場合には、例えば水、グリコール（例えば、ポリエチレングリコール）、油、アルコール、芳香剤、甘味剤、保存剤、着色剤などを；経口固体製剤（例えば、散剤、硬カプセル剤および軟カプセル剤、錠剤）の場合には、担体（例えば、スターチ（例えば、コーンまたはその他）、糖類、ラクトース、血清アルブミン、微結晶性セルロース、緩衝化剤（例えば、酢酸ナトリウム）、希釈剤、顆粒化剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤など）を使用することができ、固体の経口製剤は液体製剤よりも好ましい。
【００５３】
ｉ．  経口剤形
それらの投与が容易である理由で、固体の医薬担体を明らかに使用する場合に、錠剤およびカプセル剤は特に有利な経口投与単位形態である。所望するならば、錠剤は標準的な水性または非水性の技術によってコーティングすることができる。それらの組成物および製品は、少なくとも０．１％の活性化合物を含むべきである。これらの組成物中の活性化合物のパーセントは当然に変わり得て、そして通常該単位の約２重量パーセント〜約６０重量パーセントの間であり得る。それら治療学的に有用な組成物中での活性化合物の量は、有効な用量が得られるような量である。活性化合物はまた、例えば液体点剤またはスプレー剤として鼻腔的に投与することもできる。
【００５４】
錠剤、丸剤、カプセル剤などをまた、結合剤（例えば、トランガントガム、アカシア、コーンスターチ、またはゼラチン）；賦形剤（例えば、リン酸ジカルシウム）；崩壊剤（例えば、コーンスターチ、ポテトスターチ、アルギン酸）；滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム）；および甘味剤（例えば、スクロース、ラクトースまたはサッカリン）をも含み得る。投与単位形態がカプセル剤の場合には、そのものは、上記のタイプの物質に加えて、液体担体（例えば、脂肪油）を含み得る。
【００５５】
様々な他の物質が、コーティング剤としてまたは該投与単位の物理学的な形態を改変するために、存在し得る。例えば、錠剤は、セラック、糖類またはその両方と一緒にコーティングし得る。シロップ剤またはエリキシル剤は、活性成分に加えて、甘味剤としてスクロース、崩壊剤としてメチルおよびプロピルパラベン、染料および芳香剤（例えば、チェリーまたはオレンジ香料）を含み得る。
【００５６】
ｉｉ．液体剤形
本発明はまた、本明細書中に記載する方法に従って製造されるナフタルイミドまたはナフタルイミド塩の液体投与形態をも含む。
【００５７】
１実施態様において、本発明の方法に従って製造される液体投与形態は、封した容器（例えば、アンプルまたはバイアル）中のナフタルイミドまたはナフタルイミド塩（例えば、アモナフィドまたはアモナフィド・ジ塩酸塩）の安定な減菌水溶液であり、このものは静脈内投与に適当な１回投与形態であり、ナフタルイミドまたはナフタルイミド塩の濃度を約１〜約２５０ｍｇ／ｍＬの間で有し、そしてｐＨを約３．０〜７．０の間で有する。好ましい実施態様において、ナフタルイミドまたはナフタルイミド塩の濃度は約２０ｍｇ／ｍＬである。
【００５８】
好ましい実施態様において、液体投与形態のｐＨは約６．０である。該ｐＨは調節されることが好ましく、必要ならば、非毒性の医薬的におよび治療学的に許容し得る無機源の塩基を用いて調節される。好ましい実施態様において、該塩基は鉱質塩基である。より好ましい実施態様において、該塩基は水酸化ナトリウムである。
【００５９】
１実施態様において、本発明の方法に従って製造される液体投与形態は、いずれかの他の添加化学品がないことが好ましい。別の実施態様において、該液体投与形態は、慣習的で生理学的に許容し得る賦形剤または担体（例えば、保存剤または等張剤）を含む。１実施態様において、アモナフィドの水溶液は担体または賦形剤を含む。提供する場合には、担体または賦形剤は、濃度が約０．１ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬの間で存在することが好ましい。
【００６０】
１実施態様によれば、該液体投与形態は安定である。「安定」とは、６０℃で１ヶ月間または４０℃で９ヶ月間保存した時に、５％以下の薬効の低下（これは、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって追跡する）を示す液体投与形態を意味する。
【００６１】
本発明の組成物は、１回投与形態で容易に供することができ、そしてこのものは薬学の分野において知られるいずれかの方法によって製造される。用語「１回投与形態」とは、ヒト被験者および他の動物にとって１回用量として適当な物理学的に別個の単位を意味し、各単位は、適当な医薬的な賦形剤または担体と組み合わせた際に所望する治療学的な効果を与えるように算出された、予め決めた量の活性物質を含有する。
【００６２】
好ましい実施態様において、該医薬組成物は水溶性であって、例えば医薬的に許容し得る塩（これは、酸および塩基の付加塩の両方を含む）として存在する。「医薬的に許容し得る酸付加塩」とは、遊離塩基の生物学的な有効性を保ち、そして生物学的にもまたそれ以外にも所望し得ない塩を意味する。このものは、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸など）、および有機酸（例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸など）と合わせて形成する塩である。「医薬的に許容し得る塩基付加塩」とは、無機塩基から誘導される塩（例えば、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウムの塩など）を含む。アンモニウム、カリウム、ナトリウム、カルシウム、およびマグネシウムの塩が特に好ましい。医薬的に許容し得る有機の非毒性塩基から誘導される塩としては、第１級、第２級および第３級アミン、置換されたアミン（例えば、天然に存在する置換アミン）、環状アミンおよび塩基性のイオン交換樹脂（例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、およびエタノールアミン）の塩を含む。
【００６３】
本発明は、減菌医薬組成物を製造するための方法を含む。該医薬組成物は、ヒトへの投与に適当なアモナフィド・ジ酸性塩を含む。該方法は、
（ａ）アモナフィド・ジアンモニウム塩を水溶液中に可溶化し；
（ｂ）該可溶化したアモナフィド塩を１モル当量の塩基（例えば、水酸化ナトリウム）を用いて中和し；
（ｃ）該可溶化したアモナフィド塩のｐＨを約６に調節し；そして、
（ｄ）該可溶化したアモナフィド・ジ塩酸塩を減菌する、
工程を含む。
【００６４】
（関連文献）
Dorr, R.T.およびVonHoff, D. D.による、Cancer Chemotherapy Handbook 2版. 11994, Appleton and Lange；
Obregon, M.M., Gil, M.E., ruz, V., Bernabeu, J., Camacho, M.A.による、鼎ompatibility study of amonafide-HC1 with hydrophobic excipients   Conference Proceedings, World Meet. Pharm., Biopharm, Pharm., Technol., 1版；
Brana, M. F., Castellano, J. M., Moran, M., Emling, F., Kluge, M., Schlick, E., Klbe, G., Walker, N.による、鉄ynthesis, structure and antitumor activity of new benz[d,e]isoquinoline-1,3-diones   Arzneimittelforschung, 45 (12), 1311-8 (1995)；
Camacho-Sanchez, M. A., Torres-Suarez, A. I., Sanz, M. P.による、鉄tability of amonafide solutions in front of light and temperature   Clenc. Ind. Farm., 8(Mar-Apr), 104-109, (1989)。
【００６５】
（実施例）
以下の実施例は、本発明をいかに実施することができるかを示すものであって、限定するものではない。
【００６６】
実施例１：ミトナフィドの製造
３−ニトロ−１,８−ナフタル酸無水物（３００ｇ、１．２３モル）およびＮ,Ｎ−ジメチルエチレンジアミン（１２９ｇ、１．４６モル）を、トルエン−エタノール混合物（４：１）中に加え、そして窒素下で３０分間還流した。該方法は、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）によって追跡した。冷却後に、該反応混合物をろ過し、そして回転蒸発フラスコ中、約５０℃で乾燥した。７０％アルコールを該乾燥物質に加え、そしてろ過した。該集めた物質を真空下で乾燥して、褐色固体を得た。該反応についての反応式は以下の通りである。
【化２】
2005533088.tif 000003
【００６７】
実施例２：アモナフィドの製造
実施例１に記載する通り製造した粗ミトナフィド（２６６ｇ）を、ジメチルホルムアミドおよびメタノールの混合物（４：１）中、２５ｍＬ／ｇで溶解した。ギ酸アンモニウム（４．５モル当量）および１０％パラジウム−炭素（ミトナフィドの約２０重量％）を加えた。該反応液をＴＬＣによって追跡した。該混合物をろ過し、そして該ろ液を冷水中で沈降させた。該沈降物をろ過後に集めた。乾燥後に、アモナフィドの黄色固体（３９９ｇ）を得た。該反応についての反応式を以下に示す。
【化３】
2005533088.tif 000004
【００６８】
生成するアモナフィドは９９．６％以上の純度を有し、関連不純物の合計は０．１％よりも低かった。このものは、以下のキャラクタリゼーションを有する。1H-NMR, DMSO-d6, δ 2.205 (S, 6H, Ha), 2.490 (t, 2H, Hb), 4.131 (t, 2H, Hc), 6.002 (s, 2H, D2O交換後に消失、Hi), 7.283-8.085 (m, 5H, Hd, He, Hf, Hg, Hh)；MS (MH = 284.2)；元素分析（Ｃ１６Ｈ１７Ｎ３Ｏ２として計算）。
【００６９】
実施例３：アモナフィド・ジ塩酸塩の製造
アモナフィド（３９０ｇ）を、抽出用フラスコ中のＴＨＦ（テトラヒドロフラン）（１００ｍＬ／ｇ）中に溶解し、そして０．４５−μｍのフィルターを用いてろ過した。該ろ液を１０℃以下にまで冷却し、そしてＨＣｌガスをバブルして、該ｐＨを１として、沈降させた。該沈降物をろ過し、そして真空下、４０℃で乾燥して、＞９５％純度を有するアモナフィド・ジ塩酸塩（２６４ｇ）を得た。
【００７０】
該沈降物は場合により、テトラヒドロフランおよびジエチルエーテルの各々を用いて３回洗浄することができる。この物質は更に水中に溶解することによって精製し、そして例えばアセトンを加えることによって再沈降させることができる。
【００７１】
上記の製造方法により、結晶性粉末を得て、このものはアモナフィド・ジ塩酸塩（これは、２７０℃の融点を有する）のｘ−線回折によって確認した。アモナフィド・ジ塩酸塩としての構造および分子量は、元素分析（表１を参照）、１Ｈ−ＮＭＲおよびマススペクトル（示さない）によって確認した。該生成物は、０．９％塩化ナトリウム溶液に匹敵する浸透圧モル濃度を示す。等張性により、局所的な組織の副作用なしで、本生成物を筋肉内、皮下、腫瘍内、またはくも膜下内腔内によって注射することができる。等モルのＮａＯＨは、最終的な投与形態の製造の間に、アモナフィド・ジ塩酸塩を中和するのに必要であり、その結果、ｐＨの調節のための製造時間の減少をもたらす。
表１．アモナフィド・ジ塩酸塩の元素分析（ロット番号CB0717）
【表１】
2005533088.tif 000005
【００７２】
実施例４：溶解度
ｐＨ−溶解度プロフィルからのデータは、アモナフィド・ジ塩酸塩の物質がｐＨ１〜２を有する水中で可溶であり、そして溶解度が２５０ｍｇ／ｍＬよりも大きいことを示す。沈降は、ｐＨが６．５よりも大きい場合に生じる。溶解度は、ｐＨ９の場合には１ｍｇ／ｍＬであって、ｐＨ１１の場合には０．０５ｍｇ／ｍＬである。
【００７３】
実施例５：水酸化ナトリウムを用いる滴定
アモナフィド・ジ塩酸塩（５６１ｍｇ、１．５７ミリモル）を水（１０ｍＬ）中に溶解して、ｐＨが１．２を有する透明な赤色溶液を得た。一定に撹拌しながら、１Ｎ  ＮａＯＨを加えた。溶液は、ｐＨが６．７以上まで透明のままであった。以下の滴定曲線中に示す通り、ＮａＯＨ（３．３ｍｍｏｌ）を用いて、溶液中のアモナフィド・ジ塩酸塩を中和した。アモナフィドのＮａＯＨに対して計算されたモル比は、１．２であった。
【化４】
2005533088.tif 000006
【００７４】
実施例６．液体製剤の製造
アモナフィド・２ＨＣｌは、８０％バッチ量の注射用水に溶解した。２モル当量の計算された水酸化ナトリウムをゆっくりと加えて、ｐＨを中和した。最終的なｐＨは、希ＮａＨおよび希ＨＣｌ溶液を用いて６．０に調節した。次いで、溶液を注射用水を用いて最終的な容量にまで希釈し、そして混合した。該溶液をろ過によって減菌し、そして５−ｃｃのガラスバイアル中に分配した。
【００７５】
凍結乾燥製品を超える液体製品の利点は以下の通りである。
ａ．凍結乾燥は、不経済な製造プロセス（装置、時間、エネルギーなど）である；
ｂ．凍結乾燥製品は、凍結乾燥用バイアルおよび希釈用バイアルを含有する二重バイアル、余分な製造、パッケージおよびラベル化の費用、保存のための余分な部屋、船輸送を要する。
ｃ．凍結乾燥製品についての、より多くの製造工程、危険な廃棄物の生成、混入の危険性の増大、および安全性；
ｄ．不適当な再構築が原因の不正確な用量。
【００７６】
実施例７：水性の安定な減菌アモナフィドの投与
液体および凍結乾燥の投与形態を、静脈内注入によって投与することができる。これは、例えば注射用減菌水、注射用静菌水、デキストロース（２．５％、５％、１０％）、デキストロース−生理食塩水の組み合わせ、フルクトース（１０％）、生理食塩水中のフルクトース、リンガー注射液、乳酸化リンガー注射液、塩化ナトリウム（０．４５％、０．９％）、または他の化学療法薬との組み合わせ中に該薬物製品を希釈することによる。
【００７７】
医薬組成物の組み合わせを投与することができる。その上、該組成物は、他の治療法と組み合わせて投与することができる。関心ある組み合わせは、米国特許出願番号09/834,17、09/810,527および09/996,354（これらは、本明細書の一部を構成する）中に記載されている。
【００７８】
実施例８：アモナフィド凍結乾燥製品の製造
【表２】
2005533088.tif 000007
【００７９】
実施例９：高速液体クロマトグラフィー精製法
アモナフィドは、Keystone BDS Hypersil 5-μm C18カラムを用いてクロマトグラフィー精製を行なう。検出は、３４４ｎｍでのＵＶ吸収を追跡することによって達成し、そして定量化は、外部校正を有するピーク面積測定によって得る。本方法は、バルク散剤および液体投与製剤に適用可能である。特異性、直線性、精度、および正確さが実証された。
【図面の簡単な説明】
【００８０】
【図１】図１は、ナフタルイミド、アモナフィドの構造を示す図面である。
【図２】図２は、３−ニトロ−ナフタルイミドまたはミトナフィドアナログの構造を示す図面である。
【図３】図３は、ナフタルイミドの構造を示す図面である。該図中のＱは、本明細書中に記載する置換基である。
【図４】図４は、図３のナフタルイミド構造、または図２中のニトロ−ナフタルイミド構造中で置換し得るいくつかの可能なＱ置換基の化学構造を示す図面である。該環構造は各々、アミド窒素との結合を示す。この結合（断続線によって示す）は、図３のナフタルイミド構造、または図２のニトロ−ナフタルイミド構造との結合位置を示す。
【図５】図５は、可能なＱ置換基の別群を示す図面である。図４のものと同様に、これらの基は、図３のナフタルイミド構造、または図２のニトロ−ナフタルイミド構造中でＱを置換し得る。各構造は、図３のナフタルイミド構造または図２のニトロ−ナフタルイミド構造との置換基の結合位置を示す、結合（断続線で示す）を記載する。
【図６】図６は、アモナフィドのイキノリンアナログの構造を示す図面である。該図中のＱは、本明細書中に記載する置換基である。
【図１】
2005533088.tif 000008
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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