(57)【要約】  本発明は減少した脳への血流に係わる又は脳への血液供給の一過性停止の症例に係わる疾患、たとえば虚血性疾患の治療にドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体を使用する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
減少した脳への血流に係わる又は脳への血液供給の一過性停止の症例に係わる疾患の治療、予防又は緩和用医薬の製造に、ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体又はその薬学的に許容し得る塩を使用する方法。
【請求項２】
ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体が一般式 (I)
2005511639.tif 000009
(I)
｛式中、
Rは水素, アルキル, アルケニル, アルキニル, シクロアルキル, シクロアルキルアルキル又は2-ヒドロキシエチルである;
R3 は
・  CH2-X-R’,
［式中、XはO, S又はNR’’（式中、R’’は水素又はアルキルである。）であり、
R’ はアルキル, アルケニル, アルキニル, シクロアルキル, シクロアルキルアルキル又は-CO-アルキルである］;
・ヘテロアリール［これは   
・アルキル, シクロアルキル又はシクロアルキルアルキル;   
・フェニル（これはハロゲン, CF3,       CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）;  
・フェニルフェニル;  
・ピリジル（これはハロゲン, CF3,       CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）;  
・チエニル（これはハロゲン, CF3,       CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）又は  
・ベンジル（これはハロゲン, CF3,       CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。） 
によって１回以上置換されていてよい。］；
又は
・  (CH2)nCO2R11, COR11 又は CH2R12; 
［式中、R11 は
・  アルキル, シクロアルキル又はシクロアルキルアルキル; 
・  フェニル（これはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）; 
・  フェニルフェニル; 
・  ピリジル（これはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）; 
・  チエニル（これはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）又は
・  ベンジル；
である；
n は0又は1である; そして
R12 は
・  O-フェニル（これはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）; 又は
・  O-CO-フェニル（これはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）
である。］;
又は
・  CH=NOR’; 
［式中、R’は
・  水素;
・  アルキル, シクロアルキル, シクロアルキルアルキル, アルケニル, アルキニル又は アリール（これらのすべては
・  -COOH;
・  -COO-アルキル;
・  -COO-シクロアルキル又は
・  フェニル（これはハロゲン, CF3, CN, アルキル, シクロアルキル, アルコキシ, シクロアルコキシ, アルケニル, アルキニル, アミノ, 及びニトロより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）; 
によって置換されていてよい．）；
である。］
R4 は
・  3,4-メチレンジオキシフェニル又は
・  フェニル, ベンジル, ナフチル又はヘテロアリール（これらのすべてはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, シクロアルコキシ, アルキル, シクロアルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）
である。｝
で表わされる化合物又はその薬学的に許容し得る付加塩又はそのＮ−オキシドである、請求項１記載の使用する方法。
【請求項３】
R3 が 
・1,2,4-オキサジアゾール-3-イル［これは5位が   
・アルキル, シクロアルキル又はシクロアルキルアルキル;   
・フェニル（これはハロゲン, CF3,       CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）;   
・フェニルフェニル; 又は  
・ベンジル（これはハロゲン, CF3,       CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。） 
によって置換されていてよい；］; あるいは
・1,2,4-オキサジアゾール-5-イル［これは3位が   
・アルキル, シクロアルキル又はシクロアルキルアルキル;   
・フェニル（これはハロゲン, CF3,       CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）;   
・フェニルフェニル;  
・  ベンジル（これはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）; 
・  ピリジル（これはハロゲン , CF3, CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）;又は
・  チエニル（これはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）
によって置換されていてよい；］
である、請求項２記載の使用する方法。
【請求項４】
R3 が
・  -CH2-X-R’（式中、XがO又はS, R’がメチル, エチル, プロピル又はシクロプロピルメチルである。）; 
・  CH=NOR’; 
（式中、R’が水素又はアルキルである。）, 又は
・  1,2,4-オキサジアゾール-5-イル（これは3位がアルキルによって置換されていてよい。）；
である、請求項２記載の使用する方法。
【請求項５】
ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体が一般式 (II)
2005511639.tif 000010
(II)
｛式中、
X 及びY が一緒になって=O, =S, =NOR2, =CR3R4, =N-CN, =N-NR7R8, -(CH2)m- 又は
-W’-(CH2)p-W’’- を形成するか又は X 及び Y の一方が水素であり、他方が -OR5, -SR5 又は -NR5R6 である；
Z が水素又は -COOR9  である;
R3 及びR4 が 独立して 水素, ハロゲン, アルキル, シクロアルキル, シクロアルキルアルキル, アルケニル, アルキニル, アルコキシ, アリール, アリールアルキル,又は -(CH2)q-COOR2である;
R2, R5 及び R6 が 独立して 水素, アルキル, シクロアルキル, シクロアルキルアルキル, アルケニル, アルキニル, アリール, 又はアリールアルキル, -CO-アルキル 又は -SO2-アルキルである;
R7 及び R8 が 独立して 水素, アルキル, シクロアルキル, シクロアルキルアルキル, アルケニル, アルキニル, アリール, 又は アリールアルキルである; 
R9 が アルキル, アルケニル 又は アルキニルである;
R1 が アルキル, アルケニル, アルキニル, アリール, 又は アリールアルキルである;
この場合 このアリール基はハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, シクロアルコキシ, アルキル, シクロアルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, アルキルアミノ, ジアルキルアミノ 及び ニトロより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい;
W’ 及び W’’ がそれぞれ独立して O 又は S である;
n が 1, 2, 3 又は 4 である;
m が 2, 3, 4 又は 5 である; 
p が 1, 2, 3, 4 又は 5 である; そして
q が 0, 1, 2, 3 又は 4 である。｝
で表わされる化合物又はそのあらゆる対掌体、又はその対掌体のすべての混合物、又はその薬学的に許容し得る付加塩又はそのＮ−オキシドである、請求項１記載の使用する方法。
【請求項６】
ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体は、
(1R,2R,3S)-2-(3-シクロプロピル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-フルオロフェニル)トロパン; 
(1R,2R,3S)-2-(3-フェニル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-フルオロフェニル)トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-フェニル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-メチルフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-ベンジル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-フルオロフェニル)トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(4-フェニル-フェニル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-フルオロフェニル)トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-フェニル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(2-ナフチル)トロパン;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン-2-O-メチル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-ベンジル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-エトキシカルボニルメチル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-メトキシカルボニルメチル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-(1-エトキシカルボニル-1,1-ジメチル-メチル)-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-カルボキシメチル-2-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-メチル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-ベンジル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(4-メチルフェニル)トロパン-2-O-メチル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-(1,1-ジメチルエチル)-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(4-クロロフェニル)トロパン-2-O-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(4-クロロフェニル)トロパン-2-O-メチルアルドオキシム 塩酸塩;
(1R,2R,3S)-3-(4-クロロフェニル)トロパン-2-O-メトキシカルボニルメチル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-(2-プロピニル)-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-(2-メチルプロピル)-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-シクロプロピルメチル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-エチル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-2-メトキシメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-イソプロポキシメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-エトキシメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-シクロプロピルメチルオキシメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-メトキシメチル-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-2-メトキシメチル-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-エトキシメチル-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-2-メトキシメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-2-エトキシメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-2-エトキシメチル-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-2-シクロプロピルメチルオキシメチル-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-シクロプロピルメチルオキシメチル-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-エチルチオメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-ヒドロキシメチル-3-(4-フルオロフェニル)トロパン;
(1R,2R,3S)-2-ヒドロキシメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-N-(t-ブトキシカルボニル)-2-ヒドロキシメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン;
(1R,2R,3S)-2-ヒドロキシメチル-3-(4-クロロフェニル)トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(2-フラニル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(3-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-N-アリル-2-(3-(4-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-N-エチル-2-(3-(4-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-N-(2-ヒドロキシエチル) -2-(3-(4-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-2-(3-(4-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-N-アリル-2-(3-(3-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-N-アリル-2-(3-(2-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(2-チエニル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(2-チエニル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(4-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(2-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(4-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(3-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-クロロフェニル)-トロパン; 
(1R,2R,3S)-2-(3-(2-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-フェニル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-フルオロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-フェニル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-メチルフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-ベンジル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-フルオロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(4-フェニルフェニル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-フルオロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-フェニル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(2-ナフチル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(4-クロロフェノキシ−メチル)-3-(4-フルオロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(4-クロロフェノキシ−メチル)-3-(4-フルオロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(4-クロロフェノキシ−メチル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(4-クロロフェノキシ−メチル)-3-(4-メチルフェニル)-トロパン; 
(1R,2R,3S)-2-(4-ベンゾイルオキシ−メチル)-3-(4-フルオロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-カルボメトキシ-3-(2-ナフチル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-カルボメトキシ-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-カルボメトキシ-3-ベンジル-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-カルボメトキシ-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-カルボメトキシ-3-(4-メチルフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-カルボメトキシ-3-(1-ナフチル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-カルボメトキシ-3-(4-フェニルフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-カルボメトキシ-3-(4-t-ブチル-フェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(4-フルオロ−ベンゾイル)-3-(4-フルオロフェニル)-トロパン;
(1S,2S,4S,7R)-2-(3,4-ジクロロフェニル)-8-アザトリシクロ[5.4.0.04,8]ウンデカン-11-オン;
(1S,2S,4S,7R)-2-(3,4-ジクロロフェニル)-8-アザトリシクロ[5.4.0.04,8]ウンデカン-11-オール;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン O-メチル-オキシム;
(1S,2S,4S,7R)-2-(4-クロロフェニル)-8-アザトリシクロ[5.4.0.04,8]ウンデカン-11-オン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オール;
(1S,3S,4S,8R)-3- (3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デシ-5-イル 酢酸塩;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デシ-5-イル メタンスルフェート;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-5- メトキシ -7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-5-エトキシ-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(4-クロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(4-クロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オール;
(1S,3S,4S,8R)-3-(4-クロロフェニル)-5-エトキシ-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン O-ベンジル-オキシム;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン O-アリル-オキシム;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン オキシム;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン O-t-ブチル-オキシム;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン O-エチル-オキシム;
(1S,3S,4S,8R)-5-アリルオキシ-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン;
エチル (1S,3S,4S,8R)-2-[3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デシ-5-イリデン]酢酸塩;
(1S,3S,4S,8R)-3-(4-クロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン オキシム;
N1-[1S,3S,4S,8R)-3-(4-クロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デシ-5-イル]アセトアミド; 
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デシ-5-イル アミン;
又はその薬学的に許容し得る付加塩から選ばれる、請求項１記載の使用する方法。
【請求項７】
治療、予防又は緩和される疾患が虚血性疾患、無酸素症、あるいは外傷によって引き起こされる脳及びＣＮＳの他の部分への損傷又は頭部強打によって受けるようなその他の損傷である、請求項１〜５のいずれか１つに記載の使用する方法。
【請求項８】
治療、予防又は緩和される疾患が脳血管障害、たとえば血栓塞栓性発作又は出血性発作; 脳血管痙攣; 低血糖症; 心拍停止; 周産期仮死; 溺水、肺の手術又は脳外傷で生じる無酸素症に起因する大脳虚血又は脳梗塞症から選ばれる、請求項１〜５のいずれか１つに記載の使用する方法。
【請求項９】
治療、予防又は緩和される疾患が次の疾患の後に生じる又は次の疾患に起因する脳損傷から選ばれる：
大脳虚血、心拍停止、危険性の高い手術、たとえば心臓外科、発作、新生児低酸素症、低下した肺機能に起因する低酸素症、新生児無酸素症、低下した肺機能に起因する無酸素症、脳外傷、脳浮腫によって誘発される二次的な局所虚血、増加した頭蓋内圧、開脳手術、動脈内膜切除、大脳血流の減少をもたらす心肺機能の一過性人為的持続停止を含む外科的介入、又は心肺機能蘇生(CPR)を含む救急処置；
請求項１〜５のいずれか１つに記載の使用する方法。
【請求項１０】
対象者（患者）の減少した脳への血流に係わる又は脳への血液供給の一過性停止の症例に係わる疾患の治療、予防又は緩和方法において、ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体又はその薬学的に許容し得る塩の治療上有効な量を当該対象者に投与することからなる、上記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は減少した脳への血流に係わる又は脳への血液供給の一過性停止の症例に係わる疾患の治療、予防又は緩和用医薬の製造に、ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体又はその薬学的に許容し得る塩を使用する方法に関する。
【従来技術】
【０００２】
大脳虚血は組織損傷のさまざまな度合を引き起こす。重い虚血の病態は不可逆性損傷を引き起こし、一方穏やかな虚血の病態では組織損傷が可逆性損傷である。組織損傷の可逆性が、特に線条体で、処置に対する新しい治療法の開発に重要である。
【０００３】
大脳虚血の発症に伴い、グルタミン酸塩が皮質から線条体に遊離され、主にナトリウム流入を介したドパミン作動性神経末端の過剰の脱極化を生じる。この脱極化はドパミンの大量流出を生じ、ドパミンはつぎに線条体中で神経変性作用を行使する。
【０００４】
したがってこのような状況で線条体ドパミンレベルを減少させる能力のある化合物は、減少した脳への血流に係わる又は脳への血液供給の一過性停止の症例に係わる疾患の治療に有用であるとみなされる。
【０００５】
ドパミン輸送体(DAT)の逆戻りを介したドパミン遊離は、虚血後線条体の神経変性変化の一部がドパミン輸送体を介したドパミン遊離に由来するような線条体の虚血病態に重要でもあると記載されている (Leviel V, Neurochemistry International, 38, 83-106, 2001)。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
発明の詳細な説明
本発明者はドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体が減少した脳への血流に係わる又は脳への血液供給の一過性停止の症例に係わる疾患の治療、予防又は緩和に有用であることを見出した。 
【０００７】
したがって、第一の観点で、本発明は減少した脳への血流に係わる又は脳への血液供給の一過性停止の症例に係わる疾患の治療、予防又は緩和用医薬の製造に、ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体又はその薬学的に許容し得る塩を使用する方法を提供する。
【０００８】
第二の観点で、本発明は対象者（患者）の減少した脳への血流に係わる又は脳への血液供給の一過性停止の症例に係わる疾患の治療、予防又は緩和方法において、ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体又はその薬学的に許容し得る塩の治療上有効な量を当該対象者に投与することからなる、上記方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
１つの実施態様において、ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体は一般式 (I)
2005511639.tif 000002
【００１０】
(I)
｛式中、
Rは水素, アルキル, アルケニル, アルキニル, シクロアルキル, シクロアルキルアルキル又は2-ヒドロキシエチルである;
R3 は
・  CH2-X-R’,
［式中、XはO, S又はNR’’（式中、R’’は水素又はアルキルである。）であり、
R’ はアルキル, アルケニル, アルキニル, シクロアルキル, シクロアルキルアルキル又は-CO-アルキルである］;
・ヘテロアリール［これは   
・アルキル, シクロアルキル又はシクロアルキルアルキル;   
・フェニル（これはハロゲン, CF3,       CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）;  
・フェニルフェニル;  
・ピリジル（これはハロゲン, CF3,       CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）;  
・チエニル（これはハロゲン, CF3,       CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）又は  
・ベンジル（これはハロゲン, CF3,       CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。） 
によって１回以上置換されていてよい。］；
又は
・  (CH2)nCO2R11, COR11 又は CH2R12; 
［式中、R11 は
・  アルキル, シクロアルキル又はシクロアルキルアルキル; 
・  フェニル（これはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）; 
・  フェニルフェニル; 
・  ピリジル（これはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）; 
・  チエニル（これはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）又は
・  ベンジル；
である；
n は0又は1である; そして
R12 は
・  O-フェニル（これはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）; 又は
・  O-CO-フェニル（これはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）
である。］;
又は
・  CH=NOR’; 
［式中、R’は
・  水素;
・  アルキル, シクロアルキル, シクロアルキルアルキル, アルケニル, アルキニル又は アリール（これらのすべては
・  -COOH;
・  -COO-アルキル;
・  -COO-シクロアルキル又は
・  フェニル（これはハロゲン, CF3, CN, アルキル, シクロアルキル, アルコキシ, シクロアルコキシ, アルケニル, アルキニル, アミノ, 及びニトロより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）; 
によって置換されていてよい．）；
である。］
R4 は
・  3,4-メチレンジオキシフェニル又は
・  フェニル, ベンジル, ナフチル又はヘテロアリール（これらのすべてはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, シクロアルコキシ, アルキル, シクロアルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）
である。｝
で表わされる化合物又はその薬学的に許容し得る付加塩又はそのＮ−オキシドである。
【００１１】
一般式Ｉで表わされる化合物の別の具体的実施態様において、
R3 が 
・1,2,4-オキサジアゾール-3-イル［これは5位が   
・アルキル, シクロアルキル又はシクロアルキルアルキル;   
・フェニル（これはハロゲン, CF3,       CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）;   
・フェニルフェニル; 又は  
・ベンジル（これはハロゲン, CF3,       CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。） 
によって置換されていてよい；］; あるいは
・1,2,4-オキサジアゾール-5-イル［これは3位が   
・アルキル, シクロアルキル又はシクロアルキルアルキル;   
・フェニル（これはハロゲン, CF3,       CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）;   
・フェニルフェニル;  
・  ベンジル（これはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）; 
・  ピリジル（これはハロゲン , CF3, CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）;又は
・  チエニル（これはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, アルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）
によって置換されていてよい；］
である。
一般式Ｉで表わされる化合物の別の具体的実施態様において、
R3 は 
・  CH2-X-R’,
（式中、XはO, S又はNR’’であり、R’’は水素又はアルキルであり、
R’はアルキル, アルケニル, アルキニル, シクロアルキル, シクロアルキルアルキル又は-CO-アルキルである。）
である。
一般式Ｉで表わされる化合物のまた別の具体的実施態様において、
R3 は 
・  CH=NOR’; 
［式中、R’は
・  水素;
・  アルキル, シクロアルキル, シクロアルキルアルキル, アルケニル, アルキニル又は アリール（これらのすべては
・  -COOH;
・  -COO-アルキル;
・  -COO-シクロアルキル又は
・  フェニル（これはハロゲン, CF3, CN, アルキル, シクロアルキル, アルコキシ, シクロアルコキシ, アルケニル, アルキニル, アミノ, 及びニトロより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい。）; 
によって置換されていてよい．）；
である。］
である。
【００１２】
一般式Ｉで表わされる化合物の別の具体的実施態様において、R4 はフェニルであって、これはハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, シクロアルコキシ, アルキル, シクロアルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, ニトロ及びヘテロアリールより成る群から選ばれた置換基１個以上によって置換されている。 
【００１３】
更に具体的実施態様において、R4 は塩素によって１回又は２回置換されたフェニルである。
【００１４】
別の具体的実施態様において、ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体は式Ｉで表わされる(1R,2R,3S)-2,3-置換されたトロパン誘導体である。
【００１５】
更に別の実施態様において、
R3 は
・  -CH2-X-R’（式中、XがO又はS, R’がメチル, エチル, プロピル又はシクロプロピルメチルである。）; 
・  CH=NOR’; 
（式中、R’が水素又はアルキルである。）, 又は
・  1,2,4-オキサジアゾール-5-イル（これは3位がアルキルによって置換されていてよい。）；
である。
【００１６】
また別の実施態様において、ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体は 一般式Ｉで表わされる化合物（式中、Rが水素, メチル, エチル又はプロピルである。）である。 
【００１７】
また別の実施態様において, ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体は 一般式Ｉで表わされる化合物（式中、R4が3,4-ジクロロフェニルである。）である。
【００１８】
具体的実施態様において, ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体は:
(1R,2R,3S)-2-(3-シクロプロピル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-フルオロフェニル)トロパン; 
(1R,2R,3S)-2-(3-フェニル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-フルオロフェニル)トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-フェニル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-メチルフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-ベンジル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-フルオロフェニル)トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(4-フェニル-フェニル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-フルオロフェニル)トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-フェニル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(2-ナフチル)トロパン;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン-2-O-メチル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-ベンジル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-エトキシカルボニルメチル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-メトキシカルボニルメチル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-(1-エトキシカルボニル-1,1-ジメチル-メチル)-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-カルボキシメチル-2-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-メチル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-ベンジル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(4-メチルフェニル)トロパン-2-O-メチル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-(1,1-ジメチルエチル)-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(4-クロロフェニル)トロパン-2-O-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(4-クロロフェニル)トロパン-2-O-メチルアルドオキシム 塩酸塩;
(1R,2R,3S)-3-(4-クロロフェニル)トロパン-2-O-メトキシカルボニルメチル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-(2-プロピニル)-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-(2-メチルプロピル)-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-シクロプロピルメチル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン-2-O-エチル-アルドオキシム;
(1R,2R,3S)-2-メトキシメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-イソプロポキシメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-エトキシメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-シクロプロピルメチルオキシメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-メトキシメチル-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-2-メトキシメチル-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-エトキシメチル-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-2-メトキシメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-2-エトキシメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-2-エトキシメチル-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-2-シクロプロピルメチルオキシメチル-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-シクロプロピルメチルオキシメチル-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-エチルチオメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-ヒドロキシメチル-3-(4-フルオロフェニル)トロパン;
(1R,2R,3S)-2-ヒドロキシメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-N-(t-ブトキシカルボニル)-2-ヒドロキシメチル-3-(3,4-ジクロロフェニル)トロパン;
(1R,2R,3S)-2-ヒドロキシメチル-3-(4-クロロフェニル)トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(2-フラニル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(3-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-N-アリル-2-(3-(4-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-N-エチル-2-(3-(4-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-N-(2-ヒドロキシエチル) -2-(3-(4-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-2-(3-(4-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-N-アリル-2-(3-(3-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-N-ノルメチル-N-アリル-2-(3-(2-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(2-チエニル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(2-チエニル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(4-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(2-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(4-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(3-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-クロロフェニル)-トロパン; 
(1R,2R,3S)-2-(3-(2-ピリジル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-フェニル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-フルオロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-フェニル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-メチルフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-ベンジル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-フルオロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-(4-フェニルフェニル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(4-フルオロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(3-フェニル-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-3-(2-ナフチル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(4-クロロフェノキシ−メチル)-3-(4-フルオロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(4-クロロフェノキシ−メチル)-3-(4-フルオロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(4-クロロフェノキシ−メチル)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(4-クロロフェノキシ−メチル)-3-(4-メチルフェニル)-トロパン; 
(1R,2R,3S)-2-(4-ベンゾイルオキシ−メチル)-3-(4-フルオロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-カルボメトキシ-3-(2-ナフチル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-カルボメトキシ-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-カルボメトキシ-3-ベンジル-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-カルボメトキシ-3-(4-クロロフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-カルボメトキシ-3-(4-メチルフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-カルボメトキシ-3-(1-ナフチル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-カルボメトキシ-3-(4-フェニルフェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-カルボメトキシ-3-(4-t-ブチル-フェニル)-トロパン;
(1R,2R,3S)-2-(4-フルオロ−ベンゾイル)-3-(4-フルオロフェニル)-トロパン;
(1S,2S,4S,7R)-2-(3,4-ジクロロフェニル)-8-アザトリシクロ[5.4.0.04,8]ウンデカン-11-オン;
(1S,2S,4S,7R)-2-(3,4-ジクロロフェニル)-8-アザトリシクロ[5.4.0.04,8]ウンデカン-11-オール;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン O-メチル-オキシム;
(1S,2S,4S,7R)-2-(4-クロロフェニル)-8-アザトリシクロ[5.4.0.04,8]ウンデカン-11-オン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オール;
(1S,3S,4S,8R)-3- (3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デシ-5-イル 酢酸塩;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デシ-5-イル メタンスルフェート;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-5- メトキシ -7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-5-エトキシ-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(4-クロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(4-クロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オール;
(1S,3S,4S,8R)-3-(4-クロロフェニル)-5-エトキシ-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン O-ベンジル-オキシム;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン O-アリル-オキシム;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン オキシム;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン O-t-ブチル-オキシム;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン O-エチル-オキシム;
(1S,3S,4S,8R)-5-アリルオキシ-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン;
エチル (1S,3S,4S,8R)-2-[3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デシ-5-イリデン]酢酸塩;
(1S,3S,4S,8R)-3-(4-クロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン オキシム;
N1-[1S,3S,4S,8R)-3-(4-クロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デシ-5-イル]アセトアミド; 
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デシ-5-イル アミン;
又はその薬学的に許容し得る付加塩から選ばれる一般式(I)で表わされる化合物である。
【００１９】
１つの実施態様, ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体は一般式 (II)
2005511639.tif 000003
【００２０】
(II)
｛式中、
X 及びY が一緒になって=O, =S, =NOR2, =CR3R4, =N-CN, =N-NR7R8, -(CH2)m- 又は
-W’-(CH2)p-W’’- を形成するか又は X 及び Y の一方が水素であり、他方が -OR5, -SR5 又は -NR5R6 である；
Z が水素又は -COOR9  である;
R3 及びR4 が 独立して 水素, ハロゲン, アルキル, シクロアルキル, シクロアルキルアルキル, アルケニル, アルキニル, アルコキシ, アリール, アリールアルキル,又は -(CH2)q-COOR2である;
R2, R5 及び R6 が 独立して 水素, アルキル, シクロアルキル, シクロアルキルアルキル, アルケニル, アルキニル, アリール, 又はアリールアルキル, -CO-アルキル 又は -SO2-アルキルである;
R7 及び R8 が 独立して 水素, アルキル, シクロアルキル, シクロアルキルアルキル, アルケニル, アルキニル, アリール, 又は アリールアルキルである; 
R9 が アルキル, アルケニル 又は アルキニルである;
R1 が アルキル, アルケニル, アルキニル, アリール, 又は アリールアルキルである;
この場合 このアリール基はハロゲン, CF3, CN, アルコキシ, シクロアルコキシ, アルキル, シクロアルキル, アルケニル, アルキニル, アミノ, アルキルアミノ, ジアルキルアミノ 及び ニトロより成る群から選ばれた置換基によって１回以上置換されていてよい;
W’ 及び W’’ がそれぞれ独立して O 又は S である;
n が 1, 2, 3 又は 4 である;
m が 2, 3, 4 又は 5 である; 
p が 1, 2, 3, 4 又は 5 である; そして
q が 0, 1, 2, 3 又は 4 である。｝
で表わされる化合物又はそのあらゆる対掌体、又はその対掌体のすべての混合物、又はその薬学的に許容し得る付加塩又はそのＮ−オキシドである。
【００２１】
具体的な実施態様において、ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体 は
(1S,2S,4S,7R)-2-(3,4-ジクロロフェニル)-8-アザトリシクロ[5.4.0.04,8]ウンデカン-11-オン;
(1S,2S,4S,7R)-2-(3,4-ジクロロフェニル)-8-アザトリシクロ[5.4.0.04,8]ウンデカン-11-オール;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン O-メチル-オキシム;
(1S,2S,4S,7R)-2-(4-クロロフェニル)-8-アザトリシクロ[5.4.0.04,8]ウンデカン-11-オン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オール;
(1S,3S,4S,8R)-3- (3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デシ-5-イル 酢酸塩;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デシ-5-イル メタンスルフェート;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-5-メトキシ-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-5-エトキシ-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(4-クロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(4-クロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オール;
(1S,3S,4S,8R)-3-(4-クロロフェニル)-5-エトキシ-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン O-ベンジル-オキシム;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン O-アリル-オキシム;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン オキシム;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン O-t-ブチル-オキシム;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン O-エチル-オキシム;
(1S,3S,4S,8R)-5-アリルオキシ-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン;
エチル (1S,3S,4S,8R)-2-[3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デシ-5-イリデン]酢酸塩;
(1S,3S,4S,8R)-3-(4-クロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デカン-5-オン オキシム;
N1-[1S,3S,4S,8R)-3-(4-クロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デシ-5-イル]アセトアミド;
(1S,3S,4S,8R)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-7-アザトリシクロ[5.3.0.04,8]デシ-5-イル アミン;
又はその薬学的に許容し得る付加塩から選ばれる一般式 (II) で表わされる化合物である。
【００２２】
ある別の実施態様おいて、治療、予防又は緩和される疾患は虚血性疾患、無酸素症、あるいは外傷によって引き起こされる脳及びＣＮＳの他の部分への損傷又はその他の損傷、たとえば頭部強打によって受けるようなその他の損傷である。このような減少された血流又は血液供給で一過性停止がある疾患で、脳への酸素供給は減少されるか又は中断される。
【００２３】
別の実施態様において、治療、予防又は緩和される疾患は脳血管障害、たとえば血栓塞栓性発作又は出血性発作; 脳血管痙攣; 低血糖症; 心拍停止; 周産期仮死; 溺水、肺の手術又は脳外傷で生じる無酸素症に起因する大脳虚血又は脳梗塞症から選ばれる。
【００２４】
この方法は外傷性脳障害、具体的には虚血性、低酸素性又は無酸素性脳損傷、脊髄損傷、組織虚血及びこのような損傷の危険にさらされた哺乳類における再灌流障害の治療又は予防で使用することができる。
【００２５】
治療、予防又は緩和される疾患は次の疾患の後に生じる又は次の疾患に起因する脳損傷から選ばれる：
大脳虚血、心拍停止、危険性の高い手術、たとえば心臓外科、発作、新生児低酸素症、低下した肺機能に起因する低酸素症、新生児無酸素症、低下した肺機能に起因する無酸素症、脳外傷、脳浮腫によって誘発される二次的な局所虚血、増加した頭蓋内圧、開脳手術、動脈内膜切除、大脳血流の減少をもたらす心肺機能の一過性人為的持続停止を含む外科的介入、又は心肺機能蘇生(CPR)を含む救急処置；
具体的な実施態様において、治療、予防又は緩和される疾患は虚血性発作の救急治療、全脳虚血後の脳損傷又は危険性の高い手術後の脳損傷の予防である。
【００２６】
脳虚血の多くの症例で、治療は数時間、たとえば虚血性損傷後６時間までに患者に、発作患者の場合、一般に３〜６時間まで効果を示さない。このような遅れは虚血性脳損傷を軽減することを目的とするあらゆる治療計画に多大な要求を突きつける。しかしながら本発明者は本発明のドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体が虚血前に投与されるか、虚血後に投与されるかに関係なく驚くほど有効であることを見出した。
【００２７】
虚血後投与する場合、ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体が虚血発作の１日以内に投与されるのが望ましい。本発明で使用されるドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体が脳の再灌流後１４時間なってもまだ投与することができるが、虚血緩和又は再灌流の１２時間以内に治療を実施するのが好ましい。好ましくは、治療は虚血緩和の６時間以内に行われなければならない。一層好ましくは虚血緩和して３時間以内に本発明で使用されるドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体である。
【００２８】
ここで使用されるように、ＣＮＳは脳及び脊髄を含み、そして“病気を治す”とは治療も診断も含む。
【００２９】
ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体
ドパミン再取り込み阻害活性として作用するための特定物質の効力は標準インビトロ結合アッセイ及び（又は）標準インビボ機能性試験、たとえば“試験法”に記載される試験を用いて測定することができる。
【００３０】
本発明で使用されるドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体は特に NeuroSearch 特許出願：欧州特許第604355号及び第604352号明細書、米国特許第 5444070号明細書、欧州特許第604354号明細書、国際特許出願（WO）第95/28401号明細書及び第97/30997号明細書に開示されたトロパン誘導体、及びNeuroSearch 特許出願：国際特許出願（WO）第97/16451号明細書に開示された縮合トロパン誘導体であることができる。
【００３１】
１つの実施態様において、ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体は、 3H-DA 取り込みのインビトロ阻害について試験(試験法 1)した場合、1 μM より少ない、好ましくは100 nMより少ない, より好ましくは 50 nMより少ない, そしてさらに好ましくは10 nMより少ないIC50 値を示す。
【００３２】
第二の実施態様において、ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体は、3H-WIN 35428 結合 経口、皮下又は腹腔内のインビボ阻害 (試験法 5)について試験した場合、500 mg/kgより少ない, 好ましくは100 mg/kgより少ない, より好ましくは50 mg/kgより少ない, さらに好ましくは20 mg/kg より少ない、そしてさらにより好ましくは10 mg/kg のED50 値を示す。
【００３３】
別の実施態様において, ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体は、MPTPで処理されたマウスで線条体ドパミンへの影響について試験(試験法8)した場合、試験物質20 mg/kgで60%より大きい、好ましくは70%より大きい、より好ましくは80%より大きいMPTPに対する保護を示す。
【００３４】
また別の実施態様において、ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体は、MPTPで処理されたマウスで線条体ドパミンへの影響について試験した場合、試験物質10 mg/kgで60%より大きい、好ましくは70%より大きい、より好ましくは80%より大きいMPTPに対する保護を示す。
【００３５】
ドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体の上記例は請求項に記載した本発明の範囲に何ら限定を与えることを意図していない。
【００３６】
置換基の定義
本発明の範囲において、アルキル基は直鎖状又は分枝状鎖を示し、この鎖は炭素原子１〜６個を有し（C1-C6アルキル）を含み、これはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル, ブチル、イソブチル、t-ブチル、ペンチル及びヘキシルを含むがこれらに限定されない。本発明の好ましい具体例において、アルキルはC1-C4アルキル, 好ましくはC1-C3アルキル、最も好ましくはメチル, エチル, プロピル又はイソロピルを示す。
【００３７】
本発明の範囲において、シクロアルキル基は炭素原子３〜７個を有する環状アルキル基（C3-C7シクロアルキル）であって、これはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルを含むがこれらに限定されない。
【００３８】
本発明の範囲において、アルケニル基は少なくとも１個の二重結合を有する炭素原子２〜６個（C2-C6アルケニル）を有する基を示し、エテニル；１、２−又は２、３−プロペニル；１、２−、２、３−又は３、４−ブテニルであるが、これらに限定されない。
【００３９】
本発明の範囲において、アルキニル基は少なくとも１個の三重結合を有する、炭素原子２〜６個（C2-C6アルキニル）を有する基である。これはたとえばエチニル、１、２−又は２、３−プロピニル；１、２−、２、３−又は３、４−ブチニルであるが、これらに限定されない。
【００４０】
本発明の範囲において、シクロアルキル−アルキル基は、上記に定義された通りのアルキル基に結合される、上記に定義された通りのシクロアルキル基を示し、たとえばシクロプロピルメチルを示す。
【００４１】
本発明の範囲において、アリールは芳香族炭化水素、たとえばフェニル又はナフチルを示す。
【００４２】
本発明の範囲において、アルコキシは“アルキル- Ｏ- ”を示し、この際アルキルは上記に定義された通りである。
【００４３】
本発明の範囲において、アシルは“アルキル-ＣＯ- ”を示し、この際アルキルは上記に定義された通りである。
【００４４】
本発明の範囲において、ハロゲンはフッ素、塩素、臭素又はヨウ素を示す。
【００４５】
本発明の範囲において、アミノはNH2, NH-アルキル又はN-(アルキル)2  を示し、この際アルキルは上記に定義された通りである。
【００４６】
本発明の範囲において、ヘテロアリールは５−又は６−員のヘテロ環状単環基、たとえばオキサゾール-2-イル, オキサゾール-4-イル, オキサゾール-5-イル, イソオキサゾール3-イル, イソオキサゾール4-イル, イソオキサゾール-5-イル, チアゾール-2-イル, チアゾール-4-イル, チアゾール-5-イル, イソチアゾール3-イル, イソチアゾール4-イル, イソチアゾール5-イル, 1,2,4-オキサジアゾール-3-イル, 1,2,4-オキサジアゾール-5-イル, 1,2,4-チアジアゾール-3-イル, 1,2,4-チアジアゾール-5-イル, 1,2,5-オキサジアゾール-3-イル, 1,2,5-オキサジアゾール-4-イル, 1,2,5-チアジアゾール-3-イル, 1,2,5-チアジアゾール4-イル, 2-イミダゾリル, 4-イミダゾリル, 5-イミダゾリル, 2-ピロリル, 3-ピロリル, 2-フラニル, 3-フラニル, 2-チエニル, 3-チエニル, 2-ピリジル, 3-ピリジル, 4-ピリジルを示すが、これらに限定されない。
【００４７】
立体異性体
本発明の化合物は(+)-及び(-) 形並びにラセミ形で存在することができる。これらの異性体のラセミ化合物及び個々の異性体それ自体は本発明の範囲内にある。
ラセミ形は公知の方法及び処理で光学対掌体に分割することができる。そのジアステレオマー塩を分離する一つの方法は、光学的に活性な酸を使用し、次いで塩基で処理して光学的に活性アミン化合物を遊離することにある。ラセミ化合物の光学対掌体への他の分割法は、光学的活性なマトリックス上でのクロマトグラフィー法に基づく。本発明のラセミ化合物は、たとえばｄ- 又はｌ- 塩 (酒石酸塩、マンデル酸塩、又はシヨウノウスルホン酸塩）の分別結晶によって、その光学的対掌体に分割することができる。
【００４８】
本発明の化合物はまた、本発明の化合物と光学的活性に活性化されたカルボン酸、たとえば（＋）又は（−）フエニルアラニン、（＋）又は（−）フエニルグリシン、（＋）又は（−）カンフアン酸に由来するカルボン酸とを反応させてジアステレオマーアミドを生成させることによってあるいは本発明の化合物と光学的活性なクロロギ酸塩等々とを反応させて、ジアステレオマーカルバミン酸塩を生成させることによって分割することができる。    
【００４９】
他の光学的異性体分割法は技術上周知である。この様な方法は、Jaques J. Collet A, 及び Wilen S, “Enantiomers, Racemates, and Resolutions", John Wiley 及び Sons,ニューヨーク(1981)中に記載されている。
【００５０】
更に、オキシムである本発明のいくつかの化合物は-C=C-又は-C=N- 二重結合の周囲にある置換基の配置によって２つの形、すなわちsyn-形及びanti- 形で（Ｚ- 及びＥ- 形）で存在することができる。したがって本発明の化合物は、そのsyn-形及びanti- 形（Ｚ- 及びＥ- 形）であるか又はそれらの混合物であることができる。
【００５１】
薬学的に許容し得る塩
本発明の化合物を、意図される投与に適するすべての形態で提供することができる。適する形態は薬学的に（すなわち生理学的に）許容し得る塩及び本発明の化合物のプレドラッグ形及びプロドラッグ形を含む。
【００５２】
薬学的に許容し得る付加塩の例としては、以下のものに限定されないが、非毒性無機- 及び有機酸付加塩、たとえば塩酸塩、臭化水素酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、ギ酸塩、酢酸塩、アコニチン酸塩、アスコルビン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、ケイヒ酸塩、クエン酸塩、エンボン酸塩(embonate)、エナンチン酸塩(enantate)、フマル酸塩、グルタミン酸塩、グリコール酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフタレン-2- スルホン酸塩、フタル酸塩、サリチル酸塩、ソルビン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トルエン-p-スルホン酸塩を含む。この様な塩は技術上公知の方法及びで製造することができる。
【００５３】
本発明に使用される本発明の化合物の金属塩はアルカリ金属塩、たとえばカルボキシ基を含有する本発明に使用される化合物のナトリウム塩を含む。
【００５４】
用語“プロドラッグ”は薬物の前駆体であり、そして薬物を投与し、吸収した後に生体内でいくつかの代謝過程を経て薬物を遊離する化合物を示す。
【００５５】
具体的に好ましいプロドラッグは本発明の化合物のバイオアベイラビリティーを増加させるか（たとえば経口投与された化合物を血液中に容易に吸収されるようにする）又は特異的生物学的コンパートメント（a specific biological compartment)（たとえば脳又はリンパ系）への元となる化合物（the parent compound)の運搬を増加させるものである。
【００５６】
したがって本発明の化合物の適当なプロドラッグの例は、元となる化合物の反応性又は誘導可能な基１個以上で修飾された化合物を包含する。特に重要なことはカルボキシル基、ヒドロキシル基又はアミノ基を用いて修飾された化合物である。適当な誘導体の例はエステル類又はアミド類である。
【００５７】
薬学的調合物
本発明はドパミン再取り込み阻害剤の治療上有効な量を含有する薬学的調合物の使用を提供する。本発明にしたがって治療に使用されるドパミン再取り込み阻害活性を有するトロパン誘導体をそのまま化合物として投与してもよいが、有効成分を場合により生理学的に許容し得る塩の形で、１種以上の佐剤、賦形剤、キャリヤー、希釈剤、緩衝剤、及び（又は）その他の慣用の薬学的助剤と共に薬学的調合物の形で提供するが好ましい。
【００５８】
好ましい具体例において、本発明は、更に本発明の化合物又はその薬学的に許容し得る塩又は誘導体を薬学的に容認されたキャリヤー１種以上及び場合により他の治療及び（又は）予防成分と共に含有する薬学的調合物を提供する。このキャリヤーは、製剤中の他の成分と適合しかつこれに投与される患者に有害でないという意味で“許容し得”なければならない。
【００５９】
本発明の薬学的調合物は所望の治療に適合するあらゆる有利な経路によって投与することができる。好ましい投与経路は経口投与、具体的には錠剤、カプセル、ドラジェ、粉末又は液体の形で、そして腸管外投与、具体的には皮膚−、皮下−、筋肉内−、又は静脈内−注射を含む。薬学的調合物は標準方法及び所望の調合物に適合する有利な方法を使用することによって当業者に製造することができる。所望ならば、有効成分の徐放を生じるのに適した調合物を使用することができる。
【００６０】
調合物及び投与方法に関する更に詳しい説明は、Remington’s Pharmaceutical Sciences (Maack Publishing Co., Easton, PA)の最新版中に見出される。
【００６１】
実際の薬用量は治療される疾患の性質及び過酷さ及び投与経路に依存し、更にその量は医師の裁量にまかされており、所望の治療効果を生じるために本発明の特定の状況に薬用量を適合させることによって変化させることができる。しかし単位投薬形あたり有効成分約０．１〜約５００ｍｇ、好ましくは約１〜約１００ｍｇ、最も好ましくは約１〜約１０ｍｇを含有する調合物が治療的処置に適当であると現在考えられている。
【００６２】
有効成分を、１日１回又は数回の薬用量で投与することができる。満足のいく結果は、ある場合、０．１μｇ／ｋｇ（静脈内）及び１μｇ／ｋｇ（腹腔内）ほどの低い薬用量で得ることができる。薬用量範囲の上限は約１０ｍｇ／ｋｇ（静脈内）及び１００ｍｇ／ｋｇ（腹腔内）であると現在見なされる。好ましい範囲は、一日あたり約０．１μｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ（静脈内）及び約１μｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ（腹腔内）である。
【００６３】
組み合わせ治療
本発明で使用される薬学的調合物は、減少した脳への血流に係わる又は脳への血液供給の一過性停止の症例に係わる疾患の治療、予防又は緩和に有用な別の医薬１種以上と組み合わせて含むか又は使用するか又は投与することができる。このような別の医薬は興奮性アミノ酸レセプター（グルタミン酸塩又はアスパラギン酸塩）を遮断することができる化合物及び神経栄養化合物を含む。
【００６４】
興奮性アミノ酸レセプターを遮断することができる化合物は、特許出願；国際特許出願（ＷＯ）第９４／２６７４７号明細書、国際特許出願（ＷＯ）第９６／０８４９５号明細書、国際特許出願（ＷＯ）第９６／０８４９５号明細書、国際特許出願（ＷＯ）第９８／１４４４７号明細書及び国際特許出願（ＷＯ）第９９／４９８６４号明細書（すべてNeuroSearch）に記載された物質を含む。
【００６５】
本発明において、神経栄養活性を有する化合物は１種以上の内因性神経栄養因子の機能を擬似するか又は増加させる化合物である。ある実施態様において、神経栄養活性を有する化合物はＮＧＦ、ＢＤＮＦ及び（又は）ＧＤＮＦの機能を擬似するか又は増加させる化合物である。別の実施態様において、神経栄養活性を有する化合物はｂＦＧＦ及び（又は）ＥＧＦの機能を擬似するか又は増加させる化合物である。特定の実施態様において、神経栄養活性を有する化合物はＮＧＦの機能を擬似するか又は増加させる化合物である。神経栄養活性は成長因子とそのレセプターの相互作用での又は成長因子シグナルトランスダクション経路での特異的段階にあるとされていなかった。神経活性を有する化合物として作用する特定化合物の効力(potential)を、標準インビトロ結合アッセイ及び（又は）標準インビボ機能テストを用いて測定することができる。
【００６６】
本発明にしたがって使用される神経活性を有する化合物は国際特許出願（ＷＯ）第９８／０７７０５号明細書（Takeda Chem Ind Ltd）、 国際特許出願（ＷＯ）第００／３４２６２号明細書（Takeda Chem Ind Ltd）、 国際特許出願（ＷＯ）第００／３２１９７号明細書（Alcon Lab Inc）、 国際特許出願（ＷＯ）第９７／４００３５号明細書（NeuroSearch）、 国際特許出願（ＷＯ）第００／４３３９７号明細書（NeuroSearch）、国際特許出願（ＷＯ）第０１／５５１１０号明細書（NeuroSearch）、特開２０００２２６３８８号公報（Takeda Chem Ind Ltd)、 国際特許出願（ＷＯ）第００／３２１９７号明細書（Alcon Lab Inc)及び 国際特許出願（ＷＯ）第００／４６２２２号明細書（Schering AG）に記載されている物質を含む。
【００６７】
本発明の神経栄養活性を有する化合物の別の例は、１−（１，３−ベンゾジオキソル−５−イル）−７，８，９，１０−テトラヒドロ−１，３−ベンゾジオキソル「４，５−」イソキノリン−７−オン（Takeda）、２−（２，２，４，５，７−ペンタメチル−３−フェニル−２，３−ジヒドロ−１−ベンゾフラン−５−イル）−イソインドリン（Takeda）、４−アリル−１−フェニルアルキル−１，２，３，６−テトラヒドロピリジン（Sanofi-Synthelabo）、SR-57746A又は１−（２−ナフト−２−イル）エチル−４−（３−トリフルオロメチルフェニル）−１，２，５，６−テトラヒドロピリジン(Sanofi-Synthelabo), AIT-082 (NeoTherapeutics), NIL-A (Amgen Inc), K-252a (Cephalon), CEP-1347, GPI-1046 (Guilford), CTQ3, CTQ5 及び CTQ8 (Centre de Neurochimie du CNRS), V-10,367 及び V-13,661 (Vertex Pharmaceuticals Inc), ABS-205 (American Biogenic Sciences), Dexanabinol 又は HU-211 (Pharmos)、又はその塩、遊離塩基、ラセミ化合物又はエナンチオマーを含む。
【００６８】
興奮性アミノ酸レセプターを遮断する能力のある化合物及び神経栄養活性を有する化合物の上記例は、本発明の範囲に何ら限定を与えることを意図していない。
【００６９】
製造方法  
本発明で使用される一般式（Ｉ）及び（ＩＩ）で表わされる化合物を化学合成に通常の方法、たとえば欧州特許第６０４３５５号明細書、欧州特許第６０４３５２号明細書、米国特許第５４４４０７０号明細書、欧州特許第６０４３５４号明細書、国際特許出願（ＷＯ）第９７／３０９９７号明細書、国際特許出願（ＷＯ）第９５／２８４０１号明細書及び国際特許出願（ＷＯ）第９７／１６４５１号明細書に記載された方法によって製造することができる。
【００７０】
本発明に記載されていた方法のための出発化合物は公知であるか又は市販化合物から常法で容易に製造することができる。
【００７１】
ここに記載された反応最終生成物を、通常の手段、たとえば抽出、結晶化、蒸留、クロマトグラフィー等によって単離することができる。
【００７２】
本発明に記載された実施態様２つ以上のあらゆる起こりうる組み合わせは本発明の範囲に含まれる。
【００７３】
更に、本発明を次の試験法及び実施例によって説明するが、これらは請求項に記載した本発明の範囲に何ら限定を与えることを意図していない。
方法１
線条体シナプトゾーム中の3H−ドパミン（3H-DA ）取り込みのインビトロ阻害
この試験で、ドパミン活性を増加させる化合物（以下、試験化合物と略称する。）が線状体シナプトゾーム中の3H−ドパミン取り込みを阻害する能力を判定する。
【００７４】
組織調製： その他に明記しない限り、０〜４℃で調製を行う。雄性ウスターラット(150-200g)から得られた大脳皮質を、Ultra-Turraxホモジナーザーを用いて１ｍＭパーグリンを含有する氷冷された０．３２Ｍショ糖１００容量中で５〜１０秒間ホモジナイズする。モノアミンオキシダーゼ活性をパーグリンの存在下で阻害する。ホモジナートを１０分間１０００×ｇで遠心分離する。ついで得られた上澄みを５０分間２７，０００×ｇで遠心分離し、上澄みを捨てる。ペレット(P2)を酸素付加された（少なくとも３０分間９６％O2:４％CO2の大気で均衡に保たれた）、122 mM NaCl, 0.16 mM EDTA, 4.8 mM KCl, 12.7 mM Na2HPO4, 3.0 mM NaH2PO4, 1.2 mM MgSO4, 0.97 mM CaCl2, 10 mM グルコース及び1 mM アスコルビン酸を含有するクレブス−リンガー（ｋｒｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ）インキュベーション緩衝液（原組織１ｇあたり８０００ｍｌ）にｐＨ７．２で再懸濁する。
【００７５】
アッセイ：組織懸濁液４．０ｍｌを有するアリコートを、試験溶液１００μＬ及び 3H-DA （最終濃度１ｎＭ）１００μＬに加え、混合し、３７℃で３０分間インキュベートする。非特異的取り込みをベンズトロピン（１０μＭ、最終濃度）を用いて測定する。インキュベーション後、サンブルを吸引下にワットマンＧＦ／Ｃガラスファイバーフィルター上に直接注ぐ。ついでフィルターを氷冷０．９％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌ溶液５ｍｌで３回洗滌する。フィルター上の放射能の量を通常の液体シンチレーション計数器によって測定する。特異的取り込みを全取り込みと非特異的取り込みの差異として算出する。
【００７６】
IC50を算出する前に、２５−７５％特異結合阻害を得なければならない。試験値をIC50として表わす（3H-DAの特異結合を５０％阻害する試験化合物の濃度（μＭ））。 
方法2
ラット脳シナプトゾームでのDA 取り込み阻害
この方法で、試験化合物のドパミン輸送体蛋白質の活性を阻害する能力を[3H]ドパミン([3H]DA)のシナプトゾーム取り込みを分析することによってインビトロで測定する。
【００７７】
組織調製： その他に明記しない限り、０〜４℃で調製を行う。雄性ウスターラット(150-200g)から得られた線条体を、ガラス製均質容器中でモーター駆動テフロン乳棒を用いて１ｍＭパーグリンを含有する氷冷された０．３２Ｍショ糖１００容量中で５〜１０秒間ホモジナイズする。モノアミンオキシダーゼ活性をパーグリンの存在下で阻害する。ホモジナートを１０分間１０００×ｇで遠心分離する。ついで得られた上澄みを５０分間２７，０００×ｇで遠心分離する。上澄みを捨て、ペレット(P2)を酸素付加された（少なくとも３０分間９６％O2:４％CO2の大気で均衡に保たれた）、122 mM NaCl, 0.16 mM EDTA, 4.8 mM KCl, 12.7 mM Na2HPO4, 3.0 mM NaH2PO4, 1.2 mM MgSO4, 0.97 mM CaCl2, 10 mM グルコース及び1 mM アスコルビン酸を含有するクレブス−リンガー（ｋｒｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ）インキュベーション緩衝液（([3H]DA)アッセイに関して原組織１ｇあたり８０００ｍｌ）（ｐＨ７．２）で再懸濁する。
【００７８】
取り込みアッセイ：組織懸濁液４．０ｍｌを有するアリコートを、試験溶液１００μＬ及び[3H]DA（最終濃度１ｎＭ）１００μＬに加え、混合し、３７℃で３０分間インキュベートする。非特異的取り込みをベンズトロピン（１０μＭ、最終濃度）を用いて測定する。インキュベーション後、サンブルを吸引下にワットマンＧＦ／Ｃガラスファイバーフィルター上に直接注ぐ。ついでフィルターを氷冷０．９％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌ溶液５ｍｌで３回洗滌する。フィルター上の放射能の量を通常の液体シンチレーション計数器によってTri-carbO液体シンチレーション分析器(モデル 1600CA; Packard, 米国)を用いて測定する。特異的取り込みを全取り込みと非特異的取り込みの差異として算出する。
【００７９】
データ分析：試験値をIC50として表わす（[3H]−リガンドの特異結合を５０％阻害する試験物質の濃度（μＭ））。
【００８０】
５〜９個の濃度を阻害曲線の決定に使用し、この曲線からIC50値が決定される。完全な曲線が得られないならば、IC50を算出する前に、２５−７５％特異結合阻害を得ることが必要である。
IC50 = (適用された試験物質濃度、 μM) ×Ａ
Ａ＝
2005511639.tif 000004
【００８１】
｛上記式中、
Ｃｏはコントロールアッセイ中の特異結合であり、Ｃｘはテストアッセイ中の特異結合である。（算出は正常の質量作用動力学であるとする。）｝
方法3
ラット線条体シナプトゾームでドパミン輸送体に結合するインビトロ [3H]GBR 12935 の阻害
この方法で、試験化合物のインビトロでのドパミン輸送体へのGBR 12935の結合阻害能力を分析する。
【００８２】
組織調製：その他に明記しない限り、０〜４℃で調製を行う。雄性ウスターラット(150-200g)から得られた線条体を、Ultra-Turraxホモジナーザーを用いてトリスクエン酸塩緩衝液(50mM, pH7.1)１０ｍｌ中で５〜１０秒間ホモジナイズする。懸濁液を１５分間２７，０００×ｇで遠心分離する。上澄みを捨て、ペレットを120 mM NaCl 及び4 mM MgCl2を含有するトリスクエン酸塩緩衝液（原組織１ｇあたり７０００ｍｌ）に再懸濁し、結合アッセイに使用する。
【００８３】
結合アッセイ：組織懸濁液１．０ｍｌを有するアリコートを、試験溶液０．０５０ｍｌ及び [3H]GBR 12935 （最終濃度０．５ｎＭ）０．０５０ｍｌに加え、混合し、２℃で６０分間インキュベートする。非特異的結合をGBR 12909（１μＭ、最終濃度）を用いて測定する。
【００８４】
インキュベーション後、氷冷緩衝液５ｍｌをサンプルに添加し、吸引下にワットマンＧＦ／Ｃガラスファイバーフィルター（[3H]GBR 12935アッセイのために、フィルターを少なくとも２０分間０．１％ＰＥＩ中で前もって浸漬する。）上に直接注ぎ、直ちに氷冷緩衝液５ｍｌで洗滌する。フィルター上の放射能の量を通常の液体シンチレーション計数器によってTri-carbO液体シンチレーション分析器(モデル 1600CA; Packard, 米国)を用いて測定する。特異的取り込みを全取り込みと非特異的取り込みの差異として算出する。
【００８５】
データ分析：試験値をIC50として表わす（[3H]−リガンドの特異結合を５０％阻害する試験物質の濃度（μＭ））。
【００８６】
５〜９個の濃度を阻害曲線の決定に使用し、この曲線からIC50値が決定される。完全な曲線が得られないならば、IC50を算出する前に、２５−７５％特異結合阻害を得ることが必要である。
IC50 = (適用された試験物質濃度、 μM) ×Ａ
Ａ＝
2005511639.tif 000005
【００８７】
｛上記式中、
Ｃｏはコントロールアッセイ中の特異結合であり、Ｃｘはテストアッセイ中の特異結合である。（算出は正常の質量作用動力学であるとする。）｝
方法４
ラット線条体シナプトゾーム中でドパミン輸送体へのインビトロ[3H]WIN 35428結合阻害
この方法で、インビトロでドパミン輸送体にWIN 35428が結合するのを阻害する試験化合物の能力を判定する。
【００８８】
組織調製： 雄性ウスターラット(150-200g)から得られた線条体を、Ultra-Turraxホモジナーザーを用いてNaH2PO4（５０ｍＭ、ｐＨ７．４）１０ｍｌ中で５〜１０秒間ホモジナイズする。懸濁液を１５分間２７，０００×ｇで遠心分離する。上澄みを捨て、ペレットをリン酸塩緩衝液（原組織１ｇあたり１０００ｍｌ）で再懸濁し、結合アッセイに使用する。
【００８９】
結合アッセイ：組織懸濁液０．５ｍｌを有するアリコートを、試験溶液０．０２５ｍｌ及び[3H]WIN 35428（最終濃度１ｎＭ）０．０２５ｍｌに加え、混合し、２℃で６０分間インキュベートする。非特異結合をコカイン（３０μＭ、最終濃度）を用いて測定する。
【００９０】
インキュベーション後、氷冷された緩衝液５ｍｌをサンプルに添加し、吸引下にワットマンＧＦ／Ｃガラスファイバーフィルター（[3H]ＧＲＢ１２９３５アッセイのためにフィルターを少なくとも２０分０．１％ＰＥＩ中で予備浸漬する。）上に直接注ぎ、ついで直ちに氷冷された緩衝液５ｍｌで洗滌する。フィルター上の放射能の量を通常の液体シンチレーション計数器によってＴｒｉ−ｃａｒｂ  リキッドシンチレーション分析器（モデル  １６００ＣＡ；Ｐａｃｋａｒｄ、ＵＳＡ）を用いて測定する。特異結合を結合全体と非特異結合の差異として算出する。
【００９１】
データ分析：試験値をIC50として表わす（[3H]−リガンドの特異結合を５０％阻害する試験物質の濃度（μＭ））。
【００９２】
５〜９個の濃度を阻害曲線の決定に使用し、この曲線からIC50値が決定される。完全な曲線が得られないならば、IC50を算出する前に、２５−７５％特異結合阻害を得ることが必要である。
IC50 = (適用された試験物質濃度、 μM) ×Ａ
Ａ＝
2005511639.tif 000006
【００９３】
｛上記式中、
Ｃｏはコントロールアッセイ中の特異結合であり、Ｃｘはテストアッセイ中の特異結合である。（算出は正常の質量作用動力学であるとする。）｝
方法5
インビボ [3H]WIN 35428 結合の阻害
生理食塩水０．２５ｍｌ中の[3H]WIN 35428  2.0 μCiで尾静脈に静脈注射されたマウスの断頭前の特定の時間ポイント、５０分前に静脈内、腹腔内、皮下又は経口投与で３匹の雌性NMRIマウス(25 g)グループに試験物質を投与する。断頭の時点で、線条体を氷上で迅速に切断する。それぞれの線条体を秤量し、２％ラウリル硫酸ナトリウム１ｍｌで３６時間溶解させる。シンチレーションカクテル２ｍｌを溶解された組織に添加し、組織の１ｍｇあたりの放射能の量を通常の液体シンチレーション計数器によってTri-carbO液体シンチレーション分析器(モデル 1600CA; Packard, 米国)を用いて測定する。賦形剤治療されたマウスグループはコントロールとして使用する。非特異結合を測定するために、マウスグループを[3H]WIN 35428注射の時点でWIN 35428（2.5 mg/kg i.p.; 0.75 ml）を注射する。特異的取り込みを賦形剤とWIN 35428処理されたマウスの結合の相異として算出する。
【００９４】
データ分析：試験値をED50 として表わす（[3H]WIN 35428の特異結合を５０％阻害する試験物質の投与量（ｍｇ））。
【００９５】
試験物質の３つの投与量を投与量応答曲線の決定に使用する。この曲線からED50値が決定される。完全な曲線が得られないならば、ED500を算出する前に、２５−７５％特異結合阻害を得ることが必要である。
ED50 = (適用された試験物質投与量、mg/kg) ×Ａ
Ａ＝
2005511639.tif 000007
【００９６】
｛上記式中、
Ｃｏはコントロールアッセイ中の特異結合であり、Ｃｘはテストアッセイ中の特異結合である。｝
方法６
アレチネズミにおける一過性全虚血後の海馬保護
この試験で、試験化合物の神経保護合作用を一過性全虚血の動物実験で判定する。
【００９７】
方法：ハロタンで麻酔されたアレチネズミにおいて、右及び左の頸動脈を突き止め、４分間遮断する。加熱用ランプを用いる手術前及びその後に動物を正常の体温で保つ。手術の後、アレチネズミを加熱パッド上に置き、体温を調節し、３７±０．５℃で保つ。虚血発作後の特定の時間ポイントで試験化合物を静脈内、腹腔内、皮下又は経口投与する。
【００９８】
４日後、動物を殺し、脳を取り出し、−７０℃に冷却する。その後脳を厚さ２０μｍの切片に切断し、海馬組織を有するその切片５〜７つを選び、ヘマトキシン−エオシンで染色する。
【００９９】
海馬損傷の度合を４つのグループの１つに分類する。
グループ１：CA1−層中に損傷なし；
グループ２：CA1−層が一部損傷；
グループ３：CA1−層が完全に損傷；及び
グループ４：CA1−層だけでない損傷。
虚血総スコアは右−及び左半球におけるスコアの合計として得られる。ケンドルのタウテストを統計判定に使用する。 
【０１００】
方法 7
アレチネズミにおける一過性全虚血後の黒質保護
この試験で、試験化合物の神経保護作用を一過性全虚血の動物実験で判定する。
【０１０１】
方法：ハロタンで麻酔されたアレチネズミにおいて、右及び左の頸動脈を突き止め、１０分間遮断する。加熱用ランプを用いる手術前及びその後に動物を正常の体温で保つ。手術の後、アレチネズミを加熱パッド上に置き、体温を調節し、３７±０．５℃で保つ。虚血発作後の特定の時間ポイントで試験化合物を静脈内、腹腔内、皮下又は経口投与する。
【０１０２】
４日後、動物を殺し、脳を取り出し、−７０℃に冷却する。その後黒質領域から脳を厚さ２０μｍの切片に切断する。その切片を免疫組織化学を用いてチロシンヒドロキシラーゼ(TH+)発現のために染色する。切片のTH+細胞の数を数え、黒質中のTH+細胞の全体数を立体学によって算出する。
【０１０３】
方法8
アレチネズミにおける一過性全虚血
この試験で、試験化合物の神経保護合作用を一過性全虚血の動物実験で判定する。
【０１０４】
方法：ハロタンで麻酔されたアレチネズミにおいて、右及び左の頸動脈を突き止め、４分間遮断する。加熱用ランプを用いる手術前及びその後に動物を正常の体温で保つ。手術の後、アレチネズミを加熱パッド上に置き、体温を調節し、３７±０．５℃で保つ。虚血発作後の特定の時間ポイントで試験化合物を静脈内、腹腔内、皮下又は経口投与する。
【０１０５】
４日後、動物を殺し、脳を取り出し、−７０℃に冷却する。その後脳を厚さ２０μｍの切片に切断し、海馬組織を有するその切片５〜７つを選び、ヘマトキシン−エオシンで染色する。
【０１０６】
海馬損傷の度合を４つのグループの１つに分類する。
グループ１：CA1−層中に損傷なし；
グループ２：CA1−層が一部損傷；
グループ３：CA1−層が完全に損傷；及び
グループ４：CA1−層だけでない損傷。
【０１０７】
虚血総スコアは右−及び左半球におけるスコアの合計として得られる。ケンドルのタウテストを統計判定に使用する。 
【０１０８】
方法9
マウス中大脳動脈閉塞 (MCAO)
この試験で、試験化合物の神経保護合作用を病巣虚血の動物実験で判定する。
【０１０９】
雌性ＮＭＲＩマウス（２７−３８ｇ）をハロタン（30% O2-70% NO2中に２％ハロタン）で麻酔する。手術の間、体温をCMA/150温度調節器上にマウスを置き、３７±０．５℃で保つ。ＭＣＡＯを前記のように(Moller等, Neurol Res, 17, 353-360, 1995)行う。ＭＣＡＯの後、マウスを加熱ランプ下に置く。試験化合物を虚血発作後の特定の時間ポイントで試験化合物を静脈内、腹腔内、皮下又は経口投与する。コントロールグループに賦形剤を投与する。４日目に、動物を殺し、脳を取り出す。脳をドライアイスで凍結させ、２０μｍの切片に切断する。４０番目の切片ごとにサンプルとして採取し、梗塞全体容量を虚血損傷の最終ポイントとして使用する。梗塞容量をCavalieriの容量推定器 (Gundersen等, AMPIS, 96, 379-394, 1998)を用いて見積もる。
【０１１０】
方法１０
ＭＰＴＰで処理されたマウスにおける化合物の線条体ドパミンへの作用
この試験で、ＭＰＴＰで処理されたマウスにおいて線条体ドパミンを増加させるドパミン活性増加化合物の能力を判定する。
【０１１１】
雌性Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（体重２０−２５ｇ）（Mollegaard Breeding and Research Centre）を室温２２−２４℃で、自由に得られる餌及び水のある実験の５−７日前に実験室に順応させる。電灯を午前７時につけ、午後６時に消灯する。１つのグループに少なくとも５−８匹のマウスを使用する。ＭＰＴＰ、ＨＣＬ（ＲＢＩ）を実験直前に生理食塩水に溶解させ、種々の投薬量１２．５、２５、３×１２．５及び３×２５ｍｇ／ｋｇ皮下で試験する。ＭＰＴＰ２５ｍｇ／ｋｇの皮下注射の３０分及び３時間前に前処理した後に、試験化合物を試験する。マウスをドパミン及びその代謝物ＨＶＡ及びＤＯＰＡＣの生物学的分析のためにＭＰＴＰの最後の投与の４８時間後に殺す。生物学的分析のために、マウスの線条体を急速に切断し、凍結させ、−８０℃で貯蔵する。分析のその日に、マウス１匹あたり１つの線条体（重さ５−７ｍｇ）を５％ＥＤＴＡ含有０．１Ｎ  過塩素酸１ｍｌにホモジナイズする。３０分間遠心分離１４，００００×Ｇ後、上澄み２００μＬをガラス０．２２μｍによって濾過する。ついで２０μＬを下記カラム（Caracholamine HR-80 4.6mm×80mm 3um Nucleosil C 18）を有するESA Coulochem II HPLC装置に注入する。溶離剤はNaH2PO4１０．２５ｇ、ＥＤＴＡ１８５ｍｇ、オクタンスルホン酸１００ｍｇである。９％メタノール、ｐＨ３．７をＭｉｌｉＱ  ｗａｔｅｒに添加し、０．２２μｍによって濾過する。Ｃｏｌｏｃｈｅｍ ＥＳＡ分析細胞は５０１４Ａであり、ＥＳＡ検出器は次の設定を有する：E2 -１７５ｍＶ、ドパミン、ＤＯＰＡＣ及びＨＶＡの溶離に対する実行時間（run time)（ ＤＯＰＡＣ＝４．３分；ドパミン＝６．４分；及びＨＶＡ＝１２．７分）。自動注入器ＳＨＩＭＡＤＺＹ  ｓｉｌ−１０Ａはつぎの設定を有する；注入容量２０μＬ、分析時間１６分、温度４℃。ポンプからの流速は０．８０ｍｌ／分である。分析を、それぞれ１２回分析を行ったドパミン、ＨＶＡ及びＤＯＰＡＣの３ｐＭのスタンダードを用いて目盛りを定め、そしてスタンダードカーブと比べる。
【０１１２】
方法１１
微量透析法によって測定された細胞外ドパミンへの化合物の作用 
この試験で、種々の脳領域において線条体ドパミンを増加させるドパミン活性増加化合物の能力を判定する。
【０１１３】
雄性ＳＰＦ  Ｍｏｌウスターラット（体重３００−３５０ｇ）をMφllegaad Breeding and Research Centreから得、標準Ｍａｃｒｏｌｏｎケージ（サイズ２４×３６×１８ｃｍ）中に少なくとも５日間標準条件下で２３±２℃の温度で、６０％±１０％の湿度で、そして１２時間明るい及び暗いのサイクルで入れる。ラットを任意に自由に得られる餌及び水と共に２つのグループに分けて入れる。微量透析法のために、ラットを11/2%ハロタン、２０％酸素及び８０％亜酸化窒素を用いてハロタン麻酔下で定位装置中に置く。直腸の温度を監視し、加熱パッド（ＣＭＡ１５０ Carnegie Medicin）を用いて実験の間３７．０±１℃で保つ。小さい穴をあけ、垂直なプローブ（ＣＭＡ／１２３）を右線条体にブレグマに対して次の座標を用いて定位にインプラントさせる：ＡＰ＋１ｍｍ；Ｌ３ｍｍ；ＤＶ−６ｍｍ。側坐核（ＣＭＡ１２２）に対するプローブを次の座標で垂直にインプラントする：ＡＰ＋２．４ｍｍ；Ｌ１．４ｍｍ；ＤＶ−８ｍｍ。同様な実験を麻酔されていない自由に動く動物で側坐核にインプラントされたプローブを用いて行う。これらの実験は手術後４８時間で任意に自由に得られる餌及び水を有するプラスチックケージ中に個々に入れられた動物において昼間行われる。すべての場合、注射部位をPaxinos及びWatsonの地図にしたがって組織学的に確認する。
【０１１４】
最初の２時間後、透析物のサンプルをハロタン麻酔されたラットから集める。これらのラットへの試験化合物の投薬を３つのベースライン分析の収集後に常に開始する。ドパミン及びその代謝物を急速に−１８℃に凍結させ、ついでその後できるだけ早く分析する。透析プローブを、リンガー（Ｒｉｎｇｅｒ）液（１４７ｍＭＮａＣｌ、４ｍＭＫＣｌ、２．３ｍＭＣａＣｌ）、すなわち２ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液でｐＨ６．５に調整されたリンガー液 （ＮａＣｌ４．３ｇ、ＫＣｌ１５０ｍｇ、CaCl2１１０．３ｍｇ、全量５００ｍｌ）を用いて２μＬ／分の速度で（ＣＭＡ／１００微量潅流ポンプによって）潅流する。リンガー液を、使用する前にMilliporeガラスフィルター（０．２２μｍ）によって濾過する。透析分画（４０μＬ）２０分間隔で集め、ついでＨＰＬＣシステムに注入する。ドパミン（ＤＡ）、ジヒドロキシフェニル酢酸（ＤＯＰＡＣ）,ホモバニリン酸（ＨＶＡ）及び５−ヒドロキシインドール酢酸（５−ＨＩＡＡ）の濃度を電気化学検出の高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ−ＥＤ）によって測定する。カラムは２３℃で逆相液体クロマトグラフィーカテコールアミン３μｍＥＳＡカラムであり、移動相は０．１ｎＭオクタンスルホン酸、０．０１ｍＭＮａＥＤＴＡ及びｐＨ３．７に氷酢酸で調整された１０％メタノールと０．０５５Ｍ酢酸ナトリウムから成る。移動相を０．５５ｍｌ／分でＨＰＬＣポンプ（ＥＳＡ）によって送る。電気化学的検出はガラス状炭素電極（０．８Ｖ  Ag/AgCl比較）で電流測定検出器（Ａｎｔｅｃ）又は熱量測定検出器（Choulochem II medel ESA;高感度分析セル（５０１１）を用いる）（０．４Ｖ  Ag/AgCl比較）を用いて行われる。クロマトグラムをインテグレーターで記録する。データを基本濃度の現在の変更として算出し、１００％値を各ラットに対する最後の３個の前処理の平均として定義する。ついで平均パーセント値を各グループの処理においてラットに関して各２０分サンプルに対して算出する。
【０１１５】
方法１２
６−ＯＨＤＡ病変後屈曲行動への化合物の作用
この試験で、線条体又は内側前脳束及び腹側被蓋域６−ＯＨＤＡ病変後屈曲行動に影響を与える化合物の能力を判定する。
【０１１６】
６−ＯＨＤＡ（０．０２％アスコルビン酸が補充された０．９％ＮａＣｌ中に溶解された２０μｇ遊離塩基）をハロタン麻酔された雄性Sprague Dawley ラット（体重約２００−２５０ｇ）の線条体又は内側前脳束及び腹側被蓋域にガラスキャピラリーを用いて片側に注射する。試験化合物又は賦形剤を、６−ＯＨＤＡ注射後開始する毎日又は特定の時間ポイントで静脈内、腹腔内、皮下又は経口投与する。６−ＯＨＤＡ病変動物の回転行動を試験化合物単独投与後又はアンフェタミン(2.5 mg/kg i.p.), アポモルフィン (0.25 mg/kg s.c.)又はL-ドーパ(2-10 mg/kg i.p.)の投与後に自動化されたロトメーターボールで追跡する。
【０１１７】
実施例
例1
アレチネズミの一過性全虚血後の黒質の保護
全前脳虚血を方法７に記載したようにモンゴル系アレチネズミで１０分間一般的な頚動脈（左右）を塞ぐことによって誘発する。実験を動物の下記３つのグループに関して実施する：１）コントロールグループ（動物６匹）、２）頚動脈梗塞虚血の動物グループ（６匹）及び３）頚動脈梗塞虚血で、試験化合物で治療されたグループ（８匹）。コントロールグループの動物は梗塞以外グループ２）と同一の外科的処置が行われる。次の試験化合物を使用する：(1R,2R,3S)-3-(3,4-ジクロロフェニル)-トロパン-2-O-メチル-アルドオキシム。試験化合物を濃度2 mg/kg（腹腔内）で頚動脈梗塞終了のｓ２分後に投与する。
【０１１８】
14日後、動物を殺し、脳を切断する。黒質を含む切片をTH免疫染色する。虚血後のTH ポジティブ細胞又はコントロール動物中のTHポジティブ細胞の全数を立体学的細胞計数器を用いて測定する。
【０１１９】
その結果を表１に示す。虚血の動物においいて、黒質中でTHポジティブ細胞の全数(7510 +/- 1185)は黒質中で虚血が誘発された細胞死を示すコントロール動物中の数(9531 +/- 653)よりも低いことが明らかである。 驚くことには虚血後黒質中で生存するTHポジティブ細胞の数は、虚血に対して保護作用を示す試験化合物で処理することによって明らかに増加する。 
2005511639.tif 000008
【国際調査報告】
2005511639.tif 000011
2005511639.tif 000012
2005511639.tif 000013
2005511639.tif 000014
2005511639.tif 000015
2005511639.tif 000016
2005511639.tif 000017