(57)【要約】本発明は、肝不全、動脈管閉鎖、緑内障又は高眼圧の治療法に関し、該方法は、その必要のある患者に治療上有効量の式（Ｉ）又は（II）の選択的ＥＰ4受容体アゴニストを投与することを含む。式（Ｉ）中の変数Ａ、Ｂ、Ｑ、＝Ｕ、及びＲ2；式（II）中の変数Ａｒ、＝Ｍ、＝Ｎ、Ｒ、Ｗ、及びＺは本明細書中に定義の通りである。    【化１】2005526080.tif 000026
2005526080.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
肝不全、動脈管閉鎖、緑内障又は高眼圧の治療法であって、その必要のある患者に、式Ｉ：
【化１】
2005526080.tif 000018
［式中、
Ｑは、ＣＯＯＲ3、ＣＯＮＨＲ4又はテトラゾール−５−イルであり；
Ａは、単結合又はシス二重結合であり；
Ｂは、単結合又はトランス二重結合であり；
＝Ｕは、＝Ｏ、
【化２】
2005526080.tif 000019
であり；
Ｒ2は、α−チエニル、フェニル、フェノキシ、モノ置換フェニル又はモノ置換フェノキシであり、前記置換基は、クロロ、フルオロ、フェニル、メトキシ、トリフルオロメチル及び（Ｃ1−Ｃ3）アルキルからなる群から選ばれ；
Ｒ3は、水素、（Ｃ1−Ｃ5）アルキル、フェニル又はｐ−ビフェニルであり；
Ｒ4は、ＣＯＲ5又はＳＯ2Ｒ5であり；そして
Ｒ5は、フェニル又は（Ｃ1−Ｃ5）アルキルである］の化合物、そのプロドラッグ、又は該化合物もしくはプロドラッグの製薬学的に許容しうる塩を投与することを含む方法。
【請求項２】
Ｑが５−テトラゾリルである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
式Ｉの化合物が、
５−（３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル）−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン、
５−（３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン、
５Ｓ−［４−（３−クロロ−フェニル）−３−ヒドロキシ−ブチル］−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン、
５Ｓ−［４−（３−クロロ−フェニル）−３Ｒ−ヒドロキシ−ブチル］−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン、
５Ｓ−［３Ｒ−ヒドロキシ−４−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−ブチル］−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン、
５−［４−（４−フルオロ−フェニル）−３−ヒドロキシ−ブチル］−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン、
５−（４−ビフェニル−３−イル−３−ヒドロキシ−ブチル）−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン、又は
５−［４−（３−フルオロ−フェニル）−３−ヒドロキシ−ブチル］−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン
である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
ＱがＣＯＯＨである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
式Ｉの化合物が、
７−（２−（３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−５−オキソ−ピロリジン−１−イル）−ヘプタン酸、
７−［２−（３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル）−５−オキソ−ピロリジン−１−イル］−ヘプタン酸、
７−｛２Ｓ−［４−（３−クロロ−フェニル）−３Ｒ−ヒドロキシ−ブチル］−５−オキソ−ピロリジン−１−イル｝−ヘプタン酸、
７−｛２Ｓ−［３Ｒ−ヒドロキシ−４−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−ブチル］−５−オキソ−ピロリジン−１−イル｝−ヘプタン酸、又は
７−｛２Ｓ−［３−ヒドロキシ−４−（３−フェノキシ−フェニル）−ブチル］−５−オキソ−ピロリジン−１−イル｝−ヘプタン酸
である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
肝不全、動脈管閉鎖、緑内障又は高眼圧の治療法であって、その必要のある患者に、式II：
【化３】
2005526080.tif 000020
［式中、
Ａｒは、α−もしくはβ−チエニル、５−フェニル−α−もしくはβ−チエニル、５−低級アルキル−α−もしくはβ−チエニル、α−もしくはβ−ナフチル、トロピル、フェニル、３，５−ジメチルフェニル、３，４−ジメトキシフェニル、３，４−メチレンジオキシフェニル、３，４−ジクロロフェニル、又はモノ置換フェニルであり、前記置換基は、ブロモ、クロロ、フルオロ、トリフルオロメチル、フェニル、低級アルキル、又は低級アルコキシであり；
Ｒは、水素又はメチルであり；
Ｗは、単結合又はシス二重結合であり；
Ｚは、単結合又はトランス二重結合であり；そして
＝Ｍ及び＝Ｎは、それぞれ独立して、＝Ｏ、
【化４】
2005526080.tif 000021
である］の化合物、そのプロドラッグ、又は該化合物もしくはプロドラッグの製薬学的に許容しうる塩を投与することを含む方法。
【請求項７】
＝Ｍ及び＝Ｎが、それぞれ＝Ｏである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
＝Ｍが、
【化５】
2005526080.tif 000022
であり；そして、＝Ｎが＝Ｏである、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
＝Ｍが、
【化６】
2005526080.tif 000023
であり；そして、＝Ｎが、
【化７】
2005526080.tif 000024
である、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
＝Ｍが＝Ｏであり；そして、＝Ｎが、
【化８】
2005526080.tif 000025
である、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
前記方法が肝不全の治療である、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記方法が動脈管閉鎖の治療である、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記方法が緑内障又は高眼圧の治療である、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記方法が肝不全の治療である、請求項６に記載の方法。
【請求項１５】
前記方法が、動脈管閉鎖、緑内障又は高眼圧の治療である、請求項６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、動物、特に哺乳動物における肝不全、動脈管閉鎖、緑内障又は高眼圧の治療のための受容体選択的プロスタグランジン（ＰＧＥ2）アゴニストの使用法に関する。更に詳しくは、本発明は、４型（ＥＰ4）受容体選択的プロスタグランジン（ＰＧＥ2）アゴニストを用いるそのような方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
天然のプロスタグランジン類は、ＰＢＤ、ＰＧＥ、ＰＧＦ、ＰＧＧ、ＰＧＨ及びＰＧＩを含むいくつかの生物学的実体で構成される。プロスタグランジン類が身体の多くの器官及び系に作用することについては十分に立証されている。プロスタグランジンＥ2（本明細書ではＰＧＥ2と略す）は、アラキドン酸カスケードでシクロオキシゲナーゼによって誘導される酸化的代謝産物として知られ、ＰＧＥ2を含むプロスタグランジン類は身体の多くの器官及び系に作用することが十分に立証されている。例えば、ＰＧＥ2は、細胞保護活性、子宮収縮活性、疼痛誘発作用、消化蠕動促進作用、覚醒作用、睡眠誘発作用、胃酸分泌抑制作用、血圧降下活性及び利尿活性を有することが知られている。以前の研究で、ＰＧＥ2受容体には各種のサブタイプがあり、それぞれが異なる生理的役割を有していることが見出されている。現時点で、ＰＧＥ2受容体は、それぞれＥＰ1、ＥＰ2、ＥＰ3及びＥＰ4と表示される４種類の主要サブタイプを有し、それぞれ様々な組織及び細胞で異なる作用を媒介していることが知られている（Ｃｏｌｅｍａｎ，Ｒ．Ａ．ら、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｖ．１９９４，４６（２），２０５−２２９）。ＥＰ4受容体は、胸腺、心臓、腎臓、肝臓、腸、子宮、動脈管及び骨などの器官に分布し、ＥＰ4受容体は、平滑筋の弛緩、リンパ球の分化及び増殖、メサンギウム細胞の増殖、及び線維芽細胞のコラーゲン産生に関連していることが知られている。ブタ及びイヌではＥＰ4受容体の調節は伏在静脈の弛緩を特徴とし、ウサギでは頚静脈の弛緩が起こる（Ｃｏｌｅｍａｎ，Ｒ．Ａ．ら、Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ  １９９４，４７，１５１）。
【０００３】
数多くの研究から、プロスタグランジンＥ1の、肝損傷の実験モデル及び劇症ウィルス肝炎患者に対する保護作用が証明されている。ＰＧＥ1は多様な様式で作用してこの効果をもたらしている（Ｌｉｕ，Ｘ．Ｌ．ら、Ｗｏｒｌｄ  Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．２０００，６（３），３２６−３２９）。例えば、ＰＧＥ1は、病的血管のＰＧＥ1受容体に作用して血管を拡張し、門脈流を増やし、肝臓の微小循環を改善し、肝細胞の代謝産物を除去し、肝組織への酸素供給を増大させる。
【０００４】
ＥＰ4受容体は動脈管にも発現される（Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｙａ，Ｍ．ら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  １９９９，１００，１７５１−１７５６）。動脈管は胎児における動脈の連結で、これ故に血液は肺循環から酸素化が行われる胎盤の方向に流れる（Ｈｅｙｍａｎｎ，Ｍ．Ａ．；Ｒｕｄｏｌｐｈ，Ａ．Ｍ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｖ．１９７５，５５，６２−７８）。一つの提案モデルでは、動脈管のＥＰ4受容体は、動脈管の閉鎖の引き金を引くことで周産期の循環ＰＧＥ2濃度の降下に応答するセンサーとして作用する（Ｎｇｕｙｅｎ，Ｍ．ら、Ｎａｔｕｒｅ  １９９７，３９０，７８−８１）。動脈管の閉鎖は、選択的ＥＰ4アンタゴニスト投与後のインビボのヒツジ胎仔モデルで観察された（ＰＣＴ国際出願ＷＯ０１／４２２８１、２００１年６月１４日公開）。動脈管を開放又は開存状態に維持することは、胎児及びある種の先天性心欠陥（すなわち肺又は全身の血流が動脈管の開存に依存するような場合）を有する乳児においては望ましい。また、その他のある種の先天性心臓疾患、例えば大動脈縮窄、大血管転位、及びエブスタイン奇形を有する乳児においても動脈管の開存の維持が望ましい。例えば、先天性心欠陥の７％〜８％を構成する大動脈縮窄を有する乳児は、動脈管が閉鎖して遠位の灌流が障害されると、心不全、循環虚脱、及び重症の代謝性アシドーシスを突発することがある。このような場合、欠陥を外科的に修復する前に、ＰＧＥ1の注入を利用して動脈管を再開放し、その開存性を維持することが行われている。
【０００５】
前眼房の過剰房水は眼内圧の上昇又は高眼圧をもたらしうる。高眼圧は、視神経を損傷し、失明をもたらしかねない疾患である緑内障の症状及び／又はリスク因子である。ＥＰ4受容体は、房水の産生に関与する眼組織、例えばヒト毛様体上皮細胞及びヒト毛様体筋細胞に見出されている（Ｍｕｋｈｏｐａｄｈｙａｙら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９７，５３，１２４９−１２５５）。小柱網細胞は眼内圧の調節に関与していることが知られている（Ｃｌａｒｋら、Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ  ＆  Ｖｉｓｕａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９４，３５，２８１−２９４；及びＬｕｔｊｅｎ−Ｄｒｅｓｃｏｌｌ，Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｒｅｔｉｎａｌ  ａｎｄ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １９９８，１８，９１−１１９）。ＥＰ4受容体は、ヒト小柱網細胞にも見出されており、小柱網細胞のＥＰ4受容体の活性化がこれらの細胞の弛緩をもたらし、眼内圧を低下させうることが提案されている（ＰＣＴ国際特許出願ＷＯ００／３８６６７、２０００年７月６日公開）。
【０００６】
ＰＧＥ1及びＰＧＥ2は全４種類のＰＧＥ2受容体サブタイプ（ＥＰ1、ＥＰ2、ＥＰ3、及びＥＰ4）に結合するので様々な生理活性をもたらしうるが、その活性の一部は、ＰＧＥ2受容体サブタイプへの結合に選択性がないために望まざる副作用のこともある。ＰＧＥ2治療には重度の副作用が伴う。Ｗ．Ｓ．Ｓ．Ｊｅｅ，Ｗ．Ｓ．Ｓ．及びＭａ，Ｙ．Ｆ．Ｂｏｎｅ，１９９７，２１，２９７−３０４。
【０００７】
英国特許明細書第１５５３５９５号に、式：
【０００８】
【化１】
2005526080.tif 000003
【０００９】
［式中、二重結合はシス又はトランスで、変数は該明細書に記載の定義の通り］の化合物が開示されている。これらの化合物は、痙縮及び鎮痙活性、例えば気管支拡張及び抗高血圧作用を有すると開示されている。該化合物はまた、胃液の分泌抑制に有用性があること及び流産作用を有することも開示されている。
【００１０】
米国特許第４，１１５，４０１号には、式：
【００１１】
【化２】
2005526080.tif 000004
【００１２】
［式中、変数は該明細書に記載の定義の通り］の化合物が開示されている。これらの化合物は、痙縮、心臓血管及び気管支拡張作用を有すると開示されている。
米国特許第４，１１３，８７３号には、式：
【００１３】
【化３】
2005526080.tif 000005
【００１４】
［式中、変数は該明細書に記載の定義の通り］の化合物が開示されている。これらの化合物は、気管支拡張薬、抗高血圧薬、子宮の自発性収縮増強薬として、及び胃腸障害又は胃潰瘍の治療に有用性があると開示されている。
【００１５】
英国特許明細書第１５８３１６３号に、式：
【００１６】
【化４】
2005526080.tif 000006
【００１７】
［式中、変数は該明細書に記載の定義の通り］の化合物が開示されている。これらの化合物は、痙縮、気管支拡張、血管収縮、血管拡張及び流産作用、並びに胃酸分泌抑制における有用性があると開示されている。
【００１８】
米国特許第４，１７７，３４６号には、式：
【００１９】
【化５】
2005526080.tif 000007
【００２０】
［式中、変数は該明細書に記載の定義の通り］の化合物が開示されている。これらの化合物は、血管拡張、抗高血圧、気管支拡張、避妊、及び抗分泌活性を有すると開示されている。
【００２１】
米国特許出願公開番号ＵＳ２００１／００４１７２９（２００１年１１月１５日公開）及びＵＳ２００１／００４７１０５（２００１年１１月２９日公開）には、式：
【００２２】
【化６】
2005526080.tif 000008
【００２３】
［式中、変数は該明細書に記載の定義の通り］の化合物を用いる治療法が開示されている。ＵＳ２００１／００４１７２９に開示されている治療法は、急性又は慢性腎不全又は腎障害、又はそれによってもたらされる状態、例えば高血圧、うっ血性心不全、糸球体腎炎、尿毒症又は慢性腎機能不全の治療を含む。ＵＳ２００１／００４７１０５に開示されている治療法は、低骨量に伴って現れる状態、特に骨粗鬆症、脆弱、骨粗鬆症性骨折、骨欠損、小児特発性骨喪失、歯槽骨喪失、下顎骨喪失、骨折、骨切断、歯周炎に伴う骨喪失、又は補綴内成長の治療を含む。
【００２４】
米国特許出願第０９／９９０，５５６号（２００１年１１月２１日出願）には、式：
【００２５】
【化７】
2005526080.tif 000009
【００２６】
［式中、変数は該明細書に定義の通り］の化合物が開示されている。該化合物は、低骨量に伴って現れる状態、例えば骨粗鬆症、脆弱、骨粗鬆症性骨折、骨欠損、小児特発性骨喪失、歯槽骨喪失、下顎骨喪失、骨折、骨切断、歯周炎に伴う骨喪失、補綴内成長、又は腎不全の治療に有用である。
【００２７】
米国特許第３，９３２，３８９号は、血管拡張活性、抗高血圧活性、気管支拡張活性、避妊活性及び抗潰瘍活性を有する、２−デスカルボキシ−２−（テトラゾール−５−イル）−１１−デスオキシ−１５−置換−ω−ペンタノルプロスタグランジン類を提供している。
【００２８】
欧州特許出願ＥＰ１１１４８１６は、免疫疾患、喘息、異常骨形成、神経細胞死、肺障害、肝障害、睡眠障害及び血小板凝集などの治療に有用なω−置換フェニルプロスタグランジンＥ誘導体を開示している。
【００２９】
免疫疾患、喘息、異常骨形成、神経細胞死、肝損傷、腎炎、高血圧、心筋虚血などの治療又は予防に有用なある種の３，７−ジチアプロスタン酸誘導体が、米国特許第５，８９２，０９９号及び６，０４３，２７５号に開示されている。
【００３０】
ＰＣＴ国際特許出願番号ＷＯ９９／０２１６４は、選択的ＥＰ2又はＥＰ4プロスタノイド受容体アゴニストであるプロスタグランジン類を用いるインポテンス又は勃起不全を治療する方法及び組成物を開示している。
【００３１】
眼内圧低下薬として有用なある種のＥＰ2受容体アゴニストが、米国特許第５，４６２，９６８号及び５，６９８，５９８号に開示されている。
緑内障の治療に有用なある種のプロスタグランジンＥアゴニストが、ＰＣＴ国際特許出願番号ＷＯ００／３８６６７（２０００年７月６日公開）に開示されている。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００３２】
発明の要旨
本発明は、哺乳動物における肝不全、動脈管閉鎖、緑内障又は高眼圧の治療法を提供し、該方法は、前記哺乳動物に、選択的ＥＰ4受容体アゴニスト、その異性体、前記アゴニストもしくは異性体のプロドラッグ、又は前記アゴニスト、異性体もしくはプロドラッグの製薬学的に許容しうる塩を投与することを含む。本発明の方法に有用な選択的ＥＰ4受容体アゴニストは、式Ｉの１，５−ジ置換−２−ピロリドン類又は式IIの２−デスカルボキシ−２−（テトラゾール−５−イル）−１１−デスオキシ−１５−置換−ω−ペンタノルプロスタグランジン類である。式Ｉの１，５−ジ置換−２−ピロリドン化合物は、米国特許第４，１７７，３４６号及び米国特許出願公開ＵＳ２００１／００４７１０５（２００１年１１月２９日公開）に開示の通りに製造できる。式IIの２−デスカルボキシ−２−（テトラゾール−５−イル）−１１−デスオキシ−１５−置換−ω−ペンタノルプロスタグランジン類の製造は、米国特許第３，９３２，３８９号に記載されている。
【００３３】
本発明の方法に使用する好適な選択的ＥＰ4受容体アゴニスト群は、式Ｉ：
【００３４】
【化８】
2005526080.tif 000010
【００３５】
［式中、
Ｑは、ＣＯＯＲ3、ＣＯＮＨＲ4又はテトラゾール−５−イルであり；
Ａは、単結合又はシス二重結合であり；
Ｂは、単結合又はトランス二重結合であり；
＝Ｕは、＝Ｏ、
【００３６】
【化９】
2005526080.tif 000011
【００３７】
であり；
Ｒ2は、α−チエニル、フェニル、フェノキシ、モノ置換フェニル又はモノ置換フェノキシであり、前記置換基は、クロロ、フルオロ、フェニル、メトキシ、トリフルオロメチル及び（Ｃ1−Ｃ3）アルキルからなる群から選ばれ；
Ｒ3は、水素、（Ｃ1−Ｃ5）アルキル、フェニル又はｐ−ビフェニルであり；
Ｒ4は、ＣＯＲ5又はＳＯ2Ｒ5であり；そして
Ｒ5は、フェニル又は（Ｃ1−Ｃ5）アルキルである］の化合物、そのプロドラッグ、又は前記化合物もしくは前記プロドラッグの製薬学的に許容しうる塩である。
【００３８】
式Ｉの好適な選択的ＥＰ4受容体アゴニスト群は、Ｑが５−テトラゾリルである式Ｉの化合物である。この群に入る特に好適な化合物は、５−（３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル）−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン、及び５−（３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オンなどである。
【００３９】
式Ｉの別の好適な選択的ＥＰ4受容体アゴニスト群は、ＱがＣＯＯＨである式Ｉの化合物である。この群に入る特に好適な化合物は、７−［２−（３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル）−５−オキソ−ピロリジン−１−イル］−ヘプタン酸、及び７−（２−（３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−５−オキソ−ピロリジン−１−イル）−ヘプタン酸などである。
【００４０】
本発明の方法に使用する別の好適な選択的ＥＰ4受容体アゴニスト群は、式II：
【００４１】
【化１０】
2005526080.tif 000012
【００４２】
［式中、
Ａｒは、α−もしくはβ−チエニル、５−フェニル−α−もしくはβ−チエニル、５−低級アルキル−α−もしくはβ−チエニル、α−もしくはβ−ナフチル、トロピル、フェニル、３，５−ジメチルフェニル、３，４−ジメトキシフェニル、３，４−メチレンジオキシフェニル、３，４−ジクロロフェニル、又はモノ置換フェニルであり、前記置換基は、ブロモ、クロロ、フルオロ、トリフルオロメチル、フェニル、低級アルキル、又は低級アルコキシであり；
Ｒは、水素又はメチルであり；
Ｗは、単結合又はシス二重結合であり；
Ｚは、単結合又はトランス二重結合であり；そして
＝Ｍ及び＝Ｎは、それぞれ独立して、＝Ｏ、
【００４３】
【化１１】
2005526080.tif 000013
【００４４】
である］の化合物、そのプロドラッグ、又は前記化合物もしくは前記プロドラッグの製薬学的に許容しうる塩である。
本発明の方法に使用する別の好適な選択的ＥＰ4受容体アゴニスト群は、＝Ｍ及び＝Ｎがそれぞれ＝Ｏである、式IIの化合物である。
【００４５】
本発明の方法に使用する別の好適な選択的ＥＰ4受容体アゴニスト群は、＝Ｍが、
【００４６】
【化１２】
2005526080.tif 000014
【００４７】
であり；そして、＝Ｎが＝Ｏである、式IIの化合物である。
本発明の方法に使用する別の好適な選択的ＥＰ4受容体アゴニスト群は、＝Ｍが、
【００４８】
【化１３】
2005526080.tif 000015
【００４９】
であり；そして、＝Ｎが、
【００５０】
【化１４】
2005526080.tif 000016
【００５１】
である、式IIの化合物である。
本発明の方法に使用するさらに別の好適な選択的ＥＰ4受容体アゴニスト群は、＝Ｍが＝Ｏであり；そして、＝Ｎが、
【００５２】
【化１５】
2005526080.tif 000017
【００５３】
である、式IIの化合物である。
発明の詳細な説明
本明細書中で使用している“治療すること”、“治療する”又は“治療”という用語は、防止的（preventative）(例えば、予防的（prophylactic)）、対症的及び治癒的治療を含む。
【００５４】
“製薬学的に許容しうる”という用語は、担体、ビヒクル、希釈剤、賦形剤、及び／又は塩が、処方物の他の成分と適合性があり、患者に対して無害であるべきことを意味する。
【００５５】
“プロドラッグ”という表現は、投与後、何らかの化学又は生理的プロセスを介してインビボで薬物を放出する薬物前駆体の化合物のことを言う（例えば、生理的ｐＨに到達すると、又は酵素作用によって、プロドラッグが所望の薬物形に変換される）。典型的プロドラッグは、切断されると対応する薬物化合物を放出する。
【００５６】
“製薬学的に許容しうる塩”という表現は、アニオンを含有する非毒性のアニオン塩、例えば、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硫酸塩、硫酸水素塩、リン酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、シュウ酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、グルコン酸塩、メタンスルホン酸塩及び４−トルエン−スルホン酸塩などのことを言うが、これらに限定されない。また前記表現は、非毒性のカチオン塩のことも意味する。例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム又はプロトン化ベンザチン（Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン）、コリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（megamine）（Ｎ−メチル−グルカミン）、ベネタミン（Ｎ−ベンジルフェネチルアミン）、ピペラジン及びトロメタミン（２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−１，３−プロパンジオール）などの塩であるが、これらに限定されない。
【００５７】
本明細書中で使用している“選択的ＥＰ4受容体アゴニスト”という用語は、ＥＰ1、ＥＰ2、及びＥＰ3受容体よりもＥＰ4受容体に対して高い結合親和性を有する式Ｉ又は式IIの化合物のことである。好適な選択的ＥＰ4受容体アゴニスト群は、ＥＰ1、ＥＰ2、及びＥＰ3受容体でのＩＣ50が、ＥＰ4受容体サブタイプでのＩＣ50より少なくとも１０倍大きい式Ｉ及びIIの化合物である。従って、他のプロスタグランジン受容体と比べてＥＰ4受容体に対する高い選択性又は特異性が、本発明の方法で使用される化合物の特徴である。また、本発明の方法で使用される化合物の受容体選択性は、非選択的な剤によって起こる望まざる副作用を低減又は排除することになる。
【００５８】
本発明の方法は、同位体標識された化合物の使用も含む。該化合物は、式Ｉ又は式IIに引用された化合物と、１個以上の原子が天然に通常見出される原子質量又は質量数と異なる原子質量又は質量数を有する原子によって置換されているという事実以外は同一である。式Ｉ又は式IIの化合物に組み込むことができる同位体の例は、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素及び塩素の同位体、例えば、それぞれ、2Ｈ、3Ｈ、13Ｃ、14Ｃ、15Ｎ、18Ｏ、17Ｏ、31Ｐ、32Ｐ、35Ｓ、18Ｆ及び36Ｃｌなどである。前述の同位体及び／又は他の原子の他の同位体を含有する式Ｉ又は式IIの化合物、そのプロドラッグ、及び前記化合物及び前記プロドラッグの製薬学的に許容しうる塩、並びに前記化合物、プロドラッグ及び塩の立体異性体及びジアステレオマー混合物を用いる治療法も本発明の範囲に含まれる。ある種の同位体標識された式Ｉ又は式IIの化合物、例えば3Ｈ及び14Ｃのような放射性同位体が組み込まれた化合物は、薬物及び／又は基質の組織分布アッセイに有用である。トリチウム化すなわち3Ｈ、及び炭素−１４すなわち14Ｃといった同位体は、製造及び検出の容易さから特に好適である。さらに、ジュウテリウム、すなわち2Ｈのような重い同位体による置換は、代謝安定性の高さ、例えばインビボにおける半減期の増大又は用量要件の削減からもたらされるある種の治療的利益を可能にするので、ある状況下では好適となりうる。同位体標識された式Ｉ又は式IIの化合物及びそのプロドラッグは、一般的に、米国特許第４，１７７，３４６号、米国特許出願公開番号ＵＳ２００１／００４７１０５（２００１年１１月２９日公開）及び米国特許第３，９３２，３８９号に開示された手順を、非同位体標識試薬を容易に入手できる同位体標識試薬に置き換えて実施することによって製造できる。
【００５９】
本発明の方法で使用される式Ｉ又は式IIの化合物は、不斉炭素原子を有するので、鏡像異性体又はジアステレオマーである。ジアステレオマー混合物は、それらの物理的化学的相違に基づいて、自ずから公知の方法、例えばクロマトグラフィー及び／又は分別結晶によって個々のジアステレオマーに分離できる。鏡像異性体は、適当な光学活性化合物（例えばアルコール）との反応によって鏡像異性体混合物をジアステレオマー混合物に変換し、該ジアステレオマーを分離し、そして個々のジアステレオマーを対応する純粋な鏡像異性体に変換（例えば加水分解）することによって分離できる。式Ｉ又は式IIの化合物の鏡像異性体及びジアステレオマーは、適切な鏡像異性体に富む出発材料を利用することによって、又は不斉反応もしくはジアステレオ選択的反応によって不斉炭素原子を正しい立体化学で導入することによって製造することもできる。ジアステレオマー、鏡像異性体及びそれらの混合物を含むそのような全ての異性体は、式Ｉ又は式IIの化合物とみなされるので本発明の方法に使用できる。式Ｉ又は式IIの一部の化合物は酸性であるので、製薬学的に許容しうるカチオンと塩を形成できる。そのような塩の全ては式Ｉ又は式IIの化合物に含まれ、従来法によって製造できる。例えば、該塩は、単に酸性及び塩基性実体を、通常化学量論的比率で、必要に応じて水性、非水性又は部分水性媒体中のいずれかで接触させることによって製造できる。該塩は、必要に応じて、ろ過により、非溶媒による沈殿とその後のろ過により、溶媒の蒸発により、又は水溶液の場合は凍結乾燥により、回収される。
【００６０】
本発明の方法で使用される選択的ＥＰ4受容体アゴニストは、動物、例えば哺乳動物、特にヒトにおける治療的使用に適応できる。本発明の方法で使用される選択的ＥＰ4受容体アゴニストの、動物、例えば哺乳動物、特にヒトにおける肝不全、動脈管閉鎖、緑内障又は高眼圧の治療における医薬品としての有用性は、ＥＰ1、ＥＰ2、ＥＰ3、ＥＰ4受容体結合アッセイ、サイクリックＡＭＰアッセイを含む従来のアッセイにおけるこれらのアゴニストの活性によって示される。また肝不全モデルを含むインビボアッセイにおける活性によっても示すことができる。これらはいずれも以下で説明する。米国特許第５，０５７，６２１号、５，４６２，９６８号、及び５，６９８，５９８号に記載されているようなインビボモデルは、式Ｉ及びIIの化合物の眼圧低下作用を示すのに使用できる。そのようなアッセイは、選択的ＥＰ4受容体アゴニストの活性を互いに、及び他の公知化合物及び組成物の活性と比較する手段も提供する。これらの比較の結果は、動物、例えばヒトを含む哺乳動物におけるそのような疾患の治療のための用量レベルの決定に有用である。
【００６１】
本発明の方法による選択的ＥＰ4受容体アゴニストの投与は、該選択的ＥＰ4受容体アゴニストを全身的及び／又は局所的（例えば、肝臓、動脈管、又は眼）に送達する任意の利用可能な様式によって行うことができる。これらの方法は、経口経路、非経口、十二指腸内経路などを含む。一般的に、本発明の化合物は経口投与されるが、例えば標的にとって経口経路が不適当な場合又は患者が薬物を摂取できない場合は、非経口投与（例えば、静脈内、筋肉内、経皮、皮下、直腸又は髄内）を利用することもできる。
【００６２】
本発明の方法は、肝不全、動脈管閉鎖、緑内障、又は高眼圧の治療に使用され、選択的ＥＰ4受容体アゴニストの全身又は局所適用（例えば、動脈管、肝臓又は眼に対する）のいずれかによって実施できる。本発明の方法に有用な選択的ＥＰ4受容体アゴニストは、例えば、適切な溶媒に入れた化合物の注射によって、又は開放手術の場合は適切なビヒクル、担体又は希釈剤に入れた化合物の局所適用によって、動脈管又は肝臓の部位に適用される。眼投与の場合、ゲル、軟膏、溶液又は懸濁液のような眼科用調製物が使用できる。
【００６３】
いずれにしても、投与される化合物の量及びタイミングは、治療される患者、疾患の重症度、投与様式、及び処方医の判断によることになろう。このように患者間で変動があるので、本明細書中に与えた用量はガイドラインであって、医師が患者にとって適切であると考える治療（例えば肝不全、動脈管閉鎖、緑内障又は高眼圧の治療）を達成するために薬物化合物の用量を決定することができる。望ましい治療程度を考慮するに当たっては、医師は、患者の年齢、患者の体重、症状、既往症の存在、所望の治療効果、投与経路、及び治療期間などの様々な因子のバランスを取らなければならない。ヒト成人の場合、一人につき１回量当たりの用量は、一般的に、１μｇ〜１００ｍｇを経口投与で１日１回から数回まで、０．１μｇ〜１０ｍｇを非経口投与（好ましくは静脈内）で１日１回から数回まで、又は静脈内注入による１日１〜２４時間の連続投与である。新生児の治療の場合、用量は、患者の若年齢及び低体重に応じてそれなりに調整する必要があろう。一般的に、本発明の方法において、選択的ＥＰ4受容体アゴニスト（式Ｉ及びIIの化合物）の量は、肝不全、動脈管閉鎖、緑内障又は高眼圧の治療に十分であるように使用される。投与すべき用量は様々な条件によるので、上で特定した範囲より低い又は高い用量が使用できる場合もある。
【００６４】
本発明の方法で使用される選択的ＥＰ4受容体アゴニスト化合物は、一般的に、少なくとも一つの本発明の化合物を製薬学的に許容しうるビヒクル又は希釈剤とともに含む医薬組成物の形態で投与される。従って、選択的ＥＰ4受容体アゴニスト化合物は、経口、鼻腔内、非経口、直腸又は経皮剤形といった任意の従来型形態で個別に投与できる。
【００６５】
経口投与の場合、医薬組成物は、溶液、懸濁液、錠剤、ピル、カプセル、散剤などの形態を取ることができる。クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム及びリン酸カルシウムのような様々な賦形剤を含有する錠剤は、デンプン、好ましくはジャガイモ又はタピオカデンプン、及びある種の複合ケイ酸塩のような各種崩壊剤、及びポリビニルピロリドン、ショ糖、ゼラチン及びアカシアのような結合剤とともに使用できる。さらに、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム及びタルクのような滑沢剤も錠剤化の目的のために非常に有用であることが多い。同様のタイプの固体組成物は、軟質及び硬質ゼラチンカプセルの充填剤としても使用される。これに関連する好適な材料としては、ラクトース又は乳糖、並びに高分子ポリエチレングリコールなどもある。経口投与で水性懸濁液及び／又はエリキシルが所望の場合、本発明の組成物は、各種の甘味剤、風味剤、着色剤、乳化剤及び／又は懸濁剤、並びに水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン及びそれらの様々な類似組合せのような希釈剤と組み合わせることができる。
【００６６】
該化合物は、酢酸コレステロールのような脂質との固溶体で経口投与することもできる。脂質を処方物中に封入すると、化合物又は類似体の吸収が著しく増加する。そのような製剤の製造については、Ｒｕｄｅｌの米国特許第３，８２８，１０６号に詳述されている。
【００６７】
非経口投与の場合、ゴマ又はピーナツ油中、又は水性プロピレングリコール中の溶液、並びに対応する水溶性塩の無菌水溶液が使用できる。そのような水溶液は必要であれば適切に緩衝化でき、液体希釈剤をまず十分な生理食塩水又はブドウ糖で等張にする。このような水溶液は、静脈内、筋肉内、皮下及び腹腔内注射用に特に適切である。これに関連して、使用される無菌水性媒体はすべて、当業者に周知の標準技術によって容易に得ることができる。
【００６８】
静脈内又は注射によって投与される組成物は、例えば、等張水溶液、アルコール溶液、エタノール−生理食塩水溶液、又はエタノール−デキストロース溶液中の化合物の溶液として調製できる。エタノールを溶液に加えて溶解度を増加させることも、メチルパラベンのような他の添加剤又は充填剤、着色剤、風味剤、希釈剤などのような他の成分を包含させることもできる。該組成物は、水性又は非水性媒体中の化合物又は類似体の懸濁液として投与することもできる。
【００６９】
静脈内又は注射による投与用の好適な処方物に、活性成分とα−シクロデキストリンとの複合体がある。化合物及び類似体とα−シクロデキストリン包接化合物との複合体の調製は、Ｈａｙａｓｈｉらの米国特許第４，０５４，７３６号に詳細が記載されている。α−シクロデキストリン対本発明の化合物の比が９７：３の複合体が特に好適である。
【００７０】
経皮（例えば局所）投与の場合、希釈無菌の水溶液又は部分水溶液（通常約０．１％〜５％の濃度）、又はそうでなければ上記非経口溶液に類似のものが調製される。
眼投与の場合、式Ｉ又は式IIの化合物の水溶液が一般的に好適である（典型的な濃度範囲は０．００１〜約１％重量／体積）。次に、該水溶液は、患者の目に該溶液を滴下することによって投与できる（通常１〜２滴を１日１〜４回投与）。低水溶性の式Ｉ及び式IIの化合物の場合、水性懸濁液が好適であろう。当該技術分野で公知の他の眼科用組成物、例えば式Ｉ又は式IIの化合物を含有する粘性又は半粘性ゲル、又は他の型の固体又は半固体組成物も使用できる。
【００７１】
眼科用組成物は、塩化ベンザルコニウム、クロロブタノール、エデト酸二ナトリウム、フェニルエチルアルコール、酢酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、メチルパラベン、プロピルパラベン、ポリクオタニウム−１、ソルビン酸、チメロサール、又は他の公知保存剤のような保存剤を含有していてもよい（保存剤の典型的濃度範囲は０．００１〜１．０％重量／体積）。トゥイーン８０のような界面活性剤も眼科用組成物に使用できる。ポリビニルアルコール、ポビドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポロキサマー類、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースシクロデキストリン及び水のような各種ビヒクルも眼科用組成物に使用できる。眼科用組成物の張性は、塩化ナトリウム、塩化カリウム、マンニトール又はグリセリンのような張性調節剤を用いて調節できる。眼科用組成物は、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液及びホウ酸緩衝液のような緩衝剤を用いて、好ましくは４．５〜８．０に緩衝化できる。眼科用組成物のｐＨは、適当な酸又は塩基を用いて好ましくは４．５〜８．０の範囲に調整できる。メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、アセチルシステイン、ブチル化ヒドロキシアニソール及びブチル化ヒドロキシトルエンのような抗酸化剤も眼科用組成物に使用できる。
【００７２】
ある量の活性成分を有する各種の医薬組成物の調製法は知られている、又は本開示に鑑みて当業者には明らかであろう。医薬組成物の調製法の例として、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，ペンシルバニア州イーストン、第１９版（１９９５）参照。従って、前述のように、本発明の化合物は任意の公知製剤又は投与様式で患者に投与されうる。
【００７３】
緑内障又は高眼圧の治療には併用療法も本発明の方法で使用されうる。緑内障又は高眼圧の治療のために、式Ｉ又は式IIの選択的ＥＰ4受容体アゴニストを、緑内障の治療に有用なことが知られている他の医薬（抗緑内障薬）、例えばβ−アドレナリン遮断薬、カルボニックアンヒドラーゼ阻害薬、縮瞳薬及び交感神経興奮薬と組み合わせることができる。例えば、ベタキソロール(betaxolol)（その塩酸塩を含む）及びチモロール(timolol)（そのマレイン酸塩を含む）のようなβ−アドレナリン作用薬を式Ｉ又は式IIの選択的ＥＰ4受容体アゴニストと組み合わせることができる。式Ｉ又は式IIの選択的ＥＰ4受容体アゴニストと組み合わせて使用できる特定のカルボニックアンヒドラーゼ阻害薬のいくつかの例は、ブリンゾラミド(brinzolamide)、ジクロフェナミド(dichlorphenamide)、及びドルゾラミド(dorzolamide)（その塩酸塩を含む）などである。臭化デメカリウム(demecarium bromide)のような縮瞳薬も式Ｉ又は式IIの選択的ＥＰ4受容体アゴニストと組み合わせて使用することができる。ブリモニジン(brimonidine)（その酒石酸塩を含む）、フェニラミン(pheniramine)（そのマレイン酸塩を含む）、及びフェニレフリン(phenylephrine)（その塩酸塩を含む）のような交感神経興奮薬も式Ｉ又は式IIの選択的ＥＰ4受容体アゴニストと組み合わせて使用することができる。
【００７４】
好都合なことに、本発明は、肝不全、動脈管閉鎖、緑内障又は高眼圧の治療のために消費者が使用するキットも提供する。該キットは、ａ）選択的ＥＰ4受容体アゴニスト（式Ｉ又はIIの化合物）を含む医薬組成物；ｂ）肝不全、動脈管閉鎖、緑内障又は高眼圧の治療のための該医薬組成物の使用法を記載した使用説明書；及びｃ）容器を含む。緑内障又は高眼圧の治療法の場合、該キットは前述の抗緑内障薬を含有していてもよい。
【００７５】
本願で使用している“キット”は、医薬組成物を入れるための容器を含む。分割ボトル又は分割ホイルパケットのような分割された容器を含んでいてもよい。容器は、当該技術分野で公知の任意の従来式形状又は形態であってよく、製薬学的に許容しうる材料で製造されている。例えば、紙又はボール紙の箱、ガラス又はプラスチックのボトル又はジャー、再封可能バッグ（例えば、異なる容器に入れる錠剤の“補充品（レフィル）”を保管するためのもの）、又は治療スケジュールに従って個々の用量をパックから押し出すようになっているブリスターパックなどである。使用される容器は、包含される正確な剤形によって異なりうる。例えば、従来のボール紙の箱は液体懸濁液を入れるのには一般に使用されないであろう。単一の剤形を市場に流通させるのに２種類以上の容器を一つの包装に一緒に使用することもできる。例えば錠剤をボトルに入れ、それを今度は箱に入れる、といったことなどである。
【００７６】
そのようなキットの一例はいわゆるブリスターパックである。ブリスターパックは包装業界ではよく知られており、医薬品の単位剤形（錠剤、カプセルなど）の包装に広く使用されている。ブリスターパックは、一般的に、比較的硬質材料のシートと、それを覆う好ましくは透明のプラスチック材料のホイルからなる。包装の過程で、プラスチックのホイルに窪みが形成される。この窪みは、包装される個々の錠剤又はカプセルの大きさ及び形状を有する。又は包装される複数の錠剤及び／又はカプセルを収める大きさ及び形状であってもよい。次に、錠剤又はカプセルを窪みに適宜入れ、比較的硬質材料のシートを、窪みが形成された方向とは反対側のホイル面にプラスチックホイルに対して貼り付ける。その結果、錠剤又はカプセルは、プラスチックホイルとシート間の窪みに所望通り個々に又はまとめて密封される。好ましくは、シートの強度は、窪みを手で押すことによって窪みの部分のシートに開口部が形成され、錠剤又はカプセルをブリスターパックから取り出すことができるような強度である。次いで、錠剤又はカプセルは前記開口部から取り出すことができる。
【００７７】
文書化した記憶補助を提供するのは望ましいであろう。この文書化された記憶補助は、医師、薬剤師、又は他の医療提供者、又は患者のために、情報及び／又は使用説明書を、例えば錠剤又はカプセルの隣に書いた数字（この数字はそのように特定された錠剤又はカプセルを摂取すべき投与計画の日に対応する）の形態で含有するような種類のものである。又は同様の情報を含有するカードでもよい。そのような記憶補助の別の例は、カードに印刷された、例えば次のようなカレンダーである。“第１週、月曜日、火曜日”・・・など・・・“第２週、月曜日、火曜日”・・・など。記憶補助の他のバリエーションも容易に明らかであろう。“１日量”は、所定の日に摂取する１個の錠剤又はカプセル、又は数個の錠剤又はカプセルでありうる。
【００７８】
キットの別の具体的態様は、一時に１日量を投薬するように設計されたディスペンサーである。好ましくは、該ディスペンサーは、投与計画の順守をさらに容易にするための記憶補助を備えている。そのような記憶補助の一例は、投薬済みの１日量の数を示す機械的カウンターである。そのような記憶補助の別の例は、液晶の読み出し、又は可聴式注意喚起シグナルを備えたバッテリー式のマイクロチップメモリである。これは、例えば、最後の１日量が摂取された日を読み出し、及び／又は次の用量をいつ摂取すべきかを喚起する。
【００７９】
本明細書中に引用した文書は、すべての特許及び特許出願も含め、引用によって本明細書に援用する。
実験の部
インビトロアッセイ
本発明の方法に有用な式Ｉ又はIIの化合物は、プロスタグランジンＥ2の４型受容体（ＥＰ4受容体）に結合する。ヒトＥＰ1受容体の完全長コード配列は、Ｆｕｎｋら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９３，２６８，２６７６７−２６７７２に記載の手順に従って製造される。完全長のラットＥＰ2受容体は、Ｎｅｍｏｔｏら、Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ  ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  Ｌｉｐｉｄ  Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ，１９９７，５４，７１３−７２５に記載の手順に従って製造される。ヒトＥＰ3受容体の完全長コード配列は、Ｒｅｇａｎら、Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９９４，１１２，３７７−３８５に記載の手順に従って製造される。ラットＥＰ4受容体の完全長コード配列は、Ｓａｎｄｏら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．１９９４，２００，１３２９−１３３３に記載の手順に従って製造される。これらの完全長受容体は、ヒトＥＰ1、ラットＥＰ2、ヒトＥＰ3又はラットＥＰ4受容体を発現する２９３Ｓ細胞の調製に使用される。
ヒトＥＰ1、ラットＥＰ2、ヒトＥＰ3、ラットＥＰ4受容体結合アッセイ
前述の完全長受容体を使用して、ＥＰ1、ＥＰ2、ＥＰ3、及びＥＰ4受容体を発現する２９３Ｓ細胞を調製する。
【００８０】
ヒトＥＰ1、ラットＥＰ2、ヒトＥＰ3又はラットＥＰ4プロスタグランジンＥ2受容体のいずれかを発現する２９３Ｓ細胞は、当業者に公知の方法に従って製造される。典型的には、公開されている完全長受容体の５’及び３’末端に対応するＰＣＲ（ポリメラーゼ連鎖反応）プライマーを上に開示した周知法に従って製造し、ヒト腎臓（ＥＰ1について）、ラット腎臓（ＥＰ2について）、ヒト肺（ＥＰ3について）、又はラット腎臓（ＥＰ4について）由来の全ＲＮＡを供給源として用いるＲＴ−ＰＣＲ（逆転写−ポリメラーゼ連鎖反応）で使用する。ＰＣＲ産物は、ＴＡオーバーハング法によってｐＣＲ２．１（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，カリフォルニア州カールズバッド）にクローニングし、そして、クローニングされた受容体の同一性はＤＮＡ配列決定によって確認する。ラットＥＰ2受容体の発現の場合、確認されたｃＤＮＡを哺乳動物発現ベクターＰＵＲｐＣＩにサブクローニングする。これは、ピューロマイシン耐性の選択マーカーを哺乳動物発現ベクターｐＣＩ（Ｐｒｏｍｅｇａ，ウィスコンシン州マディソン）にサブクローニングして得られたベクターである。
【００８１】
２９３Ｓ細胞に、ｐｃＤＮＡ３にクローニングされたヒトＥＰ1又はＥＰ3受容体のいずれかをエレクトロポレーションによりトランスフェクトする。トランスフェクト細胞をＧ４１８で選別して、ヒトＥＰ1又はＥＰ3受容体のいずれかを発現する安定細胞株を確立する。２９３Ｓ細胞に、ＰＵＲｐＣｉにクローニングされたラットＥＰ2受容体を脂質媒介トランスフェクションによってトランスフェクトする。トランスフェクト細胞をピューロマイシンで選別して、ラットＥＰ2受容体を発現する安定細胞株を確立する。２９３Ｓ細胞に、ｐｃＤＮＡ３にクローニングされたラットＥＰ4受容体を脂質媒介トランスフェクションによってトランスフェクトする。トランスフェクト細胞をジェネティシン（登録商標）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，カリフォルニア州カールズバッド）で選別して、ラットＥＰ4受容体を発現する安定細胞株を確立する。
【００８２】
非標識ＰＧＥ2を競合体として用いる全細胞3Ｈ−ＰＧＥ2結合アッセイを行い、最大数の受容体を発現しているクローン細胞株を選ぶ。
膜の調製：
全操作とも４℃で実施する。プロスタグランジンＥ2の１型、２型、３型、又は４型（それぞれＥＰ1、ＥＰ2、ＥＰ3、又はＥＰ4）受容体を発現しているトランスフェクト細胞を採取し、緩衝液Ａ［５０ｍＭのトリス−ＨＣｌ（ｐＨ７．４）、１０ｍＭのＭｇＣｌ2、１ｍＭのＥＤＴＡ、１ｍＭのＰｅｆａｂｌｏｃペプチド（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｍａｎｎｈｅｉｍ  Ｃｏｒｐ．，インジアナ州インジアナポリス）、１０ｕＭのＰｈｏｓｐｏｒａｍｉｄｏｎペプチド（Ｓｉｇｍａ、ミズーリ州セントルイス）、１ｕＭのペプスタチンＡペプチド（Ｓｉｇｍａ、ミズーリ州セントルイス）、１０ｕＭのエラスタチナールペプチド（Ｓｉｇｍａ、ミズーリ州セントルイス）、１００ｕＭのアンチパインペプチド（Ｓｉｇｍａ、ミズーリ州セントルイス）］中に１ｍｌあたり２００万個の細胞を懸濁させる。該細胞を、Ｂｒａｎｓｏｎ  Ｓｏｎｉｆｉｅｒ（Ｂｒａｎｓｏｎ  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、コネチカット州ダンバリー）を用いる超音波処理によって、２回１５秒間バーストして溶解する。溶解しなかった細胞と残屑は１００×ｇで１０分間遠心分離して除去する。次に、膜を４５，０００×ｇで３０分間遠心分離して採取する。ペレット状の膜を１ｍｌあたりタンパク質３〜１０ｍｇになるように再懸濁させる。タンパク質濃度は、Ｂｒａｄｆｏｒｄ［Ｂｒａｄｆｏｒｄ，Ｍ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９７６，７２，２４８］の方法で測定する。次に再懸濁させた膜は使用するまで−８０℃で凍結保存する。
【００８３】
結合アッセイ：
前述のようにして調製した凍結膜を解凍し、１ｍｌあたり１ｍｇのタンパク質になるように上記緩衝液Ａ中に希釈する。１００μｌの細胞膜調製物を、５μｌの式Ｉ又はIIの試験化合物溶液（所望の最終濃度の４０倍の濃度になるようにＤＭＳＯ中で希釈）及び９５μｌの緩衝液Ａ中３ｎＭの3Ｈ−プロスタグランジンＥ2（Ａｍｅｒｓｈａｍ、イリノイ州アーリントンハイツ）と合わせる。該混合物（総体積２００μＬ）を２５℃で１時間インキュベートする。次いで、膜をＴｏｍｔｅｃハーベスター（Ｔｏｍｔｅｃ、コネチカット州オレンジ）を用い、ＧＦ／Ｃ型ガラス繊維フィルタ（Ｗａｌｌａｃ、メリーランド州ゲイサースバーグ）を通してろ過し、回収する。結合3Ｈ−プロスタグランジンＥ2を有する膜はフィルタに捕捉されるが、緩衝液及び非結合3Ｈ−プロスタグランジンＥ2はフィルタを通過して廃液に落ちる。次に、各サンプルを３ｍｌの［５０ｍＭトリス−ＨＣｌ（ｐＨ７．４）、１０ｍＭのＭｇＣｌ2、１ｍＭのＥＤＴＡ］で３回洗浄する。次に、フィルタを電子レンジで加熱して乾燥させる。膜に結合した3Ｈ−プロスタグランジンの量を測定するために、乾燥フィルタをシンチレーション液入りのプラスチックバッグに入れ、ＬＫＢ  １２０５  Ｂｅｔａｐｌａｔｅリーダー（Ｗａｌｌａｃ、メリーランド州ゲイサースバーグ）でカウントする。ＩＣ50は、５０％の特異的結合3Ｈ−プロスタグランジンＥ2を置換するのに要した試験化合物の濃度から決定される。
組換えラットＥＰ4受容体を安定的に過剰発現している２９３Ｓ細胞におけるサイクリックＡＭＰ上昇の測定アッセイ
ラットＥＰ4受容体の完全オープンリーディングフレームを表すｃＤＮＡは、公開配列に基づきオリゴヌクレオチドプライマーを用いる逆転写ポリメラーゼ連鎖反応によって得られる。ラットＥＰ4受容体の完全長コード配列は、Ｓａｎｄｏら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．１９９４，２００，１３２９−１３３３に記載の手順、及び鋳型としてラット腎臓（ＥＰ4）由来のＲＮＡに従って製造される。２９３Ｓ細胞に、ｐｃＤＮＡ３にクローニングされたラットＥＰ4受容体を脂質媒介トランスフェクションによってトランスフェクトする。トランスフェクト細胞をジェネティシン（登録商標）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，カリフォルニア州カールズバッド）で選別して、ラットＥＰ4受容体を発現する安定細胞株を確立する。
【００８４】
非標識ＰＧＥ2を競合体として用いる全細胞3Ｈ−ＰＧＥ2結合アッセイを行い、最大数の受容体を発現しているクローン細胞株を選ぶ。高レベルの特異的［3Ｈ］ＰＧＥ2結合を示しているトランスフェクタントは、さらにスキャッチャード分析でＰＧＥ2に対するＢmax及びＫdｓを求め、特徴付けを行う。化合物スクリーニングのために選ばれた系は、１細胞あたり約２５６，４００個の受容体とＰＧＥ2（ＥＰ4）に対するＫd＝２．９ｎＭを有する。親２９３−Ｓ細胞における受容体の構成的発現は無視できる。ラットＥＰ4受容体を含有する安定な細胞株を、１０％のウシ胎仔血清及びＧ４１８（５００μｇ／ｍｌ）を含有するダルベッコ変法イーグル培地／Ｆ１２（ＤＭＥＭ／Ｆ１２）中で８０％の集密状態になるまで成長させる。
【００８５】
２９３−Ｓ／ＥＰ4株におけるｃＡＭＰの応答は、細胞を培養フラスコから１ｍｌのカルシウム（Ｃａ++）及びマグネシウム（Ｍｇ++）欠乏リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）中で激しく叩くことによって剥離し、次いで、該細胞をカルシウム（Ｃａ++）及びマグネシウム（Ｍｇ++）欠乏リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）で濯ぐことによって測定される。該細胞を、ＭＥＭ（最少必須培地）、１％のＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ（Ｎ−［２−ヒドロキシエチル］ピペラジン−Ｎ’−［２−エタンスルホン酸］）中に３７℃で再懸濁させる。該細胞懸濁液を血球計数器上でカウントし、ＭＥＭ（最少必須培地）を加えて最終濃度１×１０6細胞／ｍｌに希釈し、３−イソブチル−１−メチルキサンチン（ＩＢＭＸ）を加えて最終濃度１ｍＭにする。２００μｌの細胞懸濁液を直ちに個別のチューブに分取し、蓋をせずに１０分間、３７℃、５％ＣＯ2、相対湿度９５％でインキュベートする。次に、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）又はエタノールのいずれかに入れた試験される式Ｉ又はIIの化合物を、最終のＤＭＳＯ又はエタノール濃度が１％になるように１：１００の希釈で細胞に加える。典型的には、細胞は６〜８種類の異なる濃度（以下に記載のように１対数ずつの増加で）の式Ｉ又はIIの化合物で処理される。本アッセイにおける式Ｉ又はIIの化合物の典型的濃度は、１０-5Ｍ〜１０-10Ｍの範囲である。例えば、６点の化合物用量反応アッセイは、１０-5Ｍ、１０-6Ｍ、１０-7Ｍ、１０-8Ｍ、１０-9Ｍ及び１０-10Ｍの濃度で式Ｉ又はIIの化合物を試験する。試験化合物の添加後直ちにチューブに蓋をし、２回逆さにして混合し、３７℃で１２分間インキュベートする。次にサンプルを１００℃で１０分間のインキュベーションによって溶解し、直ちに氷上で５分間冷却し約４℃にする。細胞残屑は約４℃で３５００×ｇ、５分間の遠心分離によってペレット化し、透明溶解液を新しいチューブに移す。ｃＡＭＰ濃度は、市販の125Ｉ−ｃＡＭＰラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）キット（ＮＥＫ−０３３，Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．，マサチューセッツ州ボストン）を用いて測定する。透明溶解液をｃＡＭＰ  ＲＩＡ  アッセイ緩衝液（キットに含まれる）中で１：１００に希釈し、再度遠心分離する。得られた上清５０μｌを１２×７５ｍｍのガラスチューブに移し、Ｗａｌｌａｃ  Ｃｏｂｒａ  II  Ｇａｍｍｍａ  Ｃｏｕｎｔｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  Ｗａｌｌａｃ，Ｉｎｃ．，メリーランド州ゲイサースバーグ）を用いるシンチレーションカウントによってデータを収集する。ＥＣ50の計算は、用量反応曲線の線状部分で線型回帰分析を用いて、又はＤａｔａ  Ｆｉｔｔｅｒを用いて計算器で実施する。
インビボアッセイ
式Ｉ又は式IIの選択的ＥＰ4受容体アゴニストは、当該技術分野で知られている各種のインビボ肝不全モデル、例えばインビボラット肝不全モデル（Ｋａｚｕｈｉｒｏ，Ｋａｓａｉら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ２００１，１２０（Ｓｕｐｐｌ．１），Ａ−５４１）で評価できる。
インビボ急性肝損傷モデル
方法：ラットの急性肝不全は、四塩化炭素（ＣＣｌ4、１ｍｇ／ｋｇ）、ジメチルニトロソアミン（ＤＭＮ、５０ｍｇ／ｋｇ）、Ｄ−ガラクトサミン（Ｄ−ｇａｌ、１ｇ／ｋｇ）、又はＤ−ガラクトサミンとリポ多糖（ＬＰＳ）（Ｄ−ｇａｌ、１ｇ／ｋｇ；ＬＰＳ  １００μｇ／ｋｇ）の一つを腹腔内注射することによって誘導できる。四塩化炭素、ジメチルニトロサミン、Ｄ−ガラクトサミン、又はＤ−ガラクトサミンとリポ多糖の腹腔内注射後直ちに、式Ｉ又はIIの試験化合物又は生理食塩水（対照として）を投与する。試験化合物（式Ｉ又はIIの選択的ＥＰ4受容体アゴニスト）は、０．０１、０．０５、０．１又は０．２ｍｇ／ｋｇといった各種用量で投与できる。式Ｉ又はIIの試験化合物の投与後２４時間したら肝臓を組織検査のために取り出し、血清を総ビリルビン（Ｔ−ｂｉｌ）、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、及びアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）の測定のために得ることができる。Ｔ−ｂｉｌ、ＡＳＴ、及びＡＬＴ濃度の顕著な上昇を伴う塊状肝壊死が生理食塩水で処理された対照群に観察された。上記モデルにおける試験化合物の有効性は、試験化合物で処理した動物で得られた組織検査及び血清検査結果を、対応する生理食塩水対照群の結果と比較することによって決定できる。
【実施例】
【００８６】
実施例
本明細書中に提供した実施例は、本発明の特別の態様を説明するためのものであり、本明細書又はクレームをいかようにも制限するものではない。
実施例１〜１０
上記のインビトロヒトＥＰ1、ラットＥＰ2、ヒトＥＰ3、ラットＥＰ4受容体結合アッセイ及び組換えラットＥＰ4受容体を安定的に過剰発現している２９３Ｓ細胞株におけるサイクリックＡＭＰ上昇測定アッセイを用いて、以下の化合物を評価した。実施例１〜８及び１０で使用された化合物は、２００１年１１月２９日公開の米国特許出願公開ＵＳ２００１／００４７１０５に記載のように調製した。
【００８７】
実施例１
米国特許出願公開ＵＳ２００１／００４７１０５の実施例１の手順に従って調製した７−｛２Ｓ−［４−（３−クロロ−フェニル）−３Ｒ−ヒドロキシ−ブチル］−５−オキソ−ピロリジン−１−イル｝−ヘプタン酸は、結合アッセイでＩＣ50が２２ｎＭ（ラットＥＰ4）及び＞３２００ｎＭ（ラットＥＰ2、ヒトＥＰ1、ＥＰ3）、そしてｃＡＭＰ（ラットＥＰ4）上昇アッセイでＥＣ50が８．８ｎＭであることが分かった。
【００８８】
実施例２
米国特許出願公開ＵＳ２００１／００４７１０５の実施例２の手順に従って調製した７−｛２Ｓ−［３Ｒ−ヒドロキシ−４−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−ブチル］−５−オキソ−ピロリジン−１−イル｝−ヘプタン酸は、結合アッセイでＩＣ50が２１ｎＭ（ラットＥＰ4）、２７６０ｎＭ（ラットＥＰ2）、及び＞３２００ｎＭ（ヒトＥＰ1、ＥＰ3）、そしてｃＡＭＰ（ラットＥＰ4）上昇アッセイでＥＣ50が１３．２ｎＭであることが分かった。
【００８９】
実施例３
米国特許出願公開ＵＳ２００１／００４７１０５の実施例３の手順に従って調製した５Ｓ−［４−（３−クロロ−フェニル）−３−ヒドロキシ−ブチル］−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オンは、結合アッセイでＩＣ50が３８ｎＭ（ラットＥＰ4）、２３７０ｎＭ（ラットＥＰ2）、及び＞３２００ｎＭ（ヒトＥＰ1、ＥＰ3）、そしてｃＡＭＰ（ラットＥＰ4）上昇アッセイでＥＣ50が３３．１ｎＭであることが分かった。
【００９０】
実施例４
米国特許出願公開ＵＳ２００１／００４７１０５の実施例４の手順に従って調製した５Ｓ−［３Ｒ−ヒドロキシ−４−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−ブチル］−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オンは、結合アッセイでＩＣ50が３３ｎＭ（ラットＥＰ4）、及び＞３２００ｎＭ（ラットＥＰ2、ヒトＥＰ1、ＥＰ3）、そしてｃＡＭＰ（ラットＥＰ4）上昇アッセイでＥＣ50が７０．２ｎＭであることが分かった。
【００９１】
実施例５
米国特許出願公開ＵＳ２００１／００４７１０５の実施例５の手順に従って調製した５−［４−（４−フルオロ−フェニル）−３−ヒドロキシ−ブチル］−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オンは、結合アッセイでＩＣ50が５０８ｎＭ（ラットＥＰ4）、及び＞３２００ｎＭ（ラットＥＰ2、ヒトＥＰ1、ＥＰ3）であることが分かった。
【００９２】
実施例６
米国特許出願公開ＵＳ２００１／００４７１０５の実施例６の手順に従って調製した５−（４−ビフェニル−３−イル−３−ヒドロキシ−ブチル）−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オンは、結合アッセイでＩＣ50が５０ｎＭ（ラットＥＰ4）、３０５０ｎＭ（ラットＥＰ2）及び＞３２００ｎＭ（ヒトＥＰ1、ＥＰ3）、そしてｃＡＭＰ（ラットＥＰ4）上昇アッセイでＥＣ50が１７５ｎＭであることが分かった。
【００９３】
実施例７
米国特許出願公開ＵＳ２００１／００４７１０５の実施例７の手順に従って調製した５−［４−（３−フルオロ−フェニル）−３−ヒドロキシ−ブチル］−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オンは、結合アッセイでＩＣ50が９６ｎＭ（ラットＥＰ4）、及び＞３２００ｎＭ（ラットＥＰ2）、そしてｃＡＭＰ（ラットＥＰ4）上昇アッセイでＥＣ50が２００ｎＭであることが分かった。
【００９４】
実施例８
米国特許出願公開ＵＳ２００１／００４７１０５の実施例８の手順に従って調製した５Ｓ−［４−（３−クロロ−フェニル）−３Ｒ−ヒドロキシ−ブチル］−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オンは、結合アッセイでＩＣ50が２８ｎＭ（ラットＥＰ4）、及び＞３２００ｎＭ（ラットＥＰ2）、そしてｃＡＭＰ（ラットＥＰ4）上昇アッセイでＥＣ50が２４．６ｎＭであることが分かった。
【００９５】
実施例９
７−（２−（３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−５−オキソ−ピロリジン−１−イル）−ヘプタン酸は、結合アッセイでＩＣ50が５４ｎＭ（ラットＥＰ4）、及び＞３２００ｎＭ（ラットＥＰ2、ヒトＥＰ1、ＥＰ3）、そしてｃＡＭＰ（ラットＥＰ4）上昇アッセイでＥＣ50が３２．５ｎＭであることが分かった。
【００９６】
実施例１０
米国特許出願公開ＵＳ２００１／００４７１０５の実施例１０の手順に従って調製した７−｛２Ｓ−［３−ヒドロキシ−４−（３−フェノキシ−フェニル）−ブチル］−５−オキソ−ピロリジン−１−イル｝−ヘプタン酸は、結合アッセイでＩＣ50が５３６ｎＭ（ラットＥＰ4）、及び＞３２００ｎＭ（ラットＥＰ2）であることが分かった。
【手続補正書】
【提出日】平成16年11月12日(2004.11.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
肝不全、動脈管閉鎖、緑内障又は高眼圧を治療するための医薬組成物であって、式Ｉ：
【化１】
2005526080.tif 000027
［式中、
Ｑは、ＣＯＯＲ3、ＣＯＮＨＲ4又はテトラゾール−５−イルであり；
Ａは、単結合又はシス二重結合であり；
Ｂは、単結合又はトランス二重結合であり；
＝Ｕは、＝Ｏ、
【化２】
2005526080.tif 000028
であり；
Ｒ2は、α−チエニル、フェニル、フェノキシ、モノ置換フェニル又はモノ置換フェノキシであり、前記置換基は、クロロ、フルオロ、フェニル、メトキシ、トリフルオロメチル及び（Ｃ1−Ｃ3）アルキルからなる群から選ばれ；
Ｒ3は、水素、（Ｃ1−Ｃ5）アルキル、フェニル又はｐ−ビフェニルであり；
Ｒ4は、ＣＯＲ5又はＳＯ2Ｒ5であり；そして
Ｒ5は、フェニル又は（Ｃ1−Ｃ5）アルキルである］の化合物、そのプロドラッグ、又は該化合物もしくはプロドラッグの製薬学的に許容しうる塩を含んでなる、前記医薬組成物。
【請求項２】
Ｑが５−テトラゾリルである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
式Ｉの化合物が、
５−（３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル）−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン、
５−（３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン、
５Ｓ−［４−（３−クロロ−フェニル）−３−ヒドロキシ−ブチル］−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン、
５Ｓ−［４−（３−クロロ−フェニル）−３Ｒ−ヒドロキシ−ブチル］−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン、
５Ｓ−［３Ｒ−ヒドロキシ−４−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−ブチル］−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン、
５−［４−（４−フルオロ−フェニル）−３−ヒドロキシ−ブチル］−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン、
５−（４−ビフェニル−３−イル−３−ヒドロキシ−ブチル）−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン、又は
５−［４−（３−フルオロ−フェニル）−３−ヒドロキシ−ブチル］−１−［６−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピロリジン−２−オン
である、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
ＱがＣＯＯＨである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
式Ｉの化合物が、
７−（２−（３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−５−オキソ−ピロリジン−１−イル）−ヘプタン酸、
７−［２−（３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル）−５−オキソ−ピロリジン−１−イル］−ヘプタン酸、
７−｛２Ｓ−［４−（３−クロロ−フェニル）−３Ｒ−ヒドロキシ−ブチル］−５−オキソ−ピロリジン−１−イル｝−ヘプタン酸、
７−｛２Ｓ−［３Ｒ−ヒドロキシ−４−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−ブチル］−５−オキソ−ピロリジン−１−イル｝−ヘプタン酸、又は
７−｛２Ｓ−［３−ヒドロキシ−４−（３−フェノキシ−フェニル）−ブチル］−５−オキソ−ピロリジン−１−イル｝−ヘプタン酸
である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
肝不全、動脈管閉鎖、緑内障又は高眼圧を治療するための医薬組成物であって、式II：
【化３】
2005526080.tif 000029
［式中、
Ａｒは、α−もしくはβ−チエニル、５−フェニル−α−もしくはβ−チエニル、５−低級アルキル−α−もしくはβ−チエニル、α−もしくはβ−ナフチル、トロピル、フェニル、３，５−ジメチルフェニル、３，４−ジメトキシフェニル、３，４−メチレンジオキシフェニル、３，４−ジクロロフェニル、又はモノ置換フェニルであり、前記置換基は、ブロモ、クロロ、フルオロ、トリフルオロメチル、フェニル、低級アルキル、又は低級アルコキシであり；
Ｒは、水素又はメチルであり；
Ｗは、単結合又はシス二重結合であり；
Ｚは、単結合又はトランス二重結合であり；そして
＝Ｍ及び＝Ｎは、それぞれ独立して、＝Ｏ、
【化４】
2005526080.tif 000030
である］の化合物、そのプロドラッグ、又は該化合物もしくはプロドラッグの製薬学的に許容しうる塩を含んでなる、前記医薬組成物。
【請求項７】
＝Ｍ及び＝Ｎが、それぞれ＝Ｏである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
＝Ｍが、
【化５】
2005526080.tif 000031
であり；そして、＝Ｎが＝Ｏである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項９】
＝Ｍが、
【化６】
2005526080.tif 000032
であり；そして、＝Ｎが、
【化７】
2005526080.tif 000033
である、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
＝Ｍが＝Ｏであり；そして、＝Ｎが、
【化８】
2005526080.tif 000034
である、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
肝不全を治療するための、請求項１ないし５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
動脈管閉鎖を治療するための、請求項１ないし５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
緑内障又は高眼圧を治療するための、請求項１ないし５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
肝不全を治療するための、請求項６ないし１０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
動脈管閉鎖、緑内障又は高眼圧を治療するための、請求項６ないし１０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【国際調査報告】
2005526080.tif 000035
2005526080.tif 000036
2005526080.tif 000037
2005526080.tif 000038
2005526080.tif 000039
2005526080.tif 000040