(57)【要約】  加工されたモリンダシトリフォリアのＣｏｘ−２の選択的阻害特徴を利用することによる、種々の病気および疾患を予防および処置する方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物における疾患を処置および予防する方法であって、
有効量のモリンダシトリフォリアを含む製剤を前記哺乳動物に投与することを含み、ここで、前記製剤がＣｏｘ−１よりも大きな程度でＣｏｘ−２を阻害し、それにより炎症誘導疾患の症状を予防および処置する、方法。
【請求項２】
モリンダシトリフォリアが加工されている請求項１に記載の方法。
【請求項３】
モリンダシトリフォリアが液状の形態である請求項１に記載の方法。
【請求項４】
モリンダシトリフォリアが食品の成分として含まれる請求項１に記載の方法。
【請求項５】
モリンダシトリフォリアがカプセルの形態である請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記モリンダシトリフォリアの投与が、炎症誘導疾患の原因となるＣｏｘ−２関連プロスタグランジンの産生を阻害する一方、同時にＣｏｘ−１関連プロスタグランジンの産生をより少ない程度で阻害する、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記モリンダシトリフォリアがあらかじめ決められた濃度で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記モリンダシトリフォリアが他の食品の成分として含まれる請求項７に記載の方法。
【請求項９】
疾患を処置および予防する方法であって、
ある量のモリンダシトリフォリア果汁および果肉を得ること；果汁から湿った果肉をろ過すること；
果汁を低温殺菌すること；および
摂取のために前記モリンダシトリフォリア果汁を投与すること；
の工程を含み、ここで、一定時間後、前記モリンダシトリフォリアの投与の工程がＣｏｘ−１よりも大きい程度でＣｏｘ−２を阻害する生理学的反応を起こし、それにより疾患に対して緩和作用を示す、方法。
【請求項１０】
モリンダシトリフォリア果汁が食品の成分として含まれる請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
Ｃｏｘ−２阻害に比較して望ましくないＣｏｘ−１阻害を制限するように予め決められた量を投与する、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
疾患を処置および予防する方法であって、
ある量のモリンダシトリフォリア果汁および果肉を得ること；果汁から湿った果肉をろ過すること、ここで、湿った果肉は、重量で１０％から４０％の繊維を含み；
果肉を低温殺菌すること；および
摂取のために前記モリンダシトリフォリア果肉を治療的に投与すること；
の工程を含み、ここで、一定時間後、前記投与がＣｏｘ−１よりも大きい程度でＣｏｘ−２を阻害する生理学的反応を起こし、それにより疾患に対して緩和作用を提供する、方法。
【請求項１３】
モリンダシトリフォリア果肉が食品の成分として含まれる請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
Ｃｏｘ−２阻害に比較して望ましくないＣｏｘ−１阻害を制限するようにあらかじめ決められた量を投与する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
哺乳動物における一定の疾患および疾病の症状を緩和し、予防し、さらには増殖を阻害する方法であって、
少なくとも２ヶ月間空腹時に１日２回少なくとも２オンスの加工されたモリンダシトリフォリア果汁を患者に投与する工程を含み、患者に投与する前記工程がＣｏｘ−１より大きい程度でＣｏｘ−２を阻害する生理学的作用を有する、方法。
【請求項１６】
前記疾患が、結腸癌、食道癌、皮膚癌、肺癌、膀胱癌、胃癌、乳癌、頭部および頸部の癌、前立腺癌、膵臓癌、分化型肝細胞癌腫、アルツハイマー病、神経変性疾患、炎症誘導疾患、心疾患、骨粗鬆症および糖尿病からなる群より選ばれるものを含む、請求項１５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、疾患を予防および処置するための方法および組成物、特に、疾患を予防および処置するために加工されたモリンダシトリフォリアの選択的Ｃｏｘ−２阻害の特徴を用いる方法および組成物に関連する。
【背景技術】
【０００２】
人々は、長期に渡る健康についてますます注意を払うようになってきている。毎年公衆の健康を脅かす死に至る種々の疾患および病気に伴い、疾患を処置および予防する処置および薬剤を見つける努力が続けられている。事実、米国癌学会により提供される統計に示されているように、２００１年には、１，２６８，０００件もの新規の癌が診断されており、身体的な健康および致命的な虚弱を避けることへの高い関心がある。さらに、癌は特に、米国における第２の死亡原因であるため、相当な脅威である。やはり、アルツハイマーのような他の疾患および他の変性疾患は、命を奪い続け、究極的には、遺族に苦しみをもたらしている。
【０００３】
近年、ヒトに見出される天然酵素であるシクロオキシゲナーゼ酵素の１つのアイソフォームを選択的に阻害する能力が、種々の疾患を処置および予防する作用を有することが、発見された。シクロオキシゲナーゼ酵素の選択的阻害がどのように疾患を予防および処置するかを理解するために、「非選択的」薬剤、主として非ステロイド抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）の背景と不充分な点をまず理解する必要があり、このような不充分な点が、疾患を予防および処置するための選択的Ｃｏｘ−２阻害薬の使用に、如何に動機を与えたかを理解する必要がある。
【０００４】
ＮＳＡＩＤのような非選択的薬は、関節痛、筋肉痛、および関節の腫れの処置に伝統的に用いられる。ＮＳＡＩＤの例には、イブプロフェン、（例えば、Ａｄｖｉｌ（登録商標）、Ｍｏｔｒｉｎ（登録商標）、Ｎｕｐｒｉｎ（登録商標））、ナプロキセン、サリンダック、ジクロフェナック、ピロキシカム、ケトプロフェン、ジフラニサル、ナブメトン、エトドラック、オキサプロジン、およびインドメタシンが含まれる。残念ながら、ＮＳＡＩＤは炎症および炎症に関係する痛みを軽減するのに効果的であるが、これらには多くの不利な副作用がある。主要な副作用は、胃腸管に関連する。例えば、ＮＳＡＩＤで処置されている患者の１０から１５パーセントは、下痢、胸焼け、増加した腹痛、および胃のむかつきのような副作用に苦しむ。これらの患者の相当の割合が、胃および上部胃腸管における潰瘍を生じ、これは内出血および他の合併症を引き起こすこととなる。
【０００５】
ＮＳＡＩＤを服用する相当数の患者が、それにより胃潰瘍の増加した危険に苦しんでおり、ＮＳＡＩＤが炎症を阻害および予防する機構の研究の動機付けとなった。この研究の成果が、いくつかの炎症緩和薬、特にＣｏｘ−２選択的阻害剤が単に痛みおよび炎症の緩和以上に、疾患の処置および予防に使用できることへの発見につながった。特に、研究者は、ヒト組織における炎症が組織細胞中におけるアラキドン酸（大部分のヒト体細胞に存在する分子）のプロスタグランジンへの変換に関連することを発見した。アラキドン酸のプロスタグランジンへの変換は、酵素シクロオキシゲナーゼ（以下、「Ｃｏｘ」という。）の存在を必要とする。従って、Ｃｏｘは、痛みおよび炎症を生じる酵素である。これにより、ＮＳＡＩＤは、Ｃｏｘを阻害し、痛みを抑制する。しかし、１９９０年代の初めにＣｏｘの２つのアイソフォーム、Ｃｏｘ−１およびＣｏｘ−２が発見された。Ｃｏｘ−１およびＣｏｘ−２はともに、アラキドン酸からプロスタグランジンへの生合成の最初の２工程を触媒する。相違点は、Ｃｏｘ−１が構成的であり、Ｃｏｘ−２が誘導されて出現することである。Ｃｏｘ−１は、身体のほとんどすべての部分で一定濃度で存在し、プロスタグランジンを産生して、胃の内側を覆い、正常な腎機能を維持し、血小板の凝集を防止する。一方、Ｃｏｘ−２は、通常は身体に存在せず、細菌の多糖類、サイトカイン、インターロイキン−１、−２、および腫瘍壊死因子のような炎症に関係する因子によって、感染部位において誘導される。一旦誘導されると、Ｃｏｘ−２は、大量のプロスタグランジンを産生し、これにより続いて痛みの閾値を下げ、体温制御中枢の設定点を引き上げ、局所的な紅斑および浮腫の形成を伴う末梢血管拡張を引き起こす。したがって、Ｃｏｘ−１の比例した阻害を避けながら、Ｃｏｘ−２を選択的に阻害することは、痛みおよび炎症を軽減するだけでなく、胃腸の内側を完全なまま維持することができることを研究者は発見した。Ｃｏｘ−２選択的阻害薬は、ＮＳＡＩＤの長期使用に関係する不利益な作用を引き起こすことなく長期に服用できるので、Ｃｏｘ−２の選択的阻害剤は、それゆえ、関節炎患者のような慢性痛患者にとって有用な緩和ツールとなる。
【０００６】
Ｃｏｘ−２選択的阻害薬の機構を理解することは、当然医薬産業に多大な進展をもたらした。例えば、炎症へのその役割に加え、Ｃｏｘ−２が細胞増殖に重要な役割を果たし、それにより癌細胞の成長およびその予防に重要な役割を果たすことが、多くの証拠により示唆された。最近の研究では、有機体レベルにおいて、Ｃｏｘ−２が創傷治癒の有糸分裂過程の間に生理学的に誘導されることが示された。Ｃｏｘ−２はヒトおよび他の生物において前悪性および悪性腫瘍の多くの型において過剰発現することが見出されていたので、これは重要なことである。即ち、Ｃｏｘ−２の過剰発現は、Ｃｏｘ−２が腫瘍発達の初期に上昇したときに起こる。従って、このようなＣｏｘ−２の過剰発現の阻害は、結腸、食道、皮膚、肺、膀胱、胃、乳、頭部および頸部、前立腺、膵臓の癌、および分化型肝細胞癌腫を予防および処置でき、これらの癌において、Ｃｏｘ−２がヒトの腫瘍の大部分で過剰発現していることが見出されている。
【０００７】
さらに、炎症がアルツハイマー、心疾患、骨粗鬆症および糖尿病のような他の多くの慢性および虚弱性疾患の根底にあるので、Ｃｏｘ−２阻害剤がこのような疾患の進行を予防し、遅延させ、または少なくとも遅らせる役割を果たせると結論づけられる。
【０００８】
Ｃｏｘ−２を選択的に阻害する現在の製品の例としては、「Ｃｅｌｅｂｒｅｘ（登録商標）」として知られるセレコキシブおよび「Ｖｉｏｘｘ（登録商標）」として知られるロフェコキシブがある。これらの医薬製品は、関節炎および他の慢性痛患者に一般的に処方される。残念なことに、「Ｃｅｌｅｂｒｅｘ（登録商標）」および「Ｖｉｏｘｘ（登録商標）」には、多くの欠点がある。例えば、これらの製品は、処方箋を通じてしか入手できない。さらに、これらは、高価であり、小児への使用および胎児発育の一定期間の妊婦への使用は、まだ承認されていない。事実、選択的Ｃｏｘ−２阻害薬が「成功した」と報告されていても、選択的Ｃｏｘ−２阻害薬が非選択的Ｃｏｘ阻害剤よりも「安全である」とする製造業者の宣伝文句には疑問がある。非選択的Ｃｏｘ阻害剤に関係した副作用のいくつかは、選択的Ｃｏｘ−２阻害薬にも見出されている。より重要なことに、選択的Ｃｏｘ−２阻害薬を使用している人が、伝統的な非選択的ＮＳＡＩＤを服用している人より心臓発作を患う危険性が４倍もあるということが示された。さらに、Ｃｏｘ−２阻害薬が、他の薬と不利に相互作用する危険も常にある。
従って、選択的なＣｏｘ−２阻害をもたらし、種々の癌、アルツハイマー、神経変性疾患、および一般的なそして他の雑多な疾患のような種々の疾患の予防および処置を可能にする方法および組成物を提供することは有用であろう。さらに、不利な胃腸の副作用を軽減するのみならず、Ｃｏｘ−２阻害薬使用者における心臓発作の危険性を完全に消すことはできなくても、これを遠ざけ、最小にする、Ｃｏｘ−２阻害組成物および方法を提供することも、有用であろう。最後に、従来技術の選択的Ｃｏｘ−２阻害薬とは違い、高価でなく、処方箋なしで入手でき、すべての年齢の人々に使用でき、全妊娠期間妊婦に使用できるＣｏｘ−２阻害薬を提供することはさらに有用であろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
（発明の概要）
本発明のいくつかの態様は、Ｃｏｘ−２の選択的阻害を通じた疾患を処置しまたは予防するための処方および方法を提供する。このような疾患には、種々の癌、アルツハイマーおよび他の神経変性疾患、または他の炎症に基づく雑多な疾患が含まれる。
【００１０】
本発明のいくつかの態様は、種々の疾患および病気を処置する方法を提供し、これは治療的に有効量の加工されたモリンダシトリフォリアを哺乳動物に投与することを含む。モリンダシトリフォリアは、一般的に果汁、油、カプセルまたは他の食品の成分としての形態で投与される。加工されたモリンダシトリフォリアを使用することの有利な点は、ＮＳＤＩＡの長期使用により起こりうる不利な胃の副作用を起こすことなしに処置を行えることである。
【００１１】
好ましい態様として、処方は加工されたモリンダシトリフォリア果汁を含み、これは、選択的Ｃｏｘ−２阻害剤の特徴を有することが発見された。加工されたモリンダシトリフォリアが選択的にＣｏｘ−２を阻害する正確な機構は不明である。本発明の好ましい方法は、加工されたモリンダシトリフォリアの治療的な量を摂取することを含む。
【００１２】
（発明の詳細な記載）
ここで一般的に記載される本発明の成分が広く種々の異なった方法、配置、または処方で配置され、設計されうることは、容易に理解できるであろう。したがって、本発明の系および方法の態様の以下のより詳細な記載は、請求の範囲に記載されたような発明の範囲を制限することを意図せず、本発明の現在の好ましい態様の単なる例示である。
【００１３】
モリンダシトリフォリアＬ．として科学的に知られるインディアンマルベリー植物（桑）は、高さ３から１０メートルの灌木あるいは、小または中位の大きさの木である。これは、世界中の熱帯沿岸域で成長する。この植物は野生で生えるが、プランテーションや小さな個別の栽培用区画でも栽培されてきた。インディアンマルベリー植物は幾らか丸い枝と、常緑の、対生（または疑似交互）、暗色、光沢、波状の突き出した葉脈のある葉を持つ。葉は広い長円形から長方形で、両端はとがり、長さ１０〜３０ｃｍで幅５〜１５ｃｍである。
【００１４】
インディアンマルベリーの花は、小さな白色の３から５個の丸い、筒状の香りのよいもので、約１．２５ｃｍの長さである。この花は、蝋質の、白色または緑白または黄色の、半透明の外皮を持つ卵形、楕円または丸みを帯びた、ゴツゴツした形の長さ５〜１０ｃｍ、厚み５〜７ｃｍの多くの小さな核果からなる果実になる。この果実は、ジャガイモと同様にその表面に「目」を持つ。この果実は水分が多く、苦く、暗黄色または黄白色であり、多くの赤茶色の硬い、長円形〜三角形の翼のついた２細胞核を含み、それぞれに約４個の種が含まれている。
【００１５】
充分に熟すと、この果実は腐ったチーズ様の強いにおいを持つ。この果実は民族によっては食物として食べられているものの、インディアンマルベリー植物の最も一般的な用法は、赤と黄色の染料源としてのものであった。近年、このインディアンマルベリー植物の栄養的および健康的利点が注目されている。
【００１６】
モリンダシトリフォリアの果実は、すべての実際的な目的では食べられないので、果実はヒトの摂取のために口に合うように加工され、種々の病気や疾患の処置に用いられる食品に含められる必要がある。加工されたモリンダシトリフォリア果汁は、熟したモリンダシトリフォリアの果実の果汁および果肉から種と皮を分離し、果汁から果肉をろ過し、果汁を包装することにより調製できる。または、果汁を包装する代わりに、果汁を直ちに他の食品の成分として含ませ、冷凍しまたは低温殺菌してもよい。いくつかの態様では、果汁と果肉は均一な混合物に裏ごしされ、他の成分と混合される。他の加工には、果実および果汁を凍結乾燥することが含まれる。果実と果汁は、最終の果汁製品の製造の間に再構成できる。また他の加工には、くだく前に、果実と果汁を空気乾燥することが含まれる。
【００１７】
モリンダシトリフォリア果汁を製造する現在の好ましい工程では、果実を手摘みまたは機械装置により摘む。果実が少なくとも直径１インチ（２〜３ｃｍ）から１２インチ（２４〜３６ｃｍ）以下の時に、これを収穫することができる。果実は暗緑から黄緑〜白色と、その中間色のグラデーションであるのが好ましい。収穫後かつすべての加工を行う前に、果実を充分に洗浄する。
【００１８】
果実を０〜１４日間、熟化または熟成させ、ほとんどの果実を２〜３日保持する。地面とは接触しないように、装置内に置いておくことによって果実を熟化または熟成させる。熟成時に原料に布掛けまたは網掛けするのが好ましいが、覆わずに熟成させることができる。さらに加工する準備ができると、果実は薄緑から、薄黄、白または半透明色で色が薄くなる。傷のあるものまたはひどく緑色で硬いものに関して、果実を検査する。傷および硬い緑色の果実を、合格した果実と分ける。
【００１９】
熟化し熟成した果実をさらに加工および輸送するためにプラスチックライニングしたコンテナに入れるのが好ましい。熟成果実のコンテナは、０〜３０日間保持することができる。ほとんどの果実コンテナは、加工前に７〜１４日間保持する。このコンテナは場合によりさらに加工前に冷蔵状態で貯蔵することができる。果実を貯蔵コンテナから取り出して、手動または機械的分離器を通して処理する。種と皮を、果汁および果肉から分ける。果汁は、果肉からろ過することができる。
【００２０】
果汁は、貯蔵および輸送用のコンテナに包装することができる。あるいは、果汁を直ちに加工して完成果汁製品にすることができる。コンテナは、冷蔵、冷凍または室温条件で貯蔵することができる。果肉は、果汁と混合してピューレを作ってもよい。モリンダシトリフォリア果汁およびピューレは、均一な混合物にブレンドされ、他の成分と混合することができる。他の成分は、水、果実果汁濃縮物、フレーバー化剤、甘味料、栄養成分、植物性薬品および着色料からなるが、これらには限定されない。完成果汁製品は、最低温度１８１°Ｆ（８３℃）以上、２１２°Ｆ（１００℃）までで加熱および低温殺菌するのが好ましい。
【００２１】
製品は、プラスチック、ガラスまたは加工温度に耐える別の好適な材料の最終コンテナに充填し、密封する。コンテナを充填温度に維持するか、急速に冷却して輸送用コンテナに設置することができる。輸送用コンテナは、最終コンテナ中の製品の温度を維持または制御できる材料または方法で覆うのが好ましい。
【００２２】
純粋な果汁は、ろ過装置を通して果汁から果肉を分離することにより加工できる。ろ過装置は、遠心分離デカンター、１ミクロン〜２０００ミクロン、より好ましくは５００ミクロン未満のサイズのスクリーンフィルタ、フィルタプレス、逆浸透濾過器と、他の標準の市販のろ過装置からなるのが好ましいが、これらに限定されない。操作フィルタ圧力は、０．１ｐｓｉｇ〜約１０００ｐｓｉｇの範囲であるのが好ましい。流量は、０．１ｇｐｍ〜１０００ｇｐｍの範囲であるのが好ましく、より好ましくは５〜５０ｇｐｍの範囲である。
【００２３】
上述の加工方法に加えて、果実を油製品、繊維製品、および果汁製品に加工する他の方法が企図され、用いられるであろう。加工された果汁、油、および繊維の処方のいくつかの態様を用いることができる。
【００２４】
本発明のいくつかの態様は、ヒトの種々の疾患および病気を処置および予防する方法を範囲に含み、これは、有効量の加工されたモリンダシトリフォリアを哺乳動物に投与することを含む。
【００２５】
本発明は、種々の癌、アルツハイマー、および他の雑多な炎症誘導疾患の処置および予防のための、加工されたモリンダシトリフォリアのＣｏｘ−２の選択的阻害特性を使用することを予期している。
【００２６】
加工されたモリンダシトリフォリアは、特定の疾患および病気に対する有用性を増すために修飾してもよい。経口投与は、好ましい投与様式である。いくつかの態様では、本発明は、Ｃｏｘ−２によるプロスタグランジンの産生を阻害し、上述の疾患および病気を処置および予防する、医薬的に許容されるキャリアー、および医薬的に有効量の上述した加工されたモリンダシトリフォリアを含む、加工されたモリンダシトリフォリアと組み合わせた医薬組成物を範囲に含む。これらは、錠剤、カプセル、溶液の形態をとることができ、または他の食品の成分として含めることもできる。
【００２７】
「純粋な」加工されたモリンダシトリフォリアにより、製剤は、結腸、食道、皮膚、肺、膀胱、胃、乳、頭部および頸部、前立腺、膵臓の癌、分化型肝細胞癌腫のような癌の予防、および、アルツハイマーのような神経変性疾患、心疾患、骨粗鬆症、糖尿病等のような他の炎症誘導疾患の予防に有用であろう。
【００２８】
加工されたモリンダシトリフォリアが作用する正確な機構は不明である一方、モリンダシトリフォリアのその製剤が他の選択的Ｃｏｘ−２阻害剤と同様の方法により機能し、それにより種々のプロスタグランジン媒介の、または炎症誘導の疾患の処置に有用であるという可能性がある。この可能性は、モリンダシトリフォリアの選択的にＣｏｘ−２を阻害する能力により示される。
【００２９】
活性成分を含む医薬組成物は、例えば、錠剤、ロゼンジ剤、水溶性若しくは油溶性懸濁剤、分散性粉末若しくは顆粒、エマルジョン、シロップ、またはエリキシル剤等の、経口使用に適した形態でもよい。経口使用を意図した組成物は、医薬組成物を製造するためのこの分野で知られたいずれの方法によって調製してもよく、このような組成物は、甘味剤、フレーバー剤、色素、および保存剤からなる群より選ばれる１またはそれ以上の剤を含んでもよい。錠剤は、無毒の医薬的な賦形剤と混合した活性成分を含み、これは、錠剤を製造するのに適したものである。水溶性懸濁剤は、水溶性懸濁剤を製造するのに適した賦形剤と混合した活性成分を含む。
【００３０】
しかし、いずれの特定の患者に対する特定の投与レベルが、年齢、体重、一般的健康状態、性別、食物、投与時間、投与経路、排泄速度、薬の組み合わせおよび治療を受ける特定の疾患の重篤度、または潜伏の過程等の種々の要因に依存することは理解される。
【００３１】
ＮＳＡＩＤが長期間摂取されたときに起こりうる型の胃の副作用を生ずることなしに、処置または予防が行えるのは、この発明の大きな長所である。
【００３２】
また、この発明には、妊婦およびすべての年齢の人々に、処置または予防が低価格で実行でき、他のＣｏｘ−２阻害剤よりも心不全の危険性を少なくできるという、他の大きな有利な点がある。
【００３３】
好ましくは、この発明のいくつかの態様は、身体の正常な機能を維持するＣｏｘ−１をより少ない程度に阻害する一方、結腸、食道、皮膚、肺、膀胱、胃、乳、頭部および頸部、前立腺、膵臓の癌、分化型肝細胞癌腫、アルツハイマー病および他の変性および神経変性疾患のような種々の疾患を処置し、または予防する方法を提供する。
一般的に、経口投与は、１日２から３回投与されることとなる。
【実施例１】
【００３４】
実際の例として、モリンダシトリフォリア果汁を、Ｃｏｘ−１およびＣｏｘ−２阻害について試験した。Ｃｏｘ−１およびＣｏｘ−２について酵素アッセイを行った。Ｃｏｘ−１酵素はヒト血小板から得た。基質は、１％ＤＭＳＯビヒクル中５千万の細胞のアラキドン酸とした。Ｃｏｘ−１免疫アッセイの予備インキュベーション時間を３７℃で１５分間とし、インキュベーションの温度および時間も３７℃で１５分間とした。インキュベーションバッファは、ｐＨ７．４で１５ｍＭＨＥＰＳを含むＨＢＳＳバッファとした。プロスタグランジンＥ２のＥＩＡ定量を行った。５０パーセントの最大刺激または阻害と同等かそれ以上を有意な基準として用いた。
【００３５】
Ｃｏｘ−２酵素アッセイに関しては、Ｃｏｘ−２はヒト組み換えＳｆ９昆虫細胞から得、基質は０．２μｍのアラキドン酸とした。ビヒクルは、１％ＤＭＳＯとした。予備インキュベーションの温度および時間は、３７℃で１５分間とした。インキュベーションの温度および時間は、３７℃で５分間とした。インキュベーションバッファは、ｐＨ７．７の、１００ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ、１ｍＭのグルタチオン、１μＭのヘマチン、および５００μＭのフェノールとした。プロスタグランジンＥ２のＥＩＡ定量を行った。５０パーセントの最大刺激または阻害と同等かそれ以上を有意な基準として用いた。生化学アッセイの結果は、２．３１パーセントの濃度において、Ｃｏｘ−１酵素の阻害はＣｏｘ−２酵素の阻害の４倍低かった。二者択一的に、これはＣｏｘ−２がＣｏｘ−１の程度より４倍阻害されることを示す。特に、この結果は、Ｃｏｘ−１の阻害は２０パーセントであるが、Ｃｏｘ−２の阻害はほぼ６０パーセントであることを示した。濃度が１０パーセントに増加した場合、Ｃｏｘ−１の阻害は約８３パーセントを示し、Ｃｏｘ−２の阻害は約８４パーセントである。したがって、高い濃度では、Ｃｏｘ−２とＣｏｘ−１の比および選択性は制限されるようであった。これらの結果は、モリンダシトリフォリア果汁の所定の濃度において、Ｃｏｘ−２の阻害が６０パーセント近くである一方、Ｃｏｘ−１の阻害がわずか２０パーセントであったことを示す。従って、モリンダシトリフォリア果汁は、選択的なＣｏｘ−２阻害を示す。
【００３６】
加工されたモリンダシトリフォリア果汁がＣｏｘ−２阻害の選択性を示すのに加え、この研究はモリンダシトリフォリア果汁によるＣｏｘ−２選択性が濃度に感受性もしくは関連することも示唆する。この研究は、異なる濃度が酵素間で異なるレベルの選択性を生じたことを示す。モリンダシトリフォリア果汁が選択的にＣｏｘ−２を阻害する機構が不明なので、濃度の結果による違いの理由をこれらのデータに基づいて最終的に決定することはできない。しかし、モリンダシトリフォリア果汁の過剰濃度を用いた場合、Ｃｏｘ−２の選択性が減少することが明らかである。Ｃｏｘ−２の選択性は、ある意味では、過剰の、増加した濃度により弱められる。モリンダシトリフォリア果汁の増加した濃度は、Ｃｏｘ−１およびＣｏｘ−２双方の非選択的な阻害をもたらすであろう。これらの結果は、モリンダシトリフォリア果汁により、望ましくないＣｏｘ−１阻害を制限することが、濃度を適切に制限することにより達成されることを示唆する。したがって、本発明の少なくとも１つの態様に関しては、データはいくつかの状況では、「より少ない」モリンダシトリフォリア果汁が「より多い」阻害選択性を提供するという驚くべき結果を示唆する。
【実施例２】
【００３７】
この例では、人が、内部の炎症の原因となるかまたは新生物を生ずる創傷を有しているか、または、その人はＣｏｘ−２が過剰発現する他のいくつかの内部の生化学的反応を経験している。Ｃｏｘ−２の発現が腫瘍の促進に関与しているので1、完全に防止できないとしても、この人は、加工されたモリンダシトリフォリアを含む予め決められた量の食品を摂取することにより、腫瘍の進行を遅らすことができる。（1テネシー州、ナッシュビルのヴァンダービルト大学医療センターのＲａｙｍｏｎｄ  Ｎ．ＤｕＢｏｉｓ博士およびその同僚による）
【実施例３】
【００３８】
この例では、人がアルツハイマーをもたらす炎症の型を脳内で経験している。その個体は、処方箋なしの調剤を用いてアルツハイマーの進行を遅らせたいと望んでいる。アルツハイマーの広がりを遅らせるために、その個体は、加工されたモリンダシトリフォリアを含む予め決められた量の食品を摂取する。この人は、疾患進行が遅くなるまで、加工されたモリンダシトリフォリアを含む食品を断続的に摂取する。
【実施例４】
【００３９】
この例では、人が、結腸、食道、皮膚、肺、膀胱、胃、乳、頭部および頸部、前立腺、膵臓の癌、および分化型肝細胞癌腫を患っている。これらの癌に関係する症状を処置するために、この人は加工されたモリンダシトリフォリアを含む処方された量の食品を摂取する。この人は、癌の症状が少なくなるまで、または完全に処置されるまで、加工されたモリンダシトリフォリアを含む食品を断続的に摂取する。
【実施例５】
【００４０】
この例では、人が、結腸、食道、皮膚、肺、膀胱、胃、乳、頭部および頸部、前立腺、膵臓の癌、および分化型肝細胞癌腫に発展する増加する危険にある。これらの癌を予防するために、この人は加工されたモリンダシトリフォリアを含む処方された量の食品を摂取する。この人は、癌が充分に予防されるまで、または少なくとも進行が妨げられるまで、加工されたモリンダシトリフォリアを含む食品を断続的に摂取する。
【実施例６】
【００４１】
この例では、人が、炎症に起因する虚弱疾患を患っている。炎症を抑制または軽減し、これにより疾患の進行を処置または予防するために、この人は、治療的投与量で加工されたモリンダシトリフォリア果汁を断続的に摂取する。
【手続補正書】
【提出日】平成15年9月2日(2003.9.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物における疾患を処置および予防する方法であって、
予め選択された濃度の加工されたモリンダシトリフォリア果汁を含む製剤を前記哺乳動物に投与することを含み、ここで、前記予め選択された濃度のモリンダシトリフォリア果汁がＣｏｘ−１に比べＣｏｘ−２の阻害を最大化するように予め決められており、それにより炎症誘導疾患の症状を予防および処置する、方法。
【請求項２】
モリンダシトリフォリアが加工されている請求項１に記載の方法。
【請求項３】
モリンダシトリフォリアが液状の形態である請求項１に記載の方法。
【請求項４】
モリンダシトリフォリアが食品の成分として含まれる請求項１に記載の方法。
【請求項５】
モリンダシトリフォリアがカプセルの形態である請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記モリンダシトリフォリアの投与が、炎症誘導疾患の原因となるＣｏｘ−２関連プロスタグランジンの産生を阻害する一方、同時にＣｏｘ−１関連プロスタグランジンの産生をより少ない程度で阻害する、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記モリンダシトリフォリアがあらかじめ決められた濃度で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記モリンダシトリフォリアが他の食品の成分として含まれる請求項７に記載の方法。
【請求項９】
疾患を処置および予防する方法であって、
ある量のモリンダシトリフォリア果汁および果肉を得ること；
果汁から湿った果肉をろ過すること；
果汁を低温殺菌すること；
果汁を濃縮してＣｏｘ−１に比べてＣｏｘ−２の阻害を最大化するように予め決められた予め選択された濃度を得ること；および
摂取のために予め選択された投与量の前記モリンダシトリフォリア果汁を提供すること；
の工程を含み、ここで、一定時間後、前記モリンダシトリフォリア果汁の前記投与量を提供する前記工程が、Ｃｏｘ−１に比べてＣｏｘ−２の阻害を最大化する生理学的反応を起こし、それにより疾患に対して緩和作用を示す、方法。
【請求項１０】
モリンダシトリフォリア果汁が食品の成分として含まれる請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
Ｃｏｘ−２阻害に比べて望ましくないＣｏｘ−１阻害を最小化するように予め決められた量を投与する、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
疾患を処置および予防する方法であって、
ある量のモリンダシトリフォリア果汁および果肉を得ること；
果汁から湿った果肉をろ過すること、ここで、湿った果肉は、重量で１０％から４０％の繊維を含み；
果肉を低温殺菌すること；
果汁を濃縮してＣｏｘ−１に比べてＣｏｘ−２の阻害を最大化するように予め決められた予め選択された濃度を得ること；および
摂取のために予め選択された治療的投与量の前記モリンダシトリフォリア果肉を提供すること；
の工程を含み、ここで、一定時間後、前記投与量がＣｏｘ−１に比べてＣｏｘ−２の阻害を最大化する生理学的反応を起こし、それにより疾患に対して緩和作用を提供する、方法。
【請求項１３】
モリンダシトリフォリア果肉が食品の成分として含まれる請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
Ｃｏｘ−２阻害に比べて望ましくないＣｏｘ−１阻害を最小化するようにあらかじめ決められた量を投与する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
哺乳動物における一定の疾患および疾病の症状を緩和し、予防し、さらには増殖を阻害する方法であって、
少なくとも２ヶ月間空腹時に１日２回少なくとも２オンスの予め選択された濃度の加工されたモリンダシトリフォリア果汁を患者に投与する工程を含み、患者に投与する前記工程が、予め選択された濃度の加工されたモリンダシトリフォリアによってＣｏｘ−１に比べてＣｏｘ−２の阻害を最大化する生理学的作用を有する、方法。
【請求項１６】
前記疾患が、結腸癌、食道癌、皮膚癌、肺癌、膀胱癌、胃癌、乳癌、頭部および頸部の癌、前立腺癌、膵臓癌、分化型肝細胞癌腫、アルツハイマー病、神経変性疾患、炎症誘導疾患、心疾患、骨粗鬆症および糖尿病からなる群より選ばれるものを含む、請求項１５に記載の方法。
【手続補正書】
【提出日】平成16年4月8日(2004.4.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物における疾患を処置および予防する組成物であって、
予め選択された濃度の加工されたモリンダシトリフォリア果汁を含み、ここで、前記予め選択された濃度のモリンダシトリフォリア果汁がＣｏｘ−１に比べＣｏｘ−２の阻害を最大化するように予め決められており、それにより炎症誘導疾患の症状を予防および処置するための組成物。
【請求項２】
モリンダシトリフォリアが加工されている請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
モリンダシトリフォリアが液状の形態である請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
モリンダシトリフォリアが食品の成分として含まれる請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
モリンダシトリフォリアがカプセルの形態である請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記モリンダシトリフォリアが、炎症誘導疾患の原因となるＣｏｘ−２関連プロスタグランジンの産生を阻害する一方、同時にＣｏｘ−１関連プロスタグランジンの産生をより少ない程度で阻害する、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記モリンダシトリフォリアがあらかじめ決められた濃度で投与される、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記モリンダシトリフォリアが他の食品の成分として含まれる請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
疾患を処置および予防する組成物であって、
ある量のモリンダシトリフォリア果汁および果肉を得ること；
果汁から湿った果肉をろ過すること；
果汁を低温殺菌すること； および
果汁を濃縮してＣｏｘ−１に比べてＣｏｘ−２の阻害を最大化するように予め決められた予め選択された濃度を得ることにより製造され、
摂取のために予め選択された投与量の前記モリンダシトリフォリア果汁を含み、ここで、前記モリンダシトリフォリア果汁が、Ｃｏｘ−１に比べてＣｏｘ−２の阻害を最大化する生理学的反応を起こし、それにより疾患に対して緩和作用を示す組成物。
【請求項１０】
モリンダシトリフォリア果汁が食品の成分として含まれる請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
Ｃｏｘ−２阻害に比べて望ましくないＣｏｘ−１阻害を最小化するように予め決められた量を投与するための、請求項９に記載の組成物。
【請求項１２】
疾患を処置および予防する組成物であって、
ある量のモリンダシトリフォリア果汁および果肉を得ること；
果汁から湿った果肉をろ過すること、ここで、湿った果肉は、重量で１０％から４０％の繊維を含み；
果肉を低温殺菌すること；および
果肉を濃縮してＣｏｘ−１に比べてＣｏｘ−２の阻害を最大化するように予め決められた予め選択された濃度を得ることにより製造され、
摂取のために予め選択された治療的投与量の前記モリンダシトリフォリア果肉を含み、ここで、モリンダシトリフォリア果肉がＣｏｘ−１に比べてＣｏｘ−２の阻害を最大化する生理学的反応を起こし、それにより疾患に対して緩和作用を提供する組成物。
【請求項１３】
モリンダシトリフォリア果肉が食品の成分として含まれる請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
Ｃｏｘ−２阻害に比べて望ましくないＣｏｘ−１阻害を最小化するようにあらかじめ決められた量を投与するための、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１５】
哺乳動物における一定の疾患および疾病の症状を緩和し、予防し、さらには増殖を阻害する組成物であって、
少なくとも２ヶ月間空腹時に１日２回少なくとも２オンスの予め選択された濃度の加工されたモリンダシトリフォリア果汁を患者に投与するための組成物であり、患者に投与したときに、予め選択された濃度の加工されたモリンダシトリフォリアによってＣｏｘ−１に比べてＣｏｘ−２の阻害を最大化する生理学的作用を有する組成物。
【請求項１６】
前記疾患が、結腸癌、食道癌、皮膚癌、肺癌、膀胱癌、胃癌、乳癌、頭部および頸部の癌、前立腺癌、膵臓癌、分化型肝細胞癌腫、アルツハイマー病、神経変性疾患、炎症誘導疾患、心疾患、骨粗鬆症および糖尿病からなる群より選ばれるものを含む、請求項１５に記載の組成物。                                            
【国際調査報告】
2005511479.tif 000002