(57)【要約】非経口投与に適した、2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸またはその生理学的に許容されうる塩の医薬組成物は、2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸またはその生理学的に許容されうる塩とpHを約6〜約11に保持するための緩衝液との水性製剤を含む。本発明の医薬組成物は、加熱殺菌後に溶液中に生じる粒状物質の量を減少させる。本発明はさらに、30日を超える保存寿命を有していて、非経口投与に対して有用な、2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸またはその生理学的に許容されうる塩の医薬組成物の製造法を含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アロステリック修飾因子化合物と安定化化合物とを含む安定化された医薬組成物。
【請求項２】
前記アロステリックエフェクター化合物が、2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の少なくとも1種の生理学的に許容されうる塩である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記医薬組成物が、25μm以上の粒径の粒子を1ミリリットル当たり3粒子以下、および10μm以上の粒径の粒子を1ミリリットル当たり25粒子以下含む、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記組成物が、25μm以上の粒径の粒子を1容器当たり600粒子以下、および10μm以上の粒径の粒子を1容器当たり6000粒子以下含む、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記医薬組成物が、25μm以上の粒径の粒子を1ミリリットル当たり2粒子以下、および10μm以上の粒径の粒子を1ミリリットル当たり12粒子以下含む、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記組成物が、25μm以上の粒径の粒子を1容器当たり300粒子以下、および10μm以上の粒径の粒子を1容器当たり25粒子以下含む、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項７】
約15ミリモル/L〜約120ミリモル/Lの範囲の、ある量の2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の少なくとも1種の生理学的に許容されうる塩を含む、請求項２記載の医薬組成物。
【請求項８】
約45ミリモル/L〜約90ミリモル/Lの範囲の、ある量の2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の少なくとも1種の生理学的に許容されうる塩を含む、請求項２記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記安定化剤が、オルトリン酸、オルトリン酸の生理学的に許容されうる塩、クエン酸、クエン酸の生理学的に許容されうる塩、トロメタミン、メグルミン、アミノ酸、ジペプチド、トリペプチド、グリシン、リシン、アルギニン、グリシルグリシン、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項１０】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸が、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、亜鉛塩、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される生理学的に許容されうる塩として存在する、請求項２記載の医薬組成物。
【請求項１１】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸が、アミン基を含有する化合物の生理学的に許容されうる塩として存在する、請求項２記載の医薬組成物。
【請求項１２】
アミン基を含有する前記化合物が、リシン、ヒドロキシリシン、ヒスチジン、アルギニン、オルニチン、トロメタミン、メグルミン、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される、請求項１１記載の医薬組成物。
【請求項１３】
ヘモグロビンをアロステリックに修飾して酸素平衡が遊離酸素のほうにシフトすることで引き起こされる疾病を治療するのに有効なある量の2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸を含む、請求項２記載の医薬組成物。
【請求項１４】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の、対イオンを有する生理学的に許容されうる塩を含み、前記対イオンが安定化剤として作用する、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記医薬組成物が無菌である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項１６】
希釈剤をさらに含み、前記希釈剤が、水、塩水、デキストロース溶液、乳酸化リンゲル液、マンニトールの水溶液、グルコースポリマーの水溶液、変性グルコースポリマーの水溶液、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項１７】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の少なくとも1種の生理学的に許容されうる塩と安定化剤とを合わせる工程を含む、2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸を含んだ医薬組成物の製造法。
【請求項１８】
前記2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の少なくとも1種の生理学的に許容されうる塩が希釈剤中に供給される、請求項１７記載の製造法。
【請求項１９】
前記希釈剤が約6.6より高いpHを有する、請求項１８記載の製造法。
【請求項２０】
前記安定化剤を、医薬組成物中における粒状物質の生成を最小限に抑えるに足る量にて加える、請求項１７記載の製造法。
【請求項２１】
前記安定化剤により、25μm以上の粒径の粒子を1ミリリットル当たり3粒子以下、および10μm以上の粒径の粒子を1ミリリットル当たり25粒子以下含む医薬組成物が保持される、請求項１７記載の製造法。
【請求項２２】
前記安定化剤により、25μm以上の粒径の粒子を1ミリリットル当たり6粒子以下、および10μm以上の粒径の粒子を1ミリリットル当たり60粒子以下含む医薬組成物が保持される、請求項１７記載の製造法。
【請求項２３】
前記安定化剤により、医薬組成物のpHが約6.5〜約11に保持される、請求項１７記載の製造法。
【請求項２４】
前記安定化剤により、医薬組成物のpHが約6.5〜約9.0に保持される、請求項１７記載の製造法。
【請求項２５】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の少なくとも1種の生理学的に許容されうる塩が、約15ミリモル/L〜約120ミリモル/Lの範囲の量にて加えられる、請求項１７記載の製造法。
【請求項２６】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の少なくとも1種の生理学的に許容されうる塩が、約45ミリモル/L〜約90ミリモル/Lの範囲の量にて加えられる、請求項１７記載の製造法。
【請求項２７】
前記緩衝剤が、オルトリン酸、オルトリン酸の生理学的に許容されうる塩、クエン酸、クエン酸の生理学的に許容されうる塩、トロメタミン、メグルミン、アミノ酸、ジペプチド、トリペプチド、グリシン、リシン、アルギニン、グリシルグリシン、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される、請求項１７記載の製造法。
【請求項２８】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸が、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、亜鉛塩、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される生理学的に許容されうる塩として存在する、請求項１７記載の製造法。
【請求項２９】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸が、リシン、ヒドロキシリシン、ヒスチジン、アルギニン、オルニチン、プロトン化トロメタミン、メグルミン、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される生理学的に許容されうる塩として存在する、請求項１７記載の製造法。
【請求項３０】
医薬組成物を殺菌する工程をさらに含む、請求項１７記載の製造法。
【請求項３１】
前記殺菌工程が加熱殺菌によって行われる、請求項３０記載の製造法。
【請求項３２】
無菌の容器中に医薬組成物を無菌充填することをさらに含む、請求項１７記載の製造法。
【請求項３３】
前記希釈剤が、水、塩水、デキストロース溶液、乳酸化リンゲル液、マンニトールの水溶液、グルコースポリマーの水溶液、変性グルコースポリマーの水溶液、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される、請求項１８記載の製造法。
【請求項３４】
ヘモグロビンをアロステリックに修飾する必要がある患者に請求項１記載の安定化された医薬組成物を投与することを含む、ヘモグロビンをアロステリックに修飾する方法。
【請求項３５】
血液酸素レベル依存性の磁気共鳴画像信号の測定法であって、
a)  請求項１記載の安定化された医薬組成物を投与すること；および
b)  血液酸素レベル依存性の磁気共鳴画像スキャンを行うこと、これによって前記血液酸素レベル依存性の磁気共鳴画像信号が測定される；
を含む前記測定法。
【請求項３６】
電離放射線の細胞傷害効果に対して細胞の感受性を増大させる方法であって、
a)  請求項１記載の安定化された医薬組成物と細胞とを接触させて細胞を酸素処理すること；および
b)  電離放射線の効果的な細胞傷害用量を細胞に投与すること；
を含む前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アロステリックエフェクター化合物またはそれらの生理学的に許容されうる塩を含有する医薬製剤に関する。さらに詳細には、本発明は、2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸またはその生理学的に許容されうる塩を含有する安定な組成物を含む。
【背景技術】
【０００２】
特定の化合物である2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸を含めた一群の化合物がヘモグロビンのアロステリック修飾因子である、ということが見出されている。こうした特性は、ヘモグロビンをアロステリックに修飾するために、血液を保存するために、血液中のヘモグロビンが低い酸素親和性状態の方向にアロステリックに修飾されるよう血液を処理するために、および赤血球の酸素親和性を回復するために本化合物を使用するインビトロ法とインビボ法において有用である。
【０００３】
ヘモグロビンをアロステリックに修飾できるということは、ヘモグロビンをアロステリックに修飾して酸素平衡が遊離酸素のほうにシフトすることで引き起こされる種々の疾患や疾病を治療する上で該化合物が有用となりうるということである。このような障害としては、全身低体温症もしくは組織低体温症、低酸素症もしくは低血圧症、創傷、脳損傷、糖尿病性潰瘍、慢性下腿潰瘍、床ずれ、組織移植、卒中虚血もしくは脳虚血、虚血もしくは酸素欠乏、急性呼吸窮迫症候群や慢性閉塞性肺障害を含めた呼吸器障害、外科的失血、敗血症、多臓器不全(multi-system organ failure)、正常血液量の血液希釈進行(normovolemic hemodilution procedures)、一酸化炭素中毒、バイパス手術、発癌性腫瘍、および胎児の酸素欠乏等があるが、これらに限定されない。該化合物は、上記の疾病に罹患しているか又は苦しんでいる患者に充分な量のアロステリックエフェクター化合物を投与する工程を含む方法において有用である。発癌性腫瘍の場合、該化合物は、単独でも、また電離放射線と併用する放射線感受性増強物質としても有用である。該化合物はさらに、こうしたアロステリック修飾特性により、特定の画像検査法(特に、血液酸素レベル依存性のMRI)に対しても、そして腫瘍の酸素処理の決定と、腫瘍の酸素処理に基づいて放射線処置を開始するための最適時間の決定とを含んだ診断法に対しても有用になりうる。2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸とその生理学的に許容しうる塩に対する製造と使用が、これまでに、米国特許第5,049,695号、第5,122,539号、第5,290,803号、第5,432,191号、第5,525,630号、第5,648,375号、第5,661,182号、第5,677,330号、第5,705,521号、第5,872,888号、および第5,927,283号、ならびに2002年2月25日付け出願中の米国特許出願第10/082,130号に開示されている。これらの特許はさらに、構造的に類似した化合物の製造と使用についても記載している。密接に関連した化合物を開示している他の特許としては、米国特許第5,248,785号と第5,731,454号がある。これらの特許と特許出願、ならびにUSP25<788>を含めた本明細書に引用の他の全ての特許、特許出願、および刊行物のそれぞれを参照により本明細書に含める。本明細書にて使用しているように、[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸とその生理学的に許容されうる塩を“アロステリック修飾化合物(allosteric modifying compound)”と総称する。静脈注射、連続的輸液、または他の非経口経路用の、アロステリック修飾化合物の最も簡便な形態は、混合(mixing)、混合(admixing)、濾過、または他のステップを施すことなくいつでも投与可能な無菌状態の形態である。
【発明の概要】
【０００４】
本発明は、アロステリック修飾因子化合物(an allosteric modifier compound)と安定化化合物(a stabilizing compound)とを含む安定化された医薬組成物を提供する。
本発明において有用なアロステリックエフェクター化合物は、式
【０００５】
【化１】
2005532288.tif 000002
【０００６】
(式中、R1-5は、水素、ハロゲン、または置換もしくは非置換C1-3アルキル基であってよく、同一であっても異なっていてもよく；R6-7はそれぞれ、水素またはメチルであってよく、同一であっても異なっていてもよく；R8は、水素、置換もしくは非置換のC1-3アルキル基、または塩カチオンであってよく；XとZは、CH2、NH、またはOである)を有する化合物；
式
【０００７】
【化２】
2005532288.tif 000003
【０００８】
(式中、XとZはそれぞれ、CH2、CO、NH、またはOであってよく、YはCOまたはNHであってよく、但し、XとYとZは全て互いに異なっていなければならず；R2-6は、水素、ハロゲン、または置換もしくは非置換C1-3アルキル基であってよく、同一であっても異なっていてもよく；R7-8は、水素、メチル、エチル、またはR7とR8を連結して形成される環中のアルキル基であってよく；R9は、水素、低級アルキル、または塩カチオンであってよい)を有する化合物；
式
【０００９】
【化３】
2005532288.tif 000004
【００１０】
(式中、R3-6は、水素、ハロゲン、置換もしくは非置換C1-3アルキル基、またはC1-3エーテルもしくはC1-3エステルであってよく、これらの成分は同一であっても異なっていてもよく、あるいはR3-6のうちの2つを組み込んで形成される芳香族環もしくは脂肪族環のアルキル成分であってもよく；R1は、フェニル環上のどの位置に結合していてもよく；部位R7-8は、水素、ハロゲン、メチル、またはエチルであってよく、これらの成分は同一であっても異なっていてもよく、あるいはR7とR8を連結して形成される環中のアルキル基であってもよく；R9は、水素、ハロゲン、C1-3低級アルキル、または塩カチオンであってよい)を有する化合物；
式
【００１１】
【化４】
2005532288.tif 000005
【００１２】
(式中、R1は、フェニル環上のどの位置に結合していてもよく；部位R7-8は、水素、ハロゲン、メチル、またはエチルであってよく、これらの成分は同一であっても異なっていてもよく、あるいはR7とR8を連結して形成される環中のアルキル基であってもよく；R2は、置換もしくは非置換芳香族化合物、置換もしくは非置換アルキル環化合物、または置換もしくは非置換フタルイミド化合物と定義され；Xはカルボキシルであり；Yは窒素であり；R2は、XとYの両方に結合することでフタルイミド化合物を形成し；XとYとZは、CH2、NH、O、またはNであってよく、但し、それぞれが互いに異なっている)を有する化合物；
式
【００１３】
【化５】
2005532288.tif 000006
【００１４】
(式中、R2、R3、R4、R5、およびR6は、水素、ハロゲン、またはアルキル基であってよく、同一であっても異なっていてもよく；R7とR8は、水素またはメチル基であってよく、同一であっても異なっていてもよく；R9成分は水素または塩カチオンである)を有する化合物；
式
【００１５】
【化６】
2005532288.tif 000007
【００１６】
(式中、R2は、置換もしくは非置換芳香族化合物、置換もしくは非置換アルキル環化合物、またはXとYを組み込んだ置換もしくは非置換フタルイミド化合物であり；Xはカルボニルであり；Yは窒素であり；R2は、XとYの両方に結合することでフタルイミド化合物を形成し；XとYとZは、CH2、NH、S、SO2、CO、O、またはNであり、但し、XとYとZは、それぞれが互いに異なっており；R1は、フェニル環上のどの位置に結合していてもよく；R3とR4は、水素、ハロゲン、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ネオペンチル、ブチル、または置換もしくは非置換アリール基であり、これらの成分は、同一であっても異なっていてもよく、あるいはR3とR4を連結して形成される脂肪族環の一部としてのアルキル成分であってもよく；R5は、水素、ハロゲン、C1-3低級アルキル、または塩カチオンである)を有する化合物；
式
【００１７】
【化７】
2005532288.tif 000008
【００１８】
〔式中、Aは、一緒に結合した2つ〜4つの化学成分(chemical moieties)を含む化学ブリッジ(a chemical bridge)であり；A中の前記化学成分が、CO、O、S、SO2、NH、NR9(式中、R9はC1-6アルキル基である)、CH2、CH、およびCからなる群から選択され、但し、Aが、互いに隣接した2つの同一のCH成分およびC成分を含有してアルケンまたはアルキンを形成する場合を除いて、A中の化学成分はそれぞれ互いに異なっており；R1-5の少なくとも1つが、化学式
【００１９】
【化８】
2005532288.tif 000009
【００２０】
(式中、nは0〜5であり；R10とR11は、水素、ハロゲン、C1-12アルキル基、カルボン酸、エステル、芳香族基、またはヘテロ芳香族基からなる群から選択され、これらの成分は、同一であっても異なっていてもよく、あるいはR10とR11を連結して形成される脂肪族環の一部としてのアルキル成分であってもよく；R12は、水素、ハロゲン、塩カチオン、金属、またはC1-6アルキル基である)を有する化合物で置換されており；R1-5成分の残りとR6-8成分は、水素、ハロゲン、C1-6アルキル基、C1-6エーテル、C1-6エステル、芳香族成分、ヘテロ芳香族成分、およびフェニル基上の2つの部位を連結して形成される脂肪族環のアルキル成分からなる群から選択される〕を有する化合物；
式
【００２１】
【化９】
2005532288.tif 000010
【００２２】
〔式中、R1とR2はそれぞれ、置換もしくは非置換芳香族化合物、置換もしくは非置換ヘテロ芳香族化合物、置換もしくは非置換アルキル環化合物、置換もしくは非置換ヘテロアルキル環化合物、または置換もしくは非置換フタルイミド化合物であり；R1とR2は、同一であっても異なっていてもよく；Aは、R1とR2との間で一緒に結合した3つの化学成分を含む化学ブリッジであり；A中の前記化学成分が、CO、O、S、SO2、NH、NR3(式中、R3はC1-6アルキル基である)、NR4(式中、R4は、R1またはR2と一緒になって形成されるフタルイミド化合物の一部としての2つのカルボニルを含む)、CH2、CH、およびCからなる群から選択され；R1とR2の少なくとも一方が、化学式
【００２３】
【化１０】
2005532288.tif 000011
【００２４】
(式中、nは0〜5であり；R5とR6は、水素、ハロゲン、置換もしくは非置換C1-12アルキル基、カルボン酸基、エステル基、置換もしくは非置換芳香族基、および置換もしくは非置換ヘテロ芳香族基からなる群から選択され、これらの成分は、同一であっても異なっていてもよく、あるいはR5とR6が連結して形成される脂肪族環の一部のアルキル成分であってもよく；R7は、水素、ハロゲン、塩カチオン、金属、または置換もしくは非置換C1-6アルキル基である)を有する化合物で置換されている〕を有する化合物；
式
【００２５】
【化１１】
2005532288.tif 000012
【００２６】
〔式中、R1とR2はそれぞれ、置換もしくは非置換芳香族化合物、置換もしくは非置換ヘテロ芳香族化合物、置換もしくは非置換アルキル環化合物、置換もしくは非置換ヘテロアルキル環化合物、または置換もしくは非置換フタルイミド化合物であり；R1とR2は、同一であっても異なっていてもよく；Aは、R1とR2との間で一緒に結合した2つ〜4つの化学成分を含む化学ブリッジであり；A中の前記化学成分が、CO、O、S、SO2、NH、NR3(式中、R3はC1-6アルキル基である)、NR4(式中、R4は、R1またはR2と一緒になって形成されるフタルイミド化合物の一部としての2つのカルボニルを含む)、CH2、CH、およびCからなる群から選択され、但し、Aが、互いに隣接した2つの同一のCH成分およびC成分を含有してアルケンまたはアルキンを形成する場合を除いて、A中の化学成分はそれぞれ互いに異なっており；R1とR2の少なくとも一方が、化学式
【００２７】
【化１２】
2005532288.tif 000013
【００２８】
(式中、nは0〜5であり；R5とR6は、水素、ハロゲン、置換もしくは非置換C1-12アルキル基、カルボン酸基、エステル基、置換もしくは非置換芳香族基、および置換もしくは非置換ヘテロ芳香族基からなる群から選択され、これらの成分は、同一であっても異なっていてもよく、あるいはR5とR6が連結して形成される脂肪族環の一部のアルキル成分であってもよく；R7は、水素、ハロゲン、塩カチオン、金属、または置換もしくは非置換C1-6アルキル基である)を有する化合物で置換されている〕を有する化合物；および/または
式
【００２９】
【化１３】
2005532288.tif 000014
【００３０】
(式中、R1は、置換されていてもよいフェニル、アダマンチル、ナフチル、およびインダニルからなる群から選択され；R2-3は、R2とR3が連結して形成されるC3-6アルキル環のアルキル成分であり；R4は、水素、一価の塩カチオン、またはC1-3低級アルキルである)を有する化合物である。
【００３１】
幾つかの実施態様においては、アロステリックエフェクター化合物は、2-[4-(((3,5-ジメチルアニリノ)カルボニル)メチル)フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または前記化合物の生理学的に許容されうる塩である。
【００３２】
好ましい実施態様においては、アロステリックエフェクター化合物は、2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の少なくとも1種の生理学的に許容されうる塩である。
【００３３】
幾つかの実施態様においては、本発明の組成物は、USP25<788>に従ったライトオブスキュレーション(light obscuration)による測定にて、25μm以上の粒径の粒子を1ミリリットル当たり3粒子以下、および10μm以上の粒径の粒子を1ミリリットル当たり25粒子以下含み、他の実施態様においては、本発明の組成物は、USP25<788>に従ったライトオブスキュレーションによる測定にて、25μm以上の粒径の粒子を1容器当たり600粒子以下、および10μm以上の粒径の粒子を1容器当たり6000粒子以下含む。
【００３４】
本発明の組成物は、約15ミリモル/L〜約120ミリモル/Lの量のアロステリックエフェクター化合物を含むのが好ましい。
本発明の安定化剤は、オルトリン酸、オルトリン酸の生理学的に許容されうる塩、クエン酸、クエン酸の生理学的に許容されうる塩、トロメタミン、メグルミン、アミノ酸、ジペプチド、トリペプチド、グリシン、リシン、アルギニン、グリシルグリシン、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される。
【００３５】
本発明のアロステリックエフェクター化合物は、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、亜鉛塩、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される生理学的に許容されうる塩として存在する。さらなる実施態様においては、生理学的に許容されうる塩は、アミン基を含有する化合物の塩である。他の実施態様においては、遊離のアミノ基を含有する化合物は、リシン、ヒドロキシリシン、ヒスチジン、アルギニン、オルニチン、プロトン化トロメタミン、メグルミン、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される。
【００３６】
本発明の組成物は、ヘモグロビンをアロステリックに修飾して酸素平衡が遊離酸素のほうにシフトすることで引き起こされる疾病を治療するのに有効なある量の2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸を含有する。幾つかの実施態様においては、アロステリックエフェクター化合物の生理学的に許容されうる塩は対イオンを含み、これが安定化剤として作用する。
【００３７】
幾つかの実施態様においては、本発明の組成物は無菌である。他の実施態様においては、本発明の組成物は、水、塩水、デキストロース溶液、乳酸化リンゲル液、マンニトールの水溶液、またはこれらの組み合わせ物等の希釈剤を含む。
【００３８】
本発明はさらに、アロステリックエフェクター化合物または前記アロステリックエフェクター化合物の少なくとも１種の生理学的に許容されうる塩と安定化剤とを合わせる工程を含む、アロステリックエフェクター化合物を含んだ医薬組成物の製造法を提供する。幾つかの実施態様においては、アロステリックエフェクター化合物が希釈剤中に供給され、そしてさらなる実施態様においては、希釈剤は約6.6より高いpHを有する。
【００３９】
幾つかの実施態様においては、前記安定化剤を、医薬組成物中における粒状物質の生成を最小限に抑えるに足る量(例えば、25μm以上の粒径の粒子を1ミリリットル当たり3粒子以下、および10μm以上の粒径の粒子を1ミリリットル当たり25粒子以下含む組成物を保持する量；あるいは25μm以上の粒径の粒子を1容器当たり600粒子以下、および10μm以上の粒径の粒子を1容器当たり6000粒子以下含む組成物を保持する量)にて加える。幾つかの実施態様においては、安定化剤は、組成物のpHを約6.5〜約11に保持する。他の実施態様においては、アロステリックエフェクター化合物を約15ミリモル/L〜約120ミリモル/Lの範囲の量にて加える。
【００４０】
他の実施態様においては、使用される対イオンと安定化剤は、本発明の安定化された組成物に関して記載した物質である。
幾つかの実施態様においては、本発明の製造法はさらに、例えば、加熱殺菌によって、あるいは無菌の容器中に組成物を無菌充填することによって組成物を殺菌することを含む。
【本発明の詳細な記述】
【００４１】
本発明は、アロステリックエフェクター化合物の医薬として安定化された組成物を含む。本明細書で使用している“医薬として安定化されたアロステリックエフェクター化合物”とは、実質的な粒状物質が生じることなく保持されるアロステリックエフェクター化合物を表わしている。本明細書で使用している“実質的な粒状物質が生成しない”または“粒状物質の生成を最小限に抑える”とは、該化合物を、米国薬局方モノグラフ<788>(USP<788>)に規定されているような、非経口投与に適したものにする粒状物質のレベルを表わしている。(米国薬局方協会改正委員会、米国薬局方、(第25版))。こうした安定化は、アロステリックエフェクター化合物の送達が可能な医薬製剤をもたらす１種以上の薬剤を、アロステリックエフェクター化合物と共に加えることによって果たすことができる。幾つかの実施態様においては、医薬として安定化された組成物は、組成物が調製されるか、あるいは組成物が加えられる希釈剤を含む。
【００４２】
本発明の医薬製剤において使用できるアロステリックエフェクター化合物は、多くの異なったカテゴリーに分類される：
グループI：一般構造式
【００４３】
【化１４】
2005532288.tif 000015
【００４４】
を有する2-[4-((アリール)アセトアミド)フェノキシ]-2-メチルプロピオン酸化合物；
グループII：一般構造式
【００４５】
【化１５】
2005532288.tif 000016
【００４６】
を有する2-[4-(((アリール)オキシ)カルボニル)アミノ)フェノキシ]-2-メチルプロピオン酸化合物；
グループIII：一般構造式
【００４７】
【化１６】
2005532288.tif 000017
【００４８】
を有する2-[4-(((アリール)アミノ)カルボニル)メチル)フェノキシ]-2-メチルプロピオン酸化合物；
グループIV：一般構造式
【００４９】
【化１７】
2005532288.tif 000018
【００５０】
を有する2-[4-“-(((アリール)オキシ)カルボニル)アミノ)フェノキシ]-2-メチルプロピオン酸化合物。
式
【００５１】
【化１８】
2005532288.tif 000019
【００５２】
で示される化合物の1つのサブセットにおいて、XとZはそれぞれCOまたはCH2であってよく、但し、XがCOであるときは、ZがCH2であり、XがCH2であるときは、ZがCOである。このサブセットの化合物は、下記のような2つのさらなるグループに適切に分けることができる：
グループV：一般構造式
【００５３】
【化１９】
2005532288.tif 000020
【００５４】
を有する2-[4-(((アリロイル)アミノ)メチル)フェノキシ]-2-メチルプロピオン酸化合物；
グループVI：一般構造式
【００５５】
【化２０】
2005532288.tif 000021
【００５６】
を有する2-[4-((((アリール)メチル)アミノ)カルボニル)フェノキシ]-2-メチルプロピオン酸化合物。
グループVIIは一般構造式
【００５７】
【化２１】
2005532288.tif 000022
【００５８】
を有する。
本発明の画像増強剤は、ヘモグロビンにアロステリックに作用してオキシヘモグロビン/デオキシヘモグロゴン比の変化を引き起こすことができる。本発明において有用なアロステリックエフェクター化合物としては、
【００５９】
【化２２】
2005532288.tif 000023
【００６０】
(式中、R1-5は、水素、ハロゲン、または置換もしくは非置換C1-3アルキル基であってよく、同一であっても異なっていてもよく；R6-7はそれぞれ、水素またはメチルであってよく、同一であっても異なっていてもよく；R8は、水素、置換もしくは非置換のC1-3アルキル基、または塩カチオンであってよく；XとZは、CH2、NH、またはOである)を含めて、米国特許第5,049,695号に開示の化合物がある。本発明において有用な他のアロステリックエフェクター化合物(米国特許第5,122,539号に開示)としては、
【００６１】
【化２３】
2005532288.tif 000024
【００６２】
(式中、XとZはそれぞれ、CH2、CO、NH、またはOであってよく、YはCOまたはNHであってよく、但し、XとYとZは全て互いに異なっていなければならず；R2-6は、水素、ハロゲン、または置換もしくは非置換C1-3アルキル基であってよく、同一であっても異なっていてもよく；R7-8は、水素、メチル、エチル、またはR7とR8を連結して形成される環中のアルキル基であってよく；R9は、水素、低級アルキル、または塩カチオンであってよい)がある。
【００６３】
本発明において有用なアロステリックエフェクター化合物としてはさらに、
【００６４】
【化２４】
2005532288.tif 000025
【００６５】
(式中、R3-6は、水素、ハロゲン、置換もしくは非置換C1-3アルキル基、またはC1-3エーテルもしくはC1-3エステルであってよく、これらの成分は同一であっても異なっていてもよく、あるいはR3-6のうちの2つを組み込んで形成される芳香族環もしくは脂肪族環のアルキル成分であってもよく；R1は、フェニル環上のどの位置に結合していてもよく；部位R7-8は、水素、ハロゲン、メチル、またはエチルであってよく、これらの成分は同一であっても異なっていてもよく、あるいはR7とR8を連結して形成される環中のアルキル基であってもよく；R9は、水素、ハロゲン、C1-3低級アルキル、または塩カチオンであってよい)を含めて、米国特許第5,248,785号と米国特許第5,250,701号に開示の化合物が含まれる。
【００６６】
本発明において有用なアロステリックエフェクター化合物としてはさらに、
【００６７】
【化２５】
2005532288.tif 000026
【００６８】
(式中、R1は、米国特許第5,248,785号に関連して前述したテール構造体(a tail structure)であり；R2は、置換もしくは非置換芳香族化合物、置換もしくは非置換アルキル環化合物、または置換もしくは非置換フタルイミド化合物と定義され；Xはカルボキシルであり；Yは窒素であり；R2は、XとYの両方に結合することでフタルイミド化合物を形成し；XとYとZは、CH2、NH、O、またはNであってよく、但し、それぞれが互いに異なっている)を含めて、米国特許第5,290,803号に開示の化合物が含まれる。
【００６９】
本発明において有用なアロステリックエフェクター化合物としてはさらに、
【００７０】
【化２６】
2005532288.tif 000027
【００７１】
(式中、R2、R3、R4、R5、およびR6は、水素、ハロゲン、またはアルキル基であってよく、同一であっても異なっていてもよく；R7とR8は、水素またはメチル基であってよく、同一であっても異なっていてもよく；R9成分は水素または塩カチオンである)を含めて、米国特許第5,382,680号に開示の化合物が含まれる。
【００７２】
本発明において有用なアロステリックエフェクター化合物としてはさらに、
【００７３】
【化２７】
2005532288.tif 000028
【００７４】
(式中、R2は、置換もしくは非置換芳香族化合物、置換もしくは非置換アルキル環化合物、またはXとYを組み込んだ置換もしくは非置換フタルイミド化合物であり；Xはカルボニルであり；Yは窒素であり；R2は、XとYの両方に結合することでフタルイミド化合物を形成し；XとYとZは、CH2、NH、S、SO2、CO、O、またはNであり、但し、XとYとZは、それぞれが互いに異なっており；R1は、フェニル環上のどの位置に結合していてもよく；R3とR4は、水素、ハロゲン、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ネオペンチル、ブチル、または置換もしくは非置換アリール基であり、これらの成分は、同一であっても異なっていてもよく、あるいはR3とR4を連結して形成される脂肪族環の一部としてのアルキル成分であってもよく；R5は、水素、ハロゲン、C1-3低級アルキル、または塩カチオンである)を含めて、米国特許第5,432,191号に開示の化合物が含まれる。
【００７５】
本発明において有用なアロステリックエフェクター化合物としてはさらに、
【００７６】
【化２８】
2005532288.tif 000029
【００７７】
〔式中、Aは、一緒に結合した2つ〜4つの化学成分を含む化学ブリッジであり；A中の前記化学成分が、CO、O、S、SO2、NH、NR9(式中、R9はC1-6アルキル基である)、CH2、CH、およびCからなる群から選択され、但し、Aが、互いに隣接した2つの同一のCH成分およびC成分を含有してアルケンまたはアルキンを形成する場合を除いて、A中の化学成分はそれぞれ互いに異なっており；R1-5の少なくとも1つが、化学式
【００７８】
【化２９】
2005532288.tif 000030
【００７９】
(式中、nは0〜5であり；R10とR11は、水素、ハロゲン、C1-12アルキル基、カルボン酸、エステル、芳香族基、またはヘテロ芳香族基からなる群から選択され、これらの成分は、同一であっても異なっていてもよく、あるいはR10とR11を連結して形成される脂肪族環の一部としてのアルキル成分であってもよく；R12は、水素、ハロゲン、塩カチオン、金属、またはC1-6アルキル基である)を有する化合物で置換されており；R1-5成分の残りとR6-8成分は、水素、ハロゲン、C1-6アルキル基、C1-6エーテル、C1-6エステル、芳香族成分、ヘテロ芳香族成分、およびフェニル基上の2つの部位を連結して形成される脂肪族環のアルキル成分からなる群から選択される〕を含めて、米国特許第5,591,892号に開示の化合物が含まれる。
【００８０】
本発明において有用なアロステリックエフェクター化合物としてはさらに、式R1-A-R2〔式中、R1とR2はそれぞれ、置換もしくは非置換芳香族化合物、置換もしくは非置換ヘテロ芳香族化合物、置換もしくは非置換アルキル環化合物、置換もしくは非置換ヘテロアルキル環化合物、または置換もしくは非置換フタルイミド化合物であり；R1とR2は、同一であっても異なっていてもよく；Aは、R1とR2との間で一緒に結合した3つの化学成分を含む化学ブリッジであり；A中の前記化学成分が、CO、O、S、SO2、NH、NR3(式中、R3はC1-6アルキル基である)、NR4(式中、R4は、R1またはR2と一緒になって形成されるフタルイミド化合物の一部としての2つのカルボニルを含む)、CH2、CH、およびCからなる群から選択され；R1とR2の少なくとも一方が、化学式
【００８１】
【化３０】
2005532288.tif 000031
【００８２】
(式中、nは0〜5であり；R5とR6は、水素、ハロゲン、置換もしくは非置換C1-12アルキル基、カルボン酸基、エステル基、置換もしくは非置換芳香族基、および置換もしくは非置換ヘテロ芳香族基からなる群から選択され、これらの成分は、同一であっても異なっていてもよく、あるいはR5とR6が連結して形成される脂肪族環の一部のアルキル成分であってもよく；R7は、水素、ハロゲン、塩カチオン、金属、または置換もしくは非置換C1-6アルキル基である)を有する化合物で置換されている〕で示される化合物を含めて、米国特許第5,648,375号に開示の化合物が含まれる。
【００８３】
本発明において有用なアロステリックエフェクター化合物としてはさらに、(i)ヘモグロビンの中央水空洞(central water cavity)における、Lys99α残基、Arg141α残基、およびAsn108α残基での一対の対称関係部位(symmetry related sites)(それぞれの対の対称関係部位が、ヘモグロビンの3つの別個のサブユニット上に残基を有する)のみに結合するアロステリックエフェクター分子、(ii)より低い酸素親和性の状態においてヘモグロビンを安定化させるアロステリックエフェクター分子、および(iii)正常な濃度の血清アルブミンが血液中に存在する状態において活性であるアロステリックエフェクター分子を含めて、米国特許第5,661,182号に開示の化合物が含まれ、前記アロステリックエフェクター分子は、(a) 37℃にて140mMのNaClと50mMのビス-トリス緩衝液中に混合して得られるpH7.4の緩衝化赤血球懸濁液(50μMの血清アルブミンを含有しない緩衝化赤血球懸濁液と比較して、テトラマーを基準として20〜25μMのヘモグロビン、50μMの血清アルブミン、および0.5mMのアロステリックエフェクター分子を含有する)に対し、ヘモグロビンの酸素解離曲線を右にシフトさせることに関してその活性の60%以上を保持し、および(b)50μMの血清アルブミンを含有しない緩衝化赤血球懸濁液と比較して、50μMの血清アルブミンを含有する緩衝化赤血球懸濁液に対し、理論酸素デリバリーインデックス(a calculated oxygen delivery index)に関してその活性の80%以上を保持し；これにより、アロステリックエフェクター分子は、血液中の赤血球に浸透して、その中のヘモグロビンと結合することができる。
【００８４】
本発明において有用なアロステリックエフェクター化合物としてはさらに、式R1-A-R2〔式中、R1とR2はそれぞれ、置換もしくは非置換芳香族化合物、置換もしくは非置換ヘテロ芳香族化合物、置換もしくは非置換アルキル環化合物、置換もしくは非置換ヘテロアルキル環化合物、または置換もしくは非置換フタルイミド化合物であり；R1とR2は、同一であっても異なっていてもよく；Aは、R1とR2との間で一緒に結合した2つ〜4つの化学成分を含む化学ブリッジであり；A中の前記化学成分が、CO、O、S、SO2、NH、NR3(式中、R3はC1-6アルキル基である)、NR4(式中、R4は、R1またはR2と一緒になって形成されるフタルイミド化合物の一部としての2つのカルボニルを含む)、CH2、CH、およびCからなる群から選択され、但し、Aが、互いに隣接した2つの同一のCH成分およびC成分を含有してアルケンまたはアルキンを形成する場合を除いて、A中の化学成分はそれぞれ互いに異なっており；R1とR2の少なくとも一方が、化学式
【００８５】
【化３１】
2005532288.tif 000032
【００８６】
(式中、nは0〜5であり；R5とR6は、水素、ハロゲン、置換もしくは非置換C1-12アルキル基、カルボン酸基、エステル基、置換もしくは非置換芳香族基、および置換もしくは非置換ヘテロ芳香族基からなる群から選択され、これらの成分は、同一であっても異なっていてもよく、あるいはR5とR6が連結して形成される脂肪族環の一部のアルキル成分であってもよく；R7は、水素、ハロゲン、塩カチオン、金属、または置換もしくは非置換C1-6アルキル基である)を有する化合物で置換されている〕で示される化合物を含めて、米国特許第5,677,330号、第5,705,521号、および第5,927,283号に開示の化合物が含まれる。
【００８７】
本発明において有用なアロステリックエフェクター化合物としてはさらに、
【００８８】
【化３２】
2005532288.tif 000033
【００８９】
(式中、R1は、置換されていてもよいフェニル、アダマンチル、ナフチル、およびインダニルからなる群から選択され；R2-3は、R2とR3が連結して形成されるC3-6アルキル環のアルキル成分であり；R4は、水素、一価の塩カチオン、またはC1-3低級アルキルである)を含めて、米国特許第5,731,454号に開示の化合物が含まれる。上記の特許および本明細書に引用の他の全ての特許と刊行物のそれぞれの全開示内容を参照により本明細書に含める。
【００９０】
好ましい実施態様においては、アロステリックエフェクター化合物は2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸であり、下記のような構造を有する。
【００９１】
【化３３】
2005532288.tif 000034
【００９２】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸のナトリウム塩(C20H22NO4Na；分子量=363.38)は下記のような構造を有する。
【００９３】
【化３４】
2005532288.tif 000035
【００９４】
これらの化合物は、組成物中に、酸の形態でも、または生理学的に許容されうる塩の形態でも使用することができる。2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の生理学的に許容されうる塩は、下記のような一般構造を有するものとして表わすことができ、このときX+は生理学的に許容されうる塩のカチオンを示している。
【００９５】
【化３５】
2005532288.tif 000036
【００９６】
塩は、無機カチオンである対イオンを含有する化合物、および有機カチオンである対イオンを含有する化合物を含んでよい。例えば、無機対イオンとしては、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン、亜鉛イオン、およびこれらの組み合わせ物があるが、これらに限定されない。有機対イオンとしては、リシンイオン、ヒドロキシリシンイオン、ヒスチジンイオン、アルギニンイオン、オルニチンイオン、トロメタミンイオン、メグルミンイオン、およびこれらの組み合わせ物があるが、これらに限定されない。
【００９７】
アロステリック修飾化合物は、投与の前に溶液にするのが好ましい。こうした溶液は、水、塩水、デキストロース溶液、乳酸化リンゲル液、マンニトールの水溶液、またはこれらの組み合わせ物を希釈剤として使用して作製することができる。患者への非経口投与に適したものである限り、他の希釈剤も使用することができる。希釈剤は、(USP)25<788>要件に不合格となるほどに、アロステリック修飾化合物の化学的安定性または物理的(粒子)安定性を低下させないような希釈剤であるのが好ましい。
【００９８】
非経口製品は、肉眼不可視の粒状物質に対する特定の要件を満たさなければならない。これらの要件を満たさないと、非経口製品は治療処置に対して許容できないものとなる。USP<788>は、肉眼不可視の粒状物質を測定するための基準を定めている。２つの試験(すなわちライトオブスキュレーション粒子計数試験と顕微鏡粒子計数試験)が定められている。注射液がライトオブスキュレーション試験に不合格になった場合、注射液は顕微鏡試験に合格しなければならない。これとは別に、ある製剤に対し、手法上の理由(例えば高粘度)からライトオブスキュレーションによる試験を行うことができない場合は、顕微鏡試験だけを使用することができる。100ml以下の少量の注射液の場合、10ミクロン以上の粒径の粒子に対するUSP25<788>のライトオブスキュレーションの限度は、1バイアル当たり6000以下であり、25ミクロン以上の粒径の粒子に対するUSP25<788>のライトオブスキュレーションの限度は、1バイアル当たり600以下である。100mlを超える多量の注射液の場合、10ミクロン以上の粒径の粒子に対するUSP25<788>のライトオブスキュレーションの限度は、1ml当たり25以下であり、25ミクロン以上の粒径の粒子に対するUSP25<788>のライトオブスキュレーションの限度は、1ml当たり3以下である。したがって幾つかの実施態様においては、容器のサイズにより、存在できる粒子の総数が決まる。例えば、100mlの容器(USPによれば、少量の注射可能液と定義)の場合、25μm以上の粒径の粒子に対する要件は、1ミリリットル当たり6粒子以下であり、10μm以上の粒径の粒子に対する要件は、1ミリリットル当たり60粒子以下である。
【００９９】
100ml以下の少量の注射液の場合、10ミクロン以上の粒径の粒子に対する顕微鏡的限度は、1バイアル当たり3000である。少量注射液の場合における、25ミクロン以上の粒径の粒子に対するUSP25による顕微鏡的限度は、1バイアル当たり300である。より多量(100mlを超える量)の注射液の場合、10ミクロン以上の粒径の粒子に対するUSP24による顕微鏡的限度は、1ml当たり12以下であり、25ミクロン以上の粒径の粒子に対するUSP24による顕微鏡的限度は、1ml当たり2以下である。
【０１００】
ヘモグロビンをアロステリックに修飾することで引き起こされる疾病を治療するのに本発明の組成物が使用される1つの実施態様においては、本発明の組成物は、ヘモグロビンをアロステリックに修飾するのに有効な量のアロステリック修飾化合物を含有するのが好ましい。
【０１０１】
本発明の組成物は、約15ミリモル/L〜約150ミリモル/Lの範囲の量のアロステリック修飾化合物を含むのが好ましい。アロステリック修飾化合物の量は、約45ミリモル/L〜約90ミリモル/Lの範囲であるのがさらに好ましい。最も好ましい実施態様においては、本発明の組成物は約58.7ミリモル/Lのアロステリック修飾化合物を含む。アロステリック修飾化合物の添加量は変わってよく、当業者に公知のファクターに依存する。こうしたファクターとしては、治療しようとする疾病の種類だけでなく、患者の体格や健康状態などがある。
【０１０２】
安定化化合物を含まない、加熱殺菌処理した、20mg/mL(58.7ミリモル/mL)でpH7.5のアロステリックエフェクター化合物2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の製剤は、加熱殺菌処理してから一週間以内にアロステリックエフェクターの沈殿を生じることが明らかになっている。本組成物中のアロステリック修飾化合物は化学分解に対しては安定であるけれども、製剤中に粒状物質が生成することがあり、このためUSPの要件に不合格となる。興味深いことに、アロステリック修飾化合物の濃度が、溶液のpHでのアロステリック修飾化合物に対する溶解度限界の1/2未満であったとしても、粒状物質の生成が起こる。2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸に対するpKaは約3.5である。したがって、pH7においてはかなり高い溶解度を有する。2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸のナトリウム塩のpH7での溶解度は約50mg/mlである。驚くべきことに、2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の濃度がわずか20mg/mlにすぎず、そして溶液のpHが25℃にて約7である場合に、2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸が溶液から析出し始め、肉眼不可視の粒状物質が生じる。特定の理論に拘束されるつもりはないが、こうした溶解度に関する検討から、本化合物は界面活性であるかも知れず、モノマー形からある種の会合化学種(例えば、小さな凝集体、オリゴマー、またはミセル)へと相転移が起こり、このためイオン化されていない酸が微量しか溶解しない、ということが考えられる。安定化剤を加えればこうした小さな凝集体様化学種の完全性が保持される、と考えられる。
【０１０３】
化合物の溶解度未満の濃度で粒状物質が生じるという思いがけない問題は、安定化剤を加えることによって解消される。安定化剤の作用は、肉眼不可視の粒状物質の生成を防止もしくは最小限に抑えることにある。幾つかの実施態様においては、安定化剤は、溶液のpHを安定化させるための緩衝剤としても作用してよい。他の実施態様においては、安定化剤と緩衝剤は別々の薬剤である。安定化剤は、特に加熱殺菌の後で、相当量の肉眼不可視粒状物質の生成を防止するよう作用する。この結果、最終的に殺菌することができ、長い保存寿命もち、そしてUSP25<788>による肉眼不可視粒状物質の要件を満たす製剤が得られる。特定の理論で拘束されるつもりはないが、pHの安定化は製剤の安定化に寄与する1つのファクターではあるが、溶液のpHだけでは、溶液を安定化させるのには不十分である、と考えられる。種々の研究により、アロステリックエフェクター化合物のpHは、最適の溶解度を得るには約6.6以上でなければならない、ということが示されている。必要であれば、溶液のpHを少なくとも約6(好ましくは約6〜約11)のpHに調節することができる。pHは、約6.5〜約9.0に調節するのがさらに好ましい。pHは、約7.5〜約8.5に調節するのがさらに好ましい。pHは、適切な酸または塩基を加えることによって調節することができる。適切な酸は、アミノ酸、カルボン酸、リン酸、塩酸、または医薬製剤に適した他の酸であってよい。適切な塩基としては、水酸化ナトリウム、または医薬製剤に適した他の塩基がある。
【０１０４】
本発明の組成物は安定化剤を含む。安定化剤はpHのずれを最小限に抑えるが、さらに重要なことに、安定化剤は、組成物中に粒状物質が生成するのを抑えるよう作用する。安定剤は、組成物に追加成分として加えることもできるし、あるいは使用するアロステリック修飾化合物の生理学的に許容されうる塩の対イオンが安定化剤として作用する能力を有する場合は、対イオンそれ自体が安定化剤として機能することがある。特定の理論で拘束されるつもりはないが、安定化剤が粒状物の生成を防止できることの1つの考えられるメカニズムは、安定化剤が、より溶解性の低い中性のプロトン化アロステリック修飾因子が形成される可能性を低下させるプロトン“シンク”(a proton “sink”)として作用する、というメカニズムである。
【０１０５】
安定化剤の選択は、ある程度は、所望する最終的なpHに依存することがある。安定化剤の量は、当業者に公知の幾つかのファクターに応じて変わる。これらのファクターの幾つかとしては、安定化剤の組成、安定化剤のpKa、アロステリック修飾化合物の濃度、安定化させようとする溶液の量、および使用される殺菌サイクル等がある。安定化剤の量とファクターは、安定化剤の種類によって変わることがある。いずれにしても、組成物に加える安定化剤の量は、組成物中での粒状物質の生成を少なくするのに有効な量でなければならない。安定化剤の量はさらに、組成物のpHを所望の範囲内に保持するような量であるのが好ましい。
【０１０６】
適切な安定化剤としては、オルトリン酸、オルトリン酸の生理学的に許容されうる塩、クエン酸、クエン酸の生理学的に許容されうる塩、トロメタミン、メグルミン、アミノ酸、ジペプチド、トリペプチド、グリシン、グリシルグリシン、リシン、アルギニン、アミン基を含有する他の化合物、およびこれらの組み合わせ物等があるが、これらに限定されない。
【０１０７】
1つの実施態様においては、安定化剤は約1〜5mMの濃度のオルトリン酸であり、製剤のpHは、約7.5、8.0、または8.5である。他の実施態様においては、安定化剤は約1〜5mMの濃度のトロメタミンであり、製剤のpHは、約7.5、8.0、または8.5である。
【０１０８】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の製剤における予期せぬ沈殿について調べた結果、安定化剤の濃度と溶解度が思いのほか関連している、ということがわかった。例えば、100〜200mMのメグルミン溶液においては、23℃およびpH7.5にて約12mg/mlの溶解度の増大が見出された。2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の溶解度は、23℃および7〜8のpHにて、水に対する約44mg/mlから0.5Mのトリス溶液に対する99.89mg/mlまで徐々に増大した。最終的には、2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の溶解度は、23℃および7.2〜7.5のpHにて、水に対する約44mg/mlから0.5Mのアルギニン溶液に対する155.07mg/mlまで大幅に増大した。したがって、アミン基を有する安定化剤は本発明の範囲内に含まれるものとする。
【０１０９】
本発明の組成物は、適切な希釈剤と安定化剤にアロステリック修飾化合物を加えることによって調製することができる。前述したように、適切な希釈剤としては、水、塩水、デキストロース溶液、乳酸化リンゲル液、マンニトールの水溶液、およびこれらの組み合わせ物等があるが、これらに限定されない。
【０１１０】
安定化剤がアロステリック修飾化合物の塩の対イオンではない場合は、安定化剤は、溶液に別個の成分として加える。安定化剤、アロステリック修飾化合物、およびpH調節剤を加える順序は重要なことではない。安定化剤は、アロステリック修飾化合物の添加前に液体に加えてもよいし、あるいはアロステリック修飾化合物の添加後に液体に加えてもよい。
【０１１１】
いったん組成物が調製されたら、これを容器に充填することができる。これとは別に、組成物の調製は容器中で行うこともできる。静脈内投与用に調製する場合、組成物は、静脈注射用溶液を収容した点滴バッグまたは点滴ボトル中で調製することができる。
【０１１２】
好ましくは、組成物は、投与する上から無菌であるべきである。医薬組成物の調製は、無菌の環境において行うことができる。アロステリック修飾化合物の化学組成を変化させないか、あるいは医薬組成物がUSP24<788>の要件に不合格となる程度にまで粒状物質の生成を引き起こさないようないかなる殺菌法も使用することができる。適切な方法としては、無菌の容器中に組成物を無菌充填するという方法、容器に組成物を充填してから加熱殺菌するという方法、濾過滅菌してから容器に充填するという方法、無菌の容器中に組成物を無菌充填するという方法、および加熱殺菌するという方法等があるが、これらに限定されない。
【０１１３】
本発明の安定化製剤は、種々の期間に対して安定化される。1つの実施態様においては、製剤は、少なくとも約2週間に対して安定化される。他の実施態様においては、製剤は、少なくとも約30日に対して安定化される。さらに他の実施態様においては、製剤は、少なくとも約６ヶ月に対して安定化される。さらに他の実施態様においては、製剤は、少なくとも約１年に対して安定化される。さらに他の実施態様においては、製剤は、少なくとも約２年に対して安定化される。
【０１１４】
本発明の組成物は、溶液中の粒状物質が少なく、静脈注射、持続注入、皮下注射、筋肉注射、および腹腔内注射(これらに限定されない)を含めた、非経口の投与経路に適している。
【０１１５】
アロステリック修飾化合物は、約6〜約11のpHにて化学的および物理的に安定である。本発明の組成物は、少なくとも約6のpHを有するのが好ましい。本発明の組成物は、約6〜約11の範囲のpHを有するのがさらに好ましい。本発明の組成物は、約6.5〜約9.0の範囲のpHを有するのが最も好ましい。
【０１１６】
表Iからわかるように、安定化剤が存在すると、最終的な殺菌処理後に溶液中に生成する粒子の数が大幅に減少する。調製は全て、溶解度限度の1/2未満の濃度にて行った。
【０１１７】
【表１】
2005532288.tif 000037
【０１１８】
本発明の組成物は、粒状物質の生成に関して、少なくとも約30日にわたって化学的に安定である。これにより、本発明の組成物は投与部位(administration site)において特に有用となる。なぜなら、患者に投与する前に、追加ステップ(例えば、組成物を濾過するステップ)は必要なくなるからである。安定性についてのデータを表IIに示す。時間は殺菌処理後の時間である。
【０１１９】
【表２】
2005532288.tif 000038
【０１２０】
本発明には広い有用性と応用が可能である、ということは当業者には容易にわかるであろう。本発明とこれまでの説明から、本発明の本旨と範囲を逸脱することなく、本明細書に記載したもの以外の本発明の多くの実施態様と改良態様(adaptations)、ならびに多くの変形、改良形、および等価集成体(equivalent arrangement)が明らかであるか、あるいは合理的に示唆されている。
【０１２１】
上記の開示内容は、本発明を限定することを意図しておらず、あるいは他の実施態様、改良態様、変形、改良形、または等価集成体を除外することを意図しておらず、本発明は、特許請求の範囲とそれらの等価物によってのみ限定される。
【手続補正書】
【提出日】平成16年12月20日(2004.12.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アロステリックヘモグロビン修飾因子化合物と安定化化合物とを含む安定化された医薬組成物。
【請求項２】
前記アロステリックエフェクター化合物が、2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の少なくとも1種の生理学的に許容されうる塩である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記アロステリックヘモグロビン修飾因子化合物が2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸であり、前記安定化化合物がリン酸ナトリウムである、請求項２記載の安定化された医薬組成物。
【請求項４】
前記医薬組成物が、
(a)  10ミクロン以上の粒径の粒子を1バイアル当たり6000粒子以下、および25ミクロン以上の粒径の粒子を1バイアル当たり600粒子以下含み、このとき前記バイアルが100ml以下の体積を有し、粒状物質がライトオブスキュレーションによって測定される；
(b)  10ミクロン以上の粒径の粒子を1ml当たり25粒子以下、および25ミクロン以上の粒径の粒子を1ml当たり3粒子以下含み、このとき全容量が100mlより大きく、粒状物質がライトオブスキュレーションによって測定される；
(c)  10ミクロン以上の粒径の粒子を1バイアル当たり3000粒子以下、および25ミクロン以上の粒径の粒子を1バイアル当たり300粒子以下含み、このとき前記バイアルが100ml以下の体積を有し、粒状物質が顕微鏡によって測定される；および
(d)  10ミクロン以上の粒径の粒子を1ml当たり12粒子以下、および25ミクロン以上の粒径の粒子を1ml当たり2粒子以下含み、このとき全容量が100mlより大きく、粒状物質が顕微鏡によって測定される；
からなる群から選択される特徴を有する、請求項１記載の安定化された医薬組成物。
【請求項５】
前記医薬組成物が、10ミクロン以上の粒径の粒子を1バイアル当たり6000粒子以下、および25ミクロン以上の粒径の粒子を1バイアル当たり600粒子以下含み、このとき前記バイアルが100ml以下の体積を有し、粒状物質がライトオブスキュレーションによって測定される、という特徴を有する、請求項４記載の安定化された医薬組成物。
【請求項６】
前記医薬組成物が、10ミクロン以上の粒径の粒子を1ml当たり25粒子以下、および25ミクロン以上の粒径の粒子を1ml当たり3粒子以下含み、このとき全容量が100mlより大きく、粒状物質がライトオブスキュレーションによって測定される、という特徴を有する、請求項４記載の安定化された医薬組成物。
【請求項７】
前記医薬組成物が、10ミクロン以上の粒径の粒子を1バイアル当たり3000粒子以下、および25ミクロン以上の粒径の粒子を1バイアル当たり300粒子以下含み、このとき前記バイアルが100ml以下の体積を有し、粒状物質が顕微鏡によって測定される、という特徴を有する、請求項４記載の安定化された医薬組成物。
【請求項８】
前記医薬組成物が、10ミクロン以上の粒径の粒子を1ml当たり12粒子以下、および25ミクロン以上の粒径の粒子を1ml当たり2粒子以下含み、このとき全容量が100mlより大きく、粒状物質が顕微鏡によって測定される、という特徴を有する、請求項４記載の安定化された医薬組成物。
【請求項９】
約15ミリモル/L〜約120ミリモル/Lの範囲の、ある量の2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の少なくとも1種の生理学的に許容されうる塩を含む、請求項４記載の安定化された医薬組成物。
【請求項１０】
約45ミリモル/L〜約90ミリモル/Lの範囲の、ある量の2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の少なくとも1種の生理学的に許容されうる塩を含む、請求項４記載の安定化された医薬組成物。
【請求項１１】
前記安定化剤が、オルトリン酸、オルトリン酸の生理学的に許容されうる塩、クエン酸、クエン酸の生理学的に許容されうる塩、トロメタミン、メグルミン、アミノ酸、ジペプチド、トリペプチド、グリシン、リシン、アルギニン、グリシルグリシン、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される、請求項４記載の安定化された医薬組成物。
【請求項１２】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸が、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、亜鉛塩、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される生理学的に許容されうる塩として存在する、請求項４記載の安定化された医薬組成物。
【請求項１３】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸が、アミン基を含有する化合物の生理学的に許容されうる塩として存在する、請求項４記載の安定化された医薬組成物。
【請求項１４】
アミン基を含有する前記化合物が、リシン、ヒドロキシリシン、ヒスチジン、アルギニン、オルニチン、トロメタミン、メグルミン、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される、請求項１３記載の安定化された医薬組成物。
【請求項１５】
ヘモグロビンをアロステリックに修飾して酸素平衡が遊離酸素のほうにシフトすることで引き起こされる疾病を治療するのに有効なある量の2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸を含む、請求項４記載の安定化された医薬組成物。
【請求項１６】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の、対イオンを有する生理学的に許容されうる塩を含み、前記対イオンが安定化剤として作用する、請求項４記載の安定化された医薬組成物。
【請求項１７】
前記医薬組成物が無菌である、請求項４記載の安定化された医薬組成物。
【請求項１８】
前記希釈剤が、水、塩水、デキストロース溶液、乳酸化リンゲル液、マンニトールの水溶液、グルコースポリマーの水溶液、変性グルコースポリマーの水溶液、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される、請求項４記載の安定化された医薬組成物。
【請求項１９】
前記医薬組成物が約6.6より高いpHを有する、請求項４記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記医薬組成物が約6.5〜約11のpHを有する、請求項４記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記医薬組成物が約6.5〜約9.0のpHを有する、請求項４記載の医薬組成物。
【請求項２２】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の少なくとも1種の生理学的に許容されうる塩と安定化剤とを化合させる工程を含む、2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸を含んだ医薬組成物の製造法。
【請求項２３】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の少なくとも1種の生理学的に許容されうる塩と安定化剤とを合わせる工程を含む、2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸を含んだ医薬組成物の製造法であって、前記医薬組成物が、
(a)  10ミクロン以上の粒径の粒子を1バイアル当たり6000粒子以下、および25ミクロン以上の粒径の粒子を1バイアル当たり600粒子以下含み、このとき前記バイアルが100ml以下の体積を有し、粒状物質がライトオブスキュレーションによって測定される；
(b)  10ミクロン以上の粒径の粒子を1ml当たり25粒子以下、および25ミクロン以上の粒径の粒子を1ml当たり3粒子以下含み、このとき全容量が100mlより大きく、粒状物質がライトオブスキュレーションによって測定される；
(c)  10ミクロン以上の粒径の粒子を1バイアル当たり3000粒子以下、および25ミクロン以上の粒径の粒子を1バイアル当たり300粒子以下含み、このとき前記バイアルが100ml以下の体積を有し、粒状物質が顕微鏡によって測定される；および
(d)  10ミクロン以上の粒径の粒子を1ml当たり12粒子以下、および25ミクロン以上の粒径の粒子を1ml当たり2粒子以下含み、このとき全容量が100mlより大きく、粒状物質が顕微鏡によって測定される；
からなる群から選択される特徴を有する前記製造法。
【請求項２４】
前記アロステリックヘモグロビン修飾因子化合物が2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸であり、前記安定化化合物がリン酸ナトリウムである、請求項２３記載の製造法。
【請求項２５】
前記医薬組成物が、10ミクロン以上の粒径の粒子を1バイアル当たり6000粒子以下、および25ミクロン以上の粒径の粒子を1バイアル当たり600粒子以下含み、このとき前記バイアルが100ml以下の体積を有し、粒状物質がライトオブスキュレーションによって測定される、という特徴を有する、請求項２３記載の製造法。
【請求項２６】
前記医薬組成物が、10ミクロン以上の粒径の粒子を1ml当たり25粒子以下、および25ミクロン以上の粒径の粒子を1ml当たり3粒子以下含み、このとき全容量が100mlより大きく、粒状物質がライトオブスキュレーションによって測定される、という特徴を有する、請求項２３記載の製造法。
【請求項２７】
前記医薬組成物が、10ミクロン以上の粒径の粒子を1バイアル当たり3000粒子以下、および25ミクロン以上の粒径の粒子を1バイアル当たり300粒子以下含み、このとき前記バイアルが100ml以下の体積を有し、粒状物質が顕微鏡によって測定される、という特徴を有する、請求項２３記載の製造法。
【請求項２８】
前記医薬組成物が、10ミクロン以上の粒径の粒子を1ml当たり12粒子以下、および25ミクロン以上の粒径の粒子を1ml当たり2粒子以下含み、このとき全容量が100mlより大きく、粒状物質が顕微鏡によって測定される、という特徴を有する、請求項２３記載の製造法。
【請求項２９】
前記2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の少なくとも1種の生理学的に許容されうる塩が希釈剤中に供給される、請求項２３記載の製造法。
【請求項３０】
前記希釈剤が約6.6より高いpHを有する、請求項２３記載の製造法。
【請求項３１】
前記安定化剤により、医薬組成物のpHが約6.5〜約11に保持される、請求項２３記載の製造法。
【請求項３２】
前記安定化剤により、医薬組成物のpHが約6.5〜約9.0に保持される、請求項２３記載の製造法。
【請求項３３】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の少なくとも1種の生理学的に許容されうる塩が、約15ミリモル/L〜約120ミリモル/Lの範囲の量にて加えられる、請求項２３記載の製造法。
【請求項３４】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸または2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸の少なくとも1種の生理学的に許容されうる塩が、約45ミリモル/L〜約90ミリモル/Lの範囲の量にて加えられる、請求項２３記載の製造法。
【請求項３５】
前記緩衝剤が、オルトリン酸、オルトリン酸の生理学的に許容されうる塩、クエン酸、クエン酸の生理学的に許容されうる塩、トロメタミン、メグルミン、アミノ酸、ジペプチド、トリペプチド、グリシン、リシン、アルギニン、グリシルグリシン、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される、請求項２３記載の製造法。
【請求項３６】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸が、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、亜鉛塩、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される生理学的に許容されうる塩として存在する、請求項２３記載の製造法。
【請求項３７】
2-[4-[2-[(3,5-ジメチルフェニル)アミノ]-2-オキソエチル]フェノキシ]-2-メチル-プロピオン酸が、リシン、ヒドロキシリシン、ヒスチジン、アルギニン、オルニチン、プロトン化トロメタミン、メグルミン、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される生理学的に許容されうる塩として存在する、請求項２３記載の製造法。
【請求項３８】
医薬組成物を殺菌する工程をさらに含む、請求項２３記載の製造法。
【請求項３９】
前記殺菌工程が加熱殺菌によって行われる、請求項２３記載の製造法。
【請求項４０】
無菌の容器中に医薬組成物を無菌充填することをさらに含む、請求項２３記載の製造法。
【請求項４１】
前記希釈剤が、水、塩水、デキストロース溶液、乳酸化リンゲル液、マンニトールの水溶液、グルコースポリマーの水溶液、変性グルコースポリマーの水溶液、およびこれらの組み合わせ物からなる群から選択される、請求項２３記載の製造法。
【請求項４２】
ヘモグロビンをアロステリックに修飾する必要がある患者に請求項１記載の安定化された医薬組成物を投与することを含む、ヘモグロビンをアロステリックに修飾する方法。
【請求項４３】
血液酸素レベル依存性の磁気共鳴画像信号の測定法であって、
a)  請求項１記載の安定化された医薬組成物を投与すること；および
b)  血液酸素レベル依存性の磁気共鳴画像スキャンを行うこと、これによって前記血液酸素レベル依存性の磁気共鳴画像信号が測定される；
を含む前記測定法。
【請求項４４】
電離放射線の細胞傷害効果に対して細胞の感受性を増大させる方法であって、
a)  請求項１記載の安定化された医薬組成物と細胞とを接触させて細胞を酸素処理すること；および
b)  電離放射線の効果的な細胞傷害用量を細胞に投与すること；
を含む前記方法。
【国際調査報告】
2005532288.tif 000039