(57)【要約】本発明は、酵素ジペプチジルペプチダーゼＩＶの治療的に活性な新規の選択的阻害剤、該化合物を含む医薬組成物および、２型真性糖尿病、高血糖症、耐糖能障害、代謝性症候群（Ｘ症候群またはインスリン抵抗性症候群）、ブドウ糖尿、代謝性アシドーシス、白内障、糖尿病性神経症、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、糖尿病性心筋症、１型糖尿病、肥満、肥満により悪化する状態、高血圧症、高脂血症、アテローム硬化症、骨粗しょう症、骨減少症、脆弱、骨損失、骨折、急性冠症候群、多のう胞卵巣症候群による不妊症、短腸症候群、不安、うつ病、不眠症、慢性疲労、てんかん、摂食障害、慢性疼痛、飲酒癖、腸運動に関連する疾患、潰瘍、過敏性腸症候群、炎症性腸症候群などのＤＰＰ−ＩＶにより処理されるタンパク質を伴う疾患を治療するために、および２型糖尿病で疾患進行を防ぐためにこのような化合物を使用することに関する。さらに本発明は、糖尿病のためのインスリン分泌促進剤を同定する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物、そのプロドラッグ、または前記の化合物もしくは前記のプロドラッグの薬学的に許容できる塩：
【化１】
2005533771.tif 000008
［上式中、
Ｒ１は、３−フルオロアゼチジン−１−イル、３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル、３，４−ジフルオロピロリジン−１−イル、３，３，４−トリフルオロピロリジン−１−イル、３，３，４，４−テトラフルオロピロリジン−１−イル、３−フルオロピペリジン−１−イル、４−フルオロピペリジン−１−イル、３，４−ジフルオロピペリジン−１−イル、３，５−ジフルオロピペリジン−１−イル、３，３−ジフルオロピペリジン−１−イル、４，４−ジフルオロピペリジン−１−イル、３，４，５−トリフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４−トリフルオロピペリジン−１−イル、３，３，５−トリフルオロピペリジン−１−イル、３，４，４−トリフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４，５−テトラフルオロピペリジン−１−イル、３，４，４，５−テトラフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４，４−テトラフルオロピペリジン−１−イル、３，３，５，５−テトラフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４，５，５−ペンタフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４，４，５−ペンタフルオロピペリジン−１−イルまたは３，３，４，４，５，５−ヘキサフルオロピペリジン−１−イルであり、および
Ｒ２は、（Ｃ１〜Ｃ８）アルキルまたは（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキルである］。
【請求項２】
Ｒ１は、３−フルオロアゼチジン−１−イルまたは３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１は、３，４−ジフルオロピロリジン−１−イル、３，３，４−トリフルオロピロリジン−１−イル、３，３，４，４−テトラフルオロピロリジン−１−イルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１は、３−フルオロピペリジン−１−イル、４−フルオロピペリジン−１−イル、３，４−ジフルオロピペリジン−１−イル、３，５−ジフルオロピペリジン−１−イル、３，３−ジフルオロピペリジン−１−イルまたは４，４−ジフルオロピペリジン−１−イルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１は、３，４，５−トリフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４−トリフルオロピペリジン−１−イル、３，３，５−トリフルオロピペリジン−１−イル、３，４，４−トリフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４，５−テトラフルオロピペリジン−１−イル、３，４，４，５−テトラフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４，４−テトラフルオロピペリジン−１−イル、３，３，５，５−テトラフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４，５，５−ペンタフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４，４，５−ペンタフルオロピペリジン−１−イルまたは３，３，４，４，５，５−ヘキサフルオロピペリジン−１−イルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
塩酸（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−ペンタン−１−オン、
塩酸（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−エタノン、
塩酸（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−ペンタン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−イル）−エタノン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−ブタン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−ペンタン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−エタノン、
塩酸（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−１−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−（４，４−ジフルオロ−ピペリジン−１−イル）−エタノン、
塩酸（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−１−（４，４−ジフルオロ−ピペリジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−プロパン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−１−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ブタン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ブタン−１−オン、
塩酸（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オン、
塩酸（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−１−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロペンチル−１−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−エタノン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロペンチル−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−イル）−エタノンまたは
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロペンチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−エタノン
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
式Ｉの化合物が、
【化２】
2005533771.tif 000009
のように示されるＳ鏡像異性体である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
治療的有効量の請求項１に記載の化合物、そのプロドラッグ、または前記の化合物もしくは前記のプロドラッグの薬学的に許容できる塩および薬学的に許容できる希釈剤または担体を含有する、医薬組成物。
【請求項９】
治療的有効量の
請求項１に記載の第１の化合物、そのプロドラッグ、または前記の化合物もしくは前記のプロドラッグの薬学的に許容できる塩および
インスリンまたはインスリン類似体；インスリノトロピン；ビグアニド；α２−アンタゴニストまたはイミダゾリン；グリタゾン；アルドースレダクターゼ阻害剤；グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤；ソルビトールデヒドロゲナーゼ阻害剤；脂肪酸酸化阻害剤；α−グルコシダーゼ阻害剤；β−アゴニスト；ホスホジエステラーゼ阻害剤；脂質低下剤；抗肥満剤；バナジン酸塩、バナジウム錯体またはペルオキソバナジウム錯体；アミリンアンタゴニスト；グルカゴンアンタゴニスト；成長ホルモン分泌促進剤；糖新生阻害剤；ソマトスタチン類似体；腎臓グルコースの阻害剤；または抗脂肪分解剤である治療的有効量の第２の化合物；前記の第２の化合物のプロドラッグまたは前記の第２の化合物または前記の第２の化合物のプロドラッグの薬学的に許容できる塩を含む、医薬組成物。
【請求項１０】
薬学的に許容できる担体または希釈剤をさらに含む、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
哺乳動物において、ジペプチジルペプチダーゼＩＶを阻害する治療方法であって、治療的有効量の請求項１に記載の化合物、そのプロドラッグまたは前記の化合物もしくは前記のプロドラッグの薬学的に許容できる塩を、ジペプチジルペプチダーゼＩＶを阻害する必要のある前記の哺乳動物に投与することを含む方法。
【請求項１２】
哺乳動物において、ジペプチジルペプチダーゼＩＶの阻害により仲介される状態を治療する方法であって、治療的有効量の請求項１に記載の化合物、そのプロドラッグまたは前記の化合物もしくは前記のプロドラッグの薬学的に許容できる塩を、ジペプチジルペプチダーゼＩＶの阻害によって仲介される状態に罹患している前記の哺乳動物に投与することを含む方法。
【請求項１３】
治療される状態が、２型糖尿病、代謝性症候群、高血糖症、耐糖能障害、ブドウ糖尿、代謝性アシドーシス、白内障、糖尿病性神経症、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、糖尿病性心筋症、１型糖尿病、肥満、肥満により悪化する状態、高血圧症、高脂血症、アテローム硬化症、骨粗しょう症、骨減少症、脆弱、骨損失、骨折、急性冠症候群、多のう胞卵巣症候群による不妊症、２型糖尿病での疾患進行、慢性疲労、てんかん、腸運動に関連する疾患、潰瘍、過敏性腸症候群、炎症性腸症候群、不安、うつ病、不眠症、慢性疲労、てんかん、摂食障害、慢性疼痛または飲酒癖である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
治療される状態が、２型糖尿病である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
薬剤がＤＰＰ−ＩＶ阻害剤であるかを同定する方法であって、
その薬剤を絶食した糖尿病のＫＫ／Ｈ１Ｊマウスに投与するステップと、
ＫＫ／Ｈ１Ｊマウスに経口ブドウ糖を負荷するステップと、
後続の経口ブドウ糖負荷に対するマウスの応答を評価するステップとを含み、ここで、前記の薬剤を、２型糖尿病、代謝性症候群、高血糖症、耐糖能障害、ブドウ糖尿、代謝性アシドーシス、白内障、糖尿病性神経症、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、糖尿病性心筋症、１型糖尿病、肥満、肥満により悪化する状態、高血圧症、高脂血症、アテローム硬化症、骨粗しょう症、骨減少症、脆弱、骨損失、骨折、急性冠症候群、多のう胞卵巣症候群による不妊症、２型糖尿病での疾患進行の防止、不安、うつ病、不眠症、慢性疲労、てんかん、摂食障害、慢性疼痛、飲酒癖、腸運動に関連する疾患、潰瘍、過敏性腸症候群、炎症性腸症候群または短腸症候群のための治療薬として同定することができる方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、酵素ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（以下、「ＤＰＰ−ＩＶ」とする）の治療活性のある新規の選択的阻害剤、該化合物を含む医薬組成物および、２型糖尿病、代謝性症候群（Ｘ症候群またはインスリン抵抗性症候群）、高血糖症、耐糖能障害、ブドウ糖尿、代謝性アシドーシス、白内障、糖尿病性神経症、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、糖尿病性心筋症、１型糖尿病、肥満、高血圧症、高脂血症、アテローム硬化症、骨粗しょう症、骨減少症、脆弱（ｆｒａｉｌｔｙ）、骨損失、骨折、急性冠症候群、多のう胞卵巣症候群による不妊症、短腸症候群、不安、うつ病、不眠症、慢性疲労、てんかん、摂食障害、慢性疼痛、飲酒癖、腸運動に関連する疾患、潰瘍、過敏性腸症候群、炎症性腸症候群などのＤＰＰ−ＩＶにより処理されるタンパク質に関連する疾患を治療するため、および２型糖尿病での疾患進行を予防するためのこのような化合物の使用に関する。さらに本発明は、糖尿病のためのインスリン分泌促進物質を同定する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＥＣ３．４．１４．５）は、２位にプロリンまたはアラニンを有するタンパク質からＮ末端ジペプチドを優先的に加水分解するセリンプロテアーゼである。ＤＰＰ−ＩＶの生理学的役割は、十分にはまだ解明されていないが、糖尿病、耐糖能、肥満、食欲調節、脂血症、骨粗しょう症、神経ペプチド代謝およびＴ細胞活性に関与していると考えられる。
【０００３】
その基質に、インクレチンペプチドグルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）および胃酸分泌抑制ポリペプチド（ＧＩＰ）を含むことから、ＤＰＰ−ＩＶは、グルコースホメオスタシスの制御に関与している。これらのペプチドからＮ末端アミノ酸が切断されると、これらは機能的に不活性となる。ＧＬＰ−１は、２型糖尿病患者の抗糖尿病療法で有効であり、１型糖尿病患者で食事に関連したインスリン要求を低減することが明らかとなっている。ＧＬＰ−１および／またはＧＩＰは、満腹、脂血症および骨形成を調節していると考えられる。外来ＧＬＰ−１は、急性冠症候群、扁桃炎および虚血性心疾患に罹患している患者のための治療薬として提案されている。
【０００４】
ｉｎ  ｖｉｖｏでＤＰＰ−ＩＶ阻害剤を投与することにより、ＧＬＰ−１およびＧＩＰのＮ末端分解が妨げられて、これらのペプチドのより高い循環濃度、インスリン分泌の上昇および耐糖能の改善が生じる。これらの観察を元に、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤は、２型糖尿病、耐糖能が関与している疾患を治療するための薬剤とみなされる。加えて、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤で治療することにより、神経ペプチドＹ（ＮＰＹ）、様々な中枢神経系疾患に関連しているペプチドおよび、潰瘍、過敏性腸症候群および炎症性腸症候群などの胃腸状態に関連しているペプチドＹＹの分解が妨げられる。
【０００５】
インスリンが早期に発見され、それに続いて糖尿病治療で広く使用されており、かつスルホニル尿素（例えば、クロルプロパミド（Ｐｆｉｚｅｒ）、トルブタミド（Ｕｐｊｏｈｎ）、アセトへキサミド（Ｅ．Ｉ．Ｌｉｌｌｙ））、ビグアニド（フェンホルミン（Ｃｉｂａ  Ｇｅｉｇｙ）、メトホルミン（Ｇ．Ｄ．．Ｓｅａｒｌｅ））およびチアゾリジンジオン（ロシグリタゾン（ｒｏｓｉｇｌｉｔａｚｏｎｅ）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ，Ｂｒｉｓｔｏｌ−ＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ）、ピオグリタゾン（ｐｉｏｇｌｉｔａｚｏｎｅ）（Ｔａｋｅｄａ，Ｅ．Ｉ．Ｌｉｌｌｙ））がその後に発見され、経口血糖降下薬として使用されているにもかかわらず、糖尿病の治療はまだ、不十分なままである。
【０００６】
１型糖尿病患者と、現在利用可能な経口血糖降下薬が無効である約１０％の２型糖尿病患者で必要とされるインスリンの使用は、通常は自己注射による毎日の複数回の投与を必要とする。適切な用量のインスリンを決定するには、尿または血中のブドウ糖濃度を頻繁に推定することが必要である。過剰な用量のインスリンが投与されると、低血糖症が誘発され、軽度な血糖値の異常から、昏睡または場合によっては死亡にいたる結果を伴う。
【０００７】
２型糖尿病の治療は通常、治療食、運動、経口薬剤、より重度な場合にはインスリンの併用を含む。しかしながら、臨床的に利用可能な血糖降下薬は、その使用を限定する副作用を示すことがある。副作用がより少ない、あるいは他の薬では失敗した場合にも成功しうる血糖降下薬に対する必要性が継続していることは、明白である。
【０００８】
コントロールの不十分な高血糖症は、進行した真性糖尿病を特徴付ける多数の合併症（白内障、神経症、腎症、網膜症、心筋症）の直接的な原因である。加えて、真性糖尿病は、高脂血症、アテローム硬化症および高血圧と往々にして混同される共存（ｃｏｍｏｒｂｉｄ）疾患であり、これらの疾患による総罹患率および死亡率全体を著しく上昇させる。
【０００９】
疫学的証拠により、アテローム硬化症による心臓血管疾患（「ＣＶＤ」）の主要な危険因子として高脂血症は確証されている。アテローム硬化症は、米国および西ヨーロッパでは、死をもたらす主要な原因であると認識されている。少なくとも一部では、この集団においては、ブドウ糖不耐症、左心室肥大および高血圧などの複数の独立した危険因子が存在するため、ＣＶＤは、糖尿病患者に特に広がっている。、したがって、通常の集団での、特には糖尿病患者での高脂血症の治療の成功は、医学的に非常に重要である。
【００１０】
高血圧症（または高血圧）は、原因となる因子または疾患が知られていない多くの患者でも起こりうる状態である。このような「本態性」高血圧は往々にして、肥満、糖尿病および高トリグリセリド血症などの疾患と関連しており、高血圧は、心不全、腎不全および発作と積極的に関連することが知られている。高血圧症は、アテローム硬化症および冠状動脈疾患の進展にも寄与しうる。高血圧は、インスリン抵抗性および高脂血症とともに、インスリン抵抗性症候群（「ＩＲＳ」）およびＸ症候群としても知られている代謝症候群を特徴付ける一群の症状を含む。
【００１１】
肥満は、アテローム硬化症、高血圧および糖尿病の進展に関してよく知られている共通の危険因子である。肥満の発生、したがってこれらの疾患の発生は、世界的に増加している。現在、有効で、許容できるほどに肥満を減らす薬剤はほとんど、利用できない。
【００１２】
骨粗しょう症は、低い骨密度および骨組織のマイクロ構造変質により特徴付けられる進行性全身疾患であり、結果として、骨の脆弱性および骨折しやすさの増大を伴う。骨粗しょう症および損なわれた骨強度の帰結は、脆弱性および高い罹患率および死亡率の明らかな原因である。
【００１３】
心疾患は、全世界での主要な健康問題である。心筋梗塞は、心疾患を有する個人が死に到る重大な原因である。急性冠症候群は、急性心筋梗塞（ＭＩ）を有するか、それを発症する高いリスクを有する患者を示している。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
糖尿病、高血糖症、高脂血症、高血圧、肥満および骨粗しょう症の治療に利用することができる療法は存在しているが、別の改善された療法に対する必要性は存在し続けている。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明は、２型糖尿病、代謝性症候群（Ｘ症候群またはインスリン抵抗性症候群）、高血糖症、耐糖能障害、ブドウ糖尿、代謝性アシドーシス、白内障、糖尿病性神経症、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、糖尿病性心筋症、１型糖尿病、肥満、高血圧症、高脂血症、アテローム硬化症、骨粗しょう症、骨減少症、脆弱、骨損失、骨折、急性冠症候群、多のう胞卵巣症候群による不妊症、短腸症候群、不安、うつ病、不眠症、慢性疲労、てんかん、摂食障害、慢性疼痛、飲酒癖、腸運動に関連する疾患、潰瘍、過敏性腸症候群、炎症性腸症候群を治療するために、および２型糖尿病での疾患進行を防ぐために役立つ式Ｉの化合物を対象とする。
【００１６】
特に、本発明は、式Ｉの化合物、そのプロドラッグ、または前記の化合物もしくは前記のプロドラッグの薬学的に許容できる塩を対象とし、
【００１７】
【化１】
2005533771.tif 000002
【００１８】
［上式中、
Ｒ１は、３−フルオロアゼチジン−１−イル、３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル、３，４−ジフルオロピロリジン−１−イル、３，３，４−トリフルオロピロリジン−１−イル、３，３，４，４−テトラフルオロピロリジン−１−イル、３−フルオロピペリジン−１−イル、４−フルオロピペリジン−１−イル、３，４−ジフルオロピペリジン−１−イル、３，５−ジフルオロピペリジン−１−イル、３，３−ジフルオロピペリジン−１−イル、４，４−ジフルオロピペリジン−１−イル、３，４，５−トリフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４−トリフルオロピペリジン−１−イル、３，３，５−トリフルオロピペリジン−１−イル、３，４，４−トリフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４，５−テトラフルオロピペリジン−１−イル、３，４，４，５−テトラフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４，４−テトラフルオロピペリジン−１−イル、３，３，５，５−テトラフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４，５，５−ペンタフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４，４，５−ペンタフルオロピペリジン−１−イルまたは３，３，４，４，５，５−ヘキサフルオロピペリジン−１−イルであり、および
Ｒ２は、（Ｃ１〜Ｃ８）アルキルまたは（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキルである］。
【００１９】
好ましい実施形態では、式Ｉの化合物は、Ｒ１が、３−フルオロアゼチジン−１−イルまたは３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イルである化合物である。
【００２０】
他の好ましい実施形態では、式Ｉの化合物は、Ｒ１が、３，４−ジフルオロピロリジン−１−イル、３，３，４−トリフルオロピロリジン−１−イル、３，３，４，４−テトラフルオロピロリジン−１−イルである化合物である。
【００２１】
他の好ましい実施形態では、式Ｉの化合物は、Ｒ１が、３−フルオロピペリジン−１−イル、４−フルオロピペリジン−１−イル、３，４−ジフルオロピペリジン−１−イル、３，５−ジフルオロピペリジン−１−イル、３，３−ジフルオロピペリジン−１−イルまたは４，４−ジフルオロピペリジン−１−イルである化合物である。
【００２２】
他の好ましい実施形態では、式Ｉの化合物は、Ｒ１が、３，４，５−トリフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４−トリフルオロピペリジン−１−イル、３，３，５−トリフルオロピペリジン−１−イル、３，４，４−トリフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４，５−テトラフルオロピペリジン−１−イル、３，４，４，５−テトラフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４，４−テトラフルオロピペリジン−１−イル、３，３，５，５−テトラフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４，５，５−ペンタフルオロピペリジン−１−イル、３，３，４，４，５−ペンタフルオロピペリジン−１−イルまたは３，３，４，４，５，５−ヘキサフルオロピペリジン−１−イルである化合物である。
【００２３】
他の好ましい実施形態では、式Ｉの化合物は、
塩酸（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−ペンタン−１−オン、
塩酸（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−エタノン、
塩酸（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−ペンタン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−イル）−エタノン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−ブタン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−ペンタン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−エタノン、
塩酸（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−１−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−（４，４−ジフルオロ−ピペリジン−１−イル）−エタノン、
塩酸（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−１−（４，４−ジフルオロ−ピペリジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−プロパン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−１−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ブタン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ブタン−１−オン、
塩酸（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オン、
塩酸（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−１−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロペンチル−１−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−エタノン、
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロペンチル−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−イル）−エタノンまたは
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロペンチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−エタノン
である。
【００２４】
他の好ましい実施形態では、式Ｉの化合物は、
【００２５】
【化２】
2005533771.tif 000003
【００２６】
のように示されるＳ鏡像異性体である。
【００２７】
他の様態では、本発明は、治療的有効量の前記の式Ｉの化合物、そのプロドラッグ、または前記の化合物もしくは前記のプロドラッグの薬学的に許容できる塩および薬学的に許容できる希釈剤または担体を含む医薬組成物を対象とする。
【００２８】
さらに他の様態では、本発明は、治療的有効量の
前記の式Ｉの第１の化合物、そのプロドラッグ、または前記の化合物もしくは前記のプロドラッグの薬学的に許容できる塩および
インスリンまたはインスリン類似体；インスリノトロピン（ｉｎｓｕｌｉｎｏｔｒｏｐｉｎ）；ビグアニド；α２−アンタゴニストまたはイミダゾリン；グリタゾン（ｇｌｉｔａｚｏｎｅ）；アルドースレダクターゼ阻害剤；グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤；ソルビトールデヒドロゲナーゼ阻害剤；脂肪酸酸化阻害剤；α−グルコシダーゼ阻害剤；β−アゴニスト；ホスホジエステラーゼ阻害剤；脂質低下剤；抗肥満剤；バナジン酸塩、バナジウム錯体またはペルオキソバナジウム錯体；アミリンアンタゴニスト；グルカゴンアンタゴニスト；成長ホルモン分泌促進剤；糖新生阻害剤；ソマトスタチン類似体；腎臓グルコースの阻害剤；または抗脂肪分解剤（ａｎｔｉｌｉｐｏｌｙｔｉｃ  ａｇｅｎｔ）である第２の化合物；前記の第２の化合物のプロドラッグまたは前記の第２の化合物または前記の第２の化合物のプロドラッグの薬学的に許容できる塩を含有する医薬組成物を対象とする。本発明のこの様態の他の実施形態では、組成物は、薬学的に許容できる担体または希釈剤をさらに含有する。
【００２９】
他の様態では、本発明は、
ａ）前記の式Ｉの化合物を含む第１の剤形；
ｂ）インスリンおよびインスリン類似体；インスリノトロピン；ビグアニド；α２−アンタゴニストおよびイミダゾリン；グリタゾン；アルドースレダクターゼ阻害剤；グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤；ソルビトールデヒドロゲナーゼ阻害剤；脂肪酸酸化阻害剤；α−グルコシダーゼ阻害剤；β−アゴニスト；ホスホジエステラーゼ阻害剤；脂質低下剤；抗肥満剤；バナジン酸塩およびバナジウム錯体およびペルオキソバナジウム錯体；アミリンアンタゴニスト；グルカゴンアンタゴニスト；成長ホルモン分泌促進剤；糖新生阻害剤；ソマトスタチン類似体；腎臓グルコースの阻害剤；または抗脂肪分解剤から選択される抗糖尿病薬を含む第２の剤形；この第２の剤形のプロドラッグおよび第２の剤形およびプロドラッグの薬学的に許容できる塩；および
ｃ）前記の第１の剤形（ａ）および前記の第２の剤形（ｂ）を備えるための容器手段
を含むキットを対象とする。
【００３０】
一実施形態では、このキットは、薬学的に許容できる担体または希釈剤およびこれらの担体または希釈剤のための容器手段をさらに含む。
【００３１】
他の様態では、本発明は、哺乳動物でジペプチジルペプチダーゼＩＶを阻害する治療方法を対象とし、この方法は、治療的有効量の前記の式Ｉの化合物、そのプロドラッグまたは前記の化合物もしくは前記のプロドラッグの薬学的に許容できる塩または前記の医薬組成物を、ジペプチジルペプチダーゼＩＶを阻害する必要のある前記の哺乳動物に投与することを含む。
【００３２】
他の様態では、本発明は、哺乳動物で、ジペプチジルペプチダーゼ−ＩＸ阻害により仲介される状態を治療する方法を対象とし、この方法は、治療的有効量の前記の式Ｉの化合物、そのプロドラッグまたは前記の化合物もしくは前記のプロドラッグの薬学的に許容できる塩または前記の医薬組成物を、ジペプチジルペプチダーゼ−ＩＸ阻害により緩和される状態に罹患している前記の哺乳動物に投与することを含む。
【００３３】
この方法の一実施形態では、治療される状態は、２型糖尿病、代謝性症候群、高血糖症、耐糖能障害、ブドウ糖尿、代謝性アシドーシス、白内障、糖尿病性神経症、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、糖尿病性心筋症、１型糖尿病、肥満、肥満により悪化する状態、高血圧症、高脂血症、アテローム硬化症、骨粗しょう症、骨減少症、脆弱、骨損失、骨折、急性冠症候群、多のう胞卵巣症候群による不妊症、２型糖尿病での疾患進行、慢性疲労、てんかん、腸運動に関連する疾患、潰瘍、過敏性腸症候群、炎症性腸症候群、不安、うつ病、不眠症、慢性疲労、てんかん、摂食障害、慢性疼痛または飲酒癖である。
【００３４】
好ましい実施形態では、治療される状態は、２型糖尿病である。
【００３５】
別の様態では、本発明は、ある薬剤がＤＰＰ−ＩＶ阻害剤であるかを同定する方法を対象とし、この方法は、
ａ）その薬剤を絶食した糖尿病のＫＫ／Ｈ１Ｊマウスに投与するステップと、
ｂ）ＫＫ／Ｈ１Ｊマウスに経口ブドウ糖を負荷するステップと、
ｃ）後続の経口ブドウ糖負荷に対するマウスの応答を評価するステップとを含み、ここで、前記の薬剤を、２型糖尿病、代謝性症候群、高血糖症、耐糖能障害、ブドウ糖尿、代謝性アシドーシス、白内障、糖尿病性神経症、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、糖尿病性心筋症、１型糖尿病、肥満、肥満により悪化する状態、高血圧症、高脂血症、アテローム硬化症、骨粗しょう症、骨減少症、脆弱、骨損失、骨折、急性冠症候群、多のう胞卵巣症候群による不妊症、２型糖尿病での疾患進行の防止、不安、うつ病、不眠症、慢性疲労、てんかん、摂食障害、慢性疼痛、飲酒癖、腸運動に関連する疾患、潰瘍、過敏性腸症候群、炎症性腸症候群または短腸症候群のための治療として同定することができる。
【００３６】
本願明細書で使用する場合、「アルキル」との用語は、１から８個の炭素原子を有する一価の飽和直鎖または分枝鎖脂肪族炭化水素基を意味する。
【００３７】
本発明の式Ｉの化合物に関して本願明細書で使用する場合、「薬学的に許容できる塩」との表現には、薬学的に許容できるアニオン性の塩が含まれる。「薬学的に許容できるアニオン」との用語は、医薬組成物の他の成分および／またはそれで治療される動物と化学的および／または毒性学的に適用可能な陰イオンをいう。適切なアニオンには、これらに限られないが、ハライド（例えば、クロリド、ヨードおよびブロミド）、（Ｃ１〜Ｃ１２）アルキルスルホネート（例えば、メシレート、エチルスルホネートなど）、アリールスルホネート（例えば、フェニルスルホネート、トシレートなど）、（Ｃ１〜Ｃ１２）アルキルホスホネート、ジ（Ｃ１〜Ｃ１２）アルキルホスフェート（例えば、ジメチルホスフェート、ジエチルホスフェート、α−ジグリセロールホスフェートなど）、アリールホスホネート、アリールホスフェート、アルキルアリールホスホネート、アルキルアリールホスフェート、（Ｃ１〜Ｃ１２）アルキルカルボキシレート（例えば、アセテート、プロピオネート、グルタメート、グリセレートなど）、アリールカルボキシレートなどが含まれる。
【００３８】
本発明の化合物は、単離するか、そのまま、または薬学的に許容できる塩、溶媒和物および／または水和物の形で使用することができる。「塩」との用語は、本発明の化合物の無機および有機塩を意味する。これらの塩は、化合物の最終単離および精製の間にその場で、または別に、化合物またはプロドラッグと適切な有機または無機酸とを反応させ、こうして生じた塩を単離することにより調製することができる。代表的な塩には、臭化水素塩、塩酸塩、ヨウ化水素塩、硫酸塩、重硫酸塩、硝酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、シュウ酸塩、ベシル酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、マロン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、ホウ酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トシル酸塩、ギ酸、クエン酸、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩、メシル酸塩、グルコヘプト酸塩、ラクトビオン酸塩およびラウリルスルホン酸塩などが含まれる。例えば、Ｂｅｒｇｅら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、６６、１〜１９頁（１９７７年）参照。
【００３９】
「プロドラッグ」との用語は、ｉｎ  ｖｉｖｏで変換して、式（Ｉ）の化合物またはこの化合物の薬学的に許容できる塩、水和物または溶媒和物をもたらす化合物を意味する。このような化合物には、これらに限られないが、式Ｉの化合物のＮ−アシルおよびＮ−カルボアルコキシ誘導体、さらにイミン誘導体が含まれる。変換は、血液中での加水分解を介するなどの様々なメカニズムを介して生じうる。プロドラッグの使用に関する考察は、Ｔ．ＨｉｇｕｃｈｉおよびＷ．Ｓｔｅｌｌａの「Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ」、Ｖｏｌ．１４  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａ．Ｃ．Ｓ．Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  ＳｅｒｉｅｓおよびＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ、ｅｄ．Ｅｄｗａｒｄ  Ｂ．Ｒｏｃｈｅ、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、１９８７年により示されている。
【００４０】
本願明細書に記載の化合物のうちの数種は、少なくとも１個の不斉中心を含み、したがって、当業者であれば、本願明細書に記載および検討されている化合物のすべての立体異性体（例えば、鏡像異性体およびジアステレオ異性体およびこれらのラセミ混合物）は、本発明の範囲内にあることを認めるであろう。特には、式Ｉの化合物およびその中間体中のＲ７で置換されている炭素が不斉であり、これらの化合物は、ラセミ混合物として請求項１に、さらにＳ鏡像異性体として請求項６に示されて請求されている。当業者であれば、式Ｉの化合物のピロリジンおよびピペリジン基のいずれもが、少なくとも１個の不斉中心を含みうることを認めるであろう（例えば、実施例７）。本願明細書で請求、描写および検討されているこれらの化合物のすべての立体異性体（例えば、鏡像異性体、ジアステレオ異性体およびこれらのラセミ混合物）は、本発明の範囲内である。
【００４１】
さらに、本技術分野の専門家であれば、式Ｉの化合物は、水分子が結晶構造内に含まれている水和物として、および溶媒分子がその中に含まれる溶媒和物として結晶形で存在しうることを認めるであろう。このような水和物および溶媒和物はすべて、本発明の一部と考えられる。
【００４２】
さらに本発明は、式Ｉにより示される化合物と同一ではあるが、実際には、１個または複数の原子が、天然に通常存在する原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を有する原子に代えられている同位体標識された化合物も含む。本発明の化合物に導入しうる同位体の例には、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ、１７Ｏおよび１８Ｆなどの水素、炭素、窒素、酸素およびフッ素の同位体が含まれる。前記の同位体および／または他の原子の他の同位体を含有する本発明の化合物、そのプロドラッグ、本化合物またはプロドラッグの薬学的に許容できる塩は、本発明の範囲内である。ある本発明の同位体標識された化合物、例えば、３Ｈおよび１４Ｃなどの放射性同位体が導入された化合物は、薬物および／または基質組織分布分析で使用することができる。調製および検出可能性のその容易さによって、トリチウム標識（即ち、３Ｈ）および炭素−１４（即ち（１４Ｃ）同位体は、特に好ましい。さらに、重水素（即ち、２Ｈ）などのより重い同位体での置換により、より大きな代謝安定性、例えば、高いｉｎ  ｖｉｖｏ半減期または低い用量要求から生じる一定の治療的利点が生じて、場合によっては有利となりうる。同位体標識されている本発明の式Ｉの化合物およびそのプロドラッグは通常、下記のスキームおよび／または実施例で検討する手順を実施し、同位体標識されていない試薬を容易に利用可能な同位体標識されている試薬に代えることにより調製することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４３】
通常、本発明の式Ｉの化合物を、化学分野で知られているプロセスを含む方法により、特に、本願明細書に含まれている記載を考慮して調製することができる。本発明の式Ｉの化合物を製造するためのあるプロセスを、下記の反応スキームにより詳述する。他のプロセスは、実施例部分に記載する。スキームおよび実施例に記載の反応のための出発化合物のうちの数種は、本願明細書に詳述されているように調製する。他の出発化合物はすべて、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ所在）などの一般的な市販源から入手することができる。
【００４４】
【化３】
2005533771.tif 000004
【００４５】
スキーム１では、（ステップ１）式中のＲ１０が前記の化学スキームＩと相容性の窒素保護基である式ＩＩの（Ｌ）アミノ酸化合物（例えば、（Ｌ）−Ｂｏｃ−イソロイシン、（Ｌ）−Ｂｏｃ−シクロヘキシルグリシン、（Ｌ）−Ｂｏｃ−ａｌｌｏ−イソロイシン、（Ｌ）−Ｂｏｃ−ロイシン、（Ｌ）−Ｂｏｃ−バリンまたは（Ｌ）−Ｂｏｃ−アラニン）と、式ＩＩＩの化合物、フッ素化ピロリジン（例えば、塩酸３，３−ジフルオロピロリジンまたは塩酸３，３，４，４−テトラフルオロピロリジン）とをカップリングさせることにより、式中のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ７が前記と同様に定義される式Ｉの化合物を調製することができる。
【００４６】
適切な窒素保護基Ｒ１０には例えば、これらに限られないが、ｔ−ブトキシカルボニル（「Ｂｏｃ」）、ベンジルオキシカルボニルおよびフルオレニルメトキシカルボニル（「Ｆｍｏｃ」）が含まれる。窒素保護基の他の例は、参照して本願明細書に援用される「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、２ｎｄ．Ｅｄ．、Ｐ．Ｇ．Ｍ．ＷｕｔｓおよびＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、３１５頁に記載されている。式ＩＩの化合物を使用してカップリングを行うと、式ＩＶの化合物が生じる。ステップ２では式ＩＶの化合物を、不活性溶媒（例えば、酢酸エチル）に溶かし、前記の参照文献に記載されているように、Ｒ１０基の性質に適した方法（例えば、Ｒ１０がＢｏｃならば気体の酸）で脱保護すると、式Ｉの化合物が得られる。
【００４７】
前記のカップリング反応は、式ＩＩの化合物及び式ＩＩＩの化合物を塩基（例えば、トリエチルアミンまたはピリジン）の存在下に、反応不活性溶媒（例えば、ジクロロメタン）に溶かすことにより容易に行うことができる。生じた溶液に、カップリング剤またはカップリング剤の組合せ（例えば、ヒドロキシベンゾトリアゾール／塩酸１−（−３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド）を加える。１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール／塩酸１−（−３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド、ヒドロキシベンゾトリアゾール／ジシクロヘキシルカルボジイミド、２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１，２−ジヒドロキノリン、カルボニルジイミダゾールまたはジエチルホスホリルシアニドなどの他のカップリング剤を使用することもできる。カップリングを、不活性溶媒、好ましくは、非プロトン性溶媒中で行う。適切な溶媒には、例えば、アセトニトリル、ジクロロメタン、ジメチルホルムアミド、クロロホルムが含まれる。カルボン酸をカップリングするために使用することができる他の条件を検討するためには、Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ、Ｖｏｌ  ＸＶ、ｐａｒｔ．１１、Ｅ．Ｗｕｎｓｃｈ、Ｅｄ．、Ｇ．Ｔｈｅｉｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ、１９７４年、ＳｔｕｔｔｇａｒｔおよびＭ．Ｂｏｄａｎｓｋｙ、Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓに記載のもの（ＳｐｒｉｎｇｅｒＶｅｒｌａｇ  Ｂｅｒｌｉｎ  １９８４年）およびＴｈｅ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ．Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（ｅｄ．Ｅ．ＧｒｏｓｓおよびＪ．Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ）、ｖｏｌｓ  １−５（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ  ＮＹ  １９７９〜１９８３年）参照。前記の参考文献のテキストは、参照して援用される。
【００４８】
通常、周囲圧力および温度で、薄層クロマトグラフィーまたは当業者によく知られている他の分析技術により検出して出発物質がもはや存在しなくなるまで、反応を行う。式ＩＶのカップリング生成物は、当業者によく知られている方法により単離することができる。
【００４９】
式ＩＶの化合物を不活性溶媒（例えば、酢酸エチル）に溶かし、約０℃まで冷却し、続いて、気体の酸（例えば、塩酸）で約１分間処理することにより、式ＩＶの化合物の脱保護を容易に行うことができる。反応混合物を約１５分間攪拌し、次いで、放置して室温にし、続いて、さらに約３０分間攪拌する。
【００５０】
当業者であれば、スキームＩＩＩに示されていて、実施例２〜８で例示されている式ＩＩの保護されている（Ｌ）アミノ酸化合物を、式ＩＩの化合物のラセミ混合物に代えることができることを認めるであろう。したがって、式Ｉの化合物は、鏡像異性体のラセミ混合物として存在してもよく、これらの混合物は、本発明の範囲内である。
【００５１】
本願明細書で使用する場合、「不活性溶媒」との用語は、その構造が、反応を妨げるような官能基を含まない溶媒である。ヒドロキシル基を活性化し、カップリングするための例は、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）である。
【００５２】
本願明細書で使用する場合、「活性化試薬」との用語はこの例では、ヒドロキシル基をブロミド、ヨード、アルキルスルホネートまたはアリールスルホネートなどの脱離基に変えるものである。
【００５３】
分解により、または不斉合成により、または当業者によく知られている他の方法により、スキームＩＩＩのステップ１でのカップリング前に、光学的に活性なアミノ酸を得ることができる。もしくは、望ましい場合には、当業者に知られている技術により、式Ｉの化合物を合成する際のより遅い時点で、分解を行うこともできる。
【００５４】
スキームＩの化合物ＩＩＩは、当技術分野の通常の専門家に知られているように調製することができる。例えば、Ｇｉａｒｄｉｎａ，Ｇら、Ｓｖｎｌｅｔｔ．１９９５年、５５頁により記載されているように、塩酸３，３−ジフルオロピロリジンを調製することもできる。Ｃｈａｕｄｒｙら、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、１９６４年、８７４頁に記載されているように、３，３，４，４−テトラフルオロピロリジンを調製することもできる。もしくは、下記のスキームＩＩに示されているように、３，３，４，４−テトラフルオロピロリジンを調製することもできる。
【００５５】
【化４】
2005533771.tif 000005
【００５６】
スキームＩＩでは、ステップ１で、２，２，３，３−テトラフルオロブタンジオール（Ｘ）のヒドロキシル基を活性化させて、脱離基Ｒ８（ここで、Ｒ８は、Ｂｒ、ＩまたはＳＯ２Ｒ１１であり、ここで、Ｒ１１は、（１）１個または複数のフッ素で場合によって置換されていてもよいＣ１〜Ｃ８直鎖または分枝鎖アルキルまたは（２）ハロゲンで場合によって置換されていてもよいアリール基または１個または４個のフッ素で場合によって置換されていてもよいＣ１〜Ｃ８直鎖または分枝鎖アルキルであってよい）にする。しかしながら好ましくは、Ｒ８は、トリフルオロメチルスルホニルオキシ基（Ｆ３ＣＳＯ３）である。アルコール官能基を例えば、フッ素またはヨウ素に変えるために必要な活性化試薬は、当業者によく知られており（例えば、参照して援用されるＭａｒｃｈ、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、３ｒｄ  ｅｄ．３８２〜３８４頁およびＬａｒｏｃｋ、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ、３５３〜３６０頁参照）、これらに限られないが、次の活性化試薬：臭化水素（「ＨＢｒ」）、三臭化リン（「ＰＢｒ３」）、五臭化リン（「ＰＢｒ５」）、臭化チオニル（「ＳＯＢｒ２」）およびヨウ化水素（「ＨＩ」）が含まれる。好ましい活性化試薬の組合せは、トリフェニルホスフィン／四臭化炭素（「Ｐｈ３Ｐ／ＣＢｒ４」）、Ｐｈ３Ｐ／Ｎ−ブロモスクシンイミド、ヨウ化カリウム／リン酸（「ＫＩ／Ｈ３ＰＯ４」）、Ｐｈ３Ｐ／Ｉ２およびＭｅ３ＳｉＣｌ／Ｎａｌが含まれる。アルコール官能基を活性化して、アルキルまたはアリールスルホネートにすることは、対応する塩化スルホニルまたは無水スルホン酸と不活性溶媒中、ピリジンまたはトリエチルアミンなどの塩基の存在下に反応させ、これを冷却し（０℃）、約１時間攪拌することにより行う。次いで、反応混合物を室温でさらに約１時間攪拌する。
【００５７】
ステップ２では、化合物ＸＩと、Ｒ９がアルキルまたはアリール「保護基」である１級アミンＲ９ＮＨ２（即ち、Ｒ９と窒素原子との結合は、ステップ３で当業者に知られている標準的な化学的処理により容易に分離されうる）との反応を、溶液を還流まで一晩加熱することにより行う。Ｎ−保護基の例は、参照により本願明細書に援用される「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、２ｎｄ．Ｅｄ．、Ｐ．Ｇ．Ｍ．ＷｕｔｓおよびＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、３６２頁に記載されており、例えば、ベンジル、ｔ−ブチル、アリルおよびベンズヒドリルが含まれる。好ましくは、Ｒ９はベンジルであり、この場合、ステップ３の脱保護を、パラジウムの存在下での水素化分解により行う。
【００５８】
ステップ３は、適切な溶媒（例えば、水、メタノールまたはエタノール）中、中間体化合物ＸＩＩの塩酸塩、臭化水素酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩などのカチオン塩で行うことができる。化合物ＸＩＩからのＲ９保護基の除去は、使用される個々のＲ９保護基に適した条件下に行うことができる。このような条件には、例えば、（ａ）Ｒ９がベンジルまたはベンズヒドリルの場合における水素化分解、（ｂ）Ｒ９がｔ−ブチルである場合における、トリフルオロ酢酸または塩酸などの強酸での処理または（ｃ）Ｒ９がアリルである場合における、触媒量のビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）の存在下での水素化トリブチルスズおよび酢酸での処理が含まれる。
【００５９】
Ｒ９がベンジルである場合、エタノール中１０％のパラジウムの存在下に、約４５ｐｓｉで、約３時間の水素化分解により、脱保護を行う。次いで、珪藻土を介しての触媒の濾過、溶媒の除去およびジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、酢酸エチル、１，４−ジオキサンまたはテトラヒドロフランなどの非ヒドロキシル溶媒での粉砕により、最終化合物ＩＩＩを対応するカチオン塩として単離する。スキームＩに記載されているように、化合物ＩＩＩを、式ＩのＤＰＰ−ＩＶ阻害剤化合物を調製するために利用する。
【００６０】
【化５】
2005533771.tif 000006
【００６１】
代替的には、ａおよびｂがそれぞれ０である式Ｉの化合物は、スキームＩＩＩのステップに従い調製することができる。スキームＩＩＩのステップ１では、式中のＲ７およびＲ１０が前記と同様に定義される式ＩＩの（Ｌ）アミノ酸化合物（例えば、（Ｌ）−Ｂｏｃ−イソロイシン）を、スキームＩのステップ１で前記したと同様に、ヒドロキシアゼチジン（式Ｖの化合物）とカップリングさせて、式ＶＩの化合物を生じさせる。式ＶＩの生じた化合物をステップ２で、トリフッ化ジエチルアミノイオウまたは同様のフッ素化剤で処理すると、式ＶＩＩの化合物が得られる。ステップ３では、式ＶＩＩの化合物を、スキームＩのステップ２で前記したと同様に酸で処理すると、式中のａおよびｂがそれぞれ０である式Ｉの化合物が得られる。
【００６２】
反応不活性溶媒（例えば、ジクロロメタン）中の三フッ化ジエチルアミノイオウの溶液を冷却し（例えば、−７８℃）、これに、式ＶＩの化合物の溶液を滴加することにより、ステップ２に記載の反応を容易に行うことができる。薄層クロマトグラフィーまたは当業者によく知られている他の分析技術により決定して、出発物質がもはや存在しなくなるか、または反応が完了するまで、反応混合物を周囲温度まで加温する。式ＶＩＩの化合物を、当業者によく知られている方法により単離して、さらにスキームＩのステップ２で前記したと同様に、ステップ３で気体の酸で処理することができる。
【００６３】
同様に、同様の順序で、それぞれピロリジン−３−オールまたはヒドロキシピペリジンから出発して、モノフルオロピロリジンおよびピペリジン誘導体を調製することができる。
【００６４】
【化６】
2005533771.tif 000007
【００６５】
代替的には、スキームＩＶに従い、式Ｉの化合物を調製することもできる。ステップ１で、スキーム１のステップ１で前記したと同様に、式中のＲ７およびＲ１０が前記と同様に定義される式ＩＩの（Ｌ）アミノ酸化合物（例えば、（Ｌ）−Ｂｏｃ−イソロイシン、Ｂｏｃ−シクロヘキシルグリシンなど）を、式中のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が前記と同様に定義される式ＶＩＩＩの化合物、フッ素化ピペリジン（例えば、塩酸４，４−ジフルオロ−ピペリジン）とカップリングさせると、式ＩＸの化合物が生じる。スキーム１のステップ２で前記したと同様に、ステップ２で、式ＩＸの化合物を脱保護すると（例えば、気体の酸）、式Ｉの化合物が得られる。
【００６６】
当業者ならば、スキームＩおよび４で使用されている合成手順を、必須のアゼチジン出発物質から出発して、ピロリジンまたはピペリジン基の代わりにアゼチジン環を含む同様の化合物の合成に適用することもできることを認めるであろう。
【００６７】
当技術分野の通常の専門家であれば、スキーム１、３および４に示されていて、実施例１〜１６で例示されている式ＩＩの保護されている（Ｌ）アミノ酸化合物を、式ＩＩの化合物のラセミ混合物に代えることができることを認めるであろう。したがって、式Ｉの化合物は、鏡像異性体のラセミ混合物として存在してもよく、これらの混合物は、本発明の範囲内である。
【００６８】
光学分割により、または不斉合成により、または当業者によく知られている他の方法により、スキームＩ、ＩＩＩおよびＩＶのステップ１でのカップリング前に、光学的に活性なアミノ酸を得ることができる。もしくは、望ましい場合には、当業者に知られている技術により、式Ｉの化合物を合成する際のより遅い時点で、光学分割を行うこともできる。
【００６９】
本発明の式Ｉの化合物は、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ関連状態の治療；２型糖尿病の治療；ＩＩ型糖尿病での疾患進行の予防；Ｉ型糖尿病、耐糖能障害、高血糖症、耐糖能障害、代謝性症候群（Ｘ症候群またはインスリン抵抗性症候群）、ブドウ糖尿、代謝性アシドーシス、白内障、糖尿病性神経症および腎症、代謝症候群、肥満の治療、高血圧、高脂血症、代謝性アシドーシス、関節炎、骨粗しょう症、骨減少症、脆弱、骨損失、骨折、成長ホルモンの欠乏による低身長、多のう胞卵巣症候群による不妊症、不安、うつ病、不眠症、慢性疲労、てんかん、摂食障害、慢性疼痛、飲酒癖、腸運動に関連する疾患、潰瘍、過敏性腸症候群、炎症性腸症候群および短腸症候群の治療のために役立つ。
【００７０】
本発明はさらに、ヒトを含む哺乳動物で前記の状態を治療または予防する治療方法に関し、この際、本発明の式Ｉの化合物を、治療効果が得られるように設計された適切な用量計画の一部として投与する。適切な用量計画、投与される各用量の量および化合物の用量間の間隔は、使用される本発明の式Ｉの化合物、使用される医薬組成物のタイプ、治療される患者の特性および状態の重度に依存する。
【００７１】
通常、前記の式Ｉの化合物での有効な用量は、１回または複数回の投与で、０．０１ｍｇ／ｋｇ／日から３０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．０１ｍｇ／ｋｇ／日から１ｍｇ／ｋｇ／日である。しかし、治療される患者の状態に依存し、この用量のいくつかのバリエーションが必然的に生じる。いずれの場合にも、用量を決定する責任を負った個人が、個々の患者に適した用量を決定する。
【００７２】
本発明の式Ｉの化合物を、経口および非経口（例えば、静脈内、皮下または髄内）を含む様々な慣用の投与経路により、治療を必要とする患者に投与することができる。さらに、本発明の医薬組成物は、鼻腔内で、座薬として、または「速溶性（ｆｌａｓｈ）」製剤を使用して、即ち、水の使用を必要とせずに医薬品を口中で溶かして、投与することができる。
【００７３】
本発明の化合物は、１回投与で（例えば、１日１回）または複数回投与で、または一定の注入により投与することができる。本発明の化合物は、単独で、または薬学的に許容できる担体、媒体または希釈剤と組み合わせて、１回または複数回の投与で投与することもできる。適切な医薬担体、媒体および希釈剤には、不活性な固体希釈剤または充填剤、無菌水溶液および様々な有機溶媒が含まれる。本発明の化合物および薬学的に許容できる担体、媒体または希釈剤を組み合わせることにより生じた医薬組成物をついで、錠剤、粉末、トローチ剤、シロップ、注入可能な溶液などの様々な剤形で容易に投与することができる。望ましい場合には、これらの医薬組成物は、香料、結合剤、賦形剤などの他の成分を含有してもよい。
【００７４】
したがって、経口投与の目的では、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウムおよび／またはリン酸カルシウムなどの様々な賦形剤を含有する錠剤を、デンプン、アルギン酸およびまたはある種の錯体ケイ酸塩などの様々な崩壊剤と共に、ポリビニルピロリドン、スクロース、ゼラチンおよび／またはアラビアゴムなどの結合剤と一緒に使用することができる。加えて、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウムおよびタルクなどの滑剤が往々にして、錠剤化の目的に役立つ。同様のタイプの固体組成物を、軟質および硬質充填ゼラチンカプセル内で充填剤として使用することもできる。このために好ましい物質には、ラクトースまたは乳糖および高分子量のポリエチレングリコールが含まれる。経口投与のために水性懸濁液またはエリキシルが望ましい場合には、その中の活性薬剤を、様々な甘味料または着香剤、着色剤または染料、望ましい場合には乳化剤または懸濁剤と、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリンおよび／またはその組合せなどの希釈剤と一緒に組み合わせることができる。
【００７５】
非経口投与のためには、ゴマ油、落花生油、水性プロピレングリコール中、または無菌水溶液中の本発明の化合物の溶液を使用することができる。このような水溶液は、必要な場合には、適切に緩衝し、液体希釈剤を初めに、十分な食塩水またはグルコースで等張性にすべきである。これらの個々の水溶液は特に、静脈内、筋肉内、皮下および腹腔内投与に適している。このことに関連して、使用される滅菌水性媒体は、当業者に知られている標準的な技術により容易に入手することができる。
【００７６】
鼻腔内投与または吸入による投与のためには、患者により押されるか、ポンピングされるポンプスプレー容器からの溶液または懸濁液の形で、または適切な推進剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または他の適切なガスを使用する加圧容器またはネブライザーからのエアロゾルスプレー状態として、本発明の化合物を簡単に送達する。加圧エアロゾルでは、用量単位を、計量された量を輸送するためのバルブを備えることにより決定することができる。加圧容器またはネブライザーは、本発明の化合物の溶液または懸濁液を含有してよい。吸入器または注入器で使用するためのカプセルおよびカートリッジ（例えば、ゼラチン製）を、本発明の１種または複数の化合物及びラクトースまたはデンプンなどの適切な粉末基剤を含む粉末ミックスを含有するように処方することができる。
【００７７】
本発明は、別々に同時投与することができる化合物の組合せで治療することによる前記の徴候の治療に関する様態を有するので、本発明は、別々の医薬組成物をキットの形に組み合わせることに関する。このキットは、２種の別々の組成物：（１）式Ｉの化合物、そのプロドラッグまたは薬学的に許容できる塩およびプロドラッグ、さらに薬学的に許容できる希釈剤または担体を含む第１の剤形；および（２）インスリンおよびインスリン類似体；インスリノトロピン；ビグアニド；α２−アンタゴニストおよびイミダゾリン；グリタゾン；アルドースレダクターゼ阻害剤；グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤；ソルビトールデヒドロゲナーゼ阻害剤；脂肪酸酸化阻害剤；α−グルコシダーゼ阻害剤；β−アゴニスト；ホスホジエステラーゼ阻害剤；脂質低下剤；抗肥満剤；バナジン酸塩、バナジウム錯体およびペルオキソバナジウム錯体；アミリンアンタゴニスト；グルカゴンアンタゴニスト；成長ホルモン分泌促進剤；糖新生阻害剤；ソマトスタチン類似体；腎臓グルコースの阻害剤；抗脂肪分解剤から選択される抗糖尿病薬を含む第２の剤形；この第２の剤形のプロドラッグおよび第２の剤形およびプロドラッグの薬学的に許容できる塩、さらに薬学的に許容できる担体または希釈剤を含有する第２の剤形を含む。
【００７８】
（１）および（２）の量は、同時投与した場合に、前記のような状態が治療または改善されるような量である。キットは、分別ボトルまたは分別ホイル包みなどの別々の剤形を備えるための容器を含み、この際、各コンパートメントは、（１）または（２）を含有する複数の剤形（例えば錠剤）を含有する。もしくは、活性成分含有剤形を分離するのではなく、キットは、別々の剤形を含む剤形全体をそれぞれが含有する別々のコンパートメントを備えていてもよい。
【００７９】
このタイプのキットの例は、ブリスターパックであり、この場合、個々のブリスターはそれぞれ、（１）からの医薬組成物剤形および（２）からの医薬組成物剤形を含む２個（またはそれ以上）の錠剤を含有する。通常、キットは、別の成分を投与するための指示書を含む。別々の成分を好ましくは異なる剤形（例えば、経口および非経口）で投与する場合に、異なる投与間隔で投与する場合に、または組合せの個々の成分の滴定が、処方医により指示されている場合に、このキット形態は特に有利である。
【００８０】
本発明の場合、したがってキットは、
ｄ）式Ｉの化合物、そのプロドラッグまたは薬学的に許容できる塩またはプロドラッグを含む第１の剤形；
ｅ）インスリンおよびインスリン類似体；インスリノトロピン；ビグアニド；α２−アンタゴニストおよびイミダゾリン；グリタゾン；アルドースレダクターゼ阻害剤；グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤；ソルビトールデヒドロゲナーゼ阻害剤；脂肪酸酸化阻害剤；α−グルコシダーゼ阻害剤；β−アゴニスト；ホスホジエステラーゼ阻害剤；脂質低下剤；抗肥満剤；バナジン酸塩およびバナジウム錯体およびペルオキソバナジウム錯体；アミリンアンタゴニスト；グルカゴンアンタゴニスト；成長ホルモン分泌促進剤；糖新生阻害剤；ソマトスタチン類似体；腎臓グルコースの阻害剤；または抗脂肪分解剤から選択される抗糖尿病薬を含む第２の剤形；この第２の剤形のプロドラッグおよび第２の剤形およびプロドラッグの薬学的に許容できる塩；
ｆ）任意の薬学的に許容できる担体または希釈剤；および
ｇ）前記の第１の剤形（ａ）、前記の第２の剤形（ｂ）および前記の場合による担体または希釈剤（ｃ）を備えるための容器手段
を含む。
【００８１】
一定量の活性成分を有する様々な医薬組成物を調製する方法は知られているか、本開示を考慮すれば、当業者には明らかである。医薬組成物を調製する方法の例に関しては、Ｒｅｍｉｎａｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ．、１９ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（１９９５年）参照。
【００８２】
ジペプチジルペプチダーゼ阻害に関するｉｎ  ｖｉｔｒｏ分析
ジペプチジルペプチダーゼ阻害は、ＤＰＰ−ＩＶ活性を測定するための公表されている方法（Ａｓｓａｙ  ｏｆ  ｄｉｐｅｐｔｉｄｙｌ  ｐｅｐｔｉｄａｓｅ  ＩＶ  ｉｎ  ｓｅｒｕｍ  ｂｙ  ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｒｙ  ｏｆ  ４−ｍｅｔｈｏｘｙ−２−ｎａｐｈｔｈｙｌａｍｉｄｅ．（１９８８年）Ｓｃｈａｒｐｅ，Ｓ．、ＤｅＭｅｅｓｔｅｒ，Ｉ．、Ｖａｎｈｏｏｆ，Ｇ．、Ｈｅｎｄｒｉｋｓ，Ｄ．、Ｖａｎ  Ｓａｎｄｅ，Ｍ．、Ｖａｎ  Ｃａｍｐ，Ｋ．およびＹａｒｏｎ，Ａ．Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．３４：２２９９〜２３０１頁；Ｄｉｐｅｐｔｉｄｙｌ  ｐｅｐｔｉｄａｓｅｓ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ（１９８８年）Ｌｏｄｊａ，Ｚ．Ｃｚｅｃｈｏｓｌｏｖａｋ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、１１：１８１〜１９４頁）から改変した次の分析によりｉｎ  ｖｉｔｒｏで証明することができる。５０μＭのＧｌｙ−Ｐｒｏ−４−メトキシＢナフチルアミドＨＣｌ（例えば、０．１Ｍの塩化ナトリウム、０．１％（ｖ／ｖ）のトリトンを含有する５０ｍＭのトリスアッセイ緩衝液（ｐＨ７．３）１０ｍＬ当りＧｌｙ−Ｐｒｏ−４−メトキシＢナフチルアミドＨＣｌ１８２μｇ）を含有する基質溶液および１：１００に希釈（基質溶液１０ｍＬ当り酵素１００μＬ）されている酵素（Ｅｎｚｙｍｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｃａｔ＃ＳＰＥ−０１、ＤＰＰ−ＩＶ５ｍＵ／ストックｍＬ）から、酵素基質溶液を生じさせ、これを、４℃に保持する。酵素基質溶液１５０μＬを、ポリスチレン９６ウェルプレートのマイクロタイターウェルにピペット注入し、４℃に維持する。式Ｉの化合物５μＬ／ウェルを加え、式Ｉの化合物の最終濃度を、１ウェル当り３μＭ〜１０ｎＭにする。
【００８３】
対照
試薬ブランクとして、４つのウェルから酵素を除去する。３ｍＭのジプロチン（Ｄｉｐｒｏｔｉｎ）Ａ５μＬを陽性質対照として４つのウェルに加えて、１００μＭの最終ジプロチンＡ濃度を得る。式Ｉの化合物の影響なしに全酵素活性を測定するために（即ち、陰性対照）、蒸留水５μＬを４つのウェルに加える。
【００８４】
全アッセイを３７℃で一晩（約１４〜１８時間）インキュベーションする。Ｆａｓｔ  Ｂｌｕｅ  Ｂ溶液１０μＬ（０．１Ｍの酢酸ナトリウム（ｐＨ４．２）および１０％（ｖ／ｖ）のトリトンＸ−１００を含有する緩衝液中Ｆａｓｔ  Ｂｌｕｅ  Ｂ  ０．５ｍｇ／ｍＬ）を各ウェルに加えることにより、反応をクエンチし、続いて、室温で約５分振盪する。Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ分光光度計または同等の装置で、プレートを分析することができる（５２５ｎｍでの吸収最大）。１０ｎＭから３μＭの化合物濃度幅にわたってＤＰＰ−ＩＶ活性を測定することにより、化合物のＩＣ５０データを得ることができる。
【００８５】
経口ブドウ糖負荷試験（「ＯＧＴＴ」）は、ヒトでは、少なくとも１９３０年代から使用されており（Ｐｉｎｃｕｓら、Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｓｃｉ、１８８：７８２（１９３４年））、ヒトの糖尿病を診断する際に日常的に使用されているが、患者での治療薬の効果を評価するためには使用されていない。
【００８６】
グリタゾン（Ｆｕｊｉｔａら、Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ３２：８０４８１０（１９８３年）；Ｆｕｊｉｗａｒａら、Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ３７：１５４９〜４８頁（１９８８年）；Ｉｚｕｍｉら、Ｂｉｏｐｈａｒｍ  Ｄｕｒｇ．Ｄｉｓｐｏｓ：１８：２４７〜２５７頁（１９９７年））、メトホルミン（Ｒｅｄｄｉら、Ｄｉａｂｅｔ  Ｍｅｔａｂｌ．１９：４４〜５１頁（１９９３年））、グルコシダーゼ阻害剤（Ｈａｍａｄａら、Ｊａｐ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．１７：１７〜２８頁（１９８８年）；Ｍａｔｓｕｏら、Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒ．５５：３１４Ｓ〜３１７Ｓ頁（１９９２年））およびスルホニル尿素の膵臓外効果（Ｋａｍｅｄａら、Ａｒｚｅｎｉｍ．Ｆｏｒｓｃｈ．／Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓ．３２：３９０４４頁（１９８２年）；Ｍｕｌｌｅｒら、Ｈｏｒｍ．Ｍｅｔａｂｌ．Ｒｅｓ．２８：４６９〜４８７（１９９））を評価するためには、ＫＫマウスが使用されている。
【００８７】
ＫＫマウスは、Ｋｏｎｄｏら、（Ｋｏｎｄｏら、Ｂｕｌｌ．Ｅｘｐ．Ａｎｉｍ．６：１０７〜１１２頁（１９５７年））により初めて確立された近交系に由来する。このマウスは、多遺伝子性糖尿病の遺伝性形態を自然に発症し、これは、進行して、ヒト糖尿病患者で見られるものと同様の腎臓、網膜および神経合併症を誘発するが、このマウスは、生存のために、インスリンまたは他の薬物を必要としない。
【００８８】
本発明は、経口ブドウ糖負荷試験でインスリン分泌促進薬の効果を評価するために、ＫＫマウスを使用することを対象としている。
【００８９】
ブドウ糖低下に関するｉｎ  ｖｉｖｏ分析
ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤、式Ｉの化合物のブドウ糖低下作用は、経口ブドウ糖負荷試験で４〜６週齢ＫＫ／Ｈ１Ｊマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｓ）で示すことができる。マウスを一晩（約１４〜１８時間）絶食するが、水は自由に摂取させる。絶食の後（時間（「ｔ」＝０）に、血液２５μＬを、眼窩後方の洞から採取し、氷の上の０．０２５％ヘパリン処理生理食塩水（１００μＬ）に加える。次いで、マウス（１群１０匹）に、０．５％のメチルセルロース中の式Ｉの化合物の溶液（０．２ｍＬ／マウス）を経口投与する。２つの対照群には、０．５％のメチルセルロースのみを与える。ｔ＝１５分の時点で、マウスから前記のように採血し、次いで、蒸留水中のグルコース１ｍｇ／ｋｇを投与する（０．２ｍＬ／マウス）。第１の対照群には、グルコースを投与する。第２の対照群には、水を投与する。ｔ＝４５分の時点で、マウスから前記のように再び採血する。血液試料を遠心分離し、血漿を集め、Ｒｏｃｈｅ−Ｈｉｔａｃｈｉ９１２グルコース分析器でグルコース含分に関して分析する。データは、２つの対照群に対するグルコース可動域の阻害パーセント（％）として示すことができる（即ち、グルコースは投与されたが、試験化合物は投与されていない動物でのグルコースレベルは、阻害０％を示し、水のみを投与された動物でのグルコース濃度は、阻害１００％を示す）。
【００９０】
一般の実験手順
融点を、Ｔｈｏｍａｓ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ毛管融点装置で決定し、補正しない。
【００９１】
フラッシュクロマトグラフィーを、Ｗ．Ｃ．Ｓｔｉｌｌら、（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９７８年、４３、２９２３）により記載された方法により行った。
【００９２】
下記の実施例は、本発明の特定の実施形態を詳述することを意図したものであり、請求項を含む本明細書をなんら限定することを意図したものではない。後記の実施例１〜１６で例示された化合物は、３μＭ、またはそれ未満のＩＣ５０（５０％阻害に必要な試験化合物濃度）を示すｉｎ  ｖｉｔｒｏ活性を示した。
【実施例１】
【００９３】
（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピリジン−１−イル）−ペンタン−１−オン
ステップ１：［（１Ｓ，２Ｓ）−２−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−カルボニル）−ブチル］−カルバミン酸ｔ−ブチルエステル
（Ｌ）−Ｂｏｃ−イソロイシン（３２２ｍｇ、１．３０ミリモル）、塩酸３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン（３００ｍｇ、１．６７ミリモル）、ヒドロキシベンゾトリアゾール（２２５ｍｇ、１．６７ミリモル）およびトリエチルアミン（０．２３ｍＬ、１．６７ミリモル）からなるジクロロメタン（１０ｍＬ）中の混合物に、塩酸１−（−３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（３１９ｍｇ、１．６７ミリモル）を加えた。この混合物を室温で一晩攪拌し、酢酸エチルで希釈し、２ＮのＨＣｌ、飽和重炭酸ナトリウム溶液、水およびブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ｈｅｘ／酢酸エチル、４：１）により、生成物を精製し、白色の固体（４１５ｍｇ、８６％）として単離した。
【００９４】
ステップ１で利用された塩酸３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジンは、Ｃｈａｕｄｒｙら、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、１９６４年、８７４頁に従い調製することができる。代替的に、このフッ素化されたピロリジンを、スキームＩＩに記載のように調製することができる。
【００９５】
ステップ２：塩酸（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピリジン−１−イル）−ペンタン−１−オン
［（１Ｓ，２Ｓ）−２−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−カルボニル）−ブチル］−カルバミン酸ｔ−ブチルエステル（２００ｍｇ、０．５６ミリモル）を酢酸エチル（４ｍＬ）に溶かし、０℃まで冷却し、気体のＨＣｌで約１分間処理した。０℃で１５分間および室温で３０分間の後に、混合物を乾燥するまで濃縮し、固体をヘキサンで粉砕し、収集し、真空下に一晩乾燥した（１２４ｍｇ、７６％、融点＞２５０℃）。
【実施例２】
【００９６】
（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オン
ステップ１：［（１Ｓ，２Ｓ）−１−（３−ヒドロキシ−アゼチジン−１−カルボニル）−２−メチル−ブチル］−カルバミン酸ｔ−ブチルエステル
実施例１のステップ１の記載と同様に、（Ｌ）−Ｂｏｃ−イソロイシンおよび３−ヒドロキシアゼチジンからなる混合物から、［（１Ｓ，２Ｓ）−１−（３−ヒドロキシ−アゼチジン−１−カルボニル）−２−メチル−ブチル］−カルバミン酸ｔ−ブチルエステルを調製した。３−ヒドロキシアゼチジンは、Ｌｅｅ，Ｊ．ら、（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｆｔ．２０００年、１０、１０６３）に従い調製した。
【００９７】
ステップ２：［（１Ｓ，２Ｓ）−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−カルボニル）−２−メチル−ブチル］−カルバミン酸ｔ−ブチルエステル
三フッ化ジエチルアミノイオウ（０．４６ｍＬ、３．５ミリモル）の氷冷（−７８℃）ジクロロメタン（６ｍＬ）溶液に、［（１Ｓ，２Ｓ）−１−（３−ヒドロキシ−アゼチジン−１−カルボニル）−２−メチル−ブチル］−カルバミン酸ｔ−ブチルエステル（１．０ｇ、３．５ミリモル）のジクロロメタン（４ｍＬ）溶液を滴加した。混合物を室温に加温し、一晩攪拌し、次いで、酢酸エチルで希釈し、氷／水に注いだ。層を分離し、有機相を水およびブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル）により生成物を精製し、オイル（２５０ｍｇ、２５％）として単離した。
【００９８】
ステップ３：（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オン
実施例１のステップ２の記載と同様に、［（１Ｓ，２Ｓ）−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−カルボニル）−２−メチル−ブチル］−カルバミン酸ｔ−ブチルエステルをＨＣｌ処理することにより、（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オンを調製した（融点２０８〜２１０℃）。
【実施例３】
【００９９】
（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−エタノン
ステップ１：（Ｓ）−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−エチル］−カルバミン酸ｔ−ブチルエステル
実施例１のステップ１の記載と同様に、（Ｌ）−Ｂｏｃ−シクロヘキシルグリシンおよび３，３，４，４−テトラフルオロピロリジンから、（Ｓ）−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−エチル］−カルバミン酸ｔ−ブチルエステルを調製した。
【０１００】
ステップ２：（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−エタノン
実施例１のステップ２の記載と同様に、（Ｓ）−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−エチル］−カルバミン酸ｔ−ブチルエステルをＨＣｌ処理することにより、（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−エタノンを得た（融点２７８℃）。
【実施例４】
【０１０１】
（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−ペンタン−１−オン
ステップ１：［（１Ｓ，２Ｒ）−２−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−カルボニル）−ブチル］−カルバミン酸ｔ−ブチルエステル
実施例１のステップ１の記載と同様に、（Ｌ）−Ｂｏｃ−ａｌｌｏ−イソロイシンおよび３，３，４，４−テトラフルオロピロリジンから、［（１Ｓ，２Ｒ）−２−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−カルボニル）−ブチル］−カルバミン酸ｔ−ブチルエステルを調製した。
【０１０２】
ステップ２：（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−ペンタン−１−オン
実施例１のステップ２の記載と同様に、［（１Ｓ，２Ｒ）−２−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−カルボニル）−ブチル］−カルバミン酸ｔ−ブチルエステルをＨＣｌ処理することにより、（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−ペンタン−１−オンを調製した（融点＞２５０℃）。
【実施例５】
【０１０３】
（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−イル）−エタノン
実施例２の記載と同様に、塩酸３−アゼチジノールおよび（Ｌ）−Ｂｏｃ−シクロヘキシルグリシンから、（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−（３−フルオロ−アゼチジン−１−イル）−エタノンを合成した（融点２３８〜２４０℃）。
【実施例６】
【０１０４】
（Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−ブタン−１−オン
実施例１の記載と同様に、（Ｌ）−Ｂｏｃ−バリンおよび３，３，４，４−テトラフルオロピロリジンから、（Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−ブタン−１−オンを調製した（融点２３４〜２３８℃）。
【実施例７】
【０１０５】
（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−１−（３，３−ジフルオロ−ピロリジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オン
実施例１の記載と同様に、塩酸３，３−ジフルオロピロリジン（Ｇｉａｒｄｉｎａ，Ｇ．Ｓｙｎｌｅｔｔ  １９９５年、５５頁に従い調製）および（Ｌ）−Ｂｏｃ−イソロイシンから、（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−１−（３，３−ジフルオロ−ピロリジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オンを調製した（融点１９６〜１９８℃）。
【実施例８】
【０１０６】
（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−１−（３，３−ジフルオロ−ピロリジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オン
実施例７の記載と同様に、塩酸３，３−ジフルオロピロリジンおよび（Ｌ）−Ｂｏｃ−イソロイシンから、（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−１−（３，３−ジフルオロ−ピロリジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オンを調製した（融点１９５〜１９８℃）。
【実施例９】
【０１０７】
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−ペンタン−１−オン
実施例１の記載と同様に、（Ｌ）−Ｂｏｃ−ロイシンおよび塩酸３，３，４，４−テトラフルオロピロリジンから、塩酸（Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−ペンタン−１−オンを調製した（融点＞２５０℃）。
【実施例１０】
【０１０８】
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−エタノン
塩酸３，３−ジフルオロ−アゼチジン（国際公開第００４７５８２号パンフレット）とＢｏｃ−（Ｌ）−シクロヘキシルグリシンとをカップリングさせ、続いて、実施例１の記載と同様にＨＣｌ脱保護することにより、塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−エタノンを調製した（融点２２０℃分解）
【実施例１１】
【０１０９】
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−１−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オン
塩酸３，３−ジフルオロ−アゼチジン（国際公開第００４７５８２号パンフレット）とＢｏｃ−（Ｌ）−イソロイシンとをカップリングさせ、続いて、実施例１の記載と同様にＨＣｌ脱保護することにより、塩酸（Ｓ）−２−アミノ−１−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オンを調製した（融点１９５℃分解）。
【実施例１２】
【０１１０】
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−（４，４−ジフルオロ−ピペリジン−１−イル）−エタノン
４，４−ジフルオロ−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（国際公開第００４０５６１号パンフレットに記載）をＨＣｌ処理することにより得られた塩酸４，４−ジフルオロ−ピペリジンを、実施例１の記載と同様にＢｏｃ−（Ｌ）−シクロヘキシルグリシンとカップリングさせ、続いてＨＣｌ脱保護した（融点＞２５０℃）。
【実施例１３】
【０１１１】
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−１−（４，４−ジフルオロ−ピペリジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オン
実施例１の記載と同様に、塩酸４，４−ジフルオロ−ピペリジンおよびＢｏｃ−（Ｌ）−イソロイシンから、塩酸（Ｓ）−２−アミノ−１−（４，４−ジフルオロ−ピペリジン−１−イル）−３−メチル−ペンタン−１−オンを調製した（融点１９０〜１９２℃）。
【実施例１４】
【０１１２】
塩酸（Ｓ）−２−アミノ−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−プロパン−１−オン
実施例１の記載と同様に、Ｂｏｃ−（Ｌ）−アラニンおよび３，３，４，４−テトラフルオロピロリジンから、塩酸（Ｓ）−２−アミノ−１−（３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン−１−イル）−プロパン−１−オンを調製した（融点＞２５０℃）。
【０１１３】
塩酸３，３，４，４−テトラフルオロピロリジンの別の調製
ステップ１：トリフルオロメタンスルホン酸２，２，３，３−テトラフルオロ−４−（トリフルオロメタンスルホニルオキシ）−ブチルエステル
２，２，３，３−テトラフルオロブタンジオール（１５ｇ、９３ミリモル）およびピリジン（１９ｍＬ、２３０ミリモル）からなる氷冷（０℃）ジクロロメタン（２５０ｍＬ）溶液に、無水トリフルオロメタンスルホン酸（３４ｍＬ、２００ミリモル）を滴加した。加えた後に、この混合物を０℃で１時間攪拌し、続いて、室温でさらに１時間攪拌し、次いで、ジクロロメタンで希釈し、水およびブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、ほぼ乾燥するまで濃縮すると、ジクロロメタン含有オイルが残った。
【０１１４】
ステップ２：塩酸１−ベンジル−３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン
粗製トリフルオロ−メタンスルホン酸２，２，３，３−テトラフルオロ−４−（トリフルオロ−メタンスルホニルオキシ）−ブチルエステル、ベンジルアミン（１０ｍＬ、９３ミリモル）およびトリエチルアミン（３３ｍＬ、２３０ミリモル）からなるエタノール（２３０ｍＬ）溶液を還流まで一晩加熱した。この混合物を、約１／３の容量まで濃縮し、エーテルで希釈し、１Ｎの水酸化ナトリウム、水およびブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、濃縮してオイルにした。このオイルをエーテルに再び溶かし、０℃に冷却し、塩化水素で飽和させた。沈殿物を収集し、乾燥した（２３．８ｇ、９５％、融点１３９〜１４３℃）。
【０１１５】
ステップ３：塩酸３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン
炭素上に担持されている１０％パラジウムを含有する塩酸１−ベンジル−３，３，４，４−テトラフルオロ−ピロリジン（２３．８ｇ、８８ミリモル）のエタノール（３００ｍＬ）溶液をＰａｒｒ振盪機中、４５ｐｓｉで水素で３時間処理した。混合物をセライト（登録商標）で濾過し、濾液を乾燥するまで濃縮した。残留物をエーテルで粉砕し、固体を収集し、乾燥した（１３．４ｇ、８５％、融点１９３〜１９６℃）。
【国際調査報告】
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