(57)【要約】本発明は、抗癌治療および抗ウイルス治療において同時投与、連続投与、または個別投与のために用いることができる配合物として、カルシウム、注射用マグネシウム、および代謝の際にオキサレートを放出する注射用産物を含む産物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗癌治療または抗ウイルス治療において同時投与、連続投与、または個別投与のために有用な配合物として、カルシウム、注射用マグネシウムおよび代謝の際にオキサレートを放出する活性成分を含む産物。
【請求項２】
カルシウムの一部が注射剤形であり、他の部分が経口剤形であることを特徴とする、請求項1記載の産物。
【請求項３】
代謝の際にオキサレートを放出する産物がオキサリプラチンであることを特徴とする、請求項1または2に記載の産物。
【請求項４】
カルシウムが、グルコネート、塩化物、ブロモガラクトグルコネート、グルコノラクテート、またはカーボネートの形であって、マグネシウムがサルフェートまたはピドレートの形である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の産物。
【請求項５】
注射用カルシウム濃度が8〜20 mg/mlであり、注射用マグネシウム濃度が10〜20 mg/ml、好ましくは15 mg/mlである（これらの濃度をカルシウムイオンとして表記する）ことを特徴とする、請求項4記載の産物。
【請求項６】
代謝の際にオキサレートを放出する産物の投与によって引き起こされた神経毒性を予防または治療することを意図する配合産物を調製するためのカルシウムおよびマグネシウムの使用。
【請求項７】
カルシウムの一部が注射剤形であり、他の部分が経口剤形であることを特徴とする、請求項6記載の使用。
【請求項８】
オキサレートを放出する産物がオキサリプラチンであることを特徴とする、請求項6記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の主題は、体内で代謝される際にオキサレートを放出する活性成分、特にオキサリプラチンの神経毒性を減少させる、カルシウムおよびマグネシウムに基づく薬学的組成物である。
【背景技術】
【０００２】
プラチナ誘導体は、特定のタイプの癌の治療に革命を引き起こした。
【０００３】
ごく最近開発されたプラチナの新規有機誘導体である1,2-ジアミンシクロヘキサン(トランス-1)オキサラトプラチナまたはオキサリプラチンは、消化器系腫瘍において非常に有効であることが証明された（Missetら、La Lettre du Cancerologue（1996）、5、20〜22）。オキサリプラチンは、転移性結腸直腸癌に対する第一選択治療として市場での認可を得た。これは、アジュバントの状況および他の腫瘍、膵臓、胃、肺および卵巣において現在試験中である。したがって、非常に頻繁に用いられる。
【０００４】
オキサリプラチンは腎毒性を示さないが、末梢の神経毒性の原因となり、これがその限定的毒性である。これは末梢のニューロパシーであり、徐々にかつ最もしばしば非可逆的に起こる慢性で累積的であるシスプラチンのニューロパシーとは異なる（Mollman、Cisplatin Neurotoxicity、（1990）、322、126〜127）。オキサリプラチンの神経毒性は、急性型および／または慢性型で表れ、時に非常に無能力となる。急性発作は全く新規のものであり、静脈内注入またはその直後のその突然の発症を特徴とする。これは四肢の知覚異常および／または口周囲の知覚異常、冷気の曝露によって悪化する感覚不全、時に減少することが困難な筋痙攣として現れる。冷気によって引き起こされる急性で初期の一過的な知覚異常は、指、手、舌、および唇に罹患する。これは、下肢の不全対麻痺を表す。末梢のニューロパシーは、治療のあいだ患者の85〜95％に少なくとも1回報告されている。これは通常、注入の際に表れ、少なくとも数日間持続しうる。その持続は、治療サイクル数と共に増加する。段階3のニューロパシーの発生率は、750〜850 mg/m2の累積投与後15〜20％であることから、これは用量依存的であり、累積的である（Berthault-Cvitkovicら、J. Clin. Oncol.（1996）、14、2950〜8）。この毒性は、偽咽頭痙攣にまで至る可能性がある。この発作は、時に非常に無力で苦しいが、一過性であり、数時間または数日のあいだに治まる。
【０００５】
慢性的に発現されるニューロパシーは部分的に、その発現および進行がシスプラチンによって引き起こされるニューロパシーに類似するが、これはかなり遅れて起こり、オキサリプラチンを数回投与した後に起こる（Machoverら、Ann. Oncol. （1996）、7、95〜8）。この後に急性毒性が起こり、これは数ヶ月持続しうる、または抑制することさえできず、それによって患者の生活の質に影響を及ぼし、患者は字を書くこと、ボタンをかけること、靴ひもを結ぶこと、流行の靴を履くこと、および歩くことに重度の困難を有する。組織学的研究は、シスプラチンの場合のような明白な神経障害を示さず、ミエリンはほとんど影響を受けず、ウォーラー変性は例外的であったのに対して（Raymond）、シスプラチンでは、生検はプラチナによる神経組織の浸潤を示し、ミエリン鞘の部分的消失およびウォーラー変性を示した（Mollman、Cisplatin Neurotoxicity、N. Engl. J. Med.（1990）、322、126〜127）。
【０００６】
これらの毒性問題のために、オキサリプラチンの使用は制限され、治療の中止に至ることもありうる。したがって、特定の癌の治療において不可欠であることが証明されたオキサリプラチンの認容性を改善することが必須である。
【０００７】
オキサリプラチンの代謝の第一段階は、二つの塩素イオンによって置換されるオキサレートの放出からなり、このようにしてジクロロダクプラチン（ジクロロジアミノシクロヘキサンプラチナ）が形成される。この反応は、血漿培地において30％で行われ、細胞内培地では70％で行われる。オキサレートは、そのカルシウムおよびマグネシウムキレート能（Haglerら、Oxalate Metabolism、（1973）、26、1073〜1079およびL'Epeeら、Intoxication aigue mortelle par l'oxalate de potassium、Med. Led. Dom. Corp.（1971）、4、178〜181）のために毒性学において知られており、急性オキサレート中毒によって、知覚異常、間代性筋痙攣が起こり、間代性筋痙攣は大量の中毒の場合には痙攣発作にまで至ることがある。低カルシウム血症および代謝性アシドーシスが報告されており、腎毒性はオキサレート結晶が尿細管に沈殿したために起こりうる。
【発明の開示】
【０００８】
したがって、本発明者らは、オキサリプラチンの神経毒性の発生におけるナトリウムチャンネルの慢性的阻害の役割に関する仮説を立てた。実際に、イオンチャンネルは神経細胞の恒常性において主要な役割を有し、ナトリウムチャンネルが長期間阻害されると、イオンの移動を妨害して、イオンおよび細胞内構成成分の濃度を改変することがありうる。ここで、後者は、神経伝達物質の放出、軸索の成長円錐の伸長、および遺伝子発現のような生命維持に必要なプロセスにとって必須である。神経分泌機能および神経突起発達の持続的な阻害によって、長期間の有害な結末が起こりうる（Rizzoら、Mechanisms of paraesthesiae, dysesthesiae and hyperesthesiae：Role of Na channel heterogeneity）。
【０００９】
以下によってインビトロで電気生理学的研究を行った：
a）二重油分離技術によってゴキブリから単離した軸索に関する電流および電圧クランプ技術、
b）ゴキブリのDUMニューロン（背側非対内側ニューロン）に対する細胞全体の形態でのパッチクランプ技術（DEA Laurence Gamelin, Etude de la neurotoxicite d'un derive du platine, l'oxaliplatine, par une approche electrophysiologigue、パリVII（1999））。
【００１０】
ゴキブリから単離した軸索に関して、オキサリプラチンを外用すると、全体としてナトリウムチャンネルの阻害を研究するための参照物質であるテトロドトキシンとは異なり、ナトリウムまたはカリウムイオン電流に有意な改変を引き起こさなかった。細胞全体の形態でのパッチクランプ技術を用いると、電流クランプでは、オキサリプラチンの存在下で活動電位の大きさの経時的な減少を認めると共に、電圧クランプでは10分間にわたるナトリウム電流の50％減少を認め、ナトリウム電流が60％減少して平衡に達した。このように、本発明者らは、オキサリプラチンがナトリウムの流入電流を実質的に減少させて、したがってニューロンの活動電位を低下させることを示すことができた。ナトリウムチャンネルの阻害に必要な濃度は、ヒトでの臨床医学においてオキサリプラチン注入の最初の数時間に得られた濃度の大きさの次数と同じであった。
【００１１】
カルシウムチャンネルに及ぼすオキサリプラチンの影響も同様に調べたが、有意な作用を認めなかった。これは、細胞内経路によってナトリウムチャンネルに対して何らかの阻害作用を示すが、その作用はテトロドトキシンとは異なり、60％阻害で起こる平衡が得られることから、IC50はあまり有効ではない（濃度比10-4）。結果は、オキサリプラチンがいくつかのカルシウム依存的イオンチャンネルに対して作用を有することを示している。実際に、カルシウムキレート剤であるBAPTAは、同一のナトリウムチャンネル阻害曲線を示した。本発明者らは、オキサリプラチンがオキサレートを通して作用して、神経のインパルスの伝達に関与するいくつかのカルシウム依存的ナトリウムチャンネルを阻害することを示すことができた（図2）。ナトリウムチャンネルのこの遮断は、ニューロンの活動電位の異常を引き起こし、すなわちニューロンの脱分極障害およびおそらくインパルスの伝達障害が起こる。
【００１２】
他のプラチナ塩を試験した。シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチンの代謝物であるダクプラチンは、作用を示さない。
【００１３】
したがって、本発明者らは、オキサリプラチンに対する認容性を増加させるためにカルシウムおよびマグネシウムを用いる目標を設定した。
【００１４】
このように、本発明の主題は、抗癌または抗ウイルス治療において同時投与、連続投与、または個別投与にとって有用な配合剤として、カルシウム、注射用マグネシウム、および体内での代謝の際にオキサレートを放出する活性成分を含む産物である。
【００１５】
本発明の都合のよい態様において、カルシウムの一部は注射剤形であり、他の部分は経口剤形である。
【００１６】
本発明のもう一つの都合のよい態様において、オキサレートを放出する活性成分はオキサリプラチンである。
【００１７】
本発明の目的に関して、カルシウムおよびマグネシウムという表現は、これらのイオンの塩化型、特にグルコン酸カルシウム、塩化カルシウム、ブロモガラクトグルコネート、グルコノ乳酸カルシウム、炭酸カルシウム、硫酸マグネシウム、およびマグネシウムピドレートを意味すると理解される。
【００１８】
本発明の都合のよい態様において、産物は、注射用カルシウム濃度が8〜20 mg/mlであって、注射用マグネシウム濃度が10〜20 mg/ml、好ましくは15 mg/ml（これらの濃度はカルシウムイオンとして表記する）であることを特徴とする。
【００１９】
カルシウムおよびマグネシウムの塩濃度は、オキサリプラチン投与のあいだ前記の塩の2〜3 g/日の静脈内投与を行うことができるように選択される。カルシウム濃度は、1〜2 g/日をその後8日間経口投与できるように選択される。
【００２０】
本発明の主題はまた、代謝の際にオキサレートを放出する産物の投与によって引き起こされた神経毒性を予防または治療することを意図した配合産物を調製するためにカルシウムおよびマグネシウムを用いることである。
【００２１】
本発明の目的に関して、オキサレートを放出する物質は、オキサリプラチンの他に、ヒト免疫不全ウイルス（HIV）阻害剤であるインジナビル、リトナビル、およびその類似体であってもよい（Stoller, ML. Curv. Opin. Urol. （2000）、10、557〜561）。
【００２２】
注射用剤形という表現は、本発明の目的に関して、例えば等張溶液のような、患者のヒト体内に組成物を輸送することができる如何なる液体剤形も意味すると理解される。
【００２３】
経口型という表現は、経口投与に適した如何なる製剤、特に錠剤、カプセル剤および溶液も意味すると理解される。
【００２４】
カルシウムおよびマグネシウムは、オキサリプラチンの認容性を増加させることができる如何なる有効濃度で用いてもよい。オキサリプラチンの前後でグルコン酸カルシウム1 gと硫酸マグネシウム1 gとを含む5％グルコース溶液を血清中に注入すると、良好な結果を生じる。
【００２５】
経口経路によるカルシウムの投与も同様に、所望の作用を得ることができる如何なる用量で、特に1 g/日の用量でオキサリプラチンの治療後8日間、経口経路によって行ってもよい。
【００２６】
消化器系腫瘍のためにオキサリプラチンによって治療した患者において、グルコン酸カルシウム1 gと硫酸マグネシウム1 gとを、オキサリプラチンの前後に5％グルコースと共に血清中に急速注入によって投与した。これらの注入の真の有効性は、最初は急性神経毒性発現に対して治療的に、かつ次に予防的に観察することが可能であった。カルシウムとマグネシウムの注入によって、急性のニューロパシーは非常に迅速にかつ長期間抑制した。カルシウムおよびマグネシウムを、オキサリプラチン注入の前後で予防的に投与すると、これは神経毒性症状の発症を強力に減少させる。
【００２７】
オキサリプラチンによって治療した患者では、通常検出不能であるオキサレートの有意な血漿濃度を示すことがあり、オキサレートの実質的な尿中排泄はオキサリプラチンの注入開始後5時間以内に起こり、カルシウム尿症、カリウム尿症およびマグネシウム尿症を伴ったが、カルシウム（合計、イオン化）およびマグネシウム（合計、および全体）の血漿濃度には如何なる変動も示さなかった。したがって、カルシウム恒常性において、微細な細胞内脱平衡を仮定することができる。
【００２８】
下記の図1〜3および臨床症例の実施例は、本発明を説明する。
【００２９】
実施例
カルシウムおよびマグネシウムによるオキサリプラチンの神経毒性の予防
1．方法
オキサリプラチンを含む治療103回を以下のスキームに従って実施した。
−  FOLFOX4：オキサリプラチン85 mg/m2/15日＋フルオロウラシルおよびフォリン酸（FUFOL）、
−  FOLFOX6：オキサリプラチン100 mg/m2/15日＋FUFOL、
FUFOL-LOHP：オキサリプラチン130 mg/m2/21日＋FUFOL、
それぞれの治療は、それぞれ治療患者の、20％、22％、および58％を表す
【００３０】
治療の認容性を評価して、毒性症状発現をNCI-CTC神経毒性尺度および下記の表1に記載するオキサリプラチンに関する特異的尺度に従って定量した。
【００３１】
【表１】
2005519062.tif 000002
【００３２】
2．結果
結果を添付の図3に示す。
【００３３】
カルシウムまたはマグネシウムを投与しない患者の群において、投与中止の40％は毒性原因によるものであり、44％が疾患の進行に関係している。カルシウムおよびマグネシウム投与群では、毒性はより少なく、治療中止の理由は有意に少ない。疾患の反応または安定性はよりしばしば認められる。治療中止の毒性原因は、カルシウムおよびマグネシウムを含まない群では主にニューロパシー（56％）であるが、カルシウムおよびマグネシウム群では、他の通常の化学療法毒性、すなわち好中球減少症（15％）、血小板減少症（9％）が認められる。カルシウムおよびマグネシウムの投与により、毒性作用を回避して、治療のあいだの期間を観察しながら十分な用量での治療を行うことができる。これは、オキサリプラチンの認容性プロフィールを認容性の良好な化学療法分子のプロフィールになるように改変する。これによってより良好な有効性が得られる。
【００３４】
カルシウムおよびマグネシウムの注入によって、有効である場合には、治療の全期間を延長させることができる。
【００３５】
化学療法の終了時、その期間にかかわらず、遠位ニューロパシーの発生率および強度は、カルシウムおよびマグネシウムを注入した場合有意に低い（p＜0.001）。
【００３６】
治療のあいだ、サイクル1、3、6および治療終了時、サイクルにかかわりなく、遠位ニューロパシーの発生率および強度はカルシウムおよびマグネシウムを投与した患者の群において有意に低い。サイクル6では、患者の40％が神経学的発現を有しないが、これに対しカルシウムおよびマグネシウムの非存在下では12％である。同様に、カルシウムおよびマグネシウム投与群では、等級3はなく、したがって、無能力となる慢性的な毒性も示さない。カルシウムまたはマグネシウム非投与群の患者の数は、サイクル1からサイクル6まで徐々に減少する。その理由は、患者の多くが、次回にカルシウムおよびマグネシウムを投与すること、他の患者はニューロパシーのためにその治療を中断するためである。
【００３７】
特異的尺度を用いても、結果はNCI-CTC尺度と同等である。特異的オキサリプラチン尺度はニューロパシーの機能的作用のみならずその期間に基づく。カルシウムおよびマグネシウムの注入によって、遠位ニューロパシーの強度、その持続および機能的影響は有意に減少する（p＜0.001）。
【００３８】
本試験は、以下を示す。
−  カルシウムおよびマグネシウムの注入は、オキサリプラチンの全ての急性神経毒性発現の強度および期間を有意に減少させることができること、
−  カルシウムおよびマグネシウムの注入はまた、慢性毒性を発生率および強度に関して有意に減少させること、
−  オキサリプラチンは、慢性的な持続的ニューロパシーの症例においても、それをカルシウムおよびマグネシウムの注入と併用する限り、780 mg/m2までの総用量での持続的な治療後に再度導入することができること。
【００３９】
場合によっては、神経学的症状発現の発症のリスクを低下させるために、オキサリプラチンの投与から間隔をあけてCaの投与を継続する必要があることがわかっている。これらの場合において、カルシウムは経口投与によって有効であり、患者の生活の質を保持することができる。
【００４０】
臨床症例1
58歳の患者を、5-フルオロウラシル、フォリン酸、オキサリプラチン、130 mg/m2/21日の併用によって治療する。
【００４１】
最初の2サイクルのあいだに、その女性患者にオキサリプラチンの前後にカルシウムおよびマグネシウムの注入を行った。神経学的作用は、2回目のサイクル時、特異的尺度の等級1の末梢ニューロパシーからなる。
【００４２】
第三のサイクルにおいて、カルシウムおよびマグネシウムによる予防を忘れる。患者は注入終了時に、等級3の末梢および口周囲の急性神経毒性（NCIおよび特異的尺度）、咽喉症状発現、特に顎および手の筋痙攣を示す。
【００４３】
次のサイクルにおいて、カルシウムおよびマグネシウムによる予防を行い、治療は非常に良好に認容される。
【００４４】
サイクル5では、再度カルシウムおよびマグネシウムを忘れ、非常に大きい急性神経学的症状が再度出現する。
【００４５】
カルシウムおよびマグネシウムによるサイクル6は、非常に良好に認容される。
【００４６】
臨床症例2
別の60歳患者を転移性結腸癌のために治療した。
【００４７】
その女性患者の治療は、5-FUフォリン酸＋オキサリプラチン130 mg/m2/21日の併用からなった。
【００４８】
サイクル1のあいだ、遠位および口周囲の等級3の知覚異常、顎および脚の筋痙攣、しびれを伴う手の筋痙攣、偽咽頭痙攣、呼吸困難、無力症、および等級3の下痢の非常に迅速な出現を認めた。
【００４９】
サイクル2において、望ましくない作用は同一であるが、カルシウムおよびマグネシウム1 gの静脈内注入によって数分以内に消失する。遠位知覚異常は、等級1から起こる（NCIおよび特異的尺度）。
【００５０】
予防目的のための注入としてのカルシウムおよびマグネシウムによる第三のサイクルでは、神経毒性または下痢を認めない。
【００５１】
臨床症例3
別の66歳患者を転移性結腸癌のために治療した。
【００５２】
その男性患者には、カルシウムおよびマグネシウムの注入を行わずに、第一選択薬の化学療法として5-FU、フォリン酸＋オキサリプラチンの130 mg/m2/3週間の用量を併用投与した。
【００５３】
サイクル1および2のあいだ、NCI等級2および特異的尺度で等級1の、遠位の口周囲の知覚麻痺が出現した。
【００５４】
サイクルC3、C4、C5では、ニューロパシーは悪化して、NCI等級2および特異的尺度で等級2となった。
【００５５】
段階C6では、ニューロパシーは悪化し続け、NCI等級3および特異的尺度で等級3となる：慢性のニューロパシー、手の筋痙攣；字を書くこと、ボタンをかけること、靴ひもを結ぶことに関して一般的で非常に厄介な臨床作用。非常に厄介で無能力なニューロパシーは、18ヶ月間持続する。
【００５６】
2年後、患者は、患者の神経障害の一つに全く有意な改善を認めたが、転移性腫瘍は再度進行する。
【００５７】
同じ化学療法治療を繰り返し、オキサリプラチンを同じスキームで130 mg/m2/3週間投与する。
【００５８】
このプロトコール6サイクルを行って、オキサリプラチンの注入前後にカルシウムおよびマグネシウムの注入を行う。ニューロパシーは報告または観察されていない。
【図面の簡単な説明】
【００５９】
【図１】オキサリプラチンの代謝を説明する。オキサリプラチンは、細胞に70％未変化で浸透して、ジアミンシクロヘキサンプラチナ（ダクプラチン）とオキサレートとに代謝される。
【図２】ナトリウムチャンネルに及ぼすオキサリプラチンの作用機序を示す。オキサリプラチンは、細胞に浸透して代謝され、細胞毒性活性代謝物であるダクプラチンとオキサレートとを生じる。
【図３】カルシウムおよびマグネシウムによる予防による治療期間およびカルシウムおよびマグネシウムの注入による治療終了時での遠位ニューロパシーの発生率および強度を示す。省略語：Tox：毒性作用；PD：進行性疾患；SD：安定な疾患；OR：客観的反応；neuro：ニューロパシー；thrombo：血小板減少症；およびneutro：好中球減少症。
【図１】
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【図２】
2005519062.tif 000004
【図３】
2005519062.tif 000005
【国際調査報告】
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2005519062.tif 000008
2005519062.tif 000009
2005519062.tif 000010
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