(57)【要約】２５−ヒドロキシビタミンＤ3及び油を含有する油組成物が提供される。さらに、各々が、２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含有するエマルション、マイクロカプセル化油組成物及び飼料プレミックス組成物が提供される。さらにまた、２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含有する油組成物、マイクロカプセル化油組成物及び飼料プレミックスの作成方法も提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
油及び２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含む油組成物であって、２５−ヒドロキシビタミンＤ3が該油中に該油組成物の総重量に基づいて約５〜５０重量％の量で溶解している、前記油組成物。
【請求項２】
さらに酸化防止剤を含む、請求項１に記載の油組成物。
【請求項３】
油及び２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含む油組成物並びに水性組成物を含むエマルションであって、２５−ヒドロキシビタミンＤ3が該油中に該油組成物の総重量に基づいて約５〜５０重量％の量で溶解している、前記エマルション。
【請求項４】
油組成物が水性組成物中に液滴として分散している、請求項３記載のエマルション。
【請求項５】
油組成物及び該油組成物をカプセル化するカプセル化剤を含むマイクロカプセル化油であって、該油組成物が該油組成物の総重量に基づいて約５〜５０重量％の量で油に溶解している２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含む、前記マイクロカプセル化油。
【請求項６】
カプセル化剤がデンプンであり、油がヤシ油又はパーム核油である、請求項５記載のマイクロカプセル化油組成物。
【請求項７】
マイクロカプセル化油及び少なくとも１種の栄養性添加剤を含む飼料プレミックス組成物であって、該マイクロカプセル化油が油組成物及び該油組成物をカプセル化するカプセル化剤を含み、該油組成物が該油組成物の総重量に基づいて約５〜５０重量％の量で油に溶解している２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含む、前記飼料プレミックス組成物。
【請求項８】
カプセル化剤がデンプンであり、油がヤシ油又はパーム核油である、請求項７記載の飼料プレミックス組成物。
【請求項９】
栄養性添加剤が、ビタミンＤ3、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＢ12、ビタミンＢ3、ナイアシン、パントテン酸カルシウム、ビタミンＫ3、葉酸、ビタミンＢ6、ビタミンＢ1、石灰石及びもみ殻であるか、又は、ビタミンＥ、ビタミンＢ3、カロテノイド、塩化コリン、酸化マンガン、酸化亜鉛、硫酸鉄、酸化銅、硫酸コバルト及び粗挽き小麦粉である、請求項７記載の飼料プレミックス組成物。
【請求項１０】
油組成物及び該油組成物をカプセル化するカプセル化剤を含むマイクロカプセル化油組成物を供給すること、及び、該マイクロカプセル化油組成物を少なくとも１種の栄養性添加剤と混合することを含んでなり、ここで、該油組成物が該油組成物の総重量に基づいて約５〜５０重量％の量で油に溶解している２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含む、飼料プレミックスの作成方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、油、エマルション、マイクロカプセル化油及び飼料プレミックスなどを包含する、２５−ヒドロキシビタミンＤ3含有組成物に関する。本発明は、さらにまた、そのような組成物の作成方法及び使用方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
ビタミン類は、種々の動物の常用飼料中の栄養補給剤として有用である。ビタミン類は、ほぼすべての生化学的経路において触媒として作用する。そのような理由により、ビタミンが欠乏すると、多くの疾患及び身体の不調を引き起こす。
【０００３】
ビタミンＤ3は、多くの疾患に関与している。副甲状腺内に存在するビタミンＤ3が多すぎたり又は少なすぎたりすると、上皮小体機能亢進症、上皮小体機能低下症、偽性副甲状腺機能低下症及び二次性上皮小体機能亢進症を引き起こす可能性がある。膵臓において、ビタミンＤ3は、糖尿病に関与している。肝臓では、ビタミンＤ3に問題があると、肝硬変及び閉塞性黄疸を引き起こす可能性がある。ビタミンＤ3は、カルシウムレベルの調節に密接に関与しており、骨においては、骨の線維形成不全症（fibrogenisis imperfecta ossium）、嚢腫性線維性骨炎、骨軟化症、骨粗鬆症、骨減少症、骨硬化症、腎性骨形成異常症及び佝僂病に関与している。腸では、ビタミンＤ3は、グルココルチコイド拮抗作用、特発性高カルシウム血症、吸収不全症候群及び熱帯性スプルーにおいて役割を担っている。皮膚の乾癬、甲状腺の髄様癌、肺のサルコイドーシス、並びに、腎臓の低リン酸血症性ＶＤＲＲ及び慢性腎疾患は、すべて、体内のビタミンＤ3のレベルの影響を受ける。
【０００４】
ビタミンＤ3は、通常の日光条件下、コレステロールの酸化を介して皮膚により産生される。次いで、ビタミンＤ3は、肝臓により、２５−ヒドロキシビタミンＤ3に変換される。２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、最終的に、腎臓により、１α，２５（ＯＨ）２ビタミンＤ3に変換されるが、これは、さまざまな生化学的経路において活性である。
【０００５】
２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、体内において、下流にある１α，２５−ヒドロキシビタミンＤ3の貯蔵所である。ビタミンＤ3のレベルが適切である場合、２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、肝臓に蓄えられる。２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、必要に応じて肝臓から放出され、腎臓により活性な分子へと加工される。
【０００６】
１α，２５（ＯＨ）2ビタミンＤ3の産生について、下記に示す。
【０００７】
【化１】
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【０００８】
これらの理由により、動物に栄養補給剤として２５−ヒドロキシビタミンＤ3を提供することは有用である。２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含有する配合物は、例えば、商標ＨＹ−Ｄ（Roche Vitamins Inc., Parsippany, New Jersey）のもとで販売されている。
【０００９】
残念ながら、２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、従来の貯蔵条件下で不安定であり、単位質量当たりの活性を時間に依存して失っていく。とりわけ、２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、特に長期間にわたり貯蔵する間に、酸化されやすい。そのような劣化は、２５−ヒドロキシビタミンＤ３を動物の餌に組み入れた場合、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の投与に悪い影響を及ぼす可能性がある。
【００１０】
したがって、さまざまな栄養性添加剤との組合せにおいて、広範囲の条件下で、改善された安定性特性を示す２５−ヒドロキシビタミンＤ3組成物を提供することは、有利であろう。本発明のこれらの目的及び別の目的について、下記においてより詳細に説明する。
【００１１】
本発明は、油と２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含有する油組成物を提供し、ここで、２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、該油中に該油組成物の総重量に基づいて約５〜５０重量％の量で溶解している。これらの油組成物は、有利には、多くの別の組成物、特に、エマルション、マイクロカプセル化油及び飼料プレミックスの中に組み入れることができる。
【００１２】
本発明で使用する油は、食用のいかなる油又は脂であることができ、好ましくは、多量のラウリン酸を含有しているもの、例えば、ババス油、ヤシ油、コフネヤシ油（cohune oil）、ムルミル牛脂（murumyru tallow）、パーム核油、ホシダネヤシ油（tucum oil）などであり得る。油は、天然油、合成油、半合成油又はそれらの混合物であり得る。天然油は、どのような起源のものであってもよく、例えば、動物、植物、菌類、海洋などに由来するものであってよい。合成油及び半合成油は、あらゆる都合のよい方法で製造することができる。
【００１３】
好ましい油は、ヤシ油、ババス油、コフネヤシ油及びパーム核油である。
【００１４】
２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、あらゆる源から得ることができる。例えば、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の製造については、ＵＳ−３，５６５，９２４に記載されており、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の単離については、ＵＳ−４，３１０，４６７に記載されている。
【００１５】
油組成物は、あらゆる都合のよい方法で調製することができる。一般に、撹拌しながら加熱することにより油に２５−ヒドロキシビタミンＤ3の結晶を溶解させる。好ましくは、最初に油を適切な容器内に入れ、所望の温度まで加熱する。その後、油の温度を維持しながら、又は、油の温度を時間と共に上昇させながら、適切な量の２５−ヒドロキシビタミンＤ3を油に添加する。得られた油組成物を、次いで、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の結晶が溶解するのに充分な時間撹拌する。油への添加に先立って、粉砕及び／又は篩い分けなどのようなあらゆる都合のよい手段により２５−ヒドロキシビタミンＤ３の結晶の寸法を小さくして、２５−ヒドロキシビタミンＤ３の溶解性を高めることができる。撹拌（agitation）は、撹拌（stirring）、容器の回転、混合、均質化、再循環及び超音波処理などのようなあらゆる都合のよい手段により行うことができる。
【００１６】
都合のよいことには、油を８０〜８５℃に加熱し、容器内に２５−ヒドロキシビタミンＤ3を導入し、油組成物を撹拌しながら２時間にわたり該温度を維持する。
【００１７】
一般に、２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、油中に油組成物の総重量に基づいて約５〜５０重量％の量で溶解させる。好ましくは、２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、油中に油組成物の総重量に基づいて約１０〜４０重量％の量で、より好ましくは、約１２．５〜２８％の量で、さらに好ましくは、約１５〜２５％の量で溶解させる。
【００１８】
油組成物は、場合により、酸化防止剤、保存剤、溶解剤、界面活性剤、ｐＨ調節剤又は緩衝剤、湿潤剤、及び、それらの混合物などのようなあらゆる別の適切な物質を含有し得るが、それらに限定されない。
【００１９】
適切な酸化防止剤には、ミックストコフェロール、天然源又は合成源由来のトコフェロール、エトキシキン（ＥＭＱ）（６−エトキシ−１，２−ジヒドロ−２，２，４−トリメチル−キノリン）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ローズマリー抽出物のような天然酸化防止剤、没食子酸プロピル及びそれらの混合物などがある。好ましくは、酸化防止剤はＥＭＱである。
【００２０】
適切な保存剤は、メチルパラベン、プロピルパラベン、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、安息香酸及びそれらの混合物などを含む。適切な溶解剤には、アルコール類、塩素化炭化水素類及びそれらの混合物をはじめとする無機溶媒又は有機溶媒などがある。
【００２１】
界面活性剤は、アニオン性、カチオン性又は非イオン性であることができる。適切な界面活性剤には、パルミチン酸アスコルビル、ポリソルベート類、ポリエチレングリコール類及びそれらの混合物などがある。適切なｐＨ調節剤又は緩衝剤には、クエン酸−クエン酸ナトリウム、リン酸−リン酸ナトリウム、酢酸−酢酸ナトリウム、及びそれらの混合物などがある。適切な湿潤剤には、グリセリン、ソルビトール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、及びそれらの混合物などがある。
【００２２】
本発明の種々の組成物の強化された安定性は、一方における不安定な２５−ヒドロキシビタミンＤ３成分と、他方における、動物飼料プレミックス及び動物飼料にしばしば添加される鉱物類、遷移金属類及び／又は過酸化物が物理的に分離されていることによると考えられる。この強化された安定性は、下記実施例における比較データに示されているように、実用に関して有利である。したがって、本発明の油組成物は、鉱物類、遷移金属類又は過酸化物を全く含有しないのが好ましい。
【００２３】
ひとたび形成されたら、本発明の油組成物は、さまざまな別の有用な組成物に組み入れることができるが、そのような別の組成物のいくつかについて、以下で論じる。例えば、エマルションを形成させることができ、そのエマルションは、優れた安定性特性を有するさまざまなカプセル化油に変換することができる。
【００２４】
本発明は、水性組成物及び油組成物を含有するエマルションも提供し、ここで、油組成物は、油組成物の総重量に基づいて約５〜約５０重量％の量で油に溶解している２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含んでいる。
【００２５】
上記油組成物を水性組成物と組み合わせることにより、さまざまなエマルションを調製することができる。該エマルションはどのような型のものであってもよい。適切なエマルションには、水中油型エマルション、油中水型エマルション、無水エマルション、固体エマルション及びマイクロエマルションなどがある。そのようなエマルションは、あらゆる都合のよい方法で調製することができる。
【００２６】
本明細書で使用される場合、用語「水性組成物」及び「水相」は、互いに交換可能に使用される。
【００２７】
一般に、エマルションは、約２０〜約９５％の水性組成物と約５〜約８０％の油組成物を含有する。しかしながら、該エマルションは、約８５〜約９５％の水性組成物と約５〜約１５％の油組成物を含有するのが好ましい。
【００２８】
都合がよいことには、油組成物は、水性組成物中に液滴として分散させることができる。例えば、液滴は、水性組成物中で約５００nm未満の平均径を有することができる。都合がよいことには、液滴は、約１００〜約２００nmの平均径を有する。
【００２９】
さらにまた、油組成物及び該油組成物をカプセル化するカプセル化剤を含むマイクロカプセル化油も提供され、ここで、油組成物は、油組成物の総重量に基づいて約５〜５０重量％の量で溶解している２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含んでいる。さらに、該マイクロカプセル化油の作成方法が提供され、この作成方法は、油組成物を供給すること、及び、該油組成物をカプセル化剤中にカプセル化することを含んでなり、ここで、油組成物の総重量に基づいて約５〜５０重量％の量で２５−ヒドロキシビタミンＤ3が油に溶解している。
【００３０】
特に有利な実施形態において、エマルションはカプセル化剤を含有し、これが、エマルションを例えば噴霧乾燥によりさらに加工する際に前記油組成物のマイクロカプセル化を促進する。本明細書で使用されるように、用語「カプセル化剤（encapsulating agent）」及び「カプセル剤（encapsulation agent）」は、互いに交換可能に使用される。
【００３１】
カプセル化剤は、油組成物をカプセル化することが可能なあらゆる食用物質であることができる。好ましくは、カプセル化剤は、油組成物をカプセル化したときに、２５−ヒドロキシビタミンＤ3が周囲の環境と接触しないようにすることができる。好ましくは、カプセル化剤は、主に、コロイド状物質である。そのような物質には、デンプン、動物起源のタンパク質（ゼラチンなど）、植物起源のタンパク質、カゼイン、ペクチン、アルギネート、寒天、マルトデキストリン、リグニンスルホネート、セルロース誘導体、糖、サッカリド、ソルビトール、ゴム、及びそれらの混合物などがある。
【００３２】
適切なデンプンには、植物デンプン（例えば、ＣＡＰＳＵＬ（登録商標）（National Starch & Chemical Corp., New York, New York）、ＨＩ−ＣＡＰ（登録商標）（National Starch & Chemical Corp., New York, New York）など）、別の変性食用デンプン、及びそれらの混合物などがある。好ましくは、該デンプンはＣＡＰＳＵＬ（登録商標）である。
【００３３】
適切な動物起源のタンパク質には、ゼラチン（例えば、ウシのゼラチン、種々のＢｌｏｏｍ数を有するブタのゼラチン（タイプＡ又はタイプＢ）、魚のゼラチンなど）、スキムミルクタンパク質、カゼイネート、及びそれらの混合物などがある。好ましくは、動物起源のタンパク質は、ゼラチンである。適切な植物起源のタンパク質には、ジャガイモタンパク質（例えば、ＡＬＢＵＲＥＸ（登録商標）（Roquette Preres Societe Anonyme, Lestrem, France）など）、エンドウ豆タンパク質、ダイズタンパク質、及びそれらの混合物などがある。好ましくは、植物起源のタンパク質は、ＡＬＢＵＲＥＸ（登録商標）ジャガイモタンパク質である。
【００３４】
種々のデキストロース当量を有する適切なマルトデキストリンには、マルトデキストリン５、マルトデキストリン１０、マルトデキストリン１５、マルトデキストリン２０、マルトデキストリン２５、及びそれらの混合物などがある。好ましくは、マルトデキストリンは、マルトデキストリン１５である。
【００３５】
適切なするセルロース誘導体には、エチルセルロース、メチルエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、及びそれらの混合物などがある。サッカリドには、乳糖、蔗糖、又はそれらの混合物などがある。好ましくは、サッカリドは、蔗糖である。ゴムには、アラビアゴム、イナゴマメ、カラギーン、及びそれらの混合物などがある。好ましくは、ゴムは、アラビアゴムである。
【００３６】
本発明のエマルションがカプセル化剤を含有する場合、カプセル化剤をあらゆる適する手段により水中に分散させて水相を形成させることができる。水相は、選択した成分の性質に依存して、溶液又は混合物であり得る。選択した成分を、均質化、混合、乳化、再循環、静的混合、超音波処理、撹拌、加熱、及びそれらの組合せなどの任意の適する手段により分散させることができる。次いで、得られた水相の粘度を、水を加えることにより所望のように調節することができる。
【００３７】
エマルションの水性組成物は、場合により、油組成物に関連して上記で論じたものなどのあらゆる別の適切な物質を含有し得る。好ましくは、水性組成物は、カプセル化剤、被膜形成剤、可塑剤、保存剤、酸化防止剤、及びそれらの混合物を含有し得るが、それらに限定されない。
【００３８】
適切な酸化防止剤には、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸、クエン酸、及びそれらの混合物などがある。適切な保存剤には、メチルパラベン、プロピルパラベン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、及びそれらの混合物などがある。
【００３９】
好ましくは、水相は、オクテニルスクシニルデンプン（ＣＡＰＳＵＬ（登録商標））などの加工食用デンプン、マルトデキストリン及びアスコルビン酸ナトリウムを含有する。選択された成分を、あらゆる適切な手段、好ましくは、撹拌することにより、水中に溶解させることができる。次いで、得られた水相の最終的な粘度を、所望の粘度、好ましくは、約２５０〜約４５０cp、より好ましくは、約３００〜約４００cp、さらに好ましくは、約３８５cpに調節し得る。
【００４０】
別の好ましい水相は、ジャガイモタンパク質（ＡＬＢＵＲＥＸ（登録商標））、マルトデキストリン２０、及びアスコルビン酸ナトリウムを含有する。選択した成分を、好ましくは均質化することにより、水中に分散させる。混合物を、好ましくは、均質でかつ塊状物がなくなるまで均質化する。好ましくは、均質化は、約５０〜約７５℃の範囲の温度で行う。
【００４１】
好ましくは、本発明のエマルション組成物は、鉱物、遷移金属又は過酸化物を全く含まないようにすべきである。
【００４２】
エマルションは、油組成物と水相を、均質化、回転子−固定子剪断、高圧剪断及びキャビテーション、高速「コールズ（cowles）」又は剪断撹拌、並びにそれらの組合せなどのようなあらゆる手段により乳化させることにより形成させることができる。エマルションの容積及び粘度は、好ましくは、乳化後に水を加えることにより調節し得る。
【００４３】
好都合には、油組成物及び水性組成物を、均質化により乳化させる。
【００４４】
上で述べたように、エマルションは、別の有用な組成物、特に、マイクロカプセル化油、例えば、噴霧乾燥粉末などの中に組み入れることができるか又はそのようなものを製造するために用いることができる。
【００４５】
一般に、マイクロカプセル化油は、油組成物及びこの油組成物をカプセル化するカプセル化剤を含有し、ここで、油組成物は油組成物の総重量に基づいて約５〜約５０重量％の量で油に溶解している２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含有している。
【００４６】
マイクロカプセル化油は、あらゆる都合のよい手段で製造することができる。好都合には、噴霧乾燥、凍結乾燥、流動床乾燥、トレー乾燥、吸着、及びそれらの組合せなどのあらゆる適切な手段でエマルションを乾燥させることにより油組成物をカプセル化する。好ましくは、マイクロカプセル化油は、カプセル化剤を含有する水相を有するエマルションを噴霧乾燥させることにより製造する。噴霧乾燥パラメーターは、最終的なマイクロカプセル化油において所望の物理的特性に応じて決まる。そのような物理的パラメーターには、粒径、粉末の形状及び流動性、並びに含水量などがある。
【００４７】
マイクロカプセル化油中で２５−ヒドロキシビタミンＤ3に比較して油の濃度が低いと、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の保護が強化され、カプセル化工程に際して２５−ヒドロキシビタミンＤ3が高い割合で回収される。好都合には、該油の量は、該マイクロカプセル化油の総重量に基づいて、約３０重量％未満、さらに好都合には、約２０％未満、より好ましくは、約１０％未満、さらに好ましくは、約５％未満である。
【００４８】
マイクロカプセル化油は、良好な流動性を有しているべきであり、２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、組成物全体にわたって均質に分散されているべきである。好都合には、マイクロカプセル化油は粉末である。
【００４９】
別の適切な添加剤を前記マイクロカプセル化油に加えてもよい。そのような添加剤の１つは、マイクロカプセル化油の流動性を増大させるための、二酸化ケイ素などの流動化剤（flow agent）であり得る。
【００５０】
マイクロカプセル化油は、飼料プレミックス組成物などのようなさまざまな別の有用な組成物中に組み入れることができるか又はそのようなものを製造するのに用いることができる。
【００５１】
本発明は、少なくとも１種の栄養性添加剤と混合した状態で本発明のマイクロカプセル化油を含有する飼料プレミックス組成物も提供する。さらにまた、飼料プレミックス組成物の調製方法も提供され、該方法は、油組成物を含有するマイクロカプセル化油を供給することを含んでなり、ここで、カプセル化剤中にカプセル化されている油組成物の総重量に基づいて約５〜約５０重量％の量の２５−ヒドロキシビタミンＤ3が油に溶解している。次いで、該マイクロカプセル化油組成物を栄養性添加剤と混合する。
【００５２】
本明細書で使用されるように、用語「栄養性添加剤」は、生成物に栄養価を付加するために、生成物の栄養価を調節するために、又は、生成物に栄養価を付加するのを促進するために、動物飼料又は動物飼料プレミックスに添加される任意の物質を意味する。適切な栄養性添加剤には、ビタミン類、プロビタミン類、鉱物、活性フィターゼ、アミノ酸、カロテノイド、デンプン、魚粉、コリン、医薬品添加物、担体、及びそれらの組合せなどがある。
【００５３】
適切なビタミン類には、すべてのビタミン及びその誘導体（ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＢ12、ビタミンＢ3、ナイアシン、ｄ−パントテン酸、葉酸、ビタミンＢ6、ビタミンＢ1、ビタミンＤ3、ビタミンＣ、ビタミンＢ2、及びそれらの組合せ）が包含される。あらゆるプロビタミン又はプロビタミンの混合物、例えば、β−カロチンなどを使用し得る。適切な鉱物及びそれらの塩には、マンガン、亜鉛、硫酸鉄（一水和物）、酸化銅、硫酸コバルトヨウ素、セレニウム、及びそれらの組合せなどがある。
【００５４】
あらゆる適切なアミノ酸を使用することができる。適切なカロテノイドには、ＣＡＲＯＰＨＹＬＬ（登録商標）Ｒｅｄ（Roche Vitamins Inc., Parsippany, New Jersey）、β−カロチン、アスタキサンチン、及びそれらの組合せなどがある。適切なデンプンには、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、ジャガイモデンプン、タピオカデンプン、及びそれらの組合せなどがある。
【００５５】
適切な医薬品添加物には、薬剤、性能向上剤、抗生物質、抗オクシジウム薬（ａntioccidial）、及びそれらの混合物などがある。適切な担体には、石灰石、粗挽き小麦粉、コーンミール、もみ殻、炭酸カルシウム、及びそれらの組合せなどがある。
【００５６】
好都合には、飼料プレミックス組成物は、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＢ12、ビタミンＢ3、ナイアシン、ｄ−パントテン酸、葉酸、ビタミンＢ6、ビタミンＢ1、石灰石及びもみ殻を含有する。
【００５７】
別の好ましい飼料プレミックス組成物は、ビタミンＥ、ビタミンＢ3、カロテノイド、塩化コリン、酸化マンガン、酸化亜鉛、硫酸鉄、酸化銅、硫酸コバルト及び粗挽き小麦粉を含有する。本発明のさらに別の好ましい飼料プレミックス組成物は、フィターゼ酵素を含有する。
【００５８】
飼料プレミックス組成物は、混合、付着、マイクロカプセル化された成分の適当な溶媒中への分散及び栄養性添加剤への噴霧、及びそれらの組合せを包含する当技術分野で知られているあらゆる都合のよい手段でマイクロカプセル化油を選択されたあらゆる栄養性添加剤と組み合わせることにより製造し得る。好都合には、飼料プレミックス組成物を、マイクロカプセル化油を選択された任意の栄養性添加剤と混合することにより製造する。
【００５９】
飼料プレミックス組成物は、さまざまな動物食品産物に添加することができる。例えば、それらは、家禽（例えば、フライ用若鶏、焼き肉用若鶏、産卵鶏、七面鳥など）の飼料、ブタ、イヌ及びネコの飼料に添加し得る。
【００６０】
一般に、プレミックスは、完成した飼料に基づいて、５０〜２００ｐｐｂ（十億分率）の２５−ヒドロキシビタミンＤ3を提供する量で動物食品産物と組み合わせる。
【００６１】
上記に従い、本発明は以下のものを提供する：
（ａ）  油組成物であって、油、例えば、ババス油、ヤシ油、コフネヤシ油、ムルミル牛脂、パーム核油及びホシダネヤシ油からなる群より選択される油、好ましくは、ヤシ油及びパーム核油から選択される油、及び２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含んでなり、ここで、２５−ヒドロキシビタミンＤ3が、油中に、油組成物の総重量に基づいて約５〜５０重量％の量で、例えば、約１０〜４０重量％の量で、例えば、好ましくは、油組成物の総重量に基づいて約１２．５〜２８重量％の量で、より好ましくは、約１５〜２５重量％の量で溶解している、油組成物；
（ｂ）  （ａ）による油組成物であって、酸化防止剤、例えば、ミックストコフェロール、トコフェロール、エトキシキン、ブチル化ヒドロキシトルエン、ブチル化ヒドロキシアニソール、天然酸化防止剤及び没食子酸プロピルからなる群より選択される酸化防止剤をさらに含んでいる、油組成物；
（ｃ）  エマルションであって、油及び２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含む油組成物、並びに、水性組成物、例えば、カプセル化剤及び水を含む水性組成物を含んでなり、ここで、２５−ヒドロキシビタミンＤ3が油中に油組成物の総重量に基づいて約５〜５０重量％の量で溶解している、前記エマルション；
（ｄ）  （ｃ）によるエマルションであって、油組成物が、液滴として、例えば、約５００nm未満の平均径、好ましくは、約１００〜約２００nmの平均径を有する液滴として水性組成物中に分散している、エマルション；
（ｅ）  マイクロカプセル化油であって、油組成物、及び、油組成物をカプセル化するカプセル化剤、例えば、デンプン、動物起源のタンパク質、植物起源のタンパク質、カゼイン、ペクチン、アルギネート、寒天、マルトデキストリン、リグニンスルホネート、セルロース誘導体、糖、サッカリド、ソルビトール及びゴムからなる群より選択されるカプセル化剤、好ましくは、デンプンであるカプセル化剤を含んでなり、ここで、油組成物が油組成物の総重量に基づいて約５〜５０重量％の量で油に溶解している２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含んでいる、マイクロカプセル化油；
（ｆ）  （ｅ）によるマイクロカプセル化油組成物であって、油が、油組成物中に、マイクロカプセル化油組成物の総重量に基づいて、約３０重量％未満の量、好ましくは、マイクロカプセル化油組成物の総重量に基づいて、約２０重量％未満の量、さらに好ましくは、約１０重量％未満の量、最も好ましくは、約５重量％未満の量で存在している、マイクロカプセル化油組成物；
（ｇ）  （ｅ）によるマイクロカプセル化油組成物であって、油が、ババス油、ヤシ油、コフネヤシ油、ムルミル牛脂、パーム核油及びホシダネヤシ油からなる群より選択され、好ましくは、ヤシ油及びパーム核油から選択される、マイクロカプセル化油組成物；
（ｈ）  （ｅ）によるマイクロカプセル化油組成物であって、カプセル化剤がデンプンであり、かつ、油がヤシ油又はパーム核油である、マイクロカプセル化油組成物；
（ｉ）  飼料プレミックス組成物であって、油組成物及び油組成物をカプセル化するカプセル化剤を含むマイクロカプセル化油、並びに、少なくとも１種の栄養性添加剤、例えば、ビタミン類、プロビタミン類、鉱物、活性フィターゼ、アミノ酸、カロテノイド、デンプン、魚粉、コリン及び担体からなる群より選択される栄養性添加剤、好ましくは、ビタミンＤ3、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＢ12、ビタミンＢ3、ナイアシン、パントテン酸カルシウム、ビタミンＫ3、葉酸、ビタミンＢ6、ビタミンＢ1、石灰石及びもみ殻であるか、又は、ビタミンＥ、ビタミンＢ3、カロテノイド、塩化コリン、酸化マンガン、酸化亜鉛、硫酸鉄、酸化銅、硫酸コバルト及び粗挽き小麦粉である栄養性添加剤を含んでなり、ここで、油組成物が油組成物の総重量に基づいて約５〜５０重量％の量で油に溶解している２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含んでいる、飼料プレミックス組成物；
（ｊ）  （ｉ）による飼料プレミックス組成物であって、油が、ババス油、ヤシ油、コフネヤシ油、ムルミル牛脂、パーム核油及びホシダネヤシ油からなる群より選択され、好ましくは、ヤシ油及びパーム核油から選択される、飼料プレミックス組成物；
（ｋ）  （ｉ）による飼料プレミックス組成物であって、カプセル化剤が、デンプン、動物起源のタンパク質、植物起源のタンパク質、カゼイン、ペクチン、アルギネート、寒天、マルトデキストリン、リグニンスルホネート、セルロース誘導体、糖、サッカリド、ソルビトール及びゴムからなる群より選択され、好ましくは、デンプンである、飼料プレミックス組成物；
（ｌ）  （ｉ）による飼料プレミックス組成物であって、カプセル化剤がデンプンであり、かつ、前記油がヤシ油又はパーム核油である、飼料プレミックス組成物；
（ｍ）  マイクロカプセル化油の作成方法であって、油組成物を供給すること、及び、油組成物を、カプセル化剤、例えば、デンプン、動物起源のタンパク質（ゼラチンなど）、植物起源のタンパク質、カゼイン、ペクチン、アルギネート、寒天、マルトデキストリン、リグニンスルホネート、セルロース誘導体、糖、サッカリド、ソルビトール及びゴムからなる群より選択されるカプセル化剤、好ましくは、デンプンであるカプセル化剤中にカプセル化することを含んでなり、ここで、油組成物が油組成物の総重量に基づいて約５〜５０重量％の量で油に溶解している２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含んでいる、作成方法；
（ｎ）  （ｍ）によるマイクロカプセル化油の作成方法であって、油が、油組成物中に、マイクロカプセル化油組成物の総重量に基づいて、約３０重量％未満の量、好ましくは、約２０重量％未満の量、より好ましくは、約１０重量％未満の量、最も好ましくは、約５重量％未満の量で存在している、作成方法；
（ｏ）  （ｍ）によるマイクロカプセル化油の作成方法であって、カプセル化剤がデンプンであり、かつ、油がヤシ油又はパーム核油である、作成方法；
（ｐ）  （ｍ）によるマイクロカプセル化油の作成方法であって、油組成物と水性組成物を組み合わせてエマルションを形成させること、及び、エマルションを乾燥させて、例えば噴霧乾燥により乾燥させて、マイクロカプセル化油を形成させることをさらに含む、作成方法；
（ｑ）  （ｏ）によるマイクロカプセル化油の作成方法であって、液滴が、約５００nm未満の平均径、好ましくは、約１００〜約２００nmの平均径を有する、作成方法；
（ｒ）  飼料プレミックスの作成方法であって、油組成物及び油組成物をカプセル化するカプセル化剤を含むマイクロカプセル化油組成物を供給すること、並びに、該マイクロカプセル化油組成物を、少なくとも１種の栄養性添加剤、例えば、ビタミン類、プロビタミン類、鉱物、活性フィターゼ、アミノ酸、カロテノイド、デンプン、魚粉、コリン、医薬品添加物及び担体からなる群より選択される栄養性添加剤と混合することを含んでなり、ここで、油組成物が油組成物の総重量に基づいて約５〜５０重量％の量で油に溶解している２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含んでいる、作成方法；
（ｓ）  （ｒ）による飼料プレミックスの作成方法であって、油が、ババス油、ヤシ油、コフネヤシ油、ムルミル牛脂、パーム核油及びホシダネヤシ油よりなる群から選択され、好ましくは、ヤシ油及びパーム核油から選択される、作成方法；
（ｔ）  （ｒ）による飼料プレミックスの作成方法であって、カプセル化剤が、デンプン、動物起源のタンパク質（ゼラチンなど）、植物起源のタンパク質、カゼイン、ペクチン、アルギネート、寒天、マルトデキストリン、リグニンスルホネート、セルロース誘導体、糖、サッカリド、ソルビトール及びゴムからなる群より選択され、好ましくは、デンプンである、作成方法；
（ｕ）  （ｒ）による飼料プレミックスの作成方法であって、カプセル化剤がデンプンであり、かつ、油がヤシ油又はパーム核油である、作成方法。
【実施例】
【００６２】
以下の実施例を、本発明の組成物及び方法をさらに説明するために提供する。これらの実施例は、例示のみを目的としたものであって、決して、本発明の範囲を制限することを意図するものではない。
【００６３】
実施例１：油組成物
油を加熱及び／又は撹拌しながら、それに、下記割合で、２５−ヒドロキシビタミンＤ3を溶解させることにより、本発明の油組成物を調製する。
【００６４】
【表１】
2005519894.tif 000003
【００６５】
実施例２：油組成物
油を加熱及び／又は撹拌しながら、それに、下記割合で、２５−ヒドロキシビタミンＤ3及び酸化防止剤を溶解させることにより、本発明の油組成物を調製する。
【００６６】
【表２】
2005519894.tif 000004
【００６７】
実施例３：エマルション
本発明の油組成物（例えば、実施例１及び２の油組成物）を水性組成物中に分散させることにより、本発明のエマルションを調製した。
【００６８】
油組成物は、２５−ヒドロキシビタミンＤ3  ７．２kg；ヤシ油  ２７．６kg；及び、ＥＭＱ  １９．８８kgを含有していた。油組成物は、ヤシ油、ＥＭＱ及び２５−ヒドロキシビタミンＤ3を混合し、約８５℃に加熱することにより調製した。一定温度で、９０分間撹拌を続けた。この時点で、溶液を顕微鏡で観察することにより確認したところ、２５−ヒドロキシビタミンＤ3のすべての結晶が溶解していた。
【００６９】
水性組成物は、ＣＡＰＳＵＬ（登録商標）  ３７６．３５kg；マルトデキストリン１５  ７８．０９kg；アスコルビン酸ナトリウム  １２．８１kg；及び、水  ４３７．６４kgを含有していた。水相を調製するために、成分を一緒にした。加熱混合することで、乾燥している成分は、水中に容易に溶解した。この溶液の粘度は、約３８５cpｓであった。
【００７０】
油組成物を水性組成物に添加し、ホモジナイザー中で３０分間均質化した。均質化している間に、油成分の液滴が約１５０nmの粒径を有するエマルションが形成された。
【００７１】
実施例４：マイクロカプセル化油組成物
下記パラメーターを用いて実施例３のエマルションを噴霧乾燥させることにより、本発明のマイクロカプセル化油組成物を調製した。
入口温度                １３５℃
出口温度                １０２℃
マイクロクロン入り口    ４．１
ファン入り口            １４．６
シリカ供給装置          乾燥生成物中にシリカ約１％を供給するように設定
アトマイザーＲＰＭ      １７０００  パートＡ
１５０００  パートＢ
ポンプスピード          １７  パートＡ
２１  パートＢ
生成物含水率            １．９〜２．２５％
【００７２】
マイクロカプセル化油は、下記特性を有する黄褐色の粉末であった。
ルーズ嵩密度            〜０．４２ｇ／mL
タップ嵩密度            〜０．５ｇ／mL
ダスト                  〜１６９mg／２５ｇ
安息角                  〜４９°
Ａｇｗａｙ  フロー      なし
乾燥減量                〜２．６％
【００７３】
さらに、マイクロカプセル化油組成物は、粉末のＵＶ吸収率で測定したところ、高度の均質性を示した。
【００７４】
実施例５：安定性
下記に記載したようにして、本発明のマイクロカプセル化油組成物の２種類のバッチ［本発明００１（又は、本発明１、もしくは、バッチ００１）及び本発明００２（又は、本発明２、もしくは、バッチ００２）］を製造した。これらバッチの安定性を、従来技術のワックス小ビーズ（wax beadlet）形態にある市販製品（従来技術）と比較した。２種類のバッチと市販製品は、すべて、１１℃又は２５℃のいずれかで４ヶ月まで期間貯蔵した。
試験を行った２種類のバッチは、実施例３及び４に従って調製した２５−ヒドロキシビタミンＤ3約１．２５重量％を含有していた。
以下のデータは、本発明のマイクロカプセル化油が市販製品よりも大きく増大した安定性を示すことを明確に表している。さらに、本発明のマイクロカプセル化油は、その劣化速度の低下を示したが、このことは、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の劣化速度が、最初の貯蔵期間の後、低下することを表している。
２５−ヒドロキシビタミンＤ3の初期含有量に関しては、バッチ００１は、バッチ００２よりも高い値を示す。
【００７５】
１１℃での貯蔵
図１は、１１℃でのさまざまな貯蔵期間において、従来技術の配合物と比較した、本発明のマイクロカプセル化油中の２５−ヒドロキシビタミンＤ3のビタミンＤ3保持％（総組成物に対する活性成分の重量％）を示す。本発明の組成物は、すべての時点で、市販製品に比較して、改善された安定性を示した。
図２は、１１℃でのさまざまな貯蔵期間において、従来技術の配合物と比較した、本発明のマイクロカプセル化油中の２５−ヒドロキシビタミンＤ３の保持％を示す。図２は、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の保持％において横ばいを示しており、このことは、本発明の組成物における劣化速度の低下を示している。
【００７６】
２５℃での貯蔵
図３は、２５℃でのさまざまな貯蔵期間において、従来技術の配合物と比較した、本発明のマイクロカプセル化油中の２５−ヒドロキシビタミンＤ3のビタミンＤ3保持％（総組成物に対する活性成分の重量％）を示す。本発明の組成物は、すべての時点で、市販製品に比較して、改善された安定性を示した。
図４は、２５℃でのさまざまな貯蔵期間において、従来技術の配合物と比較した、本発明のマイクロカプセル化油中の２５−ヒドロキシビタミンＤ3の保持パーセントを示す。図４は、２５℃での２５−ヒドロキシビタミンＤ3の保持パーセントにおいて横ばいを示しており、このことは、本発明の組成物における劣化速度の低下を示している。
【００７７】
３７℃での貯蔵
この温度では、従来技術の小ビーズは劣化しはじめ、もはや粉末ではない固体塊状物を形成した。それゆえ、従来技術の小ビーズは通常の溶媒に溶解させることができず、信頼性のある保持データを得ることができなかった。本発明の組成物は、そのような劣化を受けず、この高い貯蔵温度で、すべての時点で、良好な流動性と嵩密度を保持した。
【００７８】
図５は、さまざまな温度でのさまざまな貯蔵時間における、従来技術の配合物と比較した本発明のマイクロカプセル化油について、２５−ヒドロキシビタミンＤ３の保持データの線形回帰を示している。この回帰は、両方の温度ですべての貯蔵期間において、本発明の組成物が市販製品よりも大きく改善された安定性を有することを表している。さらに、回帰曲線の傾きは、本発明のマイクロカプセル化油組成物中の２５−ヒドロキシビタミンＤ3についての劣化速度が、すべての貯蔵時間及び温度において、従来技術の小ビーズのそれよりも著しく小さいことを明瞭に示している。したがって、短時間の貯蔵の後でさえ、本発明の組成物は、従来技術の小ビーズと比較して、有意に多い量の２５−ヒドロキシビタミンＤ3を保持する。
【００７９】
実施例６：プレミックス組成物
動物飼料で使用するための基本的なプレミックスを調製したが、その際、プレミックスは、下記成分を、プレミックスの総重量に基づいた重量％による下記比率で有していた。
【００８０】
【表３】
2005519894.tif 000005
【００８１】
実施例７：プレミックスの安定性
動物飼料で使用するための３種のプレミックス、即ち、ＣＯＭＰＬＥＴＥプレミックス、ＶＩＴＡＭＩＮプレミックス及びＢＡＳＩＣプレミックスを調製したが、その際、プレミックスは、下記成分を、プレミックスの総重量に基づいた重量％による下記比率で有していた。
【００８２】
【表４】
2005519894.tif 000006
【００８３】
上記プレミックス組成物の各々を、本発明のマイクロカプセル化油、又は、２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含有する従来技術の小ビーズを用いて調製した。さらに、対照配合物も調製したが、対照配合物では、２５−ヒドロキシビタミンＤ3をビタミンＤ3で置き換えた。プレミックスの各々は、２５℃及び３５℃で３ヶ月までの期間貯蔵した。２５−ヒドロキシビタミンＤ3の保持パーセントを、各貯蔵時間及び温度で測定した。
【００８４】
【表５】
2005519894.tif 000007
【００８５】
上記結果が示しているように、ＢＡＳＩＣプレミックス及びＶＩＴＡＭＩＮプレミックスにおいて、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の安定性はビタミンＤ3の安定性よりも劣った。しかしながら、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の安定性は、本発明の配合物と比較した従来技術の配合物についてほぼ同等であった。
【００８６】
ＣＯＭＰＬＥＴＥプレミックスを考慮に入れると、結果は、非常に異なったものとなる。従来技術の配合物中の２５−ヒドロキシビタミンＤ3の安定性は、本発明の配合物と比較して、有意に低下した。上述したように、この安定性の低下は、プレミックス中に見いだされる鉱物、遷移金属又は過酸化物によるビタミンＤ3又は２５−ヒドロキシビタミンＤ3の酸化によって起こり得る。例えば、３ヶ月の貯蔵において、従来技術の配合物は２０％未満の２５−ヒドロキシビタミンＤ3しか保持しなかったが、本発明の配合物は、５０％を超える２５−ヒドロキシビタミンＤ3を保持した（２５℃の貯蔵温度では、８０％を超えた）。
したがって、本発明の配合物は、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の劣化を促進する成分を含有するプレミックス中においてさえ、広い範囲の貯蔵温度及び時間にわたって、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の保持率を上昇させた。
【００８７】
実施例８：飼料
本発明の飼料プレミックス組成物を動物飼料と混合することにより動物飼料組成物を製造した。実施例６のプレミックスを下記成分を有する家禽用の基本的な飼料と混合することにより、家禽用の飼料を製造した。
【００８８】
【表６】
2005519894.tif 000008
【００８９】
プレミックスと基本的な飼料を、実質的な均質性が得られるまで混合した。
【００９０】
以上のように本発明を説明したが、本発明がさまざまに変更可能であることは明らかであろう。そのような変形態様は、本発明の精神及び範囲から逸脱しているとみなされるべきではなく、そのような変更はすべて添付の特許請求の範囲の範囲内に含まれるものである。
【図面の簡単な説明】
【００９１】
【図１】１１℃でのさまざまな貯蔵期間において、従来技術の配合物と比較した、本発明のマイクロカプセル化油中の２５−ヒドロキシビタミンＤ3のビタミンＤ3保持％（総組成物に対する活性成分の重量％）を示す図である。
【図２】１１℃でのさまざまな貯蔵期間において、従来技術の配合物と比較した、本発明のマイクロカプセル化油中の２５−ヒドロキシビタミンＤ3の保持％を示す図である。
【図３】２５℃でのさまざまな貯蔵期間において、従来技術の配合物と比較した、本発明のマイクロカプセル化油中の２５−ヒドロキシビタミンＤ3のビタミンＤ3保持％（総組成物に対する活性成分の重量％）を示す図である。
【図４】２５℃でのさまざまな貯蔵期間において、従来技術の配合物と比較した、本発明のマイクロカプセル化油中の２５−ヒドロキシビタミンＤ3の保持％を示す図である。
【図５】さまざまな温度でのさまざまな貯蔵時間における、従来技術の配合物と比較した本発明のマイクロカプセル化油について、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の保持データの線形回帰を示す図である。
【図１】
2005519894.tif 000009
【図２】
2005519894.tif 000010
【図３】
2005519894.tif 000011
【図４】
2005519894.tif 000012
【図５】
2005519894.tif 000013
【手続補正書】
【提出日】平成15年12月11日(2003.12.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
油及び２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含む油組成物であって、２５−ヒドロキシビタミンＤ３が該油中に該油組成物の総重量に基づいて約１２．５〜５０重量％の量で溶解している、前記油組成物。
【請求項２】
さらに酸化防止剤を含む、請求項１に記載の油組成物。
【請求項３】
油及び２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含む油組成物並びに水性組成物を含むエマルションであって、２５−ヒドロキシビタミンＤ3が該油中に該油組成物の総重量に基づいて約１２．５〜５０重量％の量で溶解している、前記エマルション。
【請求項４】
油組成物が水性組成物中に液滴として分散する、請求項３記載のエマルション。
【請求項５】
油組成物及び該油組成物をカプセル化するカプセル化剤を含むマイクロカプセル化油であって、該油組成物が該油組成物の総重量に基づいて約１２．５〜５０重量％の量で油に溶解している２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含む、前記マイクロカプセル化油。
【請求項６】
カプセル化剤がデンプンであり、油がヤシ油又はパーム核油である、請求項５記載のマイクロカプセル化油組成物。
【請求項７】
マイクロカプセル化油及び少なくとも１種の栄養性添加剤を含む飼料プレミックス組成物であって、該マイクロカプセル化油が油組成物及び該油組成物をカプセル化するカプセル化剤を含み、該油組成物が該油組成物の総重量に基づいて約１２．５〜５０重量％の量で油に溶解している２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含む、前記飼料プレミックス組成物。
【請求項８】
カプセル化剤がデンプンであり、油がヤシ油又はパーム核油である、請求項７記載の飼料プレミックス組成物。
【請求項９】
栄養性添加剤が、ビタミンＤ3、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＢ12、ビタミンＢ3、ナイアシン、パントテン酸カルシウム、ビタミンＫ3、葉酸、ビタミンＢ6、ビタミンＢ1、石灰石及びもみ殻であるか、又は、ビタミンＥ、ビタミンＢ3、カロテノイド、塩化コリン、酸化マンガン、酸化亜鉛、硫酸鉄、酸化銅、硫酸コバルト及び粗挽き小麦粉である、請求項７記載の飼料プレミックス組成物。
【請求項１０】
油組成物及び該油組成物をカプセル化するカプセル化剤を含むマイクロカプセル化油組成物を供給すること、及び、該マイクロカプセル化油組成物を少なくとも１種の栄養性添加剤と混合することを含んでなり、ここで、該油組成物が該油組成物の総重量に基づいて約１２．５〜５０重量％の量で油に溶解している２５−ヒドロキシビタミンＤ3を含む、飼料プレミックスの作成方法。
【国際調査報告】
2005519894.tif 000014
2005519894.tif 000015
2005519894.tif 000016