(57)【要約】本発明は、様々な疾患および/または身体状態を予防、治療、もしくは管理するための、リポソームを含有する医薬組成物ならびにこのようなリポソームの使用方法に関する。リポソームは大型単層膜小胞（LUVs）のみを含有してもよく、または多重膜小胞（MLVs）、小型単層膜小胞（SUVs）、もしくは他の治療法と併用してもよい。本発明は、特定の用量および/または投与計画を用いて患者に投与される、特定の直径を有するリポソームに関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
リン脂質および水性層を含む、平均直径が約50 nm〜250 nmであるリポソームを、50 mg/kg〜300 mg/kgで、単回投与もしくは分割投与にて投与することを含む、疾患また身体状態を予防、治療または管理する方法。
【請求項２】
リポソームを４〜１０日間隔で50 mg/kg〜300 mg/kgの用量で投与する、請求項１記載の方法。
【請求項３】
リポソームが約50 nm〜150 nmの平均直径を有する、請求項１記載の方法。
【請求項４】
リポソームが約50 nm〜200 nmの平均直径を有する、請求項１記載の方法。
【請求項５】
リポソームが約100 nm〜200 nmの平均直径を有する、請求項１記載の方法。
【請求項６】
リポソームが約100 nm〜250 nmの平均直径を有する、請求項１記載の方法。
【請求項７】
リポソームが約150 nm〜200 nmの平均直径を有する、請求項１記載の方法。
【請求項８】
リポソームが約150 nm〜250 nmの平均直径を有する、請求項１記載の方法。
【請求項９】
リポソームを多重膜小胞、大型単層膜小胞、小型単層膜小胞、およびその混合物から成る群より選択される他のリン脂質小胞と共に投与する、請求項５記載の方法。
【請求項１０】
用量が被験体のLDLレベルに実質的な増加または減少を引き起こさない、請求項１記載の方法。
【請求項１１】
用量が被験体のLDLレベルに実質的な増加または減少を引き起こす、請求項１記載の方法。
【請求項１２】
リン脂質が、卵ホスファチジルコリン、卵ホスファチジルグリセロール、ジステアロイルホスファチジルコリン、またはジステアロイルホスファチジルグリセロール、ホスファチジルコリン、ホスファチジルグリセロール、レシチン、ベータ、糖脂質、γ-ジパルミトイル-α-レシチン、スフィンゴミエリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、N-(2,3-ジ(9-(Z)-オクタデセニルオキシ))-プロプ-1-yl-N,N,N-トリメチルアンモニウムクロリド、ホスファチジルエタノールアミン、リゾレシチン、リゾホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ケファリン、カルジオリピン、セレブロシド、リン酸ジセチル、ジオレオイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール、ジオレオイルホスファチジルグリセロール、パルミトイル-オレオイル-ホスファチジルコリン、ジ-ステアロイル-フォスファチジルコリン、ステアロイル-パルミトイル-ホスファチジルコリン、ジ-パルミトイル-ホスファチジルエタノールアミン、ジ-ステアロイル-フォスファチジルエタノールアミン、ジ-ミリストイル-ホスファチジルセリン、ジ-オレオイル-ホスファチジルコリン、オレオイル-パルミトイル-ホスファチジルコリン、37℃で液晶相である脂質、およびこれらの混合物から成る群より選択される、請求項１記載の方法。
【請求項１３】
リン脂質がパルミトイル-オレオイル-ホスファチジルコリンである、請求項１記載の方法。
【請求項１４】
疾患または身体状態が、アテローム性動脈硬化症、静脈硬化症、またはコレステロールもしくは他の物質を含むプラーク沈着が静脈の血管内膜もしくは内部中膜に形成されたあらゆる静脈症状、急性冠症候群、安定狭心症および不安定狭心症を含む狭心症、炎症、血管性炎症、真皮性炎症、鬱血性心不全、冠動脈心疾患（CHD）、心室性不整脈、末梢血管疾患、心筋梗塞、致死性心筋梗塞の兆候、非致死性心筋梗塞、虚血、心血管性虚血、一過性虚血発作、心血管性疾患と無関係の虚血、虚血再灌流傷害、血管再開通術の必要性の減少、凝血障害、血小板減少症、深部静脈血栓症、膵炎、非アルコール性脂肪性肝炎、糖尿病性神経障害、網膜症、有痛性糖尿病性神経障害、跛行、乾癬、重篤な四肢虚血、性交不能、高脂血症、高リポタンパク血症、低αリポタンパク血症、高トリグリセリド血症、虚血症状を引き起こすあらゆる狭窄状態、I型およびII型の両方を含む糖尿病、魚鱗癬、発作、脆弱プラーク、アルツハイマー病、下肢潰瘍形成、重度の冠動脈虚血、リンパ腫、白内障、内皮機能障害、黄色腫、末端器官機能障害、血管疾患、喫煙および糖尿病に起因する血管疾患、頚動脈および冠動脈疾患、定着したプラークの退縮および収縮、不安定なプラーク、弱い血管内膜、不安定な血管内膜、内皮傷害、外科的処置の結果としての内皮損傷、血管疾患に関連した病的状態、動脈内腔における潰瘍形成、バルーン血管形成術の結果としての再狭窄、ならびに上述の副次的適応症から成る群より選択される、請求項１記載の方法。
【請求項１５】
治療が血管壁内膜を強化し、肝臓への輸送のために細胞外コレステロールの流出を促進し、アテローム硬化性プラークからコレステロールを動員し、創傷治癒を目的とし、任意の生体膜、細胞、組織、器官、細胞外領域、または構造を修正する、請求項１記載の方法。
【請求項１６】
リポソームが、ペプチド、パラオキソナーゼ、リポタンパク質リパーゼ、ApoA-Iおよびその模倣型、A-I変異型、ならびにその組合せから成る群より選択される化合物と共に投与されるか、または該化合物と結合している、請求項１記載の方法。
【請求項１７】
リポソームがコレステロールレベルに影響を及ぼす小分子または薬剤と共に投与される、請求項１記載の方法。
【請求項１８】
小分子がスタチン、再構成HDL、小型HDL、または合成模倣HDLリポタンパク質粒子である、請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
リポソームが１つ以上の心血管作動薬、抗糖尿病薬、または他の治療剤と共に投与される、請求項１記載の方法。
【請求項２０】
心血管作動薬が、小分子、スタチン、アスピリン、クロピドグレルを含むβ遮断薬、カルシウム遮断薬、低分子量ヘパリンを含むヘパリン、グルコース低下剤、硝酸塩、IIb/IIIa阻害剤、ACE阻害剤、フィブレート、および胆汁酸抑制剤から成る群より選択される、請求項１９記載の方法。
【請求項２１】
リポソームが約50 mg/kgの用量で約７日毎に投与される、請求項１記載の方法。
【請求項２２】
リポソームが約100 mg/kgの用量で約７日毎に投与される、請求項１記載の方法。
【請求項２３】
リポソームが約150 mg/kgの用量で約７日毎に投与される、請求項１記載の方法。
【請求項２４】
リポソームが約200 mg/kgの用量で約７日毎に投与される、請求項１記載の方法。
【請求項２５】
リポソームが約250 mg/kgの用量で約７日毎に投与される、請求項１記載の方法。
【請求項２６】
リポソームが約300 mg/kgの用量で約７日毎に投与される、請求項１記載の方法。
【請求項２７】
リポソームが１回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項２８】
リポソームが４〜７日間隔で２回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項２９】
リポソームが４〜７日間隔で３回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項３０】
リポソームが４〜７日間隔で４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項３１】
リポソームが４〜７日間隔で５回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項３２】
リポソームが４〜７日間隔で６回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項３３】
リポソームが４〜７日間隔で７回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項３４】
リポソームが４〜７日間隔で８回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項３５】
リポソームが４〜７日間隔で９回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項３６】
リポソームが４〜７日間隔で１０回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項３７】
リポソームが４〜７日間隔で１１回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項３８】
リポソームが４〜７日間隔で１２回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項３９】
リポソームが４〜７日間隔で１３回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項４０】
リポソームが４〜７日間隔で１４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項４１】
リポソームが１週間隔で２〜１４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項４２】
リポソームが２週間隔で２〜１４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項４３】
リポソームが１ヶ月間隔で２〜１４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項４４】
リポソームが２ヶ月間隔で２〜１４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項４５】
リポソームが３ヶ月間隔で２〜１４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項４６】
リポソームが４ヶ月間隔で２〜１４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項４７】
リポソームが５ヶ月間隔で２〜１４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項４８】
リポソームが６ヶ月間隔で２〜１４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項４９】
リポソームが７ヶ月間隔で２〜１４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項５０】
リポソームが８ヶ月間隔で２〜１４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項５１】
リポソームが９ヶ月間隔で２〜１４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項５２】
リポソームが１０ヶ月間隔で２〜１４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項５３】
リポソームが１１ヶ月間隔で２〜１４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項５４】
リポソームが３年間隔で２〜１４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項５５】
リポソームが４年間隔で２〜１４回投与される、請求項１記載の方法。
【請求項５６】
50 nm〜250 nmの平均粒子サイズを有するリポソームを100 mg/kg〜200 mg/kgの用量でそれを必要とする患者に投与することを含む、リポソーム治療に関連する悪影響を減少または回避して、末梢組織のコレステロールを減少させる方法。
【請求項５７】
リポソームを100 mg/kg〜200 mg/kgの用量でそれを必要とする患者に投与することを含み、該投与が単回投与または７日以上毎の複数回投与で行われる、異常なコレステロールレベルに関連した疾患もしくは障害の予防または治療方法。
【請求項５８】
投与が７日毎に１回行われる、請求項５６記載の方法。
【請求項５９】
投与が６〜１４回行われる、請求項５６記載の方法。
【請求項６０】
50 nm〜250 nmの平均直径を有するリポソームを100 mg/kg〜200 mg/kgの用量で４日以上毎にヒトに投与することを含む、罹患したヒトのコレステロールを減少させる方法。
【請求項６１】
上記リポソームを、１つ以上の心血管作動薬、抗糖尿病薬および/もしくは血糖制御薬、ならびに/または他の治療薬と併用して投与することを更に含む、請求項５９記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、様々な疾患および/または身体状態を予防、治療、もしくは管理するための、リポソームを含有する医薬組成物ならびにこのようなリポソームの使用方法に関する。リポソームは大型単層膜小胞（LUVs）のみを含有してもよく、または多重膜小胞（MLVs）、小型単層膜小胞（SUVs）、もしくは他の治療法と併用してもよい。本発明は、特定の用量および/または投与計画を用いて患者に投与される、特定の直径を有するリポソームに関する。
【背景技術】
【０００２】
アテローム性動脈硬化症は米国における主要な死亡原因である。アテローム性動脈硬化症は、血管内腔を閉塞させ血管での血流を妨げ得る、動脈壁でのプラーク形成である。プラークはまた、重篤な狭窄のない血管においても、破裂して血栓形成を引き起こし血管の閉塞および血流障害を誘導する。病的状態ならびに死亡は通常、虚血による末端器官の損傷および器官の機能不全を介して起こる。最も一般的な末端器官の虚血性障害は、心筋梗塞および脳血管障害である。障害または死亡は多くの場合これらの血管での事象によって起こる。不可逆的に心筋を損傷しない、または軽度の心筋損傷を引き起こすアテローム性動脈硬化症関連虚血であっても、狭心症および鬱血性心不全の形の深刻な病的状態の原因となる。腎臓、腸管、および脊髄などの他の器官もまた、アテローム硬化性閉塞により損傷されうる。更に、大動脈瘤などの疾患において、アテローム硬化性動脈は末端器官の機能不全と無関係な臨床症状を引き起こしうる。動脈硬化性病変は、コレステロール、コレステロールエステルおよびリン脂質の蓄積、平滑筋細胞の増殖、主要動脈の内膜におけるマクロファージおよび泡沫細胞への形質転換を含む単球の漏出によって形成されるプラークである。脂質はプラーク容積の主要部分を占める（通常、乾燥重量30〜65％）（Small, ARTERIOSCLEROSIS, 8:103-129 (1988)）。実際、動脈硬化症を発症する危険性は、特定の種類の血漿コレステロール濃度と直接関連する。
【０００３】
異常に高い脂質レベルに関連した他の疾患および状態は、急性冠症候群、安定狭心症、不安定狭心症、炎症、血管性炎症、真皮性炎症、冠動脈心疾患（CHD）、心室性不整脈、末梢血管障害、末梢閉塞性疾患、間欠性跛行、一過性虚血発作、再狭窄、血管再開通術の必要性の減少、凝血障害、虚血、心血管性虚血、虚血再灌流傷害などの心血管性疾患と無関係の虚血、血小板減少症、膵炎、非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）、糖尿病性神経障害、網膜症、有痛性糖尿病性神経障害、跛行、乾癬、重篤な四肢虚血、性交不能、高脂血症、高リポタンパク血症、低αリポタンパク血症、高トリグリセリド血症、虚血症状を引き起こすあらゆる狭窄状態、糖尿病、魚鱗癬、発作、脆弱プラーク、下肢潰瘍形成、重度の冠動脈虚血、リンパ腫、白内障、内皮機能障害、黄色腫、血管疾患、喫煙および糖尿病に起因する血管疾患、頚動脈および冠動脈疾患、鬱血性心不全、定着したプラークの退縮および収縮、アルツハイマー病、内皮損傷を引き起こす外科的処置の組合せ、外科的処置の結果としての内皮損傷、血管疾患に関連した病的状態、動脈内腔における潰瘍形成、バルーン血管形成術の結果としての再狭窄、ならびに上述の副次的適応症を含む。
【０００４】
コレステロールを含む脂質は通常、水性の血漿に不溶性である。血漿中脂質は水溶性のリポタンパク質複合体によって運搬される。これらのリポタンパク質複合体は、無極性脂質（コレステロールエステルおよびトリグリセリド）の内核ならびに両親媒性タンパク質および極性脂質（リン脂質および非エステル化コレステロール）の表層から成る。異なるリポタンパク質複合体（リポタンパク質）の表層には、異なるタンパク質（アポリポタンパク質）が存在する。異なるリポタンパク質は脂質代謝において異なる機能を果たす。
【０００５】
５種類のリポタンパク質が知られている。いくつかのリポタンパク質が肝臓から末梢組織にトリグリセリドおよびコレステロールを運搬するのに対して、他方は脂質を肝臓に輸送する。コレステロールは肝臓中で排出される胆汁塩に代謝され、従って体内総コレステロールを低下させうる。２つのリポタンパク質、低比重リポタンパク質（LDL）および高比重リポタンパク質（HDL）は、アテローム性動脈硬化症の発達に高度の関連を有する。LDLは高いコレステロール濃度を持ち、脂質を末梢組織の細胞に送達し、アテローム性動脈硬化症の高い危険性に関連する。HDLもまた比較的高いコレステロール濃度を持つが、胆汁塩への代謝のために脂質を肝臓に運搬し、アテローム性動脈硬化症の発達の危険性の減少に関連する。
【０００６】
コレステロールの代謝および恒常性は、細胞中および血漿中の遊離ステロール間の複雑な平衡の結果である（Phillipsら、BIOCHIM. BIOPHYS. ACTA, 906:223-276 (1987)）。細胞へのコレステロールの送達は、受容体を介したLDL経路を通じて、スカベンジャー受容体B-Iを介した選択的取り込み、および細胞膜とリポタンパク質との間の受動的なステロールの交換によって起こる。ステロイドホルモンおよび胆汁酸を産生する組織のみがコレステロールを代謝できる。残りの末梢組織における過剰な遊離ステロールの蓄積を防ぐために、細胞膜からHDLおよびリポタンパク質様粒子へのコレステロールの逆転送系が存在する。HDLは肝臓に過剰なコレステロールを輸送し、そこでそれは非エステル化コレステロールとして胆汁中に運び出され、排出のために胆汁塩に処理され、肝臓においてエステル化され貯蔵され得るか、または、リポタンパク質プールに再度加わるために超低密度リポタンパク質（VLDL）に組み入れられ得るかのいずれかである。
【０００７】
細胞およびリポタンパク質間での受動的なコレステロールの交換は、水性空間を横切るステロール分子の拡散によって起こる（Phillipsら、上述、およびSchroederら、EXP. BIOL. MED., 196:235-252 (1991)）。遊離コレステロールの化学ポテンシャルが細胞内より血漿中で低い場合、実質的な細胞性の流出が起こり、ステロールはその活性勾配に従って膜から遊離する。これらの状況下では、形態的に早期のアテローム硬化性病変の特徴を示すコレステロールエステルを負荷された細胞は、コレステロールを失うだけでなく、エステルの加水分解を促進し、その結果、この脂質の細胞内蓄積の減少を引き起こす（Small, ARTERIOSCLEROSIS, 8:103-129 (1988)）。更に上述のように、コレステロールの逆転送系を促進することが予想されうる状態（低血漿コレステロール濃度、またはHDL濃度の増加）は、早期アテローム性動脈硬化症の危険性の減少と相関し、プラークの退縮を起こしうるという疫学的な証拠がある。
【０００８】
特徴的なことに、プラークは血管内膜の潰瘍と関連する。脂質を含むプラークは動脈内腔に脆弱な塊を突出させている潰瘍において発達する。プラークはまた血管の平滑筋中膜を損傷し弱体化させる。プラーク形成が進行するにつれて、プラークのより中心領域は血液循環から遮断される。広範囲のプラーク形成はまた、プラーク部位での血管の中心性または偏心性狭窄の原因となる。
【０００９】
現在、アテローム性動脈硬化症の最も有効な治療は予防である。血漿LDL濃度が正常レベル付近に保たれた場合、その進行および病変への脂質の蓄積は阻止できるという証拠がある（Reynolds, Circulation, 79:1146-1148 (1989)）。現在のアテローム性動脈硬化症の予防管理は、血漿コレステロールレベルを調節するために、食事制限と併用した薬剤の使用に集中している。更に、動脈壁の細胞による変性LDL粒子の形成および取り込みを抑制する抗酸化剤治療が有効であることも検証されつつある（Chisolm, CLIN. CARDIOL., 14:25-30 (1991)）。コレステロール低下薬はアテローム性動脈硬化症の進行を遅らせると思われる好ましい血漿コレステロール変化を引き起こすが、一方、それらは通常アテロームコレステロールの流出および除去を促進する状況を誘導しない。アテロームの顕著な退縮を達成させ、内腔の閉塞を減少させるためには、明らかに、これらの空間を占める脂質が動員されなければならない。余剰な肝細胞コレステロールの流出を促進し、排出のためにそれを肝臓へ輸送する過程、コレステロール逆転送系（RCT）は、アテローム性動脈硬化症の予防に重要な事象である（Gwynne, Clin. CARDIOL., 14:17-24 (1991)）。
【００１０】
現在のアテローム性動脈硬化症の治療法は通常、外科的および内科的治療に分類される。外科的治療は、閉塞領域を迂回するための血管移植処置（例えば冠動脈バイパス移植）、閉塞しているプラークの動脈壁からの除去（例えば頚動脈内膜切除術）、またはプラークの経皮的な破壊（バルーン血管形成術）を必要としうる。外科的治療は重大な危険性を伴い、単一の病変しか治療しない。治療した病変より下流のアテローム硬化性プラークは血流を閉塞させ続けるかもしれない。外科的治療はまた、アテローム性動脈硬化症の進行を制限せず、再狭窄の後期合併症に関連する。
【００１１】
内科的治療は、血管疾患に関連する他の危険因子（喫煙、糖尿病、および高血圧）の減少、ならびに、上述のアテローム性動脈硬化症の発達に関連した血清コレステロール型の低下に向けられる。内科的治療はプラーク形成の進行を遅延させうるが、プラークの退縮は比較的稀である。従って、症候性のアテローム性動脈硬化症は多くの場合、外科的および内科的治療の両方を必要とする。
【００１２】
矛盾したことに、リン脂質およびリポソームの静脈内注射は、血清脂質レベルを一過的に上昇させるが、アテローム硬化性プラークの退縮を引き起こすことが示された（Williamsら、PERSPECT. BIOL. MED., 27:417-431 (1984)）。しかしいくつかの例では、アテローム性動脈硬化症の発達および進行に関連したコレステロールはリポソーム投与によって増加しうる。
【００１３】
in vivoにおけるリン脂質誘導性のコレステロールの動員を検討する以前の研究は、多重膜小胞または超音波処理したリポソーム小胞を使用していた。リポソームサイズはクリアランス速度に重要な特性であり、超音波処理した小胞がコレステロール逆転送系の促進に最も適した二重層構造を示すと期待されるいくつかの理由の１つである。超音波処理は多重膜小胞（MLV）を減少させ「限界サイズ」の小胞にする。これらの系は崩壊せずに二重層構造を取り得る最少曲率半径を示す。例えば、作製され得る卵ホスファチジルコリンリポソームの最少サイズは一般的に半径約30-nmであり、多くの場合小型単層膜小胞（SUV）に分類される。既知のリポソーム組成に対して、通常、粒径が小さいほど血中半減期が大きいと想定されている（GregoriadisおよびSenior、LIFE SCI., 113:183-192 (1986)）。このため、ホスファチジルコリンから成るSUVは、より大きなリポソームより長く循環し、従ってより多くのコレステロールを動員することが予想される。更に、（急な曲率半径によって）SUV中のリン脂質が受ける充填圧力は、リポタンパク質と融合する傾向の増加だけでなく、融合を起こし得る不安定性を生じさせる（Hopeら、CHEM. PHYS. LIPIDS, 40:89-107 (1986)）。例えば、Scherphofら、BIOCHIM. BIOPHYS. ACTA, 542:296-307 (1978)およびKruppら、BIOCHIM. BIOPHYS. ACTA, 72:1251-1258 (1976) 参照。従って、SUVは多数のHDL様粒子を産生し、それによって末梢組織からのステロールの流出を促進するであろうと期待される。この期待を支持するように、50〜80 nmの直径を持つリポソームはステロール動員およびプラーク退縮を最適化することが報告されている（欧州特許公開第0461559 A2号）。
【００１４】
各々が参照により本明細書に完全に組み入れられる、「有害な肝臓のコレステロールホメオスタシスの混乱を回避する一方、身体部分からのコレステロール逆転送系を促進する方法」と題された米国特許第5,746,223号（'223特許）、「心臓カテーテルおよび血管形成の方法」と題された米国特許第6,080,422号（'422特許）、ならびに、アテローム性動脈硬化症の治療のためのリポソーム組成物および方法と題された米国特許第6,139,871号（'871特許）は、末梢組織からのコレステロール逆転送系を誘導するため、アテローム性動脈硬化症を治療するため、ならびに血管形成処置における使用のための（特に）LUVsの使用を開示する。
【００１５】
より具体的には、'223および'422特許は、約50、80、または100 nm以上の直径を列挙した請求項およびある実施形態において120 nmの好ましい直径を開示した明細書とともに、最大1000 nmまでの直径を有するLUV（より大きなリポソームは「より効率が低い」可能性がある）の使用を開示する。'223および'422特許における投与量は１回当たり10〜1600 mg/kgに及ぶ。より具体的な実施形態では用量は１日当たり600 mg/kg以下であり、他の特定の実施形態では用量はウサギに対して１、３、および５日に300 mg/kgのボーラス投与である。
【００１６】
'871特許は、好ましい直径は125 nmである、100〜500 nmの範囲の直径を持つLUVsの使用を開示する。'871特許はまた、複数の治療において、約100〜150 mg/kg、「通常は」約200〜750 mg/kg、および「最も通常は」約280〜420 mg/kgの範囲で、「一般的に週１回」4〜16週間、「通常は」約10週間のLUVsの投与を開示する。'871特許は、担体中のLUVsの濃度は変化しうるが、一般的にその濃度は約20〜200 mg/mlであり、通常は約50〜150 mg/ml、および最も通常は約100 mg/mlであろうと記載する。
【００１７】
最近、ETC-588（1-パルミトイル-2-オレオイルホスファチジルコリンから作製されたリポソーム、Esperion Therapeutics, Inc.の登録商標製品）を用いて2つの研究が実施された。ETC-588は、血管および末梢組織からコレステロールおよび他の置換可能な脂質を隔離し（動員として知られる過程）、その結果、ETC-588がそのコレステロール負荷を処理または排出のために肝臓に送達した後、投与前レベルに戻る血清コレステロールの一過的な増加を引き起こす。実験的に誘導したアテローム性動脈硬化症の動員および退縮は、ETC-588と非常に類似したリポソームサイズおよび組成を用いた臨床前モデルにおいて示されている。ETC-588は体内のコレステロール流動を急激に増加させ、脂質の逆行輸送経路を促進する。
【００１８】
最初の研究では、20、60、150、300および600 mg/kgのETC-588リポソームの単回投与を用いて、健康なボランティアにおけるETC-588の安全性および耐容性を評価した。注入ポンプを用いて１分間に10mlで静脈内にETC-588リポソーム（200 mg/ml）を注入した。血漿中のETC-588はリン脂質（PL）としてアッセイされた。総コレステロールおよび非エステル化コレステロール（UC）ならびにPLは、標準的な自動化された方法によってアッセイされた。被験者は無作為化計画に従って治療群に割り振られた。各時点および投与前から投与後までの変化について、安全性および耐容性、検査値、バイタルサインならびに有害事象を、記述統計学を用いてまとめた。薬物動態学および薬力学的指標を記述統計学を用いてまとめた。その結果は、コレステロール動員は広範囲の用量に渡って起こるが、その効率は異なることを示した。更に、3人中3人の被験者は600 mg/kgで肝機能検査の高値を有し、1個人は肝機能酵素の増加によって示唆される重篤な有害事象を有した。他の有害事象は、頭痛、眩暈、吐き気および倦怠感を包含した。
【００１９】
第二の研究では、3日間隔で与えられた合計4回の投与を受けた健康なボランティアにおけるETC-588の安全性および耐容性を評価した。投与した用量は、100、150、200、250および300 mg/kgであった。注入ポンプを用いて１分間に10mlで静脈内にETC-588リポソーム（200 mg/ml）を注入した。血漿中のETC-588はリン脂質（PL）としてアッセイされた。総コレステロールおよび非エステル化コレステロール（UC）ならびにPLは、標準的な自動化された方法によってアッセイした。被験者は無作為的な方法に従って治療群に割り振られた。各時点および投与前から投与後までの変化について、安全性および耐容性、検査値、バイタルサインならびに有害事象を、記述統計学を用いてまとめた。薬物動態学および薬力学的指標を記述統計学を用いてまとめた。その結果は、効率は異なるものの、コレステロール動員は用量依存的な形で増加することを示した。更に、3日間隔で合計4回の投与は、ETC-588の望ましくない蓄積を引き起こすと思われた。最初の研究のように、他の有害事象は、頭痛、眩暈、吐き気および倦怠感を包含した。更に、これらの投与研究は、健康な患者のみで実施され、疾患または他の望ましくない身体状態を有する患者では行われなかった。
【００２０】
従って、罹患した患者において、あらゆる望ましくない副作用を予防または減少させる、安全で、効果的且つ毒性のない用量および投与計画を決定する必要がある。更に、本明細書で開示した疾患および/もしくは身体状態、または、他の疾患および状態に冒された患者を治療するために、最適なサイズのリポソームを用いたより最適な投与計画を決定する必要がある。
【発明の開示】
【００２１】
本発明は、様々な疾患および身体状態を予防、治療または管理するために使用される、LUVsのみを含有してもよく、MLVs、SUVsおよび/または他の治療法と併用してもよい医薬組成物ならびにリポソームの投与方法に関する。それらは、アテローム性動脈硬化症、静脈硬化症、或いは、コレステロールまたは他の物質を含むプラーク沈着が静脈の血管内膜もしくは内部中膜に形成されたあらゆる静脈症状を含む動脈硬化症、急性冠症候群、安定狭心症および不安定狭心症を含む狭心症、血管性炎症および真皮性炎症を含むがこれらに限定されない炎症または炎症性疾患、鬱血性心不全、冠動脈心疾患（CHD）、高血圧、冠動脈心室性不整脈、上室性不整脈、末梢血管疾患、致死性心筋梗塞、非致死性心筋梗塞、心血管性虚血を含む虚血、心筋冬眠、一過性虚血発作、臀部手術、膝手術、臓器移植またはPTCAによる損傷のような虚血再灌流傷害を含む心血管性疾患と無関係の虚血、冠動脈再灌流、再狭窄、手術前後（PCI）の虚血現象、血管再開通術の必要性の減少、梗塞領域の減少、凝血障害、血小板減少症、深部静脈血栓症、膵炎、非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）、糖尿病性神経障害、網膜症、糖尿病性神経障害、乾癬、重篤な四肢虚血、跛行、性交不能、前立腺癌、高脂血症、高リポタンパク血症、低αリポタンパク血症、高トリグリセリド血症、虚血症状を引き起こすあらゆる狭窄状態、I型およびII型の両方を含む糖尿病、魚鱗癬、発作、脆弱プラーク、脆弱プラーク破裂、アルツハイマー病、下肢潰瘍形成、重度の冠動脈虚血、リンパ腫、白内障、内皮機能障害、黄色腫、末端器官機能障害、血管疾患、喫煙および糖尿病に起因する血管疾患、頚動脈および冠動脈疾患、定着したプラークの退縮および収縮、内皮損傷を引き起こす外科的処置の組合せ、外科的処置の結果としての内皮損傷、血管疾患に関連した病的状態、動脈内腔における潰瘍形成、バルーン血管形成術の結果としての再狭窄、ならびに上述の副次的適応症を含むが、これらに限定されない。
【００２２】
本発明の組成物および方法は、HDLレベルを増加させるため、低いHDLレベルを増加させるため、高いLDLレベルを減少させるため、一過的にLDLレベルを増加させるため、トリグリセリドレベルを減少させるため、他の脂質レベルを増加または減少させるため、プラーク安定性を増加させまたはプラーク破裂の確率を減少させるため、血管拡張を増加または減少させるため、炎症性疾患もしくは炎症反応を治療または予防するため、平滑筋および血管内膜を強化または安定させるため、肝臓への輸送のために細胞外コレステロールの流出を促進するため、免疫応答を調節するため、コレステロールをアテローム硬化性プラークから動員するため、ならびに、組成および/または機能の改変が有利であると思われる任意の膜、細胞、組織、器官および細胞外領域および/または構造を改変するために、使用されうる。本発明の組成物および方法はまた、局所適用および創傷治癒を包含する。
【００２３】
本発明は、コレステロール減少および/または疾患の治療を達成すると同時に、副作用もしくは不要な効果を減少または回避するために、特定の用量のリポソーム、特に、特定のサイズの範囲内のリポソームが特定の時間間隔ならびに特定の用量で投与される投与計画を含む。従って、リポソームの投与方法、リポソームの投与によって総コレステロールおよびLDLコレステロールを減少させる方法、リポソームの投与によってHDLコレステロールのレベルを上昇させまたは効力を増加させる方法、ならびに、それを必要とする患者にリポソームを投与する方法を本明細書に詳細に記載した。
【００２４】
小胞粒子（またはリポソーム）はアテローム硬化性プラークからのコレステロール流出を最適化する。小胞粒子は、アポリポタンパク質、一般的にはアポリポタンパク質AIまたはAIIに結合されてもよく、多くの場合ホスファチジルコリンもしくはホスファチジルグリセロールなどの少なくとも1つのリン脂質を含有する。組成物は通常リポソームおよび製薬上許容される担体を含有する。好ましい実施形態では、リポソームは投与前にはコレステロールを含まない。新規の投与計画内で使用されるリポソームは、任意のサイズの直径を持ちうる。加えて、リポソームは任意の標準偏差またはサイズ分布を持つ任意のサイズの平均直径を持ちうる。
【００２５】
別の好ましい実施形態では、リポソームは任意の標準偏差またはサイズ分布を持つ50〜250ナノメートル（nm）の平均直径を有する。別の好ましい実施形態では、リポソームは±50%、好ましくは±40%の分布を持つ50〜250nmの平均直径を有する。別の好ましい実施形態では、リポソームは任意の標準偏差またはサイズ分布を持つ100〜140nmの平均直径を有する。別の好ましい実施形態では、リポソームは±50%、好ましくは±40%の分布を持つ100〜140nmの平均直径を有する。別の好ましい実施形態では、リポソームは任意の標準偏差またはサイズ分布を持つ110〜120nmの平均直径を有する。別の好ましい実施形態では、リポソームは±50%、好ましくは±40%の分布を持つ110〜120nmの平均直径を有する。別の好ましい実施形態では、リポソームは任意の標準偏差またはサイズ分布を持つ100〜200nmの平均直径を有する。特定の実施形態では、リポソームは、任意の標準偏差もしくはサイズ分布を持ち、好ましくは、サイズ分布が±40%から±50%の間である、100〜110nm、110〜120nm、120〜130nm 、130〜140nm、140〜150nm、150〜160nm、160〜170nm 、170〜180nm、180〜190nm、または、190〜200nmの平均直径サイズを有する。特定の実施形態において、利用したリポソームはETC-588（Esperion Therapeutics, Inc.の登録商標製品）である。
【００２６】
治療または予防に使用されうる、上記の疾患および身体状態を治療する方法もまた提供される。本方法は通常、上述の任意の疾患または身体状態を有する動物、好ましくはヒトへの本発明の組成物の投与を含む。多くの場合、組成物はある期間連続的に投与されるであろう。組成物は経口的または非経口的に投与されうる。通常、組成物は非経口的に、好ましくは静脈内に投与され、或いは、投与は筋肉内、皮下、腹腔内、くも膜下腔内、動脈内、リンパ管経由、輸液による、血管内、慢性留置カテーテルもしくは急性留置カテーテルを介した投与、シリンジを介した、または圧力投与でありうる。他の実施形態では、投与は舌下、口腔内、粘膜、局所性、直腸内、膣内、動脈内、経皮、輸液による、シリンジを介した、または圧力投与でありうる。特定の実施形態では、本発明の組成物は、炎症を予防もしくは治療するため、または、創傷治癒の目的のために、局所的に投与される。
【００２７】
本発明の方法は、それを必要とする患者に、20 mg/kg〜600 mg/kgの、好ましくは50 mg/kg〜600 mg/kgの、より好ましくは50 mg/kg〜300 mg/kgの単回投与または分割投与でのリポソームの投与を含む。別の好ましい実施形態では、リポソームはそれを必要とする患者に、100 mg/kg〜200 mg/kgの、好ましくは150 mg/kg〜200 mg/kgの単回投与または分割投与で投与される。特定の実施形態では、小胞粒子はそれを必要とする患者に、110 mg/kg〜120 mg/kg、120 mg/kg〜130 mg/kg、130 mg/kg〜140 mg/kg、140 mg/kg〜150 mg/kg、150 mg/kg〜160 mg/kg、160 mg/kg〜170 mg/kg、170 mg/kg〜180 mg/kg、180 mg/kg〜190 mg/kg、または190 mg/kg〜200 mg/kgの単回投与または分割投与で投与される。
【００２８】
特定の実施形態では、小胞粒子は単回投与もしくは、1日に1回から、2日に1回、3日に1回、4日に1回、5日に1回、6日に1回、週に1回、2週間に1回、3週間に1回、月に1回、2ヶ月に1回、3ヶ月に1回、4ヶ月に1回、5ヶ月に1回、6ヶ月に1回、7ヶ月に1回、8ヶ月に1回、9ヶ月に1回、10ヶ月に1回、11ヶ月に1回、年に1回までの１つ以上の間隔での分割投与で投与され、またはそれ以外に、所定の治療期間に対して所定の時間間隔で投与される。好ましい実施形態では、治療過程での投与の時間間隔は週に1回である。治療過程での好ましい処置期間は、1日、2日、3日、4日、5日、6日、1週間、2週間、3週間、4週間、5週間、6週間、7週間、8週間、9週間、10週間、11週間、12週間、13週間、14週間、4ヶ月、5ヶ月、6ヶ月、7ヶ月、8ヶ月、9ヶ月、10ヶ月、11ヶ月、1年、2年、3年、4年、または5年間に及びうる。好ましい実施形態では、治療過程での処置期間は14週間より長くはない。他の好ましい実施形態では、リポソームは、各々の治療過程で与えられる1〜4、1〜8、または1〜14回のいずれかの投与において4〜7日間隔で投与される。投与計画はまた、初回用量とそれに続く継続用量の使用を含みうる持続注入処置を包含する。このような組成物を用いて、このような方法に従って治療される患者は、任意の年齢であり得、１つ以上の上記に列挙した疾患および身体状態ならびに/または他の疾患および状態を患っている可能性がある。
【００２９】
有用な定義
本明細書で用いられる場合、「薬剤」は、関連した結合担体、賦活剤、または補因子を含まない、治療上の使用に適切な合成化合物を示すと意図されている。「薬剤」は、天然のもしくは内在性のアポリポタンパク質、レシチン-コレステロールアシル基転移酵素、またはアルブミンを含まない。「リポソーム」、「小胞」および「リポソーム小胞」は水性の内部を封入した脂質含有膜を有する構造を示すことが理解されるであろう。このような単一の層のリポソームは、本明細書では「単層膜」と呼ばれる。「LUVs」という用語は大型単層膜小胞と呼ばれ、「SUVs」という用語は小型単層膜小胞と呼ばれ、「MLVs」という用語は多重膜小胞と呼ばれる。本明細書で用いられる場合、「アテローム性動脈硬化症の治療」という用語は、結果的に少なくとも1つのアテローム性動脈硬化プラークのコレステロール含量を減少させ、或いは、アテローム性動脈硬化プラークの形成もしくは拡張を予防的に抑制または予防する治療行為の遂行を含む。
【００３０】
発明の詳細な説明
本発明は、一部では、リポソーム、特に特定のサイズのリポソームを送達するために使用される特定の用量および投与計画が、このようなリポソームによる末梢組織からのコレステロールの除去、および/または、アテローム性動脈硬化プラークから除去されるコレステロールの代謝の最適化において、重要な役割を果たすという発見に基づく。本発明の新しい方法は、疾患またはその症状の治療または予防を含むと同時に、例えば有毒な副作用もしくは不要な効果など弊害を減少または回避する。更に、先のリポソーム治療の記載とは反対に、本発明の発明者らは、アテローム性動脈硬化症およびリポソーム治療について先に記載された他の適応に加えて、様々な疾患および身体状態の予防、治療または管理のためにリポソームが使用されうることを発見した。
【００３１】
ある実施形態では、本発明はそれを必要とする患者へのリポソームの投与方法を含み、その方法は、コレステロール減少によって治療可能な疾患を有する患者に対して、約100 mg/kg〜約250 mg/kg、好ましくは約100 mg/kg〜約200mg /kgの単回投与または4〜7日毎に投与される分割投与での、100nm、好ましくは250nm以下の平均直径を持つリポソームの投与を含む。治療される患者、本発明で用いられるリポソーム、および特定の用量および投与計画は、以下で詳細に議論される。
【００３２】
1. リポソーム
本発明の発明者らは、100nm以上、好ましくは100nm〜140nm、より好ましくは110nm〜120nmの平均直径を持つリポソームが、その体系からのコレステロール除去に最適であることを発見した。一般に、直径100ナノメートル以上のリポソームの優れた作用は、肝臓の微細解剖学によって説明されうる。肝臓中を循環する際、大型リポソーム（本明細書で用いられる場合、直径100nm以上のリポソーム）は、類洞開口部を裏打ちするクッパー細胞によって優先的に除去されうる。クッパー細胞は、胆汁での排出または再利用のためにコレステロールを肝細胞に受け渡す。小型リポソーム（本明細書で用いられる場合、100nm未満のリポソーム）は、クッパー細胞による事前のプロセッシングなしに（または限られたプロセッシングで）、肝細胞に直接接触しうる。固定用量では、大型サイズの粒子より、より小型のリポソームが注入されうるため、肝細胞は比較的高濃度の小型リポソームおよびそれらに蓄積されたコレステロールに急激に曝されるかもしれない。本発明の発明者らは、それらが主にクッパー細胞によって除去され、且つ、より小さいまたはより大きいサイズのリポソームのいずれよりもコレステロールの動員に効果的であるため、直径が100 nm〜140 nm、好ましくは110 nm〜120 nmのリポソームが最適であることを発見した。
【００３３】
リポソームサイズ分布に加えて、およびそれとは別に、本発明者らは、罹患した患者における特定の用量および投与計画が共に疾患の治療において安全且つより効果的であることを発見した。このような方法および本方法中で用いられる組成物には、任意のサイズのリポソーム、または、任意の標準偏差もしくはサイズ分布を持つ任意の平均直径を有するリポソームを使用しうる。実際には、最適サイズのリポソームが新しい投与計画または好ましい用量の範囲内で使用されることが好ましい。
【００３４】
特定の実施形態では、リポソームは標準偏差またはサイズ分布に関わらず、100nm以上の平均直径を有する。別の好ましい実施形態では、リポソームは任意の標準偏差またはサイズ分布を持つ50〜250ナノメートル（nm）の平均直径を有する。別の好ましい実施形態では、リポソームは50〜250 nm±40〜50％の平均直径を有する。別の好ましい実施形態では、リポソームは任意の標準偏差またはサイズ分布を持つ100〜140 nm間の平均直径を有する。別の好ましい実施形態では、リポソームは100〜140 nm±40〜50％間の平均直径を有する。別の好ましい実施形態では、リポソームは任意の標準偏差またはサイズ分布を持つ110〜120 nm間の平均直径を有する。別の好ましい実施形態では、リポソームは110〜120 nm±40〜50％間の平均直径を有する。別の好ましい実施形態では、リポソームは任意の標準偏差またはサイズ分布を持つ100〜200nm間の平均直径を有する。特定の実施形態では、リポソームは、任意の標準偏差もしくはサイズ分布を持ち、好ましくは、サイズ分布が±40%から±50%の間である、100〜110nm、110〜120nm、120〜130nm 、130〜140nm、140〜150nm、150〜160nm、160〜170nm、170〜180nm、180〜190nm、または、190〜200nmの平均直径サイズを有する。特定の実施形態において、利用したリポソームは、製造後100〜140 nm±40〜50％の平均直径を有するETC-588（Esperion Therapeutics, Inc.の登録商標製品）である。
【００３５】
本発明はまた、投与の際にLDL血清濃度を上昇させるまたはさせない、50 nm以上、好ましくは100 nm以上および250 nm以下の平均直径を有するリポソームの使用をも意図する。本発明はまた、投与の際にLDL血清濃度を低下させるまたはさせない、50 nm以上、好ましくは100 nm以上および250 nm以下の平均直径を有するリポソームの使用をも意図する。場合によっては、リポソームは薬剤またはタンパク質などの別の分子と結合されない。他の場合には、本発明のリポソームは以下のもの、すなわち、（1）ペプチドを含む脂質結合タンパク質、パラオキソナーゼ、リポタンパク質リパーゼ、レシチンコレステロールアシル基転移酵素、リン脂質輸送タンパク質、ApoA-IおよびApoA-Iの模倣型または変異型などのリポソームに結合するタンパク質ならびにペプチド、（2）HDL、合成および/または組換えHDL粒子、アポリポタンパク質ApoA-IもしくはApoA-I模倣型より作製された合成および/または組換えHDL粒子を含む小型受容体、（3）小分子、スタチン、アスピリン、クロピドグレル、β遮断薬、血糖制御および/または抗糖尿病薬、降圧薬、ヘパリン、硝酸塩、IIb/IIIa阻害剤、ACE阻害剤、β遮断薬、フィブレート、カルシウムチャネル遮断薬、および/または胆汁酸抑制剤を含む心血管作動薬、（4）インスリンおよび経口剤を含むがそれに限定されない抗糖尿病（および/または血糖制御）薬物療法、と結合され、組み合わされ、かつ/または併用して投与されることがある。更に、大型リポソームは単独でまたは多重膜小胞および/もしくは小型単層膜小胞と共に投与されうる。タンパク質およびペプチド（ペプチドを含む脂質結合タンパク質、ApoA-Iおよびその模倣型またはA-Iの変異型など）の例は、米国特許第6,004,925号、6,046,166号、6,037,323号、6,287,590号、6,329,341号、および6,265,377号に記載され、そのすべては参照により本明細書に完全に組み入れられる。HDL、LDLまたはコレステロールレベルを適切にする小分子の例は、米国特許出願第09/540,740号、09/540,739号、および09/540,738号に記載され、そのすべては参照により本明細書に完全に組み入れられる。
【００３６】
当業者は、本発明の組成物中のリポソームが例えば以下に記載するものなどの種々の方法によって合成されうることを理解するであろう：米国特許第4,186,183号; 4,217,344号; 4,261,975号; 4,485,054号; 4,774,085号; 4,946,787号; 5,726,157号; 5,746,223号; 5,843,474号; 5,448,435号; 5,853,402号; 6,080,422号; 6,312,719号; 6,139,871号、PCT公開番号WO91/17424、DeamerおよびBangham, BIOCHIM. BIOPHYS. ACTA, 443:629-634 (1976); Fraleyら、PROC. NATL. ACAD. SCI. USA, 76:3348-3352 (1979); Hopeら、BIOCHIM. BIOPHYS. ACTA, 812:55-65 (1985); Mayerら、BIOCHIM. BIOPHYS. ACTA, 858:161-168 (1986); ならびにWilliamsら、PROC. NATL.ACAD. SCI., 85:242-246 (1988)（これらはそれぞれ、参照により本明細書に完全に組み入れられる）。適切な方法は、例えば超音波処理、押出、高圧/均質化、微小流動化、界面活性剤の透析、カルシウムにより誘導される小型リポソーム小胞の融合、およびエーテル注入法を含み、すべては当技術分野において公知である。
【００３７】
通常、リポソームは超音波処理および押出法により最も簡便に生成される。簡潔には、脂質は生理食塩水およびバッファーと混合される。ある実施形態では、脂質のクロロホルム溶液をボルテックスし、一定流のN2存在下で溶媒を除去する。サンプルは高真空下で乾燥される。その結果生じる乾燥脂質膜を、150 mM NaClおよび20 mM [4-(2-ヒドロキシエチル)]-ピペラジン-エタンスルホン酸（Hepes, pH 7.4）に再水和させた。これは通常、多重膜リポソーム小胞を生じる。単層膜小胞は超音波処理または押出により調製される。
【００３８】
超音波処理は通常、氷浴中でBranson tip sonifierなどのチップソニファイアーを用いて実施される。一般的に、懸濁液は数回の超音波処理サイクルに供される。押出はLipex Biomembrane Extruderなどのメンブレンエクストルーダーによって実施されうる。規定の押出フィルターの孔径は、特定サイズの単層膜リポソーム小胞を生成しうる。リポソームはまた、Norton Company, Worcester Massから市販されるCeraflow Microfilterなどの非対称セラミックフィルターを通した押出によっても形成されうる。ETC-588リポソーム（Esperion Therapeuticsの登録商標製品、現在、臨床試験において治験中）は押出により産生される。現行の方法は、リン酸緩衝生理食塩水による1-パルミトイル-2-オレオイルホスファチジルコリン（POPC）の水和、および、約100〜140 nmの平均直径に達するまで、より好ましくは約110〜120 nmの平均直径に達するまでの、メンブレンフィルターを通したこれらの押出を必要とする。メンブレンフィルターを介した１回または複数回の通過が行われうる。ある特定の実施形態では、2〜10回の通過が行われ、好ましくは2〜5回の通過が行われる。加えて、フィルターメンブレンは同一または異なるサイズでもよい（すなわち、メンブレンの階調がありうる）。その結果生じる生成物をETC-588と呼ぶ。押出による特定サイズのリポソーム調製の例は、2001年9月28日に申請された米国仮特許出願第60/326,032号に記載され、参照により本明細書に完全に組み入れられる。
【００３９】
同一の平均直径を持つリポソームを産生する他の方法は、均質化または微小流動化を含むが、粒子の分布はより大きい。図１Bと対比して図１Aを参照せよ。現存する技術を用いて、均質化または微小流動化により産生された粒子の生物学的作用は、押出により産生されたものとは異なる。クリアランス速度は若干早く、コレステロール動員に対する曲線下面積測定は若干小さいため、これらの粒子は、mgリン脂質/kgの基準に基づいて動物に同等の用量を投与した場合でも、押出したリポソームより低い効果であることを示す。
【００４０】
リポソーム小胞のサイズは、Bloomfield, ANN. REV. BIOPHYS. BIOENG., 10:421-450 (1981)（参照により本明細書に完全に組み入れられる）に記載されたように、準弾性光散乱（QELS）により測定されうる。形成されたリポソームの超音波処理により、平均リポソーム直径は減少されうる。効果的なリポソーム合成を誘導するために、QELS評価と交互に断続的な超音波処理サイクルが行われうる。リポソームは様々な脂質で構成されうる。通常、リポソームは少なくとも１つのリン脂質、一般的には、卵ホスファチジルコリン、卵ホスファチジルグリセロール、ジステアロイルホスファチジルコリン、またはジステアロイルホスファチジルグリセロールで構成されるであろう。本発明の多くの実施形態は１つ以上のリン脂質を含有し得る。
【００４１】
本明細書に記載された組成物または方法において使用できるリポソームの形成に適切な他のリン脂質は、ホスファチジルコリン、ホスファチジルグリセロール、レシチン、ベータ, γジパルミトイル-αレシチン、スフィンゴミエリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、N-(2,3-ジ(9-(Z)-オクタデセニルオキシ))-プロプ-1-yl-N,N,N-トリメチルアンモニウムクロリド、ホスファチジルエタノールアミン、リゾレシチン、リゾホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ケファリン、カルジオリピン、セレブロシド、リン酸ジセチル、ジオレオイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール、ジオレオイルホスファチジルグリセロール、パルミトイル-オレオイル-ホスファチジルコリン、ジステアロイルフォスファチジルコリン、ステアロイル-パルミトイル-ホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン、ジステアロイルフォスファチジルエタノールアミン、ジミリストイルホスファチジルセリン、ジオレオイルホスファチジルコリン、オレオイル-パルミトイル-ホスファチジルコリン、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン、37℃で液晶相である脂質、その混合物などを含むがそれに限定されない。好ましい実施形態では、リポソームはパルミトイルオレオイルホスファチジルコリンで構成される。リンを含まない脂質もまた本発明の組成物のリポソームに使用されうる。これらは、例えば、ステアリルアミン、ドデシルアミン、アセチルパルミテート、脂肪酸アミドなどを含む。本発明のリポソームへの使用に適切な更なる脂質は当業者にとって公知であり、例えば、共に参照により本明細書に完全に組み入れられるMCCUTCHEON'S DETERGENTS AND EMULSIFIERSおよびMCCUTCHEON'S FUNCTIONAL MATERIALS, Allured Publishing Co., Ridgewood, N.J.のような種々の著名な出典に列挙されている。
【００４２】
通常リポソームは、37℃で、しばしば35℃で、および32℃でも液晶である脂質で構成されることが望ましい。液晶状態のリポソームは一般的に、ゲル状態のリポソームより効果的にコレステロールを受容する。患者は一般的に約37℃の深部体温を持つため、37℃で液晶である脂質から成るリポソームは通常治療の間液晶状態であり、従って、プラークからのコレステロールの除去を最適化する。
【００４３】
本方法および組成物に使用されるリポソームはコレステロールを含まないことが好ましい。
【００４４】
2. 医薬組成物
本発明の医薬組成物は、製薬上許容され得る担体または希釈液を含み得る。多くの製薬上許容され得る担体が、本発明の合成において使用され得る。一般的に、通常の生理食塩水は、製薬上許容され得る担体として使用される。他の好適な担体は、例えば、水、緩衝水、0.4％緩衝食塩水、0.3％グリシン等を含み、それはアルブミン、リポタンパク質、グロブリン等の安定性向上のための糖タンパク質を含む。これらの組成物は、従来の公知の滅菌技術によって滅菌され得る。得られた水溶液は、使用するために包装されるかまたは無菌条件下において濾過および凍結乾燥され、該凍結乾燥製剤は投与の前に滅菌水溶液と混合される。該組成物は、pH調整剤および緩衝剤、張性調整剤等の、生理的条件を近付けるために必要な、製薬上許容され得る補助的な物質を含み、例えば、酢酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、塩化ナトリウム、リン酸ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム等が挙げられる。
【００４５】
リポソームの濃度は様々であってよい。特定の実施形態において、リポソームの濃度は約20 mg/mlから約1000 mg/mlの範囲であり得、好ましくは50〜300 mg/ml、より好ましくは50〜200 mg/ml、およびさらに好ましくは100〜200 mg/mlである。別の好ましい実施形態において、リポソームの濃度は約1〜20 mg/ml、20〜30 mg/ml、30〜40 mg/ml、40〜50 mg/ml、50〜60 mg/ml、60〜70 mg/ml、70〜80 mg/ml、80〜90 mg/ml、90〜100 mg/ml、100〜110 mg/ml、110〜120 mg/ml、120〜130 mg/ml、130〜140 mg/ml、140〜150 mg/ml、150〜160 mg/ml、160〜170 mg/ml、170〜180 mg/ml、180〜190 mg/mlまたは190〜200 mg/mlの範囲であってよい。特定の好ましい実施形態において、濃度は約50 mg/ml、100 mg/ml、150 mg/ml、200 mg/ml、250 mg/mlまたは300 mg/mlであり得る。異なるリポソーム構成成分による治療または特定の患者の治療を最適化するために、当業者はこれらの濃度を変更し得る。例えば、治療に伴う液体負荷量を低減させるために、濃度を増加させることもできる。これは、アテローム性動脈硬化症に付随する鬱血性心不全または重症の高血圧症を有する患者において特に望ましいものとなり得る。あるいはまた、刺激性脂質から構成されるリポソームは低濃度に希釈され、投与部位における炎症を軽減させ得る。
【００４６】
リポソームは、任意に様々なタンパク質およびポリペプチドに結合し、該リポソームのコレステロール輸送速度またはコレステロール結合容量を増大させ得る。リポソームへのアポリポタンパク質の結合は特に有用である。本明細書で使用する「リポソームに結合された」または「リポソームに結合している」とは、対象の化合物が共有結合的もしくは非共有結合的にリポソーム表面に結合しているか、またはリポソームの内部に全体的もしくは部分的に含まれていることを指す。アポリポタンパク質AI、アポリポタンパク質AIIおよびアポリポタンパク質Eは、一般的にリポソームに結合させるための最も有用なアポリポタンパク質となり得る。これらのアポリポタンパク質は、代謝のためにコレステロールおよびコレステリルエステルの肝臓への輸送を促進する。レシチンコレステロールアシル基転移酵素もまた、遊離型コレステロールのコレステリルエステルへの代謝に有用である。本発明の医薬組成物におけるリポソームは、アポリポタンパク質AI、アポリポタンパク質AII、アポリポタンパク質Eおよびレシチンコレステロールアシル基転移酵素の分子に、単独または任意の組合せおよびモル比で結合し得る。更なるタンパク質または他の非タンパク質分子もまた、該リポソームに結合してリポソームの安定性または半減期等を増強するのに有用であり得る。これらは例えばコレステロール、ポリエチレングリコール結合リン脂質およびガングリオシド、ステロール、アルキル硫酸、臭化アンモニウム、アルブミン等を含む。
【００４７】
特定の実施形態において、本発明の使用のための医薬組成物は、活性合物の薬理学的に使用され得る製剤への加工を促進する賦形剤および補助剤を含む１つ以上の生理的に適合した担体を用いた従来の方法で調剤され得る。特定の実施形態において、そのような製剤は安定化剤および/または抗酸化剤を含む。適当な製剤は、選択される投与経路によって決まる。本発明のリポソームは凍結乾燥形態、液形態、凍結形態または粉末形態であり得る。特定の実施形態において、本発明のリポソームは粉末形態であり、好ましくは凍結乾燥形態、より好ましくは凍結形態および最も好ましくは液形態である。
【００４８】
特定の実施形態のために、本発明のリポソームは注射剤として水溶液中、好ましくはハンクス液、リンガー液または生理的食塩バッファー等の生理的に適合するバッファー中に調剤され得る。経粘膜投与のために、透過すべきバリアーに適した浸透剤が製剤中に用いられる。そのような浸透剤は当技術分野において一般的に知られている。特定の実施形態において、局所的または経皮性の製剤は安定化剤および/または抗酸化剤を含む。
【００４９】
他の実施形態では、当技術分野において公知の製薬上許容され得る担体を該リポソームと混合することによって、化合物は経口投与のために容易に処方され得る。そのような担体は、治療する本発明の化合物を、治療すべき患者に経口投与するための、錠剤、丸剤、糖衣錠、カプセル、ゼラチンで作られたはめ込み型カプセル、ゼラチンおよび可塑剤で作られた軟性または密封カプセル、液体、ジェル、シロップ、スラリー、懸濁液等として調剤することを可能とする。更に、安定化剤を添加してもよい。経口投与のための全ての製剤は、そのような投与に適した剤形でなければならない。
【００５０】
口腔内投与に関する特定の実施形態において、組成物は従来の方法で処方されるドロップ、錠剤またはトローチ剤の形態をとり得る。該リポソームは、注射（例えばボーラス注射または上述したような継続的な注入）による非経口投与用に調剤され得る。一部の実施形態において、化合物は静脈内、筋肉内または皮下に継続的に注入されることにより投与され得る。注射用の製剤は単位用量形態中、例えばアンプルまたは多数回用量用の容器中に保存料と共に調製され得る。組成物は、油性または水溶性のビヒクル中の懸濁液、溶液またはエマルジョン等の形態を取り得、懸濁化剤、安定化剤および/または分散剤等の調剤薬を含み得る。
【００５１】
更に、リポソーム懸濁液は適切な油性注射懸濁液として調製され得る。水溶性注射懸濁液は、カルボキシメチルセルロース・ナトリウム、グリセロール、ソルビトールまたはデキストラン等の懸濁液の粘性を増大させる物質を含み得る。場合によっては、懸濁液は、リポソームの溶解度を増大させて高濃度の溶液の調製を可能にする適切な安定化剤または薬剤を含み得る。
【００５２】
あるいはまた、使用前に適切なビヒクル（例えば無菌的な発熱物質不含水）で構成または再構成するために、活性成分は粉末または凍結乾燥状態であり得る。化合物は、例えばココアバターまたは他のグリセリド等の従来の坐薬基剤を含む坐薬または浣腸剤等の直腸用組成物中にも調剤され得る。
【００５３】
上述の調剤に加え、該リポソームはまたデポー製剤として調剤され得る。そのような長時間作用性の製剤は、（例えば皮下もしくは筋肉内への）移植または筋肉内注射によって投与され得る。従って、例えば化合物は、適切な重合体もしくは疎水性物質またはイオン交換樹脂とともに、或いは難溶解性誘導体として調剤され得る。
【００５４】
医薬組成物はまた、適切な固形もしくはゲル相の担体または賦形剤を含み得る。そのような担体または賦形剤の例は、カルシウムカーボネート、リン酸カルシウム、様々な糖類、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチンおよびポリエチレングリコール等の重合体を含むがこれらに限定されない。
【００５５】
3. リポソームによる特定の疾患および他の身体状態の予防、治療または管理の方法
様々な疾患および身体状態を予防、治療または管理する方法もまた提供される。これらは：アテローム性動脈硬化症、静脈硬化症またはコレステロールもしくは他の物質を含むプラーク沈着が静脈の血管内膜もしくは内部中膜に形成されたあらゆる静脈症状を含む動脈硬化症、急性冠症候群、安定狭心症および不安定狭心症を含む狭心症、血管性炎症および真皮性炎症を含むがこれらに限定されない炎症または炎症性疾患、鬱血性心不全、冠動脈心疾患（CHD）、高血圧、冠動脈心室性不整脈、上室性不整脈、末梢血管疾患、致死性心筋梗塞、非致死性心筋梗塞、心血管性虚血を含む虚血、心筋冬眠、一過性虚血発作、臀部手術、膝手術、臓器移植または経皮経管的冠動脈形成術（PTCA）による損傷等の虚血再灌流傷害を含む心血管性疾患と無関係の虚血、冠動脈再灌流、再狭窄、手術前後（PCI）の虚血現象、血管再生の必要性の減少、梗塞領域の減少、凝血障害、血小板減少症、深部静脈血栓症、膵炎、非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）、糖尿病性神経障害、網膜症、有痛性糖尿病性神経障害、乾癬、重篤な四肢虚血、跛行、性交不能、前立腺癌、高脂血症、高リポタンパク血症、低αリポタンパク血症、高トリグリセリド血症、虚血症状を引き起こすあらゆる狭窄症、I型およびII型の両方を含む糖尿病、魚鱗癬、発作、脆弱プラーク、脆弱プラーク破裂、アルツハイマー病、下肢潰瘍形成、重度の冠動脈虚血、リンパ腫、白内障、内皮性機能障害、黄色腫、末端器官機能障害、血管疾患、喫煙および糖尿病に起因する血管疾患、頚動脈および冠動脈疾患、定着したプラークの退縮および収縮、外科的処置の結果としての内皮損傷、内皮損傷を引き起こす外科的処置の組合せ、血管疾患に関連した病的状態、動脈内腔における潰瘍形成、バルーン血管形成術の結果としての再狭窄、ならびに上述の副次的適応症を含むが、これらに限定されない。
【００５６】
本発明の組成物および方法は、HDLレベルの増加、低HDLレベルの増加、LDLレベルの減少、高LDLレベルの減少、一時的なLDLレベルの増加、トリグリセリドレベルの減少、他の脂質レベルの増加または減少、プラークの安定性増大またはプラーク破裂の可能性減少、血管拡張の増加または減少、炎症の治療または予防、炎症性疾患もしくは炎症性反応の治療または予防、平滑筋および血管内膜の強化または安定化、肝臓へ輸送するための細胞外コレステロール流出の促進、免疫反応の調節、アテローム硬化型プラークからのコレステロールの動員、ならびに組成および/または機能の修正が有利であると思われる任意の膜、細胞、組織、器官および細胞外領域および/または構造を修正に使用され得る。本発明の組成物および方法はまた、局所的な適用および創傷治癒を包含する。
【００５７】
この方法は一般的に該リポソーム組成物の、疾患または症状を有する哺乳類、好ましくはヒトへの投与を含み、それは平均直径が100 nmより大きい、好ましくは100 nm〜250 nm、好ましくは100 nm〜140 nm、およびより好ましくは110 nm〜120 nmであるリポソームを含むリポソーム組成物である。特定の実施形態において、被験体に投与されるリポソームの平均直径サイズは、100〜110 nm、110〜120 nm、120〜130 nm、130〜140 nm、140〜150 nm、150〜160nm、160〜170 nm、170〜180 nm、180〜190 nmおよび190〜200 nmの間である。より好ましい実施形態において、使用されるリポソームはETC-588（Esperion Therapeutics, Inc.の登録商標製品）であり、製造後の平均直径は100 nm〜140 nm、好ましくは110 nm〜120 nmである。
【００５８】
本方法は特に、アテローム硬化性病変と同様に、他の上記の疾患および脂質障害に関わる身体状態を治療するために有用である。ある特定の実施形態において、本発明の方法は、アテローム硬化性プラークの形成もしくは拡大の予防的な阻害または予防、アテローム硬化性プラークのコレステロール含量の減少および/またはアテローム硬化性プラークの量の減少およびそれによる血管内腔のあらゆる閉塞の程度の減少を為し得る。プラーク量の減少は一般的に少なくとも5％〜30％、しばしば50％程度、および場合によっては75％またはそれ以上であり得る。コレステロール含量は一般的に少なくとも10％〜30％、しばしば30％〜50％、および場合によっては75％〜85％程度またはそれ以上減少し得る。コレステロールは、プラークから、リポソームへの直接的な流出によって動員されるか、またはリポタンパク質中への動員されたその後リポタンパク質によってコレステロールがリポソームに運ばれ得る。コレステロールがリポタンパク質からリポソームへ輸送されると、リポタンパク質はプラークからより多くのコレステロールを受容し得る。一般的に、コレステロールがリポタンパク質から受容されると、コレステロールはHDLから輸送される。
【００５９】
この方法は、様々な動物および様々な血管においてアテローム性動脈硬化症と同様に他の疾患および身体状態を治療するために有用であり得る。一般的に、動物はヒトであり得るが、非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、げっ歯類、ウマ、ウシ等も本発明の方法により治療され得る。大動脈、（総、内および外）頚動脈、冠状動脈、腸間膜動脈、腎動脈、腸骨動脈、膝窩動脈等のあらゆる血管のアテローム性動脈硬化症が、本発明の方法によって治療され得る。同様に、静脈硬化症またはコレステロールもしくは他の物質を含むプラーク沈着が血管内膜もしくは内部中膜に形成されたあらゆる静脈症状は、本発明の方法によって治療され得る。治療されるヒト患者は、幼児、子供、十代、大人および年配者で、以前治療を受けていない者または以前コレステロール関連性障害の治療を受けた者を含む。本発明の方法はまた、手術の前、間または後の患者、そして本明細書で開示される特定の疾患もしくは身体状態のある者、ならびに/または本明細書で開示されない他の疾患および症状のある者の治療を含む。特定の実施形態において、本方法は本明細書に記載されたリポソーム製剤を、アテローム性動脈硬化症、静脈硬化症またはコレステロールもしくは他の物質を含むプラーク沈着が静脈の血管内膜もしくは内部中膜に形成されたあらゆる静脈症状、急性冠症候群、安定狭心症および不安定狭心症を含む狭心症、血管性炎症および真皮性炎症を含むがこれらに限定されない炎症または炎症性疾患、鬱血性心不全、冠動脈心疾患（CHD）、高血圧、冠動脈心室性不整脈、上室性不整脈、末梢血管疾患、致死性心筋梗塞、非致死性心筋梗塞、心血管性虚血を含む虚血、心筋冬眠、一過性虚血発作、臀部手術、膝手術、臓器移植またはPTCAによる損傷等の虚血再灌流傷害を含む心血管性疾患と無関係の虚血、冠動脈再灌流、再狭窄、手術前後（PCI）の虚血現象、血管再生の必要性の減少、梗塞部位の減少、凝血障害、血小板減少症、深部静脈血栓症、膵炎、非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）、糖尿病性神経障害、網膜症、有痛性糖尿病性神経障害、乾癬、重篤な四肢虚血、跛行、性交不能、前立腺癌、高脂血症、高リポタンパク血症、低αリポタンパク血症、高トリグリセリド血症、虚血症状を引き起こすあらゆる狭窄症、I型およびII型の両方を含む糖尿病、魚鱗癬、発作、脆弱プラーク、脆弱プラーク破裂、アルツハイマー病、下肢潰瘍形成、重度の冠動脈虚血、リンパ腫、白内障、内皮性機能障害、黄色腫、末端器官機能障害、血管疾患、喫煙および糖尿病に起因する血管疾患、頚動脈および冠動脈疾患、定着したプラークの退縮および収縮、外科的処置の結果としての内皮損傷、内皮損傷を引き起こす外科的処置の組合せ、血管疾患に関連した病的状態、動脈内腔における潰瘍形成、バルーン血管形成術の結果としての再狭窄および上述の副次的適応症を患う患者に投与することを含む。
【００６０】
本発明のリポソーム製剤はまた患者に投与することで、HDLレベルの増加、低HDLレベルの増加、LDLレベルの減少、高LDLレベルの減少、一時的なLDLレベルの増加、トリグリセリドレベルの減少、他の脂質レベルの増加または減少、プラークの安定性増大またはプラーク破裂の可能性減少、血管拡張の増加または減少、炎症の治療または予防、炎症性疾患もしくは炎症性反応の治療または予防、平滑筋および血管内膜の強化または安定化、肝臓へ輸送するための細胞外コレステロール流出の促進、免疫反応の調節、アテローム硬化性プラークからのコレステロールの動員、ならびに組成および/または機能の修正が有利であると思われる任意の膜、細胞、組織、器官および細胞外領域および/または構造を修正し得る。本発明の組成物および方法はまた、局所的な適用および創傷治癒を包含する。
【００６１】
本発明の方法はまた、予防的な治療、それは特に侵襲血管法から回復した患者の再発または合併症の予防に、有用である。内皮の損傷を有する血管部位は、アテローム硬化性プラーク発生のリスクが増大している。従って、冠状動脈血管形成術、血管バイパス移植術および血管内皮層に損傷を与える他の方法等の侵襲血管法は、本発明の方法と組み合わせて実施され得る。侵襲法が内皮に損傷を与えると、該リポソームは損傷部位からコレステロールを除去し、内皮治癒の間のプラーク形成の拡大を阻害または阻止するように作用する。
【００６２】
高脂血症もまた本発明の方法によって治療され得る。単独またはアポリポタンパク質AIおよびアポリポタンパク質AII、アポリポタンパク質Eと結合させたリポソームを、遺伝的または二次的な原因に起因する低αリポタンパク血症、家族性複合型高脂血症および家族性高コレステロール血症である個体に投与することは、治療に有用である。
【００６３】
本発明の方法において投与されるリポソームは、上述したように脂質から構成され得る。脂質は一般的に37℃で液晶状態であり得る。リポソームは上述の例のような多くの他の脂質で構成され得るが、脂質はまた一般的に１つ以上のリン脂質、場合によっては、ホスファチジルコリンまたはホスファチジルグリセロールを含み得る。
【００６４】
該リポソームは多くの方法で投与され得る。例えば、組成物は経口的または非経口的に投与され得る。一般的に、組成物は非経口的に投与され、好ましくは静脈内、またはその投与は筋肉内、皮下、腹腔内、動脈内、くも膜下腔内、リンパ管経由、血管内であり得る。投与は、留置カテーテルもしくは急性留置カテーテルを経由したポンプによる静脈注入、注射器による静脈注入またはシリンジプッシュ投与による静脈注入を通して達成され得る。他の実施形態において、投与は舌下、口腔内、粘膜、局所性、直腸内、膣内または経皮投与であり得る。特定の実施形態において、本発明の組成物は局所的に投与され、炎症を予防もしくは治療し、または創傷治癒を補助する。好ましい実施形態において、リポソームは静脈内に投与され得る。しばしばリポソームは、上大静脈または下大静脈等の大きな中心静脈中に投与され、高度に濃縮された溶液を大量に投与し、血管に流すことを可能にする。高濃度を直接的に血管患部に送達するために、該リポソームは、血管手術の前、間または後に動脈内に投与され得る。該リポソームはまた、開腹術の間に外科医によって局所的な方法で血管に直接的に投与され得る。場合によっては、該リポソームは経口的または経皮的に投与され得る。該リポソームはまた、留置後長期間の放出のために血管ステントに組み込まれ得る。これは特に冠状動脈における病変の再狭窄の血管形成術治療において有効である。
【００６５】
特定の実施形態において、本発明のリポソーム製剤は好ましくは注入ポンプを経由して静脈内に投与され、速度は約1〜2 ml/分、2〜3 ml/分、3〜4 ml/分、4〜5 ml/分、5〜6 ml/分、6〜7 ml/分、7〜8 ml/分、8〜9 ml/分、9〜10 ml/分、10〜11 ml/分、11〜12 ml/分、12〜13 ml/分、13〜14 ml/分、14〜15 ml/分、15〜16 ml/分、16〜17 ml/分、17〜18 ml/分、18〜19 ml/分、19〜20 ml/分、20〜30 ml/分、30〜40 ml/分、40〜50 ml/分、50〜60 ml/分、60〜70 ml/分、70〜80 ml/分、80〜90 ml/分もしくは90〜100 ml/分、または他の所定の投与速度であり得る。特定の好ましい実施形態において、本発明のリポソーム製剤は、シリンジポンプ、IV点滴および/または約10 ml/minの速度での高速点滴によって、注入ポンプを経由して静脈内に投与される。別の実施形態において、本発明のリポソーム製剤は透析またはアフェレーシス機器を経由して投与され得る。
【００６６】
他の特定の実施形態において、静脈内注入または他の投与形態のためのリポソーム濃度は約1〜10 mg/ml、10〜20 mg/ml、20〜30 mg/ml、30〜40 mg/ml、40〜50 mg/ml、50〜60 mg/ml、60〜70 mg/ml、70〜80 mg/ml、80〜90 mg/ml、90〜100 mg/ml、100〜110 mg/ml、110〜120 mg/ml、120〜130 mg/ml、130〜140 mg/ml、140〜150 mg/ml、150〜160 mg/ml、160〜170 mg/ml、170〜180 mg/ml、180〜190 mg/ml、190〜200 mg/ml、200〜210 mg/ml、210〜220 mg/ml、220〜230 mg/ml、230〜240 mg/ml、240〜250 mg/ml、250〜260 mg/ml、260〜270 mg/ml、270〜280 mg/ml、280〜290 mg/ml、290〜300 mg/ml、300〜310 mg/ml、310〜320 mg/ml、320〜330 mg/ml、330〜340 mg/ml、340〜350 mg/ml、350〜360 mg/ml、360〜370 mg/ml、370〜380 mg/ml、380〜390 mg/mlもしくは390〜400 mg/ml、または他の所定の濃度であり得る。好ましい実施形態において、静脈内注入のためのリポソーム濃度は約200 mg/mlである。
【００６７】
本発明の方法は、本発明のリポソーム製剤を治療的または予防的に、上述の任意の疾患もしくは身体状態または任意の他の疾患もしくは身体状態を有する動物へ投与することを含む。リポソームの用量は臨床的症状および被験体または治療を受ける患者の大きさによって変化し得る。特定の実施形態において、本発明は用量約20 mg/kg〜約300 mg/kg、50 mg/kg〜約200mg/kg、および/または罹患した患者に許容され、副作用を回避もしくは減少させつつ治療に有効な用量を包含する。
【００６８】
特定の実施形態において、本発明のリポソームは50 mg/kg〜300 mg/kg間の単回投与または分割投与で患者に投与される。別の好ましい実施形態において、本発明のリポソームは100 mg/kg〜200 mg/kgの間、およびより好ましくは150 mg/kg〜200 mg/kg間の単回投与または分割投与で患者に投与される。他のさらに特定の実施形態において、小胞粒子は110 mg/kg〜120 mg/kg、120 mg/kg〜130 mg/kg、130 mg/kg〜140 mg/kg、140 mg/kg〜150 mg/kg、150 mg/kg〜160 mg/kg、160 mg/kg〜170 mg/kg、170 mg/kg〜180 mg/kg、180 mg/kg〜190 mg/kgもしくは190 mg/kg〜200 mg/kgの単回投与または分割投与で患者に投与される。他の実施形態において、該リポソームは固定用量または0〜1g、1〜2g、2〜3g、3〜4g、4〜5g、5〜6g、6〜7g、7〜8g、8〜9g、9〜10g、10〜11g、11〜12g、12〜13g、13〜14g、14〜15g、15〜16g、16〜17g、17〜18g、18〜19gもしくは19〜20gで患者に投与される。
【００６９】
特定の実施形態において、これらの用量（もしくは他のリポソーム用量）は、単回投与または１以上の間隔の分割投与で投与され、その範囲は約：1日1回、2日に1回、3日に1回、4日に1回、5日に1回、6日に1回、7日に1回、8日に1回、9日に1回、10日に1回、11日に1回、12日に1回、13日に1回、14日に1回、2〜3週間に1回、3〜4週間に1回、4〜5週間に1回、5〜6週間に1回、6〜7週間に1回、7〜8週間に1回、2〜3ヶ月に1回、3〜4ヶ月に1回、4〜5ヶ月に1回、5〜6ヶ月に1回、6〜7ヶ月に1回、8〜9ヶ月に1回、9〜10ヶ月に1回、10〜11ヶ月に1回、11〜12ヶ月に1回、1〜2年に1回、2〜3年に1回、3〜4年に1回、4〜5年に1回；またはさもなくば所定の治療期間に対する所定の時間間隔で投与される。特定の好ましい実施形態において、治療過程における用量の間の時間間隔は約１週間に１回である。
【００７０】
治療過程に要する好ましい治療期間は、初回用量が投与された時間から約：1日、2日、3日、4日、5日、6日、7日、1〜2週間、2〜3週間、3〜4週間、4〜5週間、5〜6週間、6〜7週間、7〜8週間、2〜3ヶ月、3〜4ヶ月、4〜5ヶ月、5〜6ヶ月、6〜7ヶ月、7〜8ヶ月、8〜9ヶ月、9〜10ヶ月、10〜11ヶ月、11〜12ヶ月、1〜2年、2〜3年、3〜4年および4〜5年に及び得る。
【００７１】
特定の実施形態において、治療過程は周期的または断続的であり得、そこでは本発明の化合物および製剤が被験体に期間限定的に、または有害事象もしくは副作用が用量の減量もしくは特定期間の治療休止（休息期間）を必要とするまで投与される。用量の減量、治療の休止または休息期間の長さは、医師の決断によって決定され得る。このような休息期間またはこのような有害事象もしくは他の副作用が鎮静化した後、あるいは医師の決断において、必要ならば治療が再開され得る。
【００７２】
耐容性、安全性および有効性（コレステロールレベル、肝酵素、特定の決定因子もしくはマーカーおよび生理的因子を含むがこれらに限定されない）は、治療過程の前、間もしくは後および/または断続的もしくは周期的な治療過程における様々な期間の間にモニタリングされ得る。好ましい実施形態において、生理的因子、血管変化、プラークの安定性、血管壁および他のマーカーは映像技術（例えば磁気共鳴影像法（MRI）、血管内超音波および血液流動技術を含むがこれらに限定されない）によってモニターされる。血液マーカーは当技術分野において知られている血液試験によってモニタリングされ得る。このようなモニタリングの間または完了後、治療計画はそれに応じて改良され得る（用量の変更、リポソームのサイズもしくは配分、投与速度、リポソーム濃度、投与回数、時間間隔または治療期間の長さを含む）。
【００７３】
更に、本発明のリポソームは他の薬剤、治療法または脂質制御療法と組み合わせて患者に投与される。例えば、本発明のリポソームは、HMG-CoA還元酵素阻害剤、フィブラート系薬剤、胆汁酸捕捉剤、ニコチン酸ならびに他の高脂血症薬、抗糖尿病薬および/または糖血症制御薬、抗炎症薬剤、血圧降下薬、抗凝血薬、Apo-AI模倣薬ならびにEsperion Therapeutics Inc.のHDL上昇剤、当技術分野において知られている他の心血管作動薬およびそれらの組合せと共に投与され得る。
【００７４】
特定の実施形態において、本発明のリポソームは糖尿病を患う患者に他の抗糖尿病および/または糖血制御薬と共に投与される。他の特定の実施形態において、該リポソームを投与して、炎症、炎症性疾患を患う患者を防止、治療もしくは管理し、または炎症性反応を防止もしくは減少させる。他の特定の実施形態において、本発明のリポソームを皮膚に局所的に適用して、皮膚性、皮下性もしくは局在性炎症を治療し、または創傷の治癒を補助する。別の特定の実施形態において、本発明のリポソームを患者に投与して、アルツハイマー病に冒された患者を予防、管理または治療する。別の特定の実施形態において、本発明のリポソームを患者に投与して、アテローム性動脈硬化症、静脈硬化症またはコレステロールもしくは他の物質を含むプラーク沈着が血管の内膜もしくは内部中膜に形成されたあらゆる症状を患う患者を予防、管理および治療する。別の特定の実施形態において、本発明のリポソームを患者に投与して、非心血管性虚血を含む虚血を患う患者を予防、管理または治療する。別の特定の実施形態において、本発明のリポソームは、臀部手術、膝手術、臓器移植、PTCA等の虚血再灌流傷害を誘発し得る選択的手術に先立った、患者への前処理に使用される。
【００７５】
好ましい実施形態において、治療過程に要する治療期間は14週間以下である。他の特定の好ましい実施形態において、リポソームは各治療過程において4〜7日間隔で5〜200 mg/kgから、1〜4、1〜8または1〜14回の総用量で投与される。別の特定の実施形態において、リポソームは5〜200 mg/kgで１週間に１回、約4〜16週間、好ましくは約10週間（合計10回の治療に要する）に渡り投与される。
【００７６】
ある特定の実施形態において、濃度が5〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％、好ましくは100〜140 nm±50％、より好ましくは110〜120 nm±50％であるリポソームは、アテローム性動脈硬化症を患う患者に、単独または他の抗硬化薬剤と組み合わせて、用量100 mg/kgおよび10ml/分以上の速度で7日おきに合計10回投与される。
【００７７】
別の特定の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％、好ましくは100〜140 nm±50％、より好ましくは110〜120 nm±50％であるリポソームは、アテローム性動脈硬化症を患う患者に、単独または他の抗硬化薬剤と組み合わせて、用量150 mg/kgおよび10ml/分以上の速度で7日おきに合計12回投与される。
【００７８】
別の特定の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％の間、好ましくは100〜140 nm±50％の間、より好ましくは110〜120 nm±50％の間であるリポソームは、アテローム性動脈硬化症を患う患者に、単独または他の抗硬化薬剤と組み合わせて、用量200 mg/kgおよび10ml/分以上の速度で7日おきに合計14回投与される。
【００７９】
別の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％の間、好ましくは100〜140 nm±50％の間、より好ましくは110〜120 nm±50％の間であるリポソームは、狭心症鬱血性心不全、冠動脈心疾患、高血圧または不整脈を患う患者に、単独または他の心血管作動薬と組み合わせて、用量100 mg/kgおよび10ml/分以上の速度で7日おきに合計10回投与される。
【００８０】
別の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％の間、好ましくは100〜140 nm±50％の間、より好ましくは110〜120 nm±50％の間であるリポソームは、狭心鬱血性心不全、冠動脈心疾患、高血圧または不整脈を患う患者に、単独または他の心血管作動薬と組み合わせて、用量150 mg/kgおよび10ml/分以上の速度で7日おきに合計12回投与される。
【００８１】
別の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％の間、好ましくは100〜140 nm±50％の間、より好ましくは110〜120 nm±50％の間であるリポソームは、狭心症鬱血性心不全、冠動脈心疾患、高血圧または不整脈を患う患者に、単独または他の心血管作動薬と組み合わせて、用量200 mg/kgおよび10ml/min以上の速度で7日おきに合計14回投与される。
【００８２】
別の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％の間、好ましくは100〜140 nm±50％、より好ましくは110〜120 nm±50％であるリポソームは、炎症を患う患者に、単独または他の抗炎症薬剤と組み合わせて、用量100 mg/kgおよび10ml/分以上の速度で7日おきに合計10回投与される。
【００８３】
別の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％、好ましくは100〜140 nm±50％、より好ましくは110〜120 nm±50％であるリポソームは、炎症を患う患者に、単独または他の抗炎症薬剤と組み合わせて、用量150 mg/kgおよび10ml/分以上の速度で7日おきに合計12回投与される。
【００８４】
別の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％、好ましくは100〜140 nm±50％、より好ましくは110〜120 nm±50％であるリポソームは、炎症を患う患者に、単独または他の抗炎症薬剤と組み合わせて、用量200 mg/kgおよび10ml/分以上の速度で7日おきに合計14回投与される。
【００８５】
別の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％の間、好ましくは100〜140 nm±50％の間、より好ましくは110〜120 nm±50％の間であるリポソームは、虚血を患う患者に、単独または他の抗虚血薬剤と組み合わせて、用量100 mg/kgおよび10ml/分以上の速度で7日おきに合計10回投与される。
【００８６】
別の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％の間、好ましくは100〜140 nm±50％の間、より好ましくは110〜120 nm±50％の間であるリポソームは、虚血を患う患者に、単独または他の抗虚血薬剤と組み合わせて、用量150 mg/kgおよび10ml/分以上の速度で7日おきに合計12回投与される。
【００８７】
別の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％の間、好ましくは100〜140 nm±50％の間、より好ましくは110〜120 nm±50％の間であるリポソームは、虚血を患う患者に、単独または他の抗虚血薬剤と組み合わせて、用量200 mg/kgおよび10ml/min以上の速度で7日おきに合計14回投与される。
【００８８】
別の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％の間、好ましくは100〜140 nm±50％の間、より好ましくは110〜120 nm±50％の間であるリポソームは、高脂血症、高リポタンパク血症、低αリポタンパク血症、高トリグリセリド血症を患う患者に、単独または他の抗高脂血症、抗高リポタンパク血症、抗低αリポタンパク血症もしくは抗高トリグリセリド血症薬剤と組み合わせて、用量100 mg/kgおよび10ml/分以上の速度で7日おきに合計10回投与される。
【００８９】
別の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％、好ましくは100〜140 nm±50％、より好ましくは110〜120 nm±50％であるリポソームは、高脂血症、高リポタンパク血症、低αリポタンパク血症、高トリグリセリド血症を患う患者に、単独または他の抗高脂血症、抗高リポタンパク血症、抗低αリポタンパク血症もしくは抗高トリグリセリド血症薬剤と組み合わせて、用量150 mg/kgおよび10ml/分以上の速度で7日おきに合計12回投与される。
【００９０】
別の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％、好ましくは100〜140 nm±50％、より好ましくは110〜120 nm±50％であるリポソームは、高脂血症、高リポタンパク血症、低αリポタンパク血症、高トリグリセリド血症を患う患者に、単独または他の抗高脂血症、抗高リポタンパク血症、抗低αリポタンパク血症もしくは抗高トリグリセリド血症薬剤と組み合わせて、用量200 mg/kgおよび10ml/分以上の速度で7日おきに合計14回投与される。
【００９１】
別の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％、好ましくは100〜140 nm±50％、より好ましくは110〜120 nm±50％であるリポソームは、心血管性疾患および糖尿病を患う患者に、単独または他の抗糖尿病および/もしくは糖血制御薬および/もしくは心血管作動薬と組み合わせて、用量100 mg/kgおよび10ml/min以上の速度で7日おきに合計10回投与される。
【００９２】
別の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％、好ましくは100〜140 nm±50％、より好ましくは110〜120 nm±50％であるリポソームは、心血管性疾患および糖尿病を患う患者に、単独または他の抗糖尿病および/もしくは糖血制御薬および/もしくは心血管作動薬と組み合わせて、用量150 mg/kgおよび10ml/min以上の速度で7日おきに合計12回投与される。
【００９３】
別の実施形態において、濃度が50〜200 mg/mlで、平均直径が50〜250 nm±50％、好ましくは100〜140 nm±50％、より好ましくは110〜120 nm±50％であるリポソームは、心血管性疾患および糖尿病を患う患者に、単独または他の抗糖尿病および/もしくは糖血制御薬および/もしくは心血管作動薬と組み合わせて、用量200 mg/kgおよび10ml/min以上の速度で7日おきに合計14回投与される。
【００９４】
投与計画はまた、ボーラス投与または継続的注入治療を含み、これは初回用量とそれに続く継続用量の使用を含み得る。好ましい実施形態において、該用量は治療過程を通して一定であり得る。他の好ましい実施形態において該用量は変化してもよい。特定の実施形態において、リポソーム製剤は１回のみ投与され、他の実施形態においては連続的に複数回投与され、他の実施形態においては非継続的に複数回投与され得る。期間、治療スケジュールおよび投与計画は当業者に公知の方法によって改変され得る。総遊離コレステロール、総エステル化コレステロール、HDLコレステロール、LDLコレステロールおよびVLDLコレステロールの血清測定は、治療計画の際の用量およびスケジュールの評価ならびに改良に使用され得る。コレステロールがプラークから動員されると、総血清コレステロールは上昇する。総血清コレステロールおよびHDLコレステロールが治療中に上昇し、エステル化コレステロールが治療中に低下する（または少なくとも影響を受ける）ことが望ましい。異種動物へのリポソーム用量は、一般的にヒトの体重で決定される用量に近似し得る。かかる組成物およびかかる方法により治療される患者は、任意の年齢であり得、そして上記に列挙した１つ以上の疾患または身体状態ならびに/もしくは他の疾患および症状を患っている可能性がある。
【発明を実施するための最良の形態】
【００９５】
以下の実施例は例示として提供するが、これらに限定されるものではない。
【実施例１】
【００９６】
アテローム性動脈硬化症患者におけるETC-588リポソームの複数回投与
複数回投与の研究が行われ、アテローム性動脈硬化症であるヒト患者におけるETC-588リポソームの複数回投与の効果を評価した（ETC-588-003研究）。ETC-588リポソーム（200 mg/ml）を注入ポンプを用いて静脈内に注入した。血漿中のETC-588リポソームをリン脂質（PL）としてアッセイした。投与群は以下の通りであった：偽薬（7もしくは14回）、50 mg/kg（14回）、100 mg/kg（7回）または200 mg/kg（7回）が研究された。用量は4日間隔（q4d）または7日間隔（q7d）で与えられた。本研究には合計42人の患者（男性：36名、女性：6名）が参加し、年齢は44〜76歳の間（平均年齢は63±7歳）であった。患者の平均体重は87.7 kg±17.0 kgであり、52.4 kgから147.7 kgの範囲であった。患者のHDLコレステロールレベルの平均水準は36±4 mg/dLであり、患者の総コレステロールレベルの平均水準は182±36 mg/dLであった。さらに、心血管性疾患歴のある患者の割合は以下の通りであった：冠状動脈疾患：98％、末梢血管疾患：2％；冠状動脈バイパス移植：57％；安定狭心症：29％および不安定狭心症：19％。
【００９７】
総および非エステル化コレステロール（UC）ならびにPLは標準的な自動化された方法によりアッセイした。被験体を無作為的な方法によって治療群に割り当てた。記述統計を用いて安全性および耐容性、検査値、バイタルサインおよび有害事象を、各時点および投与前から投与後までの変化で要約した。薬物動態学的および薬力学的な測定は記述統計学を用いてまとめた。本研究に参加した42名の患者のうち36名が実際に薬剤を受けたが、2名の患者は有害事象または副作用以外の理由で全ての投与が終了する前に除外された。任意の有害事象を報告した患者の数（AE）は計26名（72％）および深刻な有害事象を報告した患者の数（SAE）は計5名（14％）であった。安全性解析に含まれた患者の数は36名であり、一方で33名の患者が薬物動態学的および薬力学的解析（3名の患者に対する不完全な薬物動態学的データを伴う）に含まれた。内皮機能（血管構造）におけるETC-588の影響、炎症性マーカーおよび磁気共鳴影像（MRI）も調べた。
【００９８】
結果は図２および３に示す。本結果は、効果を変えながらもETC-588の全ての用量に関してコレステロールの動員が起こったことを示す。以下の有害事象および深刻な有害事象が各群に報告された：
2005527582.tif 000002
有害事象が少なくとも１回起こった患者の中で最も共通した有害事象を以下に要約する。深刻な有害事象（膀胱頚部拘縮、胸痛、高糖血症または糖尿病）は治療医師によってETC-588の投与と無関係であると見なされた。
【００９９】
2005527582.tif 000003
全体的に、ETC-588-003研究の結果は、ETC-588リポソームがコレステロールを用量依存的に動員し、200 mg/kgまたはそれ以下の用量が一般的に安全および良好に許容されることを示唆する。さらに上述のように、ETC-588リポソームにとって、7日間隔の投与が4日間隔の投与より最適であると考えられるのは、7日投与が血清中のリン脂質および非エステル化コレステロールの最適な排除を可能にするためである。さらに、7日間隔の投与が4日間隔の投与より最適であり得るのは、有害事象および深刻な有害事象が減少または防止され得るためである。
【０１００】
例えば、上記の表に示すように、200 mg/kgが7日間隔で投与された場合、何らかの有害事象の割合は40％であり、何らかの深刻な有害事象は20％であった。対照的に、200 mg/kgが4日間隔で投与された場合、何らかの有害事象の割合は85.7％であり、何らかの深刻な有害事象は28.6％であった。同様に、100 mg/kgが7日間隔で投与された場合、「何らかの深刻な有害事象」の割合は0％であった。対照的に、100 mg/kgが4日間隔で投与された場合、「何らかの深刻な有害事象」の割合は25％であった。同様に、50 mg/kgが7日間隔で投与された場合、「何らかの深刻な有害事象」の割合は0％であった。しかし、50 mg/kgが4日間隔で投与された場合、「何らかの深刻な有害事象」の割合は25％であった。
【図面の簡単な説明】
【０１０１】
【図１Ａ】図１Aは押出によって産生された一群の大型単層膜リポソームのサイズ分布を示す。
【図１Ｂ】図１Bは均質化によって産生された一群の約200 nmの大型単層膜リポソームのサイズ分布を示す。
【図１Ｃ】図１Cは押出によって産生された一群のETC-588リポソームのサイズ分布を示す。
【図２】図２はリポソームの用量を4日毎に投与した後の、リポソームおよび非エステル化コレステロールのレベルを図解する。
【図３】図３はリポソームの用量を7日毎に投与した後の、リポソームおよび非エステル化コレステロールのレベルを図解する。
【図１Ａ】
2005527582.tif 000004
【図１Ｂ】
2005527582.tif 000005
【図１Ｃ】
2005527582.tif 000006
【図２】
2005527582.tif 000007
【図３】
2005527582.tif 000008
【手続補正書】
【提出日】平成16年12月2日(2004.12.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
リン脂質および水性層を含む、平均直径が約50 nm〜250 nmであり、50 mg/kg〜300 mg/kgの用量で単回投与もしくは分割投与にて使用するために製剤されたリポソームの、疾患また身体状態を予防、治療または管理するための医薬を製造するための使用。
【請求項２】
リポソームを４〜１０日間隔で50 mg/kg〜300 mg/kgの用量で投与する、請求項１記載の使用。
【請求項３】
リポソームが、約50 nm〜150 nm、約50 nm〜200 nm、約100 nm〜200 nm、約100 nm〜250 nm、約150 nm〜200 nm、または約150 nm〜250 nmの平均直径を有する、請求項１または２に記載の使用。
【請求項４】
リポソームを多重膜小胞、大型単層膜小胞、小型単層膜小胞、およびその混合物から成る群より選択される他のリン脂質小胞と共に投与する、請求項１〜３のいずれか1項記載の使用。
【請求項５】
用量が被験体のLDLレベルに実質的な増加または減少を引き起こさない、請求項１〜４のいずれか1項記載の使用。
【請求項６】
用量が被験体のLDLレベルに実質的な増加または減少を引き起こす、請求項１〜４のいずれか1項記載の使用。
【請求項７】
リン脂質が、卵ホスファチジルコリン、卵ホスファチジルグリセロール、ジステアロイルホスファチジルコリン、またはジステアロイルホスファチジルグリセロール、ホスファチジルコリン、ホスファチジルグリセロール、レシチン、ベータ、糖脂質、γ-ジパルミトイル-α-レシチン、スフィンゴミエリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、N-(2,3-ジ(9-(Z)-オクタデセニルオキシ))-プロプ-1-イル-N,N,N-トリメチルアンモニウムクロリド、ホスファチジルエタノールアミン、リゾレシチン、リゾホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ケファリン、カルジオリピン、セレブロシド、リン酸ジセチル、ジオレオイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール、ジオレオイルホスファチジルグリセロール、パルミトイル-オレオイル-ホスファチジルコリン、ジ-ステアロイル-フォスファチジルコリン、ステアロイル-パルミトイル-ホスファチジルコリン、ジ-パルミトイル-ホスファチジルエタノールアミン、ジ-ステアロイル-フォスファチジルエタノールアミン、ジ-ミリストイル-ホスファチジルセリン、ジ-オレオイル-ホスファチジルコリン、オレオイル-パルミトイル-ホスファチジルコリン、37℃で液晶相である脂質、およびこれらの混合物から成る群より選択される、請求項１〜６のいずれか1項記載の使用。
【請求項８】
リン脂質がパルミトイル-オレオイル-ホスファチジルコリンである、請求項１〜６のいずれか1項記載の使用。
【請求項９】
疾患または身体状態が、アテローム性動脈硬化症、静脈硬化症、またはコレステロールもしくは他の物質を含むプラーク沈着が静脈の血管内膜もしくは内部中膜に形成されたあらゆる静脈症状、急性冠症候群、安定狭心症および不安定狭心症を含む狭心症、炎症、血管性炎症、真皮性炎症、鬱血性心不全、冠動脈心疾患（CHD）、心室性不整脈、末梢血管疾患、心筋梗塞、致死性心筋梗塞の兆候、非致死性心筋梗塞、虚血、心血管性虚血、一過性虚血発作、心血管性疾患と無関係の虚血、虚血再灌流傷害、血管再開通術の必要性の減少、凝血障害、血小板減少症、深部静脈血栓症、膵炎、非アルコール性脂肪性肝炎、糖尿病性神経障害、網膜症、有痛性糖尿病性神経障害、跛行、乾癬、重篤な四肢虚血、性交不能、高脂血症、高リポタンパク血症、低αリポタンパク血症、高トリグリセリド血症、虚血症状を引き起こすあらゆる狭窄状態、I型およびII型の両方を含む糖尿病、魚鱗癬、発作、脆弱プラーク、アルツハイマー病、下肢潰瘍形成、重度の冠動脈虚血、リンパ腫、白内障、内皮機能障害、黄色腫、末端器官機能障害、血管疾患、喫煙および糖尿病に起因する血管疾患、頚動脈および冠動脈疾患、定着したプラークの退縮および収縮、不安定なプラーク、弱い血管内膜、不安定な血管内膜、内皮傷害、外科的処置の結果としての内皮損傷、血管疾患に関連した病的状態、動脈内腔における潰瘍形成、バルーン血管形成術の結果としての再狭窄、ならびに上述の副次的適応症から成る群より選択される、請求項１〜８のいずれか1項記載の使用。
【請求項１０】
治療が血管壁内膜を強化し、肝臓への輸送のために細胞外コレステロールの流出を促進し、アテローム硬化性プラークからコレステロールを動員し、創傷治癒を目的とし、任意の生体膜、細胞、組織、器官、細胞外領域、または構造を修正する、請求項１〜９のいずれか1項記載の使用。
【請求項１１】
リポソームが、ペプチド、パラオキソナーゼ、リポタンパク質リパーゼ、ApoA-Iおよびその模倣型、A-I変異型、ならびにその組合せから成る群より選択される化合物と共に投与されるか、または該化合物と結合している、請求項１〜１０のいずれか1項記載の使用。
【請求項１２】
リポソームがコレステロールレベルに影響を及ぼす小分子または薬剤と共に投与される、請求項１〜１１のいずれか1項記載の使用。
【請求項１３】
小分子がスタチン、再構成HDL、小型HDL、または合成模倣HDLリポタンパク質粒子である、請求項１２記載の使用。
【請求項１４】
リポソームが１つ以上の心血管作動薬、抗糖尿病薬、または他の治療剤と共に投与される、請求項１〜１３のいずれか1項記載の使用。
【請求項１５】
心血管作動薬が、小分子、スタチン、アスピリン、クロピドグレルを含むβ遮断薬、カルシウム遮断薬、低分子量ヘパリンを含むヘパリン、グルコース低下剤、硝酸塩、IIb/IIIa阻害剤、ACE阻害剤、フィブレート、および胆汁酸抑制剤から成る群より選択される、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
リポソームが、約50 mg/kgの用量で約７日毎に、約100 mg/kgの用量で約７日毎に、約150 mg/kgの用量で約７日毎に、約200 mg/kgの用量で約７日毎に、約250 mg/kgの用量で約７日毎に、または約300 mg/kgの用量で約７日毎に、投与される、請求項１〜１５のいずれか1項記載の使用。
【請求項１７】
リポソームが１回投与される、請求項１〜１６のいずれか1項記載の使用。
【請求項１８】
リポソームが、４〜７日間隔で２回、４〜７日間隔で３回、４〜７日間隔で４回、４〜７日間隔で５回、４〜７日間隔で６回、４〜７日間隔で７回、４〜７日間隔で８回、４〜７日間隔で９回、４〜７日間隔で１０回、４〜７日間隔で１１回、４〜７日間隔で１２回、４〜７日間隔で１３回、または４〜７日間隔で１４回投与される、請求項１〜１６のいずれか1項記載の使用。
【請求項１９】
リポソームが１週間隔で２〜１４回、２週間隔で２〜１４回、１ヶ月間隔で２〜１４回、２ヶ月間隔で２〜１４回、３ヶ月間隔で２〜１４回、４ヶ月間隔で２〜１４回、５ヶ月間隔で２〜１４回、６ヶ月間隔で２〜１４回、７ヶ月間隔で２〜１４回、８ヶ月間隔で２〜１４回、９ヶ月間隔で２〜１４回、１０ヶ月間隔で２〜１４回、１１ヶ月間隔で２〜１４回、３年間隔で２〜１４回、４年間隔で２〜１４回投与される、請求項１〜１６のいずれか1項記載の使用。
【請求項２０】
100 mg/kg〜200 mg/kgの用量の、50 nm〜250 nmの平均粒子サイズを有するリポソームの、リポソーム治療に関連する悪影響を減少または回避して、末梢組織のコレステロールを減少させるための医薬の製造における使用。
【請求項２１】
100mg/kg〜200 mg/kgの用量のリポソームの、異常なコレステロールレベルに関連した疾患もしくは障害の予防または治療するための単回投与または７日以上毎の複数回投与用の医薬の製造における使用。
【請求項２２】
投与が７日毎に１回行われる、請求項２０記載の使用。
【請求項２３】
投与が６〜１４回行われる、請求項２０記載の使用。
【請求項２４】
100mg/kg〜200 mg/kgの用量の、50 nm〜250 nmの平均直径を有するリポソームの、４日以上毎に疾患を有するヒトに投与するための医薬の製造における使用。
【請求項２５】
上記リポソームを、１つ以上の心血管作動薬、抗糖尿病薬および/もしくは血糖制御薬、ならびに/または他の治療薬と併用して投与することを更に含む、請求項２３記載の使用。
【国際調査報告】
2005527582.tif 000009