(57)【要約】【解決手段】  本発明は一般式（１）【化１】2005526774.tif 000008（式中、Ｙ1及びＹ2は、同一又は異なって、酸素原子を示すか２個の水素原子を示し、Ｒ1及びＲ2は、同一又は異なって水素原子又は置換基を有していてもよいアルキル基を示す）で表される環状エーテルアミン誘導体又はその塩及びこれを含有する医薬に関する。【効果】  本発明化合物（１）は、神経芽腫細胞等で発現しているｃ−ｆｏｓ発現異常に対する回復作用を有し、種々の悪性腫瘍に対する治療薬として有用である。
2005526774.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）
【化１】
2005526774.tif 000007
（式中、Ｙ1及びＹ2は、同一又は異なって、酸素原子を示すか２個の水素原子を示し、Ｒ1及びＲ2は、同一又は異なって水素原子又は置換基を有していてもよいアルキル基を示す）
で表される環状エーテルアミン誘導体又はその塩。
【請求項２】
Ｒ1及びＲ2が、同一又は異なって、水素原子であるか、又はカルボキシル基、アルコキシカルボニル基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、置換基を有していてもよいアリール基及び置換基を有していてもよい複素環式基から選ばれる１以上の基が置換していてもよいＣ1−Ｃ8アルキル基である請求項１記載の環状エーテルアミン誘導体又はその塩。
【請求項３】
Ｒ1及びＲ2が、同一又は異なって、水素原子であるか、又はカルボキシル基、Ｃ1−Ｃ6アルコキシカルボニル基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、フェニル基、アミノフェニル基、Ｃ1−Ｃ6アルキルアミノフェニル基、ジ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）アミノフェニル基、ピリジル基、アミノピリジル基、Ｃ1−Ｃ6アルキルアミノピリジル基及びジ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）アミノピリジル基から選ばれる１以上の置換基を有していてもよいＣ1−Ｃ8アルキル基である請求項１又は２記載の環状エーテルアミン誘導体又はその塩。
【請求項４】
Ｒ1及びＲ2が、同一又は異なって、水素原子であるか、又はＣ1−Ｃ6アルコキシカルボニル基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子及びジ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）アミノピリジル基から選ばれる１以上の置換基を有していてもよいＣ1−Ｃ8アルキル基である請求項１〜３のいずれか１項記載の環状エーテルアミン誘導体又はその塩。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項記載の環状エーテルアミン誘導体又はその塩を有効成分とする医薬。
【請求項６】
悪性腫瘍治療薬である請求項５記載の医薬。
【請求項７】
請求項１〜４のいずれか１項記載の環状エーテルアミン誘導体又はその塩及び薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物。
【請求項８】
請求項１〜４のいずれか１項記載の環状エーテルアミン誘導体又はその塩の医薬製造のための使用。
【請求項９】
医薬が、悪性腫瘍治療薬である請求項８記載の使用。
【請求項１０】
請求項１〜４のいずれか１項記載の環状エーテルアミン誘導体又はその塩の有効量を投与することを特徴とする悪性腫瘍の処置方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は神経芽腫などの予後の悪い悪性腫瘍の治療薬として有用な環状エーテルアミン誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
小児悪性腫瘍のうち、進行神経芽腫（neuroblastoma：NB）は集学的治療にもかかわらず、依然として予後が不良である。１３−シス−レチノイン酸を使った研究では、Ｎ−ｍｙｃ遺伝子の発現のダウンレギュレーションがおこり、分化誘導効果を示すことが知られているが、神経芽腫に対する臨床効果は十分とは言えない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
従って、本発明の目的は、神経芽腫のような予後の悪い悪性腫瘍に対して有効な医薬を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明者は、ヒト神経芽腫由来の細胞培養株を神経成長因子（Nerve Growth Factor：NGF）で刺激し、細胞内シグナル伝達系の下流にある初期発現遺伝子群の一つであるｃ−ｆｏｓ発現の有無を検討したところ、ＮＧＦ刺激によりｃ−ｆｏｓまでシグナル伝達が伝えられるのはＮＧＦ高親和性受容体（trk-A）と低親和性受容体（LNGFR）の発現の認められた細胞培養株であった。また両受容体を持つ細胞培養株で、ｃ−ｆｏｓの発現が認められない細胞株は、シグナル伝達の途中で何らかの異常が起きていることが示唆された。
そこで、本発明者は、種々の化合物を合成し、上記ｃ−ｆｏｓ発現異常に対してシグナル伝達機構を修復し、分化誘導の方向に導くか否かを検討した結果、下記一般式で表される環状エーテルアミン誘導体がｃ−ｆｏｓ発現を回復させる作用を有することを見出した。さらにこれらの化合物のｃ−ｆｏｓ発現回復作用について検討した結果、これらの化合物はｃ−ｆｏｓ発現回復作用を長時間維持し、かつｃ−ｆｏｓ発現を増大させる作用も有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００５】
すなわち、本発明は一般式（１）
【０００６】
【化１】
2005526774.tif 000003
【０００７】
（式中、Ｙ1及びＹ2は、同一又は異なって、酸素原子を示すか２個の水素原子を示し、Ｒ1及びＲ2は、同一又は異なって水素原子又は置換基を有していてもよいアルキル基を示す）
で表される環状エーテルアミン誘導体又はその塩を提供するものである。
【０００８】
また、本発明は、一般式（１）で表される環状エーテルアミン誘導体又はその塩を有効成分とする医薬を提供するものである。
【０００９】
また、本発明は、一般式（１）で表される環状エーテルアミン誘導体又はその塩及び薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物を提供するものである。
【００１０】
また本発明は、一般式（１）で表される環状エーテルアミン誘導体又はその塩の医薬製造のための使用を提供するものである。
【００１１】
さらに本発明は、一般式（１）で表される環状エーテルアミン誘導体又はその塩の有効量を投与することを特徴とする悪性腫瘍の処置方法を提供するものである。
【発明の効果】
【００１２】
本発明化合物（１）は、神経芽腫細胞等で発現しているｃ−ｆｏｓ発現異常に対する回復作用を有し、種々の悪性腫瘍に対する治療薬として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
一般式（１）中、Ｙ1及びＹ2は同一又は異なって、酸素原子を示すか、２個の水素原子を示す。このうち、Ｙ1及びＹ2が２個の水素原子を示す場合がより好ましい。
Ｒ1及びＲ2は、同一又は異なって水素原子又は置換基を有していてもよいアルキル基を示す。ここでアルキル基としてはＣ1−Ｃ8アルキル基が好ましく、さらにＣ1−Ｃ6アルキル基がより好ましい。なお、当該アルキル基は直鎖でも分岐鎖でもよい。当該アルキル基の例としては、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基等が挙げられる。
【００１４】
このアルキル基に置換し得る基としては、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、置換基を有していてもよいアリール基、置換基を有していてもよい複素環式基等が挙げられる。ここでアルコキシカルボニル基としては、Ｃ1−Ｃ6アルコキシカルボニル基が挙げられ、より具体的にはメトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、ブトキシカルボニル基等が挙げられる。ハロゲン原子としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。
【００１５】
前記アリール基としては、例えばＣ6−Ｃ10アリール基、より具体的にはフェニル基、ナフチル基が挙げられる。また前記複素環式基としては、例えば窒素原子を含有する５又は６員の複素環、より具体的にはピロリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、ピリジル基、ピリミジニル基、ピラジニル基等が挙げられる。このうちピリジル基が特に好ましい。なおこのピリジル基には、ピリジン環の窒素原子がアルキル基と結合し、ピリジニウム塩を形成する場合も含まれる。
【００１６】
またこれらのアリール基及び複素環式基上に置換し得る基としては、アミノ基、Ｃ1−Ｃ6アルキルアミノ基、ジ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）アミノ基等が挙げられる。より具体的な置換基としてはアミノ基、メチルアミノ基、エチルアミノ基、プロピルアミノ基、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、ジイソプロピルアミノ基等が挙げられる。このうち、ジ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）アミノ基がより好ましく、特にジメチルアミノ基が好ましい。
【００１７】
一般式（１）で表される環状エーテルアミン誘導体の塩としては、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩等の鉱酸塩が好ましい。また、前記のようにＲ1及び／又はＲ2がピリジニウム塩を形成する基を含む場合には、その対イオンは塩素イオン、臭素イオン等のハロゲンイオン等であるのが好ましい。
【００１８】
また、本発明においては、水和物に代表される溶媒和物も含まれる。さらに置換基の種類により本発明化合物が不斉炭素原子を有する場合もあり、この場合には光学活性体も本発明に含まれる。
上記一般式（１）で表される環状エーテルアミン誘導体又はその塩（以下、本発明化合物（１）ということがある）は、例えば次の反応式に従って製造することができる。
【００１９】
【化２】
2005526774.tif 000004
【００２０】
【化３】
2005526774.tif 000005
【００２１】
（式中、Ｘ1及びＸ2は各々独立にハロゲン原子を示し、Ｒ3は水素原子、アルキル基、フェニル基又は置換フェニル基を示し、Ｒ4はアルキル基を示し、Ｒ5はアルキル基を示し、Ｒ6は置換基を有していてもよいアリール基又は置換基を有していてもよい複素環式基を示す）
【００２２】
すなわち、４，４′−ジヒドロキシジフェニルメタン（２）にハロゲノ酢酸エステル（３）を反応させて化合物（４）を得、必要に応じて当該化合物（４）のエステル残基を活性エステルに変換し、これにアンモニアを反応させて化合物（５）を得、これを還元して化合物（６）を得、この化合物（６）と化合物（４）を反応させることにより環状エーテルアミン（１ａ）が得られる。この化合物（１ａ）を還元すれば化合物（１ｂ）が得られ、これにα，β−不飽和脂肪酸エステル又はハロゲノ脂肪酸エステルを反応させれば化合物（１ｃ）が得られる。また化合物（１ｃ）を還元すれば化合物（１ｄ）が得られ、これをハロゲン化すれば化合物（１ｅ）が得られる。当該化合物（１ｅ）に種々のアリール化合物や複素環式化合物を反応させれば化合物（１ｆ）が得られる。
以下、各反応工程毎に説明する。
【００２３】
工程（ａ）
工程（ａ）は、４，４′−ジヒドロキシジフェニルメタン（２）にハロゲノ酢酸エステルを反応させることにより化合物（４）を得る工程である。
ハロゲノ酢酸エステルとしてはブロモ酢酸メチル、ブロモ酢酸エチル等が挙げられる。この反応は、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム等の塩基の存在下に行うのが好ましい。また、反応は０〜１００℃で、ジメチルホルムアミド等の極性溶媒中で行うのが好ましい。
【００２４】
化合物（４）のエステル残基は、アンモニアとの反応をより効率良くするために、活性エステル、例えばペンタフルオロフェニルエステルに代表される置換アリールエステルに変換してもよい。このような活性エステルに変換するには、化合物（４）を加水分解後、ペンタフルオロフェノール等の置換フェノールと反応させればよい。このエステル化反応はＮ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド等の縮合剤の存在下に行うのが好ましい。
【００２５】
工程（ｂ）
工程（ｂ）は、化合物（４）にアンモニアを反応させて化合物（５）を得る工程である。
反応は、化合物（４）にテトラヒドロフラン等の溶媒中でアンモニア水を反応させることにより行われる。反応温度は０〜８０℃程度で十分である。
【００２６】
工程（ｃ）
工程（ｃ）は、化合物（５）を還元して化合物（６）を得る工程である。
還元反応は、ボラン−ジメチルスルフィド錯体等の水素化ホウ素化合物を用いて行うのが好ましい。反応はテトラヒドロフラン等の溶媒中、０℃〜溶媒の還流温度で行うのが好ましい。
【００２７】
工程（ｄ）
工程（ｄ）は、化合物（６）に化合物（４）を反応させて環状エーテルアミン（１ａ）を得る工程である。
反応は塩化メチレン等の不活性溶媒中、トリエチルアミン、ピリジン等の塩基の存在下、０℃〜溶媒の還流温度で行うのが好ましい。
【００２８】
工程（ｅ）
工程（ｅ）は、化合物（１ａ）を還元して化合物（１ｂ）を得る工程である。
還元反応は、前記工程（ｃ）と同様の条件で行うことができる。
【００２９】
工程（ｆ）
工程（ｆ）は、化合物（１ｂ）の各々のアミノ基上にアルコキシカルボニルアルキル基（-R4-COOR5）を導入して化合物（１ｃ）を得る工程である。
基-R4-COOR5を導入するための原料としては、アクリル酸エステル等のα，β−不飽和脂肪酸エステル、β−ブロモプロピオン酸エステル等のβ−ハロゲノ脂肪酸エステルが挙げられる。
【００３０】
β−ハロゲノ脂肪酸エステルを用いる場合は、工程（ａ）と同様にして行うことができる。またα，β−不飽和脂肪酸エステルを用いる場合は、硝酸銅、酢酸銅等の金属触媒の存在下、メタノール等の溶媒中、０〜１５０℃の温度で行うのが好ましい。
【００３１】
工程（ｇ）
工程（ｇ）は、化合物（１ｃ）を還元して化合物（１ｄ）を得る工程である。
この還元反応は、水素化ホウ素リチウム等の還元剤を用いて行うのが好ましい。反応は、メタノール、テトラヒドロフラン等の溶媒中で室温〜溶媒の還流温度で行うのが好ましい。
【００３２】
工程（ｈ）
工程（ｈ）は、化合物（１ｄ）をハロゲン化して化合物（１ｅ）を得る工程である。
ハロゲン化剤としては塩化チオニル等が用いられる。反応は、塩化メチレン等の溶媒中で０〜１００℃で行うのが好ましい。
【００３３】
工程（ｉ）
工程（ｉ）は、化合物（１ｅ）に種々のアリール基又は複素環式基を導入して化合物（１ｆ）を得る工程である。
反応は、ジメチルアミノピリジン等の塩基の存在下に行うのが好ましい。
反応混合物からの目的化合物の単離手段としては、洗浄、再結晶、各種クロマトグラフィー等を適宜組み合せて用いるのが好ましい。また、塩への変換は、公知の手段により行えばよい。
かくして得られた本発明化合物（１）は、ＮＧＦで刺激された神経芽腫由来の細胞におけるｃ−ｆｏｓ発現異常に対して、これを回復させる作用を有し、ヒトを含む哺乳動物の神経芽腫に代表される悪性腫瘍に対する治療薬として有用である。
【００３４】
本発明の医薬は、本発明化合物（１）に賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、被覆剤、乳化剤、懸濁化剤、溶剤、安定化剤、吸収助剤、軟膏基剤等の１以上の薬学的に許容される担体を適宜添加し、常法により経口投与用、注射投与用、直腸内投与用、外用などの剤形に製剤化することによって得られる。
経口投与用の製剤としては、顆粒、錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤、液剤、乳剤、懸濁剤等が；注射投与用の製剤としては、静脈内注射、筋肉内注射、皮下注射、点滴注射用の製剤などが；直腸内投与用の製剤としては、坐薬軟カプセル等が好ましい。
本発明の医薬は上記の如き製剤として、ヒトを含む哺乳動物に投与することができる。
本発明の医薬は、本発明化合物（１）として、１日当り約１〜５００mg／kgを１〜４回投与するのが好ましい。
【実施例】
【００３５】
次に実施例を挙げて、本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に何ら限定されるものではない。
【００３６】
参考例１：化合物Ａ（式（４）中、R3＝CH3）の合成
４，４′−ジヒドロキシジフェニルメタン（１．０ｇ，５mmol）、ブロモ酢酸メチル（１．５３ｇ，１０mmol）及び炭酸カリウム（１．３８ｇ，１０mmol）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中室温下で２４時間撹拌した。反応液をろ過した後にろ液を酢酸エチル（５０mL×３）で抽出した。飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：クロロホルム＝１：９）にて精製し無色針状晶（１．６ｇ，９３％）を得た。
【００３７】
mp 64-65℃.
1H-NMR(CDCl3)δ：3.80(s,6H), 3.85(s,2H), 4.60(s,4H), 6.82(d,4H,J=8.8Hz), 7.08(d,4H,J=8.8Hz).
MS(EI)(m/z)：344[M]+.
HRMS(EI)Calcd for C19H20O6：344.1259.
Found 344.1256.
【００３８】
参考例２：化合物Ｂ（式（４）中、Ｒ3＝Ｈ）の合成
化合物Ａ（１．０ｇ，５mmol）及び５Ｎ水酸化カリウム・メタノール溶液（４mL）をメタノール（４０mL）中で２時間加熱還流した。溶媒を減圧留去し、得られた残渣を１００mLの水に溶解し、酢酸エチル（１００mL）で抽出した。水層を１０％塩酸で酸性とし、酢酸エチル（３００mL）で抽出した。飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、無色粉末（１．０９ｇ，１００％）を得た。
【００３９】
mp 199-200℃.
1H-NMR(DMSO-d6)δ：3.79(s,2H), 4.59(s,4H), 6.80(d,4H,J=8.8Hz), 7.10(d,4H,J=8.8Hz), 12.90(s,2H).
MS(EI)(m/z)：316[M]+.
HRMS(EI)(m/z)：Calcd for C17H16O6：316.0946.
Found 316.0944.
【００４０】
参考例３：化合物Ｃ（式（４）中、Ｒ3＝ペンタフルオロフェニル）の合成
化合物Ｂ（２．９５ｇ，９．３mmol）、ペンタフルオロフェノール（３．４６ｇ，１８．８mmol）及びＮ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド（３．８８ｇ，１８．８mmol）をテトラヒドロフラン（１００mL）中で２４時間室温撹拌した。反応液をろ過した後にろ液を減圧留去して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン）にて精製し無色結晶（５．５６ｇ，９２％）を得た。
【００４１】
mp 135-136℃.
1H-NMR(CDCl3)δ：3.90(s,2H), 4.97(s,4H), 6.89(d,4H,J=8.4Hz), 7.13(d,4H,J=8.4Hz).
MS(FAB)(m/z)：648[M]+.
HRMS(EI)(m/z)：Calcd for C29H14F10O6：648.0630.
Found 648.0628.
【００４２】
参考例４：化合物Ｄ（式（５））の合成
化合物Ｄ（４．０ｇ，６．１７mmol）及び２５％アンモニア水（１２mL）をテトラヒドロフラン（３０mL）中で１２時間室温撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム（２００mL）を加え、析出する結晶をろ過した。水、エタノール、エーテルで洗浄し、無色結晶（１．９ｇ、９８％）を得た。
【００４３】
mp 233-234℃.
1H-NMR(DMSO-d6)δ：3.80(s,2H), 4.36(s,4H), 6.85(d,4H,J=8.8Hz), 7.11(d,4H,J=8.8Hz), 7.32(s,2H), 7.43(s,2H).
MS(FAB)(m/z)：315[M+1]+.
HRMS(FAB)(m/z)：Calcd for C17H19N2O4：315.1344.
Found 315.1346.
【００４４】
参考例５：化合物Ｅ（式（６））の合成
化合物Ｄ（３１４mg，１mmol）及びボラン−ジメチルスルフィド錯塩（１．１６mL，１２mmol）をテトラヒドロフラン（１２mL）中で２４時間加熱還流した。０．７Ｍ塩酸・メタノール溶液（６mL）を加え、その混合物を３０分間加熱還流した後、溶媒を減圧留去後、その残渣を２５％アンモニア水で塩基性とした後、ジクロロメタン（３００mL）で抽出した。その抽出物を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、微黄色油状物質を得た。当該油状物質をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール：２５％アンモニア水＝１００：４０：４）にて精製し無色アモルファス（２４３mg，８５％）を得た。
【００４５】
1H-NMR(CD3OD)δ：2.99(t,4H,J=5.6Hz), 3.82(s,2H), 3.98(t,4H,J=5.6Hz), 6.84(d,4H,J=8.4Hz), 7.07(d,4H,J=8.4Hz).
MS(FAB)(m/z)：287[M+1]+.
HRMS(FAB)(m/z)：Calcd for C17H23N2O2：287.1759.
Found 287.1757.
【００４６】
実施例１：化合物Ｆ（式（１ａ））の合成
化合物Ｂ（９７３mg，１．５mmol）、化合物Ｅ（４３０mg，１．５mmol）及びトリエチルアミン（２．１mL，１５mmol）をジクロロメタン（３００mL）中で２４時間加熱還流した。溶媒を減圧留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：メタノール＝９：１）にて精製し無色結晶（５８６mg，６９％）を得た。
【００４７】
mp 195-196℃.
1H-NMR(CDCl3)δ：3.53(s,2H), 3.70-3.73(m,4H), 3.80(s,2H), 3.92(t,4H,J=5.2Hz), 6.63(d,4H,J=8.8Hz), 6.71(d,4H,J=8.8Hz), 6.87(d,4H,J=8.8Hz), 6.94(t,2H,J=5.2Hz), 7.05(d,4H,J=8.8Hz).
MS(FAB)(m/z)：567[M+1]+.
HRMS(FAB)(m/z)：Calcd for C34H35N2O6：567.2495.
Found 567.2496.
【００４８】
実施例２：化合物Ｇ（式（１ｂ））の合成
化合物Ｆ（６１０mg，１．０７mmol）及びボラン−ジメチルスルフィド錯塩（１．３mL，１．３４mmol）をＴＨＦ（１３mL）中で２４時間加熱還流した。０．７Ｍ塩酸・メタノール溶液（６．５mL）を加えその混合物を３０分間加熱還流した後、溶媒を減圧留去後、残渣を２５％アンモニア水で塩基性とした後、ジクロロメタン（１００mL）で抽出した。その抽出物を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール：２５％アンモニア水＝１００：１０：１）にて精製し無色粉末（４８０mg，８３％）を得た。
【００４９】
mp 135-136℃.
1H-NMR(CDCl3)δ：3.00(t,8H,J=4.8Hz), 3.80(s,4H), 4.06(t,8H,J=4.8Hz), 6.75(d,8H,J=8.4Hz), 7.00(d,8H,J=8.4Hz).
MS(FAB)(m/z)：539[M+1]+.
HRMS(FAB)(m/z)：Calcd for C34H39N2O4：539.2909.
Found 539.2908.
【００５０】
実施例３：化合物Ｈ（式（１ｃ）中、R4＝(CH2)2、R5＝CH3）の合成
化合物Ｇ（２６９mg，０．５mmol）、アクリル酸メチル（２５８mg，３mmol）及び酢酸銅一水和物（１０mg，０．０５mmol）をメタノール（５mL）中１００℃で２４時間撹拌した。反応液をセライトろ過した後にろ液を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール：２５％アンモニア水＝１００：１０：１）にて精製し無色アモルファス（３０５mg，８６％）を得た。
【００５１】
1H-NMR(CDCl3)δ：2.53(t,4H,J=7.2Hz), 2.95(t,8H,J=6.0Hz), 2.99(t,4H,J=7.2Hz), 3.65(s,6H), 3.81(s,4H), 3.94(t,8H,J=6.0Hz), 6.72(d,8H,J=8.4Hz), 7.00(d,8H,J=8.4Hz).
MS(FAB)(m/z)：711[M+1]+.
HRMS(FAB)(m/z)：Calcd for C42H51N2O8：711.3645.
Found 711.3647.
【００５２】
実施例４：化合物Ｉ（式（１ｄ）中、R4＝(CH2)2）の合成
化合物Ｈ（３００mg，０．４２mmol）、水素化ホウ素リチウム（８４mg，３．８mmol）及びメタノール（０．２４mL）をテトラヒドロフラン中（１２mL）で２４時間加熱還流した。水と１Ｎ塩酸を加え反応を停止させた後に、２５％アンモニア水で塩基性とした後、析出物をろ取した。水洗後、減圧乾燥し無色粉末
（２６０mg，９５％）を得た。
【００５３】
mp 182-183℃.
1H-NMR(Pyridine-d5)δ：1.91(quint,4H,J=6.3Hz), 2.87(t,4H,J=6.3Hz), 2.98(t,8H,J=5.6Hz), 3.84(s,4H), 3.98(t,4H,J=6.3Hz), 4.07(t,8H,J=5.6Hz), 6.92(d,8H,J=8.4Hz), 7.11(d,8H,J=8.4Hz).
MS(FAB)(m/z)：655[M+1]+.
HRMS(FAB)(m/z)：Calcd for C40H51N2O6：655.3746.
Found 655.3747.
【００５４】
実施例５：化合物Ｊ（式（１ｅ）中、R4＝(CH2)2、X2＝Cl）の合成
化合物Ｉ（１９６mg，０．３mmol）及び塩化チオニル（２mL）をジクロロメタン（１０mL）中で２４時間室温撹拌した。減圧留去後、残渣に水を加え飽和炭酸水素ナトリウムで塩基性とした後、混合物をジクロロメタン（２５mL）で抽出した。飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：１）にて精製し無色粉末（２０７mg，１００％）を得た。
【００５５】
mp 103-104℃.
1H-NMR(CDCl3)δ：1.95(quint,4H,J=6.0Hz), 2.78(t,4H,J=6.0Hz), 2.92(t,8H,J=6.0Hz), 3.67(t,4H,J=6.0Hz), 3.81(s,4H), 3.94(t,8H,J=6.0Hz), 6.72(d,8H,J=8.4Hz), 7.00(d,8H,J=8.4Hz).
MS(FAB)(m/z)：690[M+1]+, 692[M+1]+37Cl, 694[M+1]+37Cl2.
HRMS(FAB)(m/z)：Calcd for C40H48Cl2N2O4：690.2990.
Found 690.2988.
【００５６】
実施例６：化合物Ｋ（式（１ｆ）中、R4＝(CH2)2、R6＝４−ジメチルアミノピリジン−１−イル）の合成
化合物Ｊ（４８mg，０．０７mmol）及び４−ジメチルアミノピリジン（１７mg，０．１４mmol）をメタノール（２mL）中で１８時間還流撹拌した。反応液を減圧留去して得られた無色粉末を酢酸エチルで洗浄後ろ過、減圧乾燥し、無色粉末（６５mg，１００％）を得た。
【００５７】
1H-NMR(D2O)δ：1.74(brs,4H), 2.13(brs,4H), 2.41(brs,20H), 3.26(brs,4H), 3.49(brs,8H), 3.81(brs,4H), 5.85(d,4H,J=6.8Hz), 6.34(d,8H,J=8.0Hz), 6.66(d,8H,J=8.0Hz), 7.48(d,4H,J=6.8Hz).
MS(FAB)(m/z)：899[M-Cl]+, 432[M-Cl2]2+.
HRMS(FAB)(m/z)：Calcd for C54H68ClN6O4：899.4990.
Found 899.5074.
化合物Ｋ
【００５８】
【化４】
2005526774.tif 000006
【００５９】
実施例７
（１）各神経芽腫培養株として２株（ＩＭＲ−３２，ＮＢ−３９）を用いた。各株に、本発明化合物（化合物Ｋ）（１０-5Ｍ／Ｌ〜１０-8Ｍ／Ｌ）を作用させ、その６０分後ＮＧＦ（１００ng／mL）を作用させた。ｃ−ｆｏｓ発現がピークとなるその６０分後に、ｔｏｔａｌ ＲＮＡを抽出してｃＤＮＡとし、ＲＴ−ＰＣＲを行った。その結果、本発明のシクロファン誘導体（化合物Ｋ）投与によって、ＮＧＦ刺激によりｃ−ｆｏｓ発現異常を生起するＩＭＲ−３２株に対し、１０-8Ｍ／Ｌという低濃度でｃ−ｆｏｓ発現が最大になった。
【００６０】
（２）本発明化合物のｃ−ｆｏｓ発現回復作用の持続性について検討した。すなわち、ＩＭＲ−３２株に化合物Ｋ（１０-8Ｍ／Ｌ）を作用させ、その後ＮＧＦ（１００ng／mL）を３０分後に作用させ、ＲＴ−ＰＣＲによりｃ−ｆｏｓ発現量を経時的に測定した。その結果、ｃ−ｆｏｓ発現量は、ＮＧＦ刺激直後では５．５ng／mL、３時間後で６．７ng／mL、７時間後で８．１ng／mLと増大し、２４時間後でも４．９ng／mL、４８時間後でも５．５ng／mLに維持されていた。また、ピークはＮＧＦ刺激７時間後であった。
【００６１】
（３）次に本発明化合物前投与によるｃ−ｆｏｓ発現回復作用について検討した。すなわち、ＩＭＲ−３２株に化合物Ｋ１０-8Ｍ／Ｌを７時間作用させた後
ＮＧＦ（１００ng／mL）を作用させ、経時的にＲＴ−ＰＣＲにより
ｃ−ｆｏｓ発現量を測定した。その結果、ＮＧＦ刺激直後は４．１ng／mLであったｃ−ｆｏｓ発現量が、ＮＧＦ刺激１時間後に７．６ng／mLに増大し、２〜６時間後５．１〜５．７ng／mLであったが、１５時間後には７．３ng／mL、２４時間後に６．０ng／mL、４８時間後に１２．１ng／mLと明らかに増大し、また作用の持続が確認された。さらにｃ−ｆｏｓ発現異常のあるＮＢ−３９株でも同様の効果を示した。
【国際調査報告】
2005526774.tif 000009
2005526774.tif 000010