(57)【要約】本発明は、式Ｉの化合物、ならびに、その医薬適合性の塩および水和物を包含する。本発明の化合物は、免疫により媒介される様々な疾患および状態、例えば、骨髄、臓器および組織の移植拒絶などを処置するために有用である。医薬組成物および使用方法が含まれる。
2005533058.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2005533058.tif 000022
[式中、
ｎは０または１である；
Ｙは、結合、−Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）ｋ−（式中、ｋは、０、１または２である）である：
それぞれのＲ３は独立して、水素およびＣ１〜４アルキルからなる群から選択され、ただし、前記Ｃ１〜４アルキルは、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルコキシおよびカルボキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換される；
それぞれのＲ４は独立して、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から選択され、ただし、前記Ｃ１〜４アルキル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換される；
それぞれのＲ５は独立して、
（ａ）ハロ、
（ｂ）シアノ、
（ｃ）ヒドロキシ、
（ｄ）−Ｎ（Ｒ７）２、
（ｅ）Ｃ１〜６アルキル、
（ｆ）Ｃ２〜６アルケニル、
（ｇ）Ｃ３〜６アルキニル、
（ｈ）Ｃ１〜６アルコキシ、
（ｉ）Ｃ１〜６アルキル−Ｓ（Ｏ）ｋ−（式中、ｋは０、１または２である）、
（ｊ）Ｃ３〜６シクロアルキル、
（ｋ）フェニル、および
（ｌ）ＨＥＴ１
からなる群から選択され、
ただし、上記の項目（ｅ）から項目（ｊ）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、および
上記の項目（ｋ）および項目（ｌ）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ１〜４アルキル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換される；
Ｒ６は、
（１）水素、
（２）ハロ、
（３）シアノ、
（４）Ｃ１〜１０アルキル、
（５）Ｃ２〜１０アルケニル、
（６）Ｃ３〜１０アルキニル、
（７）Ｃ３〜６シクロアルキル、
（８）フェニル、および
（９）ＨＥＴ２
からなる群から選択され、
ただし、上記の項目（４）から項目（６）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ３〜６シクロアルキル、フェニル、ＨＥＴ３およびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ３〜６シクロアルキル基、フェニル基、ＨＥＴ３基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、
上記の項目（７）は、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、フェニル、ＨＥＴ４およびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記フェニル基、ＨＥＴ４基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、
上記の項目（８）および項目（９）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ１〜４アルキル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、
ただし、Ｙが−Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）ｋ−であるとき、Ｒ６はハロまたはシアノでない；または、
Ｒ６および１つのＲ５基または２つのＲ５基は一緒になって、Ｏ、ＳまたはＮ（Ｒ７）からなる群から選択される１個または２個のヘテロ原子を場合により含有する５員または６員の単環状の環を形成することができる；
それぞれのＲ７は独立して水素またはＣ１〜４アルキルであり、前記Ｃ１〜４アルキル基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換される；および
ＨＥＴ１、ＨＥＴ２、ＨＥＴ３およびＨＥＴ４はそれそれが独立して、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾピラゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾオキサゾリル、カルバゾリル、カルボリニル、シンノリニル、フラニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、インドラジニル、インダゾリル、イソベンゾフラニル、イソインドリル、イソキノリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリドピリジニル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジル、ピロリル、キナゾリニル、キノリル、キノキサリニル、チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル、トリアゾリル、アゼチジニル、１，４−ジオキサニル、ヘキサヒドロアゼピニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ジヒドロベンゾイミダゾリル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾチオフェニル、ジヒドロベンゾオキサゾリル、ジヒドロフラニル、ジヒドロイミダゾリル、ジヒドロインドリル、ジヒドロイソオキサゾリル、ジヒドロイソチアゾリル、ジヒドロオキサジアゾリル、ジヒドロオキサゾリル、ジヒドロピラジニル、ジヒドロピラゾリル、ジヒドロピリジニル、ジヒドロピリミジニル、ジヒドロピロリル、ジヒドロキノリニル、ジヒドロテトラゾリル、ジヒドロチアジアゾリル、ジヒドロチアゾリル、ジヒドロチエニル、ジヒドロトリアゾリル、ジヒドロアゼチジニル、メチレンジオキシベンゾイル、テトラヒドロフラニルおよびテトラヒドロチエニルからなる群から選択される。]
により表される化合物またはその医薬適合性の塩もしくは水和物。
【請求項２】
ｎが０である請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ｎが１である請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ３が水素またはメチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
１つのＲ４が存在し、前記Ｒ４はハロまたはメチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ５が存在しない請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ６が、
（１）Ｃ１〜１０アルキル、
（２）Ｃ２〜１０アルケニル、
（３）Ｃ３〜１０アルキニル、
（４）Ｃ３〜６シクロアルキル、
（５）フェニル、および
（６）ＨＥＴ２
からなる群から選択され、
ただし、上記の項目（１）から項目（３）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ３〜６シクロアルキル、フェニル、ＨＥＴ３およびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ３〜６シクロアルキル基、フェニル基、ＨＥＴ３基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、
上記の項目（４）は、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、フェニル、ＨＥＴ４およびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記フェニル基、ＨＥＴ４基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、および
上記の項目（５）および項目（６）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ１〜４アルキル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換される、
請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ６が、
（１）Ｃ１〜１０アルキル、
（２）Ｃ２〜１０アルケニル、
（３）Ｃ３〜１０アルキニル、
（４）Ｃ３〜６シクロアルキル、および
（５）フェニル
からなる群から選択され、
ただし、上記の項目（１）から項目（３）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ３〜６シクロアルキル、フェニルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ３〜６シクロアルキル基、フェニル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、
上記の項目（４）は、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、フェニルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記フェニル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、および
上記の項目（５）は、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ１〜４アルキル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換される、
請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
式Ｉａ：
【化２】
2005533058.tif 000023
[式中、
ｎは０または１である；
Ｙは結合または−Ｏ−である；
Ｒ６は、
（１）Ｃ１〜１０アルキル、
（２）Ｃ２〜１０アルケニル、
（３）Ｃ３〜１０アルキニル、
（４）Ｃ３〜６シクロアルキル
（５）フェニル、および
（６）ＨＥＴ２
からなる群から選択され、
ただし、上記の項目（１）から項目（３）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ３〜６シクロアルキル、フェニル、ＨＥＴ３およびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ３〜６シクロアルキル基、フェニル基、ＨＥＴ３基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、
上記の項目（４）は、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、フェニル、ＨＥＴ４およびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記フェニル基、ＨＥＴ４基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、および
上記の項目（５）および項目（６）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ１〜４アルキル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換される；および
ＨＥＴ２、ＨＥＴ３およびＨＥＴ４はそれそれが独立して、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾピラゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾオキサゾリル、カルバゾリル、カルボリニル、シンノリニル、フラニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、インドラジニル、インダゾリル、イソベンゾフラニル、イソインドリル、イソキノリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリドピリジニル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジル、ピロリル、キナゾリニル、キノリル、キノキサリニル、チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル、トリアゾリル、アゼチジニル、１，４−ジオキサニル、ヘキサヒドロアゼピニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ジヒドロベンゾイミダゾリル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾチオフェニル、ジヒドロベンゾオキサゾリル、ジヒドロフラニル、ジヒドロイミダゾリル、ジヒドロインドリル、ジヒドロイソオキサゾリル、ジヒドロイソチアゾリル、ジヒドロオキサジアゾリル、ジヒドロオキサゾリル、ジヒドロピラジニル、ジヒドロピラゾリル、ジヒドロピリジニル、ジヒドロピリミジニル、ジヒドロピロリル、ジヒドロキノリニル、ジヒドロテトラゾリル、ジヒドロチアジアゾリル、ジヒドロチアゾリル、ジヒドロチエニル、ジヒドロトリアゾリル、ジヒドロアゼチジニル、メチレンジオキシベンゾイル、テトラヒドロフラニルおよびテトラヒドロチエニルからなる群から選択される、
を有する、請求項１に記載の化合物またはその医薬適合性の塩もしくは溶媒和物。
【請求項１０】
Ｒ６が、
（１）Ｃ１〜１０アルキル、
（２）Ｃ２〜１０アルケニル、
（３）Ｃ３〜１０アルキニル、
（４）Ｃ３〜６シクロアルキル、および
（５）フェニル
からなる群から選択され、
ただし、上記の項目（１）から項目（３）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ３〜６シクロアルキル、フェニルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ３〜６シクロアルキル基、フェニル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、
上記の項目（４）は、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、フェニルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記フェニル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、および
上記の項目（５）は、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ１〜４アルキル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換される。]
請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
ｎが０であり、Ｙが結合であり、および、Ｒ６がＣ１〜６アルキルである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１２】
下記の表：
【化３】
2005533058.tif 000024
2005533058.tif 000025
2005533058.tif 000026
2005533058.tif 000027
2005533058.tif 000028
2005533058.tif 000029
2005533058.tif 000030
2005533058.tif 000031
から選択される化合物またはその医薬適合性の塩もしくは溶媒和物。
【請求項１３】
処置を必要としている哺乳動物患者における免疫調節異常を処置する方法であって、前記免疫調節異常を処置するために有効である量で、請求項１に記載の化合物を前記患者に投与することを含む前記方法。
【請求項１４】
免疫調節異常が、全身性エリテマトーデス、慢性リウマチ様関節炎、Ｉ型糖尿病、炎症性腸疾患、胆汁性肝硬変、ブドウ膜炎、多発性硬化症、クローン病、潰瘍性大腸炎、水疱性天疱瘡、類肉腫症、乾癬、自己免疫筋炎、ヴェーゲナー肉芽腫症、魚鱗癬、グレーブズ眼症および喘息からなる群から選択される自己免疫疾患または慢性炎症性疾患である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
免疫調節異常が、骨髄移植拒絶、臓器移植拒絶または移植片対宿主病である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
免疫調節異常が、臓器または組織の移植、移植によりもたらされる移植片対宿主病、自己免疫症候群（リウマチ様関節炎を含む）、全身性エリテマトーデス、橋本甲状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、Ｉ型糖尿病、ブドウ膜炎、後ブドウ膜炎、アレルギー性脳脊髄炎、糸球体腎炎、感染後自己免疫疾患（リウマチ熱および感染後糸球体腎炎を含む）、炎症性および過増殖性の皮膚疾患、乾癬、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、湿疹性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、扁平苔癬、天疱瘡、水疱性天疱瘡、表皮水疱症、じんま疹、血管浮腫、脈管炎、紅斑、皮膚好酸球増加症、エリテマトーデス、座瘡、円形脱毛症、角結膜炎、春季結膜炎、ベーチェット病に関連するブドウ膜炎、角膜炎、ヘルペス性角膜炎、円錐角膜、角膜上皮変性症、角膜白斑、眼性天疱瘡、モーレン潰瘍、強膜炎、グレーブズ眼症、フォークト−小柳−原田症候群、類肉腫症、花粉アレルギー、可逆性閉塞性気道疾患、気管支喘息、アレルギー性喘息、内因性喘息、外因性喘息、ダスト喘息、慢性的または常習性の喘息、晩発性喘息および気道過剰応答性、気管支炎、胃潰瘍、虚血性疾患および血栓症により生じる血管損傷、虚血性腸疾患、炎症性腸疾患、壊死性腸炎、火傷に関連する腸障害、セリアック病、直腸炎、好酸球性胃腸炎、脂肪細胞過剰増殖、クローン病、潰瘍性大腸炎、片頭痛、鼻炎、湿疹、間質性腎炎、グッドパスチャー症候群、溶血性尿毒症症候群、糖尿病性腎症、多発性筋炎、ギラン−バレー症候群、メニエール病、多発神経炎、多発性神経炎、単神経炎、神経根障害、甲状腺機能亢進症、バセドウ病、真性赤血球系無形成症、再生不良性貧血、低形成貧血、特発性血小板減少性紫斑症、自己免疫溶血性貧血、無顆粒球症、悪性貧血、巨赤芽球性貧血、赤血球生成欠如、骨粗鬆症、類肉腫症、線維化肺、特発性間質肺炎、皮膚筋炎、尋常性白斑、尋常性魚鱗癬、光アレルギー過敏性、皮膚型Ｔ細胞リンパ腫、動脈硬化、アテローム性動脈硬化、大動脈炎症候群、結節性動脈周囲炎、心筋症、強皮症、ヴェーゲナー肉芽腫症、シェーグレン症候群、脂肪症、好酸球性筋膜炎、歯肉の障害、歯周の障害、歯槽骨の障害、セメント質の障害、糸球体腎炎、脱毛を妨げるか、あるいは発毛の提供ならびに／または発毛および毛髪成長の促進を妨げることによる男性型脱毛症または老年性脱毛症、筋ジストロフィー、膿疱性皮膚症およびセザリー症候群、アジソン病、保存または移植または虚血性疾患のときに生じる臓器の虚血−再潅流傷害、エンドトキシンショック、偽膜性大腸炎、薬物または放射線により生じる大腸炎、虚血性急性腎不全、慢性腎不全、肺−酸素または薬物により生じる中毒症、肺ガン、肺気腫、白内障、鉄症、色素性網膜炎、老年性黄斑変性、硝子体瘢痕形成、角膜アルカリ火傷、多形滲出性紅斑皮膚炎、線状ＩｇＡバロウス（ｂａｌｌｏｕｓ）皮膚炎およびセメント皮膚炎、歯肉炎、歯周炎、敗血症、膵炎、環境汚染により生じる疾患、老化により生じる疾患、発ガン性により生じる疾患、ガン腫の転移により生じる疾患、高山病により生じる疾患、ヒスタミンまたはロイコトリエン−Ｃ４の放出により生じる疾患、ベーチェット病、自己免疫肝炎、原発性胆汁性肝硬変、硬化性胆管炎、部分的肝臓切除、急性肝臓壊死、毒素またはウイルス性肝炎またはショックまたは無酸素症により生じる壊死、Ｂ型ウイルス肝炎、非Ａ／非Ｂ肝炎、肝硬変、アルコール性肝硬変、肝不全、劇症肝不全、遅発型肝不全、「急性型慢性」肝不全、化学療法作用の増強、サイトメガロウイルス感染、ＨＣＭＶ感染、ＡＩＤＳ、ガン、老年性痴呆、外傷、および慢性細菌感染からなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１７】
免疫調節異常が多発性硬化症である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１８】
免疫調節異常がリウマチ様関節炎である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１９】
免疫調節異常が全身性エリテマトーデスである、請求項１３に記載の方法。
【請求項２０】
免疫調節異常が乾癬である、請求項１３に記載の方法。
【請求項２１】
免疫調節異常が移植臓器または移植組織の拒絶である、請求項１３に記載の方法。
【請求項２２】
免疫調節異常が炎症性腸疾患である、請求項１３に記載の方法。
【請求項２３】
免疫調節異常がリンパ系起源の悪性腫瘍である、請求項１３に記載の方法。
【請求項２４】
免疫調節異常が急性および慢性のリンパ性白血病およびリンパ腫である、請求項１３に記載の方法。
【請求項２５】
免疫抑制を必要としている哺乳動物患者における免疫系を抑制する方法であって、請求項１に記載される化合物の免疫抑制有効量を前記患者に投与することを含む前記方法。
【請求項２６】
医薬適合性のキャリアとの組合せで請求項１に記載の化合物から構成される医薬組成物。
【請求項２７】
処置を必要としている哺乳動物患者における呼吸器の疾患または状態を処置する方法であって、前記の呼吸器の疾患または状態を処置するために有効である量で、請求項１に記載の化合物を前記患者に投与することを含む前記方法。
【請求項２８】
呼吸器の疾患または状態が、喘息、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、成人呼吸窮迫性症候群、乳児呼吸窮迫性症候群、咳、好酸球性肉芽腫、呼吸器合包体ウイルス細気管支炎、気管支拡張症、特発性肺線維症、急性肺傷害および閉塞性細気管支炎器質化肺炎からなる群から選択される、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
処置を必要としている哺乳動物患者における免疫調節異常を処置する方法であって、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体のアゴニストである化合物を、前記免疫調節異常を処置するために有効である量で前記患者に投与することを含み、前記化合物が、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイで評価された場合、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対するＥＣ５０とＳ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体に対するＥＣ５０との比率により判定されたとき、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体よりもＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対して少なくとも５，０００倍の選択性を有し、および、前記化合物が、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイにより評価された場合、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対する結合について１００ｎＭ以下のＥＣ５０を有する、前記方法。
【請求項３０】
前記化合物が、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイにより評価された場合、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対する結合について１０ｎＭ以下のＥＣ５０を有する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記化合物が、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイにより評価された場合、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対する結合について１ｎＭ以下のＥＣ５０を有する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記化合物が、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイで評価された場合、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対するＥＣ５０とＳ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体に対するＥＣ５０との比率により判定されたとき、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体よりもＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対して少なくとも１０，０００倍の選択性を有する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
前記化合物が、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイで評価された場合、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対するＥＣ５０とＳ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体に対するＥＣ５０との比率により判定されたとき、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体よりもＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対して少なくとも１５，０００倍の選択性を有する、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記化合物が、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイで評価された場合、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対するＥＣ５０とＳ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体に対するＥＣ５０との比率により判定されたとき、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体よりもＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対して少なくとも２０，０００倍の選択性を有する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記化合物が、患者はまた呼吸器の疾患または状態をまた有する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３６】
患者が心臓血管の疾患または状態をまた患っている、請求項２９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体アゴニストである化合物、従って、二次リンパ組織においてリンパ球隔離を生じさせることによって免疫抑制活性を有する化合物に関する。本発明はまた、そのような化合物を含有する医薬組成物、および処置方法または防止方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
免疫抑制剤は、全身性エリテマトーデス、慢性リウマチ様関節炎、Ｉ型糖尿病、炎症性腸疾患、胆汁性肝硬変、ブドウ膜炎、多発性硬化症、および他の障害（例えば、クローン病、潰瘍性大腸炎、水疱性天疱瘡、類肉腫症、乾癬、自己免疫筋炎、ヴェーゲナー肉芽腫症、魚鱗癬、グレーブズ眼症、アトピー性皮膚炎および喘息など）を含む広範囲の様々な自己免疫疾患および慢性炎症性疾患において有効であることが示されている。免疫抑制剤はまた、ガン、リンパ腫および白血病を処置するための化学療法における治療法の一部として有用であることが証明されている。
【０００３】
これらの状態のそれぞれの根本的な病因は極めて異なり得るが、これらの状態は、共通して、様々な自己抗体および／または自己反応性リンパ球の出現を有している。そのような自己反応性は、部分的には、正常な免疫系が機能する恒常性制御の喪失のためである場合がある。同様に、骨髄移植または臓器移植の後では、宿主のリンパ球が異物組織の抗原を認識し、移植片拒絶をもたらす抗体、サイトカインおよび細胞傷害性リンパ球を含む細胞性応答および液性応答の両方を生じさせ始める。
【０００４】
自己免疫プロセスまたは拒絶プロセスの最終結果の１つは、炎症性細胞および炎症性細胞が放出する媒介因子によって引き起こされる組織破壊である。ＮＳＡＩＤなどの抗炎症剤は、これらの媒介因子の作用および分泌を阻止することによって主に作用し、しかし、疾患の免疫学的基礎を改変するためには何もしない。他方で、シクロホスファミドなどの細胞傷害性薬剤は、正常な応答および自己免疫応答の両方が停止させられるような非特異的な様式で作用する。実際、そのような非特異的な免疫抑制剤で処置されている患者は、その自己免疫疾患により死亡するのと同じくらい、感染により死亡する可能性がある。
【０００５】
シクロスポリンＡは、移植臓器の拒絶を防止するために使用されている薬物である。ＦＫ−５０６は、移植片の臓器拒絶を防止するために、特に肝臓移植のために承認されている別の薬物である。シクロスポリンＡおよびＦＫ−５０６は、身体の免疫系が、移植片の異物タンパク質を拒絶するために自然の保護因子のその広大な集積所を可動化することを阻害することによって作用する。シクロスポリンＡは、重篤な乾癬を処置するために承認されていたが、現在は、アトピー性皮膚炎を処置するために欧州各国の規制当局によって承認されている。
【０００６】
シクロスポリンＡおよびＦＫ−５０６は、移植片の拒絶を遅らせるか、または抑制することにおいて有効であるが、腎毒性、神経毒性および胃腸障害を含む望ましくない副作用をいくつか生じさせることが知られている。従って、これらの副作用を有しない免疫抑制剤は依然として開発されておらず、そのような免疫抑制剤が非常に望ましい。
【０００７】
免疫抑制化合物ＦＴＹ７２０は、臨床試験が現在行われているリンパ球隔離剤である。ＦＴＹ７２０は、哺乳動物では、スフィンゴシン１−リン酸受容体の強力なアゴニストである化合物に代謝される。スフィンゴシン１−リン酸受容体のアゴニスト作用により、リンパ節およびパイエル板におけるリンパ球（Ｔ細胞およびＢ細胞）の隔離が、リンパ枯渇を伴うことなく誘導される。そのような免疫抑制は、臓器移植後の拒絶を防止するために望ましく、また、自己免疫障害を処置することにおいて望ましい。
【０００８】
スフィンゴシン１−リン酸は、造血細胞により分泌され、貯蔵され、活性化される血小板から放出される生物活性なスフィンゴ脂質代謝物である。Ｙａｔｏｍｉ，Ｙ．、Ｔ．Ｏｈｍｏｒｉ、Ｇ．Ｒｉｌｅ、Ｆ．Ｋａｚａｍａ、Ｈ．Ｏｋａｍｏｔｏ、Ｔ．Ｓａｎｏ、Ｋ．Ｓａｔｏｈ、Ｓ．Ｋｕｍｅ、Ｇ．Ｔｉｇｙｉ、Ｙ．ＩｇａｒａｓｈｉおよびＹ．Ｏｚａｋｉ、２０００、Ｂｌｏｏｄ、９６：３４３１〜８。スフィンゴシン１−リン酸は、一群のＧタンパク質共役受容体に対するアゴニストとして作用して、細胞の増殖、分化、生存および運動性を調節する。Ｆｕｋｕｓｈｉｍａ，Ｎ．、Ｉ．Ｉｓｈｉｉ、Ｊ．Ｊ．Ａ．Ｃｏｎｔｏｓ、Ｊ．Ａ．ＷｅｉｎｅｒおよびＪ．Ｃｈｕｎ、２００１、リゾリン脂質受容体、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．、４１：５０７〜３４；Ｈｌａ，Ｔ．、Ｍ．−Ｊ．Ｌｅｅ、Ｎ．Ａｎｃｅｌｌｉｎ、Ｊ．Ｈ．ＰａｉｋおよびＭ．Ｊ．Ｋｌｕｋ、２００１、リゾリン脂質−受容体暴露、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２９４：１８７５〜１８７８；Ｓｐｉｅｇｅｌ，Ｓ．およびＳ．Ｍｉｌｓｔｉｅｎ、２０００、スフィンゴシン１−リン酸受容体の新しいファミリーの機能、Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ、１４８４：１０７〜１６；Ｐｙｎｅ，Ｓ．およびＮ．Ｐｙｎｅ、２０００、Ｇタンパク質共役受容体の内皮分化遺伝子ファミリーを介するスフィンゴシン１−リン酸シグナル伝達、Ｐｈａｒｍ．＆Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、８８：１１５〜１３１。５つのスフィンゴシン１−リン酸受容体（Ｓ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ２、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４およびＳ１Ｐ５、これらはまた、内皮分化遺伝子Ｅｄｇ１、Ｅｄｇ５、Ｅｄｇ３、Ｅｄｇ６、Ｅｄｇ８として知られている）が特定されており、これらは広範囲の細胞分布および組織分布を有し、また、ヒトおよび齧歯類種ではよく保存されている（表参照）。Ｓ１Ｐ受容体に結合することにより、Ｇｑ、Ｇｉ／ｏ、Ｇ１２、Ｇ１３およびρに依存する経路を介するシグナル伝達が誘発される。Ｓ１Ｐ１およびＳ１Ｐ３のリガンド誘導による活性化は、Ｒａｃ経路およびρ経路を介して、血管形成、走化性および接着接合組立てを促進することが示されており（Ｌｅｅ，Ｍ．−Ｊ．、Ｓ．Ｔｈａｎｇａｄａ、Ｋ．Ｐ．Ｃｌａｆｆｅｙ、Ｎ．Ａｎｃｅｌｌｉｎ、Ｃ．Ｈ．Ｌｉｕ、Ｍ．Ｋｌｕｋ、Ｍ．Ｖｏｌｐｉ、Ｒ．Ｉ．Ｓｈａ’ａｆｉおよびＴ．Ｈｌａ、１９９９、Ｃｅｌｌ、９９：３０１〜１２を参照のこと）、これに対して、Ｓ１Ｐ２のアゴニスト作用は神経突起の引っ込めを促進し（Ｖａｎ  Ｂｒｏｃｋｌｙｎ、Ｊ．Ｒ．、Ｚ．Ｔｕ、Ｌ．Ｃ．Ｅｄｓａｌｌ、Ｒ．Ｒ．ＳｃｈｍｉｄｔおよびＳ．Ｓｐｉｅｇｅｌ、１９９９、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７４：４６２６〜４６３２を参照のこと）、また、Ｒａｃ活性化を阻止することによって走化性を阻害する（Ｏｋａｍｏｔｏ，Ｈ．、Ｎ．Ｔａｋｕｗａ、Ｔ．Ｙｏｋｏｍｉｚｏ、Ｎ．Ｓｕｇｉｍｏｔｏ、Ｓ．Ｓａｋｕｒａｄａ、Ｈ．ＳｈｉｇｅｍａｔｓｕおよびＹ．Ｔａｋｕｗａ、２０００、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．、２０：９２４７〜９２６１を参照のこと）。Ｓ１Ｐ４は造血系の細胞および組織に局在化し（Ｇｒａｅｌｅｒ、Ｍ．Ｈ．、Ｇ．ＢｅｒｎｈａｒｄｔおよびＭ．Ｌｉｐｐ、１９９９、Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２４６：１３１〜６を参照のこと）、これに対して、Ｓ１Ｐ５は主としてニューロン受容体であり、若干の発現がリンパ組織で認められる（Ｉｍ，Ｄ．Ｓ．、Ｃ．Ｅ．Ｈｅｉｓｅ、Ｎ．Ａｎｃｅｌｌｉｎ、Ｂ．Ｆ．Ｏ’Ｄｏｗｄ、Ｇ．Ｊ．Ｓｈｅｉ、Ｒ．Ｐ．Ｈｅａｖｅｎｓ、Ｍ．Ｒ．Ｒｉｇｂｙ、Ｔ．Ｈｌａ、Ｓ．Ｍａｎｄａｌａ、Ｇ．ＭｃＡｌｌｉｓｔｅｒ、Ｓ．Ｒ．ＧｅｏｒｇｅおよびＫ．Ｒ．Ｌｙｎｃｈ、２０００、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７５：１４２８１〜６を参照のこと）。
【０００９】
動物へのスフィンゴシン１−リン酸の投与は、二次リンパ器官への末梢血リンパ球の全身的な隔離を誘導し、従って、治療的に有用な免疫抑制をもたらす（Ｍａｎｄａｌａ，Ｓ．、Ｒ．Ｈａｊｄｕ、Ｊ．Ｂｅｒｇｓｔｒｏｍ、Ｅ．Ｑｕａｃｋｅｎｂｕｓｈ、Ｊ．Ｘｉｅ、Ｊ．Ｍｉｌｌｉｇａｎ、Ｒ．Ｔｈｏｒｎｔｏｎ、Ｇ．−Ｊ．Ｓｈｅｉ、Ｄ．Ｃａｒｄ、Ｃ．Ｋｅｏｈａｎｅ、Ｍ．Ｒｏｓｅｎｂａｃｈ、Ｊ．Ｈａｌｅ、Ｃ．Ｌ．Ｌｙｎｃｈ、Ｋ．Ｒｕｐｐｒｅｃｈｔ、Ｗ．Ｐａｒｓｏｎｓ、Ｈ．Ｒｏｓｅｎ、２００２、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２９６：３４６〜３４９を参照のこと）。しかしながら、スフィンゴシン１−リン酸はまた、治療剤としてのその有用性を制限する心臓血管作用および気管支収縮作用を有している。スフィンゴシン１−リン酸の静脈内投与は、ラットにおいて心拍、血管収縮および血圧を低下させる（Ｓｕｇｉｙａｍａ，Ａ．、Ｎ．Ｎ．Ａｙｅ、Ｙ．Ｙａｔｏｍｉ、Ｙ．ＯｚａｋｉおよびＫ．Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ、２０００、Ｊｐｎ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、８２：３３８〜３４２を参照のこと）。ヒト気道平滑筋細胞では、スフィンゴシン１−リン酸は、喘息における気管支収縮、気道炎症および再構築を促進する収縮、細胞成長およびサイトカイン産生を調節する（Ａｍｍｉｔ，Ａ．Ｊ．、Ａ．Ｔ．Ｈａｓｔｉｅ、Ｌ．Ｃ．Ｅｄｓａｌｌ、Ｒ．Ｋ．Ｈｏｆｆｍａｎ、Ｙ．Ａｍｒａｎｉ、Ｖ．Ｐ．Ｋｒｙｍｓｋａｙａ、Ｓ．Ａ．Ｋａｎｅ、Ｓ．Ｐ．Ｐｅｔｅｒｓ、Ｒ．Ｂ．Ｐｅｎｎ、Ｓ．Ｓｐｉｅｇｅｌ、Ｒ．Ａ．Ｐａｎｅｔｔｉｅｒｉ，Ｊｒ．、２００１、ＦＡＳＥＢ  Ｊ．、１５：１２１２〜１２１４を参照のこと）。スフィンゴシン１−リン酸の望ましくない作用は、すべてのＳ１Ｐ受容体に対するその非選択的かつ強力なアゴニスト活性に伴うものである。
【００１０】
本発明は、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体を上回る選択性を有する、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体のアゴニストである化合物を包含する。Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体選択的アゴニストは、現在の治療法を上回る様々な利点を有しており、また、リンパ球隔離剤の治療範囲を広げ、これにより、より大きい服薬に関してより良好な寛容性を可能にし、従って、単独療法としての効力を改善する。
【００１１】
免疫抑制剤の主要な使用は、骨髄、臓器および移植片の拒絶を処置することにおいてであるが、そのような化合物に対する他の使用には、関節炎（特に、リウマチ様関節炎）、インスリン依存性糖尿病およびインスリン非依存性糖尿病、多発性硬化症、乾癬、炎症性腸疾患、クローン病、エリテマトーデスなどの処置が含まれる。
【００１２】
従って、本発明は、先行技術の化合物よりも安全かつ効果的である免疫抑制化合物を提供することに集中している。これらの目的および他の目的は、本明細書中に含まれる説明から当業者には明らかである。
【００１３】
【表１】
2005533058.tif 000003
2005533058.tif 000004
【発明の開示】
【００１４】
（発明の要約）
本発明は、下記の式Ｉの化合物：
【００１５】
【化４】
2005533058.tif 000005
ならびにその医薬適合性の塩および水和物を包含する。本発明の化合物は、免疫により媒介される様々な疾患および状態、例えば、骨髄、臓器および組織の移植拒絶などを処置するために有用である。医薬組成物および使用方法が含まれる。
【００１６】
（発明の詳細な説明）
本発明は、下記の式Ｉにより表される化合物またはその医薬適合性の塩もしくは水和物を包含する：
【００１７】
【化５】
2005533058.tif 000006
式中、
ｎは０または１である；
Ｙは、結合、−Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）ｋ−（式中、ｋは、０、１または２である）である：
それぞれのＲ３は独立して、水素およびＣ１〜４アルキルからなる群から選択され、ただし、前記Ｃ１〜４アルキルは、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルコキシおよびカルボキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換される；
それぞれのＲ４は独立して、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から選択され、ただし、前記Ｃ１〜４アルキル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換される；
それぞれのＲ５は独立して、
（ａ）ハロ、
（ｂ）シアノ、
（ｃ）ヒドロキシ、
（ｄ）−Ｎ（Ｒ７）２、
（ｅ）Ｃ１〜６アルキル、
（ｆ）Ｃ２〜６アルケニル、
（ｇ）Ｃ３〜６アルキニル、
（ｈ）Ｃ１〜６アルコキシ、
（ｉ）Ｃ１〜６アルキル−Ｓ（Ｏ）ｋ−（式中、ｋは０、１または２である）、
（ｊ）Ｃ３〜６シクロアルキル、
（ｋ）フェニル、および
（ｌ）ＨＥＴ１
からなる群から選択され、
ただし、上記の項目（ｅ）から項目（ｊ）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、および
上記の項目（ｋ）および項目（ｌ）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ１〜４アルキル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換される；
Ｒ６は、
（１）水素、
（２）ハロ、
（３）シアノ、
（４）Ｃ１〜１０アルキル、
（５）Ｃ２〜１０アルケニル、
（６）Ｃ３〜１０アルキニル、
（７）Ｃ３〜６シクロアルキル、
（８）フェニル、および
（９）ＨＥＴ２
からなる群から選択され、
ただし、上記の項目（４）から項目（６）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ３〜６シクロアルキル、フェニル、ＨＥＴ３およびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ３〜６シクロアルキル基、フェニル基、ＨＥＴ３基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、
上記の項目（７）は、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、フェニル、ＨＥＴ４およびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記フェニル基、ＨＥＴ４基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、および
上記の項目（８）および項目（９）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ１〜４アルキル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、
ただし、Ｙが−Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）ｋ−であるとき、Ｒ６はハロまたはシアノでない；または、
Ｒ６および１つのＲ５基または２つのＲ５基は一緒になって、Ｏ、ＳまたはＮ（Ｒ７）からなる群から選択される１個または２個のヘテロ原子を場合により含有する５員または６員の単環状の環を形成することができる；
それぞれのＲ７は独立して水素またはＣ１〜４アルキルであり、前記Ｃ１〜４アルキル基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換される；
ＨＥＴ１、ＨＥＴ２、ＨＥＴ３およびＨＥＴ４はそれそれが独立して、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾピラゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾオキサゾリル、カルバゾリル、カルボリニル、シンノリニル、フラニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、インドラジニル、インダゾリル、イソベンゾフラニル、イソインドリル、イソキノリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリドピリジニル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジル、ピロリル、キナゾリニル、キノリル、キノキサリニル、チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル、トリアゾリル、アゼチジニル、１，４−ジオキサニル、ヘキサヒドロアゼピニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ジヒドロベンゾイミダゾリル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾチオフェニル、ジヒドロベンゾオキサゾリル、ジヒドロフラニル、ジヒドロイミダゾリル、ジヒドロインドリル、ジヒドロイソオキサゾリル、ジヒドロイソチアゾリル、ジヒドロオキサジアゾリル、ジヒドロオキサゾリル、ジヒドロピラジニル、ジヒドロピラゾリル、ジヒドロピリジニル、ジヒドロピリミジニル、ジヒドロピロリル、ジヒドロキノリニル、ジヒドロテトラゾリル、ジヒドロチアジアゾリル、ジヒドロチアゾリル、ジヒドロチエニル、ジヒドロトリアゾリル、ジヒドロアゼチジニル、メチレンジオキシベンゾイル、テトラヒドロフラニルおよびテトラヒドロチエニルからなる群から選択される。
【００１８】
本発明の実施態様には、ｎが０である式Ｉの化合物が含まれる。
【００１９】
本発明の別の実施態様には、ｎが１である式Ｉの化合物が含まれる。
【００２０】
本発明の別の実施態様には、Ｒ３が水素またはメチルである式Ｉの化合物が含まれる。
【００２１】
本発明の別の実施態様には、１つのＲ４が存在し、前記Ｒ４がハロまたはメチルである式Ｉの化合物が含まれる。
【００２２】
本発明の別の実施態様には、Ｒ５が存在しない式Ｉの化合物が含まれる。
【００２３】
本発明の別の実施態様には、Ｒ６が、
（１）Ｃ１〜１０アルキル、
（２）Ｃ２〜１０アルケニル、
（３）Ｃ３〜１０アルキニル、
（４）Ｃ３〜６シクロアルキル、
（５）フェニル、および
（６）ＨＥＴ２
からなる群から選択され、
ただし、上記の項目（１）から項目（３）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ３〜６シクロアルキル、フェニル、ＨＥＴ３およびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ３〜６シクロアルキル基、フェニル基、ＨＥＴ３基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、
上記の項目（４）は、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、フェニル、ＨＥＴ４およびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記フェニル基、ＨＥＴ４基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、および
上記の項目（５）および項目（６）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ１〜４アルキル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換される、
式Ｉの化合物が含まれる。
【００２４】
本発明のこの実施態様には、Ｒ６が、
（１）Ｃ１〜１０アルキル、
（２）Ｃ２〜１０アルケニル、
（３）Ｃ３〜１０アルキニル、
（４）Ｃ３〜６シクロアルキル、および
（５）フェニル
からなる群から選択され、
ただし、上記の項目（１）から項目（３）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ３〜６シクロアルキル、フェニルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ３〜６シクロアルキル基、フェニル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、
上記の項目（４）は、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、フェニルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記フェニル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、および
上記の項目（５）は、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ１〜４アルキル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換される、
式Ｉの化合物が含まれる。
【００２５】
別の実施態様において、本発明は、下記の式Ｉａを有する化合物またはその医薬適合性の塩もしくは溶媒和物を包含する：
【００２６】
【化６】
2005533058.tif 000007
式中、
ｎは０または１である；
Ｙは結合または−Ｏ−である；
Ｒ６は、
（１）Ｃ１〜１０アルキル、
（２）Ｃ２〜１０アルケニル、
（３）Ｃ３〜１０アルキニル、
（４）Ｃ３〜６シクロアルキル
（５）フェニル、および
（６）ＨＥＴ２
からなる群から選択され、
ただし、上記の項目（１）から項目（３）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ３〜６シクロアルキル、フェニル、ＨＥＴ３およびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ３〜６シクロアルキル基、フェニル基、ＨＥＴ３基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、
上記の項目（４）は、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、フェニル、ＨＥＴ４およびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記フェニル基、ＨＥＴ４基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、および
上記の項目（５）および項目（６）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ１〜４アルキル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換される；および、
ＨＥＴ２、ＨＥＴ３およびＨＥＴ４はそれそれが独立して、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾピラゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾオキサゾリル、カルバゾリル、カルボリニル、シンノリニル、フラニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、インドラジニル、インダゾリル、イソベンゾフラニル、イソインドリル、イソキノリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリドピリジニル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジル、ピロリル、キナゾリニル、キノリル、キノキサリニル、チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル、トリアゾリル、アゼチジニル、１，４−ジオキサニル、ヘキサヒドロアゼピニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ジヒドロベンゾイミダゾリル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾチオフェニル、ジヒドロベンゾオキサゾリル、ジヒドロフラニル、ジヒドロイミダゾリル、ジヒドロインドリル、ジヒドロイソオキサゾリル、ジヒドロイソチアゾリル、ジヒドロオキサジアゾリル、ジヒドロオキサゾリル、ジヒドロピラジニル、ジヒドロピラゾリル、ジヒドロピリジニル、ジヒドロピリミジニル、ジヒドロピロリル、ジヒドロキノリニル、ジヒドロテトラゾリル、ジヒドロチアジアゾリル、ジヒドロチアゾリル、ジヒドロチエニル、ジヒドロトリアゾリル、ジヒドロアゼチジニル、メチレンジオキシベンゾイル、テトラヒドロフラニルおよびテトラヒドロチエニルからなる群から選択される。
【００２７】
本発明のこの実施態様には、Ｒ６が、
（１）Ｃ１〜１０アルキル、
（２）Ｃ２〜１０アルケニル、
（３）Ｃ３〜１０アルキニル、
（４）Ｃ３〜６シクロアルキル、および
（５）フェニル
からなる群から選択され、
ただし、上記の項目（１）から項目（３）はそれぞれが、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ３〜６シクロアルキル、フェニルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ３〜６シクロアルキル基、フェニル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、
上記の項目（４）は、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、フェニルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記フェニル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換され、および
上記の項目（５）は、1から置換可能な位置の最大数までの、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜３アルコキシからなる群から独立して選択される置換基で場合により置換され、前記Ｃ１〜４アルキル基およびＣ１〜３アルコキシ基は、1から置換可能な位置の最大数までのハロで場合により置換される、
式Ｉの化合物が含まれる。
【００２８】
本発明はまた、ｎが０であり、Ｙが結合であり、および、Ｒ６がＣ１〜６アルキルである式Ｉの化合物を包含する。
【００２９】
本発明はまた、処置を必要としている哺乳動物患者における免疫調節異常を処置する方法であって、前記免疫調節異常を処置するために有効である量で請求項１に記載の化合物を前記患者に投与することを含む前記方法を包含する。
【００３０】
この実施態様には、免疫調節異常が、全身性エリテマトーデス、慢性リウマチ様関節炎、Ｉ型糖尿病、炎症性腸疾患、胆汁性肝硬変、ブドウ膜炎、多発性硬化症、クローン病、潰瘍性大腸炎、水疱性天疱瘡、類肉腫症、乾癬、自己免疫筋炎、ヴェーゲナー肉芽腫症、魚鱗癬、グレーブズ眼症および喘息からなる群から選択される自己免疫疾患または慢性炎症性疾患である上記方法が含まれる。
【００３１】
また、この実施態様には、免疫調節異常が、骨髄移植拒絶、臓器移植拒絶または移植片対宿主病である上記方法が含まれる。
【００３２】
また、この実施態様には、免疫調節異常が、臓器または組織の移植、移植によりもたらされる移植片対宿主病、自己免疫症候群（リウマチ様関節炎を含む）、全身性エリテマトーデス、橋本甲状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、Ｉ型糖尿病、ブドウ膜炎、後ブドウ膜炎、アレルギー性脳脊髄炎、糸球体腎炎、感染後自己免疫疾患（リウマチ熱および感染後糸球体腎炎を含む）、炎症性および過増殖性の皮膚疾患、乾癬、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、湿疹性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、扁平苔癬、天疱瘡、水疱性天疱瘡、表皮水疱症、じんま疹、血管浮腫、脈管炎、紅斑、皮膚好酸球増加症、エリテマトーデス、座瘡、円形脱毛症、角結膜炎、春季結膜炎、ベーチェット病に関連するブドウ膜炎、角膜炎、ヘルペス性角膜炎、円錐角膜、角膜上皮変性症、角膜白斑、眼性天疱瘡、モーレン潰瘍、強膜炎、グレーブズ眼症、フォークト−小柳−原田症候群、類肉腫症、花粉アレルギー、可逆性閉塞性気道疾患、気管支喘息、アレルギー性喘息、内因性喘息、外因性喘息、ダスト喘息、慢性的または常習性の喘息、晩発性喘息および気道過剰応答性、気管支炎、胃潰瘍、虚血性疾患および血栓症により生じる血管損傷、虚血性腸疾患、炎症性腸疾患、壊死性腸炎、火傷に関連する腸障害、セリアック病、直腸炎、好酸球性胃腸炎、脂肪細胞過剰増殖、クローン病、潰瘍性大腸炎、片頭痛、鼻炎、湿疹、間質性腎炎、グッドパスチャー症候群、溶血性尿毒症症候群、糖尿病性腎症、多発性筋炎、ギラン−バレー症候群、メニエール病、多発神経炎、多発性神経炎、単神経炎、神経根障害、甲状腺機能亢進症、バセドウ病、真性赤血球系無形成症、再生不良性貧血、低形成貧血、特発性血小板減少性紫斑症、自己免疫溶血性貧血、無顆粒球症、悪性貧血、巨赤芽球性貧血、赤血球生成欠如、骨粗鬆症、類肉腫症、線維化肺、特発性間質肺炎、皮膚筋炎、尋常性白斑、尋常性魚鱗癬、光アレルギー過敏性、皮膚型Ｔ細胞リンパ腫、動脈硬化、アテローム性動脈硬化、大動脈炎症候群、結節性動脈周囲炎、心筋症、強皮症、ヴェーゲナー肉芽腫症、シェーグレン症候群、脂肪症、好酸球性筋膜炎、歯肉の障害、歯周の障害、歯槽骨の障害、セメント質の障害、糸球体腎炎、脱毛を妨げるか、あるいは発毛の提供ならびに／または発毛および毛髪成長の促進を妨げることによる男性型脱毛症または老年性脱毛症、筋ジストロフィー、膿疱性皮膚症およびセザリー症候群、アジソン病、保存または移植または虚血性疾患のときに生じる臓器の虚血−再潅流傷害、エンドトキシンショック、偽膜性大腸炎、薬物または放射線により生じる大腸炎、虚血性急性腎不全、慢性腎不全、肺−酸素または薬物により生じる中毒症、肺ガン、肺気腫、白内障、鉄症、色素性網膜炎、老年性黄斑変性、硝子体瘢痕形成、角膜アルカリ火傷、多形滲出性紅斑皮膚炎、線状ＩｇＡバロウス（ｂａｌｌｏｕｓ）皮膚炎およびセメント皮膚炎、歯肉炎、歯周炎、敗血症、膵炎、環境汚染により生じる疾患、老化により生じる疾患、発ガン性により生じる疾患、ガン腫の転移により生じる疾患、高山病により生じる疾患、ヒスタミンまたはロイコトリエン−Ｃ４の放出により生じる疾患、ベーチェット病、自己免疫肝炎、原発性胆汁性肝硬変、硬化性胆管炎、部分的肝臓切除、急性肝臓壊死、毒素またはウイルス性肝炎またはショックまたは無酸素症により生じる壊死、Ｂ型ウイルス肝炎、非Ａ／非Ｂ肝炎、肝硬変、アルコール性肝硬変、肝不全、劇症肝不全、遅発型肝不全、「急性型慢性」肝不全、化学療法作用の増強、サイトメガロウイルス感染、ＨＣＭＶ感染、ＡＩＤＳ、ガン、老年性痴呆、外傷、および慢性細菌感染からなる群から選択される上記方法が含まれる。
【００３３】
この実施態様にはまた、免疫調節異常が多発性硬化症である上記方法が含まれる。
【００３４】
この実施態様にはまた、免疫調節異常がリウマチ様関節炎である上記方法が含まれる。
【００３５】
この実施態様にはまた、免疫調節異常が全身性エリテマトーデスである上記方法が含まれる。
【００３６】
この実施態様にはまた、免疫調節異常が乾癬である上記方法が含まれる。
【００３７】
この実施態様にはまた、免疫調節異常が移植臓器または移植組織の拒絶である上記方法が含まれる。
【００３８】
この実施態様にはまた、免疫調節異常が炎症性腸疾患である上記方法が含まれる。
【００３９】
この実施態様にはまた、免疫調節異常が、急性および慢性のリンパ性白血病およびリンパ腫を含むリンパ系起源の悪性腫瘍である上記方法が含まれる。
【００４０】
本発明はまた、免疫抑制を必要としている哺乳動物患者における免疫系を抑制する方法であって、式Ｉの化合物の免疫抑制有効量を前記患者に投与することを含む前記方法を包含する。
【００４１】
本発明はまた、医薬適合性のキャリアとの組合せで式Ｉの化合物から構成される医薬組成物を包含する。
【００４２】
本発明はまた、処置を必要としている哺乳動物患者における呼吸器の疾患または状態を処置する方法であって、前記の呼吸器の疾患または状態を処置するために有効である量で式Ｉの化合物を前記患者に投与することを含む前記方法を包含する。この実施態様には、呼吸器の疾患または状態が、喘息、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、成人呼吸窮迫性症候群、乳児呼吸窮迫性症候群、咳、好酸球性肉芽腫、呼吸器合包体ウイルス細気管支炎、気管支拡張症、特発性肺線維症、急性肺傷害および閉塞性細気管支炎器質化肺炎からなる群から選択される上記方法が含まれる。
【００４３】
別の実施態様において、本発明は、処置を必要としている哺乳動物患者における免疫調節異常を処置する方法であって、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体のアゴニストである化合物を、前記免疫調節異常を処置するために有効である量で前記患者に投与することを含み、前記化合物が、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイで評価された場合、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対するＥＣ５０とＳ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体に対するＥＣ５０との比率により判定されたとき、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体よりもＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対して少なくとも５，０００倍の選択性を有し、および、前記化合物が、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイにより評価された場合、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対する結合について１００ｎＭ以下のＥＣ５０を有する前記方法を包含する。
【００４４】
この実施態様には、前記化合物が、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイにより評価された場合、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対する結合について１０ｎＭ以下のＥＣ５０を有する上記方法が含まれる。
【００４５】
この実施態様にはまた、前記化合物が、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイにより評価された場合、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対する結合について１ｎＭ以下のＥＣ５０を有する上記方法が含まれる。
【００４６】
この実施態様にはまた、前記化合物が、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイで評価された場合、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対するＥＣ５０とＳ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体に対するＥＣ５０との比率により判定されたとき、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体よりもＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対して少なくとも１０，０００倍の選択性を有する上記方法が含まれる。
【００４７】
この実施態様にはまた、前記化合物が、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイで評価された場合、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対するＥＣ５０とＳ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体に対するＥＣ５０との比率により判定されたとき、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体よりもＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対して少なくとも１５，０００倍の選択性を有する上記方法が含まれる。
【００４８】
この実施態様にはまた、前記化合物が、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイで評価された場合、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対するＥＣ５０とＳ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体に対するＥＣ５０との比率により判定されたとき、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体よりもＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対して少なくとも２０，０００倍の選択性を有する上記方法が含まれる。
【００４９】
この実施態様にはまた、前記患者がまた呼吸器の疾患または状態を有する上記方法が含まれる。
【００５０】
この実施態様にはまた、前記患者がまた心臓血管の疾患または状態を患っている上記方法が含まれる。
【００５１】
本発明を例示するものには、下記の化合物がある：
【００５２】
【表２】
2005533058.tif 000008
2005533058.tif 000009
2005533058.tif 000010
2005533058.tif 000011
2005533058.tif 000012
2005533058.tif 000013
2005533058.tif 000014
【００５３】
本発明は、別途示されない限り、下記の定義を使用して記載される。
【００５４】
用語「ハロゲン」または用語「ハロ」は、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩを示す。
【００５５】
用語「アルキル」は、示された数の炭素原子を有する直鎖状構造または分枝状構造およびそれらの組合せを意味する。従って、例えば、Ｃ１〜６アルキルには、メチル、エチル、プロピル、２−プロピル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、１，１−ジメチルエチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが含まれる。
【００５６】
用語「アルコキシ」は、示された数の炭素原子を有する直鎖状形態または分枝状形態または環状形態のアルコキシ基を意味する。例えば、Ｃ１〜６アルコキシには、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシなど含まれる。
【００５７】
用語「アルケニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する、示された数の炭素原子の直鎖状構造または分枝状構造およびそれらの組合せを意味し、この場合、水素はさらなる炭素−炭素二重結合によって置換され得る。例えば、Ｃ２〜６アルケニルには、エテニル、プロペニル、１−メチルエテニル、ブテニルなどが含まれる。
【００５８】
用語「アルキニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有する、示された数の炭素原子の直鎖状構造または分枝状構造およびそれらの組合せを意味する。例えば、Ｃ３〜６アルキニルには、プロペニル、１−メチルエテニル、ブテニルなどが含まれる。
【００５９】
用語「シクロアルキル」は、示された数の炭素原子を有する、直鎖状構造または分枝状構造と場合により組み合わせられている単環構造または二環構造または三環構造を意味する。シクロアルキル基の例には、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘプチル、アダマンチル、シクロドデシルメチル、２−エチル−１−ビシクロ［４．４．０］デシルなどが含まれる。
【００６０】
用語「処置する」は、疾患または状態の徴候および症状を有する患者を緩和させるために患者を処置することだけでなく、疾患または状態の発症または進行を防止するために無症候患者を予防的に処置することもまた包含する。用語「処置するために効果的な量」は、研究者、獣医、医師または他の臨床家によって求められている組織、系、動物またはヒトの生物学的応答または医学的応答を誘発させる、薬物または医薬剤のそのような量を意味することが意図される。この用語はまた、研究者、獣医、医師または他の臨床家によって、組織、系、動物またはヒトにおいて防止することが求められている生物学的事象または医学的事象が生じる危険性を防止または低下させる医薬用薬物の量を包含する。
【００６１】
本明細書中に記載される本発明には、医薬適合性の塩および水和物が含まれる。医薬適合性の塩には、金属（無機）塩および有機塩の両方が含まれ、それらのリストがＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（第１７版、１４１８頁、１９８５年）に示されている。適切な塩形態が、物理的安定性および化学的安定性、流動性、吸湿性および溶解性に基づいて選ばれることが当業者には広く知られている。当業者によって理解されるように、医薬適合性の塩には、無機酸の塩、例えば、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、二リン酸塩、臭化水素酸塩および硝酸塩など、あるいは、有機酸の塩、例えば、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩またはパモ酸塩、サリチル酸塩およびステアリン酸塩などが含まれるが、これらに限定されない。同様に医薬適合性のカチオンには、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アルミニウム、リチウムおよびアンモニウム（特に、第二級アミンとのアンモニウム塩）が含まれるが、これらに限定されない。上記に示された理由から本発明の好ましい塩には、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩およびアンモニウム塩が含まれる。本発明の範囲内にはまた、式Ｉの化合物の様々な結晶形態、水和物および溶媒和物が含まれる。
【００６２】
本明細書の目的のために、「医薬適合性の水和物」は、１分子または２分子以上の水と一緒に結晶化して、水和した形態を形成する本発明の化合物を意味する。
【００６３】
本発明はまた、１つ以上の立体異性体の形態、実質的に純粋な形態、または立体異性体の混合物の形態にある、式Ｉに含まれる化合物を包含する。そのような異性体のすべてが本発明に含まれる。
【００６４】
そのＳ１Ｐ１／Ｅｇｄ１アゴニスト活性によって、本発明の化合物は、自己免疫疾患または慢性炎症性疾患を処置または防止するために有用な免疫調節剤である。本発明の化合物は、免疫抑制が正常な状態にある場合において、例えば、骨髄、臓器または移植片の拒絶において、また、全身性エリテマトーデス、慢性リウマチ様関節炎、Ｉ型糖尿病、炎症性腸疾患、胆汁性肝硬変、ブドウ膜炎、多発性硬化症、クローン病、潰瘍性大腸炎、水疱性天疱瘡、類肉腫症、乾癬、自己免疫筋炎、ヴェーゲナー肉芽腫症、魚鱗癬、グレーブズ眼症および喘息を含む自己免疫疾患および慢性炎症性疾患などにおいて、免疫系を抑制するために有用である。
【００６５】
より詳細には、本発明の化合物は、臓器または組織の移植、移植によりもたらされる移植片対宿主病、自己免疫症候群、（リウマチ様関節炎を含む）、全身性エリテマトーデス、橋本甲状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、Ｉ型糖尿病、ブドウ膜炎、後ブドウ膜炎、アレルギー性脳脊髄炎、糸球体腎炎、感染後自己免疫疾患（リウマチ熱および感染後糸球体腎炎を含む）、炎症性および過増殖性の皮膚疾患、乾癬、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、湿疹性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、扁平苔癬、天疱瘡、水疱性天疱瘡、表皮水疱症、じんま疹、血管浮腫、脈管炎、紅斑、皮膚好酸球増加症、エリテマトーデス、座瘡、円形脱毛症、角結膜炎、春季結膜炎、ベーチェット病に関連するブドウ膜炎、角膜炎、ヘルペス性角膜炎、円錐角膜、角膜上皮変性症、角膜白斑、眼性天疱瘡、モーレン潰瘍、強膜炎、グレーブズ眼症、フォークト−小柳−原田症候群、類肉腫症、花粉アレルギー、可逆性閉塞性気道疾患、気管支喘息、アレルギー性喘息、内因性喘息、外因性喘息、ダスト喘息、慢性的または常習性の喘息、晩発性喘息および気道過剰応答性、気管支炎、胃潰瘍、虚血性疾患および血栓症により生じる血管損傷、虚血性腸疾患、炎症性腸疾患、壊死性腸炎、火傷に関連する腸障害、セリアック病、直腸炎、好酸球性胃腸炎、脂肪細胞過剰増殖、クローン病、潰瘍性大腸炎、片頭痛、鼻炎、湿疹、間質性腎炎、グッドパスチャー症候群、溶血性尿毒症症候群、糖尿病性腎症、多発性筋炎、ギラン−バレー症候群、メニエール病、多発神経炎、多発性神経炎、単神経炎、神経根障害、甲状腺機能亢進症、バセドウ病、真性赤血球系無形成症、再生不良性貧血、低形成貧血、特発性血小板減少性紫斑症、自己免疫溶血性貧血、無顆粒球症、悪性貧血、巨赤芽球性貧血、赤血球生成欠如、骨粗鬆症、類肉腫症、線維化肺、特発性間質肺炎、皮膚筋炎、尋常性白斑、尋常性魚鱗癬、光アレルギー過敏性、皮膚型Ｔ細胞リンパ腫、動脈硬化、アテローム性動脈硬化、大動脈炎症候群、結節性動脈周囲炎、心筋症、強皮症、ヴェーゲナー肉芽腫症、シェーグレン症候群、脂肪症、好酸球性筋膜炎、歯肉の障害、歯周の障害、歯槽骨の障害、セメント質の障害、糸球体腎炎、脱毛を妨げるか、あるいは発毛の提供ならびに／または発毛および毛髪成長の促進を妨げることによる男性型脱毛症または老年性脱毛症、筋ジストロフィー、膿疱性皮膚症およびセザリー症候群、アジソン病、保存または移植または虚血性疾患のときに生じる臓器の虚血−再潅流傷害、エンドトキシンショック、偽膜性大腸炎、薬物または放射線により生じる大腸炎、虚血性急性腎不全、慢性腎不全、肺−酸素または薬物により生じる中毒症、肺ガン、肺気腫、白内障、鉄症、色素性網膜炎、老年性黄斑変性、硝子体瘢痕形成、角膜アルカリ火傷、多形滲出性紅斑皮膚炎、線状ＩｇＡバロウス（ｂａｌｌｏｕｓ）皮膚炎およびセメント皮膚炎、歯肉炎、歯周炎、敗血症、膵炎、環境汚染により生じる疾患、老化により生じる疾患、発ガン性により生じる疾患、ガン腫の転移により生じる疾患、高山病により生じる疾患、ヒスタミンまたはロイコトリエン−Ｃ４の放出により生じる疾患、ベーチェット病、自己免疫肝炎、原発性胆汁性肝硬変、硬化性胆管炎、部分的肝臓切除、急性肝臓壊死、毒素またはウイルス性肝炎またはショックまたは無酸素症により生じる壊死、Ｂ型ウイルス肝炎、非Ａ／非Ｂ肝炎、肝硬変、アルコール性肝硬変、肝不全、劇症肝不全、遅発型肝不全、「急性型慢性」肝不全、化学療法作用の増強、サイトメガロウイルス感染、ＨＣＭＶ感染、ＡＩＤＳ、ガン、老年性痴呆、外傷、および慢性細菌感染からなる群から選択される疾患または状態を処置または防止するために有用である。
【００６６】
本発明は、また、その必要性のある哺乳動物患者における臓器または組織の移植に対する抵抗性または移植拒絶を防止または処置する方法であって、式Ｉの化合物の治療上有効な量を投与することを含む前記方法が包含される。
【００６７】
必要性のある哺乳動物患者における免疫系を抑制する方法であって、式Ｉの化合物の免疫系抑制量を前記患者に投与することを含む前記方法はさらに別の実施態様である。
【００６８】
最も具体的には、本明細書中に記載される方法には、骨髄移植片拒絶または臓器移植片拒絶を処置または防止する方法であって、そのような処置または防止を必要としている哺乳動物患者に、式Ｉの化合物またはその医薬適合性の塩もしくは水和物を、骨髄移植片拒絶または臓器移植片拒絶を処置または防止するために有効である量で投与することから構成される前記方法が包含される。
【００６９】
本発明の化合物はまた、喘息、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、成人呼吸窮迫性症候群、乳児呼吸窮迫性症候群、咳、好酸球性肉芽腫、呼吸器合包体ウイルス細気管支炎、気管支拡張症、特発性肺線維症、急性肺傷害および閉塞性細気管支炎器質化肺炎などの呼吸器の疾患または状態を処置するために有用である。
【００７０】
さらに、本発明の化合物は、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体を上回る選択性を有する、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体の選択的アゴニストである。Ｅｄｇ１選択的アゴニストは、現在の治療法を上回る様々な利点を有しており、また、リンパ球隔離剤の治療範囲を広げ、これにより、より大きい服薬に関してより良好な寛容性を可能にし、従って、単独療法としての効力を改善する。
【００７１】
本発明にはまた、医薬適合性のキャリアと、式Ｉの化合物またはその医薬適合性の塩もしくは水和物とを含む医薬配合物が含まれる。この配合物の好ましい実施態様は、第２の免疫抑制剤もまた含まれる配合物である。そのような第２の免疫抑制剤の例には、アザチオプリン、ブレキナルナトリウム、デオキシスペルグアリン、ミザリビン、ミコフェノール酸モルホリノエステル、シクロスポリン、ＦＫ−５０６、ラパマイシンおよびＦＴＹ７２０があるが、これらに限定されない。
【００７２】
本発明の化合物は、その塩および水和物を含めて、骨髄移植片の拒絶、外来臓器移植片および／または関連した苦痛、疾患および病気を防止することを含む、自己免疫疾患の処置において有用である。
【００７３】
本発明の化合物は、有効成分化合物と、温血動物の体内での作用部位との接触をもたらす任意の手段によって投与することができる。例えば、投与は、経口的、局所的（経皮的を含む）、眼内、口内、鼻孔内、吸入、膣内、直腸的、槽内および非経口的であり得る。本明細書中で使用される用語「非経口的」は、皮下、静脈内、筋肉内、動脈内への注射または注入、胸骨内および腹腔内を含む投与様式を示す。
【００７４】
本発明の化合物は、個々の治療剤として、または治療剤の組合せでのいずれかで医薬品と一緒の使用のために利用することができる任意の従来の手段によって投与することができる。本発明の化合物は単独で投与することができ、しかし、一般には、選ばれた投与経路および標準的な薬学的実施に基づいて選択された医薬用キャリアとともに投与される。
【００７５】
投与される投薬量は、被投与者の年齢、健康状態および体重、疾患の程度、同時処置の種類（存在する場合）、処置頻度、ならびに所望される効果の性質に依存する。通常的には、有効成分化合物の１日投薬量は１日あたり約０．１ミリグラムから２０００ミリグラムである。たいていの場合、１回または２回以上の適用での１日あたり約１ミリグラムから１００ミリグラムが、所望する結果を得るために有効である。これらの投薬量は、自己免疫疾患の処置、外来臓器移植片の拒絶および／または関連した苦痛の防止、疾患および病気のための有効な量である。
【００７６】
有効成分は、カプセル剤、錠剤、トローチ剤、糖衣錠、顆粒剤および粉末剤などの固体の投薬形態物で、または、エリキシル剤、シロップ剤、エマルション剤、分散物および懸濁物などの液体の投薬形態物で経口投与することができる。有効成分はまた、分散物、懸濁物または溶液などの滅菌された液体投薬形態物で非経口的に投与することができる。他の投薬形態物もまた、軟膏、クリーム、滴剤、経皮パッチまたは局所投与用粉末剤として、眼に投与される眼用の溶液配合物または懸濁物配合物（すなわち、点眼剤）として、吸入または鼻腔内投与のためのエアロゾルスプレー組成物または粉末組成物として、あるいは、直腸投与または膣投与のためのクリームまたは軟膏または坐薬として、有効成分を投与するために使用することができる。
【００７７】
ゼラチンカプセル剤は有効成分および粉末化されたキャリア（例えば、ラクトース、デンプン、セルロース誘導体、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸など）を含有する。類似する希釈剤を、圧縮成形された錠剤を作製するために使用することができる。錠剤およびカプセル剤はともに、長時間にわたる医薬品の連続した放出を提供するために持続放出製造物として製造することができる。圧縮成形された錠剤は、何らかの不快な味を隠し、または、錠剤を雰囲気から保護するために糖またはフィルムで被覆することができ、あるいは、胃腸管における選択的な崩壊のために腸溶性被覆することができる。
【００７８】
経口投与される液体の投薬形態物は、患者の受け入れを増大させるために着色剤および矯味矯臭剤を含有することができる。
【００７９】
一般には、水、好適なオイル、生理的食塩水、デキストロース（グルコース）水溶液、および関連した糖溶液、およびグリコール（例えば、プロピレングリコールまたはポリエチレングリコールなど）が、非経口用溶液のための好適なキャリアである。非経口投与のための溶液は、好ましくは、有効成分の水溶性塩、好適な安定化剤、および必要な場合には緩衝剤物質を含有する。酸化防止剤、例えば、重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムまたはアスコルビン酸などは、単独または組合せのいずれでも、好適な安定化剤である。クエン酸およびその塩ならびにナトリウムＥＤＴＡもまた使用される。さらに、非経口用溶液は保存剤（例えば、塩化ベンザルコニウム、メチルパラベンまたはプロピルパラベン、およびクロロブタノールなど）を含有することができる。
【００８０】
好適な医薬用キャリアが、この分野における標準的な参考テキストであるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ａ．Ｏｓｏｌ）に記載されている。
【００８１】
吸入による投与の場合、本発明の化合物は、加圧パックまたはネブライザーからのエアロゾルスプレー提示物の形態で都合よく送達することができる。本発明の化合物はまた、配合され得る粉末剤として送達することができ、その粉末組成物を、吹入粉末吸入器デバイスの助けをかりて吸入することができる。吸入のための好ましい送達システムは計量用量吸入（ＭＤＩ）エアロゾルであり、これは、好適な噴射剤（例えば、フルオロカーボンまたは炭化水素など）における式Ｉの化合物の懸濁物または溶液として配合され得る。
【００８２】
眼投与の場合、眼用の調製物を、化合物が眼の角膜領域および内部領域に浸透することを可能するために十分な時間にわたって化合物が眼の表面との接触状態で維持されるように、適切な眼用ビヒクルにおける式Ｉの化合物の適切な重量パーセントの溶液または懸濁物とともに配合することができる。
【００８３】
本発明の化合物を投与するための有用な医薬用投薬形態物が下記に例示され得る：
カプセル剤
非常に多数の単位カプセル剤が、標準的な２片型硬ゼラチンカプセルにそれぞれ、１００ミリグラムの粉末化された有効成分、１５０ミリグラムのラクトース、５０ミリグラムのセルロースおよび６ミリグラムのステアリン酸マグネシウムを充填することによって調製される。
【００８４】
軟ゼラチンカプセル剤
消化可能なオイル（例えば、ダイズ油、綿実油またはオリーブ油など）における有効成分の混合物が調製され、容積式ポンプによってゼラチンに注入されて、１００ミリグラムの有効成分を含有する軟ゼラチンカプセル剤が形成される。カプセル剤は洗浄および乾燥される。
【００８５】
錠剤
非常に多数の錠剤が、投薬量単位が１００ミリグラムの有効成分、０．２ミリグラムのコロイド状二酸化ケイ素、５ミリグラムのステアリン酸マグネシウム、２７５ミリグラムの微結晶セルロース、１１ミリグラムのデンプンおよび９８．８ミリグラムのラクトースであるように、従来の手順によって調製される。適切な被覆を、嗜好性または遅延吸収を増大させるために施すことができる。
【００８６】
注射剤
注射による投与のために好適な非経口用組成物が、１．５重量％の有効成分を１０容量％のプロピレングリコールにおいて撹拌することによって調製される。この溶液は、注射用水で所定の体積にされ、滅菌される。
【００８７】
懸濁物
水性懸濁物が、各５ミリリットルに、１００ミリグラムの微粉砕された有効成分、１００ミリグラムのナトリウムカルボキシメチルセルロース、５ミリグラムの安息香酸ナトリウム、１．０グラムのソルビトール溶液（米国薬局方）および０．０２５ミリリットルのバニリンが含まれるように、経口投与のために調製される。
【００８８】
本発明の化合物が徐々に投与されるか、または別の治療剤と一緒に投与されるとき、同じ投薬形態物を一般には使用することができる。薬物が物理的組合せで投与されるとき、投薬形態物および投与経路は、組み合わせられた薬物の適合性に依存して選択されなければならない。従って、同時投与という用語は、２つの薬剤を同時に、または連続して、または、２つの活性な成分の一定の用量組合せとして交互に投与することを含むことが理解される。
【００８９】
合成方法
本発明において化合物を調製するために用いることができる２つの一般的な方法がスキーム１に示される。中間体ｉは、市販元から入手できる場合があり（例えば、アゼチジン−３−カルボン酸［この場合、ｎ＝０］）、または、発表された手順に従って調製することができる（例えば、ピロリジン−３−（Ｒ）−カルボン酸およびピロリジン−３−（Ｓ）−カルボン酸（ｎ＝１）の代表的な合成がＧｍｅｉｎｅｒ，Ｏ．他によりＳｙｎｔｈｅｓｉｓ、１９９８、１４９１に記載される）。ｉを、適合し得る溶媒（例えば、メタノール、エタノール、アセトニトリル、塩化メチレン）中において適切な還元剤（例えば、シアノホウ水素化ナトリウム、トリアセトキシホウ水素化ナトリウム、ホウ水素化ナトリウム）の存在下でアルデヒドｉｉと結合させることにより、式Ｉの化合物を得ることができる。あるいは、中間体ｉを、室温または室温以上で、適合し得る溶媒（例えば、メタノール、エタノール、アセトニトリル）中において適切な塩基（例えば、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）の存在下でベンジルハリドまたはスルホン酸エステルｉｖと結合させて、式Ｉの化合物を得ることができる。構造ｉにおけるカルボン酸が式Ｉの化合物への変換を妨害する場合、そのカルボン酸をマスクし、ｉｉまたはｉｖのいずれかとのカップリングの後でのその分離を可能にする適切な保護基（Ｇｒｅｅｎｅ＆Ｗｕｔｓ編、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、Ｉｎｃ．）を用いることができる。式Ｉが不斉中心を含有する場合、式Ｉの個々の立体異性体を、立体特異的合成、エナンチオ純粋な酸または塩基を用いた式Ｉの塩の分割またはその調製で使用された中間体のいずれかの分割、エナンチオ純粋な固定相を用いるＨＰＬＣによる式Ｉの分割またはその調製で使用された中間体のいずれかの分割（これらに限定されない）を含む、当業者に知られている様々な方法によって得ることができる。
【００９０】
【化７】
2005533058.tif 000015
上記スキーム１における中間体ｉｉとして用いられ得る化合物を調製するために使用することができる方法がスキーム２に示される。多くのベンゾニトリル系化合物ｖが市販されており、これらは、室温または室温以上で、適切な溶媒（メタノール、エタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）中において、中和する塩基（例えば、トリエチルアミン、重炭酸ナトリウム）の存在下でヒドロキシルアミン・ＨＣｌと結合させて、Ｎ−ヒドロキシベンズアミジン系化合物ｖｉを得ることができる。安息香酸系化合物ｖｉｉを、適切な溶媒（アセトニトリル、ＴＨＦ、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）中においてカルボジイミド（例えば、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド）および１−（ヒドロキシ）ベンゾトリアゾールで活性化し、その後、室温または室温以上でｖｉで処理して、１，２，４−オキサジアゾール系化合物ｖｉｉｉを得ることができる。安息香酸系化合物ｖｉｉを活性化するための代わりの方法は、（例えば、好適な溶媒中において、チオニルクロリドの存在下でｖｉｉを加温することによって、またはオキサリルクロリドおよび触媒的なＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドでｖｉｉを処理することによって）安息香酸系化合物ｖｉｉを対応するベンゾイルクロリドに変換することである。中間体ｉｉは、その後、ｖｉｉｉにおけるＡをアルデヒド（Ｒ３＝Ｈ）またはケトンに変換することによって得られる。Ａがアルコール、カルボン酸エステル、アセタール、ヘミアセタール、ニトリルまたはＮ−アルコキシ−Ｎ−アルキルカルボキサミドである場合、これは、当業者に知られている様々な方法を使用して行うことができる（Ｌａｒｏｃｋ、「Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｇｒｏｕｐ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ」（ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．）を参照のこと）。
【００９１】
【化８】
2005533058.tif 000016
中間体ｉｉを調製するために使用することができる安息香酸系化合物ｖｉｉの多くは市販元から入手することができる。安息香酸系化合物ｖｉｉを調製するために用いることができるいくつかの方法がスキーム３に示される。Ｒ６がアルキルであり、および、Ｙが−Ｏ−である場合、フェノールｘｉを、室温または室温以上で、好適な溶媒（例えば、ＴＨＦ、アセトニトリル、メタノール、エタノール）中において塩基（例えば、トリエチルアミン、重炭酸ナトリウム、炭酸カリウム）の存在下、アルキルハリドまたはアルキルスルホナートエステルで処理して、エーテルｘを得ることができる。フリーのカルボン酸はこの変換を妨害することがあるので、そのカルボン酸基がＢ（例えば、Ｂはカルボン酸エステル、アルデヒド、ニトリルなどであり得る）としてマスクされるｉｘを使用し、その後、続いて、Ｂを、当業者に知られている様々な方法（Ｌａｒｏｃｋ、「Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｇｒｏｕｐ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ」（ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．）を参照のこと）を使用してカルボン酸に変換することが望ましい場合がある。ｘ（および、従ってｘｉ）を調製するための代わりの方法は、ｉｘを、好適な溶媒（ＴＨＦ、ＣＨ２Ｃｌ２、トルエン）中において、アルコール、トリフェニルホスフィンおよびアゾジカルボン酸ジアルキル（例えば、アゾジカルボン酸ジエチルまたはアゾジカルボン酸ジイソプロピル）で処理して、ｘを得ることを伴い得る。ｘを調製するための別の方法は、好適な溶媒（ＴＨＦ、１，２−ジメトキシエタン）中においてアリールフルオリドｘｉｉをアルコールおよび強塩基（ＮａＨ、ＫＨ、リチウムジイソプロピルアミド）で処理して、ｘを得ることである。これらの方法はまた、Ｒ５のいずれかがアルコキシであることが望ましい場合、適用することができる。
【００９２】
多くの方法が、Ｒ６がアルキルであり、および、Ｙが結合である安息香酸系化合物ｖｉｉを調製するために有用である。１つの有用な方法がスキーム３に示される。アリールブロミド、アリールヨージドまたはアリールトリフラートｘｉｉｉを、好適な溶媒（ＴＨＦ、１，２−ジメトキシエタン）中においてニッケル触媒の存在下、臭化マグネシウムアルキルで処理することにより、アルキルベンゼンｘｉｖを得ることができる。フリーのカルボン酸はこの変換を妨害することがあるので、そのカルボン酸基がＢ（例えば、Ｂはニトリル、ビニル、アルデヒドアセタールなどであり得る）としてマスクされるｉｘを使用し、その後、続いて、Ｂを、当業者に知られている様々な方法（Ｌａｒｏｃｋ、「Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｇｒｏｕｐ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ」（ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．）を参照のこと）を使用してカルボン酸に変換することが望ましい場合がある。
【００９３】
【化９】
2005533058.tif 000017
本発明の化合物を調製するための様々な方法が下記の実施例においてさらに例示される。代わりの様々な経路がこの分野における実施者には容易に理解され得る。
【実施例】
【００９４】
概略
溶液の濃縮は、減圧下、ロータリーエバポレーターで行われた。従来のフラッシュクロマトグラフィーがシリカゲル（２３０〜４００メッシュ）で行われた。フラッシュクロマトグラフィーはまた、示されたサイズの充填済みカートリッジにおけるシリカゲル（３２〜６３ｍＭ、６０Åの細孔サイズ）で、Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｆｌａｓｈ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ装置（Ｄｙａｘ  Ｃｏｒｐ．）を使用して行われた。ＮＭＲスペクトルは、別途示されない限り、ＣＤＣｌ３溶液で得られた。カップリング定数（Ｊ）はヘルツ（Ｈｚ）単位である。略号：ジエチルエーテル（エーテル）、トリエチルアミン（ＴＥＡ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）、飽和水溶液（ｓａｔ’ｄ）、室温（ｒｔ）、時間（ｈ）、分（ｍｉｎ）。
【００９５】
ＨＰＬＣ条件
ＬＣ−１：Ｗａｔｅｒｓ  Ｘｔｅｒｒａ  ＭＳ  Ｃ１８、５μ、４．６ｘ５０ｍｍカラム、４．５分間での１０：９０〜９５：５（ｖ／ｖ）のＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ＋０．０５％ＴＦＡ、１分間の保持、ＰＤＡ検出：２００〜６００ｎｍ、流速＝２．５ｍＬ／分。
【００９６】
ＬＣ−２：ＹＭＣ−Ｐａｃｋ  Ｐｒｏ  Ｃ１８Ｓ−５μＭ  ２０ｘ１００ｍｍカラム、またはＫｒｏｍａｓｉｌ  ＫＲ１００−１０−Ｃ８  ２０ｘ１００ｍｍカラム；１２分間での１０：９０〜９０：１０（ｖ／ｖ）のＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ＋０．０５％ＴＦＡ、４分間の保持、２２０ｎＭまたは２５４ｎＭのいずれかでのＵＶ検出、流速＝１０ｍＬ／分。
【００９７】
（アルデヒド中間体の調製）
アルデヒド１
４−（５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
工程Ａ：Ｎ−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ベンズアミジン
２５．０ｇ（１５０ｍｍｏｌ）の４−（ヒドロキシメチル）ベンゾニトリル、２０．８ｇ（３００ｍｍｏｌ）のヒドロキシアミン塩酸塩および５０．４ｇ（６００ｍｍｏｌ）の重炭酸ナトリウムを２５０ｍＬのメタノールに含む溶液を加熱還流し、２０時間撹拌した。反応混合物をｒｔに冷却して、ろ過した。固体を１００ｍＬのメタノールで洗浄した。メタノール溶液を一緒にして濃縮乾固し、３１．０ｇ（９９％）の表題化合物を得た：１Ｈ  ＮＭＲ（４００Ｍｈｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ４．６３（ｓ，２Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝８．０，２Ｈ），７．６２（ｄ，Ｊ＝８．０，２Ｈ）。
【００９８】
工程Ｂ：４−（５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニルメタノール
１０．０ｇ（５６．２ｍｍｏｌ）の４−（２−メチルプロピル）安息香酸、１０．８ｇ（５６．２ｍｍｏｌ）の１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩および７．６ｇ（５６．２ｍｍｏｌ）の１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物を７０ｍＬのＤＭＦに含む溶液をｒｔで３０分間撹拌した。Ｎ−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ベンズアミジン（９．３ｇ、５６．２ｍｍｏｌ、工程Ａから得られたもの）をｒｔで反応混合物に加え、得られたスラリーを１４０℃でさらに２時間撹拌した。反応液をｒｔに冷却して、５０ｍＬの水で反応停止させた。水層を２００ｍＬの酢酸エチルで抽出した。有機層を、０．５ＮのＨＣｌ溶液、飽和ＮａＨＣＯ３溶液および水で洗浄し、濃縮乾固して、１６．５ｇの表題化合物を得た：１Ｈ  ＮＭＲ（４００Ｍｈｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ０．９５（ｄ，Ｊ＝６．７，６Ｈ），１．９６（ｍ，１Ｈ），２．６１（ｄ，Ｊ＝７．３，２Ｈ），７．４２（ｄ，Ｊ＝８．０，２Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝８．２，２Ｈ），８．１３（ｍ，４Ｈ）。
【００９９】
工程Ｃ：４−（５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
９．８ｍＬ（１１２．４ｍｍｏｌ）のオキサリルクロリドを３００ｍＬのジクロロメタンに含む溶液を、−７８℃で、１２ｍＬ（１６８．６ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯで処理した。この反応混合物に、−７８℃で、１６．５ｇの４−（５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニルメタノール（工程Ｂから得られたもの）を加え、その後、７８ｍＬ（４５０ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを加えた。反応混合物を１時間かけてｒｔに加温した。ジクロロメタンを減圧下で除き、残渣を酢酸エチルと０．５ＮのＫＨＳＯ４溶液との間で分配した。有機層を、１ＮのＨＣｌ溶液、飽和ＮａＨＣＯ３および水で洗浄し、濃縮乾固した。粗生成物をヘキサン（ｈｅｘａｎｅｓ）から再結晶して、１１．９ｇの表題化合物を得た：１Ｈ  ＮＭＲ（４００Ｍｈｚ）δ０．９７（ｄ，Ｊ＝６．７，６Ｈ），１．９７（ｍ，１Ｈ），２．６１（ｄ，Ｊ＝７．０，２Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝８．０，２Ｈ），８．０６（ｄ，Ｊ＝８．２，２Ｈ），８．１６（ｄ，Ｊ＝８．２，２Ｈ），８．３９（ｄ，Ｊ＝８．０，２Ｈ），１０．１４（ｓ，１Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ３０７（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．５分。
【０１００】
アルデヒド２
４−（５−（４−ブチルフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ｂにおいて４−（２−メチルプロピル）安息香酸の代わりに４−ブチル安息香酸を使用する、アルデヒド１と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３０７（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．６分。
【０１０１】
アルデヒド３
４−（５−（４−ヘキシルフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ｂにおいて４−（２−メチルプロピル）安息香酸の代わりに４−ヘキシル安息香酸を使用する、アルデヒド１と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３３５（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：５．０分。
【０１０２】
アルデヒド４
４−（５−（４−シクロヘキシルフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ｂにおいて４−（２−メチルプロピル）安息香酸の代わりに４−シクロヘキシル安息香酸を使用する、アルデヒド１と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３３３（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．８分。
【０１０３】
アルデヒド５
４−（５−（４−プロピルフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ｂにおいて４−（２−メチルプロピル）安息香酸の代わりに４−プロピル安息香酸を使用する、アルデヒド１と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ２９３（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．４分。
【０１０４】
アルデヒド６
４−（５−（４−イソプロポキシフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ｂにおいて４−（２−メチルプロピル）安息香酸の代わりに４−イソプロポキシ安息香酸を使用する、アルデヒド１と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３０９（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．０分。
【０１０５】
アルデヒド７
４−（５−（１，１’−ビフェニル−４−イル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ｂにおいて４−（２−メチルプロピル）安息香酸の代わりに１，１’−ビフェニル−４−カルボン酸を使用する、アルデヒド１と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３２７（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．３分。
【０１０６】
アルデヒド８
４−（５−（４−（２−フリル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ｂにおいて４−（２−メチルプロピル）安息香酸の代わりに４−（２−フリル）安息香酸を使用する、アルデヒド１と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３１７（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．１分。
【０１０７】
アルデヒド９
４−（５−（４−シクロペンチルフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ｂにおいて４−（２−メチルプロピル）安息香酸の代わりに４−シクロペンチル安息香酸を使用する、アルデヒド１と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３１９（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．６分。
【０１０８】
アルデヒド１０
（±）−４−（５−（４−（１−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ｂにおいて４−（２−メチルプロピル）安息香酸の代わりに（±）−４−（１−メチルプロピル）安息香酸を使用する、アルデヒド１と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３０７（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．５分。
【０１０９】
アルデヒド１１
４−（５−（４−（１，１−ジメチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ｂにおいて４−（２−メチルプロピル）安息香酸の代わりに４−（１，１−ジメチルプロピル）安息香酸を使用する、アルデヒド１と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３２１（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．６分。
【０１１０】
アルデヒド１２
４−（５−（４−（１，１−ジメチルエチル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ｂにおいて４−（２−メチルプロピル）安息香酸の代わりに４−（１，１−ジメチルエチル）安息香酸を使用する、アルデヒド１と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３０７（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．４分。
【０１１１】
アルデヒド１３
４−（５−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ｂにおいて４−（２−メチルプロピル）安息香酸の代わりに４−（トリフルオロメチル）安息香酸を使用する、アルデヒド１と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３１９（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：３．９分。
【０１１２】
アルデヒド１４
４−（５−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ｂにおいて４−（２−メチルプロピル）安息香酸の代わりに２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−カルボン酸を使用する、アルデヒド１と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ２９３（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：３．５分。
【０１１３】
アルデヒド１５
４−（５−（４−（２，２−ジメチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
工程Ａ：４−（２，２−ジメチルプロピル）−４−エテニルベンゼン
０．８ｇ（３３．１０ｍｍｏｌ）のマグネシウム削り屑および２．０ｇ（１３．２ｍｍｏｌ）の１−ブロモ−２，２−ジメチルプロパンを１０ｍＬのジエチルエーテルに含む溶液に、１．４２ｇ（７．７６ｍｍｏｌ）の４−ブロモスチレンおよび６９ｍｇ（０．１３ｍｍｏｌ）のＮｉ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２の溶液を加えた。得られた反応混合物を８時間にわたって加熱還流した。反応液を５０％飽和ＮＨ４Ｃｌで反応停止させ、ＭＴＢＥで抽出した（１５０ｍＬで２回）。抽出液を一緒にして、水で洗浄し、乾燥し、濃縮した。ヘキサン（ｈｅｘａｎｅｓ）を溶出液としたＢｉｏｔａｇｅ４０Ｍカートリッジでのフラッシュクロマトグラフィーにより、１．７４ｇの表題化合物を得た：ｌＨ  ＮＭＲ（５００Ｍｈｚ）δ０．９３（ｓ，９Ｈ），２．４９（ｓ，２Ｈ），５．２０（ｄ，Ｊ＝１０．９，１Ｈ），５．７３（ｄ，Ｊ＝１７．６，１Ｈ），６．７２（ｄｄ，Ｊ１＝１７．６，Ｊ２＝１０．８，１Ｈ），７．１０（ｄ，Ｊ＝８．２，２Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．０，２Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ１６１（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．４分。
【０１１４】
工程Ｂ：４−（２，２−ジメチルプロピル）安息香酸
１．７４ｇ（７．７６ｍｍｏｌ）の４−（２，２−ジメチルプロピル）−４−エテニルベンゼン（工程Ａから得られたもの）を１０ｍＬのＥｔＯＡｃおよび１０ｍＬのＨ２Ｏに含む溶液に、８．３０ｇ（３８．８ｍｍｏｌ）のＮａＩＯ４および１ｍｇ（０．００７８ｍｍｏｌ）のＲｕＯ２を加えた。反応混合物を４０℃に３０分間加熱した。反応混合物を冷却し、ｒｔで１６時間撹拌した。この反応混合物にＨ２ＯおよびＥｔＯＡｃを加えて、層を分離した。有機層を乾燥し、濃縮乾固して、７７６ｍｇの表題化合物を得た：ｌＨ  ＮＭＲ（５００Ｍｈｚ）δ０．９１（ｓ，９Ｈ），２．５３（ｓ，２Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝８．０，２Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝８．０，２Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ１９３（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：３．２分。
【０１１５】
工程Ｃ：４−（５−（４−（２，２−ジメチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、アルデヒド１の工程Ｂにおいて４−（２−メチルプロピル）安息香酸の代わりに４−（２，２−ジメチルプロピル）安息香酸（上記の工程Ｂから得られたもの）を使用する、アルデヒド１と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３２１（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．７分。
【０１１６】
アルデヒド１６
４−（５−（４−（３，３，３−トリフルオロプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ａにおいて１−ブロモ−２，２−ジメチルプロパンの代わりに１−ブロモ−３，３，３−トリフルオロプロパンを使用する、アルデヒド１５について記載される手順と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３４７（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．０分。
【０１１７】
アルデヒド１７
４−（５−（４−（３，３，３−トリフルオロブチル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ａにおいて１−ブロモ−２，２−ジメチルプロパンの代わりに１−ブロモ−３，３，３−トリフルオロブタンを使用する、アルデヒド１５について記載される手順と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３６１（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．５分。
【０１１８】
アルデヒド１８
４−（５−（４−（２−メチルプロピル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−３−メチルベンズアルデヒド
工程Ａ：３−（４−ブロモ−２−メチルフェニル）−５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
表題化合物を、Ｎ−ヒドロキシ−（４−ヒドロキシメチル）ベンズアミジンの代わりにＮ−ヒドロキシ−（４−ブロモ−２−メチル）ベンズアミジンを使用する、４−（５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニルメタノールを調製するために記載された手順（アルデヒド１、工程Ｂ）と類似する手順を使用して調製した：１Ｈ  ＮＭＲ（４００Ｍｈｚ，ＣＣｌ３Ｄ）δ０．９８（ｄ，Ｊ＝６．６，６Ｈ），１．９８（ｍ，１Ｈ），２．６２（ｄ，Ｊ＝７．１，２Ｈ），２．７２（ｓ，３Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝８．１，２Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝８．４，１Ｈ），７．５６（ｓ，１Ｈ），８．０２（ｄ，Ｊ＝８．４，１Ｈ），８．１６（ｄ，Ｊ＝８．１，２Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ３７１（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：５．３分。
【０１１９】
工程Ｂ：４−（５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−３−メチルベンゾニトリル
２．３ｇ（６．２ｍｍｏｌ）の３−（４−ブロモ−２−メチルフェニル）−５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール（工程Ａから得られたもの）、１．４６ｇ（１２．４ｍｍｏｌ）のシアン化亜鉛および２．１５ｇ（１．８６ｍｍｏｌ）のＰｄ（ＰＰｈ３）４を２０ｍＬのＤＭＦに含む溶液を１００℃で２０時間撹拌した。反応液を冷却し、１０ｍＬの飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で反応停止させた。反応停止させた混合物を１００ｍＬのジクロロメタンで抽出した。抽出液を乾燥し、濃縮して、１．４０ｇの表題化合物を得た。これを、さらに精製することなく使用した：ＥＳＩ−ＭＳ３１８（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．８分。
【０１２０】
工程Ｃ：４−（５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−３−メチルベンズアルデヒド
１．４０ｇ（４．４ｍｍｏｌ）の４−（５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−３−メチルベンゾニトリル（工程Ｂから得られたもの）を２０ｍＬのトルエンに含む溶液を、−７８℃で、８．８ｍＬ（８．８ｍｍｏｌ）のＤＩＢＡＬＨ（ジクロロメタンにおける１Ｍ）で処理した。得られた混合物を−７８℃で３０分間撹拌して、０．３ｍＬの酢酸および５ｍＬの水で反応停止させた。反応停止させた混合物をｒｔに加温して、５０ｍＬの酢酸エチルで抽出した。抽出液を乾燥し、濃縮して、１．０ｇの表題化合物を得た：ＥＳＩ−ＭＳ３２１（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．７分。
【０１２１】
アルデヒド１９
４−（５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−３−クロロベンズアルデヒド
表題化合物を、工程ＡにおいてＮ−ヒドロキシ−（４−ブロモ−２−メチル）ベンズアミジンの代わりにＮ−ヒドロキシ−（４−ブロモ−２−クロロ）ベンズアミジンを使用する、アルデヒド１９について記載される手順と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３４１（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．６分。
【０１２２】
アルデヒド２０
４−（５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−３−フルオロベンズアルデヒド
表題化合物を、工程ＡにおいてＮ−ヒドロキシ−（４−ブロモ−２−メチル）ベンズアミジンの代わりにＮ−ヒドロキシ−（４−ブロモ−２−フルオロ）ベンズアミジンを使用する、アルデヒド１９について記載される手順と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３２５（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１  ；４．４分。
【０１２３】
アルデヒド２１
４−（５−（４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）−３−トリフルオロメチルフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
工程Ａ：３−トリフルオロメチル−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）ベンゾニトリル
１．１ｇ（５．９ｍｍｏｌ）の４−フルオロ−３−トリフルオロメチルベンゾニトリルおよび４８５ｍｇ（６．５ｍｍｏｌ）の（Ｓ）−（＋）−２−ブタノールを１０ｍＬのＴＨＦに含む−１０℃の溶液を２３５ｍｇ（５．９ｍｍｏｌ）の水素化ナトリウムで処理した。得られた混合物を冷却したまま２時間撹拌し、その後、１０ｍＬのＨ２Ｏで反応停止させた。反応停止させた溶液を３０ｍＬのＥｔ２Ｏで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮した。Ｂｉｏｔａｇｅ４０Ｍカートリッジでのクロマトグラフィーを、溶出液として４：１（ｖ／ｖ）のヘキサン（ｈｅｘａｎｅｓ）／ＥｔＯＡｃを使用して行い、５５０ｍｇの表題化合物を得た：１Ｈ  ＮＭＲ（５００Ｍｈｚ）δ０．９９（ｔ，Ｊ＝７．６，３Ｈ），１．３５（ｄ，Ｊ＝６．２，３Ｈ），１．５８−１．８３（ｍ，２Ｈ），４．５１（ｓｅｐｔｅｔ，１Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝８．７，１Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝８．７，１Ｈ），７．８５（ｓ，１Ｈ）。
【０１２４】
工程Ｂ：３−トリフルオロメチル−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸
５５０ｍｇ（２．２ｍｍｏｌ）の３−トリフルオロメチル−４−（２−（Ｓ）−メチルプロピルオキシ）ベンゾニトリル（工程Ａから得られたもの）を５ｍＬのＥｔＯＨに含む溶液を１．５ｍＬの５．０Ｎ  ＮａＯＨで処理し、８０℃に３時間加熱した。その後、反応液を濃縮して、２Ｎ  ＨＣｌで処理し、３０ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮して、６００ｍｇの表題化合物を得た：１Ｈ  ＮＭＲ（５００Ｍｈｚ）δ０．９９（ｔ，Ｊ＝７．３，３Ｈ），１．４３（ｄ，Ｊ＝５．９，３Ｈ），１．７３−１．８３（ｍ，２Ｈ），４．５４（ｓｅｐｔｅｔ，１Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝８．９，１Ｈ），８．２１（ｄ，Ｊ＝８．９，１Ｈ），８．３２（ｓ，１Ｈ）。
【０１２５】
工程Ｃ：４−（５−（４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）−３−トリフルオロメチルフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニルメタノール
６００ｍｇ（２．２ｍｍｏｌ）の３−トリフルオロメチル−４−（２−（Ｓ）−メチルプロピルオキシ）安息香酸（工程Ｂから得られたもの）、５４２ｍｇ（２．２ｍｍｏｌ）のＥＤＣおよび３５７ｍｇ（２．２ｍｍｏｌ）のＨＯＢＴを６ｍＬのＤＭＦに含む溶液をｒｔで１時間撹拌した。反応液を続いて３５０ｍｇ（２．２ｍｍｏｌ）のＮ−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ベンズアミジン（アルデヒド１の工程Ａから得られたもの）で処理し、８０℃に１２時間加熱した。反応混合物を冷却し、溶出液として２：１（ｖ／ｖ）のヘキサン（ｈｅｘａｎｅｓ）／ＥｔＯＡｃを使用するＢｉｏｔａｇｅ４０Ｍカートリッジでのクロマトグラフィーによって精製して、５１０ｍｇの表題化合物を得た：１Ｈ  ＮＭＲ（５００Ｍｈｚ）δ１．０１（ｔ，Ｊ＝７．３，３Ｈ），１．３８（ｄ，Ｊ＝５．９，３Ｈ），１．７３−１．８３（ｍ，２Ｈ），４．５５（ｓｅｐｔｅｔ，１Ｈ），４．７９（ｓ，２Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝８．９，１Ｈ），７．５１（ｄ，．Ｊ＝８．２，２Ｈ），８．１５（ｄ，．Ｊ＝８．２，２Ｈ），８．３０（ｄ，Ｊ＝８．９，１Ｈ），８．４３（ｓ，１Ｈ）。
【０１２６】
工程Ｄ：４−（５−（４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）−３−トリフルオロメチルフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
５１０ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）の４−（５−（４−（２−（Ｓ）−メチルプロピルオキシ）−３−トリフルオロメチルフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニルメタノール（工程Ｃから得られたもの）、１５３ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）の４−メチルモルホリンＮ−オキシドおよび５１０ｍｇの４Ａモレキュラーシーブの混合物を、８ｍＬのＣＨ３ＣＮにおいて１３ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）の過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウムで処理し、得られた混合物をｒｔで１２時間撹拌した。固体をろ過し、ろ液を濃縮した。溶出液として９：１（ｖ／ｖ）のヘキサン（ｈｅｘａｎｅｓ）／ＥｔＯＡｃ（１Ｌ）を使用するＢｉｏｔａｇｅ４０Ｓカートリッジでのクロマトグラフィーにより、３３０ｍｇの表題化合物を得た：１Ｈ  ＮＭＲ（５００Ｍｈｚ）δ１．０１（ｔ，Ｊ＝７．３，３Ｈ），１．３８（ｄ，Ｊ＝５．９，３Ｈ），１．７３−１．８３（ｍ，２Ｈ），４．５６（ｓｅｘｔｅｔ，１Ｈ），７．１４（ｄ，Ｊ＝８．９，１Ｈ），８．０２（ｄ，．Ｊ＝８．２，２Ｈ），８．３０（ｄ，．Ｊ＝８．２，２Ｈ），８．３２（ｄ，Ｊ＝８．９，１Ｈ），８．４４（ｓ，１Ｈ），１０．１（ｓ，１Ｈ）。
【０１２７】
アルデヒド２２
４−（５−（４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）−３−フルオロフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
工程Ａ：３−フルオロ−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）ベンズアルデヒド
７５０ｍｇ（５．４ｍｍｏｌ）の３−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド、４０３ｍｇ（５．４ｍｍｏｌ）の（Ｒ）−（−）−２−ブタノールおよび２ｇ（７．５ｍｍｏｌ）のトリフェニルホスフィンを１０ｍＬのＴＨＦに含む溶液を、１．５ｍＬのアゾジカルボン酸ジイソプロピルで処理した。得られた溶液をｒｔで１４時間撹拌して、ｒｔに冷却し、濃縮した。溶出液として４：１（ｖ／ｖ）のヘキサン（ｈｅｘａｎｅｓ）／Ｅｔ２Ｏを使用するＢｉｏｔａｇｅ４０Ｍカートリッジでのクロマトグラフィーにより、１３０ｍｇの表題化合物を得た：１Ｈ  ＮＭＲ（５００Ｍｈｚ）δ０．９９（ｔ，Ｊ＝７．６，３Ｈ），１．３５（ｄ，Ｊ＝６．２，３Ｈ），１．５８−  １．８３（ｍ，２Ｈ），４．４７（ｍ，１Ｈ），７．０５（ｔ，Ｊ＝８．２，１Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝８．２，１Ｈ），７．６１（ｓ，１Ｈ），９．８４（ｓ，１Ｈ）。
【０１２８】
工程Ｂ：３−フルオロ−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸
１３０ｍｇ（０．６６ｍｍｏｌ）の３−フルオロ−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）ベンズアルデヒドを１ｍＬのアセトンに含む溶液を、０℃で、７３ｍｇ（０．７３ｍｍｏｌ）の酸化クロム（ＶＩ）を含む水／硫酸の３：１（ｖ／ｖ）混合物で処理した。反応液をｒｔに加温して、２時間撹拌し、その後、１０ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮して、１３０ｍｇの表題化合物を得た：１Ｈ  ＮＭＲ（５００Ｍｈｚ）δ１．００（ｔ，Ｊ＝７．６，３Ｈ），１．３６（ｄ，Ｊ＝６．２，３Ｈ），１．７０（ｍ，１Ｈ），１．８２（ｍ，１Ｈ），４．４４（ｍ，１Ｈ），６．９９（ｔ，Ｊ＝８．２，１Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝８．２，１Ｈ），７．８５（ｓ，１Ｈ）。
【０１２９】
工程Ｃ：４−（５−（４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）−３−フルオロフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、アルデヒド２１の工程Ｃにおいて３−トリフルオロメチル−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸の代わりに３−フルオロ−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸（工程Ｂから得られたもの）を使用する、アルデヒド２１について記載される手順（工程Ｃおよび工程Ｄ）と類似する手順を使用して調製した。
【０１３０】
アルデヒド２３
４−（５−（４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）−３，５−ジフルオロフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
工程Ａ：１−ブロモ−３，５−ジフルオロ−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）ベンゼン
表題化合物を、３−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒドの代わりに４−ブロモ−２，６−ジフルオロフェノールを使用する、アルデヒド２２に記載される手順（工程Ａ）と類似する手順を使用して調製した。
【０１３１】
工程Ｂ：３，５−ジフルオロ−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）ベンゾニトリル
４００ｍｇ（１．５ｍｍｏｌ）の１−ブロモ−３，５−ジフルオロ−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）ベンゼン（工程Ａから得られたもの）、１０６ｍｇ（０．９ｍｍｏｌ）のシアン化亜鉛、６９ｍｇのトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）および１００ｍｇ（０．１８ｍｍｏｌ）の１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンを３ｍＬのＤＭＦおよび３０μＬの水に含む溶液。得られた溶液を８０℃に１時間加熱して、冷却し、濃縮した。溶出液として２０：１（ｖ／ｖ）のヘキサン（ｈｅｘａｎｅｓ）／ＥｔＯＡｃを使用するＢｉｏｔａｇｅ４０Ｍカートリッジでのクロマトグラフィーにより、２８０ｍｇの表題化合物を得た：１Ｈ  ＮＭＲ（５００Ｍｈｚ）δ１．０１（ｔ，Ｊ＝７．６，３Ｈ），１．３５（ｄ，Ｊ＝６．２，３Ｈ），１．６８（ｍ，１Ｈ），１．７９（ｍ，１Ｈ），４．４７（ｍ，１Ｈ），７．２５（ｄ，２Ｈ）。
【０１３２】
工程Ｃ：３，５−ジフルオロ−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸
表題化合物を、３−トリフルオロメチル−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）ベンゾニトリルの代わりに３，５−ジフルオロ−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）ベンゾニトリル（工程Ｂから得られたもの）を使用する、アルデヒド２１に記載される手順（工程Ｂ）と類似する手順を使用して調製した：１Ｈ  ＮＭＲ（５００Ｍｈｚ）δ１．０（ｔ，Ｊ＝７．３，３Ｈ），１．３２（ｄ，Ｊ＝５．９，３Ｈ），１．６８（ｍ，１Ｈ），１．７９（ｍ，１Ｈ），４．４５（ｍ，１Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝８．３，２Ｈ）。
【０１３３】
工程Ｄ：４−（５−（４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）−３，５−ジフルオロフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、アルデヒド２１の工程Ｃにおいて３−トリフルオロメチル−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸の代わりに３，５−ジフルオロ−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸（工程Ｃから得られたもの）を使用する、アルデヒド２１について記載される手順（工程Ｃおよび工程Ｄ）と類似する手順を使用して調製した。
【０１３４】
アルデヒド２４
４−（５−（４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
工程Ａ：４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸メチル
表題化合物を、３−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒドの代わりに４−ヒドロキシ安息香酸メチルを使用する、アルデヒド２２に記載される手順（工程Ａ）と類似する手順を使用して調製した。
【０１３５】
工程Ｂ：４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸
１．０ｇ（４．８ｍｍｏｌ）の４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸メチルを１５ｍＬのＭｅＯＨに含む溶液を、ｒｔで１時間、１ｍＬの５．０Ｎ  ＮａＯＨで処理した。溶液を濃縮し、６ｍＬの２Ｎ  ＨＣｌで酸性化して、ＥｔＯＡｃで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮して、８００ｍｇ（８６％）の表題化合物を得た。
【０１３６】
工程Ｃ：４−（５−（４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、アルデヒド２１の工程Ｃにおいて３−トリフルオロメチル−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸の代わりに４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸（工程Ｂから得られたもの）を使用する、アルデヒド２１について記載される手順（工程Ｃおよび工程Ｄ）と類似する手順を使用して調製した。
【０１３７】
アルデヒド２５
４−（５−（４−（２−（Ｒ）−ブトキシ）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ａにおいて２−（Ｒ）−ブタノールの代わりに２−（Ｓ）−ブタノールを使用する、アルデヒド２４について記載される手順と類似する手順を使用して調製した。
【０１３８】
アルデヒド２５
４−（５−（４−（シクロブトキシ）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンズアルデヒド
表題化合物を、工程Ａにおいて２−（Ｒ）−ブタノールの代わりにシクロブタノールを使用する、アルデヒド２４について記載される手順と類似する手順を使用して調製した。
【０１３９】
（実施例の調製）
【０１４０】
（実施例１）
１−（４−（５−（４−（３−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンジル）アゼチジン−３−カルボン酸
３．０６ｇ（１０．０ｍｍｏｌ）のアルデヒド１、１．０６ｇ（１０．５ｍｍｏｌ）の３−アゼチジンカルボン酸および５ｍＬの酢酸を１５０ｍＬのメタノールに含む溶液をｒｔで２０分間撹拌した。シアノホウ水素化ナトリウム（３８０ｍｇ、５．０ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのメタノールに含む溶液を加えた。反応混合物を１時間撹拌して、ろ過した。固体を３０ｍＬのメタノールで洗浄し、乾燥して、２．８８ｇ（７４％）の表題化合物を得た：１Ｈ  ＮＭＲ（４００Ｍｈｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ０．９５（ｄ，Ｊ＝６．６，６Ｈ），１．９６（ｍ，１Ｈ），２．６２（ｄ，Ｊ＝７．３，２Ｈ），３．４２（ｍ，１Ｈ），４．１９（ｍ，４Ｈ），４．４１（ｓ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝８．０，２Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝８．２，２Ｈ），８．１４（ｄ，Ｊ＝８．０，２Ｈ），８．２３（ｄ，Ｊ＝８．２，２Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ３９２（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：３．０分。
【０１４１】
（実施例２）
１−（４−（５−（４−（１，１−ジメチルエチル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）ベンジル）アゼチジン−３−カルボン酸
１０３．７ｍｇ（０．３４ｍｍｏｌ）のアルデヒド１２および３７．７ｍｇ（０．３７ｍｍｏｌ）のアゼチジン−３−カルボン酸の溶液をｒｔで１５分間撹拌し、その後、８６．５ｍｇ（０．４０８ｍｍｏｌ）のトリアセトキシホウ水素化ナトリウムで処理した。反応混合物をｒｔで１時間撹拌した。反応混合物をＭｅＯＨで希釈し、そのままＬＣ−２によって精製して、表題化合物を得た：１Ｈ  ＮＭＲ（５００Ｍｈｚ）δ１．３８（ｓ，９Ｈ），３．６５−３．７２（ｍ，１Ｈ），４．３２−４．３９（ｍ，４Ｈ），４．５０（ｓ，２Ｈ），７．６４−７．６８（ｍ，４Ｈ），８．１３−８．１６（ｍ，２Ｈ），８．２４−８．２５（ｍ，２Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ３９２（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：２．９分。
【０１４２】
下記の実施例は、アルデヒド１２の代わりに適切なアルデヒドを使用する、実施例２について記載される手順と類似する手順を使用して調製された。
【０１４３】
【表３】
2005533058.tif 000018
2005533058.tif 000019
2005533058.tif 000020
【０１４４】
下記の実施例は、アルデヒド１の代わりに適切なアルデヒドを使用し、かつ、アゼチジン−３−カルボン酸の代わりにピロリジン−３−（Ｒ）−カルボン酸（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、１９９８、１４９１）を使用する、実施例２について記載される手順と類似する手順を使用して調製された。
【０１４５】
【表４】
2005533058.tif 000021
【０１４６】
（実施例３０）
（±）−１−（１−（４−（５−（４−（１，１−ジメチルエチル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニル）エチル）アゼチジン−３−カルボン酸
工程Ａ：（±）−４−（５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１−（１−ヒドロキシエチル）ベンゼン
０．５ｇ（１．６３ｍｍｏｌ）のアルデヒド１を１０ｍＬのＴＨＦに含む溶液を、−７８℃で、１．１ｍＬ（３．３ｍｍｏｌ）のヨウ化マグネシウムメチル（ジエチルエーテルにおける３．０Ｍ）で処理して、３０分かけてｒｔに加温した。得られた混合物を５ｍＬの１Ｎ  ＨＣｌで反応停止させ、３０ｍＬの酢酸エチルで抽出した。抽出液を洗浄し、乾燥し、濃縮して、表題化合物を得た：ＥＳＩ−ＭＳ３２３（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．２分。
【０１４７】
工程Ｂ：４−（５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）アセトフェノン
表題化合物を、４−（５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニルメタノールの代わりに（±）−４−（５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１−（１−ヒドロキシエチル）ベンゼン（工程Ａから得られたもの）を使用する、アルデヒド１に記載される手順（工程Ｃ）と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ３２１（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：４．６分。
【０１４８】
工程Ｃ：（±）−１−（１−（４−（５−（４−（１，１−ジメチルエチル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニル）エチル）アゼチジン−３−カルボン酸
表題化合物を、アルデヒド１２の代わりに４−（５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）アセトフェノンを使用する、実施例２に記載される手順と類似する手順を使用して調製した：ＥＳＩ−ＭＳ４０６（Ｍ＋Ｈ）；ＬＣ−１：３．５分。
【０１４９】
（生物学的活性）
本発明の化合物のＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１活性、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３活性、Ｓ１Ｐ２／Ｅｄｇ５活性、Ｓ１Ｐ４／Ｅｄｇ６活性またはＳ１Ｐ５／Ｅｄｇ８活性は、下記のアッセイを使用して評価することができる。
【０１５０】
Ｅｄｇ／Ｓ１Ｐ受容体に対するリガンド結合アッセイ
３３Ｐ−スフィンゴシン−１−リン酸を、５０ｍＭのＫＨ２ＰＯ４、１ｍＭのメルカプトエタノール、１ｍＭのＮａ３ＶＯ４、２５ｍＭのＫＦ、２ｍＭのセミカルバジド、１ｍＭのＮａ２ＥＤＴＡ、５ｍＭのＭｇＣｌ２、５０ｍＭのスフィンゴシン、０．１％のトリトンＸ−１１４および１ｍＣｉのγ３３Ｐ−ＡＴＰ（ＮＥＮ；比活性、３０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ）を含有する反応混合物において、スフィンゴシンキナーゼ活性を有する粗酵母抽出物を使用して、γ３３Ｐ−ＡＴＰおよびスフィンゴシンから酵素的に合成した。反応生成物をブタノールで抽出し、３３Ｐ−スフィンゴシン−１−リン酸がＨＰＬＣによって精製した。
【０１５１】
ＥＤＧ／Ｓ１Ｐ受容体を発現する細胞を、酵素非含有解離溶液（Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｍｅｄｉａ、Ｌａｖａｌｌｅｔｔｅ、ＮＪ）を用いて集めた。細胞を冷ＰＢＳで１回洗浄して、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ−Ｎａ（ｐＨ７．５）、５ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＣａＣｌ２および０．５％の脂肪酸非含有ＢＳＡを含有する結合アッセイ緩衝液に懸濁した。３３Ｐ−スフィンゴシン−１−リン酸を結合アッセイ緩衝液において０．１ｎＭのスフィンゴシン−１−リン酸とともに超音波処理した。このリガンド混合物の１００μｌを９６ウエルマイクロタイターディッシュにおける１００μｌの細胞（１Ｘ１０６細胞／ｍｌ）に加えた。結合を、穏やかに混合しながら室温で６０分間行わせた。その後、細胞を、Ｐａｃｋａｒｄ  Ｆｉｌｔｅｒｍａｔｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ｈａｒｖｅｓｔｅｒを用いてＧＦ／Ｂフィルタープレート上に集めた。フィルタープレートを３０分間乾燥させた後、４０μｌのＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ２０を各ウエルに加え、結合をＷａｌｌａｃ  Ｍｉｃｒｏｂｅｔａシンチレーションカウンターで測定した。非特異的な結合を、０．５μＭの非放射性スフィンゴシン−１−リン酸の存在下で残存する放射能の量として定義した。
【０１５２】
あるいは、リガンド結合アッセイは、Ｅｄｇ／Ｓ１Ｐ受容体を発現する細胞から調製された膜に対して行われた。細胞を、酵素非含有解離溶液を用いて集め、冷ＰＢＳで１回洗浄した。細胞を、Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａポリトロン（設定５、１０秒間）を使用して、氷冷された２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１０ｍＭ  ＥＤＴＡにおいてホモジナイズすることによって破壊した。ホモジネートを、４８，０００ｘｇで１５分間、４℃で遠心分離して、ペレットを２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、０．１ｍＭ  ＥＤＴＡに懸濁した。２回目の遠心分離の後、最終ペレットを２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２に懸濁した。リガンド結合アッセイは、０．５μｇから２μｇの膜タンパク質を使用して上記に記載されるように行われた。
【０１５３】
Ｅｄｇ／Ｓ１Ｐ受容体のアゴニストおよびアンタゴニストをこの３３Ｐ−スフィンゴシン−１−リン酸結合アッセイで特定することができる。ＤＭＳＯ、メタノールまたは他の溶媒に希釈された化合物が、マイクロタイターディッシュにおいて、３３Ｐ−スフィンゴシン−１−リン酸および結合アッセイ緩衝液を含有するプローブと混合された。Ｅｄｇ／Ｓ１Ｐ受容体を発現する細胞から調製された膜が加えられ、３３Ｐ−スフィンゴシン−１−リン酸に対する結合が記載のように行われた。様々な濃度の化合物の存在下での結合量の測定、および非線形回帰ソフトウエア（例えば、ＭＲＬＣａｌｃ（Ｍｅｒｃｋ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）またはＰＲＩＳＭ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）など）によるデータの解析が、受容体に対する化合物の親和性を測定するために使用された。Ｅｄｇ／Ｓ１Ｐ受容体に対する化合物の選択性が、それぞれの各受容体（Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３、Ｓ１Ｐ２／Ｅｄｇ５、Ｓ１Ｐ４／Ｅｄｇ６、Ｓ１Ｐ５／Ｅｄｇ８）でトランスフェクションされた細胞から調製された膜を使用して、化合物の存在下での３３Ｐ−スフィンゴシン−１−リン酸結合レベルを測定することによって決定された。
【０１５４】
３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイ
Ｇタンパク質に対するＳ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体の機能的結合が３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイで測定された。Ｅｄｇ／Ｓ１Ｐ受容体に対するリガンド結合アッセイにおいて記載されたように調製された膜（１μｇから１０μｇの膜タンパク質）が、９６ウエルマイクロタイターディッシュにおいて、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１００ｍＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのＭｇＣｌ２、５μＭのＧＤＰ、０．１％の脂肪酸非含有ＢＳＡ（Ｓｉｇｍａ、カタログＡ８８０６）、様々な濃度のスフィンゴシン−１−リン酸、および１２５ｐＭの３５Ｓ−ＧＴＰγＳ（ＮＥＮ；比活性、１２５０Ｃｉ／ｍｍｏｌ）を含有する２００μｌの体積でインキュベーションされた。結合を、穏やかに混合しながら室温で１時間行わせ、Ｐａｃｋａｒｄ  Ｆｉｌｔｅｒｍａｔｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ｈａｒｖｅｓｔｅｒを用いて膜をＧＦ／Ｂフィルタープレート上に集めることによって停止させた。フィルタープレートを３０分間乾燥させた後、４０μｌのＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ２０を各ウエルに加えて、結合をＷａｌｌａｃ  Ｍｉｃｒｏｂｅｔａシンチレーションカウンターで測定した。
【０１５５】
Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体のアゴニストおよびアンタゴニストをこの３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイで区別することができる。ＤＭＳＯ、メタノールまたは他の溶媒に希釈された化合物が、０．０１ｎＭから１０μＭの最終アッセイ濃度をもたらすようにマイクロタイターディッシュに加えられた。Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体を発現する細胞から調製された膜が加えられ、３５Ｓ−ＧＴＰγＳに対する結合が記載されたように行われた。天然のリガンドまたは他の知られているアゴニストの非存在下でアッセイされたとき、内因性レベルを超えて３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合を刺激する化合物がアゴニストであると見なされ、その一方で、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合の内因性レベルを阻害する化合物がインバースアゴニストであると見なされた。アンタゴニストが、天然のリガンドまたは知られているＳ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体アゴニストの非最大レベルの存在下での３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイで検出され、これら化合物は３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合レベルを減少させた。様々な濃度の化合物の存在下での結合量の測定が、Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体のアゴニスト、インバースアゴニストまたはアンタゴニストとしての化合物の能力を測定するために使用された。アゴニストを評価するために、基礎量に対する刺激率が、リガンドの非存在下での結合によって除され、１００倍された、化合物の存在下での結合として計算された。用量応答曲線が、非線形回帰曲線近似プログラムＭＲＬＣａｌｃ（Ｍｅｒｃｋ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を使用してプロットされ、ＥＣ５０値が、それ自身の最大刺激の５０％をもたらすために要求されるアゴニスト濃度であると定義された。Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体に対する化合物の選択性が、それぞれの各受容体でトランスフェクションされた細胞から調製された膜を使用して、化合物の存在下での３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合レベルを測定することによって決定された。
【０１５６】
細胞内カルシウム流束アッセイ
Ｇタンパク質に関連した細胞内カルシウム可動化に対するＳ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体の機能的共役が、ＦＬＩＰＲ（蛍光画像化プレートリーダー、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用して測定された。Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体を発現する細胞を集め、アッセイ緩衝液（２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、０．１％のＢＳＡおよび７１０μｇ／ｍｌのプロベニシド（Ｓｉｇｍａ）を含有するハンクス緩衝化生理的食塩水溶液（ＢＲＬ））で１回洗浄した。細胞を、３７℃および５％ＣＯ２で１時間、５００ｎＭのカルシウム感受性色素Ｆｌｕｏ−４（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ）を含有する同じ緩衝液において標識した。細胞を緩衝液で２回洗浄し、その後、１．５ｘ１０５個／ウエル（９０μｌ）を９６ウエルのポリリシン被覆黒色マイクロタイターディッシュに入れた。９６ウエルのリガンドプレートを、スフィンゴシン−１−リン酸または他のアゴニストを２００μｌのアッセイ緩衝液に希釈して、最終試験濃度の２倍である濃度にすることによって調製した。リガンドプレートおよび細胞プレートを分析のためにＦＬＩＰＲ装置に入れた。プレートは３７℃に平衡化された。アッセイは、等体積のリガンドを細胞プレートに移すことによって開始され、カルシウム流束が３分間隔で記録された。細胞応答が面積（合計）または最大ピーク高さ（最大値）として定量された。アゴニストが、化合物を適切な溶媒に希釈し、Ｆｌｕｏ−４標識の細胞に移すことによって天然のリガンドの存在下で評価された。アンタゴニストが、Ｆｌｕｏ−４標識の細胞を様々な濃度の化合物と１５分間前処理し、その後、天然のリガンドまたは他のＳ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体アゴニストの添加によりカルシウム流束を開始させることによって評価された。
【０１５７】
Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体を発現する細胞の調製
任意の様々な手順を、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３、Ｓ１Ｐ２／Ｅｄｇ５、Ｓ１Ｐ４／Ｅｄｇ６またはＳ１Ｐ５／Ｅｄｇ８をクローン化するために使用することができる。これらの方法には、下記が含まれるが、それらに限定されない：（１）ＲＡＣＥ  ＰＣＲクローニング技術（Ｆｒｏｈｍａｎ他、１９８８、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８５：８９９８〜９００２）（５’ＲＡＣＥおよび／または３’ＲＡＣＥを、全長のｃＤＮＡ配列を得るために行うことができる）；（２）適切な発現ベクターシステムにおいてＳ１Ｐ／Ｅｄｇ含有ｃＤＮＡライブラリーを構築した後におけるＥｄｇ／Ｓ１Ｐ  ｃＤＮＡの直接的な機能的発現；（３）Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇタンパク質のアミノ酸配列から設計される標識された縮重オリゴヌクレオチドプローブを用いて、バクテリオファージまたはプラスミドシャトルベクターで構築されたＳ１Ｐ／Ｅｄｇ含有ｃＤＮＡライブラリーをスクリーニングすること；（４）Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇタンパク質をコードする部分ｃＤＮＡを用いて、バクテリオファージまたはプラスミドシャトルベクターで構築されたＳ１Ｐ／Ｅｄｇ含有ｃＤＮＡライブラリーをスクリーニングすること（この部分ｃＤＮＡは、Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇタンパク質に関連づけられる他のタンパク質について知られているアミノ酸配列から縮重オリゴヌクレオチドプライマーを設計することによりＳ１Ｐ／ＥｄｇのＤＮＡフラグメントを特異的にＰＣＲ増幅することによって得られる）；（５）哺乳動物のＳ１Ｐ／Ｅｄｇタンパク質に対する相同性を有する部分ｃＤＮＡまたはオリゴヌクレオチドを用いて、バクテリオファージまたはプラスミドシャトルベクターで構築されたＳ１Ｐ／Ｅｄｇ含有ｃＤＮＡライブラリーをスクリーニングすること（この方法はまた、遺伝子特異的なオリゴヌクレオチドプライマーをＳ１Ｐ／ＥｄｇのｃＤＮＡのＰＣＲ増幅のために使用することを伴うことがある）；または（６）数多くのタイプのｃＤＮＡライブラリーおよび／またはゲノムライブラリーの１つをスクリーニングするためにプローブとして使用するためのコード領域の一部を得るか、または単離して、その結果、Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇをコードするヌクレオチド配列の全長体を単離するために、全長のｃＤＮＡを知られているＲＡＣＥ技術によって得ることができるか、またはコード領域の一部をこれらの同じＲＡＣＥ技術によって得ることができるように、Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇのヌクレオチド配列をテンプレートとして使用して５’および３’の遺伝子特異的なオリゴヌクレオチドを設計すること。
【０１５８】
他のタイプのライブラリー、ならびに他の細胞タイプまたは種タイプから構築されたライブラリーが、Ｓ１Ｐ／ＥｄｇをコードするＤＮＡまたはＳ１Ｐ／Ｅｄｇのホモログを単離するために有用であり得ることは当業者には容易に明らかである。他のタイプのライブラリーには、他の細胞に由来するｃＤＮＡライブラリーが含まれるが、これに限定されない。
【０１５９】
好適なｃＤＮＡライブラリーが、Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ活性を有する細胞または細胞株から調製され得ることは当業者には容易に明らかである。Ｓ１Ｐ／ＥｄｇをコードするｃＤＮＡを単離するためにｃＤＮＡライブラリーを調製する際に使用される細胞または細胞株の選択は、そのような目的のために好適な任意の知られているアッセイを使用して、細胞に関連するＳ１Ｐ／Ｅｄｇ活性を最初に測定することによって行うことができる。
【０１６０】
ｃＤＮＡライブラリーの調製は、この分野で広く知られている標準的な技術によって行うことができる。広く知られているｃＤＮＡライブラリー構築技術を、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ他、１９８９、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）に見出すことができる。相補的ＤＮＡライブラリーはまた、Ｃｌｏｎｔｅｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．およびＳｔｒａｔａｇｅｎｅ（これらに限定されない）を含む数多くの市販元から得ることができる。
【０１６１】
Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ様タンパク質をコードするＤＮＡを含有する発現ベクターを、組換え宿主細胞におけるＳ１Ｐ／Ｅｄｇの発現のために使用することができる。そのような組換え宿主細胞は、Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇまたは生物学的に等価な形態を産生させるために好適な条件のもとで培養することができる。発現ベクターには、クローニングベクター、改変されたクローニングベクター、特定の目的のために設計されたプラスミドまたはウイルスが含まれるが、これらに限定されない。市販の哺乳動物発現ベクターが組換えＳ１Ｐ／Ｅｄｇ発現のために好適であり得る。
【０１６２】
組換え宿主細胞は原核生物性または真核生物性であり得る。これらには、細菌（例えば、大腸菌など）、菌類細胞（例えば、酵母など）、哺乳動物細胞（ウシ起源、ブタ起源、サル起源および齧歯類起源の細胞株（これらに限定されない）を含む）、および昆虫細胞（ショウジョウバエおよびカイコに由来する細胞株（これらに限定されない）を含む）が含まれるが、これらに限定されない。
【０１６３】
様々なＳ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体に対するヌクレオチド配列がこの分野では知られている。例えば、下記を参照のこと。
【０１６４】
ヒトＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１
Ｈｌａ，Ｔ．およびＴ．Ｍａｃｉａｇ、１９９０、分化中のヒト内皮細胞において誘導される大量の転写物はＧタンパク質共役受容体に対する構造的類似性を有するポリペプチドをコードする、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２６５：９３０８〜９３１３；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１６５】
国際特許出願公開ＷＯ９１／１５５８３（１９９１年１０月１７日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１６６】
国際特許出願公開ＷＯ９９／４６２７７（１９９９年９月１６日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１６７】
マウスＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１
国際特許出願公開ＷＯ００５９５２９（２０００年１０月１２日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１６８】
米国特許第６，３２３，３３３号（２００１年１１月２７日特許付与）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１６９】
ラットＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１
Ｌａｄｏ，Ｄ．Ｃ．、Ｃ．Ｓ．Ｂｒｏｗｅ、Ａ．Ａ．Ｇａｓｋｉｎ、Ｊ．Ｍ．ＢｏｒｄｅｎおよびＡ．Ｊ．ＭａｃＬｅｎｎａｎ、１９９４、ラットｅｄｇ−１即時初期遺伝子のクローニング：発現パターンは多様な機能を示唆する、Ｇｅｎｅ、１４９：３３１〜３３６；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１７０】
米国特許第５，５８５，４７６号（１９９６年１２月１７日特許付与）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１７１】
米国特許第５，８５６，４４３号（１９９９年１月５日特許付与）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１７２】
ヒトＳ１Ｐ３／Ｅｄｇ３
Ａｎ，Ｓ．、Ｔ．Ｂｌｅｕ、Ｗ．Ｈｕａｎｇ、Ｏ．Ｇ．Ｈａｌｌｍａｒｋ、Ｓ．Ｒ．Ｃｏｕｇｈｌｉｎ、Ｅ．Ｊ．Ｇｏｅｔｚｌ、１９９７、リゾリン脂質に対する２つのＧタンパク質共役受容体をコードするｃＤＮＡの特定、ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．、４１７：２７９〜２８２；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１７３】
国際特許出願公開ＷＯ９９／６００１９（１９９９年１１月２５日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１７４】
米国特許第６，１３０，０６７号（２０００年１０月１０日特許付与）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１７５】
マウスＳ１Ｐ３／Ｅｄｇ３
国際特許出願公開ＷＯ０１／１１０２２（２００１年２月１５日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１７６】
ラットＳ１Ｐ３／Ｅｄｇ３
国際特許出願公開ＷＯ０１／２７１３７（２００１年４月１９日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１７７】
ヒトＳ１Ｐ２／Ｅｄｇ５
Ａｎ，Ｓ．、Ｙ．Ｚｈｅｎｇ，Ｔ．Ｂｌｅｕ、２０００、Ｇタンパク質共役受容体のＥｄｇ３およびＥｄｇ５により媒介されるスフィンゴシン１−リン酸誘導の細胞分化、生存および関連したシグナル伝達事象、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７５：２８８〜２９６；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１７８】
国際特許出願公開ＷＯ９９／３５２５９（１９９９年７月１５日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１７９】
国際特許出願公開ＷＯ９９／５４３５１（１９９９年１０月２８日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１８０】
国際特許出願公開ＷＯ００／５６１３５（２０００年９月２８日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１８１】
マウスＳ１Ｐ２／Ｅｄｇ５
国際特許出願公開ＷＯ００／６００５６（２０００年１０月１２日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１８２】
ラットＳ１Ｐ２／Ｅｄｇ５
Ｏｋａｚａｋｉ，Ｈ．、Ｎ．Ｉｓｈｉｚａｋａ、Ｔ．Ｓａｋｕｒａｉ、Ｋ．Ｋｕｒｏｋａｗａ、Ｋ．Ｇｏｔｏ、Ｍ．Ｋｕｍａｄａ、Ｙ．Ｔａｋｕｗａ、１９９３、心臓血管系において発現する新規な仮想的Ｇタンパク質共役受容体の分子クローニング、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．、１９０：１１０４〜１１０９；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１８３】
ＭａｃＬｅｎｎａｎ，Ａ．Ｊ．、Ｃ．Ｓ．Ｂｒｏｗｅ、Ａ．Ａ．Ｇａｓｋｉｎ、Ｄ．Ｃ．Ｌａｄｏ、Ｇ．Ｓｈａｗ、１９９４、発達に潜在的に関与する仮想的Ｇタンパク質共役受容体のクローニングおよび特徴づけ、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．、５：２０１〜２０９；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１８４】
米国特許第５，５８５，４７６号（１９９６年１２月１７日特許付与）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１８５】
米国特許第５，８５６，４４３号（１９９９年１月５日特許付与）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１８６】
ヒトＳ１Ｐ４／Ｅｄｇ６
Ｇｒａｌｅｒ，Ｍ．Ｈ．、Ｇ．Ｂｅｒｎｈａｒｄｔ、Ｍ．Ｌｉｐｐ、１９９８、ＥＤＧ６（生物活性なリゾリン脂質に対する受容体に関連づけられる新規なＧタンパク質共役受容体）はリンパ組織において特異的に発現する、Ｇｅｎｏｍｉｃｓ、５３：１６４〜１６９；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１８７】
国際特許出願公開ＷＯ９８／４８０１６（１９９８年１０月２９日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１８８】
米国特許第５，９１２，１４４号（１９９９年６月１５日特許付与）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１８９】
国際特許出願公開ＷＯ９８／５０５４９（１９９８年１１月１２日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１９０】
米国特許第６，０６０，２７２号（２０００年５月９日特許付与）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１９１】
国際特許出願公開ＷＯ９９／３５１０６（１９９９年７月１５日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１９２】
国際特許出願公開ＷＯ００／１５７８４（２０００年３月２３日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１９３】
国際特許出願公開ＷＯ００／１４２３３（２０００年３月１６日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１９４】
マウスＳ１Ｐ４／Ｅｄｇ６
国際特許出願公開ＷＯ００／１５７８４（２０００年３月２３日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１９５】
ヒトＳ１Ｐ５／Ｅｄｇ８
Ｉｍ，Ｄ．−Ｓ．、Ｊ．Ｃｌｅｍｅｎｓ、Ｔ．Ｌ．Ｍａｃｄｏｎａｌｄ、Ｋ．Ｒ．Ｌｙｎｃｈ、２００１、ヒトおよびマウスのスフィンゴシン１−リン酸受容体Ｓ１Ｐ５（Ｅｄｇ−８）の特徴づけ：スフィンゴシン１−リン酸受容体の構造−活性関係、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、４０：１４０５３〜１４０６０；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１９６】
国際特許出願公開ＷＯ００／１１１６６（２０００年３月２日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１９７】
国際特許出願公開ＷＯ００／３１２５８（２０００年６月２日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１９８】
国際特許出願公開ＷＯ０１／０４１３９（２００１年１月１８日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０１９９】
欧州特許ＥＰ１０９０９２５（２００１年４月１１日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０２００】
ラットＳ１Ｐ５／Ｅｄｇ８
Ｉｍ，Ｄ．−Ｓ．、Ｃ．Ｅ．Ｈｅｉｓｅ、Ｎ．Ａｎｃｅｌｌｉｎ、Ｂ．Ｆ．Ｏ’Ｄｏｗｄ、Ｇ．−Ｊ．Ｓｈｅｉ、Ｒ．Ｐ．Ｈｅａｖｅｎｓ、Ｍ．Ｒ．Ｒｉｇｂｙ、Ｔ．Ｈｌａ、Ｓ．Ｍａｎｄａｌａ、Ｇ．ＭｃＡｌｌｉｓｔｅｒ、Ｓ．Ｒ．Ｇｅｏｒｇｅ、Ｋ．Ｒ．Ｌｙｎｃｈ、２０００、新規なスフィンゴシン１−リン酸受容体Ｅｄｇ−８の特徴づけ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７５：１４２８１〜１４２８６；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０２０１】
国際特許出願公開ＷＯ０１／０５８２９（２００１年１月２５日公開）；これはその全体が参照して組み込まれる。
【０２０２】
心臓血管作用の測定
心臓血管パラメーターに対する本発明の化合物の作用を下記の手法によって評価することができる：
成体雄ラット（約３５０ｇの体重）に、大腿動脈カテーテルおよび大腿静脈カテーテルが動脈圧および静脈内化合物投与のためにそれぞれ取り付けられた。動物はネムブタール（５５ｍｋ／ｋｇ、ｉｐ）で麻酔された。血圧および心拍数がＧｏｕｌｄ  Ｐｏ−Ｎｅ−Ｍａｈデータ取得システムで記録された。心拍数は動脈脈波から得られた。順応期間後、ベースライン読み取りが行われ（約２０分）、データが平均化された。化合物が静脈内投与され（約５秒のボーラス注射または１５分継続した注入のいずれか）、データが化合物投与後６０分間にわたって１分毎に記録された。データは、心拍数または平均動脈圧の最大変化として計算されるか、あるいは、時間に対する心拍数または血圧の変化に関する曲線下面積として計算される。データは平均±ＳＥＭとして表される。片側スチューデントペアードｔ検定が、ベースライン値に対する統計学的比較のために使用され、ｐ＜０．０５で有意であると見なされる。
【０２０３】
ラット心臓血管系に対するＳ１Ｐの作用が、Ｓｕｇｉｙａｍａ，Ａ．、Ｎ．Ｎ．Ａｙｅ、Ｙ．Ｙａｔｏｍｉ、Ｙ．Ｏｚａｋｉ、Ｋ．Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ、２０００、ラット心臓血管系に対するスフィンゴシン−１−リン酸（天然に存在する生物活性なリゾリン脂質）の作用、Ｊｐｎ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、８２：３３８〜３４２；これはその全体が参照して組み込まれる）に記載される。
【０２０４】
マウス急性毒性の測定
１匹のマウスに、非毒性ビヒクルに溶解された試験化合物の０．１ｍｌが静脈内（尾静脈）に与えられ、マウスは毒性の徴候について観察される。重篤な徴候には、死、発作、麻痺または意識不明が含まれ得る。より軽い徴候にも注目され、これには、正常と比較して、運動失調、呼吸困難、毛を逆立てること、または活動の低下が含まれ得る。徴候を認めたとき、服薬溶液は同じビヒクルで希釈される。希釈された用量が第２のマウスに同じ様式で投与され、同様に徴候について観察される。徴候を全く生じさせない用量に達するまで、このプロセスが繰り返される。これは、見積もられた無影響レベルであると見なされる。さらなるマウスが、徴候の非存在を確認するためにこのレベルで投薬される。
【０２０５】
リンパ球減少の評価
化合物が、マウス急性毒性の評価において記載されたように投与され、リンパ球減少が、下記のように服薬後３時間でマウスにおいて評価される。マウスをＣＯ２によって影響に対して無感覚にさせた後、胸部を開き、０．５ｍｌの血液を直接的な心臓穿刺により抜き取り、血液を直ちにＥＤＴＡで安定化させ、血液学が、ネズミでの示差的計数を行うために校正された臨床血液学自動分析計（Ｈ２０００、ＣＡＲＥＳＩＤＥ、Ｃｕｌｖｅｒ  Ｃｉｔｙ、ＣＡ）を使用して評価される。試験処置によるリンパ球の減少が、３匹のビヒクル処置マウスに対する３匹のマウスの血液学的パラメーターの比較によって明らかにされる。この評価のために使用された用量は、上記希釈法の改変を使用する許容性によって決定される。この目的のために、無影響が望ましく、軽度の影響は許容され得るが、重篤な毒性用量は、軽度な影響のみを生じさせるレベルに連続希釈される。
【０２０６】
実施例化合物のインビトロ活性
本明細書中に開示された実施例化合物は、上記に記載されるアッセイで測定されたとき、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体を上回る、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体の強力かつ選択的なアゴニストとしてその活性によって明らかにされるような免疫調節剤としての有用性を有している。特に、本明細書中に開示された実施例化合物は、上記に記載された３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイで評価された場合、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対するＥＣ５０とＳ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体に対するＥＣ５０との比率により判定されたとき、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体よりもＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対して５００倍以上の選択性を有し、および、上記に記載された３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイにより評価された場合、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対する結合について５０ｎＭ未満のＥＣ５０を有する。
【国際調査報告】
2005533058.tif 000032
2005533058.tif 000033
2005533058.tif 000034