(57)【要約】式（Ｉ）または（ＩＩ）［式中、Rは、炭素骨格中に少なくとも一つのヘテロ原子を任意に含んでいてもよい、置換または非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アラルケニルまたはアラルキニル基であり、R1およびR2はH、または基−OR3（ここで、R3はその炭素骨格中に少なくとも一つのヘテロ原子を含んでいてもよい、４〜１２の炭素原子を含む置換また非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アラルケニルまたはアラルキニル基である）であり、R1およびR2の両方ともがHとはなり得ない］の化合物、および治療方法におけるそれらの使用。【化１】2005511775.tif 000022
2005511775.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式IまたはII：
【化１】
2005511775.tif 000021
［式中：
Rは、炭素骨格中に少なくとも一つのヘテロ原子を任意に含んでいてもよい、置換または非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アラルケニルまたはアラルキニル基であり、
R1およびR2はH、または基−OR3（ここで、R3はその炭素骨格中に少なくとも一つのヘテロ原子を含んでいてもよい、４〜１２の炭素原子を含む置換また非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アラルケニルまたはアラルキニル基である）であり、R1およびR2の両方ともがHとはなり得ない］
の化合物。
【請求項２】
Rが、R4CH2基（ここで、R4はその炭素骨格中に少なくとも一つのヘテロ原子を任意に含んでいてもよい、置換または非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アラルケニルまたはアラルキニル基である）である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Rが１〜１２の炭素原子を含む、請求項１または請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Rが少なくとも一つの親水性基を含む、請求項1〜３のいずれかに記載の化合物。
【請求項５】
親水性基がヒドロキシ、カルボニル、カルボキシ、アミノ、アミド、４級アンモニウムまたはチオリル基であるか、またはそれらを含む、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Rがアミン、アミド、ペプチド、エステル、カルボン酸、カルボン酸塩、アルコール、アルデヒド、ケトンまたはチオ−ルの機能をもたらす、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
基SRがS−システイニル基または置換されたS−システイニル基である、請求項１〜６のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
置換されたS−システイニル基が、S−システイニル部分を含むジ−またはトリ−ペプチド基である、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
置換されたS−システイニル基が、S−グルタチオニル、S−システイニル、N−tert−ブトキシカルボニル  S−システイニルまたはN−tert−ブトキシカルボニル  S−システイニルエステル基である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
R1およびR2の一方が基−OR3であり、他方がHである、請求項１〜9のいずれかに記載の化合物。
【請求項１１】
R3がその炭素骨格中にヘテロ原子を含むアルキル基である、請求項1〜１０のいずれかに記載の化合物。
【請求項１２】
ヘテロ原子がケイ素である、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
R3がトリアルキルシリル基である、請求項１〜１２のいずれかに記載の化合物。
【請求項１４】
R3がtert−ブチルジメチルシリル基である、請求項１〜１３のいずれかに記載の化    合物。
【請求項１５】
式Iと同等の化合物（ここで、該化合物のlogP値は、同じ技術を用いて計算または測定される）のlogP値よりも、少なくとも0.25、0.5、0.75、１または1.25低い、計算または測定されたlogP値を有する、請求項１〜１４のいずれかに記載の式IIの化合物。
【請求項１６】
医薬的または治療的に活性な、請求項１〜１５のいずれかに記載の記載の化合物。
【請求項１７】
医薬に用いられる請求項1〜１６のいずれかに記載の化合物。
【請求項１８】
ヒトもしくは動物の身体の治療用、またはヒトもしくは動物の身体に施される診断法に  用いられる、請求項１〜１７のいずれかに記載の化合物。
【請求項１９】
次の一つ以上に関して活性を有する、請求項１〜１８のいずれかに記載の化合物：
a)HSFの活性化
b)NF−κBの抑制
c)HSV−１の複製の抑制
d)センダイウィルスの複製の抑制。
【請求項２０】
ウィルス性疾患、細菌性疾患、放射線障害、炎症性疾患、免疫系障害、虚血、動脈硬化症、細胞増殖関連疾患、細胞損傷または細胞破壊関連疾患、糖尿病、水生生物に作用する障害、酸化ストレス、消耗性疾患、火傷またはカルシウム欠乏または不足障害を治療するための、あるいは老化作用に抵抗するかまたは創傷を治癒促進する抗酸化剤として用いられる、請求項１６〜１９のいずれかに記載の化合物。
【請求項２１】
細胞増殖関連疾患が癌である、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２２】
消耗性疾患が神経変性疾患であり、任意にBSE、新変種CJDまたはアルツハイマー病でもあり得る、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２３】
次の一つ以上の分析用研究ツールとしての請求項１〜１６のいずれかに記載の化合物の使用：  HSF、ＮＦ−κＢ、熱ショック応答、ウィルス複製、ウィルス性疾患、細菌性疾患、放射線障害、炎症性疾患、免疫系障害、虚血病、動脈硬化症、細胞増殖関連疾患、細胞損傷もしくは細胞破壊関連障害または糖尿病。
【請求項２４】
請求項１〜２２のいずれかによる化合物を含み、任意に医薬的に許容される担体を含んでいてもよい医薬組成物。
【請求項２５】
医薬用、好ましくは請求項２０〜２２のいずれかに列挙された疾患を治療するための、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２６】
請求項１〜２１のいずれかによる化合物を含む水生生物用飼料。
【請求項２７】
請求項１〜２１のいずれかによる化合物を含む水生環境。
【請求項２８】
ヒトまたは動物の身体に施される治療または診断法に用いられる医薬を製造するための、請求項１〜２２のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項２９】
ウィルス性疾患、細菌性疾患、放射線症害、炎症性疾患、免疫系疾患、虚血、動脈硬化症、細胞増殖関連疾患、癌、細胞損傷または細胞破壊関連疾患、糖尿病、酸化ストレス、消耗性疾患、火傷、カルシウム欠乏または不足関連障害、水生生物に作用する傷害の治療用医薬を製造するための、請求項２８に記載の使用。
【請求項３０】
創傷治癒を促進するかまたは老化作用に抵抗する抗酸化剤として用いられる医薬を製造するための、請求項２８に記載の使用。
【請求項３１】
神経変性疾患、好ましくはＢＳＥ，新変種ＣＪＤ，またはアルツハイマー病の治療用医薬を製造するための、請求項２９に記載の使用。
【請求項３２】
請求項１〜２２のいずれかに記載の化合物、または請求項２４もしくは２５に記載の組成物の治療有効量をヒトまたは動物に投与することを含む、ヒトまたは動物における症状、障害または感染を治療する方法。
【請求項３３】
請求項１〜２２のいずれか一つに記載の化合物、または請求項２４もしくは２５に記載の組成物を、次の症状の少なくとも一つを少なくとも軽減するのに有効な量において、該症状の一つ以上に罹っている患者に対して投与することを含む、ウィルス性疾患、細菌性疾患、放射線障害、炎症性疾患、免疫系疾患、虚血、動脈硬化症、細胞増殖関連疾患、癌、細胞損傷または細胞破壊関連疾患、糖尿病、酸化ストレス、消耗性疾患、老化作用、火傷、カルシウム欠乏または不足関連障害、水生生物に作用する傷害の治療方法。
【請求項３４】
請求項１〜２２のいずれか一つに記載の化合物、または請求項２４もしくは２５に記載の組成物を、創傷治癒促進に有効な量、負傷者に対して投与することを含む、創傷治癒の促進方法。
【請求項３５】
消耗性疾患が神経変性疾患、好ましくはＢＳＥ、新変種ＣＪＤ、またはアルツハイマー病である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
式Iの化合物と式HSRのチオールの付加物（ここで、Ｒは請求項１〜９のいずれかに定義された基であり、該付加物は請求項１〜１５のいずれかに定義された式IIの化合物である）を形成することを含む、請求項１〜１５のいずれかに定義された式Ｉの医薬的活性のある化合物の、親油性を低減し、および／または水溶性および／もしくは治療指数を増大させる方法。
【請求項３７】
付加物が式Iの不飽和化合物とチオールとの間のマイケル反応を介して形成される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
請求項３６または請求項３７に記載の方法により製造された、または製造され得る付加物。
【請求項３９】
NF−κBの活性に対して顕著な抑制効果をもたない濃度で、HSFを活性化する能力を示す、請求項１〜２２のいずれかに記載の化合物。
【請求項４０】
熱ショック応答に反応する症状の治療に用いられる、請求項３９に記載の化合物。
【請求項４１】
ウィルス性疾患の治療に用いられる、請求項３９または４０に記載の化合物。
【請求項４２】
炎症性成分が感染ウィルスの病理に本質的なものではない、または感染ウィルスの病理的現象が熱ショック応答により覆されるかまたは予防され得る、ウィルス性疾患の治療に用いられる、請求項４１に記載の化合物。
【請求項４３】
複製をNF−κBに依存しない、またはそのゲノムにκB要素をもたないウィルスによる感染を治療するために用いられる、請求項４１に記載の化合物。
【請求項４４】
細胞保護治療に用いられる、請求項３９または４０に記載の化合物。
【請求項４５】
細胞損傷または細胞破壊関連障害の治療に用いられる、請求項３９または４０に記載の化合物。
【請求項４６】
ヒトまたは動物の身体に施される治療または診断法に用いられる医薬を製造するための、請求項３９に記載の化合物の使用。
【請求項４７】
医薬が、請求項４０〜４５のいずれか一つに定義される治療に用いられる、請求項４６に記載の使用。
【請求項４８】
請求項３９に記載の化合物の治療有効量を、ヒトまたは動物に対して投与することを含む、請求項４０〜４５のいずれか一つに定義された症状、障害または感染の治療方法。
【請求項４９】
請求項３９〜４５のいずれかに記載の化合物の治療有効量を投与することを含む、ヒトまたは動物に対し細胞保護治療を施す方法。
【請求項５０】
請求項３９〜４５のいずれかに記載の化合物の細胞保護量を、ヒトまたは動物に投与することを含む、細胞保護方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は特定のシクロへキセノンおよびシクロヘキサノンの誘導体に関するものである。また、かかる誘導体の製造や医薬およびその他の分野におけるそれらの使用にも関する。本発明はさらに、改善された水溶性と治療指数を有する特定のシクロヘキサノン誘導体、および医薬的に活性なシクロへキセノン誘導体の水溶性と治療指数の改善方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
シクロペンテノン環構造（シクロペンテノン核としても知られる）を含む種々の化合物は、熱ショック応答を誘導することができる。熱ショック応答は、極端な温度、酸化ストレス、毒素への暴露やウィルス感染を含むいろいろなタイプの障害から細胞を護るための、見事に統制された極めて保護的なメカニズムである（１）。
【０００３】
ヒトの細胞内では、熱ショック応答を誘発するには、対調整タンパク質、つまり細胞保護の熱ショックタンパク質（HSPs）の発現を調整する、熱ショック転写因子タイプ１（HSF１）の活性が必要である（１）。HSP誘導は初めは生理学的ストレス検出のシグナルとして解釈されたが、外来タンパク質の蓄積、凝集に起因する被害を防止するために、種々の損傷後の修復過程で分子シャペロンとして細胞によりHSPが利用されていると、今では受けとめられている（１）。
【０００４】
特に、虚血、炎症およびウィルス感染症を含む様々なヒトの疾患において、熱ショックタンパク質HSP70の細胞保護の役割が目下評されてきている（２−５）。これらの理由から、HSF1は、細胞保護および抗ウィルス剤のための、新規の魅力的な対象とみなされている。ウィルス感染症の場合、強力な抗ウィルス活性を有するプロスタグランジン（PGｓ）のクラスがHSF1の活性を介して、HSP７０誘発体として機能することを、Santroらは示している（６，７）。
【０００５】
Aタイプのプロスタグランジン（PGAｓ）のウィルス複製抑制および頑固な感染体の馴化予防能力は、先ず1980年に報告された（８）。シクロペンタン環構造(シクロペンテノンPG、cyPG)におけるα、β−不飽和カルボニル基含有のPGが、試験管内および生体内実験モデルにおけるヘルペスウィルス、パラミクソウィルス、オルソミクソウィルス、レトロウィルスを含む、種々様々なDNAおよびRNAウィルスに対抗する活性を有することは、今ではすっかり定着している（９）。該抗ウィルス活性メカニズムは、周知の他のどの抗ウィルス剤よりも顕著であり、熱ショックタンパク質の誘発と感染細胞内での転写因子NF−κB(核要素κB)の抑制を含むと考えられる。
【０００６】
NF−κBは、炎症およびウィルス複製の促進に重大な役割を果たす誘発性真核転写因子である（１１）。ほとんどの細胞内で、NF−κBは不活性な細胞質コンプレックスの状態で存在し、その主な形態は、IκB族、通例IκBαの抑制タンパク質に結合し、第一（ウィルス、細菌、UV）または第二（炎症性サイトカイン）病理刺激に応答して活性化される、p５０およびp６５のサブユニットで構成されるヘテロダイマー（異質二量体）である（１２）。
【０００７】
刺激によって、IκBαの急速なリン酸化および分解が起こり、その結果、NF−κBの核への転移が生じ、そこで該因子は特定のκBサイトでDNAに結合し、信号タンパク質をエンコードする種々の遺伝子を誘発する。対象遺伝子は、炎症性および走化性サイトカイン、サイトカイン受容体ならびにウィルスタンパク質のためのコード化をするものを含んでいる。
【０００８】
NF−κBは、増大するHIV−１の転写によるAIDSの進行を含む多くの病理事象に関与しており、新規の抗ウィルス剤および抗炎症剤にとって魅力的な治療のためのターゲットとみなされている（１２）。Santoroらは、IκBαのリン酸化および分解を防ぐことで、シクロペンテノンプロスタグランジンが、ヒトの細胞の中でNF−κBの活性およびNF−κBに依存しているHIV−１の転写を抑制すること、そしてこの効果がHSF1の活性に厳密に関わっていることを示した（１１）。
【０００９】
Santroらは、HSF活性およびNF−κB抑制を司る、天然プロスタグランジンの分子構造を突きとめた（１３）。125〜500μMの濃度での、PGA分子の一つの構成要素、シクロペント−２−エン−１−オン（２−シクロペンテン−１−オンとしても知られる）が、HSF1を活性化させ、急速にかつ選択的に細胞保護をするHSP70を合成させ得ることが示されている。
【００１０】
同じ濃度で、シクロペント−２−エン−１−オンは化学的または生理学的誘発剤によりNF−κBの活性を阻止することができることが示されている。これらの作用はラブドウィルスに感染中の抗ウィルス活性と関連している（１３）。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
上記シクロペンテノン誘導体のシクロへキセノン類似体による、同様の生物学的活性を示したものは、文献には開示されていない。
【００１２】
驚くべきことに、特定のシクロへキセノンおよびシクロヘキサノン誘導体が、少なくとも上記の方法の一つにおいて、医薬的に活性のあることが、いまや発見された。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明の第一の局面によれば、式IまたはII：
【化１】
2005511775.tif 000003
［式中：
Rは、炭素骨格中に少なくとも一つのヘテロ原子を任意に含んでいてもよい、置換または非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アラルケニルまたはアラルキニル基であり、
R1およびR2は、Hまたは基−OR3（ここで、R3はその炭素骨格中に少なくとも一つのヘテロ原子を含んでいてもよい、４〜１２の炭素原子を含む、置換また非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アラルケニルまたはアラルキニル基である）であり、R1およびR2の両方ともはHになり得ない］
の化合物が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
Rは、R4CH2−基（ここで、R4はその炭素骨格中に少なくとも一つのヘテロ原子を任意に含んでいてもよい、置換または非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アラルケニルまたはアラルキニル基である）であり得る。Rは好ましくは１〜１２の炭素原子を含む。
【００１５】
好ましい具体例では、Ｒは少なくとも一つの親水性基を含む。該親水性基は、ヒドロキシ、カルボニル、カルボキシ、アミノ、アミド、４級アンモニウムまたはチオリル基であるか、またはそれらを含む。Ｒは、それゆえアミン、アミド、ペプチド、エステル、カルボン酸、カルボン酸塩、アルコール、アルデヒド、ケトンまたはチオールの機能を、本発明の化合物にもたらす。
【００１６】
より好ましい具体例では、基−SRはS−システイニル基または置換されたS−システイニル基である。本出願の文脈において、置換または非置換のS−システイニル基は、その硫黄原子を介して環に結合しているシステイニル部分を含み、システインの等価硫黄原子に結合している水素原子をその環で置換している。
【００１７】
好ましい置換されたS−システイニル基は、N−tert−ブトキシカルボニル  S−システイニルおよびN−tert−ブトキシカルボニル S−システイニルエステル（例えばメチルおよびエチル）基を含む、S−グルタチオニル、S−システイニルエステルおよびその他の同様な基のような、S−システイニル部分を含むジ−またはトリ−ペプチド基を含む。
【００１８】
好ましくは、R1またはR2の一つだけが基−OR3（ここで、R3は先に定義の通りである）であり、もう一方はHである。本発明の全ての局面において、R3は好ましくはその炭素骨格中に一つのヘテロ原子を含むアルキル基である。ヘテロ原子は好ましくはケイ素であり、好ましい態様では、R3はトリアルキルシリル基、好ましくはtert−ブチルジメチルシリル基である。
【００１９】
本発明によるある種の化合物は、少なくとも二つの鏡像体の形態で存在することができ、このようなすべての鏡像体、それらの不等な混合物およびラセミ体は、本発明に包含される。これら化合物のＲ-およびＳ−鏡像体のどちらもが有用である。それらはそれぞれ、他の鏡像体が実質的にない形態で提供され得る（例えば、少なくとも７５％、８５％、９０％、９５％または９９％ない(ｗ／ｗ)）。しかしながら、鏡像体の混合物(例えばラセミ混合物)も使用することができる。
【００２０】
本発明による多くの化合物は、シス−およびトランス−の両方の形態で存在する。すなわち、R1およびR2は、シクロヘキサノンまたはシクロへキセノン環において、互いにシス−またはトランス−である。本発明は、そのような個々の異性体およびそれらの混合物の全てを、その使用とともに包含する。
【００２１】
本発明の第一の局面による好ましい化合物は以下のものを含む：
【化２】
2005511775.tif 000004
上記の式において、Ｒは上記に定義の通りである。
【００２２】
別の局面では、本発明は、上で定義した式IまたはIIの化合物を提供する。ここで、該化合物は、式AまたはBの化合物ではない。本発明のこの別の局面による好ましい化合物は、式CおよびDの化合物を含む。
【００２３】
本発明による化合物は、実施例に記載の技術により製造することができる。特に、化合物CおよびDのように基RS−を含む化合物は、一般的な方法A(下記参照)に記載されているタイプの技術により、シクロヘキス−２−エン−１−オン類似体から製造することができる。必要なシクロヘキス−２−エン−１−オン類似体は、実施例１および２に記載の性質の技術により、製造することができる。
【００２４】
本発明による化合物は、好ましくは次の：
a) HSFの活性化
b) NF−κBの抑制
c) HSV−１の複製の抑制
d) センダイウィルスの複製の抑制
の一つ以上が可能である。
【００２５】
上記活性は、当業者であれば容易にアッセイが可能であり、適したアッセイの例を以下の実施例４、５および７に記す。
【００２６】
(少なくとも特定の濃度で)シクロペント−２−エン−１−オンよりも、上記の少なくとも一つの点において、より大きな活性をもつ化合物が、本発明の好ましい具体例を表す；１〜200μMの範囲内の濃度で、または前記範囲全体または一部に亘って、このような活性を享受するものが特に好ましい。
【００２７】
本発明による化合物は、前記項目の少なくとも一つにおいて、シクロペント−2−１−オンのレベルの少なくとも2倍の活性レベルを有することが好ましい。そのレベルが、シクロペント−2−エン−1−オンの少なくとも10倍であることは、より好ましい。
【００２８】
上記の項目の一つの活性は、化合物が医薬として作用のある可能性を示すものである。したがって、さらなる側面において、本発明は、（動物用医薬を含む）医薬用途のための発明による化合物を提供する。好ましいこのような用途には、ヒトまたは動物の身体に実施される治療、診断方法による、ヒトまたは動物の身体の手当てが含まれる。この手当ては、予防的なものでも、現在の病状に即したものでもよい。(予防を含む)治療および診断法も、本発明による化合物の使用を含めて、本発明の範囲内である。
【００２９】
ヒトまたは動物に施される治療または診断法に用いられる医薬製造のためのそのような化合物の使用は、本発明のさらなる側面の範囲内にある。
【００３０】
本発明による化合物の好ましい用途は、熱ショックタンパク質（例えばｈｓｐ７０）の誘発および／またはNF−κBの抑制により、熱ショック転写因子（例えばHSF1）を活性させて、ホスト内で施しうる疾患の治療を含む。本発明による特定の好ましい化合物を、HSFを活性化させることおよびNF−κBの活性を抑制することを含む治療用途に用いることができる。
【００３１】
かくして、該活性が示されるか有利になり得る疾患または病状の治療に、本発明による化合物を本発明に従って用いることができる。また、かかる治療のための医薬の製造にも用いることができる。本発明の化合物の好ましい治療、および診断用途を、以下に詳細に示す。
【００３２】
医薬として作用のある多くの化合物は、水溶性に乏しいか極度に脂肪親和性である。したがって、一般的に患者から好まれない腸管外のその他の投与ルートに比べ、患者に経口投与するには、該化合物はあまり適していない。
【００３３】
薬剤または医薬として作用のある化合物の治療指数は、半数有効量ED50に対する半数致死量LD50の割合で表される。この指数を使えば、治療に有効な投与量を与えられた個々の患者における毒性副作用を生じるリスクが一般的に低く、治療指数の大きい化合物が治療指数の小さなものより通常好まれる。したがって、医薬的に作用のある特定の化合物の治療指数が、悪い作用をもたずに増加し得るならば、これは魅力的な結果であろう。
【００３４】
式IIの好ましい化合物は、式Iの同等の化合物よりも：
（a）２０〜４０℃の温度で水に、より溶けやすい。
（b）脂肪親和性がより低い；および／または
（c）治療指数がより大きい。
式IIの好ましい化合物と同等の式Iの化合物は、−SR基がないことおよび6員環の２位の付加的な水素原子を除いて、式IIの好ましい化合物と同じ置換パターンをもつ化合物である。
【００３５】
本発明による好ましい化合物が、同等の化合物より脂肪親和性が低いことが要求される限り、好ましい化合物の水溶性に対するn‐オクタノールの割合（すなわちn−オクタノール／水分配係数）は、「同等の」化合物に対する割合よりも低いことを意味する。この割合は、普通その常用対数「logP」で表され、logP値が１である化合物は、水よりもn−オクタノール中に10倍溶けやすく、logP値が２である化合物は、水よりもn−オクタノール中に100倍溶けやすいといった具合になる。
【００３６】
LogP値は実験により測定することもでき、いくつか利用可能なコンピュータープログラムの一つまたはアルゴリズムを用いて計算することもできる。これらの例はPomona大学薬品化学プログラムおよびMoriguchiらにより記載の方法を含む（２０）。
【００３７】
かくして、本明細書の中で、同等の化合物よりも脂肪親和性が高いことを要求される化合物は、該同等化合物よりも低いlogP値を有していることが望ましい。この意味では、logP値は、上記のプログラムの一つまたはアルゴリズムを適用することによって得られる計算値であることが好ましい。
【００３８】
本発明による好ましい化合物が、「同等」よりも大きい（２１）治療指数を要求される限り、この関係は少なくとも一つの治療用途に対しては当てはまらなくてはならない。これを明確にするため、生体内作用の観察によって、または推定薬剤の治療指数を予測するのに当業者により慣習的に用いられる種類の試験管内テストまたはアッセイを介して、かかる関係の存在が立証され得る。例えば、以下に論ずる特質の一つのアッセイを、毒性アッセイと組み合わせて用い、本発明の化合物および同等物の特定のペアについて必要な情報を提供すことができる。適したアッセイの例を以下の実施例４〜８に示す。
【００３９】
好ましい具体例では、式IIの好ましい化合物は、式Iの同等物のlogPよりも少なくとも0.25、0.5、0.75、１または1.25低い、計算されたまたは測定されたlogP値を有し、ここで該化合物のlogP値は、同じ技術を用いて計算または測定される。好ましくは、式IIの好ましい化合物は、５以下のlogPを有し、Moriguchiらが記載の方法により計算される場合、好ましくは4.15以下の値を有する（２０）。これらの後者の好ましい範囲内のlogP値をもつ化合物は、一般に胃腸から、より容易に吸収され、それゆえ経口投与に、より適している。Lipinskiら参照（２１）。
【００４０】
式IIの好ましい化合物の利点は、それらが、−SR置換を含まない式Iの同等物よりも脂肪親和性が低い、および／またはほぼ室温および／または体温で水に溶けやすいので、経口投与の医薬組成物での使用に、より適している。さらに、かかる式IIの化合物も−SR置換基をもたない同等物より治療指数が大きくなり得るので、治療領域において潜在的により有用である。
【００４１】
シクロペンテノン化合物は、細胞内でグルタチオンとのマイケル反応を行うことで知られている。グルタチオンは体内のどこにでも見られ、酸化損傷から細胞を保護する重要な役割を果たしている（酸化還元バランスを維持する）。この点で、Uchidaらの研究（２２）およびその他の研究は、酸化ストレスからの細胞保護におけるラジカル捕獲剤としての、グルタチオンの役割を示唆している。Uchidaの研究は、枯渇したグルタチオンを有する細胞が、より高い濃度のラジカル酸素スペシーズを保持していることを示した。
【００４２】
また、かかる細胞がN-アセチル−システインで処理され細胞の生存力が測定されたときに、細胞の寿命の延びおよびラジカル酸素スペシーズの生成の減少が観察されたことを示している。Uchidaらは細胞内でグルタチオンレベルを減少させる能力のあるスペシーズは、細胞の抗酸化ディフェンスも下げ、ラジカル酸素スペシーズの誘発を増大させるという結論に達した。Uchidaらは、シクロペンテノンの介在するラジカル酸素スペシーズの生成が、細胞毒性に密に関連していることも示し、シクロペンテノン化合物による細胞毒性または細胞死誘発の重要な形態を発表した。
【００４３】
グルタチオンは、危険な求電子性スペシーズから細胞を保護することでも知られている。例えば、モルヒネタイプの化合物は、グルタチオンとのマイケル反応を行い、その結果、薬剤の完全な非活性化が生じる（２３）。大量のパラセタモール（アセトアミノフェン）を摂取すると、肝臓内のグルタチオンは枯渇する（１９９９年にパラセタモール中毒により英国で１５０人の死者が出た）。過剰投与から１５時間以内にN-アセチルシステインを、静脈注射または経口により摂取すると、攻撃的になっている求電子性パラセタモールの代謝物質が効果的に除去される（２４）。
【００４４】
その他の研究では、細胞内チオール容量の低減が、放射線治療に対する腫瘍細胞の感度を増大させ得ることが示されている。さらに、グルタチオンの枯渇レベルを示す細胞が、放射線、化学療法剤、および逆にグルタチオンとのラジカル反応によって破壊されていたであろうラジカル酸素スペシーズの影響を、より受けやすいことが示されてきている（２５）。
【００４５】
シクロヘキサノン基のような飽和の部分には、マイケル反応を介してグルタチオン基を付加することはできない。したがって、当量の不飽和のシクロヘキス−２−エン−１−オンに代謝しなければ、シクロヘキサノン基を含む本発明の化合物は、不飽和の同等物に比べ、生体内のグルタチオンとあまり反応しそうにない。
【００４６】
そのような飽和の化合物は、したがって患者の細胞内のグルタチオンレベルを枯渇させ、それによりそれらの抗酸化ディフェンスを損なう可能性は、当量のシクロヘキス−２−エン−１−オンの誘導体に比べ、あまりないだろう。理論的に結び付けられことを望まずとも、このことは、なぜ−SR基を含む本発明によるいくつかの化合物が、水溶性の向上と脂肪親和性の減少に加えて、治療指数を顕著に上昇させたかを説明するだろう。
【００４７】
また、理論によって結び付けられることを望まずとも、シクロヘキサノン環の３位の炭素原子が−SR基を含む本発明による化合物は、一部には、当量のシクロヘキス−２−エン−１−オンのプロドラッグとして働くことができるという理由で、生体内では後者に変換されると考えられているという意味において、向上した特質を享受していると考えられる。
【００４８】
この点において、切断前に基−SRはこれらの化合物に、その同等物よりもより高い水溶性およびより低い脂肪親和性を与え、このため経口摂取により適し、また生体内での−SR基の切断は、逆マイケル反応によって、より有効なシクロヘキス−２−エン−１−オン相当物を放出すると考えられる。
【００４９】
かくして、具体例において、本発明による式IIの化合物は、逆マイケル反応によって、式Iの当量のシクロへキス−２−エン−１−オン誘導体に変換し得る、またはそのような同等物のプロドラッグである。
【００５０】
より好ましい具体例では、基−SRはS−システイニルまたは置換されたS−システイニル基である。好ましい置換されたS−システイニル基は、N−tert−ブトキシカルボニルS−システイニルおよびN−tert−ブトキシカルボニルS−システイニルエステル（例えばメチルおよびエチル）基を含む、S−グルタジオニル、S−システイニルエステルおよびその他同様の基等のS−システイニル部分を含む、ジ−およびトリ−ペプチド基を含む。
【００５１】
いま一度、理論によって結び付けられることを望まないが、本発明のこれら後の具体例による化合物は、それらが置換または非置換のシステイニル部分を取り込むことにより生じる二次的な治療作用をもたらすことができると考えられる。例えば、上記のようにプロドラッグとして働くときに、該化合物は当量のシクロヘキス−２−エン−１−オン誘導体と、還元された形態の置換または非置換のシステイニル部分の両方を、患者の体内の目標細胞に引き渡すことができ、そこで治療作用を発揮することができるだろう。
【００５２】
還元された形態の置換または非置換のシステイニル部分により発揮された治療作用は、特に還元された部分がグルタチオン、類似物または前駆体であるときに、グルタチオン枯渇の予防策となり得る。例えば、還元された置換または非置換のシステイニル部分は、シクロヘキス−２−エン−１−オン誘導体（生体内切断後に形成された）または代謝物によって結合された後者の量を低減するために、天然のグルタチオンと競合するかもしれない。
【００５３】
あるいは誘導体または代謝物によって結合されたグルタチオンを置換するまたは置換に導くかもしれない。そのような作用は、当量のシクロヘキス−２−エン−１−オンに比べ、本発明の化合物のもつ毒性低減に、そしてこれらの化合物により享受される治療指数の増大に、大きく寄与すると考えられる。
【００５４】
本発明のさらなる具体例では、上記に定義した式Iの医薬として活性のある化合物の脂肪親和性を低減させる、ならびに／または水溶性および／もしくは治療指数を増大させる方法が提示されており、その方法は式Iの化合物の付加物と、式HSR（ここで、上記定義の通り、Rは先にここに定義したものと同じであり、付加物は式IIのものである）のチオールを形成することを含む。
【００５５】
付加物は上記で説明したようなプロドラッグとして作用することもでき、またはそれ自体医薬として作用することもできる。
【００５６】
本発明の好ましい具体例では、付加物は式Iの不飽和の化合物と該チオール間のマイケル反応を介して形成される。付加物の好ましい形成方法は、以下の実施例に記載されている。
【００５７】
さらなる側面では、本発明は、本発明の方法で製造されたまたは製造し得る、先にここに定義された付加物を提供する。
【００５８】
疑問を回避するために、「アルケニル」という用語は、その炭素骨格中に一つ以上の二重結合をもつ基を示し、「アルキニル」という用語は、その炭素骨格中に一つ以上の三重結合をもつ基を示すことを確認する。本明細書の目的のため、アルキニル基が、その炭素骨格中に二重結合と一重結合を含んでいてもよいことも理解されるべきである。特にそうでない場合を示さない限り、本明細書中、アルキル、アルケニルまたはアルキニル基として表される基は、直鎖または分枝鎖状であるか、あるいは環状の基であるかまたはそれを含む。しかしながら、そうでない場合を示さない限り、それらは好ましくは直鎖または分枝鎖状である。
【００５９】
本発明による化合物の医療用途：
本発明による化合物の好ましい用途は、熱ショック転写因子(例えばHSF1)、熱ショックタンパク質の誘導(例えばhsp70)および／またはNF−κBの抑制によって、ホスト体内で施し得る疾患の治療を含む。
【００６０】
本発明による特定の好ましい化合物は、HSFの活性化およびNF−κBの活性の抑制を含む治療用途において用いることができる。かくして、該活性が示される、または有利になり得る疾病または病状の治療に、該化合物を本発明に従って用いることができる。また、かかる治療に用いられる医薬の製造にも使用することができる。該化合物を用いる好ましい治療および診断方法を以下に示す。
【００６１】
本発明によるある種の化合物が、上記の点全てにおいて活性を示すわけではないと理解されたい。したがって、かかる化合物は、その特質が潜在的な有用性を示唆する、以下に記載の治療および診断方法の点で用途を見出すだけだろう。
【００６２】
ある種の疾患、例えば癌はウィルスおよび非ウィルス性因子によって媒介されるかもしれないと理解されたい。そうでない場合が示されなければ、所定の疾患の治療が、その疾患がウィルス性であろうとなかろうと施される。前記治療の種々のカテゴリー間でいくつかの重複があることも理解されたい。すなわち、カテゴリーが相互に相容れないものであるようには意図されていない。
【００６３】
１．ウィルス性疾患の治療
NF−κBが特定のウィルス性疾患の病理に関係しているとみなされる。
熱ショックタンパク質(例えばHSP70)が、ウィルス性疾患の病因に対する予防を提供することができることは周知である。本発明による化合物は、ウィルス複製の低減におそらく活性があるだろう。
【００６４】
本発明による化合物は、ウィルス性疾患の治療に有用であるだろう。
この感染症には、DNAウィルスにより媒介される疾患と同様に、RNAウィルスにより媒介される疾患も含まれる。本発明による化合物を用いて治療することができるウィルス性疾患の例は以下を含む。
【００６５】
腸内アデノウィルスによるまたはその関与する下痢または腸重積、呼吸器系アデノウィルスによるまたはその関与する上気道または下気道感染症（一般の風邪、肺炎を含む）、目のアデノウィルス感染によるまたはその関与する結膜炎、角膜炎またはトラコーマ、アデノウィルスによるまたはその関与する扁桃または腎臓感染症を（非限定的に）含む、アデノウィルス科のメンバーにより引き起こされるまたはその関与する疾患。
【００６６】
ラッサ熱ウィルスに引き起こされるラッサ熱；リンパ球性脈絡髄膜炎によるまたはその関与する髄膜炎；マクポウィルス、フニンウィルス、サビアウィルス、グアナリトウィルスまたはタカリベウィルスによる出血熱を（非限定的に）含む出血熱を（非限定的に）含む、アレナウィルス科のメンバーにより引き起こされるまたはその関与する疾患。
【００６７】
アストロウィルスによるまたはその関与する下痢を（非限定的に）含む、アストロウィルス科のメンバーにより引き起こされるまたはその関与する疾患。
【００６８】
腎性シンドロームを伴う出血熱、ハンタウィルス肺疾患症候群、またはハンターンウィルス、プーマラウィルス、ソウルウィルス、ドブラヴァウィルス、シンノンブルウィルス、バイユーウィルス、ブラッククリーク運河ウィルス、ニューヨーク１ウィルス、モノガヘラウィルス、アンデスウィルス、ラグ−ナネグラウィルスを(非限定的に)含むハンタウィルスによるまたはその関与するその他の疾患；ラクロス脳炎、カリフォルニア脳炎またはその他のブニヤウィルス感染症を(非限定的に)を含むアルボウィルス感染症；フルボウィルスの関与するリフトヴァレー熱、サンドフライ熱、ウークニエミまたはその他のアルボウィルス感染症；ナイロウィルスによって引き起こされるクリミアン−コンゴ出血熱またはその他の感染症を（非限定的に）含む、ブニヤウィルス科のメンバーにより引き起こされるまたはその関与する疾患。
【００６９】
E型肝炎ウィルスによるまたはその関与する肝炎、カリチウィルスおよび小型円形構造のウィルスによるまたはその関与する下痢を(非限定的に)含む、カリチウィルス科のメンバーおよび関連作用因子により引き起こされるまたはその関与する疾患。
【００７０】
コロナウィルスによるまたはその関与する下気道または上気道感染症（通常の風邪を含む）、コロナウィルスまたはトロウィルスによるまたはその関与する下痢、脳炎または胃腸炎を(非限定的に)含む、コロナウィルス科のメンバーにより引き起こされるまたはその関与する疾患。
【００７１】
エボラまたはマルブルグウィルスによる出血熱を(非限定的に)含む、フィロウィルス科のメンバーにより引き起こされるまたはその関与する疾患。
【００７２】
黄熱病、キャンスール森林病、オムスク出血熱、その他ダニ媒介脳炎感染症、ロチオ、日本脳炎、セントルイス脳炎、西ナイルウィルス感染症、マレーヴァレイ脳炎、デング熱、またはフラビウィルスによるまたはその関与するデング出血熱を(非限定的に)含むアルボウィルス感染症、熱または脳炎；C型肝炎ウィルスによるまたはその関与する肝炎を(非限定的に)含むフラビウィルス科のメンバーにより引き起こされるまたはその関与する疾患。
【００７３】
B型肝炎ウィルスによるまたはその関与する肝炎を(非限定的に)含むヘパドナウィルス科のメンバーにより引き起こされるまたはその関与する疾患。
【００７４】
1型もしくは2型のヘルペス単体ウィルスによるまたはその関与する口唇ヘルペス、性器ヘルペス、ヘルペス性皮膚炎、ヘルペス性・疽、帯状ヘルペスシンプレックス、眼病、脳炎または新生児ヘルペス；水痘帯状疱疹ウィルスによるまたはその関与する水痘、帯状ヘルペス、帯状ヘルペス付随の痛み、肺炎、脳炎、胎児感染または網膜壊死；移植拒絶症、先天性感染症、感染性単核症、網膜炎もしくはサイトメガロウィルスによるまたはその関与するその他の免疫システム弱体疾患；エピスタイン−バールウィルスによるまたはその関与する、感染性単核症、リンパ腫、癌腫またはその他の癌；ヒトヘルペスウィルス６または７による、またはその関与する突発性発疹、小児ばら疹、肺炎または肝炎；ヒトヘルペスウィルス８によるまたはその関与するカポジ肉腫またはその他の腫瘍性疾患（KSV）を（非限定的に含む）ヘルペスウィルス科のメンバーによるまたはその関与する疾患。
【００７５】
インフルエンザ、肺炎、その他の呼吸器系感染症、筋肉炎、ミオグロビン尿症、またはA型、B型、C型インフルエンザウィルスによるまたはその関与するレイ症候群を(非限定的に)含む、オルトミクソウィルス科のメンバーによるまたはその関与する疾患。
【００７６】
乳頭腫ウィルスによるまたはその関与する乳頭腫、コムディローマ、腫瘍形成および癌腫；BKVまたはJCVウィルスによる疾患；ポリオーマウィルスによる進行性多病巣性白質脳症を(非限定的に)含む、パポバウィルス科のメンバーによるまたはその関与する疾患。
【００７７】
B19型パルボウィルスによるまたはその関与する貧血、発熱、胎児感染症または肝炎を(非限定的に)含む、パルボウィルス科のメンバーによるまたはその関与する疾患。
【００７８】
パラインフルエンザウィルスによるまたはその関与する肺炎、細気管支炎、気管気管支炎、または偽膜性咽頭炎；呼吸器系合胞体ウィルスによるまたはその関与する細気管支炎または肺炎；麻疹ウィルスによるまたはその関与する肺炎または亜急性硬化全脳炎（SSPE）を（非限定的に）含む脳炎、麻疹または麻疹合併病；流行性耳下腺炎ウィルスによるまたはその関与する睾丸炎または膵臓炎を(非限定的に)含む、流行性耳下腺炎またはその合併症を(非限定的に)含む、パラミクソウィルス科のメンバーによるまたはその関与する疾患。
【００７９】
A型肝炎ウィルスによるまたはその関与する肝炎；ライノウィルスまたはその他の呼吸器系ピコリナウィルスによるまたはその関与する、上気道感染症（通常の風邪を含む）；ポリオウィルスによる灰白髄炎；コクサッキーウィルスまたは腸内ウィルスによるボーンホルム病、脳炎、骨膜炎、水疱性口峡炎、心筋炎、新生児疾患、膵臓炎、発熱、結膜炎、慢性疲労症候群（ME）または手、足、口の疾患を(非限定的に)含むピコルナウィルス科のメンバーによるまたはその関与する疾患。
【００８０】
天然痘ウィルスによる天然痘；ヒト型猿痘または牛痘ウィルス感染症；種痘合併症を(非限定的に)含む種痘ウィルス感染症；パラポックスウィルスによる羊鵞口瘡またはパラワクシニア；軟属腫痘ウィルスによる伝染性軟属腫；タナ痘ウィルスによる感染症を(非限定的に)含む、ポックスウィルス科のメンバーによるまたはその関与する疾患。
【００８１】
ロタウィルスによるまたはその関与する下痢を（非限定的に）含むレオウィルス科のメンバーによるまたはその関与する疾患。
【００８２】
ヒト免疫不全ウィルス（HIV）によるまたはその関与する後天性免疫不全症候群および付随疾患；白血病、リンパ腫、またはHTLVウィルスによるまたはその関与する骨髄症を(非限定的に)含む、レトロウィルス科のメンバーによるまたはその関与する疾患。
【００８３】
狂犬病ウィルスによる狂犬病；デュヴェンハーゲまたはモコラウィルスによる疾患を(非限定的に)含むその他のリッサウィルス疾患を（非限定的に）含む、ラブドウィルス科のメンバーによるまたはその関与する疾患。
【００８４】
風疹ウィルスによる風疹または先天性風疹症候群；東部ウマ脳炎ウィルス、ベネズエラウマ脳炎ウィルス、西部ウマ脳炎ウィルス、エヴァーグレイズウィルスまたはセムリキ森林ウィルスによる発熱または脳炎；シンドビスウィルス、オケルボウィルス、ロス川ウィルス、バーマ森林ウィルス、チクングニヤウィルス、オニョンニョンウィルス、マヤロウィルスまたはイゴオラウィルスによる発熱、発疹、多発性関節炎、筋肉痛または関節痛を(非限定的に)含むトガウィルス科のメンバーによるまたはその関与する疾患。
【００８５】
デルタ物質（HDV）によるまたはその関与する肝炎を(非限定的に)含む、ウィロイド様物質によるまたはその関与する疾患。
【００８６】
クロイツフェルト−ヤコブ病（CJD）、新変種CJD、GSS、および致死性家族性不眠症を（非限定的に）含む、プリオンによるまたはその関与する疾患。
【００８７】
水生生物(例えば魚、甲殻類等)に作用するウィルス性およびその他の疾患の治療に、おそらく本発明の化合物は特に有用だろう。当該疾患は、口吻潰瘍ウィルス、イリドウィルス、リンパ嚢腫炎ウィルス等の媒介による疾患を含む。
【００８８】
本発明による化合物は、したがって、水産養殖に用いてもよい。該化合物は、水生生物の飼料に用いてもよい。このような飼料は本発明の適用範囲内である。飼料は一般に密閉容器に入れ、適切なラベルを貼って販売されることになる(例えば魚の餌、甲殻類用の餌、水生生物用の餌等)。また、本発明の化合物は水処理または水生生物への直接塗布に用いてもよい。したがって、このような化合物は、水産養殖に有用となるために、必ずしも食品中に存在する必要はない。
【００８９】
２．細菌性疾患の治療
ＮＦ−κＢは細菌感染症に反応して活性化する。
本発明による化合物は、例えばＮＦ−κＢ誘導の炎症の治療におけるように、このような感染症から発生する疾患の治療において有用であり得る。最も一般的には、この炎症はグラム陰性の細菌に感染するために生じる。しかしながら、グラム陽性の細菌との感染によっても生じるかもしれない（例えばＳ.アウレウス）。
【００９０】
３．放射線障害の治療
ＮＦ−κＢは放射線に反応して活性化する（例えば紫外線）。
本発明による化合物は放射線障害の治療に有用であり得る。かかる障害は細胞および組織の外傷、細胞および組織の老化や癌(例えば皮膚癌)を含む。
【００９１】
４．炎症および免疫系疾患の治療
ＮＦ−κＢは炎症性細胞に反応して活性化する。免疫および炎症反応の初期の媒介になると思われる。
本発明の化合物は免疫疾患(例えば自己免疫疾患)の治療、および炎症性疾患の治療に有用となり得る。当該化合物により治療され得る特定の炎症性疾患および免疫系疾患の例としては、乾癬、リュウマチ性関節炎、多発性硬化症、成人呼吸窮迫症候群、肝炎および／または肝硬変、血管炎症疾患（播種性紅斑性狼瘡を含む）、および胃腸系炎症性疾患（例えば胃潰瘍）がある。
【００９２】
５．虚血および動脈硬化症の治療
ＮＦ−κＢは虚血および動脈硬化症の病因に関与してきた。
したがって、本発明による化合物は、（例えば心臓または脳内の）再灌流損傷および心臓肥大を含む当該疾患の治療に有用である。
【００９３】
６．細胞増殖関連障害の治療
ＮＦ−κＢは細胞増殖に関与している。
本発明による化合物は抗増殖剤として有用となり得る。したがって、該化合物は炎症性肉芽腫、動静脈の再狭窄における新脈管内膜増殖、および (リンパ腫、白血病、肉腫、癌腫および黒色腫を含む) 癌の治療に有用である。
【００９４】
７．細胞の損傷または破壊関連疾患の治療
熱ショックタンパク質は細胞保護作用をもたらすことが知られている。
本発明による化合物は、細胞損傷または破壊関連疾患の治療に有用となり得る。
これらの疾患には、 (例えば、パラコートのような毒素の吸入、またはパラセタモールのような医薬の過量摂取による) 薬物中毒、酸化細胞損傷、細胞および組織の老化外傷、肝炎、糖尿病および火傷が含まれる。本発明の化合物はヒトおよび動物の老化作用に抵抗するため、創傷治癒の促進のためにも用いることができる。
本発明の化合物を用いて治癒され得る、この一般的な性質をもつその他の疾患には、酸化ストレスおよび消耗性疾患、特に、BSE、新変種CJDおよびアルツハイマ−病のような神経性−消耗疾患が含まれる。
【００９５】
８．その他の治療
シクロペンテノンプロスタグランジンは、ペルオキシソーム増殖活性受容体（PPARｓ）の刺激誘導において周知のとおり有用である。本発明の化合物はかくして、糖尿病（その合併症を含む）の治療に有用となり得る。該化合物はカルシウム欠乏または不足が関与している疾患の治療にも用いることができる（骨の障害、骨格障害、歯牙障害、発育障害等を含む）。
【００９６】
９．HSF選択化合物を用いた治療
本発明による化合物は、NF−κB活性にあまり顕著な抑制作用のない濃度で、熱ショック応答を引き起こし、HSFを活性化させる、またはHSP発現を促す能力を示すことができる。
【００９７】
HSFを活性化する能力を有する化合物がNF-κBの活性も抑制することを示唆している、本明細書の冒頭節に示した報告書に照らし合わせれば（文献６,７,１１および１３を参照）、本発明による化合物の選択的作用は驚嘆すべきものである。
【００９８】
しかしながら、この予期せぬ特質のおかげで、熱ショック応答への作用は望まれるが、通常のNF−κB経路は不必要で望ましくなく、またはおそらく有害となるような治療用途において、これらの化合物は他にみられない有用なものとなっている。例えば、NF−κB経路はT細胞媒介免疫反応において重要な役割を果たすため、それを中断することは免疫抑制となる可能性があり、したがって特別な治療目的を達成するために要求されない限り、基本的に回避するべきである。
【００９９】
かくして、これらの化合物は、ウィルスの病理が炎症性成分を含まない、またはウィルスによる細胞破壊が病理において、炎症反応よりも重要であるウィルス感染症の治療において特に有用である。このようなウィルスは、それらの複製をNF−κBに依存しないか、ゲノム中にκB要素をもたないウィルスである。ウィルス感染症に加えて、HSF選択化合物は炎症成分を含まないその他の症状の治療にも用いられ、特に細胞保護用途において有用である。
【０１００】
選択性によって、NF−κB媒介炎症性免疫反応の維持が望ましい場合に、HSF選択化合物を用いることが可能である。例えば、NF−κB活性の長期抑制、および結果的に感染への患者の全免疫反応の長期抑制が、好ましからざる日和見感染に導くので、それらは慢性または予防医療において特に有用である。また、NF−κB活性を長期抑制することが、肝臓内で細胞消滅を起こす可能性もあることが知られている。
【０１０１】
かくして、NF−κBの活性を著しく抑制することなくHSFを活性化することを含む治療用途に、本発明によるHSF選択化合物を用いることができる。それゆえ、本発明に従って、このような活性が示されるまたは有利となり得る病気または病状の治癒に、これらの化合物を用いることができる。また、かかる治療用途のための医薬の製造にも用いることができる。
【０１０２】
熱ショックタンパク質は、細胞保護作用をもたらすことが知られている。かくして、HSF選択化合物は細胞保護用途において、また細胞損傷および破壊関連疾患の治療（予防治療を含み）に役立つことができる。
【０１０３】
これらの疾患には、（例えば、パラコートなどの毒物の吸入、またはパラセタモールのような医薬の過剰摂取による）薬物中毒、酸化細胞損傷、細胞および組織の老化外傷、肝炎、糖尿病さらに火傷が含まれる。これらの化合物を、ヒトまたは動物の老化作用に抵抗するためや、創傷治癒促進にも用いることもできる。
【０１０４】
HSF選択化合物を用いて治療することのできる、この一般的な性質をもつその他の疾患には、酸化ストレス、消耗性疾患、特に、BSE、新変種CFDおよびアルツハイマー病のような神経変性疾患が含まれる。
【０１０５】
HSF選択化合物は、その細胞保護作用によって、虚血の治療および虚血の発生とそれに付随する再灌流に起因する損傷にも有益なものとなっている。それだけに限定するわけではないが、特に癌治療に用いられるときに、放射線および／または薬物療法の有害作用を緩和するために用いることもできる。これらの化合物を、胃腸内に発生する特定のタイプの潰瘍を治療するために用いることもできる。
【０１０６】
上記の項で示したように、本発明による化合物を、抗ウィルス剤として用いることができる。熱ショック応答によって感染ウィルスの病理作用を覆す、または予防することができるウィルス感染症の治療において、HSF選択化合物は一般に有用である。
【０１０７】
特に、炎症成分が感染ウィルスの病理にそれほど関与していないか本質的なものではない、またはウィルスの病理が炎症成分を含まない、またはウィルスによる細胞破壊がどの炎症反応よりも重要であるウィルス感染症の治療に、それらを用いることができる。このようなウィルスには、複製をNF−κBに依存していない、またはκB要素をゲノムにもたないウィルスが含まれる。
【０１０８】
その例としては、パルボウィルス、ロタウィルス、およびピコルナウィルス、コロナウィルスおよびアデノウィルスを含む上気道管に感染するウィルスなどがある。
【０１０９】
多くのこのような菌の作用は、熱ショック応答によって覆されるか防止され、また特定の患者へのNF−κB経路を途絶する薬剤を投与することが、適切ではないかもしれない他の理由があり得るので、病理においてNF−κBと炎症性を含む、特定のウィルスによる感染症を治療するためにも、HSF選択化合物を用いることができる。
【０１１０】
HSF選択化合物で治療することができるウィルス性感染症の例には、ピコルナウィルス（ライノウィルスおよび、A型肝炎ウィルスを含む）、レオウィルス（ロタウィルスを含む）、パルボウィルス、パラミクソウィルス（センダイウィルスを含む）、ラブドウィルス(例えば、水胞性口内炎ウィルスおよび狂犬病ウィルス)、フィロウィルス(例えば、エボラウィルス)、アデノウィルスならびにコロナウィルスによる感染症がある。炎症およびNF−κB経路を含むが、本発明による化合物での治療に反応し得る病因によるウィルス性感染症は、インフルエンザウィルス感染病を含む。
【０１１１】
本発明による化合物の投与経路
薬剤は、医薬的に受容可能な担体を含んでいてもよい医薬組成物の一部として、通常供給される。この医薬組成物は、通常滅菌形態で提供される。単位投与量形態で提供されてもよい。通常密閉容器に入れられて、またキットの一部として提供され得る。このようなキットは本発明の適用範囲内である。通常（必ずではないが）使用説明書が同封されている。複数の単位投与形態が提供されてもよい。
【０１１２】
本発明の範囲内の医薬組成物は、一つ以上の次のものを含んでいてもよい：保存剤、可溶化剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、甘味料、着色剤、香料、塩（以下に詳細をさらに説明するが、本発明の化合物はそれ自体が医薬的に許容され得る塩の形態にて提供されてもよい）、緩衝剤、被覆剤または抗酸化剤。また、治療作用のあるその他の薬剤を、本発明の化合物に加えて含んでいてもよい。
【０１１３】
本発明の化合物は、それ自体どのような適切な形態において提供されてもよい、すなわち、そのような医薬として作用のある誘導体としてまたは誘導体の形態で使用されてもよい。例えば、医薬として許容される塩または水和物の形態で用いてもよい。
【０１１４】
医薬として許容される塩は、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウムまたはカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウムまたはマグネシウム塩）、アルミニウム塩、亜鉛塩、アンモニウム塩（例えばテトラ−アルキルアンモニウム塩）等を含む。無機酸付加塩(例えば、塩酸塩、硫酸塩またはリン酸塩)、あるいは有機酸付加塩（例えば、クエン酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、乳酸、プロピオン酸または酒石酸）を用いてもよい。
【０１１５】
本発明の医薬組成物は、制御放出形態で提供されてもよい。これは、所定の様式における生理学的な条件下で分解する物質と結びつけて、医薬として作用のある薬剤を提供することによって達成することができる。分解は酵素によるものでも、pHに依存するものでもよい。
【０１１６】
医薬組成物は血脳関門（BBB）を通過するように設計されてもよい。例えば、BBBを貫通することができる、脂肪酸、イノシトールまたはコレストロールのような担体が選択されてもよい。当該担体は、インスリンのような成長因子IまたはIIのような、脳内皮細胞内の特別な移動系統を通って脳に入る物質であってもよい。
【０１１７】
担体は作用剤と結合していてもよいし、作用剤を含有／混合していてもよい。BBBを通過するためにリポソームを用いることができる。WO91/04014は、作用剤がカプセルに入れられ／はめ込まれ得る、そして通常BBBを越えて運ばれる分子（例えば、インスリンまたはインスリンのような成長因子IまたはII）がリポソームの外表に存在する、リポソーム受け渡しシステムについて記載している。リポソーム配送システムは、米国特許No.4,704,355でも説明されている。
【０１１８】
本発明の範囲内の医薬組成物を、例えば経口（口腔内または舌下を含む）、直腸、鼻孔、局所的（口腔内、舌下、または経皮）、膣内または腸管外（皮下、筋肉内、静脈内、皮内を含む）経路のような、どのような適切な経路による投与に適合させてもよい。かかる組成物は、製薬技術において周知のいかなる方法、例えば一つ以上の活性成分の混和によって製造されてもよい。好ましい具体例では、本発明による化合物は、経口投与形態に組成されており、それゆえ錠剤またはカプセル剤の形状にて好ましく適用される。
【０１１９】
所望の投与経路によって、異なった薬物送達システムを本発明の医薬組成物の投与に用いることができる、薬物送達システムは、例えば、(Science 249、1527〜1533（1991）)にてLangerにより、また（BiotechnologyのCurrent Opinions 2ｍ254〜259（1991）にてIllumおよびDavisにより報告されている。薬物送達の異なる投与経路を次により詳細に考察する。
【０１２０】
(i)経口投与
経口投与に適した医薬組成物は、カプセル剤または錠剤；粉末または顆粒；溶液、シロップまたは懸濁液（水性または非水性液）；食用フォームまたはホイップ；または乳化剤として提供されてよい。錠剤またはゼラチンハードカプセル剤は、ラクトース、コーンスターチまたはその誘導体、ステアリン酸またはその塩を含んでいてもよい。
【０１２１】
ゼラチンソフトカプセルは植物油、ワックス、油脂、半固形、または液体ポリオール等を含んでいてもよい。溶液およびシロップは、水、ポリオールおよび砂糖を含んでいてもよい。懸濁液の調製には、油類（例えば、植物油）を、水中油型または油中水型の懸濁液を提供するために用いてもよい。
【０１２２】
経口投与用の作用剤は、胃腸内（例えば、モノステアリン酸グリセリン、またはジステアリン酸グリセリンを用いてもよい）での作用剤の融込み／吸収を遅らせるための材料を被覆または混和してもよい。
【０１２３】
かくして、作用剤の放出の維持は何時間にも亘って実現するが、必要であれば作用剤が胃の中で分解するのを防ぐこともできる。経口投与用の医薬組成物は特定のpHまたは酵素の状況により、胃腸内の所定の場所で作用剤が放出しやすくなるように組成される。
【０１２４】
(ii)経皮投与
経皮投与に適した医薬組成物は、長時間受容者の表皮に密着してずれないように意図された個別のパッチとして提供されてよい。例えば、活性成分はイオン泳動によってパッチから送達されてよい。(イオン泳動はPharmaceutical Research、3（6）：318（1986）に記載されている。)
【０１２５】
(iii)局所適用
局所投与に適した医薬組成物は、軟膏、クリーム、懸濁液、ローション、パウダー、溶液、ペースト、ゲル、スプレ−、エアゾールまたはオイルとして提供されてもよい。皮膚、口、目またはその他の外部組織への局所適用には、外用軟膏またはクリームを用いるのが好ましい。軟膏に組成される場合、活性成分は、パラフィンまたは水混和性の軟膏ベースに用いられる。
【０１２６】
もう一つの選択肢としては、活性成分は、水中油基または油中水剤のクリームの中に調剤されてもよい。目への局所適用に適した医薬組成物は目薬を含む。ここで、活性成分は、例えば水性溶媒のような適当な担体に溶解または懸濁され得る。口腔の局所適用に適した医薬組成物は、錠剤、トローチ剤および嗽薬を含む。
【０１２７】
(iv)直腸内投与
直腸投与に適した医薬組成物は坐薬、浣腸剤として提供される。
【０１２８】
(v)鼻腔投与
鼻腔への投与だけでなく、鼻腔を経て例えば肺のような別の部位への投与を含む。
鼻腔投与に適した医薬組成物は、固形担体、例えばパウダー（好ましくは、分子径が２０〜５００ミクロンを有する）を用いてもよい。嗅ぎタバコを吸う要領で、すなわち鼻に近接して保持されたパウダー容器から鼻を通じて急速に吸い込むことによって、パウダーを服用することができる。または、鼻腔投与に用いられる組成物は、液体保持具（例えば鼻スプレー、点鼻液を含む）を用いる。これらは、活性成分の水性または油性溶液を含む。
【０１２９】
吸入投与用の組成物を、特別に対応させた装置、例えば圧力エアロゾル、噴霧器または吸入器にて供給してもよい。所定量の活性成分を投与するために、これらの装置を作成してもよい。
【０１３０】
(vi)   膣内投与
膣内投与に適した医薬組成物は、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォームまたはスプレー製剤として提供されてよい。
【０１３１】
(vii)  腸管外投与
腸管外投与に適した医薬組成物は、水性または非水性の滅菌注射溶液または懸濁液を含む。これらは、対象受容体の血液と実質的に等張性である組成物を提供する、抗酸化物、緩衝剤、静菌剤、溶質を含んでいてもよい。かかる組成物に存在し得るその他の成分は、例えば、水、アルコール、ポリオール、グリセリンおよび植物油を含む。
【０１３２】
腸管外投与に適した組成物は、単位投与または多重投与容器内、例えば密閉アンプルおよび小瓶に入れられ、使用直前に、例えば注射用滅菌水のような滅菌液担体の添加だけが要求されるフリーズドライ(凍結乾燥)の状態で保存されていてもよい。滅菌パウダー、顆粒および錠剤から即席の注射溶液および懸濁液を製造してもよい。
上記のことから、多様な方法によって本発明の組成物を調剤することができることが理解される。
【０１３３】
投与量
治療の性質、治療を受ける個々人の年齢および病状等により、本発明の化合物の投与量は広範な限度内で変動し、内科医が最終的に適切な投与量を決定する。
【０１３４】
しかしながら、特定の投与量に縛られることなく、一日10μg〜100mg/kg体重という本発明の化合物の投与量が適切である。
より好ましくは、投与量は一日当り5〜50mg/kg体重である。適切な限り何度繰り返して投与してもよい。副作用があれば、良い臨床慣例にならって、投与量および／または頻度を減らせばよい。
【０１３５】
研究用途
本発明の化合物は、研究において有用である。例えば、次の一つ以上の分析用の研究ツールとして用いることができる：HSF、NF−κB、熱ショック応答、ウィルス複製、ウィルス性疾患、細菌性疾患、放射線障害（例えば紫外線による）、炎症性疾患、免疫系疾患、虚血、動脈硬化症、細胞増殖関連疾患(例えば癌)、細胞損傷または破壊関連疾患（例えば酸化細胞損傷）、および糖尿病。
【０１３６】
その他の用途
本発明の化合物は、植物のウィルス障害にも有用である。熱ショック応答の基本的メカニズムは、植物でも動物でも同様な様式で働き、本発明の化合物によって、植物でも動物でも同様な様式で、直接的な抗ウィルス効果が生み出されることが当然期待されるので、植物のウィルス性感染症治療において本発明の化合物を使用することは、本発明の適用範囲内である。
【０１３７】
これらの感染症には、非限定的に、ジェミニウィルス、ラブドウィルス、コリモウィルス、ブロモウィルス、トブラモウィルス、ポティウィルスおよびポテックスウィルスの、植物を媒介とした感染症が含まれる。ウィロイド（非限定的に、ジャガイモやせいも病ウィロイド、ホップ発育阻害ウィロイドおよびココナッツカダンカダンウィロイド）による感染症の処置において、本発明の化合物を使用することも本発明の範囲内である。
【０１３８】
本発明の化合物は、水生生物（例えば魚、甲殻類等）に作用するウィルス性等の疾患を治療する上で特に有用である。かかる障害は、口吻潰瘍ウィルス、イリドウィルス、リンパ嚢胞病ウィルス、感染性サーモン貧血、ノダウィルス等に媒介される疾患を含む。
【０１３９】
したがって、本発明の化合物は養殖に用いてもよい。水生生物の飼料に用いてもよい。該飼料は本発明の範囲内である。この飼料は、密閉容器に入れられ、適切なラベルが貼られて販売される(例えば、魚の餌、甲殻類飼料、水生生物用飼料等)。また、本発明の化合物は、水処理用または水生生物への直接適用に用いてもよい。したがって、当該化合物は有用となるために飼料中に存在する必要はない。
【実施例】
【０１４０】
式IIの化合物は、次の一般的方法（一般的方法A）を用いて式Iの対応化合物から製造することができる。
【化３】
2005511775.tif 000005
【０１４１】
一般的方法：トリエチルアミンの触媒量（20μl）を、エノン（１）（0.25ｍM）とチオール（0.25〜0.275ｍM）の乾燥クロロホルム（5ml）溶液に室温で加え、反応混合物を窒素雰囲気下で室温にて１〜３日間攪拌する。次いで、クロロホルムを真空下に除去し、残渣を酢酸エチルのへキサン溶液を溶出剤として用いるシリカフラッシュカラムクロマトグラフィで精製して、表題の化合物２を得る。この一般的な方法の適用例を下記の実施例３に示す。
【０１４２】
実施例１
４−tert−ブチルジメチルシリルオキシ−シクロへキス−２−エン−1−オン（化合物A）の合成：
本化合物は、J.Amer、Chem.Soc.;(1989)；111；7；2599−2604；Danishefsky、Samuel J.；Simoneau、BrunoおよびTetrahedron Lett.;(1996)；37；27；4679−4682；Pour、Milan；Negishi、Ei-ichiに記載されている方法に従って合成された。
【０１４３】
用いられた反応式は次の通りである：
【化４】
2005511775.tif 000006
【０１４４】
実施例２
５−tert−ブチルジメチルシリルオキシ−シクロヘキス−2−エン−１−オン（化合物B）の合成
合成経路：
【０１４５】
【化５】
2005511775.tif 000007
【０１４６】
A)シス,シス−1,3−ジヒドロキシ−5−tert−ブチルジメチルシリルオキシ−シクロ      ヘキサン  ２の製造
【化６】
2005511775.tif 000008
【０１４７】
市販のシス,シス−1,3,5−トリヒドロキシシクロヘキサンジハイドレート(Aldrich：3.02g、18.0mmol)を無水エタノールとトルエンの混液（1/1）150mLに溶解した。原料中に当初存在した水２分子を、回転式蒸発装置で溶媒の共沸蒸発により除去した。この操作を、溶媒としての（新たに蒸留しKOH上で保存した）ピリジン34mLで、2回繰り返した。得られた白色粉体１を、次いでピリジン45mLに溶解し、予備活性化された分子篩４A、15mLで30分間処理した。
【０１４８】
得られた無水溶液を、次いでシリンジで反応フラスコに移した。ピリジン合計30mLで分子篩を２度洗浄し、反応フラスコ中の最初の45mLと合わせた。tert−ブチルジメチルクロロシラン（3.01g、19.8mol、1.1 eq.）の無水THF（10mL）溶液を、次いでフラスコに加え、反応混合物をアルゴン下に、室温で14時間攪拌した。次いで、水1mLを加えて反応を止め、ピリジンを(45℃以下で)回転式蒸発装置で除去し、残渣をエチルアセテートと水の混液に溶解した。水相をEtOAc(3*30ｍL)で抽出し、合わせた有機相をNH4Clの飽和溶液で洗浄した。有機溶液を次いでMgSO4で乾燥し、ろ過し、蒸発させて、5.14ｇの無色の油を得た。この化合物を次いで、CC（初めはジエチルエーテル、次いでEtOAc）により精製して、1.6gのジシリル化化合物とともに、所期の物質（8.8mmol、η＝49％）2.17gを白色固形物として得た。
【０１４９】
1H-NMR(CDCl3,250MHz):δ＝3.84(3H,m,CH-O); 2.06(3H,m); 1.68-1.45（5H,m）; 0.89（9H,s,-OSiMe2tBu）; 0.08(6H,s,-OSiMe2tBu)。
13C-NMR(CDCl3,400MHz):δ＝67.16,C(5); 6.29,C(1)+C(3); 2.84,C(4)+C(6);
42.67,C(2); 31.50,C(-OSiMe2C(CH3)3); 25.80,C(-OSiMe2C(CH3)3); -4.79,-
OSiMe2 tBu )。
【０１５０】
【表１】
2005511775.tif 000009
【０１５１】
B)  シス,シス−1−ヒドロキシ−3−パラトルエンスルホネート−5−tert−ブチルジ    メチルシリルオキシ−シクロヘキサン  3の製造
【化７】
2005511775.tif 000010
【０１５２】
乾燥ピリジン0.6mL (7.5mmol、1.5eq.)と4−N,N−ジメチル−ピリジン(cat.)20mgを、シス,シス−1,3−ジヒドロキシ−5−tert−ブチルジメチルシリルオキシ−シクロへキサン（２）(1.23g、5.0mmol)の無水CH2Cl210mL溶液に加えた。パラトルエン−スルホニルクロライド1.14g (6.0mmol、1.2 eq.)を加え、混合物を室温で15時間アルゴン下に反応させた。この間の最後に、抽出アリコートのTLC分析では、未反応の出発材料２の残留を示さなかった（TLC:Et2O/へキサン(1/1)）。
次いで、水20mLを加えてこの反応を止め、水相をジエチルエーテル（3*20ｍL）で抽出した。合わせた有機相をNH4Cl飽和溶液30ｍLで洗浄し、MgSO4で乾燥し、ろ過し、蒸発させて、橙色の油を得た。
この化合物を次いでCC（Et2O/ヘキサン：(1/1)：Rf=0.35））により精製して、所期の物質３(3.3mmol、η＝66％)1.32gを白色ワックスとして得た。
【０１５３】
1H-NMR(CDCl3,250MHz):δ=7.79(2H,d,J=8.2 Hz,Tos); 7.34(2H,d,J=8.2 Hz,Tos); 4.43(1H,m,CH-OTos); 3.59(2H,m,CH-OH+CH-OTBS); 2.44(3H,
s,Tos);2.21-1.93(3H,m);1.58-1.25(4H,m)0.84（9H,s,-OSiMe2tBu）;0.01&-
0.01(2*3H,s, -OSiMe2 tBu )。
13C-NMR(CDCl3,400MHz):δ=144.74-OSO2-Cトリル134.51,Cトリル-CH3; 129.86＆127.71,CHトシル;75.81,C(3); 65.80,C(1); 65.28,C(5); 43.53,C(&); 40.93,C(2); 40.60, C(4); 30.90,C(-OsiMe2CCH3)3); 25.72,C(-OSiMe2C(CH3)3); 21.63,Meトシル ; -
4.81,-OSiMe2tBu)。
【０１５４】
【表２】
2005511775.tif 000011
【０１５５】
C)  5−tert−ブチルジメチルシリルオキシ−シクロヘキス−２−エン−1−オン  4の    製造
【化８】
2005511775.tif 000012
【０１５６】
ピリジニウムクロロクロメートPCC0.79g (3.68mmol、1.2eq.)を、シス,シス−1−ヒドロキシ−3−パラトルエンスルホネート−5−tert−ブチルジメチル−シリルオキシ−シクロヘキサン(3)(1.23g、3.07mmol)の乾燥CH2Cl2  20mL溶液に、アルゴン下、室温で加えた。懸濁液を次いで3時間加熱還流した。この間の最後に、抽出されたアリコートのTLC分析では、未反応の出発材料３の残留を示さず、二つの新たな化合物が形成されたことを示した；酸化生成物（Rf=0.1）および表題の化合物４自体（Rf=0.33 ）(TLC：Et2O/ヘキサン(1/3))。
【０１５７】
反応混合物を室温に冷却後、ジエチルエーテルを溶出剤として、高さ5cmの塩基性酸化アルミニウムパッド（カラム）を通して懸濁液をろ過した。化合物４を含むろ液を、次いで蒸発させて、無色の油580mgを得た。次いで、この化合物をさらにCC（Et2O/ヘキサン(1/3)：Rf=0.33）で精製して、４  556mg (2.45mmol, η =80%)を、無色の油として得た。これをフリーザー中で結晶化させると白色固体（Mp<0℃）となる。
【０１５８】
1H-NMR(CDCl3,250MHz):δ=6.88(1H,ddd, J=(2,3)= 12.7,J(3,4)+J(3,4')
=6.5&4.5Hz,H-C(3)); 6.06(1H,dt,J(2,4)=J(2,4')=2.4Hz,H-C(2)); 4.24(1H,ddt,
J(5,6)=11.4,J(4,5)=9.3&J(5,6')=J(5,4')5.5Hz,H-C(5)); 2.67&2.48(2H,システムABX,Jgem=19.2,H+H'-C(6)); 2.60&2.38(2H,システムABX2Y, H+H'-C(4)); 0.89(9
H,s,-OSiMe2tBu); 0.07(6H,s, -OSiMe2 tBu )。
13C-NMR(CDCl3,400MHz):δ=147.13-C(3);130.52,C(2);67.99,C(5);
48.44,C(6);35.96,C(4);26.07,C(-OSiMe2C(CH3)3);-4.38&-4.46,-OSiMe2tBu)。
(４級炭素欠失・・・再度実施)
【０１５９】
【表３】
2005511775.tif 000013
【０１６０】
実施例３
（R）−2−tert−ブトキシカルボニルアミノ−3−[（1S,2S）−2−(tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ)−５−オキソ−シクロヘキシルスルファニル]−プロピオン酸メチルエステルの製造
【化９】
2005511775.tif 000014
【０１６１】
一般的方法Aに従って、触媒量のトリエチルアミン(3滴)を加えたBoc−システイン(60mg、0.25mmol)の無水クロロホルム(1.4cm3)溶液を、エノン１(56mg、0.25mmol)の無水クロロホルム（1cm3）溶液に加えた。反応混合物をアルゴン下で16時間攪拌した。TLC分析によりエノンの消失が確認された。溶媒を減圧下に除去して、無色の油を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー[Ｒf＝0.30(ジエチルエーテル/ヘキサン；1：1)]により精製して、室温の放置で固化する、付加物２（78mg、68％収率）を無色の油として得た；次いで、システイン付加物を、(ジエチルエーテル/ヘキサン；1/3)から再結晶した。m.p.91-93℃。
【０１６２】
[α]D20+62(c=1.0,CHCL3);δH (250MHZ,CDCl3)0.12
(6H,br.s,-SitBu(CH3)2),0.91(9H,s,-SiMe2C(CH3)3),1.44(9H,s,
-OC(CH3)3),1.80-1.90(1H,m,AB-C(5)),2.12-2.30(2H,m,AB-C(5)+
AB-C(6)),2.37(1H,dd,J15.0および3.0Hz,AB-C(2)),2.52-2.68
(1H,m,AB-C(6)),2.98＆3.00(2H,br.AB,-CH2S-),3.05(1H,dd,J5.0
および15.0Hz,AB-C(2)),3.17(1H,m,H-C(3),3.74(3H,s,-OCH3),4.02
(1H,m,H-C(4)),4.51-4.60(1H,m,CH(Cys)),5.36(1H,d,J8.0 Hz,NH)。
【０１６３】
本発明による化合物の活性
本発明の好ましい化合物は、以下の実施例４および５に記載の一つ以上のアッセイにおいて活性を有する。
【０１６４】
実施例４
転写因子HSFおよびNF−κBの反応性への本発明の化合物の効果：
方法：ヒトリンパ芽球様細胞Jurkat T細胞を、5％のCO2雰囲気下において37℃で、A.Rossiらによる報告の方法（Proc.Natl.Acad.Sci.USA94:746〜750、1997）に従って、10％の仔牛胎児血清（FCS, Hyclone Europe Ltd.,UK）２mMグルタミンおよび抗性物質を補充したRPM1 1640培地（GIBCO  BRL、ゲーサーズブルグ、MD）に培養した。テスト化合物を、100％エタノール保存溶液（100mM）としてまたはDMSO(100ｍM)中に貯え、使用時に培地中で適当な濃度に希釈した。
【０１６５】
細胞を1時間、異なる濃度のテスト化合物で処理し、その後NF−κBの強力な誘導体である、12−O−テトラデカノイルホルボール−13−アセテート（TPA、25ng／ml）で刺激を与えた。調整細胞は等量の調整希釈剤を受容した。3時間後、全細胞の抽出物を準備し、HSFまたはNF−κBの作用を検出するためにA.Rossiらにより記載の方法（Proc.Natl.Acad.Sci.
USA 94:  746〜750、1997）に従い、EMSA（電気泳動移動度）によるDNA−結合作用の分析に供した。
【０１６６】
P65（Rel.A）またはHSF-1、NF−κBおよびHSFのそれぞれに特有の多クローン性抗体による免疫反応性で、タンパク質−DNAコンプレックスの特異性が確認された。
NF−κB−およびHSF−DNAコンプレックス組成の定量評価は、分子動力学燐光画像（MDP）分析により計測され、A.Rossiら（J.Biol.Chem.273: 16446〜16452、1998）に記載のように任意の単位で表された。代表的な実験の結果を、(上記で同定された)化合物Aについては図１ｂに、そして(上記で同定された)化合物Bについては図２ｂに示す。
【０１６７】
実施例5
転写因子HSFおよびNF-κBの反応性に対する本発明化合物の効果
(第二の方法)：
方法：ヒトhsp70プロモーターにより調整されたルシフェラーゼリポータープラスミドで安定的にトランスフェクトされたHeLa細胞クローン13B、および合成NF-κB-STM構造により調整されたルシフェラーゼリポータープラスミドで安定的にトランスフェクトされたHeLaκB  形質転換細胞を、10％FBS、Lグルタミン（２ｍM）およびG418(250μg/ml)を補充したDMEM培地中に、37℃で、CO2５％の加湿雰囲気下に維持した。
【０１６８】
96ウェルプレート中に４×104の細胞/ウェル密度で、細胞を植種した。18〜20時間後、培地を除去し、細胞を無血清培地中に適当に希釈された試験化合物(100μｌ)で８時間処理した。NF‐κB依存性リポーター遺伝子アッセイのために、化合物への暴露後、細胞をTPA(2ng/ml)で2時間刺激した。
【０１６９】
インキュベーション後、培地を除去し、細胞を10μｌのリーシス緩衝液中で分離した。基質100μlを加え、Victor1420マイクロプレートリーダー（Wallac、フィンランド）を用いて光の放出を測定することにより、ルシフェラーゼ活性を測定した。
【０１７０】
ＮＦ‐κＢ−ＬＵＣで安定的にトランスフェクトされたHeLa細胞クローンの製造
ルシフェラーゼ遺伝子(ＰＲＯＭＥＧＡ)を含むｐＧＬ３基本ベクターからのKpnＩ−BamＨＩフラグメントを、BglII−KpnIでダイジェストされたpcDNA３ベクター（INVITROGEN）中に挿入した。（この消化により、CMV-プロモーターがpcDNA3から取り除かれる）。得られた新しいベクターをKpn I−Hind IIIで消化し、「5xNF−κB結合サイト‐TATAボックス」を含有するブロモーターをルシフェラーゼ遺伝子の上流に挿入した。このベクターをSTMと命名した。
【０１７１】
ＮＦ−κＢのコントロール下にあるルシフェラーゼ遺伝子を発現させる安定したHeLaセルラインを得るために、HeLa細胞をSTM‐Pvu I線状ベクターで（リポフェクタミン プラス  GIBCOを用いて）トランスフェクトし、G418 (800 μg/ml)で20日間選択した。選択後、耐性HeLa細胞プールを、TNFα、IL−１およびTPAで刺激した後、ルシフェラーゼ活性のために（４倍のサンプル中で）調整した。
それぞれのルシフェラーゼ活性は以下のとおりであった。
【０１７２】
【表４】
2005511775.tif 000015
クローンを選択した。
【０１７３】
２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−3−[２−(tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ)−5−オキソ−シクロヘキシルスルファニル]−プロピオン酸メチルエステル（ＣＴＭ−68）、式Ｃの化合物、および２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−3−[3−(tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ)−5−オキソ−シクロヘキシルスルファニル]−プロピオン酸メチルエステル(CTM−78)、式Dの化合物について、得られた結果は次のとおりである。
【０１７４】
【表５】
2005511775.tif 000016
【０１７５】
HSFについてのAC200/μMは、このアッセイで試験化合物がHSF活性を倍増させた濃度である。NF−κBについてのIC50/μMは、このアッセイで試験化合物がNF−κBの活性を半減させた濃度である。これらの結果は、試験化合物が強力なNF−κB抑制剤およびHSF活性剤であることを示している。
【０１７６】
実施例６
アラマーブルー細胞毒性アッセイ
HeLa細胞を、96−ウェルマイクロタイタープレート中、100μlの培地に配した（４×104/ウェル）。20時間後、細胞を異なる希釈度の試験化合物に暴露し、さらに8時間、37℃で、５％のCO2加湿雰囲気下に培養した。6時間の培養後、アラマーブルーを、培養量(10μl)の10％に等しい量加えた。アラマーブルーを加えて２時間後、Victor1420マイクロプレートリーダーを用いて、蛍光を測定した。
化合物CTM−68およびCTM−78についての結果を次に示す。
【０１７７】
【表６】
2005511775.tif 000017
【０１７８】
LC50/μMは、このアッセイで細胞の半分を殺した試験化合物の濃度である。これらの結果は、それらの濃度が、実施例６においてNF−κBを抑制し、HSFを活性化させることを示した濃度を顕著に上回るまでは、試験化合物がHeLa細胞に対して著しく細胞毒性とならないことを示している。
【０１７９】
実施例７
センダイウィルスの複製に対する発明化合物の効果
方法：  サルの腎臓37RC細胞を、T細胞に関する実施例3に記載の条件下37℃で生育させた。10日令の孵化卵尿膜腔中でパラインフルエンザセンダイウィルス（SV）を生育させた。ウィルス滴定量を、ml当たりの血球凝集単位（HAU）で示す；C.Amiciら（J.Virol.68:6890〜6899、1994）に記載のとおり、ヒトのO型Rh＋赤血球細胞を用い、標準方法に従って、血球凝集滴定を行った。37RC細胞の融合性単層を、37℃で１時間SVウィルス（５HAU／１０5細胞）に感染させ、次いで異なる濃度の試験化合物で処理した。
【０１８０】
感染後24時間のウィルス収量を、HAU滴定による感染細胞の上澄液中で測定した。代表的な実験の結果を、(上記で特定された)化合物Aについては図１aに、(上記で特定された)化合物Bについては図２aに示す。これらの結果は、これらの後者の化合物が、センダイウィルス複製の潜在的な抑制剤であることを示している。このアッセイは化合物CTM‐68およびCTM−78に対しても実施され、これらの実験結果は以下に示されている。
試験化合物について24時間でのID50（50％抑制量/濃度）値を以下に示す。
【０１８１】
【表７】
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【０１８２】
化合物AおよびBの抗ウィルス効果は、それらが未感染細胞に対して毒性である濃度より低い濃度で現れた。
【０１８３】
実施例８
ニュートラルレッドアッセイ
細胞生命力を、ニュートラルレッドアッセイを使って測定した。37RC細胞を24−ウェルプレート中で６×104細胞/ウェルの濃度でシードした。融合性の37RC単層を、異なる希釈度の試験化合物で、37℃で24時間処理した。培養後、培地を取り除き、40μg/mlニュートラルレッド染料（500μl/ウェル）を含むRPMI培地で、細胞を培養した。37℃で2時間後、単層をリン酸‐緩衝食塩水（PBS）、次いでCaCl2 １％およびホルムアルデヒド0.5％を含む溶液で洗浄した。洗浄後、1％酢酸/50％エタノールを含む溶液を、単層（250μl/ウェル）に加えた。室温で10分後、マイクロプレートリーダー（Victor 1420、Wallac）を用いて540nmで吸収度を測定した。
【０１８４】
このアッセイで化合物CTM‐68およびCTM−78のLD50（50％致死量/濃度）値は、それぞれ9.8μMおよび18.6μMであった。かくして、これらの化合物の抗ウィルス効果(実施例７参照)が、それらが未感染の３７RC細胞に対して毒性である濃度を十分に下回る濃度で現れることが確認された。
【０１８５】
実施例９
MTTアッセイ
細胞の増殖力は3−（４,５−ジメチルチアゾール−2−イル）−2,５−ジフェニルテトラゾリウムブロマイド（ＭＴＴ）アッセイで測定することができる。
未感染のＡ549（96ウェルプレート中7.5×104 細胞／ウェル）または37ＲＣ細胞（96ウェルプレート中2.5×104細胞／ウェル）を24時間、異なる濃度の本発明の化合物またはエタノール希釈液で処理した。この後、ＭＴＴ0.5％の ＰＢＳ溶液を10mlその単層に加え、混合物を37℃で２時間培養した。10％のトリトンＸ−100を含有する酸性イソプロパノールを100μl添加することにより、還元されたＭＴＴ（ホルマザン）を細胞から抽出し、ホルマザンの吸収性を、エリザマイクロプレートリーダー中で、２種類の波長（540および690mm）にて計測した。
【０１８６】
一般的備考：
前記の本発明についての記載事項は例証に過ぎず、したがって、前項の請求項に定める本発明の精神または範囲を逸脱しない限り、種々の変更および修正が行われてよい。
【０１８７】
好ましいまたは任意の特性を、本発明の特定の局面に関して記載する場合は、特に表記のない限り、その特性は、本発明のその他の局面に準用するものとする。
ここに引用されたすべての文献は、該文献において参照されたどの引用もそうであったように、引用によってここに組み込まれる。
【０１８８】
【表８】
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【０１８９】
【表８−１】
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【図面の簡単な説明】
【０１９０】
【図１】図１ａは実施例７における化合物Ａについての実験結果を示すグラフであり    、図１ｂは実施例４における化合物Ａについての実験結果を示すグラフである。
【図２】図２ａは実施例７における化合物Ｂについての実験結果を示すグラフであり    、図２ｂは実施例４における化合物Ｂについての実験結果を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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