(57)【要約】グルカゴン受容体上において、グルカゴンペプチドホルモンの作用に拮抗するように作用する新規化合物。更に特定すれば、グルカゴンアンタゴニストまたは逆アゴニストに関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（I）の化合物、並びにその何れかのジアステレオマー、エナンチオマーまたは互変異性体およびこれらを含むの混合物、またはその薬学的に許容可能な塩：
【化１】
2005511683.tif 000283
ここで、
Aは、
【化２】
2005511683.tif 000284
であり、
mは、0または1であり、
nは、0、1、2または3（但し、mおよびnは両方とも0ではない）であり、
R4は、水素、ハロゲンまたは -(CH2)o-OR5であり、
oは、0または1であり、
R5は、水素、C1-6-アルキル、C1-6-アルカノイル、アリールもしくはアリール-C1-6-アルキルであり、
R1およびR2は、独立に水素、ハロゲンまたはC1-6-アルキルであるか、またはR1およびR2が一緒になって二重結合を形成し、
R3は、水素、C1-6-アルキルまたはハロゲンであるか、またはR3およびR2が一緒になって酸素への二重結合を形成し、
Xは、アリーレンまたはヘテロアリーレンであり、これは任意にハロゲン、-CN、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-NO2、-OR8、-NR8R9およびC1-6-アルキルから選択される一つまたは二つの基R6およびR7で置換されてもよく、
R8およびR9は、独立に水素またはC1-6-アルキルであり、
Yは、-C(O)-、-O-、-NR10-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、または-CR11R12-であり、
R10は、水素またはC1-6-アルキルであり、
R11およびR12は、独立に水素、C1-6-アルキル、もしくはヒドロキシであるか、またはR11はR1と一緒になって二重結合を形成し、またR12は水素、C1-6-アルキルもしくはヒドロキシであり、
Zは、-C(O)-(CR13R14)p-、-O-(CR13R14)p-、-S-(CR13R14)p-、-S(O)-(CR13R14)p-、-S(O)2-(CR13R14)p-、-NR15-(CR13R14)p-、または-(CR13R14)p-であり、
pは、0、1または2であり、
R13およびR14は、水素、-CF3、-OCF3およびC1-6-アルキルから独立に選択され、
R15は、水素またはC1-6-アルキルであり、
Dは、任意に一以上の置換基R16、R17、R18、R19、R20およびR21で置換されたアリールまたはヘテロアリールであり、ここで、
R16、R17、R18およびR19は、独立に、
・水素、ハロゲン、-CN、-CH2CN、-CHF2、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-OCH2CF3、
-OCF2CHF2、-S(O)2CF3、-SCF3、-NO2、-OR22、-NR22R23、-SR22、
-NR22S(O)2R23、-S(O)2NR22R23、-S(O)NR22R23、-S(O)R22、-S(O)2R22、
-C(O)NR22R23、-OC(O)NR22R23 -NR22C(O)R23、-CH2C(O)NR22R23、
-OCH2C(O)NR22R23、-CH2OR22、-CH2NR22R23、-OC(O)R22、-C(O)R22 または
-C(O)OR22、
・C1-6-アルキル、C2-6-アルケニルまたはC2-4-アルキニル、
これは任意に、ハロゲン、-CN、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-NO2、-OR22、-NR22R23
およびC1-6-アルキルから選択される一以上の置換基で置換されてもよい
・C3-8-シクロアルキル、C4-8-シクロアルケニル、ヘテロシクリル、C3-8-シクロ
アルキル-C1-6-アルキル、C3-8-シクロアルキル-C1-6-アルコキシ、C3-8-シクロ
アルキルオキシ、C3-8-シクロアルキル-C1-6-アルキルチオ、C3-8-シクロアルキ
ルチオ、C3-8-シクロアルキル-C2-6-アルケニル、C3-8-シクロアルキル-C2-6-ア
ルキニル、C4-8-シクロアルケニル-C1-6-アルキル、C4-8-シクロアルケニ
ル-C2-6-アルケニル、C4-8-シクロアルケニル-C2-6-アルキニル、ヘテロシク
リル-C1-6-アルキル、ヘテロシクリル-C2-4-アルケニル、ヘテロシクリル-C2-6-
アルキニル、アリール、アリールオキシ、アリールオキシカルボニル、
アロイル、アリール-C1-6-アルコキシ、アリール-C1-6-アルキル、
アリール-C2-6-アルケニル、アリール-C2-6-アルキニル、ヘテロアリール、
ヘテロアリール-C1-6-アルキル、ヘテロアリール-C2-6-アルケニル、または
ヘテロアリール-C2-6-アルキニル、
その芳香環もしくは非芳香環系は、ハロゲン、-C(O)OR22、-CN、-CF3、-OCF3、
-OCHF2、-NO2、-OR22、-NR22R23およびC1-6アルキルから選ばれる一以上の置
換基で任意に置換されてもよく、
R22およびR23は、独立に水素、C1-6-アルキル、アリール-C1-6-アルキルもし
くはアリールであるか、またはR22およびR23が同じ窒素原子に結合するときは
該窒素原子と一緒になって、任意に窒素、酸素および硫黄から選択される一つま
たは二つの更なるヘテロ原子を含み、且つ任意に一つまたは二つの二重結合を含
む3〜8員のヘテロ環を形成してもよい
であるか、またはR16〜R19基のうちの二つは、これらが一緒に隣接位置に配置されるときは、ブリッジ-(CR24R25)a-O-(CR26R27)c-O-を形成してもよく、
aは、0、1、または2であり、
cは、1または2であり、
R24、R25、R26およびR27は、独立に水素、C1-6アルキルまたはフルオロであり、
R20およびR21は、独立に水素、C1-6アルキル、C3-8-シクロアルキル、またはC3-8-シクロアルキル-C1-6-アルキルであり、
Eは、任意に一つまたは二つの置換基R28およびR29で置換されてもよいC3-8-シクロアルキルもしくはC4-8-シクロアルケニル（前記置換基は独立に、
・水素、ハロゲン、-CN、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-OR33、-NR33R34、C1-6-アルキ
ル、C3-8-シクロアルキル、C3-8-シクロアルケニル、ヘテロアリールおよびア
リール、
ここで、前記ヘテロアリール基およびアリール記は、任意にハロゲン、-CN、
-CF3、-OCF3、-OCHF2、-NO2、-OR33,-NR33R34およびC1-6-アルキルから選ばれ
る一以上の置換基で置換されてもよく、
R33およびR34は、独立に水素またはC1-6-アルキルであるか、
またはR33およびR34は、これらが同じ窒素原子に結合するときは、該窒素原子
と一緒になって、任意に窒素、酸素および硫黄から選択される一つまたは二つの
更なるヘテロ原子を含み、且つ任意に一つまたは二つの二重結合を含む3〜8員
のヘテロ環を形成してもよい
から選択される）、アリール、ヘテロアリール、アリール-C2-4-アルケニル、またはアリール-C2-6-アルキニルであり、そのアリールもしくはヘテロアリール部分は任意に、上記で定義した一以上のR28、R29、R30、R31およびR32で置換されてもよく、ここでR28およびR29は上記で定義した通りであり、またR30、R31およびR32は独立に、
・水素、ハロゲン、-CHF2、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-OCH2CF3、-OCF2CHF2、-SCF3、
-OR35、-NR35R36、-SR35、-S(O)R35、-S(O)2R35、-C(O)NR35R36、
-OC(O)NR35R36、-NR35C(O)R36、-OCH2C(O)NR35R36、-C(O)R35および-C(O)OR35
・C1-6-アルキル、C2-6アルケニルおよびC2-4-アルキニル、
これらは任意にハロゲン、-CN、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-NO2、-OR35、-NR35R36
およびC1-6-アルキルから選択される一以上の置換基で置換されてもよい、
・C3-8-シクロアルキル、C4-8-シクロアルケニル、ヘテロシクリル、C3-8-シクロ
アルキル-C1-6-アルキル、C3-8-シクロアルキル-C2-6-アルケニル、C3-8-シクロ
アルキル-C2-6-アルキニル、C4-8-シクロアルケニル-C1-6-アルキル、C4-8-シク
ロアルケニル-C2-6-アルケニル、C4-8-シクロアルケニル-C2-6-アルキニル、
へテロシクリル-C1-6-アルキル、ヘテロシクリル-C2-6-アルケニル、ヘテロシ
クリル-C2-6-アルキニル、アリール、アリールオキシ、アロイル、
アリール-C1-6-アルコキシ、アリール-C1-6-アルキル、アリール-C2-6-アルケニ
ル、アリール-C2-6-アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール-C1-6-アルキ
ル、ヘテロアリール-C2-6-アルケニル、およびヘテロアリール-C2-4-アルキニル、
その芳香族または非芳香族の環は任意に、ハロゲン、-CN、-CF3、-OCF3、
-OCHF2、-NO2、-OR35、-NR35R36およびC1-6-アルキルから選択される一以上の
置換基で置換されてもよく、
ここで、
R35およびR36は、独立に水素、C1-6-アルキルまたはアリールであるか、
またはR35およびR36が同じ窒素原子に結合するときは、これらは該窒素原子と
一緒になって、任意に窒素、酸素および硫黄から選択される一つまたは二つの更
なるヘテロ原子を含み、且つ任意に一つまたは二つの二重結合を含む3〜8員の
ヘテロ環を形成してもよい、
であるか、またはR30、R31およびR32のうちの二つが同じ環炭素原子または隣接する環炭素原子に結合するときは、それらが一緒になって、ブリッジ-O-(CH2)t-CR37R38-(CH2)l-O-、-(CH2)t-CR37R38-(CH2)l-、または-S-(CH2)t-CR37R38-(CH2)l-S-を形成し、
tおよびlは、独立に0、1、2、3、4または5であり、
R37およびR38は、独立に水素またはC1-6-アルキルである。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物であって、Aが
【化３】
2005511683.tif 000285
ここで、
m、nおよびR4は請求項１に定義した通りである；
である化合物。
【請求項３】
請求項２に記載の化合物であって、Aが
【化４】
2005511683.tif 000286
である化合物。
【請求項４】
請求項２に記載の化合物であって、Aが
【化５】
2005511683.tif 000287
である化合物。
【請求項５】
請求項１に記載の化合物であって、Aが
【化６】
2005511683.tif 000288
である化合物。
【請求項６】
先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物であって、Xが、任意に請求項１で定義した通りに置換されてもよい単環式のアリーレンまたはヘテロアリーレンである化合物。
【請求項７】
先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物であって、Xが、
【化７】
2005511683.tif 000289
ここで、R6およびR7は請求項１で定義した通りである
である化合物。
【請求項８】
請求項７に記載の化合物であって、Xが、
【化８】
2005511683.tif 000290
ここで、R6およびR7は請求項１で定義した通りである
である化合物。
【請求項９】
請求項７または８に記載の化合物であって、R6およびR7が両者共に 水素である化合物。
【請求項１０】
先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物であって、Eが、
【化９】
2005511683.tif 000291
ここで、R28、R29、R30、R31およびR32は請求項１で定義した通りである
である化合物。
【請求項１１】
請求項１０に記載の化合物であって、Eが、
【化１０】
2005511683.tif 000292
ここで、R28、R29、R30、R31およびR32は請求項１で定義した通りである
である化合物。
【請求項１２】
請求項１１に記載の化合物であって、Eが、
【化１１】
2005511683.tif 000293
ここで、R30、R31およびR32は請求項１で定義した通りである
である化合物。
【請求項１３】
請求項１２に記載の化合物であって、Eが、
【化１２】
2005511683.tif 000294
ここで、R30、R31およびR32は請求項１で定義した通りである
である化合物。
【請求項１４】
請求項１１に記載の化合物であって、Eが、
【化１３】
2005511683.tif 000295
ここで、R28、R29、R30、R31およびR32は請求項１で定義した通りである
である化合物。
【請求項１５】
請求項１０〜１４の何れか１項に記載の化合物であって、R30、R31およびR32は独立に、
・水素、
・ハロゲン、-OCF3、-SCF3、-OCHF2または-CF3、
・C1-6-アルキル；これらは任意にフルオロ、-CN、-CF3、-OCF3、-OR35および
-NR35R36から選択される一以上の置換基で置換されてもよい、
・C3-8-シクロアルキルまたはC4-8-シクロアルケニル；これらは任意にフルオロ、
-CN、-CF3、-OCF3、-OR35、-NR35R36およびC1-6-アルキルから選択される一以
上の置換基で置換されてもよい、
・アリール、アリールオキシ、またはアリール-C1-6-アルコキシ；これらのアリー
ル部分は任意に、ハロゲン、-CN、-CF3、-OCF3、-NO2、-R35、-NR35R36および
C1-6-アルキルから選択される一以上の置換基で置換されてもよい、
であり、
R35およびR36は、独立に水素、C1-6-アルキルもしくはアリールであるか、
またはR35およびR36が同じ窒素原子に結合するときは、これらは該窒素原子と一緒になって、任意に窒素、酸素および硫黄から選択される一つまたは二つの更なるヘテロ原子を含み、且つ任意に一つまたは二つの二重結合を含む3〜8員のヘテロ環を形成してもよい化合物。
【請求項１６】
請求項１５に記載の化合物であって、R30、R31およびR32は独立に、
・水素、
・ハロゲン、-OCF3、-OCHF2または-CF3、
・C1-6-アルキル；これらは任意にフルオロ、-CN、-CF3、-OCF3、-OR35および
-NR35R36から選択される一以上の置換基で置換されてもよい、
・シクロヘキシルまたはシクロヘキシル-1-エニル；これらは任意にフルオロ、
-CN、-CF3、-OCF3、-OR35、-NR35R36およびC1-6-アルキルから選択される一以
上の置換基で置換されてもよい、
・フェニル：これは任意に、ハロゲン、-CN、-CF3、-OCF3、-NO2、-R35、
-NR35R36およびC1-6-アルキルから選択される一以上の置換基で置換されても
よい
・フェノキシまたはベンジルオキシ；これらのフェニル部分は任意に、ハロゲ
ン、-CN、-CF3、-OCF3、-NO2、-R35、-NR35R36およびC1-6-アルキルから選択さ
れる一以上の置換基で置換されてもよい、
であり、
R35およびR36は、独立に水素またはC1-6-アルキルである化合物。
【請求項１７】
請求項１０〜１６の何れか１項に記載の化合物であって、R30およびR32は両者ともに水素であり、R31は水素とは異なる化合物。
【請求項１８】
請求項１０に記載の化合物であって、Eが下記で表される化合物：
【化１４】
2005511683.tif 000296
【請求項１９】
請求項１８に記載の化合物であって、Eが下記で表される化合物：
【化１５】
2005511683.tif 000297
【請求項２０】
請求項１８に記載の化合物であって、Eが下記で表される化合物：
【化１６】
2005511683.tif 000298
【請求項２１】
請求項１０に記載の化合物であって、Eが下記で表される化合物：
【化１７】
2005511683.tif 000299
ここで、R30は請求項１に定義した通りである。
【請求項２２】
請求項２１に記載の化合物であって、
R30が
・ハロゲン、または
・ヘテロアリール：これは任意に、ハロゲン、-CN、-CF3、-NO2、-OR35、-NR35R36
およびC1-6-アルキルから選択される一以上の置換基で置換されてもよい
であり、
R35およびR36は、独立に水素またはC1-6-アルキルであるか、
またはR35およびR36が同じ窒素原子に結合するときは、これらは該窒素原子と一緒になって、任意に窒素、酸素および硫黄から選択される一つまたは二つの更なるヘテロ原子を含み、且つ任意に一つまたは二つの二重結合を含む3〜8員のヘテロ環を形成してもよい化合物。
【請求項２３】
請求項２２に記載の化合物であって
R30が、
・ハロゲン、または
・チエニル：これは任意に、ハロゲン、-CN、-CF3、-NO2、-OR35、-NR35R36、およ
びC1-6-アルキルから選択される一以上の置換基で置換されてもよい
であり、
R35およびR36は、独立に水素またはC1-6-アルキルであるか、
またはR35およびR36が同じ窒素原子に結合するときは、これらは該窒素原子と一緒になって、任意に窒素、酸素および硫黄から選択される一つまたは二つの更なるヘテロ原子を含み、且つ任意に一つまたは二つの二重結合を含む3〜8員のヘテロ環を形成してもよい化合物。
【請求項２４】
Eが下記で表される請求項２３に記載の化合物：
【化１８】
2005511683.tif 000300
【請求項２５】
先行する全ての請求項の何れか１項に記載の化合物であって、Yが、-C(O)-、-O-、-S(O)2-、-NH-、または-CH2-である化合物。
【請求項２６】
請求項１〜２４の何れか１項に記載の化合物であって、
Yが-CHR11-であり、
R11は、R1と共に二重結合を形成する化合物。
【請求項２７】
請求項２５に記載の化合物であって、Yが-C(O)-である化合物。
【請求項２８】
請求項〜２５または２７に記載の化合物であって、R1およびR2が両者共に水素である化合物。
【請求項２９】
請求項〜２５または２７に記載の化合物であって、R1およびR2が結合されて二重結合を形成する化合物。
【請求項３０】
先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物であって、R3が水素である化合物。
【請求項３１】
先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物であって、Zが
-C(O)-(CR13R14)p-、-O-(CR13R14)p-、-NR15-(CR13R14)p、または-S(O)2-(CR13R14)p-であり、p、R13、R14およびR15は請求項１で定義した通りである化合物。
【請求項３２】
請求項３１に記載の化合物であって、Zは、-NR15-(CR13R14)p、または-C(O)-(CR13R14)p-であり、pは請求項１で定義した通りであり、R13およびR14は独立に水素、-CF3、-OCF3およびC1-6-アルキルから選択され、またR15は水素である化合物。
【請求項３３】
請求項３２に記載の化合物であって、Zが-NH(CH2)p または
-C(O)-(CH2)p-であり、pは請求項１で定義した通りである化合物。
【請求項３４】
請求項３３に記載の化合物であって、Zが NHまたは-C(O)-である化合物。
【請求項３５】
請求項３４に記載の化合物であって、Zが-C(O)-である化合物。
【請求項３６】
先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物であって、Dが次式で表される化合物：
【化１９】
2005511683.tif 000301
ここで、R16、R17、R18、R19、R20およびR21は請求項１で定義した通りである。
【請求項３７】
請求項３６に記載の化合物であって、Dが次式で表される化合物：
【化２０】
2005511683.tif 000302
ここで、R16、R17およびR18は請求項１で定義した通りである。
【請求項３８】
請求項３７に記載の化合物であって、
R16、R17およびR18は独立に、
・水素、ハロゲン、-CN、-CH2CN、-CHF2、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-OCH2CF3、
-OCF2CHF2、-S(O)2CF3、-SCF3、-NO2、-OR22、-NR22R23、-SR22、
-NR22S(O)2R23、-S(O)2NR22R23、-S(O)NR22R23、-S(O)R22、-S(O)2R22、
-C(O)NR22R23、-OC(O)NR22R23、-NR22C(O)R23、-CH2C(O)NR22R23、
-OCH2C(O)NR22R23、-CH2OR22、-CH2NR22R23、-OC(O)R22、-C(O)R22または
-C(O)OR22から選択される一以上の置換基で置換されてもよい
・C1-6-アルキル：これは任意に、フルオロ、-CN、-CF3、-OCF3、-OR22および
-NR22R23から選択される一以上の置換基で置換されてもよい
・C3-8-シクロアルキル：これは任意に、フルオロ、-C(O)OR24、-CN、-CF3、
-OCF3、-OR22、-NR22R23 およびC1-6-アルキルから選択される一以上の置換基
で置換されてもよい
・アリールまたはアリールオキシ：これらは任意に、フルオロ、-C(O)OR24、-CN、
-CF3、-OCF3、-OR22、-NR22R23およびC1-6-アルキルから選択される一以上の
置換基で置換されてもよい
上記において、R22およびR23は独立に、水素、C1-6-アルキル、アリール-
C1-6-アルキルもしくはアリールであるか、またはR22およびR23が同じ窒素原
子に結合するときは、これらは該窒素原子と一緒になって、任意に窒素、酸素お
よび硫黄から選択される一つまたは二つの更なるヘテロ原子を含み、且つ任意に
一つまたは二つの二重結合を含む3〜8員のヘテロ環を形成してもよい、
であるか、または
・基R16〜R18のうちの二つが隣接位置に配置されるときは、それらが一緒になっ
てブリッジ-(CR24R25)a-O-(CR26R27)c-O-を形成してもよく、
ａは、0、1または2であり、
ｃは、1または2であり、
R24、R25、R26およびR27は、独立に水素、C1-6アルキルまたはフルオロである化合物。
【請求項３９】
請求項３８に記載の化合物であって、
R16、R17およびR18は独立に、
・水素、ハロゲン、-CF3、-OCF3、-SCF3、C1-6-アルキル、C1-6-アルコキシ、フェ
ニル、シクロペンチル、シクロヘキシルまたはフェノキシ、
であるか、または
・基R16〜R18のうちの二つが隣接位置に配置されるときは、それらが一緒になっ
てブリッジ-O-(CF2)2-O-、-CF2-O-CF2-O-、または-O-CH2-O-
を形成してもよい化合物。
【請求項４０】
請求項３６〜３９の何れか１項に記載の化合物であって、R16が水素であり、R17およびR18は水素とはことなる化合物。
【請求項４１】
請求項３６〜３９の何れか１項に記載の化合物であって、R16およびR17が水素であり、R18は水素とは異なる化合物。
【請求項４２】
一般式（I4）の請求項１に記載の化合物、並びにその何れかのジアステレオマー、エナンチオマーまたは互変異性体およびこれらを含む混合物、またはその薬学的に許容可能な塩：
【化２１】
2005511683.tif 000303
ここで、R6、R7、EおよびDは、請求項１、１０〜２２または３６〜４１の何れか１項において定義した通りである。
【請求項４３】
一般式（I5）の請求項１に記載の化合物、並びにその何れかのジアステレオマー、エナンチオマーまたは互変異性体およびこれらを含む混合物、またはその薬学的に許容可能な塩：
【化２２】
2005511683.tif 000304
ここで、R6、R7、EおよびDは、請求項１、１０〜２４または３６〜３９の何れか１項において定義した通りである。
【請求項４４】
下記一般式の請求項４３に記載の化合物、並びにその何れかのジアステレオマー、エナンチオマーまたは互変異性体およびこれらを含む混合物、またはその薬学的に許容可能な塩：
【化２３】
2005511683.tif 000305
ここで、R6、R7、EおよびDは、１、１０〜２４または３６〜４１の何れか１項において定義した通りである。
【請求項４５】
下記一般式の請求項４３に記載の化合物、並びにその何れかのジアステレオマー、エナンチオマーまたは互変異性体およびこれらを含む混合物、またはその薬学的に許容可能な塩：
【化２４】
2005511683.tif 000306
ここで、R6、R7、EおよびDは、１、１０〜２４または３６〜４１の何れか１項において定義した通りである。
【請求項４６】
一般式（I6）の請求項１に記載の化合物、並びにその何れかのジアステレオマー、エナンチオマーまたは互変異性体およびこれらを含む混合物、またはその薬学的に許容可能な塩：
【化２５】
2005511683.tif 000307
ここで、R6、R7、EおよびDは、１、１０〜２４または３６〜４１の何れか１項において定義した通りである。
【請求項４７】
先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物であって、明細書に記載のグルカゴン結合アッセイ（I）およびグルカゴン結合アッセイ（II）によって測定したときに、5μM以下のIC50値を有する化合物。
【請求項４８】
請求項４７に記載の化合物であって、明細書に記載のグルカゴン結合アッセイ（I）およびグルカゴン結合アッセイ（II）によって測定したときに、1 M未満、好ましくは500 nM未満、更に好ましくは100 nM未満のIC50値を有する化合物。
【請求項４９】
先行する全請求項の何れか1項に記載の化合物であって、高脂血症、IGT、２型糖尿病、１型糖尿病および肥満からなる群から選択される適用症の治療胃のために有用な薬剤である化合物。
【請求項５０】
医薬として使用するための、請求項１〜４９の何れか１項に記載の化合物。
【請求項５１】
一以上の薬学的に許容可能なキャリアまたは賦形剤とともに、活性成分として、請求項１〜４９の何れか１項に記載の少なくとも一つの化合物を含有する薬学的組成物。
【請求項５２】
単位投与量形態の請求項５１に記載の薬学的組成物であって、約0.05mg〜約1000mg、好ましくは約0.1mg〜約500mg、特に約0.5mg〜約200mgの請求項１〜４９の何れか１項に記載の化合物を含有する薬学的組成物。
【請求項５３】
請求項１〜４９の何れか１項に記載の化合物の使用であって、グルカゴンンアンタゴニスト作用が有用である障害または疾患を治療する医薬を調製するための使用。
【請求項５４】
請求項１〜４９の何れか１項に記載の化合物の使用であって、グルカゴンに媒介される障害および疾患を治療する医薬を調製するための使用。
【請求項５５】
請求項１〜４９の何れか１項に記載の化合物の使用であって、高脂血症を治療する医薬を調製するための使用。
【請求項５６】
請求項１〜４９の何れか１項に記載の化合物の使用であって、動物における血糖を低下させる医薬を調整するための使用。
【請求項５７】
請求項１〜４９の何れか１項に記載の化合物の使用であって、IGTを治療する医薬を製造するための使用。
【請求項５８】
請求項１〜４９の何れか１項に記載の化合物の使用であって、２型糖尿病を治療する医薬を製造するための使用。
【請求項５９】
請求項５８に記載の使用であって、IGTから２型糖尿病への進行を遅延または防止する医薬を製造するための使用。
【請求項６０】
請求項５８に記載の使用であって、非インスリン要求性２型糖尿病からインスリン要求性２型糖尿病への進行を遅延または防止する医薬を製造するための使用。
【請求項６１】
請求項１〜４９の何れか１項に記載の化合物の使用であって、１型糖尿病を治療する医薬を製造するための使用。
【請求項６２】
請求項１〜４９の何れか１項に記載の化合物の使用であって、肥満を治療する医薬を製造するための使用。
【請求項６３】
請求項１〜４９の何れか１項に記載の化合物の使用であって、異常脂血症を治療する医薬を製造するための使用。
【請求項６４】
請求項５３〜６１の何れか１項に記載の使用であって、更なる抗糖尿病剤での治療を含んでなるレジメにおける使用。
【請求項６５】
請求項５３〜６２の何れか１項に記載の使用であって、更なる抗肥満剤での治療を含んでなるレジメにおける使用。
【請求項６６】
請求項５３〜６２の何れか１項に記載の使用であって、更なる抗高脂血症剤での治療を含んでなるレジメにおける使用。
【請求項６７】
請求項５３〜６２の何れか１項に記載の使用であって、更なる血圧降下薬での治療を含んでなるレジメにおける使用。
【請求項６８】
グルカゴンアンタゴニスト作用が有益な障害または疾患を治療する方法であって、それを必要としている患者に対して、有効量の請求項１〜４９の何れか1項に記載の化合物、または請求項５１もしくは５２に記載の薬学的組成物を投与することを含んでなる方法。
【請求項６９】
請求項６８に記載の方法であって、前記化合物の有効量が、１日当り約0.05mg〜約2000mg、好ましくは約0.1mg〜約1000mg、特に好ましくは約0.5mg〜約500mgである方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の分野】
【０００１】
本発明は、グルカゴン受容体上において、グルカゴンペプチドホルモンの作用に拮抗するように作用する薬剤に関する。更に特定すれば、本発明はグルカゴンアンタゴニストまたは逆アゴニストに関する。
【発明の背景】
【０００２】
グルカゴンは、インスリンと協働して、血中グルコース量のホメオスタシス調節を媒介する重要なホルモン物質である。グルカゴンは、血中グルコースレベルが低下したときに、主に一定の細胞（殆どは肝細胞）を刺激してグルコースを放出させることにより作用する。このグルカゴンの作用はインスリンの作用とは逆であり、インスリンは、血中グルコースレベルが上昇したときに細胞を刺激してグルコースを摂取および蓄積する。グルカゴンおよびインスリンは両者共にペプチドホルモンである。
【０００３】
グルカゴンは、膵臓のα島細胞で産生され、インスリンはβ島細胞で産生される。糖尿病は、グルコース代謝に共通した障害である。この疾患は高血糖を特徴とし、インスリン依存性形態の１型糖尿病、またはインスリン非依存性を特徴とする２型糖尿病に分類される。１型糖尿病の患者は、高血糖および低インスリン性であり、この形態の疾患の慣用的治療法はインスリンを与えることである。しかし、１型または２型糖尿病の幾らかの患者では、絶対的または相対的に上昇したグルカゴンレベルが高血糖状態に寄与することが示されている。健康な対照動物、並びに１型および２型糖尿病のモデル動物の両者において、選択的且つ特異的抗体を用いた循環グルカゴンの除去により、血糖レベルの低下がもたらされた。これらの研究は、グルカゴン抑制またはグルカゴンに拮抗する作用が、糖尿病患者における高血糖の従来の治療法に対する有用な補助となり得ることを示唆している。グルカゴンの作用は、アンタゴニストまたは逆アゴニスト、即ち、グルカゴンに誘起された応答を阻害し、または妨げる物質を与えることによって抑制することができる。このアンタゴニストは本質的にペプチド性または非ペプチド性であることができる。
【０００４】
天然のグルカゴンは、下記の配列を有する29アミノ酸からなるペプチドである：
His-Ser-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-OH
グルカゴンは、その受容体に結合してこれを活性化することによりその作用を発揮するが、該受容体は、7回膜貫通Ｇタンパク質結合受容体ファミリーのグルカゴン-セクレチン分枝の一部である。当該受容体は、アデニルシクラーゼ・セカンドメッセンジャー系を活性化することによって機能し、その結果はcAMPレベルの増大である。
【０００５】
幾つかの刊行物が、グルカゴンアンタゴニストとして作用すると述べられたペプチド類を開示している。おそらく、最も完全に特徴付けされたアンタゴニストは、DesHis1[Glu9]-グルカゴンアミドである（Unson et al.，peptides 10，1171(1989)；Post et al.，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 90，1662(1993)）。他のアンタゴニストは、DesHis1, Phe6[Glu9]-グルカゴンアミド（Azizh et al.，Bioorganic & Medicinal Chem．Lett．16,1849(1995)）およびNLeu9、Ala11,16-グルカゴンアミドである（Unson et al.，J．Biol．Chem．269(17)，12548(1994)）。
【０００６】
ペプチドホルモン類のペプチドアンタゴニストは、非常に強力であることが多い。しかし、それらは生理学的酵素による分解およびインビボでの分布が乏しいため、一般には経口的に利用可能でないことが知られている。従って、ペプチドホルモン類の経口的に利用可能な非ペプチドアンタゴニストが一般に好ましい。この非ペプチドグルカゴンアンタゴニストの中で、キノキサリン誘導体である2-スチリル-3-[3-(ジメチルアミノ)プロピルメチルアミノ]-6,7-ジクロロキノキサリンは、ラット肝臓受容体を置換することが分った（Collins，J．L．et al.，Bioorganic、およびMedicinal Chemistry Letters 2(9)：915-918(1992)）。WO 94/14426(The Welcome Foundation Limited)は、スキリン(skyrin)、即ち、一対の連結された9,10-アントラセンジオン基を含む天然物およびその合成類縁体の、グルカゴンアンタゴニストとしての使用を開示している。米国特許第4,359,474号(Sandoz)は、1-フェニルピラゾール誘導体のグルカゴン阻害特性を開示している。米国特許第4,374,130号(Sandoz)は、グルカゴン阻害剤としての置換ジシラシクロヘキサン(disilacyclohexanes)を開示している。WO 98/04528(Bayer Corporation)は、グルカゴンアンタゴニストとしての置換ピリジンおよびビフェニル類を開示している。米国特許第5,776,954号(Merck & Co.、Inc.)は、グルカゴンアンタゴニストとしての置換ピリジルピロールを開示しており、またWO 98/21957、WO 98/22108、WO 98/22109および米国特許第5,880,139号(Merck & Co.，Inc.)は、グルカゴンアンタゴニストとしての2,4-ジアリール-5-ピリジルイミダゾールを開示している。更に、WO 97/16442および米国特許第5,837,719号(Merck & Co.、Inc.)は、グルカゴンアンタゴニストとしての2,5-置換のアリールピロールを開示している。WO 98/24780、WO 98/24782、WO 99/24404およびWO 99/32448(Amgen Inc.)は、置換ピリミジノンおよびピリドン化合物、並びに置換ピリミジン化合物をそれぞれ開示しており、これらはグルカゴンアンタゴニスト活性を有していると述べられている。Madsen et al.(J．Med．Chem．1998(41) 5151-7)は、一連の2-(ベンズ-イミダゾール-2-イルチオ)-l-(3,4-ジヒドロキシフェニル)-1-エタノンを、拮抗的ヒトグルカゴン受容体アンタゴニストとして開示している。WO 99/01423およびWO 00/39088(Novo Nordisk A/S)は、異なる一連のアルキリデンヒドラジドを、グルカゴンアンタゴニスト／逆アゴニストとして開示している。WO 00/69810、WO 02/00612、WO 02/4444、WO 02/40445、およびWO 02/40446(Novo Nordisk A/S)は、更なる種類のグルカゴンアンタゴニストを開示している。
【０００７】
これら公知のグルカゴンアンタゴニストは、本発明の化合物とは構造的に異なっている。
【定義】
【０００８】
以下は、本発明の化合物を説明するために使用される用語の詳細な定義である：
「ハロゲン」は、F、Cl、BrおよびIからなる群から選択される原子を意味する。
【０００９】
ここで使用する「C1-6-アルキル」の用語は、1〜6の炭素原子を有する分岐鎖もしくは直鎖の飽和炭化水素基を表す。代表的な例には、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、tert-ペンチル、n-ヘキシル、イソヘキシル等が含まれるが、これらに限定されない。
【００１０】
ここで使用する「C2-6-アルケニル」の用語は、2〜6の炭素原子および少なくとも一つの二重結合を有する、分岐鎖若しくは直鎖の炭化水素基を表す。このような基の例には、ビニル、1-プロペニル、2-プロペニル、イソ-プロペニル、1,3-ブタジエニル、1-ブテニル、2-ブテニル、3-ブテニル、2-メチル-1-プロペニル、1-ペンテニル、2-ペンテニル、3-ペンテニル、4-ペンテニル、3-メチル-2-ブテニル、1-ヘキセニル、2ヘキセニル、3-ヘキセニル、2,4-ヘキサジエニル、5-ヘキセニル等が含まれるが、これらに限定されない。
【００１１】
ここで用いる「C2-6-アルキニル」の用語は、2〜6の炭素原子および少なくとも一つの三重結合を有する、分岐鎖もしくは直鎖の炭化水素基を表す。このような基の例には、 エチニル、1-プロピニル、2-プロピニル、1-ブチニル、2-ブチニル、3-ブチニル、1-ペンチニル、2-ペンチニル、3-ペンチニル、4-ペンチニル、1-ヘキシニル、2-ヘキシニル、3-ヘキシニル、4-ヘキシニル、5-ヘキシニル、2,4-ヘキサジニル等が含まれるが、これらに限定されない。
【００１２】
ここで用いる「C1-6-アルコキシ」の用語は、-O-C1-6-アルキルの基を意味し、ここでC1-6-アルキルは上記で定義したとおりである。
【００１３】
代表的な例は、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、sec-ブトキシ、tert-ブトキシ、ペントキシ、イソペントキシ、ヘキソキシ、イソヘキソキシ等である。
【００１４】
ここで用いる「C3-8-シクロアルキル」の用語は、3〜8の炭素原子を有する飽和の炭素環基を表す。代表的な例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル等である。
【００１５】
ここで使用する「C4-8-シクロアルケニル」の用語は、4〜８の炭素原子を有し、且つ1または2の二重結合を含む非芳香族性の炭素環基を表す。代表的な例は、1-シクロペンテニル、2-シクロペンテニル、3-シクロペンテニル、1シクロヘキセニル、2-シクロヘキセニル、3-シクロヘキセニル、2-シクロヘプテニル、3-シクロヘプテニル、2-シクロオクテニル、1,4-シクロオクタジエニル等である。
【００１６】
ここで用いる「ヘテロシクリル」の用語は、窒素、酸素および硫黄から選択される一以上のヘテロ原子を含み且つ任意に1または2の二重結合を含む、3〜10員の非芳香族性環状基を表す。代表的な例は、ピロリジニル、ピペリジル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、アジリジニル、テトラヒドロフラニル等である。
【００１７】
ここで用いる「アリール」の用語は、芳香族性の炭素環系、例えば6員の単環系、並びに9〜14員の二環および三環系の芳香族炭素環系を含めることを意図している。代表的な例は、フェニル、ビフェニリル、ナフチル、アントラセニルフェナントレニル、フルオレニル、インデニル、アズレニル等である。アリールはまた、上記で列記した環システムの部分的に水素化された誘導体をも含めることを意図している。このような部分的に水素化された誘導体の非限定的な例は、1,2,3,4-テトラヒドロナフチル、1,4-ジヒドロナフチル、インダニル等である。
【００１８】
ここで用いる「アリーレン」の用語は、二価の芳香族炭素環系、例えば6員の単環系、並びに9〜14員の二環および三環系の二価値の芳香族炭素環系を含めることを意図している。代表的な例は、フェニレン、ビフェニリレン、ナフチレン、アントラセニレン、フェナントレニレン、フルオレニレン、インデニレン、アズレニレン等である。アリーレンもまた、上記で列記した環系の部分的に水素化された誘導体を含めることを意図している。このような部分的に水素化された誘導体の非限定的な例は、1,2,3,4-テトラヒドロナフチレン、1,4-ジヒドロナフチレン等である。
【００１９】
ここで用いる「アリールオキシ」の用語は、-O-アリール基を意味し、ここでのアリールは上記で定義した通りである。
【００２０】
ここで用いる「アロイル」の用語は、-C(O)-アリール基を意味し、ここでのアリールは上記で定義した通りである。
【００２１】
ここで用いるC1-6-アルカノイルの用語は、-C(O)-C1-6-アルキル基を意味し、ここでのC1-6-アルキルは上記で定義した通りである。
【００２２】
ここで用いる「ヘテロアリール」の用語は、窒素、酸素および硫黄から選択される一以上のヘテロ原子を含む芳香族性のヘテロ環系、例えば、窒素、酸素および硫黄から選択される一以上のヘテロ原子を含む5〜7員の単環、並びに8〜14員の二環系および三環系の芳香族へテロ環系を含めることを意図している。代表的な例は、フリル、チエニル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、1,2,3-トリアゾリル、1,2,4-トリアゾリル、ピラニル、ピリジル、ピリダニジル、ピリミジニル、ピラジニル、1,2,3-トリアジニル、1,2,4-トリアジニル、1,3,5-トリアジニル、1,2,3-オキサジアゾリル、1,2,4-オキサジアゾリル、1,2,5-オキサジアゾリル、1,3,4-オキサジアゾリル、1,2,3-チアジアゾリル、1,2,4-チアジアゾリル、1,2,5-チアジアゾリル、1,3,4-チアジアゾリル、テトラゾリル、チアジアジニルインドリル、イソインドリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、インダゾリルベンズイミダゾリル、ベンズチアゾリル、ベンズイソチアゾリル、ベンゾキサゾリル、ベンズイソキサゾリル、プリニル、キナゾリニル、キノリジニル、キノリニル、イソキノリニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニル、カルバゾリル、アゼピニル、ジアゼピニル、アクリジニル等である。ヘテロアリールはまた、上記に列記した環系の水素化された誘導体を含めることを意図している。このような部分的に水素化された誘導体の非限定的な例は、2,3-ジヒドロベンゾフラニル、ピロリニル、ピラゾリニル、インドリニル、オキサゾリジニル、オキサゾリニル、オキサゼピニル等である。
【００２３】
ここで用いる「ヘテロアリーレン」の用語は、窒素、酸素および硫黄から選択される一以上のヘテロ原子を含む二価の芳香族ヘテロ環系、例えば窒素、酸素および硫黄から選択される一以上のヘテロ原子を含む5〜7員の単環および8〜14員の二環および三環の芳香族へテロ環系を含むものであり、代表的な例は、フリレン、チエニレン、ピロリレン、オキサゾリレン、チアゾリレン、イミダゾリレン、イソオキサゾリレン、イソチアゾリレン、1,2,3-トリアゾリレン、1,2,4-トリアゾリレン、ピラジニレン、ピリジレン、ピリダジニレン、ピリミジニレン、ピラジニレン、1,2,3-トリアジニレン、1,2,4-トリアジニレン、1,3,5-トリアジニレン、1,2、3-オキサジアゾリレン、1,2、4-オキサジアゾリレン、1,2,5-オキサジアゾリレン、1,3、4-オキサジアゾリレン、1,2,3-チアジアゾリレン、1,2,4-チアジアゾリレン、1,2,5-チアジアゾリレン、1,3,4-チアジアゾリレン、テトラゾリレン、チアジアジニレン、インドリレン、イソインドリレン、ベンゾフリレン、ベンゾチエニレン、イミダゾリレン、ベンゾイミダゾリレン、ベンゾチアゾリレン、ベンゾイソチアゾリレン、ベンゾオキサゾリレン、ベンゾイソオキサゾリレン、プリニレン、キナゾリニレン、キノリジニレン、キノリニレン、イソキノリニレン、キノキサリニレン、ナフチリジニレン、プテリジニレン、カルバゾリレン、アゼピニレン、ジアゼピニレン、およびアクリジニレン等である。また、ヘテロアリールは、上記で列記した環系の部分的に水素化された誘導体も含むことを意図している。このような部分的に水素化された誘導体の非限定的な例は、2,3-ジヒドロ-ベンゾフラニレン、ピロリニレン、ピラゾリニレン、インドリニレン、オキサゾリジニレン、オキサゾリニレン、およびオキサゼピニレン等である。
【００２４】
「アリールC1-6-アルキル」、「ヘテロアリールC1-6-アルキル」、「アリールC2-6-アルケニル」等は、上記で定義したアリール若しくはヘテロアリールによって置換された、上記で定義したC1-6-アルキルまたはC2-4-アルケニル、例えば、
【化２６】
2005511683.tif 000002
【００２５】
を意味する。
【００２６】
ここで用いる「任意に置換された」の用語は、問題の基が非置換であるか、または特定された一以上の置換基で置換されていることを意味する。問題の基が二以上の置換基で置換されるとき、これらの置換基は同じであっても異なっていてもよい。
【００２７】
上記で定義した一定の用語は、当該構造式中に二回以上出てくることがあり、このような場合、夫々の用語は他から独立して定義されるべきものである。
【００２８】
更に、「独立に…である」および「…から独立に選択され」の用語を用いるとき、それは問題の基が同じでもよく、異なってもよいと理解されるべきものである。
【００２９】
ここで使用する「治療」の用語は、疾患、障害または病状と戦うことを目的とした患者の管理およびケアを意味する。この用語は次の事項を含むものである：当該疾患、障害または病状の進行の遅延、症状および合併症の緩和または軽減、および/または当該疾患、障害もしくは病状の治癒もしくは除去。治療すべき患者は、好ましくは哺乳類、特に人間である。
【発明の説明】
【００３０】
本発明は、下記一般式（I）の化合物、並びにその何れかのジアステレオマー、エナンチオマーまたは互変異性体およびこれらを含む混合物、またはその薬学的に許容可能な塩に関する：
【化２７】
2005511683.tif 000003
【００３１】
ここで、
Aは、
【化２８】
2005511683.tif 000004
【００３２】
であり、
mは、0または1であり、
nは、0、1、2または3（但し、mおよびnは両方とも0ではない）であり、
R4は、水素、ハロゲンまたは -(CH2)o-OR5であり、
oは、0または1であり、
R5は、水素、C1-6-アルキル、C1-6-アルカノイル、アリールもしくは アリール-C1-6-アルキルであり、
R1およびR2は、独立に水素、ハロゲンまたはC1-6-アルキルであるか、またはR1およびR2が一緒になって二重結合を形成し、
R3は、水素、C1-6-アルキルまたはハロゲンであるか、またはR3およびR2が一緒になって酸素への二重結合を形成し、
Xは、アリーレンまたはヘテロアリーレンであり、これは任意にハロゲン、-CN、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-NO2、-OR8、-NR8R9およびC1-6-アルキルから選択される一つまたは二つの基R6およびR7で置換されてもよく、
R8およびR9は、独立に水素またはC1-6-アルキルであり、
Yは、-C(O)-、-O-、-NR10-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、または-CR11R12-であり、
R10は、水素またはC1-6-アルキルであり、
R11およびR12は、独立に水素、C1-6-アルキル、もしくはヒドロキシであるか、またはR11はR1と一緒になって二重結合を形成し、またR12は水素、C1-6-アルキルもしくはヒドロキシであり、
Zは、-C(O)-(CR13R14)p-、-O-(CR13R14)p-、-S-(CR13R14)p-、-S(O)-(CR13R14)p-、-S(O)2-(CR13R14)p-、-NR15-(CR13R14)p-、または-(CR13R14)p-であり、
pは、0、1または2であり、
R13およびR14は、水素、-CF3、-OCF3およびC1-6-アルキルから独立に選択され、
R15は、水素またはC1-6-アルキルであり、
Dは、任意に一以上の置換基R16、R17、R18、R19、R20およびR21で置換されたアリールまたはヘテロアリールであり、ここで、
R16、R17、R18およびR19は、独立に、
・水素、ハロゲン、-CN、-CH2CN、-CHF2、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-OCH2CF3、
-OCF2CHF2、-S(O)2CF3、-SCF3、-NO2、-OR22、-NR22R23、-SR22、
-NR22S(O)2R23、-S(O)2NR22R23、-S(O)NR22R23、-S(O)R22、-S(O)2R22、
-C(O)NR22R23、-OC(O)NR22R23 -NR22C(O)R23、-CH2C(O)NR22R23、
-OCH2C(O)NR22R23、-CH2OR22、-CH2NR22R23、-OC(O)R22、-C(O)R22 または
-C(O)OR22、
・C1-6-アルキル、C2-6-アルケニルまたはC2-4-アルキニル、
これは任意に、ハロゲン、-CN、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-NO2、-OR22、-NR22R23
およびC16-アルキルから選択される一以上の置換基で置換されてもよい
・C3-8-シクロアルキル、C4-8-シクロアルケニル、ヘテロシクリル、C3-8-シクロ
アルキル-C1-6-アルキル、C3-8-シクロアルキル-C1-6-アルコキシ、C3-8-シクロ
アルキルオキシ、C3-8-シクロアルキル-C1-6-アルキルチオ、C3-8-シクロアルキ
ルチオ、C3-8-シクロアルキル-C2-6-アルケニル、C3-8-シクロアルキル-C2-6-ア
ルキニル、C4-8-シクロアルケニル-C1-6-アルキル、C4-8-シクロアルケニ
ル-C2-6-アルケニル、C4-8-シクロアルケニル-C2-6-アルキニル、ヘテロシク
リル-C1-6-アルキル、ヘテロシクリル-C2-4-アルケニル、ヘテロシクリル-C2-6-
アルキニル、アリール、アリールオキシ、アリールオキシカルボニル、
アロイル、アリール-C1-6-アルコキシ、アリール-C1-6-アルキル、
アリール-C2-6-アルケニル、アリール-C2-6-アルキニル、ヘテロアリール、
ヘテロアリール-C1-6-アルキル、ヘテロアリール-C2-6-アルケニル、または
ヘテロアリール-C2-6-アルキニル、
その芳香環もしくは非芳香環系は、ハロゲン、-C(O)OR22、-CN、-CF3、-OCF3、
-OCHF2、-NO2、-OR22、-NR22R23およびC1-6アルキルから選ばれる一以上の置
換基で任意に置換されてもよく、
R22およびR23は、独立に水素、C1-6-アルキル、アリール-C1-6-アルキルもし
くはアリールであるか、またはR22およびR23が同じ窒素原子に結合するときは
該窒素原子と一緒になって、任意に窒素、酸素および硫黄から選択される一つま
たは二つの更なるヘテロ原子を含み、且つ任意に一つまたは二つの二重結合を含
む3〜8員のヘテロ環を形成してもよい
であるか、またはR16〜R19基のうちの二つは、これらが一緒に隣接位置に配置されるときは、ブリッジ-(CR24R25)a-O-(CR26R27)c-0-を形成してもよく、
aは、0、1、または2であり、
cは、1または2であり、
R24、R25、R26およびR27は、独立に水素、C1-6アルキルまたはフルオロであり、
R20およびR21は、独立に水素、C1-6アルキル、C3-8-シクロアルキル、またはC3-8-シクロアルキル-C1-6-アルキルであり、
Eは、任意に一つまたは二つの置換基R28およびR29で置換されてもよいC3-8-シクロアルキルもしくはC4-8-シクロアルケニル（前記置換基は独立に、
・水素、ハロゲン、-CN、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-OR33、-NR33R34、C1-6-アルキ
ル、C3-8-シクロアルキル、C3-8-シクロアルケニル、ヘテロアリールおよびア
リール、
ここで、前記ヘテロアリール基およびアリール記は、任意にハロゲン、-CN、
-CF3、-OCF3、-OCHF2、-NO2、-OR33,-NR33R34およびC1-6-アルキルから選ばれ
る一以上の置換基で置換されてもよく、
R33およびR34は、独立に水素またはC1-6-アルキルであるか、
またはR33およびR34は、これらが同じ窒素原子に結合するときは、該窒素原子
と一緒になって、任意に窒素、酸素および硫黄から選択される一つまたは二つの
更なるヘテロ原子を含み、且つ任意に一つまたは二つの二重結合を含む3〜8員
のヘテロ環を形成してもよい
から選択される）、アリール、ヘテロアリール、アリール-C2-4-アルケニル、またはアリール-C2-6-アルキニルであり、そのアリールもしくはヘテロアリール部分は任意に、上記で定義した一以上のR28、R29、R30、R31およびR32で置換されてもよく、ここでR28およびR29は上記で定義した通りであり、またR30、R31およびR32は独立に、
・水素、ハロゲン、-CHF2、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-OCH2CF3、-OCF2CHF2、-SCF3、
-OR35、-NR35R36、-SR35、-S(O)R35、-S(O)2R35、-C(O)NR35R36、
-OC(O)NR35R36、-NR35C(O)R36、-OCH2C(O)NR35R36、-C(O)R35および-C(O)OR35
・C1-6-アルキル、C2-6アルケニルおよびC2-4-アルキニル、
これらは任意にハロゲン、-CN、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-NO2、-OR35、-NR35R36
およびC1-6-アルキルから選択される一以上の置換基で置換されてもよい、
・C3-8-シクロアルキル、C4-8-シクロアルケニル、ヘテロシクリル、C3-8-シクロ
アルキル-C1-6-アルキル、C3-8-シクロアルキル-C2-6-アルケニル、C3-8-シクロ
アルキル-C2-6-アルキニル、C4-8-シクロアルケニル-C1-6-アルキル、C4-8-シク
ロアルケニル-C2-6-アルケニル、C4-8-シクロアルケニル-C2-6-アルキニル、
へテロシクリル-C1-6-アルキル、ヘテロシクリル-C2-6-アルケニル、ヘテロシ
クリル-C2-6-アルキニル、アリール、アリールオキシ、アロイル、
アリール-C1-6-アルコキシ、アリール-C1-6-アルキル、アリール-C2-6-アルケニ
ル、アリール-C2-6-アルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリール-C1-6-アルキ
ル、ヘテロアリール-C2-6-アルケニル、およびヘテロアリール-C2-4-アルキニル、
その芳香族または非芳香族の環は任意に、ハロゲン、-CN、-CF3、-OCF3、
-OCHF2、-NO2、-OR35、-NR35R36およびC1-6-アルキルから選択される一以上の
置換基で置換されてもよく、
ここで、
R35およびR36は、独立に水素、C1-6-アルキルまたはアリールであるか、
またはR35およびR36が同じ窒素原子に結合するときは、これらは該窒素原子と
一緒になって、任意に窒素、酸素および硫黄から選択される一つまたは二つの更
なるヘテロ原子を含み、且つ任意に一つまたは二つの二重結合を含む3〜8員の
ヘテロ環を形成してもよい、
であるか、またはR30、R31およびR32のうちの二つが同じ環炭素原子または隣接する環炭素原子に結合するときは、それらが一緒になって、ブリッジ
-O-(CH2)t-CR37R38-(CH2)l-O-、-(CH2)t-CR37R38-(CH2)l-、または
-S-(CH2)t-CR37R38-(CH2)i-S-を形成し、
tおよびlは、独立に0、1、2、3、4または5であり、
R37およびR38は、独立に水素またはC1-6-アルキルである。
【００３３】
もう一つの実施形態において、Aは次式で表される：
【化２９】
2005511683.tif 000005
【００３４】
ここで、m、nおよびR4は式（I）で定義した通りである。
【００３５】
もう一つの実施形態において、Aは、
【化３０】
2005511683.tif 000006
【００３６】
で表される。
【００３７】
もう一つの実施形態において、Aは、
【化３１】
2005511683.tif 000007
【００３８】
で表される。
【００３９】
もう一つの実施形態において、Aは、
【化３２】
2005511683.tif 000008
【００４０】
で表される。
【００４１】
もう一つの実施形態において、Xは、式（I）で定義した通りに置換されてもよい単環式のアリーレンまたはヘテロアリーレンである。
【００４２】
もう一つの実施形態において、Xは、
【化３３】
2005511683.tif 000009
【００４３】
ここで、R6およびR7は式（I)で定義した通りである
である。
【００４４】
もう一つの実施形態において、Xは次式で表される。
【化３４】
2005511683.tif 000010
【００４５】
ここで、R6およびR7は式（I）で定義した通りである。
【００４６】
もう一つの実施形態において、R6およびR7は両者共に水素である。
【００４７】
もう一つの実施形態において、Eは次式で表される：
【化３５】
2005511683.tif 000011
【００４８】
ここで、R28、R29、R30、R31およびR32は式（I）で定義した通りである。
【００４９】
もう一つの実施形態において、Eは次式で表される：
【化３６】
2005511683.tif 000012
【００５０】
ここで、R28、R29、R30、R31およびR32は式（I）で定義した通りである。
【００５１】
もう一つの実施形態において、Eは次式で表される：
【化３７】
2005511683.tif 000013
【００５２】
ここで、R30、R31およびR32は式（I)で定義した通りである
もう一つの実施形態において、Eは次式で表される：
【化３８】
2005511683.tif 000014
【００５３】
ここで、R30、R31およびR32は式（I)で定義した通りである
もう一つの実施形態において、Eは次式で表される：
【化３９】
2005511683.tif 000015
【００５４】
ここで、R28、R29、R30、R31およびR32は式（I）で定義した通りである。
【００５５】
もう一つの実施形態において、R30、R31およびR32は独立に、
・水素、
・ハロゲン、-OCF3、-SCF3、または-CF3、
・C1-6-アルキル；これらは任意にフルオロ、-CN、-CF3、-OCF3、-OR35および
-NR35R36から選択される一以上の置換基で置換されてもよい、
・C3-8-シクロアルキルまたはC4-8-シクロアルケニル；これらは任意にフルオロ、
-CN、-CF3、-OCF3、-OR35、-NR35R36およびC1-6-アルキルから選択される一以
上の置換基で置換されてもよい、
・アリール、アリールオキシ、またはアリール-C1-6-アルコキシ；これらのアリー
ル部分は任意に、ハロゲン、-CN、-CF3、-OCF3、-NO2、-R35、-NR35R36および
C1-6-アルキルから選択される一以上の置換基で置換されてもよい、
であり、
R35およびR36は、独立に水素、C1-6-アルキルもしくはアリールであるか、
またはR35およびR36が同じ窒素原子に結合するときは、これらは該窒素原子と一緒になって、任意に窒素、酸素および硫黄から選択される一つまたは二つの更なるヘテロ原子を含み、且つ任意に一つまたは二つの二重結合を含む3〜8員のヘテロ環を形成してもよい。
【００５６】
もう一つの実施例において、R30、R31およびR32は独立に、
・水素、
・ハロゲン、-OCF3、または-CF3、
・C1-6-アルキル；これらは任意にフルオロ、-CN、-CF3、-OCF3、-OR35および
-NR35R36から選択される一以上の置換基で置換されてもよい、
・シクロヘキシルまたはシクロヘキシル-1-エニル；これらは任意にフルオロ、
-CN、-CF3、-OCF3、-OR35、-NR35R36およびC1-6-アルキルから選択される一以
上の置換基で置換されてもよい、
・フェニル：これは任意に、ハロゲン、-CN、-CF3、-OCF3、-NO2、-R35、
-NR35R36およびC1-6-アルキルから選択される一以上の置換基で置換されても
よい
・フェノキシまたはベンジルオキシ；これらのフェニル部分は任意に、ハロゲ
ン、-CN、-CF3、-OCF3、-NO2、-R35、-NR35R36およびC1-6-アルキルから選択さ
れる一以上の置換基で置換されてもよい、
であり、
R35およびR36は、独立に水素またはC1-6-アルキルである化合物。
【００５７】
もう一つの実施例において、R30およびR32は両者ともに水素であり、R31は水素とは異なる。
【００５８】
もう一つの実施形態において、Eは次式で表される：
【化４０】
2005511683.tif 000016
【００５９】
もう一つの実施形態において、Eは次式で表される：
【化４１】
2005511683.tif 000017
【００６０】
もう一つの実施形態において、Eは次式で表される：
【化４２】
2005511683.tif 000018
【００６１】
もう一つの実施形態において、Eは次式で表される：
【化４３】
2005511683.tif 000019
【００６２】
ここで、R30は式（I）で定義した通りである。
【００６３】
もう一つの実施例において、
R30は
・ハロゲン、または
・ヘテロアリール：これは任意に、ハロゲン、-CN、-CF3、-NO2、-OR35、-NR35R36
およびC1-6-アルキルから選択される一以上の置換基で置換されてもよい
であり、
R35およびR36は、独立に水素またはC1-6-アルキルであるか、
またはR35およびR36が同じ窒素原子に結合するときは、これらは該窒素原子と一緒になって、任意に窒素、酸素および硫黄から選択される一つまたは二つの更なるヘテロ原子を含み、且つ任意に一つまたは二つの二重結合を含む3〜8員のヘテロ環を形成してもよい。
【００６４】
もう一つの実施例において、
R30は、
・ハロゲン、または
・チエニル：これは任意に、ハロゲン、-CN、-CF3、-NO2、-OR35、-NR35R36、およ
びC1-6-アルキルから選択される一以上の置換基で置換されてもよい
であり、
R35およびR36は、独立に水素またはC1-6-アルキルであるか、
またはR35およびR36が同じ窒素原子に結合するときは、これらは該窒素原子と一緒になって、任意に窒素、酸素および硫黄から選択される一つまたは二つの更なるヘテロ原子を含み、且つ任意に一つまたは二つの二重結合を含む3〜8員のヘテロ環を形成してもよい。
【００６５】
もう一つの実施形態において、Eは次式で表される：
【化４４】
2005511683.tif 000020
【００６６】
もう一つの実施形態において、Yは、-C(O)-、-O-、-S(O)2-、-NH-、または-CH2-である。
【００６７】
もう一つの実施形態においては、Yが-CHR11-であり、R11は、R1と共に二重結合を形成する。
【００６８】
もう一つの実施形態において、Yは、-C(O)-である。
【００６９】
もう一つの実施形態において、R1およびR2は両者共に水素である。
【００７０】
もう一つの実施形態において、R1およびR2は結合されて二重結合を形成する。
【００７１】
もう一つの実施形態において、R3は水素である。
【００７２】
もう一つの実施形態において、Zは、-C(O)-(CR13R14)p-、-O-(CR13R14)p-、
-NR15-(CR13R14)p、または-S(O)2-(CR13R14)p-であり、p、R13、R14およびR15は式（I）で定義した通りである。
【００７３】
もう一つの実施形態において、Zは、-NR15-(CR13R14)p、または-C(O)-(CR13R14)p-であり、pは式（I）で定義した通りであり、R13およびR14は独立に水素、-CF3、-OCF3およびC1-6-アルキルから選択され、またR15は水素である。
【００７４】
もう一つの実施形態において、Zは-NH(CH2)p または-C(O)-(CH2)p-であり、pは式（I）で定義した通りである
もう一つの実施形態において、Zは、NHまたは-C(O)-である
もう一つの実施形態において、Zは-C(O)-である
もう一つの実施形態において、Dは次式で表される：
【化４５】
2005511683.tif 000021
【００７５】
ここで、R16、R17、R18、R19、R20およびR21は式（I）で定義した通りである。
【００７６】
もう一つの実施形態において、Dは次式で表される：
【化４６】
2005511683.tif 000022
【００７７】
ここで、R16、R17、およびR18は式（I）で定義した通りである
もう一つの実施形態においては、R16、R17およびR18は独立に
・水素、ハロゲン、-CN、-CH2CN、-CHF2、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-OCH2CF3、
-OCF2CHF2、-S(O)2CF3、-SCF3、-NO2、-OR22、-NR22R23、-SR22、
-NR22S(O)2R23、-S(O)2NR22R23、-S(O)NR22R23、-S(O)R22、-S(O)2R22、
-C(O)NR22R23、-OC(O)NR22R23、-NR22C(O)R23、-CH2C(O)NR22R23、
-OCH2C(O)NR22R23、-CH2OR22、-CH2NR22R23、-OC(O)R22、-C(O)R22または
-C(O)OR22から選択される一以上の置換基で置換されてもよい
・C1-6-アルキル：これは任意に、フルオロ、-CN、-CF3、-OCF3、-OR22および
-NR22R23から選択される一以上の置換基で置換されてもよい
・C3-8-シクロアルキル：これは任意に、フルオロ、-C(O)OR24、-CN、-CF3、
-OCF3、-OR22、-NR22R23 およびC1-6-アルキルから選択される一以上の置換基
で置換されてもよい
・アリールまたはアリールオキシ：これらは任意に、フルオロ、-C(O)OR24、-CN、
-CF3、-OCF3、-OR22、-NR22R23およびC1-6-アルキルから選択される一以上の
置換基で置換されてもよい
上記において、R22およびR23は独立に、水素、C1-6-アルキル、アリール-
C1-6-アルキルもしくはアリールであるか、またはR22およびR23が同じ窒素原
子に結合するときは、これらは該窒素原子と一緒になって、任意に窒素、酸素お
よび硫黄から選択される一つまたは二つの更なるヘテロ原子を含み、且つ任意に
一つまたは二つの二重結合を含む3〜8員のヘテロ環を形成してもよい、
であるか、または
・基R16〜R18のうちの二つが隣接位置に配置されるときは、それらが一緒になっ
てブリッジ-(CR24R25)a-O-(CR26R27)c-O-を形成してもよく、
ａは、0、1または2であり、
ｃは、1または2であり、
R24、R25、R26およびR27は、独立に水素、C1-6アルキルまたはフルオロである。
【００７８】
もう一つの実施形態において、R16、R17およびR18は独立に、
・水素、ハロゲン、-CF3、-OCF3、-SCF3、C1-6-アルキル、C1-6-アルコキシ、フェ
ニル、シクロペンチル、シクロヘキシルまたはフェノキシ、
であるか、または
・基R16〜R18のうちの二つが隣接位置に配置されるときは、それらが一緒になっ
てブリッジ-O-(CF2)2-O-、-CF2-O-CF2-O-、または-O-CH2-O-
を形成してもよい。
【００７９】
もう一つの実施形態において、R16は水素であり、R17およびR18は水素とは異なる。
【００８０】
もう一つの実施形態において、R16およびR17は水素であり、R18は水素とは異なる
もう一つの実施形態において、本発明は、一般式（I4）の化合物、並びにその何れかのジアステレオマー、エナンチオマーまたは互変異性体およびこれらを含む混合物、またはその薬学的に許容可能な塩に関する：
【化４７】
2005511683.tif 000023
【００８１】
ここで、R6、R7、EおよびDは、式（I）について、または上記実施形態の何れか一つにおいて定義した通りである。
【００８２】
もう一つの実施形態において、本発明は、一般式（I5）の化合物、並びにその何れかのジアステレオマー、エナンチオマーまたは互変異性体およびこれらを含む混合物、またはその薬学的に許容可能な塩に関する：
【化４８】
2005511683.tif 000024
【００８３】
ここで、R6、R7、EおよびDは、式（I）について、または上記実施形態の何れか一つにおいて定義した通りである。
【００８４】
もう一つの実施形態において、本発明は、一般式（I5a）の化合物、並びにその何れかのジアステレオマー、エナンチオマーまたは互変異性体およびこれらを含む混合物、またはその薬学的に許容可能な塩に関する：
【化４９】
2005511683.tif 000025
【００８５】
ここで、R6、R7、EおよびDは、式（I）について定義した通りである。
【００８６】
もう一つの実施態様において、本発明は、一般式（I5b）の化合物、並びにその何れかのジアステレオマー、エナンチオマーまたは互変異性体およびこれらを含む混合物、またはその薬学的に許容可能な塩に関する：
【化５０】
2005511683.tif 000026
【００８７】
ここで、R6、R7、EおよびDは、式（I）について定義した通りである。
【００８８】
もう一つの実施態様において、本発明は、一般式（I6）の化合物、並びにその何れかのジアステレオマー、エナンチオマーまたは互変異性体およびこれらを含む混合物、またはその薬学的に許容可能な塩に関する：
【化５１】
2005511683.tif 000027
【００８９】
ここで、R6、R7、EおよびDは、式（I）について定義した通りである。
【００９０】
本発明の化合物はキラルであってもよく、分離された、純粋の、または部分的に生成されたエナンチオマーまたはそれらのラセミ混合物としての如何なるエナンチオマーも、本発明の範囲内に含まれるものである。
【００９１】
更に、分子内に二重結合、完全にもしくは部分的に飽和した環系、二以上の不斉中心、または回転が制限された結合が存在するときは、ジアステレオマーが形成される可能性がある。分離された、純粋な、若しくは部分的に精製されたジアステレオマー、またはその混合物のような如何なるジアステレオマーも、本発明の範囲内に含まれるものである。
【００９２】
更に、本発明の化合物の幾つかは、異なる互変異性形で存在する可能性があり。当該化合物が形成できる如何なる互変異性形も、本発明の範囲内に含まれるものである。
【００９３】
本発明はまた、本発明の化合物の薬学的に許容可能な塩を包含する。このような塩には、薬学的に許容可能な酸付加塩、薬学的に許容可能な金属塩、アンモニウムおよびアルキル化アンモニウム塩が含まれる。酸付加塩には、無機酸並びに有機酸の塩が含まれる。適切な無機酸の代表的な例には、塩酸、臭素酸、ヨウ素酸、リン酸、硫酸、硝酸等が含まれる。適切な有機酸の例には、蟻酸、酢酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、安息香酸、桂皮酸、クエン酸、フマル酸、グリコール酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、蓚酸、ピクリン酸、ピルビン酸、サリチル酸、コハク酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、酒石酸、アスコルビン酸、パモ酸（pamoic acid)、ビスメチレンサリチル酸、エタンジスルホン酸、グルコン酸、シトラコン酸、アスパラギン酸、ステアリン酸、パルミチン酸、EDTA、グリコール酸、p-アミノ安息香酸、グルタミン酸、ベンゼンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸等が含まれる。薬学的に許容可能な無機酸もしくは有機酸の酸付加塩の更なる例には、本明細書の一部として援用するJ．Pharm. Sci. 1977, 66, 2に列記された薬学的に許容可能な塩が含まれる。金属塩の例には、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩等が含まれる。アンモニウム塩およびアルキル化アンモニウム塩の例には、アンモニウム塩、メチルアンモニウム塩、ジメチルアンモニウム塩、トリメチルアンモニウム塩、エチルアンモニウム塩、ヒドロキシエチルアンモニウム塩、ジエチルアンモニウム塩、n-ブチルアンモニウム塩、sec-ブチルアンモニウム塩、tert-ブチルアンモニウム塩、テトラメチルアンモニウム塩等が含まれる。
【００９４】
本発明の化合物が形成できる水和物もまた、薬学的に許容可能な酸付加塩として意図されるものである。
【００９５】
更に、薬学的に許容可能な塩には、リジン、アルギニンおよびオルニチンのような塩基性アミノ酸塩も含まれる。
【００９６】
これらの酸付加塩は、化合物合成の直接の生成物として得ることができる。或いは、適切な酸を含有する適切な溶媒中に遊離塩基を溶解し、溶媒を蒸発させ、或いは塩と溶媒を分離することにより塩を単離してもよい。
【００９７】
本発明の化合物は、当業者に周知の方法を使用して、標準の低分子量溶媒との溶媒和物を形成してもよい。このような溶媒和物もまた、本発明の範囲内にあるものと想定される。
【００９８】
本発明はまた、本発明の化合物のプロドラッグをも包含するものであり、該プロドラッグは、投与したときに、薬理学的に活性な物質になる前に代謝プロセスによって化学的変換を受ける。一般に、このようなプロドラッグは、一般式(I)の化合物の官能基誘導体であり、インビボにおいて、式(I)の必要な化合物に容易に変換可能である。適切なプロドラッグ誘導体を選択および調製するための従来の方法は、例えば、H．Bundgaard，Elsevier編の「プロドラッグの設計（Design of Prodrugs）」（1985）に記載されている。
【００９９】
本発明はまた、本発明の活性代謝物をも包含する。
【０１００】
本発明による化合物は、グルカゴンの作用に拮抗するように作用し、従って、このような拮抗作用が有益であるような障害および疾患の治療および／または予防のために有用である。
【０１０１】
本発明による化合物は、ここに記載のグルカゴン結合アッセイ（I）およびグルカゴン結合アッセイ（II）によって測定したときに、好ましくは5μM以下、より好ましくは1 M未満、更に好ましくは500 nM未満、例えば100 nM未満のIC50値を有する。
【０１０２】
従って、本発明の化合物は、高血糖症、IGT（グルコース耐性障害）、インスリン抵抗性症候群、シンドロームX、1型糖尿病、2型糖尿病、高脂血症、異常脂血症、高トリグリセリド血症、高リポ蛋白血症、高コレステロール血症、アテローム硬化症を含む動脈硬化症、グルカゴノーマ、急性膵炎、心臓血管系疾患、高血圧、心臓肥大、胃腸系障害、肥満、肥満の結果としての糖尿病、糖尿病性異常脂血症等の治療および／または予防に適用することができる。
【０１０３】
更に、それらは、グルカゴン受容体に欠陥を有する患者を同定するための診断剤として、胃酸分泌を増大させ、またグルカゴン投与による腸の低運動性を反転させるための治療法として適用可能である。
【０１０４】
それらはまた、ラベルされた形態において、新たなグルカゴンアンタゴニストを同定するための結合アッセイにおけるツールまたは参照分子として有用であり得る。
【０１０５】
従って、更なる側面において、本発明は、医薬として使用するための本発明による化合物に関する。
【０１０６】
本発明はまた、一以上の薬学的に許容可能なキャリアまたは賦形剤と共に、活性成分として少なくとも一つの本発明による化合物を含有する薬学的組成物に関する。
【０１０７】
この薬学的組成物は、好ましくは、約0.05mg〜約1000mg、好ましくは約0.1mg〜約500mg、特に好ましくは約0.5mg〜約200mgの本発明による化合物を含有する単位投与量形態である。
【０１０８】
更に、本発明は、グルカゴン拮抗作用が有益である障害または疾患の治療および／または予防のための、本発明による化合物の使用に関する。
【０１０９】
本発明はまた、グルカゴン拮抗作用が有益である障害または疾患を治療および／または予防するための方法に関し、該方法は、それを必要としている患者に対して、本発明による有効量の化合物を投与することを含む。
【０１１０】
一つの実施形態において、本発明の化合物は、グルカゴンに媒介される何らかの症状および疾患を治療する医薬の製造のために使用される。
【０１１１】
もう一つの実施形態において、本発明の化合物は、高血糖症の治療のための医薬を製造するために使用される。
【０１１２】
更にもう一つの実施形態において、本発明の化合物は、哺乳類における血中グルコースを低下させるための医薬を製造するために使用される。本発明の化合物は、絶食中および摂食後の段階の両方において、血中グルコースを低下させるのに有効である。
【０１１３】
更にもう一つの実施形態において、本発明の化合物は、ＩＧＴの治療のための薬学的組成物を調製するために使用される。
【０１１４】
更にもう一つの実施形態において、本発明の化合物は、２型糖尿病の治療のための薬学的組成物を調製するために使用される。
【０１１５】
更にもう一つの実施形態において、本発明の化合物は、ＩＧＴの２型糖尿病への進行を遅延または予防する薬学的組成物を調製するために使用される。
【０１１６】
更にもう一つの実施形態において、本発明の化合物は、非インスリン要求性２型糖尿病からインスリン要求性２型糖尿病への進行を遅延または予防する薬学的組成物を調製するために使用される。
【０１１７】
更なる実施形態において、本発明の化合物は、１型糖尿病を治療する薬学的組成物を調製するために使用される。このような治療は、通常はインスリン療法を伴う。
【０１１８】
更なる実施形態において、本発明の化合物は、肥満を治療する薬学的組成物を調製するために使用される。
【０１１９】
更なる実施形態において、本発明の化合物は、異常脂血症のような脂質代謝障害を治療する薬学的組成物を製造するために使用される。
【０１２０】
更なる実施形態において、本発明の化合物は、食欲調節障害またはエネルギー消費障害を治療する薬学的組成物を調製するために使用される。
【０１２１】
本発明の更なる側面において、本発明の化合物を用いた患者の治療は、ダイエットおよび／または運動と組み合わされる。
【０１２２】
本発明の更なる側面において、本発明の化合物は、何れかの適切な比率で一以上の更なる活性物質と組合わせて投与される。このような更なる活性物質は、例えば、抗糖尿病剤、抗高脂血症剤、抗肥満剤、抗高血圧剤、糖尿病に由来しまたはこれに付随した合併症を治療するための薬剤から選択されてよい。
【０１２３】
適切な抗糖尿病剤には、インスリン；本明細書の一部として援用する下記文献に開示されたインスリン類縁体および誘導体、即ち、EP 792 290（Novo Nordisk A/S）、例えばNεB29-テトラデカノイルdes(B30)ヒトインスリン；EP 214 826およびEP 705 275（Novo Nordisk A/S）、例えばAspB28ヒトインスリン；米国特許第5,504,188号（Eli Lilly）、例えばLysB28ProB29ヒトインスリン；EP 368 187（Aventis）、例えばランツス（Lantus）；GLP-1および本明細書の一部として援用するWO 98/08871（Novo Nordisk A/S）に開示されたようなGLP-1誘導体、並びに経口的に活性な血糖降下剤が含まれる。
【０１２４】
経口的に活性な血糖降下剤には、イミダゾリン、スルホニル尿素、ビグアニド、メグリチニド（meglitinides）、オキサジアゾリジンジオン、チアゾリジンジオン、αグリコシダーゼ阻害剤、グルカゴンアンタゴニスト、GLP-1アゴニスト、β細胞のATP依存性カリウムチャンネルに対して作用する薬剤、例えば本明細書の一部として援用するWO 97/26265、WO 99/03861およびWO 00/37474（Novo Nordisk A/S）に開示されているようなカリウムチャンネル開放剤、またはナテグリニドもしくはBTS-67582のようなカリウムチャンネルブロッカー、インスリン感作剤、インスリン分泌促進薬、DPP-IV（ジペプチジルペプチダーゼ-IV）阻害剤、PTPase阻害剤、グルコース新生および／またはグリコーゲン分解の刺激に関与する肝臓酵素の阻害剤、グルコース取込み調節剤、本明細書の一部として援用するWO 00/58293、WO 01/44216、WO01/83465、WO 01/83478、WO 01/85706、WO 01/85707およびWO 02/08209（Hoffman-La Roche）に開示されたもののようなグルコキナーゼ（GK)の活性化剤、GSK-3（グリコーゲンシンターゼキナーゼ-3）阻害剤、抗高脂血症剤もしくは抗脂血症剤のような脂質代謝を変更する化合物、食物摂取を低下させる化合物、ALRT-268、LG-1268もしくはLG-1069のようなPPAR（ペルオキシソーム増殖剤活性化受容体；peroxisome proliferator-activated receptor）およびRXR（レチノイドＸ受容体）アゴニストが包含される。
【０１２５】
一つの態様において、本発明の化合物はインスリン、またはNεB29-テトラデカノイルdes(B30)ヒトインスリン、AspεB28ヒトインスリン、LysB28ProB29ヒトインスリン、LysB29-(Nε(γ-グルタミル-Nαリトコリル)des（B30)ヒトインスリン（LantusTM）のようなインスリン類縁体もしくは誘導体、またはこれらの一以上を含む混合製剤と組合わせて投与される。
【０１２６】
本発明の更なる態様において、本発明の化合物は、スルホニル尿素、例えばトルブタミド（tolbutamide）、クロロプロアミド（chlorpropamide）、トラザミド（tolazamide）、グリベンクラミド（glibenclamide）、グリブリド（glyburide）、グリピジド（glipizide）、グリメピリド（glimepiride）、またはグリカジド（glicazide）と組合わせて投与される。
【０１２７】
本発明のもう一つの態様において、本発明の化合物はビグアニド、例えばメトホルミンと組合わせて投与される。
【０１２８】
本発明の更にもう一つの態様において、本発明の化合物はメグリチニド（meglitinide）、例えばレパグリニド（repaglinide）またはナテグリニド（nateglinide）と組合わせて投与される。
【０１２９】
本発明の更にもう一つの態様おいて、本発明の化合物はチアゾリジンジオンインスリン感作剤、例えばトログリタゾン、シグリタゾン（ciglitazone）、ピオグリタゾン（pioglitazone）、ロシグリタゾン（rosiglitazone）、イサグリタゾン（isaglitazone）、ダルグリタゾン（darglitazone）、エングリタゾン（englitazone）、CS011/CI-1037もしくはT 174、または本明細書の一部として援用するWO 97/41097、WO 97/41119、WO 97/41120、WO 00/41121およびWO 98/45292（Dr．Reddy's Research Foundation）に開示された化合物と組合わせて投与される。
【０１３０】
更にもう一つの態様において、本発明の化合物は、GI 262570、YM-440、MCC-555、JTT-501、AR-H039242、KRP-297、GW-409544、CRE-16336、AR-H049020、LY510929、LY465608、MBX-102、CLX-0940、GW-501516のようなインスリン感作剤、テサグリタザル（tesaglitazar；AZ 242）、またはラガグリタザル（ragaglitazar；NN622または(-)DRF2725）のような本明細書の一部として援用するWO 99/19313、WO 00/50414、WO 00/63191、WO 00/63192、WO 00/63193（Dr. Reddy's Research Foundation）およびWO00/23425、WO 00/23415、WO 00/23451、WO00/23445、WO 00/23417、WO 00/23416、WO00/63153、WO 00/63196、WO 00/63209、WO 00/63190およびWO00/63189（Novo Nordisk A/S）に開示されている化合物と組合わせて投与してもよい。
【０１３１】
本発明の更なる態様において、本発明の化合物は、αグルコシダーゼ阻害剤、例えばボグリボース（voglibose）、エミグリテート（emiglitate）、ミグリトール（miglitol）またはアカルボース（acarbose）と組合わせて投与される。
【０１３２】
本発明のもう一つの態様において、本発明の化合物は、β細胞のATP依存性カリウムチャンネルに作用する薬剤、例えば、トルブタミド（tolbutamide）、クロルプロパミド、トラザミド、グリベンクラミド（glibenclamide）、グリブリド（glyburide）、グリピジド（glipizide）、グリカジド（glicazide）、BTS-67582、レパグリニド（repaglinide）またはナテグリニド(nageglinide)と組合わせて投与される。
【０１３３】
本発明の更にもう一つの態様において、本発明の化合物は、抗高脂血症剤もしくは抗脂血症剤、例えばコレスチラミン（cholestyramine）、コレスチポール（colestipol）、クロフィブレート（clofibrate）、ジェムフィブロジル（gemfibrozil）、ロバスタチン（lovastatin）、プラバスタチン（pravastatin）、スミバスタチン（simvastatin）、プロブコール（probucol）、またはデキストロチロキシン（dextrothyroxine）と組合わせて投与される。
【０１３４】
更にもう一つの態様において、本発明の化合物は、抗高脂血症剤もしくは高脂血症剤、例えばコレスチラミン（cholestyramine）、コレスチポール（colestipol）、クロフィブレート（clofibrate）、ジェムフィブロジル（gemfibrozil）、ロバスタチン（lovastatin）、プラバスタチン（pravastatin）、シンババスタチン（simvastatin）、プロブコール（probucol）、またはデキストロチロキシン（dextrothyroxine）と組合わせて投与される。
【０１３５】
本発明のもう一つの側面において、本発明の化合物は、上記化合物の一以上と組合わせて、例えば、メトホルミンおよびスルホニル尿素（例えばグリベンクラミドまたはグリブリド）；スルホニル尿素およびアカルボース；メトホルミンおよびメグリチニド（例えばレパグリニド）；アカルボースおよびメトホルミン；スルホニル尿素、メトホルミンおよびトログリタゾン；スルホニル尿素、メトホルミンおよびピオグリタゾン；スルホニル尿素、メトホルミン、およびWO 00/63189またはWO97/41097に開示されたインスリン感作剤；メグリチニド（例えばレパグリニド）、メトホルミンおよびトログリタゾン；メグリチニド（例えばレパグリニド）、メトホルミンおよびピオグリタゾン；メグリチニド（例えばレパグリニド）、メトホルミンおよびWO 00/63189またはWO97/41097に開示されたインスリン感作剤；インスリンおよびスルホニル尿素；インスリンおよびメトホルミン；インスリン、メトホルミンおよびメグリチニド（例えばレパグリニド）；インスリン、メトホルミンおよびスルホニル尿素；インスリンおよびトログリタゾン；インスリンおよびピオグリタゾン；インスリンおよびWO 00/63189またはWO97/41097に開示されたインスリン感作剤；インスリンおよびロバスタチン；インスリン類縁体もしくは誘導体、メトホルミンおよびメグリチニド（例えばレパグリニド）；インスリン類縁体もしくは誘導体、メトホルミンおよびスルホニル尿素；インスリン類縁体もしくは誘導体およびトログリタゾン；インスリン類縁体もしくは誘導多およびピオグリタゾン；インスリン類縁体もしくは誘導体およびWO 00/63189またはWO97/41097に開示されたインスリン感作剤；等と組合わせて投与される。
【０１３６】
更に、本発明による化合物は、一以上の抗肥満剤または食欲調節剤と組合わせて投与されてもよい。
【０１３７】
このような薬剤は、CART（コカインアンフェタミン調節された転写体）アゴニスト、NPY（ニューロペプチドY）アゴニスト、MC4（メラノコルチン4）アゴニスト、オーレキシンアンタゴニスト、H3ヒスタミンアンタゴニストTNF（腫瘍壊死因子）モジュレータ、CRF（コルチコトロピン放出因子）アゴニスト、CRF BP（コルチコトロピン放出因子結合タンパク質）アンタゴニスト、ウロコルチンアゴニスト、β3アドレナリン作動性アゴニスト（例えばCL-316243、AJ-9677、GW-0604、LY362884、LY377267またはAZ-40140）、MSH（布良のサイト刺激ホルモン）アゴニスト、MCH（メラノサイト濃縮ホルモン）アンタゴニスト、CCK（コレシストキニン）アゴニスト、セロトニン再吸収阻害剤（例えばフルオキセチン、セロキサット、またはシタロプラム）、セロトニンおよびノルアドレナリン再吸収阻害剤、5HT（セロトニン）アゴニスト、ボンベシンアゴニスト、ガラニンアンタゴニスト、成長ホルモン、成長ホルモン放出化合物、THR（スレオトロピン放出ホルモン）アゴニスト、UPC2もしくはUPC3（アンカップリングタンパク質2もしくは3）モジュレータ、レプチンアゴニスト、DA（ドパミン）アゴニスト（例えばブロモクリプチン、ドプレキシン）、リパーゼ／アミラーゼ阻害剤、PPARモジュレータ、RXRモジュレータ、およびTRβアゴニスト殻なる群から選択される。
【０１３８】
もう一つの実施形態において、前記抗肥満剤はデキシアンフェタミンまたはアンフェタミンである。
【０１３９】
もう一つの実施形態において、前記抗肥満剤はフェンフルラミンまたはデキシフェンフルラミンである。
【０１４０】
更にもう一つの実施形態において、前記抗肥満剤はシブトラミンである。
【０１４１】
更なる実施形態において、前記抗肥満剤はオルリスタットである。
【０１４２】
もう一つの実施形態において、前記抗肥満剤はマジンドール（mazindol）またはフェンテルミン（phentermine）である。
【０１４３】
更に、本発明による化合物は、一以上の抗高血圧剤と組合わせて投与してもよい。抗抗血圧剤の例は、βブロッカー（例えば、アルプレノロール、アテノロール、チモロール、ピンドロール、プロプラノロールおよびメトプロロール）、ACE（アンジオテンシン変換酵素）阻害剤（例えば、ベナゼプリル(benazepril)、カプトプリル(captopril)、エナラプリル(enalapril)、フォシノプリル(fosinopril)、リシノプリル(lisinopril)、キナプリル(quinapril)およびラミプリル(ramipril)）、カルシウムチャンネルブロッカー（例えば、ニフェジピン(nifedipine)、フェロジピン(felodipine)、ニカルジピン(nicardipine)、イスラジピン(isradipine)、ニモジピン(nimodipine)、ジルチアゼム(diltiazem)およびベラパミル(verapamil)）、およびαブロッカー（例えば、ドキサゾシン(doxazosin)、ウラピジル(urapidil)、プラゾシン(prazosin)およびテラゾシン(terazosin)）である。更に、Remington：The Science and Practice of Pharmacy, 19th Edi-tion, Gennaro, Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA, 1995を参照することができる。
【０１４４】
なお、ダイエットおよび／または運動、上記で述べた化合物の一以上、および任意に一以上の他の活性物質と、本発明による化合物との如何なる適切な組合せも、本発明の範囲内にあると看做されることが理解されるべきである。
【０１４５】
＜薬学的組成物＞
本発明の化合物は、単独で、または薬学的に許容可能なキャリアまたは賦形剤と組合わせて、単回投与または多数回投与で投与すればよい。本発明による薬学的組成物は、薬学的に許容可能なキャリアまたは希釈剤、並びに他の既知のアジュバントおよび賦形剤を用いて、Remington：The Science and Practice of Pharmacy, 19th Edition, Gennaro，Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA, 1995に開示されたような従来の技術に従って処方することができる。
【０１４６】
この薬学的組成物は、口腔、直腸、鼻腔、肺、局所（バッカルおよび舌下を含む）、経皮、大槽内、腹腔内、膣、および非経腸的（皮下、筋肉内、くも膜下腔内、静脈内、および皮内を含む）の経路のような何れかの適切な経路による投与のために特別に処方すればよく、経口経路が好ましい。好ましい経路は、治療すべき患者の一般条件および年齢、並びに選択された活性成分に依存することが理解されるであろう。
【０１４７】
経口投与のための薬学的組成物には、カプセル、錠剤、糖衣錠、ピル、トローチ剤、散剤および顆粒のような固体投与量形態が含まれる。適切な場合、それらは腸溶性コーティングを伴って調製することができ、または当該技術で既知の方法に従って、持続性放出もしくは遅延性放出のような活性成分の制御された放出を提供するように処方することができる。
【０１４８】
経口投与のための液体投与量形態には、溶液、エマルジョン、懸濁液、シロップおよびエリキシールが含まれる。
【０１４９】
非経腸的投与のための薬学的組成物には、滅菌された水性および非水性の注射用溶液、分散液、懸濁液またはエマルジョン、並びに使用前に滅菌注射溶液もしくは分散液に再構成される滅菌された粉末が含まれる。デポー注射処方もまた、本発明の範囲内であると考えられる。
【０１５０】
他の適切な投与形態には、座薬、スプレー、軟膏、クリーム、ゲル、吸入剤、皮膚パッチ、インプラントなどが含まれる。
【０１５１】
典型的な経口投与量は、1回以上の投与、例えば1〜3回の投与で投与される1日当り約0.001〜約100mg/kg体重、好ましくは1日当り約0.01〜約50mg/kg体重、より好ましくは1日当り約0.05〜約10mg/kg体重である。正確な投与量は、投与の頻度および形式、治療すべき患者の性別、年齢、体重および一般症状、治療される症状の性質および重篤度、並びに治療すべき併発疾患および当業者に明らかな他の因子に依存するであろう。
【０１５２】
当該処方は、当業者に知られた方法によって、単位投与量形態で提供されるのが便利である。1日当り1回以上、例えば1日1〜3回の経口投与のための典型的な単位投与量形態は、0.05〜約1000mg、好ましくは約0.1〜約500mg、より好ましくは0.5mg〜約200mgを含有することができる。
【０１５３】
静脈内、くも膜下腔内、筋肉内および同様の投与等の非経腸的経路については、典型的な投与量は経口投与で用いられる投与量の約半分のレベルである。
【０１５４】
本発明の化合物は、一般には遊離の物質として、またはその薬学的に許容可能な塩として利用される。一つの例は、遊離酸の有用性を有する化合物の塩基付加塩である。式（Ｉ）の化合物が遊離の酸を含むときは、このような塩は、式（Ｉ）の遊離酸の溶液または懸濁液を化学的当量の薬学的に許容可能な塩基で処理することにより、従来の方法で調製される。代表的な例は上記で述べたとおりである。ヒドロキシ基を有する化合物の生理学的に許容可能な塩には、ナトリウムまたはアンモニウムイオンのような適切な陽イオンと組合された前記化合物の陰イオンが含まれる。
【０１５５】
非経腸的投与のためには、滅菌水溶液、水性プロピレングリコール、水性ビタミンE、またはゴマ油もしくはピーナッツ油の中の新規化合物（Ｉ）の溶液を用いればよい。このような水溶液は必要であれば適切にバッファーされ、また希釈液は最初に食塩水もしくはグルコースを用いて等張にされる。この水溶液は、静脈内、筋肉内、皮下および腹腔内の投与に特に適している。用いられる滅菌水性媒体は全て、当業者に既知の標準的技術によって容易に入手可能である。
【０１５６】
適切な薬学的キャリアには、不活性な固体希釈剤または充填剤、滅菌水溶液および種々の有機溶媒が含まれる。固体キャリアの例は、乳糖、白土、蔗糖、シクロデキストリン、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、およびセルロースの低級アルキルエーテルである。液体キャリアの例は、シロップ、ピーナッツ油、オリーブ油、リン脂質、脂肪酸、脂肪酸アミン、ポリオキシエチレン、および水である。同様に、キャリアまたは希釈剤は、単独のまたはワックスと混合されたグリセリルモノステアレートまたはグリセリルジステアレートのような、当該技術において知られた何れかの持続放出材料を含んでいてもよい。式（Ｉ）の新規化合物および薬学的に許容可能なキャリアを組合せることにより形成された薬学的組成物は、次いで、開示された投与経路に適した種々の投与形態で容易に投与される。この処方剤は、調剤技術において既知の方法により、単位投与量形態で便宜に提供することができる。
【０１５７】
経口投与に適した本発明の処方剤は、夫々が予め定められた量の活性成分を含有し、且つ適切な賦形剤を含んでもよいカプセルもしくは錠剤のような、分離された単位として提供することができる。更に、経口的に利用可能な処方剤は、粉末もしくは顆粒、水性液もしくは非水性液中の溶液もしくは懸濁液、または油中水もしくは水中油の液体エマルジョンの形態であってもよい。
【０１５８】
経口投与のために固体キャリアが使用されるときは、この製剤は錠剤化してもよく、粉末もしくはペレットの形態で硬質ゼラチンカプセル中に配置してもよく、またはトローチもしくはロゼンジの形態であってもよい。固体キャリアの量は広範囲に変化し得るが、通常は約25mg〜約1 gであろう。液体キャリアが使用されるとき、当該製剤はシロップ、エマルジョン、軟質ゼラチンカプセル、または水性もしくは非水性の液体懸濁液もしくは溶液のような滅菌注射液の形態であってもよい。
【０１５９】
従来の錠剤化技術によって調製できる典型的な錠剤は、下記のものを含有する：
＜コア＞:
活性化合物（遊離化合物またはその塩として）            5.0mg
Lactosum Ph．Eur．                                    67.8mg
微結晶セルロース（Avicel）                            31.4mg
アンバーライトTM IRP88＊                               1.0mg
ステアリン酸マグネシウム Ph. Eur.                      q. s.
＜コーティング＞:
ヒドロキシプロピルメチルセルロース                  約9mg
Mywacett 9-40 T＊＊                                   約0.9mg 
＊ ポラクリンカリウム（Polacrillin potassium）NF、
錠剤崩壊剤、Rohm and Haas社製
＊＊フィルムコーティングのための可塑剤として使用された
アクリル化モノグリセリド
所望であれば、本発明の薬学的組成物は、上記で述べたような更なる薬理学的活性物質と共に、式（Ｉ）の化合物を含有してもよい。
【実施例】
【０１６０】
以下の例および一般手順は、本明細書および合成スキームで特定される(identified)中間体化合物および最終生成物に言及する。本発明化合物の調製を以下の例を用いて詳細に記載するが、記載される化学反応は、本発明のグルカゴンアンタゴニストの調製への一般的な適用の観点から記載される。一般に、代表的な例を１つだけ記述したが、本発明の化合物は異なる方法により調製できる。その具体的な例としていくつかの化合物を同様の方法により調製した。場合によっては、本発明の開示する範囲に含まれる各化合物に対して、反応が記載通りに適用されないかもしれない。このようなことが起こる化合物は当業における熟練者により容易に認識されるであろう。これらの場合、反応は当業における熟練者に公知である慣用的修飾、すなわち、干渉基(interfering groups)の適切な保護、他の従来の試薬への変更、または反応条件の所定の改変により、首尾よく実施することができる。代替的には、ここに記載する以外の、そうでなければ従来の反応が、本発明の対応する化合物の調製に適用されるであろう。全ての調製方法において出発物質は全て公知であるか、または公知の出発物質から容易に調製してよい。温度は他に特に記載がなければ、全て摂氏度で記載され、収率を表す場合、部(parts)およびパーセンテージは全て重量で記載され、溶媒および溶出剤を表す場合、全ての部は重量で記載される。
【０１６１】
以下の例で示されるいくつかのNMRデータは選抜されたデータのみである。例において以下の用語は次の一般的な意味を有することが意図される：
DBU：1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]undec-5-ene
DCM：ジクロメタン、塩化メチレン
DIPEA：N,N-ジイソプロピルエチルアミン
DMF：N,N-ジメチルホルムアミド
DMSO：ジメチルスルホキシド、メチルスルホキシド
EDAC：1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩
Fmoc：9-フルオレニルメチルオキシカルボニル
NMP：N-メチル-2-ピロリジノン
TFA：トリフルオロ酢酸
THF：テトラヒドロフラン
HOBt：1-ヒドロキシベンゾトリアゾール。
【０１６２】
HPLC-MS(方法Ａ)
次の装置を用いる：
Hewlett Packard シリーズ1100 G1312A ビンポンプ
Hewlett Packard シリーズ 1100 カラムコンパートメント
Hewlett Packard シリーズ 1100 G13 15A DAD ダイオードアレイ検出器
Hewlett Packard シリーズ 1100 MSD
装置はHP Chemstation ソフトウェアにより制御される。上記HPLCポンプは以下を含んだ２つの溶出剤リザーバに接続される：
Ａ：水中の0.01％TFA
Ｂ：アセトニトリル中の0.01％TFA。
【０１６３】
分析は、カラム中に適切な体積(好ましくは1mL)の試料を注入することにより40℃で実施される。このカラムは、アセトニトリルの勾配を用いて溶出する。用いたHPLC 条件、検出器の設定、および質量スペクトルの設定を以下の表に挙げる。
【表１】
2005511683.tif 000028
【０１６４】
HPLC-MS（方法Ｂ）
次の装置を用いる：
Hewlett Packard シリーズ 1100 MSD G1946A 単一四極子型質量分析計
Hewlett Packard シリーズ 1100 MSD G1312A ビンポンプ
Hewlett Packard シリーズ 1100 MSD G1313A ALS 試料採取器
Hewlett Packard シリーズ 1100 MSD G1315A ダイオードアレイ検出器(DAD)
HP Vectraコンピュータ上で稼動するHP LC/MSD ChemStation 制御ソフトウェアを、機器制御およびデータ取得のために用いる。HPLCポンプは以下を含んだ２つの溶出剤リザーバに連結される：
Ａ：水中の0.01％TFA、
Ｂ：アセトニトリル中の0.01％TFA。
【０１６５】
分析は、0.01％TFA中のアセトニトリルの勾配用いて溶出するカラムに、1mLの試料溶液を注入することにより室温で実施される。HPLC条件、検出器の設定および質量分析計の設定を以下の表に挙げる。
【表２】
2005511683.tif 000029
【０１６６】
HPLC-MS(方法Ｃ)
次の装置を用いる：
・Sciex API 100 単一四極子型質量分析計
・Perkin Elmer シリーズ 200 Quardポンプ
・Perkin Elmer シリーズ 200 自動試料採取器
・Applied Biosystems 785A UV検出器
・Sedex 55 蒸発光散乱式検出器(evaporative scattering detector)
・ポンプからの時間を計ったイベント(timed events)により制御されるValco アクチュエータを備えたValcoカラムスイッチ。
【０１６７】
Macintosh PowerPC 7200コンピュータ上で動作するSciex 試料制御ソフトウェアは、機器の制御およびデータ取得のために用いられた。HPLCポンプは以下を含んだ４つの溶出剤リザーバに連結される：
Ａ：アセトニトリル
Ｂ：水
Ｃ：水中の0.5％TFA
Ｄ：0.02M 酢酸アンモニウム。
【０１６８】
試料の要件は、分析されるべきおよそ500μg/mLの化合物を、メタノール、エタノール、アセトニトリル、THF、水、およびこれらの混合物のような受容可能な溶媒中に含んでいることである（強力に溶出させる高濃度の溶媒は、低濃度のアセトニトリルでのクロマトグラフィーに干渉するであろう）。この分析は、20μLの試料溶液をカラムに注入することにより室温で実施され、このカラムは0.05％TFAまたは0.002M 酢酸アンモニウムのいずれかにおけるアセトニトリルの勾配を用いて溶出する。
【０１６９】
分析方法によりさまざまな溶出条件が用いられる。カラムからの溶出液はおよそ20μL/分で分流(flow splitting)Ｔ型コネクタを通過し、１ｍ75μの石英ガラスキャピラリーを経てAPI 100分光計のAPI界面に達する。残りの1.48mL/分はUV検出器およびELS検出器を通過する。LC-分析の間、検出データは質量分析計、UV検出器およびELS検出器から同時に獲得される。異なる方法で用いられるLC条件、検出器の設定および質量分析計の設定を、以下の表に挙げる。
【表３】
2005511683.tif 000030
【０１７０】
HPLC-MS(方法Ｄ)
次の計測機器を用いる：
・Hewlett Packard シリーズ 1100 G1312A ビンポンプ
・Hewlett Packard シリーズ 1100 Column コンパートメント
・Hewlett Packard シリーズ 1100 G1315A DAD ダイオードアレイ検出器
・Hewlett Packard シリーズ 1100
・MSD Sedere 75 蒸発光散乱式検出器
この装置はHP Chemstation ソフトウェアにより制御される。HPLCポンプは次を含んだ２つの溶出剤リザーバに接続される：
Ａ：水中の0.01％TFA、
Ｂ：アセトニトリル中の0.01％TFA。
【０１７１】
分析は、アセトニトリルの勾配を用いて溶出するカラム中に、適切な体積の試料(好ましくは1μL)を注入することにより、40℃で実施される。使用したHPLC 条件、検出器の設定および質量分析計の設定を以下の表に挙げる。
【０１７２】
カラム  Waters Xterra MS C-18×3mm id 5μm
勾配    5％-100％アセトニトリル，線状，1.5mL/分で7.5min
検出    210nm(DADからのアナログ出力)
ELS(ELSからのアナログ出力)
ＭＳ    イオン化モードAPI-ES，走査100-1000amu  工程0.1amu
DAD後に流れを分割し、液流のおよそ1mL/分をELSへ、および0.5mL/分をMSへと分流させる。
【０１７３】
ビルディングブロック
以下のセクションでは式(II)の中間体を調製するのに用いられるビルディングブロックについて述べる：
【化５２】
2005511683.tif 000031
【０１７４】
式中、EおよびDは上記で定義したとおりである。
【０１７５】
式(II)の中間体を調製するために用いられるビルディングブロックのための出発物質
4-シクロヘキシルベンズアルデヒド
【化５３】
2005511683.tif 000032
【０１７６】
この化合物を、文献(J. Org. Chem., 37, No. 24,(1972), 3972-3973)の修正した手順にしたがい合成した。シクロヘキシルベンゼン(112.5g，0.702mol)およびヘキサメチレンテトラミン(99.3g，0.708mol)をTFA(375mL)中で混合した。この混合物を窒素下にて90℃で３日間撹拌した。室温にまで冷却後、この混合物を氷水(3600mL)中に注ぎ、１時間撹拌した。溶液をNa2CO3(水中に2M 溶液)を用いて中和させ、DCM(2.5L)を用いて抽出した。有機相を乾燥させ(Na2SO4)および溶媒を真空下で除去した。残りの油状物を分留により精製して、標題化合物(51g，39％)を得た。
【０１７７】
1H NMR(CDCl3)：δ9.96(s，1H)，7.80(d，2H)，7.35(d，2H)，2.58(m，1H)，1.94-1.70(m，5H)，1.51-1.17(m，5H)。
【０１７８】
式(II)の中間体を調製するために用いられるビルディングブロックのための出発物質
4-(2,2-ジメチルプロピル)ベンズアルデヒド
【化５４】
2005511683.tif 000033
【０１７９】
この化合物を、文献(J. Med. Chem., 36,23,(1993), 3700-3704)の修正した手順と同様に合成した。
【０１８０】
(2,2-ジメチルプロピル)ベンゼン(9,33g，63mmol)をジクロロメタン(50mL)中に溶解させ、氷浴で０℃にまで冷却した。勢いよく撹拌しながら、シリンジを介してSnCl4(28.66g，110mmol)を一度に添加し、続いてジクロロメチルメチルエーテル(7.24g，63mmol)を10分にわたり滴下添加した。20分後氷浴を取り外し、この混合物に氷水(100mL)を添加することにより反応を停止された。水相を廃棄し、有機相を水(3×25mL)、3N 塩酸(3×25mL)、および塩化ナトリウム飽和水溶液(2×25mL)を用いて洗浄した。次いで有機相を活性炭素を用いて処理し、乾燥させ(硫酸マグネシウム)、濾過し、真空下で濃縮した。これにより標題化合物を得た。収量7.49g(62％)。
【０１８１】
1H NMR(CDCl3)：δ0.94(s，9H)，2.57(s，2H)，7.28(d，2H)，7.80(d，2H)，9.98(s，1H)。
【０１８２】
式(II)の中間体を調製するために用いられるビルディングブロックのための出発物質
インダン-5-カルバルデヒド
【化５５】
2005511683.tif 000034
【０１８３】
標題化合物を、インダンおよびジクロロメチル メチルエーテルから、上述と同様の手順を用い、インダン-4-カルバルデヒドおよびインダン-5-カルバルデヒドの1：2 混合物を供して調製した。この混合物を、さらに精製せずに、続くカルコンへの変換に用いた(ビルディングブロック７)。標題化合物についてのみ得られたデータ，(主要な異性体)
1H NMR(DMSO-d6)：δ2.05(q，2H)，2.90(m，4H)，7.41(d，1H)，7.67(d，1H)，7.70(s，1H)，9.95(s，1H)。HPLC-MS(方法Ｄ)：m/z＝147(M+1)；Rt＝3.53min。
【０１８４】
式(II)の中間体を調製するために用いられるビルディングブロックのための出発物質
4-シクロヘキシ-1-エニル-ベンズアルデヒド
【化５６】
2005511683.tif 000035
【０１８５】
マグネシウム屑(14.6g，600mmol)を、乾燥した４つ首フラスコ内に配置した。乾燥THF(50mL)およびヨウ素の結晶を添加した。乾燥THF(200mL)中の2-(4-ブロモフェニル)-[1,3]-ジオキソラン(Tetrahedron, 57, No. 28,(2001), 5991-6002)(135g，589mmol)の混合物をゆっくりと添加し、反応を開始させた。反応が開始した後、2-(4-ブロモフェニル)-[1,3]-ジオキソランの添加を、温度が35〜40℃の間で維持される速度で続けた。添加の完了後、この混合物を２時間撹拌し、次いで氷浴で5℃にまで冷却した。温度を10℃未満に維持しながらシクロヘキサン(57.8g，580mmmol)を滴下添加した。この混合物を18時間室温で撹拌し、３分の２のTHFを真空下で除去した。残渣を、氷水(1リットル)中の塩化アンモニウム(65g)の混合物中に注ぎ、酢酸エチルを用いて抽出した。有機相を水を用いて洗浄し、乾燥させ(硫酸マグネシウム)、濾過し、真空下で蒸発させた。残渣の油状物を石油エーテル中でスラリーにして、48gの1-(4-[1,3]ジオキソラン-2-イル-フェニル)シクロヘキサノールを固体で得た。HPLC-MS(方法Ａ)：m/z＝231(M+1)；Rt＝3.27min。
【０１８６】
300mLのトルエン中の1-(4-[1,3]ジオキソラン-2-イル-フェニル)シクロヘキサノール(45g)およびp-トルエンスルホン酸(3.4g)を３時間、Dean-Stark 条件下で還流させた。冷却後、酢酸エチルおよび炭酸水素ナトリウム飽和溶液を添加した。有機層を水を用いて２回洗浄し、乾燥させ(硫酸マグネシウム)、濾過し、真空下で濃縮した。残渣の油状物を氷酢酸(250mL)中に溶解させ、1M 塩酸(25mL)を添加し、混合物を50℃で２時間撹拌し、冷却後、この混合物を真空下で濃縮した。残渣の油状物を酢酸エチルおよび水の間で分配した。有機相を、水を用いて３回洗浄し、乾燥させ(硫酸マグネシウム)、濾過し、真空下で濃縮した。残渣の油状物を真空下で蒸発させ、120-130℃で沸騰する画分(0.2mmHg)を回収して4.7gの標題化合物を得た。
【０１８７】
1H NMR(CDCl3)：δ1.72(m，4H)，2.25(m，2H)，2.43(m，2H)，6.30(m，1H)，7.53(d，2H)，7.82(d，2H)，9.98(s，1H)。
【０１８８】
式(II)の中間体を調製するために用いられるビルディングブロックのための出発物質
【化５７】
2005511683.tif 000036
【０１８９】
1-(3,5-ジクロロフェニル)エタノン 3,5-ジクロロ安息香酸(19,10g，100mmol)を乾燥THF(165mL)中に溶解させ、氷浴にて０℃で冷却した。勢いよく撹拌しながら138mL(210mmol)のメチルリチウム(ジエチルエーテル中に1.6M)を30分にわたりシリンジを介して滴下添加した。１時間後、混合物を氷水(500mL)中に注いだ。水相をジエチルエーテルを用いて抽出した(4×50mL)。合体した有機相を、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液(2×50mL)および塩化ナトリウム飽和水溶液(2×50mL)を用いて洗浄した。有機相を乾燥させ(硫酸マグネシウム)、濾過し、溶媒を真空下で除去した。これにより18重量％の2-(3,5-ジクロロフェニル)プロパン-2-オールを含んだ17.06gの標題化合物を得た。この化合物をさらに精製せずに次の工程で用いた。
【０１９０】
1H NMR(CDCl3)：δ2.62(s，3H)，7.92(s，2H)，7.94(s，1H)。
【０１９１】
式(II)の中間体を調製するために用いられるビルディングブロックのための出発物質
1-(2,2,3,3-テトラフルオロ-2,3-ジヒドロベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)エタノン
【化５８】
2005511683.tif 000037
【０１９２】
全ての装置をオーブンで120℃にて数時間乾燥させた。窒素雰囲気下で、分液漏斗およびコンデンサーに取り付けられた乾燥した三首の500mL 丸底フラスコ内で、マグネシウムチップ(7.31g，0.30mol)およびジエチルエーテル(20mL)を添加した。磁気撹拌しながら、このMgにヨードメタン(4.7mL，75mmol)を滴下添加し、反応を開始させた。還流を維持しながら、ジエチルエーテル(30mL)中のヨードメタン(14mL，0.22mol)をゆっくりと添加した。添加を終了した後、混合物を１時間半撹拌した。6-シアノ-2,2,3,3-テトラフルオロ-1.4-ベンゾジオキセン(35g，0.15mol)をトルエン(60mL)中に溶解させ、上記反応混合物に添加した。この混合物をコンデンサーなしで80℃で１時間加熱し、ジエチルエーテルを除去した。さらなる6-シアノ-2,2,3,3-テトラフルオロ-1.4-ベンゾジオキセン(25g，0.11mol)を添加し、この混合物を還流温度で16時間加熱した。この混合物を氷浴で冷却し、塩酸(6M，150mL)を慎重に添加し、次いでこの混合物を還流にまで1.5時間加熱した。冷却後、この混合物を酢酸エチルと水との間で分配し、炭酸水素ナトリウム水溶液を用いて洗浄した。合体した有機相を乾燥させ(硫酸マグネシウム)、真空下で濃縮した。残渣の油状物を、酢酸エチルおよびヘプタンの混合物(2：8)を用いて溶出するシリカゲル上のクロマトグラフィーにより精製した。これにより標題化合物(22g，34％)を得た。
【０１９３】
1H NMR(CDCl3)：δ7.80(dd，1H)，7.77(d，1H)，7.23(d，1H)，2.69(s，3H)；HPLC-MS(方法Ａ)：m/z＝251(M+1)；Rt＝4.27min。
【０１９４】
一般手順（Ａ）
一般式(II)のビルディングブロック化合物の液相合成のための一般手順（Ａ）：
【化５９】
2005511683.tif 000038
【０１９５】
この手順をビルディングブロック１のもとで説明する。
【０１９６】
ビルディングブロック１（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-(4-トリフルオロメチルスルファニルフェニル)プロペノン
【化６０】
2005511683.tif 000039
【０１９７】
4-(トリフルオロメチルスルファニル)アセトフェノン(2.34g，10.6mmol)および4-シクロヘキシルベンズアルデヒド(2g，10.6mmol)をエタノール(3mL)中で混合した。NaOH(0.425g，14：6mmol)を水(2mL)中に溶解させ、前記混合物に添加した。この混合物を室温で撹拌し、10分後沈殿が観察され、さらに30分撹拌しながら、さらなるエタノール(5mL)を添加した。この混合物を水(100mL)中に注いだ。沈殿物を濾過し、乾燥させた。この粗成物は、さらに精製せずに後続の使用に十分純粋であった(2.64g，64％)。代替的には、純粋な生成物を得るためにヘプタンから再結晶化させることができる。
【０１９８】
HPLC-MS(方法Ａ)：m/z＝391(M+1)；Rt＝6.68min。
【０１９９】
ビルディングブロック２（一般手順（Ａ）)
【化６１】
2005511683.tif 000040
【０２００】
3-(4-シクロヘキシ-1-エニルフェニル)-1-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン4-(トリフルオロメチルオキシ)アセトフェノン(5.18g，24.9mmol)および4-シクロヘキシ-1-エニルベンズアルデヒド(4.63g，24.9mmol)をエタノール(7mL)中で混合した。NaOH(1.0g，25mmol)を水(5mL)中に溶解させ、前記混合物に添加した。この混合物を室温で撹拌し、10分後沈殿が観察され、さらなるエタノール(10mL)を添加し、この混合物をさらに30分撹拌した。この混合物を水(100mL)中に注いだ。沈殿物を濾過し、乾燥させた。この粗成物はさらに精製せずに後続の使用に十分純粋であった(9.18g，99％)。代替的には、純粋な生成物を得るためにヘプタンから再結晶化させることができる。
【０２０１】
1H NMR(DMSO-d6)：δ1.60-1.68(m，2H)，1.72-1.80(m，2H)，2.23(m，2H)，2.40(m，2H)，6.35(t, 1H)；7.50(d，2H)，7.58(d，2H)，7.77(d，1H)，7.86(d，2H)，7.93(d，1H)，8.30(d，2H)；HPLC-MS(方法Ｃ)：m/z= 373(M+1)；Rt＝8.90min。
【０２０２】
ビルディングブロック3（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-(3,5-ジクロロフェニル)プロペノン
【化６２】
2005511683.tif 000041
【０２０３】
ビルディングブロック4（一般手順（Ａ）)
3-ビフェニル-4-イル-1-(4-クロロフェニル)プロペノン
【化６３】
2005511683.tif 000042
【０２０４】
ビルディングブロック5（一般手順（Ａ）)
3-ビフェニル-4-イル-1-ナフタレン-2-イルプロペノン
【化６４】
2005511683.tif 000043
【０２０５】
ビルディングブロック6（一般手順（Ａ）)
1-(4-シクロヘキシルフェニル)-3-(4-イソプロピルフェニル)プロペノン
【化６５】
2005511683.tif 000044
【０２０６】
ビルディングブロック7（一般手順（Ａ）)
3-インダン-5-イル-1-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化６６】
2005511683.tif 000045
【０２０７】
ビルディングブロック8（一般手順（Ａ）)
3-[4-(2,2-ジメチルプロピル)フェニル]-1-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化６７】
2005511683.tif 000046
【０２０８】
ビルディングブロック9（一般手順（Ａ）)
1-ベンゾ[1,3]ジオキソール-5-イル-3-(4-シクロヘキシルフェニル)プロペノン
【化６８】
2005511683.tif 000047
【０２０９】
ビルディングブロック10（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-(4-イソプロピルフェニル)プロペノン
【化６９】
2005511683.tif 000048
【０２１０】
ビルディングブロック11（一般手順（Ａ）)
1,3-bis-(4-シクロヘキシルフェニル)プロペノン
【化７０】
2005511683.tif 000049
【０２１１】
ビルディングブロック12（一般手順（Ａ）)
1-(4-イソブチルフェニル)-3-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化７１】
2005511683.tif 000050
【０２１２】
ビルディングブロック13（一般手順（Ａ）)
1-(4-シクロペンチルフェニル)-3-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化７２】
2005511683.tif 000051
【０２１３】
ビルディングブロック14（一般手順（Ａ）)
1-フェニル-3-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化７３】
2005511683.tif 000052
【０２１４】
ビルディングブロック15（一般手順（Ａ）)
1-p-トリル-3-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化７４】
2005511683.tif 000053
【０２１５】
ビルディングブロック16（一般手順（Ａ）)
1-(4-メトキシフェニル)-3-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化７５】
2005511683.tif 000054
【０２１６】
ビルディングブロック17（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化７６】
2005511683.tif 000055
【０２１７】
ビルディングブロック18（一般手順（Ａ）)
3-ビフェニル-4-イル-1-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化７７】
2005511683.tif 000056
【０２１８】
ビルディングブロック19（一般手順（Ａ）)
3-ビフェニル-4-イル-1-(4-トリフルオロメチルスルファニルフェニル)プロペノン
【化７８】
2005511683.tif 000057
【０２１９】
ビルディングブロック20（一般手順（Ａ）)
3-ビフェニル-4-イル-1-(2,2,3,3-テトラフルオロ-2,3-ジヒドロベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)プロペノン
【化７９】
2005511683.tif 000058
【０２２０】
ビルディングブロック21（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-(2,2,3,3-テトラフルオロ-2,3-ジヒドロベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)プロペノン
【化８０】
2005511683.tif 000059
【０２２１】
ビルディングブロック22（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-(3-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化８１】
2005511683.tif 000060
【０２２２】
ビルディングブロック23（一般手順（Ａ）)
3-(4-tert-ブチルフェニル)-1-(4-トリフルオロメチルスルファニルフェニル)プロペノン
【化８２】
2005511683.tif 000061
【０２２３】
ビルディングブロック24（一般手順（Ａ）)
3-ビフェニル-4-イル-1-(3-ブロモフェニル)プロペノン
【化８３】
2005511683.tif 000062
【０２２４】
ビルディングブロック25（一般手順（Ａ）)
3-ビフェニル-4-イル-1-(3-トリフルオロメチルフェニル)プロペノン
【化８４】
2005511683.tif 000063
【０２２５】
ビルディングブロック26（一般手順（Ａ）)
3-(4-ブロモチオフェン-2-イル)-1-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化８５】
2005511683.tif 000064
【０２２６】
ビルディングブロック27（一般手順（Ａ）)
1,3-bis-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化８６】
2005511683.tif 000065
【０２２７】
ビルディングブロック28（一般手順（Ａ）)
3-(4-tert-ブチルフェニル)-1-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化８７】
2005511683.tif 000066
【０２２８】
ビルディングブロック29（一般手順（Ａ）)
3-(4-フェノキシフェニル)-1-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化８８】
2005511683.tif 000067
【０２２９】
ビルディングブロック30（一般手順（Ａ）)
3-(3-フェノキシフェニル)-1-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化８９】
2005511683.tif 000068
【０２３０】
ビルディングブロック31（一般手順（Ａ）)
3-(4-ベンジルオキシフェニル)-1-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化９０】
2005511683.tif 000069
【０２３１】
ビルディングブロック32（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-(3,4-ジフルオロフェニル)プロペノン
【化９１】
2005511683.tif 000070
【０２３２】
ビルディングブロック33（一般手順（Ａ）)
1-(4-sec-ブチルフェニル)-3-(3-フェノキシフェニル)プロペノン
【化９２】
2005511683.tif 000071
【０２３３】
ビルディングブロック34（一般手順（Ａ）)
3-[3-(4-クロロフェノキシ)フェニル]-1-(5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル)プロペノン
【化９３】
2005511683.tif 000072
【０２３４】
ビルディングブロック35（一般手順（Ａ）)
3-(4-ベンジルオキシフェニル)-1-(3-ブロモフェニル)プロペノン
【化９４】
2005511683.tif 000073
【０２３５】
ビルディングブロック36（一般手順（Ａ）)
1-ビフェニル-4-イル-3-(4-シクロヘキシルフェニル)プロペノン
【化９５】
2005511683.tif 000074
【０２３６】
ビルディングブロック37（一般手順（Ａ）)
1-(2-クロロフェニル)-3-(4-シクロヘキシルフェニル)プロペノン
【化９６】
2005511683.tif 000075
【０２３７】
ビルディングブロック38（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-(2-トリフルオロメチルフェニル)プロペノン
【化９７】
2005511683.tif 000076
【０２３８】
ビルディングブロック39（一般手順（Ａ）)
1-(4-tert-ブチルフェニル)-3-(4-シクロヘキシルフェニル)プロペノン
【化９８】
2005511683.tif 000077
【０２３９】
ビルディングブロック40（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-(4-フェノキシフェニル)プロペノン
【化９９】
2005511683.tif 000078
【０２４０】
ビルディングブロック41（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-(4-ピペリジン-1-イルフェニル)プロペノン
【化１００】
2005511683.tif 000079
【０２４１】
ビルディングブロック42（一般手順（Ａ）)
3-(4-トリフルオロメトキシフェニル)-1-(4-トリフルオロメチルスルファニルフェニル)プロペノン
【化１０１】
2005511683.tif 000080
【０２４２】
ビルディングブロック43（一般手順（Ａ）)
1-(3-トリフルオロメトキシフェニル)-3-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化１０２】
2005511683.tif 000081
【０２４３】
ビルディングブロック44（一般手順（Ａ）)
1-3-(ビフェニル-4-イル)-1-(4-シクロヘキシルフェニル)プロペノン
【化１０３】
2005511683.tif 000082
【０２４４】
ビルディングブロック45（一般手順（Ａ）)
1-(4-tert-ブチルフェニル)-3-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化１０４】
2005511683.tif 000083
【０２４５】
ビルディングブロック46（一般手順（Ａ）)
1-(2,2,3,3-テトラフルオロ-2,3-ジヒドロベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-3-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化１０５】
2005511683.tif 000084
【０２４６】
ビルディングブロック47（一般手順（Ａ）)
1-(4-クロロフェニル)-3-(4-シクロヘキシルフェニル)プロペノン
【化１０６】
2005511683.tif 000085
【０２４７】
ビルディングブロック48（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-(5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル)プロペノン
【化１０７】
2005511683.tif 000086
【０２４８】
ビルディングブロック49（一般手順（Ａ）)
1-(5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル)-3-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化１０８】
2005511683.tif 000087
【０２４９】
ビルディングブロック50（一般手順（Ａ）)
3-(4-クロロフェニル)-1-(4-シクロヘキシルフェニル)プロペノン
【化１０９】
2005511683.tif 000088
【０２５０】
ビルディングブロック51（一般手順（Ａ）)
1-ビフェニル-4-イル-3-(4-シクロヘキシルフェニル)プロペノン
【化１１０】
2005511683.tif 000089
【０２５１】
ビルディングブロック52（一般手順（Ａ）)
1-(4-シクロヘキシルフェニル)-3-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化１１１】
2005511683.tif 000090
【０２５２】
ビルディングブロック53（一般手順（Ａ）)
1-ビフェニル-4-イル-3-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化１１２】
2005511683.tif 000091
【０２５３】
ビルディングブロック54（一般手順（Ａ）)
1-(4-シクロヘキシルフェニル)-3-(3,5-ジクロロフェニル)プロペノン
【化１１３】
2005511683.tif 000092
【０２５４】
ビルディングブロック55（一般手順（Ａ）)
3-(3-ブロモフェニル)-1-(4-シクロヘキシルフェニル)プロペノン
【化１１４】
2005511683.tif 000093
【０２５５】
ビルディングブロック56（一般手順（Ａ）)
3-(4-メチルフェニル)-1-(4-クロロフェニル)プロペノン
【化１１５】
2005511683.tif 000094
【０２５６】
この化合物は公知である(Tet Lett. 39(16), 2235, (1998))。
【０２５７】
ビルディングブロック57（一般手順（Ａ）)
1,3-bis-(4-クロロフェニル)プロペノン
【化１１６】
2005511683.tif 000095
【０２５８】
この化合物は公知である(Chem. Ber. 42, 1813, (1909))。
【０２５９】
ビルディングブロック58（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-インダン-5-イルプロペノン
【化１１７】
2005511683.tif 000096
【０２６０】
ビルディングブロック59（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-(4-イソブチルフェニル)プロペノン
【化１１８】
2005511683.tif 000097
【０２６１】
ビルディングブロック60（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-(4-シクロペンチルフェニル)プロペノン
【化１１９】
2005511683.tif 000098
【０２６２】
ビルディングブロック4（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-フェニルプロペノン
【化１２０】
2005511683.tif 000099
【０２６３】
ビルディングブロック5（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-(4-メチルフェニル)プロペノン
【化１２１】
2005511683.tif 000100
【０２６４】
ビルディングブロック6（一般手順（Ａ）)
3-(4-シクロヘキシルフェニル)-1-(4-メトキシフェニル)プロペノン
【化１２２】
2005511683.tif 000101
【０２６５】
ビルディングブロック61（一般手順（Ａ）)
1-(4-tert-ブチルフェニル)-3-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン
【化１２３】
2005511683.tif 000102
【０２６６】
4-(トリフルオロメトキシ)ベンズアルデヒド(16,5g，87mmol)および4-tert-ブチルアセトフェノン(15.3g，87mmol)をエタノール99％(25mL)中に溶解させた。この溶液に水酸化ナトリウム(8N，16.2mL)を添加した。この反応混合物を1時間撹拌し、水(100mL)を用いて希釈し、２時間後濾過し、水を用いて洗浄した。生成物を真空下で乾燥させ、次いでエタノール(80mL)中に懸濁させ、１時間半20℃で撹拌した。この混合物を16時間冷蔵庫に置き、沈殿した生成物を濾過除去し、氷冷した99％エタノールを用いて洗浄し、乾燥させて11.5g(38％)の1-(4-tert-ブチルフェニル)-3-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノンを得た。HPLC-MS(方法Ｃ)：m/z＝349(M+1)；Rt＝7.10min。
【０２６７】
ビルディングブロック62
1-(3,5-bis-トリフルオロメチルフェニル)-3-(4-シクロヘキシルフェニル)プロペノン
【化１２４】
2005511683.tif 000103
【０２６８】
3',5'-bis(トリフルオロメチル)アセトフェノン(9.3g，36.3mmol)および4-シクロヘキシルベンズアルデヒド(6.83g，36.3mmol)をNMP(18mL)中に溶解させた。酢酸亜鉛(ＩＩ)(398mg，1.8mmol)および2,2'-ビピリジン(283mg，1.81mmol)を添加し、この混合物を100℃で窒素下にて16時間加熱した。冷却後、この混合物をヘプタン(250mL)および水(250mL)の間で分配した。有機相を乾燥させ(NaSO4)、乾燥するまで蒸発させて、粗製の物質を得、乾燥するまで蒸発させて粗製の物質を得、これをヘプタンから再結晶化することができ、純粋な標題化合物を固体で得た。収量：5.8g(38％)。
【０２６９】
HPLC-MS(方法Ｄ)：m/z＝427(M+1)；Rt＝6.71min。
【０２７０】
一般手順（Ｂ）
一般式(I5)の化合物の固相合成のための一般手順（Ｂ）：
【化１２５】
2005511683.tif 000104
【０２７１】
式中、X、D、E、M、nおよびR4は式(I)で定義したとおりであり、樹脂はWang-リンカーを負荷されたポリスチレン樹脂である。
【０２７２】
工程１：
この反応は知られており(Wang S. J., J. Am. Chem. Soc. 95, 1328, 1973)、一般的に、N,N-4-ジメチルアミノピリジンのような触媒の存在下で、2〜5モル過剰のジイソプロピルカルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミドまたは1-[3-(ジメチルアミノ)プロピル]-3-エチルカルボジイミド塩酸塩を用いて活性化された4〜10モル過剰のFmoc-保護されたアミノ酸を有するWangリンカーのようなリンカーを負荷されたポリスチレン樹脂を撹拌することにより行われる。エステル化は、THF、ジオキサン、トルエン、DCM、DMF、NMPまたはこれらの２つ以上からなる混合物のような溶媒中で行われる。反応は0℃から80℃の間、好ましくは20℃から40℃の間で行われる。エステル化が完了したら、過剰な試薬を濾過除去する。樹脂を、反応中に用いた溶媒を用いて連続的に洗浄し、続いてメタノールを用いて洗浄した。樹脂結合生成物をさらに乾燥させ分析できる。
【０２７３】
工程２：
N-フルオレニルメチルカルボニル保護基を、樹脂結合誘導体を用いて、DMFまたはNMPのような極性溶媒中のピペリジンのような副次的アミンの20％〜50％溶液とともに処理することにより除去する(Carpino L., Han G. , J. Org. Chem. 37, 3404, 1972)。反応は20℃から180℃の間、好ましくは20℃から40℃の間で行われる。反応が完了したら、過剰な試薬を濾過除去する。樹脂を、反応で用いた溶媒を用いて連続的に洗浄する。得られた樹脂結合中間体を酸を用いてアシル化する。このアシル化は知られており(The combinatorial index, Ed. Bunin B. A. , 1998, Acedemic press，p. 78)、一般的に、N-ヒドロキシベンゾトリアゾールのような副反応阻害剤(side reaction inhibitor)の存在下で、2〜5モル過剰のジイソプロピル-カルボジイミド、ジシクロヘキシル-カルボジイミドまたは1-[3-(ジメチルアミノ)プロピル]-3-エチルカルボジイミド塩酸塩を用いて活性化された2〜5モル過剰の酸とともに前記樹脂結合中間体を撹拌することにより行われる。この反応は、0℃から80℃の間、好ましくは20℃から40℃の間で行われる。エステル化が完了したら、過剰な試薬を濾過除去する。樹脂を、反応で用いた溶媒を用いて連続的に洗浄し、続いてメタノールを用いて洗浄する。樹脂結合生成物をさらに乾燥させ、分析できる。
【０２７４】
工程３：
この反応はこれまでに固相支持体うえでは報告されてはいないが、溶液ベースの方法(Stetter H., Krasselt J. J. Heterocyclic. Chem. 14,573, 1977)をの変形である。活性化された二重結合へのアルデヒドの添加は、一般的に、シアン化カリウムもしくはナトリウム、またはヨウ化3,4-ジメチル-5-(2-ヒドロキシエチル)チアゾリウム、塩化3-ベンジル-5-(2-ヒドロキシエチル)-4-メチル-1,3-チアゾリウム、臭化3-エチル-5-(2-ヒドロキシエチル)-4-メチル-1,3-チアゾリウムのようなチアゾリウム塩、またはビタミンＢ1のような触媒の存在下で、置換プロペノンのような活性化された二重結合を含んだ化合物とともにアルデヒドを撹拌することにより行われる。チアゾリウム塩を触媒として用いる場合、トリエチルアミン、N,N-ジイソプロピルエチルアミンまたはDBUのような非求核性アミン塩基を添加する。この添加は、ジオキサン、DMSO、NMPもしくはDMF、またはこれらの２つ以上からなる混合物のような溶媒中で行われる。この反応は50℃から120℃の間、好ましくは50℃から80℃の間で行われる。反応が完了したら、過剰な試薬を濾過除去する。樹脂を、反応で用いた溶媒を用いて連続的に洗浄し、続いてメタノールを用いて洗浄する。樹脂結合生成物をさらに乾燥させ、分析できる。
【０２７５】
工程４：
この反応は知られており(The combinatorial index, Ed. Bunin B. A., 1998, Acedemic press，p. 21)、一般的に、工程３で得た樹脂結合中間体をTFAの50-95％ 溶液とともに撹拌することにより行われる。最後の開裂は、THF、DCM、1,2-ジクロロエタン、1,3-ジクロロプロパン、トルエンまたはこれらの混合物のような溶媒中で行われる。この反応は、0℃から80℃の間、好ましくは20℃から40℃の間で行われる。反応が完了したら、生成物を濾過除去する。樹脂をDCMを用いて連続的に洗浄する。生成物および洗浄液を回収する。溶媒を除去し、生成物を真空下で乾燥させる。
【０２７６】
上記手順を以下の例で例示する。
【０２７７】
例１（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-ビフェニル-4-イル-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１２６】
2005511683.tif 000105
【０２７８】
工程１および工程２：
樹脂結合3-(4-ホルミルベンゾイルアミノ)プロピオン酸
Wang樹脂への3-(4-ホルミルベンゾイルアミノ)プロピオン酸樹脂結合(およそ0.2-0.8mmol/gを負荷)を、WO 00/69810に記載の手順に従い合成した。
【０２７９】
工程３および工程４：
3-[4-{2-ビフェニル-4-イル-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)-ブチリル]ベンゾイルアミノ]プロピオン酸の調製
上記樹脂結合3-(4-ホルミルベンゾイルアミノ)プロピオン酸(496mg樹脂)をNMP(10mL)中に懸濁させた。ヨウ化3,4-ジメチル-5-(2-ヒドロキシエチル)チアゾリウム(432mg，1.5mmol)、3-ビフェニル-4-イル-1-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン(1.05g，2.7mmol)およびDBU(225μL，1.50mmol)を添加し、この懸濁液を70℃で16時間振とうした。樹脂を濾過により分離し、DMF(3×10mL)、エタノール(2×10mL)、DCM(10×10mL)を用いて洗浄した。樹脂結合3-{4-[2-ビフェニル-4-イル-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)-ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸をDCM(10mL)中の50％TFAを用いて0.5時間25℃で処理した。この混合物を濾過し、樹脂をDCM(10mL)を用いて洗浄した。合体した濾液を真空下で濃縮して油状物を得、これを、DCM/メタノール/酢酸(95：4：1)を用いて溶出するシリカゲルカラムで精製し、標題化合物を得た。
【０２８０】
以下の例を上記と同様に作製した。
【０２８１】
例２（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-ビフェニル-4-イル-4-オキソ-4-(3-トリフルオロメチルフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１２７】
2005511683.tif 000106
【０２８２】
例３（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメチルスルファニルフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１２８】
2005511683.tif 000107
【０２８３】
例４（一般手順（Ｂ））  3-{4-[4-(3,5-bis-トリフルオロメチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１２９】
2005511683.tif 000108
【０２８４】
例５（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-ビフェニル-4-イル-4-(3-ブロモフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１３０】
2005511683.tif 000109
【０２８５】
例６（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-ビフェニル-4-イル-4-オキソ-4-(2,2,3,3-テトラフルオロ-2,3-ジヒドロベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１３１】
2005511683.tif 000110
【０２８６】
例７（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(2,2,3,3-テトラフルオロ-2,3-ジヒドロベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１３２】
2005511683.tif 000111
【０２８７】
例８（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-ビフェニル-4-イル-4-(3,5-bis-トリフルオロメチルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１３３】
2005511683.tif 000112
【０２８８】
例９（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメチルスルファニルフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１３４】
2005511683.tif 000113
【０２８９】
例10（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-(4-ブロモチオフェン-2-イル)-4-(3,4-ジクロロフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１３５】
2005511683.tif 000114
【０２９０】
例11(一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-(4-ブロモチオフェン-2-イル)-4-(4-クロロ-3-メチルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１３６】
2005511683.tif 000115
【０２９１】
例12（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-4-(3-トリフルオロメチルフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１３７】
2005511683.tif 000116
【０２９２】
例13（一般手順（Ｂ））  3-(4-[2-ビフェニル-4-イル-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメチルスルファニルフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１３８】
2005511683.tif 000117
【０２９３】
例14（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-(4-ベンジルオキシフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１３９】
2005511683.tif 000118
【０２９４】
例15（一般手順（Ｂ））  3-{4-[4-オキソ-2-(4-フェノキシフェニル)-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１４０】
2005511683.tif 000119
【０２９５】
例16（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１４１】
2005511683.tif 000120
【０２９６】
例17（一般手順（Ｂ））  3-{4-[4-オキソ-2-(3-フェノキシフェニル)-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１４２】
2005511683.tif 000121
【０２９７】
例18（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-ビフェニル-4-イル-4-(4-クロロフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１４３】
2005511683.tif 000122
【０２９８】
例19（一般手順（Ｂ））  3-[4-(2-ビフェニル-4-イル-4-ナフタレン-2-イル-4-オキソブチリル)ベンゾイルアミノ]プロピオン酸
【化１４４】
2005511683.tif 000123
【０２９９】
例20（一般手順（Ｂ））  3-{4-[4-(4-sec-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(3-フェノキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１４５】
2005511683.tif 000124
【０３００】
例21（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-[3-(4-クロロフェノキシ)フェニル]-4-オキソ-4-(5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１４６】
2005511683.tif 000125
【０３０１】
例22（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-(4-ベンジルオキシフェニル)-4-(3-ブロモフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１４７】
2005511683.tif 000126
【０３０２】
例23（一般手順（Ｂ））  3-{4-[4-(4-シクロヘキシルフェニル)-2-(4-イソプロピルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１４８】
2005511683.tif 000127
【０３０３】
例24（一般手順（Ｂ））  3-{4-[4-ビフェニル-4-イル-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１４９】
2005511683.tif 000128
【０３０４】
例25（一般手順（Ｂ））  3-{4-[4-(2-クロロフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１５０】
2005511683.tif 000129
【０３０５】
例26（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(2-トリフルオロメチルフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１５１】
2005511683.tif 000130
【０３０６】
例27（一般手順（Ｂ））  3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１５２】
2005511683.tif 000131
【０３０７】
例28（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(4-ピペリジン-1-イルフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１５３】
2005511683.tif 000132
【０３０８】
例29（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(4-フェノキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１５４】
2005511683.tif 000133
【０３０９】
例30（一般手順（Ｂ））  3-{4-[4-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１５５】
2005511683.tif 000134
【０３１０】
例31（一般手順（Ｂ））  3-{4-[4-ビフェニル-4-イル-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１５６】
2005511683.tif 000135
【０３１１】
例32（一般手順（Ｂ））  3-{4-[4-(4-シクロヘキシルフェニル)-2-(3,5-ジクロロフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１５７】
2005511683.tif 000136
【０３１２】
例33（一般手順（Ｂ））  3-{4-[2-(3-ブロモフェニル)-4-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１５８】
2005511683.tif 000137
【０３１３】
例34（一般手順（Ｂ））  3-{4-[4-ベンゾ[1,3]ジオキソール-5-イル-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１５９】
2005511683.tif 000138
【０３１４】
一般手順（Ｃ）
一般式(Ｉ4)の化合物の固相合成のための一般手順（Ｃ）：
【化１６０】
2005511683.tif 000139
【０３１５】
式中、X、D、E、M、nおよびR4は式（Ｉ）で定義したとおりであり、樹脂はWang-リンカーで負荷されたポリスチレン樹脂である。この手順を以下の例において例示する。
【０３１６】
例35（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１６１】
2005511683.tif 000140
【０３１７】
工程１〜工程３：樹脂結合3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸の調製
化合物を一般手順（Ｂ）に従い合成した。
【０３１８】
工程４および工程５：3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸の調製
上記樹脂結合3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸(500mg樹脂)をTHF(10mL)中に懸濁させ、ヨウ素結晶(344mg，1.35mmol)およびDBU(225μL)を添加した。この懸濁液を室温で3.5時間振とうした。樹脂を濾過により分離し、THF(1×10mL)、ピロ硫酸ナトリウム溶液(水中に2％)(1×10mL)、THF(2×10mL)、DCM(10×10mL)を用いて洗浄した。この樹脂結合3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニルブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸を、DCM(10mL)中の50％TFA を用いて0.5時間25℃で処理した。この混合物を濾過し、樹脂をDCM(10mL)を用いて洗浄した。合体した濾液を真空下で濃縮して油状物を得、これをDCM/メタノール/酢酸(95：4：1)用いて溶出するシリカゲルカラムで精製し、3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸のEおよびZの混合物を得た。
【０３１９】
1H-NMR(CDCl3)：δ8.03-7.92(m，3H)，7.88-7.77(m，3H)，7.58-7.47(m，1H)，7.15(t，3H)，7.01(d，1H)；6.90-6.80(m，2H)，3.73(q，2H)，2.72(t，2H)，2.37(m，1H)，1.78-1.66(m，5H)，1.42-1.23(m，5H)；HPLC-MS(方法Ａ)：m/z＝594(M+1)；Rt＝5.44min。
【０３２０】
工程６：(Z)-3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)-ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸の調製
EおよびZ 混合物の、Z-異性体への再構成(rearrangement)は、文献記載の手順(J. Am. Chem. Soc., 75, 5997-6002,1953)の改変により行われた。3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸(155mg，0.26mmol)のEおよびZ 混合物をトルエン(15mL)中に溶解させ、濃HCl(37％，3滴)を添加し、この混合物を１時間還流にまで加熱した。溶剤を蒸発により除去して、純粋な3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸のZ異性体を得た。
【０３２１】
1H-NMR(CDCl3)：δ8.03(d，4H)，7.79(d，2H)，7.57(s，1H)，7.48(d，2H)，7.30(d，2H)；7.24(d，2H)，6.84(t，1H)，3.71(q，2H)，2.70(t，2H)，2.52(m，1H)，1.90-1.70(m，5H)，1.45-1.17(m，5H)；HPLC-MS(方法Ａ)：m/z＝594(M+1)；Rt＝5.37min。
【０３２２】
微量分析：C33H30F3NO6，0.25H2Oについての計算値：C，66.27％；H，5.14％；N，2.34％。実測値：C，66.33％；H，5.20％；N，2.57％。
【０３２３】
例36（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-(4-シクロへキシルフェニル)-4-オキソ-4-(2,2,3,3-テトラフルオロ-2,3-ジヒドロベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１６２】
2005511683.tif 000141
【０３２４】
一般手順（Ｃ）における工程５から得られるEおよびZ混合物のデータ：
1H-NMR(CDCl3)：δ8.01-7.92(m，2H)，7.83-7.45(m，6H)，7.26-7.00(m，3H)，6.84(br t，1H)，3.71(q，2H)，2.70(q，2H)，2.52(m，1H)，1.88-1.67(m，5H)，1.45-1.17(m，5H)。
【０３２５】
標題化合物のデータ：
1H NMR(CDCl3)：δ7.98(brd，2H)，7.88-7.70(m，4H)，7.50(t，3H)，7.18(d，1H)，6.84(br s，1H)，3.71(br s，2H)，2.70(br s，2H)，2.52(m，1H)，1.90-1.70(m，5H)，1.45-1.15(m，5H)。
【０３２６】
例37（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-(3,5-bis-トリフルオロメチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１６３】
2005511683.tif 000142
【０３２７】
例38（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-(3,5-bis(トリフルオロメチル)フェニル)-2-[2,2']ビチオフェニル-5-イル-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１６４】
2005511683.tif 000143
【０３２８】
例39（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-(4-ブロモチオフェン-2-イル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１６５】
2005511683.tif 000144
【０３２９】
例40（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(3-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１６６】
2005511683.tif 000145
【０３３０】
例41（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメチルスルファニルフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１６７】
2005511683.tif 000146
【０３３１】
例42（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-ビフェニル-4-イル-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１６８】
2005511683.tif 000147
【０３３２】
例43（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-(2-クロロフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１６９】
2005511683.tif 000148
【０３３３】
例44（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(2-トリフルオロメチルフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１７０】
2005511683.tif 000149
【０３３４】
例45（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１７１】
2005511683.tif 000150
【０３３５】
例46（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-(2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(4-フェノキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１７２】
2005511683.tif 000151
【０３３６】
例47（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-(4-tert-ブチル]フェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１７３】
2005511683.tif 000152
【０３３７】
例48（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-オキソ-2-(4-フェノキシフェニル)-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１７４】
2005511683.tif 000153
【０３３８】
例49（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-オキソ-2-(3-フェノキシフェニル)-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１７５】
2005511683.tif 000154
【０３３９】
例50（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-(4-ベンジルオキシフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１７６】
2005511683.tif 000155
【０３４０】
例51（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-オキソ-2,4-bis-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１７７】
2005511683.tif 000156
【０３４１】
例52（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-(3,4-ジフルオロフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１７８】
2005511683.tif 000157
【０３４２】
例53（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-ビフェニル-4-イル-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１７９】
2005511683.tif 000158
【０３４３】
例54（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-ビフェニル-4-イル-4-オキソ-4-(2,2,3,3-テトラフルオロ-2,3-ジヒドロベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１８０】
2005511683.tif 000159
【０３４４】
例55（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-4-[4-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１８１】
2005511683.tif 000160
【０３４５】
例56（一般手順（Ｃ））  (Z)3-{4-[4-ベンゾ[1,3]ジオキソール-5-イル-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１８２】
2005511683.tif 000161
【０３４６】
例57（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-(4-イソプロピルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１８３】
2005511683.tif 000162
【０３４７】
例58（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2,4-bis-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１８４】
2005511683.tif 000163
【０３４８】
例59（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-(4-ジクロロフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１８５】
2005511683.tif 000164
【０３４９】
例60（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-(4-イソブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１８６】
2005511683.tif 000165
【０３５０】
例61（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-(4-シクロペンチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１８７】
2005511683.tif 000166
【０３５１】
例62（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-オキソ-4-フェニル-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１８８】
2005511683.tif 000167
【０３５２】
例63（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-オキソ-4-p-トリル-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１８９】
2005511683.tif 000168
【０３５３】
例64（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-(4-メトキシフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１９０】
2005511683.tif 000169
【０３５４】
例65（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-[4-(2,2-ジメチルプロピル)フェニル]-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１９１】
2005511683.tif 000170
【０３５５】
例66（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-インダン-5-イル-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１９２】
2005511683.tif 000171
【０３５６】
例67（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2,4-ビフェニル-4-イル-4-(4-クロロフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１９３】
2005511683.tif 000172
【０３５７】
例68（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-[4-(2-ビフェニル-4-イル-4-ナフタレン-2-イル-4-オキソブト-2-エノイル)ベンゾイルアミノ]プロピオン酸
【化１９４】
2005511683.tif 000173
【０３５８】
例69（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-(4-シクロヘキシルフェニル)-2-(4-イソプロピルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１９５】
2005511683.tif 000174
【０３５９】
例70（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)-4-(4-トリフルオロメチルスルファニルフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１９６】
2005511683.tif 000175
【０３６０】
例71（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-オキソ-2,4-bis-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１９７】
2005511683.tif 000176
【０３６１】
例72（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-オキソ-4-(3-トリフルオロメトキシフェニル)-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１９８】
2005511683.tif 000177
【０３６２】
例73（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-ビフェニル-4-イル-4-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化１９９】
2005511683.tif 000178
【０３６３】
例74（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-ビフェニル-4-イル-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２００】
2005511683.tif 000179
【０３６４】
例75（一般手順（Ｃ））  (Z)-(3-{4-[4-ビフェニル-4-イル-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２０１】
2005511683.tif 000180
【０３６５】
例76  (Z)-3-{4-[2-(4-シクロヘキシ-1-エニルフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２０２】
2005511683.tif 000181
【０３６６】
この化合物は、開裂の前に樹脂を３日間70℃で振とうするという改変(工程３)を伴い、一般手順（Ｂ）に従って調製された。これにより酸化生成物を得た。
【０３６７】
1H-NMR(CDCl3)：δ1.60-1.74(m，2H)，1.75-1.83(m，2H)，2.18-2.27(m，2H)，2.37-2.43(m，2H)，2.68-2.75(t，2H)，3.68-3.78(q，2H)；6.24(t，1H)，6.83(t，1H)，7.30(d，2H)，7.42(d，2H)；7.50(d，2H)，7.61(s，1H)；7.80(d，2H)，8.01(dd，4H)；HPLC-MS(方法Ｃ)：m/z＝592(M+1)；Rt＝7.60min。
【０３６８】
例77（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２０３】
2005511683.tif 000182
【０３６９】
例78（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-オキソ-4-(2,2,3,3-テトラフルオロ-2,3-ジヒドロベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-2-(4-トリフルオロメトキシ-フェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２０４】
2005511683.tif 000183
【０３７０】
例79（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-(4-クロロフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２０５】
2005511683.tif 000184
【０３７１】
例80（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２０６】
2005511683.tif 000185
【０３７２】
例81（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-オキソ-4-(5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル)-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２０７】
2005511683.tif 000186
【０３７３】
例82（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2-(4-クロロフェニル)-4-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２０８】
2005511683.tif 000187
【０３７４】
例83（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[4-(4-クロロフェニル)-4-オキソ-2-p-トリルブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２０９】
2005511683.tif 000188
【０３７５】
例84（一般手順（Ｃ））  (Z)-3-{4-[2,4-bis-(4-クロロフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２１０】
2005511683.tif 000189
【０３７６】
例85（一般手順（Ｃ））  (Z)3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-インダン-5-イル-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２１１】
2005511683.tif 000190
【０３７７】
例86（一般手順（Ｃ））  (Z)3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-(4-イソブチルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２１２】
2005511683.tif 000191
【０３７８】
例87（一般手順（Ｃ））  (Z)3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-(4-シクロペンチルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２１３】
2005511683.tif 000192
【０３７９】
例88（一般手順（Ｃ））  (Z)3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-フェニルブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２１４】
2005511683.tif 000193
【０３８０】
例89（一般手順（Ｃ））  (Z)3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-p-トリルブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２１５】
2005511683.tif 000194
【０３８１】
例90（一般手順（Ｃ））  (Z)3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-(4-メトキシフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２１６】
2005511683.tif 000195
【０３８２】
例91  (E)-3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２１７】
2005511683.tif 000196
【０３８３】
3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸のEおよびZの混合物を、一般手順（Ｃ）の工程１〜５の記載どおりに調製した。この混合物を、HPLC(キラルセルOD，25×2cm，イソプロパノール：ヘプタン：トリフルオロ酢酸(20：80：0.1)を用いて溶出，6mL/分)により分離して純粋なE-異性体を得た。
【０３８４】
1H-NMR(CDCl3)：δ1.66-2.05(m，5H)，2.41(m，1H)，2.51(m，2H)，3.47(q，2H)，7.12(d，4H)，7.44(d，2H)，7.96-8.01(m，6H)，8.72(t，1H)。
【０３８５】
一般手順（Ｄ）
一般式（Ｉ3）の化合物の液相合成のための一般手順（Ｄ）：
【化２１８】
2005511683.tif 000197
【０３８６】
この手順を以下の例で例示する：
例92（一般手順（Ｄ））
4-[2-ビフェニル-4-イル-4-オキソ-4-(3-トリフルオロメチルフェニル)ブチリル]-N-(2H-テトラゾール-5-イル)ベンズアミド
【化２１９】
2005511683.tif 000198
【０３８７】
4-ホルミル-N-(2H-テトラゾール-5-イル)ベンズアミド(128mg)(WO/00169810に記載の手順にしがたい合成)、3-ビフェニル-4-イル-1-(3-トリフルオロメチルフェニル)プロペノン(223mg)およびヨウ化3,4-ジメチル-5-(2-ヒドロキシエチル)チアゾリウム(89mg)を乾燥DMF(2.2mL)中に溶解させた。トリエチルアミン(0.180mL)を添加し、この混合物を70℃で3日間窒素下にて撹拌した。反応混合物を、DCM／メタノール／酢酸(90：9：1)を用いて溶出するシリカゲルカラムを介して濾過し、溶媒を蒸発により除去して油状物を得た。この油状物を、沸騰しているヘプタン(4mL)を用いて洗浄して未反応の3-ビフェニル-4-イル-1-(3-トリフルオロメチルフェニル)プロペノンを除去し、残った物質をDCM／メタノール／酢酸(95：4：1)を用いて溶出するシリカゲル上のカラムで精製して標題化合物(30mg，9％)を得た。
【０３８８】
1H-NMR(CDCl3)：δ12.8(br s，1H)，8.38(d，2H)，8.30(s，1H)，8.26(d，2H)，8.18(d，1H)，7.83(d，1H)，7.67-7.30(m，11H)；5.41(dd，1H)，4.30(dd，1H)，3.42(dd，1H)；HPLC-MS(方法Ａ)：m/z＝570(M+1)，Rt＝5.12min。
【０３８９】
一般手順（Ｅ）
一般式(Ｉ5)の化合物の溶相合成のための一般手順（Ｅ）：
【化２２０】
2005511683.tif 000199
【０３９０】
式中、X、D、E、M、nおよびR4は式（Ｉ）で定義されたとおりであり、Pgは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、tert-ブチルまたはベンジルのような標準的な酸保護基である。この手順を以下の例で例示する。
【０３９１】
工程１：
この反応は知られており、以前WO 00/69810に記載された。保護されたアミノ酸のアシル化は一般的に、ジイソプロピル-カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミドまたは1-[3-(ジメチルアミノ)-プロピル]-3-エチルカルボジイミド塩酸塩を用いて、任意に副反応阻害剤の存在下で、カルボン酸を活性化させることにより行われる。次いで、保護化されたアミノ酸(保護された、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、tert-ブチルまたはベンジルエステル)に、上記活性化されたカルボン酸を添加する。保護されたアミノ酸がアンモニウム塩である場合、トリエチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミンのような非求核性塩基を添加する。アシル化は、THF、ジオキサン、トルエン、DCM、DMF、NMPまたはこれらの２つ以上からなる混合物のような溶媒中で行われる。反応は一般的に、0℃から80℃の間、好ましくは20℃から40℃で行われる。生成物は、当業の熟練者に知られたワークアップ手順により得ることができる。
【０３９２】
工程２：
この反応は公知である(Stetter H., Krasselt J. J. Heterocyclic. Chem. 14,573, 1977)。活性化された二重結合へのアルデヒドの添加は、一般的に、シアン化物、もしくはヨウ化3,4-ジメチル-5-(2-ヒドロキシエチル)チアゾリウム、塩化3-ベンジル-5-(2-ヒドロキシエチル)-4-メチル-1,3-チアゾリウム、臭化3-エチル-5-(2-ヒドロキシエチル)-4-メチル-1,3-チアゾリウムのようなチアゾリウム塩、またはビタミンＢ1のような触媒の存在下で、置換されたプロペノンのような活性化された二重(dobbelt)結合を含んだ化合物とともに撹拌することにより行われる。チアジリウム塩を触媒として用いる場合、トリエチルアミンまたはDBUのような非求核性アミン塩基を触媒として用いる。その添加は、 エタノール、メタノール、1-プロパノール、2-プロパノール、ジオキサン、DMSO、NMPもしくはDMF、またはこれらのうち２つ以上からなる混合物のような溶媒中で行われる。反応は50℃から120℃の間、好ましくは50℃から80℃の間で行う。生成物は、当業の熟練者に知られたワークアップ手順により得ることができる。
【０３９３】
工程３：標準的な酸保護基の除去は、保護基の性質によるが、一般的に記載されている(Protective Groups in Organic Chemistry. Greene T.W., Wuts P. G. M. 1999, Wiley-lnterscience, p. 377)。この手順を以下の例で例示する。
【０３９４】
例93（一般手順（Ｅ）)  3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸
【化２２１】
2005511683.tif 000200
【０３９５】
工程1：3-(4-ホルミルベンゾイルアミノ)-2R-ヒドロキシプロピオン酸メチルエステル
500mL丸底フラスコ内で、4-ホルミル安息香酸(7.5g，50mmol)をDMF(80mL)中に溶解させた。1-ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物(8.11g，60mmol，1.2当量)およびN'-(3-ジメチルアミノプロピル)-N-エチルカルボジイミド塩酸塩(9.59g，50mmol，1当量)を添加した。溶液をN2下で3/4時間撹拌し、R-イソセリンメチルエステル塩酸塩(WO 02/00612の記載のとおりに調製，11.67g，75mmol，1.5当量)およびDIPEA(13.6mL，80mmol，1.6当量)を添加し、この混合物を一晩撹拌した。反応混合物を80mLになるまで蒸発させ、次いで酢酸エチル(200mL)および水(200mL)の間で分配した。水相を酢酸エチルを用いて２回(100mLおよび80mL)抽出した。合体した有機相を0.2N HCl(3×100mL)および塩化ナトリウム飽和物：水(1：1)(3×100mL)を用いて洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、乾燥するまで蒸発させた。化合物を酢酸エチルエステル(30mL)中に懸濁させ、濾過した。固体を洗浄し、合体した濾液を真空下で蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶出剤は、酢酸エチルエステル：n-ヘプタン(95：5)および酢酸エチルエステル：メタノール(95：5)を用いた。3-(4-ホルミルベンゾイルアミノ)-2R-ヒドロキシプロピオン酸メチルエステル(2.24g，10％)を分離した。1H-NMR(CDCl3)：δ3.82(3H，s)，3.80-3.94(1H，m)，4.42-4.49(1H，m)，4.69(1H，br s)，6.78(1H，br s)，7.92(4H，s)。
【０３９６】
工程２：3-4-{4-(4-tert-ブチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ-2R-ヒドロキシプロピオン酸エチルエステルの調製
無水エタノール(99％，10mL)中の1-(4-tert-ブチルフェニル)-3-(4-シクロヘキシルフェニル)プロペノン(1.00g，2.91mmol)の混合物に、窒素下にて、ヨウ化3,4-ジメチル-5-(2-ヒドロキシエチル)チアゾリウム(165mg，0.58mmol)およびトリエチルアミン(0.325mL，2.33mmol)を添加し、この混合物を還流にまで加熱した。(R)-3-(4-ホルミルベンゾイルアミノ)-2-ヒドロキシプロピオン酸メチルエステル(1.01g，3.78mmol)を無水エタノール(99％，10mL)中に溶解させ、還流している上記混合物に１時間にわたり滴下添加した。反応混合物を７日間還流させ、室温にまで冷却し、DCM(50mL)およびHCl水溶液(1N，50mL)の間で分配した。水相をDCM(50mL)を用いて洗浄した。合体した有機相を乾燥させ(Na2SO4)、真空下で蒸発させた。残渣の油状物を酢酸エチルおよびヘプタン(1：1)を溶出剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、 純粋な3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸エチルエステルを得た。HPLC-MS(方法Ｄ)：m/z＝612(M+1)；Rt＝6.07min。
【０３９７】
工程３：3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸の調製
上記3-{4-(4-(4-tert-ブチルフェニル)-2R-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}2-ヒドロキシプロピオン酸エチルエステルに、エタノール(10mL)を添加した。NaOH(244mg)を水(1mL)中に溶解させ、上記混合物に添加した。混合物を30分撹拌し、水(15mL)を用いて希釈し、HCl水溶液(1N)を用いてpHを２に調整した。沈殿物を濾過により分離して、標題化合物を得た。収量：430mg(25％)。
【０３９８】
例94（一般手順（Ｅ）)  3-{4-[4-ビフェニル-4-イル-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸
【化２２２】
2005511683.tif 000201
【０３９９】
例95（一般手順（Ｅ）)  3-{4-[2-ビフェニル-4-イル-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸
【化２２３】
2005511683.tif 000202
【０４００】
例96（一般手順（Ｅ）)  3-{4-[4-(4-シクロヘキシルフェニル)-2-(4-イソプロピルフェニル)-4-オキソ-ブチリル]ベンゾイルアミノ}-2-(R)-ヒドロキシプロピオン酸
【化２２４】
2005511683.tif 000203
【０４０１】
一般手順（Ｆ）
一般式（Ｉ4）の化合物の液相合成のための一般手順（Ｆ）：
【化２２５】
2005511683.tif 000204
【０４０２】
式中、X、D、E、M、nおよびR4 は式（Ｉ）で定義したとおりであり、Pgは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、tert-ブチルまたはベンジルのような標準的なカルボン酸保護基である。この手順を以下の例で例示する。
【０４０３】
例97（一般手順（Ｆ））  (Z)-3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸
【化２２６】
2005511683.tif 000205
【０４０４】
工程１〜工程３：3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ-2R-ヒドロキシプロピオン酸の調製
化合物を一般手順（Ｅ）にしがたい合成する。
【０４０５】
工程４：3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ-2R-ヒドロキシプロピオン酸の調製
3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸(350mg，0.599mmol)をTHF(5mL)中に溶解させた。DBU(0.323mL，2.16mmol)および結晶状のヨウ素(183mg，0.719mmol)を添加した。この混合物を室温で30分撹拌し、DCM(100mL)中に注ぎ、亜硫酸ナトリウム水溶液(2％，50mL)を用いて洗浄した。有機相をHCl水溶液(1N，50mL)を用いて洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、乾燥するまで蒸発させて、3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸のEおよびZ混合物を得た。
【０４０６】
1H-NMR(CDCl3)：δ1.28および1.32(9H，s，２つのピーク)，1.15-1.40(5H，m)，1.60-1.85(5H，m)，2.36および2.50(1H，m，２つのピーク)，4.38(1H，q)，6.88 and 7.62(1H，s，２つのピーク)，7.01(1H，d)，7.13-7.25(2H，dd)，7.30-7.40(2H，m)，7.45(2H，dd)，7.73-8.00(6H，m)。
【０４０７】
工程５：(Z)-3-[4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-2R-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ]-2R-ヒドロキシプロピオン酸の調製
3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸のEおよびZ混合物をトルエン(25mL)中に溶解させた。濃HCl(37％，900μL)を添加し、この混合物を還流にまで１時間加熱した。溶剤を蒸発により除去し、一晩真空下で乾燥した後、(Z)-3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸を得た。
【０４０８】
1H-NMR(CDCl3)：δ1.32(9H，s)，1.15-1.42(5H，m)，1.60-1.90(5H，m)，2.50(1H，m)，3.78(1H，m)，3.88(1H，m)，4.38(1H，m)，7.22(2H，d)，7.46(2H，d)，7.48(2H，d)，7.61(1H，s)，7.78(2H，d)，7.88(2H，d)，7.98(2H，d)。HPLC-MS(方法Ｄ)：m/z＝582(M+1)，Rt＝5.40min。
【０４０９】
例98（一般手順（Ｆ））  (Z)-3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸
【化２２７】
2005511683.tif 000206
【０４１０】
例99（一般手順（Ｆ））
例42の化合物も、以下に例示する一般手順（Ｆ）にしたがい調製した：
(Z)-3-{4-[2-ビフェニル-4-イル-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸
【化２２８】
2005511683.tif 000207
【０４１１】
例100（一般手順（Ｆ））  (Z)-3-{4-[4-(4-シクロヘキシルフェニル)-2-(4-イソプロピルフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸
【化２２９】
2005511683.tif 000208
【０４１２】
例101（一般手順（Ｆ））  (Z)-3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-(3,5-ジクロロフェニル)-4-オキソブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２３０】
2005511683.tif 000209
【０４１３】
一般手順（Ｇ）
一般式（Ｉ4）の化合物の液相合成のための一般手順（Ｇ）：
【化２３１】
2005511683.tif 000210
【０４１４】
式中、X、D、E、M、nおよびR4 は式（Ｉ）で定義したとおりであり、Pgは標準的なメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、tert-ブチルまたはベンジルのようなカルボン酸保護基である。
【０４１５】
例102（一般手順（Ｇ））
例65の化合物もまた以下に例示する一般手順（Ｇ）にしたがい調製された：
3-{4-[2-[4-(2,2-ジメチル-プロピル)-フェニル]-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)-ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ]プロピオン酸
【化２３２】
2005511683.tif 000211
【０４１６】
工程１および工程２：4-[2-[4-(2,2-ジメチルプロピル)フェニル]-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)-ブチリル]安息香酸
3-[4-(2,2-ジメチルプロピル)フェニル]-1-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン(10.51g；29mmol)(ビルディングブロック8)、ヨウ化3,4-ジメチル-5-(2-ヒドロキシエチル)チアゾリウム(1.77g，6.2mmol)およびトリエチルアミン(3.52mL；25.27mmol)の混合物を撹拌し、100mLの無水エタノール中で還流させた。この混合物に50mLの無水エタノール中の4-ホルミル安息香酸メチル(6.8g，41.4mmol)の溶液を滴下添加した。撹拌と加熱を16時間続けた。この混合物を冷却し、1N HCl(150mL)およびDCM(200mL)の間で分配した。有機相を分離し、水相をさらにDCM(200mL)を用いて抽出した。合体したDCM抽出物を水を用いて洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、Norite Aを用いて浄化(clarify)し、濾過し、蒸発させて14g(80％)の中間体のエステル化合物を得た。この物質を80mLのメタノール中に溶解させ、この混合物に10mLの水中の水酸化ナトリウム(2.68g；67.1mmol)を添加した。エステル出発物質が消えるまで撹拌を続け、希塩酸を用いてpHを２に調整した。沈殿物を濾過除去し、乾燥させて10.3gの4-[2-[4-(2,2-ジメチルプロピル)フェニル]-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]安息香酸を得た。
【０４１７】
1H-NMR(CDCl3)：δ8.12(d，2H)，8.09(d，2H)，8.02(d，2H)，7.28(d，2H)，7.21(d，2H)，7.08(d，2H)，5.25(dd，1H)4.20(m，1H)，3.30(dd，1H)，2.43(s，2H)，0.88(s，9H)。
【０４１８】
工程３：(E/Z)-4-[2-[4-(2.2-ジメチルプロピル)フェニル]-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノニル]安息香酸の調製
4-[2-[4-(2,2-ジメチルプロピル)フェニル]-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]安息香酸(9.3g；20.1mmol)をTHF(700mL)中に溶解させた。この混合物を、ヨウ素(6.34g；24.1mmol)およびDBU(11g；42.4mmol)を添加しながら撹拌した。この混合物を２時間撹拌し、約100mLの体積になるまで減圧下で濃縮した。亜硫酸ナトリウムの2％溶液(150mL)および1N 塩酸(150mL)を添加した。この混合物をDCMを用いて抽出し(2×300mL)、塩水(400mL)を用いて洗浄した。有機相を分離させ、乾燥させ(Na2SO4)、Norite Aを用いて清浄化し、濾過し、蒸発させて8.2(88％)の(E,Z)-4-[2-[4-(2,2-ジメチルプロピル)フェニル]-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノニル]安息香酸を得た。HPLC-MS(方法Ａ)：m/z＝511(M+1)；Rt＝5.60min。
【０４１９】
工程４および工程５：(Z)-3-{4-[2-[4-(2,2-ジメチル-プロピル)-フェニル]-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシ-フェニル)-ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸の調製
20mLのDMF中の(E,Z)-4-[2-[4-(2,2-ジメチルプロピル)フェニル]-4-オキソ-4-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノニル]安息香酸(7.2g；14.1mmol)の溶液を、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物(2.29g；19.9mmol)を添加しながら撹拌した。この混合物を１時間室温撹拌し、続いてEDAC(3.24g；16.92mmol)、3-アミノプロピオン酸メチル塩酸塩(2.95g；21.16mmol)およびDIPEA(7.37mL；42.31mmol)をそれぞれ添加した。この混合物を40℃で２時間撹拌した。この混合物を減圧下で蒸発させ、残渣を水および酢酸エチルの間で分配した。有機相を分離し、塩水を用いて洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、蒸発させた。残渣をメタノール(80mL)およびTHF(20mL)の混合物中に溶解させ、10mLの水中の水酸化ナトリウム(1.69g；42.3mmol)を添加した。この混合物を1.5時間室温で撹拌した。この混合物を減圧下で約30mLにまで濃縮し、40mLの水を添加した。1M 塩酸を添加することにより、pHを1.5に調整した。沈殿物を濾過除去し、乾燥させて7.9gの粗製の物質を得た。この物質をトルエン(100mL)および濃塩酸(2.7mL)の混合物中で１時間沸騰させた。この混合物を室温にまで冷却し、沈殿物を分離して5.6g(68％)の標題化合物を得た。
【０４２０】
1H-NMR(CDCl3)：δ8.02(m，4H)，7.80(d，2H)，7.60(s，1H)，7.48(d，2H)，7.30(d，2H)；7.18(d，2H)，6.84(t，1H)，3.63(q，2H)，2.72(t，2H)，2.50(s，2H)，0.90(s，9H)；HPLC-MS(方法Ａ)：m/z＝583(M+1)；Rt＝5.03min。
【０４２１】
例103  3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２３３】
2005511683.tif 000212
【０４２２】
工程１：4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]安息香酸メチルエステル
乾燥した３つ首50mL丸底フラスコ内に1-(4-tert-ブチルフェニル)-3-(4-トリフルオロメトキシフェニル)プロペノン(9.47g，27.18mmol)、ヨウ化3,4-ジメチル-5-(2ヒドロキシエチル)チアゾリウム(7.75g，27.18mmol)およびトリエチルアミン(13.26mL，95.13mmol)を窒素下にて配置した。この混合物を、還流するエタノール(45mL，99％)中に溶解させた。エタノール(50mL，99％)中の3-(4-ホルミルベンゾイルアミノ)プロピオン酸メチルエステル(6.97g，40.77mmol)の溶液をおよそ２時間半にわたり滴下添加した。この混合物を５時間窒素下にて還流させた後、反応物を冷却し、乾燥するまで蒸発させた。残渣の油状物をDCM(100mL)中に溶解させ、1N HCl(150mL)を用いて抽出し、水相をDCM(50mL)を用いてもう一回抽出した。合体した有機相を硫酸マグネシウムを用いて乾燥させ、濾過し、乾燥するまで蒸発させて4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]安息香酸メチルエステル(16.9g)を得た。
【０４２３】
HPLC-MS(方法Ｃ)：m/z＝513(M+1)；Rt＝7.33min。
【０４２４】
工程2：4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]安息香酸
4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]安息香酸メチルエステル(13.9g，27.2mmol)をエタノール(120mL，96％)中に懸濁させ、水酸化ナトリウム(4N，27,2mL)を添加した。４時間半後、反応物を乾燥するまで蒸発させた。残渣に水(200mL)および塩酸(4N，30mL)を添加し、pH 1-2で沈殿が発生した。この混合物を半時間撹拌した。沈殿物を濾過し、水を用いて慎重に洗浄し、一晩40℃にて真空下で乾燥させた。残渣をメタノールおよび水から結晶化させて、4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]安息香酸(10.4g)を得た。HPLC-MS(方法Ｄ)：m/z＝499(M+1)；Rt＝5.51min。
【０４２５】
3-4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ-プロピオン酸メチルエステル
4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]安息香酸(10.4g，20.86mmol)をDMF(150mL)中に溶解させ、EDAC(5.60g，29.20)およびHOBt(4.23g，31.29mmol)を添加した。１時間後、DMF(20mL)中のβ-アラニンメチルエステル塩酸塩(4.37g，31.29mmol)およびDIPEA(5.36mL，31.29mmol)の溶液を上記混合物に添加し、反応混合物を一晩撹拌した。この反応物を100mLにまで濃縮し、水(200mL)を用いて希釈し、酢酸エチル(200mL)を用いて抽出した。水相を、さらなる酢酸エチル(75mL)を用いて抽出した。合体した有機相を塩酸(0.2N，3×150mL)、水溶液塩化ナトリウム(50％ 飽和，3×150mL)を用いて洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。乾燥した有機相を濾過し、乾燥するまで蒸発させて3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ]プロピオン酸メチルエステル(12.76g)を得た。HPLC-MS(方法Ｄ)：m/z＝584(M+1)；Rt＝5.48min。
【０４２６】
工程４：3-4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸メチルエステル(12g，21mmol)をエタノール 96％(250mL)中に溶解させ、4N NaOH(31.2mL，125mmol)を添加し、2時間45分撹拌した。この反応混合物を真空下で濃縮し、残渣中に水(150mL)を懸濁させ、塩酸(4N，34mL)を添加してpH 1-2にした。１時間後、沈殿物を濾過し、水を用いて慎重に洗浄し、乾燥させた。残渣を、アセトニトリル(42％から97.5％への勾配)、水およびTFA(2.5％)を溶出剤として用いた分取用HPLCにより精製して4.7gの標題化合物を得た。
【０４２７】
1H-NMR(DMSO-d6)選抜されたデータ：δ8.68(t，1H)，8.15(d，2H)，7.93(m，4H)，7.56(m，4H)，7.33(d，2H)；5.51(m，1H)，4.10(m，1H)，3.45(m，4H)，1.31(s，9H)；HPLC-MS(方法Ａ)：m/z＝570(M+1)；Rt＝5.95min。
【０４２８】
例104  3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸
【化２３４】
2005511683.tif 000213
【０４２９】
3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸メチルエステル
4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]安息香酸(0.64g，1.28mmol)をDMF(10mL)中に溶解させ、EDAC(0.35g，1.8mmol)およびHOBt 0.26gを添加した。半時間後、DMF(6mL)中のR-イソセリンメチルエステル塩酸塩(0.30g，1.92mmol)およびジイソプロピルエチルアミン(0.31mL，1.92mmol)の溶液を上記混合物に添加し、室温で16時間添加した。この混合物を水(30mL)を用いて希釈し、酢酸エチル(30mL)を用いて抽出した。水相を酢酸エチル(15mL)を用いてもう１回抽出し、合体した有機相を塩酸(0.2N，3×20mL)、50％ 塩化ナトリウム飽和物の水溶液(3×20mL)を用いて洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、乾燥するまで蒸発させて0.79gの3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸メチルエステルを得た。HPLC-MS(方法Ｄ)m/z＝600(M+1)；Rt＝5.20min。
【０４３０】
3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸メチルエステル(0.77g，1.28mmol)をエタノール(96％，30mL)中に溶解させ、水酸化ナトリウム(4N，1.93mL)を添加し、２時間半撹拌した。この反応物を真空下で濃縮し、残渣を水(30mL)中に懸濁させ、塩酸(4N，2mL)を添加してpH1〜2にした。半時間後、沈殿物を濾過し、水を用いて慎重に洗浄し、真空下で乾燥させた。生成物をアセトニトリル(55.5％から97.5％への勾配)、水およびTFA(2.5％)を溶出剤として用いた分取用HPLCにより精製して、0.16gの標題化合物を得た。1H-NMR(DMSO-d6)選抜されたデータ：δ8.66(t，1H)，8.15(d，2H)，7.93(m，4H)，7.56(m，4H)，7.33(d，2H)；5.53(m，1H)，4.07-4.20(m，2H)，3.48-3.63(m，2H)，1.31(s，9H)；HPLC-MS(方法Ｃ)：m/z＝586(M+1)；Rt＝5.42min。
【０４３１】
例105  3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸
【化２３５】
2005511683.tif 000214
【０４３２】
工程３：3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブト-2-エノイル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸
例104からの3-{4-[4-(4-tert-ブチルフェニル)-4-オキソ-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ブチリル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸(0.15g，0.24mmol)をTHF(3mL)中に溶解させ、DBU(0.13mL，0.86mmol)、ヨウ素(0.11g，0.44mmol)を添加し、室温で撹拌した。溶剤を蒸発させて除去し、残渣をDCM(25mL)中に溶解させ、亜硫酸ナトリウム(2％，10mL)、塩化水素(1N，10mL)、水および塩化ナトリウム飽和物(2×1：1,10mL)を用いて洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、乾燥するまで蒸発させて0.11gのEおよびZformationの混合物を得た。残渣をトルエン(5mL)中に溶解させ、濃縮した塩化水素を添加し、油浴で１時間130℃で還流させた。反応物を冷却させ、乾燥するまで蒸発させ、これをDCM(2×5mL)を用いて２回繰り返した。生成物を、アセトニトリル(57.5％〜97.5％)、水およびTFA(2.5％)を溶出剤として用いる分取用HPLCにより精製し、蒸発させて0.04gの標題化合物を得た。
【０４３３】
1H-NMR(DMSO-d6)選抜されたデータ：δ8.63(t，1H)，8.05(m，3H)，7.95(d，2H)，7.91(d，2H)，7.80(d，2H)；7.58(d，2H)，7.48(d，2H)，5.48(broad，1H)，4.15(m，1H)，3.54(m，1H)1.31(s，9H)；HPLC-MS(方法Ｃ)：m/z＝585(M+1)；Rt＝5.78min。
【０４３４】
一般手順（Ｈ）
一般式(Ｉ1)の化合物の光学異性体の調製のための一般手順（Ｈ）：
【化２３６】
2005511683.tif 000215
【０４３５】
例106（一般手順（Ｈ））
例４の化合物も調製され、光学異性体は以下に例示するで説明する一般手順（Ｈ）にしたがい分離される：
3-{4-[4-(3,5-bis-トリフルオロメチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２３７】
2005511683.tif 000216
【０４３６】
工程１：3-(4-ホルミルベンゾイルアミノ)プロピオン酸メチルエステル 3-(4-ホルミルベンゾイルアミノ)プロピオンメチルエステルを、WO 00/69810に記載の手順に従い合成した。
【０４３７】
工程２：3-4-[4-(3,5-bis-トリフルオロメチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-ブチリル]ベンゾイルアミノ]プロピオン酸メチルエステル
無水エタノール(99％，25mL)中の1-(3,5-bis-トリフルオロメチルフェニル)-3-(4-シクロヘキシルフェニル)プロペノン(6.12g，14.35mmol)の混合物に、窒素下にてヨウ化3,4-ジメチル-5-(2-ヒドロキシエチル)チアゾリウム(819mg，2.87mmol)およびトリエチルアミン(1.60mL，11.5mmol)を添加し、この混合物を還流にまで加熱した。3-(4-ホルミルベンゾイルアミノ)プロピオン酸メチルエステル(4.39g，18.7mmol)を無水エタノール(99％，15mL)中に溶解させ、還流している上記混合物に２時間にわたり滴下添加した。この反応混合物を30分還流させ、室温にまで冷却した。濾過後、エタノールを用いて洗浄し、真空下で乾燥させて、3-{4-[4-(3,5-bis-トリフルオロメチル-フェニル)-2-(4-シクロヘキシル-フェニル)-4-オキソ-ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸メチルエステルを分離することができた：6.9g(73％)。
【０４３８】
工程３：3-{4-[4-(3.5-bis-トリフルオロメチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]-ベンゾイル}プロピオン酸
3-{4-[4-(3,5-bis-トリフルオロメチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸メチルエステル(6.20g，9.38mmol)をTHF(75mL)中に溶解させ、HCl(6N，25mL)を添加し、この混合物を還流にまで加熱し、２時間後に加熱を止め、この混合物を室温で16時間撹拌した。この混合物を乾燥するまで蒸発させて標題化合物を得た。収量：定量的。
【０４３９】
1H-NMR(DMSO-d6)：δ8.72(t，1H)，8.60(s，2H)，8.42(s，1H)，8.14(d，2H)，7.90(d，2H)；7.34(d，2H)，7.17(d，2H)，5.43(dd，1H)，4.29(dd，1H)，3.64(dd，1H and t 2H)，3.42(t，2H)，2.42(m，1H)，1.78-1.64(m，5H)，1.38-1.25(m，5H)；HPLC-MS(方法Ｄ)：m/z＝648(M+1)；Rt＝5.58min。
【０４４０】
工程４：キラルHPLC
3-{4-[4-(3,5-bis-トリフルオロメチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸(500mg，0.77mmol)を、イソプロパノール：ヘプタン60：40(20mL)中に溶解させた。トリフルオロ酢酸(0.02mL)を添加した。ラセミ体の混合物を、ADカラム50×500mm(DAICELから)，流速100mL/分で分離した。0.01％トリフルオロ酢酸を含んだ、イソプロパノール：ヘプタン混合物を用いて溶出。溶出剤中の化合物を含んだ２つの画分を回収した。各画分を分離したまま、そうでなければ個別に処理した。各画分の体積を真空下で初期値の約1/8にまで減らし、ジクロロメタン(1L)およびNaHCO3水溶液(10％，500mL)の間で分配した。有機相を乾燥させ(NaSO4)、蒸発させて白色の結晶を得た。この結晶をアセトニトリル中で還流させ、続いて室温にまで冷却した。濾過に続いて真空下で乾燥させることにより、純粋な光学異性体を分離することができた。
【０４４１】
例107  3-{4-[4-(3,5-bis-トリフルオロメチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
もっとも速く溶出する光学異性体：Chiralpak AD, 4.6×250mm ヘプタン、イソプロパノール、トリフルオロ酢酸 60：40：0.1，0.6mL/分 流速。保持時間＝8.2min。
【０４４２】
例108  3-{4-[4-(3,5-bis-トリフルオロメチルフェニル)-2-(4-シクロヘキシルフェニル)-4-オキソ-ブチリル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
最も遅く溶出する光学異性体：Chiralpak AD, 4.6×250mm ヘプタン、イソプロパノール、トリフルオロ酢酸60：40：0.1，0.6mL/分 流速。保持時間＝12.1min。
【０４４３】
本発明のさらに好ましい化合物は以下を含む：
【化２３８】
2005511683.tif 000217
【化２３９】
2005511683.tif 000218
【化２４０】
2005511683.tif 000219
【化２４１】
2005511683.tif 000220
【化２４２】
2005511683.tif 000221
【化２４３】
2005511683.tif 000222
【化２４４】
2005511683.tif 000223
【化２４５】
2005511683.tif 000224
【化２４６】
2005511683.tif 000225
【化２４７】
2005511683.tif 000226
【化２４８】
2005511683.tif 000227
【化２４９】
2005511683.tif 000228
【化２５０】
2005511683.tif 000229
【化２５１】
2005511683.tif 000230
【化２５２】
2005511683.tif 000231
【化２５３】
2005511683.tif 000232
【０４４４】
一般手順（Ｉ）
一般式(Ｉ6)の化合物の液相合成のための一般手順（Ｉ）：
【化２５４】
2005511683.tif 000233
【０４４５】
式中、Pg、E、X、DおよびR4は上記で定義したとおりである。工程５で添加されたPgは、先の工程のPgと異なってよい。
【０４４６】
例109（一般手順（Ｉ））  3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-2-(4-トリフルオロメトキシフェニルカルバモイル)エチル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２５５】
2005511683.tif 000234
【０４４７】
工程１：E,Z-4-[2-カルボキシ-2-(4-シクロヘキシルフェニル)ビニル]安息香酸メチルエステル
4-ホルミル安息香酸メチル(5.75g；35mmol)、4-シクロヘキシルフェニル酢酸(10.93g，50.05mmol)(Chem. Ber., 76,(1943), 308)、無水酢酸(17.54mL，185.5mmol)およびトリエチルアミン(4.87mL；35mmol)の混合物を撹拌し、155℃で15分加熱した。この混合物を90℃にまで冷却し、温度が90℃と100℃の間で維持されるようは速度で水(18mL)を滴下添加した。この混合物を室温にまで冷却し50％ 酢酸水溶液(25mL)を添加した。沈殿物を濾過除去し、25％酢酸水溶液(100mL)および最後に水(125mL)を用いて洗浄した。粗成物を乾燥させ、ヘプタンから再結晶化させて、10.89g(85％)の4-[2-カルボキシ-2-(4-シクロヘキシルフェニル)ビニル]安息香酸メチルエステルのE/Z混合物を得た。
【０４４８】
1H-NMR(DMSO-d6)：δ12.88(br s，1H)，8.98-7.05(m，9H)，3.87 and 3.83(s，3H)2.54(m，1H)，1.68-1.78(m，5H)，1.48-1.20(m，5H)。
【０４４９】
工程２：4-[2-カルボキシ-2-(4-シクロヘキシルフェニル)エチル]安息香酸メチルエステル
100mLのメタノール中のE,Z-4-[2-カルボキシ-2-(4-シクロヘキシルフェニル)ビニル]安息香酸メチルエステル(10.85g，28.77mmol)および活性炭素上のパラジウム(1.085g，10％)の混合物を、56psiで7時間水素化した。触媒を濾過除去し、濾液を乾燥するまで蒸発させて、5.73(53％)の4-[2-カルボキシ-2-(4-シクロヘキシルフェニル)エチル]安息香酸メチルエステルを固体で得た。
【０４５０】
1H-NMR(CDCl3)：δ7.90(d，2H)，7.23-7.13(m，6H)，3.88(s，3H)，3.84(t，1H)，2.43(dd，1H)，3.07(dd，1H)，2.48(m，1H)，1.90-1.70(m，5H)，1.45-1.18(m，5H)。HPLC-MS(方法Ｄ)：m/z＝367(M+1)；Rt＝5.03min。
【０４５１】
工程３：4-[2-クロロカルボニル-2-(4-シクロヘキシルフェニル)エチル]安息香酸メチルエステル
トルエン中の4-[2-カルボキシ-2-(4-シクロヘキシルフェニル)エチル]安息香酸メチルエステル(5,58g，15,2mmol)の溶液を撹拌し、塩化チオニル(2.79mL，38.20mmol)を添加した。この混合物を撹拌し、15分還流させ、トルエンを減圧下で除去した。残渣をトルエンを用いて２回ストリップし、5.75g(98％)の4-[2-クロロカルボニル-2-(4-シクロヘキシルフェニル)エチル]安息香酸メチルエステルを得た。
【０４５２】
1H-NMR(CDCl3)：δ7.79(d，2H)，7.40-7.08(m，6H)，4.11(m，1H)，3.85(s，3H)，3.30(m，1H)，3.03(m，1H)，2.45(m，1H)，1.83-1.65(m，5H)，1.42-1.15(m，5H)。
【０４５３】
工程４：4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-2-(4-トリフルオロメトキシフェニルカルバモイル)エチル]安息香酸
乾燥トルエン(50mL)中の4-トリフルオロメトキシアニリン(0.575g，3.25mmol)の溶液を窒素雰囲気下で撹拌した。トリエチルアミン(0.448mL，3.25mmol)を添加し、続いて乾燥トルエン(25mL)中の4-[2-クロロカルボニル-2-(4-シクロヘキシルフェニル)エチル]安息香酸メチルエステル(1.25g，3.25mmol)の溶液を添加した。この混合物を１時間還流させ、室温にまで冷却し、水(2×100mL)および塩化ナトリウム飽和溶液(2×100mL)を用いて洗浄した。有機相を回収して乾燥するまで減圧下で蒸発させて、1.43gの粗製の中間体エステル化合物を得た。エステルをメタノール(12.5mL)およびTHF(5mL)混合物中に溶解させ、4M 水酸化ナトリウム水溶液(2.43mL，9.75mmol)を添加した。この混合物を16時間室温で撹拌した。この混合物を濾過し、濃塩酸を用いて濾液を酸性にした(pH＝2)。この混合物を１時間撹拌し、沈殿物を濾過除去し、水を用いて洗浄し、乾燥させて1.32g(80％)の4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-2-(4-トリフルオロメトキシ-フェニルカルバモイル)エチル]安息香酸を固体で得た。
【０４５４】
1H-NMR(DMSO-d6)：δ10.38(s，1H)，7.78(d，2H)，7.65(d，2H)；7.28(m，2H)，7.30(d，2H)，7.18(d，2H)，4.03(m，1H)，3.45(m，1H)，2.42(m，1H)，1.85-1.13(m，10H)。
【０４５５】
工程５および工程６：3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-2-(4-トリフルオロメトキシフェニルカルバモイル)エチル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
DMF(45mL)中の4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-2-(4-トリフルオロメトキシフェニルカルバモイル)エチル]安息香酸(1.44g；2.82mmol)の溶液を、1-ヒドロキシ-ベンゾトリアゾール水和物(0.456g；3.38mmol)を添加しながら撹拌した。この混合物を１時間室温で撹拌し、続いてEDAC(0.648g；3.38mmol)、3-アミノプロピオン酸メチル塩酸塩(0.589g；4.22mmol)およびDIPEA(1.47mL；8.45mmol)を添加した。この混合物を40℃で２時間撹拌した。この混合物を減圧下で蒸発させ、残渣を水および酢酸エチルとの間で分配した。有機相を塩水を用いて洗浄し、乾燥させ(MgSO4)、蒸発させて2.11gの中間体のエステルを得た。この物質(0.3g，0.5mmol)をメタノール(11mL)およびTHF(4.4mL)の混合物中に溶解させ、4M水酸化ナトリウム 溶液(0.37mL；1.50mmol)を添加した。この混合物を16時間室温で撹拌した。この混合物を減圧下で約1mLにまで濃縮し、水(15mL)を添加した。1M 塩酸を添加することにより、pHを1.5にまで調製した。沈殿物を濾過除去し、水を用いて洗浄し、乾燥させて0.25g(85％)の標題化合物を得た。
【０４５６】
1H-NMR(DMSO-d6)：δ12.20(br s，1H)，10.25(s，1H)，8.43(t，1H)，7.70(d，2H)，7.62(d，2H)，7.35(d，2H)，7.30(d，2H)，7.26(d，2H)，7.18(d，2H)，3.99(m，1H)，3.40(m，1H)，3.00(dd，1H)，2.48(m，3H)，1.85-1.13(m，10H)。
【０４５７】
次の化合物(例110-110)を上記方法と同様に調製した。
【０４５８】
例110（一般手順（Ｉ））  3-{4-(3,5-ジクロロフェニルカルバモイル)-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)エチル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２５６】
2005511683.tif 000235
【０４５９】
例111（一般手順（Ｉ））  3-{4-[2-(3,5-ジクロロフェニルカルバモイル)-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)エチル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸
【化２５７】
2005511683.tif 000236
【０４６０】
例112（一般手順（Ｉ））  2R-ヒドロキシ-3-{4-[2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)-2-(4-トリフルオロメトキシフェニルカルバモイル)エチル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２５８】
2005511683.tif 000237
【０４６１】
例113（一般手順（Ｉ））  3-{4-[2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)-2-(4-トリフルオロメトキシフェニルカルバモイル)エチル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２５９】
2005511683.tif 000238
【０４６２】
例114（一般手順（Ｉ））  3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-2-(3,5-ジクロロフェニルカルバモイル)エチル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２６０】
2005511683.tif 000239
【０４６３】
例115（一般手順（Ｉ））  3-{4-[2-(4-シクロヘキシルフェニル)-2-(4-トリフルオロメチルフェニルカルバモイル)エチル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２６１】
2005511683.tif 000240
【０４６４】
次の２つの化合物(例116および117)を、水素化工程(工程２)を省略することを除いた一般手順（Ｉ）に従って調製した。
【０４６５】
例116  3-{4-[2-(4-tert-ブチルフェニルカルバモイル)-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ビニル]ベンゾイルアミノ}プロピオン酸
【化２６２】
2005511683.tif 000241
【０４６６】
例117  3-{4-[2-(4-tert-ブチルフェニルカルバモイル)-2-(4-トリフルオロメトキシフェニル)ビニル]ベンゾイルアミノ}-2R-ヒドロキシプロピオン酸
【化２６３】
2005511683.tif 000242
【０４６７】
以下の好ましい化合物は本発明の範囲内であり、ここに開示された手順で調製されてよい：
【化２６４】
2005511683.tif 000243
【０４６８】
式中、
【化２６５】
2005511683.tif 000244
【化２６６】
2005511683.tif 000245
【化２６７】
2005511683.tif 000246
【化２６８】
2005511683.tif 000247
【化２６９】
2005511683.tif 000248
【化２７０】
2005511683.tif 000249
【化２７１】
2005511683.tif 000250
【化２７２】
2005511683.tif 000251
【化２７３】
2005511683.tif 000252
【化２７４】
2005511683.tif 000253
【化２７５】
2005511683.tif 000254
【化２７６】
2005511683.tif 000255
【化２７７】
2005511683.tif 000256
【化２７８】
2005511683.tif 000257
【化２７９】
2005511683.tif 000258
【化２８０】
2005511683.tif 000259
【化２８１】
2005511683.tif 000260
【化２８２】
2005511683.tif 000261
【化２８３】
2005511683.tif 000262
【化２８４】
2005511683.tif 000263
【化２８５】
2005511683.tif 000264
【化２８６】
2005511683.tif 000265
【化２８７】
2005511683.tif 000266
【化２８８】
2005511683.tif 000267
【化２８９】
2005511683.tif 000268
【化２９０】
2005511683.tif 000269
【化２９１】
2005511683.tif 000270
【化２９２】
2005511683.tif 000271
【化２９３】
2005511683.tif 000272
【化２９４】
2005511683.tif 000273
【化２９５】
2005511683.tif 000274
【化２９６】
2005511683.tif 000275
【化２９７】
2005511683.tif 000276
【化２９８】
2005511683.tif 000277
【化２９９】
2005511683.tif 000278
【化３００】
2005511683.tif 000279
【化３０１】
2005511683.tif 000280
【化３０２】
2005511683.tif 000281
【化３０３】
2005511683.tif 000282
【０４６９】
＜薬理学的方法＞
以下のセクションにおいては、本発明の化合物の有効性を評価するために有用な、結合アッセイ並びに機能的アッセイを記載する。
【０４７０】
グルカゴン受容体への結合は、クローン化されたヒトグルカゴン受容体を用いる競合結合アッセイにおいて決定すればよい。
【０４７１】
拮抗作用(antagonism)は、5 nM グルカゴンの存在下において、形成されたｃＡＭＰ量を阻害する当該化合物の能力として決定すればよい。
【０４７２】
グルカゴン結合アッセイ（Ｉ）：
受容体結合は、クローン化されたヒト受容体（Lok et al.，Gene 140，203209(1994)）を用いて試験される。EcoRI/SSt1 制限部位(Lok et al.)を用いてpLJ6'発現ベクターに挿入された受容体を、新生児ハムスターの腎臓細胞株(A3 BHK 570-25)において発現させる。クローンは0.5mg/mL G-418 の存在下で選別され、40継代以上に亘って安定であることが示される。Kdは0.1nMを示す。
【０４７３】
細胞を周密状態にまで増殖させ、それらを表面から剥がし、細胞を冷緩衝液（下記を含有する10 mM tris/HCl，pH7.4：30 mM NaCl、1 mM ジチオトレイトール、5mg/L ロイペプチン(Sigma)、5mg/L ペプスタチン(Sigma)、100mg/L バシトラシン(Sigma)、および15mg/L 組換えアプロチニン(Novo Nordisk A/S)）中に懸濁させ、Polytron PT 10-35ホモジナイザー(Kinematica)を使用して10秒バーストで２回ホモジナイズし、41 w/v％の蔗糖層上において95.000×gで75分遠心分離することにより、原形質膜を調製する。原形質膜を含有する沈殿を緩衝液中に懸濁し、使用するまで−80℃で保存する。二つの相の間に位置する白色のバンドを緩衝液中に希釈し、40.000×gで45分間遠心分離する。原形質膜を含有する沈殿を緩衝液中に懸濁し、使用するまで−80℃で保存する。
【０４７４】
グルカゴンを、クロラミンＴ法（Hunter and Greenwood, Nature 194，495(1962)）に従ってヨウ素化し、陰イオン交換クロマトグラフィーを使用して精製する（Jorgensen et al., Hormone and Metab. Res. 4, 223-224(1972)）。比活性は、ヨウ素化の日に 460μCi/μgである。トレーサーは−18℃においてアリコートで保存し、解凍後に直ちに使用する。
【０４７５】
結合アッセイは、フィルター・マイクロタイタープレート（MADV N65、Millipore）において３回実施する。このアッセイに用いた緩衝液は、50 mM HEPES、5 mM EGTA、5 mM MgCl2、0.005％ツイーン20、pH 7.4である。グルカゴンを0.05M HCl中に溶解させ、同量(w/w)のヒト血清アルブミンを添加し、凍結乾燥させた。使用する当日に、これを水中に溶解させ、緩衝液中で所望の濃度にまで希釈する。
【０４７６】
試験化合物をDMSO中に溶解および希釈する。140μLの緩衝液、25μLのグルカゴンまたは緩衝液、および10μLのDMSOまたは試験化合物を各ウエルに添加する。トレーサー（50.000cpm）を緩衝液中に希釈し、25μLを各ウエルに添加する。1〜4μgの新鮮な解凍した原形質膜タンパク質を緩衝液中で希釈し、次いで25μLのアリコートを各ウエルに添加する。プレートを30℃で２時間インキュベートする。10-6Mのグルカゴンを用いて非特異的結合を決定する。次いで、結合したトレーサーおよび未結合のトレーサーを真空濾過（Millipore vacuum manifold）により分離する。プレートを、2×100μL/ウエルの緩衝液で洗浄する。このプレートを２時間乾燥し、その際にミリポアパンチャー（Millipore Puncher）を使用して、フィルターをプレートから分離する。該フィルターをガンマ線計数機の中でカウントする。
【０４７７】
機能的アッセイ（Ｉ）：
機能的アッセイは、96ウエルのマイクロタイタープレート（組織培養プレート、Nunc）中で行う。このアッセイで得られた緩衝液濃度は、50 mM tris/HCl、1 mM EGTA、1.5 mM MgSO4、1.7 mM ATP、20μM GTP、2 mM IBMX、0.02％ツイーン20、および0.1％ヒト血清アルブミンである。pHは7.4であった。グルカゴンおよび提案アンタゴニストを、50 mM tris/HCl、1 mM EGTA、1.85 mM MgSO4、0.0222％ツイーン-20、および0.111％ヒト血清アルブミン、pH 7.4中に希釈した35μLのアリコートで添加する。20μLの、50 mM tris/HCl、1 mM EGTA、1.5 mM 硫酸マグネシウム、11.8 mM ATP、0.14 mM GTP、14 mM IBMX、および0.1％ヒト血清アルブミン、pH 7.4を添加する。アッセイの直前にGTPを溶解する。
【０４７８】
5μgの原形質膜タンパク質を含有する50μLを、tris/HCl、EGTA、硫酸マグネシウム、ヒト血清アルブミン緩衝液（実際の濃度は保存された原形質膜中のタンパク質濃度に依存する）中に添加する。
【０４７９】
合計のアッセイ容積は140μLである。プレートを連続的に振盪しながら、37℃で２時間インキュベートする。25μLの0.5N HClを添加することにより、反応を停止させる。シンチレーションプロキシミティーキット（Amersham）を使用して、cAMPを測定する。
【０４８０】
グルカゴン結合アッセイ（II）：
BHK（新生児ハムスター腎臓細胞株）細胞に、ヒトグルカゴン受容体をトランスフェクトし、該細胞の膜プレパレーションを調製する。シンチラントを含む小麦胚芽アグルチニン誘導SPAビーズ（WGA beads；Amersham）がこの膜に結合した。
【０４８１】
125I-グルカゴンが膜中のヒトグルカゴン受容体に結合し、WGAビーズ中のシンチラントを励起させて発光した。受容体に結合するグルカゴンまたはサンプルは、125I-グルカゴンと競合した。
【０４８２】
膜調製における全てのステップは、氷上に維持されるか、または４℃で行われる。BHK細胞を回収し、遠心分離する。ペレットをホモジナイゼーション緩衝液（25 mM HEPES、pH＝7.4、2.5 mM CaCl2、1.0 mM MgCl2、250mg/L バシトラシン、0.1 mM ペファブロック(Pefabloc)）中に再懸濁させ、ポリトロン(Polytron)10-35ホモジナイザー(Kinematica)を使用して2×10秒間ホモジナイズし、再懸濁のために使用する同量のホモジナイゼーション緩衝液を添加する。遠心分離（2000×gで15分）した後、その上清を冷遠心管に移して、40,000×gで45分間遠心分離する。そのペレットをホモジナイゼーション緩衝液中に懸濁させ、2×10秒間ホモジナイズし(Polytron)、更に追加のホモジナイゼーション緩衝液を添加する。この懸濁液を40,000×gで45分間遠心分離し、そのペレットを再懸濁緩衝液（25 mM HEPES、pH＝7.4,2.5 mM、CaCl2、1.0 mM MgCl2）の中に再懸濁させ、2×10秒間ホモジナイズする(Polytron)。
【０４８３】
そのタンパク質濃度は、通常は略1.75mg/mLである。安定化緩衝液（25 mM HEPES、pH＝7.4、2.5 mM CaCl2、1.0 mM MgCl2、1％ウシ血清アルブミン、500mg/L バシトラシン、2.5M 蔗糖）を加え、膜プレパレーションを−80℃で保存する。
【０４８４】
このグルカゴン結合アッセイは、オプティプレート（ポリスチレン製マイクロプレート、Packard）において行う。50μLのアッセイ緩衝液（25 mM HEPES、pH＝7.5、2.5 mM CaCl2、1.0 mM MgCl2、0.003％ツイーン20、0.005％バシトラシン、0.05％ナトリウムアジド）および5μLのグルカゴンまたは試験化合物（DMSO中）を各ウエルに加える。次いで、50μLのトレーサー（125I-ブタグルカゴン、50,000cpm）およびヒトグルカゴン受容体を含む50μLの膜（7.5μg）を各ウエルに加える。最後に、50μLのWGAビーズ（1mgのビーズを含有）を、各ウエルに移す。このプレートを振盪器上で４時間インキュベートし、次いで８〜48時間静置する。該オプティプレート(opti plates)をトップカウンタ(Topcounter)の中でカウントする。500 nMのグルカゴンを用いて、非特異的結合が決定される。
【０４８５】
このグルカゴン結合アッセイ(II)で試験した際、既述の例による化合物は、1000 nM未満のIC50値を示した。
【０４８６】
ＧＩＰ結合アッセイ：
BHK（新生児ハムスター腎臓細胞株）細胞をヒトGIP受容体で形質転換し、該細胞の膜プレパレーションを調製する。シンチラントを含む小麦胚芽アグルチニン誘導SPAビーズ（WGA beads；Amersham）がこの膜に結合した。125I-グルカゴンが膜中のヒトグルカゴン受容体に結合し、WGAビーズ中のシンチラントを励起させて発光した。受容体に結合するグルカゴンまたはサンプルは、125I-グルカゴンと競合した。
【０４８７】
膜調製における全てのステップは、氷上に維持されるか、または４℃で行われる。BHK細胞を回収し、遠心分離する。ペレットをホモジナイゼーション緩衝液（25 mM HEPES、pH＝7.4、2.5 mM CaCl2、1.0 mM MgCl2、250mg/L バシトラシン、0.1 mM ペファブロック(Pefabloc)）中に再懸濁させ、ポリトロン(Polytron)10-35ホモジナイザー(Kinematica)を使用して2×10秒間ホモジナイズし、再懸濁のために使用する同量のホモジナイゼーション緩衝液を添加する。遠心分離（2000×gで15分）した後、その上清を冷遠心管に移して、40,000×gで45分間遠心分離する。そのペレットをホモジナイゼーション緩衝液中に再懸濁させ、2×10秒間ホモジナイズし(Polytron)、更に追加のホモジナイゼーション緩衝液を添加する。この懸濁液を40,000×gで45分間遠心分離し、そのペレットを再懸濁緩衝液（25 mM HEPES、pH＝7.4，2.5 mM、CaCl2、1.0 mM MgCl2）の中に再懸濁させ、2×10秒間ホモジナイズする(Polytron)。そのタンパク質濃度は、通常は略1.75mg/mLである。安定化緩衝液（25 mM HEPES、pH＝7.4、2.5 mM CaCl2、1.0 mM MgCl2、1％ウシ血清アルブミン、500mg/L バシトラシン、2.5M 蔗糖）を加え、膜プレパレーションを−80℃で保存する。
【０４８８】
このＧＩＰ結合アッセイは、オプティプレート（ポリスチレン製マイクロプレート、Packard）において行う。50μLのアッセイ緩衝液（25 mM HEPES、pH＝7.5、2.5 mM CaCl2、1.0 mM MgCl2、0.003％ツイーン20、0.005％バシトラシン、0.05％ナトリウムアジド）、および5μLＧＩＰまたは試験化合物（DMSO中）を各ウエルに加える。次いで、50μLのトレーサー（125I-ブタＧＩＰ、50,000cpm）およびヒトＧＩＰ受容体を含む50μLの膜（20μg）を各ウエルに加える。最後に、50μLのWGAビーズ（1mgのビーズを含有）を各ウエルに移す。このプレートを振盪器上で3.5時間インキュベートし、次いで８〜48時間静置する。該オプティプレート(opti plates)をトップカウンタ(Topcounter)の中でカウントする。500 nMのＧＩＰを用いて、非特異的結合が決定される。
【０４８９】
一般に、既述の例による化合物は、ＧＩＰ受容体に比較して、グルカゴン受容体に対するより高い親和性を示す。
【国際調査報告】
2005511683.tif 000308
2005511683.tif 000309
2005511683.tif 000310