(57)【要約】本発明は、Ｒ1がＣ7〜Ｃ22−アルキル；Ｃ4〜Ｃ20−アルコキシ、Ｃ6〜Ｃ10−アリール、Ｃ6〜Ｃ10−アリールオキシまたはＣ4〜Ｃ12−アルコキシ−Ｃ2〜Ｃ4−アルコキシで置換されたＣ2〜Ｃ4アルキルを表し、またＣ7〜Ｃ20−アルケニル、３β−コレスタン−３−イルまたは置換フェニルを表し；Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5が、水素、ハロゲン、ニトロ、Ｃ1〜Ｃ4−アルキル、Ｃ1〜Ｃ9−アルキルオキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、またはＣ6〜Ｃ10−アリール−Ｃ1〜Ｃ4−アルキルオキシ、Ｃ6〜Ｃ10−アリールオキシ、Ｃ6〜Ｃ10−アリール、Ｃ3〜Ｃ8−シクロアルキルもしくはＯ−Ｃ3〜Ｃ8−シクロアルキルを表し、これらのすべてが置換されることができる、一般式（Ｉ）の置換された３−フェニル−５−アルコキシ−１，３，４−オキサジアゾール−２−オンに関する。本発明はこの化合物を製造する方法にも関する。式（Ｉ）の化合物は膵臓リパーゼに対する阻害効果を有しまた肥満を治療するための活性物質として使用することができる。  【化１】2005519085.tif 000008
2005519085.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式１
【化１】
2005519085.tif 000006
〔式中、Ｒ1は、Ｃ7〜Ｃ22−アルキル；Ｃ4〜Ｃ20−アルコキシ−、Ｃ6〜Ｃ10−アリール−、Ｃ6〜Ｃ10−アリールオキシ−またはＣ4〜Ｃ12−アルコキシ−Ｃ2〜Ｃ4−アルコキシ−で置換されたＣ2〜Ｃ4アルキル（ここでアリールはハロゲン、Ｃ1〜Ｃ4−アルキル、Ｃ1〜Ｃ4−アルコキシ、ニトロまたはＣＦ3によって１回またはそれ以上置換されたフェニルまたはナフチル基であってよい）；Ｃ7〜Ｃ20−アルケニル；３β−コレスタン−３−イル；Ｃ6〜Ｃ12−アルキルまたはフェノキシによって置換されたフェニルを意味し、
Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は互いに独立して、水素、ハロゲン、ニトロ、Ｃ1〜Ｃ4−アルキル、Ｃ1〜Ｃ9−アルキルオキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、またはＣ6〜Ｃ10−アリール−Ｃ1〜Ｃ4−アルキルオキシ、Ｃ6〜Ｃ10−アリールオキシ、Ｃ6〜Ｃ10−アリール、Ｃ3〜Ｃ8−シクロアルキルもしくはＯ−Ｃ3〜Ｃ8−シクロアルキル（これらの各々は、ハロゲン、ＣＦ3、Ｃ1〜Ｃ4−アルキルオキシまたはＣ1〜Ｃ4−アルキルによって１回、２回または３回置換されてよい）を意味する〕
の化合物ならびにその薬学的に受容可能な塩および酸付加塩。
【請求項２】
Ｒ1が、Ｃ7〜Ｃ22−アルキル、Ｃ7〜Ｃ20−アルケニル、３β−コレスタン−３−イル、またはＣ6〜Ｃ12−アルキルもしくはフェノキシによって置換されたフェニルである請求項１に記載の式１の化合物。
【請求項３】
Ｒ2が、水素、ハロゲン、Ｃ1〜Ｃ4−アルキルまたはＣ1〜Ｃ9−アルコキシである請求項１または２に記載の式１の化合物。
【請求項４】
Ｒ3が、水素、Ｃ1〜Ｃ4−アルキル、トリフルオロメトキシ、Ｃ6〜Ｃ10−アリール−Ｃ1〜Ｃ4−アルキルオキシ（このアリール部分は場合によってハロゲンによって置換されてよい）である請求項１〜３のいずれか１項に記載の式１の化合物。
【請求項５】
Ｒ4が、水素、トリフルオロメトキシまたはクロロフェノキシである請求項１〜４のいずれか１項に記載の式１の化合物。
【請求項６】
Ｒ5が水素である請求項１〜５のいずれか１項に記載の式１の化合物。
【請求項７】
Ｒ1がＣ8〜Ｃ16−アルキルである請求項１〜６のいずれか１項に記載の式１の化合物。
【請求項８】
Ｒ1がＣ8〜Ｃ16−アルキルであり、
Ｒ2が水素であり、
Ｒ3が水素またはトリフルオロメチルオキシであり、
Ｒ4が水素、トリフルオロメチルオキシまたは４−クロロフェノキシであり、そして
Ｒ5が水素である
請求項１〜７のいずれか１項に記載の式１の化合物。
【請求項９】
下式
【化２】
2005519085.tif 000007
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5が請求項１〜８のいずれか１項に規定したとおりである）に従って、式２のヒドラジンを式３のクロロギ酸エステルまたは他の反応性炭酸エステル誘導体と反応させて、式４の化合物を生成し、これをホスゲン、カルボニルジイミダゾール、ジホスゲンまたはトリホスゲンによってアシル化し、環化しそして適当なら、基Ｒ2〜Ｒ5をさらに化学的に修飾することにより、式１の化合物へと転化することからなる請求項１〜８のいずれか１項に記載の式１の化合物を製造する方法。
【請求項１０】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の式１の化合物を少なくとも１つ含有する医薬。
【請求項１１】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の式１の化合物を少なくとも１つ含有する糖尿病治療のための医薬。
【請求項１２】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の式１の化合物の少なくとも１つの医薬としての使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、膵臓リパーゼ、ＰＬに対する阻害効果を有する置換３−フェニル−５−アルコキシ−１，３，４−オキサジアゾール−２−オンに関する。
【背景技術】
【０００２】
置換基としてのオルト−置換されたフェニル環を有するかまたは縮合された５員環もしくは６員環を有するいくつかの５−アルコキシ−１，３，４−オキサジアゾール−２−オンは、駆虫作用（ＤＥ−Ａ  ２６  ０４  １１０）および殺虫作用（ＤＥ−Ａ  ２６  ０３  ８７７、ＥＰ−Ｂ  ０  ０４８  ０４０、ＥＰ−Ｂ  ０  ０６７  ４７１）を有する。
【０００３】
置換基としてオルト−置換フェニル環を有するいくつかの５−フェノキシ−１，３，４−オキサジアゾール−２−オンは、内部寄生作用（ＥＰ−Ａ  ０  ４１９  ９１８）を有する。
【０００４】
ホルモン感受性リパーゼに対する阻害効果のある置換された３−フェニル−５−アルコキシ−１，３，４−オキサジアゾール−２−オンは、ＷＯ  ０１／１７９８１（ＨＭＲ  １９９９／Ｌ  ０５２）およびＷＯ  ０１／６６５３１（ＡＶＥ−Ｄ  ２０００／Ａ  ０１５Ｋ）中に開示されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は膵臓リパーゼ、ＰＬに対する阻害効果を示す化合物を見いだすことであった。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
この目的は式１
【化１】
2005519085.tif 000003
（式中、Ｒ1はＣ7〜Ｃ22−アルキル；Ｃ4〜Ｃ20−アルコキシ−、Ｃ6〜Ｃ10−アリール−、Ｃ6〜Ｃ10−アリールオキシ−またはＣ4〜Ｃ12−アルコキシ−Ｃ2〜Ｃ4−アルコキシ−で置換されたＣ2〜Ｃ4アルキルであって、ここにおいてアリールはハロゲン、Ｃ1〜Ｃ4−アルキル、Ｃ1〜Ｃ4−アルコキシ、ニトロまたはＣＦ3によって１回またはそれ以上置換されたフェニルまたはナフチル基であってよく；Ｃ7〜Ｃ20−アルケニル；３β−コレスタン−３−イル；Ｃ6〜Ｃ12−アルキルまたはフェノキシによって置換されたフェニルを意味し、
Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は互いに独立に、水素、ハロゲン、ニトロ、Ｃ1〜Ｃ4−アルキ
ル、Ｃ1〜Ｃ9−アルキルオキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、またはＣ6〜Ｃ10−アリール−Ｃ1〜Ｃ4−アルキルオキシ、Ｃ6〜Ｃ10−アリールオキシ、Ｃ6〜Ｃ10−アリール、Ｃ3〜Ｃ8−シクロアルキルもしくはＯ−Ｃ3〜Ｃ8−シクロアルキルであって、各々はハロゲン、トリフルオロメチル、Ｃ1〜Ｃ4−アルコキシまたはＣ1〜Ｃ4−アルキルによって１回、２回または３回置換されてもよい）
の置換された３−フェニル−５−アルコキシ−１，３，４−オキサジアゾール−２−オンおよびその薬学的に受容可能な塩および酸付加塩によって達せられる。
【０００７】
上記のアリール基は場合によってはＣ1〜Ｃ9−アルキル、Ｃ1〜Ｃ8−アルキルオキシ、ハロゲン、トリフルオロメチルによって１回またはそれ以上置換されてよい。上記のシクロアルキル基は場合によりＣ1〜Ｃ4−アルキル、Ｃ6〜Ｃ10−アリールで１回またはそれ以上置換されてよく、また上記のアルキル基はヒドロキシル、ジ−Ｃ1〜Ｃ4−アルキルアミノおよびフッ素で置換されてよい。ハロゲンはフッ素、塩素、臭素、好ましくはフッ素および塩素である。アルキル、アルケニル、アルコキシなどは分枝または非分枝であってよい。
【０００８】
好ましい化合物は、Ｒ1がＣ7〜Ｃ22−アルキル、Ｃ7〜Ｃ20−アルケニル、３β−コレスタン−３−イル、またはＣ6〜Ｃ12−アルキルもしくはフェノキシによって置換されたフェニルである式１の化合物である。
【０００９】
さらに好ましい化合物は、
Ｒ2が水素、ハロゲン、Ｃ1〜Ｃ4−アルキルまたはＣ1〜Ｃ9−アルキルオキシを意味し；そして／または
Ｒ3が水素、Ｃ1〜Ｃ4−アルキル、トリフルオロメトキシ、Ｃ6〜Ｃ10−アリール−Ｃ1〜Ｃ4−アルキルオキシであって場合によってはアリール部分がハロゲンによって置換されてよく；そして／または
Ｒ4が水素、トリフルオロメトキシまたはクロロフェノキシを意味し；そして／または
Ｒ5が水素を意味する
式１の化合物である。
【００１０】
式１の特に好ましい化合物はＲ1がＣ8〜Ｃ16−アルキルである化合物である。
【００１１】
極めて特に好ましい化合物は、
Ｒ1がＣ8〜Ｃ16−アルキル、
Ｒ2が水素、
Ｒ3が水素またはトリフルオロメチルオキシ、
Ｒ4が水素、トリフルオロメチルオキシまたは４−クロロフェノキシ、そして
Ｒ5が水素
を意味する式１の化合物である。
【００１２】
式１の追加的な極めて特に好ましい化合物は実施例１、２、３、４、５、６および１６に記載する化合物である。
【００１３】
式１の本発明の化合物は膵臓リパーゼ、ＰＬに対する阻害効果を有する。
【００１４】
本発明はラセミ化合物、ラセミ混合物および純粋な鏡像体の形の式１の化合物の使用に関し、またこれのジアステレオマーおよびその混合物に関する。
【００１５】
医薬として受容可能な塩は、それがベースとする最初の化合物と比較してその水中の溶解度がより大きいので、医療への応用に特に好適である。この塩は医薬として受容可能な
陰イオンまたは陽イオンをもたねばならない。式１の化合物の医薬として受容可能な好適な酸付加塩は、塩酸、臭化水素酸、燐酸、メタ燐酸、硝酸、スルファミン酸および硫酸のような無機酸の塩、および例えば酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グリコール酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオニック酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、コハク酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酒石酸およびトリフルオロ酢酸のような有機酸の塩である。塩化物塩および酒石酸塩を医療目的に使用するのが特に好ましい。医薬として受容可能な好適な塩基性塩は、アンモニウム塩、アルカリ金属塩（ナトリウム塩およびカリウム塩のような）およびアルカリ土類金属塩（マグネシウム塩およびカルシウム塩）である。
【００１６】
医薬として受容できない陰イオンを有する塩も同様に、医薬として受容可能な塩を製造しまたは精製するためのおよび／または例えばインビトロの非療法的応用に使用するための有用な中間体として本発明の範囲に属する。
【００１７】
本記載で用いる『生理学的に機能する誘導体』という用語は、本発明の化合物の生理学的に許容できる任意の誘導体例えばエステルをさし、これは例えばヒトのような哺乳動物に投与してこのような化合物またはその活性的代謝物質を生成する（直接的または間接的に）ことができる。
【００１８】
本発明のさらなる局面は、式１の化合物のプロドラグを使用することである。このようなプロドラグはインビボで式１の化合物へと新陳代謝されることができる。このプロドラグはそれ自体活性的であってもなくてもよい。
【００１９】
式１の化合物は様々な多形の形で、例えば非晶質のおよび結晶性の多形の形として存在してもよい。式１の化合物の多形のすべての形は本発明の範囲に属しまた本発明のさらなる態様である。
【００２０】
以下に『式１の化合物』と称するとき、上記した式１の化合物ならびにそれらの塩、溶媒和物および生理学的に機能する誘導体をさす。
【００２１】
所望の生理学的効果を得るのに必要な式１の化合物の量は、多数の因子例えば選定する特定の化合物、意図する用途、投与の方式および患者の臨床的容態に依存する。１日あたりの投与量は一般に、体重１ｋｇあたり毎日０.３〜１００ｍｇ（典型的に３〜５０ｍｇ）の範囲内にあり、例えば３〜１０ｍｇ／ｋｇ／日である。静脈内投与量は例えば、０.３〜１.０ｍｇ／ｋｇの範囲内であってよく、これは毎分１０〜１００ｎｇ／ｋｇの注入として好適に投与されることができる。この目的にとって好適な注入溶液は１ミリリットルあたり例えば０.１ｎｇ〜１０ｍｇ、典型的に１ｎｇ〜１０ｍｇを含有してよい。単回の投与物は例えば１ｍｇ〜１０ｇの活性成分を含有するであろう。従って、注射用のアンプルは例えば１〜１００ｍｇを含有してよく、また例えば錠剤またはカプセルのような経口投与されることができる単回投与処方物は例えば１.０〜１０００ｍｇ、典型的には１０〜６００ｍｇを含有してよい。医薬として受容可能な塩の場合、上記の重量データは式１の化合物の塩の重量をベースとする。式１の化合物は上記に述べた状態の予防または治療のために化合物自体のままで使用されるが、これはなじみのよい担体を伴う医薬組成物の形であるのが好ましい。担体は勿論組成物の他の成分との親和性の意味でなじみがよくなければならず、また患者の健康に有害であってはならない。担体は固体もしくは液体またはこれら双方であってよく、また０.０５〜９５重量％の活性成分を含有してよい、例えば錠剤のような単回投与物として化合物とともに処方されるのが好ましい。式１の別な化合物を含めて医薬として活性のある別な物質も同様に存在してよい。本発明の医薬組成物は成分を薬学的に受容可能な担体および／または賦形剤と混合することから本質的になる既知の医薬として許容可能な製薬方法の１つによって製造されてよい。
【００２２】
本発明の医薬組成物は経口、直腸内、局所、口からの（例えば舌下）および非経口（例えば皮下、筋肉内、皮膚内または静脈内）投与に好適なものであるが、最も好適な投与方式は各個人の場合に治療すべき症状の本性および重篤度にまた各々の場合に使用する式１の化合物の性質に依存する。コーティングされた処方物およびコーティングされた徐放性処方物もまた本発明の範囲に入る。耐酸性および耐胃液性の処方物が好ましい。好適な耐胃液性コーティングはセルロースアセテートフタレート、ポリビニルアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチル−セルロースフタレートおよびメタクリル酸とメチルメタクリレートとの陰イオンポリマーからなる。
【００２３】
経口投与に好適な医薬化合物は、各々が規定された量の式１の化合物を含有する例えばカプセル、カシェ剤、トローチまたは錠剤のような個別単位の形であってよく；粉末または顆粒として；水性または非水性の液体中の溶液または懸濁液として；または水中油もしくは油中水乳濁液としてであってよい。すでに述べたように、これらの組成物は活性成分および担体（１つまたはそれ以上の追加成分からなってよい）を接触させる工程を含む任意の好適な製薬方法によって製造されることができる。一般に組成物は活性成分を液体および／または微細に分散固体担体と均一にそして均質に混合し、その後で必要なら生成物を成型することにより製造される。従って、例えば錠剤は化合物の粉末または顆粒を、適当なら１つまたはそれ以上の追加の成分とともに圧搾しまたは成型することにより製造されることができる。圧搾された錠剤は適当ならバインダー、潤滑剤、不活性な希釈剤および／または界面活性剤／分散剤の１つ（またはそれ以上）と混合された、例えば粉末または顆粒のような自由流動性の形の化合物を好適な機械中で錠剤化することにより製造されることができる。成型された錠剤は、粉末状のまた不活性液体希釈剤で湿潤されている化合物を好適な機械中で成型することにより製造されることができる。
【００２４】
口からの（例えば舌下）投与に好適な医薬組成物には、式１の化合物を芳香矯味剤、通常は蔗糖、およびアラビアガムまたはトラガカントゴムとともに含有するしゃぶることのできる錠剤、およびゼラチンのような不活性なベースおよびグリセロールまたは蔗糖およびアラビアガムの中に化合物を含有するトローチがある。
【００２５】
非経口投与にとって好適な医薬組成物は、意図するレシピエントの血液に対して好ましくは等張性である式１の化合物の無菌の水性調合物からなるのが好ましい。この調合物は静脈内に投与されるのが好ましいが、投与は皮下、筋肉内または皮膚内注射によってなされることもできる。この調合物は好ましくは、化合物を水と混合しそして得られる溶液を無菌化しそして血液と等張にすることにより製造することができる。本発明の注射可能な組成物は一般に０.１〜５重量％の活性化合物を含有する。
【００２６】
直腸内投与にとって好適な医薬組成物は、単回投与坐薬の形であるのが好ましい。この組成物は式１の化合物を１つまたはそれ以上の固形物担体例えばココアバターと混合しそして得られる混合物を成型することにより製造されることができる。
【００２７】
皮膚上の局所的使用に好適な医薬組成物は、膏薬、クリーム、ローション、ペースト、スプレイ、エアゾルまたは油の形であってよい。使用できる担体はペトロラタム、ラノリン、ポリエチレングリコール、アルコールおよびこれらの物質の２つまたはそれ以上の組み合わせである。活性成分は一般に組成物の０.１〜１５重量％例えば０.５〜２％の濃度で存在する。
【００２８】
皮膚を通じての投与もまた可能である。経皮適用に好適な医薬組成物は、患者の表皮と長期に密接に接触するのに好適な単一のプラスターの形であってよい。この種のプラスターは、適当なら緩衝された水性の溶液中の活性成分を、接着剤中に溶解および／または分散して、またはポリマー中に分散して含有するのが好適である。好適な活性成分の濃度は約１〜３５％、好ましくは約３〜１５％である。特別な選択として、活性成分は例えばＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２(６)：３１８（１９８６）中に記載されているようにエレクトロトランスポート（ｅｌｅｃｔｒｏｔｒａｎｓｐｏｒｔ）またはイオン浸透療法によって放出されることができる。
【００２９】
式１の本発明の化合物はそれ自体知られている方法によって様々な仕方で製造されることができる。
【化２】
2005519085.tif 000004
【００３０】
例えば式１の置換された３−フェニル−５−アルコキシ−１，３，４−オキサジアゾール−２−オンは、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5が上記に規定したとおりである、式２のヒドラジンを式３のクロロギ酸エステルまたは他の反応性炭酸エステル誘導体と反応させて、式４の化合物を生成し、これをホスゲン、カルボニルジイミダゾール、ジホスゲンまたはトリホスゲンによってアシル化し、環化しそして適当なら、基Ｒ2〜Ｒ5をさらに化学的に修飾することにより、例えばニトロ基をアミノ基に既知の方法で還元し、引き続いてアシル化またはアルキル化するなどにより、式１の化合物へと転化することにより製造されることができる。これらの反応では酸が通常発生するので、ピリジン、トリエチルアミン、水酸化ナトリウム溶液またはアルカリ金属炭酸塩のような塩基を添加することによる促進を行うことが推奨される。反応は広い温度範囲内で実施されることができる。０℃から使用する溶媒の沸点までで操作するのが概ね有利であることが分かっている。使用する溶媒の例はメチレンクロライド、ＴＨＦ、ＤＭＦ、トルエン、エチルアセテート、ｎ−ヘプタン、ジオキサン、ジエチルエーテルである。
【００３１】
式２のヒドラジンは既知の方法によって、例えば対応するアニリンをジアゾ化し引き続いて既知の方法によって還元することにより、または適切に置換されたフェニル誘導体６（Ｘ＝Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＳＯ2ＣＦ3）をヒドラジンハイドレートによって求核性置換することにより製造されることができる。
【化３】
2005519085.tif 000005
【００３２】
このような好適なフェニル誘導体はニトロ−置換されたハロベンゼン、好ましくはフルオロニトロベンゼンおよびクロロニトロベンゼンであろう。本発明の化合物は、これらから合成経路の適当な箇所で、還元および、例えば酸塩化物、無水物、イソシアネート、クロロギ酸エステル、スルホニルクロライドもしくはアルキルハライドおよびアリールアルキルハライドのようなアシル化剤もしくはアルキル化剤との反応によって製造され、またはアルデヒドによる還元性アルキル化によって製造されることができる。
【００３３】
式１の本発明の化合物の効果は以下の酵素アッセイシステムを使用することにより試験した。
【００３４】
式１の化合物は膵臓リパーゼ（ＰＬ）に対する阻害効果を示す。これはＰＬ阻害剤として、食物とともに摂取した脂肪の吸収を防止し、従って脂肪の取り込みのおよび体重の減少を導きまたは体重の増加を防止することができる。式１の化合物は肥満を治療するのに特に好適であるが、例えば糖尿病のような様々な新陳代謝障害、および例えば高血圧および心筋梗塞のような心臓血管疾患に極めて有益な効果を有するでもあろう。
【００３５】
化合物の活性は以下のように評価した。
１．基質の調製
トリパルミチン８０μｌ（クロロホルム中の８５ｍＭ）を１２ｍｌのポリプロピレン容器中でグリセロールトリ［９，１０（ｎ）−3Ｈ］オレエート（トルエン中５ｍＣｉ／ｍｌ）５μｌと混合した。回転蒸発器（５０℃）中で蒸発しそして２００ｍＭのＴｒｉｓ／ＨＣｌ（ｐＨ７.６）４ｍｌ、０.８％ＴＸ−１００を添加し、続いて均質なミルク状懸濁液が生成するまで、混合物を超音波処理（Ｂｒａｎｓｏｎ  Ｂ−１２ソニファイアー（ｓｏｎｉｆｉｅｒ）、出力水準４、３×２分、内１分間は氷上）した。
【００３６】
２．アッセイ：
リパーゼ緩衝剤：８０ｍＭのＴｒｉｓ／ＨＣｌ（ｐＨ７.６）、６００ｍＭのＮａＣｌ、８ｍＭのＣａＣｌ2、８ｍＭのベンズアミジン、２ｍＭのＰｅｆａｂｌｏｃ（Ｒｏｃｈｅ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ）（アッセイの日だけ阻害剤を添加）
膵臓リパーゼ：リパーゼ緩衝剤中に溶解された（１００  ０００単位／５００μｌ）ブタの膵臓からの富化された調合物（Ｓｉｇｍａ注文番号Ｌ−０３８２）
【００３７】
手順
試験物質（１００％ＤＭＳＯ中の）５μｌまたはＤＭＳＯ（対照）を基質１０μｌおよびリパーゼ５μｌとこの順序で混合しそして３０℃で３０分培養する（ＥｐｐｅｎｄｏｒｆＴｈｅｒｍｏｍｉｘｅｒ、３５０分-1）。３２５μｌのメタノール／クロロホルム／ｎ−ヘプタン（１０／９／７）および１０５μｌの０.１ＭのＫ2ＣＯ3、０.１ＭのＨ3ＢＯ3（１ＭのＫＯＨでｐＨ１０.５に調整）を添加しそして激しく混合した後、遠心分離（８０００ｒｐｍ、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ遠心分離器、４℃）によって相分離する。水性の上澄み液（発生した、放射能でラベルされたオレエートを含有する；回収率７０％）の１４０μｌの部分を２０ｍｌのシンチレーションバイアル中に移し入れそしてシンチレーションカクテル（Ｂｅｃｋｍａｎ  ＲｅａｄｙＳａｆｅ）６ｍｌと混合する。激しく混合しそして室温で２時間培養した後、放射能を液体シンチレーションカウンター（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｌ８００８  クウェンチ曲線のあるトリチウムチャンネル、測定時間２０分）中で測定する。  
【００３８】
評価：
独立の３つの培養混合物中で物質をそれぞれの濃度で常套的手順で試験する。各々の混合物は相分離（ＳＤ＜０.０２）後にそれぞれ重複測定を行う。バックグラウンド値（同一条件下であるがリパーゼのない反応）をすべての値（基質調合物中のグリセロールトリオレエートまたは遊離オレエートの水性相中の含有率に主として相当、使用する放射能の＜５％）から差し引く。試験物質の膵臓リパーゼ酵素活性の阻害は、阻害されない対照反応との比較（それぞれバックグラウンド補正後に、リパーゼの存在＝０％阻害；リパーゼの不存在＝１００％阻害）によって測定する。ＩＣ50は、試験物質の濃度８つまでの阻害のプロットから算出される。曲線のあてはめおよびＩＣ50の決定のためにソフトウェアパッケージＧＲＡＰＨＩＴ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ−ＢＩＯＳＯＦＴ）が使用される。
【００３９】
このアッセイで化合物は以下の効果を示した。
実施例化合物 ＩＣ50（μＭ）
１                  ０.０３
２                  ０.２５
３                  ０.３５
４                  ２.５
５                  ２.０
６                  ０.９
１５                  ０.６
【００４０】
以下の実施例は調製方法を一層詳細に例示するが、これに限定されるものではない。
実施例１
５−ドデシルオキシ−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
４−トリフルオロメトキシフェニルヒドラジン０.８４ｇ、ＮＭＰ１５ｍｌおよびピリジン２ｍｌからなる混合物にドデシルクロロホーメート０.４３ミリを氷中で冷却しつつ慎重に滴状に添加し、ついで室温までゆっくり温めつつ混合物を２時間撹拌した。５０ｍｌの水で希釈した後、メチレンクロライド３０ｍｌを用いて震盪による抽出を実施し、有機相を硫酸ナトリウムによって乾燥しそして、撹拌しそして氷中で冷却しつつ、５ｍｌのピリジンおよびトルエン中のホスゲンの２０％強度溶液３ｍｌを滴状に添加した。この混合物は室温で一晩放置し、そしてメチレンクロライド１０ｍｌでさらに希釈し、ついで水で３回洗浄した。硫酸ナトリウム上で乾燥した後、混合物を真空下で濃縮しそして生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶媒：メタノール：メチレンクロライド＝２：９８）によって精製した。収率：０.８５ｇ  Ｍ．ｐ．：４１℃
【００４１】
以下の実施例の化合物を似たように調製した。
実施例２
５−ヘキサデシルオキシ−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：５６℃
【００４２】
実施例３
５−オクチルオキシ−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：油状
【００４３】
実施例４
５−ヘキサデシルオキシ−３−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：５３℃
【００４４】
実施例５
５−ヘキサデシルオキシ−３−（４−（４−クロロフェノキシ）−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：５２℃
【００４５】
実施例６
５−オクチルオキシ−３−フェニル−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：３８℃
【００４６】
実施例７
５−オクチルオキシ−３−（３−フルオロ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：油状
【００４７】
実施例８
５−ヘキサデシルオキシ−３−（３−フルオロ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：５８℃
【００４８】
実施例９
５−ヘキサデシルオキシ−３−（３−ベンジルオキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：６５℃
【００４９】
実施例１０
５−ヘキサデシルオキシ−３−フェニル−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：６３℃
【００５０】
実施例１１
５−ヘキサデシルオキシ−３−（４−ニトロ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：７２℃
【００５１】
実施例１２
５−ヘキサデシルオキシ−３−（４−メトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：６６℃
【００５２】
実施例１３
５−ヘキサデシルオキシ−３−（４−ベンジルオキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：７３℃
【００５３】
実施例１４
５−デシルオキシ−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：油状
【００５４】
実施例１５
５−ウンデシルオキシ−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：３８℃
【００５５】
実施例１６
５−テトラデシルオキシ−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：４６℃
【００５６】
実施例１７
５−トリデシルオキシ−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：５０℃
【００５７】
実施例１８
５−（２−（２−ヘキシルオキシ−エトキシ）−エトキシ−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：油状
【００５８】
実施例１９
５−（（Ｚ）−オクタデカ−９−エンイルオキシ）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：油状
【００５９】
実施例２０
５−（ドデシルオキシ−エトキシ）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：油状
【００６０】
実施例２１
５−（２−（４−フルオロフェニル）−エトキシ）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：６０℃
【００６１】
実施例２２
５−（（３β−コレスタン−３−イル）−オキシ）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：１２７℃
【００６２】
実施例２３
５−（２−ブトキシ−エトキシ）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：樹脂状
【００６３】
実施例２４
５−（７−フェニル−ヘプチルオキシ）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：樹脂状
【００６４】
実施例２５
５−（ドコシルオキシ−エトキシ）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：７１℃
【００６５】
実施例２６
５−（２−（１−ナフチルオキシ）−エトキシ）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：樹脂状
【００６６】
実施例２７
５−（４−オクチルフェノキシ）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：樹脂状
【００６７】
実施例２８
５−（３−フェノキシ−フェノキシ）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：樹脂状
【００６８】
実施例２９
５−（ドデシルオキシ）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：４１℃
【００６９】
実施例３０
５−（ドデシルオキシ）−３−（３，４−ジクロロ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：７４℃
【００７０】
実施例３１
５−（ドデシルオキシ）−３−（３，５−ジクロロ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：４８℃
【００７１】
実施例３２
５−（ドデシルオキシ）−３−（３−メトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：５１℃
【００７２】
実施例３３
５−（ドデシルオキシ）−３−（４−メトキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：５７℃
【００７３】
実施例３４
５−（ドデシルオキシ）−３−（３−ニトロ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：６４℃
【００７４】
実施例３５
５−（ドデシルオキシ）−３−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：４３℃
【００７５】
実施例３６
５−（ドデシルオキシ）−３−（３，５−ビス−トリフルオロメチル−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：油状
【００７６】
実施例３７
５−（ドデシルオキシ）−３−（４−ベンジルオキシ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：６５℃
【００７７】
実施例３８
５−（ドデシルオキシ）−３−（３−フルオロ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：４４℃
【００７８】
実施例３９
５−（ドデシルオキシ）−３−（３−（４−フルオロベンジルオキシ）−４−ニトロ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：７１℃
【００７９】
実施例４０
５−（ドデシルオキシ）−３−（２−メチル−４−ニトロ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：６３℃
【００８０】
実施例４１
５−（ドデシルオキシ）−３−（３−メチル−４−ニトロ−フェニル）−３Ｈ−（１，３，４）−オキサジアゾール−２−オン
Ｍ．ｐ．：６２℃
【国際調査報告】
2005519085.tif 000009
2005519085.tif 000010
2005519085.tif 000011
2005519085.tif 000012