(57)【要約】本発明の一態様はアミンに関する。本発明の別の態様は哺乳類アナンダミド輸送体の阻害剤としてのアミンの使用に関する。本発明の化合物はまた、喘息、神経障害性疼痛、持続痛、炎症性疼痛、多動、高血圧、脳虚血、パーキンソン病、痙縮、トゥーレット症候群、統合失調症、出血性ショック、敗血性ショック、心臓ショック、偏頭痛、ホートン頭痛、多発性硬化症、拒食症、ＡＩＤＳ、消耗症候群、臓器拒絶、自己免疫疾患、アレルギー、関節炎、クローン病、悪性神経膠種、神経変性疾患、ハンチントン舞踏病、緑内障、吐き気、不安症、精神疾患、注意欠陥多動性障害、早漏、および卒中を含むがこれらに限定されない、哺乳類を冒す多数の病気、症状、および疾患の治療において用途を見出す。本発明の別の一態様は、アミンのコンビナトリアルライブラリ、およびそのライブラリを作成する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の化学式Ａで表される化合物：
【化１】
2005526133.tif 000033
Ｚは、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アラルキル、ヘテロアラルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０、または固相担体への共有結合による連結鎖を表す;
Ａｒはアリールまたはヘテロアリールを表す;
Ｒは存在しないかまたは１、２、３、４、または５個存在する;
Ｒは、各存在ごとに独立して、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ハロゲン、ヘテロアラルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、アルキルアミノ、カルボン酸、カルボキシアミド、ニトロソ、ニトロ、スルフヒドリル、アルキルチオ、チオアルキル、シリル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホルミル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アルキルオキシカルボニル、アルケニルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ'は、各存在ごとに独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ８０は、各存在ごとに独立して、シクロアルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルを表す;
ｎは、各存在ごとに独立して、０から８の範囲から選択される整数である;
Ａによって表される化合物中の立体中心における絶対立体配置は、Ｒ、Ｓ、またはその混合物である;および
Ａによって表される化合物中のアルケニル部分の配置は、Ｅ、Ｚ、またはその混合物である。
【請求項２】
Ｚが、２−メトキシエチル、２−ヒドロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、２−メチルプロピル、ブチル、アリル、４−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシプロピル、（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル、２−（ピリド−４−イル）エチル、または２−（２−フルオロフェニル）エチルを表すことを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ａｒが、４−アリルオキシフェニル、４−プロピルオキシフェニル、２−アリルオキシフェニル、３，４−（メチレンジオキシ）フェニル、４−（トリフルオロメトキシ）フェニル、４−メチルフェニル、４−メトキシフェニル、４−カルボキシフェニル、または４−フルオロフェニルを表すことを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項４】
Ｒが存在しないことを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ'がＨを表すことを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項６】
Ｚが、２−メトキシエチル、２−ヒドロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、２−メチルプロピル、ブチル、アリル、４−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシプロピル、（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル、２−（ピリド−４−イル）エチル、または２−（２−フルオロフェニル）エチルを表し;さらにＡｒが、４−アリルオキシフェニル、４−プロピルオキシフェニル、２−アリルオキシフェニル、３，４−（メチレンジオキシ）フェニル、４−（トリフルオロメトキシ）フェニル、４−メチルフェニル、４−メトキシフェニル、４−カルボキシフェニル、または４−フルオロフェニルを表すことを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項７】
Ｚが、２−メトキシエチル、２−ヒドロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、２−メチルプロピル、ブチル、アリル、４−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシプロピル、（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル、２−（ピリド−４−イル）エチル、または２−（２−フルオロフェニル）エチルを表し;Ａｒが、４−アリルオキシフェニル、４−プロピルオキシフェニル、２−アリルオキシフェニル、３，４−（メチレンジオキシ）フェニル、４−（トリフルオロメトキシ）フェニル、４−メチルフェニル、４−メトキシフェニル、４−カルボキシフェニル、または４−フルオロフェニルを表し;さらにＲが存在しないことを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項８】
Ｚが、２−メトキシエチル、２−ヒドロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、２−メチルプロピル、ブチル、アリル、４−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシプロピル、（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル、２−（ピリド−４−イル）エチル、または２−（２−フルオロフェニル）エチルを表し;Ａｒが、４−アリルオキシフェニル、４−プロピルオキシフェニル、２−アリルオキシフェニル、３，４−（メチレンジオキシ）フェニル、４−（トリフルオロメトキシ）フェニル、４−メチルフェニル、４−メトキシフェニル、４−カルボキシフェニル、または４−フルオロフェニルを表し;Ｒが存在せず;さらにＲ'がＨを表すことを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項９】
下記の化学式Ｂによって表される化合物：
【化２】
2005526133.tif 000034
Ｚは、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アラルキル、ヘテロアラルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０、または固相担体への共有結合による連結鎖を表す;
Ｘは、アリール、ヘテロアリール、（アリール）アルケニル、（ヘテロアリール）アルケニル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒは存在しないかまたは１、２、３、または４個存在する;
Ｒは、各存在ごとに独立して、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ハロゲン、ヘテロアラルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、アルキルアミノ、カルボン酸、カルボキシアミド、ニトロソ、ニトロ、スルフヒドリル、アルキルチオ、チオアルキル、シリル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホルミル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アルキルオキシカルボニル、アルケニルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ'は、各存在ごとに独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ８０は、各存在ごとに独立して、シクロアルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルを表す;
ｎは、各存在ごとに独立して、０から８の範囲から選択される整数である;
Ｂで表される化合物中の立体中心における絶対立体配置は、Ｒ、Ｓ、またはその混合物である;および
Ｂによって表される化合物中のアルケニル部分の配置は、Ｅ、Ｚ、またはその混合物である。
【請求項１０】
Ｚが、２−メトキシエチル、２−ヒドロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、エチル、アリル、４−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシプロピル、（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル、または２−（２−フルオロフェニル）エチルを表すことを特徴とする請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
Ｘが、２−フェニルエチル、（Ｅ）−（２−メトキシフェニル）ＣＨ＝ＣＨ−、４−アリルオキシフェニル、３，４−（メチレンジオキシ）フェニル、（Ｅ）−（４−メトキシフェニル）ＣＨ＝ＣＨ−、４−フルオロフェニル、３，４−ジフルオロフェニル、または４−（トリフルオロメトキシ）フェニルを表すことを特徴とする請求項９記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒが存在しないことを特徴とする請求項９記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ'がＨを表すことを特徴とする請求項９記載の化合物。
【請求項１４】
Ｚが、２−メトキシエチル、２−ヒドロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、エチル、アリル、４−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシプロピル、（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル、または２−（２−フルオロフェニル）エチルを表し;さらにＸが、２−フェニルエチル、（Ｅ）−（２−メトキシフェニル）ＣＨ＝ＣＨ−、４−アリルオキシフェニル、３，４−（メチレンジオキシ）フェニル、（Ｅ）−（４−メトキシフェニル）ＣＨ＝ＣＨ−、４−フルオロフェニル、３，４−ジフルオロフェニル、または４−（トリフルオロメトキシ）フェニルを表すことを特徴とする請求項９記載の化合物。
【請求項１５】
Ｚが、２−メトキシエチル、２−ヒドロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、エチル、アリル、４−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシプロピル、（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル、または２−（２−フルオロフェニル）エチルを表し;Ｘが、２−フェニルエチル、（Ｅ）−（２−メトキシフェニル）ＣＨ＝ＣＨ−、４−アリルオキシフェニル、３，４−（メチレンジオキシ）フェニル、（Ｅ）−（４−メトキシフェニル）ＣＨ＝ＣＨ−、４−フルオロフェニル、３，４−ジフルオロフェニル、または４−（トリフルオロメトキシ）フェニルを表し;さらにＲが存在しないことを特徴とする請求項９記載の化合物。
【請求項１６】
Ｚが、２−メトキシエチル、２−ヒドロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、エチル、アリル、４−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシプロピル、（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル、または２−（２−フルオロフェニル）エチルを表し;Ｘが、２−フェニルエチル、（Ｅ）−（２−メトキシフェニル）ＣＨ＝ＣＨ−、４−アリルオキシフェニル、３，４−（メチレンジオキシ）フェニル、（Ｅ）−（４−メトキシフェニル）ＣＨ＝ＣＨ−、４−フルオロフェニル、３，４−ジフルオロフェニル、または４−（トリフルオロメトキシ）フェニルを表し;Ｒが存在せず;さらにＲ'がＨを表すことを特徴とする請求項９記載の化合物。
【請求項１７】
下記の化学式Ｃによって表される化合物：
【化３】
2005526133.tif 000035
ＸはＣ（Ｒ'）２またはＯを表す;
Ａｒはアリールまたはヘテロアリールを表す;
Ｒは存在しないかまたは１、２、３、または４個存在する;
Ｒは、各存在ごとに独立して、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ハロゲン、ヘテロアラルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、アルキルアミノ、カルボン酸、カルボキシアミド、ニトロソ、ニトロ、スルフヒドリル、アルキルチオ、チオアルキル、シリル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホルミル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アルキルオキシカルボニル、アルケニルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ'は、各存在ごとに独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ８０は、各存在ごとに独立して、シクロアルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルを表す;
ｆは１、２、または３を表す;
ｎは、各存在ごとに独立して、０から８の範囲から選択される整数である;
ｚは０、１、または２を表す;ただしｚが０のとき、ＸはＣ（Ｒ'）２である;
Ｃで表される化合物中の立体中心における絶対立体配置は、Ｒ、Ｓ、またはその混合物である;および
Ｃによって表される化合物中のアルケニル部分の配置は、Ｅ、Ｚ、またはその混合物である。
【請求項１８】
Ｒが存在しないことを特徴とする請求項１７記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ'がＨを表すことを特徴とする請求項１７記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒが存在せず;さらにＲ'がＨを表すことを特徴とする請求項１７記載の化合物。
【請求項２１】
下記の化学式Ｄによって表される化合物：
【化４】
2005526133.tif 000036
ＸはＣ（Ｒ'）２またはＯを表す;
Ｒは、各存在ごとに独立して、存在しないかまたは１、２、３、または４個存在する; 
Ｒは、各存在ごとに独立して、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ハロゲン、ヘテロアラルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、アルキルアミノ、カルボン酸、カルボキシアミド、ニトロソ、ニトロ、スルフヒドリル、アルキルチオ、チオアルキル、シリル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホルミル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アルキルオキシカルボニル、アルケニルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ'は、各存在ごとに独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ８０は、各存在ごとに独立して、シクロアルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルを表す;
ｆは１、２、または３を表す；
ｎは、各存在ごとに独立して、０から８の範囲から選択される整数である;
ｚは０、１、または２を表す;ただしｚが０のとき、ＸはＣ（Ｒ'）２である;
Ｄで表される化合物中の立体中心における絶対立体配置は、Ｒ、Ｓ、またはその混合物である;および
Ｄによって表される化合物中のアルケニル部分の配置は、Ｅ、Ｚ、またはその混合物である。
【請求項２２】
Ｒが存在しないことを特徴とする請求項２１記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ'がＨを表すことを特徴とする請求項２１記載の化合物。
【請求項２４】
Ｒが存在せず;さらにＲ'がＨを表すことを特徴とする請求項２１記載の化合物。
【請求項２５】
下記の化学式Ｅによって表される化合物：
【化５】
2005526133.tif 000037
ＸはＣ（Ｒ'）２またはＯを表す;
Ｒは、各存在ごとに独立して、存在しないかまたは１、２、３、または４個存在する; 
Ｒは、各存在ごとに独立して、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ハロゲン、ヘテロアラルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、アルキルアミノ、カルボン酸、カルボキシアミド、ニトロソ、ニトロ、スルフヒドリル、アルキルチオ、チオアルキル、シリル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホルミル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アルキルオキシカルボニル、アルケニルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ'は、各存在ごとに独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ８０は、各存在ごとに独立して、シクロアルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルを表す;
ｆは０または１を表す；
ｎは、各存在ごとに独立して、０から８の範囲から選択される整数である;
ｚは０、１、または２を表す;ただしｚが０のとき、ＸはＣ（Ｒ'）２である;
Ｅで表される化合物中の立体中心における絶対立体配置は、Ｒ、Ｓ、またはその混合物である;および
Ｅによって表される化合物中のアルケニル部分の配置は、Ｅ、Ｚ、またはその混合物である。
【請求項２６】
Ｒが存在しないことを特徴とする請求項２５記載の化合物。
【請求項２７】
Ｒ'がＨを表すことを特徴とする請求項２５記載の化合物。
【請求項２８】
Ｒが存在せず;さらにＲ'がＨを表すことを特徴とする請求項２５記載の化合物。
【請求項２９】
下記の化学式Ｆによって表される化合物：
【化６】
2005526133.tif 000038
ＸはＣ（Ｒ'）２またはＯを表す;
Ｒは、各存在ごとに独立して、存在しないかまたは１、２、３、または４個存在する; 
Ｒは、各存在ごとに独立して、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ハロゲン、ヘテロアラルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、アルキルアミノ、カルボン酸、カルボキシアミド、ニトロソ、ニトロ、スルフヒドリル、アルキルチオ、チオアルキル、シリル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホルミル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アルキルオキシカルボニル、アルケニルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ'は、各存在ごとに独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ８０は、各存在ごとに独立して、シクロアルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルを表す;
ｆは１、２、または３を表す;
ｎは、各存在ごとに独立して、０から８の範囲から選択される整数である;
ｚは０、１、または２を表す;ただしｚが０のとき、ＸはＣ（Ｒ'）２である;
Ｆで表される化合物中の立体中心における絶対立体配置は、Ｒ、Ｓ、またはその混合物である;および
Ｆによって表される化合物中のアルケニル部分の配置は、Ｅ、Ｚ、またはその混合物である。
【請求項３０】
Ｒが存在しないことを特徴とする請求項２９記載の化合物。
【請求項３１】
Ｒ'がＨを表すことを特徴とする請求項２９記載の化合物。
【請求項３２】
Ｒが存在せず;さらにＲ'がＨを表すことを特徴とする請求項２９記載の化合物。
【請求項３３】
下記の化学式Ｇによって表される化合物：
【化７】
2005526133.tif 000039
ＸはＣ（Ｒ'）２またはＯを表す;
Ｒは、各存在ごとに独立して、存在しないかまたは１、２、３、または４個存在する; 
Ｒは、各存在ごとに独立して、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ハロゲン、ヘテロアラルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、アルキルアミノ、カルボン酸、カルボキシアミド、ニトロソ、ニトロ、スルフヒドリル、アルキルチオ、チオアルキル、シリル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホルミル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アルキルオキシカルボニル、アルケニルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ'は、各存在ごとに独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ８０は、各存在ごとに独立して、シクロアルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルを表す;
ｆは０または１を表す；
ｎは、各存在ごとに独立して、０から８の範囲から選択される整数である;
ｚは０、１、または２を表す;ただしｚが０のとき、ＸはＣ（Ｒ'）２である;
Ｇで表される化合物中の立体中心における絶対立体配置は、Ｒ、Ｓ、またはその混合物である;および
Ｇによって表される化合物中のアルケニル部分の配置は、Ｅ、Ｚ、またはその混合物である。
【請求項３４】
Ｒが存在しないことを特徴とする請求項３３記載の化合物。
【請求項３５】
Ｒ'がＨを表すことを特徴とする請求項３３記載の化合物。
【請求項３６】
Ｒが存在せず;さらにＲ'がＨを表すことを特徴とする請求項３３記載の化合物。
【請求項３７】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法で、１μＭ未満のＩＣ５０を有することを特徴とする請求項１、９、１７、２１、２５、２９、または３３記載の化合物。
【請求項３８】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法で、１００ｎＭ未満のＩＣ５０を有することを特徴とする請求項１、９、１７、２１、２５、２９、または３３記載の化合物。
【請求項３９】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法で、１０ｎＭ未満のＩＣ５０を有することを特徴とする請求項１、９、１７、２１、２５、２９、または３３記載の化合物。
【請求項４０】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法で、１μＭ未満のＥＣ５０を有することを特徴とする請求項１、９、１７、２１、２５、２９、または３３記載の化合物。
【請求項４１】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法で、１００ｎＭ未満のＥＣ５０を有することを特徴とする請求項１、９、１７、２１、２５、２９、または３３記載の化合物。
【請求項４２】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法で、１０ｎＭ未満のＥＣ５０を有することを特徴とする請求項１、９、１７、２１、２５、２９、または３３記載の化合物。
【請求項４３】
単一の立体異性体であることを特徴とする請求項１、９、１７、２１、２５、２９、または３３記載の化合物。
【請求項４４】
請求項１、９、１７、２１、２５、２９、または３３記載の化合物;および医薬的に許容される賦形剤を含む製剤。
【請求項４５】
哺乳類においてアナンダミド輸送体の活性を調節する方法であって、
前記哺乳類に、治療的効果量の請求項１、９、１７、２１、２５、２９、または３３記載の化合物を投与する工程を含む方法。
【請求項４６】
前記哺乳類が、霊長類、ウマ、イヌまたはネコであることを特徴とする請求項４５記載の方法。
【請求項４７】
前記哺乳類がヒトであることを特徴とする請求項４５記載の方法。
【請求項４８】
前記化合物が経口投与されることを特徴とする請求項４５記載の方法。
【請求項４９】
前記化合物が静脈内投与されることを特徴とする請求項４５記載の方法。
【請求項５０】
前記化合物が舌下投与されることを特徴とする請求項４５記載の方法。
【請求項５１】
前記化合物が眼に投与されることを特徴とする請求項４５記載の方法。
【請求項５２】
前記化合物が経皮投与されることを特徴とする請求項４５記載の方法。
【請求項５３】
前記化合物が直腸内投与されることを特徴とする請求項４５記載の方法。
【請求項５４】
前記化合物が膣内投与されることを特徴とする請求項４５記載の方法。
【請求項５５】
前記化合物が局所投与されることを特徴とする請求項４５記載の方法。
【請求項５６】
前記化合物が筋肉内投与されることを特徴とする請求項４５記載の方法。
【請求項５７】
前記化合物が皮下投与されることを特徴とする請求項４５記載の方法。
【請求項５８】
前記化合物が口腔内投与されることを特徴とする請求項４５記載の方法。
【請求項５９】
前記化合物が経鼻投与されることを特徴とする請求項４５記載の方法。
【請求項６０】
喘息、神経障害性疼痛、持続痛、炎症性疼痛、多動、高血圧、脳虚血、パーキンソン病、痙縮、トゥーレット症候群、統合失調症、出血性ショック、敗血性ショック、心臓ショック、偏頭痛、ホートン頭痛、多発性硬化症、拒食症、ＡＩＤＳ、消耗症候群、臓器拒絶、自己免疫疾患、アレルギー、関節炎、クローン病、悪性神経膠種、神経変性疾患、ハンチントン舞踏病、緑内障、吐き気、不安症、精神疾患、注意欠陥多動性障害、早漏、または卒中に罹患した哺乳類を治療する方法であって、
前記哺乳類に、治療的効果量の請求項１、９、１７、２１、２５、２９、または３３記載の化合物を投与する工程を含む方法。
【請求項６１】
前記哺乳類が、霊長類、ウマ、イヌまたはネコであることを特徴とする請求項６０記載の方法。
【請求項６２】
前記哺乳類がヒトであることを特徴とする請求項６０記載の方法。
【請求項６３】
前記化合物が経口投与されることを特徴とする請求項６０記載の方法。
【請求項６４】
前記化合物が静脈内投与されることを特徴とする請求項６０記載の方法。
【請求項６５】
前記化合物が舌下投与されることを特徴とする請求項６０記載の方法。
【請求項６６】
前記化合物が眼に投与されることを特徴とする請求項６０記載の方法。
【請求項６７】
前記化合物が経皮投与されることを特徴とする請求項６０記載の方法。
【請求項６８】
前記化合物が直腸内投与されることを特徴とする請求項６０記載の方法。
【請求項６９】
前記化合物が膣内投与されることを特徴とする請求項６０記載の方法。
【請求項７０】
前記化合物が局所投与されることを特徴とする請求項６０記載の方法。
【請求項７１】
前記化合物が筋肉内投与されることを特徴とする請求項６０記載の方法。
【請求項７２】
前記化合物が皮下投与されることを特徴とする請求項６０記載の方法。
【請求項７３】
前記化合物が口腔内投与されることを特徴とする請求項６０記載の方法。
【請求項７４】
前記化合物が経鼻投与されることを特徴とする請求項６０記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
哺乳類内因性カンナビノイド
哺乳類内因性カンナビノイド（ＥＣＳ）のさまざまな要素は、一般にカンナビノイドと呼ばれる幅広い群の化合物の様々な薬理学的標的を構成する。これらの要素に含まれるのは、二種類のＧタンパク質結合型膜受容体:中枢ＣＢ１受容体（非特許文献１）;および末梢ＣＢ２受容体（非特許文献２）である。
【０００２】
同じくＥＣＳの要素の中に含まれるのは、内因性リガンドであるアナンダミド（非特許文献３）、２−アラキドノイルグリセロール（非特許文献４）、および最近報告された２−アラキドニルグリセリルエーテル（非特許文献５）である。内因性リガンドの生物活性の停止の機構が解明されており、担体媒介輸送系（アナンダミド輸送体（ＡＴ））および脂肪酸アミドヒドロラーゼ（ＦＡＡＨ）という名の加水分解酵素から成る（非特許文献６;非特許文献７;非特許文献８;および非特許文献９）。
【０００３】
重要なことには、ＥＣＳは、抗侵害受容作用、脳の発達、逆行性神経細胞情報伝達、記憶、食欲、精神運動調節、心臓血管および免疫調節、および細胞増殖といった、幅広い中枢および末梢過程の調節に関与しているように思われる。（ａ）非特許文献１０;（ｂ）非特許文献１１;（ｃ）非特許文献１２;（ｄ）非特許文献１３;（ｅ）非特許文献１４;（ｆ）非特許文献１５;（ｇ）非特許文献１６;および（ｈ）非特許文献１７を参照。この広汎な作用スペクトルによって、ＥＣＳは喘息、疼痛、多発性硬化症、悪性神経膠種、および神経変性疾患を含む多様な病理の治療の重要な標的となる。（ａ）非特許文献１８;（ｂ）非特許文献１９;（ｃ）非特許文献２０;および（ｄ）非特許文献２１を参照。
【０００４】
さらに、哺乳類細胞における内因性カンナビノイドのレベルの上昇は、その取り込みおよび／または分解を阻害することによって達成することができ、古典的アゴニストでカンナビノイド受容体を直接活性化することなく局所的なカンナビノイド様(cannabimimetic)の効果を生じさせる可能性を高め、それによって、付随する望ましくない副作用を回避する。したがって、合成阻害剤は、低い内因性カンナビノイド活性によって特徴づけられる疾患の治療であって、直接的アゴニストが有効であることが証明されているが望ましくない作用をもたらす場合に、治療的価値がある可能性がある（非特許文献２２）。特に、そのような取り込み阻害剤の治療的有用性は、ハンチントン舞踏病または多発性硬化症のような多様な病状の治療において検討されている（非特許文献２３）。
【０００５】
アナンダミド
一般的に、カンナビノイドアゴニストは、外因性活性分子および内因性カンナビノイドの両方を含む。外因性アゴニストは通常、古典的カンナビノイド（たとえばΔ９−ＴＨＣおよびその類縁体のようなカンナビス・サティバ(Cannabis sativa)由来化合物）、非古典的カンナビノイド（たとえばＣＰ５５９４０のように、古典的カンナビノイドの特徴的な三環構造を欠く）、およびアミノアルキルインドール（たとえばＷＩＮ５５２１２２）に分類される一方、内因性カンナビノイドはエイコサノイド類に属する。アンタゴニストの中で、ジアリールピラゾールは、最も広く用いられている化合物であることで特筆に値する（非特許文献２４）。
【０００６】
アナンダミド（アラキドニルエタノールアミド）は、脳カンナビノイド受容体を活性化し、Δ９−テトラヒドロカンナビノール、すなわち大麻およびマリファナの有効成分の薬理作用を模倣する内因性脂質である（非特許文献３;および非特許文献２５）。ヒトでは、そのような作用は、多幸感、冷静、夢幻状態、および眠気を含む。非特許文献２６。脱分極化した神経細胞は、神経細胞膜でのリン脂質前駆体のカルシウム依存的切断を要する機構を介してアナンダミドを放出する（非特許文献２７;および非特許文献２８;非特許文献２９;および非特許文献３０）。さらに、アナンダミドは、認知および感情の調節に関与する新規な系の主要な構成要素として作用する可能性がある。実際、生理学的実験は、アナンダミドが、ドーパミンおよびセロトニンといった他のより理解された神経伝達物質と同様に、健康および疾患での我々の脳機能の調節において重要であり得ることを示している。
【０００７】
アナンダミドは、受容体刺激に反応して神経細胞の膜区画から放出される。とりわけ、Ｄ２作用はアナンダミド放出を刺激する。ラット脳神経細胞の研究では、アナンダミドは独自の機構によって放出されることが示された:アナンダミドはリン脂質前駆体の形で細胞膜中に保存され、その前駆体はカルシウムおよび活性に依存する酵素反応によって切断される。Ｎ−アラキドノイルホスファチジルエタノールアミン（ＮＡＰＥ）がアナンダミドの前駆体として同定されており、アナンダミドはホスホジエステラーゼに媒介されるＮＡＰＥの切断によって形成される。ＮＡＰＥの生合成は特定のＮ−アシルトランスフェラーゼ酵素によって触媒され、その酵素は特徴付けられており、かつラット脳抽出物から部分精製されている。ＮＡＰＥの形成およびアナンダミドを生じるその切断は高度に調節された過程であり、その過程は脳の特定の領域で起こる。
【０００８】
他の調節物質と同様に、細胞外アナンダミドは迅速に不活性化されると考えられている。前項で概要を述べた通り、その経路は、ラットの脳および肝臓で高発現された膜結合脂肪酸アミドヒドロラーゼ（ＦＡＡＨ）によって触媒される、アラキドン酸およびエタノールアミンへの加水分解を含む（非特許文献３１;非特許文献３２）。にもかかわらず、脳細胞膜で見られる低いＦＡＡＨ活性は、この酵素が細胞内酵素である得ることを示唆し、その可能性はラットＦＡＡＨの配列分析によってさらに支持される（非特許文献３３）。アナンダミドは受動拡散によってＦＡＡＨに接近できるが、この機構による輸送速度は、この脂質媒介因子の分子サイズのために低いことが予測される（非特許文献３４）。多価不飽和脂肪酸およびプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）を含むその他の脂質は、担体媒介輸送によって細胞に入る（非特許文献３５;非特許文献３６;非特許文献３７;非特許文献３８）。上述した通り、アナンダミド輸送体を介する神経細胞内へのアナンダミド蓄積の迅速で飽和可能な過程が報告されている（非特許文献２７）。
【０００９】
その生物学的作用を停止するのに必要なアナンダミドの不活性化は、二段階で起こる。アナンダミドはまず、それを細胞内へ輸送する選択的担体タンパク質によって細胞外間隙から除かれ、次いでアナンダミドアミドヒドロラーゼと称する酵素に触媒される加水分解によって、生物学的に不活性な化合物に分解される。この酵素の強力な阻害剤が同定されており（一種のブロモエノールラクトン、ＢＴＮＰ）、それが利用可能なことはアナンダミド作用の薬理学的分析を促進する。高親和性アナンダミド輸送体がラット皮質神経細胞および星状細胞で特徴づけられている。ある化合物（Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）アラキドニルアミド）が、カンナビノイド受容体に結合したりアナンダミド加水分解に影響したりすることなく、そのような輸送を選択的かつ強力に阻害することが見出されている。この輸送系は、プロスタグランジン取り込み系と類似しているが異なる、新規な脂質取り込み系を構成するように見える。また、これらの阻害剤の使用は、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏの両方で、アナンダミド輸送がアナンダミドの生物学的不活性化の律速段階を構成することを実証した。アナンダミドレベルがどのように調節されるかを理解することは、その調節解除(deregulation)が脳の機能障害につながり得るため、重要である。
【００１０】
アナンダミドおよびドーパミンは、反対方向に作用して、脳の背側線条体と呼ばれる部位における動作を調節するように思われる;ドーパミンはこの部位で作用することによって動作を刺激し、アナンダミドは見かけ上ドーパミンのこの作用を阻害する。アナンダミドがドーパミンの作用を打ち消すことができることの特定は、脳におけるドーパミン不均衡が関与すると思われる疾患を治療するための薬剤の開発に有用であることを立証する。ある種の疾患は、特定の脳領域におけるドーパミンの過剰、またはおそらくドーパミンの標的となる脳の部位の過敏性によって引き起こされるように思われる。これらの疾患は、統合失調症および、顔面チックおよび語句の繰り返しおよび不随意的な卑語の発言によって特徴づけられるジル・ド・ラ・トゥレット症候群を含む。アナンダミドを模倣する薬剤は、ドーパミン過剰活性を緩和することによって、これらおよびその他の疾患の症状を軽減できる。さらに、脳におけるアナンダミド作用を阻害する薬剤もまた、特定の脳領域におけるドーパミン過少、またはドーパミン標的の感受性低下に関連すると思われる疾患の治療に有用であることが証明されている。これらの疾患は、薬物依存症およびパーキンソン病を含む。
【００１１】
ラットでは、ＡＴ阻害剤であるＡＭ４０４は、脳において放出されたアナンダミドの寿命を延長し、またドーパミンＤ２作用の精神運動効果を低減する。ラットにおける疼痛刺激は、ＣＢ１受容体の作用を介して、脳の外側背側水道周囲灰白質における自然鎮痛反応を媒介したアナンダミド放出を引き起こす。さまざまなｉｎ ｖｉｖｏモデルで、ＡＭ４０４は、カンナビノイドＣＢ１受容体アンタゴニストＳＲ−１４１７１６Ａによって逆転することができる弱く進行の遅い運動低下症を生じた。ＡＭ４０４はまた、アポモルヒネ誘導性のあくびを用量依存的に妨げた;この効果は同様にＳＲ−１４１７１６Ａによって逆転された。さらに、ＡＭ４０４は、選択的ドーパミンＤ２アゴニストであるキンピロールによって誘導される運動行動を減少させ、またＡＤＨＤのラットモデルにおいて多動を軽減させた。ＡＭ４０４はＡＴを阻害するが（ＩＣ５０〜２μＭ）、その低い効果および特異性のために、薬物候補としては適当でない。後者の特徴は、ＡＭ４０４のアラキノニル部分による可能性が高い。さらに、ｉｎ ｖｉｔｒｏ測定法を用いて、研究者はフッ化フェニルメチルスルホニル（ＰＭＳＦ）がアナンダミドの分解を阻害できることを示している。さらに、一連のフッ化脂肪酸スルホニルが、アミダーゼを阻害し、さらにＰＭＳＦよりも強力でかつ選択的であることが確認されている（非特許文献３９）。
【００１２】
興味深いことに，アナンダミドおよび構造的に関連する脂質は、一次感覚神経上のバニロイド受容体の活性を調節することが最近報告されている（特許文献１）。この発見は、医学、薬学、および科学の分野で多様な意味を有し、またアナンダミドの非ＣＢ１受容体媒介血管拡張因子作用に分子機構を提供する。バニロイド受容体（ＶＲ１）は、Ｃａｔｅｒｉｎａらによって最近クローニングされたが（非特許文献４０）、カプサイシン感受性で熱作動性の非選択的陽イオンチャンネルである。Ｃａｔｅｒｉｎａらによる研究およびそれ以降の研究は、一次感覚神経細胞の部分集合においてＶＲ１が独自に発現されていることを確認しており（非特許文献４１）、この細胞はヒトおよび動物で広く分布している（非特許文献４２）。
【特許文献１】米国特許出願第2002/0019444号明細書
【非特許文献１】Matsuda, L. A.; Lolait, S. J.; Brownstein, M. J.; Young, A. C.; Bonner, T.I. Structure of a Cannabinoid Receptor and Functional Expression of the ClonedcDNA. Nature 1990, 346, 561-564
【非特許文献２】Munro, S.; Thomas, K. L.; Abu-Shaar, M. Molecular Characterization of a Peripheral Receptor for Cannabinoids. Nature 1993, 365, 61-65
【非特許文献３】Devane, W. A.;Hanus, L.; Breuer, A.; Pertwee, R. G.; Stevenson, L. A.; Griffin, G.; Gibson, D.; Mandelbaum, A.; Etinger, A.; Mechoulam, R. Isolation and Structure of a Brain Constituent That Binds to the Cannabinoid Receptor. Science 1992,258, 1946-1949
【非特許文献４】Sugiura, T.; Kondo, S.; Sukagawa, A.; Nakane, S.; Shinoda, A.; Itoh, K; Yamashita, A.; Waku, K. 2-Arachidonoylglycerol: a Possible Endogenous Cannabinoid Receptor Ligand in Brain. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1995, 215, 89-97
【非特許文献５】Hanus, L.; AbuLafi, S.; Fride, E.; Breuer, A.; Vogel, Z.; Shalev, D. E.; Kustanovich, I. ; Mechoulam, R. 2Arachidonyl Glyceryl Ether, an Endogenous Agonist of the Cannabinoid CBI Receptor. Proc. Natl.Acad. Sci. U. S. A. 2001, 98, 3662-3665
【非特許文献６】Hillard, C. J.; Edgemond, W. S.; Jarrahian, A; Campbell, W. B. Accumulationof N-Arachidonoylehanolamine (Anandamide) into Cerebellar Granule Cells Occurs via Facilitated Diffusion.J. Neurochem. 1997, 69,631-638
【非特許文献７】Beltramo, M.; Stella, N.; Calignano, A.; Lin, S. Y.; Makriyannis, A.; Piomelli, D. Functional Role of High-Affinity Anandamide Transport, as Revealed by Selective Inhibition, Science 1997,277, 1094-1097
【非特許文献８】Hillard, C. J.; Jarrahian, A. The Movementof N-arachidonoylethanolamine (Anandamide) across Cellular Membranes.Chem. Phys. Lipids 2000,108, 123-134
【非特許文献９】Ueda, N.;Puffenbarger, R. A.; Yamamoto, S.; Deutsch, D. G. The Fatty Acid Amide Hydrolase (FAAH). Chem. Phys. Lipids 2000,108,107-121
【非特許文献１０】Calignano, A.; La Rana, G.; Giuffrida, A.; Piomelli, D. Control of Paul Initiation by Endogenous Cannabinoids. Nature 1998, 394, 277-281
【非特許文献１１】Walker, J. M.; Hohmann, A. G.; Martin, W. J.;Strangman, N. M.; Huang, S. M.; Tsou, K The Neurobiology of Cannabinoid Analgesia. Life Sci. 1999,65, 665-673
【非特許文献１２】Fernandez-Ruiz, J.; Berrendero, F.;Hernandez, M. L.; Ramos, J. A. The Endogenous Cannabinoid System and Brain Development.Trends Neurosci. 2000, 23, 14- 20
【非特許文献１３】Wilson, R. I. ; Nicoll, R. A.; Endogenous Cannabinoids Mediate Retrograde Signaling at Hippocampal Synapses. Nature 2001, 410, 588-592
【非特許文献１４】Hampson, R. E.; Deadwyler, S. A. Cannabinoids, Hippocampal Function and Memory. Life Sci. 1999, 65, 715-723
【非特許文献１５】Di Marzo, V.; Goparaju, S. K; Wang, L.; Liu, J.;Baikal, S.; Jarai, Z.; Fezza, F.; Miura, G. I. ; Palmiter, R. D.; Sugiura, T.; Kunos, G. Leptin-Regulated Endocannabinoids Are Involved in Maintaining Food Intake. Nature 2001, 410, 822-825
【非特許文献１６】Giuffrida, A.; Piomelli, D. The Endocannabinoid System: a Physiological Perspective on its Role in Psychomotor Control. Chem.PAcys. Lipids 2000,108, 151-158
【非特許文献１７】De Petrocellis, L.; Melck, D.;Bisogno, T.; Di Marzo, V. Endocannabinoids and Fatty Acid Amides in Cancer, Inflammation and Related Disorders. Chem. Phys. Lipids 2000,108, 191-209
【非特許文献１８】Calignano, A.;Katona, I. ;Desarnaud, F.; Giuffrida, A.; La Rana, G.; Mackie, K; Freund, T. F.; Piomelli, D. Bidirectional Control of Airway Responsiveness by Endogenous Cannabinoids. Nature 2000, 408,96-101
【非特許文献１９】Baker, D.; Pryce, G.; Croxford, J. L.; Brown, P.; Pertwee, R. G.; Huffman, J. W.; Layward, L. Cannabinoids Control Spasticity and Tremor in a Multiple Sclerosis Model. Nature 2000,404, 84-87
【非特許文献２０】Galve-Roperh, I. ; Sanchez, C.; Cortes, M.L. ; Gomez del Pulgar, T.; Izquierdo, M.; Guzman, M. Antitumoral Action of Cannabinoids: Involvement of Sustained Ceramide Accumulation and Extracellular Signal-Regulated Kinase Activation. Nat. Med. 2000, 6, 313-319
【非特許文献２１】Pertwee, R. G. Pharmacology of Cannabinoid Receptor Ligands. Curr. Med. Chem. 1999, 6, 635-664
【非特許文献２２】Piomelli, D.; Giuffrida, A.; Calignano, A; Rodriguez de Fonseca, F. The Endocannabinoid System as a Target for Therapeutic Drugs. TrendsPharmacol. Sci. 2000,21, 218-224
【非特許文献２３】Baker, D.; Pryce, G.; Croxford, J. L.; Brown, P.; Pertwee, R. G.;Makriyannis, A.; Khanolkar, A.; Layward, L.;Fezza,F. ; Bisogno, T; Di Marzo, V. Endocannabinoids Control Spasticity in a Multiple Sclerosis Model. FASEB J. 2001,15, 300-302
【非特許文献２４】Pertwee, R. G. Cannabinoid Receptor Ligands: Clinical and Neuropharmacological Considerations, Relevant to Future Drug Discovery and Development. Expert Opin. Invest. Drugs 2000,9, 1-19
【非特許文献２５】R. Mechoulam, L. Hanus, B. R. Martin, Biochem. Pharmacol. 48,1537 (1994)
【非特許文献２６】W. L. Dewey, Pharmacol. Rev. 38,151 (1986)
【非特許文献２７】V. Di Marzo et al., Nature 372, 686 (1994)
【非特許文献２８】H. Cadas, S. GaiUet, M. Bettramo, L. Venance, D. Piomelli,J Neurosci. 16,3934 (1996)
【非特許文献２９】T. Sugiura et al. , Eur. J. Biochem. 240,53 (1996)
【非特許文献３０】H. Cadas, E. di Tomaso, D. Piomelli, J. Neurosci.,17, 1226 (1997)
【非特許文献３１】D. G. Deutsch and S. Chin, Biochem. Pharmacol. 46,791 (1993)
【非特許文献３２】F. Desamaud, H. Cadas,O. Piomelli, J. Biol. Chem. 270,6030 (1995)
【非特許文献３３】B. Cravatt et al., Nature 384, 83 (1996)
【非特許文献３４】W. D. Stein, Channelsand Pumps. An Introduction to Membrane Transport, (Academic Press, San Diego, 1990), pp. 53-57
【非特許文献３５】L. Z. Bito, Nature 256, 1234 (1975)
【非特許文献３６】J. E. Schaffer and H. F. Lodish, Cell 79, 427 (1994)
【非特許文献３７】I. N.Bojesen and E. Bojesen, Acta Physiol. Scand. 156, 501 (1996)
【非特許文献３８】N. Kanai et al., Science 268,866 (1995)
【非特許文献３９】Deutsch, D. G. et al. ”Fatty acid sulfonyl fluorides inhibit anandamide metabolism and bind to the cannabinoid receptor” Biochemical and Biophysical Research Communications 1997,231,217-221
【非特許文献４０】Caterina, M. J. etal., The capsaicin receptor: a heat-activated ion channel in the pain pathway., Nature 389, 816-824 (1997)
【非特許文献４１】Tominaga K, Caterina M J, Mahnberg A B, Rosen T A, Gilbert H, Skinner K, Raumann B E, Basbaum AI, Julius D. , The cloned capsaicin receptor integrates multiple pain-producing stimuli., Neuron 21, 531-543 (1998)
【非特許文献４２】Holzer P. , Capsaicin: cellular targets, mechanisms of action, and selectivity for thin sensory neurons, Pharmacol Rev 43, 143-201 (1991)
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明の一態様はアミンに関する。本発明の別の態様は哺乳類アナンダミド輸送体の阻害剤としてのアミンの使用に関する。本発明の化合物はまた、喘息、神経障害性疼痛、持続痛、炎症性疼痛、多動、高血圧、脳虚血、パーキンソン病、痙縮、トゥーレット症候群、統合失調症、出血性ショック、敗血性ショック、心臓ショック、偏頭痛、ホートン頭痛、多発性硬化症、拒食症、ＡＩＤＳ、消耗症候群、臓器拒絶、自己免疫疾患、アレルギー、関節炎、クローン病、悪性神経膠種、神経変性疾患、ハンチントン舞踏病、緑内障、吐き気、不安症、精神疾患、注意欠陥多動性障害、早漏、および卒中を含むがこれらに限定されない、哺乳類を冒す多数の病気、症状、および疾患の治療において用途を見出す。本発明の別の一態様は、アミンのコンビナトリアルライブラリ、およびそのライブラリを作成する方法に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
我々は、放出されたアナンダミドの神経細胞外寿命を延長することによって、カンナビノイド作用の治療上の利益を伸ばすことができることを発見した。Ｄ２受容体の機能亢進によって特徴づけられる精神疾患は、アナンダミド放出を介した負のフィードバックによって弱められ、そしてアナンダミドの神経細胞外寿命を伸ばすことによって防ぐことができる。
【００１５】
本発明の一態様は新規アミンに関する。本発明の別の態様は哺乳類アナンダミド輸送体の阻害剤としての新規アミンの使用に関する。本発明の化合物はまた、喘息、神経障害性疼痛、持続痛、炎症性疼痛、多動、高血圧、脳虚血、パーキンソン病、痙縮、トゥーレット症候群、統合失調症、出血性ショック、敗血性ショック、心臓ショック、偏頭痛、ホートン頭痛、多発性硬化症、拒食症、ＡＩＤＳ、消耗症候群、臓器拒絶、自己免疫疾患、アレルギー、関節炎、クローン病、悪性神経膠種、神経変性疾患、ハンチントン舞踏病、緑内障、吐き気、不安症、精神疾患、注意欠陥多動性障害、早漏、および卒中を含むがこれらに限定されない、哺乳類を冒す多数の病気、症状、および疾患の治療において用途を見出す。本発明の別の一態様は、新規アミンのコンビナトリアルライブラリ、およびそのライブラリを作成する方法に関する。
【００１６】
定義
便宜上、本明細書、実施例、および添付の請求項で用いられる一部の用語をここに集める。
【００１７】
「アナンダミド」の語は、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）アラキドンアミドを称し、下記の構造を有する:
【化１】
2005526133.tif 000002
【００１８】
「ＡＭ４０４」および「ＡＭ−４０４」の語は、Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）アラキドンアミドを称し、下記の構造を有する:
【化２】
2005526133.tif 000003
【００１９】
「細胞表面タンパク質」の語は、細胞の表面に存在し、細胞外環境と相互作用し、環境に関する情報を細胞内に伝達または導入する分子を含む。
【００２０】
「細胞外シグナル」の語は、そのシグナルと直接的にまたは間接的に相互作用する細胞表面タンパク質を介して細胞内に導入された分子または環境の変化を含む。細胞外シグナルは、細胞表面タンパク質の活性を何らかの方法で特異的に変化させる任意の化合物または物質である。そのようなシグナルの例は、細胞表面受容体およびイオンチャンネルに結合し、そのような受容体およびチャンネルの活性を調節する、アセチルコリンのような分子、増殖因子、ホルモンおよび酢酸ミリスチン酸ホルボール（ＰＭＡ）といったその他の有糸分裂誘起物質を含むがこれらに限定されない。細胞外シグナルはまた、細胞表面タンパク質の活性を調節しそれによって細胞内機能に影響を与えるまだ同定されていない物質、および特定の細胞表面受容体の活性を調節することによって特定の疾患を治療するのに用いることができる医薬品候補であるまだ同定されていない物質も含む。
【００２１】
「ＥＤ５０」の語は、最大反応または効果の５０％を生じる薬剤の用量を意味する。あるいは、被験者または被験調製物の５０％で規定の反応を生じる用量である。
【００２２】
「ＬＤ５０」の語は、被験者の５０％で致死的である薬剤の用量を意味する。
【００２３】
「治療係数」の語は、ＬＤ５０／ＥＤ５０と定義される薬剤の治療係数を称する。
【００２４】
「構造−活性相関（ＳＡＲ）」の語は、薬剤の分子構造を変えることが、その薬剤の受容体、酵素などとの相互作用を変化させる手法を称する。
【００２５】
「アゴニスト」の語は、天然の伝達物質の作用を模倣するか、または天然の伝達物質が未知である場合は、他の受容体リガンドの非存在下で受容体複合体の変化を引き起こす化合物を称する。
【００２６】
「アンタゴニスト」の語は、受容体部位に結合するが、別の受容体リガンドが存在しない限り、生理的変化を何ら引き起こさない化合物を称する。
【００２７】
「競合的アンタゴニスト」の語は、受容体部位に結合する化合物を称する;アゴニストの濃度を上昇させることによってその効果に打ち勝つことができる。
【００２８】
「部分アゴニスト」の語は、受容体部位に結合するが、濃度にかかわらず最大効果を生じない化合物を称する。
【００２９】
「逆アゴニスト」の語は、恒常的活性型受容体部位に結合しその生理的機能を低下させる化合物を称する。
【００３０】
「リガンド」の語は、受容体部位に結合する化合物を称する。
【００３１】
ここで用いられる「ヘテロ原子」の語は、炭素または水素以外の任意の元素の原子を意味する。好ましいヘテロ原子は、ホウ素、窒素、酸素、リン、硫黄、およびセレンである。
【００３２】
「電子求引基」の語は、本分野で認知されており、置換基が隣接する原子から価電子を引きつける傾向を意味し、すなわちその置換基は隣接する原子に関して陰性である。電子供与能のレベルの定量化は、ハメットのシグマ（σ）定数によって与えられる。このよく知られている定数は、多数の参考文献、たとえば、 J. March, Advanced Organic Chemistry, McGraw Hill Book Company, New York, (1977 edition) pp. 251-259に記載されている。ハメット定数値は一般的に、電子供与基について陰性（ＮＨ２についてσ[Ｐ]＝−０．６６）および電子求引基について陽性（ニトロ基についてσ[Ｐ]＝０．７８）であって、[Ｐ]はパラ置換を示す。典型的な電子求引基は、ニトロ、アシル、ホルミル、スルホニル、トリフルオロメチル、シアノ、塩化物、などを含む。典型的な電子供与基は、アミノ、メトキシ、などを含む。
【００３３】
「アルキル」の語は、直鎖アルキル基、分枝鎖アルキル基、シクロアルキル（アリサイクリック）基、アルキル置換シクロアルキル基、およびシクロアルキル置換アルキル基を含む、飽和脂肪族基のラジカルを称する。好ましい実施形態では、直鎖または分枝鎖アルキルは骨格に３０個以下の炭素原子を有し（たとえば、直鎖についてはＣ１〜Ｃ３０、分枝鎖についてはＣ３〜Ｃ３０）、およびより好ましくは２０個以下の炭素原子を有する。同様に、好ましいシクロアルキルは、環構造に３〜１０個の炭素原子を有し、およびより好ましくは環構造に５、６、または７個の炭素原子を有する。
【００３４】
炭素数が別に指定されない限り、ここで用いられる「低級アルキル」は、上記に定義される通りであるが、骨格構造に１から１０個の炭素を有する、より好ましくは１から６個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。同様に、「低級アルケニル」および「低級アルキニル」は同様の鎖長を有する。好ましいアルキル基は低級アルキルである。好ましい実施形態では、ここでアルキルと指定されている置換基は低級アルキルである。
【００３５】
ここで用いられる「アラルキル」の語は、アリール基（たとえば、芳香族基またはヘテロ芳香族基）で置換されたアルキル基を称する。
【００３６】
「アルケニル」および「アルキニル」の語は、長さおよび可能な置換について上記のアルキルと類似の不飽和脂肪族基であるが、少なくとも一の二重結合または三重結合をそれぞれ有するものを称する。
【００３７】
ここで用いられる「アリール」の語は、０から４個のヘテロ原子を含み得る５、６、および７員単環芳香族基、たとえば、ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、ピレン、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、トリアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、およびピリミジン、などを含む。環構造中にヘテロ原子を有するそれらのアリール基はまた、「アリールヘテロ環」または「ヘテロ芳香族」とも称する。芳香族環は、環の一個以上の位置で、上記のような置換基、たとえば、ハロゲン、アジド、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスホネート、ホスフィネート、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、スルホンアミド、ケトン、アルデヒド、エステル、ヘテロシクリル、芳香族またはヘテロ芳香族部分、−ＣＦ３、−ＣＮ、などで置換され得る。「アリール」の語はまた、二個以上の炭素が二つの隣接する環（それらの環は「融合環」である）に共通する、二つ以上の環を有する多環系を含み、ここでたとえば環のうち少なくとも一は芳香族であり、その他の環式環はシクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリールおよび／またはヘテロシクリルであり得る。
【００３８】
オルト、メタ、パラの語は、１，２−、１，３−、および１，４−二置換ベンゼンにそれぞれ適用される。たとえば、１，２−ジメチルベンゼンおよびオルト−ジメチルベンゼンという名称は同義である。
【００３９】
「ヘテロシクリル」または「ヘテロ環基」の語は、３から１０員環構造、より好ましくは３から７員環であって、その環構造が１から４個のヘテロ原子を含むものを称する。ヘテロ環はまた多環であることができる。ヘテロシクリル基は、たとえば、アゼチジン、アゼピン、チオフェン、チアントレン、フラン、ピラン、イソベンゾフラン、クロメン、キサンチン、フェノキサチン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、イソチアゾール、イソキサゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、インダゾール、プリン、キノリジン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、ピリミジン、フェナントロリン、フェナジン、フェナルサジン、フェノチアジン、フラザン、フェノキサジン、ピロリジン、オキソラン、チオラン、オキサゾール、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、ラクトン類、アゼチジノン類およびピロリジノン類といったラクタム類、スルタム類、スルトン類、などを含む。ヘテロ環式環は、一個以上の位置で、上記のような置換基、たとえば、ハロゲン、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスホネート、ホスフィネート、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、ケトン、アルデヒド、エステル、ヘテロシクリル、芳香族またはヘテロ芳香族部分、−ＣＦ３、−ＣＮ、などで置換され得る。
【００４０】
「ポリシクリル」または「多環基」の語は、たとえば二個以上の炭素が二つの隣接する環に共通し、それらの環は「融合環」である、二個以上の環 （たとえば， シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリールおよび／または ヘテロシクリル）を称する。隣接しない原子を介して結合した環は「架橋」環と称する。多環のうちの環のそれぞれは、上記のような置換基、たとえば、ハロゲン、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスホネート、ホスフィネート、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、ケトン、アルデヒド、エステル、ヘテロシクリル、芳香族またはヘテロ芳香族部分、−ＣＦ３、−ＣＮ、などで置換され得る。
【００４１】
ここで用いられる「炭素環」の語は、環の各原子が炭素である芳香族または非芳香族環を称する。
【００４２】
ここで用いられる「ニトロ」の語は−ＮＯ２を意味する;「ハロゲン」の語は−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−Ｉを示す;「スルフヒドリル」の語は−ＳＨを意味する;「ヒドロキシル」の語は−ＯＨを意味する;および「スルホニル」の語は−ＳＯ２−を意味する。
【００４３】
「アミン」および「アミノ」の語は本分野で認められており、非置換および置換アミンの両方、たとえば、下記の一般式で表すことができる部分を称する:
【化３】
2005526133.tif 000004
【００４４】
ここでＲ９、Ｒ１０、およびＲ'１０はそれぞれ独立に、原子価則によって許容される基を表す。
【００４５】
「アシルアミノ」の語は本分野で認められており、下記の一般式で表すことができる部分を称する:
【化４】
2005526133.tif 000005
【００４６】
ここでＲ９は上記で定義された通りであり、Ｒ'１１は水素、アルキル、アルケニル、または−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８を表し、ｍおよびＲ８は上記で定義された通りである。
【００４７】
「アミド」は、アミノ置換カルボニルとして本分野で認められており、下記の一般式で表すことができる部分を含む:
【化５】
2005526133.tif 000006
【００４８】
ここでＲ９、Ｒ１０は上記で定義された通りである。アミドの好ましい実施形態は、不安定である可能性があるイミドは含まない。
【００４９】
「アルキルチオ」の語は、硫黄ラジカルが結合した、上記で定義された通りのアルキル基を称する。好ましい実施形態では、「アルキルチオ」部分はＳ−アルキル、−Ｓ−アルケニル、−Ｓ−アルキニル、および−Ｓ−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８のうちの一つで表され、ｍおよびＲ８は上記で定義された通りである。代表的なアルキルチオ基は、メチルチオ、エチルチオ、などを含む。
【００５０】
「カルボニル」の語は本分野で認められており、下記の一般式で表すことができる部分を含む:
【化６】
2005526133.tif 000007
【００５１】
ここでＸは結合であるかまたは酸素または硫黄を表し、Ｒ１１は水素、アルキル、アルケニル、−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８、または医薬的に許容される塩を表し、Ｒ'１１は水素、アルキル、アルケニル、または−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８を表し、ｍおよびＲ８は上記で定義された通りである。Ｘが酸素であってＲ１１またはＲ'１１が水素でない場合、この式は「エステル」を表す。Ｘが酸素であり、Ｒ１１が上記で定義された通りである場合は、この部分はここではカルボキシル基と呼ばれ、特にＲ１１が水素である場合、この式は「カルボン酸」を表す。Ｘが酸素であり、Ｒ'１１が水素である場合、この式は「ギ酸」を表す。一般に、上記の式の酸素原子が硫黄によって置換される場合、この式は「チオールカルボニル」基を表す。Ｘが硫黄であってＲ１１またはＲ'１１が水素でない場合、この式は「チオールエステル」を表す。Ｘが硫黄であってＲ１１が水素である場合、この式は「チオールカルボン酸」を表す。Ｘが硫黄であってＲ'１１が水素である場合、この式は「チオールギ酸」を表す。一方、Ｘが結合であり、Ｒ１１が水素でない場合、上記の式は「ケトン」基を表す。Ｘが結合であり、Ｒ１１が水素である場合、上記の式は「アルデヒド」基を表す。
【００５２】
ここで用いられる「アルコキシル」またはアルコキシ」の語は、酸素ラジカルが結合した、上記で定義された通りのアルキル基を称する。代表的なアルコキシル基は、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどを含む。「エーテル」は、一個の酸素によって共有結合で連結された二個の炭化水素である。したがって、アルキルの、そのアルキルをエーテルにする置換基は、アルコキシルであるかまたはそれに類似しており、たとえば−Ｏ−アルキル、−Ｏ−アルケニル、−Ｏ−アルキニル、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８のうちの一つで表すことができ、ｍおよびＲ８は上記で定義された通りである。
【００５３】
「スルホネート」の語は本分野で認められており、下記の一般式で表すことができる部分を含む:
【化７】
2005526133.tif 000008
【００５４】
ここでＲ４１は、電子対、水素、アルキル、シクロアルキル、またはアリールである。
【００５５】
トリフリル、トシル、メシル、およびノナフリルの語は本分野で認められており、トリフルオロメタンスルホニル、ｐ−トルエンスルホニル、メタンスルホニル、およびノナフルオロブタンスルホニル基をそれぞれ称する。トリフレート、トシレート、メシレート、およびノナフレートの語は本分野で認められており、トリフルオロメタンスルホネートエステル、ｐ−トルエンスルホネートエステル、メタンスルホネートエステル、およびノナフルオロブタンスルホネートエステル官能基、および前記の基を含む分子をそれぞれ称する。
【００５６】
Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｈ、Ｔｆ、Ｎｆ、Ｔｓ、Ｍｓと称する短縮形は、メチル、エチル、フェニル、トリフルオロメタンスルホニル、ノナフルオロブタンスルホニル、ｐ−トルエンスルホニル、およびメタンスルホニル、をそれぞれ表す。当業者である有機化学者によって利用される短縮形のより包括的な一覧は、Journal of Organic Chemistryの各巻の第１号に登場する; この一覧は典型的にはStandard List of Abbreviationsと題する表で提示される。前記一覧に含まれる短縮形、および当業者である有機化学者によって利用されるすべての短縮形は、参照によって本開示に含まれる。
【００５７】
「硫酸塩」の語は本分野で認められており、下記の一般式で表すことができる部分を含む：
【化８】
2005526133.tif 000009
【００５８】
ここでＲ４１は上記で定義された通りである。
【００５９】
「スルホニルアミノ」の語は本分野で認められており、下記の一般式で表すことができる部分を含む:
【化９】
2005526133.tif 000010
【００６０】
「スルファモイル」の語は本分野で認められており、下記の一般式で表すことができる部分を含む:
【化１０】
2005526133.tif 000011
【００６１】
ここで用いられる「スルホニル」の語は、下記の一般式で表すことができる部分を称する:
【化１１】
2005526133.tif 000012
【００６２】
ここでＲ４４は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、またはヘテロアリールから成る群から選択される。
【００６３】
ここで用いられる「スルホキシド」の語は、下記の一般式で表すことができる部分を称する:
【化１２】
2005526133.tif 000013
【００６４】
ここでＲ４４は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アラルキル、またはアリールから成る群から選択される。
【００６５】
「セレノアルキル」は、結合したセレノ基で置換されたアルキル基を称する。アルキル上で置換された典型的な「セレノエーテル」は、−Ｓｅ−アルキル、−Ｓｅ−アルケニル、−Ｓｅ−アルキニル、および−Ｓｅ−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ７のうち一つから選択され、ｍおよびＲ７は上記で定義される。
【００６６】
類似の置換はアルケニル基およびアルキニル基に行うことができ、たとえば、アミノアルケニル、アミノアルキニル、アミドアルケニル、アミドアルキニル、イミノアルケニル、イミノアルキニル、チオアルケニル、チオアルキニル、カルボニル−置換アルケニルまたはアルキニルを生じる。
【００６７】
ここで用いられる通り、たとえばアルキル、ｍ、ｎ、などといった個々の表現の定義は、それが任意の構造中で一回より多く存在する場合は、同一の構造中の他所での定義とは独立していることが意図される。
【００６８】
「置換」または「〜で置換された」は、そのような置換は置換原子および置換基の許容される原子価に基づくこと、および置換の結果として安定化合物が生じ、それはたとえば転位、環化、脱離、などによる変化を自然に起こさないこと、という黙示的但し書きを含むと理解される。
【００６９】
ここで用いられる通り、「置換された」の語は、有機化合物のすべての許容される置換基を含むと考えられる。幅広い解釈では、許容される置換基は、有機化合物の、非環式および環式、分枝および非分枝、炭素環式およびヘテロ環式、芳香族および非芳香族置換基を含む。例証となる置換基は、たとえば、上述のものを含む。許容される置換基は、適当な有機化合物について、一個またはそれ以上であってよく、さらに同一または異なっていてよい。本発明の目的のために、たとえば窒素といったヘテロ原子は、水素置換基および／またはここに記載の有機化合物のそのヘテロ原子の原子価を満足させる任意の許容される置換基を有していてよい。本発明は、許容される有機化合物の置換基によって何らかの方法で制限されることを意図しない。
【００７０】
ここで用いられる「保護基」の語句は、潜在的に反応性の官能基を、望ましくない化学的変化から守る一時的な置換基を意味する。そのような保護基の例は、カルボン酸のエステル、アルコールのシリル エーテル、および、アルデヒドおよびケトンのアセタールおよびケタールをそれぞれ含む。保護基の化学の分野は総説がある(Greene, T. W.; Wuts, P. G. M. Protective Groups in Organic Synthesis, 2nd ed.; Wiley: New York,1991)。
【００７１】
本発明の特定化合物は、特に幾何学的形または立体異性形で存在する可能性がある。本発明は、ｃｉｓ−およびｔｒａｎｓ−異性体、Ｒ−およびＳ−光学異性体、ジアステレオマー、（Ｄ）−異性体、（Ｌ）−異性体、そのラセミ混合物、およびその他の混合物を含むそのような化合物すべてを含む。別の不斉炭素原子が、アルキル基のような置換基中に存在し得る。そのような異性体のすべて、およびその混合物が本発明に含まれることが意図されている。
【００７２】
たとえば、本発明の化合物の特定の光学異性体が望ましい場合、不斉合成によってそれを調製することができ、キラルクロマトグラフィー法を用いてそれを単離することができ、またはキラル補助基を用いた誘導体化によって、得られたジアステレオマー混合物を分離し、さらに補助基を切断して純粋な目的の光学異性体をもたらすことができる。または、その分子がアミノ基のような塩基性官能基、またはカルボキシル基のような酸性官能基を含む場合、適当な光学活性酸または塩基を用いてジアステレオマー塩が形成され、その後、そのようにして形成されたジアステレオマーの分離を、本分野でよく知られている分画結晶化法またはクロマトグラフィー法によって行い、その結果、純粋な光学異性体が回収される。
【００７３】
上述の化合物の考えられる等価物は、他の面ではそれと合致し、それと同一の一般的性質を有し（たとえば、鎮痛薬として機能する）、オピオイド受容体への結合においてその化合物の効力に悪影響を及ぼさない、置換基の一以上の単純な変形が行われている化合物を含む。一般に、本発明の化合物は、たとえば下記に示す一般的反応スキームで説明される方法によって、またはその改変によって、容易に入手可能な開始材料、試薬、および従来の合成手順を用いて調製することができる。これらの反応においては、それ自体が既知であるがここでは言及されない変形を利用することも可能である。
【００７４】
本発明の目的のために、化学元素は、元素周期表、CAS版、Handbook of Chemistry and Physics, 67th Ed. , 1986-87， 内表紙に従って同定される。
【００７５】
本発明の化合物
ある実施形態では、本発明の化合物は下記の化学式Ａによって表される:
【化１３】
2005526133.tif 000014
【００７６】
ここで、
Ｚは、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アラルキル、ヘテロアラルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０、または固相担体への共有結合による連結鎖を表す;
Ａｒはアリールまたはヘテロアリールを表す;
Ｒは存在しないかまたは１、２、３、４、または５個存在する;
Ｒは、各存在ごとに独立して、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ハロゲン、ヘテロアラルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、アルキルアミノ、カルボン酸、カルボキシアミド、ニトロソ、ニトロ、スルフヒドリル、アルキルチオ、チオアルキル、シリル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホルミル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アルキルオキシカルボニル、アルケニルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ'は、各存在ごとに独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ８０は、各存在ごとに独立して、シクロアルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルを表す;
ｎは、各存在ごとに独立して、０から８の範囲から選択される整数である;
Ａによって表される化合物中の立体中心における絶対立体配置は、Ｒ、Ｓ、またはその混合物である;および
Ａによって表される化合物中のアルケニル部分の配置は、Ｅ、Ｚ、またはその混合物である。
【００７７】
ある実施形態では、本発明の化合物はＡおよび付随する定義によって表され、ここでＺは、２−メトキシエチル、２−ヒドロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、２−メチルプロピル、ブチル、アリル、４−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシプロピル、（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル、２−（ピリド−４−イル）エチル、または２−（２−フルオロフェニル）エチルを表す。
【００７８】
ある実施形態では、本発明の化合物はＡおよび付随する定義によって表され、ここでＡｒは、４−アリルオキシフェニル、４−プロピルオキシフェニル、２−アリルオキシフェニル、３，４−（メチレンジオキシ）フェニル、４−（トリフルオロメトキシ）フェニル、４−メチルフェニル、４−メトキシフェニル、４−カルボキシフェニル、または４−フルオロフェニルを表す。
【００７９】
ある実施形態では、本発明の化合物はＡおよび付随する定義によって表され、ここでＲは存在しない。
【００８０】
ある実施形態では、本発明の化合物はＡおよび付随する定義によって表され、ここでＲ'はＨを表す。
【００８１】
ある実施形態では、本発明の化合物はＡおよび付随する定義によって表され、ここでＺは、２−メトキシエチル、２−ヒドロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、２−メチルプロピル、ブチル、アリル、４−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシプロピル、（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル、２−（ピリド−４−イル）エチル、または２−（２−フルオロフェニル）エチルを表し;さらにＡｒは、４−アリルオキシフェニル、４−プロピルオキシフェニル、２−アリルオキシフェニル、３，４−（メチレンジオキシ）フェニル、４−（トリフルオロメトキシ）フェニル、４−メチルフェニル、４−メトキシフェニル、４−カルボキシフェニル、または４−フルオロフェニルを表す。
【００８２】
ある実施形態では、本発明の化合物はＡおよび付随する定義によって表され、ここでＺは、２−メトキシエチル、２−ヒドロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、２−メチルプロピル、ブチル、アリル、４−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシプロピル、（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル、２−（ピリド−４−イル）エチル、または２−（２−フルオロフェニル）エチルを表し;Ａｒは、４−アリルオキシフェニル、４−プロピルオキシフェニル、２−アリルオキシフェニル、３，４−（メチレンジオキシ）フェニル、４−（トリフルオロメトキシ）フェニル、４−メチルフェニル、４−メトキシフェニル、４−カルボキシフェニル、または４−フルオロフェニルを表し;さらにＲは存在しない。
【００８３】
ある実施形態では、本発明の化合物はＡおよび付随する定義によって表され、ここでＺは、２−メトキシエチル、２−ヒドロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、２−メチルプロピル、ブチル、アリル、４−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシプロピル、（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル、２−（ピリド−４−イル）エチル、または２−（２−フルオロフェニル）エチルを表し;Ａｒは、４−アリルオキシフェニル、４−プロピルオキシフェニル、２−アリルオキシフェニル、３，４−（メチレンジオキシ）フェニル、４−（トリフルオロメトキシ）フェニル、４−メチルフェニル、４−メトキシフェニル、４−カルボキシフェニル、または４−フルオロフェニルを表し;Ｒは存在せず;さらにＲ'はＨを表す。
【００８４】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法では、構造Ａに記載の特定化合物は、１μＭ未満の、より好ましくは１００ｎＭ未満の、さらに最も好ましくは１０ｎＭ未満のＩＣ５０値を有する。
【００８５】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法では、構造Ａに記載の、特定化合物は、１μＭ未満の、より好ましくは１００ｎＭ未満の、さらに最も好ましくは１０ｎＭ未満のＥＣ５０値を有する。
【００８６】
ある実施形態では、本発明の化合物は以下の化学式Ｂによって表される: 
【化１４】
2005526133.tif 000015
【００８７】
ここで、
Ｚは、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アラルキル、ヘテロアラルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０、または固相担体への共有結合による連結鎖を表す;
Ｘは、アリール、ヘテロアリール、（アリール）アルケニル、（ヘテロアリール）アルケニル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒは存在しないかまたは１、２、３、または４個存在する;
Ｒは、各存在ごとに独立して、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ハロゲン、ヘテロアラルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、アルキルアミノ、カルボン酸、カルボキシアミド、ニトロソ、ニトロ、スルフヒドリル、アルキルチオ、チオアルキル、シリル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホルミル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アルキルオキシカルボニル、アルケニルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ'は、各存在ごとに独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ８０は、各存在ごとに独立して、シクロアルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルを表す;
ｎは、各存在ごとに独立して、０から８の範囲から選択される整数である;
Ｂで表される化合物中の立体中心における絶対立体配置は、Ｒ、Ｓ、またはその混合物である;および
Ｂによって表される化合物中のアルケニル部分の配置は、Ｅ、Ｚ、またはその混合物である。
【００８８】
ある実施形態では、本発明の化合物はＢおよび付随する定義によって表され、ここでＺは、２−メトキシエチル、２−ヒドロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、エチル、アリル、４−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシプロピル、（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル、または２−（２−フルオロフェニル）エチルを表す。
【００８９】
ある実施形態では、本発明の化合物はＢおよび付随する定義によって表され、ここでＸは、２−フェニルエチル、（Ｅ）−（２−メトキシフェニル）ＣＨ＝ＣＨ−、４−アリルオキシフェニル、３，４−（メチレンジオキシ）フェニル、（Ｅ）−（４−メトキシフェニル）ＣＨ＝ＣＨ−、４−フルオロフェニル、３，４−ジフルオロフェニル、または４−（トリフルオロメトキシ）フェニルを表す。
【００９０】
ある実施形態では、本発明の化合物はＢおよび付随する定義によって表され、ここでＲは存在しない。
【００９１】
ある実施形態では、本発明の化合物はＢおよび付随する定義によって表され、ここでＲ'はＨを表す。
【００９２】
ある実施形態では、本発明の化合物はＢおよび付随する定義によって表され、ここでＺは、２−メトキシエチル、２−ヒドロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、エチル、アリル、４−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシプロピル、（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル、または２−（２−フルオロフェニル）エチルを表し；さらにＸは、２−フェニルエチル、（Ｅ）−（２−メトキシフェニル）ＣＨ＝ＣＨ−、４−アリルオキシフェニル、３，４−（メチレンジオキシ）フェニル、（Ｅ）−（４−メトキシフェニル）ＣＨ＝ＣＨ−、４−フルオロフェニル、３，４−ジフルオロフェニル、または４−（トリフルオロメトキシ）フェニルを表す。
【００９３】
ある実施形態では、本発明の化合物はＡおよび付随する定義によって表され、ここでＺは、２−メトキシエチル、２−ヒドロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、エチル、アリル、４−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシプロピル、（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル、または２−（２−フルオロフェニル）エチルを表し;Ｘは、２−フェニルエチル、（Ｅ）−（２−メトキシフェニル）ＣＨ＝ＣＨ−、４−アリルオキシフェニル、３，４−（メチレンジオキシ）フェニル、（Ｅ）−（４−メトキシフェニル）ＣＨ＝ＣＨ−、４−フルオロフェニル、３，４−ジフルオロフェニル、または４−（トリフルオロメトキシ）フェニルを表し;さらにＲは存在しない。
【００９４】
ある実施形態では、本発明の化合物はＢおよび付随する定義によって表され、ここでＺは、２−メトキシエチル、２−ヒドロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、エチル、アリル、４−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシプロピル、（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル、または２−（２−フルオロフェニル）エチルを表し;Ｘは、２−フェニルエチル、（Ｅ）−（２−メトキシフェニル）ＣＨ＝ＣＨ−、４−アリルオキシフェニル、３，４−（メチレンジオキシ）フェニル、（Ｅ）−（４−メトキシフェニル）ＣＨ＝ＣＨ−、４−フルオロフェニル、３，４−ジフルオロフェニル、または４−（トリフルオロメトキシ）フェニルを表し;Ｒは存在せず;さらにＲ'はＨを表す。
【００９５】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法では、構造Ｂに記載の特定化合物は、１μＭ未満の、より好ましくは１００ｎＭ未満の、さらに最も好ましくは１０ｎＭ未満のＩＣ５０値を有する。
【００９６】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法では、構造Ｂに記載の、特定化合物は、１μＭ未満の、より好ましくは１００ｎＭ未満の、さらに最も好ましくは１０ｎＭ未満のＥＣ５０値を有する。
【００９７】
ある実施形態では、本発明の化合物は以下の化学式Ｃで表される：
【化１５】
2005526133.tif 000016
【００９８】
ここで、
ＸはＣ（Ｒ'）２またはＯを表す;
Ａｒはアリールまたはヘテロアリールを表す;
Ｒは存在しないかまたは１、２、３、または４個存在する;
Ｒは、各存在ごとに独立して、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ハロゲン、ヘテロアラルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、アルキルアミノ、カルボン酸、カルボキシアミド、ニトロソ、ニトロ、スルフヒドリル、アルキルチオ、チオアルキル、シリル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホルミル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アルキルオキシカルボニル、アルケニルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ'は、各存在ごとに独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ８０は、各存在ごとに独立して、シクロアルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルを表す;
ｆは１、２、または３を表す;
ｎは、各存在ごとに独立して、０から８の範囲から選択される整数である;
ｚは０、１、または２を表す;ただしｚが０のとき、ＸはＣ（Ｒ'）２である;
Ｃで表される化合物中の立体中心における絶対立体配置は、Ｒ、Ｓ、またはその混合物である;および
Ｃによって表される化合物中のアルケニル部分の配置は、Ｅ、Ｚ、またはその混合物である。
【００９９】
ある実施形態では、本発明の化合物はＣおよび付随する定義によって表され、ここでＲは存在しない。
【０１００】
ある実施形態では、本発明の化合物はＣおよび付随する定義によって表され、ここでＲ'はＨを表す。
【０１０１】
ある実施形態では、本発明の化合物はＣおよび付随する定義によって表され、ここでＲは存在せず；さらにＲ'はＨを表す。
【０１０２】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法では、構造Ｃに記載の特定化合物は、１μＭ未満の、より好ましくは１００ｎＭ未満の、さらに最も好ましくは１０ｎＭ未満のＩＣ５０値を有する。
【０１０３】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法では、構造Ｃに記載の、特定化合物は、１μＭ未満の、より好ましくは１００ｎＭ未満の、さらに最も好ましくは１０ｎＭ未満のＥＣ５０値を有する。
【０１０４】
ある実施形態では、本発明の化合物は以下の化学式Ｄで表される：
【化１６】
2005526133.tif 000017
【０１０５】
ここで、
ＸはＣ（Ｒ'）２またはＯを表す;
Ｒは、各存在ごとに独立して、存在しないかまたは１、２、３、または４個存在する; 
Ｒは、各存在ごとに独立して、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ハロゲン、ヘテロアラルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、アルキルアミノ、カルボン酸、カルボキシアミド、ニトロソ、ニトロ、スルフヒドリル、アルキルチオ、チオアルキル、シリル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホルミル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アルキルオキシカルボニル、アルケニルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ'は、各存在ごとに独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ８０は、各存在ごとに独立して、シクロアルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルを表す;
ｆは１、２、または３を表す；
ｎは、各存在ごとに独立して、０から８の範囲から選択される整数である;
ｚは０、１、または２を表す;ただしｚが０のとき、ＸはＣ（Ｒ'）２である;
Ｄで表される化合物中の立体中心における絶対立体配置は、Ｒ、Ｓ、またはその混合物である;および
Ｄによって表される化合物中のアルケニル部分の配置は、Ｅ、Ｚ、またはその混合物である。
【０１０６】
ある実施形態では、本発明の化合物はＤおよび付随する定義によって表され、ここでＲは存在しない。
【０１０７】
ある実施形態では、本発明の化合物はＤおよび付随する定義によって表され、ここでＲ'はＨを表す。
【０１０８】
ある実施形態では、本発明の化合物はＤおよび付随する定義によって表され、ここでＲは存在せず;さらにＲ'はＨを表す。
【０１０９】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法では、構造Ｄに記載の、特定化合物は、１μＭ未満の、より好ましくは１００ｎＭ未満の、さらに最も好ましくは１０ｎＭ未満のＩＣ５０値を有する。
【０１１０】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法では、構造Ｄに記載の、特定化合物は、１μＭ未満の、より好ましくは１００ｎＭ未満の、さらに最も好ましくは１０ｎＭ未満のＥＣ５０値を有する。
【０１１１】
ある実施形態では、本発明の化合物は以下の化学式Ｅで表される：
【化１７】
2005526133.tif 000018
【０１１２】
ここで、
ＸはＣ（Ｒ'）２またはＯを表す;
Ｒは、各存在ごとに独立して、存在しないかまたは１、２、３、または４個存在する; 
Ｒは、各存在ごとに独立して、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ハロゲン、ヘテロアラルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、アルキルアミノ、カルボン酸、カルボキシアミド、ニトロソ、ニトロ、スルフヒドリル、アルキルチオ、チオアルキル、シリル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホルミル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アルキルオキシカルボニル、アルケニルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ'は、各存在ごとに独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ８０は、各存在ごとに独立して、シクロアルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルを表す;
ｆは０または１を表す；
ｎは、各存在ごとに独立して、０から８の範囲から選択される整数である;
ｚは０、１、または２を表す;ただしｚが０のとき、ＸはＣ（Ｒ'）２である;
Ｅで表される化合物中の立体中心における絶対立体配置は、Ｒ、Ｓ、またはその混合物である;および
Ｅによって表される化合物中のアルケニル部分の配置は、Ｅ、Ｚ、またはその混合物である。
【０１１３】
ある実施形態では、本発明の化合物はＥおよび付随する定義によって表され、ここでＲは存在しない。
【０１１４】
ある実施形態では、本発明の化合物はＥおよび付随する定義によって表され、ここでＲ'はＨを表す。
【０１１５】
ある実施形態では、本発明の化合物はＥおよび付随する定義によって表され、ここでＲは存在せず；さらにＲ'はＨを表す。
【０１１６】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法では、構造Ｅに記載の、特定化合物は、１μＭ未満の、より好ましくは１００ｎＭ未満の、さらに最も好ましくは１０ｎＭ未満のＩＣ５０値を有する。
【０１１７】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法では、構造Ｅに記載の、特定化合物は、１μＭ未満の、より好ましくは１００ｎＭ未満の、さらに最も好ましくは１０ｎＭ未満のＥＣ５０値を有する。
【０１１８】
ある実施形態では、本発明の化合物は以下の化学式Ｆで表される：
【化１８】
2005526133.tif 000019
【０１１９】
ここで、
ＸはＣ（Ｒ'）２またはＯを表す;
Ｒは、各存在ごとに独立して、存在しないかまたは１、２、３、または４個存在する; 
Ｒは、各存在ごとに独立して、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ハロゲン、ヘテロアラルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、アルキルアミノ、カルボン酸、カルボキシアミド、ニトロソ、ニトロ、スルフヒドリル、アルキルチオ、チオアルキル、シリル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホルミル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アルキルオキシカルボニル、アルケニルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ'は、各存在ごとに独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ８０は、各存在ごとに独立して、シクロアルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルを表す;
ｆは１、２、または３を表す；
ｎは、各存在ごとに独立して、０から８の範囲から選択される整数である;
ｚは０、１、または２を表す;ただしｚが０のとき、ＸはＣ（Ｒ'）２である;
Ｆで表される化合物中の立体中心における絶対立体配置は、Ｒ、Ｓ、またはその混合物である;および
Ｆによって表される化合物中のアルケニル部分の配置は、Ｅ、Ｚ、またはその混合物である。
【０１２０】
ある実施形態では、本発明の化合物はＦおよび付随する定義によって表され、ここでＲは存在しない。
【０１２１】
ある実施形態では、本発明の化合物はＦおよび付随する定義によって表され、ここでＲ'はＨを表す。
【０１２２】
ある実施形態では、本発明の化合物はＦおよび付随する定義によって表され、ここでＲは存在せず；さらにＲ'はＨを表す。
【０１２３】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法では、構造Ｆに記載の、特定化合物は、１μＭ未満の、より好ましくは１００ｎＭ未満の、さらに最も好ましくは１０ｎＭ未満のＩＣ５０値を有する。
【０１２４】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法では、構造Ｆに記載の、特定化合物は、１μＭ未満の、より好ましくは１００ｎＭ未満の、さらに最も好ましくは１０ｎＭ未満のＥＣ５０値を有する。
【０１２５】
ある実施形態では、本発明の化合物は以下の化学式Ｇで表される：
【化１９】
2005526133.tif 000020
【０１２６】
ここで、
ＸはＣ（Ｒ'）２またはＯを表す;
Ｒは、各存在ごとに独立して、存在しないかまたは１、２、３、または４個存在する; 
Ｒは、各存在ごとに独立して、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ハロゲン、ヘテロアラルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、アルキルアミノ、カルボン酸、カルボキシアミド、ニトロソ、ニトロ、スルフヒドリル、アルキルチオ、チオアルキル、シリル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホルミル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アルキルオキシカルボニル、アルケニルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ'は、各存在ごとに独立して、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８０を表す;
Ｒ８０は、各存在ごとに独立して、シクロアルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルを表す;
ｆは０または１を表す；
ｎは、各存在ごとに独立して、０から８の範囲から選択される整数である;
ｚは０、１、または２を表す;ただしｚが０のとき、ＸはＣ（Ｒ'）２である;
Ｇで表される化合物中の立体中心における絶対立体配置は、Ｒ、Ｓ、またはその混合物である;および
Ｇによって表される化合物中のアルケニル部分の配置は、Ｅ、Ｚ、またはその混合物である。
【０１２７】
ある実施形態では、本発明の化合物はＧおよび付随する定義によって表され、ここでＲは存在しない。
【０１２８】
ある実施形態では、本発明の化合物はＧおよび付随する定義によって表され、ここでＲ'はＨを表す。
【０１２９】
ある実施形態では、本発明の化合物はＧおよび付随する定義によって表され、ここでＲは存在せず；さらにＲ'はＨを表す。
【０１３０】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法では、構造Ｇに記載の、特定化合物は、１μＭ未満の、より好ましくは１００ｎＭ未満の、さらに最も好ましくは１０ｎＭ未満のＩＣ５０値を有する。
【０１３１】
哺乳類アナンダミド輸送体に基づく測定法では、構造Ｇに記載の、特定化合物は、１μＭ未満の、より好ましくは１００ｎＭ未満の、さらに最も好ましくは１０ｎＭ未満のＥＣ５０値を有する。
【０１３２】
ある実施形態では、本発明は、上記で概説した構造のうち任意のもので表される化合物であって、ここで前記化合物が単一の立体異性体であるものに関する。
【０１３３】
ある実施形態では、本発明は、上記で概説した構造のうち任意のもので表される化合物;および医薬的に許容される賦形剤を含む製剤に関する。
【０１３４】
ある実施形態では、本発明は哺乳類アナンダミド輸送体に対するリガンドに関するが、ここでそのリガンドは、上記で概説した構造のうち任意のもの、およびそれらの構造のうちの一つに付随する定義の組のうち任意のものによって表される。ある実施形態では、本発明の化合物は、哺乳類アナンダミド輸送体のアンタゴニストまたはアゴニストである。いずれにしろ、本発明の化合物は好ましくは、哺乳類アナンダミド輸送体に対する効果を、約１μＭ未満の濃度で、より好ましくは約１００ｎＭ未満の濃度で、さらに最も好ましくは１０ｎＭ未満の濃度で発揮する。
【０１３５】
本発明は、本発明の化合物を含む医薬製剤を検討する。ある実施形態では、その医薬製剤は哺乳類アナンダミド輸送体に選択的に作用する本発明の化合物を含み、それによって、哺乳類アナンダミド輸送体を伴う生化学または生理的過程が少なくとも一部原因である急性または慢性の病気、疾患、または弊害に対して治療効果を有する。たとえば、背景技術（上記参照）は、哺乳類アナンダミド輸送体を伴う生化学または生理的過程によって引き起こされるかまたは悪化する急性または慢性の病気、疾患、または弊害の例を示す。当業者は、科学文献を参照することにより、哺乳類アナンダミド輸送体を伴う生化学または生理的過程によって引き起こされるかまたは悪化する急性または慢性の病気、疾患、または弊害のより包括的な一覧を蓄積することができる。本発明は、本発明の化合物を含む医薬製剤が、前述の急性または慢性の病気、疾患、または弊害に対して薬理効果を有することを考えている。
【０１３６】
ある実施形態では、本発明は、喘息、神経障害性疼痛、持続痛、炎症性疼痛、多動、高血圧、脳虚血、パーキンソン病、痙縮、トゥーレット症候群、統合失調症、出血性ショック、敗血性ショック、心臓ショック、偏頭痛、ホートン頭痛、多発性硬化症、拒食症、ＡＩＤＳ、消耗症候群、臓器拒絶、自己免疫疾患、アレルギー、関節炎、クローン病、悪性神経膠種、神経変性疾患、ハンチントン舞踏病、緑内障、吐き気、不安症、精神疾患、注意欠陥多動性障害、早漏、または卒中に罹患した哺乳類の、前記哺乳類に治療的効果量の本発明の化合物を投与することを含む、治療方法に関する。
【０１３７】
本発明の治療方法は、予防的、治療的、または治癒的であってよい。本発明の治療方法が、個体が疾患または障害の何らかの臨床兆候または症状を示す前に実施される場合、それらは予防的であると考えられる。予防的治療は、たとえば、疾患または障害を有することが疑われる個体、あるいは疾患または障害を発症するリスク高いことが疑われる個体について実施することができる。いくつかの実施形態では、予防的方法は、望ましくない血管収縮によって特徴づけられる疾患または障害を発症するリスクを低下させるかまたは消失させる。いくつかの実施形態では、予防的方法は、望ましくない炎症によって特徴づけられる疾患または障害を発症するリスクを低下させるかまたは消失させる。いくつかの実施形態では、予防的方法は、望ましくない痛みによって特徴づけられる疾患または障害を発症するリスクを低下させるかまたは消失させる。いくつかの実施形態では、予防的方法は、望ましくない臓器機能障害によって特徴づけられる疾患または障害を発症するリスクを低下させるかまたは消失させる。
【０１３８】
本発明の治療方法が疾患または障害の少なくとも一の臨床兆候または症状をすでに示している個体に実施される場合、その方法は治療的または治癒的であり得る。本発明の治療的方法は、疾患または障害の少なくとも一の症状における検出可能な変化を結果として生じる方法である。好ましくは、その検出可能な変化は、症状の改善である。いくつかの実施形態では、治療的方法は、望ましくない血管収縮を低下させるかまたは消失させる。いくつかの実施形態では、本発明の治療的方法は、望ましくない炎症を低下させるかまたは消失させる。いくつかの実施形態では、本発明の治療的方法は、望ましくない痛みを低下させるかまたは消失させる。いくつかの実施形態では、治療的方法は、望ましくない臓器機能障害を低下させるかまたは消失させる。
【０１３９】
治癒的方法は、疾患または障害の少なくとも一の症状の消失を結果として生じる治療的方法である。好ましくは、治癒的方法は、疾患または障害の原因を消失させる。いくつかの実施形態では、治癒的方法は、望ましくない血管収縮を消失させる。いくつかの実施形態では、治癒的方法は、望ましくない炎症を消失させる。いくつかの実施形態では、治癒的方法は、望ましくない痛みを消失させる。いくつかの実施形態では、治癒的方法は、望ましくない臓器機能障害を消失させる。
【０１４０】
いくつかの実施形態では、本発明の治療方法は、意図される結果をもたらすのに十分な量で、本発明の化合物を個体に投与することを含む。たとえば、いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、血管緊張を調節するのに十分な量で;炎症を調節するのに十分な量で;感覚神経活性を調節するのに十分な量で;鎮痛を達成するのに十分な量で;および／または臓器機能を調節するのに十分な量で投与される。いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、治療されている疾患、障害、または症状における検出可能な変化を達成するのに十分な量で個体に投与される。その変化は、治療された個体の全身にわたるかまたは、治療された個体の特定の部位内または体表上の変化であり得る。したがって、本発明の治療方法は、全身治療および局所治療を含む。
【０１４１】
本発明の治療方法は、個体への単回投与、または複数回投与を含んでいてよい。治療および投与の計画は、本分野でよく知られていて広く用いられているものに従って計画および実施することができる。個々の治療計画は、治療を受ける個体および、関与する疾患、障害、および／または症状に合わせて作成することができると考えられる。しかし、そのような個別のオーダーメイドは十分に当業者の技術範囲内であり、必要以上のまたは過剰な実験を含まない。
【０１４２】
本発明はまた、哺乳類アナンダミド輸送体の活性に影響を及ぼす本発明の化合物を含むキットを提供する。いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、キットの唯一の成分としてキットで提供される。いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、組成物の一部として存在する。いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、別の化合物、溶液、またはそこに含まれる化合物および／または組成物の使用のために必要であるかまたは望ましい器具と組み合わせて提供される。このように、本発明のキットは、すべての必要な化合物、溶液、ならびにそこに含まれる化合物および組成物の個体への投与のための用具を含んでいてよく、またはそのキットは本発明の化合物のｉｎ ｖｉｔｒｏでの使用のために設計することができる。
【０１４３】
細胞受容体での生化学活性、およびその活性を検出するための測定法
試薬を試料に添加し、試料および試薬の測定を行って、試薬によって刺激された試料の特性を測定する、測定の過程は本分野でよく知られている。たとえば、そのような測定過程の一つは、発色測定法において生物試料または溶液中に存在する酵素の量を測定することに関する。そのような測定法は、反応溶液中の有色物質の生成に基づく。反応は、酵素が無色の発色基質の有色の産物への変換を触媒する際に起こる。
【０１４４】
本発明において有用であるもう一つの反応は、本分野でよく知られている放射性リガンド結合測定法といわれる技術を利用する、リガンドが生物学的受容体へ結合する能力の測定に関する。この測定法は、標的受容体への放射性リガンドの特異的結合を、その総結合成分と非特異的結合成分の線引きによって正確に特定する。総結合は、受容体調製物 （細胞ホモジネートまたは再構成受容体）中に結合した放射性リガンドの、結合していないものからの迅速分離後に残る放射性リガンドの量と定義される。非特異的結合成分は、受容体、放射性リガンド、および過剰量の非標識リガンドから成る反応混合物の分離後に残る放射性リガンドの量と定義される。この条件下で、残っている放射性リガンドだけが、受容体以外の成分に結合しているものを表す。結合している特異的放射性リガンドは、総放射能結合から非特異的結合を引くことによって決定される。μオピオイド受容体についての放射性リガンド結合測定法 の具体的な例に関しては、Wang, J. B. et al.FEBS Letters 1994, 338, 217を参照。
【０１４５】
本発明において有用である測定法は、活性化がその後の細胞内現象を開始し、その中でカルシウムイオンの細胞内蓄積が二次メッセンジャーとしての用途のために放出される、受容体の活性を測定することに関する。一部のＧタンパク質結合型受容体の活性化は、イノシトール三リン酸（ＩＰ３、Ｇタンパク質結合型受容体二次メッセンジャー）の生成を、ホスファチジルイノシトールのホスホリパーゼＣ媒介加水分解を介して促進する(
Berridge and Irvine (1984); Nature 312: 315-21)。ＩＰ３は、次に細胞内カルシウムイオン蓄積の放出を促進する。
【０１４６】
細胞内蓄積からのカルシウムイオンの放出によって生じる細胞質カルシウムイオンレベルの変化は、Ｇタンパク質結合型受容体機能を測定するのに用いられる。これは別の種類の間接的測定法である。Ｇタンパク質結合型受容体の中には、ムスカリン性アセチルコリン受容体（ｍＡＣｈＲ）、アドレナリン作動性受容体、シグマ受容体、セロトニン受容体、ドーパミン受容体、アンギオテンシン受容体、アデノシン受容体、ブラジキニン受容体、代謝調節型興奮性アミノ酸受容体などがある。そのようなＧタンパク質結合型受容体を発現している細胞は、細胞内蓄積およびイオンチャンネルの活性化経由の両方からの寄与の結果として、細胞質カルシウムレベルの上昇を示し得るが、その場合は、内部蓄積からのカルシウム放出の結果として生じる蛍光反応を区別するため、必要に応じてＥＧＴＡのようなキレート剤を含む、カルシウムを含まない緩衝液中でそのような測定法を実施するのが、必要ではないが好ましい。別の種類の間接的測定法は、活性化された際に結果として細胞内環状ヌクレオチド、たとえば、ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰのレベルに変化を生じる、受容体の活性を測定することを含む。たとえば、一部のドーパミン、セロトニン、代謝調節型グルタミン酸受容体、およびムスカリン性アセチルコリン受容体の活性化は、細胞質のｃＡＭＰまたはｃＧＭＰレベルの低下を結果として生じる。
【０１４７】
さらに、ｃＡＭＰまたはｃＧＭＰの結合による活性化の際に陽イオンが透過可能になる、環状ヌクレオチド作動性イオンチャンネル、たとえば、桿光受容体細胞チャンネルおよび嗅神経細胞チャンネルがある[Altenhofen, W. et al.(1991) Proc. Natl. Acad. Sci U. S. A. 88: 9868-9872およびDhallan et al. (1990) Nature 347: 184-187]。受容体または嗅神経細胞チャンネルの環状ヌクレオチド活性化の量における変化によって引き起こされる細胞質イオンレベルの変化は、活性化された際にｃＡＭＰまたはｃＧＭＰレベルに変化を引き起こす受容体の機能を測定するのに用いられる。受容体の活性化が環状ヌクレオチドレベルの低下を結果として生じる場合は、測定法において細胞に受容体活性化化合物を加える前に、たとえばフォルスコリンといった、細胞内環状ヌクレオチドレベルを上昇させる物質に細胞を曝露することが好ましい。この種類の測定法用の細胞は、環状ヌクレオチド作動性イオンチャンネルをコードするＤＮＡおよび受容体（たとえば、特定の代謝調節型グルタミン酸受容体、ムスカリン性アセチルコリン受容体、ドーパミン受容体、セロトニン受容体など、活性化された際に細胞質中の環状ヌクレオチドレベルの変化を引き起こすもの、をコードするＤＮＡを用いた宿主細胞の同時遺伝子導入によって作製することができる。
【０１４８】
たとえば作動性カルシウムチャンネルを開くことによって活性化の際にカルシウムの細胞内濃度を直接上昇させるか、または、たとえば二次メッセンジャーとしてＣａ２＋を利用する反応を開始させることによって細胞内カルシウムの濃度に間接的に影響を与えることができる受容体タンパク質（たとえばＧタンパク質結合型受容体）を発現している任意の細胞は、測定法の基礎を形成することができる。そのような受容体またはイオンチャンネルを内生的に発現している細胞、および、一種類以上のそのような細胞表面タンパク質をコードする適当なベクターを用いて遺伝子導入することができる細胞は、当業者に既知であるかまたは当業者によって同定され得る。内因性イオンチャンネルおよび／または受容体活性を発現する任意の細胞を本質的には用いることができるが、単一の種類のイオンチャンネルまたは受容体を主に発現するように、そのようなイオンチャンネルおよび／または受容体をコードする異種ＤＮＡを用いて形質転換または遺伝子導入された細胞を用いることが好ましい。異種細胞表面タンパク質を発現するように遺伝子組み換えされ得る多数の細胞が既知である。そのような細胞は、ベビーハムスター腎（ＢＨＫ）細胞（ATCC No. CCL10）、マウスＬ細胞（ATCC No.CCLI. 3）、ＤＧ４４ 細胞 [Chasin (1986) Cell. Molec. Genet. 12: 555を参照]ヒト胚性腎（ＨＥＫ）細胞（ATCC No. CRL1573）、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞（ATCC Nos. CRL9618、CCL61、CRL9096）、ＰＣ１２細胞（ATCC No. CRL1721）、およびＣＯＳ−７細胞（ATCC No. CRL1651）を含むがこれらに限定されない。異種細胞表面タンパク質発現用に好ましい細胞は、容易におよび効率的に遺伝子導入することができるものである。好ましい細胞は、米国特許第5,024,939号に開示されたもののような、ＨＥＫ２９３細胞を含む。
【０１４９】
目的のイオンチャンネルまたは受容体を活性化することが知られている任意の化合物を、測定法を開始するのに用いることができる。適当なイオンチャンネル活性化試薬または受容体活性化試薬を、目的のイオンチャンネルまたは受容体に応じて選択することは、本分野の技術範囲内である。カルシウムチャンネル活性を測定するための、細胞膜の直接的脱分極化は、細胞を含むウェルにおけるカリウムイオンの終濃度が約５０〜１５０ｍＭの範囲内になるような、特定濃度のカリウムイオンを含むカリウム塩溶液を添加することによって達成できる（たとえば、５０ ｍＭ ＫＣｌ）。リガンド作動性受容体およびリガンド作動性イオンチャンネルに関しては、そのような受容体に対して親和性を有しかつそれを活性化するリガンドが知られている。たとえば、ニコチン性アセチルコリン受容体はニコチンまたはアセチルコリンによって活性化されることが知られている;同様に、ムスカリン性およびアセチルコリン受容体は、ムスカリンまたはカルバミルコリンの添加によって活性化され得る。
【０１５０】
アゴニスト測定法は、ある化合物が目的のイオンチャンネルまたは受容体の活性化または増強に対して、もしあればどのような効果を有するかを調べるために、イオンチャンネルおよび／または受容体を有することが知られている細胞において実施することができる。アゴニスト測定法はまた、ある細胞がそれぞれ目的の機能性のイオンチャンネルまたは受容体を発現しているかどうかを調べるために、イオンチャンネル活性化能力または受容体活性化能力を有することが知られている試薬を用いて実施することができる。
【０１５１】
機能性の受容体またはイオンチャンネルをアゴニストと接触させることは、典型的には一過性の反応を活性化する;およびアゴニストへの長時間の曝露は、受容体またはイオンチャンネルを、その後の活性化に対する感受性を低下させ得る。したがって、一般に、イオンチャンネルまたは受容体の機能を調べるための測定法は、アゴニストの添加（すなわち、反応を開始するため、使用する試薬溶液に）によって開始すべきである。アゴニスト活性を有する化合物の効果は、同一の細胞、または、アゴニストを欠く試薬（すなわち対照）がウェルに加えられることを除いて実質的に同一に処理された実質的に同一な細胞のどちらかにおける、その観測可能因子のレベルと比較して、細胞中の特定の観測可能因子の検出された変化（典型的には増加、しかし特定の受容体の活性化は減少を引き起こす）によって特定される。アゴニスト測定法が、ある細胞が目的の機能性の受容体またはイオンチャンネルを発現しているかどうかを調べるために実施される場合、被験細胞を含むウェルにおよび対照細胞（その特定の受容体またはイオンチャンネルを欠く、実質的に同一な細胞）を含むウェルに既知のアゴニストを添加し、観察可能因子のレベルを比較する。測定法に応じて、目的のイオンチャンネルおよび／または受容体を欠く細胞は、その既知のアゴニストに反応した観測可能因子の増加を実質的に示さない。実質的に同一の細胞は、組み換え細胞が作製された同一の細胞であるが異種ＤＮＡの導入によって改変されていない細胞に由来するものであってよい。または、実質的に同一の細胞は、その特定の受容体またはイオンチャンネルが除去された細胞であってもよい。観察可能因子のレベルにおける何らかの統計的に有意なまたはその他の有意な差は、被験化合物がその特定の受容体またはイオンチャンネルの活性を何らかの方法で変化させていること、または、被験細胞がその特定の受容体またはイオンチャンネルを有することを示唆する。
【０１５２】
目的のイオンチャンネルまたは受容体を調節する能力を有する化合物を特定するための医薬スクリーニング測定法の一例では、個々のウェル（または二連のウェル、など）は、異なる細胞型、または目的の受容体またはイオンチャンネルの均一な集団を発現している異なる組み換え細胞株を含み、それによって、未同定の活性を有する化合物をスクリーニングしてそれが一以上の様々な機能性イオンチャンネルまたは受容体に関して調節活性を有するか否かを調べることができる。また、個々のウェルのそれぞれが同一の細胞型を含み、それによって一つの特定の受容体またはイオンチャンネルの種類に関する調節活性について、複数の化合物（装置内の別々の試薬供給元から得られるかまたは別々のウェルに含まれる）をスクリーニングおよび比較することができることも考えられている。
【０１５３】
医薬スクリーニング測定法を含むアンタゴニスト測定法は、化合物が受容体および／またはイオンチャンネルに結合するのに十分な時間（化合物が目的のイオンチャンネルおよび／または受容体に対する親和性を有する程度）、マイクロタイタープレートの各ウェル中の細胞を入れた溶液に添加した一種類以上の化合物の存在下または非存在下で、機能性のイオンチャンネルおよび／または受容体を有する細胞をインキュベートし、次いで既知のアゴニストの添加によってイオンチャンネルまたは受容体を活性化し、さらに、同一の細胞または実質的に同一の細胞のいずれかにおけるそのアンタゴニスト候補の非存在下での観測因子のレベルと比較して、アゴニストを添加した細胞中の観測可能因子のレベルを測定することによって実施することができる。
【０１５４】
それらの測定法はこのように、化合物を迅速にスクリーニングして、細胞中の何らかの受容体またはイオンチャンネルを調節するものを同定するのに有用である。特に、それらの測定法は、リガンド作動性イオンチャンネル、電圧作動性イオンチャンネル、Ｇタンパク質結合型受容体、および増殖因子受容体を含む細胞受容体について、リガンド−受容体相互作用またはリガンド−イオンチャンネル相互作用を調べるのに用いることができる。
【０１５５】
当業者は、測定法が、差別的特性を有することが可能な化合物において細胞現象に反応してその特性を変化させる細胞現象の結果として生じる溶液の検出可能な変化を測定することを包含し得ることを認識する。細胞現象の発生に際して差別的特性を有することが可能な特定の化合物を選択することによって、さまざまな測定法を実施することができる。たとえば、化合物が細胞傷害または細胞死を誘導する能力を調べる測定法は、ＢＣＥＣＦ （Molecular Probes, Inc. , Eugene, Oreg. 97402, Catalog#B1150）のようなｐＨ感受性蛍光指示薬を細胞に加え、細胞傷害または細胞死を時間の経過に伴う蛍光の変化の関数として測定することによって実施できる。
【０１５６】
有用な測定法の別の一例では、細胞質の環状ヌクレオチドレベルにおける変化が活性化の結果として生じる受容体の機能は、そのような受容体を発現し、またｃＡＭＰの結合に際して蛍光が変化する蛍光性化合物を注入されている細胞の測定法において直接測定することができる。その蛍光性化合物は、触媒サブユニットおよび調節サブユニットがそれぞれ別の蛍光色素で標識されているｃＡＭＰ依存性タンパク質キナーゼを含む[Adams et al. (1991) Nature 349: 694-697]。ｃＡＭＰが調節サブユニットと結合する際、蛍光放出スペクトルが変化する;この変化は、ｃＡＭＰ濃度における変化の指標として用いることができる。
【０１５７】
二個の神経細胞の間の接点にあるシナプス間隙に存在する特定の神経伝達物質輸送体の機能は、そのような神経細胞の細胞質において、アミノ酸および蛍光指示薬の結合物（結合物の蛍光試薬はアセトキシメチルエステル誘導体、たとえば５−（アミノアセトアミド）フルオレセインである; Molecular Probes, Catalog#A1363）がその神経伝達物質輸送体によってその細胞の細胞質へ輸送され、そこでエステル基がエステラーゼ活性によって切断され結合物が蛍光性となるときに、蛍光の発色によって測定することができる。
【０１５８】
この種類の測定法の実施において、レポーター遺伝子構造は真核細胞に挿入され、特定の種類の細胞表面タンパク質が表面に存在する組み換え細胞を生じる。細胞表面受容体は、内因性に発現され得るかまたは、細胞に導入された異種遺伝子から発現され得る。異種ＤＮＡを真核細胞へ導入するための方法は本分野でよく知られており、任意のそのような方法を用いることができる。加えて、さまざまな細胞表面タンパク質をコードするＤＮＡは当業者に既知であり、または、それは方法当業者に既知である任意の方法によってクローニングすることができる。
【０１５９】
組み換え細胞を被験化合物と接触させ、レポーター遺伝子発現のレベルを測定する。接触は任意の媒体中で行うことができ、試験は当業者に既知である特定の分子相互作用を評価するための、たとえば段階希釈といった任意の手順を用いて行うことができる。組み換え細胞を、何らかの相互作用を生じるのに十分な時間接触させた後、遺伝子発現のレベルを測定する。そのような相互作用を達成するための時間の長さは、たとえば時間的経過を追って転写のレベルを時間の関数として測定することにより、実験的に決定することができる。転写の量は、適当であることが当業者に既知である任意の方法を用いて測定することができる。たとえば、特定のｍＲＮＡ発現はノーザンブロットを用いて検出することができ、または、特定のタンパク質産物は特徴的な染色によって同定することができる。転写の量は、同一の細胞における被験化合物の非存在下での転写の量、またはその特定受容体を欠く実質的に同一の細胞における転写の量と比較される。実質的に同一の細胞は、組み換え細胞が作製された同一の細胞であるが異種ＤＮＡの導入によって改変されていないものに由来する。または、実質的に同一の細胞は、その特定の受容体が除去された細胞である。転写の量における何らかの統計的に有意なまたはその他の有意な差は、被験化合物がその特定の受容体の活性を何らかの方法で変化させていることを示唆する。
【０１６０】
被験化合物が細胞表面タンパク質の活性を促進、活性化、または誘導しないように見える場合は、その特定の受容体の既知のアゴニストまたは活性化因子が転写を活性化する能力についてその組み換え細胞を最初に試験する段階を導入することによって、測定を繰り返しさらに改変することができ、転写が誘導されるならば、アゴニストの活性を阻害、遮断、またはその他影響を与える能力について被験化合物を試験する。
【０１６１】
転写に基づく測定法は、活性が最終的に遺伝子発現を変化させる何らかの細胞表面タンパク質と相互作用する化合物を特定するために有用である。特に、その測定法は、リガンド作動性イオンチャンネルおよび電圧作動性イオンチャンネル、およびＧタンパク質結合型受容体を含むいくつかの種類の細胞表面局在受容体に関して機能性のリガンド−受容体相互作用またはリガンド−イオンチャンネル相互作用を試験するのに用いることができる。
【０１６２】
目的の細胞表面タンパク質を、そのようなタンパク質が細胞内に細胞外シグナルを伝達するように機能する態様で発現することができる、遺伝子導入が可能な任意の細胞を使用することができる。細胞表面タンパク質を内因性に発現するかまたはそうするように遺伝子組み換えされているように細胞を選択することができる。多数のそのような細胞が当業者に既知である。そのような細胞は、Ｌｔｋ<−>細胞、ＰＣ１２細胞、およびＣＯＳ−７細胞を含むがそれらに限定されない。
【０１６３】
受容体またはイオンチャンネルおよびレポーター遺伝子発現構造を発現し、化合物を活性について試験するのに有用である細胞の調製は、Ｉ型ヒトムスカリン性（ＨＭ１）受容体を発現し、さらにａｃ−ｆｏｓプロモーター−ＣＡＴレポーター遺伝子発現構造またはｃ−ｆｏｓプロモーター−ルシフェラーゼレポーター遺伝子発現構造のどちらかを用いて形質転換された哺乳類Ｌｔｋ<−>およびＣＯＳ−７細胞株を参照することにより、ここに示した実施例で例示されている。
【０１６４】
当業者に既知であるかまたは当業者によって同定され得る任意の細胞表面タンパク質を本測定法に用いることができる。その細胞表面タンパク質は、選択された細胞上で内因性に発現され得るかまたは、クローニングされたＤＮＡから発現され得る。典型的な細胞表面タンパク質は、細胞表面受容体およびイオンチャンネルを含むがこれらに限定されない。細胞表面受容体は、ムスカリン性受容体（たとえばヒトＭ２（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号;Ｍ１６４０４）;ラットＭ３（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号;Ｍ１６４０７）;ヒトＭ４（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号;Ｍ１６４０５）;ヒトＭ５（Bonner et al. (1988) Neuron 1: 403-410）;など）;神経細胞ニコチン性アセチルコリン受容体（たとえば、参照によって全体が明示的に本開示に含まれる米国特許出願第504,455号（１９９０年４月３日出願）で開示される、α２、α３、およびβ２サブタイプ;ラットα２サブユニット（Wada et al.(1988) Science 240: 330-334）;ラットα３サブユニット（Boulter et al. (1986) Nature 319: 368-374）;ラットα４サブユニット（Goldman et al. (1987) cell 48: 965-973）;ラットα５サブユニット（Boulter et al. (1990) J. Biol. Chem. 265: 4472-4482）;ラットβ２サブユニット（Deneris et al. (1988) Neuron 1: 45-54）;ラットβ３サブユニット（Deneris et al. (1989) J. Biol. Chem. 264: 6268-6272）;ラットβ４サブユニット（Duvoisin et al. (1989) Neuron 3: 487-496）;ラットαサブユニット、βサブユニット、およびαおよびβサブユニットの組み合わせ;ＧＡＢＡ受容体（たとえば、ウシα１およびβ１サブユニット（Schofield et al. (1987) Nature 328: 221-227）;ウシα２およびα３サブユニット（Levitan et al. (1988) Nature 335: 76-79）;γサブユニット（Pritchett et al. (1989) Nature 338: 582-585）;β２およびβ３サブユニット（Ymer et alo (1989) EMBO J. 8: 1665-1670）;δサブユニット（Shivers, B. D. (1989) Neuron 3: 327- 337); など）;グルタミン酸受容体（たとえば、ラット脳から単離された受容体（Hollmann et al. (1989) Nature 342: 643-648）; など）;アドレナリン作動性受容体（たとえば、ヒトβ１（Frielle et al. (1987) Proc. Natl. Acad. Sci. 84.: 7920-7924）;ヒトα２（Kobilka et al. (1987) Science 238: 650-656）;ハムスターβ２（Dixon et al. (1986) Nature 321: 75-79);など）;ドーパミン受容体（たとえば、ヒトＤ２（Stormann et al. (1990) Molec. Pharm.37 : 1-6）;ラット（Bunzow et al. (1988) Nature 336: 783-787); など）;ＮＧＦ受容体（たとえば，ヒトＮＧＦ受容体（Johnson et al. (1986) Cell 47: 545-554);など）;セロトニン受容体（たとえば、ヒト５ＨＴ１ａ （Kobilka et al. (1987) Nature 329: 75-79）;ラット５ＨＴ２（Julius et al. (1990) PNAS 87: 928-932）;ラット５ＨＴ１ｃ（Julius et al. (1988) Science 241: 558-564);など）を含むがこれらに限定されない。
【０１６５】
レポーター遺伝子構造は、レポーター遺伝子を少なくとも一の転写調節配列と調節可能に結合させることによって調製する。転写調節配列が一個だけ含まれる場合は、それは調節可能なプロモーターでなければならない。選択された転写調節配列のうち少なくとも一個は、選択された細胞表面受容体の活性によって間接的にまたは直接的に調節されなければならず、それによって受容体の活性は、レポーター遺伝子の転写を介して監視することができる。
【０１６６】
その構造は、ＦＩＲＥ配列のような追加の転写調節配列、または、必ずしも細胞表面タンパク質によって調節されないがバックグラウンドレベル転写を低下させるかまたは導入されたシグナルを増幅する能力について選択されたそれによって測定法の感度および信頼性を向上させるその他の配列を含んでいてよい。
【０１６７】
多数のレポーター遺伝子および転写調節配列が当業者に既知であり、また、その他のものは当業者に既知である方法によって同定または合成することができる。
【０１６８】
レポーター遺伝子は、ＲＮＡ またはタンパク質であることができる検出可能な 遺伝子 産物を発現する任意の遺伝子を含む。好ましい レポーター遺伝子 は、容易に検出可能なものである。レポーター遺伝子はまた、目的の 転写調節配列を含むかまたはその他の望ましい性質を示す遺伝子との融合遺伝子の形で構造内に含まれ得る。
【０１６９】
レポーター遺伝子の例は、ＣＡＴ（クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ） （Alton and Vapnek (1979), Nature 282: 864-869）ルシフェラーゼ、およびその他の酵素検出系、たとえばβガラクトシダーゼ;ホタルルシフェラーゼ（deWet et al. (1987), Mol. Cell. Biol. 7: 725-737）;細菌ルシフェラーゼ（Engebrecht and Silverman (1984), PNAS 1 : 4154-4158; Baldwin et al. (1984), Biochemistry 23: 3663-3667）;アルカリホスファターゼ（Toh et al. (1989) Eur. J. Biochem. 182: 231-238, Hall et al. (1983) J. Mol. Appl. Gen. 2: 101）といったものを含むがそれらに限定されない。
【０１７０】
転写調節配列は、プロモーター、エンハンサー、およびリプレッサーおよび活性化因子結合部位を含むがそれらに限定されない。適当な転写調節配列は、細胞表面タンパク質と細胞表面タンパク質の活性を調節するエフェクタータンパク質との間の一般的に数分間の接触で発現が迅速に誘導される遺伝子の転写調節領域に由来するものでよい。そのような遺伝子の例は、ｃ−ｆｏｓのような前初期遺伝子（Sheng et al. (1990) Neuron 4: 477-485を参照）を含むがそれらに限定されない。前初期遺伝子は、細胞表面タンパク質へのリガンドの結合に際して迅速に誘導される遺伝子である。その遺伝子構造における使用に好ましい転写調節配列は、前初期遺伝子由来の転写調節配列、前初期遺伝子の性質の一部またはすべてを示す別の遺伝子に由来する配列、または、調節可能な結合中の遺伝子がそのような特性を示すように構成された合成配列を含む。転写調節配列を得る好ましい遺伝子の特徴として、休止期の細胞での低発現または発現検出不能、細胞外刺激の数分間以内の転写レベルでの迅速な誘導、一過性でタンパク質合成とは独立した誘導、その後の転写停止が新しいタンパク質合成を必要とすること、および、これらの遺伝子から転写されたｍＲＮＡの半減期が短いことが挙げられるが、それらに限定されない。これらのすべての性質が存在する必要はない。
【０１７１】
医薬組成物
別の一態様では、本発明は、一種類以上の医薬的に許容される担体（添加剤）および／または稀釈剤と共に製剤化された、一種類以上の上記の化合物の治療的効果量を含む、医薬的に許容される組成物を提供する。下記に詳細に示す通り、本発明の医薬組成物は、以下に記載のように適合させたものを含む、固体または液体の形態での投与のために特に製剤化することができる:（１）経口投与、たとえば、水薬（水性または非水性液剤または懸濁剤）、錠剤、たとえば、口腔、舌下、および全身吸収を目的とするもの、ボーラス、散剤、顆粒剤、舌への投与用のペースト;（２）非経口投与、たとえば皮下、筋肉内、静脈内または硬膜外注射によって、たとえば、滅菌液剤または懸濁剤、または徐放性製剤として;（３）局所使用、たとえば、皮膚に使用するクリーム、軟膏、または徐放性パッチまたはスプレーとして;（４）膣内にまたは直腸内に、たとえば、ペッサリー、クリーム、または泡として;（５）舌下に;（６）眼に;（７）経皮で;または（８）経鼻で。
【０１７２】
ここで用いられる「治療的効果量」の語句は、本発明の化合物を含む化合物、材料、または組成物が、任意の医療処置に適用可能な合理的な利益／リスク比で、少なくとも、動物の中の細胞の部分集団においていくらかの目的の治療効果を生じるために有効である量を意味する。
【０１７３】
「医薬的に許容される」の語句はここでは、健全な医療上の判断の範囲内で、ヒトおよび動物の組織と接触させる使用に適当であり、過剰な毒性、刺激性、アレルギー反応、またはその他の問題または合併症がなく、合理的な利益／リスク比に相応した、化合物、材料、組成物、および／または剤形を称するのに用いられる。
【０１７４】
ここで用いられる「医薬的に許容される担体」の語句は、医薬的に許容される材料、組成物、媒体、たとえば液体または固体の増量剤、稀釈剤、賦形剤、製造用の酸（たとえば、潤滑剤、タルクマグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、またはステアリン酸）または、一つの臓器または身体の部分から、別の臓器または身体の部分へ、その化合物を運搬または輸送するのに関与する材料を封入する溶媒を意味する。各担体は、製剤のその他の成分と適合性であり患者に有害でないという意味で「許容し得る」ものでなければならない。医薬的に許容される担体として用いることができる材料の一部の例は下記のものを含む:（１）糖類、たとえば乳糖、グルコースおよびスクロース;（２）デンプン、たとえばトウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプン;（３）セルロース、およびその誘導体、たとえばナトリウムカルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、および酢酸セルロース;（４）トラガント末;（５）麦芽;（６）ゼラチン;（７）タルク;（８）賦形剤、たとえばカカオ脂および坐剤ロウ;（９）油、たとえば落花生油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、および大豆油;（１０）グリコール、たとえばプロピレングリコール;（１１）ポリオール、たとえばグリセリン、ソルビトール、マンニトール、およびポリエチレングリコール;（１２）エステル、たとえばオレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル;（１３）寒天;（１４）緩衝剤、たとえば水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム;（１５）アルギン酸;（１６）パイロジェンフリー水;（１７）等張生理食塩水;（１８）リンゲル液;（１９）エチルアルコール;（２０）ｐＨ緩衝溶液;（２１）ポリエステル、ポリカーボネートおよび／またはポリ無水物;および（２２）医薬製剤に用いられるその他の無毒性の適合性物質。
【０１７５】
上記に示す通り、本化合物のある実施形態は、アミノまたはアルキルアミノといった塩基性官能基を含んでいてよく、したがって医薬的に許容される酸と医薬的に許容される塩を形成することができる。「医薬的に許容される塩」の語はこの点で、本発明の化合物の、相対的に無毒性の、無機および有機酸付加塩を称する。これらの塩は、投与媒体または剤形製造過程で、または精製した本発明の化合物を遊離塩基の形で適当な有機酸または無機酸と別々に反応させ、そのように生じた塩を続く精製の間に単離することによって、ｉｎ ｓｉｔｕで調製することができる。代表的な塩は、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリル酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフテン酸塩、メシル酸塩、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩、およびラウリルスルホン酸塩などを含む（たとえば、Berge et al. (1977)”Pharmaceutical Salts”, J. Pharm. Sci. 66: 1-19を参照）。
【０１７６】
本化合物の医薬的に許容される塩は、たとえば、無毒性の有機酸または無機酸からの、従来の無毒性塩またはその化合物の第四級アンモニウム塩を含む。たとえば、そのような従来の無毒性塩は、たとえば塩酸，臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸、などといった無機酸に由来するもの;および有機酸、たとえば酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パルミチン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イソチオ酸などといった有機酸から調製された塩を含む。
【０１７７】
別の場合には、本発明の化合物は一個以上の酸性官能基を含んでいてよく、そのため、医薬的に許容される塩基と、医薬的に許容される塩を形成することができる。「医薬的に許容される塩」の語はこの場合、本発明の化合物の、相対的に無毒性の、無機および有機塩基付加塩を称する。これらの塩は同様に、投与媒体または剤形製造過程で、あるいは精製した本化合物を遊離酸の形で、たとえば医薬的に許容される金属陽イオンの水酸化物、炭酸塩、または重炭酸塩といった適当な塩基と、アンモニアと、または医薬的に許容される有機一級、二級、または三級アミンと、別々に反応させることによって、ｉｎｓｉｔｕで調製することができる。代表的なアルカリまたはアルカリ土類塩は、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、およびアルミニウム塩などを含む。塩基付加塩の形成に有用である代表的な有機アミンは、エチルアミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン などを含む。（たとえば、 Berge et al.,上記を参照）
湿潤剤、乳化剤、および潤滑剤、たとえばラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム、および着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味料、香料、保存料および酸化防止剤もまた、本組成物中に存在していてよい。
【０１７８】
医薬的に許容される酸化防止剤の例は下記を含む:（１）水溶性酸化防止剤、たとえばアスコルビン酸、シスチン塩酸塩、炭酸水素ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなど;（２）脂溶性酸化防止剤、たとえばアスコルビン酸パルミチン酸エステル、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、αトコフェロール、など;および（３）金属キレート剤、たとえばクエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸、など。
【０１７９】
本発明の製剤は、経口、経鼻、局所（口腔および舌下を含む）、直腸内、膣内および／または非経口投与に適当であるものを含む。製剤は単位用量剤形で便利に与えることができ、また、薬学の分野でよく知られている任意の方法によって調製することができる。担体材料と組み合わせて単回投与剤形を作製することができる有効成分の量は、治療する宿主、特定の投与形態に応じて変化する。担体材料と組み合わせて単回投与剤形を製することができる有効成分の量は、一般的に、治療効果を生じる化合物の量となる。一般的に、百パーセントのうち、この量は有効成分の約０．１パーセントから約９９パーセント、好ましくは約５パーセントから約７０パーセント非常に好ましくは約１０パーセントから約３０パーセントの範囲にある。
【０１８０】
ある実施形態では、本発明の製剤は、シクロデキストリン、リポソーム、ミセル形成剤たとえば胆汁酸、および高分子担体たとえばポリエステルおよびポリ無水物から成る群から選択された賦形剤;および本発明の化合物を含む。ある実施形態では、前述の製剤は、本発明の化合物に経口での生物学的利用能をもたらす。
【０１８１】
これらの製剤または組成物を調製する方法は、本発明の化合物を、担体および、必要に応じて、一種類以上の副成分と会合させる段階を含む。一般に、その製剤は、本発明の化合物を液体担体、または微細に分割された固体担体、または両方と均一におよび密に会合させ、その後、必要に応じて、製品を成形することによって調製される。
【０１８２】
本発明の経口投与に適した製剤は、それぞれ有効成分として本発明の化合物の規定量を含む、カプセル剤、カシェ剤、丸剤、錠剤、トローチ剤（香味つき基剤、通常スクロースおよびアラビアゴムまたはトラガントを用いる）、散剤、顆粒剤の形、または水性または非水性液体中の液剤または懸濁剤として、または水中油型または油中水型液体の乳剤として、またはエリキシル剤またはシロップ剤として、または香錠剤として（不活性基剤、たとえばゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアラビアゴム）および／または含漱剤としてなどであることができる。本発明の化合物はまた、ボーラス、舐剤、またはペーストとして投与することができる。
【０１８３】
経口投与用の本発明の固体剤形では（カプセル剤、錠剤、丸剤、糖衣錠剤、散剤、顆粒剤など）、有効成分は、一種類以上の医薬的に許容される担体、たとえばクエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウム、および／または下記のうち任意のものと混合される:（１）増量剤または賦形剤、たとえばデンプン、乳糖、スクロース、グルコース、マンニトール、および／またはケイ酸;（２）結合剤、たとえば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび／またはアラビアゴム;（３）湿潤剤、たとえばグリセロール;（４）崩壊剤、たとえば寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモデンプンまたはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸塩、および炭酸ナトリウム;（５）溶液抑制剤(solution retarding agents)、たとえばパラフィン;（６）吸収促進剤、たとえば四級アンモニウム化合物;（７）湿潤剤、たとえば、セチルアルコール、モノステアリン酸グリセロール、および非イオン性界面活性剤;（８）吸収剤、たとえばカオリンおよびベントナイト粘土;（９）潤滑剤、たとえばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、およびそれらの混合物;および（１０）着色剤。カプセル剤、錠剤、および丸剤の場合、医薬組成物はまた緩衝剤を含んでいてよい。同様の種類の固体組成物もまた、ラクトースすなわち乳糖、および高分子量ポリエチレングリコールなどといった賦形剤を用い、硬質および軟質ゼラチンカプセル剤で、増量剤として用いることができる。
【０１８４】
錠剤は、必要に応じて一種類以上の副成分と共に、圧縮または成形によって製造することができる。圧縮錠剤は、結合剤（たとえば、ゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、潤滑剤、不活性な稀釈剤、保存料、崩壊剤（たとえば、デンプングリコール酸ナトリウムまたは架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）、界面活性または分散剤を用いて調製することができる。成形錠剤は、不活性な液体稀釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を適当な機械で成形することによって製造できる。
【０１８５】
本発明の医薬組成物の錠剤、およびその他の固体剤形、たとえば糖衣錠剤、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤は、必要に応じてコーティングおよび被覆、たとえば腸溶コーティングおよび医薬製剤技術でよく知られているその他のコーティングを用いて得るまたは調製することができる。それらはまた、たとえば、目的の放出プロファイルを与えるためのさまざまな割合のヒドロキシプロピルメチルセルロース、その他の高分子マトリックス、リポソームおよび／またはマイクロスフィアを用いて、有効成分の遅放性または徐放性を与えるように製剤化することができる。それらはまた迅速な放出のために製剤化することができ、たとえば、凍結乾燥してもよい。それらはまた、たとえば、細菌を保持するフィルターを通した濾過によって、または使用直前に滅菌水または他の注射用滅菌媒体に溶解させることができる滅菌固体組成物の形で滅菌剤を封入することによって、滅菌することができる。これらの組成物はまた、必要に応じて不透明化剤(opacifying agent)を含んでいてよく、また、消化管の特定の部分で、必要に応じて徐放性に、有効成分だけまたは優先的に、放出する組成のものであってもよい。使用することができる埋め込み組成物の例は、高分子物質およびロウを含む。有効成分はまた、適切な場合には、上記の賦形剤の一種類以上を用いた、マイクロカプセル化形態であってもよい。
【０１８６】
本発明の化合物の経口投与のための液体剤形は、医薬的に許容される乳剤、マイクロエマルション、液剤、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤を含む。有効成分に加えて、液体剤形は本分野で一般に用いられる不活性な稀釈剤、たとえば水またはその他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、たとえばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油（特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタンの脂肪酸エステル、およびその混合物を含んでいてよい。
【０１８７】
不活性な稀釈剤の他に、経口組成物はまた、湿潤剤、乳化剤または懸濁化剤、甘味料、香料、着色料、着香料、および保存料といった助剤を含んでいてもよい。
【０１８８】
懸濁剤は、活性化合物に加えて、懸濁化剤、たとえば、エトキシルイソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天、およびトラガント、およびその混合物を含んでいてよい。
【０１８９】
本発明の医薬組成物の直腸内または膣内投与のための製剤は、坐剤として提供することができ、これは一種類以上の本発明の化合物を、たとえば、カカオ脂、ポリエチレングリコール、坐剤用ロウまたはサリチル酸塩を含む一種類以上の適当な非刺激性賦形剤または担体と混合することによって調製することができ、また室温では固体であるが、体温では液体であり、したがって、直腸または膣腔内で溶解して活性化合物を放出する。
【０１９０】
膣内投与に適した本発明の製剤はまた、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト剤、泡、または本分野で適当であることが知られている担体を含む製剤を含む。
【０１９１】
本発明の化合物の経皮投与のための局所用剤形は、散剤、スプレー、軟膏、ペースト剤、クリーム、ローション、ゲル、液剤、パッチ、および吸入剤を含む。活性化合物を、医薬的に許容される担体、および必要な任意の保存料、緩衝剤、または推進剤と、滅菌条件下で混合することができる。
【０１９２】
軟膏、ペースト剤、クリーム、およびゲルは、本発明の活性化合物に加えて、たとえば動植物脂肪、油、ロウ、パラフィン、デンプン、トラガント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルク、および酸化亜鉛、またはそれらの混合物のような賦形剤を含んでいてよい。
【０１９３】
散剤およびスプレーは、本発明の化合物に加えて、たとえば乳糖、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム、およびポリアミド粉末、またはそれらの物質の混合物のような賦形剤を含んでいてよい。スプレーは、さらに従来の推進剤たとえば塩化フッ化炭化水素および揮発性非置換炭化水素、たとえばブタンおよびプロパンを含んでいてよい。
【０１９４】
経皮パッチは、本発明の化合物の身体への徐放を与える付加的な利点を有する。そのような剤形は、化合物を適当な媒体に溶解または分散することによって得ることができる。吸収エンハンサーもまた、皮膚を通した化合物の流入を増加させるために用いることができる。そのような流入の速度は、速度調節膜を用意するかまたは化合物を高分子マトリックスまたはゲル中に分散させることによって調節することができる。
【０１９５】
眼科用製剤、眼軟膏、散剤、液剤などもまた本発明の範囲内にあると考えられる。
【０１９６】
非経口投与に適した本発明の医薬組成物は、本発明の一種類以上の化合物を、医薬的に許容される一種類以上の滅菌等張水溶液または非水溶液、分散剤、懸濁剤または乳剤、または 滅菌注射用液剤または分散剤に再構成することができる滅菌散剤と組み合わせて含んでいてよく、それらは、糖類、アルコール、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤、製剤を意図したレシピエントの血液と等張にする溶質、あるいは懸濁剤または増粘剤を含んでいてよい。
【０１９７】
本発明の医薬組成物に使用することができる適当な水性および非水性担体の例は、水、エタノール、ポリオール（たとえばグリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、など）、およびその適当な混合物、植物油、たとえばオリーブ油、および注射用有機エステル、たとえばオレイン酸エチルを含む。適当な流動性は、たとえば、レシチンのようなコーティング材料の使用によって、分散剤の場合には必要な粒子径の維持によって、および界面活性剤の使用によって、維持することができる。
【０１９８】
これらの組成物はまた、保存料、湿潤剤、乳化剤、および分散化剤といった助剤を含んでいてよい。対象化合物に対する微生物の作用の防止は、さまざまな抗菌剤および抗真菌剤、たとえば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、などの添加によって確保することができる。また、等張剤、たとえば糖類、塩化ナトリウムなどを組成物に含めることが望ましい。さらに、注射用剤形の持続性吸収は、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンといった、吸収を遅らせる物質の添加によって実現することができる。
【０１９９】
一部の場合には、医薬の効果を持続させるために、皮下または筋肉内注射からの医薬の吸収を遅らせることが望ましい。これは、水溶性が低い結晶性または非晶性材料の液体懸濁剤の使用によって達成することができる。医薬の吸収の速度はその結果、溶解の速度に依存し、溶解の速度は結晶の大きさおよび結晶形に依存し得る。または、非経口的に投与される剤形の持続性吸収は、その医薬を油媒体に溶解または懸濁することによって達成される。
【０２００】
注射用デポ形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドといった生分解性高分子中に対象化合物のマイクロカプセル化マトリックスを形成することによって製造される。高分子に対する薬物の比、および使用した特定の高分子の性質に依存して、薬物放出の速度を調節することができる。他の生分解性高分子の例は、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）を含む。デポ注射用製剤はまた、体組織に適合性であるリポソームまたはマイクロエマルションに薬物を封入することによって調製される。
【０２０１】
本発明の化合物が医薬として、ヒトおよび動物に投与される場合、それ自体を、またはたとえば０．１から９９．５％（より好ましくは、０．５から９０％）の有効成分を医薬的に許容される担体と組み合わせて含む医薬組成物として投与することができる。
【０２０２】
本発明の調製物は、経口的に、非経口的に、局所に、または直腸内に投与することができる。それらはもちろん各投与経路に適した剤形で投与される。たとえば、それらは、錠剤またはカプセル剤の形態で、注射、吸入、眼科用ローション、軟膏、坐剤、などによって、注射、注入、または吸入による投与;ローションまたは軟膏によって局所;および坐剤によって直腸内に投与される。経口投与が好ましい。
【０２０３】
ここで用いられる「非経口投与」および「非経口的に投与される」の語句は、経腸および局所投与以外の、通常は注射による投与形態を意味し、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、関節包内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、角皮内、関節内、被膜下、くも膜下、脊髄内、および胸骨内注射および輸液を制限無しに含む。
【０２０４】
ここで用いられる「全身投与」、「全身的に投与される」、「末梢投与」および「末梢に投与される」の語句は、たとえば皮下投与のような、化合物、医薬、または他の材料が、患者の全身に入りしたがって代謝およびその他の同様の処理に供されるような、直接中枢神経系に投与される以外の投与を意味する。
【０２０５】
経口的に、経鼻的に（たとえばスプレーによって）、直腸内に、膣内に、非経口的に、大槽内に、および局所的に（たとえば、口腔におよび舌下投与を含み、散剤、軟膏またはドロップによって）等、任意の適当な投与経路によって、これらの化合物をヒトおよびその他の動物へ治療のために投与することができる。
【０２０６】
選択した投与経路にかかわらず、適当な水和形で用いることができる本発明の化合物、および／または本発明の医薬組成物は、当業者に既知である従来の方法によって、医薬的に許容される剤形に製剤化される。
【０２０７】
本発明の医薬組成物中の有効成分の実際の用量レベルは、特定の患者、組成物、および投与形態について、患者に対して毒性にならず、目的の治療反応を達成するのに有効である有効成分の量を得られるように変えることができる。
【０２０８】
選択された用量レベルは、使用する本発明の特定の化合物、またはそのエステル、塩、またはアミドの活性、投与経路、投与時間、使用する特定の化合物の排泄速度または代謝速度、治療期間、使用する特定の化合物と組み合わせて用いられる他の医薬、化合物および／または材料、治療を受ける患者の年齢、性別、体重、状態、全身的健康、および以前の病歴、および医療技術においてよく知られている同様の因子、を含むいろいろな因子に依存する。
【０２０９】
当業者である医師または獣医師は、必要な医薬組成物の有効量を容易に決定および製剤化することができる。たとえば、医師または獣医師は、医薬組成物に使用される本発明の化合物の用量を、目的の治療効果を達成するために必要であるよりも低いレベルで開始し、目的の効果が達成されるまで徐々に用量を増やすことができる。
【０２１０】
一般に、本発明の化合物の適当な一日量は、治療効果を生じるのに有効である最低の用量である化合物の量である。そのような有効量は一般的に上記の因子に依存する。一般的に、本発明の化合物の患者に対する静脈内、脳室内、および皮下投与量は、適応の目的の効果を得るために使用する場合、１日当たりの体重キログラム当たり約０．０００１ｍｇから約１００ｍｇの範囲である。
【０２１１】
必要に応じて、活性化合物の有効一日量は、必要に応じて単位剤形で、一日を通じて適当な間隔で分けて投与される２、３、４、５、６またはそれより多数の部分用量として投与することができる。しかし、好ましい投薬は１日１回である。
【０２１２】
本発明の化合物を単独で投与することが可能である一方、その化合物を医薬製剤（組成物）として投与することが好ましい。
【０２１３】
別の一態様では、本発明は、一種類以上の医薬的に許容される担体（添加剤）および／または稀釈剤と共に製剤された、一種類以上の対象化合物の治療的効果量を上記の通り含む、医薬的に許容される組成物を提供する。下記に詳細に示す通り、本発明の医薬組成物は、下記に適合させたものを含む固体または液体の形での投与のために特に製剤化することができる:（１）経口投与、たとえば、水薬（水性または非水性液剤または懸濁剤）、錠剤、ボーラス、散剤、顆粒剤、舌への投与用のペースト;（２）非経口投与、たとえば、皮下、筋肉内、静脈内注射によって、たとえば、滅菌液剤または懸濁剤として;（３）局所使用、たとえば、皮膚、肺、または口腔に使用するクリーム、軟膏、またはスプレーとして;または（４）膣内にまたは直腸内に、たとえば、ペッサリー、クリームまたは泡として;（５）舌下に;（６）眼に;（７）経皮的に;または（８）経鼻で。
【０２１４】
本発明に記載の化合物は、他の医薬から類推して、ヒトまたは動物用薬における使用に便利な任意の方法での投与のために製剤化することができる。
【０２１５】
「治療」の語はまた、予防、治療、および治癒も包含することが意図される。
【０２１６】
この治療を受ける患者は、必要とする任意の動物であり、霊長類、特にヒト、およびその他の哺乳類たとえばウマ、ウシ、ブタ、およびヒツジ;および家禽および一般に愛玩動物を含む。
【０２１７】
本発明の化合物は、それ自体で、または医薬的に許容される担体との混合物として投与することができ、またペニシリン、セファロスポリン、アミノグリコシド、および糖ペプチドといった抗菌剤と併せて投与することもできる。併用治療は、このように、先に投与されたものの治療効果が完全に消えないうちに次のものが投与される方法での、活性化合物の連続的な、同時のおよび別々の投与を含む。
【０２１８】
本発明の活性化合物を動物飼料へ添加することは、好ましくは活性化合物を有効量で含む適当な飼料プレミックスを調製し、そのプレミックスを完成飼料に組み込むことによって達成される
または、有効成分を含む中間濃縮物または飼料添加剤を飼料に混合することができる。そのような飼料プレミックスおよび完成飼料を調製および投与できる方法は参考書に記載されている（たとえば”Applied Animal Nutrition”, W. H. Freedman and CO. , San Francisco, U. S. A. , 1969または”Livestock Feeds and Feeding” O and B books, Corvallis, Ore. , U. S. A. , 1977）。
【０２１９】
コンビナトリアルライブラリ
対象化合物は、医薬、農薬、またはその他の生物学的または医学関連活性または材料関連品質のスクリーニングのためのコンビナトリアルライブラリの作成に容易に役立つ。図１および２を参照。本発明の目的のためのコンビナトリアルライブラリは、化学的に関連する化合物の混合物であり、目的の性質について一緒にスクリーニングすることができる;前記ライブラリは溶液中に存在するかまたは固相担体に共有結合している。単一の反応での多数の関連化合物の調製は、実施する必要のあるスクリーニング処理の数を大幅に減らし単純化する。適当な生物学的、医薬的、農業化学的、または物理的性質についてのスクリーニングは、従来の方法によって行うことができる。
【０２２０】
ライブラリにおける多様性は、いろいろな異なるレベルで作り出すことができる。たとえば、コンビナトリアルアプローチで用いられる基質アリール基は、中核のアリール部分に関して多様化することができ、たとえば環構造に関する多様化、および／またはその他の置換基について変化させることができる。
【０２２１】
小有機分子のコンビナトリアルライブラリを作製するためには本分野の色々な技術が利用可能である。たとえば、Blondelle et al. (1995) Trends Anal. Chem. 14: 83;Affymax社の米国特許第5,359, 115号および第5,362, 899号:Ellman社の米国特許第5,288, 514号：Still et al. 国際公開第94/08051号; Chen et al. (1994) JACS 116:2661 : Kerr et al. (1993) JACS 115: 252；国際公開第92/10092号，国際公開第93/09668号、および国際公開第91/07087号;およびLerner et al.国際公開第93/20242号を参照）。その結果、約１６から１，０００，０００以上のディバーソマー（diversomers）の規模のいろいろなライブラリを合成し特定の活性または性質についてスクリーニングすることができる。
【０２２２】
典型的な一実施形態では、たとえば基質の位置の一つに位置する、たとえば加水分解または光分解が可能な基によって高分子ビーズへ結合している、置換されたdiversomerのライブラリを、Stillらの国際公開第94/08051号に記載されている技術に適用された問題の反応を用いて合成することができる。Stillらの技術によると、ライブラリは一組のビーズ上に合成され、各ビーズはビーズ上の特定のdiversomerを特定する一組のタグを含む。酵素阻害剤を発見するのに特に適している一実施形態では、ビーズは透過性膜の表面上に分散することができ、diversomersはビーズのリンカーの分解によってビーズから遊離する。各ビーズからのdiversomerは膜上を測定ゾーンへ拡散し、そこで酵素測定法と相互作用する。いくつかのコンビナトリアル方法論の詳細な説明を下記に示す。
【０２２３】
Ａ．直接的特徴づけ
コンビナトリアル化学の分野で拡大している傾向は、たとえば、フェムトモル以下の量の化合物を特徴づけるのにもちいることができる、質量分析（ＭＳ）といった技術の感度を利用すること、およびコンビナトリアルライブラリから選択された化合物の化学組成を直接決定することである。たとえば、ライブラリが不溶性支持マトリックス上に供給される場合、化合物の別々の集団をまず担体から遊離してＭＳによって特徴づけることができる。別の実施形態では、ＭＳ試料調製技術の一部として、特にマトリックスに化合物をつなぐ際に不安定な結合が用いられる場合、ＭＡＬＤＩといったＭＳ技術を用いてマトリックスから化合物を遊離することができる。たとえば、ライブラリから選択されたビーズを、マトリックスからdiversomerを遊離しそのdiversomerをＭＳ分析用にイオン化するため、ＭＡＬＤＩ段階で照射することができる。
【０２２４】
Ｂ．マルチピン合成
本方法のライブラリは、マルチピンライブラリ形式を取ることができる。要約すると、Geysenおよび共同研究者らは（Geysen et al. (1984) PNAS 81: 3998-4002）、マイクロタイタープレート形式に配列した、ポリアクリル酸で処理したポリエチレンピン上での平行合成によって、化合物ライブラリを作製する方法を紹介した。Geysenの技術は、マルチピン方法を用いて週当たり何千もの化合物を合成しスクリーニングするのに用いることができ、また取り付けられた化合物は多数の測定に再使用することができる。純度の査定およびさらなる評価のために、合成後に化合物を担体から切断することができるように、適当なリンカー部分もまたピンに付けることができる（Bray et al. (1990) Tetrahedron Lett 31: 5811-5814; Valerio et al. (1991) Anal Biochem 197: 168-177 ; Bray et al. (1991) Tetrahedron Lett 32: 6163-6166を参照）。
【０２２５】
Ｃ．分割−結合−再混合
さらに別の一実施形態では、分割−結合−再混合の戦略を利用して、化合物の多様化したライブラリを一組のビーズ上に提供することができる（たとえば、Houghten (1985) PNAS 82: 5131-5135;および米国特許第4,631,211号;第5,440,016号;第5,480,971号を参照）。要約すると、名称が示唆するように、ライブラリに変質が導入される各合成段階で、ライブラリ中の特定の位置に導入される異なる置換基の数と等しい別々の群に分割され、異なる置換基が別々の反応で結合され、そしてビーズは次の反復のために一つのプールに再混合される。
【０２２６】
一実施形態では、分割−結合−再混合の戦略は、Houghtenによって最初に開発された、化合物合成が多孔質ポリプロピレンバッグ中に封入された樹脂上で起こる（Houghten et al. (1986) PNAS 82: 5131-5135）いわゆる「ティーバッグ」法と類似の手法を用いて実施することができる。置換基はバッグを適当な反応溶液中に置くことによって化合物担体樹脂に結合され、一方、樹脂洗浄および保護基除去といったすべての共通段階は同時に一個の反応容器内で実施される。合成の終了時には、各バッグは単一の化合物を含む。
【０２２７】
Ｄ．光制御空間的特定可能平行化学合成によるコンビナトリアルライブラリ
化合物の同定が合成基質上の位置によって与えられるコンビナトリアル合成の仕組みを、空間的特定可能合成と称する。一実施形態では、コンビナトリアル過程は、固相担体上の特定位置への化学試薬の添加を調節することによって実施される（Dower et al. (1991) Annu Rep Med Chem 26: 271-280; Fodor, S. P. A. (1991) Science 251: 767; Pirrung et al. (1992)米国特許第5,143,854号; Jacobs et al. (1994) Trends Biotechnol 12: 19-26）。光リソグラフィーの空間分解能は小型化を可能にする。この技術は、光不安定な保護基を用いた保護／脱保護反応の使用を通じて実施することができる。
【０２２８】
この技術の重要な点は、Gallop et al. (1994) J Med Chem 37: 1233-1251に説明されている。合成の基質を、光不安定なニトロベラトリルオキシカルボニル（ＮＶＯＣ）基で保護されたアミノリンカーまたは別の光不安定なリンカーの共有付加によって、結合のために用意する。光を用いて結合のための合成担体の特定の領域を選択的に活性化する。光不安定な保護基の光による除去（脱保護）の結果として、選択された範囲の活性化が起こる。活性化後に、それぞれ光不安定な保護基をアミノ末端に有するアミノ酸アナログの組の最初のものが、表面全体に曝露される。結合は前の段階で光によって位置指定された領域にだけ起こる。反応を停止し、プレートを洗浄し、基質を再び第二の覆いを通して照射し、第二の保護基つき構造ブロックを用いた反応のために別の領域を活性化する。覆いのパターンと反応剤の配列が、生成物およびその位置を定義する。この処理は光リソグラフィー技術を利用するため、合成できる化合物の数は、適当な分解能で位置指定できる合成部位の数によってのみ制限される。各化合物の位置は正確に知られている;ゆえに、各化合物の他の分子との相互作用を直接に評価することができる。
【０２２９】
光制御化学合成では、生成物は照射のパターンおよび反応剤の添加の順序に依存する。リトグラフィーのパターンを変えることによって、多数の異なる組の被験化合物を同時に合成することができる;この特性は、多数の異なる被覆戦略の生成に結びつく。
【０２３０】
Ｅ．コード化コンビナトリアルライブラリ
さらに別の一実施形態では、本方法はコード化タグ化系を用いて与えられる化合物ライブラリーを利用する。コンビナトリアルライブラリに由来する活性化合物の同定の最近の改良は、任意のビーズが経験した反応段階、および、推論によって、それが有する構造を、独自にコード化するタグを用いる化学的見出し付けを使用する。概念的には、この手法は、活性が発現ペプチドに由来するが活性ペプチドの構造は対応するゲノムＤＮＡ配列から推論される、ファージディスプレイライブラリを模倣する。合成コンビナトリアルライブラリの最初のコード化は、ＤＮＡをコードとして用いた。配列決定可能な生体オリゴマー（たとえば、オリゴヌクレオチドおよびペプチド）を用いるコード化、および追加の配列決定不能なタグを用いたバイナリコード化を含む、コード化のいろいろな別の形式が報告されている。
【０２３１】
１）配列決定可能な生体オリゴマーを用いたタグ化
オリゴヌクレオチドを用いてコンビナトリアル合成ライブラリをコード化することの原理は１９９２年に記載され（Brenner et al. (1992) PNAS 89: 5381-5383）、そのようなライブラリの一例が翌年に発表された（Needles et al. (1993) PNAS 90: 10700-10704）。それぞれが特定のジヌクレオチド（それぞれＴＡ、ＴＣ、ＣＴ、ＡＴ、ＴＴ、ＣＡ、およびＡＣ）でコードされた、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ｄ−Ｖａｌ、およびＴｈｒ（三文字アミノ酸コード）のすべての組み合わせから成る、名目上７７（＝８２３，５４３）個のペプチドのコンビナトリアルライブラリが、固相担体上での一連の交互の回のペプチドおよびオリゴヌクレオチド合成によって調製された。この研究で、オリゴヌクレオチド合成のためには保護されたＯＨ基を、ペプチド合成のためには保護されたＮＨ２基を生じる試薬を用いて（ここでは１:２０の比で）ビーズを同時に予備インキュベートすることによって、ペプチドまたはオリゴヌクレオチド合成に向けてビーズ上のアミン結合機能性が特異的に差別化された。完了時に、タグはそれぞれ６９量体から成り、その１４単位がコードを有した。ビーズに結合したライブラリを蛍光標識化抗体とインキュベートし、強く蛍光を発した結合抗体を含むビーズを、蛍光発色細胞分取（ＦＡＣＳ）によって採取した。ＤＮＡタグはＰＣＲによって増幅し配列決定し、予測されたペプチドが合成された。そのような技術を受けて、タグのオリゴヌクレオチド配列が特定のビーズが受けた連続的なコンビナトリアル反応を特定し、したがってビーズ上の化合物の同定を与える、本方法での使用のための化合物ライブラリを得ることができる。
【０２３２】
オリゴヌクレオチドタグの使用は、極めて高感度のタグ分析を可能にする。それでさえ、本方法は、タグおよびライブラリメンバーの交互同時合成に必要な、直交する組の保護基の慎重な選択を要する。さらに、タグ、特にリン酸塩および糖アノマー結合の化学的不安定性は、非オリゴマー性ライブラリの合成に使用することができる試薬および条件の選択を制限し得る。好ましい実施形態では、ライブラリは分析のためにライブラリメンバーの選択的な脱離を可能にするリンカーを使用する。
【０２３３】
ペプチドもまた、コンビナトリアルライブラリ用のタグ化分子として用いられている。二つの典型的な手法が本分野で記載されており、その両方が固相への分枝リンカーを使用し、その上でコード鎖およびリガンド鎖が交互に合成される。第一の手法では（Kerr JM et al. (1993) J Am Chem Soc 115: 2529-2531）、合成における直交性は、酸に不安定な保護をコード鎖に、および塩基に不安定な保護を化合物鎖に用いることによって達成される。
【０２３４】
別の一手法では（Nikolaiev et al. (1993) Pept Res 6:161-170）、コード部分および被験化合物が両方とも樹脂上の同一の官能基に結合することができるように、分枝リンカーが使用される。一実施形態では、切断可能なリンカーが分枝点とビーズとの間に置くことができ、そのため切断によって、コードおよび化合物の両方を含む分子が遊離する（Ptek et al. (1991) Tetrahedron Lett 32: 3891-3894）。
【０２３５】
別の一実施形態では、切断可能なリンカーは、コードを残して被験化合物をビーズから選択的に分離することができるように配置することができる。この最後の構造は、コード基の干渉の可能性無しでの被験化合物のスクリーニングを可能にするため、特に価値が高い。ペプチドライブラリメンバーおよびその対応するタグの独立した切断および配列決定の分野での例は、タグがペプチド構造を正確に予想できることを裏付けている。
【０２３６】
２）配列決定不能なタグ化:バイナリコード化
被験化合物ライブラリをコード化する別の形式は、バイナリコードとして用いられる一組の配列決定不能なエレクトロホリックなタグ化分子(electrophoric tagging molecule)を使用する（Ohhneyer et al. (1993) PNAS 90: 10922-10926）。典型的なタグは、フェムトモル未満のレベルで電子捕捉ガスクロマトグラフィー（ＥＣＧＣ）によってトリメチルシリルエーテルとして検出可能な、ハロゲン化芳香族アルキルエーテルである。アルキル鎖長、およびハロゲン化芳香族置換基の性質および位置における変化は、少なくとも４０種類のそのようなタグの合成を可能にし、タグは原理的には、２４０個（たとえば１０１２より上）の異なる分子をコードすることができる。原報では（Ohlmeyer et al.,上記）タグは、光切断可能なｏ−ニトロベンジルリンカーを介して、ペプチドライブラリの利用可能なアミン基の約１％に結合した。この手法は、ペプチド様または他のアミン含有分子のコンビナトリアルライブラリを作製する場合には便利である。しかし、本質的に任意のコンビナトリアルライブラリのコード化を可能にする、より多用途の系が開発されている。ここでは、化合物は光切断可能なリンカーを介して固相担体に結合し、タグはビーズマトリックス中へのカルベン挿入部を介するカテコールエーテルリンカーを通じて結合する（Nestler et al. (1994) J Org Chem 59: 4723-4724）。この直交結合戦略は、溶液中の測定およびタグの組の酸化的脱離後のＥＣＧＣによる次のコード解読のための、ライブラリメンバーの脱離を可能にする。
【０２３７】
本分野のいくつかのアミド結合ライブラリが、アミン基に結合したエレクトロホリックなタグを用いるバイナリコード化を使用しているが、これらのタグを直接にビーズマトリックスへ結合させることは、コード化されたコンビナトリアルライブラリ中に作製することができる構造に、はるかに大きな汎用性を提供する。この方法で結合されて、タグとそのリンカーはビーズマトリックス自体とほぼ同程度に反応性が低い。エレクトロホリックなタグが直接に固相へ結合している、二種類のバイナリコード化コンビナトリアルライブラリが報告されており（Ohhneyer et al. (1995) PNAS 92:6027-6031）、本化合物ライブラリを作製するための指針を与える。両方のライブラリは、ライブラリメンバーが光不安定なリンカーによって固相担体へ結合し、タグが激しい酸化によってのみ切断可能なリンカーを介して結合する、直交結合戦略を用いて構成された。ライブラリメンバーを固相担体から繰り返して部分的に光溶出することができるため、ライブラリメンバーは複数の測定に利用することができる。連続的な光溶出はまた、非常に高処理量である反復スクリーニング戦略を可能にする:第一に、複数のビーズを９６ウェルマイクロタイタープレートに入れる;第二に、化合物を部分的に脱離し測定プレートに移す;第三に、金属結合測定法によって活性ウェルを特定する;第四に、対応するビーズを単独で新しいマイクロタイタープレートに再配列する;第五に、単一の活性化合物を特定する;および第六に、構造を解読する。
【実施例】
【０２３８】
本発明を一般的に説明したが、下記の実施例を参照することによって本発明をより容易に理解できる。実施例は単に本発明の一部の態様および実施形態の説明の目的のために含められており、本発明を制限することを意図しない。
【０２３９】
実施例１
Ｎ−（４−アリルオキシベンジル）−Ｎ−（２−メトキシエチル）−Ｎ−（３−フェニル−アリル）アミン（４）の固相合成
【化２０】
2005526133.tif 000021
【０２４０】
ポリエチレンフリット付きの３ｍＬポリプロピレン濾過チューブに入れたＲＥＭ樹脂（０．１０ｇ、１．０６ｍｍｏｌ／ｇ）に、ＤＭＦ（１ｍＬ）、次いで２−メトキシエチルアミン（９２μＬ、１．０６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて２４時間振とうした。結果として生じる樹脂（１）を、ＤＭＦ（３ｘ１ｍＬ）、ＭｅＯＨ（４ｘ１ｍＬ）、およびＣＨ２Ｃｌ２（４ｘ１ｍＬ）を用いて洗浄し、次いで減圧下で乾燥した。樹脂（１）に、４−アリルオキシベンズアルデヒド（１５３μＬ、１．０６ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１ｍＬ）、およびＮａＣＮＢＨ３（１３３ｍｇ、２．１２ｍｍｏｌ）、その後に酢酸（１０μＬ）を加えた。室温（ｒｔ）にて一夜振とう後、結果として生じる樹脂（２）を、ＤＭＦ（３ｘ１ｍＬ）、ＭｅＯＨ（４ｘ１ｍＬ）、およびＣＨ２Ｃｌ２（４ｘ１ｍＬ）を用いて洗浄し、次いで減圧下で乾燥した。乾燥樹脂（２）を、臭化シンナミル（２０９ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液に懸濁し、室温にて２４時間攪拌して樹脂（３）を得た。濾過後にＤＭＦ（３ｘ１ｍＬ）、ＭｅＯＨ（４ｘ１ｍＬ）、およびＣＨ２Ｃｌ２（４ｘ１ｍＬ）を用いて洗浄し、次いで樹脂を減圧下で乾燥した。乾燥樹脂（３）に、ポリアミン樹脂（０．１０ｇ、２．４３ｍｍｏｌ／ｇ）およびＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）を加えた。混合物を室温にて２４時間攪拌し、その後に濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２（２ｘ１．５ｍＬ）を用いて洗浄した。濾液を回収し蒸発させて、無色の油として４を得た（１５ｍｇ、収率４２％、ＨＰＬＣで純度>９５％、ＬＲＭＳ ｍ／ｚ３３８）。
【０２４１】
実施例２
三級アミン５〜１２の固相合成
個々の化合物５，６，７，８，９，１０，１１，および１２は、４の合成について実施例１で説明した一般的手順を用いて調製した。これらの化合物のそれぞれの全体の収率は３５％から４５％であり、各化合物の純度は>９５％であった。
【化２１】
2005526133.tif 000022
【０２４２】
実施例３
シンナミル部分を含むアナンダミド輸送体阻害剤のコンビナトリアルライブラリの固相合成（図１参照）
【化２２】
2005526133.tif 000023
【０２４３】
ＲＥＭ樹脂（１．０６ｍｍｏｌ／ｇ）を１２本の１２ｍＬ濾過チューブ（０．８０ｇ／チューブ、０．８４８ｍｍｏｌ）に分け、次いでＤＭＦを８ｍＬ／チューブにて分配した。１２種類のアミンを８．４８ｍｍｏｌ／チューブにて１２本の反応チューブにそれぞれ加えた。室温にて２４時間振とう後、結果として生じる樹脂（１３）を、ＤＭＦ（３ｘ８ｍＬ）、ＭｅＯＨ（４ｘ８ｍＬ）、およびＣＨ２Ｃｌ２（４ｘ８ｍＬ）を用いて洗浄し、次いで減圧下で乾燥した。１２種類の樹脂をそれぞれ９６ウェル反応ブロックに、列１から列１２まで０．１０ｇ（０．１０６ｍｍｏｌ）／ウェルにてそれぞれ分配した。８種類のアルデヒド（ＡからＨ）を含むＤＭＦを行Ａから行Ｈまで１．０ｍＬ／ウェルにて（１．０６ｍｍｏｌアルデヒドを含む）それぞれ８行に分配し、次いでＮａＣＮＢＨ３を９６ウェルに１３３ｍｇ／ウェルにて分配し、その後酢酸を１０μＬ／ウェルにて添加した。室温にて一夜振とう後、反応混合物を濾過し、樹脂をＤＭＦ（３ｘ１ｍＬ／ウェル）、ＭｅＯＨ（４ｘ１ｍＬ／ウェル）、およびＣＨ２Ｃｌ２（４ｘ１ｍＬ／ウェル）を用いて洗浄し、次いで減圧下で乾燥した。臭化シンナミル（２０ｇ、１０２ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（９６ｍＬ）を９６ウェルに１．０ｍＬ／ウェルにて分配した。室温（ｒｔ）にて２４時間振とう後、反応混合物反応混合物を濾過し、樹脂をＤＭＦ（３ｘ１ｍＬ／ウェル）、ＭｅＯＨ（４ｘ１ｍＬ／ウェル）、およびＣＨ２Ｃｌ２（４ｘ１ｍＬ／ウェル）を用いて洗浄し、次いで減圧下で乾燥した。ポリアミン樹脂（２．４３ｍｍｏｌ／ｇ）を９６ウェルに０．１０ｇ／ウェルにて分配し、その後ＣＨ２Ｃｌ２を２ｍＬ／ウェルにて分配した。混合物を室温にて２４時間攪拌し、その後に濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２（２ｘ１．５ｍＬ／ウェル）を用いて洗浄した。濾液を回収し蒸発させて、一般構造１６で表される９６種類の最終化合物を得て、最終化合物はＨＰＬＣおよび質量スペクトル分析に供した。
【０２４４】
ライブラリの各メンバーについて得られた、ＬＲＭＳ実験で観察された分子イオン（Ｍ＋Ｈ＋）および収量を下記に表で示す。ライブラリの個別メンバーの構造は、この実施例および図１の反応スキームを参照することによって推論することができる。
【表１】
2005526133.tif 000024
【０２４５】
実施例５に記載のアナンダミド機能性測定法を用いて測定された、ライブラリのメンバーの、哺乳類アナンダミド輸送体に対するＩＣ５０値（μＭ）を下記に表で示す。この測定法でのＡＭ−４０４のＩＣ５０は２．０μＭであった。ライブラリの個別メンバーの構造は、この実施例および図１の反応スキームを参照することによって推論することができる。
【表２】
2005526133.tif 000025
【０２４６】
実施例４
４−アリルオキシベンジル部分を含むアナンダミド輸送体阻害剤のコンビナトリアルライブラリの固相合成（図２参照）
【化２３】
2005526133.tif 000026
【０２４７】
図２に概略的に描かれたコンビナトリアルライブラリを、実施例３に概要が示された一般的手続を用いて、上記の反応スキームにしたがって調製した。結果として、一般構造２０で表される９６種類の化合物が調製された。
【０２４８】
ライブラリの各メンバーについて得られた、ＬＲＭＳ実験で観察された分子イオン（Ｍ＋Ｈ＋）および収量を下記に表で示す。ライブラリの個別メンバーの構造は、この実施例および図２の反応スキームを参照することによって推論することができる。
【表３】
2005526133.tif 000027
【０２４９】
実施例５に記載のアナンダミド機能性測定法を用いて測定された、ライブラリのメンバーの、哺乳類アナンダミド輸送体に対するＩＣ５０値（μＭ）を下記に表で示す。この測定法でのＡＭ−４０４のＩＣ５０は２．０μＭであった。ライブラリの個別メンバーの構造は、この実施例および図２の反応スキームを参照することによって推論することができる。
【表４】
2005526133.tif 000028
【０２５０】
実施例５
３−（４−{[２−メトキシ−エチル）−（３−フェニル−アリル）−アミノ]−メチル}−フェニル）−アクリル酸（２１）の固相合成
【化２４】
2005526133.tif 000029
【０２５１】
ポリエチレンフリット付きのポリプロピレン濾過チューブに入れたＷａｎｇ樹脂（１．１ｍｍｏｌ／ｇ、１．００ｇ）に、ＤＭＦ（５ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）を加え、次いで４−ホルミル桂皮酸（５．５ｍｍｏｌ、９６９ｍｇ）、ＤＭＡＰ（１．０８ｍｍｏｌ、１３２ｍｇ）およびジイソプロピルカルボジイミド（５．５ｍｍｏｌ、８６１μＬ）を加えた。混合物を室温にて２４時間振とうした。結果として生じる樹脂を、ＤＭＦ（３ｘ５ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３ｘ５ｍＬ）、およびＣＨ２Ｃｌ２（４ｘ５ｍＬ）を用いて洗浄し、次いで減圧下で乾燥した。樹脂（１００ｍｇ）に、２−メトキシエチルアミン（１．１ｍｍｏｌ、９６μＬ）を含むＤＭＦ（１ｍＬ）、Ｎａ（ＯＡｃ）３ＢＨ（２．２ｍｍｏｌ、４６６ｍｇ）、および酢酸（２５μＬ）を含むＤＭＦ（１ｍＬ）を加えた。室温（ｒｔ）にて一夜振とう後、結果として生じる樹脂を、ＤＭＦ（３ｘ１ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３ｘ１ｍＬ）、およびＣＨ２Ｃｌ２（４ｘ１ｍＬ）を用いて洗浄し、次いで減圧下で乾燥した。結果として生じる樹脂を、ｔｒａｎｓ−桂皮アルデヒド（１．１ｍｍｏｌ、１３９μＬ）、Ｎａ（ＯＡｃ）３ＢＨ（２．２ｍｍｏｌ、４６６ｍｇ）、および酢酸（１０μＬ）を含むＤＭＦ（１ｍＬ）溶液に懸濁した。混合物を室温にて２４時間攪拌した。結果として生じる樹脂を、ＤＭＦ（３ｘ１ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３ｘ１ｍＬ）、およびＣＨ２Ｃｌ２（４ｘ１ｍＬ）を用いて洗浄し、次いで減圧下で乾燥した。乾燥樹脂に、ポリアミン樹脂およびＣＨ２Ｃｌ２を加えた。濾液を回収し蒸発させて、無色の油として２１を得た（ＬＲＭＳｍ／ｚ３５１）。
【０２５２】
実施例６
アナンダミド取り込み機能測定法
アナンダミド取り込みの特徴づけを、９６ウェル形式（反応容量５００μＬ）を使用してヒト単球（Ｕ−９３７細胞）を用いて実施した。放射性標識化アナンダミドのＵ−９３７細胞（４００μＬ／ウェル中に細胞１０５個）による取り込みは、５０μＬで溶液に添加した被験化合物および５０μＬの[３Ｈ]−ＡＥＡ（９８ｎＭ）の存在下で、３７℃でのインキュベート時間１５分間に生じた。
【０２５３】
Ｕ−９３７細胞および[３Ｈ]−ＡＥＡ／ＡＥＡは、２５ｍＭＮａＨＣＯ３、１１ｍＭグルコース、５０μＭアスコルビン酸、および１％ＢＳＡを含むＫｒｅｂｓ緩衝液ｐＨ７．４中で調製された。このインキュベート緩衝液はインキュベート前に５分間酸素を送気した。基線対照は、取り込みを妨害する被験化合物または参照化合物のどれも非存在下で、１５分間４℃にてインキュベートした。
【０２５４】
インキュベート後に、遊離の[３Ｈ]−ＡＥＡを除去するために、２５ｍＭ ＮａＨＣＯ３を含むＫｒｅｂｓ緩衝液で洗浄した「ユニフィルター９６ウェルＧＦＢプレート」（Packard）を通した濾過によって取り込みを停止した。取り込みに対応する、Ｕ−９３７細胞に付随する放射能は、ユニフィルター上に保持され、Ｔｏｐｃｏｕｎｔマイクロプレートシンチレーションカウンター（Packard）で、Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ ０シンチレーション液（Packard）を用いて測定した。
【０２５５】
図３〜５は、本発明の一部の化合物および、この測定法で測定したＩＣ５０値を表す。参照化合物ＡＭ４０４を、標準として使用したが、１０−９Ｍから１０−４Ｍにわたる１０種類の濃度で試験してＩＣ５０値を得た。一般にはMaccarrone, M. et al. ”Anandamide hydrolysis by human cells in culture and brain” J. Biol. Chem. 1998, 273 : 32332-32339;およびMuthian, S. et al. J. Pharmacol. Exp. Ther. 2000,293, 289-295を参照。
【０２５６】
実施例７
アナンダミドおよび化合物４の個別におよび組み合わせてのＩｎ Ｖｉｖｏ抗侵害受容効果（図６参照）
概要
この実験は、アナンダミド、化合物４、およびアナンダミドと化合物４の組み合わせの鎮痛効果を、マウスにおける熱板試験で評価した。
【０２５７】
試験系
体重１７ｇから２３ｇの、百匹の雄ＳｗｉｓｓマウスＩＣＯ:ＯＦ１（ＩＯＰＳ Ｃａｗ）（Iffa Credo、フランス）を試験に用いた。マウスは温度（１９．５〜２４．５℃）および相対湿度（４５〜６５％）を調節した室内にて１２時間明／暗周期で、試験期間を通じ濾過水道水および標準ペレット実験飼料（Ｕ．Ａ．Ｒ．、フランス）の自由摂取下で飼育した。動物実験施設での受領時に、マウスをケージ当たり２０個体入れ、少なくとも５日間の順化期間を観察した。動物は尾で個体識別した。
【０２５８】
使用材料
アナンダミド
化合物４
溶媒＝２０％ＤＭＳＯを含む０．９％ＮａＣｌ
装置＝熱板（Ｓｏｃｒｅｌ ｍｏｄｅｌ ＤＳ３７; Ｕｇｏ Ｂａｓｉｌｅ， イタリア）
主データ処理システム＝ＳｉｇｍａＳｔａｔ（登録商標）ｖ．２．０．３（ＳＰＳＳ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｓｏｆｔｗａｒｅ， Ｅｒｋｒａｔｈ ＧｍｂＨ）。
【０２５９】
試験計画
各１０個体の１０群をこの試験に使用した。個別の群を下記に示す通り処置した。使用した用量は遊離の活性物質に関して表されている。被験物質および参照物質および溶媒は、静脈内経路（ｉ．ｖ）によって無作為な順序で、５ｍＬ／ｋｇの容量で投与された。アナンダミドおよび化合物４は、混合物として静脈内経路によって１０ｍＬ／ｋｇの容量で同時に投与した（群３、７、および１０）。
【０２６０】
群１:溶媒（ｔ＝２０分）
群２:アナンダミド（２０ｍｇ／ｋｇ）（ｔ＝２０分）
群３:アナンダミド（２０ｍｇ／ｋｇ）＋化合物４（１０ｍｇ／ｋｇ）（ｔ＝２０分）
群４:溶媒（ｔ＝３０分）
群５:アナンダミド（２０ｍｇ／ｋｇ）（ｔ＝３０分）
群６:化合物４（１０ｍｇ／ｋｇ）（ｔ＝３０分）
群７:アナンダミド（２０ｍｇ／ｋｇ）＋化合物４（１０ｍｇ／ｋｇ）（ｔ＝３０分）
群８:溶媒（ｔ＝６０分）
群９:アナンダミド（２０ｍｇ／ｋｇ）（ｔ＝６０分）
群１０:アナンダミド（２０ｍｇ／ｋｇ）＋化合物４（１０ｍｇ／ｋｇ）（ｔ＝６０分）。
【０２６１】
実験手順
投与の２０、３０、および６０分後、任意のマウスを５６±０．２℃に保たれた金属熱板上に置いた。前肢の舐め反射によってまたは熱板からの飛び降りによって特徴づけられる侵害受容反応潜時を記録した。カットオフ時間は３０秒に設定した。Eddy NB, Touchberry CF, Lieberman JE.”Synthetic analgesics. 1-Methadone isomers andderivatives” J. Pharmacol. Exp. Ther. 1950; 98:121-137;およびBeltramo M, Stella N, Calignano A, Lin SY, Makriyannis A, Piomelli D. ”Functional role of high-affinity anandamide transport, as revealed by selective inhibition” Science 1997; 277: 1094-1097を参照。
【０２６２】
結果
生データを下記に示す。これらの実験からの結果の平均を図式的に図６に示す。図６で表にした結果は平均±標準誤差（Ｓ.Ｅ.Ｍ）で表されている。分散分析（２元配置）:溶媒群、アナンダミド群、および併用群について、時間／治療の効果、および二つの間の相互作用。ダネット検定:*は溶媒処置群と比較したＰ<０．０５の有意差を示す。ダネット検定:†はｔ−６０分の同一処置群と比較したＰ<０．０５の有意差を示す。分散分析（１元配置）:ｔ−３０分にて溶媒群、アナンダミド群、化合物４群、および併用群について。ダネット検定：°は溶媒処置群と比較したＰ<０．０５の有意差を示す。溶媒:生理食塩水＋２０％ＤＭＳＯ;ｎ＝群当たりマウス１０個体。
【０２６３】
侵害受容反応潜時（秒）
【表５】
2005526133.tif 000030
【表６】
2005526133.tif 000031
【表７】
2005526133.tif 000032
【０２６４】
参考文献
引用されたすべての特許および出版物は参照により本開示に含まれる。
【０２６５】
等価物
当業者は、定型分析しか用いずに、ここに記載の本発明の特定の実施形態の多数の等価物を認識する、または確認することができる。そのような等価物は下記の請求項によって包含されることが意図される。
【図面の簡単な説明】
【０２６６】
【図１】図１は、シンナミル部分を含むアナンダミド輸送体阻害剤のコンビナトリアルライブラリの合成および９６種類のメンバーを図式的に示す。
【図２】図２は、４−アリルオキシベンジル部分を含むアナンダミド輸送体阻害剤のコンビナトリアルライブラリの合成および９６種類のメンバーを図式的に示す。
【図３】図３は、本発明の特定化合物、および実施例５に記載の測定法を用いて測定した哺乳類アナンダミド輸送体に対するそのＩＣ５０値を示す。
【図４】図４は、本発明の特定化合物、および実施例５に記載の測定法を用いて測定した哺乳類アナンダミド輸送体に対するそのＩＣ５０値を示す。
【図５】図５は、本発明の特定化合物、および実施例５に記載の測定法を用いて測定した哺乳類アナンダミド輸送体に対するそのＩＣ５０値を示す。
【図６】図６は、アナンダミドおよび本発明の化合物の個別でのおよび組み合わせてのｉｎ ｖｉｖｏ抗侵害受容作用を示す。実施例７を参照。
【図１】
2005526133.tif 000040
【図２】
2005526133.tif 000041
【図３】
2005526133.tif 000042
【図４】
2005526133.tif 000043
【図５】
2005526133.tif 000044
【図６】
2005526133.tif 000045
【国際調査報告】
2005526133.tif 000046