(57)【要約】アルツハイマー病などの痴呆を含めた中枢神経系の疾患および障害を予防および治療するために、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬を鼻腔内送達により中枢神経系へ供給する方法および組成物を開示する。本発明の方法および組成物は、経口または注射による送達に伴う欠点、リスクおよび副作用なしに、治療的濃度のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬を哺乳動物の脳脊髄液中に供給する。
2005532372.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の療法的投与による治療を必要とする哺乳動物における疾患または症状を治療または予防するための医薬組成物であって、
ａ．少なくとも１種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の経鼻投与のための液体またはゲル溶液；および
ｂ．経粘膜薬物取込みのための少なくとも１種類の透過促進剤
を含む医薬組成物。
【請求項２】
前記疾患または症状がアルツハイマー病である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記液体またはゲル溶液が水溶液である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記液体が液体ポリオキシエチレングリコール中の溶液である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記液体が、ジメチルスルホキシド、ｎ−メチルピロリジノン、トランスキュートール、短鎖ジグリセリド、および短鎖モノグリセリドよりなる群から選択される少なくとも１種類の液体中の溶液である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬が、ドネペジル、６−Ｏ−デスメチルドネペジル、タクリン（塩酸９−アミノ−１，２，３，４−テトラヒドロアクリジン）、リバスチグミン（Ｓ−ｎ−エチル−３−［（１−ジメチルアミノ）エチル］−ｎ−メチル−フェニルカルバメート水素、イピダクリン、スタコフィリン、ガランタミン、ガランタミン類縁体、リコラミン、リコラミン類縁体、フィゾスチグミン、アンベノニウム、ネオスチグミン、メトリホネート、セレギン、メトリホネート、ガランタミン、３−［１−（フェニルメチル）ピペリジニル−４−イル］−１−（２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンザゼピン−８−イル）−１−プロパノン、５，７−ジヒドロ−３−［２−（１−（フェニルメチル）−４−ピペリジニル）エチル］−６Ｈ−ピロロ−［４，５−ｆ］−１，２−ベンゾイソオキサゾール−６−オン、４，４’−ジアミノジフェニルスルホン、ピリドスチグミン、ピロロインドールのテトラヒドロイソキノリニルカルバメート、またはそれらの類縁体および混合物である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬がドネペジルまたはその薬学的に許容できる塩もしくは誘導体である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬がタクリンまたはその薬学的に許容できる塩もしくは誘導体である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬がリバスチグミンまたはその薬学的に許容できる塩もしくは誘導体である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬がガランタミンまたはその薬学的に許容できる塩もしくは誘導体である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
さらに、ＣＯＸ−２阻害薬、ヒューペルジン（セレギン）および４，４’−ジアミノジフェニルスルホンよりなる群から選択される併用治療薬を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬が天然の神経生体分子ではない、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記医薬組成物が、ガングリオシド、ホスファチジルセリン、脳由来神経栄養因子、線維芽細胞増殖因子、インスリン、インスリン様増殖因子、毛様体神経栄養因子、グリア細胞由来ネキシン、コリン作動性促進因子、ホスホエタノールアミンおよび甲状腺ホルモンＴ３よりなる群から選択される天然の神経生体分子を実質的に含まない、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記医薬組成物が、Ｇ−１ガングリオシドを実質的に含まない、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記医薬組成物が、神経細胞の増殖を刺激する天然の神経生体分子を実質的に含まない、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記透過促進剤が下記のものから選択される、請求項１に記載の医薬組成物：
（ａ）凝集阻害剤；
（ｂ）電荷修飾剤；
（ｃ）ｐＨ制御または緩衝剤；
（ｄ）レドックス制御または緩衝剤；
（ｅ）分解酵素阻害剤；
（ｆ）粘液溶解剤または粘液清澄剤；
（ｇ）線毛制止剤；
（ｈ）下記のものから選択される吸収促進剤（ｉ）界面活性剤、（ｉｉ）胆汁酸塩、（ｉｉ）リン脂質添加物、混合ミセル、リポソームもしくはキャリヤー、（ｉｉｉ）アルコール類、（ｉｖ）エナミン類、（ｖ）ＮＯ供与化合物、（ｖｉ）長鎖両親媒性分子、（ｖｉｉ）小分子疎水性浸透促進剤、（ｖｉｉｉ）ナトリウムもしくはサリチル酸誘導体、（ｉｘ）アセト酢酸グリセロールエステル、（ｘ）シクロデキストリンもしくはβ−シクロデキストリン誘導体、（ｘｉ）中鎖脂肪酸、（ｘｉｉ）キレート化剤、（ｘｉｉｉ）アミノ酸もしくはその塩、（ｘｉｖ）Ｎ−アセチルアミノ酸もしくはその塩、（ｘｖ）選択された膜成分に対して分解性の酵素、（ｉｘ）脂肪酸合成阻害剤、または（ｘ）コレステロール合成阻害剤；あるいは（ｘｉ）（ｉ）〜（ｘ）に記載の膜浸透促進剤のあらゆる組合わせ；
（ｉ）上皮結合生理の変調剤；
（ｊ）血管拡張剤；
（ｋ）経粘膜送達促進のためにアセチルコリンエステラーゼ阻害薬と効果的に混和、会合、内包、封入もしくは結合されて該アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の安定化をもたらす安定化送達ビヒクル、キャリヤー、支持剤または複合体形成種；ここで１種類以上の前記送達促進剤と前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の配合は、前記処置対象の中枢神経系の組織または流体におけるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の生体内利用能の増大を与える；および
（ｌ）保湿剤または膜安定剤。
【請求項１７】
複数の前記透過促進剤を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
複数の前記吸収促進剤を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記吸収促進剤がグリシレチン酸またはその誘導体を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
さらに、キトサンまたはキトサン誘導体を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記キトサンまたはキトサン誘導体がポリ−ＧｕＤである、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記医薬組成物がｐＨ３．０〜６．０を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記医薬組成物がｐＨ３．０〜５．０を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記医薬組成物がｐＨ３．０〜４．０を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬を前記哺乳動物に約０．１〜約１００ｍｇの有効量で投与する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記透過促進剤が、クエン酸、クエン酸ナトリウム、プロピレングリコール、グリセリン、Ｌ−アスコルビン酸、メタ亜硫酸水素ナトリウム、エデト酸二ナトリウム、塩化ベンザルコニウム、水酸化ナトリウム、およびそれらの混合物よりなる群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬がプロドラッグである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
さらに、鼻刺激を軽減するための膜安定剤を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
鼻刺激を軽減するための前記膜安定剤がビタミンＥまたはビタミンＥ誘導体である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
前記医薬組成物は、前記哺乳動物への鼻腔内投与後に、該哺乳動物の中枢神経系の組織または流体中において、少なくとも該哺乳動物の血漿中のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の治療的血漿濃度に等しいアセチルコリンエステラーゼ阻害薬ピーク濃度を与える、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬がドネペジルまたはその薬学的に許容できる塩もしくは誘導体である、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬がタクリンまたはその薬学的に許容できる塩もしくは誘導体である、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬がリバスチグミンまたはその薬学的に許容できる塩もしくは誘導体である、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
前記経鼻投与が、前記哺乳動物の一方または両方の鼻粘膜表面への前記組成物の送達を伴う、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の療法的投与による治療を必要とする哺乳動物において疾患または症状を治療または予防するための方法であって、請求項１に記載の医薬組成物を哺乳動物に鼻腔内投与する工程を含む方法。
【請求項３６】
前記医薬組成物を複数回用鼻腔ディスペンサー内の単一液剤として投与する、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の療法的投与により処置できる疾患または症状がアルツハイマー病である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３８】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の療法的投与により処置できる疾患または症状がパーキンソン様痴呆である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３９】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の療法的投与により処置できる疾患または症状がハンチントン型痴呆である、請求項３５に記載の方法。
【請求項４０】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の療法的投与により処置できる疾患または症状がピック型痴呆である、請求項３５に記載の方法。
【請求項４１】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の療法的投与により処置できる疾患または症状がエイズ関連痴呆またはせん妄である、請求項３５に記載の方法。
【請求項４２】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の療法的投与により処置できる疾患または症状が血管障害の続発性痴呆である、請求項３５に記載の方法。
【請求項４３】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の療法的投与により処置できる疾患または症状が中等度の認知障害である、請求項３５に記載の方法。
【請求項４４】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の療法的投与により処置できる疾患または症状がクルツフェルト−ヤコブセン型痴呆である、請求項３５に記載の方法。
【請求項４５】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の療法的投与により処置できる疾患または症状が学習障害である、請求項３５に記載の方法。
【請求項４６】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の療法的投与により処置できる疾患または症状がニコチン離脱症候群である、請求項３５に記載の方法。
【請求項４７】
前記投与が哺乳動物の鼻粘膜表面への医薬組成物の送達を伴う、請求項３５に記載の方法。
【請求項４８】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬がタクリンまたはその薬学的に許容できる塩もしくは誘導体である、請求項３５に記載の方法。
【請求項４９】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬がリバスチグミンまたはその薬学的に許容できる塩もしくは誘導体である、請求項３５に記載の方法。
【請求項５０】
前記アセチルコリンエステラーゼ阻害薬を哺乳動物に約０．１〜１００ｍｇの有効量で投与する、請求項３５に記載の方法。
【請求項５１】
経粘膜薬物取込みのための前記透過促進剤が下記のものから選択される、請求項３５に記載の方法：
（ａ）凝集阻害剤；
（ｂ）電荷修飾剤；
（ｃ）ｐＨ制御剤；
（ｄ）分解酵素阻害剤；
（ｅ）粘液溶解剤または粘液清澄剤；
（ｆ）線毛制止剤；
（ｇ）下記のものから選択される膜浸透促進剤：（ｉ）界面活性剤、（ｉｉ）胆汁酸塩、（ｉｉ）リン脂質の付加物、混合ミセル、リポソームもしくはキャリヤー、（ｉｉｉ）アルコール類、（ｉｖ）エナミン類、（ｖ）ＮＯ供与化合物、（ｖｉ）長鎖両親媒性分子、（ｖｉｉ）小分子疎水性浸透促進剤、（ｖｉｉｉ）ナトリウムもしくはサリチル酸誘導体、（ｉｘ）アセト酢酸グリセロールエステル、（ｘ）シクロデキストリンもしくはα−シクロデキストリン誘導体、（ｘｉ）中鎖脂肪酸、（ｘｉｉ）キレート化剤、（ｘｉｉｉ）アミノ酸もしくはその塩、（ｘｉｖ）Ｎ−アセチルアミノ酸もしくはその塩、（ｘｖ）特定の膜成分に対して分解性の酵素、（ｉｘ）脂肪酸合成阻害剤、または（ｘ）コレステロール合成阻害剤；あるいは（ｘｉ）（ｉ）〜（ｘ）に示す膜浸透促進剤の組合わせ；
（ｈ）上皮結合生理の変調剤；
（ｉ）血管拡張剤；
（ｊ）選択的輸送促進剤；および
（ｋ）経粘膜送達促進のためにアセチルコリンエステラーゼ阻害薬と効果的に混和、会合、内包、封入もしくは結合されてアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の安定化をもたらす安定化送達ビヒクル、キャリヤー、支持剤または複合体形成種；ここで該アセチルコリンエステラーゼ阻害薬に１以上と前記送達促進剤の配合は、前記被検体の中枢神経系の組織または流体中におけるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の生体内利用能の増大を与える；および
（ｍ）保湿剤または膜安定剤。
【請求項５２】
前記透過促進剤が、クエン酸、クエン酸ナトリウム、プロピレングリコール、グリセリン、Ｌ−アスコルビン酸、メタ亜硫酸水素ナトリウム、エデト酸二ナトリウム、塩化ベンザルコニウム、水酸化ナトリウム、およびその混合物よりなる群から選択される、請求項３５に記載の方法。
【請求項５３】
前記医薬組成物は、哺乳動物への鼻腔内投与後に、該哺乳動物の中枢神経系の組織または流体中において、該哺乳動物の血漿中におけるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬のピーク濃度の少なくとも１０％であるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬ピーク濃度を与える、請求項３５に記載の方法。
【請求項５４】
前記医薬組成物は、哺乳動物への鼻腔内投与後に、該哺乳動物の中枢神経系の組織または流体中において、該哺乳動物の血漿中におけるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬のピーク濃度の少なくとも１５％であるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬ピーク濃度を与える、請求項３５に記載の方法。
【請求項５５】
前記医薬組成物は、哺乳動物への鼻腔内投与後に、該哺乳動物の中枢神経系の組織または流体中において、該哺乳動物の血漿中におけるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬のピーク濃度の少なくとも２０％であるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬ピーク濃度を与える、請求項３５に記載の方法。
【請求項５６】
前記医薬組成物は、哺乳動物への鼻腔内投与後に、該哺乳動物の中枢神経系の組織または流体中において、該哺乳動物の血漿中におけるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬のピーク濃度の少なくとも２５％であるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬ピーク濃度を与える、請求項３５に記載の方法。
【請求項５７】
前記医薬組成物は、哺乳動物への鼻腔内投与後に、該哺乳動物の中枢神経系の組織または流体中において、該哺乳動物の血漿中におけるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬のピーク濃度の少なくとも３０％であるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬ピーク濃度を与える、請求項３５に記載の方法。
【請求項５８】
前記医薬組成物は、哺乳動物への鼻腔内投与後に、該哺乳動物の中枢神経系の組織または流体中において、該哺乳動物の血漿中におけるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬のピーク濃度の少なくとも４０％であるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬ピーク濃度を与える、請求項３５に記載の方法。
【請求項５９】
前記医薬組成物は、哺乳動物への鼻腔内投与後に、前記処置対象の中枢神経系の組織または流体中において、対象の血漿中におけるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の治療的濃度より高いアセチルコリンエステラーゼ阻害薬ピーク濃度を与える、請求項３５に記載の方法。
【請求項６０】
ａ．経鼻用量を投与するための手段；および
ｂ．請求項１に記載の医薬組成物
を含む製品。
【請求項６１】
経鼻用量を投与するための手段が鼻腔ディスペンサー、タンポン、スポンジ、注入器、噴霧器またはポンプである、請求項６０に記載の製品。
【請求項６２】
請求項１に記載の医薬組成物を、販売および配送に適したパッケージ内に含む製品。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
アセチルコリンエステラーゼ阻害薬は、中枢神経系の疾患および障害を予防および治療するための重要なクラスの薬物である。これらの疾患には、特に下記のものを含めた、哺乳動物における記憶喪失、認知障害および痴呆を伴う神経症状が含まれる：アルツハイマー病、パーキンソン型痴呆、ハンチントン型痴呆、ピック型痴呆、ＣＪ型痴呆、エイズ関連痴呆、レーヴィ体痴呆、レット症候群（Ｒｅｔｔ’ｓ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、てんかん、脳の悪性疾患または腫瘍、多発性硬化症関連の認知障害、ダウン症候群、進行性核上麻痺、特定の型の統合失調症、うつ病、躁病および関連の精神症状、トゥーレット症候群、重症筋無力症、注意欠陥障害、自閉症、読字障害、各種形態のせん妄、または血管性発作もしくは脳内出血および脳外傷の後遺症としての痴呆、それらの慢性、急性および再発性形態。たとえばアルツハイマー病の病的変化は、皮質下領域の、および基底前脳（特にマイネルト側坐核）から大脳皮質および海馬へ突出する神経経路の、コリン作動性ニューロンの変性を伴う（Ｒｏｂｅｒｔ  ＰＨ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，”コリン作動仮説とアルツハイマー病：ドネペジル（ｄｏｎｅｐｅｚｉｌ）（Ａｒｉｃｅｐｔ）の作用部位”，Ｅｎｃｅｐｈａｌｅ  ５：２３−５および２８−９）。これらの経路は記憶、注意、学習その他の認知プロセスに複雑に関与すると考えられる。
【０００２】
痴呆の初期徴候は、軽度の認知障害および記憶障害として現れる。これはアルツハイマー病などの原疾患においては徐々に進行し、血管塞栓症や出血性動脈瘤においては突然発症する。進行した型の痴呆は、攻撃性行動、不合理な妄想性思考過程、記憶喪失、嗅覚喪失、およびしばしば白内障を伴う。非血管性痴呆は常に、神経本体および鞘における特定のタンパク質の異常な沈着に関連する。アルツハイマー病においては、アミロイドタンパク質の異常な沈着を斑と呼ぶ。他の特異なタンパク質を含む斑が、認知障害を伴うパーキンソン病、ハンチントン病、ピック病およびプリオン病に出現する。これらの斑は剖検に際して組織学的に確認できる。痴呆においてはタウタンパク質の緻密な絡まりも細胞内にみられる。幾つかの遺伝子座における特定の対立遺伝子（最も注目すべきものはＡｐｏＥ  ｅ４対立遺伝子）は、晩発性痴呆の高発症率を伴うことが認められた。晩発型および早発型の疾患は発症年齢により区別される；６５歳を晩発に対する”早発”の区切りとみなすことができる。
【０００３】
血管性痴呆は歩行異常および尿失禁など特異な症状を呈することがあり、これは特に一般に多発性脳梗塞、脳内出血、卒中、またはライム病の感染性血管炎、および紅斑性狼瘡の自己免疫性血管炎によるものである。
【０００４】
痴呆およびせん妄のすべての試験法のうち、最も客観的で迅速な方法は認知試験である。ヒトの標準試験法は、特にライ（Ｒｅｙｅ）聴覚言語学習試験、ミニメンタルステート試験（ＭＭＳＥ）、ウェシュラー（Ｗｅｓｃｈｅｒ）論理記憶試験、または選択的回想試験である。認知サブスケールもアルツハイマー病評価尺度（ＡＤＡＳ−ｃｏｇ）の主要な指標であり、短期記憶、場所や時間の見当識、注意範囲、言語能力および実行を同時に評価する。ＡＤＡＳ−ｃｏｇ試験は診断に用いられ、得点が高いほど認知障害があることを示すが、処置の効果を評価するためにも使用できる。タクリン（ｔａｃｒｉｎｅ）、ドネペジル（ｄｏｎｅｐｅｚｉｌ）および長時間作用型リバスチグミン（ｒｉｖａｓｔｉｇｍｉｎｅ）の使用後に得点の低下が認められた。
【０００５】
アセチルコリンエステラーゼ阻害薬は、コリン作動性機能を増強することにより、すなわちコリンエステラーゼによる酵素加水分解の可逆的阻害によってアセチルコリンの濃度を高めることにより、中枢神経系におけるそれらの治療効果を及ぼすと考えられる。この薬物療法は、ニコチン離脱症状および睡眠無呼吸、ならびに前記の痴呆およびせん妄状態の処置にも、何らかの意味をもつ。現在市販されている３種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬は、錠剤およびカプセル剤の形で経口投与される。経口送達に際しては、標的臓器である脳に到達する前に、薬物は消化管を下降し、十二指腸および回腸の毛細血管内へ吸収され、門脈に入り、次いで肝臓へ輸送される。残念ながら、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の経口送達は特に下記を含めた幾つかの欠点をもつ：
（１）肝初回通過による代謝およびクリアランス；
（２）消化酵素および消化管の酸性ｐＨ条件による、消化管内での薬物分解；
（３）特に食物摂取により影響を受けるため、取込みおよび生体内利用能が低く、かつ推定不能；ならびに
（４）吐き気、嘔吐、鼻水、下痢、食欲低下、および重篤な症例では非回復性の食道裂傷を含めた重篤な副作用。
【０００６】
ＡＣＥ阻害薬リバスチグミンを投与されているアルツハイマー患者における食道裂傷の最近の報告（Ｋｕｍａｒ  Ｖ．２００１，リバスチグミンに関連する特発性食道裂傷（ベールハーブ症候群（Ｂｏｅｒｈａａｖｅ’ｓ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ），Ａｇｅ  Ａｇｉｎｇ  ３０：１７７）は、衰弱した患者にこれらの薬物を経口投与することの危険性を強調している。食道の縦裂傷は外科修復できない場合がしばしばある。
【０００７】
コリンエステラーゼの注射または局所適用の可能性が表面的に開示され、ドネペジルの適切な注射用剤形を得るために十分な情報は開示されている：ＰＣＴ／ＵＳ０１／０７０２７。しかし、注射用剤形は筋肉質量の少ない多くの患者に不適切であり、免疫系が十分に機能していない患者には本来危険であり、かつ余分な経費、時間および訓練を必要とする。１日４回に及ぶこれらの薬物の投与が必要であることを考慮すると、侵襲度の高い注射による投与経路は、患者を入院させて中心静脈ラインを常時開放しておかない限り、全く受け入れられない代替法であると思われる。
【０００８】
アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の送達のために考慮された他の方法は、吸入および肺粘膜を介した吸収によるものである。この方法はＰＣＴ／ＵＳ０１／０７０２７（”コリンエステラーゼ阻害薬の新規な使用方法”）中で言及されている。これには、エアゾールスプレー剤および微粉末固体剤形を加圧スプレーまたは補助換気により鼻または口から投与すると肺に到達できると開示されている。これらの吸入剤形には、注入器または噴霧器に入れて使用するために噴射剤が配合される。しかし、広い肺胞表面に達するためには特殊な装置を必要とする場合がしばしばある。これらの配合物は、直径１０ｕｍ未満の粒度をもつきわめて微細なミストまたは粉末を得るための噴射剤その他の手段を必要とする。次いでミストまたは粉末を口または鼻から肺へ投与する（挿管法を採用）。可能であれば、喘息、慢性閉塞性肺疾患、肺気腫または老化による身体衰弱の患者の場合のように、投与中に自発的に吸入するように患者を訓練しなければならず、あるいは加圧呼吸補助が必要であろう。一般にこれらの患者の場合、効果的な投薬を達成するためには熟練した技術者の補助が必要である。残念ながらミストまたは粉末の投与の一貫性には問題があり、大部分の研究は高密度粉末を目標としている。薬物の溶液、特に水溶液は、吸入療法に適した沈降の遅い密なミクロエアゾール剤を形成するのに必要な低い表面張力をもたないからである。用いられる方法は高齢の患者が家庭で自ら容易に投与できるものではなく、特殊な送達用具および投与経路に関連する経費のため本来高価である。計量投薬吸入は市販されているうち最も複雑な薬物送達システムのひとつである。エアゾール剤の吸入による薬物送達に用いる加圧用具に関する情報はさらにＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，第１９版，９５章”エアゾール剤”に、薬物送達のための吸入経路の定義は４１章”薬物の吸収、作用および分布”に薬物の吸収：吸入経路という表題で提供されており、これを経鼻法および経口法による吸入薬物送達の定義として本明細書に引用する（後記参照）。
【０００９】
したがって、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の送達に関してはなお問題がある。求められているのは、たとえば中枢神経系の疾患および障害を予防および治療するためのアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の簡単な改良された送達方法であって、経口送達に伴う毒性および低い生体内利用能、ならびに注射および吸入療法による高い経費、訓練および投薬の困難さを避ける方法である。本発明の方法および組成物は急を要するこの要望を満たすものである。
【００１０】
脳障害の治療に際して他の薬物を鼻腔内に、すなわち吸入のための配合物や用具を用いずに送達する試みがある。たとえばＵＳ−Ｂ−６，１８０，６０３には、すべて脳に天然に存在する内在性タンパク質、ペプチドおよび複合脂質のオートロガスカウンターパートである治療薬を能動的に経軸索送達するための方法が開示されている。このクラスの薬物の送達は、ニューロン内輸送により神経細胞本体および膜に行われる。具体的には、この特許には、インスリン、インスリン様増殖因子、神経増殖因子、ガングリオシド、ホスファチジルセリン、脳由来神経栄養因子、線維芽細胞増殖因子、グリア細胞由来ネキシン、毛様体神経栄養因子およびコリン作動性促進因子を嗅神経の軸索により輸送することが開示されている。しかし、合成複素環式アミン、置換ピペリジンおよび置換フェノール、さらにアセチルコリンエステラーゼ阻害薬、特に天然に存在しない外因性（ｘｅｎｏｇｅｎｉｃ）アセチルコリンエステラーゼ阻害薬を含めた、天然に存在しない外因性薬物をこの機序により鼻腔内送達する有用な方法は、開示または教示されていない。傍細胞（ｐａｒａｃｅｌｌｕｌａｒ）および経細胞（ｔｒａｎｓｃｅｌｌｕｌａｒ）取込みを高めるのに有用な賦形剤は開示されていない。
【００１１】
アセチルコリンエステラーゼ阻害薬および少なくとも１種類の透過促進剤を含有する本発明の医薬組成物を鼻腔内投与法によって有効な量で送達できることは、全く予想外であった。これらのカチオン性薬物は身体にとって天然ではなく、代謝および排出のために肝臓へ送達される以外に、脳その他の臓器へ優先的に送達されるとは予想されなかったからである。
【００１２】
ＡＣＥ阻害薬について本明細書に述べる取込みは、実質的に傍細胞性である。しかもその促進が傍細胞性であるので、薬物は速やかに脳脊髄液および血液に入り、そこから脳全体へ分配される。小分子外因性モデル薬物としてのアポモルフィンについて収集されたデータは、皮質、中脳、延髄、小脳および脳脊髄液において高い濃度を示す。アポモルフィンについての脳脊髄液データは、経口または静脈内投与を用いた対応する研究から予想されたものより高い。推定ではあるが、これはクモ膜下叢によるものであろう。
【００１３】
本発明は、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬を傍細胞性鼻腔内送達により中枢神経系へ送達するための方法および組成物に関する。哺乳動物の鼻腔の豊富な血管叢により、粘膜を容易に通過するアセチルコリンエステラーゼ阻害薬が血流に入る直接経路が得られる。血流中へ直接吸収されるため、消化器破損および肝初回通過代謝の問題が避けられ、これにより経口送達と対比して薬物の生体内利用能が改善される。本発明の方法および組成物は、経口または注射による投与に伴う欠点および副作用なしに、哺乳動物の中枢神経系において他の単純な送達方式より高い生体内利用能および最大濃度をもたらす。具体的には、現在の経口送達方法に伴う重篤な消化器問題が避けられる。
【００１４】
本発明の医薬組成物は、鼻から肺へ通過するアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の輸送を最小限に抑える。当技術分野で周知のように、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬はブチルコリンエステラーゼ阻害薬と若干の交差反応性をもつ。ブチルコリンエステラーゼは構造的に関連する酵素ファミリーであるが、生物学的機能は著しく異なる。アセチルコリンエステラーゼを阻害すると有益なシナプス内アセチルコリン蓄積が得られるのに対し、ブチルコリンエステラーゼを阻害すると、特に阻害薬が肺に侵入した場合には呼吸不全が起きる可能性がある。この毒性は、広く知られている毒物および殺虫剤としてのブチルコリンエステラーゼ阻害薬の用途の基礎となる。したがって、疾患の処置における商業的な用途として鼻腔適用を提供する本発明方法は、配合物の接触を鼻甲介および咽頭口腔部に限定するように特別に設計されている。スプレーの小滴サイズは約２０〜１００ｕｍより大きく、したがってスプレー小滴は直ちに鼻粘膜へ落下し、肺にエアゾールとして侵入することはない。数滴が逃れて咽頭口腔部に侵入する可能性はあるが、本質的に肺にエアゾールの形で侵入する物質はないであろう。鼻腔内適用のためのゲル配合物を簡単なポンプまたは圧搾用具で適用しても、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬が肺に侵入することはない。投与体積は一般に鼻孔当たり０．９ｍＬ未満、より好ましくは鼻孔当たり０．２ｍＬ未満、最も好ましくは鼻孔当たり０．１ｍＬ以下に限定される。点鼻薬を用いてもリスクはない。したがって、本発明の製剤は安全であるように設計され、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬について用いる場合に経鼻または経口吸入法では明らかに生じる可能性のある毒物中毒を生じることはない。
【発明の要旨】
【００１５】
第１態様において本発明は、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の療法的投与による治療を必要とする哺乳動物において疾患または症状を治療または予防するための、
ａ．少なくとも１種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の経鼻投与のための液体またはゲル溶液；および
ｂ．経粘膜薬物取込みのための少なくとも１種類、好ましくは複数の透過促進剤
を含む医薬組成物に関する。
【００１６】
これらの疾患には、哺乳動物においてアルツハイマー病および認知障害を伴う他の神経症状が含まれる。
好ましくは、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬はドネペジル、タクリン、リバスチグミン、またはその薬学的に許容できる塩もしくは誘導体である。好ましくは、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬は天然の神経生体分子を実質的に含まない。ある態様においては、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬を哺乳動物に１回当たり約０．１〜約１００ｍｇの有効量で、最高で１日６回、より好ましくは１回当たり約１〜５０ｍｇ、最も好ましくは１回当たり約１．５〜１２ｍｇ投与する。好ましくは１日１回投与するが、１日４回またはそれ以上も許容される。耐容性を発現させるために、投与量を漸増させるべきであろう。投与方式は症状の程度および重症度、体重、腎不全または硬変および担当の医師または獣医が評価できる他の要因の存否に依存すると予想され、広範に変更できる。
【００１７】
他の好ましい態様において、本発明の医薬組成物は、哺乳動物に鼻腔内投与した後、該哺乳動物の中枢神経系の組織または流体中において、少なくとも該哺乳動物の血漿中におけるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の治療的血漿濃度に等しい、好ましくはそれより少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、より好ましくは３５％、最も好ましくは４０％高いアセチルコリンエステラーゼ阻害薬ピーク濃度をもたらす。さらに研究することによりこれの改善が予想される。
【００１８】
他の態様において本発明は、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の療法的投与による治療を必要とする哺乳動物において疾患または症状を治療または予防する方法であって、
ａ．少なくとも１種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の経鼻投与のための液体またはゲル溶液；および
ｂ．経粘膜薬物取込みのための少なくとも１種類、好ましくは複数の透過促進剤
を含む医薬組成物を投与する工程を含む方法に関する。
【００１９】
好ましくは、医薬組成物の成分を同時、逐次、または個別に投与する。好ましくは、医薬組成物を単一液剤として投与する。最も好ましくは、組成物の成分を鼻腔内投与する。
他の態様において本発明は、前記組成物と共に使用する投与用具、好ましくは鼻腔ディスペンサーまたはポンプに関する。所望により、これらは多数回投与用具であってもよい。他の態様において本発明は、販売および配送に適した、子供が開けられないパッケージ内にある前記医薬組成物を含む製品に関する。
【００２０】
本明細書中で用いる下記の定義を特許請求の範囲および明細書の説明に際しての補助とする。報文を援用した際、それに含まれる定義が本明細書に示すものと一致しない場合、そこで用いられている定義はその報文にのみ適用すべきであり、本明細書の開示に適用すべきでない。
【００２１】
”哺乳動物”には、乳房から分泌される乳汁で子供に栄養を与え、通常は多少とも体毛で覆われた皮膚をもつ、いずれかの綱の温血高等脊椎動物が含まれ、これには雌雄両方のヒトおよびヒト以外の霊長類、それらの子（新生児および未成年を含む）、家畜種、たとえばウマ、ウシ、ヒツジおよびヤギ、ならびに研究および愛玩用の種、たとえばイヌ、ネコ、マウス、ラット、モルモットおよびウサギが含まれるが、これらがすべてではない。”患者”または”対象”は本明細書において”哺乳動物”と互換性をもって用いられる。
【００２２】
”痴呆”は、意識の鮮明さが損傷または喪失した広範な知的機能衰退を意味し、短期記憶の障害、判断力の障害、合理的知性の障害、および／または場所や時間に関する見当識の障害のうち１以上の症状を特徴とする。痴呆は、一般的にみられるように器質性脳疾患を伴う場合は”不可逆的”であると考えられている。痴呆は常に、自立した生活様式の遂行不能を伴う。痴呆の症状には認知障害の症状が含まれるが、それより重症である。
【００２３】
”認知障害”は、記憶、問題解決力、抽象的な理性および見当識の障害であり、このため個体が自立した生活様式を維持する能力が低下する。軽度の認知障害はアルツハイマー病のレベルまで悪化することがなく、老化において異例ではない。鑑別は、日常的な事柄の遂行に際して錯乱を生じるような記憶障害である。
【００２４】
”鼻腔内送達”は、薬物を主に鼻腔粘膜から送達することを意味する。これには、上、中および下鼻甲介ならびに咽頭が含まれる。嗅覚領域が鼻甲介の上部（上１／３）に集中していることを留意されたい。線毛（ｃｉｌｉａ）の作用により物体は咽頭口腔部へ押しやられるので、鼻前庭に置かれた物体は咽喉に進入する前に鼻粘膜に遭遇する。
【００２５】
”アセチルコリンエステラーゼ阻害薬”は、アセチルコリンエステラーゼによるアセチルコリンの加水分解を可逆的に阻害することによりアセチルコリンの濃度を高める外因性または天然の化合物を意味する。
【００２６】
”天然の神経生体分子”は、哺乳動物により遺伝子コードされるか、または哺乳動物の正常な代謝において形成され、哺乳動物の脳または脳脊髄液中にみられる、いずれかの細胞性または体液性信号伝達分子を表わす。天然の神経生体分子には、たとえばガングリオシド、ホスファチジルセリン、脳由来神経栄養因子、線維芽細胞増殖因子、インスリン、インスリン様増殖因子、毛様体神経栄養因子、グリア細胞由来ネキシン、コリン作動性促進因子、ホスホエタノールアミンおよび甲状腺ホルモンＴ３が含まれる。ホスファチジルセリンなどの脂質は、これらの分子に特異的な小胞輸送機序の成分であると考えられる。これに対し、本発明の対象であるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬はｅｘ  ｖｉｖｏ合成された天然に存在しない化学物質であり、本明細書においては”外因性分子”、すなわち”外因性アセチルコリンエステラーゼ阻害薬”と呼ぶことを留意されたい。
【００２７】
本明細書において”外因性（ｘｅｎｏｇｅｎｉｃ）”は、ヒトの化学技術による何らかの合成物であって、哺乳動物の生合成経路の天然生成物として天然にはみられるものではないことを表わす。
【００２８】
”天然”は、植物源または動物源（油脂性および石油系の堆積物を含む）から抽出または誘導された生体分子を表わす。
”吸入経路”：Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎの記載によれば、”吸入は、大部分の全身麻酔薬の場合のようにガス状または揮発性の物質を全身循環内へ送達するために採用できる。肺胞および血管の上皮膜はかなり透過性であり、血流が豊富で、吸収のためのきわめて大きな表面積があるので、薬物を肺胞内へ送達するのと実質的に同じ速度で吸収される。不揮発性物質のエアゾール剤も吸入により投与できる。ただし、この経路は血中濃度の不規則性および到達しにくさに関与する多様な要因のため、全身循環内への送達に用いられる頻度は低い。エアゾール剤が肺胞に到達してそこに保持されるか否かは、厳密に粒径に依存する。直径１ｕｍより大きな粒子は細気管支および気管支内で沈降し、一方０．５ｕｍ未満の粒子は沈降できずに大部分が呼出される”；ＭＲ  Ｆｒａｎｋｌｉｎ，”薬物の吸収、作用および分布”，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，第１９版，ｐｐ７１１−１２。
【００２９】
”鼻腔経路”：鼻甲介を内張りする鼻粘膜に直接適用することにより、薬物を鼻腔内投与してもよい。粘膜は血管に富み、脆弱で、外鼻孔から咽頭口腔部上限および副鼻腔路（ｓｉｎｕｓ  ｐａｓｓａｇｅ）下限まで伸びている。鼻粘膜に適用された薬物は、傍細胞拡散（受動）または経細胞（受動、または促進拡散、すなわち能動輸送）により粘膜を透過する。受動拡散は１キロダルトン未満のサイズの分子に用いるのに最も簡便であり、何らかの実質的な取込みには５キロダルトンまでが最大であろう。しかし、鼻腔経路の投与による取込みにはそのような制限がない。数百キロダルトンに達するペプチドおよびタンパク質の経鼻取込みが、この数年間で証明されている。粘膜バリヤーを通過した薬物は、初回通過での肝臓を迂回して鼻毛細血管および全身循環に入る。薬物は嗅神経束または三叉神経束にも進入し、軸索内を中枢神経系（ＣＮＳ）へ輸送されると考えられる。さらに、薬物はクモ膜下叢により脳脊髄液（ＣＳＦ）中へも拡散し、脳脊髄液流内を脳の他の部分および脊髄へ輸送されると推測されている。このように鼻腔投与経路は多数の通路をもち、中枢神経系を標的とする薬物に特に関連がある。
【００３０】
”薬学的に許容できる”は、指示した投与経路でヒトまたは哺乳動物に投与した場合に、その化合物の投与により得られる有益性に対して許容できないほど不釣り合いな有害作用を誘発しない組成物を表わす。治療用物質が有害作用源である可能性はあるが、場合によっては他の賦形剤と交換することによりこの毒性が緩和される可能性があることも留意されたい。賦形剤自体が毒性源である場合、配合変更によりその不都合は除かれるであろう。ある薬物送達経路に必要な賦形剤が他の経路には不必要な可能性がある。したがって、薬物配合技術には薬物送達経路の選択と賦形剤の選択の両方が含まれる。
【００３１】
”送達システム”は、秤量された量または十分な量の薬物を選択した投与経路により送達するのを促進し、そのために用いられる配合物（用具を伴うもの、または伴わないもの）を薬学的に許容できるものにするために使用する、賦形剤の組合わせを表わす。
【００３２】
”透過促進剤”は、鼻腔内薬物投与用の組成物中において送達全般、投与量の一貫性および／または薬学的許容性を高める賦形剤を表わす。促進の評価方法は定量法であり、本明細書の実施例中に規定される。機能的なインビトロ細胞ベースの試験および方法を用いて、薬物分子自体の作用と、賦形剤を配合して投与した同一量の薬物分子の作用とを比較する。”促進”は、全体的な生体内利用能、正味取込み量、取込みおよび投与量の一貫性、薬物代謝、投与中の分解、作用部位への薬物ターゲティング、粘膜刺激、ならびに全般的な安全性および毒性を含めた、多面的な意味のものである。場合によっては、快感および副作用などの要因を犠牲にして、相対的な薬物有益性を採用して配合物の賦形剤組成を最適化する。”薬学的許容性”を定義した際に説明したように、療法の有益性が送達の不快感より優先される場合がある。長期投与も考慮しなければならない。しかし、送達全般が許容できないほど損なわれない場合、快感および安全性を最適化する。バランスの説明として、ｐＨが薬物の安定性およびその経粘膜流入量を改善する可能性はあるが、鼻腔内投与する場合、ｐＨ３〜８．５は痛みおよび組織損傷をもたらす可能性がある。このように、賦形剤の配合に際しては常に配慮すべきバランスがある。
【００３３】
”約”は、それが表わす公称数値の±２０％の近似を示す相対用語である。医薬および臨床医療、ならびに本発明の対象である同様な技術の分野については、その数値が厳密でなければならないかまたはより狭い範囲が要求されると具体的に述べられていない限り、このレベルの近似が適切である。
【００３４】
”実質的に含まない”は、本発明組成物中のある有効成分の濃度について、その有効成分が組成物中の有効成分の全重量を基準として２０％未満、好ましくは１０％未満、より好ましくは５％未満、最も好ましくは１％未満を構成することを表わす。
【００３５】
”分解生成物”は、一般に薬物に関して、インビトロで貯蔵、溶解、または安定性試験の際に、熱、光、共存溶質および溶剤の影響下で起きる化学反応の生成物を表わし、代謝産物とは異なる。
【００３６】
”代謝産物”は、一般に薬物に関して、インビボで起きる化学反応または酵素反応の生成物を表わし、分解生成物とは異なる。
”鼻粘膜”は、鼻腔の内張りを表わし、これは血管に富み、内部へ咽頭口腔部上限および副鼻腔まで伸びている。これには上鼻甲介、中鼻甲介および下鼻甲介が含まれる。ヒトにおいて嗅覚上皮以外の大部分の上皮がみられるのは後の２つである。
【００３７】
”液剤”は、液状の溶液または配合物を表わす。必ずしもすべての液剤が水性ではないこと、および液剤の挙動が温度依存性である頻度が低くないことを留意されたい。
”水性”は、水中に形成された溶液を表わすが、少量の他の補助溶剤を含有してもよい。必ずしもすべての水性液剤が液体ではないことを留意されたい。
【００３８】
”ゲル”は、水性その他の増粘した溶液であって、薬物送達ビヒクルとして使用でき、また鼻腔内適用する場合、スプレー剤または軟膏剤として投与できるものを表わす。
”短鎖”は、炭素長さＣ12以下を表わし、炭素鎖は脂肪族または分枝鎖であってよい。
【００３９】
”安定性”または”貯蔵中の安定性”は、商業的に適切な時間間隔および貯蔵条件の関数として測定した組成の変化を表わし、たとえば濃度、分解、粘度、ｐＨまたは粒度などのパラメーターにおいて商業的貯蔵期限に適切な時間間隔で１０％より高い変化を不安定と表示する。１０％以下の変化は安定を表わす。安定性を測定する期間は、その組成物について予定した商業販売および貯蔵の条件に応じた相対的なものである。長期間にわたる安定性を外挿する、より迅速な方法として、高温での”促進安定性試験”を採用することがしばしばある。たとえば制御された室温で１年間にわたる安定性を推定するためには、４０℃で４カ月間の試験を採用できる。
【００４０】
３つの様式の薬物取込みおよび輸送が文献において区別されている：
”傍細胞（ｐａｒａｃｅｌｌｕｌａｒ）”は、古典的な意味では鼻粘膜の場合のような上皮細胞の間の分子輸送を示すために用いられる。マンニトールが標準透過物質として用いられ、輸送は受動的であり、分子のサイズおよび細胞結合の水チャンネルのサイズに依存する。その直径は、密着結合を弱めるかまたは水チャンネルを拡張する促進剤による膜処理に依存する。
【００４１】
”経細胞（ｔｒａｎｓｃｅｌｌｕｌａｒ）”は、上皮における他の形式の取込みを示すために用いられ、受動的、促進拡散、または能動的である。このカテゴリーには、上皮細胞の膜における先端から側底側までの脂質系薬物の拡散、続いて交換または細胞質ゾル中への泡状突起形成（ｂｌｅｂｂｉｎｇ）による薬物散逸が含まれる。このカテゴリーには、非特異的エンドサイトーシスおよび小胞輸送を含めることができる。
【００４２】
”経軸索（ｔｒａｎｓａｘｏｎａｌ）”は、神経軸索内でのチューブリン仲介能動輸送のための天然の信号伝達分子（本明細書においては神経生体分子と定義する）の特異的な取込みを表わす。この輸送は一般に小胞輸送であり、受容体仲介エンドサイトーシスに依存すると考えられる。最初にウサギの鼻粘膜においてＭａｉｔａｎｉにより報告されたこの現象は、サイトカイン、ホルモン、およびこの経路で輸送するために形式された小胞を構成する特殊な脂質成分に特殊なものである。
【００４３】
本発明は、哺乳動物の鼻腔に下記のものを含む医薬組成物を適用することによって、鼻腔内送達により少なくとも１種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬を哺乳動物の中枢神経系に供給する：
ａ．少なくとも１種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の液体またはゲル溶液、好ましくは水溶液；および
ｂ．少なくとも１種類の透過促進剤。
本発明方法は、送達経路が消化管、肝臓および肺を迂回するので、中枢神経系に対するアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の生体内利用能を改善する。
【００４４】
中枢神経系の疾患または症状を治療または予防するのに有用な本発明の医薬組成物は、
ａ．少なくとも１種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の液体またはゲル溶液、好ましくは水溶液；および
ｂ．少なくとも１種類の透過促進剤
を含み、この医薬組成物は鼻腔内送達に適する。
【００４５】
本発明の方法および組成物は、哺乳動物において中枢神経系の疾患および障害を予防および治療するのに適しており、これらの疾患には、たとえば下記のものを含めた記憶喪失および認知障害を伴う神経症状が含まれる：パーキンソン型痴呆、ハンチントン型痴呆、ピック型痴呆、ＣＪ型痴呆、エイズ関連痴呆、レーヴィ体痴呆、レッツ症候群、てんかん、脳の悪性疾患または腫瘍、多発性硬化症関連の認知障害、ダウン症候群、進行性核上麻痺、特定の型の統合失調症、うつ病、躁病および関連の精神症状、トゥーレット症候群、重症筋無力症、注意欠陥障害、自閉症、読字障害、各種形態のせん妄、または血管性発作もしくは脳内出血および脳外傷の後遺症としての痴呆、それらの慢性、急性および再発性形態。ニコチン離脱症状もアセチルコリンエステラーゼ阻害薬で処置される症状である。
【００４６】
適切なアセチルコリンエステラーゼ阻害薬には、たとえば下記の外因性化合物が含まれる：ドネペジル、６−Ｏ−デスメチルドネペジル、タクリン、リバスチグミン、ネオスチグミン（ｎｅｏｓｔｉｇｍｉｎｅ）、ピルドスチグミン、フィゾスチグミン（ｐｈｙｓｏｓｔｉｇｍｉｎｅ）、イピダクリン（ｉｐｉｄａｃｒｉｎｅ）、スタコフィリン（ｓｔａｃｏｆｙｌｌｉｎｅ）、ガランタミン（ｇａｌａｎｔａｍｉｎｅ）、ガランタミン類縁体、リコラミン（ｌｙｃｏｒａｍｉｎｅ）、リコラミン類縁体、フィゾスチグミン、アンベノニウム（ａｍｂｅｎｏｎｉｕｍ）、デメカリウム（ｄｅｍｅｃａｒｉｕｍ）、エプロホニウム（ｅｐｒｏｐｈｏｎｉｕｍ）、メトリホネート（ｍｅｔｒｉｆｏｎａｔｅ）、セレギン（ｓｅｌｅｇｉｎｅ）、メトリホネート、３−［１−（フェニルメチル）ピペリジン−４−イル］−１−（２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンザゼピン−８−イル）−１−プロパン、５，７−ジヒドロ−３−［２−（１−（フェニルメチル）−４−ピペリジニル）エチル］−６Ｈ−ピロロ−［４，５−ｆ］−１，２−ベンゾイソオキサゾール−６−オン、４，４’−ジアミノジフェニルスルホン、ピロロインドールのテトラヒドロイソキノリニルカルバメート誘導体、およびその薬学的に許容できる塩または誘導体。
【００４７】
薬学的に許容できる塩類には、無機酸塩、有機アミン塩、有機酸塩、アルカリ土類金属塩、およびその混合物が含まれる。薬学的に許容できる塩類の適切な例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：ハロゲン化物、グルコサミン、アルキルグルコサミン、硫酸塩、塩酸塩、炭酸塩、臭化水素酸塩、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、トリエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、ジシクロヘキシルアミン、リン酸塩、硫酸塩、スルホン酸塩、安息香酸塩、酢酸塩、サリチル酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、メシラート、グルコン酸塩、トシラート、マレイン酸塩、フマル酸塩、ステアリン酸塩、およびその混合物。
【００４８】
ある好ましい態様において、本発明の組成物および方法はさらにＣＯＸ−２阻害薬、ヒューペルジン（ｈｕｐｅｒｚｉｎｅ）（セレギン）および４，４’−ジアミノジフェニルスルホンを含むことができる。
【００４９】
本発明に有用な医薬組成物は、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬と組み合わせて少なくとも１種類の賦形剤を含む。鼻腔用配合物に関する医薬技術分野の信頼できる概説が、ＢｅｈｌおよびＣｈｉｅｎにより提示されている（Ｂｅｈｌ，ＣＲ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，”物理化学的特性その他の要因が経鼻薬物全身投与に及ぼす影響”，Ａｄｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌ  Ｒｅｖ  ２９：８９−１１６；Ｂｅｈｌ，ＣＲ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，”医薬賦形剤による経鼻薬物全身送達の最適化”，Ａｄｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌ  Ｒｅｖ  ２９：１１７−１３３；およびＣｈｉｅｎ，ＹＷ，１９９２，第２版，Ｎｏｖｅｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，ニューヨーク）。
【００５０】
本発明に有用な医薬組成物は、少なくとも１種類の透過促進剤を含む。他の箇所で詳述したように、本明細書中で用いる”透過促進剤”には、薬物の放出または溶解度（たとえば配合物送達ビヒクルからの）、拡散速度、生体内利用能、透過の容量およびタイミング、取込み、滞留時間、安定性、有効半減期、ピークまたは持続濃度レベル、クリアランス、刺激の軽減、快感、生体耐容性、ならびにアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の目的とする他の鼻腔内送達特性（たとえば中枢神経系における送達部位または選択した標的活性部位で測定）を高める物質が含まれる。したがって鼻腔内送達の促進は多様な機序のいずれかにより、たとえばアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の拡散、輸送、残存性または安定性の増大、上皮の膜流動性の増大、粘膜分泌物の流動性の増大、細胞内透過または傍細胞透過を制御するカルシウムその他のイオンの利用能または作用の調節、粘膜成分（たとえば脂質）の可溶化、鼻粘膜層の非タンパク質およびタンパク質のスルフヒドリル濃度の変更、鼻粘膜表面を通過する水流入量の増加、上皮結合生理の変調、鼻粘膜上皮を覆う粘液の粘度の低下、鼻粘膜線毛クリアランス率の低下、その他の機序により行うことができる。
【００５１】
適切な透過促進剤には下記のものが含まれる：
ａ．凝集阻害剤；
ｂ．電荷修飾剤；
ｃ．ｐＨ制御またはｐＨ緩衝系；
ｄ．レドックス制御または緩衝系；
ｅ．分解酵素阻害剤；
ｆ．粘液溶解剤または粘液清澄剤；
ｇ．線毛制止剤（ｃｉｌｉｏｓｔａｔｉｃ  ａｇｅｎｔ）；
ｈ．下記よりなる群から選択される吸収促進剤または系：
（ｉ）界面活性剤；
（ｉｉ）胆汁酸塩；
（ｉｉ）リン脂質添加物、混合ミセル、リポソームまたはキャリヤー系；
（ｉｉｉ）アルコール類；
（ｉｖ）エナミン類；
（ｖ）酸化窒素供与化合物；
（ｖｉ）長鎖両親媒性分子；
（ｖｉｉ）小分子疎水性取込み促進剤；
（ｖｉｉｉ）ナトリウムまたはサリチル酸誘導体；
（ｉｘ）アセト酢酸グリセロールエステル；
（ｘ）シクロデキストリンもしくは□−シクロデキストリン誘導体；
（ｘｉ）中鎖または短鎖脂肪酸；
（ｘｉｉ）キレート化剤；
（ｘｉｉｉ）アミノ酸またはその塩；
（ｘｉｖ）Ｎ−アセチルアミノ酸もしくはその塩；
（ｘｖ）特定の膜成分に対して分解性の酵素；
（ｉｘ）脂肪酸合成阻害剤；
（ｘ）コレステロール合成阻害剤；
（ｉ）上皮結合生理の変調剤；
（ｊ）血管拡張剤；
（ｋ）経粘膜送達促進のために、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬を効果的に混和、会合、内包、封入もしくは結合してアセチルコリンエステラーゼ阻害薬を複合体形成または安定化する、安定化用の送達ビヒクル、キャリヤー、支持剤または複合体形成種；および
（ｌ）保湿剤または他の抗刺激剤。
【００５２】
凝集阻害剤には、処理しなければ凝集するであろう粒子の接近を制限し、または荷電元素間のゼータ電位を低下させるもの、特に界面活性剤、塩類、たとえばＮａＣｌ、ＫＣｌ、および糖類、特にポロキサマー（ｐｏｌｏｘａｍｅｒ）が含まれる。
【００５３】
ｐＨ調節は一般にＴＡＣ等級の試薬ＮａＯＨまたはＨＣｌを用いて行われる。緩衝能が望まれる場合、目的ｐＨに近いｐＫをもつ緩衝系を選択する。局所用医薬に十分に許容される緩衝系には、酢酸塩、クエン酸塩、リン酸塩（４および７）、イミダゾール、ヒスチジン、グリシン、酒石酸およびＴＥＡが含まれる。ｐＨ制御および塩形成用の酸には下記のものが含まれる：塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、炭酸、硝酸、ホウ酸、リン酸、酢酸、アクリル酸、アジピン酸、アルギン酸、アルカンスルホン酸、アミノ酸、アスコルビン酸、安息香酸、ホウ酸、酪酸、炭酸、クエン酸、脂肪酸、ギ酸、フマル酸、グルコン酸、ヒドロキノンスルホン酸、イソアスコルビン酸、乳酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、ｐ−ブロモフェニルスルホン酸、プロピオン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、タンニン酸、酒石酸、チオグリコール酸、トルエンスルホン酸、尿酸、およびその混合物。ｐＨ制御および塩形成用の塩基には下記のものが含まれる：塩基性アミノ酸、水酸化アンモニウム、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化アルミニウム、炭酸カルシウム、水酸化マグネシウム、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、合成ケイ酸アルミニウム、合成ヒドロタルサイト、水酸化マグネシウムアルミニウム、ジイソプロピルエチルアミン、エタノールアミン、エチレンジアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トリエチルエミン、およびトリイソプロパノールアミン。
【００５４】
レドックス制御およびレドックス”緩衝”剤には、アスコルビン酸、パルミチン酸アスコルビル、α、β、γ、δいずれかのトコフェロール、および混合トコフェロール、ならびに対応するトコトリエノールが含まれる。
【００５５】
分解酵素阻害物質には、ＰＭＳＦ、アマスタチン（ａｍａｓｔａｔｉｎ）、ベスタチン（ｂｅｓｔａｔｉｎ）、トリプシン阻害薬、メシル酸カモスタット（ｃａｍｏｓｔａｔ  ｍｅｓｉｌａｔｅ）およびボロロイシン（ｂｏｒｏｌｅｕｃｉｎｅ）が含まれる。下記のものも酵素阻害物質として考慮される：ｐ−アミノベンズアミド、ＦＫ−４４８、メシル酸カモスタット、グリココール酸ナトリウム、アミノ酸、修飾アミノ酸、ペプチド、修飾ペプチド、ポリペプチドプロテアーゼ阻害薬、錯化剤、粘膜付着性ポリマー、ポリマー−阻害薬コンジュゲート、またはその混合物、アミノボロン酸誘導体、ｎ−アセチルシステイン、バシトラシン、ホスフィン酸ジペプチド誘導体、ペプスタチン、アンチパイン、ロイペプチン、キモスタチン、エラスタチン（ｅｌａｓｔａｔｉｎ）、ベスタチン、ホスホラミンドン、ピューロマイシン、サイトカラシン、バレイショカルボキシペプチダーゼインヒビター、アマスタチン、プロチニン（ｐｒｏｔｉｎｉｎ）、ボーマン・バークインヒビター、大豆トリプシンインヒビター、ニワトリ卵白トリプシンインヒビター、ニワトリオボインヒビター、ヒト膵臓トリプシンインヒビター、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、１，１０−フェナントロリン、ヒドロキシキノリン、ポリアクリラート誘導体、キトサン、セルロース類、キトサン−ＥＤＴＡ、キトサン−ＥＧＴＡ−アンチパイン、ポリアクリル酸−バシトラトン、カルボキシメチルセルロース−ペプスタチン、ポリアクリル酸−ボーマン・バークインヒビター、およびその混合物（参照：Ｂｅｒｎｋｏｐ−Ｓｃｈｎｕｒｃｈ，”経口投与療法ペプチドおよびタンパク質に対する酵素バリヤーを克服するための阻害物質の使用”，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，５２：１−１６）。
【００５６】
線毛制止剤には、塩化ベンザルコニウム、ＥＤＴＡ、および界面活性剤、たとえば胆汁酸塩、ベタイン、および第四級アンモニウム塩が含まれる。
粘液溶解剤には、ジチオトレイトール、システイン、メチオニン、トレオニン、ｓ−アデノシル−メチオニンが含まれる。
【００５７】
吸収促進剤は、下記よりなる群から選択される：胆汁酸、胆汁酸塩、イオン、非イオン、双性イオン、アニオン、カチオン、ジェミニ・ペア（ｇｅｍｉｎｉ  ｐａｉｒ）などの界面活性剤、リン脂質、アルコール類、グリシレチン酸およびその誘導体、エナミン類、サリチル酸およびサリチル酸ナトリウム、アセト酢酸グリセロールエステル、ジメチルスルホキシド、ｎ−メチルピロリジノン、シクロデキストリン、中鎖脂肪酸、短鎖脂肪酸、短鎖および中鎖ジグリセリド、短鎖および中鎖モノグリセリド、短鎖トリグリセリド、カルシウムキレート化剤、アミノ酸、カチオン性アミノ酸、ホモポリマーペプチド、カチオン性ペプチド、ｎ−アセチルアミノ酸およびそれらの塩、分解酵素、脂肪酸合成阻害剤、コレステロール合成阻害剤。
【００５８】
吸収促進剤をその都度スクリーニングして、最適な候補を判定する。種々のモデルが研究されている：たとえばＬｅＣｌｕｙｓｅ  ａｎｄ  Ｓｕｔｔｏｎ（１９９７，”開発候補の選択のためのインビトロモデル。吸収促進の機序を調べるための透過性試験”，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，２３：１６３−１８３）。ＥｐｉＡｉｒｗａｙモデルを用いたインビトロ法が有用であることが証明された。
【００５９】
促進剤には、有用な界面活性をもつＰＥＧ−脂肪酸エステルが含まれる。ＰＥＧ−脂肪酸モノエステルのうち、ラウリン酸、オレイン酸およびステアリン酸のエステルが特に有用である。界面活性剤には、ＰＥＧ−８ラウレート、ＰＥＧ−８オレエート、ＰＥＧ−８ステアレート、ＰＥＧ−９オレエート、ＰＥＧ−１０ラウレート、ＰＥＧ−１０オレエート、ＰＥＧ−１２ラウレート、ＰＥＧ−１２オレエート、ＰＥＧ−１５オレエート、ＰＥＧ−２０ラウレートおよびＰＥＧ−２０オレエートが含まれる。ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）脂肪酸ジエステルも経鼻配合物中の界面活性剤として使用するのに適切である。親水性界面活性剤には、ＰＥＧ−２０ジラウレート、ＰＥＧ−２０ジオレエート、ＰＥＧ−２０ジステアレート、ＰＥＧ−３２ジラウレートおよびＰＥＧ−３２ジオレエートが含まれる。一般に、２種類以上の界面活性剤市販品の混合物を含めた界面活性剤混合物も本発明に有用である。数種類のＰＥＧ−脂肪酸がモノ−およびジエステルの混合物として市販されている。適切なＰＥＧ−グリセロール脂肪酸エステルは、ＰＥＧ−２０グリセリルラウレート、ＰＥＧ−３０グリセリルラウレート、ＰＥＧ−４０グリセリルラウレート、ＰＥＧ−２０グリセリルオレエート、およびＰＥＧ−３０グリセリルオレエートである。
【００６０】
アルコール類またはポリアルコール類と種々の天然油および／または水素化油の反応により、疎水度または親水度の異なる多数の界面活性剤が得られる。一般に、用いられる油はヒマシ油もしくは水素化ヒマシ油、または食用植物油、たとえばトウモロコシ油、オリーブ油、ラッカセイ油、パーム核油、杏仁油もしくは扁桃油である。アルコール類には、グリセロール、プロピレングリコール、エチレングリコール、ポリエチレングリコール、マルトール、ソルビトールおよびペンタエリトリトールが含まれる。これらのアルコール−油エステル交換型界面活性剤のうち、親水性界面活性剤はＰＥＧ−３５ヒマシ油（Ｉｎｃｒｏｃａｓ−３５）、ＰＥＧ−４０水素化ヒマシ油（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＲＨ−４０）、ＰＥＧ−２５トリオレエート（ＴＡＧＡＴ（登録商標）ＴＯ）、ＰＥＧ−６０トウモロコシグリセリド（Ｃｒｏｖｏｌ（登録商標）Ｍ７０）、ＰＥＧ−６０扁桃油（Ｃｒｏｖｏｌ  Ａ７０）、ＰＥＧ−４０パーム核油（Ｃｒｏｖｏｌ  ＰＫ７０）、ＰＥＧ−５０ヒマシ油（Ｅｍａｌｅｘ  Ｃ−５０）、ＰＥＧ−５０水素化ヒマシ油（Ｅｍａｌｅｘ（登録商標）ＨＣ−５０）、ＰＥＧ−８カプリル／カプリングリセリド（Ｌａｂｒａｓｏｌ（登録商標））およびＰＥＧ−６カプリル／カプリングリセリド（Ｓｏｆｔｉｇｅｎ（登録商標）７６７）である。このクラスの疎水性界面活性剤には、ＰＥＧ−５水素化ヒマシ油、ＰＥＧ−７水素化ヒマシ油、ＰＥＧ−９水素化ヒマシ油、ＰＥＧ−６トウモロコシ油（Ｌａｂｒａｆｉｌ  ２１２５  ＣＳ）、ＰＥＧ−６扁桃油（Ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標）Ｍ  １９６６  ＣＳ）、ＰＥＧ−６杏仁油（Ｌａｂｒａｆｉｌ  １９９４  ＣＳ）、ＰＥＧ−６オリーブ油（Ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標）Ｍ  １９８０  ＣＳ）、ＰＥＧ−６ラッカセイ油（Ｌａｂｒａｆｉｌ  １９６９  ＣＳ）、ＰＥＧ−６水素化パーム核油（Ｌａｂｒａｆｉｌ  ２１３０  ＢＳ）、ＰＥＧ−６パーム核油（Ｌａｂｒａｆｉｌ  ２１３０  ＣＳ）、ＰＥＧ−６トリオレフィン（Ｌａｂｒａｆｉｌ  ２７３５  ＣＳ）、ＰＥＧ−８トウモロコシ油（Ｌａｂｒａｆｉｌ  ＷＬ  ２６０９  ＢＳ）、ＰＥＧ−２０トウモロコシグリセリド（Ｃｒｏｖｏｌ  Ｍ４０）およびＰＥＧ−２０扁桃油グリセリド（Ｃｒｏｖｏｌ  Ａ４０）が含まれる。後２種類の界面活性剤は、約１０のＨＬＢ価をもつと報告されており、これは親水性界面活性剤と疎水性界面活性剤のほぼ境界線（ＨＬＢ  ８〜１２）である。ビタミンＡ、Ｄ、Ｅ、Ｋの誘導体、たとえばトコフェリルＰＥＧ−１０００スクシナート（ＴＰＧＳ、イーストマンから入手できる）も適切な界面活性剤である。
【００６１】
脂肪酸のポリグリセロールエステルも本発明に適切な界面活性剤である。脂肪酸のポリグリセリルエステルのうち、疎水性界面活性剤には、オレイン酸ポリグリセリル（Ｐｌｕｒｏｌ  Ｏｌｅｉｑｕｅ（登録商標））、ジオレイン酸ポリグリセリル−２（Ｎｉｋｋｅｉ  ＤＧＤＯ）およびトリオレイン酸ポリグリセリル−１０が含まれる。好ましい親水性界面活性剤には、ラウリン酸ポリグリセリル−１０（Ｎｉｋｋｏｌ  Ｄｅｃａｇｌｙｎ（登録商標）１−Ｌ）、オレイン酸ポリグリセリル−１０（Ｎｉｋｋｏｌ  Ｄｅｃａｇｌｙｎ  １−Ｏ）およびモノ、ジオレイン酸ポリグリセリル−１０（Ｃａｐｒｏｌ（登録商標）ＰＥＧ  ８６０）が含まれる。ポリリシノール酸ポリグリセリル（Ｐｏｌｙｍｕｌｓ）も好ましい親水性かつ疎水性界面活性剤である。疎水性界面活性剤には、モノラウリン酸プロピレングリコール（Ｌａｕｒｏｇｌｙｃｏｌ（登録商標）ＦＣＣ）、リシノール酸プロピレングリコール（Ｐｒｏｐｙｍｕｌｓ（登録商標））、モノオレイン酸プロピレングリコール（Ｍｙｖｅｒｏｌ（登録商標）Ｐ−Ｏ６）、ジカプリル酸／ジカプリン酸プロピレングリコール（Ｃａｐｔｅｘ（登録商標）２００）およびジオクタン酸プロピレングリコール（Ｃａｐｔｅｘ（登録商標）８００）が含まれる。プロピレングリコールのモノ−およびジエステルが共に含まれる。プロピレングリコール脂肪酸エステルとグリセロール脂肪酸エステルの混合物が市販されている。そのような混合物のひとつは、プロピレングリセロールおよびグリセロールのオレイン酸エステルからなる（Ａｒｌａｃｅｌ（登録商標）１８６）。他のクラスの界面活性剤は、モノ−およびジグリセリドのクラスのものである。これらの界面活性剤は、脂肪族鎖の長さによっては必ずしも疎水性ではない。この化合物クラスの界面活性剤には、モノオレイン酸グリセリル（Ｐｅｃｅｏｌ（登録商標））、リシノール酸グリセリル、ラウリン酸グリセリル、ジラウリン酸グリセリル（Ｃａｐｍｕｌ（登録商標）ＧＤＬ）、ジオレイン酸グリセリル（Ｃａｐｍｕｌ（登録商標）ＧＤＯ）、モノ／ジオレイン酸グリセリル（Ｃａｐｍｕｌ（登録商標）ＧＭＯ−Ｋ）、カプリル酸／カプリン酸グリセリル（Ｃａｐｍｕｌ（登録商標）ＭＣＭ）、カプリル酸モノ／ジグリセリド（Ｉｎｗｉｔｏｒ（登録商標）９８８）およびモノ−およびジアセチル化モノグリセリド（Ｍｙｖａｃｅｔ（登録商標）９−４５）が含まれ、吸収促進剤として良好に機能する。ステロールおよびステロール誘導体は本発明にある程度有用である。このクラスの疎水性界面活性剤は、ＰＥＧ−２４コレステロールエーテルである（Ｓｏｌｕｌａｎ（登録商標）Ｃ−２４）。
【００６２】
多様なＰＥＧ−ソルビタン脂肪酸エステルを入手できる。一般にこれらの界面活性剤は親水性であるが、このクラスの幾つかの疎水性界面活性剤も使用できる。ＰＥＧ−ソルビタン脂肪酸エステルのうち、親水性界面活性剤には、ＰＥＧ−２０ソルビタンモノラウレート（Ｔｗｅｅｎ−２０）、ＰＥＧ−２０ソルビタンモノパルミテート（Ｔｗｅｅｎ−４０）、ＰＥＧ−２０ソルビタンモノステアレート（Ｔｗｅｅｎ−６０）およびＰＥＧ−２０ソルビタンモノオレエート（Ｔｗｅｅｎ−８０）が含まれる。
【００６３】
ポリエチレングリコールおよびアルキルアルコールのエーテルも界面活性剤として有用である。疎水性エーテルには、ＰＥＧ−３オレイルエーテル（Ｖｏｌｐｏ  ３）およびＰＥＧ−４ラウリルエーテル（Ｂｒｉｊ  ３０）が含まれる。幾つかの親水性ＰＥＧ−アルキルフェノール界面活性剤が入手され、薬物送達用の経鼻組成物として使用するのに適切である。
【００６４】
ＰＯＥ−ＰＯＰブロックコポリマーは特異なクラスのポリマー界面活性剤である。親水性ＰＯＥ部分と疎水性ＰＯＰ部分を明確に定められた比率および配置で含むこれらの特異な構造の界面活性剤は、本発明に使用するのに適切な広範な界面活性剤を提供する。これらの界面活性剤は種々の商品名で入手でき、これにはＳｙｍｐｅｒｏｎｉｃ  ＰＥシリーズ（ＩＣＩ）；Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）シリーズ（ＢＡＳＦ）、Ｅｍｋａｌｙｘ、Ｌｕｔｒｏｌ（ＢＡＳＦ）、Ｓｕｐｒｏｎｉｃ、Ｍｏｎｏｌａｎ、ＰｌｕｒａｃａｒｅおよびＰｌｕｒｏｄａｃ（登録商標）が含まれる。これらの慣用ポリマーの一般名は”ポロキサマー（ｐｏｌｏｘａｍｅｒ）”である。このクラスの親水性界面活性剤には、ポロキサマー１０８、１８８、２１７、２３８、２８８、３３８および４０７が含まれる。このクラスの疎水性界面活性剤には、ポロキサマー１２４、１８２、１８３、２１２、３３１および３３５が含まれる。このクラスの界面活性剤は一般にポロキサマーおよびテトロニクス（ｔｅｔｒｏｎｉｃｓ）として知られる。
【００６５】
脂肪酸のソルビタンエステルは、本発明に使用するのに適切な界面活性剤である。これらのエステルのうち、好ましい疎水性界面活性剤には、モノラウリン酸ソルビタン（Ａｒｌａｃｅｌ  ２０）、モノパルミチン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ−４０）、モノオレイン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ−８０）、モノステアリン酸ソルビタンおよびトリステアリン酸ソルビタンが含まれる。低級アルコール（Ｃ2およびＣ4）と脂肪酸（Ｃ8〜Ｃ18）のエステルは、本発明に使用するのに適切な界面活性剤である。これらのエステルのうち、疎水性界面活性剤には、オレイン酸エチル（Ｃｒｏｄａｍｏｌ（登録商標）ＥＯ）、ミリスチン酸イソプロピル（Ｃｒｏｄａｍｏｌ  ＩＰＭ）およびパルミチン酸イソプロピル（Ｃｒｏｄａｍｏｌ  ＩＰＰ）が含まれる。
【００６６】
カチオン、アニオンおよび双性イオン界面活性剤を含めたイオン性界面活性剤は、本発明に使用するのに適切な親水性界面活性剤である。アニオン界面活性剤には脂肪酸塩および胆汁酸塩が含まれる。カチオン界面活性剤にはカルニチン類、たとえばパルミチン酸カルニチルが含まれる。具体的には、好ましいイオン性界面活性剤にはオレイン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルサルコシン酸ナトリウム、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム、コール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム；ラウロイルカルニチン；パルミトイルカルニチン；およびミリストイルカルニチンが含まれる。薬学的に許容できる対イオンをいずれも使用できることは配合業者に自明であろう。一般的な非イオン界面活性剤と異なり、これらのイオン性界面活性剤は、一般に専売混合物ではなく純粋な化合物として得られる。これらの化合物は、アルドリッチ、シグマなどの多数の業者から容易に入手できる。
【００６７】
ｐＨ依存性である界面活性剤の具体例には、遊離脂肪酸、特にＣ6〜Ｃ22脂肪酸、および胆汁酸が含まれる。イオン化性界面活性剤には下記のものが含まれる：脂肪酸およびそれらの塩類、たとえばカプリル酸／カプリル酸ナトリウム、オレイン酸／オレイン酸ナトリウム、カプリン酸／カプリン酸ナトリウム；リシノール酸／リシノール酸ナトリウム、リノレン酸／リノレン酸ナトリウム、およびラウリン酸／ラウリン酸ナトリウム；トリヒドロキシ胆汁酸およびそれらの塩類、たとえばコール酸（天然）、グリココール酸およびタウロコール酸；ジヒドロキシ胆汁酸およびそれらの塩類、たとえばデオキシコール酸（天然）、グリコデオキシコール酸、タウロデオキシコール酸、ケノデオキシコール酸（天然）、グリコケノデオキシコール酸、タウロケノデオキシコール酸、ウルソデオキシコール酸、タウロウルソデオキシコール酸およびグリコウルソデオキシコール酸；モノヒドロキシ胆汁酸およびそれらの塩類、たとえばリトコール酸（天然）；硫酸化胆汁酸誘導体；サルココール酸；フシジン酸およびその誘導体；リン脂質、たとえばホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、リゾレシチン、およびパルミトイルリゾホスファチジルコリン；カルニチン類、たとえばパルミトイルカルニチン、ラウロイルカルニチンおよびミリストイルカルニチン；シクロデキストリン：α、βおよびγ−シクロデキストリン、ならびにそれらの化学置換誘導体、たとえばヒドロキシプロピル、２−ヒドロキシプロピル−□−シクロデキストリンおよびヘプタキス（２，６−ジ−Ｏ−メチル−□−シクロデキストリンおよびスルホブチルエーテルがこれに含まれる。
【００６８】
イオン性界面活性剤には下記のものが含まれる：イオン化型のアルキルアンモニウム塩；胆汁酸ならびにその塩類、類縁体および誘導体；フシジン酸およびその誘導体；アミノ酸、オリゴペプチドおよびポリペプチドの脂肪酸誘導体；アミノ酸、オリゴペプチドおよびポリペプチドのグリセリド誘導体；アシルラクチレート（ａｃｙｌ  ｌａｃｔｙｌａｔｅ）；モノ−、ジ−グリセリドのモノ−、ジアセチル化酒石酸エステル；スクシニル化モノグリセリド；モノ−、ジ−グリセリドのクエン酸エステル；アルギン酸塩；アルギン酸プロピレングリコール；レシチンおよび水素化レシチン；リゾレシチンおよび水素化リゾレシチン；リゾリン脂質およびその誘導体；リン脂質およびそれらの誘導体；アルキル硫酸の塩類；脂肪酸の塩類；ドキュセートナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ  ｄｏｃｕｓａｔｅ）；カルニチン類；ならびにその混合物。
【００６９】
さらに下記のものが含まれる：イオン化型の胆汁酸ならびにその塩類、類縁体および誘導体；レシチン、リゾレシチン、リン脂質、リゾリン脂質、およびその誘導体；アルキルスルフェートの塩類；脂肪酸の塩類；ドキュセートナトリウム；アシルラクチレート；モノ−、ジグリセリドのモノおよびジアセチル化酒石酸エステル；スクシニル化モノグリセリド；モノおよびジグリセリドのクエン酸エステル；カルニチン類；ならびにその混合物。他の態様には下記のものが含まれる：ＰＥＧ−ホスファチジルエタノールアミン、ＰＶＰ−ホスファチジルエタノールアミン、脂肪酸のラクチルエステル、ステアロイル−２−ラクチレート、ステアロイルラクチレート、スクシニル化モノグリセリド、モノ／ジグリセリドのモノ／ジアセチル化酒石酸エステル、モノ／ジグリセリドのクエン酸エステル、コール酸、タウロコール酸、グリココール酸、デオキシコール酸、タウロデオキシコール酸、ケノデオキシコール酸、グリコデオキシコール酸、グリコケノデオキシコール酸、タウロケノデオキシコール酸、ウルソデオキシコール酸、タウロウルソデオキシコール酸、グリコウルソデオキシコール酸、コリルサルコシン、Ｎ−メチルタウロコール酸、カプロエート、カプリレート、カプレート、ラウレート、ミリステート、パルミテート、オレエート、リシノレエート、リノレエート、リノレネート、ステアレート、ラウリルスルフェート、テラアセチルスルフェート、ドキュセート、ラウロイルカルニチン類、パルミトイルカルニチン類、ミリストイルカルニチン類、ならびにその塩類および混合物。有用な界面活性剤は下記のものである：イオン化型のレシチン、リゾレシチン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、リゾホスファチジルコリン、ＰＥＧ−ホスファチジルエタノールアミン、脂肪酸のラクチルエステル、ステアロイル−２−ラクチレート、ステアロイルラクチレート、スクシニル化モノグリセリド、モノ／ジグリセリドのモノ／ジアセチル化酒石酸エステル、モノ／ジグリセリドのクエン酸エステル、コレート、タウロコレート、グリココレート、デオキシコレート、タウロデオキシコレート、グリコデオキシコレート、コリルサルコシン、カプロエート、カプリレート、カプレート、ラウレート、オレエート、ラウリルスルフェート、ドキュセート、ならびにその塩類および混合物。最も好ましいイオン性界面活性剤は下記のものである：レシチン、脂肪酸のラクチルエステル、ステアロイル−２−ラクチレート、ステアロイルラクチレート、スクシニル化モノグリセリド、モノ／ジグリセリドのモノ／ジアセチル化酒石酸エステル、モノ／ジグリセリドのクエン酸エステル、タウロコレート、カプリレート、カプレート、オレエート、ラウリルスルフェート、ドキュセート、ならびにその塩類および混合物。
【００７０】
界面活性剤は、アルコール類から形成することもできる：たとえばポリオキシエチレンアルキルエーテル；脂肪酸；グリセロール脂肪酸エステル；アセチル化グリセロール脂肪酸エステル；低級アルコール脂肪酸エステル；ポリエチレングリコール脂肪酸エステル；ポリエチレングリコールグリセロール脂肪酸エステル；ポリプロピレングリコール脂肪酸エステル；ポリオキシエチレングリセリド；モノ／ジグリセリドの乳酸誘導体；プロピレングリコールジグリセリド；ソルビタン脂肪酸エステル；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル；ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロックコポリマー；エステル交換植物油；ステロール；ステロール誘導体；糖エステル；糖エーテル；スクログリセリド；ポリオキシエチレン植物油；ポリオキシエチレン水素化植物油；ならびに非イオン化（中性）型のイオン化性界面活性剤。疎水性界面活性剤は、ポリオールと脂肪酸、グリセリド、植物油、水素化植物油、およびステロールの反応混合物であってもよい。疎水性界面活性剤は下記よりなる群から選択できる：脂肪酸；低級アルコール脂肪酸エステル；ポリエチレングリコールグリセロール脂肪酸エステル；ポリプロピレングリコール脂肪酸エステル；ポリオキシエチレングリセリド；グリセロール脂肪酸エステル；アセチル化グリセロール脂肪酸エステル；モノ／ジグリセリドの乳酸誘導体；ソルビタン脂肪酸エステル；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル；ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロックコポリマー；ポリオキシエチレン植物油；ポリオキシエチレン水素化植物油；ならびにポリオールと脂肪酸、グリセリド、植物油、水素化植物油、およびステロールの反応混合物。低級アルコール脂肪酸エステル；ポリプロピレングリコール脂肪酸エステル；プロピレングリコール脂肪酸エステル；グリセロール脂肪酸エステル；アセチル化グリセロール脂肪酸エステル；モノ／ジグリセリドの乳酸誘導体；ソルビタン脂肪酸エステル；ポリオキシエチレン植物油、およびその混合物；特にグリセロール脂肪酸エステルおよびアセチル化グリセロール脂肪酸エステルが考慮される。グリセロール脂肪酸エステルにおいて、これらのエステルはモノ−もしくはジグリセリド、またはモノ−およびジグリセリドの混合物を含み、その脂肪酸部分はＣ6〜Ｃ22脂肪酸である。
【００７１】
ポリオールと脂肪酸、グリセリド、植物油、水素化植物油、およびステロールの反応混合物である疎水性界面活性剤も含まれる。ポリオールはポリエチレングリコール、ソルビトール、プロピレングリコールおよびペンタエリトリトールである。
【００７２】
密着結合透過性の変調剤には、特にＥＤＴＡ、カルシウム錯化剤、クエン酸、サリチル酸、コラーゲンのｎ−アシル誘導体、およびエナミン類が含まれる。
生体接着物質には、キトサン、カルボキシメチルセルロース、カルボポール、ポリカルボフィル、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、トラガカントゴムその他が含まれる。
【００７３】
血管拡張剤、たとえば酸化窒素（ＮＯ）、ニトログリセリンおよびアルギニンを、鼻毛細血管床の血流を増加させるために含有させる。これらには、Ｓ−ニトロソ−Ｎ−アセチル−ＤＬ−ペニシラミン、ＮＯＲ１、ＮＯＲ４−−これらは好ましくはＮＯスカベンジャー、たとえばカルボキシ−ＰＩＴＯまたはドクロフェナクナトリウム（ｄｏｃｌｏｆｅｎａｃ  ｓｏｄｉｕｍ）と併用される）；サリチル酸ナトリウム；アセト酢酸のグリセロールエステル（たとえばグリセリル−１，３−ジアセトアセテートまたは１，２−イソプロピリデングリセリン−３−アセトアセテートが含まれる。
【００７４】
安定化用の送達ビヒクル、キャリヤー、支持剤または複合体形成種には、シクロデキストリン、ＥＤＴＡ、マイクロカプセル封入系、およびリポソーム配合物、たとえばバイスフェア（ｂｉｓｐｈｅｒｅ）およびバイオソーム（ｂｉｏｓｏｍｅ）技術（ＵＳ−Ａ−５，６６５，３７９）が含まれる。
【００７５】
保湿剤または他の刺激抑制剤は、たとえば下記のものから選択される：グリセロール、１，３−ブタンジオール、トコフェロール、石油成分、鉱油、ミクロクリスタリンワックス、ポリアルケン類、パラフィン、ケラシン、オゾケライト（地ろう）、ポリエチレン、ペルヒドロスクアレン、ジメチコン（ｄｉｍｅｔｈｉｃｏｎｅ）類、シクロメチコン（ｃｙｃｌｏｍｅｔｈｉｃｏｎｅ）類、アルキルシロキサン、ポリメチルシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、ヒドロキシル化乳グリセリド、ヒマシ油、大豆油、マレエート化大豆油、サフラワー油、綿実油、トウモロコシ油、クルミ油、ラッカセイ油、オリーブ油、タラ肝油、扁桃油、アボカド油、パーム油、ゴマ油、液体ショ糖オクタエステル、液体ショ糖オクタエステルと固体ポリオールポリエステルのブレンド、ラノリン油、ラノリンろう、ラノリンアルコール、ラノリン脂肪酸、イソプロピルラノレート、アセチル化ラノリン、アセチル化ラノリンアルコール、ラノリンアルコールリノレエート、ラノリンアルコールリシノレエート、蜜ろう、蜜ろう誘導体、鯨ろう、ミリスチン酸ミリスチル、ステアリン酸ステアリル、カルナウバろうおよびカンデリラろう、コレステロール、コレステロール脂肪酸エステルおよびその同族体、レシチンおよび誘導体、スフィンゴ脂質、セラミド、グリコスフィンゴ脂質およびその同族体。ピログルタミン酸ナトリウム、ヒアルロン酸、キトサン誘導体（カルボキシメチルキトサン）、β−グリセロリン酸、ラクタミド、アセトアミド、乳酸エチル、ナトリウムおよびトリエタノールアミン、金属ピロリドンカルボキシラート（特にＭｇ、Ｚｎ、ＦｅまたはＣａ）、チアモルホリノン、オロチン酸、Ｃ3〜Ｃ20  α−ヒドロキシル化カルボン酸、特にα−ヒドロキシプロピオン酸、ポリオール、特にイノシトール、グリセロール、ジグリセロール、ソルビトール、サッカリドポリオール、特にアルギナートおよびグアー、タンパク質、特に可溶性コラーゲンおよびゼラチン、酸残基ＲＣＯがＣ13〜Ｃ19炭化水素鎖を含むアミノ酸またはポリペプチドのモノ−またはポリアクリル化誘導体から選択されるリポプロチド（特にパルミトイルカゼイン酸、パルミトイルコラーゲン酸）、ヒドロキシプロリンのＯ，Ｎ−ジパルミトイル誘導体、ステアロイルグルタミン酸ナトリウム、コラーゲンのステアロイルトリペプチド、コラーゲンのオレイルテトラ−およびペンタペプチド、ヒドロキシプロリン、リノレエート、尿素およびその誘導体、特にキサンチル尿素、皮膚組織抽出物、特にＬａｂｏｒａｔｏｉｒｅｓ  Ｓｅｒｏｂｉｏｌｏｇｉｑｕｅｓ  ｄｅ  Ｎａｎｃｙ（ＬＳＮ）が”ＯＳＭＯＤＹＮ（登録商標）”の名称で販売しているもの：ペプチド、アミノ酸およびサッカリドならびに１７％のマンニトールを含有。グリセロール、尿素およびパルミトイルカゼイン酸が有用である。
【００７６】
増粘剤には下記のものが含まれる：メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシセルロース、キチン、アルギン酸ナトリウム、キサンタンゴム、マルメロ種子抽出物、トラガカントゴム、デンプンなど、半合成ポリマー材料、たとえばセルロースエーテル（たとえばヒドロキシエチルセルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、グアーゴム、ヒドロキシプロピルグアーゴム、可溶性デンプン、カチオン性セルロース、カチオン性グアーなど、ならびに合成ポリマー材料、たとえばカルボキシビニルポリマー、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸ポリマー、ポリメタクリル酸ポリマー、ポリ酢酸ビニルポリマー、ポリ塩化ビニルポリマー、ポリ塩化ビニリデンポリマー、ポリアクリラート；ヒュームドシリカ；天然ろうおよび合成ろう、アルキルシリコーンワックス、たとえばベヘニルシリコーンワックス；ケイ酸アルミニウム；ラノリン誘導体、たとえばラノステロール；高級脂肪アルコール；ポリエチレンコポリマー；ナロゲル（ｎａｒｏｇｅｌ）；ポリステアリン酸アンモニウム；スクロースエステル；疎水性クレー；石油成分；およびハイドロタルサイト。
【００７７】
ある態様において、透過促進剤はクエン酸、クエン酸ナトリウム、プロピレングリセロール、グリセリン、Ｌ−アスコルビン酸、メタ亜硫酸水素ナトリウム、ＥＤＴＡ二ナトリウム、塩化ベンザルコニウムおよび水酸化ナトリウムから選択される。
【００７８】
好ましくは本発明の医薬組成物は、ガングリオシド、ホスファチジルセリン、脳由来神経栄養因子、線維芽細胞増殖因子、インスリン、インスリン様増殖因子、毛様体神経栄養因子、グリア細胞由来ネキシン、コリン作動性促進因子、ホスホエタノールアミンおよび甲状腺ホルモンＴ３を含めた天然の神経生体分子を実質的に含まない。
【００７９】
本発明のある態様において、本発明のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬との協調（ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅ）投与または組合わせ（ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ）配合物のための吸収促進剤は親水性小分子から選択され、これにはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド、エタノール、プロピレングリコール、１，３−ブタンジオールおよび２−ピロリジノンが含まれるが、これらに限定されない。あるいは、長鎖両親媒性分子、たとえばデアシルメチルスルホキシド、アゾン、ラウリル硫酸ナトリウム、オレイン酸、および胆汁酸を用いて、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の粘膜透過を高めることができる。他の態様においては、補助剤、加工剤、または配合物添加剤として界面活性剤（たとえばポリソルベート）を用いて、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の鼻腔内送達を促進することができる。これらの透過促進剤は一般に、鼻粘膜を内張りしている上皮細胞の脂質二重層を構成する分子の極性ヘッド基または親水性テイル領域と相互作用する（Ｂａｒｒｙ，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｋｉｎ，Ｖｏｌ．１，ｐｐ．１２１−１３７，Ｓｈｒｏｏｔ  ｅｔ  ａｌ．編，Ｋａｒｇｅｒ，バーゼル，１９８７；およびＢａｒｒｙ，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，６：８５−９７，１９８７；それぞれを本明細書に援用する）。これらの部位における相互作用は、脂質分子の充填を撹乱し、二重層の流動性を高め、粘膜バリヤーを通した薬物輸送を促進する効果をもつであろう。また、これらの透過促進剤と極性ヘッド基の相互作用により、隣接二重層の親水性領域がより多量の水を取り込んで互いに離れ、こうしてアセチルコリンエステラーゼ阻害薬を輸送するための傍細胞経路が開放されるであろう。これらの作用のほか、ある種の促進剤は鼻粘膜の水性領域の全体的特性に対する直接作用をもつであろう。ＤＭＳＯ、ポリエチレングリコールおよびエタノールなどの物質は、送達環境内に十分に高い濃度で存在する場合（たとえば前投与により、または治療用配合物中に取り込ませることにより）、粘膜の水相に進入して溶解性を変化させ、これによりアセチルコリンエステラーゼ阻害薬がビヒクルから粘膜内へ分配されるのを促進することができる。
【００８０】
本発明の協調投与および処理方法ならびに組合わせ配合物に有用な他の透過促進剤には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：混合ミセル；エナミン類；酸化窒素供与体（たとえばＳ−ニトロソ−Ｎ−アセチル−ＤＬ−ペニシラミン、ＮＯＲ１、ＮＯＲ４−−これらは好ましくはＮＯスカベンジャー、たとえばカルボキシ−ＰＩＴＯまたはドクロフェナクナトリウムと共投与される）；サリチル酸ナトリウム；アセト酢酸のグリセロールエステル（たとえばグリセリル−１，３−ジアセトアセテートまたは１，２−イソプロピリデングリセリン−３−アセトアセテート）；ならびに経粘膜送達に関して生理的に適合性である他の放出−拡散、傍細胞または上皮内もしくは経上皮吸収促進剤。
【００８１】
他の透過促進剤は、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の鼻腔内送達、安定性、活性、または傍細胞もしくは経上皮取込みを促進する多様なキャリヤー、基剤および賦形剤から選択される。これらには、特にシクロデキストリンおよび□−シクロデキストリン誘導体（たとえば□−シクロデキストリンおよびヘプタキス（２，６−ジ−Ｏ−メチル−□−シクロデキストリン）が含まれる。所望により１種類以上の有効成分と包接し、さらに所望により油脂性基剤中に配合されたこれらの化合物は、本発明の医薬配合物中における生体内利用能を高める。経粘膜送達に適したさらに他の透過促進剤には中鎖脂肪酸が含まれ、これにはモノ−およびジグリセリド（たとえばカプリン酸ナトリウム、ヤシ油抽出物、Ｃａｐｍｕｌ）ならびにトリグリセリド（たとえばアミロデキストリン、Ｅｓｔａｒａｍ  ２９９、Ｍｉｇｌｙｏｌ  ８１０）が含まれる。
【００８２】
本発明の組成物には、鼻粘膜バリヤーを通したアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の吸収、拡散または透過を促進する適切な透過促進剤を添加できる。透過促進剤は、薬学的に許容できるいかなる物質または系であってもよい。したがって、より詳細な本発明の態様においては、下記のものから選択される１種類以上の透過促進剤を含む組成物が提供される：サリチル酸ナトリウムおよびサリチル酸誘導体（アセチルサリチル酸、コリンサリチル酸、サリチルアミドなど）；アミノ酸およびその塩類（たとえばモノアミノカルボン酸、たとえばグリシン、アラニン、フェニルアラニン、プロリン、ヒドロキシプロリンなど；ヒドロキシアミノ酸、たとえばセリン；酸性アミノ酸、たとえばアスパラギン酸、グルタミン酸など；および塩基性アミノ酸、たとえばリシン、アルギニンなど−それらのアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩を含む）；ならびにＮ−アセチルアミノ酸（、Ｎ−アセチルアラニン、Ｎ−アセチルフェニルアラニン、Ｎ−アセチルセリン、Ｎ−アセチルグリシン、Ｎ−アセチルリシン、Ｎ−アセチルグルタミン酸、Ｎ−アセチルプロリン、Ｎ−アセチルヒドロキシプロリンなど）およびそれらの塩類（アルカリ金属塩およびアルカリ土類金属塩）、ポリアミノ酸およびポリカチオン性ポリマー。本発明の方法および組成物において同様に提供される取込み促進剤は、一般に乳化剤として用いられる物質（たとえばオレイルリン酸ナトリウム、ラウリルリン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ミリスチル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルエステルなど）、カプロン酸、乳酸、リンゴ酸およびクエン酸、ならびにそのアルカリ金属塩、ピロリドンカルボン酸、ピロリドンカルボン酸アルキルエステル、Ｎ−アルキルピロリドン、プロリンアシルエステルなどである。
【００８３】
鼻粘膜上皮を通したアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の送達は主に”傍細胞”経路で行われるが、より親油性の化合物は経細胞輸送の可能性がある。薬物分子の全流入量および生体内利用能に対して傍細胞性取込みまたは経細胞性取込みのいずれが優位であるかは、薬物分子のサイズおよびその物理化学的特性ならびに配合物中の賦形剤およびその物理的状態（固体、エマルション、ゲル、液体）だけでなく、鼻粘膜上皮細胞の応答にも依存する。傍細胞輸送は受動拡散のみを伴い、１キロダルトン（Ｋｄａ）未満の親水性分子に特に重要であるのに対し、経細胞輸送は受動プロセス、または促進プロセス、すなわちエンドサイトーシスもしくは膜融合を伴う能動プロセスにより行われる可能性がある。一般に、受動輸送される親水性極性溶質、特に低分子量の外因性化学物質（すなわち分子量＜１ＫＤａのもの）は、傍細胞経路で拡散する。一方、天然のタンパク質、ペプチドおよび親油性溶質（疎水性アセチルコリンエステラーゼ阻害薬を含む）は、一部または全部が経細胞経路の経粘膜取込みを利用する可能性がある。
【００８４】
鼻粘膜は、２つの組織サブドメイン、嗅膜ドメインと非嗅膜ドメインからなる。嗅上皮は、特殊な嗅覚受容器細胞および支持細胞タイプを含む特有の層状円柱構造をもつ。非嗅膜は血管に富み、その表面は線毛層状円柱上皮で覆われている。鼻腔静脈は上眼静脈および顔面静脈内へ排出し、これらが頚静脈内へ集まり、心臓へ戻る。特異的な受容体をもつ天然の神経生体分子は、Ｆｒｅｙ（ＵＳ６，１８０，６０３）が提唱するように嗅粘膜を通過して脳神経に直接到達でき、中枢神経系へ経軸索輸送される。ただし、この方法は鼻甲介の上３分の１および輸送に関して認められている天然の神経生体分子に限定される。あるいは、非嗅膜の密着結合を通して血液および脳脊髄液中へ傍細胞輸送される可能性、ならびに非特異的エンドサイトーシス、脂質膜の摂動（ｐｅｒｔｕｒｂａｔｉｏｎ）および細胞仲介トランスサイトーシスにより経細胞輸送される可能性がある。本明細書においては、傍細胞輸送および経細胞輸送の機序を、ＦｒｅｙおよびＭａｉｔａｎｉ（”ウサギにおけるβ−インターフェロンの鼻腔内投与”，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  １：６５−７０）が記載した特殊な経軸索輸送機序と区別する。嗅上皮は上鼻甲介に集中している。血管に富む非嗅膜は主に中および下鼻甲介にある。
【００８５】
特別なクラスの促進剤は、機序は分からないが、経鼻吸収を促進するペプチドおよびペプチド模倣体である。
受動および能動吸収される溶質の吸収および生体内利用能は、本発明の範囲に含まれる選択したアセチルコリンエステラーゼ阻害薬について、傍細胞送達成分と経細胞送達成分の和として評価することができる。これらの経路の寄与は、周知の方法、たとえばインビトロ上皮細胞培養物透過性アッセイ法に従って識別できる（たとえば、Ｈｉｌｇｅｒｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．７：９０２−９１０，１９９０；Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，１１：２５−４０，１９９０；Ａｒｔｕｒｓｓｏｎ，Ｉ．，Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．７９：４７６−４８２，１９９０；Ｃｏｇｂｕｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．８：２１０２１６，１９９１；Ｐａｄｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １４：１２１０−１２１５，１９９７参照；それぞれをそこに教示される方法に関して本明細書に援用する）。しかし、薬物取込みを臨床症状の療法に外挿する前にヒトにおける臨床試験が必要であることに注意すべきである。
【００８６】
受動吸収された薬物について、薬物輸送に対する傍細胞経路と経細胞経路の相対的寄与は、ｐＫａ、分配係数によりおおまかに判定した親油性、薬物の分子半径およびイオン電荷（分子量からある程度推定される）、薬物が送達される管腔環境のｐＨ、配合物の緩衝能、ならびに吸収表面の面積に依存する。傍細胞経路は、鼻粘膜上皮の到達可能な表面積のうち比較的小さな画分である。一般に、細胞膜は傍細胞空間が占める面積より千倍大きな粘膜表面積を占めると報告されている。したがって、大きな（すなわち５ＫＤａより大きな）分子の透過と対比してより小さな到達可能面積ならびにサイズおよび電荷に基づく識別から、薬物輸送に関して傍細胞経路は一般に経細胞送達より劣ると示唆されるであろう。ところが意外なことに、本発明の方法および組成物によれば、鼻の非嗅粘膜上皮に進入して傍細胞経路でこれを通過するアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の輸送が有意に促進され、経口投与と比較して生体内利用能が予想外に向上し、中枢神経系へのターゲティングが向上する。
【００８７】
本発明の医薬組成物は、経鼻投与のために特別に配合されている。鼻呼吸に伴って、約１０〜２０ｕｍまたはそれ以上のサイズの粒子はほぼすべて鼻粘膜に沈着するのに対し、２ｕｍ未満の粒子は鼻腔を通過して肺内に沈着する可能性がある。配合物を、それらの物理的状態および化学組成に関して、鼻腔内送達に最適となるように最適化する。経鼻配合物は特に、散剤、ゲル剤、軟膏剤、点鼻剤、タンポン、スポンジ、およびスプレー剤であってよい。散剤は特殊な鼻腔アプリケーターで投薬される。鼻腔スプレーは、簡単な圧搾ボトルから比較的複雑なピストンまたはポンプにまで及ぶ多数の用具で投薬される。水性配合物に関しては、個々の配合物について鼻腔内送達に使用できる用具のタイプは粘度および界面張力により決まる度合いが大きい。本発明において考慮される非水性液体配合物に関しては、排出される液滴サイズの決定に際して表面張力が要因となるのは稀であり、粘度が優先する。本発明の医薬組成物は、一方または両方の鼻粘膜表面に適用できる。
【００８８】
他の態様においては、増粘剤（ｖｉｓｃｏｓｉｆｉｅｒ，ｔｈｉｃｋｅｎｅｒ）、たとえばゲルポリマーを配合物に含有させて小滴サイズを増大させ、本発明の医薬組成物が確実に鼻腔内に留まるようにすることができる。薬物ボーラスを鼻腔内に保持するための他の方法には、より高濃度の薬物を用い、急速透過物質として低分子量ポリオキシエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、グリセロール、１，３−ブタンジオール、または低分子量モノ−およびジグリセリドを組み合わせてまたは単独で用いて本質的に瞬時に鼻粘膜を湿潤させることにより、配合物を粘膜層に固着することが含まれる。適切な水性スプレー剤を、直径１０〜１０００ｕｍの粗い粒子または液滴の形で送達すると、小滴は鼻腔より奥へ進入しない。アプリケーターを鼻前庭に挿入して圧搾し、通常は０．９ｍＬ以下、好ましくは０．２ｍＬ未満、最も好ましくは０．１ｍＬ未満の量の配合物を噴射して鼻腔壁に沈着させ、非水性溶剤により直ちにそこに付着させる。ごく少量の物質が気道壁に遭遇する前に咽頭口腔部に進入する可能性はあるが、本質的に肺に進入する物質はない。これは、本発明を効果的に使用するのに必要な条件である。
【００８９】
好ましくは、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬を哺乳動物に約０．１〜約１００ｍｇの有効量で投与する。
好ましくは、本発明の医薬組成物はｐＨ３．０〜６．０、より好ましくはｐＨ３．０〜５．０、最も好ましくはｐＨ３．０〜４．０をもつ。
【００９０】
ある好ましい態様において、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬はプロドラッグである。
本発明の医薬組成物は、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬および透過促進剤のほか、薬学的に許容できるキャリヤーまたはビヒクルを含有することができる。本明細書中で用いる”キャリヤー”は、薬学的に許容できる固体または液状の充填剤、希釈剤または封入カプセル材料を意味する。水を含有する液状キャリヤーは、薬学的に許容できる添加剤、たとえば酸性化剤、アルカリ化剤、抗微生物性保存剤、酸化防止剤、緩衝剤、キレート化剤、錯化剤、可溶化剤、保湿剤、溶剤、沈殿防止剤および／または増粘剤、等張化剤、湿潤剤、または他の生体適合性物質を含有してもよい。上記カテゴリーに挙げた成分の一覧は米国薬局方国民医薬品集（Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ），ｐｐ．１８５７−１８５９，１９９０にあり、これを本明細書に援用する。薬学的に許容できるキャリヤーとして使用できる物質の若干例は、下記のものである：糖類、たとえば乳糖、ブドウ糖およびショ糖；デンプン、たとえばトウモロコシデンプンおよびバシレイショデンプン；セルロースおよびその誘導体、たとえばカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロース；粉末状トラガカント；麦芽；ゼラチン；タルク；賦形剤、たとえばカカオ脂および坐剤用ろう；油、たとえばラッカセイ油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油および大豆油；グリコール、たとえばプロピレングリコール；ポリオール、たとえばグリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコール；エステル、たとえばオレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル；寒天；緩衝剤、たとえば水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム；アルギン酸；発熱物質を含まない水；等張食塩水；リンゲル液、エチルアルコールおよびリン酸緩衝液、ならびに医薬配合物に用いられる他の無毒性適合性物質。配合者の目的に従って、湿潤剤、乳化剤および滑沢剤、たとえばラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム、ならびに着色剤、解離剤、コーティング剤、甘味剤、着香剤および香料、保存剤および酸化防止剤が組成物中に存在してもよい。薬学的に許容できる酸化防止剤の例には下記のものが含まれる：水溶性酸化防止剤、たとえばアスコルビン酸、塩酸システイン、亜硫酸水素ナトリウム、メタ亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなど；油溶性酸化防止剤、たとえばパルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α−トコフェロールなど；および金属キレート化剤、たとえばクエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸など。キャリヤー物質と組み合わせて単一剤形を製造する有効成分の量は、個々の鼻腔内投与様式に応じて異なるであろう。
【００９１】
本発明の医薬組成物は、一般に無菌であり、医薬用として安定である。本明細書中で用いる”安定”とは、適宜な政府基準書に記載の適正製造基準の原則に従って確立された同一性、強度、品質および純度に関するすべての化学的および物理的事項を満たす配合物を意味する。
【００９２】
本明細書中で用いる”経粘膜有効量のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬”は、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬を対象における薬物活性の標的部位へ効果的に経粘膜送達することを意図する。
【００９３】
本発明の種々の態様において、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬を、前記（ａ）〜（ｌ）に示した１、２、３、４またはそれ以上の種類の透過促進剤と組み合わせる。これらの透過促進剤を単独でまたは一緒に、薬学的に許容できる配合物または送達ビヒクル中においてアセチルコリンエステラーゼ阻害薬と混合し、または他の方法で混和する。アセチルコリンエステラーゼ阻害薬と本発明の教示による１種類以上の透過促進剤の配合物（所望により、前記（ａ）〜（ｌ）から選択される２種類以上の鼻腔内送達促進剤のいずれかの組合わせを含む）は、哺乳動物の鼻粘膜表面への送達によるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の生体内利用能を増大させる。
【００９４】
本発明の関連態様において、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の鼻腔内送達を向上させるための多様な協調投与方法が提供される。これらの方法には、有効量の少なくとも１種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬を、鼻腔内送達促進のためにアセチルコリンエステラーゼ阻害薬を効果的に混和、会合、内包、封入もしくは結合して有効薬剤を安定化する１種類以上の鼻腔内送達促進剤との協調投与プロトコルにおいて哺乳動物に投与する工程（１以上）が含まれる。
【００９５】
本発明による協調投与方法を実施するために、前記（ａ）〜（ｌ）に示した１、２またはそれ以上の種類の鼻腔内送達促進剤の組合わせを、鼻腔内同時投与のために混合し、または他の方法で混和することができる。あるいは、前記（ａ）〜（ｌ）に示した１、２またはそれ以上の種類の経粘膜送達促進剤の組合わせを一緒に、または個別に、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の投与とは分離して予め定めた時間順序で（たとえば１種類以上の送達促進剤を予め投与することにより）、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬と同一または異なる送達経路で（たとえばアセチルコリンエステラーゼ阻害薬と同一または異なる粘膜表面に）粘膜投与することができ、あるいは粘膜以外にすら投与できる（たとえば筋肉内、皮下、または静脈内経路）。本発明の教示によるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬と１、２またはそれ以上の種類の鼻腔内送達促進剤の協調投与により、哺乳動物の粘膜表面への送達によるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の生体内利用能が高まる。
【００９６】
さらに関連の本発明態様において、鼻腔内送達を促進するためのアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の配合物を調製する種々の”多重処理（ｍｕｌｔｉ−ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ）”または”共処理（ｃｏ−ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ）”方法が提供される。これらの方法には、１種類以上のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬を順に、または同時に、１、２またはそれ以上の種類の（いずれかの組合わせを含む）透過促進剤と接触させ、反応させ、または配合する、１以上の処理工程または配合工程が含まれる。
【００９７】
本発明による多重処理または共処理方法を実施するために、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬を、一連の処理もしくは配合工程で、または同時配合操作で、前記（ａ）〜（ｋ）に示した１、２またはそれ以上の種類の透過促進剤のいずれかの組合わせに暴露し、それと反応させ、または組合わせ配合する。これらの工程は、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬（または他の配合物成分）を１以上の構造面または機能面において改変し、あるいはそれぞれが前記（ａ）〜（ｋ）に示した個々の鼻腔内送達促進剤の接触、改変作用、または組合わせ配合物中での存在に少なくとも一部は関与する１以上の（複数の無関係なものを含む）面において、他の形で有効成分の鼻腔内送達を促進する。
【００９８】
経粘膜吸収を高めると報告されている多数の既知物質が、粘膜組織に刺激や損傷も与える（たとえばＳｗｅｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｃｕｒａｔｏｌｏ，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．８：３９−９２，１９９２参照；本明細書に援用する）。これに関して、本発明の組合わせ配合物および協調投与方法には、本発明において有用なアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の鼻腔内送達を促進するための、有効で毒性が最小限である送達促進剤を採用する。
【００９９】
吸収促進機序は本発明の透過促進剤が異なるのに伴って変化するであろうが、これに関して有用な物質は、実質的に粘膜組織に有害作用を与えないものであり、個々のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬または他の有効薬剤もしくは送達促進剤の物理化学的特性に応じて選択される。これに関して、粘膜組織の浸透性または透過性を高める透過促進剤は、鼻粘膜の保護透過バリヤーをある程度変化させることがしばしばある。本発明において有用なそのような透過促進剤については、鼻粘膜透過性の有意の変化が目的の薬物送達期間に適した時間枠内で可逆的であることが一般に望ましい。さらに、長期使用に伴って鼻粘膜のバリヤー特性に実質的な累積毒性も永久的な有害変化も誘発されてはならない。
【０１００】
本発明の種々の態様において、本発明に含まれるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬および他の治療薬が、投与部位と選択した標的部位との間にある粘膜バリヤーを通過して送達される、改善された経鼻粘膜送達用の配合物および方法が提供される。一般にアセチルコリンエステラーゼ阻害薬は、有効な濃度レベルでキャリヤーその他の送達ビヒクル中に効果的に装填され、たとえば鼻の粘膜および膜に送達され、促進拡散または受動拡散によって遠くの薬物作用標的部位（たとえば血流または中枢神経系）へ送達されるまで、安定な形態で保持される。アセチルコリンエステラーゼ阻害薬を送達ビヒクル中において、または他の修飾された形で（たとえばプロドラッグの形で）供給し、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬の放出または活性化が生理的刺激（たとえばｐＨ変化、リゾソーム酵素など）により開始されてもよい。
【０１０１】
このクラスの薬物について、ＣＳＦ（脳脊髄液）中における濃度上昇は好適な治療効果指標として採用される。好ましくは本発明の医薬組成物は、哺乳動物に鼻腔内投与した後、哺乳動物のＣＳＦ中においてその患者の血漿中におけるアセチルコリンエステラーゼ阻害薬の公称治療的濃度より高いアセチルコリンエステラーゼ阻害薬ピーク濃度を与える。ヒトにおいて現在リバスチグミンおよびその主要な活性代謝産物に認められている最小治療濃度（ＭＴＣ）値は、アセチルコリンエステラーゼ活性阻害のＩ50%（最大値の半分）に関して薬物５ｕｇ／Ｌ（ＣＳＦ）のオーダーである。ドネペジルについては、ラットにおいてＭＴＣが０．４２ｎｍｏｌ／ｇと報告された。タクリンについては、ラットにおいてＭＴＣが３．５ｎｍｏｌ／ｇと報告された。ＴＡＫ−１４７（３−［１−（フェニルメチル）−４−ピペリジニル］−１−（２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンザゼピン−８−イル）−１−プロパノン）については、ラットにおいてＭＴＣが１．１ｎｍｏｌ／ｇ（ＣＳＦ）と報告された（Ｋｏｓａｓａ  Ｔ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，”経口投与した新規なアルツハイマー病治療薬である塩酸ドネペジル（Ｅ２０２０）がラットのコリンエステラーゼ活性に及ぼす阻害作用”，Ｅｕｒ．Ｊ  Ｐｈａｒｍ  ３８９：１７３−９；Ｂｏｂｂｕｒｕ  ＪＶ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，”アルツハイマー病患者におけるコリンエステラーゼ阻害薬リバスチグミンの薬力学−薬物動態モデリング”，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍ  ４１：１０８２−９０；Ｃｕｌｔｅｒ  ＮＲ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，”アルツハイマー病におけるＳＤＺ  ＥＮＡ  ７１３による用量依存性のＣＳＦアセチルコリンエステラーゼ阻害”，Ａｃｔａ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｓｃａｎｄ  ９７：２４４−５０；Ｐｏｌｉｎｓｋｙ  ＲＪ，１９９８，”リバスチグミンの臨床薬理”Ｃｌｉｎ  Ｔｈｅｒ  ２０：６３４−４７）。
【０１０２】
本発明の方法および組成物を説明するために、以下の実施例を示す。これらの例は本発明を限定するものではない。それらは本発明を実施する方法を示唆するためのものである。薬物送達その他の専門分野の知識によれば、本発明を実施するための他の方法が見いだされるであろう。それらの方法も本発明の範囲に含まれるものとする。
【０１０３】
実施例
実施例１−ドネペジルの経鼻配合物
【０１０４】
【表１】
2005532372.tif 000003
【０１０５】
実施例２−ドネペジルの経鼻配合物
【０１０６】
【表２】
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【０１０７】
実施例３−ドネペジルの経鼻配合物
【０１０８】
【表３】
2005532372.tif 000005
【０１０９】
実施例４−ドネペジルの経鼻配合物
【０１１０】
【表４】
2005532372.tif 000006
【０１１１】
実施例５−ドネペジルの経鼻配合物
【０１１２】
【表５】
2005532372.tif 000007
【０１１３】
実施例６−ドネペジルの経鼻配合物
【０１１４】
【表６】
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【０１１５】
実施例７−ドネペジルの経鼻配合物
【０１１６】
【表７】
2005532372.tif 000009
【０１１７】
実施例８−ドネペジルの経鼻配合物
【０１１８】
【表８】
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【０１１９】
実施例９−ラットにおける生体内利用能
約１８０ｇの雄ラット（Ｒａｔｔｕｓ  ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ）に外科的に頚静脈留置カニューレを設置し、処理中は軽度に麻酔しておいた。ドネペジルを含有する鼻腔内配合物を動物の右鼻孔に鼻腔内投与した。投与後、液体が鼻腔から流出しないように動物の頭を持ち上げた。
【０１２０】
投与後、５、１０、１５、３０および６０分目に、血液およびＣＳＦ（脳脊髄液）の対試料を採集し、氷に乗せた。ＥＤＴＡを抗凝固剤として用い、冷却遠心機で遠心した後、血漿を分離した。次いですべての試料を、抽出せずにＨＰＬＣでドネペジルについて分析した。
【０１２１】
結果をプロットし、図１に示す。ドネペジルは不活性代謝産物の形成により体内から速やかに排出される。しかし、ＣＳＦ対血漿比の急速な変化（３０分目にピークＣＳＦ濃度２８．４ｎｇ／ｍＬ）は、これらのコンパートメントプールが独立して挙動し、血漿負荷とは独立した補足経路によりＣＳＦが選択的に負荷されることを示唆する。これはクモ膜下叢への直接透過によるものであろう。本発明者らは、この所見が経鼻投与による直接ＣＳＦ負荷を証明するものと解釈する。さらに、到達したＣＳＦ濃度はこの薬物に要求される公称血漿中治療的濃度より高いことが認められる。
【０１２２】
実施例１０−ラットにおける投薬耐容性
【０１２３】
【表９】
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【０１２４】
α−シクロデキストリン（１２％）中のドネペジル５０ｍｇ／ｍＬ配合物を、動物作業用に新たに調製した。承認されているプロトコルに従って、１５０〜１９０ｇの雄動物（Ｒａｔｔｕｓ  ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  Ｌｅｗｉｓ）各３匹２群の右鼻孔に、５０ｕＬ／ｋｇの被験品または生理食塩水対照を点滴注入により鼻腔内投与した。送達中に鼻粘膜を傷つけないように注意した。投与後、液体が鼻腔から流出しないように動物の頭を持ち上げた。投与量は、ヒトの常用量５ｍｇ／日から、ラット対ヒトの鼻腔表面積（ラットの７ｃｍ2対ヒトの８０ｃｍ2）に基づいて外挿された。
【０１２５】
投与後、連続的に６０分間、その後１時間毎に、各動物を観察した。投与前と投与後４時間目に、獣医職員が鼻腔の耳鏡検査を行った。
所見：ドネペジルを投与した動物に、鼻刺激の徴候、たとえば鼻を引っ掻く、鼻を舐めるもしくは咬む、異常な体位、発声、運動性の欠如、または痛みもしくは窮迫の徴候は認められなかった。耳鏡検査では、生理食塩水処理動物とドネペジル処理動物の間にいかなる相異もみられなかった。ただし、１匹の処理動物が投与直後に両鼻孔からのわずかな鼻汁を示したが、数分で自然消散した。
【０１２６】
この配合物は生体適合性であり、前臨床試験において十分に耐容されると結論された。
実施例１１−経粘膜送達−透過速度および経膜抵抗
本明細書に記載するＥｐｉＡｉｒｗａｙシステムは、ＭａｔＴｅｋ  Ｃｏｒｐ（マサチュセッツ州アッシュランド）により、気道を内張りする多列上皮のモデルとして開発された。気−液界面にある多孔膜底付き細胞培養インサート上で上皮細胞を増殖させると、細胞が高度に分極した形態に分化する。これらは、正常なヒト由来の気管／気管支上皮細胞を専売培地で培養して、気道の上皮組織に近似する高度に分化した多列組織モデルを形成したものである。先端表面には小絨毛超微構造をもつ線毛があり、この上皮は粘液を産生する（ムチンの存在がイムノブロッティングにより確認された）。顕微鏡検査により密着結合が確認され、この組織は分極した不透膜に特徴的な高い電気抵抗をもつ。対照組織の経上皮抵抗は一般に５５０±１２５オーム／ｃｍ2を超える。インサートは０．８７５ｃｍの直径をもち、０．６ｃｍ2の表面積を備えている。工場で出荷の約３週間前に細胞をこのインサート上に接種する。１”キット”が２４ユニットからなる。これらの分化した初代細胞は、多数の薬物を傍細胞輸送する機能をもち、カルシトニンを能動輸送する機能もあることが示されており、経鼻配合物のインビボ挙動を推定できる有用な情報を提供する。この試験は、配合物のスクリーニングツールとして、また傍細胞輸送を最適化する手段として、ルーティンに採用される。
【０１２７】
ａ．試験前に、６および２４ウェル細胞培養プレート（試験に必要）用に設計された特殊なデザインのカップ内で、ヒト気道上皮細胞を集密状態まで増殖させる。試験前の細胞の増殖および分化に際しては、細胞の先端側を空気に暴露し、基底側を培地に暴露する点に注意する。”カップ”の底を形成する半透膜を細胞支持体として用いる。サイトカインを含まない無血清の専売培地を細胞増殖に用いる。到着すると、これらのユニットを６ウェルマイクロプレート内の無菌支持体に乗せる。各ウェルに５ｍＬの専売培地を入れる。５ｍＬの体積は、スタンド上のユニットの底に接触するが、上皮の先端表面は空気と直接接したままであるのにちょうど十分である。プレートに入れたユニットを、空気中５％ＣＯ2の雰囲気のインキュベーター内で３７℃に２４時間保持する。この期間の終了時に培地を新鮮な培地と交換し、ユニットをインキュベーターに戻してさらに２４時間おく。
【０１２８】
ｂ．すべての実験において、ヒト気道上皮の集密単層を入れた各”カップ”の先端表面に、試験する経粘膜送達用配合物を１００μＬの体積で付与する。この体積は先端表面全体を覆うのに十分である。先端表面に付与した濃度の被験配合物の適量（一般に１００μＬ以上は必要ない）を、後続のＨＰＬＣによる薬物濃度測定用として分けておく。
【０１２９】
ｃ．これらのユニットを実験のためにスタンドのない６ウェルプレートに入れる：各ウェルには０．９ｍＬの予熱した培地が入れてあり、これはユニットの多孔膜底と接触するのに十分であるが、ユニットに対する有意の上向きの静水圧を発生しない量である。各操作間は、すべての細胞をルーティンに加湿ＣＯ2インキュベーター内で３７℃に保持する。
【０１３０】
ｄ．誤差の可能性となる原因を最小限に抑え、かつ濃度勾配が生じるのを避けるために、試験中の各時点で０．９ｍＬ入りウェルから他のウェルへユニットを移動させる。これらの移動は、体積１００μＬの被験物質を先端表面に付与したゼロ時点を基準として下記の時点で行われる：１５分、３０分、６０分および１２０分。
【０１３１】
ｅ．各時点間は、プレート内のユニットを３７℃のインキュベーター内に保持する。ウェル当たり０．９ｍＬの培地を入れたプレートも、プレートを取り出してユニットをあるウェルから他のウェルへ無菌ピンセットで移動させる短時間の間に生じる温度変異が最小限になるように、インキュベーター内に保持する。
【０１３２】
ｆ．各時点の終了時に、各ユニットを移動させたウェルから培地を取り出し、透過した試験物質の濃度を測定するために２本の試験管に分ける（１本の試験管に７００μＬ、他方に２００μＬ）。
【０１３３】
ｇ．１２０分の時点の終了時に、０．９ｍＬ入り最終ウェルから、ウェル当たり培地０．３ｍＬを入れた２４ウェルマイクロプレートへ、ユニットを移動させる。この体積も、ユニットの底と接触するのに十分であるが、ユニットに対する上向きの静水圧を発生しない量である。ユニットをインキュベーターに戻した後、経上皮抵抗を測定する。
【０１３４】
ｈ．誤認を最小限に抑えるために、すべての試験管、プレートおよびウェルに実験開始前に予めラベルを付けておく。この方法についての詳細は製造業者のウェブサイトで見ることができる−www.Mattek.com。
【０１３５】
経上皮抵抗（ＴＥＥＲ）測定のためのプロトコル
ｉ．気道上皮細胞はインビトロでもインビボでも密着結合を形成し、組織を通過する溶質の流れを制限する。これらの結合は、切出した気道組織において数百オーム／ｃｍ2の経上皮抵抗を生じる。本発明者らは、透過試験での一連の工程において擬似暴露した対照ＥｐｉＡｉｒｗａｙユニットのＴＥＥＲは７００〜８００オーム／ｃｍ2であることを見いだした。しかし小分子の透過はＴＥＥＲの逆数に比例するので、この数値は透過に対する大きなバリヤーとなるのに十分なほど高い。逆に、細胞を含まない多孔膜底付きユニットは最小の経膜抵抗を生じるにすぎない（５〜２０オーム／ｃｍ2）。
【０１３６】
ｉｉ．到着すると、ユニットを６ウェルマイクロプレート内の無菌支持体に乗せる。各ウェルに５ｍＬの専売培地を入れる。このＤＭＥＭベースの培地は無血清であるが、上皮増殖因子その他の因子が補充されている。培地を常に内因レベルのサイトカインまたは鼻腔内送達に関して考慮される増殖因子について検査するが、現在までインスリン以外には検査したすべてのサイトカインおよび因子を含まなかった。５ｍＬの体積は、スタンド上のユニットの底に接触するが、上皮の先端表面は空気と直接接したままであるのにちょうど十分である。この工程およびユニットを液体入りウェルへ移動させるすべての後続工程で、無菌ピンセットを用いてユニットの底と培地の間に空気がトラップされないことを確認する。
【０１３７】
ｉｉｉ．プレートに入れたユニットを、空気中５％ＣＯ2の雰囲気のインキュベーター内で３７℃に２４時間保持する。この期間の終了時に培地を新鮮な培地と交換し、ユニットをインキュベーターに戻してさらに２４時間おく。
【０１３８】
ｉｖ．ＴＥＥＲを正確に測定するためには、オーム計の電極を膜の上と下に広い表面積にわたって配置し、かつ膜から電極までの距離は再現性をもって制御する必要がある。ＭａｔＴｅｋが推奨している、本明細書中のすべての実験に採用したＴＥＥＲ測定方法では、Ｗｏｒｌｄ  Ｐｒｅｃｉｔｉｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社（フロリダ州サラソタ；wpiinc.com）の内部Ａｇ／ＡｇＣｌ参照電極付きＳＴＸ２電極対を備えた”ＥＶＯＭ”（登録商標）上皮電圧オーム計を用いる。
【０１３９】
ｖ．ユニットを下記の順序で読み取る：すべての擬似処理対照、続いてすべての配合物処理試料、続いて擬似処理対照それぞれの２回目のＴＥＥＲ読取り。
透過速度に関する実験プロトコル
ｉ．それぞれ四重のウェルに付与した５種類の異なる配合物を評価するために、２４個のＥｐｉＡｉｒｗａｙユニットの”キット”をルーティンに使用できる。各ウェルを透過速度（４時点）および経上皮抵抗の測定に用いる。追加の１組のウェルを対照として用い、透過速度の測定に際してはこれらを擬似処理するが、他の点では経上皮抵抗測定用の被験試料入りユニットと同一に取り扱う。対照についての測定も、四重のユニットについてルーティンに実施する。
【０１４０】
ｉｉ．すべての実験において、試験する経粘膜送達用配合物を各ユニットの先端表面に１００μＬの体積で付与する。これは先端表面全体を覆うのに十分である。先端表面に付与した濃度の被験配合物の適量（一般に１００μＬ以上は必要ない）を、後続のＨＰＬＣ、ＥＬＩＳＡその他の表示したアッセイ法による有効物質濃度測定用として分けておく。
【０１４１】
ｉｉｉ．これらのユニットを実験のためにスタンドのない６ウェルプレートに入れる：各ウェルには０．９ｍＬの培地が入れてあり、これはユニットの多孔膜底と接触するのに十分であるが、ユニットに対する有意の上向きの静水圧を発生しない量である。
【０１４２】
ｉｖ．誤差の可能性となる原因を最小限に抑え、かつ濃度勾配が生じるのを避けるために、試験中の各時点で０．９ｍＬ入りウェルから他のウェルへユニットを移動させる。これらの移動は、体積１００μＬの被験物質を先端表面に付与したゼロ時点を基準として下記の時点で行われる：１５分、３０分、６０分および１２０分。
【０１４３】
ｖ．各時点間は、プレート内のユニットを３７℃のインキュベーター内に保持する。ウェル当たり０．９ｍＬの培地を入れたプレートも、プレートを取り出してユニットをあるウェルから他のウェルへ無菌ピンセットで移動させる短時間の間に生じる温度変異が最小限になるように、インキュベーター内に保持する。
【０１４４】
ｖｉ．各時点の終了時に、各ユニットを移動させたウェルから培地を取り出す。アッセイを２４時間以内に実施する予定の場合、これらの透過培地試料を冷蔵庫内に保存する。そうでなければ、試料を小分けし、アッセイのために１回融解するまで−８０℃に凍結保存する。反復凍結融解サイクルは避けるべきである。
【０１４５】
ｖｉｉ．１２０分の時点の終了時に、０．９ｍＬ入り最終ウェルから、ウェル当たり培地０．３ｍＬを入れた２４ウェルマイクロプレートへ、ユニットを移動させる。この体積も、ユニットの底と接触するのに十分であるが、ユニットに対する上向きの静水圧を発生しない量である。ユニットをインキュベーターに戻した後、経上皮抵抗を測定する。
【０１４６】
透過性の結果
前記プロトコルの記載に従って、ドネペジルの透過性に関するインビトロデータを収集した。ＥｐｉＡｉｒｗａｙヒト気道上皮細胞モデルの組織層を通過するドネペジルの透過性を、次表に全流入量ｕｇ／ｍｉｎ／ｃｍ2として報告する。これから分かるように、ドネペジルはこのアッセイにおいてきわめて移動性である。
【０１４７】
【表１０】
2005532372.tif 000012
【０１４８】
密着結合および上皮膜を開放および撹乱することにより傍細胞輸送を高める作用をする周知の促進物質であるタウロコール酸ナトリウムに関する流入量の増大に注目されたい。
ＴＥＥＲの結果
前記プロトコルの記載に従って気道上皮組織層における密着結合電気抵抗に関するインビトロデータを収集し、次表に報告する。
【０１４９】
【表１１】
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【０１５０】
擬似処理した組織の電気抵抗（一般に約５００〜８００オーム／ｃｍ2）を１００％とした。各賦形剤に暴露した細胞の生存性を確保するように注意する。経上皮抵抗の低下は、賦形剤が傍細胞輸送を高める能力の指標である。
【０１５１】
実施例１２−リバスチグミンの鼻腔内粘膜送達の促進のための配合物
リバスチグミンは最近見いだされたアセチルコリンエステラーゼ阻害薬である。リバスチグミンの経粘膜送達の促進のために下記の配合物例を調製する。
【０１５２】
【表１２】
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【０１５３】
この配合物を、鼻腔内に、または市販の配合物を入れたカプセル剤の胃内挿入により、留置頚静脈カニューレおよびヘパリンロック処理したラット６匹１２群に投与する。承認されたプロトコルに従って、実験群の各被験動物に１回量の鼻腔内リバスチグミンを投与する。次いで、各被験動物を局部麻酔下で（皮下キシロカイン）腰椎穿刺し、脳脊髄液（ＣＳＦ）５０ｕＬを採取する。各動物から一対の血液試料を採集する。各群を異なる時点に振り当てることにより、全ＰＫ曲線を組み立てることができる。最初のＣＳＦ試料を投与の５分後に採集し、その後の試料を２０、５０、７５、１００および４００分目に採集した。対照群については、経口リバスチグミンを用いてこの操作を反復する。
【０１５４】
ＣＳＦ試料を分析まで凍結しておく。データは、血漿中リバスチグミンがＣＳＦ中の速度とは独立したＰＫに従うことを示す。さらに、鼻腔内投与した場合、ＣＳＦ中のリバスチグミン濃度はヒトにおいて経口投与後の血漿について報告されている療法レベルより高いレベルでピークに達する。経口投与リバスチグミンについての血漿曲線（ＡＵＣ）との比較により、鼻腔内リバスチグミンの血漿ＡＵＣは異例であることが示される。本発明者らは、これは経口投与薬物に関するＡＵＣの低下に初回通過クリアランスが及ぼす作用によるものであると考える。
【０１５５】
所望により、水迷路学習モデルまたは他の認知機能モデルにおいて、処理動物を記憶増強に関して試験することができる。
実施例１３−ヒューペルジンＡ（セレギン）の鼻腔内粘膜送達の促進のための配合物
ヒューペルジンＡは植物由来の天然アセチルコリンエステラーゼ阻害物質であり、シグマ・ケミカルズ（ミズーリ州セントルイス）から入手できる。ヒューペルジンの経粘膜送達の促進のために下記の配合物例を調製する。
【０１５６】
【表１３】
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【０１５７】
所望により、水迷路学習モデルまたは他の認知機能モデルにおいて、処理動物を記憶増強に関して試験することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１５８】
【図１】ラットにおいてゼロ時点で１回経鼻投与し、次いで５、１０、１５、３０および６０分目に脳脊髄液および血漿を二重測定した、ドネペジルの脳脊髄液／血漿比のプロットを示す。
【図１】
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【国際調査報告】
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