(57)【要約】本発明は、補助食品中に含めるのに有用な改善されたビードレット処方物を提供することによって、先行技術のこれらおよび他の欠点を克服する。特に、改善されたビードレットは、ＤＨＡ（ドコサヘキサエン酸）；ローズマリーおよび／またはその成分；ならびに賦形剤を含む。ビードレットは、眼の栄養を改善および維持のためにカスタマイズされた補助食品中に含めるのに特に有用である。本発明はまた、特に圧縮錠剤中に提供された場合の、改善されたビードレットを含む改善された補助食品に関する。好ましい補助食品は、眼の健康の助けとして処方されてきた。本発明はまた、眼の健康を改善するためのビードレットおよび補助食品を使用する方法に関する。本発明の方法は、眼の健康の増進および加齢性黄斑変性を含む網膜障害の予防に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）およびローズマリーを含むビードレット。
【請求項２】
前記ビードレットが無臭である、請求項１に記載のビードレット。
【請求項３】
前記ＤＨＡが、発酵によって藻類から得られる、請求項１に記載のビードレット。
【請求項４】
前記ＤＮＡおよびローズマリーをコーティングする界面活性剤およびタンパク質、該界面活性剤でコーティングされたＤＨＡおよびローズマリーを囲むアルギン酸マトリクス、ならびに該ＤＮＡおよびローズマリーを含む該アルギン酸マトリクスを囲むコーティングをさらに含む、請求項１に記載のビードレット。
【請求項５】
単離されたダイズタンパク質をさらに含む、請求項４に記載のビードレット。
【請求項６】
請求項１に記載のビードレットであって、前記ＤＨＡの濃度が、１〜２５％の間であり、前記ローズマリーの濃度が、２〜１０％の間である、ビードレット。
【請求項７】
５〜５０％のアルギン酸ナトリウムをさらに含む、請求項６に記載のビードレット。
【請求項８】
哺乳動物における眼の健康を維持または改善する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、ＤＨＡおよびローズマリーを含むｃｏ−ビードレットを含む組成物を投与する工程を包含する、方法。
【請求項９】
請求項８に記載の方法であって、前記ｃｏ−ビードレットが、第１の層および第２の層中にカプセル化されたＤＨＡおよびローズマリーを含み、ここで該第１の層が、界面活性剤およびタンパク質により作製され、そして該第２の層が、該第１の層を覆い、かつアルギン酸マトリクスにより作製され、そして該ビードレットが、該第１および第２の層を含み、コーティングでコーティングされている、方法。
【請求項１０】
前記組成物が、錠剤の形態である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
ＤＨＡおよびローズマリーを含むビードレットであって、該ビードレットが、以下の工程：
（ａ）ＤＨＡ油およびローズマリー抽出物の混合物を得る工程：
（ｂ）界面活性剤の存在下で、該混合物中の該ＤＨＡおよびローズマリーの油滴サイズを減少させて、エマルジョンを作製する工程；
（ｃ）アルカリ金属アルギン酸塩およびタンパク質の溶液を得る工程；
（ｄ）該工程（ｂ）の溶液と、該工程（ｃ）の溶液を合わせる工程；
（ｅ）該工程（ｄ）で得られた溶液を、Ｃａ２＋を含む溶液に滴下して、ビードレットを得る工程；
（ｆ）該ビードレットを該溶液から取り出す工程；
（ｇ）該ビードレットを、酸性溶液でリンスする工程；
（ｈ）該ビードレットを乾燥させる工程；ならびに
（ｉ）該ビードレットをコーティングする工程、
によって調製される、方法。
【請求項１２】
請求項１に記載にビードレットを含む錠剤。
【請求項１３】
生成物特性または製造特性を改善するために、充填剤、結合剤、崩壊剤または他の賦形剤をさらに含む、請求項１２に記載の錠剤。
【請求項１４】
請求項１２に記載の錠剤であって、該錠剤中のＤＨＡの量が、約０．１％〜約５０％であり、該錠剤中のローズマリーの量が、約０．１％〜約５０％である、錠剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、米国出願番号第６０／３６８，３０１号（２００２年３月２８日出願）からの優先権を主張する。
【０００２】
（発明の背景）
（１．発明の分野）
本発明は、眼の健康を維持または改善するための、栄養補助食品（ｎｅｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌ）の分野および補助食品（ｄｉｅｔａｒｙ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）の使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
（２．関連技術の説明）
補助食品は、視覚の改善または失明の予防を含む、種々の理由のために摂取される。眼の健康の促進において有用な補助食品のセットの例は、ＩＣａｐｓ（登録商標）Ｄｉｅｔａｒｙ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ（Ａｌｃｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｆｏｒｔ  Ｗｏｒｔｈ，ＴＸ）である。補助食品は、一般に、粉末、錠剤、カプセルまたはゲルキャップ（ｇｅｌ−ｃａｐ）の形態であり、そして種々のビタミン、ミネラルおよび薬草成分または他の有機成分または植物成分を含む。いくつかの補助食品は、ビードレット（ｂｅａｄｌｅｔ）で処方され、これは、錠剤中に取り込まれ得るか、またはカプセルもしくはゲルキャップ中に充填され得る。
【０００４】
食品物質を含むビードレットは、一般に、直径約１ミリメートル未満の小さい扁平球体である。ビードレットには、種々の機能および目的が存在する。例えば、ビードレットは、補助食品内に、１つの成分または複数の成分の別個の封じ込めを提供して、捕捉された成分の安定性を改善し得る。
【０００５】
種々のビードレット組成物が公知であり、そして多数の食品成分または薬剤製造者（Ｈ．Ｒｅｉｓｍａｎ  Ｃｏｒｐ．（Ｏｒａｎｇｅ，ＮＪ）、ＢＡＳＦ（Ｍｏｕｎｔ  Ｏｌｉｖｅ，ＮＪ）およびＨｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ（Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪ）を含む）から入手され得る。特定のビードレット組成物は、米国特許第４，２５４，１００号（Ｋｅｌｌｅｒら）および同第３，９９８，７５３号（Ａｎｔｏｓｈｋｉｗら）を含むいくつかの特許の目的であった。ビードレットの製造方法は、米国特許第４，６７０，２４７号（Ｓｃｉａｌｐｉ）および同第３，９９８，７５３号において開示されている。
【０００６】
補助食品において使用される現在のビードレット組成物は、一般に、ビードレット内に含まれる単一の栄養化合物（すなわち、「活性成分」）に対して相補的な不活性な成分および賦形剤の使用に限定されている。他の例において、同じクラスの分子（例えば、微量の関連構築物を伴う主要成分）が特定の供給源から精製され、そして両方の化合物が並行した効果を生じる場合、このような分子は、単離される必要がなくてもよいが、ビードレット中で一緒に混合される必要がある。これらは、偽単一成分（ｐｓｅｕｄｏ−ｓｉｎｇｌｅ−ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ）ビードレットとみなされ得る。市場にある現在の例としては、Ｌｕｔｒｉｎｏｌ（登録商標）ビードレットおよびＦｌｏｒａＧＬＯ（登録商標）ビードレットが挙げられ、これらは、Ｒｅｔｏｘｉｌ（登録商標）Ｄｉｅｔａｒｙ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓにおいて処方された、ルテインおよびゼアキサンチン（ｚｅａｘａｎｔｈｉｎ）の組み合わせである。ビードレット拘束（ｃｏｎｆｉｎｅｍｅｎｔ）から利益を得る成分の例としては、天然ビタミン（例えば、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥおよびビタミンＫ）；キサントフィル（例えば、ルテイン、ゼアキサンチン、カンタキサンチン（ｃａｎｔｈａｘａｎｔｈｉｎ）およびアスタキサンチン（ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ））；ならびにカロチン（例えば、β−カロチン、リコペンおよびレチノール）が挙げられてきた。
【０００７】
Ａｌｃｏｎ，Ｉｎｃ．（以前には、Ａｌｃｏｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ｌｔｄ．として知られる）は、係属中の米国特許出願番号０９／３９７，４７２号（’４７２出願、本明細書中で参考として援用される）および１種より多い成分を含むビードレットに関する、関連の外国出願を所有している。より具体的には、これらの出願は、１種以上のキサントフィル、１種以上のカロチン／レチノイド、１種以上の抗酸化剤および１種以上の凝固剤を含むビードレットに関する。’４７２出願のビードレットは、哺乳動物の疾患または障害を処置または予防することを目的とする。’４７２出願は、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）単独またはローズマリー単独の使用も、任意の組み合わせでの使用も、考察していない。
【０００８】
ＤＨＡは、ω−３必須脂肪酸として知られる長鎖脂肪酸である。これは、油の多い冷水魚（ｏｉｌｙ  ｃｏｌｄ−ｗａｔｅｒ  ｆｉｓｈ）（例えば、サケ、ニシンまたはイワシ）において比較的高濃度で見出され、そして発酵によって藻類からも得られ得る。ω−３脂肪酸は、トウモロコシおよびダイズにおいて見出されるより一般的なω−６脂肪酸、ならびに肉および乳製品中の脂肪と釣り合っている。ω−６脂肪酸取り込みが減少しつつω−３脂肪酸取り込みが増大すると、身体における抗炎症作用が改善され、そして一般に免疫系が支持されることが、公知である。ＤＨＡは、脳および網膜において濃縮し、そして特に未熟児について、先天的な発達および視覚の鋭敏さにおいて重要であることが示されている（Ｂｉｒｃｈら、２０００）。
【０００９】
不幸なことに、ＤＨＡはまた、不快な「魚臭い」または「海産物臭い」臭気を伴う。従って、ＤＨＡは、摂取されると健康上の利益を提供することが公知であるものの、多くの使用補助製品においては見出されない。不快な臭気は、多くの消費者にその使用を思いとどまらせている。従って、付随する臭気なしにＤＨＡの健康上の利益を提供する製品が、必要とされる。
【００１０】
ＤＨＡに付随する不快な臭気は、脂肪酸の酸化副産物から生じると考えられる。ビードレット技術は、酸化から化合物（例えば、ルテイン）を保護するために使用されてきた。これは、種々の公知の抗酸化剤（主に、拡張されたヒトでの消費について安全であることが既知の一般的な水溶性および油溶性の抗酸化剤（特に、トコフェロール（ビタミンＥ関連化合物）およびアスコルベート（ビタミンＣ誘導体）（例えば、アスコルビルパルミテート）））を使用して、提供されている。しかし、時間を経て、瓶詰めされたルテイン含有製品が、以下の種々の方法で挙動することが見出されている：（１）頭部空間の全ての酸素が、最終的に抗酸化剤と反応する；（２）プラスチック瓶中に拡散する任意の酸素もまた、拘束された抗酸化剤と反応する；（３）酸素が、最も酸化可能な抗酸化剤と優先的に反応する。従って、ビードレット技術は、酸化からのいくらかの保護を提供するものの、それ自体は、ＤＨＡに付随する臭気問題または他の成分に付随する安定性問題の理想的な解決ではない。さらに、ＤＨＡ含有ビードレットの錠剤（このような補助食品の投与の好ましい形態）への圧縮は、不快な海産物臭い臭気の発生率を増強することが示されている。圧縮後の不安定性もまた、ルテイン含有ビードレットの圧縮後に観察された。
【００１１】
ＤＨＡ含有製品に付随する不利益（すなわち、不快な臭気）にもかかわらず、眼の健康の改善のための、ＤＨＡ含有栄養製品を提供することがなお所望される。さらなる眼の健康を提供する他の成分の同じビードレットにおける準備もまた、所望される。従って、必要とされることは、無臭かつ安定なビードレット処方物であり、これは、製品の有効期限を超えて悪化せず、そして眼の健康を改善し、そして錠剤化の圧縮力に耐え得る。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１２】
（発明の要旨）
本発明は、補助食品中に含めるのに有用な改善されたビードレット処方物を提供することによって、先行技術のこれらおよび他の欠点を克服する。特に、改善されたビードレットは、ＤＨＡ（ドコサヘキサエン酸）；ローズマリーおよび／またはその成分；ならびに賦形剤を含む。ビードレットは、眼の栄養を改善および維持のためにカスタマイズされた補助食品中に含めるのに特に有用である。
【００１３】
本発明はまた、特に圧縮錠剤中に提供された場合の、改善されたビードレットを含む改善された補助食品に関する。好ましい補助食品は、眼の健康の助けとして処方されてきた。本発明はまた、眼の健康を改善するためのビードレットおよび補助食品を使用する方法に関する。本発明の方法は、眼の健康の増進および加齢性黄斑変性を含む網膜障害の予防に関する。
【００１４】
補助食品への本発明のビードレット技術の適用は、増強された栄養補助食品の開発を提供および促進する。このような技術は、補助品の利用可能性の増大を補助し得、そしてまた、ＤＨＡおよびローズマリーを補助品内に含む組成物を改変することを容易にする。このような改善は、眼の栄養の増強および改善された眼の健康において特に有用であると考えられる。
【００１５】
（好ましい実施形態の詳細な説明）
本発明は、改善されたビードレット処方物、この改善されたビードレットを含む改善された補助食品処方物および使用方法に関する。本明細書中で使用する場合、「補助食品（ｄｉｅｔａｒｙ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）」または短縮形「補助品（ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）」は、食事物質を含み、かつ宿主（例えば、ヒトまたは他の哺乳動物）による摂取に適切な、任意の完成された補助食品投薬形態をいう。具体的には、本発明の改善されたビードレット処方物は、単一のビードレット内に安定な形態のローズマリーおよびＤＨＡを提供し、そしてそれによって改善された消費コンプライアンスの可能性を提供することによって、眼の栄養を増強し、そして眼の健康を改善し得る。なぜなら、この投薬形態は、本質的に無臭であり、一般に不快であるとされる海産物臭い臭気を排除しているからである。
【００１６】
ローズマリーは、中枢神経系の障害を処置するために数世紀にわたって使用されてきた。より最近、ローズマリーは、感覚を増強し、そして記憶を強化するために使用されている。また、ローズマリーは、眼の健康に有益な特性を有することが示されている。さらに、ローズマリーは、カルノシン酸（ｃａｒｎｏｓｉｃ  ａｃｉｄ）、ローズマリー酸およびカルノソール（ｃａｒｎｏｓｏｌ）を含む抗酸化剤を含有する。
【００１７】
本発明において利用されるローズマリーは、Ｒｏｓｍａｒｉｎｕｓ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓの葉から、溶媒（例えば、エタノール／水、プロパノール／水もしくは他の多成分アルコール／水抽出剤、または非極性／極性有機溶媒の混合物（例えば、ヘキサン／酢酸エチル））を利用して抽出された脂質画分から主になり、ここで、溶媒蒸発後、残渣は、０．５％より高い濃度で、そして好ましくは３％よりも高い濃度で、カルノシン酸を含有する。
【００１８】
ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）は、魚油または発酵により藻類に由来する、ω−３必須脂肪酸である。ＤＨＡの微量成分およびその酸化の副産物の両方が、不快な芳香（ときどき、「海産物臭い臭気」と記載される）を有することが観察されている。生産者は、より純粋な製品を案出するか、または酸化から製品を保護し得るキャリアを創出することによって、ＤＨＡの使用のこの欠点を排除することを試みてきた。例えば、最近、藻類の発酵プロセスおよびブロスからのＤＨＡの単離の両方が改善され、魚油から得られるＤＨＡと比較して、実質的に低減された海産物臭い臭気を有する、藻類由来のＤＨＡを含むＤＨＡ製品を生じている。本発明は、遊離酸、ＤＨＡエステル、そしてさらにＤＨＡバイオマスとしての、いずれかのＤＨＡでの使用について意図されている。また、対応する形態のω−６脂肪酸ＥＰＡ（エイコサペンタエン酸）の有意な画分を含んでも含まなくてもよいＤＨＡの供給源を含む。
【００１９】
実質的に臭気を有さないＤＨＡ製品の安定性を改善し、そしてより臭気を有さない状態を維持するために、ＤＨＡは、公知のゼラチンビードレット技術を使用してカプセル化された。また、藻類由来のＤＨＡを含有するビードレットを、魚油由来のＤＨＡを含有するビードレットと比較することによって、臭気における有意な改善が明らかとなった。しかし、ＤＨＡ含有ビードレットを錠剤へと圧縮すると、ＤＨＡの供給源に関わらずに、海産物臭い臭気が再び広がった。
【００２０】
本発明者らは、ローズマリーおよび／またはその成分をＤＨＡ含有ビードレットに添加すること（その結果、両方の「活性」成分が単一のビードレット中に存在する）は、この組成物を安定化し、従って、その保存期間を増大させつつ、臭気の発生を排除する。ローズマリー抗酸化剤は、ＤＨＡに優先的に酸化されることが見出されている。ＤＨＡおよびローズマリーの組み合わせは、単一のビードレット内に少なくとも２種の活性成分（両方の成分は、眼の健康の増強または改善に寄与する）を提供することによって、眼の健康を改善する。さらに、ビードレット内に存在するローズマリーはまた、ビードレット中のＤＨＡにいくらかの保護を提供し、不快な臭気の可能性を排除しつつ、その健康改善特性が維持されることを可能にし得る。ローズマリーはまた、一部、錠剤投薬形態全体に存在し得る他の成分および他の抗酸化剤を保護し得る。
【００２１】
実質的に任意のビードレット技術（例えば、米国特許第４，６７０，２４７号および同第３，９９８，７５３号（本明細書中で参考として援用される）に記載されるビードレット技術）が、本発明の実施において有用であることが企図されるが、本発明の実施に最も有用なビードレット技術は、ＬｙｃｏＲｅｄの子会社であるＢｉｏ  Ｄａｒの、非ゼラチンのアルギネートビードレット技術であると考えられる。本発明の実施に最も有用な、非ゼラチンのアルギネートビードレット技術は、米国特許出願番号０９／９３５，０５０号（本明細書中で参考として援用される）の目的である。
【００２２】
本発明の好ましい実施において、本明細書中に記載される、ＤＨＡおよびローズマリーを含有するビードレットは、以下のプロセスによって調製される：
（ａ）４０％のＤＨＡを含有する１部のＤＨＡ油を、０．２部のローズマリー抽出物と混合し、そしてこの溶液を４０℃まで加熱する。
【００２３】
（ｂ）少なくとも１種の界面活性剤（例えば、エトキシ化モノグリセリドおよびエトキシ化ジグリセリド）を、界面活性剤の総量が０．２部になるように、このＤＨＡおよびローズマリーの混合物に添加し、４０℃に維持し、そしてこれらの油状成分の透明な単相の混合物を生じる。
【００２４】
（ｃ）ＤＨＡ、ローズマリーおよび界面活性剤の混合物を、１部のアルギン酸ナトリウムおよび０．５部のタンパク質を、０．０８部の第二の界面活性剤（例えば、糖エステル）と共に、７０部の水に４０℃の温度で完全に溶解するまで溶解させることによって調製した水溶液に添加する。この混合物を激しく混合物して、アルギネート−タンパク質−界面活性剤−ＤＨＡ−ローズマリーのエマルジョンを生じる。ＤＨＡ油およびローズマリー抽出物の微小液滴を、界面活性剤、タンパク質およびアルギネートの水中エマルジョン中にカプセル化する。
【００２５】
（ｄ）このアルギネート−タンパク質−界面活性剤−ＤＨＡ−ローズマリーエマルジョンを、Ｃａ２＋を含有する溶液に滴下して、ＤＨＡ−ローズマリー油滴（これらは、それ自体、界面活性剤およびタンパク質のコーティングを有する）上に多層アルギン酸カルシウムコーティングを備えるビードレットを形成する。
【００２６】
（ｅ）アルギン酸カルシウム−タンパク質−界面活性剤−ＤＨＡ−ローズマリービードレットを、Ｃａ２＋含有溶液から濾過によって除去し、酸性溶液でリンスし、そして乾燥させる。そして、
（ｆ）この乾燥アルギン酸カルシウム−タンパク質−界面活性剤−ＤＨＡ−ローズマリービードレットを、ローズマリー含有ポリマーコーティングでコートして、最終ビードレットを得る。ローズマリー含有ポリマー溶液のコーティングを、流動化ベッドコーター（ｆｌｕｉｄｉｚｅｄ  ｂｅｄ  ｃｏａｔｅｒ）中で、アルギン酸カルシウム−タンパク質−界面活性剤−ＤＨＡ−ローズマリー上に噴霧する。
【００２７】
上記のプロセスは、界面活性剤およびタンパク質で囲まれたＤＨＡおよびローズマリーを含むマイクロカプセル化組成物を提供し、この組成物は、アルギン酸マトリクス中にカプセル化され、そしてさらに、セルロース誘導体のフィルムでコーティングされ、この組成物は、ローズマリー抽出物を含んでいてもよい。特定の実施形態において、当該分野で公知の他の種類の外側コーティングが使用され得る。
【００２８】
このプロセスによって製造されるビードレットは、安定であり、比較的大きな活性化合物の充填能を有する。本発明の状況において、このビードレットの安定性とは、良好な封じ込めをいう。すなわち、カプセル化は、活性化合物を、酸化およびこの化合物に悪影響を与え得る他の条件への曝露から保護する。ＤＨＡと同じビードレット中、かつ表面コーティング中の両方のローズマリーは、なおさらに、ＤＨＡの、酸化および特徴的で不快な「海の」臭いを発生し得る他の条件への曝露からの保護を提供し、そして眼保護を提供するのに十分な量のローズマリーを提供する。
【００２９】
当業者は、代表的に、本発明のビードレット上のコーティングがＤＨＡおよびローズマリーのバイオアベイラビリティーに悪影響を与え、その逆もまた当てはまることを予想している。これらのビードレットは、溶解することが知られており、その結果、その内容物を胃および腸の中で放出し、そしてここでそれらの内容物は、より多くの量のＤＨＡおよびローズマリーのあまり酸化されていないより有用な形態を有すると予測され得る。ＤＨＡとローズマリーの組合せのカプセル化（ここで、ＤＨＡ油とローズマリー抽出物の組成物は、非常に微細な液滴に乳化されている）、およびアルギン酸ビードレットの酸性水溶液でのリンス、その後のビードレットの最終乾燥は、マイクロカプセルを提供し、ここでこのＤＮＡおよびローズマリーは、改善された安定性および増加したバイオアベイラビリティーを示す。
【００３０】
本発明の特定の実施形態を調製するためのプロセスによると、０．２〜１．０％の少なくとも１種の界面活性剤、０．５〜５％のＤＨＡ油、０．１〜１．０％のローズマリー抽出物および／またはその成分、ならびに０．５〜３．０％のタンパク質および充填剤を含有する溶液が、調製される。この溶液は、代表的に、エマルジョンまたはマイクロエマルジョンの形態である。ＤＨＡとローズマリーの混合物を界面活性剤（ｓｕｒｆａｃｅ−ａｃｔｉｖｅ  ａｇｅｎｔまたはｓｕｒｆａｃｔａｎｔ）で処理することにより、ＤＨＡおよびローズマリーの粒子の周りの界面活性剤のコーティング（すなわち、一次保護層）が生じる。
【００３１】
次いで、別個のアルカリ金属アルギン酸塩溶液が、アルカリ金属アルギン酸塩を水に溶解して、０．５％〜１０％のアルカリ金属アルギン酸塩を含む溶液、好ましくは水中の１．５％のアルギン酸ナトリウムの溶液を提供することによって調製される。このアルカリ金属アルギン酸塩溶液は、ＤＨＡとローズマリーのエマルジョンと混合される。この得られた溶液は、ホモジナイズされて、実質的に均一なエマルジョンまたは分散液を提供し、このエマルジョンまたは分散液は、０．２％〜５％のＣａ２＋、好ましくは、１．５％の塩化カルシウム（ＣａＣｌ２）を含む溶液に滴下される。この滴下は、液滴が１０００μｍより大きくならないように行われる。用語「滴下」とは、例えば、エマルジョンをＣａ２＋を含む溶液に噴霧すること、エマルジョンをシリンジまたはカラムを介してＣａ２＋を含む溶液に滴下すること、および「液滴」を生成する他の公知のプロセスのようなプロセスを包含することを意味する。液滴がＣａ２＋溶液と接触されると、ＤＨＡとローズマリーを含むアルギン酸のビードレットが形成される。これは、活性成分のための第２の保護層を生成する。
【００３２】
ビードレットのサイズは、液滴のサイズを制御することによって制御され得る。好ましくは、液滴のサイズは、約５０μｍ〜約７００μｍ、好ましくは約１００μｍ〜約４００μｍのサイズ範囲のビードレットを提供するように調節される。次いで、このビードレットは、従来の分離手段（例えば、ふるい分け）によって溶液から分離され、そして酸性水溶液でリンスされる。この酸性溶液は、好ましくは、０．１％〜１０％の酸溶液であり、この酸は、クエン酸、アスパラギン酸、酢酸、アスコルビン酸、酪酸、リン酸または塩酸からなる群から選択される。より好ましくは、この酸性溶液は、水中２．５％のクエン酸溶液またはリン酸溶液である。酸性溶液でリンスすることは、ビードレットの収縮に影響を与え、そしてマイクロカプセル化されたＤＨＡおよびローズマリーのバイオアベイラビリティーを改善する。
【００３３】
次いで、このビードレットは、当該分野で公知の乾燥法に従って、好ましくは、流動床乾燥によって乾燥される。「乾燥」とは、含水量が約１０％より下に低下するプロセスをいう。１０％よりいくらか上の含水量は、本発明の範囲内の適切かつ実施可能なビードレットを提供するが、約１０％より下、好ましくは約５％より下の含水量が、このビードレット中の細菌夾雑物の存在を回避し、そしてより固いビードレットを提供するのに好ましい。もちろん、当業者は、成句「約１０％より下」が、約９％より下、約８％より下、約７％より下、約６％より下（これらの間の整数量を含む）を包含することを理解する。
【００３４】
乾燥ビードレットは、次いで、米国特許第４，７１０，３８４号（本明細書中で参考として援用される）に記載されるコーティング技術に従って、流動床装置中でコーティング材料でコーティングされる。従って、それ故、第３のコーティング層が提供される。この第３の層は、ビードレットの内側の活性成分に対するさらなる保護を提供する。最終コーティング段階に適切なコーティング材料は、セルロース誘導体、蝋、脂肪、タンパク質または多糖類であり、これらの全ては、必要に応じて、溶媒に溶解されたローズマリー抽出物と混合される。コーティング材料に適切なセルロース誘導体の非限定的な例は、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびメチルセルロースである。蝋は、カルナウバ蝋、カンデリラ蝋および蜜蝋であり得る。脂肪は、パルミチン酸およびステアリン酸、ならびに水素化植物油または異なるグリセリドであり得る。タンパク質は、アルブミン、ゼイン、ダイズタンパク質または乳タンパク質であり得る。多糖類は、デンプン、マルトデキストリン、ペクチン、キサンタンガム、アラビアゴム、またはカラゲーナンであり得る。本発明の特定の実施形態によると（ここでは、動物由来の産物の使用に関する制限はない）、ゼラチンが、第３層コーティングに適切なタンパク質として適用され得る。他の好ましい実施形態において、ダイズタンパク質が、第３層コーティングに使用される。最終のコーティングは、代表的に、ローズマリーをさらに含む。最終のコーティングの手触りは、粘着性（ｓｔｉｃｋｙまたはｔａｃｋｙ）ではないことが好ましい。従って、最終のコーティングで使用されるローズマリーのタイプおよび形態は、粘着性の外側コーティングを避けるように選択される。外側コーティングに使用するためのローズマリーの１つの好ましい形態は、Ｌｙｃ−ｏ−ローズである。
【００３５】
本発明のビードレットを調製するためのプロセスの最終工程におけるサイズ減少の操作は、液体媒体中で実施され得る。この液体媒体は、水または他の水混和性溶媒であり得、ここで適切な液体の非限定的な例としては、アルコール（例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール、アセトンおよび酢酸エチル）が挙げられる。従って、この液体は、最終工程の溶液に添加され、この溶液は、ＤＮＡとローズマリーの混合物、および界面活性剤を含む。ＤＨＡとローズマリーの混合物が液体形態である場合、このＤＨＡとローズマリーの混合物の液滴サイズは、２０μｍ以下、好ましくは０．１μｍ〜７μｍの範囲のサイズに減少され、そして得られた溶液がエマルジョンであることが好ましい。
【００３６】
乾燥および最終コーティングが、流動床装置中で、１つの工程で交互に実施されることが企図される。本発明のビードレットにおける使用に適切な充填剤としては、多糖類（例えば、ペクチン、デンプン、カラゲーナン、アラビアゴム、キサンタンゴム、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロースおよびヒドロキシプロピルセルロース）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３７】
用語「界面活性剤」とは、乳化特性、コロイド特性、安定化特性または分散特性を有する任意の物質をいう。適切な界面活性剤の非限定的な例は、非イオン性界面活性剤、アニオン性界面活性剤またはカチオン性界面活性剤（例えば、アルコールアルコキシレート；アルコールエトキシレート；アルキルフェノールアルコキシレート；アルキルフェノールエトキシレート；アルキルポリサッカリド）；ブロックコポリマー（例えば、エトキシ化ポリプロピレンオキシド、アルコキシ化エチレンジアミン）；エステル（例えば、モノステアリン酸グリセロールおよびジステアリン酸グリセロール、モノオレイン酸グリセロールおよびジオレイン酸グリセロール）；エトキシ化ソルビタンエステルおよびソルビタンエステル；ならびに異なるタンパク質（例えば、ダイズ、トウモロコシまたは乳漿由来のタンパク質）であり得る。
【００３８】
本発明の特定の実施形態によると、マイクロカプセル化されたＤＨＡとローズマリーを含む組成物は、０．１％〜４０％のＤＨＡエマルジョンを含み、ここでＤＨＡエマルジョンの粒子サイズは、２０μｍ以下、好ましくは０．１μｍと７μｍとの間である。この組成物は、界面活性剤、界面活性剤でコーティングされたＤＨＡとローズマリーの混合物を組み込むアルギン酸マトリクス、およびこのＤＨＡとローズマリーを含むアルギン酸マトリクスをコーティングするコーティングをさらに含み得る。コーティング材料は、セルロース誘導体、蝋、脂肪、タンパク質および多糖類からなる群から選択され、これら全ては、必要に応じて、ローズマリー抽出物と合わせられる。
【００３９】
本発明のマイクロカプセル化組成物は、錠剤の調製、硬質カプセルの充填および異なる食品への組み込みのために適切である。本発明の特定の実施形態によると、本明細書中で用いられるＤＨＡとローズマリーの混合物は、タンパク質、充填剤、賦形剤または添加剤をさらに含み得る。適切な充填剤の例としては、デンプン、ペクチン、カラゲーナン、キサンタンゴム、タンパク質、ポリエチレングリコール、セルロース誘導体（例えば、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースおよびエチルセルロース）、および他の多糖類が挙げられる。
【００４０】
本発明の好ましいマイクロカプセルまたはビードレットは、３つの保護層を含み、これらの保護層は、ＤＨＡとローズマリーの混合物を保護する。第１の保護層は、界面活性剤により作製され、第２の保護層は、アルギン酸マトリクスによって作製され、そして第３の保護層は、最終コーティング層である。
【００４１】
本発明は、ＤＨＡおよびローズマリーを含むマイクロカプセルまたはビードレットであって、不快な臭いを有さず、改善された安定性、比較的高い活性剤の含有量および上昇した活性剤のアベイラビリティーを有するビードレットを提供するという点で有利である。これらの利点は、１つの局面において、ＤＨＡおよびローズマリーの３層コーティングを提供するプロセス、およびこれらの成分の小さな粒子サイズによって達成される。しかし、当該分野で周知の他の手段によって調製された本発明のＤＨＡとローズマリーの混合物を含む他のビードレットが、本発明の範囲内であることが企図される。本発明の利点は、同じビードレット中にＤＨＡとローズマリーの混合物が存在することに由来し、従って、不快な臭いを減少または排除し、そして安定性および貯蔵寿命を増加させる。本発明のマイクロカプセルは、錠剤等級（すなわち、錠剤形成における使用に適切）である。本発明は、本明細書中に記載されるビードレットを含む錠剤をさらに提供する。このような錠剤は、当該分野で周知の方法によって調製され得る。本発明の好ましい組成物は、ゼラチンを含まず、そしてベジタリアンに適している。
【００４２】
以下の実施例は、本発明の好ましい実施形態を実証するために含まれる。以下の実施例において開示される技術は、本発明の実施において十分に機能する、本発明者によって発見された技術を表し、従ってその実施のために好ましい様式を構成するとみなされ得ることが、当業者によって理解されるべきである。しかし、当業者は、本開示の観点から、多くの変更が開示される特定の実施形態で実施され得、本発明の精神および範囲から逸脱することなく同じかまたは類似の結果を得ることを理解するべきである。
【実施例】
【００４３】
（実施例１）
本発明のＤＨＡ／ローズマリーｃｏ−ビードレットの組成物の例：
ＤＨＡ油（４０％ＤＨＡ）：                      ２４    ％
アルギン酸ナトリウム：                          ２４．８％
単離されたダイズタンパク質：                    １６．５％
二酸化ケイ素：                                    ２    ％
ヒドロキシプロピルセルロール（Ｋｌｕｃｅｌ）：  １４．５％
Ｈｅｒｂａｌｏｘ  Ｏ型（ローズマリー）：          ４．８％
Ｌｙｃ−ｏ−ローズ（ローズマリー）：              １．９％
エトキシ化グリセリド：                            ４．８％
スクロースエステル：                              １．９％
水およびＣａ：                                  約５    ％
Ｃａ：水                                        約１：５
（実施例２）
本発明の第２のＤＨＡ／ローズマリーｃｏ−ビードレットの組成物の例：
ＤＨＡ油（４０％ＤＨＡ）：                        ２０％
アルギニン酸ナトリウム：                          ３０％
単離されたダイズタンパク質：                      １５％
ヒドロキシプロピルセルロース（Ｋｌｕｃｅｌ）      １０％
ローズマリー：                                  ６〜８％
エトキシ化グリセリド：                              ６％
スクロースエステル：                                ６％
水およびＣａ：                                    約５％
Ｃａ：水                                          約１：５
（実施例３）
本発明のＤＨＡ／ローズマリーｃｏ−ビードレットを含む錠剤処方物の例：
微量栄養素                        単位                量
ビタミンＡ（β−カロチン）  ＩＵ／ｍｇ          ２，５００／１．５
ビタミンＢ−２                  ｍｇ                ５
葉酸                            μｇ                １００
ビタミンＢ−１２                ｍｇ                ３
ビタミンＣ                      ｍｇ                ２００
ビタミンＥ                      ＩＵ                ７５
銅                              Ｍｇ                ０．５
マンガン                        ｍｇ                ５
セレン                          μｇ                ２０
（酢酸）亜鉛                    ｍｇ          ７．５（１２オキシド当量）
ルテイン                        ｍｇ                ２
ゼアキサンチン                  ｍｇ                １
ＤＨＡ（ドコサヘキサ
エン酸［２２：６ω３］）        ｍｇ                ５
ローズマリー                    ｍｇ                ７
賦形剤                          ｍｇ          ｑ．ｄ．約９５０
本明細書に開示され特許請求される全ての組成物および／または方法は、本開示の観点で、過度な実験を行うことなく作製され完成され得る。本発明の組成物および方法は、好ましい実施形態の点で記載されてきたが、バリエーションが、本発明の概念、精神および範囲から逸脱することなく、本明細書中に記載される組成物および／または方法、および本明細書に記載の方法の工程または工程の順序に適用されることが、当業者に明らかである。より詳細には、化学的かつ構造的に関連した特定の薬剤が、本明細書中に記載の薬剤で置き換えられて類似の結果を達成し得ることが明らかである。全てのこのような置換および改変は、当業者に明らかであり、そして添付の特許請求の範囲によって規定される本発明の精神、範囲および概念の中にあるとみなされることが当業者に明らかである。
【００４４】
（参考文献）
以下の参考文献は、本明細書中に記載の参考文献に対して補足的な例示的手順または他の詳細を提供する程度まで、本明細書中で参考として援用される。
【００４５】
（米国特許）
３，９９８，７５３
４，２５４，１００
４，６７０，２４７
（他の参考文献）
Ｅ．Ｅ．Ｂｉｒｃｈ，Ｓ．Ｇａｒｆｉｅｌｄ，Ｄ．Ｒ．Ｈｏｆｆｍａｎ，Ｒ．ＵａｕｙおよびＤ．Ｇ．Ｂｉｒｃｈ，「Ａ  ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ  ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｔｒｉａｌ  ｏｆ  ｅａｒｌｙ  ｄｉｅｔａｒｙ  ｓｕｐｐｌｙ  ｏｆ  ｌｏｎｇ−ｃｈａｉｎ  ｐｏｌｙｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄ  ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄｓ  ａｎｄ  ｍｅｎｔａｌ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｉｎ  ｔｅｒｍ  ｉｎｆａｎｔｓ」，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ＆  Ｃｈｉｌｄ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ４２：１７４−１８１（２０００）。
【国際調査報告】
2005527559.tif 000002
2005527559.tif 000003