(57)【要約】【課題】逆流性食道炎を罹患している患者だけでなく、発症の予防が必要な健常者においても、安全に使用できる逆流性食道炎予防剤を提供すること。【解決手段】コラーゲンを有効成分として含有する逆流性食道炎予防剤。前記コラーゲンは、魚皮由来のコラーゲン、中でもクロマグロ由来であることが好ましい。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
コラーゲンを有効成分として含有する逆流性食道炎予防剤。
【請求項２】
請求項１に記載のコラーゲンが魚皮由来である逆流性食道炎予防剤。
【請求項３】
請求項１または２に記載のコラーゲンがクロマグロ由来である逆流性食道炎予防剤。
【請求項４】
前記コラーゲンが、分子量９００００以下のコラーゲンの含有量が３０％未満であるコラーゲン組成物である、請求項１〜３のいずれかに記載の逆流性食道炎予防剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、食道炎とくに逆流性食道炎の予防剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
逆流性食道炎は、ストレス、高脂肪食、喫煙、飲酒などの原因によって胃酸を含む胃の内容物が食道内に逆流することで、食道の粘膜に炎症が起きた状態をいい、食道に、胃酸に対する防御機能がないため、酸に繰り返しさらされることで炎症を起こし、粘膜のただれや潰瘍が生じたり、胸やけ、呑酸などの不快な症状の原因になることが知られている。また、逆流性食道炎は、食道がんの原因になるとも言われている。
【０００３】
逆流性食道炎を発症している患者に対する治療薬としては、Ｈ２ブロッカー（特許文献１）、プロトンポンプ阻害薬（特許文献２）、消化管機能改善薬（特許文献３）などが知られている。
【０００４】
これに対して、逆流性食道炎の発症を予防するためには、生活スタイルの改善、暴飲暴食をやめるなどの方策が主体であり、これを予防する目的の食品や医薬品の開発はあまりなされてないのが現状である。
例えば、４−［（｛６−［イソブチル（１，３−チアゾール−２−イルスルホニル）アミノ］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−５−イル｝オキシ）メチル］−３−メチル安息香酸、その塩（特許文献４）、２,３−ジメチル−８−（２,６−ジメチルベンジルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシエチル−イミダゾ［１,２−ａ］ピリジン−６−カルボキシアミドメシラート塩およびその結晶形（特許文献５）などの化合物が逆流性食道炎の予防に有効であることが報告されているものの、これらの化合物は、いずれも高価であるという問題がある。
また、前記化合物は、逆流性食道炎以外の疾患に対しても有効であることが報告されており、特に健常者が服用する場合には、副作用の観点から、十分な注意が必要となる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特表２００８−５３４４３８号公報
【特許文献２】特表２０１０−５２９１２５号公報
【特許文献３】特表２００２−５４４１７６号公報
【特許文献４】特開２０１５−７１６３５号公報
【特許文献５】特開２０１２−１０２１４３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、逆流性食道炎を罹患している患者だけでなく、予防が必要な健常者においても、安全に使用できる逆流性食道炎予防剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは上記目的を達成するために鋭意研究を重ねた結果、コラーゲン水溶液に逆流性食道炎を予防する効果があることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
即ち、本発明の要旨は、
（１）コラーゲンを有効成分として含有する逆流性食道炎予防剤、
（２）前記（１）に記載のコラーゲンが魚皮由来である逆流性食道炎予防剤、
（３）前記（１）または（２）に記載のコラーゲンがクロマグロ由来である逆流性食道炎予防剤、
（４）前記コラーゲンが、分子量９００００以下のコラーゲンの含有量が３０％未満であるコラーゲン組成物である、前記（１）〜（３）のいずれかに記載の逆流性食道炎予防剤
に関する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の逆流性食道炎予防剤を経口摂取することによって、様々な原因により、例え胃液の逆流が起こったとしても、食道炎の発症を効果的に抑制することができる。さらには、逆流性食道炎に起因する食道がんの予防にも効果的である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明の逆流動性食道炎予防剤は、コラーゲンを有効成分として含有する。
【００１１】
本発明に用いられるコラーゲンとしては、主に脊椎動物の真皮、靱帯、腱、骨、軟骨などに由来するものである。ただし、前記コラーゲンには、ゼラチンのように熱抽出したものおよびコラーゲンペプチドのように酵素処理を施して低分子量化したものは含まない。
前記コラーゲンとしては、入手が容易で、水溶解性に優れるという観点から、魚皮由来のコラーゲンが好ましい。
前記魚皮の由来となる魚の種類としては、マグロ類、ブリ類、ハタ類、タラ類、カレイ類、カツオ類、クエ類等が挙げられる。中でも、魚体が大型で、分子量９００００以上のコラーゲンを多量に含む魚皮を採り易い点、皮が厚いため処理中に魚皮が崩れにくく抽出・精製が容易などの点などから、クロマグロ、タイセイヨウクロマグロ、キハダマグロ、ミナミマグロ、メバチマグロ、ビンナガマグロ、コシナガなどのマグロ類が好ましく、更には完全養殖に成功して安定して入手し易い点から、クロマグロがより好ましい。
【００１２】
また、前記コラーゲンは、本発明の効果が奏し易いという観点から、低分子量のコラーゲンを除いたコラーゲン組成物であってもよく、例えば、分子量９００００以下のコラーゲンの含有量が３０％未満であるコラーゲン組成物が挙げられる。
低分子量のコラーゲンを除く手法としては、コラーゲンを含む溶液を限外ろ過法或いは透析法により精製する手法が挙げられる。
前記限外ろ過法或いは透析法は、分子量９００００以下の低分子コラーゲンを除去できる方法であればよく、限外ろ過装置、ろ液などの種類について特に限定はない。
【００１３】
また、前記コラーゲンは、コラーゲン原料から所望の分子量のコラーゲンを効率よく抽出でき、かつ、他の成分の含有量も効率よく抑えることができる観点から、
コラーゲン原料を希薄強酸処理または希薄強アルカリ処理する第一工程、
前記希薄強酸処理物を希薄強アルカリ処理する、または前記希薄強アルカリ処理物を希薄強酸処理する第二工程、
前記第二工程で得られたコラーゲンを含む混合物から希薄弱酸溶液を用いてコラーゲンを抽出する第三工程、および
第三工程で抽出したコラーゲンを限外ろ過法或いは透析法により精製する第四工程
を有することが好ましい。
【００１４】
前記第一工程では、希薄強酸処理、希薄強アルカリ処理のいずれかを行う。
【００１５】
前記希薄強酸処理は、コラーゲン原料を所定濃度の希薄強酸溶液に浸漬、噴霧などして接触させることで行う。
前記希薄強酸溶液の溶媒は、水であればよいが、エタノールなどの有機溶媒を混合していてもよい。
前記希薄強酸溶液中の強酸の種類としては、通常用いられる強酸であればよく、塩酸、硫酸、硝酸などが挙げられるが特に限定は無い。
前記希薄強酸溶液中の強酸の濃度としては、コラーゲン原料から油分を効率よく除去できる観点から、０．０１〜０．５Ｎが好ましく、０．０５〜０．３Ｎがより好ましく、０．１〜０．２Ｎがさらに好ましい。
前記希薄強酸処理では、コラーゲンの変性を防ぎ、かつ効率的に脂質を除去する観点から、処理温度としては１５〜３０℃で行うことが好ましく、また、処理時間としては１〜７２時間が好ましく、３〜４８時間がより好ましく、１２〜３０時間がさらに好ましい。
【００１６】
前記希薄強アルカリ処理としては、コラーゲン原料を希薄強アルカリ溶液に浸漬、噴霧などして接触させることで行う。
前記希薄強アルカリ溶液に用いるアルカリ成分としては、食品に用いられるアルカリ成分であればよく、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウムなどが挙げられるが、特に限定はない。
前記希薄強アルカリ溶液の溶媒は、水であればよいが、エタノールなどの有機溶媒を混合していてもよい。
前記希薄強アルカリ溶液中の希薄強アルカリ濃度としては、コラーゲン以外のタンパク質成分の除去及び油分のけん化によって不純物の除去を効率よく行うとともに、テロペプチド部分の切断を効率よく行う観点から、０．０５〜０．５Ｎが好ましく、０．１〜０．２Ｎがより好ましい。
前記希薄強アルカリ処理では、コラーゲンの変性を防ぐために、処理温度としては、２５℃以下で行うことが好ましく、また、処理時間としては、１〜７２時間が好ましく、３〜４８時間がより好ましく、１２〜３０時間がさらに好ましい。
【００１７】
前記希薄強酸処理または希薄強アルカリ処理を浸漬で行う際には、攪拌機を用いて循環させてもよい。
また、希薄強酸処理または希薄強アルカリ処理後、篩を用いてコラーゲンを含む混合物をろ過した後、篩上に残った残渣を水などの溶媒に浸漬して洗浄してもよい。
【００１８】
前記第二工程では、第一工程で得られた希薄強酸処理物を希薄強アルカリ処理する、または第一工程で得られた希薄強アルカリ処理物を希薄強酸処理する。
【００１９】
第二工程で行う希薄強酸処理および希薄強アルカリ処理の条件については、前記第一工程で行う条件と同じであればよい。
【００２０】
前記第三工程では、前記第二工程で得られたコラーゲン混合物から希薄弱酸溶液を用いてコラーゲンを抽出する。
前記希薄弱酸溶液に用いる酸としては、食品に用いられる酸であればよく、例えば、塩酸、リン酸などの無機酸や、酢酸、クエン酸、乳酸などの有機酸などが挙げられるが、特に限定はない。
前記希薄弱酸溶液の溶媒は、水であればよいが、エタノールなどの有機溶媒を混合していてもよい。
前記希薄弱酸溶液中の酸濃度としては、コラーゲンの酸抽出を効率よく行う観点から、０．００１〜２Ｎが好ましく、０．０１〜２Ｎがより好ましく、ナトリウム及びカリウム等の塩の状態で使用しても良い。
また、前記希薄弱酸溶液によるコラーゲンの抽出は、２５〜４０℃、好ましくは３０〜４０℃、より好ましくは３５〜３７℃の温度条件下で、１〜４８時間、好ましくは２〜３０時間、撹拌することにより行うことが望ましい。
【００２１】
また、第三工程で抽出されたコラーゲンに不溶分が残存している場合には、コラーゲンを含む溶液（コラーゲン溶液）を濾過法、遠心分離法などに供して不溶分を除去することが好ましい。
【００２２】
前記第三工程で得られたコラーゲン組成物は、希薄弱酸溶液に溶解しているので、そのままでも使用可能であるが、さらに低分子コラーゲンを除去するために精製するのが好ましい。
すなわち、限外ろ過膜や透析膜を使用して限外ろ過や透析を行うことで抽出用の希薄弱酸溶液を含め、適当な弱酸溶液または緩衝液に置換すると同時に、低分子のペプチド、アミノ酸等の水溶性化合物を除去することが可能である。
前記限外ろ過膜或いは透析膜としては、分子量９００００以上のコラーゲンを分画できるものであればよく、例えば、分画分子量３００００（ＭＷＣＯ３００００）以上の膜、好ましくはＭＷＣＯ１０００００、より好ましくはＭＷＣＯ１５００００の膜が挙げられるが、特に限定はない。
【００２３】
使用する前記弱酸溶液および緩衝液はｐＨ３〜６で緩衝能を有する弱酸溶液または緩衝液であればどの弱酸溶液および緩衝液であっても使用可能であるが、経済性、安全性等から考えて、クエン酸、酢酸、リン酸の溶液、これらのナトリウム塩、カリウム塩との混合液を使用することが好ましい。
【００２４】
また、コラーゲン溶液中に分散している油分その他の不純物を除去するため、細孔径のメンブレンフィルターにてろ過してもよい。
前記メンブレンフィルターの口径としては、１．０マイクロメートル以下のものであればよく、特に限定はない。
【００２５】
前記の溶液状のコラーゲン組成物は、凍結乾燥法、スプレードライ法などの乾燥法により乾燥物にすることも可能である。
凍結乾燥法およびスプレードライ法については、コラーゲン組成物の水に対する溶解性および保湿性に影響を与えない範囲で、公知の手法を用いればよい。
【００２６】
本発明の逆流動性食道炎予防剤中の有効成分である前記コラーゲンの含有量としては、前記コラーゲンに由来する逆流動性食道炎発症予防効果が有効に奏される量であればよく、前記コラーゲンを２重量％以上含有していていればよい。
【００２７】
また、本発明の逆流動性食道炎予防剤は、前記コラーゲンの他に、流動パラフィン、グリセリン、エステル油、高級アルコール、セタノール、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、パルミチン酸、ミリスチン酸、ラウリン酸、オレイルアルコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビット液、ミツロウ、スクワラン、ラノリン、ラノリン誘導体、ラノリンアルコール、ラノリン脂肪酸類、ステアリン酸類、糖類、甘味料、酸味料等の任意成分を配合することができ、必要に応じて着色剤、香料、フレーバー（風味料）等の添加剤も配合することができる。
前記任意成分および添加剤の含有量としては、本発明の効果に影響を与えない範囲であればよく、特に限定はない。
【００２８】
本発明の逆流動性食道炎予防剤の形態としては、液状でも、粉体状でもよく、特に限定はない。
【００２９】
前記のような構成を有する本発明の逆流動性食道炎予防剤は、有効成分が食経験のあるコラーゲンであり、安全性に優れることから、食品、医薬部外品、医薬品、さらにはペット、家畜などの医薬品などの各方面に好適に利用することができる。
【実施例】
【００３０】
以下、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明はこれらによって何ら制限されるものではない。
【００３１】
（実施例１）
使用したクロマグロコラーゲンは、以下のように調製した。
すなわち、クロマグロ魚皮を０．１Ｎの塩酸に２０℃、２４時間浸漬した後、０．１Ｎの水酸化ナトリウムに４℃、２４時間浸漬し、得られた魚皮を水洗後に３７℃の０．１Ｎ酢酸溶液に５時間浸漬後にろ過し、得られたろ液を分画分子量（ＭＷＣＯ）１５００００の限外ろ過膜を用いた限外ろ過法（使用した緩衝液：０．３％クエン酸―０．０５％クエン酸ナトリウムｐＨ３．０）により水溶性の低分子コラーゲンを除去・精製して、目的のコラーゲン溶液を得た。
次いで、得られたコラーゲン溶液を、蒸留水を外液として透析（ＭＷＣＯ  １００００）して分子量１００００以下の低分子コラーゲンを完全に除去し、凍結乾燥した。
得られた凍結乾燥物を水に溶解して５％コラーゲン濃度の溶液タイプの逆流動性食道炎予防剤（本発明品）を作製した。
【００３２】
（試験例）
Wisterラット（雄、８週齢）１４匹（コントロール７匹、本発明品投与７匹）を用いて、胃幽門輪近傍をカテーテルにて被覆し、前胃、腺胃協会部を結紮することで胃の内容物の逆流を誘発し、逆流性食道炎マウスを作成した。
処置後、本発明品を１ｍl／日で７日及び１０日間ゾンデ投与した。７日及び１０日後剖検し、食道の組織検査をおこなった。また、本発明品の代わりに水を投与したものをコントロールとした。
【００３３】
ホルマリン固定した食道を長軸方向に２分割し、分割した双方を長軸面が観察面となるようパラフィンに包埋した。以後、常法に従い、ヘマトキシリンエオジン染色、リンタングステン酸ヘマトキシリン染色を施し、プレパラートを作成し、光学顕微鏡下で観察し、食道における壊死及び潰瘍形成部の長さを計測した。結果を表１に示す。
なお、Ｃ１〜Ｃ７は、コントロール群の７匹の食道における壊死および潰瘍形成部の長さを示し、Ｔ１〜Ｔ７は本発明品投与群の７匹の食道における壊死および潰瘍形成部の長さを示す。
【００３４】
【表１】
2018058790.tif 000002
【００３５】
胃内容物の逆流発生はコントロール及び本発明品共に試験した７匹中７匹に認められた。
食道炎の発症はコントロール７匹中６匹（８６％、内２匹は糜爛性まで進行）に対し、本発明品投与群の食道炎の発症は７匹中３匹（４３％、糜爛性進行はなし）となった。
また、潰瘍の長軸方向の長さを測定した結果、コントロール群の潰瘍長径の総和は５７ｍｍに対し、本発明品投与群のそれは５ｍｍであった。
以上の結果から、本発明品投与により、逆流性食道炎の発症を有意に予防でき、また、逆流性食道炎の症状である粘膜障害を有意に軽減できることがわかった。
また、本発明品の有効成分は、食経験のあるコラーゲンであることから、逆流性食道炎を罹患している患者だけでなく、発症の予防が必要な健常者においても、安全に使用できることがわかる。