(57)【要約】哺乳動物において虚血再灌流障害を予防し、限定し、もしくは治療するのに有用な方法を開示する。より詳細には、本発明は、Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストを投与することにより虚血再灌流障害を予防し、限定し、もしくは治療することに関する。本発明の方法に有用な化合物は、Ａ２ｂアデノシンレセプターに特異的に拮抗するかもしくはブロックすることにより、その望ましい効果を発揮する。幾つかの実施形態において、本発明の方法は、患者に対し、治療的有効量もしくは予防的有効量のＡ２ｂアデノシンレセプターを虚血発症の１０日前以内もしくは１０日後以内に投与する工程を包含する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物において虚血再灌流障害を予防するか、限定するか、もしくは治療する方法であって、該方法は、以下：
虚血を発症している、もしくは虚血の発症が切迫している哺乳動物を同定する工程、および
該虚血発症の前１０日以内もしくは後１０日以内に、治療的有効量もしくは予防的有効量のＡ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストを該哺乳動物に投与する工程、
を包含し、
該Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストは、式（Ｉ）
【化１】
2005533054.tif 000027
の化合物、またはその薬学的に受容可能な塩もしくはＮ−オキシドであり、
式中、
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、それぞれ独立して、
ａ）水素、
ｂ）置換されていないか、またはヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アラルキル、ヘテロシクリルアルキル、アシルアミノ、アルキルアミノカルボニル、アルキルスルホニルアミノおよびアルキルアミノスルホニルからなる群から選択される１つ以上の置換基によって置換されている、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、もしくはＣ２−６アルキニル、
ｃ）置換アリールもしくは非置換アリール、または
ｄ）置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル
であり、
Ｒ４は、一重結合、−Ｏ−、−（ＣＨ２）１−３−、−Ｏ（ＣＨ２）１−２−、−ＣＨ２ＯＣＨ２−、−（ＣＨ２）１−２Ｏ−、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、もしくは−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ−であり、
Ｒ５は、
（ａ）フェニル、または
（ｂ）以下：
【化２】
2005533054.tif 000028
からなる群から選択される二環式もしくは三環式基
であって、ここで、該フェニル、二環式もしくは三環式基は、置換されていないかまたは１つ以上のＲａ基で置換されているかのいずれかであり、該Ｒａ基は、以下：
（ａ）置換されていないか、または１つ以上の置換基で置換されているかいずれかのＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、もしくはＣ２−６アルキニルであって、該１つ以上の置換基は、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、（アミノ）（Ｒｂ）アシルヒドラジニルカルボニル−、（アミノ）（Ｒｂ）アシルオキシカルボキシ−、（ヒドロキシ）（カルボアルコキシ）アルキルカルバモイル、アシルオキシ、アルデヒド、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルアミノアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルホスホノ、アルキルスルホニルアミノ、カルバモイル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキルアミノ−、シアノ、シアノアルキルカルバモイル、シクロアルキルアミノ、ジアルキルホスホノ、ハロアルキルスルホニルアミノ、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヘテロシクリルカルバモイル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキルスルホニルアミノ、オキシイミノ、ホスホノ、置換アラルキルアミノもしくは非置換アラルキルアミノ、置換アリールカルボキシアルコキシカルボニルもしくは非置換アリールカルボキシアルコキシカルボニル、置換ヘテロアリールスルホニルアミノもしくは非置換ヘテロアリールスルホニルアミノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、チオカルバモイル、およびトリフルオロメチルからなる群から選択される、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、もしくはＣ２−６アルキニル、ならびに
（ｂ）（アルコキシカルボニル）アラルキルカルバモイル、アルデヒド、アルケンオキシ、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルバモイル、アルコキシカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアルキルアミノ、アルキルスルホニルアミノ、アルキルスルホニルオキシ、アミノ、アミノアルキルアラルキルカルバモイル、アミノアルキルカルバモイル、アミノアルキルヘテロシクリルアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルアルキルシクロアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルカルバモイル、アラルコキシカルボニルアミノ、アリールヘテロシクリル、アリールオキシ、アリールスルホニルアミノ、アリールスルホニルオキシ、カルバモイル、カルボニル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキルチオ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）アミノ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）カルバモイル−、Ｒｂ−アルキルアミノ−、Ｒｂ−アルキルカルバモイル−、Ｒｂ−アルキルスルホニル−、Ｒｂ−アルキルスルホニルアミノ、Ｒｂ−アルキルチオ、Ｒｂ−ヘテロシクリルカルボニル、アミノアルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルアミノアルキルアミノ、シアノ、シクロアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルカルバモイル、ハロゲン、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヒドロキシ、オキシイミノ、ホスフェート、置換アラルキルアミノもしくは非置換アラルキルアミノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリルスルホニルアミノもしくは非置換ヘテロシクリルスルホニルアミノ、スルホキシアシルアミノ、およびチオカルバモイル
からなる群から選択され、
Ｒｂは、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（ＣＦ３）２ＯＨ、−ＣＯＮＨＮＨＳＯ２ＣＦ３、−ＣＯＮＨＯＲｃ、−ＣＯＮＨＳＯ２Ｒｃ、−ＣＯＮＨＳＯ２ＮＨＲＣ、−Ｃ（ＯＨ）ＲＣＰＯ３Ｈ２、−ＮＨＣＯＣＦ３、−ＮＨＣＯＮＨＳＯ２ＲＣ、−ＮＨＰＯ３Ｈ２、−ＮＨＳＯ２ＲＣ、−ＮＨＳＯ２ＮＨＣＯＲＣ、−ＯＰＯ３Ｈ２、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＰＯ（ＯＨ）ＲＣ、−ＰＯ３Ｈ２、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２ＮＨＲＣ、−ＳＯ３ＮＨＣＯＲＣ、−ＳＯ３ＮＨＣＯＮＨＣＯ２ＲＣ、および以下の基：
【化３】
2005533054.tif 000029
からなる群から選択され、
ＲＣは、水素、−Ｃ１−４アルキル、−Ｃ１−４アルキル−ＣＯ２Ｈおよびフェニルからなる群から選択され、ここで、該−Ｃ１−４アルキル、−Ｃ１−４アルキル−ＣＯ２Ｈおよびフェニルは、置換されていないか、もしくはハロゲン、−ＯＨ、−ＯＭｅ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、非置換ベンジル、ならびにハロゲン、−ＯＨ、−ＯＭｅ、−ＮＨ２および−ＮＯ２からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されているベンジルからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されているかのいずれかであり、
Ｘ１およびＸ２は、ＯおよびＳからなる群から独立に選択され、そして
Ｘ３は、Ｎ、またはＣＲｄであり、ここで、Ｒｄは、以下：
ａ）水素、
ｂ）置換されていないか、もしくはヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アラルキル、ヘテロシクリルアルキル、アシルアミノ、アルキルアミノカルボニル、アルキルスルホニルアミノおよびアルキルアミノスルホニルからなる群から選択される１つ以上の置換基によって置換されているかのいずれかであるＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、もしくはＣ２−６アルキニル、
ｃ）置換アリールもしくは非置換アリール、ならびに
ｄ）置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル
からなる群から選択される、方法。
【請求項２】
Ｒ１がＣ１−６アルキルである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｒ２がＣ１−６アルキルである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
Ｒ３が水素である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
Ｒ４が一重結合である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
Ｒ５がＲａで置換されているフェニルである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
Ｒ５が、
【化４】
2005533054.tif 000030
からなる群から選択される置換二環式もしくは置換三環式基である、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
Ｒ５が、
【化５】
2005533054.tif 000031
であり、
ここで、該Ｒ５は、置換されていないか、または１つ以上のＲａ基で置換されているかのいずれかであり、該Ｒａ基は、以下：
（ａ）それぞれ、置換されていないか、または、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、（アミノ）（Ｒｂ）アシルヒドラジニルカルボニル−、（アミノ）（Ｒｂ）アシルオキシカルボキシ−、（ヒドロキシ）（カルボアルコキシ）アルキルカルバモイル、アシルオキシ、アルデヒド、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルアミノアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルホスホノ、アルキルスルホニルアミノ、カルバモイル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ、Ｒｂ−アルキルアミノ−、シアノ、シアノアルキルカルバモイル、シクロアルキルアミノ、ジアルキルホスホノ、ハロアルキルスルホニルアミノ、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヘテロシクリルカルバモイル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキルスルホニルアミノ、オキシイミノ、ホスホノ、置換アラルキルアミノもしくは非置換アラルキルアミノ、置換アリールカルボキシアルコキシカルボニルもしくは非置換アリールカルボキシアルコキシカルボニル、置換ヘテロアリールスルホニルアミノもしくは非置換ヘテロアリールスルホニルアミノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、チオカルバモイル、およびトリフルオロメチルからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されているかのいずれかである、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、もしくはＣ２−６アルキニル、ならびに
（ｂ）（アルコキシカルボニル）アラルキルカルバモイル、アルデヒド、アルケンオキシ、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルバモイル、アルコキシカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアルキルアミノ、アルキルスルホニルアミノ、アルキルスルホニルオキシ、アミノ、アミノアルキルアラルキルカルバモイル、アミノアルキルカルバモイル、アミノアルキルヘテロシクリルアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルアルキルシクロアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルカルバモイル、アラルコキシカルボニルアミノ、アリールヘテロシクリル、アリールオキシ、アリールスルホニルアミノ、アリールスルホニルオキシ、カルバモイル、カルボニル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキルチオ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）アミノ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）カルバモイル−、Ｒｂ−アルキルアミノ−、Ｒｂ−アルキルカルバモイル−、Ｒｂ−アルキルスルホニル−、Ｒｂ−アルキルスルホニルアミノ、Ｒｂ−アルキルチオ、Ｒｂ−ヘテロシクリルカルボニル、アミノアルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルアミノアルキルアミノ、シアノ、シクロアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルカルバモイル、ハロゲン、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヒドロキシ、オキシイミノ、ホスフェート、置換アラルキルアミノもしくは非置換アラルキルアミノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリルスルホニルアミノもしくは非置換ヘテロシクリルスルホニルアミノ、スルホキシアシルアミノ、およびチオカルバモイル
からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
Ｒａが、
（ａ）それぞれ、置換されていないか、または、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、（アミノ）（Ｒｂ）アシルヒドラジニルカルボニル−、（アミノ）（Ｒｂ）アシルオキシカルボキシ−、（ヒドロキシ）（カルボアルコキシ）アルキルカルバモイル、アシルオキシ、アルデヒド、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルアミノアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルホスホノ、アルキルスルホニルアミノ、カルバモイル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキルアミノ、シアノ、シアノアルキルカルバモイル、シクロアルキルアミノ、ジアルキルホスホノ、ハロアルキルスルホニルアミノ、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヘテロシクリルカルバモイル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキルスルホニルアミノ、オキシイミノ、ホスホノ、置換アラルキルアミノ、置換アリールカルボキシアルコキシカルボニル、置換ヘテロアリールスルホニルアミノ、置換ヘテロシクリル、チオカルバモイル、およびトリフルオロメチルからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されているかのいずれかであるＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、もしくはＣ２−６アルキニル、ならびに
（ｂ）（アルコキシカルボニル）アラルキルカルバモイル、アルデヒド、アルケンオキシ、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルバモイル、アルコキシカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアルキルアミノ、アルキルスルホニルアミノ、アルキルスルホニルオキシ、アミノ、アミノアルキルアラルキルカルバモイル、アミノアルキルカルバモイル、アミノアルキルヘテロシクリルアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルアルキルシクロアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルカルバモイル、アラルコキシカルボニルアミノ、アリールヘテロシクリル、アリールオキシ、アリールスルホニルアミノ、アリールスルホニルオキシ、カルバモイル、カルボニル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）アミノ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）カルバモイル−、Ｒｂ−アルキルアミノ−、Ｒｂ−アルキルカルバモイル−、Ｒｂ−アルキルスルホニル−、Ｒｂ−アルキルスルホニルアミノ、Ｒｂ−アルキルチオ、Ｒｂ−ヘテロシクリルカルボニル、シアノ、シクロアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルカルバモイル、ハロゲン、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヒドロキシ、オキシイミノ、ホスフェート、置換アラルキルアミノ、置換ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリルスルホニルアミノ、スルホキシアシルアミノ、およびチオカルバモイル
からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
Ｒａが、
（ａ）それぞれ、置換されていないか、またはアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、および置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリルからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されているかのいずれかであるＣ１−６アルキルもしくはＣ２−６アルケニル、ならびに
（ｂ）アルコキシカルボニルアルキルアミノ、シアノおよびヒドロキシ
からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
Ｘ１がＯである、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
Ｘ２がＯである、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
Ｘ３がＮである、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
Ｒ１およびＲ２がそれぞれＣ２−４アルキルであり、Ｒ３が水素であり、Ｒ４が一重結合であり、Ｘ１およびＸ２がそれぞれＯであり、そしてＸ３がＮである、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
Ｒ５が、Ｒａで置換されているフェニルである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
Ｒａが、以下：
（ａ）それぞれが置換されていないか、またはアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、Ｒｂ−、およびＲｂ−アルコキシ−からなる群から選択される１つ以上の置換基によって置換されているかのいずれかである、Ｃ１−６アルキルまたはＣ２−６アルケニル、ならびに
（ｂ）アルコキシカルボニルアルキルアミノ、Ｒｂ−アルコキシ−、シアノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、およびヒドロキシ
からなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
Ｒａがシアノである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
Ｒ５が、
【化６】
2005533054.tif 000032
であり、
該Ｒ５が、置換されていないか、もしくは１つ以上のＲａ基で置換されているかのいずれかであり、該Ｒａ基は、以下：
（ａ）それぞれ、置換されていないか、または、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、（アミノ）（Ｒｂ）アシルヒドラジニルカルボニル−、（アミノ）（Ｒｂ）アシルオキシカルボキシ−、（ヒドロキシ）（カルボアルコキシ）アルキルカルバモイル、アシルオキシ、アルデヒド、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルアミノアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルホスホノ、アルキルスルホニルアミノ、カルバモイル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキルアミノ−、シアノ、シアノアルキルカルバモイル、シクロアルキルアミノ、ジアルキルホスホノ、ハロアルキルスルホニルアミノ、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヘテロシクリルカルバモイル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキルスルホニルアミノ、オキシイミノ、ホスホノ、置換アラルキルアミノもしくは非置換アラルキルアミノ、置換アリールカルボキシアルコキシカルボニルもしくは非置換アリールカルボキシアルコキシカルボニル、置換ヘテロアリールスルホニルアミノもしくは非置換ヘテロアリールスルホニルアミノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、チオカルバモイル、およびトリフルオロメチルからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されているかのいずれかである、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、もしくはＣ２−６アルキニル、ならびに
（ｂ）（アルコキシカルボニル）アラルキルカルバモイル、アルデヒド、アルケンオキシ、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルバモイル、アルコキシカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアルキルアミノ、アルキルスルホニルアミノ、アルキルスルホニルオキシ、アミノ、アミノアルキルアラルキルカルバモイル、アミノアルキルカルバモイル、アミノアルキルヘテロシクリルアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルアルキルシクロアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルカルバモイル、アラルコキシカルボニルアミノ、アリールヘテロシクリル、アリールオキシ、アリールスルホニルアミノ、アリールスルホニルオキシ、カルバモイル、カルボニル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキルチオ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）アミノ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）カルバモイル−、Ｒｂ−アルキルアミノ−、Ｒｂ−アルキルカルバモイル−、Ｒｂ−アルキルスルホニル−、Ｒｂ−アルキルスルホニルアミノ、Ｒｂ−アルキルチオ、Ｒｂ−ヘテロシクリルカルボニル、アミノアルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルアミノアルキルアミノ、シアノ、シクロアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルカルバモイル、ハロゲン、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヒドロキシ、オキシイミノ、ホスフェート、置換アラルキルアミノもしくは非置換アラルキルアミノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリルスルホニルアミノもしくは非置換ヘテロシクリルスルホニルアミノ、スルホキシアシルアミノ、およびチオカルバモイル
からなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
Ｒａが、以下：
（ａ）それぞれが置換されていないか、またはアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、Ｒｂ−、およびＲｂ−アルコキシ−からなる群から選択される１つ以上の置換基によって置換されているかのいずれかである、Ｃ１−６アルキルまたはＣ２−６アルケニル、ならびに
（ｂ）アルコキシカルボニルアルキルアミノ、Ｒｂ−アルコキシ−、シアノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、およびヒドロキシ
からなる群から選択される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
Ｒａが、アミノ、モノアルキルアミノ、およびジアルキルアミノからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されているＣ２−５アルキルである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
Ｒ５が、
【化７】
2005533054.tif 000033
であり、
該Ｒ５が、置換されていないか、もしくは１つ以上のＲａ基で置換されているかのいずれかであり、該Ｒａ基は、以下：
（ａ）置換されていないか、または、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、（アミノ）（Ｒｂ）アシルヒドラジニルカルボニル−、（アミノ）（Ｒｂ）アシルオキシカルボキシ−、（ヒドロキシ）（カルボアルコキシ）アルキルカルバモイル、アシルオキシ、アルデヒド、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルアミノアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルホスホノ、アルキルスルホニルアミノ、カルバモイル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ、Ｒｂ−アルキルアミノ、シアノ、シアノアルキルカルバモイル、シクロアルキルアミノ、ジアルキルホスホノ、ハロアルキルスルホニルアミノ、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヘテロシクリルカルバモイル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキルスルホニルアミノ、オキシイミノ、ホスホノ、置換アラルキルアミノもしくは非置換アラルキルアミノ、置換アリールカルボキシアルコキシカルボニルもしくは非置換アリールカルボキシアルコキシカルボニル、置換ヘテロアリールスルホニルアミノもしくは非置換ヘテロアリールスルホニルアミノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、チオカルバモイル、およびトリフルオロメチルからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されているかのいずれかである、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、もしくはＣ２−６アルキニル、ならびに
（ｂ）（アルコキシカルボニル）アラルキルカルバモイル、アルデヒド、アルケンオキシ、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルバモイル、アルコキシカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアルキルアミノ、アルキルスルホニルアミノ、アルキルスルホニルオキシ、アミノ、アミノアルキルアラルキルカルバモイル、アミノアルキルカルバモイル、アミノアルキルヘテロシクリルアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルアルキルシクロアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルカルバモイル、アラルコキシカルボニルアミノ、アリールヘテロシクリル、アリールオキシ、アリールスルホニルアミノ、アリールスルホニルオキシ、カルバモイル、カルボニル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキルチオ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）アミノ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）カルバモイル−、Ｒｂ−アルキルアミノ−、Ｒｂ−アルキルカルバモイル−、Ｒｂ−アルキルスルホニル−、Ｒｂ−アルキルスルホニルアミノ、Ｒｂ−アルキルチオ、Ｒｂ−ヘテロシクリルカルボニル、アミノアルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルアミノアルキルアミノ、シアノ、シクロアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルカルバモイル、ハロゲン、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヒドロキシ、オキシイミノ、ホスフェート、置換アラルキルアミノもしくは非置換アラルキルアミノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリルスルホニルアミノもしくは非置換ヘテロシクリルスルホニルアミノ、スルホキシアシルアミノ、およびチオカルバモイル
からなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２２】
Ｒａが、以下：
（ａ）それぞれが置換されていないか、またはアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、Ｒｂ−、およびＲｂ−アルコキシ−からなる群から選択される１つ以上の置換基によって置換されている、Ｃ１−６アルキルまたはＣ２−６アルケニル、ならびに
（ｂ）アルコキシカルボニルアルキルアミノ、Ｒｂ−アルコキシ−、シアノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、およびヒドロキシ
からなる群から選択される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
Ｒａが、以下：
（ａ）それぞれが置換されていないか、またはアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、およびＲｂ−からなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されている、Ｃ１−４アルキルもしくはＣ２−４アルケニル、ならびに
（ｂ）Ｒｂ−アルコキシ−、および置換ヘテロシクリル
からなる群から選択される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
請求項１に記載の方法であって、ここで、
Ｒ１およびＲ２はそれぞれプロピルであり、
Ｒ３は水素であり、
Ｒ４は一重結合であり、
Ｒ５はＲａ基で置換されているフェニル、
【化８】
2005533054.tif 000034
であり、
ここで該二環式もしくは三環式基は、必要に応じてＲａ基で置換されており、
Ｒａは、以下：
（ａ）それぞれが置換されていないか、またはアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、および置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリルからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されている、Ｃ１−６アルキルもしくはＣ２−６アルケニル、ならびに
（ｃ）アルコキシカルボニルアルキルアミノ、シアノおよびヒドロキシ
からなる群から選択され、
Ｘ１およびＸ２はそれぞれＯであり、そして
Ｘ３はＮである、
方法。
【請求項２５】
前記式（Ｉ）の化合物が、３−［４−（２，６−ジオキソ−１，３−ジプロピル−２，３，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−プリン−８−イル）−ビシクロ［２．２．２］オクト−１−イル］−プロピオン酸である、請求項１に記載の方法。
【請求項２６】
前記虚血発症が、冠不全症候群、脳卒中、臓器移植、腎虚血、ショックおよび臓器移植手術からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項２７】
前記冠不全症候群が心筋梗塞である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストが、虚血発症の２日前以内もしくは２日後以内に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項２９】
前記Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストが、虚血発症の２日後以内に投与される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項３１】
前記式（Ｉ）の化合物が、Ａ２ａアデノシンレセプターもしくはＡ３アデノシンレセプターに対する親和性よりも少なくとも１０倍高い、Ａ２ｂアデノシンレセプターに対する親和性を示す、請求項１に記載の方法。
【請求項３２】
前記式（Ｉ）の化合物が、Ａ２ａアデノシンレセプターもしくはＡ３アデノシンレセプターに対する親和性よりも少なくとも１０倍高い、Ａ１アデノシンレセプターに対する親和性をさらに示す、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記式（Ｉ）の化合物が、Ａ２ｂアデノシンレセプターに対して５００ｎＭ未満のＫｉ値を示す、請求項１に記載の方法。
【請求項３４】
前記式（Ｉ）の化合物が、Ａ２ｂアデノシンレセプターに対して２００ｎＭ未満のＫｉ値を示す、請求項１に記載の方法。
【請求項３５】
Ａ２ｂアデノシンレセプターの賦活化により媒介される疾患もしくは障害を治療する方法であって、該治療を必要とする哺乳動物に対して請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物の有効量を投与する工程を包含する、方法。
【請求項３６】
虚血発症により生じる組織壊死を限定する方法であって、該方法は、以下：
虚血を発症している、もしくは虚血の発症が切迫している哺乳動物を同定する工程、および
該哺乳動物に対し該虚血発症の１０日前以内もしく１０日後以内に治療的有効量もしくは予防的有効量のＡ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストを投与する工程、
を包含し、ここで、
該Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストは、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物である、
方法。
【請求項３７】
心筋梗塞発症後の梗塞範囲を限定する方法であって、該方法は、以下：
心筋梗塞を発症している、もしくは心筋梗塞の発症が切迫している哺乳動物を同定する工程、および
該哺乳動物に対し該心筋梗塞発症の１０日前以内もしく１０日後以内に治療的有効量もしくは予防的有効量のＡ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストを投与する工程、
を包含し、ここで、
該Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストは、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物である、
方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の技術分野）
本発明は、心臓病学、医薬品化学および薬理学に関する。より詳細には、本発明は、Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニスト、ならびに虚血再灌流障害の予防もしくは治療に関する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
組織への血流および酸素供給が停止すると、虚血として公知の症状が生じる。酸素供給が大きく減少すると、低酸素症として公知の症状が生じる。虚血および低酸素症は両方とも、長引くと、組織の機能不全を招き得、さらには細胞死をもたらし得る。虚血および低酸素症を引き起こす数多くの病状には、自然の状態と、および医原性状態の両方あり、これらの病状としては、閉塞性の血管疾患、冠状動脈血栓症、脳血管血栓症、動脈瘤破裂、全身性出血、挫滅外傷、敗血症、重症皮膚熱傷、（胸腹部動脈瘤手術時の脊髄虚血のような）血管閉鎖手術手技、心肺バイパス術、臓器移植、心肺虚脱（突然心臓死）および窒息が挙げられるが、これらに限定されない。
【０００３】
虚血および低酸素症に対する従来の治療法は、全身的に酸素供給を増加させるか、血管閉塞の原因を除去することのいずれかによって、血流および酸素供給を正常レベルまで回復させることである。血流を回復させると、虚血もしくは低酸素症が長期間持続したままの状況と比べて、転帰が改善される。しかしながら、血流および酸素供給を回復させると、虚血もしくは低酸素症似よって引き起こされる損傷とは無関係に、さらに細胞死および機能不全をし得ることも良く認識されている。血流および酸素供給を回復させることによるこのさらなる損傷は、再灌流障害として公知である。再灌流障害により生じるこの逆説的な組織損傷は、再灌流組織に炎症細胞が付着し、この炎症細胞が活性化され、次いで、遊離ラジカルが生じることによる急性炎症症状と似ていると考えられる（Ｇｒａｎｇｅｒら、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．、５７、ｐ３１１−３３２（１９９５年））。再灌流組織内にフリーラジカルおよび他の細胞傷害性生体分子が生成すると、壊死またはアポトーシス経路の活性化のいずれかにより細胞死が起こる。
【０００４】
アデノシンは体内の全ての細胞によって生成される細胞内および細胞外メッセンジャーである。また、これは酵素的転換によって細胞外でも生成される。虚血および低酸素組織では、エネルギー消費過程のアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）の分解を介して、アデノシンの生成量が増大する。これらのアデノシンレセプターは、種々のアデノシンレセプターリガンドに対する相対的親和性およびこのレセプターをコードしている遺伝子配列の分析に基づいて既知の４種のサブタイプ（即ち、Ａ１、Ａ２ａ、Ａ２ｂおよびＡ３）に分類されている。これらのサブタイプをそれぞれ賦活化すると、独自の、場合により正反対の作用が生じる。
【０００５】
これら４種のアデノシンレセプターサブタイプのうちの３種は、再灌流障害の過程において炎症細胞の機能に影響を及ぼすことが公知である。Ａ２ａアデノシンレセプターを賦活化すると、刺激された好中球からの酸素フリーラジカルの遊離が抑制され、血管内皮への好中球の付着が減少し、好中球によるＴＮＦおよびＬＴＢ４の遊離が抑制されることが明らかにされている（例えば、Ｃｒｏｎｓｔｅｉｎら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１４８：ｐ２２０１−２２０６（１９９２年）、Ｔｈｉｅｌら、（１９９５年）Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．、１２６：ｐ２７５−２８２、およびＫｒｕｍｐら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．、１８６：ｐ１４０１−６（１９９７年）参照）。
【０００６】
Ａ２ａアデノシンレセプター賦活化によるこの抗炎症効果とは対照的に、Ａ１レセプターを賦活化すると、刺激された好中球による化学走化性および食作用が亢進し（例えば、Ｃｒｏｎｓｔｅｉｎら、（１９９２年）、上記文献、Ｓａｌｍｏｎら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １４５：ｐ２２３５−２２４０（１９９０年）参照）、単球の多核巨細胞への分化が促進される（Ｍｅｒｒｉｌｌら、Ａｒｔｈ．Ｒｈｅｕｍ．、４０：ｐ１３０８−１３１５（１９９７年）参照）。さらに、心臓の再灌流障害モデルにおいて血管内皮細胞のＡ１レセプターを賦活化すると、炎症および組織傷害が亢進する（Ｂｅｃｋｅｒら、Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｌｅｔｔｅｒｓ、２：ｐ８−１１（１９９２年）、Ｓｃｈｗａｒｔｚら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．、２５：ｐ．９２７−９３８（１９９３年）、Ｚａｈｌｅｒら、Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｒｅｓ．、２８：ｐ１３６６−１３７２（１９９４年）、およびＦｏｒｍａｎら、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．、２９２（３）：ｐ９２９−３８（２０００年））。
【０００７】
また、Ａ２ｂレセプターを賦活化すると、ＩＬ−６の産生増大などの炎症誘発性作用（ｐｒｏ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ａｃｔｉｖｉｔｙ）（Ｓｉｔａｒａｍａｎら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．、１０７：ｐ８６１−９（２００１年））、および局所炎症の特徴である肥満細胞の脱顆粒（Ｌｉｎｄｅｎら、Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．、６２：ｐ１５１９−２４（１９９８年）、および  Ａｕｃｈａｍｐａｃｈら、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、５２：ｐ８４６−６０（１９９７年））が生じる。さらに、血管平滑筋細胞のＡ２ｂレセプターを賦活化すると、アポトーシスを直接賦活化することによって細胞の損傷が起こる（Ｐｅｙｏｔら、Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．、８６：ｐ７６−８５（２０００年））。
【０００８】
虚血−再灌流障害に対する現行の治療法では、血流および酸素供給を回復させることによりわずかに満足できる程度に虚血性障害を治療することができるが、概して、再灌流障害により生じた損傷は完全に治療されていない。虚血−再灌流に関する治験中の治療としては、アデノシンおよびアデノシン・アナログの使用および虚血筋細胞のナトリウム−カルシウム交換ポンプの阻害が挙げられる。しかしながら、これらの治療法は十分には適切と言えない。例えば、アデノシンおよびアデノシン・アナログの使用では、降圧作用および徐脈という望ましくない作用がつきまとう。同様に、虚血単球のナトリウム−カルシウム交換ポンプの阻害は、炎症症状もしくはアポトーシスの直接的賦活化を防止または治療するものではないので、不十分である。従って、虚血再灌流障害を予防、抑制、もくしは治療するための新規で薬学的に受容可能な化合物および組成物は現在もなお求められている。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
（発明の要旨）
本出願人は、Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストが虚血再灌流障害を予防、抑制、もしくは治療することができることを発見したことにより、上記問題を解決した。本発明は、Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストを用い、虚血を発症しているか、虚血の発症が切迫している哺乳動物の虚血再灌流障害を予防、抑制、もしくは治療する方法に関する。本発明の方法に有用な化合物は、Ａ２ｂアデノシンレセプターに特異的に拮抗するかもしくはブロックすることにより、その望ましい効果を発揮する。
【００１０】
幾つかの実施形態において、本発明の方法は、患者に対し、治療的有効量もしくは予防的有効量のＡ２ｂアデノシンレセプターを虚血発症の１０日前以内もしくは１０日後以内に投与する工程を包含する。
【００１１】
本発明の幾つかの実施形態において、このＡ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストは、式（Ｉ）
【００１２】
【化９】
2005533054.tif 000002
【００１３】
の化合物、またはその薬学的に受容可能な塩もしくはＮ−オキシドであり、
式中、
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、それぞれ独立して、
ａ）水素、
ｂ）置換されていないか、またはヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アラルキル、ヘテロシクリルアルキル、アシルアミノ、アルキルアミノカルボニル、アルキルスルホニルアミノおよびアルキルアミノスルホニルからなる群から選択される１つ以上の置換基によって置換されている、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、もしくはＣ２−６アルキニル、
ｃ）置換アリールもしくは非置換アリール、または
ｄ）置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル
であり、
Ｒ４は、一重結合、−Ｏ−、−（ＣＨ２）１−３−、−Ｏ（ＣＨ２）１−２−、−ＣＨ２ＯＣＨ２−、−（ＣＨ２）１−２Ｏ−、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、もしくは−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ−であり、
Ｒ５は、
（ａ）フェニル、または
（ｂ）以下：
【００１４】
【化１０】
2005533054.tif 000003
【００１５】
からなる群から選択される二環式もしくは三環式基
であって、ここで、該フェニル、二環式もしくは三環式基は、置換されていないかまたは１つ以上のＲａ基で置換されているかのいずれかであり、該Ｒａ基は、以下：
（ａ）置換されていないか、または１つ以上の置換基で置換されているかいずれかのＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、もしくはＣ２−６アルキニルであって、該１つ以上の置換基は、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、（アミノ）（Ｒｂ）アシルヒドラジニルカルボニル−、（アミノ）（Ｒｂ）アシルオキシカルボキシ−、（ヒドロキシ）（カルボアルコキシ）アルキルカルバモイル、アシルオキシ、アルデヒド、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルアミノアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルホスホノ、アルキルスルホニルアミノ、カルバモイル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキルアミノ−、シアノ、シアノアルキルカルバモイル、シクロアルキルアミノ、ジアルキルホスホノ、ハロアルキルスルホニルアミノ、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヘテロシクリルカルバモイル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキルスルホニルアミノ、オキシイミノ、ホスホノ、置換アラルキルアミノもしくは非置換アラルキルアミノ、置換アリールカルボキシアルコキシカルボニルもしくは非置換アリールカルボキシアルコキシカルボニル、置換ヘテロアリールスルホニルアミノもしくは非置換ヘテロアリールスルホニルアミノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、チオカルバモイル、およびトリフルオロメチルからなる群から選択される、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、もしくはＣ２−６アルキニル、ならびに
（ｂ）（アルコキシカルボニル）アラルキルカルバモイル、アルデヒド、アルケンオキシ、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルバモイル、アルコキシカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアルキルアミノ、アルキルスルホニルアミノ、アルキルスルホニルオキシ、アミノ、アミノアルキルアラルキルカルバモイル、アミノアルキルカルバモイル、アミノアルキルヘテロシクリルアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルアルキルシクロアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルカルバモイル、アラルコキシカルボニルアミノ、アリールヘテロシクリル、アリールオキシ、アリールスルホニルアミノ、アリールスルホニルオキシ、カルバモイル、カルボニル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキルチオ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）アミノ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）カルバモイル−、Ｒｂ−アルキルアミノ−、Ｒｂ−アルキルカルバモイル−、Ｒｂ−アルキルスルホニル−、Ｒｂ−アルキルスルホニルアミノ、Ｒｂ−アルキルチオ、Ｒｂ−ヘテロシクリルカルボニル、アミノアルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルアミノアルキルアミノ、シアノ、シクロアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルカルバモイル、ハロゲン、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヒドロキシ、オキシイミノ、ホスフェート、置換アラルキルアミノもしくは非置換アラルキルアミノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリルスルホニルアミノもしくは非置換ヘテロシクリルスルホニルアミノ、スルホキシアシルアミノ、およびチオカルバモイル
からなる群から選択され、
Ｒｂは、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（ＣＦ３）２ＯＨ、−ＣＯＮＨＮＨＳＯ２ＣＦ３、−ＣＯＮＨＯＲｃ、−ＣＯＮＨＳＯ２Ｒｃ、−ＣＯＮＨＳＯ２ＮＨＲＣ、−Ｃ（ＯＨ）ＲＣＰＯ３Ｈ２、−ＮＨＣＯＣＦ３、−ＮＨＣＯＮＨＳＯ２ＲＣ、−ＮＨＰＯ３Ｈ２、−ＮＨＳＯ２ＲＣ、−ＮＨＳＯ２ＮＨＣＯＲＣ、−ＯＰＯ３Ｈ２、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＰＯ（ＯＨ）ＲＣ、−ＰＯ３Ｈ２、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２ＮＨＲＣ、−ＳＯ３ＮＨＣＯＲＣ、−ＳＯ３ＮＨＣＯＮＨＣＯ２ＲＣ、および以下の基：
【００１６】
【化１１】
2005533054.tif 000004
【００１７】
からなる群から選択され、
ＲＣは、水素、−Ｃ１−４アルキル、−Ｃ１−４アルキル−ＣＯ２Ｈおよびフェニルからなる群から選択され、ここで、該−Ｃ１−４アルキル、−Ｃ１−４アルキル−ＣＯ２Ｈおよびフェニルは、置換されていないか、もしくはハロゲン、−ＯＨ、−ＯＭｅ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、非置換ベンジル、ならびにハロゲン、−ＯＨ、−ＯＭｅ、−ＮＨ２および−ＮＯ２からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されているベンジルからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されているかのいずれかであり、
Ｘ１およびＸ２は、ＯおよびＳからなる群から独立に選択され、そして
Ｘ３は、Ｎ、またはＣＲｄであり、ここで、Ｒｄは、以下：
ａ）水素、
ｂ）置換されていないか、もしくはヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アラルキル、ヘテロシクリルアルキル、アシルアミノ、アルキルアミノカルボニル、アルキルスルホニルアミノおよびアルキルアミノスルホニルからなる群から選択される１つ以上の置換基によって置換されているかのいずれかであるＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、もしくはＣ２−６アルキニル、
ｃ）置換アリールもしくは非置換アリール、ならびに
ｄ）置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル
からなる群から選択される。
【００１８】
本発明の幾つかの実施形態において、Ｒ１はＣ１−６アルキルである。幾つかの実施形態において、Ｒ２はＣ１−６アルキルである。幾つかの実施形態において、Ｒ３は水素である。幾つかの実施形態において、Ｒ４は一重結合である。
【００１９】
本発明の幾つかの実施形態において、Ｒ５は置換フェニルである。別の実施形態において、Ｒ５は
【００２０】
【化１２】
2005533054.tif 000005
【００２１】
からなる群から選択される、置換二環式もしくは三環式基である。
さらに別の実施形態において、Ｒ５は
【００２２】
【化１３】
2005533054.tif 000006
【００２３】
であり；
であり、
ここで、該Ｒ５は、置換されていないか、または１つ以上のＲａ基で置換されているかのいずれかであり、該Ｒａ基は、以下：
（ａ）それぞれ、置換されていないか、または、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、（アミノ）（Ｒｂ）アシルヒドラジニルカルボニル−、（アミノ）（Ｒｂ）アシルオキシカルボキシ−、（ヒドロキシ）（カルボアルコキシ）アルキルカルバモイル、アシルオキシ、アルデヒド、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルアミノアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルホスホノ、アルキルスルホニルアミノ、カルバモイル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキルアミノ−、シアノ、シアノアルキルカルバモイル、シクロアルキルアミノ、ジアルキルホスホノ、ハロアルキルスルホニルアミノ、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヘテロシクリルカルバモイル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキルスルホニルアミノ、オキシイミノ、ホスホノ、置換アラルキルアミノもしくは非置換アラルキルアミノ、置換アリールカルボキシアルコキシカルボニルもしくは非置換アリールカルボキシアルコキシカルボニル、置換ヘテロアリールスルホニルアミノもしくは非置換ヘテロアリールスルホニルアミノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、チオカルバモイル、およびトリフルオロメチルからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されているかのいずれかである、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、もしくはＣ２−６アルキニル、ならびに
（ｂ）（アルコキシカルボニル）アラルキルカルバモイル、アルデヒド、アルケンオキシ、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルバモイル、アルコキシカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアルキルアミノ、アルキルスルホニルアミノ、アルキルスルホニルオキシ、アミノ、アミノアルキルアラルキルカルバモイル、アミノアルキルカルバモイル、アミノアルキルヘテロシクリルアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルアルキルシクロアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルカルバモイル、アラルコキシカルボニルアミノ、アリールヘテロシクリル、アリールオキシ、アリールスルホニルアミノ、アリールスルホニルオキシ、カルバモイル、カルボニル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキルチオ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）アミノ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）カルバモイル−、Ｒｂ−アルキルアミノ−、Ｒｂ−アルキルカルバモイル−、Ｒｂ−アルキルスルホニル−、Ｒｂ−アルキルスルホニルアミノ、Ｒｂ−アルキルチオ、Ｒｂ−ヘテロシクリルカルボニル、アミノアルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルアミノアルキルアミノ、シアノ、シクロアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルカルバモイル、ハロゲン、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヒドロキシ、オキシイミノ、ホスフェート、置換アラルキルアミノもしくは非置換アラルキルアミノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリルスルホニルアミノもしくは非置換ヘテロシクリルスルホニルアミノ、スルホキシアシルアミノ、およびチオカルバモイル
からなる群から選択される。
【００２４】
本発明の幾つかの実施形態において、Ｒａは、
（ａ）それぞれ、置換されていないか、または、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、（アミノ）（Ｒｂ）アシルヒドラジニルカルボニル−、（アミノ）（Ｒｂ）アシルオキシカルボキシ−、（ヒドロキシ）（カルボアルコキシ）アルキルカルバモイル、アシルオキシ、アルデヒド、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルアミノアルキルアミノ、アルキルホスホノ、アルキルスルホニルアミノ、カルバモイル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキルアミノ−、シアノ、シアノアルキルカルバモイル、シクロアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルアミノ、ジアルキルホスホノ、ハロアルキルスルホニルアミノ、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヘテロシクリルカルバモイル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキルスルホニルアミノ、オキシイミノ、ホスホノ、置換アラルキルアミノ、置換アリールカルボキシアルコキシカルボニル、置換ヘテロアリールスルホニルアミノ、置換ヘテロシクリル、チオカルバモイル、およびトリフルオロメチルからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されているかのいずれかであるＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、もしくはＣ２−６アルキニル、ならびに
（ｂ）（アルコキシカルボニル）アラルキルカルバモイル、アルデヒド、アルケンオキシ、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルバモイル、アルコキシカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアルキルアミノ、アルキルスルホニルアミノ、アルキルスルホニルオキシ、アミノ、アミノアルキルアラルキルカルバモイル、アミノアルキルカルバモイル、アミノアルキルヘテロシクリルアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルアルキルシクロアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルカルバモイル、アラルコキシカルボニルアミノ、アリールヘテロシクリル、アリールオキシ、アリールスルホニルアミノ、アリールスルホニルオキシ、カルバモイル、カルボニル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）アミノ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）カルバモイル−、Ｒｂ−アルキルアミノ−、Ｒｂ−アルキルカルバモイル−、Ｒｂ−アルキルスルホニル−、Ｒｂ−アルキルスルホニルアミノ、Ｒｂ−アルキルチオ、Ｒｂ−ヘテロシクリルカルボニル、シアノ、シクロアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルカルバモイル、ハロゲン、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヒドロキシ、オキシイミノ、ホスフェート、置換アラルキルアミノ、置換ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリルスルホニルアミノ、スルホキシアシルアミノ、およびチオカルバモイル
からなる群から選択される。
【００２５】
本発明の幾つかの実施形態において、Ｒａは、
（ａ）それぞれ、置換されていないか、またはアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、および置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリルからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されているかのいずれかであるＣ１−６アルキルもしくはＣ２−６アルケニル、ならびに
（ｂ）アルコキシカルボニルアルキルアミノ、シアノおよびヒドロキシ
からなる群から選択される。
【００２６】
本発明の幾つかの実施形態において、Ｘ１はＯである。幾つかの実施形態において、Ｘ２はＯである。幾つかの実施形態において、Ｘ３はＮである。
【００２７】
本発明の幾つかの実施形態において、Ｒ１およびＲ２はそれぞれＣ２−４アルキルであり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４は一重結合であり、Ｘ１およびＸ２はそれぞれＯであり、ならびにＸ３はＮである。本発明の別の実施形態において、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立にＣ２−４アルキルであり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４は一重結合であり、Ｘ１およびＸ２はそれぞれＯであり、Ｘ３はＮであり、ならびにＲ５はＲａで置換されたフェニルである。
【００２８】
本発明の別の実施形態において、Ｒ１およびＲ２はそれぞれＣ２−４アルキルであり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４は一重結合であり、Ｘ１およびＸ２はそれぞれＯであり、Ｘ３はＮであり、およびＲ５はＲａで置換されているフェニルであり、ならびにＲａは
（ａ）それぞれ、置換されていないか、またはアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、Ｒｂ−およびＲｂ−アルコキシ−からなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されているかのいずれかであるＣ１−６アルキルもしくはＣ２−６アルケニル、ならびに
（ｂ）アルコキシカルボニルアルキルアミノ、Ｒｂ−アルコキシ−、シアノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリルおよびヒドロキシ
からなる群から選択される。
【００２９】
本発明のさらに別の実施形態において、Ｒ１およびＲ２はそれぞれＣ２−４アルキルであり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４は一重結合であり、Ｘ１およびＸ２はそれぞれＯであり、Ｘ３はＮであり、Ｒ５はＲａで置換されたフェニルであり、そしてＲａはシアノである。
【００３０】
本発明の幾つかの実施形態において、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立にＣ２−４アルキルであり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４は一重結合であり、Ｘ１およびＸ２はそれぞれＯであり、そしてＸ３はＮであり、そしてＲ５は
【００３１】
【化１４】
2005533054.tif 000007
【００３２】
であり、
該Ｒ５が、置換されていないか、もしくは１つ以上のＲａ基で置換されているかのいずれかであり、該Ｒａ基は、以下：
（ａ）それぞれ、置換されていないか、または、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、（アミノ）（Ｒｂ）アシルヒドラジニルカルボニル−、（アミノ）（Ｒｂ）アシルオキシカルボキシ−、（ヒドロキシ）（カルボアルコキシ）アルキルカルバモイル、アシルオキシ、アルデヒド、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルアミノアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルホスホノ、アルキルスルホニルアミノ、カルバモイル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキルアミノ−、シアノ、シアノアルキルカルバモイル、シクロアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルアミノ、ジアルキルホスホノ、ハロアルキルスルホニルアミノ、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヘテロシクリルカルバモイル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキルスルホニルアミノ、オキシイミノ、ホスホノ、置換アラルキルアミノもしくは非置換アラルキルアミノ、置換アリールカルボキシアルコキシカルボニルもしくは非置換アリールカルボキシアルコキシカルボニル、置換ヘテロアリールスルホニルアミノもしくは非置換ヘテロアリールスルホニルアミノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、チオカルバモイル、およびトリフルオロメチルからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されているかのいずれかである、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、もしくはＣ２−６アルキニル、ならびに
（ｂ）（アルコキシカルボニル）アラルキルカルバモイル、アルデヒド、アルケンオキシ、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルバモイル、アルコキシカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアルキルアミノ、アルキルスルホニルアミノ、アルキルスルホニルオキシ、アミノ、アミノアルキルアラルキルカルバモイル、アミノアルキルカルバモイル、アミノアルキルヘテロシクリルアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルアルキルシクロアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルカルバモイル、アラルコキシカルボニルアミノ、アリールヘテロシクリル、アリールオキシ、アリールスルホニルアミノ、アリールスルホニルオキシ、カルバモイル、カルボニル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキルチオ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）アミノ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）カルバモイル−、Ｒｂ−アルキルアミノ−、Ｒｂ−アルキルカルバモイル−、Ｒｂ−アルキルスルホニル−、Ｒｂ−アルキルスルホニルアミノ、Ｒｂ−アルキルチオ、Ｒｂ−ヘテロシクリルカルボニル、アミノアルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルアミノアルキルアミノ、シアノ、シクロアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルカルバモイル、ハロゲン、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヒドロキシ、オキシイミノ、ホスフェート、置換アラルキルアミノもしくは非置換アラルキルアミノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリルスルホニルアミノもしくは非置換ヘテロシクリルスルホニルアミノ、スルホキシアシルアミノ、およびチオカルバモイル
からなる群から選択される。
【００３３】
本発明の別の実施形態において、Ｒ１およびＲ２はそれぞれＣ２−４アルキルであり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４は一重結合であり、Ｘ１およびＸ２はそれぞれＯであり、およびＸ３はＮであり、ならびにＲ５は
【００３４】
【化１５】
2005533054.tif 000008
【００３５】
であり；
該Ｒ５は、置換されていないか、または、１つ以上のＲａ基で置換されているかのいずれかであり、該Ｒａ基は、以下：
（ａ）それぞれが、置換されていないか、またはアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、Ｒｂ−およびＲｂ−アルコキシ−からなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されている、Ｃ１−６アルキルもしくはＣ２−６アルケニル；ならびに
（ｂ）アルコキシカルボニルアルキルアミノ、Ｒｂ−アルコキシ−、シアノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、およびヒドロキシ
からなる群から選択される。
【００３６】
別の実施形態において、Ｒ１およびＲ２はそれぞれＣ２−４アルキルであり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４は一重結合であり、Ｘ１およびＸ２はそれぞれＯであり、およびＸ３はＮであり、ならびにＲ５は
【００３７】
【化１６】
2005533054.tif 000009
【００３８】
であり；そして
該Ｒ５は、置換されていないか、または１つ以上のＲａ基で置換されているかのいずれかであり、アミノ、モノアルキルアミノ、およびジアルキルアミノからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されている、Ｃ２−５アルキルからなる群から選択される。
【００３９】
本発明の幾つかの実施形態において、Ｒ１およびＲ２はそれぞれＣ２−４アルキルであり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４は一重結合であり、Ｘ１およびＸ２はそれぞれＯであり、Ｘ３はＮであり、ならびにＲ５は
【００４０】
【化１７】
2005533054.tif 000010
【００４１】
であり；
該Ｒ５が、置換されていないか、もしくは１つ以上のＲａ基で置換されているかのいずれかであり、該Ｒａ基は、以下：
（ａ）置換されていないか、または、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、（アミノ）（Ｒｂ）アシルヒドラジニルカルボニル−、（アミノ）（Ｒｂ）アシルオキシカルボキシ−、（ヒドロキシ）（カルボアルコキシ）アルキルカルバモイル、アシルオキシ、アルデヒド、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルアミノアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルホスホノ、アルキルスルホニルアミノ、カルバモイル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ、Ｒｂ−アルキルアミノ、シアノ、シアノアルキルカルバモイル、シクロアルキルアミノ、ジアルキルホスホノ、ハロアルキルスルホニルアミノ、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヘテロシクリルカルバモイル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキルスルホニルアミノ、オキシイミノ、ホスホノ、置換アラルキルアミノもしくは非置換アラルキルアミノ、置換アリールカルボキシアルコキシカルボニルもしくは非置換アリールカルボキシアルコキシカルボニル、置換ヘテロアリールスルホニルアミノもしくは非置換ヘテロアリールスルホニルアミノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、チオカルバモイル、およびトリフルオロメチルからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されているかのいずれかである、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、もしくはＣ２−６アルキニル、ならびに
（ｂ）（アルコキシカルボニル）アラルキルカルバモイル、アルデヒド、アルケンオキシ、アルケニルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルバモイル、アルコキシカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアルキルアミノ、アルキルスルホニルアミノ、アルキルスルホニルオキシ、アミノ、アミノアルキルアラルキルカルバモイル、アミノアルキルカルバモイル、アミノアルキルヘテロシクリルアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルアルキルシクロアルキルカルバモイル、アミノシクロアルキルカルバモイル、アラルコキシカルボニルアミノ、アリールヘテロシクリル、アリールオキシ、アリールスルホニルアミノ、アリールスルホニルオキシ、カルバモイル、カルボニル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、Ｒｂ−アルキルチオ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）アミノ−、Ｒｂ−アルキル（アルキル）カルバモイル−、Ｒｂ−アルキルアミノ−、Ｒｂ−アルキルカルバモイル−、Ｒｂ−アルキルスルホニル−、Ｒｂ−アルキルスルホニルアミノ、Ｒｂ−アルキルチオ、Ｒｂ−ヘテロシクリルカルボニル、アミノアルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノアルキルアミノ、アルキルアミノアルキルアミノ、シアノ、シクロアルキルアミノ、ジアルキルアミノアルキルカルバモイル、ハロゲン、ヘテロシクリルアルキルアミノ、ヒドロキシ、オキシイミノ、ホスフェート、置換アラルキルアミノもしくは非置換アラルキルアミノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリルスルホニルアミノもしくは非置換ヘテロシクリルスルホニルアミノ、スルホキシアシルアミノ、およびチオカルバモイル
からなる群から選択される。
【００４２】
本発明の別の実施形態において、Ｒ１およびＲ２はそれぞれＣ２−４アルキルであり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４は一重結合であり、Ｘ１およびＸ２はそれぞれＯであり、Ｘ３はＮであり、Ｒ５は
【００４３】
【化１８】
2005533054.tif 000011
【００４４】
であり；そして該Ｒ５は、置換されていないか、または１つ以上のＲａ基で置換されているかのいずれかであり、該Ｒａ基は、以下：
（ａ）それぞれが、置換されていないか、またはアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換ヘテロシクリルアミノカルボニルもしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、Ｒｂ−およびＲｂ−アルコキシ−からなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されている、Ｃ１−６アルキルもしくはＣ２−６アルケニル；ならびに
（ｂ）アルコキシカルボニルアルキルアミノ、Ｒｂ−アルコキシ−、シアノ、置換ヘテロシクリルもしくは非置換ヘテロシクリル、およびヒドロキシからなる群から選択される。
【００４５】
本発明のなお別の実施形態では、Ｒ１およびＲ２はそれぞれＣ２−４アルキルであり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４は単結合であり、Ｘ１およびＸ２はそれぞれＯであり、Ｘ３はＮであり、Ｒ５は
【００４６】
【化１９】
2005533054.tif 000012
【００４７】
であり；ここで、該Ｒ５は、置換されていない、または
（ａ）それぞれが、置換されていない、またはアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換もしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、置換もしくは非置換ヘテロシクリル、およびＲｂ−からなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されているＣ１−４アルキルもしくはＣ２−４アルケニル、ならびに
（ｂ）Ｒｂ−アルコキシ−、および置換ヘテロシクリル
からなる群から選択される１つ以上のＲａ基で置換されているものである。
【００４８】
本発明のいくつかの実施形態では、Ｒ１およびＲ２はそれぞれプロピルであり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４は単結合であり、Ｒ５は１つ以上のＲａ基で置換されたフェニル、
【００４９】
【化２０】
2005533054.tif 000013
【００５０】
であり；
ここで、該二環式もしくは三環式基は、置換されていないか、１つ以上のＲａ基で置換されているものであって、
そして、
Ｒａは
（ａ）それぞれが置換されていない、またはアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換もしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、置換もしくは非置換ヘテロシクリルアミノカルボニル、Ｒｂ−、Ｒｂ−アルコキシ−、および置換もしくは非置換ヘテロシクリルからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されているＣ１−６アルキルもしくはＣ２−６アルケニル；および
（ｂ）アルコキシカルボニルアルキルアミノ、シアノおよびヒドロキシ
からなる群から選択されるものであって、
Ｘ１およびＸ２はそれぞれＯであり、そして、
Ｘ３はＮである。
【００５１】
好ましい実施形態において、本発明の方法に用いる式（Ｉ）の化合物は、３−［４−（２，６−ジオキソ−１，３−ジプロピル−２，３，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−プリン−８−イル）−ビシクロ［２．２．２］オクト−１−イル］−プロピオン酸である。
【００５２】
幾つかの実施形態において、前記Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストはヒトに投与される。
【００５３】
幾つかの実施形態において、本発明の方法に用いるＡ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストは、薬学的に適切なキャリアと共に、薬学的に受容可能な組成物に処方される。
【００５４】
本発明は、虚血を発症しているか、虚血の発症が切迫している患者の処置に有用である。虚血発症の例としては、（心筋梗塞を含む）急性冠不全症候群、脳卒中、臓器移植、腎虚血、ショックおよび臓器移植手術が挙げられる。
【００５５】
幾つかの実施形態において、本発明の方法は、Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストを虚血発症の２日前以内もしくは２日後以内に投与する工程を包含する。別の実施形態において、この方法は、Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストを虚血発症の２日後以内に投与する工程を包含する。
【００５６】
幾つかの実施形態において、本発明の方法に用いる化合物は、Ａ２ａアデノシンレセプターもしくはＡ３アデノシンレセプターに対する親和性よりも少なくとも１０倍高いＡ２ｂアデノシンレセプターに対する親和性を示す。他の実施形態において、本発明の方法に用いる化合物は、さらに、Ａ２ａアデノシンレセプターもしくはＡ３アデノシンレセプターに対する親和性よりも少なくとも１０倍高いＡ１アデノシンレセプターに対する親和性を示す。
【００５７】
幾つかの実施形態において、本発明の方法に用いる化合物は、Ａ２ｂアデノシンレセプターに対して５００ｎＭ未満のＫｉ値を示す。他の実施形態において、本発明の方法に用いる化合物は、Ａ２ｂアデノシンレセプターに対して２００ｎＭ未満のＫｉ値を示す。
【００５８】
幾つかの実施形態において、本発明は、処置を必要とする哺乳動物に対して前述の式（Ｉ）の化合物を有効量投与する工程を包含するＡ２ｂアデノシンレセプターの活性化により媒介される疾患もしくは障害を処置する方法に関する。
【００５９】
幾つかの実施形態において、本発明は、Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストを用いた、虚血を発症しているか、虚血の発症が切迫している哺乳動物の虚血の発症による組織壊死を制限する方法に関する。
【００６０】
幾つかの実施形態において、本発明は、Ａ２ｂアデノシンレセプターを用いた、心筋梗塞を発症しているか、心筋梗塞の発症が切迫している哺乳動物の心筋梗塞発症後の梗塞範囲を制限する方法に関する。
【００６１】
（発明の詳細な説明）
本明細書に用いている科学技術用語は全て、特に定義しない限り、本発明が属する分野の当業者に一般に理解されているのと同じ意味を有する。本発明の実施もしくは試行において、本明細書に開示したものと類似もしくは同等の方法および材料を用いることができるが、以下では適切な材料および方法を説明する。本明細書に記載した刊行物、特許出願、特許その他の文献は全て、その全体が、参考として援用される。さらに、以下に述べる材料、方法および実施例は単に例示的なものであり、限定的であることを意図しない。
【００６２】
明細書全体を通して、用語「含む」または「含む」もしくは「含んでいる」などの変形形態は、記載された完全体もしくは完全体の群を含むことを意味するが、任意の他の完全体もしくは完全体の群を排除するものではないことが理解される。
【００６３】
本明細書中で使用される「アルキル」基とは、飽和脂肪族炭化水素基である。アルキル基は、直鎖状もしくは分枝状のものであり得、例えば、鎖内に１〜６個の炭素原子を有し得る。直鎖状アルキル基の例としては、エチルおよびブチルが挙げられるが、これらに限定されない。分枝状アルキル基の例としては、イソプロピルおよびｔ−ブチルが挙げられるが、これらに限定されない。アルキル基は、任意に、アルコキシ、アミノ、ニトロ、カルボキシ、カルボアルコキシ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、メルカプチル、トリハロメチル、スルホキシもしくはカルバモイルなどの１個以上の置換基で置換され得る。
【００６４】
本明細書で使用される場合、「アルケニル」基とは、少なくとも１個の二重結合を有する脂肪族炭素基である。アルケニル基は、直鎖状もしくは分枝状のものであり得、例えば、鎖内に３〜６個の炭素原子および１または２個の二重結合を有し得る。アルケニル基の例としては、アリルおよびイソプレニルが挙げられるが、これらに限定されない。アルケニル基は、任意に、アルコキシ、アミノ、ニトロ、カルボキシ、カルボアルコキシ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、メルカプチル、トリハロメチル、スルホキシもしくはカルバモイルなどの１個以上の置換基で置換され得る。
【００６５】
本明細書に用いている「アルキニル」基とは、少なくとも１個の三重結合を有する脂肪族炭素基である。アルキニル基は直鎖状であっても、分枝状であってもよく、例えば、鎖内に３〜６個の炭素原子および１〜２個の三重結合を有し得る。アルキニル基の例としては、プロパルギルおよびブチニルが挙げられるが、これらに限定されるものではない。アルキニル基は、任意に、アルコキシ、アミノ、ニトロ、カルボキシ、カルボアルコキシ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、メルカプチル、トリハロメチル、スルホキシもしくはカルバモイルなどの１個以上の置換基で置換され得る。
【００６６】
本明細書に用いている「アリール」基とは、フェニルもしくはナフチル基、またはこれらの誘導体である。「置換アリール」基とは、アルキル、アルコキシ、アミノ、ニトロ、カルボキシ、カルボアルコキシ、シアノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ハロ、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、メルカプチル、アルキルメルカプチル、トリハロアルキル、カルボキシアルキル、スルホキシもしくはカルバモイルなどの１個以上の置換基で置換されているアリール基である。
【００６７】
本明細書に用いている「アラルキル」基とは、アリール基で置換されているアルキル基である。アラルキルの例としてはベンジルがある。
【００６８】
本明細書に用いている「シクロアルキル」基とは、例えば、炭素原子が３〜８個の脂肪族環である。シクロアルキル基の例としては、シクロプロピルおよびシクロヘキシルが挙げられる。
【００６９】
本明細書に用いている「アシル」基とは、直鎖状もしくは分枝状のアルキル−Ｃ（＝Ｏ）−基もしくはホルミル基である。アシル基の例としては、アルカノイル基（例えば、上記アルキル基内に１〜６個の炭素原子を有する基）が挙げられる。アセチルおよびピバノイルはアシル基の例である。アシル基は置換されていてもいなくてもよい。
【００７０】
本明細書に用いている「カルバモイル」基とは、Ｈ２Ｎ−ＣＯ２−の構造を有する基である。「アルキルカルバモイル」および「ジアルキルカルバモイル」とは、その窒素が、水素の代わりにそれぞれ１個もしくは２個のアルキル基を結合しているカルバモイル基のことを指す。同様に、「アリールカルバモイル」および「アリールアルキルカルバモイル」基は、水素のうちの１個の代わりにアリール基を含み、後者では、第２の水素の代わりにアルキル基を含む。
【００７１】
本明細書に用いている「カルボキシル」基とは、−ＣＯＯＨ基である。
【００７２】
本明細書に用いている「アルコキシ」基とは、「アルキル」が前述のとおりであるアルキル−Ｏ−基である。
【００７３】
本明細書に用いている「アルコキシアルキル」基とは、前述のアルコキシ基によって水素が置換されている前述のアルキル基である。
【００７４】
本明細書に用いている「ハロゲン」もしくは「ハロ」基とは、フッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素である。
【００７５】
本明細書に用いている「ヘテロシクリル」基とは、環内の原子の１つ以上が炭素以外の元素、例えば、Ｎ、Ｏ、Ｓである５〜約１０員環構造体である。ヘテロシクリル基は芳香族であってももしくは非芳香族であってもよく、即ち、飽和されても、または部分的もしくは完全に不飽和であってもよい。また、芳香族ヘテロシクリル基は「ヘテロアリール」基とも呼ばれ得る。ヘテロシクリル基の例としては、ピリジル、イミダゾリル、フラニル、チエニル、チアゾリル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、モルホリニル、チオモルホリニル、インドリル、インドリニル、イソインドリニル、ピペリジニル、ピリミジニル、ピペラジニル、イソキサゾリル、イソキサゾリジニル、テトラゾリル、およびベンズイミダゾリルが挙げられる。
【００７６】
本明細書に用いている「置換ヘテロシクリル」基とは、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルバルコキシ、カルバモイル、カルボキシル、シアノ、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、カルボニル、チオカルボニル、ヒドロキシアルキルもしくはニトロなどの置換基によって１個以上の水素が置換されているヘテロシクリル基である。
【００７７】
本明細書に用いている「ヒドロキシアルキル」とは、ヒドロキシ基によって置換されているアルキル基のことを意味する。
【００７８】
本明細書に用いている「スルファモイル」基は−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２の構造を有する。「アルキルスルファモイル」および「ジアルキルスルファモイル」とは、その窒素に、水素の代わりにそれぞれ１個もしくは２個のアルキル基が結合しているスルファモイル基のことを意味する。同様に、「アリールスルファモイル」および「アリールアルキルスルファモイル」基は、１個の水素の代わりにアリール基、および後者ではもう１個の水素の代わりにアルキル基を含む。
【００７９】
本明細書に用いている「アンタゴニスト」とは、レセプターに結合するが、そのレセプターを賦活化しない分子である。これは、その結合部位に対して内在性のリガンドと競合することにより、この内在性リガンドのレセプター賦活化能を低下させる。
【００８０】
本明細書に用いている「選択的アンタゴニスト」とは、アデノシンレセプターの特定のサブタイプと結合し、その親和性が他のサブタイプに対してよりも高いアンタゴニストである。本明細書に用いている「Ａ２ｂ選択的アンタゴニスト」とは、Ａ２ｂレセプターに対して高い親和性を有するアンタゴニストであり、（ａ）このＡ２ｂレセプターサブタイプに対してナノモル濃度の結合親和性、ならびに（ｂ）Ａ２ａおよびＡ３レセプターサブタイプに比し、Ａ２ｂサブタイプに対して少なくとも１０倍、より好ましくは５０倍、最も好ましくは１００倍高い親和性を有する。このＡ２ｂ選択的アンタゴニストは、任意に、Ａ１レセプターサブタイプに対して親和性を有し得、（ａ）Ａ１レセプターサブタイプに対してナノモル濃度の結合親和性、ならびに（ｂ）Ａ２ａおよびＡ３レセプターサブタイプに比し、Ａ１サブタイプに対して少なくとも１０倍、より好ましくは５０倍、最も好ましくは１００倍高い親和性を有し得る。
【００８１】
本明細書に用いている「梗塞」とは、組織（例えば、心筋）への血液供給の閉塞により生じる局在化した壊死のことを意味する。
【００８２】
本明細書に用いている「虚血」とは、局所領域（即ち、器官もしくは組織）に至る血管の閉塞によりその局所領域への血液供給が不十分になることを意味する。虚血としては、組織への血流および酸素供給の完全な停止、ならびに組織への酸素供給の大幅な低下を招く低酸素症が挙げられる。
【００８３】
本明細書に用いている「再灌流」とは、器官もしくは組織への血流が回復することを意味する。
【００８４】
本明細書に用いている「虚血再灌流障害」とは、虚血によって生じる組織への障害とその後の再灌流のことを意味する。
【００８５】
本明細書に用いている「薬学的に受容可能な」とは、アデノシン濃度の上昇および／またはアデノシンに対する感受性の増大によって特徴付けられる症状を治療もしくは予防するのに有効な量のことを意味する。
【００８６】
本明細書に用いている「患者」という用語は、哺乳動物（例えば、ヒト）を含む動物のことを意味する。
【００８７】
本明細書に用いている「薬学的に受容可能なキャリアもしくは補助剤」とは、本発明の化合物と共に動物に投与され得る、この化合物の薬理作用を無効化しない毒性のないキャリアもしくは補助剤のことを意味する。
【００８８】
薬学的に受容可能な陰イオン塩としては、以下の酸、即ち、メタンスルホン酸、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸、安息香酸、クエン酸、酒石酸、フマル酸、マレイン酸、ｎが０〜４のＣＨ３−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ、ｎが０〜４のＨＯＯＣ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨの塩が挙げられる。
【００８９】
溶媒の組合せを用いる場合、使用する溶媒間の比率は容積／容積（ｖ／ｖ）で表わす。
【００９０】
溶媒における固体の溶解度を論じる場合、その溶媒に対する固体の比率は重量／容積（ｗｔ／ｖ）で表す。
【００９１】
さらに、本明細書全体を通じて、以下の略語を用いる：
ＢＣＡは、ビシンコニン酸を意味する。
【００９２】
ＢＧ９９２８は、３−［４−（２，６−ジオキソ−１，３−ジプロピル−２，３，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−プリン−８−イル）−ビシクロ［２．２．２］オクト−１−イル］−プロピオン酸を意味する。
【００９３】
（Ｃａ２＋）ｉは、細胞内カルシウムを意味する。
【００９４】
ＣＣＤは、電荷結合素子を意味する。
【００９５】
ＣＰＡは、Ｎ６−シクロペンチルアデノシンを意味する。
【００９６】
ＣＰＭは、毎分当たりのカウント数を意味する。
【００９７】
ＤＰＭは、毎分当たりの崩壊数を意味する。
【００９８】
ＤＲは濃度比、即ち、アンタゴニストの存在下に規定の反応（通常最大値の５０％であるが、これに限られるものではない）を生じるアゴニストの濃度を、アンタゴニストの非存在下に同じ反応を生じる濃度で除算したものを意味する。
【００９９】
ＥＤＴＡは、エチレンジアミン四酢酸を意味する。
【０１００】
ＦＬＩＰＲは、蛍光イメージングプレートリーダーを意味する。
【０１０１】
［３Ｈ］−ＢＧ９９２８は、トリチウム標識ＢＧ９９２８を意味する。
【０１０２】
［３Ｈ］−ＤＰＣＰＸは、Ａ１アデノシンレセプターおよびＡ２ｂアデノシンレセプターの競合的基質であるトリチウム標識８−シクロペンチル−１，３−ジプロピルキサンチンを意味する。
【０１０３】
［３Ｈ］−ＺＭ２４１３８５は、Ａ２ａアデノシンレセプターの競合的基質であるトリチウム標識４−（２−［７−アミノ−２−（フリル）（１，２，４）トリアゾロ（２，３−ａ）（１，３，５）トリアジン−５−イルアミノエチル］フェノールを意味する。
【０１０４】
［Ｉ］は、遊離放射性リガンドの濃度を意味する。
【０１０５】
［１２５Ｉ］ＡＢ−ＭＥＣＡは、［１２５ヨウ素］−標識Ｎ６−（４−アミノベンジル）−９−（５−（メチルカルボニル）−β−Ｄ−リボフラノシル）アデノシンを意味する。
【０１０６】
ＩＢ−ＭＥＣＡは、１−デオキシ−１−［６−［［（３−ヨードフェニル）メチル］アミノ］−９Ｈ−プリン−９−イル］−Ｎ−メチル−βＮ６−（４−アミノベンジル）−９−（５−（メチルカルボニル）−β−Ｄ−リボフラヌロンアミド（ｒｉｂｏｆｕｒａｎｕｒｏｎａｍｉｄｅ）を意味する。
【０１０７】
ＩＣ５０は、測定される活性の５０％を抑制する物質の濃度を意味する。
【０１０８】
ＫＢは、アンタゴニストの解離定数を意味する。
【０１０９】
ＫＤは、飽和分析法によって求められた放射性標識薬剤の解離定数を意味する。
【０１１０】
ＫＩは、薬剤の阻害定数、即ち、放射性リガンドが存在しない場合にレセプターの５０％を占有する競合アッセイにおける競合リガンドの濃度を意味する。
【０１１１】
ＡＢ−ＭＥＣＡは、Ｎ６−（４−アミノベンジル）−９−（５−（メチルカルボニル）−β−Ｄ−リボフラノシル）アデニンを意味する。
【０１１２】
Ｎは観察回数を意味する。
【０１１３】
ＮＥＣＡは５’Ｎ−エチルカルボキサミドアデノシンを意味する。
【０１１４】
ｐＡ２は、アンタゴニストの効力の対数値（ｌｏｇａｒｉｔｈｍｉｃ  ｍｅａｓｕｒｅ）、即ち、アゴニストの濃度−応答曲線において２倍の移動を生じるアンタゴニストの濃度の対数に負号をつけたものである。
【０１１５】
ＰＭＳＦはフェニルメチルスルホニルフルオリドを意味する。
【０１１６】
ＲＦＵは相対蛍光単位を意味する。
【０１１７】
３Ｈ−Ｒ−ＰＩＡは、［３Ｈ］−Ｒ−Ｎ６−フェニルイソプロピルアデノシン（Ａ３アデノシンレセプターの放射性リガンド）を意味する。
【０１１８】
シルドプロットは、ｌｏｇ（アンタゴニスト濃度）に対するｌｏｇ（濃度比−１）、即ち、ｌｏｇ（ＤＲ−１）のグラフのことを意味する。ｌｏｇ濃度軸の切片はｐＡ２値に等しく、その勾配は拮抗作用の性質についての情報をもたらす。
【０１１９】
ＳＤは標準偏差を意味する。
【０１２０】
ＳＥＭは平均値の標準誤差を意味する。
【０１２１】
ＸＡＣはキサンチンアミノ同族体を意味する。
【０１２２】
概して、本発明の特徴は、Ａ２ｂアデノシンレセプターに対して極めて効果が強力で選択的なアンタゴニストにある。幾つかの実施形態において、本発明の化合物は、任意に、Ａ１アデノシンレセプターの選択的なアンタゴニストであり得る。
【０１２３】
（アデノシン・アンタゴニスト化合物の合成）
本発明に有用な化合物は、当該分野で公知の従来法により調製され得る。例えば、式Ｉの化合物の合成については、国際公開番号ＷＯ０１／３４６０４およびＷＯ０１／３４６１０に記載されている。
【０１２４】
本明細書では２つの一般的な方法を記載している。これら方法ではいずれも、以下の２つのスキームに示したように、共通の出発物質１，３−二置換−５，６−ジアミノウラシル（化合物（ＶＩ））を用いる。１，３−二置換−５，６−ジアミノウラシルは、対応する対称置換尿素もしくは非対称置換尿素をシアン酢酸で処理した後、ニトロソ化し、還元することによって調製され得る（例えば、参考として本明細書に援用されている、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１６、ｐ１８７９、１９５１年およびＣａｎ  Ｊ．Ｃｈｅｍ．４６、ｐ３４１３、１９６８年参照）。非対称的置換キサンチンはＭｕｅｌｌｅｒの方法によって入手され得る（参考として本明細書に援用されている、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３６、ｐ３３４１、１９９３年参照）。この方法では、Ｖｏｒｂｒｕｇｇｅｎの条件下で、６−アミノウラシルをこのウラシルのＮ３において特異的にモノアルキル化する。あるいは、合成の最後の段階で、置換されていないＮ１位もしくはＮ３位を官能基化（例えば、アルキル化）することができる。
【０１２５】
第１の一般的な方法では、先ず、１，３−二置換−５，６−ジアミノウラシル（化合物（ＶＩ））を閉環反応させることにより、８位が置換されていないキサンチン中間体を生成することができる。次いで、この中間体をＺ−Ｒ３部分の前駆体化合物とカップリングさせて目的の８−置換キサンチンを生成することができる。以下のスキーム１を参照すると、出発物質１，３−二置換−５，６−ジアミノウラシル（即ち、化合物（ＶＩ））を先ずＨＣ（ＯＥｔ）３と反応させて閉環反応を行うことにより、８位が置換されていないキサンチン中間体（即ち、化合物（Ａ））が生成される。この中間体を（例えば、Ｎ７位においてＴＨＰもしくはＢＯＭを用いて）アミノ保護基により保護した後、さらに、強塩基（例えば、ｎ−ブチル−リチウム（ｎＢｕＬｉ）もしくはリチウムジ−イソプロピル−アミド（ＬＤＡ））の存在下で、Ｚ−Ｒ３部分の前駆体化合物（例えば、アルデヒドもしくはケトン）とカップリング反応させることにより、アルコール（即ち、化合物（Ｃ））を生成する。次に、このアルコールのヒドロキシル基を、当業者に周知の方法により、反応させてこのアルコールをアミン、メルカプタン、エーテル、ラクトン（例えば、化合物（Ｅ））、もしくは他の官能基化化合物に変換することができる。次いで、このＮ７位の保護を除去することにより脱保護生成物（即ち、化合物（Ｆ））を得ることができ、これをさらに官能基化することにより本発明の化合物を得ることができる。
【０１２６】
（スキーム１）
【０１２７】
【化２１】
2005533054.tif 000014
【０１２８】
第２の一般的な方法では、本発明の化合物は、出発物質１，３−二置換−５，６−ジアミノウラシルをＺ−Ｒ３部分の前駆体化合物（例えば、アルデヒドもしくはカルボン酸またはカルボン酸クロリド）と反応させて６−アミド置換ウラシル中間体を形成した後、目的のキサンチン化合物が得られるようこれを閉環反応させることによって調製することができる。以下のスキーム２を参照すると、当業者に周知の反応によって（例えば、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）、Ｏ−ベンゾ−トリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）、もしくはＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）などのカップリング試薬を用いることによって）、先ず、出発物質１，３−二置換−５，６−ジアミノウラシル（即ち、化合物（ＶＩ））をＺ−Ｒ３部分のジカルボキシ／エステル置換前駆体化合物ＨＯＯＣ−Ｚ−Ｒ３−ＣＯＯＲａ（即ち、化合物（Ｇ）；ＲａはＨ、Ｃ１−５アルキルもしくはベンジル、またはハロ、ヒドロキシもしくはＣ１−３アルコキシからなる群から選ばれる１〜３個の置換基で任意に置換されているフェニル環を表す）とカップリングさせることにより、６−アミド置換ウラシル中間体（即ち、化合物（Ｈ））を得る。化合物（Ｇ）の例としては、ビシクロ［３．２．１］オクタン−１，５−ジカルボン酸モノメチルエステルおよびビシクロ［２．２．２］オクタン−１，４−ジカルボン酸モノエチルエステルが挙げられる。次いで、上記ウラシル中間体を塩基性条件で（例えば、ＫＯＨおよびイソプロピルアルコールを用いることによって）閉環反応させてキサンチン化合物（即ち、化合物（Ｊ））を得ることができ、これをさらに官能基化させることにより本発明の種々の化合物を生成することができる。
【０１２９】
（スキーム２）
【０１３０】
【化２２】
2005533054.tif 000015
【０１３１】
所望のアルデヒド、ケトン、カルボン酸およびカルボン酸クロリドは（例えば、アルドリッチ・ケミカル社（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｉｎｃ．，ミルウォーキー（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ）、Ｗｉｓｃ．から）市販されており、または周知の合成法により市販の物質から容易に調製することができる。このような合成法としては、酸化、還元、加水分解、アルキル化およびウィッティッヒ同族体化（ｈｏｍｏｌｏｇａｔｉｏｎ）反応が挙げられるが、これらに限定されるものではない。本発明のビシクロアルカンカルボン酸（例えば、化合物（Ｇ）の例である化合物（ＩＩＩ））の調製に関する文献としては、例えば、Ａｕｓｔ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．３８，１７０５，１９８５；Ａｕｓｔ  Ｊ．Ｃｈｅｍ．３９，２０６ｌ，１９８６；Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．７５，６３７，１９５３；Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８６，５１８３，１９６４；Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１０２，６８６２，１９８０；Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．４６，４７９５，１９８１；およびＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６０，６８７３，１９９５を参照されたい。
【０１３２】
Ｒ３部分に結合したカルボン酸もしくはエステルを含む化合物（Ｊ）をさらに官能基化するには多くの方法がある。例えば、化合物（Ｊ）を対応するアクリル酸誘導体に転換することができる。１つの方法は、先ず（ＲａがＨでないという条件で）化合物（Ｊ）のエステル基を加水分解して対応するカルボン酸を得、このカルボン酸を対応するアルコールに還元し、このアルコールを対応するアルデヒドに酸化し、次いで、ウォズワース（Ｗａｄｓｗｏｒｔｈ）−ホーナー（Ｈｏｒｎｅｒ）−エモンズ（Ｅｍｍｏｎｓ）もしくはウィッティッヒ反応を行って対応するアクリル酸誘導体を形成するものである。また、化合物（Ｊ）は直接その対応するアルコールに変換することができる。別の変形方法は、化合物（Ｊ）を直接その対応するアルデヒドに変換するものである。さらに別の変形方法は、エステル含有化合物（Ｊ）をその対応するカルボン酸に変換し、次いでこれを直接アルデヒドに変換するものである。あるいは、Ｚ−Ｒ３部分の前駆体化合物を官能基化した後に、スキーム１の１，３−二置換−８−非置換キサンチンもしくはスキーム２の１，３−二置換−５，６−ジアミノウラシルにカップリングさせることができる。さらに、本発明の化合物は、固体支持体（例えば、ワング樹脂）上で調製することができる。
【０１３３】
３−［４−（２，６−ジオキソ−１，３−ジプロピル−２，３，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−プリン−８−イル）−ビシクロ［２．２．２］オクト−１−イル］−プロピオン酸（ＢＧ９９２８）の合成は国際公開第ＷＯ０１／３４６１０号に記載されている。
【０１３４】
幾つかの実施形態において、これらの化合物は、アキラル性化合物、光学活性化合物、純粋なジアステレオマー、ジアステレオマー混合物、プロドラッグもしくはこれらの薬理学的に許容可能な塩の形をとることができる。
【０１３５】
本発明の幾つかの実施形態において、式Ｉの化合物は、Ａ２ａアデノシンレセプターもしくはＡ３アデノシンレセプターに対する親和性よりも少なくとも１０倍高いＡ２ｂアデノシンレセプターに対する親和性を示す。別の実施形態において、式Ｉの化合物は、Ａ２ａアデノシンレセプターもしくはＡ３アデノシンレセプターに対する親和性よりも少なくとも５０倍高いＡ２ｂアデノシンレセプターに対する親和性を示す。さらに別の実施形態において、式Ｉの化合物は、Ａ２ａアデノシンレセプターもしくはＡ３アデノシンレセプターに対する親和性よりも少なくとも１００倍高いＡ２ｂアデノシンレセプターに対する親和性を示す。幾つかの実施形態において、Ａ２ｂアデノシンレセプターに対する親和性の他に、式Ｉの化合物は、任意に、Ａ１アデノシンレセプターに対する親和性を示す。
【０１３６】
本発明の幾つかの実施形態において、式Ｉの化合物は、Ａ２ｂアデノシンレセプターに対して５００ｎＭ未満のＫｉ値を示す。本発明の別の実施形態において、式Ｉの化合物は、Ａ２ｂアデノシンレセプターに対して２００ｎＭ未満のＫｉ値を示す。本発明のさらに別の実施形態において、式Ｉの化合物は、Ａ２ｂアデノシンレセプターに対して１０ｎＭ未満のＫｉ値を示す。
【０１３７】
（Ａ２ｂアデノシンレセプター抗体の生成）
また、本発明は、Ａ２ｂアデノシンレセプターに対して惹起される抗体をこのレセプターのアンタゴニストとして使用することを包含する。このような抗体は、Ａ２ｂアデノシンレセプターのリガンド（例えば、アデノシン）結合部位をブロックし、またはリガンド（例えば、アデノシン）がこのレセプターに結合するのを阻止する。
【０１３８】
当業者に周知の種々の技術により、Ａ２ｂアデノシンレセプターを用いて、Ａ２ｂアデノシンレセプターに結合するポリクロナールもしくはモノクロナール抗体を誘導することができる。あるいは、Ａ２ｂアデノシンレセプターの特異的領域に相当するペプチドを合成し、これを用いて、周知の方法に従って免疫学的試薬を作製することができる。
【０１３９】
ヒトＡ２ｂアデノシンレセプターがクローンニングされ、このレセプターをコードしているＤＮＡ配列およびこのレセプターのタンパク質配列が同定されている（Ｒｉｖｋｅｅほか、Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．、６：ｐ１５９８−１６０４（１９９２年）；Ｐｉｅｒｃｅほか、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．、１８７：ｐ８６−９３（１９９２年）；Ｒｅｐｐｅｒｔほか、米国特許第５，５１６，８９４号）。
【０１４０】
本発明のＡ２ｂアデノシンレセプターに対する抗体は、本発明のＡ２ｂアデノシンレセプターに対して免疫学的な反応性を有する免疫グロブリン分子もしくはその一部分である。より好ましくは、本発明の方法に用いる抗体は、Ａ２ｂアデノシンレセプターのリガンド結合ドメインに対して免疫学的反応性を有する。
【０１４１】
Ａ２ｂアデノシンレセプターに対する抗体は、適切な宿主を免疫することにより作製することができる。このような抗体は、ポリクロナール性もしくはモノクロナール性とすることができる。好ましくは、これらはモノクロナール性である。ポリクロナールおよびモノクロナール抗体の作製は、当該分野の通常の技術の範囲内で行うことができる。本発明を実施するのに有用な方法の概説については、例えば、ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（１９８８年），Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｙｅｌｔｏｎ，Ｄ．Ｅ．ほか（１９８１年）；Ａｎｎ．Ｒｅｖ．ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．、５０：ｐ６５７−８０、および毎年改訂されるＡｕｓｕｂｅｌほか（１９８９年）；Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（ニューヨーク（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）、ジョーン・ワイリー・アンド・サンズ社（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ）を参照されたい。Ａ２ｂアデノシンレセプターに対する免疫反応性の決定は、例えば、免疫ブロット・アッセイおよびＥＬＩＳＡが挙げられる、当該分野で周知のいくつかの方法のうちの任意の方法によって行うことができる。
【０１４２】
通常、例えば、ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（１９８８年）の上記文献に記載されている標準的な方法により、１０−８Ｍ−１、または好ましくは１０−９〜１０−１０Ｍ−１以下の親和性を有するモノクロナール抗体を作製する。簡単に言えば、適切な動物を選び、所望の免疫化プロトコルに従う。適切な期間の後、この動物の脾臓を切除し、個々の脾臓細胞を、通常、適当な選択条件下に不死化骨髄腫細胞に融合させる。その後、細胞をクローンごとに分離し、各クローンの上清を、目的とする抗原領域に特異的な適切な抗体の産生について試験する。
【０１４３】
他の好適な技術は、リンパ球の、抗原性Ａ２ｂアデノシンレセプターへのインビトロ（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）の曝露、あるいはファージもしくは同様なベクター中での抗体のライブラリの選択への曝露を包含する。Ｈｕｓｅほか、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４６：ｐ１２７５−８１（１９８９年）を参照されたい。本発明に有用な抗体は、修飾して、または修飾しないで用いることができる。抗原（この場合、Ａ２ｂアデノシンレセプター）および抗体は、検出可能なシグナルを提供する物質を共有もしくは非共有結合により結合させることによって、標識することができる。種々の標識および結合技術が当該分野で公知であり、本発明の実施に用いることができる。好適な標識としては、放射性核種、酵素、基質、補因子、阻害因子、蛍光剤、化学発光剤、磁性粒子などが挙げられる。このような標識の使用について教示している特許としては、米国特許第３，８１７，８３７号、第３，８５０，７５２号、第３，９３９，３５０号、第３，９９６，３４５号、第４，２７７，４３７号、第４，２７５，１４９号および第４，３６６，２４１号が挙げられる。また、組換え免疫グロブリンを生成することもできる（米国特許第４，８１６，５６７号参照）。
【０１４４】
また、本発明の抗体は、異なる種（例えば、マウスとヒト）の免疫グロブリン配列間で、または同じ種の免疫グロブリン軽鎖および重鎖配列の部分間で形成したハイブリッド分子であり得る。抗体は、一本鎖抗体もしくはヒト化抗体であり得る。これは、ハイブリッド・ハイブリドーマの作製、ジスルフィド交換、化学的架橋、２つのモノクロナール抗体間へのペプチドリンカーの付加、特定細胞株内への２セットの免疫グロブリン重鎖および軽鎖の導入などを含む当業者に公知の多くの技術のうちの任意の技術により作製される二機能性抗体のような複数の結合特異性を有する分子であり得る。また、本発明の抗体は、例えば、不死化ヒト細胞、もしくは「ヒト」抗体を産生できるＳＣＩＤ−ｈｕマウスもしくはその他の非ヒト動物、またはクローン化ヒト免疫グロブリン遺伝子の発現によって作製されるようなヒトモノクロナール抗体であり得る。ヒト化抗体の作製については、米国特許第５，７７７，０８５号および第５，７８９，５５４号に教示されている。
【０１４５】
要するに、本発明の教示内容を知った当業者は、所与の抗体分子の安定性もしくは半減期、免疫原性、毒性、親和性または収率を増大もしくは低減させる方法を含む本発明の抗体の生物学的性質を変えるために用いることができる方法、またはこれを特定の用途により適したものにすることができる任意の他の手段でこれを変えるために用いることができる方法を種々利用することができる。
【０１４６】
（Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストの用途）
本発明の方法および組成物は、虚血を発症しているか、虚血の発症が切迫している患者に対し、予防、虚血の限定、もくしは治療を行うのに用いることができる。虚血発症の例としては、（心筋梗塞を含む）冠不全症候群、脳卒中、臓器移植、腎虚血、ショックおよび臓器移植手術が挙げられ得る。幾つかの実施形態において、この虚血の発症は心筋梗塞である。
【０１４７】
本発明の幾つかの実施形態において、Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストは虚血発症の１０日前以内もしくは１０日後以内に投与される。本発明の別の実施形態において、Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストは虚血発症の５日前以内もしくは５日後以内に投与される。本発明のさらに別の実施形態において、Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストは虚血発症の２日前以内もしくは２日後以内に投与される。別の実施形態において、Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストは虚血発症の２日後以内に投与される。
【０１４８】
また、本発明は、治療を必要とする哺乳動物に対して本発明のＡ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストの薬剤として有効な、もしくは予防的に有効な量を投与することにより、Ａ２ｂアデノシンレセプターの賦活化により媒介される疾患もしくは疾病を治療する方法を提供する。
【０１４９】
虚血を発症すると、しばしば患部の組織は壊死に陥る。また、本発明は、虚血を発症しているか、虚血の発症が切迫している哺乳動物を同定し、本発明のＡ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストの治療的もしくは予防的有効量を投与することを含む、虚血発症により生じる組織壊死を限定する方法を提供する。幾つかの実施形態において、Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストは虚血発症の１０日前以内もしくは１０日後以内に投与される。別の実施形態において、Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストは虚血発症の５日前以内もしくは５日後以内に投与される。さらに別の実施形態において、Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストは虚血発症の２日前以内もしくは２日後以内に投与される。
【０１５０】
心筋梗塞とは、酸素供給量と心筋の酸素要求量との不均衡により心筋壊死が進行することであり、心筋壊死を生じる。心筋梗塞は、しばしば冠血管内に血栓形成と共にプラークの断裂が起こることにより心筋の一部に血液供給の急性低下が生じることによって引き起こされる。これにより、血管が部分的もしくは完全に閉塞し、続いて心筋虚血が生じ得る。冠血管が数時間（例えば、４〜６時間）完全に閉塞すると、不可逆的な心筋壊死が起こる。しかしながら、この期間内に再灌流させると、心筋を救い、罹患率および死亡率を低減させることができる。従って、また、本発明は、心筋梗塞を起こしているか、虚血の発症が切迫している哺乳動物を同定し、本発明のＡ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストの治療的もしくは予防的有効量を投与することにより、心筋梗塞発症後の梗塞範囲を限定する方法を提供する。幾つかの実施形態において、本発明のＡ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストは虚血発症の１０日前以内もしくは１０日後以内に投与される。別の実施形態において、Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストは虚血発症の５日前以内もしくは５日後以内に投与される。別の実施形態において、Ａ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストは虚血発症の２日前以内もしくは２日後以内に投与される。
【０１５１】
（薬学的組成物）
アデノシンＡ２ｂレセプターアンタゴニストは、ヒトを含む動物への投与用の薬学的組成物に製剤化され得る。この薬学的組成物は、好ましくは、虚血再灌流障害の治療、限定もしくは予防に有効な量のＡ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニスト、および薬学的に受容可能なキャリアを含む。
【０１５２】
この薬学的組成物に有用な薬学的に受容可能なキャリアとしては、例えば、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質、リン酸塩などの緩衝物質、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、植物性飽和脂肪酸の部分グリセリド混合物（ｐａｒｔｉａｌ  ｇｌｙｃｅｒｉｄｅ  ｍｉｘｔｕｒｅ）、水、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩などの塩もしくは電解質、コロイダル・シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂が挙げられる。
【０１５３】
本発明の組成物は、非経口的に、経口的に、吸入スプレーにより、局所的に、直腸内に、鼻腔内に、口腔内に、膣内に、もしくは移植レザーバを介して投与され得る。本明細書に用いている「非経口的」という用語には、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑液包内、胸骨内、包膜内、肝内、病巣内および頭蓋内への注射もしくは注入法が含まれる。好ましくは、本組成物は、経口、腹腔内もしくは静脈内に投与される。
【０１５４】
本発明の組成物の滅菌注射剤型は、水性もしくは油性懸濁剤であり得る。これらの懸濁剤は、適切な分散もしくは湿潤剤および懸濁化剤を用いて、当該分野で公知の方法により製剤化することができる。また、滅菌注射用製剤は、毒性のない非経口用として許容可能な希釈液もしくは溶剤（例えば１，３−ブタンジオール溶液における滅菌注射用液剤もしくは懸濁剤）であり得る。使用することができる許容可能なビヒクルもしくは溶剤には、水、リンゲル液および等張塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌不揮発性油が溶剤もしくは懸濁化培地として従来から用いられている。このために、合成モノ−もしくはジ−グリセリドなどの無刺激不揮発性油を用いることができる。オレイン酸およびそのグリセリド誘導体などの脂肪酸は、特にポリオキシエチル化されたタイプのオリーブ油、ヒマシ油などの薬学的に受容可能な天然油と同様に、注射剤の調製に有用である。また、これらの油性液剤もしくは懸濁剤は、乳剤および懸濁剤を含む薬学的に受容可能な剤型の製剤化に一般に用いられているカルボキシメチルセルロースもしくは類似の分散剤などの長鎖アルコール希釈剤もしくは分散剤を含み得る。また、薬学的に受容可能な固形剤、液剤その他の剤型の製造に一般に用いられているツイーン（Ｔｗｅｅｎ）、スパン（Ｓｐａｎ）その他の乳化剤もしくはバイオアベイラビリティ向上剤のような他の通常用いられている界面活性剤も製剤化のために使用することができる。
【０１５５】
非経口用処方は、単回ボーラス注射、注入、もしくは最大ボーラス（ｌｏａｄｉｎｇ  ｂｏｌｕｓ）注射に続く維持量投与とすることができる。こうした組成物は、１日１回、もしくは「随時」の形で投与されることができる。
【０１５６】
本発明の薬学的組成物は、カプセル剤、錠剤、水性懸濁剤、液剤を含む経口用として許容可能な任意の剤型で経口投与されることができる。経口用の錠剤の場合、一般に用いられているキャリアとしては、乳糖およびコーンスターチが挙げられる。また通常、ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤も添加される。カプセル剤として経口投与される場合に有用な希釈剤としては、乳糖および乾燥コーンスターチが挙げられる。経口用に水性懸濁剤が必要とされる場合、活性成分は乳化剤および懸濁化剤と混合する。また、必要に応じて、特定の甘味剤、矯味矯臭剤もしくは着色剤を加えることもできる。
【０１５７】
また、本発明の薬学的組成物は、直腸内投与では坐剤として投与されることができる。これは、室温で固体であるが直腸温では液体であるため直腸で融解して薬物を放出する刺激性のない適切な賦形剤と、薬剤を混和することによって調製することができる。このような物質としては、カカオ脂、蜜蝋、およびポリエチレングリコールが挙げられる。
【０１５８】
また、本発明の薬学的組成物は、鼻腔内エアロゾルもしくは吸入によって投与できる。このような組成物は、医薬製剤分野で周知の方法により調製し、ベンジルアルコールその他の適切な保存剤、バイオアベイラビリティを向上させる吸収促進剤、過フッ化炭化水素および／または他の通常の可溶化剤もしくは分散剤を用い、生理食塩水の溶液として調製できる。
【０１５９】
キャリア物質と混合して単回投与形態を産生することができるＡ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストの量は、治療される宿主および特定の投与様式により異なる。こうした組成物は、この組成物の投与を受ける患者に対してＡ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニストが０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重の用量で投与されるように、製剤化できる。本発明の幾つかの実施形態において、この投与量は０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重である。この組成物は、単回投与もしくは複数回投与として、または所定の期間注入することによって投与され得る。
【０１６０】
特定の患者に対する具体的な投与量および治療計画は、種々の要因、例えば、特定のＡ２ｂアデノシンレセプターアンタゴニスト、患者の年齢、体重、全般的健康、性別および食習慣、投与の時間帯、排泄速度、併用薬剤ならびに治療すべき特定の疾患の重症度に依存する。医療介助者によるこのような要因の判定は、当該分野の通常の技術の範囲内にある。また、アンタゴニストの量は、治療対象の個々の患者、投与経路、製剤の種類、使用化合物の特徴、疾患の重症度、および求められる効果によって依存する。アンタゴニストの量は、当該分野で周知の薬理学的および薬動力学的原理によって決定できる。
【０１６１】
いくつかの実施形態によって、本発明は、上記薬学的組成物のうちの１種を患者に投与する手順を含む、虚血再灌流障害を予防、限定もしくは治療する方法を提供する。
【０１６２】
本明細書に記載した本発明についてより十分な理解が得られるように、以下の実施例を記載する。以下の実施例が単に例示を目的としたものであり、本発明を限定するものと決して解釈されるべきではないことは、理解されよう。
【実施例】
【０１６３】
（１．動物モデルおよび基本的手順）
心拍数、血圧、左心室内圧および局所心筋血流（放射性マイクロスフェア法）を測定する研究を試験用機器を装備した開胸バルビタール麻酔イヌを用いて実施した。左冠動脈の前室間動脈の近位部周囲に機械的オクルダーを設置して、虚血および再灌流を行った。この実験の最後には、梗塞範囲を組織化学的染色（パテント・ブルー色素およびトリフェニルテトラゾリウム）によって測定し、リスク領域のパーセンテージもしくは左心室全体のパーセンテージとして表した。
【０１６４】
（２．前処置の実験プロトコル）
前処置プロトコル（図１、プロトコルＩ参照）では、イヌの冠動脈を６０分間閉塞した後、３時間の再灌流を行い、その後心臓を摘出して梗塞範囲を評価した。イヌは、ビヒクル投与、ＣＰＸ（８−シクロペンチル−１，３−ジプロピル−３，７−ジヒドロ−プリン−２，６−ジオン）投与、ＢＧ９７１９（８−（２Ｓ−５，６−エキソ−エポキシ−エンド−ノルボルン−２−イル）−１，３−ジプロピル−３，７−ジヒドロ−プリン−２，６−ジオン）投与、もしくはＢＧ９９２８（３−［４−（２，６−ジオキソ−１，３−ジプロピル−２，３，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−プリン−８−イル）−ビシクロ［２．２．２］オクト−１−イル］−プロピオン酸）投与の４群に無作為に割り付け、投与後１０分に上記閉塞を開始した。アンタゴニストは全て、１ｍｇ／ｋｇの用量をボーラスで静注した後、再灌流開始直前まで１０μｇ／ｋｇ／分の注入を続けた（計７０分）。
【０１６５】
全身血液動態（心拍数および血圧）、最大左心室ｄＰ／ｄｔ、もしくは局所心筋血流に４群間で有意差は認められず（表１、４および５参照）、血液動態の変量はこれらのアンタゴニストにより影響を受けないことが明らかとなった。また、冠動脈閉塞の間に虚血となった左心室部分にも差は認められなかった（リスク領域範囲；図１Ａ）。しかしながら、リスク領域のパーセンテージ（図１Ｂ）もしくは左心室のパーセンテージ（図１Ｃ）のいずれかとして表した梗塞範囲は、ＣＰＸ処置（５１％減少）もしくはＢＧ９９２８処置（４９％減少）の２群のイヌでは有意に小さかった。ＢＧ９９２８処置群のイヌの梗塞範囲は、対照群と同等であった。リスク領域のパーセンテージとして表した梗塞範囲を経壁副行（ｔｒａｎｓｍｕｒａｌ  ｃｏｌｌａｔｅｒａｌ）血流に対してプロットすると（図１Ｄ）、線形回帰分析によって当てはめることができる反比例関係にあることが分かった。ＣＰＸ処置およびＢＧ９９２８処置群では、この関係は、対照群に比し、下方にシフトしたことから、これらの２群の梗塞範囲はどのような所定の程度の副行血流においてもより小さいことが明らかとなった。梗塞範囲と副行血流との関係は、対照群とＢＧ９７１９処置群との間で同様であった。従って、梗塞の前に（ＢＧ９７１９ではなく）ＣＰＸもしくはＢＧ９９２８を処置すると、梗塞範囲は有意に減少し、これは全身血液動態もしくは局所副行血流の変化に応じたものではなかった。
【０１６６】
【表１】
2005533054.tif 000016
【０１６７】
（３．プレコンディショニング実験プロトコル）
プレコンディショニング・プロトコル（図２、プロトコルＩＩ参照）では、全てのイヌの冠動脈を６０分間閉塞した後、３時間の再灌流を行った。プレコンディショニングは、上記６０分間の閉塞の１０分前に５分間閉塞／５分間再灌流の４サイクルを実施することにより誘導した。イヌは、ビヒクル投与、ＣＰＸ投与、ＢＧ９７１９投与、もしくはＢＧ９９２８投与の４群に無作為に割り付け、投与後１０分に最初のプレコンディショニング閉塞を開始した。これらのアンタゴニストは、１ｍｇ／ｋｇの用量をボーラスで静注した後、上記長時間閉塞の解放時まで１０μｇ／ｋｇ／分の注入を続けた（計１１５分）。
【０１６８】
前処置群の場合と同様に、プレコンディショニング・プロトコルの４群間で全身血液動態、局所心筋血流もしくはリスク領域範囲に有意差は認められなかった（表２、４および５、図２Ａ参照）。６０分間の閉塞の前に５分間閉塞／５分間再灌流の４サイクルによるプレコンディショニングを行うことによって、梗塞範囲は、プレコンディショニングを実施しなかったプロトコルＩの対照群に比し、著しく減少（約６５％減少）した（図２Ｂおよび２Ｃ）。また、アデノシンレセプターアンタゴニスト処置群のイヌの（リスク領域もしくは左心室のいずれかのパーセンテージで表した）平均梗塞範囲は、プレコンディショニングを実施しなかった対照群に比し、有意に小さく、プレコンディショニング対照群と同等もしくはわずかに小さい程度であった（図２Ｂおよび２Ｃ）。プレコンディショニングにより、梗塞範囲と副行血流との関係は、プレコンディショニングを実施しなかった対照群に比し、下方にシフトした（図２Ｄ）。この関係は、ＣＰＸ処置もしくはＢＧ９９２８処置の群のイヌではさらに下方にシフトしたが、ＢＧ９７１９ではこれは認められなかった。以上の結果から、ＣＰＸ、ＢＧ９７１９もしくはＢＧ９９２８を処置しても、閉塞／再灌流の複数サイクルにより誘導される虚血プレコンディショニングの保護効果を阻害しないことが明らかになった。また、これらの結果から、（ＢＧ９７１９ではなく）ＣＰＸもしくはＢＧ９９２８を処置すると、虚血プレコンディショニングの保護効果に付加されることが示唆された。
【０１６９】
【表２】
2005533054.tif 000017
【０１７０】
（４．再灌流実験プロトコル）
再灌流実験プロトコル（図３、プロトコルＩＩＩ参照）では、イヌの冠動脈を６０分間閉塞した後、３時間の再灌流を行った。イヌは、ビヒクル、ＣＰＸ、ＢＧ９７１９、もしくはＢＧ９９２８を与える４群に無作為に割り付けて、閉塞解放の１０分前に投与を始めた。これらのアンタゴニストを、１ｍｇ／ｋｇの用量をボーラスで静注した後、１０μｇ／ｋｇ／分の注入を１時間行った。
【０１７１】
この実験プロトコルのイヌ４群間で血液動態変量、局所心筋血流もしくはリスク領域範囲に有意差は認められなかった（表３〜５、図３Ａ参照）。リスク領域のパーセンテージとして表した梗塞範囲は、再灌流の初期相の間にＣＰＸもしくはＢＧ９９２８を投与することにより、有意に減少した（図３Ｂ）。しかしながら、ＢＧ９７１９投与では、保護効果は得られなかった。ＣＰＸもしくはＢＧ９９２８を処置したイヌの２群の梗塞範囲と副行血流との関係は、対照群に比し、下方にシフトした（図３Ｃ）。このプロトコルにおいてＣＰＸおよびＢＧ９９２８によりもたらされた梗塞範囲は、これらが虚血の前に投与されたプロトコルＩに比し、減少の程度が少なく（それぞれ、４２％および４４％）、データを左心室全体のパーセンテージで表した場合（図３Ｄ）、検討した動物の例数が少なかったためか、梗塞範囲の有意な減少は認められなかった。以上のデータから、（ＢＧ９７１９ではなく）ＣＰＸおよびＢＧ９９２８は、再灌流時に投与すると、梗塞範囲を減少させることが明らかとなった。
【０１７２】
【表３】
2005533054.tif 000018
【０１７３】
【表４】
2005533054.tif 000019
【０１７４】
【表５】
2005533054.tif 000020
【０１７５】
（表６）
【０１７６】
【表６】
2005533054.tif 000021
【０１７７】
（５．膜の調製）
ヒトＡ２ｂアデノシンレセプターを発現しているＨＥＫ２９３（ヒト胎児（Ｅｍｂｒｏｙｎｉｃ）腎）の膜はリセプター・バイオロジー社（Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ）から購入し、ヒトＡ２ａレセプターを発現しているＨＥＫ２９３細胞の膜はパーキンエルマー社（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）（ボストン（Ｂｏｓｔｏｎ）、ＭＡ）から購入し、ヒトＡ１レセプターを発現しているＣＨＯ−Ｋ１細胞膜およびヒトＡ３レセプターを発現しているＨＥＫ２９３細胞膜は、安定的にトランスフェクションした自家製の当該細胞から調製した。
【０１７８】
（６．放射性リガンド結合アッセイ）
膜（膜タンパク質として４０〜７０μｇ）、放射性リガンドおよび種々の濃度の競合リガンドを、０．１ｍｌの緩衝液ＨＥプラス２単位／ｍＬのアデノシン・デアミナーゼ中、２１℃で２．５時間インキュベートし、これを３回繰り返した。競合的結合アッセイに用いた放射性リガンドは、Ａ１およびＡ２ｂアデノシンレセプター用の［３Ｈ］−８−シクロペンチル−１，３−ジプロピルキサンチン（ｄｉｐｒｏｐｙｘａｎｔｈｉｎｅ）（［３Ｈ］−ＤＰＣＰＸ）（エヌ・イー・エヌ社（ＮＥＮ）、ボストン（Ｂｏｓｔｏｎ）、ＭＡ）、Ａ２ａアデノシンレセプター用の［３Ｈ］−４−（２−［７−アミノ−２−（フリル）（１，２，４）トリアゾール（２，３−ａ）（１，３，５）トリアジン−５−イルアミノエチル（ｙｌａｍｉｎｏｅｔｈｙｌｙ）］フェノール（［３Ｈ］ＺＭ２４１３８５）（トクリス社（Ｔｏｃｒｉｓ）、ブリストル（Ｂｒｉｓｔｏｌ）、ＵＫ）、ならびにＡ３アデノシンレセプター用の［１２５ヨード］−標識Ｎ６−（４−アミノベンジル）−９−（５−（メチルカルボニル）−β−Ｄ−リボフラノシル）アデニン（［１２５Ｉ］ＡＢ−ＭＥＣＡ）もしくは［３Ｈ］−Ｒ−Ｎ６−フェニルイソプロピルアデノシン（［３Ｈ］−Ｒ−ＰＩＡ）（両者共、エヌ・イー・エヌ社（ＮＥＮ）、ボストン（Ｂｏｓｔｏｎ）、ＭＡ）であった。非特異的な結合は、Ａ１およびＡ２ｂレセプターに対しては１０μＭの５’Ｎ−エチルカルボキサミドアデノシン（ＮＥＣＡ、ＲＢＩ−シグマ社（Ｓｉｇｍａ）、ナティック（Ｎａｔｉｃｋ）、ＭＡ）の存在下、もしくはＡ２ａレセプターに対しては１０μＭのキサンチンアミノコンジナー（ＸＡＣ、ＲＢＩ−シグマ社（Ｓｉｇｍａ）、ナティック（Ｎａｔｉｃｋ）、ＭＡ）の存在下に測定した。結合アッセイは、ＢＲＡＮＤＥＬセル・ハーベスター（ゲイサーズバーグ（Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ）、ＭＤ）を用い、Ｗｈａｔｍａｎ  ＧＦ／Ｃガラスファイバー・フィルターによりろ過して終結させた。このフィルターは、３〜４ｍＬのｐＨ７．４氷冷１０ｍＭトリス−ＨＣｌおよび４℃の５ｍＭ塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ２）で３回洗浄し、Ｗａｌｌａｃ  β−カウンタ（パーキンエルマー社（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）、ボストン（Ｂｏｓｔｏｎ）、ＭＡ）でカウントした。
【０１７９】
（表７：放射性リガンド競合的結合アッセイにおける１０μＭアンタゴニストのＫＩ値（ｎＭ）もしくはパーセント（％）阻害）
【０１８０】
【表７】
2005533054.tif 000022
【０１８１】
組換えヒトＡ１アデノシンレセプターおよび放射性リガンド［３Ｈ］−ＤＰＣＰＸを用いた競合的結合アッセイにおいて、ＢＧ９９２８、ＤＰＣＰＸおよびＢＧ９７１７のＫＩ値は、それぞれ１２．２ｎＭ、５．３ｎＭおよび１０．３ｎＭであった（表７、図４参照）。組換えヒトＡ２ａアデノシンレセプターおよび放射性リガンド［３Ｈ］−ＺＭ２４１３８５を用いた競合的結合アッセイにおいて、ＢＧ９９２８、ＤＰＣＰＸおよびＢＧ９７１７のＫＩ値は、それぞれ４０５９ｎＭ、１５６ｎＭおよび９１５２ｎＭであった（表７、図５参照）。組換えヒトＡ２ｂアデノシンレセプターおよび放射性リガンド［３Ｈ］−ＺＭ２４１３８５を用いた競合的結合アッセイにおいて、ＢＧ９９２８、ＤＰＣＰＸおよびＢＧ９７１７のＫＩ値は、それぞれ８８．５３±２１．０３ｎＭ（Ｎ＝３）、５６ｎＭおよび８５３±２７０ｎＭ（Ｎ＝３）であった（表７、図６参照）。
【０１８２】
組換えヒトＡ３アデノシンレセプター膜への［１２５Ｉ］−ＡＢ−ＭＥＣＡの結合に対する１０μＭのＢＧ９９２８の作用を調べるために、ワンポイント結合アッセイを行った。組換えヒトＡ３アデノシンレセプターを用いたワンポイント結合アッセイでは、１０μＭのＢＧ９９２８により結果として［３Ｈ］−ＺＭ２４１３８５の結合は３０％阻害された（図７）。
【０１８３】
（７．放射性リガンド結合アッセイ）
膜（５０μｇ膜タンパク質）、放射性リガンドおよび種々の濃度の競合リガンドを、０．１ｍＬの緩衝液ＨＥプラス２単位／ｍＬのアデノシン・デアミナーゼ中、２１℃で２時間インキュベートし、これを３回繰り返した。ヒトＡ２Ｂアデノシンレセプターに対する競合的結合アッセイに用いた放射性リガンドは、［３Ｈ］−８−シクロペンチル−１，３−ジプロピルキサンチン（［３Ｈ］−ＤＰＣＰＸ、３０〜４０ｎＭ）（エヌ・イー・エヌ社（ＮＥＮ）、ボストン（Ｂｏｓｔｏｎ）、ＭＡ）とした。非特異的な結合は、１０μＭの５’Ｎ−エチルカルボキサミドアデノシン（ＮＥＣＡ、ＲＢＩ−シグマ社（Ｓｉｇｍａ）、ナティック（Ｎａｔｉｃｋ）、ＭＡ）の存在下に測定した。結合アッセイは、ＢＲＡＮＤＥＬセル・ハーベスター（ゲイサーズバーグ（Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ）、ＭＤ）を用い、Ｗｈａｔｍａｎ  ＧＦ／Ｃガラスファイバー・フィルターによりろ過して終結させた。このフィルターは、３〜４ｍＬのｐＨ７．４氷冷１０ｍＭトリス−ＨＣｌおよび４℃の５ｍＭ塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ２）で３回洗浄し、Ｗａｌｌａｃ  β−カウンタ（パーキンエルマー社（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）、ボストン（Ｂｏｓｔｏｎ）、ＭＡ）でカウントした。
【０１８４】
競合的結合データは、単一部位結合モデル（ｓｉｎｇｌｅ  ｓｉｔｅ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｍｏｄｅｌ）に当てはめ、Ｐｒｉｚｍ  ＧｒａｐｈＰａｄを用いてプロットした。ＩＣ５０値からＫＩ値を求めるために、Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆの式ＫＩ＝ＩＣ５０／（１＋［Ｉ］／ＫＤ）を用いた。式中、ＫＩは競合リガンドの親和性定数、［Ｉ］は遊離放射性リガンドの濃度、およびＫＤは放射性リガンドの親和性定数である（Ｃｈｅｎｇ、Ｐｒｕｓｏｆｆ  １９７３年）。本発明のいくつかの化合物のＫＩ値を表８に示した。
【０１８５】
（表８：放射性リガンド競合的結合アッセイにおけるＫＩ（ｎＭ））
【０１８６】
【表８−１】
2005533054.tif 000023
【０１８７】
【表８−２】
2005533054.tif 000024
【０１８８】
【表８−３】
2005533054.tif 000025
【０１８９】
（８．蛍光イメージングプレートリーダー（ＦＬＩＰＲ）による機能アッセイ）
ヒトおよびラットＡ２ｂアデノシンレセプターを安定的に発現を示すＨＥＫ２９３細胞ならびに組換えヒトＡ１アデノシンレセプターを安定的に発現を示すＣＨＯ−Ｋ１細胞を用いて、カルシウム測定のための蛍光イメージングプレートリーダー（ＦＬＩＰＲ）アッセイを実施した。壁が黒く、底が透明な９６ウェル組織培養プレート中に細胞を接種し、８０〜９０％の集密的単層を形成するまで培養した。培地を除去しないで、（モレキュラー・デバイシズ社（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）から購入したカルシウム・アッセイキットからの）等量の色素を加えた。細胞プレートを３７℃で１時間インキュベートした後、ＦＬＩＰＲユニット（モレキュラー・デバイシズ社）に移した。
【０１９０】
組換えヒトＡ１アデノシンレセプターについてアッセイを行うために、ＣＨＯ−Ｋ１細胞を漸増用量のアゴニスト（Ｎ６−シクロペンチルアデノシン、ＣＰＡ）と共にインキュベートし、最大反応の５０％を生じるアゴニストの濃度を求めた。次いで、この濃度のアゴニスト（２００ｎＭ  ＣＰＡ）を漸増濃度（１０−１２Ｍ〜１０−５Ｍ）のアンタゴニストＢＧ９９２８と共にインキュベートした。組換えヒトおよびラットＡ２ｂアデノシンレセプターについてアッセイを行うために、ＨＥＫ−２９３細胞を漸増用量のアゴニスト（５’Ｎ−エチルカルボキサミドアデノシン、ＮＥＣＡ）と共にインキュベートし、最大反応の５０％を生じるアゴニスト（ａｇｏｎｓｔ）の濃度を求めた。次いで、この濃度のアゴニスト（ヒトＡ２ｂレセプターの場合の５μＭ  ＮＥＣＡ）および種々の濃度（ラットＡ２ｂレセプターの場合）を漸増濃度のアンタゴニストＢＧ９９２８（ヒトＡ２ｂレセプターでは１０−１２Ｍ〜５×１０−６Ｍ、ラットＡ２ｂレセプターでは１０、１１００もしくは３００ｎＭ）と共にインキュベートした。
【０１９１】
ＦＬＩＰＲには、アルゴンレーザ励起源、９６ウェル分注器、およびＣＣＤ（電荷結合素子）イメージングカメラを利用する探知システムが組み込まれている。９６ウェルからの蛍光放射は、それぞれ４８８および５２０ｎｍの励起波長および放射波長において同時にモニターした。蛍光データは、９６ウェルプレートへの化合物の同時かつ迅速な添加の前後において１秒間隔で収集した。結果は相対蛍光単位（ＲＦＵ）で示された。
【０１９２】
ＣＨＯ−Ｋ１細胞において安定的に発現されている組換えヒトＡ１アデノシンレセプターを用い、ＢＧ９９２８に対するＦＬＩＰＲ機能アッセイを実施した。零位法（ｎｕｌｌ  ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ）による組換えヒトＡ１アデノシンレセプターに対するＢＧ９９２８およびＢＧ９７１９のアンタゴニスト解離定数（ＫＢ値）は、それぞれ０．６０ｎＭおよび０．４６ｎＭであった（表９および図８参照）。
【０１９３】
ＨＥＫ２９３細胞において安定的に発現されている組換えヒトＡ２ｂアデノシンレセプターを用い、ＢＧ９９２８に対するＦＬＩＰＲ機能アッセイを実施した。零位法による組換えヒトＡ２ｂアデノシンレセプターに対するＢＧ９９２８、ＢＧ９７１９およびＤＰＣＰＸのアンタゴニストＫＢ値は、それぞれ３．３６ｎＭ、１８２ｎＭおよび２３．６ｎＭであった（表９および図９参照）。
【０１９４】
ＨＥＫ２９３細胞において安定的に発現されている組換えラットＡ２ｂアデノシンレセプターを用い、ＢＧ９９２８に対するＦＬＩＰＲ機能アッセイを実施した。零位法によるＢＧ９９２８のアンタゴニストＫＢ値は２５７ｎＭであり、シルド（Ｓｃｈｉｌｄ）解析によるｐＡ２値は６．５９であった（表９および図１０参照）。
【０１９５】
（表９：ＦＬＩＰＲ機能アッセイにおけるアンタゴニストのＫＢ（ｎＭ）値のまとめ（ヒトレセプターサブタイプ））
【０１９６】
【表９】
2005533054.tif 000026
【０１９７】
（９：データ解析）
データを、平均値の平均±標準誤差（ＳＥＭ）もしくは標準偏差（ＳＤ）として示した。飽和データは、マルカート（Ｍａｒｑｕａｒｄｔ）の非線形最小二乗法を用いて解析し、Ｐｒｉｚｍ  ＧｒａｐｈＰａｄによりプロットした。競合的結合データは、単一部位結合モデル（ｓｉｎｇｌｅ  ｓｉｔｅ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｍｏｄｅｌ）に当てはめ、Ｐｒｉｚｍ  ＧｒａｐｈＰａｄを用いてプロットした。ＩＣ５０値からＫＩ値を求めるために、Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆの式ＫＩ＝ＩＣ５０／（１＋［Ｉ］／ＫＤ）を用いた。式中、ＫＩは競合リガンドの親和性定数であり、［Ｉ］は遊離放射性リガンドの濃度であり、そしてＫＤは放射性リガンドの親和性定数である（Ｃｈｅｎｇ、Ｐｒｕｓｏｆｆ  １９７３年）。
【０１９８】
ＦＬＩＰＲ機能アッセイでは、アゴニストの濃度−反応曲線を、Ｐｒｉｚｍ  ＧｒａｐｈＰａｄの非線形回帰プログラムを用いて、ロジスティック方程式に当てはめた。アンタゴニストの解離定数（ＫＢ）は、ＬａｚａｒｅｎｏおよびＲｏｂｅｒｔｓ（１９８７年）によって開発された零位法により評価した。シルド解析を実施して、化合物のアンタゴニストとしての効力（ｐＡ２）を評価した。ｐＡ２は、反応を最大反応の５０％と定義する濃度−反応曲線において２倍のシフトを生じ得るアンタゴニストの濃度の対数に負号をつけたものである。
【図面の簡単な説明】
【０１９９】
【図１】図１は、プロトコルＩによる心筋梗塞の範囲に関するデータを示す（実施例２を参照のこと）。パネルＡは、４実験群においてリスク領域の範囲を左心室のパーセンテージで表したものを示す。パネルＢは、梗塞範囲をリスク領域のパーセンテージで表したものを示す。パネルＣは、梗塞範囲を左心室のパーセンテージで表したものを示す。パネルＤは、リスク領域のパーセンテージで表した梗塞範囲および冠動脈閉塞の３０分後に測定した経壁副行（ｔｒａｎｓｍｕｒａｌ  ｃｏｌｌａｔｅｒａｌ）血流値をプロットしたものを示す。
【図２】図２は、プロトコルＩＩによる心筋梗塞の範囲に関するデータを示す（実施例３を参照のこと）。パネルＡは、４実験群においてリスク領域の範囲を左心室のパーセンテージで表したものを示す。比較のために、プロトコルＩによる対照群も含めた。パネルＢは、梗塞範囲をリスク領域のパーセンテージで表したものを示す。パネルＣは、梗塞範囲を左心室のパーセンテージで表したものを示す。パネルＤは、リスク領域のパーセンテージで表した梗塞範囲および冠動脈閉塞の３０分後に測定した経壁副行血流値をプロットしたものを示す。
【図３】図３は、プロトコルＩＩＩによる心筋梗塞の範囲に関するデータを示す（実施例４を参照のこと）。パネルＡは、４実験群においてリスク領域の範囲を左心室のパーセンテージで表したものを示す。パネルＢは、梗塞範囲をリスク領域のパーセンテージで表したものを示す。パネルＣは、梗塞範囲を左心室のパーセンテージで表したものを示す。パネルＤは、リスク領域のパーセンテージで表した梗塞範囲および冠動脈閉塞の３０分後に測定した経壁副行血流値をプロットしたものを示す。
【図４】図４は、組換えヒトＡ１アデノシンレセプターに対するＢＧ９９２８の競合的結合を示す。ヒトＡ１アデノシンレセプターを安定的に発現するＨＥＫ２９３細胞から調製した膜（膜タンパク質として５０μｇ）、０．９２ｎＭの放射性リガンド［３Ｈ]−ＤＰＣＰＸ、および種々の濃度のＢＧ９９２８を、２単位／ｍＬのアデノシンデアミナーゼを添加した０．１ｍｌの緩衝液ＨＥプラス中、２１℃で２．５時間、３連でインキュベートした。非特異的な結合の測定は、１０μＭのＮＥＣＡの存在下で行った。結合アッセイは、ろ過することによって終結させた。（Ｎ＝１）。
【図５】図５は、組換えヒトＡ２ａアデノシンレセプターに対するＢＧ９９２８の競合的結合を示す。ヒトＡ２ａアデノシンレセプターを安定的に発現するＨＥＫ２９３細胞から調製した膜（膜タンパク質として５０μｇ）、１．１６ｎＭの放射性リガンド［３Ｈ]−ＺＭ２４１３８５、および種々の濃度のＢＧ９９２８を、２単位／ｍＬのアデノシンデアミナーゼを添加した０．１ｍｌの緩衝液ＨＥ中、２１℃で２．５時間、３連でインキュベートした。非特異的な結合の測定は、１０μＭのＸＡＣの存在下で行った。結合アッセイは、ろ過することによって終結させた。（Ｎ＝１）。
【図６】図６は、組換えヒトＡ２ｂアデノシンレセプターに対するＢＧ９９２８の競合的結合を示す。組換えヒトＡ２ｂアデノシンレセプターを安定的に発現するＨＥＫ２９３細胞から調製した膜（膜タンパク質として４０〜７０μｇ）、３０〜４０ｎＭの放射性リガンド［３Ｈ]−ＺＭ２４１３８５、および種々の濃度のＢＧ９９２８を、２単位／ｍＬのアデノシンデアミナーゼを添加した０．１ｍｌの緩衝液ＨＥ中、２１℃で２．５時間、３連でインキュベートした。非特異的な結合の測定は、１０μＭのＮＥＣＡの存在下に行った。結合アッセイは、ろ過することによって終結させた。（Ｎ＝３）。
【図７】図７は、組換えヒトＡ３アデノシンレセプターに対するＢＧ９９２８の一点結合を示す。組換えヒトＡ３アデノシンレセプターを安定的に発現するＨＥＫ２９３細胞から調製した膜（膜タンパク質として５０μｇ）および０．１２ｎＭの放射性リガンド［１２５Ｉ]−ＡＢ−ＭＥＣＡの両者のみ、またはこれに１０μＭのＩＢ−ＭＥＣＡもしくは１０μＭのＢＧ９９２８を加えて、２単位／ｍＬのアデノシンデアミナーゼを添加した０．１ｍｌの緩衝液ＨＥ中、２１℃で２．５時間、３連でインキュベートした。結合アッセイは、ろ過することによって終結させた。（Ｎ＝２）。
【図８】図８は、ＣＨＯ−Ｋ１細胞において安定的に発現された組換えヒトＡ１アデノシンレセプターを用いたＢＧ９９２８のＦＬＩＰＲアッセイの結果を示す。組換えヒトＡ１アデノシンレセプターを発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞の漸増濃度のアゴニスト（ＣＰＡ）に対する反応を測定したＦＬＩＰＲアッセイ（上段グラフ）、および零位法を用いた一定アゴニスト濃度（２００ｎＭ  ＣＰＡ）におけるアンタゴニストＢＧ９９２８のＩＣ５０（５０％の反応が得られる濃度）、次いでＫＢ値を求めるためのＦＬＩＰＲアッセイ（下段グラフ）。
【図９】図９は、ＨＥＫ−２９３細胞において安定的に発現された組換えヒトＡ２ｂアデノシンレセプターを用いたＢＧ９９２８のＦＬＩＰＲアッセイの結果を示す。組換えヒトＡ２ｂアデノシンレセプターを安定的に発現するＨＥＫ−２９３細胞の漸増濃度のアゴニスト（ＮＥＣＡ）に対する反応を測定したＦＬＩＰＲアッセイ（上段グラフ）、および零位法を用いた一定アゴニスト濃度（５μＭ  ＮＥＣＡ）におけるアンタゴニストＢＧ９９２８のＩＣ５０（５０％の反応が得られる濃度）、次いでＫＢ値を求めるためのＦＬＩＰＲアッセイ（下段グラフ）。
【図１０】図１０は、ＨＥＫ−２９３細胞において安定的に発現された組換えヒトＡ２ｂアデノシンレセプターを用いたＢＧ９９２８のＦＬＩＰＲアッセイの結果を示す。漸増濃度のアゴニスト（ＮＥＣＡ）の存在下、ラットＡ２ｂアデノシンレセプターを発現するＨＥＫ−２９３細胞を用いて１０、１００および３００ｎＭのＢＧ９９２８により観察されるコントロール反応の割合を測定したＦＬＩＰＲアッセイの結果（上段グラフ）。下段のグラフは、上段グラフに示したデータをシルド（Ｓｃｈｉｌｄ）解析した結果である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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