(57)【要約】本発明は痛みの処置に有用な化合物および医薬組成物に関する。本発明はまた、哺乳動物における痛みの処置または軽減方法に関し、この方法は痛みを感じている哺乳動物に対し痛み軽減量の一般式（Ｉ）または（ＩＩ）で表される化合物を投与することを包含する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物における痛みを処置または軽減する方法であって、痛みを受けている哺乳動物に対し痛み軽減量の一般式Ｉ：
2005500305.tif 000009
（式中、
Ｒ1は１〜１８個の炭素鎖長を有する飽和または不飽和鎖であり；および
Ｒ2は１〜１８個の炭素鎖長を有する飽和または不飽和鎖である；
ただし、Ｒ1およびＲ2は両方ともにプロピルであることはない）
で表わされる化合物およびその医薬として許容される塩を投与することを包含する、上記方法。
【請求項２】
痛みを受けている哺乳動物がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
痛みが慢性の痛み以外である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
痛みが急性の痛みである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
急性の痛みが、手術後の痛み、分娩の痛み、歯痛、火傷により誘発される痛み、筋肉痛および心筋梗塞に付随する痛みから選択される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
痛みが神経障害性痛みである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
神経障害性痛みが、ヘルペス後の神経痛、糖尿病性神経障害、三叉神経神経痛および神経虚血性損傷、神経圧迫、脱髄および切断による痛みから選択される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
痛みが病的状態または病気状態に付随する痛みである、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
病的状態または病気状態が、発作、脊髄損傷、末梢神経損傷、炎症状態、癌、三叉神経神経痛、関節炎、鎌状赤血球血症、血友病、糖尿病、帯状疱疹、ＨＩＶ感染および頭痛からなる群から選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
一般式Ｉで表わされる化合物が、
２−ペンチルヘプタン酸；
２−プロピルドデカン酸；
２−プロピルノナン酸；および
２−ヘプチルノナン酸；
からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
痛み軽減量の一般式Ｉで表わされる化合物を、痛みの発現に先行して投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
一般式Ｉで表わされる化合物を、経口、静脈内または局所投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
哺乳動物における痛みを処置または軽減する方法であって、痛みを受けている哺乳動物に対し痛み軽減量の一般式ＩＩで表わされる化合物およびその医薬として許容される塩を投与することを包含する、上記方法：
2005500305.tif 000010
式中、
Ｒ1は１〜１８個の炭素鎖長を有する飽和または不飽和鎖であり；
Ｒ2は１〜１８個の炭素鎖長を有する飽和または不飽和鎖であり；および
ＡはＰＯ4−Ｘ、ＣＯＯＬおよびＣＯＮＲ'−Ｒ''からなる群から選択され、ここでＸは水素または塩素であり、Ｌはグリセロール、Ｃ3-20脂肪酸モノグリセライド、Ｃ3-20脂肪酸ジグリセライド、Ｃ3-20脂肪酸のヒドロキシ−Ｃ2-6−アルキルエステル、リソホスファチジン酸のヒドロキシ−Ｃ2-6−アルキルエステル、リソプラスマロゲン、リソホスホリピド、リソホスファチジン酸アミド、グリセロリン酸、スフィンゴリピド、リソホスファチジルエタノールアミンおよびそのアミンのＮ−モノ−（Ｃ1-4）アルキルおよびＮ，Ｎ−ジ−（Ｃ1-4）アルキルおよび四級誘導体からなる群から選択される脂質分子であり；またＲ'およびＲ''はそれぞれ独立し、水素および炭素原子１〜５個を有する低級アルキル基からなる群から選択される。
【請求項１４】
痛みを受けている哺乳動物がヒトである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
痛みが慢性の痛み以外である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
痛みが急性の痛みである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１７】
急性の痛みが、手術後の痛み、分娩の痛み、歯痛、火傷により誘発される痛み、筋肉痛および心筋梗塞に付随する痛みから選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
痛みが神経障害性痛みである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１９】
神経障害性痛みが、ヘルペス後の神経痛、糖尿病性神経障害、三叉神経神経痛および神経虚血性損傷、神経圧迫、脱髄および切断による痛みから選択される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
痛みが病的状態または病気状態に付随する痛みである、請求項１３に記載の方法。
【請求項２１】
病的状態または病気状態が、発作、脊髄損傷、末梢神経損傷、炎症状態、癌、三叉神経神経痛、関節炎、鎌状赤血球血症、血友病、糖尿病、帯状疱疹、ＨＩＶ感染および頭痛からなる群から選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
一般式ＩＩで表わされる化合物が、
１−Ｏ−ステアロイル−２−プロピルノナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン、
１−Ｏ−ステアロイル−２−ペンチルヘプトナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン、
１−Ｏ−ステアロイル−２−ヘプチルノナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン、
１−Ｏ−ステアロイル−２−プロピルドデカノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン、
８−ペンタデカニルホスフェート、および
８−ペンタデカニルホスホコリン、
からなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項２３】
痛み軽減量の一般式ＩＩで表わされる化合物を、痛みの発現に先行して投与する、請求項１３に記載の方法。
【請求項２４】
一般式ＩＩで表わされる化合物を、経口、静脈内または局所投与する、請求項１３に記載の方法。
【請求項２５】
痛み処置用医薬組成物の製造における一般式Ｉで表わされる化合物の使用。
【請求項２６】
痛み処置用医薬組成物の製造における一般式ＩＩで表わされる化合物の使用。
【請求項２７】
下記一般式で表わされる化合物およびその医薬として許容される塩：
2005500305.tif 000011
式中、
Ｒ1は６〜１８個の炭素鎖長を有する飽和または不飽和鎖であり；
Ｒ2は１〜１８個の炭素鎖長を有する飽和または不飽和鎖であり；および
ＡはＰＯ4−Ｘ、ＣＯＯＬおよびＣＯＮＲ'−Ｒ''からなる群から選択され、ここでＸは水素または塩素であり、Ｌはグリセロール、Ｃ3-20脂肪酸モノグリセライド、Ｃ3-20脂肪酸ジグリセライド、Ｃ3-20脂肪酸のヒドロキシ−Ｃ2-6−アルキルエステル、リソホスファチジン酸のヒドロキシ−Ｃ2-6−アルキルエステル、リソプラスマロゲン、リソホスホリピド、リソホスファチジン酸アミド、グリセロリン酸、スフィンゴリピド、リソホスファチジルエタノールアミンおよびそのアミンのＮ−モノ−（Ｃ1-4）アルキルおよびＮ，Ｎ−ジ−（Ｃ1-4）アルキルおよび四級誘導体からなる群から選択される脂質分子であり；またＲ'およびＲ''はそれぞれ独立し、水素および炭素原子１〜５個を有する低級アルキル基からなる群から選択される。
【請求項２８】
Ｌがホスホリピドである、請求項２７に記載の化合物。
【請求項２９】
Ｌがリソホスファチジルコリンである、請求項２７に記載の化合物。
【請求項３０】
Ｌがリソ−ホスファチジルコリンであり、およびＲ1およびＲ2がそれぞれヘプチルである、請求項２７に記載の化合物。
【請求項３１】
Ａがホスホコリンである、請求項２７に記載の化合物。
【請求項３２】
８−ペンタデカニルホスホコリンである、請求項２７に記載の化合物。
【請求項３３】
痛み軽減量の下記一般式で表わされる化合物およびその医薬として許容される塩および少なくとも１種の医薬上で許容される担体を含有する痛み処置用組成物：
2005500305.tif 000012
式中、
Ｒ1は６〜１８個の炭素鎖長を有する飽和または不飽和鎖であり；
Ｒ2は１〜１８個の炭素鎖長を有する飽和または不飽和鎖であり；
ＡはＰＯ4−Ｘ、ＣＯＯＬおよびＣＯＮＲ'−Ｒ''からなる群から選択され、ここでＸは水素または塩素であり、Ｌはグリセロール、Ｃ3-20脂肪酸モノグリセライド、Ｃ3-20脂肪酸ジグリセライド、Ｃ3-20脂肪酸のヒドロキシ−Ｃ2-6−アルキルエステル、リソホスファチジン酸のヒドロキシ−Ｃ2-6−アルキルエステル、リソプラスマロゲン、リソホスホリピド、リソホスファチジン酸アミド、グリセロリン酸、スフィンゴリピド、リソホスファチジルエタノールアミンおよびそのアミンのＮ−モノ−（Ｃ1-4）アルキルおよびＮ，Ｎ−ジ−（Ｃ1-4）アルキルおよび四級誘導体からなる群から選択される脂質分子であり；またＲ'およびＲ''はそれぞれ独立し、水素および炭素原子１〜５個を有する低級アルキル基からなる群から選択される。
【請求項３４】
Ｌがホスホリピドである、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３５】
化合物が、１−Ｏ−ステアロイル−２−ヘプチルノナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリンである、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３６】
化合物が、８−ペンタデカニルホスホコリンである、請求項３３に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、痛みの処置方法に関する。さらに特に、本発明は、哺乳動物、特にヒトにおける痛みの処置に或る種の分枝鎖状脂肪酸化合物（ＢＦＡ）およびその誘導体を使用することに関する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
痛みは複雑な感覚であり、また病気の最も一般的症状である。体細胞性であると分類されている痛みは、痛みレセプターを活性化する有害刺激（化学的、熱的、機械的など）による侵害受容性痛み、または中枢神経系または末梢神経系の機能不全から生じ、ほとんど局限化されていない神経障害性痛みであることができる。
痛みはまた、本質的に急性または慢性として分類することができる。急性の痛みは通常、損傷の結果であり（例えば、外傷または疾病）、短時間持続し、また典型的に、損傷した組織が回復するか、または直後に解消する。慢性の痛みは通常、急性の組織損傷が解消しても１ヶ月以上にわたり持続する痛み、３ヶ月より長い期間にわたり持続または反復する痛み、または持続または進行する組織損傷に伴う痛みとして広く、独断的に定義される［Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ，１９９９］。
【０００３】
数種の痛み症状は、これらの概念に従う分類が困難である。これらは、例えば慢性の頭痛および悪性疾病における体組織の侵害により生じる連続する急性の痛みを包含する。
神経障害性痛みは、神経系に対する損傷後に発現することができる共通型であり、通常慢性の痛みである。神経障害性痛みは、外傷、中枢神経系（ＣＮＳ）病気（例えば、発作、脊髄損傷）、糖尿病、帯状疱疹、ＨＩＶ感染または後期癌、などの病気、または化学的損傷の結果であることができる。これはまた、切断後にも発現することがある。
【０００４】
慢性の痛みを伴う長期持続性神経メカニズムは、急性の痛みに見出されるものとは相違している［ＬｏｅｓｅｒおよびＭｅｌｚａｃｋによるＬａｎｃｅｔ  ３５３：１６０７−９（１９９９）］。従って、また種々の痛み症状に対し用いられる医薬は相違している。急性の痛みに対し有用である医薬が慢性の痛みに対し無効であることがあることはよく知られており、また例えば神経障害性痛みに対し活性な医薬が別種の痛みの鎮痛には有効ではないこともある。
種々の鎮痛薬が痛み症状の処置に有用であることが証明されている。しかしながら、利用できる鎮痛薬の大部分は望ましくない副作用を有する。
【０００５】
オピオイド類（opioids）はＣＮＳにおけるオピオイドレセプターのアゴニストとして作用する物質であり、最も強力な鎮痛薬であると考えられている。モルヒネおよび関連オピオイド化合物などの薬剤はしばしば、重篤な痛みの軽減に要求される。しかしながら、これらの麻薬は依存性および嗜癖性を導くという重篤な欠点を有する。さらに、オピオイドで処置された患者は、この医薬に対し寛容性を発現する傾向があり、この傾向は鎮痛作用の発揮に要する医薬の量の増加および引続く禁断症状を導く。オピオイド医薬が付随する追加の副作用には、吐気、鎮静および呼吸抑制が包含される。
【０００６】
非オピオイド系鎮痛薬、例えばシクロオキシゲナーゼインヒビター、例えばアセトアミノフェン［＝パラセタモール（paracetamol）］および非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）はしばしば、温和ないし中程度の痛みの処置に有効である。ＮＳＡＩＤ群の抗炎症薬、例えばアセチルサルチル酸［アスピリン（aspirin）］、インドメタシン（indomethacin）、ジクロフェナック（diclofenac）およびベンジダミン（benzydamine）は、外傷および炎症に付随する痛みに対する鎮痛薬として使用されている。しかしながら、臨床試験は依然として、結論に達していない。ＮＳＡＩＤ群の医薬に共通する副作用は、胃腸器官の刺激および潰瘍、血小板凝集の遮断、腎不全および肝臓障害を包含する。
【０００７】
鎮痛薬のもう１種の主要群は、ナトリウムチャンネルを遮断する局所麻酔薬である。この群の化合物、例えばリドカイン（lidocaine）は、脊椎に局所施用された場合、手術後または外傷後の痛みの制御に有効であることが見出されているが、適当な投与および監視に専門家および下部組織を必要とする。リドカインの全身潅流は、急性の痛みを軽減することができるが、痙攣または無呼吸からの蘇生を直ちに行うことができるように、連続的に監視する必要がある。
【０００８】
Ｎ−メチル−Ｄ−アスパルテート（ＮＭＤＡ）レセプターアンタゴニストは、神経障害性痛みの処置に有用である。興奮性アミノ酸グルタメートにより活性化されるＮＭＤＡレセプター複合体上の数個の部位は、鎮痛の標的である。例えば、この複合体内で開放カルシウムチャンネルを遮断するケタミン（Ketamine）は、手術後の痛みまたは神経障害性痛みに対する使用が示唆されている。臨床試験により、鎮痛薬または補助鎮痛薬（例えば、モルヒネとともに用いられる）としてのケタミン類の利益は確認されている。しかしながら、精神異常発現作用および他の副作用、例えば唾液分泌過多または心臓刺激作用は、ケタミンの標準投与の適用可能性を制限する［ＭａｒｔｉｎｄａｌｅによるＴｈｅ  Ｅｘｔｒａ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｉａ．３１版、Ｌｏｎｄｏｎ：Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，（Ｒｅｙｎｏｌｄｓ編集）１９９６年，１２５８−９頁］。
【０００９】
抗うつ薬、例えば三環状抗うつ薬であるアミトリプチリン（amitriptyline）およびイミプラミン（imipramine）、ならびにセロトニン再吸収インヒビターであるパロキセチン（paroxetine）はまた、鎮痛薬として有用であることが証明されている。三環状抗うつ薬は、数種の慢性の痛み状態、特に頭の痛みを伴う患者（頭痛を包含する）および神経障害性痛みに対する助けとなることができる。しかしながら、これらの医薬は潜在的に、有害な副作用を有し、この副作用には抗コリン作用性作用および生命を脅かす心臓血管系作用が包含される。
【００１０】
抗痙攣薬はまた、有用な鎮痛作用を有することが見出されている。ガバペンチン（gabapentin）は、慢性の痛みの処置に見込みがあることが証明されており［Ｒｏｗｂｏｔｈａｍ等によるＪＡＭＡ  ２８０：１８３７−４２（１９９８年）］、またカルバマゼピン（carbamazepine）およびフェニトイン（phenytoin）は、神経障害性痛み状態の範囲の処置に有効であることができる。特に、三叉神経神経痛はカルバマゼピンに良好に応答する［ＧｒｅｅｎおよびＳｅｌｍａｎによるＨｅａｄａｃｈｅ  ３１：５８８−５９２（１９９１年）］。ナトリウムバルプロエート（sodium valproate）は、偏頭痛の予防的処置に有効であるものと報告されている［ＨｅｒｉｎｇおよびＫｕｒｉｔｚｋｙによるＣｅｐｈａｌａｌｇｉａ  １２：８１−８４（１９９２年）］。しかしながら、ナトリウムバルプロエートは、急性の痛みである手術後の痛みの処置にかかわる偽薬対照試験で無効であることが見出された［Ｍａｒｔｉｎ等によるＡｎｎ．Ｆｒ  Ａｎｅｓｔｈ  Ｒｅａｎｉｍ  ７：３８７−９２（１９８８年）］。強力な抗痙攣薬として試験されている数種のバルプロ酸（valproic acid）の類縁化合物は、鎮静作用が見出され、または有毒な作用を有していた［Ｋｅａｎｅ等によるＮｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ２２：８７５−８７９（１９８３年）］。
【００１１】
抗痙攣薬について報告されており、血液学的反応による致死、損なわれた精神機能および運動機能を包含する重篤な副作用は、特に老齢の人々における使用を制限する［ＭａｒｉｎｄａｌｅによるＴｈｅ  Ｅｘｔｒａ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｉａ．３１版、Ｌｏｎｄｏｎ：Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，（Ｒｅｙｎｏｌｄｓ編集）１９９６年，３６７−３８１頁］。さらにまた、抗痙攣薬を用いる数種の臨床試験の結果は失望させるものであり、両立しない結果を示した［ＭｃＱｕａｙ等によるＢＭＪ３１１：１０４７−１０５２（１９９５年）］。特に、抗痙攣薬が急性の痛みに効果的であるという証拠はない［Ｗｉｆｆｅｎ等によるＴｈｅ  Ｃｏｃｈｒａｎｅ  Ｌｉｂｒａｒｙ，Ｉｓｓｕｅ  ４，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｐｄａｔｅ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ（２０００年）］。
【００１２】
総合して、現存する鎮痛薬中の多くが示す効果は、議論を要するものであり、またしばしば不適当である。さらに、現在利用することができる鎮痛薬の大部分は、それらの使用を制限する重大な欠陥を有する。
明確なこととして、急性および神経障害性痛みを包含する種々の形態の痛みを効果的に処置するための臨床上の必要性が存在している。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
（発明の要旨）
本発明の課題は、哺乳動物における痛み、特にヒトにおける急性および神経障害性痛みの処置および／または予防方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
従って、本発明は、一態様において、哺乳動物における痛みを処置または軽減する方法に関し、この方法は痛みを受けている哺乳動物に痛み軽減量の一般式（Ｉ）または（ＩＩ）で表わされる化合物またはその医薬として許容される塩を投与することを包含する。
【００１５】
本発明による有用な化合物は、一般式（Ｉ）で表わされる化合物およびその医薬として許容される塩：
2005500305.tif 000002
（式中、
Ｒ1は１〜１８個の炭素鎖長を有する飽和または不飽和鎖であり；および
Ｒ2は１〜１８個の炭素鎖長を有する飽和または不飽和鎖であり；
ただし、Ｒ1およびＲ2は両方がプロピルであることはない）
【００１６】
および一般式（ＩＩ）で表わされる化合物およびその医薬として許容される塩：
2005500305.tif 000003
【００１７】
（式中、
Ｒ1は１〜１８個の炭素鎖長を有する飽和または不飽和鎖であり；
Ｒ2は１〜１８個の炭素鎖長を有する飽和または不飽和鎖であり；および
ＡはＰＯ4−Ｘ、ＣＯＯＬおよびＣＯＮＲ'−Ｒ''からなる群から選択され、ここでＸは水素または塩素であり、Ｌはグリセロール、Ｃ3-20脂肪酸モノグリセライド、Ｃ3-20脂肪酸ジグリセライド、Ｃ3-20脂肪酸のヒドロキシ−Ｃ2-6−アルキルエステル、リソホスファチジン酸のヒドロキシ−Ｃ2-6−アルキルエステル、リソプラスマロゲン、リソホスホリピド、リソホスファチジン酸アミド、グリセロリン酸、スフィンゴリピド、リソホスファチジルエタノールアミン、およびＮ−モノ−（Ｃ1-4）アルキルおよびそのアミンのＮ，Ｎ−ジ−（Ｃ1-4）アルキルおよび四級誘導体からなる群から選択される脂質分子であり；またＲ'およびＲ''はそれぞれ独立し、水素および炭素原子１〜５個を有する低級アルキル基からなる群から選択される）
である。
【００１８】
本発明により包含される方法は、哺乳動物、特にヒトにおける痛みの処置および／または予防方法を包含する。上記痛みは急性、慢性または神経障害性痛みであることができる。
好適態様に従う場合、上記急性の痛みは手術後の痛み、分娩の痛み、歯痛、火傷により誘発される痛み、筋肉痛および心筋梗塞に付随する痛みから選択される。
もう一つの好適態様に従う場合、上記神経障害性痛みは、これらに制限されないものとして、帯状疱疹後の神経痛、糖尿病性神経障害、三叉神経神経痛および神経虚血性損傷、神経圧迫、脱髄および切断による痛みから選択される。
【００１９】
さらにもう一つの好適態様に従う場合、処置される痛みは病的状態または病気状態に付随する痛みであり、この病的状態または病気状態は、発作、脊髄損傷、末梢神経損傷、炎症状態、癌、三叉神経神経痛、関節炎，鎌状赤血球血症、血友病、糖尿病、帯状疱疹、ＨＩＶ感染および群発性頭痛を包含する頭痛から選択される。
【００２０】
現時点で好適な態様において、有用な化合物は：
２−ペンチルヘプタン酸［Ｍ（５，５）］、
２−プロピルドデカン酸［Ｍ（３，１０）］、
２−プロピルノナン酸［Ｍ（３，７）］、
２−ヘプチルノナン酸［Ｍ（７，７）］、
１−Ｏ−ステアロイル−２−プロピルノナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ−（３，７）］、
１−Ｏ−ステアロイル−２−ペンチルヘプトナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ−（５，５）］、
１−Ｏ−ステアロイル−２−ヘプチルノナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ−（７，７）］、
１−Ｏ−ステアロイル−２−プロピルドデカノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ−（３，１０）］、
８−ペンデカニルホスフェート［（７，７）−ＰＯ4］、および
８−ペンタデカニルホスホコリン［（７，７）−Ｐ−コリン］
からなる群から選択される。
【００２１】
もう一つの態様において、本発明は下記式で表わされる化合物およびその医薬として許容される塩に関する：
2005500305.tif 000004
【００２２】
式中、
Ｒ1は６〜１８個の炭素鎖長を有する飽和または不飽和鎖であり；
Ｒ2は１〜１８個の炭素鎖長を有する飽和または不飽和鎖であり；および
ＡはＰＯ4−Ｘ、ＣＯＯＬおよびＣＯＮＲ'−Ｒ''からなる群から選択され、ここでＸは水素または塩素であり、Ｌはグリセロール、Ｃ3-20脂肪酸モノグリセライド、Ｃ3-20脂肪酸ジグリセライド、Ｃ3-20脂肪酸のヒドロキシ−Ｃ2-6−アルキルエステル、リソホスファチジン酸のヒドロキシ−Ｃ2-6−アルキルエステル、リソプラスマロゲン、リソホスホリピド、リソホスファチジン酸アミド、グリセロリン酸、スフィンゴリピド、リソホスファチジルエタノールアミン、およびそのアミンのＮ−モノ−（Ｃ1-4）アルキルおよびＮ，Ｎ−ジ−（Ｃ1-4）アルキルおよび四級誘導体からなる群から選択される脂質分子であり；またＲ'およびＲ''はそれぞれ独立し、水素および炭素原子１〜５個を有する低級アルキル基からなる群から選択される。
【００２３】
好適態様の一つにおいて、本発明による化合物は、位置Ａにホスホリピド分子を含有する化合物である。位置Ａにリソ−ホスファチジルコリン分子を有する化合物は、さらに好適である。現時点で最も好適で有用な本発明による化合物は、１−Ｏ−ステアロイル−２−ペンチルヘプトナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ（５，５）］である。
もう一つの態様において、本発明による化合物は位置Ａにホスフェートまたはホスホコリンを含有する。この種の現時点で最も好適な化合物は、８−ペンタデカニルホスホコリン［（７，７）−Ｐ−コリン］である。
【００２４】
さらにもう一つの態様において、本発明は痛み処置用医薬組成物に関し、この組成物は痛み軽減量の上記式で表わされる化合物および少なくとも１種の医薬上で許容される担体を含有する。
本発明の追加の目的は、本発明の特定態様の詳細な説明を包含する下記記載をさらに参照し、当業者に明白になるものと見なされる。
【００２５】
（図面の簡単な説明）
図１は、照射熱「尾軽打」試験法（tail flick assay）を使用し、マウスで試験した場合のＤＰ−Ｍ（５，５）２５ｍｇ／ｋｇ（灰色バー）、５０ｍｇ／ｋｇ（縞柄バー）および１００ｍｇ／ｋｇ（黒色バー）の鎮痛効果を表わす。初期停止期間（initial withdrawal time）（ｔ＝０時点）に比較した停止潜在期間（withdrawal latency）における計算パーセントの増加が、医薬のｉ．ｐ．投与後の相違する時点で示されている。白色バーは媒質のみで処置された動物の対照群を表わす。
図２は、マウスにおけるホルマリン誘発痛み試験で評価された８−ペンタデカニルホスホコリン［（７，７）−Ｐ−コリン］の鎮痛効果を表わす。医薬（７，７）−Ｐ−コリン１５０ｍｇ／ｋｇ（□）は、ホルマリン注射に先立つ１時間の時点で経口投与された。生まれたままの動物を対照群（○）として用いた。統計学的有意効果（Ｐ＜０．０５）は、星印（＊）により示されている。
【００２６】
図３は、機械的異痛（mechanical allodynia）にかかわる評価法により試験した８−ペンタデカニルホスホコリン［（７，７）−Ｐ−コリン］の効果を表わす。停止閾値単位（withdrawal threshold unit）は、ホンフレイ（von Frey）フィラメントを引き下げるのに要する力（ミリグラムによる）の１０倍対数を表わす。ＣＣＩ手術後の１５日目の時点で、ラットに（７，７）−Ｐ−コリン１５０ｍｇ／ｋｇ（□）または媒質のみ（○）のどちらかをｓ．ｃ．注射した。
【００２７】
（発明の詳細な説明）
本発明の目的は、哺乳動物における痛みの処置、特にヒトにおける急性および神経障害性痛みの処置に適する新規鎮痛組成物を提供することにある。
望ましい鎮痛薬は、痛み感覚を効果的に減少または軽減するが、減少された副作用を有するか、または副作用を有していないことによって、その好ましい鎮痛効果を発揮することができる化合物である。さらに、この医薬が長期間持続性鎮痛薬であることはまた、或る種の痛みの処置に有利であることができる。
本発明による場合、一般式ＩおよびＩＩで表わされる化合物およびその医薬上で許容される塩は、急性および慢性の痛みを包含する痛みの処置に有用である。
【００２８】
予想外のこととして、本発明者等は、或る種の分枝鎖状脂肪酸およびその誘導体が許容される動物モデル系を用いる試験によって証明されるものとして、急性の痛みおよび慢性の痛み、ならびに神経障害性痛みに対し格別の効果を有することをここに証明することができた。さらにまた、驚くべきことに、元出願であるＵＳ０９／４６２，５３３（国際公開ＷＯ９９／０２４６５）に従来記載の評価法において効果的な抗痙攣薬であることが示されていなかった一般式Ｉで表わされる化合物一族の或る種の化合物が格別の鎮痛活性を有することがここに見出された。
【００２９】
本明細書において、一般式Ｉで表わされる分枝鎖状脂肪酸化合物またはその医薬上で許容される塩を総合して、「ＢＦＡ」と称する。以下の記載において、特定のＢＦＡは、それらの特定のＲ1およびＲ2アルキル鎖に存在する炭素数に従い表わす。一例として、Ｒ1およびＲ2位置の両方にプロピル基を有するバルプロ酸は、Ｍ（３，３）で表わされる。同様に、例えば２−プロピルノナン酸は、Ｍ（３，７）で表わし、２−ヘプチルノナン酸はＭ（７，７）で表わす。
ＢＦＡのＲ1およびＲ2アルキル鎖は、直鎖状または分枝鎖状の飽和鎖または１個または２個以上の二重結合および／または三重結合を有する不飽和鎖であることができる。
【００３０】
塩形態の分枝鎖状脂肪酸は、塩記号を包含する接尾語により表わす。一例として、２−プロピルノナン酸のナトリウム塩形態は、Ｍ（３，７）−Ｎａで表わす。
一般式Ｉで表わされる化合物の適当な塩は、いずれか医薬上で許容される対向イオンを含有する。或る好適態様において、この対向イオンは、これらに制限されないものとして、Ｎａ+、Ｌｉ+、Ｋ+、ＮＨ4+、Ｃａ++およびこれらのイオンの混合物を包含する。
【００３１】
一般式ＩＩで表わされる分枝鎖状脂肪酸の誘導体およびその医薬上で許容される塩はまた、本発明による有用な鎮痛化合物である。これらの化合物において、分枝鎖状脂肪酸のカルボキシル基の水素原子が脂質分子により置き換えられているか（ＢＦＡのエステル誘導体）、またはカルボキシル基のヒドロキシル基がホスフェートまたはホスホコリン（ＢＦＡのエーテル誘導体）またはアミノ基（ＢＦＡのアミド誘導体）により置き換えられている化合物は、以下の記載において、総合し「ＤＰ−ＢＦＡ」で表わす。
ＢＦＡおよびＤＰ−ＢＦＡ化合物は基本的に、米国出願Ｎｏ．０９／４６２，５３３に記載の方法により（この特許の記載を引用して、その全体をここに組入れる）、または当業者に公知の類似方法または別法により製造することができる。
【００３２】
上記したように、分枝鎖状親油性分子は遊離酸、それらの生理学的に許容される塩、またはその混合物、エステル、エーテルおよびアミドとして使用することができる。
現時点において、本発明による好適で有用な化合物は、脂肪酸残基、２−ペンチルヘプタン酸［Ｍ（５，５）］、２−プロピルドデカン酸［Ｍ（３，１０）］、２−プロピルノナン酸［Ｍ（３，７）］および２−ヘプチルノナン酸［Ｍ（７，７）］を包含する。遊離酸および塩形態の両方の化合物は、本発明による有用な鎮痛薬である。
【００３３】
別種の好適で有用な化合物は、ＢＦＡの誘導体（＝ＤＰ−ＢＦＡ）であり、この場合、ＢＦＡのカルボキシル基の水素原子は脂質分子、好ましくは極性脂質、さらに好ましくはホスホリピドにより置き換えられている。従って、本発明の好適態様は、下記ＤＰ−ＢＦＡ化合物の使用を包含する：
１−Ｏ−ステアロイル−２−プロピルノナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ（３，７）］、
１−Ｏ−ステアロイル−２−プロピルドデカノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ（３，１０）］、
１−Ｏ−ステアロイル−２−ペンチルヘプトナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ（５，５）］、および
１−Ｏ−ステアロイル−２−ヘプチルノナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ（７，７）］。
【００３４】
別種の好適で有用な化合物は、ＤＰ−ＢＦＡホスホ誘導体、８−ペンデカニルホスフェート［（７，７）−ＰＯ4］および８−ペンタデカニルホスホコリン［（７，７）−Ｐ−コリン］である。
式Ｉおよび式ＩＩの両方の好適一員中で、現時点で最も好適な化合物は、２−ペンチルヘプタン酸［Ｍ（５，５）］、１−Ｏ−ステアロイル−２−ペンチルヘプトナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ（５，５）］および８−ペンタデカニルホスホコリン［（７，７）−Ｐ−コリン］である。
一般式ＩＩで表されるＤＰ−ＢＦＡ分子がＡ位置にグリセロール基本基を含有する場合、その分枝状脂肪分子は、ｓｎ−１、ｓｎ−２またはｓｎ−３位置のいずれかでグリセロール基本基に結合することができる、すなわちリソ−ホスホリピド分子に結合したＢＦＡは、本発明に従い好適である。
【００３５】
ＤＰ−ＢＦＡは、それ自体として、またはプロドラッグとして活性であることができ、また好ましくは標的部位で、酵素反応または非酵素反応により分解させることができる。一例として、ホスホリパーゼＡ2活性の増加は、炎症性および神経障害性痛みに付随することが報告されている［ＫａｗａｋａｍｉによるＣｌｉｎ．Ｏｒｔｈｏｐ．３５１：２４１−５１（１９９８年）；Ｓａａｌ等によるＳｐｉｎｅ  １５：６７４−８（１９９０年）］。他方で、例えばｓｎ−２位置でホスホリピドに結合しているＢＦＡは、その活性が痛み部位で高められる酵素により放出させることができる。
ＤＰ−ＢＦＡ化合物の生成に選択される脂質分子の好適種類は、痛みを伴う特定の障害または病気およびその場所に依存することがある。一例として、神経組織および細胞膜に特に見出されるスフィンゴリピドは、鎮痛化合物が脳または他のＣＮＳ組織を標的とする場合、好適脂質であることができる。
【００３６】
物性として両親媒性であるＤＰ−ＢＦＡ化合物は、生物学的膜および障壁を貫通することができ、従って恩恵を受ける組織および臓器中への医薬の輸送を促進する。さらにまた、親油性分子に共有結合されているＢＦＡを有するＤＰ−ＢＦＡは、好ましい治療活性、例えば改良された薬物動態学的性質および能力を示すことができる。確実なこととして、ＤＰ−ＢＦＡ誘導体は少なくとも二つの観点からさらに有利な医薬あることが、本発明の発明者によって証明された：（ｉ）これらの化合物は対応する分枝鎖状脂肪酸に比較し、モルベースで増大された鎮痛効果を有するものとして一層、強力であり、また（ｉｉ）それらの効果は一般に、長時間にわたり持続し、従ってこれらの化合物を慢性の痛みの処置における効果的な医薬にする。さらに、ＤＰ−ＳＦＡの少なくとも一部は、それらの相当する分枝鎖状脂肪酸に比較し、鎮静作用がかなり低いことが見出された。従って、ＤＰ−ＢＦＡは減少された副作用および毒性を示すものと予測される。
【００３７】
いずれか適当な投与経路が本発明に包含され、これらに制限されないものとして、経口、静脈内、筋肉内、皮下、吸入，鼻内、局所、直腸、鞘内、全身的経皮施用、またはその他公知の経路が包含される。
好適態様の一つにおいて、本発明による有用な医薬組成物は経口または静脈内投与される。もう一つの好適態様において、投与経路は局所または地域施用である。局所施用の好適態様は、鼻および眼施用を包含する。
【００３８】
医薬組成物は、液体、エアゾルまたは固体剤型であることができ、またこれらに制限されないものとして、溶液、懸濁液、ミセル、エマルジョン、ミクロエマルジョン、軟膏、ゲル、貼布剤、座薬、カプセル剤、錠剤などを包含する、相当する投与経路に要求されるいずれか適当な製剤に調剤することができる。
経口投与用組成物は、これらに制限されないものとして、粉末または顆粒、水性または非水性媒質中の懸濁液または溶液、サシェ剤、カプセル剤または錠剤を包含することができる。増粘剤、稀釈剤、芳香剤、分散助剤、保存剤、乳化剤または結合剤が望まれることもある。
【００３９】
局所施用用製剤は、これらに制限されないものとして、ローション、軟膏、ゲル、クリーム、座薬、滴剤、液体、スプレイおよび粉末を包含することができる。慣用の調剤用担体、水性、粉末状または油性基材、増粘剤などを添加することができる。局所施用の場合、痛み軽減量の一般式ＩまたはＩＩで表わされる化合物を含有する組成物は、痛みを伴う組織に、またはその近くに施用すると好ましい。
投与は痛み感覚を誘発する損傷後であることができ、または別法として、痛みを生じさせる刺激または障害に先立つこともできる。
【００４０】
初期投与の場合、一般式ＩまたはＩＩで表わされる鎮痛化合物を含有する医薬は痛み症状の進行を防止、遅延または軽減することができる。一例として、本発明による有用な化合物は、手術の実施前に、痛みを伴う歯処置の前に、分娩収縮の最終段階に入る前になどの時点で投与することができ、これにより手術後の痛みまたは他の痛み程度の軽減または減少が得られる。
本発明による組成物の投与用量範囲は、所望の鎮痛効果を生じさせるのに充分な量である。一般式ＩまたはＩＩで表わされる化合物は、約０．０１グラム〜約１０グラムの範囲の一日薬用量で使用することができる。
【００４１】
医薬の用量範囲は、投与経路および痛みを受けている患者の状態により変化する。投与される用量はまた、年齢、性別、健康状態、受容者の体重、用いる場合、併用する処置、処置の頻度、症状の重篤度および処置される痛みの性質に依存する。さらに、用量は患者の応答に従い変えるべきであり、実際のこととして、患者の寛容度閾値およびそれらの痛み感覚の知覚度はまったく相違している。用量計画および投与手段は、担当医師または他の当業者により決定される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４２】
ここで、本発明を下記の非制限的例により説明する。
例
本発明による有用な化合物は、下記例１〜５に記載の方法により、または当業者に公知のいずれか別の方法により製造することができる。
簡潔にするために、下記説明および合成例はＢＦＡおよびＤＰ−ＢＦＡ群の直鎖状飽和化合物に関するものであるけれども、分枝鎖状および不飽和ＢＦＡおよびＤＰ−ＢＦＡもまた、本発明の記載に従う有用な化合物の中に包含されるものと認識されるべきである。
これらに制限されないものとして、ナトリウム塩、カリウム塩、アンモニウム塩およびアルキル−アンモニウム塩、ならびに二価対向イオンによる塩を包含するＢＦＡおよびＤＰ−ＢＦＡ分子の種々の医薬上で許容される塩をまた得ることができる。
【００４３】
例１：２−ペンチルヘプタン酸［Ｍ（５，５）］の合成
無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ、９００ｍｌ）およびジイソプロピルアミン（１２１．９７ｇ、１．２０８ｍｏｌ）を、乾燥アルゴン浄化フラスコにアルゴン雰囲気下に添加した。この磁気撹拌されている溶液に、ヘキサン中のｎ−ブチルリチウム（１．６Ｍの７４０ｍｌ、１．１８４ｍｏｌ）を、０℃以下の温度を保持しながら添加した。この冷たい塩基性溶液に次いで、ｎ−ヘプタン酸（８０．８１ｇ、０．６２ｍｏｌ）を添加し、次いで温度を０℃以下に再度保持した。１５分後、このミルク状白色溶液に、ＨＭＰＡ（２３０ｍｌ、１．２８ｍｏｌ）を添加し、５℃で５分間にわたり撹拌した後、この溶液は透明で、淡黄色になった。この溶液を次いで、５℃においてさらに１５分間にわたり撹拌し、次いでｎ−ペンチルブロマイド（８９．３２ｇ、０．５９２ｍｏｌ）を０℃において一度に添加した。この反応温度は直ちに、１８〜２０℃に上昇した。室温でさらに２時間にわたり撹拌した後、反応を下記の方法で処理した。混合物が酸性になるまで、稀塩酸（１０％）を０℃において添加した。この水性層を分離し、次いで石油エーテル（沸点：３０−６０℃）により抽出した。有機層を集め、稀塩酸およびＨ2Ｏで洗浄した。この有機層を次いで、乾燥させ、次いで溶媒を除去した。この残留物を蒸留した。無色油状物８７ｇ（７３％）が得られた、沸点：８５−９０°（１ｍｍＨｇ）。
【００４４】
ＴＬＣ分析：アルミニウムシート上のシリカゲル（Silica gel）６０Ｆ２５４。溶出液はペンタンとエーテルとの混合物である（８：２ｖ／ｖ）。
２−ペンチルヘプタン酸［Ｍ（５，５）］
無色油状物、沸点：８５−９０℃（１ｍｍＨｇ）、収率＝７３％。
ＴＬＣ分析：１個のスポット、Ｒf＝０．４２。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）、δ（ｐｐｍ）：０．８５−０．９５（ｍ，６Ｈ）、１．２８−１．３３（広いｓ，１２Ｈ）、１．４７−１．５０（ｍ，２Ｈ）、１．５６（ｍ，２Ｈ）、２．３１（ｍ．１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ、陰イオンモード）＝１９８．９９（Ｍ−Ｈ）−。
【００４５】
その他のＢＦＡ化合物の製造方法は上記２−ペンチルヘプタン酸の合成と類似している。分析は上記条件下にＴＬＣで行った。
２−プロピルドデカン酸［Ｍ（３，１０）］
無色油状物、沸点：１２８−１３８℃（１ｍｍＨｇ）。収率＝７７％
ＴＬＣ分析：１個のスポット。Ｒf＝０．５
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）、δ（ｐｐｍ）：０．８４（ｍ，６Ｈ）、１．２−１．３３（１８Ｈ）、１．４３（ｍ，２Ｈ）、１．５９（ｍ，２Ｈ）、２．３５（ｍ．１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ、陰イオンモード）＝２４１．１３（Ｍ−Ｈ）−。
【００４６】
２−プロピルノナン酸［Ｍ（３，７）］
無色油状物、沸点：１２８−１３５℃（１ｍｍＨｇ）。収率＝７５％
ＴＬＣ分析：１個のスポット。Ｒf＝０．４６
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）、δ（ｐｐｍ）：０．８４（ｍ，６Ｈ）、１．２−１．３３（１０Ｈ）、１．４３（ｍ，２Ｈ）、１．５９（ｍ，２Ｈ）、２．３５（ｍ．１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ、陰イオンモード）＝１９９（Ｍ−Ｈ）−。
２−ヘプチルノナン酸［Ｍ（７，７）］
無色油状物、沸点：１２８−１３５℃（１ｍｍＨｇ）。収率＝７５％
ＴＬＣ分析：１個のスポット。Ｒf＝０．４６
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）、δ（ｐｐｍ）：０．８４（ｍ，６Ｈ）、１．２−１．３３（２０Ｈ）、１．４３（ｍ，２Ｈ）、１．５９（ｍ，２Ｈ）、２．３５（ｍ．１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ、陰イオンモード）＝２５４．４（Ｍ−Ｈ）−。
【００４７】
２−プロピルエイコサン酸［Ｍ（３，１８）］
無色油状物、融点：５５．６−５７．４。収率＝７５％
ＴＬＣ分析：１個のスポット。Ｒf＝０．３９
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）、δ（ｐｐｍ）：０．８４（ｍ，６Ｈ）、１．２−１．３３（３４Ｈ）、１．４３（ｍ，２Ｈ）、１．５９（ｍ，２Ｈ）、２．３５（ｍ．１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ、陰イオンモード）＝３５３．４（Ｍ−Ｈ）−。
塩形態の分枝鎖状脂肪酸の合成は、２−ヘプチルノナン酸ナトリウム塩［Ｍ（７，７）−Ｎａ］の合成方法について下記に例示する。
【００４８】
無水エタノール（１２０ｍｌ）および２−ヘプチルノナン酸（１０ｇ，０．０３９ｍｏｌ）を、乾燥アルゴン浄化フラスコにアルゴン雰囲気下に添加した。この磁気撹拌されている溶液に、ナトリウムエチレート（０．５３Ｍの６９．９２ｍｌ，０．０３７ｍｏｌ）を室温で添加した。５−６時間後、溶媒を除去した。２−ヘプチルノナン酸ナトリウム塩をアセトンから再結晶させた。
ナトリウム滴定は１００％である。ＮＭＲ分析は、２−ヘプチルノナン酸と同一である。
【００４９】
例２：１−Ｏ−ステアロイル−２−Ｏ−プロピルノナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ（３，７）−エステル］の合成
１−Ｏ−ステアロイル−２−Ｏ−プロピルノナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ（３，７）］の合成は、二工程法である。第一工程は無水２−プロピルノナン酸の製造である。第二工程はこのＢＦＡへの脂質分子（この場合、リソ−レシチン）の結合および最終生成物の単離である。
【００５０】
工程Ｉ：無水２−プロピルノナン酸の合成
逆流コンデンサー（水冷）および磁気撹拌機を備えた丸底単頚フラスコ（２５０ｍｌ）に、２−プロピルノナン酸（１００ｇ，０．５Ｍ）、無水酢酸（分析級、４００ｍｌ，１．０６Ｍ）およびピリジン（分析級、４４ｍｌ，０．５Ｍ）を導入した。この反応混合物を磁気撹拌機により７０℃において４時間にわたり撹拌した。その後、無水酢酸を２０ｍｍＨｇの圧力において蒸発させた。この残留物を１ｍｍＨｇで蒸留し、次いで１５０−１５２℃で沸騰するフラクションを採取した。これは、無水２−プロピルノナン酸である。収率は８５％（８１．１ｇ）であった。
分析：ＴＬＣはシリカゲル６０Ｆ２５４板上で行った。溶出液はクロロホルム（分析級）である。１個のスポットがＵＶスペクトルで見られた。Ｒf＝０．８９。
元素分析：Ｃ24Ｈ46Ｏ3、計算値：Ｃ  ７５．３９％、Ｈ  １２．０４％。実測値：Ｃ  ７５．２５％、Ｈ  １１．９５％。
【００５１】
工程ＩＩ：１−Ｏ−ステアロイル−２−Ｏ−２−プロピルノナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリンの合成
リソ−レシチン（１−ステアロイル−ｓｎ−グリセロ−ホスファチジルコリン；２ｇ，３．８２ｍＭ）、バルプロ酸のナトリウム塩（０．７ｇ，４．２ｍＭ）および無水２−プロピル−ノナン酸（２０ｍｌ）を、逆流コンデンサー（水冷）および磁気撹拌機を備えた丸底単頚フラスコ（５００ｍｌ）にアルゴン雰囲気下に導入した。この反応混合物を、溶液中のリソ−レシチンが消失するまで（ＴＬＣ監視）、油浴（８０−１００℃）中で加熱した（約３時間の加熱）。未反応の無水バルプロ酸を次いで、減圧（約０．１ｍｍＨｇ）において加熱（１１０−１２０℃）することによって反応フラスコから蒸留した。この残留物をクロロホルムに溶解し、バルプロ酸のナトリウム塩の沈殿を、遠心分離によって溶液から分離した。
【００５２】
得られた溶液を蒸発器で加熱することによって濃縮した。冷却後、この反応生成物のクロロホルム溶液を、シリカゲル６０（７０−２３０メッシュ）からなるクロマトグラフイカラムにおいて濾過した。粗製反応生成物１ｇの精製に、シリカゲル３０ｇを使用した。溶出液として、クロロホルム、メタノールおよび水の混合物（６５：３５：５ｖ／ｖ）を使用する。２−プロピルヘプチル酢酸およびその未反応無水酸は、この溶出液の最初に現れる。生成物は白色ワックス状である。クロマトグラフイに付した後、生成物の精製を、ｎ−ペンタンによる洗浄（３回の洗浄、各回２０ｍｌを使用）によって行った。得られた生成物を減圧で４０℃において乾燥させた。収率は６０％（１．５ｇ）であった。
【００５３】
ＴＬＣ分析：アルミニウムシート上のシリカゲル６０Ｆ２５４。溶出液はクロロホルム（アミレンにより安定化）である。１個のスポットがＵＶスペクトルで見られた。Ｒf＝０．３。
元素分析：Ｃ38Ｈ76Ｏ8ＮＰ、計算値：Ｃ  ６４．６２％、Ｈ  １０．７７％、Ｎ  ２．００％、Ｐ  ４．３９％。実測値：Ｃ  ６４．００％、Ｈ  １０．９％、Ｎ  ２．２１％、Ｐ  ４．４％。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）、δ（ｐｐｍ）：０．８６−０．９２（ｍ，９Ｈ）、１．２６（広いｓ，４２Ｈ）、１．４２−１．４４（ｍ，２Ｈ）、１．５３−１．６１（ｍ，４Ｈ）、２．２４−２．３４（ｍ，３Ｈ）、３．３８（ｓ，９Ｈ）、３．８１−４．４５（広いｓ，８Ｈ）および５．２０−５．２８（ｍ，１Ｈ）。
３１ＰＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）、δ（ｐｐｍ）：−３．０（Ｄ2Ｏ中の各Ｈ3ＰＯ4））（ｓ）。
【００５４】
数種の特定のＤＰ−ＢＦＡ分子にかかわる分析データを下記に挙げる。
１−Ｏ−ステアロイル−２−プロピルノナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ（３，７）］
元素分析：Ｍ・２Ｈ2Ｏ（計算値／実測値％）：Ｃ＝６１．５４／６２．１８±０．５１、Ｈ＝１０．７９／１０．４０±０．１５、Ｎ＝１．８９／１．７１±０．０５、Ｐ＝４．１８／４．０４。ＭＳ（ＥＳ、陽イオンモード）＝７０６（Ｍ＋Ｈ）+。ＴＬＣ：アルミニウムシート上のシリカゲル６０Ｆ２５４。溶出液はクロロホルム−メタノール−水の混合物（６４：２５：４）である。１個のスポット。Ｒf＝０．６８。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）、δ（ｐｐｍ）：０．８４（ｍ，９Ｈ）、１．２５−１．３７（４０Ｈ）、１．４１（ｍ，２Ｈ）、１．４９−１．５９（ｍ，４Ｈ）、２．２５−２．３５（３Ｈ）、３．３７（９Ｈ）、３．３８−４．４８（８Ｈ）、５．２（ｍ，Ｈ）。
【００５５】
１−Ｏ−ステアロイル−２−ペンチルヘプトナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ（５，５）］
元素分析：Ｍ・２Ｈ2Ｏ（計算値／実測値％）：Ｃ＝６１．５４／６１．３６±０．０５、Ｈ＝１０．７９／９．９１±０．３４、Ｎ＝１．８１／１．７５±０．０４、Ｐ＝４．１８／３．６５。ＭＳ（ＥＳ、陽イオンモード）＝７０６（Ｍ＋Ｈ）+。
ＴＬＣ：アルミニウムシート上のシリカゲル６０Ｆ２５４。溶出液はクロロホルム−メタノール−水の混合物（６４：２５：４）である。１個のスポット。Ｒf＝０．６７。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）、δ（ｐｐｍ）：０．８４（ｍ，９Ｈ）、１．２５−１．３７（４０Ｈ）、１．４１（ｍ，２Ｈ）、１．４９−１．５９（ｍ，４Ｈ）、２．２５−２．３５（３Ｈ）、３．３７（９Ｈ）、３．３８−４．４８（８Ｈ）、５．２（ｍ，Ｈ）。
【００５６】
１−Ｏ−ステアロイル−２−ヘプチルノナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ（７，７）］
元素分析：Ｍ・１Ｈ2Ｏ（計算値／実測値％）：Ｃ＝６４．７０／６４．０５±０．０８、Ｈ＝１１．０４／１１．２１±０．１３、Ｎ＝１．８０／１．８１±０．０３、Ｐ＝４．０／３．０２。ＭＳ（ＥＳ、陽イオンモード）＝７６２（Ｍ＋Ｈ）+。
ＴＬＣ：アルミニウムシート上のシリカゲル６０Ｆ２５４。溶出液はクロロホルム−メタノール−水の混合物（６４：２５：４）である。１個のスポット。Ｒf＝０．７３。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）、δ（ｐｐｍ）：０．８４（ｍ，９Ｈ）、１．２５−１．３７（４８Ｈ）、１．４１（ｍ，２Ｈ）、１．４９−１．５９（ｍ，４Ｈ）、２．２７−２．３５（３Ｈ）、３．２２（９Ｈ）、３．３８−４．４８（８Ｈ）、５．２（ｍ，Ｈ）。
【００５７】
１−Ｏ−ステアロイル−２−プロピルドデカノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ（３，１０）］
元素分析：Ｍ・２Ｈ2Ｏ（計算値／実測値％）：Ｃ＝６３．５６／６３．５２±０．１２、Ｈ＝１１．２４／１０．３３±０．０３、Ｎ＝１．８０／１．６５±０．０４、Ｐ＝４．００／４．２８。ＭＳ（ＥＳ、陽イオンモード）＝７４９（Ｍ＋Ｈ）+。
ＴＬＣ：アルミニウムシート上のシリカゲル６０Ｆ２５４。溶出液はクロロホルム−メタノール−水の混合物（６４：２５：４）である。１個のスポット。Ｒf＝０．７１。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）、δ（ｐｐｍ）：０．８４（ｍ，９Ｈ）、１．２８−１．３５（４６Ｈ）、１．４１（ｍ，２Ｈ）、１．４９−１．５９（ｍ，４Ｈ）、２．２７−２．３３（３Ｈ）、３．２２（９Ｈ）、３．３８−４．４８（８Ｈ）、５．２（ｍ，Ｈ）。
【００５８】
例３：２−プロピルオクタデカンアミド［ＤＰ−Ｍ（３，１６）−アミド］の合成
分枝鎖状脂肪酸のアミド類縁化合物の合成は、２−プロピルオクタデカンアミド［ＤＰ−Ｍ（３，１６）−アミド］の合成方法により以下に例示する。
ＢＦＡ化合物のアミド誘導体の合成は、二工程法である。分枝鎖状脂肪酸のクロライド誘導体を第一工程で製造し、次いで第二工程でアミドそれ自体を付加する。別種のＤＰ−アミド化合物は下記２−プロピルオクタデカンアミドの合成方法と類似の方法に従い製造される。
【００５９】
総合し、この合成は下記合成経路に従い説明することができる：
2005500305.tif 000005
【００６０】
２−プロピルオクタデカン酸（２００ｍｇ，０．６１ｍｏｌ）を、磁気撹拌機および逆流コンデンサーを備えた単頚丸底フラスコ中に導入した。このフラスコにまた、ＳＯ2Ｃｌ2  ３ｍｌを添加した。この反応混合物を環流させ、次いで１時間にわたり放置した。この反応混合物を次いで、蒸発させた。この残留物に、乾燥ベンゼン（５ｍｌ）を添加し、次いで蒸発させた。この操作を２回、反復した。生成した残留物を乾燥テトラヒドロフラン５ｍｌに溶解し、次いでこの溶液にジオキサン中の０．５Ｍアンモニア０．２ｍｌを添加した。このようにして得られた懸濁液を磁気撹拌機により１時間にわたり撹拌し、次いで蒸発させた。この残留物に石油エーテルを添加し、次いでこの混合物を撹拌した。得られた固形物を濾取し、次いで水および石油エーテルにより２回、洗浄した。この沈殿物を減圧（１０ｍｍＨｇ）において室温で３時間かけて乾燥させた。生成物は白色粉末であった。収率は８０％であった。
【００６１】
２−プロピルオクタデカンアミド［ＤＰ−Ｍ（３，１６）−アミド］
生成物は８０％の収率をもって白色粉末であった。
ＴＬＣ分析：アルミニウムシート上のシリカゲル６０。溶出液は石油エーテルとジエチルエーテルとの混合物（３：７ｖ／ｖ）である。指示薬は４−メトキシベンズアルデヒド（１０ｍｌ）、無水エタノール（２００ｍｌ）、９８％硫酸（１０ｍｌ）、氷酢酸（２ｍｌ）のスプレイであった。この指示薬によりクロマトグラフイを展開させ、乾燥させ、次いで１００−１５０℃において焼成した。１個のスポットが見出された。Ｒf＝０．２。
元素分析：Ｃ23Ｈ47ＮＯ。計算値：Ｃ  ７８．１９％、Ｈ  １３．３１％、Ｎ  ３．９７％。実測値：Ｃ  ７８．０９％、Ｈ  １３．１１％、Ｎ  ３．７７％。
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣＬ3）、δ（ｐｐｍ）：０．８４−０．９３（ｍ，６Ｈ）、１．２４−１．４１（ｍ，３４Ｈ）、１．５２−１．６０（広いｓ，４Ｈ）、２．０６−２．１５（ｍ，１Ｈ）および５．３０−５．３６（ｄ，２Ｈ）。
【００６２】
追加のＤＰ−ＢＦＡ−アミド分子にかかわる分析データを下記に挙げる：
２−プロピル−ノンアミド［ＤＰ−Ｍ（３，７）−アミド］
生成物は７５％の収率をもって白色粉末であった。
ＴＬＣ分析：アルミニウムシート上のシリカゲル６０。溶出液は石油エーテルとジエチルエーテルとの混合物（３：７ｖ／ｖ）であった。指示薬は４−メトキシベンズアルデヒド（１０ｍｌ）、無水エタノール（２００ｍｌ）、９８％硫酸（１０ｍｌ）、氷酢酸（２ｍｌ）のスプレイであった。この指示薬によりクロマトグラフイを展開させ、乾燥させ、次いで１００−１５０℃において焼成した。１個のスポットが見出された。Ｒf＝０．２。
元素分析：Ｃ12Ｈ25ＮＯ。計算値：Ｃ  ７２．３６％、Ｈ  １２．５６％、Ｎ  ７．０４％。実測値：Ｃ  ７２．５０％、Ｈ  １２．８１％、Ｎ  ７．２２％。
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣＬ3）、δ（ｐｐｍ）：０．８５−０．９４（ｍ，６Ｈ）、１．２２−１．４２（ｍ，１４Ｈ）、１．５１−１．６０（ｍ，２Ｈ）、２．０６−２．１８（ｍ，１Ｈ）および５．３２−５．４４（ｄ，２Ｈ）。
【００６３】
２−プロピルヘキサデカンアミド［ＤＰ−Ｍ（３，１４）−アミド］
生成物は８０％の収率をもって白色粉末であった。
ＴＬＣ分析：アルミニウムシート上のシリカゲル６０。溶出液は石油エーテルとジエチルエーテルとの混合物（３：７ｖ／ｖ）であった。指示薬は４−メトキシベンズアルデヒド（１０ｍｌ）、無水エタノール（２００ｍｌ）、９８％硫酸（１０ｍｌ）、氷酢酸（２ｍｌ）のスプレイであった。この指示薬によりクロマトグラフイを展開させ、乾燥させ、次いで１００−１５０℃において焼成した。１個のスポットが見出された。Ｒf＝０．２。
元素分析：Ｃ21Ｈ43ＮＯ。計算値：Ｃ  ７７．５３％、Ｈ  １３．２３％、Ｎ  ４．３０％。実測値：Ｃ  ７７．５６％、Ｈ  １３．３９％、Ｎ  ４．３９％。
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣＬ3）、δ（ｐｐｍ）：０．８６−０．９２（ｍ，６Ｈ）、１．２４−１．４３（ｍ，３０Ｈ）、１．５２−１．６０（ｍ，４Ｈ）、２．０８−２．１２（ｍ，１Ｈ）および５．２８−５．３６（ｄ，２Ｈ）。
【００６４】
例４：アルキルホスフェートの合成
一般式ＲＯ−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）2で表されるホスフェートを製造した。ＲはＲ1（Ｒ2）−ＣＨ構造を有する分枝鎖状アルキル基であり、ここでＲ1はアルキル側鎖の炭素数を表わし、およびＲ2はアルキル主鎖の炭素数を表わす。
ＲＯ−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）2分子の合成は三工程法である。
第一工程において、対応するアルコール（Ｒ−ＯＨ）を、グリニヤル(Grignard)反応を用い、アルデヒドおよびアルキルブロマイドから製造した（Ｖｏｇｅｌによる“Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”、Ｗｉｌｅｙ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、５３１頁（１９９６年））。
【００６５】
第二工程において、ジフェニルホスフェートエステルをアルコールおよびジフェニルホスホクロリデートから製造した：
2005500305.tif 000006
第三工程において、アルカニル２水素ホスフェートを、ジフェニルエステルの水素添加により得た：
2005500305.tif 000007
【００６６】
８−ペンタデカニルジフェニルホスフェート
乾燥ピリジン（５ｍｌ）中のペンタデカン−８−オール（２．２８ｇ，０．０１ｍｏｌ）の溶液に、室温において撹拌しながら、ジフェニルホスホロクロリデート（４．０ｇ，０．０１５ｍｏｌ）をゆっくりと添加した。このフラスコに栓をし、次いで４８時間にわたり放置し、次いで内容物を氷冷１Ｎ塩酸（１００ｍｌ）中にそそぎ入れた。分離した重質の油状物をエーテルにより抽出した。このエーテル層を、１Ｎ塩酸（３回）、５％炭酸水素ナトリウム（５回）、および水（５回）により洗浄した。乾燥させた後（ＭｇＳＯ4）、エーテルを分離し、次いで残留物をカラムクロマトグラフイにより精製した［石油エーテル（沸点：３０−６０℃）：エーテル、１０：１］。溶媒の蒸発後、液体３．４ｇを得た。収率＝７５％。
【００６７】
８−ペンタデカニルホスフェート［（７，７）−ＰＯ4］の合成
氷酢酸（２０ｍｌ）中の酸化白金（アダムス（Adams）触媒）（０．３２ｇ）の懸濁液を、水素雰囲気下で吸収が止むまで振り混ぜた。アダムス触媒を次いで、２Ｎ塩酸、水および最後に氷酢酸を用いるデカンテーションにより充分に洗浄した。この触媒に、氷酢酸（４０ｍｌ）中の８−ペンタデカニルジフェニルホスフェート（３．０ｇ）の溶液を添加し、次いでこの溶液を水素雰囲気下に吸収が止むまで振り混ぜた。触媒を濾別し、次いでクロロホルムで洗浄した。この濾液から溶媒を減圧で除去した。この残留物を石油エーテル（沸点：３０−６０℃）から結晶化し、次いで６５℃で乾燥させた。最終生成物２．０１ｇが得られた。収率＝９２％。
８−ペンタデカニルホスフェート［（７，７）−ＰＯ4］
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ：０．８３−０．８８（ｔ，６Ｈ）、１．２５（広いｓ，２０Ｈ）、４．０８（広いｓ，１Ｈ）。
31Ｐ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ：３．６９ｓ。
【００６８】
例５：アルキルホスホコリン化合物の合成
式ＲＯ−ＰＯ―（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2Ｎ+（ＣＨ3）3で表わされるホスホコリン化合物を、初期工程で対応するＲ−ＯＨアルコールを使用するが、８−ペンタデカニルホスホコリン［（７，７）−Ｐ−コリン］にかかわる下記方法に従うことによって製造した。ＲはＲ1（Ｒ2）−ＣＨ型の分枝鎖状アルキルを表わす。
【００６９】
８−ペンタデカニルホスホコリン［（７，７）−Ｐ−コリン］の合成
乾燥エーテル（２５０ｍｌ）中のペンタデカン−８−オール（１０．０３ｇ，０．０４４ｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１０ｍｌ，０．０７５ｍｏｌ）の冷却溶液に（０℃）、乾燥エーテル２００ｍｌ中の２−クロロ−２−オキソ−１，３，２−ジオキサホスホラン（７ｍｌ，０．０７５ｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で２時間にわたり撹拌した。沈殿した結晶（Ｃ2Ｈ5）3Ｎ・ＨＣｌを濾別し、次いで溶媒を減圧で除去した。この残留物を無水アセトニトリル中のトリメチルアミン５００ｍｌ溶液（０．２７Ｍ）に溶解し、次いで加圧ビンに移した。この加圧ビンを油浴中で６０−６５℃において４８時間にわたり保持した。このビンを次いで、冷却させ、次いで開口した。溶媒を除去し、この残留物をカラムクロマトグラフイ（ＣＨＣｌ3：ＣＨ3ＯＨ：Ｈ2Ｏ、１：９：１）により精製した。溶媒の蒸発後に得られた油状物を６５℃において７２時間かけて凍結乾燥させた淡黄色ワックス状物１３ｇを得た。収率＝７５％。
【００７０】
８−ペンタデカニルホスホコリン［（７，７）−Ｐ−コリン］
1ＨＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）：δ  ０．９２（ｔ，６Ｈ）、１．３２（ｓ，２０Ｈ）、１．５９（ｍ，４Ｈ）、３．２３（ｓ，９Ｈ）、３．６３（ｍ，２Ｈ）、４．２６（ｍ，３Ｈ）。ＭＳ（ＦＡＢ）：ｍ／ｚ３９４．３５（Ｍ＋Ｈ）+。
31Ｐ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）：δ：０．６１ｓ。
上記方法と同様の方法によって、下記化合物を合成した。
４−ヘキサデカニルホスホコリン（３，１２−Ｐ−コリン）
1ＨＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）：δ  ０．９１（ｔ，６Ｈ）、１．２８（ｓ，２２Ｈ）、１．５７（ｍ，４Ｈ）、３．２１（ｓ，９Ｈ）、３．６２（ｍ，２Ｈ）、４．２５（ｍ，３Ｈ）。ＭＳ（ＦＡＢ）：ｍ／ｚ４０８．６８（Ｍ＋Ｈ）+。
４−オクタデカニルホスホコリン（３，１４−Ｐ−コリン）
1ＨＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）：δ  ０．９（ｔ，６Ｈ）、１．２８（ｓ，２６Ｈ）、１．５７（ｍ，４Ｈ）、３．２１（ｓ，９Ｈ）、３．６１（ｍ，２Ｈ）、４．２３（ｍ，３Ｈ）。ＭＳ（ＦＡＢ）：ｍ／ｚ４３６．９１（Ｍ＋Ｈ）+。
【００７１】
（実施例６）
例６：尾軽打評価法で試験されたＢＦＡおよびそれらの誘導体の効果（急性の痛みにかかわるモデル系）
分枝鎖状脂肪酸（ＢＦＡ）およびそれらのＤＰ−ＢＦＡ誘導体を、マウスにおいて尾軽打評価法を用い試験した。
尾軽打試験は、ダモア（D'Amour）およびスミス（Smith）により始めて用いられた熱的侵害受容試験であり［Ｄ'ＡｍｏｕｒおよびＳｍｉｔｈによるＪ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．７２：７４−７９（１９４１年）］、また急性痛み閾値の定量測定に広く用いられている動物モデル系である。このモデルは、拘束されているマウスの尾に向けて照射赤外線（ＩＲ）熱源を使用する。熱に対する耐性の閾値は経過時間−メートルにより示され、尾が打ち付けられた時点で即座に中止する。この時間を、「停止潜伏期間」（withdrawal latency）と定義する。
【００７２】
体重ほぼ２５−３０ｇの雄ＣＤ−１マウスを使用した（被験化合物の各投与量について動物４−８匹）。動物をＩＲ供給源［７３７１−プランター(Plantar)（登録商品名）、Ａｎａｌｇｅｓｉａ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ、ＵＧＯ  Ｂａｓｉｌｅ］上の透明なプラスティック製カゴに入れた。このＩＲ発生器はマウスの尾の真下に直接に配置し、また光線は尾のほぼ３分の１の位置に焦点を合わせた。
停止潜伏期間、すなわち赤外線照射の開始時点から動物が痛みを感じ、その尾を軽打するまでの期間を測定する。各動物にかかわる初期停止潜伏期間はｔ＝０で測定し、そのベースラインとして決定した。
【００７３】
被験医薬の鎮痛効果を測定するために、医薬（１０〜２００ｍｇ／体重ｋｇ）を経口（ｐ．ｏ．）によるか、または腹腔内（ｉ．ｐ．）または皮下（ｓ．ｃ．）注射によりマウスに投与した。停止潜伏期間は、医薬投与後の各種指定時点で測定した。各読みは、２〜３回行い、平均値を計算した。媒質単独で処置された対照群動物の停止潜伏期間のパーセントとして表わされる処置動物の停止潜伏期間を表１に示す。注射後の各時点における停止潜伏期間は動物４−８匹／群の平均値である。全部の被験動物にかかわるｔ＝０における停止潜伏期間は、９〜１２秒間であった。一対のＴ−テストを使用し、ベースライン値（ｔ＝０）に比較し、有意であることを評価した。陽性対照としては、モルヒネを使用した（動物２匹／投与量）。
【００７４】
2005500305.tif 000008
【００７５】
表１に示されているように、動物の痛み閾値の増加を示す停止潜伏期間の統計学的に有意の増加が、相違する量のＢＦＡおよびＤＰ−ＢＦＡ分子を用いて見出すことができる。この試験における最大の鎮痛効果は、８−ペンタデカニルホスホコリン［（７，７）−Ｐ−コリン］、１−Ｏ−ステアロイル−２−ペンチルヘプトナイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン［ＤＰ−Ｍ（５，５）］、２−ペンチルヘプタン酸［Ｍ（５，５）］および２−プロピルドテカン酸［Ｍ（３，１０）］の場合に証明された。
一般に、ＤＰ−ＢＦＡ誘導体は、対応するＢＦＡ分子に比較し、モルベースで約３−４倍、さらに強力であった。
最も強力な医薬は、（７，７）−Ｐ−コリンであった。
【００７６】
被験化合物が用量依存様相でそれらの鎮痛効果を発揮したことに気付くことは重要である（ＤＰ−Ｍ（５，５））にかかわる結果を図１に示す）。この試験モデルにおいて、大部分のＢＦＡ化合物による鎮痛効果の持続期間は、投与後、約１．５〜２時間であった。脂質およびホスホ誘導体、ＤＰ−ＢＦＡの場合、有意の効果が注射後の５〜６時間まで見出された。医薬の持続効果がまた、皮下注射（ｓ．ｃ．）されたＤＰ−ＢＦＡ誘導体について証明された。一例として、ｓ．ｃ．注射後の５〜６時間の時点で、（７，７）−Ｐ−コリンは当該医薬１５０ｍｇ／ｋｇで処置された動物において、停止潜伏期間のほぼ８０％増加を示した。
【００７７】
一般に、ＤＰ−ＢＦＡホスファチジルコリン誘導体により処置された動物は、対応するＢＦＡ化合物により処置された動物に比較し、少ない鎮静作用を示した。
結論：この「尾軽打」試験の結果は、ＢＦＡおよびＤＰ−ＢＦＡ化合物が急性の痛み感覚の減少に有効であることを証明している。
【００７８】
（実施例７）
例７：身もだえ試験法（writhing assay）（末梢の急性痛みにかかわるモデル）で試験したＢＦＡ化合物の鎮痛効果
ＢＦＡ化合物の鎮痛効果を、末梢の急性痛みにかかわる動物モデルである身もだえモデル系で評価した。
この身もだえモデルは、化学的侵害受容試験を代表するものであり、刺激性物質を腹腔内注射することによって動物に腹膜炎様症状を誘発させることに基づいている。身もだえ試験は単純であって、再現可能な試験法である。この方法は動物の後肢の緊張により引き起こされる腹部筋肉の反復痙攣を特徴とする［ＪａｑｕｅｓによるＡｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌｆｏｒｓｃｈｕｎｇ、２７：１６９８−７０、１９７７年；Ｓｉｅｇｍｕｎｄ等によるＰｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．９５：７２９−７３１、１９５７年］。
【００７９】
酢酸（ｄｄＨ2Ｏ中０．６％、１０ｍｌ／ｋｇ）のｉ．ｐ．注射によりＣＤ−１マウスに痛みを生じさせた。酢酸投与後の５分の時点から始めて、１５分の経過時間中に生じる身もだえの数（腹部痙攣に引続く背反および伸び）を記録する。
酢酸のみを注射された動物または媒質で処置された動物では、この期間中に平均してほぼ２０〜３０回の身もだえが記録された。処置動物には、酢酸注射に先立つ３０分の時点で１０−２００ｍｇ／体重ｋｇの範囲の種々の投与量で被験化合物を皮下（ｓ．ｃ．）注射した。媒質のみで処置された動物は対照として用いた。
ＢＦＡまたはＤＰ−ＢＦＡの投与後に注射された酸に応答する身もだえ回数の減少は、これらの化合物が急性の痛みの処置に有用である効果的な鎮痛薬として作用することができることを証明している。
【００８０】
（実施例８）
例８：マウスにおけるホルマリン誘発痛みに対するＤＰ−ＢＦＡの効果
ホルマリン誘発痛みは、動物における容易で信頼できる試験法である［Ｔａｋａｈａｓｈｉ等によるＪｐｎ．Ｊ．Ｏｒａｌ．Ｂｉｏｌ．２６：５４３−５４８（１９８４年）］。痛みは、マウス類を包含する多数の種の動物でホルマリン注射により誘発させることができ、本質的に二相様相である。初期急性侵害受容相（注射後の０〜５分間）および引続く神経障害性痛みに類似する第二相（ほぼ１５〜６０分）を包含する。中間期（静態相）は動物が最も小さい痛みの発現を示す期間であり、通常有害な刺激後のほぼ５〜１５分間である。
痛みの評価は、ホルマリン注射後に動物に見出される挙動に基づいている。多くの特徴的挙動が発現され、この挙動には中でも、四肢を舐める挙動、しりごみ挙動、地面から足を持ち上げる挙動、足を引きずる挙動または注射された足に一般的に見出される炎症症状がある。
【００８１】
実験デザイン
ホルマリン原液（Ｆｒｕｔａｒｏｍ  Ｌｔｄ．，Ｉｓｒａｅｌ；ｃａｔ．＃５５５１８３０；３．４−３．８％ホルムアルデヒド含有量）を塩類溶液中で２．５％ホルマリン溶液に稀釈した。この２．５％ホルマリン溶液２５μｌを、２９Ｇ針を備えた注射器を用いＣＤ−１マウスの足の足底に注射した。足を舐め、次いで足を地面から持ち上げる挙動として見出される動物の反応が注射後に直ちに見られた。ホルマリンのみが注射された処置動物および対照の生れたままの動物の両方を、５分毎の間隔で４０分間にわたり監視した（１群４−６匹の動物）。
【００８２】
痛みの評価は、動物がその足を舐めるのに費やす時間を記録することによって行った。予め設定した５分間の間、各動物がその足を舐めるのに費やす総秒数を測定するためのコンピュータープログラムを使用した。この工程を４０分間まで反復した（５分の間隔で８回）。
ホルマリン注射に先立つ１時間の時点で（７，７）−Ｐ−コリン１５０ｍｇ／ｋｇを皮下投与した実験から記録された結果が、図２に示されている。
【００８３】
図２から見ることができるように、（７，７）−Ｐ−コリンで処置された動物は、非処置動物に比較し、それらの足を舐める時間が有意に短い。この応答の減少は、ホルマリンによる処置後の１０〜３５分間、慢性相で生じる。
医薬による処置後、ホルマリン誘発痛みに対する動物の応答の減少は、この医薬の鎮痛作用を示している。
【００８４】
（実施例９）
例９：慢性狭窄損傷（ＣＣＩ）モデル系（神経障害性痛み）で測定されたＢＦＡ化合物の効果
慢性狭窄損傷（chronic constriction injury）（ＣＣＩ）は、ネズミ類における慢性末梢単神経障害を生じさせるＢｅｎｎｅｔおよびＸｉｅにより開発された動物モデル系である［Ｐａｉｎ  ３３：８７−１０７（１９８８年）］。
神経障害性痛みは、坐骨神経をゆるやかに結紮することによって生じさせ、痛覚過敏（痛みを伴う刺激に対する増大した感受性）および異痛（正常では無害な刺激に応答する感受性）を特徴とする。
【００８５】
体重ほぼ２００−２５０ｇの雄のスプラギュー−ダウレイ（Sprague-Dawley）（ＳＤ）ラットを、ケタミン(ketamine)（５０ｍｇ／ｋｇ）およびキシラジン(xylazine)（１０ｍｇ／ｋｇ）のｉ．ｐ．注射によって麻酔した。右後肢大腿部の中央部で、共通坐骨神経を露出させた。この神経の周囲を約１ｍｍの間隔で４ヶ所、ゆるく結紮した。切開部をクロムグート縫合（chromic gut suture）により縫合することによって、筋肉の内層を閉じた。５〜７日後、侵害受容閾値は、異痛を評価するための機械的刺激または冷たい温度に対する足の感受性を量的に測定することによって評価することができる。
【００８６】
動物の足の機械的感受性は、ホンフレイ（von Frey）試験を用い測定する［ＫｉｍおよびＣｈｕｎｇによるＰａｉｎ  ５０：３５５−６３（１９９２年）］。自動式ホンフレイ試験を採用した。この試験では、ホンフレイフィラメントを動物の足の足底表面に適用し、このフィラメントを予め調整された押付け力／時間経過で足底に自動的に押付ける。各測定は被験動物の各同側（epsilateral）および対側（contralateral）肢で２〜３回、反復した。この無害刺激から足を引っ込めるまで、処置動物で圧力適用後の経過時間を測定し、処置前の各動物で得られたベースライン値と比較した。
【００８７】
手術後の１５日目に（７，７）−Ｐ−コリン１５０ｍｇ／ｋｇを皮下投与した後、相違する時点で測定された機械的異痛試験の結果が図３に示されている。対照として用いるＣＣＩ処置動物には、媒質のみを注射した。
図３から見ることができるように、（７，７）−Ｐ−コリンによる処置は、医薬投与後の少なくとも５時間にわたり停止閾値を有意に増大させた。
【００８８】
冷感感受性を、アセトンに対する応答として足を強く引っ込める挙動を監視することによって量的に評価した。アセトンは動物の足の足底表面に施用し、足を引っ込める挙動の頻度を、チョイ(Choi)等により開示されたとおりに測定した［Ｐａｉｎ  ５９：３６９−３７６（１９９４年）］。
冷感異痛のもう一つの試験方法は、氷冷水（２−４℃）中に３ｍｍまで浸した金属台上に動物を配置することによるものである。動物は、この台上を２分間にわたり歩かせ、この期間中、足を上げた数を記録する。これらの停止／足上げ数（スコア）を、処置前の同一動物と比較し、適用処置の鎮痛効果の評価に使用した。
【００８９】
もう一つの試験において、無害性痛みに対する過敏を量的に評価した。この試験には、痛み刺激として、尾軽打試験法にかかわる例６に上記した方法と同様の照射赤外線（ＩＲ）熱を使用したが、この場合、ＩＲの焦点はラットの後肢の足底に合わせた。後肢の停止潜在期間を、ＢＦＡ／ＤＰ−ＢＦＡの種々の投与量（１０〜２００ｍｇ／体重ｋｇ）で予備処置した動物または媒質のみで処置した動物（対照）で記録した。停止潜在期間は、被験医薬または媒質溶液のｓ．ｃ．注射後の１５分、４５分、７５分、１０５分および１４５分の時点で記録した。測定された停止潜在期間を、ｔ＝０で測定された各動物にかかわる初期停止潜在期間および注射されていない後肢で測定された停止潜在期間と比較した。生れたままの損傷していないラットにかかわる侵害受容閾値を確立するという目的で、同一挙動試験を、手術前の１日目に全部の動物に対して行った。
ＢＦＡおよびＤＰ−ＢＦＡ化合物の鎮痛効果を、これらの医薬により処置された動物の注射した足で測定された停止潜在期間の増加を記録することによって試験した。この鎮痛効果はまた、ホンフレイ試験法および冷感感受性試験法によっても評価される。
【００９０】
（実施例１０）
例１０：脊髄のヘミセクシヨン損傷（中枢神経障害性痛み）
脊髄ヘミセクシヨン（hemisection）は中枢慢性神経障害性痛みの受容されるモデル系である。
体重ほぼ２００−２５０ｇの雄スプラギュ−ダウレイ（ＳＤ）ラットをケタミン（５０ｍｇ／ｋｇ）およびキシラジン（１０ｍｇ／ｋｇ）により深く麻酔した。脊髄は、周辺血管を損傷することなく目盛り付きブレードによりＴ９〜Ｔ１２のレベルで半側切断する。次いで、切開部分を閉じる。偽装手術した動物を対照群として使用する。
【００９１】
例９で上記した機械的および熱的異痛を代表する挙動試験を両後肢で手術前及び手術後に行った。手術前試験は手術に先立つ１日目に行い、個別および群の両方のベースライン挙動の確立に使用する。これらの試験は手術後の５日目〜７日目に始め、隔日に行い、３０日までの期間で行った。四肢の機械的異痛は、ホンフレイフィラメントにより適用される正常では無害の機械的刺激に応答して活発な四肢が停止する数を測定することによって量的に測定する［Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ等によるＰａｉｎ  ６８：９７−１０７（１９９６年）］。
【００９２】
ＢＦＡおよびＤＰ−ＢＦＡ化合物の鎮痛効果を試験する。ホンフレイフィラメントによる刺激に対する応答として四肢を停止する数の減少は鎮痛効果を示す。有益な効果がまた、熱的試験でも見出され、この場合、医薬で処置された損傷動物の同側足における停止潜在期間の増加は鎮痛活性を表す。
結論：被験分枝鎖状脂肪酸化合物およびそれらのＤＰ−誘導体は、神経障害性痛みを包含する痛みの処置に使用することができる強力な鎮痛薬である。
【００９３】
前記説明は本発明を単に例示するために記載されているものであって、制限しようとするものではない。当業者は、多くの変更および修正を本発明の教示から逸脱することなくなしうるものと認識するものと見なされる。従って、本発明は特に記載されている態様に制限されるものと解釈されるべきではなく、むしろ本発明の範囲、精神および概念は特許請求の範囲を参照することによってさらに容易に理解されるものと見なされる。
【図面の簡単な説明】
【００９４】
【図１】照射熱「尾軽打」（tail flick）試験法を使用し、マウスで試験した場合のＤＰ−Ｍ（５，５）２５ｍｇ／ｋｇ（灰色バー）、５０ｍｇ／ｋｇ（縞柄バー）および１００ｍｇ／ｋｇ（黒色バー）の鎮痛効果を表わすグラフ（実施例６）。
【図２】マウスにおけるホルマリン誘発痛み試験で分析された８−ペンタデカニルホスホコリン［（７，７）−Ｐ−コリン］の鎮痛効果を表わすグラフ（実施例８）。
【図３】機械的異痛にかかわる試験法により試験した８−ペンタデカニルホスホコリン［（７，７）−Ｐ−コリン］の効果を表わすグラフ（実施例９）。
【図１】
2005500305.tif 000013
【図２】
2005500305.tif 000014
【図３】
2005500305.tif 000015
【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
2005500305.tif 000059