(57)【要約】【課題】塩／イオンが対になった医用エアゾル薬剤の提供。【解決手段】この発明の薬剤は、（ａ）タンパク質あるいはペプチド薬物の特定の塩／イオン対と、（ｂ）前記薬物を包含するための流体キャリアとを備える。【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の構成を備える医用薬剤。
（ａ）分子の大きさが約０．５Ｋドルトンから約１５０Ｋドルトンの範囲のタンパク質あるいはペプチド薬物の有効治療量の塩／イオン対
（ｂ）前記イオン対を包含するための流体キャリア
【請求項２】
前記薬物は、次に示すグル−プ、すなわち、インシュリン、インシュリン類似物、アミリン、免疫拡大タンパク質、インタ−ロイキン、インタ−フェロン、エリトロポイエティン、ヘパリン、トロンボリティクス、アンチトリプシン、アンチ‐プロテア−ゼ、ホルモン、生長因子、酵素、核酸、免疫グロブリン、抗生物質、抗感染薬、カルシトニン、造血因子、ワクチン、管活性ペプチド、アンチセンス物質、オリゴヌクレオチド、デオキシリボヌクレア−ゼ、シクロスポリン、リバビリン、あるいは、上述したいずれかの薬物の混合物、から選ぶものの一つである、請求項１の薬剤。
【請求項３】
前記薬物は、次に示すグル−プ、すなわち、インシュリン、インシュリン類似物、アミリン、グルカゴン、ＬＨ‐ＲＨ、デルチレックス、ロイプロライド、ゴソレリン、ナファレリン、オクレオタイド、ソマトスタチン、カルシトニン、ポラチロイドホルモン、ＴＲＨ、成長ホルモン放出ホルモン、Ｇ‐ＣＳＦ、Ｇ‐ＳＦ、サイトカイン、ｒｈデオキシリボヌクレア−ゼ、ヘパリン、抗生物質、アルブミン、オバルブミン、アミンロライド（aminloride）、ＤＤＡＶＰ、ＶＩＰ、シクロスポリン、エリトロポイエティン、インタ−フェロン、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、インタ−ロイキン、ＩＲＡＰ、パパイン、ペルオキシダ−ゼ、セラチオペプチダ−ゼ（serratio peputidase）、カタラ−ゼ、α‐１‐アンチトリプシン、遺伝子、ベクタ−、アミロライド、ｒｈデオキシリボヌクレア−ゼ、オリゴヌクレオチド、リバビリン、あるいは、上述したいずれかの薬物の混合物、から選ぶものの一つである、請求項１の薬剤。
【請求項４】
前記イオン対は、Ｃａ、Ｍｇ、Ｚｎ、Ａｌ、Ｆｅ、および、上述した金属のいずれかの混合物から構成されるグル−プから選ぶ金属のカチオンである、請求項１の薬剤。
【請求項５】
前記薬物がインシュリンである、請求項１の薬剤。
【請求項６】
（ａ）水付加、（ｂ）アミノ酸あるいはその誘導体、および（ｃ）上述したもののいずれかの混合物から構成されるグル−プから選ぶ安定剤をさらに含む、請求項１の薬剤。
【請求項７】
前記安定剤が前記水付加である、請求項１の薬剤。
【請求項８】
前記安定剤の量は、医用エアゾル薬剤の全重量に対して約１０ｐｐｍから約５０００ｐｐｍである、請求項７の薬剤。
【請求項９】
前記安定剤は、アミノ酸あるいはその誘導体である、請求項１の薬剤。
【請求項１０】
前記安定剤は、現存する２０のアミノ酸、それのいずれかの混合物、および上述したもののいずれかの誘導体から構成されるグル−プから選ぶものである、請求項９の薬剤。
【請求項１１】
前記安定剤は、（１）酸化および非酸化のＬ‐システイン‐グリシン、γ‐Ｌ‐グルタミル‐Ｌ‐システイン、Ｎ‐アセチル‐Ｌ‐システイン‐グリシンの塩およびエステルを含むグル−プから選ぶジペプチド、（２）共役、非共役あるいは高分子化いずれかの形態のＬ‐Ｇｌｙ‐Ｌ‐ＧｌｕおよびＬ‐Ｖａｌ‐Ｌ‐Ｔｈｒ、（３）Ｌ‐アスパルチル‐Ｌ‐フェニルアラニン、（４）ムラミルジペプチド、（５）Ｌ‐チロシル‐Ｌ‐チロシン、Ｌ‐アラニル‐Ｌ‐チロシン、Ｌ‐アルギニル‐Ｌ‐チロシン、Ｌ‐チロシル‐Ｌ‐アルギニン、Ｎ‐Ｃｂｚ‐Ｌ‐Ｌｅｕ‐Ｌ‐Ｌｅｕ‐ＯＣＨおよび上述したものの塩あるいはエステルを含むグル−プから選ぶ栄養素、（６）グリシル‐グリシン、（７）Ｎ‐アセチル‐Ｌ‐アスパラギン酸塩‐Ｌ‐グルタミン酸塩（ＮＡＡＧ）、（８）酸化および非酸化のγ‐Ｌ‐グルタミル‐Ｌ‐システイニルグリシン、ムラミルトリペプチドを含むグル−プから選ぶトリペプチド、ならびに（９）上述した安定剤のいずれかの混合物を包含するグル−プから選ぶものである、請求項１０の薬剤。
【請求項１２】
前記安定剤の量は、薬剤の全重量に対して約０．００１ｐｐｍから約２００，０００ｐｐｍである、請求項１０の薬剤。
【請求項１３】
前記安定剤は、薬剤を撹拌した後で、再現性のある薬物投与を妨げるような速さで薬物が沈殿せず、上かすが生ぜず、あるいは凝集が生じないようにする上で効果的な量である、請求項６の薬剤。
【請求項１４】
前記流体キャリアは、1,1,1,2‐テトラフルオロエタン、1,1,1,2,3,3,3‐ヘプタフルオロプロパンあるいはその混合物を含むグル−プから選ぶプロペラントである、請求項１の薬剤。
【請求項１５】
前記流体キャリアは、ｎ‐ブタン、プロパンおよびイソペンタン、ならびにそれらの混合物を含むグル−プから選ぶ炭化水素である、請求項１の薬剤。
【請求項１６】
共溶媒をさらに含む、請求項１の薬剤。
【請求項１７】
前記共溶媒がエタノ−ルである、請求項１６の薬剤。
【請求項１８】
前記塩／イオン対は、インシュリン塩／イオン対の架橋結合した結晶である、請求項１の薬剤。
【請求項１９】
請求項１の安定した医用エアゾル薬剤を調製する方法であって、次の各工程を備える方法。
（ａ）（ｉ）治療上有効な複数回の投与をするのに充分な量の前記塩／イオン対と、（ii）治療上有効な複数回の投与をするのに充分な量の前記流体キャリアとを結合する工程
（ｂ）（ｉ）および（ii）の構成成分を分散させる工程
【請求項２０】
工程（ａ）で安定化させる上で有効な量の安定剤を結合し、しかも、工程（ｂ）で前記安定剤と（ｉ）および（ii）の構成成分とを分散させることをさらに含む、請求項１９の方法。
【請求項２１】
工程（ａ）で共溶媒を結合し、しかも、工程（ｂ）で（ｉ）、（ii）および（iii）の構成成分を前記共溶媒と分散させることをさらに含む、請求項２０の方法。
【請求項２２】
前記共溶媒がエタノ−ルである、請求項２１の方法。
【請求項２３】
経口あるいは経鼻による吸入によってヒトあるいは動物を治療する方法であり、請求項１の薬剤を前記ヒトあるいは動物に経口あるいは経鼻吸入で投与することからなる方法。
【請求項２４】
所定用量バルブを付属したエアゾル容器中にある請求項１の薬剤。
【請求項２５】
医用エアゾル薬剤を含む所定用量吸入器であって、その薬剤が次の構成を備える吸入器。
（ａ）治療上有効な量の粒子形態のタンパク質あるいはペプチドの塩／イオン対
（ｂ）流体キャリア
【請求項２６】
前記薬剤が、さらに、（１）発生期の処方水を越える量であり（２）その薬剤を撹拌した後で、再現性のある薬物投与を妨げるような速さで薬物が沈殿せず、上かすが生ぜず、あるいは凝集が生じないように前記薬剤を安定化させる量の水付加を含む安定剤を備える、請求項２５の所定用量吸入器。
【請求項２７】
前記安定剤における越える量が、前記医用エアゾル薬剤の全重量に対して約１０ｐｐｍから約５０００ｐｐｍの量である、請求項２６の所定用量吸入器。
【請求項２８】
前記薬剤は、アミリン、インシュリン、および上述したものの混合物から構成されるグル−プから選ぶものである、請求項２６の薬剤。
【請求項２９】
前記薬剤は、さらに、アミノ酸、その誘導体、あるいはそれらの混合物から選ぶ適切な安定剤であり、その薬剤を撹拌した後で、再現性のある薬物投与を妨げるような速さで薬物が沈殿せず、上かすが生ぜず、あるいは凝集が生じないように前記薬剤を安定化させる量のものを含む、請求項２５の所定用量吸入器。
【請求項３０】
前記安定剤は、現存する２０のアミノ酸、それのいずれかの混合物、および上述したもののいずれかの誘導体から構成されるグル−プから選ぶものである、請求項２９の所定用量吸入器。
【請求項３１】
前記薬物がアミリンである、請求項２５の所定用量吸入器。
【請求項３２】
前記薬物がインシュリンである、請求項２５の所定用量吸入器。
【請求項３３】
前記薬物がアミリンである、請求項２９の所定用量吸入器。
【請求項３４】
前記薬物がインシュリンである、請求項２９の所定用量吸入器。
【請求項３５】
前記流体キャリアは、1,1,1,2‐テトラフルオロエタン、1,1,1,2,3,3,3‐ヘプタフルオロプロパンあるいはその混合物を含むグル−プから選ぶプロペラントである、請求項２５の所定用量吸入器。
【請求項３６】
前記流体キャリアは、ｎ‐ブタン、プロパンおよびイソペンタン、ならびにそれらの混合物を含むグル−プから選ぶ炭化水素である、請求項２５の所定用量吸入器。
【請求項３７】
前記薬剤が共溶媒をさらに含む、請求項２５の所定用量吸入器。
【請求項３８】
前記共溶媒がエタノ−ルである、請求項３７の所定用量吸入器。
【請求項３９】
前記流体キャリアは、1,1,1,2‐テトラフルオロエタン、1,1,1,2,3,3,3‐ヘプタフルオロプロパンあるいはその混合物を含むグル−プから選ぶプロペラントである、請求項２９の所定用量吸入器。
【請求項４０】
前記流体キャリアは、ｎ‐ブタン、プロパンおよびイソペンタン、ならびにそれらの混合物を含むグル−プから選ぶ炭化水素である、請求項２９の所定用量吸入器。
【請求項４１】
前記薬剤が共溶媒をさらに含む、請求項２９の所定用量吸入器。
【請求項４２】
前記共溶媒がエタノ−ルである、請求項４１の所定用量吸入器。
【発明の詳細な説明】
【発明の背景】
【０００１】
発明の分野
この発明は、医用エアゾル薬剤に関し、さらに詳しくは、塩／イオンの対の薬物を含み、ゆっくりと溶解する、放出調整した医用エアゾル薬剤に関する。
【０００２】
先行技術の説明
吸入によって薬剤を肺に送ることは、いろいろな症状を治療するための重要な方法である。症状としては、嚢胞性繊維症、肺炎、気管支喘息や慢性閉塞性肺疾患のような通常の局部的な疾患、ならびに、疼痛処理、免疫不全、ホルモン療法、赤血球造血、糖尿病などを含むいくつかの全身的な症状がある。ステロイド、β２アゴニスト、抗コリン作用物質、タンパク質およびポリペプチドは、そのような目的で肺に投与される薬剤の仲間である。そのような薬剤は、通常、吸入可能な大きさ（直径が約１０μｍ以下）の粒子のエアゾル形態で肺に投与する。エアゾル中の粒子の大きさを適正化するために、粒子を吸入可能な大きさに調製し、その後に、加圧所定用量吸入器（ＭＤＩ）のプロペラント、あるいは乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）の場合におけるエアのいずれかを含むコロイド分散系に混合する。その代わりに、薬剤を溶液あるいはエマルジョン中に調製し、薬剤中の粒子サイズを適正化することができる。それでも、溶液薬剤は、吸入可能な大きさの粒子あるいは小滴を生じるように分配しなければならない。
【０００３】
ＭＤＩの調製のためには、いったん調製したエアゾル薬剤を、所定用量のバルブ付きのエアゾル容器に充填する。患者が手に持ち、アクチュエ−タによって薬剤の所定用量をバルブから患者に供給する。
【０００４】
所定用量のバルブから放出する薬剤が再現できるように、エアゾル薬剤は安定であることが重要である。撹拌した後ですぐにクリ−ム化すること、沈降すること、あるいは、凝集することが、分散した薬剤において、所定用量を再生産（再現）できない通常の原因である。バルブが動けなくなることも、また、所定用量を再現できない原因になりうる。それらの問題に打ち勝つために、ＭＤＩエアゾル薬剤は、しばしば界面活性剤を含んでいる。界面活性剤は、懸濁助剤として働き、所定用量を再現するに充分な時間、懸濁液を安定化させる。ある種の界面活性剤は、また、潤滑剤として機能し、バルブを潤滑して作動を滑らかにする。エアゾル薬剤の分散助剤として用いる、無数の物質が知られ明らかになっている。しかし、物質の適合性については、薬剤（処方）に用いる薬物やプロペラント、あるいはプロペラントの種類次第である。
【０００５】
たとえば、ＨＦＣ‐１３４ａやＨＦＣ‐２２７のようなハイドロフルオロカ−ボン（ＨＦＣ）プロペラント中に、通常の界面活性剤の充分な量を溶解することは時に困難である。米国特許第５，２２５，１８３号が示すように、この問題を解決するために、たとえば、エタノ−ルのような共溶媒が用いられている。共溶媒を避ける別の方法として、ハイドロフルオロカ−ボンプロペラントに可溶、あるいは均一に分散可能であり、エアゾル薬剤中で界面活性剤あるいは分散助剤となる物質を用いる方法がある。そのような物質の中に、特定のフッ素化した界面活性剤やポリエトキシ界面活性剤（polyethyoxysurfactants）がある。
【０００６】
割合に低分子の薬物は、エアゾル薬剤特性に関して高分子のものよりもはるかに予測可能である。たとえば、ペプチドあるいはタンパク質のような高分子（分子の大きさが約１Ｋドルトンから約１５０Ｋドルトンの範囲）は、安定かつ再現性のある用量を提供するエアゾル薬剤を作る際、非常に予測がしにくく、しかも、独特な問題を生じる。
【０００７】
ホルモン（たとえば、インシュリン、アミリンなど）、酵素、抗感染薬（antinfectives）のような、たいていのペプチドあるいはタンパク質は、それらのアミノ酸構造および立体構造が非常に変化しやすい。したがって、それらの表面活性は、非常に変わりやすく、そして、重要なことには、タンパク質の最も基礎的で構造的な特性、たとえば、分子量、吸着性、溶解性、分配係数、および等電ｐＨ、に基づいてタンパク質の表面活性のちがいを説明するモデルは、いまだに得られていない。たとえば、ヘモグロビンは、アルビミンよりも、固体表面に対してはるかに大きな親和力をもつが、これら２つのタンパク質の分子量は非常に似通っている。基本的には、ペプチドとタンパク質の表面活性における相違は、タンパク質の各タイプで独特な特性を示すアミノ酸のリニアな配列から生じる。アミノ酸の側鎖のあるものは、どんなｐＨにおいても電荷をもたないという点で劇的に異なるが、かなりの極性（セレン、トレオニン）を示す。その他のアミノ酸は、イオン化可能であり、かなりの酸性（アスパラギン酸およびグルタミン酸は、７．４の生理学ｐＨにおいて完全に負に荷電する）から塩基性の機能性まで異なる。たとえば、ヒスチジンのイミダゾ−ル基はｐＨ７．４で部分正荷電を保持し、また、リジンおよびアルギニンのさらに多くの塩基性アミノ基はｐＨ７．４で完全に正に荷電する。性質が多少炭化水素に似た、アミノ酸の他の基は、一般に、生物系で見い出される他のアミノ酸の多くのものよりも、水における溶解度プロフィ−ルが非常に小さい（トリプトファン、フェニルアラニン、イソロイシンなど）。注目すべきは、水を嫌うこれらのアミノ酸の疏水性が、それらのタンパク質の独特な構造によって大きく変化することである。たとえば、アラニンの単一メチル基の側鎖は、水から有機相に転移する自由エネルギ−がわずか０．５ｋｃａｌ／ｍｏｌｅであるのに対し、トリプトファンの二重環インド−ル基のそれは３．４ｋｃａｌである。アミノ酸の側鎖の種類は、溶液および表面に帰着する化学的相互作用についての多くの異なるタイプとともに、ペプチドおよびタンパク質の生物学的作用物質が生物膜を通して輸送されることには勿論のこと、エアゾル薬剤の安定性に大きな影響をもつことが期待される。
【０００８】
アミノ酸の側鎖の多様な特性は、特定のタンパク質のそれぞれがもつアミノ酸の種々の組み合わせの複雑さとともに、タンパク質の物理化学的な特性、分子内だけでなく分子間の反応性、さらには、表面との相互作用力が大きく変化しうることを意味する。それらの大きさ（サイズ）が大きいことにより、同様に、荷電した非常に多くのアミノ酸側鎖により、タンパク質は、その外側表面全体に多くの電荷が分布している。このために、エアゾル薬剤の安定性、および肺によるそれらの混合物の吸収は、大きく変動することになる。また、ペプチドおよびタンパク質の薬物は、一般に、多数のイオン化サイトをもち、したがって、しばしばｐＨ依存の溶解度プロフィ−ルを示す。重要なことに、これらの混合物の親水性特性が、水の溶解を高める上で良い状態を生み出す。その結果、ペプチドおよびタンパク質のたいていの薬物は、脂質の溶解度特性が極端に低い。この後者のことは、ハイドロフロロカ−ボンプロペラント中におけるこれらの薬物の分散が、広範囲の保管状態を通して物理的および化学的に安定していることの一つの理由となりうる。ペプチドおよびタンパク質の薬物を含むエアゾル薬剤は、実質上それらが不溶の基剤（キャリア−）つまり薬剤調製物の中にあるが、加水分解の不活性および化学的な不活性（一般的には、水溶液について）を弱めることが必要である。
【０００９】
大きな表面積、薄い吸収膜、および広範囲な脈管構造の組合わせにより、タンパク質およびペプチドを肺経路で供給するとき、それらタンパク質およびペプチドに対する好ましい吸収環境が構築される。研究によると、ペピチドの内部気管（intratracheal;i.t.）投与は迅速かつ量的な把握が可能であるが、投与の結果の分布は、しばしば中央の気道に部分的に集中する。たとえば、エアゾルによる投与は、粒子の大きさ分布に依存するが、肺胞への大きな浸透を伴い、より均一な分布を与えるために用いる。気道からの薬物吸収は、沈着する場所、薬物供給の方法、溶解の仕方および薬剤の組成に応じて変わる。したがって、薬剤および装置の特性が、肺からのペプチド吸収の速度および量に大きな影響を与える。研究によると、小分子量の化合物をエアゾルで供給したとき、その化合物の吸収速度は、内部気管供給の場合のおおよそ二倍である。望まれることは、ペプチドおよびタンパク質を多用量吸入装置（「ｐＭＤＩ）によって疏水性の分散とし、肺周辺で薬物粒子の浸透を大きくし、その吸収が水性の液注入の場合における沈着薬物よりもはるかに大きくなるようにすることである。
【００１０】
インシュリンが肺から血流の中に吸収されることは、多くの科学者が明らかにしてきている。１９９０年の論評の一つ（Lung, supplement pp.677-684）が、多くの研究結果から、エアゾル化したインシュリンを肺に供給するとき半減期が１５〜２５分であることを示しているが、結果はまったく不安定である。また、包括的な研究によると、中央気道に液滴下したインシュリンが５．６パ−セントの生物学的利用能を示すのに対し、ウサギについて周辺から肺に与えたエアゾル化インシュリンのそれは５０．７パ−セントを越えていた。したがって、これらの研究から、エアゾル化シンシュリンが最大の効率で周辺から肺へ供給されるということ、および、吸入によるエアゾル化インシュリンをうかつに配置すれば、求めるものの１／１０の効果を得るにすぎないことが分かる。エアゾル化インシュリンが糖尿病の治療に有効な方法であるなら、１０倍の投与量によるそのような変動は、明らかに許容することができない。したがって、人体にエアゾル化インシュリンを供給するために必要とされる許容誤差を達成するため、効率的で高精度なエアゾル装置が求められるところである。糖尿病の管理にエアゾル化インシュリンを用いる考え方は、また、アミリンやグルカゴン、プラズマグルコ−ス濃度調整のインシュリンに対するパ−トナ−ホルモンにも適用することができる。それについて、今までは、皮下注射（s.c.）で投与せざるを得なかった。
【００１１】
ペプチドおよびタンパク質薬剤を乾燥粉末で提供する場合、薬剤（処方）に独特な機会がある。それは、多用量吸入装置（ｐＭＤＩ）や霧状溶液のような液体での提供では生じない。ペプチドおよびタンパク質の乾燥粉末エアゾルは、固体状態の安定性が改善されており、薬剤（処方）の観点から、魅力がある。溶液および液体状態には、多くの好ましからざる相互作用の影響があるからである。この点、ルブサ−メンほかの米国特許第５，６７２，５８１号、およびパットンほかの米国特許第５，７７５，３２０号を参照されたい。
【００１２】
ルブサ−メンおよびパットンの方法は、複雑さや予想される固有のコストによって、真正糖尿病のような慢性病の管理（治療）への適用は制限される。したがって、必要とする患者に低血糖薬を日常的に供給するため、持ち運び可能で電気的な小型の噴霧器のような高価で複雑な装置を用いることが問題である。さらに、肺から体に低血糖薬を供給するため、パットンの装置のような、大きく重量があり、清浄化しにくい乾燥粉末エアゾル装置を用いることが問題である。したがって、ペプチドあるいはタンパク質の薬物を乾燥粉末吸入エアゾル（ＤＰＩ）として処方する際における主要な目的は、薬物（ある場合には、賦形剤を添加）を、化学的および物理的に安定であり、薬物粒子が肺胞あるいは他の吸収個所に到着するまで分散相（サスペンション）中に残存できるエアロコロイドを形成することができるようにすることである。いったん吸収個所に達すると、薬物粒子は、沈着個所に有効に捕らえられ、上皮の裏の流動体に迅速に溶解し、そして、生物膜を通してすばやく吸収される。そのために、気道中の新陳代謝酵素によって不活性化されることが制限される。
【００１３】
スプレ−ドライ（spray drying）は、薬物処方の薬物粒子を作るための一つのプロセスである。スプレ−ドライは、溶液あるいは分散相を粉末に変化させる単一の工程プロセスを構成する。一般に、スプレ−ドライによって、球状の粒子が作られるが、それらの粒子はしばしば中空であり、その結果、当初の物質に比べて容積密度が小さい粉末になる。スプレ−ドライ物質の粉末特性（すなわち、粒子の大きさ分布、容積密度、多孔度、湿気量、分散性など）は、一般に多くの面で良好である。しかし、このプロセスで作った粒子は、流動性が低い。さらに、このプロセスによって粒子を作る際、熱が必要であると、ペプチドやタンパク質薬物のような熱に敏感な化合物に対して、スプレ−ドライは魅力が小さい。したがって、たいていの乾燥粉末エアゾルは、装置を通る際の付着性および貧弱な流動性をもち、薬の供給量の精度が患者にとって問題になるという範囲で問題である。
【００１４】
乾燥粉末エアゾルとしてのペプチドやタンパク質薬物に関係するもう一つの問題は、それらの物質を装置に塊として詰め込むときの問題である。噴霧するとき、塊がばらばらになり、個々の粒子が気道に入り込む前に自由になるようにしなければならない。ミクロンあるいはサブミクロンの大きさの粒子のしっかりとした塊を調製することは、それほど難しい作業ではなく、重合体の結合剤を伴ったり伴わなかったりする通常の造粒技術によって達成することができる。しかし、気道に入る際に、塊がばらばらの一次粒子になるという要求は、おそらく単純で一般的な造粒方法では不可能であろう。というのは、粒子内部の力が大きいので、塊をばらばらにすることを容易に、効率良く、しかも迅速に行うことができないからである。粒子とは異なる二つのものの全付着力、あるいは粒子のような二つのものの凝集力は、一あるいは二以上の引力の総計からなると考えることができる。これらの力の多くは、薬剤（処方）中の乾燥粉末と賦形剤粒子との間の付着ユニットを形成する原因になることが知られている。したがって、粒子内部の力を使うことにより、直径５０〜２００μｍの間の塊を作ることができるだろう。そうした大きさは、供給装置の中での流れ、保管および充填に充分に耐える強度をもち、しかし、吸込みエアの流れ中の剪断力によって、すばやくしかも完全にばらばらになるであろう。ペプチドやタンパク質のエアゾル薬剤で全く一般的なこの問題は、液状の薬剤では完全に回避することができる。液状の薬剤において、薬物は不溶性であり、コロイド状の分散相として提供され、自己結合することから立体的に守られる。それにより、ペプチドおよびタンパク質薬物については、ハイドロフロロカ−ボンのような非水媒体中に遊離し、凝集したコロイドとして調製することが望まれる。そのコロイドは、気道への噴霧によって個々の粒子にすばやくかつ容易にばらばらになる。さらには、薬物粒子が絶え間なくランダムな運動をし、それにより、個々の薬物粒子が集合しないようにした、ペプチドおよびタンパク質薬物系を提供することが望まれる。
【００１５】
注射を用いない（非注射）他の糖尿病治療法が提案されており、あるものでは、清浄剤（表面活性剤）と膜浸透剤とを調製するとき、インシュリンの経鼻投与の後で生物学的療法反応が起こることを示している。モ−ゼほか、糖尿病（Diabetes）、Vol.32、1983年11月、および、ザルツマンほか、ニュ−イングランド医薬ジャ−ナル（New England Journal of Medicine）、Vol.312、No.17が示すものがそれである。かなりの間主観的な変動、および鼻粘膜の刺激が、変化はあるが、観察される。糖尿病は、インシュリンを投与することによって絶えず治療しなければならない慢性病であること、および粘膜刺激が膜浸透向上剤に繰り返しさらされることに伴って増加する経口があること、を理由として、インシュリンの非侵襲性の（注射などを用いない）経鼻投与を開発し商品化しようとする努力がなされていない。したがって、ｐＭＤＩとして肺経由のペプチドおよびタンパク質薬物の供給方法として、安全で、再現性があり、有効であり、非侵襲性のものが望まれるし、必要とされる。
【発明の開示】
【発明のサマリ−】
【００１６】
この発明は、塩／イオンが対になった医用エアゾル薬剤に関し、さらに詳しくは、ゆっくりと溶解する、放出調整した塩／イオン対のタンパク質あるいはペプチド医薬であり、分子の大きさが約１Ｋドルトン（Dalton）から約１５０Ｋドルトン（Dalton）の範囲のものである。
【００１７】
この発明は、加圧供給するのに適した、安定なサスペンションエアゾル薬剤を包含する。この発明の薬剤は、（１）高分子医薬あるいは薬物の特定の塩／イオン対と適切なプロペラントとを備える。その塩／イオンの対は、通常とは異なりサスペンション（懸濁）特性を向上させ、溶解速度を減少させ、そして、体の中で高分子医薬の持続割合を増大する。
【００１８】
適切な高分子医薬あるいは薬物は、吸入による投与に適したものである。吸入には、経口および経鼻による治療を用いる。流体中にコロイド分散した安定な医薬である。流体としては、たとえば、エア、炭化水素ガス、クロロフルオロカ−ボン（ＣＦＣ）プロペラント、あるいは、テトラフルオロエタン（ＨＦＡ‐１３４ａ）やヘプタフルオロプロパン（ＨＦＡ‐２２７）のような非ＣＦＣプロペラントを用いる。
【００１９】
この発明を適用するのに適した薬剤は、患者（たとえば、ヒトや他の動物）に供給するのに適した安定な疏水性の分散を形成するものである。一般に、その薬剤には、ペプチド、ポリペプチド、あるいは分子の大きさが０．５Ｋドルトンから１５０ｋドルトンの範囲のタンパク質治療薬を含む。特に、ペプチド、ポリペプチド、あるいはタンパク質治療薬としては、糖尿病用、インシュリンやインシュリン類似物、アミリン、グルカゴン、表面活性剤、たとえばサイトカイン、ケモカイン、リンフォカインのような免疫調製ペプチド、たとえばタクソ−ル、インタ−ロイキン‐１、インタ−ロイキン‐２やインタ−フェロンのようなインタ−ロイキン、エリトロポイエチン、トロンボリテックスやヘパリン、アンチ‐プロテア−ゼ、アンチトリプシンやアミロライド（amiloride）、ｒｈデオキシリボヌクレア−ゼ、抗生物質や他の抗感染薬、ホルモンや副甲状腺ホルモンのような生長因子、ＬＨ‐ＲＨ（黄体形成ホルモン放出ホルモン）やＧｎＲＨ（性腺刺激ホルモン放出ホルモン）類似物、核酸、ＤＤＡＶＰ、カルシトニン、シクロスポリン、リバビリン（ribavirin）、エンザイム（酵素）、ヘパリン、造血因子、シクロスポリン、ワクチン、免疫グロブリン、管活性（vasoactive）ペプチド、アンチセンス物質、遺伝子、オリゴヌクレオチド、そしてヌクレオチド類似物を含む。
【００２０】
「糖尿病用（のもの）」という用語は、たとえば、アクチビン（activin）、グルカゴン、インシュリン、ソマトスタチン、プロインシュリン、アミリン（amylin）などのように、天然（自然）の、合成の、半合成の、および組換えの薬剤を含む。
【００２１】
「インシュリン」という用語は、人体からの抽出インシュリン、人体からの組換えインシュリン、ウシおよび／またはブタからの抽出インシュリン、ウシおよびブタからの組換えインシュリン、およびそれらのインシュリン産出物のいずれかの混合を含むように解釈されるべきである。この用語については、糖尿病の治療において、通常、実質的に精製した形態で用いるポリペプチドを含めるが、その用語を用いるとき、付加的な賦形剤を含む市販の調剤形態も含む。インシュリンとしては、組換え品が好ましく、脱水（完全に乾燥）しても良いし、溶液でも良い。
【００２２】
「インシュリン類似物」、「単量体インシュリン」などの用語は、この中では交換可能に用い、前に定義した「インシュリン」のどの形態をも含める。その場合、ポリペプチド連鎖内部の１または２以上のアミノ酸を、代わりのアミノ酸に置き換えたり、および／または１または２以上のアミノ酸を削除したり、あるいは、１または２以上の付加的なアミノ酸をポリペプチド連鎖あるいはアミノ酸連鎖に加えたりすることができる。そうすると、インシュリンが血液グルコ−スのレベルを減少するように働く。一般に、この発明の「インシュリン類似物」には、米国特許第５，５４７，９２９号（その特許の全体を参照によってこの中に含める）が示すような「インシュリン  リスプロ（lispro）類似物」、リスプロ  インシュリンおよびヒトインシュリン（humalog insulin）、ならびに、他の「ス−パ−  インシュリン類似物」を含む。そのようなインシュリン類似物が血清グルコ−スレベルに影響する能力は、一般のインシュリンに比べてかなり増加している。それは、肝選択（hepatoselective）インシュリン類似物が脂肪組織におけるよりも肝臓においてより有効であると同様である。好ましい類似物は、単量体インシュリン類似物である。それらは、インシュリンと同様の一般的な目的に用いられるインシュリン類似の化合物であり、たとえば、インシュリン  リスプロなど、すなわち、血液グルコ−スのレベルを減じるために投与される化合物がある。
【００２３】
「アミリン（amylin）」という用語には、合成、半合成あるいは組換えアミリン、またはアミリン類似物を含むと同様に、天然のヒトアミリン、ウシ、ブタ、ネズミ、ウサギアミリンを含む。そして、アミリン類似物には、プラムリンチド（pramlintide）および他のアミリン作動薬を含む。それらについては、米国特許第５，６８６，４１１号および米国特許第５，８５４，２１５号（両特許の全体を参照によって、この中に含める）が示している。
【００２４】
「免疫調整タンパク質」という用語には、サイトカイン、ケモカイン、リンフォカイン捕体成分、免疫システム従属成分および付着分子、さらにはヒトあるいはヒト以外の動物の特性をもつそれらの受容体を含む。有用な例に、ＧＭ‐ＣＳＦ、ＩＬ‐２、ＩＬ‐１２、ＯＸ４０、ＯＸ４０Ｌ（ｇｐ３４）、リンフォタクチン（lymphotactin）、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌがある。また、有用な例には、インタ−ロイキン（たとえば、インタ−ロイキン１からインタ−ロイキン１５）、α、βあるいはγの各インタ−フェロン、腫瘍壊死因子、顆粒球‐マクロファ−ジコロニ−刺激因子（ＧＭ‐ＣＳＦ）、マクロファ−ジコロニ−刺激因子（Ｍ‐ＣＳＦ）、顆粒球コロニ−刺激因子（Ｇ‐ＣＳＦ）、ケモキン（たとえば、好中球活性化タンパク質（ＮＡＰ））、マクロファ−ジ化学走性誘因物質および活性化因子（ＭＣＡＦ）、ＲＡＮＴＥＳ、マクロファ−ジ炎症性ペプチドＭＩＰ‐１ａおよびＭＩＰ‐１ｂ、捕体成分およびそれらの受容体、あるいは付着分子（たとえば、Ｂ７．１、Ｂ７．２、ＩＣＡＭ‐１、２あるいは３およびサイトカイン受容体）。ＯＸ４０およびＯＸ４０‐リガンド（ｇｐ３４）は、免疫調整タンパク質のさらに有用な例である。免疫調整タンパク質は、いろいろな目的のために、ヒトあるいはヒト以外の動物の特性になりうるし、場合によっては、また便宜が良いことに、天然のタンパク質、そのムテイン（mutein）、他のポリペプチド配列（たとえば、免疫グロブリン重連鎖定ドメイン）をもつそれらの融合タンパク質の結合した作用をする細胞外ドメインおよび他のフラグメントとなることができる。一つより多くの免疫調整タンパク質を含む（エンコ−ドする）ヌクレオチド配列が入るとき、それらの配列は、たとえば、一つより多くのサイトカイン、あるいはサイトカインと従属／付着の分子との組合わせを構成する。
【００２５】
この中で用いる「インタ−フェロン」あるいは「ＩＦＮ」の用語は、ウイルス複製および細胞増殖を禁止し、免疫反応を調整する、高対応種のタンパク質のグル−プ（科）を意味する。インタ−フェロンは、その細胞の起原および抗原に基づいて３つの種類に分類される。α‐インタ−フェロン（白血球）、β‐インタ−フェロン（フィブロブラスト）、γ‐インタ−フェロン（免疫能力細胞）の３つである。各種類の組換え形態および類似物が開発されており、商業的に入手可能である。各種類のサブタイプ分けは、抗原の／構造的な特性に基づく。独特なアミノ酸連鎖をもつ少なくとも２４のインタ−フェロンαが、それらのペプチドを含む遊離および連鎖ＤＮＡによって確認されている。また、ヴィスコミ（Viscomi）,1996 生物学的療法（Biotherapy）, 10: 59-86 を参照されたい（参照によって、その全体をこの中に含める）。「α‐インタ−フェロン」、「インタ−フェロンα」、「ヒトの白血球」および「ＩＦＮ」の各用語は、この種類のものを表わすためにこの中で交換可能に用いる。天然のものおよび組換えのαインタ−フェロンの両方共に、この発明の実施のために用いることができる。それらのものには、たとえば米国特許第４，８９７，４７１号（参照によって、その特許の内容をこの中に含める）が示す交感インタ−フェロンを含む。このようにして用意するヒトの白血球インタ−フェロンは、異なるアミノ酸連鎖をもつヒトの白血球インタ−フェロンの複数の混合物を含んでいる。精製した天然のヒトα‐インタ−フェロンやそれらの混合物をこの発明で用いることができるが、日本の住友から入手可能なスミフェロンＲＴＭインタ−フェロンα‐ｎｌ、英国ロンドンのグラクソウエルカム会社から入手可能なウエルフェロング  インタ−フェロンα‐ｎｌ（Ｉｎｓ）や米国ノ−ウォ−クのパ−デュ−  フレデリック会社から入手可能なアルフェロンＲＴＭインタ−フェロンに限られるわけではない。
【００２６】
「エリトロポエチン」という用語は、合成、半合成、組換え、天然、ヒト、サルあるいは他の動物、または微生物学的に分離したポリペプチド生成物に適用する。それらは、主要な構成上の配座の一部あるいはすべて（すなわち、アミノ酸残基の連続配列）、および、対立形質の変体を含む天然エリトロポエチンの１あるいは２以上の生物学的特性（たとえば、免疫学的特性ならびに生体内および生体外の生物学的活性）を備える。それらのポリペプチドは、また、外因的なＤＮＡ配列をもつ原核生物あるいは真核生物の受容体の発現（たとえば、細菌、イ−ストおよび哺乳動物の培養細胞による）であるという特有な特徴をもつ。外因的なＤＮＡ配列については、ゲノムあるいはｃＤＮＡク−ロン、または遺伝子合成によって得ることができる。脊椎動物（たとえば、哺乳動物や鳥）細胞における微生物の発現については、さらに、ヒトのタンパク質、または天然の哺乳動物細胞環境や細胞外の流体（たとえば、血漿や尿）の中のエリトロポエチンと関連する他の汚染物から自由であり無関係であるという特徴がある。典型的な酵母菌（たとえば、サッカロミケスセレビシェ）あるいは原核生物（たとえば、大腸菌）宿主細胞の生成物は、どの哺乳動物のタンパク質と無関係である。用いる宿主に応じて、この発明のポリペプチドは、哺乳動物あるいは他の真核生物の炭水化物とグリコシル化することができるし、あるいはグリコシル化しないこともできる。この発明のポリペプチドは、また、初期メチオニンアミノ酸残基（位置‐１に）を含むことができる。この発明の新しい糖タンパク質生成物には、主要な構造的な立体配座であり、天然（たとえば、ヒト）のエリトロポエチンのそれの複製に充分になることができ、１または２以上の生物学的特性をもつことができるものを備え、しかも、天然（たとえば、ヒト）のエリトロポエチンのそれとは異なる平均炭水化物構造を備えるものを含む。
【００２７】
「ヘパリン」および「血栓崩壊（thrombolytics）」という各用語には、たとえば、ヘパリン、低分子量ヘパリン、組織プラスミノゲン活性化因子（ＴＰＡ）、ウロキナ−ゼ（アボキナ−ゼ）およびクロット（血餅）を制御するために用いる他の因子などの抗血餅因子を含む。
【００２８】
「抗プロテア−ゼ」および「プロテア−ゼ阻害剤」という各用語は、交換可能に用い、そして、合成の、半合成の、組換えの、天然あるいは天然でない、受容体と反応する溶解性あるいは固定化因子、または抗体として作用する、酵素あるいは核酸に適用する。それらには、体液免疫反応を調節（変調）する受容体、細胞免疫反応を調節する受容体（たとえば、Ｔ細胞受容体）、ならびに、神経性反応を調節する受容体（たとえば、グルタミン酸塩受容体、グリシン受容体、γ‐アミノ酪酸（ＧＡＢＡ））を含む。また、それらには、サイチカイン受容体（関節炎、敗血症ショック、移植拒絶反応、自己免疫病および炎症性疾病を含む）、細胞傷害Ｔ細胞受容体および／またはＴヘルパ−細胞受容体（自己免疫病を含む）ならびにトロンビン受容体（凝結、心臓血管疾病を含む）に抗体を提供することと関連するメジャ−組織適合性（ＭＨＣ）クラスＩおよびII容体を含む。そしてまた、そのリストには、自己抗体を認識する抗体、たとえば、自己免疫疾患やウイルス性（たとえば、ＨＩＶ、単純性疱疹ウイルス）および／または微生物抗体を認識する抗体を含んでいる。
【００２９】
「ホルモン」および「生長因子」という各用語は、ホルモンを放出するホルモンを含み、たとえば、成長ホルモン、甲状腺ホルモン、甲状腺放出ホルモン（ＴＲＨ）、ゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）、黄体形成ホルモン、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ、ス−パ−アゴニストおよび拮抗体、たとえばロイプロライド（leuprolide）、デルチレリックス（deltirelix）、ゴソレリン（gosorelin）、ナファレリン（nafarelin）、ダナゾ−ル（danazol）など）があり、天然、ヒト、ブタ、ウシ、ヒツジ、合成、半合成、組換えのものが含まれる。それらには、また、たとえばオクレオタイド（サンドスタチン）のようなソマトスタチン類似物をも含む。生物学的療法のこの種類の他の因子（作用物）には、子宮収縮用の薬剤（たとえば、オキシトシン）、利尿（たとえば、バソプレッシン）、好中球減少（たとえば、ＧＣＳＦ）、呼吸器の障害用（たとえば、超酸化物不均化酵素）、ＲＤＳ（たとえば、表面活性剤、選択的にアポタンパク質を含む）などを含む。
【００３０】
「酵素」という用語は、デオキシリボヌクレア−ゼ（ジェネンテック）プロテア−ゼ（たとえば、トリプシンやトロンビンのようなセリンプロテア−ゼ）のような組換えデオキシリボヌクレア−ゼ、ポリメラ−ゼ（たとえば、ＲＮＡポリメラ−ゼ、ＤＮＡポリメラ−ゼ）、逆転写酵素およびキナ−ゼ、関節炎に関係する酵素、骨粗鬆症、炎症性の疾病、糖尿病、アレルギ−、臓器移植拒否反応、ガン遺伝子活性化（たとえば、ジヒドロ葉酸還元酵素）、形質導入（signal transduction）、自己循環調整、転写、ＤＮＡ複製および修復を含む。
【００３１】
「核酸」という用語は、天然あるいは天然でないヌクレオシド、または、他のプロテイノイド作用物（因子）であって、他の核酸、あるいは相補的な水素結合を経るオリゴヌクレオチドに特に結合することができ、しかも非核酸配位子に結合することができるものを含むＤＮＡあるいはＲＮＡのどの部分（セグメント）をも含む。その点、アプタマ−（aptamer）ＤＮＡを用いる、トロンビン触媒作用によるフィブリノゲンからフィブリン形成の阻害についての報告、ボック，エル．ほか、Nature 355:564-566 (1992)を参照されたい。
【００３２】
この発明にしたがって、それに対し誘導分子を合成し、選択する生物学的分子の例として、細胞膜受容体、神経伝達物質、毒素および毒物、ウイルスエピト−プ、ホルモン、アヘン剤、ステロイド、ペプチド、酵素の基質および阻害剤、コファクタ−、薬物、レクチン、糖、オリゴヌクレオチド、核酸、オリゴ糖、脂質、タンパク質、ならびに上述の分子の類似物のためのアゴニストおよび拮抗体を含むが、それに限定されるわけではない。
【００３３】
「類似物」という用語は、それに類似すると思われる複数の分子と共通の機能的な活性をもち、一般には、共通の構造的な特徴をももつ分子を指す。
【００３４】
「組換え（あるいは組換え体）」という用語は、原核生物の細胞を発現するクロ−ン生物学的療法上の、あるいは遺伝工学的な分子、または、さらに別の状態に処理し第２の組合わせライブラリ−を形作る複数分子の組合わせライブラリ−、特には、物理化学的、薬理学的、および生物学的療法因子の臨床での安全性を促進する保護基を含む分子のいずれのタイプをも指す。
【００３５】
「ワクチン」という用語は、体液や細胞の免疫反応を刺激する治療上の構成（成分）を指し、それは、分離されていることもあるし、たとえば活性樹木状の細胞のような抗原提供細胞を通して、Ｔ細胞を活性化し、選択した抗原に対し多価の細胞免疫反応を生成するものでもある。効力のある抗原は、試験管内の細胞をポリペプチド複合体に晒すことによって、刺激することができる。ポリペプチド複合体としては、樹木状の細胞結合タンパク質およびポリペプチド抗原で構成することができるが、好ましくは、ポリペプチド抗原としては、組織特異的腫瘍抗原か、腫瘍遺伝子生成物のいずれかが良い。しかし、たとえばウイルス抗原のような他の抗原を、そのような組合わせに用いて免疫刺激反応を生じるようにすることができる。もう一つの好ましい実施例では、免疫刺激ポリペプチド複合体の部分を形作る樹木状の細胞結合タンパク質が、ＧＭ‐ＣＳＦである。さらに他の好ましい実施例では、複合体の部分を形作るポリペプチド抗原は、腫瘍特異的抗原前立腺酸性ホスファタ−ゼである。さらにまた、他の好ましい実施例において、ポリペプチド抗原は、腫瘍遺伝子生成ペプチド抗原のいずれか一つである。また、ポリペプチド複合体として、樹木状の細胞結合タンパク質とポリペプチド抗原との連鎖ペプチドをも含む。そのポリペプチド複合体は、ポリペプチド抗原に結合した樹木状の細胞結合タンパク質であり、そのようなポリペプチド複合体として、好ましくは、樹木状の細胞結合タンパク質（好ましくは、ＧＭ‐ＣＳＦ）、およびポリペプチド抗原から形作ったものが良い。そのポリペプチド抗原として、前立腺酸性ホスファタ−ゼ（ＰＡＰ）のような組織特異的腫瘍抗原、あるいは、Ｈｅｒ２、ｐ２１ＲＡＳ、ｐ５３のような腫瘍遺伝子生成物が好ましいが、ウイルス抗原のような他の例もまたこの発明の考えの範囲内にある。
【００３６】
「免疫グロブリン」という用語は、たとえば１または２以上の遺伝子ベクトルによる解読および遺伝情報指定（エンコ−ド）、宿主防御細胞中の核酸の半分をいろいろと結合する複合化、あるいは、ヒトや動物の治療の中で補助のためのベクトルを発現する共役のような宿主防御メカニズムに含まれるポリペプチドオリゴヌクレオチドを包含する。ポリペプチドのこのクラスに入る薬剤には、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤがあり、それらは個別の場合、あるいは互いに組み合う場合のいずれかである。
【００３７】
「塩／イオン対」という用語は、以下に述べるように、酸‐塩基反応によって生じる化学的な存在物が、固形の結晶形態の「塩」、あるいは非結晶（無定形）半固形の粘着性のある集合物「イオン‐対」のいずれかで存在するという事実を指す。この点、米国特許第５，３７３，０２２号および５，３８５，９４１号を参照されたい。参照によって、それらのすべてをこの中に含める。
【００３８】
この発明の塩／イオン対を構成（形成）するとき、選択した薬物をカチオン源あるいは化合物（たとえば、適切な金属塩）に化合させる。適切なカチオンは、カルシウム（Ｃａ）、マグネシウム（Ｍｇ）、亜鉛（Ｚｎ）、アルミニウム（Ａｌ）、および鉄（Ｆｅ）の金属群の中の一つである。塩のアニオン成分は、ヒトに用いる薬物製品として調剤的に許容されるいずれかのアニオン（たとえば、酢酸塩、フッ化物、塩化物、硫酸塩、スルフォン酸塩などである。
【００３９】
塩／イオン対を形成することについて、米国特許第５，３７３，０２２号および５，３８５，９４１号を参照されたい。特に、選択する薬物（たとえば、インシュリン）は、水あるいは他の適切な水性溶媒と結合し、それによって、分散層を形成する。それから、カチオン源（たとえば、酢酸亜鉛、塩化マグネシウム、塩化カルシウムなど）を加え、充分な量の分散（相）を得る。それによって、目的とする薬物エアゾル薬剤（処方）は、選択した薬物の塩／イオン対として、その薬剤全重量の約０．０００００１重量パ−セントから約１０重量パ−セントの濃度あるいは量を含む。
【００４０】
そして、生じた混合物から、水を除去する処理をする。水を除去するためには、今までに知られた方法、たとえば、スプレ−ドライ、凍結乾燥、超臨界流体技術、コアセルベ−ションなどを用いることができる。結果として得るもの、塩／イオン対を含む固体あるいはスラリ−を、その後、今までの方法（たとえば、ホモジナイザ−による均質化、ミルによる粉砕、粉末化など）を用いることによって、微粉（微小）化し吸込み可能な粒子にする。
【００４１】
別の実施例においては、目的とする薬物エアゾル薬剤を形成するに先立ち、塩／イオン対を橋かけ（架橋）結晶として形成する。この点、ＰＣＴ特許出願ＷＯ９２／０２６１７、米国特許第５，９３２，２１２号、６，０４２，８２４号および６，１４０，４７５号を参照されたい。参照によって、それらの内容をこの中に含ませる。
【００４２】
選択薬物の塩／イオン対の結晶は、水溶液、あるいは有機溶媒を含む水溶液から塩／イオン対を析出するように制御されることによって成長する。制御の条件として、たとえば、溶剤の蒸発速度、適切な共溶質および緩衝剤、ならびにｐＨ値および温度がある。タンパク質の結晶化に影響するいろいろな要素（ファクタ−）についての包括的な論評が、マクファ−ソン（方法酵素学、Method Enzymol. 114: 112(1985)）によって出版されている。それに加えて、マクファ−ソンとジリランド（結晶成長ジャ−ナル、J. Crystal Growth 90: 51-59(1988)）は、それらの結晶化に導く条件は勿論のこと、結晶化すると報告されているタンパク質および核酸のすべてについての包括的なリストをまとめている。結晶構造の解説については、ブルックヘ−ベン（米国）国立研究所のタンパク質デ−タバンク（バ−ンスタインほか、分子生物学ジャ−ナル、J. Mol. Biol. 112:535-542(1977)）によって保存されている。適切な結晶の塩／イオン対を形成する前段階に、そのような参考文献を利用することによって、先に結晶化されたタンパク質および酵素の結晶化についての必要条件を決めることができ、そして、塩／イオン対を得るための結晶化手段を含む処方を得ることができる。また別には、多くの場合、知能的な試行錯誤方法（たとえば、カ−タ，シィ−．ダブリュウ．ジュニアおよびカ−タ，シィ−．ダブリュウ．、生物化学ジャ−ナル（J. Biol. Chem.）254: 12219-12223(1979)参照）によって、大部分の塩／イオン対（上に述べたものを含むが、それに限定はされない）について、それらについて許容される純度が得られるという条件の下で、適切な結晶化条件を提供することができる。要求される純度のレベルは、広範囲に変動する。
【００４３】
一般に、塩／イオン対の結晶は、結晶化すべき塩／イオン対を適切な水性溶媒、あるいは適切な沈殿作用物（たとえば、塩や有機質）を含む水性溶媒と結びつけることによって生じる。溶媒は、結晶化の誘導に適するよう、ならびに安定性および活性が維持されるように実験的に定めた温度で塩／イオン対と結びつける。溶媒には、オプションによって、ｐＨをコントロ−ルするための緩衝剤だけでなく、二価のカチオン、補足因子あるいはケイオトロウプ（chaotropes）のような共溶質を含ませることができる。共溶質およびそれらの濃度に必要なことは、結晶化を促進するように実験的に定める。生産規模のプロセスにおいて、結晶化を導く沈殿のコントロ−ルは、バッチプロセスにおける、塩／イオン対、沈殿剤、共溶質およびオプションによる緩衝剤の単純な組合わせによって最良に成し遂げることができる。実験室での他の結晶化方法（たとえば、透析あるいは蒸気拡散）をもまた適応させることができる。マクファ−ソン（方法酵素学、Method Enzymol. 114: 112(1985)）、およびジリランド（結晶成長ジャ−ナル、J. Crystal Growth 90: 51-59(1988)）には、結晶化の文献のレビュ−（論評）において、適切な条件について包括的なリストを含んでいる。時折、架橋反応物質と結晶化媒体との間で不和合性が生じ、結晶をより適切な溶解システムに交換することが必要とされることもある。
【００４４】
適切な媒体中に結晶が成長すれば、それらの結晶は、架橋結合する。架橋結合によって、結晶の構成要素であるアミノ酸分子の間に共有の結合をもたらすことになり、結晶格子の安定性を得る。架橋結合については、非常に多様な二機能性の反応物質によって達成することができる。実際上は、単純で安価なグルタルアルデヒドを単独、あるいはエポキシドとの一連の使用が好ましい。架橋結合に適用可能な他の反応物質の代表的なリストについては、たとえば、ピアス化学会社（Pierce Chemical Company）の１９９６年のカタログで調べることができる。
【００４５】
グルタルアルデヒドとの架橋結合は、強い共有結合を形成する。共有結合は、たとえば、主として内部のリジンアミノ酸残基との間、および、塩／イオン対結晶を構成する結晶格子の酵素分子間に形成する。架橋結合の相互作用によって、結晶中の構成アミノ酸分子が溶液中に戻ることが防止される。その作用は、酵素分子の不溶化、あるいは微晶質な（最も好ましくは、１０−１ｍｍ）粒子の中に固定することを有効に行う。そして、肉眼で見えるような、微晶質で不溶化した結晶は、生成物および未反応物質を含む原料から、たとえば、ろ過、デカンテ−ションなどの単純なプロセスによってすぐに分離することができる。
【００４６】
架橋結合をする他の例として、米国特許第６，１４０，４７５号が示すように、エポキシドと同時に、あるいは一連に行う可逆架橋結合剤を用いて実施することができる。
【００４７】
この発明における塩／イオン対は、各薬物あるいは薬成分のそれとは異なる溶解度をもっているため、持続性あるいは向上させた放出投与薬の調製をより容易にすることができる。
【００４８】
肺の中への吸入をねらったこの発明の薬剤を得るとき、選択した薬物あるいは薬成分の塩／イオン対について、その塩／イオン対の治療上有効な量あるいは有効成分（たとえば、９０パ−セント以上）が微粒子となるように微粉化することが好ましい。一般に、微粒子は、約１０μｍ以下、好ましくは約５μｍ以下の直径とし、それらを気道および／または肺の中に吸込み可能にする。
【００４９】
選択した薬剤あるいは薬成分の塩／イオン対は、この発明の薬剤の中に、生物学的に有効な量だけ入っている。すなわち、その量とは、薬剤が、分散エアゾルとして口あるいは鼻を通して吸入し投与されることによって、必要な生物学的療法の効果、典型的には、単位投与量あるいは数投与量を生じるような量である。薬剤は、一般には、通常のバルブ装置（たとえば、所定用量バルブ装置）からエアゾルアダプタ−（アクチェエ−タとしても知られる）を通してエアゾルとして投与される。
【００５０】
この中で用いる「量」という用語は、分量あるいは状況にふさわしい濃度を指す。生物学的治療の有効量を構成する薬剤量は、用いる生物学的治療薬剤の効力、処方薬の投与経路、および処方薬の投与に用いる機械的なシステムなどの複数の要因に応じて変化する。選択薬の生物学的治療の有効量については、そのような要因を考慮して、その分野の専門家が選択することができる。一般的には、すでに述べたように、塩／イオン対の生物学的治療の有効量は、流体つまり選択プロペラントを含む目的のエアゾル薬剤を１００重量部として約０．０００００１重量部から約１０重量部であろう。
【００５１】
適切な流体には、空気のほか、ｎ‐ブタン、プロパン、イソペンタンなどの炭化水素、あるいは、プロペラント（推進剤）を含む。適切なプロペラントは、たとえば１‐６水素を含むフルオロカ−ボン（たとえば、ＣＨＦ２ＣＨＦ２、ＣＦ３ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２Ｆ２ＣＨ３およびＣＦ３ＣＨＦＣＦ３）のようなフルオロカ−ボン、たとえば１‐４カ−ボン過フルオロカ−ボン（ＣＦ３ＣＦ３、ＣＦ３ＣＦ２ＣＦ３）のような過フルオロカ−ボン、あるいは、上述したものの混合物であり、蒸気圧が充分であり、プロペラントとして有効に作用するものである。適切なプロペラントの典型例として、たとえばプロペラント１１，１２および１１４あるいはそれらの混合物のような通常のクロロフルオロカ−ボン（ＣＦＣ）プロペラントを挙げることができる。たとえば1,1,1,2‐テトラフルオロエタン（プロペラント１３４ａ）、1,1,1,2,3,3,3‐ヘプタフルオロプロパン（プロペラント２２７）あるいはそれらの混合物のような非‐ＣＦＣプロペラントが好ましい。流体あるいはプロペラントは、充分な量が入っており、それを用いるときエアゾル容器から選択薬剤の投与量を多数回にわたって推進させるようにするのが良い。
【００５２】
また、選択（オプション）によって、適切な安定剤を選ぶことができる。この点、１９９８年１２月１０日出願の米国特許出願第０９／２０９，２２８号を参照されたい。参照によって、その内容のすべてをここに含ませる。適切な安定剤は、「水付加（water addition）」のものである。この中で用いるとき、「水付加（water addition）」とは、水の量である。それは、（１）エアゾル薬剤の他の成分（たとえば、薬剤の塩／イオン対および流体キャリア）とともに最初に加えるか、あるいは、他の成分（たとえば、薬剤の塩／イオン対、流体キャリア）を組み合わせ処理した後で加えるもののいずれか、（２）常に存在する水およびエアゾル薬剤の処理および／または保存の間に生じる水（すなわち、「発生した」あるいは「発生期の」処方水）に加わるもの、ならびに、（３）発生期の処方水を含む医用エアゾル薬剤をさらに安定させる量で存在するものである。
【００５３】
エアゾル薬剤は、好ましくは、水付加を含まない（すなわち、発生期の処方水だけを含む）同一の薬剤に比べて、薬剤をより有効に安定化させるのに効果がある量の水付加を含む。それにより、塩／イオン対の薬物（成分）が、撹拌した後で、再現性のある薬物（塩／イオン対の薬物）投与を妨げるような速さで沈殿せず、上かす（あわ）が生ぜず、あるいは凝集が生じないようにする。撹拌後に薬剤が約１５秒から約５分の間塩／イオン対の薬物濃度を実質的に均一に保持するなら、再現性のある薬物投与を達成する。
【００５４】
有効な量を構成する水付加の特定量は、プロペラントなどの特定の流体キャリア、および薬剤（処方）に用いる特定の薬物（薬成分）によって変わる。したがって、この発明の具体的な薬剤に用いる具体的な有効量を挙げることは実際に則してはいない。しかし、そのような量について、当業者は、上に述べたファクタ−を充分に考慮すればすぐに定めることができる。だが、一般的には、水付加は、発生期の処方水の濃度以上の量が薬剤中に存在することが必要である。そのような発生期の処方水の濃度は、一般に、エアゾル薬剤の全重量の３００ｐｐｍまでの範囲である。そこで、この発生期の処方水の濃度を越える水付加は、一般に、エアゾル薬剤の全重量の約１０ｐｐｍから約５０００ｐｐｍまでの範囲である。最も好ましくは、この発生期の処方水の濃度を越える水付加が、エアゾル薬剤の全重量の約５００ｐｐｍから約５０００ｐｐｍの範囲にある場合である。
【００５５】
強調されるべきは、その量が発生期あるいは発育した処方水の量を超過することである。また、この水付加の量を加え、薬剤の他の成分（たとえば、アミリンの塩／イオン対、グルカゴンおよび流体キャリア（たとえば、1,1,1,2‐テトラヒドロフルオロエタン））と初期段階で結合させることが好ましいことも強調されるべきである。しかし、水付加は、結果物である薬剤に対し、これらの他の成分を処理した後で（たとえば、保管に先立ち、あるいは保管後に）加えることができる。
【００５６】
選択によって、第２の適切な安定剤を、単独あるいは水付加安定剤と組み合わせて用いることができる。第２の安定剤には、次のものから選ぶアミノ酸が含まれる。すなわち、（ａ）式がＨ２Ｎ‐Ｒ‐ＣＯＯＨ（Ｉ）のモノアミノカルボン酸、（ｂ）式がＨ２Ｎ‐Ｒ(ＣＯＯＨ)２（II）のモノアミノジカルボン酸、および、（ｃ）式が(Ｈ２Ｎ)２‐ＲＣＯＯＨ（III）のジアミノモノカルボン酸であり、ここで、Ｒは、炭素原子１〜２２の直線的あるいは分岐したアルキル基であり、一部を硫化物（‐Ｓ‐）、酸化物（‐Ｏ‐）、ヒドロキシル基（‐ＯＨ‐）、アミド（‐ＮＨ）、硫酸塩（‐ＳＯ４）、次式のアリ−ル基の一あるいは複数と置換可能である。
【００５７】
【化１】
2005500328.tif 000002
ここで、Ｘは、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、炭素原子１〜６のアルキル、炭素原子１〜６のアルコキシ、ヒドロキシおよびニトロ、ならびに、たとえばスエニル（thienyl）、フリル（furyl）、ピラニル（pyranyl）、イミダゾ−ル、ピュロリル、シゾリル（thizolyl）、オキサゾリル（oxazolyl）、ピリディル（pyridyl）のような環式化合物、さらには、ピリミディニル（pyrimidinyl）化合物である。（２）次の（ａ）（ｂ）（ｃ）から選ぶアミノ酸誘導体、（ａ）アミノ基の酸付加塩であって、有機酸（たとえば酒石酸、クエン酸、酢酸、琥珀酸、マレイン酸、フマル酸、蓚酸など）のほか、無機酸（たとえば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、過塩素酸など）から得るもの、（ｂ）カルボン酸群のアミド化合物：たとえばグルタミンやジペプチドであって、たとえば酸化および非酸化のＬ‐システイニルグリシン、γ‐Ｌ‐グルタミル‐Ｌ‐システイン、Ｎ‐アセチル‐Ｌ‐システイン‐グリシン、共役、非共役あるいは高分子化いずれかの形態のＬ‐Ｇｌｙ‐Ｌ‐ＧｌｕおよびＬ‐Ｖａｌ‐Ｌ‐Ｔｈｒ、Ｌ‐アスパルチル‐Ｌ‐フェニルアラニン、ムラミルジペプチド、栄養素（たとえばＬ‐チロシル‐Ｌ‐チロシン、Ｌ‐アラニル‐Ｌ‐チロシン、Ｌ‐アルギニル‐Ｌ‐チロシン、Ｌ‐チロシル‐Ｌ‐アルギニン、Ｎ‐Ｃｂｚ‐Ｌ‐Ｌｅｕ‐Ｌ‐Ｌｅｕ‐ＯＣＨおよびその塩あるいはエステル）、グリシル‐グリシン、Ｎ‐アセチル‐Ｌ‐アスパラギン酸塩‐Ｌ‐グルタミン酸塩（ＮＡＡＧ）など、そして、トリペプチドであって、酸化および非酸化のγ‐Ｌ‐グルタミル‐Ｌ‐システイニルグリシン、ムラミルトリペプチドなど、（ｃ）カルボン酸群のエステルであって、脂肪族の炭素原子１〜６の直線的なあるいは分岐した連鎖をもつアルコ−ルから得るもの（たとえば、Ｌ‐アスパルチル‐Ｌ‐フェニルアラニンメチルエステル、商標アスパルテ−ム）。（３）上述したもののいずれかのエ−テル、（４）上述したもののいずれかの水和物あるいは半水和物、（５）アミノ酸とアミノ酸誘導体との混合物。
【００５８】
式Ｉの適切なアミノ酸には、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、ロイシルアラニン、メチオニン、トレオニン、イソバリン、フェニルアラニン、チロシン、セリン、システイン、Ｎ‐アセチル‐Ｌ‐システイン、ヒスチジン、トリプトファン、プロリン、およびヒドロキシプロリン（たとえば、トランス‐４‐ヒドロキシプロリン）を含む。式IIの化合物には、アスパラギン酸、およびグルタミン酸を含む。また、式IIIの化合物には、アルギニン、グルタミン、リジン、ヒドロキシリジン、オルニチン、アスパラギン、およびシトルリンを含む。この点、米国特許第６，１３６，２９４号を参照されたい。参照によって、その内容のすべてをここに含ませる。
【００５９】
また、流体あるいはエアゾル薬剤は、第２の保護コロイド安定剤を含むようにするのが好ましい。その量は、その安定剤を含まない同一の薬剤に比べて薬剤を安定させる効果がある量である。その効果は、撹拌した後で、再現性のある薬物投与を妨げるような速さで薬物が沈殿せず、上かす（あわ）が生ぜず、あるいは凝集が生じない作用である。指摘したように、薬剤が約１５秒から約５分の間実質的に均一な薬物濃度を保持するなら、再現性のある薬物投与を達成する。
【００６０】
乾燥粉末あるいはエアゾル懸濁液のいずれかとして、エアゾル薬剤について最適な機能および治療上の性能を得るため、第２の安定剤を粗い担体（たとえば２０〜９０μｍ）として、あるいは細かく微粉化して（直径が１０μｍ以下）含ませる。どちらの場合でも、患者の吸入操作を訓練せずに、再現性のある薬物投与をすることができる。したがって、２リットルまでの周期的な流れで、あるいは、１５リットル／分から約９０リットル／分程度の低い流量で、均一性にすぐれた投与を達成することができる。
【００６１】
さらにまた、有効な量を構成する安定剤の特定量は、特定の安定剤、特定のプロペラント、および薬剤（処方）に用いる特定の薬物によって変わる。しかし、そのような量について、当業者は、これらのファクタ−を充分に考慮すればすぐに定めることができる。だが、一般的には、薬剤に含まれる第２の安定剤の量は、全薬剤の約０．００１ｐｐｍから約２００，０００ｐｐｍであり、好ましくは、全薬剤の約１ｐｐｍから約１０，０００ｐｐｍ、さらに好ましくは、全薬剤の約１０ｐｐｍから約５，０００ｐｐｍである。
【００６２】
驚くべきことに、この発明による薬剤は、たとえばエタノ−ルのような共溶媒や表面活性剤を用いることなく安定である。しかし、この発明によるエアゾル薬剤に対し、通常の潤滑剤や表面活性剤、共溶媒、エタノ−ルなどの添加剤をさらに加えることもできる。それに適した量について、いわゆる当業者は容易に定めるができる。その点、米国特許第５，２２５，１８３号を参照されたい。その参照によって、その特許の全体をこの中に含める。
【００６３】
一般的には、次の（ｉ）、（ii）、（iii）および（iv）のものを組み合わせることにより、この発明による薬剤を調製する。すなわち、（ｉ）生物学的治療に有効な投与量を多数回提供することができるだけの量の塩／イオン対の薬物、（ii）たとえばエアゾル容器から多数回噴射するのに充分な量の適切な流体あるいはプロペラント、（iii）できたら、各薬剤を安定化させるのに有効な量の安定剤、ならびに（iv）各成分を分散させるためにオプションで入れる成分（たとえば、共溶媒としてのエタノ−ル）、である。各構成成分については、一般のミキサ−あるいはホモジェナイザ−、振り動かすことにより、または超音波エネルギ−によって分散させることができる。各構成成分は、また、ビ−ドミルあるいはマイクロフリュ−ダイザ−を用いることにより分散させることもできる。バルクの薬剤を小さな個々のエアゾルバイアル（エアゾル小瓶）に移すときには、バルブからバルブへの切換え方法、加圧充填、あるいは一般の低温充填（cold-fill）方法を用いることができる。エアゾル薬剤の懸濁液に用いる安定剤は、プロペラントに可溶である必要はない。充分に溶けないものは、適当量が薬物粒子の上に被覆され、被覆された粒子は、上に述べたように薬剤と一体化する。
【００６４】
先に述べたように、塩／イオン対は放出調整の薬剤に用いることができる。カチオン源は、選択薬剤の塩／イオン対の放出調整特性の原因になる。
【００６５】
やはり先に述べたように、調整カチオン源あるいは成分（たとえば、酢酸亜鉛、塩化マグネシウムなど）の量が充分であるかについては、塩／イオン対の薬剤自体の放出速度をいかに定めるかによる。約２〜約６時間の放出が一般的であり、求める放出プロフィ−ル（たとえば、約１５分から約１２時間）を有効にするために、調整物質（たとえば、塩化マグネシウム）の濃度は、約１０ｐｐｍから約１００，０００ｐｐｍの範囲である。
【００６６】
選択した塩／イオン対システムの粒子については、塩／イオン対の活性な薬成分を含む溶液、懸濁スラリ−あるいはエマルションとして用意あるいは調製し、ついで、たとえば二酸化炭素、窒素、あるいはその他の適切な非溶媒などの非溶媒を用いるか、または、溶媒蒸発、スプレ−乾燥、溶媒抽出、相分離、コアセルベ−ション、界面重合、およびこの分野で周知な他の方法のいずれかを用いることによって、上述のものを乾燥する。粒子については、また、微小粒子工学、塗布方法（たとえばスプレ−凝結）、超臨界流体工学、あるいはミセルの可溶化など、この分野で知られた技術を用いてマイクロカプセル化することができる。それらの方法について、すべてではないが、次に掲げる。そして、それらを参照によって、この中に含める。
（１）ドゥブラウ，エム．，エド．、「薬および調剤におけるマイクロカプセルおよび微小粒子（ナノパ−ティクル）」、CRC Press, Boca Raton, 1992
（２）ベニ−タほか、J. Pharm. Sci. 73, 1721-1724(1984)
（３）クックほか、米国特許第４，０４４，１２６号
（４）クックほか、米国特許第４，３６３，９２３号
（５）クックほか、米国特許第４，４１４，２０９号
（６）エカナウ、米国特許第４，９６３，３６７号
（７）ホ−ルワ−スほか、米国特許第４，２０６，７５８号
（８）ホ−ルワ−スほか、米国特許第４，３５３，３６５号
（９）リンジ−、米国特許第５，１６９，４３３号
（１０）マキ−，ジュニア、米国特許第５，００２，０４８号
（１１）マチオウィツとランガ−、J. Controlled Release 5,13-22(1987)
（１２）マチオウィツほか、Reactive Polymers 6,275-283(1987)
（１３）マチオウィツほか、J. Appl. Polymer Sci. 35,755-774(1988)
（１４）マチオウィツほか、Scanning Microscopy 4:329-340(1990)
（１５）マチオウィツほか、J. Appl. Polymer Sci. 45,125-134(1992)
（１６）マ−チン、米国特許第４，８９２，２３２号
（１７）ニュ−エルほか、米国特許第４，８１１，７３１号
（１８）ニュ−エルほか、米国特許第４，６２７，４３２号
（１９）レイ、米国特許第４，８００，９０３号
（２０）リッチオレイ、米国特許第３，８５６，１８５号
（２１）ロング、米国特許第５，０５６，５１１号
（２２）ジ−フェルスほか、米国特許第４，９７０，０９３号
（２３）スミス、米国特許第４，５８２，７３１号
（２４）ホィットセット、米国特許第５，０１３，７２０号
（２５）マクナブ、米国特許第５，０４４，５２３号
（２６）ハンナとヨ−ク、国際公開番号ＷＯ９９５９７１０Ａ１
（２７）ハンナほか、国際公開番号ＷＯ９９４４７３３Ａ１
（２８）ハンナとヨ−ク、国際公開番号ＷＯ９８３６８２５Ａ１
【００６７】
この発明による放出を調整した粒子は、治療する患者（ヒトあるいは他の動物）の呼吸器系および／または肺に対し、経口吸入によって供給される。その目的は、気管支拡張のため、あるいは、吸入による治療に敏感な体調を治療するため（たとえば、喘息、慢性閉塞性肺疾患など）である。
【００６８】
この発明による放出を調整した粒子は、また、肺に対し、生物学的治療薬を体循環に適合した速度で供給し、体の他のところの疾病（たとえば、、糖尿病、ホルモン置換、癌、赤血球生成、感染、あるいはワクチンで成し遂げることができるような免疫防護）を治療するためにも供給される。
【００６９】
この発明による放出を調整した粒子は、さらにまた、鼻を通しての吸入によって、たとえばアレルギ−性鼻炎、鼻炎、（局部）あるいは糖尿病（全身）を治療するために供給されるし、また、それらの粒子は、局所（たとえば頬）を通して投与し、たとえば狭心症、扁桃炎あるいは局所感染を治療することにも適用される。
【００７０】
この発明の薬剤を供給するために、一般のバルブ（好ましくは、所定用量バルブ）付きのエアゾル容器を用いることができる。しかし、エアゾル薬剤に用いる適切なバルブ装置については、用いる安定剤および他のアジュバント（もしあるなら）が何か、プロペラントが何か、用いる薬物（薬成分）が何かに応じて選ぶことが必要である。一般のＣＦＣ薬剤を供給する所定用量バルブに用いる通常のネオプレンブナ弁ゴムは、ＨＦＣ‐１３４ａあるいはＨＦＣ‐２２７を含む薬剤に用いると、最適なバルブ供給特性および操作の容易さの面でしばしば劣ることがある。したがって、この発明の一定の薬剤については、ダイヤフラムが、たとえば、ＤＢ‐２１８（米国ガスケット／ラバ−、シラ−  パ−ク、III.）のようなニトリル製、あるいはビスタロン（Vistalon商品名、エクソン）、ロイアレン（Royalene商品名、ユニロイアル）、ブナイ−ピィ−（bunaEP、バイエル）のようなＥＰＤＭゴム製のバルブ装置によって供給するのが好ましい。また、ダイヤフラムは、フレクソマ−（FLEXOMER商品名）ゲルス１０８５エヌティ−ポリオレフィン（ユニオンカ−バイド）のような熱可塑性弾性材料から押出し、射出成形あるいは圧縮成形によって形作るのが適切である。
【００７１】
この発明の薬剤を入れるためには、一般のエアゾル容器、塗装をしたもの、あるいはしないもの、陽極酸化したもの、あるいはしないもの、たとえば、アルミニウム、ガラス、ステンレス鋼、ポリエチレンテレフタレ−トのそれら、さらには、エポン（epon）、エポキシなどで塗装した容器あるいは缶を用いることができる。
【００７２】
この発明の薬剤は、粉末エアゾルによることは勿論、今までの噴霧システムを使用することができる。
【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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