(57)【要約】紫檀から分離された、新規なグルコピラノサイド、一般式１で示される６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイド及びその分離方法が開示される。本発明は、また、６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドを含む薬物と、前記化合物を用いる糖尿病の治療方法とに関するものである。
2005528398.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式１で示される６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドであることを特徴とする新規なグルコピラノサイド。
【化１】
2005528398.tif 000005
【請求項２】
（ａ）植物の紫檀の心材を粉末化する工程と、
（ｂ）粉末化された植物物質をプロトン溶媒により抽出する工程と、
（ｃ）抽出物を最小体積に濃縮すると共に極性を増加させる他の有機溶媒により分離して非極性成分を除去し、極性溶媒により水層を抽出し、溶媒を除去して残渣を得る工程と、
（ｄ）残渣から６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドを分離する工程とを備えることを特徴とする一般式１で示される６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドの分離方法。
【化２】
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【請求項３】
前記（ｂ）の工程で抽出物を調製するために用いられるプロトン溶媒は、水、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール及びそれらの混合物からなる群から選択されることを特徴とする請求項２記載の方法。
【請求項４】
前記（ｃ）の工程で用いられる有機溶媒は、分子中に１乃至６の炭素原子を含み、極性を増加させる溶媒からなることを特徴とする請求項２記載の方法。
【請求項５】
前記（ｃ）の工程で非極性成分を除去するために用いられる極性を増加させる有機溶媒は、順に、ヘキサン、クロロホルム、メタノール及びエタノールからなることを特徴とする請求項２記載の方法。
【請求項６】
水層から抽出するために用いられる極性を増加させる有機溶媒は、順に、ヘキサン、クロロホルム、酢酸エチル及びメタノールからなることを特徴とする請求項２記載の方法。
【請求項７】
水層から抽出するために用いられる極性を増加させる有機溶媒は、順に、ヘキサン、クロロホルム、酢酸エチル、プロパノール及びｎ−ブタノールからなることを特徴とする請求項２記載の方法。
【請求項８】
６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドを分離するために用いられるクロマトグラフ法は、ＭＰＬＣ、ＨＰＬＣ及びフラッシュクロマトグラフィーから選択されることを特徴とする請求項２記載の方法。
【請求項９】
本発明はまた、薬学的に許容されるキャリアに、薬学的に有効な量の一般式１で示される６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドを含む薬物を提供する。
【請求項１０】
前記薬物中の６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドの量は、患者の体重のｋｇ当たり、０．５ｍｇ乃至１５ｍｇの範囲であることを特徴とする請求項９記載の薬物。
【請求項１１】
患者に、薬学的に有効な量の６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドを投与することからなる糖尿病の治療方法。
【請求項１２】
６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドの量は、患者の体重のｋｇ当たり、０．５ｍｇ乃至１５ｍｇの範囲であることを特徴とする請求項１１記載の治療方法。
【請求項１３】
糖尿病の治療のための薬物の調製に用いることを特徴とする６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドの使用方法。
【請求項１４】
前記薬物中の６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドの量は、患者の体重のｋｇ当たり、０．５ｍｇ乃至１５ｍｇの範囲であることを特徴とする請求項１３記載の使用方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なグルコピラノサイド、一般式１で示される６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドに関するものである。
【０００２】
【化１】
2005528398.tif 000003
【０００３】
本発明は、また、紫檀から一般式１で示される前記新規なグルコピラノサイドを分離する方法に関するものである。
【０００４】
より詳細には、本発明は、紫檀からの一般式１で示される６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドの分離方法に関するものである。本発明は、また、一般式１で示される６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドを含む薬物と、一般式１で示される前記化合物を用いる糖尿病の治療方法にも関するものである。
【背景技術】
【０００５】
インド・キノ樹またはヴィジェイサルとしても知られる紫檀（マメ科）は、通常、中央インド及びインド半島の丘陵地域にある（非特許文献１参照）。この樹木の葉、花及び樹液の抽出物は、下痢、歯痛、熱、尿道感染症及び皮膚感染症に医薬的に用いられていた（非特許文献２参照）。樹皮の抽出物は、長い間、糖尿病の治療に有効であると考えられていた（非特許文献３参照）。チャクラバーシイ(Chakravarthy)らにより、樹皮の活性な抗糖尿病素(active hypoglycemic principle)は（−）−エピカテキンであり、その効果は膵臓ベータセルの再生によるものであると報告されている（非特許文献４参照）。しかしながら、この主張は、コルブ(Kolb)ら及びシーハン(Sheehan)らにより疑問が呈されている（非特許文献５，６参照）。今や、（−）−エピカテキンがヒトの臨床的研究に用いるための実用的な抗糖尿病薬であると考えられる前に、さらに研究が必要であると感じられる。
【０００６】
インド医薬システム(Indian System of Medicine)の開業医は、紫檀の樹皮よりもむしろ心材の方が糖尿病の患者の治療に有益であり、樹木が年をとっているほど効果があるのはその心材である、という見解である。また、色において明らかに赤であり、それに浸み込まされている水に、青緑の蛍光と共に赤い色を与える心材のみが抗糖尿病薬のために適している、と主張される。
【０００７】
紫檀の心材から水またはアルコールにより抽出された物の抗糖尿病効果は、実験的なもの及び臨床的研究により証明されている（非特許文献７〜１０参照）。紫檀の心材は、フェノール類に富んでいる。紫檀の心材に関する化学的研究は１９４６年にまで遡るが、この薬に関する初期の業績は自然界でのばらばらなものである（非特許文献１１参照）。この植物に関する最初に報告された研究は、以下の化学的成分を開示している。
１．紫檀の心材のエーテル抽出物は、マースポール(Marsupol)に示されるイソフラボノイドグリコール４，４’−ジヒドロキシ−α−メチルヒドロベンゾイン（非特許文献１２参照）、ベンゾフラノン誘導体、カーパシン(carpusin)に示される２，４’，６−トリヒドロキシ−４−メトキシベンゾ（ｂ）フラン−３（２Ｈ）−オン（非特許文献１３参照）、２−プロパノール誘導体、プロプタロールに示される１，３−ビス（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−オール（非特許文献１４参照）、プロプタロールＢに示される１−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−オール（非特許文献１５参照）、６−ヒドロキシ−７−Ｏ−メチル−３−（３−ヒドロキシ−４−Ｏ−メチルベンジル）クロマン−４−オン（非特許文献１６参照）を与える。
２．心材のアルコール抽出物の酢酸エチル可溶分は、プテロスピンβ，２’，４，４’−テトラヒドロキシ−３’（ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイド）ジヒドロカルコン（非特許文献１７参照）、マースピノール(Marsupinol)（非特許文献１８参照）、５，４’−ジメトキシ−８−メチルイソフラボン−７−Ｏ−α−Ｌ−ラムノピラノサイド、レトシン(retusin)−Ｏ−β−Ｄグルコピラノサイド及びイリソリジン−７−Ｏ−α−Ｌ−ラムノピラノサイド（非特許文献１９参照）、及び心材のアルコール抽出物の酢酸エチル可溶分から得られる５，７’−ジヒドロキシ−６−メトキシ−７−Ｏ−α−Ｌ−ラムノピラノサイド（非特許文献２０参照）を与える。
３．新規なベンゾフラノン誘導体、マースピン(Marsupin)に示される２，６−ジヒドロキシ−２−（ｐ−ヒドロキシベンジル）−４−メトキシ−３（２Ｈ）−ベンゾフラノン（非特許文献２１参照）、プテロスチルビン(pterostilbin)、（２Ｓ）−ヒドロキシフラボン、イソリキリチゲニン、リキリチゲニン、７，４−ジヒドロキシフラボン、５−デオキシケンフェロール及び３，７，４’−トリヒドロキシフラボン（非特許文献２２参照）、２つのＣ−グリコサイド、８−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシル−３，７，４’−トリヒドロキシフラボン及び８−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシル−３，７，３’，４’−テトラヒドロキシフラボン、及び脱脂された心材の酢酸エチル抽出物からの３’−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシル−α−ヒドロキシジヒドロカルコン（非特許文献２３参照）。
【０００８】
しかしながら、従来技術はそのような化学的成分に関する生化学的活性について何も詳しいことを提供していない。また、従来技術はエーテル抽出物、酢酸エチル抽出物及びアルコール抽出物の酢酸エチル可溶分の調製を開示するだけで、紫檀の心材の水抽出物を調製する方法及びそこから何か化学的成分を分離しようとの試みについて何も開示していない。
【非特許文献１】Jain, S.K., Medicinal Plants, National Book Trust, New Delhi, 1968, p.116
【非特許文献２】Chopra, R.N., Chopra, I.C., Handa, K.L. and Kapur, L.D., Indigenous Drugs of India, 2nd Ed., Dhar, U.N. and Sons Private Limited, Calcutta, 1958, p.522
【非特許文献３】Kirtikar, K.R. and Basu, B.D., Indian Medicinal Plants, 2nd Ed., edited by Blatter, E., Cailes, J.F. and Mhaskar, K.S., Singh and Singh, Delhi, India, 1975, p.2135
【非特許文献４】Chakravarthy, B.K., Gupta, S. and Gode, K.D., Lancet, 1982, 272（及びその中に引用された参考文献）
【非特許文献５】Kolb, H., Kiesel, U., Grenlich, B. and Bosch, J.V.D., Lancet, 1982, 1303
【非特許文献６】Sheehan, E.W., Zemaitis, M.A., Slatkin, D.J. and Schiff, Jr., P.L., Journal of Natural Products, 1983, 46, 232
【非特許文献７】Shah, D.S., Indian Journal of Medical Research, 1967, 55, 166 及びその中に引用された参考文献
【非特許文献８】Gupta, S.S.,Indian Journal of Medical Research, 1963, 51, 716
【非特許文献９】Sepha, G.C. and Bose, S.N., J. Ind. Med. Assoc., 1956, 27, 383
【非特許文献１０】Kedar, P. and Chakrabarti, C. H., Maharashtra Med. J., 1981, 28, 165
【非特許文献１１】Bhargava, P.N., Proc. Ind. Acad. Sci., 1946, 24A, 496
【非特許文献１２】Rao, A. V. S., Mathew, J., Phytochemistry, 1982, 21, 1837
【非特許文献１３】Mathew, J. and Rao, A. V. S., Phytochemistry, 1983, 22, 794
【非特許文献１４】Rao, A. V. S., Mathew, J. and Shankaran, A. V. B., Phytochemistry, 1984, 23, 897
【非特許文献１５】Mathew, J., Rao, A. V. S. and Rambhav, S. Current Science, 1984, 53, 576
【非特許文献１６】Jain, S.C., Sharma, S.K., Kumar, R., Rajwansh, V.K. and Babu, V.R., Phytochemistry, 1997, 44, 765
【非特許文献１７】Adinarayana, D., Syamsundar, K.V., Seligmann, O., and wagner, H., (Z.Naturforsch., 1982, 37C, 145)
【非特許文献１８】Trivedi, J.J., Indian J. Phys. Pharmacol, 1977, 15, 51
【非特許文献１９】Mitra, J. and Joshi, T., Phytochemistry, 1982, 21, 2429
【非特許文献２０】Mitra, J. and Joshi, T., Phytochemistry, 1983, 22, 2326
【非特許文献２１】Maurya, R., Ray, A.B., Duah, F.K., Slatkin, D.J. and Schiff, P.L.Jr., Heterocycles, 1982, 19, 2103
【非特許文献２２】Maurya, R., Ray, A.B., Duah, F.K., Slatkin, D.J. and Schiff, P.L.Jr., J. Nat. Prod. 1984, 47, 179
【非特許文献２３】Bezuidenhoudt, B. C. B., Brandt, E. V., and Ferreira, E. V., Phytochemistry, 1987, 26, 531
【非特許文献２４】Roberts J.D., Weigert, F.J., Kroschwitz, J.I. and Reich, H.J., J. Am. Chem.Soc., 1970, 92, 1338
【非特許文献２５】Ikwya, Y., Sugama, K., and Maruno, M., Chemistry and Pharmacology Bulletin, 1994, 42, 2305
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
従って、本発明の主な目的は、紫檀の心材の水抽出物を調製することと、そこから化学的成分を得ることにある。
【００１０】
本発明の他の目的は、紫檀の心材の水抽出物から、糖尿病の治療に有益な生活性分を得ることにある。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明の上述の目的及び他の目的は、粉末化された紫檀の心材の水性抽出物を他の有機溶媒により分離することにより達成される。
【００１２】
新規な生活性分、６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドは、クロマトグラフ法により極性成分から分離されるものであり、抗糖尿病活性を示すことが明らかである。エーテル抽出物、酢酸エチル抽出物及びアルコール抽出物の酢酸エチル可溶分に関する技術について研究がなされて以来、この化合物の従来技術には何も開示されていない。
【００１３】
従って、本発明は、一般式１で示され、式中、ＲはＨまたはＣＯＣＨ３である新規なグルコピラノサイド、６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドを提供する。
【００１４】
【化２】
2005528398.tif 000004
【００１５】
本発明は、また、
（ａ）植物の紫檀の心材を粉末化する工程と、
（ｂ）粉末化された植物物質をプロトン溶媒により抽出する工程と、
（ｃ）抽出物を最小体積に濃縮すると共に極性を増加させる他の有機溶媒により分離して非極性成分を除去し、極性溶媒により水層を抽出し、溶媒を除去して残渣を得る工程と、
（ｄ）残渣から６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドを分離する工程とを備える、一般式１で示される６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドの分離方法を提供する。
【００１６】
本発明の一態様において、工程（ｂ）で抽出物を調製するために用いられるプロトン溶媒は、水、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール及びそれらの混合物からなる群から選択される。
【００１７】
本発明の他の態様において、工程（ｃ）で用いられる有機溶媒は、分子中に１乃至６の炭素原子を含み、極性を増加させる溶媒からなる。
【００１８】
本発明の他の態様において、工程（ｃ）で非極性成分を除去するために用いられる極性を増加させる有機溶媒は、順に、ヘキサン、クロロホルム、メタノール及びエタノールからなる。
【００１９】
本発明の他の態様において、水層から抽出するために用いられる極性を増加させる有機溶媒は、順に、ヘキサン、クロロホルム、酢酸エチル及びメタノールからなる。
【００２０】
本発明の他の態様において、水層から抽出するために用いられる極性を増加させる有機溶媒は、順に、ヘキサン、クロロホルム、酢酸エチル、プロパノール及びｎ−ブタノールからなる。
【００２１】
本発明の他の態様において、６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドを分離するために用いられるクロマトグラフ法は、ＭＰＬＣ、ＨＰＬＣ及びフラッシュクロマトグラフィーから選択される。
【００２２】
本発明は、また、薬学的に許容されるキャリアに、薬学的に有効な量の一般式１で示される６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドを含む薬物を提供する。
【００２３】
本発明の一態様において、前記薬物中の６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドの量は、患者の体重のｋｇ当たり、０．５ｍｇ乃至１５ｍｇの範囲である。
【００２４】
本発明は、また、患者に、薬学的に有効な量の６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドを投与することからなる糖尿病の治療方法に関する。
【００２５】
本発明の一態様において、前記薬物中の６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドの量は、患者の体重のｋｇ当たり、０．５ｍｇ乃至１５ｍｇの範囲である。
【００２６】
本発明は、また、糖尿病の治療のための薬物の調製における６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドの使用方法に関する。
【００２７】
本発明の一態様において、前記薬物中の６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドの量は、患者の体重のｋｇ当たり、０．５ｍｇ乃至１５ｍｇの範囲である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２８】
本発明は、
（ａ）植物の紫檀の心材を粉末化する工程と、
（ｂ）そのようにして調製された粉末化した植物物質をプロトン溶媒により抽出する工程と、
（ｃ）抽出物を最小体積に濃縮すると共に極性を増加させる他の有機溶媒により分離して非極性成分を除去し、極性溶媒により水層を抽出し、溶媒を除去して残渣を得る工程と、
（ｄ）残渣から６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドを分離する工程とを備える、一般式１で示される６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドの分離方法を提供する。
【００２９】
抽出物を調製するために用いられる溶媒は、水、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等、またはそれらの混合物であってよい。工程（ｃ）において、非極性成分を除去するために用いられる有機溶媒は、ヘキサン、酢酸エチル、メタノール、エタノール、プロパノール、ｎ−ブタノール及びクロロホルムから選択される。水層を抽出するために用いられる極性溶媒は、酢酸エチル、プロパノール、ブタノール及びそれらの混合物から選択される。メタノール、エタノール、プロパノールの分離に用いられるクロマトグラフ法は、ＭＰＬＣ、フラッシュクロマトグラフィー等であってよい。
【００３０】
ＭＰＬＣ法においては、必要とされる溶出溶媒はポンプでカラムに注入され、フラッシュクロマトグラフィーにおいては、溶媒は大気圧で圧入される。本発明の化合物は、酢酸エチル及びメタノールの混合物から再結晶され、融点１１７〜１１８℃、〔α〕Ｄ１９＋９．１５°（ＭｅＯＨ，ｃ，０．２９５）、メタノール中、２４２、２５３、２８４ｎｍで紫外線の最大光度(UV maxima)を示す。化合物の分子式は、分光法で支援されたＦＡＢ式質量分析における、ｍ／ｚ４０２〔Ｍ〕＋の強いピークに基づいて、Ｃ２１Ｈ２２Ｏ８と確定された。
【００３１】
化合物６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドは、紫檀の心材の水煎出物のｎ−ブタノール可溶分から分離され、ヒトと動物との両方に抗糖尿病活性を示す。エーテル抽出物、酢酸エチル抽出物及びアルコール抽出物の酢酸エチル可溶分の技術分野において研究がなされて以来、この化合物について従来技術には何も開示されていない。
【００３２】
紫檀から活性素(active principle)を分離する方法は、粉末化された心材の水抽出物を、分子中に１〜６の炭素原子を含む異なる有機溶媒により、分離することからなる。一般式１で示される６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドは、中圧液体クロマトグラフィー（ＭＰＬＣ）、高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）及びシリカゲル（２３０〜４００メッシュ）を用いるフラッシュクロマトグラフィーのような近代的クロマトグラフ法を採用することにより、極性成分から分離され、抗糖尿病活性を示す。
【００３３】
紫檀から分離された６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドは、抗糖尿病活性を備えている。６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドの分離に用いられるクロマトグラフ法は、ＭＰＬＣ、フラッシュクロマトグラフィー等であってよい。
ＭＰＬＣ法においては、溶媒はカラムにポンプで注入され、フラッシュクロマトグラフィーにおいては大気圧で圧入される。ＩＲスペクトルは、水酸基の３３００ｃｍ−１、芳香族環の１６００、１５８４、１５１２ｃｍ−１に吸収を示す。１Ｈ及び１３ＣＮＭＲスペクトルは、δ７．１８（Ｈ−５，３’，５’）とδ６．７０（Ｈ−４，２’，６’）とを中心とする芳香族プロトンの２組のマルチプレット、δ６．２７（Ｈ−３）、δＣ１０２．９の単一の１つのフランのプロトン、δ３．６５、δＣ３４．２の１つのベンジルメチレン基のシングレット及び糖類プロトンのδ３．００〜５．００のマルチプレットを示す。スペクトルデータは、本発明の化合物がリング−Ｃにフェノール性水酸基を含むベンゾフランＣ−グルコサイドであることを示唆する。本発明の化合物のアセチル化は、一般式１のＲがアセチルである六酢酸化物(hexa-acetate)を与える。前記六酢酸化物は、メタノールから再結晶され、融点８０〜８１℃、〔α〕Ｄ１９−８５．４０°（ＣＨＣｌ３，ｃ，０．１８５）であり、クロロホルム中、２４８、２５２、２７８、２８６ｎｍで紫外線の最大光度、ＫＢｒによるＩＲで１７２５、１６００、１５８０、１３８５ｃｍ−１を示し、六酢酸化物の分子式は、Ｃ３３Ｈ３４Ｏ１４、ｍ／ｚ６５５〔Ｍ＋１｝＋である。１Ｈ及び１３ＣＮＭＲスペクトルは、δ２．１７、２．１６、２．０９及び２．０８の糖類の酢酸基の４つのシングレットと、δ２．４２及び２．３５の芳香族酢酸基の２つのシングレットと、δ４．１６、δＣ３４．３のベンジルメチレン基の１つのシングレットと、δ６．３８、δＣ１０３．４のフランのプロトンの１つのシングレットと、δ７．４６（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）及びδ６．９２（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）の２つのオルト結合した芳香族プロトンと、δ７．３６（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ）及びδ７．１０（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ）の１つのＡ２Ｂ２芳香族系とを示す。糖類の芳香族プロトンはδ５．０２（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝９．９Ｈｚ）、δＣ７４．５に現れ、化学シフト及び結合定数に基づいてβ−配置を有することを示す（非特許文献２４参照）。さらに、糖類のメチンのプロトンはδ５．７３（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝９．３Ｈｚ）、δ５．４２（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝９．２Ｈｚ）及びδ５．２８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝９．４Ｈｚ）に現れる。ヘキソースのメチンのプロトンＨ−１’’乃至Ｈ−５’’の結合定数は、全てトランスアキシャル関係を示し、メチレン（Ｈ−６’’）共鳴と共に、β−Ｄ−グルコースとしての糖類と同一であることが確認された。さらに、グルコースの一部分の炭素の化学シフトは、Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシル残渣の化学シフトと一致し（非特許文献２５参照）、ＨＭＢＣスペクトルは、それがＣ−７でアグリコンと連結されていることを示す。上記スペクトルデータに基づいて、化合物の構造は、一般式１で示され、式中、Ｒが水素である６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドとして確定された。
【００３４】
化合物は、１８時間絶食させたウィスターラットで、抗糖尿病活性が評価された。経口で１５ｍｇ／ｋｇの投与量で、抗糖尿病効果は、全ての治療されたラットに記録された。記録された平均降下は、最初の血液１００ｍｌ当たり平均９１ｍｇ乃至平均６７ｍｇから、血液１００ｍｌ当たり２４ｍｇであった。これに比較して、ポジティブコントロールとして用いられるクロルプロパミドのような従来の抗糖尿病薬は、血液１００ｍｌ当たり１８ｍｇの平均降下を示した。
【００３５】
本発明は以下に与えられる実施例により詳細に記述されるが、実施例は本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。
【実施例１】
【００３６】
粉末化された紫檀の心材（１ｋｇ）は、８０％水性エタノール（３×３リットル）で４８時間浸出させた。得られた濃縮液は、ヘキサン、クロロホルム、プロパノール及びブタノールの順に分離された。極性抽出物は、素分画物を得るために、ヘキサン、クロロホルム、メタノール、エタノールの順に、シリカゲル（１００〜２００メッシュ）を用いるＭＰＬＣに供せられた。活性化合物は、ＭＰＬＣと、溶媒としてＣＨＣｌ３−ＭｅＯＨ（９：１）を用いるシリカゲル（２３０〜４００メッシュ）でのフラッシュクロマトグラフィーとの繰り返しにより精製され、一般式１で示される６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドを得た。（収率０．０３１〜０．０４１％）、融点１１７〜１１８℃、〔α〕Ｄ１９＋９．１５°（ＭｅＯＨ、ｃ、０．２９５）。また、一般式１により示され、式中、Ｒがアセチルである六酢酸化された化合物がメタノールから再結晶された。融点８０〜８１℃、〔α〕Ｄ１９−８５．４０°（ＣＨＣｌ３、ｃ、０．１８５）。
【実施例２】
【００３７】
紫檀の心材を温水で４時間抽出した。得られた濃縮物は、ヘキサン、クロロホルム、プロパノール及びブタノールの順に分離された。そのようにして得られた極性抽出物は、溶媒系として、ヘキサン、クロロホルム、酢酸エチル及びメタノールを用いて、シリカゲル（１００〜２００メッシュ）を使用するフラッシュクロマトグラフィーに供せられ、６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドに富む分画を得た。前記分画は、溶媒としてＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ（１９：１）を用いるシリカゲル（２３０〜４００メッシュ）でのフラッシュクロマトグラフィーの繰り返しにより、一般式１で示される６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドを得た。（収率０．０３２〜０．０４３％）、融点１１７〜１１８℃、〔α〕Ｄ１９＋９．１５°（ＭｅＯＨ、ｃ、０．２９５）。また、一般式１により示され、式中、Ｒがアセチルである六酢酸化された化合物がメタノールから再結晶された。融点８０〜８１℃、〔α〕Ｄ１９−８５．４０°（ＣＨＣｌ３、ｃ、０．１８５）。
【実施例３】
【００３８】
紫檀の心材は、水の体積の１／４が残るまで、水で沸騰され（１６回）、濃縮され、ヘキサン、クロロホルム、酢酸エチル、プロパノール及びｎ−ブタノールの順に分離された。得られた極性抽出物は、溶媒系としてヘキサン、クロロホルム、酢酸エチル及びメタノールを用い、シリカゲル（６０〜１２０メッシュ）を使用するカラムクロマトグラフィーに供せられ、６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドに富む分画を得た。６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドに富む分画は、酢酸エチル−アセトン（７：３）を用いるシリカゲル（１００〜２００メッシュ）でのカラムクロマトグラフィーの繰り返しにより、一般式１で示される６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドを得た。（収率０．０３１〜０．０４４％）、融点１１７〜１１８℃、〔α〕Ｄ１９＋９．１５°（ＭｅＯＨ、ｃ、０．２９５）。また、一般式１により示され、式中、Ｒがアセチルである六酢酸化された化合物がメタノールから再結晶された。融点８０〜８１℃、〔α〕Ｄ１９−８５．４０°（ＣＨＣｌ３、ｃ、０．１８５）。
〔有利な点〕
１．得られた化合物、６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドは、抗糖尿病活性を備える新規な分子である。
２．６−ヒドロキシ−２−ｐ−ヒドロキシベンジルベンゾフラン−７−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノサイドの分離の方法は、比較的単純である。
【国際調査報告】
2005528398.tif 000007
2005528398.tif 000008
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