(57)【要約】  本発明は、個体に対して治療上有効なエストラジオール阻害量のインタフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）及び／又は腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アンタゴニスト及び／又はインタ−ロイキン−１（ＩＬ−１）アンタゴニストを投与することを含んでなる、個体のエストロゲン応答性乳癌の治療方法に向けられている。該発明は、ＩＦＮ−γ及び／又は腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アンタゴニスト及び／又はインタロイキン−１（ＩＬ−１）アンタゴニストがヒト脂肪細胞内のエストラジオール産生を阻害するという驚くべき発見に基づいている。この発見は、それが、各々単独でか又は組合せた形でＩＦＮ−γ、ＴＮＦアンタゴニスト又はＩＬ−１アンタゴニストを用いてエステロゲン依存性乳癌を治療及び／又は予防できるようにするという理由のみならず、例えばタモキシフェン及び／又はアロマターゼ阻害物質といった標準的な抗エストロゲン療法と合わせてＩＦＮ−γ及び／又はＴＮＦアンタゴニスト及び／又はＩＬ−１アンタゴニストを使用することが可能であるという理由でも重要なものである。さらに、標準的な抗エストロゲン療法と組合せた場合に本発明によりエストロゲンレベルを低下させる能力は、それが抗エストロゲンの用量を低減できるようにし抗エストロゲン療法に伴って一般的に見られる副作用及び合併症の確率を低下するという点で、治療上の重要な選択肢を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療上有効なエストラジオール阻害量のＩＦＮ−γを投与することを含んでなる、個体のエストロゲン応答性乳癌の治療方法。
【請求項２】
治療上有効なエストラジオール阻害量のＩＦＮ−γを投与することを含んでなる、癌のリスクのある個体のエストロゲン応答性乳癌の予防方法。
【請求項３】
治療上有効なエストラジオール阻害量のＴＮＦアンタゴニストを投与することを含んでなる、個体のエストロゲン応答性乳癌の治療方法。
【請求項４】
治療上有効なエストラジオール阻害量のＴＮＦアンタゴニストを投与することを含んでなる、癌のリスクのある個体のエストロゲン応答性乳癌の予防方法。
【請求項５】
治療上有効なエストラジオール阻害量のＩＦＮ−γとＴＮＦアンタゴニストの組合せを投与することを含んでなる、個体のエストロゲン応答性乳癌の治療方法。
【請求項６】
治療上有効なエストラジオール阻害量のＩＦＮ−γとＴＮＦアンタゴニストの組合せを投与することを含んでなる、癌のリスクのある個体のエストロゲン応答性乳癌の予防方法。
【請求項７】
治療上有効なエストラジオール阻害量のＩＬ−１アンタゴニストを投与することを含んでなる、個体のエストロゲン応答性乳癌の治療方法。
【請求項８】
治療上有効なエストラジオール阻害量のＩＬ−１アンタゴニストを投与することを含んでなる、癌のリスクのある個体のエストロゲン応答性乳癌の予防方法。
【請求項９】
治療上有効なエストラジオール阻害量のＩＦＮ−γを抗エストロゲン剤と組合せて投与することを含んでなる、個体のエストロゲン応答性乳癌の治療方法。
【請求項１０】
治療上有効なエストラジオール阻害量のＩＦＮ−γを抗エストロゲン剤と組合せて投与することを含んでなる、癌のリスクのある個体のエストロゲン応答性乳癌の予防方法。
【請求項１１】
治療上有効なエストラジオール阻害量のＴＮＦアンタゴニストを抗エストロゲン剤の同時、逐次又は個別投与と組合せて投与することを含んでなる、個体のエストロゲン応答性乳癌の治療方法。
【請求項１２】
治療上有効なエストラジオール阻害量のＴＮＦアンタゴニストを抗エストロゲン剤の同時、逐次又は個別投与と組合せて投与することを含んでなる、癌のリスクのある個体のエストロゲン応答性乳癌の予防方法。
【請求項１３】
治療上有効なエストラジオール阻害量のＩＦＮ−γ及びＴＮＦアンタゴニストを抗エストロゲン剤の同時、逐次又は個別投与と組合せて投与することを含んでなる、個体のエストロゲン応答性乳癌の治療方法。
【請求項１４】
治療上有効なエストラジオール阻害量のＩＦＮ−γ及びＴＮＦアンタゴニストを抗エストロゲン剤の同時、逐次又は個別投与と組合せて投与することを含んでなる、癌のリスクのある個体のエストロゲン応答性乳癌の予防方法。
【請求項１５】
抗エストロゲン剤がタモキシフェンである、請求項９、１０、１１、１２、１３又は１４に記載の方法。
【請求項１６】
エストロゲン応答性乳癌の治療又は予防のための医薬組成物の調製における医薬として許容される担体と合わせたＩＦＮ−γの使用。
【請求項１７】
エストロゲン応答性乳癌の治療又は予防のための医薬組成物の調製における医薬として許容される担体と合わせたＴＮＦアンタゴニストの使用。
【請求項１８】
エストロゲン応答性乳癌の治療又は予防のための医薬組成物の調製における医薬として許容される担体と合わせたＩＬ−１アンタゴニストの使用。
【請求項１９】
エストロゲン応答性乳癌の治療又は予防のための医薬組成物の調製における医薬として許容される担体と合わせたＩＦＮ−γ及びＴＮＦアンタゴニストの使用。
【請求項２０】
抗エストロゲン剤をさらに含んで成る請求項１６、１７、１８又は１９に記載の使用。
【請求項２１】
抗エストロゲン剤がタモキシフェンである、請求項２０に記載の使用。
【請求項２２】
ｉ）個体のエストロゲン応答性乳癌を治療又は予防するため有効な用量で充分な期間、薬剤を投与できることを指示するラベルを含む包装材料；及び
ｉｉ）医薬として許容される担体と合わせてＩＦＮ−γを含んで成る、前記包装材料内に含まれた薬剤、
を含んで成る製品。
【請求項２３】
ｉ）個体のエストロゲン応答性乳癌を治療又は予防するため有効な用量で充分な期間、薬剤を投与できることを指示するラベルを含む包装材料；及び
ｉｉ）医薬として許容される担体と合わせてＴＮＦアンタゴニストを含んで成る、前記包装材料内に含まれた薬剤、
を含んで成る製品。
【請求項２４】
ｉ）個体のエストロゲン応答性乳癌を治療又は予防するため有効な用量で充分な期間、薬剤を投与できることを指示するラベルを含む包装材料；及び
ｉｉ）医薬として許容される担体と合わせてＩＦＮ−γ及びＴＮＦアンタゴニストの組合せを含んで成る、前記包装材料内に含まれた薬剤、
を含んで成る製品。
【請求項２５】
ＴＮＦアンタゴニストが、腫瘍壊死結合タンパク質、可溶性ＴＮＦレセプタ分子又は抗ＴＮＦ抗体から成る群より選択される、請求項３、４、５、６、９、１０、１１又は１２に記載の方法。
【請求項２６】
治療上有効な量のＩＬ−１アンタゴニストの投与をさらに含んで成る、請求項１、２、３、４、５、６、７、９、１０、１１、１２、１３又は１４に記載の方法。
【請求項２７】
治療上有効な量のＩＦＮ−γ及び／又はＴＮＦアンタゴニストを投与する段階をさらに含んで成る、請求項７又は８に記載の方法。
【請求項２８】
ｉ）個体のエストロゲン応答性乳癌を治療又は予防するため有効な用量で充分な期間、前記調合薬を投与できることを指示するラベルを含む包装材料；及び
ｉｉ）医薬として許容される担体と合わせてＩＬ−１アンタゴニストを含んで成る、前記包装材料内に含まれた薬剤、
を含んで成る製品。
【請求項２９】
前記薬剤がさらにＩＬ−１アンタゴニストを含んで成る、請求項２２、２３又は２４に記載の製品。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
乳癌は、米国内及び世界中の女性にとって重大な健康上の問題である。この疾病の検出及び治療において進歩が見られたものの、乳癌は、女性における癌関連死の第２位の原因であり続けており、毎年アメリカで１８万人以上の女性がこれに罹患している（Forbes, 腫瘍学セミナー、第２４巻（１）、追補１、１９９７；ｐｓｌ−２０−Ｓ１−３５）。アメリカでは、女性がその生涯において（８０才までに）この疾病を発生させる確率は８人中１人であり、一方女性が乳癌で死亡する生涯リスクは２８人中１人である（Harris et al., Ed.「乳房疾患」、１９９６；ｐ１５９−１６８）。
【０００２】
男性の乳癌はまれではあるものの、乳房の悪性腫瘍全体の約１％を占めている（Borgen ＰＩ，Wong GY, Vlamis V. et al：現行の男性乳癌の管理；１０４症例の再検討。Annals of Surgery２１５（５）；４５１−４５９，１９９２）。診断時点の平均年令は６０〜７０才の間であるが、すべての年令の男性がこの疾病に罹患する可能性がある（Jaiyesimi IA, Buzdar AU, Sahin AA, et al；  男性の乳房の悪性腫瘍、Annals of Internal Medicine １１７（９）；７７１−７７７，１９９２）。リスク素因には、放射線被曝、エストロゲン投与及び肝硬変又はクラインフェルター症候群（Hultborn R. Hanson C, Kopf I, et al,：  男性の乳癌患者におけるクラインフェルター症候群の罹患率。Anticancer Research１７（６Ｄ）；４２９３−４２９８，１９９７）といったようなエストロゲン過剰症に付随する疾病が含まれるものと思われる。明確な家族的傾向も存在し、乳癌を有する女性の親類を数多く有する男性において、発生率の増大が見られる。
【０００３】
歴史的には、乳癌において内分泌治療が果たす役割を最初に発見したのは、１８９６年、閉経前女性における乳癌が卵巣摘除術の後に沈静化するということを観察したBeatsonであった。その後その他の科学者達により確認されたこの発見事実は、少なくとも１部の乳房腫瘍がその成長についてホルモンに直接依存しているという証拠を裏づけし、ホルモンの内因性供給源を除去する目的での内分泌器官の切除の治療的アプローチに対する関心を惹起した。乳癌のための外科的内分泌療法においては、エストロゲンの分泌に関与する器官は、エストロゲン依存性乳癌を退行させるために除去される。しかしながら、この結果として、エストロゲンのみならず、ステロイドホルモンを含む生命維持ホルモンの損失ももたらされ、生活の質に付随する数多くの問題が発生する。
【０００４】
現在、エストロゲンは、乳癌の発生において主要な役割を果たしている。閉経前の患者の約６０％そして閉経後の患者の７５％が、エストロゲン依存性腫瘍を有する。男性では、８０％以上の乳房腫瘍組織がホルモンレセプターを含有し、約３分の２の男性がホルモン療法に応答する（Richard B. Everson 及びMarc E. Lippman.「男性の乳癌」、Breast Cancer第３巻中、William L. McGuire 編、New York：Plenum Plublishing Corporation, １９７９）。
【０００５】
エストロゲン依存性乳癌の治療中、エストロゲンにより誘発される効果を大幅に削減するか又は可能であれば消失させることが重要となるだろう。この目的で、エストロゲンにより刺激されたレセプター部位を遮断することと同様、これらの部位で作用すべきエストロゲンの量を減少させることが望まれる。
【０００６】
卵巣摘除術の形での内分泌切除に加えて、エストロゲン依存性乳癌の現行の療法は、例えばタモキシフェンといったような抗エストロゲン化合物の使用に頼っている。しかしながら、これらの抗エストロゲン剤は、そのエストロゲン（アゴニスト）特性に起因して子宮内の或る癌細胞集団に対し刺激効果をもつ可能性があり、従ってこれらは、一部のケースにおいては逆効果となる。１つの理由は、内因性ホルモン産生が、視床下部−脳下垂体−生殖腺系の活動過剰を巻き込むということにある。
【０００７】
例えば、最も重大な副作用は、子宮内膜増殖症及び子宮内膜癌腫の発生率の実質的な増大（５年にわたるタモキシフェン投与後の３〜４倍のリスク増加）をひき起こす子宮内でのタモキシフェンのエストロゲン効果である（Goldhirsch et al., 乳癌の内分泌療法、Sem in Onc. 第２３（４）巻、ｐ４９４−５０５，１９９６）。このような理由及び長期に及ぶタモキシフェンの使用に伴う延命効果の改善の欠如のため、現在では、５年以上の長い期間に及ぶタモキシフェン療法は禁忌である。さらに、タモキシフェンは同様に、静脈血栓塞栓症の発生率の著しい増大、血管運動性症候又はホットフラッシュの発生率の著しい増大（１６〜６７％の範囲）、白内障形成及び、臨床的には確認されていないもののなおも（動物モデルにおいて実験的に観察された）肝細胞癌の可能性についての懸念を発生させるＤＮＡ−アダクツ形成とも結びつけられている。その上、データは、長期にわたるタモキシフェン露呈に伴い、乳房腫瘍細胞は、抗エストロゲン効果に対する耐性を細胞に発生させ代替的にそのエストロゲン特性に対し応答させるような変性を受けるということを示唆している（Santen, Editorial：長期タモキシフェン療法：アンタゴニストはアゴニストとなりうるか？  J Clin Endo & Metab, 第８１巻（６）ｐｐ.２０２７−２０２９，１９９６）。
【０００８】
かくして、タモキシフェンのような、かかる混合型エストロゲンアゴニスト／アンタゴニストは、エストロゲン依存性乳癌の治療において有益な効果をもち、エストロゲン副作用は急性の生命に関わる状況では容認できるものであっても、理想的なものではない。
【０００９】
従って、エストロゲン依存性乳癌のためには外科手術及び抗エストロゲン療法が利用可能であるものの、単独で又はその他の抗エストロゲン剤と組合せた形で、現在使用されている抗エストロゲン療法の副作用を消失させるか又は減少させることになる作用物質を得ることが有用であると考えられる。
【発明の開示】
【００１０】
本発明は、ＩＦＮ−γ及び／又は腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アンタゴニスト及び／又はインターロイキン−１（ＩＬ−１）アンタゴニストがヒト脂肪細胞内のエストラジオール産生を阻害するという驚くべき発見に基づいている。この発見は、各々単独で又は組合せた形でのＩＦＮ−γ、ＴＮＦアンタゴニスト又はＩＬ−１アンタゴニストを用いてエステロゲン依存性乳癌を治療及び／又は予防できるようにするという理由のみならず、例えばタモキシフェン及び／又はアロマターゼ阻害物質といった標準的な抗エストロゲン療法と合わせてＩＦＮ−γ及び／又はＴＮＦアンタゴニスト及び／又はＩＬ−１アンタゴニストを使用することが可能であるという理由でも、重要なものである。さらに、標準的な抗エストロゲン療法と組合せた場合に本発明によりエストロゲンレベルを低下させる能力は、それが抗エストロゲンの用量を低減できるようにし抗エストロゲン療法に伴って一般的に見られる副作用及び合併症の確率を低下するという点で、治療上の重要な選択肢を提供する。
【００１１】
１実施形態においては、治療上有効なエストラジオール阻害量のＩＦＮ−γ及び／又は１種以上のＴＮＦアンタゴニスト及び／又は１種以上のＩＬ−１アンタゴニストの投与を含んで成る、個体のエストロゲン応答性乳癌を治療及び／又は予防するための方法がここで提供されている。
【００１２】
第２の実施形態においては、本発明は、治療上有効なエストラジオール阻害量のＩＦＮ−γ及び／又は１種以上のＴＮＦアンタゴニスト及び／又は１種以上のＩＬ−１アンタゴニストを抗エストロゲン剤と組合せた形で投与することを含んで成る、個体のエストロゲン応答性乳癌を治療及び／又は予防するための方法を提供する。タモキシフェン及び／又はアロマターゼ阻害物質が好ましい抗エストロゲン剤である。
【００１３】
本発明はさらに、エストロゲン応答性乳癌の治療及び／又は予防のための医薬組成物の調製における医薬として許容される担体と組合せた又は単独でのＩＦＮ−γ及び／又は１種以上のＴＮＦアンタゴニスト及び／又は１種以上のＩＬ−１アンタゴニストの使用を提供している。１変形実施形態では、該組合せは、標準的な抗エストロゲン剤を含む。タモキシフェン及び／又はアロマターゼ阻害物質が好ましい抗エストロゲン剤である。
【００１４】
本発明においては、ＩＦＮ−γ及び／又はＴＮＦアンタゴニスト及び／又はＩＬ−１アンタゴニストの投与経路には、皮内、経皮（例えば徐放性製剤の形）、筋内、腹腔内、静脈内、皮下、経口、硬膜外、局所及び鼻腔内経路が含まれる。好ましい投与経路は、非経口投与である。静脈内、筋内及び皮下を含むあらゆる非経口投与が適したものでありうる。医薬として許容される担体以外に、本発明の組成物は、安定剤、賦形剤、緩衝液及び防腐剤といったようなわずかな量の添加剤をも含むことができる。
【００１５】
本発明の方法において有用なＩＦＮ−γは、天然ＩＦＮ−γ、組換え型ＩＦＮ−γ及び例えばその安定性を増大するべく、修飾されたＩＦＮ−γを包含する。
【００１６】
本発明の方法において有用であるＴＮＦアンタゴニストには、可溶性ＴＮＦレセプター分子、抗ＴＮＦ抗体及びＴＮＦレセプターのシグナリングを防止及び／又は阻害する化合物が含まれる。脂肪細胞内のＴＮＦによるエストラジオール誘発を阻害する小分子薬物、タンパク質、突然変異タンパク質、タンパク質由来のペプチド、模倣体（mimetics）も又、本発明において使用可能である。ＴＮＦアンタゴニストを単独で又はその他のＴＮＦアンタゴニストと組合せた形で使用することが可能である。
【００１７】
本発明の方法において有用である特定のＴＮＦアンタゴニストには、Serono SA からの組換え型ヒトＴＢＰ（ｒ−ｈＴＢＰ、例えば米国特許第ＵＳ６，２２５，３００号に記載されている腫瘍壊死因子結合タンパク質）；Immunex Corporation からのエタナセプト（Etanercept）（ＥＮＢＲＥＬTM）；Centocor Incからのインフリキシマブ（Infliximab）（ＲＥＭＩＣＡＤＥTM）；Hoffman-LaRoche からのイエナセプト(Ienercept）（ＲＯ−４５−２０８１，Tenefuse）；可溶性ＴＮＦレセプターＩ型（Amgen Inc からのｓＴＮＦ−Ｒ１）；可溶性ＴＮＦレセプターを含有するその他の作用物質；Celltech Chiroscience からのＣＤＰ５７１（ヒト化モノクローナル抗ＴＮＦアルファ抗体）；その他のモノクローナル抗ＴＮＦアルファ抗体；AbbottからのＤ２Ｅ７／アダリムマブ（adalimumab）（ヒト抗ＴＮＦｍＡｂ）；サリドマイド；ホスホジエステラーゼ４（ＩＶ）阻害サリドマイド類似体；その他のホスホジエステラーゼＩＶ阻害物質；及びＴＮＦアルファ変換酵素が含まれる。
【００１８】
ＩＬ−１アンタゴニストには、ＩＬ−１レセプターアンタゴニスト、ＩＬ−１結合タンパク質、抗ＩＬ−１モノクローナル抗体、ＩＬ−１レセプター修飾タンパク質及び、ＩＬ−１の in vivo合成又は細胞外放出を遮断するその他の化合物及びタンパク質が含まれる。好ましい実施形態においては、ＩＬ−１アンタゴニストはＩＬ−１βアンタゴニストである。
【００１９】
本発明は同様に、包装材料及びその中に収容された個体のエストロゲン依存性乳癌を治療又は予防するために治療上有効である薬剤を含む製品にも関する。該包装材料は、エストロゲン依存性乳癌を治療及び／又は予防するために該薬剤を使用することができるということを指示するラベルを含んでよい。該薬剤は、有効量のＩＦＮ−γ又は有効量のＴＮＦアンタゴニスト又は有効量のＩＬ−１アンタゴニストを含む。１実施形態においては、薬剤は、有効量のＩＦＮ−γ及び／又はＴＮＦアンタゴニスト及び／又はＩＬ−１アンタゴニストの組合せを含む。もう１つの実施形態では、本発明は、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦアンタゴニスト及びＩＬ−１アンタゴニストの組合せを含む。
【００２０】
別の実施形態においては、本発明は、単独で又は組合せた形でのＩＦＮ−γ、ＴＮＦアンタゴニスト及び／又はＩＬ−１アンタゴニストを含む第１のエストロゲン依存性癌治療又は予防剤、及び第２の治療剤を含んでなる組成物及びキットに関する。第２の治療剤は、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦアンタゴニスト、ＩＬ−１アンタゴニストではない。これらの組合せは、個体におけるエストロゲン依存性乳癌を治療又は予防するのに有効である。タモキシフェン等の抗エストロゲン剤を包含するさまざまなクラスの治療剤が組成物中で使用可能である。１実施形態においては、第１のエストロゲン依存性癌治療又は予防剤には、有効量のＩＦＮ−γ及びＴＮＦアンタゴニスト及び／又はＩＬ−１の組合せが含まれる。
【００２１】
以上の全般的記載及び以下の詳細な説明が共に本発明を例示するものにすぎず、請求されている通りの本発明の性質及び特徴を理解するための概要又は枠組を提供するよう意図されている、ということを理解すべきである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
本明細書に記載されている発明は、ヒト脂肪細胞からのエストラジオール産生が、ＩＦＮ−γの付加によって又はＩＬ−１アンタゴニスト、ＴＮＦアンタゴニストによりＴＮＦを遮断することによって低減されるという予想外の結果を明らかに示している。理論により束縛されることは望まないものの、エストラジオール産生の減少はアロマターゼｍＲＮＡの誘発阻害の結果であると考えられている。その結果、本発明の１実施形態は、治療上有効なエストラジオール産生阻害量のＩＦＮ−γ及び／又はＴＮＦアンタゴニスト及び／又はＩＬ−１アンタゴニストを単独で又は組合せた形で投与することを含んで成る、個体におけるエストロゲン応答性乳癌を治療及び／又は予防する方法を提供する。
【００２３】
もう１つの実施形態においては、本発明は、単独で又は組合せた形での治療上有効なエストラジオール産生阻害量のＩＦＮ−γ及び／又はＴＮＦアンタゴニスト及び／又はＩＬ−１アンタゴニスト、更に抗エストロゲン剤と組合せた形での投与を含んで成る、個体のエストロゲン応答性乳癌を治療又は予防するための方法に関する。好ましくは、抗エストロゲン剤は非ステロイド系である。タモキシフェンが好ましい抗エストロゲン剤である。
【００２４】
本発明のさらなる実施形態は、個体のエストロゲン応答性乳癌の治療及び／又は予防のための医薬組成物の調製における医薬として許容される担体と組合せた又は単独のＩＦＮ−γ及び／又はＴＮＦアンタゴニスト及び／又はＩＬ−１アンタゴニストの使用にある。医薬組成物は、同様に抗エストロゲン剤をも含み得る。
【００２５】
本発明において使用される活性成分は、ＴＮＦアンタゴニスト、ＩＬ−１アンタゴニスト、ＩＦＮ−γ及び抗エストロゲン剤である。ＴＮＦアンタゴニストは、２つの経路の１つでその活性を及ぼす。まず第１に、アンタゴニストは、ＴＮＦレセプター結合をつかさどるＴＮＦエピトープを実質的に中和するのに充分な親和性及び特異性でＴＮＦ分子自体に結合するか又はこれを隔絶することができる（以下、隔絶アンタゴニストと呼ぶ）。代替的には、ＴＮＦアンタゴニストは、ＴＮＦ結合の後に細胞表面レセプターにより活性化されるＴＮＦシグナリング経路を阻害し得る（以下、シグナリングアンタゴニストと呼ぶ）。両方のアンタゴニスト群は共に、単独で又は合わさって、本発明に従ったエストロゲン応答性乳癌の療法において有用である。
【００２６】
ＴＮＦアンタゴニストは、ＴＮＦが増殖及びＩｇ分泌をひき起こす例えばヒトＢ細胞といったin vitroの罹病性細胞株に対する天然ＴＮＦの活性に対する該アンタゴニストの効果について候補を常法によりスクリーニングすることによって容易に同定及び評定される。この検定は、検定中に使用されるＴＮＦのモル量に対して候補アンタゴニストの希釈度が例えば０．１〜１００倍に変動するＴＮＦ製剤と、ＴＮＦを全く伴わない又はアンタゴニストのみを伴う対照とを含んでいる（Tucci et al., ヒトＢ細胞検定内のＩＬ−１及び腫瘍壊死因子阻害物質及び１１のサイトカインの効果。J. Immunol. １９９２年５月１日；１４８（９）：２７７８−８４）。
【００２７】
隔絶アンタゴニストは、本発明に従った好ましいＴＮＦアンタゴニストである。隔絶アンタゴニストのうち、高い親和性でＴＮＦと結合し低い免疫原性を有するポリペプチドが好ましい。可溶性ＴＮＦレセプター分子及びＴＮＦに対する中和抗体は特に好ましい。例えば、本発明では、ＴＮＦ−ＲＩ及びＴＮＦ−ＲＨが有用である。レセプターの細胞外ドメイン又はその機能的部分を含むこれらのレセプターの切断形態（truncated form）が、本発明に従ったより特に好ましいアンタゴニストである。ＴＮＦレセプターの切断形態は可溶性であり、当初それぞれＴＢＰＩ及びＴＢＰＩＩと呼ばれていた３０ｋＤａ及び４０ｋＤａのＴＮＦ阻害結合タンパク質として尿及び血清中で検出されてきた（Engelmann et al., ヒトの尿から精製された２つの腫瘍壊死因子結合タンパク質。細胞表面腫瘍壊死因子レセプターとの免疫学的交差反応についての証拠。J. Biol Chem. １９９０ Jan ２５；２６５（３）：１５３１−６）。レセプター分子の誘導体、フラグメント、領域及び生物活性部分は、機能的に、本発明で使用され得るレセプター分子と似ている。レセプター分子のこのような生物活性等価物又は誘導体は、前記ポリペプチドの部分又はレセプター分子をコードする配列の部分であって、膜結合型ＴＮＦレセプターとの相互作用が阻害されるか又は遮断されるような親和性をもってＴＮＦと結合でき、かつ、充分なサイズを有する部分を意味する。好ましい実施形態において、ヒト可溶性ＴＮＦ−ＲＩが患者に投与されるＴＮＦアンタゴニストである。天然の及び組換え型の可溶性ＴＮＦレセプター分子及びその産生方法は、欧州特許出願第ＥＰ３０８，３７８号；第ＥＰ３９８，３２７号及び第ＥＰ４３３，９００号、並びに米国特許及び米国特許出願第ＵＳ５，３５９，０３７号；第ＵＳ５，５１２，５４４号；第ＵＳ５，６９５，９５３号；第ＵＳ５，８１１，２６１号；第ＵＳ５，９８１，７０１号；第ＵＳ６，２３２，４４６号；第ＵＳ６，２６２，２３９号及び第ＵＳ２００１００１９８３３Ａ１号に記載されている。
【００２８】
ＴＮＦレセプター多量体分子及びＴＮＦ免疫レセプター融合分子、及びその誘導体又は部分は、本発明の方法に有用なレセプター分子の追加の例である。本発明において有用なＴＮＦレセプター多量体分子は、１つ以上のポリペプチドリンカーを介して結合された２つ以上のＴＮＦレセプターの細胞外ドメインの全部又は機能的部分を含む。多量体分子はさらに、多量体分子の発現を導くべく、分泌タンパク質のシグナルペプチドを含むことができる。
【００２９】
これらの多量体分子及びその産生方法は、欧州特許出願第ＥＰ５２６，９０５号に記載されている。
【００３０】
本発明の方法において有用なＴＮＦ免疫レセプター融合分子は、１種以上の免疫グロブリン分子の少なくとも１部分、及び１種以上のＴＮＦレセプターの全部又は機能的部分を含む。これらの免疫レセプター融合分子は、単量体又はヘテロ多量体又はホモ多量体として組立て得る。免疫レセプター融合分子は同様に一価又は多価であり得る。ＴＮＦ免疫レセプター融合分子及びその産生方法は、ＰＣＴ特許出願第ＷＯ９４／０６４７６号に対応する欧州特許出願第ＥＰ６２０，７３９号に記載されている。
【００３１】
本発明の方法において有用である隔絶アンタゴニストのもう１つのクラスは、 in vivoでのＴＮＦに対する高い親和性及び低い毒性により特徴づけられるモノクローナル抗体、キメラヒト化抗体及び組換え型抗体及びそのフラグメントを包含する、抗ＴＮＦ抗体によって代表される。本発明において使用可能な抗体は、ホルモン依存性乳癌について患者を治療する能力及び低い毒性によって特徴づけられる。中和抗体は、ＴＮＦでの免疫化によりウサギ又はマウスといったような動物の体内で容易に産生する。
【００３２】
免疫化されたマウスは、それ自体で抗ＴＮＦモノクローナル抗体を大量に産生するべく培養されるハイブリドーマの製造のためのＢ細胞供給源を提供するために特に有用である。キメラ抗体は、異なる動物種に由来する２つ以上のセグメント又は部分によって特徴づけられる免疫グロブリン分子である。一般に、キメラ抗体の可変領域は、マウスモノクローナル抗体といったような非ヒト哺乳動物抗体に由来し、免疫グロブリン定常領域は、ヒト免疫グロブリン分子に由来する。好ましくは、両方の領域及び組合せが、常法により決定される低い免疫原性を有する（Elliott et al.,「慢性関節リウマチ内のプラシーボに対する、腫瘍壊死因子アルファ（ｃＡ２）に対するキメラモノクローナル抗体の無作為化二重盲検比較」Lancet, ３４４；１１０５−１１１０（１９９４））。ヒト化抗体は、マウス抗原結合領域を保持する一方でマウス定常領域がヒトの対応物と置換される遺伝子工学技術によって作り出された免疫グロブリン分子である。結果として得られたマウス−ヒトキメラ抗体は、低減された免疫原性と改善された薬物動態学を有するはずである（Knight et al., マウス−ヒト キメラ抗ＴＮＦ抗体の構築及び初期特徴づけ。Mol Immunol. １９９３ Nov；３０（１６）；１４４３−５３）。本発明において有用である高親和性モノクローナル抗体及びそのキメラ誘導体の好ましい例は、欧州特許出願第ＥＰ１８６，８３３号；ＰＣＴ特許出願第ＷＯ９２／１６５５３号及び米国特許第ＵＳ６，０９０，９２３号に記載されている。
【００３３】
ＴＮＦアンタゴニストは、さまざまな方法で個体に投与され得る。投与経路としては、皮内、経皮（例えば徐放性製剤）、筋内、腹腔内、静脈内、皮下、経口、硬膜外、局所及び鼻腔内経路が含まれる。その他の治療上有効な投与経路、例えば上皮又は内皮組織を通した吸収、あるいはＴＮＦアンタゴニストをコードするＤＮＡ分子を患者に（例えばベクターを介して）投与し、ＴＮＦアンタゴニストを in vivoで発現させ分泌させる遺伝子療法、のいずれも使用することができる。さらに、ＴＮＦアンタゴニストは、医薬として許容される表面活性剤、賦形剤、希釈剤又はその他のいずれかの担体といったような生物活性作用物質の他の成分と合わせて、投与することもできる。
【００３４】
クローニングされた遺伝子を取得、操作および発現するための技術を用いて、可溶性ＴＮＦレセプター等のＴＮＦアンタゴニスト並びに本発明で有用な他のタンパク質の変異体及び類似体を作ることができる。突然変異タンパク質及びペプチド類似体を調製、改変および利用するための組換え型ＤＮＡ方法、化学合成方法、酵素方法及び混合型方法が周知である。例えば、このような方法は、その全体が本明細書に参考として内含されるSambrook及びRusselの「分子クローニング：実験マニュアル、第３版、Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.,（２００１）に記されている。
【００３５】
当業者であれば、タンパク質のアミノ酸配列を改変するために、クローニングされた遺伝子を容易に操作できるということがわかるだろう。ヒトのＴＮＦレセプターのためのクローニングされた遺伝子は、本発明に従って使用可能である、in vitro突然変異誘発のためのさまざまな周知の技術、なかでも本明細書中で突然変異タンパク質と呼ばれている天然に発生するヒトタンパク質の変異体を産生するための技術、によって操作可能である。
【００３６】
ＩＬ−１アンタゴニストのクラスとしては、以下で記載するようなＩＬ−ｌｒａといったインターロイキン−Ｉレセプターアンタゴニスト（ＩＬ−１に対する細胞レセプターの活性化を特異的に防止する能力をもつあらゆる化合物）；本明細書にその開示が参考として内含される抗ＩＬ−１レセプターモノクローナル抗体（例えば第ＥＰ６２３６７４号）；可溶性ＩＬ−１レセプターといったようなＩＬ−１結合タンパク質（例えば米国特許第ＵＳ５４９２８８８号，第ＵＳ５４８８０３２号、及び第ＵＳ５４６４９３７号、第ＵＳ５３１９０７１号及び第ＵＳ５１８０８１２号）；抗ＩＬ−１モノクローナル抗体（例えば第ＷＯ９５０１９９７号、第ＷＯ９４０２６２７号、第ＷＯ９００６３７１号、米国特許第４，９３５，３４３号、第ＥＰ３６４７７８号、第ＥＰ２６７６１１号及び同ＥＰ２２００６３号）；ＩＬ−１レセプター修飾タンパク質（例えばＷＯ９６／２３０６７）、及びＩＬ−１のin vivo合成又は細胞外放出を遮断するその他の化合物及びタンパク質が含まれる。
【００３７】
ＩＬ−１レセプターアンタゴニスト（ＩＬ−１ｒａ）はＩＬ−１の天然の阻害物質として作用するヒトタンパク質である。好ましいレセプターアンタゴニストならびにその製造方法及び使用方法は、米国特許第ＵＳ５０７５２２２号；第ＷＯ９１／０８２８５号；第ＷＯ９１／１７１８４号；第ＡＵ９１７３６３６号；第ＷＯ９２／１６２２１号；第ＷＯ９３／２１９４６号；第ＷＯ９４／０６４５７号；第ＷＯ９４／２１２７５号；第ＦＲ２７０６７７２号；第ＷＯ９４／２１２３５号；第ＤＥ４２１９６２６号；第ＷＯ９４／２０５１７号；第ＷＯ９６／２２７９３号及び第ＷＯ９７／２８８２８号に記載されている。タンパク質は、グリコシル化された、ならびにグリコシル化されていないＩＬ−１レセプターアンタゴニストを包含する。
【００３８】
詳しく、各々同じＤＮＡコード配列から誘導されるつの好ましいＩＬ−１ｒａ形態（ＩＬ−１ｒａ．アルファ，ＩＬ−１ｒａ．ベータ及びＩＬ−１ｒａｘ）が米国特許第ＵＳ５，０７５，２２２号に開示され、記載されている。ＩＬ−１アンタゴニスト、特にＩＬ−１ｒａを産生するための方法は同様に上記特許第ＵＳ５，０７５，２２２号にも開示されている。特定の実施形態においては、ＩＬ−１ｒａは、E. coli での発現の結果としてＮ末端メチオニル基を含有している。本発明は、修飾されたＩＬ−１ｒａｓをも包含する。修飾されたＩＬ−１ｒａｓには、例えば、天然の阻害物質のアミノ酸配列内の１種以上の部位でシステイン残基がアミノ酸により置換されているような阻害物質の突然変異タンパク質が含まれる。このような突然変異タンパク質は次に、官能化されたポリエチレングリコール（ＰＥＧ）単位又は他のスルフヒドリル含有ポリエーテルと部位選択的に反応させられてＩＬ−１ｒａＰＥＧ種を作り出すことができる。ＷＯ９２／１６２２１は、一定数の修飾されたＩＬ−１ｒａ種及びかかるＰＥＧ修飾された阻害物質の製造方法を開示している。
【００３９】
ＩＬ−１アンタゴニストの追加のクラスとしては、ＩＬ−１に対する細胞レセプターの活性化を特異的に防止する能力をもつ化合物が含まれる。かかる化合物には、可溶性レセプター及びモノクローナル抗体といったようなＩＬ−１結合タンパク質が含まれる。かかる化合物は、レセプターに対するモノクローナル抗体をも包含する。
【００４０】
インターロイキン−１アンタゴニストのさらなるクラスには、ＩＬ−１の in vivo合成及び／又は細胞外放出を遮断する化合物及びタンパク質が含まれる。かかる化合物には、ＩＬ−１ 遺伝子の転写又はＩＬ−１タンパク質前駆体のプロセッシングに影響を及ぼす作用物質が含まれる。
【００４１】
本発明において有用なＴＮＦ及びＩＬ−１レセプターの突然変異タンパク質の一次構造の変異には、欠失、付加及び置換が含まれうる。置換は、保存的であっても非保存的であってもよい。天然タンパク質と突然変異タンパク質の差は、一般に、望ましい性質を保存し、望まれない性質を軽減又は削除し、望ましい又は新しい性質を付加するものである。本発明では、一般に、突然変異タンパク質は抗ＴＮＦ活性又は抗ＩＬ−１活性を維持又は増加させる突然変異タンパク質である。特に、ＴＮＦ及びＩＬ−１レセプターの突然変異タンパク質は、エストラジオール誘発の阻害を維持又は増大させるＴＮＦ及びＩＬ−１レセプターのアミノ酸配列変異体である。
【００４２】
同様に、大きいタンパク質から（一次配列において）由来して該大きいタンパク質の活性を示す、より小さなオリゴペプチド及びポリペプチドを作るための技術は、周知であり、当該技術分野において常法になっている。したがって、それぞれＴＮＦ又はＩＬ−１アンタゴニスト活性を示す可溶性ＴＮＦ又はＩＬ−１レセプターのペプチド類似体といったような本発明のタンパク質のペプチド類似体も同様に、本発明において有用である。
【００４３】
模倣体（mimetics）も同様に、乳癌を予防するか又は治療するために、本発明に従って使用可能である。模倣体の設計は、当業者にとって既知であり、一般に、それらがモデルとする大きい分子（往々にしてタンパク質である）の活性と同一又は類似の活性をもった比較的小さい他の分子又はペプチドであると理解されている。
【００４４】
脂肪細胞におけるＴＮＦにより誘発されるエストラジオール産生を阻害する上述のタンパク質、突然変異タンパク質、タンパク質由来模倣体などの以外の化合物も、本発明において有用であり得る。かかる化合物の中には、模倣体でありうる或る種の小さな有機分子が含まれる。かかる小さい分子の例としては、ＰＣＭ（Omega Pharmaceuticals Inc.）、ＳＨ−６３６（Shering AG, Germany）、ＮＰＩ−１３０２（Hensler et al. 議事録中の摘要；米国癌研究協会；サイトカインと癌；規則、血管新生及び臨床的応用；Vail, Colorado, ２０００年９月２０〜２４日；及び１５１５−１０４８３８（Isis Pharmaceuticals, Inc., Carlsbad, CA）が含まれるが、これらに制限されるわけではない。
【００４５】
生物学的に活性であることが示されている全ての形態のヒトＩＦＮ−γを、本発明に従って使用することができる。これらの形態には、天然の供給源から得られるか、化学的に合成されるか又は組換え型ＤＮＡ技術により産生されるかの如何に関わらず、成熟型、ｐｒｏ型、ｍｅｔ型及び／又はｄｅｓ（１−３）型（ｄｅｓ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ  ＩＦＮ−γとも呼ばれる）形態が含まれる。そのｃＤＮＡ及びアミノ酸配列を含む組換え型ヒトＩＦＮ−γ（ｒｈｕＩＦＮ−γ）の調製の完全な記載は、例えば米国特許第ＵＳ４，７２７，１３８号；第ＵＳ４，７６２，７９１号；第ＵＳ４，９２５，７９３号；第ＵＳ４，９２９，５５４号；第ＵＳ５，５８２，８２４号；第ＵＳ５，０９６，７０５号；第ＵＳ４，８５５，２３８号；第ＵＳ５，５７４，１３７号及び第ＵＳ５，５９５，８８８号に開示されている。さまざまな形で切断された(truncated）誘導体を内含する、ＣｙｓＴｙｒＣｙｓが欠如した組換え型ヒトＩＦＮ−γは、例えば米国特許第ＵＳ５，５８２，８２４号に開示されている。本発明において有用であるＩＦＮ−γには当該技術分野において既知であるか又は将来において入手可能になろうとしているかに関わらず、さまざまな形でグリコシル化された形態及びその他の変異体（例えばアミノ酸配列変異体）及びその天然（野生型）ＩＦＮ−γの誘導体が含まれる。かかる変異体の例としては、対立遺伝子及び、残基が欠失、挿入及び／又は置換されている部位特異的突然変異誘発の産物がある（例えば上述の米国特許ＵＳ５，５８２，８２４を参照のこと）。本発明において有用なＩＦＮ−γは、さまざまな商業的供給源から入手可能であり、数多くの適応症の治療のために承認されている。
【００４６】
本発明に従って使用されるＩＦＮ−γは、天然供給源からのものであってよいが、好ましくは組換え型産物である。本発明に有用なＩＦＮ−γには、ＩＦＮ−γ活性を有するポリペプチド又はそのフラグメント及び、なかでも米国特許ＵＳ５，５９３，６６７及びＵＳ５，５９４，１０７の中で開示されているような、例えばその生物活性の性質に影響を及ぼすことなく安定性を増強するために、配列修飾が導入されたＩＦＮ−γのキメラ形態又は突然変異体形態も含まれる。例えば、本発明に有用なＩＦＮ−γは、商業用製剤 Actimmune（登録商標）（Genetech, Inc. South San Francisco, CA）の活性成分である組換え型ヒトＩＦＮ−γ種（１４０個のアミノ酸を含有する組換え型ヒトインターフェロンガンマ−１ｂ、ｒｈＩＦＮ−γ−１ｂ）であり得る。
【００４７】
「医薬として許容される」という定義は、活性成分の生物活性の有効性を妨げず、それが投与される宿主に対し有毒でない何れの担体をも包含することを意味している。例えば、非経口投与のためには、ＴＮＦアンタゴニスト、ＩＬ−１アンタゴニスト及び／又はＩＦＮ−γは、食塩水、デキストロース溶液、血清アルブミン及びリンガー液といったようなビヒクル中の注入のための単一用量形態で製剤されうる。
【００４８】
非経口（例えば静脈内、皮下、筋内）投与のためには、ＴＮＦアンタゴニスト、ＩＬ−１アンタゴニスト及び／又はＩＦＮ−γは、医薬として許容される非経口ビヒクル（例えば水、食塩水、デキストロース溶液）及び等張性（例えばマンニトール）又は化学的安定性（例えば防腐剤及び緩衝液）を維持する添加剤と関連する溶液、懸濁液、エマルジョン又は凍結乾燥粉末として製剤可能である。製剤は、一般に用いられる技術により滅菌される。
【００４９】
ＴＮＦアンタゴニスト、ＩＬ−１アンタゴニスト及び／又はＩＦＮ−γの治療上有効なエストラジオール阻害量は、数多くの変数の関数である。これらの変数としては、ＴＮＦアンタゴニスト又はＩＬ−１アンタゴニストのタイプ、ＴＮＦ又はＩＬ−１に対するアンタゴニストの親和性、アンタゴニストが示す何らかの残留細胞毒性活性、投与経路、患者の臨床状態（内因性ＴＮＦ活性、ＩＬ−１活性又はＩＦＮ−γ活性の非毒性レベルを維持することの望ましさを含む）、及び例えば抗体といった隔絶剤内の多数のＴＮＦ又はＩＬ−１組合せ部位の存在、がある。
【００５０】
「治療上有効なエストラジオール阻害量」というのは、投与時にＴＮＦアンタゴニスト、ＴＮＦアンタゴニスト又はＩＦＮ−γが脂肪細胞からのエストラジオール産生の減少を結果としてもたらすようなものである。５０％の減少が好ましい。より好ましくは、エストラジオール産生の減少は７５％、最も好ましくは９５％である。単回投与又は複数回投与として個体に投与される用量は、化合物の薬物動態学的特性、投与経路、患者の状態及び特徴（姓別、年令、体重、健康、サイズ）、症候の規模、併用治療、治療の頻度及び所望される効果を含めた多様な要因に応じて変動することになる。設定された用量範囲の調整及び操作は、エストラジオールの阻害を決定するin vitro及び in vivoの方法と同様、当業者の能力の範囲内に充分入るものである。
【００５１】
乳癌のリスク因子、例えばＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２遺伝子内の突然変異といった遺伝的因子または疾病の家族履歴をもつ患者においては、ＴＮＦアンタゴニスト、ＩＬ−１アンタゴニスト及び／又はＩＦＮ−γは、乳癌の予防のためのその他の抗エストロゲン療法と別々に、同時に又は逐次的に、予防を目的として投与することができる。ＩＦＮ−γ、ＴＮＦアンタゴニスト又はＩＬ−１アンタゴニストがその他の治療剤と同時に投与される場合、これらは、同じ又は異なる組成で投与可能である。
【００５２】
抗エストロゲン剤の例としては、ラロキシフェン及びタモキシフェンにより代表される２−フェニル−３−ベンゾチオフェン及び１−（アルキルアミノエトキシフェニル）−１−フェニル−２−フェニルブト−１−エン；４−ヒドロキシタモキシフェン；クロミフェン；ナフォキシジン（Upjohn & Co.,700 Portage Road, Kalamazoo, MI）；米国特許第ＵＳ５，５６７，８３１号に記載されているような非ステロイド系スルファターゼ阻害化合物；米国特許第ＵＳ５，５７１，９３３号に記載されている３−アミノ化合物であるエストラ−１，３，５（１０）トリエン−１７−オンの誘導体；米国特許第ＵＳ６，２８８，０５０号に記載されている抗エストロゲンステロイドスルファターゼ阻害が含まれるが、これらに制限されるわけではない。本発明で考慮されているその他の抗エストロゲン剤は、トレミフェン、ドロロキシフェン、ＴＡＴ−５９、イドキシフェン、ＥＭ１３９、クロミフェン、ＭＥＲ−２５、ＤＥＳ、ナフォキシデン、ＣＰ−３３６，１５６、ＧＷ５６３８、ＬＹ１３９４８１、ＬＹ３５３５８１、ズクロミフェン、エンクロミフェン、エタモキシトリフェトール、デルマジノンアセテート、ビスホスホネートなどである。
【００５３】
例えば、ラロキシフェンを用いた乳癌治療は、米国特許第ＵＳ４，４１８，０６８号で記載されている。ドロロキシフェン（３−ヒドロキシタモキシフェン）は、米国特許ＵＳ５，０４７，４３１で乳癌治療において有効であるものとして報告されている。
【００５４】
エストロゲン活性が欠如した幾つかのステロイド系抗エストロゲン剤が合成されてきた。この中に含まれているのはＩＣＩ１６４，３８４、ＩＣＩ１８２，７８０及びＲＵ５８６６８である。例えばＩＣＩ１６４，３８４に関するWakeling et al., J Steroid Biochem.３１：６４５−６５３（１９８８）；ＩＣＩ１８２，７８０に関する、Wakeling et al.,Cancer Res. ５１：３８６７−３８７３（１９９１）、及びWakeling et al.,J.Steroid Biochem, Molec.Biol.３７：７７１−７７４（１９９０）、そしてＲＵ５８６６８に関するVan de Velde et al., Ann. N.Y. Acad, Sci.７６１：１６４−１７５（１９９５），Van de Velde et al., Pathol, Biol４２：３０（１９９４）、及びNique et al., Drugs Future ２０：３６２−３６６（１９９５）を参照のこと。
【００５５】
米国特許第ＵＳ６，２８１，２０５号で提供されている抗エストロゲン剤も、本発明でも考慮される。本発明において有用な抗エストロゲン剤には、例えば限定されることなくラロキシフェン、ドロロキシフェン、トレミフェン、４′−ヨードタモキシフェンおよびイドキシフェンを包含する米国特許第ＵＳ６，３００，３６７号に記載されているエストロゲンレセプターモジュレータも含まれ、ゲニステイン、ダイドゼイン、ビオカニンＡ、ホルモノネチン及びその天然のグルコシド及びグルコシド結合体の中から選択された少なくとも１つのイソフラボンと同時投与される。さらに、既知のアロマターゼ阻害物質が、抗エストロゲン剤として考慮される。かかるアロマターゼ阻害物質の例としては、ＭＰＶ−２２１３ａｄというコードでも知られている１−〔１−（４−シアノフェニル）−３−（４−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシプロピル〕−１，２，４−トリアゾール、ジアステレオ異性体ａ＋ｄといったような国際特許出願公報ＷＯ９４／１３６４５中の構造式（Ｉ）が含まれる。その他の適切なアロマターゼ阻害物質としては、アミノグルテチミド、アナストロゾール、ＣＧＳ１６９４９Ａ、４−ヒドロキシアンドロステンジオン（４−ＯＨＡ）、ファドロゾール、レトロゾール、ボロゾール、ログレチミド、アタメスタン、エキセメスタン、フォルメスタン、ＹＭ−５１１（４−［Ｎ−（４−ブロモベンジル）−Ｎ−（４−シアノフェニル）アミノ］−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール）、ＺＤ−１０３３（アリメデックス）及びＮＫＳ−０１（１４−アルファ−ヒドロキシアンドロスト−４−エン−３，６，１７−トリオン）及びそれらの立体異性体が含まれるが、これらに制限されるわけではない。
【００５６】
本発明は同様に、包装材料及び、その中に収納された個体のエストロゲン依存性乳癌を治療又は予防するために治療上有効である薬剤を含む製品にも関する。該包装材料には、エストロゲン依存性乳癌を治療及び／又は予防するために該薬剤を使用できることを指示するラベルが含まれてよい。該薬剤には、有効量のＩＦＮ−γ又は有効量のＴＮＦアンタゴニスト又は有効量のＩＬ−１アンタゴニストが含まれる。１実施形態においては、該薬剤は、有効量のＩＦＮ−γ及びＴＮＦアンタゴニストの組合せを含む。さらにもう１つの実施形態においては、該薬剤は、有効量のＩＦＮ−γ及びＴＮＦアンタゴニスト及びＩＬ−１アンタゴニストの組合せを含む。
【００５７】
別の実施形態においては、本発明は、ＩＦＮ−γ及び／又はＴＮＦアンタゴニスト及び／又はＩＬ−１アンタゴニストを含む第１のエストロゲン依存性癌治療又は予防剤、及び第２の治療剤を含んでなる組成物及びキットに関する。第２の治療剤は、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦアンタゴニスト、ＩＬ−１アンタゴニストではない。これらの組成物は、個体におけるエストロゲン依存性乳癌を治療又は予防するのに有効である。タモキシフェンなどの抗エストロゲン剤を包含する様々なクラスの治療剤が組成物に使用可能である。１実施形態において、第１のエストロゲン依存性癌治療又は予防用の薬剤は、有効量のＩＦＮ−γ及びＴＮＦアンタゴニストの組合せを含む。他の実施形態において、第１のエストロゲン依存性癌治療又は予防用の薬剤は、有効量のＩＦＮ−γ及びＴＮＦアンタゴニスト及びＩＬ−１アンタゴニストの組合せを含む。
【００５８】
本発明についてここで、いかなる形であれ制限的な意味をもたず以下の図面を参考にした例を用いて説明する。
【実施例】
【００５９】
例１
ヒト皮下培養脂肪細胞及び前駆脂肪細胞カタログ番号ＳＰ−１０１２、ＳＰ−１０２４、ＳＰ−１０９６、ＳＰ−７５又はＳＰ−２５をZen-Bio, Inc（Research Triangle Park, NC）から購入し、該メーカーの説明書に従ってこれを培養した。
【００６０】
前駆脂肪細胞の培地に、図１に示されているように増大する濃度のＴＮＦ−α又はＴＮＦ−βのいずれか及び０．１μｇ／ｍｌのＩＦＮ−γを補給した。メーカーの説明書に従ってActiveTMエストラジオールＥＩＡキット（カタログ番号ＤＳＬ−１０−４３００、Diagnostic Systems Laboratories, Inc., Webster, TX）を用いてエストラジオール濃度を測定した。図１の楕円形により示されるように、ＴＮＦ−α及びＴＮＦ−βは両方ともエストラジオール量を著しく増大させた。しかしながら、細胞にＩＦＮ−γが与えられたときは、三角形により示されるように、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）が、ヒトの脂肪細胞における腫瘍壊死因子ベータ（ＴＮＦ−β）及び腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）により誘発されるエストラジオール産生を阻害する。
【００６１】
例２
脂肪細胞を、ＩＬ−１−β、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦ−α、並びにＩＬ−１−βとＩＦＮ−γの組合せ及びＴＮＦ−αとＩＦＮ−γの組合せで処理した。その結果、培養された脂肪細胞由来の全ＲＮＡが、従来の方法を用いて単離された。アロマターゼ特異的プライマを用いて、逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）を実施した。ＲＴ−ＰＣＲによって産生された増幅したアロマターゼｃＤＮＡフラグメントをアガロースゲル上で分離した。図２に示されているように、ＩＬ−１β及びＴＮＦ−αは単独では、未処理の対照に比べアロマターゼｍＲＮＡの転写を誘発した。しかしながら、ＩＦＮ−γの投与がＩＬ−１β又はＴＮＦ−αと合わせて行われる場合には、アロマターゼｍＲＮＡの転写を阻害する。下の図は、構成的に発現されるハウスホールド遺伝子であるグリセルアルデヒドリン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）の転写を示している。対照レーンは、脂肪細胞内のアロマターゼｍＲＮＡ発現の基本レベルを示している。脂肪細胞によるエストラジオール産生は、アロマターゼｍＲＮＡレベルを示すゲル写真の下にピコグラム／ｍｌ（ｐｇ／ｍｌ）として示されている。
【００６２】
例３
単離されたヒト脂肪細胞を同様に、異なるインターフェロンファミリー構成員すなわちＩＦＮ−α、−β及び−γで処理した。図３に示されているように、ヒト脂肪細胞中のアロマターゼｍＲＮＡの発現は、ＩＦＮ−α及び−βの添加により著しく増大したが、一方、ＩＦＮ−γは、内因性アロマターゼｍＲＮＡ発現を阻害する。エストラジオールの産生は、（アロマターゼｍＲＮＡレベルを示すゲル写真の上に培地１ｍｌあたりのエストラジオールｐｇ数単位で示されているように）ＩＦＮ−αによる誘発により約６倍増加し、ＩＦＮ−βによる誘発により約１６倍増大した。
【００６３】
例４
単離されたヒト脂肪細胞は、図４に正方形で示されているように、変動する濃度のＴＮＦ−α及びＴＮＦ−βの存在下で増殖した。米国特許第６，２２５，３００号（ＴＢＰ）に記載されているような可溶性ＴＮＦレセプターであるＴＮＦ−Ｒ１（ＴＢＰ）及びＴＮＦ−αの両方の存在下で、又は並列のウェル内でＴＮＦ−β及びＴＢＰの存在下で、脂肪細胞を成長させたときは、図４に三角形で示されているように、エストラジオールの産生は完全に遮断された。
【００６４】
前記の各例は、例示的なものとして評価されるべきものであり、本発明の範囲を制限するものとして意図されていない。
【００６５】
本明細書で引用された全ての刊行物及び特許出願は、あたかも各々個々の刊行物又は特許出願が特定的及び個別に参考として包含されるべく指示されているかのごとく、本明細書に参考として包含される。上述の発明は、明確に理解できることを目的として例示及び例を用いて詳細に記載されてきたが、当業者には、本発明の教示に照らして、添付の特許請求の範囲の精神又は範囲から逸脱することなく或る種の変更及び修飾をそれに加えることができるということが容易に明らかとなるだろう。
【図面の簡単な説明】
【００６６】
【図１】ＩＦＮ−γがヒトの脂肪細胞内の腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）及び腫瘍壊死因子ベータ（ＴＮＦ−β）により誘発されるエストラジオール産生を阻害することを示す。
【図２】インターロイキン−１β（ＩＬ−１β）又はＴＮＦにより転写が誘発される場合のアロマターゼｍＲＮＡの転写をインターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）が阻害することを示す。下の図は、ハウスホールド遺伝子グリセルアルデヒドリン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）の転写を示す。ＩＬ−１β又はＴＮＦ±ＩＮＦ−γにより調節されるエストラジオールレベルも同じくｐｇ／ｍｌ単位で示されている。対照レーンは、脂肪細胞内のアロマターゼｍＲＮＡ発現の基本レベルを示す。
【図３】ヒトの脂肪細胞内のアロマターゼｍＲＮＡの発現に対するインターフェロン（ＩＦＮ）α、β及びγの効果の差を示す。エストラジオール産生は、ＩＦＮ−γ誘発により約６倍、ＩＦＮ−β誘発により約１６倍誘発され、ＩＦＮ−γにより完全に遮断される。
【図４】ヒト脂肪細胞内のＴＮＦ−レセプターの活性化が、エストラジオール産生をつかさどること、及び可溶性ＴＮＦ結合タンパク質、ＴＮＦ−Ｒ１（ＴＢＰ）がＴＮＦ−α及びＴＮＦ−βにより誘発されるエストラジオール産生を完全に遮断することを示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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