(57)【要約】ヒト及び動物におけるリーシュマニア症の治療用医薬又は獣医学用組成物の製造のための、任意にユビキチンとの併用におけるプロテインＵＫ１１４の使用。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト及び動物におけるリーシュマニア症の治療用医薬又は獣医学用組成物の製造のための、任意にユビキチンとの併用におけるプロテインＵＫ１１４の使用。
【請求項２】
ヒト及び動物におけるリーシュマニア症の治療用であって、抽出又は組換えプロテインＵＫ１１４と、任意にユビキチンを併用し、適当な賦形剤とを含有する医薬又は獣医学用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、任意にユビキチンを併用する、ヒト及び動物におけるリーシュマニア症の治療用のプロテインＵＫ１１４の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
リーシュマニア属の原虫は、犬、ヒト及び多数の野生動物のマクロファージ及び樹状細胞の細胞内寄生生物である。ヒトの医学に用いられる分類基準の基礎では、リーシュマニア症は、３つの臨床形態、内臓（カラ・アザールとしてヒトにおいて知られている）、皮膚及び粘膜皮膚で存在する。
犬の場合には、粘膜及び内臓形態は、独特の臨床像のために、過去において、切り離して分類されていたが、それらは、現在では、双方とも同じ疾患の進行性形態とみなされており、「一般化されたイヌ科のリーシュマニア症」として知られている。
【非特許文献１】Urquhart G. M. , Armour J. , Duncan J. L. , Dunn A. M, Jennings F. W. Veterinary Parasitology 2nd ed. , Italian edition edited by C. Genchi, UTET 1998
【非特許文献２】Murray H. W. , Jungbluth A. , Ritter E. , Montelibano C., Marino M. W. Visceral Leishmaniasis in Mice Devoid of Tumor Necrosis Factor and Response to Treatment, Infection and Immunity, November 2000, p. 6289- 6293, Vol. 68, No. 11.
【非特許文献３】Katzung B. G. Basic & Clinical Pharmacology, 1995 by Appleton & Lange, E. N. , Connecticut.
【発明の開示】
【０００３】
ベクターは、旧世界ではサシチョウバエ属及び新世界ではルツォミヤ属のチョウバエである。原虫は、チョウバエ中で繁殖し、感染性の生物体に形質変換される。
リーシュマニア属の寄生生物は、マクロファージ中では球形又は卵形の生物体として現れ、核に近接する杆状様動原核を伴う。直径２〜５μｍの寸法の生物体は、細胞の縁を越えては伸張しない不完全発育の鞭毛を有している。寄生生物のこの無鞭毛体は、チョウバエによって、生血を餌にする間に摂取される。原虫は、媒介宿主の腸内で前鞭毛体に形質変換され、寄生生物の前端から突出する長く、自由に動き回る鞭毛で特徴づけられる。生物体は、伸長した形状を有しており、通常、体と同じ寸法を有している鞭毛を除いて、１５μｍの長さに成長することができる。
摂取された無鞭毛体は、チョウバエの腸に達し、そこでそれらは前鞭毛体に形質変換される。前鞭毛体は、二分裂によって分割が繰り返され、その後、前方方向に体内移動する。咽頭で、寄生生物は、高い移動性の発育終末の前鞭毛体に変わり、それは、口吻に向かって体内移動する。前鞭毛体はチョウバエの咬創によって、新たな脊椎動物宿主に伝達される。
【０００４】
脊椎動物宿主において、前鞭毛体は、単核細胞／マクロファージによって摂取される。摂取された後、前鞭毛体は無鞭毛体に変わる。無鞭毛体は、マクロファージを破裂させるのに十分な数になるまで、寄生生物を支える小胞で二分裂によって分割する。よって、放出された無鞭毛体は、他のマクロファージによって摂取される。
無鞭毛体のマクロファージ内で生き残る能力及び体中に広がる能力は、寄生生物に内在する因子及び宿主によって発現させられる細胞性免疫のタイプに関連する因子に依存する。寄生マクロファージがT−ヘルパー（Th)リンパ球によって十分刺激されると、それらは非常に多くのライソゾーム酵素及び酸素代謝産物、超酸化及び過酸化水素ならびに亜酸化窒素（ＮＯ）を含む他の因子（これらは寄生生物に毒性を有する）を産生する。
【０００５】
細胞性免疫応答のタイプ及び産生されたインターロイキンのプロファイルは、リーシュマニア感染に対する抵抗及び感受性を決定する。実験動物では、リーシュマニア感染に対する抵抗は、ＩＬ−２及びインターフェロン・ガンマ（ＩＦＮγ）の産生ならびに寄生生物を排泄するマクロファージの活性化を伴うＴｈ１応答によって特徴づけられる。逆に、感染に感受性のある動物では、その応答はタイプＴｈ２であり、ＩＬ−４及びＩＬ−１０が産生され、その後マクロファージの殺寄生生物活性が抑制され、免疫グロブリンの産生の増加を伴うＢリンパ球が刺激されるという結果が生じることで特徴づけられる。
リーシュマニア症における体液免疫応答は強い印象を与えるが、保護を与えるものではない。リーシュマニアに対して産生される特定の抗体は、寄生生物に対して無力化する作用はない。
【０００６】
疾患に対して感受性のある動物では、マクロファージ内で、原虫は体中に広がる。寄生生物は、中枢神経系以外の体の器官及び組織の全てにおいて観察される。寄生生物の抗原と免疫担当細胞との間のゆっくりした、連続的な接触は、疾患の病原性発現の基礎を形成し、それは、
一般にポリクローン性の高グロブリン血症、Ｂリンパ球の連続的な刺激に関係し、それは、総プロテインの増加及びアルブミン／グロブリン比の逆転を引き起こす；
自己抗体の産生、おそらく寄生体の抗原及び自己抗原の間の交差反応のためであり、血小板減少及び貧血を引き起こす；
脈管炎、糸球体腎炎及び多発性関節炎症候群の原因となる免疫複合体の産生及び沈積；によって特徴づけられる。
【０００７】
大部分の患者に存在する皮膚障害の病因は、未だ明らかでない。何人かの著者によれば、マクロファージ内の寄生生物の残存は、炎症細胞、特に形質細胞、マクロファージ及びリンパ球の真皮への浸潤を連続的に促進する。他の著者によれば、免疫複合体の沈積は、免疫学的試験において、全身紅斑性狼蒼のような、免疫複合体によって誘発される他の疾患によって引き起こされるのと同様の障害をしばしば引き起こす皮膚炎の主な原因である。最終的には、皮膚変質は脈管炎の結果かもしれない。
イヌのリーシュマニア症の兆候は非常に変わりやすく、末梢性リンパ節症（感染対象の９０％以上）、皮膚障害（＞８０％）、慢性結膜炎（５０％）、爪鉤形症（４０％）、食欲不振（＞３５％）、過食症（３０％）、体重減少（３０％）、発熱（２０％）、腎障害（２０％）、鼻血（１０％）、ブドウ膜炎（８％）及び歩行障害（６％）を含む。
【０００８】
皮膚の徴候は、疾患における最も重要なもののひとつである。巨視的及び顕微鏡的障害の種々のタイプは、イヌのリーシュマニア症において説明されており、乾燥剥離性皮膚炎、潰瘍性皮膚炎、小結節性皮膚炎、無菌性膿疱性皮膚炎、爪周囲炎ならびに鼻及び／又は指の過角化症である。皮膚障害は、一般に、慢性で、対称性で、痒みはない。
最近の研究は、抗リーシュマニア応答におけるマクロファージの活性化が可能なＴＮＦ−依存補償メカニズムの存在を明確に証明している。インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）及びインターフェロン・ガンマ（ＩＦＮγ）によって仲介されるＴｈ１応答が、逆説的に、マクロファージの活性化のみならず、リーシュマニア症のほとんど全ての兆候の原因となるので、Ｔｈ１応答を阻害することによるこの補償メカニズムを促進することが有利かもしれない。
現行の選択治療は、浸潤（皮膚リーシュマニア症において）又は注射（他の形態において）によって投与されたグルコン酸アンチモンに基づいて、治療の中断を必要とするに足りるほど重篤な毒性作用（悪心及び嘔吐）を引き起こすかもしれず、よって、ペンタミジンのような芳香族ジアミンでの治療に置き換えられ、その耐性は一般に不十分である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
ＳＤＳ−ＰＡＧＥにおいて分子量１４ｋＤａのプロテインは、過塩素酸塩で動物の肝臓から抽出することによって得られ、ＵＫ１１４と呼称されており、欧州特許第５７４３９４号及び米国特許５７９２７４４号に開示されているが、任意にユビキチン（ＵＫ１１０）を併用して、リーシュマニア症の治療に有効であることを、たった今見出した。
組換え型プロテインＵＫ１１４はＷＯ００／６３３６８号に開示されている。
顕性のリーシュマニア症の臨床兆候（重度の末梢リンパ節障害及び皮膚障害、主に
物質欠乏を伴うただれ及び出血潰瘍、欠食欲不振及び体重減少によって発現する）を有する１０頭のイヌ群への、ＵＫ１１４及びユビキチンの皮下投与を、表に示した用量及び回数で行い、治療期間の間に、すべての障害の治療を完了させた。
副作用は治療期間中、観察されなかった。
これらの所見は、ＵＫ１１４及びユビキチンの投与が総合的に安全な方法でリーシュマニア症の臨床症状を治療することを示す。これは、治療において一般に使用していた薬物が高い毒性を有しており、臨床的な見地から時に不十分な応答の可能性があるという観点から、非常に興味深い。
【００１０】
【表１】
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本発明によれば、このように、抽出又は組換え基原のプロテインＵＫ114は、タイミングよく、非経口経路、特に皮下又は筋肉内経路によって、１日約０．５から１０ｍｇの用量範囲で、症状が消失又は実質的に減少するまで、リーシュマニア症患者に投与されるであろう。本発明の組成物は、溶液又は懸濁液、好ましくは水性滅菌溶液の形態で、０．１から５ｍｇ／用量に対応する量で、さらにユビキチンを含んでいてもよい。
【国際調査報告】
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