(57)【要約】本発明は、レチノイン酸の水溶性ポリマー結合体を提供する。本発明の結合体は、レチノイン酸のようなレチノイドに、ポリエチレングリコールのような水溶性の非ペプチド性ポリマーを共有結合することによって調製される。この結合体のポリマー部分は、直鎖状であり得るか（すなわち、末端キャップ化されたＰＥＧまたはメトキシＰＥＧを使用して調製されるか、または直鎖状の二官能性ＰＥＧである）、分枝状であり得るか、またはフォーク状であり得る。本発明の結合体は、水溶性であり、そして、特に、レチノイド治療法に応答性である気道の状態の吸入による治療において特に、有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
肺投与にとって適切なポリマーレチノイド結合体組成物であって、ここで、該組成物は、水溶性でかつ非ペプチド性であるポリマーに共有結合しているレチノイドを含む、組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の組成物であって、ここで、前記ポリマーは、以下：
ポリ（アルキレングリコール）、ポリ（オキシエチル化ポリオール）、ポリ（オレフィンアルコール）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリレート）、ポリ（サッカリド）、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリホスファーゼン、ポリオキサゾリン、ポリ（Ｎ−アクリロイルモルホリン）、ならびにそれらのコポリマー、ターポリマー、ならびに混合物
からなる群より選択される、組成物。
【請求項３】
前記ポリマーがポリエチレングリコールである、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
請求項１に記載の組成物であって、ここで、前記レチノイドは、以下：
１３−シスレチノイン酸、全てトランスのレチノイン酸、９−シスレチノイン酸、１１−シスレチノイン酸およびレチノールからなる群より選択される、組成物。
【請求項５】
前記レチノイドが全てトランスであるレチノイン酸である、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
前記レチノイドがシスレチノイン酸である、請求項４に記載のレチノイド組成物。
【請求項７】
前記ポリマーレチノイド結合体が水溶性である、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
液体形態または乾燥形態にある、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
請求項１に記載の組成物を含む、エアロゾル。
【請求項１０】
吸入デバイス中にある、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
請求項１に記載の組成物であって、エアロゾル化されるときに、約１０ミクロン未満の空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）によって特徴付けられる、組成物。
【請求項１２】
請求項１に記載の組成物であって、エアロゾル化された場合に、約５ミクロン未満のＭＭＡＤによって特徴付けられる、組成物。
【請求項１３】
薬学的に受容可能な賦形剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１４】
遊離ラジカルスカベンジャーをさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１５】
前記組成物が乾燥粉末である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１６】
少なくとも約３０％の放出用量によって、特徴付けられる、請求項８に記載の組成物。
【請求項１７】
請求項１に記載の噴霧乾燥組成物。
【請求項１８】
吸入デバイスにおける使用について、請求項１に記載の組成物を含む、単位投薬形態。
【請求項１９】
請求項１に記載の組成物であって、ここで、前記水溶性で非ペプチド性のポリマーが、加水分解可能な結合によって、前記レチノイドに共有結合する、組成物。
【請求項２０】
請求項１９に記載の組成物であって、前記加水分解非安定性結合がエステル、チオールエステル（−Ｃ（Ｏ）：Ｓ）およびアミドからなる群より選択される、組成物。
【請求項２１】
請求項１に記載の組成物であって、前記水溶性で非ペプチド性のポリマーが、加水分解非安定性結合結合を介して、前記レチノイドに結合している、組成物。
【請求項２２】
前記水溶性で非ペプチド性のポリマーが、約５００ダルトン〜約１００，０００ダルトンの平均分子量を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項２３】
前記水溶性で非ペプチド性のポリマーが、約７５０ダルトン〜約４０，０００ダルトンの平均分子量を有する、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
前記ポリエチレングリコールが末端キャップ化されている、請求項３に記載の組成物。
【請求項２５】
前記ポリエチレングリコールが、アルコキシ基で末端キャップ化されている、請求項３に記載の組成物。
【請求項２６】
請求項３に記載の組成物であって、前記ポリエチレングリコールが
以下：直鎖状ポリエチレングリコール、分枝状ポリエチレングリコール、フォーク状ポリエチレングリコールおよびダンベル状ポリエチレングリコール
からなる群より選択される、組成物。
【請求項２７】
前記レチノイドをキャリアビヒクル中に可溶化するために必要な薬剤を欠いている、請求項１に記載の組成物。
【請求項２８】
レチノイドの水溶性形態を必要とする哺乳動物被験体に、該水溶性形態を投与するための方法であって、該方法は、以下：
（ｉ）請求項１に記載のポリマーレチノイド結合体組成物を提供する工程；
（ｉｉ）（ｉ）に由来する組成物をエアロゾル化して、エアロゾル組成物を形成する工程、および
（ｉｉｉ）該被験体の肺における局所的貯留のために該エアロゾル組成物を、吸入によって該被験体に投与する工程
を包含する、方法。
【請求項２９】
レチノイドの水溶性形態を必要とする哺乳動物被験体の肺に、該水溶性形態を投与するための方法であって、該方法は、以下：
（ｉ）レチノイドを水溶性で非ペプチド性のポリマーに共有結合して、水溶性ポリマーレチノイド結合体を形成する工程、
（ｉｉ）該結合体を含む薬学的に受容可能な組成物を提供する工程
（ｉｉｉ）該組成物をエアロゾル化する工程、および
（ｉｖ）吸入によって、（ｉｉｉ）に由来する該組成物を必要とする被験体の肺に、治療有効量の該組成物を投与する工程
を包含する、方法。
【請求項３０】
前記被験体が、慢性閉塞性肺疾患である、請求項２８または２９に記載の方法。
【請求項３１】
ポリマーレチノイド結合体であって、該結合体は、加水分解可能結合を形成するためのレチノイン酸のカルボニル炭素に共有結合される水溶性で非ペプチド性のポリマーを含み、ここで、
該ポリマーが直鎖状ポリエチレングリコールであり、かつ該結合がエステル結合である場合、該ポリエチレングリコールの分子量は、少なくとも約２，０００ダルトンであり、そして、（ｉｉ）該ポリマーが、直鎖状末端キャップ化ポリエチレングリコールであり、かつ該結合がアミド結合である場合に、該ポリエチレングリコールが少なくとも約５，０００ダルトンの分子量を有する、結合体。
【請求項３２】
請求項３１に記載のポリマーレチノイド結合体であって、
前記加水分解可能結合が、カルボキシレートエステル、アミドおよびチオールエステルからなる群より選択される、結合体。
【請求項３３】
請求項３１に記載のポリマーレチノイド結合体であって、ここで、前記ポリマーは、以下：
ポリ（アルキレングリコール）、ポリ（オキシエチル化ポリオール）、ポリ（オレフィンアルコール）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリレート）、ポリ（サッカリド）、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリホスファーゼン、ポリオキサゾリン、ポリ（Ｎ−アクリロイルモルホリン）、およびそれらのコポリマー、ターポリマー、ならびに混合物
からなる群より選択される、
結合体。
【請求項３４】
前記ポリマーがポリエチレングリコールである、請求項３１に記載のポリマーレチノイド結合体。
【請求項３５】
前記レチノイン酸がシスレチノイン酸である、請求項３１に記載のポリマーレチノイド結合体。
【請求項３６】
前記レチノイン酸が全てトランスであるレチノイン酸である、請求項３１に記載のポリマーレチノイド結合体。
【請求項３７】
ポリマーレチノイド結合体であって、該結合体は、以下の構造：
【化１】
2005507934.tif 000022
を有し、ここで、ＲＡは、そのカルボニル基と一緒になって、レチノイン酸部分を表現し、Ｘは、Ｏ、Ｎ−Ｈ、およびＳから選択されるヘテロ原子であり、そして、ＰＯＬＹは、水溶性の非ペプチド性ポリマーであり、ここで、
（ｉ）該ＰＯＬＹが直鎖状ポリエチレングリコールであり、そして、ＸがＯである場合、該ＰＯＬＹの分子量は、少なくとも約２，０００ダルトンであり、そして、（ｉｉ）ＰＯＬＹが直鎖状末端キャップ化ポリエチレングリコールであり、かつＸがＮである場合、ＰＯＬＹは、少なくとも約５，０００  ダルトンの分子量を有する、ポリマーレチノイド結合体。
【請求項３８】
請求項３７に記載のポリマーレチノイド結合体は、以下：
【化２−１】
2005507934.tif 000023
【化２−２】
2005507934.tif 000024
からなる群より選択される、結合体。
【請求項３９】
ＰＯＬＹが、ポリ（ポリエチレングリコール）である、請求項３８に記載のポリマーレチノイド結合体。
【請求項４０】
ＰＯＬＹが約５００Ｄａ〜約１００，０００Ｄａの平均分子量を有する、請求項３９に記載のポリマーレチノイド結合体。
【請求項４１】
ＰＯＬＹが約７５０Ｄａ〜約４０，０００Ｄａの平均分子量を有する、請求項３９に記載のポリマーレチノイド結合体。
【請求項４２】
ＸがＯまたはＳである、請求項３８に記載のポリマーレチノイド結合体。
【請求項４３】
ＰＯＬＹは、約２〜約３００の末端を有する、請求項３８に記載のポリマーレチノイド結合体。
【請求項４４】
前記ＰＯＬＹが、末端キャップ化されている、請求項３８に記載のポリマーレチノイド結合体。
【請求項４５】
請求項３７に記載のポリマー結合体であって、以下の構造：
【化３】
2005507934.tif 000025
を有し、ここで、Ｚが官能基である、ポリマー結合体。
【請求項４６】
請求項４５に記載のポリマー結合体であって、ここで、Ｚは、以下：
アルコキシ、ヒドロキシ、活性エステル、活性カーボネート、アセタール、アルデヒド、アルデヒドハイドレート、アルケニル、アクリレート、メタクリレート、アクリルアミド、活性スルホン、アミン、ヒドラジン、チオール、カルボン酸、イソシアネート、イソチオシアネート、マレイミド、ビニルスルホン、ジチオピリジン、ビニルピリジン、ヨードアセトアミド、エポキシド、グリオキサール、ジオン、メシレート、トシレート、トレシレート、およびそれらの機能的等価物
からなる群より選択される、
ポリマー結合体。
【請求項４７】
請求項４５に記載のポリマー結合体であって、ここで、Ｚが、以下の構造：
【化４】
2005507934.tif 000026
を有し、ここで、前記カルボニルと一緒にＸ’が、加水分解可能な結合であり、そして、
【化５】
2005507934.tif 000027
がＰＯＬＹに対する結合点を表現する、ポリマー結合体。
【請求項４８】
ＰＯＬＹがポリ（エチレングリコール）でありかつＺがメトキシである、請求項７に記載のポリマー結合体。
【請求項４９】
請求項３７に記載のポリマーレチノイド結合体であって、以下の構造：
【化６】
2005507934.tif 000028
を有し、ｎは、３〜約１００であり；
Ｒが、中心コア分子であり；
隣接するカルボニル基と一緒になったＸが、加水分解可能な結合であり；
Ｙは、結合であり；そして、各ＰＯＬＹが、独立して選択された、水溶性で非ペプチド性のポリマーである、結合体。
【請求項５０】
ｎが約３〜約２０の範囲である、請求項４９に記載のポリマーレチノイド結合体。
【請求項５１】
ＹがＯ、ＳまたはＮＨである、請求項４９に記載のポリマーレチノイド結合体。
【請求項５２】
請求項４９に記載のポリマーレチノイド結合体であって、ここで、Ｒは、グリセロール、グリセロールオリゴマー、ペンタエリスリトール、ソルビトールおよびリジンからなる群より選択される中央コア分子の残基である、
結合体。
【請求項５３】
請求項３７に記載のポリマーレチノイド結合体であって、ここで、ＰＯＬＹは、直鎖状態ＰＥＧ、分枝状ＰＥＧ、フォーク状ＰＥＧ、またはダンベル状ＰＥＧからなる群より選択されるポリエチレングリコール、結合体。
【請求項５４】
気腫を処置する方法であって、該方法は、気腫に罹患する哺乳動物に、水溶性で非ペプチド性のポリマーに共有結合したレチノイドを含む治療有効量のポリマーレチノイド結合体を投与する工程を包含する、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生物学的に活性なレチノイドの水溶性ポリマー結合体に関し，そして、特に、吸入によって肺へ送達するのに適切な水溶性レチノイドポリマー結合体の組成物に関する。このような結合体を調製および投与するための方法がまた、提供される。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
レチノイド（例えば、レチノール、レチノイン酸、およびレチニルエステル）は、ビタミンＡの考慮される全ての形態である。βカロチン、レチナール、レチノール、全てのトランスのレチノイン酸、９−シスレチノイン酸および１３−シスレチノイン酸のような、ビタミンＡのいくつかの誘導体が存在する。ビタミンＡは、必須栄養元素と考えられており、そして、ビタミンＡの欠乏は、粘膜層における角質化（角質増殖症）、特に呼吸系の角質化のような有害な効果を有し得る。重篤な場合において、ビタミンＡの欠失は、気管支の感染症および失明にさえに対する感受性の増大に至り得る（ＭｃＤｏｗｅｌｌ，Ｅ．Ｍ．ら，Ｃｅｌｌ  Ｐａｔｈｏｌ．，４５：１９７−２１９，１９８４）。幸いなことに、多くの場合において、ビタミンＡの摂取によって、これらのビタミンＡ欠乏に誘導される状態の逆転を生じ得る。興味深いことに、ビタミンＡの欠乏によって誘導されるのでない、急性または慢性の気管支炎、気腫、ならびに特定の型の癌のような呼吸系の粘膜の疾患はまた、通常、高用量でのビタミンＡの全身投与により、首尾よく処置されるかまたは予防される。実際、レチノイドは、ざ瘡のような皮膚障害および急性前骨髄性（ｐｒｏｍｙｌｅｏｃｙｔｉｃ）白血病、肺癌、前立腺癌および乳癌のような癌を含む多くの状態を処置する際に首尾よく使用される。
【０００３】
不運なことに、効率的な処置に必要とされる高用量に起因して、レチノイドは、破壊的かつ潜在的に致死的であり得る毒性の副作用を有する。これらの副作用としては、高脂血症、高カルシウム血症、ならびに皮膚、肝臓、および中枢神経に対する毒性（傷害性）が挙げられる。さらに、天然に存在する形態のビタミンＡ（例えば、レチノイン酸の全てトランスの異性体およびシス異性体）は、親油性であり、これは、これらの形態のビタミンＡが水に対して不溶性であることを意味している。この不溶性は、有効であるために高用量のレチノイドを投与するという必要性に対して寄与するばかりか、これらのような水に不溶性の薬剤は処方が極めて困難である。さらにこれらの水における不溶性の結果として、レチノイン酸のような薬物は、しばしば、非常に低いバイオアベイラビリティを保持する。
【０００４】
従って、レチノイドの新規の可溶性形態および処方、好ましくは、以下のようなレチノイド（例えば、レチノイン酸）の水溶性形態に対する必要性が存在する：治療組成物へと、容易に処方され得て、そして、（ｉ）低バイオアベイラビリティまたは高い毒性（傷害性）のような、天然に存在する形態のビタミンＡにおいて及ぼされる問題によって干渉されず、（ｉｉ）レチノイドを可溶化させるためのアルキルアミンまたは表面活性剤または界面活性剤の添加を必要とせず、そして、（ｉｉｉ）特定の例において、特に気道の疾患の局所的な処置のために、吸入によって、肺に送達され得る、レチノイド。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
（発明の要旨）
一般的に、本発明は、レチノイン酸の新規の水溶性誘導体を提供し、これらの水溶性に起因して、それらの誘導体は、それらの改変されていないレチノイド対応物よりもずっと、処方しやすく、加工しやすく、そして、送達しやすい。さらに、本発明の改変されたレチノイドは、特に、吸入による投与にとって特に十分適切である。実際に、本発明は、本明細書中で提供されるレチノイド誘導体の水溶性の増大に関連する上述の利点に加え、本発明の化合物は、肺に投与されるときに、肺組織に貯留され得、それが、このような化合物が、特に、気腫のような慢性閉塞性肺疾患を処置するために肺に限局的送達するのに特に有益であることを発見した。従って、肺に対するこのような化合物の直接的投与が、本明細書中で提供されるレチノイドの水溶性の増大を伴って、本発明のレチノイド誘導体の、治療的に有用なレベルを達成するためのより低用量の投与を可能にし得、それによって、全身的な毒性を低減することを可能にし得る。
【０００６】
１局面において、本発明は、肺投与について適切なポリマーレチノイド結合体組成物を提供し、ここで、これらの組成物は、水溶性で非ペプチド性のポリマーに共有結合されるレチノイドを含む。
【０００７】
本発明の結合体を形成するのに使用される代表的な水溶性で非ペプチド性のポリマーとしては、ポリ（アルキレングリコール）、ポリ（オキシエチル化ポリオール）、ポリ（オレフィンアルコール）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリレート）、ポリ（サッカリド）、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリホスファーゼン、ポリオキサゾリン、ポリ（Ｎ−アクリロイルモルホリン）、およびそれらのコポリマー、ターポリマー、ならびに混合物が挙げられる。本発明の１つの特に好ましい実施形態において、このポリマーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である。結合体のポリマー部分は、直鎖状構造、分枝状構造、フォーク状構造、ダンベル状構造を含む任意の多くの幾何学的形状を保持する。
【０００８】
本発明の１つの実施形態において、その吸入可能組成物は、１３−シスレチノイン酸、全てトランスのレチノイン酸、９−シスレチノイン酸、１１−シスレチノイン酸，およびレチノールからなる群より選択される親油性レチノイドから調製される結合体である。
【０００９】
本発明の組成物は、液状処方物であり得るかまたは乾燥粉末処方物であり得る。
【００１０】
上述したようなポリマーレチノイド結合体組成物のエアロゾルがまた、本発明に包含される。
【００１１】
本発明の１つの実施形態において、エアロゾル組成物は、吸入デバイスに含まれる。
【００１２】
なお別の実施形態において、このポリマー結合体組成物は、遊離ラジカルスカベンジャーをさらに含む。
【００１３】
代替的な実施形態において、ポリマーレチノイド結合体の噴霧乾燥組成物が提供される。
【００１４】
なおさらなる別の実施形態に従うと、その水溶性で非ペプチド性のポリマーは、加水分解可能な不安定結合を介してそのレチノイドに共有結合する。好ましい結合としては、エステル、チオールエステル（−Ｃ（Ｏ）−Ｓ）およびアミドが挙げられる。
【００１５】
さらに別の実施形態において、そのポリマーレチノイド結合体組成物は、レチノイドをキャリアビヒクル中に可溶化するために必要な薬剤を欠いている。
【００１６】
別の局面に従って、水溶性レチノイドの形態を必要とする哺乳動物被験体に、その水溶性形態を投与するための方法が提供され、この方法は、以下：（ｉ）本明細書中に記載のポリマーレチノイド結合体組成物を提供する工程；（ｉｉ）（ｉ）に由来する組成物をエアロゾル化して、エアロゾル組成物を形成する工程、および（ｉｉｉ）その被験体の肺における局所的貯留のために該エアロゾル組成物を、吸入によって該被験体に投与する工程を包含する、方法である。
【００１７】
本発明のさらに別の局面に従って、レチノイドの水溶性組成物を必要とする哺乳動物被験体の肺に、その水溶性組成物を投与するための方法が提供される。その方法は、以下の工程：（ｉ）レチノイドを水溶性で非ペプチド性のポリマーに共有結合して、水溶性ポリマーレチノイド結合体を形成する工程、（ｉｉ）（ｉ）に由来するその結合体を含む薬学的に受容可能な組成物を提供する工程（ｉｉｉ）その組成物をエアロゾル化する工程、および（ｉｖ）吸入によって、（ｉｉｉ）に由来するその組成物を必要とする被験体の肺に、治療有効量の該組成物を投与する工程を包含する。好ましい実施形態において、この被験体は、気腫のような慢性閉塞性肺疾患に罹患している。
【００１８】
さらに別の局面において、本発明は、特定のポリマーレチノイド結合体を提供する。
【００１９】
１つの実施形態において、本発明は、ポリマーレチノイド結合体を提供し、その結合体は、加水分解可能結合を形成するためのレチノイン酸のカルボニル炭素に共有結合される水溶性で非ペプチド性のポリマーを含む。そのポリマーレチノイド結合体自体の１つの特定の実施形態に従って、そのポリマーが直鎖状ポリエチレングリコールであり、かつ該結合がエステル結合である場合、そのポリエチレングリコールの分子量は、少なくとも２，０００ダルトンである。
【００２０】
そのポリマーレチノイド結合体自体のなお別の実施形態に従って、そのポリマーが、直鎖状末端キャップポリエチレングリコールであり、このレチノイドが、ＡＴＲＡであり、そして、この結合は、アミド結合である場合に、このポリエチレングリコールは、少なくとも５，０００ダルトンの分子量を有する。
【００２１】
本発明のなお別の実施形態において、ポリマーレチノイド結合体が提供され、この結合体は、以下の構造：
【００２２】
【化７】
2005507934.tif 000002
【００２３】
を有し、ここで、ＲＡは、そのカルボニル基と一緒になって、レチノイン酸部分を表現し、Ｘは、ヘテロ原子であり、そして、ＰＯＬＹは、水溶性の非ペプチド性ポリマーである。
【００２４】
構造（１）の具体的な実施形態として、Ｘが、Ｏ、Ｎ−Ｈ、およびＳからなる群より選択され、ここで、（ｉ）そのＰＯＬＹが直鎖状ポリエチレングリコールであり、そして、ＸがＯである場合、そのＰＯＬＹの分子量は、少なくとも約２，０００ダルトンであり、そして、（ｉｉ）ＰＯＬＹが直鎖状末端キャップ化ポリエチレングリコールであり、隣接するカルボニルと一緒になったＲＡが、ＡＴＲＡ部分を表現し、かつＸがＮである場合、ＰＯＬＹは、少なくとも約５，０００ダルトンの分子量を有する。
【００２５】
好ましい実施形態において、本発明の結合体は、そのレチノイン酸部分とそのポリマーとの間に、エステル結合のような加水分解可能な結合を含む。従って、このような実施形態において、そのポリマー結合体は、プロドラックであると考えられ、これは、加水分解可能な結合は、加水分解されて、改変されていない親レチノイドを放出し得ることを意味する。
【００２６】
特に好ましい結合体は、以下の一般化された構造：
【００２７】
【化８】
2005507934.tif 000003
【００２８】
を有しており、ここで、ＸはおよびＰＯＬＹは、上記で定義されたものである。
【００２９】
本発明の結合体のＰＯＬＹ部分は、直鎖状（例えば、メトキシＰＥＧ）、分岐鎖（またはマルチアーム）あるいは、フォーク状）であり得る。このポリマーが直鎖状である本発明の具体的な実施形態において、この結合体は、ヘテロ二官能性またはホモ二官能性ポリマーを取り込み得る。ヘテロ二官能性ポリマー結合体は、そのポリマーの一方の末端が、レチノイドに結合しており、もう一方の末端が、異なる部分で官能化されている結合対である。ホモ二官能性ポリマーの結合は、直鎖状ポリマーの各々の末端が、代表的には、同じ結合によって、レチノイドに共有結合している構造を有する。
【００３０】
なお別の局面において、本発明は、レチノイン酸のポリマー結合体を形成する方法を提供する。この方法は、カルボン酸または酸ハライド基と反応性の官能基（例えば、ヒドロキシル基、アミノ基、またはチオール基）である末端を有する水溶性非ペプチド性ポリマーを提供する工程を包含する。次いで、このようなポリマーは、レチノイン酸またはレチノイン酸の活性形態（例えば、対応する酸ハライド）と反応して、そのポリマー骨格とレチノイン酸部分との間に、例えば、エステル結合、チオールエステル結合、またはアミド結合を有するポリマーレチノイド結合体を形成する。
【００３１】
本発明のポリマーレチノイド結合体は、エアロゾル化および吸入による投与の際に、気腫の処置において特に有用である。
【００３２】
本発明のこれらのおよび他の目的および特徴は、以下の詳細な説明の観点から考察される際に、より明らかになる。
【００３３】
（発明の詳細な説明）
１つの局面において、種々の代表的なＰＥＧ−レチノイン酸結合体は、肺に対する肺送達に対して最適化される。ここで、肺に対する送達のためにＰＥＧ−レチノイン酸結合体の調製および処方は、実証されていない。本発明の結合体の調製および処方は、最も顕著には、本発明の組成物および結合体の水溶性特質を含む多くの利点を与える。従って、本明細書で提供されるポリマー結合体は、それらの改変されていない親油性の親レチノイド対応物と比較したときに、投与され得る治療組成物に処方されやすい。例えば、吸入治療法に対するレチノイドの以前の組成物は、レチノイドを可溶化させるために、クロロフルオロカーボン溶媒にアルキルアミンの添加を必要とする定量吸入組成物に限定されてきた（例えば、Ｔｏｎｇ，Ｗ．，およびＷａｒｒｅｌｌ，Ｒ．，米国特許第６，２５１，９４１号を参照のこと）。対照的には、この親レチノイド結合体は、それらの水溶性を利用して、さらなる可溶化薬剤または乳化剤（例えば、ＣＲＥＭＡＰＨＯＲ（登録商標）またはＭＯＬＥＣＵＳＯＬ（登録商標））（これらの多くのものは、肺に対する投与に関して所望されない）を必要とすることなしに、多くの送達ビヒクルのうちの任意のものを使用して投与され得る。
【００３４】
さらに、本発明のレチノイド結合体の特定の噴霧乾燥組成物を形成する際に、本発明者は、改変されていないレチノイン酸の噴霧乾燥の間に直面する不利益、すなわち、この噴霧乾燥機における低融点化合物の昇華を克服することを可能とした。従って、レチノイン酸に対するポリマー鎖の共有結合は、レチノイン酸の融点および沸点の両方を上昇させ、それによって、収率および効率の両方に関して、噴霧乾燥工程を非常に魅力的なプロセスにするのに十分である。
【００３５】
ついには、インビボデータは、本発明のレチノイド結合体が、肺においてレチノイン酸の徐放性レベルを提供する（すなわち、レチノイン酸結合体は、肺組織を介して全身循環へと迅速に吸収されたというよりも、少なくとも測定可能な程度まで肺に貯留されているようであり、これは、ここで、静脈内注入と比較した場合に全身性の毒性を低減する結果に至る）。さらに、血漿データによって、本発明のポリマー結合体が、対応する非改変または非ポリマー結合体化のレチノイドよりもずっと多量に肺に保持されていることを示している。すなわち、この非改変レチノイドは、比較的速く、肺組織を介してその循環へと吸収されるが、その結合体は、肺に顕著に保持されており、さらに、気腫のような気道の状態の局所的処置をするまたはその予防をすることにおいて、非改変の親と比較したときに、ポリマーレチノイド結合体の利点を実証するものである。
【００３６】
（Ｉ．定義）
以下の用語は、本明細書中で用いられる場合、示される意味を有する。
【００３７】
本明細書および添付の特許請求の範囲において用いられる場合、単数形の「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」は、その文脈が明らかにそうではないことを示すのでない限り、複数形の言及を包含する。
【００３８】
用語「官能基」、「活性部分」、「反応性部位」、「化学反応基」および「化学反応部分」は、当該分野分子で使用されるものであり、本明細書中においては、分子のうちの、別個の定義可能な部分または単位をいう。これらの用語は、化学分野では幾分同義語であり、そして本明細書中では、何らかの機能または活性を果たしかつ他の分子と反応性である分子部分を示すために用いられる。用語「活性な」または「反応性である」は、官能基に関連して用いられる場合、反応するために強力な触媒または非常に非現実的な反応条件を必要とする基（すなわち、「非反応性」基または「不活性」基）とは対照的に、他の分子上の求電子基または求核基と容易に反応する官能基を包含することを意図する。例えば、当該分野で理解されるように、用語「活性エステル」は、求核性基（例えば、アミン）と容易に反応するエステルを包含する。例示的な活性エステルとしては、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステルまたは１−ベンゾトリアゾリルエステルが挙げられる。代表的に、活性エステルは、水性媒質中のアミンとほんの数分間で反応し、他方、特定のエステル（例えば、メチルエステルまたはエチルエステル）は、求核性基と反応するために強力な触媒を必要とする。本明細書中で用いられる場合、用語「官能基」は、保護された官能基を包含する。
【００３９】
用語「保護された官能基」または「保護基（ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  ｇｒｏｕｐ）」または「保護基（ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｇｒｏｕｐ）」とは、特定の反応条件下での分子の特定の化学的反応性官能基の反応を防止またはブロックする部分（すなわち、この保護基）の存在をいう。この保護基は、保護される化学反応基の種類ならびに用いられる反応条件およびその分子中のさらなる反応性基または保護基の存在（ある場合）に依存して変動する。当該分野で公知の保護基は、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．ら，ＰＲＯＴＥＣＴＩＶＥ  ＧＲＯＵＰＳ  ＩＮ  ＯＲＧＡＮＩＣ  ＳＹＮＴＨＥＳＩＳ，第３版，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ（１９９９）に見出され得る。
【００４０】
用語「結合」または「リンカー」（Ｌ）は、本明細書中で、相互接続する部分（例えば、２つのポリマーセグメントまたはポリマーの末端および生体活性因子（例えば、レチノイン酸）上に存在する反応性官能基）を（好ましくは、１以上の共有結合によって）連結するために用いられる原子または原子の集合を言及するために用いられる。本発明のリンカーは、加水分解に安定であり得るか、または生理学的に加水分解可能な結合もしくは酵素分解可能な結合を含み得る。
【００４１】
「生理学的に加水分解可能な」または「加水分解によって分解可能な」結合は、生理学的条件下で水と反応する（すなわち、加水分解される）、弱い結合である。代表的な加水分解に不安定な結合または加水分解性結合としては、カルボン酸エステル、リン酸エステル、チオールエステル、無水物、アセタール、ケタール、アシルオキシアルキルエーテル、イミン、オルトエステル、ペプチド、およびオリゴヌクレオチドが挙げられるがこれらに限定されない。本発明の代表的か化合物についての、緩衝液中および血清中の両方における例示の加水分解速度は、実施例９および１０に提供される。
【００４２】
「加水分解に安定な」結合（ｌｉｎｋａｇｅまたはｂｏｎｄ）とは、水中で実質的に安定である、すなわち、長期にわたって何らかの認識し得る程度で生理学的条件下で加水分解されない、化学的結合（代表的には、共有結合）をいう。加水分解に安定な結合の例としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：（例えば、脂肪族鎖中の）炭素−炭素結合、エーテル、アミド、ウレタンなど。一般に、加水分解に安定な結合は、生理学的条件下で１日あたり約１％〜２％未満の加水分解速度を示す結合である。代表的な化学結合の加水分解速度は、大部分の標準的な化学の教科書に見出され得るか、あるいは、所定の化合物の加水分解速度は、当該分野で公知の標準的技術を用いて測定され得る。
【００４３】
「酵素的に不安定な」または分解可能な結合は、１以上の酵素によって分解され得る結合である。
【００４４】
本明細書中で使用される場合、「ＰＥＧ」またはポリエチレングリコールは、任意の水溶性ポリ（エチレンオキシド）を包含することを意味する。最も代表的には、本発明において使用するＰＥＧは、以下の構造「−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２−」を含む。ここで、末端基または全ＰＥＧ部分の実際の構造（ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ）は変化し得る。１つの一般的に使用されるＰＥＧは、末端キャップされたＰＥＧであり、このＰＥＧの一方の末端は、比較的不活性な基（代表的には、アルコキシ基（例えば、メトキシ（−ＯＣＨ３）））でキャップされ、もう一方の末端は、後に化学修飾に供され得るヒドロキシル基である。用語「ＰＥＧ」は、直鎖形態、分枝形態、またはマルチアーム形態のいずれかのポリ（エチレングリコール）を包含し、このようなＰＥＧとしては、アルコキシＰＥＧ、二官能性ＰＥＧ、フォーク状ＰＥＧ、分枝ＰＥＧ、ペンダントＰＥＧ、または内部に分解可能な連結を有するＰＥＧが挙げられる。本発明のレチノイド結合体を調製するのに使用するための特別なＰＥＧ形態（例えば、分枝ＰＥＧ、直鎖ＰＥＧ、フォーク状ＰＥＧなど）は、以下により詳細に記載される。
【００４５】
本発明の疎水性非ペプチドポリマーの関係で、「見かけの平均分子量」は、代表的に、サイズ排除クロマトグラフィー、光散乱、または１，２，４−トリクロロベンゼン中での固有速度によって決定される、ポリマーの質量平均分子量をいう。本発明のポリマーは、代表的に、多分散性であり、約１．０５未満の低い多分散値を有する。
【００４６】
用語「アルキル」、「アルケニル」、および「アルキニル」とは、代表的には、約１〜約１２個の炭素原子（好ましくは１〜約６原子）長の範囲にわたる炭化水素鎖をいい、そして直鎖および分岐鎖を包含する。別段示されない限り、本明細書中で言及される任意のアルキルの好ましい実施形態は、Ｃ１−Ｃ６アルキル（例えば、メチルまたはエチル）である。
【００４７】
「シクロアルキル」とは、架橋、縮合、またはスピロ環式化合物を含め、好ましくは３〜約１２個の炭素原子、より好ましくは３〜約８を含む、飽和または不飽和の環式炭化水素鎖をいう。
【００４８】
用語「置換アルキル」、「置換アルケニル」、「置換アルキニル」または「置換シクロアルキル」とは、例えば、以下であるがこれらに限定されない１以上の非干渉置換基で置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基またはシクロアルキル基をいう：Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル（例えば、シクロプロピル、シクロブチルなど）；アセチレン；シアノ；アルコキシ（例えば、メトキシ、エトキシなど）；低級アルカノイルオキシ（例えば、アセトキシ）；ヒドロキシ；カルボキシル；アミノ；低級アルキルアミノ（例えば、メチルアミノ）；ケトン；ハロ（例えば、クロロまたはブロモ）；フェニル；置換フェニルなど。
【００４９】
「アルコキシ」とは、−Ｏ−Ｒ基をいい、ここでＲは、アルキルまたは置換アルキル、好ましくはＣ１−Ｃ６アルキル（例えば、メトキシまたはエトキシ）である。
【００５０】
「アリール」とは、５または６個のコア炭素原子から各々構成される、１以上の芳香族環を意味する。複数のアリール環は、ナフチルにおいてのように縮合されてもよく、またはビフェニルにおいてのように縮合されていなくてもよい。アリール環はまた、１以上の環式炭化水素、ヘテロアリールまたは複素環式環と縮合されても縮合されなくてもよい。
【００５１】
「置換アリール」は、１以上の非干渉性基を置換基として有するアリールである。フェニル環での置換については、この置換基は、任意の配向（すなわち、オルト、メタまたはパラ）にあり得る。
【００５２】
「ヘテロアリール」は、１〜４個のヘテロ原子（好ましくはＮ、Ｏ、もしくはＳ）またはそれらの組み合わせを含む、アリール基であり、このヘテロアリール基は、炭素原子または窒素原子にて、Ｃ１−６アルキル、−ＣＦ３、フェニル、ベンジル、もしくはチエニルを用いて必要に応じて置換されるか、またはこのヘテロアリール基中の炭素原子は、酸素原子と一緒になってカルボニル基を形成するか、またはこのヘテロアリール基は、必要に応じてフェニル環と縮合される。ヘテロアリール環はまた、１以上の環式炭化水素環、複素環式環、アリール環、またはヘテロアリール環と縮合され得る。ヘテロアリールとしては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：１個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリール（例えば、チオフェン、ピロール、フラン）；１，２位または１，３位に２個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリール（例えば、オキサゾール、ピラゾール、イミダゾール、チアゾール、プリン）；３個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリール（例えば、トリアゾール、チアジアゾール）；３個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリール；１個のヘテロ原子を有する６員ヘテロアリール（例えば、ピリジン、キノリン、イソキノリン、フェナントリン、５，６−シクロヘプテノピリジン）；２個のヘテロ原子を有する６員ヘテロアリール（例えば、ピリダジン、シンノリン（ｃｉｎｎｏｌｉｎｅ）、フタラジン、ピラジン、ピリミジン、キナゾリン）；３個のヘテロ原子を有する６員ヘテロアリール（例えば、１，３，５−トリアジン）；および４個のヘテロ原子を有する６員ヘテロアリール。
【００５３】
「置換ヘテロアリール」は、１以上の非干渉性基を置換基として有するヘテロアリールである。
【００５４】
「複素環」または「複素環式」とは、不飽和特性または芳香族特性および炭素ではない少なくとも１つの環原子を有するかまたは有さない、５〜１２個の原子（好ましくは５〜７個の原子）の１以上の環を意味する。好ましいヘテロ原子としては、硫黄、酸素、および窒素が挙げられる。複数の環は、キノリンまたはベンゾフランにおいてのように縮合され得る。
【００５５】
「置換複素環」は、非干渉性置換基から形成された１以上の側鎖を有する複素環である。
【００５６】
「非干渉置換基」は、分子中に存在する場合、その分子内に含まれる他の官能基と代表的には非反応性である基である。
【００５７】
適切な非干渉性置換基またはラジカルとしては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：ハロ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、Ｃ２−Ｃ１０アルキニル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、Ｃ７−Ｃ１２アラルキル、Ｃ７−Ｃ１２アルカリール、Ｃ３−Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ１０シクロアルケニル、フェニル、置換フェニル、トルオイル、キシレニル、ビフェニル、Ｃ２−Ｃ１２アルコキシアルキル、Ｃ７−Ｃ１２アルコキシアリール、Ｃ７−Ｃ１２アリールオキシアルキル、Ｃ６−Ｃ１２オキシアリール、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルフィニル、Ｃ１−Ｃ１０アルキルスルホニル、−（ＣＨ２）ｍ−Ｏ−（Ｃ１−Ｃ１０アルキル）（ここで、ｍは１〜８である）、アリール、置換アリール、置換アルコキシ、フルオロアルキル、ヘテロ環式ラジカル、置換ヘテロ環式ラジカル、ニトロアルキル、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＮＲＣ（Ｏ）−（Ｃ１−Ｃ１０アルキル）、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ１−Ｃ１０アルキル）、Ｃ２−Ｃ１０チオアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ１−Ｃ１０アルキル）、−ＯＨ、−ＳＯ２、＝Ｓ、−ＣＯＯＨ、−ＮＲ、カルボニル、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ１−Ｃ１０アルキル）−ＣＦ３、−Ｃ（Ｏ）−ＣＦ３、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２、−（Ｃ１−Ｃ１０アルキル）−Ｓ−（Ｃ６−Ｃ１２アリール）、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ６−Ｃ１２アリール）、−（ＣＨ２）ｍ−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−Ｏ−（Ｃ１−Ｃ１０アルキル）（ここで、各ｍは１〜８である）、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ、−ＳＯ２ＮＲ、−ＮＲＣ（Ｏ）ＮＲ、−ＮＲＣ（Ｓ）ＮＲ、それらの塩など。本明細書中で用いられる各Ｒは、Ｈ、アルキルもしくは置換アルキル、アリールもしくは置換アリール、アラルキル、またはアルカリールである。
【００５８】
「ヘテロ原子」は、炭化水素アナログ化合物中の任意の非炭素原子を意味する。例としては、酸素、硫黄、窒素、リン、ヒ素、ケイ素、セレン、テルル、スズおよびホウ素が挙げられる。
【００５９】
本明細書中で用いられる場合、「非ペプチド性」とは、ペプチド結合を実質的に含まないポリマー骨格をいう。しかし、このポリマー骨格は、この骨格の長さに沿って間隔が空けられた少数のペプチド結合（例えば、約５０モノマー単位あたり約１以下のペプチド結合）を含み得る。
【００６０】
「ポリペプチド」とは、α炭素骨格に沿ってアミド結合（ペプチド結合ともいう）によって連結された一連のアミノ酸残基（代表的には少なくとも約１０〜２０残基）を含む任意の分子をいう。いくつかの場合、この用語は本明細書中で同義に用いられ得るが、ポリペプチドは、代表的には約１０，０００Ｄａまでの分子量を有するペプチドであり、他方、それよりも高い分子量を有するペプチドは一般にタンパク質と呼ばれる。グリコシル化、ヒドロキシル化などに沿って、ペプチド側鎖の改変が生じ得る。さらに、他の非ペプチド性分子（支質および低分子薬物分子を含む）は、このポリペプチドに結合され得る。
【００６１】
「アミノ酸」とは、塩基性アミン基および酸性カルボキシル基の両方を含む有機酸をいう。アミノ基は、最も一般的には、カルボキシ官能基に隣接する位置に生じるが、その分子内の任意の位置に位置し得る。アミノ酸はまた、さらなる官能基（例えば、アミノ、チオ、カルボキシ、カルボキサミド、イミダゾールなど）を含み得る。アミノ酸は、合成アミノ酸または天然に存在するアミノ酸であり得、そしてそのラセミ形態または光学活性（ＤまたはＬ）形態のいずれかで使用され得る（種々の比のエナンチオマーを含む）。
【００６２】
「オリゴマー」とは、２〜約１０個のモノマー単位（好ましくは２〜約５個のモノマー単位）を含む短いモノマー鎖をいう。
【００６３】
用語「結合体」は、反応性ポリマー分子（好ましくは、ポリ（エチレングリコール））への分子（例えば、レチノイド）の共有結合の結果として形成される実体を言及することが意図される。
【００６４】
本発明のポリマーの文脈において「二官能性」とは、同じであっても異なっていてもよい２つの反応性官能基を保有するポリマーをいう。
【００６５】
本発明のポリマーの文脈において「多官能性」とは、３以上の官能基が結合したポリマーを意味し、ここでこれらの官能基は同じであっても異なっていてもよい。本発明の多官能性ポリマーは代表的には、約３〜１００官能基、または３〜５０官能基、または３〜２５官能基、または３〜１５官能基、もしくは３〜１０官能基を含むか、またはこのポリマー骨格に結合した３、４、５、６、７、８、９もしくは１０個の官能基を含む。
【００６６】
「乾燥粉末」は、代表的に、約１０％未満の水分を含む粉末組成物をいう。
【００６７】
「肺送達に適した」組成物は、エアロゾル化可能であり、エアロゾル化粒子の一部が肺に達して下気道および肺胞に浸透するよう被験体により吸入され得る組成物をいう。このような組成物は、「呼吸可能」または「吸入可能」であると考えられる。
【００６８】
「エアロゾル化」粒子は、代表的には、吸入デバイス（例えば、乾燥粉末吸入器、噴霧器（アトマイザー）、測量用量吸入器、または噴霧器（ネブライザー））の作動（または発射）の結果として、気体中に懸濁された液体または固体粒子である。
【００６９】
「放出用量（Ｅｍｉｔｔｅｄ  Ｄｏｓｅ）」または「ＥＤ」は、放出または分散事象の後の適切な吸入デバイスからの薬物処方物の送達の指標を提供する。より詳細には、乾燥粉末処方物について、ＥＤは、単位用量パッケージから取り出され、そして吸入デバイスのマウスピースを出た粉末のパーセンテージの尺度である。このＥＤは、見かけの用量（すなわち、放出前に適切な吸入デバイスに入れられた単位用量あたりの粉末の質量）に対する吸入デバイスにより送達される用量の比として定義される。ＥＤは、実験的に決定されるパラメータであり、そして代表的に、患者への投薬を模倣するインビトロデバイス設定を用いて決定される。ＥＤ値を決定するために、乾燥粉末の見かけの用量（代表的には、単位用量形態）が、適切な乾燥粉末吸入器（例えば、Ｉｎｈａｌｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  Ｓｙｓｔｅｍｓに譲渡された、米国特許第５，７８５，０４９号に記載の吸入器）に入れられ、次いで、作動させ、粉末を分散させる。次いで、得られるエアロゾルクラウドは、真空によってデバイスから引き出され、デバイスのマウスピースに取り付けられたテアフィルターに捕捉される。例えば、吸入デバイスに入れられた５ｍｇの乾燥粉末含有投薬形態は、粉末を分散させると、上記のようなテアフィルターに４ｍｇの粉末が回収される場合、その乾燥粉末組成物の放出用量は：４ｍｇ（送達される用量）／５ｍｇ（見かけの用量）×１００＝８０％である。非均一粉末について、ＥＤは、乾燥粉末の送達ではなく、放出後の吸入デバイスからの薬物の送達の指標を提供し、これは、総粉末重量ではなく、薬物の量に基づく。同様に、ＭＤＩおよび噴霧器投薬形態については、ＥＤは、投薬形態から取り出され、そして吸入デバイスのマウスピースを出た薬物のパーセンテージに対応する。
【００７０】
「微粒子用量（ｆｉｎｅ  ｐａｒｔｉｃｌｅ  ｄｏｓｅ）」または「ＦＤＰ」は、３．３μｍ未満の空気動力学的粒径（代表的に、Ａｎｄｅｒｓｅｎカスケードインパクターにおける測定により決定される）を有する粉末粒子の質量パーセントとして規定される。
【００７１】
「分散性（ｄｉｓｐｅｒｓｉｂｌｅまたはｄｉｓｐｅｒｓｉｖｅ）」粉末は、少なくとも約３０％、より好ましくは４０〜５０％、そしてなおより好ましくは少なくとも約５０〜６０％またはそれ以上のＥＤ値を有する粉末である。
【００７２】
「質量平均粒径（ｍａｓｓ  ｍｅｄｉａｎ  ｄｉａｍｅｔｅｒ）」または「ＭＭＤ」は、平均粒径の尺度である。なぜなら、本発明の粉末は、一般的に多分散（すなわち、ある範囲の粒径からなる）であるからである。本明細書中に示される場合のＭＭＤ値は、遠心沈降により決定されるが、多数の一般的に使用される技術が、平均粒径を測定するために使用され得る（例えば、電子顕微鏡法、光散乱法、レーザー回折法）。
【００７３】
「空気動力学的粒径（ｍａｓｓ  ｍｅｄｉａｎ  ａｅｒｏｄｙｎａｍｉｃ  ｄｉａｍｅｔｅｒ）」、または「ＭＭＡＤ」は、分散した粒子の空気力学的サイズの尺度である。この空気動力学的粒径は、その沈降挙動に関してエアロゾル化された粉末を記載するために使用され、そして空気中で粒子の同じ沈降速度を有する単位密度球の直径である。この空気動力学的粒径は、粒子形状、粒子の密度および物理的大きさを含む。本明細書中で使用される場合、ＭＭＡＤは、他に示されなければ、カスケードインパクションにより決定されたエアロゾル化された粉末の空気動力学的粒径分布の重心またはメジアンを指す。
【００７４】
「薬学的に受容可能な賦形剤またはキャリア」とは、本発明の組成物に必要に応じて含まれ得る賦形剤をいう。吸入のための組成物に関して好ましいものは、被験体および特に被験体の肺に対して、有意な毒物学的悪影響を全く伴わずに肺に取り込まれ得る賦形剤である。
【００７５】
「薬理学的有効量」または「生理学的有効量」は、本明細書に記載されるとおりの治療組成物中に存在するポリマー−レチノイン酸結合体の量であって、レチノイドを用いる処置に対して応答性の標的状態の処置に関して有効なレベルのレチノイン酸を提供するために必要な量である。正確な量は、多数の因子（例えば、特定のＰＥＧ−レチノイド、使用される送達デバイス、治療的組成物の成分および物理的特性、意図される患者の人口、患者への配慮など）に依存し、そして本明細書中に提供される情報に基づいて当業者により容易に決定され得る。
【００７６】
（ＩＩ．レチノイド）
本発明における使用のためのレチノイドは、天然のレチノイドおよび合成アナログ、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩およびエステルを含む。本発明に従ってポリマー結合体を調製する際に使用するための代表的なレチノイドとしては、レチノール、全トランスレチノイン酸、１３−シスレチノイン酸、９−シスレチノイン酸、１１−シスレチノイン酸、および１４−ヒドロキシ−レトロ（ｒｅｔｒｏ）−レチノールが挙げられる。親油性レチノイン酸化合物（全トランスレチノイン酸（ＡＴＲＡ）、１３−シスレチノイン酸、９−シスレチノイン酸、１１−シスレチノイン酸）が好ましい。参照の容易さのために、未修飾親シスレチノイン酸および未修飾親トランスレチノイン酸の構造を以下に示す：
【００７７】
【化９】
2005507934.tif 000004
【００７８】
このポリマー鎖の共有結合は、化学改変に適切なレチノイド部分内の任意の部分で生じ得るが、ポリマーの最も好ましい結合は、カルボン酸部分のカルボニル炭素を有する適切に活性化されたポリマーの反応によって生じる。
【００７９】
特に好ましいレチノイン酸は、肺気腫、慢性気管支炎、および喘息のような特定の呼吸障害の処置に有効であることが示されているレチノイン酸であり、例えば、全トランスレチノイン酸（Ｍａｓｓａｒｏ  Ｇ．，Ｍａｓｓａｒｏ，Ｄ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，３：６７５−６７７，１９９７）および１３−シスレチノイン酸（Ｂｅｌｌｏｎｉ，Ｐ．，米国特許第６，３３９，１０７号）である。
【００８０】
（ＩＩＩ．ポリマー）
一般的に、結合体の、水溶性で非ペプチド性であるポリマー部分は、非毒性かつ生体適合性であり、典型的には、２〜約３００の末端を有するとして特徴付けられる。このようなポリマーの例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：ポリ（アルキレングリコール）（例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ（プロピレングリコール）（「ＰＰＧ」））、エチレングリコールとプロピレングリコールのコポリマーなど）、ポリ（オキシエチル化ポリオール）、ポリ（オレフィンアルコール）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリレート）、ポリ（サッカライド）、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリ（Ｎ−アクリロイルモルホリン）、ならびにこれらのコポリマー、ターポリマーおよび混合物。
【００８１】
１つの特に好ましいポリマーは、ポリエチレングリコールである。本明細書中で使用される場合、用語ＰＥＧは、多数の構造または形態（その直鎖形態（例えば、アルコキシＰＥＧ、または二官能性ＰＥＧ）、分枝鎖形態もしくはマルチアーム形態（例えば、フォーク状ＰＥＧまたはポリオール核に結合されるＰＥＧを含む）、ペンダントＰＥＧ、またはその中に分解可能な結合を有するＰＥＧ）のいずれかである、ポリ（エチレングリコール）を含み、以下でより完全に記載される。
【００８２】
典型的には、ＰＥＧは、カルボニル炭素のようなレチノイド上の所望の部位にカップリングするのに適切な、適切な活性化基で活性化される。活性化ＰＥＧは、レチノイドとの反応のために末端に反応基を有する。本明細書中で使用される場合、用語「リンカー」は、レチノイン酸のようなレチノイドとの反応のためにＰＥＧ末端に位置される活性化基を包含することを意味し、そして活性化ＰＥＧの調製を容易にするために、そのポリマーのＰＥＧ部分とその末端における活性化基との間に位置するさらなる（典型的には不活性な）原子をさらに含み得る。しかし、このリンカーは任意の多数の原子を含み得、好ましくは、ＰＥＧ骨格と末端活性化基との間に介在するメチレンを含む。代表的な活性化ＰＥＧ誘導体およびこれらのポリマーをレチノイドのような薬物に結合させるための本発明の方法は、は、当該分野で公知であり、Ｚａｌｉｐｓｋｙ，Ｓら，Ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  Ｇｌｙｃｏｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，「Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚｅｄ  Ｐｏｌｙ（Ｅｔｈｙｌｅｎｅ  Ｇｌｙｃｏｌｓ）ｆｏｒ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｓ」；Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｊ．Ｍ．Ｈａｒｒｉｓ，Ｐｌｅｎｕｓ  Ｐｒｅｓｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ（１９９２），およびＡｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，１６：１５７−１８２（１９９５）にさらに記載される。
【００８３】
代表的に、本発明のポリマー結合体のポリマー位置の数平均分子量は、約１００ダルトン（Ｄａ）〜約１００，０００Ｄａ、好ましくは約５００ダルトン〜約１００，０００ダルトンである。
【００８４】
より詳細には、本発明のＰＥＧレチノイド結合体は、代表的に、各々が約２００〜約４０，０００ダルトン、好ましくは約２００〜約２０，０００ダルトンの範囲の分子量を有する１つ以上のＰＥＧ鎖を含む。好ましくは、本発明における使用のためのＰＥＧは、以下の範囲の１つの範囲内の平均分子量を有する：約２００〜１０，０００ダルトン、約２００〜約７５００ダルトン、約２００〜約６，０００ダルトン、約２００〜約５，０００、約２００〜約３０００ダルトン、約２００〜約２０００ダルトン、および約２００〜約１０００ダルトン。
【００８５】
レチノイドに結合するためのポリマーは、一般的に、以下から選択される数平均分子量を有する：（ｉ）約５００Ｄａ、または（ｉｉ）約７５０Ｄａ、または（ｉｉｉ）約９００Ｄａ、または（ｉｖ）約１，０００Ｄａ、または（ｖ）約２，０００Ｄａ、または（ｖｉ）約３，０００Ｄａ、または（ｖｉｉ）約４，０００Ｄａ、または（ｖｉｉｉ）約５，０００Ｄａ、または（ｉｘ）約１０，０００Ｄａ、または（ｘ）約１５，０００Ｄａ、または（ｘｉ）約２０，０００、または（ｘｉｉ）約２５，０００Ｄａ。本発明の１つの特定の実施形態において、約２０００ダルトンより大きい分子量を有するポリマーが好ましい。５，０００ダルトン、２，０００ダルトン、２０００ダルトンおよび１０，０００ダルトンの分子量を有するＰＥＧ（線形ＰＥＧおよびマルチアームのＰＥＧを使用して）で調製された例示的なレチノイド結合体は、実施例に記載される。
【００８６】
サブユニットの数に関して、本発明における使用のためのＰＥＧは、代表的に、以下の範囲の１つ以上の範囲内の多数の（ＯＣＨ２ＣＨ２）サブユニットを含む：２〜約９００サブユニット、約４〜４５０サブユニット、約４〜２５０サブユニット、約４〜１７０サブユニット、約４〜約１４０サブユニット、約４〜約１００サブユニット、約１０〜約１００サブユニット、約４〜約７０サブユニット、約４〜約４５サブユニットおよび約４〜約２５サブユニット。
【００８７】
本発明における使用のための１つの特に好ましいポリマーは、エンドキャップ（ｅｎｄ−ｃａｐｐｅｄ）ポリマーであり、相対的に不活性基（例えば、低級Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基）でキャップされた少なくとも１つの末端を有するポリマーを意味する。ＰＥＧの１つのこのような特に好ましい形態は、メトキシ−ＰＥＧ（一般に、ｍＰＥＧと呼ばれる）、ＰＥＧの線形形態であり、ここで、ポリマーの１つの末端は、メトキシ（−ＯＭｅ）基であるが、他方の末端は、ヒドロキシルまたは化学的に改変され得る他の官能基である。
【００８８】
マルチアームＰＥＧ分子または分枝ＰＥＧ分子（例えば、米国特許番号第５，９３２，４６２号に記載されるＰＥＧ分子、その全体において本明細書中で参考として援用される）はまた、本発明の結合体を形成するために使用され得る。一般的に言えば、マルチアームポリマーまたは分枝ポリマーは、介在性の連結アームを介して、１つの活性部分（例えば、レチノイド）に直接的かまたは間接的にかのいずれかで共有結合される、中央の分枝点（例えば、以下の構造中のＣ）から延びる２つ以上のポリマー「アーム」を有する。例えば、例示的な分枝ＰＥＧポリマーは、以下の構造を有し得る：
【００８９】
【化１０】
2005507934.tif 000005
【００９０】
ここで、
ＰＯＬＹａおよびＰＯＬＹｂは、ＰＥＧポリマー（例えば、メトキシポリ（エチレングリコール））であり；
Ｒ’’は、非反応性部分（例えば、Ｈ、メチルまたはＰＥＧ）であり；そして
ＰおよびＱは、非反応性連結である。好ましい実施形態において、分枝ＰＥＧポリマーは、メトキシポリ（エチレングリコール）二置換リジンまたはその誘導体である。ポリマーにカップリングするように意図されるレチノイド内の活性部分に依存して、二置換リジンの反応性エステル機能は、レチノイド内で標的基との反応に適切な官能基を形成するようにさらに改変され得る。
【００９１】
ポリマーは、分岐した構造を代替的に有し得る。一般的に言えば、分岐した構造を有するポリマーは、ポリマー中の加水分解に安定な分枝点から延びた、共有結合を介して２つ以上の活性剤に結合したポリマー鎖を有するとして特徴付けられる。分岐したＰＥＧの例は、ＰＥＧ−ＹＣＨＺ２によって表され、ここで、Ｙは連結基であり、そしてＺは、生物学的活性剤（例えば、レチノイド）への共有結合のための活性化末端基である。Ｚ基は、規定された長さの原子鎖によってＣＨに連結される。国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９９／０５３３３（この内容は、本明細書中で参考として援用される）は、本発明における使用に適切な種々の分岐されたＰＥＧ構造を記載する。分枝炭素原子にＺ官能基を連結する原子鎖は、つなぎ（ｔｅｔｈｅｒｉｎｇ）基として作用し、そして例えば、アルキル鎖、エーテル結合、エステル結合、アミド結合またはその組み合せを含み得る。
【００９２】
ＰＥＧポリマーはまた、ＰＥＧ鎖の末端ではなくＰＥＧ骨格の長さに沿って共有結合される反応性基（例えば、ヒドロキシル）を有するペンダントＰＥＧ分子の形態をとり得る。このようなペンダント反応性基は、直接にか、または連結部分（例えば、アルキレン基）を介してかで、ＰＥＧ骨格に結合され得る。
【００９３】
上記ＰＥＧの形態に加えて、このポリマーはまた、ポリマー骨格中の１つ以上の弱い結合または分解性の結合を用いて調製され得、このポリマーとしては、上記ポリマーのいずれかを含む。すなわち、ポリマーをレチノイドに結合する結合に加えて、ポリマーは、例えば、吸入による投与に続く、被験体の肺における結合体の貯留の際に、ポリマーのさらなる分解を提供するように、ポリマー内に加水分解可能なさらなる結合を含み得る、例えば、ＰＥＧは、ポリマー骨格中に、加水分解されるエステル結合を用いて調製され得る。以下に示されるように、この加水分解は、ポリマーのより低分子量のフラグメントへの切断を生じる：
−ＰＥＧ−ＣＯ２−ＰＥＧ−  ＋Ｈ２Ｏ→−ＰＥＧ−ＣＯ２Ｈ＋ＨＯ−ＰＥＧ−。
【００９４】
ポリマー骨格内に含まれる他の加水分解性の結合としては、カーボネート結合；例えば、アミンとアルデヒドとの反応から生じるイミン結合（例えば、Ｏｕｃｈｉら、Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｐｒｅｐｒｉｎｔｓ，３８（１）：５８２−３（１９９７）（本明細書中に参考として援用される））；アルコールとリン酸基との反応によって形成されるリン酸結合；ヒドラジンとアルデヒドとの結合によって代表的に形成されるヒドラジン結合；アルデヒドとアルコールとの間の反応によって代表的に形成されるアセタール結合；例えば、ギ酸とアルコールとの反応によって形成されるオルトエステル結合；アミン基（例えば、ポリマー（例えば、ＰＥＧ）の末端）およびペプチドのカルボキシル基によって形成されるペプチド結合；ならびに例えば、ホスホルアミデイト基（例えば、ポリマーの末端）およびオリゴヌクレオチドの５’ヒドロキシル基によって形成されるオリゴヌクレオチド結合が挙げられる。
【００９５】
ポリマー結合体のこのような任意の特徴（すなわち、１つ以上の分解性結合をポリマー鎖に導入すること）は、投与の際に、結合体の最終的に所望される薬理学的特徴を制するさらなる制御を提供し得る。例えば、大きく比較的不活性な結合体（すなわち、そこに結合された１つ以上の高分子量ＰＥＧ鎖を有する結合体、（例えば、結合体が本質的に生体活性を保有しない、約１０，０００より大きい分子量を有する１つ以上のＰＥＧ鎖））が、投与され得、肺に存在する場合、これは、元のＰＥＧ鎖の一部を保有する生体活性結合体を生成するように加水分解される。このようにして、ＰＥＧ−レチノイド結合体の特徴は、肺の中での結合体の生体活性とレチノイドの貯留効果（滞留時間）のバランスをとるように、いくらかより有効に合わせられ得る。
【００９６】
まとめると、非ペプチド性であり水溶性である、種々の一機能性ポリマー、二機能性ポリマーまたは多機能性ポリマーのいずれかは、本発明に従うレチノイド結合体を形成するように使用され得る。ポリマーは、直線状であっても、上記の形態（例えば、分枝形態、フォーク状形態など）のいずれかであってもよい。
【００９７】
（ＩＶ．ポリマーレチノイド結合体）
上記に一般的に記載されるように、本発明のポリマー結合体は、レチノイド化合物に共有結合した水溶性非ペプチドポリマーを含み、この結合体のポリマー部分は、上記ＩＩＩ節に記載される例示的形態のいずれかを保有し得る。このレチノイドがレチノイン酸である場合、好ましい結合体は、そのレチノイン酸をこのポリマーに結合する結合が親カルボン酸基の誘導体（例えば、エステル、アミド、またはチオールエステル）である、結合体である。本発明のポリマー結合体は、レチノイド治療に対して応答性である任意の状態を処置するために有用であり、特に自己消化（ａｅｒｏｄｉｇｅｓｔｉｖｅ）癌（例えば、肺癌ならびに頭頸部の癌腫および悪性腫瘍）の化学的予防において使用するために、特に有益である。さらに、本発明のポリマー結合体を吸入によって局所投与すると、望ましい作用部位（すなわち、肺胞領域）に到達する用量が、全身投与と比較した場合に多量になる。この様式で、本発明のポリマー結合体は、循環中のレチノイドの毒性レベルにより引き起こされる全身レチノイド治療に共通する有害な副作用を最小限にすることが可能である。さらに、本発明の結合体の水可溶性に起因して、噴霧乾燥のようなプロセスの間に、水性ベースの送達ビヒクルと、水処理状態とを使用し得、可溶化剤に頼る必要も、有機溶媒を用いる噴霧乾燥の危険に訴える必要もない。
【００９８】
本発明の結合体は、好ましくは、このポリマーとレチノイドとの間の結合が、親レチノイドの放出を可能にするために加水分解可能であることを意味する、プロドラッグであるが、必ずしもそうである必要はない。例示的な分解性結合としては、カルボン酸エステル、リン酸エステル、チオールエステル、無水物、アセタール、ケタール、アシルオキシアルキルエーテル、イミン、オルトエステル、ペプチドおよびオリゴヌクレオチドが挙げられる。このような結合は、当該分野で一般的に使用されるカップリング方法を使用して、レチノイド部分（例えば、レチノイド上のカルボキシル基、またはレチノール上のヒドロキシ基）および／またはこのポリマーの適切な改変により容易に調製され得る。しかし、最も好ましいのは、適切に活性化されたポリマーと、親分子内に含まれる非改変官能基との反応により容易に形成される、加水分解性結合である。例えば、レチノイン酸の改変のために最も好ましいのは、このポリマー上のヒドロキシル基またはチオール基のいずれかによるレチノイドのカルボニル炭素に対するアタックから生じる、エステル結合またはチオエステル結合である。
【００９９】
あるいは、加水分解に安定な結合（例えば、アミド結合、ウレタン（カルバメートとしても公知）結合、アミン結合、チオエーテル（スルフィドとしても公知）結合、または尿素（カルバミドとしても公知）結合）もまた、このポリマーにレチノイドをカップリングするために使用され得る。また、加水分解に安定な好ましい結合は、化学の簡単な性質に起因して、アミド結合である。すなわち、アミドは、アミノ末端ポリマーとレチノイン酸（またはその機能的等価物）との反応により容易に調製され得る。使用される特定の結合および結合化学は、特定のレチノイド分子、ポリマーへの付着または適切な付着部位への転換のいずれかのために利用可能なレチノイド中の官能基、レチノイド分子内にさらなる官能基の存在が可能なことなどに依存する。使用される特定の結合および結合化学は、本明細書中に提示される指針に基づいて、当業者によって容易に決定され得る。
【０１００】
本発明のポリマー結合体は、測定可能な程度のレチノイン活性を保有してもよいし、保有していなくてもよい。すなわち、本発明に従うポリマー結合体は、非改変親レチノイド化合物の生物活性のうちの約０％から約１００％までのいずれかまたはそれ以上を保有する。レチノイン生物活性をほとんど保有しない化合物または全く保有しない化合物は、代表的には、レチノイド部分にこのポリマーを結合する加水分解性結合を含み、その結果、この水溶性プロドラッグが生物活性を欠くか否かに関わらず、活性な親分子が、この加水分解性結合の水誘導性切断の際に放出される。このような活性は、適切なインビボモデルまたはインビトロモデルを使用して決定され得、このモデルは、使用される特定の親レチノイド化合物の既知の活性に依存する。レチノイドをポリマーに結合する加水分解に安定な結合を保有する結合体について、その結合体は、代表的には、測定可能な程度の比活性を保有する。例えば、そのようなポリマー結合体は、代表的には、適切なモデル（当該分野で周知のモデル）において測定した場合、非改変親レチノイドの生物活性と比較して少なくとも約２％、５％、１０％、１５％、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、８０％、９０％以上の生物活性を有するとして特徴付けられる。好ましくは、加水分解に安定な結合（例えば、アミド結合）を有する化合物は、非改変親レチノイドの生物活性のうちの少なくとも約４０％を保有する。
【０１０１】
本発明に従う例示的ポリマー結合体が、ここで記載される。本発明に従う代表的ポリマー結合体は、概して、以下の構造：
【０１０２】
【化１１】
2005507934.tif 000006
【０１０３】
により特徴付けられ得、
この構造において、ＲＡは、隣接するカルボニル基と一緒になって、レチノイド部分を示し、Ｘは、リンカー（好ましくは、Ｏ、Ｎ−Ｈ、およびＳから選択されるヘテロ原子）であり、ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドポリマーである。
【０１０４】
例えば、このポリマーが直鎖状ポリエチレングリコールであり、レチノイドをポリマーに結合する結合がエステル結合（例えば、ＸがＯである）である例において、このポリマーの分子量は、好ましくは、少なくとも約２，０００ダルトンである。あるいは、このポリマーが直鎖状の末端キャップポリエチレングリコールであり、結合がアミド結合（例えば、ＸがＮ−Ｈである）場合、このポリマーは、好ましくは、少なくとも約５，０００ダルトンの分子量を有する。
【０１０５】
Ｃ（Ｏ）−Ｘ結合は、このポリマーの末端にある官能基と、レチノイン酸分子との反応から生じる。上記のように、特定の結合は、利用される官能基の型に依存する。このポリマーが、ヒドロキシル基で末端官能化されるかまたは「活性化される」場合、生じる結合は、カルボン酸エステルであり、ＸはＯである。このポリマーの骨格がチオール基で官能化される場合、生じる結合は、チオエステルであり、ＸはＳである。特定のマルチアーム分枝ポリマーまたはマルチアーム分岐ポリマーが使用される場合、Ｃ（Ｏ）Ｘ部分（特に、Ｘ部分）は、比較的より複雑であり得、そしてより長い結合構造を含み得る。例えば、「分岐」ポリマー実施形態において下記に示されるように、この結合体のＸ部分は、このポリマーとレチノイン酸部分との間の−Ｘ１−（Ｗ）ｐ−ＣＨ−Ｙ１−結合に対応する結合である。
【０１０６】
特に好ましい結合体は、ＸおよびＰＯＬＹが下記に記載されるような、以下に示される一般構造を有する。
【０１０７】
【化１２】
2005507934.tif 000007
【０１０８】
あるいは、本発明の結合体は、以下の型の構造：
【０１０９】
【化１３】
2005507934.tif 000008
【０１１０】
を保有し得、この構造において、改変ポリマーの一端は、官能基Ｚで末端官能化されている。官能基Ｚは、末端キャップ基（例えば、アルコキシまたはベンジルオキシ）であり得るか、または反応性官能基（例えば、ヒドロキシル、活性エステル、活性カルボネート、アセタール、アルデヒド、アルデヒドヒドレート、アルケニル、アクリレート、メタクリレート、アクリルアミド、活性スルホン、アミン、ヒドラジン、チオール、カルボン酸、イソシアネート、イソチオシアネート、マレイミド、ビニルスルホン、ジチオピリジン、ビニルピリジン、ヨードアセトアミド、エポキシド、グリオキサール、ジオン、メシレート、トシレート、トレシレート、またはそれらの機能的等価物）であり得る。
【０１１１】
適切な末端官能基の特定の例としては、Ｎ−スクシンイミジルカルボネート（例えば、米国特許第５，２８１，６９８号、同第５，４６８，４７８号を参照のこと）、アミン（例えば、Ｂｕｃｋｍａｎｎら、Ｍａｋｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．１８２：１３７９（１９８１）、Ｚａｐｌｉｐｓｋｙら、Ｅｕｒ．Ｐｏｌｙｍ．Ｊ．１９：１１７７（１９８３）を参照のこと）、ヒドラジド（例えば、Ａｎｄｒｅｓｚら、Ｍａｋｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．１７９：３０１（１９７８）を参照のこと）、スクシンイミジルプロピオネートおよびスクシンイミジルブタノエート（例えば、Ｏｌｓｏｎら、Ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＆  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．１７０−１８１，Ｈａｒｒｉｓ  ＆  Ｚａｐｌｉｐｓｋｙ編、ＡＣＳ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＤＣ，１９９７を参照のこと；米国特許第５，６７２，６６２号もまた参照のこと）、スクシンイミジルスクシネート（例えば、Ａｂｕｃｈｏｗｓｋｉら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．７：１７５（１９８４）およびＪｏｐｐｉｃｈら、Ｍａｃｒｏｌｏｌ．Ｃｈｅｍ．１８０：１３８１（１９７９）もまた参照のこと）、スクシンイミジルエステル（例えば、米国特許第４，６７０，４１７号を参照のこと）、ベンゾトリアゾールカルボネート（例えば、米国特許第５，６５０，２３４号を参照のこと）、グリシジルエーテル（例えば、Ｐｉｔｈａら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．９４：１１（１９７９）、Ｅｌｌｉｎｇら、Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１３：３５４（１９９１）を参照のこと）、オキシカルボニルイミダゾール（例えば、Ｂｅａｕｃｈａｍｐら、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１３１：２５（１９８３）、Ｔｏｎｄｅｌｌｉら、Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １：２５１（１９８５）を参照のこと）、ｐ−ニトロフェニルカルボネート（例えば、Ｖｅｒｏｎｅｓｅら、Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１１：１４１（１９８５）；およびＳａｒｔｏｒｅら、Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２７：４５（１９９１）を参照のこと）、アルデヒド（例えば、Ｈａｒｒｉｓら、Ｊ．Ｐｏｌｙｍ．Ｓｃｉ．Ｃｈｅｍ．Ｅｄ．２２：３４１（１９８４）、米国特許第５，８２４，７８４号、米国特許第５，２５２，７１４号を参照のこと）、マレイミド（例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ８：３４３（１９９０）、Ｒｏｍａｎｉら、Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ２：２９（１９８４）を参照のこと）、ならびにＫｏｇａｎ、Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｃｏｍｍ．２２：２４１７（１９９２）を参照のこと）、オルトピリジル−ジスルフィド（例えば、Ｗｏｇｈｉｒｅｎら、Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．４：３１４（１９９３）を参照のこと）、アクリロール（例えば、Ｓａｗｈｎｅｙら、Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ２６：５８１（１９９３）を参照のこと）、ビニルスルホン（例えば、米国特許第５，９００，４６１号を参照のこと）が、挙げられる。
【０１１２】
１実施形態において、上記（ＶＩ）の一般構造を有するとして特徴付けられる結合体は、Ｚが、
【０１１３】
【化１４】
2005507934.tif 000009
【０１１４】
に対応する結合体であり、
ここでＸ’は、カルボニルと一緒になって、加水分解性結合であり、
【０１１５】
【化１５】
2005507934.tif 000010
【０１１６】
は、このポリマーへの結合点を示す。このような結合体は、本明細書中において、中心的な代表的には直鎖状のポリマーが各末端に共有結合したレチノイドを保有する、ダンベル構造を有すると言われる。直前に記載された特定の実施形態は、ＸおよびＸ’が同一である場合に、ホモ二官能性ポリマー結合体と考えられる。なぜなら、このポリマーの両端は、同じである官能基（従って、用語「ホモ」）を保有するように改変されるからである。
【０１１７】
また、本明細書中に提供されるのは、以下のようなマルチアーム構造または分子構造：
【０１１８】
【化１６】
2005507934.tif 000011
【０１１９】
を有する結合体である。中心コア分子は、ｎ個のポリマー（ＰＯＬＹ）に、結合Ｙを介して結合可能な、ｎ個の機能性部位を有する分子から誘導される。代表的には、そのような結合体は、約３〜１００以上の範囲、代表的には、約３〜約２０の範囲、または約３〜約１０の範囲の値ｎを保有する。Ｒは、好ましくは非樹状的な中心コア分子（例えば、ポリオール、ポリアミン、またはアミノ基とヒドロキシル基との組み合わせを有する分子を示す。特定のコア分子の例としては、グリセロール、グリセロールオリゴマー、ペンタエリスリトール、ソルビトール、およびリジンが挙げられる。ＲＡ、ＸおよびＰＯＬＹは、（各ＰＯＬＹが独立して選択される場合）上記のように記載され、Ｙは、リンカーを示す。好ましくは、Ｒの分子量は、約２，０００Ｄａ未満である。
【０１２０】
このような特に好ましい結合体は、以下の構造：
【０１２１】
【化１７】
2005507934.tif 000012
【０１２２】
を保有し、この構造において、ＰＥＧは、約２，０００Ｄａ〜約１００，０００Ｄａの分子量または上記の別のＰＥＧ分子量範囲の１つを有するポリエチレングリコールを示す。
【０１２３】
レチノイドがＡＴＲＡである本発明の実施形態において、この結合体は、下記に示される構造を保有する。
【０１２４】
【化１８】
2005507934.tif 000013
【０１２５】
本発明の例示的「分岐」ポリマー結合体の特定の例が、下記に示され：
【０１２６】
【化１９】
2005507934.tif 000014
【０１２７】
ここで、各Ｘ１はカルボニルと一緒になって、加水分解性結合を形成し、例えば、Ｘ１は、ＯまたはＳのような原子もしくは原子群であり、Ｙ１は、リンカー（例えば、Ｏ、Ｓ、またはＮＨ）であり、各ｐは独立して０または１であり、そして各Ｗは、−（ＣＨ２）ｍ−、−（ＣＨ２）ｍ−Ｏ−、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−、−（ＣＨ２）ｍ−Ｏ２Ｃ−ＣＨ２ＣＨ２−、および（ＣＨ２）ｍ−Ｏ−（ＣＨ２）ｒ−（ｍおよびｒは、独立して１〜１０である）からなる群より独立して選択される。好ましくは、各ｐは、１であり、各Ｗは、−（ＣＨ２）ｍ−であり、各ｍは、独立して１〜１０である。
【０１２８】
上記の分岐ポリマー結合体の一実施形態において、Ｙ１は、−ＰＯＬＹ−Ｚに結合され、ここでＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドポリマーであり、Ｚは、上記の不活性キャップ基のような官能基（例えば、
【０１２９】
【化２０】
2005507934.tif 000015
【０１３０】
）である。あるいは、Ｚは、反応性官能基（例えば、ヒドロキシル、活性エステル、活性カルボネート、アセタール、アルデヒド、アルデヒドヒドレート、アルケニル、アクリレート、メタクリレート、アクリルアミド、活性スルホン、アミン、ヒドラジン、チオール、カルボン酸、イソシアネート、イソチオシアネート、マレイミド、ビニルスルホン、ジチオピリジン、ビニルピリジン、ヨードアセトアミド、エポキシド、グリオキサール、ジオン、メシレート、トシレート、トレシレート、またはそれらの機能的等価物）であり得る。
【０１３１】
例示的ホモ二官能性分岐ポリマー結合体は、Ｚが
【０１３２】
【化２１】
2005507934.tif 000016
【０１３３】
である、上記に示される一般構造を有する結合体である。
【０１３４】
（Ｖ．調製方法）
本明細書中に記載される結合体は、当該分野で一般的に使用されるカップリング法を使用して調製される。ポリマーレチノイド結合体は、例えば、活性化された水溶性非ペプチドポリマーを、カルボン酸基または活性化カルボン酸（例えば、酸ハライド）と反応する官能基（例えば、ヒドロキシルもしくはチオール）と反応させることによって、形成され得る。このような場合、生じるポリマー結合体は、このポリマーとレチノイン酸部分との間に、例えば、カルボン酸エステル結合またはチオールエステル結合を有する、レチノイン酸プロドラッグである。付随する実施例に記載されるように、レチノイン酸を用いて実行されるカップリング反応のために、この反応は、好ましくは、触媒量のカップリング剤（例えば、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）またはＮ，Ｎ’−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ））の存在下で生じる。ヒドロキシ末端ポリマーとレチノイン酸のカルボキシ基との反応によってエステル結合結合体を調製するために適切な反応条件は、例えば、「Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ」Ｌａｒｏｃｋ，Ｒ．，ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，１９８９に記載されるような多くの経路のいずれかを使用して、当業者によって容易に決定され得る。あるいは、酸ハライド形態のレチノイン酸を用いて実行される反応において、その酸ハライドは、レチノイン酸を、オキサリルハライド（例えば、塩化オキサリル）と反応させることによって形成され得、その酸ハライドは、その後、上記に一般的に記載されるように結合されてポリマーにされる。対応するアミド結合結合体またはチオエステル結合結合体の調製もまた、従来の合成方法を使用して調製され得る。
【０１３５】
最終ポリマー結合体産物は、一般的には、沈殿、およびその後の濾過および乾燥によって、精製および収集される。
【０１３６】
本発明の結合体を調製するために適切な反応スキームの例が、下記に示され、ここで、Ｚは、キャップ基であり、ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドポリマーであり、そしてＸは、ＯまたはＳである。
【０１３７】
【化２２】
2005507934.tif 000017
【０１３８】
（ＶＩ．組成物）
本発明のポリマー−レチノイド結合体組成物は、特定の投与様式および投与形態に依存して、そのままでか、またはさらなる賦形剤、溶媒、安定化剤を含む治療組成物／薬学的組成物の状態で、投与され得る。本結合体は、非経口投与および経口投与され得る。特定の投与経路としては、経口経路、直腸経路、経頬経路、局所経路、経鼻経路、経眼経路、皮下経路、筋肉内経路、静脈内経路、皮内経路、および経肺経路が挙げられる。最も好ましいのは、肺経路であり、特に、タバコの使用または曝露に関連する気道の疾患の処置のために特に好ましい。
【０１３９】
哺乳動物（特に、ヒト）への投与のための薬学的処方物は、代表的には、１種以上の薬学的に受容可能なキャリアとともに本発明の少なくとも１種のＰＥＧ−レチノイド結合体を、下記により詳細に記載されるように、特に肺組成物のために含む。例えば、非経口投与のための本発明の処方物は、最も代表的には、液体溶液または液体懸濁物であるが、肺投与のための吸入可能な処方物は、一般的には液体または粉末であり、粉末処方物が、一般的には好ましい。本発明の化学改変レチノイドのそれほど好ましくはないがさらなる組成物としては、シロップ剤、クリーム、軟膏、錠剤などが挙げられる。
【０１４０】
（Ａ．ポリマーレチノイド結合体の吸入可能な処方物）
上記のように、本発明の結合体の好ましい一投与経路は、肺への吸入による。特定の処方物の成分、特徴および送達デバイスが、ここでより完全に記載される。
【０１４１】
この処方物中のレチノイド結合体の量は、望ましい治療効果を達成するために、１単位用量あたり治療有効量のレチノイドを送達する必要がある量である。実際、これは、特定のレチノイド、その結合体のポリマー部分、その活性、処置されるべき状態などに依存して、広範に変化する。この組成物は、一般的には、そのポリマー結合体の約１重量％〜約９９重量％、代表的には約２重量％〜約９５重量％、より代表的には約５重量〜８５重量％のいずれかを含み、これもまた、その組成物中に含まれる賦形剤／添加剤の相対量に依存する。より詳細には、この組成物は、代表的には、以下のパーセンテージのうちの少なくとも約１つの結合体を含む：１０重量％、２０重量％、３０重量％、４０重量％、５０重量％、６０重量％、７０重量％、８０重量％、９０重量％またはそれ以上。好ましくは、粉末組成物は、少なくとも約４０％、例えば、約４０〜１００重量％のポリマーレチノイド結合体を含む。より多くのレチノイドが本明細書中に記載される処方物中に組込まれ得ることが、理解されるべきである。
【０１４２】
本発明の組成物は、ほとんどの場合、１つ以上の賦形剤を含む。乾燥粉末組成物について、好ましいのは、高融点を有する賦形剤、または高ガラス転移温度（例えば、約３５℃を超える、好ましくは約４０℃を超える、より好ましくは約４５℃を超える、最も好ましくは約５５℃を超える）を有する賦形剤である。
【０１４３】
一般的に使用されるのは、糖質賦形剤（単独、または他の賦形剤もしくは添加剤との組み合わせのいずれか）である。本発明の組成物中で使用するための例示的糖質としては、糖、誘導体化糖（例えば、アルジトール、アルドン酸、エステル化糖、および糖ポリマーが挙げられる。好ましいのは、非還元糖、レチノイド結合体とあわせた場合に部分的無定形相もしくは実質的無定形相もしくは部分的ガラス相もしくは実質的ガラス相を形成し得る糖、および比較的高いＴｇｓ（例えば、４０℃より高いＴｇｓ、好ましくは５０℃より高いＴｇｓ、より好ましくは６０℃より高いＴｇｓ、なおより好ましくは７０℃より高いＴｇｓ、最も好ましくは８０℃以上のＴｇｓ）を有する糖である。
【０１４４】
さらなる賦形剤としては、アミノ酸、ペプチド、特に、２アミノ酸〜９アミノ酸を含むオリゴマー、より好ましくは２マー〜５マーを含むオリゴマー、およびポリペプチドが挙げられ、これらはすべて、ホモ種であっても、ヘテロ種であってもよい。特に好ましいアミノ酸は、ロイシンである。
【０１４５】
また賦形剤として有用なのは、Ｉｎｈａｌｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｓｙｓｔｅｍの国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ００／０９７８５（その全体が参考として本明細書中に援用される）に記載されるように、２つ以上のロイシル残基を含むジペプチドまたはトリペプチドである。一つのそのような賦形剤は、トリロイシンである。トリロイシンを含む吸入可能な処方物が、実施例１４に記載される。
【０１４６】
ポリアミノ酸、特に、本明細書中に記載されるアミノ酸のうちのいずれかを含むポリアミノ酸もまた、賦形剤として使用するために適切である。好ましいのは、ポリアミノ酸（例えば、ポリ−リジン、ポリ−グルタミン酸、およびポリ（ｌｙｓ，ａｌａ）である。
【０１４７】
さらなる賦形剤および添加剤としては、タンパク質、非生物学的ポリマーおよび生物学的ポリマー（これらは、単独または組み合わせて提示され得る）が挙げられるが、これらに限定されない。適切な賦形剤は、Ｉｎｈａｌｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｓｙｓｔｅｍの国際公開番号ＷＯ  ９６／３２０９６および同９８／１６２０５に提供される賦形剤である。この組成物はまた、緩衝剤またはｐＨ調整剤を含み得る。
【０１４８】
さらに、本発明に従う組成物は、好ましくは、フリーラジカルスカベンジャー（例えば、ブチレート化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、アスコルビン酸（ビタミンＣ）、またはαトコフェロール（ビタミンＡ））を含む。本発明を支持して実行された実験の間に、特定のＰＥＧ−レチノイド組成物（例えば、ＰＥＧ  ＡＴＲＡ結合体（例えば、ＰＥＧ−５Ｋ−エステル−ＡＴＲＡ））は、おそらくＰＥＧ−ＡＴＲＡ組成物中に少量のフリーラジカルスカベンジャーが存在することに起因して、非改変親レチノイド組成物よりも分解しやすい（すなわち、安定性が低い）ことが発見された。この組成物中にフリーラジカルスカベンジャーを組込むことは、その結合体のフリーラジカル誘導性分解を実質的に減少するかまたは有効に排除するために、有効であった。
【０１４９】
有利なことには、本発明のレチノイド結合体は、その結合体の水溶性の性質に起因して、可溶化剤も乳化剤も組込む必要がない。
【０１５０】
穿孔処理した微小構造物（すなわち、中空の多孔性ミクロスフェア）を作製するための特定の二置換ホスファチジルコリンの使用が、下記により詳細に記載され、実施例１５において記載される。本発明に従う組成物における使用に適切な他の薬学的賦形剤および／または添加剤は、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ＆  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ」第１９版、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｌｉａｍｓ（１９９５）および「Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ」第５２版、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｍｏｎｉｃｓ、Ｍｏｎｔｖａｌｅ、ＮＪ（１９９８）に記載される。
【０１５１】
一般に、本発明の薬学的組成物は、約１重量％〜約９９重量％の賦形剤、好ましくは約５重量％〜９８重量％の賦形剤、より好ましくは約１５重量％〜９５％重量％の賦形剤を含む。さらにより好ましくは、この組成物は、約０〜５０重量％の賦形剤、より好ましくは、０〜４０重量％の賦形剤を含む。一般に、相対的に高いレチノイド濃度（重量％）が、最終薬学的組成物において望まれる。代表的には、賦形剤／添加剤の最適量は、実験的に、すなわち、種々の量の賦形剤（低量〜高量の範囲）を含む組成物を調製し、ＰＥＧ−レチノイドの化学的および物理的安定性、その結合体の活性、肺から循環へのその結合体の吸収を、その組成物のエアロゾル特性とともに試験し、その後さらに、最適なエアロゾル性能が達成される一方で上記に示される他の要因と均衡する範囲を発見することによって、決定される。
【０１５２】
（Ｂ．乾燥粉末の調製）
本発明のＰＥＧ−レチノイド結合体を含む乾燥粉末処方物は、多数の乾燥技術のいずれか、好ましくは噴霧乾燥によって、調製され得る。この処方物の噴霧乾燥は、例えば、「Ｓｐｒａｙ  Ｄｒｙｉｎｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ」第５版、Ｋ．Ｍａｓｔｅｒｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，ＮＹ，ＮＹ（１９９１）およびＰｌａｔｚ，Ｒ．ら、国際特許公開番号ＷＯ９７／４１８３３（１９９７）およびＷＯ９６／３２１４９（１９９６）（その内容は、参考として本明細書中に援用される）に記載されるようにして、実行される。
【０１５３】
処理の見地から、本発明の結合体組成物は、多数の理由のために、その非改変レチノイド対応物組成物よりも好ましい。第１に、その水不溶性に起因して、非改変レチノイドは、代表的には、懸濁物としてか、または有機溶媒（例えば、エタノール）中のいずれかで、噴霧乾燥される。有機溶媒中での噴霧乾燥は、大容量の可燃性有機廃棄物ストリームの生成および爆発の可能性に起因して、望ましくないものであり得る。さらに、実施例１３において理解され得るように、従来の処理パラメータを使用して、例融点固体（例えば、ＡＴＲＡ）の噴霧乾燥は、噴霧乾燥装置全体を通してのこの化合物の昇華と、非自由流動粉末の生成を生じる。これらの問題は、本発明のレチノイド結合体を噴霧乾燥した場合に克服され得る。なぜなら、水性供給溶液が使用され得るからである。さらに、ポリマーの選択に依存して、この結合体のポリマー部分は、生じる化合物に水溶性を付与するのに有効であるだけでなく、この結合体の融点を上昇させるのにも有効であり、これにより、従来の処理パラメータを使用しての噴霧乾燥が可能になる。第２に、その低水溶性に起因して、水ベースの処方物は、非改変レチノイドを処方するために使用され得る。これは、吸入可能な処方物のための特に問題である。なぜなら、レチノイドを可溶化するのに必要な薬剤は、代表的には、エアロゾル処方物のために不適切な組成物を生成するからである。この問題は、本発明の結合体の使用によって、同様に回避される。
【０１５４】
ポリマーレチノイド結合体の溶液または懸濁物は、従来の噴霧乾燥器（例えば、Ｎｉｒｏ  Ａ／Ｓ（Ｄｅｎｍａｒｋ）、Ｂｕｃｈｉ（Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）などのような商業的供給源から入手可能なもの）にて噴霧乾燥され得、実施例において示されるような、分散可能な乾燥粉末を生じ得る。ＰＥＧ−レチノイド溶液を噴霧乾燥するための至適条件は、処方物成分に依存して変化し、そしてその至適条件は、一般的には実験により決定される。この物質を噴霧乾燥するために使用される気体は、代表的には空気であるが、不活性気体（例えば、窒素またはアルゴン）もまた、適切である。さらに、噴霧される物質を乾燥するために使用される気体の入口および出口の両方の温度は、その噴霧乾燥プロセスの間にＰＥＧ−レチノイドの分解も融解も引き起こさないような温度である。この結合体の融点に依存して、その結合体の融解温度よりも少なくとも約１０℃または好ましくは１５℃低い出口温度を生じる入口温度が、選択される。好ましくは、この結合体の融解温度は、まず、出口温度および他の関連プロセスパラメータの適切な選択を補助するように決定される。
【０１５５】
本明細書中に記載される特徴を有する呼吸可能なポリマー−レチノイド組成物もまた、ＷＯ９９／１６４１９（その内容全体が、本明細書中に参考とし援用される）に記載されるような穿孔処理した微小構造粉末の処方をもたらす特定の処方物成分を乾燥することによって、生成され得る。この穿孔処理された微小構造粉末は、代表的には、大きな内部空隙を規定する比較的薄い多孔性壁を有する、噴霧乾燥される中空ミクロスフェアを含む。この穿孔処理された微小構造粉末は、選択された懸濁媒体（例えば、非水性発泡剤および／またはフッ素化発泡剤）中で分散されて、乾燥前に安定な分散物を提供し得る。比較的低密度の穿孔処理した（すなわち、多孔性の）微小構造または微粒子を使用すると、その粒子間の誘引力を有意に減少し、それにより、剪断力を低下させ、生じる粉末の流動性および分散性を増加させ、そしてその安定化した分散物の凝集、沈降またはクリーム化による分解を減少する。
【０１５６】
あるいは、肺送達のためのＰＥＧ−レチノイド組成物は、米国特許第６，１３６，２９５号に記載されるような、空気力学的に軽い粒子を含み得る。
【０１５７】
本発明の粉末化処方物はまた、凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚａｔｉｏｎ）、減圧乾燥、噴霧凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ  ｄｒｙｉｎｇ）、超臨界流体処理（例えば、Ｈａｎｎａら、米国特許第６，０６３，１３８号に記載されるような）、空気乾燥または他の形態の蒸発乾燥によって、調製され得る。
【０１５８】
乾燥粉末はまた、乾燥粉末形態の処方物成分を、混和、研磨、篩分けまたはジェットミルすることによって、調製され得る。
【０１５９】
一旦形成されると、乾燥粉末組成物は、好ましくは、製造、処理および保存の間に過度の熱または光に対して最少限しか曝露されずに、乾燥（すなわち、比較的低い湿度）条件下で維持される。
【０１６０】
（Ｃ．吸入可能な乾燥粉末処方物の特徴）
本発明の粉末は、いくつかの特徴、最も顕著には、以下のうちの１つ以上の特徴：（ｉ）保存の際にさえ維持される、一定して高い分散性、（ｉｉ）小さい空気力学的粒子サイズ（ＭＭＡＤ）、（ｉｉｉ）改善された微細な粒子用量値（すなわち、高い割合で、３．３ミクロン未満のＭＭＡＤの粒子サイズを有する粒子）によって、さらに特徴付けられ、これらは全て、肺への局所的な送達、あるいは非呼吸状態の処置において使用される場合の全身循環への吸収のいずれかのための、粉末が気道下部の組織（すなわち、肺胞）へと浸透する改善された能力に寄与する。本発明の吸入可能な粉末のこれらの物理的特徴は、以下により完全に記載され、肺および肺深部へのこのような粉末のエアロゾル化送達の効率を最大化することにおいて、重要である。
【０１６１】
本発明の乾燥粉末は、肺へ浸透するために有効なエアロゾル化可能な粒子から構成される。本発明の粒子は、約２０〜３０μｍ、または２０μｍ未満、または約１０μｍ未満、好ましくは約７．５μｍ未満、そしてより好ましくは約４μｍ未満、そして３．５μｍ未満さえもの質量中央径（ｍａｓｓ  ｍｅｄｉａｎ  ｄｉａｍｅｔｅｒ）（ＭＭＤ）を有し、そして通常は０．１μｍ〜５μｍの範囲の直径である。好ましい粉末は、約０．２〜４．０μｍのＭＭＤを有する粒子から構成される。いくつかの場合、この粉末は、ラクトースのような呼吸不能なキャリア粒子もまた含み、ここで、この呼吸不能の粒子は、代表的に、約４０ミクロンより大きいサイズである。
【０１６２】
本発明の粉末は、約１０μｍ未満の空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）のエアロゾル粒径分布によって、好ましくは約５μｍ未満、より好ましくは４．０μｍ未満、なおより好ましくは３．５μｍ未満、そして最も好ましくは３μｍ未満のＭＭＡＤを有することによって、さらに特徴付けられる。粉末の空気動力学的粒径は、特徴的には、約０．１〜１０μｍ、好ましくは約０．２〜５．０μｍのＭＭＡＤ、より好ましくは約１．０〜４．０μｍのＭＭＡＤ、そしてなおより好ましくは約１．５〜３．０μｍの範囲である。小さい空気力学的直径は、一般に、最適化された噴霧乾燥条件と賦形剤の選択および濃度との組み合わせによって、達成され得る。
【０１６３】
この粉末は、一般に、約２０重量％より低い水分含有量、通常は約１０重量％より低い水分含有量、そして好ましくは約５重量％より低い水分含有量を有する。本発明に従う好ましい粉末は、以下の重量％のうちの１つ以上のおよその％より低い水分を有する：１５％、１０％、７％、５％または３％。このような低含水固体は、梱包および保存の際に、より高い安定性を示す傾向がある。
【０１６４】
さらに、本明細書中に記載される噴霧乾燥法ならびに安定剤および賦形剤は、高度に分散性のポリマー結合体処方物を提供するのに有効である。粉末処方物について、これらの粉末の放出用量（ＥＤ）は、代表的に、３０％より高く、そして通常は４０％より高い。より好ましくは、本発明の粉末のＥＤは、５０％より高く、そしてしばしば、６０％より高い。
【０１６５】
（Ｄ．結合体組成物の投与）
本明細書中に記載されるようなポリマー−レチノイド処方物は、多数の送達デバイスのいずれかを使用して、肺に直接送達され得る。例えば、乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）（すなわち、患者の吸入される呼吸を、肺に乾燥粉末薬物を輸送するためのビヒクルとして利用する吸入デバイス）が、使用され得る。Ｐａｔｔｏｎ，Ｊ．Ｓ．ら、米国特許第５，４５８，１３５号（１９９５年１０月１７日）；Ｓｍｉｔｈ，Ａ．Ｅ．ら、米国特許第５，７４０，７９４号（１９９８年４月２１日）；およびＳｍｉｔｈ，Ａ．Ｅ．ら、米国特許第５，７８５，０４９号（１９９８年７月２８日）（これらは、本明細書中で参考として援用される）に記載されるような、Ｉｎｈａｌｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｓｙｓｔｅｍｓの粉末乾燥吸入デバイスが好ましい。この型のデバイスを使用して投与する場合、粉末医薬は、穿刺可能な蓋または他のアクセス表面を有するレセプタクル（好ましくはブリスター包装またはカートリッジ）中に含まれ、ここで、このレセプタクルは、単回投薬単位または複数回投薬単位を含み得る。乾燥粉末処方物の計量された用量で、多数のキャビティ（すなわち、単位投薬包装）を充填するための従来の方法は、例えば、Ｐａｒｋｓ，Ｄ．Ｊ．ら、国際特許公開ＷＯ  ９７／４１０３１（１９９７年１１月６日）（本明細書中で参考として援用される）に記載される。従って、別の局面において、本発明は、吸入デバイスにおいて使用するための本発明のポリマー−レチノイド結合体の単位投薬形態を包含する。
【０１６６】
乾燥粉末の肺投与のための他の乾燥粉末分散デバイスとしては、例えば、以下に記載されるデバイスが挙げられる：Ｎｅｗｅｌｌ，Ｒ．Ｅ．ら、欧州特許番号ＥＰ１２９９８５（１９８８年９月７日）；Ｈｏｄｓｏｎ，Ｐ．Ｄ．ら、欧州特許番号ＥＰ４７２５９８（１９９６年７月３日）；Ｃｏｃｏｚｚａ，Ｓ．ら、欧州特許番号ＥＰ４６７１７２（１９９４年４月６日）およびＬｌｏｙｄ，Ｌ．Ｊ．ら、米国特許第５，５２２，３８５号（１９９６年６月４日）（これらは、本明細書中で参考として援用される）。ＰＥＧ−レチノイド乾燥粉末を送達するために、Ａｓｔｒａ−Ｄｒａｃｏの「ＴＵＲＢＵＨＡＬＥＲ」のような吸入デバイスもまた、適切である。この型のデバイスは、Ｖｉｒｔａｎｅｎ，Ｒ．、米国特許第４，６６８，２１８号（１９８７年５月２６日）；Ｗｅｔｔｅｒｌｉｎ，Ｋ．ら、米国特許第４，６６７，６６８号（１９８７年５月２６日）；およびＷｅｔｔｅｒｌｉｎ，Ｋ．ら、米国特許第４，８０５，８１１号（１９８９年２月２１日）（これらは全て、本明細書中で参考として援用される）において詳細に記載される。他の適切なデバイスとしては、乾燥粉末吸入器（例えば、Ｒｏｔａｈａｌｅｒ（登録商標）（Ｇｌａｘｏ）、Ｄｉｓｃｕｓ（登録商標）（Ｇｌａｘｏ）、ＳｐｉｒｏｓＴＭ吸入器（Ｄｕｒａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）およびＳｐｉｎｈａｌｅｒ（登録商標）（Ｆｉｓｏｎｓ））が挙げられる。１回より多い治療用量の送達を可能にする、複数回用量ＤＰＩシステム（ＭＤＤＰＩ）もまた適切である。このようなデバイスは、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ、ＧｌａｘｏＷｅｌｌｃｏｍｅおよびＳｋｙｅＰｈａｒｍａから入手可能である。粉末化医薬を飛沫同伴するか、空気をキャリアスクリーンに通過させることによって、キャリアスクリーンから医薬を巻き上げるか、または混合チャンバにおいて粉末医薬と空気とを混合するかのいずれかのために、空気を提供するためにピストンの使用を用いるデバイスもまた適切であり、このデバイスのマウスピースを介して、患者へと粉末を引き続き導入する（例えば、Ｍｕｌｈａｕｓｅｒ，Ｐ．ら、米国特許第５，３８８，５７２号（１９９７年９月３０日）（本明細書中で参考として援用される）に記載される）。
【０１６７】
吸入可能なＰＥＧ−レチノイド組成物はまた、薬学的に不活性な液体噴霧剤（例えば、クロロフルオロカーボンまたはフルオロカーボン）中の薬物の溶液または懸濁物を含む、圧縮した計量した用量の吸入器（ＭＤＩ）（例えば、Ｖｅｎｔｏｌｉｎ（登録商標）計量用量吸入器）を使用して、送達され得る（Ｌａｕｂｅら、米国特許第５，３２０，０９４号（１９９４年６月１４日）およびＲｕｂｓａｍｅｎ，Ｒ．Ｍ．ら、米国特許第５，６７２，５８１号（１９９４）（両方とも、本明細書中で参考として援用される）に記載される）。ＭＤＩデバイスは、３Ｍ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ａｖｅｎｔｉｓ、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＰｌｏｕｇｈおよびＶｅｃｔｕｒａのような供給者から入手可能である。
【０１６８】
あるいは、本明細書中に記載されるＰＥＧ−レチノイドは、溶媒（例えば、水または生理食塩水）中に溶解または懸濁され得、そして噴霧によって投与され得る。エアロゾル化溶液を送達するための噴霧器としては、ＡＥＲｘＴＭ（Ａｒａｄｉｇｍ）、Ｕｌｔｒａｖｅｎｔ（登録商標）（Ｍａｌｌｉｎｋｒｏｄｔ）。Ｐａｒｉ  ＬＣ  ＰｌｕｓＴＭまたはＰａｒｉ  ＬＣ  ＳｔａｒＴＭ（Ｐａｒｉ  ＧｍｂＨ，  Ｇｅｒｍａｎｙ）、ＤｅＶｉｌｂｉｓｓ  Ｐｕｌｍｏ−ＡｉｄｅおよびＡｃｏｒｎ  ＩＩ（登録商標）（Ｍａｒｑｕｅｓｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）が挙げられる。
【０１６９】
本発明の結合体を肺に送達するために使用され得る別の型のデバイスは、例えば、Ａｒａｄｉｇｍ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎによって供給される、液体スプレーデバイスである。
【０１７０】
あるいは、電気流体力学的（ＥＨＤ）エアロゾルデバイスが、肺にレチノイド結合体を送達するために使用され得る。
【０１７１】
上記のように、本明細書中に記載されるポリマー−レチノイド結合体はまた、静脈内注射によって非経口投与され得るか、またはあまり好ましくないが筋内注射もしくは皮下注射によって非経口投与され得る。このような処方物の正確な成分は、当業者によって容易に決定され得る。非経口投与のために適切な処方物の型としては、注射準備のできた溶液、使用前に溶媒と合わされる乾燥粉末、注射準備のできた懸濁物、使用前にビヒクルと合わされる乾燥不溶性組成物、投与前の希釈のためのエマルジョンおよび液体の濃縮物。例えば、本発明のＰＥＧ−レチノイド組成物の注射可能な溶液は、水性ビヒクル（例えば、塩化ナトリウム水溶液、リンゲル溶液、デキストロース注射溶液、乳酸化リンゲル溶液など）中に溶解された組成物を含み得、そして上記のような、１種以上の薬学的に受容可能で適合性の賦形剤または添加剤を含み得る。
【０１７２】
（ＶＩＩ．有用性）
本発明のポリマー結合体は、ヒトを含む哺乳動物中の、レチノイン酸に応答する任意の状態を処置するために使用され得る。レチノイド治療に応答性の状態および本発明に従う結合体の投与によって処置もしくは緩和され得る状態としては、皮膚の状態（例えば、挫創）、前立腺癌、白血病、乳癌、慢性気管支炎、喘息、気腫および気道消化管（ａｅｒｏｄｉｇｅｓｔｉｖｅ）の癌（例えば、頭部および頚部の癌）が挙げられる。特に、本発明のポリマー結合体の吸入可能な処方物の肺投与による処置のために好ましい状態は、気腫である。
【０１７３】
肺投与アプローチは、標的組織へのレチノイド（例えば、ＡＴＲＡ）の直接的な局所送達を提供し得る。さらに、本発明の結合体は、肺に直接送達される場合、循環に迅速に吸収されるのではなく、肺組織において長期間にわたって測定可能な濃度で残留することが示されており、このことは、このアプローチの有用性をさらに実証する。
【０１７４】
一般に、処置または予防の方法は、このような処置または予防を必要とする哺乳動物に、治療的有効投薬量の上記レチノイン酸のポリマー結合体を投与する工程を包含する。任意の特定の結合体の治療的有効投薬量は、結合体ごと、患者ごとにいくらか変動し、そして患者の状態および大きさ、ポリマー結合体の負荷能力および送達経路のような要因に依存する。経口または注射のいずれかにより投与される場合のシスレチノイドの通常の患者投薬量は、約０．１μｇ〜約１０ｍｇの範囲、好ましくは約１．０μｇと約１．０ｍｇとの間、そしてより好ましくは約１００μｇと約３００μｇとの間の範囲である。肺へのシスレチノイド結合体の投与は、必要な用量を、約１／２〜約１／１００との間まで減少させ得る；従って、本発明の結合体についての適切な投薬量範囲は、送達される結合体の全体の用量ではなく、レチノイドの用量に基づいて、しかるべく計算され得る。
【０１７５】
本明細書中で参照される全ての文献、書籍、特許および他の刊行物は、その全体が本明細書中で参考として援用される。
【０１７６】
以下の実施例は、本発明を例示するが、本発明の範囲を決して限定しないことが意図される。
【実施例】
【０１７７】
（材料および方法）
レチノイン酸を、Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から得た。
【０１７８】
添付の実施例において言及される全てのＰＥＧ試薬は、Ｓｈｅａｒｗａｔｅｒ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ，ＡＬから入手可能である。
【０１７９】
全ての１ＨＮＭＲデータを、Ｂｒｕｋｅｒにより製造された３００ＭＨｚまたは４００ＭＨｚのＮＭＲ分光光度計によって得た。
【０１８０】
粒径測定（Ｈｏｒｉｂａ）：粉末の質量中央径（ＭＭＤ）を、Ｈｏｒｉｂａ  ＣＡＰＡ−７００粒径分析器（Ｈｏｒｉｂａ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  ｉｎｃ．，Ｉｒｖｉｎｅ，ＣＡ）を使用して測定した。測定は、懸濁媒体中に分散した粒子の遠心分離による沈降に基づいた。質量中央径（これは、粒子のストークス直径に基づく）を、粒子密度ならびに懸濁媒体の密度および粘度を使用して計算した。
【０１８１】
粉末の密度を、全ての粉末について１．５ｇ／ｃｍ３に設定した（この公称値は、分析した全ての粉末について使用した。これは、噴霧乾燥した粉末について代表的な範囲内である）。粒径の測定を、５ｍｌのＳｅｄｉｓｐｅｒｓｅ  Ａ−１１（Ｍｉｃｒｏｍｅｒｉｔｉｃｓ，Ｎｏｒｃｒｏｓｓ，ＧＡ）中に懸濁され、そして１０分間にわたって超音波処理によって分散された、約５〜１０ｍｇの粉末を用いて、実施した。粒径データを集める範囲を、０．４〜１０．０μｍに設定した。
【０１８２】
（空気動力学的粒径測定）
Ａｎｄｅｒｓｅｎカスケードインパクター：Ａｎｄｅｒｓｅｎカスケードインパクター（篩様の装置であり、そのサイズに従う慣性衝突によって、プレート上の粒子を捕捉する、一連のステージを備える）を使用して、空気流中のエアロゾル化粉末処方物のＭＭＡＤおよび粒径分布を決定した。これらのプレートを、試験の前後に計量し、そして各々のステージのプレート上に堆積した粉末の質量を決定した。他に示さない限り、研究を、９．０〜０．４μｍの範囲のカットオフサイズを有する８つのステージ（上から下に向かって、０から７）、および２８．３Ｌ／分の流速で操作した場合に、０．４μｍ未満の粒子を捕捉する最後のフィルタステージを有する、従来のＡｎｄｅｒｓｅｎカスケードインパクターを使用して行った。デバイス試験設定は、カスケードインパクター以外はＥＤ試験と類似しており、そしてＵＳＰ（Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｉａ）のど（ＵＳＰ  ２３，第＜６０１＞章）を、フィルタではなくデバイスのマウスピースに取り付けた。複数の分散を、代表的に、重力測定的に正確なデータを達成するために、各カスケードインパクション試行について実施した。
【０１８３】
以下の実施例は、例示的なレチノイド（シスレチノイン酸およびトランスレチノイン酸）のポリマー結合体の調製を実証する。結合体を、種々の幾何学および分子量のＰＥＧを使用して調製した。線状、フォーク状および分枝状の幾何学を有する例示的な結合体を、２ｋＤ〜２０ｋＤの範囲の全体的なＰＥＧ分子量を用いて調製した。それぞれの結合体を、ポリマーアームをレチノイド部分に繋げるエステル結合を含むように合成した。緩衝液および血漿の両方における結合体の加水分解性の結合特性を実証する加水分解データが、実施例９および１０に提供される。
【０１８４】
（実施例１）
（ｍＰＥＧ（５ｋＤａ）ＡＴＲＡエステル結合体の調製）
５ｋＤの分子量を有する線状ＰＥＧを利用する例示的なＰＥＧ−レチノイン酸結合体の合成を、以下に記載する。
【０１８５】
丸底フラスコ中で、４００ｍｇのＡＴＲＡ（１．３３ｍｍｏｌｅ，Ａｌｄｒｉｃｈ）を、６０ｍｌの無水ベンゼン中に溶解させた。この溶液に、塩化メチレン中のオキサリルクロライド（２Ｍ）３ｍｌを添加した。この溶液を、光の非存在下で、アルゴン下で２時間攪拌した。次いで、溶媒を、回転エバポレーションによって除去し、そして残渣を、減圧下でさらに乾燥させた。この乾燥残渣に、６０ｍｌの無水ベンゼン中の、３．２ｇの乾燥メトキシ−ＰＥＧ（５ｋＤａ）を添加し、その後、２００ｍｇのジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）を添加した。この溶液を、室温で一晩攪拌した。沈殿物を、濾過によって除去し、そして濾液を減圧下でエバポレートし、そして残留シロップを、８０ｍｌのエチルエーテルに添加した。得られた沈殿生成物を、濾過によって収集し、エーテルで洗浄し、そして減圧下で乾燥させた。この生成物を、水／アセトニトリル勾配を用いて溶出する、Ｃ４カラム（Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ  １５Ｕｍ  １００  Ａ，２５×ｌ００ｍｍ）での調製的ＨＰＬＣによって、さらに精製した。１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．５（ｂｒ  ｍ，ＰＥＧ），４．１５（ｔ，ＰＥＧＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＯ−ＡＴＲＡ），５．８〜７．１（Ｍ，二重結合中のＨ）１．０１（ｓ，２ＣＨ３），１．６８（ｓ，ＣＨ３），１．９９（ｓ，ＣＨ３），２．３０（ｓ，ＣＨ３）。
【０１８６】
（実施例２）
（ｍＰＥＧ（２０ｋＤａ）ＡＴＲＡエステル結合体の調製）
２０ｋＤの分子量を有する線状ＰＥＧを利用する例示的な結合体の合成を、以下に記載する。
【０１８７】
丸底フラスコ中で、３００ｍｇのＡＴＲＡ（１ｍｍｏｌｅ，Ａｌｄｒｉｃｈ）を、２０ｍｌの無水ベンゼン中に溶解させた。この溶液に、塩化メチレン中のオキサリルクロライド（２Ｍ）２．２ｍｌを添加した。この溶液を、光の非存在下で２時間攪拌した。次いで、溶媒を、回転エバポレーションによって除去し、そして残渣を、減圧下でさらに乾燥させた。この乾燥残渣に、無水塩化メチレンおよびベンゼンの混合物（１／１）１２０ｍｌ中の、１０ｇの乾燥ｍＰＥＧ（２０ｋＤａ）を添加し、その後、１５０ｍｇのジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）を添加した。この溶液を、室温で一晩攪拌した。沈殿物を、濾過によって除去し、そして濾液を減圧下でエバポレートし、そして残留シロップを、３００ｍｌのエチルエーテルに添加した。得られた沈殿生成物を、濾過によって収集し、エーテルで洗浄し、そして減圧下で乾燥させた。この生成物を、水／アセトニトリル勾配を用いて溶出する、Ｃ４カラム（Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ  １５Ｕｍ  １００  Ａ，２５×１００ｍｍ）での調製的ＨＰＬＣによって、さらに精製した。１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．５（ｂｒ  ｍ，ＰＥＧ），４．１５（ｔ，ＰＥＧＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＯ−ＡＴＲＡ），５．８〜７．１（Ｍ，二重結合中のＨ）１．０１（ｓ，２ＣＨ３），１．６８（ｓ，ＣＨ３），１．９９（ｓ，ＣＨ３），２．３０（ｓ，ＣＨ３）。
【０１８８】
（実施例３）
（ｍＰＥＧ（２ｋＤａ）ＡＴＲＡエステル結合体の調製）
２ｋＤの分子量を有する線状ＰＥＧを利用する例示的な結合体の合成を、以下に記載する。
【０１８９】
丸底フラスコ中で、２００ｍｇのＡＴＲＡ（０．６６ｍｍｏｌｅ，Ａｌｄｒｉｃｈ）を、２０ｍｌの無水ベンゼン中に溶解させた。この溶液に、塩化メチレン中のオキサリルクロライド（２Ｍ）１．５ｍｌを添加した。この溶液を、光の非存在下で、アルゴン下で２時間攪拌した。次いで、溶媒を、回転エバポレーションによって除去し、そして残渣を、減圧下でさらに乾燥させた。この乾燥残渣に、無水ベンゼン２０ｍｌ中の、０．６４ｇの乾燥ｍＰＥＧ（ＰＥＧのモノメチルエーテル、メトキシ−ＰＥＧ−ＯＨ）２ｋＤａを添加し、その後、１２０ｍｇのジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）を添加した。この溶液を、室温で一晩攪拌した。沈殿物を、濾過によって除去し、そして濾液を減圧下でエバポレートし、そして残留シロップを、６０ｍｌのエチルエーテルに添加した。沈殿生成物を、濾過によって収集し、エーテルで洗浄し、そして減圧下で乾燥させた。１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．５（ｂｒ  ｍ，ＰＥＧ），４．１５（ｔ，ＰＥＧＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＯ−ＡＴＲＡ），５．８〜７．１（Ｍ，二重結合中のＨ）１．０１（ｓ，２ＣＨ３），１．６８（ｓ，ＣＨ３），１．９９（ｓ，ＣＨ３），２．３０（ｓ，ＣＨ３）。
【０１９０】
（実施例４）
（ｍＰＥＧ（２０ｋＤａ）ジ−ＡＴＲＡエステル結合体（ＡＴＲＡ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＰＥＧ  ２０ｋＤ−Ｏ−（Ｏ）Ｃ−ＡＴＲＡ）の調製）
２０ｋＤの分子量を有するホモ二官能性線状ＰＥＧ反応物（ＰＥＧジオール）を利用する、例示的結合体の合成を、以下に示す。得られた結合体を、ダンベル状構造有するとして特徴付ける。
【０１９１】
丸底フラスコ中で、３００ｍｇのＡＴＲＡ（１ｍｍｏｌｅ，Ａｌｄｒｉｃｈ）を、２０ｍｌの無水ベンゼン中に溶解させた。この溶液に、塩化メチレン中のオキサリルクロライド（２Ｍ）２．２ｍｌを添加した。この溶液を、光の非存在下で、アルゴン下で２時間攪拌した。次いで、溶媒を、回転エバポレーションによって除去し、そして残渣を、減圧下でさらに乾燥させた。この乾燥残渣に、無水ベンゼン２０ｍｌ中の、５ｇの乾燥ＰＥＧジオール（２０ｋＤａ）を添加し、その後、１５０ｍｇのジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）を添加した。この溶液を、室温で一晩攪拌した。沈殿物を、濾過によって除去し、そして濾液を減圧下でエバポレートし、そして残留シロップを、１２０ｍｌのエチルエーテルに添加した。得られた沈殿生成物を、濾過によって収集し、エーテルで洗浄し、そして減圧下で乾燥させた。１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．５（ｂｒ  ｍ，ＰＥＧ），４．１５（ｔ，ＰＥＧＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＯ−ＡＴＲＡ），５．８〜７．１（Ｍ，二重結合中のＨ）１．０１（ｓ，２ＣＨ３），１．６８（ｓ，ＣＨ３），１．９９（ｓ，ＣＨ３），２．３０（ｓ，ＣＨ３）。
【０１９２】
（実施例５）
（４−アーム−ＰＥＧ  ２０ｋＤａ  ＡＴＲＡエステル結合体（Ｃ−［ＣＨ２Ｏ−ＰＥＧ−Ｏ（Ｏ）Ｃ−ＡＴＲＡ］４）の調製）
約５ｋＤのおおよその分子量を各々が有し、そして中心のペンタエリスリトールコアから延びる４つのＰＥＧアームによって特徴付けられる、例示的な分枝結合体またはマルチアームの結合体の合成を、以下に提供する。従って、この結合体の全体的構造は、各々がエステル結合によって末端に結合されたレチノイン酸を有し、そして約２０ｋＤの全体的分子量を有する、４つのＰＥＧアームが延びる中心コアによって特徴付けられる。
【０１９３】
丸底フラスコ中で、２００ｍｇのＡＴＲＡ（０．６６ｍｍｏｌｅ，Ａｌｄｒｉｃｈ）を、２０ｍｌの無水ベンゼン中に溶解させた。この溶液に、塩化メチレン中のオキサリルクロライド（２Ｍ）２．２ｍｌを添加した。この溶液を、光の非存在下で、アルゴン下で２時間攪拌した。次いで、溶媒を、回転エバポレーションによって除去し、そして残渣を、減圧下でさらに乾燥させた。この乾燥残渣に、無水ベンゼン２０ｍｌ中の、１．６ｇの乾燥４−アームＰＥＧ  ２０ｋＤａ，Ｃ−［ＣＨ２Ｏ−ＰＥＧ−ＯＨ］４（Ｓｈｅａｒｗａｔｅｒ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  ２００１，Ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  Ｇｌｙｃｏｌ  ａｎｄ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，頁５）を添加し、その後、１２０ｍｇのジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）を添加した。この溶液を、室温で一晩攪拌した。沈殿物を、濾過によって除去し、そして濾液を減圧下でエバポレートし、そして残留シロップを、６０ｍｌのエチルエーテルに添加した。沈殿生成物を、濾過によって収集し、エーテルで洗浄し、そして減圧下で乾燥させた。１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．５（ｂｒ  ｍ，ＰＥＧ），４．１５（ｔ，ＰＥＧＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＯ−ＡＴＲＡ），５．８〜７．１（Ｍ，二重結合中のＨ）１．０１（ｓ，２ＣＨ３），１．６８（ｓ，ＣＨ３），１．９９（ｓ，ＣＨ３），２．３０（ｓ，ＣＨ３）。
【０１９４】
（実施例６）
（ベンジルオキシＰＥＧ（５ｋＤａ）ジ−ＡＴＲＡエステル結合体の調製）
５ｋＤの分子量を有し、そしてベンジルオキシ基によって末端キャップされた線状ＰＥＧを利用する、例示的な結合体の合成を、以下に記載する。
【０１９５】
丸底フラスコ中で、５０ｍｇのＡＴＲＡ（０．１６６ｍｍｏｌｅ，Ａｌｄｒｉｃｈ）、０．７ｇのベンジルオキシ−ＰＥＧ−ＯＨ  ５  ｋＤａ、４０ｍｇのＤＣＣ、３０ｍｇのＨＯＢＴおよび１０ｍｇのＤＭＡＰを、１０ｍｌの無水ベンゼン中に溶解させた。この溶液を、光の非存在下で、アルゴン下で室温にて一晩攪拌した。次いで、溶媒を、回転エバポレーションによって除去し、そして残渣を、１０ｍｌの１，４−ジオキサン中に部分的に溶解させた。不溶性物質を、濾過によって除去し、そして溶媒を減圧下で部分的に除去した。得られたシロップを、６０ｍｌのエチルエーテルに添加した。得られた沈殿物を、濾過によって収集し、エーテルで洗浄し、そして減圧下で乾燥させた。１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．５（ｂｒ  ｍ，ＰＥＧ），４．１５（ｔ，ＰＥＧＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＯ−ＡＴＲＡ），４．４８（ｓ，Ｃ６Ｈ５−ＣＨ２−），７．３２（ｍ，Ｃ６Ｈ５−ＣＨ２−），５．８〜７．１（Ｍ，二重結合中のＨ）１．０１（ｓ，２ＣＨ３）１．０１（ｓ，２ＣＨ３），１．６８（ｓ，ＣＨ３），１．９９（ｓ，ＣＨ３），２．３０（ｓ，ＣＨ３）。
【０１９６】
（実施例７：４−アーム−ＰＥＧ  １０ｋＤａ  ＡＴＲＡエステル結合体Ｃ−［ＣＨ２Ｏ−ＰＥＧ−Ｏ（Ｏ）Ｃ−ＡＴＲＡ］４の調製）
４つのＰＥＧアーム（各々が、約２．５ｋＤのおよその分子量を有し、中心ペンタエリスリトールコアから延びる）によって特徴付けられる例示的な分枝型またはマルチアーム型の結合体の合成を、以下に記載する。その結合体の全体的な構造は、中心コアによって特徴付けられ、中心コアから４つのＰＥＧアームをのばし、各々は、レチノイン酸が、エステル結合によって末端に連結され、約１０ｋＤの全体的な分子量を有する。
【０１９７】
丸底フラスコ中において、２００ｍｇのＡＴＲＡ（０．６６ｍｍｏｌｅ、Ａｌｄｒｉｃｈ）を、２０ｍｌの無水ベンゼン中に溶解させた。この溶液に、１００μｌの塩化オキサリルを添加した。この溶液を遮光してアルゴン下で２時間攪拌した。次いで、その溶媒を、ロータリーエバポレーターによって除去し、残渣を、減圧下でさらに乾燥させた。この乾燥残渣に、２０ｍｌの無水ベンゼン中の１ｇの乾燥４−アームＰＥＧ  １０ｋＤａ、Ｃ−［ＣＨ２Ｏ−ＰＥＧ−ＯＨ］４、および１００ｍｇのジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）を添加した。この溶液を室温にて一晩攪拌した。沈澱生成物を、濾過によって取り出し、溶媒を減圧下で乾燥させ、そのシロップ状物質を、６０ｍｌのエチルエーテルに添加した。その沈殿物を、濾過により回収し、エーテルで洗浄し、減圧下で乾燥させた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．５（ｂｒ  ｍ，ＰＥＧ），４．１５（ｔ，ＰＥＧＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＯ−ＡＴＲＡ），５．８−７．１（Ｍ，Ｈ（二重結合））１．０１（ｓ，２ＣＨ３），１．６８（ｓ，ＣＨ３），１．９９（ｓ，ＣＨ３），２．３０（ｓ，ＣＨ３）。
【０１９８】
（実施例８：フォーク状ＰＥＧ  ５ｋＤａ−ＡＴＲＡエステル結合体の調製）
【０１９９】
【化２３】
2005507934.tif 000018
【０２００】
この実施例において、中心ＰＥＧ鎖を有し（この鎖から２つのＡＴＲＡ部分を伸ばす）、ポリマーまたはポリマーリンカーの加水分解的に安定な分枝点（すなわち、ＣＨ基）から延びるフォーク状ポリマー結合体の合成を、記載する。ＡＴＲＡは、加水分解可能なエステル結合を介してフォーク状ポリマー構造に結合される。
【０２０１】
丸底フラスコ中において、３００ｍｇの全てトランスのレチノイン酸（１ｍｍｏｌｅ、Ａｌｄｒｉｃｈ）を、２０ｍｌの無水ベンゼン中に溶解した。得られた溶液に、塩化メチレン中の２．２ｍｌの塩化オキサリル（２Ｍ）を０℃にて添加した。その溶液を遮光してアルゴン下で２時間攪拌した。次いで、その溶媒を、ロータリーエバポレーターによって除去し、残渣を、減圧下でさらに乾燥させた。この乾燥残渣に、２０ｍｌの無水ベンゼン中の１．５ｇの乾燥２−ｍＰＥＧｙｌオキシ−１，３−プロパンジオール（５ｋＤａ）、続いて１５０ｍｇのジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）を添加した。この溶液を室温にて一晩攪拌した。沈澱生成物を、濾過によって取り出し、溶媒を減圧下で乾燥させ、その残渣のシロップ状物質を、１２０ｍｌのエチルエーテルに添加した。その沈殿物を、濾過により回収し、エーテルで洗浄し、減圧下で乾燥させた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．５（ｂｒ  ｍ，ＰＥＧ），４．１５（ｄｘｄ，ＭｅＯ−ＰＥＧＯＣＨ（ＣＨ２ＯＣＯ−ＡＴＲＡ）２，５．８−７．１（Ｍ，Ｈ（二重結合））１．０１（ｓ，２ＣＨ３），１．６８（ｓ，ＣＨ３），１．９９（ｓ，ＣＨ３），２．３０（ｓ，ＣＨ３）。
【０２０２】
（実施例９：緩衝液中でのｍＰＥＧ  ５ｋＤａ  ＡＴＲＡエステル結合体のエステルの加水分解速度）
本発明に従う例示的ＰＥＧ−ＡＴＲＡ結合体の緩衝液中での加水分解速度を、２つの異なる温度（室温および体温）にて決定した。
【０２０３】
ＭＰＥＧ  ５ｋＤａ  ＡＴＲＡ（実施例１を参照のこと）を、０．５ｗｔ％の濃度で、２３℃および３７℃の温度にてリン酸緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ７．０）中で溶解した。定期的な間隔で、アリコートを、分析的逆相ＨＰＬＣによる分析のために取り出した。加水分解半減期を、擬一次速度論を使用して得た。図１に示されるように、２３℃での加水分解の半減期（ｔ１／２）は、約３５００時間であったのに対して、３７℃での半減期は、約８７７時間であった。これらの結果は、親レチノイド化合物を放出するこれらの特定のエステル結合結合体の加水分解可能な性質を示す。従って、これらの結合体は、レチノイドの水溶性プロドラッグ形態として特徴付けられ得る。
【０２０４】
（実施例１０：ラット血清中でのｍＰＥＧ  ５ｋＤａ−ＡＴＲＡエステル結合体の加水分解研究）
上記実施例９からの緩衝液データを補充するために、同じ例示的なＰＥＧ−ＡＴＲＡ結合体のラット血清中での加水分解速度を、３７℃にて決定して、このような結合体が身体内で遭遇する条件を厳密にモデル化した条件下で、加水分解速度の予測を提供した。
【０２０５】
ｍＰＥＧ  ５ｋＤａ−ＡＴＲＡ（８０ｍｇ）（実施例１を参照のこと）を、５ｍｌのラット血清中に溶解し、得られた溶液を、３７℃にてインキュベートした。定期的な間隔で、０．７ｍｌのＡＴＲＡ／血清混合物を抜き取り、２ｍｌのジクロロメタンで２回抽出した。このジクロロメタン抽出物を、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレートした。水をその乾燥残渣に添加し、得られた混合物を、濾過した。濾液を、逆相ＨＰＬＣ（Ｂｅｔａｓｉｌ  Ｃ１８、１００×２）によってＰＥＧ  ＡＴＲＡおよびＰＥＧについて分析した。図２に示すように、加水分解の半減期（ｔ１／２）は、約２．５時間であった。
【０２０６】
繰り返すと、これらの結果は、本発明に従うエステル結合体の加水分解可能な性質、および経時的に、このような結合体がそれ自体肺投与に役立つことをさらに支持する。このような結合体は、肺に存在して、親レチノイドを放出する場合、長期にわたって加水分解する可能性がある。このようなプロフィールは、気道の疾患の局所的な処置を介する、吸入治療には特に魅力的である。
【０２０７】
（実施例１１：雄性ラットにおける気管内滴注後の血漿および肺組織におけるＡＴＲＡおよびｍＰＥＧ（５ｋＤ）ＡＴＲＡエステル結合体の回収）
ラットにおける以下の研究を行って、雄性ラットの気管内に滴注した後に、非ＰＥＧ化全てトランスのレチノイン酸（ＡＴＲＡコントロール）  対  ＰＥＧ化全てトランスのレチノイン酸ｍＰＥＧ（５ｋＤ）ＡＴＲＡエステル結合体の血漿濃度および肺組織濃度を決定した。
【０２０８】
動物：  Ｈｉｌｌｔｏｐ  Ｌａｂ  Ａｎｉｍａｌｓ  Ｉｎｃ（Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ  １８３，Ｓｃｏｔｔｄａｌｅ，ＰＡ  １５６８３）から、事前カニューレ挿入（頸静脈カテーテル［ＪＶＣ］）Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラット（３５０〜３７５ｇ）を得た。試験系には、６つの試験群の各々につき、無作為に選択した２匹の雄性ラットを含めた。
【０２０９】
ＡＴＲＡおよびＰＥＧ−ＡＴＲＡサンプル：  非ＰＥＧ化全てトランスのレチノイン酸を、５０重量％  ＡＴＲＡ（コントロール物質）を含有する粉末として得た。この粉末を、−２０℃で保存し、遮光した。メトキシＰＥＧ（５ｋＤ）ＡＴＲＡエステル結合体（試験物質）を、５重量％  ＡＴＲＡを含む粉末を提供し、これを−２０℃で保存し、遮光した。
【０２１０】
ストック溶液：  投薬用のストック溶液を、以下のように調製した。
【０２１１】
ＡＴＲＡストック溶液／コントロール（２．０ｍｇ／ｍｌストック）：  ３．０ｍＬのＰＢＳを、６．０ｍｇのＡＴＲＡ粉末に添加した。この溶液を、超音波処理およびボルテックスで攪拌した後に、懸濁液としてラットに投薬した。
【０２１２】
メトキシＰＥＧ（５ｋＤ）ＡＴＲＡエステル結合体（２０．０ｍｇ／ｍＬストック）：  ３．０ｍＬのＰＢＳを、６０．０ｍｇのメトキシＰＥＧ（５ｋＤ）ＡＴＲＡエステル結合体粉末に添加した。
【０２１３】
気管内滴注：  コントロール物質および試験物質の投与を、黄色光の下での気管内滴注によって行った。プレキシグラス麻酔チャンバ中で、酸素と混合した３．０〜５．０％  イソフルランの吸入を使用して、ラットに軽く麻酔をかけた。１ｍＬのシリンジを取り付けた胃管針をラットの口へ挿入して、気管を下って竜骨のすぐ上まで挿入することにより、用量を投与した。この方法を利用して、その用量を肺に投与し、次いで、胃管針を、取り出した。動物をケージの中に戻し入れ、投薬手順の後に、動物を麻酔からさまさせた。ラットは、以下の用量を受けた：
【０２１４】
【表１】
2005507934.tif 000019
【０２１５】
ラットに、３５４μｇ（１．２μｍｏｌｅ）のＲＡまたはｍＰＥＧ５Ｋ−ＡＴＲＡのＡＴＲＡ当量３００μｇ（１μｍｏｌｅ）をＩＴで投薬した。
【０２１６】
採血：  約３．０ｍｌの投薬前血液サンプルを、頸静脈カテーテルからヘパリン添加血漿チューブに回収した。各動物について指定した屠殺時間にて、外科手術レベルの麻酔を、酸素と混合した３．０〜５．０％  イソフルランの吸入を使用して誘導した。一旦外科手術レベルの麻酔が達成されると、末端血流を回収した。血漿サンプルを、太陽光および白色光から保護し、−２０℃で凍結保存した。
【０２１７】
肺採取：  末端血流を採取した後に、横隔膜を穿刺した。ラットの気管を露出し、肋骨を切り離して、肺に近づけるようにした。心臓および肺をひとかたまりとして取り出した。一旦肺を切り出した後、心臓およびなお残っているいずれの結合組織も、除去した。肺を、太陽光および白色光から保護し、アルミニウムホイルで包み、液体窒素を用いて急速凍結し、−８０℃で保存した。
【０２１８】
ＡＴＲＡおよびＰＥＧ−ＡＴＲＡを、最初にラット肺を秤量し、ラット肺を黄褐色のバイアルに移し、小片に肺を切断することによって、ラット肺全体から抽出した。次いで、ＨＰＬＣ等級の水を、切断した肺組織に添加し、サンプルを、氷浴上に置き、次いで、組織を、ホモジナイズおよび超音波処理した。得られたサンプルを、遠心管に移し、これに、エタノールを添加し、そのサンプルを約１分間ボルテックスで攪拌した。続いて、２〜８℃、３０分間、１４，０００ＲＰＭにて遠心分離した。次いで、そのサンプルをＨＰＬＣによって分析した。
【０２１９】
サンプル分析：  血漿サンプルおよび肺組織サンプルを、肺組織に関しては、逆相高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）手順によって、および血漿サンプルについては、液体クロマトグラフィー直列質量分析（ＬＣ−ＭＳ−ＭＳ）技術によって、全てトランスのレチノイン酸濃度について分析した。ＨＰＬＣ分析を、Ｗａｔｅｒｓ  ２６９０  ＨＰＬＣ機器およびＶｙｄａｃ  Ｃ１８  ４．６×２５０ｍｍカラムを使用して行った。
【０２２０】
水に溶解したＰＥＧ−ＡＴＲＡの種々の既知の濃度の標準溶液およびエタノールに溶解したＡＴＲＡを調製し、上記のホモジナイズしたラット肺調製物から調製した肺マトリクスサンプルを形成するために利用した。分析用の肺マトリクスサンプルを調製するために、上記のラット肺全体のホモジナイズサンプルに、既知量の上記標準溶液を添加した。サンプルをアッセイして、ＡＴＲＡおよびＰＥＧ−ＡＴＲＡ両方のＩＴ投与後の種々の時点での、肺組織中のレチノイド含量の指標を提供した。
【０２２１】
結果（図３にグラフにまとめた）により、ＰＥＧ  ＡＴＲＡに対応する、持続してかつ相応に高いレベルのＡＴＲＡが、肺への送達後に肺組織中で局所的に達成され、レチノイドの全身的な高レベルが、最小化されることが示された。より具体的には、ＨＰＬＣデータは、ＰＥＧ  ＡＴＲＡが、投与して少なくとも２時間後までに、７０％を超える用量が肺で維持されることを示唆する。ＡＴＲＡ（ＰＥＧ化されていない）はまた、肺の中に保持された（図３）が、そのＰＥＧ化対応物より程度が低かった。
【０２２２】
１時間の時点でのラット血漿の分析は、非ＰＥＧ化−ＡＴＲＡ処方物に関しては血漿レチノイン酸（ＡＴＲＡ）濃度は、約１４５ｎｇ／ｍｌであるのに対し、ＰＥＧ化−ＡＴＲＡ処方物に関しては、血漿レチノイン酸濃度は、約６５ｎｇ／ｍｌであることを示した。これらの結果は、図３に示される肺組織濃度とともに、ポリマー改変レチノイド（例えば、ＰＥＧ化ＡＴＲＡ）が、ポリマー改変していない対応物より有意に高い濃度でより長い期間肺に留まることを示す。
【０２２３】
（実施例１２：１３−シス−レチノイン酸（１３−シス−ＲＡ）のエステル結合を介したｍＰＥＧ（５ｋＤａ）結合体の調製）
丸底フラスコ中において、１５６ｍｇの１３−シス−レチノイン酸（１．３３ｍｍｏｌｅ、Ａｌｄｒｉｃｈ）を、２５ｍｌの無水ベンゼン中に溶解した。この溶液に、１．９ｍｌの塩化メチレン中の塩化オキサリル（２Ｍ）を添加した。その溶液を、遮光してアルゴン下で２時間攪拌した。次いで、その溶媒をロータリーエバポレーターによって４０℃にて除去し、その残渣をさらに減圧下で乾燥させた。その乾燥残渣に、２５ｍｌの無水ベンゼン中の２ｇの乾燥メトキシＰＥＧ−ＯＨ（５ｋＤａ）、続いて、１２５ｍｇのジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）を添加した。その溶液を室温で一晩攪拌した。沈殿物を濾過により除去し、濾液を減圧下でエバポレートし、その残渣のシロップ状物質を、５０ｍｌのエチルエーテルに添加した。得られた沈殿物を、濾過により回収し、エーテルで洗浄し、減圧下で乾燥させた。収量：１．９９ｇ。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．５（ｂｒ  ｍ，ＰＥＧ），４．１５（ｔ，ＰＥＧＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＯ−１３−シス−ＲＡ），５．８−７．１（Ｍ，Ｈ（二重結合）），１．０２（ｓ，２ＣＨ３），１．６９（ｓ，ＣＨ３），１．９９（ｓ，ＣＨ３）。
【０２２４】
（実施例１３：ＡＴＲＡの噴霧乾燥）
以下の実験を行って、噴霧乾燥させたレチノイン酸処方物の特徴を調査した。
【０２２５】
全てトランスのレチノイン酸（２．９９７ｇ）を、２５５ｍＬのエタノール中に溶解して、微細な黄色懸濁液を形成した（全てのＡＴＲＡが溶解したわけではない）。次いで、これを、Ｂｕｃｃｉスプレードライヤーを用いて、供給ガスとして窒素ガスを用い、９８℃の入り口温度および７１℃の出口温度で操作して、噴霧乾燥させた。噴霧乾燥粉末を、約６５％の収率にて回収した。しかし、薄く着色したかなりの量のレチノイン酸が、供給溶液を噴霧乾燥する間に、おそらく、噴霧乾燥プロセスの間の化合物の昇華に起因して、スプレードライヤー装置全体に蓄積した。
【０２２６】
レチノイド、および特にＡＴＲＡの低い融解温度および昇華温度によって、従来の噴霧乾燥条件を使用すると、非改変化合物の噴霧乾燥がいくらか問題になる。
【０２２７】
（実施例１４：吸入に適切な噴霧乾燥ＰＥＧ−レチノイン酸粉末）
例示的なＰＥＧ−レチノイド結合体、ｍＰＥＧ（５ｋＤ）ＡＴＲＡエステル結合体を、吸入用の乾燥粉末として処方した。特定の乾燥粉末処方物のために、トリロイシンを、例示的な賦形剤として使用して、エアロゾル特性および安定性を増強した。
【０２２８】
吸入可能な乾燥粉末処方物を、以下のように調製した：１００ｍｇの精製ｍＰＥＧ５Ｋ−ＡＴＲＡエステル結合体および４００ｍｇのトリロイシン（Ｂａｃｈｅｍ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ  Ｉｎｃ，ＵＳＡ  Ｔｏｒｒａｎｃｅ，ＣＡ）を、２００ｍＬのＨＰＬＣ等級の水に溶解した。得られた溶液は、８０固体重量％のトリロイシン、２０固体重量％のｍＰＥＧ５Ｋ−ＡＴＲＡを含み、０．２５％の総固体濃度であった。
【０２２９】
次いでこの溶液を、約３〜５ｍＬ／分の供給速度、入り口温度６９℃、出口温度４０℃、および−１００ｍｂａｒの減圧にて、Ｂｕｃｈｉ  １９０スプレードライヤーを用いて噴霧乾燥した。ＰＥＧ−ＡＴＲＡ結合体の低い融解温度に起因して、稀な低い出口温度を使用した。
【０２３０】
噴霧乾燥収率は、２９％であり、噴霧乾燥粉末は、黄色であり、自由に流動した。粒子の走査型電子顕微鏡写真（ＳＥＭ）により、約２μｍサイズの粒子のしわになった形態が示された。示差走査熱量計により測定された粉末の融解温度は、２００℃であった。ｍＰＥＧ５Ｋ−ＡＴＲＡエステル結合体の融解点は、約５３℃であった。
【０２３１】
粉末についてのエアロゾルデータを決定した。
【０２３２】
【表２】
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【０２３３】
（ＦＰＭは、微細な粒子塊を示し、これは、規定のサイズ（例えば、３．３ミクロン）より小さな乾燥粉末（または処方物に依存して、液滴）の重量である）
２０重量％のトリロイシンおよび８０重量％のｍＰＥＧ５Ｋ−ＡＴＲＡエステル結合体から構成される噴霧乾燥処方物を、同様に調製した。噴霧乾燥粉末は、以下の特性を有した：ＥＤ  ２７％、ＭＭＡＤ  ７．０μｍ、ＦＰＭ＜３．３μｍ  ３％。示差走査熱量計により測定されたその粉末の融解点は、約５３℃であった。
【０２３４】
（実施例１５：吸入に適した噴霧乾燥ＰＥＧ−レチノイン酸粉末）
例示的なＰＥＧ−レチノイド結合体、ｍＰＥＧ（５ｋＤ）ＡＴＲＡエスエル結合体を、吸入用乾燥粉末として、別の様式で処方した。
【０２３５】
６０％  ＰＥＧ−ＲＡ／３７％  ＤＳＰＣ／３％  ＣａＣｌ２から構成されるＰＥＧ−ＡＴＲＡ処方物を、以下の通りに調製した。１８３ｍｇのＤＳＰＣおよび１７ｍｇの塩化カルシウムを、２２．９ｇの熱ＤＩ水（＞７０℃）に添加した。ＤＳＰＣおよびＣａＣｌ２を、ホモジナイザー（１０，０００ｒｐｍにて５分間操作）を用いて熱ＤＩ水中に分散させた。次いで、１０．９ｇのＰＦＯＢ（ペルフルオロオクチルブロミド）を、その混合物に添加し、その混合物を、混合速度１２，０００ｒｐｍにて５分間、さらに混合した。そのエマルジョンを、１８，０００ｐｓｉにてさらに数回ホモジナイザーを通過させることにより、さらにプロセスした。３００ｍｇのｍＰＥＧ５Ｋ−ＡＴＲＡ（実施例１）を、そのエマルジョンに添加した。そのエマルジョンを、Ｂｕｃｈｉ  Ｂ−１９１スプレードライヤーを用いて、供給速度２．０ｍＬ／分、入り口温度８５℃、出口温度６６℃、および減圧−２９ｍｂａｒにて、噴霧乾燥させた。
【０２３６】
噴霧乾燥収率は、１７％であった。得られた噴霧乾燥粉末組成物は、黄色であり、自由に流動した。走査型電子顕微鏡写真ＳＥＭにより、いくらか非球形の予測されたよりも見た目があまり多孔性でない粒子があることが明らかになった。
【０２３７】
得られた粉末のエアロゾルデータを、生成した。
【０２３８】
【表３】
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【０２３９】
上記の実施例、実施例１５および１６はともに、エアロゾル特性（例えば、分散性および空気力学的直径）（この特性により、肺への送達に特に十分に適したものになるまたは有利なものになる）を有するＰＥＧ化レチノイドの乾燥粉末処方物の調製を示す。
【０２４０】
前述の説明および添付の図面に示される教示の利点を有する、本発明の多くの改変および他の実施形態が、本発明が属する分野の当業者に想起される。従って、本発明が、開示される特定の実施形態に限定されるのではなく、改変および他の実施形態が、添付の特許請求の範囲内に含まれることが意図されることが、理解されるべきである。本明細書中で特定の用語が使用されてきたが、それらは、包括的かつ説明的な意味においてのみ使用され、限定目的で使用されるのではない。
【図面の簡単な説明】
【０２４１】
【図１】図１は、緩衝液中のレチノイン酸の代表的なポリマー結合体の加水分解速度を図示する。この結合体は、レチノイド部分をポリマーにカップリングするエステル結合を含む。この加水分解研究は、実施例９において記載されている。
【図２】図２は、ラット血清中のレチノイン酸の代表的なポリマー結合体の加水分解速度を図示する。この結合体は、レチノイド部分をポリマーにカップリングするエステル結合を含む。この加水分解研究は、実施例１０において記載されている。
【図３】図３は、実施例１１に記載の気管支内投与後のラット肺における、ＡＴＲＡおよびＰＥＧ−５ｋＤ−ＡＴＲＡエステル結合体の濃度を実証する。
【図１】
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【図３】
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【図２】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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