(57)【要約】【課題】腫瘍の発病を処置、予防及び／または遅延させるための方法及び組成物を提供すること。【解決手段】抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬を個体に投与する腫瘍の発病を処置、予防または遅延させる方法。抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬を個体に投与する腫瘍の重量または容量を低減する方法。組成物は、抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬から成る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬を個体に投与することを特徴とする腫瘍の臨床的発病を処置、予防または遅延させる方法。
【請求項２】
該腫瘍が、悪性腫瘍である請求項１記載の方法。
【請求項３】
該悪性腫瘍が、大腸癌、乳癌、前立腺癌またはその組み合わせから成る請求項２記載の方法。
【請求項４】
該腫瘍が、良性腫瘍である請求項１記載の方法。
【請求項５】
該良性腫瘍が、髄膜腫である請求項４記載の方法。
【請求項６】
該抗腫瘍剤が、カンプトテシンまたはその薬学的に容認できる塩もしくはエステルから成る請求項１記載の方法。
【請求項７】
該抗腫瘍剤が、イリノテカンまたはその薬学的に容認できる塩もしくはエステルから成る請求項１記載の方法。
【請求項８】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、ヒト成長ホルモンから成る請求項１記載の方法。
【請求項９】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、組換え型ヒト成長ホルモンまたは組換え型ヒト成長ホルモンの変異体から成る請求項１記載の方法。
【請求項１０】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、Ｂ２０３６から成る請求項９記載の方法。
【請求項１１】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、ＰＥＧ修飾成長ホルモンから成る請求項１記載の方法。
【請求項１２】
イリノテカン塩酸塩またはその薬学的に容認できる塩もしくはエステル、及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）修飾ヒト成長ホルモンを個体に投与することから成り、該ＰＥＧ修飾ヒト成長ホルモンが、約４から約５個の共有結合ＰＥＧ分子を含有し、かつ各ＰＥＧ分子が約５，０００Ｄａの平均分子量を有する請求項１記載の方法。
【請求項１３】
抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬から成ることを特徴とする組成物。
【請求項１４】
該抗腫瘍剤が、カンプトテシンまたはその薬学的に容認できる塩もしくはエステルから成る請求項１３記載の組成物。
【請求項１５】
該抗腫瘍剤が、イリノテカンまたはその薬学的に容認できる塩もしくはエステルから成る請求項１３記載の組成物。
【請求項１６】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、ヒト成長ホルモンから成る請求項１３記載の組成物。
【請求項１７】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、組換え型ヒト成長ホルモンまたは組換え型ヒト成長ホルモンの変異体から成る請求項１３記載の組成物。
【請求項１８】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、Ｂ２０３６から成る請求項１７記載の組成物。
【請求項１９】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、ＰＥＧ修飾成長ホルモンから成る請求項１３記載の組成物。
【請求項２０】
抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬を個体に投与することを特徴とする腫瘍の重量または容量を低減する方法。
【請求項２１】
該腫瘍が、悪性腫瘍である請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
該悪性腫瘍が、大腸癌、乳癌、前立腺癌またはその組み合わせから成る請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
該腫瘍が、良性腫瘍である請求項２０記載の方法。
【請求項２４】
該良性腫瘍が、髄膜腫である請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
該抗腫瘍剤が、カンプトテシンまたはその薬学的に容認できる塩もしくはエステルから成る請求項２０記載の方法。
【請求項２６】
該抗腫瘍剤が、イリノテカンまたはその薬学的に容認できる塩もしくはエステルから成る請求項２０記載の方法。
【請求項２７】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、ヒト成長ホルモンから成る請求項２０記載の方法。
【請求項２８】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、組換え型ヒト成長ホルモンまたは組換え型ヒト成長ホルモンの変異体から成る請求項２０記載の方法。
【請求項２９】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、Ｂ２０３６から成る請求項２８記載の方法。
【請求項３０】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、ＰＥＧ修飾成長ホルモンから成る請求項２０記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腫瘍の発病を処置、予防及び／または遅延させるための方法並びに組成物に関する。これらの方法は、抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗体を個体に投与することから成る。
【背景技術】
【０００２】
多くの個体は、良性または悪性のいずれかの腫瘍を有している。さらに、ある種の個体は、腫瘍を発現する危険がある。例えば、幾つかの広範な疫学に基づく研究は、正常な範囲の上部のインスリン様増殖因子（ＩＧＦ−Ｉ）濃度を有する個体が、乳癌、大腸癌及び／または前立腺癌を含む多くの異なる悪性腫瘍を発現する危険性が増大しているように思われることを示している。さらに、末端肥大症の個体には、ある種の型の腫瘍、特に大腸癌を発現する危険性が増大していることが報告されている。
【０００３】
イリノテカン（Irinotecan）等のカンプトテシン類(camptothecins)を含む抗腫瘍剤が、種々の腫瘍の治療に使用されることが知られている。しかし、腫瘍を治療するための改良方法及び組成物が引き続き本当に必要とされている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、腫瘍の発病を処置、予防及び／または遅延させるための方法及び組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
これら及び更なる目的は、本発明の方法及び組成物によって提供される。一態様において、本発明は、腫瘍の発病を処置、予防及び／または遅延させる方法に関する。これらの方法は、抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬を個体に投与することを特徴とする。
【０００６】
他の実施態様において、本発明は、イリノテカン塩酸塩及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）修飾ヒト成長ホルモンを個体に投与することから成る腫瘍の発病を処置、予防及び／または遅延させる方法であって、ＰＥＧ修飾ヒト成長ホルモンが、約４から約５個の共有結合ＰＥＧ分子を含有し、かつ各ＰＥＧ分子が約５，０００Ｄａの平均分子量を有することを特徴とする方法に関する。
【０００７】
更なる他の実施態様において、本発明は、抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬を個体に投与することを特徴とする腫瘍の重量又は容量を低減する方法に関する。
【０００８】
更なる他の実施態様において、本発明は、抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬から成ることを特徴とする組成物に関する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の方法及び組成物は、腫瘍の発病を処置、予防及び／または遅延させるのに有効である。転移の処置及び／または予防は、具体的な実施態様において達成することができる。本発明の更なる実施態様、目的及び利点は、以下の詳細な説明からより十分に明らかになる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明は、腫瘍の発病を処置、予防及び／または遅延させるための方法、並びに腫瘍重量または容量を低減するための方法に関する。これらの方法は、抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗体を個体に投与することから成る。また、本発明は、抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗体から成る組成物にも関する。
【００１１】
ここで使用する「個体」とは、腫瘍を持つか、あるいは腫瘍を発現する危険性にあるヒト、哺乳類またはげっ歯類を含むが、それらに限定されず、動物について言及するものである。腫瘍を発現する危険性にある個体には、それらに限定されないが、後天的か生来のいずれかの遺伝的異常を持つ個体または末端肥大症の個体等の腫瘍を発現する素因を持つ個体がある。ここで使用する「処置」とは、腫瘍の重量及び／または容量の低減について言及するものである。一方、予防及び遅延は、抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬の投与後の腫瘍の臨床的発病または発現における予防及び遅延ついてそれぞれ言及するものである。本発明の一実施態様において、腫瘍は、大腸癌、乳癌、前立腺癌またはそれらの組み合わせを含むが、それらに限定されず、悪性腫瘍（癌）である。本発明の他の実施態様において、腫瘍は、髄膜腫を含むが、それに限定されない、良性腫瘍である。
【００１２】
本発明の開発に際し、本発明者らは、抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬を組み合わせて投与することが、抗腫瘍剤単独の投与より優れていることを確定した。
【００１３】
当業者であれば、腫瘍の発病を処置、予防及び遅延させることが知られている種々の抗腫瘍剤を知ることができる。一実施態様において、抗腫瘍剤は、カンプトテシン、例えば、イリノテカン等のカンプトテシン誘導体、またはその薬学的に容認しうる塩もしくはエステルから成る。イリノテカンは、明細書の一部としてここに引用するミヤサカ（Miyasaka）らの米国特許第４，６０４，４６３号明細書に開示されている、大腸癌を含む腫瘍類の処置に一般に使用されている薬剤であるが、大腸癌には限定されない。イリノテカン塩酸塩は、カンプトテシンの半合成誘導体であり、また、カンプトテカアクミナツ（camptotheca acuminats）等の植物からのアルカロイド抽出物であり、かつトポイソメラーゼ−１阻害薬である。イリノテカンの化学名は、（４Ｓ）−４，１１−ジエチル−４−ヒドロキシ−９−［（４−ピペリジノピペリジノ）カルボニルオキシ］−１Ｈ−ピラノ（３′，４′：６，７）インドリジノ（１，２−ｂ）キノリン−３，１４（４Ｈ,１２Ｈ）ジオン塩酸塩である。その構造式は、次の通りである。
【００１４】
【化１】
2005524694.tif 000002
【００１５】
イリノテカンは、カンプトサル（Camptosar）の登録商標名でファルマシアから例えば塩酸塩として市販されている。
【００１６】
他の抗腫瘍剤は、当業界で知られており、本発明の方法及び組成物に使用するのに適している。例えば、腫瘍類の処置に種々の活性剤を使用することが、当業界に知られている。そのような活性剤は、抗腫瘍剤として本発明の範囲に考えられ、アントラサイクリン類（例えば、ドキソルビシン及びエピルビシン）；タキサン類（例えば、パクリタキセル及びドセタキセル）；エポシロン類；シクロホスファミド等の他のアルキル化剤類；シス−プラチン、カルボプラチン及びオキサプラチン等のプラチナム系薬剤類；フルオロピリマジン類（例えば、５−ＦＵ及びカプシチジン（capcitidine））；代謝拮抗薬類（例えば、メトトレキサート）；ＳＥＲＭ類；アロマターゼ阻害薬類；ＬＨＲＨ作動薬及び拮抗薬類；エストラムスチン（estrumstine）；リボヌクレオシド還元酵素阻害薬類（例えば、ジェムシタビン（gemcytabine））；ＥＧＦＲ拮抗薬類；及び抗新脈管形成剤類（antiangiogenesis agents）を含むが、それらに限定されない。
【００１７】
成長ホルモン受容体拮抗薬に使用される成長ホルモン（ＧＨ）は、ヒト成長ホルモン、野生型または組換え型もしくは成長ホルモン活性を示すその変異体を含む。ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）は、特に直線成長（体細胞原性、ソマトジェネシス（somatogenesis））、乳液分泌、マクロファージの活性及びインスリン様並びに糖尿病誘発性効果を含む多くの生物学的効果示すことが知られている２２，０００ドルトン下垂体ホルモンである（Chawla, Annu. Rev. Med., 34:519(1983); Edwads et al, Science, 239:769(1988); Isaksson et al, Annu. Rev. Physiol., 47:483(1985); Thormer et al, J. Clin. Invest., 82:745(1988); Hughes et al, Annu. Rev. Physiol., 47:469(1985)）。これらの生物学的効果は、ｈＧＨと特異の細胞受容体との相互作用から導出される。
【００１８】
ｈＧＨは、胎盤性のラクトゲン類（placental lactogens）、プロラククチン類、及び成長ホルモンの他の遺伝及び種変異体を含む相同ホルモン系の一員である。ｈＧＨは、広い種特異性を示し、かつクローン化体細胞原性（cloned somatogenic）受容体かプロラクチン受容体のいずれかに結合するという点で、これらの中で特異である。ｈＧＨのクローン化遺伝子は、E. Coli, Chang et al, Gene, 55:189(1987)に分泌型（secreted form）で表示されている。また、そのＤＮＡ及びアミノ酸配列が、Goeddel et al, Nature, 281:544(1979); Gray et al, Gene, 39:247(1985)に報告されている。ｈＧＨの受容体及び抗体エピトープ類が、相同走査変異誘発（homolog-scanning mutagenesis）及びアラニン走査変異誘発（alanine-scanning mutagenesis）によって同定されている（Cunningham et al, Science, 243:1330(1989); Cunningham et al, Science, 244:1081(1989); WO 97/11178）。
【００１９】
ｈＧＨとその受容体（ｈＧＨｂｐ）の細胞外ドメインとのホルモン−受容体複合体が知られている（Wells et al, Annu. Rev. Biophys. Biomol. Struct., 22:329(1993)）。高分解構造及び突然変異分析及び構造分析によって、ｈＧＨの一つの分子が、部位１及び２と呼ばれるホルモン上の異なる部位を用いて二つの受容体分子に連続的に結合することが示されている（Cummingham et al, Science, 244:1081(1989); Cunninghame et al, Science, 254:821(1991); De Vos et al, Science, 255:306(1991)）。
【００２０】
ＧＨの広範な種特異性に加えて、ＧＨ自体及びＧＨ刺激ペプチドインスリン様成長因子Ｉ（GH-stimulated peptide insulin-like growth factor I；ＩＧＨ−Ｉ）を含むＧＨ軸が、正常及び腫瘍細胞両方の成長を刺激することができることが知られている。さらに、少なくとも研究室の制御された環境下にＧＨ軸をかえることによって、固形であれまたは血液学的であれ、ヒト腫瘍の成長を典型的に調節することができる。
【００２１】
ｈＧＨの多くの天然産及び組換え型突然変異体（mutants）または変異体(variant)が知られている。これらは、成長ホルモン受容体拮抗薬としてここで使用するのに適している。例えば、Kostyo et al, Biochem. Biophys. Acta, 925:314(1987); Lewis et al, J. Biol. Chem., 253:2679(1978); Tokunaga et al, Eur. J. Biochem., 153:445(1985); WO 91/05853; WO 92/09690; WO 92/19736; WO 92/21029; 及びWO 97/11178参照。ここで使用する用語「変異体（variant）」とは、誘導体がｈＧＨ活性を示すという条件で、ｈＧＨのアミノ酸の１つ以上が置換または削除されているｈＧＨの天然産及び組換え型誘導体の両方を包含する。具体的な実施態様において、明細書の一部としてここに引用するＷＯ９７／１１１７８に開示されているｈＧＨ変異体Ｂ２０３６を、ここで開示する本発明の方法に使用する。
【００２２】
ｈＧＨ変異体Ｂ２０３６は、以下の置換体を有する。
Ｈ１８Ｄ、Ｈ２１Ｎ、Ｇ１２０Ｋ、Ｒ１６７Ｎ、Ｋ１６８Ａ、Ｄ１７１Ｓ、Ｋ１７２Ｒ、Ｅ１７４Ｓ及びＩ１７９Ｔ。
【００２３】
ＷＯ９７／１１１７８は、その位置での他の置換体は容認できるけれど、Ｇ１２０Ｋ置換体を加えて、より良好な拮抗薬候補体を生じることを開示している。どのアミノ酸もＧ１２０で置換されて拮抗体を生じることができる。より好ましくは、置換アミノ酸は、リジン、アルギニン、トリプトファン、チロジン、フェニルアラニンまたはグルタミン酸塩である。Ｋ１６８Ａ及びＫ１７２Ｒ置換体を加えて、ホルモン受容体部位１結合界面でペギレーション（pegylation）に利用できる部位の数を減少することができる。これに反して、Ｇ１２０Ｋ置換体は、効果部位２ブロックを提供しながら、ぺギレーションにさらにリジンを利用できるようにする。残部１２０でグリシンを改修することによって、Ｂ２０３６をさらに修飾することによって、他の変異体、例えば８５２ｄと比べてヒトにおける低減された抗原性を有することが期待されるアゴニスト（作動薬；agonist）として使用するための候補体を生じることができることが期待される。
【００２４】
大腸菌におけるＢ２０３６の発現に利用されるベクターは、ｐＭＹ２３３である。プラスミドｐＭＹ２２３は、十分に特徴づけられたプラスミドｐＢＲ３２２に基づくものであり、Ｂ２０３６をコードしている配列がｈＧＨをコードしている配列に置換わることを除いて、ｈＧＨ産生プラスミドｐＨＧＨ４Ｒ（Chang et al, Gene, 55:189(1987)）に類似している。ｐＭＹ２２３は、テトラサイクリン抗生物質耐性をコードするが、これと異なり、ｐＢＲ３２２は、Ｂ−ラクタム抗生物質（ペニシリン、アンピシリン等）に感受性がある。
【００２５】
ｐＭＹ２２３によってコードされるＢ２０３６変異体と野生型ヒト成長ホルモン配列とのアミノ酸の相違を、これらの部位でのコドンと共に以下に示す。
【００２６】
野生型      アミノ酸    Ｂ２０３６    Ｂ２０３６
アミノ酸 番号     アミノ酸   コドン
Ｈｉｓ        １８      Ａｓｐ        ＧＡＣ
Ｈｉｓ        ２１      Ａｓｎ        ＡＡＣ
Ｇｌｙ      １２０      Ｌｙｓ        ＡＡＧ
Ａｒｇ      １６７      Ａｓｎ        ＡＡＣ
Ｌｙｓ      １６８      Ａｌａ        ＧＣＧ
Ａｓｐ      １７１      Ｓｅｒ        ＡＧＣ
Ｌｙｓ      １７２      Ａｒｇ        ＡＧＧ
Ｇｌｕ      １７４      Ｓｅｒ        ＡＧＣ
Ｉｌｅ      １７９      Ｔｈｒ        ＡＣＣ
【００２７】
生産の実施態様を含むＢ２０３６のさらなる詳細は、明細書の一部としてここに引用するＷＯ９７／１１１７８に開示されている。
【００２８】
一実施態様において、成長ホルモン受容体拮抗薬は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）修飾成長ホルモンである。ここで使用する用語「ポリエチレングリコール修飾」、「ＰＥＧ修飾」及び「ぺギレーションされた」とは、そこに共有結合的に結合された一つ以上のポリエチレングリコール基を有する成長ホルモンを言及するために、同義に使用されるものである。
【００２９】
上記成長ホルモン受容体拮抗薬は、一つ以上のポリエチレングリコール基に共有結合的に付着または接合し得る。そのような接合は、非修飾成長ホルモンより大きな実分子量を有する成長ホルモン接合体（growth hormone conjugate）を生産する。ここで使用する用語「実分子量(actual molecular weight)」とは、例えば質量分析（例えば、マトリックスアシストレーザ脱着電離質量分析(matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry)）によって測定される分子量である。例えば、ｈＧＨ変異体接合体の実分子量は、通常少なくとも約３０ｋＤであり、より具体的には、約３５ｋＤから約５５ｋＤの範囲であり、さらに具体的には、約４０ｋＤから約５０ｋＤの範囲である。一般に、ｈＧＨ変異体接合体の実分子量は、１００ｋＤを超えない。
【００３０】
ポリエチレングリコールを、リジン残基を含む１つ以上のアミノ酸残基で成長ホルモン分子に接合することができる。線状または分岐鎖を有する１つ以上のさらなる水溶性ポリ（アルキレンオキサイド）重合体を、ポリエチレングリコールに加えて使用することができるが、ポリエチレングリコール単独が好ましい。ＰＥＧの平均分子量は、約５００から約３０，０００ドルトン（Ｄａ）、より具体的には、約１，０００から約２５，０００（Ｄａ）、さらに具体的には、約４，０００から約２０，０００ドルトン（Ｄａ）の範囲であり得る。一実施態様において、ぺギレーションは、約５，０００Ｄａの平均分子量を有するＰＥＧ（以下、「ＰＥＧ（５０００）」と言う）を用いて実施される。他の実施態様において、ぺギレーションは、約２０，０００Ｄａの平均分子量を有するＰＥＧを用いて実施される。
【００３１】
一実施態様において、反応条件を調節して、１つから約６つのポリエチレングリコール分子に接合した成長ホルモンの生産を最大にする。一方、他のより具体的な実施態様において、反応条件を調節して、約４つから約５つのポリエチレングリコール分子に接合した成長ホルモンの生産を最大にする。さらに他の実施態様において、反応条件を調節して、１つのＰＥＧに接合した成長ホルモン分子の生産を最大にする。これらの実施態様の変形において、分岐鎖ＰＥＧも使用することができる。
【００３２】
本発明に使用するのに適した市販のＰＥＧ製剤は、分子量に従って販売されている不均質製剤である。例えば、ＰＥＧ（５０００）製剤は、通常±５００Ｄａで分子量がわずかに異なる分子を典型的に含んでいる。
【００３３】
蛋白質をペギレーションするための種々の方法が記載されている（例えば、多くのホルモン及び酵素をＰＥＧ並びにポリプロピレングリコールに接合させて生理学的に活性の非免疫原性の組成物を生産することを開示しているデイビス（Davis）らの米国特許第４，１７９，３３７号明細書参照）。一般に、少なくとも１つの末端ヒドロキシ基を有するＰＥＧを、カップリング剤と反応させて、末端反応基を有する活性ＰＥＧを生成する。次に、この反応基は、蛋白質のα−及びε−アミン類と反応して、共有結合を形成することができる。都合のよいことに、ＰＥＧの他の末端を、メトキシ基等の非反応性化学基で「保護(blocked)」して、蛋白質分子のＰＥＧ架橋複合体の生成を低減することができる。
【００３４】
ｈＧＨまたはｈＧＨ変異体のペギレーションのために、活性ＰＥＧは、部位１結合活性を壊さない条件下に、この変異体と反応することができるものである。アゴニストｈＧＨ変異体のためには、部位２結合活性も保存せねばならない。さらに、アゴニスト及び拮抗体ｈＧＨ変異体のためには、毒性結合基を接合体に導入する活性ＰＥＧ類は、通常避けられる。適切な活性ＰＥＧ類は、多くの従来の反応によって生成することができる。例えば、ＰＥＧ（Ｍ−ＮＨＳ−ＰＥＧ）のＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルを、Buckmann et al, Makromol. Chem., 182:1379(1981) の方法に従って、Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）及びＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）との反応によって（ユニオンカーバイドから市販されている）ＰＥＧ−モノメチルエーテルから調製することができる。さらに、ＰＥＧ末端水酸基を、例えば、臭化チオニルとの反応によってＰＥＧ−Ｂｒを形成し、引続き過剰のアンモニアでのアミノ分解を行いＰＥＧ−ＮＨ２を生成することによってアミノ基に転化することができる。次に、ＰＥＧ−ＮＨ２は、ウッドワード試薬Ｋ等の標準カップリング剤を用いて興味のある成長ホルモンに接合される。さらに、ＰＥＧ末端−ＣＨ２ＯＨ基を、例えば、ＭｎＯ２での酸化によってアルデヒド基に転化することができる。アルデヒド基は、シアノボロハイドライド(cyanoborohydride)等の試薬を用いる還元アルキル化によって蛋白質に接合することができる。
【００３５】
あるいはまた、本発明に使用するのに適した活性ＰＥＧ類は、多くの売り手から購入することができる。例えば、シェアウォーター・ポリマーズ社（ハンツヴィル、アラバマ州）は、メトキシ−ＰＥＧのスクシニミジルカーボネート（「ＳＣ−ＰＥＧ」）及びメトキシ−ＰＥＧスクシニミジルプロピオネート（「ＳＰＡ−ＰＥＧ」、以下、「Ｍ−ＳＰＡ−ＰＥＧ」と言い、メトキシ保護基の存在を示す）以外に「ＳＣＭ−ＰＥＧ」としてＭ−ＮＨＳ−ＰＥＧを販売している。シェアウォーター・ポリマーズ社は、２つの１０，０００Ｄ鎖を有する枝分れ鎖ＰＥＧ（以下、「ＮＨＳ−ＰＥＧ２（２０，０００）」と言う）も販売している。
【００３６】
本発明で使用する成長ホルモンのペギレーションの程度を調節して、対応する非ペギレーション成長ホルモンと比べて、例えば、肺性ルートを経ての配送に際し成長ホルモンの所望の循環半減期の増加、物理化学的安定性の増加及び／または生物学的利用能の増加をもたらすことができる。
【００３７】
成長ホルモンのペギレーションの部位も、種々の第一級アミン類の反応性によってある程度束縛される。例えば、Ｂ２０３６変異体（Ｋ４１）の部位１ホルモン−受容体結合界面における潜在的リジンは、Ｎ−ＳＰＡ−ＰＥＧ（５０００）と比較的非反応性である。かくして、変異体分子当たり約４から６個のＰＥＧを有する適度にペギレーションされたＢ２０３６変異体製剤は、部位１にｈＧＨ受容体を結合する能力を保持している（この結合界面に潜在的ペギレーション部位が存在するにもかかわらず）。
【００３８】
標準変異誘発技術を使用して、成長ホルモン中のリジンの数を変えることができる。かくして、アミノ酸置換体がリジンを導入するか、あるいはリジンに置き換わる程度まで、本発明のｈＧＨ変異体は、野生型ｈＧＨより多くのまたは少ない数の潜在的ペギレーション部位を含むことができる。Ｂ２０３６変異体は、野生型ｈＧＨより１個少ない９個の潜在的ペギレーション部位を含んでいる。さらに、リジンを導入するか、あるいはリジンに置き換わるアミノ酸置換体は、潜在的ペギレーション部位の位置を変える。例えば、Ｂ２０３６変異体においては、Ｋ１６８Ａ及びＫ１７２Ｒ置換体が、ホルモン受容体部位１結合界面でペギレーションに利用できる部位の数を減少する。Ｇ１２０を異なるアミノ酸で置換えることによって、部位２で結合するｈＧＨが分裂され、分子をｈＧＨ拮抗体に転化する。この位置でのグリシンのリジンへの置換によって、部位２において追加の潜在的ペギレーション部位が、提供される。これによって、この部位でのいずれの残存結合も減じることが予想される。ペギレーションの程度及び部位は、活性ＰＥＧ及び蛋白質の相対濃度ならびにｐＨ等の反応条件を調節することによっても操作することができる。所望の程度のペギレーションに適した条件は、経験に基づいて決定することができる。
【００３９】
Ｂ２０３６等のｈＧＨ変異体のペギレーションは、いずれの都合のよい方法によっても実施することができる。この型の市販品は、ペグビソマント(Pegvisomant)である。一実施態様を例示すると、ｈＧＨ変異体を、Ｈ−ＳＰＡ−ＰＥＧ（５０００）を用いてペギレーションする。簡潔に言うと、攪拌しながら固体ＳＰＡ−ＰＥＧ（５０００）を室温でｈＧＨ変異体の水溶液に加える。代表的に、この水溶液を、反応を行うｐＨ（一般に、約４〜１０のｐＨ）付近のｐＫを有する緩衝液で緩衝する。例えばｐＨ７．５でのペギレーションに適した緩衝液の例には、ＨＥＰＥＳ、燐酸塩、硼酸塩、トリス−ＨＣｌ、ＥＰＰＳ及びＴＥＳが挙げられる。必要ならば、ｐＨを連続的にモニターかつ調整する。反応は、約１から約２時間継続させる。次に、反応生成物を疎水性相互作用クロマトグラフィ(hydrophobic interaction chromatography)にかけて、遊離Ｈ−ＳＰＡ−ＰＥＧ（５０００）及びペギレーションされたｈＧＨ変異体の高分子量複合体からペギレーションされたｈＧＨ変異体を分離する。保護されていないＰＥＧが、その分子の両末端で活性化されると、ｈＧＨ変異体分子を架橋して、高分子量複合体が生じる。疎水性相互作用クロマトグラフィ中の条件は、遊離Ｍ−ＳＰＡ−ＰＥＧ（５０００）がカラムを流れる間に、架橋されたペギレーションｈＧＨ変異体複合体が、１つ以上のＰＥＧ基に接合した１ｈＧＨ変異体分子を含む所望の形態の後に溶出するものである。適切な条件は、所望の接合体に対する架橋複合体の相対的大きさによって変わり、当業者によって容易に決定される。所望の接合体を含む溶出液は、限外ろ過によって濃縮し、また透析ろ過によって脱塩する。
【００４０】
この製剤は、ｈＧＨ変異体１分子当たり３から６の間のＰＥＧ基を有するＰＥＧ−ｈＧＨ変異体接合体の不均質混合物を代表する。一実施態様において、この混合物は、ペギレーションされたｈＧＨのより均質な製剤を生成するさらなる精製工程にかけることができる。より具体的には、混合物を陽イオン交換クロマトグラフィにかけ、ペギレーションの程度に従ってペギレーションされたｈＧＨ変異体を分別する。
【００４１】
その条件は、より多くのＰＥＧ基を有するより高度にペギレーションされたｈＧＨ変異体が、勾配をもって初期に溶出するものである。このようにして、主として１つまたは２つの形態を含むペギレーションされたｈＧＨ変異体の溜りを得ることが可能である。以下に使用するペギレーションされたｈＧＨ変異体の「形態」とは、特定の数のＰＥＧ基を含むＰＥＧ−ｈＧＨ変異体接合体のことである。したがって、ペギレーションされたｈＧＨ変異体の異なる形態は、同一のｈＧＨ変異体に接合した異なる数のＰＥＧ基を有している。一実施態様を例示すると、主として２つの形態、すなわちｈＧＨ変異体１分子当たり４つまたは５つのＰＥＧを有する接合体を含んでいるペギレーションされたｈＧＨ変異体の溜り（以下、「ＰＥＧ−４／５ｈＧＨ変異体製剤」と言う）が得られる。次に、この溜りを濃縮し、脱塩し、投与用に配合する。
【００４２】
本発明に使用するペギレーションされたｈＧＨ変異体を含む組成物は、不均質すなわち数種または多くのＰＥＧ−ｈＧＨ形態を含むものでも、あるいは均質すなわち単一のＰＥＧ−ｈＧＨ形態を含むものでもよい。代表的には、組成物は、少なくとも７０％のＰＥＧ−ｈＧＨ変異体接合体の１または２形態、好ましくは少なくとも８０％の１または２形態、より好ましくは少なくとも９０％の１またはは２形態を含んでいる。
【００４３】
成長ホルモン受容体拮抗薬のペギレーションされた形態は、本発明に使用するのに適しているが、成長ホルモン受容体拮抗薬のペギレーションされていない形態を使用することも、同様に本発明の方法及び組成物の範囲にある。
【００４４】
当業者は、抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬の投与に使用することが可能な種々の方法を認識している。本発明の一実施態様において、抗腫瘍剤は、非経口的に、局所的に、または系統的に投与される。本発明の他の実施態様において、成長ホルモン受容体拮抗薬は、肺性配送(pulmonary delivery)によって、非経口的に、局所的に、系統的に、あるいはそれらの組み合わせによって投与される。非経口投与の例には、それらに限定されないが、皮下、筋肉内、静脈内、動脈内及び腹腔内投与がある。非経口投与は、連続注入（例えば、浸透ポンプ等のミニポンプを用いて）であるか、あるいは例えば静脈内または皮下手段を用いる注射によるものでよい。一実施態様において、成長ホルモン受容体拮抗薬及び／または抗腫瘍剤は、皮下に投与される。投与は、単一のボーラス(bolus)として、あるいは遅延放出デポ剤(depot formulation)によって行うこともできる。成長ホルモン受容体拮抗薬は、液体か固体のいずれかの形状で肺性ルートを経て配送することもできる。成長ホルモン受容体アゴニストのペギレーションされた形態は、本実施態様に使用するのに適している。具体的な一実施態様において、ペギレーションされた成長ホルモンは、液滴または粒子が、約１から約３ミクロンの直径を有する微細な液体エーロゾルの形で配送される。液体エーロゾルは、成長ホルモン受容体拮抗薬の液状配合物から形成され、あるいはその代わりに、凍結乾燥(lyophilized)された粉体の再構成によって形成することもできる。さらに、当業者であれば、成長ホルモン受容体拮抗薬及び抗腫瘍剤を、一緒にまたは別々に投与してもよいことを認識することができる。
【００４５】
抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬は、治療に効果的な量で個体に投与される。当業者であれば、これらの化合物の用量及び治療プログラム（regimen）が、抗腫瘍剤の有効性、投与形式、患者の年齢及び体重、処置すべき症状の容態等のいくつかの要因に依存することを理解することができる。これは、当業者の技能内のものであると思われ、また、最適な用量を決定するために、これらの成分に関する既存の文献を参照することができる。
【００４６】
ここに使用する「薬学的に容認しうる」とは、薬理学的／毒物学的観点から患者に、また、組成、処方、安定性、患者の容認及び生物学的利用性に関する物理的／化学的観点から製薬化学者に容認しうる特性及び／または物質について言及するものである。
【００４７】
抗腫瘍剤は、多くの場合、身体表面積（ＢＡＳ）の平方メートル（ｍ2）に基づいて投与される。ＢＡＳは、２つの理由で、計算の根拠として、多くの場合、体重よりむしろ選択される。第一に、ＢＡＳは、ある薬剤の活性及び毒性のより精密な交差種比較(cross-species comparison)を提供するために提示されている。第二に、ＢＳＡは、肝臓及び腎臓への血流を決定する心拍出量とより密接に関連しており、よって、薬剤放出に影響する。限定する意図はないが、ＢＳＡの例示的な平均値は、おおよそ次の通りである。男性：１．９ｍ２；女性：１．６ｍ２；９歳の子供：１．０７ｍ２；１０歳の子供：１．１４ｍ２；及び１２〜１３歳の子供：１．３３ｍ２。当業者であれば、これらは、単に一般的な指針であり、その変更を当業者の能力内で技術を十分に用いて決定することができることを理解するであろう。用量は、例えば、１投与につき約５０から約５００ｍｇ／ｍ２の範囲であり、投与プログラムの設計は、普通の技術の熟練内のものである。
【００４８】
より具体的な例として、イリノテカンは、１２５ｍｇ／ｍ２の用量のイリノテカンを毎週１回９０分間かけて４週間静脈内投与し、引続き２週間投与を休止する治療プログラムで投与することができる。その後、処置の追加課程を、６週間毎に（４週間治療し、引続き２週間治療を休止する）繰り返すことができる。その後の用量は、担当内科医の判断に従って、処置に対する個々の患者の耐性に依存して２５ｍｇ／ｍ２から５０ｍｇ／ｍ２増量して、１５０ｍｇ／ｍ２と高くまたは５０ｍｇ/ｍ２と低く調節することができ、また、３５０ｍｇ／ｍ２の用量のイリノテカンを３週間毎に９０分間かけて静脈内投与する治療プログラムが適しうる。
【００４９】
一般的な提案として、一用量当たりに非経口的に投与される成長ホルモン受容体拮抗薬の薬学的に容認しうる総量は、上記したように治療上の裁量であるが、患者の体重に基づいて約１μｇ／ｋｇ／日から約１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。通常、この用量は、約０．０１から約１０ｍｇ／ｋｇ／日、また、ヒトに対してより通常的には、約０．０１から約１ｍｇ／ｋｇ／日である。連続的に投与する場合は、成長ホルモン受容体拮抗薬は、１日当たり１から４回の注射によるか、例えばミニポンプを用いて連続的な皮下注入のいずれかによって、典型的に約１μｇ／ｋｇ／時から約５０μｇ／ｋｇ／時の用量で投与される。静脈内嚢溶液（intravenous bag solution）も使用することができる。
【実施例】
【００５０】
本実施例は、抗腫瘍剤、イリノテカンの投与と組み合わせる成長ホルモン受容体拮抗薬ペグビソマントの投与が、単独で投与した時のイリノテカンの治療効果より顕著な改善をもたらすことを実証する。ペグビソマント及びイリノテカンの単独及び組み合わせでの効果を、ＢＡＬＢ／ｃマウスの脾臓に注射したＣＴ−２６細胞（マウス大腸癌細胞系）に対して評価する。このモデルは、一次腫瘍（脾臓）及び肝転移に及ぼす処置効力を評価するものである。
【００５１】
成長ホルモン受容体拮抗薬
ペグビソマントは、一般のヒト成長ホルモンのＰＥＧ修飾１９１アミノ酸残基類似体、具体的には、各ポリエチレングリコールの平均分子量が約５，０００Ｄａである平均で約５から約５のポリエチレングリコール分子から成るＢ２０３６から成る。このＢ２０３６蛋白質は、上記のように、ｈＧＨ幹におけるアミノ酸残基の交換によってｈＧＨ受容体の拮抗薬として作用するために選定される。ＰＥＧ関連Ｂ２０３６蛋白質は、ｈＧＨと同じ数のアミノ酸残基のものであるので、このＰＥＧ関連蛋白質を、ＰＥＧ関連ｈＧＨのモデル変異体として考察することができる。
【００５２】
細胞培養/動物
ＣＴ−２６細胞（マウス大腸癌）を、１０％ウシ胎児血清を有するＤＭＥＭ中で、細胞が、全面成長の約５０％になるまで成長させる。トリプシンを用いて、付着した細胞を組織培養フラスコの表面から持ち上げる。次に、細胞を洗浄し、そしてハンクス緩衝食塩溶液中に懸濁する。５〜８週齢のＢＡＬＢ/cマウス（ジャクソン・ラボラトリーズ（Jackson Laboratories）、バー・ハーバー、メイン州）を、本実施例で使用する。初めに、左側腹切開術を用いて脾臓を動員する。ＣＴ−２６細胞の脾臓への直接注射を実施する（１ｘ１０４生細胞、合計０．０５ｍｌ容量）。創クリップを使用して、切開を閉じる。これが、同系の大腸癌モデルであるので、宿主動物は、免疫無防備状態ではない。
【００５３】
処置
マウスを、賦形剤（食塩水）単独、毎日１回のペグビソマント（３．３３、５．０または１０．０ｍｇ）の皮下注射、イリノテカン（接種後７、１４及び２１日目に１００ｍｇ／ｋｇ）及び食塩水、またはイリノテカンとペグビソマントとの組み合わせで処置する。さらにまた別の実験において、一日に２回の２μｇのオクトレオチド（octreotide）注射を皮下に行う。注射は、ツベルクリン注射器に２５ゲージの針を用いる脾臓注射から創クリップの側と反対の側腹に行う。
【００５４】
腫瘍回収
マウスを２４日目に犠牲にする。測定を、一次腫瘍（脾臓）、転移腫瘍負荷（肝臓重量）及び肝臓転移の平均数について行う。処置群を、標準ｔ−検定を用いて比較する。賦形剤に比較してＰ＜０．０５；賦形剤及びイリノテカンに比較してＰ＜０．０５。
【００５５】
血清ＩＧＦ−Ｉアッセイ
マウスＩＧＦ−Ｉを、酸−エタノール抽出後に放射線免疫検定法（ＲＩＡ）によって測定する。要約すると、血清／抽出混合物を、室温で２時間保温し、遠心分離し、そして上澄み液を分析用に２００倍に希釈する。ＩＧＦ−Ｉ濃縮物を、多クローン性ウサギ抗体（ニコルス・インスチュート（Nicohls Institute）、サン・ジュアン・カピストラノ、カリフォルニア州）を用いるＲＩＡによって測定する。検定標準液を、組換えヒトＩＧＦ−Ｉ（アマーシャム・インターナショナル（Amersham International、バックス、英国）で生成する。
【００５６】
ＲＮＡ−ＰＣＲ
半定量ポリメラ−ゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を実施して、回収した腫瘍検体におけるＩＧＦ−Ｉ及びＩＧＦ−IIメッセンジャＲＮＡの相対量を測定する。各反応に合計１μｇのＲＮＡを使用する。逆転写を実施する。以下に記載するＰＣＲプライマ対の各々の下流プライマを、逆転写の遺伝子特異プライマとして使用する。
【００５７】
ＩＧＦ−Ｉ    上流  ５′−ATGGGAAAAATCAGCAGTCTTCC−３′
下流  ５′−CTGGGTCTTGGGCATGTCGGTGTG−３′
ＰＣＲ生成物４０１。
【００５８】
ＩＧＦ−II    上流  ５′−GGAGACAGTCCGCGGGACG−３′
下流  ５′−GATGGTACTACATTGCAG−３′
ＰＣＲ生成物サイズ２２７。
【００５９】
β−アクチン  上流  ５′−GACAGGATGCAGAAGGAG−３′
下流  ５′−CTAGAAGCATTTGCGGTG−３′
ＰＣＲ生成物サイズ２００。
【００６０】
ＰＣＲを、末端標識プライマーを用いて行い〔２５サイクル〕、生成物を、アクリルアミドゲルでの電気泳動によって未取込み放射線標識プライマから分離する。各個体試料における目標メッセージの量を燐光イメージングアナライザ（Phosphorimager）を用いて定量する。負荷差を補正するために、試料値を  β−アクチンメッセージ含量に対し正規化する。
【００６１】
図１Ａ〜１Ｄは、脾臓の一次腫瘍に、及び４処置群すなわち食塩水、ペグビソマント（５．０ｍｇ/日）、イリノテカン（接種後７、１４、及び２１日目に１００ｍｇ／ｋｇ）及びペグビソマント＋イリノテカンの肝性転移の数及び質量に及ぼす処置効率を示す図である。具体的には、図１Ａは、血清ＩＧＦ−Ｉ濃縮物（μｇ／Ｌ）を示し；図１Ｂは、肝臓の重量（グラム）を示し；図１Ｃは、一次腫瘍の容量〔ｃｃｓ〕を示し；及び図１Ｄは、４処置群の肝性転移の数を示す。ペグビソマントとイリノテカンとの組み合わせ治療が、ＣＴ−２６大腸癌細胞を用いる実験で測定した全てのパラメーターに関し、イリノテカン単独での処置より優れている。イリノテカンと組み合わせたペグビソマントの有利な効果は、一次腫瘍及び肝性転移の両方で見られる。ぺグビソマント処置が、特に、肝臓における転移疾病の発現を阻害することに関し、イリノテカンの作用の効力を高める。
【００６２】
動物を犠牲にし、検定した時に集められた血清の平均値±標準誤差は、ＩＧＦ−Ｉ濃縮物（μ／Ｌ）について次の通りである：（血清）８７．６±９．１、（ペグビソマント）５０±５．３、（イリノテカン）１２８．６±５．９、（ペグビソマント＋イリノテカン）５３±２．９。腫瘍負荷を持たないマウスにおける基準値は、約２００μ／Ｌである。食塩水群における低値は、おそらく犠牲にする前の数日間に病気が顕著に進行した動物を反映している。
【００６３】
ペグビソマントとイリノテカンとの組み合わせで処置した１０匹の動物のうちの４匹だけが肝性転移を発現した。これは、擬薬またはイリノテカン治療で転移を発現した動物の数の単に５０％に過ぎない。肝臓への転移疾病が、処理することが最も困難な合併症の一つであり、かつ大腸癌死亡率に対する顕著な寄与体であるとすれば、そのような転移を低減するペグビソマント／イリノテカン組み合わせ治療の能力は、顕著な臨床的意義がある。
【００６４】
本実施例は、イリノテカン等の抗腫瘍剤と共にペグビソマント等の成長ホルモン受容体拮抗薬の投与が、ＧＨ及び／またはＩＧＦ−Ｉに反応性であることが知られている三つの腫瘍型（大腸癌、乳癌及び髄膜腫）の動物モデルに顕著な抗腫瘍効果を及ぼすことを実証するものである。
【００６５】
本発明における上記種々の実施態様の説明は、具体例をもって説明するためのものである。これは、完全であるつもりはなく、本発明を開示した明確な形式に限定するものでもない。上記教示の多くの選択、改変及び変更が、当業者には明らかである。したがって、本発明は、本明細書で論じた全ての選択、改変、変更及び請求の範囲の精神並びに広範な範囲内にある他の全てを包含する。
【図面の簡単な説明】
【００６６】
【図１】図１Ａ〜１Ｄは、実施例に示すように、マウス大腸癌細胞系ＣＴ−２６を注射したＢＡＬＢ／ｃマウスにおける脾臓腫瘍容量に、並びに肝性転移の数及び質量に及ぼす投与賦形剤(Saline)単独、ペグビソマント(Pegvisomant)単独、イリノテカン(Irinotecan)単独、及びペグビソマントとイリノテカンとの組み合わせ(Peg+Irinotecan)のそれぞれを投与した効果を示す図である。
【図１】
2005524694.tif 000003
【手続補正書】
【提出日】平成16年4月29日(2004.4.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
カンプトテシンまたはその薬学的に容認できる塩もしくはエステルから成る抗腫瘍剤と成長ホルモン受容体拮抗薬とを個体に投与することを特徴とする腫瘍の臨床的発病を処置、予防または遅延させる方法。
【請求項２】
該腫瘍が、悪性腫瘍である請求項１記載の方法。
【請求項３】
該悪性腫瘍が、大腸癌、乳癌、前立腺癌またはその組み合わせから成る請求項２記載の方法。
【請求項４】
該腫瘍が、良性腫瘍である請求項１記載の方法。
【請求項５】
該良性腫瘍が、髄膜腫である請求項４記載の方法。
【請求項６】
該抗腫瘍剤が、イリノテカンまたはその薬学的に容認できる塩もしくはエステルから成る請求項１記載の方法。
【請求項７】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、ヒト成長ホルモンから成る請求項１記載の方法。
【請求項８】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、組換え型ヒト成長ホルモンまたは組換え型ヒト成長ホルモンの変異体から成る請求項１記載の方法。
【請求項９】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、Ｂ２０３６から成る請求項８記載の方法。
【請求項１０】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、ＰＥＧ修飾成長ホルモンから成る請求項１記載の方法。
【請求項１１】
イリノテカン塩酸塩またはその薬学的に容認できる塩もしくはエステルとポリエチレングリコール（ＰＥＧ）修飾ヒト成長ホルモンとを個体に投与することから成り、該ＰＥＧ修飾ヒト成長ホルモンが、約４から約５個の共有結合ＰＥＧ分子を含有し、かつ各ＰＥＧ分子が約５，０００Ｄａの平均分子量を有する請求項１記載の方法。
【請求項１２】
カンプトテシンまたはその薬学的に容認できる塩もしくはエステルから成る抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬から成ることを特徴とする組成物。
【請求項１３】
該抗腫瘍剤が、イリノテカンまたはその薬学的に容認できる塩もしくはエステルから成る請求項１２記載の組成物。
【請求項１４】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、ヒト成長ホルモンから成る請求項１２記載の組成物。
【請求項１５】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、組換え型ヒト成長ホルモンまたは組換え型ヒト成長ホルモンの変異体から成る請求項１２記載の組成物。
【請求項１６】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、Ｂ２０３６から成る請求項１５記載の組成物。
【請求項１７】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、ＰＥＧ修飾成長ホルモンから成る請求項１２記載の組成物。
【請求項１８】
カンプトテシンまたはその薬学的に容認できる塩もしくはエステルから成る抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬を個体に投与することを特徴とする腫瘍の重量または容量を低減する方法。
【請求項１９】
該腫瘍が、悪性腫瘍である請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
該悪性腫瘍が、大腸癌、乳癌、前立腺癌またはその組み合わせから成る請求項１９記載の方法。
【請求項２１】
該腫瘍が、良性腫瘍である請求項１８記載の方法。
【請求項２２】
該良性腫瘍が、髄膜腫である請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
該抗腫瘍剤が、イリノテカンまたはその薬学的に容認できる塩もしくはエステルから成る請求項１８記載の方法。
【請求項２４】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、ヒト成長ホルモンから成る請求項１８記載の方法。
【請求項２５】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、組換え型ヒト成長ホルモンまたは組換え型ヒト成長ホルモンの変異体から成る請求項１８記載の方法。
【請求項２６】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、Ｂ２０３６から成る請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
該成長ホルモン受容体拮抗薬が、ＰＥＧ修飾成長ホルモンから成る請求項１８記載の方法。
【請求項２８】
腫瘍が、大腸癌または乳癌の悪性腫瘍であり、あるいは良性腫瘍である、該腫瘍の臨床的発病を処置、予防または遅延させる方法であって、抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬を個体に投与することを特徴とする方法。
【請求項２９】
腫瘍が、大腸癌または乳癌の悪性腫瘍であり、あるいは良性腫瘍である、該腫瘍の重量または容量を低減する方法であって、抗腫瘍剤及び成長ホルモン受容体拮抗薬を個体に投与することを特徴とする方法。
【国際調査報告】
2005524694.tif 000004
2005524694.tif 000005
2005524694.tif 000006
2005524694.tif 000007