(57)【要約】本発明は、肝炎ウイルス感染症を治療する方法を提供する。方法は、全般的に、抗ウイルス剤の多相血清濃度プロフィールを得る用量レジメで抗ウイルス剤を含む組成物を投与することを含む。投与レジメには、現在利用可能な肝炎治療より回数が少ない投与事象が含まれる。本発明の方法を用いて得られる多相抗ウイルス剤血清濃度プロフィールは、持続的なウイルス反応を得るために、ウイルス力価の初回の急激な減少を引き起こした後、ウイルス力価のさらに経時的な減少を引き起こす。【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の段階を含む、個体におけるC型肝炎ウイルス感染症を治療する方法：
約24〜48時間の第1の期間内で最大認容量（MTD）の少なくとも約80％であるインターフェロンα（IFN-α）の第1の血清濃度、その後少なくとも7日間の第2の期間維持されるMTDの約50％またはそれ未満であるIFN-αの第2の濃度を得るために有効な量のIFN-αを含む組成物を投与する段階。
【請求項２】
持続的なウイルス反応が得られる、請求項1記載の方法。
【請求項３】
IFN-αの投与前約1日〜約14日間、IFN-γを投与することをさらに含む、請求項1記載の方法。
【請求項４】
IFN-αがデポー剤で投与される、請求項1記載の方法。
【請求項５】
IFN-αが持続的注入によって投与される、請求項1記載の方法。
【請求項６】
持続的注入投与がポンプによって得られる、請求項5記載の方法。
【請求項７】
IFN-αが、1回皮下注射の後にポンプを用いる持続的注入によって投与される、請求項1記載の方法。
【請求項８】
以下の段階を含む、個体におけるC型ウイルス感染症を治療する方法：
第1の相において、約24時間の第1の期間内で最大認容量（MTD）の少なくとも約80％であるIFN-αの第1の血清濃度が得られ、第2の相において、第2の相の任意の24時間において測定したIFN-αの最低血清濃度に対するIFN-αの最高血清濃度の比が3未満であり、第2の相におけるIFN-αの最高濃度がMTDの約50％またはそれ未満である、第1の相と第2の相とを含む投与レジメにおいてIFN-αを投与する段階。
【請求項９】
第2の期間の任意の24時間において測定したIFN-αの最低血清濃度に対するIFN-αの最高血清濃度の比が約1である、請求項8記載の方法。
【請求項１０】
以下の段階を含む、個体におけるC型肝炎ウイルス感染症を治療する方法：
約24時間の第1の期間内で最大認容量（MTD）の少なくとも約80％であるコンセンサスインターフェロンα（CIFN）の第1の血清濃度、その後少なくとも7日間の第2の期間維持されるMTDの約50％またはそれ未満であるCIFNの第2の濃度を得るために有効な量のCIFNを含む組成物を投与する段階。
【請求項１１】
以下の段階を含む、個体におけるC型肝炎ウイルス感染症を治療する方法：
第1の相において、約24時間の第1の期間内で最大認容量（MTD）の少なくとも約80％であるコンセンサスインターフェロンα（CIFN）の第1の血清濃度が得られ、第2の相において、第2の相の任意の24時間において測定したCIFNの最低血清濃度に対するCIFNの最高血清濃度の比が3未満であり、第2の相におけるCIFNの最高濃度がMTDの約50％またはそれ未満である、第1の相と第2の相とを含む投与レジメにおいてCIFNを投与する段階。
【請求項１２】
以下の段階を含む、個体におけるC型肝炎ウイルス感染症を治療する方法：
第1の相において、約24時間の第1の期間内でIFN-αの第1の血清濃度C1maxが得られ、第2の相において、C1maxの約50％またはそれ未満であるCsusが得られ、第2の相の任意の24時間における時間の関数としてのIFN-αの血清濃度によって定義された曲線下面積が、図2に示される2日〜3日の曲線下面積を超えない、第1の相と第2の相とを含む投与レジメにおいてIFN-αを投与する段階。
【請求項１３】
以下の段階を含む、個体におけるC型肝炎ウイルス感染症を治療する方法：
第1の相において、約24時間の第1の期間内でコンセンサスIFN-α（CIFN）の第1の血清濃度C1maxが得られ、第2の相において、C1maxの約50％またはそれ未満であるCsusが得られ、第2の相の任意の24時間における時間の関数としてのCIFNの血清濃度によって定義された曲線下面積が、図2に示される2日〜3日の曲線下面積を超えない、第1の相と第2の相とを含む投与レジメにおいてCIFNを投与する段階。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、ウイルス感染症、特に肝炎ウイルス感染症の治療分野に属する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
C型肝炎ウイルス（HCV）感染症は、米国における最も一般的な慢性血液媒介性感染症である。新たな感染症の数は減少しているが、慢性感染症の負荷は相当なものであり、米国疾病予防センターは、アメリカにおける感染者は390万人（1.8％）であると推定している。慢性肝疾患は、アメリカにおける成人の死因の第10位であり、年間約25,000人が死亡し、死亡全体の約1％を占める。慢性肝疾患の40％がHCV関連であり、毎年推定で8,000〜10,000人が死亡することを示す研究がある。HCV関連末期肝疾患は、成人における肝臓移植の最も多い適応である。
【０００３】
慢性C型肝炎の抗ウイルス療法は、この10年間で急激に進化して、治療の有効性には有意な改善が認められる。それにもかかわらず、ポリエチレングリコール化IFN-αプラスリバビリンを用いた併用治療を行っても、患者の40％〜50％が治療に失敗して、すなわち無反応であるか、または再発する。これらの患者は現在、有効な代替治療がない。特に、肝生検において進行した線維症または硬変を認めた患者は、腹水、黄疸、静脈瘤出血、脳症、および進行肝不全を含む進行肝疾患の合併症を発症する有意なリスクを有するのみならず、肝細胞癌のリスクが著しく増加している。
【０００４】
慢性HCV感染症の高い発生率は、アメリカにおける慢性肝疾患の将来的な負荷に関して公衆衛生の点から重要な意味を有する。国立健康栄養試験調査（NHANES III）に由来するデータは、1960年代後半から1980年代初期に新たなHCV感染率の大きい増加が、特に年齢20〜40歳の人に起こったことを示している。20歳またはそれ以上で長期HCV感染症を有する人の数は、1990年から2015年のあいだに750,000人から300万人以上へと4倍以上となりうると推定される。30または40歳代での感染者の比例的な増加はさらに大きい。HCV関連慢性肝疾患のリスクは感染症の期間に関連することから、20年以上の感染者では硬変のリスクは進行的に増加して、これによって1965〜1985年のあいだに感染した患者における硬変関連罹患率および死亡率の実質的な増加が起こる。
【０００５】
慢性C型ウイルス感染症は、血清中のアラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT）レベルの間欠的または持続的な上昇および循環中のHCV RNAの一定レベルを特徴とする。現在のところ、承認された治療は、天然の白血球に由来する、または特異的サブタイプもしくはコンセンサスインターフェロンα（IFN-α）のcDNA配列を用いる組換え法によるαインターフェロンを用いる。承認された投与レジメは、用量範囲6〜50μgのIFN-αの皮下投与を週に3回、24〜48週間の期間で行うことである。
【０００６】
ウイルスの消失を得ることができることを期待して、IFN-αの定期的な投与も行われている。反復投与は、IFN-αの急速なクリアランスおよびインビボ分解を考慮すると必要であるように思われる。よりよい有効性を得るもう一つの試みにおいて、IFN-αとリバビリンのような併用療法が行われている。最も数が多いHCV株である遺伝子型1型のウイルスに感染した患者では、併用治療を行っても持続的なウイルス反応を示したのは患者の25％以下に過ぎなかった。治療法をさらに改善する試みで、様々な研究者が、タンパク質の分子量および大きさを増加させるため、そして全身循環時間を延長するために、ポリマー鎖を付加することによるIFN-αの化学改変を試みている。IFN-αのこれらの操作によって、循環時間が増加して、有効性がさらに改善したが、タンパク質の有意な分画がその生物活性を失う。このように、より大量のタンパク質を患者に送達しなければならず、そのような投与に伴って好中球減少症のような副作用が生じる。
【０００７】
IFN-αが含まれる治療レジメの際のウイルスの動態が調べられている。全般的に、何人かではウイルス力価の初回の急激な減少を認める（初期ウイルス反応；EVR）。EVRによって血清中HCV RNAレベルは、治療開始後24〜48時間のあいだに約0.5〜3対数減少する。初期の強い反応は、持続性のある反応を得るために都合がよい。患者によっては、EVRの後にさらに血中のウイルスのより急激でない減少が起こる（第2相の減少）。第2相の減少は、数週間または数ヶ月のあいだのウイルスレベルのより遅い減少である。
【０００８】
上記の承認された治療レジメが利用できるにもかかわらず、持続的なウイルス反応を得たのは、治療した患者のごく少数に過ぎない。このように、当技術分野においてHCV感染症を治療する改善された方法が必要である。本発明は、この要求に取り組む。
【０００９】
文献
米国特許第6,172,046号；第6,245,740号；第5,824,784号；第5,372,808号；第5,980,884号；国際特許出願国際公開公報第96/21468号；国際公開公報第96/11953号；
2005508943.tif 000002
【発明の開示】
【００１０】
発明の概要
本発明は、肝炎ウイルス感染症を治療する方法を提供する。方法は一般的に、抗ウイルス剤の多相血清濃度プロフィールが得られる投与レジメにおいて抗ウイルス物質を含む組成物を投与することを含む。投与レジメには、現在利用可能な肝炎治療より回数が少ない投与事象が含まれる。本発明の方法を用いて得られる多相抗ウイルス物質血清濃度プロフィールは、持続的なウイルス反応を得るために、ウイルス力価の初回の急激な減少の後に、経時的なウイルス力価のさらなる減少を引き起こす。
【００１１】
発明の特徴
いくつかの態様において、本発明は、個体におけるC型肝炎ウイルス感染症を治療する方法を特徴とする。方法は一般的に、約24〜48時間の第1の期間において最大認容量（MTD）の少なくとも約80％であるIFN-αの第1の血清濃度の後、少なくとも7日間の第2の期間維持されるMTDの約50％またはそれ未満である第2の濃度を得るために有効な量でインターフェロンα（IFN-α）を含む組成物を投与することを含む。いくつかの態様において、持続的なウイルス反応が得られる。
【００１２】
いくつかの態様において、方法にはさらに、IFN-αの投与前約1日〜約14日間、IFN-γを投与することが含まれる。
【００１３】
いくつかの態様においては、IFN-αをデポー剤で投与する。他の態様において、IFN-αは、持続的注入によって投与される。いくつかの態様において、持続的注入投与はポンプによって行う。他の態様において、IFN-αは、1回皮下注射の後にポンプを用いる持続的注入によって投与する。
【００１４】
いくつかの態様において、本発明は、個体におけるC型肝炎ウイルス感染症を治療する方法を特徴とし、方法は、第1の相と第2の相を含む投与レジメにおいてIFN-αを投与することを一般的に含み、第1の相において、約24時間の第1の期間のあいだに最大認容量（MTD）の少なくとも約80％であるIFN-αの第1の血清濃度が得られ、第2の相において、第2の相における任意の24時間のあいだに測定したIFN-αの最低血清濃度に対するIFN-αの最高血清濃度の比が3未満であって、第2の相におけるIFN-αの最高濃度がMTDの約50％またはそれ未満である。これらの態様のいくつかにおいて、第2の期間の任意の24時間のあいだに測定したIFN-αの最低血清濃度に対するIFN-αの最高血清濃度の比は約1である。
【００１５】
いくつかの態様において、本発明は、個体におけるC型肝炎ウイルス感染症を治療する方法を特徴とし、方法は、約24時間の第1の期間において最大認容量（MTD）の少なくとも約80％であるコンセンサスインターフェロンα（CIFN）の第1の血清濃度の後、少なくとも7日の第2の期間維持されるMTDの約50％またはそれ未満であるCIFNの第2の濃度を得るために有効な量のCIFNを含む組成物を投与することを含む。
【００１６】
いくつかの態様において、本発明は、個体におけるC型肝炎ウイルス感染症を治療する方法を特徴とし、方法は、第1の相と第2の相を含む投与レジメにおいてコンセンサスインターフェロンα（CIFN）を投与することを一般的に含み、第1の相において、約24時間の第1の期間のあいだに最大認容量（MTD）の少なくとも約80％であるCIFNの第1の血清濃度が得られ、第2の相において、第2の相における任意の24時間において測定したCIFNの最低血清濃度に対するCIFNの最高血清濃度の比が3未満であって、第2の相におけるCIFN濃度の最高濃度がMTDの約50％またはそれ未満である。
【００１７】
いくつかの態様において、本発明は、個体におけるC型肝炎ウイルス感染症を治療する方法を特徴とし、方法は、第1の相と第2の相を含む投与レジメにおいてIFN-αを投与することを一般的に含み、第1の相において、約24時間の第1の期間においてIFN-αの第1の血清濃度C1maxが得られ、第2の相において、C1maxの約50％またはそれ未満であるCsusが得られ、第2の相における任意の24時間のあいだの時間の関数としてのIFN-α血清濃度によって定義される曲線下面積が、図2に示すように2日目から3日目の曲線下面積を超えない。
【００１８】
いくつかの態様において、本発明は、個体におけるC型肝炎ウイルス感染症を治療する方法を特徴とし、方法は、第1の相と第2の相とを含む投与レジメにおいてコンセンサスIFN-α（CIFN）を投与することを一般的に含み、第1の相において、約24時間の第1の期間においてCIFNの第1の血清濃度C1maxが得られ、第2の相において、C1maxの約50％またはそれ未満であるCsusが得られ、第2の相における任意の24時間における時間の関数としてのCIFN血清濃度によって定義される曲線下面積は、図2に示すように2日目から3日目の曲線下面積を超えない。
【００１９】
定義
本明細書において用いられるように、「治療」、「治療する」等の用語は、所望の薬理学的および/または生理学的作用を得ることを意味する。作用は、疾患もしくはその症状を完全もしくは部分的に予防することに関して予防的であってもよく、および/または疾患および/もしくは疾患に帰因する有害な作用の部分的もしくは完全な治癒に関して治療的であってもよい。本明細書において用いられるように、「治療」とは、哺乳類、特にヒトにおける疾患の如何なる治療も含み、これには以下が含まれる：（a）疾患に対する素因を有する可能性があるがまだ疾患を有すると診断されていない被験者に、疾患または疾患の症状が起こらないようにすること（例えば、原発疾患に関連する、またはそれによって引き起こされる疾患（慢性HCV感染症の状況において起こりうる肝線維症のような）を含む）；（b）疾患を阻害する、すなわちその発生を停止させること；および（c）疾患を軽減する、すなわち疾患の退縮を引き起こすこと。
【００２０】
「個体」、「宿主」、「被験者」および「患者」という用語は、本明細書において互換的に用いられ、サルおよびヒトを含む霊長類を含むがこれらに限定されない哺乳類を意味する。
【００２１】
「初期ウイルス反応（EVR）」という用語は、「初回ウイルス反応」と互換的に用いられ、「急激なウイルス反応」とは、HCV感染症の治療開始後約24時間、約48時間、約3日、または約1週間以内のウイルス力価の減少を意味する。
【００２２】
本明細書において用いられる「第2相の減少」という用語は、EVR後数週間から数ヶ月間のウイルスレベルのより遅い減少を指す。
【００２３】
本明細書において用いられるように、「持続的なウイルス反応」（SVR；「持続的反応」または「永続性反応」とも呼ばれる）という用語は、HCV感染症の治療レジメに対する血清中HCV力価に関する個体の反応を意味する。一般的に、「持続的ウイルス反応」は、検出可能なHCV RNA（例えば、血清1ミリリットルあたり約500ゲノムコピー未満、約200ゲノムコピー未満、または約100ゲノムコピー未満）が治療中止後少なくとも約1ヶ月、少なくとも約2ヶ月、少なくとも約3ヶ月、少なくとも約4ヶ月、少なくとも約5ヶ月、または少なくとも約6ヶ月患者の血清中に認められないことを意味する。
【００２４】
本明細書において用いられるように「治療失敗患者」とは、一般的に、HCVに関するこれまでの治療に反応しなかったHCV感染患者（「非反応者」と呼ばれる）、またはこれまでの治療に当初反応したが、治療反応が維持されなかった患者（「再発者」と呼ばれる）を意味する。これまでの治療には一般的に、IFN-α単剤療法またはIFN-α併用療法による治療が含まれうるが、併用治療には、IFN-αとリバビリンのような抗ウイルス剤の投与が含まれてもよい。
【００２５】
「肝炎ウイルス感染症」という用語は、一つまたはそれ以上のA、B、C、D、またはE型肝炎ウイルスによる感染症を意味し、血液媒介肝炎ウイルス感染症が特に重要である。
【００２６】
本明細書において用いられるように、「肝（hepatic）線維症」という用語は、本明細書において「肝（liver）線維症」と互換的に用いられ、慢性肝炎感染症の状況において起こりうる肝臓における瘢痕組織の増殖を意味する。
【００２７】
本明細書において用いられるように、「肝機能」という用語は、血清タンパク質（例えば、アルブミン、凝固因子、アルカリホスファターゼ、アミノトランスフェラーゼ（例えば、アラニンアミノトランスフェラーゼ、アスパラギン酸トランスアミナーゼ）、5'-ヌクレオシダーゼ、γ-グルタミルトランスペプチダーゼ等）、のようなタンパク質の合成、ビリルビンの合成、コレステロールの合成、および胆汁酸の合成を含むがこれらに限定されない合成機能；糖質代謝、アミノ酸およびアンモニア代謝、ホルモン代謝、ならびに脂質代謝を含むがこれらに限定されない肝代謝機能；外因性薬剤の解毒化；内臓および門脈血行力学を含む血行力学機能等を含むがこれらに限定されない肝臓の正常な機能を意味する。
【００２８】
本発明の方法において用いるために適した薬物送達装置には、注射装置、埋め込み可能な装置、例えばカテーテルによって接続してもよく接続しなくてもよい浸透圧ポンプのようなポンプ、生分解性のインプラント、リポソーム、デポー剤、およびミクロスフェアが含まれるがこれらに限定されない。
【００２９】
本明細書において用いられる「投与事象（dosing event）」という用語は、その事象が薬物分配装置からの抗ウイルス剤の1回またはそれ以上の放出を含んでもよい、それを必要とする患者に抗ウイルス剤を投与することを意味する。このように、本明細書において用いられる「投与事象」という用語には、抗ウイルス剤を含むデポー剤の設置；連続送達装置（例えば、ポンプまたは他の徐放性注射装置）の設置；および1回皮下注射後の連続送達装置の設置が含まれるがこれらに限定されない。
【００３０】
「デポー剤」という用語は、一般的に容器に入っていないが、薬物の貯蔵所として作用し、そしてそこから薬物が放出される、多くの埋め込み型の生分解性、または非生分解性の徐放性システムの如何なるものも意味する。デポー剤には、ポリマー、非ポリマー生体分解材料が含まれ、固体、半固体、または液体型であってもよい。
【００３１】
「ミクロスフェア」という用語（「微粒子」、「ナノスフェア」または「ナノ粒子」とも呼ばれる）は、一般的にポリマー材料から調製され、通常大きさの範囲が直径約0.01μm〜約0.1 μm、または約0.1 μm〜約10 μmである小さい粒子を意味する。
【００３２】
「治療的有効量」という用語は、所望の治療効果を促進するために有効な治療物質の量、または治療物質の送達速度を意味する。正確な望ましい治療効果は、治療すべき病態、投与すべき製剤、および当業者に認識される他の多様な要因に応じて変化する。
【００３３】
本発明をさらに詳しく説明する前に、記述される特定の態様は当然変化する可能性があるために、本発明は、そのような態様に制限されないと理解すべきである。同様に、本発明の範囲は、添付の請求の範囲に限って制限されるために、本明細書において用いた用語は、特定の態様を記述する目的に限られ、制限的に解釈してはならないと理解すべきである。
【００３４】
値の範囲を提供する場合、特に明記していなければ、その範囲の上限と下限のあいだの下限の単位の10分の1までのそれぞれの介在する値、およびその記述の範囲における他の任意の記述のまたは介在する値が本発明に含まれると理解される。これらのより小さい範囲の上限および下限は独立してより小さい範囲に含まれてもよく、同様に本発明に含まれ、記述の範囲における任意の特に除外された限界に従属する。記述の範囲に一つまたは双方の限界が含まれる場合、それらの含まれる限界のいずれかまたは双方を除外する範囲も同様に本発明に含まれる。
【００３５】
特に明記していなければ、本明細書において用いられる全ての技術および科学用語は、本発明が属する当業者によって一般的に理解される意味と同じ意味を有する。本明細書に記述のものと類似または同等の如何なる方法および材料も同様に、本発明の実践または試験において用いることができるが、好ましい方法および材料を以下に記述する。本明細書において言及した全ての出版物は、出版物が引用される内容に関連して方法および/または材料を開示および説明するために参照として本明細書に組み入れられる。
【００３６】
本明細書において、そして添付の請求の範囲において用いられるように、単数形「一つ（a）」、「一つ（an）」、および「その（the）」には、本文が特に明記していない限り複数形が含まれる。このように、例えば、「一つの用量（a dose）」と言う場合、そのような用量の複数形が含まれ、「一つの方法（a method）」と言う場合には、当業者に既知の一つまたはそれ以上の方法およびその同等物に対する言及等が含まれる。
【００３７】
本明細書において考察した出版物は、本出願の提出日よりその開示が単になされたために提供される。本明細書の如何なる開示も、先行発明によって、日付をさかのぼって付ける権利が本発明にはないと自認したと解釈されるべきではない。さらに、提供された出版日は実際の出版日とは異なっている可能性があり、それらは個々に確認する必要があるかも知れない。
【００３８】
発明の詳細な説明
本発明は、肝炎ウイルス感染症を治療する方法を提供し、C型肝炎（HCV）感染症が特に重要である。方法は一般的に、個体におけるウイルス量を減少させるために、特に個体における持続的なウイルス反応を得るために、有効な量の抗ウイルス剤を個体に投与することを含む。抗ウイルス剤は、血清中の抗ウイルス剤の多相濃度を得るために有効な投与レジメにおいて個体に投与される。抗ウイルス剤の多相濃度プロフィールは、IFN-αによるC型肝炎ウイルス（HCV）の治療の際に認められるウイルス動態を考慮に入れてデザインされる。
【００３９】
HCV感染症を治療するために現在利用可能なIFN-α療法は、一般的に、IFN-αの毎日（QD）、1日おき（QOD）、または1週間に3回（TIW）の皮下注射を必要とする。RNA PCRによって決定した、通常のIFN-α治療に反応した反応者におけるHCV感染症の動態は、数学的モデリングによって分析されており、これを図1に示す。そのような研究から、治療開始後24〜48時間において急速なウイルス減少相が認められ、その結果RNA血清レベルの約0.5対数から約3対数またはそれ以上の減少が起こることが明白に示された。この初期ウイルス反応（EVR）は、ウイルス粒子の産生を減少させるために重要である。初期の強い反応は、一般的により持続性の反応を予測する。この初期反応の後、通常、数日間または数週間にわたってより遅い持続的なウイルスの消失が起こる。一般的に、この第2相は、患者に関連する特徴に依存する。如何なる理論にも拘束されたくはないが、第2相のウイルス力価の減少は、例えば、免疫系媒介メカニズムによるウイルス感染細胞の除去に関連する可能性がある。この第2相の勾配は、患者の持続的なウイルス反応（SVR）を決定し、例えば第2相の勾配がより急であれば、一般的にSVRおよび陽性治療転帰に関連する。
【００４０】
IFN-αに基づく治療レジメの経過におけるウイルスの動態およびIFN-α血清濃度を図2〜6に示す。ウイルスの動態（VL；ウイルスRNA（「RNA」）対時間として示す）を、通常の（例えば、TIW）療法および本発明に従う治療的投与レジメ（例えば、CRI療法のような徐放性治療）の双方に関してIFN-α血清濃度（薬物動態（PK）；血清IFN対時間として示す）と共に示す。活性成分の1回毎のまたは反復投与後に得られたIFN-αの最高血清濃度を、C1max（図2〜5）、C2max（図6）等によって示す。C1max、C2max等は、最大認容量（MTD）またはその近傍である。持続的な期間に得られたIFN-αの血清濃度を、Csusと表示する（図2〜6）。Csusは、MTDの約50％である。生物学的に利用可能な抗ウイルス剤の量は、血清濃度対時間プロフィール下面積または曲線下面積（AUC）によって示される。副作用が出現する閾値の血清濃度はMTDとして表示する。
【００４１】
HCV感染症を治療するための現行の療法は特定の欠点を有する。長期治療期間でのIFN-αの毎日（QD）、1日おき（QOD）、または週に3回（TIW）注射を含む投与レジメは、以下の欠点の一つまたはそれ以上を有する：（1）投与レジメは、患者にとって不快であり、場合によっては患者のコンプライアンスが低下する；（2）投与レジメはしばしば副作用に関連し、患者にさらなる不快を引き起こし、場合によっては患者のコンプライアンスが低下する；（3）投与レジメによってIFN-αの血清濃度に「山」（Cmax）と「谷」（Cmin）が起こり、「谷」の期間ではウイルスが複製しうる、および/またはさらなる細胞に感染しうる、および/または変異しうる；（4）多くの場合、初期ウイルス反応の際のウイルス力価の対数的減少は、最終的にウイルスの消失が起こるほど持続的なウイルス反応を行うには不十分である（図2を参照されたい；通常のIFN-αTIW療法後のウイルス動態）。
【００４２】
本発明は、これらの欠点を回避する投与レジメを提供し、以下を含む有意な長所を提供する：（1）投与はQD、QOD、またはTIWより回数が少ないことから、患者の不快感は減少し、おそらく患者のコンプライアンスは増加する；（2）投与が一定期間のあいだ連続的であるため、IFN-αの血清濃度における「山」（すなわち、Cmax）と「谷」（Cmin）とが回避され、例えば、Cminに対するCmaxの比が減少する；（3）これまでの投与レジメに関連した山/谷サイクルが回避されることから、副作用が減少する；（4）これまでの投与レジメに関連した山/谷サイクルが回避されることから、ウイルス複製、さらなる細胞の感染、および変異が減少する（すなわち、血清中に抗ウイルス剤がより一定レベルで存在するために、ウイルスに対して一定の「圧力」がかかる）；（5）本発明に従う1回投与事象は、ウイルス動態の初期ウイルス反応および持続的なウイルス反応相の双方に対処する（例えば、図5のシナリオIIIを参照されたい）；（6）本発明に従う反復投与事象は、持続的なウイルス反応に対して作用を有し、ウイルス力価をさらに一層減少させる（例えば、図6を参照されたい；C1max、C2max等は、ウイルスに対して膨大な負の選択圧を発揮して、投与サイクル間のウイルス変異および/または複製および/または回避事象を減少させる）；（7）本発明に従う投与事象の第1の相におけるウイルス力価の対数的な減少は、上記のこれまでに利用可能な投与レジメより大きい（例えば、図3、シナリオIを参照されたい）；（8）持続相（Csus）における一定の高い薬物濃度によって、第2相の勾配は急となる（例えば、図4のシナリオIIを参照されたい）；および（9）ウイルス力価における対数的な減少が増加するため、第2相の転帰はより都合がよく、すなわち、持続的なウイルス反応相の際のウイルス力価の減少は、上記のこれまでの投与レジメより急激である（勾配がより急である）。
【００４３】
本発明は、抗ウイルス剤の多相血清濃度を提供する投与レジメを含む、肝炎ウイルス感染症を治療する方法を提供する。抗ウイルス剤の多相血清濃度は、現行の療法より少ない投与回数で得られる。
【００４４】
最適なCmax濃度を提供するために、ウイルス力価の可能な限り急勾配が得られるように、低濃度IFN-αが有効となるようにウイルス力価を急激に低下させるために、第1相のあいだIFN-α血清濃度は高い。この高いIFN-α初回濃度は、「初回用量」または「初回負荷量」と呼ばれる。
【００４５】
第2相のあいだ、IFN-α血清濃度は第1相より低く、ウイルス力価をさらに一層減少させるために有効である。第1相のあいだに送達されるIFN-α量は個体によって認容される最大量（「MTD」）またはその近傍であることから、第1相は、可能な限り短く維持される。ウイルス力価がこの最初の高用量相のあいだに急激に減少すれば、ウイルス力価をなおさらに減少させるために十分に有効なままであるAUCを維持しながらIFN-α濃度を低下させることができる（例えば、図3を参照されたい）。IFN-αのこの第2のより低い濃度は、ほとんどの個体によって認容され、このように、患者の快適さとコンプライアンスは最大となる。
【００４６】
第1相および第2相は1回投与事象において得られ、この場合、例えば「1回投与事象」には、デポー剤の設置；ポンプの設置；および1回皮下注射後のポンプの設置の併用が含まれる。1回投与事象は、一つまたはそれ以上の投与剤形で、例えばデポー剤；ポンプ；および注射装置の一つまたはそれ以上によって得られる。
【００４７】
いくつかの態様において、抗ウイルス剤はデポー剤で投与する。この形の投与は、一般的に望ましくないと考えられるデポー剤送達の特性、すなわち患者への埋め込みまたは注射後デポー剤からの初回「大量」薬物放出を利用する。抗ウイルス剤の大量を初回に放出するデポー製剤で抗ウイルス剤を送達することによって、抗ウイルス剤の多相血清濃度が得られる。初回に大量の抗ウイルス剤が放出されることによって、より低い濃度の抗ウイルス剤によって治療可能なレベルまでウイルス力価を急速に減少させるために有効である抗ウイルス剤の初回血清濃度が得られる。この抗ウイルス剤のより低い血清濃度は、初回大量放出後のデポー剤からの抗ウイルス剤の持続的な放出によって得られる。
【００４８】
多くの態様において、投与レジメは、1回投与事象を含む。他の態様において、投与レジメ投与事象は反復される。そのような送達システムを用いる反復投与は、C1max、C2max等を提供し、それぞれの場合において、その後に定常状態濃度が得られる（Csus、図6に示す）。
【００４９】
肝炎感染症を治療する方法
本発明は、肝炎ウイルス感染症を治療する方法を提供する。方法は一般的に、抗ウイルス剤の多相血清濃度を得るために有効なレベルおよび方法で抗ウイルス剤を投与することを含む。第1相および第2相は、1回投与事象（例えば、デポー剤の設置（例えば、埋め込みまたは注射）；ポンプのような連続注入装置の設置；1回皮下注射と連続注入装置の設置の組み合わせ）によって得られる。
【００５０】
本発明の全ての態様において、本発明の方法の投与レジメによって、抗ウイルス剤の血清濃度の「山」（Cmax；抗ウイルス剤の最高血清濃度）と「谷」（Cmin；抗ウイルス剤の最低血清濃度）とが減少または回避される、抗ウイルス剤の血清濃度が得られる。全ての態様において、本発明の方法の投与レジメによってCmax：Cmin比は、第2の相のあいだに約3.0未満、約2.5未満、約2.0未満、または約1.5未満となる（例えば、図2〜6に示すように、治療の2〜15日のあいだ、治療の2〜10日のあいだ、治療の3〜10日のあいだ、または治療の3〜15日のあいだ）。いくつかの態様において、投与レジメは、第2の相のあいだにCmax：Cmin比が約1.0に達する（例えば、図2〜6に示すように、治療の2〜15日のあいだ、治療の2〜10日のあいだ、治療の3〜10日のあいだ、または治療の3〜15日のあいだ）。
【００５１】
一般的に、本発明の方法の投与レジメにおいて、第2の相の任意の24時間に測定した第2の相における抗ウイルス剤血清濃度対時間の曲線下面積（AUC）（すなわち、AUCsus）は、第1相の任意の24時間のAUC（すなわち、AUCmax）より小さい。言い換えれば、第2相の任意の24時間で測定したAUCsusは、第1相の任意の24時間に測定したAUCmaxより小さい。
【００５２】
第1相における抗ウイルス剤の血清濃度は、個体の血清中のウイルス力価の1.5対数、2対数、2.5対数、3対数、3.5対数、4対数、4.5対数、または5対数の減少を得るために有効である。
【００５３】
第1相における抗ウイルス剤の血清濃度は、投与レジメの開始後約12時間〜約48時間、約16時間〜約24時間の期間で、個体の血清中のウイルス力価の1.5対数、2対数、2.5対数、3対数、3.5対数、4対数、4.5対数、または5対数の減少を得るために有効である。
【００５４】
抗ウイルス剤の第2の濃度は、約24時間〜約48時間、約2日〜約4日、約4日〜約7日、約1週間〜約2週間、約2週間〜約4週間、約4週間〜約6週間、約6週間〜約8週間、約8週間〜約12週間、約12週間〜約16週間、約16週間〜約24週間、または約24週間〜約48週間の期間維持される。
【００５５】
第2の相において、血清中の抗ウイルス剤の濃度は、ウイルス力価を検出不可能なレベルまで、例えば、約1000〜約5000、約500〜約1000、または約100〜約500ゲノムコピー/mL血清まで減少させるために有効である。いくつかの態様において、抗ウイルス剤の有効量は、100ゲノムコピー/mL血清未満にウイルス量を減少させるために有効な量である。
【００５６】
第2相における抗ウイルス剤の血清濃度は、持続的なウイルス反応を得るために有効であり、例えば、検出可能なHCV RNA（例えば、約500ゲノムコピー未満、約200ゲノムコピー未満、または約100ゲノムコピー未満/mL血清）が、治療中止後少なくとも約1ヶ月間、少なくとも約2ヶ月間、少なくとも約3ヶ月間、少なくとも約4ヶ月間、少なくとも約5ヶ月間、または少なくとも約6ヶ月間患者の血清中に認められない。
【００５７】
いくつかの態様において、第1の相と第2の相の後に少なくとも第3の相が続く。これらの態様のいくつかにおいて、第3の相には、第1の血清濃度と等しいまたはほぼ等しい抗ウイルス剤の血清濃度を得るために有効な用量で抗ウイルス剤を投与することが含まれる。これらの態様のいくつかにおいて、第四の相には、第2の血清濃度と等しいまたはほぼ等しい抗ウイルス剤の血清濃度を得るために有効な用量で抗ウイルス剤を投与することが含まれる。
【００５８】
HCV感染症のIFN-α治療
対象となる特定の態様において、肝炎ウイルスはC型肝炎ウイルス（HCV）である。対象となる特定の態様において、肝炎ウイルスはHCVであり、抗ウイルス剤はインターフェロンα（IFN-α）である。
【００５９】
第1の相において、患者によって認容される最大レベルまたはその近傍のIFN-αの血清濃度が得られる。第1の相において得られる血清濃度（第1の濃度）は、約10〜約1000、約10〜約500、約20〜約250、約30〜約100、または約50〜約75国際単位（IU）/mlの範囲である。第1の血清濃度は、約6時間〜約12時間、約12時間〜約24時間、または約24時間〜約48時間のあいだ維持される。
【００６０】
第1の相において、最大認容量（MTD）の約65％〜約70％、約70％〜約75％、約75％〜約80％、約80％〜約85％、約85％〜約90％、約90％〜約95％、または約95％〜約100％であるIFN-αの血清濃度を得るために有効であるIFN-αの量が投与される。このように、投与レジメの開始から約6時間〜約12時間、約12時間〜約24時間、または約24時間〜約48時間のあいだに、最大認容量（MTD）の約65％〜約70％、約70％〜約75％、約75％〜約80％、約80％〜約85％、約85％〜約90％、約90％〜約95％、または約95％〜約100％であるIFN-αの血清濃度が得られる。
【００６１】
IFN-αの第1の血清濃度を得るために投与される用量は、約10 μg〜約100 μg、約20 μg〜約70 μg、約25 μg〜約60 μg、約30 μg〜約50 μgの範囲である。これらの様々な用量は、遊離のインターフェロンを指し、これを得るために投与するデポー剤の量は、下記のように薬物負荷効率に依存する。
【００６２】
コンセンサスIFN-αの有効量には、約3 μg、約9 μg、約15 μg、約18 μg、または約27 μg/用量が含まれる。IFN-α2aおよびIFN-α2bの有効量は、300万国際単位（MIU）〜10 MIU/用量の範囲である。ポリエチレングリコール化IFN-α2aの有効量は、90〜180 μg/用量の範囲である。ポリエチレングリコール化IFN-α2bの有効量は、0.5μg/kg体重〜1.5 μg/kg体重の範囲である。
【００６３】
慢性C型肝炎患者は、一般的に循環中のウイルスを105〜107ゲノムコピー/mlのレベルで有する。この第1の相において、IFN-αの血清濃度は、HCV力価を約5×104〜約105、約104〜約5×104、または約5×103〜約104ゲノムコピー/ml血清まで減少させるために有効である。
【００６４】
いくつかの態様において、第1の相におけるIFN-αの血清濃度は、投与レジメの開始後約12時間〜約48時間、または約16時間〜約24時間の期間内でHCV力価を約5×104〜約105、約104〜約5×104、または約5×103〜約104ゲノムコピー/ml血清まで減少させるために有効である。
【００６５】
いくつかの態様において、第1相におけるIFN-αの血清濃度は、個体の血清中のウイルス力価の1.5対数、2対数、2.5対数、3対数、3.5対数、4対数、4.5対数、または5対数の減少を得るために有効である。
【００６６】
第1相におけるIFN-αの血清濃度は、投与レジメの開始後約12時間〜約48時間、または約16時間〜約24時間の期間で、個体の血清中のウイルス力価の1.5対数、2対数、2.5対数、3対数、3.5対数、4対数、4.5対数、または5対数の減少を得るために有効である。
【００６７】
第1相において、感染者によって認容されうるインターフェロンの用量によって治療可能なレベルまでウイルス力価を減少させるために有効なIFN-αの血清濃度が得られる。
【００６８】
第2相において、IFN-αは、患者によって認容できる最大レベルより十分に低い、そしてウイルス力価をさらに一層減少させるために有効なIFN-αの血清濃度を得るために有効であるレベルで投与される。第2相において、IFN-αは、約5 IU/ml〜約50 IU/mlのIFN-αの血清濃度を得るために有効な用量で投与される。いくつかの態様において、IFN-αは、約5 IU/ml〜約100 IU/mlまたはそれ以上のIFN-αの血清濃度を得るために有効である用量で投与される。第2相において、IFN-αの投与量は、約0.5×106 IU〜約50×106 IUの範囲である。
【００６９】
第2相において、IFN-αは、MTDの約10％〜約15％、約15％〜約20％、約20％〜約25％、約25％〜約30％、約30％〜約35％、約35％〜約40％、約40％〜約45％、または約45％〜約50％であるIFN-αの血清濃度を得て維持するために有効なレベルで投与される。第2相におけるIFN-αの血清濃度は、MTDより十分下であるが、なおも抗ウイルス作用を発揮するために有効である。このように、投与レジメの開始後約48時間〜約4日間、約48時間〜約7日間、約48時間〜約10日間、または約48時間〜約15日間にわたって、MTDの約10％〜約15％、約15％〜約20％、約20％〜約25％、約25％〜約30％、約30％〜約35％、約35％〜約40％、約40％〜約45％、または約45％〜約50％であるIFN-αの血清濃度が得られる（そして一般的に維持される）。
【００７０】
IFN-αの第2の濃度は、約24時間〜約48時間、約2日〜約4日、約4日〜約7日、約1週間〜約2週間、約2週間〜約4週間、約4週間〜約6週間、約6週間〜約8週間、約8週間〜約12週間、約12週間〜約16週間、約16週間〜約24週間、または約24週間〜約48週間のあいだ維持される。
【００７１】
第2の相において、IFN-αの第2の血清濃度は、ウイルス力価を、約1000〜約5000、約500〜約1000、または約100〜約500ゲノムコピー/mL血清まで減少させるために有効である。いくつかの態様において、IFN-αの有効量は、100ゲノムコピー/mL血清未満にウイルス量を減少させるために有効な量である。
【００７２】
IFN-αの第2の血清濃度は、持続的なウイルス反応を得るために有効であり、例えば、検出可能なHCV RNA（例えば、約500ゲノムコピー未満、約200ゲノムコピー未満、または約100ゲノムコピー未満/mL血清）が、治療中止後少なくとも約1ヶ月間、少なくとも約2ヶ月間、少なくとも約3ヶ月間、少なくとも約4ヶ月間、少なくとも約5ヶ月間、または少なくとも約6ヶ月間患者の血清中に認められない。
【００７３】
いくつかの態様において、第1の相と第2の相の後に少なくとも第3の相が続く。これらの態様のいくつかにおいて、第3の相には、第1の血清濃度と等しいまたはほぼ等しいIFN-αの血清濃度を得るために有効な用量でIFN-αを投与することが含まれる。これらの態様のいくつかにおいて、第四の相には、第2の血清濃度と等しいまたはほぼ等しいIFN-αの血清濃度を得るために有効な用量でIFN-αを投与することが含まれる。
【００７４】
併用治療
いくつかの態様において、方法は、IFN-αと、IFN-γおよび/またはリバビリンのようなさらなる治療物質とを投与することを含む、併用治療を提供する。投与レジメがIFN-αとIFN-αと、IFN-γおよび/またはリバビリンのようなさらなる物質とを含む全ての態様において、IFN-αは、上記のようにIFN-αの多相血清濃度が得られるように投与される。
【００７５】
いくつかの態様において、さらなる治療物質は、IFN-αの全治療期間において投与され、治療期間の開始と終了は一致する。他の態様において、さらなる治療物質は、IFN-α治療の期間と重なり合う期間投与され、例えばさらなる治療物質による治療は、IFN-α治療が始まる前に始まり、IFN-α治療が終わる前に終了する；さらなる治療物質による治療は、IFN-α治療が始まった後に始まり、IFN-α治療が終了した後に終了する；さらなる治療物質による治療はIFN-α治療が始まった後に始まり、IFN-α治療が終了する前に終了する；またはさらなる治療物質による治療は、IFN-α治療が始まる前に始まり、IFN-α治療が終了した後に終了する。
【００７６】
なお他の態様において、さらなる治療物質は、IFN-α治療が始まる前に投与され、IFN-α治療が始まると終了し、例えば、さらなる治療物質は「プライミング（priming）」投与レジメにおいて用いられる。
【００７７】
IFN-αおよびIFN-γ
いくつかの態様において、インターフェロンγ（IFN-γ）は、IFN-αとは個別に投与される、例えばIFN-γは、IFN-αとは異なる製剤で、そして異なる投与事象において投与される。他の態様において、IFN-γは、IFN-αと同じ製剤で投与される（従って同じ投与事象において）。なお他の態様において、IFN-γは、IFN-αとは異なる製剤で投与され、上記の多相の血清濃度を提供する投与レジメにおいて投与される。
【００７８】
IFN-γの有効量は、患者の体格に応じて、約0.5 μg/m2〜約500 μg/m2、通常約1.5 μg/m2〜200 μg/m2の範囲である。この活性は、タンパク質50 μgあたりの106国際単位（IU）に基づく。
【００７９】
先に述べたように、いくつかの態様において、IFN-γは、IFN-αと異なる投与事象において投与される。一つの非制限的な実施例において、IFN-γは、約1 MIU/日の用量で14日間投与した後、5 MIUを14日間投与し、その後5 MIUを週に3回、22週間投与される。
【００８０】
いくつかの態様において、IFN-γは、IFN-αの治療の全期間のあいだ投与される。他の態様において、IFN-γは、IFN-α治療の期間と重なり合う期間投与され、例えばIFN-γ治療は、IFN-α治療が始まる前に始まり、IFN-α治療が終わる前に終了してもよく；IFN-γ治療は、IFN-α治療が始まった後に始まり、IFN-α治療が終了した後に終了してもよく；IFN-γ治療はIFN-α治療が始まった後に始まり、IFN-α治療が終了する前に終了してもよく；またはIFN-γ治療は、IFN-α治療が始まる前に始まり、IFN-α治療が終了した後に終了してもよい。
【００８１】
いくつかの態様において、IFN-γは、IFN-αが投与される前の期間投与される。如何なる一つの理論に拘束されたくはないが、IFN-γは、Th2のTh1へのシフトを引き起こす可能性がある。Th1免疫応答のこの増加によって、IFN-α投与の開始後にウイルス力価の減少速度が増加する可能性がある。これらの態様において、IFN-γは、IFN-αによる治療開始前、約1〜約14日間、約2〜約10日間、または約3〜約7日間投与される。この期間を「プライミング」相と呼ぶ。これらの態様のいくつかにおいて、IFN-γ治療はIFN-αの全治療期間を通して継続される。他の態様において、IFN-γ治療はIFN-α治療の終了前に中止される。これらの態様において、IFN-γの総治療期間（「プライミング」相を含む）は、約2日〜約30日、約4日〜約25日、約8日〜約20日、約10日〜約18日、または約12日〜約16日である。
【００８２】
IFN-γは、皮下、皮内、経口等を含むがこれらに限定されない任意の通常の経路および手段によって投与することができる。IFN-γは、IFN-γの多相血清濃度を提供しながら本発明の方法によって投与することができる。投与は、注射、連続注入装置（例えば、ポンプ）等によって行うことができる。多くの態様において、IFN-γは、注射によって皮下投与される。
【００８３】
IFN-αおよびリバビリン
ICNファーマシューティカルズインク（ICN Pharmaceuticals Inc、コスタメサ、カリフォルニア州）から販売されているリバビリン、1-β-D-リボフラノシル-1H-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキサミドは、メルクインデックス第11版において化合物番号8199として記述されている。その製造および処方は米国特許第4,211,771号に記述されている。本発明はまた、リバビリンの誘導体を用いることも企図する（例えば、米国特許第6,277,830号を参照されたい）。リバビリンは、カプセルまたは錠剤型で経口投与してもよく、IFN-αと同じまたは異なる投与剤形で、そしてIFN-αと同じまたは異なる経路で投与してもよい。当然、双方の薬剤に関して鼻腔スプレー、経皮、静脈内、坐剤、徐放性薬剤等の他の種類の投与も、それらが利用できるようになれば企図される。活性成分を破壊せずに適当な用量が送達される限り、任意の投与剤形が可能である。
【００８４】
リバビリンは、一般的に約30 mg〜約60 mg、約60 mg〜約125 mg、約125 mg〜約200 mg、約200 mg〜約300 mg、約300 mg〜約400 mg、約400 mg〜約1200 mg、約600 mg〜約1000 mg、または約700 mg〜約900 mg/日の範囲の量で投与される。
【００８５】
いくつかの態様において、リバビリンは、IFN-αの治療期間を通して投与される。他の態様において、リバビリンは、IFN-α治療の全期間より短い間投与され、例えばIFN-α治療の第1相のあいだのみ、IFN-α治療の第2相のあいだのみ、またはIFN-α治療レジメのいくつかの他の期間投与される。
【００８６】
抗ウイルス剤
多様な如何なる抗ウイルス剤も本発明の方法を用いて送達することができる。本発明の方法において用いるために適した抗ウイルス剤には、IFN-α、IFN-γ、およびリバビリンが含まれるがこれらに限定されない。
【００８７】
IFN-α
如何なる既知のIFN-αも本発明において用いることができる。本明細書において用いられる「インターフェロンα」という用語は、ウイルス複製および細胞増殖を阻害して、免疫応答を調節する関連ポリペプチドのファミリーを意味する。「IFN-α」という用語には、天然に存在するIFN-α；合成IFN-α；誘導体化IFN-α（例えば、ポリエチレングリコール化IFN-α、グリコシル化IFN-α等）；および天然に存在するまたは合成IFN-αの類似体；天然に存在するIFN-αに関して記述されたような抗ウイルス特性を有する本質的に任意のIFN-αが含まれる。
【００８８】
適したαインターフェロンには、天然に存在するIFN-α（天然に存在するIFN-α2a、IFN-α2bを含むがこれらに限定されない）；シェリングコーポレーション（Schering Corporation、ケニルワース、ニュージャージー州）から販売されるIntron（登録商標）Aインターフェロンのような組換え型インターフェロンα2b；ホフマン・ラ-ロシュ（Hoffman-La Roche、ナトリー、ニュージャージー州）から販売されているRoferon（登録商標）インターフェロンのような組換え型α-2a；ベーリンガーインゲルハイムファーマシューティカルズインク（Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc、リッジフィールド、コネチカット州）から販売されているBerofor（登録商標）α2インターフェロンのような組換え型インターフェロンα-2C；日本のスミトモ（Sumitomo）から販売されているスミフェロンまたはグラクソ-ウェルカム（Glaxo-Wellcome Ltd.、ロンドン、イギリス）から販売されているWellferon（登録商標）インターフェロンα-n1（INS）のような天然のαインターフェロンの純粋な混合物であるインターフェロンα-n1；およびインターフェロンサイエンシズ（Interferon Sciences）が製造して、パーデュー・フレデリック（Purdue Frederick Co.、ノーウォーク、コネチカット州）からAlferon（登録商標）の商品名で販売されている天然のαインターフェロン混合物であるインターフェロンα-n3が含まれるがこれらに限定されない。
【００８９】
「IFN-α」という用語はまた、コンセンサスIFN-αを含む。コンセンサスIFN-α（「CIFN」および「IFN-con」とも呼ばれる）は、米国特許第4,695,623号および第4,897,471号に開示されるIFN-con1、IFN-con2、およびIFN-con3と命名されるアミノ酸配列、ならびに天然に存在するインターフェロンα（例えば、Infergen（登録商標）、アムジェン（Amgen）、サウザンドオークス、カリフォルニア州）のコンセンサス配列の決定によって定義されるコンセンサスインターフェロンを含むがこれらに限定されない。IFN-conをコードするDNA配列は、上記の特許または他の標準的な方法に記述されるように合成してもよい。CIFNの使用は特に重要である。
【００９０】
「IFN-α」という用語はまた、血清半減期のような特定の特性を変化させるように誘導体化された（例えば、化学改変された）誘導体を含む。そのため、「IFN-α」という用語には、グリコシル化IFN-α；ポリエチレングリコールによって誘導体化されたIFN-α（「ポリエチレングリコール化IFN-α」）等が含まれる。ポリエチレングリコール化IFN-α、およびこれを作製する方法は、米国特許第5,382,657号；第5,981,709号；および第5,951,974号において考察されている。ポリエチレングリコール化IFN-αは、PEG結合インターフェロンα-2a（Roferon、ホフマン・ラ-ロシュ、ナトリー、ニュージャージー州）、インターフェロンα2b（Intron、シェリング-プラウ（Schering-Plough）、マディソン、ニュージャージー州）、インターフェロンα-2c（Beroforα、ベーリンガー・インゲルハイム、インゲルハイム、ドイツ）；および天然に存在するインターフェロンα（Infergen（登録商標）、アムジェン、サウザンドオークス、カリフォルニア州）のコンセンサス配列の決定によって定義されたコンセンサスインターフェロンを含むがこれらに限定されない、PEGと上記の任意のIFN-α分子との結合体を含む。
【００９１】
インターフェロンγ
IFN-γポリペプチドをコードする核酸配列は、公共のデータベース、例えばジェンバンク、雑誌刊行物等からアクセスしてもよい。ヒト疾患の治療に関して様々な哺乳類IFN-γポリペプチドが重要であるが、一般的にヒトタンパク質が用いられる。ヒトIFN-γコード配列は、ジェンバンクアクセッション番号X13274；V00543；およびNM_000619に認められる。対応するゲノム配列は、ジェンバンクアクセッション番号J00219；M37265；およびV00536に認められる。例えば、Grayら（1982）Nature 295：501（ジェンバンクX13274）；およびRinderknechtら（1984）J.B.C. 259：6790を参照されたい。
【００９２】
IFN-γ1b（Actimmune（登録商標）；ヒトインターフェロン）は、アミノ酸140個の一本鎖ポリペプチドである。これは、大腸菌における組換えによって産生され、グリコシル化されない。Rinderknechtら（1984）、J. Biol. Chem. 259：6790〜6797。
【００９３】
本発明の方法において用いられるIFN-γは、それらがIFN-γ活性、特にヒトIFN-γ活性を有する限り、天然のIFN-γs、組換え型IFN-γsおよびその誘導体の如何なるものであってもよい。ヒトIFN-γは、インターフェロンに特徴的な抗ウイルスおよび抗増殖特性を示すと共に、当技術分野で既知であるように他の多くの免疫調節活性を示す。IFN-γは、先に提供した配列に基づくが、タンパク質の産生およびタンパク質溶解プロセシングによって、そのプロセシング変種が起こりうる。Grayら、上記によって提供された非プロセシング配列は、アミノ酸（aa）166個からなる。大腸菌において産生された組換え型IFN-γは、当初アミノ酸146個であると考えられた（アミノ酸20位で始まる）が、無処置のヒトIFN-γは、残基23位の後で切断されて、アミノ酸143個のタンパク質、または細菌において発現に必要な末端のメチオニンが存在する場合にはアミノ酸144個のタンパク質を生じることが後に判明した。N末端メチオニンは、大腸菌発現の特定の場合において、プロセシングによって除去されない、mRNA翻訳「開始」シグナルAUGによってコードされるアーチファクトである。他の微生物システムまたは真核細胞発現系では、メチオニンは除去される可能性がある。
【００９４】
本発明の方法において用いるために、無処置のIFN-γペプチド、その改変および変種、または一つもしくはそれ以上のペプチドの組み合わせの如何なるものを用いてもよい。対象となるIFN-γペプチドには断片が含まれ、完全な配列と比較してカルボキシ末端で多様に切断されうる。そのような断片は、アミノ酸24〜149個（プロセシングされていないポリペプチドの残基からの番号付け）が存在する限り、ヒトγインターフェロンの特徴的な特性を示し続ける。外来の配列は、活性を失うことなく、アミノ酸155位後のアミノ酸配列を置換することができる。例えば、米国特許第5,690,925号を参照されたい。無処置のIFN-γ部分には、アミノ酸残基24〜150、24〜151、24〜152、24〜153、24〜155、および24〜157から多様に伸長した分子が含まれる。これらの変種および当技術分野で既知のIFN-γ活性を有する他の変種の如何なるものも、本発明の方法において用ることができる。
【００９５】
IFN-γポリペプチドの配列は、配列における標的変化を生成するために当技術分野において既知の様々な方法で変化させてもよい。変種ポリペプチドは、通常、本明細書に定義される配列と実質的に類似である、すなわちアミノ酸の少なくとも1個が異なる、および少なくとも2個しかし約10個を超えないアミノ酸が異なる。配列の変化は置換、挿入、または欠失であってもよい。アラニンまたは他の残基を系統的に導入する変異の走査を用いて、重要なアミノ酸を決定してもよい。対象となる特定のアミノ酸置換には、保存的および非保存的変化が含まれる。保存的アミノ酸置換には典型的に、以下の群内の置換が含まれる：（グリシン、アラニン）；（バリン、イソロイシン、ロイシン）；（アスパラギン酸、グルタミン酸）；（アスパラギン、グルタミン）；（セリン、トレオニン）；（リジン、アルギニン）；または（フェニルアラニン、チロシン）。
【００９６】
一次アミノ酸配列を変化させる、または変化させない可能性がある対象となる改変には、ポリペプチドの誘導体化、例えばアセチル化またはカルボキシル化；グリコシル化部位を導入または除去するアミノ酸配列の変化；タンパク質をポリエチレングリコール化に対して感受性にするアミノ酸配列の変化等が含まれる。同様に、グリコシル化の改変、例えば、その合成およびプロセシング、またはさらなるプロセシング段階において、ポリペプチドのグリコシル化パターンを改変することによって得られた改変、例えば、哺乳類のグリコシル化または脱グリコシル化酵素のようなグリコシル化に影響を及ぼす酵素にポリペプチドを曝露することによって得られた改変が含まれる。同様に、リン酸化アミノ酸残基、例えばホスホチロシン、ホスホセリン、またはホスホトレオニンを有する配列も含まれる。
【００９７】
タンパク質溶解分解に対するその抵抗性を改善するために、溶解度特性を最適にするために、または治療物質としてそれらをより適するようにするために、通常の化学技術を用いて改変されているポリペプチドが本発明に含まれる。例えば、ペプチド骨格を環状化して安定性を増強してもよい（Friedlerら（2000）、J. Biol. Chem. 275：23783〜23789）。天然に存在するL-アミノ酸以外の残基、例えばD-アミノ酸または天然に存在しない合成アミノ酸を含む類似体を用いてもよい。タンパク質は、安定性を増強するためにポリエチレングリコール化してもよい。
【００９８】
ポリペプチドは、当技術分野で既知の通常の方法を用いたインビトロ合成によって調製しても、組換え法によって調製してもよく、または誘導されてもしくは本来タンパク質を産生する細胞から単離してもよい。特定の配列および調製法は、簡便さ、経済性、必要な純度等によって決定される。望ましければ、合成または発現の際に他の分子または表面との結合を可能にする様々な基をポリペプチドに導入してもよい。このように、チオエーテルを作製するためにはシステイン、金属イオン錯体に結合させるためにはヒスチジン、アミドまたはエステルを形成するためにはカルボキシ基、アミドを形成するためにはアミノ基等を用いることができる。
【００９９】
ポリペプチドはまた、組換え合成の通常の方法に従って単離および精製してもよい。発現宿主の溶解物を調製して、溶解物をHPLC、排除クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、アフィニティクロマトグラフィー、または他の精製技術によって精製してもよい。ほとんどの場合、用いられる組成物は、産物の調製およびその精製法に関連した混入物に対して、所望の産物を重量で少なくとも20％、より通常、重量で少なくとも約75％、好ましくは重量で少なくとも約95％含み、治療目的の場合には、通常少なくとも約99.5％を含む。通常、割合は、総タンパク質に基づく。
【０１００】
リバビリン
ICNファーマシューティカルズインク（ICN Pharmaceuticals Inc、コスタメサ、カリフォルニア州）から販売されているリバビリン、1-β-D-リボフラノシル-1H-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキサミドは、メルクインデックス第11版において化合物番号8199として記述されている。その製造および処方は米国特許第4,211,771号に記述されている。本発明はまた、リバビリンの誘導体を用いることも企図する（例えば、米国特許第6,277,830号を参照されたい）。
【０１０１】
肝臓ターゲティングシステム
本明細書に記載の抗ウイルス剤は、任意の既知のターゲティング手段を用いて肝臓にターゲティングすることができる。当業者は、肝細胞に化合物をターゲティングすることが証明されている広く多様な化合物を承知している。そのような肝臓ターゲティング化合物には、アシアロ糖ペプチド；ガラクトースまたはラクトース残基に結合した塩基性ポリアミノ酸；ガラクトシル化アルブミン；アシアロ糖タンパク質-ポリ-L-リジン結合体；ラクトサミン化アルブミン；ラクトシル化アルブミン-ポリ-L-リジン結合体；ガラクトシル化ポリ-L-リジン；ガラクトース-PEG-ポリ-L-リジン結合体；ラクトース-PEG-ポリ-L-リジン結合体；アシアロフェツイン；およびラクトシル化アルブミンが含まれるがこれらに限定されない。
【０１０２】
いくつかの態様において、肝臓ターゲティング化合物は、抗ウイルス剤に直接結合させる。他の態様において、肝臓ターゲティング化合物は、抗ウイルス剤に間接的に、例えばリンカーによって結合させる。なお他の態様において、肝臓ターゲティング化合物を、例えばリポソームまたはミクロスフェアに会合させ、肝細胞ターゲティング送達媒体を形成して、肝細胞ターゲティング送達媒体を用いて抗ウイルス剤を送達する。
【０１０３】
「肝臓にターゲティングする」および「肝細胞ターゲティング」という用語は、被験者に投与された抗ウイルス剤の少なくとも約25％、少なくとも約30％、少なくとも約35％、少なくとも約40％、少なくとも約45％、少なくとも約50％、少なくとも約55％、少なくとも約60％、少なくとも約65％、少なくとも約70％、少なくとも約75％、少なくとも約80％、少なくとも約85％、または少なくとも約90％またはそれ以上が、肝門脈を通して肝臓に入り、肝細胞に関連するようになる（例えば、取り込まれる）ように、肝細胞に抗ウイルス剤をターゲティングすることを指す。
【０１０４】
薬物送達系
抗ウイルス剤の多相血清濃度プロフィールを提供することができる任意の既知の送達系を、本発明において用いることができる。さらに、任意の既知の送達系の併用を用いることができる。
【０１０５】
薬物送達系は、装置が、例えば機械的注入ポンプ、電気機械的注入ポンプ、デポー剤、ミクロスフェアに基づくことができる埋め込み型装置を含む任意の装置となりうる。本質的に、先に記述したような制御された放出（少なくとも二相性の放出）を提供する薬物送達系が、本発明において用いるために適している。いくつかの態様において、薬物送達系はデポー剤である。他の態様において、薬物送達系は、連続送達装置（例えば、注射システム、ポンプ等）である。なお他の態様において、薬物送達系は、注射装置（例えば、シリンジおよび針）と連続送達システムとの併用である。「連続送達システム」という用語は、本明細書において「制御送達システム」と互換的に用いられ、その多様ものが当技術分野において既知であるカテーテル、注射装置等と組み合わせた連続的（例えば、制御された）送達装置（例えば、ポンプ）を含む。
【０１０６】
いくつかの態様において、送達システムはデポーシステムである。デポーシステムは、IFN-αまたは他の抗ウイルス剤が抱埋されるマトリクスを含む。マトリクスはポリマーまたは非ポリマー物質である。
【０１０７】
特定の態様において、薬物送達システムはデポー剤を含む。
【０１０８】
いくつかの態様において、デポー剤はポリマーマトリクスを含む。例えば、加水分解可能なエステル結合を有するコポリマーおよびホモポリマーポリエステルに由来するポリマーマトリクスを用いてもよい。これらの多くが当技術分野において生分解性で、毒性を有しないまたは毒性が低い分解産物に至ることが知られている。そのようなポリマーの非制限的な例は、ポリグリコール酸（PGA）およびポリ乳酸（PLA）ポリ(DL-乳酸-コ-グリコール酸)（DL PLGA）、ポリ(D-乳酸-コグリコール酸)（D PLGA）、およびポリ(L-乳酸-コ-グリコール酸)（L PLGA）である。ポリ(乳酸-コ-グリコール酸)における乳酸およびグリコール酸ポリマーの例としての比は、100：0（すなわち、純粋なポリラクチド）〜50：50の範囲である。他の有用な生分解性または生体腐食性ポリマーには、ポリ(ε-カプロラクトン)、ポリ(ε-カプロラクトン-コ-乳酸)、ポリ(ε-カプロラクトン-コ-グリコール酸)、ポリ(β-ヒドロキシ酪酸)、ポリ(アルキル-2-シアノアクリレート)、ポリ(ヒドロキシエチルメタクリレート）のようなハイドロゲル、ポリアミド、ポリ(アミノ酸)（すなわち、L-ロイシン、グルタミン酸、L-アスパラギン酸等）、ポリ(エステルウレア)、ポリ(2-ヒドロキシエチルDL-アスパルトアミド)、ポリアセタールポリマー、ポリオルトエステル、ポリカーボネート、ポリマレアミド、多糖類およびそのコポリマーが含まれるがこれらに限定されない。
【０１０９】
いくつかの態様において、薬物送達システムは、ポリ(乳酸-コ-グリコール酸)システムである。そのようなシステムは文献、例えば米国特許第6,183,781号および第5,654,008号に記載されている。
【０１１０】
これらの態様のいくつかにおいて、デポー剤は、非ポリマーの非水溶性液体担体材料、例えば、ショ糖アセテートイソブチレート（SAIB）、または米国特許第5,968,542号および第5,747,058号に記述の化合物のようなもう一つの化合物等の高粘度液体である。例えばSABER（商標）システム（サザンバイオシステムズインク（Southern Biosystems, Inc））を用いる。
【０１１１】
放出改変薬および/または添加剤をデポーマトリクスに含めることができる。
【０１１２】
本明細書において用いられる「放出改変剤」は、ポリマー/薬物マトリクスに組み入れられると、マトリクスの薬物放出特性を改変する材料を指す。放出改変剤は、例えば、マトリクスからの薬物放出速度を減少または増加させることができる。放出改変剤の一つの群には金属含有塩が含まれる。
【０１１３】
一つのカテゴリーの添加剤には、生分解性のポリマーおよびオリゴマーが含まれる。ポリマーは、送達される物質の放出プロフィールを変化させるために、組成物に完全性を加えるために、またはそうでなければ組成物の特性を改変するために用いることができる。適した生分解性のポリマーおよびオリゴマーの非制限的な例には、ポリ(ラクチド)、ポリ(ラクチド-コグリコリド)、ポリ(グリコリド)、ポリ(カプロラクトン)、ポリアミド、ポリ無水物、ポリアミノ酸、ポリオルトエステル、ポリシアノアクリレート、ポリ(フォスファジン)、ポリ(ホスホエステル)、ポリエステルアミド、ポリジオキサノン、ポリアセタール、ポリケタール、ポリカーボネート、ポリオルトカーボネート、分解性ポリウレタン、ポリヒドロキシブチレート、ポリヒドロキシバレレート、ポリアルキレンオキサレート、ポリアルキレンスクシネート、ポリ(リンゴ酸)、キチン、キトサン、およびコポリマー、ターポリマー、酸化セルロース、または上記の材料の組み合わせもしくは混合物が含まれる。
【０１１４】
ポリ(α-ヒドロキシ酸)の例には、ポリ(グリコール酸)、ポリ(DL-乳酸)およびポリ(L-乳酸)、ならびにそのコポリマーが含まれる。ポリラクトンの例には、ポリ(ε-カプロラクトン)、ポリ(δ-バレロラクトン)およびポリ(γ-ブチルラクトン)が含まれる。
【０１１５】
他の添加剤には、非生分解性のポリマーが含まれる。添加剤として用いることができる非腐食性ポリマーの非制限的な例には、ポリアクリレート、エチレン-酢酸ビニルポリマー、セルロースおよびセルロース誘導体、アシル置換セルロースアセテートおよびその誘導体、非腐食性ポリウレタン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、ポリフッ化ビニル、ポリ(ビニルイミダゾール)、クロロスルホン化ポリオレフィンおよびポリエチレンオキサイドが含まれる。
【０１１６】
本発明の組成物において用いることができるさらなるクラスの添加剤は、天然および合成油ならびに脂肪である。動物またはナッツ植物種子に由来する油には、典型的に、脂肪酸、主にオレイン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、およびリノレン酸のグリセリドが含まれる。
【０１１７】
他の添加剤には、被膜特性改変剤および放出制御剤が含まれる。被膜特性改変剤の例には、可塑剤、例えばクエン酸トリエチル、トリアセチン、ポリエチレングリコール、ポリエチレンオキサイド等が含まれる。放出制御剤の例には、無機塩基（例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム等）、有機塩基（例えば、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、リドカイン、テトラカイン等）、無機酸（例えば、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム）、有機酸（例えば、クエン酸、乳酸、グリコール酸、アスコルビン酸等）、および放出の際にコーティングに孔を形成する固体可溶性物質（例えば、塩化ナトリウム結晶、グルコース、マンニトール、ショ糖等）が含まれる。
【０１１８】
いくつかの態様において、薬物送達システムは、米国特許第6,201,071号；第6,117,949号；および第6,004,573号に記述されるように、ポリエチレングリコール-ポリ(乳酸コグリコール)酸（PEG-PLGA）に基づく水溶性注射用熱感受性ゲルである。例えば、デポー剤は、水溶性の生分解性のABA型またはBAB型のトリブロックポリマーを含むことができ、これは生分解性のポリエステルで構成される疎水性のAポリマーブロックの主要な量と、親水性のPEG Bポリマーブロックの少量とで構成され、全体的な平均分子量は約2000〜4999であり、逆熱ゲル化特性を有する。そのような材料は、体内でゲルデポー剤を形成して、そこから薬剤が一定速度で放出される。
【０１１９】
いくつかの態様において、薬物送達システムは、例えば米国特許第6,071,538号；第6,245,359号；第6,221,367号；および第6,099,856号に記述されるように、ポリアミノ酸に基づくシステムである。
【０１２０】
他の態様において、薬物送達システムはミクロスフェアである。ミクロスフェアは文献に十分に記述されている。
【０１２１】
もう一つの態様において、薬物送達システムはポンプ、例えば埋め込み型ポンプ、特に調節可能な埋め込み型ポンプである。調節型ポンプ、特に送達位置に存在しながら調節可能なポンプ（例えば、患者の体外から外部調節可能な）が特に重要である。そのようなポンプには、治療的に有効となるAUC IFN-α血清濃度を得るために、IFN-αまたは他の抗ウイルス剤の高濃度を長時間、例えば24〜72時間にわたって提供することができるプログラム可能なポンプが含まれる。
【０１２２】
いくつかの態様において、送達装置はMedipad（登録商標）装置（エランファームインターナショナル（Elan Pharm Int'l., Ltd））である、
【０１２３】
機械的または電気機械的注入ポンプも同様に、本発明によって用いるために適格となりうる。そのような装置の例には、例えば、米国特許第4,692,147号；第4,360,019号；第4,487,603号；第4,360,019号；第4,725,852号等に記述される装置が含まれる。一般的に、本発明の薬物送達法は、多様な任意の再充填可能なポンプシステムを用いて行うことができる。ポンプは経時的に一定で制御された放出を提供する。
【０１２４】
好ましい態様において、薬物送達システムは、少なくとも部分的に埋め込み可能な装置である。埋め込み可能な装置は、当技術分野で周知の方法および装置を用いて任意の適した埋め込み部位に埋め込むことができる。埋め込み部位は、薬物送達装置が導入されて配置される被験者の体内の部位である。埋め込み部位には、皮下、皮下、筋肉内、または被験者の体内の他の適した部位が含まれるが必ずしもそれらに限定されない。薬物送達装置の埋め込みおよび除去の簡便さから、皮下埋め込み部位が一般的に好ましい。
【０１２５】
先に述べたように、送達システムの併用を用いることができる。一つの非制限的な例として、初回薬物放出または大量放出特徴を有するPLGAに基づくシステムを、大量に薬物を放出しないショ糖アセテートイソブチレートに基づくシステムと組み合わせてもよい。もう一つの非制限的な例として、ボーラス投与後にゼロ次数スループットを行うような負荷量が装置システムによって実現または得られる。送達分子は、これら全ての送達システムについて、αインターフェロンまたはPEG誘導体化αインターフェロンであってもよい。
【０１２６】
薬物送達システムに応じて、IFN-αは、経口、皮下、筋肉内、非経口、または経皮、皮膚等のような他の経路で投与することができる。例えば薬物が経口送達として門脈循環に入り、所望の臓器に薬物をターゲティングするために有用である場合を例外として、そのような経路、例えば経口によって投与する場合には、薬物の大量放出が起こりうる。
【０１２７】
多くの態様において、IFN-αは皮下送達される。
【０１２８】
IFN-αは、薬学的に許容される賦形剤との製剤として個体に投与される。広く多様な薬学的に許容される賦形剤が当技術分野で既知であり、本明細書において詳細に説明する必要はない。薬学的に許容される賦形剤は、例えば、A.Gennaro（2000）、「Remington：The Science and Practice of Pharmacy」、第20版、リッピンコット、ウィリアムス＆ウィルキンス；「Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems」（1999）H.C.Anselら編、第7版、リッピンコット、ウィリアムス＆ウィルキンス；および「Handbook of Pharmaceutical Excipients」（2000）、A.H. Kibbeら編、第3版、全米製薬協会を含む、多様な出版物において十分に記述されている。
【０１２９】
IFN-αは、一つまたはそれ以上のさらなる治療物質と共に（すなわち、異なる剤形で同時に；同じ剤形で同時に；異なる剤形で約48時間以内、約36時間以内、約24時間以内、約16時間以内、約12時間以内、約8時間以内、約4時間以内、約2時間以内、約1時間以内、約30分以内、または約15分以内もしくはそれ未満で投与する）投与することができる。
【０１３０】
他の態様において、患者は、IFN-αとリバビリンとの併用によって治療される。ICNファーマシューティカルズインク（コスタメサ、カリフォルニア州）から販売されているリバビリン、1-β-D-リボフラノシル-1H-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキサミドは、メルクインデックス第11版において化合物番号8199として記述されている。その製造および処方は米国特許第4,211,771号に記述されている。リバビリンは、IFN-αの投与に関連してカプセルまたは錠剤型で経口投与してもよい。当然のこととして、双方の薬剤に関して、鼻腔スプレー、経皮、静脈内、坐剤、徐放性投与剤形のような他のタイプの投与が利用できればそれらも企図される。活性成分を破壊することなく適当な用量が送達される限り、如何なる投与剤形も有効である。投与する場合、リバビリンは、約400 mg〜約1200 mg、約600 mg〜約1000 mg、または約700 mg〜約900 mg/日の範囲の量で投与される。
【０１３１】
いくつかの態様において、併用治療はIFN-αとIFN-γとを含む。これらの態様のいくつかにおいて、IFN-αおよびIFN-γは、同じ製剤で投与され、同時に投与される。他の態様において、IFN-αおよびIFN-γは、個別に、例えば異なる製剤で投与される。これらの態様のいくつかにおいて、IFN-αおよびIFN-γは、個々に同時投与される。他の態様において、IFN-αおよびIFN-γは、個々に、そして互いに約5秒〜約15秒以内、約15秒〜約30秒以内、約30秒〜約60秒以内、約1分〜約5分以内、約5分〜約15分以内、約15分〜約30分以内、約30分〜約60分以内、約1時間〜約2時間以内、約2時間〜約6時間以内、約6時間〜約12時間以内、約12時間〜約24時間以内、または約24時間〜約48時間以内に投与される。
【０１３２】
治療の有効性の決定
本発明の方法が肝炎ウイルス感染症、特にHCV感染症を治療するために有効であるか否かは、ウイルス量を測定することによって、肝線維症を含むがこれらに限定されないHCV感染症に関連したパラメータを測定することによって、決定することができる。
【０１３３】
ウイルス量は、血清中のウイルス力価またはレベルを測定することによって測定することができる。これらの方法には、定量的ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）および分岐DNA（bDNA）試験が含まれるがこれらに限定されない。例えば、HCV RNAのウイルス量（力価）を測定するための定量的アッセイ法が開発されている。定量的逆転写PCR（RT-PCR）（Amplicor HCV Monitor（商標）、ロシュモレキュラーシステムズ（Roche Molecular Systems）、ニュージャージー州）；および分岐DNA（デオキシリボ核酸）シグナル増幅アッセイ法（Quantiplex（商標）HCV RNAアッセイ法（bDNA）、カイロンコーポレーション（Chiron Corp.）、エメリービル、カリフォルニア州）を含む、多くのそのようなアッセイ法が市販されている。例えば、Gretchら（1995）、Ann. Intern. Med. 123：321〜329を参照されたい。
【０１３４】
先に述べたように、本発明の方法が肝炎ウイルス感染症、例えばHCV感染症を治療するために有効であるか否かは、肝線維症のような肝炎ウイルス感染症に関連したパラメータを測定することによって決定することができる。肝線維症の減少は、肝生検試料を分析することによって決定される。肝生検の分析は、二つの主要な成分、すなわち重症度および現行の疾患活動度の測定としての「等級」によって評価した壊死炎症と線維症病変、ならびに長期疾患進行の反映としての「進行期（stage）」によって評価した肝実質または血管再形成の評価を含む。例えば、Brunt（2000）Hepatol. 31：241〜246；およびMETAVIR（1994）Hepatology 20：15〜20を参照されたい。肝生検の分析に基づき、スコアを割付する。線維症の程度および重症度の定量的評価を提供する多くの標準化採点システムが存在する。これらには、METAVIR、ノデル（Knodell）、シャウア（Scheuer）、ルドウィグ（Ludwig）、およびイシャク（Ishak）採点システムが含まれる。
【０１３５】
肝線維症の血清マーカーも同様に、本発明の治療法の有効性の指標として測定することができる。肝線維症の血清マーカーには、ヒアルロネート、N末端プロコラーゲンIIIペプチド、IV型コラーゲンの7Sドメイン、C末端プロコラーゲンIペプチド、およびラミニンが含まれるがこれらに限定されない。肝線維症のさらなる生化学マーカーには、α-2-マクログロブリン、ハプトグロビン、γグロブリン、アポリポタンパク質A、およびγグルタミルトランスペプチダーゼが含まれる。
【０１３６】
一つの非制限的な例として、標準的なアッセイ法を用いて血清アラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT）レベルを測定する。一般的に、約45国際単位/ml血清未満のALTレベルが、正常であると見なされる。いくつかの態様において、IFN-αの有効量は、ALTレベルを約45 IU/ml血清未満に減少させるために有効な量である。
【０１３７】
肝線維症を治療する方法
本発明は、肝線維症を治療する方法を提供する。方法は、ウイルス量が個体において減少し、肝線維症が治療される、上記のように抗ウイルス剤を投与することを含む。肝線維症の治療には、肝線維症が起こるリスクを減少させること、肝線維症に関連した症状を減少させること、および肝機能を増加することが含まれる。
【０１３８】
本明細書に記述の抗ウイルス剤による治療が肝線維症の減少に有効であるか否かは、肝線維症および肝機能を測定するために十分に確立された多数の任意の技術によって決定される。肝線維症の減少は、肝生検試料を分析することによって決定される。肝生検の分析は、二つの主要な成分、すなわち重症度および現行の疾患活動度の測定としての「等級」によって評価した壊死炎症と線維症病変、ならびに長期疾患進行の反映としての「進行期」によって評価した肝実質または血管再形成の評価を含む。例えば、Brunt（2000）Hepatol. 31：241〜246；およびMETAVIR（1994）Hepatology 20：15〜20を参照されたい。肝生検の分析に基づき、スコアを割付する。線維症の程度および重症度の定量的評価を提供する多くの標準化採点システムが存在する。これらには、METAVIR、ノデル、シャウア、ルドウィグ、およびイシャク採点システムが含まれる。
【０１３９】
METAVIR採点システムは、線維症（門脈線維症、中心葉線維症、および硬変）；壊死（断片および葉の壊死、好酸性陥没、および風船状変性）；炎症（門脈炎症、門脈リンパ様凝集物、および門脈炎症の散布）；胆管の変化；およびノデル指数（門脈周囲壊死、葉壊死、門脈炎症、線維症、および全体的な疾患活動度のスコア）を含む、肝生検の様々な特徴の分析に基づく。METAVIRシステムにおけるそれぞれの進行期の定義は、以下の通りである：スコア0、線維症なし；スコア1、隔膜形成を伴わない門脈の放射状肥大；スコア2、まれに隔膜形成を伴う門脈の肥大；スコア3、硬変を伴わない多数の隔膜；およびスコア4、硬変。
【０１４０】
ノデル採点システムは、肝炎活動度指数とも呼ばれ、四つの組織学的特徴のスコアに基づいて標本を分類する：I、門脈周囲および/またはまたがる壊死；II、葉内変性および巣状壊死；III、門脈炎症；およびIV、線維症。ノデル進行期分類システムでは、スコアは以下の通りである：スコア0、線維症なし；スコア1、軽度の線維症（線維様門脈膨張）；スコア2、中等度の線維症；スコア3、重度の線維症（またがる線維症）；およびスコア4、硬変。スコアが高くなれば、肝組織の損傷はより重度となる。Knodell（1981）Hepatol. 1：431。
【０１４１】
シャウア採点システムのスコアは以下の通りである：スコア0、線維症なし；スコア1、肥大した線維症門脈；スコア2、構築は無傷である門脈周囲または門脈-門脈隔膜；スコア3、明白な硬変を認めないが構築が歪んでいる線維症；スコア4、可能性があるまたは明白な硬変。Scheuer（1991）J. Hepatol. 13：372。
【０１４２】
イシャク採点システムは、Ishak（1995）J. Hepatol. 22：696〜699に記載される。ステージ0、線維症なし；ステージ1、短い線維様隔膜を伴うまたは伴わないいくつかの門脈領域の線維様膨張；ステージ2、短い線維様隔膜を伴うまたは伴わないほとんどの門脈領域の線維様膨張；ステージ3、時に門脈-門脈（P-P）架橋を伴うほとんどの門脈領域の線維様膨張；ステージ4、顕著な架橋（P-P）と共に門脈-中心（P-C）を伴う門脈領域の線維様膨張；ステージ5、時に結節（不完全な硬変）を伴う顕著な架橋（P-Pおよび/またはP-C）；ステージ6、可能性があるまたは明白な硬変。抗線維症治療の利益も同様に、ビリルビン血清レベル、アルブミン血清レベル、プロトロンビン時間の異常、腹水の有無および重症度、ならびに脳症の存在および重症度に基づく多成分ポイントシステムを含むチャイルド・プー（Child-Pugh）採点システムを用いて測定および評価することができる。これらのパラメータの異常の有無および重症度に基づいて、患者を臨床疾患の重症度が増加する順に三つのカテゴリーの一つに分類してもよい：A、BまたはC。
【０１４３】
いくつかの態様において、抗ウイルス剤の治療的有効量は、治療前および治療後の肝生検に基づく線維症進行期において1単位またはそれ以上の変化を引き起こす抗ウイルス剤の量である。特定の態様において、IFN-αとIFN-γの治療的有効量は、METAVIR、ノデル、シャウア、ルドウィグ、またはイシャク採点システムにおいて肝線維症を少なくとも1単位減少させる。
【０１４４】
次に、または間接的に、肝機能指数も同様に用いて、治療の有効性を評価することができる。コラーゲンの特異的染色および/または肝線維症の血清マーカーに基づく肝線維症の定量的程度の形態測定コンピューター化半自動測定も同様に、本発明の治療法の有効性の指標として測定することができる。肝機能の二次指数には、トランスアミナーゼ血清レベル、プロトロンビン時間、ビリルビン、血小板数、門脈血圧、アルブミンレベル、およびチャイルド・プースコアの評価が含まれるがこれらに限定されない。抗ウイルス剤の有効量は、無処置の個体またはプラセボ処置個体における肝機能の指数と比較して、肝機能指数を少なくとも約10％、少なくとも約20％、少なくとも約25％、少なくとも約30％、少なくとも約35％、少なくとも約40％、少なくとも約45％、少なくとも約50％、少なくとも約55％、少なくとも約60％、少なくとも約65％、少なくとも約70％、少なくとも約75％、または少なくとも約80％またはそれ以上増加させるために有効な量である。当業者は、その多くが市販されており、臨床の状況で日常的に用いられる標準的なアッセイ法を用いて、肝機能のそのような指標を容易に測定することができる。
【０１４５】
肝線維症の血清マーカーも同様に、本発明の治療法の有効性の指標として測定することができる。肝線維症の血清マーカーには、ヒアルロネート、N末端プロコラーゲンIIIペプチド、IV型コラーゲンの7Sドメイン、C末端プロコラーゲンIペプチド、およびラミニンが含まれるがこれらに限定されない。肝線維症のさらなる生化学マーカーには、α-2-マクログロブリン、ハプトグロビン、γグロブリン、アポリポタンパク質A、およびγグルタミルトランスペプチダーゼが含まれる。
【０１４６】
抗ウイルス剤の治療的有効量は、無処置の個体またはプラセボ処置個体におけるマーカーレベルと比較して、肝線維症の血清マーカーレベルを少なくとも約10％、少なくとも約20％、少なくとも約25％、少なくとも約30％、少なくとも約35％、少なくとも約40％、少なくとも約45％、少なくとも約50％、少なくとも約55％、少なくとも約60％、少なくとも約65％、少なくとも約70％、少なくとも約75％、または少なくとも約80％またはそれ以上低下させるために有効な量である。当業者は、その多くが市販されており、臨床の状況で日常的に用いられる標準的なアッセイ法を用いて、肝線維症のそのような血清マーカーを容易に測定することができる。血清マーカーを測定する方法には、免疫学に基づく方法、例えば、所定の血清マーカーに対して特異的な抗体を用いる酵素結合イムノソルベントアッセイ法（ELISA）、ラジオイムノアッセイ法等が含まれる。
【０１４７】
機能的肝貯蔵の定量的試験も同様に用いて、抗ウイルス剤による治療の有効性を評価することができる。これらには、インドシアニングリーンクリアランス（ICG）、ガラクトース排泄能（GEC）、アミノピリン呼吸試験（ABT）、アンチピリンクリアランス、モノエチルグリシン-キシリジド（MEG-X）クリアランス、およびカフェインクリアランスが含まれる。
【０１４８】
本明細書において用いられるように、「肝臓の硬変に関連した合併症」とは、非代償性肝疾患の続発症である、すなわち肝線維症の発症の後におよびその結果として起こる障害を指し、これには、腹水の発生、静脈瘤出血、門脈高血圧症、黄疸、進行性肝不全、脳症、肝細胞癌、肝臓移植を必要とする肝不全、および肝臓関連死が含まれるがこれらに限定されない。
【０１４９】
抗ウイルス剤の治療的有効量は、無処置の個体またはプラセボ処置個体と比較して、肝硬変に関連した障害の発生率（例えば、個体が発症する確率）を少なくとも約10％、少なくとも約20％、少なくとも約25％、少なくとも約30％、少なくとも約35％、少なくとも約40％、少なくとも約45％、少なくとも約50％、少なくとも約55％、少なくとも約60％、少なくとも約65％、少なくとも約70％、少なくとも約75％、または少なくとも約80％またはそれ以上減少させるために有効な量である。
【０１５０】
抗ウイルス剤による治療が、肝硬変に関連した障害の発生を減少させるために有効であるか否かは、当業者によって容易に決定することができる。
【０１５１】
肝線維症が減少すれば肝機能は増加する。このように、本発明は、一般的に、抗ウイルス剤の治療的有効量を投与することを含む、肝機能を増加させる方法を提供する。肝機能には、血清タンパク質（例えば、アルブミン、凝固因子、アルカリホスファターゼ、アミノトランスフェラーゼ（例えば、アラニントランスアミナーゼ、アスパラギン酸トランスアミナーゼ）、5'-ヌクレオシダーゼ、γ-グルタミルトランスペプチダーゼ等）のようなタンパク質の合成、ビリルビンの合成、コレステロールの合成、および胆汁酸の合成；糖質代謝、アミノ酸およびアンモニア代謝、ホルモン代謝、ならびに脂質代謝を含むがこれらに限定されない肝代謝機能；外因性薬剤の解毒化；内臓および門脈血行力学を含む血行力学機能等が含まれるがこれらに限定されない。
【０１５２】
肝機能が増加したか否かは、十分に確立された肝機能試験を用いて、当業者によって容易に確認することができる。このように、アルブミン、アルカリホスファターゼ、アラニントランスアミナーゼ、アスパラギン酸トランスアミナーゼ、ビリルビン等のような肝機能マーカーの合成は、標準的な免疫学および酵素アッセイ法を用いて、血清中のこれらのマーカーのレベルを測定することによって評価することができる。内臓および門脈血行力学は、標準的な方法を用いて門脈楔入圧および/または抵抗によって測定することができる。代謝機能は血清中のアンモニアレベルを測定することによって測定することができる。
【０１５３】
肝臓によって通常分泌される血清タンパク質が正常範囲であるか否かは、標準的な免疫および酵素アッセイ法を用いて、そのようなタンパク質レベルを測定することによって決定することができる。当業者はそのような血清タンパク質の正常範囲を知っている。以下は非制限的な例である。アラニントランスアミナーゼの正常範囲は、約7〜約56単位/L血清である。アスパラギン酸トランスアミナーゼの正常範囲は、約5〜約40単位/ml血清である。ビリルビンは標準的なアッセイ法を用いて測定する。正常なビリルビンレベルは通常、約1.2 mg/dL未満である。アルブミン血清レベルは標準的なアッセイ法を用いて測定する。血清アルブミンの正常レベルは約35〜約55 g/Lの範囲である。プロトロンビン時間の延長は標準的なアッセイ法を用いて測定する。正常なプロトロンビン時間は対照より約4秒未満長い。
【０１５４】
抗ウイルス剤の治療的有効量は、肝機能を少なくとも約10％、少なくとも約20％、少なくとも約30％、少なくとも約40％、少なくとも約50％、少なくとも約60％、少なくとも約70％、少なくとも約80％またはそれ以上増加させるために有効な量である。例えば、抗ウイルス剤の治療的有効量は、上昇した肝機能の血清マーカーレベルを少なくとも約10％、少なくとも約20％、少なくとも約30％、少なくとも約40％、少なくとも約50％、少なくとも約60％、少なくとも約70％、少なくとも約80％もしくはそれ以上低下させるために、または肝機能の血清マーカーレベルを正常範囲内まで減少させるために有効な量である。IFN-γの治療的有効量も同様に、低下した肝機能の血清マーカーレベルを少なくとも約10％、少なくとも約20％、少なくとも約30％、少なくとも約40％、少なくとも約50％、少なくとも約60％、少なくとも約70％、少なくとも約80％もしくはそれ以上増加させるために、または肝機能の血清マーカーレベルを正常範囲内まで増加させるために有効な量である。
【０１５５】
肝臓癌のリスクを低下させる方法
本発明は、個人が肝臓癌を発症するリスクを低下させる方法を提供する。方法は、ウイルス量が個体において減少し、個体が肝臓癌を発症するリスクを低下させる、上記のように抗ウイルス剤を投与することを含む。抗ウイルス剤の有効量は、肝臓癌のリスクを少なくとも約10％、少なくとも約20％、少なくとも約25％、少なくとも約30％、少なくとも約35％、少なくとも約40％、少なくとも約45％、少なくとも約50％、少なくとも約55％、少なくとも約60％、少なくとも約65％、少なくとも約70％またはそれ以上低下させる量である。肝臓癌のリスクが低下するか否かは、例えば試験群において決定することができ、本発明の方法に従って治療される個体は肝臓癌の発生率が低下する。
【０１５６】
治療に適した被験者
肝炎ウイルス、特にHCVに感染したと臨床診断された個体は、本発明の方法による治療に適している。HCVに感染した個体は、その血液中にHSV RNAを有する、および/または血清中に抗HCV抗体を有すると同定される。そのような個体には、無処置の個体（例えば、これまでHCVによって治療されていない個体）およびHCVのこれまでの治療が失敗した個体（「治療失敗」患者）が含まれる。治療失敗患者には、非反応者（例えば、HCV力価がHCVのこれまでの治療によって有意にまたは十分に減少しなかった個体）および再発者（例えば、HCVに関してこれまで治療して、HCV力価が減少したがその後増加した個体）が含まれる。対象となる特定の態様において、個体はHCV力価が少なくとも約105、少なくとも約5×105、または少なくとも約106 HCVゲノムコピー/ml血清を有する。
【０１５７】
実施例
以下の実施例は、本発明を作製して用いる方法に関する完全な開示および記述を当業者に提供するために述べるのであって、本発明者らが本発明であると見なした範囲を制限すると解釈されず、下記の実験が、実施される全てまたは唯一の実験であると表すことを意図していない。用いた数字（例えば、量、温度等）に関しては正確さを保証するように努力したが、何らかの実験誤差および偏差は容赦されたい。特に明記していなければ、容積は重量での容積であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏であり、気圧は大気圧またはほぼ大気圧である。
【０１５８】
実施例1
HCV感染症を示す個体をIFN-αによって治療する。典型的な患者は血清1 mlあたりHCVの約105〜107ゲノムコピーを示す。IFN-αは、1週間放出の場合には63〜189 μgの量、または2週間放出の場合には126〜378 μgの量の濃度でIFN-αを含む薬物送達系で投与される。
【０１５９】
一連の治療レジメにおいて、IFN-αは、薬物40 μg/日の皮下注入でゼロ次数の入力レベルを得るために皮下ポンプを用いて投与する。
【０１６０】
血清中のIFN-α濃度と共にウイルス力価を様々な時点、例えば0時間、6時間、12時間、24時間、48時間、4日、7日、15日で測定する。結果を図6に示す。類似の測定は、治療中止後6ヶ月間毎月継続する。
【０１６１】
実施例2
IFN-αは、皮下注射によって約0.2〜0.5 mlの容量で200 mg〜500 mgの範囲で投与される。
【０１６２】
典型的な薬物負荷量は以下の通りである：0.1％w/wの薬物負荷は、10〜50％の「大量放出」または負荷用量を提供する。このように、200 mg用量の0.1％（0.1 g/100 g）は、200 μgであり、その12〜48時間で放出された用量の5〜50％が10 μg〜100 μg（一次放出）であり、10〜16日のあいだにゼロ次数で放出された用量（例えば、〜5〜10 μg/日）と釣り合う。
【０１６３】
もう一つの投与レジメにおいて、薬物負荷は、調節された放出プロフィールを提供するために調節され、「大量放出が制御される」。200 mg用量の0.5％（0.5 g/100 g＝0.005）の薬物負荷は1 mg用量を提供し、したがって大量放出を適当に制御して1ヶ月もの放出プロフィール、およびゼロ次数で必要な20 μg/日もの毎日の維持放出プロフィールを提供する。
【０１６４】
本発明は、その特定の態様を参照して説明してきたが、様々な変更を行ってもよく、その同等物で置換してもよく、それらも本発明の真の趣旨および範囲に含まれることは当業者によって理解されるべきである。さらに、特定の状況、材料、物質の組成、プロセス、プロセス段階、または複数の段階を、本発明の目的、趣旨、および範囲に適合させるように、多くの改変を行ってもよい。そのような改変は全て、添付の特許請求の範囲内であると意図される。
【図面の簡単な説明】
【０１６５】
【図１】ポリメラーゼ連鎖反応のような感度のよい測定を用いて、血清中のウイルスRNAレベルによってモニターした血液中のHCVウイルスのクリアランスとして、本明細書に示したインターフェロンα療法のあいだのウイルス動態を示すグラフである。
【図２】徐放性注射（CRI）システムまたはゼロ次数スループットシステムおよびボーラスの投与のあいだのIFN-α血清濃度のプロフィールを示すグラフである。本発明に従う治療的投与レジメによる改善と対比させるために、通常のTIWレジメ後のウイルス動態を含める（下記を参照されたい）。
【図３】徐放性注射（CRI）システムの投与のあいだのIFN-α血清濃度のプロフィールを示すグラフである。一つのシナリオにおいて、初期相の濃度は、初回のウイルス減少を改善する（破線を参照されたい）。
【図４】CRI療法後のウイルス動態および薬物動態を示すグラフである。このシナリオにおいて、初期ウイルス反応（EVR）は、通常のTIW療法と類似である。第2の相における高濃度のCsusは、勾配に影響を及ぼし、勾配を急にする（破線を参照されたい）。
【図５】IFN-αを用いるCRI療法後のウイルス動態および薬物動態を示すグラフである。このシナリオにおいて、初期ウイルス力価は有意により減少して、第2の相も同様に急激な減少を示す（破線を参照されたい）。
【図６】有意な持続的ウイルス反応を得るために、薬物の反復CmaxおよびCsus濃度を提供する持続的放出送達システムによるIFN-αの投与のあいだのウイルス動態を示すグラフである。反復Cmaxおよび持続的な高いCsusのために、ウイルス力価の減少は段階的に見える（破線を参照されたい）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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