(57)【要約】      新規のブロックコポリマーを、それからの生理学的可溶性ポリマー治療剤の製造と共に記載する。該ブロックコポリマーは、一般式（１）を有し、式中、Ｒは、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ6−Ｃ18アリール、カルボン酸、Ｃ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ2−Ｃ18アルカミノカルボニル、あるいは該炭素骨格内にあるかまたはそこへ結合したヘテロ原子で置換されたＣ2−Ｃ18アルカミノカルボニルおよびＣ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ6−Ｃ18アリール、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ1−Ｃ18アルキルのいずれか１つからなる群から選択され；Ｒ1は、水素およびＣ1−Ｃ6アルキル基からなる群から選択され；Ｒ2は連結基であり；Ｘは電子吸引基であり；Ｒ3は、Ｃ1−Ｃ18アルキレン、Ｃ2−Ｃ18アルケニレン、Ｃ7−Ｃ18アラルキレン、Ｃ7−Ｃ18アルカリーレンおよびＣ6−Ｃ18アリーレンからなる群から選択され；Ｌは、該ブロックを結合する二価のリンカーであり；そしてｍおよびｎは、各々、１を超える整数である。
2005514500.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ユニット（Ｉ）：
【化１】
2005514500.tif 000023
［式中、Ｒは、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ6−Ｃ18アリール、カルボン酸、Ｃ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ2−Ｃ18アルカミノカルボニル、あるいは該炭素骨格内にあるかまたはそこへ結合したヘテロ原子で置換されたＣ2−Ｃ18アルカミノカルボニルおよびＣ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ6−Ｃ18アリール、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ1−Ｃ18アルキルのいずれか１つからなる群から選択され；Ｒ1は、水素およびＣ1−Ｃ6アルキル基からなる群から選択され；Ｒ2は連結基であり；Ｘは電子吸引基であり；Ｒ3は、Ｃ1−Ｃ18アルキレン、Ｃ2−Ｃ18アルケニレン、Ｃ7−Ｃ18アラルキレン、Ｃ7−Ｃ18アルカリーレンおよびＣ6−Ｃ18アリーレンからなる群から選択され；Ｌは、該ブロックを結合する二価のリンカーであり；そしてｍおよびｎは、各々、１より大きい整数である］
を含むブロックコポリマー。
【請求項２】
ｍおよびｎが、５〜３００、より好ましくは１０〜２００、最も好ましくは２５〜１５０の整数である、請求項１に記載のブロックコポリマー。
【請求項３】
１．４未満、好ましくは１．２未満の多分散性および１００，０００未満の分子量（Ｍｗ）を有する、請求項１または請求項２に記載のブロックコポリマー。
【請求項４】
水溶性である前記請求項のいずれかに記載のブロックコポリマー。
【請求項５】
Ｘがカルボキシレート活性化基であり、そして好ましくはＮ−スクシンイミジル、ペンタクロロフェニル、ペンタフルオロフェニル、パラ−ニトロフェニル、ジニトロフェニル、Ｎ−フタルイミド、ノルボルニル、シアノメチル、Ｎ−ピリジル、Ｎ−トリクロロトリアジン、５−クロロキニリノ、およびＮ−イミダゾールからなる群から選択され、より好ましくはＮ−スクシンイミジルまたはイミダゾール部分である、前記請求項のいずれかに記載のブロックコポリマー。
【請求項６】
Ｒが、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルケニル、Ｃ1−Ｃ6アラルキルおよびＣ1−Ｃ6アルカリール、Ｃ2−Ｃ8アルコキシカルボニル、Ｃ2−Ｃ8アルカミノカルボニル、好ましくは水素およびメチルからなる群から選択される、前記請求項のいずれかに記載のブロックコポリマー。
【請求項７】
Ｒ1が、水素、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチルまたはその異性体、好ましくは水素およびメチルからなる群から選択される、前記請求項のいずれかに記載のブロックコポリマー。
【請求項８】
Ｒ2が、結合、あるいはカルボニル、Ｃ1−Ｃ18アルキレンおよび／またはＣ6−Ｃ18アリーレン基（これらは１以上のヘテロ原子で置換されていてもよい）から選択される二価の基である、前記請求項のいずれかに記載のブロックコポリマー。
【請求項９】
Ｒ2が、Ｃ1−Ｃ6アルキレン、Ｃ6−Ｃ12アリーレン、Ｃ1−Ｃ12オキシアルキレンおよびカルボニル−Ｃ1−Ｃ6アルキレンからなる群から選択される、請求項８に記載のブロックコポリマー。
【請求項１０】
Ｒ2が、メチレン、１，２−エチレン、１，３−プロピレン、ヘキシレン、オクチレン、ベンジレン、トリレンまたはキシリレンである、請求項９に記載のブロックコポリマー。
【請求項１１】
基Ｒ3が、同一であっても異なっていてもよく、Ｃ1−Ｃ8アルキレン基、好ましくは１，２−アルキレン、およびＣ6−Ｃ12アリーレン基、最も好ましくはメチレン、エチレン、１，２−プロピレンおよび１，３−プロピレンからなる群から選択される、前記請求項のいずれかに記載のブロックコポリマー。
【請求項１２】
全てのＲ3基が同一であり、そして好ましくは全て１，２−エチレンまたは１，２−プロピレンである、請求項１１に記載のブロックコポリマー。
【請求項１３】
Ｌが、１またはそれ以上のヘテロ原子で置換および／または中断されていてもよいＣ1−Ｃ18アルキレンまたはＣ6−Ｃ18アリーレン基を含む、前記請求項のいずれかに記載のブロックコポリマー。
【請求項１４】
Ｌが、Ｃ1−Ｃ6アルキレン、Ｃ6−Ｃ12アリーレン、Ｃ1−Ｃ12オキシアルキレンおよびＣ1−Ｃ6アシルからなる群から選択される、請求項１３に記載のブロックコポリマー。
【請求項１５】
ＬがＣＯＲa基を含み、ここでＲaが、Ｃ1−Ｃ6アルキレンまたはＣ6−Ｃ12アリーレン、好ましくはメチレン、１，２−エチレン、１，２−プロピレン、１，３−プロピレン、tertブチレンおよびsecブチレンからなる群から選択される、請求項１４に記載のブロックコポリマー。
【請求項１６】
構造（ＩＩ）：
【化２】
2005514500.tif 000024
［式中、Ｒ4は、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ6−Ｃ18アリール、カルボン酸、Ｃ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ2−Ｃ18アルカミノカルボニル、あるいは該炭素骨格内にあるかまたはそこへ結合したヘテロ原子で置換されたＣ2−Ｃ18アルカミノカルボニルおよびＣ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ6−Ｃ18アリール、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ1−Ｃ18アルキルのいずれか１つからなる群から選択され；Ｒ5は、水素およびＣ1−Ｃ6アルキル基からなる群から選択され；Ｒ6は連結基であり；Ｑは、ヒドロキシル、Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ2−Ｃ12アルケニル、Ｃ7−Ｃ12アラルキル、Ｃ7−Ｃ12アルカリール、Ｃ1−Ｃ12アルコキシ、Ｃ1−Ｃ12ヒドロキシアルキル、Ｃ1−Ｃ12アルキルアミノ、Ｃ1−Ｃ12ヒドロキシアルキルアミノ、あるいはアミン、ヒドロキシル、カルボニルまたはチオール基で置換されたＣ1−Ｃ12アルキルアミノ、Ｃ1−Ｃ12アルキルアミノ、Ｃ1−Ｃ12ヒドロキシアルキル、Ｃ1−Ｃ12アルコキシ、Ｃ7−Ｃ12アルカリール、Ｃ7−Ｃ12アラルキル、Ｃ2−Ｃ12アルケニル、Ｃ1−Ｃ12アルキルのいずれかからなる群から選択される可溶化基であり；
Ｒ7は、Ｃ1−Ｃ18アルキレン、Ｃ2−Ｃ18アルケニレン、Ｃ7−Ｃ18アラルキレン、Ｃ7−Ｃ18アルカリーレンおよびＣ6−Ｃ18アリーレンからなる群から選択され；
ｎ、ｍおよびｐは、各々、１より大きい整数であり；
Ｒ12は、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ6−Ｃ18アリール、カルボン酸、Ｃ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ2−Ｃ18アルカミノカルボニル、あるいは該炭素骨格内にあるかまたはそこへ結合したヘテロ原子で置換されたＣ2−Ｃ18アルカミノカルボニルおよび、Ｃ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ6−Ｃ18アリール、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ1−Ｃ18アルキルのいずれか１つからなる群から選択され；Ｒ13は、水素およびＣ1−Ｃ6アルキル基からなる群から選択され；Ｒ14は連結基であり；Ｌ1は、該ブロックを結合する二価のリンカーであり；Ｚは、ＯＭ1/dd+、ＮＲ8Ｒ9、ＳＲ10、ＯＲ11およびＯＸからなる群から選択されるペンダント基であり、ここで、Ｘは上記で定義され、Ｍは金属イオンであり、そしてｄは１または２の整数であり、Ｒ8はアルキル基、好ましくはアミノアシル置換アルキル基、より好ましくはオリゴペプチジル基を含み；Ｒ9は、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリールから選択され；Ｒ10およびＲ11は、水素、Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ2−Ｃ12アルケニル、Ｃ7−Ｃ12アラルキル、Ｃ7−Ｃ12アルカリールおよびＣ1−Ｃ12ヒドロキシアルキルからなる群から個々に選択される基を含み、そして１またはそれ以上の切断可能な結合を含み得そして生物活性剤を含み得る］
を含む請求項１に記載のブロックコポリマー。
【請求項１７】
Ｚが１またはそれ以上のアミノアシル基、好ましくは２−６アミノアシル基、最も好ましくは４アミノアシル基を含む、請求項１６に記載のブロックコポリマー。
【請求項１８】
Ｚがグリシン−ロイシン−フェニルアラニン−グリシンリンカーを含む、請求項１７に記載のブロックコポリマー。
【請求項１９】
Ｚがｃｉｓ−アコニチル基を含む、請求項１６に記載のブロックコポリマー。
【請求項２０】
Ｚが生物活性剤またはリンカーを含む、請求項１６〜１９のいずれかに記載のブロックコポリマー。
【請求項２１】
生物活性剤が抗癌剤から選択される、請求項２０に記載のブロックコポリマー。
【請求項２２】
ＱがＲ6ＣＯカルボニル炭素へ結合されたアミン基、好ましくはＣ1−Ｃ12ヒドロキシアルキルアミノ基、最も好ましくは２−ヒドロキシプロピルアミノ基を含む、請求項１６〜２１のいずれかに記載のブロックコポリマー。
【請求項２３】
化合物（ＩＩＩ）：
【化３】
2005514500.tif 000025
［式中、Ｒは、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ6−Ｃ18アリール、カルボン酸、Ｃ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ2−Ｃ18アルカミノカルボニル、あるいは該炭素骨格内にあるかまたはそこへ結合したヘテロ原子で置換されたＣ2−Ｃ18アルカミノカルボニルおよびＣ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ6−Ｃ18アリール、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ1−Ｃ18アルキルのいずれか１つからなる群から選択され；Ｒ1は、水素およびＣ1−Ｃ6アルキル基からなる群から選択され；Ｒ2は連結基であり；Ｘは電子吸引基である］
を含むエチレン性不飽和モノマーを、
開始剤化合物（ＩＶ）：
【化４】
2005514500.tif 000026
［式中、ｎは１またはそれ以上の整数であり、そしてＹはラジカル開始基であり；Ｒ3は、Ｃ1−Ｃ18アルキレン、Ｃ2−Ｃ18アルケニレン、Ｃ7−Ｃ18アラルキレン、Ｃ7−Ｃ18アルカリーレンおよびＣ6−Ｃ18アリーレンからなる群から選択され；Ｒ15は、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリールおよびＣ6−Ｃ18アリール、Ｃ1−Ｃ18アルコキシ、Ｃ2−Ｃ18アルケニルオキシ（alkeneyloxy）、Ｃ7−Ｃ18アラルコキシ、Ｃ7−Ｃ18アルカリールオキシ、Ｃ6−Ｃ18アリールオキシおよび−Ｏ−Ｙからなる群から選択される］
の存在下で重合させて、
ユニット（Ｖ）：
【化５】
2005514500.tif 000027
［式中、ｍおよびｎは上記に定義される通りであり、そしてＬ2はＹから誘導される二価の連結基であり、そしてＲ15'はＲ15であるか、またはＲ15が−Ｏ−Ｙである場合、Ｒ15は、
【化６】
2005514500.tif 000028
である］
を含むブロックコポリマーを生成させることを包含する、ブロックコポリマーの製造方法。
【請求項２４】
基Ｘ、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3が請求項２〜１５のいずれかに定義される通りである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
Ｙが−ＣＯＲy基（式中、Ｒyは、ハロゲン置換されたＣ1−Ｃ6アルキルまたはＣ6−Ｃ12アリール、好ましくはメチル、エチル、プロピル、tertブチルおよびsecブチルからなる群から選択される）、好ましくはＣＯtertブチルブロミドである、請求項２３または２４に記載の方法。
【請求項２６】
Ｌ2が、Ｃ1−Ｃ6アルキレン、Ｃ6−Ｃ12アリーレン、Ｃ1−Ｃ12オキシアルキレンおよびカルボニル−Ｃ1−Ｃ6アルキレン、好ましくは−ＣＯＲa基（式中、Ｒaは、Ｃ1−Ｃ6アルキレンまたはＣ6−Ｃ12アリーレン、好ましくはメチレン、１，２−エチレン、１，２−プロピレン、１，３−プロピレン、tertブチレンおよびsecブチレンからなる群から選択される）からなる群から選択される、請求項２３〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
Ｒ15が、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、Ｃ2−Ｃ10アルケニル、Ｃ7−Ｃ10アラルキル、Ｃ7−Ｃ10アルカリールおよびＣ6−Ｃ10アリールおよび−Ｏ−Ｙからなる群から選択され、好ましくはメトキシまたはＯＹである、請求項２３〜２６のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】
制御ラジカル重合法、好ましくは原子移動ラジカル重合法であり、より好ましくはＣｕ（Ｉ）錯体を含む重合メディエーターの存在下で行なわれる、請求項２３〜２７のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
コモノマーが式ＩＩＩのモノマーと共重合される、請求項２３〜２８のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】
式Ｖのブロックコポリマーを、更に、試薬ＨＲx［式中、Ｒxは、ＮＲ19Ｒ20、ＳＲ21およびＯＲ22からなる群から選択され、式中、Ｒ19はリンカー基であるかこれを含み、好ましくは置換アルキル基、より好ましくはペプチド基であり；Ｒ20は、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ6−Ｃ18アリールから選択され；Ｒ21およびＲ22は、水素、Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ1−Ｃ12アルケニル、Ｃ1−Ｃ12アラルキル、Ｃ1−Ｃ12アルカリール、Ｃ1−Ｃ12アルコキシおよびＣ1−Ｃ12ヒドロキシアルキルからなる群から選択され、これらのいずれもが、生物活性剤置換基を含み得および／または１以上の切断可能な結合を含み得る］と反応させて、構造（ＶＩ）：
【化７】
2005514500.tif 000029
［式中、１≦ｐ≦ｍ］
を有する誘導化ブロックコポリマーを形成させる、請求項２３〜２９のいずれかに記載の方法。
【請求項３１】
ＨＲxがＨ2ＮＲ2［式中、Ｒ2はアミノアシルリンカーまたはｃｉｓ−アコニチルリンカーおよび生物活性剤またはリガンドを含む］である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
式ＶＩのブロックコポリマーが、残存する基−ＣＯＯＸとアミン基含有化合物（好ましくは、ヒドロキシプロピルアミン）とを反応させることによってクエンチされる、請求項３０または３１に記載の方法。
【請求項３３】
化合物（ＶＩＩＩ）：
【化８】
2005514500.tif 000030
［式中、Ｒ23は、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ6−Ｃ18アリール、カルボン酸、Ｃ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ2−Ｃ18アルカミノカルボニル、あるいは該炭素骨格内にあるかまたはそこへ結合したヘテロ原子で置換されたＣ2−Ｃ18アルカミノカルボニルおよびＣ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ6−Ｃ18アリール、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ1−Ｃ18アルキルのいずれか１つからなる群から選択され；Ｒ24は、水素およびＣ1−Ｃ6アルキル基からなる群から選択され；Ｒ25は連結基であり；Ｘ1は、カルボキシル活性化基、水素、Ｍ11/dd+およびカルボキシル保護基からなる群から選択され、式中、Ｍ1は金属イオンであり、そしてｄは１または２の整数であり；Ｒ26は、Ｃ1−Ｃ18アルキレン、Ｃ2−Ｃ18アルケニレン、Ｃ7−Ｃ18アラルキレン、Ｃ7−Ｃ18アルカリーレンおよびＣ6−Ｃ18アリーレンからなる群から選択される］を含むエチレン性不飽和モノマーを、
開始剤化合物（ＶＩＩＩ）：
【化９】
2005514500.tif 000031
［式中、ｎは１またはそれ以上の整数であり、そしてＹ’はラジカル開始基であり；Ｒ27は、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリールおよびＣ6−Ｃ18アリール、Ｃ1−Ｃ18アルコキシ、Ｃ2−Ｃ18アルケニルオキシ（alkeneyloxy）、Ｃ7−Ｃ18アラルコキシ、Ｃ7−Ｃ18アルカリールオキシ、Ｃ6−Ｃ18アリールオキシおよび−Ｏ−Ｙ1からなる群から選択される基を含み；そしてＲ28は、Ｃ1−Ｃ18アルキレン、Ｃ2−Ｃ18アルケニレン、Ｃ7−Ｃ18アラルキレン、Ｃ7−Ｃ18アルカリーレンおよびＣ6−Ｃ18アリーレンからなる群から選択される］の存在下で重合させて、
ユニット（Ｘ）：
【化１０】
2005514500.tif 000032
［式中、ｍは１より大きい整数であり、そしてＬ3はＬ3から誘導される二価の連結基であり；そしてＲ27'はＲ27であるか、またはＲ27が−Ｏ−Ｙ1である場合、Ｒ27は、
【化１１】
2005514500.tif 000033
である］
を含むブロックコポリマーを生成させる工程、
（Ｘ）を試薬ＨＲxx［式中、Ｒxxは、ＮＲ29Ｒ30、ＳＲ31およびＯＲ32からなる群から選択され、式中、Ｒ29はリンカー基、好ましくはペプチド基であり；Ｒ30は、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ6−Ｃ18アリールから選択され；Ｒ31およびＲ32は、個々に、水素、Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ1−Ｃ12アルケニル、Ｃ1−Ｃ12アラルキル、Ｃ1−Ｃ12アルカリール、Ｃ1−Ｃ12アルコキシおよびＣ1−Ｃ12ヒドロキシアルキルからなる群から選択され、そして１以上の切断可能な結合を含み得る］と反応させて、
構造（ＸＩ）：
【化１２】
2005514500.tif 000034
［式中、１≦ｐ≦ｍ］
を有する誘導化ブロックコポリマーを形成させる工程を包含する、ブロックコポリマーの製造方法。
【請求項３４】
前記エチレン性不飽和モノマー化合物が
【化１３】
2005514500.tif 000035
であり、そして前記開始剤が、
【化１４】
2005514500.tif 000036
［式中、ａは１〜５００である］
である、請求項２３または請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記コポリマーを、化合物
Ｈ2Ｎ−Ｇｌｙ−Ｌｅｎ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ドキソルビシン
と反応させ、そして生成物を２−ヒドロキシ−プロピルアミンと反応させる、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
構造（ＸＩＩ）：
【化１５】
2005514500.tif 000037
［式中、ａおよびは、５００までの整数である］
を有する請求項１〜２２のいずれかに記載のブロックコポリマー。
【請求項３７】
請求項３６に記載のブロックコポリマーと、アミノアシルリンカーまたはｃｉｓ−アコニチルリンカーおよび生物活性剤を含むペンダント基を提供するように選択される試薬とを反応させることによって得られる、ブロックコポリマー。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、ブロックコポリマーならびにそれからの生理学的可溶性ポリマー治療剤、官能化ポリマー、薬学的組成物および材料の製造のクラスに関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
ポリマー治療剤（Polymer Therapeutics）は、生理学的可溶性ポリマー（physiologically soluble polymers）を必要とする生物医学的適用のために開発され、そして生物学的に活性なポリマー、ポリマー−薬物複合体（Polymer-drug conjugates）、ポリマー−蛋白質複合体、および生物活性分子とのポリマーの他の共有結合性構造物を含む。ポリマー−薬物複合体の例示的クラスは、癌化学療法について細胞傷害性薬物の複合体化について広範囲に研究されている、ヒドロキシプロピルメタクリルアミド（ＨＰＭＡ）のコポリマーから誘導される。ドキソルビシンに複合体化したＨＰＭＡコポリマー（ＰＫ−１として公知）は、現在、英国においてフェーズＩＩ評価にある。ＰＫ−１は、フェーズＩ研究においてフリーのドキソルビシンと比較して減少された毒性を示す。ＰＫ−１の最大許容用量（maximum tolerated dose）は、３２０ｍｇ／ｍ2であり、これは、フリーのドキソルビシンの通常の臨床用量よりも４〜５倍高い。
【０００３】
ポリマー治療剤を開発するために使用されるポリマーはまた、独立して、他の生物医学適用のために開発され得、ここで、ポリマー複合体が、凝集物（例えば、ポリマーミセルおよびコンプレックス）を形成するために開発される（例えば、ブロックコポリマーとして）。ポリマー治療剤を開発するために使用されるポリマーはまた、該ポリマーが生理学的に可溶性である分子としてよりもむしろ材料として使用されるように要求する他の生物医学的適用のために個々に開発され得る。従って、薬物放出マトリックス（マイクロスフェアおよびナノ粒子を含む）、ヒドロゲル（注射可能なゲルおよび粘性溶液を含む）およびハイブリッドシステム（hybrid systems）（例えば、外部表面が複合化ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）を有するリポソーム）およびデバイス（ロッド、ペレット、カプセル、フィルム、ゲルを含む）が、組織または部位特異的薬物送達のために製造され得る。ポリマーはまた、薬物処方における賦形剤として臨床的に広範囲に使用されている。これら３つの広範囲な適用領域内において：（１）生理学的に可溶性である分子（physiologically soluble molecules）、（２）材料および（３）賦形剤、生物医学ポリマーは、治療的に生物活性な薬剤の有効性を最適化するための広範囲の技術的プラットフォームを提供する。
【０００４】
ポリマーに共有結合的に複合体化され得る治療的生物活性剤（therapeutic bioactive agents）としては、薬物、ペプチドおよび蛋白質が挙げられる。可溶性の生体適合性ポリマーへのこのような複合体は、治療剤の改善された有効性を生じ得る。フリーの複合体化されていない生物活性剤と比較して、治療学的ポリマー複合体は、以下の主要な理由のために、有効性においてこの改善を示し得る：（１）変化された生体分布、（２）延長された循環、（３）ピノサイトーシスによる複合体の細胞取り込み後の二次リソソームの蛋白質分解性および酸性環境における生物活性剤の放出、ならびに（４）大きな分子の特性に起因する、薬物へ付与されたより有利な物理化学的特性（例えば、生物学的流体における増加した薬物溶解性）。
【０００５】
親水性および疎水性ブロックを含む共−ブロックコポリマー（co-block copolymers）は、溶液においてポリマーミセルを形成し［Kataoka, Kwon, Yokoyama, Okano andSakurai J. ContRet. 1993, 24,119, Gros,RingsdorfandSchuppAngew. Chemie Int. Ed. Eng. 1981, 20,301, Kwon, Yokoyama, Okano, Sakurai and Kataoka Pharm. Res. 1993, 10, 970, Kwon and Kataoka Adv. Drug. Del. Rev. 1995, 16, 295, Kwon and Okano Adv. DrugDel. Rev.1996, 21, 107, Yokoyama Crit. Rev.Therap. Drug Carrier Systems 1992,9, 213］、そして自己集積ミセル送達システム（serf-assembling micelar delivery systems）は、増大する注目を受けている［Alakhov and Kabanov Exp.Opin. Invest. Drugs 1998,7, 1453, Calibres and Chabner The Pharmacological Basis of Therapeutics 1996,1225, Kabanov and Alakhov J. Cont. Rel. 1994,28, 15, Yokayama, Okano, Sakurai and Kataoka J. Cont. Rel. 1994,32, 269］。これらのシステムの顕著な利点は、ＥＰＲ効果によって腫瘍捕捉を最大化し得る延長された循環時間を示す、より高分子量ミセル凝集物を設計する能力である。ミセル解離（micelle disassociation）の際、個々のブロックコポリマー分子は安全に分泌され、そしてそれらが十分に低い分子量である限り、これらのポリマーは非生分解性であり得る。例えば、ポリ（エチレングリコール−アスパルテート）ブロックコポリマードキソルビシン複合体は、２０〜６０ｎｍのサイズ範囲のミセルを形成し、これは、固形腫瘍において凝集しそして抗腫瘍活性を示す［Kataoka, Kwon, Yokoyama, Okano and Sakurai J. Cont. Rel. 1993,24, 119, Kwon, Yokoyama, Okano, Sakurai and Kataoka Pharm. Res. 1993, 10, 970, Kwon andKataoka Adv. Drug. Del. Rev. 1995, 16, 295, Kataoka Controlled drug delivery-challenges and strategies 1997, 49, Yokoyama, Okano, Sakurai, Ekimoto, Shibazak and Kataoka Cancer Res. 1991, 51, 3229］。ドキソルビシンは、そのフリーのアミンによって、ポリ（アスパラギン酸）ブロックにおけるａ−またはｂ−のいずれかのペンダントカルボキシレートへ直接複合体化されている。しばしば、薬物の物理的取り込み（physical entrapment）が複合体化に伴い［Yokoyama, Fukushima, Uehara, Okamoto, Kataoka, Sakurai and Okano J. Cont. Rel. 1998, 50, 79］、そして安定なブロックコポリマーミセルに伴って、薬物取り込みは、腫瘍へ細胞傷害性薬物を送達する実行可能なストラテジーとなる［Alakhov and Kabanov Exp.Opin. Invest. Drugs 1998,7, 1453, Yokoyama, Fukushima, Uehara, Okamoto, Kataoka, Sakurai and Okano J. Cont. Rel. 1998, 50, 79, Batrakova, Dorodnych, Klinskii, Kliushnenkova, Shemchukova, Goncharova, Ajakov, Alakhov and Kabanov Br. J. Cancer 1996, 74, 1545, Venne, Li, Mandeville, Kabanov and Alakhov Cancer Res. 1996, 56, 3626, Inoue, Chen, Nakamae and Hoffman J. Cont. Rel. 1998, 51, 221］。
【０００６】
ポリ（アクリル酸）、ポリ（メタクリル酸）およびポリ（エチレングリコール）ベースの賦形剤が、錠剤および薬学的製剤の接着、膨潤およびｐＨ依存特性を改変するために広範囲に使用される。官能化アミンの複合体化反応の化学量論における増加変化は、狭いＭＷＤ候補ポリマーのライブラリーを提供する。これは、熱的特性、結晶化、接着、膨潤、コーティングおよびｐＨ依存構造を独立的または集合的に含む材料特性を最適化することを可能にする。これら多くの材料特性の中でも、結晶化プロセスの速度を制御することは、化学的または生物学的に感受性である薬物（例えば、蛋白質）の安定性、溶解性および活性に影響を与える傾向にある。従って、結晶化プロセスを遅延させそして薬学的製剤の不安定なアモルファスモルホロジー（即ち、ブレンド）を維持するように設計された官能化賦形剤が、広範囲の用途が見出され得る。
【０００７】
更に、コポリマー賦形剤［Kabanov, Alakov and Batrakova PCT-WO 99/39731 1999, 80 pages, Galakatos, Langer and Putnam PCT-WO 059627 2000, 46 pages, Alakhov, Klinski, Li, Piertrzynski, Venne, Batrakova, Bronitch and Kabanov Colloids Surf., B. 1999, 16, 114, Lemieux, Guerin, Paradis, Proulz, Chistyakova, Kabanov and Alakhov Gene Ther. 2000, 7, 986］およびナノスケール粒子［Boal, Ilhan, DeRouchey, Thurn-Albrecht, Russell and Rotello Nature 2000, 404, 746］が検査された。一般的に安全であると認識されている多くの賦形剤が、薬理学的に活性な化合物の物理化学的特性に適合し得る多数の動向を測定するために評価された。２つのプルロニクス（pluronics）の組み合わせを使用するドキソルビシン処方が、この処方は、ドキソルビシンの現在の臨床的処方よりも広い有効性を有し得ることを示した［Alakhov and Kabanov Exp. Opin. Invest. Drugs 1998, 7, 1453］。ブロックコポリマーは凝集されたミセル状構造を形成するので、これらは、潜在的に、生物活性剤の経口投与の新規製剤に開発され得る。
【０００８】
ポリマー−薬物複合体は、ポリマーの分子量ならびにポリマー主鎖に沿う複合体ペンダント鎖の位置および数の点で、不均一である傾向にある。ポリマー治療剤は、それらの分子量および多分散性の点で厳密に特徴付けられなければならず、何故ならば、生体分布および薬理学的活性は分子量依存性であることが知られているためである。例えば、血液循環半減期（blood circulation half-life）［Cartlidge, Duncan, Lloyd, Kopeckova-Rejmanova and Kopecek J Con. Rel. 1986, 4, 253］、腎クリアランス、器官における沈着［Sprincl, Exner, Sterba and Kopecek J. Biomed. Mater. Res. 1976, 10, 953］、嚢胞内膜取込みの速度（rates of endocytic uptake）［Duncan, Pratten, Cable, Ringsdorf and Lloyd Biochem. J. 1981, 196, 49, Cartlidge, Duncan, Lloyd, rejmanova and Kopecek J. Cont. Rel. 1986, 3, 55］および生物学的活性が、ポリマー分子量特徴に依存し得る［Kaplan Anionic Polymeric Drugs 1980, 227, Ottenbrite, Regelson, Kaplan, Carchman, Morahan and Munson Polymeric Drugs 1978, 263, Butler Anionic Polymeric Drugs 1980, 49, Muck, Rolly and Burg Makromol. Chem. 1977, 178, 2773, Muck, Christ and Keller Makromol. Chem. 1977, 178, 2785, Seymour J. Bioact. Compat. Polymers 1991, 6, 178］。臨床的評価を現在受けているＨＰＭＡコポリマーは増加された有効性を示し、そしてポリマー−薬物複合体についての相当な量の生物学的理由付けが解明されており、該事実は、これらの治療化合物は、分子量に関しての広範な統計学的分布および複合体化ペンダント鎖の構造として存在するということである。これは、調節の観点から、特に慢性状態について、問題である。例えば、長期効果が、多分散性治療複合体中の低分子量種または高分子量種に起因するかどうかを確認することは困難であろう。
【０００９】
現在、多くの候補コポリマー−薬物複合体が、少数の反応性繰り返し単位を有する活性エステルポリマー前駆体と低分子量薬物の、ポリマーにおける反応またはポリマーアナログ反応によって調製される［Kopecek and Bazilova Eur. Polymer J. 1973, 9, 7, Strohalm and Kopecek Angew. Makromol. Chem. 1978, 70, 109, Rejmanova, Labsky and Kopecek Makromol. Chem. 1977, 178 2159, Kopecek Makromol. Chem. 1977, 178, 2169, Rihova, Ulbrich, Strohalm, Bilej, Duncan and Kopecek Biomaterials 1989, 10, 335, Kopecek J. Cont. Rel. 1990, 11, 279］。
【００１０】
多くの複合体が、ポリマーアナログ反応（polymer analogous reaction）によって調製されているが、ｐ−ニトロフェノールエステルの競合的加水分解が、実際に、薬物、カルボキシレート、またはアミノプロパノールのいずれかで終結しているペンダント鎖を有する複合体を生成する［Configliacchi, Razzano, Rizzo and Vigevani J. Pharm. Biomed. Analysis 1996, 15, 123, Pinciroli, Rizzo, Angelucci, Tato and Vigevani Magn. Reson. Chem. 1997, 35, 2］。フリーラジカル沈殿重合（free radical precipitation polymerisation）は、典型的に１．３〜２．５の範囲の多分散性を有しそしてペンダント鎖によってランダムコポリマーとして、少数の反応性繰り返し単位を有する活性エステルポリマー前駆体を与える。また、このような沈殿重合ストラテジーのみが、狭い範囲の分子量を有するポリマー前駆体を提供する。種々のペンダント鎖を種々の量のモノマーに組み込むことは、重合条件が、腎臓閾値下で再生可能な分子量を得るために最適化されることを必要とする。主に、複合体化の間にその化学量論を変化させることによって薬物ローディング（drug loading）を変化させることが可能であるが、最終的なポリマー性複合体は、広い分子量分布に渡って統計的に分布された、外部薬物（out drug）と反応していないペンダント鎖の混合物を含む。非薬物複合体化ペンダント基のリソソーム分解は、薬物複合体化ペンダントの分解と競合する。この競合は、ポリマー−薬物複合体のための薬理学および薬物動態学を複雑化させる。薬物調節権威者の観点から、複合体を調製するためのこの戦略は、構造が非常に変化に富んでおりそして従って医薬として調節するのが困難である、最終ポリマー−薬物複合体を生じる。
【００１１】
調節課題に加えてそして上述のように、構造異種性が、治療的複合体の薬理学および薬物動態学に影響を与える。例えば、所定のポリマー鎖からの薬物放出速度は、ペンダント鎖および薬物の構造に従って変化し得る［Duncan Anti-Cancer Drugs 1992, 3, 175, Duncan, Seymour, Ulbrich, Spreafico, Grandi, Ripamonti, Farao and Suarato Eur. J. Cancer 1991, 27, S52］。放出速度はまた、複合体化された薬物のポリマー主鎖に沿った配置および量（即ち、ローディング）によって影響を受ける。より多量の疎水性薬物が、可溶性の親水性ポリマーに複合体化されるので、リンカーを分解して複合体化薬物を放出するリソソーム酵素のアクセスを妨げ得る単分子ポリマーミセルを形成する可能性が増加する［Ulbrich, Konak, Tuzar and Kopecek Makromol. Chem. 1987, 188, 1261］。親水性ポリマーに複合体化された疎水性薬物は、相分離が生じそして複合体が不溶性となる、下部臨界溶液温度（lower critical solution temperature）（ＬＣＳＴ）を生じ得る。また、薬物がポリマー−薬物複合体から放出されるので、ポリマー立体配座の変化が生じることが予想され、それは、時間経過で薬物放出速度の差異に至り得［Pitt, Wertheim, Wang and Shah Macromol. Symp. 1997, 123, 225, Shah, Werthim, Wang and Pitt J. Cont. Rel. 1997, 45, 95］そして従って薬理学的特性に影響を与え得る。薬物ローディングの程度および位置ならびにポリマー溶液特性に対するその影響は、治療的ポリマー複合体のインビボ特性に対して基本的な効果を有する、重要であり且つ未だに殆ど理解されていない現象である。
【００１２】
構造体の混合物である場合、研究されている多分散かつランダムに複合体化されたポリマー−薬物複合体は最適でないことが、明らかである。ポリマー治療剤の開発についての生物学的な理由付けに関して顕著な量が知られており、化学的な理由付けに関してはより知られていない。系統的な研究の価値がある化学的構造に関する３つの広い要求が、医薬における可溶性付加ポリマーの用途を広げるために同定された：（１）狭い分子量およびペンダント鎖分布を有する関連ポリマーの調製、（２）競合反応を最小化する好適な複合体化戦略の使用、および（３）ポリマー主鎖に沿う複合体化させるペンダント鎖の制御された配置（例えば、ブロックコポリマーの調製）。
【００１３】
治療的複合体を調製するためのこれらの化学的限定に取り組むために、ＷＯ  ０１／１８０８０は、１．４以下の多分散性を有する低分子量分布ホモ−およびコポリマー（ブロックコポリマーを含む）の製造を記載する。重合は、広範囲のメタ−およびアクリルアミド ホモ−およびコポリマーを調製するために、前駆体ポリマーとして使用される、狭い分子量ポリマー前駆体を与える制御ラジカル重合法によって行なわれた。狭い分子分布を有するほんの数個のメタ−およびアクリルアミド ホモ−およびコポリマーが、重合から直接調製され得る。これらは、所望の生物学的プロフィールを有するポリマー薬物複合体の製造において使用される。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１４】
発明の要旨
本発明の第１局面において、ユニット（Ｉ）：
【００１５】
【化１】
2005514500.tif 000003
［式中、Ｒは、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ6−Ｃ18アリール、カルボン酸、Ｃ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ2−Ｃ18アルカミノカルボニル、あるいは該炭素骨格内にあるかまたはそこへ結合したヘテロ原子で置換されたＣ2−Ｃ18アルカミノカルボニルおよびＣ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ6−Ｃ18アリール、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ1−Ｃ18アルキルのいずれか１つからなる群から選択され；Ｒ1は、水素およびＣ1−Ｃ6アルキル基からなる群から選択され；Ｒ2は連結基であり；Ｘは電子吸引基であり；Ｒ3は、Ｃ1−Ｃ18アルキレン、Ｃ2−Ｃ18アルケニレン、Ｃ7−Ｃ18アラルキレン、Ｃ7−Ｃ18アルカリーレンおよびＣ6−Ｃ18アリーレンからなる群から選択され；Ｌは、該ブロックを結合する二価のリンカーであり；そしてｍおよびｎは、各々、１より大きい整数である］。
を含むブロックコポリマーが提供される
コポリマー（Ｉ）はＡ−Ｂタイプブロックコポリマーである。それは、Ａ−Ｂ−ＡまたはＡ−Ｂ−Ｃタイプブロックコポリマーであり得る。四角括弧（square parentheses）で規定される構造が、該ブロックである。好ましくは、ｍおよびｎは、５〜３００、より好ましくは１０〜２００、最も好ましくは２５〜１５０の整数である。
【００１６】
好ましくは、該ブロックコポリマーは、１．４未満、好ましくは１．２未満の多分散性および１００，０００未満の分子量（Ｍｗ）を有する。好ましくは（Ｉ）は水溶性である。
【００１７】
Ｘは、好ましくは、各ブロックについて個々に選択され、そして同一であっても異なっていてもよい。
【００１８】
電子吸引基Ｘは、好ましくは、カルボキシレート活性化基（carboxylate activating group）であり、そして好ましくはＮ−スクシンイミジル、ペンタクロロフェニル、ペンタフルオロフェニル、パラ−ニトロフェニル、ジニトロフェニル、Ｎ−フタルイミド、ノルボルニル、シアノメチル、Ｎ−ピリジル、Ｎ−トリクロロトリアジン、５−クロロキニリノ、およびＮ−イミダゾールからなる群から選択される。好ましくは、Ｘは、Ｎ−スクシンイミジルまたはイミダゾール部分である。
【００１９】
好ましくは、Ｒは、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルケニル、Ｃ1−Ｃ6アラルキルおよびＣ1−Ｃ6アルカリール、Ｃ2−Ｃ8アルコキシカルボニル、Ｃ2−Ｃ8アルカミノカルボニルからなる群から選択される。最も好ましくは、Ｒは、水素およびメチルから選択される。
【００２０】
好ましくは、Ｒ1は、水素、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチルまたはその異性体からなる群から選択される。最も好ましくは、Ｒ1は、水素およびメチルから選択される。
【００２１】
好ましくは、Ｒ2は、結合から選択されるか、あるいは少なくとも１つの炭素原子または少なくとも１つのヘテロ原子を含む。
【００２２】
Ｒ2が結合でない場合、Ｒ2は、好ましくは、カルボニル、Ｃ1−Ｃ18アルキレンおよび／またはＣ6−Ｃ18アリーレン基（これらは１以上のヘテロ原子で置換されていてもよい）を含む二価の基を介してＣＲ1へ結合されている。好ましくは、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ6アルキレン、Ｃ6−Ｃ12アリーレン、Ｃ1−Ｃ12オキシアルキレンおよびカルボニル−Ｃ1−Ｃ6アルキレンからなる群から選択される基を含む。Ｒ2がアルキレン基を含む場合、それは、１以上のアルキル基で置換されているか又は置換されていない、分枝鎖、直鎖または環式であり得、そして好ましくは、メチレン、１，２−エチレン、１，３−プロピレン、ヘキシレンまたはオクチレンである。Ｒ2がアリーレン基を含む場合、好ましくは、それは、ベンジレン、トリレンまたはキシリレンである。
【００２３】
好ましくは、基Ｒ3は、同一であっても異なっていてもよく、Ｃ1−Ｃ8アルキレン基、好ましくは１，２−アルキレン、およびＣ6−Ｃ12アリーレン基、最も好ましくはメチレン、エチレン、１，２−プロピレンおよび１，３−プロピレンからなる群から選択される。好ましくは全てのＲ3基は同一であり、最も好ましくは全てが１，２−エチレンまたは１，２−プロピレンである。
【００２４】
Ｌは、好ましくは、１またはそれ以上のヘテロ原子で置換および／または中断されていてもよいＣ1−Ｃ18アルキレンまたはＣ6−Ｃ18アリーレン基を含む。好ましくは、Ｌは、Ｃ1−Ｃ6アルキレン、Ｃ6−Ｃ12アリーレン、Ｃ1−Ｃ12オキシアルキレンおよびＣ1−Ｃ6アシルからなる群から選択される。Ｌがアルキレン基を含む場合、それは、１以上のアルキル基で置換されているか又は置換されていない、分枝鎖、直鎖または環式であり得、そして好ましくは、メチレン、１，２−エチレン、１，２−プロピレン、１，３−プロピレン、tertブチレン、secブチレン、ヘキシレンまたはオクチレンである。Ｌがアリーレン基を含む場合、それは、好ましくは、ベンジレン、トリレンまたはキシリレンである。最も好ましくは、ＬはＣＯＲa基を含み、ここでＲaは、Ｃ1−Ｃ6アルキレンまたはＣ6−Ｃ12アリーレン、好ましくはメチレン、１，２−エチレン、１，２−プロピレン、１，３−プロピレン、tertブチレンおよびsecブチレンからなる群から選択される。
【００２５】
本発明のブロックコポリマーは、他のポリマー、オリゴマーまたはモノマーブロックを組み込み（incorporate）得る。例えば、該ポリマーに組み込まれたさらなるポリマーブロックは、アクリリックポリマー、アルキレンポリマー、ウレタンポリマー、アミドポリマー、ポリペプチド、ポリサッカリドおよびエステルポリマーを含み得る。
【００２６】
ブロックコポリマーの分子量は、ブロックコポリマーが生理学的に可溶なブロックコポリマー（腎閾値が超過されないように、即ち、該ポリマーが腎糸球体から排出されることを確実にするために）として使用される場合、理想的には、１００，０００未満、好ましくは５０，０００未満であるべきである。好ましくは、該ブロックコポリマーの分子量は、４０００〜５０，０００、より好ましくは２５，０００〜４０，０００の範囲内である。
【００２７】
本発明の更なる局面は、構造（ＩＩ）：
【００２８】
【化２】
2005514500.tif 000004
［式中、Ｒ4は、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ6−Ｃ18アリール、カルボン酸、Ｃ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ2−Ｃ18アルカミノカルボニル、あるいは該炭素骨格内にあるかまたはそこへ結合したヘテロ原子で置換されたＣ2−Ｃ18アルカミノカルボニルおよびＣ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ6−Ｃ18アリール、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ1−Ｃ18アルキルのいずれか１つからなる群から選択され；Ｒ5は、水素およびＣ1−Ｃ6アルキル基からなる群から選択され；
Ｒ6は連結基であり；Ｑは、ヒドロキシル、Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ2−Ｃ12アルケニル、Ｃ7−Ｃ12アラルキル、Ｃ7−Ｃ12アルカリール、Ｃ1−Ｃ12アルコキシ、Ｃ1−Ｃ12ヒドロキシアルキル、Ｃ1−Ｃ12アルキルアミノ、Ｃ1−Ｃ12ヒドロキシアルキルアミノ、あるいはアミン、ヒドロキシル、カルボニルまたはチオール基で置換されたＣ1−Ｃ12アルキルアミノ、Ｃ1−Ｃ12アルキルアミノ、Ｃ1−Ｃ12ヒドロキシアルキル、Ｃ1−Ｃ12アルコキシ、Ｃ7−Ｃ12アルカリール、Ｃ7−Ｃ12アラルキル、Ｃ2−Ｃ12アルケニル、Ｃ1−Ｃ12アルキルのいずれかからなる群から選択される可溶化基であり；Ｒ7は、Ｃ1−Ｃ18アルキレン、Ｃ2−Ｃ18アルケニレン、Ｃ7−Ｃ18アラルキレン、Ｃ7−Ｃ18アルカリーレンおよびＣ6−Ｃ18アリーレンからなる群から選択され；
ｎ、ｍおよびｐは、各々、１より大きい整数であり；Ｒ12は、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ6−Ｃ18アリール、カルボン酸、Ｃ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ2−Ｃ18アルカミノカルボニル、あるいは該炭素骨格内にあるかまたはそこへ結合したヘテロ原子で置換されたＣ2−Ｃ18アルカミノカルボニルおよび、Ｃ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ6−Ｃ18アリール、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ1−Ｃ18アルキルのいずれか１つからなる群から選択され；Ｒ13は、水素およびＣ1−Ｃ6アルキル基からなる群から選択され；Ｒ14は連結基であり；Ｌ1は、該ブロックを結合する二価のリンカーであり；Ｚは、ＯＭ1/dd+、ＮＲ8Ｒ9、ＳＲ10、ＯＲ11およびＯＸからなる群から選択されるペンダント基であり、ここで、Ｘは上記で定義され、Ｍは金属イオンであり、そしてｄは１または２の整数であり、Ｒ8はアルキル基、好ましくはアミノアシル置換されたアルキル基、より好ましくはオリゴペプチジル基を含み；Ｒ9は、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリールから選択され；Ｒ10およびＲ11は、水素、Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ2−Ｃ12アルケニル、Ｃ7−Ｃ12アラルキル、Ｃ7−Ｃ12アルカリールおよびＣ1−Ｃ12ヒドロキシアルキルからなる群から個々に選択される基を含み、そして１またはそれ以上の切断可能な結合を含み得そして生物活性剤を含み得る］
を含むブロックコポリマーを提供する
Ｍは、好ましくは、ナトリウムまたはカリウムイオンである。
【００２９】
Ｚは、好ましくは、各ブロックについて個々に選択され、そして同一であっても異なっていてもよい。従って、種々のペンダント基が、種々のブロックへ結合され得る。
【００３０】
Ｑは、好ましくは、各ブロックについて個々に選択され、そして同一であっても異なっていてもよい。
【００３１】
好ましくは、本発明のこの局面のブロックコポリマーは、１．４未満、好ましくは１．２未満の多分散性および１００，０００未満の分子量（Ｍｗ）を有する。好ましくは（ＩＩ）は水溶性である。該ブロックコポリマーの分子量は、５０，０００未満、より好ましくは４０００〜５０，０００、最も好ましくは２５，０００〜４０，０００の範囲内である。
【００３２】
好ましくは、Ｒ4は、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルケニル、Ｃ1−Ｃ6アラルキルおよびＣ1−Ｃ6アルカリール、Ｃ2−Ｃ8アルコキシカルボニル、Ｃ2−Ｃ8アルカミノカルボニルからなる群から選択される。最も好ましくは、Ｒ4は、水素およびメチルから選択される。
【００３３】
好ましくは、Ｒ5は、水素、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチルまたはその異性体からなる群から選択される。最も好ましくは、Ｒ1は、水素およびメチルから選択される。
【００３４】
好ましくは、Ｒ6は、結合から選択されるか、あるいは少なくとも１つの炭素原子または少なくとも１つのヘテロ原子を含む。
【００３５】
Ｒ6が結合でない場合、Ｒ6は、好ましくは、１以上のヘテロ原子で置換されていてもよいカルボニル、Ｃ1−Ｃ18アルキレンおよび／またはＣ6−Ｃ18アリーレン基を含む二価の基を介してＣＲ5へ結合されている。より好ましくは、Ｒ6は、Ｃ1−Ｃ6アルキレン、Ｃ6−Ｃ12アリーレン、Ｃ1−Ｃ12オキシアルキレンおよびカルボニル−Ｃ1−Ｃ6アルキレンからなる群から選択される基を含む。Ｒ6がアルキレン基を含む場合、それは、１以上のアルキル基で置換されているか又は置換されていない、分枝鎖、直鎖または環式であり得、そして好ましくは、メチレン、１，２−エチレン、１，２−プロピレン、１，３−プロピレン、tertブチレン、secブチレン、ヘキシレンまたはオクチレンである。Ｒ6がアリーレン基を含む場合、好ましくは、それは、ベンジレン、トリレンまたはキシリレンである。
【００３６】
好ましくは、基Ｒ7は、同一であっても異なっていてもよく、Ｃ1−Ｃ8アルキレン基、好ましくは１，２−アルキレン、およびＣ6−Ｃ12アリーレン基、最も好ましくはメチレン、エチレン、１，２−プロピレンおよび１，３−プロピレンからなる群から選択される。好ましくは全てのＲ7基は同一であり、最も好ましくは全てが１，２−エチレンまたは１，２−プロピレンである。
【００３７】
Ｚは、保護基、即ち基ＯＸを含み得、ここでＸは上記に定義される通りである。
【００３８】
Ｚは、ペプチド基を含み得る。好ましくは、Ｚは、１以上のアミノアシル基、好ましくは２−６アミノアシル基、最も好ましくは４アミノアシル基を含む。特に好ましい実施形態において、基Ｚはグリシン−ロイシン−フェニルアラニン−グリシンリンカーを含む。アミノアシルリンカーは、最も好ましくは、予め選択された細胞酵素（例えば、癌細胞中に見られるリポソーム中に見られるもの）によって切断され得るペプチドリンカーである。
【００３９】
更なる局面において、基Ｚはｃｉｓ−アコニチル基を含む。この基は、中性ｐＨ（〜７．４）で血漿において安定のままであるが、より酸性環境のエンドソームまたはリポソーム（〜ｐＨ５．５−６．５）における加水分解によって細胞内で分解するように設計される。これは、特に、癌の治療について有利であり、何故ならば、増強された浸透性および保持（ＥＰＲ）効果（the enhanced permeability and retention effect）による部位特異的受動捕捉（site spedific passive capture）および治療効率における顕著な改善があるためである。ＥＰＲ効果は、その不連続な内皮の漏れに起因する腫瘍新生血管系（neovasculature）内のマクロ分子または小粒子の増強された浸透性から生じる。腫瘍血管新生（血管過多（hypervasculature））ならびに血管網状構造の不規則性および不完全性に加えて、リンパドレナージ（lymphatic drainage）の付随する欠如が、浸出するマクロ分子の蓄積を促進する。この効果は、マクロ分子薬剤および脂質について、多くの固体腫瘍において観察される。従って、このような腫瘍における増加された蓄積は、（以下に議論するような）生物活性剤およびｃｉｓ−アコニチル基を組み込む基Ｚの標的化された送達に導く。
【００４０】
ペンダント鎖Ｚは、更に、リガンドまたは生物活性剤を含み得る。リガンドは、多価相互作用（polyvalent interactions）し得る任意のリガンドであり得る。好ましい生物活性剤は、ドキソルビシン、ダウノマイシンおよびパクリタキセルのような抗癌剤である。生物活性剤は、好ましくは、ペプチドリンカーを介してＲ14ＣＯへ結合されている。
【００４１】
Ｌ1は、好ましくは、１またはそれ以上のヘテロ原子で置換および／または中断されていてもよいＣ1−Ｃ18アルキレンおよび／またはＣ6−Ｃ18アリーレン基を含む。好ましくは、Ｌ1は、Ｃ1−Ｃ6アルキレン、Ｃ6−Ｃ12アリーレン、Ｃ1−Ｃ12オキシアルキレンおよびＣ1−Ｃ6アシルからなる群から選択される。Ｌ1がアルキレン基を含む場合、それは、１以上のアルキル基で置換されているか又は置換されていない、分枝鎖、直鎖または環式であり得、そして好ましくは、メチレン、１，２−エチレン、１，２−プロピレン、１，３−プロピレン、tertブチレン、secブチレン、ヘキシレンまたはオクチレンである。Ｌ1がアリーレン基を含む場合、それは、好ましくは、ベンジレン、トリレンまたはキシリレンである。最も好ましくは、Ｌ1は−ＣＯＲa基を含み、ここでＲaは（Ｉ）について上記のように定義される。
【００４２】
上記（ＩＩ）の図表示は、括弧によって囲まれたブロック内に順序を限定する意図はないこと、即ち、Ｑを含む構造がＲ7を含むブロックに隣接してもよいことが、理解されるべきである。
【００４３】
好ましくは、ｐは、１〜５００、より好ましくは２０〜２００の整数である。
【００４４】
Ｒ12、Ｒ13およびＲ14の好ましい定義は、それぞれ、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6と同様の基である。
【００４５】
好ましくは、Ｑは、Ｒ6ＣＯカルボニル炭素へ結合されたアミン基、好ましくはＣ1−Ｃ12ヒドロキシアルキルアミン基、最も好ましくは２−ヒドロキシプロピルアミノ基を含む。この基は、水溶液中の該ブロックコポリマーについての可溶化基（solubilising group）であるように設計される。一般的に、本発明のブロックコポリマーは、水溶性ポリアクリルアミド／ポリアルキレングリコールブロックコポリマー、好ましくはポリメタクリルアミドまたはポリエタクリルアミド／ポリエチレングリコールブロックコポリマーである。
【００４６】
更なる局面において、本発明は、以下を包含するブロックコポリマーの製造方法を提供し、以下を包含する：
化合物（ＩＩＩ）：
【００４７】
【化３】
2005514500.tif 000005
［式中、Ｒは、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ6−Ｃ18アリール、カルボン酸、Ｃ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ2−Ｃ18アルカミノカルボニル、あるいは該炭素骨格内にあるかまたはそこへ結合したヘテロ原子で置換されたＣ2−Ｃ18アルカミノカルボニルおよびＣ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ6−Ｃ18アリール、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ1−Ｃ18アルキルのいずれか１つからなる群から選択され；Ｒ1は、水素およびＣ1−Ｃ6アルキル基からなる群から選択され；Ｒ2は連結基であり；Ｘは電子吸引基である］
を含むエチレン性不飽和モノマーを、
開始剤化合物（ＩＶ）：
【００４８】
【化４】
2005514500.tif 000006
［式中、ｎは１またはそれ以上の整数であり、そしてＹはラジカル開始基であり；Ｒ3は、Ｃ1−Ｃ18アルキレン、Ｃ2−Ｃ18アルケニレン、Ｃ7−Ｃ18アラルキレン、Ｃ7−Ｃ18アルカリーレンおよびＣ6−Ｃ18アリーレンからなる群から選択され；Ｒ15は、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリールおよびＣ6−Ｃ18アリール、Ｃ1−Ｃ18アルコキシ、Ｃ2−Ｃ18アルケニルオキシ（alkeneyloxy）、Ｃ7−Ｃ18アラルコキシ、Ｃ7−Ｃ18アルカリールオキシ、Ｃ6−Ｃ18アリールオキシおよび−Ｏ−Ｙからなる群から選択される基を含む］
の存在下で重合させて、
ユニット（Ｖ）：
【００４９】
【化５】
2005514500.tif 000007
［式中、ｍおよびｎは上記に定義される通りであり、そしてＬ2はＹから誘導される二価の連結基であり、そしてＲ15'はＲ15であるか、またはＲ15が−Ｏ−Ｙである場合、Ｒ15は、
【００５０】
【化６】
2005514500.tif 000008
である］
を含むブロックコポリマーを生成させること。
【００５１】
Ｘ、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3の定義の好ましい例は、（Ｉ）に関して上記で規定される通りである。
【００５２】
Ｙは、好ましくは、ハロゲン置換されたＣ1−Ｃ18アルキルまたはＣ6−Ｃ12アリール基を含み、好ましくは臭素または塩素置換されている。好ましくは、Ｙは、１以上のハロゲン原子で置換された、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ6−Ｃ12アリール、Ｃ1−Ｃ12オキシアルキルおよびＣ1−Ｃ6アシルからなる群から選択される基を含む。Ｙがアルキル基を含む場合、それは、１以上のアルキル基で置換されているか又は置換されていない、分枝鎖、直鎖または環式であり得、そして好ましくは、メチル、エチル、プロピル、tertブチル、secブチル、ヘキシルまたはオクチルである。Ｙがアリール基を含む場合、好ましくは、それは、ベンジル、トリルまたはキシリルである。最も好ましくは、Ｙは、−ＣＯＲy基を含み、式中、Ｒyは、ハロゲン置換されたＣ1−Ｃ6アルキルまたはＣ6−Ｃ12アリール、好ましくはメチル、エチル、プロピル、tertブチルおよびsecブチルからなる群から選択される。最も好ましくは、Ｙは、−ＣＯtertブチルブロミドである。
【００５３】
Ｌ2は、好ましくは、Ｙから誘導され（即ち、モノマーとのラジカル反応の生成物）、そして１以上のヘテロ原子で置換されていてもよいＣ6−Ｃ18アリーレン基および／またはＣ1−Ｃ18アルキレンである。好ましくは、Ｌ2は、Ｃ1−Ｃ6アルキレン、Ｃ6−Ｃ12アリーレン、Ｃ1−Ｃ12オキシアルキレンおよびカルボニル−Ｃ1−Ｃ6アルキレンからなる群から選択される。Ｌ2がアルキレン基を含む場合、それは、１以上のアルキル基で置換されているか又は置換されていない、分枝鎖、直鎖または環式であり得、そして好ましくは、メチレン、１，２−エチレン、１，２−プロピレン、１，３−プロピレン、tertブチレン、secブチレン、ヘキシレンまたはオクチレンである。Ｌ2がアリーレン基である場合、好ましくは、それは、ベンジレン、トリレンまたはキシリレンである。最も好ましくは、Ｌ2は、−ＣＯＲa基であり、式中、Ｒaは、Ｃ1−Ｃ6アルキレンまたはＣ6−Ｃ12アリーレン、好ましくはメチレン、１，２−エチレン、１，２−プロピレン、１，３−プロピレン、tertブチレンおよびsecブチレンからなる群から選択される。
【００５４】
Ｒ15は、好ましくは、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、Ｃ2−Ｃ10アルケニル、Ｃ7−Ｃ10アラルキル、Ｃ7−Ｃ10アルカリールおよびＣ6−Ｃ10アリールおよび−Ｏ−Ｙから選択され、より好ましくはメトキシまたは−Ｏ−Ｙ（これは、Ａ−Ｂ−Ａタイプブロックコポリマーを生成する）である。
【００５５】
好ましくは、該方法は、制御ラジカル重合法（controlled radical polymerization）である。
【００５６】
重合が原子移動ラジカル重合法（atom transfer radical polymerization）で行なわれる場合、重合は、好ましくは、Ｃｕ（Ｉ）錯体を含む重合メディエーター（polymerisation mediator）の存在下で行なわれる。このような錯体は、キレート化リガンドにより錯化されたＣｕ（Ｉ）Ｂｒ錯体である。典型的なメディエーターは、Ｃｕ（Ｉ）Ｂｒ（Ｂｉｐｙ）2、Ｃｕ（Ｉ）Ｂｒ（Ｂｉｐｙ）、Ｃｕ（Ｉ）Ｂｒ（ペンタメチルジエチレン）、Ｃｕ（Ｉ）Ｂｒ［メチル6トリス（２−アミノエチル）アミン］およびＣｕ（Ｉ）Ｂｒ（Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’−ペンタメチルジエチレントリアミン）である。
【００５７】
エチレン性不飽和モノマーは、式（ＩＩＩ）のモノマーと共重合可能なコモノマーを含み得る。
【００５８】
反応は、好適な溶媒の存在下で行なわれるべきである。このような溶媒は、一般的に、非プロトン性溶媒、例えば、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、アセトン、ジメチルスルホキシド、酢酸エチル、メチルホルムアミド、エチレンカーボネートおよびスルホランならびにそれらの混合物である。あるいは、水が使用され得る。特に好ましい溶媒は、ジメチルスルホキシド、エチレンカーボネート、テトラヒドロフラン、およびジメチルホルムアミドならびにそれらの混合物である。
【００５９】
好ましくは、（Ｖ）は、更に、試薬ＨＲx［式中、Ｒxは、ＮＲ19Ｒ20、ＳＲ21およびＯＲ22からなる群から選択され、式中、Ｒ19はリンカー基、好ましくは置換アルキル基、より好ましくはペプチド基であるかこれを含み；Ｒ20は、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ6−Ｃ18アリールから選択され；Ｒ21およびＲ22は、水素、Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ1−Ｃ12アルケニル、Ｃ1−Ｃ12アラルキル、Ｃ1−Ｃ12アルカリール、Ｃ1−Ｃ12アルコキシおよびＣ1−Ｃ12ヒドロキシアルキルからなる群から選択され、これらのいずれもが、生物活性剤置換基を含み得および／または１以上の切断可能な結合を含み得る］と反応させて、構造（ＶＩ）：
【００６０】
【化７】
2005514500.tif 000009
［式中、１≦ｐ≦ｍ］
を有する誘導化ブロックコポリマーを形成させ得る。
【００６１】
好ましくは、ｐは、１〜２００、より好ましくは１〜１０の整数である。好ましくは、ＨＲXは、Ｈ2ＮＲZである。
【００６２】
ＨＲXは、Ｘ−Ｏを置換して、Ｒ2へ結合されたアシル基と共有結合を形成し得る求核試薬である。最も好ましくは、ＲZは、上述のようなアミノアシルリンカーまたはｃｉｓ−アコニチルリンカーのような切断可能な結合を含む。一般的に、ＲZは、（Ｖ）との反応前に結合されていてもよい、生物活性剤を含む。
【００６３】
構造（ＶＩ）を有するブロックコポリマーの製造に引き続いて、該ブロックコポリマーをクエンチする（quenching）更なる工程が行われ得る。これは予め未反応基ＣＯＯＸをクエンチング基と反応させることを包含する。この基は、好ましくは、アミン部分を含み、そして一般的に、該ブロックコポリマーについての可溶化または溶解性改変基であるように選択される。このようなクエンチング化合物は、例えば、親水性試薬（例えば、ヒドロキシプロピルアミン）である。種々のタイプのクエンチング基が、同一のポリマーにおいて使用され得る。
【００６４】
あるいは、（Ｉ）は、上記で定義されるような試薬ＨＲXと反応され、化合物（ＶＩＩ）を形成し得る：
【００６５】
【化８】
2005514500.tif 000010
式中、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、ＲX、ｎ、ｐおよびＬは上記で定義される通りである。この化合物は、更に、クエンチング基と反応され得る。これらの基は、任意の未反応の基ＣＯＯＸと反応する。この基は、好ましくは、アミン部分を含み、そして一般的に、該ブロックコポリマーについての可溶化または溶解性改変基であるように選択される。このようなクエンチング化合物は、例えば、親水性試薬（例えば、ヒドロキシプロピルアミン）である。
【００６６】
更なる局面において、本発明は、以下の工程を包含する、ブロックコポリマーの製造方法を提供する：
（１）  化合物（ＶＩＩＩ）：
【００６７】
【化９】
2005514500.tif 000011
［式中、Ｒ23は、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ6−Ｃ18アリール、カルボン酸、Ｃ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ2−Ｃ18アルカミノカルボニル、あるいは該炭素骨格内にあるかまたはそこへ結合したヘテロ原子で置換されたＣ2−Ｃ18アルカミノカルボニルおよびＣ2−Ｃ18アルコキシカルボニル、Ｃ6−Ｃ18アリール、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ1−Ｃ18アルキルのいずれか１つからなる群から選択され；Ｒ24は、水素およびＣ1−Ｃ6アルキル基からなる群から選択され；Ｒ25は連結基であり；Ｘ1は、カルボキシル活性化基、水素、Ｍ11/dd+およびカルボキシル保護基からなる群から選択され、ここでＭ1は金属イオンであり、そしてｄは１または２の整数であり；Ｒ26は、Ｃ1−Ｃ18アルキレン、Ｃ2−Ｃ18アルケニレン、Ｃ7−Ｃ18アラルキレン、Ｃ7−Ｃ18アルカリーレンおよびＣ6−Ｃ18アリーレンからなる群から選択される］を含むエチレン性不飽和モノマーを、
開始剤化合物（ＶＩＩＩ）：
【００６８】
【化１０】
2005514500.tif 000012
［式中、ｎは１またはそれ以上の整数であり、そしてＹ’はラジカル開始基であり；Ｒ27は、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリールおよびＣ6−Ｃ18アリール、Ｃ1−Ｃ18アルコキシ、Ｃ2−Ｃ18アルケニルオキシ（alkeneyloxy）、Ｃ7−Ｃ18アラルコキシ、Ｃ7−Ｃ18アルカリールオキシ、Ｃ6−Ｃ18アリールオキシおよび−Ｏ−Ｙ1からなる群から選択される基を含み；そしてＲ28は、Ｃ1−Ｃ18アルキレン、Ｃ2−Ｃ18アルケニレン、Ｃ7−Ｃ18アラルキレン、Ｃ7−Ｃ18アルカリーレンおよびＣ6−Ｃ18アリーレンからなる群から選択される］の存在下で重合させて、
ユニット（Ｘ）：
【００６９】
【化１１】
2005514500.tif 000013
［式中、ｍは１より大きい整数であり、そしてＬ3はＬ3から誘導される二価の連結基であり；そしてＲ27'はＲ27であるか、またはＲ27が−Ｏ−Ｙ1である場合、Ｒ27は、
【００７０】
【化１２】
2005514500.tif 000014
である］
を含むブロックコポリマーを生成させる工程、
（２）  （Ｘ）を試薬ＨＲxx［式中、Ｒxxは、ＮＲ29Ｒ30、ＳＲ31およびＯＲ32からなる群から選択され、式中、Ｒ29はリンカー基、好ましくはペプチド基であり；Ｒ30は、水素、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、Ｃ7−Ｃ18アラルキル、Ｃ7−Ｃ18アルカリール、Ｃ6−Ｃ18アリールから選択され；Ｒ31およびＲ32は、個々に、水素、Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ1−Ｃ12アルケニル、Ｃ1−Ｃ12アラルキル、Ｃ1−Ｃ12アルカリール、Ｃ1−Ｃ12アルコキシおよびＣ1−Ｃ12ヒドロキシアルキルからなる群から選択され、そして１以上の切断可能な結合を含み得る］と反応させて、
構造（ＸＩ）：
【００７１】
【化１３】
2005514500.tif 000015
［式中、１≦ｐ≦ｍ］
を有する誘導化ブロックコポリマーを形成させる工程。
【００７２】
Ｙ1は、好ましくは、ハロゲン置換されたＣ1−Ｃ18アルキルまたはＣ6−Ｃ18アリール基を含み、好ましくは臭素または塩素置換されている。好ましくは、Ｙ1は、１以上のハロゲン原子で置換された、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ6−Ｃ12アリール、Ｃ1−Ｃ12オキシアルキルおよびＣ1−Ｃ6アシルからなる群から選択される基を含む。Ｙ1がアルキル基を含む場合、それは、１以上のアルキル基で置換されているか又は置換されていない、分枝鎖、直鎖または環式であり得、そして好ましくは、メチル、エチル、プロピル、tertブチル、secブチル、ヘキシルまたはオクチルである。Ｙ1がアリール基を含む場合、好ましくは、それは、ベンジル、トリルまたはキシリルである。最も好ましくは、Ｙ1は、−ＣＯＲy基を含み、式中、Ｒyは上記で定義される通りである。
【００７３】
Ｌ3は、好ましくは、Ｙ1から誘導され、そして１以上のヘテロ原子で置換および／または中断されていてもよいＣ1−Ｃ18アルキレンまたはＣ6−Ｃ18アリーレン基である。
好ましくは、Ｌ3は、Ｃ1−Ｃ6アルキレン、Ｃ6−Ｃ12アリーレン、Ｃ1−Ｃ12オキシアルキレンおよびカルボニル−Ｃ1−Ｃ6アルキレンからなる群から選択される基を含む。Ｌ3がアルキレン基である場合、それは、１以上のアルキル基で置換されているか又は置換されていない、分枝鎖、直鎖または環式であり得、そして好ましくは、メチレン、１，２−エチレン、１，２−プロピレン、１，３−プロピレン、tertブチレン、secブチレン、ヘキシレンまたはオクチレンである。Ｌ3がアリーレン基である場合、好ましくは、それは、ベンジレン、トリレンまたはキシリレンである。最も好ましくは、Ｌ3は、−ＣＯＲa基であり、ここで、Ｒaは、Ｃ1−Ｃ6アルキレンまたはＣ6−Ｃ12アリーレン、好ましくはメチレン、１，２−エチレン、１，２−プロピレン、１，３−プロピレン、tertブチレンおよびsecブチレンからなる群から選択される。
【００７４】
電子吸引基Ｘ1は、好ましくは、カルボキシレート活性化基（carboxylate activating group）であり、そして好ましくはＮ−スクシンイミジル、ペンタクロロフェニル、ペンタフルオロフェニル、パラ−ニトロフェニル、ジニトロフェニル、Ｎ−フタルイミド、ノルボルニル、シアノメチル、Ｎ−ピリジル、Ｎ−トリクロロトリアジン、５−クロロキニリノ、およびＮ−イミダゾールからなる群から選択される。好ましくは、Ｘ1は、Ｎ−スクシンイミジルまたはイミダゾール部分である。
【００７５】
Ｒ25は、好ましくは、Ｒ2と同一である。
【００７６】
Ｒ27は、好ましくは、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、Ｃ2−Ｃ10アルケニル、Ｃ7−Ｃ10アラルキル、Ｃ7−Ｃ10アルカリールおよびＣ6−Ｃ10アリールおよび−Ｏ−Ｙ1からなる群から選択される。
【００７７】
好ましくは、Ｒ28は、Ｃ1−Ｃ8アルキレン基およびＣ6−Ｃ12アリーレン基からなる群から選択され、最も好ましくは、メチレン、エチレン、プロピレンおよびイソプロピレンである。
【００７８】
好ましくは、ＨＲXXは、上記に定義されるようなＨＲXである。
【００７９】
好ましくは、工程（１）プロセスは、制御ラジカル重合（controlled radical polymerization）であり、そして（２）は求核置換反応である。
【００８０】
発明の詳細な説明
本発明は、好ましくは、１．４未満、好ましくは１．２未満の多分散性を有するブロックコポリマーを提供する。ブロックコポリマーは、好ましくは、制御ラジカル重合（Controlled Radical Polymerization）によって調製される活性化ポリアクリレートエステルである。これらのブロックコポリマーは、誘導可能であるように設計され、そして改善された生物学的プロフィールを有するポリマー−薬物複合体を形成するために使用され得る。
【００８１】
本発明の有用性は、主鎖に沿ってランダムではなく、ポリマーの所定の箇所に、生物活性剤の複合が調製され得ることである。狭い分子量ポリマー前駆体の使用が、より効率的な前臨床開発を可能にし、水溶液ベースの構造−特性相関（これは、ポリマー−薬物複合体の生物学的プロフィールを最適化するために利用され得る）の範囲を理解する。
【００８２】
共−ブロックされた（co-blocked）ポリマー前駆体の使用は、更に非−ＰＥＧブロックで官能化される、ポリ（エチレングリコール）ポリアクリル−およびメタクリル酸の誘導化コポリマーであり得る、水溶性の狭いＭＷＤ官能化賦形剤の調製を可能にする。
【００８３】
本発明の特に好ましいブロックコポリマーは、構造（ＸＩＩ）を含む：
【００８４】
【化１４】
2005514500.tif 000016
式中、ａおよびｂは１以上の整数であり、そして好ましくはＡ−Ｂタイプブロックコポリマーのブロックを規定する。活性化部分は、Ｎ−スクシンイミジル基である。この特定の基は、溶液中で特に安定であることが判り、そして自発的な加水分解に耐性である。このブロックコポリマーは、Ｃｕ（Ｉ）Ｂｒ（ペンタメチルジエチレン）メディエーターを使用した原子移動重合（Atom Transfer Polymerization）によって生成され得る。該重合は、好適な非プロトン性溶媒中でのモノマー（ＸＩＩＩ）とポリエチレングリコール開始剤化合物（ＸＩＶ）との反応を包含する。
【００８５】
【化１５】
2005514500.tif 000017
１つの好ましい実施形態において、溶媒はテトラヒドロフランである。別の好ましい実施形態において、溶媒は、ジメチルスルホキシドおよび必要に応じてそれと混合されたジメチルホルムアミドである。更なる特に好ましい実施形態は、溶媒としてエチレンカーボネートを使用する。反応は、好ましくは、窒素雰囲気下、０〜１５０℃の温度で行なわれる。好ましい温度範囲は、３０〜８０℃、最も好ましくは５０〜７０℃である。
【００８６】
ユニット（ＸＩＩ）を含むブロックコポリマーは、引き続いて、誘導化され得る。カルボキシル活性化基は、好適な求核試薬によって置換され得る。ポリマー薬物複合体を形成させるために、ユニット（ＸＩＩ）をペンダント部分で誘導化することが好ましい。このような部分は、上記で定義されるようなアミノアシルリンカーまたは加水分解に不安定なリンカーを含み得る。このようなリンカーは、疾患細胞（diseased cell）のリソソームに入ると分解し得、従って標的部位へ直接薬物または薬物前駆体を放出する。
【００８７】
好ましくは、ペンダント部分は、Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙリンカーまたはｃｉｓアコニチルリンカーを含む。このようなペンダントリンカーは、ブロックコポリマー誘導化前に薬物へ共有結合されていてもよく、あるいは、ブロックコポリマー骨格へのペンダント部分の結合に引き続いて誘導化されてもよい。
【００８８】
好ましい実施形態において、ユニット（ＸＩＩ）を含むブロックコポリマーを、１当量未満のペンダント基と反応させて、従って前もって特定された数のＮ−スクシンイミジル部分を置換するのみである。これは、残存するＮ−スクシンイミジル基を可溶化基で置換する、第二のクエンチング工程（quenching step）を可能にする。このような基は、水溶液（生物学的流体）中におけるブロックコポリマーの可溶化を助ける。好ましいクエンチング剤は、親水性アミンまたはアミノ酸、好ましくはヒドロキシル化アミン（例えば、２−ヒドロキシプロピルアミン）を含むべきである。アミン末端化ＰＥＧもまた使用され得る。あるいは、カルボキシル活性化基は、遊離のカルボン酸部分を生成させるために加水分解され得る。好ましい反応方法の概略を、下記のスキーム１に提供する。この特定の例において、薬物ドキソルビシンは、ＧＬＦＧリンカーを介してブロックコポリマーへ結合される。
【００８９】
好ましくは、多数の異なる生物活性剤が、ポリマー鎖に結合され得る。
【００９０】
ａおよびｂは、１〜５００の範囲の整数であり、そしてｃは、活性化ブロックコポリマーと反応されたペンダントの当量数である。ＣＲＰ法は、リンカーポリマーの鎖末端で不活性開始部分(dormant initiating moieties)の存在を生じさせることが知られている。
【００９１】
本発明はまた、生理学的に可溶性のポリマー生物活性剤複合体、ポリマー治療剤、官能化ポリマー、薬学的組成物および材料を調製するための、上記のブロックコポリマーの使用に関する。
【００９２】
ポリマー主鎖に沿って生物活性複合化ペンダント鎖をより制御された配置にブロック前駆体（ＸＩＩ）を使用することは可能であり、何故ならば、この複合化は、該ブロック内においてＮ−スクシンイミジル基でのみ生じるからである。これは、親水性および疎水性ブロックを含む共−ブロックコポリマーを生じさせて、溶液中でポリマーミセルを形成させる。これらのシステムの顕著な利点は、延長された循環時間（これは、ＥＰＲ効果による腫瘍捕捉を最大化し得る）を示すより高い分子量ミセル凝集物を設計する能力である。ミセル解離時に、個々のブロックコポリマー分子が安全に分泌され、そして、それらが十分に低分子量である限り、これらのポリマーは非生分解性であり得る。更に、ポリ（アクリル酸）、ポリ（メタクリル酸）およびポリ（エチレングリコール）ベースの賦形剤が、錠剤および薬学的製剤の接着、膨潤およびｐＨ依存特性を修飾するために、広く使用される。共−ブロック化されたポリマー前駆体（ＸＩ）の使用は、非−ＰＥＧブロックにおいて更に官能化される、ポリ（エチレングリコール）ポリアクリル酸およびメタクリル酸のコポリマーから誘導される、水溶性の狭い分子量分布官能化賦形剤の調製を可能にする。コブロックポリマーは凝集されたミセル構造を形成するので、これらの新しい官能化賦形剤は、生物活性剤の経口投与のための新規の製剤に、潜在的に開発され得る。
【００９３】
【化１６】
2005514500.tif 000018
【実施例】
【００９４】
実施例１
マクロ開始剤２の調製
ＰＥＧ（ポリエチレングリコール）マクロ開始剤（macroinitiators）を、Ｊａｎｋｏｖａらの手順（Macromolecules (1998), 31, 538-541）によって調製した。１５ｍｌ乾燥ＣＨ2Ｃｌ2中のトリエチルアミン（１２．５×１０-3ｍｏｌ、１．２６５ｇ、１．７５ｍｌ）を、冷却器、滴下漏斗（dropping funnel）、ガス注入口およびマグネチックスターラーを備えた２５０ｍｌ三頚丸底フラスコに添加した。０℃に冷却した後、１０ｍｌ ＣＨ2Ｃｌ2中の２，２−ブロモイソブチルブロミド（１２．５×１０-3ｍｏｌ、２，８７４ｇ、１．５５ｍｌ）を添加し、そして混合物を窒素でパージした。次いで、５０ｍｌ ＣＨ2Ｃｌ2中のモノメトキシでキャップしたＰＥＧ（Ｍｗ＝２，０００ｇ／ｍｏｌ）（５×１０-3ｍｏｌ、１０ｇ）を、窒素下、１時間の間、滴下した。ＰＥＧを、トルエン中での共沸蒸留によってあらかじめ乾燥させ、そして残存するトルエンを真空中で除去した。反応混合物の温度を室温まで上昇させ、そして反応を１８時間継続させた。溶液を濾過し、溶媒の半分を真空下で蒸発させ、そして生成物を冷エーテル中で析出させた。析出物を無水エタノール中で再結晶させた（冷蔵庫中に一晩保存）。マクロ開始剤を濾過し、冷エーテルで洗浄し、そして真空下で乾燥させた。粗生成物を、８０ｍｌ水中に４ｇ溶解させることによって精製した。溶液ｐＨをｐＨ８まで上昇させ、過剰なｉ−ＢｕＢｒを加水分解させた。次いで、溶液をＣＨ2Ｃｌ2（７０ｍｌ）で抽出した。安定なエマルジョンが得られ、そして完全な相分離について数時間を要した。溶媒を真空下で除去した。生成物を熱ＥｔＯＨに溶解し、そして冷蔵庫に配置して結晶化した。次いで、それを濾過して、エーテルで洗浄し、そして真空下で乾燥させた。精製した生成物は白色であった。置換度をＨ ＮＭＲスペクトルによって算出した。
【００９５】
この手順はまた、ＰＥＧ５０００およびＰＥＧ１００００から誘導される、モノメトキシでキャップされたＰＥＧマクロ開始剤を調製するために使用された。
【００９６】
実施例２
コ−ブロック狭分子量ポリマー前駆体３の調製
【００９７】
【化１７】
2005514500.tif 000019
一般的な重合定量化（試薬および条件）を表１に略述する。
【００９８】
モノマー１（ＷＯ  ０１／１８０８０に合成される通り）、エチレンカーボネート、およびビピリジンの混合物を、セプタム（septum）で密封したチューブ中に配置し、そしてそれを５分間アルゴンでパージし、そして次いで、ＣｕＢｒを添加した。混合物を徐々に加熱して、溶液を形成させ（深い褐色）、そして更に３０分間アルゴンでパージした。次いで、エチレンカーボネート中の表に記載のモノマーに相当する量のＰＥＧマクロ開始剤２の溶液（徐々に加熱して、エチレンカーボネートおよび２の両方を溶かした）を、アルゴンで１０分間パージし、そしてアルゴンで洗浄したシリンジによって該モノマー溶液中へ添加した。混合物をオイルバスに配置し、そして撹拌した。反応を、空気に曝し、ＤＭＦで冷却および稀釈することによって、停止させた。次いで、溶液を、アルミナで充填させたカラムに通過させ、そしてポリマーをＭｅＯＨ中で析出させた。析出物を濾過し、エーテルで洗浄し、そして真空下で乾燥させた。生成物を白色粉末として得た。
【００９９】
表１は、重合条件ならびに分子量２０００ｇ／ｍｏｌのＰＥＧから誘導されたマクロ開始剤２で行われた重合の収量および分子量特性を示す。表１において、1ＥＣ＝エチレンカーボネート
2Ｇｅｌパーミエーションクロマトグラフィーは、ＰＭＭＡ標準物質を有するＤＭＦ溶離液を使用した。
3反応混合物は１時間アルゴンでパージした。
【０１００】
【表１】
2005514500.tif 000020
【０１０１】
実施例３
複合体化反応は、該前駆体の有用性を実証して、狭い分子量分布の官能化ポリマーを作製するために包含される。
ポリマー前駆体３の複合体化反応
【０１０２】
【化１８】
2005514500.tif 000021
コ−ブロック化前駆体３（０．１ｇ；Ｍｎ＝３２，５００（ＤＭＦ溶離液でのＧＰＣによって測定される））を、無水ＤＭＳＯ（０．３ｇ）中に溶解し、そして１５分間アルゴンでパージした。１−アミノ−２−プロパノール（０．２ｇ）を無水ＤＭＳＯ（０．１ｇ）中に溶解し、そして１５分間アルゴンでパージし、次いでスターラーを備えたバイアルを、５０℃のオイルバス中に配置した。ポリマー溶液をシリンジによって滴下した（〜１５分間）。反応混合物を１．５時間反応させた。次いで、生成物をアセトン：エーテル（１：１）中に沈殿させた。水溶性コ−ブロックポリマー４を、ＭｅＯＨ中に溶解させ、そしてアセトン：エーテル（１：１）中で再沈殿させた。ＩＲスペクトルは１７３２ｃｍ-1で吸収を示さず、全てのＮ−ヒドロキシスクシンイミドが置換されたことを示した。ＧＰＣ分析は、Ｍｎが２５，５００ｇ／ｍｏｌ（ＰＤ＝１．３５）であることを示し、ポリマー４の流体力学半径（hydrodynamic radius）が出発の前駆体ポリマー３と有意に異なることを実証している。生成物４のＨ−ＮＭＲ分析は、ＰＥＧブロックが共有結合されたことを実証した。
【０１０３】
実施例４
１０モルパーセントペプチド薬物モデル５の複合体化に続いて、１−アミノ−２−プロパノールの複合体化を行い、コブロックされた複合体７を得た。
【０１０４】
【化１９】
2005514500.tif 000022
コ−ブロック化前駆体３（０．１５ｇ；Ｍｎ＝１９，７００ｇ／ｍｏｌ（ＤＭＦ溶離液でのＧＰＣによって測定される））を、無水ＤＭＳＯ（１．２５ｍｌ）中に溶解し、そして１０分間アルゴンでパージした。マクロ開始剤２はＧＰＣ分子量Ｍｎ＝４，４００ｇ／ｍｏｌを有すると判ったので、前駆体ポリマー３のこのサンプルにおける反応性ユニットの量は、６．３×１０-4ｍｏｌであると算出された。１０モルパーセント５を複合体化するために、５の６．３×１０-5ｍｏｌ（０．０２２ｇ）を反応混合物に添加し、そしてフラスコを５０℃のオイルバス中に配置した。０．２５ｍｌ ＤＭＳＯ（予めＡｒでパージした）中のトリエチルアミン（１２．６×１０-4ｍｏｌ、０．０１２７ｇ）の溶液を、１〜２分間、滴下した。混合物を１０分間撹拌し、そして次いで０．５ｍｌ ＤＭＳＯ中の１−アミノ−２−プロパノール（１２．６×１０-4ｍｏｌ＝０．０９４６ｇ）の溶液を１０分間滴下し、そして撹拌を５０℃で更に５０分間継続した。ＩＲスペクトルは１７３２ｃｍ-1で吸収を示さず（全てのＮ−ヒドロキシスクシンイミドが置換されたことを示した）、そして複合体を遠心分離後に冷ＴＨＦ中で単離した。生成物７のＨ−ＮＭＲ分析は、ＰＥＧブロックが共有結合されたことを実証した。
【国際調査報告】
2005514500.tif 000038
2005514500.tif 000039
2005514500.tif 000040
2005514500.tif 000041
2005514500.tif 000042
2005514500.tif 000043
2005514500.tif 000044