(57)【要約】大豆タンパク等の植物タンパク、フィトステロール及びイソフラボンを含む血中全コレステロール低減用飲食性製品。血漿脂質プロファイルの改善の点において（イソフラボンを含む）大豆タンパクとフィトステロールとの組み合わせは個々の成分よりも優れている。好ましくは前記製品は食物である。本発明はまた、血漿コレステロール低減相乗有効量のイソフラボン、大豆タンパク及びフィトステロールを含む組成物を与える、動物、好ましくはヒトの血漿中コレステロールの低減方法でもある。【特許請求の範囲】
【請求項１】
動物に
有効量の少なくとも１つの植物タンパク、少なくとも１つのフィトステロール、及び、少なくとも１つのイソフラボンを含む組成物を与えることを含み、
前記植物タンパク、フィトステロール及びイソフラボンが相乗的に血中コレステロールを低減させる、
動物の血中コレステロール低減方法。
【請求項２】
コレステロールを相乗的に低減するのに効果的な量の植物タンパク、フィトステロール及びイソフラボンを含む可食性組成物。
【請求項３】
イソフラボンがゲニステイン、ダイゼイン及びグリシテインからなる群から選択される、請求項１記載の方法。
【請求項４】
フィトステロールがβシトステロール、βシトスタノール、カンペステロール及びスティグマステロールからなる群から選択される、請求項１記載の方法。
【請求項５】
前記組成物が４重量％未満の食物繊維を含む、請求項１記載の方法。
【請求項６】
前記組成物が３重量％未満の食物繊維を含む、請求項１記載の方法。
【請求項７】
前記組成物が食物繊維を含まない、請求項５記載の方法。
【請求項８】
前記組成物が４重量％未満の食物繊維を含む、請求項２記載の組成物。
【請求項９】
前記組成物が３重量％未満の食物繊維を含む、請求項２記載の組成物。
【請求項１０】
前記組成物が食物繊維を含まない、請求項２記載の組成物。
【請求項１１】
前記植物タンパクが大豆タンパクを含む、請求項１記載の方法。
【請求項１２】
前記植物タンパクが大豆タンパクを含む、請求項２記載の組成物。
【請求項１３】
前記動物がヒトである、請求項１記載の方法。
【請求項１４】
前記動物に１以上の食物を１食分以上与えることを含む、請求項１記載の方法。
【請求項１５】
前記１以上の食物が少なくとも１食分のスプレッドを含む、請求項１記載の方法。
【請求項１６】
前記組成物が０．５重量％未満のカルシウム塩を含む、請求項１記載の方法。
【請求項１７】
前記組成物が０．１重量％未満のカルシウム塩を含む、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
前記組成物が０．５重量％未満のカルシウム塩を含む、請求項２記載の組成物。
【請求項１９】
前記組成物が０．１重量％未満のカルシウム塩を含む、請求項１８記載の組成物。
【請求項２０】
前記組成物がカルシウムそのものとして測定された０．５重量％未満のカルシウムを含む、請求項１記載の方法。
【請求項２１】
前記組成物がカルシウムそのものとして測定された０．３重量％未満のカルシウムを含む、請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
前記組成物がカルシウムそのものとして測定された０．１重量％未満のカルシウムを含む、請求項１７記載の方法。
【請求項２３】
前記組成物がカルシウムそのものとして測定された０．５重量％未満のカルシウムを含む、請求項２記載の組成物。
【請求項２４】
前記組成物がカルシウムそのものとして測定された０．３重量％未満のカルシウムを含む、請求項２３記載の組成物。
【請求項２５】
前記組成物がカルシウムそのものとして測定された０．１重量％未満のカルシウムを含む、請求項２４記載の組成物。
【請求項２６】
前記組成物が０．１重量％未満のカルシウム塩を含む、請求項１８記載の組成物。
【請求項２７】
動物に
１から２５ｇの少なくとも１つの植物タンパク、０．２から３ｇの少なくとも１つのフィトステロール、及び、５から１５０ｍｇの少なくとも１つのイソフラボンを含む組成物を与えることを含む、動物の血中コレステロール低減方法。
【請求項２８】
コレステロールを相乗的に低減するのに効果的な量の、１から２５ｇの範囲の少なくとも１つの植物タンパク、０．２から３ｇの範囲の少なくとも１つのフィトステロール及び５から１５０ｍｇの範囲の少なくとも１つのイソフラボンを含む可食性組成物。
【請求項２９】
動物に、一日につき、
１から２５ｇの少なくとも１つの植物タンパク、０．２から３ｇの少なくとも１つのフィトステロール、及び、５から１５０ｍｇの少なくとも１つのイソフラボンを与えることを含む、動物の血中コレステロール低減方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
以下の略語が本明細書中で使用される。
ＬＤＬ：低密度リポタンパク質
ＴＣ：全コレステロール（フリーのコレステロールとコレステリルエステルとを含む）
ＴＧ：トリグリセリド
ＶＬＤＬ：極低密度リポタンパク質
ＣＨＤ：冠状動静脈心臓病
ＭＵＦＡ：モノ不飽和脂肪酸部分
ＰＵＦＡ：ポリ不飽和脂肪酸部分
【背景技術】
【０００２】
長年の研究努力にも係わらず、冠状動静脈心臓病（ＣＨＤ）は世界中の多くの国々の人々の健康に対する大きな脅威である。ＣＨＤのリスクに関する予測値として考慮されている要素の中で、伝統的に重要なものは血中全コレステロール（ＴＣ）濃度であり、近年、ＨＤＬコレステロールとＬＤＬコレステロールの相対量がＣＨＤのリスクと関連づけられている。ＬＤＬに対するＨＤＬの比が高いと一般に健康な冠状動静脈状態の指標とされる。
【０００３】
フィトステロール（すなわち植物ステロール）は低コレステロール化効果を有することがよく報告されている。フィトステロールはコレステロールの腸吸収を阻害し、血中の全及び低密度リポタンパク（ＬＤＬ）コレステロール濃度を低減させる。ヒトの研究では、フィトステロールは血中コレステロール濃度を平均で１０％低減させることが示されている。Moghadasian MH, Frohlich JJ, "Effects of dietary phytosterols on cholesterol metabolism and atherosclerosis: clinical and experimental evidence", Am. J. Med. 1999; 107: 588-594。
【０００４】
大豆タンパクは、低コレステロール化効果を有することがよく報告されている多くの他の食物成分の一つである。動物（Potter SM. "Overview of proposed mechanisms for the hypocholesterolemic effect of soy", J. Nutr. 1995; 125:606S-611S）、ヒト（Cassidy A, Bingham S, Setchell KD. "Biological effects of a diet of soy protein rich in isoflavones on the menstrual cycle of premenopausal women", Am. J. Clin. Nutr. 1994; 60: 333-340; Teixeira SR, Potter SM, Weigel R, Hannum S, Erdman JWJ, Hasler CM. "Effects of feeding 4 levels of spy protein for 3 and 6 wk on blood lipids and apolipoproteins in moderately hypercholesterolemic men", Am. J. Clin. Nutr. 2000; 71:1077-1084）及び疫学的（Hollman PC, Katan MB. "Dietary flavonoids: intake, health effects and bioavailability", Food Chem. Toxicol. 1999; 37:937-942）研究から得られた多くの研究報告によると、大豆タンパクを経口摂取すると血中コレステロール濃度が減少し、冠状動静脈疾患の発生率が低下する。
【０００５】
大豆タンパクがその低コレステロール効果を発揮する機構はフィトステロールの機構とは異なる。一般に、大豆タンパクのコレステロール低減効果は血漿コレステロール消去及び／又は胆汁分泌及び形成の増大を通して実現すると想定されている（Cassidy A, Bingham S, Setchell K D, "Biological effects of a diet of soy protein rich in isoflavones on the menstrual cycle of premenopausal women," Am J Clin Nutr 1994;60:333-340; Lichtenstein A H. "Soy protein, isoflavones and cardiovascular disease risk," J Nutr 1998;128:1589-1592; Baum J A, Teng H, Erdman J W J, et al. "Long-term intake of soy protein improves blood lipid profiles and increases mononuclear cell low-density-lipoprotein receptor messenger RNA in hypercholesterolemic, postmenopausal women," Am J Clin Nutr 1998;68:545-551）。
【０００６】
大豆タンパクのコレステロール低減効果はよく報告されているが、大豆タンパク中でこの効果を担う成分はまだ同定されていない。大豆タンパクはイソフラボンの豊富な供給源である。大豆タンパク中のイソフラボンがコレステロール低減効果の原因であるかもしれない旨を実証した幾つかの研究（Merz-Demlow B E, Duncan A M, Wangen K E, et al. "Soy isoflavones improve plasma lipids in normocholesterolemic, premenopausal women," Am J Clin Nutr 2000;71:1462-1469; Anthony M S, Clarkson T B, Williams J K, "Effects of soy isoflavones on atherosclerosis: potential mechanisms, Am J Clin Nutr 1998;68:1390S-1393S; Ni W, Yoshida S, Tsuda Y, Nagao K, Sato M, Imaizumi K., "Ethanol-extracted soy protein isolate results in elevation of serum cholesterol in exogenously hypercholesterolemic rats," Lipids 1999;34:713-716; Crouse J R, Morgan T, Terry J G, Ellis J, Vitolins M, Burke G L, "A randomized trial comparing the effect of casein with that of soy protein containing varying amounts of isoflavones on plasma concentrations of lipids and lipoproteins," Arch Intern Med 1999;159:2070-2076）があるようであるが、他の研究（Greaves K A, Wilson M D, Rudel L L, Williams J K, Wagner J D. "Consumption of soy protein reduces cholesterol absorption compared to casein protein alone or supplemented with an isoflavone extract or conjugated equine estrogen in ovariectomized cynomolgus monkeys," J Nutr 2000;130:820-826）は大豆タンパク自身（大豆アミノ酸又はペプチドを含む）又はイソフラボン以外のタンパク関連物質がコレステロール低減活性を有すると示しているようである。
【０００７】
ヒト対象者における大豆タンパクの低トリグリセリド効果はAnderson J W, Johnstone B M, Cook-Newell M E in "Meta-analysis of the effects of soy protein intake on serum lipids," N.Engl.J Med 1995;333 :276-282による包括的な分析に記載されている。
【０００８】
コレステロール状態の改善又は潜在的なコレステロール改善効果を引き起こすとして学術文献又は刊行物に示唆されている他の可食性物質は：スタチン、ナイアシン、イノシトール、ヘキサナイアシネート、ビタミンＥ、トコトリエノール、ビタミンＣ、パンテチン、クエルセチン、クロム、マグネシウム、Ｌ−カルチニン、大豆、コンドロイチン硫酸、レシチン、キトサン、ロイヤルゼリー及び銅を含む。動物及びヒトに潜在的なコレステロール改善利益を有するものとして学術文献又は刊行物にこれまで多くの成分が記載されてきたが、好ましくは薬を使うことなく、コレステロール状態を更に改善する必要性が多くの個人又は個体に存在する。
【０００９】
高コレステロール濃度の問題は特許文献においてもかなりの注目を受けている。
【００１０】
Potterらの米国特許第５８５５８９２号はダイゼイン及びその代謝物、ｏ−デスメチルアンゴレンシン及びジヒドロダイゼインが、高密度リポタンパクコレステロールの濃度を増大させ、且つ、低密度リポタンパクコレステロールの濃度を低減させて、ヒトの血中コレステロール成分の濃度を変更させるのに有用である旨を開示している。Potterらは、植物タンパク物質、特に大豆タンパク物質が動物の血中の全コレステロール及びＬＤＬ−コレステロールの濃度を低減させることが知られているとも報告している。
【００１１】
大豆タンパク中のフィトエストロゲンは大豆タンパクの低コレステロール効果の潜在的に重要な要素として認識されていると言われており、エステロゲン自体は重要な心臓保護要素とされていると言われている。Potterらは、従来技術の説明において、イソフラボンが動物の全コレステロール及びＬＤＬコレステロールの血中濃度を低減させ、アテローム硬化症の進行を遅延又は阻害することが最近の研究で決定された旨を報告しているが、ヒトの血中コレステロール濃度へのこれらのイソフラボンの効果は未だ不明確である。
【００１２】
Potterらの発明は、ヒトの血中のＨＤＬコレステロール濃度を増大し且つＬＤＬコレステロール濃度を低減させるのに有効な量で、ダイゼインを含む物質をヒトに投与することにより、アテローム硬化症及び循環器病のリスクを低減してヒトの血中のコレステロール成分濃度を変更する方法を指向している。ある実施態様では、大豆タンパク物質補助食品中のダイゼインがヒトに投与されている。ダイゼインを含む補助食品は、ダイゼインを、栄養ドリンクを含む飲料、アイスクリーム・アイスミルク・低脂肪冷凍デザート・非乳性冷凍デザート等の氷菓子、スープ、サラダドレッシング及びディップ、並びに、マヨネーズ及びチップディップ等のスプレッド（塗り広げた状態で摂取する食品）といった殆ど全ての食品に配合することによって調製可能であるとされている。許容可能且つ有効な日々の摂取量は約１０から約１０００ミリグラム／日、より典型的には約３０から約５００ミリグラム／日、最も好ましくは約５０から約３００ミリグラム／日であるとされている。約８−２４ミリグラムのダイゼインを有する約８ｇの大豆タンパクを提供する１７０グラムの大豆ヨーグルトが調製されている。
【００１３】
米国を指定国に含むＷＯ００／４５６５０（国際出願日２０００年２月７日；公開日２０００年８月１０日）は「カルシウム補助食品製品及び新規なカルシウム含有成分」という表題を有し、食品及び飲料に関し、特に、カルシウムを補充された乳化脂肪スプレッドに関する。スプレッド並びに他の食品及び飲料には、ビタミンＡ及びＤ等のビタミン、並びに、ヒトの健康に有益であることが既知の他の任意の添加剤を補充できるとされている。その実施例は、コレステロール低下の付加的な利益を提供するために植物ステロール又はそのエステル、他のビタミン及びミネラル、カロテノイド（例えばリコペン）、αトコフェロール、抗酸化剤（例えばアスコルビン酸、フラボノイド及びイソフラボン）、ルテイン及び他の植物性化学物質を含む。請求項２９には、ビタミン、ミネラル、植物ステロール、リコペン、カロテノイド、フラボノイド、イソフラボン、抗酸化剤、ルテイン及びこれらの混合物からなる群から選択される食品添加物を有する食品又は飲料が権利請求されている。乳由来固体中に存在するタンパク質は核形成部位又は微小結晶又はカルシウム塩粒子と相互作用して沈殿又は結晶化の通常の経路を変更すると言われている。大豆タンパク質等の他の供給源からのタンパク質又は他の植物由来タンパク質及びカルシウム源とアニオン源を組み合わせる前に水溶液に添加されたときに同一の官能基（カルボキシル、ヒドロキシル、アミノ、アミド、チオール又はフェノール基）を１以上有する他の食品添加物は、乳化脂肪スプレッド又は他の食品及び飲料配合物に導入されたときに、カルシウム複合体の官能特性に類似の影響を与えるべきであるとされている。
【００１４】
２０００年１１月２日に公開されたＷＯ００／６４２７６はイソフラボンを補充したスプレッドに関する。フィトステロールが２０重量％まで、特に１０重量％まで配合されうること、並びに、大豆タンパクが０．４重量％から２又は３重量％までの間で添加されうることが述べられている。米国特許出願に基づく優先権が主張されている。
【００１５】
２０００年６月２日に公開されたＷＯ００／３０６６５は、大豆タンパク、フィトエストロゲン化合物及び食物繊維を含む、皮脂コレステロール及びＬＤＬコレステロール及び皮脂トリグリセリドを低減し、また、ＨＤＬ／ＬＤＬ比を増大させるのに有用であるとされる組成物を開示している。請求項３８には、ステロールを更に含む組成物が記載されているが、請求項３９にはスタノールエステル又はフィトステロールでありうる更なる化合物が配合されている。スプレッド可能製品、栄養バー、液状ドリンク等の様々な食品が記載されている。
【００１６】
２０００年６月２日に公開されたＷＯ００／３０６６５は、大豆タンパク、フィトエストロゲン化合物及び食物繊維を含む、糖尿病患者のタイプ２の糖尿病及び心臓循環器疾患の治療に有用であるとされる組成物を開示している。前記組成物は医薬として及び／又は医薬の製造に使用可能である。前記組成物は更にスタノールエステル又はシトステロール等のフィトステロールでありうるステロールを更に含むことができる。スプレッド可能製品、栄養バー、液状ドリンク等の様々な食品が記載されている。或いは、この発明は食物繊維が存在しない組成物を提供する。皮脂コレステロール濃度及び／又はＬＤＬコレステロール濃度の低減に有効な量での使用が記載されている。
【００１７】
ＷＯ９３／２３０６９は、癌、月経前症候群又は高コレステロール症の場合の健康増進用の、ゲニステイン、ダイゼイン、ホルモノネチン及びバイオカニンＡから選択されるフィトエステロゲン又はその類似体が豊富な、食品添加物、錠剤又はカプセルとしての組成物を開示している。大豆はフィトエステロゲンの多くの可能な供給源の中に含まれている。
【００１８】
Setchell, et al. "Mammalian Lignans and Phyto-oestrogens Recent Studies on their Formation, Metabolism and Biological Role in Health and Disease," "Role of the Gut Flora in Toxicity and Cancer," pp. 315-345 (1988)は、ホルモン、胆汁酸及びステロールに対する腸内細菌代謝の役割について興味深い研究を行っている。
【００１９】
Crankらの米国特許第５８５８４４９号は、イソフラボンが豊富な大豆タンパク製品及びその製造方法を指向している。前記製品は、幼児用特別食、栄養ドリンク、ミルク代替品、バローナ、疑似プロセスチーズスプレッド、水注入ハム、ヨーグルト及び冷凍デザート等の乳又は肉系食品の成分となるかもしれない。Crankらはイソフラボンが豊富な大豆製品の製造方法をも開示している。
【００２０】
実施例５は、大豆系の疑似プロセスチーズスプレッドを開示している。実施例８は大豆系冷凍デザート及びヨーグルトを開示している。前記ヨーグルトはホエー、植物油、砂糖、乳化剤、塩、ビタミン及びミネラルを含む。大豆製品はダイゼイン、ゲニステイン及びグリシテインを含む。
【００２１】
Kellyの米国特許第５８３０８０７号は、ゲニステイン、ダイゼイン、ホルモノネチン及びバイオカニンＡから選択される天然フィトエストロゲン又はその類似体が豊富な組成物を指向している。癌、月経前症候群又は高コレステロール症の場合の健康増進用の食品添加剤、錠剤又はカプセルとして有用かもしれないとされている。組成物はドリンク、溶液、シロップ等を含む。
【００２２】
ＷＯ９８／０８５０３は、のぼせ、不安、鬱等の更年期症候群、気分性障害、ふらつき、寝汗、頭痛、尿失禁、骨粗鬆症、月経前症候群、流体保持、周期性乳房痛、月経困難症、レーノー症候群、レーノー現象、バーガー病、冠状動脈痙攣、偏頭痛、高血圧、良性前立腺肥、肺癌、子宮癌、卵巣癌、結腸癌、子宮内膜癌、精巣癌、前立腺癌、大腸癌、周期性乳房痛、アテローム硬化症、アルツハイマー病、男性不全、大腸炎症候群、潰瘍性大腸炎、クローン病、慢性関節リウマチを含むリウマチ様疾患等の炎症、面皰、男性型脱毛症を含む禿、乾癬及び癌を含む酸化ストレス関連疾患、心筋梗塞、脳卒中、関節炎、日光誘起皮膚ダメージ又は白内障、酸化関連疾患、炎症性疾患、更年期障害、不安、鬱、気分性障害、ふらつき、面皰、エステロゲン効果、アンドロゲン効果、血管拡張及び痙攣効果を含む様々な状態に使用されるイソフラボン型化合物の投与を開示している。それはビタミンＥと共に使用可能である。健康バー又はデザートなどの食品及び飲料の添加剤としての使用が記載されている。
【００２３】
「食物」の用語は可能かかぎり広い意味で使用されるとされている。それはドリンク等の液体組成物を含み、乳製品及び他の食品を含む。健康ドリンクが記載されている。
【００２４】
Gorbachらの米国特許第５４９８６３１号は、女性に有効量のイソフラボノイドを投与することにより、更年期障害、月経前症候群又は生来のエストロゲンの濃度減少から起こる状態を治療する方法を指向している。投与されうるイソフラボンはゲニステイン、ダイゼイン、バイオカニンＡ、ホルモノネチン、ｏ−デスメチルアンゴレンシン、及び、エクオールを含む。この発明は、生来のエストロゲンの減少又は変動した濃度から起こる症候群を予防又は治療する治療性食品であることを特徴とするとされている。前記食品は風味のよい食品担体（例えば菓子バー、ビスケット、シリアル又は飲み物）中に提供された多量のイソフラボンを含む大豆抽出物を好ましくは含むものである。
【００２５】
ＷＯ００／０３６８４はグラム当たり３−２３ミリグラムの少なくとも１つのイソフラボンを含む大豆組成物を開示しており、それはグラム当たり０．４から１．２グラムのタンパク質を含むことができる。前記組成物は更に、エストロゲン置換治療、ホルモン置換治療、コレステロール低減治療、骨強化治療、子宮内膜治療、癌治療、アルツハイマー病治療、潰瘍治療、虚弱治療、皮膚治療、腎臓治療、血液治療、リンパ液治療、肺治療、神経系治療、糖尿病治療、眼治療等に利用可能な薬又は処方箋などの医薬組成物を含んでもよい。
【００２６】
Jacksonらの米国特許第５８０７５８６号はフィトエストロゲンを含む多くの成分を用いて女性の摂取必要物を補充する方法を開示している。
【００２７】
Sekiyaらの米国特許第５７７６９０６号はヒトに有効量のイソフラボンを含む組成物を投与することを含む脂肪分解促進方法を指向しており、それにより脂肪細胞中の脂肪分解が促進される。大豆は潜在的な供給源として記載されており、ダイゼイン、ゲニステイン、ゲニスチン及びこれらの誘導体が記載されている。前記組成物が食品である場合は、５から１０００ミリグラム−ミリリットル（ｇ）のイソフラボンを含む。
【００２８】
Barnesらの米国特許第５５０６２１１号は、イソフラボンであるゲニステインが破骨細胞の酸分泌を阻害し、骨の再吸収を減少させることを開示している。特許請求の範囲はゲニステイン／グルコシド複合体の使用を記載している。破骨細胞の酸分泌を減少させるために、一般には、１以上の破骨細胞を生物学的な有効量のゲニステインを含む組成物と接触させるであろう。ゲニステイン又はその濃縮形態を含む大豆等の食物が有効量のゲニステインを与えるために摂取されうる。大豆タンパク等の様々な大豆製品が使用されうる。
【００２９】
ヒトの治療では、適当な方法は２から５０ミリグラムから２０から５０ミリグラムのゲニステインを食品の形態で投与することを含む。これは、１人・１日当たり、約２から５０ミリグラム又は約２０から５０ミリグラムの単離された大豆タンパクを摂取することによって達成されうる。Barnesらはゲニステインがチロシンキナーゼインヒビターであることが知られており、心臓血管病、アテローム硬化症及びある種の癌等の幾つかの疾患の治療に使用することが提案されていたことを認めている。
【００３０】
１９９６年７月３０日に出願されたJacksonらの米国特許第５６５４０１１号（Energetics）は閉経期前の女性の必要栄養物を補充するための補助食品を指向している。
【００３１】
Kellyの米国特許第５８３０８０７号は、ゲニステイン、ダイゼイン、ホルモノネチン及びバイオカニンＡから選択される天然フィトエストロゲン又はその類似体が豊富な組成物を指向している。癌、月経前症候群、閉経期又は高コレステロール症の場合の健康増進用の食品添加剤、錠剤又はカプセルとして有用かもしれないとされている。実施例４では、大豆の胚軸が食品に添加される粉体として消費されている。
【００３２】
Liuらの"A comparison of pharmacodynamics between daidzein and a solid dispersion of daizein", Shenyang Yaoxueyuan Xuebao, 1990, Vol. 7, No. 2, 123-5, pp 131は、ダイゼインが高血圧及び冠状動静脈アテローム心臓病の臨床治療に使用されることを開示しているが、ゆっくりと吸収されるので、１週間経過しないと効果が示されない。ダイゼインの固形分散物が記載されており、等量では、麻酔したラットにおいてＢａＣｌ２で誘起された不整脈へのより有意の結果を生み出す結果が示されているとされている。
【００３３】
Zillikenの米国特許第４１５７９８４号は食用の油脂を含む食品組成物用の安定剤として有用な抗酸化組成物を指向している。前記組成物は天然物、テンペ、発酵大豆製品から調製される。抗酸化特性を有し、イソフラボンの混合物と組み合わせると顕著な抗酸化特性を有する組成物を提供するエルゴスタジエントリオールが開示されている。これは単独で使用されてもよいし、イソフラボン又は他の化合物と共に混合物中で使用されてもよい。
【００３４】
Shlyankevichの米国特許第５４２４３３１号（Biovirus Research）は１以上のフィトエストロゲン化合物、生物学的に許容可能なカルシウム塩に含まれるカルシウム、生物学的に許容可能なマグネシウム塩に含まれるマグネシウム、生物学的に許容可能な亜鉛塩に含まれる亜鉛、ベータカロテン、ビタミンＤ及びビタミンＥを含む骨粗鬆症の治療又は予防用組成物を指向している。前記組成物は補助食品又は医薬品のいずれかとして投与されうる。
【００３５】
ＷＯ９６／１０３４１（Schouten Industries）は食品又は他の製品に使用可能なグリシンマックスの実質的に純粋な胚軸を開示している。これは、ダイゼイン、ゲニスチン及びグリシチン等のイソフラボンの単離用原料として使用されうる。それは飲み物、乳製品、パン製品、健康茶及び他の製品に配合されうる。実施例２では、トマト濃縮液、天然緑茶、ベータカロテン、天然ビタミンＥ及びグリシンマックスの胚軸を含むトマトジュースカクテルが開示されている。この製品は１６３ｍｌの１缶につきグルコシドとして１０ｍｇのゲニステイン／ダイゼインを含有していた。
【００３６】
Zillikenの米国特許第４３９０５５９号は、抗酸化剤として、また、食用の油脂を含む食品組成物中において有用なイソフラボンを指向している。
【００３７】
Shouten Industries（米国）は、SoyLife（登録商標）と称される大豆単離物製品を販売しており、それは４０．５％のタンパク、１１．２％の脂肪酸、３．０％のイソフラボン及び４．１％のサポニンを含む。彼らは、１％から５％のSoyLife（登録商標）製品を飲料を含む任意の食品に配合することを示唆している。
【特許文献１】米国特許第５８５５８９２号明細書
【特許文献２】国際公開第００／４５６５０号パンフレット
【特許文献３】国際公開第００／６４２７６号パンフレット
【特許文献４】国際公開第００／３０６６５号パンフレット
【特許文献５】国際公開第００／３０６６３号パンフレット
【特許文献６】国際公開第９３／２３０６９号パンフレット
【特許文献７】米国特許第５８５８４４９号明細書
【特許文献８】米国特許第５８３０８０７号明細書
【特許文献９】国際公開第９８／０８５０３号パンフレット
【特許文献１０】米国特許第５４９８６３１号明細書
【特許文献１１】国際公開第００／０３６８４号パンフレット
【特許文献１２】米国特許第５８０７５８６号明細書
【特許文献１３】米国特許第５７７６９０６号明細書
【特許文献１４】米国特許第５５０６２１１号明細書
【特許文献１５】米国特許第５６５４０１１号明細書
【特許文献１６】米国特許第４１５７９８４号明細書
【特許文献１７】米国特許第５４２４３３１号明細書
【特許文献１８】国際公開第９６／１０３４１号パンフレット
【特許文献１９】米国特許第４３９０５５９号明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００３８】
本発明は、既知の３つのコレステロール低減剤である大豆タンパク、イソフラボン（もともと大豆タンパク中に存在する）及びフィトステロールが組み合わされて使用された場合に、この３つを一緒に用いる場合よりも少ないものを使用した場合に得られるデータから予測されるよりも高いコレステロール改善効果が生成するという発見に基づく。大豆タンパクに代えて他の植物タンパクが使用可能かもしれない。
【００３９】
フィトステロール及び大豆タンパク（イソフラボンを含む）の組み合わせの相互作用が明確な低コレステロール化相乗効果を与えることが見出された。被験者の数は統計的有意性の厳格な確認には不十分であるが、前記組み合わせの効果は総和効果を越えることが発見された。特に、０．２４から０．４８％（ｗ／ｗ）に可食性フィトステロール補充量を増大しても特別な低コレステロール化効果が達成されないことを実証した過去（ハムスター）の類似実験条件下での研究に鑑みると、フィトステロールと大豆タンパクの組み合わせの、総和効果を越える、コレステロール低減効果は驚くべきものであり、動物、特にヒトの高コレステロール症の治療に有用な手段を提供すると思われうる。
【００４０】
理論に拘束されることを望むものではないが、本発明の前記成分の組み合わせはこれまでに報告されたフィトステロールと大豆タンパクの間の異なる生体活性に関連しているかもしれない。フィトステロールがコレステロールの腸内吸収を阻害する一方で大豆タンパクがＬＤＬ受容体活性を増大させることが実証されている。他の研究は大豆タンパクが肝臓コレステロール７α−ヒドロキシラーゼ活性を増大させ、胆汁酸生成を促すことを示している。したがって、大豆タンパクを添加すると、ＬＤＬ受容体活性及び肝臓胆汁酸の増大並びに腸内コレステロール分泌によって血中からのＬＤＬ除去が増大し、これにより、け血中コレステロールが低下すると推定される。この作用は、腸からのコレステロールの（再）吸収を阻害するフィトステロールによって高められる。
【００４１】
コレステロール低減効果に加えて、前記組み合わせは血中トリグリセリド濃度を有意に低減させる。この発見は後分析（Andersonら）に記載のヒトにおける大豆タンパクの低トリグリセリド化効果に合致するものである。断食状態では血中ＶＬＤＬが血中ＴＧの主要な担体である。このことは、大豆タンパクのＴＧ抑制効果がＶＬＤＬ生成抑制又は代謝によるものであるかもしれないことを示唆する。血中ＴＧ濃度の増大は心臓血管疾患の進行の独立したリスク要因であると考えられているので、フィトステロールと大豆タンパクの組み合わせは心臓血管疾患のリスク減少に特に有益かもしれない。
【００４２】
大豆タンパクは本発明の組成物の主要な成分であり、大豆繊維等の食物繊維は重要な寄与をしないと思われる。したがって、好ましくは、本組成物は大豆又は他の食物繊維を全く含まないか又は殆ど含まない。特に、前記組成物は好ましくは４重量％未満、特に３重量％未満、より好ましくは１重量％未満の大豆又は他の食物繊維しか含まない。
【００４３】
コレステロール低減成分の上記組み合わせを含む本発明の組成物は、カプセル、ピル及びゲルキャップ等の多くの形態をとりうるが、特にはスプレッド、フローズン、デザート、飲料及び栄養バー等の食品である。
【００４４】
本発明の好ましい食品の例はマーガリン又は他の油系スプレッド製品、パン製品、乳製品（例えばヨーグルト）、チーズ及び乳系ドリンク、飲料（例えばソフトドリンク、フルーツジュース、お茶及びコーヒー系ドリンク）、ソース、ドレッシング、マヨネーズ及び菓子製品（例えばアイスクリーム又は氷菓等の冷凍菓子製品）である。特に好ましいのはマーガリン及び他のスプレッド、お茶系飲料、ドレッシング及び冷凍菓子製品から選択される食品中での使用である。
【００４５】
スプレッドは有利には脂肪相と水性相とを組み合わせて、混合物を乳化物とし、イソフラボン、大豆タンパク及びフィトステロール並びに他の添加物を添加することによって調製される。
【００４６】
幾つかの食品では、１食分に上記成分の有効量を配合することが可能であるが、他の場合は、２食分を使用したり及び／又は異なる食品の給仕を組み合わせたりすることが必要かもしれない。そして、１食分で望ましい量を達成することは全食物をもってしても不可能であることを念頭におくと、本発明で好ましく使用される前記成分の量は１食分につき１から２５ｇの大豆又は他の植物タンパク（含まれるあらゆるイソフラボン又はフィトステロールを除く）、５から１５０ｍｇのイソフラボン及び０．２から３ｇのフィトステロールである。特に好ましい量は１から８、又は好ましくは３から７ｇの大豆タンパク（含まれるあらゆるイソフラボン又はフィトステロールを除く）、１０から１００ｍｇのイソフラボン及び０．４から２．５ｇのフィトステロールである。最も好ましい量は５から６．５ｇの大豆タンパク（含まれるあらゆるイソフラボン又はフィトステロールを除く）、１５から５０ｍｇのイソフラボン及び０．６から１．７ｇのフィトステロールである。
【００４７】
意図する製品消費者によるが、本発明の製品はカルシウムが補充されてもよく、また、所望であれば、補充カルシウムは省略可能であり、及び／又は、制限されたカルシウム量はカルシウムのない又は実質的にカルシウムのない製品を手強することができる。例えば、前記製品は約１．５重量％、特に０．５重量％又は０．１重量％未満の全カルシウム塩を製品中に有する。最も好ましくは、カルシウムとして測定して、前記製品は０．５重量％未満、特に０．３重量％未満、より好ましくは０．１重量％未満のカルシウムを有する。あるいは、カルシウム補充／高濃度カルシウムが製品中で望まれるのであれば、好ましいカルシウム濃度は後述される。カルシウムが含まれる場合は、一般には、本発明では、乳由来固形分の水溶液の沈殿物と同じカルシウム塩の個々の成分とを組み合わせる必要はない。共沈殿は一般に回避可能であるが、幾つかの状況では有用でありうる。使用される場合は、カルシウムは可溶性又は不溶性塩でありうる。
【００４８】
本発明の上記の及び他の特徴のより完全な理解のために、以下の好ましい態様の詳細な説明及び図面を参照すべきである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４９】
イソフラボンの好ましい供給源は、大豆、赤クローバー及び地下性クローバーを含むクローバー、穀類、ヒヨコマメ、粉砕したナッツ、レンズ豆及び豆類であり、１００ｇの乾燥重量当たり４０〜５００ｍｇの量である。イソフラボンは植物中にグルコース等の糖と結合したグルコシドとして主に見出される。少量のものは植物中にアグルコン形態で見出される。本発明は結合及び／又はフリー形態のいずれのイソフラボンの添加をも包含するものである。
【００５０】
大豆は例えば大豆粉の形態で使用されてもよく、あるいは、外皮及び／又は胚軸が使用されてもよい。
【００５１】
フィトエストロゲン及びフィトエストロゲン部分含有化合物及び複合体を植物から単離することは周知である。これらはFlueryらの米国特許第５１４１７４６号（その開示内容はここに参照として組み込まれる）、Guggerらの米国特許第５７０２７５２号及びShenらの米国特許第５６３７５６２号に記載の方法を含む。フィトエストロゲンは大豆粉から得られる大豆イソフラボン濃縮物の形態でも入手可能であり、ミネソタ州ミネアポリス市のSchouten社からSoylife（登録商標）の名称で販売されている。その他のフィトエストロゲンの供給源はＡＤＭ社から入手可能なNovasoyである。
【００５２】
フィトエストロゲンの好ましい量は、好ましくは食品である製品の全重量の少なくと０．０１重量％、特に少なくとも０．０５重量％である。
【００５３】
ここで「フィトステロール」とは、植物ステロール、植物ステロールのエステル、植物スタノール又はスタノールエステル並びに植物ステロールから誘導されるスタノール及びスタノールエステルを意味する。例えば、シトステロール、シトスタノール、その脂肪酸エステル等である。これらは、ステロール分に基づき食品の１から約２０重量％、特に約１０重量％まで含まれる。
【００５４】
より具体的には、その例には、αシトステロール、βシトステロール、スティグマステロール、エルゴステロール、カンペステロール、αシトスタノール、βシトスタノール、カンペスタノール及びブラッシシアステロールが含まれる。上記のものはより重要なフィトステロールであるが、これまでに少なくとも４４のフィトステロールが同定されており、当業者にとってはこれらの多くが本発明に適切であることが明らかである。オリザノールも使用可能であろう。フィトステロールは、ここに参照として組み込まれる"Advance in Lipid Research", pages 193-218, Paoletti, and Kiritchevsky, (Eds) Academic press, NY(1993)の豆フィトステロールにおいて同定されている。上記の"Effect of Plant Sterolson Lipids and Atherosclerosis", Pollack, O. J., Pharmac, Ther., 31, 177-208 (1985)の開示内容もまたここに参照として組み込まれる。 
【００５５】
より重要な供給源は、米糠、トウモロコシもみがら、トウモロコシ胚、小麦胚油、トウモロコシ油、ベニバナ油、オートムギ油、オリーブ油、綿実油、大豆油、例えば大豆油蒸留物、ピーナツ油、紅茶、オレンジジュース、バレンシア、緑茶、Colocsia、ケール、ブロッコリ、ゴマ種、シアー油、グレープシード油、アマニ油、キャノーラ油、木パルプからのタール油及び他の樹脂性油である。
【００５６】
大豆タンパクは、上記のSoylife（登録商標）及びDupont社からのSupro（登録商標）を含む多くの供給源から得ることができる。
【００５７】
スプレッド
イソフラボン、大豆タンパク及びフィトステロールの摂取用の有益な形態は油中水型すプレッド、特にパン用スプレッドである。ピル、カプセル等の医薬型製品（これらも本発明の範疇であるが）がなくとも、このスプレッドを消費することによって消費者がイソフラボン、フィトステロール及び大豆タンパクの報告された健康増進効果を享受しうることが予期される。
【００５８】
他の好ましい態様では、前記スプレッドは添加されたイソフラボン、大豆タンパク、フィトステロール及び少なくとも０．２５重量％、特に少なくとも０．５重量％のカルシウム塩を含むエマルジョンである。前記スプレッドは好ましくは油中水型エマルジョンである。前記スプレッドは女性に健康効果に関し好ましいものであるとされているフィトエストロゲン及びカルシウムの両者を提供する優れた担体である。
【００５９】
本発明の他の好ましい態様では、前記スプレッドはイソフラボン、大豆タンパク、フィトステロール及び１以上の、好ましくは２つの、ビタミンＡ、Ｄ、Ｅ、Ｂ６及びＢ１２を含むエマルジョンである。好ましくは、前記スプレッドは多量のカルシウム及び／又はマグネシウムをも含む。好ましくは、このスプレッドは油中水型エマルジョンでもある。
【００６０】
好ましくは、イソフラボン、大豆タンパク、フィトステロール及び（スプレッドの全重量に基づいて）少なくとも５重量％のポリ不飽和脂肪酸部分が存在する種類及び量のトリグリセリドがスプレッドに配合されて、有益な血液形態にこれらの物質を取得するように消費者に提供される。より好ましくは、トリグリセリドの種類及び量は、スプレッドが少なくとも７重量％、特に２０重量％までのポリ不飽和脂肪酸部分を含むように選択される。
【００６１】
使用されうるイソフラボンはゲニステイン、ダイゼイン、ゲニスチン、ダイゼイン、エクオール、グリシテイン及びグリシチンを含む。
【００６２】
本発明のスプレッドは８０重量％未満の可食性トリグリセリド物質を一般に含む。好適な可食性トリグリセリド物質は例えばBaileyの「Industrial Oil and Fat Products」（１９７９）に記載されている。高脂肪スプレッドでは、トリグリセリド物質の量は一般に６０重量％より多く８０重量％未満であり、好ましくは７０から７９重量％である。低脂肪スプレッドではトリグリセリド量は一般に３０−６０重量％、より一般的には３５から４５重量％であろう。極低脂肪スプレッドではトリグリセリド量は一般に、０から４０重量％、例えば、３０重量％、２５重量％、２０重量％、１０重量％又は約０重量％であろう。
【００６３】
水性相と組み合わされる連続脂肪相中の任意成分は乳化剤、塩（特に塩化ナトリウム）、防腐剤、香味料、タンパク、ビタミン、特に、ビタミンＡ等の脂溶性ビタミン、抗酸化剤、抗菌剤、並びに、クエン酸及びその他の酸を含む保存剤を含む。乳化剤はモノ及びジグリセリド、ポリグリセロールエステル、レシチン、及び、TWEEN60、TEEN80等のポリオキシエチレンソルビタンモノエステルを含みうる。ある有利な乳化剤はオランダのナアデン市のQuest International社から入手可能なAdmul Wolの名称で販売されているポリグリセロールポリリシノレートである。
【００６４】
乳化剤は０．０５から２重量％、典型的には１重量％以下で配合される。
【００６５】
使用される脂肪は、大豆油、キャノーラ油、トウモロコシ油、ヒマワリ油、ヤシ油、ヤシ実油、アブラナ油、ココナツ油、ベニバナ油、綿実油、ピーナツ油及びオリーブ油を含む植物源由来のトリグリセリドであることが好ましい。他の使用可能な消化性脂肪源は魚油、乳脂肪、スキムミルク脂肪、バター脂肪、ラード及び牛脂である。望ましい融点特性を達成するために必要であれば油は水素添加により硬化される。また、所望の融点範囲を得るために分別化及びエステル交換も使用可能である。特に好ましいのはキャノーラ油及び大豆油等のポリ不飽和脂肪酸部分が比較的多い割合である脂肪である。ここに参照として組み込まれるオランダ特許第１４１１５、１７８５５９、１５５４３６、１４９６８７、１５５１７７及び欧州特許第４１３０３、２０９１７６、２４９２８２及び４７０６５８に記載の脂肪組成物が特に好適である。脂肪混合物が使用される場合は、コレステロール低下促進のために、脂肪系食品の全重量に対して少なくとも３０％、より好ましくは少なくとも４５％のポリ不飽和脂肪酸部分を含むことが最も好ましい。
【００６６】
脂肪は単一物でも混合物でもよい。ＰＵＦＡ（ポリ不飽和脂肪酸）豊富なトリグリセリドをかなりの量で含む脂肪組成物が特に有益なものである。
【００６７】
脂肪源として非消化性脂肪もまた使用可能である。非消化性脂肪には、スクロースポリエステル、スクロースポリエーテル、シリコーン油／シロキサン、ポリカルボン酸エステル、分岐鎖脂肪酸トリグリセリド、ネオペンチルアルコールエステル、ジカルボン酸エステル、ホホバ油及びトリグリセロールエーテル等のＣ８−Ｃ２２脂肪酸のポリオールポリエステルが含まれる。非消化性脂肪は脂肪の０から１００％、特に１０から９０％、更には２５から７５％の範囲で使用可能である。
【００６８】
製品に形態を与えるために非脂質脂肪代替物も使用可能である。これには、Singerらの米国特許第４９６１９５３に記載されるようなタンパク系脂肪代替物、マイクロクリスタリンセルロース及びカルボキシメチルセルロース等のセルロース増量剤が含まれる。
【００６９】
カロテン、パプリカ、ウコン、アナット並びに黄色５号及び６号等の着色剤、乃至は、これらの組み合わせも使用可能である。ＴｉＯ２等の不透明化剤と組み合わせて黄色が望ましく使用される。大豆粉等のフィトエストロゲン源は茶色を与えるので適切な色を付けることが重要であろう。
【００７０】
本発明の組成物中に存在しうる大豆タンパクはスプレッドに添加されたフィトエストロゲンと共に大豆粉中に存在しうる。
【００７１】
ピーナツタンパク、綿実タンパク等の他の植物タンパクは大豆と共に又はそれに代えて使用することができる。大豆タンパク又は他の植物タンパクに加えて、所望であれば、他のタンパクが、全乳、スキムミルク又は他の低脂肪乳からの乳タンパクの形態で、都合よく配合可能であり、乳漿タンパク（ラクトース入り又は抜き）、酸カゼイン及びカゼイネートを含みうる。
【００７２】
塩化ナトリウムに加えて、採用可能な香味料は、ラクトン、脂肪分解バター油及び当初留出物、ジアセチル２−オクタノン、酪酸、ヘキサン酸及び他の脂肪酸、酪酸のエステル、ヘキサン酸及び他の脂肪酸、酪酸のエステル、Δ−ヒドロキシ酸及びそのグリセロールエステル並びにこれらの混合物を含む。
【００７３】
安息香酸、ソルビン酸、リン酸、乳酸、酢酸、塩酸及びその可溶性塩等の保存剤（防腐剤）も使用可能である。
【００７４】
抗酸化剤はｎ−プロピルガレート、ビタミンＥを含むトコフェロール、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ノルジヒドログアイアレン酸（ＮＤＧＡ）、tert-ブチルヒドロキノン（ＴＢＱＨ）及びクエン酸を含むうる。エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）のナトリウムカルシウム塩等の金属キレート化剤又は金属イオン封鎖剤も使用しうる。
【００７５】
製品が油中水型エマルジョンの形態をとる場合、脂肪相にはより疎水性の添加剤が通常添加され、水性相にはより親水性の添加剤が通常添加されることがよい。
【００７６】
水性相は水及び任意の他の成分を含む。好ましい成分はゼラチン等の１以上のゲル化剤である。スプレッドが低脂肪スプレッドの場合、水性組成物がゲル化されることが有利であり、製品中の脂肪量の少なさをある程度補償する。水性組成物はプレゲル化、すなわち水性組成物を連続脂肪エマルジョンと組み合わせる前にゲル化することが有利でありうる。他の適当なゲル化剤は、ニュージャージー州のBridgewaterのNational Starch and Chemical社から入手可能なUltra-Tex2等のワックス状トウモロコシ澱粉、Remyrise AC等の米澱粉を含む。ゲル化剤の特に効果的な組み合わせはゼラチンとワックス状トウモロコシ又は米澱粉であることが判明した。他のゲル化剤はカラギーナンと、ゲル化性マルトデキストリン、例えば、Paselli maltodextrin SA2（登録商標）等のゲル化性加水分解澱粉誘導体を含む。
【００７７】
ゲル化剤の量は、スプレッドの水性相の重量の０から３０％、特に０．１から２５％の範囲とすることができる。加水分解澱粉が存在する場合、その量は２から２０％でありうる。他のゲル化剤は１０％以下、好ましくは１−７％、最も好ましくは２−５％の量で使用可能である。これらの百分率は水性相の重量に基づく。
【００７８】
ゲル化剤よりは増粘剤であるヒドロコロイドもまた使用可能である。ヒドロコロイドはZeitschrift fur Lebenmittletechnologie und Verfahrenstechnk 32 (1981) 6, pp. 253-256に記載されている。上記のものに加えてヒドロコロイドは天然及び変性澱粉等の多糖類、セルロース誘導体、ペクチン、ガレオン、キサンタンガム、寒天、ダニッシュ寒天、フルセラン、アラビアゴム、グアーガム、イナゴマメガム、アルギン及びアルギン酸塩を含む。ヒドロコロイドは製品の全重量の０．２から６％の量で一般に使用される。ゲル化及び増粘剤は様々な組み合わせで使用することができる。
【００７９】
水性相中に存在しうる追加成分は塩（特に塩化ナトリウム）；ソルビン酸ナトリウム、乳酸又は他の酸等の保存剤、タンパク質、着色剤、香味料、抗菌剤、抗酸化剤及びビタミン、特にビタミンＢ等の水溶性ビタミンを含む。
【００８０】
フルーツピューレ等の強香味料、オレガノ及び／又はガーリック等のバニラ及びサボイ成分を含むフルーツ香味料、並びに、スパイス及び砂糖の添加は大豆等のフィトエストロゲン供給源粉体のマスキングに重要である。
【００８１】
水性組成物に有用なタンパク質、水溶性着色剤、香味料、保存剤、抗菌剤及び抗酸化剤は脂肪相に関して説明した上記のものと同じであり、一般に、水性相にはより親水性の添加剤が最もよく配合される。
【００８２】
スプレッド又はマーガリンの平均的１食分の典型的サイズは１４ｇである。マーガリン又はスプレッド中の好ましい大豆タンパク量は１から２５重量％、好ましくは２から２０重量％であり、より好ましくは４から２０重量％、最も好ましくは４から１５重量％である。マーガリン又はスプレッド中の好ましいイソフラボン量は０．００３から１．７重量％、好ましくは０．０７から０．７１重量％であり、より好ましくは０．１１から０．３６重量％、最も好ましくは０．０７から０．１３重量％である。マーガリン又はスプレッド中の好ましいフィトステロールは０．６５から２１重量％、好ましくは３から１８重量％であり、より好ましくは４から１２重量％、最も好ましくは５から１０重量％である。マーガリン又はスプレッド中の好ましいカルシウム量は０．３から７重量％、好ましくは０．３３から３．５重量％であり、より好ましくは０．３５から１．７５重量％、最も好ましくは０．３５から０．７重量％である。
【００８３】
メラトニンが添加可能であるが、メラトニンが特に存在しない組成物、特にメラトニンが完全に存在しない組成物が特に好ましい。
【００８４】
スプレッドの残部は殆ど水であり、９９．９重量％以下、より一般には１０から９８重量％、好ましくは２０から９７重量％の量で配合されうる。本発明のスプレッドは連続脂肪相又は連続水相を有するものであるが、好ましくは連続脂肪相を有する。
【００８５】
冷凍菓子製品
本発明では、冷凍菓子製品は、アイスクリーム、フローズンヨーグルト、シャーベット、ソルベ、アイスミルク及びフローズンカスタード、ウォーターアイス、グラニータ及びフローズンフルーツピューレ等の乳含有冷凍菓子を含む。
【００８６】
好ましくは、冷凍菓子中の固形分量（砂糖、脂肪、香味料等）は３重量％より多く、好ましくは１０から７０重量％、例えば４０から７０重量％である。
【００８７】
アイスクリームは典型的には２から２０重量％の脂肪、０から２０重量％の甘味料、２から２０重量％の非脂肪成分、及び、乳化剤、安定剤、保存剤、香味料成分、ビタミン、ミネラル等の任意成分を含み、残部は水である。典型的にはアイスクリームは例えば２０から４００％、より一般的には４０から２００％空気を混入され、−２から−２００℃、より一般的には−１０から−３０℃の温度へ冷凍される。アイスクリームは通常は約０．１重量％の量のカルシウムを含む。
【００８８】
冷凍菓子物質の平均的１食分の典型サイズは６６ｇである。冷凍菓子中の好ましい大豆タンパク量は０．７から２５重量％、好ましくは０．７から１５重量％であり、より好ましくは１．６から１２．０重量％、最も好ましくは３から９重量％である。冷凍菓子中の好ましいイソフラボン量は０．００１５から０．３重量％、好ましくは０．０３から０．２０重量％であり、より好ましくは０．０２から０．１７重量％、最も好ましくは０．００８から０．０９重量％である。冷凍菓子中の好ましいフィトステロールは０．３から７．０重量％、好ましくは０．３から６．０重量％であり、より好ましくは０．６から５．０重量％、最も好ましくは０．６から３．０重量％である。冷凍菓子中の好ましいカルシウム量は０．１５から３重量％、好ましくは０．１７から１．５重量％であり、より好ましくは０．１８から０．７５重量％、最も好ましくは０．１８から０．３重量％である。
【００８９】
お茶系製品
本発明では、お茶系製品とは、ティーバッグ、リーフティ、香草ティーバッグ、香草煎じ液、粉茶、粉香草茶、アイスティー、アイス香草茶、炭酸アイスティー、炭酸香草煎じ液等の、茶又は茶代替草含有組成物を指す。
【００９０】
典型的には、本発明のお茶系製品は消費直前に、ティーバッグ、リーフティー、香草ティーバッグ又は香草煎じ液からお茶をいれる、又は、粉茶若しくは粉香草茶の可溶化等の準備工程を要するかもしれない。これらの製品では、消費される最終製品の１食分が上記の所望の量のイソフラボン、大豆タンパク及びフィトステロールを有するように、製品中のイソフラボン、大豆タンパク、フィトステロール及び任意のカルシウムの量を調節することが好ましい。
【００９１】
アイスティー、アイス香草茶、炭酸アイスティー、炭酸香草煎じ液の１回の飲料分の典型サイズは２５０ｍｌ又は２５０ｇである。これらの直接飲食性製品中の好ましい大豆タンパク量は０．４から１０重量％、好ましくは１．２から８重量％であり、より好ましくは２から６重量％、最も好ましくは２から４重量％である。これらの直接飲食性製品中の好ましいイソフラボン量は０．０００４から０．１重量％、好ましくは０．０００８から０．０５重量％であり、より好ましくは０．００１６から０．１６重量％、最も好ましくは０．００２から０．０２重量％である。これらの直接飲食性製品中の好ましいフィトステロールは０．０８から１．５重量％、好ましくは０．１６から１重量％であり、より好ましくは０．２から０．８重量％、最も好ましくは０．２４から０．７重量％である。これらの直接飲食性製品中の好ましいカルシウム量は０．０４から０．８重量％、好ましくは０．０４５から０．４重量％であり、より好ましくは０．０５から０．２重量％、最も好ましくは０．０５から０．０８重量％である。
【００９２】
最終製品を得るために抽出される製品の目的は、一般に、２５０ｍｌ又は２５０ｇの１回の飲料分が上記の所望量を含むようにすることである。この意味において、通常は、お茶系製品に存在するイソフラボンの一部が最終お茶飲料中に最終的に抽出されることが認識されるべきである。この作用を完成させるために、一般に、抽出物中に存在することが望まれるイソフラボン量の約２倍を、抽出を受ける製品中に配合することが望ましい。
【００９３】
サラダドレッシング又はマヨネーズ
一般に、ドレッシング又はマヨネーズは水中油型エマルジョンである。前記エマルジョンの油相は一般に製品の０から８０重量％である。無又は低脂肪製品では脂肪量は典型的には６０から８０重量％であり、サラダドレッシングでは脂肪量は一般に１０から６０重量％、より好ましくは１５から４０重量％である。無又は低脂肪ドレッシングは例えば０、５、１０、１５重量％のトリグリセリド量を含みうる。
【００９４】
ドレッシング及びマヨネーズは一般に低ｐＨ製品であり、好ましくは２−６のｐＨを有する。
【００９５】
ドレッシング又はマヨネーズは、乳化剤（例えば卵黄）、安定剤、酸性化剤、バイオポリマー、増量剤、香味料、着色剤等の他の任意成分を含みうる。組成物の残部は水であり、有利には、０．１から９９．９重量％、より一般的には２０−９９重量％、最も好ましくは５０から９８重量％の量で存在しうる。
【００９６】
ドレッシングの平均的１食分の典型サイズは３０ｇ、マヨネーズのそれは１４ｇである。ドレッシング又はマヨネーズ中の好ましい大豆タンパク量は１から２５重量％、好ましくは２から２０重量％であり、より好ましくは４から２０重量％、最も好ましくは４から１５重量％である。ドレッシング又はマヨネーズ中の好ましいイソフラボン量は０．００３から１．０重量％、好ましくは０．０７から０．６７重量％であり、より好ましくは０．１０から０．３３重量％、最も好ましくは０．０５から０．０１７重量％である。ドレッシング又はマヨネーズ中の好ましいフィトステロールは１から２０重量％、好ましくは３から１７重量％であり、より好ましくは４から１１重量％、最も好ましくは２から６．０重量％である。マーガリン又はスプレッド中の好ましいカルシウム量は０．３から７重量％、好ましくは０．３３から３．５重量％であり、より好ましくは０．３５から１．７５重量％、最も好ましくは０．３５から０．７重量％である。
【実施例】
【００９７】
材料及び方法
動物：約７５ｇの体重の４周齢の雄のゴールデンシリアハムスター（SASCO）が米国のマサチューセッツ州ウィルミントン市のCharles River Laboratories社から入手された。１週間の環境適応期間後に、１２０匹の選ばれたハムスター（健康で似た体重である）が体重に基づき６群（１群は２０匹）に分配された。ハムスターはおが屑層のベッドを備えたMacrolonII型カゴにそれぞれ入れられた。環境温度は制御され、１２時間の昼／夜サイクル（７時から１９時まで照明）が維持された。研究中、上記動物は食物及び飲料水に自由にアクセス可能とされた。実験プロトコル及び手順はオランダのユニリバー社のDEC（動物ケア委員会）によって承認されたものである。
【００９８】
化学物質：給餌されたフィトステロールは植物ステロール−脂肪酸エステルの混合物であり、その大部分はヒマワリ油のエステルとβ−シトステロールであり、オランダのVlaardingenのユニリバーリサーチ社から提供された。大豆タンパクは米国のセントルイス市（MO）のPTI Technology社から供給されたSupro texturizedタンパクであった。大豆イソフラボン（Novasoy 40）は米国イリノイ州のDecaturのArcher Daniels Midland社から供給された。
【００９９】
食事：環境適応期間中、ハムスターは以下の成分（g/kg乾燥重量で表す）：
カゼイン１６１、小麦澱粉９７、脂肪１２６、ミネラル混合物４０．７、ビタミン混合物１１．６、塩素・塩化物２．９、Arbocel(BC-200)５８．１
を含む基礎食を与えられた。脂肪は全食物エネルギーの３０％に寄与していた。食物の脂肪酸組成は全食物エネルギーからみて１６．８％が飽和脂肪酸、８．４％がMUFA、及び、４．６％がPUFAであり、典型的な西洋型食事に類似していた。ミネラル混合物とビタミン混合物の組成は過去に詳細に説明されている（Reeves P G, Nielsen F H, Fahey G C J. AIN-93 purified diets for laboratory rodents: final report of the American Institute of Nutrition ad hoc writing committee on the reformulation of the AIN-76A rodent diet. J Nutr 1993;123:1939-1951).(13)）。
【０１００】
実験期間中、ハムスターは６つの異なる実験食（食事Ａ−Ｆ）を５週間与えられた。対照食（食事Ａ）は２０％（ｗ／ｗ）のカゼインを含んでおり、他の５つの実験食は、それぞれ、２０％のカゼイン＋０．２４％のフィトステロール（食事Ｂ）、２０％の大豆タンパク（カゼインの代替）（食事Ｃ）、２０％のカゼイン＋０．０２２％のイソフラボン（食事Ｄ）、２０％の大豆タンパク（カゼインの代替）＋０．２４％のフィトステロール（食事Ｅ）、又は、２０％のカゼイン＋０．２４％のフィトステロール＋０．０２２％のイソフラボン（食事Ｆ）であった。実験食の詳細な組成を表１に示す。食物消費及び体重が２週間毎に監視された。
【表１】
2005508621.tif 000002
【０１０１】
サンプル収集及び化学分析：被テスト成分の均一性及び可食性組成物を評価するために実験食の各バッチから３つの組が収集された。可食性イソフラボンはＧＣ法を用いて決定された。
【０１０２】
血液サンプル：研究終了時に、ハムスターに食事を一晩（約１６時間）与えず、次に、Ｎ２Ｏ及びＯ２の混合ガスをハロタンと共に使用した麻酔下で全採血を行った。眼窩血液サンプルが４ｍｌのＥＤＴＡチューブに採集された。全コレステロール（ＴＣ）及びトリグリセリド（ＴＧ）の血漿濃度がCOBAS分析機での酵素アッセイで決定された。
【０１０３】
統計分析：データは平均±SEMで示されている。統計的差異はANOVAを用いて評価された。Student-Newman-Keulsテストが処理群間の差異を評価するために使用された。この統計分析はSASソフトウェア（ver.6.12）を用いて行われた。有意差はｐ値＜０．０５に基づく。
【０１０４】
結果
食事中のイソフラボン含量：実験食中のイソフラボンの実際の含量が決定され表２に示されている。ここでは、イソフラボンはアグリコンの形態で存在している。食事Ａ（対照）及びＢは無視しうる量のイソフラボンしか含んでいない。イソフラボン食（食事Ｄ及びＦ）は１５５−１５８（mg/kg食事）イソフラボンを含んでおり、これは大豆タンパク食（２０３−２１３mg/kg食事）に含まれるイソフラボンの全量の７６−７８％であった。大豆タンパク食よりもイソフラボン食には主により少量のゲニステインが含まれていた。理由は不明であるが、可食性イソフラボンの化学分析値（１５５−１５８mg/kg）は、Supro及びNovasoy（表１参照）の化学分析値に基づく食事Ｄ及びＦにおける計算値（２１８mg/kg）よりも低い。
【０１０５】
【表２】
2005508621.tif 000003
【０１０６】
食物摂取及び動物成長：どの実験群においても食物摂取に有意差はなかった。実験給餌の５週間、ハムスターは体重を同様に増大させたが、これは対照と比較して、どの処理によっても影響を受けていないようであった。
【０１０７】
血漿脂質濃度：実験食のTC及びTGの断食血漿濃度への作用を表３に示す。対照食に比べて、フィトステロール食及び大豆タンパク食は血漿TCをそれぞれ１３％及び８．６％減少させたが、イソフラボン含有食は効果がなかった。食事中のフィトステロールと大豆タンパクの組み合わせはは血漿TCを２５％減少させる結果となり、これは単なる総和効果ではなく相乗効果であった。フィトステロール、大豆タンパク又はイソフラボンを単独で含む食事では血漿TG濃度は影響を受けなかったが、食事中のフィトステロールと大豆タンパクの組み合わせは血漿TGを３７％とかなり減少させた。
【０１０８】
【表３】
2005508621.tif 000004
【０１０９】
議論
この研究は、カゼイン対照食に比較してフィトステロール及び大豆タンパクの両方を含む食事がハムスターに低コレステロール化効果を有する更なる証拠を提供している。この研究の新規な発見は、フィトステロールと大豆タンパクの干渉組み合わせが添加剤による低コレステロール効果を明確に与えることである。類似の実験条件下で行われた過去のハムスターでの研究は０．２４から０．４８％（ｗ／ｗ）の可食性フィトステロールの補充量増大が特別な低コレステロール化効果を達成しない（Trautwein et al 1999, 未発表観察）ことを実証していた。したがって、フィトステロールと大豆タンパクの組み合わせの添加剤によるコレステロール低減効果は予期しないものであり、高コレステロール症に対する有用な手段を提供するものである。
【０１１０】
大豆タンパクの一部としてのイソフラボンは大豆タンパクの低コレステロール化効果を担うものと考えられてきた（19;20）。しかし、対照食と比べて、イソフラボン含有食が血漿TC及びTGに影響を与えないので、現在のデータはこの考えを支持するものではない。我々のデータは、大豆タンパク含有食におけるダイゼインとグリシテインの量にイソフラボン含有食におけるダイゼインとグリシテインの量が匹敵しないので、イソフラボンは、少なくともダイゼインとグリシテインだけでは、大豆タンパクの低コレステロール化効果を説明できないかもしれないということを示唆する。この結果は、血中脂質プロファイルが大豆イソフラボン錠剤（80mg/dアグリコンに匹敵）を消費している閉経後女性において改善されないというヒトでの研究結果(21)と一致する。Crouseらはヒトでの研究(22)において、大豆タンパク（アルコール抽出大豆タンパク）だけではコレステロール低減効果はないが、イソフラボン含有大豆タンパク（1.5mgイソフラボンアグリコン／ｇタンパク）は高脂質症個体のLDLコレステロールを顕著（-8%）に低減することを実証している。Hodgsonらは最近、１日当たり55mgのイソフラボノイド（主にゲニステインの形態）の摂取が健康なヒト対象者の血漿脂質プロファイルを改善しなかったことを報告(24)している。
【０１１１】
［実施例４］冷凍菓子製品
従来のアイスクリーム冷凍器中で冷凍することにより、以下のアイスクリーム製品が調製された。
【０１１２】
製品Ａ
【表４】
2005508621.tif 000005
【０１１３】
製品Ｂ
【表５】
2005508621.tif 000006
【０１１４】
［実施例５］お茶系製品
アイスティーミックスＩ
【表６】
2005508621.tif 000007
【０１１５】
３．３ｇの製品が２５０ｍｌのアイスティーの１杯を調製するために有利に使用可能である。
【０１１６】
アイスティーミックスＩＩ
【表７】
2005508621.tif 000008
【０１１７】
このミックスもミックスＩと同様に使用可能である。
【０１１８】
［実施例６］
シーザードレッシング
以下の配合のドレッシングが調製された。
【表８】
2005508621.tif 000009
【０１１９】
イタリアンドレッシング
以下の配合のイタリアンドレッシングが調製された。
【表９】
2005508621.tif 000010
【０１２０】
［実施例７］
以下のホワイトミックスとチョコレートミックスとを最初に調製することにより、４つのアイスクリームフレーバーのバリエーションが調製された。
【０１２１】
I．ホワイトミックス
【表１０】
2005508621.tif 000011
【０１２２】
II．チョコレートミックス
【表１１】
2005508621.tif 000012
【０１２３】
次に、以下の如く、異なるフレーバーを調製するためにホワイト及びチョコレートミックスが使用された。
【０１２４】
Ａ．フレンチチョコレートアイスクリーム
成分  チョコレートミックス  ９２．８重量％
ミルクチョコレートフレーク  ７．１７重量％
バニラフレーバー  ０．０５重量％
【０１２５】
Ｂ．バニラアイスクリーム
成分  ホワイトミックス  ９９．６０重量％
バニラフレーバー  ０．４０重量％
【０１２６】
Ｃ．バニラファッジアイスクリーム
成分  ホワイトミックス  ９０．７４重量％
バニラフレーバー  ０．３６４重量％
無脂肪液状ファッジ多色剤  ８．９０重量％
【０１２７】
Ｄ．キャラメル木の実入りアイスクリーム
成分  ホワイトミックス  ８２．３５重量％
バニラフレーバー  ０．４０重量％
液状キャラメル多色剤  １１．６５重量％
木の実及びタフィー（粒状）  ５．６０重量％
【０１２８】
［実施例８ａ］
スプレッド
【表１２】
2005508621.tif 000013
【０１２９】
［実施例８ｂ］
スプレッド−低カルシウム
【表１３】
2005508621.tif 000014
【０１３０】
実施例８ａ及び実施例８ｂのスプレッドは以下の手順で調製された。ただし、リン酸三カルシウム塩の添加は実施例８ｂでは省略されている。
【０１３１】
液状油及び部分水素化豆油をタンク中で６５℃に加熱することにより油相を調製した。乳化剤、レシチン及びモノグリセリドが混合され、混合物は３０分保持されて、脂肪結晶の溶融を完全に行った。
【０１３２】
ビタミンＡ及び香味料が上記の加熱油相に添加された。
【０１３３】
タンク中の４０℃の水にキサンタンガムを添加して水性相を調製した。ガムを１５分間水和させた後、リン酸三カルシウムが分散された。他の全乾燥成分が添加され、高剪断混合機で混合されて均一な水性相を得た。タンク内の内容物は、８０℃に加熱して５分保持後５５℃に冷却してバッチ式で低温殺菌された。
【０１３４】
約４０部の脂肪相と約６０部の水性相の比で、約５５℃で脂肪相と水性相とが一緒にタンク内で混合された。このエマルジョンは連続水性相を有する。次に、このエマルジョンを冷却されたスクレープ型熱交換機（Ａ−ユニット）を通して、脂肪が結晶化を開始する温度（α点４℃の数度下）へ冷却した。もし水性相がゲル化剤を有する場合は水性相はゲル化し始め、及び／又は、もし増粘剤のみが水性相に存在する場合は粘度が増大する。冷却されたエマルジョンは次にゆっくりと撹拌された変速結晶化器（Ｃ＊ユニット）を通過させられ、ここで製品は、シャフト速度を素早く増大させることにより連続水性相エマルジョンから連続脂肪相エマルジョンへと転化した。この転化は１００％の脂肪を系に注入することによって促進される。Ｃ＊ユニットは転化ユニットとも称される。転化機速度は１０００ｒｐｍである。転化機のシャフト速度はその大きさに依存するが、通常は、２００−２０００ｒｐｍである。連続脂肪エマルジョンは３００ｒｐｍのシャフト速度で運転している追加のＣユニットを通過させられ、ゆっくりとした混合を付与され、その間に、脂肪がα型からβ主型へ結晶化し続けた。
【０１３５】
追加Ａユニットにより特別の冷却容量がこのプロセスに追加されうる。特別滞留時間は追加のＣユニットを含むことで追加することができる。
【０１３６】
上記では、イソフラボンの供給源は、米国のミネソタ州ミネアポリス市に支店を有するオランダのSoyLife社から市販されている大豆杯粉末のSoyLife（登録商標）である。
【０１３７】
SoyLife（登録商標）の組成はおよそ以下のとおりである。
成分−重量％
イソフラボン１  ３重量％
サポニン  ４重量％
タンパク質  ４０重量％
脂肪  １１重量％
繊維  ４重量％
灰分  ５重量％
炭水化物  ３５重量％
コレステロール  ０重量％
トコフェロール  ０．０５重量％
α−トコフェロール  ０．００８重量％
レシチン  ２重量％
水  残部
１）グルコシド
【０１３８】
Novosoy（登録商標）はイリノイ州DecaturのArcher Daniels Midland(ADM)から入手可能な大豆製品である。Supro（登録商標）はセントルイス市（MO）のProten Technologies社から入手可能なタンパク単離物である。ステロールエステルの製造方法は例えば米国特許第６２３１９１５号、６１０６８８６号、６２３１９１５号、６１８４３９７号、６１０６８８６号、６０３１１１８号、５９５８９１３号又は５８９２０６８号に記載されている。
【０１３９】
以下のビタミンミックスが上記では使用されている。
【０１４０】
XR05837000（ex Roche）
成分−重量％
ビタミンB6  ２．９重量％
ビタミンB12  ７．８重量％
ビタミンE  ７２重量％
マルトデキストリン  残量
【０１４１】
GLATT PH990097:
成分−重量％
乳酸カルシウム  ７３．８重量％
ビタミンB6  ０．２９重量％
ビタミンB12  ０．７８重量％
ビタミンE  ０．７２重量％
マルトデキストリン  残量
【０１４２】
特に断らない限り、ここでは「脂肪」及び「油」の用語は互換可能なものとして使用されている。ある相が製品全体を本質的に構成するものであるとされている場合は、そのような相はそのような製品の少なくとも９８重量％、特には９９重量％より多くを構成することを意味する。特に断らない限り、百分率は重量百分率である。
【手続補正書】
【提出日】平成15年8月20日(2003.8.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
コレステロールを相乗的に低減するのに効果的な量の大豆タンパク、フィトステロール及びイソフラボンを含み、少なくとも７重量％のポリ不飽和脂肪酸分を更に含む食品。
【請求項２】
前記組成物が４重量％未満の食物繊維を含む、請求項１記載の食品。
【請求項３】
前記組成物が３重量％未満の食物繊維を含む、請求項２記載の食品。
【請求項４】
前記組成物が食物繊維を含まない、請求項１記載の食品。
【請求項５】
前記組成物が０．１重量％未満のカルシウム塩を含む、請求項１記載の食品。
【請求項６】
コレステロールを相乗的に低減するのに効果的な量の、１から２５ｇの範囲の大豆タンパク、０．２から３ｇの範囲の少なくとも１つのフィトステロール及び５から１５０ｍｇの範囲の少なくとも１つのイソフラボンを含み、
少なくとも７重量％、特に２０重量％以下のポリ不飽和脂肪酸分を更に含む可食性組成物。
【国際調査報告】
2005508621.tif 000015
2005508621.tif 000016