(57)【要約】本発明は、解糖酵素錯体及びアミノ基転移酵素錯体調節用化合物に関し、このような化合物含有医薬成分、及び種々の疾患治療用医薬成分調合にこの化合物を使用する事に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉに示す化合物で、
2005538165.tif 000005
式中Ｒ１は水素、シアノ基, カルボキシ基（-COO+）,チオカルボキシ基（ -COS+）,カルボン酸基, チオカルボン酸基, カルボン酸エステル基（-COOR1.1）, チオカルボン酸エステル基(-COSR1.1)、ナフタリミジル基で、
前記R1.1は水素、炭素数１乃至１０のアルキル基、炭素数１乃至１０のアラルキル又はアリル基で、
前記R2は水素、炭素数１乃至４のアルキル基、アルコキシ基（-OR1.1）、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）、アミノ基（-NR2.1R2.2）、-Am、-O-Am, -O-Am、-S-Amで、
前記R3は水素、炭素数１乃至４のアルキル基、アルコキシ基（-OR1.1）、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）、アミノ基（-NR2.1R2.2）、-Am、-O-Am、-S-Am-で、
前記R2.1は水素、炭素数１乃至１０のアルキル基、炭素数１乃至１０アラルキル又はアリル基で、
前記R2.2は水素、炭素数１乃至１０のアルキル基、炭素数１乃至１０のアラルキル又はアリル基で、
前記R2.1とR2.2は同一でも異なっても良く、
前記ｎとｍは同一でも異なっても良く且つ０乃至１０であり、
前記oとpは同一でも異なっても良く且つ０乃至３であり、
前記nとmが０の場合はoは０より大であり、
前記R2とR3はCn及び/又はCmに関し同一でも異なっても良く、
前記R2は全てのCxが１からｎ迄に関し同一でも異なっても良く、
前記R3は全てのCyが１からｍ迄に関し同一でも異なっても良く、
前記Amはアミノ酸基で、
前記ｑとｒは０か１で且つ同一でも異なっても良く、
前記エーテル基-Or-及び/又はエーテル基-Oq-はそれぞれチオエーテル基-Sr-又はチオエーテル基-Sq-で置換でき、
前記アミノ基（-NR2.1R2.2）は直鎖か分岐炭素数１乃至２０のアルキル、アラルキル、又はアリル基で置換でき、
前記シアノ基, シアノカルボニル基、-(CO)-O-R1又は（CO）-R1、又は-C-O-R1はスルファミド（-SO2-NR2.1R2.2）で置換でき、
又はこのような化合物の十分に生理的耐性のある塩である化合物。
【請求項２】
前記Ｒ１がシアノ基である請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記R2が少なくとも一個-Amとして存在し、
前記Amが好ましくは必須アミノ酸のアミノ酸基を表し、前記特にｑは０で且つｒは１或いはｑは１で且つｒは０或いはｑは１で且つｒは１で、ｍは１、R3は水素、ｎとoとｐは０で、R2.1とR2.2は水素である請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
前記ｎとoとｐは０で、前記ｍは０乃至４で、前記R2とR3は水素で、前記R2.1とR2.2は水素で、前記ｑは０で且つｒは１である請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項５】
前記ｍとｐは０で、前記oは１で、前記ｎは０乃至４で、前記R2は水素で、前記R3はCxが１の場合は水素かハロゲンで、全てのCxがｎに等しく且つ１より大なる場合R3は水素で、前記R2.1とR2.2は水素で、前記ｑは０で且つｒは１である請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項６】
前記ｍは１乃至４で、前記ｎとoとｐは０で、前記R2は水素で、R3はCyが１の場合は水素或いはハロゲンで、前記全てのCyがｍに等しく１より大なる場合R3は水素で、前記R2.1とR2.2は水素で、前記ｑは０で且つｒは１である請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項７】
前記oとｐは１で、前記ｍは０で、前記ｎは０乃至４で、前記R2とR3は水素で、前記R2.1とR2.2は水素で、前記ｑは０で且つｒは１である請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項８】
前記ｎとｐは０で、前記oは１で、前記ｍは０乃至４で、前記R2とR3は水素で、前記R2.1とR2.2は水素で、前記ｑは０で且つｒは１である請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項９】
前記ｍとｐは０で、前記oは１で、前記ｎは１乃至４で、前記R2とR3は水素で、前記R2.1とR2.2は水素で、前記ｑは０で且つｒは１である請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項１０】
前記一個のR2が-Amで置換した請求項４から９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
“癌、慢性炎症、喘息、関節炎、骨関節炎、慢性多発性関節炎、リュウマチ性関節炎、炎症性腸疾患、変性関節病、軟骨障害性リュウマチ疾患、敗血症、自律免疫疾患、Ｉ型糖尿病、橋本甲状腺炎、自律免疫血小板減少症、多発性硬化症、重症筋無力症、慢性炎症性腸疾患、クローン病、ブドウ膜炎、乾癬、膠原病、グッドパスチャー症候群、かく乱性白血球付着病、カキシー、ＴＮＦ―アルファ濃度増加による疾患、糖尿病、肥満症、細菌感染、特に耐性細菌（抗生物質）による感染”からなる一連の病気の一つか幾つかの治療用医薬成分調合に使用することを特徴とする請求項１から１０の化合物。
【請求項１２】
請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物を含み、生理的に良く耐える補助物質及び/又は担体物質の一つ、或いは幾つかと混合されてなり、局所投与特に口径投与或いは全身投与、特に静脈内投与用に生薬調合された医薬成分。
【請求項１３】
生体外及び/又は生体内で、解糖及び/又はグルタミノリシス、特にピルビン酸キナーゼ、アスパラギナーゼ、セリン脱水酵素、アミノ基転移酵素、グルタミン酸オキザル酢酸アミノ基転移酵素、グルタミン酸ピルビン酸アミノ基転移酵素、グルタミン酸脱水素酵素、リンゴ酸脱水素酵素、脱アミノ基酵素及び/又はグルタミナーゼを、特に原核生物及び/又は真核生物において、阻害するために使用することを特徴とする請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は解糖酵素及び/又はアミノ基転移酵素錯体調節用化合物に関し、特に細胞及び/又は細菌の成長阻害に関し、このような化合物含有医薬成分及び種々の疾患治療用医薬組成調合にこの化合物を使用する事に関する。
【背景技術】
【０００２】
癌は今日死因の中で最も高いもの一つであり先進国では癌症例数は増加し続けている。これは悪性疾患が高齢者疾患であり、感染症抑制の成功により多くの人がこの年齢に到達出来るという事実に基づく。診断及び治療分野でのあらゆるの進歩にもかかわらず、最も多い内部癌型の治癒する成功率はめったに２０％以上にはならない。癌性腫瘍は今日その増大を破壊又は阻害できる。しかし腫瘍細胞の正常細胞への再変換は未だ不可能である。最も重要な治療手段である手術と放射線治療は生物の癌細胞除去である。現在使用されている癌化学療法剤の細胞分裂抑制剤は又腫瘍細胞の崩壊或いは損傷をもたらす。大部分の場合その効果は特異的でなく健康細胞を同時に損傷する。
【０００３】
一般に腫瘍細胞は健康細胞と代謝、特に解糖において異なる。かくして腫瘍細胞では典型的には解糖関与のアイソザイム系が変化し且つＮＡＤＨ輸送が変化する。その他の影響では解糖酵素活性の増加がある。これは腫瘍細胞に典型的な好気条件下で反応速度を高くする。より詳細にはイー．アイゲンブロット（Ｅ．Ｅｉｇｅｎｂｒｏｄｔ）他、“精選癌の生化学的分子的要素”（Biochemical and Molecular Aspects of Selected Cancers煤A２巻、３１１頁、１９９４が参考になる。
【０００４】
下記の他の異なる疾患は解糖酵素錯体による（過剰）代謝で特徴づけられるかその軽減又は阻害により治療するかのいずれかである。
先行技術
【０００５】
アイゲンブロット（Ｅ．Ｅｉｇｅｎｂｒｏｄｔ）他の書籍、“精選癌の生化学的分子的要素”（Biochemical and Molecular Aspects of Selected Cancers、２巻、３１１頁、１９９４から判るように解糖阻害に糖類似体を使用する。そこで知られている他のアプローチは例えば適当なキレート化或いはキレート化、抑制による解糖アイソザイム抑制剤の使用である。その結果腫瘍細胞はいわば餓死する。上記化合物の問題は、その多くが遺伝毒性で且つ/又は腫瘍細胞に特異的でないという事である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の技術目的は、解糖酵素及びアミノ基転移酵素錯体、特に癌細胞増殖を調節或いは阻害でき、新生腫瘍増殖を抑制すると同時に敗血症ショック、自己免疫疾患、移植拒否更には急性及び慢性炎症疾患のような身体過剰反応を防御し完全な解糖酵素錯体、又は他の錯体構造を有する細胞に対し、同時に殆ど乃至全く細胞毒性の無い活性成分を特定する事である。更に単細胞生物の成長を抑制しようとする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上述の技術目的達成のため本発明は下記の式による化合物を教示し、
【０００８】
2005538165.tif 000002
式中Ｒ１はシアノ基、カルボキシル基(-COO+)、チオカルボキシル基(-COO+)、カルボン酸基、チオカルボン酸基、カルボン酸エステル基（-COOR1.1）、チオカルボン酸エステル基(-COSR1.1)で、ここでR1.1は水素、炭素数１乃至１０のアルキル基、炭素数１乃至１０のアラルキル又はアリル基で、ここでR2は水素、エーテル基(-OR1.1)、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）、アルキルアミノ基（-NR2.1R2.2）、-Am、-O-Am、-S-Amで、ここでR3は水素、エーテル基(-OR1.1)、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）、アミノ基（-NR2.1R2.2）、-Am、-O-Am、-S-Amで、ここでR2.1は水素、炭素数１乃至１０のアルキル基、炭層数１乃至１０アラルキル又はアリル基で、ここでR2.2は水素、炭素数１乃至１０のアルキル基、炭層数１乃至１０のアラルキル又はアリル基で、ここでR2.1とR2.2は同一でも異なっても良く、ここでｎとｍは同一でも異なっても良く且つ０乃至１０であり、ここでoとpは同一でも異なっても良く且つ０乃至３であり、ここでnとmが０の場合はoは０より大であり、ここでR2とR3はCnとCmに関し同一でも異なっても良く、ここでR2は全てのCxが１乃至ｎ迄に関し同一でも異なっても良く、ここでR3は全てのCyが１乃至ｍ迄に関し同一でも異なっても良く、ここで-Amはアミノ酸基で、ここでｑとｒは０か１で且つ同一でも異なっても良く、ここでエーテル基-Or-及び/又はエーテル基-Oq-はそれぞれチオエーテル基-Sr-又はチオエーテル基-Sq-に置換でき、ここでアミノ基(-NR2.1R2.2)は直鎖又は分岐炭素数１乃至２０アルキル基、或いは十分に生理的耐性のある同じような化合物の塩により置換できる。
【０００９】
アミノ酸基は次のようなアミノ酸と定義する：NH2-CHAm-COOH。これらは特に蛋白質性アミノ酸、特に必須アミノ酸のアミノ酸基である。本発明の化合物は光学活性を有する限り（例えば請求項３の実施形態に従うと）、Ｌ及びＤ体のような種々の変形もが含まれ
る。対応する考察は（幾つかの）キラルセンターに適用される。
【００１０】
特に本発明による化合物で、特に適する物はR2が少なくとも一つは-Amであり、ここで-Amは好ましくは必須アミノ酸のアミノ酸基であり、ここで特にｑは０で且つｒは１或いはｑは１で且つｒは０或いはｑは１で且つｒは１であり、ｍは１であり、且つR3は水素で、nとoとｐは０で、Ｒ２．１とＲ２．２は水素である。
【００１１】
更に種々の特定グループが好ましく、即ちi)そこで  nとoとpは０で、そこで mは０乃至４で、そこでR2とR3は水素で、そこでR2.1とR2.2は水素で、そこでｑは０で且つｒは１、ii)そこでmとpは０で、そこでoは１で、そこでｎは０乃至４で、そこでR2は水素で、そこでCx  が１の場合R3は水素又はハロゲンで、そこで全てのCxがnに等しく１より大きい場合R3は水素で、そこでR2.1とR2.2は水素で、そこでｑは０で
且つｒは１、iii)そこで mは１乃至４で、そこでnとoとpは０で、そこでR2は水素で、そこでCyが１の場合R3は水素又はハロゲンで、そこで全てのCyがｍに等しく１より大きい場合R3は水素で、そこでR2.1とR2.2は水素で、そこでｑは０で且つｒは１、iv)そこでoとpは1で、 そこでmは０で、そこでnは０乃至４で、そこでR2とR3は水素で、そこでR2.1とR2.2は水素で、そこでｑは０で且つｒは１、ｖ）そこでnとpは０で、ここでoは１で、そこでｍは０乃至乃至４で、そこでR2とR3は水素で、そこでR2.1とR2.2は水素で、そこでｑは０で且つｒは１、又はvi) そこでｍとpは０で、そこでoは１で、そこでnは１乃至４で、そこでR2とR3は水素で、そこでR2.1とR2.2は水素で、そこでｑは０で且つｒは１である。
【００１２】
一般に一個のR2は-Am基で置換出来る。
【００１３】
アミノ基（-NR2.1R2.2）が炭素数１乃至２０のアルキル基で置換できる化合物の例は：メトキアルキレン基（CH3-O-(CH2)m-R1）, アルキルカルボン酸メチル基（CH3-O-CO-(CH2)-R1）, アルコキシアルキレン基（CR5R6R7-O-(CH2)m-R1）, アルキルカルボン酸アルキルエステル基（CR5R6R7-O-CO-(CH2)m-R1）で、ここでR5, R6及びR7は直鎖又は分岐、非置換又は置換炭素数1乃至10のアルキル基である。メチレン基（(CH2)）は勿論(CR2R3)でも良い。エーテル基（-O-）或いは=Oはチオエーテル基（-S-）或いは=Sで置換出来る。R1基は上に明記している。CR5R6R7は特にｔ−ブチル基でも良い。
【００１４】
本発明による化合物の例は：NH2-O-(CH2)m-R1, NH2-O-(CH2)n-CO-R1, NH2-O-CHHal-(CO)o-R1, NH2-O-CHHal-CH2-(CO)o-R1, NH2-O-CHHal-(CH2)2-(CO)o-R1,
NH2-O-CHHal-(CH2)3-(CO)o-R1, NH2-O-CHHal-(CH2)4-(CO)o-R1, NH2-O-CO-(CH2)n-CO-R1, NH2-O-CO-(CH2)n-R1, NH2-O-(CH2)n-CO-R1, NH2-O-CO-(CH2)n-CHNH2-R1, NH2-O-(CH2)n-CHNH2-R1でR1はシアノ基又はカルボン酸基で、ｍ又はｎは０乃至４で、oは０又は１であり、エーテル基（-O-）は硫黄原子（S）で置換出来る。
【００１５】
本発明による他の式は式IIであり
2005538165.tif 000003
【００１６】
ここでRaはシアノ基、Rbは水素、=０、水酸基、アミノ基で、Rcはアミノ基, オキシアミノ基（-O-NH2）,  炭素数１乃至１０のアルコキシ基、Rdは水素、ハロゲン、=０、水酸基で、ここで=Oの場合は一個のメチン基(CH)の水素を除去し、ここでｗは０乃至１０で即ち１乃至４である。
【００１７】
本発明による他の式は式IIIであり
2005538165.tif 000004
【００１８】
ここでRpは-R1, -O-R1, -O-(CR2R3)x-R1, -(CR2R3)x-O-R1でRqは-NR2.1R2.2, -O-NR2.1R2.2, -O-(CR2R3)x-NR2.1R2.2, -(CR2R3)x-O-NR2.1R2.2で、Rrは-Am, -O-Am, -O-(CR2R3)x-Am, -(CR2R3)x-O-Amで、Rsは水素、炭素数１乃至１０のアルキル基、アリル又はアラルキル基、炭素数１乃至１０のヒドロキシアルキル、アリル又はアラルキル基、又はこのようなヒドロキシル基のエーテルで、ここでエーテル基（-O-）はチオエーテル基（-S-）で置換でき且つｘは１乃至１０、特に１乃至４である。R1は上に指定した通りで特にシアノ基かカルボン酸基である。このような化合物の例は：NH2-O-CHAm-R1, NH2-CHAm-O-R1, NH2-O-CHAm-O-R1, NH2-CHR1-O-Am, Am-O-CHNH2-O-R1, NH2-O-(Am-O-CH-O-R1)である。一個或いは数個のエーテル基（-O-）の一方側に或いは一個或いは数個のエーテル基（-O-）の両側にメチレン基（-(CH2)-）を直接挿入出来る。
【００１９】
本発明による化合物はｐＨ値によるが（即ち塩基性条件下ではカルボン酸アニオンと
して或いは酸性条件下ではアンモニュウムカチオンとして）溶液中にイオン化状態で存在しても良い。塩酸塩のような塩もまた形成できる。
【００２０】
本発明は、真性糖尿病や肥満症のような古典的代謝疾患のほかに、癌、自律免疫疾患及びリュウマチのような、他の疾患が代謝欠陥に起因すると云う発見に基づく。この事は、食物がこれら疾患に強い影響することで理解できる。これらの代謝ケトアシドーゼの直接測定可能な生化学パラメーターとして、上記及び下記全疾患の血液中で増大する、ピルビン酸キナーゼ型Ｍ２(Ｍ２−ＰＫ)の増加がある。患者血液中のＭ２−ＰＫ検出可能物は各疾患の依存し、異なる細胞に由来する。即ち癌は腫瘍細胞に、敗血症は免疫細胞に、リュウマチは免疫及び/又は滑膜細胞に由来する。健康細胞では高次細胞基質錯体、即ち解糖酵素錯体中でＭ２−ＰＫ四量体が存在する。腫瘍性蛋白質の過剰活性化により、Ｍ２−ＰＫは錯体から遊出し腫瘍代謝の典型的変化が起こる。同時にフォスフォグリセロムターゼ（ＰＧＭ）はこの錯体を離れ細胞基質アミノ基転移酵素と関連する他の酵素錯体に移行する。（実施例２参照）従ってこの錯体はアミノ基転移酵素錯体と呼ばれる。ＰＧＭ基質であるグリセレートー３−Ｐはアミノ酸セリン及びグリシン合成の第一段階となる。両アミノ酸はＤＮＡ及びポリリン脂質合成に必須である。ＰＧＭのアミノ基転移酵素錯体への移行によりグルタミン酸のセリン合成、即ちグルタアミノリシスが活性化される。同じ変化が例えばリュウマチ、敗血症又は多発性外傷の場合のような免疫系が機能しない場合免疫細胞で起こる。多細胞生物の異なる細胞代謝は細胞質ゾル中で臓器固有の酵素結合により組み入れられる：例えば筋肉中の収縮蛋白質との結合。この理由により異なる臓器はそれぞれ固有のアイソザイムを備えている。この秩序の崩壊は必ず病気へ進行する。十分な食物供給により散逸増殖する細菌や、酵母のような単細胞生物は細胞質ゾルの複雑な組織を持たない。その結果多細胞生物代謝が機能しなくなるのを抑制する物質は、このような単細胞生物の増殖を阻害する。
【００２１】
本発明は更に“癌、慢性炎症、喘息、関節炎、骨関節炎、慢性多発性関節炎、リュウマチ性関節炎、炎症性腸疾患、変性関節病、軟骨障害性リュウマチ疾患、敗血症、自律免疫疾患、Ｉ型糖尿病、橋本甲状腺炎、自律免疫血小板減少症、多発性硬化症、重症筋無力症、慢性炎症性腸疾患、クローン病、ブドウ膜炎、乾癬、膠原病、グッドパスチャー症候群、かく乱性白血球付着性疾患、カキシー、ＴＮＦ―アルファ濃度増加による疾患、糖尿病、肥満症、細菌感染、特に耐性細菌による感染”からなる一連の病気の一つか又は幾つかの治療に医薬成分調合用の本発明化合物を使用する事を教示する。治療という用語は又予防も含む。
【００２２】
本発明は更に、本発明による化合物を生理的に良耐性な補助物質及び/又は担体物質の一つか幾つかと混合し、局所又は全身投与、特に口径、非口径、標的臓器への注入、注射（即ち静脈内、筋肉内、関節内或いは腰椎内）、歯ポケット（歯根と歯肉の間）への塗布用に生薬調合する医薬成分を教示する。
【００２３】
本発明は最後に、生体外で解糖酵素錯体阻害用に、特にピルビン酸キナーゼ、アスパラギナーゼ、セリン脱水酵素、アミノ基転移酵素、脱アミノ基酵素、及び/又はグルタミナーゼ阻害用に本発明化合物の使用を教示する。特にアミノ基転移、酸化脱アミノ化、加水分解脱アミノ化、脱離脱アミノ化及び還元脱アミノ化を阻害する。
【００２４】
もし適用出来れば式Ｉによる化合物には立体異性体が存在しその立体異性体は全て本発明に包含すると考える。アルキル基と云う用語は直鎖及び分岐アルキル基と同時に環状アルキル基を含み、適用出来れば直鎖及び分岐アルキル置換基含有環状アルキル基を含む。アリル基と云う用語はアラルキル基を含みアルキル置換基はアルキル基又は環状アルキル基でも良い。
【００２５】
驚くべき事に、本発明による化合物は上述の解糖酵素錯体メンバーを競争的に阻害出来ることを見いだした。治療に適切な濃度で癌増殖を抑制出来る。各投与量範囲で予期される細胞毒性は見られない。その薬理学的性質により、本発明の化合物は上述の更なる疾患の治療及び予防に良く適する。炎症阻害又は、抗リュウマチ効果を示唆すると共に特に適切なのは本発明物質が非ステロイド物質である事である。
【００２６】
解糖酵素及びアミノ基転移酵素錯体の阻害は特にセリン、グルタミン、オルニチン、プロリン及びアルギニン又はこれらと他種のアミノ酸による代謝活性並びにエネルギー獲得の阻害を含み、更に例えば腫瘍細胞用だけでなく、細菌及び酵母の重要なエネルギー源であるエネルギー生成用に、このようなアミノ酸合成の阻害を含む。細胞、細菌或いは酵母はいわば餓死する。詳細には本発明による物質は例えば以下の反応を阻害する。i)スレオニンからグリシン、ii)スレオニンからα―アミノーβ―ケト酪酸、iii) α−アミノ−β−ケト酪酸からグリシン、iv)セリンピリドキサールリン酸（ＰＬＰ）シッフ塩基からアミノアクリレート、特に葉酸依存性セリンヒドロキシメチル基転移酵素、v) アミノアクリレートからピルビン酸（ＰＬＰシッフ塩基の自然加水分解平衡のシッフ塩基への変位による）、vi）アミノ酸合成用ＰＬＰによるオキソ酸からのアミノ基転移、特に分岐アミノ基転移酵素、α―ケトグルタル酸、オキサル酢酸、３−ヒドロピルビン酸及びグリオキザル酸アミノ基転移酵素、グルタミン酸脱水酵素の転移、特にアミノ酸からのピルビン酸生成は本発明による物質により阻害される。重要なのはグルタミナーゼ、アルギナーゼ、アスパラギナーゼ又はセリンヒドロキシメチル基転移酵素によるヒドロキシルアミン又はメタノールの放出である。（適応出来れば他の基による、例えばアルキル基による水素原子から炭素又は窒素原子への置換。）腫瘍細胞の特色はグルタミナーゼ及びセリンヒドロキシメチル基転移酵素が高活性である事から、この事は特異性の増加をもたらす。例えばNH2-OH（ヒドロキシルアミン、ＨＡ）はリン酸エステル（即ちアデノシン二リン酸）のヒドロキシ基の代わりに高ピルビン酸キナーゼ活性によりリン酸エステル化される。この事は腫瘍細胞のピルビン酸キナーゼ反応を切断する事になる。それ故本発明は全ての一般性を持って本発明による物質の全自然代謝物、特にアミノオキシ酢酸代謝物、即ちこれら物質の断片を含む。
【００２７】
アミノ基転移酵素錯体ではＰＧＭ及びＮＤＰＫの他にグルタミン酸オキサル酢酸アミノ基転移酵素（ＧＯＴ）、グルタミン酸ピルビン酸アミノ基転移酵素（ＧＰＴ）、グルタミン酸脱水素酵素（ＧＩＤＨ）及びリンゴ酸脱水素酵素（ＭＤＨ）の細胞質内イソ型も関与する。ＧＯＴとＭＤＨはリンゴ酸―アスパラギン酸シャトル成分でありこれにより細胞質ゾル中に生じた水素をミトコンドリアに輸送する。ＮＡＤ＋は細胞質内グリセルアルデヒド三リン酸脱水素酵素反応に再循環する。リンゴ酸―アスパラギン酸シャトルはグルタミノリシスの一部である。活性リンゴ酸―アスパラギン酸シャトルには実施例３に示すようにＧＯＴの他にｐ３６結合型ＭＤＨの存在が重要である。
【００２８】
本発明に関してその他様々な実施形態が可能である。例えば本発明よる医薬組成は上記定義の幾つかの異なる化合物を含む事ができる。更に本発明よる医薬組成は更に式Ｉ化合物とは異なる活性成分を含有出来る。それは組み合わせ調合である。そこでは種々の使用活性成分が単一型処方で調合でき、即ち活性成分を処方形態に従い混合する。しかし又種々の活性成分を空間的に分離した同一種又は異種処方を調合する事も出来る。
【００２９】
式Ｉによるイオン性化合物の対イオンはナトリウムイオン、カリウムイオン、リチュウムイオン、シクロヘキシルアンモニュウムイオン又は塩基性アミノ酸（即ちリシン、アルギニン、オリニチン、グルタミン）が使用できる。
【００３０】
本発明による方法で調合した医薬品は口径、筋肉内、関節周囲、関節内、静脈内、腹腔内、皮下或いは直腸型で投与出来る。
【００３１】
本発明は又少なくとも式Ｉ化合物一個を医薬的に用い十分に生理的耐性のある担体を用いて且つ適するならば更に適当な活性成分、添加物或いは助剤を用いて適当な投薬形態に取り入れる事を特徴とする医薬調合方法に関する。
【００３２】
適当な固体又は液体投薬形態は例えば顆粒、粉末、糖衣錠、錠剤、（ミクロ）カプセル、座薬、シロップ、ジュース、懸濁剤、エマルジョン、点滴薬、注射型溶液の他に調合に担体物質、爆発剤、結合剤、コーティング剤、膨潤剤、滑り剤又は潤滑剤、風味剤、甘み剤及び溶液媒介体のような通常の方法を用いて活性成分の遅延放出する調合である。
【００３３】
助剤は例えば炭酸マグネシウム、酸化チタン、乳糖、マニトール及びその他の糖類、タルク、牛乳蛋白質、ゼラチン、澱粉、セルロース及びその誘導体、鱈肝油、ひまわり油、ピーナッツ油又はごま油のような動物油と植物油、ポリエチレングリコール及び減菌水や一価又は多価アルコール、即ちグリセリンのような溶剤がある。
【００３４】
好ましく薬は投薬量単位で調合し投与するが、各単位は活性成分として好ましいことに本発明の式Ｉによる化合物を規定用量含有する。錠剤、カプセル、糖衣錠或いは座薬のような固体用量に関しては、その用量は１乃至１，０００ｍｇ、好ましくは５０乃至３００ｍｇでありアンプル形態の注射溶液に関しては０．３乃至３００ｍｇ、好ましくは１０乃至１００ｍｇである。
【００３５】
体重５０乃至１００ｋｇ、例えば７０ｋｇの成人患者の治療には、例えば一日服用量は活性成分２０乃至１，０００ｍｇ、好ましくは１００乃至５００ｍｇが示唆される。特定環境下ではより高い或いはより低い一日服用量が推奨出来る。一日服用量の投与は単一投薬量単位或いは幾つかの少量投薬量単位形態で一日おきに投与する他に一定間隔で別々の服用量で多投与出来る。
【００３６】
以下に本発明を実施形態に示した実施例だけを参考により詳細に説明する。
【実施例１】
【００３７】
本発明による化合物の効果性の定量
適当なヴィヴィコフ肝臓癌細胞をハイデルベルグのドイツ癌研究センター腫瘍銀行から得た。（癌研究、（Cancer Research）１９５１、１７巻、１０１０頁）。２５ｃｍ２の培養瓶当たり細胞１００，０００個をそれぞれ播種した。本発明による物質を細胞培養液使用に適した溶剤、例えば水、希釈エタノール、ジメチルスルフォキシドや類似体に溶解し培養培体に濃度増加するように、即ち８０μＭ―５，０００μＭ或いは１００μＭ―３００μＭの濃度範囲で添加した。４日間培養後瓶一個当たりの細胞数を数える。コントロール試料（本発明による化合物の添加無しか或いは代わりに参照化合物を添加した物）と比較して、使用化合物の増殖阻害に対する測定及び用量依存性を調べる。
【実施例２】
【００３８】
ＰＧＭの移行
図１aに腫瘍細胞抽出物（ＭＣＦ−７細胞）の等電点電気泳動を示す。ＰＧＭは解糖酵素錯体を離れ細胞質内アミノ基転移酵素関連錯体、即ちアミノ基転移酵素錯体への移行が認められる。アミノ基転移酵素錯体は次のように構築される：細胞基質グルタミン酸オキサル酢酸アミノ基転移酵素（ＧＯＴ），ｃ−リンゴ酸脱水素酵素（ＭＤＨ）、ホスホグリセロムターゼ（ＰＧＭ）。非表示のものは：ｃ−グルタミン酸ピルビン酸アミノ基転移酵素（ＧＰＴ）、ｃ−グルタミン酸ヒドロキシピルビン酸アミノ基転移酵素（ＧＰＴ）、ｃ−アラニンヒドロキシピルビン酸アミノ基転移酵素、ｃ−セリンヒドロキシメチル転移酵素及びｃ−グルタミン酸脱水素酵素（ＧＩＤＨ）。ＰＧＭとヌクレオチド二リン酸キナーゼ（ＮＤＰＫ）はアミノ基転移酵素と解糖酵素錯体の両者に関連出来る。
【実施例３】
【００３９】
リンゴ酸―アスパラギン酸シャトルの阻害
図１ｂにアミノ酢酸（ＡＯＡ）とヒドロキシルアミン（ＨＡ）の生体外でのＧＯＴの細胞質内ミトコンドアアイソザイム活性への影響を示す。ＧＯＴのアイソザイムは等電点電気泳動により分離した。アミノオキシ酢酸は主として細胞質内アイソザイムを阻害しヒドロキシルアミンはＧＯＴの両アイソザイムを阻害する事が判る。ＧＯＴの阻害はリンゴ酸―アスパラギン酸シャトルの阻害をもたらす。その結果ＮＡＤは再循環できず解糖はＧＡＰＤＨ段階で阻害される。
【００４０】
以下の説明は上述の実施例に依存しない。本発明は更に腫瘍疾患、特に固体腫瘍治療用医薬組成調剤に対して図２ｂのＮ−（４‘―トリフルオロメチルフェニル）―５−メチルイソオキサゾールー４−カルボキサミド（Ｃ１２Ｈ９Ｆ３Ｎ２Ｏ２；分子量  ２７０．２、又図２a参照）及び/又はその自然活性代謝物Ａ７７１７２６の使用を教示する。ベンゼン環は表示トリフルオロメチル基置換の代わりに適当位に一般にトリハロメチル基又はトリハロメトキシ基又はハロゲン基で一，二，三，四又は五置換出来る。本発明による医薬成分は大きい腫瘍、即ち０．１に始まり１ｃｍ３サイズ迄の腫瘍治療に特に適している。本発明による医薬成分は例えば以下の助剤及び担体物質を用いて口径投与用に調合する：コロイダルシリカ、クロスポビドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、乳糖一水和物、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、ポピドン、澱粉、タルク、酸化チタン及び/又は黄色酸化鉄。服用量は一日当たり１乃至５０ｍｇ、好ましくは１０乃至３０ｍｇである。治療には最初の１乃至１０日間に、特に１乃至３日間に初期投薬量２０乃至５００ｍｇ、特に５０乃至１５０ｍｇを投与する事を薦める。本発明の他の実施形態では上記物質は一個或いは数個の糖リン酸エステル、例えばフルクトースー１、６―二リン酸エステル、グリセリンー２，３−二リン酸エステル、グリセリンー３−リン酸エステル、リボースー１，５−二リン酸エステル、リブロースー１，５−二リン酸エステルと組み合わし且つ投薬形態として例えば錠剤としてこれらの物質を組み合わせて混合する事も出来る。しかしその成分を別々に同一又は異種投薬形態で供与出来る。糖リン酸エステルの用量は一日当たり２０乃至５，０００ｍｇ、例えば１００乃至５００ｍｇ投与出来る。
【００４１】
本発明のこのような変形は、これらの物質或いはその代謝物がピルビン酸キナーゼと結合しエネルギー代謝を阻害するか、反対に腫瘍細胞を衰えさせるので、驚くべき事に腫瘍細胞及び腫瘍組織の増大を阻害する。この状態から、これら物質は腫瘍細胞代謝に特異的に影響し正常細胞への影響は無いか低く、例えあっても副作用はほんのわずかであると云う特別な利点がある。
【００４２】
ピリミジン合成阻害剤としての既知効果は、全く異なる有効機構が関与しその抗増殖効果は現象的には、実質的に免疫細胞及び炎症疾患関連細胞へと導くよう観察されるか
ら、これら物質の効力は驚くべき事である。
【００４３】
特に重要なのは、前頁に記述の一個或いは数個の活性成分と前頁以前に記述の一個或いは数個の活性成分或いはアミノオキシ酢酸（ＡＯＡ、NH2-O-CH2-COOH、その塩又はそのエステル、例えば炭素数1乃至10のアルキル又はヒドロキシアルキルエステル）との組み合わせである。例えば、ＡＯＡは小さな腫瘍（０．１乃至１ｃｍ３以下）に特に有効で又その発生、特に転移発生を防止する一方、式１０又は１１の化合物はもし糖リン酸エステルと組み合わせて利用出来れば大きな腫瘍に有効である。これは小さな腫瘍と大きな腫瘍とでは代謝が異なる事という理由による。組み合わせに関する上述の説明は同様に適用される。
【００４４】
本発明による物質は、更に心機能不全又は慢性心不全（ＣＣＦ）治療用医薬成分の調合に使用出来る。これらはニューヨーク心臓協会（ＮＹＨＡ）分類、又は、ＮＹＨＡ等級のNYHA IからNYHA IVによる定義の変形である。これら疾患の全ては生物代謝に必要な血液循環又は輸送能力供給時に運転中或いは既に停止下での心筋の急性及び/又は慢性不全による。その理由は心筋中のブドウ糖不足による解糖不足及び/又酸素供給不足と複雑な冠動脈炎症プロセス（免疫系及び補体細胞の活性化）による。本発明のこの様態は代替えエネルギー生成生化学プロセスが本発明による物質により変調し、例えばセリン代謝及びグルタミノリシスの活性化により、上記の不十分な活動プロセスのいわば置き換え経路を生成出来るか又本発明による物質により一方で、解糖他方でグルタミノリシス間の既存動的平衡を酸素の同時投与（例えば呼吸による血液中酸素分圧の増加）下で解糖側に変位出来る事を見いだした事に基づく。この状況で本発明による抗炎症物質投与により、切迫した非常に危険なアシドーシス（乳酸生成による）を防止出来る。アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、利尿剤、ジキタリス、強心剤、又はイソソルビドジニトラートのような既知技術手段と比較して、本発明による物質はエネルギー代謝に直接影響しその代謝を改善する。副作用はその結果比較的弱い。
【００４５】
この状況で、本発明により少なくともＮＹＨＡ等級II乃至IVでは、細胞及び/又は血液中の腫瘍Ｍ２−ＰＫ（＝標準Ｍ２−ＰＫが四量体とは対照的にＭ２−ＰＫ二量体）濃度が増加し今までの常法以外の日常的方法として容易に濃度決定出来ることを見いだした。それ故本発明は心機能不全、特にそれの等級や関連炎症プロセスの生体外診断に、診断物質調合腫瘍Ｍ２−ＰＫ検出試験システムとして使用できる事を教示する。もし患者の血漿中にＭ２−ＰＫ値が標準値（定義の最大限界；正常集団）に比べ増加値（病気集団）が見られた場合には、心機能不全の存在及び/又はそれに関連した炎症プロセスを、少なくとも心機能不全になる危険を示唆する。このような血漿分析は容易に且つ迅速に実行できる。これに比し以前の標準法（既存最適方法、血液ガス分析）は、日常的試験には適さず高価につく。本発明のこの様態では、既知のいかなる試験システムも腫瘍Ｍ２−ＰＫの検出に、即ち抗体の免疫試験システムに使用出来る。特に、既知試験システム自身腫瘍代謝マーカーとして、例えばモノクロナール抗体はここで特異的であるとして、腫瘍Ｍ２−ＰＫ検出に使用できる。
【００４６】
本発明により、使用出来る種々の物質を更に図に示す。順序列変換により容易に推定出来るので、簡単のため表示していないが、特に本質的に変形可能なものは見本形で示す。本発明は、最後に又記述物質の全自然代謝物を含む。
【図面の簡単な説明】
【００４７】
【図１ａ】腫瘍細胞抽出物（ＭＣＦ−７細胞）の等電点電気泳動を示す。
【図１ｂ】アミノ酢酸（ＡＯＡ）とヒドロキシルアミン（ＨＡ）の生体外でのＧＯＴの細胞質内ミトコンドアアイソザイム活性への影響を示す。
【図２】本発明により、使用出来る物質を示す。
【図３】本発明により、使用出来る物質を示す。
【図４】本発明により、使用出来る物質を示す。
【図５】本発明により、使用出来る物質を示す。
【図６】本発明により、使用出来る物質を示す。
【図１ａ】
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【図１ｂ】
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【国際調査報告】
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