(57)【要約】本発明は広範囲のヒドロキシチロソールエステルの調製法に関する。本発明によれば、この種の化合物は、合成ヒドロキシチロソールもしくは天然のヒドロキシチロソール化合物、オレウロペインまたはオレウロペインアグリコン（オリーブ油、植物水、オリーブの搾りかすまたはオリーブの葉の中に存在する化合物）に少なくとも１個のアシル基Ｒを有するアシル化剤と反応させることによって合成される。この場合、ＲはＨ、アルキル基（炭素原子数が１〜３１の線状、分枝状または環状のアルキル基）、アルケニル基（炭素原子数が３１までの線状、分枝状または環状のアルケニル基）またはアリール基を示す。  本発明は、本発明によって調製されるエステル類であって、食品、化粧品および薬剤の添加剤として使用することができるエステル類にも関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒドロキシチロソール、３,４−ジヒドロキシフェニル酢酸もしくはそのエステル誘導体の還元における中間化合物としてのヒドロキシチロソール、オレウロペインおよびオレウロペインアグリコンから選択される化合物を、触媒の存在下において、アシル化剤と、上記のヒドロキシチロソールもしくはその類似化合物／アシル化剤の濃度比が１０：１〜１：１０００の条件下において０〜１５０℃で３０分間〜１ヶ月間にわたって接触させることによっておこなわれる位置選択性エステル化反応を含むことを特徴とする、下記の一般式（Ｉ）で表されるヒドロキシチロソールエステルの製造方法：
【化１】
2005531641.tif 000007
【請求項２】
アシル化剤が、少なくとも１個のアシル基Ｒを有する化合物である請求項１記載の方法。
【請求項３】
アシル化剤としてのエステルを用いておこなわれるエステル化反応が少なくとも９５％の位置選択性を示す請求項２記載の方法。
【請求項４】
ＲがＨ、アルキル基、アルケニル基またはアリール基である請求項１から３いずれかに記載の方法。
【請求項５】
アルキル基が、炭素原子数が３１までの置換もしくは非置換の線状、分枝状または環状の炭素鎖構造を有するアルキル基である請求項１から４いずれかに記載の方法。
【請求項６】
アルケニル基が、炭素原子数が３１までの置換もしくは非置換の線状、分枝状または環状の炭素鎖構造を有するアルケニル基であって、該炭素鎖のいずれかの位置に１もしくは複数の不飽和結合を有するアルケニル基である請求項１から４いずれかに記載の方法。
【請求項７】
アリール基が、フェニル基またはその置換誘導体である請求項１から４いずれかに記載の方法。
【請求項８】
反応を、所望により、エステル、エーテルおよびハロゲン化炭化水素から選択される溶剤の存在下でおこなう請求項１から７いずれかに記載の方法。
【請求項９】
反応を酸性触媒または酵素触媒の存在下でおこなう請求項１から８いずれかに記載の方法。
【請求項１０】
触媒が鉱酸である請求項９記載の方法。
【請求項１１】
触媒がリン酸である請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
触媒が有機スルホン酸である請求項９記載の方法。
【請求項１３】
触媒がリパーゼである請求項９記載の方法。
【請求項１４】
接触工程後、得られるヒドロキシチロソールエステルの単離と精製をおこなう工程を含む請求項１から１３いずれかに記載の方法。
【請求項１５】
請求項１から１４いずれかに記載の方法によって得られるヒドロキシチロソールエステルであって、アシル基が、炭素原子数が３〜６の炭素鎖を含む該エステル。
【請求項１６】
請求項１から１４いずれかに記載の方法によって得られるヒドロキシチロソールエステルであって、アシル基が、炭素原子数が７〜９の炭素鎖を含む該エステル。
【請求項１７】
請求項１から１４いずれかに記載の方法によって得られるヒドロキシチロソールエステルであって、アシル基が、炭素原子数が９よりも大きい炭素鎖を含む該エステル。
【請求項１８】
食品配合物用添加剤としての請求項１５から１７いずれかに記載のヒドロキシチロソールエステルの使用。
【請求項１９】
ヒドロキシチロソールエステルが請求項１から１４いずれかに記載の方法によって得られるエステルである請求項１８記載の使用。
【請求項２０】
該ヒドロキシチロソールエステルを、食品の無極相中の濃度が２００ｐｐｍを越えない濃度で単独添加するか、または他の天然のオルトジフェノール型もしくはジテルペン型の抗酸化剤と一緒に添加する請求項１８または１９記載の使用。
【請求項２１】
請求項１から１３いずれかに記載の方法による反応において得られる触媒と溶剤の除去前の混合生成物の、食品配合物用添加剤としての使用。
【請求項２２】
化粧品用添加剤としての請求項１５から１７いずれかに記載のヒドロキシチロソールエステルの使用。
【請求項２３】
ヒドロキシチロソールエステルが、請求項１から１４いずれかに記載の方法によって得られるエステルである請求項２２記載の使用。
【請求項２４】
請求項１から１３いずれかに記載の方法による反応において得られる触媒と溶剤の除去前の混合生成物の、化粧品用添加剤としての使用。
【請求項２５】
請求項１５から１７いずれかに記載のヒドロキシチロソールエステルの薬剤における使用。
【請求項２６】
請求項２５記載の薬剤用添加剤としてのヒドロキシチロソールエステルの使用であって、ヒドロキシチロソールエステルが請求項１から１４いずれかに記載の方法によって得られるエステルである該使用。
【請求項２７】
請求項１から１３いずれかに記載の方法による反応において得られる触媒と溶剤の除去前の混合生成物の薬剤における使用。
【請求項２８】
請求項１５から１７いずれかに記載のヒドロキシチロソールエステルを添加剤として、単独でまたはオルトジフェノール型もしくはジテルペン型の天然の抗酸化剤と一緒に含有する食品配合物であって、食品の無極相中の該エステルの全濃度が２００ｐｐｍを越えない該食品配合物。
【請求項２９】
請求項１５から１７いずれかに記載のヒドロキシチロソールエステルを添加剤として含有する化粧品。
【請求項３０】
請求項１５から１７いずれかに記載のヒドロキシチロソールエステルを添加剤として含有する薬剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はヒドロキシチロソール（hydroxytyrosol）エステルの製造方法、該方法によって得られるエステルおよび該エステルの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
脂質の酸化に起因する望ましくない色や香味の発生および他の化合物の生成を防止するために、油脂類や食品には抗酸化剤が添加される［Ｂ．Ｊ．Ｆ．フドソン編、「食品用抗酸化剤」、エルサビーア、ロンドン、１９９０年；Ｇ．パスカル、「農業栄養工業における製造用の添加剤と助剤」、Ｌ．Ｊ．ムルトン編、Ｅｄ．アクリビア、サラゴサ（スペイン）、１９８８年、第１５７頁以降］。多くの食品の保存寿命は、抗酸化剤の使用によって１５〜２００％延びると評価されている［Ｒ．マエストロ・デュラン、Ｒ．ボルハ・パジーリャ、Grasas y Aceites（脂肪と油）、第４４巻（１９９３年）、第１０１頁］。
【０００３】
天然および合成の食品［王立法規１４５／１９９７年、政府公報２２／３／９７、第９３７８頁以降］および化粧品［「化粧品成分の一覧表」、保健消費省の発行センター（マドリッド）、１９９６年］の製造においては、酸化から保護しようとする製品の多かれ少なかれ脂質含有量を含む性状に応じて、広範囲の抗酸化性添加剤が現在使用されている。
【０００４】
天然の抗酸化剤のなかでも、特に高い活性を有するものはポリフェノール化合物、就中、オルトカテコールとパラカテコールである。以下の一般式（II）で表されるヒドロキシチロソールはこのようなオルトカテコールの１種であり、種々の天然物中において見出されているが、オリーブ中に含まれているものが特に重要である［Ａ．バスケス・ロンセロ、Rev. Fr. Corps. Gras. 第２５巻（１９７８年）、第２１頁］。この場合、ヒドロキシチロソールは遊離の形態であってもよく、あるいは誘導体の形態であってもよい。誘導体は基本的には以下の式（III）で表されるオレウロペインである［Ｌ．Ｍ．パニッジ、Gazz. Chim. Ital.、第９０巻（１９６０年）、第１４４９頁］。ヒドロキシチロソールは、酸化に対しては、脂肪食品の転化（conversion）において通常使用されている抗酸化性添加剤［トコフェロール（天然に存在する抗酸化剤）およびブチルヒドロキシトルオール（ＢＨＴ；合成される抗酸化剤）］に比べて、非常に高い保護能を発揮する［Ｍ．セルヴィリら、Rev. Ital. Sostanze Grasse、第７３巻（１９９６年）、第５５頁］。しかしながら、ヒドロキシチロソールは親油性媒体には実際上溶解しないので、この種の食品に対しては使用することができない。
【０００５】
しかしながら、次のことが知られている。バージンオリーブ油（ＶＯＯ）は、該油に苦味を付与するオレウロペインアグリコン［以下の式（IV）および（Ｖ）で表される化合物］を一定の濃度とで含有しており［Ｇ．Ｆ．モンテドロら、J. Agric. Food. Chem.、第４１５巻（１９９３年）、第２２２８頁；Ａ．バスケス・ロンセロら、Grasas y Aceites、第２５巻（１９７４年）、第２６９頁］、この種の誘導体（IVおよびＶ）は、遊離のヒドロキシチロソールが発揮する抗酸化能と類似する抗酸化能を示す［Ｍ．セルヴィリら、Rev. Ital. Sostanze Grasse、第７３巻（１９９６年）、第５５頁］。このことは、該分子中のエステル結合の存在は抗酸化能に影響を及ぼさないということを示す。
【０００６】
【化１】
2005531641.tif 000002
【０００７】
ＶＯＯ中に他のヒドロキシチロソールエステル［前記の式（VI）で表される化合物］が存在することが最近報告されている［Ｍ．ブレネスら、J. Agric. Food. Chem.、第４７巻（１９９９年）、第３５３５頁；Ｊ．Ｌ．エスパルテロら、リプロ・デ・レスメネス・デ・ラ・XXVII レユニオン・ビエナル・デ・ラ・レアル・ソシエダッド・エスパニョーラ・デ・キミカ、テネリフェ、１９９９年、Ref. S6-1C-10、第１６５頁；Ｒ．マテオスら、J. Agric. Food. Chem.、第４９巻（２００１年）、第２１８５頁］。この化合物が抗酸化能を有するかどうかについて研究がなされた結果、該化合物は、遊離のヒドロキシチロソール自体が発揮する抗酸化能と同じ抗酸化能を示すことが判明した。さらに、該化合物は油溶性であり、苦味もなく、このような特徴は、食品用添加剤としての利用可能性の観点から特に注目すべきである。
【０００８】
さらにまた、オリーブ油に含まれるフェノール類は人間の健康に有益な効果をもたらすということに対してはしばしば疑いがもたらされている［Ｆ．ヴィシオリ、Ｃ．ガリ、J. Agric. Food. Chem.、第４６巻（１９９８年）、第４２９２頁］。ヒドロキシチロソールがＤＮＡに対する酸化的損傷および低密度リポタンパク質の酸化を防止するということ［Ｏ．Ｉ．アルオマら、J. Agric. Food. Chem.、第４６巻（１９９８年）、第５１８１頁］、該化合物が血小板の凝集を阻止するということ［Ａ．ペトロントら、Thromb. Res.、第７８巻（１９９５年）、第１５１頁］、該化合物が特定のリポキシゲナーゼの活性を阻害すること［Ｎ．コウヤマら、Biosci. Biotechnol. Biochem.、第６１巻（１９９７年）、第３４７頁；Ｒ．デ・ラ・プエルタら、Biochem. Pharmacol.、第５７巻（１９９９年）、第４４５頁］および該化合物がオリーブ油の摂取に際して人間の生体内へ吸収されること［Ｆ．ヴィシオリら、FEBS Lett.、第４６８巻（２０００年）、第１５９頁］が報告されている。これらの全ての研究は、ヒドロキシチロソールとその誘導体が薬理学的用途に利用できるということを提案している。
【０００９】
ヒドロキシチロソールエステルの製造に関する文献がバラルディらによって１９８３年に発行されている［Ｐ．Ｇ．バラルディら、Liebigs Ann.Chem.、第８３巻（１９８３年）、第６８４頁］。この場合、ヒドロキシチロソールアセテートは、それ以前にシェッフらによって研究された合成法を用いて得られている。この合成法には、下記の反応経路に示すように、２−（３,４−ジメトキシフェニル）エタノール（VII）を出発物質とする５つの工程が含まれる：
【００１０】
【化２】
2005531641.tif 000003
【００１１】
新しい合成法が最近になって報告されている［Ｍ．Ｈ．ゴルドンら、J. Agric. Food. Chem.、第４９巻（２００１年）、第２４８０頁］。この合成法はヒドロキシチロソールを出発物質とするものであって、３つの工程からなる。即ち、ヒドロキシチロソールをベンジルブロミドで処理することによって２−(３,４−ジベンジルオキシフェニル）エタノールを調製し、次いで、この生成物をピリジン中において酢酸によるアセチル化に付すことによって該生成物の酢酸エステルを調製し、最後に、パラジウム触媒を用いる水素化によってベンジル基を除去する。
【００１２】
上記の２つの合成法は非常に長い時間を必要とするだけでなく、一部の合成工程においては、生成物の不必要な消失を防止するために特殊な条件および／または特に注意深い取扱い操作を必要とし、また、全収率は低い。さらに、これらの合成法を利用する場合には、ヒドロキシチロソールの酢酸エステル（VI）のみが得られるだけである。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明の課題は、以下の一般式で表される広範囲のヒドロキシチロソールエステル類の簡単で有効な製造方法を提供することである：
【化３】
2005531641.tif 000004
【課題を解決するための手段】
【００１４】
上記の一般式（Ｉ）で表されるヒドロキシチロソールエステルの合成は、合成のヒドロキシチロソール化合物または天然のヒドロキシチロソール化合物、オレウロペインもしくはオレウロペインアグリコン（これらの化合物はオリーブ油、植物水、オリーブの搾りかすまたはオリーブの葉の中に存在する）をアシル化剤、即ち、少なくとも１個のＲを含むアシル基を有する有機酸もしくはエステルと反応させることによっておこなわれる。この場合、アシル基中のＲはＨ、炭素原子数が１〜３１の線状もしくは分枝状のアルキル基、炭素原子数が３１までのアルケニル基またはアリール基を示す。
【００１５】
本発明方法によって製造されるエステル類は食品、化粧品および薬剤の添加剤として使用することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
位置選択性エステル化反応法は次の工程（ａ）および（ｂ）を含む：
（ａ）触媒の存在下において、ヒドロキシチロソールもしくは天然のヒドロキシチロソールエステル（オレウロペイン、オレウロペインアグリコン）をアシル化剤と０〜１５０℃で３０分間〜１ヶ月間接触させる（ヒドロキシチロソール／アシル化剤の濃度比＝１０：１〜１：１０００）。
（ｂ）上記の工程で得られるヒドロキシチロソールエステルを分離して精製する。
【００１７】
アシル化剤は、少なくとも１個のアシル基Ｒを有するエステルまたは有機酸である。前記の一般式における基ＲはＨ、アルキル基、アルケニル基またはアリール基であってもよい。アルキル基は、炭素原子数が３１までの線状および／または分枝状アルカンから誘導されるいずれの基であってもよい。アルケニル基は、炭素原子数が３１までの線状または分枝状アルケン（１もしくは複数の不飽和結合を炭素鎖のいずれかの位置に含む）から誘導されるいずれの基であってもよい。アリール基はフェニル基またはその置換誘導基である。
【００１８】
アシル化剤が有機酸のときには酸性触媒が使用され、また、アシル化剤がエステルのときには酸性触媒もしくは酵素触媒が使用される。アシル化剤がエステルの場合、反応の位置選択性は少なくとも９５％である。
【００１９】
上記の反応は不活性溶剤および酸性触媒もしくは酵素触媒の存在下でおこなう。溶剤はエステル、エーテルおよびハロゲン化炭化水素から成る群から選択される。
【００２０】
触媒は鉱酸、リン酸、有機スルホン酸またはリパーゼであってもよい。硫酸を存在させる場合、反応は周囲温度において３０分間〜２４時間でおこなわれる。
【００２１】
本発明方法には、接触工程後、得られるヒドロキシチロソールエステルの分離と精製工程が含まれる。
【００２２】
本発明方法によって得られるヒドロキシチロソールエステルは食品配合物、化粧品および薬剤の添加剤として使用することができる。得られる反応生成物は、エステルを分離することなく、精製処理に付す前の状態で上記の適用対象の添加剤として使用することができる。
【００２３】
特に、食品配合物に使用する場合、得られるエステルは単独で使用してもよく、あるいはオルトジフェノール型もしくはジテルペン型の他の天然の抗酸化剤と併用してもよい。この場合、該エステルの使用量は食品の無極性相中の抗酸化剤の全濃度が２００ｐｐｍを越えないようにする。
【００２４】
本発明は、本発明方法によって得られるヒドロキシチロソールエステルを添加剤として単独で含有するか、またはオルトジフェノール型もしくはジテルペン型の他の天然の抗酸化剤と併用する食品配合物にも関する。この場合、食品の無極性相中の抗酸化剤の全濃度は２００ｐｐｍを越えないようにする。
【００２５】
さらに本発明は、本発明方法によって得られるヒドロキシチロソールエステルを含有する化粧品および薬剤にも関する。
【００２６】
本発明は、ヒドロキシチロソールもしくは天然のヒドロキシチロソールエステル（オレウロペイン、オレウロペインアグリコン）およびアシル化剤（少なくとも１個のアシル基Ｒを含有するエステルまたは有機酸）を出発物質とする式（Ｉ）で表されるヒドロキシチロソールエステル［２−（３,４−ジヒドロキシフェニル）エタノール］の新規な製造方法を提供する：
【化４】
2005531641.tif 000005
（式中、ＲはＨ、炭素原子数が１〜３１の線状もしくは分枝状アルキル基、炭素原子数が３１までのアルケニル基またはアリール基を示す）
【００２７】
ヒドロキシチロソールは合成によって得られるものであってもよく［Ｒ．カパッソら、J. Agric. Food. Chem.、第４７巻（１９９９年）、第１７４５頁；Ｃ．バイら、J. Agric. Food. Chem.、第４６巻（１９９８年）、第３９９８頁；Ｒ．ベルヘら、Bull. Liaison Group Polyphenols、第１５巻（１９９２年）、第２３７頁；Ａ．ビアンコら、Synth. Comun.、第１８巻（１９８８年）、第１７６５頁；Ｐ．Ｇ．バラルジら、Liebigs Ann. Chem.、第８３巻（１９８３年）、第６８４頁；Ｊ．Ｃ．スピンら、J. Agric. Food. Chem.、第４９巻（２００１年）、第１１８７頁］、あるいは天然に存在するものであってもよい。オレウロペインおよびオレウロペインアグリコンは天然に存在する。
【００２８】
ヒドロキシチロソール並びにオレウロペインおよびそのアグリコンはオリーブの果実、オリーブ油、オリーブの葉、オリーブ油もしくは食卓用オリーブの製造時に得られる廃棄物中に含まれており、また基本的にはスペイン風グリーンオリーブの製造時に得られる廃水、オリーブの搾りかすおよび植物水（vegetable water）中に含まれている［Ｍ．Ｊ．アミオトら、J. Agric. Food. Chem.、第３４巻（１９８６年）、第８２３頁；Ｒ．ブリアンテら、J. of Biotechnol.、第９３巻（２００２年）、第１０９頁；Ｍ．ブレネスら、J. Agric. Food. Chem.、第４３巻（１９９５年）、第２７０２頁；Ｒ．マテオスら、J. Agric. Food. Chem.、第４９巻（２００１年）、第２１８５頁；Ｒ．キャパッソら、J. Agric. Food. Chem.、第４７巻（１９９９年）、第１７４５頁；Ｒ．キャパッソら、Agrochimica、第３８巻（１９９４年）、第１６５頁；Ｒ．キャパッソら、Phytochemistry、第１２巻（１９９２年）、第４１２５頁；Ｅ．ラガッツィら、Ann. Chim.、第５７巻（１９６７年）、第１４７６頁；Ｒ．キャパッソら、Appl. Biochem. Biotechnol.、第６０巻（１９９６年）、第３６５頁；Ｌ．Ｍ．パニッツィら、Gazz. Chim. Ital.、第９０巻（１９６０年）、第１４４９頁］。
【００２９】
この明細書で使用する「炭素原子数が１〜３１のアルキル基」という用語は、炭素原子数が３１まで（３１も含む）の線状もしくは分枝状のアルカンから誘導されるいずれのアルキル基も含む。
【００３０】
同様に、「炭素原子数が１〜３１のアルケニル基」という用語は、炭素原子数が３１まで（３１も含む）の線状もしくは分枝状アルケン（炭素鎖中のいずれらの位置に１もしくは複数の不飽和結合を有する）から誘導されるいずれのアルケニル基を含む。
【００３１】
さらに、「アリール基」という用語は、フェニル基または１もしくは複数のいずれかの特性を有する置換基を有するベンゼン誘導基を含む。
【００３２】
本発明による化合物（Ｉ）の合成は、先に説明したいずれかの方法によって得られる合成ヒドロキシチロソール（II）または前述のいずれか記載の入手源から得られる天然物、即ち、ヒドロキシチロソール（II）、オレウロペイン（III）およびオレウロペインアグリコン（IVおよびＶ）に有機酸またはエステルを反応させることによっておこなわれる（これらの式中のＲは前記と同意義である）。この反応は、以下の反応スキームに従って、加熱温度もしくは周囲温度において、アシル化剤が有機酸のときは酸性触媒の存在下でおこない、アシル化剤がエステルのときは酸性触媒もしくは酵素触媒の存在下でおこなう。
【００３３】
【化５】
2005531641.tif 000006
【００３４】
酸性触媒としては、酸性を示すいずれの物質も使用することができるが、次の化合物が好ましい：硫酸（Ｈ２ＳＯ４）、塩酸（ＨＣｌ）、リン酸、トリフルオロ酢酸（ＣＦ３ＣＯＯＨ）、酢酸（ＣＨ３ＣＯＯＨ）、ｐ−トルエンスルホン酸（ＣＨ３−Ｃ６Ｈ４−ＳＯ３Ｈ）およびカンフォールスルホン酸（Ｃ１０Ｈ１６ＨＯ４Ｓ）。酵素触媒としては、エステラーゼ活性もしくはリパーゼ活性を有する粗製もしくは精製のいずれの酵素も使用することができるが、好ましくはブタの膵臓リパーゼ（ＰＰＬ）、パパインまたはウマ、ブタ、ウシ、ウサギもしくはヒツジの肝臓エステラーゼである。
【００３５】
上記の反応は不活性溶剤の不存在下もしくは存在下でおこなうことができる。
【００３６】
本発明方法によって得られるヒドロキシチロソールエステルの抗酸化能を調べたところ、酸化に対しては、遊離のヒドロキシチロソール自体の場合と同じ活性を示すことが判明した。ヒドロキシチロソール自体に比べてヒドロキシチロソールエステルの有利な点は、脂質環境（油、ラード、脂肪等）に対する溶解性が高いことである。従って、式（Ｉ）で表される化合物は食品工業と化粧品工業における抗酸化性添加剤として有用である。さらに、この種のヒドロキシチロソールエステルはヒドロキシチロソールの場合と類似の薬理学的効果を示し、しかもこの効果はこれらの分子の油溶性に起因して後者の場合よりも大きい。
【００３７】
従来技術に比べて、本発明方法は次の利点を有する。
（１）エステル交換反応によるヒドロキシチロソールエステルの製造は本発明によって初めて可能となった。
（２）容易に除去可能な触媒が使用できるので、反応後の精製処理は不要となる。
（３）本発明方法によれば、ＲＣＯＸ試薬の特性を単に変更させるだけでいずれのヒドロキシチロソールエステルも原則的には合成することができる。
（４）反応は高い化学的収率を伴っておこなわれる。
（５）ヒドロキシチロソールアセテートを合成するための従来法に比べて、より簡単かつ効率的な方法である。
【００３８】
（６）本発明方法によって得られるヒドロキシチロソールエステルは脂質に対して高い可溶性を示すとともに苦味を呈することもない。
（７）この種のエステルの抗酸化活性は、現在使用されている他の添加剤（トコフェロールおよびＢＨＴ）の場合よりも高い。
（８）この種のエステルは、ヒドロキシチロソールまたは前述のオリーブ油（植物水）の製造時の廃水並びに固体状廃棄物（搾りかす）およびオリーブの葉に豊富に存在して既知の方法で抽出できる天然のヒドロキシチロソール誘導体を出発原料として調製することができる。これによってオリーブの圧搾機からの廃棄物の有効利用が可能となる。
（９）天然の動物の脂肪およびまたは植物油中に存在する脂肪酸（例えば、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸等）の残基Ｒを有するヒドロキシチロソールエステルを容易に調製することができ、この種のエステルはヒトの食品や薬剤用の抗酸化性添加剤として有効に利用可能である。
【実施例】
【００３９】
本発明を以下の実施例によって説明するが、これらの実施例は本発明の範囲を限定するものではない。
実施例１：２−(３,４−ジヒドロキシフェニル）エチルアセテート［ヒドロキシチロソールアセテート］の調製
方法Ａ（出発原料：ヒドロキシチロソール）
酢酸エチル（２ｍｌ）にヒドロキシチロソール（II)(５０ｍｇ）を溶解させた溶液に粗製ブタ膵臓リパーゼ（アルドリッチ社製)(５０ｍｇ）を添加し、得られた混合物を４８時間撹拌した。得られた懸濁液をセライトによる濾過処理に付し、溶剤を真空蒸発させることによって純粋なヒドロキシチロソールアセテートを得た（収率：８６％）。
【００４０】
方法Ｂ（出発原料：オレウロペイン）
酢酸エチル（４ｍｌ）にオレウロペイン（III)(５０ｍｇ）を溶解させた溶液に１２Ｎ塩酸（０．４ｍｌ）を添加し、得られた混合物を４０℃で１６時間撹拌した。得られた懸濁液を炭酸水素ナトリウムの飽和溶液で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥させ、次いで濾過処理に付した後、蒸発処理に付すことによって生成物残渣を得た。この生成物をカラムクロマトグラフィーで精製することによって純粋なヒドロキシチロソールアセテートを得た（収率：７２％）。
【００４１】
生成物の核磁気共鳴スペクトロスコピー（ＮＭＲ）のデータを以下に示す。
１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ６） δ：６．６３（ｄ，１Ｈ）、６．６０（ｄ，１Ｈ）、６．４６（ｄｄ，１Ｈ）、４．１０（ｔ，２Ｈ）、２．６８（ｔ，２Ｈ）、１．９７（ｓ，  ３Ｈ）ｐｐｍ
１３Ｃ （ＤＭＳＯ−ｄ６） δ：１７０．２、１４５．０、１４３．７、１２８．５、１１９．４、１１６．１、１１５．５、６４．６、３３．５、２０．６ｐｐｍ
マススペクトロメリー（ＭＳ）のデータを以下に示す。
計算値（Ｃ１０Ｈ１３Ｏ４［Ｍ＋Ｈ］＋）：１９７．０８１３８４
ＨＲＭＳ（Ｃ１）による測定値      ：１９７．０８１３６（６．３ｐｐｍ）
また、元素分析のデータを以下に示す。
計算値（Ｃ１０Ｈ１２Ｏ４）：Ｃ７５．５９、Ｈ１０．６４
測定値                ：Ｃ７６．３２、Ｈ１０．９１
【００４２】
実施例２：２−(３,４−ジヒドロキシフェニル）エチルオレエート［ヒドロキシチロソールオレエート］の調製
方法Ａ（出発原料：エチルオレエート）
エチルオレエート（１．０ｍｌ）にヒドロキシチロソール（II)(５０ｍｇ）を溶解させた溶液にｐ−トルエンスルホン酸（５ｍｇ）を添加し、得られた混合物を６０℃で２４時間撹拌した。反応混合物を冷却させた後、ＮａＨＣＯ３の飽和溶液を用いて洗浄し、次いで有機フラクションを集めて無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、精製用クロマトグラフィーカラム内へ導入させることによって純粋なヒドロキシチロソールオレエートを得た（収率：７６％）。
【００４３】
生成物の分析データを以下に示す。
ＮＭＲのデータ
１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ６） δ：６．６２（ｄ，１Ｈ）、６．５９（ｄ，１Ｈ）、６．４４（ｄｄ，１Ｈ）、５．３１（ｍ，２Ｈ）、４．１０（ｔ，２Ｈ）、２．６７（ｔ，２Ｈ）、２２３（ｔ，２Ｈ）、１．９７（ｑ，４Ｈ）、１．４７（ｍ，２Ｈ）、１．２５（ｍ，２０Ｈ）、０．８４（ｔ，３Ｈ）ｐｐｍ
１３Ｃ （ＤＭＳＯ−ｄ６） δ：１７２．７、１４５．０、１４３．７、１２９．６、１２８．５、１１９．３、１１６．１、１１５．４、６４．５、３３．７、３３．４、３１．２、２９．０、２８．９、２８．７、２８．６、２８．５、２８．４、２８．３、２６．５、２４．３、２２．０、１３．８ｐｐｍ
ＭＳのデータ
計算値（Ｃ２６Ｈ４３Ｏ４［Ｍ＋Ｈ］＋）：４１９．３１６１３５
ＨＲＭＳ（Ｃ１）による測定値      ：４１９．３１５４２７（１．７ｐｐｍ）
元素分析のデータ
計算値（Ｃ２６Ｈ４２Ｏ４・１／２Ｈ２Ｏ）：Ｃ７３．０７、Ｈ１０．０７
実測値                              ：Ｃ７３．５８、Ｈ１０．４８
【００４４】
方法Ｂ（出発原料：オリーブ油）
オリーブ油（０．５ｍｌ）にヒドロキシチロソール（II)(５０ｍｇ）を溶解させた溶液に硫酸（１滴）を添加し、得られた混合物を２４時間撹拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ３の飽和溶液で洗浄し、有機フラクションを集めて硫酸ナトリウムで乾燥させ、次いで溶剤を蒸発させた。残存オリーブ油で希釈されたヒドロキシチロソールの脂肪エステル混合物（主成分はヒドロキシチロソールオレエートである）は精製処理に付さない状態でも使用に供することができる。精製することが望まれる場合には、該混合物をクロマトグラフィーカラムで精製することができる。なお、この精製処理によってヒドロキシチロソールオレエート（８３％）、ヒドロキシチロソールパルミテート（１１％）およびヒドロキシチロソールリノレート（６％）が得られた。
【国際調査報告】
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