(57)【要約】本発明はカプセルまたは錠剤、特にソフトカプセルまたはハードタブレットの調整用のヘテロキシラン組成物に関する。本発明は、ハードまたはソフトカプセルであって、少なくともヘテロキシランを、少なくとも軟化剤を、かつ少なくともゲル化剤を具備するカプセルのための、フィルム形成組成物に関する。本発明はまた前記組成から得られるフィルムに関する。本発明はさらに前記組成物または前記フィルムから得られるカプセルに係る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
カプセル製造のためのフィルム形成組成物であって、
−少なくとも一つのヘテロキシラン型化合物、
−少なくとも一つの可塑剤、および
−少なくとも一つのゲル化剤
を主に含むことを特徴とする組成物。
【請求項２】
前記ヘテロキシランはアラビノキシランであることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項３】
前記可塑剤は、好ましくは（ポリ）ヒドロキシル化化合物の群から、より好ましくはさらにグリセロール、ソルビトール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、マルチトール、トリアセチンまたはそれらの混合物を含む群から選ばれることを特徴とする請求項１または２記載の組成物。
【請求項４】
前記ゲル化剤はカラゲナン（ｋ−カラゲナンおよびｌ−カラゲナン）、ジュランガム、ペクチンまたはそれらの混合物から選ばれることを特徴とする上述の請求項のいずれか１項記載の組成物。
【請求項５】
−２０乾燥重量％〜９９乾燥重量％のヘテロキシラン、
−５乾燥重量％〜４０乾燥重量％の可塑剤、および
−０．１乾燥重量％〜２０乾燥重量％のゲル化剤
を含むことを特徴とする上述の請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
少なくとも１つの増量剤を付加的に含むことを特徴とする上述の請求項のいずれか１項記載の組成物。
【請求項７】
前記増量剤は、スクロース、フラクト−ス、デンプン、セルロース、マルトデキストリン、シリアルおよびノンシリアル粉のような炭水化物、カルシウム、ナトリウムまたはカリウム塩ような鉱物充填剤、またはそれらの混合物を含む群から選ばれ、好ましくはデキストロース等量の５〜４０を有するマルトデキストリンであることを特徴とする前述の請求項記載の組成物。
【請求項８】
０乾燥重量％〜７０乾燥重量％の増量剤を含むことを特徴とする前述の請求項記載の組成物。
【請求項９】
前記へテロキシラン型の前記化合物は、好ましくはとうもろこし、ライ麦もしくは米のぬかまたはそれらの混合物から抽出されることを特徴とする上述の請求項のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１０】
前記へテロキシラン型の前記化合物は、好ましくは１００００〜３０００００ｇ／ｍｏｌのモル質量を有すことを特徴とする上述の請求項のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１１】
−酸化チタン、酸化鉄、パテントブルー、キノリンイエロー、オレンジイエローＳ、コチニールレッドＡまたはクロロフィリン−銅錯体からなる群から特に選ばれる着色剤、
−アスコルビン酸、トコフェロール、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）またはブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）のような酸化防止剤、
から選ばれる、添加物または添加物の混合物を付加的に含むことを特徴とする上述の請求項のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１２】
−０〜３乾燥重量％の着色剤、および／または
−０〜３乾燥重量％の抗酸化物
を含むことを特徴とした上述の請求項のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１３】
溶液、好ましくは水溶液の形態であることを特徴とする上述の請求項のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１４】
２５〜８０重量％の水を含むことを特徴とした前述の請求項記載の組成物。
【請求項１５】
フィルムを製造するための請求項１ないし１４のいずれか１つ記載の組成物の使用。
【請求項１６】
請求項１ないし１４のいずれか１つ記載の組成物からまたは上述の請求項記載の使用によって得られるフィルム。
【請求項１７】
以下の機械的特性；
−３０〜２５０Ｎの破断強度、
−２０〜１２０Ｎ・ｓ−１の弾性、
−２〜２０％の変形量
を有すことを特徴とする上述の請求項記載のフィルム。
【請求項１８】
請求項１ないし１４記載のいずれか１項記載の組成物、または請求項１６または１７のいずれか記載のフィルムから得られるカプセル。
【請求項１９】
ソフトカプセルであって、
−６０〜９９乾燥重量％の少なくとも１つのヘテロキシラン、
−５〜４０乾燥重量％の少なくとも１つの可塑剤、
−０．１〜２０乾燥重量％の少なくとも１つのゲル化剤、
−０〜７０乾燥重量％の少なくとも１つの増量剤
を含むことを特徴とするソフトカプセル。
【請求項２０】
ハードカプセルであって、
−２０〜９０乾燥重量％の少なくとも１つのヘテロキシラン、
−１０〜３０乾燥重量％の少なくとも１つの可塑剤、
−５〜２０乾燥重量％の少なくとも１つのゲル化剤、
−０〜７０乾燥重量％の少なくとも１つの増量剤
を含むことを特徴とするハードカプセル。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の技術分野は一般的に、フィルム形成組成物に係る。さらには特に、本発明はカプセルの調製のためのヘテロキシランに基づく組成物に係る。
【背景技術】
【０００２】
説明するカプセルは、今日、薬学、植物療法、または食品製造に広く使用されるデバイスであるハードまたはソフトカプセルを意味すると理解される。
【０００３】
一般的に楕円形である薬学的ハードカプセルは、液体または準固体薬剤用に使用されるソフトカプセルとは対照的に、主に固体活性成分のまとまった投与量の摂取を意図した固体投与剤（ボウマンおよびオフナー、２００２）に分類される。
【０００４】
カプセルはまた、その味および／または臭気が不愉快である製品を保存することを可能にする。
【０００５】
ハードカプセルの調製は典型的に可塑剤、着色剤、および保存料などのような添加物が添加された動物性ゼラチンを元にして行われる。
【０００６】
これらゼラチン基デバイスの調製は「Pharmacotechnie Industrielle」（Rosetto, 1998, Ed. IMT）に記載されている。
【０００７】
しかし、牛海綿状脳症（BSE）に関連する周知の健康問題の出現、および従来ゼラチン分離に使用された動物組織におけるそれらのベクター発見のため、この技術分野の科学界および工業界は摂取させる製品において動物起源のゼラチンを使用することから生じる危険に気付き始めた。
【０００８】
ゼラチンと代替が可能なカプセル製品の開発はそれ故に、本技術分野の多くの会社にとって重要な研究領域となった。
【０００９】
ゼラチンの代用品はその結果、デンプンのようなものが考えられた。押し出し法を使って、工業的にデンプンカプセルの製造が可能になった（Targit（登録商標） Technologies, VILIVALAMら, 2000）。
【００１０】
ある特許はまた、ジェランガムおよびマンナンのような他の種類の親水コロイドを併用する、主なフィルム形成剤としてのｋ−カラゲナンからのハードカプセルの製造を提案し出願されている（US-B-6,214,376）が、この製法はまだ工業的な見込みがない。
【００１１】
研究はまた、その調製はセルロースエーテルに基づき、かつゼラチンフィルムと同様の機械的特性および気体、液体からの障壁を有するフィルムを開発するために行われている。
【００１２】
実際、植物の細胞壁から優勢的に抽出される本来のセルロースは、かなり多量なポリマー内の分子内水素結合、およびそれらの溶媒和を制限する結晶度の高さのために、水に不溶である。
【００１３】
一方、結晶単位の形成を阻害する連鎖置換に沿って導入することで、このポリマーを溶解することがそれから可能になり、これはエーテル化を成し遂げる。
【００１４】
従って、セルロースを水酸化ナトリウムと反応させ、かつそれから塩化メチルと反応させることで、プロピレンオキシド、またはナトリウムモノクロロアセテート、メチルセルロース（ＭＣ）、ヒドロプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロプロピルセルロース（ＨＰＣ）およびカルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ）が生成される。
【００１５】
これらの化合物は透明で、固体でありながら柔軟で、水に可溶であり、かつ油分および脂肪に対して耐性のあるフィルムの製造を結果的に可能にする（NISPEROS=CARRIEDO, 1994）。
【００１６】
これらのセルロース派生物の中で最も特にＨＰＭＣは、薬学的なハードカプセルの適用において、ゼラチンの代替品として使用される。
【００１７】
工業的に、単独のゲル化剤（EP-A-0 056 825）として、またはカラゲナン（EP-A-0  592 130, EP-A-1 029 539）と併用して使用されることで、より低いという溶解速度を除いてゼラチンカプセルと同様の特性を有すカプセルを得ることが可能になる。
【００１８】
しかし、これらのカプセルは技術的および商業的に都合がいいにもかかわらず、それらは欠点を有す。化学的な由来として、カプセルに収容される所定の活性物質との相互作用が予想される。警告の本質はそれゆえに食品工業での使用を避けることを必要とする。
【００１９】
医学的および食品工業はいまだに、ゼラチンが植物起源の１つまたは複数の構成成分で置換されたものであり、消費者への危険を引き起こさず、その製造がゼラチンベースのカプセルと比べて許容範囲外の付加的コストを生み出さず、かつ後者と同様のタイプの機械的および溶解特性を示すカプセルを切望している。
【００２０】
ヘテロキシラン、特にアラビノキシランのハードまたはソフトカプセルの製造用組成物におけるフィルム形成構成成分としての使用は、目新しいきっかけ、および特に安全性、製造コストおよび製品フィルムの質の点で好都合に上述の化合物の使用に替わるものを構成できたことを論証することは出願人の称賛に値する。
【００２１】
ヘテロキシランは、とうもろこし製粉工業の副生成物であるとうもろこしぬか（とうもろこしの種の末梢部）に多量に存在しているが、ライ麦および米のぬかにも膨大な量が見出される場合がある。これらとうもろこしぬかのほとんどは現在、動物の餌として意図され、かつほんのわずかな量が飲食用繊維として使用される。とうもろこしぬかは主にセルロース（１０〜２０％）、およびヘテロキシラン（４０〜５０％）からなる。とうもろこしぬかに含まれるヘテロキシランの高抽出収率（９０％を超える）はポリマーの分子量の明らかな減少を見せることなしに得ることができる。
【００２２】
ヘテロキシランは細胞壁に位置する植物多糖類（側膜多糖類）であり、かつヘミセルロース群に属する。それらはセルロース系側膜多糖類で最も豊富にある。それらは様々な型と数の側鎖を置換されたβ−１，４結合のキシロピラノースの直線状の骨格を具備する。β−１，４型のグリコール結合は比較的直線状の配座を与える。β−１，４キシランのヘリックス配座は、セルロースの場合は二つであるがそれは単一の水素結合のみで安定化されているため、キシロースとグルコースに類似であるにもかかわらずセルロースのものより柔軟である。この結合はキシラン残基の３位の水酸基の水素とすぐ隣の５位の酸素との間に確立される。キシランが置換されるとき、それらは３位にてそれらの酸素で、およびさらにまれに２位にてそれらの酸素で置換される。側鎖の性質、それらの形およびキシロース骨格上でのそれら分岐の形態はひとつのへテロキシランと他のものとは違う構造要素である。
【００２３】
とうもろこしぬかから得られたヘテロキシランにおいて、キシロースは単糖類のおよそ半分、アラビノ−スはそのおよそ三分の一を構成するので、従ってそれらはアラビノキシランいう名前である。それに次いでガラクト−ス、グルコロン酸およびフェルラ酸が他の構成要素である。ヘテロキシランの分子量は１０００００〜２５００００ｇ／ｍｏｌで変化し、この可変性は使用される抽出形態または分析されるヘテロキシランを構成する糖類を決定するために使用される分析方法の違いで特に説明される。それゆえにそれらの重合度は７００〜１８００である。
【００２４】
ヘテロキシランは一般的にアルカリ媒体で抽出される。ヘテロキシラン抽出法の種類に依存してヘテロキシランの３つの主な種類すなわち、浄化されてないもの、適度に浄化されたものおよび高純度の製品にそれぞれ相当する、等級Ｃ、ＢまたはＡへテロキシランが得られる。
【発明の開示】
【００２５】
本発明の第１の目的は、薬学、植物療法または食品の部門で使用することができるカプセルの製造に使用されるフィルムの形成を意図した組成物の提供である。
【００２６】
本発明の第２の目的は、最良の考えられる視覚的および外見、およびカプセルの製造に使用されるように成形かつ意図される能力を有すフィルムを提供することである。
【００２７】
本発明の第３の目的は、この組成物またはこのフィルムからカプセルを得ることである。
【００２８】
他の間で、これらの目的は、
−ヘテロキシラン型の少なくとも１つの化合物、
−少なくとも１つの可塑剤、および
−少なくとも１つのゲル化剤、
を含む、カプセル製造用のフィルム形成組成物に関する本発明により達成される。
【００２９】
好ましくは、このような組成物はハードカプセルを生成させるように意図されたものである。
【００３０】
注目すべきことに、この組成物で使用されるヘテロキシランはアラビノキシランである。
【００３１】
有利的に可塑剤は好ましくは（ポリ）ヒドロキシル化化合物の群から、より好ましくはグリセロール、ソルビトール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、マルチトール、トリアセチンまたはそれらの混合物を含む群から選ばれる。
【００３２】
有利的にこのゲル化剤は、好ましくは植物起源であり、カラゲナン（ｋ−カラゲナンおよびｌ−カラゲナン）、ジュランガム、ペクチンまたはそれらの混合物から選択される。
【００３３】
好ましい変形に従い、乾燥基準において前記組成物は、
−６０〜９９乾燥重量％のアラビノキシラン、
−５〜４０乾燥重量％の可塑剤、および
−０．１〜２０乾燥重量％のゲル化剤、
を含む。
【００３４】
さらにより有利的には、前記組成物は付加的に少なくとも１つの増量剤を含む。この増量剤はスクロース、フラクト−ス、デンプン、セルロース、マルトデキストリン、シリアルおよびノンシリアル粉のような炭水化物、カルシウム、ナトリウムまたはカリウム塩ような鉱物充填剤、またはそれらの混合物を含む群から選ばれる。このような増量剤は、有利的にデキストロース等量の５〜４０を有するマルトデキストリンであってよい。
【００３５】
さらに好ましくは、前記増量剤は０〜７０乾燥重量％の割合で前記組成物に含まれる。
【００３６】
注目すべきことに、アラビノキシランは好ましくはとうもろこし、ライ麦または米のぬか、またはそれらの混合物から抽出される。
【００３７】
他の都合のよい変更に従い、本発明に従う組成物は、
−酸化チタン、酸化鉄、パテントブルー、キノリンイエロー、オレンジイエローＳ、コチニールレッドＡまたはクロロフィリン−銅錯体からなる群から特に選ばれる着色剤、
−アスコルビン酸、トコフェロール、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）またはブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）のような酸化防止剤、
から選ばれる、添加物または添加物の混合物を付加的に含む。
【００３８】
例えば、前記組成物は、
−０〜３乾燥重量％の着色剤、および／または
−０〜３乾燥重量％の酸化防止剤、
を含む。
【００３９】
注目すべきことに、前記組成物は溶液、好ましくは水溶液の形態で供される。
【００４０】
この注目すべき特徴に従って、前記組成物は水を２５〜８０重量％含む。
【００４１】
本発明の他の目的はフィルムを生成するための上述の組成物の使用に係る。
【００４２】
本発明の他の目的は前記組成物から得られる、またはそのような組成物の使用に基づくフィルムに係る。
【００４３】
注目すべき特徴に従い、このフィルムは以下の機械的特性；
−３０〜２５０Ｎの破断強度、
−２０〜１２０Ｎ・ｓ−１の弾性、
−２〜２０％の変形量
を有す。
【００４４】
本発明のさらに他の目的は、前記組成物または本発明に従うフィルムから得られるカプセルに係る。
【００４５】
これらのカプセルはハードまたはソフトカプセルであってよい。
【００４６】
有利的に、ソフトへテロキシランカプセルは、多量の可塑剤を有し、かつゲル化剤をごくわずかまたは全く有さない組成物から生成される。このようなカプセルは例えば、
−６０〜９９乾燥重量％の少なくとも１つのヘテロキシラン、
−５〜４０乾燥重量％の少なくとも１つの可塑剤、
−０．１〜２０乾燥重量％の少なくとも１つのゲル化剤、
−０〜７０乾燥重量％の少なくとも１つの増量剤
を含む。
【００４７】
こうして得られるカプセルは５〜１８％の最終水分を有す。
【００４８】
ハードへテロキシランカプセルは、それらの一部としてとして、比較的、少ない可塑剤、および一般的に多いゲル化剤を含む組成物から生成される。従ってハードカプセルは；
−２０〜９０乾燥重量％の少なくとも１つのヘテロキシラン、
−１０〜３０乾燥重量％の少なくとも１つの可塑剤、
−５〜２０乾燥重量％の少なくとも１つのゲル化剤、
−０〜７０乾燥重量％の少なくとも１つの増量剤
を含んでよい。
【００４９】
こうして得られるカプセルは一般的に５〜１８％の最終水分を有す。
【００５０】
これらのカプセルの調製のために使用される方法は当業者に知られ、かつ一般的に使用される方法から選ばれる。
【００５１】
発明は、少しも限定されない以下の例の助力、図面の参照をもってより鮮明に理解されるだろう。
【００５２】
例；
例１；とうもろこしぬかから分離したヘテロキシランの重量組成
ヘテロキシランの抽出は、Chanliaudらによって記載された手順（Journal of cereal Science, 21, pp. 195-203, 1995）に従って行われる。工業的に開発されることができ、かつヘテロキシランの様々な等級（等級“Ａ”、“Ｂ”または“Ｃ”ヘテロキシラン）を使用できる方法を得るために、変形が導入されてきている。
【００５３】
１）等級“Ｃ”ヘテロキシランの調製
とうもろこしぬかヘテロキシランはアルカリ媒体（ｐＨ：１１−１２）内で、石灰（飽和Ｃａ（ＯＨ）２、１．５Ｍ水酸化カリウム）を用い、かつ高温（約９０〜１００℃で２時間）で抽出される。固体／液体分離は、ヘテロキシランリッチの溶液を、特にセルロース、たんぱく質および炭水化物からなる混合物から分離することを可能にする。前記溶液は酸、好ましくは硫酸または塩酸で中和される。
【００５４】
等級“Ｃ”ヘテロキシランの液体抽出物はこうして得られ、約１５％の乾燥抽出物を得るために濃縮されてもよい。こうして得られた抽出物はそれから、約５５乾燥重量％〜約７０乾燥重量％の等級“Ｃ”ヘテロキシランおよび、塩（約１０％〜約２０％）およびヘテロキシランを着色できるポリフェノール、タンニンのようなほかの物質を多量に含む等級“Ｃ”ヘテロキシランパウダーを得るために、乾燥、好ましくは噴霧乾燥をされることができる。
【００５５】
２）等級“Ｂ”ヘテロキシランの調製
アルカリ抽出、固体／液体分離および中和工程の終わりに上で得た等級“Ｃ”ヘテロキシランの液体抽出物は、３％未満の塩基準を有す等級“Ｂ”ヘテロキシラン液体抽出物を得るために、限外濾過による脱イオン工程にかけられる。
【００５６】
こうして得られた等級“Ｂ”ヘテロキシラン液体抽出物または限外濾過濃縮水はそれから、乾燥材料の約１５重量％のヘテロキシランを含む等級“Ｂ”ヘテロキシランの抽出物を得るために濃縮される。そうやって得られた抽出物は、約７１％〜８０％のヘテロキシランを含む等級“Ｂ”ヘテロキシラン粉、この粉はわずかに色付きかつポリフェノールを含む、を得るために、乾燥、好ましくは噴霧乾燥を受けることができる。
【００５７】
３）等級“Ａ”ヘテロキシラン調製
アルカリ抽出、固体／液体分離、中和および限外濾過による脱イオンの工程の終わりに上で記載されたように得られた３％未満の塩基準を含む等級“Ｂ”ヘテロキシランの抽出物は、等級“Ｂ”ヘテロキシランに存在する沈殿物およびポリフェノールの存在に支配的に連繋される薄茶色をそれぞれ除去する目的で、脱塩および脱色によって純化される。
【００５８】
従って、脱イオン工程後、ヘテロキシランはエタノールからの析出もしくは様々なイオン交換樹脂および／または吸着樹脂に連続的に通すことで純化される。
【００５９】
異なった脱色経路が、特に過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）型の強力な酸化剤の使用において見出される。食品処理市場用に意図されたヘテロキシランの製品に選択された方法はこのタイプの薬品ではなく、むしろ消費者および環境を鑑みた経路を使用する。
【００６０】
純化工程の終わりで得られた等級“Ａ”ヘテロキシラン抽出物は、等級“Ａ”ヘテロキシランを８１％よりも多く含有する等級“Ａ”ヘテロキシラン粉を得るために、乾燥、好ましくは噴霧乾燥を受ける。
【００６１】
純化されたヘテロキシランを形成する組成物は以下の表に表される。
【表１】
2005513255.tif 000002
【００６２】
これら等級“Ａ”ヘテロキシランの中で、本発明に従うフィルム形成組成物およびカプセルを製造するために使用されたのはアラビノキシラン（ＡＸ）であった。これら等級“Ａ”ＡＸは２５００００ｇ／ｍｏｌのモル質量を有す。
【００６３】
等級“Ｈ”アラビノキシランの使用もまた想像可能である。これらのアラビノキシランはヘミセルロース、特にキシラナーゼを使用する酵素的加水分解によって等級“Ａ”ヘテロキシランから得られる。これらのアラビノキシランは１０００００ｇ／ｍｏｌのオーダーのモル質量を有す。
【００６４】
例２：対照標準カプセルの選択
使用される対照標準の調製のための方法は：
工業的に使用されるものに近い浸漬液を得ることを可能にする商用カプセルの崩壊（deformulation）、すなわち決められた割合での溶解。それらはCAPSUGELによって配給されたゼラチンおよびＨＰＭＣカプセルである；
薬局方で認められ、文献に記載された割合と一致する、商用原料を使用するカプセルの調製、
の両方に基づく。
【００６５】
例３：原料および方法
３．１  浸漬液の調製
説明する浸漬液はカプセルの製造用支持体が浸漬される溶液と理解される。
【００６６】
３．１．１  使用する装置
溶液は；
ステンレスビーカー（直径（φ）＝７．５ｃｍ）＋カバー（熱ガラスぺトリ皿  φ＝８ｃｍ）内で、
磁気棒を使用し、磁気攪拌（０−１３００ｒｐｍ）をし、
恒温水槽内で、
調整される。
【００６７】
３．１．２  原料の混合
崩壊の場合には、カプセルは所定の量の水に単純に溶解するので問題はない。。
【００６８】
カプセルの調製の場合には、特に最も複雑で、乾燥材料を構成する原料の均質混合のオーダーが重要である。
【００６９】
実際、原料の水に対する親和性の違いが観察され、そこで、強親水性原料の水和は、それの前に溶液に導入された低親水性原料のものの浪費を起こす危険をあえて冒す。前記低水和性分子は接近する傾向があり、その接近は混合物の不十分な均一性、または塊をの形成さえも引き起こす。
【００７０】
さらに、ゲル化剤は、もし他の原料が既に水とゲル化網の冷却およびそれゆえにゲル強度に影響する相互作用を起こしていたなら、最大に水和する。
【００７１】
前記原料はそれ故に溶液に好ましくはそれらの水への親和性の順序で導入されるべきである。この場合それは；
１）ゲル化剤、
２）フィルム形成剤
３）増量剤
の可溶剤を含む。
【００７２】
可塑剤として使用されるグリセロールは液体の形態である。水に可溶なので、それゆえ水（ジェランガムの場合を除く）への他の粉末状の乾燥材料の導入に先立ちそれ故に均一混合する。
【００７３】
乾燥材料の可溶化
粉状の形態で導入される原料の良好な水和および可溶化をなすために、それらは工業方法に調和していわゆる成熟期になされるべきである。
【００７４】
前記原料は実際それらの可溶化の前に上述のものと同様の原理で水和を受けなくてはならない。もし他の原料が後で速やかに取り込まれるなら、可溶化を引き続いてもたらす水和相は崩壊させられる。
【００７５】
これらの原料はそれゆえに、溶液へのそれらの導入に従う時間の経過に対して１つずつ可溶化することをなす。
【００７６】
蒸発した水の補償
ビーカーを覆うカバーは浸漬液の調整中に全ての蒸発を防ぐのには十分でない。けれども、水の減少はその粘性の増加および冷却によるそのゲル強度の増加を引き起こす。
【００７７】
これら二つのパラメータを良好に調製することは非常に重要であることを考慮すると、我々はカプセルの製造中に粘性およびゲル強度の良好な再現性を有すことを可能にする、蒸発した水を補償するために選択した。
【００７８】
従って、調製した浸漬液の理論合計質量を知るのには、それから目方を量ることによる欠損質量を測量し、かつ水を加えることによってそれを補償することで十分である。
【００７９】
３．２  塗布によるフィルムの製造
３．２．１  使用する装置
フィルムは、調整した速度（４０ｍｍ／ｓ）で塗布をなす自動塗布器（Automatic Film Applicator 1137-SHEEN）の助力を、その一部に調節された塗布厚（０-２ｍｍ）をなす薄層クロマトグラフィーの手動塗布器（DESAGE HEIDELBERG）を併用して作られる。
【００８０】
フィルム形成液はリザーバーに流れ込みかつ所望の厚さで塗布される。フィルム用の支持体は、フィルムの剥離を促進する付着性ポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）で前もって被覆されたガラス板（５０×２０ｃｍ）である。
【００８１】
３．２．２  実行条件
フィルムの最終の厚さは従って１００−１１０μｍであるべきであり、塗布フィルム厚の調整を必要とする。
【００８２】
全ての調製が同様の乾燥材料（ＤＭ）の割合、または一定のＤＭにおいて同様の水保持容量を有す必要性を持たないので、塗布厚はそれ故に製品に従って変化できる。
【００８３】
それの良好な保存を確実にするために、二つの少量の保存剤、亜硫酸ナトリウムがサンプル調製物に添加された。
【００８４】
３．３  水切りによるハードカプセルの製造
カプセルの工業的製造用の条件は、カプセル形成の型としての支持体を使用し、かつ水平予備乾燥に続いて垂直乾燥をなすシステムを製造させることで再現された。
【００８５】
支持体の選択
選択された支持体は普通工業的に使用されるテフロン（登録商標・デュポン社製商品）およびステンレス製の支持体である。（雄雌性外皮の製造）
水切りシステム
支持体はカプセルの浸漬、水切りおよび乾燥工程中に回転することで移動できる。
【００８６】
回転速度は１００ｒｐｍに設定される（崩壊により得たゼラチンの対照標準サンプルに基づく）。
【００８７】
回転は、支持体が適合する棒に集積して取り付けられるモーターシステムによってなされる。
【００８８】
支持体の浸漬および引き上げは、一方では、手動でゆっくりかつ円滑になされる。
【００８９】
垂直から水平への移動はその軸でのシステムの手動回転によってなされる。この工程は水切りの間、支持体に均一に分配できるように、製品をカプセルの後部に蓄積させることをなす。
【００９０】
カプセル製造の条件は以下の表２にまとめられる。
【表２】
2005513255.tif 000003
【００９１】
カプセルの最終厚さは水切り時間に直接依存する。
【００９２】
ここで水切りはゲル化のそのキネティクスと共に液体の粘性によって決定される。高粘性およびゲル化の速いキネティクスを有す溶液は従ってあまり粘性がなく、かつゲル化が遅い溶液よりも、水切りが非常に少なくなる。
【００９３】
サンプルが浸漬液から脱した時間（Ｔｅ０）と、小滴が製品の欠陥を通って落ちないまたはゲル化のための時間（Ｔｅｍａｘ）との間、システムを水平に運ぶことで水切りを停止することが可能である。
【００９４】
３．４  乾燥方法
３．４．１  使用される装置
工業的に、乾燥は：
室温（２２−２８℃）よりも少し高い温度で
３５〜８５％の相対湿度（ＲＨ）で
なされる。我々はそれゆえに、ＲＨを調節しつつ恒温の換気されたオーブン（WTP Binder Labotechnik）を使用した。
【００９５】
３．４．２ 乾燥条件
乾燥条件は、それらの含水率に直接依存するカプセルの外見（特にもろさおよび厚さ）に大きな影響を及ぼす。ゆえに乾燥中の相対湿度の調整は重要である。
【００９６】
乾燥は３０℃−４０％ＲＨでなされる。
【００９７】
フィルムの場合、乾燥が完了する前にそれらをそれらＰＶＣ支持体から除去することがしばしば勧められ、実際に：
乾燥後に考えられる脆性によるサンプルの崩壊の回避；
それらがプレートに強く付着したとき、それらを剥離がそれほど困難でないこと、
の両方を可能にする。
【００９８】
同様の方法において、カプセルに対して、できるだけ早くそれらのテフロン（登録商標）またはステンレスの支持体からそれを剥離することが好ましい。容易な剥離をなすために、支持体は前もって食用植物油で油塗布されてもよい。
【００９９】
製品、フィルムまたはカプセルのそれらの支持体からの最短の剥離時間は、乾燥のキネティクスの概略的な考えを与えるために、測定される重要なパラメータである。
【０１００】
乾燥は最後に調節したＲＨにてカプセル含水率が安定化したとき完了する。
【０１０１】
カプセルは一旦乾燥されたらそれらの特性を保持することを可能にするねじ式キャップで閉鎖されるプラスチックボトルに室温にて包装される。
【０１０２】
フィルムのために一旦乾燥されたら、それらが貼りつかないように硫化紙の二枚のシート間にてアルミホイルで包装される。
【０１０３】
これらのフィルムおよびカプセルの特性は製造中およびその後、浸漬液から最終製品まで分析される。
【０１０４】
例４：対照標準カプセルの調製
４．１  商用カプセルの崩壊／再調製
崩壊方法は：
１）知られている特徴を有すゼラチンまたはＨＰＣＭカプセルを水に溶解させること、
２）同様の特徴を有すカプセルを、実験室系での製造方法を確立することで得ることを試みること
からなる。
【０１０５】
実際、商用のゼラチンおよびＨＰＭＣのカプセルは主に：
１２−１６％の間の含水率（Ｘｗ  単位％）、
１００−１１０μｍの間の厚さ（ｔ  単位μｍ）
で特徴付けられていてよい。
【０１０６】
もし類似でないならば、われわれはそれ故にあまり違いのない特徴を有すカプセルを得ようと努力した。
【０１０７】
商業的に利用可能なものと類似なゼラチンおよびＨＰＭＣベースのカプセルを得ることを可能にする操作条件は以下の表３に組分けされる。
【表３】
2005513255.tif 000004
【０１０８】
４．２  商用原料からの調製
上述のように、我々の原料を用いて調製された対照標準は商用の対照標準カプセルと同様の特性、特に見かけ、含水率および厚さを有すべきである。それゆえに前記調製物はさらに一致すべきである。
【０１０９】
（ａ）ハードゼラチンカプセルの調製
ゼラチンの選択
二つのタイプ、タイプＡおよびタイプＢがある。これらゼラチンのそれぞれは独立的にカプセルの製造に使用されてよいが、それらの組合せがそれらの特徴を最適化するために推奨される（AUGSBURGER, 1991）。
【０１１０】
１５０〜２８０ブルームのブルーム強度を有す二つのゼラチン：
タイプＡに属する、ゼラチンＰＳ２４０（Pig Skin 240 Bloom）
タイプＢに属する、ゼラチンＬＢ２００（Limed Bone 200 Bloom）
が調べられた。
【０１１１】
調製物の選択
多くの試行が商用カプセルと近い性質を有すカプセルを得ることを可能にする調製を仕上げることを目的として行われた。
【０１１２】
最適な調製は以下の表４にある。
【表４】
2005513255.tif 000005
【０１１３】
グリセロールはハードゼラチンカプセルの製造に最も広く使用される可塑剤であり、ならびにミネラルウォーターは水質の変化によって影響されない結果の再現性をなす。
【０１１４】
乾燥材料の含有率はゼラチンカプセルの崩壊で得られた結果に従って調節される。
【０１１５】
（ｂ）ＨＰＣＭカプセルの調製
ＨＰＣＭの選択
使用されるＨＣＰＭは以下のとおりである；METHOCEL（登録商標） E15 （DOW CHEMICAL（登録商標））。このＨＰＣＭは欧州薬学により認可されている。
【０１１６】
調製の選択
ゼラチンカプセルに対して行われた試みに従って、商業的に利用可能なものに近いカプセルを得ること可能にする調製物を決定するために、同様の試みがＨＰＭＣカプセルに対して行われた。
【０１１７】
この調製は以下の表５に表される。
【表５】
2005513255.tif 000006
【０１１８】
付加的なゲル化剤はアラビノキシランベースの調製に対して選択されるものと同様である。
【０１１９】
例５：  アラビノキシランベースカプセルの調製
アラビノキシランベースカプセルの二つの異なる調製：
マルトデキストリンを有さないハードＡＸカプセルの調製
マルトデキストリンを有すハードＡＸカプセルの調製
が作られ分析された。
【０１２０】
５．１ マルトデキストリンなしのハードＡＸカプセルの調製
５．１．１  分析された濃度
以下の表６は、マルトデキストリンなしのハードＡＸカプセル調製物の分析された濃度範囲を示す。
【表６】
2005513255.tif 000007
【０１２１】
５．１．２  ＡＸの溶解
ＡＸの１５％（全体の質量の）未満の量は７０℃に加熱された水（Volvic（登録商標））に容易に溶解したが、カプセルが最も均一な状態であるのは１０％の領域である。
【０１２２】
ゼラチンに対してのように、ＡＸの水に対する高親和性は：
−溶液への迅速な導入によるそれの予備可溶化、
−およびそれから、攪拌しながらそれを完全に可溶化させること
を可能にする。
【０１２３】
ゼラチンおよびＨＰＭＣと違い、ＡＸは浸漬液のオーバーランの問題を示さず、抗発泡剤の使用は工業的に前もって必要ではない。
【０１２４】
５．１．３  結果
二つの調製：
−ソフトＡＸカプセルを作ることを可能にするグリセロールおよそ２５％（ｗ／ｗ）含む第１；
−均一な外見とソフトな組織を有すハードカプセルをその部分で与えるグリセロールを２．４％（ｗ／ｗ）含む第２、
が選択された。
【０１２５】
これらの配合は以下の表７に表される。
【表７】
2005513255.tif 000008
【０１２６】
記：ジェランガムを熱溶液の粘性をわずかに増加させるために２５％グリセロールのＡＸ調製物に添加する。
【０１２７】
我々は故にそこから、ＡＸはハードカプセルだけでなくソフトカプセルをも簡単な調製によって製造することを可能にすると結論した。
【０１２８】
主なゼラチンおよびＨＰＭＣ対照標準と似ていて、３０秒の水切り時間は１００μｍの厚さを有するハードカプセルの製造を可能にする。
【０１２９】
前記カプセルは、非常に容易に２時間３０分―３時間でそれらの支持体から剥離されることができる。
【０１３０】
ＨＰＭＣ調製物のカプセルに対してのように、乾燥は３−４時間で完了すると考えられることができる。
【０１３１】
含水率は、対照標準サンプルでの測定値（平均１１％）以下の、９−１０％あたりで安定する。これは、ゼラチンやＨＰＭＣより低い“ＡＸ＋Gercarin（登録商標）”の調製物の低い水保有容量のためである。
【０１３２】
５．１．３：  結論
より好ましくは任意であるハードカプセルは、ゼラチンおよびＨＰＣＭ対照標準とすべてそれぞれ類似な外見および組織を有す。しかし浸漬液のＤＭ含有率は対照標準のもの未満で、全体質量の３０〜３５％の間にある。
【０１３３】
ＡＸおよびGelacarin（登録商標）ベースの調製がより良好に規定されるので、溶液に増量剤を導入することで多量のＤＭを取り込む調製の開発を探求した。
【０１３４】
５．２  マルトデキストリンを有すハードＡＸカプセルの調製
５．２．１  実施
我々は、それらの特徴を比較するために、一つは１０％のグリセロールを含み、他方は１２％含む二つのハードカプセルを研究すると決めた。浸漬液の調製およびカプセルの製造に使用される手順は前記３つの調製に対して同様である。
【０１３５】
以下の表８は、高いＤＭ含有率（端数切捨ての割合）を有すハードカプセルの製造を可能にする最適なＡＸベースの調製を分類する。
【表８】
2005513255.tif 000009
【０１３６】
５．２．２  結果
調整されたカプセルは、外形および組織に関して対照標準カプセルと類似であることが確認される。
【０１３７】
ＡＸ９に対して得られた結果は、３０秒の水切りが類似なカプセルを得ることを可能にすることを示す。
【０１３８】
前記結果は二つの調製がわずかに異なるＡＸ１０カプセルと類似である。
【０１３９】
例８：  粘度および浸漬液のゲル化キネティクスの測定
８．１  粘度の測定
使用される装置はRheometic Scientific SR 5000である。それは流動中および応力揺らぎ中の両方で測定を行うことが可能なレオメーターである（Dynamic Stress Rheometer）。
【０１４０】
しかし、測定のタイプを問わず、使用される回転子は５ｃｍの直径を有す平行板タイプの外形である。一方、測定法に依存して、エアギャップは：
流動中の測定では０．５ｍｍ、
動的測定では２ｍｍ、
であるように異なる。
【０１４１】
８．１．１  結果
平均粘度の結果は以下の表９に示す：
【表９】
2005513255.tif 000010
【０１４２】
重要な記：４０℃で測定された粘度は、ＡＸ２に対して９００ｍＰａ．ｓの平均結果を示す。しかし、この値は厳密にはこの温度での文献によって得られる限度内にはないのだが、それらは妥当な参考値としては高すぎる（１０００〜８０００ｍＰａ．ｓ）と判断した。それに応じて、我々は５５℃での測定を行うことを選んだ：この値は浸漬液のものであるため、その粘度は工業製品と比較することができる。
【０１４３】
８．１．２  考察
熟考のうえでの生成物であることにかかわらず、得られた曲線は典型的なレオ流動化挙動であり、生成物の粘度は応力の増加に応じて減少する。
【０１４４】
しかし、様々な挙動は、図１〜６で表されるように、組成物に依存すると明らかにされる。
【０１４５】
ゼラチンサンプルの粘度は低速度勾配（γ）で高いままである一方、ＡＸおよびＨＰＭＣ液は低い応力の値であるときからかなり低い粘度を有する。
【０１４６】
しかし、ＡＸおよびＨＰＭＣ液はゼラチン液と異なり迅速に安定化する粘度を有する。
【０１４７】
さらに、ＡＸおよびＨＰＭＣの溶液は高速度勾配を乗り越える（一般的に乱流レジムは６００ｓ−１前では起きない）一方、ゼラチン液は２５０ｓ−１の速度勾配（一般的には３００ｓ−１以上）から始まる乱流レジムに突入することができる。
【０１４８】
ＡＸおよびＨＰＭＣ溶液はそれ故にゼラチン溶液よりも高い応力に対してより安定である。
【０１４９】
溶液の挙動がニュートン挙動と比較可能なものを超える応力閾値は、ＡＸおよびＨＰＣＭに対するものはゼラチン溶液に対するものよりもあまり明白でない。これは１に向かい漸近する勾配値によっても明らかである。
【０１５０】
ＡＸおよびＨＰＭＣ溶液は、ゼラチンよりも、応力に対してより一定の反応を有する。
【０１５１】
他のサンプルは３回から６回しか繰り返さなかったが、崩壊によって得たゼラチンおよびＡＸ９になされる測定は９回繰り返された：これはより高い信頼区間を明白にする。
【０１５２】
さらに、この信頼区間はその調製物が作られた（ＨＰＭＣ ３５％）ＨＰＭＣにとって重要である。これは測定中に他のサンプルのものより高い溶液の粘度の増加により説明されることができる。この現象はエタノールの蒸発によって説明されることができる。
【０１５３】
総合的に、５５℃での浸漬液の粘度はそれゆえに我々の異なる生成物に対して目標であるとして測定された：その範囲は５００〜９００ｍＰａ．ｓである。
【０１５４】
しかし、ＡＸサンプルは実質的にゼラチン溶液のものより低い粘度を有す：もし我々の最も再現性のある測定法が考えられたなら（崩壊によって得たゼラチンと比較されるＡＸ９）、これらの粘度はＡＸに対して６００−８００ｍＰａ．ｓ、ゼラチンに対して７００−９００ｍＰａ．ｓである。
【０１５５】
平行して、我々は我々の液のゲル化のキネティクスを研究した。
【０１５６】
８．２  ゲル化キネティクス
定義により、二つのパラメーター：
−溶液の平均ゲル化時間
−このゲル化が起きる温度
がゲル化キネティクスの測定によって調べられる。
【０１５７】
８．２．１  ゲル化時間および温度
これらの測定はレオメーターで全てのサンプルに対して行われた。図１および２はそれぞれ平均ゲル化時間および平均ゲル化温度を表す。
【０１５８】
図３〜８は調べられたそれぞれの組成の、時間の関数としてのゲル化プロファイルを表す。
【０１５９】
８．２．３  考察
冷却条件はカプセルの製造と類似でありかつレオメトリー測定下であれば、ゲル化の開始時の測定と最大水きり時間のものとの類似性は証明される。実際、カプセルの製造中、ＨＰＭＣおよびゼラチン液に対してはわずか２分未満の水切りをなす一方、ここで測定されるようにＡＸ液に対しては５０秒さえの水きりもなさないですむことが可能である。
【０１６０】
冷却キネティクスは全てのサンプルに対して同様なので、それゆえより高いゲル化温度はＡＸ液に対しておよび対照標準に対して同時に得られる。
【０１６１】
最大ゲル強度（Ｇ’） は我々のＡＸ液に対して対照標準に対するものよりも高く測定されることができる（特に崩壊によって得られる対照標準の１０〜２００００に対して２０〜４００００Ｐａ）。しかし、ゼラチンおよびＨＰＭＣのゲルよりも早く形成した我々のＡＸゲルは、Ｇ’のさらなる減少を示し、室温において安定化するためにより時間がかかる。２５度での５分後のゲル強度は、対照標準のものと同様な、１０〜２００００Ｐａあたりで安定化する。
【０１６２】
８．３  結論
我々はこういう風に、商用の対照標準と同様の外見、組織および厚さの特性を有する、ＡＸベースのカプセルを製造することが可能であった。
【０１６３】
製造方法は実質的に類似である。標準的な厚さのカプセルの製造に対して必要な水きり時間のみがＡＸ液よりもわずかに低く、他の製造パラメーターは変化しないままである。
【０１６４】
この違いは対照標準と比べて低いＡＸ液の粘度により説明される。さらにこの低い粘性は、使用されたゲル化剤を加減することで実質的に改善されることができるゲル化の非常に高いキネティクスによって補償される。
【０１６５】
我々の製品の調製は標準的なカプセルの厚さのために最適化されるので、この最適化を含水率の基準において完了しようと試みた。
【０１６６】
例９  ハードカプセルの機械的および溶解特性の比較
研究が最も詳細に行われているので、我々は論理的に調製物ＡＸ９およびＡＸ１０によって得られたカプセルの性質決定の継続を決めた。
【０１６７】
これらのカプセルの機械的および溶解特性は測定され、かつ、いくらかの場合、カプセルとフィルムの両方を研究することによって対照標準ゼラチンおよびＨＰＭＣカプセルのものと比較された。
【０１６８】
９．１  機械的特性
研究は７０℃で浸漬液を使用する塗布によって作られたフィルムで行われた。
【０１６９】
それぞれの調製物に対して確立されたものと同様で水切り時間が標準的カプセル厚を得ることを可能にする方法において、我々は塗布厚は標準厚のフィルムの製造を可能にするということを探し当てた。
【０１７０】
９．１．１  乾燥後にフィルムの厚さの標準化をなす塗布厚
我々は乾燥後に、１００〜１１０μｍの厚さの、カプセルの標準と同等の厚さを得ることを可能にする塗布厚を用いようと努めた。
【０１７１】
得られた結果は以下の表１０に表される。
【表１０】
2005513255.tif 000011
【０１７２】
平均では、得られたフィルムは１１０〜１１５μｍの厚さを有する。１３％のＤＭを具備するＨＰＭＣベースフィルムのみは乾燥後に１００〜１３０μｍの厚さを有する。
【０１７３】
９．１．２  フィルムの機械的特性
得られたフィルムから、我々はゆえにInstron 1122で機械的特性の測定を行った。
【０１７４】
結果は以下の表１１に表される。
【表１１】
2005513255.tif 000012
【０１７５】
ＡＸ１０ベースフィルムの弾性は商用ＨＰＭＣベースフィルムのものよりも良好であることが観察される。一方、それはゼラチンベースのものよりは良好ではない。
【０１７６】
ＡＸ１０ベースフィルムの変形は一方では崩壊によって得たＨＰＭＣおよびゼラチンベースフィルムのものよりも良好である。それは一方では商用ＨＰＭＣベースフィルムの崩壊よりも低い。しかし、後者は１３０μｍの厚さを有すると気付くことが重要であり、これほど高い変形容量を保持する理由を説明できる。
【０１７７】
９．１．３  結論
我々のＡＸサンプルと同様の形態（マルトデキストリンなし）に従って調製された、ＨＰＭＣ１３％ＤＭサンプル上の正確なフィルム厚の測定が行われることは都合がいい。実際、１３０μｍでの弾性に対して得られた結果はＡＸ１０の１１５μｍで得られたものよりもわずかに大きい。これら新しい測定がＡＸ１０で得られたものと類似の結果を与えるということが、それ故に可能である。
【０１７８】
９．２  崩壊および溶解キネティクス
行われた第１の測定は、ＡＸをベースに作られたカプセルは最大溶解を満足させ、かつさらにゼラチンカプセルよりも良好な溶解特性を有することを示す。
【０１７９】
まとめ
アラビノキシランはそれ故に薬学的ハードカプセルの工業的製法のための選択の置換体を構成する。
【０１８０】
実際、我々は、アラビノキシランとゲル化剤、Gelcarin（登録商標）との組合せを元にして、植物由来の自然原料からの調製を規定できた。この調製は、乾燥材料を含有し、かつ商用サンプルに使用するものと同一な方法に従うハードカプセルを得ることを可能にする。
【０１８１】
これらのカプセルは工業的対照標準と類似の特徴を有する。
【０１８２】
得られたカプセルは乾燥後に標準的な工業値と類似した外形、組織およびサイズを有す。
【０１８３】
所望の組織に対して、それらの含水率は普通の工業的な値未満の値であるがゼラチンおよびＨＰＭＣカプセルが普通脆くなるおよそ９％にて安定する。この特性は、保管中の挙動に対して都合がいい。
【０１８４】
最後に、我々のカプセルはゼラチンよりも良好な溶解特性を有すということに注目すべきである。この文章で、それらの機械的特性はそれらの厚さを増加させることで改良されてよい。
【０１８５】
ソフトカプセルがアラビノキシランから作られるという容易さは、さらに詳細な方法での仕事および作られた調製の改良で得ることができるハードカプセルの良好な品質の効能を与える。
【図面の簡単な説明】
【０１８６】
【図１】乾燥材料を３０％含んだゼラチンベース浸漬液の流動曲線。
【図２】乾燥材料を３０％含んだ崩壊によって得たゼラチンカプセルから得られた浸漬液の流動曲線。
【図３】乾燥材料を３０％含んだ崩壊によって得たＨＰＭＣカプセルから得られた浸漬液の流動曲線。
【図４】乾燥材料を３５％含んだＨＰＭＣベースの浸漬液の流動曲線。
【図５】乾燥材料を３２．５％含んだアラビノキシランベースの浸漬液の流動曲線。
【図６】乾燥材料を３２％含んだアラビノキシランベースの浸漬液の流動曲線。
【図７】様々な浸漬溶液のゲル化温度の測定結果。
【図８】様々な浸漬溶液のゲル化時間の測定結果。
【図９】乾燥材料を３２．５％含んだアラビノキシランベースの浸漬液のゲル化分布。
【図１０】乾燥材料を３２％含んだアラビノキシランベースの浸漬液のゲル化分布。
【図１１】乾燥材料を３０％含んだ崩壊により得たゼラチンカプセルから得られた浸漬液のゲル化分布。
【図１２】乾燥材料を３０％含んだゼラチンベース浸漬液のゲル化分布。
【図１３】乾燥材料を３０％含んだ崩壊により得たＨＰＭＣカプセルから得られた浸漬液のゲル化分布。
【図１４】乾燥材料を１３％含んだＨＰＭＣベースの浸漬液のゲル化分布。
【図１】
2005513255.tif 000013
【図２】
2005513255.tif 000014
【図３】
2005513255.tif 000015
【図４】
2005513255.tif 000016
【図５】
2005513255.tif 000017
【図６】
2005513255.tif 000018
【図７】
2005513255.tif 000019
【図８】
2005513255.tif 000020
【図９】
2005513255.tif 000021
【図１０】
2005513255.tif 000022
【図１１】
2005513255.tif 000023
【図１２】
2005513255.tif 000024
【図１３】
2005513255.tif 000025
【図１４】
2005513255.tif 000026
【国際調査報告】
2005513255.tif 000027
2005513255.tif 000028
2005513255.tif 000029
2005513255.tif 000030
2005513255.tif 000031
2005513255.tif 000032