(57)【要約】組織の検体を処理するための装置は、静止した外側のケーシング（２）を含み、その上部には液体を保持するための環状の溝槽（３）が位置付けられる。外側のケーシング（２）には中央のハブ（５）が回転可能に取付けられ、ディスク状の蓋（６）を支持し、その下側は磁石（７）を担持する。使用中、磁石は着脱可能に組織の検体（１２）を保持し、溝槽（３）は検体を処理するための液体で満たされる。ハブ（５）はケーシング（２）に関して垂直の並進運動が可能であり、検体を溝槽（３）に下げ、続いてそこから引上げることができる。組織の検体を処理する方法も提供される。
2005531005.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体に浸漬することによって組織の検体を処理するための装置であって、前記装置は、前記液体を保持するためのチャンバを提供する第１の構造、および前記検体を解放可能に保持するための保持手段を含む第２の構造を含み、前記第１および第２の構造は、前記保持手段が前記チャンバの比較的近くにあり、かつ前記第２の構造が前記チャンバの上部を閉じて前記検体が前記液体に浸漬されるようにし、一方で後者が環境から守られる第１の位置と、前記保持手段が前記チャンバから比較的遠くにあって前記検体を前記保持手段に載せ降ろしすることができる第２の位置との間で垂直の成分を有する方向で相対的に可動である、装置。
【請求項２】
前記第１の構造は静止しており、前記第２の構造は前記第１の構造に関して垂直に移動可能である、請求項１に記載の装置。
【請求項３】
前記保持手段は、各々に金属の台が設けられた検体を磁気引力によって前記第２の構造に着脱可能に保持できるようにするために磁石を含む、請求項１または２に記載の装置。
【請求項４】
前記チャンバは環状の溝槽の形である、請求項１から３のいずれかに記載の装置。
【請求項５】
前記保持手段は前記検体を保持するため、後者は、前記第２の構造がその第１の位置へと下げられたときに、前記検体が前記溝槽へと下げられるように円の周りで角度をもって隔てられた位置で前記保持手段から垂れ下がる、請求項４に記載の装置。
【請求項６】
前記第２の構造は、前記第１の位置で前記チャンバを閉じる働きをし、かつその下側が前記保持手段を担持する蓋を含む、請求項４または５に記載の装置。
【請求項７】
前記第２の構造は、中央の垂直の軸のまわりで回転可能に可動であり、前記検体は、ロボットアームまたは人間の手によって、前記装置に沿って選ばれた位置で前記第２の構造に載せ降ろしすることができる、請求項１から６のいずれかに記載の装置。
【請求項８】
前記装置は前記第１の位置にあるときに前記液体を交換しやすく、前記検体は、前記チャンバを閉じたまま、一連の処理ステージで異なる液体によって処理することができる、請求項１から７のいずれかに記載の装置。
【請求項９】
チャンバ内の液体に浸漬することによって組織の検体を処理する方法であって、前記方法は、前記検体をホルダに載せて、前記検体が前記ホルダから垂れ下がりかつ前記チャンバ内の前記液体の上方に配置されるようにするステップと、前記チャンバと前記検体との間で一方向で相対的な動きを行なって、浸漬中に前記チャンバを閉じて環境から保護して維持しつつ前記液体に前記検体を浸漬するステップと、前記チャンバと前記検体との間で反対方向で相対的な動きを行なって、前記検体を前記液体から取出すステップと、処理された検体を前記ホルダから降ろすステップとを含む、方法。
【請求項１０】
前記検体は、複数の処理ステージで異なる液体によって処理される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記処理ステージは、前記検体が前記チャンバ内にあり、かつ前記チャンバが閉じられて環境から保護されている一方で、連続的に前記チャンバを空にして異なる液体で満たすことによって実行される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
請求項１から１１のいずれかに記載の方法または装置の使用を含む以下に列挙される分
析または手順のいずれか１つまたは複数行なう方法であって、前記分析または手順は、
生物学的な組織の構造の分析
生物学的な組織の機能の分析
生物学的な組織の形状の分析
生物学的な組織内の細胞の種類の分布の分析
生物学的な組織内の遺伝子の活動の分布の分析であって
−ＲＮＡの写し
−タンパク質の分布の分析を含む
生物学的な組織内のトランスジェニック遺伝子の活動の分布の分析
生物学的な組織内の細胞の活動の分布の分析であって
−停止を含む細胞周期の状態
−細胞死
−細胞の増殖
−細胞の移動の分析を含む
生物学的な組織内の生理学的な状態の分布の分析
免疫組織化学染色技術の結果の分析
そのままの状態でのハイブリッド形成染色技術の結果の分析
生物学的な組織内の分子マーカーの分布の分析であって、
着色された物質または吸光物質、たとえば、
５，５’−ジブロモ−４，４’−ジクロロ−インジコ（または他のハロゲン化インジゴ化合物）
ホルマザン
または、ｂ−ガラクトシダーゼ、アルカリホスファターゼまたは染色基質の触媒性の変換によって形成された他の着色された沈殿物を含む酵素の触媒性の活動を通じて生成された他の着色された沈殿物の分布の分析を含み、これは、
ファストレッド（Fast Red）、ベクターレッド（Vector Red）を含み、
任意の発光物質を含み、
したがって、任意の蛍光物質、
たとえば、アレクサ（Alexa）色素、ＦＩＴＣ、ローダミンを含み、
さらに、任意の冷光物質、
たとえば、緑色の蛍光を発するタンパク質（ＧＦＰ）または同様のタンパク質を含み、
任意の燐光物質を含む
すべての植物種からの組織の分析
農学的な研究のための任意の組織の分析であって、
植物生態学のすべての局面の基本的な研究（遺伝学、発生、生理学、病理学等）
遺伝子的に変更を加えられた組織の分析を含む
すべての動物種からの組織の分析であって、すべての動物種は
無脊椎動物
線虫
脊椎動物
すべての種類の魚（ゼブラフィッシュなどの硬骨類の魚、およびサメを含む軟質類を含む）
両生類（ツメガエル属およびアホロートルを含む）
爬虫類
鳥（ニワトリおよびウズラを含む）
すべての動物（すべての齧歯類、犬、猫およびヒトを含む霊長類を含む）を含む
任意の目的のための胚組織の分析であって、
幹細胞集団の研究
発生生物学の研究
ヒト症候群を含む異常な胚の発生の原因の研究
ヒトの終了された妊娠（自発的および誘導された中絶の両方）の検死を含む
ゲノムの研究の目的のための任意の組織の分析であって、
ゲノムの研究の目的のための任意の組織の分析を含み、これは
トランスジェニック、ノックイン、ノックダウンまたはノックアウト有機体の分析
空間的な分布および発現のレベルを含む遺伝子の発現（または活動）の分析もしくは発見
故意の実験（化学的または生化学的なゲノム的な方法を含む遺伝学的または物理的な変形など）による干渉の結果としての組織の構造または形態学での異常、および／または自発的な異常（たとえば自然に起こる突然変異）の発見の分析を含む
神経生物学的な研究の目的のための任意の組織の分析であって、
神経の形態学の分析
神経の経路および接続の分析
動物の脳の一部または全体の分析を含む
薬剤の研究のための任意の組織の分析であって、
薬剤物質（薬物、分子、タンパク質、抗体）の分析を含み、これは
それらの空間的な組織内での分布、およびそれらの濃度を含み、
組織の構造または形態学での異常の分析または発見を含む
医学的な研究のための組織の分析であって、
動物の組織の遺伝学、発生、生理学、構造および機能の研究
あらゆる種類の疾患のさらなる理解に向けての病的な組織の分析を含み、あらゆる種類の疾患は
先天性の疾患
後天性の疾患を含み、後天性の疾患は
感染性の疾患
腫瘍性の疾患
血管の疾患
炎症性の疾患
外傷性の疾患
代謝の疾患
内分泌の疾患
変性の疾患
薬物の関係する疾患
医原性の疾患
突発性の疾患を含む
医学的な診断、処置または監視のための組織の分析であって、
癌患者の診断を含み、これは、
生検内の癌細胞および組織の調査
生検内の組織の異常な構造または形態学の調査を含み
すべての生検の分析をさらに含み、これは、
リンパ節
ポリープ
肝臓の生検
腎臓の生検
前立腺の生検
筋肉の生検
脳の組織の分析を含み、
患者からの腫瘍の抽出の過程で取除かれた組織の分析を含み、これは
すべての腫瘍が取除かれたかの決定
腫瘍の種類、および癌の種類の決定を含む、方法。
【請求項１３】
以下に列挙される分析または手順のいずれか１つまたは複数での請求項１から１１のいずれかに説明されるような方法または装置の使用であって、前記分析または手順は、
生物学的な組織の構造の分析
生物学的な組織の機能の分析
生物学的な組織の形状の分析
生物学的な組織内の細胞の種類の分布の分析
生物学的な組織内の遺伝子の活動の分布の分析であって
−ＲＮＡの写し
−タンパク質の分布の分析を含む
生物学的な組織内のトランスジェニック遺伝子の活動の分布の分析
生物学的な組織内の細胞の活動の分布の分析であって
−停止を含む細胞周期の状態
−細胞死
−細胞の増殖
−細胞の移動の分析を含む
生物学的な組織内の生理学的な状態の分布の分析
免疫組織化学染色技術の結果の分析
そのままの状態でのハイブリッド形成染色技術の結果の分析
生物学的な組織内の分子マーカーの分布の分析であって、
着色された物質または吸光物質、たとえば、
５，５’−ジブロモ−４，４’−ジクロロ−インジコ（または他のハロゲン化インジゴ化合物）
ホルマザン
または、ｂ−ガラクトシダーゼ、アルカリホスファターゼまたは染色基質の触媒性の変換によって形成された他の着色された沈殿物を含む酵素の触媒性の活動を通じて生成された他の着色された沈殿物の分布の分析を含み、これは、
ファストレッド（Fast Red）、ベクターレッド（Vector Red）を含み、
任意の発光物質を含み、
したがって、任意の蛍光物質、
たとえば、アレクサ（Alexa）色素、ＦＩＴＣ、ローダミンを含み、
さらに、任意の冷光物質、
たとえば、緑色の蛍光を発するタンパク質（ＧＦＰ）または同様のタンパク質を含み、
任意の燐光物質を含む
すべての植物種からの組織の分析
農学的な研究のための任意の組織の分析であって、
植物生態学のすべての局面の基本的な研究（遺伝学、発生、生理学、病理学等）
遺伝子的に変更を加えられた組織の分析を含む
すべての動物種からの組織の分析であって、すべての動物種は
無脊椎動物
線虫
脊椎動物
すべての種類の魚（ゼブラフィッシュなどの硬骨類の魚、およびサメを含む軟質類を含む）
両生類（ツメガエル属およびアホロートルを含む）
爬虫類
鳥（ニワトリおよびウズラを含む）
すべての動物（すべての齧歯類、犬、猫およびヒトを含む霊長類を含む）を含む
任意の目的のための胚組織の分析であって、
幹細胞集団の研究
発生生物学の研究
ヒト症候群を含む異常な胚の発生の原因の研究
ヒトの終了された妊娠（自発的および誘導された中絶の両方）の検死を含む
ゲノムの研究の目的のための任意の組織の分析であって、
ゲノムの研究の目的のための任意の組織の分析を含み、これは
トランスジェニック、ノックイン、ノックダウンまたはノックアウト有機体の分析
空間的な分布および発現のレベルを含む遺伝子の発現（または活動）の分析もしくは発見
故意の実験（化学的または生化学的なゲノム的な方法を含む遺伝学的または物理的な変形など）による干渉の結果としての組織の構造または形態学での異常、および／または自発的な異常（たとえば自然に起こる突然変異）の発見の分析を含む
神経生物学的な研究の目的のための任意の組織の分析であって、
神経の形態学の分析
神経の経路および接続の分析
動物の脳の一部または全体の分析を含む
薬剤の研究のための任意の組織の分析であって、
薬剤物質（薬物、分子、タンパク質、抗体）の分析を含み、これは
それらの空間的な組織内での分布、およびそれらの濃度を含み、
組織の構造または形態学での異常の分析または発見を含む
医学的な研究のための組織の分析であって、
動物の組織の遺伝学、発生、生理学、構造および機能の研究
あらゆる種類の疾患のさらなる理解に向けての病的な組織の分析を含み、あらゆる種類の疾患は
先天性の疾患
後天性の疾患を含み、後天性の疾患は
感染性の疾患
腫瘍性の疾患
血管の疾患
炎症性の疾患
外傷性の疾患
代謝の疾患
内分泌の疾患
変性の疾患
薬物の関係する疾患
医原性の疾患
突発性の疾患を含む
医学的な診断、処置または監視のための組織の分析であって、
癌患者の診断を含み、これは、
生検内の癌細胞および組織の調査
生検内の組織の異常な構造または形態学の調査を含み
すべての生検の分析をさらに含み、これは、
リンパ節
ポリープ
肝臓の生検
腎臓の生検
前立腺の生検
筋肉の生検
脳の組織の分析を含み、
患者からの腫瘍の抽出の過程で取除かれた組織の分析を含み、これは
すべての腫瘍が取除かれたかの決定
腫瘍の種類、および癌の種類の決定を含む、方法または装置の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
この発明は、組織の検体の処理、特に（これに限らないが）光学投影断層撮影（ＯＰＴ）による検体の画像化の前の組織の検体の処理、および光学投影断層撮影の方法および装置の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
組織の検体は、通常、検体がＯＰＴ装置で画像化される前に１つまたは複数の液体に浸漬することによって処理される。この発明は、この検体の前処理を容易にする仕方としてなされたものである。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
発明の概要
この発明の一局面によると、液体に浸漬することによって組織の検体を処理するための装置が提供され、この装置は、液体を保持するためのチャンバを提供する第１の構成、および検体を解放可能に保持するための保持手段を含む第２の構造を含み、第１および第２の構造は、保持手段が比較的チャンバの近くにあり、かつ第２の構造がチャンバの上部を閉じて検体が液体に浸漬されるようにし、一方で後者が環境から守られる第１の位置と、保持手段が比較的チャンバから遠くにあり、検体を保持手段に載せ降ろしすることができる第２の位置との間で、垂直の成分を有する方向で相対的に動くことができる。
【０００４】
第１の構造は静止していることが好ましく、第２の構造は第１の構造に関して垂直に移動可能であることが好ましい。
【０００５】
保持手段は、各々に金属の台を設けられた検体が磁気引力によって第２の構造に着脱可能に保持されるように磁石を含んでもよい。
【０００６】
チャンバは環状の溝槽の形であることが好ましく、この場合、保持手段は検体を保持することができるため、後者は保持手段から垂れ下がり、第２の構造がその第１の位置に下げられたときに検体が溝槽へと下げられるように都合よく円の周りに角度をもって隔てられた位置にある。この場合、第２の構造は、第１の位置でチャンバを閉じる働きをする蓋を含むことが好ましく、その下側は保持手段を担持する。蓋が閉じることで、揮発性の処理液の蒸発が防止される。
【０００７】
第２の構造は、中央の垂直の軸のまわりで回転可能に可動であってもよく、ロボットのアームまたは人間の手によって、装置に沿った選ばれた位置で第２の構造に検体を載せ降ろしすることができる。
【０００８】
装置は、第１の位置にあるときに液体を交換し易くなっていてもよく、チャンバを閉じたまま、一連の処理ステージで異なる液体によって検体を処理することができる。たとえば、装置は、一連の選ばれた液体でチャンバを満たし、空にするためのポンプを有してもよく、組織の検体の場合、これは光学投影断層撮影の手段によって検体が画像化される前に検体を洗浄するかまたは他の態様で処理する働きをしてもよい。
【０００９】
この発明の別の局面によると、チャンバ内の液体に浸漬することによって組織の検体を
処理する方法が提供され、この方法は、検体をホルダに載せて検体がホルダから垂れ下がりかつチャンバ内の液体の上方に配置されるようにするステップと、浸漬中にチャンバを閉じて環境から保護されるように維持しつつ、チャンバと検体との間で一方向で相対的な動きを行なって検体を液体に浸漬するステップと、チャンバと検体との間で反対方向で相対的な動きを行なって検体を液体から取出すステップと、処理された検体をホルダから降ろすステップとを含む。
【００１０】
検体は、複数の処理ステージで異なる液体によって処理されてもよく、これは、検体がチャンバ内にありかつチャンバが閉じられて環境から保護されている一方で、連続的に異なる液体でチャンバを満たし空にすることによって行なわれるのが好ましい。
【００１１】
この発明の別の局面によると、上述の局面のいずれかの方法または装置の使用を含む、以下に列挙される分析または手順のいずれか１つまたは複数を行なう方法が提供される。
【００１２】
以下に列挙される分析または手順のいずれか１つまたは複数での上述のような局面のいずれかで説明されるような方法または装置の使用も提供される。
【００１３】
この発明によると、この発明の分析および手順は以下のものを含む。
【００１４】
生物学的な組織の構造の分析
生物学的な組織の機能の分析
生物学的な組織の形状の分析
生物学的な組織内の細胞の種類の分布の分析
生物学的な組織内の遺伝子の活動の分布の分析であって
−ＲＮＡの写し
−タンパク質の分布の分析を含む
生物学的な組織内のトランスジェニック遺伝子の活動の分布の分析
生物学的な組織内の細胞の活動の分布の分析であって
−停止を含む細胞周期の状態
−細胞死
−細胞の増殖
−細胞の移動の分析を含む
生物学的な組織内の生理学的な状態の分布の分析
免疫組織化学染色技術の結果の分析
そのままの状態でのハイブリッド形成染色技術の結果の分析
生物学的な組織内の分子マーカーの分布の分析であって、
着色された物質または吸光物質、たとえば、
５，５’−ジブロモ−４，４’−ジクロロ−インジコ（または他のハロゲン化インジゴ化合物）
ホルマザン
または、ｂ−ガラクトシダーゼ、アルカリホスファターゼまたは染色基質の触媒性の変換によって形成された他の着色された沈殿物を含む酵素の触媒性の活動を通じて生成された他の着色された沈殿物の分布の分析を含み、これは、
ファストレッド（Fast Red）、ベクターレッド（Vector Red）を含み、
任意の発光物質を含み、
したがって、任意の蛍光物質、
たとえば、アレクサ（Alexa）色素、ＦＩＴＣ、ローダミンを含み、
さらに、任意の冷光物質、
たとえば、緑色の蛍光を発するタンパク質（ＧＦＰ）または同様のタンパク質を含み、
任意の燐光物質を含む
すべての植物種からの組織の分析
農学的な研究のための任意の組織の分析であって、
植物生態学のすべての局面の基本的な研究（遺伝学、発生、生理学、病理学等）
遺伝子的に変更を加えられた組織の分析を含む
すべての動物種からの組織の分析であって、すべての動物種は
無脊椎動物
線虫
脊椎動物
すべての種類の魚（ゼブラフィッシュなどの硬骨類の魚、およびサメを含む軟質類を含む）
両生類（ツメガエル属およびアホロートルを含む）
爬虫類
鳥（ニワトリおよびウズラを含む）
すべての動物（すべての齧歯類、犬、猫およびヒトを含む霊長類を含む）を含む
任意の目的のための胚組織の分析であって、
幹細胞集団の研究
発生生物学の研究
ヒト症候群を含む異常な胚の発生の原因の研究
ヒトの終了された妊娠（自発的および誘導された中絶の両方）の検死を含む
ゲノムの研究の目的のための任意の組織の分析であって、
ゲノムの研究の目的のための任意の組織の分析を含み、これは
トランスジェニック、ノックイン、ノックダウンまたはノックアウト有機体の分析
空間的な分布および発現のレベルを含む遺伝子の発現（または活動）の分析もしくは発見
故意の実験（化学的または生化学的なゲノム的な方法を含む遺伝学的または物理的な変形など）による干渉の結果としての組織の構造または形態学での異常、および／または自発的な異常（たとえば自然に起こる突然変異）の発見の分析を含む
神経生物学的な研究の目的のための任意の組織の分析であって、
神経の形態学の分析
神経の経路および接続の分析
動物の脳の一部または全体の分析を含む
薬剤の研究のための任意の組織の分析であって、
薬剤物質（薬物、分子、タンパク質、抗体）の分析を含み、これは
それらの空間的な組織内での分布、およびそれらの濃度を含み、
組織の構造または形態学での異常の分析または発見を含む
医学的な研究のための組織の分析であって、
動物の組織の遺伝学、発生、生理学、構造および機能の研究
あらゆる種類の疾患のさらなる理解に向けての病的な組織の分析を含み、あらゆる種類の疾患は
先天性の疾患
後天性の疾患を含み、後天性の疾患は
感染性の疾患
腫瘍性の疾患
血管の疾患
炎症性の疾患
外傷性の疾患
代謝の疾患
内分泌の疾患
変性の疾患
薬物の関係する疾患
医原性の疾患
突発性の疾患を含む
医学的な診断、処置または監視のための組織の分析であって、
癌患者の診断を含み、これは、
生検内の癌細胞および組織の調査
生検内の組織の異常な構造または形態学の調査を含み
すべての生検の分析をさらに含み、これは、
リンパ節
ポリープ
肝臓の生検
腎臓の生検
前立腺の生検
筋肉の生検
脳の組織の分析を含み、
患者からの腫瘍の抽出の過程で取除かれた組織の分析を含み、これは
すべての腫瘍が取除かれたかの決定
腫瘍の種類、および癌の種類の決定を含む。
【００１５】
この発明によると、この発明で使用するためのサンプルは、以前の特許出願に説明されるように準備されてもよいし、および／または当業者に周知の従来の病理学的および組織学的な技術ならびに手順を用いて準備してもよい。
【００１６】
たとえば、そのままの状態でのハイブリッド形成（ＲＮＡを検出するのに特に有用）では、Hammond K L, Hanson I M, Brown A G, Lettice L A, Hill R E 「哺乳類およびショウジョウバエのダックスフンド遺伝子はSkiプロト腫瘍遺伝子に関連し、目および手足に発現される」（“Mammalian and Drosophila dachsund genes are related to the Ski proto-oncongene and are expressed in eye and limb”.） Mech Dev. 1998 Jun;74(1-2):121-31.。
【００１７】
免疫組織化学（タンパク質および他の分子を検出するのに特に有用）では、Sharpe J, Ahlgren U, Perry P, Hill B, Ross A, Hecksher-Sorensen J, Baldock R, Davidson D.「３Ｄ顕微鏡法および遺伝子発現の研究のためのツールとしての光学投影断層撮影」（“Optical projection tomography as a tool for 3D microscopy and gene expression studies”）Science.2002 Apr 19;296(5567);541-5.。
【００１８】
この発明の範囲を離れることなく、この発明の変形を行ない得ることが理解されるであろう。
【００１９】
この発明を添付の図面を参照して例によってさらに説明する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
詳細な説明
装置は、円筒形の外側のケーシング２を有する固定構造を含み、その上部には環状の溝槽３が位置付けられ、これは上部で開口している。固定構造には、中央のハブまたはスピンドル５を有する可動構造４が取付けられ、その上部にはディスク状の蓋６が取付けられ、その下側は角度をもって隔てられかつ下方に垂れ下がったいくつかの円筒形の磁石７を担持する。ハブまたはスピンドル５は、図４の８に示される中央の垂直の軸の周りでの可動構造の回転のために固定構造に回転可能に取付けられる。さらに、ハブまたはスピンドル５は、垂直な軸８に沿って固定構造１に対して垂直の並進運動が可能である。
【００２１】
ケーシング２内には、図４の９に示されるように、回転運動および並進運動の両方で構造４を駆動するためのモータおよび伝達装置がある。溝槽３は、液体で満たすことができ、構造１は、これら液体を保持するための容器、および図４の１０に示されるように、溝槽を満たし空にするためのポンプを含む。
【００２２】
磁石７は、組織の検体１２を着脱可能に保持するために使用され、その各々は、検体の一端にある金属の台１３で準備されている。これにより各金属１３台は磁石７の１つから垂れ下がり、検体１２は台１３から下方に垂れ下がっている。この装置が開いた状態であるとき（図１）、磁石７は溝槽３の上部から十分に持上げられ、検体１２を磁石７に装着するかまたはそこから取外すことができる。この装置が閉じられた位置にあるとき（図２）、蓋６がケーシング２の上部と係合し、検体１２は溝槽３内の液体１４に浸漬される。
【００２３】
図６および図７に示されるロボットアーム１５は、処理されていない検体を装置に載せるために使用され、処理された検体を装置から検体が画像化されるＯＰＴスキャナの回転ステージ１６へと移動させるのにも使用される。
【００２４】
使用中、ロボットアーム１５は検体を装置に載せるのに使用され、各検体は、磁石７と検体１２の一端にある金属の台１３との間の磁気引力によって対応する磁石７の下方端部に装着され、検体が載せられるとき可動構造４は開いた位置にあり、回転の向きに索引をつけられる。検体が載せられると、可動構造はその下方の位置または閉じられた位置に動かされ、これにより検体１２は溝槽３にポンプで入れられた液体１４に浸漬される。この閉じられた位置では、蓋６は外側のケーシング２の上方の縁に係合して液体１４は空気に対して閉じられ、これにより、液体を通って検体を移動するためにコンベアベルトを使用する既知の装置とは異なり、揮発性の液体の使用が可能である。
【００２５】
一連の液体によって検体を処理する必要がある場合、第１の液体は溝槽３から排出され、第２の液体がポンプでそこに入れられ、溝槽３を空気に対して開放する必要はない。さらに、金属の台１３を磁石７に装着することによって、検体１２は垂れ下がり位置に保持されるため、検体は、それらを損傷し得る溝槽３の底部に係合しない。
【００２６】
このようにして任意の数の処理ステージを実行することができ、液体は、検体を動かす必要なく、かつ少量の各処理液で交換される。
【００２７】
検体１２の処理の後、可動構造４はその上方の位置に持上げられ、処理された検体１２はロボットアーム１５によって回転ステージ１６に移動され、構造４は回転の向きに索引をつけられるため、ロボットアーム１５は各検体１２を降ろし、処理された検体５を回転ステージ１６へと移動することができる。
【００２８】
検体を処理するための液体の例は、定着液（ポラフォルムアルデヒドまたはホルマリンなど）、アルコール（特にメタノールおよびエタノール）および検体を洗浄するための有機溶剤（特にベンジルアルコールおよびベンジルベンゾエート）である。
【００２９】
装置および方法は、以下に示されるようなさまざまな分析および手順で使用可能である。
【００３０】
生物学的な組織の構造の分析
生物学的な組織の機能の分析
生物学的な組織の形状の分析
生物学的な組織内の細胞の種類の分布の分析
生物学的な組織内の遺伝子の活動の分布の分析であって
−ＲＮＡの写し
−タンパク質の分布の分析を含む
生物学的な組織内のトランスジェニック遺伝子の活動の分布の分析
生物学的な組織内の細胞の活動の分布の分析であって
−停止を含む細胞周期の状態
−細胞死
−細胞の増殖
−細胞の移動の分析を含む
生物学的な組織内の生理学的な状態の分布の分析
免疫組織化学染色技術の結果の分析
そのままの状態でのハイブリッド形成染色技術の結果の分析
生物学的な組織内の分子マーカーの分布の分析であって、
着色された物質または吸光物質、たとえば、
５，５’−ジブロモ−４，４’−ジクロロ−インジコ（または他のハロゲン化インジゴ化合物）
ホルマザン
または、ｂ−ガラクトシダーゼ、アルカリホスファターゼまたは染色基質の触媒性の変換によって形成された他の着色された沈殿物を含む酵素の触媒性の活動を通じて生成された他の着色された沈殿物の分布の分析を含み、これは、
ファストレッド（Fast Red）、ベクターレッド（Vector Red）を含み、
任意の発光物質を含み、
したがって、任意の蛍光物質、
たとえば、アレクサ（Alexa）色素、ＦＩＴＣ、ローダミンを含み、
さらに、任意の冷光物質、
たとえば、緑色の蛍光を発するタンパク質（ＧＦＰ）または同様のタンパク質を含み、
任意の燐光物質を含む
すべての植物種からの組織の分析
農学的な研究のための任意の組織の分析であって、
植物生態学のすべての局面の基本的な研究（遺伝学、発生、生理学、病理学等）
遺伝子的に変更を加えられた組織の分析を含む
すべての動物種からの組織の分析であって、すべての動物種は
無脊椎動物
線虫
脊椎動物
すべての種類の魚（ゼブラフィッシュなどの硬骨類の魚、およびサメを含む軟質類を含む）
両生類（ツメガエル属およびアホロートルを含む）
爬虫類
鳥（ニワトリおよびウズラを含む）
すべての動物（すべての齧歯類、犬、猫およびヒトを含む霊長類を含む）を含む
任意の目的のための胚組織の分析であって、
幹細胞集団の研究
発生生物学の研究
ヒト症候群を含む異常な胚の発生の原因の研究
ヒトの終了された妊娠（自発的および誘導された中絶の両方）の検死を含む
ゲノムの研究の目的のための任意の組織の分析であって、
ゲノムの研究の目的のための任意の組織の分析を含み、これは
トランスジェニック、ノックイン、ノックダウンまたはノックアウト有機体の分析
空間的な分布および発現のレベルを含む遺伝子の発現（または活動）の分析もしくは発見
故意の実験（化学的または生化学的なゲノム的な方法を含む遺伝学的または物理的な変形など）による干渉の結果としての組織の構造または形態学での異常、および／または自発的な異常（たとえば自然に起こる突然変異）の発見の分析を含む
神経生物学的な研究の目的のための任意の組織の分析であって、
神経の形態学の分析
神経の経路および接続の分析
動物の脳の一部または全体の分析を含む
薬剤の研究のための任意の組織の分析であって、
薬剤物質（薬物、分子、タンパク質、抗体）の分析を含み、これは
それらの空間的な組織内での分布、およびそれらの濃度を含み、
組織の構造または形態学での異常の分析または発見を含む
医学的な研究のための組織の分析であって、
動物の組織の遺伝学、発生、生理学、構造および機能の研究
あらゆる種類の疾患のさらなる理解に向けての病的な組織の分析を含み、あらゆる種類の疾患は
先天性の疾患
後天性の疾患を含み、後天性の疾患は
感染性の疾患
腫瘍性の疾患
血管の疾患
炎症性の疾患
外傷性の疾患
代謝の疾患
内分泌の疾患
変性の疾患
薬物の関係する疾患
医原性の疾患
突発性の疾患を含む
医学的な診断、処置または監視のための組織の分析であって、
癌患者の診断を含み、これは、
生検内の癌細胞および組織の調査
生検内の組織の異常な構造または形態学の調査を含み
すべての生検の分析をさらに含み、これは、
リンパ節
ポリープ
肝臓の生検
腎臓の生検
前立腺の生検
筋肉の生検
脳の組織の分析を含み、
患者からの腫瘍の抽出の過程で取除かれた組織の分析を含み、これは
すべての腫瘍が取除かれたかの決定
腫瘍の種類、および癌の種類の決定を含む。
【００３１】
この発明の範囲を離れることなく、この発明に変形を行ない得ることが理解されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】この発明による開いた状態の装置の等角図である。
【図２】閉じられた状態の装置の等角図である。
【図３】この装置によって保持される検体を示す、開いた状態の装置の一部の拡大断片図である。
【図４】装置の断面図である。
【図５】ロボットアームと組合せた装置の図である。
【図６】図５の部分の拡大図である。
【図７】検体をＯＰＴスキャナの回転ステージへと位置付けているロボットアームの図である。
【図１】
2005531005.tif 000003
【図２】
2005531005.tif 000004
【図３】
2005531005.tif 000005
【図４】
2005531005.tif 000006
【図５】
2005531005.tif 000007
【図６】
2005531005.tif 000008
【図７】
2005531005.tif 000009
【手続補正書】
【提出日】平成17年1月7日(2005.1.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体に浸漬することによって組織の検体を処理するための装置であって、前記装置は、前記液体を保持するためのチャンバを提供する第１の構造、および前記検体を解放可能に保持するための保持手段を含む第２の構造を含み、前記第１および第２の構造は、前記保持手段が前記チャンバの比較的近くにあり、かつ前記第２の構造が前記チャンバの上部を閉じて前記検体が前記液体に浸漬されるようにし、一方で後者が環境から守られる第１の位置と、前記保持手段が前記チャンバから比較的遠くにあって前記検体を前記保持手段に載せ降ろしすることができる第２の位置との間で垂直の成分を有する方向で相対的に可動である、装置。
【請求項２】
前記第１の構造は静止しており、前記第２の構造は前記第１の構造に関して垂直に移動可能である、請求項１に記載の装置。
【請求項３】
前記保持手段は、各々に金属の台が設けられた検体を磁気引力によって前記第２の構造に着脱可能に保持できるようにするために磁石を含む、請求項１または２に記載の装置。
【請求項４】
前記チャンバは環状の溝槽の形である、請求項１から３のいずれかに記載の装置。
【請求項５】
前記保持手段は前記検体を保持するため、後者は、前記第２の構造がその第１の位置へと下げられたときに、前記検体が前記溝槽へと下げられるように円の周りで角度をもって隔てられた位置で前記保持手段から垂れ下がる、請求項４に記載の装置。
【請求項６】
前記第２の構造は、前記第１の位置で前記チャンバを閉じる働きをし、かつその下側が前記保持手段を担持する蓋を含む、請求項４または５に記載の装置。
【請求項７】
前記第２の構造は、中央の垂直の軸のまわりで回転可能に可動であり、前記検体は、ロボットアームまたは人間の手によって、前記装置に沿って選ばれた位置で前記第２の構造に載せ降ろしすることができる、請求項１から６のいずれかに記載の装置。
【請求項８】
前記装置は前記第１の位置にあるときに前記液体を交換しやすく、前記検体は、前記チ
ャンバを閉じたまま、一連の処理ステージで異なる液体によって処理することができる、請求項１から７のいずれかに記載の装置。
【請求項９】
チャンバ内の液体に浸漬することによって組織の検体を処理する方法であって、前記方法は、前記検体をホルダに載せて、前記検体が前記ホルダから垂れ下がりかつ前記チャンバ内の前記液体の上方に配置されるようにするステップと、前記チャンバと前記検体との間で一方向で相対的な動きを行なって、浸漬中に前記チャンバを閉じて環境から保護して維持しつつ前記液体に前記検体を浸漬するステップと、前記チャンバと前記検体との間で反対方向で相対的な動きを行なって、前記検体を前記液体から取出すステップと、処理された検体を前記ホルダから降ろすステップとを含む、方法。
【請求項１０】
前記検体は、複数の処理ステージで異なる液体によって処理される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記処理ステージは、前記検体が前記チャンバ内にあり、かつ前記チャンバが閉じられて環境から保護されている一方で、連続的に前記チャンバを空にして異なる液体で満たすことによって実行される、請求項１０に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
この発明は、組織の検体の処理、特に（これに限らないが）光学投影断層撮影（ＯＰＴ）による検体の画像化の前の組織の検体の処理、および光学投影断層撮影の方法および装置の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
組織の検体は、通常、検体がＯＰＴ装置で画像化される前に１つまたは複数の液体に浸漬することによって処理される。この発明は、この検体の前処理を容易にする仕方としてなされたものである。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
発明の概要
この発明の一局面によると、液体に浸漬することによって組織の検体を処理するための装置が提供され、この装置は、液体を保持するためのチャンバを提供する第１の構成、および検体を解放可能に保持するための保持手段を含む第２の構造を含み、第１および第２の構造は、保持手段が比較的チャンバの近くにあり、かつ第２の構造がチャンバの上部を閉じて検体が液体に浸漬されるようにし、一方で後者が環境から守られる第１の位置と、保持手段が比較的チャンバから遠くにあり、検体を保持手段に載せ降ろしすることができる第２の位置との間で、垂直の成分を有する方向で相対的に動くことができる。
【０００４】
第１の構造は静止していることが好ましく、第２の構造は第１の構造に関して垂直に移動可能であることが好ましい。
【０００５】
保持手段は、各々に金属の台を設けられた検体が磁気引力によって第２の構造に着脱可能に保持されるように磁石を含んでもよい。
【０００６】
チャンバは環状の溝槽の形であることが好ましく、この場合、保持手段は検体を保持することができるため、後者は保持手段から垂れ下がり、第２の構造がその第１の位置に下げられたときに検体が溝槽へと下げられるように都合よく円の周りに角度をもって隔てられた位置にある。この場合、第２の構造は、第１の位置でチャンバを閉じる働きをする蓋を含むことが好ましく、その下側は保持手段を担持する。蓋が閉じることで、揮発性の処理液の蒸発が防止される。
【０００７】
第２の構造は、中央の垂直の軸のまわりで回転可能に可動であってもよく、ロボットのアームまたは人間の手によって、装置に沿った選ばれた位置で第２の構造に検体を載せ降ろしすることができる。
【０００８】
装置は、第１の位置にあるときに液体を交換し易くなっていてもよく、チャンバを閉じたまま、一連の処理ステージで異なる液体によって検体を処理することができる。たとえば、装置は、一連の選ばれた液体でチャンバを満たし、空にするためのポンプを有してもよく、組織の検体の場合、これは光学投影断層撮影の手段によって検体が画像化される前に検体を洗浄するかまたは他の態様で処理する働きをしてもよい。
【０００９】
この発明の別の局面によると、チャンバ内の液体に浸漬することによって組織の検体を処理する方法が提供され、この方法は、検体をホルダに載せて検体がホルダから垂れ下がりかつチャンバ内の液体の上方に配置されるようにするステップと、浸漬中にチャンバを閉じて環境から保護されるように維持しつつ、チャンバと検体との間で一方向で相対的な動きを行なって検体を液体に浸漬するステップと、チャンバと検体との間で反対方向で相対的な動きを行なって検体を液体から取出すステップと、処理された検体をホルダから降ろすステップとを含む。
【００１０】
検体は、複数の処理ステージで異なる液体によって処理されてもよく、これは、検体がチャンバ内にありかつチャンバが閉じられて環境から保護されている一方で、連続的に異なる液体でチャンバを満たし空にすることによって行なわれるのが好ましい。
【００１１】
この発明の別の局面によると、上述の局面のいずれかの方法または装置の使用を含む、分析または手順のいずれか１つまたは複数を行なう方法が提供される。
【００１２】
この発明によると、この発明で使用するためのサンプルは、以前の特許出願に説明されるように準備されてもよいし、および／または当業者に周知の従来の病理学的および組織学的な技術ならびに手順を用いて準備してもよい。
【００１３】
たとえば、そのままの状態でのハイブリッド形成（ＲＮＡを検出するのに特に有用）では、Hammond K L, Hanson I M, Brown A G, Lettice L A, Hill R E 「哺乳類およびショウジョウバエのダックスフンド遺伝子はSkiプロト腫瘍遺伝子に関連し、目および手足に発現される」（“Mammalian and Drosophila dachsund genes are related to the Ski proto-oncongene and are expressed in eye and limb”.） Mech Dev. 1998 Jun;74(1-2):121-31.。
【００１４】
免疫組織化学（タンパク質および他の分子を検出するのに特に有用）では、Sharpe J, Ahlgren U, Perry P, Hill B, Ross A, Hecksher-Sorensen J, Baldock R, Davidson D.「３Ｄ顕微鏡法および遺伝子発現の研究のためのツールとしての光学投影断層撮影」（“
Optical projection tomography as a tool for 3D microscopy and gene expression studies”）Science.2002 Apr 19;296(5567);541-5.。
【００１５】
この発明の範囲を離れることなく、この発明の変形を行ない得ることが理解されるであろう。
【００１６】
この発明を添付の図面を参照して例によってさらに説明する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
詳細な説明
装置は、円筒形の外側のケーシング２を有する固定構造を含み、その上部には環状の溝槽３が位置付けられ、これは上部で開口している。固定構造には、中央のハブまたはスピンドル５を有する可動構造４が取付けられ、その上部にはディスク状の蓋６が取付けられ、その下側は角度をもって隔てられかつ下方に垂れ下がったいくつかの円筒形の磁石７を担持する。ハブまたはスピンドル５は、図４の８に示される中央の垂直の軸の周りでの可動構造の回転のために固定構造に回転可能に取付けられる。さらに、ハブまたはスピンドル５は、垂直な軸８に沿って固定構造１に対して垂直の並進運動が可能である。
【００１８】
ケーシング２内には、図４の９に示されるように、回転運動および並進運動の両方で構造４を駆動するためのモータおよび伝達装置がある。溝槽３は、液体で満たすことができ、構造１は、これら液体を保持するための容器、および図４の１０に示されるように、溝槽を満たし空にするためのポンプを含む。
【００１９】
磁石７は、組織の検体１２を着脱可能に保持するために使用され、その各々は、検体の一端にある金属の台１３で準備されている。これにより各金属１３台は磁石７の１つから垂れ下がり、検体１２は台１３から下方に垂れ下がっている。この装置が開いた状態であるとき（図１）、磁石７は溝槽３の上部から十分に持上げられ、検体１２を磁石７に装着するかまたはそこから取外すことができる。この装置が閉じられた位置にあるとき（図２）、蓋６がケーシング２の上部と係合し、検体１２は溝槽３内の液体１４に浸漬される。
【００２０】
図６および図７に示されるロボットアーム１５は、処理されていない検体を装置に載せるために使用され、処理された検体を装置から検体が画像化されるＯＰＴスキャナの回転ステージ１６へと移動させるのにも使用される。
【００２１】
使用中、ロボットアーム１５は検体を装置に載せるのに使用され、各検体は、磁石７と検体１２の一端にある金属の台１３との間の磁気引力によって対応する磁石７の下方端部に装着され、検体が載せられるとき可動構造４は開いた位置にあり、回転の向きに索引をつけられる。検体が載せられると、可動構造はその下方の位置または閉じられた位置に動かされ、これにより検体１２は溝槽３にポンプで入れられた液体１４に浸漬される。この閉じられた位置では、蓋６は外側のケーシング２の上方の縁に係合して液体１４は空気に対して閉じられ、これにより、液体を通って検体を移動するためにコンベアベルトを使用する既知の装置とは異なり、揮発性の液体の使用が可能である。
【００２２】
一連の液体によって検体を処理する必要がある場合、第１の液体は溝槽３から排出され、第２の液体がポンプでそこに入れられ、溝槽３を空気に対して開放する必要はない。さらに、金属の台１３を磁石７に装着することによって、検体１２は垂れ下がり位置に保持されるため、検体は、それらを損傷し得る溝槽３の底部に係合しない。
【００２３】
このようにして任意の数の処理ステージを実行することができ、液体は、検体を動かす必要なく、かつ少量の各処理液で交換される。
【００２４】
検体１２の処理の後、可動構造４はその上方の位置に持上げられ、処理された検体１２はロボットアーム１５によって回転ステージ１６に移動され、構造４は回転の向きに索引をつけられるため、ロボットアーム１５は各検体１２を降ろし、処理された検体５を回転ステージ１６へと移動することができる。
【００２５】
検体を処理するための液体の例は、定着液（ポラフォルムアルデヒドまたはホルマリンなど）、アルコール（特にメタノールおよびエタノール）および検体を洗浄するための有機溶剤（特にベンジルアルコールおよびベンジルベンゾエート）である。
【００２６】
この発明の範囲を離れることなく、この発明に変形を行ない得ることが理解されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】この発明による開いた状態の装置の等角図である。
【図２】閉じられた状態の装置の等角図である。
【図３】この装置によって保持される検体を示す、開いた状態の装置の一部の拡大断片図である。
【図４】装置の断面図である。
【図５】ロボットアームと組合せた装置の図である。
【図６】図５の部分の拡大図である。
【図７】検体をＯＰＴスキャナの回転ステージへと位置付けているロボットアームの図である。
【国際調査報告】
2005531005.tif 000010
2005531005.tif 000011
2005531005.tif 000012
2005531005.tif 000013