(57)【要約】本発明は、眼の損傷や炎症に適用するのに適したマイクロスフェアの組成物、及び眼の損傷や炎症の予防及び治療において本組成物を単独で又は他の薬剤と組合わせて用いる方法に関する。治癒速度を高める本組成物は、異物、感染、熱傷、病巣、裂傷、虚血、鈍的外傷からの損傷、外傷性前房出血、交感性眼炎、放射エネルギーからの損傷、白内障、角膜びらん又は視神経損傷に起因する損傷、また、線維柱帯切除(濾過手術)後; 翼状片手術後; 眼の付属器外傷後や手術後; 眼内手術後; 硝子体切除術後; 網膜剥離後又はレチノトミーレクトミー後のような手術における損傷を含むがこれらに限定されない損傷や炎症を治療するために使用し得る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
組成物を貯蔵し混合し、その組成物が分配され眼の表面に適用され得る、包装された治療組成物であって、前記組成物が懸濁液中に約0.001〜25重量％のマイクロスフェアと前記マイクロスフェアのための薬学的に許容しうる担体を含み、前記マイクロスフェアが細胞膜と多点接触を生じることができ、前記マイクロスフェアが治療期間の間に、ほとんど生分解性でなく; 前記マイクロスフェアが前記担体にほとんど不溶である、前記治療組成物。
【請求項２】
前記マイクロスフェアが、ポリスチレン、誘導体化ポリスチレン、ポリリジン、ポリ-N-エチル-4-ビニルピリジニウムブロミド、ポリメチルアクリレート及びシリコーンからなる群より選ばれた材料から製造される、請求項1記載の治療組成物。
【請求項３】
マイクロスフェアが、相当な電荷をもつ表面基を示す、請求項1記載の治療組成物。
【請求項４】
前記表面電荷が実質的に負である、請求項6記載の治療組成物。
【請求項５】
前記マイクロスフェアの直径が、約0.01μm〜約200μmの範囲である、請求項1記載の治療組成物。
【請求項６】
前記マイクロスフェアの直径が、約1μm〜約100μmの範囲である、請求項6記載の治療組成物。
【請求項７】
前記マイクロスフェアの直径が、約2μm〜約20μmの範囲である、請求項7記載の治療組成物。
【請求項８】
前記組成物が、直径が約1μm〜約10μmの範囲である、薬学的に許容しうる担体中のマイクロスフェアの懸濁液を含む、請求項7記載の治療組成物。
【請求項９】
前記組成物が、前記マイクロスフェアの少なくとも80%の粒度分布が直径3〜7マイクロメートルであり、pHが約7〜9である、薬学的に許容しうる担体中のマイクロスフェアの懸濁液を含む、請求項8記載の治療組成物。
【請求項１０】
ポリヒール1からなる、請求項9記載の治療組成物。
【請求項１１】
前記組成物が、創傷治癒、細胞融合、角膜間質の再造形や再上皮化、瘢痕減少、眼損傷治癒、又は疼痛軽減を促進させる、請求項1記載の治療組成物。
【請求項１２】
前記組成物が、線維柱帯切除術(濾過手術); 翼状片手術後; 眼の付属器外傷や手術後; 眼内手術後; 硝子体切除術後; 網膜剥離後又はレチノトミーレクトミー後を含む眼の手術と関連している眼の炎症を軽減又は予防する請求項1記載の治療組成物。
【請求項１３】
前記薬学的に許容しうる担体が水性媒体である、請求項1記載の治療組成物。
【請求項１４】
抗生物質を更に含む、請求項1記載の治療組成物。
【請求項１５】
前記抗生物質が、テトラサイクリン、オキシテトラサイクリン、ゲンタマイシン、ゲンタマイシン硫酸ネオマイシン、バシトラシン、ポリマイシンB硫酸塩及びグラマシクリンからなる群より選ばれる、請求項14記載の治療組成物。
【請求項１６】
医薬剤を更に含む、請求項1記載の治療組成物。
【請求項１７】
前記医薬剤が抗ヒスタミン剤を含む、請求項16記載の治療組成物。
【請求項１８】
前記医薬剤が抗炎症剤を含む、請求項16記載の治療組成物。
【請求項１９】
前記医薬剤が、抗癌剤、抗ウイルス剤又は抗真菌剤からなる群より選ばれる、請求項16記載の治療組成物。
【請求項２０】
前記医薬剤が金属イオンを含む、請求項16記載の治療組成物。
【請求項２１】
前記金属イオンが、亜鉛、マグネシウム、コバルト、鉄、銅及びマンガンからなる群より選ばれる、請求項20記載の治療組成物。
【請求項２２】
前記医薬剤が麻酔剤である、請求項16記載の治療組成物。
【請求項２３】
前記医薬剤が、リドカイン、プロカイン、及びエピネフリンからなる群より選ばれた麻酔剤を含む、請求項22記載の治療組成物。
【請求項２４】
前記医薬剤が鎮痛剤である、請求項16記載の治療組成物。
【請求項２５】
前記鎮痛剤が、モルヒネ、ヘロイン及びフェンタニールからなる群より選ばれる、請求項24記載の治療組成物。
【請求項２６】
医薬剤が、シクロオキシゲナーゼ-2阻害剤である、請求項16記載の治療組成物。
【請求項２７】
医薬剤がビタミンである、請求項16記載の治療組成物。
【請求項２８】
医薬剤がスルホンアミドである、請求項16記載の治療組成物。
【請求項２９】
医薬剤が、チモロール、エピネフリン、及びアセタゾラミドからなる群より選ばれた眼圧を低下させる薬剤である、請求項16記載の治療組成物。
【請求項３０】
医薬剤はアミノ酸である、請求項16記載の治療組成物。
【請求項３１】
生物学的薬剤を更に含む、請求項1記載の治療組成物。
【請求項３２】
生物学的薬剤が蛋白質分解酵素である、請求項31記載の治療組成物。
【請求項３３】
生物学的薬剤が、21-アミノステロイド類と併用したブラジキニン拮抗剤である、請求項31記載の治療組成物。
【請求項３４】
生物学的薬剤が毛様体筋麻痺剤である、請求項31記載の治療組成物。
【請求項３５】
生物学的薬剤が成長因子である、請求項31記載の治療組成物。
【請求項３６】
成長因子が、PDGF、PDAF、TGFB、PF-4、αFGF、βFGF、EGF及びGHからなる群より選ばれる、請求項35記載の治療組成物。
【請求項３７】
被検者の眼の炎症又は眼の損傷を治療する方法であって、該被検者の損傷した目に請求項1記載の組成物の有効な量を投与することを含む、前記方法。
【請求項３８】
損傷が、線維柱帯切除(濾過手術)後; 翼状片手術後; 眼の付属器外傷後や手術後; 眼内手術後; 硝子体切除術後; 網膜剥離後又はレチノトミーレクトミー後を含む眼科手術によるものである、請求項37記載の方法。
【請求項３９】
前記眼の損傷が、異物、感染、熱傷、病巣、虚血、鈍的外傷からの損傷、外傷性前房出血、交感性眼炎、放射エネルギーからの損傷、白内障、又は視神経損傷からの損傷を含む、請求項37記載の方法。
【請求項４０】
前記熱傷が、化学傷、熱傷及び放射線熱傷からなる群より選ばれる、請求項38記載の方法。
【請求項４１】
容器を含む装置であって、前記容器が請求項1記載の組成物を保持している、前記装置。
【請求項４２】
前記装置が前記組成物を再懸濁するために用い得る、請求項41記載の装置。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
1. 発明の分野
本発明は、眼の炎症又は損傷に適用するための抗炎症特性を有する創傷治癒能力をもったマイクロスフェアの組成物、及び眼の炎症又は損傷の予防及び治療において前記組成物を単独で又は他の薬剤と組合わせて用いる方法に関する。
【０００２】
2. 発明の背景
目は、微生物及び他の異物に対する効果的な障壁である、眼瞼の皮膚から始まる、感染や損傷に対する一連の防衛手段をもっている。角膜に接している結膜は、異質粒子を捕らえるとともに目がぬれているように設計された粘膜である。角膜上皮は、2つの保護機序をもっている。流体の浸透を防止する角膜上皮の基底の密着結合と、微生物の付着を防止する涙層の連続すり液体瞬間によって滑らかにされる角膜上皮の表面。目の表面から涙が蒸発すると眼表面温度が低下して微生物生育を阻害し、まばたきによって微生物が取り除かれる。しかしながら、感染や損傷を防止するこれらの機序や他の機序は、目に対する炎症又は損傷によってほとんど効果がなくなることがあり得る。軽い損傷さえ、目の上皮表面を破損させることができ、微生物が付着しコロニーを作る場所を与える。
眼の損傷は、一般的であり、スポーツ損傷からの鈍的外傷、金属又はガラスの破片のような異物、鋭い物体からの裂傷、化学傷又は熱傷を含む多くの方法において引き起こされ得る。治療には、しばしば、あらゆる異物の除去、目をすすいで化学剤を希釈すること、裂傷の縫合、局所抗生物質の適用が含まれる。損傷は、当て布がしばしば眼表面温度を上げることによって微生物生育を促進し、微生物に有利な状態をつくるので当て布をしてもしなくてもよい。目の損傷は感染の危険度を低減するために、できる限り急速に治癒することが重要である。
眼性炎症は、組織損傷の非特異的な結果である。炎症反応を誘発し得るいくつかの物質があるが、微生物(細菌、ウィルス、又は菌類)感染や種々の免疫状態(例えば、過敏症、アレルギー、自己免疫)が眼の炎症の最も一般的な原因である。化学傷や熱傷と関連している炎症は、目、特に角膜上の高度に破壊的な結果をもち得る。角膜に対する物理的な外傷は、眼内の炎症、緑内症に至る癒着、二次膜形成を伴うことができる。
【０００３】
眼の損傷の治癒過程の間、合併症が起こることがある。損傷が生じた1週間後に角膜の上皮化が不完全な場合には、間質壊死の危険がある。場合によっては、二次出血、酸素フリーラジカルによる組織損傷、又はスキャニングの危険がある。眼の損傷の治癒速度は、糖尿病又は老年のようなこれに限定されない複雑な要因をもつ患者において遅くなることがある。
組成物を目に局所適用することに関連している主要な問題は、ヒト目が非常に感度が高い器官であるということと適合しないあらゆる物質が刺激や痛みを引き起こすことである。これにより、眼表面から刺激性物質の除去を意図した生理的反応であるまばたきと反射-催涙が呼び起こされる。刺激は、眼投与に意図された多くの組成物おける不十分な患者コンプライアンスが主な原因である。この現象は、局所適用された眼薬の生体利用性が通常は非常に不十分であるので、治療効果を得るためにそのような眼組成物中の薬剤の比較的高い濃度を含むことを必要とすることにより悪化する。従つて、組成物の刺激作用の低下が、眼薬剤の生体利用性を上げること、薬剤による患者のコンプライアンスを高めること、薬剤の治療効力を高めることを可能にすることは疑いない。
水溶液は、眼薬に極めて一般的な賦形剤であるが、このことにより投与された薬剤の眼の生体利用性は、急速な排液と涙液代謝回転のために通常非常に不十分である。Fitzgerald et al. (1987) J. Pharm. Pharmacol. 39:487-490を参照のこと。眼科用液剤の典型的な用量は約50-100μlの範囲にあり、約7-1Oμlの正常な涙の容積をはるかに上回る。従って、眼瞼裂溝から流出によって除去されない用量の部分が急速に排液する。更に、ヒトにおいては正常状態下で毎分約16%である、流涙及び生理的涙液代謝回転が眼組成物の導入の後に上がり、流出又は排出されなかった薬剤の残量の急速な希釈が生じる。結果として、液体水性組成物によって目に適用される薬剤の目(すなわち、角膜や強膜)の吸収表面との接触時間は約2分未満である。
【０００４】
目における薬剤滞留時間を長くする種々の送達賦形剤を開発する試みがなされた。この目標を達成する最も直接的な方法は、賦形剤の粘度の増加によるものである。従つて、種々の粘稠な賦形剤、例えば、ヒドロゲル又は軟膏が試みられ、一部は疎水性薬剤の目への送達を可能にする。更に、眼薬の賦形剤として種々の慣用でない担体、例えば、リポソーム、ミセル溶液、ナノパーティクルを用いる多くの試みがなされた。そのような送達系は、目における薬剤の滞留時間を延長する際の成功が制限られるものであるので、眼の生体利用性の増進は一部である。Harmia et al. (1987) pharm. Acta Helv. 62:322-332. Saettone et al. (1988) J. Pharm. 4367-7O; Meisner et al. (1989) Int. J. Pharm. 55:105-113を参照のこと。欧州特許第391,369号、Ellis et al. (1987) J. Ocutar Pharmcol. (U.S.) 3:121-128;Shell (1984) Surv. Ophthalmol. 29:177-178)のような文献においては、薬剤を目に送達する賦形剤としてエマルジョンが示された。
抗炎症ステロイド類は、一般的な眼の適応症に一般に投与される薬剤の多くの種類の一種である。これらの物質は、眼圧を上げることが既知であること、また、創傷治癒を直接又は間接的に妨害することがある欠点をもつ。
コルチコステロイド類のような局所ステロイド類は、目の抗炎症治療に、特に眼瞼又は球の結膜、前角膜、眼球の後部炎症症状を治療するために一般に用いられる。ステロイド類に共通の治療適用としては、自己免疫、アレルギー、ウィルスタイプの結膜炎、酒さざ瘡、表在性虹彩炎、インド毛様体炎、ブドウ膜炎のような後部炎症過程が含まれる。ステロイドは、また、化学傷又は熱傷、又は異物の侵入による角膜損傷と関連している炎症を改善するために用いられる。そのような状態は、目の手術、損傷、アレルギー又は感染症から生じることがあり、厳しい不快感が生じることがあり得る。
【０００５】
眼変性、物理的化学的外傷性眼損傷、眼の炎症の後遺症を治療するために多くの治療や治療剤が長年にわたって開発されてきた。これらの多くが有効であることとともに損傷を受けた目の組織に許容レベルの治療を与えることがわかったが、他は、すでに損なわれた/負傷した目を更に易損性(例えば、毒性)に処置する許容できない副作用を持つ。
それらの治療の利点にもかかわらず、コルチコステロイド類の眼の局所使用は、眼圧の上昇、後嚢下白内障形成、続発性の眼感染、角膜創傷治癒の遅延、ブドウ膜炎、散瞳、一時的な眼性不快感及び下垂症を含む多くの合併症と関連している。多くの全身系合併症も、コルチコステロイド類の眼の局所適用に起因することがある。これらの合併症には、副腎機能不全、クッシング症候群、消化性潰瘍形成、骨粗鬆症、高血圧、筋肉虚弱又は萎縮、発育阻止、糖尿病、感染症の活性化、気分変化及び創傷治癒の遅延が含まれる。
多くの抗生物質(例えば、βラクタムやある種のフルオロキノロン)は、十分に通用しないか、毒性を引き起こすか、又は中程度の効力である。自己免疫の眼疾患、例えば、ブドウ膜炎を治療する際の免疫抑制剤の使用は、骨髄うつ病、血小板減少症、出血、嘔気、嘔吐、口内炎を含む多くの重い副作用を含むことから議論を引き起こしやすい。眼変性、損傷、外科的な外傷、及び付随する炎症の一次後遺症や二次後遺症の処置において有益であることがわかった物質の包括的で網羅的なリストを試みずに、代表的な種類の化合物には、抗菌性物質(例えば、広域抗生物質)、抗ウイルス剤、非ステロイド系消炎剤(NSAlD)、アミノステロイド類、コラゲナーゼ阻害剤、コリン作用剤、毛様体筋麻痺剤、創傷治癒モジュレータが含まれる。
本発明者は、マイクロスフェアがヒトにおけるの糖尿病性潰瘍を含むある種の創傷の治癒を高めるために用い得ること(米国特許第5,861,149号)、また、その特許が本出願に全体で含まれることを記載した。本発明は、マイクロスフェア組成物が抗炎症性を有する創傷治癒能力をもつことを発見した後の眼の処置のためのこれらのマイクロスフェアの使用に関する。
本発明によれば、目の随伴する炎症過程を同時に軽減しつつ創傷治癒を高めるための効果的手段(ステロイド類やNSAIDのような抗炎症投薬を必要としない)がまず提供され、それにより、長く渇望された要求が成し遂げられた。
【０００６】
3. 発明の概要
本発明の目的は、眼の損傷を治療又は予防することができ、損傷した目に適用した場合に眼の組織の治癒を促進させることもできる組成物を提供することである。
本発明の目的は、炎症や炎症反応を治療又は防止することができ、炎症を起こした目に適用した場合に眼組織の治癒を促進させることができ、手術のために損傷を受けた目の準備時間を短くすることができる組成物を提供することである。
本発明の他の目的は、マイクロスフェアの懸濁液の媒体として役立つ組成物及び医薬剤の薬剤送達システムを提供することである。
本発明の更に他の目的は、目における瘢痕形成を防止する組成物を提供することである。
本発明の更に他の目的は、目における細胞融合を促進させるのに役立つ組成物を提供することである。
本発明の更に他の目的は、炎症反応を軽減し、それにより、眼の治癒を容易にしつつ瘢痕化を防止する組成物を提供することである。
本発明の更に他の目的は、マイクロスフェアと、眼の損傷治癒を促進させる外因性成長因子とを含む組成物を提供することである。
本発明の更に他の目的は、補助治療として手術、放射線療法又は化学療法に適用される、活性物質の有無にかかわらずマイクロスフェアを含む組成物を提供することである。
本発明の更に他の目的は、マイクロスフェアと、抗生物質; ビタミン; 鉱物; 抗癌剤; 抗ウイルス剤; 抗真菌剤; 鎮痛剤又は麻酔剤; スルホンアミド; チモロール、エピネフリン、アセタゾラミドを含むがこれらに限定されない眼圧を低下させる薬剤; 間質の壊死を防止する蛋白質分解酵素; アセチルシステイン、ペニシラミン、エチレンジアミン四酢酸(EDTA)を含むがこれらに限定されない他の薬剤; 21-アミノステロイドと組み合わせたブラジキニン拮抗剤; 毛様体筋麻痺剤; 抗酸化剤; メチルプレドニゾロンを含むがこれに限定されない抗炎症剤や非ステロイド抗炎症剤からなる群より選ばれた既知の活性治療剤とを含む組成物を提供することである。
本発明の更に他の目的は、あらゆる上記要因による炎症反応による発症、眼の炎症、創傷治癒又は手術後の目のリハビリテーションを防止するあらゆる侵襲的又は非侵襲的治療とともに用いられるマイクロスフェアを含む組成物を提供することである。
本発明の更に別の目的は、手術の前に目の予防的治療のためのマイクロスフェアを含む組成物を提供することである。
本発明の更に他の目的は、線維柱帯切除術(濾過手術)後、翼状片手術後、眼付属器外傷及び手術後、眼内手術後、特に、硝子体切除術後、網膜剥離後、網膜切開術/切除後の治療のためのマイクロスフェアを含む組成物を提供することである。
これらの目的と他の目的は、本明細書に開示される組成物及び方法によって満たされる。
【０００７】
予想外に、眼適用のためこれらのマイクロスフェアの安全と効力の評価中に、マイクロスフェアのこれらの懸濁液が顕著な抗炎症性を有するということが発見された。それ故、創傷治癒過程を促進させる際のマイクロスフェアの効用に加えて炎症現象の発症を抑制するのに有効であることが企図される。
マイクロスフェア製剤の抗炎症特性は、そのような炎症過程が眼の損傷に伴っても伴わなくても炎症を含む適用に用いることができる。
マイクロスフェア組成物は、抗炎症ステロイド類の使用に伴って生じることが既知である、創傷治癒過程を損なうことなく炎症過程を抑制することが重要である、眼の損傷を治療するのに特に有効である。
本発明によれば、本組成物は荷電された表面基をもつマイクロスフェアを含み、ここで、電荷は負又は正であり得、前記組成物はpH約7-9である。マイクロスフェア材料は、ポリスチレン、誘導体化ポリスチレン、ポリメチルメタクリレート(PMMA)、シリコーン、ポリリジン、及びポリ-N-エチル-4-ビニルピリジニウムブロミドからなる群より選ばれる。本発明のある種の実施態様によれば、荷電されたる表面基は、ポリスチレン、誘導体化ポリスチレン、硫酸塩、ポリ-N-eエチル-4-ビニルピリジニウムブロミド、プロタミン、硫酸プロタミン、プロタミン塩、ポリリジン及びカルボキシルからなる荷電された基より選ばれる。また好ましくは、マイクロスフェアの直径は、0.01マイクロメートル(ミクロン)〜約200マイクロメートル(ミクロン)の範囲、更に好ましくは約1〜約100マイクロメートル(ミクロン)の範囲、最も好ましくは約2〜約20ミクロンの範囲をもつ。本発明の他の実施例によれば、組成物は、また、マイクロスフェアのための薬学的に許容しうる担体を含む。
本発明によれば、本組成物は生理食塩水又は他の薬学的に許容しうる賦形剤を含む液体製剤を形成するのに適した薬学的に許容しうる担体を含む。目における組成物の滞留時間を長くするために当該技術において既知であるように種々の添加剤によって媒体の粘度を上げることが可能である。
本発明によれば、眼の損傷を治療するための組成物は、細胞膜と多点接触を生じることができるマイクロスフェア及びマイクロスフェアがほとんど不溶である場合の薬学的に許容しうる担体、及び組成物を保持するための容器を含んでいる。担体は、好ましくは水性媒体である。
本発明によれば、無菌状態のマイクロスフェアの組成物を保持し、細胞膜と多点接触を生じることができる容器が提供される。
本発明によれば、マイクロスフェアと1種以上追加の活性物質の無菌組成物を保持する容器が提供される。
本発明によれば、マイクロスフェアと1つ以上のその他の容器の無菌の組成物を保持し、各々が活性物質の製剤を保持し、損傷に適用する前にマイクロスフェアと混合することができ、又は、別個に損傷に適用することができる容器が提供される。
【０００８】
4.図面の簡単な説明
本発明とその付随する利点や特徴のより完全な理解は、ポリヒール(Polyheal)1が化学薬品の直後に適用された添付の図面とともに考慮された場合、次の詳細な説明によって容易に理解される
【０００９】
5.発明の詳細な説明
本発明は、マイクロスフェアを用いることにより眼の損傷の治癒を促進させるための予防や治療の組成物及び方法に関する。予想外に、本明細書に記載されるサイズ範囲のマイクロスフェアは、いかなる薬剤又は治療物質を更に添加又は封入せずに眼の損傷の治癒を促進させる。後述するように、マイクロスフェアは、分解せず、それらの治療効果を生じる他の化学的変化も受けない。本発明のマイクロスフェアは、また、補助療法として従来の治療、例えば、放射線又はレーザ療法に投与され得る。
驚くべきことに、ここで、標準の眼刺激性試験によって評価されるように、本発明のマイクロスフェアが有効な抗炎症性を有することが初めて開示される。それ故、マイクロスフェアは、目に対する損傷に無関係な適応症の炎症の治療の効用を有する。
これらのマイクロスフェアの構造は、コア材料及びマイクロスフェアの少なくとも外部に存在する荷電された表面基の少なくとも一つの種類を含んでいる。材料の例としては、ポリスチレン、ラテックス、ポリ-β-アラニン、ポリメチルメタクリレート(PMMA)、シリコーン、誘導体化ポリスチレンのような長鎖ポリマーが含まれる。表面基の例としては、硫酸塩、ポリ-N-エチル-4-ビニルプリジニウムブロミド、プロタミン、硫酸プロタミン、プロタミン塩、ポリリジン、カルボキシル、ポリスチレンを含む。これらの表面基は、コア材料の一部として存在することができ又は長鎖ポリマーの誘導体化として、そのような化学工程によって後で添加することもできる。以後、“誘導体化"という用語は分子又はそれの一部を化学的に変更、修正、又は変化させる過程を意味する。ポリマーから製造されるマイクロスフェアは、水性媒体にほとんど不溶でなければならず、そのような媒体に懸濁したもの又は分散したものが形成される。
本発明のパラメータを更に明らかにするために、多くの用語を定義しなければならない。以後、“損傷"という用語は、金属及びガラスの破片を含む目のあらゆるパッドにおける異物、裂傷、鈍的外傷、化学傷又は熱傷によって生じる損傷、交感神経眼炎(ブドウ膜路のび慢性炎症)、外傷性前房出血、放射白内障のような放射エネルギー、医療手順中に維持される損傷、慢性又は遺伝状態によって生じる損傷、微生物感染、角膜びらん、栄養的且つ毒性の視覚神経障害から損傷を含むがこれらに限定されない目のあらゆる損傷を意味する。以後、”被検者"という用語は、本発明が実施されるヒト哺乳動物又はより下等動物を意味する。以後、“促進させる"という用語は、加速することや増強することを含んでいる。下記の考察は特定の種類のマイクロスフェアを意味するが、これは決して限定するものではない。これらのマイクロスフェアが、固体か中空である、ビーズ、粒子、又は小球であり得ることは当業者に理解される。本発明の好適な実施例においては、これらのマイクロスフェアは、薬剤がほとんど不溶性である、薬学的に許容しうる担体媒体に、水性媒体に懸濁したものとして分散される。マイクロスフェアの形状は、定型的、例えば、球形又は楕円、又は定型的非球面形状であり得; 粒子の形状は、非定型的でもあり得るので、表面は単一の連続曲線でなく、表面は平滑でもない。
【００１０】
マイクロスフェアは、異なるポリマーの混合物であり得、異なるサイズの異なる粒子、ビーズ又は小球の混合物であり得る。薬剤は、また、異サイズの孔をもつことができる。
少なくとも薬剤は、次の特性を持たなければならない:
1. 細胞又はその細胞の一部、例えば、この外部細胞膜やこの膜上の分子と多点接触を生じることができなければならない;
2. 有意な化学変化又は分解なしで眼の損傷を治癒を促進させることができなければならない;
3. 体液のような水性媒体にほとんど不溶で、代わりに懸濁液を形成しなければならない。
後述されるように、本発明の薬剤の効果は薬剤の材料と細胞の一部、例えば、外部の細胞膜間に多点接触の形成に関連があると思われ、それにより、細胞が付着することができる付着した表面を形成することからこれらの特徴は重要である。そのような多点接触は、荷電された基を分子と外部細胞膜の一部との相互作用に利用できることを可能にする多くの異なるポリマーにおいて可能である。従って、下記の説明は薬剤の１つの種類、マイクロスフェアに集中しているが、それが理解されて、本発明がそのような多点接触を形成することができるあらゆる材料を包含することは理解される。
上記のように、マイクロスフェアの直径は、好ましくは約0.01マイクロメートル(ミクロン)〜約200マイクロメートル(ミクロン)の範囲、更に好ましくは約1〜約100マイクロメートル(ミクロン)、最も好ましくは約2〜約20マイクロメートル(ミクロン)の範囲にある。本発明のマイクロスフェア組成物のpHは、約7-9である。あらゆる機序によって縛られていることを望まないが、これらの好適範囲が創傷領域を浸潤させるマクロファージによってマイクロスフェアの取り込みを可能にするための最良のサイズであることは留意すべきである。マイクロスフェアは、実際に引き付けるように見え、マクロファージの少なくとも一部、おそらくはマクロファージの外部細胞膜の分子との接触によってマクロファージを活性化する。従って、マイクロスフェアに観察される抗炎症作用と抗菌作用はおそらくマクロファージ又は他の細胞の活性化で得られた間接効果である。
【００１１】
マイクロスフェアの他の重要な特性は、表面基の電荷である。マイクロスフェアのある種の好ましい例がもつ全体の電荷は、ZetaMaster(Malvern Instruments、英国)から電気泳動移動度(ミリボルト)によって、Z又はゼータ電位として測定した。以下に、負でも正でも、“荷電した"という用語は絶対値が少なくとも約1 mV、好ましくは約10 mVのZ電位を意味する。
本発明のマイクロスフェアは、目に便利に適用し得る溶液に懸濁される。マイクロスフェアは、従来法によって至適pHと様々な濃度と容積でアルゴン、ネオン、又は窒素下で滅菌の容器内に包装される。
試験される懸濁液中のマイクロスフェアは、凝集せず、融合せず、塊状にならず、又は、不可逆性のケーキングを受けない。マイクロスフェアは時間が経つにつれていくらか沈降したが、穏やかな撹拌によって容易に再懸濁した。
懸濁液として目に適用する場合、マイクロスフェアを適切な媒体に維持し、周囲温度で長時間の貯蔵中に、凝集体を形成しないことが必要である。許容しうる懸濁液媒体は、貯蔵期間の間に沈降した後に単に穏やかな逆転だけを必要としなければならない。
多回投与を意図した懸濁液の安定性は、潜在的微生物学的な発育を防止する保存剤の添加によって支持される。製剤は無菌状態の下で調製され、各材料のアリコートは4週間の示された微生物学的な生物体にさらされて、米国薬局方に記載されるように、発育が評価される。
満足な粒度及び安定性を有する組成物は、保存剤のない単一量懸濁液として調製することができる。これらの組成物は、無菌状態下で調製され、一回量のための容器に包装される場合に眼科使用を満たしている。
【００１２】
5.2 医薬剤と生物学的薬剤
本明細書に開示されるように、適切な賦形剤中のマイクロスフェアからなる組成物は、その他の有効成分を含まずに付随する抗炎症効果とともに眼創傷治癒を促進させる。しかし、マイクロスフェアの有益効果が1種以上の追加の医薬剤によって強化、補充又は補足することができることは理解されるべきである。
次の種類の医薬剤のいずれか1種以上: 防腐剤、抗真菌剤、抗ウイルス剤、抗ヒスタミン剤、抗生物質、抗炎症剤、鎮痛剤、鉱物、ビタミンがマイクロスフェアと共に予防又は治療組成物に含まれる得る。
治療組成物に含むことができる生物学的に活性な物質としては、スルホンアミド、蛋白質分解酵素、抗生物質、抗酸化剤、アミノ酸、マクロファージ刺激因子、麻酔剤、毛様体筋麻痺剤、COX-2阻害剤、又は21-アミノステロイドと組み合わせたブラジキニン拮抗剤が含まれるがこれらに限定されない。
眼損傷部位の再上皮化を援助するために、成長因子と調節因子を治療組成物に添加することができる。そのような因子としては、血小板由来成長因子(PDGF)、血小板由来脈管形成因子(PDAF)、形質転換成長因子-β(TGFB)、血小板因子(PF-4)、α及びβ線維芽細胞成長因子(αFGF及びβFGF)、上皮成長因子(EGF)及び成長ホルモン(GH)が含まれてもよいがこれらに限定されない。
血小板由来成長因子は、再上皮化に関係している系のカスケードを刺激し、形質転換成長因子-βは、多くの細胞型の増殖と分化を調整する二量体タンパク質のファミリである。(Massague, 1990, Ann. Rev. Cell. Biol. 6:597-619)。
眼の損傷、特に化学傷は、フリーラジカルによる壊死や組織損傷の危険度をもつ。抗酸化剤(例えば、ビタミンE)やタンパク質分解酵素又は他の薬剤(例えば、アセチルシステイン又はEDTA)を含めると、これらの状態を防止するのに有効であることがわかった。
上皮化は、また、微量元素(例えば、亜鉛、コバルト)を含むことにより高めることができる。多くの酵素、特にDNA-ポリメラーゼや逆転写酵素は、亜鉛依存性であり、上皮の増殖に必要とされる。低レベルの亜鉛は、これらの酵素の機能低下と等価である。DNA-ポリメラーゼや逆転写酵素は、上皮増殖に必要とされる。また、コバラミンとも呼ばれるビタミンB12は、酵素の中央に活性のコバルト基を有し、B12欠乏は視神経や損なわれた視覚の病変につながり得る。B12とコバルトをマイクロスフェアとともに導入すると本来は上皮である神経が治癒され、ビタミン欠乏症が対処される。
ビタミンAは、上皮化と視覚に必要である。ビタミンＡの欠乏は、粘液分泌細胞、例えば、目の結膜における細胞の減少につながり、角膜上皮において円柱上皮性細胞を層化上皮に置き換えることにつながる。ビタミンAは、また、目の杆状体細胞と相互に作用することによって、視覚にとって重要である。ビタミンAとマイクロスフェアを導入すると、上皮化を促進することができ、場合によっては、視覚を改善することができる。
【００１３】
5.3 眼の損傷
(A)異物
全ての眼の損傷の25%は、角膜の表面上に異物を含むものである。損傷が角膜上皮だけに影響を及ぼす場合には瘢痕化は生じないが、ボウマンゾーンに影響を及ぼす場合には瘢痕化は可能である。異物の除去の後、目は、スルホンアミド又は抗生物質で治療され、毛様体充血と羞明がある場合には、又は異物の除去が難しい場合には、毛様体筋麻痺剤、例えば、5%ホマトロピンで治療される。本発明の治療組成物は異物によって生じる損傷の治癒を加速し、感染を防止し、且つ臨床成果を改善するように設計されている。
(B) 化学傷
化学傷は目を流体で洗浄することによって化学剤をまず希釈し、次に、局所抗生物質の使用によって感染を防止することによって治療される。眼圧は、チモロール、エピネフリン、アセタゾラミド又は他の類似した薬剤を適用することによって低下させることができる。角膜の上皮化が1週後に不完全な場合には、感染の危険性に加えて、間質の壊死の危険性がある。それ故、治癒はされるこれらの危険を減少させるように加速することが重要である。
ひどい瘢痕化は、化学傷の他の一般的な結果である。本発明の治療組成物は、化学傷によって生じた角膜びらんの治癒を加速し、目の間質壊死と感染を防止し、角膜瘢痕化を減少させ、それにより角膜透明性を回復/保存するように設計されている。
予想外に本発明の組成物は、同時に眼の治癒、傷の修復を強化するとともに角膜透明性を維持しつつ、瘢痕形成を防止又は減少させることができる。あらゆる個々の作用機序によって縛られていることを望まないが、これらの有益効果は組成物の抗炎症作用によって得られることができるように見える。抗炎症効果が追加薬剤を含めずにマイクロスフェア懸濁液によって得られることが強調される。
【００１４】
(C) 裂傷
角膜の裂傷に続いて、虹彩が脱出し、損傷を閉じる。全ての眼の損傷のように、感染の危険がある。裂傷は強膜にも伸びることがあり、それはかなり重い損傷である。そのような場合、手術は受傷面積から脱出したブドウ膜組織を取り出すのに必要とされ、強膜は縫合によって閉じる。本発明の治療組成物は、裂傷の治癒を加速するとともに感染を防止するように設計されている。
(D) 外傷性、毒性、欠乏性、及び遺伝性視神経障害  視覚神経障害は視神経に影響を及ぼし、視覚に悪影響を及ぼすことがある。頭部が物体、例えば、ボールに打たれた場合、又はそれが物体、例えば弾丸によって貫通した場合には、外傷性視神経障害は生じることがある。毒性視神経障害は、視神経に対して毒性の化学薬品によって生じ;  一般的な例は、メタノールの摂取である。欠乏性視神経障害は、B12欠乏のようなビタミン欠乏症から生じることがあり、視神経の病変を生じてしまう。
遺伝性視神経障害は、核又はミトコンドリアゲノムの突然変異によって生じ得る。本発明の治療や予防の化合物は、視神経を治癒させるとともにビタミン欠乏を補正するために用いることができる。また、視覚細胞ゲノムの突然変異を減少又は防止する環境をつくることができる。
(E) 炎症症状
マイクロスフェアの懸濁液は、特に眼付属器、眼瞼の又は球結膜、角膜及び眼球の前分節の炎症状態を治療するために、目の抗炎症治療として用いることができる。抗炎症性マイクロスフェア懸濁液の一般的な治療的適用としては、ウイルス性、アレルギー性結膜炎、酒さざ瘡、虹彩炎、虹彩毛様体炎が含まれる。マイクロスフェアは、また、化学傷又は熱傷又は異物の侵入による角膜損傷と関連している炎症を改善するために用いることができる。そのような状態は、手術、損傷、アレルギー又は目に対する感染から生じることがあり、重い不快が生じる。
特に、マイクロスフェアは、NSAI剤やコルチコステロイドの一般的な局所眼使用と比較して、炎症反応を減少させる点でかなりの治療的利点をもっている。局所ステロイド類の使用は、後嚢下白内障形成、眼圧の上昇、続発性の眼感染、角膜創傷治癒の遅延、ブドウ膜炎、散瞳、一時的な眼性不快感及び下垂症を含む多くの合併症と関連している。多くの全身系合併症も、コルチコステロイド類の眼の局所適用に起因することがある。
これらの合併症には、副腎機能不全、クッシング症候群、消化性潰瘍形成、骨粗鬆症、高血圧、筋肉虚弱又は萎縮、発育阻止、糖尿病、感染症の活性化、気分変化及び創傷治癒の遅延が含まれる。
(F.)眼の外科的適用
本発明のマイクロスフェアの組成物は、また、眼手術と関連している炎症を改善するために用いることができ、これに関連して、上で詳述されたように予防的治療において並びに治癒を促進させること及び瘢痕化を減少させることにおいて特に有効である。
本発明の組成物の使用は、線維柱帯切除術後(濾過手術); 翼状片手術後; 眼性付属器外傷後や手術後; 眼内手術後、特に: 硝子体切除術後、網膜剥離後、レチノトミーレクトミー後が特に適している。
本発明の組成物及び方法が有効である一般的な外科的手術の非限定的例としてこれらが役立つものであることは、当業者によって理解される。
【００１５】
6. 実施例
実施例1
化学傷によって生じる角膜びらんの上皮化に対するマイクロスフェアの効果
本発明のマイクロスフェアは、重い化学傷によって生じる目の炎症反応を著しく減少させるために示された。
本発明の有効性を試験するために、6匹のニュージーランドアルビノ成体ウサギ(体重2.5-3.5kg)の左眼に適用された5N NaOHで浸漬した標準化ろ紙ディスクによって化学傷が生じた。3匹の対照ウサギの創傷を、DMEM(賦形剤対照)で治療した。3匹の試験ウサギの創傷を、Polyheal1、本発明の一具体的実施態様で治療した。
Polyheal1は、4.5×1O6±25%粒子/mlの濃度において粒子の少なくとも80%が直径3-7マイクロメートル(ミクロン)の範囲にある場合、粒度分布が1-10マイクロメートル(ミクロン)のポリスチレンマイクロスフェアから構成される。溶液のpHは、7〜9であり、ゼータ電位は-60mV以下である。重量オスモル濃度は320-354であり、発熱原性は、0.5EU/ml以下であり、発育促進可能性は、標準曲線の60%以上である。
各ウサギの目に2滴のDMEM又はPolyheal1を(1日につき4回投与した。眼の損傷治癒に対して溶液の効果を角膜の炎症反応と透明度に基づいて肉眼的に評価した。
重要なことに、損傷によって誘発された炎症反応は、対照と比較して試験ウサギにおいて著しく減少した。
この実験は、最も重症の急性アルカリ熱傷において本発明の組成物の効用を示すものである。5Nアルカリ(アンモニア)溶液に10秒間浸漬した6mmろ紙パッチを適用した後、6ヵ月齢のNZWウサギの目の臨床外見は、Polyheal1と対照の適用の後に大幅に改善された。
図1に示されるように、polyheall(q.i.d)で熱傷の直後に治療されたウサギの目は強膜白化、中程度の結膜浮腫、角膜混濁化が明らかであることを示したが、角膜はいくつかの透明な島(矢印)を示し、結膜と眼の付属器は中程度に炎症を起こしている。
図2に見ることができる比較においては、対照賦形剤(polyheal賦形剤媒体)で治療されたウサギの目は強膜白化、重い結膜浮腫、全角膜混濁化が見られることを示し、更に、結膜と眼の付属器が潰瘍性であり、高度に炎症を起こしていることは明らかである。
【００１６】
実施例2
眼刺激性試験
ウサギにおける急性眼刺激性/腐食性
1987年2月24日に採用された、the Testing of chemicals, Section 4, No. 405, “Acute Eye Irritation/corrosion"のOECDガイドライン、Draft Revised Guideline 405, March 2O00。一回量の点眼法とウサギ目の前表面の限られた曝露によって眼刺激性/腐食性を生じる、試験項目POLYHEAL 1と×10 Polyheal 1の可能性の評価、それにより、創傷治癒刺激物質としてその予測された使用の条件下で、その曝露に起因するらしい健康に有害なものに関する情報が示される。
試験系:
6匹の雌(ニュージーランドホワイトウサギ、体重2.5-3.5kg以上)を2つのグループに割けた。3匹の動物を、Polyheal 1で処理し、他の3匹を10倍濃縮マイクロスフェア懸濁液で処理した。
動物の予備試験準備:
投薬の約24時間前に、試験に暫定的に割り当てられた各試験動物の両眼を調べる。眼刺激性、眼の障害又は既存の角膜損傷を示している動物は、実験から除外される。
開始試験: 試験は1匹の動物を用いて連続の試験戦略で行われる。
この試験の結果が腐食性である物質又は目に重い刺激物であることを示す場合には、更なる試験は行われない。
確認試験:
最初の試験が腐食作用を示さない場合には、負の応答が2匹の追加動物において確認される。
刺激作用が開始試験において観察される場合には、同時に2匹の追加動物をさらすことよりむしろ1匹の動物を用いて連続の方法で、同様に続行する。第2の動物が重い刺激物作用の腐食を示す場合には、試験は継続しない。
【００１７】
試験品目の適用:
穏やかに下のまぶたを眼球から引き離した後に、試験品目を各動物の右眼の結膜嚢に入れる。次に、適用した材料の消失を防止するために、まぶたを約2秒間共に穏やかに保持される。未処理の左眼は、対照として役立つ。
洗浄:
試験動物の目は、試験品目の点眼後24時間洗い流さない。第一動物において即座の腐食作用又は刺激作用が試験品目の点眼後に観察される場合には、適切な流失状態があてはまる。この場合、ウサギの処理した目を、あらゆる損傷を引き起こさない、容積と流速を用いが滅菌生理的食塩水で洗浄する。
臨床観察と目の反応のグレーディング
試験品目の潜在的洗浄作用の最後の評価は、全3匹の動物の各々の次の洗浄パラメータの平均の１日の計算に基づく: 毎日の平均混濁; 毎日の平均虹彩炎; 毎日の平均結膜浮腫。
グレーディング時間の平均スコアが次のいずれか: 角膜2.0; 虹彩1.0; 発赤2.5; 結膜浮腫 2.5である場合には、試験品目は刺激物として分類される。
【００１８】
異なる眼の病変のグレードを次のように評価した:
角膜: 混濁、混濁の程度(表示は、最も密集した領域から取り出される);
潰瘍形成も混濁もなし;
明らかに可視虹彩の混濁(正常光沢のわずかな曇り以外の)詳細の散在又はび慢性領域;  容易に識別可能な半透明の領域; 真珠光領域をわずかに不鮮明にした虹彩の詳細; 可視虹彩の詳細なし;かろうじて識別可能な不透明な角膜の瞳孔サイズ; 混濁で識別可能でない虹彩。
虹彩: 正常
顕著に深くなったヒダ、うっ血、腫張、中程度の角膜周囲の充血; 又は充血; これらのいずれか又はそのいずれかの組合わせ;
光に反応性の虹彩(緩慢な反応は効果であるとみなされる);
出血、肉眼的破壊又は光に対する反応なし(これらのいずれか又は全て)。
結膜炎: 発赤; 眼瞼の結膜炎と球結膜炎を示す; 角膜と虹彩を除く
正常
充血のある(充血した)血管
び慢性、深紅の色; 容易に識別可能でない個々の血管
び慢性、牛肉の赤。
結膜浮腫: 腫張は、まぶた及び/又は瞬膜を示している
正常
正常よりいくらか腫張
明らかな腫張、まぶたの部分的な外反まぶたが半分閉じた腫張
半分を超えるまぶたが閉じた腫張。
眼の反応:
眼刺激性の反応を、試験品目を点眼した1時間、24時間、48時間、72時間後に調べる。刺激の所見が72時間の検査でない場合には、実験を終える。
眼曝露後、定期的な検査(１日１回)を、試験動物が有意な又は拡張した苦痛を示さないことを確認するために行った。
点眼直後に処理に関連した眼反応は認められなかった。動物のいずれも、全ての71時間の所見期間の全体にわたって、眼の刺激作用を現さなかった。それ故、Polyheal 1及び10倍の濃縮したPolyheal 1が目に非刺激物として分類することができることが結論される。
本発明は、本明細書に記載されている個々の実施態様によって、範囲において制限されるべきでない。本明細書に記載されているものに加えて本発明の種々の変更は、前述の説明及び添付の図面から当業者にとって明らかになる。そのような変更は、添付した特許請求の範囲に包含するものである。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】化学傷が誘発された４日後の試験ウサギの目を示す図である。試験ウサギをPolyheal1で治療した。
【図２】化学傷が誘発された4日後の対照ウサギグループを示す図である。対照ウサギを賦形剤DMEMで治療した。
【図１】
2005538160.tif 000002
【図２】
2005538160.tif 000003
【国際調査報告】
2005538160.tif 000004