(57)【要約】カンプトテシンのカスケードエステルが記載される。これらの化合物を製造する方法およびこれらを癌治療に使用する方法も記載される。【化１】2005529920.tif 000015
2005529920.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式Ｉの化合物：
【化１】
2005529920.tif 000014
式中、ＲがＨ、ＮＯ２、ＮＨ２、Ｎ３、ハロゲン、カルボキシル、Ｃ１−１６アルキル基、Ｃ１−１６アルケニル基、Ｃ３−８シクロアルキル基、Ｃ１−８アルコキシル基、アロキシル基、ＣＮ、ＳＯ３Ｈ、Ｃ１−８ハロゲン化アルキル基、（ＣＨ２）ｎＮＲ２７、ヒドロキシル、ＳＨ、ＳＲ８、カルボニル基、ＳｉＲ３１０；Ｃ１−１２アルケニル基、ＣＦ３、ＣＣｌ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨＦ２、ＣＨＣｌ２、ＯＨ、またはＯＲ１２であり、ここで、Ｒ基がそれぞれＡ環の９、１０、１１または１２位に位置する；Ｒ１２がＣ１−８アルキル基、Ｃ１−８アルケニル基、または芳香族基である；Ｒ７がＨまたはＣ１−８アルキル基である；ｎが１〜８の整数である；Ｒ８がＣ１−８アルキル基またはフェニル基である；Ｒ１０がＣ１−４アルキル基である；ＸがＨ、Ｃ１−８アルキル基、Ｃ１−８アルケニル基、Ｃ１−８アルコキシル基、アロキシル基、ＳｉＲ３１１基またはＣＨ２ＮＺＹである；Ｘ１がアルキレン基または芳香族ラジカルであり、かつ、Ｒ１がアルキル基、ハロアルキル基、または芳香族基、またはアセチルサリチル酸エステル、アセメタシン−イルまたはそれらの誘導体である。
【請求項２】
Ｘ１がＡｒ−Ｙ１Ｙ２Ｙ３Ｙ４であり、ここで、Ａｒが芳香族ラジカルであり、かつ、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３およびＹ４が同じまたは異なっていて、水素、アルキル基、ハロゲン基、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、ヒドロキシル基、カルボニル基、またはカルボキシル基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｙ１、Ｙ２およびＹ３がそれぞれ水素であり、かつ、Ｙ４がアルキル基、ハロゲン基、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、ヒドロキシル基、カルボニル基、またはカルボキシル基である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｙ１およびＹ２がそれぞれ、水素であり、かつ、Ｙ３およびＹ４が同じまたは異なっていて、アルキル基、ハロゲン、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、ヒドロキシル基、カルボニル基、またはカルボキシル基である、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｙ１が水素であり、かつ、Ｙ２、Ｙ３およびＹ４が同じまたは異なっていて、アルキル基、ハロゲン基、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、ヒドロキシル基、カルボニル基、またはカルボキシル基である、請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３およびＹ４が同じまたは異なっていて、アルキル基、ハロゲン基、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、ヒドロキシル基、カルボニル基またはカルボキシル基である、請求項２に記載の化合物。
【請求項７】
請求項１に記載の化合物の有効量を含む組成物を投与することを含む哺乳動物の腫瘍または癌の治療方法であって、前記腫瘍または癌が前記組成物に反応性である治療方法。
【請求項８】
請求項２に記載の化合物の有効量を含む組成物を投与することを含む哺乳動物の腫瘍または癌の治療方法であって、前記腫瘍または癌が前記組成物に反応性である治療方法。
【請求項９】
請求項３に記載の化合物の有効量を含む組成物を投与することを含む哺乳動物の腫瘍または癌の治療方法であって、前記腫瘍または癌が前記組成物に反応性である治療方法。
【請求項１０】
請求項４に記載の化合物の有効量を含む組成物を投与することを含む哺乳動物の腫瘍または癌の治療方法であって、前記腫瘍または癌が前記組成物に反応性である治療方法。
【請求項１１】
請求項５に記載の化合物の有効量を含む組成物を投与することを含む哺乳動物の腫瘍または癌の治療方法であって、前記腫瘍または癌が前記組成物に反応性である治療方法。
【請求項１２】
請求項６に記載の化合物の有効量を含む組成物を投与することを含む哺乳動物の腫瘍または癌の治療方法であって、前記腫瘍または癌が前記組成物に反応性である治療方法。
【請求項１３】
腫瘍または癌が肺、乳房、大腸、前立腺、膵臓、胃、肝臓、脳、腎臓、子宮、頚部、卵巣、尿管、直腸管に存在するか、あるいは黒色腫または白血病である、請求項７に記載の方法。
【請求項１４】
腫瘍または癌が肺、乳房、大腸、前立腺、膵臓、胃、肝臓、脳、腎臓、子宮、頚部、卵巣、尿管、直腸管に存在するか、あるいは黒色腫または白血病である、請求項８に記載の方法。
【請求項１５】
腫瘍または癌が肺、乳房、大腸、前立腺、膵臓、胃、肝臓、脳、腎臓、子宮、頚部、卵巣、尿管、直腸管に存在するか、あるいは黒色腫または白血病である、請求項９に記載の方法。
【請求項１６】
腫瘍または癌が肺、乳房、大腸、前立腺、膵臓、胃、肝臓、脳、腎臓、子宮、頚部、卵巣、尿管、直腸管に存在するか、あるいは黒色腫または白血病である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１７】
腫瘍または癌が肺、乳房、大腸、前立腺、膵臓、胃、肝臓、脳、腎臓、子宮、頚部、卵巣、尿管、直腸管に存在するか、あるいは黒色腫または白血病である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１８】
腫瘍または癌が肺、乳房、大腸、前立腺、膵臓、胃、肝臓、脳、腎臓、子宮、頚部、卵巣、尿管、直腸管に存在するか、あるいは黒色腫または白血病である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】
請求項１の化合物を含む組成物を哺乳動物へ投与することによって、生物学的条件下でカンプトテシンのラクトン環を加水分解する原因となる酵素を阻害する方法。
【請求項２０】
請求項１の化合物を含む組成物を哺乳動物へ投与することによって、生物学的条件下でカンプトテシンのラクトン環を加水分解する原因となる酵素を阻害する方法であって、酵素がトポイソメラーゼＩである方法。
【請求項２１】
前記アルキレン基が−ＣＨ２−ｎであり、ｎが１〜１５である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２２】
カンプトテシン；溶媒；有機酸；および触媒をいかなる順序でも混合することを含む、請求項１に記載のカンプトテシンのカスケードエステルを製造する方法。
【請求項２３】
さらに、前記溶媒に結合剤を混合することを含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記結合剤がジシクロヘキシルカルボジイミドである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
カンプトテシンに対する前記結合剤のモル比が、約１：２．２である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
前記溶媒が前記カンプトテシンを溶解することができるが、前記有機酸と反応することができない、請求項２２に記載の方法。
【請求項２７】
前記溶媒がヒドロキシ基を含まない、請求項２２に記載の方法。
【請求項２８】
前記溶媒がジメチルホルムアミドである、請求項２２に記載の方法。
【請求項２９】
前記有機酸が前記カンプトテシンと前記触媒を前記溶媒に接触させる前、最中または後に、前記溶媒と混合される、請求項２２に記載の方法。
【請求項３０】
前記有機酸がアシル化剤である、請求項２２に記載の方法。
【請求項３１】
前記有機酸がアセチルサリチル酸である、請求項２２に記載の方法。
【請求項３２】
前記触媒がジメチルアミノピリジンである、請求項２２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はカンプトテシンのカスケードエステルに関し、かつ、投与システムにおけるカンプトテシンのカスケードエステル誘導体、好ましくは、低毒性および低副作用を有する誘導体を含む組成物に関する。本発明はまた、哺乳動物の癌または腫瘍の治療におけるこれらの誘導体の使用に関する。本明細書において参照する全資料の記載を参考としてその全体を本明細書中に導入する。
【背景技術】
【０００２】
ウォール(Wall)およびその共同研究者によってカレンボク（Camptotheca Acuminata）(ニッサ科（Nyssaceae）)の木および樹皮から最初に単離された細胞毒性アルカロイド、カンプトテシン(J. Am. Chem. Soc. 88, 3888, 1966（非特許文献１）)は、マウス白血病Ｌ１２１０系に対して、抗腫瘍活性を有することが示された。カンプトテシンの構造、一般的に生成するインドールアルカロイド基を有するアルカロイド（ヘッケンドルフ(Heckendorf)ら、J. Org. Chem.41, 2045, 1976（非特許文献２））は、以下の式（Ｘ）として示される。
【０００３】
【化１】
2005529920.tif 000003
【０００４】
この化合物（「ＣＰＴ」）は２０（Ｓ）配置を有する環Ｅに唯一の非対照中心を有する五環性環系を有する。五環性環系はピロール[３，４−ｂ]キノリン部分（Ａ、ＢおよびＣ環）、共役ピリドン（Ｄ環）、およびα−ヒドロキシル基を有する六員環ラクトン（Ｅ環）を含む。カンプトテシンはマウス白血病Ｌ１２１０系における顕著な活性により最初に単離されたときから大きな関心がもたれていた。カンプトテシンの抗腫瘍活性についての初期のデータは、マウスの白血病Ｌ１２１０またはラットのウォーカー(Walker)２５６腫瘍などの実験的に移植された悪性腫瘍を使用して得られた(Chem. Rev. 23, 385, 1973, Cancer Treat. Rep. 60, 1007, 1967（非特許文献３）)。続いての臨床研究では、この化合物はその高い毒性ゆえにインビボ(in vivo)で抗癌剤として使用できないことが示された。カンプトテシンはそれ自体、水に不溶性である。したがって、カンプトテシンは初期には水可溶性カルボン酸ナトリウム塩として臨床的に評価されていた。この形態のカンプトテシンは重度の毒性を呈し、抗癌活性を欠いているようであった（ゴットリーブ(Gottlieb)ら、Cancer Chemother. Rep. 54, 461, 1970および56, 103, 1972（非特許文献４及び５）、ムッジア(Muggia)ら、Cancer Chemother. Rep. 56, 515, 1972（非特許文献６）、メーテル(Moertel)ら、Cancer Chemother. Rep. 56, 95, 1972（非特許文献７）およびシェッピ(Schaeppi)ら、Cancer Chemother. Rep. 5:25, 1974（非特許文献８））。これらの結果はフェーズＩＩ試験中止の原因となった。この薬剤の続いての評価では、カルボン酸ナトリウム塩は、完全なままの閉鎖ラクトン環を有する天然カンプトテシンのたった１０％の効果しか有さないことが示された（ウォール(Wall)ら、In International Symposium on Biochemistry And Physiology of The Alkaloids、モーテス（Mothes）ら編、Academie - Verlag, Berlin, 77, 1969（非特許文献９）、ジョバネッラ(Giovanella)ら、Cancer res. 51, 3052, 1991（非特許文献１０））。さらに、カンプトテシンファミリーの抗腫瘍活性における重要なパラメーターが確立されてきた（ウォール(Wall)ら、Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 17, 117, 1977（非特許文献１１））。これらの結果は、完全なままのラクトンＥ環およびα−ヒドロキシル基が抗腫瘍活性において必須であることを示す。
【０００５】
１９８９年にジョバネッラ(Giovanella)らはカンプトテシンの水不溶性誘導体のいくつかが、ヒト腫瘍の異種移植片に対して高い抗腫瘍活性を有することを見出した（ジョバネッラ(Giovanella)ら、Science, 246, 1046, 1989（非特許文献１２））。閉鎖ラクトン環を有するカンプトテシンの投与は水可溶性カルボン酸塩の注射より優れていることも示されている（ジョバネッラ(Giovenella)ら、Cancer Res. 51, 3052, 1991（非特許文献１３））。さらに、これらの知見により生物活性に対する完全なままのラクトン環の重要性が確認された。
【０００６】
２０（Ｓ）−カンプトテシン（「ＣＰＴ」）の開環は、ヒトよりもマウスで、より強力な抗癌活性を導く。事実、筋肉内（「i.m.」）、皮下（「s.c.」）および胃内（「i.s.」）投与されたＣＰＴは、マウス内のヒト腫瘍に対して、すなわちヌードマウスの異種移植片として成長した場合に、非常に強力な抗癌剤であることが立証された（ジョバネッラ(Giovanella)ら、Cancer Res. 51:3052, 1991（非特許文献１３））。しかしながら、腫瘍がヒトにおいてＣＰＴで治療されたとき、マウスよりもヒトで、より低度の抗癌活性を示した(ステーリン(Stehlin)ら、In Camptothecins: New Anticancer Agents, 1995, CRC Press, pp. 59-65（非特許文献１４）)。
【０００７】
同じ現象は他のＣＰＴ誘導体でも観察された。マウスでは、９−ニトロカンプトテシン（「９ＮＣ」）がヒト腫瘍異種移植片に対してＣＰＴよりも２〜３倍も強くて、治療されたヒト悪性腫瘍の全ての全体的根絶を生じることが立証されている（パンタジス(Pantazis)ら、Cancer Res. 53:1577, 1993（非特許文献１５）; パンタジス(Pantazis)ら、Int. J. Cancer 53:863, 1995（非特許文献１６））。
【０００８】
薬理学的研究により、i.s.投与後に血漿中に存在する９ＮＣ薬の大部分（５７％）が、閉鎖ラクトン型であることが実証された。フェーズＩ臨床試験患者へ経口投与した後の９ＮＣの血漿濃度についての薬理学的研究は、平均で、存在する薬の３％以下しか閉鎖ラクトン型でないことを示している。
【０００９】
このような知見と完全に一致して、このグループの患者での臨床的反応は、ＣＰＴで得られたものよりは高いが、なおもマウスで得られた結果よりかなり低いものである（完全腫瘍退行がマウスでは３２／３２であるのに対して、ヒトでは２／３２である）。血液循環中へ導入したときに、ラクトン環開環をゆっくりと遅らせるような修飾が緊急に必要であることは明らかである。
【００１０】
開環には、カンプトテシンが下記平衡式に示されるように、生理学的ｐＨ、すなわち７またはそれ以上で、２つの異なった形態で存在するという特別な問題がある：
【００１１】
【化２】
2005529920.tif 000004
【００１２】
カンプトテシンの生物活性ラクトン環の、より高いｐＨでの水による加水分解反応は、生物学的に不活性な開環型を生じる。さらに、大部分の血清アルブミンが優先的にカルボン酸塩型に結合し、ラクトン／カルボン酸塩平衡を不活性型に変化させるから、ＣＰＴおよびその類似体による加水分解問題は、ヒト血液中で増悪される（J. Biochem., 212, 285-287, 1993（非特許文献１７）; Biochemistry, 33, 10325-10336,1994（非特許文献１８）; Biochemistry, 33, 12540-12545, 1994（非特許文献１９）。したがって、腫瘍細胞がＳ期中を一巡りするのに十分な時間、分子のラクトン環を持続することは大きな挑戦であり、かつ、相当な量の研究の的であった。
【００１３】
より高い生物活性と増強された安定性を有するカンプトテシン誘導体を提供するために、いくつかの試みがなされている。これらの化合物の多くは、分子のＡ，Ｂ，およびＣ環を修飾した生成物であるが、これらの修飾のいくつかは生理学的条件下でのラクトン環の安定性を増強している。他のアプローチはさらに成功している。例えば、２０−ＯＨ基のアシル化はラクトンＥ環の保護のための有用な手段となる。ウォール(Wall)ら、米国特許第４，９４３，５７９号（特許文献１）は、生理学的条件下ではラクトンが完全なまま残存しないけれども、水可溶性を有する数種のアシル化カンプトテシン化合物が記載されている。カオ(Cao)ら、米国特許第５，９６８，９４３号（特許文献２）は有効な抗腫瘍剤であるＣＰＴ誘導体を記載する。残念ながら、哺乳動物の生理学的条件は、公知の全てのＣＰＴ誘導体を破壊するから、医療目的において新規なＣＰＴ誘導体および関連した投与システムが、なおも必要である。
【００１４】
特に、抗腫瘍活性のために構造的要素、すなわち２０−ヒドロキシルとラクトンＥ環を保持しながら、正常な生理学的条件でラクトン環を完全なままに残存させることができるように、２０（Ｓ）−カンプトテシンを修飾する必要性がなおも存在する。したがって、本発明は母類似体、ＣＰＴに比べて抗腫瘍活性を増強し、かつ延長させる、ラクトン環Ｅの開環を遅延させる新規なＣＰＴ−誘導体を記載する。すなわち、本発明は上記した問題点の１つまたはそれ以上を克服する。
【特許文献１】米国特許第４，９４３，５７９号
【特許文献２】米国特許第５，９６８，９４３号
【非特許文献１】J. Am. Chem. Soc. 88, 3888, 1966
【非特許文献２】Heckendorfら、J. Org. Chem. 41, 2045, 1976
【非特許文献３】Chem. Rev. 23, 385, 1973, Cancer Treat. Rep. 60, 1007, 1967
【非特許文献４】Gottliebら、Cancer Chemother. Rep. 54, 461, 1970
【非特許文献５】Gottliebら、Cancer Chemother. Rep. 56, 103, 1972
【非特許文献６】Muggiaら、Cancer Chemother. Rep. 56, 515, 1972
【非特許文献７】Moertelら、Cancer Chemother. Rep. 56, 95, 1972
【非特許文献８】Schaeppiら、Cancer Chemother. Rep. 5:25, 1974
【非特許文献９】Wallら、In International Symposium on Biochemistry And Physiology of The Alkaloids、Mothesら編、Academie - Verlag, Berlin, 77, 1969
【非特許文献１０】Giovanellaら、Cancer res.51, 3052, 1991
【非特許文献１１】Wallら、Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 17, 117, 1977
【非特許文献１２】Giovanellaら、Science, 246, 1046, 1989
【非特許文献１３】Giovenellaら、Cancer Res.51, 3052, 1991
【非特許文献１４】Stehlinら、In Camptothecins: New Anticancer Agents,1995, CRC Press, pp. 59-65
【非特許文献１５】Pantazisら、Cancer Res.53:1577, 1993
【非特許文献１６】Pantazisら、Int. J. Cancer 53:863, 1995
【非特許文献１７】J. Biochem., 212, 285-287, 1993
【非特許文献１８】Biochemistry, 33, 10325-10336, 1994
【非特許文献１９】Biochemistry, 33, 12540-12545, 1994
【発明の開示】
【００１５】
（発明の概要）
したがって、本発明の目的は哺乳動物の体、特に人体において完全なままで、より長く残存するカンプトテシンのカスケードエステルを提供することにある。
本発明の他の目的は抗腫瘍または抗癌活性において重要であるラクトンＥ環および２０−ヒドロキシル基を完全なまま保持する新規なＣＰＴ誘導体を提供することにある。
本発明のなおも他の目的は、生存する哺乳動物におけるリポソーム投与系に、これらの化合物を使用することにある。
本発明のさらなる目的および利点は、以下の説明において部分的に開示され、かつ、これらの説明から部分的に明白になるか、あるいは本発明の実施により知られ得るであろう。本発明の目的および利点は添付される特許請求の範囲に特に指摘される要件およびその組合せによって実現され、かつ、達成される。
【００１６】
これらの目的を達成するために、かつ、本発明の目的により、ここに具体化され、かつ明白に記載されるように、本発明は下記一般式の化合物に関する：
【００１７】
【化３】
2005529920.tif 000005
【００１８】
この式で、Ｒ基は上記構造式の１つの環の１つまたはそれ以上の置換基を示す。特に、ＲはＨ、ＮＯ２、ＮＨ２、Ｎ３、−ＯＨ、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、カルボキシル（ＣＯＯＨ）、Ｃ１−１６アルキル基、Ｃ１−１６アルキレニル基、Ｃ３−８シクロアルキル基、Ｃ１−８アルコキシル基、アロキシル基、ＣＮ、ＳＯ３Ｈ、Ｃ１−８ハロゲン化アルキル基、（ＣＨ２）ｎＮＲ２７（ここで、Ｒ７はＨ、またはＣ１−８アルキル基であり、ｎは１〜約８の整数である）、ヒドロキシル、ＳＨ、ＳＲ８（ここで、Ｒ８はＣ１−８アルキル基、または未置換または置換フェニル基である）、カルボニル基（例えば、ＣＯＲ９、ここでＲ９はＣ１−８アルキル基、未置換フェニル基、または置換フェニル基である）、ＳｉＲ３１０（ここで、Ｒ１０はＣ１−４アルキル基である）を示す。Ｒ基はそれぞれ、Ａ環の９、１０、１１、または１２位に位置する。Ｒはまた、二置換１０，１１−Ｏ−（ＣＨ２）ｙ−Ｏ−基（ここで、ｙは１〜３の整数であることができる）でもあり得る。ＲはＣ１−１２アルケニル基、ＣＦ３、ＣＣｌ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨＦ２、ＣＨＣｌ２、ＯＲ１２、（ここで、Ｒ１２はＣ１−８アルキル基、またはＣ１−８アルケニル基、または芳香族基である）、ＮＲ２１３（ここで、Ｒ１３はＨ、またはＣ１−４アルキル基である）でもあり得る。ＸはＨ、Ｃ１−８アルキル基、Ｃ１−８アルケニル基、Ｃ１−８アルコキシル基、アロキシル基、ＳｉＲ３１１基（ここで、Ｒ１１はＣ１−４アルキル基である）、またはＣＨ２ＮＺＹ（ここで、ＺおよびＹは独立して、Ｈ、Ｃ１−４アルキル、またはＣ１−４ハロゲン化アルキル基である）を示す。好ましくは、Ｒは水素、ハロゲン、ハロゲン含有基、アルキル基（例えば、Ｃ１−Ｃ１５アルキル基）、−ＮＯ２、−ＯＨ、アルコキシ、または−ＮＨ２であり、Ｘ１は−ＣＨ２−ｎ型のアルキル鎖（ここで、ｎは１〜１５である）、または−Ａｒ（Ｙ１Ｙ２Ｙ３Ｙ４）（ここで、Ａｒは芳香族ラジカル（例えば、アシル、ベンジル）、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３およびＹ４は同じでも異なっていてもよく、水素、アルキル基、ハロゲン基、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、ヒドロキシル基、カルボニル基、またはカルボキシル基である）などの芳香族基であり、かつＲ１はアルキル基、ハロアルキル基または芳香族基である。
【００１９】
本発明はまた、哺乳動物の癌および／または悪性腫瘍を治療し、かつ、投与システムまたは他の治療手段を含む、上記ＣＰＴ誘導体の１つまたはそれ以上の有効量を投与することを含む方法に関する。
【００２０】
また、本発明は、本発明の化合物を製造する方法に関し、哺乳動物の体、特に人体で、完全なまま、より長く残存するカンプトテシンのハロアルキルエステルを提供する。
【００２１】
前記一般的な説明および下記詳細な説明はどちらも、単に実施例および説明であって、特許請求される本発明をさらに説明することを意図することは理解されよう。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
（発明の詳細な説明）
最も一般的な意味では、本発明はカンプトテシンのカスケードエステルおよび医薬品目的におけるその使用に関する。カンプトテシン（「ＣＰＴ」）は顕著な抗腫瘍および抗癌活性を有するが、これらの化合物は正常な生理学的条件下で分解を受けやすく、かつ、生成した代謝産物はしばしば毒性を示す。したがって、本発明は哺乳動物の体、特に人体中で、完全なまま、より長く残存するＣＰＴ類似体を提供し、それによって望ましくない副作用を生じることなく、抗腫瘍および抗癌効果を増強する。他の実施態様では、本発明はラクトン環Ｅおよび２０−ヒドロキシル基を完全なまま保持する新規なＣＰＴ誘導体を提供するが、先の研究はこれらの構造的態様が抗腫瘍および抗癌活性において重要であることを示している。本発明の化合物は生理活性を有し、および／または生理活性化合物を生じるプロドラッグである。
【００２３】
研究室内で実施したヒト血漿中のカンプトテシンの代謝研究は、検出された唯一の代謝産物が毒性を有し、かつ不活性である開環カルボン酸ナトリウム塩であることを示した。ヒト血漿中のＣＰＴの薬物動態測定は、ラクトンを完全なまま有する医薬の半減期が３０分であることを示す。これらの結果は、患者はこの医薬を取得した後、非常に短時間で、この医薬がその活性の９０％を失い、多くの毒性または副作用を生じることを意味する。
【００２４】
マウスおよびヒトでの比較薬物動態学研究は、マウスでは胃内投与後に血漿中に存在するＣＰＴの大部分が、閉鎖ラクトン型のものであり、曲線下の領域の約５４％であることを示した。ヒトでは、反対にＣＰＴの経口投与後、曲線下の領域のたった約０．４％が閉鎖ラクトン環の形態である。
【００２５】
マウスとヒトのこの相違は、マウスとヒトの血液ｐＨが同じ、すなわち７．４であるけれども、ＣＰＴのそのナトリウム塩への変換を触媒するヒトアルブミンが、マウスアルブミンよりもこの過程で最大１００倍も効果的であるという事実によって生じる（ミ(Mi)およびバーク(Burke)、Biochem. 33:12540, 1994）。
【００２６】
先に説明したように、マウスおよびヒトで抗癌剤または抗腫瘍剤としてＣＰＴ類似体を使用して得た異なった成功率から見て、生物学的条件下にラクトン環の開環を遅延させることがＣＰＴの有益な性質を増強させ、そして代謝産物のマイナスの副作用を避けるために必須であることが明らかである。従って、これらの目的を達成するために、本発明は所望の生物学的性質を有する新規なＣＰＴ類似体を形成するＣＰＴのＣ−２０ヒドロキシルを提供する。好ましくは、本発明は下記一般構造式を有する「カスケード」エステルに関する。
【００２７】
【化４】
2005529920.tif 000006
【００２８】
この式で、Ｒ基は上記構造式の環の１つの置換基を示す。特に、ＲはＨ、ＮＯ２、ＮＨ２、Ｎ３、−ＯＨ、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、カルボキシル（ＣＯＯＨ）、Ｃ１−１６アルキル基、Ｃ１−１６アルケニル基、Ｃ３−８シクロアルキル基、Ｃ１−８アルコキシル基、アロキシル基、ＣＮ、ＳＯ３Ｈ、Ｃ１−８ハロゲン化アルキル基、（ＣＨ２）ｎＮＲ２７（ここで、Ｒ７はＨ、またはＣ１−８アルキル基でありうり、ｎは１〜約８の整数である）、ヒドロキシル基、ＳＨ、ＳＲ８（ここで、Ｒ８はＣ１−８アルキル基、未置換フェニル基または置換フェニル基でありうる）、カルボニル基（例えば、ＣＯＲ９、ここでＲ９はＣ１−８アルキル基、未置換フェニル基または置換フェニル基でありうる）、ＳｉＲ３１０（ここで、Ｒ１０はＣ１−４アルキル基でありうる）を示す。Ｒ基はそれぞれ、Ａ環の９、１０、１１、または１２位に位置することができる。Ｒはまた、二置換１０，１１−Ｏ−（ＣＨ２）ｙ−Ｏ−基（ここで、ｙは１〜３の整数でありうる）でもありうる。ＲはＣ１−１２アルケニル基、ＣＦ３、ＣＣｌ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨＦ２、ＣＨＣｌ２、ＯＨ、ＯＲ１２、（ここで、Ｒ１２はＣ１−８アルキル基、またはＣ１−８アルケニル基、または芳香族基でありうる）、ＮＲ２１３（ここで、Ｒ１３はＨ、またはＣ１−４アルキル基でありうる）でもある。ＸはＨ、Ｃ１−８アルキル基、Ｃ１−８アルケニル基、Ｃ１−８アルコキシル基、アロキシル基、ＳｉＲ３１１基（ここで、Ｒ１１はＣ１−４アルキル基でありうる）、またはＣＨ２ＮＺＹ（ここで、ＺおよびＹは独立して、Ｈ、Ｃ１−４アルキル、またはＣ１−４ハロゲン化アルキル基でありうる）を示す。好ましくは、Ｒは水素、ハロゲン、ハロゲン含有基、アルキル基（例えば、Ｃ１〜Ｃ１５アルキル基）、−ＮＯ２、−ＯＨ、アルコキシ、または−ＮＨ２である。Ｘ１は−ＣＨ２−ｎ型のアルキル鎖（ここで、ｎは１〜１５でありうる）、または芳香族ラジカル、例えば、−Ａｒ（Ｙ１Ｙ２Ｙ３Ｙ４）型の芳香族基（ここで、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３およびＹ４は同じでも異なっていてもよく、水素、アルキル基、ハロゲン基、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、ヒドロキシル基、カルボニル基、またはカルボキシル基であることもでき、Ａｒはアリール、ベンジルなどの芳香族ラジカルでありうる）であることができる。Ｒ１はアルキル基、ハロアルキル基、芳香族基、または下記実施例２に示される種々の異なった官能基を含む基（すなわち、アセチルサリチル酸のエステル、またはそれらの誘導体）である。
【００２９】
アルキル基、アルキレン基および／または芳香族基は、アルキル基、ハロゲンまたは芳香族基で置換されるなど置換されていても、あるいは未置換でもよい。ここに記載される種々の置換体は鎖状、分岐、環状またはこれらの組合せであってもよい。アルキル基の例としては、Ｃ１〜Ｃ１５アルキル基が挙げられる。アルケニル基の例としてはＣ２〜Ｃ１５アルケニル基が挙げられる。エポキシ基の例としてはＣ２〜Ｃ１５エポキシ化アルケニル基が挙げられる。シクロアルキル基の例としてはＣ３〜Ｃ８シクロアルキル基が挙げられる。
【００３０】
使用可能であるアルキル基のいくつかの具体的な例としては、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２−、ＣＨ３（ＣＨ２）３−、ＣＨ３（ＣＨ２）４−、ＣＨ３（ＣＨ２）５−、およびＣＨ３（ＣＨ２）６−１７−、（ＣＨ３）２ＣＨ−、ＣＨ３−ＣＨ３−ＣＨ２ＣＨ−ＣＨ３、（ＣＨ３ＣＨ２）２ＣＨ−、（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２）２ＣＨ−、（ＣＨ３）３Ｃ−、ＣＨ３（ＣＨ３ＣＨ２）２Ｃ−がある。
【００３１】
使用可能であるアルケニル基のいくつかの具体的な例としては、ＣＨ２＝ＣＨ−、ＣＨ３ＣＨ＝ＣＨ−、ＣＨ３ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）−、ＣＨ３ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、ＣＨ３（ＣＨ２）３−１５ＣＨ＝ＣＨ−、ＣＨ３ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ２）３−１５ＣＨ２、ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−、ＣＨ３ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−、ＣＨ３（ＣＨ２）３−６−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ２）３−６−ＣＨ２−がある。
【００３２】
使用可能なシクロアルコキシル基のいくつかの具体的な例としては、以下のものがある。
【００３３】
【化５】
2005529920.tif 000007
【００３４】
使用可能なアルコキシル基のいくつかの具体的な例としては、ＭｅＯ−、ＥｔＯ−、ｎ−Ｃ３Ｈ７−、ｉ−Ｃ３Ｈ７−Ｏ−、ｎ−Ｃ４Ｈ９−Ｏ−、ｉ−Ｃ４Ｈ９−、ｔ−Ｃ４Ｈ４−Ｏ−、ｎ−Ｃ５−Ｈ１１Ｏ−、（ＣＨ３）２ＣＨＣＨ２ＣＨ２Ｏ−、
【００３５】
【化６】
2005529920.tif 000008
【００３６】
（ＣＨ３ＣＨ２）２ＣＨ−Ｏ−、ｎ−ＣＨ６Ｈ１３−Ｏ−、ｎ−Ｃ７Ｈ１５−Ｏ−、ｎ−Ｃ８Ｈ１７−Ｏ−がある。
【００３７】
使用可能なアロキシル基のいくつかの具体的な例としては、ｐ−ＣＨ３ＯＣ６Ｈ４−、ｍ−ＣＨ３Ｏ−Ｃ６Ｈ４−、ｏ−ＣＨ３ＯＣ６Ｈ４−、ｏ，ｐ−ジメトキシフェニル、ｍ，ｍ−ジメトキシフェニル、ｍ，ｐ−ジメトキシフェニル−、ｏ−ＣＨ３ＣＨ２ＯＣ６Ｈ４−、ｍ−ＣＨ３ＣＨ２ＯＣ６Ｈ４−、ｐ−ＣＨ３ＣＨ２Ｏ−Ｃ６Ｈ４−がある。
【００３８】
使用可能なシクロアルキル基のいくつかの具体的な例としては、シクロ−Ｃ３、シクロ−Ｃ４、シクロ−Ｃ５、シクロ−Ｃ６、シクロ−Ｃ７、シクロ−Ｃ８、アルキル置換シクロ−Ｃ３、アルキル置換シクロ−Ｃ４、アルキル置換シクロ−Ｃ５、アルキル置換シクロ−Ｃ６、アルキル置換シクロ−Ｃ７およびアルキル置換シクロ−Ｃ８（ここで、アルキルは好ましくは、上記したアルキル基を含む）がある。
【００３９】
使用可能な置換および未置換フェニル基のいくつかの例としては、Ｃ６Ｈ５−、（ｏ，ｍ，ｐ）ＣＨ３Ｃ６Ｈ４−、ハロゲン置換フェニル基（ＸＣ６Ｈ４、ここでＸ＝Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、（ｏ，ｐ，ｍ）ＣＨ３ＯＣ６Ｈ４−、（ｏ，ｍ，ｐ）ＮＯ２Ｃ６Ｈ４−、（ｏ，ｍ，ｐ）ＮＨ２Ｃ６Ｈ４−、（ｏ，ｍ，ｐ）ＣＮＣ６Ｈ４−がある。使用可能なカルボニル基のいくつかの例としては、以下のものがある。
【００４０】
【化７】
2005529920.tif 000009
【００４１】
上記したように、ラクトン環の開環を遅延させることが、カンプトテシン化合物シリーズの生物学的有効性を改良する中心的目標である。この知見にそって、本発明は、保護基の開裂がラクトン環の開環に先行するようであるから、カンプトテシンシリーズの生物学的性質を増強する生産的な手段である保護基でＣ−２０ヒドロキシル基を機能化させる新規な戦略を提供する。Ｃ−２０ヒドロキシルから保護基を開裂する速度を遅延させるように設計された種々の戦略を予期するであろう。また永久的保護基でＣ−２０ヒドロキシル基を機能化することさえも考えるであろう。しかしながら、親化合物、ＣＰＴが生物学的観点から活性剤であるようにみえる。したがって、親化合物の遊離がその治療的潜在性を最大限とするために最終的に必要であるから、永久的保護基でＣ−２０ヒドロキシル基を単に保護することはできない。言い換えると、保護基の開裂速度を遅延させなければならないが、完全に停止させてはならない。さらに、上記した化合物は、好ましくは上記開示した形態で活性である。
【００４２】
もしも１つの保護基がカンプテシン類似体の生物学的性質を改良するなら、２つの保護基でＣ−２０ヒドロキシル基を保護することがより望ましいと考えるであろう。明らかに、第１保護基が生物学的条件で開裂してしまった後に別な第２保護基を加えることは不可能であるが、保護基の開裂を多段階工程に含ませ、このように２つの保護基の機能的な同等性を作り出すことは可能である。より具体的には、親化合物、ＣＰＴを遊離する前に１つ以上の位置で開裂する保護基を想像することができる。このような有機基、一般的にエステルまたはエステル様化合物の多段階開裂は、一連の滝が常にある連続を伴うような流れ落ちる水のように、１つの工程または変換が自然に他のものにつながる「カスケード」鎖として公知である。
【００４３】
これをもとに、本発明は親化合物を生成する前にカスケード連続(sequence)において２つの異なった位置で開裂する新規な保護基を有するＣＰＴ誘導体を提供する。医薬が血液中を循環する場合、第１開裂が外側のエステルで生じ、第２開裂は腫瘍組織中で生じて、活性な親化合物を遊離すると考えられる。したがって、エステルの連続的開裂は腫瘍または癌を標的とすることができ、親化合物の生成はＣＰＴにより抑制をもっとも受け易い腫瘍または癌の部位で生じる。
【００４４】
好ましい事象の連続は以下に示される。
【００４５】
【化８】
2005529920.tif 000010
【００４６】
本発明の化合物は１つ以上の合成経路によって産生され、また保護基の置換体の変更は合成有機化学分野の当業者には明白であるから可能である。カンプトテシンのカスケードエステルを産生する代表例は直接に以下に開示ならびに検討される。
【００４７】
【化９】
2005529920.tif 000011
【００４８】
一般的方法は、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などの適当な溶媒の存在下に、適当に置換された有機酸およびエステル化を促進することが知られている化合物をＣＰＴに反応させることを含む。エステル化を促進することが知られている化合物の例は、ジアルキルカルボジイミド、その例としてはジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、およびジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、その例としては４−ジメチルアミノピリジンなどの結合剤（または他の好適な触媒）である。好ましくは、反応は室温（≒２５℃）および窒素雰囲気下に実施し、ここで、反応時間は約１日から約１週間である。
【００４９】
ＣＰＴの純度および濃度は重要ではない。溶媒はアシル化および／またはエステル化剤と反応可能なヒドロキシ基を含まない溶媒でありうる。すなわち、ＣＰＴを溶解することができるが、アシル化剤／エステル化剤と反応しない溶媒が使用することができる。好適な溶媒の例としてはクロロホルム、より好ましくは、ＤＭＦがある。
【００５０】
この反応で使用する溶媒は一般的に入手可能であり、純粋である必要はない（例えば、工業用グレードの溶媒であってもよい）；しかしながら、有機反応物質として高度に精製された溶媒を使用することが好ましい。さらに、溶媒はＣＰＴを分解しないｐＨを有することができる。好ましくは、溶媒は塩基性でなく、より好ましくは溶媒は中性である。
【００５１】
本発明の有機酸のｐＨは重要ではない。好ましくは、有機酸はアシル化剤として作用する。より好ましくは、有機酸はアセチルサリチル酸である。一般的に有機酸は一般式：Ｒ１ＣＯＯＸ１ＣＯＯＨを有し、ここで、Ｘ１は−ＣＨ２−ｎ型のアルキル鎖などのアルキレン基（ｎは１〜１５である）または芳香族ラジカル、例えば−Ａｒ（Ｙ１Ｙ２Ｙ３Ｙ４）型であり、ここで、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３およびＹ４は同じであるかまたは異なっていて、水素、アルキル基、ハロゲン基、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、ヒドロキシル基、カルボニル基、またはカルボキシル基であり、Ａｒはアリールおよびベンジルなどの芳香族ラジカルであることができる。Ｒ１はアルキル基、ハロアルキル基、芳香族基、または下記実施例２に示されるような種々の異なった官能基からなる基（すなわちアセチルサリチル酸のエステルまたはそれらの誘導体）である。本発明の有機酸は、Aldrich Chemical Co., Milwaukee, WIなどから市販されている。使用可能な有機酸の１つの例としては、市販されているアセチルサリチル酸がある。本発明の有機酸はまた、所望の化学的性質を有するように合成され得る。
【００５２】
本発明では、エステル化を促進するいかなる触媒も使用することができる。このタイプの反応で普通に使用される触媒の１例としては、ＤＭＡＰがある；しかしながら、ＤＭＡＰと同じ特性を有する他の触媒もまた使用することができる。不純物が反応物質と反応しないかぎり、触媒の純度は重要ではない。
【００５３】
結合剤もまた使用することができる。普通に使用される結合剤の一例としては、ＤＣＣである。もしもＤＣＣが本発明で使用されるなら、ＤＭＡＰなどの触媒またはＤＭＡＰと同じ特性を有する他の触媒を使用することが好ましい。
【００５４】
所望の生成物を製造する代表的な例としては、好ましくはＤＭＦであるような溶媒にＣＰＴを添加することができる。ＣＰＴに対する溶媒の割合は、約１ｇのＣＰＴに対して約１０ｍｌ以下の溶媒から、約１ｇのＣＰＴに対して約１０００ｍｌの溶媒でありうる。しかしながら、割合が１ｇのＣＰＴに対して１０００ｍｌの溶媒の割合では、より長い反応時間が必要である。
【００５５】
ＤＣＣなどの結合剤はまた、溶媒へＣＰＴを添加する前、最中または後に溶媒（ＤＭＦ）へ添加することもできる。好ましくは、ＣＰＴに対するＤＣＣのモル比は約１〜約２．２である。
【００５６】
いつでも溶媒へ添加してもよいＤＣＣと同様に、溶媒へＣＰＴまたはＤＣＣを添加する前、最中または後に、触媒を溶媒（ＤＭＦ）へ添加することもできる。反応を適当に実施するために溶媒へ添加する触媒の量は、溶媒へ添加するＤＣＣのモル量の半分以下であることができる。
【００５７】
さらに、一般式：Ｒ１ＣＯＯＸ１ＣＯＯＨを有するアシル化剤として作用することができる有機酸もまた上記混合物へ添加することができる。好ましくは、アセチルサリチル酸または以下に示される実施例２に使用された酸である有機酸は、溶媒へＣＰＴ、ＤＣＣおよび触媒を添加する前、最中または後に溶媒へ添加することができる。アセチルサリチル酸などの有機酸はいかなる量で添加することもできる。しかしながら、大過剰の有機酸（アセチルサリチル酸）を添加しないことが望ましい。より好ましくは、ＤＣＣに対する有機酸のモル比は、約１：１である。
【００５８】
好ましくは、上記組成物の全ては反応容器へ添加し、Ｎ２などの不活性雰囲気下、室温で、かつ常圧にて攪拌する。所望の生成物を生成するに十分な攪拌速度で溶液を攪拌することが好ましい。好ましくは、攪拌速度は中程度、約１００ｒｐｍ〜約２５０ｒｐｍである。
【００５９】
反応時間はＣＰＴに対する溶媒の割合などいくつかの変数に依存する。反応は好ましくは反応が終了するまで継続し、これは例えば溶液の色変化によって決定することができる。さらに、溶液が均質な溶液から懸濁液に変化したとき、反応が終了する。反応は約１日から約１週間実施して終了すればよい。
【００６０】
反応終了後、溶媒は蒸発法または真空システム法などの一般に公知である分離法によって除去することができる。溶媒除去後に残存する残渣はカラムクロマトグラフィーによって濾過することができる。残渣は溶離溶媒としてＴＨＦ−塩化メチレンを使用して、シリカ上でクロマトグラフィーにて分離することができる。ＣＺ１８３として同定された最終生成物を、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した後、収量３８％の黄色粉末として得た。
【００６１】
上記した合成経路の最終生成物の収量は、正確な反応条件、出発物質の純度、アシル化剤の性質、溶媒の選択、および合成有機化学に共通する他の因子またはパラメーターに依存して、通常、１０〜９０％である。上記した本発明の化合物を製造する方法は、独占的または限定的であることを意味するのでなく、むしろ実施例にすぎない。また、これらの化合物を生成するか、または反応条件を最適とする他の手段が当業者には可能である。
【００６２】
本発明の化合物は哺乳動物の悪性腫瘍または癌を治療することにおいて有効である。ここで使用するように、「悪性腫瘍」との用語は、低度に分化した、中程度に分化した、また十分に分化した形態で生じるヒト癌腫、肉腫および黒色腫の全ての形態を含むことを意図する。
【００６３】
より具体的には、本発明の化合物および本発明の処方剤は、ヒトの肺、乳房、大腸、前立腺、黒色腫、膵臓、胃、肝臓、脳、腎臓、子宮、頚部、卵巣、尿管、胃腸の癌、および血流以外の解剖学的部位で成長する他の固形腫瘍、ならびに白血病などの血液由来腫瘍を含む多くの腫瘍および／または癌の治療に使用することができるが、これらに限定されない。他の固形腫瘍は大腸癌および直腸癌を含むが、これらに限定されない。本発明の化合物はまた、酵素トポイソメラーゼＩの阻害剤としても有用である。
【００６４】
本発明の化合物は経口、筋肉内、経皮、静脈内、吸引器または他の空気投与システムによるものなどを含む許容された経路から投与することができるが、これらに限定されない。好ましくは、本発明の化合物および処方剤は経口、筋肉内、または経皮によって投与され、最も好ましくは経口にて投与される。経皮投与システムの例としては、例えば米国特許第５，５５２，１５４号および第５，６５２，２４４号に見ることができる。これらはその全体を参考として本明細書中に導入する。本発明の化合物および処方剤はまた、米国特許第５，８８２，６７９号、第５，８３４，０１２号、第５，７８３，２１１号、第５，７１８，９１４号、第５，６３１，２３７号、第５，５５２，１５６号、第５，０５９，４２１号、第５，０００，９５８号、第５，８７４，１０５号、第５，５６７，４３４号、第５，５４９，９１０号、第５，０４３，１６５号、第５，７３６，１５６号、第５，５６７，４３３号および第４，６６３，１６１号に記載されるものなどリポソーム系によって患者に投与することもでき、これら全てはその全体を参考として本明細書中に導入する。本発明の化合物はリポソーム投与系により導入または被包、包囲または包括あるいは拘束されて、本発明の化合物を使用した「リポソームプロドラッグ」を形成する。他の一般的に使用する方法としては、例えば経口投与用ゼラチンカプセルならびに液体および液状乳化液（例えばIntralipid 20、綿実油および落花生油）の筋肉内投与用リポソームプロドラッグの微小懸濁液および皮下長期投与用コレステロールペレット中の封入体などの処方剤が挙げられる。
【００６５】
患者に経口投与した場合、プロドラッグは患者血流中に急速に入り、体内で親化合物に容易に変換される。母化合物、ＣＰＴへのプロドラッグの変換はヒトを含む多くの動物の血液中に存在するエステラーゼと呼ばれる１群の酵素によって仲介される。プロドラッグは投与後の短時間で体中に急速に分布するから、これらの化合物は親化合物への酵素的加水分解を行うときには非常に低濃度で存在し、これは血流中でのＣＰＴの沈殿を阻止する。
【００６６】
本発明の組成物を投与する他の方法としては、経皮性または経皮的経路による方法がある。このような実施態様の一例としてはパッチの使用がある。特にパッチは例えばジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）またはＤＭＳＯと綿実油との混合物中の本願のプロドラッグの微細な懸濁液でもって調製し、皮膚窩内側の腫瘍位置から離れた腫瘍担持哺乳動物の皮膚と接触させることができる。他の媒体又は他の溶媒とのその混合物および固体支持体は、プロドラッグを投与するには同じように等しく作用するであろう。パッチは溶液または懸濁液の形態で本発明のＣＰＴ誘導体含有プロドラッグを含むことができる。次いで、パッチは例えばステッチ、クリップまたは他の保持装置を用いて互いに皮膚を折りたたんだ状態とすることによって形成した患者の皮膚窩中に挿入することによって、患者の皮膚へ投与され得る。この窩は皮膚との連続接触が哺乳動物の障害なくして確保されるような方法に使用されるべきである。皮膚窩を使用することのほかに、皮膚と接触するパッチの安定した位置を確実にする他の装置を使用することができる。例えば、皮膚上の所定位置にパッチを保持するために接着性包帯を使用することができる。
【００６７】
さらに、本発明の化合物及び処方剤はタキソール、タキソテールまたはそれらの誘導体ならびにシスプラチンおよびその誘導体などの癌治療のための他の医薬および処方剤と組み合わせて使用することができる。
【００６８】
ここで使用するように、本発明の化合物および処方剤の「有効量」とは、癌の成長を阻止または遅延させるか、または悪性腫瘍細胞を殺し、かつ悪性腫瘍の退行または緩和を生じ、すなわちこのような腫瘍の容積または大きさを減少させるか、あるいは腫瘍を完全に除去する化合物の量を意味することを意図する。
【００６９】
ヒトを含む哺乳動物では、有効量は体表面積をもとに投与され得る。用量との相互関係は種々の大きさや種類の動物において異なり、ヒトでは（ｍｇ／体表面Ｍ２に基づく）、E.J.フライライヒ（Freireich）ら、Cancer Chemother. Rep., 50(4):219(1966)に記載される。体表面積は個人の伸長および体重からほぼ決定すればよい（例えば、Scientific Tables, Geigy Pharmaceuticals, Ardsley, N.Y. pp.537-538 (1970)参照）。本発明のカンプトテシン化合物の好ましい有効量は、1日当たり約１２．５〜約３１．３ｍｇ／体表面ｍ２であり、プロドラッグの有効量はプロドラッグおよび投与系の重量に基づいて、１日当たり約１２．５〜３０００ｍｇ／体表面ｍ２の範囲であり得る。
【００７０】
マウスにおける本発明のプロドラッグの好ましい有効量又は用量は、筋肉内経路では１週間当たり２回、体重１ｋｇにつきプロドラッグ約１〜約４００ｍｇであり、経口経路ではプロドラッグは約０．７５〜約１５０ｍｇ／ｋｇ／日である。マウスにおける本発明のプロドラッグの有効量または用量は、例えば経皮経路ではプロドラッグは約１．５ｍｇ／ｋｇ／週〜約１０００ｍｇ／ｋｇ／週である。投与経路の全てにおいて、用量の正確な投与時間は至適結果を達成するために異なりうる。一般的に、ＣＰＴ誘導体のためのリポソーム担体として、Intralipid 20を使用する場合、患者に到達するＣＰＴ誘導体の実際の用量は減少する。これはシリンジ、針および調製容器の壁にＣＰＴ誘導体のいくらかが失われることによる。一般的には、約１ｍｇ〜約４ｍｇのＣＰＴ誘導体が約０．１ｍｌ〜約１ｍｌの脂質担体に添加される。
【００７１】
本発明で使用される化合物は、リポソーム投与系に導入、被包、包囲または包括あるいは拘束される前に、まず、Intaralipid 10または20または天然油、または親油性化合物のための他の好適な乳化剤などの薬学的に許容される担体または希釈剤と組み合わせてもよい。
【００７２】
リポソームは癌患者に薬剤を投与するのに有効に使用されていて、ドキソルビシン、ダウノルビシン、およびシスプラチン複合体などの抗癌剤の投与において臨床的に有用であることが示されている。フォッセン(Forssen)ら、Cancer Res.1992, 52: 3255-3261; ペレス−ソラー(Perez-Soler)ら、Cancer Res. 1990, 50: 4260-4266; およびコクハー(Khokhar)ら、J. Med. Chem. 1991, 34:325-329、これら全てを参考としてその全体を本明細書中に導入する。
【００７３】
リポソームを含む投与としては、例えばコレステロールなどの脂質、リン脂質、または例えばドデシル硫酸ナトリウム、オクチルフェノールポリオキシエチレングリコール、またはモノオレイン酸ソルビタンなどの界面活性剤からなるミセルが挙げられる。通常、プロドラッグは高親和性を有するリポソームの脂質二層膜に結合する。プロドラッグに結合したリポソームは好ましくは脂質のアシル鎖の間に挿入することができる。カンプトテシン誘導体のラクトン環によって、膜結合プロドラッグはリポソームの内側および外側の水性環境から除去され、加水分解から保護される。リポソーム結合医薬が加水分解から保護されるから、この医薬の抗腫瘍活性は保存される。リポソーム膜に対して低親和性を有し、リポソーム膜から解離してリポソーム内部に存在するカンプトテシンプロドラッグでは、リポソーム内部のｐＨが低下して、このようなカンプトテシン誘導体プロドラッグの加水分解を阻止する。
【００７４】
同様に、ミセルもまた患者へ薬剤を投与するために使用されていて（ブロディン（Brodin）ら、Acta Pharm. Suec. 19, 267-284 (1982)）、ミセルは医薬担体として、また癌薬物療法（ファング(Fung)ら、Biomater. Artif. Cells. Artif. Organs 16: 439 et. seq. (1988);およびヨコヤマ(Yokoyama)ら、Cancer Res. 51: 3229-3236 (1991)）を含む標的薬物投与（D.D. ラジック(Lasic), Nature 335: 279-280 (1992)およびスーパーサクソ(Supersaxo)ら、Pharm. Res.8:1286-1291 (1991)）において使用されており、これらの全ては参考としてその全体を本明細書中に導入されている。
【００７５】
カンプトテシン誘導体プロドラッグを含む本発明のリポソームおよび／またはミセルは癌患者に投与することができる。リポソームおよび／またはミセルは癌細胞へ循環系によって運ばれ、そこで小胞膜が癌細胞膜と融合し、癌細胞へカンプトテシ誘導体プロドラッグを放出するか、またはリポソームおよび／またはミセルは癌細胞に隣接して残存し、カンプトテシン誘導体プロドラッグはリポソームおよび／またはミセルから拡散して癌細胞に吸収される。
【００７６】
リポソームおよび／またはミセルを形成する脂質または脂質混合物が本発明で使用するには好適である。リポソームおよび／またはミセルはポリエチレングリコールまたは粒子が細網内皮系を避けることを助けるＧＭ１タンパク質によって被覆されていてもよい。さらに、ミセルはリン脂質などの脂質及び脂質混合物から構成されていてもよい。また、ミセルは脂質と好適な界面活性剤の両者から構成されていてもよい。
【００７７】
多くのリポソームおよびミセルの調製は米国特許第５，５５２，１５６号および第５，７３６，１５６号に記載され、これらは参考としてその全体を本明細書中に導入する。本発明で使用する好ましいリポソーム投与系群は、米国特許第５，５５２，１５６号および第５，７３６，１５６号に記載されるものを含み、これらは参考としてその全体を本明細書中に導入される。本発明で使用する他のリポソーム投与系としては、米国特許第５，８２７，５３３号および第５，８８２，６７９号に記載される脂質または界面活性剤で凝集する活性剤を含むリポソーム；米国特許第５，８７４，１０５号に記載されるアルキルアンモニウム脂肪酸塩でもって形成された脂質小胞；米国特許第５，７８３，２１１号に記載される活性剤乾燥粉末組成物を被包するリポソーム；米国特許第５，７１８，９１４号に記載される局所パッチ用リポソーム医薬投与系；米国特許第５，６３１，２３７号に記載されるリポソーム；米国特許第５，５４９，９１０号および第５，０７７，０５７号に記載されるリポソームおよび脂質複合体組成物；米国特許第５，０４３，１６５号に記載されるステロイド系医薬の放出を持続するために使用されるリポソーム；米国特許第５，０１３，５５６号に記載されるリポソーム；米国特許第４，６６３，１６１号に記載されるリポソームが挙げられる。これらは全て参考としてその全体を本明細書中に導入する。
【００７８】
本発明はまた、例えば上記した量を使用する上記特定化合物の１つの有効量を投与することによって、哺乳動物中のトポイソメラーゼＩを阻害する。最後に、本発明がもたらす最も重要な利点の１つは、本明細書の教示に従って投与された化合物の相対的に低い、または、はっきりとではない全体的毒性に関する。全体的毒性は種々の基準で判断され得る。例えば、最初に記録された体重（すなわち治療前）の１０％以上の対象の体重減少は、毒性の１つの徴候とみなされ得る。さらに、全体的移動性および活性の喪失、および対象の下痢または膀胱炎の徴候もまた毒性の証拠と解釈され得る。この点で、本発明の化合物および処方剤の低毒性は、先行技術を超えた有意な利点を示す。
本発明は以下の実施例によってさらに明確になるであろう。これらは本発明の単なる例に過ぎないことを意図する。
【実施例】
【００７９】
実施例中で参照する全てのガラス容器は使用する前に最低２時間、８０〜１００℃で焼成した。融点はＭＥＬ−ＴＥＭＰ融点装置を使用して得て、修正しなかった。１Ｈおよび１３ＣＮＭＲスペクトルはＪＥＯＬ  ＧＸ−２７０ＷＢ  ＮＭＲスペクトロメーターを使用し、２７０．０５ＭＨＺで得た。化学シフトは、内部標準としてテトラメチルシランを使用し、百万分の幾つか（parts per million）（δスケール）で記録した。ＮＭＲデータを記録するには、下記略号を使用する：結合定数ヘルツ（Ｊ）、一重項（ｓ）、二重項（ｄ）、三重項（ｔ）、広一重項（ｂｒｓ）、多重項（ｍ）など。質量分析は、解像度１００００のＶＧＺＡＢ−ＳＥＱ質量分析計（VG Analytical Co., England）を使用して記録した。カンプトテシンの炭素骨格に使用した番号は、式（Ｘ）に示される。
【００８０】
実施例１
ＣＺ１８３の調製
【００８１】
【化１０】
2005529920.tif 000012
【００８２】
ＣＰＴ誘導体、９−ニトロカンプトテシン１．５ｇ（０．００３８モル）をＤＭＦ約１００ｍｌ中に溶解した。この溶液にＤＣＣ１．７０ｇ（０．００８３モル）およびＤＭＡＰ０．４１ｇ（０．００３４モル）およびアセチルサリチル酸１．５０ｇ（０．００８３モル）を、機械的攪拌子を備えた三つ首丸底フラスコ中で室温、不活性雰囲気下に添加した。９６時間後に、溶媒をロータリーエバポレーターで除去し、溶離溶媒として、１：１５（ｖ／ｖ）のＴＨＦ−塩化メチレンを使用して、シリカ上でクロマトグラフィーにより残渣を分離した。適当な分画を蒸発した後、ＣＺ１８３として示される最終生成物が、黄色粉末として３８％収量で得られた。側鎖の番号は上記式に示されている。
【００８３】
実施例２
ＣＺ２０７の調製
【００８４】
【化１１】
2005529920.tif 000013
【００８５】
ＣＰＴ誘導体、９−ニトロカンプトテシン０．５ｇ（０．００１３モル）をＤＭＦ約６０ｍｌ中に溶解した。この溶液にＤＣＣ０．７５ｇ（０．００３６モル）およびＤＭＡＰ０．２０ｇ（０．００１６モル）および１−（４−クロロベンジル）−５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−酢酸カルボキシメチルエステル（またはアセメタシン）[したがって、アセメタシン−イルを付加する]を、機械的攪拌子を備えた三つ首丸底フラスコ中に室温、窒素雰囲気下で添加した。９６時間後、溶媒を真空下に除去し、溶離溶媒として１：１０（ｖ／ｖ）のＴＨＦ−塩化メチレンを使用して、シリカ上でクロマトグラフィーにより残渣を分離した。ＣＺ２０７として示される最終生成物が黄色粉末として３２％収量で得られた。側鎖の番号は上記式に示されている。
【００８６】
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．０５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０８ＨＺ、Ｃｌ９メチルプロトン）、２．２００−２．３６（２Ｈ，ｍ，Ｃｌ８−メチレンプロトン、２．５０（３Ｈ，Ｓ，Ｃ４０−ＣＨ３）、３．９５（３Ｈ，Ｓ，Ｃ２９−メトキシプロトン）、４．１０−４．５０（２Ｈ、ｄｄ，Ｊ＝１７．２０，１７．４０ＨＺ，Ｃ２５−メチレンプロトン）、５．２０−５．４０（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１７．３５，１７．５２ＨＺ，Ｃ２３−メチレンプロトン）、５．６５（２Ｈ，Ｓ，Ｃ５−メチレンプロトン）、５．６８−６．０８（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５４，８．５８ＨＺ，Ｃ３０−Ｈ，Ｃ３１−Ｈ）、７．２５（１Ｈ，Ｓ，Ｃ１４−Ｈ）、７．８０（１Ｈ，Ｓ，Ｃ２８−Ｈ）、８．０−８．２０（４Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．６５，８．６８ＨＺ，３５−Ｈ，Ｃ３６−Ｈ，Ｃ３８−Ｈ，Ｃ３９−Ｈ）、８．３５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８５ＨＺ，Ｃ１１−Ｈ）、８．８０−９．００（２Ｈ，ｄｄ＝８．５６，８．６２ＨＺ，Ｃ１０−Ｈ，Ｃ１２−Ｈ）、９．６８（１Ｈ，Ｓ，Ｃ７−Ｈ）。１３Ｃ：７．９（Ｃ１９，１３．２（Ｃ４０−メチル炭素）、２５．５，２９．５，３．１５（Ｃ１８，Ｃ２３，２５），４９．２（Ｃ２９−メトキシ炭素）、５０．６（Ｃ５）、６１．４（Ｃ１７）、６７．２（Ｃ２０）、９７．０（Ｃ１４）、１００．８、１１２．０、１１２．１、１１４．５、１２１．０、１２５．８、１２７．０、１２８．２、１２９．１、１３０．５、１３１．０、１３１．５、１３３．６、１３５．８、１３６．５、１３９．５、１４５．０、１４５．５、１４５．６、１４８．５、１５４．５、１５５．８、１５６．９、１５７．０（Ｃ２，Ｃ３，Ｃ６−Ｃ１６ａ，Ｃ２６−Ｃ４０）、１６６．５、１６７．５、１７０．５（Ｃ２１，Ｃ２２，Ｃ２４）。
【００８７】
質量ｍ／ｅ（相対強度）：７９０（ｍ＋，弱い）、４１５（４０）、１３９（１００）、１１１（２０）、７５（５）；Ｃ４１Ｈ３１Ｎ１４Ｏ１１Ｃｌの正確な質量：見かけ７９０．１７０、要求７９０．１６９
【００８８】
本発明の他の実施態様は、明細書中の検討およびここに記載される発明の実施から当業者には明らかになるであろう。明細書および実施例は、下記特許請求の範囲およびその均等によって示される発明の真の範囲と真髄を有する単なる例として考慮されることを意図する。
【国際調査報告】
2005529920.tif 000016
2005529920.tif 000017
2005529920.tif 000018
2005529920.tif 000019