(57)【要約】光学色素に共有結合したフィブリン結合部分を含む光学因子、ならびにこのような光学因子を使用して患者における脈管内病変を処置する方法、が記載される。患者において脈管内の病変を処置するための方法であって、以下：ａ）光学因子を投与する工程であって、該光学因子は、フィブリン結合部分および光学色素を含み、該光学因子は、該病変部位にてフィブリン−光学因子複合体を形成する、工程；ｂ）該病変近傍に挿入されたデバイスを使用して、該フィブリン−光学因子複合体からのシグナルを検出する工程；ｃ）該フィブリン−光学因子複合体からのシグナルに基づいて、該病変についてのデータを得る工程；ならびにｄ）該得られたデータに基づいて、該病変の少なくとも一部へと治療を送達する工程、を包含する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者において脈管内の病変を処置するための方法であって、以下：
ａ）光学因子を投与する工程であって、該光学因子は、フィブリン結合部分および光学色素を含み、該光学因子は、該病変部位にてフィブリン−光学因子複合体を形成する、工程；
ｂ）該病変近傍に挿入されたデバイスを使用して、該フィブリン−光学因子複合体からのシグナルを検出する工程；
ｃ）該フィブリン−光学因子複合体からのシグナルに基づいて、該病変についてのデータを得る工程；ならびに
ｄ）該得られたデータに基づいて、該病変の少なくとも一部へと治療を送達する工程、
を包含する、方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法であって、前記フィブリン結合部分が、ペプチドを含む、方法。
【請求項３】
請求項２に記載の方法であって、前記光学色素が、前記ペプチドのＮ末端アミノ酸に共有結合している、方法。
【請求項４】
請求項２に記載の方法であって、前記光学色素が、リンカーを介して、前記ペプチドのＮ末端アミノ酸に共有結合している、方法。
【請求項５】
請求項２に記載の方法であって、前記フィブリン結合部分が、アミノ酸配列Ｃｙｓ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ（配列番号１）を含む、方法。
【請求項６】
請求項２に記載の方法であって、前記フィブリン結合部分が、アミノ酸配列Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｘａａ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ（配列番号２）を含み、ここで、ＸａａがＧｌｙまたはＡｓｐである、方法。
【請求項７】
請求項２に記載の方法であって、前記フィブリン結合部分が、アミノ酸配列Ｃｙｓ−Ｈｙｐ−Ｔｙｒ（３Ｘ）−Ｘａａ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ（配列番号３）を含み、ここで、３Ｘは、該チロシンのベンジル環の３位にて、ハロゲン、ニトロ−およびトリフルオロメチル基からなる群より選択され、そしてＸａａは、ＧｌｙまたはＡｓｐである、方法。
【請求項８】
請求項２に記載の方法であって、前記フィブリン結合部分が、アミノ酸配列Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｃｙｓ−Ｈｙｐ−Ｔｙｒ（３−Ｉ）−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ（配列番号４）を含む、方法。
【請求項９】
請求項３に記載の方法であって、前記Ｎ末端アミノ酸が、β−アラニン、６−アミノヘキサン酸およびリジンからなる群より選択される、方法。
【請求項１０】
請求項２に記載の方法であって、前記光学色素が、前記ペプチドのＣ末端アミノ酸に共有結合している、方法。
【請求項１１】
請求項２に記載の方法であって、前記光学色素が、リンカーを介して、前記ペプチドのＣ末端アミノ酸に共有結合している、方法。
【請求項１２】
請求項３に記載の方法であって、前記ペプチドのＣ末端が、Ｃ末端アミドとしてキャップされている、方法。
【請求項１３】
請求項３に記載の方法であって、前記ペプチドのＣ末端が、非光学部分でキャップされている、方法。
【請求項１４】
請求項３に記載の方法であって、前記Ｃ末端アミノ酸が、Ｄ−立体配置である、方法。
【請求項１５】
請求項１に記載の方法であって、前記光学色素が、フルオレセイン、ローダミン、ヘマトポルフィリン、フルオレサミン（ｆｌｕｏｒｅｓｄａｍｉｎｅ）、インドシアニン、テトラメチルローダミン、Ｃｏｓｉｎ、エリトロシン、クマリン、メチル−クマリン、ピレン、マラカイト（Ｍａｌａｃｉｔｅ）グリーン、スチルベン、Ｌｕｃｉｆｅｒ  Ｙｅｌｌｏｗ、Ｃａｓｃａｄｅ  Ｂｌｕｅ、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄおよびこれらの誘導体からなる群より選択される、方法。
【請求項１６】
請求項１に記載の方法であって、前記光学因子が、以下：
【化１】
2005529839.tif 000015
2005529839.tif 000016
2005529839.tif 000017
2005529839.tif 000018
2005529839.tif 000019
からなる群より選択される、方法。
【請求項１７】
請求項１に記載の方法であって、前記病変が、血栓、血餅、アテローム硬化症性斑および塞栓からなる群より選択される、方法。
【請求項１８】
請求項１に記載の方法であって、前記病変が、血管中で血流に曝されているフィブリンを含む、方法。
【請求項１９】
請求項１に記載の方法であって、前記フィブリン−光学因子複合体が、約１０μＭ未満の解離定数値を有する、方法。
【請求項２０】
請求項１に記載の方法であって、前記フィブリン−光学因子複合体が、約５μＭ未満の解離定数値を有する、方法。
【請求項２１】
請求項１に記載の方法であって、前記フィブリン−光学因子複合体が、約１μＭ未満の解離定数値を有する、方法。
【請求項２２】
請求項１に記載の方法であって、前記フィブリン−光学因子複合体が、約０．３μＭ未満の解離定数値を有する、方法。
【請求項２３】
請求項１に記載の方法であって、前記光学因子が、経口投与または非経口投与される、方法。
【請求項２４】
請求項２３に記載の方法であって、前記非経口投与が、静脈内投与、動脈内投与、間隙性投与、鞘内投与、皮下投与または腔内投与である、方法。
【請求項２５】
請求項１に記載の方法であって、前記デバイスが、カテーテルおよび光学検出器を備える、方法。
【請求項２６】
請求項２５に記載の方法であって、前記光学検出器が、蛍光放射検出器である、方法。
【請求項２７】
請求項２５に記載の方法であって、前記デバイスが、励起源をさらに備える、方法。
【請求項２８】
請求項２５に記載の方法であって、前記デバイスが、腔、組織、間隙空間または血管中の病変の近傍に挿入される、方法。
【請求項２９】
請求項２５に記載の方法であって、前記デバイスが、前記病変と同じ血管中に挿入される、方法。
【請求項３０】
請求項１に記載の方法であって、前記デバイスが、前記病変の少なくとも一部に前記治療を送達し得る、方法。
【請求項３１】
請求項１に記載の方法であって、前記治療が、血栓崩壊剤を含む、方法。
【請求項３２】
請求項３１に記載の方法であって、前記血栓崩壊剤が、組織プラスミノゲン賦活剤、ストレプトキナーゼ、アンチストレプラーゼおよびウロキナーゼからなる群より選択される、方法。
【請求項３３】
請求項３１に記載の方法であって、前記血栓崩壊剤が、前記病変から離れた部位にて静脈内投与される、方法。
【請求項３４】
請求項３１に記載の方法であって、前記血栓崩壊剤が、前記病変の表面の少なくとも約９０％に送達される、方法。
【請求項３５】
請求項３１に記載の方法であって、前記血栓崩壊剤が、前記病変の表面の少なくとも約５０％に送達される、方法。
【請求項３６】
請求項３１に記載の方法であって、前記血栓崩壊剤が、前記病変の表面の少なくとも約１０％に送達される、方法。
【請求項３７】
請求項１に記載の方法であって、前記治療が、前記病変の機械的操作を含む、方法。
【請求項３８】
請求項３７に記載の方法であって、前記機械的操作が、バルーン血管形成術および前記病変のレーザーアブレーションからなる群より選択される、方法。
【請求項３９】
請求項１に記載の方法であって、ｅ）前記治療の送達の間に、前記フィブリン−光学因子複合体からのシグナルを検出する工程、をさらに包含する、方法。
【請求項４０】
請求項３９に記載の方法であって、ｆ）前記フィブリン−光学因子複合体からのシグナルが、所定の値まで減少する場合に、前記治療の送達を停止する工程、をさらに包含する、方法。
【請求項４１】
請求項４０に記載の方法であって、前記フィブリン−光学因子複合体からのシグナルが前記治療の送達前のシグナルの約９０％未満である場合に、該治療が停止される、方法。
【請求項４２】
請求項４０に記載の方法であって、前記フィブリン−光学因子複合体からのシグナルが前記治療の送達前のシグナルの約５０％未満である場合に、該治療が停止される、方法。
【請求項４３】
請求項４０に記載の方法であって、前記フィブリン−光学因子複合体からのシグナルが前記治療の送達前のシグナルの約１０％未満である場合に、該治療が停止される、方法。
【請求項４４】
請求項１０に記載の方法であって、前記ペプチドのＮ末端がアルキル化されている、方法。
【請求項４５】
請求項１０に記載の方法であって、前記Ｎ末端アミノ酸が、Ｄ−立体配置である、方法。
【請求項４６】
光学因子を含む組成物であって、該光学因子が、リンカーを介して、ペプチドフィブリン結合部分（ＦＢＭ）のＮ末端に共有結合された光学色素を含み、該光学因子は、以下の一般式：
【化２】
2005529839.tif 000020
を有し、ここで、
Ｘは、ＮＨまたはＣＨ２であり、
ｎは１〜２０である、
組成物。
【請求項４７】
請求項４６に記載の組成物であって、前記光学因子が、以下：
【化３】
2005529839.tif 000021
2005529839.tif 000022
2005529839.tif 000023
2005529839.tif 000024
2005529839.tif 000025
、ならびにこれらの薬学的に受容可能な塩からなる群より選択される、組成物。
【請求項４８】
請求項４７に記載の組成物を含む処方物であって、該処方物は、可溶化剤、賦形剤、キャリア、アジュバント、ビヒクル、保存剤、局所麻酔剤、香味剤および着色剤からなる群より選択される少なくとも１つの成分を含む、処方物。
【請求項４９】
請求項４７に記載の組成物を含む、キット。
【請求項５０】
患者において、血管中の血栓を処置するための方法であって、該方法は、以下：
ａ）光学因子を投与して、フィブリン−光学因子複合体を形成する工程であって、該光学因子は、以下の構造：
【化４】
2005529839.tif 000026
を有する、工程；
ｂ）該血栓を有する血管中にカテーテルを挿入して、該血栓についての情報を得る工程であって、該情報は、該フィブリン−光学因子複合体の蛍光放射シグナルの検出に基づく、工程；
ｃ）該情報に基づいて、組織プラスミノゲン賦活剤（ｔＰＡ）を含む血栓崩壊治療を、該カテーテルを用いて、該血栓の約９０％へと送達して、その結果、該血栓のサイズが減少する、工程、
を包含する、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、脈管内病変の検出および処置のための組成物および方法に関し、より詳細には、脈管内病変を処置するための医療デバイスに関連する光学因子の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
（背景）
心臓血管疾患は、高度に成長した世界における主たる健康の脅威である。特定の脈管内病変（例えば、深静脈血栓症、肺動脈塞栓症、およびアテローム硬化性斑）は、有意な罹患率プロフィールおよび致死率プロフィールを有する心臓血管疾患の臨床的発現である。例えば、米国単独において、各年肺動脈塞栓症に罹患する患者が、推定６００，０００人存在する。これらの患者の約１１４，０００人が、この疾患に関連する合併症に起因して後に死亡する。
【０００３】
高い致死率は、脈管内病変を検出するための現在利用可能な方法に関連する重大な制限に一部起因する。特に、脈管内病変の同定は、血管内でのこれらの真の位置に起因して複雑化される。血液は、タンパク質と細胞との流動性の不透明な混合物であり、これらの正味の効果は、検出に干渉する有意なバックグラウンドである。結果として、脈管内病変を検出するための多くの方法が、決定的ではない。さらに、検出のための多くの方法が、臨床的に有効な期間における処置の施与を機能的に妨害する時間枠を必要とする。
【０００４】
病変の大きさを減少し、病変の形状を変化するように設計された治療への中間アクセスと、病変の高感度の検出を組み合わせる、脈管内病変を治療するための方法を有することは有用である。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
（要旨）
本発明は、脈管内病変の検出および処置のための組成物および方法に関し、より詳細には、脈管内病変を処置するための医療デバイスに関連する光学因子の使用に関する。本発明の方法および組成物の使用は、感度を増強し、時期の良い形態での治療施与を容易にする。さらに、本方法は、治療を中止する臨床的に有効な終点を決定するために、治療の実時間モニタリングを可能にする。
【０００６】
従って、本発明の１つの局面は、患者における脈管内病変を処置するための方法を提供する。用語「脈管内病変」は、血管内の病変を意味する。例えば、病変は、血栓、血餅、アテローム硬化性斑または塞栓であり得る。病変は、血管を流れる血液に曝露されるフィブリンを含み得る。本方法は、光学因子を（例えば、経口的または非経口的（例えば、静脈内的、動脈内的、間隙的、鞘内的、皮下的、または腔内的に））投与する工程を包含し、ここで、光学因子は、フィブリン結合部分および光学色素を含み、ここで、光学因子は、病変の部位でフィブリン−光学因子複合体を形成し得る。フィブリン−光学因子複合体からの信号は、病変の近傍に挿入されたデバイスを使用して検出され、データは、フィブリン−光学因子複合体の信号に基づいて病変のまわりで得られる。次いで、治療が、得られたデータに基づいて、病変の少なくとも一部に送達され、その結果、例えば、病変の大きさが、減少されるかまたは病変の形状が変更される。
【０００７】
フィブリン結合部分は、ペプチドを含み得る。例えば、フィブリン結合部分は、アミノ酸配列Ｃｙｓ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ（配列番号１）、アミノ酸配列Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｘａａ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ（配列番号２）（ここで、Ｘａａは、ＧｌｙまたはＡｓｐであり得る）、またはアミノ酸配列Ｃｙｓ−Ｈｙｐ−Ｔｙｒ（３Ｘ）−Ｘａａ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ（配列番号３）（ここで３Ｘは、チロシンのベンジル環の３位の、ハロゲン、ニトロ−、またはトリフルオロメチル基を示し、ここでＨｙｐは、ヒドロキシプロリンを示し、そしてここでＸａａは、ＧｌｙまたはＡｓｐであり得る）を含み得る。フィブリン結合部分はまた、アミノ酸配列Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｃｙｓ−Ｈｙｐ−Ｔｙｒ（３−Ｉ）−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ（配列番号４）（ここでＴｙｒ（３−Ｉ）は、３−ヨード−チロシンを示し、Ｈｙｐは、ヒドロキシプロリンを示す）を含み得る。
【０００８】
いくつかの実施形態において、光学色素は、ペプチドフィブリン−結合部分のＮ末端アミノ酸に共有結合する。Ｎ末端アミノ酸は、天然に存在するアミノ酸であっても、天然に存在しないアミノ酸であってもよい。例えば、Ｎ末端アミノ酸は、β−アラニン（β−ａｌａ）、６−アミノヘキサン酸（Ａｈｘ）、またはリジン残基であり得る。フィブリン結合部分のアミノ酸配列のＣ末端は、Ｃ末端アミドとしてキャップされ得る。あるいは、Ｃ末端は、非光学的部分でキャップされ得る。Ｃ末端アミノ酸はまた、Ｄ−配置であり得る。
【０００９】
他の実施形態において、光学色素は、ペプチドフィブリン結合部分のＣ末端アミノ酸に共有結合される。フィブリン結合部分のアミノ酸配列のＮ末端は、アルキル化され得る。Ｎ末端アミノ酸はまた、Ｄ−配置であり得る。
【００１０】
光学色素は、フルオレセイン、ローダミン、テトラメチルローダミン、ヘマトポルフィリン、フルオレサミン（ｆｌｕｏｒｅｓｄａｍｉｎｅ）、インドシアニン、テトラメチルローダミン、Ｃｏｓｉｎ、エリトロシン、クマリン、メチル−クマリン、ピレン、Ｍａｌａｃｉｔｅグリーン、スチルベン、Ｌｕｃｉｆｅｒ  Ｙｅｌｌｏｗ、Ｃａｓｃａｄｅ  Ｂｌｕｅ、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ、およびこれらの誘導体からなる群から選択され得る。１つの実施形態において、光学色素は、フルオレセインである。別の実施形態において、光学色素は、テトラメチルローダミンである。
【００１１】
本発明の方法における使用のための光学因子の特定の実施形態としては、以下が挙げられる：
【００１２】
【化５】
2005529839.tif 000002
2005529839.tif 000003
2005529839.tif 000004
2005529839.tif 000005
１つの実施形態において、光学因子の解離定数は、約１０μＭ未満の値を有する。別の実施形態において、光学因子の解離定数値は、約５μＭ未満である。あるいは、光学因子の解離定数値は、約１μＭ未満である。光学因子の解離定数値はまた、約０．３μＭ未満であり得る。
【００１３】
病変の近傍に挿入されたデバイスは、カテーテルおよび光学検出器（例えば、蛍光発光検出器）を備え得る。デバイスは、さらに励起光源を備え得る。デバイスは、空洞、組織、間隙空間、または血管内の、病変の近傍に挿入され得る。１つの実施形態において、デバイスは、病変と同じ血管に挿入される。
【００１４】
治療は、血栓崩壊性組成物（例えば、組織プラスミノゲン活性化因子（ｔＰＡ）、ストレプトキナーゼ、アンチストレプラーゼ（ａｎｔｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ）、またはウロキナーゼ）を含み得る。あるいは、治療は、病変の機械的操作（例えば、バルーン血管形成術）を含み得る。別の実施形態において、治療は、病変のレーザーアブレーションを含み得る。
【００１５】
治療は、病変の近傍に挿入されたデバイスによって送達され得る。あるいは、治療が血栓崩壊性である実施形態において、治療は、病変から離れた部位に静脈内投与され得る。治療は、病変の少なくとも一部に送達される。１つの実施形態において、血栓崩壊性薬剤は、病変の表面の約９０％に送達される。別の実施形態において、血栓崩壊性薬剤は、病変の表面の約５０％に送達される。さらに別の実施形態において、血栓崩壊性薬剤は、病変の表面の約１０％に送達される。
【００１６】
本方法は、治療の送達の間に、フィブリン光学因子複合体の信号を検出する工程を包含する。本方法は、フィブリン光学因子複合体の信号が、所定の値まで減少する場合、治療送達を中止する工程を包含する。例えば、１つの実施形態において、治療は、フィブリン光学因子複合体の信号が、治療の送達の前の信号の約９０％未満である場合、中止される。別の実施形態において、治療は、フィブリン光学因子複合体の信号が、治療の送達の前の信号の約５０％未満である場合、中止される。さらに別の実施形態において、治療は、フィブリン光学因子複合体の信号が、治療の送達の前の信号の約１０％未満である場合、中止される。
【００１７】
別の局面において、本発明は、光学因子を含む組成物およびキットを特徴付け、ここで、光学因子は、リンカーを介してペプチドフィブリン結合部分（ＦＢＭ）のＮ末端に共有結合される光学色素を含み、ここで、光学因子は、以下の一般式を有する：
【００１８】
【化６】
2005529839.tif 000006
光学因子の特定の実施形態は、構造Ｉ〜ＸＩＩＩおよびその薬学的に受容可能な塩を含む。
【００１９】
本発明はまた、光学因子を含む組成物を含む処方物を特徴付け、ここで、処方物は、可溶化剤、賦形剤、キャリア、アジュバント、ビヒクル、保存剤、局所麻酔薬、芳香剤および着色料からなる群から選択される少なくとも１つの成分を含む。
【００２０】
他に規定されない限り、本明細書中で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明の属する分野における当業者によって通常理解されるのと同じ意味を有する。本明細書中で記載されるのと同様または等価な方法および材料が、本発明の実施または試験において使用され得るが、適切な方法および材料は、以下に記載される。本明細書中に示される全ての刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は、その全体を参考として援用される。係争の場合において、定義を含む本明細書は、支配する。さらに、方法、材料および実施例は、ただの例示であり、限定を意図されない。
【００２１】
本開示において明示的に規定されない一般に使用される化学的略語は、Ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  Ｓｔｙｌｅ  Ｇｕｉｄｅ，第２版；Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．（１９９７）；「２００１  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  Ａｕｔｈｏｒｓ」Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６６（１），２４Ａ（２００１）；および「Ａ  Ｓｈｏｒｔ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ａｂｂｒｅｖｉａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｕｓｅ  ｉｎ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ」，Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｃｉ．５，４６５−４７１（１９９９）において見いだされ得る。
【００２２】
本発明の１以上の実施形態の詳細は、添付の図面および以下の説明に示される。本発明の他の特徴、目的および利点は、その説明および図面、および特許請求の範囲から明らかである。
【００２３】
（詳細な説明）
本発明は、光学因子およびその光学因子を使用して血管内病変を検出および処置するための方法を提供する。本発明の光学因子は、フィブリン結合部分（ＦＢＭ）に連結された光学色素（ＯＤ）を含み、フィブリンに対する親和性を有する。光学因子を哺乳動物（例えば、ヒト患者）に投与した後に、この光学因子は、フィブリン−光学因子複合体を形成し得、この複合体は、病変検出の改善された感度を可能にする、検出可能なシグナルを有する。フィブリンに対する親和性は、フィブリンが大部分の病変に存在し、正常な血栓崩壊プロセスを妨害することなく標的化され得るので有用である。
【００２４】
改善された感度によって、比較的小さな病変の検出が可能になり、その病変におけるフィブリンの存在および分布についての情報が提供される。光学因子および病変近辺に挿入されて、フィブリン−光学因子複合体のシグナルを検出する医学的デバイス（例えば、カテーテル）の使用はまた、血管における背景にある血流に起因する妨害を避ける。その病変近辺に挿入された医学的デバイスは、病変のサイズを縮小するかまたは病変の形状を変化させるために、適時にかつ有効な様式にて、その病変の少なくとも一部に治療を送達するために使用され得る。フィブリン−光学因子複合体のシグナルを治療の経過の間にモニタリングすることによって、その治療は、臨床的に重大な時点で中止され得る。
【００２５】
（光学因子）
本発明の光学因子は、直接的にまたはリンカーによってのいずれかで互いに共有結合されたＯＤおよびＦＢＭ（ＯＤ−Ｌ−ＦＢＭ）を含む。そのＦＢＭは、低分子またはペプチドであり得る。本明細書中で使用される場合、用語「ペプチド」とは、約２〜約７５アミノ酸長（例えば、３〜５０アミノ酸）であるアミノ酸の鎖をいう。ペプチドのフィブリンに対する親和性は、そのペプチドの、フィブリンのＤＤ（Ｅ）フラグメントからの解離反応についての平衡定数である、その解離定数（Ｋｄ）の点から表され得る。用語「フィブリンのＤＤ（Ｅ）フラグメント」とは、フィブリンの、プラスミンまたはトリプシンでのタンパク質分解によって生成されるフィブリン部分成分をいう。そのＤＤ（Ｅ）フラグメントは、隣接するフィブリンモノマーの架橋されたＤドメインと、フィブリンの中心Ｅドメインとの複合体である（例えば、Ｓｐｒａｇｇｏｎら，Ｎａｔｕｒｅ  ３８９：４５５−４６２（１９９７）を参照のこと）。ＤＤ（Ｅ）は、フィブリンのタンパク質分解から得られる生成物であるので、当業者は、その組成においていくつかのわずかな不均一性が存在し得ることを理解する。そのＤＤ（Ｅ）フラグメントは、ビオチン化され得、アビジンを介して固体基材（例えば、マルチウェルプレート）へ固定化され得る。ペプチドは、適切な緩衝液中で、固定化されたＤＤ（Ｅ）フラグメントとともにインキュベートされ得、公知の方法論を用いて、結合が検出され得る。そのペプチドのＤＤ（Ｅ）に対する解離定数を決定するための方法は、ＷＯ  ０１／０９１８８に記載される。
【００２６】
フィブリンに対する親和性を有するＦＢＭの結果として、その光学因子もまた、フィブリンに対する親和性を有する。用語「親和性」とは、光学因子が病変においてフィブリンに取り込まれるか、保持されるか、または結合される能力をいう。光学因子の親和性は、その光学因子のフィブリンからの解離反応についての平衡定数であるそのＫｄの点から表され得、ペプチドについて上記で議論されたように決定される。光学因子のＤＤ（Ｅ）に対する解離定数は、約１０μＭ未満（例えば、０．１μＭ〜１０μＭ）の値を有し得る。１つの実施形態において、その解離定数値は、約５μＭ未満である。別の実施形態において、その解離定数値は、約１μＭ未満である。その解離定数はまた、約０．３μＭ未満（例えば、０．２μＭ）の値を有し得る。
【００２７】
ペプチドフィブリン結合部分は、天然に存在するアミノ酸または天然に存在しないアミノ酸を含み得る。本明細書中で使用される場合、用語「天然」アミノ酸または「天然に存在する」アミノ酸とは、２０の最も一般的に存在するアミノ酸のうちの１つをいう。天然のアミノ酸は、それらの標準的な一文字略語または三文字略語により言及される。用語「非天然アミノ酸」または「天然に存在しない」とは、天然のアミノ酸の任意の誘導体（Ｄ形態、βおよびγアミノ酸誘導体、α−Ｎ−アルキル化アミノ酸、およびアミン含有側鎖を有するアミノ酸（例えばえ、ＬｙｓまたはＯｒｎを含む）をいう。ここで、このアミンは、アシル化されているかまたはアルキル化されている。本明細書中で非天然アミノ酸として分類される特定のアミノ酸（例えば、ヒドロキシプロリン）は、特定の生物内にまたは特定のタンパク質内に天然に見いだされ得ることに注意のこと。
【００２８】
本発明のそのフィブリン結合部分は、環化されてもよいし、環化されなくてもよい。環化される場合、そのフィブリン結合部分は、そのアミノ酸配列中の２つのシステイン残基の間でジスルフィド連結を有する。環化は、光学色素を用いたＦＢＭの改変の前、その間またはその後のいずれかに、公知の方法を使用して行われ得る。図２を参照のこと。
【００２９】
いくつかの実施形態において、フィブリン結合部分のアミノ酸配列のＣ末端もしくはＮ末端は、キャップされ得る。例えば、そのＣ末端は、アミンでキャップされ得るか、またはＮ末端は、アミン基をアルキル化することによってキャップされ得る。あるいは、そのＣ末端またはＮ末端は、任意の非光学的部分を用いてキャップされ得る。用語「非光学的部分」とは、本明細書中で用いられる場合、光学色素でない任意の分子をいう。そのＣ末端またはＮ末端がそのようにキャップされる場合、本発明の光学因子は、光学因子分子１つにつき１つの光学色素分子を含む。いずれの理論に拘束されないが、その光学因子が、光学因子分子１つにつきわずか１つの光学色素分子を有する場合、光学色素分子からの光学的シグナルを、同じ光学因子分子上の別の光学色素分子に対して分子内クエンチする可能性が、排除される。
【００３０】
Ｃ末端およびＮ末端がまた、分解（例えば、代謝プロセスおよびタンパク質分解プロセスによる分解）を受けにくくされ得る。例えば、ＦＢＭのＣ末端またはＮ末端のアミノ酸は、プロテアーゼによる分解に対してＦＢＭを安定化するために、Ｄ−アミノ酸（すなわち、「Ｄ」立体化学を有する）であり得る。
【００３１】
本発明のＦＢＭは、アミノ酸配列Ｃｙｓ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ（配列番号１）またはＣｙｓ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｘａａ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ（配列番号２）を含み得る。ここでＸａａは、ＧｌｙまたはＡｓｐであり得る。別の実施形態において、そのフィブリン結合部分は、アミノ酸配列Ｃｙｓ−Ｈｙｐ−Ｔｙｒ（３Ｘ）−Ｘａａ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ（配列番号３）を含み、ここで３Ｘは、チロシンのベンゼン環の３位のハロゲン、ニトロ−、またはトリフルオロメチル基を示し、Ｈｙｐは、ヒドロキシプロリン（例えば、４−ヒドロキシプロリン）を示し、そしてＸａａは、ＧｌｙまたはＡｓｐである。なお別の実施形態において、そのフィブリン結合部分は、アミノ酸配列Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｃｙｓ−Ｈｙｐ−Ｔｙｒ（３−Ｉ）−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ（配列番号４）を含み、ここでＴｙｒ（３−Ｉ）は、３−ヨード−チロシンを示し、Ｈｙｐは、ヒドロキシプロリンを示す。
【００３２】
ペプチドフィブリン結合部分は、公知のペプチド合成方法（固相合成を含む）を使用して合成され得る。ペプチドの固相合成においてすぐに使用するために適切な多くの異なる保護基を有するアミノ酸は、市販されている。実施例１は、固相ペプチド合成方法を用いるＦＢＭの合成を示す。さらなる方法およびフィブリン結合部分の合成の詳細は、ＷＯ０１／０９１８８に見いだされ得る。
【００３３】
一旦合成されると、ＦＢＭは、光学色素に共有結合され得る。例えば、その光学色素は、ＦＢＭのＮ末端アミノ酸（例えば、β−アラニン、６−アミノヘキサン酸、またはリジン残基、図１を参照のこと）に、ＦＢＭのＣ末端アミノ酸（例えば、ロイシン残基）に、またはＦＢＭのＮ末端およびＣ末端の両方に共有結合され得る。いくつかの実施形態において、そのＣ末端が、ＯＤに連結される場合、Ｎ末端は、ＯＤと共有結合も、またはＯＤでキャップされてもいないことが好ましい。そのＯＤは、ＦＢＭが（例えば、蛍光放射スペクトルによって）検出されることを可能にする光学的シグナルを提供する。光学因子を薬学的に受容可能でないものにしない限り、任意のＯＤが使用され得る。適切なＯＤの非限定的例としては、フルオレセイン、ローダミン、ヘマトポルフィリン、フルオレサミン（ｆｌｕｏｒｅｓｄａｍｉｎｅ）、インドシアニン、テトラメチルローダミン、コシン（Ｃｏｓｉｎ）、エリスロシン、クマリン、メチル−クマリン、ピレン、マラカイト（Ｍａｌａｃｉｔｅ）グリーン、スチルベン、Ｌｕｃｉｆｅｒ  Ｙｅｌｌｏｗ、Ｃａｓｃａｄｅ  Ｂｌｕｅ（登録商標）、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ（登録商標）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）、およびそれらの誘導体が挙げられる。フルオレセインおよびテトラメチルローダミンは、特に有用なＯＤである。図２は、ＦＢＭの、光学色素であるフルオレセインでの改変のための方法を示す。
【００３４】
いくつかの実施形態において、ＯＤは、リンカーを介してＦＢＭに共有結合される。適切なリンカーは、性質がペプチドまたは非ペプチドであり得、全て炭素鎖であり得るか、あるいはヘテロ原子（例えば、酸素、窒素、硫黄、およびリンのような）を含み得る。リンカーは、直鎖もしくは分枝鎖であり得るか、またはフェニル環、非芳香族炭素環式環もしくは複素環式環、二重結合もしくは三重結合などのような構造エレメントを含み得る。リンカーは、アルキル基、アリール基、アルケニル基、またはアルキニル基で置換されていてもよい。
【００３５】
いくつかの実施形態において、リンカーは、以下の式のうちの一方を有し得る：
【００３６】
【化７】
2005529839.tif 000007
ここで、Ｘは、ＮＨまたはＣＨ２であり、
そしてｎは、１〜２０である。
【００３７】
本発明の光学因子は、１つ以上の不斉炭素原子を含み得、従って、ラセミ体およびラセミ混合物、単一のエナンチオマー、ジアステレオマー混合物、ならびに個々のジアステレオマーとして存在し得る。これらの化合物の全てのこのような異性体形態は、本発明に含まれる。本願において例示される特定の化合物は、特定の立体化学配置で示され得るが、任意の所定のキラル中心において逆の立体化学のいずれかを有する化合物またはその混合物もまた、企図される。
【００３８】
本発明の方法において使用するための光学因子の特定の実施形態が、図１に示される。図１において、「ｆｌｕｏｒ（蛍光）」とは、ＯＤのようなフルオレセインを表し；Ａｈｘとは、６−アミノヘキサン酸を表し；β−ａｌａとは、β−アラニンを表し；Ｐ（４−ＯＨ）とは、ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）を表し；そしてＹ（３−Ｉ）とは、３−ヨードチロシンを表す。表における１個の大文字は、１個のアミノ酸文字コードに対応する。１３位におけるＮＨ２は、アミノ酸番号１２のＣ末端が、アミドとしてキャップされていることを示す。図１は、各光学因子についてのＫｄ（μＭ）対ＤＤ（Ｅ）を提供する。
【００３９】
図１に対応する特定の構造としては、以下が挙げられる：
【００４０】
【化８】
2005529839.tif 000008
2005529839.tif 000009
2005529839.tif 000010
光学因子のさらなる例としては、構造ＸＩＩおよびＸＩＩＩが挙げられる（以下に示される）。構造ＸＩＩおよびＸＩＩＩにおいて、ＯＤとは、クマリン色素である。構造ＸＩＩのＫｄ対ＤＤ（Ｅ）は、６．６μＭである；構造ＸＩＩＩのＫｄ対ＤＤ（Ｅ）は、０．２μＭである。
【００４１】
【化９】
2005529839.tif 000011
（脈管内病変を処置する方法）
本発明の１つの局面によれば、脈管内病変を処置する方法が提供される。用語「脈管内病変」とは、血管内の病変を意味する。「血管」とは、本明細書中において使用される場合、動脈、静脈、毛細血管、および心臓のチャンバを包含し得る。病変は、血栓、血餅、アテローム性動脈硬化症の斑、または塞栓であり得る。具体的には、病変は、深部静脈の血栓、冠状動脈の血栓、頚動脈の血栓、アテローム性動脈硬化症の斑（高い危険性として特徴付けられる斑が挙げられる）、心房または心室の血栓、ならびに大動脈弓の血栓、または肺動脈塞栓症であり得る。
【００４２】
病変は、その表面にフィブリンを含み得る。露出したフィブリンは、血管内を流れる血液と接触し得る。いずれの理論によっても束縛されないが、光学因子は、病変の表面に露出したフィブリンが存在する場合に、より効率的にフィブリン−光学因子複合体を形成し得ると考えられる。さらに、またいずれの理論によっても束縛されないが、露出したフィブリンを有する病変は、自発的な移動の危険が最も高いと考えられる。
【００４３】
この方法は、光学因子またはその誘導体を投与する工程を包含する。適切な光学因子誘導体としては、本発明の組成物の任意の薬学的に受容可能な塩、エステル、または他の誘導体が挙げられ、これは、投与されると、本発明の化合物またはその活性な代謝産物もしくはその残基を（直接的にかまたは間接的に）提供し得る。他の誘導体は、投与される場合に、化合物のバイオアベイラビリティを増加させる誘導体、または特定の生物学的区画への送達を増強する誘導体である。
【００４４】
光学因子またはその誘導体は、薬学的に受容可能な様式で処方され、その結果、この因子は、受容不可能な有害な影響なしに、患者または動物に投与され得る。光学因子は、慣用的な手順に従って、ヒト患者または動物に適合される薬学的処方物として処方され得る。必要であれば、この処方物は、安定化剤、賦形剤、キャリア、アジュバント、ビヒクル、防腐剤、局所麻酔、矯味矯臭剤、着色料などのような成分を含有し得る。これらの成分は、別個に提供され得る（例えば、キット中）か、または単一投薬形態に一緒に混合され得る。投与される投薬量および投与の様式は、種々の要因（患者の年齢、体重、性別、状態、処方物の薬理学的パラメータ、遺伝因子などが挙げられる）に依存する。当業者が認識するように、投薬量は、最終的に、臨床医によって決定される。
【００４５】
光学因子は、多数の従来の様式（経口または非経口（例えば、皮下投与、静脈内投与、動脈内投与、間質内投与、鞘内投与、空洞内投与）が挙げられる）で投与され得る。投与後、この光学因子は、フィブリン−光学因子複合体を、病変の部位で形成する。光学因子のフィブリンに対する親和性は、この因子が、病変の内部または表面のフィブリンに局在することを可能にする。フィブリン−光学因子複合体は、検出され得る光学シグナルを有する。例えば、光学シグナルは、蛍光発光スペクトルであり得る。フィブリン−光学因子複合体からの光学シグナルは、投与前の光学因子の光学シグナルと同じであっても異なっていてもよい。例えば、シグナルは、蛍光波長極大のシフト、減少、または増強を受け得る。シグナルは、検出され得る任意の光学シグナルであり得、特定の波長の光の透過または吸収、蛍光またはリン光の吸収および発光、反射、吸収振幅または極大の変化、および弾性散乱放射線が挙げられる。
【００４６】
デバイスが、病変の近くに挿入されて、フィブリン−光学因子複合体のシグナルの検出に基づいて、この病変に関する情報（すなわち、データ）を得る。Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓによって販売される光ファイバーカテーテルのＯＰＴＩＣＡＴＨ（登録商標）ファミリーのようなカテーテルが、フィブリン−光学因子複合体からのシグナルを検出するために使用され得る。これらのカテーテルはまた、必要に応じて、病変に治療を送達するために使用され得る。他の可能な光ファイバーカテーテルは、ＣＯＯＫおよびＢａｘｔｅｒ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎｓから入手され得る。Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ  Ｇｅｎｅｒａｌ  ＨｏｓｐｉｔａｌのＷｅｌｌｍａｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  ｏｆ  Ｐｈｏｔｏｍｅｄｉｃｉｎｅ製の光ファイバーカテーテルは、フィブリン−光学因子複合体を検出するために適切である。ＦＩＳＯ技術は、カテーテルへの挿入のために設計された、高品質の光ファイバーセンサを有する。他の可能な光ファイバーカテーテル検出システムは、米国特許第４，１７５，５４５号；同第４，４１６，２８５号；同第４，６４８，８９２号；同第５，０１５，４６３号；および同第６，３６６，７２６号に開示されている。
【００４７】
病変の一般的な位置は、代表的に、デバイスがその近くに挿入される前に決定される。病変の一般的な位置は、フィブリン−光学因子複合体を、患者の身体の外の検出器で検出することによって、決定され得る。例えば、光学因子が蛍光光学色素を含む場合、この光学色素の蛍光発光の位置（これは一般に、フィブリン−光学因子複合体の位置に対応する）が、患者の身体の外側に位置する蛍光検出器で決定され得る。あるいは、デバイス挿入のための位置は、病変の一般的な位置を決定するための多数の公知の方法（磁気共鳴または病変を標的化する放射性核種標識された因子、Ｘ線血管造影技術、肺換気／血流スキャンなどの使用が挙げられる）を参照して決定され得る。
【００４８】
別の実施形態において、病変の一般的な位置は、病変が過去に存在した位置の知識によって決定され得る。例えば、病変の一般的な位置は、その患者の医学的履歴（例えば、ステントまたは血管形成手順が過去に実施された位置、あるいは過去において患者が病変を経験したことが分かっている位置）を参照することによって、推定され得る。
【００４９】
デバイスは、病変の近くに挿入される。デバイスは、空洞、組織、間質空間、または血管内に挿入され得る。１つの実施形態において、デバイスは、病変と同じ血管に挿入される。例えば、デバイスがカテーテルである場合、このカテーテルは、病変の１０ｃｍ以内の位置に配置され得る。あるいは、このカテーテルは、病変の５ｃｍ以内の位置に配置され得る。あるいは、このカテーテルは、病変の１ｃｍ以内の位置に配置され得る。
【００５０】
病変についての情報は、フィブリン−光学因子複合体のシグナルの検出に基づく。病変の近くに挿入されるデバイスは、フィブリン−光学因子複合体のシグナルを検出するための光学検出器を備え得る。１つの実施形態において、デバイスは、蛍光発光検出器を備える。このデバイスはまた、励起源を備え得る。励起源は、必要な場合、励起波長の光を提供して、フィブリン−光学因子複合体によって光学シグナルが発生し、そして光学検出器によって検出される。例えば、光学色素であるフルオレセインの励起は、４９２ｎｍにおいて起こり、一方で、発光は、５１５ｎｍにおいて検出される。光学色素であるテトラメチルローダミンの励起は、５５５ｎｍにおいて起こり、一方で発光は、５７５ｎｍにおいて検出される。
【００５１】
フィブリン−光学因子複合体のシグナルの検出に基づいて得られる、病変についての情報は、その病変の大きさおよび形状；その病変の表面特徴；その病変内のフィブリンの分布および相対量（病変の表面に露出する量を含む）；その病変の危険プロフィールの評価（例えば、自発的な移動能力）；ならびに血管の閉塞および狭窄の推定を含み得る。
【００５２】
病変についての情報が得られた後に、治療が、少なくともその病変の一部に対して得られた情報に基づいて、送達される。この治療は、病変の近くに挿入されたデバイスによって送達され得る。例えば、このデバイスがカテーテルである場合、このカテーテルは、治療を病変の近くに送達し得る。あるいは、治療が血栓崩壊剤である実施形態において、この治療は、病変から離れた部位で静脈内送達され得る。１つの実施形態において、治療は、病変の表面の約９０％に送達される。別の実施形態において、治療は、病変の表面の約５０％に送達される。なお別の実施形態において、治療は、病変の表面の約１０％に送達される。
【００５３】
治療は、病変の大きさを減少させるか、または病変の形状を変化させるかの、いずれかであるべきである。病変の大きさを減少させるために、治療は、血栓崩壊性組成物（例えば、組織プラスミノゲンアクチベーター（ｔＰＡ）、ストレプトキナーゼ、アンチストレプラーゼ（ａｎｔｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ）、または単鎖ウロキナーゼもしくは二鎖ウロキナーゼ）を含有し得る。血栓崩壊剤の使用に関するさらなる情報（投薬量、処方物、および処置の時間経過が挙げられる）は、ＷＯ０１／０９８１１に記載されている。
【００５４】
病変の大きさを減少させるため、または病変の形状を変化させるために、治療は、病変の機械的操作を包含し得る。例えば、挿入されるデバイスは、病変の部位においてバルーン血管形成術を実施するための構成要素を備え得る。病変のバルーン血管形成処置は、病変を血管に対して平坦化させて血流を可能にすることによって、病変の大きさを減少させ得るか、または病変の形状を変化させ得る。血管形成術（時々、「ＰＴＣＡ」（経皮的経管的冠状動脈形成術）と称される）は、介在手順の大部分を閉める。この手順において、カテーテルは、病変の部位の近くに挿入され、そして小さなバルーンが膨張される。これらのデバイスは、病変を動脈壁に押し付けて圧縮し、そしてこの動脈を開き、これによって、増加した流れを可能にする。例えば、Ｋａｎｄａｒｐａ  Ｋら「Ｔｒａｎｓｃａｔｈｅｔｅｒ  ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃ  ｌｅｓｉｏｎｓ：ｐａｒｔ  ＩＩ」、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  ＆  Ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎａｌ  Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ．１２（７）：８０７−１２（２００１年７月）；Ｋａｎｄａｒｐａ  Ｋら「Ｔｒａｎｓｃａｔｈｅｔｅｒ  ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃ  ｌｅｓｉｏｎｓ：ｐａｒｔ  Ｉ」、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  ＆  Ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎａｌ  Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ．１２（６）：６８３−９５（２００１年６月）を参照のこと。
【００５５】
別の実施形態において、治療は、病変のレーザーアブレーションを包含し得る。例えば、挿入されるデバイスは、病変の部位においてレーザーアブレーションを実施するための構成要素を備え得る。例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｈｅａｒｔ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ（Ｈｅａｒｔ  ａｎｄ  Ｓｔｒｏｋｅ  Ａ  ｔｏ  Ｚ  Ｇｕｉｄｅ）のウェブサイトを参照のこと。ここでは、以下のことが注目されている：「レーザー血管形成術は、斑（動脈の内側ライニングにおけるコレステロールおよび他の脂肪物質の蓄積）によってブロックされた冠状動脈を開くために使用される技術である。先端部にレーザーを備えるカテーテル（細い管）が、動脈に挿入され、そして血管を通して、心臓内のブロックされた動脈へと進められる。レーザーは、光のパルス化ビームを発生さえて、斑を蒸発させる。この手順は、単独でか、または血管形成術と共に使用されている」。
【００５６】
この方法は、治療の送達の間に、フィブリン−光学因子複合体のシグナルを検出する工程をさらに包含し得る。治療が送達されている間、挿入されたデバイスは、フィブリン−光学因子複合体のシグナルを検出し続ける。臨床医は、検出されたシグナルに基づいて、治療の送達をいつ停止するかを決定し得る。この方法は、フィブリン−光学因子複合体のシグナルが予め決定された値に低下したときに、治療の送達を停止する工程を包含し得る。例えば、１つの実施形態において、治療は、フィブリン−光学因子複合体のシグナルが、治療の送達前のシグナルの約９０％未満になったときに、停止される。別の実施形態において、治療は、フィブリン−光学因子複合体のシグナルが、治療の送達前のシグナルの約５０％未満になったときに、停止される。なお別の実施形態において、治療は、フィブリン−光学因子複合体のシグナルが、治療の送達前のシグナルの約１０％未満になったときに、停止される。
【００５７】
本発明の方法において、光学因子は、フィブリン−光学因子複合体を、病変の部位において形成する。光学因子がフィブリン−光学因子複合体を形成する能力は、上で議論されるように、フィブリンのＤＤ（Ｅ）フラグメントに対するその光学因子の解離定数（Ｋｄ）を試験することによって、測定され得る。
【００５８】
（製品）
本明細書中に記載される光学因子は、パッケージング材料と組み合わせられ得、そして製品またはキットとして販売され得る。製品の成分および製品を製造するための方法は、周知である。製品は、本明細書中に記載される１つ以上の光学因子を組み合わせ得る。さらに、製品は、以下のうちの１つ以上をさらに備え得る：滅菌水または生理食塩水、薬学的キャリア、緩衝剤、注射器、またはカテーテル。光学因子が、脈管内病変の処置のためにどのように使用され得るかを記載するラベルまたは指示が、このようなキットに備えられ得る。光学因子は、予めパケージされた形態で、単回投与または複数投与のために十分な量で、提供され得る。
【００５９】
本発明は、以下の実施例においてさらに記載され、この実施例は、特許請求の範囲に記載される本発明の範囲を限定しない。
【実施例】
【００６０】
（実施例１．光学因子の合成）
（フィブリン結合部分の調製  −  固相合成）
ＮｏｖａＳｙｎ  ＴＧＲ樹脂（０．２０ｍｍｏｌ／ｇ、１００ｍｇ、２０μｍｏｌ）を、ＮＭＰ／エーテル／ＮＭＰで洗浄した。ペプチドを、ＰｙＢＯＰ／ＨＯＢｔ／ＤＩＥＡ活性化を使用する標準的な固相方法によって、構築した。最後のアミノ酸残基のカップリングの後に、この樹脂に結合したペプチドを、ＤＭＦ中のピペリジンの溶液（２０容量％、２．０ｍＬ）で１０分間処理して、保護基を除去した。この樹脂を、ＮＭＰ／エーテル／ＮＭＰで徹底的に洗浄し、そしてフルオレセイン−５−イソチオシアネート（２３．４ｍｇ、６０μｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１１．６ｍｇ、１５．７μＬ、９０μｍｏｌ）のＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の溶液で、１２時間処理した。この樹脂を徹底的に洗浄し（ＮＭＰ／エーテル／ＮＭＰ）、そしてＴｌ（ＴＦＡ）３（１８．７ｍｇ、３４．５μｍｏｌ）のＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の溶液で、４℃で３時間処理した。この処理の後に、この樹脂を洗浄し、そしてＴＦＡ／ＴＩＳ／水（９５／２．５／２．５、２．０ｍＬ）のカクテルで２時間処理した。切断カクテルにエーテルを添加することによって、粗製ペプチドを沈澱させ、そしてＶｙｄａｃ  Ｃ−１８カラムを使用する分取ＨＰＬＣによって精製した。
【００６１】
ＴＭＲ（トリメチルローダミン）誘導体を、フルオレセイン−５−イソチオシアネートの代わりに、６−カルボキシテトラメチルローダミンスクシンイミジルエステルを使用して調製した。
【００６２】
（光学色素を用いる、フィブリン結合部分の改変）
図２を参照のこと。
【００６３】
（構造Ｉ〜ＸＩの質量分析およびＫｄデータ：）
【００６４】
【表１】
2005529839.tif 000012
Ｎ／ａ＝入手不能。
【００６５】
（実施例２．病変上のフィブリン−光学因子複合体の検出）
部位２／フィブリン：０．１ｍｇ／ｍＬのフィブリノゲンを、光学色素としてテトラメチルローダミンを含む光学因子（構造ＸＩ、図３を参照）０．６μＭと混合した。この混合物（約４〜２０μＬ）を、ガラススライド上にコーティングし、そしてフィブリノゲンの架橋を、１．３μｇ／Ｌのトロンビンで開始した。血餅形成は、約１５秒で発生した。このスライドを、共焦点蛍光画像化（励起５５５ｎｍ、放射５７５ｎｍ）を使用して画像化した。フィブリンを、トロンビンを用いた架橋フィブリノゲンによって形成された、病変上の、フィブリンへの構造ＸＩの結合によって形成されたフィブリン−光学因子複合体のシグナルに基づいて検出した。
【００６６】
部位２／血漿血餅：ヒト血漿（血小板豊富なヒト血漿）を、光学色素としてテトラメチルローダミンを含む光学因子（構造ＸＩ、図３を参照）０．６μＭと混合した。この混合物（約４〜２０μＬ）を、ガラススライド上にコーティングし、そして血漿の血餅形成を、１．３μｇ／Ｌのトロンビンで開始した。血餅形成は、約１５秒で発生した。このスライドを、共焦点蛍光画像化（励起５５５ｎｍ、放射５７５ｎｍ）を使用して画像化した。フィブリンを、トロンビンを用いた架橋フィブリノゲンによって形成された、病変（血漿血餅）上の、フィブリンへの構造ＸＩの結合によって形成されたフィブリン−光学因子複合体のシグナルに基づいて検出した。
【００６７】
部位１／フィブリン：０．１ｍｇ／ｍＬのフィブリノゲンを、光学色素としてテトラメチルローダミンを含む光学因子（構造Ｘ）０．６μＭと混合した。この混合物（約４〜２０μＬ）を、ガラススライド上にコーティングし、そしてフィブリンの架橋を、１．３μｇ／Ｌのトロンビンで開始した。血餅形成は、約１５〜２０秒で発生した。このスライドを、共焦点蛍光画像化（励起５５５ｎｍ、放射５７５ｎｍ）を使用して画像化した。フィブリンを、トロンビンを用いた架橋フィブリノゲンによって形成された、病変上の、フィブリンへの構造Ｘの結合によって形成されたフィブリン−光学因子複合体のシグナルに基づいて検出した。
【００６８】
他の例において、フィブリノゲンの血餅形成がスライドの表面上で生じた後に、光学因子を、フィブリノゲンのほぼ化学量論的量で、添加した。光学因子を、血餅形成期間（例えば、１５０秒）の１０倍の時間待機した後で、スライド上の血餅の上に溶液を層状化し、そしてカバーガラスで覆うことによって、添加した。
【００６９】
（実施例３．病変の処置）
モルモット（Ｈａｒｌｅｙ、オス）に麻酔する。切開を腹部に作製し、そして下大静脈（ＩＶＣ）を隔離する。この血管を、１０分間にわたって回復させる。１ｃｍの部分のＩＶＣをクランピングし、そしてヒトトロンビン（５０μＬ、４単位）をこの血管に注射して、血栓形成を促進する。下側のクランプを開閉して、この区画への部分的血流を可能にする。２〜３分後、クリップを取り外す。血栓を、動物中で３０分間熟成（ａｇｅ）させる。この時点で、光学因子を、０．０２μｍｏｌ／ｋｇの用量で、頚静脈への注射を介して投与する。３０分後、光学蛍光検出器を有するカテーテルをＩＣＶ中に挿入し、そして血栓上のフィブリン−光学因子複合体によって放射される蛍光シグナルを検出することによって、血栓を可視化する。組織プラスミノゲン賦活剤（ｔＰＡ）を、このカテーテルを介して送達し、光学蛍光シグナルの低減は、血餅の分解および溶解を示す。ＴＮＫＡＳＥＴＭ（Ｔｅｎｅｃｔｅｐｌａｓｅ）は、組換えＤＮＡ技術によって生成され、そしてＧｅｎｅｔｅｃｈによって販売される、市販の認可された組織プラスミノゲン賦活剤（ｔＰＡ）である。この薬物を、患者の体重に依存して、３０〜５０ｍｇの用量で静脈内投与する。
【００７０】
（他の実施形態）
本発明の多数の実施形態を記載してきた。それにもかかわらず、種々の改変が、本発明の精神および範囲から逸脱することなしになされ得ることが、理解される。従って、他の実施形態が、添付の特許請求の範囲の範囲内である。
【図面の簡単な説明】
【００７１】
【図１】図１は、２４℃にてフィブリンのＤＤ（Ｅ）フラグメントに対する解離定数（Ｋｄ）を有する光学因子の実施形態の構造を示す表である。
【図２】図２は、光学色素を本発明のフィブリン結合部分にカップリングするための一般的合成スキームを示す。
【図３】図３は、実施例２の画像化研究において使用される２つの光学因子の構造を提供する。
【配列表】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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