(57)【要約】本発明は、チューブリン重合を抑制することによって明らかに影響を受ける腫瘍性疾患の治療のため医薬の製造における一般式（Ｉ）によって表される２−アルコキシエストロゲン・スルファメートの使用に関する。前記式中、Ｒ１とＲ２が、独立にＨ、メチル、Ｃ１−Ｃ４アシル、又はベンゾイルを表し、Ｒ３が、Ｃ１−Ｃ４アルキル、又は式ＣｎＦｍＨｏ（式中、ｎ＝１、２、３、４、５又は６であり、ｍ＞１であり、そしてｍ＋ｏ＝２ｎ＋１である。）によって表される基を表し、Ｒ４とＲ５が、いずれもＨを表すか、又は一緒にメチレン基、若しくは追加の二重結合を表し、Ｒ６が、Ｈを表し、そしてＲ７が、ＯＨ、ＯＣ１−Ｃ４アルキル、ＯＣ１−Ｃ１１−アシル、又はＯＳＯ２ＮＲ１Ｒ２を表し、ここで、ステロイド骨格のＢ及びＣ環内の破線が、最大２つの二重結合をさらに表している。前記本発明の化合物は、１７−ヒドロキシ置換に関連する２−アルコキシ置換を特徴とする。それらはチューブリン重合を抑制する特異活性を示し、そして、例えば前立腺癌を治療するために使用されることができる。
2005501849.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
チューブリン重合を抑制することにより正に影響されうる腫瘍性疾患の治療のための医薬の製造における、以下の一般式：
【化１】
2005501849.tif 000012
｛式中、
Ｒ１とＲ２が、独立にＨ、メチル、Ｃ１−Ｃ４アシル、又はベンゾイルを表し、
Ｒ３が、Ｃ１−Ｃ４アルキル、あるいは式ＣｎＦｍＨｏ（式中、ｎ＝１、２、３、４、５又は６であり、ｍ＞１であり、そしてｍ＋ｏ＝２ｎ＋１である。）によって表される基を表し、
Ｒ４とＲ５が、それぞれ、Ｈを表すか、又は一緒にメチレン残基、若しくは追加の二重結合を表し、
Ｒ６が、Ｈを表し、
Ｒ７が、ＯＨ、ＯＣ１−Ｃ４アルキル、ＯＣ１−Ｃ１１アシル、又はＯＳＯ２ＮＲ１Ｒ２を表し、そして
上記ステロイド骨格のＢ環及びＣ環内の点線が、最大２つの二重結合をさらに表す。｝によって表される化合物の使用。
【請求項２】
前記Ｒ３が、メチル、エチル、又は２，２，２−トリフルオロエチルを表すことを特徴とする、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記Ｒ１がＨを表すことを特徴とする、請求項１又は２に記載の使用。
【請求項４】
前記Ｒ２がＨを表すことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５】
前記Ｒ３がメチル基を表すことを特徴とする、請求項４に記載の使用。
【請求項６】
前記化合物が、以下の：
１）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
２）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
３）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
４）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
５）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
６）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
７）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
８）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
９）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
１０）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５β−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
１１）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
１２）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
１３）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
１４）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
１５）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
１６）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
１７）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
１８）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
１９）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
２０）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
２１）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
２２）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
２３）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・アセチルスルファメート、
２４）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・アセチルスルファメート、
２５）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
２６）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
２７）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
２８）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
２９）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
３０）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
３１）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
３２）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
３３）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
３４）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
３５）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、又は
３６）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項７】
乳腺を含む、男性又は女性の生殖腺、あるいは男性又は女性の生殖器の腫瘍性疾患の治療のための医薬の製造における、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項８】
乳癌の治療のための医薬の製造における、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項９】
前立腺癌の治療のための医薬の製造における、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１０】
以下の：
１）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
２）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
３）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
４）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
５）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
６）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
７）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
８）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
９）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
１０）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５β−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
１１）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
１２）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
１３）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
１４）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
１５）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
１６）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
１７）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
１８）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
１９）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
２０）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
２１）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
２２）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
２３）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・アセチルスルファメート、
２４）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・アセチルスルファメート、
２５）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
２６）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
２７）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
２８）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
２９）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
３０）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
３１）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
３２）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
３３）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
３４）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
３５）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、又は
３６）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
のいずれかである２−アルコキシエストラジオール・スルファメート。
【請求項１１】
医薬として適合する補助剤及び／又は担体とともに、請求項１０に記載の化合物の内の少なくとも１を含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、２−アルコキシエストラジオール・スルファメート、及び抗腫瘍性として有効な活性をもつ医薬品の生産におけるその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
微小管は、ほとんどの真核生物細胞に発生する細胞小器官であり、かつ、例えば有糸分裂、細胞内移動、及び細胞遊走、及び細胞形状の決定といった、そこでの多数の機能を有する。微小管は、順々の、α及びβユニットから成る二量体であるチューブリンの重合体である。これらのヘテロ二量体は、２分子のグアノシン三リン酸（ＧＴＰ）を結合し、このＧＴＰｓの１つが永久に結合されていて、そしてもう一方が交換可能である。ヘテロ二量体は、フィラメント状巨大高分子、いわゆるプロトフィラメントに頭−尾方向で重合し、それらは次々に集まって、管状の細胞小器官、微小管を形成する。微小管は、絶えず合成及び分解されている。成長と分解の間の平衡は、新しいＧＴＰチューブリン・サブユニットの利用可能性、及び２番目の結合ＧＴＰの加水分解速度に依存する。プラス端にて、新しいサブユニットが加えられて、そしてマイナス端にて、サブユニットが分散される。細胞毒性物質、例えばコルヒチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、タクソール、エポシロン、ポドフィロトキシン、ステガニシン（ｓｔｅｇａｎｉｃｉｎ）、コンブレタスタチン及びメトキシエストラジオール（ｍｅｔｈｏｘｙｅｓｔｒａｄｉｏｌ）は、微小管の合成及び分解（チューブリン重合と脱重合）に影響して、それによって、位相特異的な様式で細胞分裂に影響を及ぼし得ることが知られている。これは、その成長が細胞内の制御機構にほとんど影響されない、急速に成長している新生物細胞に特有の場合である。原則として、この種類の活性物質は、悪性腫瘍の治療に好適である。ＦｏｔｓｉｓらのＮａｔｕｒｅ  １９９４，３６８，２３７−２３９は、２−メトキシエストラジオールが腫瘍成長と血管形成を抑えることを報告している。
【０００３】
ＣｕｓｈｍａｎらのＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９５，３８，２０４１−２０４９は、２−メトキシエストラジオールの細胞毒性、並びにチューブリン重合抑制効果を調査し、そしてＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９７，４０，２３２３−２３３４中に、２−アルコキシ−６−オキシミノエストラジオール誘導体（２−ａｌｋｏｘｙ−６−ｏｘｉｍｉｎｏｅｓｔｒａｄｉｏｌ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ）がチューブリンの重合と、チューブリンへの［３Ｈ］−コルヒチンの結合を抑えることを報告した。チューブリン重合の抑制作用に関して、本明細書中で触れた２−アルコキシ−６−オキシミノエストラジオール誘導体は、２−エトキシエストラジオールのそれに匹敵する活性を示し、そしてその活性は２−メトキシエストラジオールのそれより高かった。
【０００４】
２−アルコキシエストラジオール、特に２−メトキシエストラジオールの経口生物学的利用能を高めるための試みにおいて、選ばれた２−アルコキシエストラジオール誘導体の３−ヒドロキシ官能基は、本発明によりスルファモイル化（ｓｕｌｆａｍｏｙｌａｔｉｏｎ）を受けた。そうすることで、得られた２−アルコキシエストラジオール・スルファメートは、生物学的利用能を改善されただけでなく、２−アルコキシエストラジオール自身と比べてより強力にチューブリンの重合を抑制することが測定された。したがって、本発明の対応のスルファメートは、生体内の抗腫瘍性活性をも有する。
【０００５】
特にエストラジオール、及び密接に関係する誘導体に関して、スルファメート基の導入が生体内で生物学的利用能の増加をもたらすことは周知である（ＥｌｇｅｒらのＪ．Ｓｔｅｒｏｉｄ．Ｂｉｏｃｈｅｍ、及びＭｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９９５，５５，３９５）。改善された生物学的利用能は、これらの薬物の赤血球への結合から起こり、そこでそれらがゆっくり代謝されて、そして持続的に放出される。もう一方で、スルファモイル化されていないエストロゲンは、経口投与によって、非常に迅速な肝臓の代謝の対象となる（初回通過効果）。ＳｃｈｗａｒｚらのＳｔｅｒｏｉｄｓ  １９９６，６１，７１０−７１７は、エストロゲン・スルファメートの合成を記載している。
【０００６】
もう一方で、ステロイド−３−スルファメートが、ステロイド・スルファターゼの阻害薬として記載された。
【０００７】
ＷＯ９３／０５０６４は、中でも以下の式：
【０００８】
【化１】
2005501849.tif 000003
【０００９】
｛式中、
各々Ｒ１及びＲ２が、独立に水素又はメチル基を表す、
但し、Ｒ１及びＲ２残基の少なくとも１つが、水素原子であり、かつ、Ｏ−多環残基が、３−ステロールであり、その硫酸エステルが、ステロイド・スルファターゼ活性を有する酵素によって加水分解されうる。｝によって表される化合物に関する。ステロイド骨格の２つの位置で特異的に置換された化合物は、明確に開示されていない。
【００１０】
ＵＳ  ６，０１１，０２４は、ＷＯ９３／０５０６４に基づき、そして、例えばその中の第１スルファメート官能基が６員環に連結される全ての化合物に及ぶ。またしても、ステロイド骨格の２位にて特異的に置換された化合物を明確に開示していない。
【００１１】
ＷＯ  ９６／０５２１６は、Ｃ２−置換されていないエストラ−１，３，５（１０）−トリエンのスルファメート誘導体に関する。
【００１２】
ＷＯ  ９６／０５２１７は、以下の一般式：
【００１３】
【化２】
2005501849.tif 000004
【００１４】
｛式中、
Ｒ＝ＮＨ２であり、
Ｒ３＝ＯＨ、Ｃ１−５アルコキシ基であり；そして
Ｒ８、Ｒ９及びＲ１０が独立に＝Ｈ又はＯＨであるか；又はＲ９及びＲ１０が一緒にＯを表す。｝によって表される活性物質を含む医薬組成物に関する。そこに開示された医薬組成物は、女性の避妊法、更年期ＨＲＴ、及び婦人科医学的又は男性病学的症候群、例えば乳癌又は前立腺癌の治療のために使用されうる。
【００１５】
ＷＯ  ９７／１４７１２は、以下の一般式：
【００１６】
【化３】
2005501849.tif 000005
【００１７】
｛式中、
Ｒ１が、アシル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、スルホニル又はスルホンアミジル基を表し；
Ｒ２が、水素又は金属原子を表し；
Ｒ７及びＲ８が、独立に、Ｈ、ＯＨ及びＣ１−５アルコキシを表し；
Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立に、Ｈ又はＯＨを表す。｝によって表されるステロイド・スルファメート誘導体に関する。
【００１８】
ＷＯ  ９８／４２７２９は、１６−ハロ−置換１，３，５−エストラトリエン・モノスルファメート、及びＣ２でアルコキシ置換された６３，１７β−ビススルファメートに関する。１６−ハロゲン置換は、スルファターゼ抑制作用効果、並びには対応のスルファメート誘導体のエストロゲン様活性を高めた。３−スルファメート官能基に加えて、１７−スルファメート官能基の導入は、エストロゲン様活性を劇的に減少させる。
【００１９】
ＷＯ  ９８／２４８０２は、エストロン・スルファターゼを抑制するスルファメートに関する。２−メトキシエストロン・スルファメートは、明確に名称が指定されている。明細書中で、前立腺癌ではなく、乳癌が、治療の可能な部位として挙げられている。同様に、ＷＯ  ９９／３３８５８は、下記式：
【００２０】
【化４】
2005501849.tif 000006
【００２１】
｛式中、
Ｒ１及びＲ２が、独立にＨ、アルキルを表すか、又は一緒にピペリジン、モルホリン若しくはピペラジンを表し；そして
Ｒ３＝Ｈ、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＯ２Ｒ４であり；
Ｒ８＝Ｈ、ＮＯ２又はＮＲ６Ｒ７である。｝によって表されるエストロン・スルファターゼ阻害薬を記載している。明細書中で、乳癌が治療の可能な部位として言及されている。
【００２２】
ＷＯ  ９９／６４０１３は、（ＴＮＦαのような）細胞シグナル変更因子を伴うスルファメート誘導体から成る医薬組成物に関する。この組み合わせで、２−メトキシエストロン・スルファメートが、好ましいスルファメートとして明確に請求されている；しかし、おびただしい数の他のステロイド３−スルファメートが、同様に一般式の範囲内に含まれる。本発明の医薬組成物又は（好ましくは少なくとも１つの２−アルコキシ置換基を伴う）そこに含まれるステロイド３−スルファメートの作用機序として記載されるものは、１）腫瘍細胞のグルコース吸収の抑制、２）腫瘍血管形成の抑制、３）微小管の分解、４）アポトーシスの誘導である。ＷＯ  ００／７６４８７は、ＴＮＦαに誘発されたアロマターゼ活性を抑制する薬物に関する。そのように、２−アルコキシエストロン３−スルファメート、好ましくは２−メトキシエストロン・スルファメートが請求された。
【００２３】
ＷＯ  ０１／１８０２８は、非エストロゲン様作用の、エストロン・スルファターゼを抑制する、Ｎ−アシル−１８ａで置換されたステロイド３−スルファメート、例えば１６α−フルオロ−２−メトキシ−１８ａ−ホモエストラジオールＮ−アセチルスルファメート、又は１６α−フルオロ−２−メトキシ−１８ａ−ホモエストロンＮ−アセチルスルファメートに関する。
【００２４】
Ｃａｎｃｅｒ  ２０００，８５，９８３−９９４において、ヘパトーマ細胞における２−メトキシエストラジオール−、ドセタキセル−及びパクリタキセルによって誘発されたアポトーシス、及び活性酸素種とそれらの相関性が比較された。ｐｏｔｔｅｒらのＩｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ２０００，８５，５８４−５８９は、乳癌細胞及び誘発された乳腫瘍の成長に対する２−メトキシエストロンのそれと比較した２−メトキシエストロン・スルファメートの効果を調査して、２−メトキシエストロン・スルファメートが乳癌の治療に関して相当な治療の可能性を有することが分かった。
【００２５】
ＰｏｔｔｅｒらのＣａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２０００，６０，５４４１−５４５０は、１０μＭで２５〜４９％のグルコース吸収を抑制する２−メトキシエストロン、及び２−メトキシエストロン３−スルファメートによってＭＣＦ−７乳癌細胞におけるデオキシグルコースの吸収抑制を調査し（同様に、２−メトキシエストラジオール及び２−メトキシエストロン）、そしてグルコースの吸収を抑制するそれらの能力により、上記化合物が乳癌を抑制するための治療の可能性があるか判断する。
【００２６】
ＰｏｔｔｅｒらのＣａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２０００，６０，５４４１−５４５０は、乳癌細胞にインビトロでの抗癌性として活性をもち、従ってインビボにおいても活性であるかもしれない新規抗微小管活性化合物として、２−メトキシエストロン・スルファメート及び２−エトキシエストロン・スルファメートを説明している。Ｊ．Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．及びＭｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９９９，６９，２２７−２３８は、ステロイド・スルファターゼ活性の抑制がホルモン依存性乳癌の治療のための重要な起点であることを報告している。２−メトキシエストロン・スルファメート、１７−デオキシエストロン・スルファメート、及びエストロン・スルファメートが明確に言及されている。単環式又は二環式非ステロイド系スルファメートは、ステロイド・スルファターゼを抑制する一方で、それらは対応するステロイド誘導体ほどは有効ではない。
【００２７】
本発明の目的は、２−メトキシエストラジオールが抑制するより効果的にチューブリン重合を抑制し、同時に、より高い経口生物学的利用能を有する化合物を提供することである。
【００２８】
本発明によると、前述の目的は，チューブリン重合の抑制に都合よく効果を表す、腫瘍による疾患の治療のための医薬の生産に使用される以下の一般式（Ｉ）：
【００２９】
【化５】
2005501849.tif 000007
【００３０】
｛式中、
Ｒ１及びＲ２が、独立にＨ、メチル、Ｃ１−Ｃ４アシル、ベンゾイルを表し、
Ｒ３が、Ｃ１−Ｃ４アルキル、又は式ＣｎＦｍＨｏ｛｛式中、ｎ＝１、２、３、４、５又は６であり、ｍ＞１であり、そしてｍ＋ｏ＝２ｎ＋１である。｝｝によって表される基を表し、
Ｒ４とＲ５が、各々Ｈを表すか、あるいは一緒にメチレン基又は追加結合を表し，
Ｒ６が、Ｈを表し、
Ｒ７が、ＯＨ、ＯＣ１−Ｃ４−アルキル、ＯＣ１−Ｃ１１アシル又はＯＳＯ２ＮＲ１Ｒ２を表す。
【００３１】
ステロイド骨格のＢ及びＣ環の破線は、最大２つの二重結合をさらに表している。｝によって表される化合物によって達成される。
【００３２】
意外にも、本発明の２−アルコキシエストラジオール・スルファメートは、２−メトキシエストラジオール自体より強いインビトロでの、チューブリン重合に対する抑制効果を有することが分かった。本発明の化合物は、インビボでの抗腫瘍活性をも有する。改善されたチューブリン重合抑制の結果として、腫瘍増殖のより強力な抑制が期待されうる。
【００３３】
Ｒ３が、Ｃ１−Ｃ４アルキル基を表す場合、それは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、又はｎ−、イソ−、若しくはｔ−ブチル基である。メチル又はエチル基が好ましい。
【００３４】
Ｒ１とＲ２がアシル基を表す場合、それは、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、又はイソブチリル基である。
【００３５】
Ｒ３置換基の部分的に又は完全にフッ化アルキル基について、例えば、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、又は２，２，２−トリフルオロエチル基が可能である。
【００３６】
Ｒ７アルコキシ基は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、又はｎ−、イソ−若しくはｔ−ブトキシ基を表す。
【００３７】
Ｒ７アシルオキシ基は、例えばアセチルオキシ、プロピオニルオキシ、ブチリルオキシ、イソブチリルオキシ、バレリルオキシ、デシルオキシ又はウンデシルオキシ基である。
【００３８】
本発明により、一般式（Ｉ）：
｛式中、
Ｒ１が、Ｈ、メチル、アセチル、プロピオニル、ブチリルを表し、
Ｒ２が、Ｈを表し、
Ｒ３が、Ｃ１−Ｃ４アルキルなたはＣＨ２ＣＦ３を表し、
Ｒ４及びＲ５が、Ｈを表すか、又は一緒にメチレン基を表し、
Ｒ６が、Ｈを表し、そして
Ｒ７が、ＯＨ、ＯＣ１−Ｃ４アルキル、ＯＣ１−Ｃ１１アシル又はＯＳＯ２ＮＲ１Ｒ２を表し、
ステロイド構造のＢ及びＣ環内の破線が、８−二重結合をさらに表す。｝によって表されるそれらの化合物が、好ましい。
【００３９】
本発明により、以下に列挙した化合物及びその使用が特に好ましい：
１）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
２）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
３）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
４）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
５）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
６）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
７）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
８）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
９）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
１０）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５β−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
１１）  ２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
１２）  ２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
１３）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
１４）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
１５）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
１６）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
１７）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
１８）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
１９）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
２０）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
２１）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
２２）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
２３）  ２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・アセチルスルファメート、
２４）  ２−エトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・アセチルスルファメート、
２５）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
２６）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
２７）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
２８）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
２９）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
３０）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート、
３１）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
３２）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート、
３３）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
３４）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、
３５）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート、又は
３６）  ２−（２’，２’，２’−トリフルオロエトキシ）−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート。
【００４０】
薬学的データ
本発明の化合物を、様々なモデルで試験した。一般式（Ｉ）によって表される本発明の化合物は、それらが２−メトキシエストラジオールが抑制するよりもチューブリン重合を抑制する点で注目に値する。チューブリン重合に対する効果を、以下の方法によってインビトロで試験した：
微小管タンパク質を、ブタの脳から環の組み立て／分解により、Ｓｈｅｌａｎｓｋｉらの方法（Ｓｈｅｌａｎｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １９７３，  ７０，  ７６５−８）によって精製した。使用したバッファー系は、以下の組成物であった：２０ｍＭのＰＩＰＥＳ（１，４−ピペラジンジエタンスルホン酸、ｐＫａ６．８）、８０ｍＭのＮａＣＩ、０．５ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＥＧＴＡ（エチレングリコール・ビス（２−アミノエチル）テトラ酢酸）。１ｍｇ／ｍｌ（約１０−５ｍＭのチューブリン）のタンパク質濃度を、活性物質を試験するために使用した。タンパク質を、標準としてウシ血清アルブミンを使ったラウリーの方法（Ｌｏｗｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９５１，１９３，２６５−７５）によって測定した。微小管の組み立てを、０．２５ｍＭのＧＴＰの存在下で実施し、そしてサンプルを３７℃に加熱した。
【００４１】
微小管形成を、３４０ｎｍの波長にて比濁法を使って確認した。通常は、微小管タンパク質が組み立て物（ａｓｓｅｍｂｌａｔｅ）濃度（微小管の濃度に相当する）の上昇を示さず、そして濁度が増加しない、平衡の状態に２０分後に達した。
【００４２】
組み立て開始又は平衡の状態の時点でそれらを加えることによって、活性物質を試験した。それらの有効性を、対照のそれらからの濁度曲線の偏差によって特徴づける。効果と計測された濁度値の評価を確認するために、組み立て物の透過電子顕微鏡（ＣＥＭ  ９０２  Ａ，Ｚｅｉｓｓ，Ｏｂｅｒｋｏｃｈｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）の調査を、１％の酢酸ウラニル水溶液を用いたネガティブ染色後に常に実施した。
【００４３】
【表１】
2005501849.tif 000008
【００４４】
以下の略記を、本明細書中に列挙された図中で使用した：
カソデックス（Ｃａｓｏｄｅｘ）：Ｎ−［４’−シアノ−３−（トリフルオロフェニル）］−３−［（４−フルオロフェニル）スルホニル］−２−ヒドロキシ−２−メチルプロパンアミド；
Ａ：２−メトキシ−１７β−エストラジオール３−スルファメート（実施例１）；
Ｂ：２−メトキシ−１７β−エストラジオール３−（Ｎ−アセチルスルファメート）（実施例６）。
【００４５】
本発明において、腫瘍増殖に対する本発明の２−アルコキシエストラジオール・スルファメートの効果を、皮下経路で継続的に投与された本発明の化合物のマウス異種移植片モデルによってインビボで調査した。
【００４６】
ＰＣ８２腫瘍モデル（Ｇ．Ｓｔｅｅｎｂｒｕｇｇｅ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｒｏｔｔｅｒｄａｍ，Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ  Ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ  Ｓｔｅｅｎｂｒｕｇｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｕｒｏｌｏｇｙ  １３１：８１２−８１７，１９８４）は、ホルモン依存性ヒト前立腺癌モデルである。腫瘍モデルを、手術の間に取り除かれた前立腺癌組織の連続継代によって免疫不全ヌードマウスにおいて確立し、そしてさらに増殖させた。アンドロゲン依存性ＬＮＣａＰ前立腺癌モデルを、同様に患者の腫瘍から確立した。この腫瘍モデルを、細胞培養、及び免疫不全マウスに対する異種移植の療法で増殖させた（Ｃｕｌｉｇ，Ｈｏｆｆｍａｎｎ，Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，１９９９，２４２−２５１）。治療実験のために、６週齢の雄ヌードマウス（ＮＭＲＩマウス、Ｍ＆Ｂ  Ｂｏｍｈｏｌｄｔｇａｒｄ，Ｄｅｎｍａｒｋ）に、テストステロン・ペレット剤（１２．５ｍｇ、９０日放出；ＩＲＡ，Ｓａｒａｓｏｔａ，ＦＬ）によって補われる。ＬＮＣａＰ細胞（１．５×１０６細胞）又は小ＰＣ８２腫瘍断片（２×２ｍｍ）のいずれかを、動物（左側面の皮下）に移植した。腫瘍が２０−２５ｍｍ２のサイズに達した後に、本発明の薬物による治療を開始した。
【００４７】
結果を、図１及び２に示す。未処理対照動物において腫瘍が急速に発達した一方で、本発明の薬物による治療は、前立腺腫瘍の増殖の明らかな抑制をもたらす。ＰＣ８２モデルで、増殖におけるこの抑制は、抗アンドロゲン又は去勢の効果に匹敵する。ＬＮＣａＰモデルで、腫瘍増殖の用量依存的な抑制が、記録されることもできる。ここでも同様に、前記効果は、去勢に匹敵して、カソデックス抗アンドロゲンによる治療をむしろ超えている。前立腺癌モデルを用いた実験の結果を、腫瘍増殖が本発明の薬物によって抑えられることを示す。
【００４８】
【化６】
2005501849.tif 000009
【００４９】
【化７】
2005501849.tif 000010
【００５０】
本発明で、腫瘍増殖に対する本発明の２−アルコキシエストラジオール・スルファメートの効果を、本発明の化合物を継続的に皮下経路で投与することにより、マウス異種移植片モデルによってインビボで調査した。未処理対照動物と比較して、腫瘍増殖が抑えられた。腫瘍増殖の抑制は、去勢マウスにおいて有意であった。前記治療は、十分に認められた。去勢モデルとは対照的に、マウス前立腺及び精嚢の萎縮は観察されなかった。
【００５１】
本発明は、本発明による化合物が前立腺腫瘍の増殖の抑制を引き起こすことを証明する。
【００５２】
服用量
一般的に、満足のいく結果は、日用量が患者の体重１ｋｇにつき、本発明の化合物を５μｇ〜５０ｍｇ含むときに、期待される。ヒトのような大きな哺乳動物について、推薦される日用量は、体重１ｋｇにつき１０μｇ〜３０ｍｇの範囲である。
【００５３】
本発明の化合物の好適な投与量は、患者の年齢及び体質に依存して、体重１ｋｇにつき１日０．００５〜５０ｍｇの範囲である。必要とされている日用量は、単回又は複回の服用量として投与されることができる。
【００５４】
しかし、エストロゲン・スルファメートの特別な徐放効果によって、本発明の化合物は、１日１回より長い間隔で投与されることができる（ＷＯ  ００／０６１７５）。
【００５５】
新規化合物に基づく医薬品は、活性物質を、医薬技術において慣習的である媒質、充填剤、分解制御剤、結合剤、ハーネクタント（ｈｕｒｎｅｃｔａｎｔｓ）、滑沢剤、吸収剤、希釈剤、着色料等と、加工し、そして所望の投与形態に変えることにより、知られている様式によってそれ自体が処方される。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，１５ｔｈ  ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔ  Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ  （１９８０）を参考文献とする。
【００５６】
経口投与のために、特に錠剤、コート錠、カプセル、丸剤、散剤、顆粒、ロゼンジ、懸濁化剤、乳濁液、又は液剤が可能である。注射及び輸液製剤は、腸管外適用のために可能である。適当に準備された結晶の懸濁化剤は、関節内の注射のために使用されることができる。水性及び油性の注射液又は懸濁化剤、並びに適当な徐放性製剤が、筋中注射のために使用されることができる。直腸投与のために、新規化合物は、全身、並びに局所治療のための、懸濁化剤、カプセル、（例えば、浣腸器の形態の）液剤、及び軟膏の形態で使用されることができる。
【００５７】
肺投与のために、新規化合物は、エアゾル剤及び吸入剤の形態で使用されることができる。
【００５８】
局所投与のために、ゲル、軟膏、油脂軟膏、クリーム、ペースト剤、散剤、乳濁剤、及びチンキ剤としての処方が可能である。これらの製剤への一般式（Ｉ）によって表される化合物の用量は、薬学的効果を成し遂げるのに十分であるように、０．０１％〜２０％であるべきである。
【００５９】
本発明は、チューブリン重合を抑制することで明らかに影響を受ける腫瘍性疾患の治療のための薬剤を生産するための一般式（Ｉ）によって表される本発明の化合物の使用を含む。好ましくは、一般式（Ｉ）によって表される本発明の化合物は、特に前立腺癌及び乳癌を含む、男性及び女性の性腺、並びに男性及び女性の生殖器官の腫瘍性疾患の治療ための薬剤を生産するために使用される
本発明は、場合により医薬として／薬理学として適合する塩の形態で、少なくとも１つの化合物、特に好ましくは本発明による化合物を、単独で又は医薬として適合する補助剤及び／又は担体と一緒に含む医薬組成物に関する。
【００６０】
これらの医薬組成物及び薬物は、経口、直腸、経膣、皮下、経皮、静中又は筋中投与されることができる。通常の担体及び／又は希釈液は別として、それらは、本発明により特に好ましい、少なくとも１つの化合物を含んでいる。
【００６１】
本発明の医薬品は、通常の固体若しくは液体担体又は希釈剤、そして所望の適用タイプ及び好適な用量に従って一般に使用される医薬補助剤を用いる、既知の手順によって調製される。好ましい製剤は、経口適用に好適である投与形態から成る。そのような投与形態は、例えば錠剤、フィルムコート錠、コート錠、カプセル、丸剤、散剤、液剤、又は懸濁化剤、あるいは徐放形態でもある。
【００６２】
本発明の化合物の少なくとも１つを含んでいる医薬組成物は、好ましくは経口投与される。
【００６３】
同様に、注射液のような腸管外の製剤が可能である。さらに、例えば、坐剤及び経膣投与のための手段が、製剤として言及されもする。
【００６４】
適当な錠剤は、前記活性物質を周知の補助薬を、例えばデキストロース、砂糖、ソルビット、マンニトール、ポリビニルピロリドンのような不活性な希釈液、コーンスターチ若しくはアルギン酸のような崩壊剤、スターチ若しくはゼラチンのような結合剤、ステアリン酸マグネシウム若しくはタルクのような滑沢剤、及び／又はカルボキシポリメチレン、カルボキシメチルセルロース、酢酸フタル酸セルロース若しくは酢酸ビニル若しくはポリビニル酢酸ような徐放効果を成し遂げるための材料と混合することによって入手されうる。錠剤は、いくつかの層から成りもする。
【００６５】
従って、コート錠は、錠剤コーティングに慣習的に使用される材料、例えばポリビニルピロリドン若しくはセラック、アラビアゴム、タルク、酸化チタン、又は糖を用いて、錠剤と同じ方法で調製された、コート核によって調製されることができる。
【００６６】
同様に、錠剤のコーティングは、錠剤について先に言及した補助剤のような材料を使用した数層から成る。
【００６７】
一般式（Ｉ）によって表される本発明のものを含む液剤又は懸濁化剤は、味を改善する薬物、例えばサッカリン、シクラメート、又は糖、並びに、例えば調味料及び香料、例えばバニリン又はオレンジ抽出物をさらに含む。さらに、それらは、カルボキシメチルセルロース・ナトリウムのような懸濁化剤、及びｐ−オキシベンゾエートのような保存剤を含んでいるかもしれない。
【００６８】
一般式（Ｉ）によって表される化合物を含むカプセルは、例えば一般式（Ｉ）によって表される化合物を、不活性な担体、例えばラクトース又はソルビットと、混合し、その後ゼラチンカプセル内に充填することによって生産することができる。
【００６９】
好適な坐剤は、中性脂肪又はポリエチレングリコールあるいはその誘導体のようなこの目的を対照とした担体材料と混合することによって生産されることができる。
【００７０】
前立腺癌の治療のために、本発明の化合物は、１以上の、下記の活性物質と一緒に投与されることができる：
１）ＣＰＡ、フルタミド、カソデックス等のような抗アンドロゲン薬
２）生殖腺刺激ホルモン（ＧｎＲＨ）アゴニスト
３）フィナステライドのような５α−レダクターゼ阻害薬
４）細胞増殖抑制剤
５）ＶＥＧＦキナーゼ阻害薬
６）抗ゲスターゲン薬
７）抗エストロゲン薬
８）アンチセンス・オリゴヌクレオチド
９）ＥＧＦ抗体
１０）エストロゲン
しかも、一般式（Ｉ）によって表される本発明の化合物は、先に記載されていない他の病状の治療及び予防のためにも使用されることができる。
【００７１】
一般式（Ｉ）の本発明の化合物は、以下に記載のとおり合成されうる：
好ましくは、エストラ−１，３，５（１９）トリエン−１７−オン誘導体、例えば化合物１〜３のＣ原子２の求電子置換を、文献（Ｔ．Ｎａｍｂａｒａ，  Ｓ．Ｈｏｎｍａ，  Ｓ．Ａｋｉｙａｍａ，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  １９７９，１８，４７４−４８０）に記載のとおり、Ｆｒｉｅｄｅｌ−Ｃｒａｆｔｓのアシル化によって実施する。３位の保護基の変更後に、２−カルボキシ−エストラ−１，３，５−（１０）−トリエン−１７−オンを、Ｂａｅｙｅｒ−Ｖｉｌｌｉｇｅｒ酸化（Ｍａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊ．Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ  １９８５，９９０−９９１、そして本明細書中に援用する）によって生産する。このエステルを、鹸化し、そして塩基を使用して適当なハロゲン化アルキルを用いて２−アルキル・エーテルに変換する。３位の保護基を、文献（Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊ．Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９９，ｐｐ．２４９−２７５）に記載のとおり除去する。
【００７２】
一般式（ＩＩ）｛式中、Ｒ２とＲ３が一緒にメチレン架橋を形成するか又はステロイド骨格内に追加の２重結合を有する。｝によって表される化合物から開始した２−アシル化は、オルソメタレーションによって実現される（Ｄ．Ｊ．Ｐｅｒｔ，Ｄ．Ｄ．Ｒｉｄｌｅｙ，Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９８９，４２，４０５−４１９；  Ｖ．Ｓｎｉｅｃｋｕｓ，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  １９９０，９０，８７９−９３３；  Ｐ．Ｂｅａｋ，Ｒ．Ａ．Ｂｒｏｗｎ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９８２，４７，３４−４６）。
【００７３】
【化８】
2005501849.tif 000011
【００７４】
好ましくは、カルバメート基が、３位のオルソ配向性保護基としてＲ１に使用される。２位にリチウムが導入された後に、ジメチルホルムアミドを使って求電子置換が実施される。２−ホルミルエストラジオール誘導体は、ギ酸エステルへと酸化されて、既知の手順によって２−アルコキシ化合物に変換される（ＷＯ９８／４０３９８）。一般式（ＩＩ）｛式中、Ｒ２とＲ３が一緒にメチレン架橋を形成するか又はステロイド骨格内に追加の二重結合を有する。｝によって表される化合物の合成は、当該技術分野で周知である（例えば、ＤＥ  ４２３９９４５；  ＤＥ  ４２３９９４６；  Ｒ．Ｐｒｏｕｓａ，  Ｂ．Ｓｃｈｏｎｅｃｋｅｒ，  Ｄ．Ｔｒｅｓｓｅｌｔ，  Ｋ．Ｐｏｎｓｏｌｄ，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｆｕｒ  Ｐｒａｋｔｉｓｃｈｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  １９８６，３２８，５５−７０；  Ｈ．Ｊ．Ｓｉｅｍａｎｎ，  Ｐ．Ｄｒｏｅｓｃｈｅｒ，  Ｂ．Ｕｎｄｅｕｔｓｃｈ，  Ｓ．Ｓｃｈｗａｒｚ，  Ｓｔｅｒｏｉｄｓ  １９９５，６０，３０８−３１５）。
【００７５】
本発明を、それだけに制限されることのない以下の実施例に関して言及することによってより詳細に説明する。
【００７６】
合成方法
１）エストラ−１，３，５−（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート及びエストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメートの合成のための一般法
エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−１７−オン誘導体（７ｍｍｏｌｅｓ）を、１００ｍｌの塩化メチレン中に攪拌しながら懸濁させ、そして３５ｍｍｏｌｅｓの２，６−ジ−ｔ−ブチルピリジンと７０ｍｍｏｌｅｓのスルファモイル・クロライドを室温で添加する。白色〜黄色がかった懸濁液が形成されて、さらに２時間攪拌される。前記反応混合物を、水に加えて、酢酸エチルで抽出し、この抽出物を、中性まで水と飽和炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄する。有機相を、硫酸ナトリウムによって乾燥させて、溶剤を留去し、そして未精製の産物を分離する。トルエン／酢酸エチル溶出液（ｖ／ｖ＝１：１０）を用いたシリカゲルによるクロマトグラフィーの後に、産物を７０〜８５％の収率で分離する。
【００７７】
２）エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート及びエストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメートのアセチル化のための一般法
記載のとおり合成されたステロイド・スルファメート（１０．５ｍｍｏｌｅｓ）を、５０ｍｌのピリジン中に溶解し、０℃〜５℃の温度にて１１５ｍｍｏｌｅｓの無水酢酸で処理する。透明な溶液を得、これを室温にてさらに１時間攪拌する。前記バッチを氷上に注ぎ、そして酢酸エチルで抽出する。抽出物を６Ｎの塩酸で酸性化した後に、それらを、水及び塩化ナトリウム溶液で洗浄する。有機相を乾燥させて、そして溶剤を留去する。乾燥させた未精製の産物を、精製することなくさらなる反応のために使用する。
【００７８】
３）３−スルファメート及びＮ−アセチル・スルファメートを還元するための一般法
ステロイド（１２ｍｍｏｌｅｓ）を、ＴＨＦとメタノールの１：１の混合物１２０ｍｌ中に溶解し、そして室温にて分割して１００ｍｍｏｌｅｓの水素化ホウ素ナトリウムで処理する。前記反応溶液を、室温で１時間攪拌し、続いて水の添加後に、１Ｍの塩酸を用いて酸性化し、そして酢酸エチルで抽出する。有機相を、中性まで塩化ナトリウム溶液で洗浄し、乾燥させ、そして溶剤を留去する。未精製の産物を、トルエン／酢酸エチル（ｖ／ｖ＝３：１）を使ったシリカゲルにより精製する。還元産物を、良好〜非常に良好な収率で得る（理論の６０〜９５％）。
【００７９】
＜実施例＞
以下の本発明の化合物を、所定の方法によって合成した：
実施例１
２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１Ｏ）−トリエン−３−イル・スルファメート１：
１３．９８ｍｍｏｌｅｓの２−メトキシ−１７−オキソ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−オールから前記一般合成方法１及び３によって、１０．４４ｍｍｏｌｅｓの収率（理論の７５％）で得た。
【００８０】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，ＴＭＳ）δ（ｐｐｍ）：７．８０（ｓ，２Ｈ，−ＮＨ２）、６．９７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１）、６．９６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−４）、４．５２  （ｄ，Ｊ，＝４．７Ｈｚ，１Ｈ，１７β−ＯＨ）、３．７６（ｓ，３Ｈ，２−ＯＣＨ３）、３．５８−３．４９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−１７α）、２．７７−２．６８（ｍ，２Ｈ，Ｈ−６）、０．６８（ｓ，３Ｈ，Ｈ−１８）。
【００８１】
実施例２
２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１Ｏ）−トリエン−３−イル・スルファメート２：
一般合成方法１、そして続くｔ−ブチルジメチルシリル保護基の除去（Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊ．Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  １９９９，  ｐｐ．２７３−２７６）によって、２（１．４２ｍｍｏｌｅｓ、理論の６１％）を、２．３３ｍｍｏｌｅｓの１７β−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−２−メトキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−オールから得た。
【００８２】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，ＴＭＳ）δ（ｐｐｍ）：７．８０（ｓ，２Ｈ，−ＮＨ２）、６．９５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１）、６．９４（ｓ，１Ｈ，Ｈ−４）、５．６７（ｓ，１Ｈ，１７β−ＯＨ）、３．７４（ｓ，３Ｈ，２−ＯＣＨ３）、３．５６−３．５０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−１７α）、２．８０−２．６２（ｍ，２Ｈ，Ｈ−６）、０．８９（ｓ，３Ｈ，Ｈ−１８）、０．２８−０．２０（ｍ，２Ｈ，１４α，１５α−ＣＨ２）。
【００８３】
実施例３
２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イル・スルファメート３：
３を、一般合成方法１及び３によって、１．２３ｍｍｏｌｅｓ（理論の７５％）の収率で１．６４ｍｍｏｌｅｓの２−エトキシ−１７−オキソ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−オールから得た。
【００８４】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，ＴＭＳ）δ（ｐｐｍ）：７．７６（ｓ，２Ｈ，−ＮＨ２）、６．９６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１）、６．９５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−４）、４．５３（ｄ，Ｊ＝３．９Ｈｚ，１Ｈ，１７β−ＯＨ）、４．０７−３．９９（ｍ，２Ｈ，２−ＯＣＨ２ＣＨ３）、３．５９−３．４８（ｍ，１Ｈ，Ｈ−１７α）、２．７６−２．６９（ｍ，２Ｈ，Ｈ−６）、１．３１（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ，２−ＯＣＨ２ＣＨ３）、０．７１（ｓ，３Ｈ，Ｈ−１８）。
【００８５】
実施例４
２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート４：
６を、一般合成方法１、２及び３によって、１．０５ｍｍｏｌｅｓ（理論の７３％）の収率で１．４３ｍｍｏｌｅｓの２−メトキシ−１７−オキソ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−オールから得た。
【００８６】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，ＴＭＳ）δ（ｐｐｍ）：１２．２０（ｓ，１Ｈ，−ＮＨ）、６．９７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１）、６．９２（ｓ，１Ｈ，Ｈ−４）、４．５１（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ，１７β−ＯＨ）、３．７３（ｓ，３Ｈ，２−ＯＣＨ３）、３．５７−３．４８（ｍ，１Ｈ，Ｈ−１７α）、２．７５−２．６７（ｍ，２Ｈ，Ｈ−６）、１．９９（ｓ，３Ｈ，−ＮＣＯＣＨ３）、０．６８（ｓ，３Ｈ，Ｈ−１８）。
【００８７】
実施例５
２−メトキシ−１７β−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−イルＮ−アセチル−スルファメート５：
７を、一般合成方法１及び２、そして続くｔ−ブチルジメチルシリル保護基の除去（Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊ．Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  １９９９，  ｐｐ．２７３−２７６）によって、１．１９ｍｍｏｌｅｓ（理論の５１％）の収率で２．３３ｍｍｏｌｅｓの１７β−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−２−メトキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−オールから得た。
【００８８】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，ＴＭＳ）δ（ｐｐｍ）：１２．２０（ｓ，１Ｈ，−ＮＨ）、６．９５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１）、６．９２（ｓ，１Ｈ，Ｈ−４）、５．６７（ｓ，１Ｈ，１７β−ＯＨ）、３．７４（ｓ，３Ｈ，２−ＯＣＨ３）、３．５６−３．５０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−１７α）、２．８０−２．６２（ｍ，２Ｈ，Ｈ−６）、１．９７（ｓ，３Ｈ，−ＮＣＯＣＨ３）、０．８９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１８）、０．２８−０．２０（ｍ，２Ｈ，１４α，１５α−ＣＨ２）。
【００８９】
実施例６
２−エトキシ−１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）トリエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート６：
８を、一般合成方法１、２及び３を使って、０．９４ｍｍｏｌｅｓ（理論の６７％）の収率で１．４０ｍｍｏｌｅｓの２−エトキシ−１７−オキソ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−オールから得た。
【００９０】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，ＴＭＳ）δ（ｐｐｍ）：１２．２０（ｓ，１Ｈ，−ＮＨ）、６．９９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１）、６．８６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−４）、４．５３（ｄ，Ｊ，＝４．７Ｈｚ，１Ｈ，１７β−ＯＨ）、４．０７−３．９６（ｍ，３Ｈ，２−ＯＣＨ２ＣＨ３）、３．５６−３．５０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−１７α）、２．７４−２．６８（ｍ，２Ｈ，Ｈ−６）、１．９７（ｓ，３Ｈ，−ＮＣＯＣＨ３）、１．２９（ｔ，３Ｈ，２−ＯＣＨ２ＣＨ３）、０．６８（ｓ，３Ｈ，Ｈ−１８）。
【００９１】
実施例７
２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イル・スルファメート７：
１１を、一般合成方法１、そして続くｔ−ブチルジメチルシリル保護基の除去（Ｔ．Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ，  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊ．Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  １９９９，  ｐｐ．２７３−２７６）を使って、１．０８ｍｍｏｌｅｓ（理論の６５％）の収率で１．６７ｍｍｏｌｅｓの１７α−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−２−メトキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−オールから得た。
【００９２】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，ＴＭＳ）δ（ｐｐｍ）：７．８１（ｓ，２Ｈ，−ＮＨ２）、６．９８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１）、６．９３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−４）、３．９０（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−１７β）、３．８０（ｓ，３Ｈ，２−ＯＣＨ３）、２．８０−２．６２（ｍ，２Ｈ，Ｈ−６）、１．２８−１．２５（ｍ，１Ｈ，１４α，１５α−ＣＨ２）、０．９３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１８）、０．４７−０．４３（ｍ，１Ｈ，１４α，１５α−ＣＨ２）。
【００９３】
実施例８
２−メトキシ−１７α−ヒドロキシ−１４α，１５α−メチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−イルＮ−アセチルスルファメート８：
１２を、一般合成方法１及び２、そして続くｔ−ブチルジメチルシリル保護基の除去（Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊ．Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  １９９９，  ｐｐ．２７３−２７６）を使って、０．９１ｍｍｏｌｅｓ（理論の４８％）の収率で１．８９ｍｍｏｌｅｓの１７α−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−２−メトキシ−１４α，１５αメチレン−エストラ−１，３，５（１０），８−テトラエン−３−オールから得た。
【００９４】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，ＴＭＳ）δ（ｐｐｍ）：１２．２０（ｓ，１Ｈ，−ＮＨ）、６．９８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１）、６．９０（ｓ，１Ｈ，Ｈ−４）、３．８９（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−１７β）、３．８０（ｓ，３Ｈ，２−ＯＣＨ３）、２．８０−２．６２（ｍ，２Ｈ，Ｈ−６）、１．９６（ｓ，３Ｈ，−ＮＣＯＣＨ３）、１．２８−１．２５（ｍ，１Ｈ，１４α，１５α−ＣＨ２）、０．９３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１８）、０．４７−０．４０（ｍ，１Ｈ，１４α，１５α−ＣＨ２）。
【国際公開パンフレット】
2005501849.tif 000013
2005501849.tif 000014
2005501849.tif 000015
2005501849.tif 000016
2005501849.tif 000017
2005501849.tif 000018
2005501849.tif 000019
2005501849.tif 000020
2005501849.tif 000021
2005501849.tif 000022
2005501849.tif 000023
2005501849.tif 000024
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2005501849.tif 000026
2005501849.tif 000027
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2005501849.tif 000029
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2005501849.tif 000039
2005501849.tif 000040
2005501849.tif 000041
2005501849.tif 000042
【国際調査報告】
2005501849.tif 000043
2005501849.tif 000044
2005501849.tif 000045
2005501849.tif 000046
2005501849.tif 000047
2005501849.tif 000048
2005501849.tif 000049
2005501849.tif 000050