(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）（式中、Ｒ1およびＲ2は、各々、水素、アルキル、アリールアルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、アミノおよびアミノアルキル（場合により置換されている）から選択された基を示し；ＲａおよびＲｂは、各々アルキレン鎖を示し；Ｘ1およびＸ2は、各々、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アルキル、アミノ（場合により置換されている）、ハロゲン、アルキルカルボニルオキシ、およびアジドから選択された基を示し；Ｘ4は、メチリデン基またはその記載において定義されたような式−Ｒｃ−Ｘ1で示される基を示す）で示される化合物；その異性体および医薬的に許容される酸もしくは塩基によるその付加塩に関する。本発明は医薬として使用するためのものである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）：
【化１】
2005509641.tif 000015
（式中、
Ｒ1およびＲ2は、同一または異なり得、これらは各々、他とは独立的に、水素、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アリール（Ｃ1−Ｃ6）アルキル（アルキル部分は直鎖または分岐であり得る）、ヒドロキシ、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）ヒドロキシアルキル、直鎖または分岐ジヒドロキシ（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アミノおよび直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アミノアルキルから選択された基を示し、ここで各基のアミノ部分は、場合により、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アリールおよびアリール−（Ｃ1−Ｃ6）アルキルから選択された１または２つの同一または異なる基により置換されており、ここでアルキル部分は直鎖または分岐であり得、
ＲａおよびＲｂは、同一または異なり得、これらは各々、他とは独立的に、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルキレン鎖を示し、
Ｘ1、Ｘ2、およびＸ3は、同一または異なり得、これらは各々、他とは独立的に、ヒドロキシ、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、アリールオキシ、アリール−（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ（アルコキシ部分は直鎖または分岐であり得る）、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アミノ（場合により、１または２つの同一または異なる直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルキル基により置換されている）、ハロゲン、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルキルカルボニルオキシ、およびアジドから選択された基を示し、
Ｘ4は、メチリデン基または式−Ｒｃ−Ｘ1の基を示し、ここでＲｃは、単結合またはメチレン基を示し、Ｘ1は前記に定義した通りである）
で示される化合物、その異性体および医薬的に許容される酸もしくは塩基とのその付加塩（「アリール基」によりフェニル基またはナフチル基、「異性体」により光学異性体が意味されると理解される）。
【請求項２】
Ｒ1が、水素原子、直鎖もしくは分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルキル基、または直鎖もしくは分岐（Ｃ1−Ｃ6）ヒドロキシアルキル基を示すことを特徴とする、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、その異性体および医薬的に許容される酸もしくは塩基とのその付加塩。
【請求項３】
Ｒ2が、水素原子を示すことを特徴とする、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項４】
ＲａおよびＲｂが、同一であり、直鎖（Ｃ1−Ｃ3）アルキレン鎖を示すことを特徴とする、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、その異性体および医薬的に許容される酸もしくは塩基とのその付加塩。
【請求項５】
Ｘ1、Ｘ2、およびＸ3が、各々、ヒドロキシ、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシおよび直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルキルカルボニルオキシから選択された基を示すことを特徴とする、請求項１に記載の化合物、その異性体および医薬的に許容される酸もしくは塩基とのその付加塩。
【請求項６】
Ｘ4が、−Ｒｃ−Ｘ1基から選択された基を示し、ここでＲｃは、メチレン基を示し、Ｘ1は、ヒドロキシ、ハロゲン、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、および（Ｃ1−Ｃ6）アルキルカルボニルオキシから選択された基を示すことを特徴とする、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、その異性体および医薬的に許容される酸もしくは塩基とのその付加塩。
【請求項７】
式（ＩＡ）：
【化２】
2005509641.tif 000016
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒａ、Ｒｂ、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、式（Ｉ）に定義した通りである）
の化合物を示すことを特徴とする、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、その異性体および医薬的に許容される酸もしくは塩基とのその付加塩。
【請求項８】
３，９−ビス（ヒドロキシメチル）−１２−（４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］−カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオンである、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、その異性体および医薬的に許容される酸もしくは塩基とのその付加塩。
【請求項９】
請求項１記載の式（Ｉ）の化合物の調製方法であって、
出発材料として式（II）：
【化３】
2005509641.tif 000017
（式中、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、式（Ｉ）に定義した通りである）
で示される化合物を使用し、
式（II）の化合物を、ラネーニッケルおよび水酸化ナトリウム溶液の存在下で水素化分解に付して、式（III）：
【化４】
2005509641.tif 000018
（式中、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、前記に定義した通りである）
の化合物を生成し、
式（III）の化合物を、式（IV）：
【化５】
2005509641.tif 000019
（式中、Ｒ1は、式（Ｉ）に定義した通りである）
の化合物の作用に付して、
式（Ｖ）：
【化６】
2005509641.tif 000020
（式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、前記に定義した通りである）
の化合物を生成し、
式（Ｖ）の化合物を、ルイス酸の存在下でα，α−ジクロロメチルメチルエーテルと反応させて、式（VI）
【化７】
2005509641.tif 000021
（式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、前記に定義した通りである）
の化合物を生成し、
式（VI）の化合物のアルデヒド官能基を、有機合成に一般的に使用される還元剤の作用により還元して、式（Ｉ）の化合物の特定の例である式（Ｉ／ａ）：
【化８】
2005509641.tif 000022
（式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、前記に定義した通りである）
の化合物を生成し、
式（Ｉ／ａ）の化合物を、有機化学の慣用的な条件に従ってその対応する二ハロゲン化化合物へと変換し、その後、ジメチルスルホキシドの存在下でアルカリシアン化物と反応させて、式（VII）：
【化９】
2005509641.tif 000023
（式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、前記に定義した通りである）
の化合物を生成し、
式（VII）の化合物を、慣用的な条件に従ってエステルに変換し、その後、還元剤の作用に付して、式（Ｉ）の化合物の特定の例である式（Ｉ／ｂ）：
【化１０】
2005509641.tif 000024
（式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、前記に定義した通りである）
の化合物を生成し、
式（Ｉ／ｂ）の化合物を、式（Ｉ／ａ）の化合物から開始して式（VII）および（Ｉｂ）の化合物を生じる同じ一連の反応に再度繰り返し付して、式（Ｉ）の化合物の特定の例である式（Ｉ／ｃ）：
【化１１】
2005509641.tif 000025
（式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、前記に定義した通りであり、ＲａおよびＲｂは、式（Ｉ）に定義した通りである）
の化合物を生成し、
式（Ｉ／ｃ）の化合物を、式（VIII）
【化１２】
2005509641.tif 000026
（式中、Ｒ2ａは、水素原子を除いて、式（Ｉ）のＲ2と同じ定義を有する）
の化合物の作用に付して、式（Ｉ）の化合物の特定の例である式（Ｉ／ｄ）：
【化１３】
2005509641.tif 000027
（式中、Ｒ1、Ｒａ、Ｒｂ、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4、およびＲ2ａは、前記に定義した通りである）
の化合物を生成し、
式（Ｉ／ａ）〜（Ｉ／ｄ）の化合物は、式（Ｉ）の化合物の全体を構成し、これらの化合物を、場合により従来の精製技術に従って精製し、所望であれば、従来の分離技術に従ってその異なる異性体に分離してもよく、その置換基Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4を、糖化学の分野で使用される有機合成の従来の方法に従って修飾してもよく、所望であれば、医薬的に許容される酸または塩基との付加塩に変換することを特徴とする方法。
【請求項１０】
活性成分として、請求項１〜８のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物を単独で、または１つ以上の医薬的に許容される不活性の無毒性の賦形剤または担体と組合せて含む、医薬組成物。
【請求項１１】
グリコーゲンシンターゼキナーゼＧＳＫ−３の阻害剤として使用するための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の少なくとも１つの活性成分を含む、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
II型糖尿病、肥満、中枢神経系の病態、アルツハイマー病、パーキンソン病の処置において医薬として使用するための、および、抗癌処置により引き起こされる正常細胞のアポトーシスを抑制するための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の少なくとも１つの活性成分を含む、請求項１０に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規ヒドロキシアルキルインドロカルバゾール化合物、その調製方法、およびそれらを含む医薬組成物に関する。
【０００２】
本発明の化合物は、トポイソメラーゼＩに関する阻害活性を有する、レベッカマイシンの誘導体であり、そのため腫瘍の処置に特に有用である。治療特性を向上する目的で、レベッカマイシンの数多くの化学的修飾が、分子上に存在する官能基（ＷＯ９８／０７４３３）および六環骨格上におけるその位置の両方について実施されている。
【０００３】
出願人により記載の化合物は、驚くべきことに、キナーゼファミリーについて、より特定するとキナーゼＧＳＫ−３（グリコーゲンシンターゼキナーゼ）について選択的阻害活性を有する。
【０００４】
グリコーゲンシンターゼキナーゼ３は、ほとんどのヒト組織（筋肉、肝臓、膵臓、心臓、腸など）に存在する。この酵素はインスリンシグナル伝達経路に関与している。従って、ＰＩ3−キナーゼ経路によりインスリンがＧＳＫ−３を阻害すると、グリコーゲンの形態の貯蔵物の合成が増加する。ＧＳＫ−３はまたインスリンの基質タンパク質をリン酸化し、インスリン刺激経路の脱感作を引き起こす。Ｚｕｃｋｅｒラット（肥満および糖尿病）で実施した実験により、ＧＳＫ−３の阻害によりグルコース輸送が刺激されることが実証された。また、ＧＳＫ−３活性は動物およびヒトのいくつかのモデルまたはいくつかの病態状況（II型糖尿病）において増加していたことが確認された。さらに、ＧＳＫ−３活性の阻害により、神経変性病態に罹患している被験者におけるニューロン死の予防、および腫瘍疾患に罹患し細胞毒性剤で処置している被験者における健康細胞の死の予防が可能となることがいくつかの要素により実証された。
【０００５】
従って、ＧＳＫ−３の合成を阻害できる化合物は、II型糖尿病、肥満、中枢神経系の病態、アルツハイマー病、およびパーキンソン病の処置、および抗癌医薬により誘導された正常細胞のアポトーシスの予防に特に有用である。
【０００６】
従って、出願人により記載された化合物は、新規である他に、意外にも、グリコーゲンシンターゼキナーゼ３に関して選択的な阻害活性を示し、これにより、前記した病態の処置における医薬として使用するのに特に有益である。
【０００７】
本発明は、より特定すると、式（Ｉ）
【０００８】
【化１４】
2005509641.tif 000002
【０００９】
（式中、
Ｒ1およびＲ2は、同一または異なり得、これらは各々、他とは独立的に、水素、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アリール（Ｃ1−Ｃ6）アルキル（アルキル部分は直鎖または分岐であり得る）、ヒドロキシ、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）ヒドロキシアルキル、直鎖または分岐ジヒドロキシ（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アミノおよび直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アミノアルキルから選択された基を示し、ここで各基のアミノ部分は、場合により、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アリールおよびアリール−（Ｃ1−Ｃ6）アルキルから選択された１または２つの同一または異なる基により置換されており、ここでアルキル部分は直鎖または分岐であり得、
ＲａおよびＲｂは、同一または異なり得、これらは各々、他とは独立的に、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルキレン鎖を示し、
Ｘ1、Ｘ2、およびＸ3は、同一または異なり得、これらは各々、他とは独立的に、ヒドロキシ、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、アリールオキシ、アリール−（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ（アルコキシ部分は直鎖または分岐であり得る）、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アミノ（場合により、１または２つの同一または異なる直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルキル基により置換されている）、ハロゲン、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルキルカルボニルオキシ、およびアジドから選択された基を示し、
Ｘ4は、メチリデン基または式−Ｒｃ−Ｘ1の基を示し、ここでＲｃは、単結合またはメチレン基を示し、Ｘ1は前記に定義した通りである）
で示される化合物、その異性体および医薬的に許容される酸もしくは塩基とのその付加塩に関する（「アリール基」によりフェニル基またはナフチル基、「異性体」により光学異性体（ラセミ体、エナンチオマー、およびジアステレオ異性体）が意味されると理解される）。
【００１０】
医薬的に許容される酸としては、限定を意味するものではないが、塩酸、臭化水素酸、硫酸、ホスホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、フマル酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、アスコルビン酸、シュウ酸、メタンスルホン酸、ショウノウ酸などを記載し得る。
【００１１】
医薬的に許容される塩基としては、例として、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、トリエチルアミン、tert−ブチルアミンなどを記載し得る。
【００１２】
本発明の化合物の好ましいＲ1基は、水素原子、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルキルおよび直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）ヒドロキシアルキルである。
【００１３】
本発明の化合物の好ましいＲ2基は、水素原子である。
【００１４】
本発明の有利な変種によると、好ましい化合物は、ＲａおよびＲｂが同一であり、直鎖（Ｃ1−Ｃ3）アルキレン鎖を示す式（Ｉ）の化合物である。
【００１５】
本発明の化合物の好ましいＸ1、Ｘ2、およびＸ3基は、ヒドロキシ、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、および直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルキル−カルボニルオキシ基から選択される。
【００１６】
本発明の化合物の好ましいＸ4基は、Ｒｃが、メチレン基を示し、Ｘ1が、ヒドロキシ、ハロゲン、直鎖または分岐（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、および（Ｃ1−Ｃ6）アルキルカルボニルオキシから選択された基を示す−Ｒｃ−Ｘ1基から選択される。
【００１７】
本発明の有利な変種によると、好ましい化合物は、式（ＩＡ）：
【００１８】
【化１５】
2005509641.tif 000003
【００１９】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒａ、Ｒｂ、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、式（Ｉ）に定義した通りである）
で示される化合物である。
【００２０】
本発明の好ましい化合物は、３，９−ビス（ヒドロキシメチル）−１２−（４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオンである。
【００２１】
好ましい化合物の異性体および医薬的に許容される酸もしくは塩基との付加塩は、本発明の完全な部分を形成する。
【００２２】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物の調製方法であって、出発材料として式（II）：
【００２３】
【化１６】
2005509641.tif 000004
【００２４】
（式中、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、式（Ｉ）に定義した通りである）
で示される化合物を使用し、
式（II）の化合物を、ラネーニッケルおよび水酸化ナトリウム溶液の存在下で水素化分解に付して、式（III）：
【００２５】
【化１７】
2005509641.tif 000005
【００２６】
（式中、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、前記に定義した通りである）
の化合物を生成し、
式（III）の化合物を、式（IV）：
【００２７】
【化１８】
2005509641.tif 000006
【００２８】
（式中、Ｒ1は、式（Ｉ）に定義した通りである）
の化合物の作用に付して、
式（Ｖ）：
【００２９】
【化１９】
2005509641.tif 000007
【００３０】
（式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、前記に定義した通りである）
の化合物を生成し、
式（Ｖ）の化合物を、ルイス酸の存在下でα，α−ジクロロメチルメチルエーテルと反応させて、式（VI）
【００３１】
【化２０】
2005509641.tif 000008
【００３２】
（式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、前記に定義した通りである）
の化合物を生成し、
式（VI）の化合物のアルデヒド官能基を、有機合成に一般的に使用される還元剤の作用により還元して、式（Ｉ）の化合物の特定の例である式（Ｉ／ａ）：
【００３３】
【化２１】
2005509641.tif 000009
【００３４】
（式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、前記に定義した通りである）
の化合物を生成し、
式（Ｉ／ａ）の化合物を、有機化学の慣用的な条件に従ってその対応する二ハロゲン化化合物へと変換し、その後、ジメチルスルホキシドの存在下でアルカリシアン化物と反応させて、式（VII）：
【００３５】
【化２２】
2005509641.tif 000010
【００３６】
（式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、前記に定義した通りである）
の化合物を生成し、
式（VII）の化合物を、慣用的な条件に従ってエステルに変換し、その後、還元剤の作用に付して、式（Ｉ）の化合物の特定の例である式（Ｉ／ｂ）：
【００３７】
【化２３】
2005509641.tif 000011
【００３８】
（式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、前記に定義した通りである）
の化合物を生成し、
式（Ｉ／ｂ）の化合物を、式（Ｉ／ａ）の化合物から開始して式（VII）および（Ｉｂ）の化合物を生じる同じ一連の反応に再度繰り返し付して、式（Ｉ）の化合物の特定の例である式（Ｉ／ｃ）：
【００３９】
【化２４】
2005509641.tif 000012
【００４０】
（式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4は、前記に定義した通りであり、ＲａおよびＲｂは、式（Ｉ）に定義した通りである）
の化合物を生成し、
式（Ｉ／ｃ）の化合物を、式（VIII）
【００４１】
【化２５】
2005509641.tif 000013
【００４２】
（式中、Ｒ2ａは、水素原子を除いて、式（Ｉ）のＲ2と同じ定義を有する）
の化合物の作用に付して、式（Ｉ）の化合物の特定の例である式（Ｉ／ｄ）：
【００４３】
【化２６】
2005509641.tif 000014
【００４４】
（式中、Ｒ1、Ｒａ、Ｒｂ、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4、およびＲ2ａは、前記に定義した通りである）
の化合物を生成し、
式（Ｉ／ａ）〜（Ｉ／ｄ）の化合物は、式（Ｉ）の化合物の全体を構成し、これらの化合物を、場合により従来の技術に従って精製し、所望であれば、従来の分離技術に従ってその異なる異性体に分離してもよく、その置換基Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、およびＸ4を、糖化学の分野で使用される有機合成の従来の方法に従って修飾してもよく、所望であれば、医薬的に許容される酸または塩基との付加塩に変換することを特徴とする方法に関する。
【００４５】
式（II）、（IV）、および（VIII）の化合物は、市販の化合物であるか、または当業者が容易に利用できる有機合成の従来の方法に従って得られる化合物である。
【００４６】
式（Ｉ）の化合物は、全く驚くべきである選択的なＧＳＫ−３（グリコーゲンシンターゼキナーゼ−３）阻害活性を示す。その特徴的な特性により、II型糖尿病、肥満、中枢神経系の病態、アルツハイマー病、パーキンソン病、およびアポトーシスの処置に使用できる。
【００４７】
本発明はまた、活性成分として、式（Ｉ）の少なくとも１つの化合物、その異性体、または医薬的に許容される酸もしくは塩基との付加塩を、単独で、または１つ以上の医薬的に許容される不活性で無毒性の賦形剤または担体との組合せて含む、医薬組成物に関する。
【００４８】
本発明に記載の医薬組成物としては、より特定すると、経口、非経口（静脈内、筋肉内、または皮下）、経皮的、膣内、直腸、鼻腔、舌下、頬側、眼内、または呼吸器内投与に適したものを記載し得る。
【００４９】
非経口注射のための本発明の医薬組成物は、特に、水性または非水性の分散液、懸濁液、またはエマルションである無菌液剤、および注射可能な液剤または分散液を再構成するための無菌粉末を含む。
【００５０】
固体経口投与のための本発明の医薬組成物は、特に錠剤または糖衣錠、舌下錠、サシェ剤、ゼラチンカプセル剤、顆粒剤を含み、液体の経口、鼻腔、頬側または眼内投与のための医薬組成物は、特に、エマルション、液剤、懸濁液、液滴、シロップ剤、およびエアゾール剤を含む。
【００５１】
直腸または膣内投与のための医薬組成物は、好ましくは坐剤であり、経皮投与のための医薬組成物は、特に、粉剤、エアゾール剤、クリーム剤、軟膏剤、ゲル剤、およびパッチ剤を含む。
【００５２】
前記した医薬組成物は、本発明を説明するがいかなる方法によっても限定するものではない。
【００５３】
医薬的に許容される不活性で無毒性の賦形剤または担体としては、説明のために、希釈剤、溶媒、保存剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、結合剤、膨張剤、崩壊剤、遅延放出剤、潤滑剤、吸収剤、懸濁剤、着色剤、香味剤などを記載し得るが、限定を意味するものではない。
【００５４】
有用な用量は、患者の年齢および体重、投与経路、使用する医薬組成物、疾患の性質および重度、および併用する処置の投与に応じて変化する。用量は、１日あたり１回以上の投与で０.５mg〜５００mgの範囲である。
【００５５】
以下の実施例は本発明を説明するが、いかなる方法によっても限定するものではない。
【００５６】
使用する出発材料は既知の生成物であるか、または既知の手順に従って調製した生成物である。種々の調製工程により、本発明の化合物の調製に使用するための合成中間体が得られる。
【００５７】
実施例および調製に記載した化合物の構造は、慣用的な分光学的技術に従って決定した（赤外線、核磁気共鳴、質量分析法など）。
【００５８】
実施例１：３，９−ビス（ヒドロキシメチル）−１２−（４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
工程Ａ：１２−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
０℃で、１.３７mmolの無水酢酸および３mmolのピリジンを、連続的に、０.１３６mmolの脱塩化レベッカマイシンに加えた。周囲温度で１９時間攪拌した後、反応混合物を氷上に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機層をＮａ2ＣＯ3溶液で洗浄し、その後、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル）にかけると、期待された生成物が単離された。
【００５９】
工程Ｂ：３，９−ジホルミル−１２−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
２.４mmolのα，α−ジクロロメチルメチルエーテルを、２mlジクロロメタン中の工程Ａで得られた化合物０.１２mmolの溶液に加えた。混合物を０℃まで冷却し、２.４mmolの１ＭのＴｉＣｌ4のジクロロメタン溶液を加え、その後、混合物を周囲温度で２４時間攪拌した。加水分解し、ジクロロメタンで抽出した後、有機層を飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮すると、期待された生成物が得られた。
【００６０】
工程Ｃ：３，９−ジホルミル−１２−（４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
工程Ｂで得られた化合物を、１３mlのメタノールに溶かし、その後６mlの３０％ＮＨ4ＯＨ水溶液を加えた。周囲温度で２４時間攪拌した後、反応混合物を蒸発乾固させた。残渣を酢酸エチル／テトラヒドロフラン混液に溶かし、１Ｎの塩酸溶液で酸性とし、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／アセトン：２０／８０）にかけると、期待された生成物が単離された。融点：＞３００℃。
【００６１】
工程Ｄ：３，９−ビス（ヒドロキシメチル）−１２−（４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
２０mgのラネーニッケル（重量にして水中で１／１）を、２８mlのメタノール中の工程Ｃで得られた化合物０.０９mmolの溶液に加えた。混合物を周囲温度で１バールの水素圧下で３日間攪拌した。セライトでろ過し、固体をメタノール、テトラヒドロフラン、およびアセトンで連続的に洗浄した後、溶媒を蒸発除去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／アセトン：１／１）にかけると、期待された生成物が単離された。融点：＞３００℃。赤外線（ＫＢｒ）：ｖCO＝１７２０、１７４０cm-1；ＶNH,OH＝３１００〜３６００cm-1
【００６２】
実施例２：３，９−ビス（ヒドロキシメチル）−６−メチル−１２−（４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ−［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン
工程Ａ：１２−（４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロフロ［３，４−ｃ］インドロ［２，３−ａ］カルバゾール−５，７−ジオン
０.４０mmolの１２−（４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオンの溶液、４２０mgの水酸化ナトリウム溶液、および７０mlの水を３時間加熱還流し、その後、希釈し、１Ｎ塩酸水溶液で酸性とし、酢酸エチルで抽出した。有機層を洗浄し、乾燥し、ろ過し、その後減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／シクロヘキサン：８０／２０）により、期待された生成物が単離された。
【００６３】
工程Ｂ：６−メチル−１２−（４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン
工程Ａで得られた０.１２mmolの化合物、および１４mlのテトラヒドロフラン中の２Ｍメチルアミン溶液を、７０℃で１６時間攪拌した。冷却後、反応混合物を加水分解し、沈降物が形成された。これをシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／シクロヘキサン：８０／２０）により精製すると、期待された生成物が単離された。
【００６４】
工程Ｃ：３，９−ビス（ヒドロキシメチル）−６−メチル−１２−（４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン
生成物は、基質として前記の工程Ｂで得られた化合物を使用して、実施例１の工程Ａ〜Ｄの手順に従って得られた。
【００６５】
実施例３：６−（２−ヒドロキシエチル）−３，９−ビス（ヒドロキシメチル）−１２−（４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］−カルバゾール−５，７−ジオン
工程Ａ：６−（２−ヒドロキシエチル）−１２−（４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン
実施例２の工程Ａで得られた０.３０mmolの化合物および１.３mlのエタノールアミンの溶液を、周囲温度で１時間攪拌し、その後氷上に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機層を乾燥し、ろ過し、その後減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／シクロヘキサン）により、期待された生成物が単離された。
【００６６】
工程Ｂ：６−（２−ヒドロキシエチル）−３，９−ビス（ヒドロキシメチル）−１２−（４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン
生成物は、基質として前記の工程Ａで得られた化合物を使用して、実施例１の工程Ａ〜Ｄの手順に従って得られた。
【００６７】
実施例４：６−ジエチルアミノエチル−３，９−ビス（ヒドロキシメチル）−１２−（４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン
工程Ａ：６−ジエチルアミノエチル−１２−（４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン
２６μlのＮ，Ｎ−ジエチルエチレンジアミンを、７mlの乾燥テトラヒドロフランに溶かした実施例２の工程Ａで得られた６０mgの化合物の溶液に滴下して加えた。反応混合物を６５℃で遮光して４日間加熱し、その後冷却し、混合物（１Ｎ塩酸水溶液／酢酸エチル）中にとった。酢酸エチルで抽出した後、有機層を乾燥し、ろ過し、その後減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーにより期待された生成物が単離された。
【００６８】
工程Ｂ：６−ジエチルアミノエチル−３，９−ビス（ヒドロキシメチル）−１２−（４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン
生成物は、基質として前記の工程Ａで得られた化合物を使用して、実施例１の工程Ａ〜Ｄの手順に従って得られた。
【００６９】
実施例５：３，９−ビス（ヒドロキシメチル）−１２−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
生成物は、基質として実施例１の工程Ｂで得られた化合物を使用して、実施例１の皇帝Ｄの手順に従って得られた。
【００７０】
実施例６：３，９−ビス（ヒドロキシメチル）−１２−（６−クロロ−６−デオキシ−４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
工程Ａ：１２−（６−クロロ−６−デオキシ−４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
４当量のＰＰｈ3および２当量のＣＣｌ4を、２mlのピリジン中の０.４５mmolの脱塩化レベッカマイシン溶液に加えた。周囲温度で３時間攪拌した後、反応混合物を１Ｎ塩酸水溶液で加水分解し、その後酢酸エチルで抽出した。有機層を洗浄し、乾燥し、ろ過し、その後減圧下で濃縮した。
【００７１】
工程Ｂ：３，９−ビス（ヒドロキシメチル）−１２−（６−クロロ−６−デオキシ−４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
生成物は、基質として前記の工程Ａで得られた化合物を使用して、実施例１の工程Ａ〜Ｄの手順に従って得られた。
【００７２】
本発明の化合物の薬理試験
実施例７：ＧＳＫ−３に関する阻害活性
実験プロトコル
グリコーゲンシンターゼキナーゼ３は、Eur.J.Biochem.1992、305-311に記載のようにトランスフェクトしたＳｆ９細胞から出発して精製した。反応混合物は、３０μlの最終容量中に、１mg/mlのＢＳＡ、１０mMのＤＴＴ、基質である６.７μMのＧＳ−１ペプチド、１５μMの［γ−32Ｐ］ＡＴＰ（３０００Ｃｉ/mmol、１ｍＣｉ/ml）、１０mMのＭｇＣｌ2、１mMのＥＧＴＡ、２５mMのトリス−ＨＣｌ pH＝７.５、５０μg/mlのヘパリン、および所定の濃度の阻害剤を含んでいた。３０℃で３０分後、２５μlの混合物を、ホワットマン（登録商標）Ｐ８１ホスホセルロースろ紙に堆積させ、その後１０mlのリン酸（１０ml/ｌ）で５回洗浄した。その後、ろ紙の放射活性を、１mlのシンチレーション液体の存在下で計測した。ＩＣ50値を、用量−応答曲線から概算した。この試験では、実施例１の化合物のＩＣ50は０.０３μMであった。従って、ＧＳＫ−３に関して活性であり、下記した実施例８および９に示した結果により証明されるように活性は選択的であった。
【００７３】
実施例８：ＣＤＫ−１に関する阻害活性
実験プロトコル
酵素は、Ｍ期のヒトデ（Marthasterias glacialis）卵母細胞ホモジネートからEur.J.Biochem、1997、243、527-536およびJ.Biol.Chem.、1999、274、11977-11986に記載のように精製した。反応混合物は、３０μlの容量中に、基質である１mg/mlのヒストンＨ１、１５μMの［γ−32Ｐ］ＡＴＰ（３０００Ｃｉ/mmol、１ｍＣｉ/ml）、１５mMのＭｇＣｌ2、６０mMのβ−グリセロホスフェート、１５mMのｐ−ニトロフェニルホスフェート、２５mMのＭＯＰＳ pH＝７.２、５mMのＥＧＴＡ、１mMのＤＴＴ、１mMのバナジウム酸ナトリウム、および所定の濃度の阻害剤を含んでいた。３０℃で１０分間インキュベートした後、２５μlの反応混合物を取り出し、ＧＳＫ−３プロトコルで前記したように処理した。ＩＣ50値は、用量−応答曲線から概算した。この試験では、実施例１の化合物のＩＣ50は５μMよりも大きく、従って、サイクリン依存的プロテインキナーゼを阻害する能力が低いことが実証された。
【００７４】
実施例９：ＣＤＫ５に関する阻害活性
実験プロトコル
ＣＤＫ５は、Ｅ.ｃｏｌｉにおいてＧＳＴ（グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ）融合タンパク質の形態で発現され、グルタチオン−アガロースアフィニティカラムで精製した。その後、ＣＤＫ５は、同じように調製したｐ２５（１/１混合物）により活性化した。ＣＤＫ５/ｐ２５複合体の酵素活性は、ＣＤＫ１/サイクリンＢで前記したように測定した。ＩＣ50値は、用量−応答曲線から概算した。この試験では、実施例１の化合物のＩＣ50は５μMよりも大きく、従ってサイクリン依存的プロテインキナーゼを阻害する能力が低いことが実証された。
【００７５】
実施例１０：各々が１０mgの用量を含む１０００錠の医薬組成物
実施例１の化合物・・・・・・・・・・１０ｇ
ヒドロキシプロピルメチルセルロース・１０ｇ
小麦デンプン・・・・・・・・・・・・１５ｇ
ラクトース・・・・・・・・・・・・・９０ｇ
ステアリン酸マグネシウム・・・・・・・２ｇ
【国際調査報告】
2005509641.tif 000028
2005509641.tif 000029
2005509641.tif 000030
2005509641.tif 000031