(57)【要約】本発明は、トランスプランテーションの間での血管における痙縮を最小化するための方法に関し、より具体的には、エクスビボの手法およびインビボの手法の両方に関しての、動脈移植片における痙縮を最小化するための方法に関する。本発明はさらに、これらの方法において用いることができる製剤に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
痙縮を最小化する薬剤、抗凝血剤および少なくとも一種の血管拡張剤を含む、移植中および移植後の血管移植片における痙縮を最小化するための医薬製剤。
【請求項２】
前記痙縮を最小化する薬剤が、ハロアルキルアミンのαアドレナリン遮断薬類からなる群より選択される、請求項１の製剤。
【請求項３】
前記痙縮を最小化する薬剤が、フェノキシベンザミン、フェノキシベンザミンの異性体およびフェノキシベンザミンの第三アミンからなる群より選択される、請求項１の製剤。
【請求項４】
前記ハロアルキルアミンのαアドレナリン遮断薬が、フェノキシベンザミン、フェノキシベンザミンの異性体およびフェノキシベンザミンの第三アミンからなる群より選択される、請求項２の製剤。
【請求項５】
約１０-6Ｍ〜約１０-1Ｍの濃度の溶液で痙縮を最小化する薬剤が存在し、活性凝固時間が約２００秒間よりも長い時間となるのに十分な濃度の抗凝血剤が存在し、そして約５〜約６０ｍｇの濃度の少なくとも一種の血管拡張剤が存在する、請求項１の製剤。
【請求項６】
約１０〜約１０００ＩＵの投与量の抗凝血剤が存在する、請求項５の製剤。
【請求項７】
抗凝血剤が、ヘパリン、クマジン、ＥＴＤＡ、クエン酸塩、ＥＧＴＡ、および活性凝固時間を約２００秒間よりも長くさせるその他の抗凝血剤からなる群より選択される、請求項１の製剤。
【請求項８】
少なくとも一種の血管拡張剤が、リドカイン、キシロカイン、テトラカイン、プロカイン、ならびにパパベリン、アデノシン、一酸化窒素供与剤、カルシウムチャネル遮断薬、ナトリウムチャネル遮断薬および関連するアデノシン制御剤などのその他の短時間の血管拡張剤からなる群より選択される、請求項１の製剤。
【請求項９】
少なくとも一種の血管拡張剤が、パパベリン、アデノシン、一酸化窒素供与剤、カルシウムチャネル遮断薬、ナトリウムチャネル遮断薬および関連するアデノシン制御剤からなる群より選択される、請求項１の製剤。
【請求項１０】
少なくとも一種の血管拡張剤が、リドカインおよびパパベリンからなる群より選択される、請求項１の製剤。
【請求項１１】
（ａ）動脈グラフトとして用いるための血管を採取する工程、
（ｂ）痙縮を最小化する薬剤を含む溶液を作製する工程、
（ｃ）痙縮を最小化する薬剤の溶液を、少なくとも一種の血管拡張剤および抗凝血剤と混合して、痙縮を最小化する薬剤の前処理溶液を作製する工程、
（ｄ）痙縮を最小化する薬剤の前処理溶液中に、採取された血管をある時間浸漬する工程、ならびに
（ｅ）痙縮を最小化する薬剤の前処理溶液から採取された血管を取り出し、そして採取された血管を動脈グラフトとして患者の中に移植する工程
を含む、血管の手術を受ける患者における血管移植片の前処理および移植のための方法。
【請求項１２】
混合工程（ｃ）において、患者の血液の量を添加する、請求項１１の方法。
【請求項１３】
混合工程（ｃ）において、生理的クリスタロイド緩衝液を添加する、請求項１２の方法。
【請求項１４】
（ａ）動脈グラフトとして用いるための動脈を採取する工程、
（ｂ）希釈剤およびフェノキシベンザミンを含む溶液を作製する工程、
（ｃ）フェノキシベンザミンを含む溶液を、患者の血液の量の、少なくとも一種の血管拡張剤および抗凝血剤と混合して、フェノキシベンザミンの前処理溶液を作製する工程、
（ｄ）フェノキシベンザミンの前処理溶液中に、採取された動脈をある時間浸漬する工程、ならびに
（ｅ）フェノキシベンザミンの前処理溶液から採取された動脈を取り出し、そして採取された動脈を動脈グラフトとして患者の中に移植する工程
を含む、血管の手術を受ける患者における動脈グラフトの前処理および移植のための方法。
【請求項１５】
希釈剤が、標準的な塩類および関連する生理的溶液ならびに緩衝液からなる群より選択される、請求項１４の方法。
【請求項１６】
動脈および動脈の周囲の茎を含む動脈を採取する、請求項１４の方法。
【請求項１７】
動脈グラフトの、フェノキシベンザミンの前処理溶液への接触を強めるように茎が改変されている、請求項１６の方法。
【請求項１８】
筋膜切開術によって茎が改変されている、請求項１７の方法。
【請求項１９】
動脈の筋肉を取り去られた部分のみを含む動脈を採取する、請求項１４の方法。
【請求項２０】
採取される動脈が、内胸動脈、胃大網動脈、下腹壁動脈、橈骨動脈および血管コンジットに指定されたその他の任意の動脈からなる群より選択される、請求項１４の方法。
【請求項２１】
採取された動脈が橈骨動脈である、請求項２０の方法。
【請求項２２】
フェノキシベンザミンの前処理溶液におけるフェノキシベンザミンの濃度の範囲が約１０-6Ｍ〜約１０-1Ｍである、請求項１４の方法。
【請求項２３】
フェノキシベンザミンの前処理溶液におけるフェノキシベンザミンの濃度の範囲が約１０-6Ｍ〜約１０-1Ｍである、請求項１６の方法。
【請求項２４】
採取された動脈がフェノキシベンザミンの前処理溶液中に浸漬される時間の範囲が約５〜約６０分間である、請求項１４の方法。
【請求項２５】
密封および加圧が可能な容器内に、採取された動脈およびフェノキシベンザミンの前処理溶液を置き、次いでその容器を密封し、次いでその容器を０．０１〜１００ｍｍＨｇの圧力にある時間加圧して、フェノキシベンザミンの前処理溶液が採取された動脈内に浸透するのを助力する、請求項１４の方法。
【請求項２６】
採取された動脈をフェノキシベンザミンの前処理溶液中に浸漬する時間の範囲が約５〜約６０分間である、請求項２５の方法。
【請求項２７】
浸漬工程が、フェノキシベンザミンの前処理溶液を、採取された動脈または採取された動脈に流れるかもしれない伴行静脈の管腔内に注入することをさらに含む、請求項１４の方法。
【請求項２８】
フェノキシベンザミンの前処理溶液を、採取された動脈または採取された動脈に流れるかもしれない伴行静脈の管腔内に注入した後に、採取された動脈を０．０１〜１００ｍｍＨｇの圧力にある時間加圧して、フェノキシベンザミンの前処理溶液が採取された動脈内に浸透するのを助力する、請求項２７の方法。
【請求項２９】
フェノキシベンザミンの前処理溶液を、採取された動脈または採取された動脈に流れるかもしれない伴行静脈の管腔内に注入した後に、採取された動脈の少なくとも一方の末端を、加圧する前に締め付けるかまたはその他の方法で閉じる、請求項２８の方法。
【請求項３０】
ａ）コンジットの一方の末端として用いるための内胸動脈を採取する工程、
ｂ）採取された動脈コンジットの一方の末端を、フェノキシベンザミン溶液中にある時間浸漬する工程、ならびに
ｃ）フェノキシベンザミン溶液から採取された動脈コンジットの一方の末端を取り出し、そして動脈グラフトとして採取された動脈コンジットを患者の中に移植する工程
を含む、冠動脈バイパス術を受ける患者における内胸動脈コンジットのインビボでの前処理および移植のための方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［優先権の主張］
本出願は、２００１年１０月３１日に出願された、同時係属している米国仮特許出願第６０／３３５，６４２号および第６０／３３６，０９０号（代理人の整理番号はＷＳＰＣ／００６ＰおよびＷＳＰＣ／００８Ｐ）を基礎とする。
【０００２】
［発明の分野］
本発明は、エクスビボおよびインビボでの血管移植片における痙縮を最小化するための一般的な方法および製剤に関し、より具体的には、痙縮を最小化する薬剤溶液を動脈グラフトに投与することによって痙縮を最小化することに関する。
【背景技術】
【０００３】
冠動脈疾患（たとえば、冠動脈閉塞を示す患者が挙げられるが、これに限定されない）を示す患者の人口は高齢化しており、そしてこれらの患者の１０％〜３０％はバイパスグラフトの交換を含めた心臓の再手術を受けなければならないので、バイパスグラフトコンジットの新しい供給源と、同じものを調製するための新しい治療法とを発見するための必要性が存在する。
【０００４】
バイパスグラフトコンジット（ｃｏｎｄｕｉｔ）は伝統的に、静脈グラフト、通常は患者の足からの静脈の一部（一般的に伏在静脈）を用いて実施されており、この静脈を採取し、次いでバイパス術、通常は冠動脈バイパス術にて移植する。しかしながら、これらの動脈は一般的に、静脈のそれよりも筋肉性に富む中膜を有し、それゆえに、静脈グラフトのそれよりも、概して高い血圧に耐えることができるので、バイパスグラフトコンジットのために動脈を用いる頻度が増加しつつある。
【０００５】
この１５年の間に、動脈コンジットを用いて冠動脈バイパス移植術（ＣＡＢＧ）を実施することが著しく増加した。両側の内胸動脈グラフトの臨床上の利点および生存上の利点から、ＣＡＢＧのためのコンジットの最初の選択肢としてこれらのことが確立されてきた。一方、橈骨動脈は、二番目に一般的な動脈コンジットとして急速に用いられるようになった。
【０００６】
トランスプランテーション（バイパス術）に広く用いられる血管グラフト、特に動脈グラフトには、痙縮、すなわち血管痙攣が生じる傾向（血管壁の筋肉性の中膜には断続的な収縮を来たす傾向または増加させる傾向がある）、または手術中および手術後の昇圧療法の使用による「ストリングサイン」が生じる傾向があり、それゆえに抵抗が高まり、結果として動脈グラフトを経由する血流量が低下してしまう。静脈血の血管（静脈）よりも筋肉性に富む中膜が持つ動脈としての固有の性質のために、たとえば、動脈グラフトのために用いられるその他の動脈のような内胸動脈は、血管痙攣すなわち痙縮を来たす可能性を有する。このような痙縮の結果、狭心症に至る心筋への血流量の低下となる可能性、ならびに重篤な心筋梗塞または低灌流の可能性がある。従って、動脈の痙縮が、コンジットの（グラフトの）長期間の開通性に悪影響を及ぼす可能性があり、そしてそれゆえに、三年間という短い期間内に、新しいグラフトまたはコンジットを用いて別の冠動脈バイパス術を実施しなければならないという結果になる可能性がある。具体的に言えば、橈骨動脈バイパスコンジットは痙縮を来たす傾向が強く、冠動脈バイパスグラフトにおける抵抗の増加や血流量の低下を引き起こす。
【０００７】
橈骨動脈は用途が広いコンジットであり、このものを容易にかつ安全に採取することが可能であり、その他の動脈グラフトよりも取扱適性に優れ、そして任意の冠動脈のターゲットに余裕をもって到達する。いくつかの研究から、ＣＡＢＧから五年後までにおいて、橈骨動脈グラフトの開通性は静脈グラフトよりも優れていることが報告されている。しかしながら、ＣＡＢＧについて、コンジットとしての橈骨動脈の普及に対する熱意は、その周術期において痙攣が生じる傾向がより強いということによって和らいでしまう。
【０００８】
実際には、１９７３年に冠動脈の手術のためのコンジット（グラフト）として、橈骨動脈が提案されたのが最初であった。しかし、その後のグラフトの機能不全の割合の高さ（手術から二年以内に３５％）が原因で−主に血管痙攣（痙縮）に帰するこのような機能不全により−断念された。その後、手術後にカルシウムチャネル遮断薬およびアスピリンを投与して添加する処理を行うことにより、機能不全の割合は若干低下した。しかしながら、動脈グラフトを採取する時間の間に、カルシウムチャネル遮断薬、アスピリンならびにニトログリセリン、ニトロプルシドナトリウムおよびパパベリンなどの血管拡張剤を用いたのにもかかわらず、血管痙攣、低灌流およびグラフトの機能不全はなおも観察された。
【０００９】
従って、橈骨動脈が痙縮（血管痙攣）する傾向は、手術後に重篤な心筋の低灌流を招く結果ならびにグラフトの長期間の開通性に悪影響を与える結果となる可能性がある。血管痙攣についての橈骨動脈の可能性は、その他の動脈、たとえば内胸動脈の可能性よりも数倍高く、このことの理由は、その筋肉性に富む中膜と、一般的により厚い動脈壁にある。そして、強心剤または血管収縮剤を投与されている患者においては、この痙縮／血管痙攣のリスクはさらに高まる。
【００１０】
周術期における橈骨動脈の血管痙攣を起こすリスクを減少させる（最小化する）ための種々の薬理学的な操作が提唱されてきた。しかし、すべてのものに明らかな限界がある。カルシウムチャネル遮断薬の静脈内注射によって、低血圧、徐脈および顕著なリズムの乱れが引き起こされる。その一方、パパベリンおよびニトログリセリンなどの局所に適用される薬剤は相対的に半減期が短い。パパベリンまたはその他の血管拡張剤を用いる現在の手術前および／または手術後の処理では、トランスプランテーション中およびその直後の痙縮（血管収縮）を最小化することも持続的に抑制することもできない。
【００１１】
従って、動脈グラフト、最も具体的には橈骨動脈グラフトには、動脈が静脈と比べて非常に筋肉性に富むことも手伝って、痙縮すなわち血管痙攣が生じる強い傾向がある。橈骨動脈に関して言えば、動脈壁における筋肉組織が増加すること、その他の動脈−たとえば内胸動脈−よりも中膜が厚いこと、筋細胞の組織の密度がより高いこと、そして結合組織がより少ないこと、のすべてが合わさって、血管作用性物質−たとえばカリウム、セロトニンならびにαアゴニストのノルエピネフリンおよびフェニレフリン−に対する橈骨動脈の感受性をより高めている。結果として、動脈グラフト、特に橈骨動脈グラフトは、心肺バイパス術中および手術後に発生する出来事（たとえば換気の中止および胸腔チューブの除去）の間に発生するカテコールアミンの急激な増加の間での、ならびに手術後の患者の血圧を維持するための昇圧剤を投与している間での痙縮（血管痙攣）に対してより高いリスクを有する。
【００１２】
現在のところ、ホスホジエステラーゼインヒビター−このものはパパベリンなどの血管拡張剤である−を用いて、動脈グラフトの痙縮を軽減（すなわち血管痙攣の減衰または最小化）している。しかしながら、パパベリン治療にも、収縮反応の減少は一時的であるという制限と、予想される動脈グラフトセグメントの内皮に損傷を与えるリスクが極めて高いという結果を生じるかもしれないという問題がある。
【００１３】
最後に、痙縮すなわち血管痙攣が生じる傾向が強いことと、内胸動脈グラフトにおける開通性が短期間であることという問題は、冠動脈バイパス術において当該動脈を用いることによって最小化され、そしてこの問題によって、採取された動脈グラフトを用いて冠動脈バイパス術を行うためにエクスビボの手法を採用することが本質的に要求されてきた。このような採取された動脈グラフトに関するエクスビボの手法では、通常、ドナーまたは患者の体から採取され取り出された動脈を無菌環境に置き、（痙縮の最小化を行うことを試みるのであれば）その動脈を手術室から実験室またはその他の部屋へ移すために冷却し、そしてその後に、手術室に戻して元の患者の体内に移植するために酸素を供給し、適切なｐＨ（通常約ｐＨ７．４）を維持しながら、ほぼ体温にまで再度加温することが必要である。採取された動脈グラフトに関する無菌処理、酸素供給および冷却／加熱ショックに加えて、このようなエクスビボ法に必要な時間は、冠動脈バイパス術における、採取された動脈のトランスプランテーションすなわち移植のほんのわずかな遅延において大きな欠点となるり得る。
【発明の開示】
【００１４】
驚くべきことに、痙縮を最小化する薬剤−たとえばフェノキシベンザミンなどのハロアルキルアミンのαアドレナリンアンタゴニスト（遮断薬）−を溶液として局所に適用すること、溶液に浸漬すること、または血管グラフト内に注入することによって、エクスビボの手法およびインビボの手法による（血管の採取と当該採取された血管移植片の移植）処理後４８時間までと４８時間を含む間において、フェニレプリンまたはノルエピネプリンなどの強心剤によって誘導された痙縮すなわち血管収縮が減衰すること（すなわち減少すること）を、我々は見出した。インビボの手法においては、内胸動脈を患者から除去することはないが、その代わりに一箇所（末端）のみを採取（切断）する。その結果、内胸動脈の一部はなお患者の循環器系に存在するが、内胸動脈の採取された末端を、フェノキシベンザミン溶液もしくはその他のαアドレナリン作用性溶液を用いる注入または浸漬によって、所望であればその場で（たとえば手術室内で）迅速に処理することができる。次いで、切り取られた内胸動脈の採取末端を取り付けて、閉塞した冠動脈に移植して接続する。
【００１５】
上記の本発明の特徴が達成し、そして詳細を理解することができるやり方の故に、添付された図面に図解されたその実施形態を引用することによって、本発明のより詳細な説明−上記に要約されている−を行うことができる。
【００１６】
しかしながら、添付された図面は本発明の代表的な実施形態だけを図解するものであり、従って、その範囲を制限するものとみなすべきではないことに注意し、本発明は、その他の同等に有効な実施形態についても認める。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
静脈および動脈の両者に関して、好ましい動脈グラフトが形成されるように採取される動脈と共に、移植される血管の採取を行ってもよい。
【００１８】
任意の動脈を採取して、本明細書において検討される手法に用いてもよく、内胸動脈、胃大網動脈、下腹壁動脈および橈骨動脈が挙げられるが、これらに限定されない。エクスビボの手法では、橈骨動脈を採取して橈骨動脈グラフトを形成することが、そしてインビボの手法では、内胸動脈を採取して内胸動脈グラフトを形成することが好ましい。
【００１９】
当分野で周知の方法に従って、採取法を実施する。しかしながら、周囲の結合組織（茎）を全く伴わない、筋肉を取り去った血管としての動脈（たとえば図１を参照すること）、または周囲の結合組織（茎）を伴う動脈を直接採取したものとしての動脈（たとえば図２を参照すること）のいずれかを採取することが好ましい。採取に関する公知の手術上の懸念（たとえばワンタッチイシュー）が原因で、必要に応じて、採取法はエクスビボの手法に適した、橈骨動脈および周囲の茎を直接採取することでもよい。インビボの手法のためには、胸壁から内胸動脈を採取し、その末端側の端を引き離して（切断して）、閉塞の下側の閉塞した冠動脈に接続するのに用いる。
【００２０】
橈骨動脈を採取する一つの方法において、茎を伴う橈骨動脈の筋膜切開術を実施して、動脈壁を、痙縮を最小化する薬剤−好ましくはフェノキシベンザミンなどの痙縮を最小化する薬剤の全部または一部を含有する溶液−に触れさせる。必要に応じて、痙縮を最小化する薬剤溶液を少なくとも一種の血管拡張剤および抗凝血剤と混合して、医薬製剤としての、痙縮を最小化する薬剤の前処理溶液−たとえばフェノキシベンザミンの前処理溶液−を作製してもよい。この方法において、橈骨動脈の最上層の下部に横たわる筋膜だけでなく、橈骨動脈の上部に横たわる橈骨動脈の茎をも縦方向に切開する。この特定の方法によって、橈骨動脈の壁を、痙縮を最小化する薬剤の前処理溶液−たとえばフェノキシベンザミンの前処理溶液−に直接触れさせることが可能となる。その上橈骨動脈を部分的に伸ばすことも可能となることから、より長いグラフトに達するか、またはより長いグラフトととして利用できるかのいずれかとなる。
【００２１】
移植される血管を採取した後、採取された血管を、痙縮を最小化する薬剤−たとえばフェノキシベンザミン−を含む溶液、すなわち前処理溶液中にある時間−好ましくは約５〜約６０分間−浸漬する。当分野で公知の方法のようにして浸漬工程を実施し、そして浸漬工程には、直接灌流、血管の管腔内への注入、加圧による管腔内への注入およびその他の周知の手法が含まれる。たとえば、痙縮を最小化する薬剤−たとえばフェノキシベンザミン−を含む溶液を動脈の管腔−たとえば橈骨動脈の管腔−内に注入することと、その後に動脈の一方または両方の末端を締め付けて、痙縮を最小化する薬剤（たとえばフェノキシベンザミン）を含む溶液を管腔内に保持することによって、浸漬工程を実施してもよい。
【００２２】
あるいは、痙縮を最小化する薬剤溶液−たとえばフェノキシベンザミンの前処理溶液−を並行する伴行静脈内に導くことを利用して、脈管の脈管を間接的に触れさせることによって、浸漬工程を実施してもよい。必要に応じて、患者の血液の量の前処理溶液を含んでもよく、さらに、生理的クリスタロイド緩衝液を含んでもよい。この浸漬工程において、約０．０１ｍｍＨｇ〜約１００ｍｍＨｇのいくらかの圧力を個々の静脈に加えて動脈壁を潅流している間に、茎を有する動脈の一つ末端を（動脈および静脈を含めて）締め付ける。
【００２３】
浸漬工程の別の実施形態において、本明細書で説明するように、約０．０１〜約１００ｍｍＨｇに制御した圧力によって、採取された橈骨動脈そのものを直接灌流することができ、それによって橈骨動脈の管腔から外れた脈管の脈管の分岐を直接灌流することが可能となる。
【００２４】
浸漬工程のさらに別の実施形態において、圧力を利用して、痙縮を最小化する薬剤の溶液−たとえばフェノキシベンザミン（すなわちフェノキシベンザミンの前処理溶液）−がたとえば橈骨動脈および茎などの動脈内に浸透するのを助力する。そのような手法において、採取された動脈をコップなどの容器内に置き、痙縮を最小化する薬剤（フェノキシベンザミン）溶液を添加する。次いで、容器を密封して約０．０１ｍｍＨｇ〜約１００ｍｍＨｇに加圧して、痙縮を最小化する薬剤（フェノキシベンザミン）の溶液、ならびに必要に応じて関連する薬剤−たとえば抗生物質、麻酔剤、またはこのようなバイパス術において通常用いられるその他の公知の薬剤−の溶液を動脈の壁内に押し込む。
【００２５】
さらに、本発明に従って、任意の冠動脈内にまたは血管内に導入する−たとえば内胸動脈の管腔内に注入する−ために、ならびに末梢血管の移植片すなわちコンジット−たとえば大腿膝窩バイパスすなわちシャント−において血管における痙縮を最小化（すなわち減少または減衰）するために、大脳の血管−たとえば動脈瘤の修復、外側からまたは血管内からのアプローチによるＡ−Ｖフィステルの閉鎖−における痙縮の最小化の際に、遊離皮弁の血管再新生の間の痙縮の最小化の際に、透析患者における血管に接近するための上腕動脈またはその他の動脈のシャントの際に、切断部の修復または血管再新生またはその他の外傷の修復（たとえば、外傷性切断すなわち銃創および鋭的または鈍的外傷などに起因する外傷の後の指または手足の再付着のために、引き裂かれた血管を再吻合することが挙げられるが、これらに限定されない）の際に、医薬製剤（「浸漬溶液」）を用いてもよく、ならびに当業者に知られている通常の露出技術−たとえば、筋膜切開術、伴行静脈を介する注入、管腔内の露出および血管（たとえば脈管の脈管）を介して浸透させるための管腔内の加圧が挙げられるが、これらに限定されない−を用いてもよい。溶液そのものによるか、または主要な効果もしくは副作用の一部のいずれかとして痙縮を最小化または抑制するために同時に注入する薬剤として、器官、組織または組織層内への局所的な送達を介して「浸漬溶液」を用いることもできる。
【００２６】
痙縮を最小化する薬剤の溶液、すなわち前処理溶液−たとえばフェノキシベンザミンの前処理溶液−を冠動脈内または血管内に導入することによって、浸漬工程を実施することもできる。たとえば、フェノキシベンザミンなどの痙縮を最小化する薬剤の溶液を血管痙攣の冠動脈内にまたは既に痙縮（血管痙攣）が減少または最小化している動脈グラフト内に導入する。この手法の一つの実施形態において、動脈または痙縮が生じているグラフト（痙攣性グラフト）に蛍光透視下でカテーテルを挿入することができ、次いでフェノキシベンザミンなどの痙縮を最小化する薬剤の溶液を注入する。このような手法において、カテーテルを用いて一時的に血管またはグラフトの末端を塞いでグラフトの空間を設けてもよく、次いで、フェノキシベンザミンなどの痙縮を最小化する薬剤の溶液を添加することによって、グラフトの空間の内部を満たしてある時間浸漬する（「留める」）。次いで、閉鎖しているカテーテルを取り外す際に、フェノキシベンザミンなどの痙縮を最小化する薬剤の溶液を循環させて洗浄すること、または冠動脈カテーテルを介してこの溶液を再度吸引することのいずれかによって、体循環を防ぐこともできる。当業者であれば、この手法の、その他の任意の器官−たとえば腎臓、脳、末梢骨格筋などが挙げられるが、これらに限定されない−に適用できる能力を認識できるだろう。
【００２７】
本発明の痙縮を最小化する薬剤は、ハロアルキルアミンのαアドレナリン遮断薬類からなる群より選択され、そして好ましくはフェノキシベンザミン、フェノキシベンザミンの異性体およびフェノキシベンザミンの第三アミンからなる群より選択される。
【００２８】
痙縮を最小化する薬剤を希釈して溶液にしてもよく、痙縮を最小化する薬剤の溶液の濃度は、約１０-6Ｍ〜約１０-1Ｍである。標準的な塩類および関連する生理的溶液ならびに当分野で知られている緩衝液からなる群より、希釈剤を選択してもよい。さらにおよび好ましくは、医薬製剤に関して、痙縮を最小化する薬剤の溶液を、少なくとも一種の血管拡張剤−たとえば、リドカイン、キシロカイン、テトラカイン、プロカイン、およびパパベリン、アデノシン、一酸化窒素供与剤、カルシウムチャネル遮断薬、ナトリウムチャネル遮断薬および関連するアデノシン制御剤などのその他の短時間の血管拡張剤−ならびに痙縮を最小化する薬剤の前処理溶液を作製するための抗凝血剤−たとえば、ヘパリン、クマジン、ＥＴＤＡ、クエン酸塩、ＥＧＴＡおよび活性凝固時間を約２００秒間よりも長くさせるその他の抗凝血剤−と混合して、痙縮を最小化する薬剤の前処理溶液を作製する。約５〜約６０ｍｇの濃度の少なくとも一種の血管拡張剤が存在し、好ましくは、リドカインおよびパパベリンからなる群より選択される。一方、約１０〜約１０００ＩＵの濃度、すなわち活性凝固時間−凝固が活性化し始めるすなわち開始する時間−が約２００秒間よりも長い時間となるのにほぼ十分な濃度の抗凝血剤が存在する。
【００２９】
痙縮を最小化する前処理溶液−たとえばフェノキシベンザミン溶液−を用いることによって、採取されたイヌの橈骨動脈（実施例１）およびヒトの橈骨動脈（実施例２）を用いて実施された次の実施例において、減少（すなわち、血管痙攣すなわち痙縮の減衰または最小化）が統計的に有意であることが実証された。
【実施例１】
【００３０】
イヌの橈骨動脈を、茎を除いて採取し、そしてコントロール緩衝液、またはパパバリン溶液（１０-6Ｍ）、２，３−ブタジオンモノオキシム溶液（ＢＤＭ、１０-6Ｍ）（推定上のプロテインホスファターゼ）もしくはフェノキシベンザミン溶液（１０-6Ｍ）にて３０分間インキュベートした。次いで、緩衝液にてこの動脈を洗浄し、そして設定された時間（例あたり２時間、２４時間または４８時間）、薬剤が含まれていない培地内で保存した。保存後、昇圧剤のノルエピネフリンまたはフェニレフリンを添加して、０．７〜３．５μｍｏｌ／Ｌ（ノルエピネフリン）の範囲または０．３００〜１．５μｍｏｌ／Ｌ（フェニレフリン）の範囲で徐々に濃度を高めて、すべての動脈サンプルの痙縮すなわち血管収縮の誘導を試みた。次いで、オルガンチャンバー内で血管収縮の程度を定量した。ノルエピネフリンまたはフェニレフリンに対する動脈サンプルの反応を、レセプターに依存しない３０ｍｍｏｌ／Ｌの塩化カリウム（ＫＣｌ）にての痙縮すなわち収縮と比較した。
【００３１】
コントロールの橈骨動脈セグメントにおいて、２時間の保存後、２４時間の保存後および４８時間の保存後のあらゆる濃度におけるノルエピネフリンおよびフェニレフリンに対する濃度依存性の収縮反応の差は有意ではなかった。ＫＣｌ、フェニレフリンおよびノルエピネフリンで処理しなかった橈骨動脈セグメントならびに処理した橈骨動脈セグメントの最大の反応を、（張力のグラムで）表１に要約している。下記のフェニレフリンおよびノルエピネフリンに対する収縮（収縮）反応は、ＫＣｌに対する反応のパーセント、すなわち１００×（ノルエピネフリンの張力グラム／ＫＣｌの張力グラム）として表されている。
【００３２】
ノルエピネフリンに対する最大の収縮（収縮）反応は３．５μｍｏｌ／Ｌにおいて観察され、そして平均は、ＫＣｌに対する収縮反応と比較して、２時間後で５４％±２％、２４時間後で５４％±３％、および４８時間後で５８％±７％であった。フェニレフリンで誘導された収縮反応の最大の収縮反応は１．５μｍｏｌ／Ｌにおいて観察された、同様の濃度依存性の収縮様式に従った。２時間の保存後、２４時間の保存後および４８時間の保存後の間のあらゆる濃度のフェニレフリンにおいて、収縮反応に有意差はなかった。最大の収縮反応（ＫＣｌで誘導された反応の％）の平均は、２時間後でＫＣｌの反応の６７％±４％、２４時間後でＫＣｌの反応の６２％±６％、および４８時間後でＫＣｌの反応の６５％±６％であった。
【００３３】
【表１】
2005507924.tif 000002
【００３４】
非処理動脈に対する血管拡張剤のパパベリンでの前処理の２時間後、２４時間後または４８時間後の、ノルエピネフリンまたはフェニレフリンのいずれかに対する血管収縮反応の減衰（最小化）には有意差はなかった。興味深いことに、それぞれのコントロールの血管と比較して、保存から４８時間の時点で、パパベリンで処理した橈骨動脈のリングにおいて、ノルエピネフリンおよびフェニレフリンの両方に対する最大の収縮反応が高まることへの矛盾した傾向があった。しかしながら、この収縮反応の高まりは有意な程度には到達しなかった。パパベリンで処理した血管においてどちらの血管収縮剤にも対する、これらの明らかに高まった反応の原因となったかもしれないところの３．５μｍｏｌ／Ｌのノルエピネフリン（２時間後で５４％±２％、２４時間後で５３％±１．０％そして４８時間後で５８％±７．２％）または１．５μｍｏｌ／Ｌのフェニレフリン（２時間後で６７．０％±３．５％、２４時間後で６２．０％±１．６％そして４８時間後で６５．２％±５．７％）を用いたコントロールの血管におけるＫＣｌの反応と比べての最大の収縮反応には、有意差はなかった。従って、パパベリンには、洗浄後（２時間）または３０分間の前処理から２４時間もしくは４８時間後において、ノルエピネフリンで誘導されたまたはフェニレフリンで誘導された収縮に対する妨害作用はなかった。
【００３５】
ＢＤＭで前処理された橈骨動脈セグメントにおけるノルエピネフリンに対する２時間後の最大の収縮反応は、それぞれのコントロールの血管と比較して有意に大きかった（コントロールに対しては約５０％、そしてＢＤＭで処理されたセグメントに対しては約７５％）。しかしながら、薬剤を含まずに２４時間および４８時間保存した後では、ノルエピネフリンに対する収縮反応は、コントロールの血管と薬剤処理された血管との間で類似していた。フェニレフリンに晒されたＢＤＭ被処理橈骨動脈セグメントの収縮反応は、２時間後および２４時間後のコントロールセグメントと極めてよく類似していた。しかし、わずかに４８時間保存した後では、この収縮反応は明らかに減衰していた（コントロールに対しては約６５％、そしてＢＤＭで処理されたセグメントに対しては約３９％）。
【００３６】
しかしながら、フェノキシベンザミンで処理された橈骨動脈セグメントにおいてノルエピネフリンを適用することは、収縮を高めることはなく、むしろ利用したノルエピネフリンのすべての濃度にて、フェノキシベンザミンで処理されたセグメントにおける収縮を、非処理セグメントに比べて減衰させた。橈骨動脈セグメントを１×１０-6Ｍのフェノキシベンザミンで３０分間前処理すると、図３に示されるような三つの時点のすべてにおいて、ノルエピネフリンおよびフェニレフリンの最大の濃度に対する収縮反応が有意に減衰した。フェノキシベンザミンに接触させてから２時間後では、すべての濃度範囲のノルエピネフリンに対する収縮反応は有意に抑制されており、非処理血管における４９％±２％と比較して、最大の収縮反応がＫＣｌ反応の平均で−７％±１％であった。非処理血管に対してフェノキシベンザミンで処理した後の、最大の収縮反応の有意な抑制は、それぞれ２４時間後（４２％±３％に対して−５％±５％）および４８時間（５８％±７％に対して−２０％±５％）後でもなお観察された。さらに、フェノキシベンザミンで前処理された血管におけるフェニレフリンに対する収縮反応も有意に減衰（すなわち減少）し、処理から２時間後でのフェニレフリンの最大の濃度に対する収縮反応は、図３に見られるように非処理の血管に対して有意に低かった（６７±４に対して１９％±８％）。この減衰すなわち最小化は維持され、しかもフェノキシベンザミンでの３０分間の前処理のそれぞれ２４時間後（６２％±２％に対して１％±４％）および４８時間後（６５％±６％に対して−１２％±４％）でも強められた。
【実施例２】
【００３７】
［トの橈骨動脈におけるαアゴニストで誘導された血管収縮のフェノキシベンザミンによる抑制］
エモリー大学のクロフォード・ロング病院において心肺バイパスを用いてまたは用いずに、本人が選択して冠動脈バイパス移植術を受けた患者から、橈骨動脈（ＲＡ）セグメントを得た。改良型のアレン試験を実施して、手術前の手への副行循環の妥当性を評価した。「ノータッチ」テクニックを用いてＲＡを、伴行静脈、血管周囲の脂肪および疎性結合組織を含むその茎と一緒に（筋膜を切開せずに）採取した。血管クリップでＲＡの枝を結紮した。橈骨動脈グラフトのサブセットには、そのグラフトに隣接する疎性結合組織を露出するために（筋膜切開術で）切開された筋筋膜組織があった。次いで、２０ｍＬのヘパリン添加血液、１．６ｍＬの１％リドカインおよび０．４ｍＬのパパベリン（３０ｍｇ／ｍＬ）を含有する溶液中に、ＲＡを約３０分間放置した。浸漬期間の最初と終わりの１５分間、管腔内にて、血液／パパベリン／リドカイン溶液でこのＲＡグラフトを洗浄した。大動脈冠動脈の位置に配置する前に、ＲＡの小さなセグメントを取得し、直ちに４℃、ｐＨ７．４のクレブス−ヘンゼライト（Ｋ−Ｈ）緩衝液（１１８ｍｍｏｌ／ＬのＮａＣｌ、４．７ｍｍｏｌ／ＬのＫＣｌ、１．２ｍｍｏｌ／ＬのＫＨ2ＰＯ4、１．２ｍｍｏｌ／ＬのＭｇＳＯ4、２．５ｍｍｏｌ／ＬのＣａＣｌ2、１２．５ｍｍｏｌ／ＬのＮａＨＣＯ3および１０ｍｍｏｌ／Ｌのグルコース）中に置き、そして心胸研究室に移した。
【００３８】
採取された、筋膜切開を伴うまたは伴わない橈骨動脈セグメントを、ｐＨ７．４の、１０、１００もしくは１０００μＭのＰＢＺを含むＫ−Ｈ緩衝液かまたは媒体のみのＫ−Ｈ緩衝液のいずれかの中に置いた。管腔内にて、この溶液で二回−一回はインキュベートの期間の最初に、もう一回はインキュベートの期間の終わりの３０分間−橈骨動脈を洗浄した。これは、ＲＡの採取と大動脈冠動脈の位置への配置の間の時間に近い。さらに、手術中に行うパパベリン／リドカイン溶液でのコンジットの前処理の前に、コントロールＲＡセグメントを得て、このものにはその他の処理を行わなかった。冷Ｋ−Ｈ緩衝液中でこれらの筋肉を慎重に取り去り、そして長さが３〜５ｍｍのリングに切断することによって、オルガンチャンバー内に配置するためのセグメントを準備した。次いで、リングをステンレス製のホックに載せ、ＦＴ−０３力学的変位変換器に接続して、３７℃でｐＨ７．４の酸素を送り込んだ（９５％がＣＯ2、５％がＣＯ2）７ｍＬのＫ−Ｈ緩衝液を含むラドノーティのオルガンチャンバー（Ｒａｄｎｏｔｉ  Ｇｌａｓｓ社、モンロビア、カリフォルニア州）内に置いた。インドメタシン（１０μｍｏｌ／Ｌ）を緩衝液に添加して、内因性のプロスタノイドに対する反応を妨害した。頻繁に緩衝液を交換しながら一時間かけてリングを安定化させ、そして予定される張力が、３０ｍＭの塩化カリウム（ＫＣｌ）に対する最大の収縮の７５％となるように設定した。
【００３９】
次いで、ＰＥ（０．５〜１５μＭ）またはＮＥ（０．５〜１５μＭ）の濃度を高めつつ、リングをインキュベートした。αアドレナリン作用薬が最も高い濃度に達した後、３０ｍＭのＫＣｌを槽に添加して、レセプター非介在性の最大の収縮を定量した。無作為に選択した血管における、徐々に濃度を高めたアセチルコリン（ＡＣｈ）−一酸化窒素シンターゼの刺激物質である−に対するレセプター依存性の弛緩反応についても、橈骨動脈の内皮の完全性を試験した。トロンボキサンＡ２を模倣するＵ４６６１９（１．４ｎｍｏｌ／Ｌ）でリングを予約し、次いで、１０μＭのインドメタシン存在下での徐々に濃度を高めたＡｃｈ（１ｎｍｏｌ／Ｌ〜１１．７μｍｏｌ／Ｌ）に接触させた。
【００４０】
２Ｈｚでサンプリングを行うアナログ・デジタル・コンバータを用いて、等尺性力の変化を定量した。ウィンドウズに基づくビデオグラフィックス・プログラム（ＳＰＥＣＴＲＵＭ、ウェイクフォレスト大学、ウインストン−セーラム、ノースカロライナ州）を用いて、反応を分析した。徐々に濃度を高めたＰＥおよびＮＥに接触させることによって惹起された収縮力を、それぞれのリングにおけるＫＣｌによって生じた最大収縮のパーセントとして表現した。ＡＣｈに接触させた後の弛緩の程度を、Ｕ４６６１９から得られた最大収縮力から減少した張力のパーセントとして表現した。
【００４１】
ノルエピネフリンおよびフェニレフリンのそれぞれの濃度において、一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）を利用してコントロール群、パパベリン／リドカイン群およびフェノキシベンザミン（ＰＢＺ）群を比較することで、データの有意性について分析した。ＡＮＯＶＡによって群間の有意差が割り当てられれば、この後にスチューデント・ニューマン・クール検定を適用して、差の原因が突き止められた。ｐ値が０．０５未満であれば、統計的に有意であると考えられた。すべてのデータを、平均値±標準誤差として記録する。
【００４２】
コントロールの橈骨動脈セグメントにおいて、フェニレフリン（ＰＥ）を適用することによって濃度依存性の血管収縮が引き起こされた。ＰＥ濃度の最大値（１５μＭ）において到達した収縮の平均は、ＫＣｌの反応の（図４）４４．２±９．１％であった。パパベリン／リドカイン溶液中で前処理された橈骨動脈は、ＰＥに対する濃度依存性の収縮反応の有意な減衰を示さなかった。ＰＥの最大濃度における収縮は、コントロールの血管の２７％減少しただけであった（コントロールに対して３２．１±５．９％、ｐ＝０．２２）。対照的に、パパベリン／リドカインに加えてＰＢＺでは、ＰＥに対する血管収縮が投与量依存的に減衰（減少）した（図４）。最大濃度のＰＥ（１５μＭ）を用いた場合、血管収縮反応は１０μＭのＰＢＺでのコントロールの６３％（１６．５±４．３％、ｐ＝０．０２）、１００μＭのＰＢＺでのコントロールの８０％（８．７±５．１％、ｐ＝０．００３）および１０００μＭのＰＢＺでのコントロールの１１６％（−７．２±４．４％、ｐ＜０．００１）に減衰（すなわち最小化）した。
【００４３】
ノルエピネフリンの濃度を徐々に高めたものによっても、ヒトＲＡセグメントにおいて連続的な血管収縮が引き起こされた（３０ｍＭのＫＣｌに対する最大収縮の５４．７±７．５％、図５）。パパベリン／リドカイン・血液の混合溶液中にＲＡを浸漬すると、１５μＭのＮＥに対するこの血管収縮反応は、緩やかではあるが有意に減衰した（３５．６±５．１％、ｐ＝０．０４）。１０μＭでのＰＢＺは、７μＭを超える濃度のＮＥに対する収縮を抑制したが、１０００μＭでのＰＢＺは、すべての濃度のＮＥに亘る収縮反応を完全に抑制した（図５）。要約すれば、パパベリン／リドカインに添加された１０００μＭのＰＢＺは、ＰＥおよびＮＥで誘導される血管収縮を完全に抑制する。
【００４４】
ＲＡの採取の時点で筋膜切開術を行うことが、ＰＢＺの前処理に対する血管の接触を促進する可能性について調査した。試験を行ったフェニレフリンの最高濃度（１５μＭ）において、パパベリン／リドカイン処理またはＰＢＺ処理（１０００μＭ）、図６のいずれかを行ったものであって、筋膜切開術を実施したＲＡセグメントと筋膜切開術を行わなかったＲＡセグメントとの間に有意差は認められなかった。同様に、ノルエピネフリンによって血管収縮を達成した場合に、パパベリン／リドカイン前処理またはＰＢＺ前処理のいずれかを伴う筋膜切開術にとっての利点はなかった（図７）。
【００４５】
濃度を徐々に高めたアセチルコリン（ＡＣｈ）−レセプター依存性の一酸化窒素シンターゼ刺激物質−に対する弛緩反応を定量することによって、ＲＡの内皮機能を試験した。筋膜切開術を行ったＲＡセグメントでは、内皮機能は有意に減衰しなかった（図８）。パパベリン／リドカインで処理したセグメントにおいて、筋膜切開術を行っていないものは、１２μＭのＡＣｈに対して８４．６±６．８％の弛緩反応を示し、そして筋膜切開術を行ったものは、８０．７±５．７％の弛緩反応を示した（ｐ＝ＮＳ）。手術中のパパベリン／リドカインに加えて１０００μＭのＰＢＺで処理したセグメントにおいて、筋膜切開術を行っていないものは、１２μＭのＡＣｈに対して８１．０±１１．８％の弛緩反応を示した。このことは、パパベリン／リドカイン単独で処理したＲＡセグメントと比べて、内皮機能のさらなる障害がないことを示唆する。筋膜切開術を行い、かつＰＢＺ／パパベリン／リドカインで処理したものは内皮機能の減少傾向を示し、ＡＣｈに対する弛緩反応の平均が６７．６＋５．２％であった（ＰＢＺ／パパベリン／リドカイン処理を行い、筋膜切開術を行わなかったセグメントとの比較、ｐ＝０．３３、独立スチューデントｔ検定）。
【００４６】
ＫＣｌに対する比較可能な収縮反応を２、２４および４８時間を超えて観察したところ、橈骨動脈セグメントを長期間保存した後でも血管平滑筋が生存可能であることが示唆されたのにもかかわらず、内皮の生存可能性は長期間保存についての懸念材料であった。その他の血管作用性物質の中の一酸化窒素などのオータコイドを持続的に放出することによって、内皮は血管の全体的な緊張度に寄与する。さらに、フェノキシベンザミンまたはその希釈剤の放出によって、オータコイドに関連するあらゆる機能が減衰することは望ましくないものであっただろう。４８時間を超える保存期間にて、アセチルコリンのすべての濃度に対する内皮弛緩反応を、フェノキシベンザミン処理の有無について比較した。フェノキシベンザミン処理を行ったものについて、２時間の時点における、アセチルコリンの最大濃度に対する最大の弛緩反応は６１％±５％であり、２４時間後では５７％±６％であり、そして４８時間後では３０％±５％であった。弛緩反応のこれらのレベルは、非処理コントロールの橈骨動脈セグメントに匹敵する。これらのデータから、橈骨動脈セグメントをフェノキシベンザミンで処理しても、生存可能性または内皮の機能は変化しないこと、そしてむしろこの処理によって、橈骨動脈セグメントにおいて収縮（血管痙攣すなわち痙縮）の減衰すなわち最小化が生じることが示唆される。
【００４７】
冠動脈手術における臨床評価は、当面の開通性だけではなく、長期間の開通性と、用いたグラフトの寿命に左右される。橈骨動脈は形態学的に理想的な代替バイパスグラフトコンジットであるにもかかわらず、術後の血管痙攣および「ストリングサイン」が報告されていることから、バイパスグラフトとしての血管に対する熱意が削がれてきた。このコンジットにおけるαアドレナリンレセプターの支配が、循環するカテコールアミンに対する、ならびに手術後に用いられることが一般的なアドレナリン性の昇圧剤を周術期に投与することに対する強力な収縮反応を決定している。橈骨動脈のバイパスコンジット（パパベリン、リドカイン、ニトログリセリン、カルシウムチャネル遮断薬）における血管痙攣を打ち消すまたは予防するために用いられている最新の投薬計画では、手術期間直後に制限されている一時的な効果、またはカルシウムチャネル遮断薬を全身投与した時の副作用のいずれかに苦しんでいる。さらに、カルシウムチャネル遮断薬は、手術後の橈骨動脈グラフトの血管痙攣の予防に特別に効果があるわけではない。
【００４８】
本発明のこの実施例では、約５〜約６０分間の、好ましくは約３０分間の時間、橈骨セグメントを低濃度のフェノキシベンザミン溶液に接触させる処理によって、ノルエピネフリンおよびフェニレフリンの両方に対する収縮反応が、処理直後に減衰することを実証し、これにはフェノキシベンザミンによる約３０分間の処理後４８時間まで、アドレナリン作動的に誘導された収縮の減衰／最小化が伴う。
【００４９】
血管の手術を受ける患者における血管移植片−好ましくは動脈グラフト−の前処理および移植すなわちトランスプランテーション（移植）のためのエクスビボ法において、αアドレナリン遮断薬を用いて可溶化して、採取され移植された血管移植片における痙縮および血管痙攣を減衰させる（最小化する）ことによって、狭心症および心筋梗塞の発生率を減少させてもよい。このような手法において、グラフトすなわち移植片として用いられる血管を採取する。動脈をグラフトとして選択する場合、内胸動脈（胸動脈）、胃大網動脈、下腹壁動脈、橈骨動脈、および当分野で知られた血管コンジットに指定されたその他の任意の動脈からなる群より、採取する動脈を選択すればよい。採取された動脈は動脈の茎を含んでもよく、またはその筋肉を取り去ってもよい（すなわち茎はない）。動脈グラフトの組織を、痙縮を最小化する薬剤の前処理溶液により多く触れさせるために、必要に応じて、筋膜切開術またはその他の外科的手段によって茎を改変してもよい。次いで、採取された血管を、痙縮を最小化する薬剤の前処理溶液−たとえばフェノジベンザミン前処理溶液、具体的にはフェノジベンザミン、少なくとも一種の血管拡張剤および抗凝血剤−中に、ある時間、約５〜約６０分間浸漬する。痙縮を最小化する薬剤の前処理溶液における痙縮を最小化する薬剤−たとえばフェノキシベンザミン−の濃度範囲は、約１０-6Ｍ〜約１０-1Ｍである。
【００５０】
あるいは、浸漬工程の一部として、痙縮を最小化する薬剤の前処理溶液−たとえばフェノキシベンザミンの前処理溶液−を、採取された動脈または採取された動脈に流れるかもしれない伴行静脈のいずれかの管腔内に注入してもよい。浸漬工程は、密封および加圧が可能な容器内に、採取された血管−たとえば採取された動脈−および痙縮を最小化する薬剤の前処理溶液を置く工程、ならびに痙縮を最小化する薬剤の前処理溶液中に、そのように密封されれた採取された血管に、約０．０１〜１００ｍｍＨｇの圧力をある時間与えて、前処理溶液−たとえばフェノジベンザミンの前処理溶液−が採取された血管に浸透するのを助力する工程を含んでもよい。必要に応じて、採取された動脈、または採取された動脈に流れるかもしれない伴行静脈の一方の末端を、加圧する前に締め付けるかまたはその他の方法で閉じることによって、この加圧工程を実施してもよい。
【００５１】
あるいは、αアドレナリン遮断薬を用いて可溶化してもよく、そしてαアドレナリン遮断薬を用いて、内胸動脈をコンジットとして利用するインビボ法によって採取され移植された動脈グラフトにおける痙縮および血管痙攣を減衰させることによって、狭心症および心筋梗塞の発生率を減少させる。当該方法はαアドレナリン遮断薬−たとえばフェノキシベンザミン−を利用し、それによってαアドレナリン遮断薬生理的溶液中に溶解させて、血管コンジット内にインビボで注入する。その中では、薬剤がコンジットから体循環に抜け出るのを防ぐ操作をしている間は、コンジットの一つの末端が意図的に塞がれている。たとえば、図２を参照すること。このように、内胸動脈（採取された動脈コンジットの一つの末端）の内部の管腔は、フェノキシベンザミン溶液にある時間−通常は、内胸動脈がなお患者の循環器系に接続している間の約５分間〜約６０分間−晒されている。フェノキシベンザミン溶液またはその他のαアドレナリン溶液に接触させた後、内胸動脈のグラフト／コンジットを生理的溶液で洗浄することができ、次いで、公知の手法に従って、閉塞した冠動脈に接続するための準備を行う。たとえば、図２を参照すること。内胸動脈グラフト／コンジットの採取と移植との間の時間を、従来技術のエクスビボの手法と比較して最小限にすることで、新しく結合された内胸動脈グラフト／コンジットを経由する冠循環への血流を再確立する。
【００５２】
当該内胸動脈コンジット−自然状態では動脈である−は、強心性の昇圧剤−たとえば、エピネフリン、ノルエピネフリンまたはαアドレナリンアゴニスト活性を有するその他の薬剤であり、周術期に血圧を維持するために当該薬剤を利用する−と接触した時に血管痙攣の動きが生じやすい。α遮断薬であるフェノキシベンザミンはαレセプターと不可逆的に結合し、それによって、コンジットが閉塞した冠動脈に結合して、冠循環を経由する心筋への血流が再確立した後の周術期に、強心性の昇圧剤を用いている間のその刺激を抑制する。
【００５３】
本発明の一つの実施形態のインビボ法は、エクスビボで橈骨動脈コンジットを用いる方法（図１を参照すること）について記載された方法とは、上記のインビボの手法とエクスビボの手法についての違いに加えて、内胸動脈が橈骨動脈コンジット内に存在する血管痙攣のより強い程度の生じやすさを欠いている点で異なる。内胸動脈に比べると橈骨動脈は筋肉性の程度が大きいため、周術期に血圧を維持するための強心性の昇圧剤の導入の有無にかかわらず、橈骨動脈コンジットの血管痙攣のリスクはより高い。この理由のために、冠動脈バイパス術用のコンジットとして橈骨動脈を用いることは、しばらくの間、完全に断念されていた。
【００５４】
内胸動脈のケースに関して言えば、それを行う外因性の昇圧剤による刺激がない限りこの動脈には血管痙攣を生じる傾向がないため、強心性の昇圧剤を用いる場合にのみ血管痙攣の生じやすさの程度が臨床上の課題となる。橈骨動脈コンジットのケースでは、筋肉性の程度が高いために、強心性の昇圧剤を導入しなくても、この動脈は自発的に痙攣を起こす傾向がある。この理由のために、内胸動脈法は、周術期の冠動脈バイパスグラフトにおいて、外因性の強心性の昇圧剤を用いることに起因するかもしれない狭心症および心筋梗塞を予防するものの一つであり、それに対して橈骨動脈法は、冠動脈バイパスグラフト術を行う前に、自発的・非外因性的に血管痙攣が誘導される傾向がある処理の一つである。冠動脈バイパス術を実施する場合、エクスビボおよびインビボの二つの方法の時間の差、ならびに上記の違いが多くの場合決定的なものとなるかもしれない。
【００５５】
上記のものは本発明の好ましい実施形態を対象としているのにもかかわらず、その基本的な範囲から逸脱することなく、本発明のその他の実施形態およびさらなる実施形態を考え出すことができるだろう。そしてその範囲は、請求の範囲によって定められる。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】腕、手首および手の領域における橈骨動脈の位置を表す概念図であり、どのようにして体内から動脈を完全に取り出し、次いで、体内に戻す移植を行って閉塞の末端側（下流側）の閉塞した冠動脈に接続する前に、溶液でエクスビボの前処理を行うかに関する注釈を伴う。
【図２】心臓に関する内胸動脈およびその位置を表す概念図であり、内胸動脈の一方の末端を締め付けて、示されるように茎を伴う動脈に痙縮を最小化する薬剤溶液（たとえばフェノキシベンザミン溶液）を注入することに適した別の方法−インビボの手法−が表された注釈を伴う。このようにして、この溶液が体循環に参加することは回避される。
【図３】２時間（上方のパネル）、２４時間（中央のパネル）および４８時間（フェノキシベンザミンで処理した下方のパネルの間の、フェニレフリン（左）およびノルエピネフリン（右）に対する、イヌの橈骨動脈セグメントの収縮反応を表すグラフである。
【図４】前処理を行ったものまたは行わなかったもの、そしてフェノキシベンザミン（ＰＢＺ）の濃度が異なる三種のものについて、濃度を徐々に高めたフェニレフリンに対するヒトの橈骨動脈の血管収縮反応を表すグラフである。
【図５】前処理を行ったものまたは行わなかったもの、そしてフェノキシベンザミン（ＰＢＺ）の濃度が異なる三種のものについて、濃度を徐々に高めたノルエピネフリンに対する橈骨動脈の血管収縮反応を表すグラフである。
【図６】１０-3Ｍのフェノキシベンザミン（ＰＢＺ）またはパパベリン／リドカイン（Ｐａｐ／Ｌｉｄｏ）での処理後に筋膜切開術を行ったものまたは行わなかったものについて、１５μＭのフェニレフリンに対する橈骨動脈の血管収縮反応を表すグラフである。
【図７】１０-3Ｍのフェノキシベンザミン（ＰＢＺ）またはパパベリン／リドカイン（Ｐａｐ／Ｌｉｄｏ）での処理後に筋膜切開術を行ったものまたは行わなかったものについて、１５μＭのノルエピネフリンに対する橈骨動脈の血管収縮反応を表すグラフである。
【図８】１０-3Ｍのフェノキシベンザミン（ＰＢＺ）またはパパバリン／リドカイン（Ｐａｐ／Ｌｉｄｏ）での処理後に筋膜切開術を行ったものまたは行わなかったものについて、１２μＭのアセチルコリンに対する弛緩のパーセントとして表示される橈骨動脈の内皮機能を表すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図３Ｅ】
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【図３Ｆ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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