(57)【要約】ＰＤＦ阻害剤およびそれらの新規使用方法が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2005507364.tif 000022
(I)
［式中、Ｒ１はＣ１−６アルキル、−Ｃ１−２アルキルＡｒ、およびＡｒからなる群より選択され；
Ｒ２は水素、Ｃ１−６アルキル、−（ＣＨ２）ｍＯＨ、−（ＣＨ２）ｎＡｒ’、−（ＣＨ２）ｎＨｅｔ、−Ａｒ’、−ＳＯ２Ｒ３、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ３、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−ＣＨ（Ｒ４）ＣＯＮＲ５Ｒ６、および−ＣＨ（Ｒ４）ＣＯ２Ｒ７からなる群より選択され；
Ｒ３はＣ１−６アルキル、−Ｃ１−２アルキルＡｒ’、およびＡｒ’からなる群より選択され；
Ｒ４は水素、またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ５およびＲ６は水素、Ｃ１−６アルキル、−Ｃ１−２アルキルＡｒ’、およびＡｒ’からなる群より独立して選択され；あるいはＲ５、Ｒ６は一緒になって、−ＣＨ２ＯＲ７により一置換されていてもよい５員または６員のシクロアルキル環を形成し；
Ｒ７は水素、およびＣ１−３アルキルからなる群より選択され；
Ａｒはフェニル、フリル、およびチエニルからなる群より選択され；それらはいずれも１個またはそれ以上のＺ１基により置換されていてもよく；
Ａｒ’はフェニル、ナフチル、フリル、ピリジル、チエニル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イミダゾリル、イミダゾリジニル、ベンゾフラニル、インドリル、チアゾリジニル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、モルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニル、ピロリル、およびピリミジルからなる群より選択され、それらはいずれも１個またはそれ以上のＺ２基により置換されていてもよく；
Ｚ１はＣ１−３アルキル、−ＣＮ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩからなる群より独立して選択され；
Ｚ２はＣ１−６アルキル、−ＯＲ２、−（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６、−ＣＮ、−（ＣＨ２）ｎＯＨ、−ＮＯ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＲ５Ｒ６、および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１からなる群より独立して選択され；
ｍは２ないし５であり；
ｎは０ないし５である］
で示される化合物。
【請求項２】
2-[4-ブチル-1-(5-ヒドロキシペンチル)-2-オキソピロリジン-3-イル]-N-ヒドロキシアセトアミド;
2-[(3R,4R)-4-ブチル-1-(5-ヒドロキシペンチル)-2-オキソピロリジン-3-イル]-N-ヒドロキシアセトアミド；および
2-[(3S,4S)-4-ブチル-1-(5-ヒドロキシペンチル)-2-オキソピロリジン-3-イル]-N-ヒドロキシアセトアミド
からなる群より選択される請求項１記載の化合物。
【請求項３】
治療を要する対象に請求項１記載の化合物を投与することによる細菌感染の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は、新規抗細菌化合物、およびペプチドデホルミラーゼ阻害剤としてのこれらの化合物を含む医薬組成物に関する。
【０００２】
発明の背景
細菌のイニシエーターであるメチオニルｔＲＮＡは、ホルミル−メチオニルｔＲＮＡを生じるメチオニルｔＲＮＡホルミルトランスフェラーゼ（ＦＭＴ）により修飾される。次いで、ホルミルメチオニン（ｆ−ｍｅｔ）は、新たに合成されたポリペプチドのＮ−末端に取り込まれる。次いで、ポリペプチドデホルミラーゼ（ＰＤＦまたはＤｅｆ）は一次翻訳産物を脱ホルミル化してＮ−メチオニルポリペプチドを生じさせる。大部分の細胞内蛋白はメチオニンアミノペプチダーゼ（ＭＡＰ）によりさらにプロセッシングされて、成熟ペプチドおよび遊離メチオニンを生じ、遊離メチオニンは再利用される。ＰＤＦおよびＭＡＰはいずれも細菌増殖に必須であり、ＰＤＦはＭＡＰ活性に必要である。この一連の反応はメチオニンサイクルと呼ばれる（図１）。
【化１】
2005507364.tif 000002
図１．メチオニンサイクル
【０００３】
現在に至るまで、ポリペプチドデホルミラーゼホモログ遺伝子が細菌、葉緑体含有植物、マウスおよびヒトにおいて見出されている。植物蛋白は核にコードされているが、葉緑体局在化シグナルを担持していると思われる。このことは、葉緑体ＲＮＡおよび蛋白の合成がユーバクテリア（eubacteria）のそれと大変類似しているという観察結果と矛盾しない。哺乳動物ＰＤＦ遺伝子ホモログの蛋白発現については情報が限られているが（Bayer Aktiengesellschaft, Pat. WO2001/42431）、かかる蛋白の機能的役割は今日に至るまで示されていない（Meinnel, T., Parasitology Today 16(4), 165-168, 2000）。
【０００４】
ポリペプチドデホルミラーゼはすべてのユーバクテリアにおいて見出されており、それに関して広範なゲノム配列情報が利用可能である。ＰＤＦホモログ間の配列の多様性は大きく、関連性の低い配列間では２０％程度の同一性しかない。しかしながら、活性部位周辺の保存性は非常に高く、数個の完全に保存された残基があり、それらは１個のシステインおよび２個のヒスチジンを含み、それらは活性部位金属との共同作用に必要である（Meinnel, T. et al, 1997, Journal of Molecular Biology, 267, 749-761）。
【０００５】
ＰＤＦは、インビトロでの細菌増殖に必須であることが示されているので（Mazel, D. et al, EMBO J. 13 (4), 914-923, 1994）、魅力的な抗細菌標的であることが認識されているが、真核蛋白合成には関与するとは考えられておらず（Rajagopalan et al, J. Am. Chem. Soc. 119, 12418-12419, 1997）、原核細胞において保存されている（Kozak, M. Microbiol. Rev. 47, 1-45, 1983）。それゆえ、ＰＤＦ阻害剤は広スペクトル抗細菌剤として役立つ可能性がある。
【０００６】
発明の概要
本発明は、下式（Ｉ）により示される新規抗細菌化合物およびＰＤＦ阻害剤としてのそれらの使用を包含する。
【０００７】
さらに本発明はヒトを包含する動物におけるＰＤＦ阻害方法も提供し、該方法は、治療を要する対象に有効量の下式（Ｉ）により示される化合物を投与することを特徴とする。
【０００８】
発明の詳細な説明
本発明方法において有用な化合物は下式（Ｉ）：
【化２】
2005507364.tif 000003
(I)
［式中、Ｒ１はＣ１−６アルキル、−Ｃ１−２アルキルＡｒ、およびＡｒからなる群より選択され；
Ｒ２は水素、Ｃ１−６アルキル、−（ＣＨ２）ｍＯＨ、−（ＣＨ２）ｎＡｒ’、−（ＣＨ２）ｎＨｅｔ、−Ａｒ’、−ＳＯ２Ｒ３、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ３、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−ＣＨ（Ｒ４）ＣＯＮＲ５Ｒ６、および−ＣＨ（Ｒ４）ＣＯ２Ｒ７からなる群より選択され；
Ｒ３はＣ１−６アルキル、−Ｃ１−２アルキルＡｒ’、およびＡｒ’からなる群より選択され；
Ｒ４は水素、またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ５およびＲ６は水素、Ｃ１−６アルキル、−Ｃ１−２アルキルＡｒ’、およびＡｒ’からなる群より独立して選択され；あるいはＲ５、Ｒ６は一緒になって、−ＣＨ２ＯＲ７により一置換されていてもよい５員または６員のシクロアルキル環を形成し；
Ｒ７は水素、およびＣ１−３アルキルからなる群より選択され；
Ａｒはフェニル、フリル、およびチエニルからなる群より選択され；それらはいずれも１個またはそれ以上のＺ１基により置換されていてもよく；
Ａｒ’はフェニル、ナフチル、フリル、ピリジル、チエニル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イミダゾリル、イミダゾリジニル、ベンゾフラニル、インドリル、チアゾリジニル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、モルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニル、ピロリル、およびピリミジルからなる群より選択され、それらはいずれも１個またはそれ以上のＺ２基により置換されていてもよく；
Ｚ１はＣ１−３アルキル、−ＣＮ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩからなる群より独立して選択され；
Ｚ２はＣ１−６アルキル、−ＯＲ２、−（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６、−ＣＮ、−（ＣＨ２）ｎＯＨ、−ＮＯ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＲ５Ｒ６、および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１からなる群より独立して選択され；
ｍは２ないし５であり；
ｎは０ないし５である］から選択される。
【０００９】
本明細書の用語「アルキル」は炭素−炭素一重結合により結合された炭化水素基をいう。アルキル炭化水素基は直鎖状、分枝状、あるいは環状であってもよい。
【００１０】
本発明において有用な好ましい化合物は下記のものからなる群より選択される：
2-[4-ブチル-1-(5-ヒドロキシペンチル)-2-オキソピロリジン-3-イル]-N-ヒドロキシアセトアミド;
2-[(3R,4R)-4-ブチル-1-(5-ヒドロキシペンチル)-2-オキソピロリジン-3-イル]-N-ヒドロキシアセトアミド；および
2-[(3S,4S)-4-ブチル-1-(5-ヒドロキシペンチル)-2-オキソピロリジン-3-イル]-N-ヒドロキシアセトアミド。
【００１１】
医薬上許容される塩および複合体、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩およびトリフルオロ酢酸塩、ならびにナトリウム、カリウムおよびマグネシウム塩も本発明に包含される。本発明の化合物は１個またはそれ以上の不斉炭素原子を含んでいてもよく、ラセミ体および光学活性体として存在してもよい。これらの化合物およびジアステレオマーはすべて本発明の範囲内にあると考える。
【００１２】
本発明の化合物および方法は、下記の合成スキームと関連づけてよりよく理解されるであろうが、合成スキームは本発明の化合物の製造に関する単なる説明であり、特許請求の範囲に定義された本発明の範囲を限定するものではない。
【００１３】
本発明は式（Ｉ）：
【化３】
2005507364.tif 000004
(I)
で示される化合物を提供し、それは下記工程からなる方法により製造されうる：
式（２）の不飽和ラクトン：
【化４】
2005507364.tif 000005
(2)
を、例えば、触媒量の臭化銅（Ｉ）のごとき銅の塩、ＨＭＰＡおよびクロロトリメチルシランの存在下、適当な温度においてグリニヤール試薬Ｒ１ＭｇＸと反応させて、式（３）：
【化５】
2005507364.tif 000006
(3)
のラクトンを得る。
【００１４】
式（３）のラクトンを、触媒量の三臭化リンおよびジメチルホルムアミドの存在下で臭素で処理し、次いで、塩化チオニルで処理して式（４）：
【化６】
2005507364.tif 000007
(4)
の化合物を得る。
【００１５】
式（４）の酸塩化物を、クロロホルムのごとき適当な溶媒中、水酸化ナトリウムのごとき塩基の存在下で式（５）：
2005507364.tif 000008
のアミンと反応させ、次いで、例えば、還流トルエン中で水素化ナトリウムを用いる環化を行なって式（６）：
【化７】
2005507364.tif 000009
(6)
のラクトンを得る。
【００１６】
式（６）のα−ブロモ−ラクタムを、ジメチルホルムアミドのごとき適当な溶媒中で、例えば、ｔ−ブチルメチルマロネートのナトリウム塩と反応させ、次いで、還流トルエン中、触媒量のｐ−トルエンスルホン酸の存在下において脱炭酸を行なって式（７）：
【化８】
2005507364.tif 000010
(7)
の化合物を得る。
【００１７】
Ｒ１および／またはＲ２中の保護基（もしあれば）の除去、次いで、ジオキサンのごとき適用な溶媒中の水中で５０％ヒドロキシルアミンでの処理を行なって式（Ｉ）のラセミ化合物を得る。
【００１８】
適当な溶媒中で水素化ホウ素ナトリウムのごとき適当な還元剤を用いて式（６）のブロモ−ラクタムを式（８）：
【化９】
2005507364.tif 000011
(8)
のデス−ブロモ化合物に変換することができる。
【００１９】
別法として、式（９）：
R1CHO  (9)
のアルデヒドから出発して式（８）の中間体を得ることができ、該アルデヒドはテトラヒドロフランのごとき溶媒中でＰｈ３Ｐ＝ＣＨＣＯ２Ｅｔと反応して式（１０）：
【化１０】
2005507364.tif 000012
(10)
のα，β−不飽和エステルが生じる。
【００２０】
Triton Bの存在下における式（１０）の化合物のニトロメタンでの処理により式（１１）：
【化１１】
2005507364.tif 000013
(11)
のMichael付加生成物が得られる。
【００２１】
トルエンのごとき適当な溶媒中、適当な温度において水素添加条件下での式（１１）の化合物中のニトロ基の還元および分子内環化を行なって、Ｒ２がＨである式（８）のラクタムを得て、アルキル化反応により、これをＲ２がＨ以外の式（８）の化合物に変換することができる。
【００２２】
Ｒ２＝Ｈである式（８）の化合物のラクタム窒素を、標準的な条件下でＢｏｃ基のごとき適当な保護基を用いて保護することができ、式（１２）：
【化１２】
2005507364.tif 000014
(12)
の多用途中間体が得られる。
【００２３】
式（８）のラクタムから得られたエノレートを、乾テトラヒドロフランのごとき適当な溶媒中でブロモ酢酸エチルのごとき適当なアルキル化剤で処理して式（１３）：
【化１３】
2005507364.tif 000015
(13)
のエステルを得る。
【００２４】
トリフルオロ酢酸のごとき適当な酸を用いて式（１３）の化合物からＢｏｃ基を除去して式（１４）：
【化１４】
2005507364.tif 000016
(14)
の化合物を得る。
【００２５】
次いで、ハロゲン化アルキル、塩化スルホニル、酸塩化物またイソシアネートでの処理、次いで、５０％ヒドロキシアミン溶液での処理により式（１４）のラクタムを式（Ｉ）の目的化合物に容易に変換する。
【００２６】
トルエンのごとき適当な溶媒中で還流させて２−ヒドロキシピリジンのごとき触媒の存在下において、式（３）のラクトンを（Ｓ）−メチルフェニルアミンのごときキラルアミンで処理して、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーにより容易に分離できる式（１５）および（１６）：
【化１５】
2005507364.tif 000017
の二種のジアステレオマーを得ることにより、光学活性のある式（Ｉ）の化合物を得ることができる。
【００２７】
式（１５）または（１６）の化合物の分子内Mitsunobu反応により、それぞれ式（１７）または（１８）：
【化１６】
2005507364.tif 000018
のラクタムが得られる。
【００２８】
液体アンモニア中ナトリウムを用いて式（１７）または（１８）の化合物のラクタムのＮ−保護基の除去を行なって光学的に純粋な式（１９）または（２０）：
【化１７】
2005507364.tif 000019
のラクタムをそれぞれ得る。
【００２９】
ジメチルホルムアミドまたは塩化メチレンのごとき適当な溶媒中、水素化ナトリウムまたはトリエチルアミンのごとき塩基の存在下において式（２１）：
2005507364.tif 000020
の化合物での式（１９）または（２０）のラクタムの処理により式（２２）または（２３）：
【化１８】
2005507364.tif 000021
の化合物を得る。
【００３０】
次いで、式（８）のラセミ化合物の式（Ｉ）のラセミ化合物への変換に関して上で説明した試薬および条件を用いて、式（２２）または（２３）のキラルラクタムの、式（Ｉ）のキラル目的化合物への変換を行なうことができる。
【００３１】
本発明の化合物を下記実施例によりさらに説明するが、実施例は本発明の説明であり、本発明を何ら限定しない。
【００３２】
実施例１
2-[4-ブチル-1-(5-ヒドロキシペンチル)-2-オキソピロリジン-3-イル]-N-ヒドロキシアセトアミドの調製
1(a) 1-(5-ベンジルオキシペンチル)-3-ブロモ-4-ブチルピロリジン-2-オン
４−ブチルジヒドロフラン−２−オン（４．２６ｇ，３０ｍｍｏｌ）および三臭化リン（０．０５２ｍＬ，０．５５ｍｍｏｌ）の混合物をアルゴン雰囲気下で１１０℃に加熱した。反応物を５０℃までゆっくりと冷却し、ジメチルホルムアミド（０．００３ｍＬ）を添加した。９０℃まで加熱後、塩化チオニル（２．５８ｍｌ，３０ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加し、同じ温度で反応を３時間継続した。揮発性物質を減圧除去して、おそらく塩化2,4-ジブロモ-3-ブチルブチリルと思われる９．０ｇ（９４％）の褐色油状物質を得て、これを精製せずに次工程に直接使用した。この粗化合物の一部（２．５ｇ，７．７ｍｍｏｌ）をクロロホルム（１０ｍＬ）に溶解し、０℃まで冷却した。この冷溶液に、クロロホルム（１０ｍＬ）中５−ベンジルオキシペンチルアミン（１．５ｇ，７．７ｍｍｏｌ）を添加した。１０分後、激しく撹拌しながら水（３ｍＬ）中水酸化ナトリウム（０．３４ｇ，８．５ｍｍｏｌ）を添加した。反応を０℃で１時間継続し、有機相を分離し、０．５Ｎ ＨＣｌ（１０ｍｌ）、水（１０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）、ブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、次いで、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４で）。濾過後、溶媒を減圧除去した。残さをベンゼン（２０ｍＬ）に溶解し、アイスバスで冷却し、少量の水素化ナトリウム（鉱油中６０％、０．３１ｇ，７．７ｍｍｏｌ）で注意深く処理した。３０分後、反応混合物を氷水中に注ぎ、有機相を分離し、ブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４で）。濾過し、溶媒を除去した後、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、１：３ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により残さを精製して、１．６ｇ（５２％）の標記化合物を黄色油状物質として得た：1H NMR (CDCl3) δ 7.34 (m, 5 H), 4.53 (s, 2 H), 4.32 (d, 1 H), 3.65 (m, 2 H), 3.48 (t, 2 H), 3.29 (m, 2 H), 2.48 (m, 1 H), 1.24-1.70 (m, 12 H), 0.91 (t, 3 H).  MS(ES) m/e 396 [M+H]+。
【００３３】
1(b) 1-(5-ベンジルオキシペンチル)-4-ブチル-2-オキソピロリジン-3-イル]酢酸メチルエステル
ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中のｔ−ブチルメチルマロネート（０．６９ｇ，３．９ｍｍｏｌ）の溶液を、６０℃において水素化ナトリウム（鉱油中６０％、０．１６ｇ，３．９ｍｍｏｌ）で３０分間処理した。室温まで冷却後、ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中の実施例１（ａ）の化合物（１．２ｇ，３．０ｍｍｏｌ）を滴下した。室温で一晩撹拌後、反応混合物を酢酸エチル／ヘキサン（１：１、１００ｍＬ）で希釈し、水（５ｘ５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４で）。溶媒を減圧除去した後、残さをトルエン（１００ｍＬ）に溶解し、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．２ｇ，１．０ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を加熱して２時間還流させた。室温まで冷却後、混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４で）。溶媒を減圧除去後、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、１：４ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により残さを精製して、０．４７ｇ（４０％）の標記化合物を褐色油状物質として得た：1H NMR (CDCl3) δ 7.34 (m, 5 H), 4.55 (s, 2 H), 3.67 (s, 3 H), 3.54 (m, 3 H), 3.33 (m, 2 H), 3.05 (m, 1 H), 2.68 (m, 3 H), 2.16 (m, 1 H), 1.25-1.70 (m, 12 H), 0.93 (t, 3 H).  MS(ES) m/e 390 [M+H]+。
【００３４】
1(c) 2-[4-ブチル-1-(5-ヒドロキシペンチル)-2-オキソピロリジン-3-イル]-N-ヒドロキシアセトアミド
メタノール（３ｍＬ）中の実施例１（ｂ）（５０ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）の溶液を、活性炭上パラジウムの存在下、水素バルーン下において、室温で一晩、撹拌した。反応混合物を濾過し、濃縮して、おそらく(+/-)-[4-ブチル-1-(5-ヒドロキシペンチル)-2-オキソピロリジン-3-イル]酢酸メチルエステルと思われる３７ｍｇ（９５％）の透明油状物質を得た。MS(ES) m/e 300 [M+H]+。この化合物をジオキサン（１．５ｍＬ）に溶解し、水中ヒドロキシルアミン（５０％、２ｍＬ）にて室温で一晩処理した。反応混合物を減圧濃縮し、自動ＨＰＬＣにより精製して２５ｍｇ（６８％）の標記化合物を透明ガラス状物質として得た：1H NMR (CD3OD) δ 3.56 (m, 3 H), 3.33 (m, 2 H), 3.07 (m, 1 H), 2.53 (m, 2 H), 2.18 (m, 1 H), 2.12 (m, 2 H), 1.31-1.70 (m, 12 H), 0.93 (t, 3 H).  MS(ES) m/e 301 [M+H]+。
【００３５】
実施例２
2-[(3R,4R)-4-ブチル-1-(5-ヒドロキシペンチル)-2-オキソピロリジン-3-イル]-N-ヒドロキシアセトアミドの調製
2(a) (R)-3-ヒドロキシメチルヘプタン酸,(S)-1-フェニルエチルアミド
乾トルエン（５０ｍＬ）中の（＋／−）−４−ブチルジヒドロフラン−２−オン（３．９ｇ，２７．４ｍｍｏｌ）、２−ヒドロキシピリジン（３．１ｇ，３２．９ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−１−フェニルエチルアミン（７．８ｍＬ，６０．３ｍｍｏｌ）の混合物を加熱して一晩還流させた。反応混合物を室温まで冷却し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、１Ｎ ＨＣｌ（２ｘ５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４で）、次いで、濃縮した。フラッシュクカラムロマトグラフィー（シリカゲル、８：２ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により残さを精製して、２種の化合物を白色固体として得た。最初に溶出したフラクションは(S)-3-ヒドロキシメチルヘプタン酸、(S)-1-フェニル−エチルアミド（２．８ｇ，３９％）であり、これを実施例３に使用する。1H NMR (CDCl3) δ 7.33 (m, 5 H), 6.07 (bs, 1 H), 5.11 (q, 1 H), 3.63 (m, 1 H), 3.48 (m, 1 H), 3.29 (bs, 1 H), 2.29 (m, 2 H), 1.95 (m, 1 H), 1.50 (d, 2 H), 1.28 (m, 6 H), 0.88 (t, 3 H).  MS(ES) m/e 264 [M+H]+。次に溶出したフラクションは標記化合物であった（２．６ｇ，３６％）。1H NMR (CDCl3) δ 7.29 (m, 5 H), 6.34 (bs, 1 H), 5.09 (q, 1 H), 3.64 (m, 1 H), 3.57 (bs, 1 H), 3.48 (m, 1 H), 2.28 (m, 2 H), 1.93 (m, 1 H), 1.48 (d, 2 H), 1.28 (m, 6 H), 0.88 (t, 3 H).  MS(ES) m/e 264 [M+H]+。
【００３６】
2(b) (R)-4-ブチル-1-[(S)-1-フェニルエチル]ピロリジン-2-オン
アルゴン雰囲気下のテトラヒドロフラン（２５ｍＬ）中のジ−ｔ−ブチルアゾジカルボン酸（２．１ｇ，９．１ｍｍｏｌ）の溶液にトリブチルホスフィン（２．２７ｍＬ，９．１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５分間撹拌し、０℃の乾ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の実施例２（ａ）の化合物（１．８４ｇ，７．０ｍｍｏｌ）の溶液にゆっくりと添加した。反応物を室温まで温め、反応混合物を一晩撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）を反応混合物に添加し、得られた混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２ｘ１００ｍＬ）で抽出した。一緒にした有機抽出物を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４で）、濾過し、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、１：４ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により残さを精製して、１．４ｇ（８２％）の標記化合物を透明油状物質として得た。1H NMR (CDCl3) δ 7.33 (m, 5 H), 5.48 (q, 1 H), 3.06 (t, 1 H), 2.92 (t, 1 H), 2.53 (q, 1 H), 2.06 (m, 2 H), 1.51 (d, 3 H), 1.20-1.46 (m, 6 H), 0.88 (t, 3 H)。MS(ES) m/e 246 [M+H]+。
【００３７】
2(c) (R)-4-ブチルピロリジン-2-オン
−７８℃の乾テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）中の実施例２（ｂ）の化合物（１．４ｇ，５．７ｍｍｏｌ）の溶液に濃液体アンモニア（１００ｍＬ）を添加した。新たにカットしたナトリウム（０．６６ｇ，２８．５ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を−７８℃で２時間撹拌した。固体塩化アンモニウムで反応を不活性化させた。反応混合物を室温までゆっくりと温めることによりアンモニアを蒸発させた。水（５０ｍＬ）を添加し、混合物を酢酸エチル（３ｘ５０ｍＬ）で抽出した。一緒にした有機抽出物を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４で）、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、８：２ ＥｔＯＡｃ／アセトン）により残さを精製して、０．７ｇ（８７％）の標記化合物を透明油状物質として得た：[a]D = +0.95°(c = 0.60, CH2Cl2) {(S)-エナンチオマーに関する文献値 [a]D = -0.67°(c = 0.60, CH2Cl2), Meyers, A.I. and Snyder, L. 1993, J. Org. Chem. 58, 36-42}; 1H NMR (CDCl3) δ 6.07 (bs, 1 H), 3.48 (t, 1 H), 3.02 (t, 1 H), 2.45 (m, 2 H), 1.99 (m, 1 H), 1.22-1.50 (m, 6 H), 0.90 (t, 3 H)。MS(ES) m/e 142 [M+H]+。
【００３８】
2(d) (R)-1-(5-ベンジルオキシペンチル)-4-ブチルピロリジン-2-オン
アルゴン雰囲気下のジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中の実施例２（ｃ）の化合物（０．４２ｇ，２．９ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃において、水素化ナトリウム（鉱油中６０％、０．１４ｇ，３．５ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。０℃で３０分撹拌後、臭化５−ベンジルオキシペンチル（０．９ｇ，３．５ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を室温で一晩撹拌し、次いで、酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈した。有機溶液を水（４ｘ３０ｍＬ）、ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４で）、次いで、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、１：１ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により残さを精製して、０．７３ｇ（９５％）の標記化合物を透明油状物質として得た：1H NMR (CDCl3) δ 7.33 (m, 5 H), 4.51 (s, 2 H), 3.45 (m, 3 H), 3.27 (t, 2 H), 2.99 (dd, 1 H), 2.52 (dd, 1 H), 2.32 (m, 1 H), 2.06 (m, 1 H), 1.24-1.71 (m, 12 H), 0.93 (t, 3 H)。MS(ES) m/e 318 [M+H]+。
【００３９】
2(e) [(3R,4R)-1-(5-ベンジルオキシペンチル)-4-ブチル-2-オキソピロリジン-3-イル]酢酸,エチルエステル
アルゴン雰囲気下、−７８℃において、ＴＨＦ（２ｍＬ）中のリチウムジイソプロピルアミド（０．４７ｍＬ，０．９４ｍｍｏｌ）の２Ｍ溶液に乾ＴＨＦ（３ｍＬ）中の実施例２（ｄ）の化合物（０．２５ｇ，０．７９ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくりと添加した。同じ温度で１時間撹拌後、ブロモ酢酸エチル（０．１ｍＬ，０．９４ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を３時間撹拌し続け、次いで、飽和塩化アンモニウム（１０ｍＬ）で反応を不活性化させた。混合物を酢酸エチル（３ｘ１０ｍＬ）で抽出し、一緒にした有機抽出物を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４で）、濾過し、次いで、濃縮した。残さをＨＰＬＣにより精製して、０．１１ｇ（３５％）の標記化合物を褐色油状物質として得た：1H NMR (CDCl3) δ 7.35 (m, 5 H), 4.51 (s, 2 H), 4.16 (q, 2 H), 3.48 (t, 2 H), 3.44 (m, 1 H), 3.29(m, 2 H), 2.98 (m, 1 H), 2.75 (m, 1 H), 2.52 (m, 1 H), 2.08 (m, 1 H), 1.31-1.72 (m, 12 H), 1.29 (t, 3 H), 0.91 (t, 3 H)。MS(ES) m/e 404 [M+H]+。
【００４０】
2(f) 2-[(3R,4R)-4-ブチル-1-(5-ヒドロキシペンチル)-2-オキソピロリジン-3-イル]-N-ヒドロキシアセトアミド
実施例１（ｂ）の化合物のかわりに実施例２（ｅ）の化合物を用いること以外は実施例１（ｃ）の手順に従って、標記化合物を得た（５０％）。1H NMR (CD3OD) δ 3.56 (m, 3 H), 3.32 (m, 2 H), 3.07 (m, 1 H), 2.54 (m, 2 H), 2.18 (m, 1 H), 2.11 (m, 2 H), 1.33-1.79 (m, 12 H), 0.94 (t, 3 H)。MS(ES) m/e 301 [M+H]+。
【００４１】
実施例３
2-[(3S,4S)-4-ブチル-1-(5-ヒドロキシペンチル)-2-オキソピロリジン-3-イル]-N-ヒドロキシアセトアミドの調製
(R)-3-ヒドロキシメチルヘプタン酸,(S)-1-フェニルエチルアミドのかわりに(S)-3-ヒドロキシメチルヘプタン酸,(S)-1-フェニルエチルアミドを用いること以外は、実施例２（ｂ）〜２（ｆ）の手順に従って、標記化合物を調製した。それは実施例２（ｆ）の化合物と同じ１Ｈ ＮＭＲおよびＭＳを有する。
【００４２】
化学官能基を適当に処理および保護して、上記実施例セクションと同様の方法により残りの式（Ｉ）の化合物を合成する。
【００４３】
式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩をヒトおよび他の哺乳動物の治療に使用するために、通常には、それを標準的な製薬慣習に従って医薬組成物として処方する。
【００４４】
本発明の化合物は呼吸器感染および／またはグラム陽性菌感染（これらに限らない）を包含する細菌感染の治療に有用である。
【００４５】
式（Ｉ）の化合物およびそれらの医薬上許容される塩を、抗生物質に関する標準的な方法で、例えば、経口投与、非経口投与、舌下投与、皮膚から、経皮的に、直腸から、吸入によりあるいは頬側から投与してもよい。
【００４６】
経口投与された場合に活性のある式（Ｉ）の化合物およびそれらの医薬上許容される塩の組成物を、シロップ、錠剤、カプセル、クリームおよびロゼンジとして処方することができる。一般的には、シロップ処方は、香料または着色料を含有する液体担体、例えば、エタノール、ピーナッツ油、オリーブ油、グリセリンまたは水中の化合物または塩の溶液からなる。組成物が錠剤形態の場合、固体処方の調製に常用されるいずれの医薬担体を用いてもよい。かかる担体の例は、ステアリン酸マグネシウム、白陶土、タルク、ゼラチン、アラビアゴム、ステアリン酸、デンプン、乳糖およびショ糖を包含する。組成物がカプセル形態の場合、常用されるいずれのカプセル封入法であっても適合し、例えば、上記担体を硬ゼラチンカプセル殻中に用いてもよい。組成物が軟ゼラチン殻カプセル形態の場合、分散物または懸濁液を調製するために常用されるいずれの医薬担体を用いてもよく、例えば、水性ガム、セルロース、シリケートまたは油脂が軟ゼラチンカプセル殻中に含まれていてもよい。
【００４７】
典型的な非経口組成物は、非経口的に許容される油脂、例えば、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、レシチン、落花生油またはゴマ油を含んでいてもよい、滅菌済み水性または非水性担体中の化合物または塩の溶液または懸濁液からなる。
【００４８】
典型的な吸入用組成物は、ジクロロジフルオロメタンまたはトリクロロフルオロメタンのごとき慣用的な噴射剤を用いて乾燥粉末あるいはエアロゾルの形態として投与されうる溶液、懸濁液またはエマルジョンの形態である。
【００４９】
典型的な坐薬処方は、結合剤および／または滑沢剤、例えば、高分子グリコール、ゼラチン、カカオ脂または他の低融点植物ロウまたは油脂またはそれらの合成アナログとともに、このようにして投与された場合に活性のある式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩を含む。
【００５０】
典型的な皮膚および経皮処方は、慣用的な水性または非水性担体を含み、例えば、クリーム、軟膏またはパスタであるか、あるいは薬用プラスター、パッチまたは膜の形態である。
【００５１】
好ましくは、組成物は単位投与形態であり、例えば、錠剤、カプセルまたは計量エアロゾルであり、患者が１回で投与できるものである。
【００５２】
経口投与用の各投与単位は、適当には、０．１ｍｇないし５００ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩（遊離酸として計算）を含有し、好ましくは１ｍｇないし１００ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩（遊離酸として計算）を含有し、非経口投与用の各投与単位は、適当には、０．１ｍｇないし１００ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩（遊離酸として計算）を含有する。鼻腔内投与および経口吸入用の各投与単位は、適当には、１人あたり１〜４００ｍｇ、好ましくは１人あたり１０ないし２００ｍｇを含有する。局所処方は、適当には０．０１ないし５．０％の式（Ｉ）の化合物を含有する。
【００５３】
経口投与のための１日の投与規則は、適当には、約０．０１ｍｇ／ｋｇないし４０ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩（遊離酸として計算）である。非経口投与のための１日の投与規則は、適当には、約０．００１ｍｇ／ｋｇないし４０ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩（遊離酸として計算）である。鼻腔内投与および経口吸入のための１日の投与規則は、適当には、約１０ないし約５００ｍｇ／人である。所望活性を示すに十分な活性成分を１日１ないし６回投与してもよい。
【００５４】
本発明の化合物を本発明に従って投与する場合、毒物学的効果は予想されない。
【００５５】
式（Ｉ）の化合物の生物学的活性は下記試験により示される：
【００５６】
生物学的アッセイ：
Lazennec および Meinnel, (1997) "Formate dehydrogenase-coupled spectrophotometric assay of peptide deformylase"  Anal. Biochem. 244, pp.180-182により開発された連続酵素結合アッセイを少々改変して用いてS. aureusまたはE. coliのＰＤＦ活性を２５℃で測定する。反応混合物は５０μｌ中に５０ｍＭのリン酸カリウムバッファー（ｐＨ７．６）、１５ｍＭのＮＡＤ、０．２５Ｕのギ酸デヒドロゲナーゼを含む。ＫＭ濃度の基質ペプチド、ｆ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｓｅｒが含まれる。１０ｎＭのＤｅｆ１酵素を添加して反応の引き金を引き、３４０ｎｍの吸光度を２０分間モニターする。
【００５７】
抗微生物活性のアッセイ：
National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS)が推奨する方法、Document M7-A4, "Methods for Dilution Susceptibility Tests for Bacteria that Grow Aerobically" (参照により本明細書に記載されているものとする)を用いるブロスのマイクロダイリューション（microdilution）により全−細胞抗微生物活性を調べた。化合物を０．０６から６４ｍｃｇ／ｍｌの範囲で２倍系列希釈して試験した。アッセイにおいて１２株のパネルを評価した。このパネルは下記の研究室株からなっていた：Staphylococcus aureus Oxford, Staphylococcus aureus WCUH29, Enterococcus faecalis I, Enterococcus faecalis 7, Haemophilus influenzae Q1, Haemophilus influenzae NEMC1, Moraxella catarrhalis 1502, Streptococcus pneumoniae 1629, Streptococcus pneumoniae N1387, Streptococcus pneumoniae N1387, E. coli 7623 (AcrABEFD+) および E. coli 120 (AcrAB-)。肉眼で見た場合に増殖を抑制した化合物の最小濃度として最小阻害濃度（ＭＩＣ）を決定した。ミラーリーダー（mirror reader）を用いてＭＩＣ終点の決定をアシストした。
【００５８】
本明細書にて引用された、特許および特許出願（これらに限らない）を包含するすべての刊行物を、参照によりそれらが完全に本明細書に記載されているものとする。
【００５９】
上の説明は、本発明の好ましい具体例を含めて本発明を十分に開示するものである。本明細書に詳細に開示された具体例の修飾および改良は以下の特許請求の範囲内である。さらに努力することなく、当業者は、上の説明を用いて本発明を最大限に用いることができると確信する。それゆえ、本明細書の実施例は単なる説明と解すべきであり、本発明の範囲を限定するものと解釈してはならない。排他的な権利または特権が主張されている本発明の具体例を以下に定義する。
【国際公開パンフレット】
2005507364.tif 000023
2005507364.tif 000024
2005507364.tif 000025
2005507364.tif 000026
2005507364.tif 000027
2005507364.tif 000028
2005507364.tif 000029
2005507364.tif 000030
2005507364.tif 000031
2005507364.tif 000032
2005507364.tif 000033
2005507364.tif 000034
2005507364.tif 000035
2005507364.tif 000036
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2005507364.tif 000038
2005507364.tif 000039
2005507364.tif 000040
2005507364.tif 000041
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2005507364.tif 000042
【国際調査報告】
2005507364.tif 000043