(57)【要約】本発明は、患者に、（i）四置換ピリミドピリミジン、および（ii）コルチコステロイドを、同時に、または互いに14日間以内に、免疫炎症を減少または阻害するのに十分な量で投与することにより、免疫炎症疾患を有する患者を治療するための方法を特徴とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
免疫炎症疾患を有するか、または免疫炎症疾患を発症する危険性がある患者を治療するための方法であって、該患者に、
（a）コルチコステロイド；および
（b）下記の式を有する化合物
を投与する段階を含み、
該化合物および該コルチコステロイドが、該患者の治療に十分な量で、かつ十分な期間に、同時に投与されるか、または互いに14日間以内に投与される方法：
2005508346.tif 000023
式中、各Zおよび各Z'は、独立してN、O、C、
2005508346.tif 000024
、
2005508346.tif 000025
または
2005508346.tif 000026
であり、
ZまたはZ'がOまたは
2005508346.tif 000027
である場合、p＝1であり、
ZまたはZ'がN、
2005508346.tif 000028
または
2005508346.tif 000029
である場合、p＝2であり、
ZまたはZ'がCである場合、p＝3であり；
各R1は、独立してX、OH、N-アルキル、1個から20個の炭素原子を有する分岐アルキル基もしくは非分岐アルキル基、複素環であるか、またはp＞1である場合には、共通のZまたはZ'原子からの2つのR1基が、互いに組み合わされて、-(CY2)k-を示し、
kは、4から6の整数であり（4および6を含む）；
各Xは、独立してY、CY3、C(CY3)3、CY2CY3、(CY2)1〜5OY、CnY2n-1であり、
n＝3〜7であり（3および7を含む）；かつ
各Yは、独立してH、F、Cl、Br、またはIである。
【請求項２】
化合物が、2,6-二置換4,8-ジベンジルアミノピリミド[5,4-d]ピリミジンである、請求項1記載の方法。
【請求項３】
化合物は、ジピリダモール、モピダモール、一酢酸ジピリダモール、NU3026（2,6-ジ-(2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-イル)-メトキシ-4,8-ジ-ピペリジノピリミドピリミジン）、NU3059（2,6-ビス-(2,3-ジメチオキシプロポキシ)-4,8-ジ-ピペリジノピリミドピリミジン）、NU3060（2,6-ビス[N,N-ジ(2-メトキシ)エチル]-4,6-ジ-ピペリジノピリミドピリミジン）、またはNU3076（2,6-ビス(ジエタノールアミノ)-4,8-ジ-4-メトキシベンジルアミノピリミドピリミジン）である、請求項1記載の方法。
【請求項４】
化合物がジピリダモールである、請求項3記載の方法。
【請求項５】
コルチコステロイドが、アルゲストン、6-α-フルオロプレドニゾロン、6-α-メチルプレドニゾロン、6-α-メチルプレドニゾロン21-アセテート、6-α-メチルプレドニゾロン21-ヘミスクシネートナトリウム塩、6-α,9-α-ジフルオロプレドニゾロン21-アセテート17-ブチレート、アムシナファル、ベクロメタゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン一水和物、6-β-ヒドロキシコルチゾール、ベタメタゾン、ベタメタゾン-17-バレレート、ブデソニド、クロベタゾール、プロピオン酸クロベタゾール、クロベタゾン、クロコルトロン、ピバル酸クロコルトロン、コルチゾン、酢酸コルチゾン、コルトドクソン、デフラザコート、21-デオキシコルチゾール、デプロドン、デシノロン、デソニド、デスオキシメタゾン、デキサメタゾン、デキサメタゾン-21-アセテート、ジクロリゾン、ジフロラゾン、二酢酸ジフロラゾン、ジフルコルトロン、ドキシベタゾール、フルドロコルチゾン、フルメタゾン、ピバル酸フルメタゾン、フルモキソニド、フルニソリド、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、9-フルオロコルチゾン、フルオロヒドロキシアンドロステンジオン、フルオロメトロン、酢酸フルオロメトロン、フルオキシメステロン、フルプレジデン、フルプレドニゾロン、フルランドレノリド、ホルモコータル、ハルシノニド、ハロメタゾン、ハロプレドン、ヒルカノシド、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、シピオン酸ヒドロコルチゾン、リン酸ヒドロコルチゾンナトリウム、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、酪酸プロピオン酸ヒドロコルチゾン、吉草酸ヒドロコルチゾン、6-ヒドロキシデキサメタゾン、イソフルプレドン、酢酸イソフルプレドン、イソプレドニデン、メクロリゾン、メチルプレドニゾロン、酢酸メチルプレドニゾロン、コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウム、パラメタゾン、酢酸パラメタゾン、プレドニゾロン、酢酸プレドニゾロン、メタスルホ安息香酸プレドニゾロン、リン酸プレドニゾロンナトリウム、t-ブチル酢酸プレドニゾロン、プレドニゾロン-21-ヘミスクシネート遊離酸、プレドニゾロン-21-アセテート、プレドニゾロン-21(β-D-グルクロニド)、プレドニゾン、プレドニリデン、プロシノニド、トラロニド、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアセトニド21-パルミテート、二酢酸トリアムシノロン、トリアムシノロンヘキサアセトニド、またはワートマニンである、請求項1記載の方法。
【請求項６】
コルチコステロイドがフルドロコルチゾンまたはプレドニゾロンである、請求項5記載の方法。
【請求項７】
化合物がジピリダモールである、請求項6記載の方法。
【請求項８】
化合物およびコルチコステロイドが、互いに10日間以内に投与される、請求項1記載の方法。
【請求項９】
化合物およびコルチコステロイドが、互いに5日間以内に投与される、請求項8記載の方法。
【請求項１０】
化合物およびコルチコステロイドが、互いに24時間以内に投与される、請求項9記載の方法。
【請求項１１】
化合物およびコルチコステロイドが同時に投与される、請求項10記載の方法。
【請求項１２】
化合物およびコルチコステロイドが、同じ薬学的組成物で投与される、請求項11記載の方法。
【請求項１３】
免疫炎症疾患が、関節リウマチ、乾癬、潰瘍性大腸炎、クローン病、炎症性皮膚疾患、または卒中により誘発される脳細胞死である、請求項1記載の方法。
【請求項１４】
化合物が0.5〜800mg/日の量で投与され、コルチコステロイドが0.1〜1500mg/日の量で投与される、請求項1記載の方法。
【請求項１５】
化合物が18〜600mg/日の量で投与され、コルチコステロイドは0.5〜30mg/日の量で投与される、請求項14記載の方法。
【請求項１６】
コルチコステロイドは0.5〜10mg/日の量で投与される、請求項15記載の方法。
【請求項１７】
以下を含む薬学的組成物：
（i）コルチコステロイド；
（ii）下記の式を有する化合物：
2005508346.tif 000030
（式中、各Zおよび各Z'は、独立してN、O、C、
2005508346.tif 000031
、
2005508346.tif 000032
または
2005508346.tif 000033
であり、
ZまたはZ'がOまたは
2005508346.tif 000034
である場合、p＝1であり、
ZまたはZ'が、N、
2005508346.tif 000035
または
2005508346.tif 000036
である場合、p＝2であり、
ZまたはZ'がCである場合、p＝3であり；
各R1は、独立してX、OH、N-アルキル、1個から20個の炭素原子を有する分岐アルキル基もしくは非分岐アルキル基、複素環であるか、または、p＞1である場合、共通のZまたはZ'原子からの2つのR1基が、互いに組み合わされて-(CY2)k-を示し、
kは、4から6の整数であり（4および6を含む）；
各Xは、独立してY、CY3、C(CY3)3、CY2CY3、(CY2)1〜5OY、CnY2n-1であり、
n＝3〜7であり（3および7を含む）；かつ
各Yは、独立してH、F、Cl、Br、またはIである）；ならびに
（iii）薬学的に許容される賦形剤。
【請求項１８】
化合物が、2,6-二置換4,8-ジベンジルアミノピリミド[5,4-d]ピリミジンである、請求項17記載の組成物。
【請求項１９】
化合物が、ジピリダモール、モピダモール、一酢酸ジピリダモール、NU3026、NU3059、NU3060、またはNU3076である、請求項18記載の組成物。
【請求項２０】
コルチコステロイドが、アルゲストン、6-α-フルオロプレドニゾロン、6-α-メチルプレドニゾロン、6-α-メチルプレドニゾロン21-アセテート、6-α-メチルプレドニゾロン21-ヘミスクシネートナトリウム塩、6-α,9-α-ジフルオロプレドニゾロン21-アセテート17-ブチレート、アムシナファル、ベクロメタゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン一水和物、6-β-ヒドロキシコルチゾール、ベタメタゾン、ベタメタゾン-17-バレレート、ブデソニド、クロベタゾール、プロピオン酸クロベタゾール、クロベタゾン、クロコルトロン、ピバル酸クロコルトロン、コルチゾン、酢酸コルチゾン、コルトドクソン、デフラザコート、21-デオキシコルチゾール、デプロドン、デシノロン、デソニド、デスオキシメタゾン、デキサメタゾン、デキサメタゾン-21-アセテート、ジクロリゾン、ジフロラゾン、二酢酸ジフロラゾン、ジフルコルトロン、ドキシベタゾール、フルドロコルチゾン、フルメタゾン、ピバル酸フルメタゾン、フルモキソニド、フルニソリド、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、9-フルオロコルチゾン、フルオロヒドロキシアンドロステンジオン、フルオロメトロン、酢酸フルオロメトロン、フルオキシメステロン、フルプレジデン、フルプレドニゾロン、フルランドレノリド、ホルモコータル、ハルシノニド、ハロメタゾン、ハロプレドン、ヒルカノシド、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、シピオン酸ヒドロコルチゾン、リン酸ヒドロコルチゾンナトリウム、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、酪酸プロピオン酸ヒドロコルチゾン、吉草酸ヒドロコルチゾン、6-ヒドロキシデキサメタゾン、イソフルプレドン、酢酸イソフルプレドン、イソプレドニデン、メクロリゾン、メチルプレドニゾロン、酢酸メチルプレドニゾロン、コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウム、パラメタゾン、酢酸パラメタゾン、プレドニゾロン、酢酸プレドニゾロン、メタスルホ安息香酸プレドニゾロン、リン酸プレドニゾロンナトリウム、t-ブチル酢酸プレドニゾロン、プレドニゾロン-21-ヘミスクシネート遊離酸、プレドニゾロン-21-アセテート、プレドニゾロン-21(β-D-グルクロニド)、プレドニゾン、プレドニリデン、プロシノニド、トラロニド、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアセトニド21-パルミテート、二酢酸トリアムシノロン、トリアムシノロンヘキサアセトニド、またはワートマニンである、請求項17記載の組成物。
【請求項２１】
（i）コルチコステロイド；および
（ii）下記の式を有する化合物
を含む薬学的包装：
2005508346.tif 000037
式中、各Zおよび各Z'は、独立してN、O、C、
2005508346.tif 000038
、
2005508346.tif 000039
または
2005508346.tif 000040
であり、
ZまたはZ'がOまたは
2005508346.tif 000041
である場合、p＝1であり、
ZまたはZ'がN、
2005508346.tif 000042
または
2005508346.tif 000043
である場合、p＝2であり、
ZまたはZ'がCである場合、p＝3であり；
各R1は、独立してX、OH、N-アルキル、1個から20個の炭素原子を有する分岐アルキル基もしくは非分岐アルキル基、複素環であるか、または、p＞1である場合、共通のZまたはZ'原子からの2つのR1基が、互いに組み合わされて-(CY2)k-を示し、
kは、4から6の整数であり（4および6を含む）；
各Xは、独立してY、CY3、C(CY3)3、CY2CY3、(CY2)1〜5OY、CnY2n-1であり、
n＝3〜7であり（3および7を含む）；
各Yは、独立してH、F、Cl、Br、またはIである。
【請求項２２】
化合物が、2,6-二置換4,8-ジベンジルアミノピリミド[5,4-d]ピリミジンである、請求項21記載の薬学的包装。
【請求項２３】
化合物が、ジピリダモール、モピダモール、一酢酸ジピリダモール、NU3026、NU3059、NU3060、またはNU3076である、請求項22記載の薬学的包装。
【請求項２４】
化合物がジピリダモールである、請求項23記載の薬学的包装。
【請求項２５】
コルチコステロイドが、アルゲストン、6-α-フルオロプレドニゾロン、6-α-メチルプレドニゾロン、6-α-メチルプレドニゾロン21-アセテート、6-α-メチルプレドニゾロン21-ヘミスクシネートナトリウム塩、6-α,9-α-ジフルオロプレドニゾロン21-アセテート17-ブチレート、アムシナファル、ベクロメタゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン一水和物、6-β-ヒドロキシコルチゾール、ベタメタゾン、ベタメタゾン-17-バレレート、ブデソニド、クロベタゾール、プロピオン酸クロベタゾール、クロベタゾン、クロコルトロン、ピバル酸クロコルトロン、コルチゾン、酢酸コルチゾン、コルトドクソン、デフラザコート、21-デオキシコルチゾール、デプロドン、デシノロン、デソニド、デスオキシメタゾン、デキサメタゾン、デキサメタゾン-21-アセテート、ジクロリゾン、ジフロラゾン、二酢酸ジフロラゾン、ジフルコルトロン、ドキシベタゾール、フルドロコルチゾン、フルメタゾン、ピバル酸フルメタゾン、フルモキソニド、フルニソリド、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、9-フルオロコルチゾン、フルオロヒドロキシアンドロステンジオン、フルオロメトロン、酢酸フルオロメトロン、フルオキシメステロン、フルプレジデン、フルプレドニゾロン、フルランドレノリド、ホルモコータル、ハルシノニド、ハロメタゾン、ハロプレドン、ヒルカノシド、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、シピオン酸ヒドロコルチゾン、リン酸ヒドロコルチゾンナトリウム、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、酪酸プロピオン酸ヒドロコルチゾン、吉草酸ヒドロコルチゾン、6-ヒドロキシデキサメタゾン、イソフルプレドン、酢酸イソフルプレドン、イソプレドニデン、メクロリゾン、メチルプレドニゾロン、酢酸メチルプレドニゾロン、コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウム、パラメタゾン、酢酸パラメタゾン、プレドニゾロン、酢酸プレドニゾロン、メタスルホ安息香酸プレドニゾロン、リン酸プレドニゾロンナトリウム、t-ブチル酢酸プレドニゾロン、プレドニゾロン-21-ヘミスクシネート遊離酸、プレドニゾロン-21-アセテート、プレドニゾロン-21(β-D-グルクロニド)、プレドニゾン、プレドニリデン、プロシノニド、トラロニド、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアセトニド21-パルミテート、二酢酸トリアムシノロン、トリアムシノロンヘキサアセトニド、またはワートマニンである、請求項21記載の薬学的包装。
【請求項２６】
化合物およびコルチコステロイドは、別々に、かつ個々の投与量で製剤化される、請求項21記載の薬学的包装。
【請求項２７】
化合物およびコルチコステロイドは、一緒に、かつ個々の投与量で製剤化される、請求項21記載の薬学的包装。
【請求項２８】
免疫炎症疾患を有するか、または免疫炎症疾患を発症する危険性がある患者を治療するための方法であって、該患者に、
（a）2種またはそれ以上のコルチコステロイド；および
（b）下記の式を有する化合物
を投与する段階を含み、
該化合物および該2種またはそれ以上のコルチコステロイドの各々は、該患者の治療に十分な量で投与される方法：
2005508346.tif 000044
式中、各Zおよび各Z'は、独立してN、O、C、
2005508346.tif 000045
、
2005508346.tif 000046
または
2005508346.tif 000047
であり、
ZまたはZ'がOまたは
2005508346.tif 000048
である場合、p＝1であり、
ZまたはZ'がN、
2005508346.tif 000049
または
2005508346.tif 000050
である場合、p＝2であり、
ZまたはZ'がCである場合、p＝3であり；
各R1は、独立してX、OH、N-アルキル、1個から20個の炭素原子を有する分岐アルキル基もしくは非分岐アルキル基、複素環であるか、またはp＞1である場合、共通のZまたはZ'原子からの2つのR1基が、互いに組み合わされて-(CY2)k-を示し、
kは、4から6の整数であり（4および6を含む）；
各Xは、独立してY、CY3、C(CY3)3、CY2CY3、(CY2)1〜5OY、CnY2n-1であり、
n＝3〜7であり（3および7を含む）；
各Yは、独立してH、F、Cl、Br、またはIである。
【請求項２９】
化合物が、ジピリダモール、モピダモール、一酢酸ジピリダモール、NU3026、NU3059、NU3060、またはNU3076である、請求項28記載の方法。
【請求項３０】
化合物がジピリダモールである、請求項29記載の方法。
【請求項３１】
コルチコステロイドの少なくとも1種が、アルゲストン、6-α-フルオロプレドニゾロン、6-α-メチルプレドニゾロン、6-α-メチルプレドニゾロン21-アセテート、6-α-メチルプレドニゾロン21-ヘミスクシネートナトリウム塩、6-α,9-α-ジフルオロプレドニゾロン21-アセテート17-ブチレート、アムシナファル、ベクロメタゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン一水和物、6-β-ヒドロキシコルチゾール、ベタメタゾン、ベタメタゾン-17-バレレート、ブデソニド、クロベタゾール、プロピオン酸クロベタゾール、クロベタゾン、クロコルトロン、ピバル酸クロコルトロン、コルチゾン、酢酸コルチゾン、コルトドクソン、デフラザコート、21-デオキシコルチゾール、デプロドン、デシノロン、デソニド、デスオキシメタゾン、デキサメタゾン、デキサメタゾン-21-アセテート、ジクロリゾン、ジフロラゾン、二酢酸ジフロラゾン、ジフルコルトロン、ドキシベタゾール、フルドロコルチゾン、フルメタゾン、ピバル酸フルメタゾン、フルモキソニド、フルニソリド、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、9-フルオロコルチゾン、フルオロヒドロキシアンドロステンジオン、フルオロメトロン、酢酸フルオロメトロン、フルオキシメステロン、フルプレジデン、フルプレドニゾロン、フルランドレノリド、ホルモコータル、ハルシノニド、ハロメタゾン、ハロプレドン、ヒルカノシド、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、シピオン酸ヒドロコルチゾン、リン酸ヒドロコルチゾンナトリウム、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、酪酸プロピオン酸ヒドロコルチゾン、吉草酸ヒドロコルチゾン、6-ヒドロキシデキサメタゾン、イソフルプレドン、酢酸イソフルプレドン、イソプレドニデン、メクロリゾン、メチルプレドニゾロン、酢酸メチルプレドニゾロン、コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウム、パラメタゾン、酢酸パラメタゾン、プレドニゾロン、酢酸プレドニゾロン、メタスルホ安息香酸プレドニゾロン、リン酸プレドニゾロンナトリウム、t-ブチル酢酸プレドニゾロン、プレドニゾロン-21-ヘミスクシネート遊離酸、プレドニゾロン-21-アセテート、プレドニゾロン-21(β-D-グルクロニド)、プレドニゾン、プレドニリデン、プロシノニド、トラロニド、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアセトニド21-パルミテート、二酢酸トリアムシノロン、トリアムシノロンヘキサアセトニド、またはワートマニンである、請求項28記載の方法。
【請求項３２】
免疫炎症疾患を有する患者の治療に有用な化合物の組合せを同定する方法であって、以下の段階を含む方法：
（a）免疫細胞を、（i）ジピリダモール、フルドロコルチゾン、およびプレドニゾロンからなる群より選択される第一の化合物、および（ii）候補化合物とインビトロで接触させる段階；ならびに
（b）該第一の化合物と該候補化合物との組合せが、第一の化合物と接触させたが候補化合物とは接触させていない免疫細胞、または候補化合物と接触させたが第一の化合物とは接触させていない末梢血単核細胞と比較して、免疫細胞におけるTNFαレベルを減少させるかどうかを判定し、TNFαレベルの減少により、該組合せが免疫炎症疾患を有する患者の治療に有用な組合せであると同定される段階。
【請求項３３】
必要とする患者における1種または複数種の炎症誘発性サイトカインの産生を抑制するための方法であって、サイトカイン抑制量の請求項17記載の薬学的組成物を患者に投与する段階を含む方法。
【請求項３４】
サイトカインの1種がTNFαである、請求項33記載の方法。
【請求項３５】
（i）請求項21記載の薬学的包装、および（ii）免疫炎症疾患と診断された患者、または発症する危険性がある患者に該包装を投与するための説明書を含むキット。
【請求項３６】
免疫炎症疾患を有するか、または免疫炎症疾患を発症する危険性がある患者を治療するための方法であって、（i）ジピリダモールおよび（ii）プレドニゾロンまたはフルドロコルチゾンを、患者を治療するのに十分な量および期間で、互いに1時間以内に患者に投与する段階を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、免疫炎症疾患の治療に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
免疫炎症疾患（例えば関節リウマチ、乾癬、潰瘍性大腸炎、クローン病、卒中により誘発される脳細胞死、強直性脊椎炎、線維筋痛、および炎症性皮膚疾患、喘息、多発性硬化症、I型糖尿病、全身性エリテマトーデス、強皮症、全身性硬化症、およびシェーグレン症候群）は、免疫系の調節不全、および健康組織の傷害をもたらす生体防御の不適切な活性化により特徴づけられる。
【０００３】
世界中の人間の1％が、重度の腫脹、疼痛、ならびに最終的な関節の変形および破壊を引き起こす、容赦ない進行性疾患である関節リウマチ（RA）に罹患している。関節炎財団（Arthritis Foundation）によれば、現在200万人を超える米国人が関節リウマチに罹患し、その中で女性は3倍罹患しやすい。関節リウマチは、関節および／または他の内部器官の裏打ちの炎症、ならびにリンパ球数の増加および高レベルの炎症誘発性サイトカインの存在により特徴づけられる。
【０００４】
RAの診断には、一般に以下の段階が含まれる：（i）改善までに少なくとも1時間持続する朝の関節の硬直、（ii）同時に軟組織腫脹または液体を有する、3箇所またはそれ以上の関節領域の関節炎；（iii）少なくとも1箇所の手関節の関節炎；（iv）対称性関節炎、すなわち、身体の両側の同じ関節領域の同時併発；（v）リウマトイド結節；（vi）異常な血清リウマチ因子；および（vii）罹患した関節に局在するか、または最も顕著には隣接して認められる、糜爛または明白な骨脱灰を含む、手および手首の後前方向のX線像上における、関節リウマチに典型的なX線像の変化。患者は、これらの7つの基準のうち少なくとも4つを満たす場合にRAに罹患していると分類され、（i）から（iv）は少なくとも6週間存在しなければならない（米国リウマチ学会、1987、Arnett FCらに基づく、関節リウマチの急性関節炎の分類基準、Arthritis Rheum.1988;31:315-324）。疼痛自体はRAの診断に必要ではない。
【０００５】
RAの治療には、一般に、滑膜肥厚、関節圧痛、および関節硬直を含む、関節炎症の臨床徴候を抑制することに向けられた抗炎症戦略が含まれる。これらの兆候および症状に対処するために使用される薬物には、一般に（i）非ステロイド系抗炎症薬（NSAID；例えばデトプロフェン、ジクロフェナク、ジフルニサル、エトドラク、フェノプロフェン、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、メクロフェナメート、メフェナム酸、メロキシカム、ナブメトン、ナプロキセンナトリウム、オキサプロジン、ピロキシカム、スリンダク、トルメチン、セレコキシブ、ロフェコキシブ、アスピリン、サリチル酸コリン、サルサラート、ならびにサリチル酸ナトリウムおよびサリチル酸マグネシウム）（これらの薬物は軽度のRAには適切であり得るが、疾患の長期経緯は変化させないようである）；ならびに（ii）ステロイド（例えばコルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、プレドニゾン、トリアムシノロン）が含まれる。
【０００６】
RAの治療には、関節の炎症により引き起こされる長期関節傷害および変形を制限することに向けられた戦略を含んでもよい。このような治療は一般に、DMARD、すなわち疾患修飾性抗リウマチ薬（例えばシクロスポリン、アザチオプリン、メトトレキサート、レフルノミド、シクロホスファミド、ヒドロキシクロロキン、スルファサラジン、D-ペニシラミン、ミノサイクリン、金、エタネルセプト（可溶性TNF受容体）およびインフリキシマブ（キメラモノクローナル抗TNF抗体））として記載されている。
【０００７】
免疫炎症疾患を治療するための新しい療法を開発する必要がある。
【発明の開示】
【０００８】
発明の要約
本発明者らは、ジピリダモール（2,6-ビス(ジエタノールアミノ)-4,8-ジピペリジノピリミド(5,4-d)ピリミジンとしても知られる）などの四置換ピリミドピリミジンと、フルドロコルチゾン（9-α-フルオロ-11-β,17-α,21-トリヒドロキシ-4-プレグネン-3,20-ジオンアセテートとしても知られる）またはプレドニゾロン（1-デヒドロコルチゾール；1-デヒドロヒドロコルチゾン；1,4-プレグナジエン-11β,17α,21-トリオール-3,20-ジオン；および11β,17α,21-トリヒドロキシ-1,4-プレグナジエン-3,20-ジオンとしても知られる）などのコルチコステロイドとの組合せが、末梢血単核細胞（PBMC）に誘導されるTNFαレベルの実質的な抑制をもたらすことを発見した。
【０００９】
従って、本発明は、免疫炎症疾患を有するか、または免疫炎症疾患を発症する危険性がある患者を治療する方法を特徴とする。本方法は、（i）コルチコステロイド；および（ii）下記の式（I）を有する四置換ピリミドピリミジンを投与する段階を含む：
2005508346.tif 000002
式中、各Zおよび各Z'は、独立してN、O、C、
2005508346.tif 000003
、
2005508346.tif 000004
または
2005508346.tif 000005
である。
ZまたはZ'がOまたは
2005508346.tif 000006
である場合、p＝1であり、
ZまたはZ'がN、
2005508346.tif 000007
または
2005508346.tif 000008
である場合、p＝2であり、
ZまたはZ'がCである場合、p＝3である。式（I）において、各R1は、独立してX；OH；N-アルキル（アルキル基は1個から20個の炭素原子を有する）；1個から20個の炭素原子を有する分岐アルキル基もしくは非分岐アルキル基；または複素環である。または、p＞1である場合、共通のZまたはZ'原子からの2つのR1基が、互いに組み合わされて-(CY2)k-を示してもよく、kは、4から6の整数である（4および6を含む）。各Xは、独立してY、CY3、C(CY3)3、CY2CY3、(CY2)1〜5OY、構造CnY2n-1の置換または非置換シクロアルカンであり、n＝3〜7である（3および7を含む）。各Yは、独立してH、F、Cl、Br、またはIである。1つの態様において、各Zは同じ部分であり、各Z'は同じ部分であり、ZおよびZ'は異なる部分である。2つの化合物は各々、第二の化合物と組み合わせた場合に、免疫炎症疾患を治療または予防するのに十分な量で投与される。
【００１０】
関連した局面において、本発明は、（i）コルチコステロイド；および（ii）式（I）を有する四置換ピリミドピリミジンを投与することにより、必要とする患者において1種または複数種の炎症誘発性サイトカインの産生を抑制する方法を特徴とする。
【００１１】
特に有用な四置換ピリミドピリミジンにおいて、R1は、置換もしくは非置換フラン、プリン、またはピリミジン、(CH2CH2OY)、(CH2CH(OH)CH2OY)、（HCH2CH(OH)CX3）、((CH2)nOY)（n＝2〜5である）、
2005508346.tif 000009
または
2005508346.tif 000010
である。他の有用な四置換ピリミドピリミジンにおいて、各ZはNであり、かつ2つの連結されたR1基の組合せは-(CH2)5-であり、かつ各Z'はNであり、各々の連結されたR1基は-CH2CH2OHである。
【００１２】
四置換ピリミドピリミジンおよびコルチコステロイドは、薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤を含む薬学的組成物中に存在してもよく、患者に治療上の利益を生むほど十分にTNFαレベルを抑制するよう、十分な投与量および頻度で投与される。四置換ピリミドピリミジンおよびコルチコステロイドは、互いに14日間以内に（例えば互いに10日間以内、5日間以内、24時間以内、もしくは1時間以内、または同時にでも）投与され得る。各化合物の投与は、例えば、毎日1回から5回、または症状を軽減するために必要に応じて行うことができる。
【００１３】
従って、本発明はまた、1種または複数種の四置換ピリミドピリミジンおよび1種または複数種のコルチコステロイドを含む、薬学的組成物、薬学的包装、およびキットを特徴とする。本発明の方法および組成物（薬学的組成物および薬学的包装）は、四置換ピリミドピリミジンとコルチコステロイドのより高次の組合せを特徴とし得る。具体的に、1種、2種、3種、またはそれ以上の四置換ピリミドピリミジンを、1種、2種、3種、またはそれ以上のコルチコステロイドと組み合わせてもよい。好ましい態様において、四置換ピリミドピリミジン、コルチコステロイド、またはその両方は、ヒトへの投与のために米国食品医薬品局（USFDA）により認可されている。
【００１４】
本発明の方法および組成物に有用な四置換ピリミドピリミジンの例には、例えば2,6-二置換4,8-ジベンジルアミノピリミド[5,4-d]ピリミジンが含まれる。特に有用な四置換ピリミドピリミジンには、ジピリダモール（2,6-ビス(ジエタノールアミノ)-4,8-ジピペリジノピリミド(5,4-d)ピリミジンとしても知られる）、モピダモール、一酢酸ジピリダモール、NU3026（2,6-ジ-(2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-イル)-メトキシ-4,8-ジ-ピペリジノピリミドピリミジン）、NU3059（2,6-ビス-(2,3-ジメチオキシプロポキシ)-4,8-ジ-ピペリジノピリミドピリミジン）、NU3060（2,6-ビス[N,N-ジ(2-メトキシ)エチル]-4,6-ジ-ピペリジノピリミドピリミジン）、およびNU3076（2,6-ビス(ジエタノールアミノ)-4,8-ジ-4-メトキシベンジルアミノピリミドピリミジン）が含まれる。
【００１５】
本明細書に記載される本発明は、コルチコステロイドのフルドロコルチゾン（9-α-フルオロ-11-β,17-α,21-トリヒドロキシ-4-プレグネン-3,20-ジオンアセテートとしても知られる）およびプレドニゾロン（1-デヒドロコルチゾール；1-デヒドロヒドロコルチゾン；1,4-プレグナジエン-11β,17α,21-トリオール-3,20-ジオン；および11β,17α,21-トリヒドロキシ-1,4-プレグナジエン-3,20-ジオンとしても知られる）を使用して例示されているが、当業者は、これらのコルチコステロイドの構造的および機能的類似体も、本発明の方法および組成物において、四置換ピリミドピリミジンと組み合わせて使用できることを認識すると考えられる。他の有用なコルチコステロイドは、コルチコステロイドファミリー間で共有される構造的特徴、および明らかな作用機序に基づいて同定し得る。
【００１６】
四置換ピリミドピリミジンおよびコルチコステロイドは、同じかまたは異なる薬学的製剤において投与され得る。薬学的包装の薬学的組成物または成分は、同じかまたは異なる経路により投与されてよく、これには経口、直腸、静脈内、筋肉内、皮下、動脈内、吸入、局所、または経皮、膣内、および点眼投与が含まれる。
【００１７】
四置換ピリミドピリミジンおよびコルチコステロイドの用量は個々に決定され得るが；四置換ピリミドピリミジンは、典型的にはヒト患者に約0.5〜800mg／日、18〜600mg／日、または50〜400mg／日で投与する。コルチコステロイドは、典型的に、約0.1〜1500mg／日、0.5〜30mg／日、または0.5〜10mg／日で投与される。低用量のコルチコステロイド（例えば10mg／日またはそれ未満のプレドニゾロン、またはその等価物）が好ましい。四置換ピリミドピリミジンおよびコルチコステロイドの合計1日量を、1回、2回、3回、4回、またはそれ以上の投薬で投与し得る。四置換ピリミドピリミジンおよびコルチコステロイドは、1日量を同じ回数で投与する必要はない。さらに、四置換ピリミドピリミジンおよび／またはコルチコステロイドを、毎日または同じ投与経路により投与する必要はない。例えば、四置換ピリミドピリミジンを、隔日に静脈内注射により投与してもよく、かつコルチコステロイドを局所適用により毎日2回投与してもよい。従って、異なる組成物で投与される場合、薬学的製剤、包装、およびキットは、所望の治療計画を達成するのに適した形態および投与量で調製する。
【００１８】
本発明の方法および組成物を使用して治療する疾病または疾患は、免疫炎症疾患であり、これには例えば関節リウマチ、乾癬、潰瘍性大腸炎、クローン病、卒中により誘発される脳細胞死、強直性脊椎炎、線維筋痛、喘息、多発性硬化症、I型糖尿病、全身性エリテマトーデス、強皮症、全身性硬化症、炎症性皮膚疾患、またはシェーグレン症候群が含まれる。
【００１９】
本発明はまた、免疫炎症疾患を有する患者を治療するのに有用な化合物を同定する方法を特徴とする。方法は以下の段階を含む：免疫細胞を、（i）式（I）を有する四置換ピリミドピリミジンまたはコルチコステロイドの群より選択される免疫調節化合物；および（ii）候補化合物とインビトロで接触させ、免疫応答が、（a）免疫調節化合物と接触させたが候補化合物とは接触させていない免疫細胞、および（b）候補化合物と接触させたが免疫調節化合物とは接触させていない免疫細胞と比較して、調節されているかどうかを判定する。免疫調節化合物と組み合わせた場合、対照よりも免疫応答を大幅に調節する候補化合物は、免疫炎症疾患を有する患者を治療するのに潜在的に有用な化合物である。
【００２０】
本発明に有用な化合物には、本明細書に記載される化合物のジアステレオ異性体およびエナンチオマーなどの異性体、塩、溶媒和物、および多形、ならびにラセミ混合物を含む、任意の薬学的に許容される形態の本明細書に記載される化合物が含まれる。
【００２１】
「複素環」とは、環原子の1つまたは複数が炭素以外の原子である、任意の環式分子を意味する。好ましい複素環は、1つまたは2つの環構造からなる。好ましいヘテロ原子は、N、O、およびSである。複素環の各環構造は、3個から10個の原子、好ましくは4個から8個の原子、最も好ましくは5個から7個の原子からなる。ヘテロ原子が少なくとも1つの環構造に存在するならば、各々の環構造がヘテロ原子を含む必要はない。好ましい複素環は、例えば、β-ラクタム、フラン、テトラヒドロフラン、ピロール、ピロリジン、チオフェン、テトラヒドロチオフェン、オキサゾール、イミダゾリジン、インドール、グアニン、およびフェノチアジンである。
【００２２】
「治療する」とは、炎症疾患の治療または予防のための薬学的組成物を、投与または処方することを意味する。
【００２３】
「患者」とは、任意の動物（例えばヒト）を意味する。
【００２４】
「免疫炎症疾患」という用語には、自己免疫疾患を含む多様な容態が包含される。免疫炎症疾患の結果、炎症過程により健康組織が破壊される。免疫炎症疾患の例には、関節リウマチ、乾癬、潰瘍性大腸炎、クローン病、卒中により誘発される脳細胞死、硬直性脊椎炎、線維筋痛、喘息、多発性硬化症、I型糖尿病、全身性エリテマトーデス、強皮症、全身性硬化症、炎症性皮膚疾患、重症筋無力症、およびシェーグレン症候群が含まれる。
【００２５】
「コルチコステロイド」とは、コレステロールに由来し得る任意の天然または合成ステロイドホルモンを意味し、水素化されたシクロペンタノペルヒドロフェナントレン環系により特徴づけられる。天然コルチコステロイドは、一般に、副腎皮質により産生される。合成コルチコステロイドはハロゲン化されてもよい。活性に必要な官能基には、Δ4における二重結合、C3ケトン、およびC20ケトンが含まれる。コルチコステロイドは、糖質コルチコイドおよび／または鉱質コルチコイド活性を有し得る。好ましい態様において、コルチコステロイドはフルドロコルチゾンまたはプレドニゾロンのいずれかである。
【００２６】
例示的なコルチコステロイドには、アルゲストン、6-α-フルオロプレドニゾロン、6-α-メチルプレドニゾロン、6-α-メチルプレドニゾロン21-アセテート、6-α-メチルプレドニゾロン21-ヘミスクシネートナトリウム塩、6-α,9-α-ジフルオロプレドニゾロン21-アセテート17-ブチレート、アムシナファル、ベクロメタゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン一水和物、6-β-ヒドロキシコルチゾール、ベタメタゾン、ベタメタゾン-17-バレレート、ブデソニド、クロベタゾール、プロピオン酸クロベタゾール、クロベタゾン、クロコルトロン、ピバル酸クロコルトロン、コルチゾン、酢酸コルチゾン、コルトドクソン、デフラザコート、21-デオキシコルチゾール、デプロドン、デシノロン、デソニド、デスオキシメタゾン、デキサメタゾン、デキサメタゾン-21-アセテート、ジクロリゾン、ジフロラゾン、二酢酸ジフロラゾン、ジフルコルトロン、ドキシベタゾール、フルドロコルチゾン、フルメタゾン、ピバル酸フルメタゾン、フルモキソニド、フルニソリド、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、9-フルオロコルチゾン、フルオロヒドロキシアンドロステンジオン、フルオロメトロン、酢酸フルオロメトロン、フルオキシメステロン、フルプレジデン、フルプレドニゾロン、フルランドレノリド、ホルモコータル、ハルシノニド、ハロメタゾン、ハロプレドン、ヒルカノシド（hyrcanoside）、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、シピオン酸ヒドロコルチゾン、リン酸ヒドロコルチゾンナトリウム、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、酪酸プロピオン酸ヒドロコルチゾン（hydrocortison probutate）、吉草酸ヒドロコルチゾン、6-ヒドロキシデキサメタゾン、イソフルプレドン、酢酸イソフルプレドン、イソプレドニデン、メクロリゾン、メチルプレドニゾロン、酢酸メチルプレドニゾロン、コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウム、パラメタゾン、酢酸パラメタゾン、プレドニゾロン、酢酸プレドニゾロン、メタスルホ安息香酸プレドニゾロン、リン酸プレドニゾロンナトリウム、t-ブチル酢酸プレドニゾロン（prednisolone tebutate）、プレドニゾロン-21-ヘミスクシネート遊離酸、プレドニゾロン-21-アセテート、プレドニゾロン-21(β-D-グルクロニド)、プレドニゾン、プレドニリデン、プロシノニド、トラロニド、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアセトニド21-パルミテート、二酢酸トリアムシノロン、トリアムシノロンヘキサアセトニド、およびワートマニンが含まれる。望ましくは、コルチコステロイドはフルドロコルチゾンまたはプレドニゾロンである。
【００２７】
「有効量」とは、免疫炎症疾患を治療または予防するのに必要な、本発明と組み合わせた、化合物の量を意味する。炎症疾患により引き起こされるか、または炎症疾患の一因となる容態の治療処置のために本発明を実施するのに使用される、活性化合物（群）の有効量は、投与様式、患者の年齢、体重、および全身の健康状態に応じて変化する。最終的には、医師または獣医師が適切な量および投与療法を決定する。このような量は有効量と称される。
【００２８】
「サイトカイン抑制量」とは、過剰な、または調節されていない炎症誘発性サイトカイン産生により悪化するか、または引き起こされる、免疫炎症疾患の予防または治療処置のために患者に与えられた場合に、炎症誘発性サイトカインのインビボでの存在またはレベルの減少を引き起こすと考えられる組合せの量を意味する。
【００２９】
本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明および特許請求の範囲から明らかになると考えられる。
【００３０】
詳細な説明
本発明者らは、四置換ピリミドピリミジンとコルチコステロイドの組合せが、刺激された白血球に対して、実質的なTNFα抑制活性を示すことを発見した。ジピリダモールとフルドロコルチゾン、およびジピリダモールとプレドニゾロンとの組合せが特に効果的であった。従って、四置換ピリミドピリミジンとコルチコステロイドの組合せは、免疫炎症疾患の治療に有用である。
【００３１】
ジピリダモール
ジピリダモール（2,6-ビス(ジエタノールアミノ)-4,8-ジピペリジノピリミド(5,4-d)ピリミジン）は、例えば、心臓弁手術後の血塊形成を防ぐため、および心筋梗塞および脳梗塞を含む凝固疾患に関連した瀕死を減少させるために、血小板阻害剤として使用される四置換ピリミドピリミジンである。典型的には、抗凝固療法（予防または治療）は、ジピリダモールを約75〜200mg、1日2回、1日3回、または1日4回、単独でまたはアスピリンと組み合わせて投与することにより実施される。
【００３２】
四置換ピリミドピリミジン
四置換ピリミドピリミジンは、本発明の方法および組成物においてジピリダモールを代用することができる構造的類似体である。四置換ピリミドピリミジンは、下記の一般構造：
2005508346.tif 000011
（式中、各Zおよび各Z'は、独立してN、O、C、
2005508346.tif 000012
、
2005508346.tif 000013
または
2005508346.tif 000014
である）を有する。
ZまたはZ'がOまたは
2005508346.tif 000015
である場合、p＝1であり、
ZまたはZ'がN、
2005508346.tif 000016
または
2005508346.tif 000017
である場合、p＝2であり、
ZまたはZ'がCである場合、p＝3である。
各R1は、独立してX；OH；N-アルキル；1個から20個の炭素原子を有する分岐アルキル基もしくは非分岐アルキル基、複素環である。または、p＞1である場合、共通のZまたはZ'原子からの2つのR1基が、互いに組み合わされて、-(CY2)k-を示してもよく、kは4から6の整数である（4および6を含む）。各Xは、独立してY、CY3、C(CY3)3、CY2CY3、(CY2)1〜5OY、構造CnY2n-1の置換または非置換シクロアルカンであり、n＝3〜7である（3および7を含む）。各Yは、独立してH、F、Cl、Br、またはIである。
【００３３】
特に有用な四置換ピリミドピリミジンにおいて、R1は、置換または非置換フラン、プリン、またはピリミジン、(CH2CH2OY)、(CH2CH(OH)CH2OY)、(HCH2CH(OH)CX3)、((CH2)nOY)（n＝2〜5である）、
2005508346.tif 000018
または
2005508346.tif 000019
である。他の四置換ピリミドピリミジンにおいて、各ZはNであり、かつ2つの連結されたR1基の組合せは-(CH2)5-であり、各Z'はNであり、かつ各々の連結されたR1基は-CH2CH2OHである。
【００３４】
例示的な四置換ピリミドピリミジンは、2,6-二置換4,8-ジベンジルアミノピリミド[5,4-d]ピリミジンであり、これには例えば、モピダモール、一酢酸ジピリダモール、NU3026（2,6-ジ-(2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-イル)-メトキシ-4,8-ジ-ピペリジノピリミドピリミジン）、NU3059（2,6-ビス-(2,3-ジメチオキシプロポキシ)-4,8-ジ-ピペリジノピリミドピリミジン）、NU3060（2,6-ビス[N,N-ジ(2-メトキシ)エチル]-4,6-ジ-ピペリジノピリミドピリミジン）、およびNU3076（2,6-ビス(ジエタノールアミノ)-4,8-ジ-4-メトキシベンジルアミノピリミド-ピリミジン）が含まれる（例えば、Curtinら、Br.J.Cancer 80:1738-1746、1999を参照されたい）。
【００３５】
治療法
本発明による組合せ治療法は、単独で、または別の治療法と併用して実施されてもよく、家庭で、医院で、診療所で、病院の外来部門で、または病院で提供されてもよい。治療は、一般に、医師が治療法の効果を綿密に観察し、必要とされる任意の調整を行なうことができるように、病院で開始される。組合せ治療法の期間は、治療する免疫炎症疾患の型、患者の年齢および容態、患者の疾病の段階および型、どのように患者が治療に応答するかに依存する。さらに、免疫炎症疾患を発症する危険性がより高い人（例えば、遺伝的な素因があるか、または以前に免疫炎症疾患に罹患したことがある人）は、炎症応答を阻害または遅延させるために予防的な治療を受けてもよい。
【００３６】
組合せの各成分の用量、頻度および投与形態は、独立して制御され得る。例えば、ある化合物を1日3回経口投与してもよく、一方で第二の化合物を1日1回筋肉内投与してもよい。組合せ治療法は、患者の身体が、依然として予見されない任意の副作用からの回復の機会を有するように、休止期間を含む断続的なサイクルで与えられ得る。化合物はまた、1回の投与により両方の化合物が送達されるように一緒に製剤化されてもよい。
【００３７】
薬学的組成物の製剤
組合せの各化合物の投与は、他の成分と組み合わせて、標的領域に到達した際に抗炎症性である化合物の濃度を生じる、任意の適切な手段により得る。化合物は、任意の適切な量で任意の適切な担体物質に含まれてもよく、一般に、組成物の全重量の1〜95重量％の量で存在する。組成物は、経口、非経口（例えば静脈内、筋肉内）、直腸、皮膚、鼻腔、膣内、吸入、皮膚（パッチ）、または点眼投与経路に適した剤形で提供され得る。従って、組成物は、例えば錠剤、カプセル剤、丸剤、散剤、顆粒剤、懸濁剤、乳剤、液剤、ゲル（ヒドロゲルを含む）、ペースト、軟膏、クリーム、硬膏、水薬、浸透性の送達装置、坐剤、浣腸、注射液、インプラント、噴霧、またはエアゾールの形態であり得る。薬学的組成物は、慣用的な薬学的実践に従って製剤化され得る（例えばRemington：The Science and Practice of Pharmacy（第20版）、A.R.Gennaro編、Lippincott Williams & Wilkins、2000およびEncyclopedia of Pharmaceutical Technology、J.SwarbrickおよびJ.C.Boylan編、1988-1999、Marcel Dekker、ニューヨークを参照されたい）。
【００３８】
本発明による薬学的組成物は、実質的に投与の直後か、または投与後の任意の所定の時間または期間の後に活性化合物を放出するように製剤化され得る。後者のタイプの組成物は、一般に放出制御製剤として知られ、これには（i）長期間にわたり体内で実質的に一定の薬物濃度を生じる製剤；（ii）所定の遅延時間の後に長期間にわたり体内で実質的に一定の薬物濃度を生じる製剤；（iii）血漿中の活性薬物物質レベルの変動（鋸刃状の動態パターン）を伴う望ましくない副作用を最小限にすると同時に、比較的一定の有効な薬物レベルを体内で維持することにより、所定の期間中、薬物作用を保持する製剤；（iv）例えば疾病組織もしくは器官の付近に、またはその中に放出制御組成物を空間的に配置することにより薬物作用を局在させる製剤；ならびに（v）薬物を特定の標的細胞型に送達するための担体または化学的誘導体を使用することにより、薬物作用を標的化する製剤が含まれる。
【００３９】
化合物が、単独または組合せで、（i）狭い治療指数（すなわち、有害な副作用または毒性反応を導く血漿中濃度と、治療効果を導く血漿中濃度との間の差が小さい；一般に、治療指数TIは、半有効量（ED50）に対する半致死量（LD50）の比として定義される）；（ii）胃腸管における狭い吸収窓（absorption window）；または（iv）血漿中レベルを治療レベルに維持するために1日の間に頻繁に投与する必要があるような、非常に短い生物学的半減期を有する場合、放出制御製剤の形態での化合物の投与が特に好まれる。
【００４０】
問題の化合物の放出速度が代謝速度を上回る放出制御を得るために、多くの戦略のうちのいずれかを追求することができる。1つの例において、放出制御は、例えば種々の型の放出制御組成物およびコーティングを含む、種々の製剤パラメータおよび成分を適切に選択することにより得られる。従って、薬物は適切な賦形剤を用いて薬学的組成物に製剤化され、これは投与時に薬物を制御された様式で放出する。例には、1単位または複数単位の錠剤またはカプセル剤組成物、油溶液、懸濁液、乳剤、マイクロカプセル、マイクロスフェア、ナノ粒子、パッチ、およびリポソームが含まれる。
【００４１】
経口用途のための固体剤形
経口用途のための製剤には、無毒性の薬学的に許容される賦形剤と混合された活性成分（群）を含む錠剤が含まれる。これらの賦形剤は、例えば、不活性希釈剤または充填剤（例えばスクロース、ソルビトール、糖、マンニトール、微結晶セルロース、ジャガイモデンプンを含むデンプン、炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、またはリン酸ナトリウム）；造粒剤および崩壊剤（例えば微結晶セルロースを含むセルロース誘導体、ジャガイモデンプンを含むデンプン、クロスカルメロースナトリウム、アルギン酸塩、またはアルギン酸）；結合剤（例えばスクロース、グルコース、ソルビトール、アカシア、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、デンプン、予めゼラチン化されたデンプン、微結晶セルロース、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、ポリビニルピロリドン、またはポリエチレングリコール）；ならびに潤滑剤、滑沢剤、および抗粘着剤（例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸、シリカ、水素化植物油、またはタルク）であり得る。他の薬学的に許容される賦形剤は、着色剤、香味剤、可塑剤、湿潤剤、緩衝剤などであり得る。
【００４２】
錠剤はコーティングされていなくてもよく、または任意で胃腸管における崩壊および吸収を遅延し、それによってより長時間にわたり持続した作用を提供するように、既知の技術によりコーティングされていてもよい。コーティングは、予め決められたパターンで活性薬物物質を放出するように適合されていても（例えば、放出制御製剤を得るために）、または胃を通過する後まで活性薬物物質を放出しないように適合していてもよい（腸溶性コーティング）。コーティングは、糖衣、フィルムコーティング（例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、メチルヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、アクリレートコポリマー、ポリエチレングリコールおよび／またはポリビニルピロリドンをベースとする）、または腸溶性コーティング（例えば、メタクリル酸コポリマー、セルロースアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート、ポリビニルアセテートフタレート、シェラック、および／またはエチルセルロースをベースとする）であり得る。さらに、例えばモノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルなどの時間遅延材料を使用してもよい。
【００４３】
固体錠剤組成物は、組成物を望ましくない化学変化（例えば活性薬物物質の放出前の化学的分解）から防御するのに適合したコーティングを含み得る。コーティングは、Encyclopedia of Pharmaceutical Technology（前記）に記載されたものと類似した様式で固体剤形に適用され得る。
【００４４】
2つの薬物は錠剤中で一緒に混合されていても、または仕切られていてもよい。1つの例において、第二の薬物のかなりの部分が、第一の薬物の放出前に放出されるように、第一の薬物は錠剤の内側に含まれ、第二の薬物は錠剤の外側に含まれる。
【００４５】
経口用途のための製剤は、咀嚼可能な錠剤として与えられても、または硬ゼラチンカプセル（活性成分は不活性固体希釈剤（例えばジャガイモデンプン、ラクトース、微結晶セルロース、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、またはカオリン）と混合されている）もしくは軟ゼラチンカプセル（活性成分は水または油状媒体、例えばピーナッツ油、流動パラフィン、もしくはオリーブ油と混合されている）として示されてもよい。散剤および顆粒剤は、例えばミキサー、流動床装置または噴霧乾燥装置を使用し、慣用的な方法で、錠剤およびカプセル剤について前記した成分を使用して調製し得る。
【００４６】
放出制御経口剤形
経口用途のための放出制御組成物は、例えば、活性薬物物質の溶出および／または拡散を制御することにより、活性薬物を放出するように構築され得る。
【００４７】
溶出または拡散の放出制御は、化合物の錠剤、カプセル剤、ペレット、または顆粒製剤の適切なコーティングにより、または、化合物を適切なマトリックスに取り込むことにより達成され得る。放出制御コーティングは、前記したコーティング物質の1つもしくは複数、および／または、例えばシェラック、蜜蝋、グリコワックス（glycowax）、カスターワックス、カルナバワックス、ステアリルアルコール、モノステアリン酸グリセリル、ジステアリン酸グリセリル、パルミトステアリン酸グリセロール、エチルセルロース、アクリル樹脂、dl-ポリ乳酸、セルロースアセテートブチレート、ポリビニルクロリド、ポリビニルアセテート、ビニルピロリドン、ポリエチレン、ポリメタクリレート、メチルメタクリレート、2-ヒドロキシメタクリレート、メタクリレートヒドロゲル、1,3ブチレングリコール、エチレングリコールメタクリレート、および／またはポリエチレングリコールを含み得る。放出制御マトリックス製剤において、マトリックス材料はまた、例えば水和メチルセルロース、カルナバワックスおよびステアリルアルコール、カルボポール934、シリコン、トリステアリン酸グリセリル、メチルアクリレート-メチルメタクリレート、ポリ塩化ビニル、ポリエチレン、ならびに／またはハロゲン化フルオロカーボンを含み得る。
【００４８】
主張される組合せの1つまたは複数の化合物を含む放出制御組成物はまた、浮遊錠剤または浮遊カプセル剤（すなわち、経口投与時に一定時間の間、胃内容物の上部で浮遊する錠剤またはカプセル剤）の形態であり得る。化合物（群）の浮遊錠剤製剤は、薬物（群）と、賦形剤および20〜75％w/wの親水コロイド、例えばヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、またはヒドロキシプロピルメチルセルロースとの混合物を造粒することにより調製され得る。その後、得られた顆粒を圧縮して錠剤にすることができる。胃液と接触すると、錠剤は、実質的に水不透過性のゲル障壁をその表面の周囲に形成する。このゲル障壁は、濃度を1未満に維持するのに関与し、これにより錠剤は胃液中の浮遊物として留まることができる。
【００４９】
経口投与のための液体
水の添加により水性懸濁液を調製するのに適した粉末、分散性粉末、または顆粒は、経口投与のための都合のよい剤形である。懸濁液としての製剤は、活性成分を、分散剤または湿潤剤、懸濁剤、および1種または複数種の保存剤との混合物で提供する。適切な分散剤または湿潤剤は、例えば、天然ホスファチド（例えばレシチン、もしくは酸化エチレンと脂肪酸の縮合生成物、長鎖脂肪族アルコール、または脂肪酸に由来する部分エステル）、およびヘキシトールまたはヘキシトール無水物（例えばステアリン酸ポリオキシエチレン、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートなど）である。適切な懸濁剤は、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、アルギン酸ナトリウムなどである。
【００５０】
非経口組成物
薬学的組成物はまた、慣用的な無毒性の薬学的に許容される担体および補助剤を含む剤形、製剤で、または適切な送達装置もしくはインプラントを介して、注射、点滴、またはインプラント（静脈内、筋肉内、皮下など）により、非経口的に投与され得る。このような組成物の製剤および調製物は、薬学的製剤の分野の当業者には周知である。製剤は、Remington:The Science and Practice of Pharmacy（前記）に見出され得る。
【００５１】
非経口用途の組成物は、単位剤形で（例えば1回量のアンプルで）または数回用量を含むバイアルで提供されてもよく、適切な保存剤が添加されてもよい（下記を参照されたい）。組成物は、溶液、懸濁液、乳液、点滴装置、もしくはインプラント用の送達装置の形態であってもよく、または水または別の適切な溶剤で使用前に再構成される乾燥粉末として与えられてもよい。活性薬物（群）とは別に、前記組成物は、適切な非経口的に許容される担体および／または賦形剤を含んでいてもよい。活性薬物（群）は、放出制御のために、マイクロスフェア、マイクロカプセル、ナノ粒子、リポソームなどに組み込まれ得る。さらに、組成物は、懸濁剤、可溶化剤、安定剤、pH調整剤、および／または分散剤を含み得る。
【００５２】
前記に示したように、本発明による薬学的組成物は、無菌注射に適した形態であり得る。このような組成物を調製するために、適切な活性薬物（群）を、非経口的に許容される液体溶剤に溶解または懸濁する。使用され得る許容される溶剤および溶媒には、水、適切な量の塩酸、水酸化ナトリウムまたは適切な緩衝液の添加により適切なpHに調整した水、1,3-ブタンジオール、リンガー液、および等張塩化ナトリウム溶液がある。水性製剤はまた、1種または複数種の保存剤（例えばp-ヒドロキシ安息香酸メチル、エチルまたはn-プロピル）を含み得る。化合物の1つが、少しまたはわずかしか水に溶けない場合、溶解増強剤または可溶化剤を添加することができ、または溶媒は、10〜60％w/wのプロピレングリコールなどを含み得る。
【００５３】
放出制御非経口組成物
放出制御非経口組成物は、水性懸濁液、マイクロスフェア、マイクロカプセル、磁気マイクロスフェア、油性溶液、油性懸濁液、または乳液の形態であり得る。または、活性薬物（群）は、生物適合性の担体、リポソーム、ナノ粒子、インプラント、または点滴装置に組み込まれ得る。
【００５４】
マイクロスフェアおよび／またはマイクロカプセルの調製に使用される材料は、例えばポリガラクチン、ポリ-(イソブチルシアノアクリレート)、ポリ(2-ヒドロキシエチル-L-グルタミン)およびポリ(乳酸)などの生分解性／生物侵食性ポリマーである。放出制御非経口製剤を製剤化する場合に使用され得る生物適合性担体は、炭水化物（例えばデキストラン）、タンパク質（例えばアルブミン）、リポタンパク質、または抗体である。インプラントに使用される材料は、非生分解性（例えばポリジメチルシロキサン）または生分解性（例えばポリ(カプロラクトン)、ポリ(乳酸)、ポリ(グリコール酸)、もしくはポリ(オルトエステル)）であり得る。
【００５５】
直腸組成物
直腸適用のための、組成物の適切な剤形は、坐剤（乳液または懸濁液型）、および直腸ゼラチンカプセル（溶液または懸濁液）を含む。典型的な坐剤製剤では、活性薬物（群）を、ココアバター、エステル化脂肪酸、グリセリン化ゼラチンなどの適切な薬学的に許容される坐剤基剤、およびポリエチレングリコールおよびポロオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルなどの種々の水溶性基剤または分散性基剤と合わせる。種々の添加剤、増強剤、または界面活性剤を組み込んでも良い。
【００５６】
吸入用の組成物
吸入による投与のための、典型的な剤形には、鼻腔スプレーおよびエアゾールが含まれる。典型的な鼻腔製剤では、活性成分（群）を適切な溶剤に溶解または分散する。薬学的に許容される溶剤および賦形剤（ならびに、希釈剤、増強剤、香味剤、および保存剤などの、組成物に存在する他の薬学的に許容される材料）は、医薬を製剤化する分野の当業者により理解される様式で、慣用的な薬学的実践に従って選択される。
【００５７】
経皮および局所組成物
薬学的組成物はまた、慣用的な無毒性の薬学的に許容される担体および賦形剤を含む剤形または製剤（マイクロスフェアおよびリポソームを含む）で、経皮吸収のために皮膚上に局所的に投与され得る。製剤には、クリーム、軟膏、ローション剤、リニメント剤、ゲル、ヒドロゲル、液剤、懸濁剤、粘着剤、スプレー、ペースト、硬膏、および他の種類の経皮薬物送達システムが含まれる。薬学的に許容される担体または賦形剤には、乳化剤、抗酸化剤、緩衝剤、保存剤、湿潤剤、浸透増強剤、キレート剤、ゲル形成剤、軟膏基剤、香料、および皮膚保護剤が含まれ得る。
【００５８】
乳化剤の例は、天然ガム（例えばアカシアガムまたはトラガカントガム）および天然ホスファチド（例えば大豆レシチンおよびモノオレイン酸ソルビタン誘導体）である。抗酸化剤の例は、ブチル化ヒドロキシアニソール（BHA）、アスコルビン酸およびその誘導体、トコフェロールおよびその誘導体、ブチル化ヒドロキシアニソール、ならびにシステインである。保存剤の例は、パラベン、例えばp-ヒドロキシ安息香酸メチルもしくはプロピル、および塩化ベンザルコニウムである。湿潤剤の例は、グリセリン、プロピレングリコール、ソルビトール、および尿素である。浸透増強剤の例は、プロピレングリコール、DMSO、トリエタノールアミン、N,N-ジメチルアセトアミド、N,N-ジメチルホルムアミド、2-ピロリドンおよびその誘導体、テトラヒドロフルフリルアルコール、およびAZONE（登録商標）である。キレート剤の例は、EDTAナトリウム、クエン酸、およびリン酸である。ゲル形成剤の例は、CARBOPOL（登録商標）、セルロース誘導体、ベントナイト、アルギン酸塩、ゼラチン、およびポリビニルピロリドンである。軟膏基剤の例は、蜜蝋、パラフィン、パルミチン酸セチル、植物油、脂肪酸のソルビタンエステル（Span）、ポリエチレングリコール、および脂肪酸とエチレンオキシドのソルビタンエステル間縮合生成物（例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（TWEEN（登録商標））である。
【００５９】
皮膚への局所適用のための前記した薬学的組成物はまた、治療する身体部分上または身体部分の近くへの局所投与と関連して使用され得る。組成物は、直接適用するため、または身体の関連した開口部（群）（例えば、直腸、尿道、膣、または口腔の開口部）に導入するために適合され得る。組成物は、包帯もしくは代替的に硬膏、パッド、スポンジ、細片、または他の形態の適切な柔軟な材料などの特別な薬物送達装置を用いて適用され得る。
【００６０】
放出制御経皮組成物および局所組成物
薬物の放出および経皮浸透にわたって速度制御を提供するいくつかの手法が存在し、これには、膜緩和システム（membrane-moderated system）、粘着性拡散制御システム、マトリックス分散型システム、およびマイクロレザバーシステムが含まれる。放出制御経皮組成物および／または局所組成物は、前記の手法の適切な混合を使用することにより得られる。
【００６１】
膜緩和システムにおいて、活性薬物は、金属プラスチック積層物（laminate）などの薬物不透過性積層物、および、微孔性または無孔性ポリマー膜（例えばエチレン-酢酸ビニルコポリマー）などの速度制御ポリマー膜から成形された、浅い区画に完全に封入されるレザバー中に存在する。活性化合物は、速度制御ポリマー膜を通してのみ放出される。薬物レザバー中で、活性薬物物質は、固体ポリマーマトリックスに分散されていても、またはシリコン液などの粘性液体媒体中に懸濁されていてもよい。ポリマー膜の外表面上に粘着ポリマーの薄層を適用して、皮膚表面と経皮システムとの密接な接触を達成する。粘着ポリマーは、好ましくは活性薬物と適合性である低アレルギー誘発性ポリマーである。
【００６２】
粘着性拡散制御システムでは、活性薬物のレザバーは、活性薬物を粘着ポリマーに直接分散させ、その後活性薬物を含む粘着物を、実質的に薬物不透過性の金属プラスチック裏材の平らなシートに延ばし、薄い薬物レザバー層を形成することにより形成される。マトリックス分散型システムは、活性薬物物質を親水性または親油性ポリマーマトリックスに実質的に均一に分散させ、その後薬物含有ポリマーを、実質的に十分に明確な表面積および厚さを有するディスクへと成形することによって、活性薬物物質のレザバーが形成されることを特徴とする。粘着ポリマーは、外周に沿って延びて、ディスクの周りに粘着片を形成する。
【００６３】
マイクロレザバーシステムでは、活性物質のレザバーは、まず薬物固体を水溶性ポリマーの水溶液に懸濁し、その後薬物懸濁液を親油性ポリマーに分散させ、薬物レザバーの多数の顕微的な球体を形成することにより形成される。
【００６４】
用量
主張される組合せの各化合物の用量は、投与法、治療する容態、容態の重度、容態を治療するかまたは予防するか、ならびに治療する人の年齢、体重、および健康状態を含むいくつかの因子に依存する。さらに、特定の患者に関する薬理ゲノミクス（治療の薬物動態的、薬力学的、または効力プロファイルに及ぼす遺伝子型の効果）情報が、使用される用量に影響し得る。
【００６５】
前記のように、問題の化合物は、錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、またはシロップの形態で経口投与され得るか、または坐剤の形態で直腸投与され得る。化合物の非経口投与は、例えば食塩水溶液の形態で、または化合物をリポソームに組み込み、適切に実施される。化合物自体が、溶解するほど十分に可溶性ではない場合、エタノールなどの可溶化剤を適用できる。以下に、例示目的で、ジピリダモールおよびフルドロコルチゾンの用量を記載する。
【００６６】
投与経路
四置換ピリミドピリミジンの経口、筋肉内、皮下、局所、吸入、直腸、膣内、および点眼投与では、用量は、通常約0.5〜800mg/日、好ましくは約18〜600mg/日、より好ましくは約50〜400mg/日である。投与は1日あたり1回から4回、1日から1年の間であってよく、患者の生涯にわたる場合さえある。慢性の長期投与が多くの場合において適応となる。1600mg/日までの用量が必要な場合もある。四置換ピリミドピリミジンの静脈内投与では、用量は、通常約0.1〜200mg/日、好ましくは約0.5〜150mg/日、より好ましくは約1〜100mg/日である。投与は1日1回から4回であり得る。全身投与により、好ましくは0.1〜7.0μM、より好ましくは0.5〜5.0μM、最も好ましくは1.0〜2.0μMの定常血漿中濃度が得られる。
【００６７】
四置換ピリミドピリミジンと組み合わせて使用するためのコルチコステロイドの用量は、通常約0.1〜1500mg/日、好ましくは約0.5〜30mg/日、より好ましくは約0.5〜10mg/日である。投与は、1日あたり1回から4回、1日から1年の間であってよく、患者の生涯にわたる場合さえある。慢性の長期投与が多くの場合において適応となる。3000mg/日までの用量が必要な場合もある。
【００６８】
以下の実施例は本発明を例示するためのものである。それらは決して本発明を限定するものではない。
【００６９】
実施例1：対化合物の混合組合せの連続希釈マトリックスの調製
16mg/mlのジピリダモールおよび1.6mg/mlの酢酸フルドロコルチゾンの保存溶液（シグマ-アルドリッチ、ミズーリ州セントルイス；それぞれカタログ番号D9766およびF6127）を、ジメチルスルホキシド（DMSO）中で作製した。ジピリダモールマスタープレートは、25μlの濃縮保存溶液を、75μlの無水DMSOを予め充填しておいたポリプロピレン384ウェル保存プレートの縦列3、9、および15（横列CからN）に添加することにより作製した。TomTec Quadra Plus液体ハンドラーを使用して、25μlのジピリダモール保存溶液を、隣接する縦列（縦列4〜7、10〜13、16〜19）中に4回連続希釈した。六番目の縦列（8、14、および20）は、化合物を全く受容せず、溶剤対照として機能した。フルドロコルチゾンマスタープレートは、25μlの濃縮保存溶液を、適切なマスターポリプロピレン384ウェル保存プレートの適切なウェル（横列C、縦列3〜8；横列C、縦列9〜14；横列C、15〜20；横列I、縦列3〜8；横列I、縦列9〜14；横列I、縦列15〜20）に添加することにより作製した。これらのマスタープレートは、75μlの無水DMSOで予め充填しておいた。TomTec Quadra Plus液体ハンドラーを使用して、25μlを、隣接する横列（横列D〜G、およびJ〜M）中に4回連続的に希釈した。六番目の横列（HおよびN）は全く化合物を受容せず、溶剤対照として機能した。マスタープレートを密封し、使用準備ができるまで-20℃で保存した。
【００７０】
ジピリダモールおよびフルドロコルチゾンマスタープレートの各々から1μlを、100μlの培地（RPMI；ギブコBRL、#11875-085）、10％ウシ胎児血清（ギブコBRL、#25140-097）、2％ペニシリン／ストレプトマイシン（ギブコBRL、#15140-122））を含む希釈プレートに、TomTec Quadra Plus液体ハンドラーを使用して移すことにより、最終ジピリダモール／フルドロコルチゾン組合せプレートを作製した。その後、この希釈プレートを混合し、10μlのアリコートを、TNFα分泌を活性化するための適切な刺激剤を含むRPMI培地40μl/ウェルで予め充填しておいた最終アッセイプレートに移した（以下を参照されたい）。
【００７１】
実施例2：ジピリダモールおよびフルドロコルチゾンの組合せによるTNFα抑制活性についてのアッセイ法
化合物希釈マトリックスを、TNFαELISA法を使用してアッセイした。簡潔には、ポリスチレン384ウェルプレート（NalgeNunc）の各ウェル内に含まれる100μlの希釈ヒト白血球の懸濁液を、最終濃度10ng/mlのホルボール12-ミリステート13-アセテート（シグマ）および750ng/μlのイオノマイシン（シグマ）での処理により、TNFαを分泌するように刺激した。種々の濃度の各試験化合物を、刺激時に加えた。加湿インキュベーター中37℃で16〜18時間インキュベートした後、プレートを遠心分離し、抗TNF抗体（PharMingen、#18631D）でコーティングされた白色不透明なポリスチレン384ウェルプレート（NalgeNunc、Maxisorb）に上清を移した。2時間インキュベートした後、プレートを、0.1％Tween20（ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート）を含むリン酸緩衝食塩水（PBS）で洗浄（Tecan Power Washer 384）し、ビオチン標識された別の抗TNF抗体（PharMingen、18642D）およびストレプトアビジンに連結されたセイヨウワサビペルオキシダーゼ（HRP）（PharMingen、13047E番）と共にさらに1時間インキュベートした。プレートを0.1%Tween20/PBSで洗浄した後、HRP基質（ルミノール、過酸化水素、およびパラ-ヨードフェノールなどの増強剤を含む）を各ウェルに加え、光強度を、LJLAnalystルミノメーターを使用して測定した。対照ウェルは、最終濃度1μg/mlのシクロスポリンA（シグマ）を含んだ。
【００７２】
ジピリダモールおよびフルドロコルチゾンは一緒になって、ホルボール12-ミリステート13-アセテートおよびイオノマイシンで刺激された血液においてTNFα分泌を抑制することができた。表1および表2で分かるように、ジピリダモールは、フルドロコルチゾンの強度を60倍増強できた。947nMの濃度では、フルドロコルチゾン単独では、TNFα分泌を39％阻害した。124nMのジピリダモールを、僅か15nMの濃度のフルドロコルチゾンに添加することにより、TNFα分泌は39％阻害された（表1）。全薬物種を947nMから163nMへと、80％を超えて減少させたが効力は維持された。2μMのジピリダモールの存在下で、50％のTNFα阻害が、僅か4nMのフルドロコルチゾンにより達成される。この阻害レベルは、重度の鉱質コルチコイド誘発副作用を引き起こすと考えられる濃度のフルドロコルチゾンのみでは不可能である。ジピリダモールによるフルドロコルチゾン活性の増強は、二次スクリーンでも観察された（表2）。ここでも低用量の495nMのジピリダモールが、フルドロコルチゾンの強度を135倍超に増強した。具体的に、TNFα分泌の52％減少を達成するのに、単独で947nMのフルドロコルチゾンが必要であった。類似の減少（49％）が、7nMのフルドロコルチゾンと495nMのジピリダモールとの組合せで測定された。さらに、248nMのジピリダモールの添加により、59nMという低いフルドロコルチゾン濃度で、TNFα分泌阻害に対する過最大の効果がもたらされた。
【００７３】
（表１）2つのプレートのフルドロコルチゾン対ジピリダモールの平均結果の一次スクリーンデータ
（P/I誘導白血球からのTNFα抑制（％））
2005508346.tif 000020
【００７４】
（表２）2つのプレートのフルドロコルチゾン対ジピリダモールの平均結果の二次スクリーンデータ
（P/I誘導白血球からのTNFα抑制（％））
2005508346.tif 000021
【００７５】
実施例3：対化合物の混合組合せの連続希釈マトリックスの調製
ジピリダモールおよびプレドニゾロンの化合物マトリックスを、実施例1の方法に従って調製した。ジピリダモールの最初の保存溶液は16mg/mlであり、プレドニゾロンは1.6mg/mlであった。
【００７６】
実施例4：ジピリダモールおよびプレドニゾロンの組合せによる、TNFα抑制活性に関するアッセイ法
実施例3の化合物希釈マトリックスを、実施例2のTNFαELISA法を使用してアッセイした。結果を表3に示す。ジピリダモールおよびプレドニゾロンは一緒になって、ホルボール12-ミリステート13-アセテートおよびイオノマイシンで刺激した血中のTNFα分泌を、いずれか単独の化合物よりもより大きく抑制することができた。具体的には、ジピリダモールは、プレドニゾロンの強度を大いに増加させた。プレドニゾロン単独では、250nMの濃度で、TNFα分泌を38％抑制することができた。同じレベルの抑制（41％）が、2μMのジピリダモールと組合せた僅か1nMのプレドニゾロンにより達成できた。これは、プレドニゾロンの強度の250倍超の移行を示す。さらに、2μMのジピリダモールを250nMのプレドニゾロンに添加することにより、プレドニゾロン単独（38％）に比べて過最大の効果（57％）が得られた。それ故、低用量のプレドニゾロンおよびジピリダモールの組合せにより、グルココルチコイドが誘発する副作用の高い危険性を伴わずに、以前では達成できなかったレベルまでTNFαが阻害される。
【００７７】
（表３）2つのプレートのプレドニゾロン対ジピリダモールの平均結果の一次スクリーンデータ
（P/I誘導白血球からのTNFα抑制（％））
2005508346.tif 000022
【００７８】
他の態様
本発明の記載された方法およびシステムの種々の改変および変形が、本発明の範囲および趣旨から逸脱することなく、当業者に明らかであると考えられる。本発明を特定の望ましい態様に関連して記載してきたが、主張される本発明は、このような特定の態様に過度に限定されるべきではないことを理解すべきである。実際に、医学分野、免疫学分野、薬理学分野、内分泌学分野、または関連分野の当業者に明らかな、本発明を実施するための記載された様式の種々の改変が、本発明の範囲内であることが意図される。
【００７９】
本明細書に引用した全ての刊行物および特許出願は、個々の刊行物または特許出願が参照として明確にかつ個別に組み入れられるかのごとく、参照として本明細書に組み入れられる。
【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
2005508346.tif 000092