(57)【要約】本出願は式Iで表される化合物に関する：式中、PおよびQのうちの一方はOであり、PおよびQのもう一方はCHであり、QおよびPのいずれかでCHであるものとR3基を有している炭素原子との間に二重結合があり；YはOまたはSのいずれかであり；R1およびR2は独立に水素、任意で置換されたC1-7 アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、もしくはC5-20アリール基とすることができ、または、R1とR2が一緒に、任意で置換された、4から8個の環の原子を有する複素環を形成することができ；R3はフェニルまたはピリジル基で、それは-S-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-O-、-NRN-およびCRC1RC2-から選択された第1の架橋基によって任意で置換されたC5-20カルボアリール基と結合し；該フェニル基もしくはピリジル基、および任意で置換されたC5-20カルボアリール基は、さらに任意で第2の架橋基で連結され、任意で置換されたC5-7 環が形成されるようにし、該フェニルもしくはピリジル基はさらに任意で置換されたものである。2005521689.tif 000072
2005521689.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式I: 
【化１】
2005521689.tif 000069
（式中、
PおよびQのうちの一方はOであり、PおよびQのもう一方はCHであり、QおよびPのいずれかでCHであるものとR3基を有している炭素原子との間に二重結合があり；
YはOまたはSのいずれかであり；
R1およびR2は独立に水素、置換されていてもよいC1-7 アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、もしくはC5-20アリール基であり、または、R1とR2が一緒に、それらが結合している窒素原子と共に、置換されていてもよい、4から8個の環の原子を有する複素環を形成することができ；
R3はフェニルまたはピリジル基で、それは-S-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-O-、-NRN-およびCRC1RC2-から選択された第1の架橋基によって、置換されていてもよいC5-20カルボアリール基と結合し、そのカルボアリール基内では1個の芳香環の原子が窒素環原子で置き換えられていてもよく；
該フェニル基もしくはピリジル基、および置換されていてもよいC5-20カルボアリール基は、さらに第2の架橋基で連結されていてもよく、その架橋基はこれらの基の双方上で第1の架橋基と隣接して結合して、該フェニル基もしくはピリジル基およびC5-20カルボアリール基の双方と縮合された、置換されていてもよいC5-7 環が形成され、該フェニルもしくはピリジル基はさらに置換されていてもよく；
式中、RNは水素、エステル基、置換されていてもよいC1-7アルキル基、置換されていてもよいC3-20 ヘテロシクリル基、および置換されていてもよいC5-20アリール基から選択され；
ならびにRC1とRC2 は独立に、水素、置換されていてもよいC1-7アルキル基、置換されていてもよいC3-20ヘテロシクリル基、および置換されていてもよいC5-20アリール基から選択されたものである）
で表される化合物、ならびにその異性体、塩、溶媒和物、化学的に保護された形態、およびプロドラッグ。
【請求項２】
式Iaで表される、請求項１に記載の化合物。
【化２】
2005521689.tif 000070
【請求項３】
YがOである、請求項1または２のいずれかに記載の化合物。
【請求項４】
R1およびR2が、それらが結合している窒素原子とともに、6個の環の原子を有するヘテロ環を形成する、請求項1から3のいずれかに記載の化合物。
【請求項５】
R1およびR2が、それらが結合している窒素原子とともに、モルホリノおよびチオモルホリノから選択された基を形成する、請求項５に記載の化合物。
【請求項６】
該フェニルまたはピリジル基がフェニル基である、請求項１から５のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
R3における該フェニル環もしくはピリジル環、またはC5-20カルボアリール基が、アシルアミド、スルホンアミノ、エーテル、エステル、アミド、およびアシルからなる群から選択された置換基を有する、請求項１から６のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
R3が次の置換されていてもよい基から選択されたものである、請求項１から７のいずれかに記載の化合物。
【化３】
2005521689.tif 000071
【請求項９】
請求項１から８のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩および製薬上許容される担体または希釈剤を含んでなる組成物。
【請求項１０】
治療方法に用いるための請求項１から８のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項１１】
ATMの活性を阻害するための薬剤の調製における請求項１から８のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
【請求項１２】
癌治療の補助剤として使用するための薬剤、または電離放射線もしくは化学療法剤を用いた治療に対して腫瘍細胞を感受性化するための薬剤の調製における、請求項１から８のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
【請求項１３】
後天性免疫不全症候群を含む、レトロウイルスが媒介する疾患またはATMの阻害によって改善する疾患の治療のための薬剤の調製における、請求項１から８のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
【請求項１４】
細胞を、有効量の請求項１から８のいずれかに記載の化合物と接触させることを含んでなる、ATMのin vitroでの阻害方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はATM阻害剤として作用する化合物、その使用および合成に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒトのDNAは常に、主として酸化的代謝の副産物からの活性酸素中間体による攻撃に曝されている。活性酸素種はDNA一本鎖切断を産生させることができ、そのようなもの2つが非常に近接して生じた場合は、DNA二本鎖切断(DSB)が生じる。さらに、DNA複製フォークがダメージを受けた鋳型と遭遇すると一本鎖および二本鎖切断が誘導され、それらの切断は電離放射線(IR)およびある種の抗癌剤(例えば、ブレオマイシン、エトポシド、カンプトテシン)などの外来性作用物によって生じる。DSBはまた、部位特異的V(D)J組換え、これは機能を有する脊椎動物の免疫系の生成にきわめて重要なプロセスであるが、この組換えの中間体としても生ずる。DNA DSBが修復されないままとなった場合、または不正確に修復された場合には、変異および/または染色体の異常が誘発され、それが今度は細胞死をもたらしうる。DNA DBSによってもたらされる深刻な脅威に打ち勝つために、真核細胞はそれらの修復を媒介するいくつかの機作を発達させている。DNA修復のプロセスにきわめて重要なのは、その細胞にダメージを修復するための時間を与えるために、細胞の増殖を遅らせることである。DNA DSBの検出、およびこの情報の細胞周期機構へのシグナル伝達においてキイとなるタンパク質は、キナーゼ ATM (ataxia telangiectasia mutate, 毛細血管拡張性運動失調症の変異)である (DurocherとJackson (2001), "DNA-PK, ATM and ATR as sensors of DNA damage：variations on a theme?" Curr. Opin. Cell Biol., 13：225-31, Abraham(2001), Cell Cycle Checkpoint signaling through the ATM and ATR kinases. Genes Dev., 15：2177-96)。
【０００３】
ATMタンパク質は、そのカルボキシル末端領域中にキナーゼドメインと推定されるものがあるのでホスファチジルイノシトール(PI) 3-キナーゼファミリーのタンパク質の一員とされている〜350 kDaのポリペプチドである(Savitskyら, (1995), "A single ataxia telangiectasia gene with a product similar to PI-3 kinase", Science, 268：1749-53)。PI-3キナーゼそれ自身などの古典的なPI 3-キナーゼはシグナル伝達と細胞内のセカンドメッセンジャーとして働くイノシトール脂質のリン酸化に関与している(TokerとCantley (1997), "Signaling through the lipid products of phosphoinositide-3-OH kinase", Nature, 387：673-6で総説が述べられている)。しかし、ATMは、PI 3-キナーゼファミリーのサブセットと大部分の配列が類似しており、そのファミリーはATMと同様に、細胞周期の調節および/またはDNAの損傷の検出およびシグナル伝達に関与しているものである(KeithとSchreiber(1995)「PIK関連のキナーゼ：DNA修復、組換え、および細胞周期チェックポイント」"PIK-related kinase：DNA repair、 recombination、 and cell cycle checkpoints", Science, 270：50-1.  Zakian (1995), ATM-related genes: what do they tell us about functions of the human gene? Cell, 82：685-7)。特に、現在までのところ、PI 3-キナーゼファミリーのこのサブセットのメンバーのいずれかが脂質をリン酸化できるとの証拠はない。しかし、このファミリーのメンバーは全てセリン/トレオニンキナーゼ活性を有することが示されている。ATMは、DNAのDBS生成に応じて開始される種々の細胞周期チェックポイントシグナル伝達系路に関与するキイとなるタンパク質をリン酸化する(下記参照)。そのような下流のエフェクタータンパク質としてはp53、Chk2、NBS1/ニブリン、BRCA1、およびRad 17が挙げられる(Abraham, 2001)。
【０００４】
ATMは、毛細血管拡張性運動失調症(A-T)では変異している遺伝子の産物である(Savitskyら, (1995))。A-Tは人口100、000人あたり約一例発生する、ヒト常染色体劣性遺伝病である。A-Tは、進行性小脳変性、眼皮膚毛細血管拡張症、成長の遅延、免疫不全、癌の素因、および早発老化のいくつかの特徴を含む多数の衰弱症状によって特徴付けられる(LavinとShiloh (1997), "The genetic defect in ataxia-telangiectasia",  Annu. Rev.Immunol., 15：177-202; Shiloh (2001), "ATM and ATR ： networking cellular responses to DNA damege", Curr. Opin. Genet. Dev., 11：71-7)。細胞レベルでは、A-Tは染色体の不安定性が高度であり、放射線に抵抗性のDNA合成が起こり、電離放射線(IR)および放射線類似作用薬剤に高感受性であることが特徴である。さらに、A-T細胞は、DNA損傷に対してそのゲノムをDNA複製または有糸分裂の前に修復できるようにするためにそのDNA損傷に応答してその細胞周期を一旦止めると考えられている、放射線で誘発されるG1-S、S、およびG2-M細胞周期チェックポイントに異常がある。このことはおそらく部分的には、A-T細胞がIRに応答するp53の誘導を行わないかまたは非常に遅らせるという事実を反映したものであろう。事実、p53が媒介するその後の現象も、IR暴露後のA-T細胞中では不完全なものとなる。従って、ATMは、IRで誘導されるDNA損傷シグナル伝達系路中ではp53の上流で作用する。また、A-T細胞では、電離放射線の照射を受けた後にDNA二本鎖切断(DSB)が蓄積することが示されており、これはDSB修復が不完全であることを示唆している。
【０００５】
ATMがDNA DSBに対する細胞性応答の主要なレギュレーターであることは明らかである。従って、小分子を介するこのキナーゼを阻害すれば、DNA DSBを直接的または間接的に誘発する、電離放射線および化学療法の双方に対する感受性を細胞に持たせることになる。従ってATM阻害剤は癌の放射線療法および化学療法の補助剤として用いることができる。現在までに報告されているATMの阻害剤はカフェインとウォルトマンニンのみであり(Sarkariaら, (1999), "Inhibition of ATM and ATR kinase activities by the radiosensitizing agent、 caffeine" Cancer Res., 59：4375-82; Baninら, (1998), "Enhanced phosphorylation of p53 by ATM in response to DNA damage", Science, 281：1674-1677)、これらは放射線感受性化を生じさせるがその作用機作がATMの阻害によるものかどうかは明確ではなく、それはこれらの小分子がキナーゼ阻害剤としては非常に非特異的であるからである。
【０００６】
電離放射線が誘発するDNA損傷に応答するATMの機能は組織特異的であることが示されている。例えば、Atm nullマウス由来の線維芽細胞は放射線に感受性だが、Atm null ニューロンはIRで誘導されるアポトーシスがないので放射線に抵抗性である(Herzogら, (1998), "Requirement for Atm in ionizing radiation-induced cell death in the developing central nervous system",  Science, 280：1089-91)。従って、ATMの阻害剤は特定の細胞のコンテクストにおいて放射線防護性を示す可能性がある。
【０００７】
ATM阻害剤はまた、レトロウイルスが媒介する疾患の治療にも有用であろう。一定の条件下ではレトロウイルスDNAの安定な形質導入にはATM機能が必要である(Daniel ら, (2001), "Wortmannin potentiates integrase-mediated killing of lymphocytes and reduces the efficiency of stable transduction by retroviruses" Mol. Cell Biol., 21：1164-72)。従って、ATM阻害剤はレトロウイルスのインテグレーションをブロックする能力がある。
【０００８】
ATMはテロメア性の染色体の末端の長さの調節にきわめて重要な役割を果たしていることが知られている(Metcalfeら, (1996), "Accelerated telomere shortening in ataxia telangiectasia" Nat Genet., 13 ：350-3)。大多数の正常な細胞タイプではテロメア性の末端は細胞分裂毎に短くなる。過剰に短縮されたテロメアを有する細胞は分裂できない。従って、ATM阻害剤は癌性の、または前癌性の細胞の増殖能を限定させることによる癌の進行の防止に有用なものとなる可能性がある。さらに、ATMはテロメラーゼの酵素それ自体の一部ではないものと思われる(Metcalfら, (1996))。従って、ATM阻害剤は抗テロメラーゼ剤と協同して作用しうると考えられる。
【０００９】
A-T患者またはATM null マウス由来の細胞は培養液中で遺伝的にマッチしたATM陽性細胞よりも増殖が遅い。従って、ATM阻害剤はそれ自身の本来の状態で増殖阻害/抗増殖性を有しているのかもしれない。従って、ATM阻害剤は癌治療において細胞増殖抑制剤として用いることができる。
【００１０】
A-T患者は免疫不全を示す。このことは完全な機能を有する免疫系が作られるにはATMが必要であることを示している。従って、ATMの阻害剤は免疫系を調節するために用いることができる。
【００１１】
要約すれば、ATM阻害剤は腫瘍細胞を電離放射線またはDNA DSBを調節する化学療法に対して感受性となるようにし、テロメアの長さを制御する機作に変化を与え、レトロウイルスのインテグレーションをブロックし、免疫系に変化を与え、DNAの損傷が誘発するアポトーシスから特定の細胞タイプを防護する能力を有する。
【発明の開示】
【００１２】
本発明の発明者らはATMの阻害作用を示す化合物を見出した。
【００１３】
本発明の第1の態様では式Iで表される化合物：
【化１】
2005521689.tif 000003
【００１４】
およびその異性体、塩、溶媒和物、化学的に保護された形態、およびプロドラッグを提供し、式中：
PおよびQのうちの一方はOであり、PおよびQのもう一方はCHであり、QおよびPのいずれかでCHであるものとR3基を有している炭素原子との間に二重結合があり；
YはOまたはSのいずれかであり；
R1およびR2は独立に水素、任意で置換されたC1-7 アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、もしくはC5-20アリール基とすることができ、または、R1とR2が一緒に、それらが結合している窒素原子と共に、任意で置換された、4から8個の環の原子を有する複素環を形成することができ；
R3はフェニルまたはピリジル基で、それは-S-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-O-、-NRN-およびCRC1RC2-から選択された第1の架橋基によって任意で置換されたC5-20カルボアリール基と結合し、そのカルボアリール基内では1個の芳香環の原子が窒素環原子で置き換えられていてもよく；
該フェニル基もしくはピリジル基、および任意で置換されたC5-20カルボアリール基は、さらに任意で第2の架橋基で連結され、その架橋基はこれらの基の双方上で第1の架橋基の近傍に結合して、該フェニル基もしくはピリジル基およびC5-20カルボアリール基の双方と縮合された任意で置換されたC5-7 環が形成されるようにし、該フェニルもしくはピリジル基はさらに任意で置換されたものであり；
式中、RNは水素、エステル基、任意で置換されたC1-7アルキル基、任意で置換されたC3-20 ヘテロシクリル基ならびに任意で置換されたC5-20アリール基であり；
ならびにRC1とRC2 は独立に、水素、任意で置換されたC1-7アルキル基、任意で置換されたC3-20ヘテロシクリル基および任意で置換されたC5-20アリール基から選択されたものである。
【００１５】
従って、PがOでQがCHの場合には、該化合物は式(Ia)であり：
【化２】
2005521689.tif 000004
【００１６】
PがCHでQがOの場合には、該化合物は式(Ib)である。
【化３】
2005521689.tif 000005
【００１７】
本発明の第2の態様では、第1の態様の化合物および製薬上許容される担体または希釈剤を含んでなる組成物が提供される。
【００１８】
本発明の第3の態様では、第1の態様の化合物の治療方法における使用を提供する。
【００１９】
本発明の第4の態様では、第1の態様の化合物のATMの活性を阻害する薬剤の調製における使用を提供する。
【００２０】
本発明の第5の態様では、本発明の第1の態様で定義された化合物の、癌治療での補助として使用するための薬剤、または電離放射線もしくは化学療法剤を用いた治療に対して腫瘍細胞を感受性化するための薬剤の調製における使用を提供する。
【００２１】
本発明の第6の態様では、本発明の第1の態様で定義された化合物の、レトロウイルスが媒介する疾患またはATMを阻害することによって改善される疾患、それらには後天性免疫不全症候群が含まれるが、それらの疾患を治療するための薬剤の調製における使用を提供する。
【００２２】
本発明のさらに別の態様では、本明細書に記載の活性成分の、ヒトまたは動物の体の治療方法における使用、好ましくは医薬組成物の形態での使用を提供する。
【００２３】
本発明のまた別の態様では、in vitroまたはin vivoでのATMを阻害する方法を提供し、その方法は細胞を、有効量の本明細書に記載の活性化合物と接触させることを含んでなる。
【００２４】
定義
C1-7アルキル：本明細書で用いている「C1-7 アルキル」という用語は、炭素原子を1個から7個有するC1-7 炭化水素化合物から水素1原子を除去することによって得られる1価の分子部分であり、そのC1-7 炭化水素化合物は脂肪族化合物もしくは脂環式化合物、またはそれらの組み合わせとすることができ、その化合物は飽和したもの、部分的に不飽和のもの、または完全に不飽和のものとすることができる。
【００２５】
飽和直鎖状C1-7アルキル基の例としては、限定はされないが、メチル、エチル、n-プロピル、n-ブチル、およびn-ペンチル(アミル)が挙げられる。
【００２６】
飽和分枝C1-7アルキル基の例としては、限定はされないが、イソプロピル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、およびネオ-ペンチルが挙げられる。
【００２７】
飽和脂環式C1-7アルキル基(「C3-7シクロアルキル」基とも呼ばれる)の例としては、限定はされないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルのような基、ならびに、例えばこれらの基を含んでいる基である、メチルシクロプロピル、ジメチルシクロプロピル、メチルシクロブチル、ジメチルシクロブチル、メチルシクロペンチル、ジメチルシクロペンチル、メチルシクロヘキシル、ジメチルシクロヘキシル、シクロプロピルメチル、およびシクロヘキシルメチルなどの置換された基が挙げられる。
【００２８】
1個以上の炭素-炭素二重結合を有する不飽和C1-7 アルキル基(「C2-7アルケニル基」とも呼ばれる)の例としては、限定はされないが、エテニル(ビニル、-CH=CH2)、 2-プロペニル(アリル、 -CH-CH=CH2)、イソプロペニル(-C(CH3)=CH2)、ブテニル、ペンテニル、およびヘキセニルが挙げられる。
【００２９】
1個以上の炭素-炭素三重結合を有する不飽和C1-7 アルキル基(「C2-7アルキニル基」とも呼ばれる)の例としては、限定はされないが、エチニルおよび2-プロピニル(プロパルギル)が挙げられる。
【００３０】
1個以上の炭素-炭素二重結合を有する不飽和脂環式(カルボサイクリック)C1-7 アルキル基(「C3-7シクロアルケニル」とも呼ばれる)の例としては、限定はされないが、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、およびシクロヘキセニルなどの置換されていない基、ならびに、例えばそのような基を含んでいる基である、シクロプロペニルメチルおよびシクロヘキセニルメチルなどの置換された基が挙げられる。
【００３１】
C3-20 ヘテロシクリル： 本明細書で用いている「C3-20 ヘテロシクリル」という用語は、C3-20 複素環化合物の環の原子から水素原子1個を除去することによって得られた1価の分子部分を意味し、該化合物は環を1つ、または２個以上有し(例えば、スピロ、縮合環、架橋されたもの)、3から20個の環の原子を有し、それらの原子の1から10個は環のヘテロ原子であり、その環(1個または複数個)のうちの少なくとも1つが複素環である。好ましくは、環は各々が3から7個の環の原子を有し、そのうちの1から4個が環のヘテロ原子である。「C3-20」とは環の原子数を、それが炭素原子、ヘテロ原子のいずれであっても、示すものである。
【００３２】
環の原子として窒素を1個有しているC3-20ヘテロシクリル基としては、限定はされないが、アジリジン、アゼチジン、ピロリジン(テトラヒドロピロール)、ピロリン(例えば3-ピロリン、2、5-ジヒドロピロール)、2H-ピロールまたは3H-ピロール(イソピロール、イソアゾール)、ピペリジン、ジヒドロピリジン、テトラヒドロピリジン、およびアゼピン由来のものが挙げられる。
【００３３】
環の原子に酸素を1個有しているC3-20 ヘテロシクリル基の例としては、限定はされないが、オキシラン、オキセタン、オキソラン(テトラヒドロフラン)、オキソール(ジヒドロフラン)、オキサン(テトラヒドロピラン)、ジヒドロピラン、ピラン(C6)、およびオキセピン由来のものが挙げられる。置換されたC3-20ヘテロシクリル基としては環状の糖、例えば、フラノースおよびピラノース、それらとしては、例えばリボース、リキソース、キシルロース、ガラクトース、ショ糖、果糖、およびアラビノースが挙げられる。
【００３４】
環の原子に1個のイオウを有するC3-20ヘテロシクリル基の例としては、限定はされないが、チイラン、チエタン、チオラン(テトラヒドロチオフェン)、チアン(テトラヒドロチオピラン)、およびチエパン由来のものが挙げられる。
【００３５】
環の原子に酸素を2個有しているC3-20 ヘテロシクリル基の例としては、限定はされないが、ジオキソラン、ジオキサン、およびジオキセパン由来のものが挙げられる。
【００３６】
環の原子に窒素を2個有しているC3-20 ヘテロシクリル基の例としては、限定はされないが、イミダゾリジン、ピラゾリジン(ジアゾリジン)、イミダゾリン、ピラゾリン(ジヒドロピラゾール)、およびピペラジン由来のものが挙げられる。
【００３７】
環の原子に窒素を1個および酸素を1個有しているC3-20 ヘテロシクリル基の例としては、限定はされないが、テトラヒドロオキサゾール、ジヒドロオキサゾール、テトラヒドロイソキサゾール、ジヒトロイソキサゾール、モルホリン、テトラヒドロオキサジン、ジヒドロオキサジン、およびオキサジン由来のものが挙げられる。
【００３８】
環の原子に酸素を1個およびイオウを1個有しているC3-20 ヘテロシクリル基の例としては、限定はされないが、オキサチオラン、およびオキサチアン(チオキサン)由来のものが挙げられる。
【００３９】
環の原子に窒素を1個およびイオウを1個有しているC3-20 ヘテロシクリル基の例としては、限定はされないが、チアゾリン、チアゾリジン、およびチオモルホリン由来のものが挙げられる。
【００４０】
C3-20 ヘテロシクリル基のその他の例としては、限定はされないが、オキサジアジン、およびオキサチアジンが挙げられる。
【００４１】
1個以上のオキソ(=O)基をさらに有するヘテロシクリル基の例としては、限定はされないが、次のものに由来するものが挙げられる：
C5複素環、例えばフラノン、ピロン、ピロリドン(ピロリジノン)、ピラゾロン(ピラゾリノン)、イミダゾリドン、チアゾロン、およびイソチアゾロン；
C6複素環、例えばピペリジノン(ピペリドン)、ピペリジンジオン、ピペラジノン、ピペラジンジオン、ピリダジノン、およびピリミジノン(例えば、シトシン、チミン、ウラシル)、およびバルビツール酸；
縮合複素環、例えばオキシンドール、プリノン(例えばグアニン)、ベンゾキサゾリノン、ベンゾピロン(例えば、クマリン);
環状無水物(環中に-C(=O)-O-C(=O)-がある)、限定はされないが、無水マレイン酸、無水コハク酸、および無水グルタル酸など；
環状炭酸(環中に-O-C(=O)-O-がある)、例えば、炭酸エチレン、および炭酸1、2-プロピレン；
イミド(環中に-C(=O)-NR-C(=O)-がある)、限定はされないが、スクシニミド、マレイミド、フタルイミド、およびグルタルイミドなど； 
ラクトン(環状エステル、環中に-O-C(=O) -がある)、限定はされないが、β-プロピオラクトン、γ-ブチロラクトン、δ-バレロラクトン(2-ピペリドン)、およびε-カプロラクトンなど; 
ラクタム(環状アミド、環中に-NR-C(=O)-がある)、限定はされないが、β-プロピオラクタム、γ-ブチロラクタム(2-ピロリドン)、δ-バレロラクタム、およびε-カプロラクタムなど;
環状カルバメート(環中に-O-C(=O)-NR-がある)、例えば2-オキサゾリドン;
環状尿素(環中に-NR-C(=O)-NR-がある)、例えば2-イミダゾリドン、およびピリミジン-2、4-ジオン(例えば、チミン、ウラシル)。
【００４２】
C5-20 アリール：本明細書で用いている「C5-20 アリール」という用語は、C5-20 芳香族化合物の芳香環の原子から水素原子1個を除去することによって得られた1価の分子部分を意味し、該化合物は環を1つ、または2個以上有し(例えば、縮合環)、5から20個の環の原子を有し、それらの環の少なくとも1個が芳香環である。好ましくは、環は各々が5から7個の環の原子を有する。
【００４３】
環の原子は「カルボアリール基」中のように全て炭素原子とすることができ、そのような場合には、その基は「C5-20 カルボアリール」基と呼ぶことができ、それが好都合である。
【００４４】
環の原子にヘテロ原子を持たないC5-20アリール基(すなわち、C5-20 カルボアリール基)の例としては、限定はされないが、ベンゼン(すなわちフェニル)(C6)、ナフタレン(C10)、アントラセン(C14)、フェナントレン(C14)、ナフタセン(C18)、およびピレン(C16)に由来する基が挙げられる。
【００４５】
縮合環を含み、そのうちの1つが芳香環でないアリール基の例としては、限定はされないが、インデンおよびフルオレン由来の基が挙げられる。
【００４６】
あるいはまた、その環の原子には1つ以上のヘテロ原子を含むことができ、そのようなヘテロ原子としては、限定はされないが、「ヘテロアリール基」中のように、酸素、窒素、およびイオウが挙げられる。この場合には、その基は「C5-20ヘテロアリール」基と呼ぶことができ、それが好都合であり、ここで「C5-20」とは、環の原子数を、それが炭素原子、ヘテロ原子のいずれであっても、示すものである。好ましくは環の各々は5から7個の環の原子を有し、そのうちの0から4個は環のヘテロ原子である。
【００４７】
C5-20ヘテロアリール基の例としては、限定はされないが、フラン(オキソール)、チオフェン(チオール)、ピロール(アゾール)、イミダゾール(1、3-ジアゾール)、ピラゾール(1、2-ジアゾール)、トリアゾール、オキサゾール、イソキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、オキサジアゾール、およびオキサトリアゾール由来のC5ヘテロアリール基；ならびにイソキサジン、ピリジン(アジン)、ピリダジン(1、2-ジアジン)、ピリミジン(1、3-ジアジン；例えば、シトシン、チミン、ウラシル)、ピラジン(1、4-ジアジン)、トリアジン、テトラゾール、およびオキサジアゾール(フラザン)由来のC6ヘテロアリール基が挙げられる。
【００４８】
縮合環を含んでいるC5-20ヘテロアリール基の例としては、限定はされないが、ベンゾフラン、イソベンゾフラン、インドール、イソインドール、プリン(例えば、アデニン、グアニン)、ベンゾチオフェン、ベンズイミダゾール由来のC9複素環基；キノリン、イソキノリン、ベンゾジアジン、ピリドピリジン、キノキサリン由来のC10複素環基；カルバゾール、ジベンゾチオフェン、ジベンゾフラン由来のC13複素環基；アクリジン、キサンテン、フェノキサチン、フェナジン、フェノキサジン、フェノチアジン由来のC14複素環基が挙げられる。
【００４９】
上記のC1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、およびC5-20アリール基は、それらが単独で存在するかまたは別の置換基の一部となっているかにかかわらず、それらをそれら自体および下記に列挙した追加の置換基から選択された1つ以上の基で任意に置換することができる。
【００５０】
ハロ：-F、-Cl、-Br、および-I。
【００５１】
ヒドロキシ：-OH。
【００５２】
エーテル：-OR、ここでRはエーテル置換基、例えば、C1-7アルキル基(これはC1-7アルコキシとも呼ばれ、下記に述べる)、C3-20ヘテロシクリル基(これはC3-20 ヘテロシクリルオキシ基とも呼ばれる)、またはC5-20アリール基(これはC5-20アリールオキシ基とも呼ばれる)であり、好ましくは、C1-7アルキル基である。
【００５３】
C1-7 アルコキシ：-OR、ここでRはC1-7アルキル基である。C1-7アルコキシ基の例としては、限定はされないが、-OCH3(メトキシ)、-OCH2CH3(エトキシ)および-OC(CH3)3 (tert-ブトキシ)が挙げられる。
【００５４】
C1-2 アルキジオキシレン（alkdioxylene）：本明細書で用いている「C1-2 アルキジオキシレン」という用語は、1個または2個の炭素原子を有するC1-2炭化水素ジオール化合物の2個の異なるアルコール基の各々から2個の水素原子を除去すること、すなわちCH2(OH)2およびHO-CH2-CH2-OHから-O-CH2-O-および-O-CH2-CH2-O-を形成させることによって得られる二座の分子部分を意味する。
【００５５】
オキソ(ケト、-オン)： =O。置換基としてオキソ基(=O)を有する環状化合物および/または基の例としては、限定はされないが、シクロペンタノンおよびシクロヘキサノンなど炭素環化合物；ピロン、ピロリドン、ピラゾロン、ピラゾリノン、 ピペリドン、ピペリジンジオン、ピペラジンジオン、およびイミダゾリドンなどの複素環化合物；無水環状化合物としては、限定はされないが、無水マレイン酸および無水コハク酸が挙げられ；環状炭酸化合物、例えば炭酸プロピレン；イミドとしては、限定はされないが、スクシンイミドおよびマレイミドが挙げられ；ラクトン(環状エステル、環中に-O-C(=O)-がある)としては、限定はされないが、β-プロピオラクトン、γ-ブチロラクトン、δ-バレロラクトン、およびε-カプロラクトンが挙げられる; ならびにラクタム(環状アミド、環中に-NR-C(=O)-がある)としては、限定はされないが、β-プロピオラクタム、γ-ブチロラクタム(2-ピロリドン)、δ-バレロラクタム、およびε-カプロラクタムが挙げられる。
【００５６】
イミノ(イミン)： =NR、 ここでRはイミノ置換基、例えば、水素、C1-7 アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20 アリール基であり、好ましくは水素またはC1-7 アルキル基である。エステル基の例としては、限定はされないが、=NH、=NMe、=NEt、及び =NPhが挙げられる。
【００５７】
ホルミル(カルボアルデヒド、カルボキシアルデヒド)：-C(=O)H。
【００５８】
アシル(ケト)：-C(=O)R、ここでRはアシル置換基で、例えば、C1-7アルキル基(C1-7アルキルアシルまたはC1-7アルカノイルとも呼ばれる)、C3-20ヘテロシクリル基(C3-20ヘテロシクリルアシルとも呼ばれる)、またはC5-20アリール基(C5-20アリールアシルとも呼ばれる)、好ましくは、C1-7アルキル基である。アシル基の例としては、限定はされないが、-C(=O)CH3 (アセチル)、-C(=O)CH2CH3(プロピオニル)、-C(=O)C(CH3)3(ブチリル)、および-C(=O)Ph(ベンゾイル、フェノン)が挙げられる。
【００５９】
カルボキシ(カルボン酸)：-COOH。
【００６０】
エステル(カルボキシレート、カルボン酸エステル、オキシカルボニル)：-C(=O)OR、ここでRはエステル置換基で、例えば、C1-7 アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20 アリール基であり、 好ましくはC1-7アルキル基である。エステル基の例としては、限定はされないが、-C(=O)OCH3、-C(=O)OCH2CH3、-C(=O)OC(CH3)3、および-C(=O)OPhが挙げられる。
【００６１】
アシルオキシ(逆行エステル)：-OC(=O)R、ここでRはアシルオキシ置換基で、例えば、C1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくはC1-7アルキル基である。アシルオキシ基の例としては、限定はされないが、-OC(=O)CH3(アセトキシ)、-OC(=O)CH2CH3、-OC(=O)C(CH3)3、-OC(=O)Ph、および-OC(=O)CH2Phが挙げられる。
【００６２】
アミド(カルバモイル、カルバミル、アミノカルボニル、カルボキサミド)：-C(=O)NR1R2、 ここでR1およびR2は独立にアミノ置換基で、それはアミノ基について定義される。アミド基の例としては、限定はされないが、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3、-C(=O)N(CH3)2、-C(=O)NHCH2CH3、および-C(=O)N(CH2CH3)2が挙げられ、ならびに、アミド基であって、R1とR2がそれらが付着している窒素原子とともに複素環構造を形成し、それは例えば、ピペリジノカルボニル、モルホリノカルボニル、チオモルホリノカルボニル、およびピペラジノカルボニル中に存在する構造のようなものが挙げられる。
【００６３】
アシルアミド(アシルアミノ)：-NR1C(=O)R2、ここでR1はアミド置換基で、例えば、水素、C1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20 アリール基で、好ましくは水素またはC1-7 アルキル基であり、R2はアシル置換基で、例えばC1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基で、好ましくは、水素またはC1-7 アルキル基である。アシルアミド基の例としては、限定はされないが、-NHC(=O)CH3、-NHC(=O)CH2CH3、および-NHC(=O)Phが挙げられる。R1とR2 は一緒に環状構造をとることができ、それは例えば、スクシニミジル、マレイミジル、およびフタルイミジル中に存在する構造のようなものである：
【化４】
2005521689.tif 000006
【００６４】
チオアミド(チオカルバミル)：-C(=S)NR1R2、ここでR1とR2は独立にアミノ置換基で、それはアミノ基で定義されるとおりのものである。アミド基の例としては、限定はされないが、-C(=S)NH2、-C(=S)NHCH3、-C(=S)N(CH3)2、および-C(=S)NHCH2CH3が挙げられる。
【００６５】
テトラゾリル：4個の窒素原子と1個の炭素原子を有する5員の芳香環である。
【化５】
2005521689.tif 000007
【００６６】
アミノ：-NR1R2、ここでR1とR2は独立にアミノ置換基で、例えば、水素、C1-7アルキル基(C1-7アルキルアミノまたはジ-C1-7アルキルアミノとも呼ばれる)、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくは水素またはC1-7アルキル基であり、または環状アミノ基の場合には、R1とR2は、それらが結合している窒素原子とともに、4から8個の環の原子を有する複素環を形成する。アミノ基の例としては、限定はされないが、-NH2、-NHCH3、-NHC(CH3)2、-N(CH3)2、-N(CH2CH3)2、および-NHPhが挙げられる。環状アミノ基の例としては、限定はされないが、アジリジノ、アゼチジノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ、モルホリノ、およびチオモルホリノが挙げられる。
【００６７】
イミノ：=NR、 ここでRはイミノ置換基で、例えば、水素、C1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくは水素またはC1-7アルキル基である。
【００６８】
アミジン：-C(=NR)NR2、ここでRは各々アミジン置換基で、例えば、水素、C1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくは水素またはC1-7アルキル基である。アミジン基の一例は-C(=NH)NH2である。
【００６９】
ニトロ：-NO2。
【００７０】
ニトロソ：-NO。
【００７１】
アジド：-N3。
【００７２】
シアノ(ニトリル、カルボニトリル)：-CN。
【００７３】
イソシアノ：-NC。
【００７４】
シアナート：-OCN。
【００７５】
イソシアナート：-NCO。
【００７６】
チオシアノ(チオシアナート)：-SCN。
【００７７】
イソチオシアノ(イソチオシアナート)：-NCS。
【００７８】
スルフヒドリル(チオール、メルカプト)：-SH。
【００７９】
チオエーテル(スルフィド)：-SR、ここでRはチオエーテル置換基で、例えば、C1-7アルキル基(C1-7アルキルチオ基とも呼ばれる)、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくはC1-7アルキル基である。C1-7アルキルチオ基の例としては、限定はされないが、-SCH3および-SCH2CH3が挙げられる。
【００８０】
ジスルフィド：-SS-R、ここでRはジスルフィド置換基で、例えば、C1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくはC1-7アルキル基(本明細書ではC1-7アルキルジスルフィドとも呼ぶ)である。C1-7アルキルジスルフィド基の例としては、限定はされないが、-SSCH3および-SSCH2CH3が挙げられる。
【００８１】
スルホン(スルホニル)：-S(=O)2R、ここでRはスルホン置換基で、例えば、C1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくはC1-7アルキル基である。スルホン基の例としては、限定はされないが、-S(=O)2CH3(メタンスルホニル、メシル)、-S(=O)2CF3(トリフリル)、-S(=O)2CH2CH3、-S(=O)2C4F9(ノナフリル)、-S(=O)2CH2CF3 (トレシル)、-S(=O)2Ph(フェニルスルホニル)、4-メチルフェニルスルホニル(トシル)、4-ブロモフェニルスルホニル(ブロシル)、および4-ニトロフェニル(ノシル)が挙げられる。
【００８２】
スルフィン(スルフィニル、スルホキシド)：-S(=O)R、ここでRはスルフィン置換基で、例えば、C1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくはC1-7アルキル基である。スルフィン基の例としては、限定はされないが、-S(=O)CH3および-S(=O)CH2CH3が挙げられる。
【００８３】
スルホニルオキシ：-OS(=O)2R、ここでRはスルホニルオキシ置換基で、例えば、C1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくはC1-7アルキル基である。スルホニルオキシ基の例としては、限定はされないが、-OS(=O)2CH3および-OS(=O)2CH2CH3が挙げられる。
【００８４】
スルフィニルオキシ：-OS(=O)R、ここでRはスルフィニルオキシ置換基で、例えば、C1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくはC1-7アルキル基である。スルフィニルオキシ基の例としては、限定はされないが、-OS(=O)CH3および-OS(=O)CH2CH3が挙げられる。
【００８５】
スルフアミノ：-NR1S(=O)2OH、ここでR1はアミノ置換基で、アミノ基について定義されるものである。スルフアミノ基の例としては、限定はされないが、-NHS(=O)2OHおよび-N(CH3)S(=O)2OHが挙げられる。
【００８６】
スルホンアミノ：-NR1S(=O)2R、ここでR1はアミノ置換基で、アミノ基について定義されるものであり、Rはスルホンアミノ置換基であり、例えば、C1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくはC1-7アルキル基である。スルホンアミノ基の例としては、限定はされないが、-NHS(=O)2CH3および-N(CH3)S(=O)2C6H5が挙げられる。
【００８７】
スルフィンアミノ：-NR1S(=O)R、ここでR1はアミノ置換基で、アミノ基で定義されるものであり、Rはスルフィンアミノ置換基で、例えば、C1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくはC1-7アルキル基である。スルフィンアミノ基の例としては、限定はされないが、-NHS(=O)CH3および-N(CH3)S(=O)C6H5が挙げられる。
【００８８】
スルファミル：-S(=O)NR1R2、ここでR1およびR2は独立にアミノ置換基で、アミノ基で定義されるものである。スルファミル基の例としては、限定はされないが、-S(=O)NH2、-S(=O)NH(CH3)、-S(=O)N(CH3)2、-S(=O)NH(CH2CH3)、-S(=O)N(CH2CH3)2、および-S(=O)NHPhが挙げられる。
【００８９】
スルホンアミノ：-NR1S(=O)2R、ここでR1はアミノ置換基で、アミノ基で定義されるものであり、Rはスルホンアミノ置換基であり、例えば、C1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくはC1-7アルキル基である。スルホンアミノ基の例としては、限定はされないが、-NHS(=O)2CH3および-N(CH3)S(=O)2C6H5が挙げられる。スルホンアミノ基の特別なクラスのものは、スルタム由来のもので、それらの基ではR1およびRのうちの1つはC5-20アリール基で、好ましくはフェニルであり、他方、R1およびRのうちのもう一方はC5-20アリール基と結合した二座の基で、例えばC1-7アルキル基由来の二座の基などである。そのような基の例としては、限定はされないが：
【化６】
2005521689.tif 000008
【００９０】
2、3-ジヒドロ-ベンゾ[d]イソチアゾール-1、1-ジオキシド-2-イル
【化７】
2005521689.tif 000009
【００９１】
1、3-ジヒドロ-ベンゾ[c]イソチアゾール-2、2-ジオキシド-1-イル
【化８】
2005521689.tif 000010
【００９２】
3、4-ジヒドロ-2H-ベンゾ[e][1、2]チアジン-1、1-ジオキシド-2-イル
ホスホルアミダイト：-OP(OR1)-NR22、R1およびR2はホスホルアミダイト置換基で、例えば、-H、(任意で置換された)C1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくは-H、C1-7アルキル基、またはC5-20アリール基である。ホスホルアミダイト基の例としては、限定はされないが、-OP(OCH2CH3)-N(CH3)2、-OP(OCH2CH3)-N(i-Pr)2、および-OP(OCH2CH2CN)-N(i-Pr)2が挙げられる。
【００９３】
ホスホルアミデート:-OP(=O)(OR1)-NR22、ここでR1 およびR2はホスホルアミデート置換基で、例えば、-H、(任意で置換された)C1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくは-H、C1-7アルキル基、またはC5-20アリール基である。ホスホルアミデート基の例としては限定はされないが、-OP(=O)(OCH2CH3)-N(CH3)2、-OP(=O)(OCH2CH3)-N(i-Pr)2、および、-OP(=O)(OCH2CH2CN)-N(i-Pr)2が挙げられる。
【００９４】
多くの場合、置換基はそれ自体を置換されたものとすることができる。例えば、C1-7アルコキシ基は、例えば、C1-7アルキルで置換することができ(C1-7アルキル-C1-7アルコキシ基とも呼ばれる)、 また例えば、シクロヘキシルメトキシ、C3-20ヘテロシクリル基で置換することができ(C5-20アリール-C1-7アルコキシ基とも呼ばれる)、また例えば、フタルイミドエトキシ、またはC5-20アリール基で置換することができ(C5-20アリール-C1-7アルコキシ基とも呼ばれる)、また例えば、ベンジルオキシで置換することができる。
【００９５】
C5-7 環
R3中のC5-7環は、それがベンゼン環またはピリジン環およびC5-20カルボアリール基と縮合することによって少なくとも2個の炭素-炭素二重結合を有する。C5-20カルボアリール基が環の原子に窒素を含んでいる場合には、そのものはC5-7環の一部とはならない。同じことがピリジル基の環の窒素原子にも適用される。
【００９６】
従って、C5-7環はC5-7イオウ含有複素環、C5-7酸素含有複素環、C5-7 窒素含有複素環、または環の原子に少なくとも5個の炭素原子を含んでいるC5-7環状基とすることができる。
【００９７】
第2の架橋基は典型的には、一重結合(C5環がもたらされる)、または鎖中に1または2個の原子を有するもの(それぞれC6およびC7環がもたらされる)とすることができ、それらの原子は通常はC、S、O、およびNから選択されたもので、場合に応じて置換を有するものとすることができる。
【００９８】
C5-7 イオウ含有複素環
R3中のC5-7イオウ含有複素環は、それがベンゼン環またはピリジン環およびC5-20カルボアリール基と縮合することによって少なくとも2個の炭素-炭素二重結合を有する。関連のC5-7イオウ含有複素環の例としては、限定はされないが、次のものが挙げられる：
【化９】
2005521689.tif 000011
【００９９】
2005521689.tif 000012
【０１００】
C5-7イオウ含有複素環は(可能であれば)上述の置換基で置換することができる。
【０１０１】
上記で示した基は特に、第1の架橋基中のイオウ原子において1または2個のオキソ(=O)基により置換され得る。
【０１０２】
C5-7 酸素含有複素環
R3中のC5-7酸素含有複素環は、それがベンゼン環またはピリジン環およびC5-20カルボアリール基と縮合することによって少なくとも2個の炭素-炭素二重結合を有する。関連のC5-7酸素含有複素環の例としては、限定はされないが、次のものが挙げられる：
【化１０】
2005521689.tif 000013
【０１０３】
C5-7酸素含有複素環は(可能であれば)上述の置換基で置換することができる。
【０１０４】
C5-7 窒素含有複素環
R3中のC5-7窒素含有複素環は、それがベンゼン環またはピリジン環およびC5-20カルボアリール基と縮合することによって少なくとも2個の炭素-炭素二重結合を有する。関連のC5-7窒素含有複素環の例としては、限定はされないが、次のものが挙げられる(RN = Hで示している):
【化１１】
2005521689.tif 000014
【０１０５】
C5-7窒素含有複素環は(可能であれば)上述の置換基で置換することができる。特に、第1の架橋基中の窒素原子はRNで置換することができる。
【０１０６】
環に少なくとも5個の炭素原子を含有するC5-7環状基
R3中の環の原子に少なくとも5個の炭素原子を含有するC5-7環状基は、それがベンゼン環またはピリジン環およびC5-20カルボアリール基と縮合することによって少なくとも2個の炭素-炭素二重結合を有する。環の原子に少なくとも5個の炭素原子を含有する関連のC5-7環状基の例としては、限定はされないが、次のものが挙げられる:
【化１２】
2005521689.tif 000015
【０１０７】
環の原子に少なくとも5個の炭素原子を含有するC5-7環状基は(可能であれば)上述の置換基で置換することができる。
【０１０８】
R3の構造として可能なもの
従って、フェニル基またはピリジル基がC5-20 カルボアリール基に結合している場合には、R3は下記の構造をとることができ、それに限定されるものではないが、下記ではフェニル基またはピリジル基およびC5-20カルボアリール基はベンゼン環として示す。XはO、 S、 S(=O)、S(=O)2、NRNおよびCRC1RC2とすることができる：
【化１３】
2005521689.tif 000016
【０１０９】
上記のコア構造に、それが適切なものであるならば置換を有するものとすることができる。
【０１１０】
フェニル基またはピリジル基がC5-20カルボアリール基、そのカルボアリール基中の1個の芳香環炭素原子は芳香環窒素原子と置換されているものであるが、そのような場合のR3は上記に示した構造のうちのいずれかをとることができ、ここでベンゼン環は環の原子に窒素原子を含有するC5-20カルボアリール基を代表して示す。例えば：
【化１４】
2005521689.tif 000017
【０１１１】
上記の式中Xは上記で定義したとおりである。
【０１１２】
R3中の第1の基が上に示したようなフェニル基ではなくピリジル基である場合には、環の窒素原子はその環でとりうる位置ならばどこであっても良い。
【０１１３】
第1の架橋はR3中のフェニル基のどの位置にあってもよく、任意の第2の架橋はそのフェニル基の隣接する原子のいずれかに(可能であれば)位置させることができる。従って、この結果得られたR3基は(全体として)、中央部分に結合させたベンゼン環上の、とりうる多数の位置でラジカルとなりうるものであり、例えば、下記の考えられるR3基 (置換されていないキサンテニル)：
【化１５】
2005521689.tif 000018
【０１１４】
は、1、2、3、または4の位置でラジカルとなることができる。
【０１１５】
その他の形態で含まれるもの
上述のものに含まれるものとしては、これらの置換基のよく知られたイオン、塩、溶媒和物、および保護された形態がある。例えば、カルボン酸(-COOH)について述べる場合は、陰イオン(カルボキシラートイオン)の形態のもの(-COO-)、それの塩または溶媒和物、ならびに、従来から知られている保護された形態が含まれる。同様にして、アミノ基について述べる場合には、プロトン付加された形態(-N+HR1R2)、そのアミノ基の塩または溶媒和物、例えば、塩酸塩、ならびに従来から知られているアミノ基の保護された形態が含まれる。同様にして、ヒドロキシル基について述べる場合には、陰イオンの形態のもの(-O-)、それの塩または溶媒和物、ならびに従来から知られている、ヒドロキシル基の保護された形態のものが含まれる。
【０１１６】
異性体、塩、溶媒和物、保護された形態、およびプロドラッグ
ある種の化合物は、1種以上の特定の幾何異性体、光学異性体、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、エピマー、立体異性体、互変異性体、配座異性体、およびアノマーの形態で存在することができ、そのようなものとしては、限定はされないが、シス-およびトランス-形；E-およびZ-形；c-、t-、およびr-形；エンドおよびエキソ形；R-、S-、およびメソ-形；D-およびL-形；d-およびl-形；(＋)および(−)形；ケト-、エノール-、およびエノラート-形；シン-およびアンチ-形；シンクリナル-およびアンチクリナル-形；α-およびβ-形；アキシアルおよびエクイトリアル形；舟形、いす形、ねじれ形、封筒形、半いす形；ならびにこれらの組み合わせが含まれ、以後これらを集合的に「異性体」と呼ぶ。
【０１１７】
互変異性体について下記で述べることを除いて、本明細書で用いている「異性体」という用語からは構造的(または構成的)異性体(すなわち、原子の空間的位置のみが異なっているのではなく、原子間の結合状態が異なっている異性体)は特に除外されることに留意されたい。例えば、メトキシ基、-OCH3、について述べる場合、その構造異性体であるヒドロキシメチル基、-CH2OH、はその意味の中に含まれない。
【０１１８】
同様に、オルトクロロフェニルについて述べる場合にはその構造異性体であるメタクロロフェニルはその意味の中に含まれない。しかしあるクラスの構造について述べる場合、そのクラスに分類される、構造異性体を含めることはできる(例えば、C1-7アルキルにはn-プロピルおよびイソプロピルが含まれ;ブチルにはn-、iso-、sec-、およびtert-ブチルが含まれ;メトキシフェニルにはオルト-、メタ-、およびパラ-メトキシフェニルが含まれる)。
【０１１９】
上記の除外には、例えば、下記の互変異性体のペア：ケト/エノール(下記に図示している)、イミン/エナミン、アミド/イミノアルコール、アミジン/アミジン、ニトロソ/オキシム、チオケトン/エネチオール、N-ニトロソ/ヒドロキシアゾ、およびニトロ/aci-ニトロなどにおけるような、例えば、ケト形、エノール形、およびエノラート形などの互変異性体は関係しない。
【化１６】
2005521689.tif 000019
【０１２０】
「異性体」という用語には1個以上の同位体を含んでいる化合物が特に含まれていることに留意されたい。例えば、Hはどのような同位体の形態でもよく、そのようなものとしては1H、 2H(D)、および 3H(T)が含まれ; Cはどのような同位体の形態でもよく、そのようなものとしては12C、13C、および14Cが含まれ; Oはどのような同位体の形態でもよく、そのようなものとしては16Oおよび18Oが含まれ;ならびに類似のものが含まれる。
【０１２１】
特に断らない限りは、特定の化合物に関して述べたことはそれの異性体の全てを含んだ言及であり、そのような異性体としてはラセミ体およびその他のそれらの混合物を(全体として、または部分として)含んでいる。そのような異性体の調製(例えば、不斉合成)および分離(例えば、分別結晶およびクロマトグラフィー)の方法は当業界で既知であるか、または本明細書に記載のもしくは既知の方法を既知の様式で改変することによって容易に得ることができる。
【０１２２】
特に断らない限りは、ある特定の化合物についての言及は、例えば下記のような、その化合物のイオン、塩、溶媒和物、および保護された形態のものを含んだ言及である。
【０１２３】
活性化合物の対応する塩、たとえば製薬上許容される塩を調製し、精製し、および/または取り扱うことが好都合または望ましい場合がある。製薬上許容される塩の例については、Berge ら, 1977, “Pharmaceutically Acceptable Salts”, J.Pharm. Sci., Vol. 66, pp.1-19に述べられている。
【０１２４】
例えば、該化合物が陰イオン性である場合、または陰イオン性となりうる官能基を有している場合(例えば、-COOHは-COO-となりうる)、適切な陽イオンと塩を形成することができる。適切な無機陽イオンの例としては、限定はされないが、Na+およびK+などのアルカリ金属イオン、Ca2+およびMg2+などのアルカリ土類の陽イオン、ならびにAl3+などのその他の陽イオンが挙げられる。適切な有機陽イオンの例としては、限定はされないが、アンモニウムイオン(すなわち、NH4+)および置換されたアンモニウムイオン(例えば、NH3R+、 NH2R2+、 NHR3+、 NR4+)が挙げられる。いくつかの適切な置換されたアンモニウムイオンの例としては次のものに由来するものが挙げられる：エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミン、およびトロメタミン、ならびに、リシンやアルギニンなどのアミノ酸が挙げられる。一般的な第四級アンモニウムイオンの例はN(CH3)4+である。
【０１２５】
該化合物が陽イオン性、または陽イオンとなりうる官能基(例えば、-NH2は-NH3+となりうる)を有している場合には、適切な陰イオンと塩を形成させることができる。適切な無機陰イオンとしては、限定はされないが、次の無機酸由来のものが挙げられる: 塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、亜硫酸、硝酸、亜硝酸、リン酸、およびホスホン酸。適切な有機陰イオンとしては、限定はされないが、次の有機酸由来のものが挙げられる:酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、パルミチン酸、乳酸、リンゴ酸、パモ酸、酒石酸、クエン酸、グルコン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、アスパラギン酸、安息香酸、ケイ皮酸、ピルビン酸、サリチル酸、スルファニル酸、2-アセトキシ安息香酸、フマル酸、フェニルスルホン酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、パントテン酸、イセチオン酸、吉草酸、ラクトビオン酸、およびグルコン酸。適切なポリマー性陰イオンとしては、限定はされないが、次のポリマー性の酸由来のものが挙げられる：タンニン酸、カルボキシメチルセルロース。
【０１２６】
該活性化合物の対応する溶媒和物を調製し、精製し、および/または取り扱うことが好都合または望ましいことがある。本明細書では「溶媒和物」という用語は、従来通り、溶質(例えば、活性化合物、活性化合物の塩)と溶媒との複合体を意味するために用いられる。その溶媒が水である場合は、溶質は、水和物、例えば、一水和物、二水和物、三水和物、などの水和物を意味するものであることが好都合であり得る。
【０１２７】
該活性化合物の化学的に保護された形態のものを調製し、精製し、および/または取り扱うことが好都合または望ましいであろう。本明細書で用いている「化学的に保護された形態」という用語は、1つ以上の反応性の官能基が望ましくない化学反応から保護されている化合物、すなわち、保護された形態または保護基を有する形態の化合物を意味する(マスクされた、もしくはマスク基を有する形態、または、ブロックされた、もしくはブロック基を有する形態としても知られている)。反応性の官能基を保護することによって他の保護されていない反応性官能基の関与する反応を保護基に影響を与えることなく行うことができる：その保護基は、通常はその後のステップで、その分子の残りの部分に実質的な影響を与えることなく除去される。例えば、"Protective Groups in Organic Synthesis" (T.GreenとP.Wuts, Wiley, 1999)を参照せよ。
【０１２８】
例えば、ヒドロキシル基はエーテル(-OR)またはエステル(-OC(=O)R)で保護することができ、例えば:t-ブチルエーテル;ベンジル、ベンズヒドリル(ジフェニルメチル)、もしくはトリチル(トリフェニルメチル)エーテル;トリメチルシリルもしくはt-ブチルジメイｔルシリルエーテル;またはアセチルエステル(-OC(=O)CH3、-OAc)などのように保護することができる。
【０１２９】
例えば、アルデヒド基またはケトン基はそれぞれアセタールまたはケタールとして保護することができ、それらではカルボニル基(>C=O)は、例えば第一級アルコールと反応させることによってジエーテル(>C(OR)2)に転換されている。このようなアルデヒド基またはケトン基は酸の存在下で大過剰の水を用いて加水分解させることによって容易に再生される。    
例えば、アミン基は、例えば、アミドまたはウレタンとして保護することができ、例えば：メチルアミド(-NHCO-CH3);ベンジルオキシアミド(-NHCO-OCH2C6H5, -NH-Cbz);t-ブトキシアミド(-NHCO-OC(CH3)3, -NH-Boc);2-ビフェニル-2-プロポキシアミド (-NHCO-OC(CH3)2C6H4C6H5, -NH-Bpoc);9-フルオレニルメトキシアミド(-NH-Fmoc)；6-ニトロベラトリルオキシアミド(-NH-Nvoc)；2-トリメチルシリルエチルオキシアミド(-NH-Teoc)；2,2,2-トリクロロエチルオキシアミド(-NH-Troc)；アリルオキシアミド(-NH-Alloc)；2(-フェニルスルホニル)エチルオキシアミド(-NH-Psec); または、それが適切である場合には、N-オキシド (>NO・)などのように保護することができる。
【０１３０】
例えば、カルボン酸基はエステルとして保護することができ、例えば:C1-7アルキルエステル(例えば、メチルエステル;t-ブチルエステル);C1-7ハロアルキルエステル(例えば、C1-7トリハロアルキルエステル);トリC1-7アルキルシリル-C1-7アルキルエステル;またはC5-20アリール-C1-7アルキルエステル(例えば、ベンジルエステル;ニトロベンジルエステル);またはアミド、例えばメチルアミドなどのように保護することができる。
【０１３１】
例えば、チオール基はチオエーテル(-SR)として保護することができ、例えば：ベンジルチオエーテル；アセタミドメチルエーテル(-S-CH2NHC(=O)CH3)などのように保護することができる。
【０１３２】
該活性化合物のプロドラッグの形態のものを調製し、精製し、および/または取り扱うことが好都合または望ましいことがある。本明細書で用いている「プロドラッグ」という用語は、代謝されたときに(例えば、in vivoで)所望の活性化合物をもたらす化合物を意味する。典型的には、該プロドラッグは不活性、または該活性化合物よりも活性が低いが、取り扱い、投与、または代謝における性質の点で利点のあるものである。
【０１３３】
例えば、プロドラッグのいくつかのものは活性化合物のエステル(例えば、生理学的に許容される、代謝系で不安定なエステル)である。代謝の際にそのエステル基(-C(=O)OR)は切断されて活性の薬物がもたらされる。そのようなエステルは、例えば、親の化合物中のカルボン酸基(-C(=O)OH)のいずれかを、それが適切である場合には、親の化合物中に存在するほかの反応性の基を全てまず保護した後にエステル化し、続いて必要に応じて脱保護することにより作成することができる。そのような代謝系で不安定なエステルの例としては、RがC1-7アルキル(例えば、-Me, -Et); C1-7アミノアルキル(例えば、アミノエチル;2-(N、N-ジエチルアミノ)エチル;2-(4-モルホリノ)エチル);およびアシルオキシ-C1-7アルキル (例えば、アシルオキシメチル;アシルオキシエチル;例えば、ピバロイルオキシメチル;アセトキシメチル;1-アセトキシエチル;1-(1-メトキシ-1-メチル)エチル-カルボニルオキシエチル;1-(ベンゾイルオキシ)エチル;イソプロポキシ-カルボニルオキシメチル; 1-イソプロポキシ-カルボニルオキシエチル;シクロヘキシル-カルボニルオキシメチル;1-シクロヘキシル-カルボニルオキシエチル;シクロヘキシルオキシ-カルボニルオキシメチル;1-シクロヘキシルオキシ-カルボニルオキシエチル;(4-テトラヒドロピラニルオキシ) カルボニルオキシメチル;1-(4-テトラヒドロピラニルオキシ) カルボニルオキシエチル;(4-テトラヒドロピラニル)カルボニルオキシメチル;および1-(4-テトラヒドロピラニル)カルボニルオキシエチル)が挙げられる。
【０１３４】
また、プロドラッグのいくつかは酵素によって活性化されて、活性化合物または、さらに化学反応を経ることによって活性化合物がもたらされる化合物がもたらされる。例えば、そのようなプロドラッグは糖誘導体もしくはその他のグリコシドコンジュゲートとすることができ、またはアミノ酸エステル誘導体とすることができる。
【０１３５】
更なる好適な形態
下記の好ましい形態は、本発明の種々の異なる態様では異なるものとすることができ、また組み合わせることができる。
【０１３６】
式Iの化合物では、PがOでありQがCHであることが好ましい、すなわち該化合物が式IAで表されるものあることが好ましい。
【０１３７】
Yは好ましくはOである。
【０１３８】
式Iでは、R1およびR2が、それらが結合している窒素原子とともに4から8個の原子を有するヘテロ環を形成する場合には、このヘテロ環は上記で定義したC4-20ヘテロシクリル基の一部を形成することができ(ただし環の原子は最小で4個である)、それには少なくとも1個の環の窒素原子が含まれていなければならない。R1とR2が、それらが結合している窒素原子とともに5、6、または7個の、より好ましくは6個の原子を有するヘテロ環を形成することが好ましい。
【０１３９】
窒素原子を1個持っている単一の環としては、アゼチジン、ピロリジン(テトラヒドロピロール)、ピロリン(例えば、3-ピロリン、2、5-ジヒドロピロール)、2H-ピロールもしくは3H-ピロール(イソピロール、イソアゾール)、ピペリジン、ジヒドロピリジン、テトラヒドロピリジン、およびアゼピンが含まれ;窒素原子を2個持っている環としては、イミダゾリジン、ピラゾリジン(ジアゾリジン)、イミダゾリン、ピラゾリン(ジヒドロピラゾール)、およびピペラジンが含まれ；1個の窒素と1個の酸素を持っている環としては、テトラヒドロオキサゾール、ジヒドロオキサゾール、テトラヒドロイソキサゾール、ジヒドロイソキサゾール、モルホリン、テトラヒドロオキサジン、ジヒドロオキサジン、およびオキサジンが含まれ；1個の窒素と1個のイオウを持っているものとしてはチアゾリン、チアゾリジン、およびチオモルホリンが挙げられる。
【０１４０】
好ましい環は窒素以外に1個のヘテロ原子を含有しているもので、特に、好ましいヘテロ原子は酸素およびイオウである。従って好ましい基としては、モルホリノ、チオモルホリノ、チアゾリニル基が挙げられる。さらに別のヘテロ原子は含んでいない、好ましい基としては、ピロリジノ基が挙げられる。
【０１４１】
最も好ましい基はモルホリノ基およびチオモルホリノ基である。
【０１４２】
上述のとおり、これらのヘテロシクリル基はそれ自体が置換されたものとすることができ：好ましい置換基のクラスはC1-7アルキル基である。このヘテロシクリル基がモルホリノ基である場合には、1つまたは複数の置換基はメチルまたはエチルであることが好ましく、より好ましいのはメチルである。2の位置にメチルの置換基が1つのみあることが最も好ましい。
【０１４３】
上述の単一環の基と同様に、架橋のある環も意図されている。そのようなタイプの環でその基に窒素原子1個および酸素原子1個を含んでいるものの例としては:
【化１７】
2005521689.tif 000020
【０１４４】
これらはそれぞれ、8-オキサ-3-アザ-ビシクロ[3.2.1]オクタ-3-イル、 6-オキサ-3-アザ-ビシクロ[3.1.0]へキサ-3-イル、 2-オキサ-5-アザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタ-5-イル、および7-オキサ-3-アザ-ビシクロ[4.1.0]ヘプタ-3-イルと名付けられている。
【０１４５】
R3では該フェニルまたはピリジル基は好ましくはフェニル基である。
【０１４６】
RC1およびRC2は好ましくはHである。
【０１４７】
RNは好ましくはH、またはエステルである。
【０１４８】
R3におけるフェニル環またはピリジル環の好ましい置換基としては、限定はされないが、ハロ、ヒドロキシ、C1-7アルキル、C1-7アルコキシ、アシル、アシルオキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、チオール、およびC1-7アルキルチオが挙げられ、ハロとヒドロキシが最も好ましい。
【０１４９】
R3中フェニル環もしくはピリジル環、またはC5-20カルボアリール基の置換基として好ましいものとしては、限定はされないが、アシルアミド、スルホンアミノ、エーテル、エステル、アミド、アミノ、およびアシルが挙げられる。
【０１５０】
該アシルアミド基中では、そのアミドの置換基は好ましくは水素であり、そのアシルの置換基は好ましくは、エステル(そのエステルの置換基がアルキルまたはアリールである場合)、C1-7アルキル(任意でエーテル、エステル、C5-20アリール、アシルオキシ、アミノ、およびヘテロシクリル)、C5-20アリール (任意でアルコキシ、アルキル、エステル、およびC5-20アリールで置換されたもの)、ならびにC3-20ヘテロシクリル(任意でアシルで置換されたもの)である。
【０１５１】
アシルアミド基上のアシル置換基として特に好ましいものは式IIIで表されるものである:
【化１８】
2005521689.tif 000021
【０１５２】
式中、nは1から4、好ましくは1または2であり、R3とR4は独立に、水素、任意で置換されたC1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、もしくはC5-20アリール基、またはそれらが結合している窒素原子とともに、環の原子を4個から8個有する任意で置換されたヘテロ環を形成することができる。
【０１５３】
スルホンアミノ基では、そのアミノの置換基は好ましくは水素であり、そのスルホンの置換基はC1-7アルキルおよびC5-20アリールから選択されたものである。
【０１５４】
エーテル基では、そのエーテルの置換基は好ましくはC1-7アルキル(任意でアミノ、C3-20 ヘテロシクリル、チオエーテルおよびC5-20アリールで置換されたもの)である。特に好ましいエーテルの置換基は式III(上記で定義)のものである。
【０１５５】
アミド基では、アミドの置換基は好ましくは、水素およびC1-7アルキル(任意でC3-20ヘテロシクリル、 C5-20アリールおよびアミノで置換されたもの)から独立に選択されたものである。特に好ましいアミドの置換基は式III(上記で定義)で表されるものである。
【０１５６】
アシル基では、そのアシルの置換基は好ましくはC3-20ヘテロシクリルである。
【０１５７】
これらの置換基は好ましくはフェニル基またはピリジル基中ではラジカル位置に対してパラ位であり、第1の架橋基がフェニル基またはピリジル基中のラジカル位置に対してオルト位である場合には、C5-20アリール基(特にその基がフェニルである場合に)中では第1の架橋基に対してパラ位である。
【０１５８】
R3の好ましい構造としては、限定はされないが、次の「コア」の基が挙げられ、それは適切な位置に置換があってもよく、これらの構造で*は好ましいラジカル位置を示している(それは典型的には、フェニル基上にある第1の架橋基に隣接している)：
【化１９】
2005521689.tif 000022
【０１５９】
最も好ましいコア構造は次のとおりである：
【化２０】
2005521689.tif 000023
【０１６０】
特に好ましいR3基としては次のものが挙げられる:
【化２１】
2005521689.tif 000024
【０１６１】
（式中、Rは上記で定義した適切な置換基を意味する）。
【０１６２】
頭文字語
便宜上、多数の化学的部分はよく知られた略号を用いて示しており、そのような略号としては、限定はされないが、メチル(Me)、エチル(Et)、n-プロピル(nPr)、イソプロピル(iPr)、n-ブチル(nBu)、tert-ブチル(tBu)、n-ヘキシル(nHex)、シクロヘキシル(cHex)、フェニル(Ph)、ビフェニル(biPh)、ベンジル(Bn)、ナフチル(naph)、メトキシ(MeO)、エトキシ(EtO)、ベンゾイル(Bz)、アセチル(Ac)、1,3-ビス(ジフェニルホスフィノ)プロパン(dppf)が挙げられる。
【０１６３】
便宜上、多数の化合物はよく知られた略号を用いて示しており、そのような略号としては、限定はされないが、メタノール(MeOH)、エタノール(EtOH)、イソプロパノール(i-PrOH)、メチルエチルケトン(MEK)、エーテルまたはジエチルエーテル(Et2O)、酢酸(AcOH)、ジクロロメタン(塩化メチレン、DCM)、トリフルオロ酢酸(TFA)、ジメチルホルムアミド(DMF)、テトラヒドロフラン(THF)、およびジメチルスルホキシド(DMSO)が挙げられる。
【０１６４】
合成経路
本発明の第1の態様である、式Iaの化合物は、Y=Oである場合には、2-クロロ-6-アミノピラン-4-オンを適切なアリールボロン酸またはアリールボロン酸エステルと、パラジウムが触媒するカップリング反応、例えばSuzukiカップリング法を用いてカップリングさせることによって合成することができる。Y=Sである化合物は、対応するY=Oである化合物から作成することができる。
【０１６５】
2-クロロ-6-アミノピラン-4-オンの合成
これらの化合物は下記の経路で合成することができる:
【化２２】
2005521689.tif 000025
【０１６６】
ステップ(a)では、 CCl4がジケテンの炭素-炭素二重結合にフリーラジカル付加によって付加されて、4-クロロ-4(2,2,2,-トリクロロエチル)-オキセタン-2-オン(1)が得られる。適切な開始剤としては、BCHPO((ビス-4-t-ブチルシクロヘキシル)ペルオキシジカーボネート)などの過酸化物が挙げられる。
【０１６７】
ステップ(b)では、アミン R1R2NHがラクトン環をそのカルボニル中心での求核攻撃によって開裂させる。生じたオキシアニオンはα炭素上の塩素原子と置換してβ-ケトアミド中間体が生ずる。さらにHClを除去して最終的に5,5-ジクロロ-1-アミノ-ペンタ-4-エン-1,3-ジオンが得られる。このステップの適切な条件としては、炭酸水素ナトリウムなどの無機塩基および無水ジクロロメタンなどの溶媒が挙げられる。
【０１６８】
ステップ(c)では、5-クロロ基のうちの1つがアミド部分の酸素と置換されてピラン-4-オン環を形成することにより閉環が起こり、この反応は過塩素酸などのLewis酸によって触媒される。
【０１６９】
アリールボロン酸およびアリールボロン酸エステル
適切なアリールボロン酸およびアリールボロン酸エステルのいくつかは市販されている。その他の適切なアリールボロン酸およびアリールボロン酸エステルのいくつかは下記の経路のうちの1つを用いて合成することができ、それらの経路では、出発材料は市販されているかまたは容易に合成できるものである。例えば、チオキサンテノンへの合成経路についてはArcher, S.ら, J. Med. Chem., 25, 220-227, 1982,に記載されており、チオキサンテノンのチオキサンテンへの変換についてはMLotkowska, B.L.ら, J. Heterocyclic Chem., 28, 731-736, 1991に記載されている。その他の経路については実施例中に示されており、そのような経路としては、中心のC5-7環が適切なカルボン酸からの閉環による合成が挙げられ、その後残存するケト基が還元されてもよい。
【０１７０】
アリールボロン酸エステルの合成
【化２３】
2005521689.tif 000026
【０１７１】
(a)：PdCl2dppf, dppf, ピナコールジボラン, KOAc
式中、RはR3基の残りの部分である。
【０１７２】
アリールボロン酸エステルは適切なアリールトリフラートまたはアリールハライドとテトラ(アルコキシ)ジボロン、例えばピナコールジボロンとのPd(0)で触媒されるクロスカップリング反応で作成することができる。適切な条件としては、PdCl2dppfなどの触媒、dppfなどの追加の配位子、塩基として酢酸カリウムを使用し、ジオキサン、DMF、またはジオキサンなどの溶媒中で反応させることを含む。
【０１７３】
この方法の例はT. Ishiyamaら, Tet. Lett., vol. 38, no. 19, 3447-3450, 1997 およびA. Girouxら, Tet. Lett., vol. 38, no. 22, 3841-3844, 1997 中に見出すことができる。
【０１７４】
アリールボロン酸の合成
【化２４】
2005521689.tif 000027
【０１７５】
(a): t-BuLi, (EtO)3
（式中、RはR3基の残りの部分である）。
【０１７６】
ボロン酸は芳香環のtert-ブチルリチウムによるリチウム化反応を介して生成させることができ、その後、生じたアニオンを、ホウ酸トリエチルなどのホウ酸アルキルと反応させることにより所望のアリールボロン酸を得る。
【０１７７】
パラジウムが触媒するカップリング
アリールボロン酸またはアリールボロン酸エステルの2-クロロ-6-アミノ-ピラン-4-オンとのカップリングは通常の条件、例えば、パラジウム触媒(Pd(PPh3)4、Pd(dppf)Cl2)および塩基(Na2CO3, NaOCH2CH3, TlOH, N(CH2CH3)3, K3PO4)が存在する条件を用いて行うことができる。
【０１７８】
本発明の第1の態様である式Ibの化合物は、Y=Oである場合には下記の方法に従って合成することができる。ここでRはR3の残りの部分を示している：
【化２５】
2005521689.tif 000028
【０１７９】
ステップ(a)では、カリウムtert-ブトキシドなどの塩基の存在下でCS2をアセトフェノン誘導体に添加して、3-アリール-3-ヒドロキシジチオアクリル酸を得る。
【０１８０】
ステップ(b)では、ヨードエタンが活性化チオ酸による求核攻撃を受けてエチルエステルが得られる。チオ酸の活性化は、例えば硫酸水素テトラブチルアンモニウムと水酸化ナトリウムの混合物などの塩基を用いることによって行うことができる。
【０１８１】
ステップ(c)では、アミンがエチル基と置換し、その後ステップ(d)において、残存するチオ基をヨードエタンと反応させる(互変異性化合物を介して)。
【０１８２】
最終のステップ(e)はブロモ酢酸エチルとの縮合であり、閉環4-アミノ-6-アリール-ピラン-2-オンが得られる。
【０１８３】
YのOからSへの変換
この変換はトルエンなどの有機溶媒中でLawesson試薬を用いて行うことができ、その後適切な精製ステップを行うことができる。Lawesson試薬に感受性の基の保護をその試薬を用いる前に施すことができ、ピランチオンが合成された後に脱保護することができる。
【０１８４】
本発明の化合物の使用
本発明は活性化合物、具体的には、活性2-アリール-6-アミノピラン-4-オン、2-アリール-6-アミノピラン-4-チオン、4-アミノ-6-アリールピラン-2-オン、および4-アミノ-6-アリールピラン-2-チオンを提供する。
【０１８５】
本明細書で用いている「活性」という用語は、ATM活性を阻害することのできる化合物を意味し、より具体的には、固有の活性を有する化合物(薬剤)ならびにそのような化合物のプロドラッグが挙げられ、そのプロドラッグはそれ自体は固有の活性をほとんどまたは全く示さない。
【０１８６】
ある特定の化合物によって示されるATMの阻害を評価するために用いることのできる一アッセイ法は下記の実施例に記載している。
【０１８７】
本発明はさらに、細胞中でATMを阻害するための方法を提供し、その方法は細胞を有効量の活性化合物、好ましくは製薬上許容される組成物の形態の活性化合物と接触させることを含んでなる。そのような方法はin vitroまたはin vivoで行うことができる。
【０１８８】
例えば、細胞のサンプル(例えば、腫瘍から得たもの)をin vitroで増殖させ、その細胞に活性化合物を、治療的効果があることが既知の薬剤とともに接触させ、それらの細胞に対する該化合物の治療効果を増強させることができる。
【０１８９】
本発明はさらに、ATM活性を阻害する活性化合物ならびにATM活性を阻害する方法を提供し、その方法は細胞を有効量の活性化合物と、in vitroまたはin vivoにかかわらず、接触させることを含んでなる。
【０１９０】
本発明はさらに、ヒトまたは動物の身体の治療方法における活性化合物の使用を提供する。そのような方法は、被験体に対して治療上有効な量の活性化合物を、好ましくは医薬組成物の形態で、投与することを含んでなる。
【０１９１】
本明細書中である状態を治療することの文脈で用いている「治療」という用語は、ある所望の治療的効果、例えば、その状態の進行を阻害する効果がその体内で達成されることとなるヒトまたは動物(例えば獣医学的適用)の処置および治療を通常は意味し、そのようなものとしては、進行速度の遅延化、進行速度の休止、その状態の改善、およびその状態の治癒が挙げられる。予防策としての処置(すなわち、予防)も含まれる。
【０１９２】
本明細書で用いている「治療上有効な量」という用語は、活性化合物、または、活性化合物を含んでなる材料、組成物、もしくは投与剤形の量であって、何らかの所望の治療的効果を創り出すために有効であり、釣り合いの取れた利益/危険性比を示すものである。
【０１９３】
本発明の発明者らは、本発明の化合物が、1ステップの細胞をベースとするインテグレーションアッセイ(LUCIAと名付けられている)でレトロウイルスベクターの形質導入を効率的に抑制し、マイクロモル未満の濃度で4日間の複製アッセイでHIV-1感染を阻害することができる。さらに、Danielらの観察結果、彼らはレトロウイルスのインテグレーションに及ぼすATMの影響は、DNA−PK欠乏のバックグラウンドがある場合にのみ認められると結論付けているが、それに反して、ここでの効果は機能を有するDNA-PK活性の存在のもとで作用する。
【０１９４】
直鎖状のレトロウイルスDNAの宿主細胞染色体DNAとの最初の連結はウイルスのインテグラーゼ(IN)によって触媒され、その結果、宿主細胞DNAの付着部位に、短い、互い違いのDNA鎖の切断をもたらす(Brown, P.O. (1990) "Integration of retroviral DNA" Curr. Top. Microbiol. Immunol., 157, 19-48)。これらのギャップのあるDNA中間体は宿主細胞によってDNA損傷部位として検知され、ATM経路によって修復されてインテグレーションのプロセスが完了し、有効な感染が生ずることとなる。本発明の化合物はギャップのあるDNA中間体のATM経路による修復を阻害し、それによってレトロウイルスDNAの宿主のゲノムへの完全なインテグレーションを阻害する。
【０１９５】
上述のとおり、本発明は、本発明の第1の態様で定義された、レトロウイルス感染の治療に使用するための化合物、およびレトロウイルス感染治療に用いるための薬剤の製造におけるそのような化合物の使用を提供する。
【０１９６】
また、本発明はレトロウイルス感染の治療方法も提供し、その方法は本発明の第1の態様で定義した化合物を、それの投与を必要とする個体に投与することを含んでなる。
【０１９７】
レトロウイルス感染治療に有用であることが示されている、本発明の化合物の一例は2-チアントレン-1-イル-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(4)である。
【０１９８】
上述のように治療することのできる、レトロウイルスが媒介する疾患としては、HIV感染、および後天性免疫不全症候群(AIDS)、ならびにヒトT細胞白血病ウイルス(HTLV)感染およびその関連疾患である成人T細胞白血病/リンパ腫(ATLL)、および熱帯性痙性対麻痺/HTLV-1関連ミエロパシー(TSP/HAM)が挙げられる。
【０１９９】
本発明の化合物は、ウイルスの複製を抑えるために、他のレトロウイルス治療、例えば「高活性抗レトロウイルス療法」すなわちHAART治療と組み合わせて用いることができる。
【０２００】
本発明は、本明細書に記載の化合物および1種以上のその他の抗レトロウイルス剤を含んでなる医薬組成物を提供する。
【０２０１】
本発明はまた、本発明の第1の態様で定義した化合物とレトロウイルス感染の治療のための1種以上の他の抗レトロウイルス剤を含んでなる組成物、ならびにレトロウイルス感染の治療において使用するための薬剤の製造でのそのような組成物の使用をも提供する。
【０２０２】
レトロウイルスの複製を阻害する、適切な抗レトロウイルス剤としては、例えば、セキナビル、インジナビル、リトナビル、およびネルフィナビルなどのレトロウイルスプロテアーゼインヒビター(PI)、3'-アジド-3'デオキシチミジン(AZT;ジドブジン), 2', 3'-ジデオキシシトシン(ddC;ザルシタビン),  2', 3'-ジデオキシイノシン(ddI;ジダノシン)および3TC(ラミブジン)などのヌクレオシド系レトロウイルス逆転写酵素阻害剤；およびネビラピン、デラビリジン、およびエファビレンツなどの非ヌクレオシド系レトロウイルス逆転写酵素阻害剤が挙げられる。
【０２０３】
投与
該活性化合物または該活性化合物を含んでなる医薬組成物は被験動物に、全身的/末梢的または所望の作用が行われる部位へ、都合のよい投与経路であればどのような経路によっても投与することができ、そのような投与経路としては、経口投与(例えば、摂取)；局所投与(例えば経皮、鼻腔内、眼内、頬、および舌下を含む)；肺投与(例えばエアロゾルを用い、たとえば口または鼻を経由することによる、例えば吸入または通気療法によって)；直腸内投与；経膣投与；例えば、皮下、皮内、筋肉内、静脈内、動脈内、心臓内、髄腔内、脊髄内、嚢内、嚢下、眼窩内、腹腔内、気管内、表皮下、関節内、くも膜下、および胸骨内などへの注射によるものなどの非腸管内投与；デポ剤のインプラントによる投与、例えば皮下または筋肉内へのインプラントによる投与が挙げられる。
【０２０４】
被験動物は真核生物、動物、脊椎動物、哺乳類、げっ歯類(例えば、モルモット、ハムスター、ラット、マウス)、ネズミ類(例えば、マウス)、イヌ類(例えばイヌ)、ネコ類(例えば、ネコ)、ウマ類(例えば、ウマ)、霊長類、類人猿(例えば小型サルまたは大型サル)、サル類(例えば、マーモセット、ヒヒ)、大型サル(例えば、ゴリラ、チンパンジー、オランウータン、テナガザル)、またはヒトとすることができる。
【０２０５】
製剤
該活性化合物を単独で投与することは可能ではあるが、その化合物を、少なくとも1種の、上記で定義した活性化合物の少なくとも1種を、1種以上の製薬上許容される担体、アジュバント、賦形剤、希釈剤、充填剤、バッファー、安定化剤、保存剤、滑沢剤、またはその他の当業者にはよく知られた材料、および任意で他の治療用または予防用薬剤とともに含んでなる医薬組成物(例えば、製剤)として提示することが好ましい。
【０２０６】
本発明はさらに、上記で定義した医薬組成物および医薬組成物を作成する方法を提供し、その方法は、本明細書に記載のとおり、少なくとも1種の上記で定義した活性化合物を、1種以上の他の製薬上許容される担体、賦形剤、バッファー、アジュバント、安定化剤、またはその他の材料とともに混合することを含んでなる。
【０２０７】
本明細書で用いている「製薬上許容される」という用語は、化合物、材料、組成物、および/または投与剤形であって、健全な医学的判断で認めうる範囲内にあり、過剰な毒性、刺激性、アレルギー反応、またはその他の問題もしくは合併症をもたらさず被験体(例えばヒト)の組織との接触のための使用に適しており、妥当な利益/危険性比を示すものであることを意味する。担体、賦形剤などの各々はまた、製剤中の他の成分と適合しうるという意味でも「許容される」ものでなければならない。
【０２０８】
適切な担体、賦形剤などについては、標準的な製薬の教科書、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, 第18版, Mack Publishing Company, Easton, PA., 1990中に記載されている。
【０２０９】
該製剤は単位剤形で都合よく提供することができ、製薬業界でよく知られたいずれかの方法によって調製することができる。そのような方法は、該活性化合物を1種以上の補助成分からなる担体と会合させるステップを含んでいる。一般的には、該製剤は、該活性化合物を液状担体もしくは微細末化した固体担体、またはその双方と均一に十分に会合させ、次いで必要に応じて生成物を成形することによって調製される。
【０２１０】
製剤は、液体、溶液、懸濁液、乳剤、エリキシル、シロップ、錠剤、ロゼンジ、顆粒剤、粉末剤、カプセル、カシェ剤、丸剤、アンプル剤、坐剤、ペッサリー、軟膏、ゲル、ペースト、クリーム、スプレー、ミスト、フォーム、ローション、オイル、ボーラス剤、舐剤、またはエアロゾルの形態とすることができる。
【０２１１】
経口投与(例えば摂取によって)に適した製剤は、別個の単位として提供することができ、それは例えば、カプセル、カシェ剤、もしくは錠剤で、各々があらかじめ定められた量の該活性化合物を含有しているもの；粉末剤または顆粒剤；水性もしくは非水性液体中の溶液もしくは懸濁液；または水中油型乳剤、もしくは油中水型乳剤；ボーラス剤；舐剤；またはペーストなどである。
【０２１２】
錠剤は、例えば圧縮または成形などの従来法で任意で1種以上の補助成分と共に作成することができる。圧縮錠剤は、適切な機械中で、粉末や顆粒などの自由流動体とした該活性化合物を、任意で1種以上の結合剤(例えば、ポビドン、ゼラチン、アラビアゴム、ソルビトール、トラガカント、ヒドロキシプロピルメチルセルロース)；充填剤もしくは希釈剤(例えば、乳糖、微結晶性セルロース、リン酸水素カルシウム)；滑沢剤(例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、シリカ)；崩壊剤(例えば、グリコール酸ナトリウムデンプン、架橋ポビドン、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム)；界面活性剤または分散剤または湿潤剤(例えば、ラウリル硫酸ナトリウム)；および保存剤(例えば、p-ヒドロキシ安息香酸メチル、p-ヒドロキシ安息香酸プロピル、ソルビン酸)と混合して圧縮することによって調製することができる。成形錠剤は、不活性の液状希釈剤で湿潤化した粉末の該化合物の混合物を適切な機械中で成形することによって作成することができる。錠剤は任意でコーティングまたは切れ目を入れることができ、また、錠剤に含まれる該活性化合物の緩徐なもしくは制御された放出が行われるように、例えば、所望の放出プロフィールを得るためにヒドロキシプロピルメチルセルロースを様々な割合で用いることによって製剤化することができる。錠剤は任意で腸溶性コーティングを施したものとすることができ、胃ではなく腸の一部で放出するようにすることができる。
【０２１３】
局所投与(例えば、経皮、鼻腔内、眼内、頬、および舌下)に適した製剤は、軟膏、クリーム、懸濁剤、ローション、粉末剤、溶液、ペースト、ゲル、スプレー、エアロゾル、またはオイルとして製剤化することができる。あるいはまた、製剤は、活性化合物と任意で1種以上の添加剤または希釈剤をしみこませた包帯もしくは絆創膏などのパッチまたは包帯類を含んでなるものとすることができる。
【０２１４】
口腔内の局所投与に適した製剤としては、着香したベース、通常はショ糖およびアラビアゴムもしくはトラガカント中に、該活性化合物を含んでいるものからなるロゼンジ剤；ゼラチンおよびグリセリン、またはショ糖およびアラビアゴムなどの不活性のベース中に該活性化合物を含んでいるトローチ剤；ならびに適切な液状担体中に該活性化合物を含んでいる含嗽剤が挙げられる。
【０２１５】
眼への局所投与に適した製剤としては、点眼剤が挙げられ、点眼剤では、該活性化合物は適切な担体、特に該活性化合物の水性溶剤中に溶解または懸濁される。
【０２１６】
経鼻投与に適した製剤としては、担体が固体である場合には、例えば、粒子径が例えば、約20ミクロンから約500ミクロンの範囲の粗粉末が挙げられ、それは鼻から吸い込む様式で、すなわち鼻に近接して保持された容器からの該粉末の鼻腔を経由する急速な吸入によって投与される。例えば、鼻スプレー、点鼻剤としての投与、またはネブライザーによるエアロゾルの投与に適した製剤としては、担体が液体である場合には、該活性化合物の水性または油性溶液が挙げられる。
【０２１７】
吸入による投与に適した製剤としては、適切な噴射剤、例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、またはその他の適切な気体を用いた加圧パックからのエアロゾルスプレーとして提供されるものが挙げられる。
【０２１８】
皮膚を経由する局所投与に適した製剤としては、軟膏、クリーム、および乳剤が挙げられる。軟膏に製剤化する場合には、該活性化合物は任意でパラフィン性、または水と混和性の軟膏基剤と共に用いることができる。あるいはまた、該活性化合物は水中油滴型クリーム基剤と共にクリームに製剤化することができる。所望により、そのクリーム基剤の水相には、例えば、少なくとも約30 % w/wの多価アルコール、すなわち、プロピレンクリコール、ブタン-1,3-ジオール、マンニトール、ソルビトール、グリセロール、およびポリエチレングリコール、ならびにそれらの混合物などの2つ以上のヒドロキシル基を有するアルコールを含ませることができる。局所用の製剤には所望により該活性化合物の皮膚またはその他の適用部分からの吸収または浸透を増強する化合物を含めることができる。そのような皮膚浸透増強剤の例としては、ジメチルスルホキシド、および関連の類似体が挙げられる。
【０２１９】
局所用乳剤として製剤化する場合には、油相は任意で単一の乳化剤(emulgentとしても知られている)を含むものとすることができ、または少なくとも1種の乳化剤と脂肪もしくは油または脂肪と油の双方との混合物を含むものとすることができる。好ましくは、親水性の乳化剤を、安定剤として作用する親油性の乳化剤と共に含む。また、油と脂肪の双方を含むものであることが好ましい。乳化剤は安定剤と共に、または安定剤を伴わずにいわゆる乳化ワックスを作り、そのワックスは該油および/または脂肪と共にいわゆる乳化軟膏基剤を作り、それがクリーム製剤の油性分散層を形成する。
【０２２０】
適切な乳化剤および乳剤安定剤としては、Tween 60、Span 80、セトステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、モノステアリン酸グリセリル、およびラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。該製剤のための適切な油または脂肪の選択は、所望の外見上の性質が得られるか否かに基づいて行われるが、それは医薬品の乳剤に用いられる可能性がある大部分の油では、該活性化合物の溶解性は非常に低い可能性があるためである。従って、該クリームは好ましくは、チューブやその他の容器からの漏れを避けうる適切な粘度を有する、油っぽくなく、シミを作らず、洗い流せる製品としなければならない。直鎖状のまたは分枝した、一塩基または二塩基アルキルエステル、例えばジイソアジペート、ステアリン酸イソセチル、ココナッツ脂肪酸のプロピレングリコールジエステル、ミリスチン酸イソプロピル、オレイン酸デシル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、パルミチン酸2-エチルヘキシル、またはCrodamol CAPとして知られている分枝鎖状エステルの混合物を用いることができ、最後の3つのものが好ましいエステルである。これらは求める性質によって単独でまたは組み合わせて用いることができる。
【０２２１】
あるいはまた、白色軟パラフィンおよび/または液状パラフィンなどの高融点の脂質、またはその他の鉱油を用いることができる。
【０２２２】
直腸投与に適した製剤は、例えばカカオ脂またはサリチル酸塩を含んでなる適切なベースを含む坐剤として提供することができる。
【０２２３】
経膣投与に適した製剤は、該活性化合物に加えて当業界で適切であることが知られている担体を含有するペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム、またはスプレーの剤型で提供することができる。
【０２２４】
腸管外投与(例えば、皮膚、皮下、筋肉内、静脈内、および皮内注射を含む注射)に適した製剤としては、さらに、抗酸化剤、バッファー、保存剤、安定化剤、静菌剤、および該製剤を、意図しているレシピエントの血液と等張とする溶質などを含んでいてよい、水性または非水性で、等張、パイロジェンフリーの無菌の注射用液体；ならびに、懸濁剤および濃厚化剤を含んでいてよい、水性および非水性無菌懸濁液；ならびに該化合物が血液成分もしくは1つ以上の器官に標的化されるようデザインされているリポソームまたはその他の微粒子システム、が挙げられる。このような製剤中に用いられる適切な等張のビヒクルの例としては、注射用塩化ナトリウム水溶液、リンゲル液、または乳酸加リンゲル注射液が挙げられる。典型的には、その液体中の該活性化合物の濃度は約1ng/mLから約10μg/mL、例えば約10ng/mLから約1μg/mLである。該製剤は単位投与量または多数回投与量の密封容器、例えば、アンプルおよびバイアルに入れた形で提供することができ、無菌の液状担体、例えば注射用水を使用直前に添加することのみを必要とする凍結乾燥された条件で保存することができる。すぐに用いることのできる注射用溶液および懸濁液は無菌の粉末、顆粒、および錠剤から調製することができる。製剤はリポソームまたはその他の微粒子システムの形態とすることができ、それらは該活性化合物が血液成分もしくは1つ以上の器官に標的化されるようデザインされている。
【０２２５】
投与量
当業者であれば、該活性化合物、および該活性化合物を含んでいる組成物の適切な投与量は、患者毎に異なることが理解されよう。最適な投与量の決定は、通常は治療上の有益性のレベルと有害な副作用の危険性とのバランスを取ることを必要とする。選択された投与量のレベルは様々な因子によって変わり、そのような因子としては、限定はされないが、その特定の化合物の活性、投与経路、投与時間、該化合物の排泄速度、治療期間、組み合わせて用いられるその他の薬剤、化合物、および/または物質、ならびに患者の年齢、性別、体重、体調、一般的健康状態、および病歴が挙げられる。一般的には投与量は作用部位で所望の効果を有害な副作用を起こすことなく達成できるような局所濃度が選択されるが、化合物の量と投与経路は究極的には医師の裁量で決定されることとなる。
【０２２６】
in vivoの投与は1回の投与で、持続的投与で、または治療のコースを通じて間欠的に(例えば、適切な間隔をおいて分割した投与量で)行うことができる。最も効果的な投与方法と投与量を決定するための方法は当業者にはよく知られており、治療に用いる製剤、治療の目的、治療しようとする標的の細胞、および治療しようとする被験体によって異なる。単回または複数回の投与は治療担当医師によって選択された投与量および投与パターンで行うことができる。
【０２２７】
通常は、該活性化合物の適切な投与量は、被験体の体重1kgあたり1日に約100μgから約250mgの範囲である。該活性化合物が塩、エステル、プロドラッグ、または類似のものである場合には、投与量は親の化合物の量に基づいて計算され、用いられる実際の重量は相応に増加する。
【０２２８】
下記の実施例は本発明を説明するためにのみ提供するものであり、本明細書に記載の、本発明の範囲を限定することを意図したものではない。
【０２２９】
これらの実施例で、下記の図を参照せよ。
【実施例】
【０２３０】
A) 化学反応の実施例
一般的実験方法
薄層クロマトグラフィーはMerck Kieselgel 60 F254 ガラス裏打ちプレートを用いて行った。それらのプレートをUVランプ(254 nm)を用いて可視化した。E.M.Merckから供給されたシリカゲル60(粒子径40-63μ) をフラッシュクロマトグラフィーに用いた。1H NMRスペクトルを300MHzでBruker DPX-300装置で記録した。ケミカルシフトはテトラメチルシランを参照として調べた。
【０２３１】
ライブラリーサンプルの精製と同定
サンプルはGilson LCユニット上で精製した。
【０２３２】
移動相  A - 0.1%  TFA水溶液、移動相  B - アセトニトリル、流速  6mL/分、勾配 - 典型的には、90% A/10% Bを1分間から開始して15分後に97%Bまで上昇させ、そこで2分間保持し、次いで開始時の条件に戻す。カラム：Jones Chromatography Genesis 4μ C18カラム, 10 mm x 250 mm。ピーク捕捉は254nmでのUVの検出に基づいて行う。
【０２３３】
マススペクトルはFinnegan LCQ装置で、陽イオンモードで記録した。
【０２３４】
移動相A - 0.1%ギ酸水溶液、移動相B - アセトニトリル、流速2 mL/分、勾配 - 95% A/5% Bを1分間から開始して5分後に98%Bまで上昇させ、そこで3分間保持し、次いで開始時の条件に戻す。カラム：Phenomenex 5μ Luna C18カラム, 4.6 mm x 50 mm
UV検出は254 nm, PDA検出スキャンニングは210nmから600nm。
【０２３５】
他の化合物のマススペクトル
ライブラリー以外の化合物およびビルディングブロックのマススペクトルはWaters 600 HPLC Pumpおよび2700 Autosamplerを用いてMicromass ZQ装置(単一四重極、エレクトロスプレーイオン化モードで操作)で記録した。移動相A:0.1% ギ酸水溶液、移動相B:アセトニトリル中の0.1%ギ酸、流速：2.0mL/分、勾配：5%Bから95%Bを3分間かけて行い、3分間保持する。カラム：様々だが、常にC18 50 mm x 4.6 mm (Currently Genesis C18 4μ, Jones Chromatography)を用いた。PDAでの検出: Waters 996, スキャン範囲210-400 nm。
【０２３６】
2-クロロ-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オンの合成 (3)
【化２６】
2005521689.tif 000029
【０２３７】
4-クロロ-4-(2,2,2-トリクロロ-エチル)-オキセタン-2-オン (1)
BCHPO (ビス-4-t-ブチルシクロヘキシル)ペルオキシジカーボネート(11.8 g) およびジケテン(83.5 mL)を含有するCCl4(300 mL)をCCl4の還流溶液に120分かけて滴下し、さらに1時間撹拌した。得られた淡黄色の溶液を冷却しDCMで共沸混合した。得られた残査をヘキサン(3 x 150mL)を用いて10分間撹拌し、液体を傾斜してセライトパッドを通過させて除いた。ろ過した液体を併せ真空中で濃縮して上記１を黄色の油として得た(125.0g, 52.9%)。
【０２３８】
5,5-ジクロロ-1-モルホリン-4-イル-ペント-4-エン-1,3-ジオン(2)
DCM (120 mL)中に上記１ (62.5 g, 0.26 ミリモル)およびモルホリン(24.0 g, 0.28 モル)を含有する、２つの別々の溶液を同時に、NaHCO3(44.0 g, 0.52 モル)含有の無水DCM(300 mL)混合物中に添加した。この反応を15℃で140分間撹拌しつつ維持した。その反応液をろ過し、DCM(3 x 100mL)で洗い、有機層を併せて真空中で濃縮してスラリーとし、次いでそれを短いシリカパッドを通過させ、さらにDCM(4 x 100mL)で洗った。有機層を併せて真空中で濃縮し、ヘキサン(400mL)中に懸濁し、1時間撹拌、ろ過、および乾燥してクリーム状の固形物を得た。その固形物をTBME(100mL)中に懸濁し、15分間撹拌し、ろ過し、TMBEで洗い、乾燥して上記２の化合物を白色粉末として得た(47.8 g, 72%)。m/z (LC-MS, ESP): 252 (M+ +1)。
【０２３９】
2-クロロ-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン (3)
上記２の化合物(11.3 g, 44.9 ミリモル)をジオキサン中に懸濁させた懸濁液に過塩素酸 (11.4 mL, 0.14 モル)を添加し、その反応液をN2 雰囲気下で1時間、90℃で加熱した。その反応液を冷却し、2M NaOH(75mL)で中和し、ろ過した。水層をDCM(4 x 30mL)で抽出し、有機層を併せてMgSO4上で乾燥した。有機層をさらに活性炭で処理し、セライトを通過させてろ過した。暗黄色のろ液を真空中で蒸発させ、得られた固形物をヘキサン(50mL)で破砕し、乾燥して式３の化合物(7.3 g, 75%)を淡黄色の粉末として得た。m/z (LC-MS, ESP): 216 (M+ +1),  1H-NMR  (300MHz, DMSO-d6): 3.3 (t, 4H), 3.65 (t, 4H), 5.4 (d, 1H), 6.25 (d, 1H)。
【０２４０】
実施例１
2-チアントレン-1-イル-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(4)の合成
【化２７】
2005521689.tif 000030
【０２４１】
2-クロロ-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(3)(863 mg, 4 ミリモル)、 チアントレン-1-ボロン酸(1.145 g, 4.4 ミリモル)、および磨砕した炭酸カリウム(1.105 g, 8 ミリモル) をジオキサン(10 mL)中に懸濁し、脱気した(5分間超音波処理した後、N2で飽和させた)。 次いでPd(PPh3)4(231 mg, 0.2 ミリモル)を添加し、その反応混液をN2雰囲気下で、激しく撹拌しつつ、90℃で24時間加熱した。 真空中で溶媒を除去し、残査を水(50mL)中に懸濁し、酢酸エチル(3 x 100mL)で抽出した。有機物を併せ、飽和塩水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥した。真空中で溶媒を除去し、残査をカラムクロマトグラフィー(シリカ；酢酸エチル:エタノール；9:1)で精製して標題の化合物を白色固形物として得た(70 mg, 4%)。 1H-NMR (300MHz,DMSO-d6) : δH = 3.44 (4H, t, J 5Hz); 3.76 (4H, t, J 5Hz); 5.57 (1H, d, J 2Hz); 6.30 (1H, d, J 2Hz); 7.43 (2H, m); 7.53 (1H, t, 8Hz); 7.66 (3H, m); 8.49 (1H, dd, J 1および8 Hz). m/z (LC-MS, ESP) : 396 (M+ +1)。
【０２４２】
実施例２
2-フェノキサチン-4-イル-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(5)の合成
【化２８】
2005521689.tif 000031
【０２４３】
2-クロロ-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(3)(863 mg, 4 ミリモル)、 フェノキサチン-4-ボロン酸(1.07 g, 4.4 ミリモル)、および磨砕した炭酸カリウム(1.1 g, 8 ミリモル) をジオキサン(10 mL)中に懸濁し、脱気した(5分間超音波処理した後、N2で飽和させた)。 次いでPd(PPh3)4(231 mg, 0.2 ミリモル)を添加し、その反応混液をN2雰囲気下で、激しく撹拌しつつ、90℃で24時間加熱した。 真空中で溶媒を除去し、残査を水(50mL)中に懸濁し、酢酸エチル(3 x 50mL)で抽出した。有機物を併せ、飽和塩水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥した。真空中で溶媒を除去し、残査をカラムクロマトグラフィー(シリカ；酢酸エチル:エタノール；9:1)で精製して標題の化合物を白色固形物として得た(620 mg, 41%)。1H-NMR (300MHz, DMSO-d6) : δ = 3.38 (4H, t, J 5Hz); 3.71 (4H, t, J 5Hz); 5.49 (1H, d, J 2Hz); 6.49 (1H, d, J 2Hz); 7.06 (1H, dd, J 1 および8Hz); 7.26 (4H, m); 7.46 (1H, dd, J 1.5 および8Hz);  7.55 (1H, dd, J 1.5 および8 Hz). m/z (LC-MS, ESP) : 380 (M+ +1)。
【０２４４】
実施例３
2-ジベンゾフラン-1-イル-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(6)の合成
【化２９】
2005521689.tif 000032
【０２４５】
2-クロロ-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(3)(22 mg, 0.1 ミリモル)、 4-ジベンゾフラン-1-ボロン酸(28 mg, 0.13ミリモル)、および炭酸セシウム(65 mg, 0.2 ミリモル) をジオキサン(0.5mL)中に懸濁し、脱気した(5分間超音波処理した後、N2で飽和させた)。 次いでPd(PPh3)4(5 mg, 0.005ミリモル)を添加し、その反応混液をN2雰囲気下で、激しく撹拌しつつ、90℃で24時間加熱した。その反応混液を分取用HPLCで精製して標題の化合物を得た(2.1 mg; 6%)。m/z (LC-MS, ESP): 348 (M+ +1)。
【０２４６】
実施例４
2-ジベンゾチオフェン-1-イル-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(7)の合成
【化３０】
2005521689.tif 000033
【０２４７】
2-クロロ-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(3)(740 mg, 3.43 ミリモル)、ジベンゾチオフェン-1-ボロン酸(860 mg, 3.77ミリモル)、および磨砕した炭酸カリウム(964 mg, 6.86ミリモル)をジオキサン(10 mL)中に懸濁し、脱気した(5分間超音波処理した後、N2で飽和させた)。 次いでPd(PPh3)4(200 mg, 0.17ミリモル)を添加し、その反応混液をN2雰囲気下で、激しく撹拌しつつ、90℃で24時間加熱した。 真空中で溶媒を除去し、残査を水(50mL)中に懸濁し、酢酸エチル(3 x 50mL)で抽出した。有機物を併せ、飽和塩水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥した。真空中で溶媒を除去し、残査をカラムクロマトグラフィー(シリカ；酢酸エチル:エタノール；9:1)で精製して標題の化合物を白色固形物として得た(80 mg, 6%)。1H-NMR (300MHz, DMSO-d6): δH = 3.49 (4H, t, J 5Hz); 3.76 (4H, t, J 5Hz); 5.53 (1H, d, J 2Hz); 6.63 (1H, d, J 2Hz); 7.59 (2H, m); 7.69 (1H, t, J 8Hz); 7.96 (1H, dd, J 1 および7.5Hz);  8.11 (1H, m); 8.47 (1H, m); 8.57 (1H, dd, J 1 および8 Hz), m/z (LC-MS, ESP): 364 (M+ +1)。
【０２４８】
実施例５
2-(2-フェニルフルファニル-フェニル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(9)の合成
(a) 2-フェニルスルフィド-ベンゼン ボロン酸(8)
【化３１】
2005521689.tif 000034
【０２４９】
冷却し(-78°C)撹拌した、30mLの無水THF中のジフェニルスルフィド (1.66 mL, 10ミリモル) の溶液に、窒素雰囲気下で7mLのt-BuLiを滴下して添加した。t-BuLiを添加するとその溶液は橙色に変わり、次いで褐色となった。その混合物を加温して室温とした後、3時間撹拌し続けた。その混合物を冷却した(−78℃)。この冷却した黄色の溶液にホウ酸トリエチル(2.03 mL, 12ミリモル)を滴下して添加するとその溶液は青緑色に変わった。この添加の間、温度をモニターし−75℃を超えないようにした。次いでその溶液を放置して室温まで昇温させ、2時間撹拌し続けた。その反応混液に水を添加し、水層をジエチルエーテルで抽出した。水層(pH14)を1M HClを用いて酸性化してpH1とし、生成物をジエチルエーテル中に抽出した。有機物を硫酸マグネシウム上で乾燥し、その有機物を真空中で蒸発させて油性の残査(690 mg, 30%)を得て、それ以上精製することなく用いた。
【０２５０】
(b) 2-(2’-フェニルスルフィド-フェニル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(9)
【化３２】
2005521689.tif 000035
【０２５１】
2-クロロ-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(3)(582 mg, 2.7 ミリモル)、2-フェニルスルフィド-ベンゼンボロン酸(8)(690g, 3ミリモル)、および磨砕した炭酸カリウム(819 mg, 5.94ミリモル)をジオキサン(10 mL)中に懸濁し、脱気した(5分間超音波処理した後、N2で飽和させた)。 次いでPd(PPh3)4(156mg, 0.13ミリモル)を添加し、その反応混液をN2雰囲気下で、激しく撹拌しつつ、90℃で24時間加熱した。 真空中で溶媒を除去し、残査を分取用HPLCで精製して標題の化合物を得た(27mg, 3%)。 1H-NMR (300MHz, DMSO-d6): δH = 3.37 (4H, t); 3.76 (4H, t) 5.45 (1H, d); 6.31 (1H, d); 7.32-7.55 (9H, m). m/z (LC-MS, ESP):  366 (M+ +1)。
【０２５２】
実施例６
2-(1-フルオロ-9-オキソ-9H-チオキサンテン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(13)の合成
【化３３】
2005521689.tif 000036
【０２５３】
a:H2SO4, チオサリチル酸；  b:Tf2O, ピリジン；  c:ビス(ピナコラート)ジボロン, PdCl2dppf，  dppf，  ジオキサン, 100℃; d:クロロピラノン, Pd(PPh3)4, ジオキサン, 90℃。
【０２５４】
(a) 1-フルオロ-4-ヒドロキシ-チオキサンテン-9-オン(10)
チオサリチル酸(46.26g, 0.3モル)および4-フルオロフェノール(56.05g, 0.5モル) を濃H2SO4(750 mL)中に溶解し、その混合物を窒素雰囲気下で24時間撹拌した。その反応混液を氷(1.5L)上に注ぎ、黄色の沈殿をろ過し、水(300mL)で洗った。その沈殿を50℃で24時間乾燥し、それ以上精製することなく用いた(31.4g, 42.5%)。 m/z (LC-MS, ESP):  247 (M+ +1)。
【０２５５】
(b) 1-フルオロ-9-オキソ-チオキサンテン-4-イル トリフルオロメタンスルホネート(11)
1-フルオロ-4-ヒドロキシ-チオキサンテン-9-オン(4.92g, 20ミリモル)を無水ピリジン(100mL)中に溶解し、窒素雰囲気下で0℃まで冷却した。その溶液を撹拌し、そこへ無水トリフリック酸(3.66 mL, 22.3 ミリモル)を5分かけて滴下して添加した。この反応液を一晩おき、次いで水(300mL)に注ぎ入れ、生成した沈殿をろ過した。その固形物をシリカのプラグを通過させて精製して(酢酸エチル/ヘキサン；1:9)標題の化合物を白色のフワフワの固形物として得た(1.72 g, 22.4%)。m/z (LC-MS, ESP):  379 (M+ +1)。
【０２５６】
(c) 1-フルオロ-4-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-チオキサンテン-9-オン(12)
1-フルオロ-9-オキソ-チオキサンテン-4-イル トリフルオロメタンスルホネート(11)(378 mg, 1ミリモル)、ビス(ピナコラート)ジボロン(305mg, 1.2ミリモル)、および磨砕した酢酸カリウム(294mg, 3ミリモル)をジオキサン(5 mL)中に懸濁し、脱気した(5分間超音波処理した後、N2で飽和させた)。 次いでPdCl2dppf (40 mg, 0.050ミリモル)およびdppf(27.7 mg, 0.05 ミリモル)を添加し、その反応混液をN2雰囲気下で、激しく撹拌しつつ、100℃で24時間加熱した。 真空中で溶媒を除去し、残査をカラムクロマトグラフィー(シリカ；酢酸エチル:エタノール；9:1)で精製して油を得て、それ以上精製せずにそれを用いた(116 mg, 32%)。 m/z (LC-MS, ESP):  357 (M+ +1)。
【０２５７】
(d) 2-(1-フルオロ-9-オキソ-チオキサンテン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(13)
2-クロロ-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(3) (100 mg, 0.46 ミリモル)、1-フルオロ-4-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-チオキサンテン-9-オン(12)(110mg, 0.31ミリモル)、および磨砕した炭酸カリウム(63mg, 0.62ミリモル)をジオキサン(5 mL)中に懸濁し、脱気した(5分間超音波処理した後、N2で飽和させた)。 次いでPd(PPh3)4(18mg, 0.016ミリモル)を添加し、その反応混液をN2雰囲気下で、激しく撹拌しつつ、90℃で24時間加熱した。 真空中で溶媒を除去し、残査を水(50mL)中に懸濁し、酢酸エチル(3 x 50mL)で抽出した。有機物を併せ、飽和塩水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥した。真空中で溶媒を除去し、残査をカラムクロマトグラフィー(シリカ；酢酸エチル:エタノール；9:1)で精製して標題の化合物を白色固形物として得た(5 mg, 4%)。 m/z (LC-MS, ESP): 410 (M+ +1)。
【０２５８】
実施例７
2-(1-フルオロ-9H-チオキサンテン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(17)の合成
【化３４】
2005521689.tif 000037
【０２５９】
a:BH3-THF；  b:Tf2O, ピリジン；  c:ビス(ピナコラート)ジボロン, PdCl2dppf，  dppf，  ジオキサン, 100℃; d:クロロピラノン, Pd(PPh3)4, ジオキサン, 90℃。
【０２６０】
(a) 1-フルオロ-4-ヒドロキシ-チオキサンテン-9-オン(14)
1-フルオロ-4-ヒドロキシ-チオキサンテン-9-オン(4.93g, 20ミリモル)をTHF(50 mL)中に溶解し、N2雰囲気下で0℃まで冷却した。その溶液を撹拌してボラン-テトラヒドロフラン複合体(1M, 60 mL, 60 ミリモル)を10分かけて滴下して添加した。その反応液を一晩放置して反応させ、次いでアセトン(100mL)でその反応を停止させた。その混合物を蒸発させて乾燥状態とし、その残査を水(200mkL)中に取った。生成物を酢酸エチル(3 x 100mL)で抽出し、有機物を併せ、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で蒸発させた。その残査をカラムクロマトグラフィー(シリカ；酢酸エチル:エタノール；9:1)で精製して、空気によって容易に酸化される白色固形物を得た(2.19 g, 47%)。 1H-NMR (300MHz, DMSO-d6): δH = 3.86 (2H, s); 6.73 (1H, m); 6.95 (1H, m); 7.24 (2H, m) 7.47 (2H, m); 10.07 (1H, s)。
【０２６１】
(b) 1-フルオロ-9H-チオキサンテン-4-イル トリフルオロメタンスルホネート(15)
1-フルオロ-4-ヒドロキシ-チオキサンテン-9-オン(1.66g, 7.15ミリモル)を無水ピリジン(35mL)中に溶解し、窒素雰囲気下で0℃まで冷却した。その溶液を撹拌し無水トリフリック酸(2.22 g, 7.87 ミリモル)を5分間かけて滴下して添加した。その反応液を室温で4時間反応させ、次いで水(350mL)に注ぎ入れた。乳濁した溶液をDCM(3 x 200mL)で抽出し、有機物を併せ、硫酸マグネシウム上で乾燥した。真空中で溶媒を除去し、得られた固形物をシリカのプラグを通過させて精製して、標題の化合物を白色のフワフワの固形物として得た(2.55g, 98%)。1H-NMR (300MHz, DMSO-d6): δH = 3.86 (2H, s); 7.3-7.6 (6H, m)。
【０２６２】
(c) 1-フルオロ-4-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-9H-チオキサンテン(16)
1-フルオロ-9H-チオキサンテン-4-イル トリフルオロメタンスルホネート(1g, 2.75ミリモル)、ビス(ピナコラート)ジボロン(840mg, 3.30ミリモル)、および磨砕した酢酸カリウム(809mg, 8.25ミリモル)をジオキサン(7 mL)中に懸濁し、脱気した(5分間超音波処理した後、N2で飽和させた)。 次いでPdCl2dppf (0.112mg, 0.138ミリモル)およびdppf(77mg, 0.138ミリモル)を添加し、その反応混液をN2雰囲気下で、激しく撹拌しつつ、100℃で24時間加熱した。 真空中で溶媒を除去し、残査をカラムクロマトグラフィー(シリカ；酢酸エチル:エタノール；9:1)で精製して油を得て、それ以上精製せずにそれを用いた(460 mg, 49%)。
【０２６３】
(d) 2-(1-フルオロ-9H-チオキサンテン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン (17)
2-クロロ-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(3)(252mg, 1.17ミリモル)、1-フルオロ-4-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-9H-チオキサンテン(400mg, 1.17ミリモル)、および磨砕した炭酸カリウム(239mg, 2.34ミリモル)をジオキサン(7 mL)中に懸濁し、脱気した(5分間超音波処理した後、N2で飽和させた)。 次いでPd(PPh3)4(67mg, 0.059ミリモル)を添加し、その反応混液をN2雰囲気下で、激しく撹拌しつつ、90℃で24時間加熱した。 真空中で溶媒を除去し、残査をカラムクロマトグラフィー(シリカ；酢酸エチル:エタノール；9:1)で精製してオフホワイト色の固形物を得て、それをエーテル中で破砕し、標題の化合物を白色固形物として、得た(72.3mg, 16%)。 1H-NMR (300MHz, DMSO-d6): δH = 3.41 (4H, t); 3.71 (4H, t) 5.50 (1H, d); 6.21 (1H, d); 7.25-7.35 (3H, m); 7.52-7.62 (3H, m), m/z (LC-MS, ESP):  396 (M+ +1)。
【０２６４】
実施例８
2-チアントレン-1-イル-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-チオン(18)の合成
【化３５】
2005521689.tif 000038
【０２６５】
2-チアントレン-1-イル-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(4)(140mg, 0.354ミリモル)をトルエン(5mL)中に溶解した。その溶液にLawesson試薬(215mg, 0.53ミリモル)を添加し、その混合物を窒素雰囲気下で撹拌しつつ一晩還流した。真空中でトルエンを除去し、残査をカラムクロマトグラフィー(シリカ, ジクロロメタン)で精製して、所望の化合物(18)を暗橙色の固形物として得た(27mg, 18%)。1H-NMR (300MHz, DMSO-d6): δH = 3.56 (4H, t, J 5Hz); 3.73 (4H, t, J 5Hz); 7.83 (1H, d, J 2Hz); 7.76 (1H, d, J 2Hz); 7.30-7.80 (7H, m), m/z (LC-MS, ESP):412 (M+ +1)。
【０２６６】
実施例９
2-(7-アミノ-9H-チオキサンテン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン N-アミド誘導体
【化３６】
2005521689.tif 000039
【０２６７】
2-(2-メトキシ-フェニルスルファニル)-5-ニトロ-安息香酸 
2-メトキシチオフェノール(9.9mL, 81.29ミリモル) を水(80mL)中にKOH(18.24g, 325.18ミリモル)を含有する溶液に添加し、15分間脱気した。その反応混液に2-ブロモ-5-ニトロ安息香酸(20.0g, 81.29ミリモル)および銅（copper bronze） (258mg, 4.06ミリモル)を添加し、一晩還流させた。その反応を停止させ、その混合物をセライトのパッドを通過させてろ過し、2M NaOHで洗い、次いで水(50mL)で洗った。そのろ液を濃HClで酸性化(pH1)した。生成された沈殿をろ過し、真空オーブン(50℃)中で一晩乾燥して標題の化合物の粗製物を淡黄色の固形物として得た(26.0g)。その生成物をそれ以上精製することなく用いた。
【０２６８】
5-メトキシ-2-ニトロ-チオキサンテン-9-オン
2-(2-メトキシ-フェニルスルファニル)-5-ニトロ-安息香酸(13.00g, 42.58ミリモル)をメタンスルホン酸(100mL)中に懸濁し、100℃で加熱した。その粗製混合物を強く撹拌しつつ氷上に徐々に注ぎ、次いで濃アンモニア溶液で中和した。その沈殿をろ過し、水で洗った。その黄色/黄緑色の固形物を真空中で50℃で乾燥して標題の化合物の粗製物を得て、それ以上精製することなくそれを用いた(12g, 98%)。 m/z (LC-MS, ESP), RT=4.89 分, (M++1)= 288。
【０２６９】
5-メトキシ-2-ニトロ 9H-チオキサンテン
無水テトラヒドロフラン(40mL)中の5-メトキシ-2-ニトロ-チオキサンテン-9-オン(24.46g, 85.13ミリモル)の冷却(0℃)した懸濁液に窒素雰囲気下でボラン-THF複合体(170mL, THF中に1.0M)を滴下して添加した。その混合物を撹拌しつつ室温で一晩加温した。その反応混液を冷却し(0℃)、過剰のボランをアセトンでクエンチングした。真空中で溶媒を除去した。残査をフラッシュクロマトグラフィー(1:1, ジクロロメタン/ヘキサン)で精製して標題の化合物を明黄色の非晶質固形物として得た(11.59g, 50%)。1HNMR (300MHz, DMSO-d6): δH= 3.86 (3H, s), 4.03 (2H, s), 7.00 (2H, dd), 7.28 (1H, t), 7.73 (1H, d), 8.05 (1H, dd), 8.28 (1H, d)。
【０２７０】
5-メトキシ-9H-チオキサンテン-2-イルアミン
5-メトキシ-2-ニトロ 9H-チオキサンテン(11.59g, 42.4ミリモル) を酢酸エチル(250mL)中に懸濁した。SnCl2.2H20 (47.84g, 212ミリモル) を添加し、その澄明な黄色溶液を50℃で一晩撹拌した。その反応をNaOH(2M)で停止させた後、酢酸エチル(3 x 300mL)で抽出した。有機物を飽和塩水(100mL)で洗い、硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で溶媒を除去して標題の化合物を粘稠な黄色の油として得た(10.32g, 100%)。1HNMR (300MHz, DMSO-d6): δH= 3.83 (3H, s), 3.67 (2H, s), 5.14 (2H, bs), 6.43 (1H, dd), 6.61 (1H, d), 6.89 (1H, d), 6.99 (1H, d), 7.06 (1H, d), 7.18 (1H, t),  m/z (LC-MS, ESP), RT=3.88 分, (M+ +1)= 244。
【０２７１】
7-アミノ-9H-チオキサンテン-4-オール 
5-メトキシ-9H-チオキサンテン-2-イルアミン(10.32g, 41.09ミリモル)および塩酸ピリジン(49.0g, 424ミリモル)を窒素雰囲気下で200℃で5時間加熱した。その黒色の反応混液を室温まで冷却し、水(50mL)を添加した。その混合物をNaOH(2M)でpH7に中和した後、ジクロロメタン(4x100mL)で抽出した。有機物を飽和塩水で洗い、MgSO4上で乾燥し、真空中で濃縮して黒色の油を得た。この油をフラッシュクロマトグラフィー(ジクロロメタン)で精製して標題の化合物を暗褐色の油として得て(7.78g, 80%)、それ以上精製することなくそれを用いた。1HNMR (300MHz, DMSO-d6): δH= 3.61 (2H, s), 5.08 (2H, bs), 6.42 (1H, dd), 6.58 (1H, d), 6.69 (1H, d), 6.81 (1H, d) 6.95-7.06 (2H, m), 9.88 (1H, bs); m/z (LC-MS, ESP), RT= 3.23 分, (M+ +1)= 230。
【０２７２】
(5-ヒドロキシ-9H-チオキサンテン-2-イル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル 
THF(14 mL)中の7-アミノ-9H-チオキサンテン-4-オール(7.77 g, 81.32 ミリモル)に、THF(4mL)中のジ-tert-ブチルジカーボネート(17.74 mg, 0.49ミリモル)を添加した。その反応液を窒素雰囲気下で室温で撹拌した。その反応の完了後溶媒を蒸発させた。残査をメタノール(50mL)中に取り、水酸化ナトリウム(4.06g, 101.16ミリモル)を添加した。その暗褐色の混合物を20分間還流させた。真空中で溶媒を除去し、油を水中に取り、酢酸エチルで抽出し、MgSO4上で乾燥し、真空中で蒸発させて粗生成物を得た。その暗褐色の油をフラッシュクロマトグラフィー(ジクロロメタン)で精製して標題の化合物をクリーム色の非晶質の固形物として得た(4.2g, 38%)。1HNMR (300MHz, DMSO-d6): δH= 3.74 (2H, s), 6.74 (1H, d), 6.87 (1H, d), 7.04 (1H, t), 7.23-7.33 (2H, m), 7.57 (1H, bs), 10.03 (1H, bs)。
【０２７３】
(5-トリフルオロメタンスルホニル-9H-チオキサンテン-2-イル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル
無水ピリジン(8mL)中に(5-ヒドロキシ-9H-チオキサンテン-2-イル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル(4.0g, 12.14ミリモル)を含有する0℃に冷却した金色の溶液に窒素雰囲気下でトリフルオロメタンスルホン酸無水物(2.36mL, 13.35ミリモル)を滴下して添加した。その溶液はトリフルオロメタンスルホン酸無水物の添加で濃い橙色に変化した。その反応液を室温まで昇温させた。この温度で10分間撹拌した後、その溶液を水(20mL)中に注ぎ入れた。生成物を酢酸エチルで抽出した。有機物を飽和塩水で洗い、MgSO4上で乾燥し、真空中で濃縮して標題の化合物を暗橙色の固形物として得た(5.6g, 100%)。
【０２７４】
[5-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-9H-チオキサンテン-2-イル]-カルバミン酸tert-ブチルエステル
1,4-ジオキサン(20 mL)中の(5-トリフルオロメタンスルホニル-9H-チオキサンテン-2-イル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル(3.31g, 7.17ミリモル)、ビス(ピナコラート)ジボロン(2.18g, 8.6ミリモル)、 および酢酸カリウム(2.11g, 21.5ミリモル)を、15分間脱気した。その黄色の懸濁液にPdCl2(dppf)(293mg, 0.36ミリモル)およびdppf(199mg, 0.36ミリモル)を添加した。その暗赤色の混合物をN2雰囲気下で90℃で48時間加熱した。その粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー(ジクロロメタン)で精製して粘稠な褐色の油を得て(3.15g)、それ以上精製せずにそれを用いた。
【０２７５】
[5-(6-モルホリン-4-イル-4-オキソ-4H-ピラン-2-イル)-9H-チオキサンテン-2-イル]-カルバミン酸tert-ブチルエステル(19)
[5-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-9H-チオキサンテン-2-イル]-カルバミン酸tert-ブチルエステル(1.02g, 2.32ミリモル)、2-クロロ-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(3) (0.60g, 2.78ミリモル)、およびK2CO3(0.64g, 4.64ミリモル)を無水1,4-ジオキサン(mL)中に溶解した。その混合物を15分間脱気し、Pd(PPh3)4 (0.13g, 0.12モル)を添加した。その暗褐色の混合物をN2 雰囲気下で90℃で24時間加熱した。その反応混液を真空中で濃縮し、水(50mL)を添加した。褐色の固形物をろ過し、水で洗った (1.21g, 88%)。 m/z (LC-MS, ESP), RT = 4.6 分, (M++1)= 493。
【０２７６】
2-(7-アミノ-9H-チオキサンテン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン (20)
ジクロロメタン(10 mL)中に[5-(6-モルホリン-4-イル-4-オキソ-4H-ピラン-2-イル)-9H-チオキサンテン-2-イル]-カルバミン酸tert-ブチルエステル(19)(1.08 g, 2.19ミリモル)を含む溶液に、リフルオロ酢酸(2 mL)を添加し、撹拌しつつ室温で一晩おいた。真空中で溶媒を除去して粘稠な暗褐色の液体を得た。飽和炭酸水素ナトリウム溶液(20mL)をその残査に添加し、20分間撹拌した。褐色の沈殿をろ過し、水で洗い真空オーブン中で一晩乾燥させた(0.77g, 90%)。 1HNMR (300MHz, DMSO-d6): δH= 3.40 (4H, t), 3.70 (4H, t), 3.77 (2H, s), 5.23 (2H, bs), 5.50 (1H, d), 6.17 (1H, d), 6.44 (1H, dd), 6.65 (1H, d), 7.09 (1H, d), 7.35 (1H, t), 7.47-7.59 (2H, m); m/z (LC-MS, ESP), RT= 3.51 分, (M++1)= 392。
【０２７７】
2-(7-アミノ-9H-チオキサンテン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン N-アミド誘導体
(a) 小試験管に2-(7-アミノ-9H-チオキサンテン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(20)(20mg, 0.05ミリモル)、無水ジメチルアセタミド(0.5mL)、トリエチルアミン (0.01mL, 0.08ミリモル)、および所望の酸塩化物(0.08ミリモル)を添加し一晩撹拌した。その反応液を分取用HPLCで精製して所望の生成物を得た。それらを下記に示す：
【表１】
2005521689.tif 000040
2005521689.tif 000041
2005521689.tif 000042
【０２７８】
(b) 小試験管に2-(7-アミノ-9H-チオキサンテン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(20)(20mg, 0.05ミリモル)、無水ジメチルアセタミド(0.5mL)、トリエチルアミン (8μL, 0.06ミリモル)、および塩化３−クロロアセチル(4μL, 0.06ミリモル)を添加し一晩撹拌した。適切なアミンまたはチオール(20mgまたは20μL)を添加し、室温で一晩撹拌した。その反応液を分取用HPLCで精製して所望の生成物を得た。それらを下記に示す：
【表２】
2005521689.tif 000043
2005521689.tif 000044
【０２７９】
(c) 小試験管に2-(7-アミノ-9H-チオキサンテン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(20)(20mg, 0.05ミリモル)、無水ジメチルアセタミド(0.5mL)、トリエチルアミン (8μL, 0.06ミリモル)、および塩化ブロモプロピオニル(5μL, 0.05ミリモル)を添加し一晩撹拌した。適切なアミンまたはチオール(20mgまたは20μL、トリエチルアミンの添加により、塩酸塩が遊離された)を添加し、室温で一晩撹拌した。その反応液を分取用HPLCで精製して所望の生成物を得た。それらを下記に示す：
【表３】
2005521689.tif 000045
2005521689.tif 000046
2005521689.tif 000047
【０２８０】
実施例１０
2-(4-ヒドロキシ-9H-チオキサンテン-1-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン エーテル誘導体
【化３７】
2005521689.tif 000048
【０２８１】
1-ブロモ-4-ヒドロキシ-チオキサンテン-9-オン
チオサリチル酸(20.0g, 129.71ミリモル)および4-ブロモフェノール(35.9g, 207.53ミリモル)を濃H2SO4 (200mL)中に懸濁し、48時間撹拌した。その赤色の溶液を氷(500mL)の上に強く撹拌しつつ徐々に注いだ。得られた黄色の沈殿をろ過し、真空オーブン(50℃)中で乾燥して標題の化合物を黄色の非晶質固形物として得た(24.23g, 61%)。m/z (LC-MS, ESP), RT=4.39 分, (M--1)=  305-307。
【０２８２】
1-ブロモ-9H-チオキサンテン-4-オール
無水テトラヒドロフラン(40mL)中に1-ブロモ-4-ヒドロキシ-チオキサンテン-9-オン  (24.23g, 78.88ミリモル)を含む冷却した(0℃)懸濁液に、窒素雰囲気下でボラン-THF複合体(237mL, THF中に1M)を滴下して添加した。その混濁した混合物を室温まで加温し、一晩撹拌し続けた。その反応混液を冷却し(0℃)、過剰のボランをアセトンでクエンチングした。黄色の溶液を真空中で蒸発させた。得られた油をフラッシュクロマトグラフィー(4:1, ヘキサン/酢酸エチル)で精製して標題の化合物を得た(11.50g, 50%)。 m/z (LC-MS, ESP), RT=4.84 分, (M- -1)=  291-293。
【０２８３】
炭酸tert-ブチルエステル 1-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-9H-チオキサンテン-4-イル エステル
ピリジン(7mL)中に1-ブロモ-9H-チオキサンテン-4-オール(11.50g, 39.22ミリモル)を含む撹拌溶液にトリエチルアミン(8.15mL, 58.83ミリモル)を添加した。その溶液にピリジン(4mL)中のジ-tert-ブチルジカーボネート(9.41g, 3.14ミリモル)を添加した。1時間撹拌した後、粗反応混液を水(100mL)に注ぎ入れ、ジクロロメタン(3 x 100mL)で抽出した。有機物を飽和塩水(50mL)で洗い、MgSO4 上で乾燥し、真空中で溶媒を除去して標題の化合物を澄明で粘稠な油として得た(10.40g, 67%)。1HNMR (300MHz, DMSO-d6): δH= 1.53 (9H, s), 4.09 (2H, s), 7.15-7.65 (6H, m)。
【０２８４】
炭酸tert-ブチル エステル 1-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-9H-チオキサンテン-4-イル エステル
炭酸tert-ブチル エステル 1-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-9H-チオキサンテン-4-イル エステル (5.00g, 12.71ミリモル)、無水酢酸カリウム (3.74g, 38.13ミリモル)、1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン(352mg, 0.64ミリモル)、およびビス(ピナコラート)ジボロン(3.87g, 15.25ミリモル)を無水ジオキサン(8mL)中に窒素雰囲気下で懸濁した。その混合物を10分間脱気し、その混合物にジクロロ[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]パラジウム(II)ジクロロメタン付加化合物(514mg, 0.64ミリモル)を添加した。その反応液を窒素雰囲気下で90℃で24時間加熱した。粗反応混液をフラッシュクロマトグラフィー(ジクロロメタン)で精製して標題の化合物を組成の褐色の油を得て(3.02g)、それ以上精製することなくそれを用いた。
【０２８５】
2-(4-ヒドロキシ-9H-チオキサンテン-1イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(87)
炭酸 tert-ブチル エステル 1-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-9H-チオキサンテン-4-イル エステル(3.00g, 6.81ミリモル)、2-クロロ-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(1.22g, 5.67ミリモル)、および炭酸カリウム(2.07g, 14.98ミリモル)を窒素雰囲気下で無水ジオキサン(6mL)中に懸濁した。その溶液を15分間脱気した。その溶液にテトラキス(トリフェニルホスフィノ)パラジウム(291mg, 5% eq.)を添加した。その混合物をさらに5分間脱気した。その反応液を窒素雰囲気下で90℃で24時間加熱した。真空中で溶媒を除去し、その粗混合物をカラムクロマトグラフィー(9:1, 酢酸エチル/エタノール)で精製して、標題の化合物を淡黄色の非晶質固形物として得た(421mg, 16%)。1H NMR (300MHz, DMSO-d6): δH= 3.33 (4H, t), 3.67 (4H, t), 3.88 (2H, s), 5.45 (1H, d), 6.05 (1H, d), 6.87 (1H, d), 7.24-7.65 (5H, m), 10.62 (1H, bs); m/z (LC-MS, ESP), RT=3.96 分, (M++1)=  394。
【０２８６】
2-(4-ヒドロキシ-9H-チオキサンテン-1イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン エーテル誘導体
(a) N,N-ジメチルホルムアミド(0.5mL) 中に2-(4-ヒドロキシ-9H-チオキサンテン-1イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(87)(20mg, 0.05ミリモル)、および炭酸カリウム(16mg, 0.11ミリモル)を含有する混合物にジブロモエタン(22μL, 0.25ミリモル)を添加した。4時間後にその溶液に適切なアミンまたはチオール(0.254ミリモル, 5eq)を添加した。単離された化合物を下記に示す：
【表４】
2005521689.tif 000049
2005521689.tif 000050
2005521689.tif 000051
【０２８７】
(b) 2-(4-ヒドロキシ-9H-チオキサンテン-1イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン (87)(20 mg, 0.0508 ミリモル)、炭酸カリウム(44mg, 0.315 ミリモル)およびN,N-ジメチルホルムアミド(0.5mL)を、塩酸2, 3または4-ピコリルクロリド(0.25ミリモル)にそれぞれ添加した。その反応液を室温で2時間撹拌した。粗反応混液を分取用HPLCで精製し、それ以上精製はしなかった。生成された化合物を下記に示す：
【表５】
2005521689.tif 000052
2005521689.tif 000053
【０２８８】
実施例１１
N-アシル 2-(1-アミノ-9H-チオキサンテン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン 誘導体
【化３８】
2005521689.tif 000054
【０２８９】
1-フルオロ-4-ヒドロキシ-チオキサンテン-9-オン
濃硫酸(700mL)中に2-チオサリチル酸(39.32g, 255 ミリモル)を含む溶液に、4-フルオロフェノール(32.0 g, 280 ミリモル)を添加した。その赤色の溶液を室温で18時間撹拌した。撹拌の完了後、その混合物を直接、4Lの砕いた氷の上に注ぎ、得られた赤色の固形物をろ過して取り、水(1L)中に懸濁し、pH6となるまでアンモニア溶液を添加し、その時点で沈殿を再ろ過して標題の化合物を橙色の固形物として得た(44.48 g, 70.8%)。 m/z (LC-MS, ESP): 247 [M+H]+, R/T = 3.99 分。
【０２９０】
4-ベンジルオキシ-1-フルオロ-チオキサンテン-9-オン
K2CO3(21.0g, 150ミリモル)をメタノール(100mL)中に1-フルオロ-4-ヒドロキシ-チオキサンテン-9-オン(18.47 g, 75.0 ミリモル)を含む撹拌懸濁液に添加した後、ベンジルブロミド(16 mL, 75.0 ミリモル)をシリンジを用いてゆっくりと流して添加した。得られた混合物を90分間還流しつつ加熱した後、室温まで冷却し、その後砕いた氷(0.5L)の上に注いだ。得られた沈殿をろ過して取り、乾燥(P2O5)して標題の化合物を黄色の固形物として得た (16.7 g, 66.1%)。 m/z (LC-MS, ESP): 337 [M+H]+, R/T = 5.22 分。
【０２９１】
4-ベンジルオキシ-1-(4-メトキシ-ベンジルアミノ)-チオキサンテン-9-オン
無水ピリジン(10mL)中に4-メトキシベンジルアミン(1.63 g, 11.89 ミリモル)を含有する溶液に4-ベンジルオキシ-1-フルオロ-チオキサンテン-9-オン(1 g, 2.97 ミリモル)を 一度に添加した。次いでその混合物を18時間還流しつつ加熱した(140℃)。得られた高温の橙色の懸濁液を室温まで冷却した後、100mLの砕いた氷の上に注いだ。沈殿をろ過して取り、多量の水で洗って標題の化合物を赤色/橙色の固形物として得た(1.35 g, 89.6%)。 m/z (LC-MS, ESP): 454 [M +H]+ R/T = 6.09 分。
【０２９２】
(4-ベンジルオキシ-9H-チオキサンテン-1-イル)-(4-メトキシ-ベンジル)-アミン
0℃に冷却した無水THF(150mL)中に4-ベンジルオキシ-1-(4-メトキシ-ベンジルアミノ)-チオキサンテン-9-オン(8.16 g, 18.00 ミリモル)を含有する懸濁液に、ボラン-THF複合体(90 ミリモル, 90 mL THF中に1M)を滴下して添加した。その反応液を徐々に室温まで加温し、さらに16時間撹拌して均一な黄色溶液を得た。この混合物を冷却し(0℃)アセトン(150mL)で徐々に希釈し、次いで室温で60分間撹拌した。真空中で溶媒を除去して粗残査を得てそれをCH2Cl2(100 mL)中に希釈し、飽和NaHCO3溶液(100mL)で洗い、MgSO4を用いて乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮して標題の化合物を淡いコハク色の油として得た(7.90 g, 99.8%)。 m/z (LC-MS, ESP): 438 [M+H]+, R/T = 5.01 分。
【０２９３】
1-アミノ-9H-チオキサンテン-4-オール
(4-ベンジルオキシ-9H-チオキサンテン-1-イル)-(4-メトキシ-ベンジル)-アミン(14.51 g, 33.00 ミリモル) を固体の塩酸ピリジン(190 g, 165.00 ミリモル)と十分に混合した後、150℃に加熱し、この温度でさらに12時間撹拌した。完了後にこの反応液をわずかに冷却した後、氷/水を入れたビーカー中に注ぎ入れた。褐色の沈殿をろ過して除き、ろ液のpHをNH3OH溶液でpH11に調整した後、CH2Cl2(3 x 100 mL)で抽出した。有機相を併せ、水(1 x 100mL)および塩水(1 x 100mL)で洗った後、MgSO4で乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮して標題の化合物を濃い褐色の油として得た(7.50 g, 99.1%)。 m/z (LC-MS, ESP): 229 [M+H]+, R/T = 4.15 分。
【０２９４】
(4-ヒドロキシ-9H-チオキサンテン-1-イル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル
無水THF(50mL)中に1-アミノ-9H-チオキサンテン-4-オール(7.57 g, 33.00 ミリモル)を含有する溶液にジ-tert-ブチルジカーボネート(20 g, 91.64 ミリモル)を一度に添加した。その反応液を室温で4時間撹拌した後、メタノール(50mL)と固体のNaOH(10g, 250ミリモル)を添加した。得られたスラリーを室温で1時間撹拌した後、H2O(250mL)とEtOAc(250mL)を添加した。有機抽出物を除去し、残存する水相をさらにEtOAc(2 x 50mL)で抽出した。有機物を併せMgSO4を用いて乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮して標題の化合物を暗コハク色の油として得た(10.87 g, 92 %)。 m/z (LC-MS, ESP): 328 [M-H]-, R/T = 4.73 分。
【０２９５】
トリフルオロ-メタンスルホン酸 1-tert-ブトキシカルボニルアミノ-9H-チオキサンテン-4-イル エステル
0℃に冷却した(4-ヒドロキシ-9H-チオキサンテン-1-イル)-カルバミン酸tert-ブチル エステル(10.05 g, 30.50 ミリモル)を含有する無水ピリジン(70mL)に、トリフルオロメタンスルホン酸無水物(8 mL, 48.77 ミリモル)をシリンジを用いてゆっくりと流して10分間かけて添加した。褐色の混合物を0℃でさらに30分間撹拌した後、水を滴下して添加した。
【０２９６】
その混合物をEtOAc(3 x 100mL)で抽出し、有機抽出物を併せ、MgSO4を用いて乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮して単褐色の油を得た。粗残査の精製は、ヘキサン：EtOAc(4:1)を用いたフラッシュクロマトグラフィー(SiO2)により行い、淡コハク色の油を得て、それをフラッシュクロマトグラフィー(SiO2)(ヘキサン、次いで3:1ヘキサン：EtOAc)で精製して淡コハク色の油を得た(9.42 g, 67.0%)。 m/z (LC-MS, ESP): 460 [M-H]-, R/T = 5.52 分。
【０２９７】
[4-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-9H-チオキサンテン-1-イル]-カルバミン酸tert-ブチルエステル
トリフルオロメタンスルホン酸 1-tert-ブトキシカルボニルアミノ-9H-チオキサンテン-4-イル エステル(3.05g, 6.60 ミリモル)を含有する無水ジオキサン(10mL)溶液に、ビス(ピナコラート)ジボロン(2.0 g, 7.92 ミリモル)および無水酢酸カリウム(1.9 g, 19.80 ミリモル)を添加した。次いでその反応液を脱気し(20分間超音波処理した後、N2で飽和させた)、その後、ジクロロ[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]パラジウム(II) ジクロロメタン付加化合物(0.26 g)を添加した。その反応混液をさらに20分間脱気した後、反応容器に還流コンデンサーを取り付け、その容器を100℃に加熱し、24時間激しく撹拌した。褐色の反応混液をヘキサン中に調製したシリカパッド上に注ぎ入れ、CH2Cl2:ヘキサン(1:1)で抽出した。溶出液を集め真空中で濃縮して標題の化合物の粗製物を暗褐色の油として得て、それ以上精製することなく用いた(2.90 g)。
【０２９８】
[4-(6-モルホリン-4-イル-4-オキソ-4H-ピラン-2-イル)-9H-チオキサンテン-1-イル]-カルバミン酸tert-ブチルエステル
[4-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-9H-チオキサンテン-1-イル]-カルバミン酸tert-ブチルエステル (2.90g, 6.50ミリモル)を、無水ジオキサン(6mL)中に2-クロロ-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(3)(1.4g, 6.50ミリモル)を含有する溶液中に添加した。粉末状のK2CO3(2.01g, 14.50ミリモル) を添加し、その混合物を脱気した(20分間超音波処理した後、N2で飽和させた)。その脱気した溶液にテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0.39 g)を添加した後、さらに20分間脱気した。反応容器に還流コンデンサーを取り付け、その容器をオイルバス中に浸漬し100℃で14時間保持した後、金色の混合物を冷却しEtOAc(50mL)で希釈し、水(20mL)と飽和塩水(20mL)で洗った。有機抽出物をMgSO4を用いて乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮して標題の化合物を明褐色の油として得て、それ以上精製することなく用いた。m/z (LC-MS, ESP): 493 [M+H]+, R/T = 4.41 分。
【０２９９】
2-(1-アミノ-9H-チオキサンテン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(106)
CH2Cl2(25mL)中に[4-(6-モルホリン-4-イル-4-オキソ-4H-ピラン-2-イル)-9H-チオキサンテン-1-イル]-カルバミン酸tert-ブチルエステル(3.25g)を含有する溶液に、トリフルオロ酢酸(5mL)を添加した。その混合物を室温で18時間撹拌した後、冷却し(0℃)、飽和NaHCO3をpH9となるまで滴下して添加し反応を停止させた。その混合物をCH2Cl2(3 x 20 mL)を用いて抽出し、有機抽出物を併せ、乾燥し(MgSO4)、ろ過し、真空中で濃縮して半結晶状の固形物を得て、それをシリカパッド上に適用し、EtOAc(100%)からEtOAc:MeOH(9:1)へと変えて溶出した。その溶出液を真空中で濃縮して標題の化合物を淡いコハク色の油として得た(1.46 g, 3ステップの合計で56.4%)。 m/z (LC-MS, ESP): 393 [M+H]+, R/T = 3.79 分。
【０３００】
N-アシル 2-(1-アミノ-9H-チオキサンテン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン 誘導体
(a) 無水N,N-ジメチルホルムアミド(1mL)中に2-(1-アミノ-9H-チオキサンテン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(106)(39mg, 0.1ミリモル)を含有する撹拌溶液に、N-エチルジイソプロピルアミン(0.4mL, 2.31ミリモル)およびO-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(50mg, 1.3ミリモル)を添加した。次いで、適切なカルボン酸(0.1ミリモル)を添加し、その混合物を室温で一晩撹拌した。その化合物を分取用HPLCで精製して所望の化合物を得た。それらを下記に示す：
【表６】
2005521689.tif 000055
2005521689.tif 000056
【０３０１】
(b) CH2Cl2(1mL)中に2-(1-アミノ-9H-チオキサンテン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(106)(25mg, 0.06ミリモル)およびピリジン(0.5ミリモル)を含有する溶液に、適切な塩化スルホニル(0.2ミリモル)を一度に添加した。その反応液を室温で一晩撹拌した。得られた反応混液を分取用HPLCで精製して所望の化合物を得た。それらを下記に示す：
【表７】
2005521689.tif 000057
【０３０２】
実施例１２
2-モルホリン-4-イル-6-(11-オキソ-10,11-ジヒドロ-ジベンゾ[b,f]チエピン-4-イル)-ピラン-4-オン
【化３９】
2005521689.tif 000058
【０３０３】
[2-(2-メトキシ-フェニルスルファニル)-フェニル]-酢酸
2-メトキシチオフェノール(2.8g, 20ミリモル)を、水(50mL)中に水酸化カリウム(4.6g, 80ミリモル)を含有する溶液に添加し、その混合物を15分間脱気した。次いでその反応混液に2-ヨードフェニル酢酸(5.24g, 20ミリモル)および銅（copper bronze）(64mg, 1ミリモル)を添加し、それを一晩還流した。その溶液を冷却し、ろ過し、沈殿を水(50mL)で洗った。ろ液を濃HClで酸性化し(pH1)、ジクロロメタン(3 x 100mL)で抽出した。有機物を併せ、飽和塩水で抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で蒸発させて標題の化合物を淡褐色の油として得てそれを一晩かけて固化させた。この化合物をそれ以上精製することなく用いた(5.10g, 93%)。
【０３０４】
6-メトキシ-11H-ジベンゾ[b,f]チエピン-10-オン
[2-(2-メトキシ-フェニルスルファニル)-フェニル]-酢酸(5.40g, 20ミリモル)をメタンスルホン酸(50mL)中に溶解し、その混合物を窒素雰囲気下で撹拌しつつ90℃で2時間加熱した。その反応混液を室温まで冷却し、撹拌しつつ氷上に注いだ。黒色の沈殿をろ過し、真空オーブン(50℃)中で一晩乾燥させた。この化合物はそれ以上精製することなく用いた (4.60g, 91%)。
【０３０５】
6-ヒドロキシ-11H-ジベンゾ[b,f]チエピン-10-オン
6-メトキシ-11H-ジベンゾ[b,f]チエピン-10-オン(1.54g, 6ミリモル)および塩酸ピリジン(10g)をN2雰囲気下で撹拌しつつ200℃で2時間加熱した。この反応液を室温まで冷却し、水(200mL)中で破砕した。淡緑色の沈殿をろ過し、真空オーブン(50℃)中で一晩乾燥させた (1.40g, 96%)。 1HNMR (300MHz, DMSO-d6): δH= 4.20 (2H, s), 7.05-7.69 (7H, m), 10.56 (1H, s)。
【０３０６】
トリフルオロメタンスルホン酸 11-オキソ-10,11-ジヒドロ-ジベンゾ[b,f]チエピン-4-イル エステル
6-ヒドロキシ-11H-ジベンゾ[b,f]チエピン-10-オン(242mg, 1ミリモル)を無水ピリジン(5mL)中に溶解し、その撹拌溶液中にN2雰囲気下で0℃でトリフルオロメタンスルホン酸無水物(0.17mL, 1ミリモル)を滴下して添加した。その反応混液を4時間おいて反応させ、水(50mL)中に注ぎ入れた。有機物をジクロロメタン(3 x 50mL)で抽出し、0.2N HClで洗い、硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で蒸発させて暗褐色の固形物を得た。この固形物をカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/ヘキサン, 3:7, Rf=0.15)で精製して標題の化合物を淡褐色の固形物として得た(0.37g, 100%)。 1HNMR (300MHz, DMSO-d6): δH= 3.70 (2H, s), 7.31-7.8 (7H, m)。
【０３０７】
6-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-11H-ジベンゾ[b,f]チエピン-10-オン
トリフルオロメタンスルホン酸 11-オキソ-10,11-ジヒドロ-ジベンゾ[b,f]チエピン-4-イル エステル(0.374 g, 1ミリモル)、ビス(ピナコラート)ジボロン(305mg, 1.2ミリモル)、および酢酸カリウム(294mg, 3ミリモル)を1,4-ジオキサン(5mL)中に溶解し、その混合物を5分間脱気した。その容器にPd(dppf)Cl2 (40mg, 0.05ミリモル)およびdppf(28mg, 0.05ミリモル)を添加し、それらの試薬を窒素雰囲気下で撹拌しつつ100℃で12時間加熱した。その反応混液をフラッシュクロマトグラフィー(ジクロロメタン/ヘキサン, 1:4)で精製し、黒色の残査をそれ以上精製することなく用いた(0.35g)。
【０３０８】
2-モルホリン-4-イル-6-(11-オキソ-10,11-ジヒドロ-ジベンゾ[b,f]チエピン-4-イル)-ピラン-4-オン (132)
2-クロロ-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(3)(215mg, 1ミリモル)、6-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-11H-ジベンゾ[b,f]チエピン-10-オン (352mg, 1ミリモル)、および磨砕した炭酸カリウム(276mg, 2ミリモル)を1,4-ジオキサン(10mL)中に懸濁し、5分間脱気した。次いでPd(PPh3)4(57mg, 0.05ミリモル)を添加し、その反応混液をN2雰囲気下で激しく撹拌しつつ90℃で4時間加熱した。真空中で溶媒を除去し、残査を水(100mL)中に懸濁した。有機物をジクロロメタン(3 x 100mL)で抽出し、それらを併せ、飽和塩水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥した。真空中で溶媒を除去し、残査をカラムクロマトグラフィー(シリカ；酢酸エチル：エタノール;9:1)で精製して標題の化合物を淡褐色の固形物として得た(0.12g, 29%)。 1HNMR (300MHz, DMSO-d6): δH= 3.40 (4H, t), 3.70 (4H, t), 4.43 (2H, s), 5.55 (1H, d), 6.29 (1H, d), 7.25-7.55 (5H, m), 7.78-7.81 (1H, m), 8.20-8.22 (1H, m); m/z (LC-MS, ESP), RT=4.12 分, (M++1)= 406。
【０３０９】
実施例１３
2-(10,11-ジヒドロ-ジベンゾ[b,f]チエピン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン
【化４０】
2005521689.tif 000059
【０３１０】
4-メトキシ-10,11-ジヒドロ-ジベンゾ[b,f]チエピン
エチレングリコール(20mL)中に6-メトキシ-11H-ジベンゾ[b,f]チエピン-10-オン (4.10g, 16ミリモル)を含有する液にヒドラジン水和物(4mL)および水酸化カリウム (2.72g, 48ミリモル) を添加し、その反応混液を175℃で3時間加熱した。その反応混液を室温まで冷却し、水(100mL)を添加した。その白色の溶液をエーテル(3 x 200mL)で抽出し、有機物を併せ、水(100mL)、塩水(100mL)で洗い、硫酸マグネシウム上で乾燥した。真空中で溶媒を除去して油を得て、その油を放置して固化させて褐色の固形物を得て、それ以上精製することなく用いた(2.45g, 63%)。
【０３１１】
10,11-ジヒドロ-ジベンゾ[b,f]チエピン-4-オール
4-メトキシ-10,11-ジヒドロ-ジベンゾ[b,f]チエピン(2.42g, 10ミリモル)および塩酸ピリジン(15g)を撹拌しつつ180℃で1時間加熱した。水(100mL)をその反応混液に添加し、有機物を酢酸エチル(3 x 100mL)で抽出した。有機物を併せ2N HCl(50mL)、塩水(50mL)で洗い、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。真空中で溶媒を除去し、残査をカラムクロマトグラフィー(1:9; ジクロロメタン:ヘキサン)で精製して所望の化合物を白色の固形物として得た(1.55g, 68%)。 1HNMR (300MHz, DMSO-d6): δH= 3.13-3.23 (4H, m), 6.70 (2H, t), 6.97-7.15 (4H, m), 7.38 (1H,s) 9.78 (1H, s); m/z (LC-MS, ESP), RT=4.59 分, (M++1)=  229。
【０３１２】
トリフルオロメタンスルホン酸 10,11-ジヒドロ-ジベンゾ[b,f]チエピン-4-イル エステル
10,11-ジヒドロ-ジベンゾ[b,f]チエピン-4-オール(1.26g, 5.5ミリモル)をピリジン(5mL)中に溶解し、その撹拌溶液にN2雰囲気下、0℃でトリフルオロメタンスルホン酸無水物(1.12mL, 6.6ミリモル)を滴下して添加した。その反応混液を4時間おいて反応させた後、水(100mL)に注ぎ入れた。有機物をジクロロメタン(100mL)で抽出し、0.2N HClで洗い、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、真空中で蒸発させて暗褐色の固形物を得た。この固形物をフラッシュクロマトグラフィー(ジクロロメタン)で精製して油を得た(1.1g, 56%)。  1HNMR (300MHz, DMSO-d6): δH= 3.25-3.29 (2H, m), 3.37-3.41 (2H, m), 7.12-7.17 (1H, m), 7.21-7.31 (3H, m), 7.38-7.41 (3H,s)。
【０３１３】
2-(10,11-ジヒドロ-ジベンゾ[b,f]チエピン-4-イル)-4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン
トリフルオロメタンスルホン酸 10,11-ジヒドロ-ジベンゾ[b,f]チエピン-4-イル エステル(1.08g, 3ミリモル)、ビス(ピナコラート)ジボロン(914mg, 3.6ミリモル)、および酢酸カリウム(883mg, 9ミリモル)を1,4-ジオキサン(10mL)中に溶解し、その混合物を5分間脱気した。その容器にPd(dppf)Cl2(121mg, 0.15ミリモル)およびdppf(83mg, 0.15ミリモル)を添加し、それらの試薬を窒素雰囲気下で撹拌しつつ100℃で12時間加熱した。その反応混液をフラッシュクロマトグラフィー(ジクロロメタン)で精製し、黒色の残査をそれ以上精製することなく用いた(0.87g)。
【０３１４】
2-(10,11-ジヒドロ-ジベンゾ[b,f]チエピン-4-イル)-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン
2-クロロ-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(3)(1.12g, 5.2ミリモル)、2-(10,11-ジヒドロ-ジベンゾ[b,f]チエピン-4-イル)-4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン(880mg, 2.6ミリモル)、および磨砕した炭酸カリウム(720mg, 5.2ミリモル)を1,4-ジオキサン(10mL)中に懸濁し、5分間脱気した。次いでビス(トリ-t-ブチルホスフィン)パラジウム(66mg, 0.13 ミリモル)を添加し、その反応混液をN2雰囲気下で激しく撹拌しつつ90℃で4時間加熱した。真空中で溶媒を除去し、残査を水(100mL)に懸濁した。有機物をジクロロメタン(3 x 100mL)で抽出し、それらを併せ、飽和塩水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。真空中で溶媒を除去し、残査をカラムクロマトグラフィー(シリカ；酢酸エチル：エタノール;9:1)で精製して淡褐色の固形物を得た(50mg, 5%)。 1HNMR (300MHz, DMSO-d6): δH= 3.24-3.32 (6H, m), 3.44 (2H, t), 3.66 (4H, t), 5.50 (1H, d), 6.10 (1H, d), 7.08-7.51 (7H, m); m/z (LC-MS, ESP), RT= 4.48分, (M++1)= 392。
【０３１５】
実施例１４
2-モルホリン-4-イル-6-(10H-フェノチアジン-4-イル)-ピラン-4-オン
【化４１】
2005521689.tif 000060
【０３１６】
10H-フェノチアジン-4-オール
1,2-ジクロロベンゼン(50 mL)中に3-フェニルアミノ-フェノール(5 g, 26.99ミリモル)を含有する液に、S8 イオウ(1.82 g, 56.76 ミリモル) を一度に、およびヨウ素(0.1 g, 0.39 ミリモル)を10分かけて3回に分けて添加した。反応容器に還流コンデンサーを取り付け、その容器を窒素雰囲気下で185℃に加熱した。その混合物をこの温度で4時間撹拌した後、室温まで冷却した。その反応混液をろ過して黒色の沈殿を取り除き、ろ液をEt2O(100mL)で希釈し、水(2 x 100mL)で洗った。有機層を分離し、揮発性の溶媒を除去して濃緑色の油を得て、それをフラッシュカラムクロマトグラフィー(SiO2)(ヘキサン、次いで8:1-ヘキサン:EtOAc)で精製して淡黄色の固形物を得た(2.38g, 40.96%)。 m/z (LC-MS, ESP) 216 [M+H]+, R/T = 4.12 分。
【０３１７】
4-ヒドロキシ-フェノチアジン-10-カルボン酸tert-ブチルエステル
無水ピリジン(10mL)中に10H-フェノチアジン-4-オール(0.77 g, 3.58 ミリモル)を含有する液に、ジ-tert-ブチルジカーボネート(3.12 g, 14.31 ミリモル)を一度に添加した。その溶液を窒素雰囲気下で撹拌しつつ80℃で60分間加熱した後、室温まで冷却し、水(20mL)で処理し、EtOAc(2 x 30mL)で抽出した。有機層を水(20mL)で洗い、MgSO4を用いて乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮してコハク色の油を得た。粗残査をMeOH(15mL)と固体のNaOH(0.65 g, 16.25 ミリモル)で処理した。その混合物を80℃で60分間加熱した後、室温まで冷却し、1M HCl溶液でpH７となるまで中和した。得られた懸濁液をろ過し、乾燥して標題の化合物をベージュ色の固形物として得て(1.13 g, 100%)、それ以上精製することなく用いた。 m/z (LC-MS, ESP): 315 [M-H]-, R/T = 4.72 分。
【０３１８】
4-トリフルオロメタンスルホニルオキシ-フェノチアジン-10-カルボン酸tert-ブチルエステル
トリフルオロメタンスルホン酸無水物(2.95mL, 17.09ミリモル)を、4-ヒドロキシ-フェノチアジン-10-カルボン酸tert-ブチルエステル(3.60g, 11.41ミリモル)を含有するピリジン(40mL)の冷却した(0℃)撹拌溶液に滴下して添加した。この反応混液を0℃で1時間撹拌した後、水(80mL)を添加した。この混合物をEtOAc(2 x 60mL)を用いて抽出した。有機抽出物をMgSO4を用いて乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮して暗褐色の油を得た。粗残査をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2)(4:1-ヘキサン:EtOAc)で精製して黄色の油を得た (5.02 g, 98.24%)。 m/z (LC-MS, ESP): 348 [M+H-BOC]+, R/T = 5.61 分。
【０３１９】
4-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-フェノチアジン-10-カルボン酸tert-ブチルエステル
無水ジオキサン(10mL)中に4-トリフルオロメタンスルホニルオキシ-フェノチアジン-10-カルボン酸tert-ブチルエステル(3.0 g, 6.7 ミリモル)を含有する撹拌溶液に、ビス(ピナコラート)ジボロン(2.05g, 8.06ミリモル)および酢酸カリウム(1.96g, 20.01ミリモル)を添加した。次いでその反応液を脱気(20分間超音波処理した後、N2で飽和させた)した後、ジクロロ[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン] パラジウム(II)ジクロロメタン付加化合物(0.27g, 0.33ミリモル)を添加した。その反応混液をさらに20分間脱気した後、反応容器に還流コンデンサーを取り付け、その容器を激しく撹拌しつつ90℃で72時間加熱した。暗褐色の反応混液を室温まで冷却した後、ヘキサン中に調製した厚いシリカパッドに適用し、ヘキサン:CH2Cl2-(2:1)で溶出させた。溶出液を真空中で濃縮して暗褐色の油を得て(2.85g, 100%)、それ以上精製することなく次の反応に用いた。  m/z (LC-MS, ESP): 326 [M+H-BOC]+, R/T = 5.86 分。
【０３２０】
4-(6-モルホリン-4-イル-4-オキソ-4H-ピラン-2-イル)-フェノチアジン-10-カルボン酸tert-ブチルエステル (134)
無水ジオキサン(20mL)中に4-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-フェノチアジン-10-カルボン酸tert-ブチルエステル(2.85g, 6.70ミリモル)を含有する撹拌溶液に、粉末状炭酸カリウム(2.03g, 14.68ミリモル)および2-クロロ-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(1.44g, 6.70ミリモル)を添加し、その混合物を十分に脱気した(20分間超音波処理した後、N2で飽和させた)。テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウムを一度に添加し、その混合物を再度脱気(20分間超音波処理した後、N2で飽和させた)した後、還流コンデンサーを取り付け、窒素雰囲気下で100℃で20時間加熱した。水(30mL)を添加し、その混合物をEtOAc(3 x 30mL)で抽出した。ついでその有機抽出物をMgSO4を用いて乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮して暗褐色の結晶性の固形物を得て(3.21g, 100%)、それ以上精製することなくその後の反応に用いた。 m/z (LC-MS, ESP): 479 [M+H]+, R/T = 4.55 分。
【０３２１】
2-モルホリン-4-イル-6-(10H-フェノチアジン-4-イル)-ピラン-4-オン(135)
CH2Cl2(30 mL)中に4-(6-モルホリン-4-イル-4-オキソ-4H-ピラン-2-イル)-フェノチアジン-10-カルボン酸tert-ブチルエステル(3.65g, 7.63ミリモル)を含有する撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸を一度に添加した。その混合物を室温で20時間撹拌した後、反応液を真空中で濃縮して濃厚なシロップを得て、それに飽和NaHCO3(40mL)を滴下して塩基性化した。その暗緑色の混合物を室温で18時間撹拌した。その混合物をろ過し、ろ液を取って水で洗い、乾燥して標題の化合物を暗緑色の固形物として得た(2.89g, 3ステップ合計で83.74%)。  m/z (LC-MS, ESP): 479 [M+H]+, R/T = 4.05 分。
【０３２２】
実施例１５
4-モルホリン-4-イル-6-チアントレン-1-イル-ピラン-2-オン
【化４２】
2005521689.tif 000061
【０３２３】
チアントレン-1-カルボン酸
無水THF(250mL)中にチアントレン(16.9g, 78ミリモル)を含む撹拌溶液に、不活性気体(N2)の雰囲気下で−78℃で30分間かけてt-ブチルリチウム(ヘキサン中に1.7M, 55.1mL, 93.6ミリモル)を滴下して添加した。その反応混液を室温まで加温し、得られた赤色の溶液を24時間撹拌し続けた。その混合物を−78℃まで冷却し、その溶液中で二酸化炭素(ドライアイスペレットからの二酸化炭素をいくつかの活性化A4シーブ (activated A4 sieves) を通過させて乾燥させたもの)を1時間発泡させた。その反応液をさらに1時間CO2の発泡を継続しつつ室温まで再度加温した。その溶液に水(10mL)を注意深く添加し、2N HClでpHを1に調整した(pH試験紙にて)。真空中で溶媒を除去し、生成した黄色の固形物をろ過し、真空デシケーター中で一晩乾燥した。次いでその固形物をメタノールから再結晶させて所望の生成物を淡黄色の結晶性の固形物として得た(11.9g, 59%)。1HNMR (300MHz, CDCl3): δH = 7.25 (3H, m); 7.50 (4H, m). m/z (LC-MS, ESP): RT= 4.53分, (M--1)= 259。
【０３２４】
1-チアントレン-1-イル-エタノン
無水テトラヒドロフラン(200mL)中にチアントレン-1-カルボン酸(11.71g, 45ミリモル)を含有する撹拌溶液に、不活性気体(N2)の雰囲気下で−78℃で30分間かけてメチルリチウム(エーテル中に1.6M, 57mL, 90ミリモル)を滴下して添加した。その反応混液を室温まで加温し(非常に濃厚な白色の懸濁液ができる)、4時間撹拌し続けた。次いでその溶液に水(10mL)を注意深く添加し、2N HClでpH1に調製した(pH試験紙にて)。真空中で溶媒を除去し、生成した黄色の固形物をろ過し、真空デシケーター中で一晩乾燥した。その固形物をカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル/ヘキサン；1:9)で精製し、エタノールから再結晶させて所望の生成物を得た(6.58g, 57%)。1HNMR (300MHz, CDCl3): δH = 2.65 (3H, s); 7.26 (3H, m); 7.47 (2H, m); 7.62 (2H, d), m/z (LC-MS, ESP) RT= 4.95 分; (M+ + 1)= 259。
【０３２５】
3-オキソ-3-チアントレン-1-イル-ジチオプロピオン酸
無水テトラヒドロフラン(50mL)中にカリウム t-ブトキシド(5.73g, 51ミリモル)を含有する溶液に、無水テトラヒドロフラン(20mL)中にCS2(1.55mL, 25.5ミリモル)および1-チアントレン-1-イル-エタノン(6.59g, 25.5ミリモル)を含有する溶液を、N2雰囲気下で0℃で滴下して添加した。液が赤色となり、沈殿の形成が観察された。その混合物を週末の間激しく撹拌しつつ放置した後、水(200mL)に注ぎ入れ、エーテル(3 x 100mL)で抽出した。水相を2N H2SO4でpH1に酸性化し(Whatmann pH試験紙にて)、エーテル(3 x 100mL)で抽出した。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で溶媒を除去して所望の生成物を暗橙色の樹脂状のものとして得た(5.00g, 59%)。 m/z (LC-MS, ESP), RT= 5.11; (M- -1)= 333。
【０３２６】
3-オキソ-3-チアントレン-1-イル-ジチオプロピオン酸エチルエステル
硫酸水素テトラブチルアンモニウム(5.1g, 15ミリモル)および水酸化ナトリウム(1.2g, 30ミリモル)を水(50mL)中に溶解した。その溶液に、ジクロロメタン(50mL)中に3-オキソ-3-チアントレン-1-イル-ジチオプロピオン酸(5.02g, 15ミリモル)を含有する溶液を一度に添加し、30分間激しく撹拌した。水層を除去しヨードエタン(4mL)をそのジクロロメタン溶液に添加した後、1時間撹拌した。真空中で溶媒を除去し、残査を水(200mL)中に取った。有機物をエーテル(3 x 100mL)で抽出し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で蒸発させた。次いでその残査をカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:ヘキサン；1:4)で精製して所望の化合物を明黄色の固形物として得た(4.00g, 73%)。 1HNMR (300MHz, CDCl3): δH = 1.43 (3H, t), 3.33 (3H, q), 6.57 (1H, s), 7.26 (3H, m), 7.51 (3H, m), 7.60 (1H, m), 15.09 (1H, s); m/z (LC-MS, ESP), RT=6.50 分, (M--1)= 361。
【０３２７】
3-モルホリン-4-イル-1-チアントレン-1-イル-3-チオキソ-プロパン-1-オン
モルホリン(0.96mL, 11ミリモル)を、エタノール(20mL)中に3-オキソ-3-チアントレン-1-イル-ジチオプロピオン酸エチルエステル(3.99g, 11ミリモル)含有する溶液に添加した。この反応液を8時間還流した後、室温まで冷却した。生成した沈殿をろ過し、乾燥して所望の生成物を明橙色の固形物として得た(3.50g, 82%)。 m/z (LC-MS, ESP), RT= 4.81および5.33分、同じ、(M+1)= 388。
【０３２８】
3-エチルスルファニル-3-モルホリン-4-イル-1-チアントレン-1-イル-プロペノン
3-モルホリン-4-イル-1-チアントレン-1-イル-3-チオキソ-プロパン-1-オン(3.49g, 9ミリモル)、ヨードエタン(0.8mL, 10ミリモル)、および磨砕した炭酸カリウム(1.38g, 10ミリモル)をアセトン(20mL)中に懸濁し、その混合物を24時間還流した。真空中で溶媒を除去し、残査を水(50mL)中に取った。有機物をジクロロメタン(3 x 100mL)中に抽出し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で蒸発させた。その粗生成物をカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル/ヘキサン)で精製して所望の生成物を黄色の固形物として得た(2.26g, 60%)。 1HNMR (300MHz, CDCl3): δH= 1.34 (3H, t), 2.96 (2H, q), 3.73 (4H, m), 3.84 (4H, m), 7.21 (3H, m), 7.47 (4H, m); m/z (LC-MS, ESP), RT= 5.01分, (M++1)= 416。
【０３２９】
4-モルホリン-4-イル-6-チアントレン-1-イル-ピラン-2-オン (136)
無水テトラヒドロフラン(20mL)中に活性化亜鉛ダスト(0.65g, 10ミリモル)、ブロモ酢酸エチル(0.56mL, 5ミリモル)、およびヨウ素の結晶を2,3個含有する懸濁液を、N2雰囲気下で撹拌しつつ50℃で1時間加熱した。無水テトラヒドロフラン(20mL)中の3-エチルスルファニル-3-モルホリン-4-イル-1-チアントレン-1-イル-プロペノン(1.04g, 2.5ミリモル)を撹拌しつつ滴下して添加し、その混合液をN2雰囲気下で12時間還流した。その混合液を氷冷した3%希H2SO4(50mL)に注ぎ入れ、水層を酢酸エチル(3 x 50mL)で抽出し、抽出物を併せて硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で溶媒を除去した。残査をカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル/ヘキサン)で精製して所望の生成物を得た(0.35g, 35%)。  1HNMR (300MHz, CDCl3): δH= 3.45 (4H,t), 3.85 (4H, t), 5.35 (1H, d), 6.29 (1H, d), 7.26 (3H, m), 7.50 (3H, m) 7.61 (1H, m); m/z (LC-MS, ESP), RT= 4.50分, (M++1)= 396。
【０３３０】
実施例１６
6-(6-モルホリン-4-イル-4-オキソ-4H-ピラン-2-イル)-チアントレン-2-カルボン酸アミド誘導体
【化４３】
2005521689.tif 000062
【０３３１】
3-クロロスルホニル-4-フルオロ-安息香酸
クロロスルホン酸(100mL, 1.5モル)を4-フルオロ安息香酸(43g, 0.307モル)に撹拌しつつ徐々に添加した。澄明な暗黄色の混合物を150℃で24時間加熱した。その黄色の溶液を室温まで冷却し、激しく撹拌しつつ氷上に注いだ。白色の沈殿をろ過し、圧をかけて乾燥させた。その固形物をデシケーター中で真空下で活性化シリカ上で一晩乾燥した（54.65g, 75%）。Mp: 116-117℃; m/z (LC-MS, ESP), RT= 4.03分, (M--1)= 237-239 (比 1:3)。
【０３３２】
4-フルオロ-3-スルフィノ-安息香酸
水(150mL)中に3-クロロスルホニル-4-フルオロ-安息香酸(49.39g, 0.207モル)を含む液に、亜硫酸ナトリウム(130mg, 1.034ミリモル)を0℃で激しく撹拌しつつ緩徐に添加した。添加の完了後、反応液を室温に戻して1時間おき、その溶液のpHを2N 水酸化ナトリウム溶液で約pH 6〜7に保った。白濁した懸濁液をろ過し、固形物を2N 水酸化ナトリウム溶液(150mL)で、次いで水(100mL)で洗った。次いで、ろ液を氷浴中で冷却し、濃HClを沈殿がそれ以上生成されなくなるまで添加した(pH<1)。その白色沈殿をろ過し、圧をかけて乾燥し、デシケーター中で真空下で活性化シリカ上で一晩乾燥した(27.92G, 66%)。 M/Z (LC-MS, ESP), RT= 0.98分, (M<SUP>--1)= 203。
【０３３３】
4-(2-ブロモ-フェニルスルファニル)-3-スルフィノ-安息香酸
2-ブロモベンゼンチオール(25g, 132 ミリモル)を、水(30mL)中に4-フルオロ-3-スルフィノ-安息香酸(13.5g, 66ミリモル)およびNaOHペレット(11g, 264ミリモル)を含有する溶液に添加した。次いでその黄色の混合物を10分間脱気し、140℃で48時間加熱した。その反応液を0℃に冷却し、濃HClでpH4〜5(pH試験紙にて)に酸性化した。生成した沈殿をろ過し、ヘキサンで洗い、真空デシケーター中で活性化シリカ上で一晩乾燥した(20.69g, 84%)。 m/z (LC-MS, ESP), RT= 3.67分, (M--1)= 373。
【０３３４】
6-ブロモ-チアントレン-2-カルボン酸
4-(2-ブロモ-フェニルスルファニル)-3-スルフィノ-安息香酸(14g, 38ミリモル)をメタンスルホン酸(160mL)の撹拌溶液に緩徐に添加した。その紫色の溶液を60℃で3時間加熱した。その反応液を室温まで冷却し、氷(300mL)に注ぎ、黄白色の沈殿が生成した。その固形物をろ過し、水(100mL)で洗い、真空デシケーター内で活性化シリカ上で乾燥した(9.48g, 73%)。 1HNMR (300MHz, CDCl3): δH= 7.29 (1H, t), 7.59 (1H, dd), 7.70 (1H,dd) 7.74 (1H, d), 7.87 (1H, dd), 8.03 (1H, d).m/z (LC-MS, ESP), RT= 4.99分, (M--1)= 339。
【０３３５】
6-ブロモ-チアントレン-2-カルボン酸メチルエステル
メタノール(180mL)中に6-ブロモ-チアントレン-2-カルボン酸(9g, 28ミリモル)を含有する液に、濃H2SO4(5 mL)を緩徐に添加した。その白濁した懸濁液を80℃で固形物が全て溶解するまで加熱した(2時間)。その懸濁液を真空中で濃縮した。水(100mL)を添加し、有機物をジクロロメタン(3 x 70mL)で抽出し、MgSO4上で乾燥し、真空中で蒸発させて黄色の固形物を得た(4.48g, 45%)。 1HNMR (300MHz, CDCl3): δH=  3.94 (3H, s); 7.13 (1H, t), 7.44 (1H, dd), 7.54 (1H,dd) 7.61 (1H, d), 7.93 (1H, dd), 8.13 (1H, d)。
【０３３６】
6-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-チアントレン-2-カルボン酸メチルエステル
1,4-ジオキサン(15mL)中に6-ブロモ-チアントレン-2-カルボン酸メチルエステル(1g, 2.8ミリモル)、ビス(ピナコラート)ジボロン(0.86g, 3.4ミリモル)、および酢酸カリウム(0.12g, 0.14ミリモル)を含有する液を15分間脱気した。その黄色の懸濁液にPdCl2(dppf) (78mg, 0.14ミリモル)およびdppf(0.83g, 8.5ミリモル)を添加した。暗赤色の混合物をN2雰囲気下で90℃で48時間加熱した。この粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー(ジクロロメタン)で精製して粘稠な褐色の油を得て(1.13g)、それ以上精製することなく用いた。
【０３３７】
6-(6-モルホリン-4-イル-4-オキソ-4H-ピラン-2-イル)-チアントレン-2-カルボン酸メチルエステル (137)
6-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-チアントレン-2-カルボン酸メチルエステル(1.1g, 2.83ミリモル)、2-クロロ-6-モルホリン-4-イル-ピラン-4-オン(0.73g, 3.4ミリモル)、およびK2CO3(0.8g, 5.66ミリモル)を無水ジオキサン(7mL)中に溶解した。この混合物を15分間脱気した後、Pd(PPh3)4(0.16g, 5モル%)を添加した。暗褐色の混合物をN2雰囲気下で90℃で24時間加熱した。この反応混液を真空中で濃縮し、水(100mL)を添加した。褐色の固形物をろ過し、水で洗った(1.23g, 96%)。  m/z (LC-MS, ESP), RT= 4.49 分, (M++1)= 454。
【０３３８】
6-(6-モルホリン-4-イル-4-オキソ-4H-ピラン-2-イル)-チアントレン-2-カルボキシレートナトリウム塩 (138)
6-(6-モルホリン-4-イル-4-オキソ-4H-ピラン-2-イル)-チアントレン-2-カルボン酸メチルエステル(1.1g, 2.43ミリモル)およびNaOHペレット(97mg, 2.43ミリモル)をメタノール(40mL)中に溶解した。その褐色の懸濁液をN2雰囲気下で80℃で24時間加熱した。真空中で溶媒を除去し、残査をジエチルエーテルで破砕した。生成物をろ過して集め、微細な暗褐色粉末として生成物を得た(1.11g, 99%)。  m/z (LC-MS, ESP), RT=3.90 分, (M- -1)=  438。
【０３３９】
6-(6-モルホリン-4-イル-4-オキソ-4H-ピラン-2-イル)-チアントレン-2-カルボン酸アミド誘導体
6-(6-モルホリン-4-イル-4-オキソ-4H-ピラン-2-イル)-チアントレン-2-カルボキシレートナトリウム塩(138)(20mg, 0.04ミリモル)、HBTU(18mg, 0.05ミリモル)、ジ-イソプロピルエチルアミン(9μL, 0.05ミリモル)、適切なアミン(0.04ミリモル)、および無水ジメチルアセトアミド(0.5mL)。その暗褐色混合物を室温で2時間撹拌した後、分取用HPLCで精製して所望の生成物を得た。それらを下記に示す：
【表８】
2005521689.tif 000063
2005521689.tif 000064
2005521689.tif 000065
2005521689.tif 000066
【０３４０】
B)生物学的実施例
材料と方法
in vitro ATM阻害アッセイ
該化合物のATMに対する阻害作用をin vitroで評価するために、下記のアッセイを用いてIC50値を求めた。
【０３４１】
ATMタンパク質は、HeLa細胞の核抽出物から、ヒトATMタンパク質のC末端の〜500個のアミノ酸残基に対して作成したウサギポリクローナル抗血清を用いて免疫沈降させたものである。免疫沈降法はBanin, S.ら, (1998)に記載の方法論に従って行った。10μLのバッファーC(50mM Hepes, pH7.4、6mM MgCl2、150mM NaCl、0.1mM オルトバナジン酸ナトリウム、4mM MnCl2、0.1mM ジチオスレイトール、10% グリセロール)中に免疫沈降法で生じたATMを含有する液を、Ｖ字型の底部を有する96ウエルのポリプロピレンプレート中で、1μgのATM基質GSTp53N66を含有する32.5μLのバッファーCに添加した。GSTp53N66基質はグルタチオンS-トランスフェラーゼに融合させたヒト野生型p53のアミノ末端の66個のアミノ酸残基である。ATMはp53をそのセリン残基15においてリン酸化する(Banin, S. ら, (1998))。次いで種々の濃度の阻害剤を添加した。供試化合物は全てDMSOで希釈して最終のアッセイ濃度を100μMと1nMの間の濃度とし、そのときDMSOは最終濃度が1%となった。37℃で10分間インキュベートした後、その反応を5μLの500μM Na-ATPを添加することによって開始した。37℃で1時間振盪した後、150μLのリン酸緩衝食塩液(PBS)をその反応液に添加し、プレートを1500rpmで10分間遠心した。次いで反応液の5μLを、45μLのPBSを含有している96ウエルの乳白色のプレートに移してGSTp53N66基質をプレートのウエルと結合させた。そのプレートをカバーし室温で振盪させつつ1時間インキュベートした後、その内容物を棄てた。プレートのウエルをPBSで2回洗った後、PBS中の3%(w/v)ウシ血清アルブミン(BSA)を添加した。プレートを室温で振盪させつつ1時間インキュベートした後、内容物を棄て、PBSで2回洗った。それらのウエルに、3% BSA/PBS中のホスホセリン-15一次抗体(Cell Signaling Technology, #9284L)の1:10,000希釈のものを50μL添加して、ATMキナーゼによって引き出されたp53の15の位置のセリン残基に起こったリン酸化を検出した。室温で振盪させつつ1時間インキュベートした後、ウエルをPBSで4回洗い、その後抗ウサギHRPコンジュゲート二次抗体(Pierce, 31462)を添加して室温で振盪させつつ1時間インキュベートした。次いでそれらのウエルをPBSで4回洗った後、化学発光試薬(NEN Renaissance, NEL105)を添加した。プレートを軽く振盪し、透明なプレートシールでカバーし、化学発光のカウントのためにTopCount NSTに移した。1秒間のカウント時間の後、1秒あたりのカウント数を各反応液について記録した。
【０３４２】
各化合物での酵素活性は下記の式を用いて計算した：
％阻害率＝100−((未知物質のcpm −陰性対照の平均cpm) x 100 ／ (陽性対照の平均cpm −陰性対照の平均cpm))
電離放射線またはDNA二本鎖切断化学療法に対する細胞の感受性化
ATM阻害剤の化合物4の、電離放射線またはDNA二本鎖切断を誘発する化学療法に対して細胞を感受性化する能力を試験するために、HeLaまたはLoVoヒト腫瘍由来細胞系統を用いて、クローン原性生存性アッセイ(clonogenic survival assay)を行った。HeLa細胞系統は電離放射線での研究に用い、LoVo細胞系統は化学療法剤での研究で用いた。一処理あたり〜100コロニーを得るために十分な数の細胞を、6ウエルのディッシュに蒔き、4〜6時間後に、グラフに示している濃度で化合物4を添加した。1時間後に、一連の濃度のエトポシド(図2)、カンプトテシン(図3)、またはドキソルビシン(図4)を添加した。電離放射線処理(図1)では、化合物4と1時間インキュベートした後、Faxitron 43855D X線キャビネットを用いて、細胞に1Gy/分照射した。全ての処理について、さらに16時間のインキュベーションを行った後、薬剤を含有する培地を除去して新鮮な培地を添加し、さらに10日間のインキュベーションを行った後、コロニーをギムザ染色した。供試化合物は全てDMSO中に溶解し、細胞に用いる際の最終濃度を0.1%以下とした。この細胞を>50含んでいる残存コロニーを陽性と計数した。
【０３４３】
組換えレトロウイルスベクターおよびウイルス標品
Ψ-/LTR-/Vpr- 複製欠損HIV gag/polを発現しているパッケージング構築物を、ベクターLΔP2GPH (Haselhorstら, 1998 "Development of cell lines stably expressing human immunodeficiency virus type 1 proteins for studies in encapsidation and gene transfer" J. Gen. Virol., 79, 231-7)に基づいてデザインした。HIVインテグラーゼ変異体パッケージング構築物、これはインテグラーゼ遺伝子中のD64Vアミノ酸の変化をコードするものであるが、これを部位特異的突然変異導入によって作成した(Quickchange mutagenesis system, Stratagene)。HIV-1ルシフェラーゼトランスファーベクターであるHIV-Lucを、fireflyのルシフェラーゼ遺伝子を2個のHIV-1 LTR配列とΨ HIV-1 RNA パッケージングシグナル配列の間に挿入することによって構築した。VSV G エンベロープ発現プラスミドについては既に報告されている(Naldiniら, (1996) "In vivo gene delivery and stable transduction of nondividing cells by a lentiviral vector", Science, 272, 263-7)。HIV-1組換えレトロウイルスのストックはNaldiniら, 1996に報告されている3-プラスミド発現系を改変したものを用いて作成した。6 x 106個のヒト腎臓293T細胞を、Lipofectamine-2000試薬(Gibco-BRL)を用いて、10μgのパッケージング構築物WTまたはインテグラーゼD64V変異体、8μgのHIV-Luc移送ベクターおよび5μgのVSV G エンベロープタンパク質発現プラスミドで同時トランスフェクションした。トランスフェクションの48時間後にレトロウイルスを含んでいる細胞培養上清を集め、0.45μmのセルロースアセテート膜を通過させてろ過し、−80℃で保存した。組換えHIV-1ウイルス力価はHIV-1 p24 gag抗原ELISAキット(Beckman-Coulter)を製造者の使用説明書に従って用いて測定した。
【０３４４】
レトロウイルス形質導入(LUCIA)
HIV-1をベースとしたルシフェラーゼアッセイ(LUCIA)には、Jurkat T細胞(懸濁培養)を8μg/mL ポリブレンの存在下で37℃で1時間MOIを0.5とした上清を含有しているHIV-Luc組換えウイルスで形質導入した。細胞を洗った後、種々の濃度の阻害剤を含有している96ウエルの乳白色の組織培養プレート(Corning)の複数のウエルに蒔いた(3 x 104個の細胞/ウエル)。HeLa細胞(接着性細胞)では、細胞を蒔き24時間付着させてから、ウイルスを含有している上清に暴露させた。ウイルス添加後37℃で48時間その細胞をインキュベートし、ルシフェラーゼ活性をPackard TopCount-NXT マイクロプレートシンチレーションカウンターでBright-Glo ルシフェラーゼアッセイ試薬(Promega Corp.)を用いて定量した。形質導入を定量した実験では全て少なくとも3回の独立した実験から標準誤差(S.E.)を計算した。細胞傷害性は、LUCIAと並行して(ただしウイルスは含まず)市販のCellTiter-96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay (Promega Corp.)を用いて製造者の使用説明書に従って評価した。
【０３４５】
HIV-1 4日間複製アッセイ
C8166 T細胞を洗い、HIV-1(HXB2wtおよびHXB2AZTres株、逆転写酵素のアミノ酸の変化は67N、70R、215F、219Q)を低多重感染度で室温で1時間感染させた。次いでその細胞を洗い、種々の濃度の阻害剤を含有している96ウエルの細胞培養プレートに蒔いた(5 x 104個の細胞/ウエル、3回重複測定)。プレートを37℃で4日間インキュベートした。次いで無細胞の培養液を集め、p24ウイルス抗原のレベルを市販のELISAキット(Murex)を、製造者の使用説明書に従って用いてアッセイした。細胞傷害性は未感染のC8166 T細胞を、種々の濃度の阻害剤を含有している96ウエルの細胞培養プレートに蒔き(5 x 104個の細胞/ウエル、3回重複測定)、そのプレートを37℃でインキュベートして評価した。4日後、25μLのXTT、これは生細胞では代謝されるが、死んだ細胞では代謝されないものだが、これを添加し、プレートを37℃でさらに3時間インキュベートした。最後に、450nmの波長で吸光度を測定した。
【０３４６】
結果
in vitro ATM アッセイ
上述の方法を用いて化合物のATM 阻害活性をアッセイした。結果のいくつかをIC50値(酵素活性の50%が阻害される濃度)として下記の表1に詳述している。これらは種々の濃度、通常は100μMから1nMの範囲で測定したものである。このIC50値は、化合物の活性が強いものを特定するための比較値として用いられる。
【表９】
2005521689.tif 000067
【０３４７】
次の化合物はIC50値が200nM未満であった：19-43、44-87、93、102、106-107、109-113、115-117、119、122-124、126-131、133-135、137-140、142-182。
【０３４８】
上記のものに加え、次の化合物はIC50値が2μM未満であった：88-92、94-101、103-105、108、114、118、120-121、125、132、136、および141。
【０３４９】
電離放射線またはDNA二本鎖切断化学療法に対する細胞の感受性化
図1-4のデータは、化合物4でのATMの阻害がDNA二本鎖切断誘導剤に対する腫瘍由来細胞系統の感受性化に著しい効果を有することを明らかに示している。
【０３５０】
レトロウイルス形質導入(LUCIA)
HIV-1をベースとしたLUCIAを用いて、化合物4(Ku0064として知られている)のレトロウイルス感染を抑制する能力について試験した(図5)。
【０３５１】
化合物4はJurkat T細胞(図5)ならびにその他のATMが働いている細胞系統で試験したもの全てにおいて、低いマイクロモル濃度レベルの濃度でHIV-1 LUCIAを効率的に阻害することが示された。LUCIAでの化合物4の50%阻害濃度(IC50)は、Jurkat細胞で1〜2μMであり(図5)、その他の試験した細胞系統の全てで1から10μMの範囲であった。
【０３５２】
化合物4の細胞傷害性および増殖阻害効果の試験を、それらが観察された形質導入の効率の低下の理由ではないことを確認するために、LUCIAと並行して行った。10μMまでの濃度で化合物4で暴露されても、アッセイの際、Jurkat細胞に対して著しい細胞傷害性効果は示さなかった(図5)。
【０３５３】
HIV-1をベースとしたLUCIAを、化合物4およびヌクレオシド類似体の逆転写酵素阻害剤である3'-アジド-3'-デオキシチミジン(AZT)の双方の濃度を増加させつつ存在させてHeLa細胞で行った。
【０３５４】
図7は、化合物4とAZTの組み合わせがHIV-1感染の阻害においてそれぞれの薬剤単独よりもより効果的に作用することを見出した。図7はAZTの濃度を増大させると本発明の化合物のHIV-1感染の阻害での有効性が増強することの一例を示している。
【０３５５】
HIV複製の阻害
HIVの複製が起こっている系における本発明の化合物の有効性を示すために、化合物4の不在下、またはその濃度を増加させつつ、C8166 T細胞を感染させるために複製能のあるHIV-1株(HIVHXB2)を用いた。4日間ウイルスを複製させた後、細胞培養上清中のHIV-1の量をp24抗原ELISAで定量した。対照として、逆転写酵素阻害剤であるAZTを並行実験で用いた。図8Aは野生型HIV-1株(HIVHXB2 wt)のHIV-1複製の、化合物4およびAZTによる阻害を示している。HIV-1複製阻害に対しての化合物4のIC50濃度は0.1μMであった。AZTは0.002μMのIC50を示した。
【０３５６】
AZT耐性のHIV-1株(HIVHXB2 AZTres)を用いて4日間複製アッセイを、化合物4の不在下、または濃度を増加させつつ行った(図８B、表2)。AZT耐性株のHIV-1複製阻害に対する化合物4のIC50濃度は0.06μMであった。AZTは0.05μMのIC50を示し(表2)、このことはこの株が野生型株と比較するとAZTに対して25倍、耐性が強いであることを示している。
【０３５７】
化合物4はHIV-1の複製を、野生型HIV-1に対しても(IC50=0.1μM、図8A、表2)、AZT耐性HIV-1株に対しても(IC50=0.6μM、図8B、表2)、同等によく阻害した。これらのデータは本発明の化合物が、野生型株およびAZTへの耐性を獲得したHIV-1の株の双方でのHIV-1感染に有効であることの証拠を提供するもので、ウイルスタンパク質を標的とする他の薬剤に対して耐性のHIV-1株への有効性を示唆するものである。
【０３５８】
化合物4の細胞傷害性および増殖阻害効果の試験を、それらが観察されたウイルス力価への効果の理由ではないことを確認するために、HIV-1複製アッセイと並行してC8166細胞で試験した(図8C)。C8166細胞を化合物4に暴露させてもアッセイの際に著しい細胞傷害性は示さず、HIV-1複製阻害に有効な濃度範囲(1μM未満)にわたって細胞傷害性は見られなかった。50%のC8166細胞に傷害性を示す化合物4の濃度(CC50)は20μMを越えるものと推測された。表2は4日間複製アッセイにおける化合物4の抗HIV-1活性を示した実験を要約したものである。興味深いことに、LUCIAでのIC50値(1μM；図5)は複製アッセイでの値(0.1μM；図8A)よりも10倍高かった。この相違は複製アッセイでは感染が複数ラウンド起こり、各ラウンドでHIV-1阻害能が提供されたという事実によって説明できるであろう。従って、化合物4の阻害作用はHIV-1複製アッセイでは複合化したものとなっている。従って、複製アッセイにおける推定IC50濃度は、HIV-1感染患者の体内で認められうる阻害の程度をより正確に反映したものといえる。
【表１０】
2005521689.tif 000068
【図面の簡単な説明】
【０３５９】
【図１】図1は化合物4が電離放射線に対して細胞を感受性化することができることを示している。HeLa細胞の生存率(%)は、化合物4不存在下(黒正方形)、化合物4の2種類の異なる濃度0.5μM(黒三角形)および2μM(黒丸)において、電離放射線の量を増加させて測定したものである。
【図２】図2は化合物4がエトポシドに対して細胞を感受性化することができることを示している。LoVo細胞の生存率(%)は、化合物4不存在下(黒正方形)、および化合物4の10μM存在下(黒丸)において、エトポシドの量を増加させて測定したものである。
【図３】図3は化合物4がカンプトテシンに対して細胞を感受性化することができることを示している。LoVo細胞の生存率(%)は、化合物4不存在下(黒正方形)、および化合物4の10μM存在下(黒逆三角形)において、カンプトテシンの量を増加させて測定したものである。
【図４】図4は化合物4がドキソルビシンに対して細胞を感受性化することができることを示している。LoVo細胞の生存率(%)は、化合物4不存在下(黒正方形)、および化合物4の10μM存在下(黒丸)において、ドキソルビシンの量を増加させて測定したものである。
【図５】図5は化合物4が組換えレトロウイルスベクターの感染を阻害することができることを示している。ATM阻害剤である化合物4によるそのレトロウイルスの形質導入の阻害は、化合物4の濃度を増加させて、Jurkat T細胞においてHIV-1をベースとしたLUCIAを行うことにより調べた(黒菱形)。データは非処理の対照細胞と比較して形質導入効率(ルシフェラーゼシグナル)で示した。化合物4によるHIV-1感染のIC50濃度は約1μMである。薬剤の細胞傷害性(白正方形)はMTSホルマザン色素還元アッセイで測定し、データは薬剤での処理後に残存する生細胞のパーセンテージで示している。試験した化合物4の濃度範囲では顕著な細胞傷害性は観察されなかった。
【図６】図6は化合物4がHIV-1 RTを阻害しないことを示している。HIV-1 RTの阻害は化合物4(黒菱形)の量を増加させて、化学発光HIV-1逆転写酵素アッセイを行って調べた。試験に用いた濃度範囲では化合物4は有意な抗RT活性を示さない。ネビラピン(白正方形)を用いた対照のRT阻害も示している。
【図７】図7は化合物4がAZTと協働してHIV-1感染を阻害することを示している。AZTの不存在下 (黒三角形) または0.1 μＭ (白正方形)、0.4μＭ (星印) もしくは1.2μＭ (白菱形) 存在下において、化合物4の濃度を増加させつつHeLa細胞でHIV-1をベースとしたLUCIAを行った。データは非処理の対照細胞と比較して形質導入効率(ルシフェラーゼシグナル)で示した。化合物4とAZTが組み合わされて存在すると、それぞれの薬剤単独の場合と比較して抗HIV活性の増強が認められた。
【図８】図8は化合物4がHIV-1の複製を阻害することを示している。4日間HIV-1複製アッセイを化合物4(黒菱形)またはAZT(白正方形)の濃度を増加させつつ、C1866細胞で行った。HIV-1力価はp24抗原ELISAで定量し、データは非処理の対照細胞と比較して無細胞の上清中のHIV-1 p24のパーセンテージとして示した。(A)複製アッセイを野生型HIV-1株(HIV-1HXB2 wt)を用いて行った。(B)複製アッセイをAZT耐性HIV-1株(HIV-1HXB2 AZTres)を用いて行った。化合物4は野生型およびAZT耐性のHIV-1株でHIV-1複製をそのどちらも同程度に強く阻害した。(C)対照の薬剤の細胞傷害性(白三角形)をXTT色素還元アッセイで調べた。データは薬剤処理後に残存している生細胞のパーセンテージで示している。HIV-1複製を阻害することが示されている化合物4の濃度範囲で著しい細胞傷害性は認められなかった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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