(57)【要約】試料を受け入れて試料中の異なる化合物を分離するように接続されたクロマトグラフィーカラム（１８）と、カラム（１８）を離れた試料中の化合物の存在を示すシグナルを出力するフロースルー検出器（１０）と、カラム（１８）からの試料の分画を別個の分画ウェル（２６）に送給するフラクションコレクタ（２２）と、検出器（１０）からの入力を受け、フラクションコレクタ（２２）を制御する電子制御装置（２８）とを備えるクロマトグラフィーシステム。電子制御装置（２８）は、検出器（１０）からのシグナルを経時的にモニタリングし、経時的なシグナルが肩を示す、つまり経時的なシグナルの勾配が変化の徴候を示さないが所定量より多く変化する場合、電子制御装置（２８）は、フラクションコレクタ（２２）の１つのウェル（２６）から別のウェルまでのカットを開始する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
クロマトグラフィーによって試料中の異なる化合物を自動的に分離し、前記試料の前記異なる化合物の分画を別個の分画ウェルに回収するクロマトグラフィーシステムであって、
試料を受け入れて前記試料中の異なる化合物を分離するように接続されたクロマトグラフィーカラムと、
前記試料を前記カラムから受け入れるように接続された検出器であって、前記検出器を通過する前記試料中の化合物の存在を示すシグナルを出力する前記検出器と、
前記試料を前記検出器から受け入れるように接続され、前記試料の分画を別個の分画ウェルに送給するフラクションコレクタと、
前記検出器からの入力を受け、前記フラクションコレクタを制御する電子制御装置を備え、前記電子制御装置は、前記検出器からの前記シグナルを経時的にモニタリングし、その経時的なシグナルが、肩を示すつまり前記経時的なシグナルの勾配が変化の徴候を示さないが所定量より多く変化し、かつ、負である場合、前記フラクションコレクタの１つのウェルから別のウェルまでのカットを開始するものである前記クロマトグラフィーシステム。
【請求項２】
クロマトグラフィーによって試料中の異なる化合物を自動的に分離し、前記試料の前記異なる化合物の分画を別個の分画ウェルに回収するクロマトグラフィーシステムであって、
試料を受け入れて前記試料中の異なる化合物を分離するように接続されたクロマトグラフィーカラムと、
前記試料を前記カラムから受け入れるように接続された検出器であって、前記検出器を通過する前記試料中の化合物の存在を示すシグナルを出力する前記検出器と、
前記試料を前記検出器から受け入れるように接続され、前記試料の分画を別個の分画ウェルに送給するフラクションコレクタと、
前記検出器からの入力を受け、前記フラクションコレクタを制御する電子制御装置とを備え、前記電子制御装置は、前記検出器からの前記シグナルを経時的にモニタリングし、その経時的なシグナルが、肩を示すつまり前記経時的なシグナルの勾配が変化の徴候を示さないが所定量より多く変化する場合、前記フラクションコレクタの１つのウェルから別のウェルまでのカットを開始し、前記電子制御装置は、前記勾配が正で、ある時点での勾配が勾配閾値よりも小さくその後の勾配が勾配閾値のＸ倍（Ｘは１より大きい）より大きい場合、１つのウェルから別のウェルまでのカットを開始することを決定するものである前記クロマトグラフィーシステム。
【請求項３】
Ｘが１．５より大きい請求項２に記載のシステム。
【請求項４】
Ｘが１．５と２．５の間である請求項３に記載のシステム。
【請求項５】
前記制御装置が前記カットを開始するために、前記その後の勾配は勾配検出不能閾値よりも小さくなければならない請求項３に記載のシステム。
【請求項６】
前記勾配が負であり、前記勾配が負の勾配閾値よりも大きい場合に、前記電子制御装置は前記フラクションコレクタの１つのウェルから別のウェルまでのカットを開始することを決定する請求項１に記載のシステム。
【請求項７】
前記制御装置が前記カットを開始するために、前記勾配は勾配検出不能閾値よりも小さくなければならない請求項６に記載のシステム。
【請求項８】
前記勾配が負の場合、前記カットを過ぎた設定時間遅延で前記勾配が正になることによって、前記制御装置は前記シグナルが谷にあるかどうかを判断する請求項６に記載のシステム。
【請求項９】
前記制御装置は前記設定時間遅延後に前記フラクションコレクタを新しいウェルに移動させる請求項８に記載のシステム。
【請求項１０】
前記制御装置は前記設定時間遅延後に回収を終了する請求項８に記載のシステム。
【請求項１１】
谷の間回収するかどうかを前記ユーザーが選択するのを可能にするユーザー対話式表示入力装置を更に備える請求項８に記載のシステム。
【請求項１２】
前記勾配閾値を前記ユーザーに入力するのを可能にするユーザー対話式表示入力装置を更に備える請求項２に記載のシステム。
【請求項１３】
前記勾配閾値を前記ユーザーに入力するのを可能にするユーザー対話式表示入力装置を更に備える請求項６に記載のシステム。
【請求項１４】
前記勾配検出不能閾値を前記ユーザーに入力するのを可能にするユーザー対話式表示入力装置を更に備える請求項５に記載のシステム。
【請求項１５】
前記設定時間遅延を前記ユーザーに入力するのを可能にするユーザー対話式表示入力装置を更に備える請求項８に記載のシステム。
【請求項１６】
前記設定時間遅延を前記ユーザーに入力するのを可能にするユーザー対話式表示入力装置を更に備える請求項９に記載のシステム。
【請求項１７】
前記制御装置が回収を開始および停止させる前記シグナルの閾値を前記ユーザーに入力するのを可能にするユーザー対話式表示入力装置を更に備える請求項１または２に記載のシステム。
【請求項１８】
クロマトグラフィーによって試料中の異なる化合物を自動的に分離し、前記試料の前記異なる化合物の分画を別個の分画ウェルに回収するクロマトグラフィーシステムであって、
試料を受け入れて前記試料中の異なる化合物を分離するように接続されたクロマトグラフィーカラムと、
前記試料を前記カラムから受け入れるように接続されたフロースルー型検出器とであって、前記検出器を通過する前記試料中の化合物の存在を示すシグナルを出力する前記フロースルー型検出器と、
前記試料を前記検出器から受け入れるように接続され、前記試料の分画を別個の分画ウェルに送給するフラクションコレクタと、
前記検出器からの入力を受け、前記フラクションコレクタを制御する電子制御装置とを備え、前記電子制御装置は前記検出器からの前記シグナルを経時的にモニタリングし、そのシグナルが勾配検出不能閾値よりも小さく、経時的な前記シグナルが勾配条件の指定された変化を示す場合、前記電子制御装置は前記フラクションコレクタの１つのウェルから別のウェルまでのカットを開始するクロマトグラフィーシステム。
【請求項１９】
前記勾配条件の変化は、負の勾配閾値よりも小さい１つの負の勾配値から、前記負の勾配閾値よりも大きい別の負の勾配値への負の勾配の変化である請求項１８に記載のシステム。
【請求項２０】
前記勾配条件の変化は、正の勾配閾値よりも小さい１つの正の勾配値から、前記正の勾配閾値よりも大きい別の正の勾配値への正の勾配の変化である請求項１８に記載のシステム。
【請求項２１】
クロマトグラフィーによって試料中の異なる化合物を自動的に分離し、前記試料の前記異なる化合物の分画を別個の分画ウェルに回収するクロマトグラフィーシステムであって、
試料を受け入れて前記試料中の異なる化合物を分離するように接続されたクロマトグラフィーカラムと、
前記試料を前記カラムから受け入れるように接続されたフロースルー型検出器であって、前記検出器を通過する前記試料中の化合物の存在を示すシグナルを出力する前記フロースルー型検出器と、
前記試料を前記検出器から受け入れるように接続され、前記試料の分画を別個の分画ウェルに送給するフラクションコレクタと、
前記検出器からの入力を受け、前記フラクションコレクタを制御し、前記検出器からの前記シグナルを経時的にモニタリングし、前記検出器からの経時的な前記シグナル中の谷を同定する電子制御装置と、
前記ユーザーが経時的な前記シグナル中の谷の間に回収するかどうかを選択するのを可能にするユーザー対話式表示入力装置とを備え、前記制御装置は谷を同定した後に回収を終了するかまたは設定時間に分画をカットするクロマトグラフィーシステム。
【請求項２２】
前記検出器がＵＶ吸収検出器であり、前記シグナルがＵＶ吸収である請求項１に記載のシステム。
【請求項２３】
前記検出器がＵＶ吸収検出器であり、前記シグナルがＵＶ吸収である請求項１８に記載のシステム。
【請求項２４】
前記検出器がＵＶ吸収検出器であり、前記シグナルがＵＶ吸収である請求項２１に記載の
【請求項２５】
クロマトグラフィーによって試料中の異なる化合物を自動的に分離し、前記試料の前記異なる化合物の分画を別個の分画ウェルに回収するクロマトグラフィーシステムであって、
試料を受け入れて前記試料中の異なる化合物を分離するように接続されたクロマトグラフィーカラムと、
前記試料を前記カラムから受け入れるように接続されたフロースルー型検出器であって、前記検出器を通過する前記試料中の化合物の存在を示すシグナルを出力する前記フロースルー型検出器と、
前記試料を前記検出器から受け入れるように接続され、前記試料の分画を別個の分画ウェルに送給するフラクションコレクタと、
前記検出器からの入力を受け、前記フラクションコレクタを制御し、前記検出器からの前記シグナルを経時的にモニタリングし、前記検出器からの経時的な前記シグナル中の谷を同定する電子制御装置と、
ユーザーが回収を開始および終了するためのセットポイント条件を決定するカスタムモードで操作するか、または回収を開始および終了するためのセットポイント条件が予め設定されている一組のプリセット回収モードの一方で操作するかを前記ユーザーが選択するのを可能とするユーザー対話式表示入力装置とを備えるクロマトグラフィーシステム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クロマトグラフィー分離および分画に関する。
【背景技術】
【０００２】
クロマトグラフィーカラムを用いると、溶媒に含めてカラムに通される試料中の異なる化合物を分離することができる。試料中の異なる化合物は、カラムの通過中に異なる程度で遅延し、異なる時間でカラムから出る。フラクションコレクタは、カラムを離れた試料の第１の部分を１つの分画回収ウェルに、第２の部分を第２のウェルに、という具合に送給する。検出器を用いて、カラムからの流れに含まれる異なる化合物の存在を検出し、回収を開始および終了する時間とフラクションコレクタを新しいウェルに進める時間とを判断するために、カラムの下流とフラクションコレクタの上流で試料を処理する際の試料の吸光度または他の特性を検出することができる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
パラレックス・フレックス・アンド・ホライズンという名称でバイオタージ社から入手されるクロマトグラフィーシステムでは、ＵＶ吸収値、またはこれらの値の経時的な勾配に基づいて、サンプリングが開始および終了される。分画のカットは、回収された容量（即ち、ウェルがその容量まで充填された時）と、負の値から正の値への勾配の変化の検出に基づいたピーク間の谷の検出とをきっかけにして行われる。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
１つの態様において、本発明は、一般に、試料を受け入れて試料中の異なる化合物を分離するように接続されたクロマトグラフィーカラムと、カラムを離れた試料中の化合物の存在を示すシグナルを出力する検出器と、カラムからの試料の分画を別個の分画ウェルに送給するフラクションコレクタと、検出器からの入力を受け、フラクションコレクタを制御する電子制御装置とを備えるクロマトグラフィーシステムを特徴とする。電子制御装置は、検出器からのシグナルを経時的にモニタリングし、経時的なシグナルが、肩を示すつまり経時的な前記シグナルの勾配が変化の徴候を示さないが所定量より多く変化し、かつ、勾配が負になる場合、前記フラクションコレクタの１つのウェルから別のウェルまでのカットを開始する。
【０００５】
別の態様において、本発明は、一般に、既に記載したようなクロマトグラフィーカラムと、フロースルー型検出器と、フラクションコレクタとを備えるクロマトグラフィーシステムを特徴とする。システムは、検出器からのシグナルを経時的にモニタリングする電子制御装置も含んでおり、勾配が正であり、勾配閾値よりも小さい一時点での正の勾配と、勾配閾値のＸ倍（Ｘは１より大きく、好ましくは１．５より大きく、最も好ましくは１．５〜２．５である）より大きい後の時間での正の勾配とによって決定されるような肩を示す場合、電子制御装置は、１つのウェルから別のウェルまでのカットを開始する。
【０００６】
別の態様において、本発明は、一般に、クロマトグラフィーカラムと、フロースルー型検出器と、フラクションコレクタとを備えるクロマトグラフィーシステムを特徴とする。システムは、検出器からのシグナルを経時的にモニタリングする電子制御装置も含んでおり、シグナルが勾配検出不能閾値よりも小さく経時的なシグナルが勾配条件の指定された変化を示す場合に、電子制御装置は、フラクションコレクタの１つのウェルから別のウェルまでのカットを開始する。
【０００７】
別の態様において、本発明は、一般に、クロマトグラフィーカラムと、フロースルー型検出器と、フラクションコレクタとを備えるクロマトグラフィーシステムを特徴とする。システムは、検出器からのシグナルを経時的にモニタリングする電子制御装置も含んでおり、それは、検出器からの経時的なシグナルの谷を同定する。システムは、経時的なシグナルの谷の間回収するか否かをユーザーが選択するのを可能とするユーザー対話式表示入力装置も含み、制御装置は、谷を同定した後に回収を終了させるか、または設定時間に分画をカットさせる。
【０００８】
別の態様において、本発明は、一般に、クロマトグラフィーカラムと、フロースルー型検出器と、フラクションコレクタと、検出器からのシグナルを経時的にモニタリングする電子制御装置とを備えるクロマトグラフィーシステムを特徴とする。システムは、ユーザーが回収を開始および終了するためのセットポイント条件を決定するカスタムモードで操作するか、または回収を開始および終了するためのセットポイント条件が予め設定されている一組のプリセット回収モードの一方で操作するかをユーザーが選択するのを可能とするユーザー対話式表示入力装置も含んでいる。
【０００９】
本発明の好ましい実施形態は、以下の特徴の１つ以上を含んでいてもよい。好ましい実施形態において、電子制御装置は、勾配が負である場合、勾配がカットを過ぎた設定時間遅延で正になることによって、シグナルが谷にあるかどうかを判断する。制御装置は、設定時間遅延の後、フラクションコレクタを新しいウェルに移動させることができる。あるいは制御装置は、設定時間遅延の後回収を終了させることができる。システムは、勾配閾値と、勾配検出不能閾値と、設定時間遅延と、制御装置が回収を開始および停止するためのシグナルの閾値とをユーザーが入力するのを可能とするユーザー対話式表示入力装置も含んでいる。検出器は、化合物の特性を測定するシグナルを発する。例えばＵＶ吸収検出器は、ＵＶ吸収を測定するシグナルを発する。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の実施形態は以下の利点の１つ以上を含んでいてもよい。ＵＶの勾配とＵＶの勾配の変化とに基づく検出によって、分画工程が緻密に制御され、回収される化学的化合物の純度と効率が向上する。ユーザーは、様々なデータを入力して、終了／開始およびカットポイント決定分析を制御することができる、またはあらかじめ選択した操作モードを択一的に依存することができる。
【００１１】
本発明の別の利点および特徴は、以下の特別な実施形態の説明および特許請求の範囲から明らかとなろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
図１を参照すると、溶液の供給源１２、試料導入ポート１４、ポンプ１６、クロマトグラフィーカラム１８、フロースルー型ＵＶ検出器２０、分画回収システム２２、廃液２４、分画回収ウェル２６、制御装置２８（例えばパーソナルコンピュータ）、モニター３０およびキーボードユーザー入力３２を含むクロマトグラフィーシステム１０が示されている。操作中は、ポート１４に導入される試料を含んだ溶液１２がポンプ１６によってクロマトグラフィーカラム１８に供給される。試料中の異なる化合物は、カラム１８の通過中に異なる程度に遅延し、異なる時間でカラムから出る。互いに少なくとも部分的に分離された試料化合物を含んでいる溶液は、ＵＶ検出器２０を通過する。ＵＶ検出器２０は、通過する溶液によるＵＶ光の吸光度を示すシグナルを制御装置２８に供給する。溶液は引続き分画回収システム２２に流れる。制御装置２８は、ＵＶ検出器２０からのＵＶ吸収シグナルに基づいて、溶液を廃液２４またはウェル２６に送給したり、１つのウェル２６から別のウェルへ移動するように分画回収システム２２を制御する。制御装置２８は、１秒あたり１または２回のＵＶ吸収シグナルを入力として捕らえる。他のデータ速度を用いてもよい。
【００１３】
ユーザーは、モニター３０およびキーボード３２によって提供される対話式グラフィカルユーザーインターフェースを介して、ＵＶ吸収シグナルに応答する分画回収システムの操作を指定することができる。図２を参照すると、モニター３０に表示されるメニュー３４が示されている。メニュー３４は、８種の選択ボタン３６〜５０を含み、ボタン３６によって「全回収」モードを、ボタン３８〜４８によって６種の自動操作モードの１つを、ボタン５０によって操作のカスタムユーザーモードをユーザーに選択させる。「全回収」モードでは、分画回収システム２２は、カートリッジ１８からの溶液全てを連続して回収し、排出した容量に基づいて、１つの回収ウェル２６から別のウェルに移動する。
【００１４】
ボタン３８、４０および４２によって選択される低閾値、中閾値または高閾値モードでは、検出器２０からのＵＶシグナルがＵＶ吸収閾値Ｔvを超えており、かつ、感知されたＵＶ吸収がＴvより高く維持されている限り溶液を回収ウェル２６に排出し続けると制御装置２８が判断した後、分画回収システム２２はカートリッジ１８からの溶液を回収ウェル２６に送給する。これらのモードでは、分画回収システム２２も排出された容量に基づいて１つの回収ウェル２６から別のウェルに移動する。その３種のモードでは、Ｔvの値が異なっており、最低は低閾値モード、最高は高閾値モードである。これらの操作モードは、吸光度の値に基づいているため、値に基づく回収とみなされる。溶液が回収用のウェル２６に送給されない場合、溶液は代わりに廃液２４に送給される。
【００１５】
低閾値ボタン３８、中閾値ボタン４０および高閾値ボタン４２を、１つの閾値ボタンとユーザーが所望の閾値を入力することができるボックス（図示しない）とに置き換えてもよい。
【００１６】
ボタン４４、４６および４８によって選択される低勾配、中勾配または高勾配モードでは、２つの条件（１）検出器２０からのＵＶシグナルが勾配可能閾値Ｔｓを超えていること、および（２）検出器２０からのＵＶシグナルの勾配（即ち、検出器での１つの読み取りから次の読み取りへの吸光度値の変化）が勾配閾値Ｓを超えていること、に適っていると制御装置２８が判断した後、分画回収システム２２は、カートリッジ１８からの溶液の回収ウェル２６への送給を開始する。分画回収システム２２は、感知したＵＶ吸収がＴｓを超え続け、勾配がＳを超え続けている限り、溶液を回収ウェル２６に排出し続ける。これらのモードでは、分画回収システムも、排出した容量に基づいて、１つの回収ウェル２６から別のウェルに移動する。様々なモードで、Ｓの値は異なっており、最低は低閾値モード、最高は高閾値モードである。これらの操作モードは、回収が吸光度の値の変化率に基づいているため、勾配に基づく回収とみなされる。溶液が回収されるウェル２６に送給されない場合、代わりに廃液２４に送給される。
【００１７】
ボタン５０で選択されるカスタムＵＶモードでは、ユーザーは、検出されたＵＶ吸収に基づいて、回収を開始および停止する決定と、回収ウェル間をカットする決定とを調整することができる。ボタン５０を選択すると、図３で示されるスクリーン５２が表示され、スクリーン５２が完了すると、図４で示されるスクリーン５４が表示される。図５は、ＵＶ吸収Ａ［ｎ］（この場合、ＡはＵＶ吸収であり、時間はデータポイント数ｎの単位である）対時間のグラフである。スクリーン５２および５４では、ユーザーは様々なパラメータ（多くを図５に示す）の値を選択し、各ボックス５６〜６６にその値を入力する。これらは、値閾値Ｔvのボックス５６、勾配閾値Ｓのボックス５８、勾配可能閾値Ｔsのボックス６０、勾配検出不能閾値Ｔsdのボックス６２、谷閾値勾配限界Ｔslのボックス６４、および勾配カット計数限界Ｃcのボックス６６を含んでいる。ユーザーは、ＵＶ吸収データの谷の間試料が回収されるべきか否かを指定するために、ボタン６８またはボタン７０のいずれかも選択する。ユーザーによって入力されたこれらのパラメータおよび回収条件のセットポイントを、以下の表に要約している。
【００１８】
【表１】
2005521865.tif 000003
回収の開始、分画カットの実行、および回収の終了の条件を以下に示す。
【００１９】
【表２】
2005521865.tif 000004
【００２０】
【表３】
2005521865.tif 000005
【００２１】
【表４】
2005521865.tif 000006
【００２２】
【表５】
2005521865.tif 000007
これらの条件を、図５を参照して説明する。
【００２３】
値回収モード
ユーザーが値回収モードで操作したい場合、ボックス５６の所望のセットポイントにＴvを設定する。分画回収システム２２は、吸光度値Ａ［ｎ］がＴv未満であれば溶液を廃棄し、Ａ［ｎ］がＴvを超えていれば溶液を回収ウェル２６に送給する。こうして、上記表「分画回収の開始条件」に示したとおり、Ａ［ｎ］＞Ｔvであれば回収を開始する。その後、ウェル２６に指定容量が排出された後、回収システム２２が１つのウェル２６から別のウェル２６に自動的に進む。所望なら、勾配値によって異なる化合物の存在が示される場合、ユーザーは、勾配に基づく分画カッティングを指定することができる。これを実行するために、ユーザーは、ボックス６２にＴdsの値を、ボックス６４にＴslの値を、そしてボックス６６にＣcの値を入力しなければならない（図４）。
【００２４】
オーバーラップする化合物の存在を示す曲線の変曲点で、上流肩カット（例えば、図５の垂直線８０、８２、８４および８６で示される）を実行する。上記表「分画カッティング条件」に記載したとおり、指定条件に適えば時間ｎ＋ｋで上流肩カットを実行する。第一に、ピーク頂上でのノイズを化合物の変化とする偽測定を避けるために吸光度値Ａ［ｎ］を超える勾配が考慮されないため、この吸光度値はＴds未満でなければならない。第二に、勾配ｄＡ［ｎ］は、曲線の上流部分を示す正でなければならない。第三に、時間ｎでの勾配は、トリガー値Ｔsl未満でなければならず、第四に、異なる化合物を示すほど勾配に十分な変化があるためには、時間ｎ＋ｋでの勾配がＴslの２倍を超えていなければならない。２種以外にも、他の乗数を用いることができる。例えばその値は、を１．０より大きな別の値、例えば１．５〜２．５であってもよい。直線の垂直線８０、８４は、破線の垂直線８２、８６で示されたカットよりも勾配閾値が高く設定されたＴslでの上流肩カットを示している。
【００２５】
オーバーラップする化合物の存在を示す曲線の変曲点で、下流肩カット（例えば図５の垂直線８８、９０、９２、９４および９６で示す）も実行する。上記表「分画カッティング条件」に記載したとおり、指定条件に適えば時間ｎで下流肩カットを実行する。第一に、ピーク頂上でノイズを化合物の変化とする偽測定を避けるために吸光度値Ａ［ｎ］を超える勾配が考慮されないため、この吸光度値はＴds未満でなければならない。第二に、勾配ｄＡ［ｎ］は、曲線の下流部分を示す負でなければならない。第三に、時間ｎでの勾配は、トリガー値−Ｔslを超えていなければならない。トリガー−Ｔslが通過した直後に下流カットを実行し、異なる試料時間の勾配を考慮する必要はない。直線の垂直線８８、９２および９６は、破線の垂直線９０、９４で示されたカットよりも勾配閾値が高く設定されたＴslでの下流肩カットを示している。
【００２６】
下流肩カットを時間ｎds（例えば、より低いＴsl値を選択したと仮定すると、図５では時間９０）で実行した後の指定時間で、「谷のカット」を実行することができる。ユーザーは、Ｃcの値をボックス６６に入力することによって谷のカットの時間を設定する（図４）。上記表「分画カッティング条件」に記載したとおり、谷のカットは、指定条件に適えば時間ｎ＋１で実行される。最初の２つは、下流肩カットが時間ｎdsで実行されたこと、即ちｎdsでの勾配が負であるが−Ｔslよりも大きかったことを示す条件に関する。次の条件は、勾配が時間ｎで正であること、即ち時間ｎdsと時間ｎとの間に谷があることが必要となる。最後の条件は、下流肩トリガーの後、指定時間Ｃcを経ていることが必要となる。
【００２７】
谷で実行される更に別の分画回収では、谷の回収「イエス」ボタン６８（図４）を選択しなければならない。実行しない場合、上記表「分画回収の停止条件」に示される条件（２）に準じて回収が停止する。これらの条件は、谷のカットを実行する場合と同様であり、その時間の回収停止（即ち、廃液２４に送給される）を示している。
【００２８】
値回収モードで分画回収を停止させる他の条件（上記表「分画回収の停止条件」の条件（１））は、吸光度値Ａ［ｎ］がＴv未満になることである。
勾配回収モード
ユーザーが勾配回収モードで操作したい場合、ボックス５６および６０（図３）内の所望のセットポイントにＳおよびＴsを設定する。分画回収システム２２は、上記表「分画回収の開始条件」に示されるとおり、２つの条件に適うまで溶液を廃棄する。第一に、吸光度値Ａ［ｎ］がＴsより大きくなければならない。第二に、勾配ｄＡ［ｎ］がＳよりも大きくなければならない。これらの条件が適った後、制御装置２８によって、分画回収システム２２が溶液を回収ウェル２６に送給する。回収を開始した後、回収システム２２は、ウェル２６に指定容量が排出された後、自動的に１つのウェル２６から別のウェル２６に進む。
【００２９】
所望なら、勾配値の変化によって異なる化合物の存在が示される場合に、ユーザーは、勾配に基づく分画カッティングを指定することができる。勾配回収モードでの分画カッティングは、値回収モードで既に記載したものと同様である。つまり「分画カッティング条件」の表の条件が勾配回収モードでも適用される。
【００３０】
勾配回収モードでの回収停止の２つの状況が上記「分画回収の停止条件」の表に示されている。最初の状況は、吸光度値Ａ［ｎ］が勾配可能閾値Ｔs未満になる時である。二番目は、上記の通り谷のカットを実行する条件と同様である。
【００３１】
ＵＶ吸収データの実時間分析を利用することによって、システムは分画を正確かつ自動的に分離することができる。ＵＶの勾配およびＵＶの勾配の変化に基づく検出によって、分画工程がより緻密に制御され、回収される化合物の純度と効率が向上する。これは、未知の化合物の混合物を分離するため、オペレータが最適な溶剤と吸収特性を早期に選択できないような場合に特に有用である。
【００３２】
本発明の他の実施形態は添付した請求の範囲内にある。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】自動クロマトグラフィーシステムのブロック図。
【図２】図１のシステムのモニターでの対話式スクリーンディスプレーの表示。
【図３】図１のシステムのモニターでの対話式スクリーンディスプレーの表示。
【図４】図１のシステムのモニターでの対話式スクリーンディスプレーの表示。
【図５】回収を開始および終了するため、そしてＵＶ吸収値、経時的なＵＶ吸収の勾配、および経時的なＵＶ吸収の勾配の変化に基づいて分画カットを実行するための様々な条件を示すＵＶ吸収対時間のグラフ。
【図１】
2005521865.tif 000008
【図２】
2005521865.tif 000009
【図３】
2005521865.tif 000010
【図４】
2005521865.tif 000011
【図５】
2005521865.tif 000012
【国際調査報告】
2005521865.tif 000013