(57)【要約】  本発明の化合物は、非ペプチド系の、癌、血管腫、増殖性網膜症、関節リウマチ、アテローム性動脈硬化性血管新生、乾癬、眼球血管新生および肥満症などの血管形成により媒介される症状の治療に有用である、２型メチオニンアミノペプチダーゼの可逆的阻害剤である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物におけるＭｅｔＡＰ２を阻害する方法であって、かかる処理を必要とする哺乳動物に、有効量の式（ＩＡ）：
【化１】
2005508841.tif 000006
式（ＩＡ）
［式中：
Ｒ１は置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ１−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ１−６アルキル−または置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ１−６アルキル−であり； 
Ｒ２は置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−または置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−であって；
Ｒ３はＨ、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−、−Ｃ０−６アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｘ’ＡＢ、−Ｃ０−６アルキル−Ｓ（Ｏ）２Ｘ’ＡＢまたはＣ０−６アルキル−Ｘ’ＡＢであり、ここでＸ’はＯ、Ｓ、ＣまたはＮであって、ＡおよびＢは、独立して、不存在、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−またはＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−である］
で示される化合物あるいはその医薬上許容される塩または溶媒和物を投与することを含む、方法。
【請求項２】
式（ＩＡ）の化合物が、
３−アニリノ−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（２−イソプロピル−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（２−メチル−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（４−メチル−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（４−メトキシ−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（４−フルオロ−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（２−ピリジル）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−アニリノ−３−メチル−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
１−（５−フェネチル−４Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−キノリン；
４−（５−ベンジル−４−Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イルアミノ）−安息香酸エチルエステル；
フェニル−［５−（チオフェン−２−イルスルファニルメチル）−４Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イル］−アミン；
フェニル−５−（フェニルスルファニルメチル−４Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イル）−アミン；
３−アニリノ−５−［２−（シクロヘキシル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（２−イソプロピル−アニリノ）−５−［２−（２−チエニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−アニリノ−５−［１−メチル−２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；および
３−アニリノ−５−［２−（２−チエニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
あるいはその医薬上許容される塩または溶媒和物から選択される、請求項１記載の方法。
【請求項３】
式（ＩＡ）の化合物が、
３−アニリノ−５−［２−（２−チエニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；または
３−（２−イソプロピル−アニリノ）−５−［２−（２−チエニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
あるいはその医薬上許容される塩または溶媒和物から選択される、請求項１記載の方法。
【請求項４】
哺乳動物におけるＭｅｔＡＰ２が媒介する疾患を治療する方法であって、かかる治療を必要とする哺乳動物に、有効量の式（ＩＡ）：
【化２】
2005508841.tif 000007
式（ＩＡ）
［式中：
Ｒ１は置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ１−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ１−６アルキル−または置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ１−６アルキル−であり； 
Ｒ２は置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−または置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−であり；
Ｒ３はＨ、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−、−Ｃ０−６アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｘ’ＡＢ、−Ｃ０−６アルキル−Ｓ（Ｏ）２Ｘ’ＡＢまたはＣ０−６アルキル−Ｘ’ＡＢであり、ここでＸ’はＯ、Ｓ、ＣまたはＮであって、ＡおよびＢは、独立して、不存在、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−またはＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−である］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩を投与することを含む、方法。
【請求項５】
式（ＩＡ）の化合物が、
３−アニリノ−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（２−イソプロピル−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（２−メチル−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（４−メチル−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（４−メトキシ−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（４−フルオロ−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（２−ピリジル）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−アニリノ−３−メチル−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
１−（５−フェネチル−４Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−キノリン；
４−（５−ベンジル−４−Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イルアミノ）−安息香酸エチルエステル；
フェニル−［５−（チオフェン−２−イルスルファニルメチル）−４Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イル］−アミン；
フェニル−５−（フェニルスルファニルメチル−４Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イル）−アミン；
３−アニリノ−５−［２−（シクロヘキシル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（２−イソプロピル−アニリノ）−５−［２−（２−チエニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−アニリノ−５−［１−メチル−２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；および
３−アニリノ−５−［２−（２−チエニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
あるいはその医薬上許容される塩または溶媒和物
から選択される、請求項４記載の方法。
【請求項６】
式（ＩＡ）の化合物が、
３−アニリノ−５−［２−（２−チエニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；または
３−（２−イソプロピル−アニリノ）−５−［２−（２−チエニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
あるいはその医薬上許容される塩または溶媒和物
から選択される、請求項４記載の方法。
【請求項７】
式（Ｉ）：
【化３】
2005508841.tif 000008
式（Ｉ）
［式中：
Ｒ１は置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ１−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ１−６アルキル−または置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ１−６アルキル−である；
ただし、Ｒ１が置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ１−４アルキル−であって、Ｈｅｔがインドリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンズイソキサゾリル、ベンズイソチアゾリル、ベンゾピラゾリルまたはピロロ［２,３−ｃ］ピリジニルである場合、その任意の置換基は−（ＣＨ２）１−５ＣＨＲIＮＲIIＲIII以外の基であるか、またはその任意の置換基は１個の窒素を含有する４−ないし６−員のヘテロサイクル以外の基であり；
ＲIはＨまたはＣ１−６アルキルであり；
ＲIIおよびＲIIIは、独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキルであるか、またはそれらが結合する窒素と一緒になって、さらにＮ、ＯおよびＳから選択される１個またはそれ以上のヘテロ原子を含有していてもよい４−ないし６−員の複素環式環を形成し；
Ｒ１がＣ１アルキルである場合、その任意の置換基は−ＯＲ４、−Ｒ４または−ＮＲ４Ｒ５以外の基であり、ここにＲ４、Ｒ５およびＲ６は、独立して、Ｈ、Ｃ２−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、Ｐｈ−Ｃ０−６アルキル−、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキル−またはＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−から選択され；
Ｒ２は置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−または置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−である；ただし、Ｒ２が置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ１−４アルキル−であって、Ｈｅｔがインドリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンズイソキサゾリル、ベンズイソチアゾリルまたはベンゾピラゾリルである場合、その任意の置換基は−ＣＨ２ＣＨＲIＮＲIIＲIII以外の基であるか、またはその任意の置換基は窒素を１個含有する４−ないし６−員のヘテロサイクル以外の基であり；および
Ｒ３はＨ、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−、−Ｃ０−６アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｘ’ＡＢ、−Ｃ０−６アルキル−Ｓ（Ｏ）２Ｘ’ＡＢまたは−Ｃ０−６アルキル−Ｘ’ＡＢであり、ここにＸ’はＯ、Ｓ、ＣまたはＮであり、ＡおよびＢは、独立して、不存在、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−またはＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−である］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩；
ただし、該化合物は
５−ベンジル−３−アニリノ−１,２,４−トリアゾール、
５−（２−ナフタレニルメチル）−３−アニリノ−１,２,４−トリアゾール、
５−（２−ナフタレニルメチル）−３−（４−メチル−アニリノ）−１,２,４−トリアゾール、
５−（２−ナフタレニルメチル）−３−（４−メトキシ−アニリノ）−１,２,４−トリアゾール、
Ｎ−フェニル−５−［（フェニルチオ）メチル］−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−アミン、
Ｎ−フェニル−５−［（４−クロロ−フェニルチオ）メチル］−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−アミン
以外の化合物である。
【請求項８】
請求項７に記載の化合物および医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項９】
１−（３−シクロヘキシル−プロパノイル）−２−エチル−３−フェニル−イソチオ尿素；
１−（３−（２−チエニル）−プロパノイル）−２−エチル−３−（２−イソプロピルフェニル）−イソチオ尿素；
１−（２−メチル−３−フェニル−プロパノイル）−２−エチル−３−（２−イソプロピルフェニル）−イソチオ尿素；
１−（３−（２−チエニル）−プロパノイル）−２−エチル−３−フェニル−イソチオ尿素； および
１−（２−フェニルチオ−アセチル）−２−エチル−３−フェニル−イソチオ尿素
から選択される化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の化合物は、非ペプチド系の、癌、血管腫、増殖性網膜症、関節リウマチ、アテローム性動脈硬化性血管新生、乾癬、眼球血管新生（ocular neovascularization）および肥満症などの血管形成により媒介される症状の治療に有用である、２型メチオニンアミノペプチダーゼの可逆的阻害剤である。
【背景技術】
【０００２】
１９７４年に、Folkmanは、臨界的大きさを超えて成長し、広がって転移を形成する腫瘍の場合、血管形成と称される工程にて、腫瘍は腫瘍それ自体の内因性微小循環系を形成するため、周囲の間質から内皮細胞を補強する必要があると提案した（Folkman J. (1974) Adv Cancer Res. １９；３３１）。また、酸素および栄養の生命線として腫瘍細胞により誘発される新規の血管は、癌細胞が体の他の部分に広がるための出口をも提供する。この工程の阻害は充実性腫瘍の増殖および転移を効果的に停止させることがわかった。この工程を特異的に阻害する薬物は血管形成阻害剤として知られている。
癌治療のために有望な新規方法として浮上してきた抗血管形成療法（「間接攻撃」）は、「直接攻撃」方法よりもいくつかの利点を有する。ＤＮＡ損傷薬物、抗代謝剤を用いる、ＲＡＳ経路を攻撃する、ｐ５３を復元する、プログラム細胞死を活性化する、攻撃的Ｔ−細胞を使用する、モノクローナル抗体を注入する、およびテロメラーゼを阻害するなどの、「直接攻撃」方法は全て、必然的に、耐性腫瘍細胞の選択をもたらす。しかしながら、「間接攻撃」におけるように腫瘍の内皮区画を標的とすれば、内皮細胞は腫瘍細胞と同じようなゲノム不安定性を示さないので、耐性の問題を回避できるはずである。さらには、正常な内皮細胞は体内で相対的に静止状態にあり、極めて長期にわたるターンオーバーを示すという事実から、抗血管形成療法は、一般には、毒性が低い。最終的に、「間接攻撃」と「直接攻撃」は、異なる細胞型を標的とするため、より有効な組み合わせ療法である可能性が大きい。
【０００３】
３００種を超える血管形成阻害剤が発見されており、そのうちの約３１種の薬剤が、現在、癌の治療における、ヒト試験で試験されている（Thompsonら、（１９９９） J Pathol １８７、５０３）。ＴＮＰ−４７０、すなわち、アスペルギルス・フイガツス（Aspergillus fuigatus）のフマギリン（fumagillin）の半合成誘導体は、血管形成の最も強力な阻害剤の中の１つである。これは、インビトロおよびインビボで、内皮細胞増殖および移動を直接的に阻害することにより作用する（Ingberら、（１９９０）Nature ３４８、５５５）。フマギリンおよびＴＮＰ−４７０は、２型メチオニンアミノペプチダーゼ（以下、ＭｅｔＡＰ２と称する）を、その活性部位を不可逆に修飾することにより阻害することが明らかにされた。フマギリン類似物の生化学活性はヒト臍静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）の増殖に対するその抑制作用に関連することが明らかにされた。フマギリンおよび関連化合物のＭｅｔＡＰ２媒介内皮細胞増殖抑制性作用についての選択的作用の機構はまだ確立されていないが、細胞増殖におけるＭｅｔＡＰ２の潜在的役割が示唆されている。
【０００４】
第１に、蛋白のイニシエーターであるメチオニンをｈＭｅｔＡＰ−２触媒で切断することが、ミリストイル化の後、細胞増殖に関与する重要なシグナル化細胞因子として機能する多くの蛋白を放出するのに不可欠といえる。ミリストイル化されることで知られている蛋白として、ｓｒｃファミリーチロシンキナーゼ、小型ＧＴＰａｓｅＡＲＦ、ＨＩＶ蛋白ネフ（nef）およびヘテロトリメリックＧ蛋白のαサブユニットが挙げられる。近年公開された研究は、細胞アポトーシスに関与する膜蛋白上の、一酸化窒素シンターゼのミリストイル化がフマギリンにより遮断されることを明らかにした（Yoshidaら、（１９９８）Cancer Res. ５８（１６）、３７５１）。これは、ＭｅｔＡＰ２が触媒作用してグリシン末端のミリストイル化基質の放出を間接的に阻害した結果であると提案されている。また、ＭｅｔＡＰ酵素は、Ｎ末端メチオニン前駆体に対して相対的にメチオニン切断蛋白でその安定性が増加することを示唆する「Ｎ末端ルール」に従って、インビボにおける蛋白の安定性に重要であることも知られている（Varshavsky, A、（１９９６）Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. ９３、１２１４２）。ｈＭｅｔＡＰ２の阻害は、細胞周期にとって不可欠ないくらかの細胞の蛋白質の異常な存在または不存在をもたらしうる。
【０００５】
メチオニンアミノペプチダーゼ（ＭｅｔＡＰ）は、全ての生物の至るところに分布している。これらは、新たに翻訳されたポリペプチドから、２価の金属イオンをコファクターとして用いて、イニシエーターのメチオニンの除去を触媒する。２つのあまり関係しないＭｅｔＡＰ酵素、１型および２型は、真核生物中に見出されており、少なくとも酵母中では、その両方が正常な増殖のために必要とされる；それに対して、ユーバクテリア（１型）および始原細菌（２型）では、１つだけのＭｅｔＡＰが見られる。Ｎ末端の伸長領域は、真核細胞のメチオニンアミノペプチダーゼと原核生物のそれとで異なる。触媒性Ｃ末端ドメインの６４アミノ酸配列の挿入（ｈＭｅｔＡＰ−２中の３８１〜４４４残基）は、ＭｅｔＡＰ−２ファミリーとＭｅｔＡＰ−１ファミリーとで異なる。遺伝子構造の相違にもかかわらず、全てのＭｅｔＡＰ酵素は、高保存触媒スカホールド「ピタパン（pita-bread）と称される」折りたたみ部を共有することが明らかであり（Bazanら、（１９９４）Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. ９１、２４７３）、金属共同因子の配位に関する６つの完全に保存される残基を含む。
【０００６】
哺乳動物の２型メチオニンアミノペプチダーゼは、Ｎ末端メチオニンのナセントポリペプチドからの切断を触媒する能力（Bradshawら、（１９９８）Trends Biochem. Sci. ２３、２６３）および真核生物のイニシエーションファクター２α（ｅＩＦ−２α）と結合してリン酸化を防止する能力（Rayら、（１９９２）Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. ８９、５３９）によって関連付けられる２官能性蛋白として同定されている。ヒトおよびラットのＭｅｔＡＰ２の両方の遺伝子はクローン化され、９２％の配列同一性を示した（Wuら、（１９９３）J Biol. Chem. ２６８、１０７９６；Li, X.およびChang, Y.-H.、（１９９６）Biochem. & Biophys. Res. Comm. ２２７、１５２）。これらの酵素でのＮ末端の伸長部は高度に充填されており、２つの塩基性ポリリシンブロックおよび１つのアスパラギン酸ブロックから成り、これらは、ｅＩＦ−２αの結合に関連すると推測されている（Guptaら、（１９９３）Translational Regulation of Gene Expression 2 （Ilan, J., Ed.）、４０５−４３１頁、Plenum Press、New York）。
【０００７】
抗血管形成化合物、フマギリンおよびその類似物は、ｈＭｅｔＡＰ２：ｅＩＦ２α複合体の形成を妨害することなく、ｈＭｅｔＡＰ２のエキソ−アミノペプチダーゼ活性を特異的に遮断することが知られている（Griffithら、（１９９７）Chem. Biol. ４、４６１；Sinら、（１９９７）Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. ９４、６０９９）。フマギリンおよびその類似物は、高い特異性でｈＭｅｔＡＰ２の酵素活性を不活性化し、これは、酵母のインビトロおよびインビボ両方で、これら化合物の、密接に関係する１型メチオニンアミノペプチダーゼ（ＭｅｔＡＰ１）に対する効果の欠如により強調される（Griffithら、（１９９７）Chem. Biol. ４、４６１；Sinら、（１９９７）Proc.Natl.Acad.Sci. U.S.A. ９４、６０９９）。これらの阻害剤の極めて高い能力（ＩＣ５０＜１ｎＭ）は、ｈＭｅｔＡＰ２の活性部位残基、Ｈｉｓ２３１の不可逆的修飾によることは明らかである（Liuら、（１９９８）Science ２８２、１３２４）。インビボでのＭｅｔＡＰ２活性の妨害は、酵母（Griffithら、（１９９７）Chem. Biol. ４、４６１；Sinら、（１９９７）Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. ９４、６０９９；社内データ）ならびにドロソフィラ（CutforthおよびGaul（１９９９）Mech. Dev. ８２、２３）の正常な増殖を害する。最も有意なことは、インビトロにおけるｈＭｅｔＡＰ２の酵素活性に対するフマギリン関連化合物の阻害作用と、インビボにおける腫瘍誘導血管形成に対する該化合物の抑制効果の間に明確な相間関係があることである（Griffithら、（１９９７）Chem. Biol. ４、４６１）。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
癌は、米国で、心臓病に次ぐ、第２の死因である。最近では、腫瘍疾患のいくつかの形態に対する療法にて成功しているにもかかわらず、他の形態では依然として難治性のままである。したがって、癌は、米国および他の国で、死および病気の主な原因のままである（BailarおよびGornik（１９９７）N Engl J Med ３３６、１５６９）。ｈＭｅｔＡＰ２の阻害は、癌治療における、新規な抗血管形成剤の開発のための、有望な機構を提供する。この度、式（Ｉ）および（ＩＡ）の化合物がｈＭｅｔＡＰ２の効果的な阻害剤であり、したがって、ｈＭｅｔＡＰ２介在症状の治療にて有用であることが見出された。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
１つの態様において、本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
2005508841.tif 000002
式（Ｉ）
【００１０】
［式中：
Ｒ１は置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ１−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ１−６アルキル−または置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ１−６アルキル−である；
ただし、Ｒ１が置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ１−４アルキル−であって、Ｈｅｔがインドリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンズイソキサゾリル、ベンズイソチアゾリル、ベンゾピラゾリルまたはピロロ［２,３−ｃ］ピリジニルである場合、その任意の置換基は−（ＣＨ２）１−５ＣＨＲIＮＲIIＲIII以外の基であるか、またはその任意の置換基は１個の窒素を含有する４−ないし６−員のヘテロサイクル以外の基であり；
ＲIはＨまたはＣ１−６アルキルであり；
ＲIIおよびＲIIIは、独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキルであるか、またはそれらが結合する窒素と一緒になって、さらにＮ、ＯおよびＳから選択される１個またはそれ以上のヘテロ原子を含有していてもよい４−ないし６−員の複素環式環を形成し；
Ｒ１がＣ１アルキルである場合、その任意の置換基は−ＯＲ４、−Ｒ４または−ＮＲ４Ｒ５以外の基であり、ここにＲ４、Ｒ５およびＲ６は、独立して、Ｈ、Ｃ２−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、Ｐｈ−Ｃ０−６アルキル−、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキル−またはＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−から選択され；
【００１１】
Ｒ２は置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−または置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−である；ただし、Ｒ２が置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ１−４アルキル−であって、Ｈｅｔがインドリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンズイソキサゾリル、ベンズイソチアゾリルまたはベンゾピラゾリルである場合、その任意の置換基は−ＣＨ２ＣＨＲIＮＲIIＲIII以外の基であるか、またはその任意の置換基は窒素を１個含有する４−ないし６−員のヘテロサイクル以外の基であり；および
Ｒ３はＨ、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−、−Ｃ０−６アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｘ’ＡＢ、−Ｃ０−６アルキル−Ｓ（Ｏ）２Ｘ’ＡＢまたは−Ｃ０−６アルキル−Ｘ’ＡＢであり、ここにＸ’はＯ、Ｓ、ＣまたはＮであり、ＡおよびＢは、独立して、不存在、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−またはＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−である］
で示される；
【００１２】
ただし、該化合物は
５−ベンジル−３−アニリノ−１,２,４−トリアゾール、
５−（２−ナフタレニルメチル）−３−アニリノ−１,２,４−トリアゾール、
５−（２−ナフタレニルメチル）−３−（４−メチル−アニリノ）−１,２,４−トリアゾール、
５−（２−ナフタレニルメチル）−３−（４−メトキシ−アニリノ）−１,２,４−トリアゾール、
Ｎ−フェニル−５−［（フェニルチオ）メチル］−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−アミン、
Ｎ−フェニル−５−［（４−クロロ−フェニルチオ）メチル］−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−３−アミン以外の化合物である、
で示される新規な化合物またはその医薬上活性な塩または溶媒和物、および癌、血管腫、増殖性網膜症、関節リウマチ、アテローム性動脈硬化性血管新生、乾癬、眼球血管新生および肥満症などの血管形成により媒介される症状の治療におけるその使用に関する。
【００１３】
第２の態様において、本発明は、癌、血管腫、増殖性網膜症、関節リウマチ、アテローム性動脈硬化性血管新生、乾癬、眼球血管新生および肥満症などの血管形成により媒介される症状の治療方法であって、式（ＩＡ）：
【化２】
2005508841.tif 000003
式（ＩＡ）
【００１４】
［式中：
Ｒ１は置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ１−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ１−６アルキル−または置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ１−６アルキル−であり； 
Ｒ２は置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−または置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−であって；
Ｒ３はＨ、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−、−Ｃ０−６アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｘ’ＡＢ、−Ｃ０−６アルキル−Ｓ（Ｏ）２Ｘ’ＡＢまたはＣ０−６アルキル−Ｘ’ＡＢであり、ここでＸ’はＯ、Ｓ、ＣまたはＮであって、ＡおよびＢは、独立して、不存在、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−またはＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−である］
で示される化合物あるいはその医薬上許容される塩または溶媒和物を投与することによる方法に関する。
【００１５】
他の態様において、本発明は、全ての哺乳動物、好ましくはヒトの血管形成介在疾患の治療におけるＭｅｔＡＰ２の阻害方法であって、その治療を必要とする哺乳動物に、式（ＩＡ）の化合物またはその医薬上活性な塩または溶媒和物を投与することを含む方法に関する。
さらなる他の態様において、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＡ）の化合物およびそのための医薬上許容される担体を含む医薬組成物に関する。特に、本発明の医薬組成物は、ＭｅｔＡＰ２介在疾患の治療に使用される。
さらなる態様において、本発明は、本発明の化合物の調製に有用な新規な中間体に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
この度、式（Ｉ）および（ＩＡ）で示される置換１，２，４−トリアゾールは、ＭｅｔＡＰ２の阻害剤であることが見出された。また、式（Ｉ）および式（ＩＡ）で示される阻害剤またはその医薬上許容される塩または溶媒和物での治療によるＭｅｔＡＰ２酵素機構の選択的阻害は、限定するものではないが、癌、血管腫、増殖性網膜症、関節リウマチ、アテローム性動脈硬化性血管新生、乾癬、眼球血管新生および肥満症を含む、種々の病態の治療に対する新規な療法および予防方法を示すことが見出された。
「Ｐｈ」なる語はフェニル環を意味する。
本明細書に使用される「Ｃ１−６アルキル」なる語はすべて、鎖長を限定しない限り、炭素数が１ないし６の置換および非置換の直鎖または分枝鎖基を意味し、限定するものではないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルおよびｔ−ブチル、ペンチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチルおよびヘキシルおよびその単純な脂肪族異性体を含む。
適当には、いずれのＣ１−６アルキル基も、所望により、独立して、１個またはそれ以上のＯＲ４、Ｒ４、ＮＲ４Ｒ５、ＳＲ４により置換されていてもよい。Ｃ０アルキルは、その基にアルキル基が存在しないことを意味する。したがって、Ａｒ−Ｃ０アルキルは、Ａｒと等価である。
【００１７】
本明細書に使用される「Ｃ３−７シクロアルキル」なる語はすべて、置換または非置換の炭素数３〜７の環状基を意味し、限定するものではないが、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチル基を含む。
本明細書に使用される「Ｃ２−６アルケニル」なる語はすべて、一の炭素−炭素単結合が一の炭素−炭素二重結合により置きかえられている、炭素数が２ないし６のアルキル基を意味する。Ｃ２−６アルケニルは、エチレン、１−プロペン、２−プロペン、１−ブテン、２−ブテン、イソブテンおよびいくつかの異性体ペンテンおよびヘキセンを含む。シスおよびトランス異性体の両方は、本発明の範囲に含まれる。
適当には、いずれのＣ２−６アルケニル基も、独立して、１個またはそれ以上のＰｈ−Ｃ０−６アルキル、Ｈｅｔ’−Ｃ０−６アルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６−Ｓ、Ｐｈ−Ｃ０−６アルコキシ、Ｈｅｔ’−Ｃ０−６アルコキシ、ＯＨ、ＮＲ４Ｒ５、Ｈｅｔ−Ｓ−Ｃ０−６アルキル、Ｐｈ−Ｓ−Ｃ０−６アルキル、ＨＯ（ＣＨ２）１−６、ＮＲ４Ｒ５（ＣＨ２）２−６、Ｒ４Ｒ５Ｎ（ＣＨ２）２−６Ｏ、Ｒ６ＣＯ２（ＣＨ２）０−６、Ｒ６ＣＯ２（ＣＨ２）１−６Ｏ−、Ｒ６ＳＯ２（ＣＨ２）１−６、ＣＦ３、ＯＣＦ３またはハロゲンにより置換されていてもよい。
【００１８】
本明細書にて使用される「Ｃ２−６アルキニル」なる語はすべて、一の炭素−炭素単結合が、一の炭素−炭素三重結合により置きかえられている、炭素数２ないし６のアルキル基を意味する。Ｃ２−６アルキニルは、アセチレン、１−プロピン、２−プロピン、１−ブチン、２−ブチン、３−ブチンおよびペンチンおよびヘキシンの単純な異性体を含む。
適当には、いずれのＣ２−６アルキニル基も、独立して、１個またはそれ以上のＰｈ−Ｃ０−６アルキル−、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキル−、Ｃ１−６アルキル−、Ｃ１−６アルコキシ−、Ｃ１−６アルキル−Ｓ−、Ｐｈ−Ｃ０−６アルコキシ−、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルコキシ−、ＨＯ−、Ｒ４Ｒ５Ｎ−、Ｈｅｔ−Ｓ−Ｃ０−６アルキル−、Ｐｈ−Ｓ−Ｃ０−６アルキル−、ＨＯ（ＣＨ２）１−６−、Ｒ４Ｒ５Ｎ（ＣＨ２）２−６−、Ｒ４Ｒ５Ｎ（ＣＨ２）２−６Ｏ−、Ｒ６ＣＯ２（ＣＨ２）０−６−、Ｒ６ＣＯ２（ＣＨ２）１−６Ｏ−、Ｒ６ＳＯ２（ＣＨ２）１−６−、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３またはハロゲンで置換されていてもよい。
「アルコキシ」なる語は、本明細書にてすべて、鎖長を限定しない限り、その長さに限定されないが、酸素原子に結合した炭素数１ないし６の直鎖または分岐鎖の基を意味し、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシなどを包含するが、これに限定されない。
【００１９】
本明細書にて互換的に用いられる「ヘテロ」または「ヘテロ原子」なる語はすべて、酸素、窒素および硫黄を意味する。
本明細書にて互換的に用いられる「ハロ」または「ハロゲン」なる語は、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩを意味する。
本明細書を通して、Ｃ０なる語はそのすぐ後に続く置換基のないことを意味し、例えば、ＰｈＣ０−６アルキル−基では、Ｃが０の場合、置換基はフェニルである。
本明細書にて互換的に用いられる「Ａｒ」または「アリール」なる語はすべて、１個またはそれ以上のＰｈ−Ｃ０−６アルキル−、Ｈｅｔ’−Ｃ０−６アルキル−、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル−Ｓ−、Ｐｈ−Ｃ０−６アルコキシ−、Ｈｅｔ’−Ｃ０−６アルコキシ−、−ＯＨ、−ＮＲ４Ｒ５、Ｈｅｔ’−Ｓ−Ｃ０−６アルキル−、−（ＣＨ２）１−６ＯＨ、−（ＣＨ２）１−６ＮＲ４Ｒ５、−Ｏ（ＣＨ２）１−６ＮＲ４Ｒ５、−（ＣＨ２）０−６ＣＯ２Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）１−６ＣＯ２ Ｒ６、−（ＣＨ２）１−６ＳＯ２Ｒ６、ＣＦ３、ＯＣＦ３またはハロゲンで置換されていてもよいフェニルまたはナフチルを意味する；加えて、Ｐｈは１またはそれ以上のＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、−ＯＨ、−（ＣＨ２）１−６ＮＲ４Ｒ５、−Ｏ（ＣＨ２）１−６ＮＲ４Ｒ５、−ＣＯ２Ｒ６、ＣＦ３またはハロゲンで置換されていてもよく；Ｈｅｔ’もＨｅｔと同意義であり、１またはそれ以上のＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ＯＨ、−（ＣＨ２）１−６ＮＲ４Ｒ５、−Ｏ（ＣＨ２）１−６ＮＲ４Ｒ５、−ＣＯ２Ｒ６、−ＣＦ３またはハロゲンで置換されていてもよく；あるいは２個のＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルコキシ基が一緒になって、Ａｒ環に縮合した、５−７員の飽和または不飽和環を形成してもよい（例えば、Ａｒ環上の隣接する位置に結合する２価のアルキレンまたはアルキレンジオキシ基を形成してもよい）。
【００２０】
本明細書にて互換的に使用される「Ｈｅｔ」または「ヘテロサイクリック」なる語はすべて、安定な５ないし７員の単環式、安定な７ないし１０員の二環式、または安定な１１ないし１８員の三環式の複素環式環を意味し、これらの全ては、飽和または不飽和のどちらかであり、炭素原子およびＮ、ＯおよびＳからなる群から選択される１ないし３個のヘテロ原子からなり、ここに、窒素および硫黄へテロ原子は、所望により、酸化されていてもよく、窒素へテロ原子は、所望により４級化されていてもよく、いずれかの上記で定義した複素環式環がベンゼン環に縮合したいずれの二環式基も含む。複素環式環は、安定した構造物の形成をもたらす、いずれのヘテロ原子または炭素原子で結合してもよい。
Ｈｅｔが１またはそれ以上のＰｈ−Ｃ０−６アルキル−、Ｈｅｔ’−Ｃ０−６アルキル−、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル−Ｓ−、Ｐｈ−Ｃ０−６アルコキシ−、Ｈｅｔ’−Ｃ０−６アルコキシ−、−ＯＨ、−ＮＲ４Ｒ５、Ｈｅｔ’−Ｓ−Ｃ０−６アルキル−、−（ＣＨ２）１−６ＯＨ、−（ＣＨ２）１−６ＮＲ４Ｒ５、−Ｏ（ＣＨ２）１−６ＮＲ４Ｒ５、−（ＣＨ２）０−６ＣＯ２Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）１−６ＣＯ２Ｒ６、−（ＣＨ２）１−６ＳＯ２Ｒ６、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＣＮまたはハロゲンで置換されていてもよく；Ｐｈが１またはそれ以上のＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ＯＨ、（ＣＨ２）１−６ＮＲ４Ｒ５、Ｏ（ＣＨ２）１−６ＮＲ４Ｒ５、ＣＯ２Ｒ６、ＣＦ３またはハロゲンで置換されていてもよく；２個のＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルコキシ基が一緒になって、Ｈｅｔ環に縮合した、５−７員の飽和または不飽和環を形成してもよい（例えば、Ｈｅｔ環上の隣接する位置に結合する２価のアルキレンまたはアルキレンジオキシ基を形成してもよい）、ことが認識されよう。Ｈｅｔの好ましい任意の置換基はＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル−Ｓ−、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＣＮまたは−ＮＲ４Ｒ５である。
Ｈｅｔ’はＨｅｔと同意義であり、１またはそれ以上のＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、−ＯＨ、−（ＣＨ２）１−６ＮＲ４Ｒ５、−Ｏ（ＣＨ２）１−６ＮＲ４Ｒ５、−ＣＯ２Ｒ６、ＣＦ３またはハロゲンで置換されていてもよい。
【００２１】
このようなヘテロサイクルの例として、限定されるものではないが、ピペリジニル、ピペラジニル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロロジニル、２−オキソアゼピニル、アゼピニル、ピロリル、４−ピペリドニル、ピロリジニル、ピラゾリル、ピラゾリジニル、イミダゾリル、ピリジニル、ピラジニル、オキサゾリジニル、オキサゾリニル、オキサゾリル、イソキサゾリル、モルホリニル、チアゾリジニル、チアゾリニル、チアゾリル、キヌクリジニル、インドリル、キノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾピラニル、ベンゾキサゾリル、フリル、ピラニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロピラニル、チエニル、ベンゾキサゾリル、ベンゾフラニリル、ベンゾチオフェニル、チアモルホリニルスルホキシド、チアモルホリニルスルホンならびに慣用的な化学合成により入手でき、安定であるオキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、イミダゾリル、ピリダジニル、ピリミジニルおよびトリアジニルが挙げられる。
【００２２】
式（Ｉ）で示される本発明の化合物は、Ｒ２が置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０アルキルであり、Ｈｅｔがインドール、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ベンズイソキサゾール、ベンゾチオゾールまたはベンゾピラゾールであって、任意の置換基が−（ＣＨ２）２ＮＲ４Ｒ５である化合物を含まない。
さらに、基が「置換されていてもよい」場合、その基は、１つまたはそれ以上の任意の置換基を有していてもよく、任意の置換基は、各々、独立して選択される、ことが認識されよう。
本明細書にて互換的に用いられる「ヘテロ」または「ヘテロ原子」なる語はすべて、酸素、窒素および硫黄を意味する。
本明細書にて互換的に用いられる「ハロ」または「ハロゲン」なる語はすべて、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩを意味する。
【００２３】
Ｒ１がベンジルまたは２−ナフチルメチルであり、Ｒ２がフェニル、４−メチルフェニルまたは４−メトキシフェニルであって、Ｒ３が水素である、式（Ｉ）の化合物が知られている。
本明細書全体を通して、Ｃ０なる語はそのすぐ後に置換基のないことを意味し、例えば、ＡｒＣ０−６アルキル−の場合、Ｃが０だと、その置換基はＡｒ、例えば、フェニルである。逆に、ＡｒＣ０−６アルキル−基が特定の芳香族基、例えばフェニルと同定されるならば、Ｃは０であると理解される。
適当には、Ｒ１は置換されていてもよいＣ２−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−または置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−である。好ましくは、Ｒ１はＡｒ−Ｃ０−６アルキル−または置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−である。より好ましくは、Ｒ１はＡｒ−Ｃ２アルキル−または置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ２アルキル−である。最も好ましくは、Ｒ１はフェネチル、置換されていてもよいエチルフラン または置換されていてもよいエチルチオフェンである。Ｒ１がＡｒ−Ｃ２アルキル−またはＨｅｔ−Ｃ２アルキル−である場合、そのアルキル鎖がトリアゾールの５−位に直接結合している。
【００２４】
適当には、Ｒ２は置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−または置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−である。好ましくは、Ｒ２は置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−である。より好ましくは、Ｒ２は置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０アルキル−であり、ここに任意の置換基はオルトまたはパラ位のいずれかである。最も好ましくは、Ｒ２は置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０アルキル−であり、ここに任意の置換基はオルト位のＣ１−６アルキルであり、好ましくは分岐したＣ１−６アルキルであって、最も好ましくはイソプロピルである。
適当には、Ｒ３はＨ、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−、−Ｃ０−６アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｘ’ＡＢ、−Ｃ０−６アルキル−Ｓ（Ｏ）２Ｘ’ＡＢまたは−Ｃ０−６アルキル−Ｘ’ＡＢであり、ここにＸ’はＯ、Ｓ、ＣまたはＮであり、ＡおよびＢは、独立して、不存在、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、置換されていてもよいＡｒ−Ｃ０−６アルキル−、置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル−またはＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−である。好ましくは、Ｒ３は水素または−Ｃ０−６アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｘ’ＡＢである。より好ましくは、Ｒ３は水素または−Ｃ０−６アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｘ’ＡＢであり、ここにＸ’は酸素であり、ＡおよびＢは不存在、水素またはメチルである。
【００２５】
適当には、Ｒ４、Ｒ５および Ｒ６は、独立して、Ｈ−、Ｃ２−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、Ｐｈ−Ｃ０−６アルキル−、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキル−またはＣ３−７シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル−から選択される。
さらには、基が「置換されていてもよい」場合には、その基は１またはそれ以上の任意の置換基で置換されていてもよく、任意の置換基は、各々、独立して選択されることが認識されよう。
適当には、式（Ｉ）および式（ＩＡ）で示される医薬上許容される塩は、限定されるものではないが、無機酸との塩、例えば、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、二リン酸塩、臭化水素酸塩および硝酸塩、あるいは有機酸との塩、例えばリンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、パルミチン酸塩、サリチル酸塩およびステアリン酸塩を含む。
本発明の化合物は、１つまたはそれ以上の不斉炭素原子を含んでいてもよく、ラセミ体および光学活性形態で存在できる。立体中心は、（Ｒ）、（Ｓ）またはＲおよびＳ配置の組み合わせ、例えば、（Ｒ，Ｒ）、（Ｒ，Ｓ）、（Ｓ，Ｓ）または（Ｓ，Ｒ）であってもよい。これら化合物はすべて、本明細書の範囲内にある。
【００２６】
本発明の化合物を製造するのに有用な新規な中間体は以下のとおりである：
１−（３−シクロヘキシル−プロパノイル）−２−エチル−３−フェニル−イソチオ尿素；
１−（３−（２−チエニル）−プロパノイル）−２−エチル−３−（２−イソプロピルフェニル）−イソチオ尿素；
１−（２−メチル−３−フェニル−プロパノイル）−２−エチル−３−（２−イソプロピルフェニル）−イソチオ尿素；
１−（３−（２−チエニル）−プロパノイル）−２−エチル−３−フェニル−イソチオ尿素； および
１−（２−フェニルチオ−アセチル）−２−エチル−３−フェニル−イソチオ尿素。
本発明に有用な中間体は本明細書のスキームに従って製造される
【００２７】
式（ＩＡ）の化合物のうち好ましい化合物は以下の化合物である：
３−アニリノ−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（２−イソプロピル−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（２−メチル−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（４−メチル−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（４−メトキシ−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（４−フルオロ−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（２−ピリジル）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−アニリノ−３−メチル−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
１−（５−フェネチル−４Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−キノリン；
４−（５−ベンジル−４−Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イルアミノ）−安息香酸エチルエステル；
フェニル−［５−（チオフェン−２−イルスルファニルメチル）−４Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イル］−アミン；
フェニル−５−（フェニルスルファニルメチル−４Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イル）−アミン；
３−アニリノ−５−［２−（シクロヘキシル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−（２−イソプロピル−アニリノ）−５−［２−（２−チエニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；
３−アニリノ−５−［１−メチル−２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール； および
３−アニリノ−５−［２−（２−チエニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール。
【００２８】
式（ＩＡ）の化合物のうち最も好ましい化合物は以下の化合物である：
３−アニリノ−５−［２−（２−チエニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール；および
３−（２−イソプロピル−アニリノ）−５−［２−（２−チエニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール。
【００２９】
調製方法
式（Ｉ）または（ＩＡ）の化合物は、スキーム１に記載の方法と同様の方法により調製した。
【化３】
2005508841.tif 000004
ａ）ＥｔＩ、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＦ；ｂ）Ｒ３ＣＯＮＨＮＨ２、ピリジニル、８５℃；ｃ）Ｒ３ＣＯ２Ｈ、ＨＯＢＴ、ＤＣＣ、ＣＨ２Ｃl２；ｄ）ＮＨ２ＮＨ２、アセトニトリル、８５℃
【００３０】
チオ尿素（例えば、１−（２−メチルフェニル）チオ尿素、１−（４−メチルフェニル）−チオ尿素、１−（４−フルオロフェニル）チオ尿素、１−（４−メトキシフェニル）チオ尿素、１−（２−ピリジル）チオ尿素、１−（２−イソプロピルフェニル）−チオ尿素、３,４−ジヒドロ−２Ｈ−キノリン−１−カルボチオ酸アミド）を、ＤＭＦ中、ヨードエタンおよびトリエチルアミンと反応させた。ピリジニル中、アシルヒドラジド（例えば、３−フェニルプロピオン酸ヒドラジドおよびチオフェン−２−イルスルファニル−酢酸ヒドラジド）と反応させてトリアゾールを得た。別法として、Ｓ−エチルイソチオ尿素を、標準的カップリング条件下、カルボン酸（例えば、２−メチル−３−フェニル−プロパン酸、３−シクロヘキシルプロピオン酸、３−（２−チエニル）プロパン酸、フェニルスルファニル−酢酸）を用いてアシル化し、アミドを得ることができた。アミドをヒドラジンとエタノール中で反応させてトリアゾールを得た。
【００３１】
医薬組成物の処方
本発明の医薬上有効な化合物（およびその医薬上許容される塩）は、癌、血管腫、増殖性網膜症、関節リウマチ、アテローム性動脈硬化性血管新生、乾癬、眼球血管新生または肥満症（「ＭｅｔＡＰ２介在病態」）の治療に有効な量の本発明の式（Ｉ）または（ＩＡ）の化合物（「活性成分」）と、標準的な医薬担体または希釈剤を、当該分野にてよく知られた慣用的方法に従って組み合わせることにより製造される従来の剤形で投与される。これらの操作は、必要に応じて、成分を所望の製剤に、混合、造粒および圧搾または溶解させることを含む。
例えば、使用される医薬担体は、固体または液体のどちらであってもよい。固体担体の例は、ラクトース、白土、シュークロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸等である。液体担体の例は、シロップ、ピーナッツ油、オリーブ油、水等である。同様に、担体または希釈剤は、当該分野にてよく知られた時間遅延物質、例えば、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルを、単独でまたはワックスと共に含む。
広範囲の医薬形態が使用できる。したがって、固体担体が使用される場合、製剤は錠剤化でき、粉末またはペレットの形態でハードゼラチンカプセルに充填でき、またはトローチまたはロゼンジの形態でありうる。固体担体の量は、広範囲であるが、好ましくは、約２５ｍｇないし約１０００ｍｇである。液体担体を使用する場合、製剤は、シロップ、エマルジョン、ソフトゼラチンカプセル、滅菌注射液、例えば、アンプルまたは非水性液体懸濁液の形態である。
【００３２】
また、活性成分は、ＭｅｔＡＰ２介在病態の治療または予防を必要とする哺乳動物に局所的に投与できる。もちろん、局所投与に治療的に有効な必要とされる活性成分の量は、選択する化合物、治療する病態の性質および重度、治療を受ける哺乳動物で変化し、最終的に医師の決定による。活性成分の適当な量は、局所投与の場合、１．５ｍｇないし５００ｍｇであり、最も好ましい投与量は１ｍｇないし１００ｍｇであり、例えば、５ないし２５ｍｇを、１日２または３回投与する。
局所投与とは、非全身性投与を意味し、活性成分の外的な表皮、口腔への適用および化合物の耳、目および鼻への注入を含み、その場合、当該化合物は、血流に有意には入らない。全身性投与とは、経口、静脈内、腹膜内および筋肉内投与を意味する。
活性成分を、原料として、単独で投与することは、可能であるが、医薬処方として投与することが好ましい。活性成分は、局所投与の場合、処方の０．００１％ないし１０％ｗ／ｗ、例えば、１重量％ないし２重量％を含むことができる。１０％ｗ／ｗと多量に含んでいてもよいが、好ましくは、５％を超えず、より好ましくは、処方の０．１％ないし１％ｗ／ｗである。
【００３３】
獣医およびヒト医療での両方の使用に関して、本発明の局所処方は、活性成分を１またはそれ以上の許容される担体（複数でも可）と共に含み、したがって、所望により、他の治療的成分（複数でも可）を含んでいてもよい。担体（複数でも可）は、処方の他の成分と適合するという意味で「許容される」でなければならず、その受容者に有害であってはならない。
局所投与に適する処方は、皮膚を通して炎症部位に浸透することに適した液体または半液体製剤、例えば、リニメント、ローション、クリーム、軟膏またはペースト、あるいは目、耳または鼻に投与するのに適当な滴剤を含む。
本発明の滴剤は、滅菌水性または油性の溶液または懸濁液を含み、活性成分を、殺菌および／または殺真菌剤および／またはいずれかの他の適当な防腐剤、好ましくは、界面活性剤の適当な水性またはアルコール性溶液に溶かすことにより製造できる。ついで、得られた溶液を、濾過により浄化し、適当な容器に移し、ついで、密封し、オートクレーブまたは９８〜１００℃で半時間維持することにより滅菌する。別法として、溶液を濾過により滅菌処理に付し、無菌法により容器に移すことができる。滴剤に配合するのに適当な殺菌および／または殺真菌剤は、硝酸または酢酸フェニル水銀（０．００２％）、塩化ベンズアルコニウム（０．０１％）および酢酸クロロヘキシジン（０．０１％）である。油性溶液の製剤に適当な溶媒は、グリセロール、希釈アルコール、およびプロピルグリコールである。
【００３４】
本発明のローションは、皮膚または目への適用に適当なものを含む。眼用ローションは、所望により殺菌剤を含む滅菌水性溶液を含むことができ、点滴の製法と同様の方法により製造できる。また、皮膚に適用されるローションまたはリニメントは、乾燥を速め、皮膚を冷却する薬剤、例えば、アルコールまたはアセトン、および／またはグリセロールのような保湿剤またはヒマシ油またはラッカセイ油のような油を含む。
本発明のクリーム、軟膏またはペーストは、外服用の、活性成分の半固体処方である。これらは、微細または粉末形態の活性成分を、単独で、あるいは水性または非水性流体の溶液または懸濁液にて、適当な装置を用いて、グリース状または非グリース状基剤と混合することにより製造できる。基剤は、炭化水素、例えば、ハード、ソフトまたは流動パラフィン、グリセロール、蜜蝋、金属石鹸；粘液；天然源油、例えば、アーモンド、コーン、アラキス、ヒマシまたはオリーブ油；羊毛脂またはその誘導体、または脂肪酸、例えば、ステアリン酸またはオレイン酸を、アルコール、例えばプロピレングリコールと共に含んでいてもよい。処方は、いずれか適当な界面活性剤、例えば、アニオン性、カチオン性、または非イオン性界面活性剤、例えばエステルまたはそのポリオキシエチレン誘導体を配合する。また、沈殿防止剤、例えば、天然ガム、セルロース誘導体または無機物質、例えば、シリカ、および他の成分、例えば、ラノリンも含まれうる。
【００３５】
また、活性成分は、吸入によっても投与できる。「吸入」は、鼻腔および経口吸入投与を意味する。エアロゾル処方または計量用量吸引器などのかかる投与に適する剤形は、従来の方法により製造できる。吸入により投与される活性成分の１日の投与量は、約０．１ｍｇないし約１００ｍｇ／日であり、好ましくは、約１ｍｇないし約１０ｍｇ／日である。
１つの態様において、本発明は、全ての哺乳動物、好ましくはヒトの癌、血管腫、増殖性網膜症、関節リウマチ、アテローム性動脈硬化性血管新生、乾癬、眼球血管新生または肥満症の治療方法であって、かかる哺乳動物にＭｅｔＡＰ２阻害剤、特に、本発明の化合物の有効量を投与することを含む、方法に関する。
【００３６】
「治療」なる語は、予防的または治療的治療のいずれかを意味する。該化合物は、本発明の化合物と、公知の方法で、従来の医薬上許容される担体または希釈剤とを組み合わせることにより製造された従来の剤形で、該哺乳動物に投与できる。当業者であれば、医薬上許容される担体または希釈剤の形態および特徴が、組み合わせる活性成分の量、投与経路および他のよく知られた変数により決定されることは、認識できるだろう。化合物を、癌、血管腫、増殖性網膜症、関節リウマチ、アテローム性動脈硬化性血管新生、乾癬、眼球血管新生または肥満症の治療を必要とする哺乳動物に、これらの病態に付随する症状を減少させるために十分な量で投与する。投与経路は経口または非経口であってもよい。
本明細書に使用される「非経口」なる語は、静脈内、筋肉内、皮下、直腸内、膣内または腹膜内投与を含む。一般に、非経口投与の皮下および筋肉内の形態が好ましい。１日の非経口投与量は、好ましくは、約３０ｍｇないし約３００ｍｇ／日の活性成分である。１日の経口投与量は、好ましくは、約１００ｍｇないし約２０００ｍｇ／日の活性成分である。
本発明の化合物の個々の投与の最適量および間隔は、治療する症状の性質および程度、投与の形態、経路および部位、および治療される特定の哺乳動物により決定され、したがって、最適条件は、従来の方法により決定できることは、当業者には理解できるだろう。治療の最適過程、すなわち、所定の日数の間の、１日当たりに投与される化合物の投与の回数は、当業者であれば、従来の治療過程決定試験を用いて確かめることができる。
【実施例】
【００３７】
本発明を以下の実施例を用いて記載する。これは、単なる例示であって、本発明の範囲を限定するものではない。実施例において、プロトンＮＭＲスペクトルは、特記しない限り、Bruker 400 ＮＭＲを用いて測定した。
【００３８】
実施例１
３−アニリノ−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾールの調製
３−フェニル−プロピオン酸ヒドラジド（０.２０ｇ、１.２２ミリモル）（Verma, R.；Ghosh, S. K. J. Chem. Soc. Perkin Trans. I、１９９８、１５、２３７７）のピリジニル（８ｍｌ）中攪拌溶液に、Ｓ−エチル−１−フェニルイソチオ尿素ヨウ素酸塩（０.３３ｇ、１.８３ミリモル）（Shearer, B. G.；Lee, S.；Oplinger, J. A.；Frick, L. W.；Garvey, E. P.；Furfine, E. S., J. Med. Chem. １９９７、４０、１９０１）を添加した。その反応混合物を１１５℃で１５時間加熱し、濃縮して乾燥させ、ついで分取性ＨＰＬＣで精製し、標記化合物を白色固体（４７ｍｇ、１５％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）２６５.２（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）： δ  １.０８（２Ｈ,Ｊ＝６.８Ｈｚ）、３.０２（２Ｈ,ｍ）、６.８８（１Ｈ,ｍ）、７.１７−７.２８（６Ｈ,ｍ）、７.３７（ｍ,２Ｈ）。
【００３９】
実施例２
３−（２−イソプロピル−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾールの調製
ａ）Ｓ−エチル−１−（２−イソプロピルフェニル）−イソチオ尿素ヨウ素酸塩
１−（２−イソプロピルフェニル）チオ尿素（２.５ｇ、１２.８９ミリモル）のＥｔＯＨ（８ｍｌ）中攪拌溶液に、ＥｔＩ（１.２６ｍｌ、１４.１８ミリモル）を添加した。反応混合物を８５℃で一夜加熱した。２４時間経過後、当該混合物を室温に冷却し、濃縮して標記化合物を明褐色油（２.２７ｇ、７８％）として得た。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ６−ＤＭＳＯ）：δ  １.０３（ｔ,２Ｈ,Ｊ＝７.０Ｈｚ）、１.１８（ｄ,６Ｈ,Ｊ＝６.９Ｈｚ）、２.９１（ｍ,１Ｈ）、３.４５（ｑ,２Ｈ,Ｊ＝６.９Ｈｚ）、７.２６（ｍ,１Ｈ）、７.３５（ｍ,１Ｈ）、７.４８（ｍ,２Ｈ）。
ｂ）３−（２−イソプロピル−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾール
Ｓ−エチル−１−フェニルイソチオ尿素の代わりにＳ−エチル−１−（２−イソプロピルフェニル）−イソチオ尿素を用いることを除き、実施例１の操作に従って、標記化合物を白色固体（３４％）として調製した。ＭＳ（ＥＳＩ） ３０７.２（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）：δ  １.２５（ｄ,６Ｈ,Ｊ＝＝６.８Ｈｚ）、２.９２（ｍ,２Ｈ）、３.０３（ｍ,２Ｈ）、３.２４（七重線,１Ｈ,Ｊ＝６.８Ｈｚ）、７.１１−７.３３（ｍ,８Ｈ）、７.４２（ｍ,１Ｈ）。
【００４０】
実施例３
３−（２−メチル−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾールの調製
工程２（ａ）にて１−（２−イソプロピルフェニル）チオ尿素の代わりに１−（２−メチルフェニル）−チオ尿素を用いることを除き、実施例 ２（ａ）−２（ｂ）の操作に従って、標記化合物を白色固体（２９％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）２７９.０（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）：δ  １.３２（ｓ,３Ｈ）、２.９４（ｍ,２Ｈ）、３.０４（ｍ,２Ｈ）、６.９５（ｍ,１Ｈ）、７.１４−７.２９（ｍ,７Ｈ）、７.５４（ｍ,１Ｈ）。
【００４１】
実施例４
３−（４−メチル−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾールの調製
工程２（ａ）にて１−（２−イソプロピルフェニル）チオ尿素の代わりに１−（４−メチルフェニル）−チオ尿素を用いることを除き、実施例 ２（ａ）−２（ｂ）の操作に従って、標記化合物を白色固体（１８％）として調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）２７９.０（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）：δ  ２.４４（ｓ,３Ｈ）、２.９１−３.０９（ｍ,４Ｈ）、７.０７（ｍ,２Ｈ）、７.１２−７.２９（ｍ,７Ｈ）。
【００４２】
実施例５
３−（４−メトキシ−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾールの調製
工程２（ａ）にて１−（２−イソプロピルフェニル）チオ尿素の代わりに１−（４−メトキシフェニル）チオ尿素を用いることを除き、実施例 ２（ａ）−２（ｂ）の操作に従って、標記化合物を白色固体（１４％）として調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）２９５.２（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）：δ  ２.９２−３.０５（ｍ,４Ｈ）、３.７７（ｓ,３Ｈ）、 ６.８７（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝８.９Ｈｚ）、７.１８−７.３１（ｍ,７Ｈ）。
【００４３】
実施例６
３−（４−フルオロ−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾールの調製
工程２（ａ）にて１−（２−イソプロピルフェニル）チオ尿素の代わりに１−（４−フルオロ−フェニル）チオ尿素を用いることを除き、実施例 ２（ａ）−２（ｂ）の操作に従って、標記化合物を白色固体（３１％）として調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）２８３.２（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）：δ  ２.８９−３.０９（ｍ,４Ｈ）、６.９８（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝８.７Ｈｚ）、７.１０−７.２９（ｍ,５Ｈ）、７.３８−７.４１（ｍ,２Ｈ）。
【００４４】
実施例７
３−（２−ピリジル−アニリノ）−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾールの調製
工程２（ａ）にて１−（２−イソプロピルフェニル）チオ尿素の代わりに１−（２−ピリジル）チオ尿素を用いることを除き、実施例 ２（ａ）−２（ｂ）の操作に従って、標記化合物を白色固体（１５％）として調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）２６６.２（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）：δ  ２.９３−２.９７（ｍ,２Ｈ）、３.０３−３.０７（ｍ,２Ｈ）、６.９２−６.９５（ｍ,２Ｈ）、７.１６−７.２９（ｍ,５Ｈ）、７.７０（ｍ,１Ｈ）、８.２９（ｍ,１Ｈ）。
【００４５】
実施例８
３−アニリノ−３−メチル−５−［２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾールの調製
工程２（ａ）にて１−（２−イソプロピルフェニル）チオ尿素の代わりに１−メチル−１−フェニルチオ尿素を用いることを除き、実施例 ２（ａ）−２（ｂ）の操作に従って、標記化合物を白色固体（４５％）として調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）２７９.０（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）：δ  ２.９２−２.９４（ｍ,２Ｈ）、３.００−３.０３（ｍ,２Ｈ）、３.４０（ｓ,３Ｈ）、７.１３−７.３８（ｍ,１０Ｈ）。
【００４６】
実施例９
１−（５−フェネチル−４Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−キノリンの調製
工程２（ａ）にて１−（２−イソプロピルフェニル）チオ尿素の代わりに３,４−ジヒドロ−２Ｈ−キノリン−１−カルボチオ酸アミドを用いることを除き、実施例 ２（ａ）−２（ｂ）の操作に従って、標記化合物を白色固体（３２％）として調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）３０５.４（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）：δ  １.９８−２.０７（ｍ,２Ｈ）、２.８１（ｔ,２Ｈ,Ｊ＝６.３Ｈｚ）、２.８８−３.０７（ｍ,４Ｈ）、３.８８（ｔ,２Ｈ,Ｊ＝６.５Ｈｚ）、６.８６（ｍ,１Ｈ）、７.０７（ｍ,２Ｈ）、７.１８−７.３０（ｍ,６Ｈ）。
【００４７】
実施例１０
４−（５−ベンジル−４−Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イルアミノ）−安息香酸エチルエステルの調製
工程２（ａ）にて１−（２−イソプロピルフェニル）チオ尿素の代わりに４−チオウレイド−安息香酸エチルエステルを用いることを除き、実施例 ２（ａ）−２（ｂ）の操作に従って、標記化合物を白色固体（８％）として調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）３２３.２（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）：δ  １.２９（ｔ,３Ｈ,Ｊ＝７.１Ｈｚ）、４.０２（ｓ,２Ｈ）、４.４５（ｑ,２Ｈ,Ｊ＝７.１Ｈｚ）、７.２４（ｍ,１Ｈ）、７.２６−７.３５（ｍ,４Ｈ）、７.５７（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝８.８Ｈｚ）、７.８１（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝８.８Ｈｚ）、９.６８（ｂｒｓ,１Ｈ）。
【００４８】
実施例１１
フェニル−［５−（チオフェン−２−イルスルファニルメチル）−４Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イル］−アミンの調製
ａ）チオフェン−２−イルスルファニル−酢酸ヒドラジド
チオフェン−２−イルスルファニル−酢酸メチルエステル（０.５０ｇ、２.６６ミリモル）のＭｅＯＨ（８ｍｌ）中攪拌溶液に、無水ヒドラジン（０.４２ｍｌ、１３.３０ミリモル）を加え、混合物を室温で２４時間攪拌した。混合物を濃縮して標記化合物を白色固体（０.５０ｇ、９８％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）１８９.２（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）：δ  ３.４０（ｓ,２Ｈ）、７.２３（ｍ,１Ｈ）、７.５１（ｓ,１Ｈ）、７.５２（ｓ,１Ｈ）。
ｂ）フェニル−［５−（チオフェン−２−イルスルファニルメチル）−４Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イル］−アミン
３−フェニル−プロピオン酸ヒドラジドの代わりにチオフェン−２−イルスルファニル−酢酸ヒドラジドを用いることを除き、実施例１の操作に従って、標記化合物を白色固体（２２％）として調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）２８９.０（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）：δ  ３.９８（ｓ,２Ｈ）、７.０２−７.０９（ｍ,２Ｈ）、７.１６（ｓ,１Ｈ）、７.３２−７.３７（ｍ,４Ｈ）、７.５４（ｓ,１Ｈ）。
【００４９】
実施例１２
３−アニリノ−５−［２−（シクロヘキシル）エチル］−１,２,４−トリアゾールの調製
ａ）１−（３−シクロヘキシル−プロパノイル）−２−エチル−３−フェニル−イソチオ尿素
Ｓ−エチル−１−フェニルイソチオ尿素ヨウ素酸塩（０.５０ｇ、１.６２ミリモル）（Shearer, B. G.；Lee, S.；Oplinger, J. A.；Frick, L. W.；Garvey, E. P.；Furfine, E. S. J. Med. Chem. １９９７、４０、１９０１）のＤＭＦ（１５ｍｌ）中攪拌溶液に、３−シクロヘキシルプロピオン酸（０.３８ｇ、２.４４ミリモル）、ＨＯＢt（０.３３ｇ、２.４４ミリモル）およびＮ−メチルモルホリン（０.４１ｇ、４.０６ミリモル）を加えた。この混合物にＨＢＴＵ（０.９２ｇ、２.４４ミリモル）を添加し、当該反応混合物を室温で２４時間攪拌した。混合物をＨ２Ｏ（７５ｍｌ）中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３ｘ４０ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ抽出液を合し、ブライン（７５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。有機抽出液を濾過し、濃縮し、粗アミドをフラッシュクロマトグラフィーに付し、標記化合物を透明油（０.４８ｇ、９５％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ） ３１９.２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００５０】
ｂ）３−アニリノ−５−［２−（シクロヘキシル）エチル］−１,２,４−トリアゾール
実施例 １２（ａ）の化合物（０.４８ｇ、１.５３ミリモル）のアセトニトリル（８ｍｌ）中攪拌溶液に、無水ヒドラジン（０.２３ｍｌ、７.２０ミリモル）を添加した。その混合物を８５℃に加熱し、４時間攪拌した。当該反応物を室温に冷却し、濃縮し、分取用ＨＰＬＣで精製し、標記化合物を白色固体（２５％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）２７１.４（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）：δ  １.００（ｍ,２Ｈ）、１.２５−１.３０（ｍ,４Ｈ）、１.６１−１.８３（ｍ,７Ｈ）、２.７１（ｍ,２Ｈ）、６.９０（ｍ,１Ｈ）、７.２３−７.２７（ｍ,２Ｈ）、７.３９−７.４１（ｍ,２Ｈ）。
【００５１】
実施例１３
３−（２−イソプロピル−アニリノ）−５−［２−（２−チエニル）エチル］−１,２,４−トリアゾールの調製
工程１２（ａ）にてＳ−エチル−１−フェニルイソチオ尿素ヨウ素酸塩の代わりにＳ−エチル−１−（２−イソプロピルフェニル）−イソチオ尿素ヨウ素酸塩を用い、３−シクロヘキシルプロピオン酸の代わりに３−（２−チエニル）プロパン酸を用いることを除き、実施例１２（ａ）−２（ｂ）の操作に従って、標記化合物を白色固体（３％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）３１３.０（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）：δ  １.２５（ｄ,６Ｈ,Ｊ＝６.９Ｈｚ）、２.９６（ｔ,２Ｈ,Ｊ＝７.５Ｈｚ）、３.２２−３.２８（ｍ,３Ｈ）、６.８４（ｓ,１Ｈ）、６.９１（ｍ,１Ｈ）、７.１１−７.１９（ｍ,３Ｈ）、７.３２（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝７.６Ｈｚ）、７.４４（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝７.７Ｈｚ）。
【００５２】
実施例１４
３−アニリノ−５−［１−メチル−２−（フェニル）エチル］−１,２,４−トリアゾールの調製
工程１２（ａ）にて３−シクロヘキシルプロピオン酸の代わりに２−メチル−３−フェニル−プロパン酸を用いることを除き、実施例１２（ａ）−２（ｂ）の操作に従って、標記化合物 を白色固体（３２％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）２７９.０（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）：δ  １.３２（ｍ,３Ｈ）、２.８７−２.９２（ｍ,１Ｈ）、３.０６−３.１１（ｍ,１Ｈ）、３.１６−３.２０（ｍ,１Ｈ）、６.８８（ｂｒｓ,１Ｈ）、７.１２−７.２６（ｍ,７Ｈ）、７.３７（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝６.６Ｈｚ）。
【００５３】
実施例１５
３−アニリノ−５−［２−（２−チエニル）エチル］−１,２,４−トリアゾールの調製
工程１２（ａ）にて３−シクロヘキシルプロピオン酸の代わりに３−（２−チエニル）プロパン酸を用いることを除き、実施例１２（ａ）−２（ｂ）の操作に従って、標記化合物を白色固体（３７％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）２７１.２（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）：δ  ３.０２（ｔ,２Ｈ,Ｊ＝７.７Ｈｚ）、３.２９（ｔ,２Ｈ,Ｊ＝７.６Ｈｚ）、６.８５（ｓ,１Ｈ）、６.９０（ｍ,２Ｈ）、７.１９（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝４.８Ｈｚ）、７.２６（ｍ,２Ｈ）、７.３９（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝７.９Ｈｚ）。
【００５４】
実施例１６
フェニル−５−（フェニルスルファニルメチル−４Ｈ−［１,２,４］トリアゾール−３−イル）−アミンの調製
工程１２（ａ）にて３−シクロヘキシルプロピオン酸の代わりにフェニルスルファニル−酢酸を用いることを除き、実施例１２（ａ）−２（ｂ）の操作に従って、標記化合物を白色固体（５４％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）２８３.２（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ４−ＭｅＯＨ）：δ  ４.１３（ｓ,２Ｈ）、６.９３（ｍ,１Ｈ）、７.２５−７.３６（ｍ,７Ｈ）、７.４３（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝７.３Ｈｚ）。
【００５５】
生物学的データ：
ｈＭｅｔＡＰ２の直接分光学的アッセイ
ｈＭｅｔＡＰ２活性は、別の基質、Ｌ−メチオニン−ｐ−ニトロアニリド（Ｍｅｔ−ｐＮＡ）およびＬ−メチオニン−７−アミド−４−メチルクマリン（Ｍｅｔ−ＡＭＣ）を用いる直性分光学的アッセイ法により測定できる。ｐ−ニトロアニリン（ｐＮＡ）または７−アミド−４−メチルクマリン（ＡＭＣ）の形成を、各々、４０５ｎｍおよび４６０ｎｍでの対応するプレートリーダー上での吸光度または蛍光の増加により連続的にモニターした。アッセイはすべて３０℃で行った。蛍光または分光光度プレートリーダーを、各々、シグマ（Sigma）社から入手した標体のｐＮＡおよびＡＭＣで校正した。典型的な９６ウェルプレートアッセイに関して、５０μＬアッセイ溶液の各ウェル中での吸光度（ｐＮＡは４０５ｎｍで）または蛍光発光（ＡＮＣは、λｅｘ＝３６０ｎｍ、λｅｍ＝４６０ｎｍ）の増加を用い、ｈＭｅｔＡＰ２の初期速度を計算した。各々の５０μＬのアッセイ溶液は、５０ｍＭのヘペス（Hepes）・Ｎａ＋（ｐＨ７．５）、１００ｍＭのＮａＣｌ、１０〜１００ｎＭの純粋なｈＭｅｔＡＰ２酵素、および可変量のＭｅｔ−ＡＭＣ（３％ＤＭＳＯ水溶液中）またはＭｅｔ−ｐＮＡを含有した。アッセイを基質を添加して開始し、初期速度をｈＭｅｔＡＰ２不在下で測定されたバックグラウンド速度を用いて訂正した。
【００５６】
ｈＭｅｔＡＰ２の結合分光学的分析
また、ｈＭｅｔＡＰ２のメチオニンアミノペプチダーゼ活性は、遊離Ｌ−アミノ酸形成をモニターすることにより分光学的に測定できる。トリペプチド（Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｓｅｒ、シグマ社）またはテトラペプチド（Ｍｅｔ−Ｇｌｙ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ、シグマ社）基質からのＮ−末端メチオニンの放出を、Ｌ−アミノ酸オキシダーゼ（ＡＡＯ）／西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）対（式１〜３ａ，ｂ）を用いてアッセイした。過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）の形成を、４５０ｎｍ（酸化後のｏ−ジアニシジン（シグマ社）の吸光度の増加、Δε＝１５３００Ｍ−１ｃｍ−１）２および３０℃で、９６−または３８４−ウェルプレートリーダー中で、Tsunasawa, S. （１９９７）（式３ａ）らに適合した方法により、連続的にモニターした。別法として、Ｈ２Ｏ２の形成を、５８７ｎｍ（Δε＝５４，０００Ｍ−１ｃｍ−１、λｅｘ＝５６３ｎｍ、励起および発光両方のスリット幅は１．２５ｍｍであった）および３０℃で、アンプレックス・レッド（Amplex Red）（Molecular Probes, Inc)(Zhou, M. et al.（1997） Anal. Biochem. 253, 162）（式３ｂ）を使用して、蛍光発光の増加をモニターすることで追跡した。５０μＬの全容量において、典型的なアッセイは、５０ｍＭのヘペス・Ｎａ＋、ｐＨ７．５、１００ｍＭのＮａＣｌ、１０μＭのＣｏＣｌ２、１ｍＭのｏ−ジアニシジンまたは５０μＭのアンプレックス・レッド、０．５ユニットのＨＲＰ（シグマ社）、０．０３５ユニットのＡＡＯ（シグマ社）、１ｎＭのｈＭｅｔＡＰ２、および可変量のペプチド基質を含有した。アッセイをｈＭｅｔＡＰ２を添加して開始し、速度をｈＭｅｔＡＰ２不在下で測定されたバックグラウンド速度を用いて訂正した。
【００５７】
【化４】
2005508841.tif 000005
【００５８】
動的データ分析
データをグラフィット・コンピューターソフトウェアを用いて適当な速度方程式に適合させた。ミカエリス−メンテン（Michaelis-Ｍｅnton）動力学に適合する初期速度データは、式４に適合した。見かけ競合および非競合的阻害に適合する阻害パターンは、各々、式５および式６に適合した。
ν= VA/(Ka ＋ A)                                (4)
ν= VA/[Ka(1 ＋ I/Kis) ＋ A]                     (5)
ν= VA/[Ka(1 ＋ I/Kis) ＋ A(1 ＋ I/Kii)]          (6)
式４〜６において、νは初期速度であり、Ｖは最大速度であり、Ｋａは見かけ上のミカエリス定数であり、Ｉは阻害剤濃度であり、Ａは、種々の基質の濃度である。阻害定数の速度式で使用される学名は、クレランド（Cleland）（１９６３）の学名であり、ＫｉｓおよびＫｉｉは、各々、見かけ上の傾きおよび切片阻害定数を意味する。
【００５９】
細胞増殖阻害アッセイ
ＭｅｔＡＰ２阻害剤の細胞増殖を阻害する能力を、標準的なＸＴＴマイクロタイターアッセイにより評価した。ＸＴＴ、真核細胞中のミトコンドリアのｐＨの変化に感受的な色素を用いて、化合物の存在下での細胞の生存度を定量する。所定の数で播種された細胞は７２時間のインキュベーションで平均しておよそ２回分裂する。化合物の不在下において、細胞のこの個体群は、インキュベーション期間の終りで、指数関数的に増殖する；これらの細胞のミトコンドリア活性は分光学的読み出し（Ａ４５０）に反映する。所定の濃度の化合物の存在下で、同様の細胞の個体群の生存度を、試験ウェルと対照ウェルからのＡ４５０読み取り値を比較することにより評価する。平面底の９６ウェルプレートに、トリプシン処理した指数関数的に増殖する培養物から、適当な数の細胞（２００μｌの容量で、４〜６×１０３細胞／ウェル）を播種する。ＨＵＶＥＣの場合、ウェルをマトリゲルでコーティングし、培養物を確立する。「ブランク」ウェルには、培地だけを加える。細胞を一夜インキュベートして吸着させる。翌日、細胞を含有するウェルの培地を１８０μｌの新鮮な培地と入れ換える。試験化合物の適当な希釈液を、ウェルに加え、全てのウェルの最終ＤＭＳＯ濃度を０．２％にする。細胞を化合物と一緒に、使用する細胞系の通常の増殖条件下、３７℃でさらに７２時間インキュベートする。ついで、細胞を標体のＸＴＴ／ＰＭＳ（使用直前に調製した：プレート毎に８ｍｇのＸＴＴ（シグマＸ−４２５１）を１００μｌのＤＭＳＯに溶かす。３．９ｍｌのＨ２Ｏを加えてＸＴＴを溶かし、カチオン不含の３．３ｍｌのＰＢＳ中の冷結アリコートストック溶液（１０ｍｇのＰＭＳ（フェナジンメトスルフェート）、シグマＰ−９６２５）からの２０μｌのＰＭＳストック溶液（３０ｍｇ／ｍｌ）を加える。これらのストックを、使用まで−２０℃で冷凍する。）を用いて生存度についてアッセイする。５０μｌのＸＴＴ／ＰＭＳ溶液を各ウェルに加え、プレートを９０分間（必要とされる時間は細胞系等に依存し変化しうる）、３７℃で、Ａ４５０が１．０を超えるまで、インキュベートする。４５０ｎＭでの吸光度を、９６ウェルＵＶプレートリーダーを使用して測定する。各々のウェルでの細胞の生存率を、それらのデータ（バックグラウンド吸光度で訂正した）から計算する。ＩＣ５０は、細胞の生存率を対照（未処理）の生存率の５０％にまで減少させる化合物の濃度である。
【００６０】
本発明の化合物は、ＩＣ５０値が０．０００１ないし１００μＭの範囲の、ＭｅｔＡＰ２阻害剤活性を示す。本発明の化合物についての構造／活性の完全な関係は、まだ、確立されていない。しかし、本明細書の開示が得られたならば、本発明のどの化合物がＭｅｔＡＰ２の阻害剤であり、０．０００１ないし１００μＭの範囲のＩＣ５０値でそれと結合するかを決定するために本発明のアッセイを利用することができる。
【００６１】
限定するものではないが、本明細書中に引用する特許および特許出願を含め、全ての刊行物を出典明示により本明細書の一部とする。
当該記載は、好ましい具体例を含め、本発明を完全に開示している。本明細書に具体的に開示されている具体例の修飾および改善は本発明の範囲内にある。さらに工夫することなく、当業者は、先の記載を利用して、最大限に本発明を利用できると考えられる。したがって、いずれもの実施例は、いかなる点においても、本発明の単なる例示であって、発明の範囲を限定するものではない。
【国際調査報告】
2005508841.tif 000009
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