(57)【要約】本方法は、希土類元素材料、ドープされた化合物半導体またはドープされた無機化合物である発光性材料の水溶性粒子の調製方法であって、この発光性材料の粒子を、この粒子の製造中にまたはその後に、有機酸またはルイス塩基でコーティングして、コーティングの表面が１またはそれ以上の反応基を有するようにする工程を包含する調製方法、を開示する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
希土類元素材料、ドープされた化合物半導体またはドープされた無機化合物である発光性材料の水溶性粒子の調製方法であって、
該発光性材料の粒子を、該粒子の製造中にまたはその後に、有機酸またはルイス塩基でコーティングして、コーティングの表面が１またはそれ以上の反応基を有するようにする工程を包含する、方法。
【請求項２】
前記反応基が、−ＳＨ、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、アミノまたはアミド基である、請求項１記載の方法。
【請求項３】
希土類元素材料が、希土類元素エレメントを用いてドープされた希土類金属酸化物または無機化合物である、請求項１または２記載の方法。
【請求項４】
前記希土類金属が、ユーロピウム、テルビウム、セリウム、イットリウム、スカンジウム、ランタンまたはガドリニウムである、請求項１〜３いずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記ドープされた材料が、式
Ｚ２Ｏ３：Ｚｘ＋
［式中、Ｚは希土類金属であり、ｘは２〜４である。］
のドープされた希土類元素酸化物である、請求項１〜４いずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記無機化合物が、希土類金属酸化物、フッ化物、オキシハライド、ボレート、アルミネート、シリケート、ホスフェート、バナジン酸塩、オキシスルフィド、タングステン酸塩、モリブデン酸塩またはウラニル化合物である、請求項１〜４いずれかに記載の方法。
【請求項７】
前記ドープされた化合物半導体または無機化合物のドーパントが、希土類元素材料または周期表の第一列の遷移金属もしくはIIＡ族の金属である、請求項１または２記載の方法。
【請求項８】
前記ドーパントが、請求項４記載の希土類金属、マンガン、銅、クロミウム、カルシウムまたはストロンチウムである、請求項７記載の方法。
【請求項９】
化合物半導体が、II族／VI族、またはIII族／Ｖ族の半導体である、請求項７または８記載の方法。
【請求項１０】
前記コーティングが前成形された希土類元素材料に設けられ、表面コーティングが有機酸またはルイス塩基を有し、および粒子の表面上に反応基を提供する水溶性有機酸またはルイス塩基のコーティングが水溶液から適用される、請求項１〜９いずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記コーティングが粒子の製造中に設けられる、請求項１〜９いずれかに記載の方法。
【請求項１２】
希土類金属塩の溶液に対して表面キャッピング効果を有する金属表面活性分子を加える工程、および
アルカリを加えてコロイド状沈殿の形成を引き起こす工程、
を包含する、請求項５記載の粒子の製造における、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
コーティングが、一座配位、二座配位または多座配位である配位子である、請求項１〜１２いずれかに記載の方法。
【請求項１４】
前記配位子が、トリアルキルホスフィンオキシド、またはジアルキルスルホスクシナート、ホスホン酸基およびカルボン酸基を有するポリマー、またはヌクレオシドリン酸である、請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
粒子が１０ミクロン以下のサイズを有する、請求項１〜１４いずれかに記載の方法。
【請求項１６】
粒子が１０ｎｍ〜１ミクロンのサイズを有する、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
実施例いずれかにおいて実質的に記載される、請求項１記載の方法。
【請求項１８】
請求項１〜１７いずれかに記載の方法によって調製される、発光性材料の水溶性粒子。
【請求項１９】
希土類元素材料、ドープされた半導体またはドープされた無機化合物であって、コーティングの表面上に１またはそれ以上の反応基を有するコーティングを有する、発光性材料の水溶性粒子。
【請求項２０】
前記反応基が、−ＳＨ、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、アミノまたはアミド基である、請求項１９記載の粒子。
【請求項２１】
希土類元素材料の、請求項１９または２０記載の粒子。
【請求項２２】
請求項３〜５の１またはそれ以上の特徴を有する、請求項２１記載の粒子。
【請求項２３】
II族／VI族半導体、またはIII族／Ｖ族半導体の、請求項１９または２０記載の粒子。
【請求項２４】
ドープされた無機化合物の、請求項１９または２０記載の粒子。
【請求項２５】
請求項６〜８の１またはそれ以上の特徴を有する、請求項２３または２４記載の粒子。
【請求項２６】
アクリル酸およびビニルホスホン酸のコポリマーでコートされたＴｂ２Ｏ３またはＥｕ２Ｏ３の、請求項１９記載の粒子。
【請求項２７】
アデノシン−５'-トリリン酸でコートされたタングステン酸ユーロピウムの、請求項１９記載の粒子。
【請求項２８】
配位子結合ペアの１のメンバーに付着した、請求項１８〜２７いずれかに記載の粒子を含む、バイオタグ。
【請求項２９】
前記配位子結合ペアが、アビジンおよびビオチン、または抗体および抗原である、請求項２８記載のバイオタグ。
【請求項３０】
明細書中に実質的に記載された、請求項２８記載のバイオタグ。
【請求項３１】
請求項２８〜３０いずれかに記載のバイオタグを、直接的にまたは配位子結合ペアの他のメンバーを部分に付着させた後に付着させる、部分をタギングする方法。
【請求項３２】
前記バイオタグが架橋剤の助力を伴って生じる、請求項３１記載の方法。
【請求項３３】
明細書中に実質的に記載された、請求項３１記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、生物学的タギングにおいて特に有用な発光性ナノ材料に関する。
【０００２】
通常使用されるタギング用の有機染料の使用には幾つかの問題、特に光退色によるもの、があり、そして吸収バンドの狭さは、一度に異なる色を引き起こすことを困難にしている。染料放出もまた幅広く、そのため多色イメージングが困難である。
【０００３】
タギング用途用の発光性量子ドットを利用という従前の試みは、近年は主として、量子の制限された半導体バンドギャップに従った転移により生じる種々の色の発光を用いた、半導体に基づいている。ナノ粒子の大きさが放出波長を支配する。このアプローチは多くの重大な欠点がある：
【０００４】
(i)  適した大量バンドギャップを有する半導体は、III／V属またはII／VI属材料などの材料に由来する。典型的にはＣｄＳｅまたはＣｄＳが用いられる。これらの材料は有毒であり、また合成は通常有機溶媒中で行われる。従って、これらを調製した後に水への相移動が必要とされる。発光効率を維持しながらこれを行うことは技術的に困難である。水中で形成することができる量子ドットによって、合成の障害が有意に取り除かれる。
【０００５】
(ii)  半導体を使用する場合は、サイズ選択を行って異なる放出波長の材料を分けなければならない。これは単独の合成操作において実質的な材料の浪費を引き起こし、一方、特殊装置の使用を伴う別の工程を必要とする。
【０００６】
(iii)  典型的な半導体材料は有毒であり、そしてそれらの前駆物質は毒性が高い。またこれらはしばしば空気/湿気に敏感である。
【０００７】
(iv)  高度発光性粒子の作成は、より広いバンドギャップの半導体の殻を必要とし、しばしばケイ素の殻を超えるものが必要とされる。
【０００８】
従って、非毒性でありそして専門的な機器を必要とすることなく効率よく調製することができる、水溶性量子ドット材料(一般に１００ｎｍ未満)が必要とされている。
【０００９】
今回、本発明に基づいて、半導体量子ドットで直面する大半の問題を克服することができる、一般的な希土類元素含有粒子の使用が可能であることを見いだした。特に、一般に、これらは容易に調製することができ、大気劣化に対して敏感ではなく、そして放出色は、粒子サイズにではなく、構成する希土類元素イオンに依存する。
【００１０】
本発明により、この発光性材料の粒子を、粒子の製造中にまたはその後に、有機酸またはルイス塩基でコーティングして、コーティングの表面が１またはそれ以上の反応基（典型的には−ＳＨ、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、アミノまたはアミド基）を有するようにすることを包含する、希土類元素材料、ドープされた化合物半導体またはドープされた無機化合物である発光性材料の水溶性粒子の調製方法が提供される。
【００１１】
本発明で用いることができる希土類元素材料として、
希土類元素が、式Ｌｎ２Ｏ３の希土類元素酸化物、水酸化物、タングステン酸、モリブデン酸またはウラニル化合物における格子の一部である、化合物、
並びに、希土類金属がドープされた酸化物中においてドーパントである無機化合物、
例えば、Ｙ２Ｏ３：ＲＥ［式中、ＲＥはユーロピウムなどの希土類元素である。］および混合酸化物、
並びに、希土類元素ドープされたフッ化物、例えばＣａＦ２、ＳｒＦ２、ＢａＦ２、および（ＬａＡｌＣｅ）Ｆ３およびＬｉＹＦ４などのアルカリ土類金属フッ化物などの、ＬｉＹＦ４：Ｅｕ、オキシハライド（ＹＯＣｌおよびＬａＯＣｌなど）、ボレート（ＳｃＢＯ３、ＹＢＯ３、ＬａＢＯ３、ＣｅＢＯ３およびＹＡｌ３Ｂ２Ｏ１２など）、アルミネート（Ｙ２Ａｌ８Ｏ１２、Ｙ３Ａｌ５Ｏ１２など）、例えばＹ３Ａｌ５Ｏ１２：Ｅｕ、Ｙ４Ａｌ２Ｏ９、シリケート（Ｓｃ２Ｓｉ２Ｏ７、Ｙ２Ｓｉ２Ｏ７およびＣｅ２Ｓｉ２Ｏ７など）およびホスフェート（ＹＰＯ４、ＬａＰＯ４、ＣｅＰＯ４およびＧｄＰＯ４など）、を含む蛍光物質、
並びに、例えばモリブデン酸ジスプロシウムまたはモリブデン酸ユーロピウムおよびウラニル化合物を用いてドープした、オキシスルフィド、タングステン酸、バナジン酸（ＹＶＯ４など）、
が挙げられる。これらの無機化合物は、他のドーパント金属を用いてドープされてもよい。
使用できる他のドーパント金属として、Ｍｎ、ＣｕおよびＣｒを含む、周期表の第一列の遷移金属、並びにアルカリ土類金属、すなわちＣａおよびＳｒなどの周期表IIA族の金属、加えて、鉛、スズおよびアンチモンなどのIIB族、IVB族およびVB族が挙げられる。
これらを、半導体（以下の例えばＺｎＳ：Ｃａを参照）および無機化合物（希土類元素化合物を含む）と併せて用いてもよい。発光性材料を提供するのに何れの無機化合物がドープされるかは、当業者には知られている。
例として、マンガンを、ＢａＭｇＡｌ１４Ｏ２３、フッ化カルシウムまたはフッ化マグネシウム、金属酸化物（酸化カルシウムおよび酸化チタニウムなど）、リン酸カドミウムまたはリン酸亜鉛、ケイ酸マグネシウム、ケイ酸亜鉛またはケイ酸カルシウム、アルミン酸ストロンチウムおよびホウ酸カドミウム、並びに、例えば、式ＭＥ(Ｍ＝Ｚｎ、Ｃｄ、Ｃａ、Ｓｒ、Ｍｇ、Ｂａ；Ｅ＝Ｓ、Ｓｅ、Ｔｅ）などの半導体、中に加えてもよい。
マンガンおよび他のドーパントを、Ａｓ、Ｃｅ、Ｐｂ、Ｓｂ、ＳｎおよびＴｂなどの他のドーパント(補助因子)と併せて使用することができる。クロミウムを、例えば没食子酸亜鉛、ＧａＡｓおよびＡ１２Ｏ３などにドープすることができ、また銅を、例えばＭＥ（Ｍ＝Ｚｎ、Ｃｄ、Ｃａ、Ｓｒ、Ｍｇ、Ｂａ；Ｅ＝Ｓ、Ｓｅ、Ｔｅ）中にドープすることができる。混合ドーパントおよび上方変換蛍光物質材料も使用することができる。
希土類金属を用いてドープされうる他の材料として、硫酸カルシウムなどのサルフェートが挙げられ、これらは典型的には例えばジスプロシウムまたはユーロピウムを用いてドープされる。同様に化合物半導体（例えばＺｎＳ）または他のII／VI族またはIII/V族半導体（ＺｎＳ：Ｅｕなど）が挙げられる。
化合物半導体そのものを用いる場合とは異なり、ドープされた材料の放出は粒子サイズとは無関係である。従って、本発明で使用できる、適した希土類金属として、ユーロピウム、テルビウムおよびセリウム、同様にイットリウム、スカンジウム、ランタンおよびガドリニウムが挙げられる。
本発明の方法において使用できる、適したドープされた酸化物として、例えば国際公開第９９４６２０４パンフレットに開示される、式：Ｚ２Ｏ３：Ｚｘ＋［式中、Ｚは希土類金属であり、ｘは２〜４である。］、特にＴｂ２Ｏ３：ＴｂおよびＥｕ２Ｏ３：Ｅｕ、が挙げられる。
他の適した蛍光物質として、国際公開第００３６０５０パンフレット、国際公開第００３６０５１パンフレットおよび国際公開第００７１６３７パンフレットに記載されるものが挙げられ、ホスト酸化物に希土類元素をドープすることによって調製することができ、式：Ｚ２Ｏｙ：ＲＥおよびＺｚＸｘＯｙ：ＲＥ［式中、Ｚは結合価ａの金属であり、Ｘは結合価ｂの金属または半金属であり、２ｙ＝ａ．ｚまたは２ｙ＝ａ．ｚ＋ｂ．ｙとなり、およびＲＥは希土類元素ドーパントイオンまたはマンガンである。］の化合物が提供される。
【００１２】
典型的にはＺはイットリウム、ガドリニウム、ガリウムまたはタンタルであり、Ｘはアルミニウム、ケイ素または亜鉛である。ＲＥは典型的にはテルビウム、ユーロピウム、セリウム、ツリウム、サマリウム、ホルミウム、エルビウム、ジスプロシウムまたはプラセオジムである。
【００１３】
記載されるように、本発明の方法は、粒子を、重合性および樹枝状材料に含まれる特定の有機酸またはルイス塩基（通常は極性）でコーティングまたはキャップすることを包含する。これらの材料は、その後にバイオタグを調製するカップリング反応に関与しうる表面反応基を有していなければならない。一般に、２つの異なる機能性を有する酸または塩基が必要であり、１つは上記の通りその後のカップリングのためのものであり、２つめで粒子に対して配位子を固着する。
【００１４】
ある実施態様においては、既にキャップされたプレ形成された水溶性粒子は、水中での反応に供され、それによって所望の酸または塩基が存在するキャッピング剤と置き換わる。あるいは、所望のキャッピング剤を、粒子の形成中に固着する。例えば、国際公開９９４６２０４パンフレットに記載されるように、金属錯化表面活性分子は、所望の官能基を有するように選択されるものである。
【００１５】
粒子を水溶性にするために、水が粒子を可溶化する基を有する金属錯化剤表面活性分子を選択する必要がある。このような基として、−ＯＨ、−ＣＯＯ−および−ＮＨ３＋が含まれる。第１の実施態様では、粒子の水溶液を調製して、所望の酸／ルイス塩基を加える。これにより、通常、酸／ルイス塩基でコートされた粒子の沈殿が得られる。粒子が、例えば有機酸またはルイス塩基で既にコートされ、所望の表面反応基を有しないものが好ましい。このような粒子は、典型的には国際公開第9946204パンフレットに記載されるように調製される。従って、クロライドなどの希土類金属塩の溶液に、表面キャッピング効果を有する金属錯化表面活性分子（例えばトリオクチルホスフィンオキシド(ＴＯＰＯ)またはナトリウムヘキサメタリン酸）を加え、次いでアルカリを加えて、コロイド状沈殿を形成した酸化物が得られる。
【００１６】
反応基を有するコーティング剤を、存在するコーティングと置き換えるためには、存在するコーティング剤よりも、金属粒子により強く結合するコーティング剤を選択する必要があるであろう。当業者は当然、どのようにこれを達成すべきか知っている；例えばホスフィンオキシド（例えばＴＯＰＯ）は、チオールと比べて相対的に弱く結合し、そのためＴＯＰＯは一般にチオール基を含むキャッピング剤によって主として置換される。明らかに、最初のキャッピング剤はこれらを考慮して選択されるべきである。
【００１７】
第２の態様では、国際公開第９９４６２０４パンフレットに記載されるような方法を使用して、必要とされる反応基を有する有機酸またはルイス塩基を使用する。従って、アルカリまたは塩基を、必要なキャッピング剤の存在下で、希土類金属塩（典型的には塩化物）の溶液に加える。ｐＨを高める目的は、沈殿した材料において、正確なアニオン/カチオン割合を維持するためである。一般に、ｐＨは少なくとも８であり、典型的には８〜１０であり、例えば８〜９である。表面活性分子は、希土類元素イオンと結合し、そして非放射性再結合されうる任意の表面状態を不動態化するように作用する。従ってこれは表面キャッピング効果を有する。カップリング可能な（粒子に結合するホスホン基など）表面カルボキシルグルーピングを有する粒子を提供する、ポリマーを用いる典型的な反応を、下記に示す：
【００１８】
【表１】
2005507454.tif 000002
【００１９】
同様の方法を使用して、本発明の他のキャップド粒子を調製することができる。例えば、
式：Ｘ（ＹＯａ）ｂ
［式中、Ｘは、希土類金属、または周期表IIＡまたはIIＢの金属または鉛、あるいはこれらの２種またはそれ以上の混合物であり、
Ｙは、酸素と共にアニオンを形成する金属であるか、あるいはこれらの２種またはそれ以上の混合物であり、および
ａおよびｂは、化合物が化学量論的であるような値である。］
の化合物の粒子であって、この粒子が１００ｎｍ以下の大きさを有する粒子、を、
Ｙのアニオンを含む化合物および界面活性剤を含有する、塩基性ｐＨを有する水溶液と、カチオンＸを含む化合物の水溶液とを混合することによって調製することができる。さらなる詳細は、同出願人による英国特許出願番号第０１２６２８４．９号（同出願人整理番号８３８０７）から参照できる。
【００２０】
コーティングが表面に−ＣＯＯＨ基を提供する場合は、塩基を加えて、これらの基を、水に可溶する−ＣＯＯ−基に変換する必要があるであろう。表面アミノ基を有する場合も同様に、ＨＮＯ３などの酸を加えて、水に可溶する−Ｎ＋基に変換する必要がある。しかしながら、ポリマーを用いて、これらの変換を不要として、存在する少なくとも幾つかの他の基が水可溶性基を提供してもよい。例えば、粒子表面に結合しない過剰のＰ(Ｏ)(ＯＨ)２側鎖は、水中でドット水溶性を示しうる。
【００２１】
効果的な配位子／表面活性分子について、粒子表面に固持させることができなければならない。典型的には、これを達成できる化合物として、ホスフィン類、ホスフィンオキシド類、チオール類、アミン類、カルボン酸類、ホスフェート類、スルホン酸類、スルフィン酸類、リン酸類、ホスホン酸類、ホスフィン酸類、クラウンエーテル類およびこれらの混合物が挙げられる。
【００２２】
配位子自体は、一座配位（すなわち、単一の結合点を有するもの、例えば炭素鎖４〜２０のトリアルキルホスフィンオキシドなど）、二座配位（例えばジヒドロリポまたはジアルキルスルホスクシナート、例えば一座配位と同様の炭素鎖を有するナトリウムジオクチルスルホスクシナートなど）または多座配位（ホスフィン、ホスフィンオキシド、チオール、アミン、カルボン酸、ホスフェート、スルホン酸、スルフィン酸、リン酸、ホスフィン酸およびこれらの複数などのペンダント側基を有する、ポリマー／デモノマー／デンドリマー)であってもよい。
【００２３】
上記のとおり、配位子も、バイオカップリング反応に対して、さらなる官能基（カルボン酸、アミン、アミド、チオールおよびヒドロキシ基など）を必要とする。これらは分子の末端部にあるか、または側鎖としてあり、そして１以上あってもよい。一座配位／二座配位配位子においては、これらの官能部をプロトン化／脱プロトン化して、配位子を水溶性にしてもよい。
【００２４】
配位子は重合性であってよく、すなわち所望の基を有するポリマーであってよい。従って典型的には、例えばビニルカルボン酸（アクリル酸など）、および粒子と結合することができる基を有するビニルモノマー（ビニルホスホン酸など）から誘導されたコポリマーを使用してもよい。
【００２５】
配位子は水溶性であることが必要とされる。従って必要に応じて、分子が、ヒドロキシおよび脱プロトン化された酸、またはプロトン化アミン基などの、溶解性を助力する他の基を含んでもよい。ポリマーを使用する場合は、例えばヒドロキシ基、脱プロトン化酸またはプロトン化アミンなどの、配位子を水溶性にする側鎖を有していてもよい。
【００２６】
使用できる他の水溶性配位子として、水溶性であり、そしてさらにバイオカップリング反応のための側基（ヒドロキシ基など）を有する、糖分子（オリゴ糖、単糖および多糖が含まれる）が挙げられる。同様に、ＡＴＰ（アデノシン−５’−トリリン酸）、ＡＤＰ（アデノシンジリン酸）、ＡＭＰ（アデノシンモノリン酸）およびＧＭＰ（グアノシンモノリン酸）などを含む、アデノシンおよびグアノシンリン酸などの、アミンリン酸、典型的にはヌクレオシドリン酸、が挙げられる。シクロデキストリン(環状オリゴ糖)、ホスフィン、ホスフィンオキシド、チオール、アミン、カルボン酸、ホスフェート、スルホン酸、スルフィン酸、リン酸、ホスフィン酸およびこれらの混合物で官能化されたもの、も使用することができる。
【００２７】
特定の金属は、特定の基に良好に結合することが知られている。従って、このような基を有する分子は、この基を介して金属に結合し、そしてバイオカップリング反応のための他の基（複数の他の基）は遊離の状態のままである。従って、幾つかの事例では、チオカルボン酸は、表面上でカルボン酸グルーピングにより粒子をコートし、粒子中の金属(金属類)に対してより強力な親和性を有するチオール基を有する。必要に応じて、化学的および分光学的試験を行って、キャッピング剤がどのように配向しているかを確認することもできる。
【００２８】
バイオタギングに有効な粒子は、あまり大きくない方がよい。一般に粒子サイズは１０ミクロンを超えないのがよい。下限はない。従って典型的なサイズ範囲は、１ｎｍ〜１０ミクロンであり、例えば１０ｎｍ〜１ミクロンである。
【００２９】
タグ使用のための、部分に粒子を結合させる目的として、この部分と、配位子結合ペア(ligand binding pair)を含む粒子に付着された分子との結合相互作用がなされる。典型的にはこのような相互作用は、生理学的および／または細胞条件において互いに結合することができる、この部分と分子との間の高親和性非共有カップリング相互作用である。この結合は可逆的であってもよく、不可逆的であってもよい。
【００３０】
ある実施態様において、この部分自体がタグされるべき物質であり、そしてこの場合、この部分は非修飾形態、すなわち自然発生的形態であってよい。他の実施態様においては、この部分はタグされるべき物質に付着されている。
【００３１】
粒子上の部分および分子の１または両方が、タンパク質またはポリヌクレオチドであってもよい。典型的には、部分および分子の１または両方が自然発生的物質、例えば生物（例えば原核生物および／または真核生物）中に見いだされる物質、である。ある実施態様では、部分および分子は、自然発生位置に存在する場合に互いに結合しうる物質であり、例えばレセプター配位子ペアなどである。
【００３２】
この方法で様々な種類の部分、例えば細胞質中において膜結合などする任意の細胞成分（細胞外または細胞内）をタグさせることができる。ある細胞位置から他へ移動する部分は、特に有用である。この部分は、細胞小器官内、例えばミトコンドリアまたは核中、にあってもよい。これらは典型的にはタンパク質、ポリヌクレオチド カルボキシレートまたは脂質である。
【００３３】
適した配位子レセプター結合ペアの例として下記が含まれる：
−  トランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ）と、トランスフォーミング成長因子レセプター（ＴＧＦＲ）またはＥＧＦレセプター(ＥＧＦＲ);
−  表皮性成長因子(ＥＧＦ)とＥＧＦＲ；
−  腫瘍壊死因子−α(ＴＮＦ−α)と腫瘍壊死因子レセプター(ＴＮＦＲ)；
−  インターフェロンとインターフェロンレセプター；
−  血小板由来成長因子(ＰＤＧＦ)とＰＤＧＦレセプター；
−  トランスフェリンとトランスフェリンレセプター；
−  アビジンと、ビオチンまたは抗ビオチン；
−  抗体と抗原ペア；
−  インターロイキンとインターロイキンレセプター(３、４および５型を含む)；
−  顆粒球マクロファージコロニー刺激因子(ＧＭＣＳＦ)とＧ,４ＣＳＦレセプター；
−  マクロファージコロニー刺激因子(ＭＣＳＦ)とＭＣＳＦレセプター；および
−  顆粒球コロニー刺激因子(Ｇ−ＣＳＦ)とＧ−ＣＳＦレセプター。
【００３４】
部分が、上記ペアの第１に記載されたいずれかの物質である場合は、分子は一般に第２に記載された物質であり、そして逆に分子が第１に記載されたいずれかの物質である場合は、部分が第２に記載された物質である。抗体/抗原ペアの事例において、抗原はタンパク質であってもよく、また非タンパク質抗原であってもよい。抗原は、ジゴキシゲニンまたはホスホチロシンであってもよい。
【００３５】
上記したように、分子と部分の両方がポリヌクレオチドであってもよい。この場合は典型的には、ポリヌクレオチドは単鎖であり、ワトソン・クリック塩基塩基対合によって互いに結合することができる、すなわちこれらは部分的にまたは全体的に相補的である。
【００３６】
粒子の表面上の反応基は、ペアの１つのメンバーが直接的にまたは架橋剤の助力を伴って、粒子と反応させることができるように選択されてもよいことは、理解されることあろう。これらは当業者によく知られた標準的な反応である。例えば、ウシ血清アルブミンを、グルタルジアルデヒドを用いて、アミノ酸でコートされた蛍光物質でタグすることができる。
【００３７】
下記実施例は、本発明をさらに例示説明する。
【００３８】
実施例１
ＡＴＰ（アデノシン−５’−トリリン酸、ジナトリウム含水塩）（０．４４ｇ、７．９８×１０−４Ｍ）およびタングステン酸ナトリウム（０．３３ｇ、１×１０−３Ｍ）を、脱イオン水１００ｍｌに溶かした。水酸化ナトリウム水溶液を用いてｐＨを８．５にした。これに、塩化ユーロピウム６水和物の水溶液（０．３７ｇ、１×１０−３Ｍ、水５０ｍｌ）を、滴下して加え、一方で水酸化ナトリウム水溶液を用いて、ｐＨを８．５より上に保った。塩を加えた後、溶液を約１時間放置し、次いで遠心分離して、何れの沈殿物を取り除いた。澄んだ溶液に、アセトン／プロパノール（容積比１：１）２００ｍｌを加え、沈殿させた。沈殿物を減圧下で乾燥し、不活性ガス雰囲気下で貯蔵した。
【００３９】
実施例２
塩化テルビウム６水和物（ＴｂＣｌ３・６Ｈ２Ｏ、０．８８ｇ、２．３５×１０−３Ｍ）、そしてアクリル酸およびビニルホスホン酸のコポリマー（２ｇ、水１０ｍｌ中、Rhodia社、Albritect 30）を、メタノール１リットルに溶かした。ＮａＯＨ水溶液（０．１Ｍ）を用いて、ｐＨを５．５に調節した。このＮａＯＨ溶液を加える間に、沈殿の形成が開始した。この溶液を４０分間放置し、遠心分離で沈殿を単離した。
【００４０】
実施例３
塩化ユーロピウム６水和物（０．０４３７ｇ、１．２×１０−４Ｍ）、そしてアクリル酸およびビニルホスホン酸のコポリマー(０．２ｇ、水１ｍｌ中、Albritect CP30)を、メタノール１００ｍｌ中に溶かした。ＮａＯＨ水溶液を用いてｐＨを５．４に調節し、沈降が開始した。これを３０分間軽く動かし、遠心分離で単離下した。
【国際公開パンフレット】
2005507454.tif 000003
2005507454.tif 000004
2005507454.tif 000005
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2005507454.tif 000015
2005507454.tif 000016
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2005507454.tif 000017
【国際調査報告】
2005507454.tif 000018
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