(57)【要約】  本発明は、続発性上皮小体機能亢進症を有する腎性患者における上皮小体ホルモンの治療的抑制をモニタリングおよび誘導するための新規の方法に関する。腎性患者における上皮小体ホルモンアゴニストおよび上皮小体ホルモンアンタゴニストのレベルを決定およびモニタリングする。上皮小体ホルモン抑制治療剤は、上皮小体ホルモンアンタゴニストのレベルを最少にするように患者に投与される。１つの実施形態において、後発性上皮小体機能亢進症を罹患する腎性患者における上皮小体ホルモンの治療的抑制をモニタリングし管理するための方法が、提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
続発性上皮小体機能亢進症を有する腎性患者における上皮小体ホルモンの治療的抑制をモニタリングおよび誘導するための方法であって、該方法は、以下の工程：
ａ）続発性上皮小体機能亢進症を有する腎性患者における上皮小体ホルモン（ＰＴＨ）アゴニストのレベルを決定およびモニタリングする工程；
ｂ）該患者におけるＰＴＨアンタゴニストのレベルを決定およびモニタリングする工程；ならびに
ｃ）ＰＴＨアゴニストを抑制する該患者に治療剤を投与する工程であって、投与された治療剤の量は、ＰＴＨアゴニストレベルが減少され、かつＰＴＨアンタゴニストのレベルが最小化されるように調整される、工程、
を包含する、方法。
【請求項２】
前記治療剤が、名目上の量から漸増して投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
請求項１に記載の方法であって、前記患者は既に治療剤を受けており、また、ＰＴＨアンタゴニストのレベルが最小化されるまで、治療剤の量を調整する工程を包含する、方法。
【請求項４】
請求項１に記載の方法であって、ここで、前記治療剤投与が、ビタミンＤ処置またはビタミンＤアナログ処置、カルシウム処置、あるいはカルシウム模倣物投与からなる群より選択される、方法。
【請求項５】
前記ビタミンＤアナログが、パリカルシトロール、カルシトリオール、マキサカルシトール、アルファカルシドール、カルシフェジオール、またはエルゴカルシフェロールを含む、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
工程ａ）およびｂ）が、腎性患者から得られたサンプルを用いて実施される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記サンプルが、血清サンプル、血漿サンプルおよび血液サンプルからなる群より選択される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記ＰＴＨアゴニストレベルが、前記ＰＴＨアンタゴニストレベルと比較される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記ＰＴＨアンタゴニストレベルが、前記上皮小体ホルモンの全レベルから前記ＰＴＨアゴニストレベルを減算することによって決定される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＰＴＨアゴニストレベルが、前記上皮小体ホルモンの全レベルと比較される、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＰＴＨアンタゴニストレベルが、前記上皮小体ホルモンの全レベルと比較される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＰＴＨアゴニストレベルが、比率または割合の形式で前記ＰＴＨアンタゴニストレベルと比較される、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記上皮小体機能亢進症が、慢性腎不全によって引き起こされる、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＰＴＨアゴニストレベルおよびＰＴＨアンタゴニストレベルが、イムノアッセイを用いて決定される、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記ＰＴＨアゴニストレベルが、ＰＴＨアンタゴニストとＰＴＨアゴニストを区別する抗体を用いて決定される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＰＴＨアンタゴニストレベルが、ＰＴＨアンタゴニストとＰＴＨアゴニストを区別する抗体を用いて決定される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記患者における血管石灰化をモニタリングする工程をさらに包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記血管石灰化が、アルカリフォスファターゼレベルをモニタリングすることによってモニタリングされる、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記患者は既に治療剤を受けており、また、該患者が少なくとも１つの比較的抑制されていない状態に戻ることを可能にするのに十分な時間の間、該治療剤投与を休止させる工程を包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
前記患者が少なくとも１つの比較的抑制されていない状態に戻ることを可能にするのに十分な時間が、約３ヶ月〜約６ヶ月の間である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記患者が少なくとも１つの比較的抑制されていない状態に戻ることを可能にするのに十分な時間が、約３分〜約２０分の間である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
請求項１に記載の方法であって、前記ＰＴＨアゴニストが、配列番号１（ＰＴＨ１−８４）に記載されるアミノ酸配列を有するヒトＰＴＨの隣接部分を含み、そして該ＰＴＨアゴニストが、以下の特徴：
ａ）該ＰＴＨアゴニストのＮ末端アミノ酸残基が、ＰＴＨ１−８４の位置１で開始すること、ならびに
ｂ）該ＰＴＨアゴニストのＣ末端アミノ酸残基が、ＰＴＨ１−８４の位置３４〜位置８４にわたるいずれかの位置で終結すること、
を有する、方法。
【請求項２３】
前記ＰＴＨアゴニストが、ヒトＰＴＨ１−８４のアミノ酸配列を有するペプチドである、請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
請求項１に記載の方法であって、前記ＰＴＨアンタゴニストが、配列番号１（ＰＴＨ１−８４）に記載されるアミノ酸を有するヒトＰＴＨの隣接部分を含み、そして該ＰＴＨアンタゴニストが、以下の特徴：
ａ）該ＰＴＨアンタゴニストのＮ末端アミノ酸残基が、ＰＴＨ１−８４の位置２〜位置３３にわたるいずれかの位置で開始すること、
ｂ）該ＰＴＨアンタゴニストのＣ末端アミノ酸残基が、ＰＴＨ１−８４の位置３５〜位置８４にわたるいずれかの位置で終結すること、ならびに
ｃ）該ＰＴＨアンタゴニストが、３つのアミノ酸残基の最少長を有すること、
を有する、方法。
【請求項２５】
前記ＰＴＨアンタゴニストが、ヒトＰＴＨ７−８４のアミノ酸配列を有するペプチドである、請求項１に記載の方法。
【請求項２６】
前記ＰＴＨアゴニストレベルおよび前記ＰＴＨアンタゴニストレベルの決定が、骨生検データと比較される、請求項１に記載の方法。
【請求項２７】
前記ＰＴＨアゴニストレベルおよび前記ＰＴＨアンタゴニストレベルの決定が、前記治療剤の投与後の骨生検データと比較される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記比率または割合の決定が骨生検データと比較される、請求項１２に記載の方法。
【請求項２９】
続発性上皮小体機能亢進症を有する腎性患者における上皮小体ホルモンの治療的抑制をモニタリングおよび誘導するための方法であって、該方法は、以下の工程：
ａ）続発性上皮小体機能亢進症を有する腎性患者からサンプルを得る工程、
ｂ）該腎性患者における上皮小体ホルモン（ＰＴＨ）アンタゴニストのレベルを決定およびモニタリングする工程；ならびに
ｃ）該患者にＰＴＨアゴニストを抑制し得る治療剤を投与する工程であって、投与された治療剤の量は、該患者において、ＰＴＨアンタゴニストのレベルが最小化されるように調整される、工程、
を包含する、方法。
【請求項３０】
前記治療剤が、名目上の量から漸増して投与される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
請求項２９に記載の方法であって、ここで、前記治療剤投与が、ビタミンＤ処置またはビタミンＤアナログ処置、カルシウム処置、あるいはカルシウム模倣物投与からなる群より選択される、方法。
【請求項３２】
前記ビタミンＤアナログが、パリカルシトロール、カルシトリオール、マキサカルシトール、アルファカルシドール、カルシフェジオール、またはエルゴカルシフェロールを含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記患者における血管石灰化をモニタリングする工程をさらに包含する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３４】
前記血管石灰化が、アルカリフォスファターゼレベルをモニタリングすることによってモニタリングされる、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記患者は既に治療剤を受けており、また、該患者が少なくとも１つの比較的抑制されていない状態に戻ることを可能にするのに十分な時間の間、該治療剤投与を休止させる工程を包含する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３６】
前記患者が少なくとも１つの比較的抑制されていない状態に戻ることを可能にするのに十分な時間が、約３ヶ月〜約６ヶ月の間である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記患者が少なくとも１つの比較的抑制されていない状態に戻ることを可能にするのに十分な時間が、約３分〜約２０分の間である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３８】
前記ＰＴＨアンタゴニストレベルが、決定する工程によって決定され、そして前記ＰＴＨの全レベルと前記ＰＴＨアゴニストレベルとが比較される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３９】
続発性上皮小体機能亢進症を有する腎性患者における上皮小体ホルモンの治療的抑制をモニタリングおよび誘導するのに有用なキットであって、該キットは、以下：
ａ）続発性上皮小体機能亢進症を有する腎性患者における上皮小体ホルモン（ＰＴＨ）アゴニストのレベルをモニタリングするための手段；
ｂ）該患者におけるＰＴＨアンタゴニストのレベルをモニタリングするための手段；ならびに
ｃ）該患者にＰＴＨアゴニストを抑制する治療剤を投与するための手段であって、投与された治療剤の量は、ＰＴＨアゴニストレベルが減少され、かつＰＴＨアンタゴニストのレベルが最小化されるように調整される、手段、
を備える、キット。
【請求項４０】
請求項３９に記載のキットであって、ここで、前記治療剤投与が、ビタミンＤ処置またはビタミンＤアナログ処置、カルシウム処置、あるいはカルシウム模倣物投与からなる群より選択される、キット。
【請求項４１】
前記ビタミンＤアナログが、パリカルシトロール、カルシトリオール、マキサカルシトール、アルファカルシドール、カルシフェジオール、またはエルゴカルシフェロールを含む、請求項４０に記載のキット。
【請求項４２】
使用するための指示書をさらに備える、請求項３９に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本願は、現在特許になっている米国特許出願１０／００２，８１８（２００１年１１月２日出願）に関し、これは本明細書中で参考として援用される。
【０００２】
（技術分野）
本発明は、続発性上皮小体機能亢進症を有する腎性患者における上皮小体ホルモンの治療的抑制をモニタリングおよび誘導するための新規の方法に関する。当業者は、腎性患者における上皮小体ホルモンアゴニストおよび上皮小体ホルモンアンタゴニストのレベルを決定し、そしてモニタリングする。上皮小体ホルモン抑制薬は、上皮小体ホルモンアンタゴニストのレベルを最小限にするように、患者に投与される。
【背景技術】
【０００３】
（背景技術）
カルシウムは、細胞透過性、骨および歯の形成、血液凝固、神経インパルスの伝達および正常な筋肉収縮において、不可欠な役割を果たす。血液中のカルシウム濃度は、カルシトリオールおよびカルシトニンと一緒になって、上皮小体ホルモン（ＰＴＨ）により主に調節される。カルシウムの取込みおよび排出は、変化し得るが、ＰＴＨは、フィードバック機構を通して、細胞および周辺流体中の一定のカルシウム濃度を維持するように働く。血清カルシウムが低下した場合、上皮小体はＰＴＨを分泌して、貯蔵されたカルシウムの放出に影響を与える。血清カルシウムが増加した場合、貯蔵されたカルシウム放出が、ＰＴＨの低下した分泌によって遅らされる。
【０００４】
完全形態のヒトＰＴＨは、時折、当該分野において、ｈＰＴＨと称されるが、本発明においては、ＰＴＨアゴニストの一例と称され、図１に示されるように、特有の８４アミノ酸ペプチド（配列番号１）である。研究者によって、このペプチドが、プロテインキナーゼＣの活性化のためのドメイン（アミノ酸残基２８〜３４）およびアデニレートシクラーゼの活性化のためのドメイン（アミノ酸残基１〜７）を含む、骨に対する同化効果を有することが見出された。しかし、種々の異化形態の短縮化ＰＴＨペプチドまたはフラグメント化ＰＴＨペプチドはまた、循環において見出され、腺内代謝または周辺代謝により形成される可能性が最も高い。例えば、総ＰＴＨは、アミノ酸３４とアミノ酸３５との間で切断されて、（１−３４）ＰＴＨ  Ｎ末端フラグメントおよび（３５−８４）ＰＴＨ  Ｃ末端フラグメントを生成し得る。同様に、クリッピング（ｃｌｉｐｐｉｎｇ）が、アミノ酸３６と３７との間または３７と３８との間のいずれかで生じ得る。最近、「非（１−８４）ＰＴＨ」と称される、ＰＴＨのＮ末端近くでクリッピングされたラージＰＴＨフラグメントが開示された（Ｒ．ＬｅＰａｇｅら「Ａ  ｎｏｎ−（１−８４）ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ  ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄ  ｈｏｒｍｏｎｅ（ＰＴＨ）  ｆｒａｇｍｅｎｔ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｓ  ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ  ｗｉｔｈ  ｉｎｔａｃｔ  ＰＴＨ  ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ  ａｓｓａｙ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ  ｉｎ  ｕｒｅｍｉｃ  ｓａｍｐｌｅｓ」、Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．（１９９８）；４４：８０５−８１０を参照のこと）。
【０００５】
ＰＴＨの正確な測定の臨床的必要性が、十分に証明される。血清ＰＴＨレベルは、以下の疾患を有する患者についての最も重要な指数の１つである：家族性低カルシウム尿症；高カルシウム血症；多発性内分泌腺腫症Ｉ型およびＩＩ型；骨粗鬆症；パジェット骨疾患；原発性上皮小体機能亢進症（上皮小体の原発性過形成またはアデノーマにより生じる）；偽性上皮小体機能低下症；および腎不全（これは、続発性上皮小体機能亢進症を引き起こし得る）。
【０００６】
ＰＴＨは、慢性腎不全を有する患者において、疾患の過程において役割を果たす。腎臓腎性骨形成異常症（ＲＯ）は、複雑な骨格疾患であり、この骨格疾患は、嚢胞性線維性骨炎（ＰＴＨ過剰により生じる）、骨軟化症−非石灰化骨マトリクス（ビタミンＤ不足により生じる）、骨外性石灰化／骨形成（異常なカルシウムおよびリンの代謝により生じる）、および無形成低骨代謝回転疾患（ａｄｙｎａｍｉｃ  ｌｏｗ  ｂｏｎｅ  ｔｕｒｎｏｖｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ＰＴＨの抑制により寄与される）。慢性腎不全患者は、ＲＯを発症し得る。腎臓の不全により、血清中リンが増加し（高リン酸塩血症）、そして腎臓による１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ（１，２５−Ｄ）産生を減少する。前者は、減少した胃腸のカルシウム吸収から続発性上皮小体機能亢進症を生じ、そして血清リンの増加に応答して増加したＰＴＨから嚢胞性線維性骨炎を生じる。後者は、低カルシウム血症および骨軟化症を生じる。続発性上皮小体機能亢進症の発症に伴い、上皮小体は、そのカルシウムレセプターおよびビタミンＤレセプターの減少した発現に起因して、そのホルモン調節因子に対してあまり応答性ではなくなる。血清カルシウムは、低下する。ＲＯは、遠位壊疽、骨の痛み、骨折および筋肉の衰弱を生じ得る。
【０００７】
続発性上皮小体機能亢進症を有する慢性腎不全患者について、多くの異なる治療的処置が利用可能である。当業者は、炭酸カルシウムを投与して、有効なカルシウムイオンレベルを直接調整し得る。しかし、異所性石灰化の発生が増加した場合、カルシウム取込みを増加することは、しばしば、望ましくない。当業者は、カルシウム模倣物（ｃａｌｃｉｍｉｍｅｔｉｃｓ）（例えば、Ｔｈｏｕｓａｎｄ  Ｏａｋｓ，ＣａｌｉｆｏｒｎｉａのＡｍｇｅｎ，Ｉｎｃ．により製造されるＡＭＧ０７３）を投与し得る。しかし、ＡＭＧ０７３は、米国においては、使用が許可されていなかった。当業者は、ビタミンＤアナログ（例えば、Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｓ（Ａｂｂｏｔｔ  Ｐａｒｋ，Ｉｌｌｏｎｏｉｓ）製のＣａｌｃｉｊｅｘ（登録商標）またはＺｅｍｐｌａｒ（登録商標）ブランド；Ｒｏｃｈｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｂａｓｌｅ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）製のＲｏｃａｌｔｒｏｌ（登録商標）ブランド；Ｃｈｕｇａｉ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ製のＯｘａｒｏｌブランド）を投与して、ＰＴＨを下げ得る。しかし、研究者によって、ビタミンＤアナログは、ＰＴＨを過剰抑制し得、それにより、患者を異所性石灰化および血管石灰化の危険性を有するようにする無形成低骨代謝回転疾患を生じることが見出された。（Ｚｅｍｐｌａｒ（登録商標）、Ａｂｂｏｔｔ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ０６−９９９８−Ｒ１−Ｒｅｖ，Ａｐｒｉｌ  １９９８のパッケージ挿入物を参照のこと。Ｒｏｃａｌｔｒｏｌ（登録商標），Ｒｏｃｈｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，ｉｎｃ．Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  １９９８  Ｐｒｏｄｕｃｔ  ｉｎｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｇｕｉｄｅ，３３４頁のパッケージ挿入物を参照のこと）。
【０００８】
研究者によってまた、大循環ＰＴＨフラグメント（例えば、シクラーゼ不活化上皮小体ホルモン）が、天然に存在するＰＴＨアンタゴニストとして機能することが見出された。シクラーゼ不活化ＰＴＨは、無形成低骨代謝回転を有する患者から、高い骨代謝回転を有する未処置の末期の腎臓疾患（ＥＳＲＤ）患者を分離する際の指標として、全ＰＴＨと並んで有用であることが見出された（Ｆａｕｇｅｒｅ，Ｍ．Ｃ．ら「Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｂｏｎｅ  Ｔｕｒｎｏｖｅｒ  ｂｙ  ｔｈｅ  ＰＴＨ  １−８４／ｌａｒｇｅＣ−ＰＴＨ  ｆｒａｇｍｅｎｔｓ  ｒａｔｉｏ  ｉｎ  ＥＳＲＤ  ｐａｔｉｅｎｔｓ」，Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００１；６０：１４６０−１４６８を参照のこと）。さらに、研究者によって、シクラーゼ不活化ＰＴＨは、破骨細胞の形成、骨再吸収および骨代謝回転の阻害によって、無形成低骨代謝回転を引き起こし得ることが見出された（Ｄｉｖｉｅｔｉ，Ｐ．ら、「Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｂｏｎｅ  Ｒｅｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｈｕｍａｎ  ＰＴＨ（７−８４）」，Ｊ．Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ  Ｒｅｓ  ２００１：ｓｕｐｐｌ  １，Ｓ３０７を参照のこと。Ｆａｕｇｅｒｅ，Ｍ．Ｃ．ら，「Ｔｈｅ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ＰＴＨ（１−８４）  ｏｎ  ｂｏｎｅ  ｔｕｒｎｏｖｅｒ    ａｒｅ  Ａｎｔａｇｏｎｉｚｅｄ  ｂｙ  ＰＴＨ（７−８４）ｉｎ  Ｔｈｙｒｏｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｅｃｔｏｍｉｚｅｄ  ａｎｄ  Ｎｅｐｈｒｅｃｔｏｍｉｚｅｄ  Ｒａｔｓ」；Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  １２：２００１，７６４Ａもまた参照のこと）。
【０００９】
ヒトにおける循環している生物学的に活性なＰＴＨレベルを決定することは、興味をもたれてきた。１つの主な問題は、ＰＴＨが、低いレベル（通常１０ｐｇ／ｍＬ〜６５ｐｇ／ｍＬ）で見出されることである。ＰＴＨおよびその多くの循環フラグメントの異質性の問題は、非常に低い循環レベルと組み合わさる。多くの場合、免疫アッセイは、循環ＰＴＨフラグメントからの実質的に有意な妨害に直面している。例えば、いくつかの市販のＰＴＨキットは、非（１−８４）ＰＴＨフラグメントとのほぼ１００％の交差反応性を有する（ＬｅＰａｇｅ物品を参照のこと）。
【００１０】
ＰＴＨ免疫アッセイは、数年かけて変化している。１つの初期のアプローチは、二重抗体沈降免疫アッセイであり、これは、Ａｒｎｏｌｄ  Ｗ．Ｌｉｎｄａｌｌらの米国特許第４，３６９，１３８号において見出される。一次抗体は、（６５−８４）ＰＴＨフラグメントに対する高い親和性を有する。放射標識（６５−８４）ＰＴＨペプチドが、内在性非標識ペプチドと競合するように、この一次抗体と共にサンプルに加えられる。任意の一次抗体および放射標識ＰＴＨフラグメント複合体と結合する二次抗体が添加され、それにより沈殿物を形成する。沈殿物および上清の両方を、放射活性について測定し、そして内在性ＰＴＨレベルを、これから算出し得る。
【００１１】
ＰＴＨフラグメント干渉を克服するための奮闘において、インタクトなＰＴＨ（Ｉ−ＰＴＨ）についてのイムノラジオメトリック２部位アッセイ（例えば、Ｓａｎ  Ｊｕａｎ  Ｃａｐｉｓｔｒａｎｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ  のＮｉｃｈｏｌ研究所によるＡｌｌｅｇｒｏ（登録商標）Ｉｎｔａｃｔ  ＰＴＨアッセイ）が導入された。１つのバージョンにおいて、捕捉抗体は、ｈＰＴＨのＣ末端部分に特異的に結合するのに対して、標識抗体は、捕捉ｈＰＴＨのＮ末端部分に特異的に結合する。別のバージョンにおいて、２つのモノクローナル抗体が、使用され、これらの両方は、ｈＰＴＨのＮ末端部分に結合する。不幸なことに、これらのアッセイは、測定するが、全（ｗｈｏｌｅ）ＰＴＨと全てでないＰＴＨペプチドフラグメントとの間を区別しないということにおいて問題を有する。この不能性は、上皮小体機能亢進症患者および有意な大きく全てでないＰＴＨフラグメントの体内濃度を有する腎不全患者において表立って来る。
【００１２】
最近、Ｓｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｉｎｃ．（Ｓａｎｔｅｅ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ  ＵＳＡ）は、ＯＰＴＨアゴニストとＰＴＨアンタゴニストの両方の正確な測定を可能にする、一連の新規のキットを導入した。ＰＴＨアゴニストアッセイは、直接測定であるが、全ＰＴＨアンタゴニストアッセイは、ＰＴＨアゴニストアッセイ値と総（ｔｏｔａｌ）ＰＴＨ（ＰＴＨアゴニストおよびＰＴＨアンタゴニスト両方を含む）アッセイ値の差から計算される。多くの予期されない利点は、臨床医に利用可能になり、この利点としては、ＨＢＴおよびＡＬＢＴを用いた、後発性上皮小体機能亢進症患者の識別を補助するための第１の非侵襲性の方法が挙げられる。
【００１３】
（発明の開示）
１つの実施形態において、後発性上皮小体機能亢進症を罹患する腎性患者（ｒｅｎａｌ  ｐａｔｉｅｎｔ）における上皮小体ホルモンの治療的抑制をモニタリングし管理するための方法が、提供され、この方法は、以下の工程：ａ）後発性上皮小体機能亢進症を罹患する腎性患者における上皮小体ホルモン（ＰＴＨ）アゴニストのレベルを決定しモニタリングする工程；ｂ）この患者におけるＰＴＨアンタゴニストのレベルを決定しモニタリングする工程；およびｃ）ＰＴＨアゴニストを抑制する患者に医薬を投与し、それによって、投与された医薬の量を調節し、その結果、ＰＴＨアンタゴニストのレベルが最小化される工程、を包含する。しばしば、医薬は、わずかな量から漸増量投与される。さらに、しばしば、工程ａ）および工程ｂ）は、腎性患者から得られたサンプルを使用して実施され、これらのサンプルは、血清サンプル、血漿サンプルおよび／または血液サンプルであり得る。
【００１４】
１つの局面において、腎性患者は、既に医薬を受容しており、医薬投与は、患者が、少なくとも相対的に抑制されていない状態にまで戻されるのに十分な時間で終了される。１つの局面において、このタイミングは、上皮小体の状態および／または骨の状態に関して測定され得る。関連して、患者が少なくとも相対的に抑制されていない状態にまで戻されるのに十分な時間は、骨の状態に関しては、しばしば、約３ヶ月と約６ヶ月との間である。患者が少なくとも相対的に抑制されていない状態にまで戻されるのに十分な時間は、上皮小体の状態に関しては、しばしば、約３分と約２０分との間である。時折、患者が少なくとも相対的に抑制されていない状態にまで戻されるのに十分な時間は、約２週間と約６週間との間であるか、または時々約４週間である。さらに、これらの患者の治療を管理する間、投与される医薬の量は、ＰＴＨアンタゴニストのレベルが最小化されるまで調整され得る。
【００１５】
本発明の別の局面において、投与される医薬は、カルシウム、ビタミンＤ、ビタミンＤアナログ、およびカルシウム類似物（ｃａｌｃｉｍｉｍｅｔｉｃ）（例えば、ＡＭＧ０７３）からなる群から選択される。しばしば、ビタミンＤアナログが使用される場合、これらは、パリカルシトロール（ｐａｒｉｃａｌｃｉｔｒｏｌ）、カルシトリオール、マクサカルシトール（ｍａｘａｃａｌｃｉｔｏｌ）、アルファカルシドール、カルシフェジオール（ｃａｌｃｉｆｅｄｉｏｌ）、またはエルゴカルシフェロールから選択される。
【００１６】
本発明のさらなる局面において、ＰＴＨアゴニストレベルは、ＰＴＨアンタゴニストレベルと比較される。別の局面において、ＰＴＨアゴニストレベルは、総上皮小体ホルモンレベルと比較される。さらに別の局面において、ＰＴＨアンタゴニストレベルは、総上皮小体ホルモンレベルと比較される。さらなる局面において、ＰＴＨアゴニストレベルは、比または割合の形態において、ＰＴＨアンタゴニストレベルと比較される。
【００１７】
１つの局面において、ＰＴＨアンタゴニストレベルは、総ＰＴＨレベルを決定することおよび総ＰＴＨアゴニストレベルを決定すること、その後の総ＰＴＨレベルから総ＰＴＨアゴニストレベルを減算することによって決定される。
【００１８】
別の局面において、ＰＴＨアゴニストレベルおよびＰＴＨアンタゴニストレベルは、免疫学的検定法を使用して決定される。さらに別の局面において、ＰＴＨアゴニストレベルは、ＰＴＨアンタゴニストからＰＴＨアゴニストを区別する抗体を使用して決定される。さらなる局面において、しばしば、ＰＴＨアンタゴニストレベルは、ＰＴＨアンタゴニストからＰＴＨアゴニストを区別する抗体を使用して決定される。
【００１９】
１つの実施形態において、上記方法は、患者における脈管カルシウム沈着についてモニタリングする工程をさらに包含する。しばしば、脈管カルシウム沈着は、患者におけるアルカリホスファターゼレベルをモニタリングすることによってモニターされる。
【００２０】
別の実施形態において、ＰＴＨアゴニストレベルとＰＴＨアンタゴニストレベルとが、個々にまたは一緒に対応する骨生検データと比較される。１つの局面において、ＰＴＨアゴニストのＰＴＨアンタゴニストに対する比または割合が、対応する骨生検データと比較される。時折、骨生検データは、ＰＴＨアゴニストレベル決定および／もしくはＰＴＨアンタゴニストレベル決定ならびに／またはＰＴＨアゴニスト／アンタゴニスト比の結果を検証するために使用される。しばしば、ＰＴＨアゴニストレベルおよびＰＴＨアンタゴニストレベルの決定は、医薬投与後の対応する骨生検データと比較される。時折、医薬の投与後の比較は、患者のＰＴＨ療法をモニターするために有用である。しばしば、このような処置は、ＰＴＨアゴニストレベルの減少およびＰＴＨアンタゴニストレベルの最小化に関する。
【００２１】
さらなる局面において、ＰＴＨアゴニストは、配列番号１（ＰＴＨ１−８４）に示されるアミノ酸配列を有するヒトＰＴＨの連続部分を含み、ＰＴＨアゴニストは、以下の特徴を有する：ＰＴＨアゴニストのＮ末端アミノ酸残基は、ＰＴＨ１−８４の１位で開始し；そしてＰＴＨアゴニストのＣ末端アミノ酸残基は、ＰＴＨ１−８４の３４位〜８４位にわたる任意の位置で終結する。別の局面において、ＰＴＨアンタゴニストは、配列番号１（ＰＴＨ１−８４）に示されるアミノ酸配列を有するヒトＰＴＨの連続部分を含み、そしてＰＴＨアンタゴニストは、以下の特徴を有する：ＰＴＨアンタゴニストのＮ末端アミノ酸残基は、ＰＴＨ１−８４の２位〜３３位ににわたる任意の位置で開始し；ＰＴＨアンタゴニストのＣ末端アミノ酸残基は、ＰＴＨ１−８４の３５位〜８４位ににわたる任意の位置で終結し；ＰＴＨアンタゴニストは、３つのアミノ酸残基の最小の長さを有する。
【００２２】
別の実施形態において、後発性上皮小体機能亢進症を罹患する腎性患者において上皮小体ホルモンの治療的抑制をモニタリングし管理するための方法が提供される、この方法は、以下の工程：ａ）後発性上皮小体機能亢進症を罹患する腎性患者からサンプルを得る工程；ｂ）腎性患者におけるＰＴＨアンタゴニストのレベルを決定しモニタリングする工程；およびｃ）医薬を、ＰＴＨアゴニストを抑制し得る患者に投与し、それによって、投与される医薬の量を調整し、ＰＴＨアンタゴニストのレベルが、患者において最小化される工程、を包含する。
【００２３】
さらなる実施形態において、後発性上皮小体機能亢進症を罹患する腎性患者における上皮小体ホルモンの治療的抑制をモニタリングし管理するのに有用なキットが提供され、このキットは、以下：ａ）後発性上皮小体機能亢進症を罹患する腎性患者において、上皮小体ホルモン（ＰＴＨ）のアゴニストのレベルをモニタリングするための手段；ｂ）患者におけるＰＴＨアンタゴニストのレベルをモニタリングするための手段；およびｃ）医薬を、ＰＴＨアゴニストを抑制し得る患者に投与し、それによって、投与される医薬の量を調整し、その結果，ＰＴＨアゴニストのレベルが減少し、ＰＴＨアンタゴニストのレベルが、患者において最小化される手段、を含む。
【００２４】
（発明の詳細な説明）
開示を明瞭にするために、そして限定ではなく、本発明の詳細な説明は、以下の小節に分割される。
【００２５】
（Ａ．定義）
他に規定されない限り、本明細書で使用される全ての技術的用語および科学的用語は、本発明が属する当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書で言及される全ての特許、出願、公開出願および他の出版物は、それら全体が参考として援用される。この節に示される定義が、本明細書で参考として援用される特許、出願、公開出願および他の出版物において示される定義に反するか、そうでなければ矛盾する場合、この節に示される定義は、本明細書で参考として援用される定義より優勢である。
【００２６】
本明細書で使用される場合、「ａ」または「ａｎ」は、「少なくとも１つ」または「１つ以上」を意味する。
【００２７】
本明細書で使用される場合、「上皮小体ホルモン（ＰＴＨ）アゴニスト」は、ＰＴＨの完全な分子または血中カルシウムレベルを増加させるために破骨細胞形成および骨代謝回転を刺激するそのフラグメント、誘導体またはアナログをいう。ＰＴＨアゴニストは、さらに、ＰＴＨアゴニスト特性を有するペプチドをいう。ＰＴＨの他の名称としては、パラトルモンおよびパラチリンが挙げられる。本明細書での目的のために、名称「上皮小体ホルモン（ＰＴＨ）」が、本明細書で使用されるが、他の全ての名称が、意図される。その生物学的活性を実質的に変更しない保存的アミノ酸置換をともなうＰＴＨアゴニストを包含することが意図される。アミノ酸の適切な保存的置換は、当業者に公知であり、そして一般的に、生じる分子の生物学的活性を変更することなく作製され得る。当業者は、一般的に、ポリペプチドの非必須領域における単一のアミノ酸置換は、生物学的活性を実質的に変更しない（例えば、Ｗａｔｓｏｎら，ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＢＩＯＬＯＧＹ  ＯＦ  ＴＨＥ  ＧＥＮＥ，第４版、１９８７，Ｔｈｅ  Ｂｅｊａｍｉｎ／Ｃｕｍｍｉｎｇｓ  Ｐｕｂ．Ｃｏ．，２２４ページを参照のこと）を認識する。ＰＴＨアゴニストアッセイ値は、Ｓｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｗｈｏｌｅ  ＰＴＨアッセイまたはＳｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ＣＡＰアッセイまたは第３世代ＰＴＨアッセイまたはＮｉｃｈｏｌｓ  ＢｉｏＩｎｔａｃｔ  ＰＴＨアッセイまたはＩｍｍｕｔｏｐｉｃｓ  Ｈｕｍａｎ  Ｂｉｏａｃｔｉｖｅ  ＰＴＨアッセイを用いてサンプルを測定することにより得られ得る。「シクラーゼ活性化ＰＴＨ」、「全体ＰＴＨ」、および「ＣＡＰ」は、ＰＴＨアゴニストの代表的な例である。
【００２８】
本明細書で使用される場合、「上皮小体ホルモン（ＰＴＨ）アンタゴニスト」は、ＰＴＨアゴニストの効果を打ち消すか、またはそうでなければＰＴＨアゴニスト活性を欠くＰＴＨフラグメントまたはＰＴＨ誘導体をいう。その活性を実質的に変更しない保存的アミノ酸置換を有するＰＴＨアンタゴニストを包含することが意図される。アミノ酸の適切な保存的置換は、当業者に公知であり、そして一般的に、生じる分子の生物学的活性を変更することなく作製され得る。当業者は、一般的に、ポリペプチドの非必須領域における単一のアミノ酸置換は、生物学的活性を実質的に変更しない（例えば、Ｗａｔｓｏｎら，ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＢＩＯＬＯＧＹ  ＯＦ  ＴＨＥ  ＧＥＮＥ，第４版、１９８７，Ｔｈｅ  Ｂｅｊａｍｉｎ／Ｃｕｍｍｉｎｇｓ  Ｐｕｂ．ｃｏ．，２２４ページを参照のこと）を認識する。「シクラーゼ不活性ＰＴＨ」および「ＣＩＰ」は、ＰＴＨアンタゴニストの代表的な例である。
【００２９】
本明細書で使用される場合、「全ＰＴＨ」、「インタクトなＰＴＨ」および「全インタクトなＰＴＨ」は、相互交換可能であり、そしてＰＴＨアゴニストレベルおよびＰＴＨアンタゴニストレベルの測定に指向されるアッセイをいう。
【００３０】
本明細書で使用される場合、ＰＴＨアゴニストまたはＰＴＨアンタゴニストの「機能的誘導体またはフラグメント」は、ＰＴＨアゴニストまたはＰＴＨアンタゴニストとしての機能を依然として実質的に保持するＰＴＨの誘導体またはフラグメントをいう。通常、誘導体またはフラグメントは、そのＰＴＨアゴニスト活性またはＰＴＨアンタゴニスト活性の少なくとも５０％を保持する。好ましくは、誘導体またはフラグメントは、そのＰＴＨアゴニスト活性またはＰＴＨアンタゴニスト活性の少なくとも６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％および１００％を保持する。ＰＴＨアゴニストまたはＰＴＨアンタゴニストの機能的誘導体またはフラグメントが、機能的誘導体またはフラグメントが由来する親分子より高いＰＴＨアゴニスト活性またはＰＴＨアンタゴニスト活性を有することもまた、可能である。
【００３１】
本明細書で使用される場合、「処置」は、状態、障害または疾患の症状が、緩和されるか、またはそうでなければ有益に変更される任意の様式を意味する。処置はまた、本明細書の組成物の任意の薬学的使用を包含する。
【００３２】
本明細書で使用される場合、「疾患または障害」とは、例えば、感染または遺伝的欠陥から生じ、そして同定可能な症状によって特徴付けられる、生物における病理学的状態をいう。
【００３３】
本明細書で使用される場合、「無形成低骨代謝回転疾患（ａｄｙｎａｍｉｃ  ｌｏｗ  ｂｏｎｅ  ｔｕｒｎｏｖｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ）」とは、個人における異常なＰＴＨアゴニストレベルおよび／またはアンタゴニストレベルを包含する種々の障害をいう。この定義は、１つの特定の疾患のみをいわない点で非限定的であり、個人における異常なＰＴＨまたＰＴＨ成分レベルから生じ得る種々の障害をいう。ＰＴＨレベルが、骨代謝回転速度に関連しているので、異常に低いレベルのＰＴＨアゴニスト、異常に低いレベルのＰＴＨアゴニスト／アンタゴニスト比、および異常に高いレベルのＰＴＨアンタゴニストは、個人における異常に低い骨代謝回転をもたらし得る。個人において、この型の状態は、無形成低骨代謝回転疾患の存在、またはそれに対する疑わしさを示し得る。逆に、異常に高いレベルのＰＴＨアゴニスト、異常に高いレベルのＰＴＨアゴニスト／アンタゴニスト比、および異常に低いレベルのＰＴＨアンタゴニストは、個人における異常に高い骨代謝回転をもたらし得る。
【００３４】
本明細書で使用される場合、用語「サンプル」とは、分析物アッセイが所望される分析物を含むことが疑われるもの全てをいう。サンプルは、生物学的サンプル（例えば、生物学的流体または生物学的組織）であり得る。生物学的流体の例としては、尿、血液、血漿、血清、唾液、精液、便、痰、脳髄液、涙、粘液、羊水などが挙げられる。生物学的組織は、細胞の凝集体、通常は、ヒト、動物、植物、細菌、真菌またはウイルス構造物の構造的物質（接着組織、上皮組織、筋組織および神経組織が挙げられる）のうちの１つを形成するそれらの細胞間物質に付随する特定の種の凝集体である。生物学的組織の例としてはまた、器官、腫瘍、リンパ節、動脈および個々の細胞も挙げられる。頻繁に、本発明の使用のために得られるサンプルは、本明細書に記載される方法および実施される方法を介して検出可能なレベルのＰＴＨアゴニストおよび／またはＰＴＨアンタゴニストを含むか、または含むと疑われる。
【００３５】
本明細書で使用される場合、用語「ビタミンＤアナログ」とは、臨床的使用または実験的使用のための種々の供給源からの合成ビタミンＤの任意の入手可能な供給源をいう。例えば、ビタミンＤアナログは、Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｂｏｎｅ  Ｃａｒｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｈｏｆｆｍａｎ−Ｌａ  Ｒｏｃｈｅ，Ｌｔｄ．，Ｃｈｕｇａｉ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ａｍｇｅｎ，Ｉｎｃ．，ＮＰＳ  Ｐｈｒａｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ，Ｋｉｒｉｎ  Ｂｒｅｗｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｌｔｄ．，Ｓｕｍｉｔｏｍｏ  Ｃｏｒｐ．，などの供給源から得られ得る。これらの供給源から入手可能なビタミンＤアナログとしては、Ｃａｌｃｉｊｅｘ（登録商標）、Ｚｅｍｐｌａｒ（登録商標）、Ｈｅｃｔｏｒａｌ（登録商標）、Ｒｏｃａｌｔｒｏｌ（登録商標）、Ｏｘａｒｏｌなどが挙げられる。さらに、本明細書で意図される種々の合成ビタミンＤ供給源中の活性成分としては、パリカルシトロール（ｐａｒｉｃａｌｃｉｔｒｏｌ）、カルシトリオール（ｃａｌｃｉｔｒｉｏｌ）、マキサカルシトール（ｍａｘａｃａｌｃｉｔｏｌ）、アルファカルシドール（ａｌｆａｃａｌｃｉｄｏｌ）、カルシフェジオール（ｃａｌｃｉｆｅｄｉｏｌ）、またはエルゴカルシフェロール（ｅｒｇｏｃａｌｃｉｆｅｒｏｌ）が挙げられ得る。
【００３６】
（Ｂ．ＰＴＨアゴニストレベルおよびＰＴＨアンタゴニストレベルに基づく危険性決定および治療決定）
本発明は、続発性上皮小体機能亢進症を有する腎性患者における上皮小体ホルモンの治療抑制をモニタリングおよび誘導するための新規な方法に関する。１つの局面において、腎性患者におけるＰＴＨアゴニストレベルおよびＰＴＨアンタゴニストレベルを決定し、そしてモニタリングする。別の局面において、腎性患者におけるＰＴＨアゴニストレベルを決定し、そしてモニタリングする。頻繁に、治療を抑制する上皮小体ホルモンは、ＰＴＨアゴニストのレベルを最小限にするために、患者に投与される。
【００３７】
続発性上皮小体機能亢進症は、腎臓を損なった患者、特に、ＥＳＲＤを有する患者における共通の疾患である。実質的に、全てのＥＳＲＤ患者は、骨疾患および鉱物代謝障害、高い骨代謝回転疾患または無形成低骨代謝回転疾患のいずれかを有する。上昇したＰＴＨアゴニストレベル（ＰＴＨアンタゴニストに対して）は、高骨代謝回転疾患（ＨＢＴ）をもたらす。上昇したＰＴＨアンタゴニストレベル（ＰＴＨアゴニストに対して）は、無形成低骨代謝回転疾患（ＡＬＢＴ）をもたらす。一般的に、これら２つの障害のうちより医学的に重篤な障害は、この障害に付随する軟組織石灰化の高い危険性に起因するＡＬＢＴである。ＡＬＢＴにおいて、異所性組織石灰化は、血管狭窄（冠動脈の閉塞を含む）および大動脈の硬直性を生じる。それゆえに、ＡＬＢＴ患者は、循環器系障害（例えば、ＨＢＴに付随する以外の心筋梗塞）に起因する重篤な医学的合併症の高い可能性に供される。このことに対する１つの理由は、過去において、ＡＬＢＴに対する信頼できる治療処置を見出すことが困難であったということである。さらに、治療的ＰＴＨ抑制の使用は、治療的ＰＴＨ過剰抑制をもたらし得、次いで、ＡＬＢＴをもたらし得る。言い換えると、信頼できる指標を欠くことによって、ＰＴＨアゴニスト抑制治療は、ＰＴＨ過剰抑制に起因するＡＬＢＴを意図せずもたらし得る。
【００３８】
ＰＴＨ抑制治療の実施の困難性は、過去１０年以内の、少なくとも１０の異なるＰＴＨ標的推薦の設定に見出され得る。治療的指標におけるこの不確実性の正味の結果は、血管石灰化の発生率が、ＥＳＲＤ患者について８８％であると報告されていることである。（Ｇｏｏｄｍａｎ，Ｗ．ら，「Ｃｏｒｏｎａｒｙ  Ａｒｔｅｒｙ  Ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｙｏｕｎｇ  Ａｄｕｌｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｅｎｄ  Ｓｔａｇｅ  Ｒｅｎａｌ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｗｈｏ  Ａｒｅ  Ｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇ  Ｄｉａｌｙｓｉｓ」；ＮＥＪＭＨ２０００，５月１８日；３４２：２０，１４７８〜１４８３を参照のこと。）
本発明のもたらした新規な知見は、ＰＴＨアゴニストレベルが、ＰＴＨアゴニスト抑制剤の投与に応答して減少し、一方、ＰＴＨアンタゴニストレベルは減少し得ないということである。さらに、ＰＴＨアゴニスト抑制剤の使用を介する過剰抑制は、ＰＴＨアンタゴニストレベルを上昇させ得る。上昇したＰＴＨアゴニストレベルを有する未処置の腎性患者について、ＰＴＨ抑制剤の投与はまた、初期にＰＴＨアンタゴニストレベルも抑制する。しかし、ＰＴＨ抑制剤投与量が増加するにつれて、ＰＴＨアンタゴニストレベルは、最小限レベルに達し、次いで、ＰＴＨアゴニストレベルの減少が停止する前に、増加し始める。このような患者においてＡＬＢＴの誘導を回避するために、ＰＴＨ抑制剤の投与は、ＰＴＨアンタゴニストレベルが、上記の最小限レベルにまで達し、そしてそれを維持するように調節されるべきである。当業者は、このレベルは、患者から患者へと変化し得るが、治療に対するＰＴＨレベル応答のモニタリングを介して、特定の患者に対して何が最善であるかを決定し得ることを知る。
【００３９】
好ましくは、ＰＴＨアゴニストレベルは、血液、血漿または血清のいずれかにおいてＰＴＨアンタゴニストを検出しないアッセイを用いて直接測定される。例えば、Ｓｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｗｈｏｌｅ  ＰＴＨアッセイまたはＳｃａｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ＣＡＰアッセイが、適切なアッセイである。
【００４０】
ＰＴＨアンタゴニストレベルは、直接ＰＴＨアンタゴニストを検出する（しかしＰＴＨアゴニストは検出しない）アッセイかまたはＰＴＨアゴニストおよびＰＴＨアンタゴニストの合計を測定する総ＰＴＨ測定により間接的に検出するアッセイのいずれかを使用して測定されるはずである。間接的測定は、全ＰＴＨ値からＰＴＨアゴニスト値を差し引き、ＰＴＨアンタゴニスト値を導く。従って、ＰＴＨアンタゴニストおよびＰＴＨアゴニストについて本質的に１００％の交差反応性を有するように設計された総ＰＴＨアッセイを使用するべきである。例えば、Ｓｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ総インタクト（Ｔｏｔａｌ  Ｉｎｔａｃｔ）ＰＴＨアッセイまたはＳｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ＬａｂｏｒａｔｏｒｙインタクトＰＴＨアッセイが適切なアッセイである。
【００４１】
本発明の方法は、ＰＴＨ抑制剤型治療が使用される場合に使用されるべきである。適用可能な処置としては、カルシウム投与、ビタミンＤおよびビタミンＤアナログ投与、ならびにカルシウム模倣物（ｃａｌｃｉｍｉｍｅｔｉｃ）投与が挙げられる。未処置のＥＳＲＤ患者については、治療は、選択されたＰＴＨ抑制剤についての名目上の量から漸増して投与されるべきである。患者が、すでにＰＴＨ抑制剤型治療を受けている場合、その患者を比較的抑制されていない状態まで復帰させるのに十分な時間の間その治療投与を停止し得る。比較的抑制されていない状態まで復帰させるのにかかる時間は、約３〜５分から約２０分まで、約３〜約６ヶ月までの範囲にわたり得る。
【００４２】
比較的抑制されていない状態は、上皮小体状態および／または骨状態のいずれかの原因となり得る。例えば、理論に束縛されることなく、ある人物は、上皮小体状態に関して、約３〜約５分間、頻繁には約２０分までの範囲で比較的抑制されていない状態に復帰し得る。これは、上皮小体状態に関して、ある患者におけるＰＴＨレベルが、ＰＴＨ抑制剤の用量の変化から数分以内に変化し得、そして比較的抑制されていない状態への復帰が、数分以内に起こると考えられ得るからである。しばしば、上皮小体状態に関してこの比較的抑制されていない状態への復帰は、約１０分から１時間以上または１日以上までの範囲にわたり得る。また、例えば、理論に束縛されることなく、ある人物は、骨状態に関して比較的抑制されていない状態に、約３週間〜約６ヶ月で復帰し得、頻繁には約３〜約６ヶ月にわたり得る。この範囲は、３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月または約６ヶ月であり得る。しばしば、この比較的抑制されていない状態への復帰は、約３〜約４週から約６週にわたり得る。また、頻繁には、比較的抑制されていない状態に復帰するのにかかる時間は、数週または数ヶ月のより広い範囲のうちの日毎または同様の増分で（例えば、１週間隔内の約１日から約６日または約７日の間）測定され得る。
【００４３】
不連続式ＰＴＨ型抑制剤治療の代替として、患者がすでにＰＴＨ型抑制剤治療を受けている場合、治療の量を、ＰＴＨアンタゴニストのレベルが最小になるまで、上下して調整し得る。頻繁には、ＰＴＨアンタゴニストのレベルを最小にするように治療を調節する間、ＰＴＨアゴニストレベルを考慮に入れる。投与している医師は、患者毎に適切な投薬量を容易に決定し得る。当業者は、ＰＴＨ抑制剤の投薬量変化が、それぞれ異なり得ることを理解する。しかし、医師は常に、本発明の手順により導かれて、ＰＴＨ過剰抑制と異常に上昇したＰＴＨとの間の個々の患者のそれぞれに最良の妥協策をとり得る。
【００４４】
（Ｃ．上皮小体ホルモンアンタゴニスト）
一般的に、本発明のＰＴＨアンタゴニストは、配列番号１に記載のアミノ酸配列（ＰＴＨ１−８４）を有するヒトＰＴＨの連続的な一部分、またはヒトＰＴＨのその一部をコードする核酸を含み、このＰＴＨアンタゴニストは、以下の特徴を有する：ａ）このＰＴＨアンタゴニストのＮ末端アミノ酸残基が、上記ＰＴＨ１−８４の２位から３３位にわたる任意の位置において開始する；ｂ）このＰＴＨアンタゴニストのＣ末端アミノ酸残基が、上記ＰＴＨ１−８４の３５位から８４位にわたる任意の位置で終止する；およびｃ）このＰＴＨアンタゴニストは、３アミノ酸残基の最小の長さを有する。好ましくは、このＰＴＨアンタゴニストは、薬学的組成物の形態であり、この薬学的組成物は、有効量のＰＴＨアンタゴニストおよび薬学的に受容可能なキャリアまたは賦形剤を含む。
【００４５】
このＰＴＨアンタゴニストのＮ末端アミノ酸残基は、上記ＰＴＨ１−８４の２位から３３位にわたる任意の位置において開始し得る。例えば、このＰＴＨアンタゴニストのＮ末端アミノ酸残基は、ＰＴＨ１−８４の２位で開始し得る。このＰＴＨアンタゴニストのＣ末端アミノ酸残基は、上記ＰＴＨ１−８４の３５位から８４位にわたる任意の位置で終止し得る。例えば、このＰＴＨアンタゴニストのＣ末端アミノ酸残基は、ＰＴＨ１−８４の８４位で終止し得る。
【００４６】
特定の実施形態において、ＰＴＨアンタゴニストは、タンパク質もしくはペプチドであるか、またはこのタンパク質もしくはペプチドをコードする核酸であり、以下からなる群から選択される：ＰＴＨ２−８４、ＰＴＨ３−８４、ＰＴＨ４−８４、ＰＴＨ５−８４、ＰＴＨ６−８４、ＰＴＨ７−８４、ＰＴＨ８−８４、ＰＴＨ９−８４、ＰＴＨ１０−８４、ＰＴＨ１１−８４、ＰＴＨ１２−８４、ＰＴＨ１３−８４、ＰＴＨ１４−８４、ＰＴＨ１５−８４、ＰＴＨ１６−８４、ＰＴＨ１７−８４、ＰＴＨ１８−８４、ＰＴＨ１９−８４、ＰＴＨ２０−８４、ＰＴＨ２１−８４、ＰＴＨ２２−８４、ＰＴＨ２３−８４、ＰＴＨ２４−８４、ＰＴＨ２５−８４、ＰＴＨ２６−８４、ＰＴＨ２７−８４、ＰＴＨ２８−８４、ＰＴＨ２９−８４、ＰＴＨ３０−８４、ＰＴＨ３１−８４、ＰＴＨ３２−８４、およびＰＴＨ３３−８４。別の特定の実施形態において、ＰＴＨアンタゴニストは、タンパク質もしくはペプチドであるか、またはこのタンパク質もしくはペプチドをコードする核酸であり、以下からなる群から選択される：ＰＴＨ７−６９、ＰＴＨ７−７０、ＰＴＨ７−７１、ＰＴＨ７−７２、ＰＴＨ７−７３、ＰＴＨ７−７４、ＰＴＨ７−７５、ＰＴＨ７−７６、ＰＴＨ７−７７、ＰＴＨ７−７８、ＰＴＨ７−７９、ＰＴＨ７−８０、ＰＴＨ７−８１、ＰＴＨ７−８２、ＰＴＨ７−８３およびＰＴＨ７−８４。
【００４７】
ＰＴＨアンタゴニストは、そのアンタゴニスト活性を維持する限り、任意の適切な長さを有し得る。例えば、ＰＴＨアンタゴニストは、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２または８３のアミノ酸残基長を有し得る。
【００４８】
（Ｄ．上皮小体ホルモンアゴニスト）
一般的に、本発明のＰＴＨアゴニストは、配列番号１に記載のアミノ酸配列（ＰＴＨ１−８４）を有するヒトＰＴＨの連続した部分を含み、そしてこのＰＴＨアゴニストは、以下の特徴を有する：ａ）ＰＴＨアゴニストのＮ末端アミノ酸残基は、ＰＴＨ１−８４の１位において開始する；およびｂ）ＰＴＨアゴニストのＣ末端アミノ酸残基は、ＰＴＨ１−８４の３４位から８４位にわたる任意の位置において終止する。
【００４９】
理論に束縛されることなく、ＰＴＨアゴニストのＮ末端アミノ酸残基は、一般的に上記ＰＴＨ１−８４の１位で開始し得る。例えば、ＰＴＨアゴニストのＮ末端アミノ酸残基は、ＰＴＨ１−８４の１位で開始し得る。上記ＰＴＨアゴニストのＣ末端アミノ酸残基は、ＰＴＨ１−８４の３４位から８４位にわたる任意の位置において終止し得る。例えば、ＰＴＨアゴニストのＣ末端アミノ酸残基は、ＰＴＨ１−８４の８４位で終止し得る。
【００５０】
ＰＴＨアゴニストは、そのアゴニスト活性を維持する限り、任意の適切な長さを有し得る。たとえば、ＰＴＨアゴニストは、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０，４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２または８３のアミノ酸残基長を有し得る。
【００５１】
本発明は、以下の実施例によりさらに記載される。これらの実施例は、特定の実施形態を参照することにより本発明を例示するためのみに提供される。これらの例示は、本発明の特定の具体的な局面を例示するが、限定を表すものでも、開示される本発明の範囲を限定するのでもない。
【００５２】
（Ｅ．キット）
本発明はまた、本発明の方法を実施するためのキットを提供する。このようなキットは、以下を備える：１つ以上の容器内に、続発性上皮小体機能亢進症を有する腎性患者における上皮小体ホルモン（ＰＴＨ）アゴニストのレベルを測定およびモニタリングするための手段；１つ以上の容器内に、患者単独または他の薬剤と組み合わせたＰＴＨアンタゴニストのレベルを測定およびモニタリングするための手段；ならびに、患者にＰＴＨアゴニストを抑制する治療剤を投与するための手段（投与される治療剤の量は、ＰＴＨアゴニストレベルが低下しかつＰＴＨアンタゴニストのレベルが最小になるように、調節される）。患者におけるＰＴＨアゴニストレベルを測定およびモニタリングするための手段の例は、本明細書中でさらに記載される種々のＰＴＨアッセイを含む。そして、患者におけるＰＴＨアンタゴニストレベルを測定およびモニタリングするための手段の例は、本明細書中でさらに記載される種々のアッセイを含む。好ましい形態は、滅菌生理食塩水、デキストロース溶液、あるいは緩衝溶液、または他の薬学的に受容可能な滅菌流体との組み合わせであり得る。あるいは、有用な治療組成物は、凍結乾燥されていても乾燥（ｄｅｓｓｉｃａｔｅ）されていてもよく、この場合において、このキットは、容器内に、薬学的に受容可能な溶液（好ましくは、滅菌溶液）を必要に応じてさらに備え、複合体を再構築して注射目的のための溶液を形成する。例示的な薬学的に受容可能な溶液は、生理食塩水およびデキストロース溶液である。
【００５３】
１つの局面において、本発明のキットは、治療剤（好ましくは、滅菌形態でパッケージングされた）を患者に投与するための手段、組成物および／またはパッケージングされたアルコールパッドを注射するための手段として、ニードルまたはシリンジをさらに備える。医師または患者によって組成物を投与するための指示書が、必要に応じて備えられる。
【００５４】
本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明、および特許請求の範囲から明らかとなる。
【００５５】
本発明は、以下の例によってさらに記載される。これらの例は、特定の実施形態を参照することによって本発明を例示するために、単に提供されているにすぎない。本発明のある特定の局面を例示しているものの、これらの例示は、制限を記述していないし、開示される本発明の範囲を制限もしない。
【実施例】
【００５６】
（実施例１）
臨床試験を、９０人のＥＳＲＤ患者に対して行った。各患者は、製造業者のガイドラインに従って、ビタミンＤ抑制剤治療を受けた。各患者を、４週間の洗浄期間の間、治療から解放し、そして治療の解放後、ＰＴＨ測定値の上昇によって、これを確認した。洗浄後、３日毎の５．５μｇの一定静脈内投与にて、ＰＴＨマキサカルシトール（Ｃｈｕｇａｉ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｏｋｙｏ，Ｊａｐａｎ製）の抑制剤治療を開始した。洗浄後（０週目）、治療の再開から６週間後（６週目）、および治療の再開から１２週間後（１２週目）に、血液サンプルを各患者から得た。これらのサンプルを、Ｓｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｉｎｃによって作製されたＰＴＨアゴニストアッセイおよび総ＰＴＨアッセイを使用して、ＰＴＨアゴニストレベルおよびＰＴＨアンタゴニストレベルについてアッセイした。これらのサンプルを、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣａｌｉｆｏｒｎｉａのＨｙｂｒｉｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．から市販されている免役アッセイを使用して、骨特異的アルカリホスファターゼについてアッセイした。
【００５７】
（臨床結果）
９０人の患者についてのアッセイの結果を、平均値として、図２および以下の表に示す：
（表）
【００５８】
【表１】
2005513419.tif 000002
この表は、ＰＴＨ抑制剤が、ＰＴＨアゴニスト値および総ＰＴＨ値の両方をどの程度低下させたかを示している。６週間後、ＰＴＨアゴニスト値および総ＰＴＨ値は、４１％低下した。しかし、１２週間後、これらの値は、８％（ＰＴＨアゴニスト）および０．８％（総ＰＴＨ）しか低下しなかった。これらの結果は、ＰＴＨ抑制剤が、ＰＴＨアゴニストレベルをさらに下げるのに困難性を有することを示している。さらに、総ＰＴＨおよびＰＴＨアゴニストのレベルは、依然として一般的に、非ＥＳＲＤ患者に対する正常レベル（ＰＴＨアゴニストについて３７ｐｇ／ｍｌ未満のレベルおよび総ＰＴＨについて６５ｐｇ／ｍｌ未満のレベル（例えば、Ｎｕｓｓｂａｕｍ  ＳＲら「Ｈｉｇｈｌｙ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  ｔｗｏ−ｓｉｔｅ  ｉｍｍｕｎｏｒａｄｉｏｍｅｔｒｉｃ  ａｓｓａｙ  ｏｆ  ｐａｒａｔｈｙｒｉｎ，ａｎｄ  ｉｔｓ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｕｔｉｌｉｔｙ  ｉｎ  ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｈｙｐｅｒｃａｌｃｅｍｉａ」Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．１９８７；３３：１３６４−６７を参照のこと））よりも高いとみさなれている。
【００５９】
上で与えられる表は、ＰＴＨ抑制剤に対するＰＴＨアンタゴニストの応答  対  総ＰＴＨおよびＰＴＨアゴニスト応答の差異を示している。６週間後に、ＰＴＨアンタゴニストレベルは、４２％低下し、６週間後のＰＴＨアゴニストレベルと一致した。しかし、１２週間後に、このＰＴＨアンタゴニストレベルは、ＰＴＨアゴニストレベルとは対照的に、２１％増加した。このレベルでのＰＴＨ抑制剤の連続使用は、ＰＴＨアンタゴニストレベルを高める。一定期間にわたる、ＰＴＨアンタゴニストレベルの増加は、ＡＬＢＴおよび引き続く脈管カルシウム沈着を誘導する（表では、１２週目でのアルカリホスファターゼのさらなる低下によって確認される）。これらの患者は、ＰＴＨ抑制剤の投薬量を低下して、ＰＴＨアンタゴニストを最小レベル（この場合、１６０ｐｇ／ｍｌ）で維持する必要がある。わずかなパーセンテージでさえも、特定のレベルを超えるＰＴＨアゴニストレベルを低下させる際に認識される医学的利点は、結果的なＰＴＨアンタゴニストレベルの上昇によって引き起こされる危害をかなり下回る。このＰＴＨアンタゴニストレベルの上昇は、破骨細胞の形成（骨の吸収および骨の代謝回転を含む健康な骨成形に必要な構成要素）を阻害することによって、ＡＬＢＴを引き起こし得る。
【００６０】
（実施例２）
ＰＴＨアゴニスト濃度およびＰＴＨアンタゴニスト濃度、ならびにＰＴＨアゴニスト／アンタゴニスト比が、腎性患者における骨の高い代謝回転と骨の低い代謝回転との間を正確に区別することを確証するために、骨生検データを、続発性上皮小体機能亢進症を有する腎性患者から得る。Ｆａｕｇｅｒｅ，Ｍ−Ｃら、Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ’ｌ．２００１；６０：１４６０−６８を参照のこと。骨生検データはまた、腎性患者におけるＰＴＨアゴニストレベルおよびＰＴＨアンタゴニストレベルの両方のレベルデータの計算および評価が、ＰＴＨアゴニストデータ単独の評価よりも、より有用な治療指標および診断指標を与えることを確証する。
【００６１】
（実験設計）
２００ｐｇ／ｍｌよりも高い総ＰＴＨを有する患者（Ｉｎｔａｃｔ  ＰＴＨアッセイによって測定される）は、Ｓｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（登録商標）ＣＡＰ  ＰＴＨアッセイ（ＰＴＨアゴニスト）、Ｓｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（登録商標）Ｗｈｏｌｅ  ＰＴＨアッセイ（ＰＴＨアゴニスト）、Ｓｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（登録商標）総インタクト（ｔｏｔａｌ  ｉｎｔａｃｔ）ＰＴＨアッセイ（総ＰＴＨ）および／またはＳｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（登録商標）インタクトＰＴＨアッセイ（総ＰＴＨ）によって決定される、ＰＴＨアゴニストレベルおよびＰＴＨアンタゴニストレベル、ならびにＰＴＨアゴニスト／アンタゴニスト比を有する。４００ｐｇ／ｍｌより高いかまたは２００〜４００ｐｇ／ｍｌの間の総ＰＴＨレベル、および１．５未満のＰＴＨアゴニスト／アンタゴニスト比を有する患者は、二重テトラサイクリン骨標識を受け、そして外来患者は、局所麻酔下で、骨盤稜（ｐｅｌｖｉｃ  ｃｒｅｓｔ）骨の経皮針生検を受ける。
【００６２】
これらの患者はまた、既知の手段を介して測定される、骨特異的アルカリホスファターゼおよびＴＲＡＰ（酒石酸耐性ホスファターゼ）を有する。さらに、当該分野で公知のマンモグラフィ（ｍａｍｏｇｒａｐｈｉｃ）Ｘ線技術の使用を介して、各患者からＸ線データを得る。
【００６３】
（患者集団および選択基準）
血液透析患者および腹膜透析患者の広い断面を、本研究において評価する。全ての透析患者は、初期患者集団選択に含まれる。しかし、排除基準は、一般的に状態が悪過ぎて本研究に参加することができず、抗凝固が、約４８〜７２時間の間で停止させ得ず、かつ本研究の必要条件と協同することができない患者である。少なくとも３０〜５０％の透析集団が、骨生検を考慮するために必要とされる範囲内のＰＴＨ値を有するようである。
【００６４】
（結果）
骨生検結果は、患者の骨の代謝回転比を決定する際に、ＰＴＨアゴニスト測定値単独に対するＰＴＨアゴニスト／アンタゴニスト比の正確さを確証するためのＰＴＨレベルのアッセイの結果と相関する。生化学データおよび放射線学データを使用して、これらの結果を確証する。公知の臨床学的共存症および治療は、骨の代謝回転に対する効果を有し、これらの効果は、データを評価する際に考慮される。
【００６５】
骨生検データは、ＰＴＨアゴニスト／アンタゴニストレベルの比較の有効性を確認し、そして治療は、ＰＴＨアゴニストレベルとＰＴＨアンタゴニストレベルとの比較に基づいて導かれる。治療は、患者におけるＰＴＨアゴニストレベルを低下しかつＰＴＨアンタゴニストレベルを最小にするように施される。
【００６６】
１２ヶ月後、生化学パラメータおよび放射線医学パラメータを再分析し、そしてＰＴＨアゴニスト／アンタゴニスト比の分析アプローチの臨床学的利点を評価するために、繰り返し骨生検を実施する。
【００６７】
上記の実施例は、例示目的のみのために含まれており、本発明の範囲を制限することを意図していない。上記のものに対する多くの改変が可能である。上記の実施例に対する改変およびバリエーションは、当業者に明らかであるので、本発明は、添付の特許請求の範囲によってのみ制限されることが意図される。
【００６８】
上記の刊行物または文献の引用は、それら前出のもののいずれもが関連する先行技術であることの承認として意図されておらず、これらの刊行物または文献の内容またはデータに関していかなる承認をも構成しない。
【図面の簡単な説明】
【００６９】
【図１】図１は、ヒトｗＰＴＨの概略図である。
【図２】図２は、ＰＴＨ抑制療法を受けた患者に対するＰＴＨ測定パラメーターの経時変化を比較するグラフである。
【図１】
2005513419.tif 000003
【図２】
2005513419.tif 000004
【国際調査報告】
2005513419.tif 000005