(57)【要約】本発明は、動物の学習能力を向上させるのに十分な量のロイシンを送達する組成物に関する。本発明は、動物の学習能力を向上させるための栄養補助食品およびそのような学習能力を向上させる方法にも関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
動物の学習能力を向上させるのに十分な量のロイシンを送達する組成物。
【請求項２】
湿重量基準で２％を超える量でロイシンを含有することを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項３】
湿重量基準で２．３％の量でロイシンを含有することを特徴とする請求項２記載の組成物。
【請求項４】
完全なバランス食であることを特徴とする請求項１から３いずれか１項記載の組成物。
【請求項５】
前記動物が犬または猫であることを特徴とする請求項１から４いずれか１項記載の組成物。
【請求項６】
動物の学習能力を向上させるのに十分な量のロイシンを送達する動物用栄養補助食品。
【請求項７】
湿重量基準で少なくとも５０％のロイシンを含むことを特徴とする請求項６記載の補助食品。
【請求項８】
粉末または液体の形態にあることを特徴とする請求項６または７記載の補助食品。
【請求項９】
犬用または猫用であることを特徴とする請求項６から８いずれか１項記載の補助食品。
【請求項１０】
請求項１から５いずれか１項記載の組成物または請求項６から９いずれか１項記載の補助食品を製造する方法であって、成分を一緒に混合し、任意の名前の食品成分を調理するために必要に応じて加熱し、混合物を消費または投与に適した形態に必要に応じて形成する各工程を有してなることを特徴とする方法。
【請求項１１】
動物の学習能力を向上させるためにロイシンを使用する方法。
【請求項１２】
前記ロイシンが食品または栄養補助食品内にあることを特徴とする請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
前記動物が猫または犬であることを特徴とする請求項１１または１２記載の方法。
【請求項１４】
動物のロイシンのレベルを増加させる方法であって、前記動物に、該動物の総ロイシンレベルを増加させるのに十分な量のロイシンを投与する工程を有してなることを特徴とする方法。
【請求項１５】
前記方法により前記動物の学習能力が向上することを特徴とする請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
前記動物が学習能力を向上させる必要のあるものであることを特徴とする請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
前記動物が猫または犬であることを特徴とする請求項１４から１６いずれか１項記載の方法。
【請求項１８】
動物の学習能力を向上させる方法であって、請求項１から５いずれか１項記載の組成物または請求項６から９いずれか１項記載の補助食品を前記動物に給餌する工程を有してなることを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、動物の学習能力を向上させるのに十分な量のロイシンを送達する組成物に関する。本発明は、動物の学習能力を向上させるための栄養補助食品およびそのような学習能力を向上させる方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
タスクを学習させ、実行させるように動物、特に、犬を訓練するのに、多大な時間、労力および費用がかけられている。これらのタスクは、例えば、サーカスでの興行目的のためのこともあるし、動物の働きの役割に関することもある。
【０００３】
犬は、その犬に特定のメンバーまたは目の不自由な人や耳の不自由な人のような人たちを介助させたり、補助させたりする命令を学習させるために、通例選択され、訓練されている。「介助」動物、主には犬であるが、人間を介助する全ての動物を含む。そのような動物としては、視力障害者を介助するように訓練された犬、および飼い主が発作を起こしたときに反応するように訓練された犬（「発作」警告犬）並びに例えば、車椅子の使用者を物理的に補助する犬が挙げられる。これらの全てには、介助犬の役割を引き受けられるようになる前に徹底した訓練が必要である。犬は、命令を覚え、サインを認識し、これらのサインに反応する必要がある。耳の不自由な人、すなわち聴覚障害者のための犬にも徹底した訓練が必要である。他のグループとしては、犯罪の現場で補助するように犬を利用する警察、および薬物を捜し出すために鋭い嗅覚を持つ犬を利用する薬物捜査班または税関が挙げられる。
【０００４】
そのような動物は全て、非常に若いときに訓練を始め、リタイアするまでの作業寿命は比較的短い傾向にある。したがって、そのような動物はできるだけ早く訓練を完了することが一般に望ましい。
【０００５】
作業犬としての犬の役割の他に、家事の訓練がなされ、従順になり、人間のコンパニオンに喜びを与えるために、ペットに簡単なタスクと命令を教える要望があることがより広く知られている。家庭でのペットの訓練以外に、馬などのコンパニオン動物を訓練する要望もある。若い馬の訓練は、馬に障害飛越や調教などの複雑なタスクやスキルを学習させることを目的とする場合、少なくとも、厳しくかつ時間がかかる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
上述した全ての状況に関して、動物の訓練にかかる時間、費用および労力は非常に多大になることがあるので、訓練のプロセスを捗らせることに非常に関心が持たれている。さらに、全ての動物が、その寿命に亘り機敏性を示すことが望ましい。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
したがって、本発明は、第一の態様において、動物の学習能力を向上させるのに十分な量のロイシンを送達する組成物を提供する。向上した学習能力は、改善した認知機能と称しても差し支えない。
【０００８】
この組成物は食品（規定食）であることが好ましい。食品は、固体、半固体または液体の形態をとってもよい。
【０００９】
ここで用いているように、「学習能力の向上」という用語は、「向上した機敏性」を含む。動物の機敏性を向上させることは、学習能力の向上を表す。本発明は、動物の機敏性を向上させるのに十分な量のロイシンを送達する組成物を提供することが好ましい。
【００１０】
ロイシンは、体内で産生できず、したがって、必須アミノ酸である。ロイシンは、イソロイシンやバリンのように、タンパク質および酵素の内部の構成要素として見つかった疎水性アミノ酸である。ロイシンには、公知の重要な代謝的役割はないようである。しかしながら、ロイシンは、必須であるので、食事で摂られなければならない。
【００１１】
第一の形態による組成物は、動物の学習能力を改善する上で効果的であることが示された。この組成物は、特に、以下のものを与えることが示された：
ａ．  識別タスクを学習するのにかかる時間の減少および／または
ｂ．  タスクを学習する成功率の増加および／または
ｃ．  動物の機敏性の増加。
【００１２】
本発明は、全ての態様について、人間を含むあらゆる動物に関する。特に、本発明は、犬や猫やウマ属（例えば、馬）やスキルを学習し、学習した反応を身につけ、または機敏性を向上させる能力が望ましいそのような他の動物などのコンパニオン動物に関する。本発明による犬と猫は、飼い猫（イエネコ）または飼い犬（イエイヌ）であることが好ましく、介助犬を含む。
【００１３】
本発明の第一の態様は、例えば、National Research Counsil, 1985, Nutritional Requirements for Dogs, National Academy Press, Washington DC (ISBN: 0-309-03496-5); National Research Counsil, 1986, Nutritional Requirements for Cats, National Academy Press, Washington DC (ISBN: 0-309-03682-8)またはAssociation of American Feed Countrol Officials, Official Publication 1996に記載されているように、問題の特定の動物のために推奨されたビタミン類およびミネラル類の全てを提供する完全なバランス食と組み合わせて用いてもよい。
【００１４】
完全なバランス食は、一般に、問題の動物の栄養要件を満足するのに十分な量しかロイシンを含有していない。
【００１５】
本発明の第一の態様による組成物は、市販のペットフード製品であってもよい。そのような製品は、ペット動物、特に、ペットの猫やペットの犬に給餌するための製品として販売されていることが好ましい。ペットフード製品は包装されていることが好ましい。このようにして、消費者は、そのパッケージから食品中の成分を同定し、その製品が問題の特定のペットに適していることを確認することができる。包装は、缶詰、ホイル包装、プラスチック包装等であってよい。
【００１６】
組成物は、Waltham Book of Dog and Cat Nutrition, Ed. ATB Edney, Chapter by A.Rainbird, entitled "A Balanced Diet", pages 57 to 74, Pergamon Pressなど、当該技術分野において知られたどのような方法により製造されたものであって差し支えない。
【００１７】
組成物は、ドライ、セミモイストまたはモイストの製品であってよい。水分のある（モイスト）食品は、缶詰の形態で販売され、７０〜９０％の含水量を有する。乾燥した食品は、同様の組成の食品を含むが、含水量が５〜１５％であり、小さなビスケット状のキブルとして、または乾燥した膨張またはフレーク状形態で提供される。
【００１８】
本発明の第一の態様による組成物は、動物が規定食において消費するどのような組成物も包含する。それゆえ、本発明は、標準の食品並びにスナック類（例えば、スナック・バー、ビスケットおよび菓子類）を含む。組成物は調理製品であることが好ましい。製品は、肉または動物由来の材料（ビーフ、チキン、七面鳥、ラム、ポーク、魚、血漿、髄骨等またはそれらの組合せなど）を含んでよい。あるいは、この製品は、肉を含まなくてもよい（（蛋白源を提供するために）大豆、トウモロコシ、グルテンまたは大豆製品などの肉代替物を含むことが好ましい）。製品は、大豆蛋白濃縮物、乳蛋白質、グルテンなどの追加の蛋白源を含んでもよい。製品は、一種類以上の穀物（例えば、小麦、トウモロコシ、米、オート麦、大麦等）などのデンプン源を含んでも、デンプンを含まなくてもよい。一般的なドライタイプのドッグフードまたはキャットフードは、約２０〜３０％の粗蛋白質、約１０〜２０％の脂肪を含み、その残りは、食物繊維および灰分を含む炭水化物である。一般的なウェットすなわちモイストタイプの製品は、（乾物基準で）約４０％の脂肪、約５０％の蛋白質を含み、残りは繊維質および灰分である。
【００１９】
一般的な馬用のドライタイプの食品は、乾燥濃縮食品が補給された飼い葉ベースの規定食（例えば、干し草）を含有する。干し草は、一般に、１０〜１５％の蛋白質、６０〜７０％の繊維質、２〜５％の脂肪、並びに残りの量の炭水化物、水分および灰分からなる。典型的な栄養補助食品は、１０〜１５％の蛋白質、４〜１５％の繊維質、４〜１５％の脂肪および５〜１０％の灰分、並びに残りの量の炭水化物および水分からなる。馬には、維持用規定食で、飼い葉のみを給餌してもよく、一方で、軽い作業を行う馬には、規定食の７０％位が飼い葉として、３０％位が給餌濃縮物として給餌される。
【００２０】
本発明の第一の態様による組成物中のロイシンの量は、動物の学習能力を向上させる任意の量である。量は、食品の「そのままの」重量パーセントに基づいて、０．５重量％を超えるロイシンを含む。量は、０．５％から１５％、好ましくは、０．５、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０、３．５、４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５および１０％（そのままの）を含む１０％までのいずれをも含む。これらの値は一般に、犬に給餌するための組成物に適用する。
【００２１】
ドッグフードおよびキャットフードにおけるロイシンの典型的なレベルは異なる傾向にある。しかしながら、平均レベルは以下の通りである（％）：
犬用ウェットタイプ        ０．５８
犬用ドライタイプ          １．８４
猫用ウェットタイプ        ０．６５
猫用ドライタイプ          ４．３
【００２２】
本発明に含有するためのロイシンの供給源には制限がない。ロイシンの適切な供給源としては、肉製品やシリアル製品が挙げられる。ロイシンを含有する一般的な食品は、卵、肉、穀物および豆類、例えば、卵、魚、レンズ豆、家禽類、ビーフ、種子、大豆、小麦、アーモンド、乳製品、豆および玄米である。あるいは、ロイシンは合成したものであってもよい。ロイシンはＬ形態、すなわち、Ｌ−ロイシンであることが好ましい。
【００２３】
食品にはロイシンのみを補給してもよく、または食品にロイシンを他のアミノ酸と組み合わせて補給してもよい。組合せで存在する場合、ロイシンおよび他のアミノ酸は、食品に一緒に加えても、別々に加えてもよい。
【００２４】
本発明の第一の態様の組成物は、投与しても、または消費により送達してもよい。
【００２５】
ロイシンは蛋白質含有食品中に見られるので、通常は、組成物の成分中に存在する各々の濃度を決定し、次いで、各々の濃度の合計を本発明による必要レベルにするのに十分な量で加える必要がある。食品のロイシンの含有量を分析する方法は、当該技術分野において公知である。そのような方法としては、食品の短時間の熱希酸処理、単純な抽出およびＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）が挙げられる。
【００２６】
ロイシンのレベルに加え、本発明によれば、他の特定の成分を用いても差し支えない。そのような特定の成分としては、他のアミノ酸、例えば、トリプトファンが挙げられる。トリプトファンは、本発明の第一の態様において、少なくとも１％を超え、動物の標準的な規定食中に含まれるトリプトファンのレベルより多いレベルで含んでもよい。このレベルのトリプトファンは、本発明によるロイシンまたは他のアミノ酸の任意の組合せと共に用いても差し支えない。
【００２７】
本発明の第二の態様は、動物の学習能力を向上させるのに十分な量のロイシンをその動物に送達する動物用栄養補助食品を提供する。
【００２８】
この補助食品は、湿重量（「そのままの」）基準で、少なくとも５％、１０％、２０％または５０％のロイシンを含んでよい。
【００２９】
ここで用いているように、「補助食品」という用語は、固体、半固体または液体であってよい全ての形態の栄養補給食品および栄養補助食品を含む。補助食品は、経口からの消費に適した形態で提供することが好ましい。
【００３０】
補助食品は、非常に高レベルのロイシンを有する濃縮物として提供してもよい。この形態において、補助食品は、動物に給餌する前に、「希釈」を必要としてもよい。補助食品は、どのような形態であってもよく、固体または半固体、例えば、粉末、粒子、ペレット、錠剤、カプセル、フリーズドライ組成物などの非液体であることが好ましい。補助食品は、動物の食品と共に、必要濃度まで混合しても差し支えない。補助食品は、ロイシンのみ、または他の成分とロイシンとの組合せであってもよい。
【００３１】
本発明の第一の態様の特徴の全ては、本発明の第二とそれに続く態様に適用される。
【００３２】
本発明はまた、第三の態様によれば、動物の学習能力を向上させるためのロイシンの使用を提供する。ロイシンは、組成物、食品または栄養補助食品中にあってもよい。したがって、本発明の第三の態様は、動物の学習能力を向上させるために、第一の態様による組成物または第二の態様による栄養補助食品の使用を提供する。
【００３３】
本発明によるロイシン、組成物、食品または補助食品の使用は、動物の学習能力を向上させる方法を提供する。第三の態様による使用は、ロイシン、組成物、食品または補助食品の消費によるものであることが好ましい。
【００３４】
第四の態様は、本発明の第一の態様による組成物または第二の態様による栄養補助食品を調製する方法を提供する。この方法は、成分を一緒に混合し、任意の生の食品成分を調理するために必要に応じて加熱し、必要に応じて混合物を消費に適した形態で提供する各工程を有してなる。ロイシン含有成分は、ロイシンまたはロイシンの豊富な成分であってもよい。この方法は、押出調理製品を含んでもよい。押出調理製品は、乾燥したペレット形態、乾燥した膨張形態またはフレーク状形態であってよい。
【００３５】
本発明の第五の態様は、動物の総ロイシンレベルを増加させるのに十分な量のロイシンを動物に投与する工程を有してなる、動物のロイシンレベルを増加させる方法を提供する。体内のロイシンレベルは、ロイシンの安定な同位体を使用し、次いで、血漿レベルを測定することにより、または組織生体検査（全身区画希釈基準）を行うことにより、測定することができる。
【００３６】
第五の態様の方法は、健康かつ正常に成長しているときに、例えば、機敏性において、学習能力およびタスクに反応する能力の改善または向上から恩恵を受けることのできる動物、他の動物、人などに適用することができる。第五の態様の方法は、学習能力の改善または向上を必要とする動物に適用することが好ましい。
【００３７】
現在まで、動物におけるこれらのアミノ酸の欠乏を防ぐのに十分な最小レベルを超えたロイシンのレベルには関心が持たれていない。本発明は、健康かつ正常に成長しているときに、学習能力の向上から恩恵を受けることのできる動物に適用できる、本発明の第五の態様による方法を検討する。
【００３８】
本発明は、正常な学習挙動を持つ健康な動物、並びに「学習遅滞」と説明されるであろう動物において効果があるという点で治療ではない。したがって、本発明とその使用は、表面的かつ非治療的と説明することができる。本発明は、学習障害の補正に関するものではなく、むしろ、好ましくは、完全なバランス食によって、健康な動物の学習能力を向上させる。
【００３９】
本発明の全ての態様による学習能力の改善は、犬に関する二つの別々の研究により例証された。研究１は、実験期間中定期的に認識テスト（テストＡ）を学習する速度を測定する工程を含む。研究２は、テスト期間中定期的にタスク（テストＢ）を学習する上での成功率を測定する工程を含む。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４０】
本発明を図面を参照して説明する。
【００４１】
ここで、本発明を以下の非限定実施例を参照して説明する。
【００４２】
実施例１
方法
テストＡの装置
テストＡの装置は、前方が開いており、長い側面が並んで連結された３つの箱からなった。各箱の後部には、箱の床に食品ペレットを落とすことのできる、遠隔操作できるカバーを持つハッチがあった。各ハッチの側に、食品がそのハッチから得られることを示すように作動して点滅できる赤い光があった。
【００４３】
テストＢの装置
テストＢの装置は、後部に入口を持つ並べて配置された二つの箱からなった。犬は、箱の外側を赤い光を過ぎて行き、内部（すなわち、装置の中心に向かう）に向きを変え、食品ハッチの方を向くことによりこれらの箱に入ることができた。
【００４４】
試行の構成
様々な年齢およびタイプの８０匹の犬を犬の訓練機関から募集した。各犬のベースラインの学習能力を、添付資料（テストＡの実験計画）に概説したように、認識タスクで決定した。認識タスクの結果により、犬を二つの群、「遅い」学習犬と「早い」学習犬に分けることができた。
【００４５】
給餌
遅い学習犬
以下のドライタイプの規定食をこの研究に用いた。添加したアミノ酸は合成したものであった。  
規定食Ｃ（ペディグリー・アドバンス・レシピ−コントロール・ダイエット）
規定食Ｔ（規定食Ｃ＋「そのまま」基準で０．３％のトリプトファン）
規定食Ｌ（規定食Ｃ＋「そのまま」基準で０．３％のロイシン）
規定食Ｏ（飼い主の規定食）
【００４６】
早い学習犬
規定食Ｏ（飼い主の規定食）
規定食Ｄ（規定食Ｔと同じ）
【００４７】
栄養のバランスのとれた規定食は、ペットの栄養に関するウォルサム・センター(Waltham Centre for Pet Nutrition)により供給された。この規定食は、家禽食、トウモロコシ、家禽とチキンの肉、米から製造されたものであり、３７８ｋｃａｌ／１００ｇのエネルギー密度を有した。ペディグリー・アドバンス・レシピ（コントロール・ダイエット）は、以下の成分からなる（おおよその比率）：
蛋白質              ２６．０％
脂肪                １６．０％
灰分                  ７．０％
ロイシン              ２．０％
水分                  ８．０％
炭水化物            ４３．０％
他のアミノ酸        １９．５％
（ほぼ等量で、スレオニン、セリン、グルタミン酸、プロリン、グリシン、シスチン、バリン、メチオニン、イソロイシン、チロシン、フェニルアラニン、ヒスチジン、リシン、アラニン）
【００４８】
遅い学習犬として分類された犬を規定食Ｃ、Ｔ、ＬまたはＯに無作為に割り当てた。
【００４９】
早い学習犬として分類された犬を規定食ＯまたはＤに割り当てた。
【００５０】
犬は、３週間に亘り割り当てられた規定食のままであり、次いで、その学習能力を別の認識タスクにより再評価した。飼い主と研究者の両者は、規定食の内容物が分かっていなかったことに留意されたい。
【００５１】
テストおよび評価
第二の認識テスト（添付資料、テストＢ）に成功した犬についてかかった時間を記録した。
【００５２】
データ分析および発表
認識タスク（テストＢ）の成功は、５連続の正解の認識として定義した。成功する時間は、最初の光を作動させたときに開始とし、犬が正しい箱に入ったときに終わりとして記録し、成功基準に到達するまで累積した。記録は、各犬が行った正しい進入と正しくない進入の両方から構成され、試行の合計数と正しい進入の比率の両方を計算した（比率補正）。割り当てた規定食を給餌した犬におけるテストＡおよび／またはＢの成功の試行の数の統計差を、一元配置分散分析(one-way ANOVA)により評価した。Ｐが０．０５以下のときに、統計的有意性に到達した。
【００５３】
結果
８０匹の犬について、成功するのにかかる時間および挙動データを収集して、研究を終了した。
【００５４】
成功するのにかかる時間
したがって、データに対数変換（図１）を行い、正規分布を示し、ｔテストなどのテストおよび分散分析を使用することが出来、統計分析中にほとんどタイプ２エラーが起こらなかったことを裏付けた。
【００５５】
テストＡの成績が、遅い学習犬のグループと早い学習犬のグループとで著しい差があることを示すために、それらの平均値を比較し（t=9.5ｄｆ＝２．７p<0.001）、成績に差があり、各犬の学習能力の正確な評価が行われたことが示された。
【００５６】
一元配置分散分析テストを用いて、規定食を割り当てる前に、遅い学習犬の４つのグループにおいてグループの差があるか否かを確立した。平均は同じではなかったが、成績の実質的な差は見られなかった（Ｆ(3,61)＝１１．２８、ｐ＝０．２９）。
【００５７】
飼い主の規定食（規定食Ｏ）または規定食Ｔの早い学習犬の２つの群には差がなかったが、両方の群には非常に少ない試料セットしかなかった（それぞれ、３および１２）。
【００５８】
テストＢのデータを見ると、分散分析に関する一元配置分散分析(one-way ANOVA)は、遅い学習犬の４つのグループ間には、テストＢにおける学習能力と学習時間には著しい差があったことを示している（Ｆ(3,61)＝５．９２、ｐ＜０．００１）。ダンカンの多重検定により、この著しいＡＮＯＶＡ結果は、他のテスト用規定食の犬よりも、規定食Ｌの犬のほうが早く学習したことにより説明され、実際に、規定食Ｌが割り当てられた犬はテストＡでわずかに遅いようであったので、そのような改善は、そられの犬が他のどのグループよりも早く学習したことを示していることが確認された。これは、テストＢの箱髭図（図２）に示されている。
【００５９】
テストＢからの結果のｔテストは、規定食Ｌが割り当てられた遅い学習犬の成績が、早い学習犬と同じくらい良好になったことを示した（t=-0.174、ｄｆ＝３１．０、ｐ，０．８５）。早い学習犬のグループと比較した場合、実行が著しく遅い、残りの遅い学習犬のグループのいずれにも、テストＢについての成績には、著しい差は見られなかった。
【００６０】
テストＡの結果を、遅い学習犬のテストＢの一元配置分散分析内の共変量として含めると、そのフラクションは、５．９２３から８．０まで増加し、規定食Ｌの犬は、他のグループよりもテストＡでわずかに遅かったので、テストＢの結果が示すよりは改善されたことを示している。このことが図３に示されており、この図は全てのグループの犬についてテストＡおよびテストＢの両方における成績の平均を示している。
【００６１】
規定食Ｔの遅い学習犬の成績と、規定食Ｄの早い学習犬の成績との間には著しい差があるが（ｔ＝４．４２１、ｄｆ＝２９．５、ｐ＜０．００１）、これらの規定食は同一であった。飼い主の規定食と規定食Ｄの早い学習犬の成績の間には、著しい差は見られなかった（ｔ＝１．２３０、ｄｆ＝３．４、ＮＳ）。これらの結果は、早い学習犬は、天井効果があり、改善できないほど早かったことを示唆している。
【００６２】
挙動変化
挙動変化のデータについてはどれも、統計分析を行わなかった。テスト用規定食のほとんどに、喉の渇きの高まりが見られたが、これは、製造業者によると正常であると考えられた。予測したように、既存の規定食のままのどの犬にも、挙動の変化は見られなかった。
【００６３】
規定食Ｌ−挙動のどの変化も一般にポジティブであった。増加した活動は、飼い主の観点からはポジティブな変化と考えられ、すぐに反応する犬であることを示している。給餌挙動すなわち食欲の差は見られなかった。  
規定食Ｔ−一般に、挙動の変化はほとんどなかったが、すべてはポジティブであった。  
規定食Ｃ−挙動の変化は本当にほとんどなかった。  
規定食Ｄ−挙動に大きな変化は見られなかった。
【００６４】
議論
試行を始める前は、遅い学習犬の４つのグループ間には著しい差は見られなかったが、テストＢを完了したときに、４つのグループ間に成績の著しい差が見られた。
【００６５】
規定食Ｌを割り当てられた遅い学習犬のテストＢの成績は、早い学習犬と同じくらい良好になった。しかしながら、残りの遅い学習犬のグループのいずれにも、テストＢの成績の差は見られず、規定食中の増大したレベルのロイシンは、イヌの学習と挙動に影響を与えるであろうことを示している。
【００６６】
規定食Ｌ（ロイシンを添加）を給餌した犬の学習能力の差は、他の３つのグループよりもこれらの犬が早く学習することにより説明できる。さらに、何人かの飼い主は、規定食Ｌの犬の活動が増加したことを報告しており、これは、飼い主の観点からはポジティブな変化であると見られた。
【００６７】
実施例２
試行の構成
結果に影響を与えることのできた実施例１の変動要素は数多くあった。例えば、犬の気質、犬のトレーナー、または環境要因がそうである。実施例１の研究をさらに別の８０匹の犬について反復することを決定した。各犬のベースラインの学習能力を認識タスク（テストＡ）で決定して、犬を遅い学習犬と早い学習犬の二つのグループに分けることができた。遅い学習犬と早い学習犬に、規定食Ａ、Ｂ、ＣまたはＤを無作為に割り当てた。犬に、２２日間に亘り割り当てられた規定食を給餌し続け、次いで、別の認識タスク（テストＢ）により学習能力を再評価した。各犬による認識タスクをうまく学習する時間、認識の試行の合計数、および正解の反応の比率を記録した。
【００６８】
給餌
４種類のドライタイプの規定食をこの研究に用いた。
【００６９】
規定食Ａ（規定食Ｂ＋「そのまま」基準で０．３％のロイシン）
規定食Ｂ（ペディグリー・アドバンス・レシピ−コントロール・ダイエット）
規定食Ｃ（＋「そのまま」基準で０．３％のトリプトファン）
規定食Ｄ（＋「そのまま」基準で０．３％のイソロイシン）
【００７０】
規定食Ａ、Ｂ、ＣまたはＤが割り当てられたグループのバランス
【表１】
2005521426.tif 000002
【００７１】
各規定食を給餌された雌および雄の数（χ2＝３．１８、ｄ．ｆ．＝３、Ｐ＝０．３７）、または去勢された動物とされていない動物の数（χ2＝１．７２、ｄ．ｆ．＝３、Ｐ＝０．６３）には著しい差はなかった。規定食ＣおよびＤの割り当てられた犬は、規定食ＡおよびＢが割り当てられた犬よりもわずかにかつ有意に年とっていた（Ｐ＞０．０１５）。若い犬は、テストＡ（Ｐ＝０．０１）およびテストＢ（Ｐ＝０．１３）の両方において成功する可能性が高いようであるので、規定食の成功への影響を分析する場合に年齢のこのバランスの欠如を考慮した（以下参照）。
【００７２】
テストおよび評価
実施例１と同様。
【００７３】
テストＡとＢとの関係
より多くの犬が、テストＡ（３４％）よりもテストＢ（７１％）に成功した。何故ならば、おそらく、その犬たちは、二回目の訪問で、実験、環境、および学習すべき一般的関連事（点滅する信号が食品に結びつく）にすでに馴染みがあったからであろう。しかしながら、テストＢの成功とテストＡの成功との間に著しい関連はなかった（χ2＝２．２３、ｄ．ｆ．＝１、Ｐ＝０．１４）。テストＡで成功した５匹の犬が、テストＢの成功率が全体で高いにもかかわらず、テストＢでは成功しなかった。このことは、二つのテストが犬の異なる能力を測定したことを示している。
【００７４】
結果
【表２】
2005521426.tif 000003
【００７５】
ロイシンを含有する規定食（規定食Ａ）を給餌した２０匹の犬の内１９匹がテストＢに成功し、これは、他の３種類の規定食を給餌した犬よりも著しく多かった（Ｐ＝０．０２３）。
【００７６】
規定食ＣおよびＤを給餌した犬の低い成功率は、規定食Ａを給餌した犬よりもわずかに年を取っていることにより説明されるかもしれないが、この説明は、規定食Ａを給餌した犬と年齢が同様な規定食Ｂを給餌した犬には当てはまりそうにない。
【００７７】
年齢の影響は、テストＢの成功へのロジスティック回帰を測定した統計分析を用いて切り捨てた。この分析結果により、規定食Ａは他の３種類の規定食とは著しく異なることが確認された（Ｐ＝０．０３５）・
議論
約２％のレベルのロイシンを通常含有する対照食品に０．３％のロイシンを添加して、イヌの学習において測定できるほどの改善が生じた。イヌの学習における統計学的に有意な改善は、トリプトファンまたはイソロイシンを含有する規定食を給餌した犬には示されなかった。
【００７８】
添付資料
テストＡ
段階１
食品嗜好テストを行って、犬が、利用できる食品ペレットにより十分に意欲を起こすことを裏付けた。飼い主は、両手に異なる型の食品を保持した。犬は、両方の手の臭いを嗅がせられ、次いで、そこから離され、二種類の食品を少し離して地面に配置した。どちらの食品に犬が最初に行くがが、その犬に最も口に合うものと推定した。
【００７９】
段階２
犬を設備に馴染ませ、手で投げ入れられた食品を拾うように箱に入らせた。犬が最初の不安を克服するのに十分な時間をかけた。要した時間は、犬ごとに著しく異なった。
【００８０】
段階３
犬を箱の一つの前に約１ｍ離して配置し、その箱の光を作動させた。光が点滅している間に食品ペレットが落下するのを犬に見させ、それを取りに行くように前に移動させた。３つの箱の各々について、無作為の順番で、これを何回か繰り返した。
【００８１】
段階４
犬の出発地点を徐々に箱から離して移動させ、箱の一つの光を作動させた。トレーナーが光に向かって歩き、犬が箱に入ったときにハッチから放出された食品を取るように、犬に一匹で前進するように促した。犬が一匹で前進するのに十分に確信するまで、トレーナーが移動する距離を減少させた。
【００８２】
段階５
犬を中央に配置し、３つの光の全てが見える位置に、箱から約３ｍ離れて箱に向かせた。箱の一つの光を作動させ、その光景を見る時間を与えた後、犬を放して、その犬の選択する箱に行かせた。犬が点滅する光の箱に入ったときだけに、食品を落とした。
【００８３】
これらの５つの導入段階は、犬の環境への最初の反応に応じて、平均で２０分かかった。短い休憩後、犬を外にちょっと出したときに、計時テストを開始した。
【００８４】
テスト
光を無作為な順序で作動させて、導入の段階５と同じ様式でテストを行った。各犬に、テストを解くために、２０分の作業時間を与えた。犬が、連続して５回、正しい箱に入ったときに成功したと考えた。進入は、頭と肩が箱の内部にあるものとして定義した。計時は、光が作動したときに開始し、犬が正しい箱にうまく入った時間毎に時計を停止した。記録は、各犬が行った成功の進入と不成功の進入の両方から構成された。
【００８５】
テストＢ
テストＢは、テストＡと同様に段階的に導入した。再度、犬がタスクを完了するのにかかった時間の長さに応じて、１時間までに亘り、各犬をテスト区域に置いた。
【００８６】
段階１
食品の嗜好テストを必要なだけ繰り返した。
【００８７】
段階２
犬を各箱の側部を通って連れて行き、食品の落下区域中に食品を前に投げることによりその区域に後方から入るように催促された。
【００８８】
段階３
トレーナーが箱の一つの前に立ち、自身で犬に側方を通り箱に入るように促した。頭が入口通路の端部に達したときに、前方パネルの上からその区域に食品を手で落とした。これを、両方の箱について無作為に繰り返した。
【００８９】
段階４
犬を箱の後から約２．５ｍの中央に配置し、赤の光を作動させた。トレーナーが光に向かって前方に歩いて、犬を一匹で側方の通路に沿って箱の中まで前進するように促し、犬の頭が入口通路の端部に到達したときにハッチから食品ペレットを落とした。
【００９０】
段階５
犬を設備から約３ｍ離して中央に配置した。光を作動させ、犬に設備を見る時間を与えた。次いで、犬を放して、どの箱に近づくかの自身の決定をさせた。正しい箱に入った場合、その区域に食品ペレットを落とした。
【００９１】
これらの５つの導入段階には、犬の環境への最初の反応に応じて、平均で２０分かかった。短い休憩後、犬をちょっとそとに出したときに、計時テストを開始した。
【００９２】
テスト
光を無作為の順序で作動させて、導入の段階５と同じ様式でテストを行った。各犬に、テストを解くために２０分の作業時間を与えた。犬は、連続して５回正しい箱に入った場合に成功したと考えた。進入は、全身が側方通路内にあるものとして定義した。光を作動させたときに計時を開始し、正しいものか否かにかかわらず、犬が箱に入った度毎に時計を止めた。各進入後、正しいか否かにかかわらず、テストを中央の地点から再度開始した。記録は、各犬が行った成功と不成功の進入の両方から構成された。
【図面の簡単な説明】
【００９３】
【図１】Ｙ軸＝秒で表したｌｏｇ10（時間）、Ｘ軸＝規定食コード、規定食コード：１＝規定食Ｏ、２＝規定食Ｌ、３＝規定食Ｔ、４＝規定食Ｃ、５＝規定食Ｄである、対数変換データ（テストＡ）の箱髭図
【図２】Ｙ軸＝秒で表したｌｏｇ10（時間）、Ｘ軸＝図１に示した規定食コードである、対数変換データ（テストＢ）の箱髭図
【図３】テストＡおよびテストＢ両方における成績の平均（対数平均値）を示すグラフ
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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