(57)【要約】本発明は、酵素の助けによるエナンチオマーの混合物の立体区別変換による式Ｉ【化１】2005503783.tif 000010（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、特許請求の範囲に示した意味を有する）の２−置換２−（２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）酢酸誘導体のエナンチマー形の製造方法に関する。
2005503783.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
実質的にエナンチオマー的に純粋な形の式Ｉ
【化１】
2005503783.tif 000008
［式中、
２個のＲ1残基は、同一であって、水素、フッ素、（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、（Ｃ2−Ｃ4）−アルケニル、（Ｃ2−Ｃ4）−アルキニルまたは（Ｃ3−Ｃ4）−シクロアルキル（ここでアルキル、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルは、フッ素、塩素、臭素およびメトキシから成る群から選択される１、２または３個の同一であるかまたは異なる置換基によって置換されていることができる）であるか、または２個のＲ1残基は、一緒になって、テトラメチレン−(ＣＨ2)4−またはペンタメチレン−(ＣＨ2)5−であり；
Ｒ2は、フッ素、塩素、臭素、ニトロ、シアノ、ヒドロキシル、メトキシ、アセチルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ、ベンジルオキシカルボニルアミノ、メチルメルカプト、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプト、（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル、アリール、アリール−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−、ヘテロアリール、ヘテロアリール−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−、（Ｃ2−Ｃ10）−アルケニル、（Ｃ2−Ｃ10）−アルキニル、（Ｃ3−Ｃ7）−シクロアルキルまたは（Ｃ3−Ｃ7）−シクロアルキル−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−（ここでアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルは、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、トリフルオロメチル、メチル、ニトロ、シアノ、アセチルアミノ、９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ、ベンジルオキシカルボニルアミノ、メルカプト、メチルメルカプト、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプト、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシおよびＣＯＯＲ4から成る群から選択される１、２または３個の同一であるかまたは異なる置換基によって置換されていることができる）であり；
Ｒ3は、水素、（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル、アリール−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−、（Ｃ2−Ｃ10）−アルケニル、（Ｃ3−Ｃ10）−アルキニル、（Ｃ3−Ｃ7）−シクロアルキルまたは（Ｃ3−Ｃ7）−シクロアルキル−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−（ここでアルキル、アリール、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルは、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、トリフルオロメチル、メチル、シアノ、ニトロ、アセチルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ、ベンジルオキシカルボニルアミノ、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシおよびＣＯＯＲ5から成る群から選択される１、２または３個の同一であるかまたは異なる置換基によって置換されていることができる）であり；
Ｒ4およびＲ5は、同一であるかまたは異なっていることができて、水素、（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、（Ｃ2−Ｃ4）−アルケニルまたはアリール−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−である］
の化合物またはその塩の製造方法であって、上記式中、Ｒ3が水素以外の意味を有する化合物のエナンチマー形の混合物をエステラーゼの助けによる酵素的加水分解に供し、次いで変換化合物と未変換化合物とを相互に分離することを含む、上記の製造方法。
【請求項２】
式Ｉ中の２個のＲ1残基が同一であって、水素、メチル、エチル、プロピルまたはトリフルオロメチルであるか、または両方のＲ1残基が一緒になってテトラメチレンまたはペンタメチレンである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
式Ｉ中のＲ2が（Ｃ1−Ｃ6）−アルキル、フェニル、フェニル−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル−、（Ｃ3−Ｃ6）−シクロアルキルまたは（Ｃ3−Ｃ6）−シクロアルキル−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル−（ここでアルキル、シクロアルキルおよびフェニルは、請求項１に記載したように置換されていることができる）である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
式Ｉ中の２個のＲ1残基が同一であって、水素、メチルまたはトリフルオロメチルであるか、または２個のＲ1残基が一緒になってテトラメチレン−(ＣＨ2)4−またはペンタメチレン−(ＣＨ2)5−であり；
Ｒ2が（Ｃ1−Ｃ6）−アルキルまたは（Ｃ3−Ｃ6）−シクロアルキル−（Ｃ1−Ｃ2）−アルキル−であり；
Ｒ3が水素または（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
使用する酵素が哺乳類肝臓エステラーゼまたは哺乳類肝臓アセトン粉末である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
反応を水と１種またはそれ以上の有機溶媒との混合物中で実施する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
反応をｐＨ範囲５ないし９で実施する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
式Ｉｅ
【化２】
2005503783.tif 000009
［式中、
２個のＲ1残基は、同一であって、水素、フッ素、（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、（Ｃ2−Ｃ4）−アルケニル、（Ｃ2−Ｃ4）−アルキニルまたは（Ｃ3−Ｃ4）−シクロアルキル（ここでアルキル、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルは、フッ素、塩素、臭素およびメトキシから成る群から選択される１、２または３個の同一であるかまたは異なる置換基によって置換されていることができる）であるか、または２個のＲ1残基は、一緒になって、テトラメチレン−(ＣＨ2)4−またはペンタメチレン−(ＣＨ2)5−であり；
Ｒ2は、フッ素、塩素、臭素、ニトロ、シアノ、ヒドロキシル、メトキシ、アセチルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ、ベンジルオキシカルボニルアミノ、メチルメルカプト、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプト、（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル、アリール、アリール−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−、ヘテロアリール、ヘテロアリール−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−、（Ｃ2−Ｃ10）−アルケニル、（Ｃ2−Ｃ10）−アルキニル、（Ｃ3−Ｃ7）−シクロアルキルまたは（Ｃ3−Ｃ7）−シクロアルキル−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−（ここでアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルは、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、トリフルオロメチル、メチル、ニトロ、シアノ、アセチルアミノ、９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ、ベンジルオキシカルボニルアミノ、メルカプト、メチルメルカプト、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプト、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシおよびＣＯＯＲ4から成る群から選択される１、２または３個の同一であるかまたは異なる置換基によって置換されていることができる）であり；
Ｒ3は、（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル、アリール−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−、（Ｃ2−Ｃ10）−アルケニル、（Ｃ3−Ｃ10）−アルキニル、（Ｃ3−Ｃ7）−シクロアルキルまたは（Ｃ3−Ｃ7）−シクロアルキル−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−（ここでアルキル、アリール、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルは、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、トリフルオロメチル、メチル、シアノ、ニトロ、アセチルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ、ベンジルオキシカルボニルアミノ、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシおよびＣＯＯＲ5から成る群から選択される１、２または３個の同一であるかまたは異なる置換基によって置換されていることができる）であり；
Ｒ4およびＲ5は、同一であるかまたは異なっていることができて、水素、（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、（Ｃ2−Ｃ4）−アルケニルまたはアリール−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−である］
の化合物またはその塩の速度論的光学分割法であって、式Ｉｅの化合物のエナンチマー形の混合物をエステラーゼの助けによる酵素的加水分解に供し、次いで変換化合物と未変換化合物とを相互に分離することを含む、上記の分割法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、酵素を用いるエナンチオマーの混合物の立体区別変換による式Ｉ
【化１】
2005503783.tif 000003
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、下記の意味を有する）の２−置換２−（２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）酢酸誘導体のエナンチマー形の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
酢酸単位の２−位に２−（２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）残基およびさらに別の置換基Ｒ2を有する式Ｉのキラル酢酸誘導体は、例えばＥＰ−Ａ−９１８０５９および、ＵＳ−Ｂ−６３３１５５２を包含するその対応物に、またはＷＯ−Ａ−９９／６００１５またはＷＯ−Ａ−００／６９８３１に記載されたとおりの一連の効力ある活性医薬成分のための鍵となる基礎単位または前駆体である。これらの文書に記載された活性成分は、白血球の接着および遊走の阻害剤および／またはインテグリン接着受容体ＶＬＡ−４のアンタゴニストであり、そして例えば、炎症性障害、例えば慢性関節リウマチの、アレルギー性障害の、または喘息もしくはアテローム性動脈硬化症の、治療および予防のために適している。２−置換２−（２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）酢酸単位の２−位のキラル炭素原子での立体化学的均一形で存在する活性医薬成分を製造するためには、立体化学的に均一な基礎単位を、出発物質（このものは、最初に立体化学的に均一な出発物質から複雑な方法で合成されなくてはならないであろう）として使用するか、または立体異性化合物の混合物を面倒な方法で、例えばクロマトグラフィーによって、分離しなくてはならない。特に工業規模でのこの型の活性医薬成分の製造のためには、そのため、十分なエナンチオマー純度（光学純度）の式Ｉの化合物のエナンチマー形への簡単で原価効率のよい経路が必要とされている。例えばラセミ体の２−置換２−アミノ酢酸誘導体からヒダントイン環の形成によるかまたはラセミ体の２−置換２−ハロ酢酸誘導体を用いるヒダントインのアルキル化によって、簡単に得ることができる式Ｉのラセミ化合物の光学分割またはエナンチオマー分離は、これまでのところ知られていない。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
驚くべきことに、Ｒ3が水素以外の意味を有する化合物の立体選択的加水分解による式Ｉの化合物の酵素的光学分割は、多くの酵素を用いても有効には成功しないけれども、それにもかかわらず式Ｉのエナンチオマー化合物の混合物から純粋な形で個々のエナンチオマー形を提供する特定の酵素群があることが見出された。不適当であることがわかった酵素の中には、例えばリパーゼ、実際には微生物由来のリパーゼおよびカンジダ属の種（Ｃａｎｄｉｄａ  ｓｐｅｃ．）またはシュードモナス属の種（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐｅｃ．）からのリパーゼのみならずまたウシまたはブタ膵臓からのリパーゼもある。全くそのとおりに、ズブチリシンまたはプロナーゼのようなプロテアーゼおよびペプチダーゼは、式Ｉの化合物の酵素的光学分割のために不適当であることがわかった。驚くべきことに、十分な変換および良好な立体選択性は、哺乳類肝臓エステラーゼまたは哺乳類肝臓アセトン粉末のようなエステラーゼを使用してのみ観察され、この哺乳類肝臓エステラーゼまたは哺乳類肝臓アセトン粉末は、式Ｉの化合物のエナンチオマー混合物を簡単にそして有効にその光学的に純粋なエナンチオマー形に分離することを可能にする。
【０００４】
そのため本発明は、Ｒ3が水素以外の意味を有する式Ｉの化合物のエナンチマー形の混合物をエステラーゼの助けによる酵素的加水分解に供すことおよび変換化合物と未変換化合物とを相互に分離することを含む、実質的にエナンチオマー的に純粋な形の式Ｉ
【化２】
2005503783.tif 000004
［式中、
２個のＲ1残基は、同一であって、水素、フッ素、（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、（Ｃ2−Ｃ4）−アルケニル、（Ｃ2−Ｃ4）−アルキニルまたは（Ｃ3−Ｃ4）−シクロアルキル（ここでアルキル、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルは、フッ素、塩素、臭素およびメトキシから成る群から選択される１、２または３個の同一であるかまたは異なる置換基によって置換されていることができる）であるか、または２個のＲ1残基は、一緒になって、テトラメチレン−(ＣＨ2)4−またはペンタメチレン−(ＣＨ2)5−であり；
Ｒ2は、フッ素、塩素、臭素、ニトロ、シアノ、ヒドロキシル、メトキシ、アセチルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ、ベンジルオキシカルボニルアミノ、メチルメルカプト、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプト、（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル、アリール、アリール−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−、ヘテロアリール、ヘテロアリール−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−、（Ｃ2−Ｃ10）−アルケニル、（Ｃ2−Ｃ10）−アルキニル、（Ｃ3−Ｃ7）−シクロアルキルまたは（Ｃ3−Ｃ7）−シクロアルキル−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−（ここでアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルは、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、トリフルオロメチル、メチル、ニトロ、シアノ、アセチルアミノ、９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ、ベンジルオキシカルボニルアミノ、メルカプト、メチルメルカプト、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプト、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシおよびＣＯＯ  Ｒ4から成る群から選択される１、２または３個の同一であるかまたは異なる置換基によって置換されていることができる）であり；
Ｒ3は、水素、（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル、アリール−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−、（Ｃ2−Ｃ10）−アルケニル、（Ｃ3−Ｃ10）−アルキニル、（Ｃ3−Ｃ7）−シクロアルキルまたは（Ｃ3−Ｃ7）−シクロアルキル−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−（ここでアルキル、アリール、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルは、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、トリフルオロメチル、メチル、シアノ、ニトロ、アセチルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ、ベンジルオキシカルボニルアミノ、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシおよびＣＯＯＲ5から成る群から選択される１、２または３個の同一であるかまたは異なる置換基によって置換されていることができる）であり；
Ｒ4およびＲ5は、同一であるかまたは異なっていることができて、水素、（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、（Ｃ2−Ｃ4）−アルケニルまたはアリール−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−である］
の化合物またはその塩の製造方法を提供する。本発明の方法を実施した後に式Ｉの化合物が実質的にエナンチオマー的に純粋な形で存在する立体中心は、式Ｉ中に星印＊によって示される。
【０００５】
式Ｉの化合物中のアルキル、アルケニルおよびアルキニル残基は、直鎖または分枝鎖であることができる。これはまた、それらが置換されているかまたは他の残基の置換基として出てくるときにも適用される。アルキル残基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシル、イソプロピル、イソブチル、イソペンチル、イソヘキシル、３−メチルペンチル、ネオペンチル、ネオヘキシル、２,３,５−トリメチルヘキシル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｔｅｒｔ−ペンチルがある。好ましいアルキル残基は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルである。本発明の一態様においては、式Ｉの化合物中のアルキル残基または一般に残基Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、キラル中心を有しておらず、その結果この態様においては残基Ｒ2が結合しているキラル炭素原子が式Ｉの化合物における唯一のキラル中心である。置換されたアルキル残基の例としては、ヒドロキシメチル、２−ヒドロキシエチル、３−ヒドロキシプロピル、４−ヒドロキシブチル、６−ヒドロキシヘキシル、ブロモメチル、３−ブロモプロピル、クロロメチル、トリクロロメチル、トリフルオロメチル、２,２,２−トリフルオロエチル、メトキシメチル、２−メトキシエチル、３−メトキシプロピル、シアノメチル、２−シアノエチル、メチルメルカプトメチル、２−メチルメルカプトエチル、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプトメチル、２−アセチルアミノエチル、３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル、３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピル、ヒドロキシカルボニルメチル、２−ヒドロキシカルボニルエチル、２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルエチルがある。
【０００６】
アルケニルおよびアルキニル残基は、好ましくは、いずれかの位置に在ることができる二重結合または三重結合を含有する。アルケニルおよびアルキニル残基の例は、ビニル、１−プロペニル、２−プロペニル（＝アリル）、２−ブテニル、３−ブテニル、２−メチル−１−プロペニル、２−メチル−２−プロペニル、３−メチル−２−ブテニル、２−ヘキセニル、５−ヘキセニル、２−デセニル、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル（＝プロパルギル）、２−ブチニル、３−ブチニル、２−ヘキシニル、４−ヘキシニルまたは５−ヘキシニルである。
【０００７】
シクロアルキル残基の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルである。好ましいシクロアルキル残基は、一方ではシクロプロピルであり、そして他方ではシクロペンチルおよびシクロヘキシルである。置換されたシクロアルキル残基の例は、３,４−ジメチルシクロペンチル、４−メチルシクロヘキシル、３,３−ジメチルシクロヘキシル、４,４−ジメチルシクロヘキシル、４−ｔｅｒｔ−ブチルシクロヘキシル、４−ヒドロキシシクロヘキシルである。シクロアルキル−アルキル残基の例は、シクロプロピルメチル、２−シクロプロピルエチル、３−シクロプロピルプロピル、シクロブチルメチル、シクロペンチルメチル、２−シクロペンチルエチル、シクロヘキシルメチル、２−シクロヘキシルエチル、３−シクロヘキシルプロピル、シクロヘプチルメチルであり、これらは、シクロアルキル部分および／またはアルキル部分において前記のように置換されていることができる。
【０００８】
アリール残基の例としては、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、２−ビフェニリル、３−ビフェニリル、４−ビフェニリルまたはフルオレニルがある。好ましいアリール基は、フェニルである。アリールアルキル残基の例としては、ベンジル、１−フェニルエチル、２−フェニルエチル、３−フェニルプロピル、４−フェニルブチル、２−、３−および４−ビフェニリルメチル、（１−ナフチル）メチル、（２−ナフチル）メチル、２−（１−ナフチル）エチル、２−（２−ナフチル）エチル、９−フルオレニルメチルがあり、これらは、アリール部分および／またはアルキル部分において前記のように置換されていることができる。
【０００９】
ヘテロアリールは、好ましくは、窒素、酸素および硫黄から成る群から選択される１、２または３または４個、好ましくは１または２個、の同一であるかまたは異なる環ヘテロ原子を含有し、そしていずれかの適当な環原子を通して結合していることができる、単環式または二環式芳香環系の残基である。ヘテロアリール残基の例としては、ピロリル、フラニル、例えば２−フラニルおよび３−フラニル、チエニル、例えば２−チエニルおよび３−チエニル、イミダゾリル、例えば２−イミダゾリルおよび４−イミダゾリル、ピラゾリル、１,３−オキサゾリル、１,２−オキサゾリル、１,３−チアゾール、例えば１,３−チアゾール−２−イルおよび１,３−チアゾール−４−イル、１,２−チアゾリル、テトラゾリル、ピリジル、例えば２−ピリジル、３−ピリジルおよび４−ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、インドリル、例えば２−インドリル、３−インドリルおよび５−インドリル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、キノリニル、イソキノリニル、キノキサリニル、キナゾリニルがある。ヘテロアリールアルキル残基の例は、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、４−ピリジルメチル、２−（２−ピリジル）エチル、２−（３−ピリジル）エチル、２−（４−ピリジル）エチル、２−フリルメチル、３−フリルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチル、４−イミダゾリルメチル、３−インドリルメチル、２−（３−インドリル）エチルであり、これらは、ヘテロアリール部分および／またはアルキル部分において前記のように置換されていることができる。
【００１０】
置換されたアルキル残基、アルケニル残基、アルキニル残基、シクロアルキル残基、アリール残基およびヘテロアリール残基は、得られる分子が十分に安定であり、そして意図された使用のための適当な性質を有するという条件で、いずれかの位置において置換されていることができる。モノ置換されたフェニル残基においては、置換基は、２−位、３−位または４−位に在ることができる。ジ置換されたフェニルは、２,３−置換、２,４−置換、２,５−置換、２,６−置換、３,４−置換または３,５−置換されていることができる。トリ置換されたフェニル残基は、２,３,４−置換、２,３,５−置換、２,４,５−置換、２,４,６−置換、２,３,６−置換または３,４,５−置換されていることができる。モノ置換された１−ナフチル残基は、２−、３−、４−、５−、６−、７−または８−位において置換されていることができ、モノ置換された２−ナフチル残基は、１−、３−、４−、５−、６−、７−または８−位において置換されていることができる。
【００１１】
式Ｉの化合物の塩の例としては、１個もしくはそれ以上のヒドロキシカルボニル基を含有する化合物のアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩またはアンモニウム塩、例えばリチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、またはカルシウム塩、あるいは未置換アンモニウムイオンまたは１、２、３もしくは４個の同一であるかもしくは異なる有機残基を伴うアンモニウムイオン、例えばメチル−、ジメチル−、トリエチル−、トリス（２−ヒドロキシエチル）−または１,１,１−トリス（ヒドロキシメチル）メチル−アンモニウムイオン、を含有する塩、がある。式Ｉの化合物の塩中には、２個またはそれ以上の異なるカチオンも存在することができる。さらに別の包含される塩は、塩基性基、例えば窒素複素環、を含有する式Ｉの化合物の無機酸または有機カルボン酸またはスルホン酸、例えば塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、酒石酸またはメタンスルホン酸、との酸付加塩である。酸性基と塩基性基との両方を含む式Ｉの化合物はまた、分子内塩（ｉｎｔｅｒｎａｌ  ｓａｌｔ）、双性イオンまたはベタインの形で存在することもできる。
【００１２】
２個のＲ1残基が一緒になってテトラメチレンまたはペンタメチレンであるときは、式ＩａまたはＩｂのスピロ化合物がある。
【化３】
2005503783.tif 000005
【００１３】
Ｒ1残基が一緒になってポリメチレン鎖ではないとき、同一である２個のＲ1残基は、好ましくは水素、メチル、エチル、プロピルまたはトリフルオロメチル、より好ましくは水素、メチルまたはトリフルオロメチル、最も好ましくはメチルまたはトリフルオロメチル、特にメチル、である。
【００１４】
Ｒ2は、好ましくは（Ｃ1−Ｃ6）−アルキル、フェニル、ベンジルのようなフェニル−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル−、（Ｃ3−Ｃ6）−シクロアルキルまたは（Ｃ3−Ｃ6）−シクロアルキル−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル−（ここでアルキル、シクロアルキルおよびフェニルは、前記のように置換されていることができる）である。Ｒ2は、より好ましくは（Ｃ1−Ｃ6）−アルキルまたは（Ｃ3−Ｃ6）−シクロアルキル−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル−、最も好ましくは（Ｃ1−Ｃ6）−アルキルまたは（Ｃ3−Ｃ6）−シクロアルキル−（Ｃ1−Ｃ2）−アルキル−、特に好ましくは（Ｃ1−Ｃ6）−アルキルまたはシクロプロピル−（Ｃ1−Ｃ2）−アルキル−、そしてさらに好ましくはイソブチル（(ＣＨ3)2ＣＨ−ＣＨ2−）またはシクロプロピルメチル（シクロプロピル−ＣＨ2−）である。
【００１５】
酵素的光学分割に使用され、Ｒ3が水素ではない式Ｉの化合物においては、Ｒ3は、好ましくは、前記のように置換されていることができる（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル、より好ましくは（Ｃ1−Ｃ6）−アルキル、最も好ましくは（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、特に好ましくはメチルまたはエチル、である。酵素的光学分割を実施するとき得られる式Ｉの化合物においては、Ｒ3は、付加的に、これらの好ましい態様の各々において水素であることができる、すなわち基ＣＯＯＲ3がカルボン酸基ＣＯＯＨである式Ｉの化合物またはその塩もまた包含される。
【００１６】
本発明の一態様においては、残基Ｒ4およびＲ5は、水素または（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルである。本発明のもう一つの態様においては、酵素的光学分割に使用され、Ｒ3が水素以外の意味を有する式Ｉの化合物において、Ｒ4およびＲ5残基は、水素である。Ｒ2またはＲ3を表しているアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール残基が置換されているとき、本発明のさらに別の態様において、この残基は、ＣＯＯＲ4またはＣＯＯＲ5置換基を全く有していない。所望ならば、特定の式Ｉの化合物を製造する際に、Ｒ4およびＲ5の意味を、基ＣＯＯＲ4および／またはＣＯＯＲ5の反応性が基ＣＯＯＲ3の反応性とは異なるように選択することができる。その後本発明の光学分割を実施した後に、基ＣＯＯＲ4および／またはＣＯＯＲ5を変更することができる。
【００１７】
好ましい態様においては、本発明は、Ｒ3が水素以外の意味を有する式Ｉの化合物のエナンチマー形の混合物をエステラーゼの助けによる酵素的加水分解に供すことおよび変換化合物と未変換化合物とを相互に分離することを含む、実質的にエナンチオマー的に純粋な形の式Ｉ
［式中、
２個のＲ1残基は、同一であって、水素、メチルまたはトリフルオロメチルであるか、
または２個のＲ1残基は、一緒になって、テトラメチレン−(ＣＨ2)4−またはペンタメチレン−(ＣＨ2)5−であり、そして好ましくは２個のＲ1残基は、ともにメチルまたはトリフルオロメチルであり；
Ｒ2は、（Ｃ1−Ｃ6）−アルキルまたは（Ｃ3−Ｃ6）−シクロアルキル−（Ｃ1−Ｃ2）−アルキル−であり、そして好ましくはイソブチルまたはシクロプロピルメチルであり、；
Ｒ3は、水素または（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであり、そして好ましくは水素、メチルまたはエチルである］
の化合物またはその塩の製造方法に関する。
【００１８】
下記の化合物は、例えば相当するメチルまたはエチルエステルの形でエナンチオマーの混合物として酵素的光学分割に使用することができ、そして実質的にエナンチオマー的に純粋な形の特定の酸形または相当する未反応エステル形で得ることができる式Ｉの化合物の例である：
（Ｒ）−２−（２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸
（Ｓ）−２−（２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸
（Ｒ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸
（Ｓ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸
（Ｒ）−２−［４,４−ビス（トリフルオロメチル）−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル］−４−メチルペンタン酸
（Ｓ）−２−［４,４−ビス（トリフルオロメチル）−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル］−４−メチルペンタン酸
（Ｒ）−２−（４,４−テトラメチレン−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸
（Ｓ）−２−（４,４−テトラメチレン−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸
（Ｒ）−２−（４,４−ペンタメチレン−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸
（Ｓ）−２−（４,４−ペンタメチレン−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸
（Ｒ）−２−（２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−シクロプロピルプロピオン酸
（Ｓ）−２−（２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−シクロプロピルプロピオン酸
（Ｒ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−シクロプロピルプロピオン酸
（Ｓ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−シクロプロピルプロピオン酸
（Ｒ）−２−［４,４−ビス（トリフルオロメチル）−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル］−３−シクロプロピルプロピオン酸
（Ｓ）−２−［４,４−ビス（トリフルオロメチル）−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル］−３−シクロプロピルプロピオン酸
（Ｒ）−２−（４,４−テトラメチレン−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−シクロプロピルプロピオン酸
（Ｓ）−２−（４,４−テトラメチレン−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−シクロプロピルプロピオン酸
（Ｒ）−２−（４,４−ペンタメチレン−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−シクロプロピルプロピオン酸
（Ｓ）−２−（４,４−ペンタメチレン−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−シクロプロピルプロピオン酸
（Ｒ）−２−（２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−フェニルプロピオン酸
（Ｓ）−２−（２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−フェニルプロピオン酸
（Ｒ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−フェニルプロピオン酸
（Ｓ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−フェニルプロピオン酸
（Ｒ）−２−［４,４−ビス（トリフルオロメチル）−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル］−３−フェニルプロピオン酸
（Ｓ）−２−［４,４−ビス（トリフルオロメチル）−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル］−３−フェニルプロピオン酸
（Ｒ）−２−（４,４−テトラメチレン−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−フェニルプロピオン酸
（Ｓ）−２−（４,４−テトラメチレン−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−フェニルプロピオン酸
（Ｒ）−２−（４,４−ペンタメチレン−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−フェニルプロピオン酸
（Ｓ）−２−（４,４−ペンタメチレン−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−フェニルプロピオン酸
【００１９】
本発明の光学分割を実施することによって得られる式Ｉの化合物のエナンチマー形、すなわちＲ形およびＳ形は、式ＩｃおよびＩｄ
【化４】
2005503783.tif 000006
（ここで式に対する立体化学表示ＲおよびＳの指定は、Ｒ2残基に依る）によって表すことができる。
【００２０】
本発明の方法のためのラセミ体出発化合物、すなわちＲ3が水素以外の意味を有する式Ｉの化合物、の製造は、例えば、ＥＰ−Ａ−９１８０５９および、ＵＳ−Ｂ−６３３１５５２を包含するその対応物、またはＸ．Ｘｉａｏ外、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９７、６２、６９６８およびその中に列挙された文献中の方法に従ってラセミ体の２−置換ハロ酢酸誘導体またはアミノ酸誘導体またはジペプチドから出発して行うことができる。しかしながら、ラセミ混合物の他に、全くの非−ラセミ混合物、すなわち１：１以外の比率で２種のエナンチオマー形を含有する混合物も本発明の方法に使用することができる。本発明の文脈においては、この種の出発混合物も常に、例えばラセミ混合物の酵素的分割が論議される場合さらに包含される。
【００２１】
立体選択的加水分解による酵素的光学分割のための本発明の方法は、酵素反応の当業者にはよく知られた通例法によって実施することができる。均一系または不均一系を使用することができる。有用な溶媒または希釈剤としては、水、有機溶媒、２種もしくはそれ以上の有機溶媒の混合物、または水と１種もしくはそれ以上の有機溶媒との混合物がある。しかしながら、反応の性質のゆえに、カルボン酸を得るためのエステルの所望の加水分解のために必要とされるものと少なくとも同量の水が、いずれかの有機溶媒に加えて反応混合物中に存在しなくてはならない。適当な有機溶媒の例としては、アルコール、例えばメタノール、エタノール、イソプロパノールまたはｔｅｒｔ−ブタノールのような（Ｃ1−Ｃ4）−アルカノール、エーテル、例えばジイソプロピルエーテルまたはｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルのようなジアルキルエーテル、エチレングリコールエーテルおよび１,２−ジメトキシエタンのようなジエチレングリコールエーテルまたはテトラヒドロフランもしくはジオキサンのような環状エーテル、ケトン、例えばアセトンまたはブタノンのような（Ｃ3−Ｃ6）−アルカノン、ジメチルホルムアミドまたはＮ−メチルピロリドンのようなアミド、あるいはヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサンまたはトルエンのような飽和または芳香族炭化水素がある。本発明の光学分割は、有利には水、または水と１種もしくはそれ以上の有機溶媒との混合物、中で、より有利には水と１または２種の有機補助溶媒との混合物中で、実施される。水と有機溶媒との混合物中の有機溶媒の含量は、好ましくは約５ないし約８０容量％、特に約５ないし約３０容量％、例えば約１０ないし約２０容量％（使用する溶媒の体積から決定される容量パーセント）、である。溶媒または溶媒混合物の量は、一般に、反応混合物が約１ないし約５０重量％の式Ｉの出発化合物、好ましくは約５ないし約２０重量％、を含むように選択される。
【００２２】
使用する酵素および使用する式Ｉの化合物に依って、本発明の方法を特定のｐＨ範囲で、例えば約５ないし約９の範囲、特に約６ないし約８の範囲、のｐＨで、例えばｐＨ約７で、実施することが有利であることができる。このｐＨ範囲を保持するために、適当な緩衝剤を反応媒質に加えることができるか、または他の処置を講ずることができる。有用な緩衝剤の例としては、リン酸緩衝液またはトリス（Ｔｒｉｓ）緩衝剤［＝１,１,１−トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン］緩衝剤がある。緩衝剤は、例えばほぼ０.０１モルないしほぼ１モル水溶液とし使用することができて、この水溶液は、場合により有機溶媒の添加後に、反応媒質として役立つこともできる。
【００２３】
本発明の方法は、好ましくは温度約１０℃ないし約８０℃、好ましくは約１５℃ないし約６０℃、例えば約１５℃ないし約４０℃、で反応混合物を撹拌しながら実施される。
【００２４】
式Ｉの化合物の光学分割のために有用な酵素としては、特にエステラーゼがあり、そして式Ｉの化合物中の反応基がカルボン酸エステル基であるので、特にカルボン酸エステラーゼまたはカルボキシルエステラーゼであるが、しかしながらここで上記のとおり、リパーゼは、あまり適当でない。好ましいエステラーゼは、哺乳類肝臓からのもの、例えばブタ肝臓エステラーゼ（ＰＬＥ；Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．またはＲｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）［これはまた、キラザイム（Ｃｈｉｒａｚｙｍｅ）Ｅ−１およびキラザイム（Ｃｈｉｒａｚｙｍｅ）Ｅ−２（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）のようなイソ酵素画分（ｆｒａｃｔｉｏｎ）の形で使用することもできる］、またはウサギ肝臓エステラーゼ（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．）である。酵素はまた、混合物の形でまたは通例の哺乳類肝臓アセトン粉末、例えばウマ、仔ウシ、ラットまたはウサギからの肝臓アセトン粉末（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．）、の形で使用することもできる。酵素は、遊離形、例えば市販の固体、溶液または懸濁液として、または固定化形（Ｗ．Ｈａｒｔｍｅｉｅｒ、Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ  Ｂｉｏｃａｔａｌｙｓｔｓ、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ  Ｂｅｒｌｉｎ、１９８８参照）で使用することができる。酵素量は、使用する酵素の型および活性、使用する式Ｉの化合物、反応条件、所望の変換度および所望の反応時間に依存し、そして自由に選択することができるか、または所望ならば簡単な予備実験によって容易に決定することができる。適当なパラメーターの選択によって、例えば約１日という反応時間を設定することができる。
【００２５】
反応が所望の程度まで進行したとき、未変換エステル、すなわちＲ3が水素以外の意味を有する式Ｉの化合物の残留部分、および形成された酸、すなわちＲ3が水素である式Ｉの化合物、すなわち式Ｉの化合物の２つのエナンチオマー形は、相互に分離される。このためには、反応混合物を標準法によって、例えば抽出またはクロマトグラフィー法によって、処理することができる。例えば、未反応エステルは、反応溶液を水と、酢酸エチル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルまたはジクロロメタンのような水と非混和性の有機溶媒との間に分配させ、そして有機相を乾燥させ、濃縮することによって単離することができる。得られる酸は、その後、得られた水性相を酸性化して、例えば酢酸エチルまたはジクロロメタンで抽出し、そして有機相を乾燥させ、濃縮することによって単離することができる。適宜、得られた生成物を通例法によってさらに精製することができる。必要ならば、反応混合物を、この処理前に部分濃縮することができ、そして／または特定のｐＨ、例えばエステルの抽出のための塩基性範囲のｐＨ、を設定することができる。生成物はまた、塩の形で単離することもできる。酵素の回収は、凍結乾燥によって行うことができる。酵素の除去および後のバッチでのその再使用は、固定化によってより容易にすることができる。
【００２６】
反応を適当に実施することによって、エナンチオマー的に純粋な（光学的に純粋な）形または実質的にエナンチオマー的に純粋な（実質的に光学的に純粋な）形の式Ｉの化合物の２つのエナンチオマー形の少なくとも１つを得ることが、常に可能である。所望のエナンチオマー的に純粋な形が式Ｉ中のＲ3が水素であるカルボン酸として生じるとき、酵素によるエステル開裂は、便宜上、ラセミ形で使用するエステルの５０％未満または最大で５０％が変換されたとき終了させられる。所望のエナンチオマー的に純粋な形が式Ｉ中のＲ3が水素以外の意味を有するエステルとして生じるとき、酵素によるエステル開裂は、便宜上、ラセミ形で使用するエステルの少なくとも５０％または５０％より多くが変換されるまで終了させられない。酵素反応の変換の決定は、例えば２種の反応生成物、一方の配置で生じる酸および反対の配置で生じるエステル、の光学純度の決定と同時に、光学活性固定相を使用する高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって行うことができる。得られる生成物のエナンチオマー純度（光学純度）は、例えば、通例のｅｅ値（鏡像異性体過剰率）によって示すことができ、このｅｅ値は、両方のエナンチオマーの量の合計に対する両方のエナンチオマーの量の差の比率である。本発明の方法によって少なくとも約９０％、より好ましくは少なくとも約９５％、最も好ましくは少なくとも約９８％、の鏡像異性体過剰率ｅｅを有する実質的にエナンチオマー的に純粋な形（実質的に光学的に純粋な形）の式Ｉの化合物の少なくとも１つのエナンチオマー形を製造することが好ましい。少なくとも約９８％の鏡像異性体過剰率ｅｅを有する生成物は、エナンチオマー的に純粋（光学的に純粋）であると考えられる。
【００２７】
本発明の方法からの得られる酸または望ましくない配置を有する残留エステルは、所望ならば公知方法によって再エステル化して、ラセミ化することができ、そしてその後酵素的光学分割に再使用することができて、その結果所望のエナンチオマーの収率を、５０％を超えるまで増大させることができる。例えば、非ラセミ体の酸は、塩基性条件下でのエステルへの変換によって、例えば式Ｒ3ＯＮａのナトリウムアルコキシドの存在において式Ｒ3ＯＨのアルコールとともに温めることによって、ラセミ混合物に変換し、そして光学分割に再使用することができる。
【００２８】
本発明の光学分割からの所望のエナンチオマーがカルボン酸として生じるが、活性成分の合成における次の工程のためにエステルが必要とされているときは、この酸をラセミ化または反転なしに公知のエステル化法によってエステルに変換することができる（例えばＥ．Ｈａｓｌａｍ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９８０、３６、２４０９参照）。したがって、本発明の光学分割からの所望のエナンチオマーがエステルとして生じるが、活性成分の合成における次の工程のためにカルボン酸または他のカルボン酸誘導体が必要とされているときは、このエステルをラセミ化または反転なしに公知方法によってカルボン酸またはカルボン酸誘導体に変換することができる（例えばＣ．Ｊ．Ｓａｌｏｍｏｎ外、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９９３、４９、３６９１参照）。
【００２９】
本発明はまた、式Ｉｅの化合物のエナンチマー形の混合物をエステラーゼの助けによる酵素的加水分解に供すことおよび変換化合物と未変換化合物とを相互に分離することを含む、式Ｉｅ
【化５】
2005503783.tif 000007
［式中、
２個のＲ1残基は、同一であって、水素、フッ素、（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、（Ｃ2−Ｃ4）−アルケニル、（Ｃ2−Ｃ4）−アルキニルまたは（Ｃ3−Ｃ4）−シクロアルキル（ここでアルキル、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルは、フッ素、塩素、臭素およびメトキシから成る群から選択される１、２または３個の同一であるかまたは異なる置換基によって置換されていることができる）であるか、または２個のＲ1残基は、一緒になって、テトラメチレン−(ＣＨ2)4−またはペンタメチレン−(ＣＨ2)5−であり；
Ｒ2は、フッ素、塩素、臭素、ニトロ、シアノ、ヒドロキシル、メトキシ、アセチルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ、ベンジルオキシカルボニルアミノ、メチルメルカプト、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプト、（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル、アリール、アリール−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−、ヘテロアリール、ヘテロアリール−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−、（Ｃ2−Ｃ10）−アルケニル、（Ｃ2−Ｃ10）−アルキニル、（Ｃ3−Ｃ7）−シクロアルキルまたは（Ｃ3−Ｃ7）−シクロアルキル−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−（ここでアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルは、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、トリフルオロメチル、メチル、ニトロ、シアノ、アセチルアミノ、９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ、ベンジルオキシカルボニルアミノ、メルカプト、メチルメルカプト、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプト、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシおよびＣＯＯＲ4から成る群から選択される１、２または３個の同一であるかまたは異なる置換基によって置換されていることができる）であり；
Ｒ3は、（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル、アリール−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−、（Ｃ2−Ｃ10）−アルケニル、（Ｃ3−Ｃ10）−アルキニル、（Ｃ3−Ｃ7）−シクロアルキルまたは（Ｃ3−Ｃ7）−シクロアルキル−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−（ここでアルキル、アリール、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルは、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、トリフルオロメチル、メチル、シアノ、ニトロ、アセチルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ、ベンジルオキシカルボニルアミノ、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシおよびＣＯＯＲ5から成る群から選択される１、２または３個の同一であるかまたは異なる置換基によって置換されていることができる）であり；
Ｒ4およびＲ5は、同一であるかまたは異なっていることができて、水素、（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、（Ｃ2−Ｃ4）−アルケニルまたはアリール−（Ｃ1−Ｃ10）−アルキル−である］
の化合物またはその塩の速度論的光学分割またはエナンチオマー分離法をも提供する。上記の式Ｉの化合物に関する説明はすべて、相応じて式Ｉｅの化合物およびこれらの化合物の速度論的光学分割またはエナンチオマー分離法、例えば好ましい残基の意味、本方法を実施する方法、または相当する式Ｉｅ中のＲ3が水素である形成されたカルボン酸またはその塩から未反応の式Ｉｅの化合物を分離する方法、に適用される。
【発明の効果】
【００３０】
本発明の方法は、技術的に簡単な方法による実質的にエナンチオマー的に純粋な形の式Ｉの化合物の経済的で迅速な製造を可能にする。これらは、等モル量の光学的に純粋な出発物質または助剤、高価な反応物または溶媒、および複雑で費用のかかる工程を必要とせず、そしてこれらは、相当する活性医薬成分を合成するための全プロセスを実質的に改良する。
下記の実施例は、本発明を具体的に説明する。
【００３１】
使用したリン酸塩緩衝液は、ＣＲＣ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ、Ｒ．Ｃ．Ｗｅａｓｔ（編者）、第４９版、１９６８−１９６９、クリーブランド（オハイオ）、第Ｄ−７９ページに従ってリン酸二水素カリウムおよび水酸化ナトリウムから製造したｐＨ値７.０の０.１Ｍリン酸ナトリウムカリウム緩衝液であった。
【００３２】
使用した酵素は、下記のように省略する：
ＰＬＥ      ブタ肝臓エステラーゼ（工業銘柄、懸濁液；Roche  Diagnostics）
ＲＬＥ      ウサギ肝臓エステラーゼ（Sigma  Chemical  Co.）
ＣＬＡＰ    仔ウシ肝臓アセトン粉末（Sigma  Chemical  Co.）
ＨＬＡＰ    ウマ肝臓アセトン粉末（Sigma  Chemical  Co.）
ＲＬＡＰ    ウサギ肝臓アセトン粉末（Sigma  Chemical  Co.）
【００３３】
エステルおよび酸の光学純度は、下記の条件下での、キラル相を使用しＵＶ検出するＨＰＬＣによって決定した：
ＨＰＬＣ（方法Ａ）：カラム  キラルパック（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ）ＡＤ２５０×４.６（Ｄａｉｃｅｌ）；溶離剤  ｎ−ヘキサン／イソプロパノール（２５：１）＋０.１％トリフルオロ酢酸；流量  １ｍｌ／分；温度  ３０℃；検出波長  ２０２.６ｎｍ。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ）：カラム  キラルパック（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ）ＡＤ２５０×４.６（Ｄａｉｃｅｌ）；溶離剤  ｎ−ヘキサン／イソプロパノール（２５：１）＋０.１％トリフルオロ酢酸；流量  １ｍｌ／分；温度  ３０℃；検出波長  ２０５.４ｎｍ。
【００３４】
単離した生成物および粗生成物混合物は、1Ｈ−ＮＭＲスペクトルおよび／または質量スペクトル（ＭＳ）によって、および／またはＨＰＬＣ保持時間によって確認した。
【実施例１】
【００３５】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのアセトン中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸メチルを２０ないし２５℃で２ないし５ｍｇのキラザイム（Ｃｈｉｒａｚｙｍｅ）Ｅ−１（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）と混合して、反応混合物をこの温度で２２ないし２３時間撹拌した。試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、＞９９％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、５８％であった。
【実施例２】
【００３６】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのエタノール中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で１滴のＰＬＥと混合して、反応混合物をこの温度で１日間撹拌した。試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、６８％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、９３％であった。
【実施例３】
【００３７】
２００ｍｌのリン酸緩衝液および３４ｍｌのエタノール中の２.０ｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で１０滴のＰＬＥと混合して、反応混合物をこの温度で、約３６％の変換が達成されるまで撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで抽出して、合わせた有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させた。真空で濃縮して、１.０ｇの、光学純度６４.８％ｅｅ（ＨＰＬＣ、方法Ａ）を有する未変換Ｓエステルを得た。未変換Ｓエステルの分析データ：
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3、３００ＭＨｚ）：δ＝０.９５（ｄ、Ｊ＝７Ｈｚ、６Ｈ、ＣＨ(ＣＨ3)2）、１.２５（ｔ、Ｊ＝７.５Ｈｚ、３Ｈ、ＯＣＨ2ＣＨ3）、１.４６（ｓ、６Ｈ、Ｃ(ＣＨ3)2）、１.５（ｍ、１Ｈ、ＣＨ(ＣＨ3)2）、１.８８（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣＨ2ＣＨ）、２.３０（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣＨ2ＣＨ）、４.２０（ｍ、２Ｈ、ＯＣＨ2ＣＨ3）、４.７０（ｄｄ、Ｊ1＝１０Ｈｚ、Ｊ2＝４Ｈｚ、１Ｈ、Ｎ−ＣＨ−ＣＨ2）、５.８ｐｐｍ（ｓ、ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）。
【００３８】
酢酸エチルで抽出した後に得られた水性相を、希塩酸を使用してｐＨ３まで酸性化し、そして酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させた。真空で濃縮して、０.６５ｇの、光学純度９４％ｅｅ（ＨＰＬＣ、方法Ａ）を有するＲ酸を得た。得られたＲ酸の分析データ：
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3、３００ＭＨｚ）：δ＝０.９−１.０（ｍ、６Ｈ、ＣＨ(ＣＨ3)2）、１.４６（ｓ、６Ｈ、Ｃ(ＣＨ3)2）、１.５（ｍ、１Ｈ、ＣＨ(ＣＨ3)2）、１.８８（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣＨ2ＣＨ）、２.３０（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣＨ2ＣＨ）、４.７５（ｄｄ、Ｊ1＝１０Ｈｚ、Ｊ2＝４Ｈｚ、１Ｈ、Ｎ−ＣＨ−ＣＨ2）、６.７５（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８.３（ｓ、ｂｒ、１Ｈ、ＣＯＯＨ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝２４３（[Ｍ＋Ｈ]+；１００％）、１９７（［Ｍ−ＣＯＯＨ］+；２２％）。
【実施例４】
【００３９】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのアセトン中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で１滴のＰＬＥと混合して、反応混合物をこの温度で、約５３％の変換が達成されるまで撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで抽出して、有機相をＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、＞９９％であった。
【実施例５】
【００４０】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのｎ−ヘプタン中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で３ないし５ｍｇのＨＬＡＰと混合して、反応混合物をこの温度で撹拌した。約５０％の変換の後、試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、９３％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、９４％であった。
【実施例６】
【００４１】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのアセトン中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で３ないし５ｍｇのＲＬＡＰと混合して、反応混合物をこの温度で撹拌した。約５２ないし５５％の変換の後、試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、＞９８％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、８０％であった。
【実施例７】
【００４２】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのシクロヘキサン中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で３ないし５ｍｇのＨＬＡＰと混合して、反応混合物をこの温度で撹拌した。約５０％の変換の後、試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、＞９９％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、＞９５％であった。
【実施例８】
【００４３】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのｎ−ヘプタン中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で１滴のＰＬＥと混合して、反応混合物をこの温度で撹拌した。約５４％の変換の後、試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、９３％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、７９％であった。
【実施例９】
【００４４】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのジイソプロピルエーテル中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で３ないし５ｍｇのＨＬＡＰと混合して、反応混合物をこの温度で撹拌した。約５３％の変換の後、試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、９８％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、＞８６％であった。
【実施例１０】
【００４５】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのシクロヘキサン中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−シクロプロピルプロピオン酸エチルを２０ないし２５℃で３ないし５ｍｇのＨＬＡＰと混合して、反応混合物をこの温度で撹拌した。約３７％の変換の後、試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ｂ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、５５％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、９４％であった。
【実施例１１】
【００４６】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で３ないし５ｍｇのＨＬＡＰと混合して、反応混合物をこの温度で撹拌した。約４７％の変換の後、試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、８３％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、＞９２％であった。
【実施例１２】
【００４７】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌの１,２−ジメトキシエタン中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で１滴のＰＬＥと混合して、反応混合物をこの温度で１日間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで抽出して、有機相をＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、９９％であった。
【実施例１３】
【００４８】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのアセトン中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で１滴のＲＬＥと混合して、反応混合物をこの温度で２１時間撹拌した。試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、９８％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、７９％であった。
【実施例１４】
【００４９】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で３ないし５ｍｇのＲＬＡＰと混合して、反応混合物をこの温度で撹拌した。約４９％の変換の後、試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、８９％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、９３％であった。
【実施例１５】
【００５０】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのアセトン中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸メチルを２０ないし２５℃で３ないし５ｍｇのＲＬＡＰと混合して、反応混合物をこの温度で２２ないし２３時間撹拌した。試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、＞９９％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、５４％であった。
【実施例１６】
【００５１】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのアセトン中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で３ないし５ｍｇのキラザイム（Ｃｈｉｒａｚｙｍｅ）Ｅ−１（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）と混合して、反応混合物をこの温度で撹拌した。約４５％の変換の後、試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、７７％であった。
【実施例１７】
【００５２】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのジメチルホルムアミド中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で１滴のＰＬＥと混合して、反応混合物をこの温度で１日間撹拌した。試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、９７％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、７５％であった。
【実施例１８】
【００５３】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのアセトン中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で３ないし５ｍｇのキラザイム（Ｃｈｉｒａｚｙｍｅ）Ｅ−２（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）と混合して、反応混合物をこの温度で撹拌した。約５０％の変換の後、試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、９５％であった。
【実施例１９】
【００５４】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのアセトン中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸メチルを２０ないし２５℃で１滴のＰＬＥと混合して、反応混合物をこの温度で２２ないし２３時間撹拌した。試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、＞９９％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、５７.６％であった。
【実施例２０】
【００５５】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのアセトン中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸メチルを２０ないし２５℃で２ないし５ｍｇのキラザイム（Ｃｈｉｒａｚｙｍｅ）Ｅ−２（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）と混合して、反応混合物をこの温度で２２ないし２３時間撹拌した。試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、９７.７％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、５８％であった。
【実施例２１】
【００５６】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で３ないし５ｍｇのＣＬＡＰと混合して、反応混合物をこの温度で撹拌した。約３３％の変換の後、試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、４６％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、９２％であった。
【実施例２２】
【００５７】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのジイソプロピルエーテル中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−４−メチルペンタン酸エチルを２０ないし２５℃で１滴のＰＬＥと混合して、反応混合物をこの温度で１日間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで抽出して、有機相をＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、９６.７％であった。
【実施例２３】
【００５８】
３ｍｌのリン酸緩衝液および０.５ｍｌのエタノール中の２５ｍｇの（ＲＳ）−２−（４,４−ジメチル−２,５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−３−シクロプロピルプロピオン酸エチルを２０ないし２５℃で１滴のＰＬＥと混合して、反応混合物をこの温度で撹拌した。約１９％の変換の後、試料を取って、ＨＰＬＣ（方法Ｂ）によって分析した。未変換Ｓエステルの光学純度ｅｅは、２３％であり、形成されたＲ酸の光学純度ｅｅは、＞９９％であった。
【国際公開パンフレット】
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