(57)【要約】    本発明は、ニンニクの球根の花脂、これらを含む組成物、ならびに特に肥満の処理における治療用として、および特に皮膚、蜂巣炎、および局部的真皮脂肪過剰の処理のための化粧品用としてのこれらの用途に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ニンニク（Ａｌｌｉｕｍ  ｓａｔｉｖｕｍ）の球根の花脂。
【請求項２】
ニンニクの球根の少なくとも１つの粗製脂から得られたニンニクの球根の花脂。
【請求項３】
ヘキサン抽出された粗製脂から得られることを特徴とする、請求項２に記載の花脂。
【請求項４】
酢酸エチル抽出された粗製脂から得られることを特徴とする、請求項２に記載の花脂。
【請求項５】
ニンニクの球根の抽出含油樹脂から得られたニンニクの球根の花脂。
【請求項６】
アセトン抽出された抽出含油樹脂から得られることを特徴とする、請求項５に記載のニンニクの球根の花脂。
【請求項７】
ニンニクの球根の少なくとも１つの花脂を含むこと、およびワックスを含んでいないことを特徴とする組成物。
【請求項８】
水溶液状のニンニクの球根の少なくとも１つの花脂を含むことを特徴とする、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
ニンニクの球根の少なくとも１つの花脂の水溶液から構成されていることを特徴とする、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
皮膚の刺激または過敏化を実質的に引起こすことなく、ＶＥＧＦの分泌を少なくとも実質的に誘発するのに適した量のニンニクの球根の少なくとも１つの花脂を含むことを特徴とする、請求項７〜９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１】
皮膚の微小循環を少なくとも実質的に促進するのに適した量のニンニクの球根の少なくとも１つの花脂を含むことを特徴とする、請求項７〜１０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１２】
皮膚の刺激または過敏化を実質的に引起こすことなく、前脂肪細胞から成熟脂肪細胞への分化を少なくとも実質的に阻害するのに適した量のニンニクの球根の少なくとも１つの花脂を含むことを特徴とする、請求項７〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１３】
蜂巣炎および／または局部的真皮脂肪過剰の局所治療に適した量のニンニクの球根の少なくとも１つの花脂を含むことを特徴とする、請求項７〜１２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１４】
ニンニクの球根の花脂３ｐｐｍ〜２０ｐｐｍを含むことを特徴とする、請求項７〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１５】
ニンニクの球根から抽出された粗製脂から得られた少なくとも１つの花脂を含むことを特徴とする、請求項７または１４に記載の組成物。
【請求項１６】
そのほかに、ニンニクの球根から抽出された抽出含油樹脂から得られた少なくとも１つの花脂を含むことを特徴とする、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
ヘキサン抽出された粗製脂から得られた花脂；酢酸エチル抽出された粗製脂から得られた花脂；アセトン抽出された抽出含油樹脂から得られた花脂から選択されるニンニクの球根の少なくとも１つの花脂を含むことを特徴とする、請求項７〜１６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１８】
請求項７〜１７のいずれか１項に記載の治療用組成物。
【請求項１９】
治療すべき皮膚の少なくとも１つの部分に、少なくとも有効量のニンニクの球根の花脂を局所的に塗布することを特徴とする、皮膚の化粧品的処理方法。
【請求項２０】
治療すべき皮膚の少なくとも１つの部分に、請求項７〜１８のいずれか１項に記載の組成物を局所的に塗布することを特徴とする、皮膚の化粧品的処理方法。
【請求項２１】
皮膚の疾患の局所的処理のための治療用組成物の調製への、ニンニクの球根の少なくとも１つの花脂の使用。
【請求項２２】
肥満の局所的処理のための治療用組成物の調製への、ニンニクの球根の少なくとも１つの花脂の使用。
【請求項２３】
ニンニクの球根の抽出物の製造方法であって、
ニンニクの球根を非水性揮発性溶媒による抽出に付す工程、
第一抽出生成物を得るための溶媒の蒸発工程、
を含む方法において、
第一抽出生成物が、花脂を得るために後続エタノール抽出に付されることを特徴とする方法。
【請求項２４】
後続エタノール抽出が、
第一抽出生成物を周囲温度でエタノール中に溶解すること、および濾過によって第一エタノール溶液を回収すること、
−１０℃程度の温度で第一エタノール溶液を冷却し、ついでこれを濾過して第二エタノール溶液を回収すること
第二エタノール溶液のエタノールを蒸留して最終的に花脂を得ること、
からなることを特徴とする、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
非水性揮発性溶媒による抽出工程が、非水性および非ベンゼン性揮発性溶媒を用いて実施されることを特徴とする、請求項２３または２４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ａｌｌｉｕｍ  ｓａｔｉｖｕｍ（ニンニク）の球根の抽出物、ならびにこれらの使用に関する。前記組成物は、有利にかつより詳しくは、製薬業および化粧品業において使用することができる。したがって本発明はまた、特に肥満の処理のための治療用組成物（薬剤）に関する。同様に本発明は、化粧品組成物、特に美容（化粧品）用またはスキンケア用の局所塗布の化粧品組成物、および蜂巣炎および／または局部的真皮脂肪過剰の局所的な予防的または治療的処理のための化粧品にも及ぶ。
【背景技術】
【０００２】
この文書全体において、抽出生成物を規定する用語（精油、粗製脂、含油樹脂またはレジノイド、花脂など）は、規格ＮＦＴ７５−００６（１９９８年２月）によって規定された用語法にしたがって用いられている。
【０００３】
Ａｌｌｉｕｍ  ｓａｔｉｖｕｍすなわちニンニクは、昔から栄養分の豊富さ（タンパク質、ビタミンＡおよびＣ、チアミン、および無機塩の高い含有量）、消化の良さ、ならびに殺菌、抗ウイルス、心臓保護、強壮、利尿などの作用について評価が高かった。しかしながらこれを特徴付ける強いにおいから、調理用に少量用いられる以外ほとんど評価されていない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
同様に、最も多様な抽出、すなわち精油、粗製脂、含油樹脂、花脂などの対象となるほかの植物に対して、ニンニクをベースとする抽出物について言及している出版物はめったにない。例えば日本特許第０４−３３８，３３６号は、水またはエタノールの単一抽出に付された乾燥ニンニクから得られたニンニク抽出物を含む経口肥満処理用錠剤について記載している。したがって抽出含油樹脂に関する。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
したがって本発明は、次のような新規組成物、特に水中に可溶な新規ニンニク抽出物を提供することによって、この不備を補うことにする。すなわち、産業界、特に製薬業界または化粧品業界によって有利に活用されうる特性を有し、かつその製造方法は実施が容易であると同時にコストがあまりかからない組成物である。
【０００６】
本発明はまた、特に肥満の治療的処理、または皮膚、蜂巣炎、および／または局部的真皮脂肪過剰の局所的化粧品的処理のためのこれらの組成物の使用を提案することも目的とする。
【０００７】
したがって本発明は、ニンニクの球根の花脂に関する。
【０００８】
花脂は、少なくとも２つの抽出工程の結果生じる抽出物である。第一工程は、非水性、特に非ベンゼン性揮発性抽出溶媒を用いて実施され、この工程によって粗製脂または含油樹脂を得ることができる。第二工程は、溶媒としてエタノールを用いて実施される。植物の花脂は、この植物に特徴的な非常に強烈なにおいを有することに注目すべきである。これらは通常、もっぱら香水産業において調製され、用いられている。同様に、このカテゴリーの抽出物にはほとんど向いていないにおいを有するニンニクから製造された花脂の利点は分かっていなかった。同様に現在に至るまで、ニンニクの球根から得られた花脂に関する現実的な知識については、何も記載されていない。
【０００９】
実際、日本特許第５１−０３３０６６号、第ＥＰ０４６４５２１号、第ＦＲ０１／０３３２５号は、ニンニク抽出物について記載しているが、本発明によるニンニクの球根の花脂についても、花脂の製造方法についても、花脂の構造的または機能的特徴を有する抽出物についてもまったく記載していない。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
有利には本発明によれば、少なくとも１つの粗製脂（非水性、特に非ベンゼン性揮発性溶媒を用いた、新鮮なニンニクまたは解凍ニンニクの抽出物）、特にヘキサン抽出された粗製脂（この文書全体において、ＡＣＨという用語は、ヘキサン抽出された粗製脂から得られた花脂を示す）、または酢酸エチル抽出された粗製脂（この文書全体において、ＡＣＡＥという用語は、酢酸エチル抽出された粗製脂から得られた花脂を示す）から得られたニンニクの球根の花脂に関する。
【００１１】
本発明のもう１つの実施態様によれば、ニンニクの球根の花脂は、少なくとも１つの抽出含油樹脂（非水性、特に非ベンゼン性揮発性溶媒を用いた乾燥ニンニクの抽出物）、特にアセトン抽出された抽出含油樹脂（この文書全体において、ＡＯＡという用語は、アセトン抽出された含油樹脂から得られた花脂を示す）から得られる。
【００１２】
本発明はまた、本発明による花脂に対応するニンニク抽出物の製造方法にも関する。
【００１３】
本発明によるニンニク抽出物の製造方法は、次の工程を含む。
ニンニクの球根を非水性揮発性溶媒による抽出に付す工程、
第一抽出生成物を得るための溶媒の蒸発工程。
【００１４】
本発明によれば、この第一抽出生成物はついで、花脂を得るために後続エタノール抽出に付される。
【００１５】
用いられる植物材料が、新鮮な材料または（保存のために冷凍された後）解凍された材料である時、溶媒抽出工程後に得られた第一抽出生成物は粗製脂であることに注目することが望ましい。この植物材料がこの同じ抽出工程に乾燥状態で用いられる時は、抽出含油樹脂（レジノイド）である。
【００１６】
この文書全体において、「球根」という用語は、この植物の球根（ニンニクの鱗片群）も、剥かれているか、または剥かれていない互いに別れたニンニクの鱗片も包含する。
【００１７】
有利には本発明によれば、本発明による方法において用いられている植物材料は、新鮮な材料または（保存のために冷凍された後）解凍された材料である。
【００１８】
有利には本発明によれば、特に第一抽出生成物のワックスを除去することができる後続エタノール抽出は、
第一抽出生成物を周囲温度でエタノール中に溶解すること、および濾過によって第一エタノール溶液を回収すること、
−１０℃程度の温度で第一エタノール溶液を冷却し、ついでこれを濾過して第二エタノール溶液を回収すること
第二エタノール溶液のエタノールを蒸留して、最終的に花脂を得ること、
からなる。
【００１９】
有利には本発明によれば、非水性揮発性溶媒による抽出工程は、非水性および非ベンゼン性揮発性溶媒を用いて実施される。
【００２０】
有利には本発明によれば、この抽出は、非水性および非ベンゼン性揮発性溶媒としてヘキサンまたは酢酸エチルを用いて実施される。
【００２１】
本発明の変形例によれば、本発明の方法において用いられるこの植物材料は、乾燥状態の植物材料である。有利には本発明によれば、抽出は、非水性および非ベンゼン性揮発性溶媒としてアセトンを用いて行なわれる。
【００２２】
本発明はまた、特に興味深い用途、特に治療および／または美容目的のニンニクの球根の少なくとも１つの花脂を含む組成物にも及ぶ。
【００２３】
本発明による組成物は、人体の２つの生物学的メカニズム、すなわち皮膚の微小循環、および前脂肪細胞から脂肪細胞への分化のレベルにおける本発明による花脂の効果の驚くべき意外な発見に基づいている。
【００２４】
本発明者は、皮膚の微小循環のレベルで、本発明による花脂がＶＥＧＦ（「脈管内皮成長因子（Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ）」）の分泌に対して積極的に作用することを証明した。
【００２５】
ＶＥＧＦは、血管形成（Ｆｅｒｒｅｒａ  Ｎ．、Ｅｎｄｏｃｒ．Ｒｅｖ．１３：１８−３２、１９９２）、血管拡張（Ｆｏｌｋｍａｎ  Ｊ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６７：１０９３１−１０９３４、１９９２）、脈管透過性（Ｋｅｃｋ  Ｐ．Ｊ．、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４６：１３０９−１３１２、１９８９）の最も重要な調節正因子の１つである。これは、脈管内皮に特異的なものである。これは、内皮の最も重要な成長および生存因子の１つである。これは、主要な前血管形成因子であると考えられている。その作用は、内皮細胞のレベルに限定されており（Ｍｕｓｔｅｎｅｎ  Ｔ．ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１２９：８９５−８９８、１９９５）、その発現は、修復プロセスに関連した血管形成プロセスと完全な相関関係にある。
【００２６】
この事実から、ニンニクの球根の花脂は、薬剤の製造、特に皮膚障害の処理において大きい利点を示すか、またはこれらは、皮膚の微小循環の活性化剤として有利に用いることができる。これらはまた、微小循環の改良が望まれているあらゆる治療的または美容的処理に（化粧品、スキンケア）、補助剤として有効に参加しうる。
【００２７】
実際、皮膚は脈管を非常に多く含んでいる。皮膚循環が行なわれるのは真皮のこのレベルである。すなわち、どの脈管も表皮中に入り込まず、その必要な代謝は、乳頭真皮からの拡散によって確実に行なわれる。皮膚循環によって、皮膚の様々な構造の酸素化および栄養摂取が確実に行なわれる。特に線維芽細胞のレベルで、この皮膚循環によって、コラーゲンおよびエラスチンの線維を生産するのに不可欠なあらゆる原料の分配が確実に行なわれる。これと平行して、これはこれらの代謝から出た廃棄物を排出する。これは、生体の一般的レベルで行なわれると同時に、組織に送り出される血液流が調節される組織の局部レベルでも行なわれる。
【００２８】
皮膚の変質は、あらゆる場合に、真皮微小循環系の萎縮を介して皮膚のレベルに送り出される血液の量の減少の結果生じる、真皮の微小脈管系のレベルでの変性の表われである。
【００２９】
さらには本発明による花脂はまた、蜂巣炎および局部的脂肪過剰の予防的または治療的処理のための化粧品として、または肥満の処理のための治療用として、これらの組成物中の抗脂肪活性剤として有利に用いることができることも証明された。
【００３０】
実際、既知の痩身用クリームは、脂肪分解を促進し、および／または脂肪生成を阻害し、および／または毛管およびリンパ微小循環を回復することを目指す少なくとも１つの活性剤を含んでいる。本発明によって提案された組成物の方は、蜂巣炎に対する闘いにおいて新たな道を切り開く。本発明による組成物は、既知の痩身用クリームのように従来の標的に対して作用しつつ、脂肪塊の膨張におけるキー工程である前脂肪細胞から成熟脂肪細胞への分化プロセスのレベルに介入する。
【００３１】
概略的には蜂巣炎は、体のいくつかの部位、特に腰、臀部、ひざ、および前腕の脂肪組織の増大に対応する。生体のこの脂肪組織または脂肪塊は、皮膚のほとんど全表面下に存在する。蜂巣炎は多くの場合、全体的な脂肪過剰と関連しており、脂肪塊の安定性は、蜂巣炎の進行の制御において重要な点である。
【００３２】
脂肪塊の過剰な発達は通常、脂肪細胞の容積およびこれらのトリグリセリド含有量の増加と関係している。ただしこれらの数の上昇はない。すなわち肥大と呼ばれる。あるいくつかの重量過剰の場合、肥大には、過形成、すなわち脂肪細胞数の増加を伴なう。
【００３３】
同様に、脂肪細胞数は産前期に決定されず、脂肪細胞の形成は一生涯にわたって行なわれることも、今や証明されている。これは、先駆細胞、すなわち前脂肪細胞から行なわれる。前脂肪細胞は、線維芽細胞形態を有する薄い細胞であり、増殖しうるのはこれであって、脂肪細胞ではない。
【００３４】
概略的には、末端脂肪細胞分化は、前脂肪細胞から成熟脂肪細胞への形質転換を伴なって、２工程で行なわれる。成熟脂肪細胞は、トリグリセリドを蓄積しうる。
【００３５】
本発明は、局所塗布によって前脂肪細胞から成熟脂肪細胞への脂肪細胞の転換の阻害を引起こしうる、ニンニクの球根の花脂中に存在する活性成分を明らかにする。
【００３６】
したがって本発明によるニンニクの花脂は、蜂巣炎に対する闘いの新規側面に作用する。すなわち、これらは休眠前脂肪細胞の補充を制限して、脂肪組織の膨張を制限する。
【００３７】
しかしながら、これはこれらの単一の効能ではない。その理由は、本発明による単一の抗脂肪活性剤を用いた場合、蜂巣炎に対して闘うための複数の鍵が提供されることが明らかになるからである。実際、本発明による抗脂肪剤によって、脂肪組織の良好な血管新生も確実に行なわれる。
【００３８】
したがって本発明による花脂は、痩身用の化粧品または治療用配合物において活性剤の組合わせを増やすことを無用にする、最大限の効能を有する抗脂肪活性剤を構成する。
【００３９】
ほかの実験によってもまた、本発明による抗脂肪活性剤が、成熟肥大脂肪細胞のレベルにおいても同様に活性であることを、意外にも確認することができた。したがってこれらは、脂肪成長、過形成、および肥大の２つのプロセスに作用する。このことによって、肥満の処理のための治療領域においてこれらを用いて成功しうる。さらにはこれらの抗脂肪活性剤は、脂肪細胞に局部的に作用し、その脂肪酸の一部の血液循環中への放出を伴なわない。脂肪酸は、燃やされなければ、健康面で有害であることが明らかになるであろう（動脈壁または腹部内組織への蓄積）。本発明による抗脂肪活性剤の確認されたもう１つの利点は、得られる現象が可逆性であること、およびその結果、これらは生理学的メカニズムの遮断を生じないという事実にある。
【００４０】
したがって本発明は一般的に、本発明による少なくとも１つの花脂を含む組成物を提案する。
【００４１】
本発明はまた、本発明による少なくとも１つの花脂を含む、特に皮膚障害および／または肥満の局所的処理のための治療用組成物にも及ぶ。本発明はまた、本発明による少なくとも１つの花脂を含む、皮膚の障害および／または蜂巣炎、および局部的真皮脂肪過剰の予防的または治療的局所処理のための化粧品組成物にも及ぶ。局部的真皮脂肪過剰の処理とは、真皮レベルでも皮下組織でも、局部的脂肪塊の処理を意味する。
【００４２】
有利には、本発明による組成物は、皮膚の刺激または過敏化を実質的に引起こすことなく、ＶＥＧＦの分泌を少なくとも実質的に誘発するのに適した、および／または前脂肪細胞から成熟脂肪細胞への分化を少なくとも実質的に阻害するのに適した量の本発明による少なくとも１つの花脂を含む。
【００４３】
有利には、本発明による花脂の量は、皮膚の微小循環を少なくとも実質的に促進するのに適しているか、および／または蜂巣炎および／または局部的脂肪過剰の処理に適している。好ましくは本発明によれば、この量は、３ｐｐｍ〜２０ｐｐｍ、特に１０ｐｐｍ程度である。
【００４４】
本発明の実施において、様々な花脂がエタノール中に２５％希釈されているが、本発明による様々な組成物の花脂の割合（ｐｐｍ）の方は、「純粋な」花脂、すなわち２％未満の残留エタノールを含む花脂の量に従う。
【００４５】
本発明による１つの実施態様によれば、この組成物は、水溶液としてのニンニクの球根の少なくとも１つの花脂を含んでいる。
【００４６】
本発明によれば、この組成物は、ニンニクの球根の少なくとも１つの花脂の水溶液から構成されている。
【００４７】
好ましい実施態様において、本発明による組成物は、ニンニクの球根から抽出された粗製脂から得られた少なくとも１つの花脂を含んでいる。有利にはこの同じ実施態様によれば、本発明による組成物はそのほかに、ニンニクの球根から抽出された抽出含油樹脂から得られた少なくとも１つの花脂を含んでいる。
【００４８】
より詳しくは、本発明による組成物は有利には、ヘキサン抽出された粗製脂から得られた花脂；酢酸エチル抽出された粗製脂から得られた花脂；アセトン抽出された抽出含油樹脂から得られた花脂から選択されるニンニクの球根の少なくとも１つの花脂を含むことを特徴とする。
【００４９】
本発明によれば、ヘキサン抽出された粗製脂から得られた花脂を含む組成物の場合、これの量は有利には、３ｐｐｍ〜２０ｐｐｍ、特に１０ｐｐｍ程度である。
【００５０】
本発明によれば、酢酸エチル抽出された粗製脂から得られた花脂またはアセトン抽出された抽出含油樹脂から得られた花脂を含む組成物の場合、これの量は有利には、５ｐｐｍ〜２０ｐｐｍ、特に１０ｐｐｍ程度である。
【００５１】
さらには本発明による治療用または化粧品組成物は、好ましくは一年中の毎日、一日あたり少なくとも一回、処理されるべき皮膚の部分に外部処理として塗布されるスキンケアである。
【００５２】
本発明による組成物は、本発明による花脂以外の活性剤はまったく不要である。１つまたは複数のニンニクの花脂は、前記組成物の微小循環の単一活性剤または抗脂肪活性剤を構成しうる。したがって本発明による組成物は、補足活性剤は含まなくてもよい。特に、好ましくはニンニクの球根の１つまたは複数の花脂は、本発明による組成物の植物の単一抽出物である。
【００５３】
しかしながら本発明による組成物はまた、特に夏季の前に、２ヶ月または３ヶ月間の処理を実施することからなる、いわゆる「フラッシュ（ｆｌａｓｈ）」ケアのためにも用いることができる。この場合、この組成物は有利には、それ自体知られているあらゆる型の脂肪分解剤からなる補足活性剤を含んでいる。有利には本発明による組成物は、天然起源の脂肪分解剤（例えばカフェインおよびＡＭＰの合成を刺激しうる作用物質）、および合成脂肪分解剤（キサンチンベースの化合物）から選択された少なくとも１つの脂肪分解剤を含んでいる。
【００５４】
特に美容効果を有するほかの補足活性剤が、本発明による花脂に組合わされてもよい。
【００５５】
本発明による組成物は、弾性網を安定化すること（例えばケイ素誘導体）；および／または即座の張筋効果を得ること（合成ポリマーまたは植物性タンパク質（大豆、小麦の胚芽）の組込み）；および／または最適な水和を確実に行なうこと（湿潤剤および／または再構成剤の組込み）が可能なあるいくつかの数の作用物質を含んでいてもよい。
【００５６】
有利には本発明による組成物は、その浸透力を改良しうる作用物質（例えば剥離剤）の組込みを必要としない
【００５７】
本発明による組成物は、次のようなあらゆる賦形剤を含んでいてもよい。すなわち、本発明による花脂と相溶性があり、製薬的または化粧品的に許容しうるものであり、かつゲル化剤、香料、保存料、安定剤、着色料などを包含するあらゆる適切なアジュバントを含んでいてもよく、所望の適切な生薬形態を得ることができる賦形剤である。
【００５８】
本発明による組成物は、有利には単なるローションの形態の外観を示す。
【００５９】
したがって本発明者は驚くべきことに、本発明による組成物において、ニンニクのにおいは、この同じ植物から生じた含油樹脂または粗製脂のにおいよりも容易に消すことができることを確認した。この結果は、その時まで当業者にはまったく予測できないものであった。その理由は、植物の花脂は、主としてその芳香性によって利用されているからである。しかしながら本発明による花脂は、蜂巣炎、および／または脂肪過剰、および／または肥満の処理に有利な特性を示すという事実のほかに、製造が簡単なクリームまたはローションの組成に入れることができ、かつ嗅覚的不快さを伴なわない局所塗布による効果的処理を可能にすることができるという利点もある。
【００６０】
本発明による組成物の製造例を下記に示す。
【００６１】
ニンニクの花脂をベースとするローションの製造のためには、様々な成分の濃度の量（容量）は、次のものであってもよい。
組成物Ｎｏ．１：
・ヘキサン抽出された粗製脂から得られたニンニクの球根の花脂：０．０００３％〜０．００２％、
・賦形剤：１００％を得るのに適した濃度、
組成物Ｎｏ．２：
・酢酸エチル抽出された粗製脂から得られたニンニクの球根の花脂：０．０００５％〜０．００２％、
・賦形剤：１００％を得るのに適した濃度、
組成物Ｎｏ．３：
・アセトン抽出された抽出含油樹脂から得られたニンニクの球根の花脂：０．０００５％〜０．００２％、
・賦形剤：１００％を得るのに適した濃度。
【００６２】
本発明による組成物は、非常に単純でコストがあまりかからない。
【００６３】
本発明は、皮膚障害、蜂巣炎、局部的真皮脂肪過剰、または肥満の予防または治療の、治療的および／または化粧品的処理方法において、ニンニクの球根の少なくとも１つの花脂を、微小循環の活性化剤としておよび／または抗脂肪活性剤として、処理すべき皮膚の部分に局所的に塗布することを特徴とする方法にも及ぶ。本発明はまた、本発明による組成物を用いることを特徴とする処理方法にも関する。
【００６４】
本発明はまた、処理すべき皮膚の部分への局所的塗布による、特に皮膚の疾患または肥満の局所的処理のための治療用組成物の調製のためのニンニクの球根の少なくとも１つの花脂の使用において、微小循環の活性化剤としておよび／または抗脂肪剤として、ニンニクの球根の少なくとも１つの花脂の有効量をこの組成物中に組込むことを特徴とする方法にも及ぶ。
【００６５】
有利には、本発明による方法または使用において、ＶＥＧＦの分泌または前脂肪細胞から成熟脂肪細胞への分化の阻害を少なくとも実質的にもたらすのに適した量のニンニクの球根の少なくとも１つの花脂が用いられるが、皮膚の刺激も過敏化も引起こすことがない。
【００６６】
有利には、本発明による方法または使用において、本発明による組成物を、処理すべき少なくとも１つの皮膚部分に局所的に塗布する。
【００６７】
本発明の有効性は、添付図面１Ａ〜１Ｆ、２Ａおよび２Ｂ、３Ａおよび３Ｂを参照して例証された下記の実施例１〜６の結果から明らかになる。
【実施例１】
【００６８】
ニンニクの球根の花脂の製造、および花脂ＡＣＨ、ＡＣＡＥ、およびＡＯＡ、およびこれらを組込んでいる溶液の調製
本発明による花脂を、それ自体香水産業において従来のものであり、よく知られており、かつよく規定されている方法にしたがって調製する。
【００６９】
花脂ＡＣＨの製造
第一工程は、ニンニクの球根の粗製脂を調製することである。これを行なうためには、皮を取除いた新鮮なニンニクの鱗片を、機械的粉砕に付す。ついでヘキサン抽出を行なう。中程度の加熱によって、この混合物を沸騰させずに、ヘキサンの完全な蒸発後、この粗製脂を回収する。この粗製脂は、ワックスおよび芳香物質を含んでいる。周囲温度において、これは黄色のペースト状外見を示す。
【００７０】
洗浄によってエタノール中にこの粗製脂を溶解した後、この溶液を濾過し、ついで−１０℃で冷却し、ワックスを除去する。エタノールの蒸留後、花脂ＡＣＨが得られる。エタノール中に２５％希釈された時、これは強いにおいを有する薄い黄色の透明溶液の外見として現われる。
【００７１】
花脂ＡＣＡＥの製造
ＡＣＡＥは、ＡＣＨの製造プロトコルと同様なプロトコルにしたがって調製する。第一工程は今度は酢酸エチル抽出である。
【００７２】
エタノール中に２５％希釈された花脂ＡＣＡＥは、中程度のにおいの薄い栗色の透明溶液の外見として現われる。
【００７３】
花脂ＡＯＡの製造
ＡＯＡは、ＡＣＨの製造プロトコルと同様なプロトコルにしたがって調製する。第一抽出は今度は、予め乾燥工程に付されたニンニクの鱗片からアセトンを用いて行なわれる。この第一抽出を終えた時、抽出含油樹脂が得られる。周囲温度において、これは非常に濃い栗色のペースト形態にある。ついで、上記のように花脂ＡＯＡを調製する。
【００７４】
エタノール中に２５％希釈されたこの花脂ＡＯＡは、非常に弱いにおいを有する栗色の透明溶液の外見を示す。
【００７５】
本発明による花脂の特徴決定を行なうことができ、かつニンニクベースのその他の抽出物（含油樹脂、粗製脂、精油、水性抽出物）の大部分からこれらを区別することができる簡単なテストは、この溶液を非常な低温、特に−２０℃程度にすることである。花脂のみが液体のままであり、透明なままである。脂肪質の沈積物はまったく観察されない。
【００７６】
花脂ＡＣＨ、ＡＣＡＥ、およびＡＯＡの水溶液の調製
ＡＣＨ、ＡＣＡＥ、およびＡＯＡの水溶液を、各々の花脂（ＡＣＨ、ＡＣＡＥ、またはＡＯＡ）の母液を、花脂（ＡＣＨ、ＡＣＡＥ、またはＡＯＡ）１８．４μｌおよび細胞培養用水（Ｅｕｒｏｂｉｏ（登録商標）、フランス国）９８１．６μｌの割合で、細胞培養用水（Ｅｕｒｏｂｉｏ（登録商標）、フランス国）中に１／１０希釈して調製する。
【実施例２】
【００７７】
人の真皮微小脈管細胞の初代培養（ｐｒｉｍｏ−ｃｕｌｔｕｒｅ）に対するＡＣＨ、ＡＣＡＥ、およびＡＯＡの効果
皮膚の微小循環のレベルにおいて、真皮、主として乳頭真皮中に存在する脈管は、内皮細胞層、筋肉壁、周皮細胞の不連続層、および基底膜から構成されている。
【００７８】
内皮細胞は、血液−組織界面において必要とされる重要な機能を有する。すなわちこの細胞は、脈管の緊張状態したがって組織の血液流と、動脈壁の構造とを同時に制御する、二重の役割を果たす。この細胞は分泌活性および代謝活性を有し、新血管の形成を確実に行なう血管形成プロセスが開始するのは、これらの細胞のレベルにおいてである。
【００７９】
細胞および処理
ヒトの真皮微小脈管細胞（ｐ３のＨｄＭＥＣ、Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ（登録商標））の初代培養物を、６ウエルプレートに播種し（３，５００細胞／ウエル）、完全ＥＢＭ培地（「内皮基礎培地（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｂａｓａｌ  ｍｅｄｉｕｍ）」）中で培養した。これに、供給業者によって供給されたアリコート（Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ（登録商標））を添加する。すなわち、１０ｎｇ／ｍｌの組換えＥＧＦ；５μｇ／ｍｌのインシュリン；１μｇ／ｍｌのヒドロコルチゾン；５０μｇ／ｍｌのゲンタマイシン；５０ｎｇ／ｍｌのアンフォテリシンＢ；および５％ＳＶＦである。実験は、継代５〜７で実施した。細胞ＨｄＭＥＣを培地中で培養し、最後にこれに、培養培地１ミリリットルあたり３〜１０μｌの溶液ＡＣＨ、またはＡＣＡＥ、またはＡＯＡを添加する。対照細胞ＨｄＭＥＣを、単独培地中で培養に保持する。培養培地を２日毎に更新する。
【００８０】
取り上げた活性基準は次のとおりである。
細胞ＨｄＭＥＣの分化の刺激。形態変更は、ＣＣＤカメラと組合わされた逆相顕微鏡での形態分析によって評価する。
培養培地中に分泌されたＶＥＧＦ（「脈管内皮成長因子（Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ）」）の秤量（「クアンティキンヒトＶＥＧＦイミュノアッセイ（Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ  Ｈｕｍａｎ  ＶＥＧＦ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）」、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、英国）による、ＶＥＧＦ血管形成因子の分泌の刺激。
【００８１】
結果
形態変更
細胞ＨｄＭＥＣの培養培地中へのＡＣＨ、またはＡＣＡＥ、またはＡＯＡの添加は、形態変更を誘発する。細胞ＨｄＭＥＣは、隣接細胞の方への膨張を伴なって紡錘形態として伸びる。対照細胞ＨｄＭＥＣは大部分、中心核および明確でない細胞縁を伴なった、多角形細胞の均一集団の形態にある。これらの構造的転位反応は、一種の毛管様網状構造の形成を生じる。
【００８２】
ＶＥＧＦの分泌
細胞ＨｄＭＥＣの培養培地中へのＡＣＨ、またはＡＣＡＥ、またはＡＯＡの添加は、培養培地中へのＶＥＧＦの分泌を非常に有意に誘発する。ヘキサン抽出された粗製脂から得られたニンニクの球根の花脂（ＡＣＨ）、酢酸エチル抽出された粗製脂から得られたニンニクの球根の花脂（ＡＣＡＥ）、アセトン抽出された抽出含油樹脂から得られたニンニクの球根の花脂（ＡＯＡ）は、その増殖特性を変更せずに内皮細胞の分化された機能に作用する。ＶＥＧＦの率のこの変更は、皮膚の微小血管新生の増加に至らせる。
【実施例３】
【００８３】
脂肪細胞の形態に対するＡＣＨ、ＡＣＡＥ、またはＡＯＡの溶液の効果（図１Ａ〜１Ｆ）
用いられた細胞モデルおよび処理
脂肪細胞の分化プロセスに関与するメカニズムは、ずっと以前からインビトロで研究されている（一般誌：Ｋｌａｕｓ  Ｓ．、ＢｉｏＥｓｓａｙｓ、２１５−２２３、１９９７）。
【００８４】
ＡＣＨ、ＡＣＡＥ、およびＡＯＡの生物活性を、細胞３Ｔ３−Ｆ４４２Ａ（脂質を蓄積するその能力のために用いられる、ネズミ起源の細胞系統）の培養から明らかにし、ついでヒトの前脂肪細胞の初代培養に対して確認する。
【００８５】
これらの細胞を、６ウエルプレートに播種し（播種密度：１５，０００細胞／ウエル）、ＤＭＥＭ−１０％ＳＶＤおよび抗生物質培地中で、融合（ｃｏｎｆｌｕｅｎｃｅ）に至るまで保持する。融合した時、ついでこれらの前脂肪細胞をＤＭＥＭ−１０％ＳＶＦおよびインシュリン培地中で培養する。処理された細胞を、最後に培養培地１ミリリットルあたり２５μｌのテストされる溶液の１つ（ＡＣＨ、またはＡＣＡＥ、またはＡＯＡ）が添加されている培養培地中に保持する。対照前細胞３Ｔ３−Ｆ４４２Ａを、培養培地１ミリリットルあたり２５μｌの対照溶液が添加されている培養培地中で培養する。この培養培地は、４８時間毎に更新する。
【００８６】
ヒト前脂肪細胞の初代培養物
ヒト前脂肪細胞（ＺｅｎＢｉｏ（登録商標）、米国）を、供給業者の指示にしたがって培養する。これらのヒト前脂肪細胞は、受取った時、供給された適切な培地中で培養し、最後にこれに、培養培地１ミリリットルあたりテストされる溶液の１つ（ＡＣＨ、またはＡＣＡＥ、またはＡＯＡ）３μｌ〜１０μｌを添加する。対照前脂肪細胞を、単独の培地中に培養に保持する。この培養培地は、３日毎に更新する。
【００８７】
結果
処理の７日目（細胞３Ｔ３−Ｆ４４２Ａ、図１Ａおよび１Ｂ）および９日目（ヒト前脂肪細胞、図１Ｃ〜１Ｆ）の終わりに、分化プロセスに対するＡＣＨ、ＡＣＡＥ、およびＡＯＡの溶液の効果を、処理済み培養物および対照培養物の顕微鏡観察によって、形態学的基準に基づいて調べた。これらの細胞は、丸い輪郭を得た時、およびこれらの細胞質が脂質小滴で完全に満たされた時、ＣＣＤカメラと組合わされた逆相顕微鏡での形態分析によって、分化されていると考えられる。ＡＣＨ、ＡＣＡＥ、またはＡＯＡの溶液が、ネズミ前脂肪細胞３Ｔ３−Ｆ４４２Ａ（図１Ａおよび１Ｂ）の細胞分化を阻害することが確認される。
【００８８】
慢性処理の７日目の終わりに、溶液ＡＣＨ（図１Ａ）は、発育した成熟脂肪細胞の数の有意な減少を誘発する。大部分の細胞は、脂質の蓄積の非常に明白な阻害を伴なって、これらの前脂肪細胞線維芽細胞形態を保持する。図面には例証されていないが、ＡＣＡＥおよびＡＯＡの溶液を用いた場合も、同じ結果が得られる。対照細胞３Ｔ３−Ｆ４４２Ａ（図１Ｂ）は、末端分化の正常プロセスを辿り、強い屈折性が証明するように、トリグリセリド小滴で満たされた細胞質を伴なった成熟脂肪細胞の形態学的特徴を獲得する。
【００８９】
同様に、ＡＣＨ、ＡＣＡＥ、またはＡＯＡの溶液は、ヒト前脂肪細胞の末端分化プロセスを阻害することも確認される。
【００９０】
ＡＣＨ溶液（図１Ｃ）の存在下に培養されたヒト前脂肪細胞は、前脂肪細胞の形態を保持する。すなわちヒト細胞は、検出可能な細胞質内脂質小滴をほとんど伴なわずに、紡錘形のままである。ＡＣＡＥ（図１Ｄ）およびＡＯＡ（図１Ｅ）の溶液の場合、同じ結果が得られる。これに対して対照ヒト前脂肪細胞（図１Ｆ）は、これらの線維芽細胞形態を失い、球形が現われ、これらの強い屈折性によって同定可能な多くの細胞質内脂質小胞の存在がある。
【００９１】
ヘキサン抽出された粗製脂から得られたニンニクの球根の花脂（ＡＣＨ）、酢酸エチル抽出された粗製脂から得られたニンニクの球根の花脂（ＡＣＡＥ）、アセトン抽出された抽出含油樹脂から得られたニンニクの球根の花脂（ＡＯＡ）による慢性処理は、脂肪細胞分化に特徴的な形態学的変化および生化学的変化を制限する。ＡＣＨ、ＡＣＡＥ、およびＡＯＡと接触した時、これらの前脂肪細胞は、これらの脂質代謝を調節し、かつ通常は前脂肪細胞から成熟分化脂肪細胞への転換を可能にするホルモン環境に対してもはや感受性がない。
【実施例４】
【００９２】
成熟肥大脂肪細胞の形態に対するＡＣＨ、ＡＣＡＥ、またはＡＯＡの溶液の効果（図２Ａおよび２Ｂ）
融合した時に、前脂肪細胞３Ｔ３−Ｆ４４２Ａを、分化培地（ＤＭＥＭ−１０％ＳＶＦおよびインシュリン）中で４日間培養する。これらの条件下、これらの細胞は、増加したトリグリセリド容積および含有量を有する「成熟脂肪細胞」の段階に移る。ついでこれらの細胞を、前と同様に処理する。
【００９３】
嵩張った球形形態および細胞質内脂質小胞の大きい蓄積を有する対照成熟脂肪細胞（図２Ｂ）と比較して、ＡＣＨの溶液によって処理された成熟脂肪細胞（図２Ａ）は、あまり丸くない細胞形態、および非常に減少した脂肪細胞内脂質小胞の含有量を有し、したがって本発明によるＡＣＨの溶液は、分化プロセスを逆転させて、脂肪細胞の肥大の制限プロセスにおいて有効であることが明らかになる。本発明によるＡＣＡＥまたはＡＯＡの溶液の場合も、同じ結果が得られる。
【実施例５】
【００９４】
ＰＰＡＲγ２のｍＲＮＡの発現に対するＡＣＨ、ＡＣＡＥ、またはＡＯＡの溶液の効果（図３Ａおよび３Ｂ）
脂肪細胞の分化は、脂肪組織の発育および肥満の重要な要素である。脂肪細胞の分化プロセスは、リポタンパク質脂肪分解、脂肪酸の細胞捕獲、および脂肪酸およびトリグリセリドの合成を調節する様々な遺伝子のプログラミングされた誘発によって、インビトロで特徴決定される。概略的にはこれらの遺伝子は、次の型の分化マーカーとして分類することができる。すなわち非常に早い（例えばリパーゼリポタンパク質のｍＲＮＡの発現）、早い（例えばＰＰＡＲγ２のｍＲＮＡの発現）、または遅い（例えばレプチンの発現）である（一般誌：Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  Ｒ．Ｆ．、Ｆａｒｍｅｒ  Ｓ．Ｒ．、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｓｕｐｐｌ．３２／３３：５９−６７、１９９９）。したがって脂肪細胞の分化段階は、関連のあるｍＲＮＡ（ＰＰＡＲγ２のｍＲＮＡ）の発現レベルを調べるか、またはレプチンの発現レベルによって正確に確立することができる。
【００９５】
末端分化プロセスは、早いか遅い分化マーカーの誘発によって特徴決定される（一般誌：Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  Ｒ．Ｆ．、Ｆａｒｍｅｒ  Ｓ．Ｒ．、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｓｕｐｐｌ．３２／３３：５９−６７、１９９９）。
【００９６】
ＰＰＡＲ（「ペルオキシソーム増殖剤−活性化受容体（Ｐｅｒｏｘｉｓｏｍａｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ−Ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ）」）型の核受容体族は、３つのサブタイプ、すなわちＰＰＡＲα、ＰＰＡＲδ、ＰＰＡＲγから構成されている。ＰＰＡＲαは肝臓において強力に発現され、これはそこで、脂質代謝に関わる遺伝子の発現を調節する。ＰＰＡＲδの発現は遍在し、この受容体の機能はいまだに決定されていない。ＰＰＡＲγは、２つのイソ型ＰＰＡＲγ１およびＰＰＡＲγ２の形態で存在する。哺乳動物の脂肪組織のレベルで強力に発現されるのはＰＰＡＲγ２である。ＰＰＡＲγ２が活性化される時、これは、脂肪細胞の表現型の作製および維持に関わるタンパク質および酵素についてコードする複数の脂肪細胞遺伝子の転写を誘発する。したがってこれは、脂肪細胞の分化および代謝において最も重要な役割を果たす。
【００９７】
ＡＣＨ、ＡＣＡＥ、またはＡＯＡの溶液のＰＰＡＲγ２のｍＲＮＡの発現に対する効果を、処理の３日目（図３Ａ、細胞３Ｔ３−Ｆ４４２Ａ）または６日目（図３Ｂ、ヒト前脂肪細胞）の終わりに測定した。予めＲＮｅａｓｙ  Ｔｏｔａｌ  ＲＮＡシステム（Ｑｉａｇｅｎ（登録商標））の手順にしたがってＲＮＡを精製し、２６０および２８０ｎｍでの吸光度の測定および比によってこれらの試料のＲＮＡ含有量を定量し、得られたＲＮＡの品質をアガロースゲル上の泳動後に確かめた後、ＰＰＡＲγ２のｍＲＮＡの含有量をＲＴ−ＰＣＲ（「逆転写−ポリメラーゼ連鎖反応（Ｒｅｖｅｒｓｅ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ−Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ）」）によって分析する。
【００９８】
ＲＴ工程のために、相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）を、１μｇの全ＲＮＡ（３Ｔ３−Ｆ４４２Ａ）または０．２μｇの全ＲＮＡ（ヒト前脂肪細胞）から合成する。ＰＰＡＲγ２についてコードするＤＮＡの増幅は、適切なセンスおよびアンチセンスプライマーの存在下に得られる（Ｇｅｎｓｅｔ（登録商標）、表１参照）。ＰＣＲの生成物のサイズは、３０７塩基対（細胞３Ｔ３−Ｆ４４２Ａ）および５８２塩基対（ヒト前脂肪細胞）である。適切な検査（ＰＣＲによる逆転写工程および増幅工程）を実施した。ＰＣＲの混合物を、変性（９４℃で２分）、交雑（６０℃で１分）、および延長（７２℃で６分）によって、増幅の２２サイクル（細胞３Ｔ３−Ｆ４４２Ａ）または３５サイクル（ヒト前脂肪細胞）に付した。ＰＣＲの生成物を、アガロースゲル電気泳動法によって分析し、臭化エチジウムで視覚化する。
【００９９】
【表１】
2005509636.tif 000002
【０１００】
ＰＰＡＲγ２の脂質生成転写因子の発現レベルは、細胞３Ｔ３−Ｆ４４２ＡがＡＣＨの溶液（図３Ａ、結果２）と接触した時、バンドの強度が証明しているように、対照細胞（図３Ａ、結果１）と比較して非常に減少している。ＡＣＡＥの溶液（図３Ａ、結果３）およびＡＯＡの溶液（図３Ａ、結果４）の場合も、同じ結果が得られる。
【０１０１】
同様に、本発明によるＡＣＨ、ＡＣＡＥ、またはＡＯＡの溶液は、対照ヒト前脂肪細胞（図３Ｂ、結果５）と比較して、ヒト前脂肪細胞（図３Ｂ、結果６は、ＡＣＨ溶液での処理を例証している）のＰＰＡＲγ２のｍＲＮＡの発現を有意に阻害する。
【０１０２】
ヘキサン抽出された粗製脂から得られたニンニクの球根の花脂（ＡＣＨ）、酢酸エチル抽出された粗製脂から得られたニンニクの球根の花脂（ＡＣＡＥ）、アセトン抽出された抽出含油樹脂から得られたニンニクの球根の花脂（ＡＯＡ）は、分化プログラムのレベルで作用し、ＰＰＡＲγ２のメッセンジャーの発現を減少させる。
【実施例６】
【０１０３】
レプチンの分泌に対する花脂ＡＣＨ、ＡＣＡＥ、およびＡＯＡの効果
花脂ＡＣＨ、ＡＣＡＥ、およびＡＯＡがヒト前脂肪細胞の分化プロセスを阻害する能力を、様々な試験の培養媒質中に分泌されたレプチン率の定量的測定によって決定した。実際、ｏｂ遺伝子によってコードされ、合成され、かつ脂肪細胞によって分泌されたレプチンは、脂肪細胞分化プロセスの遅いマーカーであると考えられる。インビトロにおいて、レプチンの基礎分泌は、前脂肪細胞から成熟脂肪細胞への転換プロセス全体の間に漸進的に増加する（Ｍａｃ  Ｄｏｕｇａｌｄ，Ｏ．Ａ．ら、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ．，米国、９２：９０３４−９０３７、１９９５）。
【０１０４】
花脂ＡＣＨ、ＡＣＡＥ、およびＡＯＡのレプチンの分泌に対する効果を、９日間の処理期間にわたって調査した（ヒト前脂肪細胞）。対照細胞および処理済み細胞によって分泌されたレプチン率を、３日目、６日目、および９日目（培地の更新日）に採取された様々な培養培地中で測定した。放出されたレプチン率の定量的測定を、供給業者の指示にしたがって、ＥＬＩＳＡ秤量（Ｒ＆Ｄシステムズ・ヨーロッパ）によって実施する。これらの結果は、平均±平均への標準偏差として表示される。統計的比較を、スチューデントＴテストによって実施する（ｐ＜０．００５は、有意閾値を表わす）。
【０１０５】
これらの結果を次のように標準化する。処理の９日目の終わりに、３日目、６日目、および９日目に処理の各々について定量されたレプチンの値を累積し、対照について得られた値のパーセントとして表示する（表２）。
【０１０６】
【表２】
2005509636.tif 000003
【０１０７】
花脂ＡＣＨ、ＡＣＡＥ、およびＡＯＡの存在下に培養されたヒト前脂肪細胞は、未処理対照ヒト前脂肪細胞の培養培地中で検出された量よりも有意に低いレプチンの量を、培養培地中に分泌する。得られた結果は、花脂ＡＣＨ、ＡＣＡＥ、およびＡＯＡが、分化プログラムのレベルで作用し、脂肪細胞の転換プロセスを阻害しうることを証明している。
【図面の簡単な説明】
【０１０８】
【図１Ａ】脂肪細胞の顕微鏡写真図面である。
【図１Ｂ】脂肪細胞の顕微鏡写真図面である。
【図１Ｃ】脂肪細胞の顕微鏡写真図面である。
【図１Ｄ】脂肪細胞の顕微鏡写真図面である。
【図１Ｅ】脂肪細胞の顕微鏡写真図面である。
【図１Ｆ】脂肪細胞の顕微鏡写真図面である。
【図２Ａ】脂肪細胞の顕微鏡写真図面である。
【図２Ｂ】脂肪細胞の顕微鏡写真図面である。
【図３Ａ】電気泳動ゲルの写真図面である。
【図３Ｂ】電気泳動ゲルの写真図面である。
【図１Ａ】
2005509636.tif 000004
【図１Ｂ】
2005509636.tif 000005
【図１Ｃ】
2005509636.tif 000006
【図１Ｄ】
2005509636.tif 000007
【図１Ｅ】
2005509636.tif 000008
【図１Ｆ】
2005509636.tif 000009
【図２Ａ】
2005509636.tif 000010
【図２Ｂ】
2005509636.tif 000011
【図３Ａ】
2005509636.tif 000012
【図３Ｂ】
2005509636.tif 000013
【国際調査報告】
2005509636.tif 000014
2005509636.tif 000015
2005509636.tif 000016
2005509636.tif 000017
2005509636.tif 000018
2005509636.tif 000019
2005509636.tif 000020
2005509636.tif 000021