(57)【要約】本発明は、治療を必要とする患者の関節から分泌される滑膜流体の量又は成分を変化させる方法に関する。前記方法は、P2Yプリン作動性受容体作用物質を含んで成る医薬組成物を対象者に対して、滑膜流体の量又は成分を変化させる有効な量で投与することを含んで成る。P2Yプリン作動性受容体レセプター作用物質は、滑膜流体、ルブリシン、ヒアルロン酸、又は表層活性リン脂質の分泌を刺激し；関節の潤滑を増強する、あるいは変形性関節症を治療するのに有効な量で投与されている。本発明中で有用な医薬組成物は、P2Yプリン作動性受容体作用物質又は、医薬的に許容できるそれらの担体と一緒の組み合わせを含んで成る。P2Yプリン作動性受容体作用物質は、式Ｉの化合物であり、ウリジン−、アデノシン−、シチジン−5'−ジ又はトリリン酸、ジヌクレオシドポリリン酸、及びそれらの類似物が挙げられるが、それらには限定されない。【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療を必要とする対象者の関節から分泌される滑膜流体（synovial fluid）の量又は組成を改変する方法であって：対象者に対してプリン作動性受容体作用物質を、滑膜流体の量又は組成を改変するために治療上有効な量で投与することを含んで成る方法。
【請求項２】
前記プリン作動性受容体作用物質が：関節潤滑を増強すること、変形性関節症を治療すること、及び滑膜流体、ルブリシン、ヒアルロン酸、又は表層活性リン脂質の分泌を刺激すること、からなる群から選択された反応に影響を及ぼすために治療上有効な量で投与されている、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記プリン作動性受容体作用物質が、P2Yプリン作動性受容体作用物質である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記P2Yプリン作動性受容体作用物質が、式I：
【化１】
2005508297.tif 000008
（式中、X１、X2及びX3は、独立してもしくは一緒に、酸素、メチレン、モノクロロメチレン、ジクロロメチレン、モノフルオロメチレン、ジフルオロメチレン、もしくはイミドであり；
T、T'、W及びVは、独立してもしくは一緒に酸素もしくは硫黄であり；
ｍ＝0、1又は2；
n＝0又は1；
p＝0、１、又は２であり；
ここで：
m＋n＋pの合計は１〜5であり；
Mはそれぞれ、独立して水素もしくは医薬的に許容できる無機もしくは有機の対イオンであり；
A＝置換基もしくはヘテロ原子を有するもしくは有さない、M、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、アリール、もしくはアシルチオアルキルであり；又は
Aは以下のように規定されているヌクレオシド残基であり：
【化２】
2005508297.tif 000009
ここで：
D1及びD2は、それぞれ独立してO又はCであり；
Z及びZ'は、独立してH、OR2又はOR3であり；
Y及びY'は、独立してH、F、OR1又はOR4であり；
独立して、R1、R2、R3及びR4はHであるかあるいはR1、R2、R3又はR4の少なくとも１つがHであるならば式IIの残基であり；
【化３】
2005508297.tif 000010
ここで：
Qは炭素原子であり；
R5、R6及びR7は、独立してH、置換されているもしくは置換されていない、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、アリール、もしくは複素環式の部分であるか、あるいはR5及びR6は、一緒になって4〜7員の炭素環式もしくは複素環式の環を形成し、従って、式IIに規定されている部分がエーテルであり；又は
R5及び R6が、一緒になってQに対して二重結合した酸素もしくは硫黄であり、そしてR7が置換されているもしくは置換されていない、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、もしくは4〜7員の複素環であるならば、従って、式IIに規定された部分はエステルもしくはチオエステルであり；又は
R5及び R6が、一緒になってQに対して二重結合した酸素もしくは硫黄であり、そしてR7がアミノもしくは一置換アミノもしくは二置換アミノであり、ここで置換基は、アルキル、シクロアルキル、アラルキル、アリール、置換されているアラルキル、もしくは置換されているアリールであるかあるいは窒素上の置換基が4〜7員の複素環を形成するならば、従って、式IIの部分はカルバメートもしくはチオカルバメートであり；又は
R5及び R6が、一緒になってQに対して二重結合した酸素もしくは硫黄であり、そしてR7がアルコキシ、シクロアルコキシ、アラルキルオキシ、アリールオキシ、置換されているアラルキルオキシ、もしくは置換されているアリールオキシであるならば、従って、式IIの部分はカルボネートもしくはチオカルボネートであり；
B及びB'は、独立して式III もしくはIVのプリンもしくはピリミジン残基であり、それらは、フラノースもしくは炭素環の１'の位置に対して、プリンの９位もしくはピリミジンの１位を介して結合し；
【化４】
2005508297.tif 000011
【化５】
2005508297.tif 000012
ここで：
R10及び R14は、独立してCN、N3、ヒドロキシ、オキソ、アミノ、メルカプト、アルキルチオ、アルコキシ、アリールオキシ、アルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アラルキルアミノ、アリールアミノ、ジアラルキルアミノ、ジアリールアミノ、N−アルキル−N−アリールアミノ、又はジアルキルアミノであり、ここで、前記アルキル及び／又はアリール基は、任意に結合し複素環を形成し；又は
R10及び R14は、独立して式Ｖのアシルアミノであり；又は
【化６】
2005508297.tif 000013
R10及び R14がその第一原子として窒素を有する場合、R10と R11又はR14と R15が−CH＝CH−として一緒になって5員の、縮合イミダゾール環を形成し、任意に、当該イミダゾール環上で、置換されているもしくは置換されていない、アルキル、シクロアルキル、アラルキル、もしくはアリール部分により置換され；
Jは、炭素又は窒素であり、Jが窒素であるならば、R12は存在せず；
R11は、水素、O、又は不在であり；
R12は、それが存在する場合、水素、アルキル、アジド、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アラルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ジアリールアミノ、ジアラルキルアミノ、N−アルキル−N−アリールアミノ、N−アルキル−N−アラルキルアミノ、N−アラルキル−N−アリールアミノ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシもしくはアラルキルオキシ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオもしくはアラルキルチオ、もしくは、ω−X（C1−6アルキル）G−であり、ここで、Xは、置換されているもしくは置換されていないアミノ、メルカプト、ヒドロキシもしくはカルボキシであり、そしてGは、−O−、−S−、−NR20−、−N（CO）R20−、もしくはN（CO）OR22であり；
R13は、水素、塩素、フッ素、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アラルキコキシ、アミノ、一置換アミノ、二置換アミノ、アルキルチオ、トリフルオロアルキルチオ、アリールチオ、もしくはアラルキルチオであり、ここで、硫黄上での置換基は、不飽和結合を有する又は有さない最大で20個の炭素原子を含み；
R15は、水素、又は置換基を有するもしくは有さないアシルであり；
R16は、水素、メチル、置換されているもしくは置換されていない、アルキル、ハロ、アリール、アラルキル、アルケニル、置換されているアルケニル、アルキニル、又は置換されているアルキニルであり；
R17は、ハロゲン、水素、アルコキシ、又は式Ｖのアシルアミノ基である、かあるいは；R16及びR17が一緒になる場合、ヘテロ原子もしくは置換基を有するもしくは有さない5〜７員の環を示し；
R18は、水素、オキソ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アラルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ジアリールアミノ、アリールアルキルアミノ、アリールアラルキルアミノ、アルキルアラルキルアミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、アラルキルチオ、又は式Ｖのアシルアミノであり；
R19は、アミノ、又は一置換もしくは二置換アミノであり、従って、式Ｖの部分は、ウレアもしくはチオウレアであり；又は
R19は、アルコキシ、アラルキルオキシもしくはアリールオキシであり、従って、式Ｖの部分は、カルバメートもしくはチオカルバメートであり；又は
R19は、水素、置換基もしくはヘテロ原子を有するもしくは有さない、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アラルキル、アラルケニル、アラルキニルであり、従って、式Ｖの部分は、アミドもしくはチオアミドであり；
R20及びR21は、独立して、水素、置換基もしくはヘテロ原子を有するもしくは有さない、アルキル、シクロアルキル、アラルキルもしくはアリールであり；
R22は、置換基もしくはヘテロ原子を有するもしくは有さない、アルキル、シクロアルキル、アラルキル、もしくはアリールであり；そして
W1は、酸素又は硫黄である）
のヌクレオシドポリリン酸塩である、請求項3に記載の方法。
【請求項５】
前記ヌクレオシドポリリン酸塩の糖の部分の少なくとも１つが：リボフラノシル、2'−デオキシリボフラノシル、3'−デオキシフラノシル、2'，3'−ジデオキシリボフラノシル、アラビノフラノシル、3'−デオキシアラビノフラノシル、キシロフラノシル、2'−デオキシキシロフラノシル及びリキソフラノシルからなる群から選択されている請求項4に記載の方法。
【請求項６】
前記ヌクレオシドポリリン酸塩が、ヌクレオシド二リン酸塩、ヌクレオシド三リン酸塩、及びジヌクレオシポリリン酸塩からなる群から選択されている、請求項4に記載の方法。
【請求項７】
前記ヌクレオシドポリリン酸塩が、ウリジン−5'−二リン酸塩、アデノシン−5'−二リン酸塩、シチジン−5'−二リン酸塩、ウリジン−5'−三リン酸塩、アデノシン−5'−三リン酸塩、シチジン−5'−三リン酸塩、及びエテノシチジン−5'−三リン酸塩からなる群から選択されている、請求項6に記載の方法。
【請求項８】
前記一般式Ｉのジヌクレオシドポリリン酸塩が：P1，P4−ジ（ウリジン−5'−）四リン酸塩；P1−（シチジン−5'−）P4−（ウリジン−5'）四リン酸塩；P1，P4−ジ（アデノシン−5'−）四リン酸塩；P1−（アデノシン−5'−）P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩；P1−（アデノシン−5'−）P4−（シチジン−5'）四リン酸塩；P1，P4−ジ（エタノアデノシン）四リン酸塩；P1−（ウリジン−5'−）P4−（チミジン−5'−）四リン酸塩；P1−（アデノシン−5'−）P4−（イノシン−5'−）四リン酸塩；P1，P4−ジ（ウリジン−5'−）P2，P3−メチレン四リン酸塩；P1，P4−ジ（ウリジン−5'−）P2，P3−ジフルオロメチレン四リン酸塩；P1，P4−ジ（ウリジン−5'−）P2，P3−イミド四リン酸塩；P1，P4−ジ（4−チオウリジン−5'−）−四リン酸塩；P1，P4−ジ（3，N4−エテノシチジン−5'−）四リン酸塩；P1，P4−ジ（イミダゾ[1，2−c]ピリミジン−5（6H）−オン−2−（3−ニトロフェニル）−6−β−D−リボフラノシド−5'−）四リン酸塩；P1−（イノシン−5'−）P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩；P1−（4−チオウリジン−5'−）P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩；P1−（シトシン−β−D−アラビノフラノシド−5'−）P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩；P1−（ウリジン−5'−）P4−（キサントシン−5'−）四リン酸塩；P1−（2'−デオキシウリジン−5'−）P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩；P1−（3'−アジド−3'−デオキシチミジン−5'−）P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩；P1，P4−ジ（3'−アジド−3'−デオキシチミジン−5'−）四リン酸塩；P1，P4−ジ（3'−アジド−3'−デオキシチミジン−5'−）四リン酸塩；2'（3'）−ベンゾイル−P1，P4−ジ（ウリジン−5'−）四リン酸塩；P1，P4−ジ（2'（3'）−ベンゾイルウリジン−5'−）四リン酸塩；P1−（2'−デオキシグアノシン−5'−）P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩；P1−（2'−デオキシアデノシン−5'−）P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩；P1−（2'−デオキシイノシン−5'−）P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩；P1−（2'−デオキシシチジン−5'−）P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩；P1−（8−アザアデノシン−5'−）P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩；P1−（6−メルカプトプリンリボシド−5'−）P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩；P1−（6−メルカプトプリンリボシド−5'−）P4−（2'−デオキシウリジン−5'−）四リン酸塩；P1−（4−チオウリジン−5'−）P4−（アラビノシチジン−5'−）四リン酸塩；P1−（アデノシン−5'−）P4−（4−チオメチルウリジン−5'−）四リン酸塩；P1−（2'−デオキシアデノシン−5'−）P4−（6−チオヘキシルプリンリボシド−5'−）四リン酸塩及びP1−（6−デシルオキシプリンリボシド−5'−）P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩、からなる群から選択されたジヌクレオシド四リン酸塩である、請求項6に記載の方法。
【請求項９】
前記一般式Ｉのジヌクレオシドポリリン酸塩が：P1，P3−ジ（ウリジン−5'−）三リン酸塩；P1−（シチジン−5'−）P3−（ウリジン−5'）三リン酸塩；P1，P3−ジ（アデノシン−5'−）三リン酸塩；P1−（アデノシン−5'−）P3−（ウリジン−5'−）三リン酸塩；P1−（アデノシン−5'−）P3−（シチジン−5'−）三リン酸塩；P1，P3−ジ（エタノアデノシン）三リン酸塩；P1−（ウリジン−5'−）P3−（チミジン−5'−）三リン酸塩；P1−（アデノシン−5'−）P3−（イノシン−5'−）三リン酸塩；P1，P3−ジ（ウリジン−5'−）P2，P3−メチレン三リン酸塩；P1，P3−ジ（ウリジン−5'−）P2，P3−ジフルオロメチレン三リン酸塩；P1，P3−ジ（ウリジン−5'−）P2，P3−イミド三リン酸塩；P1，P3−ジ（4−チオウリジン−5'−）三リン酸塩；P1，P3−ジ（3，N4−エテノシチジン−5'−）三リン酸塩；P1，P3−ジ（イミダゾ[1，2−c]ピリミジン−5（6H）−オン−2−（3−ニトロ）−フェニル−6−β−D−リボフラノシド−5'−）三リン酸塩；P1−（イノシン−5'−）P3−（ウリジン−5'−）三リン酸塩；P1−（4−チオウリジン−5'−）P3−（ウリジン−5'−）三リン酸塩；P1−（シチジン−β−D−アラビノフラノシド−5'−）P3−（ウリジン−5'−）三リン酸塩；P1−（ウリジン−5'−）P3−（キサントシン−5'−）三リン酸塩；P1−（2'−デオキシウリジン−5'−）P3−（ウリジン−5'−）三リン酸塩；P1−（3'−アジド−3'−デオキシチミジン−5'−）P3−（ウリジン−5'−）三リン酸塩；P1，P3−ジ（3'−アジド−3'−デオキシチミジン−5'−）三リン酸塩；2'（3'）−ベンゾイル−P1，P3−ジ（ウリジン−5'−）三リン酸塩；P1，P3−ジ（2'（3'）−ベンゾイルウリジン−5'−）三リン酸塩；P1−（2'−デオキシグアノシン−5'−）P3−（ウリジン−5'−）三リン酸塩；P1−（2'−デオキシアデノシン−5'−）P3−（ウリジン−5'−）三リン酸塩；P1−（2'−デオキシイノシン−5'−）P3−（ウリジン−5'−）三リン酸塩；P1−（2'−デオキシシチジン−5'−）P3−（ウリジン−5'−）三リン酸塩；P1−（4−チオウリジン−5'−）P3−（ウリジン−5'−）三リン酸塩；P1−（8−アザアデノシン−5'−）P3−（ウリジン−5'−）三リン酸塩；P1−（6−メルカプトプリンリボシド−5'−）P3−（ウリジン−5'−）三リン酸塩；P1−（6−メルカプトプリンリボシド−5'−）P3−（2'−デオキシウリジン−5'−）三リン酸塩；P1−（4−チオウリジン−5'−）P3−（アラビノシチジン−5'−）三リン酸塩；P1−（アデノシン−5'−）P3−（4−チオメチルウリジン−5'−）三リン酸塩；P1−（2'−デオキシアデノシン−5'−）P3−（6−チオヘキシルプリンリボシド−5'−）三リン酸塩；及びP1−（6−ノニルオキシプリンリボシド−5'−）P3−（ウリジン−5'−）三リン酸塩、からなる群から選択されたジヌクレオシド三リン酸塩である、請求項6に記載の方法。
【請求項１０】
前記一般式Ｉのジヌクレオシドポリリン酸塩が：P1−（ウリジン−5'−）P2−（4−チオウリジン−5'−）二リン酸塩；P1，P5−ジ（ウリジン−5'−）五リン酸塩；及び，P1，P6−ジ（ウリジン−5'−）六リン酸塩、からなる群から選択されている、請求項6に記載の方法。
【請求項１１】
前記ヌクレオシドポリリン酸塩が、更にそのための医薬的に適切な担体を含んで成る医薬組成物の滅菌製剤中にある、請求項4に記載の方法。
【請求項１２】
前記ヌクレオシドポリリン酸塩を含んで成る医薬組成物が、約10−7M〜約10−1Mの範囲の関節流体濃度を達成するために投与されている、請求項11に記載の方法。
【請求項１３】
前記P2Yプリン作動性受容体作用物質を含んで成る医薬組成物が、約10−5M〜約10−1Mの範囲の関節流体濃度を達成するために投与されている、請求項12に記載の方法。
【請求項１４】
前記ヌクレオシドポリリン酸塩が、関節炎を治療するための既存の治療剤と共投与されている、請求項4に記載の方法。
【請求項１５】
前記既存の治療剤が、鎮痛剤、抗炎症薬、筋弛緩剤、抗鬱剤、及び関節の潤滑を促す薬剤からなる群から選択されている、請求項14に記載の方法。
【請求項１６】
前記投与が、前記化合物の局所投与である請求項1に記載の方法。
【請求項１７】
前記化合物が、溶液、ゲル、懸濁、クリーム、軟膏、泡沫、ペッサリー又は錠剤の形態において投与されている、請求項16に記載の方法。
【請求項１８】
前記投与が前記化合物の全身又は局所投与である、請求項1に記載の方法。
【請求項１９】
前記全身投与が、前記対象者に対して、治療上有効な量の前記化合物が全身的な吸収及び循環を介して前記対象者の滑膜組織に接触するように：呼吸に適した粒子のエアロゾルの懸濁；点鼻薬もしくは鼻腔スプレーとして投与するための液体もしくは液体懸濁；経口的にかあるいは鼻咽頭気道に対して投与するための噴霧状の液体；経口形態；座薬形態；注射用形態；及び経皮パッチ又は経皮パッド；からなる群から選択された形態において前記化合物を投与する、請求項18に記載の方法。
【請求項２０】
前記局所投与が、前記対象者に対して、前記化合物を、患部関節に対する局所関節内投与をするための注射用形態で投与することである、請求項19に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本発明は、P2Y受容体作用物質を用いることにより、滑膜流体（synovial fluid）、ムチン、ヒアルロン酸、及び／又は表層活性リン脂質の分泌を刺激し、それによってかかる治療を必要とする患者の関節潤滑を増強する方法に関連する。
【背景技術】
【０００２】
関節腔は、包によってとり囲まれそして靭帯によって束ねられている。滑膜は関節腔に広がり、それ自身、重要な運動を許容するために幾重にも折り重なっている。滑膜の内部には、食作用及び分泌に関わるA型の細胞並びに滑膜流体のヒアルロン酸塩を合成すると考えられているB細胞からなる滑膜細胞の層が整列している（Boraら、Hand Clin. Vol.3：pp.325〜336（1987））。
【０００３】
ヒトの関節は、関節ではない内部の接続表層を覆う滑膜から分泌される流体によって潤滑されている。滑膜流体の潤滑特性は、表層活性リン脂質（SAPL）、ムチン糖タンパク質のルブリシン、ヒアルロン酸（ヒアルロナン）、及び水からなる界面活性物質に原因する（Schwartzら、Br.J.Rheumatol.Vol35：pp.821〜827（1996）、Jayら、Br.J.Rheumatol.Vol27：pp.594〜600（2000）、Marshallら、Curr.Opin.Rheumatol.Vol.12：pp.468〜474（2000）、Boraら、Hand Clin. Vol.3：pp.325〜336（1987）、Hillsら、Br.J.Rheumatol.Vol.37：pp.143〜147（1998）、Jayら、Connect.Tissue.Res.Vol28：pp.245〜255（1996）、Hillsら、Proc.Inst.Mech.Eng.Vol.214：pp.83〜94（2000））。ヒアルロナンは、正常な滑膜流体の重要な構成成分であり且つ関節恒常性のための重要な貢献物質である。ヒアルロンは、抗炎症特性及び抗侵害特性を正常な滑膜流体に対して与え、そして関節の潤滑に寄与し、関節表層に渡る負荷伝達を緩衝し、そして関節組織に対するヒアルロナンの持続補充資源を担う（Marshall、Curr. Opin. Rheumatol. Vol.12：pp.468〜474（2000））。
【０００４】
関節潤滑は、変形性関節症（OA）（Schwartzら、Br.J.Rheumatol.Vol35：pp.821〜827（1996）、Marshallら、Curr.Opin.Rheumatol.Vol.12：pp.468〜474（2000）、Hillsら、Br.J.Rheumatol.Vol.37：pp.143〜147（1998）、Hillsら、Proc.Inst.Mech.Eng.Vol.214：pp.83〜94（2000））及び下記の関節形成手術（Delecrinら、Clin.Orthop.Vol.307:pp.240〜249（1994））では損なわれている。OAは、関節の内部及び周辺における新たなる骨及び軟部組織の増殖に関連する関節軟骨の進行性の変性及び欠失を特徴とする変形性関節疾患である。OAは：（1）根底にある原因が明らかではない1次段階；（2）外傷、反復ストレス（職業、運動）、先天性の異常、代謝性疾患、又は他の骨／関節の疾患などの素因に関連する2次段階、及び（3）滑膜炎を伴う手のOAを特徴とするびらん性段階、並びに関節表層の放射線中心びらん（radiographic central erosion）段階として分類できる。リユーマチ性の関節炎とは違い、全身性の疾患は同時に多数の関節に影響を及ぼし、OAは、外傷を受けたかあるいは機械的に酷使された関節にのみ関与する。OAは、本質的に、磨耗の速度が、軟骨細胞による新たなるコラーゲン繊維の生産を上回る場合に進行する。リン脂質など、関節内の脂質は、骨折が起こるか否かに関わらず、最終的にはOAに至る衝撃外傷の後、間もなくして特性が変化する（Rabinowitzら、Clinical Orthopedics and Related Res.Vol.190：pp.292〜298（1984））。
【０００５】
患者の病歴
変形性関節症の典型的な症状としては、共通して休むことの少ない１又は少数の関節に影響を及ぼす使用に関連した痛み及び夜間の痛み、並びに休息後あるいは朝の30分も続かない短時間の硬直が挙げられる。他の症状としては、関節の動きの欠失又は関節が不安定なことによる機能的な制限、変形及び捻髪音（「クラッキング」）が挙げられる。
【０００６】
身体検査
身体検査により、慢性関節炎もしくは左右非対称の少数／多発性関節炎、及びHebeldenもしくはBouchard節のような、関節の縁部の硬いもしくは「骨の」隆起が明らかになる。患者は、まれに冷たい滲出液を伴う滑膜炎を示す。身体検査により、れき音、動作中の関節の聞き取れるほどのきしみ音又は亀裂が時々確認される。変形性関節症は、変形をも伴う。患者は、動きの制限、例えば、でん部内側の回転制限を示す。客観的な神経学的異常は、脊椎が巻き込まれ、そして椎間円板、アポフィーゼ関節及び傍脊椎靭帯に影響が及ぶ場合に時々確認される。
【０００７】
診療所での調査
診療所での機械的な仕事は通常のことであり、通風のような関節炎の原因を除外するため及び他の一次疾患を検出するために行われている。赤血球沈降速度は、滑膜炎の患者においては、時々上昇する以外は正常である。
【０００８】
滑膜流体解析
滑膜流体の解析により、変形性関節症の関節流体特性に関する情報が供される。通常、滑膜流体は、良い粘性を有する藁色であり且つ関節流体白血球細胞（WBC）の数は、2000／μLに満たない。関節流体を解析することは、結晶誘導関節炎及び感染症を除外することにおいて重要である。
【０００９】
X線検査
疾患が進行し、且つ期間が長期に渡るにつれ、放射線検査は、関節空間の狭さく、肋軟骨下ののう胞及び骨棘を発見する。びらんは、関節表層の中心部分に沿って肋軟骨下に生じるのでリューマチ性及び乾癬性の関節炎の特徴とは異なる。
【００１０】
SAPLが変形性関節症の関節中に注射された場合、OAによる磨耗は首尾よく減少している（Hills，Proc.Inst.Mech.Eng.Vol.214：pp.83〜94（2000））OAにおいて、滑膜流体中のヒアルロナンの濃度及び分子量は、滑膜細胞による、通常より低い分子量のヒアルロナンの希釈、分断及び生産により減少する。その結果、ヒアルロナンにより維持される滑膜流体の恒常性の状態が損なわれる（Marshall,Curr.Opin.Rheumatol.12：pp.468〜474（2000））。滑膜流体から関節軟骨上に沈着するSAPLの最外潤滑層は、OAを有さない（Hills及びMonds、Br.J.Rheumatol.Vol37：pp.143〜147（1998））。全ての膝を置換したウサギモデルにおける総関節形成後の関節流体における変化に関する研究により、関節流体の体積及び総タンパク質濃度は、正常（値）へと回復するのだが、ヒアルロン酸の濃度及び分子量は減少し、正常な値へと完全に回復することはないことが示されている（Delecrinら、Clinical Orthopaedics and Related Reserch vol.307：pp.240〜249（1994））。
【００１１】
OAでは滑膜流体のヒアルロナンが異常であるという認識により、病理学的な変形性関節症滑膜流体の除去、並びにヒアルロナンの分子量及び濃度を通常レベルへと回復せしめる生成物質により置換することが、有利な臨床的効果を有するという説がもたらされる。この治療法は、関節内補充療法（Marshall,Curr.Opin.Rheumatol.Vol12：pp.468〜474（2000））と呼ばれている。関節潤滑特性を有するヒアルロン酸の市販製剤（Healon）は、OAのための関節内補充療法（Jayら、J.Biomed.Math.Res.vol.40：vol.414〜418（1998））の場合に使用されている。しかし、ヒアルロン酸の市販の製剤は、滑液のムチンに比べて潤滑特性に劣る（Jayら、J.Biomed.Math.Res.vol.40：vol.414〜418（1998））。関節炎を処置するのに用いられる医薬治療剤としては、鎮痛剤、抗炎症薬、筋弛緩剤、及び抗鬱剤があげられる。アスピリンは、抗炎症及び鎮痛の作用の両方が理由で、えり抜きの薬剤である。他の非ステロイド系の抗炎症薬が使用されて良く、そして細胞膜脂質のアラキドン酸へのリポオキシゲナーゼによる転換を阻害することにより作用する。局所カプサイシンクリームは、手又は膝の痛みを取り除くことに役立ち、そして感覚ニューロンからペプチドP物質の放出を生じさせことにより作用する。筋弛緩剤は、通常、低投与量で用いられており、そしてそれには、ジアゼパン、シクロベンザプリン、カリソプロドール及びメトカルバモールが挙げられる。コルチコステロイドは、経口的な投与はされないが、炎症を減らすために筋内へ投与さえて良く、そして軟骨破壊の加速化を回避するために間欠性基底へと投与されて良い。しかし、コルチコステロイドの結晶製剤は、滑膜炎を生じうる。純粋な鎮痛剤及び鬱病のための三環系抗鬱薬も有用でありうる。しかし、イブプロフェン及びインドメタシンのような非ステロイド系の抗炎症剤（NSAID）、並びにシクロオキシゲナーゼ−2（COX−阻害物質）に対して特異的なセレコジブなどのより新しい抗炎症薬（NASAID）は、胃腸毒性を誘導することが知られている（Mundasadら、J.Ocul.Pharmacol.Ther.、Vol.17（No.2）：pp.173〜179（2001））。
【００１２】
上記のように、OAを治療するために通常用いられる薬剤は、有害な副作用、例えば、胃腸毒性を引き起こす可能性があり、且つ関節流体特性を直接的に改善するかあるいは関節の潤滑を増強するわけではない。関節潤滑を増強することによるOA治療において、安全且つ有効な薬剤に対する要請が存在する。
【００１３】
P2Y受容体作用物質は、肺の呼吸器上皮表層から、ムチン、界面活性剤、及び水の分泌を誘導することが知られている（Yerxa及びJhonson、Drugs Future、vol.24：pp.759〜769（1999）；Benaliら、Am.J.Respir.Cell.Mol.Biol.Vol.10：pp.363〜368（1994）；Gorbanら、Am.J.Physiol.p.267：L265〜L663（1994）；Knowlesら、New Engl.J.Med.Vol.325：pp.533〜538（1991）；Lethemら、Am.Respir.Cell.Mol.Biol.Vol.9：pp.315〜322（1993））。加えて、P2Y受容体作用物質は、涙流体の分泌を誘導し且つ結膜上皮からのムチン及び水の放出を刺激することによってドライアイ疾患において眼の表層の潤滑性及び水和を向上させる（Hosoyaら、J.Pharmacol.Exp.Ther.Vol.291（No.1）：pp.53〜59（1999）；Murakamiら、Invest.Opthalmol.Vis.Sci.Vol.（No.1）：S457（ARVO Abstract 2423（2000）；Murakamiら、Curr.Eyes Res.Vol.21（No.4）：pp.782〜787（2000）；Shuieら、Life Sci.Vol.66（No.6）：PL105〜111（2000）；Jumblatt及びJumblatt、Exp.Eyes Res.Vol.67：pp.341〜346（1998））。しかし、P2Y受容体が、関節に対して又は関節潤滑において任意の有利な影響を及ぼすことは知られていない。
【００１４】
P2Y受容体作用物質は、粘膜毛様体（MCC）系の全ての構成成分を調節することも知られている。その調節方法とは、（1）in vitroで杯細胞によるムチン分泌の速度及び総量の両方を増加させること（Lathemら、Am.J.Respir.Cell.Mol.Biol.Vol.9：pp.315〜22（1933））；（2）in vitroでヒト気道上皮細胞の繊毛収縮頻度を増やすこと（Drutzら、Drug Dev.Res.Vol.37（No.3）：p185（1986））；（3）Cl−分泌を増やし、従って、in vitroで気道上皮細胞からの水の分泌を増やすこと（Masonら、Br.J.Pharmacol.Vol.103：pp.1649〜1656（1991））；並びに（4）II型の肺胞細胞からの界面活性物質を放出させること（Goban,Am.J.Physiol.Vol 267:L625〜633（1994））による。かかる作用に加えて、P2Y作用物質は、P2Y2レセプターによるホスホリパーゼCの刺激により細胞内Ca＋＋を増加させることも分かっている（Brownら、Mol.Pharmacol.Vol.40：pp648〜655（1998）；Yerxa及びJhonson、Drugs of the Future Vol24（No.7）：pp.759〜769（1999））。米国特許第5,789,391号；5,763,447号；5,635,160号；5,935,555号；5,656,256号；5,628,984号；5,902,567号；5,292,498号；5,837,861号；5,900,407号；5,972,904号；5,981,506号；5,958,897号；5,968,913号；6,022,527号；6,133,247号；及び6,143,329号、並びにPCT国際特許出願WO97／29756、WO97／35591、WO96／40059、WO97／05195、WO94／08593、WO98／19685、WO98／15835、WO98／03182、WO98／03177、WO98／34942、WO98／34593、WO99／09998、WO99／32085、WO99／61012、WO00／30629、WO00／50024及びWO96／40059には、副鼻腔炎、中耳炎、繊毛運動障害、固定化に関連する肺炎、肺疾患、嚢胞性線維症、ドライアイ疾患、膣の乾燥、気管支炎、浮腫状網膜疾患、網膜変性及び剥離、並びに胃腸疾患における、ジヌクレオチド及び類縁化合物の有利な治療効果が開示されている。
【発明の開示】
【００１５】
発明の概要
本発明は、治療を必要とする対象者の関節から分泌される滑膜流体の量又は組成を改変する方法に関する。前記方法は、P2Yプリン作動性受容体作用物質を含んで成る医薬組成物を対象者に対して、滑膜流体の量又は組成を改変する有効な量で投与することを含んで成る。P2Yプリン作動性受容体作用物質は、滑膜流体の、ルブリシン、ヒアルロン酸、又は表層活性リン脂質の分泌を刺激し；関節の潤滑を増強する、又は変形性関節症を治療するのに有効な量で投与されている。本発明中で有用な医薬組成物は、P2Yプリン作動性受容体作用物質、又は医薬的に許容できるその担体と一緒の作用物質を組み合わせを含んで成る。P2Yプリン作動性受容体作用物質は式Ｉの化合物であり、そして：ウリジン−、アデノシン−、シチジン−5'−ジ又はトリリン酸塩、ジヌクレオシドポリリン酸塩、及びそれらの類似物が挙げられるが、それらには限定はされない。
【００１６】
前記医薬組成物の投与経路としては：液体、クリーム、ゲル、軟膏、泡末、ペッサリー、又は錠剤による局所投与；点鼻薬又はスプレー、吸入（噴霧器もしくは他の装置）、経口形態（液体又はピル）、注射可能形態、座薬形態、又は経皮形態による全身投与；並びに関節腔中への直接注射による関節内投与が挙げられるが、それらに限定はされない。全身投与及び関節内投与は、移植された装置などによる持続放出によっても達成できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
発明の詳細な説明
本発明は、治療を必要とする患者の関節から分泌される滑膜流体の量又は組成を改変する方法を供する。滑膜流体の潤滑特性を決定し且つプリン作動性受容体作用物質による全身又は局所的な治療法に従って改変されて良い成分としては、水、粘液性糖タンパク質ルブリシン、ヒアルロン酸及び／又は表層活性リン脂質が挙げられる。滑膜流体中での成分の量を増加させること又は成分比率を変化させることにより、関節の潤滑を増強し、そして関節分泌及び潤滑が低下したことに伴う障害、例えば、変形性関節症並びに膝及びでん部置換体の合併症を改善できる。従って、本発明の１つの実施態様は、滑膜流体の、ルブリシン、ヒアルロン酸、及び／又は表層活性リン脂質の分必を増強せしめることである。前記方法は、プリン作動性受容体作用物質もしくはプリン作動性受容体作用物質の組み合わせを含んで成る製剤を、それらを必要とする対象者に対して、膝、でん部及び肩など関節からの滑膜流体の量もしくは組成を改変するのに有効な量において投与することを含んで成る。前記P2Yプリン作動性受容体作用物質は、P2Yプリン作動性レセプターを刺激し、それにより、分泌前効果をもたらすシグナル伝達経路の相互作用が生じる。
【００１８】
本発明の他の実施態様は、プリン作動性受容体作用物質を投与することによって関節の潤滑を高める方法である。かかる方法は、哺乳動物、好適にはヒトにおいて、限定はされないが、関節炎、変形性関節症、関節手術、膝及びでん部の置換、並びに関節形成手術（関節の置換）から生じる関節の分泌及び／もしくは潤滑の欠陥の予防、治療技術及び／もしくは治療を提供する。
【００１９】
本発明の方法は、関節炎などの関節の硬直に伴う障害を治療するために通常用いられる抗炎症薬及び鎮痛剤に対して、専ら又は付随的に用いることができる。組み合わせ治療方法は、関節の潤滑が減少したことに関連するOAなどの障害を予防、処置又は治療するために通常用いられる、非ステロイド系の抗炎症薬（NSAID）などの薬剤に伴う副作用を軽減することにおいて有利である。安全性を高めることに加えて、組み合わせ治療方法は、治療の効果を高めることにおいても有利である。
【００２０】
化合物の説明
P2Y作用物質としては、一般式（Ｉ）のヌクレオシドポリリン酸塩又はジヌクレオシドポリリン酸塩が挙げられる。本願中で有用なヌクレオシド三リン酸塩としては、ウリジン−5'−三リン酸塩（UTP）、アデノシン−5'−三リン酸塩（ATP）、シチジン−5'−三リン酸塩（CTP）及び一般式Ｉのそれらの類似体が挙げられ；一般式Ｉのジヌクレオシドポリリン酸塩も本願においては有用である。
【００２１】
式Ｉの化合物が開示されている。
【化１】
2005508297.tif 000002
（式中、X１、X2及びX3は、独立してもしくは一緒に、酸素、メチレン、モノクロロメチレン、ジクロロメチレン、モノフルオロメチレン、ジフルオロメチレン、もしくはイミドであり；
T'、T、W及びVは、独立してもしくは一緒に酸素もしくは硫黄であり；
ｍ＝0、1又は2；
n＝0又は1；
p＝0、１、又は２であり；
ここで：
m＋n＋pの合計は１〜5であり；
Mはそれぞれ、独立して水素もしくは医薬的に許容できる無機もしくは有機の対イオンであり；
A＝置換基もしくはヘテロ原子を有するもしくは有さない、M、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、アリール、もしくはアシルチオアルキルであり；又は
Aは以下のように規定されているヌクレオシド残基であり：
【化２】
2005508297.tif 000003
ここで：
D1及びD2は、それぞれ独立してO又はCであり；
Z及びZ'は独立してH、OR2又はOR3であり；
Y及びY'は独立してH、F、OR1又はOR4であり；
独立して、R1、R2、R3及びR4はHであり、R1、R2、R3又はR4の少なくとも１つがHであるならば式IIの残基であり；
【化３】
2005508297.tif 000004
ここで：
Qは炭素原子であり；
R5、R6及びR7は、独立してH、アルキル、シクロアルキル、アラルキル、アリール、置換されているアラルキル、置換されているアリール、もしくは複素環式の部分であり、又はR5及びR6は、一緒になって4〜7員の炭素環式もしくは複素環式の環を形成し、従って、式IIに規定されている部分がエーテルであり；又は
R5及び R6が、一緒になってQに対して二重結合した酸素もしくは硫黄であり、そしてR7がアルキル、シクロアルキル、アラルキル、置換されているアラルキル、アリール、置換されているアリール、もしくは4〜7員の複素環であるならば、従って、式IIの部分はエステルもしくはチオエステルであり；又は
R5及び R6が、一緒になってQに対して二重結合した酸素もしくは硫黄であり、そしてR7がアミノ又は一置換アミノもしくは二置換アミノであり、ここで置換基が、アルキル、シクロアルキル、アラルキル、アリール、置換されているアラルキルもしくは置換されているアリールであるかあるいは窒素上の置換基が4〜7員の複素環を形成するならば、従って、式IIの部分はカルバメートもしくはチオカルバメートであり；又は
R5及び R6が、一緒になってQに対して二重結合した酸素もしくは硫黄であり、そしてR7がアルコキシ、シクロアルコキシ、アラルキルオキシ、アリールオキシ、置換されているアラルキルオキシ、もしくは置換されているアリールオキシであるならば、従って、式IIの部分はカルボネートもしくはチオカルボネートであり；
B及びB'は、独立して式III もしくはIVのプリンもしくはピリミジン残基であり、それらは、フラノースもしくは炭素環の１'の位置に対して、プリンの９位もしくはピリミジンの１位を介して結合し、
【化４】
2005508297.tif 000005
【化５】
2005508297.tif 000006
ここで：
R10及び R14は、独立してCN、N3、ヒドロキシ、オキソ、アミノ、メルカプト、アルキルチオ、アルコキシ、アリールオキシ、アルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アラルキルアミノ、アリールアミノ、ジアラルキルアミノ、ジアリールアミノ、N−アルキル−N−アリールアミノ、又はジアルキルアミノであり、ここで、前記アルキル及び／又はアリール基は、任意に結合し複素環を形成し；又は
R10及び R14は、独立して式Ｖのアシルアミノであり；
【化６】
2005508297.tif 000007
又は、R10及び R14がその第一原子として窒素を有する場合、R10と R11又はR14と R15が任意に−CH＝CH−として一緒になって5員の、縮合イミダゾール環（エテノ化合物）を形成し、任意に、当該エテノ化合物のイミダゾール環上で、置換されているもしくは置換されていない、アルキル、シクロアルキル、アラルキル、もしくはアリール部分により置換され；
Jは、炭素又は窒素であり、Jが窒素であるならば、R12は存在せず；
R11は、水素、O（アデニン1−オキシド誘導体）又は不在（アデニン誘導体）であり；
R12は、それが存在する場合、水素、アルキル、アジド、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アラルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ジアリールアミノ、ジアラルキルアミノ、N−アルキル−N−アリールアミノ、N−アルキル−N−アラルキルアミノ、N−アラルキル−N−アリールアミノ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシもしくはアラルキルオキシ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオもしくはアラルキルチオ、もしくは、ω−X（C1−6アルキル）G−であり、ここで、Xは、置換されているもしくは置換されていないアミノ、メルカプト、ヒドロキシもしくはカルボキシであり、そしてGは、−O−（エーテルを示す）、−S−（チオエーテルを示す）、−NR20−（アミンを示す）、−N（CO）R20−（アミドを示す）、もしくはN（CO）OR22（カルバメートを示す）から選択されており；
R13は、水素、塩素、フッ素、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アラルキコキシ、アミノ、一置換アミノ、二置換アミノ、アルキルチオ、トリフルオロアルキルチオ、アリールチオ、もしくはアラルキルチオであり、ここで、硫黄上での置換基は、不飽和結合を有する又は有さない最大で20個の炭素原子を含み；
R15は、水素、又はアシル（例えば、置換基を有するもしくは有さない、アセチル、ベンゾイル、フェニルアシル）であり；
R16は、水素、メチル、置換されているもしくは置換されていない、アルキル、ハロ、アリール、アラルキル、アルケニル、置換されているアルケニル、アルキニル、又は置換されているアルキニルであり；
R17は、ハロゲン、水素、アルコキシ、又は式Ｖのアシルアミノ基であるか、あるいは；R16及びR17が一緒になる場合、ヘテロ原子もしくは置換基を有するもしくは有さない5〜７員の環を示し；
R18は、水素、オキソ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アラルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ジアリールアミノ、アリールアルキルアミノ、アリールアラルキルアミノ、アルキルアラルキルアミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、アラルキルチオ、又は式Ｖのアシルアミノであり；
R19は、アミノ、又は一置換もしくは二置換アミノであり、従って、式Ｖの部分は、ウレアもしくはチオウレアであり；又は
R19は、アルコキシ、アラルキルオキシもしくはアリールオキシであり、従って、式Ｖの部分は、カルバメートもしくはチオカルバメートであり；又は
R19は、水素、置換基もしくはヘテロ原子を有するもしくは有さない、アルキル、シクロアルキル、アラルキルもしくはアリールであり、従って、式Ｖの部分は、アミドもしくはチオアミドであり；
R20及びR21は、独立して、水素、置換基もしくはヘテロ原子を有するもしくは有さない、アルキル、シクロアルキル、アラルキルもしくはアリールであり；
R22は、置換基もしくはヘテロ原子を有するもしくは有さない、アルキル、シクロアルキル、アラルキル、もしくはアリールであり；そして
W1は、酸素又は硫黄である）
【００２２】
D1及びD2が酸素である場合、式Ｉのフラノシル部分は、独立的にD型の配置もしくはL型の配置又はD及びLの両方の配置であって良い。D型の配置が好適である。各ヌクレオシド残基は、独立して、α又はβ配置であって良いが、β−D型の配置にあるのが最も好ましい。フラノシル部分には、リボフラノシル、2'−デオキシリボフラノシル、3'−デオキシリボフラノシル、2',3'−ジデオキシリボフラノシル、アラビノフラノシル、3'−デオキシアラビノフラノシル、キシロフラノシル、2'−デオキシキシロフラノシル、及びリキソフラノシルの誘導体が挙げられて良く、そしてリボフラノシル及び2'−デオキシリボフラノシル部分が好適である。
【００２３】
式III の一般構造体中、点線は、これらの位置に単結合又は二重結合が存在していることを意味しており；二重結合又は単結合の相対的な位置は、R10及びR11置換基がケト−エノール互変異性をできるかどうかによって決定されている。
【００２４】
式IVの一般構造体中、2〜4位の点線は、これらの位置に単結合又は二重結合が存在していることを意味しており；二重結合又は単結合の相対的な位置は、R14 、R15及びR18置換基がケト−エノール互変異性をできるかどうかによって決定されている。R14が、ピリミジン環の４位で炭素原子に対して酸素又は硫黄原子から二重結合をしている場合、R15は水素である。
【００２５】
本明細書中で用いられた場合、用語「アルキル」とは、専らC1−10の、直鎖、枝分かれした、又は環状、飽和もしくは不飽和（即ち、アルケニル及びアルキニル）炭化水素鎖を意味し、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ペンチル、ヘキシル、オクチル、エテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、オクテニル、ブタジエニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、ヘプチニル、アレニル並びに任意に置換されているアリールアルケニル及びアリールアルキニルの基である。本明細書中で用いられた場合、用語「アシル」とは、有機酸基を意味し、ここでカルボキシル基の−OHは、他の置換基によって置換されている（即ち、X'CO−又はX'CS−として表されており、式中、X'は、水素、アルキル、アラルキル、アリール、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、アミノ、N−置換アミノ又はN，N−二置換アミノの基である）。用語「アシル」とは、それ自体具体的に、アリールアシル基を含む。アシル基の具体例としては、アセチル及びベンゾイルが挙げられる。本明細書中で用いられた場合、用語「アリール」とは、5〜12個の環原子からなる炭素環式又は複素環式の芳香族基を意味する。アリール基の例としては、フェニル、ナフチル、フラン、チオフェン、ピロール、ピリジン、イミダゾール、イソチアゾール、イソオキサゾール、ピラゾール、ピラジンなどが挙げられる。本明細書中で用いられた場合、用語「アルコキシ」とは、専らC1−10の、酸素原子に対して結合した、直鎖、枝分かれした、又は環状、飽和もしくは不飽和炭化水素鎖を意味する。これには、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、t−ブトキシ、及びデシルオキシが挙げられる。本明細書中で用いられた場合、用語「アリールオキシ」とは、例えば、フェニルオキシ、並びにアルキル−、ハロ−、及び／又はアルコキシ−置換されているアリールオキシ基を意味する。本明細書中で用いられた場合、用語「チオアルキル」とは、専らC1−10の、硫黄原子に対して結合した、直鎖、枝分かれした、環状、飽和もしくは不飽和炭化水素鎖を意味する。これには、例えば、チオメチル、チオエチル、チオプロピル、チオイソプロピル、チオブチル、チオ−t−ブチル、及びチオデシルが挙げられる。本明細書中で用いられた場合、用語「チオアリール」とは、例えば、チオフェニル、並びにアルキル−、ハロ−、及び／又はアルコキシ−置換されているチオアリール基を意味する。本明細書中で用いられた場合、用語「置換されているアルキル」及び「置換されているアリール」とは、例えば、アルキル及びアリール基を意味し、ここで、アリールもしくはアルキル基の1もしくは複数の原子もしく官能基が、他の原子もしくは官能基、例えば、ハロゲン、アリール、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、硫黄及びチオアルキルにより置換されているものと規定されている。本明細書中で用いられた場合、用語「ハロ」、「ハロゲン化物」又は「ハロゲン」とは、フルオロ、クロロ、ブロモ、及びヨードの基を意味する。
【００２６】
式Ｉの化合物の具体例は、WO99／09998中に開示されているものであり、この参考文献は本明細書中に組み込まれている。例えば、式Ｉの化合物としては：P1，P4−ジアデノシン四リン酸塩（A2P4）；ウリジン−5'−二リン酸塩（UDP）；ウリジン−5'−O−（2−チオ二リン酸塩）（UDPβS）；5−ブロモウリジン−5'−三リン酸塩（5−BrUTP）；5−（1−フェニルエチニル）−ウリジン−5'−三リン酸塩（5−（1−フェニルエチニル）UTP）；5−メチルウリジン−5'−二リン酸塩（5−メチルUDP）；4−ヘキシルチオウリジン−5'−三リン酸塩（4−ヘキシルチオUTP）；4−チオウリジン−5'−三リン酸塩（4−チオUTP）；2−メトキシウリジン−5'−三リン酸塩（2−メトキシUTP）；4−（1−モルホリノ）ウリジン−5'−四リン酸塩（4−（１−モルホリノ））UP4；4−ヘキシルオキシウリジン−5'−二リン酸塩（4−ヘキシルオキシUDP）；4−（N，N−ジメチル）シチジン−5'−三リン酸塩（N，N−ジメチルCTP）；4−（N−ヘキシル）シチジン−5'−三リン酸塩（N−ヘキシルCTP）；P1−（シチジン−5'）−P4−（ウリジン−5'）四リン酸塩（CP4 U）；P1−O−（メチル）−P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩（MeP4U）及び4−（N−シクロペンチル）チミジン−5'−三リン酸塩（N−シクロペンチルCTP）が挙げられる。
【００２７】
好適な式Ｉの化合物としては、5'−アデノシン−三リン酸塩（ATP）、5'−ウリジンン−三リン酸塩（UTP）、ウリジン−5'−O−（3−チオ三リン酸塩）（UTPγS）及びP1−（ウリジン−5'）−P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩（U2P4）が挙げられる。特に好適な式Ｉの化合物としては、5'−［4−（チオウリジン）］−四リン酸塩（4−チオUTP）及びP1−（シチジン−5'）−P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩（CP4U）が挙げられる。式（Ｉ）の所定の化合物（例えば、UTP、dUDP、ATPγS及び４−チオUDP）は公知であり且つ公知の方法又はその変更版により作ることができ、その方法は当業者により明らかであろう。例えば、ヌクレオシド二リン酸塩の所定のチオリン酸塩類似物（UDP−β−Sなど）の調製及び同定法は、米国特許第3,846,402号及びGooddy及びEckstein（J.Am.Chem.Soc.Vol.93:pp.6562〜6257（1971））に開示されている。代わりに、UTP及び他のそれの類似物もSigma（St.Louis、MO）及びPharmacia（Uppsala、Sweden）などの業者から商業的に入手できる。
【００２８】
本発明のある実施態様は、加水分解抵抗性作用物質を用いる方法である。加水分解抵抗性作用物質とは、変更されたリン酸エステル骨格、例えば、メチレン、イミドもしくは他の基、又はリン酸エステル及び／もしくはリン酸無水結合が容易に加水分解されるのを保護するいくつか他の構造的な変更を伴うヌクレオチドである。他の実施態様は、ジヌクレオシドポリリン酸塩（これもまた、終末リン酸塩基が無いことにより加水分解耐性である）を用いる方法である。所定のジヌクレオチドリン酸塩は、特に加水分解に対して抵抗性である。例えば、P1−（シチジン−5'）−P4−（ウリジン−5'−）四リン酸塩は、P1，P4−ジ（ウリジン−5'−）四リン酸塩と比べて一層抵抗性である。更に一層、リン酸塩の鎖の末端に位置する基により、加水分解に対する何らかの安定性が与えられる。それは例えば、単純なアルキルリン酸塩エステル（メチル、エチル、ベンジルなど）又は一層ゆっくりと加水分解するチオリン酸塩誘導体（例えば、UTPγS）である。多くのP2Y作用物質は、ジヌクレオチド又はジヌクレオチドの類似物であり、そしてこれらの多くは、P2Y2受容体において特に活性がある。一般式Ｉのジヌクレオシドポリリン酸塩は、本願中で有用である。従って、本発明の更に好適な実施態様は、P2Y2受容体作用物質を用いて患部関節における分泌を刺激する方法である。
【００２９】
本発明に包含されている化合物は、縮合剤（例としては、カルボニルジイミダゾール又はジシクロヘキシルカルボジイミドが挙げられるが、それらには限定されない）で活性化された、ヌクレオシド一リン酸塩、ヌクレオシド二リン酸塩又はヌクレオシド三リン酸塩と、同じ又は異なる第二の一リン酸塩、二リン酸塩、又は三リン酸塩の分子とを縮合させ、所望のジヌクレオシドポリリン酸塩を形成させることよって調製できる。他の調製方法は、上記のようにして活性化されたヌクレオシドリン酸塩の、非ヌクレオシド一リン酸塩、非ヌクレオシドニリン酸塩、又は非ヌクレオシド三リン酸塩部分（例えば、一リン酸塩又はピロリン酸塩の陰イオンが挙げられるが、これらには限定されない）との連続縮合により、所望のジヌクレオシドポリリン酸塩、単離されてない中間体（モノヌクレオシドポリリン酸塩の場合には）を生じさせることである。更に他の調製方法は、上記のようにして活性化した、一リン酸塩、二−リン酸塩、又はポリリン酸塩部分、又は酸ハロゲン化物の形態もしくは求核置換に向けて反応性の他の誘導体と、ヌクレオシドリン酸塩又はポリリン酸塩との連続縮合により、所望のジヌクレオシドポリリン酸塩を得る方法である。所望のジヌクレオシドポリリン酸塩は、予め形成されたジヌクレオシドポリリン酸塩の、プリン、ピリミジンもしくは炭水化物の環上の一又は複数の部分の置換もしくは誘導体化による改変によって形成できる。出発原料として用いられるヌクレオシドリン酸塩は、商業的に入手できるかあるいは、当業者に周知の方法によって対応するヌクレオシドから作製できる。同様に、ヌクレオシドが商業的に入手不可能な場合にも、それらは、容易に入手できる他のヌクレオシドの変更によってかあるいは、当業者に周知の方法によって複素環式及び炭素環式の前駆体からの合成によって作製できる。
【００３０】
出発原料は様々であって良くそして化合物を生産するための更なる段階は、本発明に包含されていることに当業者は気付いているだろう。ある場合において、所定の反応性官能基の保護は、上記のいくつかの転換を達成するためには欠かせない。一般に、基をかかるように保護する必要性並びにかかる基を結合及び除去するのに欠かせない条件は、有機合成の当業者により明らかであろう。
【００３１】
本発明の化合物には、それらの無毒性の医薬的に許容できる塩も含まれる。それには、例えば、リチウム、ナトリウム又はカリウムなどのアルカリ金属の塩；マグネシウム又はカルシウムなどのアルカリ土類金属の塩；又はアンモニウムもしくはテトラアルキルアンモニウム塩、即ち、NL4＋（式中、LはC1−4である）、が挙げられるが、それらに限定されず、そしてリチウム、ナトリウム、カリウム及びアンモニウムなどの一価の塩が最も好適である。医薬的に許容できる塩とは、親化合物の所望の生物活性を維持し且つ不都合な毒性効果を及ぼさない塩である。本発明は、本明細書中で開示された化合物のアシル化されたプロドラックをも包含する。当業者は、無毒性の医薬的に許容できる及び本化合物のアシル化されたプロドラッグを調製するのに用いることができる様々な合成方法ことに気付くだろう（国際特許WO96／40059、WO96／02554A1、WO−A−9815563、及びWO98／55494；Theoclitouら、J.Chem.Soc. Perkin Trans.I.pp.2009〜2019（1996）；Guranowskiら、Nucleoside and Nucleotides Vol.14、pp.731〜734（1995）；Visscherら、Nucleic Acids Reserch Vol.20、pp.5749〜5752（1992）；Hollerら、Biochemistry Vol.22、pp.4924〜4933（1983）；Orrら、Biochem. Pharmacol. pp.673〜678（1988）；Blateuら、Biochemisty Vol.24、pp.914〜922（1985）；Hagmeirら、J.Chromatography Vol.237、pp.174〜177（1982）；Scheffezkら、Biochemistry Vol.35、pp.9716〜9727（1996）；Stridhら、Antiviral   Res.pp.97〜105（1981）；Tarasovaら、Chem.Abs.Vol.110、p.154770（1998）；Hataら、Chem Lett、pp.987〜990（1976）；Huhnら、Vol.28、pp.1959〜1970（1993）；Tumanovら、Chem.Abs.pp.109〜6867d（1987）；Pintorら、Molecular Pharmacology Vol.51、pp.277〜284（1997）；並びに米国特許第4,855,304号；5,635,160号；5,495,550号；及び5,681,823号）。
【００３２】
本発明の化合物の医薬的な有効性は、P2Y2及び他のP2Y受容体活性に関する細胞内カルシウムアッセイにより示されている。Pendergastら（2001）（Bioorg.Med.Chem.Lett.Vol.11、pp.157〜160）の記載にあるような、このような幅広く用いられているアッセイは、Gタンパク質を介しホスホリパーゼCに対して結合している受容体を活性化する前記化合物の生物活性を測定するために、細胞内カルシウム量の増加量を測定することに依存する。これらの化合物の有効性は、関節（例えば、膝、でん部、及び肩などが挙げられるがそれらには限定されない）の分泌活性を変え、そして／又は増強させ、薬剤の標的反応を達成するそれらの能力に反映される。標的反応とは、関節の潤滑及び動きの改善である。
【００３３】
上記の症状、例えば、関節潤滑の障害の治療においては、投与量は、約10−７M〜約10−１Mのオーダー、好適には、10−5〜10−１Mの範囲が有用ある。有効な投与量範囲は、単一投与に関して、約0.1〜約1000mg、好適には、約0.1〜約100mg、そして最も好適には、約0.5〜約50mgである。担体物質と組み合わせ単一投与形態を生産することができる活性成分の量は、治療される宿主及び特に投与の態様により様々である。しかしながら、全ての特定の患者のための特異的投与量は、様々な因子に依存し、そして当業者によって決定できることが理解されるだろう。その因子とは、用いられる特異的化合物の活性、年齢、体重、体全体の健康、性別、食事、投与の時間、投与の経路、及び排泄の度合い、薬物の組み合わせ及び特に治療中の患者の疾患の症度などである。
【００３４】
本発明の化合物は、主にヒト対象者の治療に関連しており、それらは獣医学的な目的のために、他のほ乳類対象者、例えば、イヌ、ネコ、及びウマの治療のためにも用いることができる。
【００３５】
本明細書中で開示されている化合物は、任意の適切な手段、例えば、局所、関節内注射又は全身投与によって患者の関節に対して投与することができる。局所投与としては、溶液、ゲル、懸濁、クリーム、又は生理的に許容できるビヒクル中に活性化合物を含む軟膏の使用などが挙げられる。ゲル又はゼリーは、適切なゲル化剤、例えば、それらに限定されないが、ゼラチン、トラガカント、もしくはセルロース誘導体を用いて生産することことができ、そして保湿剤、軟化剤としてグリセロール及び防腐剤を含んで良い。軟膏は、脂肪基剤、ロウ基剤、又は合成基剤中へと組み込まれた活性成分から成る半個体調製物である。適切なクリームの例としては、油中水及び水中油乳濁液が挙げられるが、それらには限定されない。油中水クリームは、乳化ワックスに類似する又は脂肪アルコールの例えば、セチルアルコール又はセトステアリルアルコールのようなものに類似する特性を有する適切な乳化剤を用いることによって処方できる。水中油クリームは、適切な乳化剤、例えば、セトマクロゴール乳化ワックスを用いることによって処方できる。適切な特性としては、乳濁液の粘度を改変せしめる能力並びに幅広いpHに渡り物理的及び化学的な特性の両方を変化せしめる能力が挙げられる。水溶性又は水混和性のクリーム基剤には、防腐剤系を含むことができ、そして許容できる生理pHを維持するために緩衝化されてもよい。
【００３６】
代わりに、活性化合物は持続放出装置によっても投与できる。デリバリーシステム開発における当業者は、常用の基準を用いて選択できる。関節に対して投与するために処方された溶液は通常、洗浄水といわれている。これらは、単独使用の滅菌溶液を目的とする滅菌注射の典型的な方法で調製された、無菌溶液である。
【００３７】
泡沫調製物は、不活性な推進剤を用いて、加圧されたエアロゾル容器から、適切なアプリケーターを介して運ばれるように処方され良い。泡沫基剤を処方するための適切な賦形剤としては、プロピレングリコール、乳化ワックス、セチルアルコール、及びステアリン酸グリセリルが挙げられるが、それらに限定はされない。有力な防腐剤としては、メチルパラベン及びプロピルパラベンが挙げられる。
【００３８】
局所投与の他の方法は、膣を通じてのデリバリーによる。ペッサリーは、膣に挿入するために適切に成型された固体状単一投与形態であり且つ体温で融解するかあるいは粘性の分泌物と接触した場合に溶解する基剤のいずれかからなる。適切な基剤としては、カカオ油、合成脂質基剤（Witepsolなど）、ポリエチレングリコール（マクロゴール）、及びグリセロール座薬基剤が挙げられるが、それらには限定されない。膣錠は、固体投与形態基剤内に含まれている活性成分から成る。その基剤の例としては、賦形剤の例えば、ラクトース、微結晶性セルロース、トウモロコシデンプン、ステアリン酸マグネシウム、二酸化ケイ素、及びヒドロキシプロピルメチルセルロースが挙げられるが、それらには限定されない。
【００３９】
対象者の滑膜組織へと活性化合物を投与する他の方法は、治療上有効な量の当該活性化合物が滑膜組織へと局所的に到達するように、当該活性化合物を関節内注射することが含まれる。
【００４０】
活性化合物を投与する更なる手段は、様々な方法を介して全身的に投与する方法である。かかる方法の１つは、対象者が吸入する活性化合物を含んで成る呼吸用粒子のエアロゾル懸濁が含まれる。活性化合物は、肺を介して血流中に吸収されて医薬的に有効な量で滑膜組織と接触する。呼吸用粒子は、液体又は固体であって良く、そして吸入により口及び咽頭を通過すために十分小さな粒子サイズを有する。その粒子サイズとは、一般に、約1〜10ミクロン、しかし一層好適には1〜5ミクロンのサイズが呼吸用に適していると考えられている。
【００４１】
活性化合物を対象者の滑膜組織へと全身的に投与する他の方法には、液体製剤の点鼻薬の形態における液体／液体懸濁、又は対象者が吸入する呼吸用粒子の鼻腔スプレーが含まれる。鼻腔スプレーもしくは点鼻薬を生産するための活性化合物の液体医薬組成物は、活性化合物と適切なビヒクル、例えば、当業者に公知の滅菌病原体フリー水もしくは滅菌塩類溶液とを組み合わせることによって調製されている。
【００４２】
活性化合物を全身投与する他の手段には、経口投与を含む。この場合、化合物もしくは式Ｉの化合物を含む医薬組成物は、錠剤、ロゼンジ、水性もしくは油性の懸濁、散性粉末もしくは顆粒、乳濁液、硬もしくは軟カプセル、又はシロップもしくはエリキシル剤の形態である。経口使用を目的とする組成物は、当業者に周知の方法により調製されて良く；かかる組成物は、甘味剤、香味剤、着色剤、及び防腐剤からなる群から選択された1又は複数の薬剤を、医薬的な格調及び口当たりの良い調製物を提供するために含んで良い。錠剤は、錠剤を製造するために適切な医薬的に許容できる無毒の賦形剤との混合物において、活性成分を含むように調製されて良い。これらの賦形剤は、例えば、不活性な希釈剤の炭酸カルシウム塩、炭酸ナトリウム塩、ラクトース、リン酸カルシウム塩、又はリン酸ナトリウム塩；顆粒化及び破解剤の例えば、トウモロコシデンプン又はアルギン酸；結合剤の例えば、デンプン、ゼラチン、又はアカシア；及び潤滑剤の例えば、ステアリン酸マグネシウム塩、ステアリン酸、又はタルクでありうる。錠剤はコーティングされていなくても良く、又は胃腸管中での破解及び吸収を遅延させて、それによってより長い時間に渡り持続的な作用を供するような公知の技術によるコーティングをされて良い。例えば、モノステアリン酸グリセリル又はジステアリル酸グリセリンなどの時間遅延物質が用いられて良い。経口使用のための製剤は、活性成分が不活性な固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム塩、リン酸カルシウム塩、もしくはカオリンと混合されている硬ゼラチンカプセルとしてかあるいは、活性成分が水もしくは油溶媒の例えば、ピーナッツ油、液状パラフィン、もしくはオリーブ油と混合されている軟ゼラチンカプセルとして存在しても良い。
【００４３】
活性化合物は、経皮パッチ又はパッドを用いることで、皮膚による呼吸を通じて患者に対してデリバリーされても良い。活性化合物は、皮膚を通じて血流中へと吸収される。活性化合物の血漿濃度は、異なる量の活性化合物を含むパッチを用いることで調節されて良い。
【００４４】
活性化合物を対象者の滑膜組織へと全身的に投与する他の方法には、治療上有効な量の活性化合物が滑膜組織へと全身的な吸収及び循環により到達するような、活性化合物の座薬形態が含まれる。
【００４５】
本発明は、以下の治療の実施例により更に説明されており、その例は、それらに記載された特定の手順に範囲又は精神を限定するように構成されてはいない。
【実施例】
【００４６】
実施例1
培養した滑膜繊維芽細胞中の細胞内カルシウムの測定
P2Y受容体アゴニトによって誘導された細胞内カルシウム増加を検出するために、当業者に周知の常用の技術を用いた。細胞を96ウェルプレートに播き、そして細胞内カルシウムアッセイのために用いた。アッセイの日に、増殖培地を吸引して、アッセイバッファー（mM）(KCl（10）、NaCl（118）、CaCl2（2.5）、MgCl2（1）、HEPES（20）、グルコース（10）からなる)中のフルオロ−3AM（2.5μMの最終濃度）の溶液で置換した。細胞中で色素の保持特性を高めるために、ロードする色素及び色素洗浄培地に対してプロベン酸（Sigma Chemical Co.）を有効濃度2.5mMで加えた。細胞を、フルオロ−3AMと25℃で60分インキュベーションした後、洗浄して色素を伴わないようにし（Columbus Plate Washer、TECAN U.S. Inc.、Reserch Triangle Park，N.C）そして増加濃度のP2Y受容体作用物質で刺激した。細胞内カルシウム量を、各ウェルにおいて同時に、FLIPR（Molecular Device Corp.、Sunnyvale、CA.）を用いての蛍光強度の変化を測定することによって観測した。
【００４７】
滑膜繊維芽細胞を上記の細胞内カルシウムアッセイに委ねた。結果により示されたことは、P2Y受容体作用物質のATP及びUTPは、これらの細胞中での細胞内カルシウムの増加を刺激し、それは滑膜細胞中でのP2Y2受容体の活性化と一致しているということである（図1）。P2Y1受容体選択的作用物質の2−メチルチオADPは、滑膜繊維芽細胞中の細胞内カルシウム濃度を変化させることはなく、これらの細胞内はP2Y1受容体を欠いていることを示している。滑膜繊維芽細胞中での、ATP及びUTPによる細胞内カルシウムの増加の誘導により、P2Y2受容体作用物質の関節における医薬的な有効性が示された。
【００４８】
実施例2
変形性関節症の患者におけるプリン作動性受容体作用物質の効果
医薬的に許容できる担体と一緒の、式Ｉのプリン作動性受容体作用物質である医薬組成物の製剤を、関節内注射による投与をするための滅菌溶液として調製している。この製剤を患者に対して、10−7〜10−１Mの範囲の関節流体濃度を達成するために投与している。変形性関節症の典型的な臨床症状を示す患者を診断し、そして関節の症状の傾向、放射線写真の特徴、臨床検査、及び滑膜流体所見の基づき、治療するために選択した。基底状態及び製剤による治療後に、患者を、病歴、専門家による理学的診察、通常の身体検査、放射線による評価、及び関節流体の分析などの試験に委ねた。
【００４９】
治療効率に関する基準
製剤による治療の有効性を特定するための1つの基準とは、1つ以上の関節流体特性の正常化である。その特性とは、限定されないが、滑膜流体の色合い、粘度及びWBC数が2,000／uLであることなどである。滑膜炎の患者では、赤血球沈降速度の正規化が、治療の効果を特定するための他の基準である。それに代わる基準とは、関節の動きの改善の、例えば、関節硬直の減少、関節の回転の制限がより少なくないこと、及び／又は捻髪音の減少、放射線（X線）検査における改善の、例えば、関節空間の狭さく、軟骨下骨硬化症、軟骨下のう胞、及び骨棘の減少、並びに関節痛の減少である。本製剤は、上記の症状又は基準を1つ以上改善する。
【００５０】
本発明及びそれを作製して使用する態様及び方法は、十分、明確に、簡潔且つ正確に当業者が作製しそして使用することができるように記載されている。前述の、本発明の好適な実施態様及びその改良は、特許請求の範囲に開示されている本発明の精神又は範囲から出発せずとも作製できる。本発明の対象を詳細に指摘し且つ明確に主張するために、以下の請求項は、本明細書の内容を含む。
【図面の簡単な説明】
【００５１】
【図１】UTP、ATP及び２−メチルチオADPの滑膜細胞における細胞内カルシウム量に対する効果を示す。
【図１】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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