(57)【要約】式（Ｉ）で表され、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に−ＮＨ−，−Ｎ（アルキル）−，−Ｏ−，−Ｓ−，−ＳＯ−，−ＳＯ２−，−Ｏ−ＳＯ２−，−ＳＯ２−Ｏ−，−ＳＯ３−Ｏ−，−ＣＯ−，−ＣＯ−Ｏ−，−Ｏ−ＣＯ−，−ＣＯ−ＮＲ’−，もしくは−ＮＲ’−ＣＯ−を随意的に挿入される水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，カルボキシ，アミノ，カルボキシル，オキソ，スルホン酸，もしくはアルキルであるか；あるいはＲ３およびＲ４，Ｒ４およびＲ５，Ｒ５およびＲ６，またはＲ６およびＲ７はこれらが結合している２つの炭素間にＣ＝Ｃ結合が生成されるように共に除去され；Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１０，Ｒ１３，およびＲ１４はそれぞれ独立に水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシアルキル，アルコキシ，ヒドロキシ，もしくはアミノであり；ｎは０，１，もしくは２であり；Ａはアルキレン，アルケニレン，もしくはアルキニレンであり；Ｘ，Ｙ，およびＺはそれぞれ独立にアルキル，ハロアルキル，−ＯＲ’，−ＳＲ’，−ＮＲ’Ｒ”，−Ｎ（ＯＲ’）Ｒ”，もしくは−Ｎ（ＳＲ’）Ｒ”であるか；あるいはＸおよびＹは共に＝Ｏ，＝Ｓ，もしくはＮＲ’であり；Ｒ’およびＲ”はそれぞれ独立に水素，アルキル，もしくはハロアルキルである式（Ｉ）の化合物。
2005507855.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）で表され、
【化１】
2005507855.tif 000005
上記式において、
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に−ＮＨ−，−Ｎ（アルキル）−，−Ｏ−，−Ｓ−，−ＳＯ−，−ＳＯ２−，−Ｏ−ＳＯ２−，−ＳＯ２−Ｏ−，−ＳＯ３−Ｏ−，−ＣＯ−，−ＣＯ−Ｏ−，−Ｏ−ＣＯ−，−ＣＯ−ＮＲ’−，もしくは−ＮＲ’−ＣＯ−を随意的に挿入される水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，カルボキシ，アミノ，カルボキシル，オキソ，スルホン酸，もしくはアルキルであるか；あるいはＲ３およびＲ４，Ｒ４およびＲ５，Ｒ５およびＲ６，またはＲ６およびＲ７はこれらが結合している２つの炭素間にＣ＝Ｃ結合が生成されるように共に除去され；
Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１０，Ｒ１３，およびＲ１４はそれぞれ独立に水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシアルキル，アルコキシ，ヒドロキシ，もしくはアミノであり；
ｎは０，１，もしくは２であり；
Ａはアルキレン，アルケニレン，もしくはアルキニレンであり；かつ
Ｘ，Ｙ，およびＺはそれぞれ独立にアルキル，ハロアルキル，−ＯＲ’，−ＳＲ’，−ＮＲ’Ｒ”，−Ｎ（ＯＲ’）Ｒ”，もしくは−Ｎ（ＳＲ’）Ｒ”であるか；あるいはＸおよびＹは共に＝Ｏ，＝Ｓ，もしくは＝ＮＲ’であり；
Ｒ’およびＲ”はそれぞれ独立に水素，アルキル，もしくはハロアルキルである化合物。
【請求項２】
Ｒ５およびＲ６はそれぞれ独立に水素，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシ，もしくはアミノである請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ５はＨであり；かつＲ６はヒドロキシである請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
ＸおよびＹは共に＝Ｏもしくは＝Ｓであり；かつＺは−ＯＲ’，−ＳＲ’，−ＮＲ’Ｒ”，−Ｎ（ＯＲ’）Ｒ”，もしくは−Ｎ（ＳＲ’）Ｒ”である請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
ＸおよびＹは共に＝Ｏであり；かつＺは−ＮＲ’Ｒ”，−Ｎ（ＯＲ’）Ｒ”，もしくは−Ｎ（ＳＲ’）Ｒ”である請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１４，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシ，もしくはアミノであり；Ｒ１０およびＲ１３はそれぞれ独立に水素，アルキル，もしくはハロアルキルであり；ｎは０であり；かつＡはアルキレンである請求項４に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１４，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシ，もしくはアミノであり；Ｒ１０およびＲ１３はそれぞれ独立に水素，アルキル，もしくはハロアルキルであり；ｎは０であり；かつＡはアルキレンである請求項５に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１４，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に水素であり；Ｒ３はヒドロキシであり；Ｒ１０およびＲ１３はそれぞれ独立にアルキルであり；かつＡはアルキレンである請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｘ，Ｙ，およびＺはそれぞれ独立にアルキル，ハロアルキル，−ＯＲ’，もしくは−ＳＲ’である請求項３に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１４，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシ，もしくはアミノであり；Ｒ１０およびＲ１３はそれぞれ独立に水素，アルキル，もしくはハロアルキルであり；ｎは０であり；かつＡはアルキレンである請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１４，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に水素であり；Ｒ３はヒドロキシであり；Ｒ１０およびＲ１３はそれぞれ独立にアルキルであり；かつＡはアルキレンである請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ５およびＲ６はＲ５およびＲ６が結合している２つの炭素間にＣ＝Ｃ結合が生成されるように共に除去される請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
ＸおよびＹは共に＝Ｏもしくは＝Ｓであり；かつＺは−ＯＲ’，−ＳＲ’，−ＮＲ’Ｒ”，−Ｎ（ＯＲ’）Ｒ”，もしくは−Ｎ（ＳＲ’）Ｒ”である請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
ＸおよびＹは共に＝Ｏであり；かつＺは−ＮＲ’Ｒ”，−Ｎ（ＯＲ’）Ｒ”，もしくは−Ｎ（ＳＲ’）Ｒ”である請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１４，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシ，もしくはアミノであり；Ｒ１０およびＲ１３はそれぞれ独立に水素，アルキル，もしくはハロアルキルであり；ｎは０であり；かつＡはアルキレンである請求項１３に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１４，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシ，もしくはアミノであり；Ｒ１０およびＲ１３はそれぞれ独立に水素，アルキル，もしくはハロアルキルであり；ｎは０であり；かつＡはアルキレンである請求項１４に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１４，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシ，もしくはアミノであり；Ｒ３はヒドロキシであり；Ｒ１０およびＲ１３はそれぞれ独立にアルキルであり；ｎは０であり；かつＡはアルキレンである請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｘ，Ｙ，およびＺはそれぞれ独立にアルキル，ハロアルキル，−ＯＲ’，−ＳＲ’，−ＮＲ’Ｒ”，−Ｎ（ＯＲ’）Ｒ”，もしくは−Ｎ（ＳＲ’）Ｒ”である請求項１２に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１４，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシ，もしくはアミノであり；Ｒ１０およびＲ１３はそれぞれ独立に水素，アルキル，もしくはハロアルキルであり；ｎは０であり；かつＡはアルキレンである請求項１８に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ３はヒドロキシであり；かつＲ１０およびＲ１３はそれぞれ独立にアルキルである請求項１９に記載の化合物。
【請求項２１】
ＸおよびＹは共に＝Ｏもしくは＝Ｓであり；かつＺは−ＯＲ’，−ＳＲ’，−ＮＲ’Ｒ”，−Ｎ（ＯＲ’）Ｒ”，もしくは−Ｎ（ＳＲ’）Ｒ”である請求項１に記載の化合物。
【請求項２２】
ＸおよびＹは共に＝Ｏであり；かつＺは−ＮＲ’Ｒ”，−Ｎ（ＯＲ’）Ｒ”，もしくは−Ｎ（ＳＲ’）Ｒ”である請求項２１に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１４，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシ，もしくはアミノであり；Ｒ１０およびＲ１３はそれぞれ独立に水素，アルキル，もしくはハロアルキルであり；ｎは０であり；かつＡはアルキレンである請求項２１に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１４，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシ，もしくはアミノであり；Ｒ１０およびＲ１３はそれぞれ独立に水素，アルキル，もしくはハロアルキルであり；ｎは０であり；かつＡはアルキレンである請求項２２に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ５，Ｒ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１４，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に水素であり；Ｒ３およびＲ６はそれぞれ独立に水素もしくはヒドロキシであり；Ｒ１０およびＲ１３はそれぞれ独立にアルキルであり；ｎは０であり；かつＡはアルキレンである請求項２４に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｘ，Ｙ，およびＺはそれぞれ独立にアルキル，ハロアルキル，−ＯＲ’，−ＳＲ’，−ＮＲ’Ｒ”，−Ｎ（ＯＲ’）Ｒ”，もしくは−Ｎ（ＳＲ’）Ｒ”である請求項１に記載の化合物。
【請求項２７】
Ｘ，Ｙ，およびＺはそれぞれ独立にアルキル，ハロアルキル，−ＯＲ’，もしくは−ＳＲ’である請求項に２６記載の化合物。
【請求項２８】
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１４，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシ，もしくはアミノであり；Ｒ１０およびＲ１３はそれぞれ独立に水素，アルキル，もしくはハロアルキルであり；ｎは０であり；かつＡはアルキレンである請求項２６に記載の化合物。
【請求項２９】
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１４，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシ，もしくはアミノであり；Ｒ１０およびＲ１３はそれぞれ独立に水素，アルキル，もしくはハロアルキルであり；ｎは０であり；かつＡはアルキレンである請求項２７に記載の化合物。
【請求項３０】
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ５，Ｒ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１４，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に水素であり；Ｒ３およびＲ６はそれぞれ独立に水素もしくはヒドロキシであり；かつＲ１０およびＲ１３はそれぞれ独立にアルキルである請求項２９に記載の化合物。
【請求項３１】
前記化合物は
【化２】
2005507855.tif 000006
である請求項１に記載の化合物。
【請求項３２】
医薬組成物であって、
下記式で表され、
【化３】
2005507855.tif 000007
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に−ＮＨ−，−Ｎ（アルキル）−，−Ｏ−，−Ｓ−，−ＳＯ−，−ＳＯ２−，−Ｏ−ＳＯ２−，−ＳＯ２−Ｏ−，−ＳＯ３−Ｏ−，−ＣＯ−，−ＣＯ−Ｏ−，−Ｏ−ＣＯ−，−ＣＯ−ＮＲ’−，もしくは−ＮＲ’−ＣＯ−を随意的に挿入される水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシ，アミノ，カルボキシ，オキソ，スルホン酸，もしくはアルキルであるか；あるいはＲ３およびＲ４，Ｒ４およびＲ５，Ｒ５およびＲ６，またはＲ６およびＲ７はこれらが結合している２つの炭素間にＣ＝Ｃ結合が生成されるように共に除去され；
Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１０，Ｒ１３，およびＲ１４はそれぞれ独立に水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシアルキル，アルコキシ，ヒドロキシ，もしくはアミノであり；
ｎは０，１，もしくは２であり；
Ａはアルキレン，アルケニレン，もしくはアルキニレンであり；かつ
Ｘ，Ｙ，およびＺはそれぞれ独立にアルキル，ハロアルキル，−ＯＲ’，−ＳＲ’，−ＮＲ’Ｒ”，−Ｎ（ＯＲ’）Ｒ，もしくは−Ｎ（ＳＲ’）Ｒ”であるか；あるいはＸおよびＹは共に＝Ｏ，＝Ｓ，もしくは＝ＮＲ’であり；
Ｒ’およびＲ”はそれぞれ独立に水素，アルキル，もしくはハロアルキルである化合物を有効量と、
薬剤として許容されるキャリアとを含有する医薬組成物。
【請求項３３】
ＸおよびＹは共に＝Ｏもしくは＝Ｓであり；かつＺは−ＯＲ’，−ＳＲ’，−ＮＲ’Ｒ”，−Ｎ（ＯＲ’）Ｒ”，もしくは−Ｎ（ＳＲ’）Ｒ”である請求項３２の医薬組成物。
【請求項３４】
Ｘ，Ｙ，およびＺはそれぞれ独立にアルキル，ハロアルキル，−ＯＲ’，もしくは−ＳＲ’である請求項３２の医薬組成物。
【請求項３５】
前記化合物は
【化４】
2005507855.tif 000008
である請求項３２に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（資金供与）
ここに記載の研究は、米国国立衛生研究所（ＣＡ−５  ８０７３およびＤＫＡ  １６７０）による交付金の支援を受けたものである。米国政府は、本発明に一定の権利を有する。
【０００２】
本発明は、ＬＸＲアゴニストとして作用する新規ステロイド化合物に関する。
【背景技術】
【０００３】
核内受容体スーパーファミリーの一員である受容体Ｘ受容体（ＬＸＲ）には、ＬＸＲαとユビキタスレセプター（ＵＲ、ＬＸＲβとも呼ぶ）とがある。これらは、遺伝子発現を転写活性化する。ＬＸＲの直接の標的として、数種類のコレステロールホメオスタシス関連の遺伝子が同定されている。このような遺伝子の例には、コレステロール流入トランスポーター（ｅｆｆｌｕｘ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ）ＡＴＰ結合カセット１のＡＢＣＡ１およびＡＢＣＧ１、コレステロールからの胆汁酸の生合成の律速酵素であるコレステロール７αヒドロキシラーゼ、コレステロールエステル転送蛋白質（ＣＥＴＰ）、リポ蛋白質のアポリポ蛋白質Ｅ（ＡｐｏＥ）、およびステロール調節配列結合蛋白質１ｃ（ｓｔｅｒｏｌ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  ｅｌｅｍｅｎｔ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ  １ｃ：ＳＲＥＢＰ−１ｃ）をコードする遺伝子がある。
【非特許文献１】
シュワルツら（Schwartz et al., Biocliem. Biophys. Res. Commun., 2000, 274: 794-802）
【非特許文献２】
ラフィットら（Laffitte et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA, 2001, 98(2): 507-512 ）
【非特許文献３】
レパら（Repa et al., Genes Dev., 2000, 14: 2819-30）
【０００４】
ＬＸＲによってこのような遺伝子が調整されると、コレステロールの逆輸送および廃棄が影響を受けて、脂質および線維素（ｆｉｂｒｏｕｓ  ｅｌｅｍｅｎｔ）の生成、ＡｐｏＥ遺伝子の発現、核因子κ−ＢおよびＡＰ−１の活性化に直接影響を及ぼす。脂質および線維素が動脈に蓄積されると、心疾患や脳卒中など多くの疾患の原因となるアテローム性動脈硬化症を発症する。ＡｐｏＥ遺伝子発現の異常は、アルツハイマー病などの疾患と関係することが明らかにされている。核因子κ−ＢおよびＡＰ−１の活性化は、ヒトの免疫系を調整して、抗炎症作用を向上させる。
【０００５】
本発明は、ＬＸＲアゴニストとして作用する新規ステロイド化合物の発見に基づくものである。
本発明の一態様は、式（Ｉ）の化合物に関する。
【０００６】
【化１】
2005507855.tif 000003
上記式において、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ４’，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７，Ｒ１１，Ｒ１２，Ｒ１５，Ｒ１６，およびＲ１７はそれぞれ独立に−ＮＨ−，−Ｎ（アルキル）−，−Ｏ−，−Ｓ−，−ＳＯ−，−ＳＯ２−，−Ｏ−ＳＯ２−，−ＳＯ２−Ｏ−，−ＳＯ３−Ｏ−，−ＣＯ−，−ＣＯ−Ｏ−，−Ｏ−ＣＯ−，−ＣＯ−ＮＲ’−，もしくは−ＮＲ’−ＣＯ−を随意的に挿入される水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，カルボキシ，アミノ，カルボキシル，オキソ，スルホン酸，もしくはアルキルであるか；あるいはＲ３およびＲ４，Ｒ４およびＲ５，Ｒ５およびＲ６，またはＲ６およびＲ７はこれらが結合している２つの炭素間にＣ＝Ｃ結合が生成されるように共に除去され；Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１０，Ｒ１３，およびＲ１４はそれぞれ独立に水素，ハロ，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシアルキル，アルコキシ，ヒドロキシ，もしくはアミノであり；ｎは０，１，もしくは２であり；Ａはアルキレン，アルケニレン，もしくはアルキニレンであり；Ｘ，Ｙ，およびＺはそれぞれ独立にアルキル，ハロアルキル，−ＯＲ’，−ＳＲ’，−ＮＲ’Ｒ”，−Ｎ（ＯＲ’）Ｒ”，もしくは−Ｎ（ＳＲ’）Ｒ”であるか；あるいはＸおよびＹは共に＝Ｏ，＝Ｓ，もしくはＮＲ’であり；Ｒ’およびＲ”はそれぞれ独立に水素，アルキル，もしくはハロアルキルである。
【０００７】
上記の「アルキル」との語、アルコキシ（ａｌｋｏｘｙ）等に用いられている「ａｌｋ」との接頭語、およびヒドロキシアルキル等に用いられている「−アルキル」との接尾辞は、全てＣ１−８の直鎖もしくは分枝鎖である。
【０００８】
式（Ｉ）において，Ｒ５およびＲ６がそれぞれ独立に水素，アルキル，ハロアルキル，ヒドロキシ，もしくはアミノであるという特徴を有する化合物のサブセットが存在する。また、Ｒ５およびＲ６が、これらが結合している２つの炭素間にＣ＝Ｃ結合が形成されるように共に除去されるという特徴を有する化合物の別のサブセットも存在する。このほか、ＸおよびＹは共に＝Ｏもしくは＝Ｓであり、かつＺは−ＯＲ’，−ＳＲ’，−ＮＲ’Ｒ”，−Ｎ（ＯＲ’）Ｒ”，もしくは−Ｎ（ＳＲ’）Ｒ”であるという特徴と、Ｘ，Ｙ，およびＺはそれぞれ独立にアルキル，ハロアルキル，−ＯＲ’，−ＳＲ’，−ＮＲ’Ｒ”，−Ｎ（ＯＲ’）Ｒ”，もしくは−Ｎ（ＳＲ’）Ｒ”であるという特徴を有する２つの化合物のサブセットが存在する。
【０００９】
このほか、上記の化合物は、適用可能であればその塩およびプロドラッグを含む。この種の塩は、例えば、本発明の化合物の正に帯電している置換基（アミノ等）とアニオンとの間で生成され得る。適したアニオンには、塩化物イオン、臭化物イオン、ヨウ化物イオン、硫酸イオン、硝酸イオン、リン酸イオン、クエン酸イオン、メタンスルホン酸イオン、トリフルオロ酢酸イオン、酢酸イオンがあるが、これらに限定されない。同様に、本発明の化合物の負に帯電している置換基（カルボキシレート等）は、カチオンと塩を生成し得る。適したカチオンには、ナトリウムイオン、カリウムイオン、マグネシウムイオン、カルシウムイオンのほか、テトラメチルアンモニウムイオン等のアンモニウムカチオンがあるが、これらに限定されない。プロドラッグの例には、エステルや薬剤として許容されるその他の誘導体などがあり、これらは、対象物に投与されると上記のステロイド化合物を生成する。
【００１０】
本発明の別の態様は、本発明の化合物を有効量と薬剤として許容されるキャリアとを含有する医薬組成物に関する。本発明の化合物は、心疾患、脳卒中、アルツハイマー病、炎症性疾患など、ＬＸＲがメディテートする疾患の治療に用いることが可能である。このため、これらの疾患のいずれか１つを治療するために本発明の化合物を使用する方法と、本発明の化合物を使用して上記の疾患のいずれか１つの治療に用いられる薬剤を製造する方法とも本発明の範囲に含まれる。
【００１１】
本発明のいくつかの化合物の詳細を下記の詳細説明に記載する。本発明のその他の特徴、目的ならびに利点は、特許請求の範囲を参照すれば明らかである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明の化合物は、出発物質として適したステロイドを用い、当業界で公知の方法によって合成することができる。適したステロイドとは、Ｃ−１７［上記式（Ｉ）においてＲ１７が結合している炭素］に修飾可能な置換基を有し、式（Ｉ）においてＸ，Ｙ，およびＺとして定義される部分を有するものである。このようなステロイドの例には、コール酸、デヒドロコール酸、デオキシコール酸、リトコール酸、ウルソデオキシコール酸、ヒオコール酸、ヒオデオキシコール酸、コラン酸がある。これらは商業的に入手することも、ローダら（Roda et al., F. Lipid Res., 1994, 35: 2268-2279 、ならびにRoda et al., Dig. Dis. Sci., 1987, 34: 24S-35S）の文献等に記載されている方法によって合成することも可能である。
【００１３】
Ｃ−１７にアミド含有置換基を有する（すなわち、ＸおよびＹは共に＝Ｏであり、Ｚはアミンである）本発明の化合物は、Ｃ−１７にカルボキシ含有置換基を有するステロイドとアミノ含有化合物（ジメチルアミン、アニリン、グリシンおよびフェニルアラニン等）とを反応させて調製することができる。同様に、Ｃ−１７にエステル含有置換基を有する（すなわち、ＸおよびＹは共に＝Ｏであり、Ｚはアルコキシである）本発明の化合物は、Ｃ−１７にカルボキシ含有置換基を有するステロイドとヒドロキシル含有化合物（エタノール、イソプロパノールなど）とを反応させて調製することができる。アミド生成反応またはエステル生成反応は、任意の適した溶媒で行われる。水溶液中で反応が起こる場合、インビトロ（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）またはインビボ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）によるスクリーニングアッセイのためにステロイド生成物を単離する必要がない。
【００１４】
Ｃ−１７にカルボニル含有置換基を有する（すなわち、ＸおよびＹは共に＝Ｏである）本発明の化合物は、硫化水素と反応させてチオカルボニル基を有する（すなわち、ＸおよびＹは共にＳである）本発明の化合物等に変換することも、ヒドラジンと反応させてイミノ基を含有する（すなわち、ＸおよびＹは共に＝ＮＲである）本発明の化合物に変換することもできる。
【非特許文献４】
ジャンセンら編、有機硫黄化学（Jaussen et al. (Ed.), Organosulfur Chemistry; Wiley: New York, 1967, 219-240）
【非特許文献５】
パタイら編、炭素−窒素二重結合の化学（Patai et al. (Ed.), The Chemistry of the Carbon-Nitrogen Double Bond; Wiley: New York, 1970, 64-83および465-504 ）
【００１５】
Ｃ−１７以外の環を構成する原子の置換基も、必要であれば当業界で公知の方法によって置換してもよい。例えば、Ｃ−３のヒドロキシル置換基を、酢酸などの酸と反応させてエステル置換基に変換してもよい。
【００１６】
上記の反応は単純であるため、容易に自動化できる。反応生成物は、薄層クロマトグラフィー、高圧液体クロマトグラフィー、ガスクロマトグラフィー、キャピラリー電気泳動法のほか、他の分析法および分離法によって単離および定量することができる。
【００１７】
Ｃ−１７置換基にカルボニル基、チオカルボニル基、またはイミノ基を含まない化合物も、当業界で公知の方法によって調製することもできる。例えば、３α，６α，２４−トリヒドロキシ−２４，２４−ジ（トリフルオロメチル）−５β−コランは、次式に従って調製することができる。
【００１８】
【化２】
2005507855.tif 000004
上記式が示すように、まず、コラン酸とメタノールとを酸存在下で反応させて、コラン酸のメチルエステルを得、３β−ヒドロキシル基を保護するためにこのエステルをｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（ＴＢＤＭＳＣｌ）と反応させる。保護したメチルエステルを、ジ（イソブチル）水素化アルミナと反応させてアルデヒドに変換し、得られたアルデヒドを、トリメチル（トリフルオロメチル）シランと反応させて、トリフルオロメチルによるα−置換アルコールに変換する。このアルコールをデス−マーティン反応させてケトンに変換する。
【非特許文献６】
デスら（Dess et al., J. Org. Chem., 1983, 38: 4155）
【００１９】
このケトンを再度トリメチル（トリフルオロメチル）シランで処理して、２つのトリフルオロメチル基によるα−置換アルコールを得る。最後に、この二基置換アルコールを、テトラブチルアンモニウムフロライド（ＴＢＡＦ）と反応させて保護基を外し、３α，６α，２４−トリヒドロキシ−２４，２４−ジ（トリフルオロメチル）−５β−コランを得る。
【００２０】
このようにして調製した化合物を有効量を、薬剤として許容されるキャリアとを配合して、医薬組成物を調製したのち、アテローム性動脈硬化症またはＡｐｏＥ欠損症、あるいは炎症性疾患に関連する疾患の治療を目的として投与することができる。「有効量」とは、治療対象に治療効果を付与するために必要な化合物の量を指す。動物の投与量（体表面積ｍ２あたりの投与量［ミリグラム］）とヒトの投与量の間の相関は、フレイレイチら（Freireich et al., Cancer Chemother. Rep. 1966, 50, 219）によって記載されている。体表面積は、患者の身長および体重から概算される。
【非特許文献７】
サイエンティフィックテーブル、ガイギーファーマシューティカルズ（Scientific Tables, Geigy Pharmaceuticals, Ardley, New York, 1970, 537 ）
【００２１】
当業者が公知のように、有効量は、投与経路、賦形剤、他の治療法との併用によって変わる。薬剤として許容されるキャリアの例に、コロイド状二酸化シリコン、ステアリン酸マグネシウム、セルロース、ラウリル硫酸ナトリウム、Ｄ＆Ｃイエロー１０号などがある。
【００２２】
医薬組成物は、局所投与、腹腔内投与、静脈内投与などの非経口的経路によって投与され得る。非経口剤形の例に、有効な化合物をリン酸緩衝液に溶解させたものや、薬剤として許容される他のキャリアと混合したものなどがある。シクロデキストリンなどの溶解補助剤や、当業界で公知となっているその他の溶解補助剤が医薬組成物に含まれていてもよい。
【００２３】
インビトロアッセイを実施して、本発明の化合物がＬＸＲにアゴニスト作用を及ぼして、ＬＸＲがメディテートする疾患の治療における効力を予備的にスクリーニングした。例えば、腎細胞をルシフェラーゼレポーター遺伝子（ヒトｃ−ｆｏｓミニマルプロモーターを含む）とＬＸＲとでトランスフェクトした。トランスフェクトした細胞を被検化合物を加えてインキュベート後、ルシフェラーゼ活性を測定し、レポーター遺伝子の転写活性の程度を調べた。
【００２４】
予備的アッセイで効力が認められた化合物は、動物実験を用いて当業界で公知の方法によってさらに評価することができる。例えば、コレステロールを含有する食餌を与えたマウスに化合物を経口投与してもよい。組織中のコレステロール濃度を化合物を投与したマウスと投与していないマウスとで比較することによって、化合物の効力を評価してもよい。
【００２５】
当業者は、詳細に記載しなくとも、本明細書の記載に基づいて本発明を最大限に活用することができると考える。本明細書中に引用した文献はすべて参照によってここにその全内容が援用される。下記の実施例では、本発明の化合物のうちのいくつかを合成して生物学的試験を実施しているが、これらは例示的なものに過ぎず、本開示の内容をいかなる方法によって限定するものではない。
（実施例１）
本発明の化合物の合成
３α，６α，２４−トリヒドロキシ−２４，２４−ジ（トリフルオロメチル）−５β−コラン［化合物（１）］は上記の方法によって合成した。
【００２６】
３α，６α−ジヒドロキシ−５β−コラン酸−Ｎ−メチル−Ｎ−メトキシ−２４−アミド［化合物（２）］、２，２，２−トリフルオロエチル−３α，６α−ジヒドロキシ−５β−コラン酸２４−アミド［化合物（３）］、２４−コレステン−アミド［化合物（４）］、Ｎ，Ｎ−ジメチル−２４−コレステン−アミド［化合物（５）］、およびＮ−メトキシ−２４−コレステン−アミド［化合物（６）］は下記の方法によって合成した。
【００２７】
ステロイド２４−カルボン酸（シグマ［Ｓｉｇｍａ］、ミズーリ州セントルイス所在）、アミン、ジエチルシアノホスホネート（アルドリッチ［Ａｌｄｒｉｃｈ］、ウィスコンシン州ミルウォーキ所在）、およびトリエチルアミンをジメチルホルムアミド中に溶解させた。この溶液を１２〜１６時間２０〜７０℃で攪拌してから氷で急冷したのち、酢酸エチルによって抽出した。このようにして得られた酢酸エチル抽出液を１．０Ｎ  ＨＣｌ溶液、１．０Ｎ  ＮａＯＨ溶液によってこの順で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。酢酸エチルを除去して未精製化合物を得、未精製物を必要に応じて通常のシリカクロマトグラフィーによって精製した。
（実施例２）
レポーター遺伝子転写活性化アッセイ
ヒト胎児腎臓２９３細胞を、１０％ウシ胎児血清を添加したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）中で４８ウェル培養プレートに１ウェルあたり１０５個となるように播種した。２４時間のインキュベーション後、この細胞を、１ウェルあたり２５０ｎｇのｐＧＬ３／ＵＲＥｌｕｃレポーター遺伝子（プラスミドｂａｓｉｃ  ｐＧＬ３（プロメガ［Ｐｒｏｍｅｇａ］、ウィスコンシン州マディソン所在）中のホタルルシフェラーゼ遺伝子の前の、ヒトｃ‐ｆｏｓプロモーターのヌクレオチド‐５６から＋１０９に融合された３コピーのＡＧＧＴＣＡａｇｃｃＡＧＧＴＣＡで構成される遺伝子）、４０ｎｇのｐＳＧ５／ｈＲＸＲα、４０ｎｇのｐＳＧ５／ｒＵＲもしくはＣＭＸ／ｈＬＸＲα、１０ｎｇのｐＳＧ５／ｈＧｒｉｐ１、０．４ｎｇのＣＭＶ／Ｒ‐ｌｕｃ（トランスフェクション標準化レポーター、プロメガ）、および２５０ｎｇのキャリアＤＮＡを用いてリン酸カルシウム共沈殿法によりトランスフェクションした。さらに１２〜２４時間インキュベーションした後、細胞をリン酸緩衝生理食塩水で洗浄し、次いで４％の脱脂されたウシ胎児血清を添加したＤＭＥＭを添加した。被験化合物、すなわち化合物（２）または化合物（３）を含有するエタノール溶液を、化合物の終濃度が１〜１０μＭでかつ最終エタノール濃度が０．２％となるようにＤＭＥＭ細胞培養物に２連で添加した。さらに２４〜４８時間インキュベートした後、細胞をハーベストして、市販のキット（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｄｕａｌ  ｌｕｃｉｆａｒａｓｅ（登録商標）ＩＩ）を用いてＭｏｎｏｌｉｇｈｔ（登録商標）ルミノメータ（ベクトンディッキンソン［Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｅｎｓｏｎ］、カリフォルニア州マウンテンビュー所在）によりルシフェラーゼ活性を測定した。
【００２８】
この実験の結果から、化合物（２）および化合物（３）のいずれも強力なＬＸＲαおよびＵＲのアゴニストであることが示された。
（実施例３）
食餌誘発性高コレステロール血症マウスに対する作用
３ヵ月齢のｎｏｎ−Ｓｗｉｓｓ系アルビノマウス（ハーラン［Ｈａｒｌａｎ］、インディアナ州インディアナポリス所在）の対照群および実薬群の２つの群に、コレステロール１％を添加した固形飼料（ハーランテックラッド［Ｈａｒｌａｎ  Ｔｅｋｌａｄ］  ７００１）（ハーラン、インディアナ州インディアナポリス所在）を７日間与えた。対照群にはヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰＣＤ、アルコスオーガニクス、ニュージャージー州サマービル所在）０．２５％を含有する飲料水を与え、実薬群には、ＨＰＣＤ０．２５％と化合物（２）（０．１２５ｇ／Ｌ、０．２５ｇ／Ｌおよび０．５ｇ／Ｌ）とを含有する飲料水を与えた。マウスには固形飼料と飲料水とを自由に摂取させた。対照群および実薬群の水の摂取量の差は１０％未満であった。
【００２９】
マウスを４時間絶食させ、血液を採取した。市販のキット（シグマ、ミズーリ州セントルイス所在）を使用して、血清コレステロール濃度および血清トリグリセリド濃度を酵素学的に測定した。高密度リポ蛋白コレステロールを単離し、ウォーミックら（Wamick et al., Clin. Chem., 1982, 28: 1379-88 ）の方法によって酵素学的に定量した。 肝コレステロールおよびトリグリセリドを単離し、ブライら（Bligh et al., Canadian J. Biochem. Physiol. 1959, 37: 911-918 ）の方法によって定量した。 糞中の胆汁酸を水素化ホウ素ナトリウムによって還元したのち抽出し、ターリーら(Turley et aｌ., J. Cardiovasc. Pharmacol. 1996, 27: 71-79）の方法によって定量した。胆汁酸を市販のキット（シグマ、ミズーリ州セントルイス所在）によって定量した。
【００３０】
この実験の結果から、コレステロール食餌によって、マウスの循環血中コレステロール濃度は変化しないが、肝コレステロール濃度が上昇することが示された。化合物（２）を投与することによって、肝コレステロール濃度の上昇を予防すると共に、糞中に胆汁酸を分泌させることによってコレステロールの除去を促進させることが示された。血清中および肝のトリグリセリド濃度は、化合物（２）の投与によっても変化しなかった。
【００３１】
同じ実験を、アテローム性動脈硬化症を発症し易いＣ５７ＢＬ／６Ｊ雄マウス（ジャクソンラボラトリー［Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ］、メイン州バーハーバー所在）を使用して実施した。血清コレステロール濃度は、化合物（２）の投与量に依存して低下したが、実験期間中に血清トリグリセリド濃度の有意な低下は認められなかった。
（実施例４）
食餌誘発性高コレステロール血症ハムスター対する作用
ラット、マウスではなく、ハムスターの胆汁酸および循環血中のコレステロール濃度のプロファイルは、ヒトのプロファイルに類似している。さらに、血清中におけるコレステロールの主要な担体は、ラットおよびマウスでは高密度リポ蛋白質であるが、ヒトおよびハムスターでは低密度リポ蛋白質である。このため、ハムスターを使用して、コレステロールおよびトリグリセリドのプロファイルに対する化合物（２）の作用を調べた。
【００３２】
２００ｍｇ／ｋｇ／日の化合物（２）を、通常の固形飼料で飼育したハムスターに２週間経口投与した。ハムスターの血清コレステロール濃度も血清トリグリセリド濃度も変化がみられなかった。一方、コレステロール１％を添加した飼料で飼育したハムスターに化合物（２）を投与すると、血清コレステロール濃度または肝のコレステロールエステル濃度が増大した。化合物（２）を投与したハムスターでは、溶媒対照群のハムスターよりも血清トリグリセリド濃度が有意に高かった。しかし、この値は通常の固形飼料で飼育された対照群とほぼ同じであり、トラウトウェインら（Trautwein et al., Camp. Biochem. Physiol. A Mol. Integ. Physiol. 1999, 124: 93-103）によって報告されているように正常範囲内であった。溶媒対照群でみられたトリグリセリド濃度の低下は、肝臓にコレステロールエステルが高濃度で蓄積されたためであると考えられる。
（実施例５）
食餌誘発性高コレステロール血症ラットに対する作用
化合物（２）とハムスターの代わりに化合物（３）と３ヵ月齢のＨａｒｌａｎ  Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系雄ラット（ハーラン、インディアナ州インディアナポリス所在）とを用いた点を除いて、例４と同様の方法によって動物実験を実施した。この実験の結果から、化合物（３）も化合物（２）と同じようにコレステロールを低下させる作用があることが示された。
（実施例６）
ＡｐｏＥ遺伝子の発現に対する作用のインビトロ実験
（１）ラット星状細胞
１〜２日齢のＨａｒｌａｎ  Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系新生仔ラット（ハーラン、インディアナ州インディアナポリス所在）の大脳皮質から、ラデゥら（LaDu et al., J Biol. Cliem., 2000, 275 (43): 33974-80 ）の方法によって星状細胞の培養株を調製した。実験開始前に、この星状細胞を９０％のコンフルトな状態まで増殖させた。培地を、Ｎ２サプリメント（ライフテクノロジーズインク［Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，  Ｉｎｃ．］、メリーランド州ゲーサーズバーグ所在）を含むα−最少必須培地に変えて、同培地に化合物（２）（０．１〜１μＭ／Ｌ）を３連で追加した。４８〜７２時間のインキュベーション後に、順化培地を回収して、ＳＤＳ添加緩衝液と混合した。培養皿にＳＤＳ添加緩衝液を添加することによって、細胞破砕液（ｃｅｌｌ  ｌｙｓａｔｅ）をインサイチュ（ｉｎ  ｓｉｔｕ）で作製した。
【００３３】
ラデゥらの上記文献の方法によってウェスタンブロット解析を実施した。細胞破砕液と順化培地とを４〜２０％勾配のＳＤＳポリアクリルアミド電気泳動ゲルに添加して、電気泳動した後にニトロセルロース膜に移した。ニトロセルロース膜をアミノブラックで短時間染色した後、蒸留水で脱染した。蛋白質染色パターンをスキャンした後、０．２％のＴｗｅｅｎ  ２０と１％の脱脂粉乳とを含むリン酸緩衝生理食塩水溶液で膜をブロックした。ＡｐｏＥ量を、抗ラットＡｐｏＥポリクロナール抗体、ホースラディッシュペルオキシダーゼ抱合ヤギ抗ウサギＩｇＧ、ｃｈｍｉｌｉｍｉｎｅｓｃｅｎｔ基質（ピアース［Ｐｉｅｒｃｅ］、イリノイ州ロックフォード所在）およびＸ線フィルムで検出した。
【００３４】
溶媒対照と比較して、化合物（２）を投与した場合は、ＡｐｏＥの量が細胞培地と細胞破砕液との両者で増大していた。
（２）ヒトＨＰ−１細胞
実施例６の方法によって、ヒト単球細胞株であるＴＨＰ−１細胞（ＡＴＣＣ、バージニア州マナッサス所在）を使用してインビトロ実験を実施した。より詳細には、使用前に、１０％ウシ胎児血清を含有するＲＰＭＩ１６４０培地にＴＨＰ−１細胞を維持し、ＰＭＡで処理して２４時間活性化させた。この培地を無血清Ｃｅｌｌｇｒｏ（登録商標）完全培地（メディアテック［Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ］、フィッシャーサイエンティフィック［Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ］、ペンシルバニア州ピッツバーグ所在）と交換した。化合物（２）（０．１〜１μＭ／Ｌ）のエタノール溶液をこの細胞培地に添加した。細胞をさらに４８〜７２時間インキュベートしてハーベストした。上記の方法によって細胞中のＡｐｏＥの量を測定した。
【００３５】
この実験により、化合物（２）の投与によってＡｐｏＥの量が、分泌量でも細胞での量でも増大することが示された。
（実施例７）
ＡｐｏＥ遺伝子の発現動物実験
２４ヵ月齢のＣ５７ＢＬ／６Ｊ雄マウス（メイン州バーハーバー所在、ジャクソンラボラトリー）に、コレステロール１．２５％、コール酸０．５％、及びコーン油１５％を添加した固形飼料（Ｈａｒｌａｎ  ７００１）（ハーラン、インディアナ州インディアナポリス所在）を８週間与えた。各々５匹のマウスからなる３つの群に、ＨＰＣＤ０．２５％と、化合物（２）とを含む飲料水を摂取させた。化合物（２）の濃度は、２５ｍｇ／ｋｇ／日、５０ｍｇ／ｋｇ／日、および１００ｍｇ／ｋｇ／日がそれぞれの群に投与されるように変えた。第４群には、化合物（２）を投与しなかった。８週間後に、マウスを屠殺して脳を採取した。各群について、フェノール含有試薬（Ｔｒｉｚｏｌ（登録商標）試薬、ライフテクノロジーズ、メリーランド州ゲーサーズバーグ所在）を用いて、集めた脳からＡｐｏＥ  ｍＲＮＡを単離した。このｍＲＮＡをノーザンブロット解析によって解析して、ＡｐｏＥ遺伝子の発現の程度を調べた。
【００３６】
この結果、検出されたＡｐｏＥ  ｍＲＮＡは溶媒群よりも治療群のほうが多かった。化合物（２）による治療により、循環血中の総コレステロール濃度が低下し、肝へのコレステロール蓄積が低減した。
（実施例８）
ＡｐｏＥ遺伝子の発現の動物実験
２０匹のＬＤＬ受容体ヌル遺伝子マウスを、各々５匹からなる４つの群に分け、アテローム誘発食（脂肪１５％、コレステロール０．２％）のほか、化合物（２）を各々０ｍｇ／ｋｇ／日（対照群）、２５ｍｇ／ｋｇ／日、５０ｍｇ／ｋｇ／日、または１００ｍｇ／ｋｇ／日と０．２５％のＨＰＣＤとを添加した飲料水を２週間摂取させた。２週間後に、マウスを屠殺して、肝臓、脳、腸の組織を採取した。採取した組織を実施例７に記載の方法により分析した。
【００３７】
この結果、血清総コレステロール濃度は治療群では７００ｍｇ／ｄＬ、対照群では１４００ｍｇ／ｄＬであった。被検物質を投与したマウスでは、脳中のＡｐｏＥ  ｍＲＮＡの量が対照群よりも４〜５倍多かった。抗ＡｐｏＥプローブを使用したインサイチュハイブリダイゼーションの結果、被検物質を投与したマウスでは、脳、特に海馬および大脳皮質中のｍＲＮＡが被検物質を投与しないマウスよりも多かった。
（実施例９）
抗炎症作用の動物実験
本実験は、トネリら（Tonelli et al., Endocrinology 1965, 77: 625-634 ）による方法に従って実施した。クトロン油１％、ピリジン２５％、エチルエーテル６０％、水５％、ならびに被検化合物（化合物（４）および化合物（６））を含有するクトロン油混合物を調製した。Ｎｏｎ−Ｓｗｉｓｓ系アルビノ雄マウス（ハーラン、インディアナ州インディアナポリス所在）を使用した。
【００３８】
各マウスの右耳の両面に、クトロン油混合物１００ｍＬを局所塗布した。６時間後に耳を切断して、その重量を測定した。化合物（４）または化合物（６）を含む混合物を塗布した耳の重量の増加分は、クトロン油のみを塗布した耳の重量の増加分に比べて有意に低かった。このように、化合物（４）または化合物（６）は有用な抗炎症剤であることが示された。
（他の実施形態）
本発明の種々の実施形態を記載した。しかし、本発明の精神ならびに範囲から逸脱することなく、本発明を種々に変更することが可能であることが理解される。したがって、その他の実施形態も特許請求の範囲に含まれる。
【国際公開パンフレット】
2005507855.tif 000009
2005507855.tif 000010
2005507855.tif 000011
2005507855.tif 000012
2005507855.tif 000013
2005507855.tif 000014
2005507855.tif 000015
2005507855.tif 000016
2005507855.tif 000017
2005507855.tif 000018
2005507855.tif 000019
2005507855.tif 000020
2005507855.tif 000021
2005507855.tif 000022
2005507855.tif 000023
2005507855.tif 000024
2005507855.tif 000025
2005507855.tif 000026
2005507855.tif 000027
2005507855.tif 000028
2005507855.tif 000029
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2005507855.tif 000030
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2005507855.tif 000031
【国際調査報告】
2005507855.tif 000032