(57)【要約】本発明は、フェニルオキサゾリジノン誘導体に関する。さらに具体的には、本発明は、式Ｉの塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドの多形体形態に関する。さらに、本発明は、そのような化合物を抗菌剤として使用する方法、新規の多形体形態を含有している薬学的組成物、およびそのような多形体形態の調製方法に関する。
2005529924.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の１０個の最も強いＸ線粉末回折ピーク（２θ）を有している、塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドの多形体「Ａ型」：
２６．６２、２６．２０、２４．７２、２１．９４、２１．１８、２０．６０、１７．６２、１６．８４、１６．２２、１４．７４。
【請求項２】
臭化カリウム中の赤外吸収スペクトルを使用して以下の吸収帯を有している、塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドの多形体「Ａ型」：
３４２１；３２８６；２９６７；１７４７；１７２３；１６６８；１５２４；１４１６；１３５４；１３２７；１２４２；１１７０；１１０６；１０７８；１０２２；８１１および７４９ｃｍ-1。
【請求項３】
２１１．９℃（２０６．６℃で始まる）で示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）による吸熱を有している、塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドの多形体「Ａ型」。
【請求項４】
以下のＸ線粉末回折パターン：（２θ）を有している、塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドの多形体「Ｂ型」：
１５．９、１９．１、２０．２、２３．１、２５．７、２６．５、２８．５。
【請求項５】
以下で表される吸収帯を有している臭化カリウム中の赤外吸収スペクトルを特徴とする、塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドの多形体「Ｂ型」：
３４２３．２；２３８６；１７４７；１６５４．３；１５１９；１４２５．９；１３５６．２；１２３９．２；１０２２；９７２．１；８１１．７および７５０．２ｃｍ-1。
【請求項６】
１５４．９℃（１４８．３℃で始まる）および２０９．２℃（２０７．５℃で始まる）で示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）による吸熱を有している、塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドの多形体「Ｂ型」。
【請求項７】
以下の段階を含む、塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドの多形体「Ａ型」の調製プロセス：
ａ）（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチルアセトアミドをエタノール中に溶解させる段階；
ｂ）エタノール性塩酸を添加する段階；
ｃ）反応混合物を冷却し、攪拌する段階；
ｄ）エタノール中の固形物を濾過し、蒸解させる段階；
ｅ）固形物を冷却、濾過し、そして乾燥させて、多形体「Ａ型」を得る段階。
【請求項８】
蒸解後のエタノール中の固形物の冷却を約１０℃の温度で行う、請求項７に記載の調製プロセス。
【請求項９】
生成物の乾燥を、約６０〜６５℃の温度範囲で減圧下で行う、請求項７に記載の調製プロセス。
【請求項１０】
塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドの多形体「Ｂ型」の調製プロセスであって：
ａ）（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチルアセトアミドをエタノール中に溶解させる段階；
ｂ）溶液を冷却し、エタノール性塩酸を添加する段階；
ｃ）反応混合物を攪拌する段階；
ｄ）固形物を濾過して、多形体「Ｂ型」を生産する段階、
を含む、調製プロセス。
【請求項１１】
冷却を約２０℃の温度で行う、請求項１０に記載の調製プロセス。
【請求項１２】
塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドの多形体「Ａ型」の調製プロセスであって：
ａ）（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチルアセトアミドをエタノール中に溶解させる段階；
ｂ）エタノール中の塩酸の混合液を添加する段階；
ｃ）溶媒を除去し、ジクロロメタン中で残渣を蒸解させる段階；
ｄ）固形物を濾過し、結晶化させる段階；
ｅ）エタノール中で固形物を蒸解させる段階；
ｆ）固形物を冷却し、濾過し、そして乾燥させて、多形体「Ａ型」を得る段階、
を含む、調製プロセス。
【請求項１３】
固形物の結晶化を、メタノールおよびイソプロピルアルコールからなる群より選択した溶媒中で行う、請求項１２に記載の調製プロセス。
【請求項１４】
冷却を、約２５〜３０℃の温度で行う、請求項１２に記載の調製プロセス。
【請求項１５】
固形物の乾燥を約６０〜６５℃の温度範囲で減圧下で行う、請求項１２に記載の調製プロセス。
【請求項１６】
塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドの多形体「Ａ型」の調製プロセスであって：
ａ）塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチルアセトアミドを脱塩水中に溶解させる段階；
ｂ）イソプロピルアルコールを添加する段階；
ｃ）固形物を攪拌し、濾過する段階；
ｄ）固形物を乾燥させて、多形体「Ａ型」を生産する段階、
を含む、調製プロセス。
【請求項１７】
固形物の乾燥を約６０℃の温度で減圧下で行う、請求項１６に記載の調製プロセス。
【請求項１８】
塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドの多形体「Ａ型」の調製プロセスであって：
ａ）塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチルアセトアミドを脱塩水中に溶解させる段階；
ｂ）エタノールを添加する段階；
ｃ）攪拌し、冷却し、そして固形物を濾過する段階；
ｄ）固形物を乾燥させて、多形体「Ａ型」を生産する段階、
を含む、調製プロセス。
【請求項１９】
固形物の乾燥を約６０℃の温度で減圧下で行う、請求項１８に記載の調製プロセス。
【請求項２０】
請求項１、２、３、４、５、または６のいずれか１項に記載の化合物と薬学的に許容可能なキャリアを含有している、薬学的組成物。
【請求項２１】
哺乳動物に請求項１、２、３、４、５、または６のいずれか１項に記載の化合物を投与することを含む、哺乳動物の微生物感染を治療または予防する方法。
【請求項２２】
哺乳動物に請求項２０に記載の薬学的組成物を投与することを含む、哺乳動物の微生物感染を治療または予防する方法。
【請求項２３】
哺乳動物に、治療有効量の請求項１、２、３、４、５、または６のいずれか１項に記載の化合物を投与することを含む、哺乳動物の好気性細菌および嫌気性細菌による感染を治療または予防する方法。
【請求項２４】
哺乳動物に、治療有効量の請求項２０に記載の薬学的組成物を投与することを含む、哺乳動物の好気性細菌および嫌気性細菌による感染を治療または予防する方法。
【請求項２５】
哺乳動物に、治療有効量の請求項１、２、３、４、５、または６のいずれか１項に記載の化合物を投与することを含む、哺乳動物のカテーテル感染、および異物または補綴物による感染を治療または予防する方法。
【請求項２６】
哺乳動物に、治療有効量の請求項２０に記載の薬学的組成物を投与することを含む、哺乳動物のカテーテル感染、および異物または補綴物による感染を治療または予防する方法。
【請求項２７】
微生物感染の原因がグラム陽性細菌およびグラム陰性細菌である、請求項２１または２２に記載の方法。
【請求項２８】
以下の２０個の最も強いＸ線粉末回折ピーク（２θ）を有している、請求項１に記載の多形体「Ａ型」：
３１．４８、２８．６０、２８．１４、２６．６２、２６．２０、２４．７２、２３．５２、２２．８４、２２．４８、２１．９４、２１．１８、２０．６０、２０．００、１９．７４、１７．６２、１６．２２、１６．８４、１４．７４、１３．２０、１２．８６。                                                                               
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フェニルオキサゾリジノン誘導体に関する。さらに具体的には、本発明は、式Ｉの塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドの多形体形態に関する。
【０００２】
【化１】
2005529924.tif 000003
【０００３】
さらに、本発明は、そのような化合物を抗生物質として使用する方法、新規の多形体形態を含有している薬学的組成物、およびそのような多形体形態の調製方法に関する。
【背景技術】
【０００４】
表皮ブドウ球菌（Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）は、カテーテル、ペースメーカー、人工補助関節、心臓弁、および中枢神経系シャントのような移植された医療器具によって起こりやすい多くの感染の原因菌である。これらの感染は多くの場合、再発を繰り返し、抗生剤で治療することが難しくなりがちである。抗生物質を投与するとともに器具を除去することが、通常は、感染を完全に除去するための唯一の方法である。
【０００５】
式Ｉの化合物、すなわち、塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドは、ＰＣＴ出願ＷＯ０２／０６２７８に開示されているように、フェニルオキサゾリジノン誘導体である。これは抗生剤として有用であり、多数のヒトおよび獣の病原体に対して有効であると言われている。病原体としては、グラム陽性好気性細菌（例えば、多剤耐性ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）、連鎖球菌（ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）、および腸球菌（ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ））、および嫌気性細菌（例えば、バクテロイデス属（Ｂａｃｔｅｒｉｏｉｄｅｓ）、クロストリジウム属（Ｃｌａｓｔｒｉｄｉａ）の種、ならびに好酸菌（例えば、結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、非定型坑酸菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ）、およびマイコバクテリウム属（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ））を挙げることができる。
【０００６】
ＰＣＴ出願ＷＯ０２／９６２７８には、式Ｉの化合物の調製が記載されている。記載されている方法によって得られる式Ｉの生成物は、湿りやすく濾過が困難になる傾向がある。これらの種の不利な特性は、化合物の大規模な製造の重大な障害となることが明らかにされている。さらにＷＯ０２／０６２７８に開示されている方法に従って得られる式Ｉの吸湿性化合物を含有している薬学的組成物の調製の間の、その操作性にも問題がある。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本明細書では、非吸湿性の形態で式Ｉの化合物を調製する手法が提供される。これにより、大規模での合成が可能になり、薬学的組成物の調製の間に生じる操作性の問題を克服することができる。薬剤耐性株を含むあらゆる嫌気性細菌に対して有効である新しい薬剤の発見、開発が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本明細書では、塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミド（式Ｉ）の新規の多形体形態が提供され、「Ａ型」および「Ｂ型」と命名される。新規の多形体形態の調製プロセスもまた提供される。さらに、多形体形態Ａおよび／またはＢを含有している薬学的組成物、ならびにそれらを、抗菌剤として、哺乳動物の嫌気性細菌による感染、カテーテル感染、および異物または補綴物による感染を治療または予防するための薬剤として使用する方法も提供される。さらに、「Ａ型」は粘液菌に対して非常に有効であり、接着性の細菌に対する活性を有しているので、カテーテル感染、および異物または補綴物による感染の予防および治療に有用である。
【０００９】
「Ａ型」および「Ｂ型」と呼ばれる式Ｉの化合物の多形体形態は、そのＸ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）、赤外スペクトル、および示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）による特徴によって特徴付けることができる。
【００１０】
従って、式Ｉの化合物の多形体「Ａ型」、および多形体「Ａ型」の調製プロセスが提供される。この調製プロセスには以下の段階が含まれる：
（ｉ）式Ｉの遊離の塩基を準備する、
（ｉｉ）式Ｉの遊離の塩基をエタノール中に溶解させる、
（ｉｉｉ）エタノール性ＨＣｌ（約２〜１０Ｎの塩酸を含むエタノール）を約４０〜５５℃で添加する、
（ｉｖ）得られた溶液を室温より低い温度、例えば、約１０℃に冷却し、この温度で４〜６時間にわたって攪拌する、
（ｖ）分離した固形物を濾過し、固形物をエタノール中で７０〜８０℃で４〜６時間蒸解させる、および
（ｖｉ）室温より低い温度、例えば、約１０℃に冷却し、生成物を濾過し、減圧下で約５０〜７５℃で乾燥させて、「Ａ型」を得る。
「Ａ型」は、例えば以下のデータによって特徴付けることができる：
赤外吸収帯（ｃｍ-1）：３４２１、３２８６、２９６７、１７４７、１７２２、１６６８、１５２４、１５０４、１４１６、１３５４、１３２７、１２７２、１２４２、１１７０、１１０６、１０７８、１０２２、８１１、７４９（図１）。
【００１１】
Ｘ線粉末回折（２θ）：６．５８、１１．３４、１２．８６、１３．２０、１３．４０、１４．０６、１４．３２、１４．７４、１５．２６、１５．４６、１５．９１、１６．２２、１６．４６、１６．８４、１７．２２、１７．６２、１８．１６、１８．３８、１８．８４、１９．１４、１９．７４、２０．００、２０．６０、２０．９０、２１．１８、２１．９４、２２．４８、２２．８４、２３．５２、２３．８６、２４．０８、２４．７２、２５．０８、２５．５６、２５．９０、２６．２０、２６．６２、２７．０４、２７．８０、２８．１４、２８．４８、２８．６８、２９．１２、２９．７０、３０．１０、３０．８８、３１．４８、３２．４０、３３．５０、３４．２４（図２）
ＤＳＣ：２１１．９３℃で吸熱（２０６．５８℃で開始）（図３）。
【００１２】
別の態様では、式Ｉの化合物の多形体「Ｂ型」、および多形体「Ｂ型」の調製プロセスが提供される。この調製プロセスには以下の段階が含まれる：
（ｉ）式Ｉの遊離の塩を準備する、
（ｉｉ）式Ｉの遊離の塩基を熱いエタノール（例えば、約６０〜８０℃の温度のエタノール）中に溶解させる、
（ｉｉｉ）溶液を室温以下、例えば、約２０℃に冷却する、
（ｉｖ）エタノール性ＨＣｌ（約２〜１０Ｎの塩酸を含むエタノール）をこの温度で添加する、
（ｖ）反応混合物をこの温度で約１５分間攪拌する、および
（ｖｉ）分離した固形物を濾過して、「Ｂ型」を得る。
「Ｂ型」は、例えば以下のデータによって特徴付けることができる：
赤外吸収帯（ｃｍ-1）：３４２３．２、２３８６、１７４７、１６５４．３、１５１９、１４２５．９、１３５６．２、１２３９．２、１０２２、９７２．１、８１１．７、７５０．２（図４）
Ｘ線粉末回折（２θ）：１５．９、１９．１２、１９．４４、２０．２２、２３．１４、２５．６６、２６．５２、２８．４６（図５）
ＤＳＣ：１５４．９２℃（１４８．２６℃で開始）および２０９．２２℃（２０７．５１℃で開始）で吸熱（図６）。
【００１３】
別の実施形態では、以下の段階を含む、式Ｉの化合物の多形体「Ａ型」の調製プロセスが提供される：
（ｉ）式Ｉの遊離の塩基を準備する工程、
（ｉｉ）式Ｉの遊離の塩基を、約６０〜８０℃に加熱しながらエタノール中に溶解させる、
（ｉｉｉ）エタノール中のＨＣｌ（約２〜１０Ｎ）の混合物を、室温より低い温度、例えば、約５℃で添加する、
（ｉｖ）反応混合物を、約５〜１５℃で約１〜３時間攪拌する、
（ｖ）溶媒を除去し、ジクロロメタン中で残渣を蒸解させる、
（ｖｉ）固形物を、メタノール／イソプロピルアルコール混合物、例えば、約４：１から約２０：１の範囲の混合物から濾過し、結晶化させる、
（ｖｉｉ）固形物をエタノール中で約６０〜８０℃で約４時間蒸解させる工程、および
（ｖｉｉｉ）これを約２５〜３０℃に冷却し、濾過し、減圧下で約５０〜７５℃で乾燥させて、「Ａ型」を得る。
これは、「Ａ型」について上記に示したデータによって特徴付けることができる。
【００１４】
別の実施形態では、以下の段階を含む、式Ｉの化合物の新規の多形体「Ａ型」の調製プロセスが提供される：
（ｉ）式Ｉの化合物を、約４０〜６０℃に加熱しながら脱塩水中に溶解させる、
（ｉｉ）溶液を約３５〜４５℃まで少し冷却する、
（ｉｉｉ）イソプロピルアルコールを２５〜３０℃で添加する、
（ｉｖ）攪拌し、濾過し、そして固形物をイソプロピルアルコールで洗浄する工程、
（ｖ）減圧下で約６０℃で乾燥させて、「Ａ型」を得る。
これは、「Ａ型」について上記に示したデータによって特徴付けることができる。
【００１５】
別の実施形態では、以下の段階を含む、式Ｉの化合物の新規の多形体「Ａ型」の調製プロセスが提供される：
（ｉ）式Ｉの化合物を、約４０〜６０℃に加熱しながら、脱塩水中に溶解させる工程、
（ｉｉ）溶液をほぼ室温または室温よりわずかに高い温度にまで少し冷却する、
（ｉｉｉ）エタノールを室温または室温よりわずかに高い温度、例えば、２５〜３０℃で添加する工程、
（ｉｖ）反応混合物を攪拌し、１０〜１５℃まで冷却し、濾過し、そして固形物をエタノールで洗浄する、および
（ｖ）減圧下で約６０℃で乾燥させて、「Ａ型」を得る工程。
これは、「Ａ型」について上記に示したデータによって特徴付けることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
以下のデータが得られた：
ＸＲＤ：機器：モデルＲＵ−Ｈ３Ｒ（リガク）
データ収集パラメーター：電圧５０ＫＶ；電流：１２０ｍＡ；スキャン速度：２°／分；スキャンステップ：０．０２°；スキャン範囲：３〜４０°。
実施例１に従って調製した化合物についてのＸＲＤデータを表１に示す。アスタリスクは２０個の最も強いＸＲＤピークを示す。
ＩＲ：機器：ＦＴＩＲ  Ｐａｒａｇｏｎ  １０００ＰＣ
データ収集パラメーター：媒体：ＫＢｒ；スキャン範囲：４４０〜４４００ｃｍ-1。
ＤＳＣ：機器：Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｐｙｒｉｓ  １
データ収集パラメーター：スキャン速度：１０℃／分；温度：５０℃〜３００℃。
【表Ｉ】
2005529924.tif 000004
【００１７】
生物学的活性
嫌気性細菌および微生物に対する活性
嫌気性細菌についての寒天希釈法：
ＭＩＣを、Ｗｉｌｋｉｎｓ  Ｃｈａｌｇｒｅｎ  Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）を用いてＮＣＣＬＳ寒天希釈法によって決定した。プレートを８５％の窒素、１０％の水素、および５％の二酸化炭素の雰囲気の嫌気ジャー中で４８時間インキュベートした。ＭＩＣ値を表ＩＩに示す。
【表ＩＩ】
2005529924.tif 000005
【００１８】
得られたＭＩＣのいくつかを表ＩＩＩに示す。
【表ＩＩＩ】
2005529924.tif 000006
【００１９】
カテーテルによる感染に対する活性
器具による感染においては、ＭＩＣ水準と臨床効果との相関性は乏しく、治療するためには感染した移植物を除去しなければならない状況になっている。このような感染の主な特徴は、バイオフィルムを形成する微生物の接着であり、表面に接着した微生物の遅い増殖速度である。従って、通常の抗生物質の感受性試験の結果と、器具による感染の治療についての成功との矛盾は、細菌のバイオフィルムの耐性パターンがプランクトン様細菌と比較して異なるという現実が原因であり得る。実験用の器具による感染における治癒率は、非増殖性の接着性細菌に対する抗生物質についてのインビトロでの殺菌効果から予想できることが明らかになっている。
【００２０】
臨床上最も重要な嫌気性細菌は、グラム陰性桿菌属である。バクテロイデス属（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、特に、バクテロイデスフラギリス（Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ）群が特に重要である。他の重要なグラム陰性細菌属としては、プレボテラ属（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）、フソバクテリウム属（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ポルフィロモナス属（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ）、ビロフィラ属（Ｂｉｌｏｐｆｉｌａ）、およびシテレラ属（Ｓｉｔｔｅｒｅｌｌａ）がある。グラム陽性嫌気性細菌の中には、球菌（主に、ペプトストレプトコッカス属（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ））、および芽胞形成性細菌（クロストリジウム属（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ））、および非芽胞形成性細菌（放線菌（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ）およびプロピオン酸菌属（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉａ））がある。
【００２１】
嫌気性細菌による感染の治療は困難な場合がある。混合感染において嫌気性細菌の対象の特定を誤ると、不良な反応を生じるか、または反応しない場合がある。アミノグリコシド抗生物質、トリメトプリムスルファメトキサゾール配合剤、ほとんどのキノロン系抗菌剤、およびモノバクタム系抗菌剤を含む多くの抗菌剤は、多くのまたはほとんどの嫌気性細菌に対する活性が低い。薬剤の４つのグループは嫌気性細菌のほとんどに対して活性であり、臨床的に意義がある。これらの４つのグループは、メトロニダゾールのようなニトロイミダゾール、イミペネムのようなカルベペネム、クロラムフェニコール、およびβ−ラクタムとβ−ラクタマーゼ阻害剤の組み合わせである。
【００２２】
非芽胞形成性嫌気性グラム陽性細菌（例えば、放線菌（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ）、真性細菌（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、およびプロピオン酸菌属（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉａ））は通常、メトロニダゾールに対して耐性である。最近、バクテロイデスフラギリス（Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ）群の一部の菌類が上記の薬剤に対して耐性であることが報告された。セフォキシチン、クリンダマイシン、およびチカルシリンまたはピペラシリンのような広域ペニシリンもまた、嫌気性細菌に対するかなりの活性を有している。しかし、米国の病院で分離されたバクテロイデスフラギリス（Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ）の１５〜２５％は、これらの薬剤に対して耐性がある。セフォキシチンおよびクリンダマイシンはウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）以外のクロストリジウム属（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ）に対して比較的弱い活性を有しており（この株のうち２０〜３５％が耐性である）、一部の嫌気性球菌はクリンダマイシンに対して耐性である。ペニシリンＧは、これらの嫌気性グラム陰性桿菌のいずれかが関係している重篤感染症の治療については確実ではない。なぜなら、そのような生物体ではβ−ラクタマーゼの産生量が多いからである。
【００２３】
器具による感染において新規の多形体「Ａ型」が有効であることを明らかにするために、２つの試験を行った：
１．粘液の産生の阻害
２．ガラス接着性細菌に対する活性
バイオフィルムの産生の阻害に対する多形体「Ａ型」の効果を研究するために、以下の研究を、ＢｌａｋｅらＪ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．２００１；３９：５４４−５５０；およびＰｏｌｏｎｉｏら、Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．２００１；４５：３２６２−３２６６に示されているように行った。Ｍｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ培養液はバイオフィルムの形成を支援しないので、２％のグルコースを加えたＴＳ培養液（ｔｒｙｐｔｉｃａｓｅ  ｓｏｙ  ｂｒｏｔｈ）を使用して、ＭＲＳＡ  １０２９／９９およびＭＲＳＥ  ８７９／２４７（いずれも最近、三次高度医療機関により分離された臨床分離株）によるバイオフィルムの形成を刺激した。細菌懸濁液（三連で）を抗生物質の２倍希釈液に曝し、一定速度で震盪させながら（１００ｒｐｍ）３７℃で一晩インキュベートした。翌日、培地を吸引した後、バイオフィルムをサフラニン（０．１％）を用いて室温で１時間染色し、蒸留水で洗浄し、完全に乾燥させ、２００μＬの０．２ＭのＮａＯＨ中で色素を抽出し、５４４ｎｍでＯＤを測定した。相対的な阻害を以下の式を使用して決定した：
％阻害＝１００−［（処理した穴壁のＯＤ／対照穴のＯＤ）×１００］。
【００２４】
グラフＡからＤに示すように、多形体「Ａ型」の低い方の濃度で、バイオフィルムの形成の阻害が生じている。
（グラフＡ）
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（グラフＢ）
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（グラフＣ）
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（グラフＤ）
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【００２５】
多形体「Ａ型」は接着性細菌に対して活性である：
リネゾリドは、ほとんど全ての臨床的に関係があるグラム陽性病原体に対して活性であり、ＭＩＣ90は２〜４μｇ／ｍｌであることが示されており、一方Ｃmaxは１２から１６μｇ／ｍｌである。リネゾリドは全てのグラム陽性細菌に対して有効であり、それらが他の抗生剤に対して敏感であるかどうかとは無関係である。作用は静菌性であるが、研究室で耐性変異体を作製することは困難であることが実証されている。しかし、臨床的な使用から数ヶ月以内に、バンコマイシン耐性腸球菌（Ｖａｎｃｏｍｉｃｉｎ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ：ＶＲＥ）およびメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ：ＭＲＳＡ）が報告された。両方の報告における共通の特徴は、これらの患者の中に異物（カテーテル）が存在し、これにより治療が不成功となり、耐性変異体が生じたことである。
【００２６】
リネゾリド、バンコマイシン、シナシッド、および多形体「Ａ型」について、ＭＩＣの変化を、焼結ガラス接着細菌モデルにおいてＭＲＳＥ  ８７９細菌を用いて調べた。培養液のＭＩＣはリネゾリド（２μｇ／ｍｌ）、バンコマイシン（１μｇ／ｍｌ）、シナシッド（０．５μｇ／ｍｌ）、および多形体「Ａ型」（０．５μｇ／ｍｌ）であったが、接着性細菌を死滅させる濃度は、リネゾリド（３２μｇ／ｍｌ）、バンコマイシン（８μｇ／ｍｌ）、シナシッド（２μｇ／ｍｌ）、および多形体「Ａ型」（２μｇ／ｍｌ）であることがわかった。培養液中、および焼結ガラス接着細菌上でのＭＩＣの変化を、グラフＥに示す。
（グラフＥ）
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【００２７】
Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ（結核菌）についての寒天希釈法：
抗生剤を、ＯＡＤＣ  ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ（Ｄｉｆｃｏ）を加えたＭｉｄｄｌｅｂｒｏｏｋ  ７Ｈ１０平板寒天培地に、８、４、２、１、０．５、０．２５、０．１２５、０．０６、および０．０３μｇ／ｍｌの濃度で加えた。試験生物体を、０．０５％のＴｗｅｅｎ  ８０を含む７Ｈ９培地（Ｄｉｆｃｏ）中で増殖させた。３７℃で７日間のインキュベーションの後、培養液を１ＭａｃＦａｒｌａｎｄに調整し、その後、生物体を０．０５％のＴｗｅｅｎ  ８０を含む滅菌水で１０倍に希釈した。得られた細菌懸濁液を、予め乾燥させた補充７Ｈ１０平板上にスポットした。３７℃で２１日間のインキュベーションの後、生物体の増殖を完全に阻害した薬剤の濃度のうち最も低い濃度としてＭＩＣを記録した。これを表ＩＶおよびＶに示す。
【表ＩＶ】
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【表Ｖ】
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【００２８】
以下の実施例を説明だけのために示す。これらは本発明の範囲を限定しない。
【実施例】
【００２９】
式Ｉの（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドの遊離の塩基は、例えば、ＷＯ０２／０６２７８に記載されている手順に従って調製することができる。
【００３０】
実施例１
式Ｉの化合物の多形体「Ａ型」の調製
５０ｇｍの式Ｉの遊離の塩基をエタノール（７５０ｍｌ）中に約６０℃に加熱することにより溶解させ、この溶液にエタノール性ＨＣｌ（１３．３６ｍｌ、８．９Ｎ）を約４５〜５０℃で加えた。反応混合液を約１０℃まで冷却し、約４時間攪拌した。分離した固形物を濾過し、減圧下、６０℃で乾燥させた。その後、固形物をエタノール（１５０ｍｌ）中で、７０〜８０℃で約４時間の間蒸解させた。次いで、これを約１０℃に冷却し、固形物を濾過し、減圧下、６０〜６５℃で乾燥させると、３０ｇｍの式Ｉの化合物の純粋な多形体「Ａ型」が得られた。
【００３１】
実施例２
式Ｉの化合物の多形体「Ｂ型」の調製
７．３ｇｍの式Ｉの遊離の塩基を熱いエタノール（１３０ｍｌ）中に溶解させ、約２０℃まで冷却した。エタノール性ＨＣｌ（２．６０ｍｌ、８．９Ｎ）をこれに添加した。このようにして得られた反応混合液を２０℃で約１５分間攪拌した。分離した固形物を濾過し、エタノール（３０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させると、５．９ｇｍの式Ｉの化合物の純粋な多形体「Ｂ型」が得られた。
【００３２】
実施例３
式Ｉの化合物の多形体「Ａ型」の調製
式Ｉの遊離の塩基の溶液（３６５ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ、７ｍｌのエタノール中に溶解させた）を約６０〜８０℃に加熱し、その後、約５℃に冷却した。エタノール中に溶解させたＨＣｌ（０．３０ｍｌ、２．６Ｎ、０．７５ｍｍｏｌ）を約５℃で反応混合液に添加した。このようにして得られた反応混合液を５〜１０℃で約２時間攪拌した。溶媒を減圧下で完全に除去し、残渣をジクロロメタンで蒸解させ、固形物を濾過し、メタノール／イソプロピルアルコールの混合液から結晶化させた。その後、得られた固形物をエタノール（４ｍｌ）中、約８０℃で約４時間蒸解させた。反応混合液を２５〜３０℃に冷却し、固形物を濾過し、減圧下、約６０℃で乾燥させると、式Ｉの化合物の「Ａ型」が得られた。
【００３３】
実施例４
式Ｉの化合物の多形体「Ａ型」の調製
１．０ｇｍの式Ｉの塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドを、７ｍｌの脱塩水中に５０℃で数分間加熱することにより溶解させた。溶液を約４０〜４５℃に冷却し、その後、０．２μｍの濾紙で濾過して固形物を除去した。濾紙を水（２．５ｍｌ）で洗浄した。濾液にイソプロピルアルコール（４０ｍｌ）を、室温（２５〜３０℃）で攪拌しながらゆっくりと加えた。約３０分間攪拌し続け、沈殿した固形物を濾過し、イソプロピルアルコール（５ｍｌ）で洗浄し、減圧下、約６０℃で２４時間乾燥させると、０．８５ｇｍの式Ｉの化合物の純粋な多形体「Ａ型」が得られた。
【００３４】
実施例５
式Ｉの化合物の多形体「Ａ型」の調製
１０ｇｍの式Ｉの塩酸（Ｓ）−Ｎ−［［３−フルオロ−４−［Ｎ−１−［４−｛２−フリル−（５−ニトロ）メチル｝］ピペラジニル］−フェニル］−２−オキソ−５−オキサゾリジニル］−メチル］アセトアミドを７０ｍｌの脱塩水中に、約５０℃で数分間加熱することによって溶解させた。溶液を約４０〜４５℃に冷却し、０．２μｍの濾紙で濾過し、水（１０ｍｌ）で洗浄した。エタノール（４００ｍｌ）を濾液に対して室温（２５〜３０℃）でゆっくりと加えた。室温で約３０分間攪拌すると固形物が分離した。約１０〜１５℃で冷却し続け、３時間維持した。固形物を濾過し、エタノール（１０ｍｌ）で洗浄し、減圧下、６０℃で２４時間乾燥させると、９ｇｍの式Ｉの化合物の純粋な多形体「Ａ型」が得られた。
【００３５】
本発明の実施形態を、添付の図面によりさらに詳細に説明する。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
【図１】実施例１に従って調製した化合物から得られた式Ｉの化合物の「Ａ型」のスペクトルを示す赤外スペクトル（ＩＲ）である。
【図２】実施例１に従って調製した化合物から得られた式Ｉの化合物の「Ａ型」の粉末Ｘ線回折パターン（ＸＲＰＤ）である。
【図３】実施例１に従って調製した化合物から得られた式Ｉの「Ａ型」の示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）によるサーモグラムである。
【図４】実施例２に従って調製した化合物から得られた式Ｉの化合物の「Ｂ型」のスペクトルを示す赤外スペクトル（ＩＲ）である。
【図５】実施例２に従って調製した化合物から得られた式Ｉの化合物の「Ｂ型」の粉末Ｘ線回折パターン（ＸＲＰＤ）である。
【図６】実施例２に従って調製した化合物から得られた式Ｉの化合物の「Ｂ型」の示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）によるサーモグラムである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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