(57)【要約】本発明は、血小板凝集に関連する病状を処置する方法であって、治療上有効量のＡＲＢまたはＡＲＢの代謝物、とりわけバルサルタンまたはその代謝物バレリル４−ヒドロキシバルサルタンを投与することを含んでなる方法を提供する。血小板凝集の阻害により処置される病状には、急性心筋梗塞、虚血性脳卒中、狭心症、急性冠症候群、ＴＩＡ（一過性脳虚血性発作、または急性脳血管症候群）、心不全、虚血性病因の胸部疼痛、シンドロームＸ、血栓塞栓症、肺高血圧、真性糖尿病、末梢血管疾患、深部静脈血栓症、任意の血管の動脈血栓症、カテーテル血栓閉塞または再閉塞が含まれる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
血小板凝集を阻害する方法であって、それを必要としている患者に、所望により医薬上許容される担体の存在下で、治療上有効量のＡＲＢまたは医薬上許容されるその塩を投与することを含んでなる方法。
【請求項２】
ＡＲＢがバルサルタンである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
血小板凝集を阻害する方法であって、かかる方法を必要としている患者に、所望により医薬上許容される担体の存在下で、治療上有効量のＡＲＢの代謝物または医薬上許容されるその塩を投与することを含んでなる方法。
【請求項４】
代謝物がバレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
血小板凝集により仲介される病状を処置する方法であって、それを必要としている患者に、治療上有効量のＡＲＢを投与することを含んでなる方法。
【請求項６】
ＡＲＢがバルサルタンである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
血小板凝集により仲介される病状が、急性心筋梗塞、虚血性脳卒中、狭心症、急性冠症候群、ＴＩＡ（一過性脳虚血性発作、または急性脳血管症候群）、心不全、虚血性病因の胸部疼痛、シンドロームＸ、血栓塞栓症、肺高血圧、真性糖尿病、末梢血管疾患、深部静脈血栓症、任意の血管の動脈血栓症、カテーテル血栓閉塞または再閉塞である、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
血小板凝集により仲介される病状を処置する方法であって、治療上有効量のＡＲＢの代謝物を、それを必要としている患者に投与することを含んでなる方法。
【請求項９】
代謝物がバレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
血小板凝集が、急性心筋梗塞、虚血性脳卒中、狭心症、急性冠症候群、ＴＩＡ（一過性脳虚血性発作、または急性脳血管症候群）、心不全、虚血性病因の胸部疼痛、シンドロームＸ、血栓塞栓症、肺高血圧、真性糖尿病である、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
末梢血管疾患、深部静脈血栓症、任意の血管の動脈血栓症、カテーテル血栓閉塞または再閉塞。
【請求項１２】
治療上有効量のＡＲＢの代謝物および医薬上許容される担体を含んでなる医薬組成物。
【請求項１３】
代謝物がバレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンである、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
血小板凝集、特に、急性心筋梗塞、虚血性脳卒中、狭心症、急性冠症候群、ＴＩＡ（一過性脳虚血性発作、または急性脳血管症候群）、心不全、虚血性病因の胸部疼痛、シンドロームＸ、血栓塞栓症、肺高血圧、真性糖尿病、末梢血管疾患、深部静脈血栓症、任意の血管の動脈血栓症、カテーテル血栓閉塞または再閉塞により仲介される疾患および障害の予防、進行遅延または処置のための医薬の製造のための、ＡＲＢまたは医薬上許容されるその塩の使用。
【請求項１５】
血小板凝集、特に、急性心筋梗塞、虚血性脳卒中、狭心症、急性冠症候群、ＴＩＡ（一過性脳虚血性発作、または急性脳血管症候群）、心不全、虚血性病因の胸部疼痛、シンドロームＸ、血栓塞栓症、肺高血圧、真性糖尿病、末梢血管疾患、深部静脈血栓症、任意の血管の動脈血栓症、カテーテル血栓閉塞または再閉塞により仲介される疾患および障害の予防、進行遅延または処置のための医薬の製造のための、ＡＲＢの代謝物または医薬上許容されるその塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の背景
バルサルタンは、ＡＴ１レセプターに対するアンギオテンシンＩＩの結合を選択的にブロックし、血管拡張を引き起こし、そしてアルドステロンの分泌を減少させる。最近の臨床試験により、急性血管事象後の患者のコホートにおけるバルサルタンの追加的利点が明らかとなった。血小板の活性化が冠血管および脳血管の閉塞の病因において重要な役割を果たすこと、およびＡＴ１レセプターが血小板の表面に存在することを考慮して、血管疾患の複数のリスクファクターを有する対象における血小板上のバルサルタンおよびその主要な肝代謝物、バレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンのインビトロ（in vitro）効果を評価した。
【０００２】
図面の簡単な説明
以下の図面は、本発明の一定の実施態様を表す。それらは例示のみを目的とし、そして本明細書において特記しない限り、本発明を限定するわけではない。
【０００３】
図１Ａ〜Ｃ。ベースラインでの（Ａ）、ならびに１００μＭのバルサルタン（Ｂ）および１μＭのバレリル ４−ヒドロキシ バルサルタン（Ｃ）でのインキュベーション後の試験患者からの、実際にスキャンされた血小板凝集曲線。高濃度のバルサルタンは、エピネフリン−誘導性凝集に対して影響することなく、ＡＤＰ−誘導性凝集（Ｂ）を有意に阻害するが、その代謝物は、治療的濃度範囲でエピネフリン−誘導性凝集（Ｃ）をブロックする。
【０００４】
発明の要約
１つの態様において、本発明は、血小板凝集を阻害する方法であって、それを必要としている患者に、所望により医薬上許容される担体の存在下で、治療上有効量のアンギオテンシンＩＩレセプターブロッカー（「ＡＲＢ」）、好ましくはバルサルタン、または医薬上許容されるその塩を投与することを含んでなる方法に関する。
【０００５】
別の実施態様において、本発明は、血小板凝集を阻害する方法であって、それを必要としている患者に、所望により医薬上許容される担体の存在下で、治療上有効量のＡＲＢの代謝物、とりわけバルサルタンの代謝物、バレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンを投与することを含んでなる方法に関する。
【０００６】
本発明の別の態様において、血小板凝集に関連する病状を処置する方法であって、ＡＲＢまたはＡＲＢの代謝物を、それを必要としている患者に投与することを含んでなる方法を提供する。血小板凝集に関連する病状には、急性心筋梗塞、虚血性脳卒中、狭心症、急性冠症候群、ＴＩＡ（一過性脳虚血性発作、または急性脳血管症候群）、心不全、虚血性病因の胸部疼痛、シンドロームＸ、血栓塞栓症、肺高血圧、真性糖尿病（diabetes mellitus）、末梢血管疾患、深部静脈血栓症、任意の血管の動脈血栓症、カテーテル血栓閉塞または再閉塞が含まれる。
【０００７】
本発明の別の態様は、ＡＲＢまたはＡＲＢの代謝物および医薬上許容される担体を含んでなる医薬組成物に関する。
【０００８】
好適な実施態様の詳細な記載
ＡＴ１−レセプターアンタゴニスト（アンギオテンシンＩＩレセプターアンタゴニストとも呼ばれる）は、アンギオテンシンＩＩレセプターのＡＴ１−レセプターサブタイプに結合するが、当該レセプターの活性化をもたらさない活性成分であると理解される。ＡＴ１レセプターの阻害の結果として、これらのアンタゴニストは、たとえば、血小板凝集を予防し、そしてそれらに関連する病状を処置するために使用され得る。
【０００９】
ＡＴ１−レセプターアンタゴニストのクラスには、異なる構造的特徴を有する化合物が含まれ、非ペプチド性化合物が本質的に好適である。本発明の範囲内のＡＲＢとしては、バルサルタンが挙げられ、これは式（Ｉ）
【化１】
2005529913.tif 000002
で示されるＡＴ１−レセプターアンタゴニスト、（Ｓ）−Ｎ−（１−カルボキシ−２−メチル−プロパ−１−イル）−Ｎ−ペンタノイル−Ｎ−［２;（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−４−イル−メチル］アミンであり、そして欧州特許出願公開第０４４３９８３Ａ号および米国特許第５,３９９,５７８号において記載され、これらの開示の全体を、出典明示により本明細書の一部とする。他のＡＲＢ化合物としては、ロサルタン、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、サプリサルタン、タソサルタン、テルミサルタン、オルメサルタン、ゾラサルタン（１−［［３−ブロモ−２−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル］−５−ベンゾ−フラニル］メチル］−２−ブチル−４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−５−カルボン酸）、および３−（３−ブロモ−２−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−フェニル］−ベンゾフラン−５−イル メチル）−２−ブチル−５−クロロ−３Ｈ−イミダゾール−４−カルボン酸、メチル ２−［［４−ブチル−２−メチル−６−オキソ−５−［［２'−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）［１,１'−ビフェニル］−４−イル］メチル］−１（６Ｈ）−ピリミジニル］メチル］−３−チオフェンカルボキシレート（ＬＲ−Ｂ／０８１としても知られる）およびメチル ２−［［４−ブチル−２−メチル−６−オキソ−５−［［２'−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）［１,１'−ビフェニル］−４−イル］メチル］−１−（６Ｈ）−ピリミジニル］メチル］−３−チオフェンカルボキシレート（３ｋとしても知られる）、３位に（カルボキシヘテロアリール）メチル部分が導入されたＬＲ−Ｂ／０８１（Ｌｕｓｏｆａｒｍａｃｏ）、２,７−ジエチル−５−［［２'−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−４−イル］メチル］−５Ｈ−ピラゾロ［１,５−ｂ］［１,２,４］−トリアゾールカリウム塩（ＹＭ ３５８（Ｙａｍａｎｏｕｃｈｉ）としても知られ、Ｂｉｏｌ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｕｌｌ  ２０００  Ｆｅｂ；２３（２）：１７４−８１において開示されている）、Ｔｈｒｏｍｂ  Ｒｅｓ  ２００２  Ｍａｒ  １５；１０５（６）：５３１−６において開示されたＬ−１５８，８０９、Ｊ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １９９５  Ｊａｎ；２５（１）：２２−９において開示されたＫＴ３  ６７１、Ｊ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １９９８  Ａｐｒ；３１（４）：５６８−７５において開示されたＴＡ  ６０６、Ｆｕｎｄａｍ  Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １９９７；１１（５）：３９５−４０１において開示されたＴＨ  １４２１７７、Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １９９７  Ｆｅｂ；１２０（３）：４８８−９４において開示されたＵＰ  ２６９−６、下記の式
【化２】
2005529913.tif 000003
で示されるＥ−１４７７の名称を有する化合物、
下記の式
【化３】
2005529913.tif 000004
で示されるＳＣ−５２４５８の名称を有する化合物、
下記の式
【化４】
2005529913.tif 000005
で示されるＺＤ−８７３１の名称を有する化合物、またはそれぞれの場合において、医薬上許容されるそれらの塩が含まれるが、これらに限定されるわけではない。
【００１０】
驚くべきことに、ＡＲＢの代謝物も、血小板凝集を有意に減少させることが見いだされた.ＡＲＢの代謝物には、
Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ  １９９０  Ｏｃｔ；２５５（１）：２１１−７において開示されたような２−ｎ−ブチル−４−クロロ−１−［（２'−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ビフェニル−４−イル） メチル］イミダゾール−５−カルボン酸 塩酸塩（ＥＸＰ−３１７４とも呼ばれる）である、ロサルタンの代謝物、およびＪ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ  １９９２  Ｊａｎ  １７；５７３（２）：２９５−３０１において開示された代謝物ＥＸＰ−３１７４（ＩＩ）；
（１）イルベサルタンのテトラゾール Ｎ２−β−グルクロニドコンジュゲート、（２）ブチル側鎖のω−１酸化に由来するモノヒドロキシル化代謝物、（３、４）スピロシクロペンタン環の酸化に由来する２つの異なるモノヒドロキシル化代謝物、（５）ブチル側鎖のω−１酸化およびスピロシクロペンタン環の酸化に由来するジオール、（６）ω−１酸化モノヒドロキシル化代謝物のさらなる酸化に由来するケト代謝物、（７）ジオールのω−１ヒドロキシルのさらなる酸化に由来するケト−アルコール、ならびに（８）Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ  Ｄｉｓｐｏｓ  １９９８  Ｍａｙ；２６（５）：４０８−１７において開示されたブチル側鎖の末端メチル基の酸化に由来するカルボン酸代謝物である、イルベサルタンの代謝物；
Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ  ２００２；４１（１）：７−１７、Ｊ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ  Ｂ  Ｂｉｏｍｅｄ  Ｓｃｉ  Ａｐｐｌ  １９９９  Ａｕｇ  ２０；７３１（２）：４１１−７、およびＪ  Ｈｕｍ  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ  １９９７  Ｓｅｐ；１１  Ｓｕｐｐｌ  ２：Ｓ１９−２５において開示されたカンデサルタン（２−エトキシ−１−［［２'−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−４−イル］メチル］−１Ｈ−ベンズイミダゾール−７−カルボン酸）（ＣＶ １１９７４およびＣＶ−１５９５９としても知られる）である、カンデサルタン  シレキセチルの代謝物；
Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ  Ｄｉｓｐｏｓ  １９９９  Ｏｃｔ；２７（１０）：１１４３−９において開示されたテルミサルタン  １−Ｏ−アシルグルクロニドである、テルミサルタンの代謝物；
Ｊ  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ  Ｓｕｐｐｌ  ２００１  Ｊｕｎ；１９  Ｓｕｐｐｌ  １：Ｓ２１−３２において開示されたような、オルメサルタンまたはＣＳ８６６である、オルメサルタン  メドキソミルの代謝物；
Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ  １９９９  Ａｐｒ；１９（４  Ｐｔ  ２）：７３Ｓ−７８Ｓにおいて開示されたグルクロニドである、エプロサルタンの代謝物；
Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ  ２０００  Ｎｏｖ；２９５（２）：６４９−５４において開示されたエノールタソサルタンである、タソサルタンの代謝物、ならびにＪ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  １９９８、Ｏｃｔ．  ２２，  ４１（２２），  ４２５１−６０において開示された５つの他の代謝物；
グルクロン酸コンジュゲートであるゾラサルタンの代謝物、および生体内変換産物に関連する５つの代謝物、脂肪族側鎖がヒドロキシル化された３つの代謝物、さらにケトンまで酸化された１つの代謝物、およびＪ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｉｏｍｅｄ  Ａｎａｌ  １９９４  Ｓｅｐ；１２（９）：１１８１−７およびＪ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｉｏｍｅｄ  Ａｎａｌ  １９９４  Ｓｅｐ；１２（９）：１１８１−７において開示されたフェニル環がヒドロキシル化された１つの代謝物；
ＺＤ−８７３１の代謝物；
Ｊ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １９９３  Ｏｃｔ；２２（４）：６１７−２５において開示された（５−［（３,５−ジブチル−１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−１−イル） メチル］−２−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルフェニル）］ピリジンの代謝物（ＳＣ−５２４５８としても知られる）；
以下のものの代謝物：ＡＲＢ、ＺＤ−８７３１（Ｚｅｎｅｃａ）、メチル ２−［［４−ブチル−２−メチル−６−オキソ−５−［［２'−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）［１,１'−ビフェニル］−４−イル］メチル］−１（６Ｈ）−ピリミジニル］メチル］−３−チオフェンカルボキシレート（ＬＲ−Ｂ／０８１としても知られる）およびメチル ２−［［４−ブチル−２−メチル−６−オキソ−５−［［２'−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）［１,１'−ビフェニル ］−４−イル］メチル］−１−（６Ｈ）−ピリミジニル］メチル］−３−チオフェンカルボキシレート（３ｋとしても知られる）、３位に（カルボキシヘテロアリール）メチル部分を導入したＬＲ−Ｂ／０８１（Ｌｕｓｏｆａｒｍａｃｏ）、２,７−ジエチル−５−［［２'−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ビフェニル−４−イル］メチル］−５Ｈ−ピラゾロ［１,５−ｂ］［１,２,４］−トリアゾール カリウム塩（ＹＭ ３５８（Ｙａｍａｎｏｕｃｈｉ）としても知られ、Ｂｉｏｌ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｕｌｌ  ２０００  Ｆｅｂ；２３（２）：１７４−８１において開示されている）、Ｔｈｒｏｍｂ  Ｒｅｓ  ２００２  Ｍａｒ  １５；１０５（６）：５３１−６において開示されたＬ−１５８，８０９、Ｊ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １９９５  Ｊａｎ；２５（１）：２２−９において開示されたＫＴ３  ６７１、Ｊ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １９９８  Ａｐｒ；３１（４）：５６８−７５において開示されたＴＡ  ６０６、Ｆｕｎｄａｍ  Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １９９７；１１（５）：３９５−４０１において開示されたＴＨ  １４２１７７、Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １９９７  Ｆｅｂ；１２０（３）：４８８−９４において開示されたＵＰ  ２６９−６
が含まれる。
【００１１】
Ｗａｌｄｍｅｉｅｒ  Ｆ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｘｅｎｏｂｉｏｔｉｃａ，  １９９７，  Ｖｏｌ．  ２７，  Ｎｏ．  １，  ５９−７１（出典明示により、そのすべての内容を本明細書の一部とする。）において開示された式
【化５】
2005529913.tif 000006
を有する、バレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンであるバルサルタンの代謝物が好適である。
【００１２】
ＡＲＢおよびそれらの代謝物は、本明細書において「本発明の化合物」と称され得る。置換基の性質に依存して、本発明の化合物は、１またはそれ以上の不斉中心を有し得る。得られるジアステレオ異性体、エナンチオマーおよび幾何異性体は、本発明に包含される。
【００１３】
出発物質および方法の選択に依存して、化合物は、可能性のある異性体の１つまたはそれらの混合物の形態、たとえば実質的に純粋な幾何（シスまたはトランス）異性体、光学異性体（対掌体）、ラセミ体、あるいはこれらの混合物であり得る。前記の可能性のある異性体またはそれらの混合物は、本発明の範囲内である。
【００１４】
得られる異性体の任意の混合物は、構成物質の物理化学的相違に基づいて、純粋な幾何または光学異性体、ジアステレオ異性体、ラセミ体へと、たとえばクロマトグラフィーおよび／または分別結晶化により分離され得る。
【００１５】
得られる最終生成物または中間体の任意のラセミ体は、既知の方法により、たとえば光学活性酸または塩基で得られたジアステレオ異性体塩の分離、および光学的活性化合物の遊離化により、光学対掌体へと分割され得る。したがって、カルボン酸中間体は、Ｄ−またはＬ−（アルファ−メチルベンジルアミン、シンコニジン、シンコニン、キニーネ、キニジン、エフェドリン、デヒドロアビエチラミン（dehydroabietylamine）、ブルシンまたはストリキニーネ）−塩の分別結晶化により、それらの光学対掌体へと分割され得る。ラセミ生成物は、また、キラルクロマトグラフィー、たとえばキラル吸着剤を用いる高速液体クロマトグラフィーにより分割され得る。
【００１６】
最後的に、本発明の化合物は、遊離の形態、または塩形成基が存在する場合にはその塩として得られる。
【００１７】
本発明の酸性化合物は、医薬上許容される塩基、たとえば水性アルカリ金属ヒドロキシドを用いて、有利にはエーテル性またはアルコール性溶媒、たとえば低級アルカノールの存在で、塩に変換され得る。後者の溶液から、塩は、エーテル、たとえばジエチルエーテルで沈澱し得る。得られる塩は、酸での処理により遊離の化合物へと変換され得る。これらのまたは他の塩は、また、得られた化合物の精製のために使用され得る。
【００１８】
塩基性基を有する本発明の化合物は、酸付加塩、とりわけ医薬上許容される塩に変換され得る。これらは、たとえば、無機酸、たとえば鉱物酸、たとえば硫酸、リン酸またはハロゲン化水素酸で、あるいは有機カルボン酸、たとえば（Ｃ１−Ｃ４）−アルカンカルボン酸（これらは、たとえば、非置換であるか、またはハロゲンにより置換されている。）、たとえば酢酸、たとえば飽和または不飽和ジカルボン酸、たとえばシュウ酸、コハク酸、マレイン酸またはフマル酸、たとえばヒドロキシ−カルボン酸、たとえばグリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸またはクエン酸、たとえばアミノ酸、たとえばアスパラギン酸またはグルタミン酸で、あるいは有機スルホン酸、たとえば（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル−スルホン酸（たとえばメタンスルホン酸）またはアリールスルホン酸（これらは、非置換であるか、またはたとえばハロゲンにより置換されている。）で形成される。塩酸、メタンスルホン酸およびマレイン酸で形成された塩が好適である。
【００１９】
遊離の化合物とそれらの塩の形態の化合物との間の密接な関係の観点において、本明細書において「化合物」という場合はいつでも、その状況下でかかる塩があり得るか、または適当であることを条件として、対応する塩も意図される。
【００２０】
化合物（それらの塩を含む）は、また、それらの水和物の形態で得られ得るか、またはそれらの結晶化に使用された他の溶媒を含む。
【００２１】
本発明の別の態様には、治療上有効量の本発明の化合物および医薬上許容される担体を含んでなる医薬組成物が含まれる。本発明の医薬組成物は、自体公知の方法で製造され、そしてヒトを含む哺乳類（温血動物）への経腸、たとえば経口または経直腸、および非経腸投与に適したものであり、そして、単独の、あるいは１種またはそれ以上の医薬上許容される担体、とりわけ経腸または非経腸適用に適したものと組み合わせられた治療上有効量の薬理活性化合物を含んでなる。典型的な経口製剤としては、錠剤、カプセル剤、シロップ剤、エリキシル剤および懸濁剤が挙げられる。典型的な注射可能な製剤としては、溶液および懸濁液が挙げられる。医薬組成物は、血小板凝集、特に、急性心筋梗塞、虚血性脳卒中、狭心症、急性冠症候群、ＴＩＡ（一過性脳虚血性発作、または急性脳血管症候群）、心不全、虚血性病因の胸部疼痛、シンドロームＸ、血栓塞栓症、肺高血圧、真性糖尿病、末梢血管疾患、深部静脈血栓症、任意の血管の動脈血栓症、カテーテル血栓閉塞または再閉塞により仲介される病状の処置のために使用され得る。
【００２２】
上記の製剤において使用される典型的な医薬上許容される担体としては、医薬製剤において通常使用される、糖類、たとえばラクトース、スクロース、マンニトールおよびソルビトール；スターチ、たとえばコーンスターチ、タピオカスターチおよびポテトスターチ；セルロースおよび誘導体、たとえばナトリウムカルボキシメチルセルロース、エチルセルロースおよびメチル セルロース；リン酸カルシウム、たとえばリン酸二カルシウムおよびリン酸三カルシウム；硫酸マグネシウム；硫酸カルシウム；ポリビニルピロリドン；ポリビニルアルコール；ステアリン酸；ステアリン酸アルカリ土類金属、たとえばステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸カルシウム；ステアリン酸；植物油、たとえばピーナッツ油、綿実油、ゴマ油、オリーブ油およびコーン油；非イオン性、カチオンおよびアニオン性界面活性剤；エチレングリコールポリマー；β−シクロデキストリン；脂肪アルコール；および穀物加水分解物（hydrolyzed cereal solid）、ならびに他の非毒性適合性増量剤、結合剤、崩壊剤、緩衝剤、保存剤、抗酸化剤、滑沢剤、着香剤などが挙げられる。
【００２３】
これらの医薬調製物は、単独または通常の医薬補助剤とともに薬理活性化合物を含んでなる調製物で、恒温動物への経腸、たとえば経口および経直腸または非経腸投与のためのものである。たとえば、医薬調製物は、約０.１％〜９０％、好ましくはof from 約１％〜約８０％の活性化合物から成る。経腸または非経腸投与のための医薬調製物は、たとえば単位用量形態、たとえば被覆錠剤、錠剤、カプセル剤または坐剤およびアンプル剤である。これらは、自体公知の方法で、たとえば慣用的混合、造粒、コーティング、可溶化または凍結乾燥処理を用いて製造される。したがって、経口的使用のための医薬調製物は、活性化合物を固体賦形剤と合わせること、所望により得られた混合物を造粒すること、および所望または必要ならば、適当な補助剤を添加した後に混合物または顆粒を錠剤または被覆錠へと加工することにより得られ得る。
【００２４】
ＡＲＢ、とりわけバルサルタン、およびＡＲＢの代謝物、とりわけバレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンは、他の治療剤、たとえば、それぞれの治療上有効両にて当分野において報告されているように組み合わせられ得る。かかる治療剤としては、ヘパリン、ワルファリン、ｔ−ＰＡ、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、アスピリン、チクロピジン、クロピドグレル、アブシキシマブ、エプチフィバチドおよびチロフィバン、抗高血圧剤および抗糖尿病剤が挙げられる。
【００２５】
活性化合物の用量は、さまざまな要因、たとえば投与用式、恒温動物の種、年齢および／または個々の病状に依存し得る。
【００２６】
本発明の活性成分の好適な用量は、治療上有効量、とりわけ商品として入手可能なバルサルタンの用量である。
【００２７】
通常、本発明の化合物の経口投与の場合において、おおよその１日用量は、体重約７５ｋｇの患者に関して、約０.１ｍｇ〜約３６０ｍｇと見積もられる。
【００２８】
バルサルタンは、適当な単位用量形態、たとえば、カプセル剤または錠剤の形態で供給され、そして患者に投与され得る治療上有効量、たとえば約２０〜約３２０ｍｇのバルサルタンを含んでなる。活性成分は、たとえば２０ｍｇまたは４０ｍｇのバルサルタンの１日用量で開始され、１日８０ｍｇまで増量され、そしてさらに１日１６０ｍｇまで、１日３２０ｍｇまで増量されて、１日３回まで、適用され得る。好ましくは、バルサルタンは、それぞれ、８０ｍｇまたは１６０ｍｇの用量で、患者に１日１回または２回適用される。対応する用量が、たとえば、朝、昼または晩に服用され得る。
【００２９】
バレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンの場合において、好適な単位用量形態は、たとえば、１日１回投与される、約５０〜７０ｋｇの哺乳類について、約１ｍｇ〜約１０００ｍｇ、有利には約５ｍｇ〜約５００ｍｇ、いっそうさらに有利には約２０ｍｇ〜約３２０ｍｇを含んでなる錠剤またはカプセル剤である。
【００３０】
上記の用量は、本発明の活性成分の治療上有効量を含む。
【００３１】
驚くべきことに、ＡＲＢ、特にバルサルタンおよびＡＲＢの代謝物、特にバレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンの両方がヒト血小板の有意なインビトロ（in vitro）阻害を示すことが見いだされた。
【００３２】
本発明の化合物は、血小板凝集を阻害し、したがって、血小板凝集、特に、急性心筋梗塞、虚血性脳卒中、狭心症、急性冠症候群、ＴＩＡ（一過性脳虚血性発作、または急性脳血管症候群）、心不全、虚血性病因の胸部疼痛、シンドロームＸ、血栓塞栓症、肺高血圧、真性糖尿病、末梢血管疾患、深部静脈血栓症、任意の血管の動脈血栓症、カテーテル血栓閉塞または再閉塞により仲介される病状の処置に使用され得る。
【００３３】
本発明は、さらにまた、血小板凝集、特に、急性心筋梗塞、虚血性脳卒中、狭心症、急性冠症候群、ＴＩＡ（一過性脳虚血性発作、または急性脳血管症候群）、心不全、虚血性病因の胸部疼痛、シンドロームＸ、血栓塞栓症、肺高血圧、真性糖尿病、末梢血管疾患、深部静脈血栓症、任意の血管の動脈血栓症、カテーテル血栓閉塞または再閉塞により仲介される疾患または病状の予防、進行遅延、処置において使用するための本発明の化合物に関する。
【００３４】
本発明は、さらにまた、血小板凝集、特に、急性心筋梗塞、虚血性脳卒中、狭心症、急性冠症候群、ＴＩＡ（一過性脳虚血性発作、または急性脳血管症候群）、心不全、虚血性病因の胸部疼痛、シンドロームＸ、血栓塞栓症、肺高血圧、真性糖尿病、末梢血管疾患、深部静脈血栓症、任意の血管の動脈血栓症、カテーテル血栓閉塞または再閉塞により仲介される疾患および障害の予防、進行遅延または処置のための医薬の製造のための本発明の化合物の使用に関する。
【００３５】
上で引用した特性は、以下の方法により証明された：
血小板凝集、フローサイトメトリー試験、およびカートリッジベース血小板アッセイアナライザーのための血液試料は、既知の血管リスクファクターを有する２０名のボランティアから取得した。試験参加者は、彼らが出血性素因、卒中の病歴、過去６ヶ月における大きな手術または深刻な外傷、および２００／１１０ｍｍを超える高血圧を有する場合、除外された。彼らのうち、アスピリンまたは他の任意の抗血小板剤を投与されているものはいなかった。すべての対象者は、少なくとも３０分間の休息および２時間またはそれ以上の絶食の後に採血された。血液は、あらゆる昼間影響（diurnal influence）を避けるために午前８〜１０時の間に採取し、最初の１.５ｍｌの自由継続血液を廃棄した後に、３.８％ クエン酸ナトリウム（１：９ 容積）を含有する２１−ゲージのバタフライニードルを用いて前腕前部静脈から採取した。１１個のバキュテイナー（Vacutainer）チューブ（４.５ｍｌ）を、それぞれの試験参加者からの全血−クエン酸混合物の全量４９ｍｌのために集めた。１個のチューブを、内部標準として維持し、そしてバッファー溶液とともにインキュベートした。５個のチューブを、１０ｎＭ、１００ｎＭ、１μＭ、１０μＭ、および１００μＭの化合物の最終濃度を達成するために、バルサルタンとともに３７℃で６０分間インキュベートした。残りの５本のチューブを、同様に、１０ｎＭ、１００ｎＭ、１μＭ、１０μＭ、および１００μＭの濃度を達成するために、増加量のバレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンとともにインキュベートした。バルサルタンおよびバレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンの濃度は、バルサルタン治療を受けている患者において観察される治療域以下から著しく治療域を超える血漿レベルの範囲であった。バルサルタンピークの血漿濃度は、１６０ｍｇ服用後に７.５μＭに到達し得るが、血漿中のバレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンはバルサルタンのレベルの１０％のみを示す。バルサルタンおよびバレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンの新たな溶液を、血小板試験が行われたのと同日の朝に用時調製した。可能性のある観察者バイアスを回避するために、血液試料をコード化し、そして盲検化した。血液採取手順および血小板試験は、プロトコールを知らない者により行われた。
【００３６】
血小板凝集
Ａ.  血小板富化血漿（platelet-rich plasma）
クエン酸および全血混合物を、１時間以内に使用するために室温で維持された血小板富化血漿（ＰＲＰ）を取得するために、１２００ｇにて５分間遠心分離に付した。血小板の計数を、Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｃｏｕｎｔｅｒ ＺＭ （Coulter Co., Hialeah, FL）を用いて個々のＰＲＰについて測定した。血小板の数を、同一源の血小板欠乏血漿で３.５０×１０８／ｍｌに調節した。血小板凝集（ＰＡ）を、５μＭ ＡＤＰ、および５μＭ エピネフリンにより誘導した。すべてのアゴニストを、Ｃｈｒｏｎｏｌｏｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ （Havertown, PA）から入手した。凝集試験を、４チャネルＣｈｒｏｎｏｌｏｇ Ｌｕｍｉ−Ａｇｇｒｅｇｏｍｅｔｅｒ（model 560 - Ca）を用いて行った。凝集を、参照として血小板欠乏血漿を用いて、記録時間の最後のベースラインからの光線透過率の変化の最大値（％最大）として表した。凝集曲線を６分間記録し、そして国際的に確立された標準的方法 Ruggeri ZM, Semin Hemat 1994;31: 229 - 239にしたがって解析した。
【００３７】
Ｂ. 全血
該方法は、Abbate R, et al., Amer J Clin Pathol 1986;86: 91-96において詳細に記載されている。簡単に説明すると、全血クエン酸混合物を、０.５ｍｌ ＴＢＳで１：１に希釈し、次いでゆっくりと回旋した。撹拌棒を有するキュベットを、インキュベーションウェル内に置き、そして３７℃まで５分間加温した。次いで、試料をアッセイウェルに移した。電極を、試料キュベット内に置いた。血小板凝集を、１μg／ｍｌのコラーゲンで促進した。血小板凝集試験を、Ａｇｇｒｏｌｉｎｋ" ソフトウェアを用いるＣｈｒｏｎｏ−Ｌｏｇ Ｗｈｏｌｅ Ｂｌｏｏｄ Ａｇｇｒｅｇｏｍｅｔｅｒを用いて行った。血小板凝集能を、電気インピーダンスの変化として表し、そしてオームで表す。
【００３８】
全血フローサイトメトリー
血小板レセプターの発現を、以下のモノクローナル抗体：ＣＤ３１（血小板内皮細胞接着分子（ＰＥＣＡＭ−１）、ＣＤ４１（グリコプロテイン［ＧＰ］ ＩＩｂ／ＩＩＩａ、（ＩＩｂ （３）、ＣＤ４２ｂ（ＧＰ Ｉｂ）、ＣＤ ５１／ＣＤ６１（（ｖ（３、またはビトロネクチンレセプター）、ＣＤ６２ｐ（Ｐ−セレクチン）、ＣＤ１０７ａ（リソソーム関連膜タンパク質−１；ＬＡＭＰ−１）、ＣＤ １０７ｂ（ＬＡＭＰ−２）、ＣＤ１５１（血小板／内皮４回膜貫通抗原−３；ＰＥＴＡ−３）、およびフィブリーノーゲン−血小板（PharMingen, San Diego, CA）のためのＰＡＣ−１を用いることにより測定した。血小板−白血球相互作用を、ＣＤ１４、単球／マクロファージマーカーとともにパン−血小板マーカー（ＣＤ１５１）に関するデュアル抗体（dual antibody）を用いて評価した。血液−クエン酸混合物（５０μｌ）を、４５０μｌ Ｔｒｉｓ緩衝化食塩水（ＴＢＳ）（１０ｍｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ、０.１５ｍｏｌ／Ｌ 塩化ナトリウム）で希釈し、そしてエッペンドルフ（Eppendorf）チューブをゆっくりと２回反転させることにより混合した。次いで、５μｌの対応する抗体を、個々の溶液に添加し、そして試料を３０分間インキュベートした。インキュベーション後、４００μｌの２％緩衝化パラホルムアルデヒドを固定のために添加した。試料を、Gurbel PA, et al., J Am Coll Cardiol. 1998;31:1466-1473において記載されたように、蛍光散乱を測定するために設定したＢｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ＦＡＣＳｃａｎフローサイトメータにより解析した。データを、リストモードファイルに集め、次いで解析した。Ｐ−セレクチンを、Gurbel PA, et al, Am Heart J 2000;139: 320-328において記載されたように、陽性細胞のパーセントとして表した。他の抗原を、平均蛍光強度の対数として表した。
【００３９】
カートリッジベースの血小板アナライザー
血小板機能アナライザー（ＰＦＡ−１００'、Dade Behring, Deerfield, IL）は、流動条件下で小血管に対する損傷後の一次止血における変化を促進するデバイスである（Kundu SK, et al., Semin Thromb Hemost 1995;21(Suppl 2):106-112）。開口部が閉塞するのに要する時間を、せん断誘導性の血小板凝集の測定としてデジタル的に記録した。閉口時間の測定を、デュプリケートで行った。
【００４０】
凍結乾燥ヒトフィブリノーゲン被覆マイクロパーティクルを有するポリスチレンビーズ被覆カートリッジを用いて、急速血小板機能アッセイカートリッジ試験（ＲＰＦＡ−ＡＳＡ、Ultegra(r) Accumetrics, Inc., San Diego, CA, USA）、および没食子酸プロピルを、アゴニストとして供給した。全血クエン酸混合物をカートリッジに添加し、そして血小板と被覆ビーズの間の凝集を記録した。データは濁度（turbidometric）血小板凝集を映し、そして血小板プロスタグランジン阻害の程度を反映した（Smith JW, et al., Circulation 1999;99:620-625）。Ｕｌｔｅｇｒａ（ｒ）アッセイを、デュプリケートで行った。電子的品質試験を、各装置の毎日に使用について、すべての対象試料試験の前に行った。
【００４１】
統計解析
すべての比較を、血小板凝集における特異的相違、Ｕｌｔｅｇｒａ（ｒ）、Ｄａｄｅ−ＰＦＡ １００（ｔｍ）の結果、およびベースラインとバルサルタン／バレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンインキュベーション後との間のレセプター発現を同定するためにＳｔｕｄｅｎｔ’ｓ ｔ−検定により計算した。Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ Ｕ 検定を用いて、ノンパラメトリックデータを解析した。正規分布データを、平均±ＳＥとして表し、そしてメジアン（範囲）として非対称化した。ｐ＜０.０５の確率値（probability value）は、統計学的有意と見なされた。線形回帰解析を、統計解析のため、ＳＰＳＳ ｖ９．０ プログラム（SPSS Inc. Chicago, Illinois）を用いることにより、すべての試験参加者の正規分布データに適用した。
【００４２】
血小板富化血漿における血小板凝集
漸増用量のバルサルタンでのプレインキュベーションは、１００μＭ（これは、治療レベルを超えている。）の濃度のみで、ＡＤＰ誘導性血小板凝集の阻害をもたらし、そしてエピネフリン誘導性血小板凝集に影響しなかった。対照的に、バレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンでのインキュベーションは、１μＭおよび１０μＭの濃度でエピネフリン誘導性凝集を阻害し、そしてＡＤＰ誘導性凝集に対して影響しなかった。５μＭ ＡＤＰおよび５μＭ エピネフリン刺激凝集の代表的データを、表１に示す。
【００４３】
【表１】
2005529913.tif 000007
【００４４】
全血中の血小板凝集
バルサルタンおよびバレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンは、治療活性の範囲内で全血中１μＭコラーゲンにより誘導されるヒト血小板の凝集を阻害した。用量依存的効果が、両方の化合物について観察されたが、バレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンでのプレインキュベーションは、血小板凝集能の有意な減少をもたらした。コラーゲン誘導性血小板凝集の結果を表２に示す。
【００４５】
【表２】
2005529913.tif 000008
【００４６】
カートリッジベースの血小板機能アナライザー（ＰＦＡ−１００ＴＭおよびＵｌｔｅｇｒａ（登録商標））
血小板凝集単位（Ｕｌｔｅｇｒａ）の減少としての一貫した凝血時間（ＰＦＡ）の用量依存性遅延が観察され、これは、高せん断条件下での血小板阻害を示唆している。全血凝集およびエピネフリン誘導性凝集と同様に、バレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンは、バルサルタンよりも強力な抗血小板特性を有していた。表３は、カートリッジベースアナライザーでの代表的実験を示す。
【００４７】
【表３】
2005529913.tif 000009
【００４８】
全血フローサイトメトリー
バルサルタンおよびバレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンでのインキュベーションは、ＧＰ ＩＩｂ／ＩＩＩａ （ＣＤ ４１）の発現およびフィブリノーゲン結合（ＰＡＣ−１）を僅かに減少させ、そしてバレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンは、治療的濃度でこの効果を達成したが、バルサルタンは、高用量でのみ、ＣＤ４１の発現を低減化した。両剤は、血小板表面上のＰ−セレクチンの濃度を有意に減少させ、そしてビトロネクチンレセプターの発現を中程度に低減化したが、この効果でさえ、バルサルタンとバレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンの差を示すための統計的検出力を有していなかった。バルサルタンおよびバレリル ４−ヒドロキシ バルサルタンでのインキュベーションは、ＰＥＣＡＭ−１（ＣＤ３１）；ＧＰ Ｉｂ（ＣＤ４２）およびＬＡＭＰ−２（ＣＤ１０７ｂ）、ＰＥＴＡ−３（ＣＤ１５１）、および血小板−白血球マイクロパーティクル（ＣＤ１５１＋１４）に対する効果を伴わなかった。フローサイトメトリーの結果を表４に示す。
【００４９】
【表４】
2005529913.tif 000010
【表５】
2005529913.tif 000011
【表６】
2005529913.tif 000012
【００５０】
以下の実施例により上記の発明を説明する；しかしながら、如何なる方法においても本発明の範囲を制限することを意図するものではない。
【００５１】
実施例１
バルサルタン代謝物の合成方法
（Ｓ）−２−{（４−ヒドロキシ−ペンタノイル）−［２'−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ビフェニル−４−イルメチル］アミノ}−３−メチル−酪酸
【化６】
2005529913.tif 000013
【００５２】
６.７ｇの（Ｓ）−３−メチル−２−{（４−オキソ−ペンタノイル）−［２'−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ビフェニル−４−イルメチル］−アミノ}−酪酸を、６０ｍｌのメタノールに溶かし、そして０℃に冷却する。２.２５ｇの水素化ホウ素ナトリウムを少しずつ添加して、撹拌反応混合物を２７℃以下に維持する（激しく発泡）。混合物を室温にて１時間撹拌し、真空中で濃縮し、塩化メチレンに溶かし、そして２Ｎ水性塩酸で２回抽出する。有機相を乾燥し、真空中で濃縮し、そして生成物を、塩化メチレン、メタノール、濃水性アンモニア（３０：１０：１  ｖ／ｖ）の溶媒混合物を用いて、クロマトグラフィー（フラッシュカラム、２４０ｇのシリカゲル ６０、ＫＧ４０−６２マイクロメーター）に付す。生成物を含有するフラクションを濃縮し、塩化メチレンに溶かし、そして２Ｎ水性塩酸で２回抽出し、そして硫酸マグネシウムで乾燥する。濃縮後、残渣を真空中（６０℃）で３日間乾燥すると、白色の泡状物質として（Ｓ）−２−{（４−ヒドロキシ−ペンタノイル）−［２'−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ビフェニル−４−イルメチル］アミノ}−３−メチル−酪酸を得る（［α］Ｄ２０＝−５８°（ｃ＝１、メタノール）。ＴＬＣ−Ｒｆ：０.１８（トルエン／酢酸エチル／塩化メチレン／ギ酸  １６：４０：４０：４）。
【００５３】
出発物質（Ｓ）−３−メチル−２−｛（４−オキソ−ペンタノイル）−［２’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ビフェニル−４−イルメチル］−アミノ｝−酪酸は、以下のように製造され得る。
【００５４】
（Ｓ）−２−｛（２’−シアノ−ビフェニル−４−イルメチル）−［３−（２−メチル−［１，３］ジオキソラン−２−イル）−プロピオニル］−アミノ｝−３−メチル−酪酸  ベンジルエステル
【化７】
2005529913.tif 000014
【００５５】
１３．８ｇの（Ｓ）−２−［（２’−シアノ−ビフェニル−４−イルメチル）−アミノ］−３−メチル−酪酸  ベンジルエステル  塩酸塩（ＥＰ ４４３９８３に記載）を、５０ｍｌの塩化メチレンに溶かし、０℃に冷却し、そして２３．８ｍｌのエチルジイソプロピルアミン（Ｈｕｎｉｇ塩基）で処理する。この混合物に、０℃にて、４０ｍｌの塩化メチレン中の３−（２−メチル−［１，３］ジオキソラン−２−イル）−プロピオニルクロライド（８．９ｇの３−（２−メチル−［１，３］ジオキソラン−２−イル）−プロピオン酸（Tetrahedron 37, 307, 1981）から製造）および１０．３１ｍｌの（１−クロロ−２−メチル−プロペニル）−ジメチル−アミン（Tetrahydron 54, 9207, 1998）の溶液を添加する。反応混合物を、変換の進行に応じて、室温にて３〜４日撹拌する。好ましくは、３−（２−メチル−［１，３］ジオキソラン−２−イル）−プロピオニルクロライドを、２日かけて３〜４部添加する。反応混合物を真空中で濃縮し、酢酸エチルに溶かし、水、１Ｎ水性塩酸、水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、そして真空中で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー（２４０ｇのシリカゲル  ６０、４０−６３マイクロメーター、石油エーテル／酢酸エチル  ２：１から１：１）に付すと、真空中５００℃での生成物の乾燥後に、金色の粘着性残渣として純粋な（Ｓ）−２−｛（２’−シアノ−ビフェニル−４−イルメチル）−［３−（２−メチル−［１，３］ジオキソラン−２−イル）−プロピオニル］−アミノ｝−３−メチル−酪酸  ベンジルエステルを得る。ＴＬＣ−Ｒｆ：  ０．２３  （石油エーテル／酢酸エチル  ２：１）。
【００５６】
（Ｓ）−２−［（２’−シアノ−ビフェニル−４−イルメチル）−（４−オキソ−ペンタノイル）−アミノ］−３−メチル−酪酸  ベンジルエステル
【化８】
2005529913.tif 000015
【００５７】
９．８ｇの（Ｓ）−２−｛（２’−シアノ−ビフェニル−４−イルメチル）−［３−（２−メチル−［１，３］ジオキソラン−２−イル）−プロピオニル］−アミノ｝−３−メチル−酪酸  ベンジルエステルを１００ｍｌのテトラヒドロフランに溶かし、そして５０ｍｌの１Ｎ水性塩酸で処理する。混合物を室温にて６．５時間撹拌し、真空中で濃縮し、そして塩化メチレンで抽出する。有機相を水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で濃縮し、蒸発させ、そして真空中５００℃にて１時間乾燥する。橙色の粘り気のあるオイルとして（Ｓ）−２−［（２’−シアノ−ビフェニル−４−イルメチル）−（４−オキソ−ペンタノイル）−アミノ］−３−メチル−酪酸  ベンジルエステルを得る。ＴＨＬ−ＲＦ：  ０．１８  （石油エーテル／酢酸エチル  ２：１）。
【００５８】
（Ｓ）−３−メチル−２−｛（４−オキソ−ペンタノイル）−［２’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ビフェニル−４−イルメチル］−アミノ｝−酪酸  ベンジルエステル
【化９】
2005529913.tif 000016
【００５９】
２０ｍｌのキシレン中の、８．６４ｇの（Ｓ）−２−［（２’−シアノ−ビフェニル−４−イルメチル）−（４−オキソ−ペンタノイル）−アミノ］−３−メチル−酪酸  ベンジルエステルおよび１２．７１ｇのトリブチルスズアジド（tributyltinazid）（Ａｌｄｒｉｃｈ）を２８時間加熱還流する。混合物を、０．５Ｎ水性水酸化ナトリウム溶液で処理し、水相をエーテルで洗浄し、そしてエーテル相を水で抽出する。合わせた水相を濃塩酸で酸性化し、塩化メチレンで抽出し、水で洗浄し、活性炭で懸濁化し、濾過し、硫酸マグネシウムで乾燥し、そして真空中で乾燥する。生成物（Ｓ）−３−メチル−２−｛（４−オキソ−ペンタノイル）−［２’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ビフェニル−４−イルメチル］−アミノ｝−酪酸  ベンジルエステルを、褐色の泡状物質として得る。ＴＬＣ−Ｒｆ：  ０．３６  （トルエン／塩化メチレン／メタノール／ギ酸  ４０：４０：４０：４）。
【００６０】
（Ｓ）−３−メチル−２−｛（４−オキソ−ペンタノイル）−［２’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ビフェニル−４−イルメチル］−アミノ｝−酪酸
【化１０】
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【００６１】
１６０ｍｌのテトラヒドロフラン中の、７．９ｇの（Ｓ）−３−メチル−２−｛（４−オキソ−ペンタノイル）−［２’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ビフェニル−４−イルメチル］−アミノ｝−酪酸  ベンジルエステルを、飽和に達するまで、常圧下で室温にて１．５ｇの炭素担持パラジウム（１０％）の存在下で水素化する。混合物を濾過し、そして真空中で濃縮すると、ほとんど白色の泡状物質として（Ｓ）−３−メチル−２−｛（４−オキソ−ペンタノイル）−［２’−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ビフェニル−４−イルメチル］−アミノ｝−酪酸を得る。ＴＬＣ−Ｒｆ：  ０．１（トルエン／塩化メチレン／メタノール／ギ酸  ４０：４０：４０：４）。
【００６２】
本発明を、一定の好適な態様を参照してかなり詳細に説明したが、本明細書に包含される好適な態様の精神および範囲から逸脱することなく、他の態様もあり得る。
【００６３】
本明細書で言及したすべての参考文献および特許を、出典明示により、それらの全体が本明細書に記載されているが如くそれらの全体を本明細書の一部とする。
【国際調査報告】
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