(57)【要約】本発明は、細胞死抑制を要する哺乳動物における細胞死抑制方法を提供し、該方法は、該哺乳動物に有効量のラパマイシンを与えることを特徴とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞再生後の細胞死抑制を必要とする哺乳動物に有効量のラパマイシンを与えることを含む、哺乳動物における細胞再生後の細胞死抑制方法。
【請求項２】
細胞再生が、冠状動脈の病気、鬱血性心不全、糖尿病（Ｉ型およびＩＩ型）、アルツハイマー病、痴呆、記憶喪失、リューマチ性関節炎、ニューロパシー、軟骨の病気、または脊髄の傷害あるいは変性により引き起こされる細胞または組織の損傷後に起こるものである、請求項１記載の方法。
【請求項３】
ラパマイシンがラパマイシンである請求項１または請求項２記載の方法。
【請求項４】
ラパマイシンがラパマイシンのエステル、エーテル、オキシム、ヒドラゾン、またはヒドロキシルアミンである請求項１または請求項２記載の方法。
【請求項５】
ラパマイシンがラパマイシンの４２−エステルまたは４２−エーテルである請求項４記載の方法。
【請求項６】
ラパマイシンが３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロピオン酸とのラパマイシン４２−エステルである請求項５記載の方法。
【請求項７】
ラパマイシンが４２−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エチルラパマイシンである請求項５記載の方法。
【請求項８】
膵臓β細胞、血管組織、心臓組織、ニューロンを包含する脳細胞、肝細胞、肝臓細胞、皮膚細胞、骨細胞および脊髄組織の細胞再生後におけるかかる細胞または組織の細胞死抑制を必要とする哺乳動物における細胞死抑制方法であって、有効量のラパマイシンを該哺乳動物に与えることを含む方法。
【請求項９】
ラパマイシンがラパマイシンである請求項８記載の方法。
【請求項１０】
ラパマイシンがラパマイシンのエステル、エーテル、オキシム、ヒドラゾン、またはヒドロキシルアミンである請求項８記載の方法。
【請求項１１】
ラパマイシンがラパマイシンの４２−エステルまたは４２−エーテルである請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
ラパマイシンが３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロピオン酸とのラパマイシン４２−エステルである請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
ラパマイシンが４２−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エチルラパマイシンである請求項１１記載の方法。
【請求項１４】
細胞再生促進を必要とする哺乳動物における細胞再生促進方法であって、有効量のラパマイシンを該哺乳動物に与えることを含む方法。
【請求項１５】
ラパマイシンがラパマイシンである請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
ラパマイシンがラパマイシンのエステル、エーテル、オキシム、ヒドラゾン、またはヒドロキシルアミンである請求項１４記載の方法。
【請求項１７】
ラパマイシンがラパマイシンの４２−エステルまたは４２−エーテルである請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
ラパマイシンが３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロピオン酸とのラパマイシン４２−エステルである請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
ラパマイシンが４２−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エチルラパマイシンである請求項１７記載の方法。
【請求項２０】
哺乳動物における細胞再生後の細胞死を抑制するための医薬の製造のためのラパマイシンの使用。
【請求項２１】
哺乳動物における膵臓β細胞、血管組織、心臓組織、ニューロンを包含する脳細胞、肝細胞、肝臓細胞、皮膚細胞、骨細胞および脊髄組織の細胞再生後におけるかかる細胞または組織の細胞死を抑制するための医薬の製造のためのラパマイシンの使用。
【請求項２２】
哺乳動物における細胞再生促進のための医薬の製造のためのラパマイシンの使用。
【請求項２３】
ラパマイシンがラパマイシンである請求項２０〜２２のいずれか１項記載の使用。
【請求項２４】
ラパマイシンがラパマイシンのエステル、エーテル、オキシム、ヒドラゾン、またはヒドロキシルアミンである請求項２０〜２２のいずれか１項記載の使用。
【請求項２５】
ラパマイシンがラパマイシンの４２−エステルまたは４２−エーテルである請求項２４記載の使用。
【請求項２６】
ラパマイシンが３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロピオン酸とのラパマイシン４２−エステルである請求項２５記載の使用。
【請求項２７】
ラパマイシンが４２−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エチルラパマイシンである請求項２５記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の背景
本発明は、細胞死の抑制方法、より詳細には、特に細胞再生後の細胞死の抑制におけるラパマイシンの使用に関する。
【０００２】
最近公表された情報は、適切な細胞タイプは損傷組織を再集団化させ、それらの修復を導くことができるという考え方を支持するものである。このことに関する２つの例が、Orlic（Nature 2001;410:701-705）およびQuaini（NEJM 2002;346:5-15）の刊行物により示されている。Orlicらの刊行物において、骨髄細胞が梗塞を起こした心筋を再生させるうることが見出された。Quainiの刊行物において、移植されたドナーの心臓が、幹細胞マーカーおよび成熟心筋細胞の特徴の両方を有するレシピエントの細胞により集団化されうることが示された。この情報は、組織再生の考え方を支持するものであるが、多くの疾病のプロセスにおいて、再集団化した細胞を破壊するであろう進行中の免疫または自己免疫応答が存在する。このことの例は、先ずインスリン分泌島細胞が自己免疫プロセスにより破壊されるＩ型糖尿病において見られ、さらに、免疫破壊による機能的心筋細胞の有意な損失が起こる慢性心不全において見られる。これらの２つの例において、再集団化する幹細胞は免疫系により再度破壊されるだけである。
【０００３】
ラパマイシンはストレプトマイセス・ヒグロスコピクスにより産生される大環状トリエン抗生物質であり、インビトロおよびインビボの両方における抗真菌活性、特にカンジダ・アルビカンスに対する活性を有することが見出された（C. Vezina et al., J. Antibiot. 28, 721 (1975); S.N. Sehgal et al., J. Antibiot. 28, 727 (1975); H. A. Baker et al., J. Antibiot. 31, 539 (1978); U.S. Patent 3,929,992; および U.S. Patent 3,993,749）。さらに、ラパマイシン単独（米国特許第４８８５１７１号）あるいはピシバニルとの組み合わせ（米国特許第４４０１６５３号）が抗腫瘍活性を有することが示されている。
【０００４】
ラパマイシンの免疫抑制効果がFASEB 3,  3411 (1989)に開示されている。他の大環状分子であるシクロスポリンＡおよびＦＫ−５０６もまた、免疫抑制剤として有効であり、それゆえ、移植片拒絶反応の防止に有用であることが示されている（FASEB 3,  3411 (1989); FASEB 3,  5256 (1989); R. Y. Calne et al., Lancet 1183 (1978); および 米国特許第5,100,899号）。Martelら（Can. J. Physiol. Pharmacol. 55, 48 (1977)）は、ラパマイシンが実験的なアレルギー性脳髄膜炎モデル、多発性硬化症モデル、アジュバント関節炎モデル、リューマチ性関節炎モデルにおいて有効であり、ＩｇＥ様抗体の生成を効果的に抑制したことを開示した。
【０００５】
ラパマイシンは全身性エリトマトーデス（米国特許第５０７８９９９号）、肺炎（米国特許第５０８０８９９号）、インスリン依存性糖尿病（米国特許第５３２１００９号）、乾癬のごとき皮膚疾患（米国特許第５２８６７３０号）、腸疾患（米国特許第５２８６７３１号）、血管傷害後の平滑筋細胞増殖および内膜厚肥（米国特許第５２８８７１１号および第５５１６７８１号）、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫（欧州特許出願公開第５２５９６０Ａ１号）、目の炎症（米国特許第５３８７５８９号）、悪性癌腫（米国特許第５２０６０１８号）、心臓の炎症性疾患（米国特許第５４９６８３２号）ならびに貧血（米国特許第５５６１１３８号）の予防または治療にも有用である。
【０００６】
発明の説明
本発明は、細胞死を抑制する必要のある哺乳動物における細胞死の抑制方法を提供し、該方法は、有効量のラパマイシンを該哺乳動物に提供することを含む。詳細には、本発明は、細胞死を引き起こす疾病または外傷性傷害に応答した細胞の再集団化後の細胞死を抑制することにおいて有用である。
【０００７】
本明細書の用語「ラパマイシン」は、基本ラパマイシン核（下に示す）を含む免疫抑制化合物の１のクラスをいう。本発明のラパマイシンは、化学的または生物学的に修飾されてラパマイシン核の誘導体となっているが免疫抑制特性を保持している化合物を包含する。したがって、用語「ラパマイシン」は、ラパマイシンのエステル、エーテル、オキシム、ヒドラゾンおよびヒドロキシルアミンならびにラパマイシン核上の官能基が例えば還元または酸化により修飾されているラパマイシンを包含する。用語「ラパマイシン」は、塩を形成しうる酸性または塩基性部分を有することによる、ラパマイシンの医薬上許容される塩も包含する。
【０００８】
【化１】
2005524673.tif 000002
【０００９】
ラパマイシン核の４２−および／または３１−位がヒドロキシル基、および２７−位がヒドロキシル基（２７−ケトンを化学的に還元した後）であるもののラパマイシンのエステルおよびエーテルが好ましく、ラパマイシン核の４２−位のケトン（４２−ヒドロキシル基の酸化後）および２７−ケトンがオキシム、ヒドラゾンおよびヒドロキシルアミンとなっているものが好ましい。
【００１０】
ラパマイシンの好ましい４２−および／または３１−エステルおよびエーテルは、参照により本明細書に一体化される下記特許に開示されている：ラパマイシンのアルキルエステル (米国特許 第4,316,885号); アミノアルキルエステル (米国特許 第4,650,803号); フッ化エステル (米国特許 第5,100,883号); アミドエステル (米国特許 第5,118,677号); カルバメートエステル (米国特許 第5,118,678号); シリルエーテル (米国特許 第5,120,842号); アミノエステル (米国特許 第5,130,307号); アセタール (米国特許 第5,51,413号); アミノジエステル (米国特許 第5,162,333号); スルホネートおよびスルフェートエステル (米国特許 第5,177,203号); エステル類 (米国特許 第5,221,670号); アルコキシエステル (米国特許 第5,233,036号); O-アリール, -アルキル, -アルケニル および -アルキニルエーテル (米国特許 第5,258,389号); カルボネートエステル (米国特許 第5,260,300号); アリールカルボニル および アルコキシカルボニルカルバメート (米国特許 第5,262,423号); カルバメート類 (米国特許 第5,302,584号); ヒドロキシエステル (米国特許 第5,362,718号); 束縛エステル (米国特許 第5,385,908号); 複素環エステル (米国特許 第5,385,909号); gem-二置換エステル (米国特許 第5,385,910号); アミノアルカン酸エステル (米国特許 第5,389,639号); ホスホリルカルバメートエステル (米国特許 第5,391,730号); カルバメートエステル (米国特許 第5,411,967号); カルバメートエステル (米国特許 第5,434,260号); アミノカルバメートエステル (米国特許 第5,463,048号); カルバメートエステル (米国特許 第5,480,988号); カルバメートエステル (米国特許 第5,480,989号); カルバメートエステル (米国特許 第5,489,680号); 束縛N-オキシドエステル (米国特許 5,491,231); ビオチンエステル (米国特許 第5,504,091号); O-アルキルエーテル (米国特許 第5,665,772号); および PEGエステル (米国特許 5,780,462)。これらのエステルおよびエーテルの製造は上記特許に開示されている。
【００１１】
ラパマイシンの好ましい２７−エステルおよびエーテルは、参照により本明細書に一体化される米国特許第５２５６７９０号に開示されている。これらのエステルおよびエーテルの調製は上記特許に開示されている。
【００１２】
ラパマイシンの好ましいオキシム、ヒドラゾンおよびヒドロキシルアミンは、参照により本明細書に一体化される米国特許第５３７３０１４号、第５３７８８３６号、第５０２３２６４号および第５５６３１４５号に開示されている。これらのオキシム、ヒドラゾンおよびヒドロキシルアミンの調製は上記特許に開示されている。４２−オキソラパマイシンの調製は、参照により本明細書に一体化される米国特許第５０２３２６３号に開示されている。
【００１３】
特に好ましいラパマイシンは、ラパマイシン [米国特許 第3,929,992号]、3-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)-2-メチルプロピオン酸とのラパマイシン42-エステル [米国特許 第5,362,718号]、および 42-O-(2-ヒドロキシ)エチルラパマイシン [米国特許 第5,665,772号]を包含する。
【００１４】
適切ならば、ラパマイシンが適当な塩基性部分を含んでいる場合には、有機および無機酸から、例えば、酢酸、プロピオン酸、乳酸、クエン酸、酒石酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、マロン酸、マンデリン酸、リンゴ酸、フタル酸、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硝酸、硫酸、メタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、しょうのうスルホン酸、および同様の既知の許容される酸から医薬上許容される塩を得ることができる。また、ラパマイシンが適当な酸性部分を含んでいる場合には、有機および無機塩基から塩を得てもよく、例えば、アルカリ金属(例えばナトリウム、リチウムまたはカリウム)塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、１ないし６個の炭素原子を含むアルキルアンモニウム塩または各アルキル基中に１ないし６個の炭素原子を含むジアルキルアンモニウム塩または各アルキル基中に１ないし６個の炭素原子を含むトリアルキルアンモニウム塩がある。
【００１５】
本発明に包含される化合物または物質に関する本明細書の用語「提供」は、かかる化合物または物質の直接投与、あるいは体内で同等の量の化合物または物質を生じるプロドラッグ、誘導体またはアナログの投与を意味する。
【００１６】
本明細書の用語「細胞再生」は、疾病または外傷性傷害により損傷を受けたあるいは死滅した細胞または組織を再集団化させる新たな細胞増殖を意味する。
【００１７】
本発明によれば、ラパマイシンは、特に、細胞死または外傷性傷害後の細胞再生後の細胞嘘の抑制において有用である。詳細には、本発明のラパマイシンは、自己免疫疾患、老化性疾患、外傷性傷害から生じた損傷細胞または組織において再生している細胞の細胞死を抑制することにおいて有用である。冠状動脈の病気、鬱血性心不全、糖尿病（Ｉ型およびＩＩ型）、アルツハイマー病、痴呆、記憶喪失、リューマチ性関節炎、ニューロパシー、軟骨の病気、および脊髄の傷害あるいは変性のごとき疾病または外傷はすべて、局所的な細胞死を引き起こす。かかる細胞は、膵臓β細胞、血管組織、心臓組織、ニューロンを包含する脳細胞、肝細胞、肝臓細胞、皮膚細胞、骨細胞および脊髄組織を包含するが、これらに限らない。種々の薬剤での治療後あるいは身体の自然再生プロセスの後に、死滅したあるいは損傷を受けた組織を再生させることができる。細胞死を抑制するための有効な治療を行わないと、疾病プロセスは再生中の細胞を死滅させるであろう。本発明のラパマイシンは、再生中の膵臓β細胞、血管組織、心臓組織、ニューロンを包含する脳細胞、肝細胞、肝臓細胞、皮膚細胞、骨細胞または脊髄組織の細胞死を抑制することにおいて有用である。
【００１８】
ラパマイシンの有効な用量は、個々の使用化合物、投与方法、症状、および治療すべき症状の重さ、ならびに治療すべき個体に関連する種々の身体的因子に応じて変更されうることが理解される。本発明によれば、体重１ｋｇあたり約５μｇないし０．７５ｍｇのラパマイシンを毎日経口投与した場合に満足な結果を得ることができる。計画された毎日の用量は、投与経路により変更されると考えられる。
【００１９】
ラパマイシンを組み合わせ処方の一部として用いる場合、組み合わせの各成分の用量を所望治療期間中投与する。組み合わせの成分を同時に投与してもよく、両方の成分を含む単位用量として、あるいは個々の用量単位として投与してもよい。治療期間中の異なる時間に組み合わせの成分を投与してもよく、あるいは他方の成分のための前処置として投与してもよい。
【００２０】
本発明の活性化合物をレシピエントの血流中に指向するいずれの様式でかかる用量を投与してもよく、経口投与、インプラントを介する投与、非経口投与（静脈、腹腔内および皮下注射を包含）、直腸投与、鼻腔内投与、膣内投与、および経皮投与を包含する。本開示の目的からすれば、経皮投与は身体表面ならびに表皮および粘膜組織を含む身体の膜を介するすべての投与を包含するものと理解される。ローション、クリーム、フォーム、パッチ、懸濁液、溶液および坐薬（直腸および膣）中の本発明の化合物またはその医薬上許容される塩を用いてかかる投与を行ってもよい。
【００２１】
本発明の有効成分を含有する経口処方は、錠剤、カプセル、ブッカル形態、トローチ、ロゼンジおよび経口用液体、懸濁液または溶液を包含するいずれかの慣用的に用いられる経口用形態であってよい。カプセルは、医薬上許容されるデンプン（例えば、トウモロコシ、バレイショまたはタピオカデンプン）、糖類、人工甘味料、結晶および微細結晶セルロースのごとき粉末セルロース、小麦粉、ゼラチン、ガム等のごとき不活性充填剤および／または希釈剤と活性化合物との混合物を含んでいてもよい。慣用的な圧縮、湿顆粒化または乾顆粒化法により有用な錠剤処方を作成してもよく、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルク、ラウリル硫酸ナトリウム、微細結晶セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、アルギン酸、アラビアゴム、キサンタンガム、クエン酸ナトリウム、複合シリケート、炭酸カルシウム、グリシン、デキストリン、ショ糖、ソルビトール、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、乳糖、カオリン、マンニトール、塩化ナトリウム、タルク、乾燥デンプンおよび粉末砂糖（これらに限らない）を包含する、医薬上許容される希釈剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、表面修飾剤（界面活性剤を包含）、懸濁剤または安定化剤を用いてもよい。好ましい表面修飾剤は非イオン性およびアニオン性表面修飾剤である。表面修飾剤の代表例は、ポロキサマー１８８、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸カルシウム、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ワックス、ソルビタンエステル、コロイド状二酸化ケイ素、ホスフェート、ドデシル硫酸ナトリウム、マグネシウムアルミニウムシリケート、およびトリエタノールアミンを包含するが、これらに限らない。ポロキサイマー１８８を表面修飾剤として用いることがより好ましい。本発明の経口処方は、活性化合物の吸収を変化させる標準的な遅延または除放性処方を用いるものであってもよい。ラパマイシンの好ましい経口処方は、参照により本明細書に一体化される米国特許第５５５９１２１号、第５５３６７２９号、第５９８９５９１号、および第５９８５３２５号に記載されている。
【００２２】
いくつかの場合において、化合物をエアロゾルの形態として気道に直接投与することが望ましいかもしれない。
【００２３】
本発明の化合物を非経口的または腹腔内投与してもよい、遊離塩基または医薬上許容される塩となったこれらの活性化合物の溶液または懸濁液を、ヒドロキシ−プロピルセルロースのごとき界面活性剤と混合された水中に調製してもよい。分散物をグリセロール、液体ポリエチレングリコールおよびそれらの油中混合物中に調製してもよい。保存および使用の通常の条件下において、微生物の増殖を防止するためにこれらの調合物は保存料を含有する。
【００２４】
注射可能な用途に適した医薬剤形は、滅菌注射可能溶液または分散物を即座に調合するための滅菌水溶液または分散物ならびに滅菌粉末を包含する。すべての場合において、剤形は滅菌されなくてはならず、容易に注射筒に入れられるものでなくてはならない。剤形は製造および保存条件下で安定でなくてはならず、細菌および真菌のごとき微生物のコンタミネーション作用に対抗して保存されなくてはならない。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール）、それらの安定な混合物、ならびに植物油を含有する溶液または分散媒でありうる。ラパマイシン投与に好ましい非経口処方は米国特許第５５３０００６号、５５１６７７０号および５６１６５８８号に開示されており、参照によりそれらを本明細書に記載されているものとする。
【００２５】
坐薬の融点を変化させるためにロウを添加あるいは無添加のカカオ脂、およびグリセリンを包含する慣用的材料から坐薬処方を作成してもよい。種々の分子量のポリエチレングリコールのごとき水溶性坐薬基材を用いてもよい。
【国際調査報告】
2005524673.tif 000003
2005524673.tif 000004
2005524673.tif 000005
2005524673.tif 000006
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