(57)【要約】本発明は、細胞増殖障害、例えば、良性腫瘍細胞に関連する障害および悪性腫瘍細胞に関連する障害を処置するために使用され得る、ペプチドおよびペプチド模倣物を含有する化合物を提供する。本発明は、いずれの特定の機構にも限定されないが、本発明の化合物は、少なくとも部分的には、Ｇ２細胞周期チェックポイントを阻害することによって機能するようである。従って、本発明の化合物は、細胞増殖を阻害するために、単独で使用され得るか、または核酸損傷処置と組み合わせて、細胞増殖を阻害するために使用され得る。
2005529845.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の構造を含む、連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列：
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号１）またはＰ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号２）；
ここで、Ｐ１は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、類似の側鎖間隔を占有するアミノ酸、あるいは側鎖において、１つもしくは２つの芳香族基、ピペリジン基、ピラジン基、ピリミジン基、ピペラジン基、モルホリン基もしくはピリミジン基、または１つのインドール基、ペンタレン基、インデン基、ナフタレン基、ベンゾフラン基、ベンゾチオフェン基、キノリン基、インドリン基、クロマン基、キノキサリン基、キナゾリン基を有する任意のアミノ酸であり；
ここで、Ｐ２は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、類似の側鎖間隔を占有するアミノ酸、あるいは側鎖において、１つもしくは２つの芳香族基、ピペリジン基、ピラジン基、ピリミジン基、ピペラジン基、モルホリン基もしくはピリミジン基、または１つのインドール基、ペンタレン基、インデン基、ナフタレン基、ベンゾフラン基、ベンゾチオフェン基、キノリン基、インドリン基、クロマン基、キノキサリン基、もしくはキナゾリン基を有する任意のアミノ酸であり；
ここで、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５は、任意のアミノ酸であるか、あるいはここで、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５のうちの１つ以上は、単純な炭素鎖であり、その結果、Ｐ２とＰ６との間の距離は、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５の各々がアミノ酸である場合の距離とおよそ同じであり；
ここで、Ｐ６は、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、任意の１つのアミノ酸およびＴｙｒ、任意の１つのアミノ酸およびＰｈｅ、任意のアミノ酸、または非存在である、
連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項２】
前記単純な炭素鎖を有するアミノ酸が、１１−アミノウンデカン酸、１０−アミノデカン酸、９−アミノノナン酸、８−アミノカプリン酸、７−アミノヘプタン酸、６−アミノカプロン酸、または１つ以上の不飽和炭素結合を有する類似の構造である、請求項１に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項３】
前記任意の１つのアミノ酸が、Ｓｅｒである、請求項１に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項４】
Ｐ４がＴｒｐである、請求項１に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項５】
類似の側鎖間隔を占有する前記アミノ酸が、ＴｙｒまたはＰｈｅである、請求項１に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項６】
以下の構造を含む、連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列：
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号３）；Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号４）；Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号５）；Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７（配列番号６）；Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、P1、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号７）；Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１、Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７（配列番号８）；Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号９）；Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号１０）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号１１）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号１２）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号１３）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ４、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号１４）；Ｐ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号１５）；またはＰ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ４、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号１６）；
ここで、Ｐ１は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、類似の側鎖間隔を占有するアミノ酸（例えば、ｄ−Ｔｙｒまたはｌ−Ｔｙｒ、ｄ−Ｐｈｅまたはｌ−Ｐｈｅ）、あるいは側鎖において、１つもしくは２つの芳香族基、ピペリジン基、ピラジン基、ピリミジン基、ピペラジン基、モルホリン基もしくはピリミジン基、または１つのインドール基、ペンタレン基、インデン基、ナフタレン基、ベンゾフラン基、ベンゾチオフェン基、キノリン基、インドリン基、クロマン基、キノキサリン基、もしくはキナゾリン基を有する任意のアミノ酸であり；
ここで、Ｐ２は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、または類似の側鎖間隔を占有するアミノ酸、あるいは側鎖において、１つもしくは２つの芳香族基、ピペリジン基、ピラジン基、ピリミジン基、ピペラジン基、モルホリン基もしくはピリミジン基、または１つのインドール基、ペンタレン基、インデン基、ナフタレン基、ベンゾフラン基、ベンゾチオフェン基、キノリン基、インドリン基、クロマン基、キノキサリン基、キナゾリン基を有する任意のアミノ酸であり；
ここで、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５は、任意のアミノ酸であるか、あるいはここで、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５のうちの１つ以上は、単純な炭素鎖であり、その結果、Ｐ２とＰ６との間の距離は、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５の各々がアミノ酸である場合の距離とおよそ同じであり；
ここで、Ｐ６は、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、任意の１つのアミノ酸およびＴｙｒ、任意の１つのアミノ酸およびＰｈｅであり；そして
ここで、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２のうちの少なくとも３つは、塩基性アミノ酸であり、そして残りは、任意のアミノ酸であるかもしくは非存在である、
ペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項７】
前記単純な炭素鎖を有するアミノ酸が、１１−アミノウンデカン酸、１０−アミノデカン酸、９−アミノノナン酸、８−アミノカプリン酸、７−アミノヘプタン酸、６−アミノカプロン酸、または１つ以上の不飽和炭素結合を有する類似の構造である、請求項６に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項８】
前記任意の１つのアミノ酸が、Ｓｅｒである、請求項６に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項９】
Ｐ４がＴｒｐである、請求項６に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項１０】
類似の側鎖間隔を占有する前記アミノ酸が、ＴｙｒまたはＰｈｅである、請求項６に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項１１】
以下の構造を含む、連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列：
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号１７）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号１８）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ４、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号１９）；またはＰ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ４、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号２０）；
ここで、Ｐ１は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３），Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、類似の側鎖間隔を占有するアミノ酸、あるいは側鎖において、１つもしくは２つの芳香族基、ピペリジン基、ピラジン基、ピリミジン基、ピペラジン基、モルホリン基もしくはピリミジン基、または１つのインドール基、ペンタレン基、インデン基、ナフタレン基、ベンゾフラン基、ベンゾチオフェン基、キノリン基、インドリン基、クロマン基、キノキサリン基、もしくはキナゾリン基を有する任意のアミノ酸であり；
ここで、Ｐ２は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、類似の側鎖間隔を占有するアミノ酸、あるいは側鎖において、１つもしくは２つの芳香族基、ピペリジン基、ピラジン基、ピリミジン基、ピペラジン基、モルホリン基もしくはピリミジン基、または１つのインドール基、ペンタレン基、インデン基、ナフタレン基、ベンゾフラン基、ベンゾチオフェン基、キノリン基、インドリン基、クロマン基、キノキサリン基、キナゾリン基を有する任意のアミノ酸であり；
ここで、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５は、任意のアミノ酸であるか、あるいはここで、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５のうちの１つ以上は、単純な炭素鎖であり、その結果、Ｐ２とＰ６との間の距離は、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５の各々がアミノ酸である場合の距離とおよそ同じであり；
ここで、Ｐ６は、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、任意の１つのアミノ酸およびＴｙｒ、任意の１つのアミノ酸およびＰｈｅ、任意のアミノ酸、または非存在であり；そして
ここで、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２のうちの少なくとも３つは、塩基性アミノ酸であり、そして残りは、任意のアミノ酸であるかもしくは非存在である、
ペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項１２】
前記単純な炭素鎖を有するアミノ酸が、アミノウンデカン酸または８−アミノカプリル酸である、請求項１１に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項１３】
前記任意の１つのアミノ酸が、Ｓｅｒである、請求項１１に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項１４】
Ｐ４がＴｒｐである、請求項１１に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項１５】
類似の側鎖間隔を占有する前記アミノ酸が、ＴｙｒまたはＰｈｅである、請求項１１に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項１６】
以下の構造を含む、連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列：
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号２１）またはＰ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号２２）；
ここで、Ｐ１は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであり；
ここで、Ｐ２は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであり；
ここで、Ｐ３は、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｃｙｓ、Ｐｒｏ、またはＡｓｎであり；
ここで、Ｐ４は、Ｔｒｐであり；
ここで、Ｐ５は、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、またはＡｓｎであるか；あるいは
ここで、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５は、単一のアミノウンデカン酸または単一の８−アミノカプリン酸であり；そして
ここで、Ｐ６は、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、（Ｓｅｒ−Ｔｙｒ）、または（Ｓｅｒ−Ｐｈｅ）である、
連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項１７】
以下の構造を含む、連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列：
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号２３）；Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７（配列番号２４）；Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、P1、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号２５）；Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１、Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７（配列番号２６）；Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号２７）；Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号２８）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号２９）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号３０）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号３１）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ４、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号３２）；Ｐ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号３３）；またはＰ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ４、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号３４）；
ここで、Ｐ１は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであり；
ここで、Ｐ２は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであり；
ここで、Ｐ３は、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｃｙｓ、Ｐｒｏ、またはＡｓｎであり；
ここで、Ｐ４は、Ｔｒｐであり；
ここで、Ｐ５は、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、またはＡｓｎであるか；あるいは
ここで、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５は、単一のアミノウンデカン酸または単一の８−アミノカプリン酸であり；
ここで、Ｐ６は、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、（ｄ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｔｙｒ）、または（ｄ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｐｈｅ）であり；そして
ここで、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２のうちの少なくとも３つは、ＡｒｇまたはＬｙｓであり、そして残りは、任意のアミノ酸または非存在である、
連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項１８】
以下の構造を含む、連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列：
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号３５）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号３６）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ４、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号３７）；またはＰ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ４、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号３８）；
ここで、Ｐ１は、Ｃｈａ、またはＮａｌ（２）であり；
ここで、Ｐ２は、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）であり；
ここで、Ｐ３は、Ｓｅｒであり；
ここで、Ｐ４は、Ｔｒｐであり；
ここで、Ｐ５は、ＳｅｒまたはＡｓｎであり；
ここで、Ｐ６は、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、（Ｓｅｒ−Ｔｙｒ）、または（Ｓｅｒ−Ｐｈｅ）であり；そして
ここで、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２のうちの少なくとも３つは、Ａｒｇであり、そして残りは、任意のアミノ酸または非存在である、
連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項１９】
以下の構造を含む、連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列：
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号３９）またはＰ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号４０）；
ここで、Ｐ１は、Ｃｈａ、またはＮａｌ（２）であり；
ここで、Ｐ２は、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）または（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）であり；
ここで、Ｐ３は、Ｓｅｒであり；
ここで、Ｐ４は、Ｔｒｐであり；
ここで、Ｐ５は、Ｓｅｒであり；そして
ここで、Ｐ６は、Ｂｐａ、または（Ｓｅｒ−Ｔｙｒ）である、
連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項２０】
以下の構造を含む、連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列：
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号４１）；Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号４２）；Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号４３）；Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７（配列番号４４）；Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、P1、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号４５）；Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１、Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７（配列番号４６）；Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号４７）；Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号４８）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号４９）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号５０）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号５１）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ４、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号５２）；Ｐ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号５３）；またはＰ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ４、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号５４）；
ここで、Ｐ１は、Ｃｈａ、またはＮａｌ（２）であり；
ここで、Ｐ２は、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）または（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）であり；
ここで、Ｐ３は、任意のアミノ酸であり；
ここで、Ｐ４は、ｄ−Ｔｒｐまたはｌ−Ｔｒｐであり；
ここで、Ｐ５は、任意のアミノ酸であり；
ここで、Ｐ６は、Ｂｐａまたは（Ｓｅｒ−Ｔｙｒ）であり；
ここで、Ｐ７は、Ａｒｇであり；
ここで、Ｐ８は、Ａｒｇであり；
ここで、Ｐ９は、Ａｒｇであり；
ここで、Ｐ１０は、ＧｌｎまたはＡｒｇであり；
ここで、Ｐ１１は、Ａｒｇであり；そして
ここで、Ｐ１２は、ｄ−Ａｒｇまたはｌ−Ａｒｇである、
連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項２１】
前記任意のアミノ酸が、Ｓｅｒ、またはＰｒｏである、請求項２０に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項２２】
以下の構造を含む、連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列：
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号５５）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号５６）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ４、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号５７）；またはＰ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ４、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号５８）；
ここで、Ｐ１は、ＣｈａまたはＮａｌ（２）であり；
ここで、Ｐ２は、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）であり；
ここで、Ｐ３は、Ｓｅｒであり；
ここで、Ｐ４は、Ｔｒｐであり；
ここで、Ｐ５は、Ｓｅｒであり；
ここで、Ｐ６は、Ｂｐａまたは（Ｓｅｒ−Ｔｙｒ）であり；
ここで、Ｐ７は、Ａｒｇであり；
ここで、Ｐ８は、Ａｒｇであり；
ここで、Ｐ９は、Ａｒｇであり；
ここで、Ｐ１０は、ＧｌｎまたはＡｒｇであり；
ここで、Ｐ１１は、Ａｒｇであり；そして
ここで、Ｐ１２は、Ａｒｇである、
連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項２３】
以下の構造を含む、連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列：
（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号８０）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号１００）；（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号５９）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号６０）；（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号６１）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｂｐａ）（配列番号６２）；（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号６３）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｂｐａ）（配列番号６４）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｂｐａ）（配列番号６５）；（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号６６）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号６７）；（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号６８）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号６９）；（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号７０）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号７１）；（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号７２）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号７３）；（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号７４）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号７５）；または（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号７６）。
【請求項２４】
以下の構造を含む、連続的なペプチド配列またはペプチド模倣物配列：
（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号７７）。
【請求項２５】
１つ以上の残基が、ｌ型である、請求項１、６、１１、１６〜２０または２２のいずれか１項に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項２６】
１つ以上の残基が、ｄ型である、請求項１、６、１１、１６〜２０または２２のいずれか１項に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項２７】
ｄ残基が、ｌ残基で置換されている、請求項２３または２４のいずれか１項に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項２８】
前記配列が、細胞の増殖を阻害する、請求項１、６、１１、１６〜２０および２２〜２４のいずれか１項に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項２９】
前記配列が、細胞の細胞周期Ｇ２チェックポイントを抑制する、請求項１、６、１１、１６〜２０および２２〜２４のいずれか１項に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項３０】
前記配列が、約６〜約１２残基長、１０〜約２０残基長、１８〜約２５残基長、２５〜約１００残基長、２５〜約２００残基長、または５０〜約３００残基長の長さを有する、請求項１、６、１１、１６〜２０および２２〜２４のいずれか１項に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列。
【請求項３１】
請求項１、６、１１、１６〜２０および２２〜２４のいずれか１項に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列、ならびに核酸損傷剤を含有する、組成物。
【請求項３２】
請求項１、６、１１、１６〜２０および２２〜２４のいずれか１項に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列、ならびに抗増殖剤を含有する、組成物。
【請求項３３】
請求項１、６、１１、１６〜２０および２２〜２４のいずれか１項に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列を含有する、薬学的組成物。
【請求項３４】
請求項１、６、１１、１６〜２０および２２〜２４のいずれか１項に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列、ならびに核酸損傷剤または抗増殖剤を含有する、薬学的組成物。
【請求項３５】
請求項１、６、１１、１６〜２０および２２〜２４のいずれか１項に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列、ならびに使用指示書を備える、キット。
【請求項３６】
前記使用指示書が、核酸損傷処置と組み合わせて、細胞増殖を阻害するための指示を含む、請求項３５に記載のキット。
【請求項３７】
核酸損傷剤をさらに備える、請求項３５に記載のキット。
【請求項３８】
抗増殖剤をさらに備える、請求項３５に記載のキット。
【請求項３９】
細胞の増殖を阻害する方法であって、細胞を、該細胞の増殖を阻害するために十分な量の請求項１、６、１１、１６〜２０および２２〜２４のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣物と接触させる工程を包含する、方法。
【請求項４０】
前記細胞を核酸損傷剤と接触させる工程、または該細胞を核酸損傷処置に曝露する工程をさらに包含する、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記細胞が、培養された細胞であるか、または被験体中に存在する、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
細胞の、核酸損傷剤または処置に対する感受性を増加させる方法であって、該細胞を、該細胞の核酸損傷剤または処置に対する感受性を増加させるために十分な量の請求項１、６、１１、１６〜２０および２２〜２４のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣物と接触させる工程を包含する、方法。
【請求項４３】
前記細胞を、核酸損傷剤と接触させる工程、または該細胞を、核酸損傷処置に暴露する工程をさらに包含する、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記細胞が、培養された細胞であるか、または被験体中に存在する、請求項５７に記載の方法。
【請求項４５】
細胞に対する核酸損傷を増加させる方法であって、細胞を、該細胞の核酸損傷を増加させるために十分な量の請求項１、６、１１、１６〜２０および２２〜２４のいずれか１項に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列と接触させる工程を包含する、方法。
【請求項４６】
前記細胞を、核酸損傷剤と接触させる工程、または該細胞を、核酸損傷処置に暴露する工程をさらに包含する、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記細胞が、培養された細胞であるか、または被験体中に存在する、請求項４５に記載の方法。
【請求項４８】
細胞増殖障害を処置する方法であって、細胞増殖障害を有するか、または細胞増殖障害を有する危険のある被験体に、該細胞増殖障害を処置するために有効な量の請求項１、６、１１、１６〜２０および２２〜２４のいずれか１項に記載のペプチド配列またはペプチド模倣物配列を投与する工程を包含する、方法。
【請求項４９】
前記細胞増殖障害を構成する細胞の少なくとも一部が、血液、胸部、肺、甲状腺、頭部または頸部、脳、リンパ、胃腸管、鼻咽腔、生殖泌尿器管、膀胱、腎臓、膵臓、肝臓、骨、筋肉、あるいは皮膚中に位置する、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記ペプチドまたはペプチド模倣物が、局部的、局所的、または全身的に投与される、請求項４８に記載の方法。
【請求項５１】
前記細胞増殖障害が、良性または悪性の、固形または液体の腫瘍を含む、請求項４８に記載の方法。
【請求項５２】
前記腫瘍が、転移性または非転移性である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記固形腫瘍が、肉腫または癌腫を含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５４】
前記液体腫瘍が、造血癌を含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５５】
前記造血癌が、骨髄腫、リンパ腫または白血病を含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記処置が、被験体の状態の改善を生じる、請求項５１に記載の方法。
【請求項５７】
前記改善が、前記細胞増殖障害を構成する細胞の少なくとも一部の、減少した細胞増殖、減少した細胞数、増加した細胞増殖の阻害、細胞数の増加の阻害、増加したアポトーシス、または減少した生存を含む、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
核酸損傷剤、核酸損傷処置、抗増殖剤または抗増殖処置を、前記被験体に投与する工程をさらに包含する、請求項５４に記載の方法。
【請求項５９】
前記薬剤または処置が、薬物、放射線、放射性同位元素、環境ショックを含む、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記薬物が、化学療法薬物を含有する、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
前記薬物が、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、レベッカマイシン、アドリアマイシン（ＡＤＲ）、ブレオマイシン（Ｂｌｅｏ）、ペプレオマイシン、シスプラチン誘導体、またはカンプトテシン（ＣＰＴ）を含有する、請求項５８に記載の方法。
【請求項６２】
前記シスプラチン誘導体が、シスプラチン（ＣＤＤＰ）またはオキサリプラチンを含む、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記放射性同位元素が、Ｉ１３１、Ｉ１２５、９０Ｙ、１７７Ｌｕ、２１３Ｂｉ、または２２１Ａｔを含む、請求項５９に記載の方法。
【請求項６４】
前記放射線が、ＵＶ放射線、ＩＲ放射線、またはα放射線、β放射線もしくはγ放射線を含む、請求項５９に記載の方法。
【請求項６５】
前記環境ショックが、高熱を含む、請求項５９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
本出願は、米国特許出願第６０／３５０，２０８号（２００２年１月１７日出願）に対する優先権を主張する。
【０００２】
（技術分野）
本発明は、膠細胞増殖活性のみを有するペプチドおよびペプチド模倣物を含む化合物、ならびに核酸（例えば、ＤＮＡ）を直接的もしくは間接的のいずれかで損傷する処置と組み合わせた、その化合物に関する。従って、本発明の化合物は、細胞増殖を阻害するために有用であり、よって、癌を含む細胞増殖障害を処置するために有用である。特に、本発明の化合物は、転移性および非転移性の固形腫瘍または液状腫瘍を処置するにおいて有用である。
【背景技術】
【０００３】
（背景）
細胞周期は、Ｓ期（ＤＮＡ複製）、Ｍ期（減数分裂）、およびＳ期とＭ期の間の２つのギャップ期（Ｇ１期およびＧ２期）を含む。ＤＮＡ完全性、ＤＮＡ複製、細胞サイズ、および周辺環境の状態のモニタリングのような細胞周期におけるチェックポイントは、正確な連続を保証する（Ｍａｌｌｅｒ，Ｊ．Ｌ．Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．，３：２６（１９９１））。多細胞器官にとってゲノムの完全性を維持することは特に重要であり、ゲノムの状態をモニタリングする多くのチェックポイントがある。中には、ＤＮＡ複製および減数分裂の前に存在する、それぞれ、Ｇ１チェックポイントおよびＧ２チェックポイントがある。Ｓ期に入る前にＤＮＡ損傷を修正することは重要である。なぜなら、一旦損傷したＤＮＡが複製されると、しばしば変異を生じるからである（Ｈａｒｔｗｅｌｌ，Ｌ．  Ｃｅｌｌ，７１：５４３（１９９２））。広範なＤＮＡ損傷を修復することなくＧ１チェックポイントとＧ２チェックポイントを通ることが続くと、アポトーシスおよび／またはカタストロフィーが誘導される。
【０００４】
大部分の癌細胞は、Ｇ１チェックポイント関連タンパク質（例えば、ｐ５３、Ｒｂ、ＭＤＭ−２、ｐｌ６ＩＮＫ４およびｐ１９ＡＲＦ（Ｌｅｖｉｎｅ，Ａ．Ｊ．  Ｃｅｌｌ，８８：３２３（１９９７））において異常を有する。あるいは、変異により、Ｇ１チェックポイントの厳密性を低下させる癌遺伝子産物（例えば、Ｒａｓ、ＭＤＭ−２およびサイクリンＤ）の過剰発現および／または過剰活性化が引き起こされ得る。これらの変異に加えて、過剰な増殖因子シグナル伝達は、増殖因子の過剰発現によって引き起こされ得、Ｇ１チェックポイントの厳密性を低下させ得る。機能低下変異および機能増加変異とともに、増殖因子レセプターまたは下流シグナル伝達分子の連続的活性化は、Ｇ１チェックポイントを無効にすることによって細胞系質転換を引き起こし得る。妨げられたＧ１チェックポイントは、より高い変異率に寄与し、多くの変異は、癌細胞において認められる。結果として、大部分の癌細胞は、過剰なＤＮＡ損傷に逆らって生き残るために、Ｇ２チェックポイントに依存する（Ｏ’ＣｏｎｎｏｒおよびＦａｎ，Ｐｒｏｇ．Ｃｅｌｌ  Ｃｙｃｌｅ  Ｒｅｓ．，２：１６５（１９９６））。
【０００５】
ＤＮＡ損傷後の細胞周期Ｇ２抑制を促進する機構は、酵母からヒトにいたるまで、種間で保存されていると考えられる。損傷したＤＮＡの存在下で、Ｃｄｃ２／サイクリンＢキナーゼは、Ｃｄｃ２キナーゼ上のスレオニン−１４およびチロシン−１５残基の阻害性リン酸化が原因で不活性なままであるか、またはサイクリンＢのタンパク質レベルが、低下される。減数分裂の開始時に、二重ホスファターゼＣｄｃ２５は、これらの阻害性ホスフェートを除去し、それによってＣｄｃ２／サイクリンＢキナーゼを活性化する。Ｃｄｃ２／サイクリンＢの活性化は、Ｍ期の開始と等しい。
【０００６】
分裂酵母において、プロテインキナーゼＣｈｋ１は、損傷したＤＮＡに応答した細胞周期抑制のために必要である。Ｃｈｋ１キナーゼは、いくつかのｒａｄ遺伝子産物の下流で作用し、ＤＮＡ損傷の際に、リン酸化によって改変される。出芽酵母のキナーゼＲａｄ５３および分裂酵母のＣｄｓ１は、非複製ＤＮＡからのシグナルを伝達することが公知である。Ｃｈｋ１とＣｄｓ１との間にいくらかの重複性が存在するようである。なぜなら、Ｃｈｋ１とＣｄｓ１両方の排除は、損傷したＤＮＡによって誘導されるＧ２抑制の破壊をもたらしたからである。興味深いことに、Ｃｈｋ１およびＣｄｓ１はともに、Ｃｄｃ２５をリン酸化し、Ｃｄｃ２５へのＲａｄ２４結合を促進し、このことによって、Ｃｄｃ２５をサイトゾルへ隔離し、Ｃｄｃ２／サイクリンＢ活性化を防止する。従って、Ｃｄｃ２５は、これらのキナーゼの共通した標的であるようである。このことは、この分子が、Ｇ２チェックポイントにおける必須の要因であることを暗示する。
【０００７】
ヒトにおいて、ｈＣｈｋｌ（分裂酵母Ｃｈｋ１のヒトホモログ）およびＣｈｋ２／ＨｕＣｄｓ１（出芽酵母Ｒａｄ５３および分裂酵母Ｃｄｓ１のヒトホモログ）はともに、ＤＮＡ損傷に応答して、セリン−２１６（重要な調節部位）においてＣｄｃ２５Ｃをリン酸化する。このリン酸化は、小さな酸性タンパク質１４−３−３ｓ（分裂酵母のＲａｄ２４およびＲａｄ２５のヒトホモログ）の結合部位を作り出す。このリン酸化の調節の役割は、Ｃｄｃ２５Ｃ上のセリン−２１６のアラニンへの置換が、ヒト細胞における細胞周期Ｇ２抑制を破壊するという事実によって明らかに示された。しかし、Ｇ２チェックポイントの機構は、完全には理解されていない。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
（要旨）
本発明に従って、細胞増殖障害によって特徴付けられるような、細胞増殖を阻害し、アポトーシスもしくはカタストロフィーを刺激し、または望ましくない細胞増殖もしくは生存を処置するために、１以上の活性を有するペプチドおよびペプチド模倣物が提供される。１つの実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号１）またはＰ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号２）。Ｐ１はＣｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、類似の側鎖空間を占有するアミノ酸（例えば、ＴｙｒもしくはＰｈｅ）、あるいは１もしくは２個の芳香族、ピペリジン、ピラジン、ピリミジン、ピペラジン、モルホリンもしくはピリミジン基を有するか、または１個のインドール、ペンタレン、インデン、ナフタレン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、キノリン、インドリン、クロマン、キノキサリン、もしくはキナゾリン基を側鎖に有する任意のアミノ酸であり；Ｐ２は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、類似の側鎖空間を占有するアミノ酸（例えば、ＴｙｒもしくはＰｈｅ）、あるいは１または２個の芳香族、ピペリジン、ピラジン、ピリミジン、ピペラジン、モルホリンもしくはピリミジン基を有するか、または１個のインドール、ペンタレン、インデン、ナフタレン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、キノリン、インドリン、クロマン、キノキサリン、もしくはキナゾリン基を側鎖に有する任意のアミノ酸であり；Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５は、任意のアミノ酸である（例えば、Ｐ４はＴｒｐである）か、またはここでＰ３、Ｐ４、Ｐ５のうちの１以上は、単純な炭素鎖である（例えば、１１−アミノウンデカン酸、１０−アミノデカン酸、９−アミノノナン酸、８−アミノカプリル酸、７−アミノヘプタン酸、６−アミノカプロン酸、または１個以上の不飽和炭素結合を有する類似の構造）。その結果、Ｐ２とＰ６との間の距離は、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５の各々がアミノ酸である場合の距離とほぼ同じであり；Ｐ６は、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、任意の１つのアミノ酸とＴｙｒ（例えば、Ｓｅｒ−Ｔｙｒ）、任意の１つのアミノ酸とＰｈｅ（例えば、Ｓｅｒ−Ｐｈｅ）、任意のアミノ酸、またはなしである。
【０００９】
別の実施形態において、連続するペプチド配列もしくはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号３）；Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号４）；Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号５）；Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７（配列番号６）；Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号７）；Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１、Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７（配列番号８）；Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号９）；Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号１０）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号１１）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号１２）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号１３）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ４、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号１４）；Ｐ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号１５）；またはＰ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ４、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号１６）。Ｐ１は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、類似の側鎖空間を占有するアミノ酸（例えば、ｄ−Ｔｙｒもしくはｌ−Ｔｙｒ、ｄ−Ｐｈｅもしくはｌ−Ｐｈｅ）、あるいは１もしくは２個の芳香族、ピペリジン、ピラジン、ピリミジン、ピペラジン、モルホリンもしくはピリミジン基を有するか、または１個のインドール、ペンタレン、インデン、ナフタレン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、キノリン、インドリン、クロマン、キノキサリン、もしくはキナゾリン基を側鎖に有する任意のアミノ酸であり；Ｐ２は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、または類似の側鎖空間を占有するアミノ酸（例えば、ＴｙｒもしくはＰｈｅ）、あるいは１または２個の芳香族、ピペリジン、ピラジン、ピリミジン、ピペラジン、モルホリンもしくはピリミジン基を有するか、または１個のインドール、ペンタレン、インデン、ナフタレン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、キノリン、インドリン、クロマン、キノキサリン、もしくはキナゾリン基を側鎖に有する任意のアミノ酸であり；Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５は、任意のアミノ酸である（たとえば、Ｐ４はＴｒｐである）か、またはＰ３、Ｐ４、Ｐ５のうちの１つ以上が、単純な炭素鎖である（例えば、１１−アミノウンデカン酸、１０−アミノデカン酸、９−アミノノナン酸、８−アミノカプリル酸、７−アミノヘプタン酸、６−アミノカプロン酸、または１個以上の不飽和炭素結合を有する類似の構造）。その結果、Ｐ２とＰ６との間の距離は、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５の各々がアミノ酸である場合の距離とほぼ同じであり；Ｐ６は、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、任意の１つのアミノ酸とＴｙｒ（例えば、Ｓｅｒ−Ｔｙｒ）、任意の１つのアミノ酸とＰｈｅ（例えば、Ｓｅｒ−Ｐｈｅ）であり；そしてＰ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２のうちの少なくとも３つは、塩基性アミノ酸であり、残りは、任意のアミノ酸またはなしである。
【００１０】
さらなる実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号１７）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号１８）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ４、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号１９）；またはＰ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ４、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号２０）。Ｐ１は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、類似の側鎖空間を占有するアミノ酸、あるいは１もしくは２個の芳香族、ピペリジン、ピラジン、ピリミジン、ピペラジン、モルホリンもしくはピリミジン基を有するか、または１個のインドール、ペンタレン、インデン、ナフタレン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、キノリン、インドリン、クロマン、キノキサリン、もしくはキナゾリン基を側鎖に有する任意のアミノ酸であり；Ｐ２は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、または類似の側鎖空間を占有するアミノ酸（例えば、ＴｙｒもしくはＰｈｅ）、あるいは１または２個の芳香族、ピペリジン、ピラジン、ピリミジン、ピペラジン、モルホリンもしくはピリミジン基を有するか、または１個のインドール、ペンタレン、インデン、ナフタレン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、キノリン、インドリン、クロマン、キノキサリン、もしくはキナゾリン基を側鎖に有する任意のアミノ酸であり；Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５は、任意のアミノ酸である（例えば、Ｐ４はＴｒｐである）か、またはＰ３、Ｐ４、Ｐ５のうちの１つ以上が、単純な炭素鎖である（例えば、アミノウンデカン酸または８−アミノカプリル酸）。その結果、Ｐ２とＰ６との間の距離は、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５の各々がアミノ酸である場合の距離とほぼ同じであり；Ｐ６は、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、任意の１つのアミノ酸とＴｙｒ（例えば、Ｓｅｒ−Ｔｙｒ）、任意の１つのアミノ酸とＰｈｅ（例えば、Ｓｅｒ−Ｐｈｅ）であり；そしてＰ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２のうちの少なくとも３つは、塩基性アミノ酸であり、残りは、任意のアミノ酸またはなしである。
【００１１】
さらなる実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号２１）またはＰ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号２２）。Ｐ１は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、ＴｙｒまたはＰｈｅであり；Ｐ２は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、ＴｙｒまたはＰｈｅであり；Ｐ３は、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｃｙｓ、Ｐｒｏ、またはＡｓｎであり；Ｐ４は、Ｔｒｐであり；Ｐ５は、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、またはＡｓｎであるか；またはＰ３、Ｐ４、Ｐ５は、単純なアミノウンデカン酸または単純な８−アミノカプリル酸であり；そしてＰ６は、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、（Ｓｅｒ−Ｔｙｒ）または（Ｓｅｒ−Ｐｈｅ）である。
【００１２】
なお別の実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号２３）；Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７（配列番号２４）；Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号２５）；Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１、Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７（配列番号２６）；Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号２７）；Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号２８）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号２９）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号３０）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号３１）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ４、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号３２）；Ｐ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号３３）；またはＰ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ４、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号３４）。Ｐ１は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、ＴｙｒまたはＰｈｅであり；Ｐ２は、Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、ＴｙｒまたはＰｈｅであり；Ｐ３は、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｃｙｓ、Ｐｒｏ、またはＡｓｎであり；Ｐ４は、Ｔｒｐであり；Ｐ５は、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、またはＡｓｎであるか；またはＰ３、Ｐ４、Ｐ５は、単純なアミノウンデカン酸または単純な８−アミノカプリル酸であり；Ｐ６は、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、（ｄ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｔｙｒ）または（ｄ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｐｈｅ）であり；そしてＰ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２のうちの少なくとも３つは、ＡｒｇまたはＬｙｓであり、残りは、任意のアミノ酸またはなしである。
【００１３】
なお別の実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号３５）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号３６）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ４、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号３７）；またはＰ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ４、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号３８）。Ｐ１は、ＣｈａまたはＮａｌ（２）であり；Ｐ２は、（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）であり；Ｐ３は、Ｓｅｒであり；Ｐ４は、Ｔｒｐであり；Ｐ５は、ＳｅｒまたはＡｒｇであり；Ｐ６は、Ｂｐａ、Ｐｈｅ４ＮＯ２、（Ｓｅｒ−Ｔｙｒ）または（Ｓｅｒ−Ｐｈｅ）であり；そしてＰ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２のうちの少なくとも３つは、Ａｒｇであり、残りは、任意のアミノ酸またはなしである。
【００１４】
なお、さらなる実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号３９）またはＰ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号４０）。Ｐ１はＣｈａ、またはＮａｌ（２）であり；Ｐ２は（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）または（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）であり；Ｐ３はＳｅｒであり；Ｐ４はＴｒｐであり；Ｐ５はＳｅｒであり；そしれＰ６はＢｐａまたは（Ｓｅｒ−Ｔｙｒ）である。
【００１５】
なお、さらなる実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号４１）；Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号４２）；Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号４３）；Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７（配列番号４４）；Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号４５）；Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１、Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７（配列番号４６）；Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号４７）；Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号４８）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号４９）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号５０）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号５１）；Ｐ１２、Ｐｌｌ、Ｐ１０、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ４、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号５２）；Ｐ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号５３）；あるいはＰ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ４、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号５４）。Ｐ１はＣｈａ、またはＮａｌ（２）であり；Ｐ２は（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）または（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）であり；Ｐ３は任意のアミノ酸であり（例えば、Ｓｅｒ、またはＰｒｏ）；Ｐ４はｄ−Ｔｒｐまたはｌ−Ｔｒｐであり；Ｐ５は任意のアミノ酸であり（例えば、Ｓｅｒ、またはＰｒｏ）；Ｐ６はＢｐａまたは（Ｓｅｒ−Ｔｙｒ）であり；Ｐ７はＡｒｇであり；Ｐ８はＡｒｇであり；Ｐ９はＡｒｇであり；Ｐ１０はＧｌｎまたはＡｒｇであり；Ｐ１１はＡｒｇであり；そして、Ｐ１２はｄ−Ａｒｇまたはｌ−Ａｒｇである。
【００１６】
なお、さらなる実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号５５）；Ｐ１２、Ｐｌｌ、Ｐ１０、Ｐ９、Ｐ８、Ｐ７、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号５６）；Ｐ１２、Ｐ１１、Ｐ１０、Ｐ６、Ｐ９、Ｐ４、Ｐ７、Ｐ２、Ｐ１（配列番号５７）；またはＰ１、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ４、Ｐ９、Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２（配列番号５８）。Ｐ１はＣｈａまたはＮａｌ（２）であり；Ｐ２は（Ｐｈｅ−2,3,4,5,6−Ｆ）であり；Ｐ３はＳｅｒであり；Ｐ４はＴｒｐであり；Ｐ５はＳｅｒであり；Ｐ６はＢｐａまたは（Ｓｅｒ−Ｔｙｒ）であり；Ｐ７はＡｒｇであり；Ｐ８はＡｒｇであり；Ｐ９はＡｒｇであり；Ｐ１０はＧｌｎまたはＡｒｇであり；Ｐ１１はＡｒｇであり；そしてＰ１２はＡｒｇである。
【００１７】
特定の局面において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−2,3,4,5,6−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号９９）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号１００）；（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号５９）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号６０）；（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号６１）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｂｐａ）（配列番号６２）；（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号６３）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｂｐａ）（配列番号６４）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｂｐａ）（配列番号６５）；（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号６６）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号６７）；（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号６８）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号６９）；（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号７０）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号７１）；（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号７２）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号７３）；（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号７４）；（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号７５）；または（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号７６）；（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号７７）。
【００１８】
さらなる局面において、ペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下を含む：１つ以上のｌ型またはd型残基；d−残基のｌ−残基への置換；あるいはｌ−残基のｄ−残基への置換。
【００１９】
ペプチド配列およびペプチド模倣物配列は、以下の活性の１つ以上を含む：細胞増殖を阻害する；細胞周期のＧ２チェックポイントを抑制する；細胞のアポトーシスを刺激する；細胞の破局を刺激する。
【００２０】
ペプチド配列およびペプチド模倣物配列は、以下を含む：約６から約１２、１０から約２０、１８から約２５、２５から約１００、２５から約２００、または５０から約３００残基長の長さを有する配列。
【００２１】
本発明のペプチド配列およびペプチド模倣物配列を含む組成物が、さらに提供される。１つの実施形態において、組成物は、ペプチド配列またはペプチド模倣物配列および核酸損傷剤を含む。別の実施形態において、組成物は、ペプチド配列またはペプチド模倣物配列および抗増殖剤（ａｎｔｉ−ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ａｇｅｎｔ）を含む。さらなる実施形態において、組成物は、薬学的に受容可能なキャリアまたは賦形剤およびペプチド配列またはペプチド模倣物配列を含み、そして、必要に応じて、核酸損傷剤または抗増殖剤を含む。
【００２２】
さらに、本発明において、必要に応じて核酸損傷処置（例えば、核酸損傷剤）、または抗増殖剤と組み合わせられた、本発明のペプチド配列およびペプチド模倣物配列を含むキットが提供される。１つの実施形態において、キットは、ペプチド配列またはペプチド模倣物配列、および本発明の方法の実施における使用のための指示書を含む。特定の局面において、指示書は、細胞増殖を阻害するためである。
【００２３】
本発明はまた、本発明のペプチド配列およびペプチド模倣物配列を使用する方法を提供する。１つの実施形態において、方法は、細胞を、その細胞の増殖を阻害するのに十分な量のペプチドまたはペプチド模倣物と接触させる工程を包含する。別の実施形態において、方法は、細胞を、核酸損傷剤と接触させる工程か、または細胞を、核酸損傷処置に曝露する工程を包含する。
【００２４】
本発明は、核酸損傷剤または核酸損傷処置に対する細胞の感受性を増加させる方法を提供する。１つの実施形態において、方法は、核酸損傷剤または核酸損処置に対する細胞感受性を増加するのに十分な量の、ペプチドまたはペプチドと細胞を接触させる工程を包含する。
【００２５】
本発明はさらに、細胞に対する核酸損傷を増加する方法を提供する。１つの実施形態において、方法は、細胞の核酸損傷を増加するのに十分な量のペプチドまたはペプチド模倣物を、その細胞に接触させる工程を包含する。
【００２６】
本発明の方法の種々の局面において、細胞は、培養細胞であるか、または被験体中に存在する。さらなる局面において、方法は、さらに、その細胞を、核酸損傷剤を接触させる工程、または細胞を核酸損傷処置に曝露する工程を包含する。
【００２７】
本発明はさらに、細胞増殖障害を処置する方法を提供する。１つの局面において、方法は、細胞増殖障害を有する被験体、または細胞増殖障害のリスクを有する被験体に対して、細胞増殖障害を処置するのに有効な量のペプチドまたはペプチド模倣物を投与する工程を包含する。特定の局面において、細胞増殖障害は、良性または悪性の、固形腫瘍または液体腫瘍（例えば、転移性または非転移性の肉腫または癌腫、あるいは骨髄腫、リンパ腫、または白血病のような造血性の癌）を含む。さらなる特定の局面において、細胞増殖障害を含む細胞の少なくとも一部は、血液、胸部、肺、甲状腺、頭部または頸部、脳、リンパ、胃腸管、鼻咽頭、尿生殖器管、膀胱、腎臓、すい臓、肝臓、骨、筋肉、あるいは皮膚の中に局在する。
【００２８】
本発明の方法は、任意の経路での投与を包含する。特定の実施形態において、ペプチドまたはペプチド模倣物が、局所的に、局部的に、または全身に投与される。
【００２９】
本発明の方法は、被験体の状態を改善する結果を生じる処置を包含する。特定の実施形態において、改善とは、細胞増殖障害を含む細胞の少なくとも部分の、細胞増殖の減少、細胞数の減少、細胞増殖の増加の阻害、細胞数増加の阻害、アポトーシスの増大、または生存の減少の１つ以上を含む。
【００３０】
本発明の方法は、被験体に対する、核酸損傷剤、核酸損傷処置、抗増殖剤、または抗増殖処置の投与を含む。特定の局面において、薬剤または処置は、薬物（例えば、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、レベカマイシン（rebeccamycin）、アドリアマイシン（ＡＤＲ）、ブレオマイシン（Ｂｌｅｏ）、ペプロマイシン、シスプラチン（ＣＤＤＰ）またはオキザリプラチン（oxaliplatin）のようなシスプラチン誘導体、あるいは、カンプトセシン（ＣＰＴ）のような化学治療剤）、照射（例えば、ＵＶ照射、ＩＲ照射、あるいはα線照射、β線照射、またはγ線照射）、放射性同位体（例えば、Ｉ１３１、Ｉ１２５、９０Ｙ、１７７Ｌｕ、２１３Ｂｉ、または２１１Ａｔ）、環境ショック（例えば、高熱）を含む。
【００３１】
（詳細な説明）
本発明は、細胞増殖を阻害するペプチドおよびペプチド模倣物を含む化合物を提供する。従って、本発明の化合物は、細胞増殖障害を処置するのに、または所望されないまたは不必要な細胞増殖（例えば、良性腫瘍細胞および悪性腫瘍細胞）によって特徴付けられる生理学的条件を処置するのに有用である。本発明のペプチドおよびペプチド模倣物の細胞増殖を阻害する能力は、細胞周期Ｇ２チェックポイントの抑制に少なくともある程度起因しているように思われる。細胞が、核酸損傷に応答して細胞周期Ｇ２チェックポイントに入るよう誘導されて、細胞がＤＮＡ複製および細胞分割が生じる前に損傷を修復することを可能にし得るために、Ｇ２チェックポイントを阻害することによって、発明のペプチドおよびペプチド模倣物は、細胞を核酸損傷剤および処置プロトコールに対して敏感にする。十分な核酸損傷を蓄積する細胞は、Ｇ２チェックポイントが破壊されるために、損傷した核酸の修復を完了できない。このような細胞が、減少した増殖（例えば、修復されない生存のために不可欠な遺伝子の変異に起因する）を示し、結局アポトーシスを経る。
【００３２】
正常なＧ１を有する細胞は、核酸修復がまた、Ｇ１の間に起こり得るために、損傷された核酸を蓄積しやすさが小さい。従って、正常な細胞は、本発明の化合物の効果の受けやすさが小さい。しかし、損なわれたまたは妨害された細胞周期Ｇ１チェックポイントを有する細胞は、Ｇ１チェックポイントが、損なわれまたは破壊されて、細胞が損傷された核酸を完全に修復し得る可能性をより小さくするために、損傷された核酸をより蓄積しやすい。従って、Ｇ２チェックポイントを破壊する発明のペプチドまたはペプチド模倣物でＧ１が損なわれたまたは破壊された細胞を処置することは、この細胞が損傷された核酸の修復を完了し得る可能性を、いっそう小さくする。従って、Ｇ１が損なわれた細胞または破壊された細胞が、このような発明ペプチドおよびペプチド模倣物に特に感受性である。従って、ペプチドおよびペプチド模倣物を含む発明の化合物は、一般に、細胞増殖を阻害するまたは妨げるのに、および特に、損傷されたまたは破壊されたＧ１チェックポイントを有する細胞の増殖を阻害するのに用いられ得る。
【００３３】
損なわれたまたは破壊されたＧ１細胞周期チェックポイントを有する細胞としては、迅速に増殖する細胞が挙げられるが、これに限定されない。細胞増殖障害および迅速に増殖する細胞、所望されないで増殖する細胞またはアポトーシスを経る代わりに生き残る細胞によって特徴付けられる生理学的状態は、損なわれたまたは破壊されたＧ１細胞周期チェックポイントをしばしば有する。従って、増殖を阻害する、またはアポトーシスを刺激する発明のペプチドおよびペプチド模倣物の能力が、少なくともある部分、Ｇ２細胞周期チェックポイントを破壊することに起因するように見えるために、損傷されたまたは破壊されたＧ１チェックポイントに起因して迅速にまたは所望されないで増殖する細胞は、特に魅力的な標的である。
【００３４】
Ｇ２チェックポイントを破壊することが、細胞が分割する場合に核酸損傷の蓄積を導く可能性があるために、ぺプチドおよびペプチド模倣物を含む発明の化合物はまた、核酸を損傷する、または抗増殖活性を有するさらなる処置なしに、化合物自体によって細胞増殖を抑圧し得る。従って、異常なまたは所望されない増殖または生存細胞が、細胞の増殖を阻害もしくは妨げるために、または細胞アポトーシス／カタストロフィーを刺激するために、発明の化合物のみで、または核酸損傷処置（例えば、化学剤または処置プロトコール）と組み合わせて、処置され得る。
【００３５】
細胞が通常か異常（例えば、癌細胞）かにかかわらず、迅速に増殖する細胞を標的化する従来の抗細胞増殖剤と違い、発明の化合物は、損なわれたまたは破壊された細胞周期Ｇ１チェックポイントを有する細胞を優先的に標的化する。例えば、ＣＢＰ５０１は、シスプラチンと異なり、ＨＵＶＥＣ細胞の増殖に作用しない（例えば、表３を参照のこと）。ＣＢＰ５０１はまた、Ｍ期細胞周期阻止および／またはコルヒチンによって誘導される非特異的毒性に作用しない（例えば、図１２を参照のこと）。結果としては、発明の化合物は、従来の抗細胞増殖処置剤に関連した過剰な所望されない副作用（例えば、骨髄抑制、悪心、欲求喪失、下痢、および毛髪喪失）を生成する可能性が低い。さらに、癌細胞の非常に多数が、損なわれたまたは破壊された細胞周期Ｇ１チェックポイントを有するので、癌細胞は、細胞周期Ｇ２チェックポイントを抑制する発明の化合物に対する増加された感受性を示す。正常の細胞があまり感受性でないことはまた、ペプチドおよびペプチド模倣物を含む発明の化合物が、より大きな量で使用され得ることを意味する。
【００３６】
本発明に従って、抗細胞増殖活性を有し、そして／またはＧ２細胞周期チェックポイントを抑制するペプチドおよびペプチド模倣物を含む化合物が提供される。ペプチドまたはペプチド模倣物は、細胞の増殖を阻害する、または細胞のアポトーシスを刺激する配列を含む。ペプチドまたはペプチド模倣物はまた、細胞周期Ｇ２チェックポイントを抑制する配列を含む。ある実施形態において、連続的なペプチドまたはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６（配列番号：１）またはＰ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（配列番号：２）；ここでＰ１は、ｄ−Ｃｈａもしくはｌ−Ｃｈａ、ｄ−Ｎａｌ（２）もしくはｌ−Ｎａｌ（２）、ｄ−（Ｐｈｅ−２、３、４、５、６−Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−２、３、４、５、６−Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−３、４、５Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−３、４、５Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、同様の側鎖空間を占めるアミノ酸（例えば、ｄ−Ｔｙｒもしくはｌ−Ｔｙｒ，ｄ−Ｐｈｅもしくはｌ−Ｐｈｅ）、あるいは側鎖において１つもしくは２つの芳香族基、ピペリジン基、ピラジン基、ピリミジン基、ピペラジン基、モルホリン基、もしくはピリミジン基、または１つのインドール基、ペンタレン基、インデン基、ナフタレン基、ベンゾフラン基、ベンゾチオフェン基、キノリン基、インドリン基、クロマン基、キノキサリン基、もしくはキナゾリン基を持つ任意のアミノ酸である；Ｐ２は、ｄ−Ｃｈａもしくはｌ−Ｃｈａ、ｄ−Ｎａｌ（２）もしくはｌ−Ｎａｌ（２）、ｄ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ），ｄ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）もしくは１−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、ｄ−Ｂｐａもしくはｌ−Ｂｐａ、ｄ−Ｐｈｅ４ＮＯ２もしくはｌ−Ｐｈｅ４ＮＯ２、同様の側鎖空間を占めるアミノ酸（例えば、ｄ−Ｔｙｒもしくはｌ−Ｔｙｒ、ｄ−Ｐｈｅもしくはｌ−Ｐｈｅ）あるいは側鎖において１つもしくは２つの芳香族基、ピペリジン基、ピラジン基、ピリミジン基、ピペラジン基、モルホリン基もしくはピリミジン基、または１つのインドール基、ペンタレン基、インデン基、ナフタレン基、ベンゾフラン基、ベンゾチオフェン基、キノリン基、インドリン基、クロマン基、キノキサリン基、もしくはキナゾリン基を持つ任意のアミノ酸である；Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５は、任意のアミノ酸であるか、またはＰ３、Ｐ４、Ｐ５の１つ以上が、Ｐ２とＰ６との間の距離が、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５の各々がアミノ酸（ｄ−Ｔｒｐまたはｌ−Ｔｒｐが、Ｐ４での例である）である場合の距離とほぼ同じであるような、単純な炭素鎖である；Ｐ６は、ｄ−Ｂｐａもしくはｌ−Ｂｐａ、ｄ−Ｐｈｅ４ＮＯ２、もしくはｌ−Ｐｈｅ４ＮＯ２任意のアミノ酸およびｄ−Ｔｙｒもしくはｌ−Ｔｙｒ（例えば、ｄ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｔｙｒ）、任意のアミノ酸およびｄ−Ｐｈｅもしくはｌ−Ｐｈｅ（例えば、ｄ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｐｈｅ）、任意のアミノ酸、または存在しない。種々の局面において、単純な炭素鎖を有するアミノ酸は、ｄ−１１−アミノウンデカン酸もしくはｌ−１１−アミノウンデカン酸、ｄ−１０−アミノデカン酸もしくはｌ−１０−アミノデカン酸、ｄ−９−アミノノナン酸もしくはｌ−９−アミノノナン酸、ｄ−８−アミノカプリル酸もしくはｌ−８−アミノカプリル酸、ｄ−７−アミノヘプタン酸もしくはｌ−７−アミノヘプタン酸、ｄ−６−アミノカプロン酸もしくはｌ−６−アミノカプロン酸、または１つ以上の不飽和炭素結合を持つ類似の構造である。
【００３７】
別の実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：
【００３８】
【数１】
2005529845.tif 000003
ここでＰ１は、ｄ−Ｃｈａもしくはｌ−Ｃｈａ、ｄ−Ｎａｌ（２）もしくはｌ−Ｎａｌ（２）、ｄ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ），ｄ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ），ｄ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３），ｄ−Ｂｐａもしくはｌ−Ｂｐａ，ｄ−Ｐｈｅ４ＮＯ２もしくはｌ−Ｐｈｅ４ＮＯ２、同様の側鎖空間を占めるアミノ酸（例えば、ｄ−Ｔｙｒもしくはｌ−Ｔｙｒ、ｄ−Ｐｈｅもしくはｌ−Ｐｈｅ）または側鎖において１つもしくは２つの芳香族基、ピペリジン基、ピラジン基、ピリミジン基、ピペラジン基、モルホリン基もしくはピリミジン基、あるいは１つのインドール基、ペンタレン基、インデン基、ナフタレン基、ベンゾフラン基、ベンゾチオフェン基、キノリン基、インドリン基、クロマン基、キノキサリン基、キナゾリン基を持つ任意のアミノ酸である；Ｐ２は、ｄ−Ｃｈａもしくはｌ−Ｃｈａ、ｄ−Ｎａｌ（２）もしくはｌ−Ｎａｌ（２）、ｄ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、同様の側鎖空間を占めるアミノ酸（例えば、ｄ−Ｔｙｒもしくはｌ−Ｔｙｒ、ｄ−Ｐｈｅもしくはｌ−Ｐｈｅ）あるいは側鎖において１つもしくは２つの芳香族基、ピペリジン基、ピラジン基、ピリミジン基、ピペラジン基、モルホリン基もしくはピリミジン基、または１つのインドール基、ペンタレン基、インデン基、ナフタレン基、ベンゾフラン基、ベンゾチオフェン基、キノリン基、インドリン基、クロマン基、キノキサリン基、キナゾリン基を持つ任意のアミノ酸である；Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５は、任意のアミノ酸であるか、またはＰ３、Ｐ４、Ｐ５の１つ以上が、Ｐ２とＰ６との間の距離が、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５の各々がアミノ酸（ｄ−Ｔｒｐまたはｌ−Ｔｒｐが、Ｐ４での例である）である場合の距離とほぼ同じであるような、単純な炭素鎖である；Ｐ６は、ｄ−Ｂｐａもしくはｌ−Ｂｐａ、ｄ−Ｐｈｅ４ＮＯ２もしくはｌ−Ｐｈｅ４ＮＯ２、任意のアミノ酸およびｄ−Ｔｙｒもしくはｌ−Ｔｙｒ（例えば、ｄ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｔｙｒ）、任意のアミノ酸およびｄ−Ｐｈｅもしくはｌ−Ｐｈｅ（例えば、ｄ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｐｈｅ）であり、そしてＰ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２の少なくとも３つが塩基性アミノ酸であり、残りは任意のアミノ酸であるか、または存在しない。種々の局面において、単純な炭素鎖を有するアミノ酸は、ｄ−１１−アミノウンデカン酸もしくはｌ−１１−アミノウンデカン酸、ｄ−１０−アミノデカン酸もしくはｌ−１０−アミノデカン酸、ｄ−９−アミノノナン酸もしくはｌ−９−アミノノナン酸、ｄ−８−アミノカプリル酸もしくはｌ−８−アミノカプリル酸、ｄ−７−アミノヘプタン酸もしくはｌ−７−アミノヘプタン酸、ｄ−６−アミノカプロン酸もしくはｌ−６−アミノカプロン酸、または１つ以上の不飽和炭素結合を持つ類似の構造である。
【００３９】
さらなる実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：
【００４０】
【数２】
2005529845.tif 000004
ここでＰ１は、ｄ−Ｃｈａもしくはｌ−Ｃｈａ、ｄ−Ｎａｌ（２）もしくはｌ−Ｎａｌ（２）、ｄ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、ｄ−Ｂｐａもしくはｌ−Ｂｐａ、ｄ−Ｐｈｅ４ＮＯ２もしくはｌ−Ｐｈｅ４ＮＯ２、同様の側鎖空間を占めるアミノ酸（例えば、ｄ−Ｔｙｒもしくはｌ−Ｔｙｒ、ｄ−Ｐｈｅもしくはｌ−Ｐｈｅ）あるいは側鎖において１つもしくは２つの芳香族基、ピペリジン基、ピラジン基、ピリミジン基、ピペラジン基、モルホリン基もしくはピリミジン基、または１つのインドール基、ペンタレン基、インデン基、ナフタレン基、ベンゾフラン基、ベンゾチオフェン基、キノリン基、インドリン基、クロマン基、キノキサリン基、またはキナゾリン基を持つ任意のアミノ酸である；Ｐ２は、ｄ−Ｃｈａもしくはｌ−Ｃｈａ、ｄ−Ｎａｌ（２）もしくはｌ−Ｎａｌ（２）、ｄ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、同様の側鎖空間を占めるアミノ酸（例えば、ｄ−Ｔｙｒもしくはｌ−Ｔｙｒ、ｄ−Ｐｈｅもしくはｌ−Ｐｈｅ）あるいは側鎖において１つもしくは２つの芳香族基、ピペリジン基、ピラジン基、ピリミジン基、ピペラジン基、モルホリン基もしくはピリミジン基、または１つのインドール基、ペンタレン基、インデン基、ナフタレン基、ベンゾフラン基、ベンゾチオフェン基、キノリン基、インドリン基、クロマン基、キノキサリン基、キナゾリン基を持つ任意のアミノ酸である；Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５は、任意のアミノ酸であり、またはＰ３、Ｐ４、Ｐ５の１つ以上が、その結果、Ｐ２とＰ６との間の距離は、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５の各々がアミノ酸（ｄ−Ｔｒｐまたはｌ−Ｔｒｐが、Ｐ４での例である）である場合の距離とほぼ同じであるような、単純な炭素鎖である；Ｐ６は、ｄ−Ｂｐａもしくはｌ−Ｂｐａ、ｄ−Ｐｈｅ４ＮＯ２もしくはｌ−Ｐｈｅ４ＮＯ２、任意のアミノ酸およびｄ−Ｔｙｒもしくはｌ−Ｔｙｒ（例えば、ｄ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｔｙｒ）、任意のアミノ酸およびｄ−Ｐｈｅもしくはｌ−Ｐｈｅ（例えば、ｄ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｐｈｅ）、任意のアミノ酸、または存在しない；そしてＰ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２の少なくとも３つが塩基性アミノ酸であり、残りは任意のアミノ酸であるか、または存在しない。種々の局面において、単純な炭素鎖を有するアミノ酸は、ｄ−アミノウンデカン酸もしくはｌ−アミノウンデカン酸、またはｄ−８−アミノカプリル酸もしくはｌ−８−アミノカプリル酸である。
【００４１】
さらに別の実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：
【００４２】
【数３】
2005529845.tif 000005
ここでＰ１は、ｄ−Ｃｈａもしくはｌ−Ｃｈａ、ｄ−Ｎａｌ（２）もしくはｌ−Ｎａｌ（２）、ｄ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、ｄ−Ｂｐａもしくはｌ−Ｂｐａ、ｄ−Ｐｈｅ４ＮＯ２もしくはｌ−Ｐｈｅ４ＮＯ２、ｄ−Ｔｙｒもしくはｌ−Ｔｙｒ、またはｄ−Ｐｈｅもしくはｌ−Ｐｈｅである；Ｐ２は、ｄ−Ｃｈａもしくはｌ−Ｃｈａ、ｄ−Ｎａｌ（２）もしくはｌ−Ｎａｌ（２）、ｄ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、ｄ−Ｂｐａもしくはｌ−Ｂｐａ、ｄ−Ｐｈｅ４ＮＯ２もしくはｌ−Ｐｈｅ４ＮＯ２、ｄ−Ｔｙｒもしくはｌ−Ｔｙｒ、またはｄ−Ｐｈｅもしくはｌ−Ｐｈｅである；Ｐ３は、ｄ−セリンもしくはｌ−セリン、ｄ−アルギニンもしくはｌ−アルギニン、ｄ−システインもしくはｌ−システイン、ｄ−プロリンもしくはｌ−プロリン、またはｄ−アスパラギンもしくはｌ−アスパラギンである；Ｐ４は、ｄ−トリプトファンもしくはｌ−トリプトファンである；そしてＰ５は、ｄ−セリンもしくはｌ−セリン、ｄ−アルギニンもしくはｌ−アルギニン、またはｄ−アスパラギンもしくはｌ−アスパラギンである；またはＰ３、Ｐ４、Ｐ５は、１つのｄ−アミノウンデカン酸もしくはｌ−アミノウンデカン酸または１つのｄ−８−アミノカプリル酸もしくはｌ−８−アミノカプリル酸である；Ｐ６は、ｄ−Ｂｐａもしくはｌ−Ｂｐａ、ｄ−Ｐｈｅ４ＮＯ２もしくはｌ−Ｐｈｅ４ＮＯ２、（ｄ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｔｙｒ）、または（ｄ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｐｈｅ）である。
【００４３】
なお別の実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：
【００４４】
【数４】
2005529845.tif 000006
ここでＰ１は、ｄ−Ｃｈａもしくはｌ−Ｃｈａ、Ｎａｌ（２）、ｄ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、ｄ−Ｂｐａもしくはｌ−Ｂｐａ、ｄ−Ｐｈｅ４ＮＯ２もしくはｌ−Ｐｈｅ４ＮＯ２、ｄ−Ｔｙｒもしくはｌ−Ｔｙｒ、またはｄ−Ｐｈｅもしくはｌ−Ｐｈｅである；Ｐ２は、ｄ−Ｃｈａもしくはｌ−Ｃｈａ、ｄ−Ｎａｌ（２）もしくはｌ−Ｎａｌ（２）、ｄ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）、ｄ−Ｂｐａもしくはｌ−Ｂｐａ、ｄ−Ｐｈｅ４ＮＯ２もしくはｌ−Ｐｈｅ４ＮＯ２、ｄ−Ｔｙｒもしくはｌ−Ｔｙｒ、またはｄ−Ｐｈｅもしくはｌ−Ｐｈｅである；Ｐ３は、ｄ−セリンもしくはｌ−セリン、ｄ−アルギニンもしくはｌ−アルギニン、ｄ−システインもしくはｌ−システイン、ｄ−プロリンもしくはｌ−プロリン、またはｄ−アスパラギンもしくはｌ−アスパラギンである；Ｐ４は、ｄ−トリプトファンもしくはｌ−トリプトファンである；Ｐ５は、ｄ−セリンもしくはｌ−セリン、ｄ−アルギニンもしくはｌ−アルギニン、またはｄ−アスパラギンもしくはｌ−アスパラギンである；またはＰ３、Ｐ４、Ｐ５は、１つのｄ−アミノウンデカン酸もしくはｌ−アミノウンデカン酸または１つのｄ−８−アミノカプリル酸もしくはｌ−８−アミノカプリル酸である；Ｐ６は、ｄ−Ｂｐａもしくはｌ−Ｂｐａ、ｄ−Ｐｈｅ４ＮＯ２もしくはｌ−Ｐｈｅ４ＮＯ２、（ｄ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｔｙｒ）、または（ｄ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｐｈｅ）である；そしてＰ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２の少なくとも３つがｄ−Ａｒｇもしくはｌ−Ａｒｇまたはｄ−Ｌｙｓもしくはｌ−Ｌｙｓであり、残りは任意のアミノ酸であるか、または存在しない。
【００４５】
さらなる実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：
【００４６】
【数５】
2005529845.tif 000007
ここでＰ１は、ｄ−Ｃｈａもしくはｌ−Ｃｈａ、またはｄ−Ｎａｌ（２）もしくはｌ−Ｎａｌ（２）である；Ｐ２は、ｄ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）もしくはｌ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）である；そしてＰ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２の少なくとも３つがｄ−Ａｒｇまたはｌ−Ａｒｇであり、残りは任意のアミノ酸であるかまたは存在しない；Ｐ３は、ｄ−セリンもしくはｌ−セリンである；Ｐ４は、ｄ−トリプトファンもしくはｌ−トリプトファンである；Ｐ５は、ｄ−セリンもしくはｌ−セリンまたはｄ−アスパラギンもしくはｌ−アスパラギンである；Ｐ６は、ｄ−Ｂｐａもしくはｌ−Ｂｐａ、ｄ−Ｐｈｅ４ＮＯ２もしくはｌ−Ｐｈｅ４ＮＯ２、（ｄ−Ｓｅｒもしくはｌ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｔｙｒもしくは−ｌ−Ｔｙｒ）、または（ｄ−Ｓｅｒもしくはｌ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｐｈｅもしくはｌ−Ｐｈｅ）である。
【００４７】
さらに追加の実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：
【００４８】
【数６】
2005529845.tif 000008
ここでＰ１は、ｄ−Ｃｈａもしくはｌ−Ｃｈａ、またはｄ−Ｎａｌ（２）もしくはｌ−Ｎａｌ（２）である；Ｐ２は、（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）もしくは（ｌ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（ｄ−Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）もしくは（ｌ−Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）または（ｄ−Ｐｈｅ−４ＣＦ３）もしくは（ｌ−Ｐｈｅ−４ＣＦ３）である；Ｐ３は、ｄ−Ｓｅｒもしくはｌ−Ｓｅｒである；Ｐ４は、ｄ−Ｔｒｐもしくはｌ−Ｔｒｐである；Ｐ５は、ｄ−Ｓｅｒもしくはｌ−Ｓｅｒである；Ｐ６は、ｄ−Ｂｐａもしくはｌ−Ｂｐａ、または（ｄ−Ｓｅｒもしくはｌ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｔｙｒもしくは−ｌ−Ｔｙｒ）である。
【００４９】
さらなる実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：
【００５０】
【数７】
2005529845.tif 000009
ここでＰ１は、ｄ−Ｃｈａもしくはｌ−Ｃｈａ、またはｄ−Ｎａｌ（２）もしくはｌ−Ｎａｌ（２）である；Ｐ２は、（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）もしくは（ｌ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、（ｄ−Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）もしくは（ｌ−Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）または（ｄ−Ｐｈｅ−４ＣＦ３）もしくは（ｌ−Ｐｈｅ−４ＣＦ３）である；Ｐ３は、任意のアミノ酸（例えば、ｄ−Ｓｅｒもしくはｌ−Ｓｅｒまたはｄ−Ｐｒｏもしくはｌ−Ｐｒｏ）である；Ｐ４は、ｄ−Ｔｒｐまたはｌ−Ｔｒｐである；Ｐ５は、任意のアミノ酸（例えば、ｄ−Ｓｅｒまたはｌ−Ｓｅｒ）である；Ｐ７は、ｄ−Ａｒｇまたはｌ−Ａｒｇである；Ｐ８は、ｄ−Ａｒｇまたはｌ−Ａｒｇである；Ｐ９は、ｄ−Ａｒｇまたはｌ−Ａｒｇである；Ｐ１０は、ｄ−Ｇｌｎもしくはｌ−Ｇｌｎまたはｄ−Ａｒｇもしくはｌ−Ａｒｇである；Ｐ１１は、ｄ−Ａｒｇまたはｌ−Ａｒｇである；Ｐ１２は、ｄ−Ａｒｇまたはｌ−Ａｒｇである；Ｐ６は、ｄ−Ｂｐａもしくはｌ−Ｂｐａまたは（ｄ−Ｓｅｒもしくはｌ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｔｙｒもしくは−ｌ−Ｔｙｒ）である。
【００５１】
なお別の実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：
【００５２】
【数８】
2005529845.tif 000010
ここでＰ１は、ｄ−Ｃｈａもしくはｌ−Ｃｈａ、またはｄ−Ｎａｌ（２）もしくはｌ−Ｎａｌ（２）である；Ｐ２は、（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）もしくは（ｌ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）である；Ｐ３は、ｄ−Ｓｅｒまたはｌ−Ｓｅｒである；Ｐ４は、ｄ−Ｔｒｐまたはｌ−Ｔｒｐである；Ｐ５は、ｄ−Ｓｅｒまたはｌ−Ｓｅｒである；Ｐ７は、ｄ−Ａｒｇまたはｌ−Ａｒｇである；Ｐ８は、ｄ−Ａｒｇまたはｌ−Ａｒｇである；Ｐ９は、ｄ−Ａｒｇまたはｌ−Ａｒｇである；Ｐ１０は、ｄ−Ｇｌｎもしくはｌ−Ｇｌｎまたはｄ−Ａｒｇもしくはｌ−Ａｒｇである；Ｐ１１は、ｄ−Ａｒｇまたはｌ−Ａｒｇである；Ｐ１２は、ｄ−Ａｒｇまたはｌ−Ａｒｇである；Ｐ６は、ｄ−Ｂｐａもしくはｌ−Ｂｐａまたは（ｄ−Ｓｅｒもしくはｌ−Ｓｅｒ−ｄ−Ｔｙｒもしくは−ｌ−Ｔｙｒ）である。
【００５３】
なおさらなる実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：
【００５４】
【数９】
2005529845.tif 000011
【００５５】
【数１０】
2005529845.tif 000012
なお追加の実施形態において、連続するペプチド配列またはペプチド模倣物配列は、以下の構造を含む：
【００５６】
【数１１】
2005529845.tif 000013
発明のペプチドおよびペプチド模倣物は、細胞膜を横断するのを補助するために、必要に応じてポリｌｙｓ配列および／またはポリａｒｇ配列を含む。他のアミノ酸配列（例えば、ＨＩＶ  ｔａｔ、細胞表面レセプター／タンパク質に対するリガンドなど）は、膜を横断するのが可能であり、そして他の分子が、Ｇ２抑制ペプチドおよびペプチド模倣物の細胞侵入を容易にするために使用され得る（例えば、リポソーム、ミセルおよび他の脂質分子、ウイルスおよび他のベクター、エレクトロポレーションなど）ため、ポリｌｙｓ配列および／またはポリａｒｇ配列を含むことは任意である。従って、追加の実施形態において、ペプチドおよびペプチド模倣物は、細胞侵入を補助するポリｌｙｓ配列および／またはポリａｒｇ配列を有さない。例えば、２つの特定の実施形態において、細胞膜横断を補助するポリｌｙｓ配列／ポリａｒｇ配列のない最小の配列は、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１（例えば、ｄ−Ｂｐａ、ｄ−Ｓｅｒ、ｄ−Ｔｒｐ、ｄ−Ｓｅｒ、ｄ−Ｐｈｅ−２、３、４、５、６Ｆ、ｄ−Ｃｈａ（配列番号：１０１）；およびｄ−Ｔｙｒ、ｄ−Ｓｅｒ、ｄ−Ｐｒｏ、ｄ−Ｔｒｐ、ｄ−Ｓｅｒ、ｄ−Ｐｈｅ−２、３、４、５、６Ｆ、ｄ−Ｃｈａ（配列番号：１０２））を含む。２つの追加の特定の実施形態において、細胞膜横断を補助するポリｌｙｓ配列／ポリａｒｇ配列のない最小の配列は、例えば、ｄ−Ｂｐａ、ｄ−Ｃｙｓ、ｄ−Ｔｒｐ、ｄ−Ｓｅｒ、ｄ−Ｐｈｅ−２、３、４、５、６Ｆ、ｄ−Ｃｈａ、ｄ−Ｃｙｓ（配列番号：１０３）；およびｄ−Ｔｙｒ、ｄ−Ｃｙｓ、ｄ−Ｐｒｏ、ｄ−Ｔｒｐ、ｄ−Ｓｅｒ、ｄ−Ｐｈｅ−２、３、４、５、６Ｆ、ｄ−Ｃｈａ、ｄ−Ｃｙｓ（配列番号：１０４）を含む；Ｃｙｓ残基は、必要に応じて環化される。
【００５７】
議論されるように、発明の化合物は、単独で、抗細胞増殖活性またはＧ２抑制活性を有する。抗細胞増殖活性は、直接的または間接的に核酸損傷を引き起こす処置とこのような発明の化合物とを組み合わせることで増加し得る。抗細胞増殖活性はまた、処置が核酸を損傷するかしないかにかかわらず、細胞増殖を阻害する処置とこのような発明の化合物とを組み合わせることで増加し得る。従って、本発明はさらに、本発明の化合物（例えば、ペプチド配列またはペプチド模倣物配列）および核酸損傷剤を含む組成物、ならびに本発明の化合物（例えば、ペプチド配列またはペプチド模倣物配列）および抗増殖剤を含む組成物を提供する。
【００５８】
本明細書中で使用される場合、用語「細胞周期Ｇ２チェックポイントを抑制する」「細胞周期Ｇ２チェックポイントを破壊する」「細胞周期Ｇ２チェックポイントを損なう」およびその文法上の変化が、Ｇ２チェックポイントで細胞周期を阻止する細胞を阻害することを意味する。細胞周期Ｇ２チェックポイントが抑制される細胞は、細胞がＧ２チェックポイント内にいる時間の長さにおける減少を示し、これは、Ｇ２チェックポイントの全くの不在から、適切な条件下で分単位、時間単位、日単位、週単位、またはそれ以上の持続時間の減少を有するＧ２チェックポイントにわたり得る。従って、本発明の化合物に接触された細胞は、細胞が化合物の存在しない間に通常有するよりも、長さにおいてより短いＧ２チェックポイント時間を有する。例えば、Ｇ２チェックポイント時間の長さにおける減少は、本発明の化合物と接触した時、特定の時間（例えば、４時間）の間Ｇ２中にある細胞が、４時間よりも短い間（例えば、３．５時間、３時間、２．５時間、２時間、１時間またはより少ない時間）Ｇ２中にあることを意味する。
【００５９】
本明細書中で使用される場合、用語「アポトーシス」は、プログラムされた細胞死、および当該分野で理解されるような細胞生理学における関連した変化（例えば、核酸断片化、カスパーゼ活性化など）をいう。用語「カタストロフィー」は、分裂プロセスにおける誤りから生じる細胞死を意味する。カタストロフィーにおいて、アポトーシスを特徴付ける特徴（例えば、カスパーゼ活性化、染色体濃縮など）は、あまり存在しない。
【００６０】
本明細書中で使用される場合、用語「ペプチド」、「ポリペプチド」および「タンパク質」は、交換可能に使用され、アミド結合または非アミド等価物によって共有結合された２以上のアミノ酸をいう。本発明のペプチドは、任意の長さであり得る。例えば、ペプチドは、約５〜１００以上の残基長（例えば、５〜１２残基長、１２〜１５残基長、１５〜１８残基長、１８〜２５残基長、２５〜５０残基長、５０〜７５残基長、７５〜１００残基長）またはそれ以上の残基長を有し得る。本発明のペプチドは、ｌ−異性体およびｄ−異性体ならびにｌ−異性体とｄ−異性体との組み合わせを含む。ペプチドは、代表的に、タンパク質の翻訳後プロセシング（例えば、環化（例えば、ジスルフィド結合またはアミド結合）、リン酸化、グリコシル化、カルボキシル化、ユビキチン化、ミリスチル化、または脂質化）に関連する改変を含み得る。
【００６１】
本明細書中に開示されるペプチドは、模倣物が１つ以上の機能または活性を有する限り、アミノ酸構造アナログおよびアミノ酸機能アナログ（例えば、合成アミノ酸または非天然アミノ酸あるいはアミノ酸アナログを有するペプチド模倣物）を有する化合物をさらに含む。従って、本発明の化合物は、「模倣物」形態および「ペプチド模倣物」形態を含む。
【００６２】
本明細書中に使用される場合、用語「模倣物」および「ペプチド模倣物」は、合成化学的化合物をいい、本発明のペプチドと実質的に同じ構造特性および／または機能特性を有する。類似物は、全体として、合成、非天然アミノ酸アナログから構成され得るか、または１つ以上の天然ペプチドアミノ酸および１つ以上の非天然アミノ酸アナログを含むキメラ分子であり得る。類似物はまた、置換が模倣物の活性を破壊しない限り、任意の数の天然アミノ酸保存的置換を組込み得る。保存的改変体である本発明のポリペプチドを用いる際に、慣用的な試験が、模倣物が必要不可欠な活性を有するかどうか（例えば、検出可能な細胞周期Ｇ２チェックポイント抑制活性を有すること）を決定するために使用され得る。従って、Ｇ２細胞周期チェックポイントを検出可能に破壊する模倣物は、被験体に投与されるか、または細胞に接触される場合に、Ｇ２チェックポイント抑制活性を有する。
【００６３】
ペプチド模倣物組成物は、非天然構造成分の組み合わせを含み、これらは、代表的に以下の３つの構造的官能基由来である：ａ）天然アミド結合（「ペプチド結合」）連結以外の残基連結基；ｂ）天然に存在するアミノ酸残基の代わりの非天然残基；またはｃ）二次構造擬態を誘導する（すなわち、二次構造（例えば、βターン、γターン、βシート、αヘリックスコンフォメーションなど）を誘導するか、または安定化する）残基。例えば、ポリペプチドは、１つ以上の残基が、アミド結合以外の化学的手段によって結合される場合、模倣物として特徴付けられ得る。個々のペプチド模倣物残基は、アミド結合、非天然化学結合および非アミド化学結合（他の化学結合またはカップリング手段）（例えば、グルタルアルデヒド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、二官能性マレイミド、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）またはＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）を含む）によって結合され得る。アミド結合の代替である結合基としては、例えば、ケトメチレン（例えば、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−の代わりに、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−）、アミノメチレン（ＣＨ２−ＮＨ）、エチレン、オレフィン（ＣＨ＝ＣＨ）、エーテル（ＣＨ２−Ｏ）、チオエーテル（ＣＨ２−Ｓ）、テトラゾール（ＣＮ４−）、チアゾール、レトロアミド、チオアミド、またはエステルが挙げられる（例えば、Ｓｐａｔｏｌａ（１９８３）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，第７巻，第２６７頁−第３５７頁，「Ｐｅｐｔｉｄｅ  ａｎｄ  Ｂａｃｋｂｏｎｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ」、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｃｋｅｒ，ＮＹを参照のこと）。
【００６４】
議論されるように、ペプチドは、天然に存在するアミノ酸残基の代わりに、１つ以上の非天然残基を含むことによって模倣物として特徴付けられ得る。非天然残基は、当該分野で公知である。天然アミノ酸残基の模倣物として有用な非天然残基の特定の非限定的な例は、芳香族アミノ酸の模倣物であり、これらとしては、例えば、Ｄ−ナフチルアラニン（ｎａｐｈｙｌａｌａｎｉｎｅ）またはＬ−ナフチルアラニン（ｎａｐｈｙｌａｌａｎｉｎｅ）；Ｄ−フェニルグリシンまたはＬ−フェニルグリシン；Ｄ−２チエニルアラニン（ｔｈｉｅｎｅｙｌａｌａｎｉｎｅ）またはＬ−２チエニルアラニン（ｔｈｉｅｎｅｙｌａｌａｎｉｎｅ）；Ｄ−１ピレニルアラニン（ｐｙｒｅｎｅｙｌａｌａｎｉｎｅ）、Ｄ−２ピレニルアラニン（ｐｙｒｅｎｅｙｌａｌａｎｉｎｅ）、Ｄ−３ピレニルアラニン（ｐｙｒｅｎｅｙｌａｌａｎｉｎｅ）、もしくはＤ−４ピレニルアラニン（ｐｙｒｅｎｅｙｌａｌａｎｉｎｅ）またはＬ−１ピレニルアラニン（ｐｙｒｅｎｅｙｌａｌａｎｉｎｅ）、Ｌ−２ピレニルアラニン（ｐｙｒｅｎｅｙｌａｌａｎｉｎｅ）、Ｌ−３ピレニルアラニン（ｐｙｒｅｎｅｙｌａｌａｎｉｎｅ）、もしくはＬ−４ピレニルアラニン（ｐｙｒｅｎｅｙｌａｌａｎｉｎｅ）；Ｄ−３チエニルアラニン（ｔｈｉｅｎｅｙｌａｌａｎｉｎｅ）またはＬ−３チエニルアラニン（ｔｈｉｅｎｅｙｌａｌａｎｉｎｅ）；Ｄ−（２−ピリジニル）−アラニンまたはＬ−（２−ピリジニル）−アラニン；Ｄ−（３−ピリジニル）−アラニンまたはＬ−（３−ピリジニル）−アラニン；Ｄ−（２−ピラジニル）−アラニンまたはＬ−（２−ピラジニル）−アラニン；Ｄ−（４−イソプロピル）−フェニルグリシンまたはＬ−（４−イソプロピル）−フェニルグリシン；Ｄ−（トリフルオロメチル）−フェニルグリシン；Ｄ−（トリフルオロメチル）−フェニルアラニン；Ｄ−ｐ−フルオロ−フェニルアラニン；Ｄ−またはＬ−ｐ−ビフェニルフェニルアラニン；Ｄ（Ｋ）−ｐ−メトキシ−ビフェニルフェニルアラニンまたはＬ−ｐ−メトキシ−ビフェニルフェニルアラニン；Ｄ−２−インドール（アルキル）アラニンまたはＬ−２−インドール（アルキル）アラニン；およびＤ−アルキルアラニンまたはＬ−アルキルアラニンが挙げられ、ここで、アルキルは、置換または非置換のメチルアミノ酸、エチルアミノ酸、プロピルアミノ酸、ヘキシルアミノ酸、ブチルアミノ酸、ペンチルアミノ酸、イソプロピルアミノ酸、イソ−ブチルアミノ酸、ｓｅｃ−イソブチル（ｉｓｏ−ｉｓｏｔｙｌ）アミノ酸、イソ−ペンチルアミノ酸、または非酸性アミノ酸であり得る。天然芳香環の代わりに使用され得る非天然アミノ酸の芳香環としては、例えば、チアゾール芳香環、チオフェニル芳香環、ピラゾリル芳香環、ベンズイミダゾール芳香環、ナフチル芳香環、フラニル芳香環、ピロリル芳香環、およびピリジル芳香環が挙げられる。
【００６５】
酸性アミノ酸の模倣物は、非カルボン酸アミノ酸で置換することによって生成され得、その一方で、負電荷を維持する；（ホスホノ）アラニンおよび硫酸化スレオニン。カルボキシ側鎖基（例えば、アスパラチルまたはグルタミル）はまた、カルボジイミド（Ｒ’−Ｎ−Ｃ−Ｎ−Ｒ’）との反応によって選択的に改変され得、このカルボジイミドとしては、例えば、１−シクロヘキシル−３（２−モルホリニル−（４−エチル）カルボジイミドまたは１−エチル−３（４−アゾニア−４，４−ジメチルペンチル（ｄｉｍｅｔｈｏｌｐｅｎｔｙｌ））カルボジイミドが挙げられる。アスパルチル基またはグルタミル基はまた、アンモニウムイオンとの反応によって、アスパラギニル基およびグルタミニル基に転換され得る。
【００６６】
塩基性アミノ酸の模倣物は、例えば、リジンおよびアルギニンに加えて、アミノ酸オルニチン、シトルリン、または（グアニジノ）−酢酸、あるいは（グアニジノ）アルキル−酢酸での置換によって生成され得、ここで、アルキルは、置換または非置換のメチルアミノ酸、エチルアミノ酸、プロピルアミノ酸、ヘキシルアミノ酸、ブチルアミノ酸、ペンチルアミノ酸、イソプロピルアミノ酸、イソ−ブチルアミノ酸、ｓｅｃ−イソブチルアミノ酸、イソ−ペンチルアミノ酸、または非酸性アミノ酸であり得る。ニトリル誘導体（例えば、ＣＯＯＨの代わりにＣＮ−部分を含む）は、アスパラギンまたはグルタミンについて置換され得る。アスパラギニル残基およびグルタミニル残基は、対応するアスパルチル残基またはグルタミル残基に脱アミノ化され得る。
【００６７】
アルギニン模倣物は、必要に応じて、アルカリ条件下で、アルギニルを１つ以上の試薬（例えば、フェニルグリオキサール、２，３−ブタンジオン、１，２−シクロヘキサンジオン、またはニンヒドリンが挙げられる）と反応させることによって生成し得る。チロシン残基模倣物は、チロシルを、芳香族ジアゾニウム化合物またはテトラニトロメタンと反応させることによって生成され得る。Ｎ−アセチルイミダゾールおよびテトラニトロメタンは、それぞれ、Ｏ−アセチルチロシル種および３−ニトロ誘導体を形成するために使用され得る。
【００６８】
リジン模倣物は、リジニルを、コハク酸または他のカルボン酸無水物と反応させることによって生成され得る（そして末端アミノ酸残基は、変更され得る）。リジンおよび他のα−アミノ−含有残基模倣物はまた、イミドエステル（例えば、メチルピコリンイミデート、ピリドキサールリン酸、ピリドキサール、クロロボロヒドリド（ｃｈｌｏｒｏｂｏｒｏｈｙｄｒｉｄｅ）、トリニトロベンゼンスルホン酸、Ｏ−メチルイソ尿素、２，４、ペンタンジオン）との反応およびグリオキシル酸とのトランスアミダーゼ触媒反応によって生成され得る。
【００６９】
メチオニン模倣物は、メチオニンスルホキシドとの反応によって生成され得る。プロリン模倣物としては、例えば、ピペコリン酸、チアゾリジンカルボン酸、３−ヒドロキシプロリンまたは４−ヒドロキシプロリン、デヒドロプロリン、３−メチルプロリンまたは４−メチルプロリンおよび３，３−ジメチルプロリンが挙げられる。ヒスチジン模倣物は、ヒスチジルをジエチルプロカーボネート（ｄｉｅｔｈｙｌｐｒｏｃａｒｂｏｎａｔｅ）またはパラ−ブロモフェナシルブロミドと反応させることによって生成され得る。他の模倣物としては、例えば、プロリンおよびリジンのヒドロキシル化によって生成される模倣物；セリル残基またはスレオニル残基のヒドロキシル基のリン酸化；リジン、アルギニンおよびヒスチジンンのα−アミノ基のメチル化；Ｎ−末端アミンのアセチル化；主鎖アミド残基のメチル化またはＮ−メチルアミノ酸での置換；あるいはＣ−末端カルボキシル基のアミド化が挙げられる。
【００７０】
１つ以上の残基はまた、反対のキラリティーのアミノ酸（またはペプチド模倣物残基）によって置換され得る。従って、Ｌ配置（化学的実体の構造に依存して、ＲまたはＳとしてもいわれ得る）の天然に存在する任意のアミノ酸は、同じアミノ酸または模倣物であるが、反対のキラリティーの同じアミノ酸または模倣物（Ｄ−アミノ酸といわれるが、さらに、Ｒ−形態またはＳ−形態としていわれ得る）で置換され得る。
【００７１】
本発明のペプチドおよびペプチド模倣物は、本明細書中に示される配列の改変形態をさらに含み、但し、この改変形態は、少なくとも一部の、非改変（すなわち参照）ペプチドまたはペプチド模倣物の機能を保持する。例えば、改変ペプチドまたはペプチド模倣物は、細胞増殖阻害活性またはＧ２破壊活性の少なくとも一部を保持するが、参照ペプチドまたはペプチド模倣物に対して、増加したまたは減少した、細胞増殖阻害活性またはＧ２破壊活性を有し得る。
【００７２】
改変されたペプチドおよびペプチド模倣物は、別のアミノ酸で置換された１つ以上のアミノ酸残基を有し得るか、配列に付加された１つ以上のアミノ酸を有し得るか、または配列から１つ以上のアミノ酸を欠失され得る。１つの実施形態において、改変されたペプチドまたはペプチド模倣物は、１つ以上（例えば、１〜３個、３〜５個、５〜１０個か、またはそれ以上）のアミノ酸置換、付加または欠失を有する。１つの局面において、置換は、側鎖が、参照アミノ酸または模倣物（置換されるアミノ酸または模倣物）と類似する空間を占めるアミノ酸または模倣物による。なお別の局面において、置換は、ヒト残基に構造的に類似する非ヒトアミノ酸による。特定の局面において、置換は、保存的アミノ酸置換である。
【００７３】
本明細書中で使用される場合、用語「類似の空間」は、参照部分にサイズが類似する三次元空間を占める化学部分を意味する。代表的には、類似の空間を占める部分は、参照部分にサイズが類似する。「類似の側鎖空間を占める」アミノ酸または模倣物は、参照アミノ酸または模倣物にサイズが類似する三次元空間を占める側鎖を有する。ｄ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、ｌ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、ｌ−（Ｐｈｅ−３，４，５Ｆ）、ｄ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）またはｌ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）に対する特定の例は、（ｌまたはｄ−Ｐｈｅ−２Ｒ１，３Ｒ２，４Ｒ３，５Ｒ４，６Ｒ５）であり、ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は、塩素、臭素、フッ素、ヨウ素、水素、酸化水素であっても、または存在しなくてもよい。低分子（例えば、約１Åのサイズを有するフルオリド）について、類似の空間は、部分が存在しなくても良い。
【００７４】
用語「保存的置換」は、生物学的にか、化学的にか、または構造的に類似する残基による、１つのアミノ酸の置換を意味する。生物学的に類似するは、置換が、生物学的活性（例えば、抗細胞増殖活性またはＧ２破壊活性）に適合性であることを意味する。構造的に類似するは、アミノ酸が、類似の長さを有する側鎖を有する（例えば、アラニン、グリシン、およびセリン）か、または類似のサイズを有することを意味する。化学的に類似するは、残基が、同じ電荷を有するか、または親水性もしくは疎水性の両方であることを意味する。特定の例としては、別の残基の代わりの１つの疎水性残基（例えば、イソロイシン、バリン、ロイシンまたはメチオニン）の置換、または別の残基の代わりの１つの極性残基（例えば、リジンの代わりのアルギニンの置換、アスパラギン酸の代わりのグルタミン酸の置換、またはアスパラギンの代わりのグルタミンの置換、スレオニンの代わりのセリンの置換など）の置換が挙げられる。
【００７５】
従って、本発明のペプチドおよびペプチド模倣物は、表１に示されるペプチド配列およびペプチド模倣物の配列に同一でない配列を有するペプチドおよびペプチド模倣物を包含する。１つの実施形態において、ペプチドまたはペプチド模倣物は、表１に示される配列と５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％以上の同一性を有する配列を有する。１つの局面において、同一性は、配列の規定された領域（例えば、アミノ末端３〜５残基またはカルボキシ末端３〜５残基）にわたる。
【００７６】
本発明の化合物（ペプチドおよびペプチド模倣物を含む）は、当該分野で公知の任意の方法を使用して産生され、そして単離され得る。ペプチドは、当該分野で公知の化学的方法を使用して、全体または部分的に、合成され得る（例えば、Ｃａｒｕｔｈｅｒｓ（１９８０）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．Ｓｙｍｐ．Ｓｅｒ．２１５−２２３；Ｈｏｒｎ（１９８０）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．Ｓｙｍｐ．Ｓｅｒ．２２５−２３２；およびＢａｎｇａ，Ａ．Ｋ．，Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ，Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ａｎｄ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（１９９５）Ｔｅｃｈｎｏｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｌａｎｃａｓｔｅｒ，ＰＡを参照のこと）。ペプチド合成は、種々の固相合成技術を使用して実施され得（例えば、Ｒｏｂｅｒｇｅ（１９９５）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６９：２０２；Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ（１９９７）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．２８９：３−１３を参照のこと）、自動化合成は、製造業者の指示書に従って、例えば、ＡＢＩ  ４３１Ａ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して、達成され得る。
【００７７】
個々の合成残基およびポリペプチド組込み模倣物は、当該分野で公知の種々の手順および方法論を使用して合成され得る（例えば、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｖｅ  Ｖｏｌｕｍｅｓ，Ｇｉｌｍａｎら（編）Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，ＮＹを参照のこと）。ペプチドおよびペプチド模倣物はまた、コンビナトリアル方法論を使用して合成され得る。ペプチドライブラリーおよびペプチド模倣物ライブラリーを生成するための技術は、周知であり、これらとしては、例えば、マルチピン（ｍｕｌｔｉｐｉｎ）技術、ティーバッグ（ｔｅａ  ｂａｇ）技術、およびスプリット−カップル−混合（ｓｐｌｉｔ−ｃｏｕｐｌｅ−ｍｉｘ）技術が挙げられる（例えば、ａｌ−Ｏｂｅｉｄｉ（１９９８）Ｍｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．９：２０５−２２３；Ｈｒｕｂｙ（１９９７）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．１：１１４−１１９；Ｏｓｔｅｒｇａａｒｄ（１９９７）Ｍｏｌ．Ｄｉｖｅｒｓ．３：１７−２７；およびＯｓｔｒｅｓｈ（１９９６）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．２６７：２２０−２３４を参照のこと）。改変ペプチドは、化学修飾法によってさらに生成され得る（例えば、Ｂｅｌｏｕｓｏｖ（１９９７）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：３４４０−３４４４；Ｆｒｅｎｋｅｌ（１９９５）Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．１９：３７３−３８０；およびＢｌｏｍｍｅｒｓ（１９９４）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３３：７８８６−７８９６を参照のこと）。
【００７８】
ペプチドはまた、より免疫原性のペプチドを産生し、組換え合成されたペプチドをより容易に単離するか、または抗体または抗体発現Ｂ細胞を同定し、そして単離するために、それに連結される１つ以上のさらなるドメインとの融合タンパク質として合成され、そして発現され得る。検出および精製を容易にするドメインとしては、例えば、固定化された金属上での精製を可能にする金属キレートペプチド（例えば、ポリヒスチジントラクトおよびヒスチジン−トリプトファンモジュール）；固定化された免疫グロブリン上での精製を可能にするプロテインＡドメイン；およびＦＬＡＧＳ伸長／アフィニティー精製系（Ｉｍｍｕｎｅｘ  Ｃｏｒｐ，Ｓｅａｔｔｌｅ  ＷＡ）において使用されるドメインが挙げられる。精製ドメインとペプチドとの間の切断可能リンカー配列（例えば、第Ｘａ因子またはエンテロキナーゼ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ  ＣＡ））の含入は、ペプチド精製を容易にするために使用され得る。例えば、発現ベクターは、６個のヒスチジン残基、続くチオレドキシンおよびエンテロキナーゼ切断部位に連結されたペプチドコード核酸を含み得る（例えば、Ｗｉｌｌｉａｍｓ（１９９５）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３４：１７８７−１７９７；Ｄｏｂｅｌｉ（１９９８）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｘｐｒ．Ｐｕｒｉｆ．１２：４０４−１４を参照のこと）。ヒスチジン残基は、融合タンパク質の検出および精製を容易にし、その一方で、エンテロキナーゼ切断部位は、融合タンパク質の残りからペプチドを精製するための手段を提供する。融合タンパク質をコードするベクターおよび融合タンパク質の適用に関する技術は、当該分野で公知である（例えば、Ｋｒｏｌｌ（１９９３）ＤＮＡ  Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，１２：４４１−５３を参照のこと）。
【００７９】
本発明は、本発明のペプチドをコードする核酸をさらに提供する。特定の実施形態において、核酸は、約８〜約１２アミノ酸長、約１２〜約１５アミノ酸長、約１５〜約１８アミノ酸長、約１５〜約２０アミノ酸長、約１８〜約２５アミノ酸長、約２０〜約２５アミノ酸長、約２５〜約３５アミノ酸長、約２５〜約５０アミノ酸長または約５０〜約１００アミノ酸長あるいはそれを超える長さを有する本発明のペプチド配列をコードする。
【００８０】
用語「核酸」および「ポリヌクレオチド」は、全ての形態の核酸をいうために本明細書中で交換可能に使用され、これらとしては、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）およびリボ核酸（ＲＮＡ）が挙げられる。核酸は、二本鎖、一本鎖、または三本鎖の直鎖状または環状であり得る。核酸としては、ゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡ、およびアンチセンスが挙げられる。ＲＮＡ核酸は、スプライスされたか、またはスプライスされない、ｍＲＮＡ、ｒＲＮＡ、ｔＲＮＡまたはアンチセンス（例えば、ＲＮＡｉ）であり得る。本発明の核酸としては、天然核酸、合成核酸ならびにヌクレオチドアナログおよびヌクレオチド誘導体が挙げられる。このような変更または改変されたポリヌクレオチドとしては、例えば、ヌクレアーゼ耐性を提供するアナログが挙げられる。核酸長はまた、例示的なペプチド配列より短くあり得る。例えば、ペプチド配列のいずれかの部分配列は、抗増殖活性またはＧ２破壊活性を有するペプチドをコードする。
【００８１】
核酸は、種々の周知の標準的なクローニング法および化学合成法のいずれかを使用して生成され得、そして、部位特異的変異誘発または当業者に公知の他の組換え技術によって計画的に変更され得る。ポリヌクレオチドの純度は、配列決定、ゲル電気泳動などによって決定され得る。
【００８２】
本発明の核酸は、核酸の発現が「発現制御エレメント」によって影響を受けるか、または調節される核酸構築物に挿入され得、この組み合わせは、発現カセットといわれる。用語「発現制御エレメント」は、作動可能に連結された核酸配列の発現を制御するかまたは影響を与える、１つ以上の配列エレメントを意味する。核酸配列に作動可能に連結された発現制御エレメントは、転写を制御し、そして適切な場合、核酸配列の翻訳を制御する。
【００８３】
用語「作動可能に連結される」は、機能的な並置をいい、ここで、このように記載される成分は、これらの意図される様式においてこれらが機能するのを可能にする関係にある。代表的な発現調節エレメントは、遺伝子の５’末端または３’末端に並置されるが、これはまた、イントロン性であり得る。プロモーターは、一般的に、コード配列の５’位置決めされる。「プロモーター」は、転写を指向するのに十分な最小の配列エレメントを意味する。
【００８４】
発現調節エレメントとしては、プロモーター、エンハンサー、転写終結因子、遺伝子サイレンサー、タンパク質コード遺伝子の前の開始コドン（例えば、ＡＴＧ）が挙げられる。発現調節エレメントは、構成性転写、誘導性転写を活性化する（すなわち、活性化のための外部シグナルを必要とする）か、または転写を抑制する（すなわち、シグナルが、転写を止め；シグナルを除去することによって、転写が活性化される）。発現カセットはまた、遺伝子発現を特定の細胞型または特定の組織について調節可能にするのに十分である調節エレメント（すなわち、組織特異的調節エレメント）を含み得る。
【００８５】
本発明の核酸は、宿主細胞中で増殖するために、そして、続いての遺伝子操作のためにプラスミドに挿入され得る。プラスミドは、宿主細胞中で安定して増殖される核酸であり得；プラスミドは、宿主細胞中でペプチドコード核酸の発現を駆動するために発現調節エレメントを、必要に応じて含む。用語「ベクター」は、本明細書中でプラスミドと同義的に使用され、これはまた、宿主細胞中での発現のために発現調節エレメントを含み得る。プラスミドおよびベクターは、一般的に、少なくとも細胞中での増殖のための複製起点およびプロモーターを含む。従って、プラスミドおよびベクターは、例えば、ペプチドコード核酸の遺伝子操作、ペプチドの産生、および、宿主細胞または生物体全体におけるペプチドの発現に有用である。
【００８６】
従って、ペプチドは、構成性プロモーター（例えば、Ｔ７）または誘導性プロモーター（例えば、バクテリオファージλのｐＬ、ｐｌａｃ、ｐｔｒｐ、ｐｔａｃ（ｐｔｒｐ−ｌａｃハイブリッドプロモーター））を使用して細菌系において；構成性プロモーター（例えば、ＡＤＨまたはＬＥＵ２）または誘導性プロモーター（例えば、ＧＡＬ）を使用して酵母系において（例えば、Ａｕｓｕｂｅｌら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，第２巻，第１３章，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈ．Ａｓｓｏｃ．  ＆  Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ編，１９８８；Ｇｒａｎｔら、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｖｍｏｌｏｓｙ．１５３：５１６（１９８７），Ｗｕ  ＆  Ｇｒｏｓｓｍａｎ編；Ｂｉｔｔｅｒ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｖｍｏｌｏｇｙ，１５２：６７３（１９８７），Ｂｅｒｇｅｒ  ＆  Ｋｉｍｍｅｌ編，Ａｃａｄ．Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．；およびＳｔｒａｔｈｅｒｎら、Ｔｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｙｅａｓｔ  Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ（１９８２）Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ編，第Ｉ巻および第ＩＩ巻；Ｒ．Ｒｏｔｈｓｔｅｉｎ：ＤＮＡ  Ｃｌｏｎｉｎｇ  Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，第１１巻，第３章，Ｄ．Ｍ．Ｇｌｏｖｅｒ編，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，Ｗａｓｈ．，Ｄ．Ｃ．，１９８６を参照のこと）；構成性プロモーターまたは誘導性プロモーター（例えば、エクジソン）を使用して昆虫細胞系において；および構成性プロモーター（例えば、ＳＶ４０、ＲＳＶ）または哺乳動物細胞のゲノムに由来する誘導性プロモーター（例えば、メタロプロテインＩＩＡプロモーター、熱ショックプロモーター）もしくは哺乳動物ウイルスに由来する誘導性プロモーター（例えば、アデノウイルス後期プロモーターまたは誘導性マウス乳腺腫瘍ウイルスの長い末端反復）を使用して哺乳動物細胞系において、発現され得る。ペプチド発現系は、インビボ使用のために設計されたベクターをさらに含み、これとしては、アデノウイルスベクター（米国特許第５，７００，４７０号および同第５，７３１，１７２号）、アデノ随伴ウイルスベクター（米国特許第５，６０４，０９０号）、単純疱疹ウイルスベクター（米国特許第５，５０１，９７９号）およびレトロウイルスベクター（米国特許第５，６２４，８２０号、同第５，６９３，５０８号および同第５，６７４，７０３号ならびにＷＩＰＯ公報ＷＯ９２／０５２６６およびＷＯ９２／１４８２９）が挙げられる。ウシパピローマウイルス（ＢＰＶ）がまた、遺伝子治療において使用されてきた（米国特許第５，７１９，０５４号）。このような遺伝子治療ベクターとしてはまた、ＣＭＶベースのベクターが挙げられる（米国特許第５，５６１，０６３）。
【００８７】
従って、本発明はまた、宿主に挿入された、本発明のペプチドをコードする核酸を提供する。１つの実施形態において、宿主細胞は、原核生物細胞である。別の実施形態において、宿主細胞は、真核生物細胞である。種々の局面において、真核生物細胞は、酵母細胞または哺乳動物（例えば、ヒト、霊長類など）細胞である。
【００８８】
本明細書中で使用される場合、「宿主細胞」は、増殖され得るか、転写され得るか、またはコードされるペプチドを発現され得る、核酸が導入される、細胞である。この用語はまた、本宿主細胞の任意の子孫を含む。
【００８９】
宿主細胞としては、微生物（例えば、細菌細胞または酵母細胞；および植物細胞、昆虫細胞および哺乳動物細胞）が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、組換えバクテリオファージ核酸発現ベクター、プラスミド核酸発現ベクターまたはコスミド核酸発現ベクターで形質転換された細菌；組換え酵母発現ベクターで形質転換された酵母；組換えウイルス発現ベクター（例えば、カリフラワーモザイクウイルス、ＣａＭＶ；タバコモザイクウイルス、ＴＭＶ）で感染させた植物細胞系または組換えプラスミド発現ベクター（例えば、Ｔｉプラスミド）で形質転換された植物細胞系；組換えウイルス発現ベクター（例えば、バキュロウイルス）で感染された昆虫細胞系；あるいは組換えウイルス発現ベクター（例えば、レトロウイルス、アデノウイルス、ワクシニアウイルス）で感染させた動物細胞系、あるいは安定な発現のために操作された、形質転換された動物細胞系が、提供される。
【００９０】
発現ベクターはまた、選択圧に対する耐性を付与する選択マーカーまたは識別マーカー（例えば、β−ガラクトシダーゼ）をコードする核酸を含み得、その結果、ベクターを有する細胞が、同定され、増殖（ｇｒｏｗｎ  ａｎｄ  ｅｘｐａｎｄｅｄ）されるのを可能にする。あるいは、選択マーカーは、第２のベクター上に存在し得、このベクターは、本発明のポリヌクレオチドを含む第１のベクターと宿主細胞中に共トランスフェクトされる。多くの選択系が使用され得、これらとしては、単純疱疹ウイルスチミジンキナーゼ遺伝子（Ｗｉｇｌｅｒら、Ｃｅｌｌ  １１：２２３（１９７７））、ヒポキサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ遺伝子（Ｓｚｙｂａｌｓｋａら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ４８：２０２６（１９６２））、およびアデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（Ｌｏｗｙら、Ｃｅｌｌ  ２２：８１７（１９８０））が挙げられるがこれらに限定されず、遺伝子は、それぞれ、ｔｋ−細胞、ｈｇｐｒｔ−細胞またはａｐｒｔ−細胞中で使用され得る。抗代謝耐性は、ｄｈｆｒ（これは、メトトレキサートに対する耐性を付与する（Ｏ’Ｈａｒｅら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７８：１５２７（１９８１）））；ｇｐｔ遺伝子（ミコフェノール酸に対する耐性を付与する（Ｍｕｌｌｉｇａｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７８：２０７２（１９８１）））；ネオマイシン遺伝子（アミノグリコシドＧ−４１８に対する耐性を付与する（Ｃｏｌｂｅｒｒｅ−Ｇａｒａｐｉｎら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５０：１（１９８１）））；およびハイグロマイシン遺伝子（ハイグロマイシンに対する耐性を付与する（Ｓａｎｔｅｒｒｅら、Ｇｅｎｅ  ３０：１４７（１９８４）））に対する選択の基準として使用され得る。さらなる選択遺伝子としては、ｔｒｐＢ（細胞が、トリプトファンの代わりにインドールを使用することを可能にする）；ｈｉｓＤ（細胞が、ヒスチジンの代わりにヒスチノールを使用することを可能にする（Ｈａｒｔｍａｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：８０４７（１９８８）））；およびＯＤＣ（オルニチンデカルボキシラーゼ）（オルニチンデカルボキシラーゼインヒビター（２−（ジフルオロメチル）−ＤＬ−オルニチン）に対する耐性を付与する）、ＤＦＭＯが挙げられる（ＭｃＣｏｎｌｏｇｕｅ（１９８７）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）。
【００９１】
本明細書中で使用される場合、用語「核酸損傷処置」および「核酸損傷剤」は、直接的または間接的に核酸（例えば、ＤＮＡ、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、ｍＲＮＡ、ｔＲＮＡ、またはｒＲＮＡ）に損傷を与える任意の処置レジメンを意味する。このような薬剤の特定の例としては、アルキル化剤、ニトロソ尿素、代謝拮抗剤、植物アルカロイド、植物抽出物、および放射性同位元素が挙げられる。また、薬剤の特定の例としては、核酸損傷剤（例えば、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、カペシタビン、Ｓ−１（テガフール、５−クロロ−２，４−ジヒドロキシピリジンおよびオキソ酸）、５−エチニルウラシル、アラビノシルシトシン（ａｒａ−Ｃ）、５−アザシチジン（５−ＡＣ）、２’，２’−ジフルオロ−２’−デオキシシチジン（ｄＦｄＣ）、プリン代謝拮抗剤（メルカプトプリン、アザチオプリン、チオグアニン）、塩酸ゲンシタビン（Ｇｅｍｚａｒ）、ペントスタチン、アロプリノール、２−フルオロ−アラビノシル−アデニン（２Ｆ−ａｒａ−Ａ）、ヒドロキシ尿素、硫黄マスタード（ビスクロロエチルスルフィド）、メクロレタミン、メルファラン、クロラムブシル、シクロホスファミド、イホスファミド、チオテーパ、ＡＺＱ、マイトマイシンＣ、ジアンヒドロガラクチトール、ジブロモダシトール（ｄｉｂｒｏｍｏｄｕｃｉｔｏｌ）、スルホン酸アルキル（ブスルファン）、ニトロソ尿素（ＢＣＮＵ、ＣＣＮＵ、４−メチルＣＣＮＵ、またはＡＣＮＵ）、プロカルバジン、デカルバジン、レベッカマイシン、アントラサイクリン（例えば、ドキソルビシン（アドリアマイシン：ＡＤＲ）、ダウノルビシン（Ｃｅｒｕｕｂｉｃｉｎｅ）、イダルビシン（Ｉｄａｍｙｃｉｎ）、およびエピルビシン（Ｅｌｌｅｎｃｅ））、アントラサイクリンアナログ（例えば、ミトキサントロン、アクチニマイシンＤ、非インターカレートトポイソメラーゼインヒビター（例えば、エピポドフィロトキシン（エトポシド＝ＶＰ１６、テニポシド＝ＶＭ−２６）、ポドフィロトキシン、ブレオマイシン（Ｂｌｅｏ）、ペプレオマイシン、核酸付加物を形成する化合物（パラジウム誘導体（例えば、シスプラチン（ＣＤＤＰ）、シスプラチンのトランスアナログ、カルボプラチン、イプロプラチン、テトラプラチン、およびオキサリプラチンを含む））、カンプトテシン、トポテカン、イリノテカン（ＣＰＴ−１１）、ならびにＳＮ−３８）が挙げられる。核酸損傷処置の特定の例としては、放射線照射（例えば、紫外線（ＵＶ）、赤外線（ＩＲ）、またはα線、β線、もしくはγ線の照射）および環境的ショック（例えば、温熱療法）が挙げられる。
【００９２】
本明細書中で使用される場合、用語「抗増殖処置」および「抗増殖剤」は、その処置または薬剤が核酸に損傷を与えるか否かに拘らず、細胞、ウイルス、細菌、または他の単細胞生物もしくは多細胞生物の増殖を直接的または間接的に阻害する任意の処置レジメンを意味する。抗増殖剤の特定の例は、細胞増殖またはウイルス増殖もしくは複製を阻害する抗腫瘍薬および抗ウイルス薬である。特定の例としては、特に、シクロホスファミド、アザチオプリン、シクロスポリンＡ、プレドニソロン、メルファラン、クロラムブシル、メクロレタミン、ブスルファン、メトトレキセート、６−メルカプトプリン、チオグアニン、シトシンアラビノシド、タキソール、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ドキソルビシン、アクチノマイシンＤ、ミトラマイシン、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ストレプトゾトシン、ヒドロキシ尿素、シスプラチン、ミトタン、プロカルバジン、ダカルバジン、およびジブロモマンニトールが挙げられる。核酸複製の失敗を引き起こすかまたは核酸複製を阻害する抗増殖剤としては、ヌクレオシドおよびヌクレオチドアナログ（例えば、ＡＺＴまたは５−ＡＺＣ）が挙げられる。
【００９３】
本発明のペプチドおよびペプチド模倣物はまた、微小管安定化剤または微小管不安定化剤（例えば、ビンカアルカロイド（ビンブラスチン＝ＶＬＢ、ビンクリスチン＝ＶＣＲ、ビンオレルビン＝ＶＲＬＢ、ビンフルニン＝ＶＦＬ）およびタキサン（パクリタキセルおよびドセタキセル＝タキソテール））の抗細胞増殖活性を増強し得る。従って、このような薬剤はさらに、本発明の組成物中に含まれ得、そして本発明の方法において使用され得る。
【００９４】
本発明の化合物を用いて処置される細胞は、その増殖がインビトロ、エキソビボ、またはインビボで阻害または防止されることが望まれる任意の細胞を含む。特定の標的細胞は、正常細胞よりも短い細胞周期Ｇ１チェックポイント時間を示すか、またはその細胞が核酸複製を完了するのに十分な時間が経過する前にＧ１チェックポイントを出るように減少した細胞周期Ｇ１チェックポイントを有する。従って、候補細胞としては、細胞が正常であろうが異常であろうが迅速に増殖する細胞が挙げられる。特定の例は、良性細胞または腫瘍性細胞、転移性細胞または非転移性細胞である。さらなる候補細胞は、それらの増殖速度または細胞がＧ１期で維持される時間の長さを測定することによって同定され得る。候補細胞はまた、試験細胞と本発明の化合物を、単独でかまたは核酸損傷処置と組み合わせて接触させ、そしてその接触細胞が減少した増殖または増加した細胞死もしくはアポトーシス／カタストロフを示すか否かを決定することにより同定され得る。
【００９５】
従って、本発明の化合物は、インビトロ、エキソビボ、およびインビボで細胞増殖を阻害するのに有用である。従って、異常かまたは望ましくないかまたは求められない細胞増殖または細胞生存、あるいは異常かまたは欠損した細胞分化により特徴付けられる障害または生理学的状態を有するかまたはその危険にある被験体は、本発明の化合物単独でかまたは核酸損傷を直接的または間接的に引き起こす処置もしくは抗増殖処置と組み合わせて処置され得る。
【００９６】
従って、本発明に従って、細胞増殖を阻害する方法、核酸損傷剤または核酸損傷処置に対する細胞の感受性を増大する方法、およびインビトロ、エキソビボ、およびインビボで細胞に対する核酸損傷を増大する方法が提供される。１つの実施形態において、方法は、細胞の増殖を阻害するのに十分な量の本発明のペプチドまたはペプチド模倣物と細胞（例えば、培養細胞または被験体中に存在する細胞）とを接触させる工程を包含する。別の実施形態において、方法は、核酸損傷剤または核酸損傷処置に対する細胞の感受性を増大するのに十分な量の本発明のペプチドまたはペプチド模倣物と細胞とを接触させる工程を包含する。さらに別の実施形態において、方法は、細胞の核酸損傷を増加させるのに十分な量の本発明のペプチドまたはペプチド模倣物と細胞とを接触させる工程を包含する。種々の局面において、方法はさらに、核酸損傷剤と細胞とを接触させる工程、または細胞を核酸損傷処置に供する工程を包含する。
【００９７】
被験体における細胞増殖障害または細胞分化障害（所望でないまたは必要でない、細胞増殖または細胞生存によって特徴付けられる状態、欠損性アポトーシスまたは異常なアポトーシスによって特徴付けられる状態、異常な細胞生存または欠損性細胞生存によって特徴付けられる状態、および異常な細胞分化または欠損性細胞分化によって特徴付けられる状態が挙げられる）を処置するための方法が、さらに提供される。１つの実施形態において、この方法は、細胞増殖障害を有する被験体または細胞増殖障害を有する危険性のある被験体に、その細胞増殖障害を処置するのに有効な量の、本発明のペプチドまたはペプチド模倣物を投与する工程を包含する。１つの局面において、この量は、被験体の状態を改善するのに十分である。特定の局面において、この改善としては、標的細胞（例えば、異常に増殖している細胞）の少なくとも一部における、細胞増殖の減少、細胞数の減少、この細胞数の増加の阻害、アポトーシスの減少、または生存の減少が挙げられる。なお別の局面において、この被験体に、細胞増殖を阻害する処置を投与する前、この投与と同時またはこの投与の後に、本発明の化合物を投与する。さらなる特定の局面において、細胞増殖障害である細胞の少なくとも一部は、血液、胸部、肺、甲状腺、頭部または頸部、脳、リンパ、胃腸管、尿生殖器管、腎臓、膵臓、肝臓、骨、筋肉、または皮膚に位置する。
【００９８】
別の実施形態において、この方法は、一定量の化合物を被験体に投与して、固形腫瘍を処置する工程を包含する。なお別の実施形態において、この方法は、一定量の化合物を被験体に投与して、液体腫瘍を処置する工程を包含する。種々の局面において、腫瘍を有する被験体に、別の抗腫瘍治療の前、この抗腫瘍治療と同時またはこの抗腫瘍治療の後に、本発明の化合物を投与する。
【００９９】
本明細書中で使用される場合、用語「増殖障害」および「増殖状態」は、任意の病理学的または非病理学的な生理学的状態を意味し、これらは、（例えば、細胞、ウイルス、細菌、真菌などの）異常な増殖または所望でない増殖によって特徴付けられる。用語「細胞増殖障害」および「細胞増殖状態」は、任意の病理学的または非病理学的な生理学的状態を意味し、これらは、異常な細胞増殖または所望でない細胞増殖によって特徴付けられる。これらの状態としては、（例えば、欠損性アポトーシスに起因する）所望でないまたは必要でない、細胞増殖または細胞生存によって特徴付けられる状態、欠損性アポトーシスもしくは異常なアポトーシスまたは欠損性アポトーシスによって特徴付けられる状態、および異常な細胞生存または望ましくない細胞生存もしくは必要でない細胞生存によって特徴付けられる状態が挙げられる。用語「分化障害」は、任意の病理学的または非病理学的な生理学的状態を意味し、これらは、異常な分化または欠損性分化によって特徴付けられる。
【０１００】
処置に従順な増殖障害または分化障害としては、良性および腫瘍性の両方の、疾患および非病理学的な生理学的状態が挙げられ、これらは、異常なまたは所望でない、細胞数、細胞増殖または細胞生存によって特徴付けられる。従って、このような障害または状態は、疾患状態を構成し得、これらとしては、癌性増殖または腫瘍プロセスの全ての型、転移性組織、または悪性に形質転換された細胞、組織もしくは器官が挙げられるか、あるいはこれらは、非病理学的であり得る（すなわち、正常から逸脱するが、代表的に疾患に関連しない）。本発明に従って処置され得る非病理学的状態の特定の例は、瘢痕を生じ得る創傷修復からの組織再生である。
【０１０１】
増殖障害または分化障害を含む細胞は、細胞塊において凝集され得るか、または分散され得る。用語「固形腫瘍」とは、代表的に一緒に凝集して塊を形成する、新形成または転移をいう。特定の例としては、内臓腫瘍（例えば、胃癌または結腸癌）、ヘパトーム、細静脈（ｖｅｎａｌ）癌腫、肺および脳の腫瘍／癌が挙げられる。「液体腫瘍」とは、造血系の新形成（例えば、リンパ腫、骨髄腫および白血病）、またはそれらが代表的に固形塊を形成しない場合に、天然に拡散する新形成をいう。白血病の特定の例としては、急性または慢性の、リンパ芽球性骨髄腫、骨髄芽球性骨髄腫および多発性骨髄腫が挙げられる。
【０１０２】
このような障害としては、実質的に任意の細胞または組織型に影響を及ぼし得る、新生物または癌（例えば、癌腫、肉腫、黒色腫、転移性障害または造血性の新生物障害）が挙げられる。転移性腫瘍は、複数の原発腫瘍型から生じ得、これらとしては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：胸部、肺、甲状腺、頭部および頸部、脳、リンパ、胃腸（口、食道、胃、小腸、結腸、直腸）、尿生殖器管（子宮、卵巣、頸、精巣、膀胱、精巣、陰茎、前立腺）、腎臓、膵臓、肝臓、骨、筋肉、皮膚など。
【０１０３】
癌腫とは、上皮組織または内分泌組織の悪性疾患をいい、これらとしては、呼吸器系癌腫、胃腸系癌腫、泌尿生殖器系癌腫、精巣癌腫、胸部癌腫、前立腺癌腫、内分泌系癌腫、および黒色腫が挙げられる。例示的な癌腫としては、頸、肺、前立腺、胸部、頭部および頸部、結腸、肝臓および卵巣から生じる癌腫が挙げられる。この用語はまた、例えば、癌性組織および肉腫性組織から構成される悪性腫瘍を含む癌肉腫を含む。腺癌としては、腺組織の癌腫が挙げられ、ここにおいて、その腫瘍は、腺様構造を形成する。
【０１０４】
肉腫とは、間葉細胞起源の悪性腫瘍をいう。例示的な肉腫としては、例えば、リンパ肉腫、脂肪肉腫、骨肉腫、および線維肉腫が挙げられる。
【０１０５】
本明細書中で使用される場合、用語「造血性増殖障害」は、例えば、骨髄性細胞、リンパ球系細胞または赤血球系細胞の系統、またはそれらの前駆体細胞から生じる、造血性起源の過形成細胞／新生物性細胞を含む疾患を意味する。代表的には、この疾患は、未分化型急性白血病（例えば、正赤芽球性白血病および急性巨核芽球性白血病）から生じる。さらなる例示的な骨髄性障害としては、以下が挙げられるがこれらの限定されない：急性前骨髄球白血病（ａｃｕｔｅ  ｐｒｏｍｙｅｌｏｉｄ  ｌｅｕｋｅｍｉａ（ＡＰＭＬ））、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）および慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）；リンパ球系悪性腫瘍としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）（これは、Ｂ細胞系統ＡＬＬおよびＴ細胞系統ＡＬＬを含む）、慢性リンパ芽球性白血病（ＣＬＬ）、前リンパ球性白血病（ｐｒｏｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ（ＰＬＬ））、ヘアリーセル白血病（ＨＬＬ）およびヴァルデンストレームマクログロブリン血症（ＷＭ）。さらなる悪性リンパ腫としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：非ホジキンリンパ腫およびその改変体、抹消Ｔ細胞リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫（ＡＴＬ）、皮膚Ｔ細胞白血病（ＣＴＣＬ）、大顆粒リンパ球性白血病（ｌａｒｇｅ  ｇｒａｎｕｌａｒ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ（ＬＧＦ））、ホジキン病およびリード−シュテルンベルグ病。
【０１０６】
本発明の化合物と組み合わせて使用するための処置は、本明細書中に開示されるかまたは当該分野で公知である、任意の抗増殖処置、核酸損傷処置、または抗腫瘍処置を包含する。例えば、抗細胞増殖処置または抗腫瘍処置は、必要に応じて薬物処置と組み合わせた、照射処置または外科的切除を包含し得る。この処置は、化学物質（例えば、放射性同位体）、薬物（例えば、化学療法剤）、または遺伝子治療（例えば、抗オンコジーン（例えば、Ｒｂ、ＤＣＣ、ｐ５３など）、ドミナントネガティブオンコジーン、もしくはオンコジーンに対するアンチセンス）の投与を包含し得る。この化合物は、他の処置プロトコルの前にか、それと同時にか、またはその後に、投与され得る。例えば、抗細胞増殖治療（例えば、照射療法、化学療法、遺伝子治療、外科的切除など）のための候補被験体は、抗細胞増殖治療を開始する前に、本発明の化合物を投与され得る。従って、予防的処置方法が、提供される。
【０１０７】
用語「被験体」とは、動物を指し、代表的には哺乳動物を指し、例えば、霊長類（ヒト、サル、テナガザル、チンパンジー、オランウータン、マカク）、家畜（イヌおよびネコ）、牧場動物（ウマ、ウシ、ヤギ、ヒツジ、ブタ）、および実験動物（マウス、ラット、ウサギ、モルモット）を指す。被験体は、動物疾患モデル（たとえば、腫瘍保有マウス）を包含する。
【０１０８】
処置のために適切な被験体は、増殖障害もしくは分化障害についての処置または例えば抗腫瘍治療を、現在受けている被験体、またはその処置についての候補である被験体を包含する。さらなる候補被験体としては、例えば、細胞増殖障害を発症する危険がある被験体が挙げられる。従って、本発明の方法は、細胞増殖障害の危険があるが未だその障害の明白な症状を示していない被験体を処置するために、適用可能である。危険がある被験体は、細胞増殖障害を発症する遺伝的素因または家族歴を有するものとして、同定され得る。例えば、活性化オンコジーンを有するかまたは腫瘍サプレッサ遺伝子の変異もしくは欠失を有する被験体は、候補被験体である。従って、危険がある被験体は、遺伝子損傷の存在について慣用的遺伝子スクリーニングを使用してか、またはその被験体がその障害の危険があることを確立するためのその被験体の家族歴への照会を使用して、同定され得る。危険がある被験体の特定の例は、新形成細胞もしくは薬物耐性新形成細胞がＣＤ４０を発現する癌に対する素因を示す家族歴または他の遺伝的特徴を有する、被験体である。遺伝子疾患の特定の詳細な例は、網膜芽細胞腫であり、これは、Ｒｂ腫瘍サプレッサ遺伝子における欠損によって引き起こされる。
【０１０９】
投与量は、代表的には、望ましい影響を生じるために充分な量である、「有効量」または「十分量」である。従って、有効量は、増殖細胞を含む細胞の少なくとも一部（例えば、標的細胞の少なくともいくらか）の、細胞増殖の減少、細胞数の減少、増殖増大の阻害、細胞数増加の阻害、アポトーシス増加、または生存の減少のうちの１つ以上を包含する。従って、例えば、細胞増殖を阻害することが望ましい場合、有効量は、細胞増殖もしくは増殖細胞数を検出可能に減少する量、または細胞アポトーシスを増加する量、または細胞生存を減少する量である。従って、この量は、標的細胞数を減少するため、標的細胞数を安定化するため、または標的細胞数の増加を阻害するために、十分であり得る。例えば、この障害が固形腫瘍を包含する場合、その腫瘍の少なくとも一部の、腫瘍サイズの減少、腫瘍サイズの安定化、またはさらなる腫瘍増殖の防止（例えば、その細胞の５〜１０％の増殖阻害、または腫瘍塊を含む細胞の１０〜２０％以上の増殖阻害）が、満足な臨床的終点である。その障害が液体腫瘍を含む場合、その腫瘍細胞のうちの少なくとも部分集団の、腫瘍細胞数の減少、腫瘍細胞数の安定化、または腫瘍細胞数の更なる増加の阻害（例えば、その細胞のうちの５％〜１０％の増殖阻害、またはその細胞のうちの１０％〜２０％以上の増殖阻害）は、満足な臨床終点である。
【０１１０】
さらに、有効であると考慮される量は、この状態または障害の進行を、予防または阻害し得る。たとえば、特定の腫瘍は、進行するにつれて、次第に攻撃的になる（転移形態への進行を含む）。従って、有効であると考慮される量はまた、腫瘍が次第に攻撃的になることまたは転移することを、減少するかまたは防ぐ。従って、この障害または状態の悪化の阻害または予防（すなわち、この状態の安定化）が、さらなる満足な臨床的終点である。
【０１１１】
液体腫瘍を含む生物学的サンプル（例えば、血液または組織サンプル）の試験は、腫瘍細胞塊もしくは腫瘍細胞数が減少したか否か、または腫瘍細胞増殖の阻害が生じたか否かを、確立し得る。固形腫瘍について、侵襲的画像化法および非侵襲的画像化法が、腫瘍サイズの減少または腫瘍サイズ増加の阻害を確認し得る。レセプター陽性腫瘍のレセプター計数の減少は、腫瘍細胞増殖の減少または阻害を評価するために使用され得る。ホルモン産生腫瘍（例えば、乳癌、精巣癌、または卵巣癌）のホルモン量は、その腫瘍の増殖の減少または阻害を評価するために使用され得る。
【０１１２】
有効量はまた、その障害または状態に関係する症状の重篤度もしくは頻度を、客観的または主観的に低下もしくは減少し得る。例えば、疼痛、悪心、もしくは他の不快感を減少するかまたは食欲もしくは主観的福祉を増大する、本発明の化合物の量は、満足な臨床的終点である。
【０１１３】
有効量はまた、別のプロトコルを用いる処置の量（例えば、投与量）または頻度の減少を包含する。これは、満足な臨床終点と見なされる。例えば、本発明の化合物を用いて処置される癌患者には、癌細胞増殖を阻害するための核酸損傷処置がより少なくしか必要とされ得ない。この場合、有効量は、本発明の化合物を用いる処置を伴わずに投与される投与の頻度もしくは量と比較して、その被験体が投与される核酸損傷剤の投与頻度もしくは投与量を減少させる、量を包含する。
【０１１４】
被験体の状態または治療利点の改善をもたらす本発明の方法は、期間が比較的短くあり得る。例えば、その改善は、数時間、数日間〜数週間継続し得るか、または長期間（例えば、数ヶ月もしくは数ヵ年）にわたり延長し得る。有効量は、その状態または障害の何らかの症状もしくはすべての症状を完全に除去する必要はない。従って、有効量についての満足な臨床終点は、その障害もしくは状態の状況を決定するために適切な上記の基準もしくは当該分野で公知の他の基準を使用して決定される、短期間または長期間にわたる被験体の状態の主観的改善もしくは客観的改善が存在する場合に、達成される。本明細書中に記載されるかまたは当該分野で公知であるような１つ以上の有益な効果を提供するために有効な量は、被験体の状態の「改善」または被験体への「治療効果」と呼ばれる。
【０１１５】
本発明の化合物の有効量は、動物研究に基づいて、または必要に応じてヒト臨床試験に基づいて、決定され得る。特定の被験体を処置するために必要な投与量および時機に影響を与え得る種々の要因（例えば、被験体の全身の健康、年齢、もしくは性別、その障害もしくは状態の重篤度もしくは段階、以前の処置、望ましくない副作用に対する感受性、望ましい臨床結果、および他の障害もしくは状態の存在）を、当業者は認識する。このような要因は、治療利点のために充分な量を提供するために必要な投与量および時機に影響を与え得る。投与レジメンはまた、薬物速度論（すなわち、薬学的組成物の吸収速度、バイオアベイラビリティ、代謝、およびクリアランス）を考慮する（例えば、Ｅｇｌｅｔｏｎ（１９９７）「Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｄｒｕｇｓ  ｉｎｔｏ  ｔｈｅ  ｂｒａｉｎ」  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  １８：１４３１〜１４３９；およびＬａｎｇｅｒ（１９９０）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７〜１５３３を参照のこと）。さらに、用量または処置プロトコルは、被験体に特に合わせられ得るか、または薬理遺伝学的データに基づいて改変され得る。
【０１１６】
従って、本発明の化合物は、単独でか、または薬学的組成物として、望ましい効果を達成するための任意のプロトコルもしくは経路に従って、全身投与され得るか、（例えば、器官または組織に向かって、例えば、肝臓の細胞増殖障害を処置するために門脈中に注射することによって）局所（ｒｅｇｉｏｎａｌｌｙ）投与され得るか、または（例えば、腫瘍塊中に直接）局所（ｌｏｃａｌｌｙ）投与され得る。この化合物および薬学的組成物は、単回用量としてか、あるいは、多回用量として、（例えば、低用量で）毎日か、または（例えば、より高用量で、１日毎、１週間に１回など）断続的に、投与され得る。この化合物および薬学的組成物は、吸入（例えば、気管内吸入）を介してか、経口的にか、静脈内にか、動脈内にか、脈管内にか、髄腔内にか、腹腔内にか、筋肉内にか、皮下にか、腔内にか、経皮的（例えば、局所投与）にか、経粘膜的（例えば、頬投与、膀胱投与、膣投与、子宮投与、直腸投与、もしくは鼻投与）にか、多回投与によってか、徐放（例えば、経時的な逐次灌流）によってか、または単回ボーラスによって、投与され得る。薬物を投与するための移植可能なデバイス（微小製造デバイスを含む）は、周知であり、そしてまた、被験体に本発明の化合物を送達するために適用可能である。
【０１１７】
静脈内（ＩＶ）投与される化合物は、数時間（代表的には、１時間、３時間、もしくは６時間）にわたって、約０．０１ｍｇ／時間〜約１．０ｍｇ／時間であり、これは、断続的周期で１週間以上反復され得る。かなり高い投与量（約１０ｍｇ／ｍｌまでの範囲）が、特に薬物を隔離部位に投与して血流中には投与しない場合（例えば、体腔または器官管腔（例えば、脳脊髄液（ＣＳＦ））中に投与する場合）には、使用され得る。
【０１１８】
従って、本発明は、薬学的組成物をさらに提供する。そのような薬学的組成物は、被験体にインビボもしくはエキソビボで投与するため、および例えば、被験体を本発明の化合物で処置するために、有用である。
【０１１９】
本明細書中で使用される場合、用語「薬学的に受容可能」および「生理学的に受容可能」は、薬学的投与に適合性である、溶媒（水性溶媒もしくは非水性溶媒）、溶液、乳濁物、分散媒、コーティング、等張剤、および吸収促進剤もしくは吸収遅延剤を包含する。従って、「薬学的組成物」または「薬学的処方物」は、被験体における薬学的使用のために適切な組成物を指す。この薬学的組成物および処方物は、一定量の本発明の化合物（例えば、有効量の本発明のペプチドもしくはペプチド模倣物、それをコードする核酸、ベクター、もしくは細胞）と、薬学的もしくは生理学的に受容可能なキャリアとを含む。
【０１２０】
薬学的組成物は、特定の投与経路（全身投与または局所投与）と適合性であるように処方され得る。従って、薬学的組成物は、種々の経路による投与のために適切な、キャリア、希釈剤、もしくは賦形剤を含む。
【０１２１】
経腸（経口）投与のための処方物は、錠剤（コーティング錠剤または非コーティング錠剤）、カプセル剤（硬カプセル剤または軟カプセル剤）、ミクロスフェア、乳濁剤、散剤、顆粒、結晶、懸濁物、シロップ剤、またはエリキシル剤中に含まれ得る。従来の非毒性固体キャリア（例えば、薬剤グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルク、セルロース、グルコース、スクロース、炭酸マグネシウム）が、固形処方物を調製するために使用され得る。補助的活性化合物（例えば、保存剤、抗菌剤、抗ウイルス剤、および抗真菌剤）もまた、この処方物中に組み込まれ得る。液体処方物もまた、経腸投与のために使用され得る。このキャリアは、種々の油（石油、動物油、植物油、または合成油（例えば、ラッカセイ油、ダイズ油、鉱物油、ゴマ油）を含む）から選択され得る。適切な薬学的賦形剤としては、例えば、デンプン、セルロース、タルク、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、イネ、コムギ、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、塩化ナトリウム、脱脂粉乳、グリセロール、プロピレングリコール、水、エタノールが、挙げられる。
【０１２２】
経腸送達、非経口送達、または経粘膜送達のための薬学的組成物は、例えば、水、生理食塩水、リン酸緩衝化生理食塩水、ハンクス溶液、リンゲル溶液、デキストロース／生理食塩水、およびグルコース溶液を含む。この処方物は、生理学的条件に近づけるための補助物質（例えば、緩衝化剤、張度調整剤、湿潤剤、界面活性剤など）を含み得る。添加物としてはまた、さらなる活性成分（例えば、殺菌剤または安定化剤）も挙げられ得る。例えば、この溶液は、酢酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、モノラウリン酸ソルビタン、またはオレイン酸トリエタノールアミンを含み得る。さらなる非経口処方物および非経口方法が、Ｂａｉ（１９９７）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ．８０：６５〜７５；Ｗａｒｒｅｎ（１９９７）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌ．Ｓｃｉ．１５２：３１〜３８およびＴｏｎｅｇａｗａ（１９９７）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８６：５０７〜５１５に記載される。非経口調製物は、ガラス製またはプラスチック製の、アンプル、使い捨てシリンジ、または多用量バイアル中に封入され得る。
【０１２３】
皮内投与または皮下投与のための薬学的組成物は、滅菌希釈剤（例えば、水、生理食塩水溶液、不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、または他の合成溶媒；抗菌剤（例えば、ベンジルアルコールまたはパラベンメチル）；抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸、亜硫酸水素グルタチオンまたは亜硫酸水素ナトリウム）；キレート剤（例えば、エチレンジアミン四酢酸）；緩衝剤（例えば、酢酸塩、クエン酸塩、またはリン酸塩）；ならびに張度調整剤（例えば、塩化ナトリウムまたはデキストロース）を含み得る。
【０１２４】
注射のための薬学的組成物としては、水溶液（水溶性である場合）または分散剤および滅菌した注入可能な溶液もしくは分散剤の即座調製のための滅菌粉末が挙げられる。静脈内投与のために適切なキャリアとしては、生理食塩水、静菌水、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬＴＭ（ＢＡＳＦ，Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ，ＮＪ）またはリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）が挙げられる。このキャリアは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコールなど）、ならびにこれらの適切な混合物を含む、溶媒または分散媒であり得る。流動性は、例えば、レシチンのようなコーティングの使用によって、分散体の場合において要求される粒子サイズを維持することによって、および界面活性剤の使用によって、維持され得る。抗菌剤および抗真菌剤としては、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸およびチメロサールが挙げられる。等張剤（例えば、糖類、ポリアルコール（例えば、マンニトール、ソルビトール、塩化ナトリウム）が、この組成物中に含まれ得る。得られる溶液は、そのままでの使用のためにパッケージされ得るか、または凍結乾燥され得、この凍結乾燥された調製物は、投与の前に滅菌溶液と後に組み合わされ得る。
【０１２５】
薬学的受容可能なキャリアは、吸収もしくはクリアランスを安定化、増加または遅延させる化合物を含み得る。このような化合物としては、以下が挙げられる：例えば、糖質（例えば、グルコース、スクロース、またはデキストラン）；低分子量タンパク質；ペプチドのクリアランスもしくは加水分解を低減させる組成物；または賦形剤または他の安定化剤および／もしくは緩衝液。吸収を遅延させる薬剤としては、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンが挙げられる。界面活性剤もまた使用して、薬学的組成物（リポソームキャリアを含む）の吸収を安定化、増加または減少させ得る。消化から保護するために、化合物は、組成物と複合体化され、酸および酵素的加水分解に対する抵抗性を付与され得るか、または化合物は、適度に抵抗性のあるキャリア（例えば、リポソーム）中で複合体化され得る。化合物を消化から保護するための手段は、当該分野で公知である（例えば、Ｆｉｘ（１９９６）Ｐｈａｒｍ  Ｒｅｓ．１３：１７６０〜１７６４；Ｓａｍａｎｅｎ（１９９６）Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４８：１１９〜１３５；および米国特許第５，３９１，３７７号（これは、治療薬剤の経口送達のための脂質組成物を記載する）を参照のこと）。
【０１２６】
経粘膜投与または経皮投与について、透過されるバリアに対して適切な透過剤が、処方物中で使用される。このような透過剤は、一般的に、当該分野で公知であり、そして、例えば、経粘膜投与については、界面活性剤、胆汁酸塩、およびフシジン酸誘導体が挙げられる。経粘膜投与は、鼻スプレーまたは坐剤を介し得る（例えば、Ｓａｙａｎｉ（１９９）「Ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ａｃｒｏｓｓ  ａｂｓｏｐｔｉｖｅ  ｍｕｃｏｓａｅ」Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒ．Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓｔ．１３：８５〜１８４）。経皮投与については、この活性化合物は、当該分野で一般的に公知である軟膏剤、軟膏、ゲル、またはクリーム剤へ処方される。経皮的送達系はまた、パッチを使用して達成され得る。
【０１２７】
吸入送達について、薬学的処方物は、エアロゾルまたは霧の形態で送達され得る。エアロゾル投与について、処方物は、界面活性剤および推進剤とともに微細に分割された形態で供給され得る。別の実施形態において、処方物を呼吸器組織に送達するためのデバイスは、処方物が蒸発するデバイスである。当該分野で公知の他の送達系としては、乾燥粉末エアロゾル、液体送達系、吸入器、空気噴射噴霧器および推進剤系が挙げられる（例えば、Ｐａｔｔｏｎ（１９９８）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  １６：１４１〜１４３；Ｄｕｒａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ；Ａｒａｄｉｇｍ，Ｈａｙｗａｒｄ，ＣＡ；Ａｅｒｏｇｅｎ，Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ，ＣＡ；およびＩｎｈａｌｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｓａｎ  Ｃａｒｌｏｓ，ＣＡ）。
【０１２８】
生分解性の生体適合性ポリマーが使用され得る（例えば、エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸）。このような処方物の調製のための方法は、当業者には公知である。これらの材料はまた、Ａｌｚａ  ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎおよびＮｏｖａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．から商業的に入手可能である。リポソーム懸濁液（抗体またはウイルスコートタンパク質を使用して、細胞または組織へ標的化されたリポソームを含む）がまた、薬学的に受容可能なキャリアとして使用され得る。これらは、例えば、米国特許第４，２３５，８７１号；同第４，５０１，７２８号；同第４，５２２，８１１号；同第４，８３７，０２８号；同第６，１１０，４９０号；同第６，０９６，７１６号；同第５，２８３，１８５号；同第５，２７９，８３３号；Ａｋｉｍａｒｕ（１９９５）Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ  Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１：１９７−２１０；Ａｌｖｉｎｇ（１９９５）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．１４５：５−３１；およびＳｚｏｋａ（１９８０）Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｂｉｏｅｎｇ．９：４６７に記載されるような、当該分野で公知の方法に従って調製され得る。低分子（ペプチドを含む）の持続性送達が可能なマイクロスフィアもしくは生分解性カプセルまたは他の生分解性ポリマー構成は、当該分野で公知である（例えば、Ｐｕｔｎｅｙ（１９９８）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１６：１５３−１５７を参照のこと）。本発明の化合物は、ミセル中に組み込まれ得る（例えば、Ｓｕｎｔｒｅｓ（１９９４）Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４６：２３−２８；Ｗｏｏｄｌｅ（１９９２）Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．９：２６０−２６５を参照のこと）。ペプチドは、脂質単層または脂質二重層の表面に結合され得る。例えば、ペプチドは、ヒドラジド−ＰＥＧ−（ジステアロイルホスファチジル）エタノールアミン含有リポソーム（例えば、Ｚａｌｉｐｓｋｙ（１９９５）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．６：７０５−７０８を参照のこと）に結合され得る。あるいは、任意の形態の脂質膜（例えば、平面脂質膜またはインタクトな細胞（例えば、赤血球）の細胞膜）が、使用され得る。リポソーム処方物および脂質含有処方物は、任意の手段（例えば、静脈内投与、経皮投与（例えば、Ｖｕｔｌａ（１９９６）Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．８５：５〜８を参照のこと）、経粘膜投与、または経口投与）によって送達され得る。
【０１２９】
薬学的に受容可能な処方物は、約１％〜約９９．９％の活性な成分（例えば、ペプチドまたはペプチド模倣物）を組み込み得る。薬学的組成物は、従来の周知の滅菌技術によって滅菌され得るか、または濾過滅菌され得る。
【０１３０】
さらなる薬学的処方物および送達システムは、当該分野で公知であり、本発明の方法および組成物に適用可能である（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９９０）１８版，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ；Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ（１９９６）１２版，Ｍｅｒｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ，ＮＪ；Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｓｏｌｉｄ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ，Ｔｅｃｈｎｏｎｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｉｎｃ．，Ｌａｎｃａｓｔｅｒ，Ｐａ．，（１９９３）；およびＰｏｚｎａｎｓｋｙら，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｒ．Ｌ．Ｊｕｌｉａｎｏ編，Ｏｘｆｏｒｄ，Ｎ．Ｙ．（１９８０），２５３〜３１５ページを参照のこと）。
【０１３１】
薬学的処方物は、投与の容易性および投薬量の均一性のために単位投与量形態でパッケージされ得る。「単位投与量形態」とは、本明細書で使用される場合、処置される被験体への投与のための物理的に個々の単位投与量をいい；各単位は、薬学的キャリアまたは賦形剤と組み合わせて、所望の効果を生じる所定量の化合物を含む。
【０１３２】
本発明はさらに、必要に応じて適切なパッケージ材料にパッケージされた本発明の化合物およびその薬学的処方物を含むキットを提供する。キットは、代表的に、ラベルまたはパッケージ挿入物（構成要素の説明、またはその中の構成要素のインビトロ、インビボ、もしくはエキソビボでの使用のための指示書を含む）を備える。キットは、このような構成要素の集合体（例えば、２つ以上の本発明の化合物、または核酸損傷剤もしくは抗増殖剤と組み合わせた本発明の化合物）を含む。
【０１３３】
用語「パッケージ材料」とは、キットの構成要素を収容する物理的構造体をいう。パッケージ材料は、構成要素の滅菌性を維持し得、そして、このような目的に一般的に使用される材料（例えば、紙、波形繊維、ガラス、プラスチック、ホイル、アンプルなど）から作製され得る。ラベルまたはパッケージ挿入物は、適切な書面での指示書を含み得る。従って、本発明のキットは、本発明の任意の方法においてキット構成要素を使用するためのラベルまたは指示書をさらに備え得る。指示書は、本明細書に記載される本発明の任意の方法（処置方法、検出方法、モニタリング方法または診断方法を含む）を実施するための指示を備える。従って、例えば、キットは、本発明の処置方法において化合物を投与するための指示書と一緒に、パックまたはディスペンサー中に本発明の化合物を含み得る。指示書は、満足のいく臨床的指標もしくは生じ得る任意の有害症状の指標、またはヒト被験体に対する使用について規制機関（例えば、米国食品医薬品局）によって必要とされるさらなる情報をさらに含み得る。
【０１３４】
指示書は、「印刷物」（例えば、キット内かまたはキットに添付された、紙もしくは厚紙上にあっても、またはキットもしくはパッケージ材料に添付されたラベル上にあっても、または、キットの構成要素を含むバイアルもしくは管に添付されてもよい。指示書はさらに、コンピューター読み取り可能媒体（例えば、ディスク（フロッピー（登録商標）ディスクまたはハードディスク）、光学ＣＤ（例えば、ＣＤ−ＲＯＭ／ＲＡＭまたはＤＶＤ−ＲＯＭ／ＲＡＭ）、磁気テープ、電気的記憶媒体（例えば、ＲＡＭおよびＲＯＭ）、ＩＣチップおよびこれらのこのような磁気／光学記憶媒体の混成物）上に含まれ得る。
【０１３５】
本発明のキットは、薬学的処方物中に緩衝剤、または保存剤または安定化剤をさらに含み得る。キットの各構成要素は、個々の容器内に封入され得、そして全ての種々の容器は、単一のパッケージ内にあり得る。本発明のキットは、冷却保存用として設計され得る。
以下は、本明細書で使用される略号である：
Ｃｈａ：シクロヘキシルアラニン
Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ：フルオリドが、フェニルアラニンのフェニル残基上の２位，３位，４位，５位，６位にある
Ｆ：フッ化物
Ｂｐａ：ベンゾイルフェニルアラニン
Ｎａｌ（２）：２−ナフチル−アラニル
Ａｌａ（３−Ｂｚｔ）：（３−ベンゾチエニル）−アラニン
Ｎａｌ（１）：１−ナフチル−アラニル
Ｄｐｈ：ジフェニル−アラニン
Ａｌａ（ｔＢｕ）：ｔ−ブチル−アラニル
Ｃｙｓ（ｔＢｕ）：ｔ−ブチル−システイン
Ｐｈｅ−３，４，５−Ｆ：フルオリドが、フェニルアラニンのフェニル上の３位，４位，５位にある
Ｐｈｅ−４ＣＦ３：ＣＦ３が、フェニルアラニンのフェニル残基上の４位にある
Ｐｈｅ−３Ｂｒ，４ＣＩ，５Ｂｒ：ブロミドが、フェニルアラニンのフェニル上の３位にあり，クロリドが、フェニルアラニンのフェニル上の４位にあり，ブロミドが、フェニルアラニンのフェニル上の５位にある
Ｐｈｅ−４ＣＩ：クロリドが、フェニルアラニンのフェニル上の４位にある
Ｐｌ，Ｐ２，Ｐ３，Ｐ４，Ｐ５，Ｐ６などおよび（Ｐｌ，Ｐ２，Ｐ３，Ｐ４，Ｐ５，Ｐ６など）；およびＰ７，Ｐ８，Ｐ９，Ｐ１０，Ｐｌｌ，Ｐ１２など，および（Ｐ７，Ｐ８，Ｐ９，Ｐ１０，Ｐ１１，Ｐ１２など）：それぞれ、Ｐｌ，Ｐ２，Ｐ３，Ｐ４，Ｐ５，Ｐ６などの連続配列；およびＰ７，Ｐ８，Ｐ９，Ｐ１０，Ｐ１１，Ｐ１２などの連続配列。
【０１３６】
他に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する分野の当業者によって一般的に理解されるような同じ意味を有する。本明細書に記載されたものと類似または等価な方法および材料は、本発明の実施または試験において使用され得るが、適切な方法および材料は、本明細書に記載される。
【０１３７】
本明細書で引用される全ての刊行物、特許および他の参考文献は、それらの全体が参考として援用される。矛盾する場合は、定義を含む本明細書が制御する。
【０１３８】
本明細書で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎｄ」、「ｔｈｅ」および「ｉｓ」は、文脈が明らかに別のものを示していない限り、複数形を含む。従って、例えば、「化合物」に対する言及は、複数の化合物を含み、「残基」または「アミノ酸」に対する言及は、１つ以上の残基およびアミノ酸に対する言及を含む。
【０１３９】
本発明の多数の実施形態が、記載されている。しかしながら、種々の改変が、本発明の精神および範囲から逸脱することなくなされ得ることが理解される。従って、以下の実施例は、特許請求の範囲に記載された本発明の範囲を実証するが、限定はしないことが意図される。
【実施例】
【０１４０】
（実施例１）
本実施例は、材料および幾つかの方法を記載する。本実施例はまた、分析されたペプチド／ペプチド模倣物の配列を記載する。
【０１４１】
（化学物質および試薬）ブレオマイシンとは、Ｗａｋｏ  Ｐｕｒｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．（Ｏｓａｋａ，Ｊａｐａｎ）から購入し、それを、１０ｍｇ／ｍｌまで蒸留したＨ２Ｏ中に溶解した。ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）およびアドリアマイシンを、Ｓｉｇｍａ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から購入した。
【０１４２】
（細胞培養）ヒトＴ細胞白血球由来細胞株であるＪｕｒｋｅｔを、１０％ウシ胎仔血清（ＩＢＬ：Ｉｍｍｕｎｏ−Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｇｕｎｍａ，Ｊａｐａｎ）を補充された、ＲＰＭＩ  １６４０（Ｓｉｇｍａ）中で３７℃／５％ＣＯ２で培養した。ヒト膵臓癌由来細胞株であるＭＩＡＰａＣａ２を、１０％ウシ胎仔血清を補充したＤＭＥＭ中で３７℃／５％ＣＯ２で培養した。
【０１４３】
（細胞周期分析）ブレオマイシンまたはアドリアマイシンにより処理した細胞の細胞周期状態を、Ｋａｗａｂｅ（１９９７）Ｎａｔｕｒｅ  ３８５：４５４−４５８によって記載されるようにフローサイトメトリーによって分析した。簡単に言うと、２百万個の細胞を再懸濁し、そして２００μｌのＫｒｉｓｈａｎ’ｓ溶液（０．１％クエン酸ナトリウム，５０μｇ／ｍｌ  ＰＩ，２０μｇ／ｍｌ  ＲＮａｓｅ  Ａおよび０．５％  ＮＰ−４０）中、４℃で１時間インキュベートし、そしてプログラムＣＥＬＬＱｕｅｓｔＴＭ（Ｂｅｃｋｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）を用いて、フローサイトメトリー、ＦＡＣＳｃａｎＴＭ（Ｂｅｃｋｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ）によって分析した。
【０１４４】
（表１．例示的なペプチド／ペプチド模倣物の配列および対応するコード名）
【０１４５】
【表１−１】
2005529845.tif 000014
【０１４６】
【表１−２】
2005529845.tif 000015
（実施例２）
本実施例は、種々のペプチドのＧ２抑制活性および活性に対する種々の配列置換の影響（配列長の減少の影響を含む）を示すデータを記載する。
【０１４７】
Ｇ２チェックポイント抑制のフローサイトメトリー分析を、ヒト白血球由来Ｊｕｒｋｅｔ細胞株を使用して実施した。簡単には、培養した細胞を、種々の用量のペプチド／ペプチド模倣物および４０μｇ／ｍｌのブレオマイシンで２４時間処理した。細胞のＤＮＡをヨウ化プロピジウムにより染色し、フローサイトメトリーによって分析した。これらの結果を、表２にまとめる。
【０１４８】
ブレオマイシン処理したＪｕｒｋｅｔ細胞株に対して使用した場合の各ペプチド／ペプチド模倣物の用量応答曲線は、図１、５、６、７、８、１１および１２に示される；Ｙ軸は、処理の２４時間後のＧ２／Ｍ  Ｊｕｒｋｅｔ細胞％を示す。
【０１４９】
化合物によるＭ期チェックポイント抑制のフローサイトメトリー分析を、コルチシン（０．５μｇ／ｍｌまたは５μｇ／ｍｌ）および種々の用量のペプチド／ペプチド模倣物により２４時間処理したヒトＴ細胞白血球Ｊｕｒｋｅｔ細胞株を用いて実施した（図１２）。細胞のＤＮＡを染色して、上記のようにフローサイトメトリーによって分析した。これらの結果をまた、表２にまとめる。
【０１５０】
コルチシン処理したＪｕｒｋｅｔ細胞に対して使用した場合の各ペプチド／ペプチド模倣物の用量応答曲線は、図２および１４に示される；Ｙ軸は、処理の２４時間後のＧ２／Ｍ  Ｊｕｒｋｅｔ細胞％を示す。
【０１５１】
（表２．Ｇ２チェックポイント抑制または副作用を示す化合物の用量）
【０１５２】
【表２】
2005529845.tif 000016
「単独で使用された場合の副作用の出現」は、Ｊｕｒｋｅｔ細胞周期妨害（すなわち、有意な量のＳｕｂＧ１細胞（死細胞）または各々のＤＮＡ含量が通常より多くの変化している細胞の出現）を生じたペプチド／ペプチド模倣物用量を示す。例えば、Ｇ１細胞は、通常、ＦＡＣＳ分析において鋭いピークを呈するが、処理後、細胞周期が妨害された場合、そのピークは、より幅広く、かつより低下する。このことは、不適切な細胞周期進行または細胞死の開始を示す。「Ｇ２抑制用量」は、２４時間処理した後に検出可能なＧ２チェックポイント抑制活性を生成した４０μｇ／ｍｌのブレオマイシンによるペプチド／ペプチド模倣物用量を示す。「コルチシンとともに使用された場合の副作用の出現」は、２４時間の処理後にＪｕｒｋｅｔ細胞周期妨害を生じた５μｇ／ｍｌコルチシンによるペプチド／ペプチド模倣物用量を示す。
【０１５３】
シスプラチンと組み合わされた場合のＣＢＰ５０１のＧ２チェックポイント抑制活性を、種々の細胞株において研究した。簡単には、シスプラチン（３μｇ／ｍｌ）およびＣＢＰ５０１（０．４μＭ、２μＭおよび１０μＭ）を、同時に細胞培養物に加え、これを３７℃で３時間５％  ＣＯ２とともにインキュベートした。培地を吸引し、これらの化合物を含まない新鮮な培地を加え、そして細胞をさらに４５時間インキュベートした。浮遊細胞を含む細胞をトリプシン−ＥＤＴＡ溶液を用いて収集し、Ｋｒｉｓｈａｎ’ｓ溶液とともにインキュベートして、前に記載したようにフローサイトメトリーによってＤＮＡ含量について分析した。これらの結果を表３にまとめる。ＨＵＶＥＣ以外の陰をつけた強調は、Ｇ２集団の有意な損失および増加したｓｕｂＧ１集団を有する細胞株を示し、これは、Ｇ２チェックポイント抑制およびＣＢＰ５０１によるシスプラチンに対する感作を示す。少なくとも５０μＭ  ＣＢＰ５０１まで、ＨＵＶＥＣ細胞（これらは、正常Ｇ１チェックポイントを有する細胞である）が感作されなかったという観察は、ＣＢＰ５０１が、非特異的ではなくＧ２チェックポイントに特異的であることを示す。
【０１５４】
（表３．種々の細胞株に対するＣＢＰ５０１のＧ２チェックポイント抑制用量）
【０１５５】
【表３】
2005529845.tif 000017
ブレオマイシン（Ｂｌｅｏ）またはアドリアマイシン（ＡＤＲ）により処理したヒト膵臓癌由来細胞株ＭＩＡＰａＣａ２に対する異なる用量での種々の化合物のＧ２チェックポイント抑制活性を研究した。簡単には、細胞を、化合物およびブレオマイシン（１０μｇ／ｍｌ）またはアドリアマイシン（１μｇ／ｍｌ）とともに３時間インキュベートした。培地を交換し、さらに２１時間インキュベートした。収集した細胞を、ヨウ化プロピウムによってＤＮＡについて染色し、前に記載したようにフローサイトメトリーにより分析した。ｓｕｂＧ１細胞集団の％を図３において死細胞として示す。結果は、ＣＢＰ５０１は、ブレオマイシンおよびアドリアマイシンの両方に対してＭＩＡＰａＣａ２細胞を、用量依存様式で感作したことを示す。
【０１５６】
図４Ａおよび４Ｃは、複数のペプチド対（ここで、一方のアミノ酸残基は、他方のアミノ酸残基とは異なる）を用いて実施したＧ２チェックポイント抑制活性の要約である。
これらのペプチドのＧ２チェックポイント抑制活性を、上記のようにブレオマイシン処理したＪｕｒｋｅｔ細胞を用いて分析した。図４Ｂは、複数のペプチド対（ここで、一方のアミノ酸残基は、他方のアミノ酸残基とは異なる）を用いて実施したＭチェックポイント抑制活性および／または非特異的毒性分析の要約である。これらのペプチドのＭチェックポイント抑制活性および／または非特異的毒性を、上記のようにコルチシン処理したＪｕｒｋｅｔ細胞を用いて分析した。
【０１５７】
ブレオマイシンで処理した細胞に対する、異なる用量の種々のアルギニンリッチな配列のＧ２チェックポイント抑制活性を研究した。簡単には、ブレオマイシン（４０μｇ／ｍｌ）を含むＪｕｒｋａｔ細胞の培養培地に０．２μｇ／ｍｌ、０．３９μｇ／ｍｌ、０．７８μｇ／ｍｌ、１．５６μｇ／ｍｌ、３．１２５μｇ／ｍｌ、６．２５μｇ／ｍｌ、１２．５μｇ／ｍｌ、２５μｇ／ｍｌおよび５０μｇ／ｍｌのペプチドを添加した。引き続いて、２４時間後に細胞を回収し、Ｋｒｉｓｈａｎ溶液で染色し、以前に記載されたようにフローサイトメトリーで分析した。％Ｇ２／Ｍ細胞（Ｙ軸）をペプチド用量（Ｘ軸）に対してプロットした（図５）。このデータは、「（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号：１３７）」塩基性残基リッチな配列が、より少ないかまたはより多い数の残基を有する配列と比較して最もよい配列であることを示す。
【０１５８】
ブレオマイシンで処理した細胞に対する、異なる用量での（Ｄ−Ｂｐａ）を有さないペプチドのＧ２チェックポイント抑制活性を研究した。簡単には、ブレオマイシン（４０μｇ／ｍｌ）を含むＪｕｒｋａｔ細胞の培養培地に０．２μｇ／ｍｌ、０．３９μｇ／ｍｌ、０．７８μｇ／ｍｌ、１．５６μｇ／ｍｌ、３．１２５μｇ／ｍｌ、６．２５μｇ／ｍｌ、１２．５μｇ／ｍｌ、２５μｇ／ｍｌおよび５０μｇ／ｍｌのペプチドを添加した。引き続いて、細胞を回収し、以前に記載されたようにフローサイトメトリーで分析した。％Ｇ２／Ｍ細胞（Ｙ軸）をペプチド用量（Ｘ軸）に対してプロットした（図６）。この結果は、配列（Ｔｙｒ）（Ｓｅｒ）（Ｐｒｏ）（Ｔｒｐ）（Ｓｅｒ）（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６Ｆ）（Ｃｈａ）（配列番号：１３８）が、配列（Ｂｐａ）（Ｓｅｒ）（Ｔｒｐ）（Ｓｅｒ）（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６Ｆ）（Ｃｈａ）（配列番号：１３９）に対して類似するＧ２チェックポイント抑制活性を有することを示す。
【０１５９】
異なる用量でブレオマイシンで処理した細胞のアルギニンリッチな配列およびリジンリッチな配列のＧ２チェックポイント抑制活性を研究した。簡単には、ブレオマイシン（４０μｇ／ｍｌ）を含むＪｕｒｋａｔ細胞の培養培地に示される用量（Ｘ軸）のペプチドを添加した。引き続いて、細胞を回収し、以前に記載されたようにフローサイトメトリーで分析した。％Ｇ２／Ｍ細胞（Ｙ軸）をペプチド用量（Ｘ軸）に対してプロットした（図７）。結果は、塩基性アミノ酸リッチな配列について、Ａｒｇ配列がＬｙｓ配列よりもよい活性を提供し、Ｇｌｎがこれらの配列の機能に必須でないように見えることを示す。
【０１６０】
アルギニンリッチな領域の位置が変化する配列のＧ２チェックポイント抑制活性を研究した。簡単には、２４時間にわたって、ブレオマイシン（４０μｇ／ｍｌ）を含むＪｕｒｋａｔ細胞の培養培地に示される用量（Ｘ軸）のペプチドを添加した。引き続いて、細胞を回収し、以前に記載されたようにフローサイトメトリーで分析した。％Ｇ２／Ｍ細胞（Ｙ軸）をペプチド用量に対してプロットした（図８）。
【０１６１】
データは、このペプチドのＧ２抑制活性がアルギニンリッチな領域の位置を変化することによって有意には変更されないことを示す。さらに、ＣＢＰ５０１は水溶性であったが、ＣＢＰ５１１は水溶性でなかった。この違いは、いくつかの系が水に不溶性の化合物を好むため、特定の薬物送達系に有利であり得る。
【０１６２】
図９は、種々のペプチド対で実施された分析の概要を示し、ここで、１つのアミノ酸残基のみが対の間で異なった。これらのペプチドのＧ２チェックポイント抑制活性を記載のようにブレオマイシン処理したＪｕｒｋａｔ細胞を使用して分析した。
【０１６３】
各アミノ酸のサイズ、電荷および疎水性が、その配列がいかに効率的に標的分子に適合するかを決定する。ペプチドまたはペプチド模倣物の側鎖は、自由に移動し、１つまたは２つの好ましくない側鎖を有してさえもペプチドまたはペプチド模倣物は標的分子のポケットまたは溝に適合し得る。この概要は、各側鎖について好ましいサイズが存在することを示し、このことは、各側鎖に対する標的タンパク質の結合領域（ポケットまたは溝）のサイズを示唆する。例えば、環状構造（例えば、ベンゼン、インドールおよびシクロヘキサン）を有する側鎖は、Ｇ２抑制またはＭ抑制の強さおよび／または非特異的な毒性を決定する；図９および４を参照のこと、ここで、５員より大きい環状構造はＧ２抑制活性に影響を及ぼし、Ｐ１およびＰ２の中等度のサイズはＧ２抑制活性を増加するが、大き過ぎる構造（Ｐ１、Ｐ５およびＰ６）は、Ｍ抑制および／または非特異的毒性を増加する。
【０１６４】
環状構造を有さない側鎖は、中性のように見える。従って、よりよい活性を得るために、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ４およびＰ６の適切なサイズの環状構造ならびにＰ３およびＰ５の非環状構造かまたは６員未満の環状構造のいずれかが望ましい。Ｐ１、Ｐ２およびＰ６についての適切な環は、５員または６員のいずれかの２環を縮合した１〜６員環である。Ｐ４について、適切なサイズの環は、２つの環の縮合であり、その各々は、５員または６員である。従って、Ｐ１について、ＣｈａまたはＮａｌ（２）が最も適合するように見え；Ｐ２については、Ｐｈｅ−２，３，４，５，６Ｆ、Ｐｈｅ−３，４，５ＦまたはＰｈｅ−ＣＦ３が最良であるようである。これらの側鎖サイズは、標的分子におけるこの領域が相互作用する位置に２つのポケットかまたは１つの大きなポケットのいずれかが存在することを示す。Ｐ３およびＰ５について、小さな側鎖（例えば、ＳｅｒまたはＰｒｏ）が受容可能であり、そして、より大きな側鎖（例えば、Ａｒｇ）がまた受容可能であり、このことは、標的分子のこの領域にはポケットが存在せず、従って、側鎖は単に標的に対向して置かれ得ることを示す。しかし、環状構造は、ペプチドまたはペプチド模倣物が別の分子（すなわち標的分子以外）と相互作用させ得ることが可能であり、このことは、次に、副作用を増やし得る。Ｐ６について、ＢｐａまたはＳｅｒ−ＴｙｒがＴｙｒ単独またはより小さい側鎖よりも良いように見える（標的内に水平に横たわるより深い溝を示す）。Ｐ４対する残基の大きさに基づくと、標的内に、Ｐ４についての浅くてより広いポケットがまた存在し得る。
【０１６５】
以下のペプチドを、Ｊｕｒｋａｔおよびブレオマイシンを使用して、記載のように分析した。ペプチドの配列は以下の通りである：
【０１６６】
【数１２】
2005529845.tif 000018
この結果は、ＣＢＰ７００、７０１、７０２、７０３が他の例示的なペプチドよりも短いが、有意なＧ２チェックポイント抑制活性を有する他のペプチドに匹敵する、Ｇ２チェックポイント抑制活性を保持することを示す（図１１）。
【０１６７】
ＣＢ５０１によるＧ２チェックポイント抑制活性と非特異的毒性（Ｍチェックポイント抑制）との間の比較を行った。簡単には、Ｊｕｒｋａｔ細胞を、Ｇ２チェックポイント抑制活性および非特異的毒性のそれぞれについて、４０μｇ／ｍｌのブレオマイシンまたは０．５μｇ／ｍｌのコルヒチンで処理した。処理した細胞の各々のＤＮＡ量を、以前に記載されるように、フローサイトメトリーにより分析した。データは、Ｇ２チェックポイントがＣＢＰ５０１の用量依存する様式で抑制されたのに対し、非特異的毒性は、５０μＭ（Ｍ期阻止細胞の未変化割合によって決定した）までのペプチドでは存在しなかったことを示す（図１２）。
【０１６８】
（実施例３）
この実施例は、ペプチド/ペプチド模倣物のキナーゼ阻害活性および種々のペプチドの血清安定性分析を記載する。
【０１６９】
２つのキナーゼ（Ｃｈｋ１およびＣｈｋ２）がＧ２チェックポイント機構に重要であるため、両方の酵素のキナーゼ阻害分析を実施した。インビトロキナーゼ阻害分析を、「ＰｅｐＴａｇ（登録商標）Ｎｏｎ−Ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａｓｓａｙｓ」（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、ＰＫＣの代わりに精製ＣＨＫ２キナーゼを使用した以外は、会社のプロトコルに従って実施した。精製ＰＫＣは、Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．より購入した。これらの結果を表４Ａに示す。
【０１７０】
（表４Ａ  化合物のキナーゼ阻害分析）
【０１７１】
【表４Ａ】
2005529845.tif 000019
インビトロキナーゼ阻害分析を、ＣｙｃＬｅｘ，Ｃｏ．Ｌｔｄ．（Ｎａｇａｎｏ，Ｊａｐａｎ）により実施した。簡単には、ヒスチジンタグを有するバキュロウイルス由来の組換えヒト全長Ｃｈｋ１、またはＧＳＴと融合したＥ．Ｃｏｌｉ由来の組換えヒト全長Ｃｈｋ２をキナーゼとして使用した。Ｅ．Ｃｏｌｉ由来組換えＧＳＴ−Ｃｄｃ２５Ｃ（アミノ酸１６７〜２６７）を基質として使用した。反応条件は、２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ−ＫＯＨ（ｐＨ７．５）、１ｍＭ  ＤＴＴ、８０μｇ／ｍｌ  ＢＳＡ、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２および５０ｍＭ  ＡＴＰ（３０℃で６０分間）であった。ＧＳＴ−Ｃｄｃ２５Ｃのセリン２１６のリン酸化を、酵素結合免疫アッセイを用い、抗Ｃｄｃ２５Ｃ−リン酸化Ｓ２１６抗体により検出した。これらの結果を表４Ｂに示す。
【０１７２】
（表４Ｂ  ペプチドのキナーゼ阻害分析）
【０１７３】
【表４Ｂ】
2005529845.tif 000020
このデータは、Ｃｈｋ１とＣｈｋ２のキナーゼ阻害の両方がＧ２抑制用量よりも高い用量（ＣＢＰ５００、５０１、５０５、５０６、６０３によるＧ２抑制についてのＩＣ５０は、全て１μＭ未満である）で生じることを示す。これらの結果は、これらのペプチドがCｈｋ１／２分子を阻害するのに加え、作用の機構を有することを示唆する。あるいは、ペプチドはおそらく細胞内で蓄積され、その結果、この濃度が取り囲む培地よりも細胞内で高くなる。
【０１７４】
マウスおよびヒトの血清中でのペプチドの安定性を決定するために、血清分析を行った。簡単には、ペプチド（１０ｍＭまたは２．５ｍＭ）を、新しく調製したヒト血清とともに、３７℃で１時間インキュベートした。ＣＢＰ５０１（１０ｍＭ）を、新しく調製したマウス血清とともに、３７℃で１時間インキュベートした。Ｊｕｒｋａｔ細胞をペプチドおよびブレオマイシン（４０μｇ／ｍｌ）を伴ってかまたは伴わないで、血清で処理し、２４時間インキュベートした。Ｇ２期細胞の集団を、以前に記載されるようにフローサイトメトリーにより決定した。血清処理ペプチドの残存Ｇ２チェックポイント抑制活性を、処理血清のＧ２細胞％と培地処理ペプチド、ブレオマイシンおよびＪｕｒｋａｔ細胞で作製した標準曲線とを比較することにより決定した（表５Ａ）。残存ＣＢＰ５０１量を、エタノール処理での除タンパクの後にＨＰＬＣにより決定した（表５Ｂ）。このデータは、ｄ型アミノ酸（例えば、ＣＢＰ５０１およびＣＢＰ６０３）を有するペプチドが、ｌ型アミノ酸（例えば、ＣＢＰ４１３）を有するペプチドよりも、血清中で安定であることを示す。
【０１７５】
（表５Ａ  ヒト血清処理分析）
【０１７６】
【表５Ａ】
2005529845.tif 000021
（表５Ｂ  マウス血清処理分析）
【０１７７】
【表５Ｂ】
2005529845.tif 000022
（実施例４）
この実施例は、培養細胞上のＣＢＰ５０１の抗細胞増殖活性を記載する。この実施例はまた、ペプチド／ペプチド模倣物のインビボ活性を示すデータを記載する。
【０１７８】
化合物の抗細胞増殖活性を示すために、培養ＭＩＡＰａＣａ２ヒト膵臓癌細胞を、ＣＢＰ５０１（１０μｍＭ）、シスプラチン（１、３または９μｇ／ｍｌ）およびオキサリプラチン（１、３または９μｇ／ｍｌ）の単独、ならびに組み合せで処理した。簡単には、細胞を１ウェルあたり３００細胞で６ウェルプレートに撒き、一晩インキュベートし、そして、化合物で３時間処理した。培地を交換し、さらに１０日間培養した。引き続き、細胞を７０％メタノールで固定し、０．１％クリスタルバイオレットで染色し、可視化した。コロニー形成分析結果は、ＣＢＰ５０１がシスプラチンとオキサリプラチンの両方のＭＩＡＰａＣａ２細胞に対する細胞傷害活性を増強することを示した。
【０１７９】
正常ヒト臍内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）を用いて同様の研究を行った。正常細胞はコロニーを形成しないので、これらを１ウェルあたり３００細胞の代わりに１ウェルあたり３０００細胞を撒いた。この結果は、ペプチド単独ではが正常細胞の増殖を妨害しないか、またはペプチドがシスプラチンおよびオキサリプラチンの細胞に対する細胞傷害活性を増強しないかのいずれかを示す。従って、ペプチドは、核酸傷害処置に感作された過剰増殖細胞（ｈｙｐｅｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ  ｃｅｌｌ）（例えば癌細胞）とは対照的に、核酸傷害処置を受けた正常細胞に対する有意なＧ２抑制活性を示すようにはみえない。この結果は、正常細胞ではなく、感作した増殖細胞における、核酸傷害処置に対するペプチドの特異性を示す。
【０１８０】
（表６  アラマーブルー（ａｌａｍａｒ  ｂｌｕｅ）を用いたＭＩＡＰａＣａ２の増殖阻害分析）
【０１８１】
【表６】
2005529845.tif 000023
アラマーブルー分析を行い、シスプラチンを伴うおよび伴わないＣＢＰ５０１の増殖阻害活性を分析した。簡単には、ＭＩＡＰａＣａ２細胞を１、３、１０、３０、１００μＭのシスプラチン、または１０μＭのシスプラチンを伴うかまたは伴わない０．２２、０．６７、２、６および１８μＭのＣＢＰ５０１に、二連様式で１ウェルあたり２５００細胞で、９６ウェルプレートにて３時間曝露した。培地を交換し、さらに２４、４８または７２時間インキュベートした。インキュベーションの後、２０μｌのアラマーブルー  ９０％試薬を各ウェルに添加し、さらに６時間、蛍光強度により細胞生存度を検出するためにインキュベートした。蛍光強度をＳｐｅｃｔｒａｆｌｕｏｒ  Ｐｌｕｓプレートリーダーを使用して、５３０ｎｍ励起および５９０ｎｍ発光で測定した。ＩＣ５０を算出した（表６）。
【０１８２】
この研究は、ＣＢＰ５０１単独がモル用量のシスプラチンよりも良好に細胞増殖を阻害することを示す。ＣＢＰ５０１は、１０μＭのシスプラチン（およそ癌処置のために使用されるシスプラチンの量である）と組合された場合、より低い用量で細胞増殖を抑制した。さらに、ＣＢＰ５０１の増殖抑制活性は、シスプラチンよりも長かった；７２時間でのＩＣ５０は、シスプラチンよりもＣＢＰ５０１を使用する場合の方がより良好であった。
【０１８３】
ＣＢＰ５０１のインビボ半減期を、ＣＢＰ５０１の腹腔内注入（４０ｍｇ／ｋｇ）の、１、３および６時間後のマウス血清中のＣＢＰ５０１を定量することにより決定した。残存するインタクトなＣＢＰ５０１の量を、注入したマウスから採取したマウス血清をエタノール処置により脱タンパクした後に、ＨＰＬＣにより決定した（表７）。
【０１８４】
（表７  ＣＢＰ５０１のインビボ半減期）
【０１８５】
【表７】
2005529845.tif 000024
ペプチドの耐性を決定するために、１０匹のマウスの群にＣＢＰ５０１（５、８または１０ｍｇ／ｋｇ）を静脈内に一度かまたはＣＢＰ５０１（５０、８０または１００ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内に一度、注入した。注入したマウスを、その生存について１週間観察した（表８）。
【０１８６】
（表８  単回注入によるマウスの最大耐用量）
【０１８７】
【表８】
2005529845.tif 000025
化合物のインビボ効力を検討するために、ＭＩＡＰａＣａ２ヒト膵臓癌細胞をｓｃｉｄマウスに皮下移植した。原発腫瘍のサイズが０．１ｃｍ３以上（例えば、直径７または８ｍｍ）になったときに処置を開始した（０日目）。ＣＤＤＰ（３ｍｇ／ｋｇ）およびＣＢＰ５０１（１０または４０ｍｇ／ｋｇ）を単独でか組み合せで腹腔内投与した。ノギスを用いて１週間に３回腫瘍サイズを測定し、体積を以下の式：
重量（ｍｇ）＝［幅（ｍｍ）２×長さ（ｍｍ）］／２
を用いて計算した。各処置群に対する平均腫瘍サイズを処置開始後の日数に対してプロットする（ｎ＝４）（図１０）。
【０１８８】
この結果は、ＣＢＰ５０１処置単独がインビボでヒト膵臓癌細胞の増殖を抑制することを示す。この結果はさらに、ＣＢＰ５０１がシスプラチンの抗腫瘍活性を増加したことを示す。
【図面の簡単な説明】
【０１８９】
【図１】図１は、ブレオマイシン処理したジャーカット細胞に対して使用した場合の、各化合物の用量応答曲線を示す。Ｘ軸は、用量を示し、そしてＹ軸は、処理後のＧ２／Ｍ細胞（％）を示す。
【図２】図２は、コルヒチン処理したジャーカット細胞に対して使用した場合の、各化合物の用量応答曲線を示す。Ｘ軸は、用量を示し、そしてＹ軸は、処理後のＧ２／Ｍ細胞（％）を示す。
【図３】図３Ａおよび３Ｂ。種々の用量の化合物で、（Ａ）ブレオマイシン（Ｂｌｅｏ）処理または（Ｂ）アドリアマイシン（ＡＤＲ）処理した、ヒト膵臓癌由来細胞株ＭＩＡＰａＣａ２。収集した細胞を、細胞のＤＮＡについて染色し、そしてフローサイトメトリーを用いて分析した。Ｇ１下の細胞集団のパーセンテージを、死細胞として示す。
【図４】図４Ａ〜４Ｃは、Ｇ２チェックポイント抑制剤（ｌ−Ｇｌｙ）（ｌ−Ａｒｇ）（ｌ−Ｌｙｓ）（ｌ−Ｌｙｓ）（ｌ−Ａｒｇ）（ｌ−Ａｒｇ）（ｌ−Ｇｌｎ）（ｌ−Ａｒｇ）（ｌ−Ａｒｇ）（ｌ−Ｃｈａ）（ｌ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｌ−Ａｒｇ）（ｌ−Ｓｅｒ）（ｌ−Ｐｒｏ）（ｌ−Ｓｅｒ）（ｌ−Ｔｙｒ）（ｌ−Ｔｙｒ）（配列番号７８）の、構造活性相関の説明図である：（Ａ）ブレオマイシン処理したジャーカット細胞における、１−Ｃｈａのアミノ酸置換のＧ２チェックポイント抑制活性を順番で示す、［ｌ−Ｃｈａ＝ｌ−Ｎａｌ（２）］  ＞  ［ｌ−Ａｌａ（３−Ｂｚｔ）＝ｌ−Ｎａｌ（ｌ）＝ｌ−Ｔｒｐ＝ｌ−Ｄｐｈ］  ＞  ［ｌ−Ａｌａ（ｔＢｕ）＝Ｃｙｓ（ｔＢｕ）＝Ｌｅｕ］；（Ｂ）コルヒチン処理したジャーカット細胞における、１−Ｃｈａのアミノ酸置換のＭ期チェックポイント抑制活性および／または非特異的毒性を順番で示す、［Ａｌａ（３−Ｂｚｔ）＝ｌ−Ｎａｌ（ｌ）＝ｌ−Ｄｐｈ］  ＞  ［ｌ−Ｃｈａ＝ｌ−Ｎａｌ（２）］；（Ｃ）ｌ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆのアミノ酸置換のＧ２チェックポイント抑制活性を順番で示す、ｌ−（Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）＝ｌ−（Ｐｈｅ−３，４，５−Ｆ）＝ｌ−（Ｐｈｅ−４ＣＦ３）］  ＞  ［ｌ−（Ｐｈｅ−３Ｂｒ，４Ｃｌ，５Ｂｒ）＝ｌ−（Ｐｈｅ−４Ｃｌ）＝ｌ−Ｔｙｒ］。
【図５】図５は、種々のアルギニンリッチ配列のＧ２抑制活性を示す。示されたペプチドを、ブレオマイシンとともに、またはブレオマイシンを用いずに、ジャーカット細胞に添加した。Ｇ２／Ｍ細胞のパーセントを、Ｙ軸に示す。Ｘ軸は、以下のとおりである：１、ブレオマイシン単独；２、０．２μｇ／ｍｌ；３、０．３９μｇ／ｍｌ；４、０．７８μｇ／ｍｌ；５、１．５６μｇ／ｍｌ；６、３．１２５μｇ／ｍｌ；７、６．２５μｇ／ｍｌ；８、１２．５μｇ／ｍｌ；９、２５μｇ／ｍｌ；および１０、５０μｇ／ｍｌ。ペプチド配列は以下の通りである：ｒｒｒｑｒｒｋｋｒ、（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｌｙｓ）（ｄ−Ｌｙｓ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号７９）；ＣＢＰ５０１、（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号８０）；ＴＡＴなし（ｎｏ  ＴＡＴ）、（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号８１）；ｒｑｒｒ、（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号８２）；ｒｒｑｒｒ、（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号８３）；ｒｒｒｑ、（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（配列番号８４）；およびｒｒｒｑｒ、（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号８５）。
【図６】図６は、（ｄ−Ｂｐａ）を有さない種々のペプチドのＧ２抑制活性を示す。示されたペプチドを、ブレオマイシンとともに、またはブレオマイシンを用いずに、ジャーカット細胞に添加した。Ｇ２／Ｍ細胞のパーセントを、Ｙ軸に示す。Ｘ軸は、以下のとおりである：１、ブレオマイシン単独；２，０．２μｇ／ｍｌ；３、０．３９μｇ／ｍｌ；４、０．７８μｇ／ｍｌ；５、１．５６μｇ／ｍｌ；６、３．１２５μｇ／ｍｌ；７、６．２５μｇ／ｍｌ；８、１２．５μｇ／ｍｌ；９、２５μｇ／ｍｌ；および１０、５０μｇ／ｍｌ。ペプチド配列は以下のとおりである：ＣＢＰ０、（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号８６）；ＣＢＰ４５１、（ｄ−Ｔｙｒ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｒｏ）（ｌ−Ｔｒｐ）（ｌ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号８７）；ＣＢＰ４５２、（ｄ−Ｔｙｒ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｌ−Ｐｒｏ）（ｌ−Ｔｒｐ）（ｌ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号８８）；およびＣＢＰ５０１、（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号８０）。
【図７】図７は、種々のアルギニンリッチペプチド配列およびリジンリッチペプチド配列のＧ２抑制活性を示す。示されたペプチドを、上記のようにジャーカット細胞に添加した。Ｇ２／Ｍ細胞のパーセントを、計算した（Ｙ軸）。ペプチド配列は、以下のとおりである：ＣＢＰ６０３、（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ４ＮＯ２）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号８９）；ＣＢＰ６０７、（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号９０）；ＣＢＰ６０８、（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号９１）；およびＣＢＰ６０９、（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｌｙｓ）（ｄ−Ｌｙｓ）（ｄ−Ｌｙｓ）（ｄ−Ｌｙｓ）（ｄ−Ｌｙｓ）（ｄ−Ｌｙｓ）（配列番号９２）。
【図８】図８は、配列のアルギニンリッチ部分の位置を改変できることを示す。示されたペプチドを、上記のようにジャーカット細胞に添加した。Ｇ２／Ｍ細胞のパーセントを、計算した（Ｙ軸）。ペプチド配列は、以下のとおりである：ＣＢＰ５０１、（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２、３，４、５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号８０）；ＣＢＰ５１０、（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｂｐａ）（配列番号９３）；ＣＢＰ５１１、（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号９４）；およびＣＢＰ５１２、（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｂｐａ）（配列番号９５）。
【図９】図９は、いくつかの研究された置換ペプチド配列の構造を示す。Ｇ２抑制活性は、明るく網掛けした置換の場合に増加し（＊）、Ｍ期チェックポイント抑制活性および／または非特異的毒性は、暗い網掛けした置換の場合に増加し（＊＊）、そしてその他は、他の置換について、ほぼ同一のままであった。
【図１０】図１０は、CBP501およびシスプラチンを用いて処理した後の、ＳＣＩＤマウスにおける、腫瘍（ヒト膵臓癌腫）増殖の阻害を示す。「０日目」は、処置の開始を示す。各処理群について、標準偏差とともに、平均腫瘍サイズをＹ軸に示し、そして処置開始後の日数をＸ軸に示す。
【図１１】図１１は、上記のように、キナーゼ阻害配列領域、およびＨＩＶ−ＴＡＴ形質導入配列に基づく配列領域を有するペプチドのＧ２抑制活性を示す。Ｇ２／Ｍ細胞のパーセントを、Ｙ軸に示す。Ｘ軸は、以下のとおりである：１、ブレオマイシン単独；２，０．２μｇ／ｍｌ；３、０．３９μｇ／ｍｌ；４、０．７８μｇ／ｍｌ；５、１．５６μｇ／ｍｌ；６、３．１２５μｇ／ｍｌ；７、６．２５μｇ／ｍｌ；８、１２．５μｇ／ｍｌ；９、２５μｇ／ｍｌ；および１０、５０μｇ／ｍｌ。ペプチド配列は以下のとおりである：ＣＢＰ５０１、（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号８０）；ＣＢＰ７００、（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号９６）；ＣＢＰ７０１、（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号９７）；ＣＢＰ７０２、（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号９８）；ＣＢＰ７０３、（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（配列番号９９）。
【図１２】図１２は、Ｇ２抑制分析についてブレオマイシンを用い、そしてＭ抑制活性および／または非特異的毒性についてコルヒチンを用いた、ペプチドのＧ２抑制活性、およびＭ抑制活性、および／または非特異的毒性の間の比較を示す。示したペプチドを、ブレオマイシンまたはコルヒチンとともに、ジャーカット細胞に添加した。Ｇ２／Ｍ細胞のパーセントを、Ｙ軸に示す。Ｘ軸は、以下のとおりである：１、ブレオマイシンまたはコルヒチン単独；２，０．２μｇ／ｍｌ；３、０．３９μｇ／ｍｌ；４，０．７８μｇ／ｍｌ；５、１．５６μｇ／ｍｌ；６、３．１２５μｇ／ｍｌ；７、６．２５μｇ／ｍｌ；８、１２．５μｇ／ｍｌ；９、２５μｇ／ｍｌ；および１０、５０μｇ／ｍｌ。ペプチド配列は、以下の通りである：ＣＢＰ５０１、（ｄ−Ｂｐａ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｔｒｐ）（ｄ−Ｓｅｒ）（ｄ−Ｐｈｅ−２，３，４，５，６−Ｆ）（ｄ−Ｃｈａ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ｇｌｎ）（ｄ−Ａｒｇ）（ｄ−Ａｒｇ）（配列番号８０）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
2005529845.tif 000037
【図１１】
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【図１２】
2005529845.tif 000039
【国際調査報告】
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