(57)【要約】  本発明は、ポルフィラ属紅藻の含水アルコール抽出物を含有するまたはそれからなることを特徴とする、細胞に対して物理的、生理学的拘束または生理病理学的侵襲があった場合にストレス蛋白質の合成を誘発できる製品を対象とする。本発明は、該製品ならびにそれの栄養補充物または化粧品組成物への使用に関するものである。
2005508999.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
紅藻の含水アルコール抽出物を含有するかまたはそれからなることを特徴とする、細胞に対して物理的、生理的拘束作用または病態生理学的侵襲があったときにストレス蛋白質の合成を誘発できる製品。
【請求項２】
紅藻がアマノリ（Ｐｏｒｐｈｙｒａ）属、好ましくはポルフィラ・ウンビリカリス（Ｐｏｒｐｈｙｒａ  ｕｍｂｉｌｉｃａｌｉｓ）種に属することを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の製品。
【請求項３】
該藻の抽出物が下記の化合物を含有していることを特徴とする特許請求の範囲第１項または第２項に記載の製品：
−タウリンおよび誘導体：１〜５％、
−フロリドシドおよび誘導体：１０〜２５％、
−カロテノイド類およびＡＧＰＩ、
−水溶性ビタミン類、
−遊離アミノ酸類および誘導体、
−色素。
【請求項４】
製品の全重量に対して１〜３０重量％の紅藻抽出物を含有することを特徴とする特許請求の範囲第１項〜第３項のいずれかに記載の製品。
【請求項５】
製品の全重量に対して１５〜２５重量％、好ましくは約２０重量％の紅藻抽出物を含有することを特徴とする特許請求の範囲第４項に記載の製品。
【請求項６】
マルトデキストリン類を含有することを特徴とする特許請求の範囲第５項に記載の製品。
【請求項７】
グリセリンを含有することを特徴とする特許請求の範囲第５項に記載の製品。
【請求項８】
紅藻の含水アルコール抽出物を３〜２０％含有することを特徴とする特許請求の範囲第４項に記載の製品。
【請求項９】
化粧品に使用しうる保存剤を含有し、滅菌濾過（０．２μ）に付されていることを特徴とする特許請求の範囲第８項に記載の製品。
【請求項１０】
細胞に対して物理的拘束がある場合にストレス蛋白質の合成を誘発することを目的とした栄養摂取用組成物または化粧品組成物の調製のための、特許請求の範囲第１項〜第９項のいずれかに記載の製品の使用。
【請求項１１】
物理的侵襲、とくに熱ショックまたはＵＶ光線に対して細胞を保護することを目的とした栄養摂取用組成物または化粧品組成物の調製のための、特許請求の範囲第１項〜第９項のいずれかに記載の製品の使用。
【請求項１２】
生理的ストレスおよび病態生理学的侵襲、とりわけ感染および炎症に対して細胞を保護することを目的とした栄養摂取用組成物または化粧品組成物の調製のための、特許請求の範囲第１項〜第９項のいずれかに記載の製品の使用。
【請求項１３】
該栄養摂取用組成物が、１回の摂取当り、該製品１０〜１０００ｍｇ、好ましくは２５〜２５０ｍｇをもたらすものであることを特徴とする特許請求の範囲第１０項〜第１２項のいずれかに記載の使用。
【請求項１４】
該化粧品組成物が、該製品を０．１〜５重量％、好ましくは０．５〜２重量％含有していることを特徴とする特許請求の範囲第１０項〜第１２項のいずれかに記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、栄養補充物として、また一般的に化粧品および皮膚科領域での応用に有用な藻類抽出物を主成分とする製品を調製する分野に関するものである。
【０００２】
アマノリ（Ｐｏｒｐｈｙｒａ）属に属する紅藻は、下記を含めていくつもの種を包含する：
−ポルフィラ・ウンビリカリス（Ｐｏｒｐｈｙｒａ  ｕｍｂｉｌｉｃａｌｉｓ；マルバチシマクロノリ）、ブルターニュ地方で採取されている；
−ポルフィラ・プルプレア（Ｐｏｒｐｈｙｒａ  ｐｕｒｐｕｒｅａ）、ブルターニュ地方に存在する；
−ポルフィラ・テネラ（Ｐｏｒｐｈｙｒａ  ｔｅｎｅｒａ；アサクサノリ）、日本で栽培されている；
−ポルフィラ・エゾエンシス（Ｐｏｒｐｈｙｒａ  ｙｅｚｏｅｎｓｉｓ；スサビノリ）、日本で栽培されている；
−ポルフィラ・コルンビナ（Ｐｏｒｐｈｙｒａ  ｃｏｌｕｍｂｉｎａ）、オーストラリアで採取されている。
【０００３】
ポルフィラの食用種は、海苔とも呼ばれている。ポルフィラ・ウンビリカリス種は、紫がかった色の披針形ないしは円形の薄い葉身を形成し、それは長さ６０ｃｍに達しうる。このポルフィラ種は、世界中でもっとも多く消費されている食用の藻である。フランスでは、ポルフィラ・ウンビリカリス種は、ヒトが食品として摂取することが認可されている。この藻の栄養上の興味は、それが、
−乾燥物の４５％までの蛋白質、
−藻の脂質の５％までの、ＥＰＡ（エイコサペンタエン酸）などの多不飽和脂肪酸、
−Ｂ群ビタミン、とくにビタミンＢ１２、
−ビタミンＡおよびカロテノイド類
などの種々の化合物に富んでいることにある。
【０００４】
先行技術において、ポルフィラ属藻類の抽出物およびそれらが含有している化合物の多くの性質が記載されている。たとえば、
−ポルフィラ・テネラのメタノール（８０％）抽出物の抗酸化作用、
−ポルフィラ・エゾエンシスの種々の極性および無極性溶媒への抽出物、とくにメタノール抽出物の抗酸化作用、
−メタノール（５０％）およびアセトンにより得られた抽出物の抗酸化作用、
−含水アルコール性媒質に可溶性で、シャペロン蛋白質（ＨＳＰ）により誘発されるそれの諸性質のゆえに有名なタウリンおよびその誘導体の高濃度での存在、
−フロリドシド（α−Ｄ−ガラクロピラノシル−（１−２）−グリセリン）およびその異性体などの含水アルコール性媒質に可溶性の糖誘導体の存在。それらは、大きい水圧ストレスを受けた細胞媒質の浸透圧調節のために重要な役割を演じる。
−アルコール含量が７０％を超える含水アルコール性媒質に不溶性であるために抽出されないｇａｒｓ系多糖類ポルフィランの存在。免疫促進作用および抗腫瘍作用を示す。
【０００５】
本出願人は、今回、紅藻ポルフィラ・ウンビリカリスの含水アルコール抽出物が、細胞に種々の物理的拘束作用が加わったときに、ストレス蛋白質の合成を誘発する能力を示すことを見出した。
【０００６】
思いがけないことに、この能力のため、熱ショックやＵＶ光線への暴露などの生理的または物理的拘束作用により、さらには病態生理学的拘束作用、とりわけ感染または炎症により誘発されたストレス細胞を保護するための活性組成物を調製するについて、これらの抽出物に著しい関心がもたれる。
【０００７】
すなわち、熱などの蛋白質の変性を促進する処置に応答してのストレス蛋白質の合成は、きわめて種々の侵襲に対処するために細胞が用いる一般化された防御手段である。ストレス蛋白質は、侵襲のために三次元構造が変化させられた蛋白質に結合し、それらの除去、それらの再生に関与し、あるいは、ストレス蛋白質は、三次元構造をいまだ獲得していない蛋白質（生合成途中の蛋白質）に結合して、それらの成熟に関与する。このように、ストレス蛋白質は、蛋白質の構成要素の完全性を、従ってそれらの機能を保存することによって、細胞を保護する。
【０００８】
それゆえ、なんらかの侵襲に応答してのストレス蛋白質の合成を早期に誘発させ、これらの蛋白質のより多量を合成させることは、より効果的な防御系を付与される細胞にとって有利なことである。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
従って、本発明は、紅藻の含水アルコール抽出物を含有するかまたはそれからなることを特徴とする、細胞に対して物理的生理的拘束作用または病態生理学的侵襲があったときにストレス蛋白質の合成を誘発できる製品を対象とする。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明は、好ましくは、アマノリ（Ｐｏｒｐｈｙｒａ）属に属する紅藻の抽出物、とくに好ましくはポルフィラ・ウンビリカリス種の紅藻の抽出物に関するものである。
【００１１】
該藻の抽出物は、下記の化合物類を含有する。含有率は、定量したときの抽出物の全重量に対する重量で表してある：
−タウリンおよび誘導体：１〜５％、
−フロリドシドおよび誘導体：１０〜２５％、
−カロテノイド類およびＡＧＰＩ（定量せず）、
−水溶性ビタミン類（定量せず）、
−アミノ酸類および誘導体（定量せず）、
−種々の色素。
【００１２】
本発明の一製品は、紅藻の含水アルコール抽出物を、該製品の全重量に対して１〜３０重量％含有する。
【００１３】
前記藻の含水アルコール抽出物は、下記によって安定化できる：
−粉末形態でののちの安定化のためには、マルトデキストリンによって；本発明の粉末形態の製品は、前記紅藻の含水アルコール抽出物を、該製品の全重量に対して１０〜３０重量％、好ましくは１５〜２５重量％、とくに好ましくは約２０重量％含有する。
−液状形態（化粧品組成物用に使用する場合以外）でののちの安定化のためには、グリセリンによって。本発明の液状製品は、前記紅藻の含水アルコール抽出物を、該製品の全重量に対して１０〜３０重量％、好ましくは１５〜２５重量％、とくに好ましくは約２０重量％含有する。
−化粧品組成物に使用する場合には、保存剤（フェノニップ（ＰＨＥＮＯＮＩＰ）（登録商標）、たとえば０．５％（ｗ／ｗ））の添加および滅菌濾過（０．２μ）；化粧品組成物への使用を目的とした本発明の液状製品は、前記紅藻の含水アルコール抽出物を１〜２５％、好ましくは３〜２０％含有する。
【００１４】
粉末形態では、前記製品を、栄養補充物の乾燥処方中に配合し、ゼラチンカプセルに充填し、または圧縮錠剤とし、あるいは小さな袋に小分けしたりすることなどを容易に行うことができる。
【００１５】
液状形態の場合、前記製品は、化粧品製剤に、またはソフトカプセルへの充填に有用である。
【００１６】
本発明は、細胞に対して種々の物理的拘束がある場合にストレス蛋白質の合成を誘発することを目的とした組成物、とりわけ栄養摂取用組成物または化粧品組成物の調製に、紅藻抽出物またはそれを含有する製品を使用することに関する。本発明の組成物は、とりわけ、ストレス蛋白質ＨＳＰ６０、ＨＳＰ２７およびＨＳＰ７０を調節するのに有用である。
【００１７】
本発明の範囲内で実施した研究作業により、前記抽出物またはそれを含有する製品の、熱ショック、ＵＶ光線またはその他のあらゆる物理的または治療上のショックに対して細胞を保護する能力を明らかにすることができた。
【００１８】
これらの性質は、ヒトにおいても、動物においても、本発明の組成物への関心を引き起こさせるものである。
【００１９】
本発明は、生理的ストレスおよび病態生理学的侵襲、とりわけ感染および炎症に対して細胞を保護することを目的とした組成物、とりわけ栄養摂取用組成物または化粧品組成物の調製に、紅藻抽出物またはそれを含有する製品を使用することに関する。
【００２０】
本発明は、また、物理的侵襲、とくに熱ショックまたはＵＶ光線に対して細胞を保護することを目的とした組成物、とりわけ栄養摂取用組成物または化粧品組成物の調製に、紅藻抽出物またはそれを含有する製品を使用することに関する。
【００２１】
本発明に従った前記使用は、高温熱ショックにも低温熱ショックにも関係するものである。たとえば、本発明の組成物は、海や山などの過酷な環境に暴露された個人、それゆえとくに潜水夫、スキーヤー、登山家および高地でのスポーツマンに属する個人によって使用されることもできる。
【００２２】
ＵＶ光線への暴露に関しては、本発明は、紫外線防止剤としての紅藻抽出物に関するものではなく、かかる暴露時に皮膚が受けるストレスに対する保護剤としてのそれに関するものである。
【００２３】
物理的侵襲、とくに熱ショックまたはＵＶ光線に対して細胞を保護することを目的とした本発明の組成物は、経口経路または局所経路によって投与することができる。
【００２４】
本発明の組成物は、摂取１回当り１０〜１０００ｍｇ、好ましくは２５〜２５０ｍｇの紅藻抽出物含有製品を与える栄養補充物を構成することができる。
【００２５】
栄養補充物を構成する本発明の組成物は、ゼラチンカプセル、ソフトカプセル、圧縮錠剤または小分け袋入り、シロップなどの形態をとることができる。
【００２６】
本発明の組成物は、また、化粧品組成物、場合により皮膚科用組成物を構成することもでき、そのときには、それらは皮膚に局所的に適用される。本発明の組成物は、物理的侵襲、とくに熱ショックまたはＵＶ光線に対して皮膚を保護することを可能ならしめる。本発明の化粧品組成物は、また、皮膚の質および外観を改善するための老化防止組成物としても有用である。
【００２７】
本発明の化粧品組成物は、顔または身体の皮膚へ適用すること以外は製剤学的に限定されることなく、化粧品および皮膚科の領域において当業者に既知のあらゆる形態をとることができる。本発明の組成物は、ジェル、クリーム、乳濁液、乳液、スプレーなどの形態をとることが有利である。
【００２８】
これらの組成物は、また、たとえば、ただしこれらに限定されるものではないが、柔軟化剤、着色剤、造膜剤、界面活性剤、香料、保存剤、乳化剤、油類、グリコール類、皮脂吸収剤、ビタミン類などの、化粧品組成物および皮膚科用組成物において使用することが既知であり、標準的なものである処方剤または添加剤の１種以上を含有することができる。これらは化粧品の領域で知られているから、当業者ならば、本発明の組成物にどの処方剤を添加すべきか、また求める諸性質に応じてどれだけの量を添加すべきかが分るであろう。
【００２９】
本発明の組成物は、紅藻抽出物含有製品を０．１〜５％、好ましくは０．５〜２％含有する。
【００３０】
本発明の他の利点および特徴は、試験管内培養細胞の熱ショックまたはＵＶ光線への応答に対するポルフィラ・ウンビリカリスの含水アルコール抽出物の活性に関する以下の実施例から明らかになるであろう。これらの実施例は、添付の図面を参照して以下に記載される。
【実施例】
【００３１】
実施例１：試験管内培養細胞の熱ショックおよびＵＶ照射への応答に対するポルフィラ・ウンビリカリス含水アルコール抽出物の活性
【００３２】
本実施例に記載した実験を実施するために、藻から抽出した乾燥物を０．１２％含有するポルフィラの含水アルコール抽出物（７％アルコール）を用いる。この抽出物を、培地に１％まで添加する。藻抽出物の最終濃度は０．００１２％である。同濃度のアルコール溶液（７％アルコールｖ／ｖ）を対照として用い、培地に１％まで添加した（最終濃度：０．０７％）。
【００３３】
実験１：ポルフィラ抽出物によるＨＳＰ合成誘発の証明
【００３４】
このようにして調製したポルフィラ抽出物および対照溶液を、遺伝子操作したＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣）細胞（テクノロジーＴＳＰｃ（登録商標））の培地に添加した。つぎに、細胞に４３℃の熱ショックを９０分間受けさせた。このモデルでは、ＥＬＩＳＡキット（ベーリンガー・ロシュ）によって定量した成長ホルモンの合成が、熱的侵襲に応じたＨＳＰ合成の誘発を示す。
【００３５】
図１は、熱ストレスがあったとき、ポルフィラ抽出物との細胞のプレインキュベーションが、ポルフィラ抽出物の作用を受けなかった細胞で認められるよりも有意に上回る、ｈＧＨの、それゆえＨＳＰの合成刺激を誘発することを示している。
【００３６】
実験２：ポルフィラ抽出物によって合成を誘発されたＨＳＰの同定（熱ショックおよびＵＶ）
【００３７】
特異的抗体である抗ＨＳＰ２７、抗ＨＳＰ６０および抗ＨＳＰ７０ならびにウェスタンブロット手法を用いた。用いた細胞は、熱ショックにはＨｅＬａ細胞、ＵＶ（波長２５４ｎｍのＵＶ光０．２５０Ｊ／ｃｍ２）によるストレスにはＨａＣａｔ細胞である。
【００３８】
図２は、ポルフィラ抽出物は、あらゆる侵襲の範囲外で、ＨＳＰの産生を変化させることがないことを示しているが、このことは、ポルフィラ抽出物がＨＳＰ合成の生理学的態様を変化させないことを意味する。その反面、熱ショックがあったとき、ポルフィラ抽出物は、蛋白質ＨＳＰ６０、ＨＳＰ７０およびＨＳＰ２７の産生を刺激・促進する。ｔ＝３０分において、対照と比較して、ポルフィラ抽出物とともにプレインキュベートした細胞において、ＨＳＰ２７および６０の合成が明瞭に増加していることが認められる。これに対し、ＨＳＰ７０の合成は、対照細胞のそれと同等である。熱ショック後ｔ＝４時間３０分およびｔ＝１９時間の時点では、ＨＳＰ２７、６０および７０の合成は、対照細胞と比較して、ポルフィラ抽出物とともにプレインキュベートした細胞において有意に多くなっている。
【００３９】
図３は、あらゆる侵襲の範囲外では、ポルフィラ抽出物がＨＳＰ産生を変化させないが、ＵＶ照射時には、ＨａＣａｔ細胞によるＨＳＰ７０の合成を刺激することを示している。
【００４０】
実施例２：ポルフィラの含水アルコール抽出物の処方
【００４１】
１）ヒト用栄養補充物
１容器当り７００ｍｇカプセル３０個。正味重量：２１ｇ（丸めた値）。
成分：グリセリン、ルリジサ属植物のバージンオイル中の本発明のポルフィラ抽出物。カプセル（魚のゼラチンおよびジャガイモデンプン）。被覆剤：黄色蜜蝋。
ビタミン類、無機質類、植物抽出物および乳酸酵母を添加してもよい。
【００４２】
２）動物用栄養補充物
１容器当り７００ｍｇカプセル３０個。正味重量：２１ｇ（丸めた値）。
成分：グリセリン、ルリジサ属植物のバージンオイル中の本発明のポルフィラ抽出物。カプセル（魚のゼラチンおよびジャガイモデンプン）。被覆剤：黄色蜜蝋。
ビタミン類、無機質類、植物抽出物および乳酸酵母を添加してもよい。
【００４３】
３）経口日焼け止め組成物
１容器当り６００ｍｇカプセル４５個（サイズ６）。正味重量：２７ｇ。成分：カプセル（魚のゼラチンおよびジャガイモデンプン）、ルリジサ属植物のバージンオイル。グリセリン中の本発明の抽出物、被覆剤：蜜蝋、トマト抽出物、セレンおよびビタミンＥ富化培地で培養した酵母。
【００４４】
４）皮膚用経口老化防止組成物
１容器当り６７３ｍｇカプセル６０個。正味重量：４０．４ｇ（丸めた値）。成分：ルリジサ属植物のバージンオイル、カプセル（魚のゼラチンおよびジャガイモデンプン）。緑茶の乾燥抽出物。被覆剤：蜜蝋、グリセリン中の本発明のポルフィラ抽出物、コムギ蛋白質の加水分解物、セレン含有酵母、硫酸亜鉛、硫酸マグネシウム。
【００４５】
５）老化防止化粧品組成物：セラミド含有しわ防止スキンケア
【００４６】
【表１】
2005508999.tif 000003
【００４７】
６）化粧品組成物：よごれ防止多層薄地織物
【００４８】
【表２】
2005508999.tif 000004
【００４９】
７）化粧品組成物：しわ防止手入れ用ホエー（乳清様液）
【００５０】
【表３】
2005508999.tif 000005
【図面の簡単な説明】
【００５１】
【図１】ＣＨＯ細胞による成長ホルモン（ｈＧＨ）産生のキネティクスを表す。
【図２】熱ショック後にＨｅＬａ細胞により産生された異なるＨＳＰの比率のウェスタンブロット手法による分析結果を表す。ポルフィラ抽出物にはＥを、対照にはＴを付してある。
【図３】ＵＶ照射後にＨａＣａｔ細胞により産生された異なるＨＳＰの比率のウェスタンブロット手法による分析結果を表す。ポルフィラ抽出物にはＥを、対照にはＴを付してある。
【符号の説明】
【００５２】
Ｅ  ポルフィラ抽出物
Ｔ  対照
【図１】
2005508999.tif 000006
【図２】
2005508999.tif 000007
【図３】
2005508999.tif 000008
【手続補正書】
【提出日】平成16年1月27日(2004.1.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞に対して物理的、生理的拘束作用または病態生理学的侵襲があったときにストレス蛋白質の合成を誘発することを目的とした栄養摂取用組成物または化粧品組成物の調製における、紅藻の含水アルコール抽出物を含有するかまたはそれからなる製品の使用。
【請求項２】
紅藻がアマノリ（Ｐｏｒｐｈｙｒａ）属、好ましくはポルフィラ・ウンビリカリス（Ｐｏｒｐｈｙｒａ  ｕｍｂｉｌｉｃａｌｉｓ）種に属することを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の使用。
【請求項３】
該藻の抽出物が下記の化合物を含有していることを特徴とする特許請求の範囲第１項または第２項に記載の使用：
−タウリンおよび誘導体：１〜５％、
−フロリドシドおよび誘導体：１０〜２５％、
−カロテノイド類およびＡＧＰＩ、
−水溶性ビタミン類、
−遊離アミノ酸類および誘導体、
−色素。
【請求項４】
該製品が製品の全重量に対して１〜３０重量％の紅藻抽出物を含有することを特徴とする特許請求の範囲第１項〜第３項のいずれかに記載の使用。
【請求項５】
該製品が製品の全重量に対して１５〜２５重量％、好ましくは約２０重量％の紅藻抽出物を含有することを特徴とする特許請求の範囲第４項に記載の使用。
【請求項６】
該製品がマルトデキストリン類を含有することを特徴とする特許請求の範囲第５項に記載の使用。
【請求項７】
該製品がグリセリンを含有することを特徴とする特許請求の範囲第５項に記載の使用。
【請求項８】
該製品が化粧品に使用しうる保存剤を含有し、滅菌濾過（０．２μ）に付されていることを特徴とする特許請求の範囲第７項に記載の使用。
【請求項９】
物理的侵襲、とくに熱ショックまたはＵＶ光線に対して細胞を保護することを目的とした栄養摂取用組成物または化粧品組成物の調製のための、特許請求の範囲第１項〜第８項のいずれかに記載の使用。
【請求項１０】
生理的ストレスおよび病態生理学的侵襲、とりわけ感染および炎症に対して細胞を保護することを目的とした栄養摂取用組成物または化粧品組成物の調製のための、特許請求の範囲第１項〜第８項のいずれかに記載の使用。
【請求項１１】
該栄養摂取用組成物が、１回の摂取当り、該製品１０〜１０００ｍｇ、好ましくは２５〜２５０ｍｇをもたらすものであることを特徴とする特許請求の範囲第９項または第１０項に記載の使用。
【請求項１２】
該化粧品組成物が、該製品を０．１〜５重量％、好ましくは０．５〜２重量％含有していることを特徴とする特許請求の範囲第９項または第１０項に記載の使用。
【国際調査報告】
2005508999.tif 000009
2005508999.tif 000010
2005508999.tif 000011
2005508999.tif 000012
2005508999.tif 000013
2005508999.tif 000014