(57)【要約】  心不全、高脂血症およびアテローム性動脈硬化症などの、ＰＰＡＲα活性化に応答する疾患の治療に有用な式（Ｉ）の化合物（その置換基の意味は明細書中に記載）が記載される。【化１】2005514456.tif 000017
2005514456.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物：
【化１】
2005514456.tif 000014
［式中：Ｒは、−Ｈ、−ＹＣＲ５Ｒ６ＣＯＸ、単環式、二環式または三環式アリールあるいはヘテロアリール（ハロゲンによって置換されていてもよい、−ＹＣＲ５Ｒ６ＣＯＸ、ハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、アルキル、およびアルコキシのタイプの基によって置換されていてもよい）、単環式、二環式または三環式アリールアルキルあるいはヘテロアリールアルキル（ここでアリールまたはヘテロアリールは、ハロゲンによって置換されていてもよい、−ＹＣＲ５Ｒ６ＣＯＸ、ハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、アルキル、およびアルコキシのタイプの基によって置換されていてもよい）；
ヘテロアリールは以下のタイプの荷電したものであってもよい：
【化２】
2005514456.tif 000015
ここで正の荷電は、好適な負の対イオンによって平衡される；
ｍは、０−１を表す；
ｎは、０−３を表す；ｎが１を表す場合、Ｒ３およびＲ４は、同じであっても異なっていてもよく、ＨまたはアルキルＣ１−Ｃ５から選択される；ｎが２または３を表す場合、Ｒ３とＲ４はともに、Ｈを表す；
ｐは、０−１を表す；
Ｘは、−ＯＨ，−Ｏ−アルキルＣ１−Ｃ３を表す；
Ｒ１およびＲ２は、同じであっても異なっていてもよく、以下から選択される：−Ｈ；アルキルＣ１−Ｃ５；ハロゲンによって置換されていてもよい−アルコキシ；ハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、アルキルによって置換されていてもよい−フェノキシ；ハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、アルキルによって置換されていてもよい−ベンジルオキシ；−ＣＯＸ；あるいは一般式（Ｉ）のＣＯＸとともに以下のタイプの環を形成してもよい：
【化３】
2005514456.tif 000016
Ｒ５およびＲ６は、同じであっても異なっていてもよく、Ｒ１およびＲ２について挙げられた基から選択される；
ＱおよびＺ、同じであっても異なっていてもよく、以下から選択される：ＮＨ、Ｏ、Ｓ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｓ）Ｏ−、−ＮＨＣ（Ｓ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−；そして、
Ｙは、Ｏ、Ｓを表す］。
【請求項２】
医薬分野において使用するための請求項１の式（Ｉ）の化合物。
【請求項３】
活性成分として請求項１の式（Ｉ）の化合物を含み、少なくとも１つの医薬上許容される賦形剤および／または希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項４】
錠剤、カプセル剤、丸剤、サシェ、バイアル、散剤、坐薬、溶液、懸濁液、乳濁液またはリポソーム調製物の形態の、請求項３の組成物。
【請求項５】
経腸または非経口経路によって投与されうる請求項４の組成物。
【請求項６】
ＰＰＡＲα活性化に応答する疾患の治療用医薬の調製のための請求項１の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項７】
疾患が、心不全、高脂血症およびアテローム性動脈硬化症からなる群から選択される、請求項６の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本明細書に記載する本発明は、一般式（Ｉ）の、ＰＰＡＲα（ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体アルファ）活性化に応答する疾患の治療に有用なα−フェニルチオカルボン酸およびα−フェニルオキシカルボン酸の誘導体に関する：
【化１】
2005514456.tif 000003
［式中：Ｒは、−Ｈ；−ＹＣＲ５Ｒ６ＣＯＸ；１または複数のハロゲン基によって置換されていてもよい１または複数の−ＹＣＲ５Ｒ６ＣＯＸハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、アルキル基およびアルコキシによって置換されていてもよい単環式、二環式または三環式アリールあるいはヘテロアリール；単環式、二環式または三環式アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル（ここでアリールまたはヘテロアリールは、１または複数のハロゲン基によって置換されていてもよい１または複数の−ＹＣＲ５Ｒ６ＣＯＸハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、アルキル基およびアルコキシによって置換されていてもよい）；
ここでヘテロアリールは以下のタイプにて荷電されていてもよい：
【化２】
2005514456.tif 000004
ここで正の荷電は、好適な負の対イオンによって平衡される；
ｍは、０−１を表す；
ｎは、０−３を表す；ｎが１の場合、Ｒ３およびＲ４は、同じであっても異なっていてもよく、ＨまたはアルキルＣ１−Ｃから選択される；ｎが２または３の場合、Ｒ３とＲ４はともにＨを表す；
ｐは、０−１を表す；
Ｘは、−ＯＨ、−Ｏ−アルキルＣ１−Ｃ３を表す；
ＲＩおよびＲ２は、同じであっても異なっていてもよく、以下から選択される：
−Ｈ；１または複数のハロゲン基によって置換されていてもよいアルキルＣ１−Ｃ５、−アルコキシ；
１または複数のハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、アルキル基によって置換されていてもよい−フェノキシ、；
１または複数のハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、アルキル基によって置換されていてもよい−ベンジルオキシ；
−ＣＯＸ；
あるいはＲ１またはＲ２は一般式（Ｉ）のＣＯＸとともに以下のタイプの環を形成してもよい：
【化３】
2005514456.tif 000005
Ｒ５およびＲ６は、同じであっても異なっていてもよく、Ｒ１およびＲ２について挙げられた基から選択される；
ＱおよびＺは、同じであっても異なっていてもよく、以下から選択される：ＮＨ、Ｏ、Ｓ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｓ）Ｏ−、−ＮＨＣ（Ｓ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−；そして、
Ｙは、Ｏ、Ｓを表す］。
【０００２】
本明細書に記載する本発明においてＰＰＡＲαの活性化に応答する疾患は、心不全、高脂血症(hyperlipaemias)およびアテローム性動脈硬化症である。
【背景技術】
【０００３】
核内受容体スーパーファミリーのメンバーであるＰＰＡＲは、遺伝子発現を調節するリガンドによって活性化される転写因子である。
【０００４】
ＰＰＡＲの様々なアイソフォームが同定されている：ＰＰＡＲα、ＰＰＡＲδ（βと称されることもある）およびＰＰＡＲγ（J. Med. Chem. 2000、43、527-550; Nature 2000,405、421-424）。
【０００５】
ＰＰＡＲαはステロイドホルモン受容体の大きなファミリーに属する（Kersten et al.、Nature 2000、405 : 421-424）。
【０００６】
この受容体は最初は、フィブリック酸（fibric acid）の誘導体などのペルオキシソーム増殖因子に応答する脂肪酸酸化酵素をコードする遺伝子の制御に基づいて同定された（Issemann and Green、Nature 1990,347 : 645-650）。
【０００７】
Leoneらは、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1999、96: 7473- 7478において、組織においてＰＰＡＲαによって発揮される脂肪酸の重要な役割を確認した。
【０００８】
心不全は能力障害および突然死の主要な原因である。それは様々な組織の代謝要求に見合う十分な量の血液を心臓が拍出できないことによる。
【０００９】
この症状は、心臓の電気的および機械的機能の制御系における深刻な変化を伴う。観察される生化学的および神経ホルモンの異常は代償できない心臓の変化した血行力学状態への適応機構を構成し、該状態は主に心拍出量の低下、末梢抵抗の上昇および機能不全の心臓における血流の保持、そしてその結果の心房拡張および逆行性代償不全によって特徴づけられる。
【００１０】
心不全の発症、発達および進展に関する生理病理的機構には未だに解明されていない部分がある。
【００１１】
ＰＰＡＲα活性化に応答する疾患の治療に有用な化合物は既に知られている。
【００１２】
Gen. Pharmacol. 1995 Sep; 26 (5): 897-904には、エトモキシルが心臓の機能に有益な効果を有することおよびＰＰＡＲが関与していることが報告されている。
【００１３】
Prostaglandins Leukot. Essent. Fatty Acids; 1999 May-Jun; 60 (5-6): 339-43には、エトモキシルおよびＰＰＡＲαが脂質代謝の制御に関与していることが報告されている。
【００１４】
Am. J. Physiol. Renal. Physiol. 2000 Apr; 278 (4): F667-75には、エトモキシルがＰＰＡＲα活性化因子であり、この活性化によって脂肪酸酸化の制御が誘導されることが報告されている。
【００１５】
Circulation 1997,96 : 3681-3686、およびBr. J. Pharmacol. 1999、126: 501-507には、エトモキシルが肥大および心不全の動物モデルにおける心筋機能の向上に有効であることが報告されている。
【００１６】
Clin. Sci. (Colch) 2000; Jul. ; 99 (1) : 27-35には、エトモキシルでの治療後に心不全患者の心臓機能が向上したことが報告されている。
【００１７】
Curr. Opin. Lipidol. 1999,10 : 245-247には、フィブラートが、ＰＰＡＲαを活性化することにより、脂肪酸酸化を刺激し、血管壁の炎症を阻害し、アテローム性動脈硬化症から保護することが報告されている。
【００１８】
国際特許出願第ＷＯ９８／０５３３１号には、フィブラートが、ＰＰＡＲαを活性化することにより、高血圧、冠動脈障害および糖尿病に起因するアテローム性現象に対して保護作用を有することが報告されている。
【００１９】
しかし今日までＰＰＡＲαを活性化することができ、心臓の代償不全の治療に有用な化合物はほんのわずかしか存在しなかった。
【００２０】
したがってこの医学分野において、この病状の治療用の特異的な新規薬剤の必要性が強く認識されるようになっている。
【００２１】
上記の公知の化合物には欠点がないわけではない。
【００２２】
実際のところ、Therapie 1991 Sep-Oct; 46 (5): 351-4には、フィブラートによって皮膚反応、出血、膵炎および神経系障害などのいくつかの副作用がもたらされることが報告されている。
【００２３】
Current Pharmaceutical Design、1998; 4; 1-15には、エトモキシルは心筋肥大を引き起こし、心筋梗塞の危険性を増加させるということが報告されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２４】
それゆえ、上記病状の治療活性を有するが、上記の公知化合物の欠点を示さない、新規なＰＰＡＲα活性化因子の必要性が強く認識されるようになっている。
【課題を解決するための手段】
【００２５】
このたび、驚くべきことに、式（Ｉ）の化合物がＰＰＡＲα活性化因子であり、ＰＰＡＲαの活性化に応答する疾患の治療に有用であることが見いだされた。
【００２６】
ＰＰＡＲαの活性化に応答する疾患には、先に説明したように、心不全、高脂血症およびアテローム性動脈硬化症が含まれる。
【００２７】
本明細書に記載する本発明の目的は、式（Ｉ）の化合物および医薬分野におけるその使用にある。
【００２８】
本明細書に記載する本発明のさらなる目的は、活性成分として式（Ｉ）の化合物を含み、少なくとも１つの医薬上許容される賦形剤および／または希釈剤を含む医薬組成物にある。
【００２９】
本明細書に記載する本発明のさらなる目的は、ＰＰＡＲα活性化に応答する疾患の治療用医薬の調製のための式（Ｉ）の化合物の使用にあり、かかる疾患の例はこれらに限定されないが、心不全、高脂血症およびアテローム性動脈硬化症である。
【００３０】
以下の実施例においてさらに詳細に本発明を説明する。
【００３１】
一般合成方法
以下の図式は、式（Ｉ）の化合物の合成に使用される方法を説明するものである。
【００３２】
特に断りのない限り、様々な記号の意味は一般式（Ｉ）において示したものと同じである。方法Ａに記載される加水分解工程はその他の方法にも適用できる。
【００３３】
【化４】
2005514456.tif 000006
【００３４】
一般式（Ｉ）の化合物の調製は、一般式ＩＩの化合物と塩基、好ましくは無機塩基、好ましくは水素化ナトリウムと反応させて、対応するアニオンを形成し、このアニオンと脱離基（例えば、塩素、臭素、ヨウ素、メシル、トシルおよびジアゾなど（ジアゾ基の場合、触媒として無機塩基の代わりに二価酢酸ロジウムダイマーを用いる））を含む一般式ＩＩＩの化合物、例えば２−メチル−アルファ−ブロモイソ−ブチラートを極性溶媒（例えば、アセトニトリル、トルエンまたは好ましくはジメチルホルムアミド）中で、１８から４８時間、１０〜５０℃、好ましくは２５℃で反応させることにより達成された。得られた生成物を、例えばＮａＯＨ、またはＨＣｌ／酢酸の混合物を用いる、１０〜１００℃、好ましくは２５℃での、１〜７２時間、好ましくは３時間の塩基または酸加水分解にかけ、対応する酸ＩＡを得た。
【００３５】
【化５】
2005514456.tif 000007
【００３６】
一般式（Ｉ）の化合物の調製は、一般構造ＩＶの化合物から開始し、これを一般構造Ｖのアルコールと、Synthesis 1981,1-28に記載のようなミツノブ反応の常套の条件下で、無水および非プロトン性溶媒（例えば、ベンゼン、トルエン、エーテルまたは好ましくはテトラヒドロフラン）を用い、３０分〜７２時間、好ましくは４８時間、１０〜４０℃、好ましくは２５℃で反応させることによって達成された。
【００３７】
【化６】
2005514456.tif 000008
【００３８】
この方法によって調製される化合物は、非プロトン性溶媒（例えばトルエン、エーテル、ベンゼン、しかし好ましくはテトラヒドロフラン）に溶解した一般構造ＶＩから開始して、これに関連するイソシアナート、チオイソシアナートまたはクロロホルミアートＶＩＩを、無機または有機塩基、好ましくはトリエチルアミンを触媒量または化学量論量添加し、混合物を６〜７２時間、好ましくは４８時間、１０〜４０℃、好ましくは２５℃で反応させて得た。ＫがＣＯＯＨの場合、縮合剤（例えば、ジエチルホスホロ−シアニデート、ＥＥＤＱ、ＤＣＣまたはＣＤＩなど）を基質に対して１−３当量、好ましくは１−１．５当量の比で用いるか、あるいは酸の塩化物の形成を介して有機溶媒（例えばＤＭＦ、ＣＨ３ＣＮ、ＣＨＣｌ３、ＴＨＦなど）中で、２０〜８０℃、好ましくは２５℃、１８時間〜３日間、好ましくは２４時間、縮合反応を行う。
【００３９】
【化７】
2005514456.tif 000009
【００４０】
一般式（Ｉ）の化合物（ｍおよびｎは０であり、ＹおよびＱはＯおよび／またはＳ）の調製は、例えば、Tetrahedron、1990,46 (3)、967-978に記載の方法に従って、生成物ＩＶから開始し、これを脱離基（例えば、塩素、臭素、ヨウ素、メシル、トシルおよびジアゾ（ジアゾ基の場合、二価の酢酸ロジウムダイマーを無機塩基の代わりに触媒として用いる））を含む一般式ＩＩＩの化合物、例えば、２−メチル−アルファ−ブロモイソブチラートとを、塩基（例えば炭酸カリウム）および相間移動触媒（例えば、テトラブチルアンモニウムブロミド（ＴＢＡＢ））の存在下でトルエンなどの非プロトン性溶媒中、２５℃から選択した溶媒の還流温度で１〜５日間、好ましくは２日間反応させることにより達成された。
【実施例１】
【００４１】
メチル２−（４−ヒドロキシフェニルチオ）イソブチラート（ＳＴ１９２３）の調製
方法Ａ工程１
１０ｍＬの無水ＣＨ３ＣＮ中の４−メルカプトフェノール（０．５００ｇ、４．０ｍｍｏｌ）に、ＮａＨ８０％（０．１４４ｇ、４．８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃に冷却し、メチル−α−ブロモイソブチラート（０．７２４ｇ、４．０ｍｍｏｌ）を５分後に添加した。反応物をマグネティックスターラーで撹拌しながら２日間室温で放置した。その後、反応混合物をＨ２Ｏに注ぎ酢酸エチルで抽出した；水相を酸性にし、酢酸エチルで再び抽出した。プールした有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過および蒸発させた。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてＣＨＣｌ３を用いた。０．７６０ｇの生成物が得られた（収率：８４％）；Ｍｐ（融点）：１１０−１１２℃；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ＣＨＣｌ３、Ｆｒ（前部比(frontal ratio)）：０．１１；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．３０（ｄ、２Ｈ）、６．７３（ｄ、２Ｈ）、５．５７（ｂｒｍ、１Ｈ）、３．７０（ｓ、３Ｈ）、１．４５（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：対称−Ｃ１８、（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．（室温）、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ５０／５０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．７５ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間１０．１４分；Ｅ．Ａ．（元素分析）により確認：Ｃ１１Ｈ１４Ｏ３Ｓ
【実施例２】
【００４２】
２−（４−ヒドロキシフェニルチオ）イソ酪酸（ＳＴ１９８１）の調製
方法Ａ工程２
メチル２−（４−ヒドロキシフェニルチオ）イソブチラート（ＳＴ１９２３）（０．２００ｇ、０．８８ｍｍｏｌ）に、２．７ｍＬの酢酸および２．７ｍＬの３７％塩酸を添加し、こうして得られた混合物を一晩還流下でマグネティックスターラーで撹拌しながら還流して放置した。溶液を水に注ぎ、水相を酢酸エチルで抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過および蒸発させた。０．１６１ｇの生成物が得られた（収率：８７％）；Ｍｐ（融点）１５２−１５４℃；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ＣＨＣｌ３／ＣＨ３ＯＨ  ９／１、Ｆｒ：０．３８；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ、３００ｍＨｚ）δ７．２３（ｄ、２Ｈ）、６．７２（ｄ、２Ｈ）、３．３０（ｂｒｍ、２Ｈ）、１．３０（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：イナーティシル（Inertisil）ＯＤＳ−３（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／ＫＨ２ＰＯ４５０ｍＭ４０／６０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．７５ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間７．３９分；ＫＦ：０．５％Ｈ２Ｏ；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ１０Ｈ１２Ｏ３Ｓ
【実施例３】
【００４３】
メチル２−（３−ヒドロキシフェニルチオ）イソブチラート（ＳＴ２０４７）の調製
生成物を方法Ａ（工程１）に記載のようにして、０℃の４０ｍＬの無水ＣＨ３ＣＮ、８０％ＮａＨ（０．５７２ｇ、１９．１ｍｍｏｌ）中の３−メルカプトフェノール（２．０００ｇ、１５．９ｍｍｏｌ）から開始して調製した。５分後、メチル−２−ブロモイソブチラート（２．８８ｇ、１５．９ｍｍｏｌ）を懸濁液に添加した。このようにして得た反応混合物を一晩マグネティックスターラーで撹拌しながら室温で放置した。その後、反応混合物をＨ２Ｏに注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過および蒸発させた。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてＣＨＣｌ３／ＣＨ３ＯＨ９８／２を用いた。２．９００ｇの生成物が得られた（収率：８１％）；Ｍｐ：４１．５−４２．５℃；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ＣＨＣｌ３／ＣＨ３ＯＨ９８／２、Ｆｒ：０．２３；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．１９（ｔ、１Ｈ）、７．００（ｄ、１Ｈ）、６．９５（ｂｒｔ、１Ｈ）、６．８１（ｄｄ、１Ｈ）、３．６９（ｓ、３Ｈ）、１．５０（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：イナーティシルＯＤＳ−３（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ５０／５０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．７５ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間１３．８２分；ＫＦ：０．３％Ｈ２Ｏ；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ１１Ｈ１４Ｏ３Ｓ
【実施例４】
【００４４】
メチル２−［４−［２−（４−クロロフェニル）エトキシ］フェニル−チオ］イソブチラート（ＳＴ１９２９）の調製
方法Ｂ
２０ｍＬの無水ＴＨＦ中のメチル２−（４−ヒドロキシフェニルチオ）イソブチラート（ＳＴ１９２３、実施例１に記載のようにして調製）（０．８００ｇ、３．５４ｍｍｏｌ）および４−クロロフェネチルアルコール（０．５５４ｇ、３．５４ｍｍｏｌ）に、ＤＥＡＤ（０．８０１ｇ、４．６ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１．２０５ｇ、４．６ｍｍｏｌ）を、温度を３０℃以下に保持しながら少しずつ添加した。反応混合物を室温で一晩マグネティックスターラーで撹拌しながら放置した。その後、溶媒を蒸発させ残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／酢酸エチル９／１を用いた。０．４１６ｇの油状生成物が得られた（収率：３２％）；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／酢酸エチル９／１、Ｆｒ：０．３２；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．４０−７．１９（ｍ、６Ｈ）、６．８０（ｄ、２Ｈ）、４．１５（ｔ、２Ｈ）、３．６５（ｓ、３Ｈ）、３．０８（ｔ、２Ｈ）１．４５（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：対称−Ｃ１８、（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ７０／３０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．７５ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間３１．４０分；ＫＦ：０．４％Ｈ２Ｏ；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ１９Ｈ２１ＣｌＯ３Ｓ
【実施例５】
【００４５】
メチル２−［４−［２−（１−インドリル）エトキシ］フェニル−チオ］イソブチラート（ＳＴ１９８３）の調製
中間体生成物１−（２−ヒドロキシ−エチル）インドールの調製
J. Med. Chem. 1998、41/10、1619-1639に報告されている中間体生成物をそこに記載されている手順に従って調製した。ただし、反応時間は３０分ではなく３０時間とし、５０ｍｌの無水ＤＭＳＯ中のインドール（５．０ｇ、４２．７ｍｍｏｌ）、ＫＯＨ（３．６ｇ、６４．１ｍｍｏｌ）およびブロモエタノール（６．４ｇ、５１．３ｍｍｏｌ）から開始し、温度２５−３０℃として、５ｇの油状生成物（収率：７３％）を得た。
【００４６】
メチル２−［４−［２−（１−インドリル）エトキシ］フェニルチオ］イソブチラート（ＳＴ１９８３）の調製
生成物を方法Ｂに記載の方法に従って調製した。メチル２−（４−ヒドロキシフェニルチオ）イソブチラート（ＳＴ１９２３、実施例１に記載のように調製）（０．６７１ｇ、２．９７ｍｍｏｌ）から開始し、１５ｍＬの無水ＴＨＦ中の１−（２−ヒドロキシエチル）インドール（０．４７８ｇ、２．９７ｍｍｏｌ）、ＤＥＡＤ（０．６７２ｇ、３．８６ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１．０１１ｇ、３．８６ｍｍｏｌ）を少しずつ３０℃以下に保持しながら添加した。反応混合物をマグネティックスターラーで撹拌しながら４８時間室温で放置した。その後、溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。ヘキサン／酢酸エチル８／２を溶離液として用いた。全部で０．５００ｇの純粋でない生成物が得られ、これを酢酸エチルに溶解し、ＮａＯＨの１Ｎ溶液で洗浄した。有機相を乾燥させ、蒸発させて０．２３０ｇの残渣を得、これをさらにシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。溶離液としてＣＨＣｌ３を用いた。０．１８４ｇの油状生成物が得られた（収率：１７％）；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／酢酸エチル８／２、Ｆｒ：０．２９；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．６２（ｄ、１Ｈ）、７．４０−７．１０（ｍ、６Ｈ）、６．７８（ｄ、２Ｈ）、６．５０（ｄ、１Ｈ）、４．５０（ｍ、２Ｈ）、４．２４（ｍ、２Ｈ）、３．６１（ｓ、３Ｈ）１．４０（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：対称−Ｃ１８、（３．５μｍ）４．６ｘ７５ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ６０／４０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０，９０ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間１０．７０分；ＫＦ：１．７％Ｈ２Ｏ；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ２１Ｈ２３ＮＯ３Ｓ
【実施例６】
【００４７】
メチル２−［４−［２−（２−ナフチル）エトキシ］フェニル−チオ］イソブチラート（ＳＴ２０１１）の調製
生成物を方法Ｂに記載のようにして調製した。メチル２−（４−ヒドロキシフェニルチオ）イソブチラート（ＳＴ１９２３、実施例１に記載のように調製）（１．０００ｇ、４．４２ｍｍｏｌ）から出発し、３０ｍＬの無水ＴＨＦ中で、２−（２−ナフチル）エタノール（０．７６０ｇ、４．４２ｍｍｏｌ）、ＤＥＡＤ（１．０００ｇ、５．７５ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１．５００ｇ、５．７５ｍｍｏｌ）を少しずつ３０℃以下に保持しながら添加した。反応混合物をマグネティックスターラーで撹拌しながら室温で一晩放置した。その後、溶媒を蒸発させ残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／酢酸エチル９／１を用いた。１．２６２ｇの生成物が得られた（収率：７５％）；Ｍｐ：５６−５７℃；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／酢酸エチル９／１、Ｆｒ：０．２３；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．８５−７．７０（ｍ、４Ｈ）、７．４５−７．２８（ｍ、５Ｈ）、６．８３（ｄ、２Ｈ）、４．２７（ｔ、２Ｈ）、３．６５（ｓ、３Ｈ）、３．２６（ｔ、２Ｈ）１．４５（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：イナーティシルＯＤＳ−３（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ８０／２０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速０．７５ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間２３．５１分；ＫＦ：０．１６％Ｈ２Ｏ；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ２３Ｈ２４Ｏ３Ｓ
【実施例７】
【００４８】
２−［４−［２−（２−ナフチル）エトキシ］フェニルチオ］イソ−酪酸（ＳＴ２０３６）の調製
３０ｍＬのメタノール中のＳＴ２０１１（実施例６に記載のように調製）（０．４８９ｇ、１．２９ｍｍｏｌ）の溶液に、１２．９ｍＬのＮａＯＨ  １Ｎを添加した。このようにして得られた溶液を還流しながら一晩放置した。その後、溶液を冷却し、水で希釈し、酸性にし、水相を酢酸エチルで抽出した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で蒸発させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてクロロホルムを用いた。０．３６０ｇの生成物が得られた（収率：７６，２％）；Ｍｐ：１０３−１０４℃；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ＣＨＣｌ３／ＣＨ３ＯＨ９８／２、Ｆｒ：０，１３；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．８０（ｍ、３Ｈ）、７．７０（ｓ、１Ｈ）、７．５０−７．３８（ｍ、５Ｈ）、６．８３（ｄ、２Ｈ）、４．２６（ｔ、２Ｈ）、３．３５（ｔ、２Ｈ）１．４８（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：イナーティシルＯＤＳ−３（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／ＫＨ２ＰＯ４７５／２５（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．７５ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間１３．０７分；ＫＦ：１％Ｈ２Ｏ；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ２２Ｈ２２Ｏ３Ｓ
【実施例８】
【００４９】
メチル２−［４−［［（４−メトキシベンジル）カルバモイル］オキシ］フェニルチオ］イソブチラート（ＳＴ２０３１）の調製
方法Ｃ
１０ｍＬの無水ＴＨＦ中のＳＴ１９２３（０．４８２ｇ、２．１３ｍｍｏｌ）（実施例１に記載のように調製）に、ｐ−メトキシベンジルイソシアナート（０．４１７ｇ、２．５６ｍｍｏｌ）および０．０１０ｇのトリエチルアミンを添加した。溶液をマグネティックスターラーで撹拌しながら室温で４８時間放置した。その後、溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてＣＨＣｌ３／ＣＨ３ＯＨ９８／２を用いた。０．４１０ｇの生成物が得られた（収率：５０％）；Ｍｐ：６４−６５℃；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ＣＨＣｌ３、Ｆｒ：０，１４；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．４４（ｄ、２Ｈ）、７．２８（ｄ、２Ｈ）、７．１０（ｄ、２Ｈ）、６．９０（ｄ、２Ｈ）、５．２９（ｂｒｍ、１Ｈ）、４．３９（ｄ、２Ｈ）、３．８０（ｓ、３Ｈ）、３．６５（ｓ、３Ｈ）１．４８（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：イナーティシルＯＤＳ−３（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ７０／３０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速０．７５ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間１１．２２分；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ２０Ｈ２３ＮＯ５Ｓ
【実施例９】
【００５０】
メチル２−［３−［［（４−メトキシ−ベンジル）カルバモイル］オキシ］フェニルチオ］イソブチラート（ＳＴ２１３９）の調製
生成物を方法Ｃに記載の手順に従って調製した。７ｍＬの無水ＴＨＦ、ｐ−メトキシベンジルイソシアナート（０．２０７ｇ、１．２７ｍｍｏｌ）および０．０１０ｇのトリエチルアミン中のＳＴ２０４７（実施例３に記載のように調製）（０．２４０ｇ、１．０６ｍｍｏｌ）から開始し、溶液を１８時間室温で撹拌しながら放置した。その後、０．０８６ｇ（０．５３ｍｍｏｌ）のｐ−メトキシベンジルイソシアナートを添加し、混合物をマグネティックスターラーで撹拌しながらさらに６時間室温で放置した。溶媒を蒸発させて乾燥させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／酢酸エチル７／３を用いた。０．３２０ｇの生成物が得られこれをさらにＮａ２ＣＯ３で洗浄することにより精製した。０．２００ｇの油状生成物が得られた（収率４８％）；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／酢酸エチル７／３、Ｆｒ：０．３７；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．３５−７．１８（ｍ、６Ｈ）、６．９０（ｄ、２Ｈ）、５．２５（ｂｒｍ、１Ｈ）、４．４０（ｄ、２Ｈ）、３．８０（ｓ、３Ｈ）、３．６２（ｓ、３Ｈ）１．５０（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：イナーティシルＯＤＳ−３（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ５０／５０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．７５ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間４７．０２分；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ２０Ｈ２３ＮＯ５Ｓ
【実施例１０】
【００５１】
メチル２−［４−（２メトキシ−１，１−ジメチル２−オキソエトキシ）フェニルチオ］イソブチラート（ＳＴ１９８２）の調製
方法Ｄ
１５ｍＬの無水トルエン中のメチル２−（４−ヒドロキシフェニルチオ）イソブチラート（ＳＴ１９２３、実施例１に記載のように調製）（０．２５０ｇ、１．１１ｍｍｏｌ）に、Ｋ２ＣＯ３（０．３０６ｇ、２．２２ｍｍｏｌ）およびテトラブチルアンモニウムブロミド（ＴＢＡＢ）（０．０１９３ｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を添加した；混合物を１００℃に加熱し、５分後、メチル２−ブロモイソブチラート（０．８０３ｇ、４．４４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２日間還流して放置した（油浴温度１３０℃）。ついで混合物をろ過し固体をトルエンで洗浄した。プールした有機相を乾燥させ、油状残渣を酢酸エチルで溶解し、ＮａＯＨ  １Ｎで洗浄した。有機溶媒の蒸発後に得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／酢酸エチル９／１を用いた。０．１４５ｇの油状生成物が得られた（収率：４０％）；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／酢酸エチル９／１、Ｆｒ：０．１７；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．３１（ｄ、２Ｈ）、６．７４（ｄ、２Ｈ）、３．７５（ｓ、３Ｈ）、３．６５（ｓ、３Ｈ）１．６０（ｓ、６Ｈ）１．４５（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：対称−Ｃ１８、（３．５μｍ）４．６ｘ７５ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ５０／５０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．７５ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間１３．００分；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ１６Ｈ２２Ｏ５Ｓ
【実施例１１】
【００５２】
メチル２−［３−［２−（３−ヒドロキシ−フェノキシ）エトキシ］フェノキシ］イソブチラート（ＳＴ１８７７）およびメチル２−［３−［２−［３−（２メトキシ１，１−ジメチル−２−オキソエトキシ）フェノキシ］エトキシ］フェノキシ］イソブチラート（ＳＴ１８７８）の調製
生成物を方法Ｄに記載の手順に従って調製した。１００ｍＬのトルエン中の３，３−エチレンジオキシドフェノール（２．０００ｇ、８．１ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（４．５００ｇ、３２．４ｍｍｏｌ）、ＴＢＡＢ（０．１３１ｇ、０．４ｍｍｏｌ）およびメチル−２−ブロモイソブチラート（１１．６１１ｇ、６４ｍｍｏｌ）から開始した。反応混合物を１３０℃に３日間加熱し、次いで冷却およびろ過した。得られた固体をトルエンで洗浄し、プールした有機相を減圧下で蒸発させて乾燥させ、油状残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／酢酸エチル８／２を用いた。２つの生成物が得られた：モノ誘導体ＳＴ１８７７（０．７００ｇ）（収率：２５％）およびビス誘導体ＳＴ１８７８（１．１００ｇ）（収率：３０．４％）
【００５３】
ＳＴ１８７７の分析データ
融点：７７−７９℃；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．１３（ｔ、２Ｈ）、６．６２−６．４０（ｍ、６Ｈ）、４．２５（ｓ、４Ｈ）、３．７８（ｓ、３Ｈ）１．６０（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム、イナーティシルＯＤＳ−３（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．；移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ（６０／４０ｖ／ｖ）、ｐＨ：３．２、流速：１．０ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間：８．７６分；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ１９Ｈ２２Ｏ６
【００５４】
ＳＴ１８７８の分析データ
融点：６０−６２℃；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．１３（ｔ、２Ｈ）、６．６０（ｄ、２Ｈ）、６．４１（ｍ、４Ｈ）、４．２６（ｓ、４Ｈ）、３．７８（ｓ、６Ｈ）１．６０（ｓ、１２Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム、イナーティシルＯＤＳ−３（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ（６０／４０ｖ／ｖ）、ｐＨ：３，２、流速：１．０ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間：２３．９２分；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ２４Ｈ３０Ｏ８
【実施例１２】
【００５５】
ジメチル２−［４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）１−メチル−エチル］フェノキシ］マロネート（ＳＴ２０２０）の調製
生成物を以下の手順に従って方法Ａ工程１に記載のように調製した：１００ｍＬの無水トルエン中の二価の酢酸ロジウムダイマー（０．２２０ｇ、０．５ｍｍｏｌ）とビスフェノールＡ（２，２−ビス−（４−ヒドロキシフェニル）−プロパン）（３．４００ｇ、１５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、窒素流下で５０ｍＬの無水トルエン中のジアゾマロネート（２．８４６ｇ、１８ｍｍｏｌ）（Org. Synth.: 1973、V、179に記載のように調製）の溶液を滴下し、温度を１５から２０℃に保つように注意した。反応混合物を窒素下で２４時間１２０−１３０℃で還流した。その後、反応混合物をろ過しトルエンを減圧下で蒸発させた。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／酢酸エチル８／２を用いた。１．７００ｇの油状生成物が得られた（収率：３２％）；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／酢酸エチル７／３、Ｆｒ．０．２３；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．１６（ｍ、４Ｈ）、６．９０（ｄ、２Ｈ）、６．８７（ｄ、２Ｈ）、５．１２（ｓ、１Ｈ）、３．９０（ｓ、６Ｈ）１．６２（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：イナーティシルＯＤＳ−３（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ７０／３０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．７５ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間７．００分；ＫＦ：０．６％Ｈ２Ｏ；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ２０Ｈ２２Ｏ６
【実施例１３】
【００５６】
ジメチル２−［４−（１−｛４−［２−メトキシ−１−（メトキシカルボニル）−２−オキソエトキシ］フェニル｝−１−メチルエチル）フェノキシ］マロネート（ＳＴ２０４８）の調製
生成物を実施例１２に記載の手順に従って方法Ａ工程１に記載のように調製した。３６ｍＬの無水トルエン中の二価の酢酸ロジウムダイマー（０．０８８５ｇ、０．２ｍｍｏｌ）とＳＴ２０２０（１．２３０ｇ、３．４ｍｍｏｌ）（実施例１２に記載のように調製）から開始し、これに１８ｍＬの無水トルエン中のジアゾマロネート（１．８８２ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）を滴下し、温度を１５から２０℃に保つように注意した。反応混合物を窒素下で２４時間１２０−１３０℃で還流した。その後、反応混合物をろ過し、トルエンを減圧下で蒸発させた。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／酢酸エチル８／２を用いた。０．４３０ｇの油状生成物が得られた（収率：２６％）；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／酢酸エチル６／４、Ｆｒ：０．４６；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．２０（ｄ、４Ｈ）、６．９０（ｄ、４Ｈ）、５．２２（ｓ、２Ｈ）、３．９０（ｓ、１２Ｈ）１．６１（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：イナティシルＯＤＳ−３（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ７０／３０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．７５ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間９．６８分；ＫＦ：０．７％Ｈ２Ｏ；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ２５Ｈ２８Ｏ１０
【実施例１４】
【００５７】
メチル２−［３−［２−（２−ナフチル）エトキシ］フェニル−チオ］イソブチラート（ＳＴ２１６７）の調製
生成物を方法Ｂに記載の手順に従って調製した（ただし、ＤＥＡＤの代わりにＤＩＡＤを用いた）。２０ｍＬの無水ＴＨＦ中のメチル２−（３−ヒドロキシフェニルチオ）イソブチラート（ＳＴ２０４７）（１．１１０ｇ、４．９ｍｍｏｌ）、２−（２−ナフチル）エタノール（０．８４２ｇ、４．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＡＤ（１．２９０ｇ、６．３７ｍｍｏｌ）、およびトリフェニルホスフィン（１．６７０ｇ、６．３７ｍｍｏｌ）から開始した。反応混合物をマグネティックスターラーで撹拌しながら室温で一晩放置した。その後、溶媒を減圧下でのぞき、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／酢酸エチル７／３を用いた。生成物をさらに、酢酸エチルに溶解し、有機相をＮａ２ＣＯ３溶液で洗浄することによって精製した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。１．１４ｇの生成物が得られた（収率：６１．２％）；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／酢酸エチル９／１、Ｆｒ：０．２０；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．８０（ｍ、３Ｈ）、７．７５（ｓ、１Ｈ）、７．４５（ｍ、３Ｈ）、７．２５（ｔ、１Ｈ）、７．０５（ｍ、２Ｈ）、６．９０（ｄ、１Ｈ）、４．２５（ｔ、２Ｈ）、３．６５（ｓ、３Ｈ）、３．３０（ｔ、２Ｈ）１．５０（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：イナティシルＯＤＳ−３（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ８０／２０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０，９ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間１８．９１分；ＫＦ：１．０％Ｈ２Ｏ；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ２３Ｈ２４Ｏ３Ｓ
【実施例１５】
【００５８】
メチル２−［３−［［［４−（トリフルオロ−メチル）フェニル］カルバモイル］オキシ］フェニルチオ］イソブチラート（ＳＴ２２０８）の調製
生成物を方法Ｃに記載の手順に従って調製した。１０ｍＬの無水ＴＨＦ、４−トリフルオロメチルイソシアナート（０．７４９ｇ、４．２５ｍｍｏｌ）および０．０１０ｇのトリエチルアミン中のＳＴ２０４７（０．８００ｇ、３．５４ｍｍｏｌ）（実施例３に記載のように調製）から開始した；反応時間は４８時間ではなく１８時間とし、室温で行った。溶媒を蒸発させて乾燥させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてＣＨＣｌ３およびＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ９８／２を用いた。０．８８１ｇの生成物が得られた（収率＝６０％）；Ｍｐ＝６６−６７℃；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ＣＨＣｌ３、Ｆｒ：０．３８；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．６０（ｍ、４Ｈ）、７．３８（ｍ、３Ｈ）、７．１５（ｍ、１Ｈ）、７．０６（ｂｒｓ、１Ｈ）、３．７０（ｓ、３Ｈ）１．５５（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：イナティシルＯＤＳ−３（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／ＫＨ２ＰＯ４  ５０ｍＭ（６０／４０ｖ／ｖ）、ｐＨ：３．０（Ｈ３ＰＯ４８５％）、流速：１ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間２５．４６分；ＫＦ：２．５％Ｈ２Ｏ；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ１９Ｈ１８Ｆ３ＮＯ４Ｓ
【実施例１６】
【００５９】
メチル２−［４−［［［４−（トリフルオロ−メチル）フェニル］カルバモイル］オキシ］フェニルチオ］イソブチラート（ＳＴ２２０９）の調製
標題の化合物を方法Ｃに記載の手順に従って調製した。７ｍＬの無水ＴＨＦ、４−トリフルオロメチルイソシアナート（０．２９８ｇ、１．６ｍｍｏｌ）および０．０１０ｇのトリエチルアミン中のＳＴ１９２３（０．３００ｇ、１．３３ｍｍｏｌ）（実施例１に記載のように調製）から開始した；反応時間を４８時間ではなく１８時間とし、室温で行った。溶媒を蒸発させて乾燥させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／ＡｃＯＥｔ７／３を用いた。０．３４０ｇの生成物が得られた（収率：＝６２％）；Ｍｐ＝１１０−１１１℃：ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ＣＨＣｌ３、Ｆｒ：０．３４；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．５５（ｍ、４Ｈ）、７．４８（ｄ、２Ｈ）、７．１５（ｄ、２Ｈ）、７．１０（ｂｒｓ、１Ｈ）、３．７０（ｓ、３Ｈ）１．５５（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：イナティシルＯＤＳ−３（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／ＫＨ２ＰＯ４  ５０ｍＭ（６０／４０ｖ／ｖ）、ｐＨ：３．０（Ｈ３ＰＯ４８５％）、流速：１ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間２５．６０分；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ１９Ｈ１８Ｆ３ＮＯ４Ｓ
【実施例１７】
【００６０】
メチル２−［３−［２−（４−クロロフェニル）エトキシ］フェニル−チオ］イソブチラート（ＳＴ２１９５）の調製
標題の化合物を方法Ｂに記載の手順に従って調製した。１５ｍＬの無水ＴＨＦ中のメチル２−（３−ヒドロキシフェニルチオ）イソブチラート（ＳＴ２０４７、実施例３に記載のように調製）（１．００ｇ、４．４２ｍｍｏｌ）および４−クロロフェネチルアルコール（０．６９２ｇ、４．４２ｍｍｏｌ）から開始し、これに少しずつＤＩＡＤ（１．１６ｇ、５．７５ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１．５００ｇ、５．７５ｍｍｏｌ）を温度を３０℃以下に保持しながら添加した。反応物をマグネティックスターラーで撹拌しながら室温で一晩放置した。この後溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／ＡｃＯＥｔ９／１を用いた。１．１４６ｇの油状生成物が得られた（収率：７１％）；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／ＡｃＯＥｔ９／１、Ｆｒ：０．２８；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．２５（ｍ、６Ｈ）、７．００（ｍ、１Ｈ）、６．９０（ｄ、１Ｈ）、４．１５（ｔ、２Ｈ）、３．６５（ｓ、３Ｈ）、３．０８（ｔ、２Ｈ）１．５５（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：イナティシルＯＤＳ−３（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ８０／２０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．７５ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間１９．３４分；ＫＦ：１．７％Ｈ２Ｏ；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ１９Ｈ２１ＣｌＯ３Ｓ
【実施例１８】
【００６１】
メチル２−［３−［２−（１−インドリル）エトキシ］フェニル−チオ］イソブチラート（ＳＴ２３９４）の調製
標題の化合物を方法Ｂに記載の手順に従って調製した。２０ｍＬの無水ＴＨＦ中のメチル２−（３−ヒドロキシフェニルチオ）イソブチラート（ＳＴ２０４７、実施例３に記載のように調製）（１．００ｇ、４．４２ｍｍｏｌ）、および１−（２−ヒドロキシエチル）インドール（実施例５に記載のように調製）（０．７１１ｇ、４．４２ｍｍｏｌ）から開始し、これに少しずつＤＩＡＤ（１．１６ｇ、５．７５ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１．５００ｇ、５．７５ｍｍｏｌ）を添加し、温度を３０℃以下に保った。反応物をマグネティックスターラーで撹拌しながら室温で一晩放置した。その後、溶媒を蒸発させて乾燥させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／ＡｃＯＥｔ８／２を用いた。０．５８１ｇの油状生成物が得られた（収率：３５％）；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／ＡｃＯＥｔ９／１、Ｆｒ：０．２２；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ：７．６２（ｄ、１Ｈ）、７．４２（ｄ、１Ｈ），７．３０−６．８０（ｍ、７Ｈ）、６．５２（ｄ、１Ｈ）、４．５５（ｍ、２Ｈ）、４．３０（ｍ、２Ｈ）、３．６１（ｓ、３Ｈ）１．５０（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：スペルコ(Supelco)−Ｃ１８（５μｍ）４．６ｘ１５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ７０／３０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．９０ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間６．３６分；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ２１Ｈ２３ＮＯ３Ｓ
【実施例１９】
【００６２】
メチル２−［３−［（１−メチル−１メトキシカルボニル）エチルオキシ］フェニルチオ］イソブチラート（ＳＴ２４１８）の調製
標題の化合物を方法Ｄに記載の手順に従って調製した。１００ｍＬのトルエン中の２−（３−ヒドロキシフェニル−チオ）イソブチラート（ＳＴ２０４７、実施例３に記載のように調製）（０．８７０ｇ、３．８５ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（１．０６ｇ、７．７ｍｍｏｌ）、ＴＢＡＢ（０．０６２ｇ、０．１９ｍｍｏｌ）およびメチル２−ブロモイソブチラート（２．８ｇ、１５．４ｍｍｏｌ）から開始した。反応混合物を１３０℃に３日間加熱し、次いで冷却してろ過した。得られた固体をトルエンで洗浄し、プールした有機層を減圧下で蒸発させて乾燥させ、油状残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。ヘキサン／ＡｃＯＥｔ９：１を溶離液として用いた。１．０ｇの油状生成物を得た（収率：７９％）；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／ＡｃＯＥｔ９／１、Ｆｒ：０．２０；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ：７．２０（ｍ、１Ｈ）、７．０５（ｄ、１Ｈ）、６．９５（ｓ、１Ｈ）、６．９０（ｄ、１Ｈ）、３．８０（ｓ、３Ｈ）、３．６５（ｓ、３Ｈ）１．６０（ｓ、６Ｈ）１．４５（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：対称−Ｃ１８（５μｍ）４．６ｘ１５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ６０／４０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．７５ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間９．５３分；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ１６Ｈ２２Ｏ５Ｓ
【実施例２０】
【００６３】
２−［４−［２−（４−クロロフェニル）エトキシ］フェニルチオ］−２−メチルプロパン酸（ＳＴ２５０５）の調製
標題の化合物を一般方法Ａ工程２に記載の手順に従って調製した。３６ｍＬのメタノール中のＳＴ１９２９（実施例４に記載のように調製）（０．５７２ｇ、１．５７ｍｍｏｌ）溶液から開始し、これに１５．７ｍＬのＮａＯＨ  １Ｎを添加した。このようにして得られた溶液を一晩還流した。その後、溶液を冷却し、水で希釈して酸性にし、水相をＡｃＯＥｔで抽出した。有機相を減圧下で蒸発させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／ＡｃＯＥｔ７／３を用いた。０．４４８ｇの生成物が得られた（収率：８１％）；Ｍｐ＝８７−８８℃；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／ＡｃＯＥｔ６／４、Ｆｒ：０．３０；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．４５（ｄ、２Ｈ）、７．１５（ｍ、４Ｈ）、６．８５（ｄ、２Ｈ）、４．１５（ｔ、２Ｈ）、３．０５（ｔ、２Ｈ）１．５０（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：対称−Ｃ１８（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／酢酸アンモニウム１０ｍＭ４５／５５（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．７０ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間４．７３分；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ１８Ｈ１９ＣｌＯ３Ｓ
【実施例２１】
【００６４】
メチル２−［３−［５−（４−ニトロフェニル）フルフリル−オキシ］フェニルチオ］イソブチラート（ＳＴ２５０１）の調製
標題の化合物を方法Ｂに記載の手順に従って調製した。２３ｍＬの無水ＴＨＦ中のメチル２−（３−ヒドロキシフェニルチオ）イソブチラート（ＳＴ２０４７、実施例３に記載のように調製）（１．０２ｇ、４．５ｍｍｏｌ）および５−（ニトロフェニル）フルフリルアルコール（０．９８６ｇ、４．５ｍｍｏｌ）から開始し、これに少しずつＤＩＡＤ（１．１８ｇ、５．８５ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１．５３ｇ、５．８５ｍｍｏｌ）を添加し、温度を３０℃以下に保った。反応物をマグネティックスターラーで撹拌しながら室温で一晩放置した。その後、溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／ＡｃＯＥｔ９．４／０．６を用いた。０．３００ｇの生成物が得られた（収率：１６％）；Ｍｐ：８１−８２℃；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／ＡｃＯＥｔ７／３、Ｆｒ：０．４５；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ８．２５（ｄ、２Ｈ）、７．８０（ｄ、２Ｈ）、７．３０（ｍ、１Ｈ）、７．０５（ｍ、１Ｈ）、７．０３（ｍ、１Ｈ）、７．０１（ｍ、１Ｈ）、６．９０（ｄ、１Ｈ）、６．６０（ｄ、１Ｈ）、５．１０（ｓ、２Ｈ）、３．７０（ｓ、３Ｈ）１．５０（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：対称−Ｃ１８（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ８５／１５（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．８５ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間６．２４分；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ２２Ｈ２１ＮＯ６Ｓ
【実施例２２】
【００６５】
２−［３−［２−（４−クロロフェニル）エトキシ］フェニルチオ］−２−メチルプロパン酸（ＳＴ２５１８）の調製
標題の化合物を一般方法Ａ工程２に記載の手順に従って調製した。９ｍＬのメタノール中のＳＴ２１９５（実施例１７に記載のように調製）（０．１５０ｇ、０．４１ｍｍｏｌ）の溶液から開始し、これに４ｍＬのＮａＯＨ  １Ｎを添加した。このようにして得られた溶液をマグネティックスターラーで撹拌しながら４８時間室温で放置し、その後、溶液を水で希釈し、酸性にし、水相をＡｃＯＥｔで抽出した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。０．１２８ｇの生成物が得られた（収率＝８８％）；Ｍｐ：１０５−１０６℃；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ＣＨＣｌ３／ＣＨ３ＯＨ９．４／０．６、Ｆｒ：０．４２；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．４５（ｍ、５Ｈ）、７．１０（ｍ、２Ｈ）、６．８０（ｄｄ、１Ｈ）、４．１５（ｔ、２Ｈ）、３．０５（ｔ、２Ｈ）１．５０（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：対称−Ｃ１８（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／酢酸アンモニウム１０ｍＭ３５／６５（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．８０ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間４．６６分；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ１８Ｈ１９ＣｌＯ３Ｓ
【実施例２３】
【００６６】
メチル２−［４−（２−（２，４−ジクロロ−フェニル）エトキシ）フェニルチオ］イソブチラート（ＳＴ２５３１）の調製
標題の化合物を方法Ｂに記載の手順に従って調製した。３ｍＬの無水ＴＨＦ中に溶解したメチル２−（４−ヒドロキシフェニルチオ）イソブチラート（ＳＴ１９２３、実施例１に記載のように調製）（０．２８０ｇ、１．２４ｍｍｏｌ）およびＤＩＡＤ（０．３２５ｇ、１．６１ｍｍｏｌ）から開始し、これを４ｍＬの無水ＴＨＦ中の２，４−ジクロロフェネチルアルコール（０．２６０ｇ、１．３６ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（０．４２２ｇ、１．６１ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で滴下した。反応混合物をマグネティックスターラーで撹拌しながら室温で一晩放置した。その後、溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／ＡｃＯＥｔ９．６／０．４を用いた。０．３４６ｇの生成物が得られた（収率：７０％）；Ｍｐ：７３−７４℃；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／ＡｃＯＥｔ９／１、Ｆｒ：０．２６；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．３５（ｍ、３Ｈ）、７．２２（ｍ、２Ｈ）、６．８３（ｄ、２Ｈ）、４．１８（ｔ、２Ｈ）、３．６５（ｓ、３Ｈ）、３．２０（ｔ、２Ｈ）１．４５（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：イナティシルＯＤＳ−３（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ８５／１５（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：１ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間１２．５８分；ＫＦ：０．４％Ｈ２Ｏ；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ１９Ｈ２０Ｃｌ２Ｏ３Ｓ
【実施例２４】
【００６７】
メチル２−［３（２（２，４−ジクロロ−フェニル）エトキシ）フェニルチオ］イソブチラート（ＳＴ２５３４）の調製
標題の化合物を方法Ｂに記載の手順に従って調製した。３ｍＬの無水ＴＨＦに溶解したメチル２−（３−ヒドロキシフェニルチオ）イソブチラート（ＳＴ２０４７、実施例３に記載のように調製）（０．２８０ｇ、１．２４ｍｍｏｌ）およびＤＩＡＤ（０．３２５ｇ、１．６１ｍｍｏｌ）から開始し、これを４ｍＬの無水ＴＨＦ中の２，４−ジクロロフェネチルアルコール（０．２６０ｇ、１．３６ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（０．４２２ｇ、１．６１ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で滴下した。反応物をマグネティックスターラーで撹拌しながら室温で一晩放置した。その後、溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／ＡｃＯＥｔ９．６／０．４を用いた。０．３２７ｇの油状生成物が得られた（収率：６６％）；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／ＡｃＯＥｔ９／１、Ｆｒ：０．３４；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ７．４０（ｄ、１Ｈ）、７．２０（ｍ、３Ｈ）、７．００（ｍ、２Ｈ）、６．９０（ｄｄ、１Ｈ）、４．１５（ｔ、２Ｈ）、３．６５（ｓ、３Ｈ）、３．２０（ｔ、２Ｈ）１．４５（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：イナティシルＯＤＳ−３（５μｍ）４．６ｘ２５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ９０／１０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．８ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間１２．４０分；ＫＦ：０．２％Ｈ２Ｏ；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ１９Ｈ２０Ｃｌ２Ｏ３Ｓ
【実施例２５】
【００６８】
メチル２−［３−（２−（カルバゾール−９−イル）エトキシ）フェニル−チオ］イソブチラート（ＳＴ２３６５）の調製
標題の化合物を方法Ｂに記載の手順に従って調製した。メチル２（３−ヒドロキシフェニルチオ）イソブチラート（ＳＴ２０４７、実施例３に記載のように調製）（０．６０９ｇ、２．７ｍｍｏｌ）、９Ｈ−カルバゾール−９−エタノール（０．５７０ｇ、２．７ｍｍｏｌ）、ＤＩＡＤ（０．７０８ｇ、３．５ｍｍｏｌ）、およびトリフェニルホスフィン（０．９１７ｇ、３．５ｍｍｏｌ）から開始し、少しずつ、温度を３０℃以下に保ちながら１４ｍＬの無水ＴＨＦに添加した。反応混合物をマグネティックスターラーで撹拌しながら室温で１８時間放置した。その後、溶媒を蒸発させて乾燥させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／ＡｃＯＥｔ９／１を用いた。０．５１０ｇの生成物が得られた（収率：４５％）；Ｍｐ：１０１−１０３℃；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／ＡｃＯＥｔ８／２、Ｆｒ：０．３８；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ８．０５（ｄ、２Ｈ）、７．５０（ｍ、４Ｈ）、７．１５（ｍ、２Ｈ）、７．０８（ｔ、１Ｈ）、７．００（ｄ、１Ｈ）、６．９０（ｓ、１Ｈ）、６．８０（ｍ、１Ｈ）、４．７５（ｔ、２Ｈ）、４．３５（ｔ、２Ｈ）、３．６０（ｓ、３Ｈ）１．４０（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：対称−Ｃ１８、（５μｍ）４．６ｘ１５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ６５／３５（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．８０ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間１１．４５分；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ２５Ｈ２５ＮＯ３Ｓ
【実施例２６】
【００６９】
メチル２−［４−（２−（カルバゾール−９−イル）エトキシ）フェニル−チオ］イソブチラート（ＳＴ２３８７）の調製
生成物を方法Ｂに記載の手順に従って調製した。メチル２−（３−ヒドロキシフェニル−チオ）イソブチラート（ＳＴ１９２３、実施例１に記載のように調製）（０．６０９ｇ、２．７ｍｍｏｌ）、９Ｈ−カルバゾール−９−エタノール（０．５７０ｇ、２．７ｍｍｏｌ）、ＤＩＡＤ（０．７０８ｇ、３．５ｍｍｏｌ）から開始し、これに１４ｍＬの無水ＴＨＦ中のトリフェニルホスフィン（０．９１７ｇ、３．５ｍｍｏｌ）を温度を３０℃以下に保ちながら少しずつ添加した。反応混合物をマグネティックスターラーで撹拌しながら室温で１８時間放置した。その後、溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。溶離液としてヘキサン／ＡｃＯＥｔ９／１を用いた。０．７０２ｇの生成物が得られた（収率：６２％）；Ｍｐ＝７２−７４℃；ＴＬＣ：シリカゲル、溶離液ヘキサン／ＡｃＯＥｔ８／２、Ｆｒ：０．３０；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ｍＨｚ）δ８．０５（ｄ、２Ｈ）、７．５０（ｍ、４Ｈ）、７．１５（ｍ、４Ｈ）、６．７５（ｄ、２Ｈ）、４．７５（ｔ、２Ｈ）、４．３５（ｔ、２Ｈ）、３．６０（ｓ、３Ｈ）１．４０（ｓ、６Ｈ）；ＨＰＬＣ：カラム：対称−Ｃ１８、（５μｍ）４．６ｘ１５０ｍｍ、Ｒ．Ｔ．、移動相ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ７０／３０（ｖ／ｖ）、ｐＨ：不変、流速：０．８０ｍＬ／分、２０５ｎｍＵＶ検出器、保持時間１１．６０分；Ｅ．Ａ．により確認：Ｃ２５Ｈ２５ＮＯ３Ｓ
【実施例２７】
【００７０】
大動脈の狭窄
使用した動物は体重１００−１２０ｇの雄性ウィスター系ラット(Wister rats)であり、ケージあたり５匹（ケージサイズ：４２５ｍｍｘ２６６ｍｍｘ１８０ｍｍ、おがくずを散らしてある）、温度２１±１℃および湿度５０±１５％、明暗周期１２／１２時間、１時間あたり１５から２０回換気しながら、飼育した。動物にＬＰ  ＡＬＴＲＯＭＩＮ飼料（REIPER）および天然水を自由に与えた。
【００７１】
心臓肥大の誘導
左心室肥大をネンブタール（ペントバルビタールナトリウム）で麻酔したラットに、横隔膜と腎分枝部の間の腹部大動脈に設置したクリップ（φ０．８ｍｍ）によって腹部大動脈を狭窄することにより引き起こした；１群の動物は対照群として用い、同じ手術を行ったがクリップは移植せず、したがって大動脈狭窄は起こさなかった（ブランク）。
【００７２】
動物を以下の群に無作為に分けた：
ブランク：大動脈狭窄せずに手術した（８匹）
対照：大動脈狭窄して手術した（８匹）
ＣＬＯ：大動脈狭窄して手術し、手術の翌日から１２週間本明細書に記載の本発明の化合物で処理した（１１匹）。
【００７３】
心臓機能の評価
処理後、ネンブタール（ペントバルビタールナトリウム）で麻酔した動物において、心臓機能を評価した。これは、頸動脈を介して左心室に挿入したポリエチレンカテーテルによって行い、カテーテルを圧力変換器（Statham p23XL）と増幅器（Biomedica Mangoni bm 61）に接続した。
【００７４】
記録したパラメータは、心拍数、収縮期および拡張末期左心室内圧力、および心室内圧力の正負の導関数であり、これらは、パーソナルコンピュータに特別のデータ捕捉システム（ＩＤＡＳ）によって記録した。記録は３０分間行った。
【００７５】
巨視的評価
実験の最後に動物を致死量のネンブタールによって屠殺し、腹腔を開腹し、内臓を露出させて大動脈クリップが正しく配置されていたかを確認した；心臓、肺および肝臓を摘出し、可能性のある異常について巨視的に調べた後、十分乾燥させて計量した。
【００７６】
この試験によって得られた予備的結果により、本明細書に記載の本発明の化合物は、良好に許容され、対照群と比較して、処理群においては圧力値が正常化していることが示された。
【実施例２８】
【００７７】
ＰＰＡＲαリガンドのアゴニスト活性を評価するための真核細胞の一過性トランスフェクション
真核細胞におけるトランス活性化アッセイにより、推定リガンドが、転写因子とプロモーター内のその応答要素との相互作用を促進する能力の定量的評価が可能となる。
【００７８】
ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体アイソフォームアルファ（ＰＰＡＲα）は、９−シスレチノイン酸受容体（ＲＸＲ）とのヘテロダイマー化により標的遺伝子の転写を調節する。形成されたダイマーは、２つの受容体のうち少なくとも１つのリガンドの存在によって活性化された場合には、標的遺伝子プロモーターに位置するペルオキシソーム増殖因子応答要素（ＰＰＲＥ）へ結合することができる。
【００７９】
したがってトランス活性化アッセイには予め選択された細胞系において以下のものが同時に存在することが必要である：
ａ）十分な量のＰＰＡＲα；
ｂ）十分な量の９シス−レチノイン酸受容体（ＲＸＲ）；
ｃ）キメラプラスミド（これは異種のウイルスプロモーターの上流に位置する、ＰＰＲＥによって制御されるレポーター遺伝子を含む。本願の場合、レポーター遺伝子はクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）である）。
【００８０】
ＰＰＡＲαおよびＲＸＲの内在レベルが不十分な場合は、それらをかかる受容体の遺伝子を含む発現ベクターによるトランスフェクションによって外部源から補充すればよい。  
【００８１】
プラスミドｐＣＨ１１０は、β−ガラクトシダーゼの遺伝子を含み、レポーター遺伝子ＣＡＴとともに共トランスフェクションされ、それによってトランスフェクション効率および結果の標準化についての内部対照が与えられる。
【００８２】
実験手順
サル腎臓線維芽細胞の細胞系（ＣＯＳ−７）を用いた。細胞をレポーター遺伝子（上記項目ｃを参照）およびＰＰＡＲα遺伝子のコード配列（ｃＤＮＡ）を含む発現プラスミドでトランスフェクションした。細胞を様々な濃度の被験化合物に曝し、ＣＡＴ活性を評価した。未処理細胞を対照として用いた。ＣＡＴレベルの上昇は、ＰＰＲＥへの結合によるＰＰＡＲα依存的遺伝子転写の活性（化合物のアゴニスト活性）を示す。
【００８３】
細胞培養
サル腎臓線維芽細胞（ＣＯＳ−７）を通常の細胞培養技術に従って、３７℃で５％ｖ／ｖ二酸化炭素雰囲気で、培地としてＤＭＥＭ（ダルベッコ改変イーグル培地）（３．７ｇ／ｌの炭酸水素ナトリウム、４ｍＭのＬ−グルタミン、４．５ｇ／ｌのグルコース、１ｍＭのピルビン酸ナトリウムおよび１０％ｖ／ｖのウシ胎児血清により改変）を用い、ストレプトマイシン１００μｇ／ｍｌとペニシリン１００Ｕ／ｍｌ（終濃度）の存在下で培養した。
【００８４】
ＣＯＳ−７細胞の一過性トランスフェクション
ＣＯＳ−７細胞を核酸とリン酸カルシウムの共沈技術によって一過性に共トランスフェクションした。
【００８５】
細胞をトランスフェクションの２４時間前に、６つのウェル（直径２５ｍｍ）を有するプレートに３ｘ１０５細胞／ウェルの密度で播いた。培地をトランスフェクションの２時間前に交換し、各ウェルに２８０μｌの以下のように調製したトランスフェクション混合物を滴下した：
１）ＰＰＡＲαのｃＤＮＡを含む発現プラスミド（２．５μｇ）
２）レポーター遺伝子ＣＡＴを含むプラスミド（５μｇ）
３）ｐＣＨ１１０（１μｇ）；
＋１７．５μｌの塩化カルシウム２Ｍ。
【００８６】
水を最終容積１４０μｌとなるよう添加した。このプラスミドと塩の混合物に等量のＨＢＳ溶液２ｘｐＨ７．１（１ｌあたり、塩化ナトリウム１６ｇ、塩化カリウム０．７４ｇ、脱水塩基性リン酸ナトリウム０．２７ｇ、デキストロース２ｇ、Ｈｅｐｅｓ１０ｇ）を添加した。
【００８７】
細胞を６時間、３７℃で５％ｖ／ｖ二酸化炭素雰囲気でインキュベートした。
【００８８】
本明細書に記載の本発明の化合物および参照化合物、クロフィブラートおよび４−クロロ−６−（２，３キシリジノ）−２−ピリミジルチオ酢酸（ＷＹ−１４，６４３）による処理を２ｍｌの新鮮な培地中で２４時間行った。未処理細胞を陰性対照として用いた。様々な処理が、レポーター遺伝子ＣＡＴの転写に影響を与える能力を、放射測定により処理および非処理細胞からのタンパク質抽出物について評価した。
【００８９】
細胞タンパク質抽出物の調製およびＣＡＴ活性のアッセイ
処理後、細胞をリン酸バッファー（５ｍｌ）で２回洗浄し、ウェルから機械的に除き、ＴＥＮバッファー（トリス［ヒドロキシメチル］アミノメタン１０ｍＭ  ｐＨ８、エチレンジアミンテトラ酢酸１ｍＭ、ｐＨ８、塩化ナトリウム０．１Ｍ）に入れた。エッペンドルフ５４１７Ｒ遠心機（ローターＦ４５３０１１）中での４℃、２分間、１０００回転／分（ｒｐｍ）での遠心分離後、細胞を０．１５ｍＬのバッファー（トリス［ヒドロキシメチル−アミノメタン−塩酸０．２５Ｍ、ｐＨ８）に再懸濁し、凍結乾燥を繰り返すことにより溶解した（３回の５分サイクル）。
【００９０】
不溶性細胞物質を４℃、１５分、最速での遠心分離により除き、上清を回収し、ＣＡＴ活性アッセイに用いた。
【００９１】
ＣＡＴ活性を測定するアッセイは以下からなる：
１）５０μｌのタンパク質細胞抽出物（６５℃で１０分加熱したもの）
２）１０μｌのｎ−ブチリル−コエンザイムＡ（３．５ｍｇ／ｍｌ）
３）５μｌの［１４Ｃ］クロラムフェニコール（０．２５μＣｉ）；
水によって最終容積を１００μｌとした。
【００９２】
３７℃でのおよそ２時間のインキュベーションの後、反応を２容量のキシレン／２，６，１０，１４テトラメチル−ペンタデカン（１：２ｖ／ｖ混合物）でブロックした。この溶媒での抽出後、１５０μｌの上相を５ｍｌのシンチレーション液に添加し、ベータ・カウンター（シンチレーター）で分析し、酵素反応の結果生成した［１４Ｃ］ブチリル−クロラムフェニコールの含量を測定した。
【００９３】
β−ガラクトシダーゼ活性測定試験
トランスフェクション効率についてＣＡＴ活性を標準化するための内部対照として、プラスミドｐＣＨ１１０に存在する対応する遺伝子によってコードされるβ−ガラクトシダーゼ活性を用いた。
【００９４】
２０μｌのタンパク質抽出物（上記参照）の、基質ＯＮＰＧ（Ｏ−ニトロフェニル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド）２ｍｇ／ｍｌに対する活性を「Ｚバッファー」（リン酸バッファー中、塩化カリウム１０ｍＭ、塩化マグネシウム１ｍＭ、およびβ−メルカプトエタノール５０ｍＭ）の存在下で評価した。１５−１２０分の３７℃でのインキュベーション後（典型的な黄色が現れる速度に応じた時間）、反応を２００μｌの炭酸ナトリウム１Ｍでブロックした。サンプルを１０分間室温でインキュベートし、分光光度計で分析し、波長４２０ｎｍでの吸光度（Ａ４２０）を測定した。
【００９５】
以下の式をβ−ガラクトシダーゼ活性についてのＣＡＴアッセイの結果の標準化に用いた：
2005514456.tif 000010
【実施例２９】
【００９６】
ＰＰＡＲαリガンドのアゴニスト活性を評価するための真核細胞の一過性トランスフェクション（ＩＩ方法）
ＤＮＡ上に受容体が位置する様式が異なり、リガンド結合現象が転写活性化にどのようにつながるかに依存する、別のトランス活性化システムを用いた。
【００９７】
このモデルにおいて、真核細胞を酵母Ｇａｌ４転写因子のＤＮＡ結合ドメイン（ＤＢＤ）とＰＰＡＲαのリガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）の融合タンパク質（Ｇａｌ４ＤＢＤ／ＰＰＡＲαＬＢＤ）をコードする発現ベクターで一過性にトランスフェクションした。５コピーのＧａｌ４に対する高アフィニティー結合部位（ＵＡＳ(upstream activating sequence)と称する）を、レポーター遺伝子クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）に連結する強力なウイルスプロモーターの上流に含むレポーターベクターを共トランスフェクションした。このモデルによってもたらされるいくつかの利点のうち、もっとも重要なことは、内在性受容体による干渉がないことである。
【００９８】
発現およびレポーターベクターに加えて細胞をβ−ガラクトシダーゼ酵素をコードする対照ベクターｐＣＨ１１０でトランスフェクションし、トランスフェクション効率における相違を補正した。
【００９９】
実験方法
サル腎臓線維芽細胞系（ＣＯＳ−７）を用いた。細胞を遺伝子レポーターを含むプラスミド、融合タンパク質Ｇａｌ４ＤＢＤ／ＰＰＡＲαＬＢＤをコードする発現プラスミドおよび対照ベクターｐＣＨ１１０で共トランスフェクションした。細胞を様々な濃度の被験化合物で処理しＣＡＴ活性を測定した。未処理細胞を対照として用いた。
【０１００】
細胞培養
サル腎臓線維芽細胞（ＣＯＳ−７）を常套方法により３，７ｇ／ｌ炭酸水素ナトリウム、４ｍＭ  Ｌ−グルタミン、４，５ｇ／ｌグルコース、１ｍＭピルビン酸ナトリウムおよび１０％ｖ／ｖウシ胎児血清を追加したＤＭＥＭ（ダルベッコ改変イーグル培地）でストレプトマイシン１００μｇ／ｍｌおよびペニシリン１００  Ｕ／ｍｌの存在下で培養した。
【０１０１】
ＣＯＳ−７細胞の一過性トランスフェクション
ＣＯＳ−７細胞を、トランスフェクションの際にＤＮＡと複合体形成し、細胞へと輸送する多成分脂質ベースＦｕＧＥＮＥ６トランスフェクション試薬を用いて一過性にトランスフェクションした。細胞を１２−ウェルプレートに１，２ｘ１０５細胞／ウェルで播き一晩３７℃で５％ｖ／ｖ二酸化炭素雰囲気で培養した。トランスフェクションの２時間前に培地を新鮮な無血清培地に交換し、トランスフェクションを製造業者の指示に従ってＦｕＧＥＮＥ６トランスフェクション試薬によって行った。簡単に説明すると、トランスフェクション混合物（各ウェルにつき０．８μｇの発現ベクター、１．６μｇのレポーターベクター、０．８μｇの対照ベクターおよび９μｌのＦｕＧＥＮＥ６トランスフェクション試薬を含有）を直接無血清培地の存在下で細胞に添加した。５時間後、トランスフェクション培地を、被験分子を３種類の濃度で（２、２０および１００μＭ）含むかあるいは含まない１ｍｌの完全培地に交換した。２μＭの既知のＰＰＡＲαリガンドであるＷｙ−１４，６４３を陽性対照として用いた。
【０１０２】
細胞タンパク質抽出物の調製およびＣＡＴ活性アッセイ
４８時間後、細胞を１ｍｌのリン酸バッファー（ＰＢＳ）で２回洗浄し、ＴＥＮバッファー（トリス［ヒドロキシメチル］アミノメタン１０ｍＭ  ｐＨ８、エチレンジアミンテトラ酢酸１ｍＭ、ｐＨ８、塩化ナトリウム０．１Ｍ）中に掻爬することによって収集した。室温で３分、１０００回転／分（ｒｐｍ）の遠心分離後、細胞を６０μｌの溶解バッファー（０．２５Ｍ、トリス−ＨＣｌ、ｐＨ８）に再懸濁し、３回の迅速な凍結乾燥サイクルによって溶解した。細胞残骸を４℃、１５分、１５．０００回転／分（ｒｐｍ）での遠心分離（３ｘ５分サイクル）によって除いた。グリセロール（終濃度１０％ｖ／ｖ）およびβ−メルカプトエタノール（終濃度５ｍＭ）を添加し（最終容積７５μｌ）、細胞抽出物を−８０℃でアッセイまで保存した。
【０１０３】
ＣＡＴ活性アッセイを以下のように行った：２０μｌの細胞溶解液（予め６５℃で１０分加熱し、内部脱アセチル酵素活性を不活化した）を１０μｌの３．５ｍｇ／ｍｌのｎ−ブチリル−ＣｏＡ、５μｌ（０．２５μＣｉ）の［１４Ｃ］−クロラムフェニコールおよび６５μｌ蒸留水に添加し、３７℃で２時間インキュベートした。反応を２００μｌのキシレン／２，６，１０，１４テトラメチル−ペンタデカン溶液（１：２ｖ／ｖ混合物）を添加することによってブロックした。激しいボルテックスおよび最速での５分間の遠心分離の後、１５０μｌの上清を５ｍｌのシンチレーション液の存在下でシンチレーションバイアルに移し、比放射能をβ−カウンターにより測定した。
【０１０４】
β−ガラクトシダーゼ活性の測定試験
β−ガラクトシダーゼ活性を以下のように測定した：２０μｌの細胞抽出物を、７５０μｌの反応バッファーに添加した。反応バッファーは、１容積の２ｍｇ／ｍｌＯＮＰＧおよび３容積の「Ｚバッファー」（リン酸バッファー中、塩化カリウム１０ｍＭ、塩化マグネシウム１ｍＭ、およびβ−メルカプトエタノール５０ｍＭ）からなる。反応を３７℃で行い、典型的な黄色がみられるようになったら２００μｌの１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３を添加することによりブロックした。サンプルを１０分間、室温でインキュベートし、４２０ｎｍでの吸光度（Ａ４２０）を分光光度法により測定した。
【０１０５】
ＣＡＴ活性の結果を以下のようにβ−ガラクトシダーゼ活性に対して標準化した：
2005514456.tif 000011
【０１０６】
得られた予備的結果を表１に報告するが、これは本発明による化合物がＰＰＡＲαアゴニストであることを示す。
【０１０７】
【表１】
2005514456.tif 000012
【０１０８】
結果を参照化合物（ＷＹ−１４．６４３  ２μＭ）（１００％と見なす）の存在下で測定したものと比較したＣＡＴレポーター遺伝子の活性化のパーセンテージとして表す。
【実施例３０】
【０１０９】
ｄｂ／ｄｂマウスにおけるＨＤＬ−コレステロールレベルの上昇
この実験においてＰＰＡＲα発現が正常値を超え（Memon et al.、Endocrinology 2000、4021 - 4031）、ＨＤＬ−コレステロールレベルが実質的に上昇している（Silver et al.、J Biol Chem 1999、274: 4140 - 4146）ｄｂ／ｄｂマウスを用いた。
【０１１０】
Ｃ５７ＢＬ／ＫｓＪｄｂ／ｄｂマウスを１週間標準条件下（２２±２℃；５５±１５％湿度；１５−２０回換気／時間；１２時間明暗周期（明期午前７時から午後７時））で標準４ＲＦ２１飼料（Mucedola）を与えて馴化させた。血液サンプルを吸収後条件（午前８．３０から午後４．３０まで絶食）で尾側静脈からＪｅｌｃｏ２２Ｇカテーテル（Johnson and Johnson）によって採取した。グルコース、インシュリン、トリグリセリド、コレステロール、遊離脂肪酸および尿素レベルを処理群における均一に分布したマウスについて血漿において確認した。
【０１１１】
処理の最初に動物の体重を確認し、その水および飼料の消費をモニターするために配列させた。
【０１１２】
マウスを１日２回（午前８．３０および午後６．３０）経口で１０または１４日間処理した。
【０１１３】
実施例４に記載のようにして得た被験化合物（ＳＴ１９２９）を１０ｍｌ／ｋｇの媒体（脱イオン水中Ｔｗｅｅｎ８０  ０．５％を含有する１％ＣＭＣ）中２４ｍｇ／ｋｇの用量で投与した。
【０１１４】
その他の被験化合物も実施例４の化合物と匹敵する用量で投与した。
【０１１５】
既知のＰＰＡＲαアゴニストであるシプロフィブラート（Varanasi et al.、J Biol Chem 1996、271: 2147 - 2155; Latruffe et al. Cell Biochem Biophys 2000、32 Spring: 213 - 220）を２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与した（Dwivedi et al.、Toxicol Pathol 1989、17: 16 - 26; Qi et al.、Proc Natl Acad Sci USA 1999、96: 1585 - 1590）。
【０１１６】
動物を吸収後条件下（午前９．３０から午後４．３０絶食）で最後の処理から７時間後に（断頭により）屠殺した。数々の重要な脂質および炭水化物代謝パラメータのレベルを血清において測定した。
【０１１７】
ＨＤＬ−コレステロールレベルをカイロミクロン、超低密度および低密度リポタンパク質を除去するホスホタングステン酸・ベース・  沈降剤（ABX Diagnostics）により血清を処理することにより測定し、上清におけるＨＤＬ−コレステロールレベルをコレステロールキット（ABX Diagnostics)およびCobas Mira S Autoanalyzer(Roche）を用いて測定した。
【０１１８】
結果は、ｄｂ／ｄｂマウスにおいて、本発明の化合物が、ＨＤＬ−コレステロール値（ＰＰＡＲαアゴニスト活性の指標）を参照化合物、シプロフィブラートと同様にあるいはそれ以上に上昇させることができることを示す（表２）。
【０１１９】
【表２】
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【０１２０】
スチューデントｔ検定：黒三角は対照に対し、Ｐ＜０．００１を示す。
【０１２１】
本明細書に記載の本発明による式（Ｉ）の化合物は、そのまま、あるいは医薬上許容される誘導体の形態、例えば、塩または薬理動力学面を向上させつつ比活性を維持する誘導体（プロドラッグ）の形態で利用できる
【０１２２】
本明細書に記載の本発明の産業利用面については、医薬は、好適な医薬製剤（または組成物）の形態として当業者に周知の常套方法によって調製すればよい。医薬組成物の例としては、錠剤、カプセル剤、丸剤、坐薬、サシェ(sachet)、経口投与用の液体形態、例えば溶液、懸濁液および乳濁液が挙げられる；経口または経腸投与用の徐放形態も一般的である；また非経口投与形態、例えば注射用形態も挙げられる。
【国際調査報告】
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