(57)【要約】  式（Ｉ）の化合物は、レボドパおよびＣＯＭＴ阻害剤を放出する。ゆえに、レボドパおよびＣＯＭＴの阻害が有用であることが示されている疾患または状態の治療のために使用され得る。    【化１】2005509673.tif 000018（式中、Ｅ、Ｇ、Ｔ、Ｒd、ＲeおよびＲfはクレームにおいて定義される通りである。）
2005509673.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能なエステルもしくは塩。
【化１】
2005509673.tif 000010
（式中、ＥはＣＯＭＴ阻害剤残基であり、Ｇは−（ＣＯ）a−（ａは０または１）であり、Ｔは−（ＣＨ2）b−である。ここで、ｂはａに依存し、
ａが０である場合は、ｂは０
ａが１である場合は、ｂは２または３
である。
ＲdおよびＲeは、それぞれ独立して水素または生理学的条件下において加水分解可能な基であり、任意に置換された低級アルカノイルもしくはアロイル、低級アルカノイルアミノ、任意に置換された低級アルキルもしくはアリールスルフォニル、または任意に置換された低級アルキルカルバモイル、あるいは両者共に低級アルキリデンもしくはシクロアルキリデンを示す；Ｒfは水素または生理学的条件下において加水分解可能な基であり、任意に置換された低級アルカノイルもしくはアノイル、低級アルキルアミノもしくは低級ジアルキルアミノまたは低級アルカノイルアミノ、任意に置換された低級アルキルもしくはアリールスルフォニル、あるいは任意に置換された低級アルキルカルバモイルを示す。）
【請求項２】
Ｒfが水素またはアルキルである請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒfがアルキルである請求項１または２記載の化合物。
【請求項４】
ＲdおよびＲeがそれぞれ独立して水素または任意に置換されたアルカノイルもしくはアロイルである請求項１、２または３記載の化合物。
【請求項５】
Ｅがカテコール化合物の誘導体である請求項１、２、３または４記載の化合物。
【請求項６】
Ｅが式Ｉａの残基である請求項１、２、３、４または５記載の化合物。
【化２】
2005509673.tif 000011
（式中、Ｒ2は水素、任意に置換されたアシルもしくはアロイル、低級アルキルスルフォニル、またはアルキルカルバモイルであり、Ｘはハロゲン、ニトロ、シアノ、低級アルキルスルフォニル、スルフォンアミド、アルデヒド、カルボキシルまたはトリフルオロメチルなどの陰性置換基からなる；Ｒ3は水素、ハロゲン、置換アルキル、ヒドロキシアルキル、アミノ、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキルスルフォニル、スルフォンアミド、アルデヒド、アルキルカルボニル、アラルキリデンカルボニルもしくはカルボキシル、または
−ＣＨ＝ＣＲ4Ｒ5および−ＣＨ2ＣＨＲ4Ｒ5（式中、Ｒ4は水素、アルキル、アミノ、シアノ、カルボキシルまたはアシルであり、Ｒ5は水素、アミノ、シアノ、カルボキシル、アルコキシカルボニル、カルボキシアルケニル、ニトロ、アシル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、あるいは任意に置換されたカルボキシアミド、カルバモイルまたはアロイルもしくはヘテロアロイルか、あるいは、Ｒ4およびＲ5が５〜７員環の置換シクロアルカノン環を共に形成する。）；
−（ＣＯ）n（ＣＨ2）m−ＣＯＲ（式中、ｎは０または１であり、ｍは０または１〜７であり、Ｒはヒドロキシ、アルキル、カルボキシアルキル、任意に置換されたアルケン、アルコキシまたは任意に置換されたアミノである。）；
−ＣＯＮＲ8Ｒ9（式中、Ｒ8およびＲ9はそれぞれ独立して水素またはアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アラルキルの任意に置換された基の１つであるか、または任意に置換されたピペリジルを共に形成する。）；および
−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ10（式中、Ｒ10は置換アルキルである。）
から選択された基である。）
【請求項７】
Ｒ2が水素である請求項６記載の化合物。
【請求項８】
ＸがＲ2Ｏ−のオルト位にある請求項６または７記載の化合物。
【請求項９】
Ｅが式Ｉｂの残基である請求項１、２、３、４または５記載の化合物。
【化３】
2005509673.tif 000012
（式中、Ｒ1は陰性置換基である；Ｒ2は−Ａ−Ｒ4（式中、Ａは分岐鎖または直鎖の（Ｃ1-9）アルキレン；Ｒ4はカルボキシ、５−テトラゾリル、Ｒ5またはＣＯ−Ｒ5（式中、Ｒ5はフェニルまたは少なくとも１つのカルボキシもしくは５−テトラゾリルで置換された（Ｃ3-7）シクロアルキル））である；Ｒ3は陰性置換基である。）
【請求項１０】
Ｒ1がニトロ、シアノ、ホルミルまたはカルボキシである請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ3がニトロ、シアノ、ハロゲン、ホルミル、カルボキシ、（Ｃ1-5）アルキルカルボニル、アリールカルボニルまたはＳＯ2Ｒ6（式中、Ｒ6は分岐鎖もしくは直鎖の（Ｃ1-5）アルキル、アリールアルキル、アリールもしくはＮＲ7Ｒ8（式中、Ｒ7およびＲ8はそれぞれ独立して水素または分岐鎖もしくは直鎖の（Ｃ1-5）アルキルであるか、あるいは（Ｃ3-6）環を共に形成する。））である請求項９または１０記載の化合物。
【請求項１２】
Ｅが式Ｉｃの残基である請求項１、２、３、４または５記載の化合物。
【化４】
2005509673.tif 000013
（式中、Ｒaはニトロまたはシアノである；Ｒbは水素またはハロゲンであり、Ｒcはハロゲン、ニトロ、シアノまたは−（Ａ）n−（Ｑ）m−Ｒ1もしくは−（Ａ）n−Ｑ−Ｒ2であり、Ａは低級アルキルにより任意に置換されたビニレンであり、ｎは０または１であり、ｍは０または１であり、Ｒ1は−ＣＯＲ3、芳香族炭素環または炭素原子を介して結合した芳香族もしくは部分不飽和複素環であり、Ｒ2は水素または任意に置換された飽和もしくは部分不飽和低級炭化水素残基であり、Ｒ3はヒドロキシ、アミノ、酸素原子またはイミノもしくは低級アルキルイミノを介して結合した任意に置換された飽和または部分不飽和低級炭化水素残基、あるいは環状窒素原子を介して結合した飽和Ｎ含有複素環であり、Ｑは−ＣＯ−または＞Ｃ＝Ｎ−（Ｚ）p−Ｒ4であり、Ｚは酸素原子またはイミノであり、ｐは０または１であり、そしてＲ4は水素、または任意に置換され、かつカルボニルを介して任意に結合した飽和もしくは部分不飽和低級炭化水素残基である。）
【請求項１３】
Ｅが式Ｉｄの残基である請求項１、２、３、４または５記載の化合物。
【化５】
2005509673.tif 000014
（式中、Ｒ2は水素または生理学的条件下に加水分解可能な基であり、任意に置換された低級アルカノイルもしくはアロイル、任意に置換された低級アルキルもしくはアリールスルフォニル、または任意に置換された低級アルキルカルバモイルを示す；Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は同じかまたは異なり、水素、任意に置換された飽和もしくは部分不飽和低級炭化水素残基、ヒドロキシ、任意に置換された低級アルコキシもしくはアリールオキシ、任意に置換されたアリール、任意に置換されたアルカノイルもしくはアロイル、低級アルカノイルアミノ、低級ジアルカノイルアミノ、カルボキシル、任意に置換された低級アルキルオキシカルボニルもしくはアリールオキシカルボニル、任意に置換されたカルバモイル、ハロゲン、ニトロ、アミノ、低級アルキルアミノもしくは低級ジアルキルアミノまたはシアノであるか、あるいは共に脂肪族もしくは複素脂肪族環または芳香族もしくは複素芳香族環を示す。）
【請求項１４】
Ｒ2が水素である請求項１３記載の化合物。
【請求項１５】
（Ｓ）−２−｛５−［（Ｅ）−２−シアノ−２−（ジエチルカルバモイル）ビニル］−２−ヒドロキシ−３−ニトロフェノキシカルボニルアミノ｝−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）プロピオン酸メチルエステル、またはその薬学的に許容可能なエステルもしくは塩。
【請求項１６】
（Ｓ）−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−［２−ヒドロキシ−５−（４−メチルベンゾイル）−３−ニトロフェノキシカルボニルアミノ］プロピオン酸メチルエステル、またはその薬学的に許容可能なエステルもしくは塩。
【請求項１７】
式Ｉで表される化合物、またはその薬学的に許容可能なエステルもしくは塩がレボドパおよびＣＯＭＴ阻害剤の前駆体として使用される医薬品の製造のための使用。
【化６】
2005509673.tif 000015
（式中、Ｅ、Ｇ、Ｔ、Ｒd、ＲeおよびＲfは請求項１において定義される通りである。）
【請求項１８】
前記化合物が（Ｓ）−２−｛５−［（Ｅ）−２−シアノ−２−（ジエチルカルバモイル）ビニル］−２−ヒドロキシ−３−ニトロフェノキシカルボニルアミノ｝−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）プロピオン酸メチルエステル、またはその薬学的に許容可能なエステルもしくは塩である請求項１７記載の使用。
【請求項１９】
前記化合物が（Ｓ）−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−［２−ヒドロキシ−５−（４−メチルベンゾイル）−３−ニトロフェノキシカルボニルアミノ］プロピオン酸メチルエステル、またはその薬学的に許容可能なエステルもしくは塩である請求項１７記載の使用。
【請求項２０】
活性剤として式Ｉで表される化合物、またはその薬学的に許容可能なエステルもしくは塩および任意的に薬学的に許容可能な賦形剤からなる医薬組成物。
【化７】
2005509673.tif 000016
（式中、Ｅ、Ｇ、Ｔ、Ｒd、ＲeおよびＲfは請求項１において定義される通りである。）
【請求項２１】
前記化合物が（Ｓ）−２−｛５−［（Ｅ）−２−シアノ−２−（ジエチルカルバモイル）ビニル］−２−ヒドロキシ−３−ニトロフェノキシカルボニルアミノ｝−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）プロピオン酸メチルエステル、またはその薬学的に許容可能なエステルもしくは塩である請求項２０記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記化合物が（Ｓ）−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−［２−ヒドロキシ−５−（４−メチルベンゾイル）−３−ニトロフェノキシカルボニルアミノ］プロピオン酸メチルエステル、またはその薬学的に許容可能なエステルもしくは塩である請求項２０記載の医薬組成物。
【請求項２３】
レボドパおよびＣＯＭＴ阻害が有用であることが示されている疾患または状態を治療する方法であって、そのような治療を必要とする哺乳動物に対して式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能なエステルもしくは塩を有効量投与することからなる方法。
【化８】
2005509673.tif 000017
（式中、Ｅ、Ｇ、Ｔ、Ｒd、ＲeおよびＲfは請求項１において定義される通りである。）
【請求項２４】
前記化合物が（Ｓ）−２−｛５−［（Ｅ）−２−シアノ−２−（ジエチルカルバモイル）ビニル］−２−ヒドロキシ−３−ニトロフェノキシカルボニルアミノ｝−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）プロピオン酸メチルエステル、またはその薬学的に許容可能なエステルもしくは塩である請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
前記化合物が（Ｓ）−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−［２−ヒドロキシ−５−（４−メチルベンゾイル）−３−ニトロフェノキシカルボニルアミノ］プロピオン酸メチルエステル、またはその薬学的に許容可能なエステルもしくは塩である請求項２３記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、無保護の、または適切に保護されたレボドパおよびカテコールＯ−メチルトランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）阻害剤の共薬物（codrug）、またはその薬学的に許容可能なエステルもしくは塩に関する。本発明は、さらにそれらの医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
プロドラッグ手法は、一般的に、治療剤の物理化学的特性、生物薬剤学的特性、およびドラッグデリバリー特性を改善するために使用される。理想としては、不活性前部分（inactive pro-moiety）は共有結合により親分子（parent molecule）に結合しており、得られるプロドラッグはその薬理効果を発現する前に体内で親ドラッグ（parent drug）に変換される。多くの疾患は、別個の投薬形態で同時投与される治療剤を組み合わせることにより治療される。
【０００３】
しかしながら、単一の化学物質として薬剤を同時投与すると、例えば、デリバリー特性が向上する、薬物が特定の作用部位に標的化されるなどの潜在的な利点がある。共薬物においては、少なくとも２つの相乗作用する薬物が互いに結合し、親ドラッグを所望の作用部位で放出するよう設計されている。
【０００４】
レボドパ（３，４−ジヒドロキシフェニル−Ｌ−アラニン）は、パーキンソン病（ＰＤ）患者の脳内において不足するドーパミンの前駆体である。従来のＰＤ治療は、レボドパをカルビドパなどのアミノ酸デカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）阻害剤と組み合わせてなる。治療中、ＣＯＭＴはレボドパを代謝させるための主要な酵素のままである。エンタカポーネ［（Ｅ）−２−シアノ−Ｎ，Ｎ−ジエチル−３−（３，４−ジヒドロキシ−５−ニトロフェニル）プロペンアミド］は新規の強力なＣＯＭＴ阻害剤である。エンタカポーネは、現在、ＰＤ治療におけるレボドパ治療に対して臨床添加剤として使用されている。エンタカポーネをレボドパおよびＡＡＤＣ阻害剤とともに投与すると、レボドパのバイオアベイラビリティが高まり、その作用持続期間も伸びる。
【０００５】
［外１］
2005509673.tif 000003
【０００６】
共薬物手法は、レボドパおよびＣＯＭＴ阻害剤の治療効果を組み合わせるための生産的な方法と考えられ得る。効果的な共薬物は化学的加水分解に対して安定であるが、例えば生理学的条件下における酵素的加水分解によって親ドラッグを放出する。
【発明の開示】
【０００７】
本発明の目的は、レボドパおよびＣＯＭＴ阻害剤を放出する化合物を提供することにある。
【０００８】
また本発明は、レボドパおよびＣＯＭＴ阻害剤が有用であることが示されている疾患または状態を治療するための化合物、ならびにレボドパおよびＣＯＭＴ阻害剤の前駆体として使用される医薬の製造のための該化合物の使用を提供する。さらに、本発明の化合物を含有する医薬組成物を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
レボドパはスペーサーを介してＣＯＭＴ阻害剤に結合され得る。好ましくは、ＣＯＭＴ阻害剤はカテコール化合物の誘導体である。本発明に使用される好適なカテコールＣＯＭＴ阻害剤は、例えば英国特許第２２００１０９Ａ号明細書、米国特許第６，１５０，４１２号明細書、欧州特許第２３７９２９Ｂ１号明細書および同第１０１０６８８Ａ１号明細書などに開示されている。
【００１０】
したがって、本発明は一般式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能なエステルもしくは塩を提供する。
【００１１】
【化１】
2005509673.tif 000004
【００１２】
式中、ＥはＣＯＭＴ阻害剤残基であり、Ｇは−（ＣＯ）a−（ａは０または１）であり、Ｔは−（ＣＨ2）b−である。ここで、ｂはａに依存し、
ａが０である場合は、ｂは０
ａが１である場合は、ｂは２または３
である。
【００１３】
ＲdおよびＲeは、それぞれ独立して水素または生理学的条件下において加水分解可能な基であり、任意に置換された低級アルカノイルもしくはアロイル、低級アルカノイルアミノ、任意に置換された低級アルキルもしくはアリールスルフォニル、または任意に置換された低級アルキルカルバモイル、あるいは両者共に低級アルキリデンもしくはシクロアルキリデンを示す；Ｒfは水素または生理学的条件下において加水分解可能な基であり、任意に置換された低級アルカノイルもしくはアノイル、低級アルキルアミノもしくは低級ジアルキルアミノまたは低級アルカノイルアミノ、任意に置換された低級アルキルもしくはアリールスルフォニル、あるいは任意に置換された低級アルキルカルバモイルを示す。好ましくは、Ｒfは水素またはアルキルであり、例えばアルキルであることが好ましい。さらに好ましくは、ＲdおよびＲeはそれぞれ独立して水素または任意に置換されたアルカノイルまたはアロイルである。Ｅがカテコール化合物の誘導体である化合物が好ましい。Ｒd、ＲeおよびＲfの定義において、用語「低級」は、最高８つ、好ましくは最高４つの炭素原子を有する残基を示す。単独で、または「アルカノイル、アルキリデン、シクロアルキリデン、アルキルアミノ」などの用語と組み合わせて用いられる用語「アルキル」は、直鎖状または分岐状の飽和または部分不飽和炭化水素残基を示す。「アロイル」などの用語と組み合わせて用いられる用語「アリール」は炭素環式芳香族、好ましくは単環式基または二環式基を示す。種々の残基と関連した用語「任意に置換された」は、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素もしくはトリフルオロメチルなどのハロゲン置換基、アルキルオキシまたはアリール置換基について言及される。「任意に置換された」基は１〜３、好ましくは１または２、最も好ましくは１つの前記置換基を含有し得る。
【００１４】
式Ｉの化合物は、胃および小腸における条件を考慮して、所望の特性である酸性ｐＨでの化学的加水分解に対する充分な安定性を提供するとともに、適切な生分解性を示す。
【００１５】
式Ｉの化合物の部分基としては、本発明は英国特許第２２００１０９Ａ号明細書に開示されているようにＥがカテコールＣＯＭＴ阻害剤である化合物を提供する。すなわち、Ｅは式Ｉａの残基である。
【００１６】
【化２】
2005509673.tif 000005
【００１７】
式中、Ｒ2は水素、任意に置換されたアシルもしくはアロイル、低級アルキルスルフォニル、またはアルキルカルバモイルであり、Ｘはハロゲン、ニトロ、シアノ、低級アルキルスルフォニル、スルフォンアミド、アルデヒド、カルボキシルまたはトリフルオロメチルなどの陰性置換基からなる；Ｒ3は水素、ハロゲン、置換アルキル、ヒドロキシアルキル、アミノ、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキルスルフォニル、スルフォンアミド、アルデヒド、アルキルカルボニル、アラルキリデンカルボニルもしくはカルボキシル、または
−ＣＨ＝ＣＲ4Ｒ5および−ＣＨ2ＣＨＲ4Ｒ5（式中、Ｒ4は水素、アルキル、アミノ、シアノ、カルボキシルまたはアシルであり、Ｒ5は水素、アミノ、シアノ、カルボキシル、アルコキシカルボニル、カルボキシアルケニル、ニトロ、アシル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、あるいは任意に置換されたカルボキシアミド、カルバモイルまたはアロイルもしくはヘテロアロイルか、あるいは、Ｒ4およびＲ5が５〜７員環の置換シクロアルカノン環を共に形成する。）；
−（ＣＯ）n（ＣＨ2）m−ＣＯＲ（式中、ｎは０または１であり、ｍは０または１〜７であり、Ｒはヒドロキシ、アルキル、カルボキシアルキル、任意に置換されたアルケン、アルコキシまたは任意に置換されたアミノである。）；
−ＣＯＮＲ8Ｒ9（式中、Ｒ8およびＲ9はそれぞれ独立して水素またはアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アラルキルの任意に置換された基の１つであるか、または任意に置換されたピペリジルを共に形成する。）；および
−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ10（式中、Ｒ10は置換アルキルである。）
から選択された基である。好ましくは、Ｒ2は水素である。さらに好ましくは、ＸはＲ2Ｏ−のオルト位にある。Ｒ、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9およびＲ10の定義において、用語「アルキル」は、それ自体または他の基の一部として、炭素原子数が１８以下、好ましくは１〜８、もっとも好ましくは１〜４である直鎖状および分岐鎖状のラジカルの両方を含む。用語「低級アルキル」は、それ自体または他の基の一部として、炭素原子数１〜７、好ましくは１〜４、もっとも好ましくは１または２の直鎖状および分岐鎖状のラジカルの両方を含む。用語「アルケニル」および「アルキニル」は、用語「アルキル」に関して前記に定義した通りの炭化水素残基であって、それぞれ少なくとも１つの炭素−炭素二重結合および炭素−炭素三重結合を含むものを示す。アルケニルおよびアルキニル残基は１２以下、好ましくは１〜８、もっとも好ましくは１〜４の炭素原子を含有し得る。用語「アシル」とは、それ自体または他の基の一部として、アルキルカルボニルまたはアルケニルカルボニルをいう。用語「アロイル」は、それ自体または他の基の一部として、アリールカルボニル、アリールを示し、それは環状部分に６〜１０の炭素原子を含有する単環式基または二環式基である。アリールの具体例としては、フェニル、ナフチルなどである。用語「低級アルキリデン」とは、２〜８、好ましくは２〜４の炭素原子を含有する鎖をいう。用語「アルコキシ」としては、それ自体または他の基の一部として、酸素原子に結合したアルキル残基があげられる。用語「シクロアルキル」としては３〜８、好ましくは５〜７の炭素原子を含有する飽和環状炭化水素基があげられる。用語「アラルキル」とはアリール置換基を有するアルキルをいう。具体例は、ベンジルである。用語「ハロゲン」とは、塩素、臭素、フッ素またはヨウ素をいい、塩素および臭素が好ましい。種々の残基に関連する用語「任意に置換された」とは、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素もしくはトリフルオロメチルなどのハロゲン置換基、アルキルオキシ、アリール、アルキルーアリール、ハロゲンーアリール、シクロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヒドロキシ、アルキルアミノ、アルカノイルアミノ、アリールカルボニルアミノ、ニトロ、シアノ、チオール、またはアルキルチオ置換基をいう。「任意に置換された」基は、１〜３、好ましくは１または２、もっとも好ましくは１つの前記置換基を含有し得る。用語「ヘテロアロイル」とは、１〜３、好ましくは１または２のヘテロ原子Ｎおよび／またはＯおよび／またはＳを含有する単環式基または二環式基をいう。
【００１８】
式Ｉの化合物のさらなる部分基として、本発明はＥが米国特許第６，１５０，４１２号明細書に開示されているカテコールＣＯＭＴ阻害剤である化合物を提供する。すなわち、Ｅは式Ｉｂの残基である。
【００１９】
【化３】
2005509673.tif 000006
【００２０】
式中、Ｒ1は陰性置換基であり、好ましくはニトロ、シアノ、ホルミル、カルボキシである；Ｒ2は−Ａ−Ｒ4（式中、Ａは分岐鎖または直鎖の（Ｃ1-9）アルキレン；Ｒ4はカルボキシ、５−テトラゾリル、Ｒ5またはＣＯ−Ｒ5（式中、Ｒ5はフェニルまたは少なくとも１つのカルボキシもしくは５−テトラゾリルで置換された（Ｃ3-7）シクロアルキル））である；Ｒ3は陰性置換基であり、好ましくはニトロ、シアノ、ハロゲン、ホルミル、カルボキシ、（Ｃ1-5）アルキルカルボニル、アリールカルボニルまたはＳＯ2Ｒ6（式中、Ｒ6は分岐鎖もしくは直鎖の（Ｃ1-5）アルキル、アリールアルキル、アリールもしくはＮＲ7Ｒ8（式中、Ｒ7およびＲ8はそれぞれ独立して水素または分岐鎖もしくは直鎖の（Ｃ1-5）アルキルであるか、あるいは（Ｃ3-6）環を共に形成する。））である。用語「アリール」はフェニルまたはナフチルを意味する。
【００２１】
式Ｉの化合物のさらなる部分基として、本発明はＥが欧州特許第２３７９２９Ｂ１号明細書に開示されているカテコールＣＯＭＴ阻害剤である化合物を提供する。すなわち、Ｅは式Ｉｃの残基である。
【００２２】
【化４】
2005509673.tif 000007
【００２３】
式中、Ｒaはニトロまたはシアノである；Ｒbは水素またはハロゲンであり、Ｒcはハロゲン、ニトロ、シアノまたは−（Ａ）n−（Ｑ）m−Ｒ1もしくは−（Ａ）n−Ｑ−Ｒ2であり、Ａは低級アルキルにより任意に置換されたビニレンであり、ｎは０または１であり、ｍは０または１であり、Ｒ1は−ＣＯＲ3、芳香族炭素環または炭素原子を介して結合した芳香族もしくは部分不飽和複素環であり、Ｒ2は水素または任意に置換された飽和もしくは部分不飽和低級炭化水素残基であり、Ｒ3はヒドロキシ、アミノ、酸素原子またはイミノもしくは低級アルキルイミノを介して結合した任意に置換された飽和または部分不飽和低級炭化水素残基、あるいは環状窒素原子を介して結合した飽和Ｎ含有複素環であり、Ｑは−ＣＯ−または＞Ｃ＝Ｎ−（Ｚ）p−Ｒ4であり、Ｚは酸素原子またはイミノであり、ｐは０または１であり、そしてＲ4は水素、または任意に置換され、かつカルボニルを介して任意に結合した飽和もしくは部分不飽和低級炭化水素残基である。Ｒa、ＲbおよびＲcの定義において、用語「低級」は、最高７、好ましくは最高４の炭素原子を有する残基および化合物を示す。用語「アルキル」は、単独で、または「アルキル基」、「アルコキシ」、「アルキルチオ」および「アルキルイミノ」などと組み合わせて、直鎖または分岐鎖の飽和炭化水素残基、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔ−ブチルなどを示す。用語「飽和または部分不飽和低級炭化水素残基」は開鎖および環状基ならびにこれらの組み合わせを示す。飽和および部分不飽和低級炭化水素残基の例は、前記に定義した低級アルキル基；例えば、２−プロペニル、２−ブテニル、３−ブテニルおよび２−メチル−２−プロペニルなどの低級アルケニル基；例えば、シクロプロピル、シクロペンチル、２−メチルシクロペンチル、シクロヘキシルおよび３−メチルシクロヘキシルなどの、低級アルキル基により任意に置換されたＣ3-7シクロアルキルおよびＣ8-10ビシクロアルキル基；例えば、３−シクロペンテニル、１−メチル−３−シクロペンテニルおよび３−シクロヘキセニルなどの、低級アルキル基により任意に置換された低級シクロアルケニル基；例えば、シクロプロピルメチル、シクロプロピルエチル、シクロペンチルメチル、シクロヘキシルメチル、２−シクロヘキセニルメチルおよび３−シクロプロピル−２−プロペニルなどの、低級シクロアルキルまたはシクロアルケニル基により置換された低級アルキルまたはアルケニル基である。低級アルケニル基は好ましくは炭素原子を２〜４含む；シクロアルキルおよびシクロアルケニル基は好ましくは炭素原子を３〜６含む。次にあげるのは、前記低級炭化水素残基の置換基として考えられるものである：ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、ハロゲン、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ（低級アルキル）アミノ、低級アルコキシ、低級アルコキシカルボニル、アリール、アリールアミノカルボニル、アリールカルボニル、アリールカルボニルアミノ、低級アルカノイルオキシ、低級アルカノイル、カルバモイル、モノまたはジ（低級アルキル）カルバモイル、低級アルキレンジオキシ、トリフルオロメチル、カルボキシ、低級アルカノイルアミノ、低級アルコ��シカルボニルアミノおよび低級アルキルチオ。飽和または部分不飽和低級炭化水素残基は、好ましくは不飽和、または一置換もしくは二置換される。用語「アリール」は、炭素環式芳香族基、好ましくは単環式基または二環式基を示す。特に好ましい炭素環式芳香族基は、フェニルおよびナフチルであり、特にフェニルである。これらの基は、ハロゲン、トリフルオロメチル、ニトロ、アミノ、モノ−またはジ（低級アルキル）アミノ、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、低級アルカノイル、低級アルコキシカルボニル、カルボキシ、ヒドロキシ、シアノ、低級アルカノイルオキシ、カルバモイル、モノ−またはジ（低級アルキル）カルバモイル、低級アルキレンシオキシ、低級アルカノイルアミノまたは低級アルコキシカルボニルアミノにより任意に置換されている。炭素環式芳香族基は、好ましくは無置換あるいは一置換または二置換される。用語「芳香族または部分不飽和複素環式基」は、好ましくはモノ、ジもしくはトリ環式、芳香族、または窒素、硫黄および酸素からなる群より選択されるヘテロ原子を５個まで有する部分不飽和複素環式基を示す。複素環式基は好ましくは１〜４個の窒素原子および／または酸素もしくは硫黄原子を含む。それらは、好ましくは単環式または二環式である。ヘテロ原子は、好ましくは一つまたは二つの環上に配置されており、窒素原子は同時に二つの環の構成部分にもなり得る。複素環式基は、好ましくは芳香族である。それらは置換され得、好ましくは一置換、二置換または三置換される。置換基としては、ハロゲン、トリフルオロメチル、ニトロ、カルボキシ、アミノ、アリールアミノ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルカノイル、低級アルカノイルオキシ、オキソ、低級アルキレンジオキシ、メルカプト、低級アルキルチオ、低級アルキルアミノ、ジ（低級アルキル）アミノ、Ｃ3-7シクロアルキルアミノ、Ｃ8-10ビシクロアルキルアミノ、低級アルカノイルアミノ、低級アルコキシカルボニルアミノ、カルバモイル、モノまたはジ（低級アルキル）カルバモイル、シアノ、アリール、アリール（低級アルキル）、アリール（低級アルキル）アミノ、ヘテロアリール、ヘテロアリール（低級アルキル）、ヘテロアリールアミノおよびＣ3-7シクロアルキルが考えられる。単環複素環式基は、好ましくは５員環または６員環であり、ヘテロ原子を最高４つ含む。二環複素環式基は、好ましくは８〜１０員環であり、個々の環は好ましくは５員環または６員環である。次にあげるのは、そのような複素環式基の例である：ピリジル、ピラジニル、トリアジニル、チアジアジニル、チアゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、ピラゾリル、テトラゾリル、イミダゾリル、チエニル、キノリニル、イソキノリニル、ジヒドロイソキノリニル、ベンゾキサジニル、キノキサリニル、ベンゾピラニル、ベンズイミダゾリル、インドリル、イミダゾチアゾリル、イミダゾチアジアゾリル、イミダゾピリジル、ベンゾチアジニル、ベンゾキノキサリニルおよびイミダゾベンゾチアゾリル。用語「ヘテロアリール」は、前記に定義した芳香族複素環式基を示す。用語「環窒素原子を介して結合した飽和Ｎ含有複素環式基」は、好まし���は、３〜７員環、好ましくは４〜６員環の、前記窒素原子に加えて第二ヘテロ原子として酸素、硫黄または窒素原子を含み得る飽和Ｎ複素環を示す。これらの飽和Ｎ複素環は、低級アルキル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルカノイルオキシ、低級ヒドロキシアルキル、低級アルコキシアルキル、低級アルカノイルオキシアルキル、低級アルコキシカルボニル、低級アルカノイル、カルバモイル、モノまたはジ（低級アルキル）カルバモイル、オキソおよび／または低級アルキレンジオキシにより一置換または二置換され得る。次にあげるのは、そのようなＮ含有複素環式基の例である：４−モルホリニル、１−ピロリジニルおよび１−アゼチジニル。
【００２４】
式Ｉの化合物のさらなる部分基として、本発明はＥが欧州特許１０１０６８８Ａ１号明細書に開示されているカテコールＣＯＭＴ阻害剤である化合物を提供する。すなわち、Ｅは式Ｉｄの残基である。
【００２５】
【化５】
2005509673.tif 000008
【００２６】
式中、Ｒ2は水素または生理学的条件下に加水分解可能な基であり、任意に置換された低級アルカノイルもしくはアロイル、任意に置換された低級アルキルもしくはアリールスルフォニル、または任意に置換された低級アルキルカルバモイルを示す；Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は同じかまたは異なり、水素、任意に置換された飽和もしくは部分不飽和低級炭化水素残基、ヒドロキシ、任意に置換された低級アルコキシもしくはアリールオキシ、任意に置換されたアリール、任意に置換されたアルカノイルもしくはアロイル、低級アルカノイルアミノ、低級ジアルカノイルアミノ、カルボキシル、任意に置換された低級アルキルオキシカルボニルもしくはアリールオキシカルボニル、任意に置換されたカルバモイル、ハロゲン、ニトロ、アミノ、低級アルキルアミノもしくは低級ジアルキルアミノまたはシアノであるか、あるいは共に脂肪族もしくは複素脂肪族環または芳香族もしくは複素芳香族環を示す。好ましくは、Ｒ2は水素である。Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5の定義において、用語「低級」は、最高８つ、好ましくは最高４つの炭素原子を有する残基を示す。用語「アルキル」は、単独で、または「アルカノイル、アルキルオキシカルボニル、アルキルアミノ」などの用語と組み合わせて、直鎖状または分岐鎖状の飽和炭化水素残基を示す。用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を示す。用語「アリール」は、炭素環式芳香族基を示し、好ましくは単環式または二環式基である。
【００２７】
好ましくは、前記化合物は（Ｓ）−２−｛５−［（Ｅ）−２−シアノ−２−（ジエチルカルバモイル）ビニル］−２−ヒドロキシ−３−ニトロフェノキシカルボニルアミノ｝−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）プロピオン酸メチルエステルまたは（Ｓ）−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−［２−ヒドロキシ−５−（４−メチルベンゾイル）−３−ニトロフェノキシカルボニルアミノ］プロピオン酸メチルエステル、またはその薬学的に許容可能なエステルもしくは塩である。
【００２８】
前記に開示されたすべての化合物の薬学的に許容可能な塩およびエステルは、適用可能な場合、公知の方法により製造され得る。薬学的に許容可能な塩は、当該技術における通常の有機または無機塩である。そのような塩は文献において周知である。
【００２９】
本発明は、レボドパおよびＣＯＭＴの阻害が有用であることが示されている障害または状態を治療するための化合物、ならびにレボドパおよびＣＯＭＴ阻害剤の前駆体として使用される医薬品の製造のための該化合物の使用を提供する。さらには、本発明の化合物を含有する医薬組成物も提供される。
【００３０】
本発明の化合物は、適切な開始物質を用いる、文献において公知の方法と同じかまたはそれに準じた種々の合成経路により製造することができる。
【００３１】
概して、式Ｉの化合物は、例えば図式１と同じようにまたはそれに準じて製造することができる。
【００３２】
【化６】
2005509673.tif 000009
【００３３】
ここで、Ｒは例えばアルキル、Ｒ’は例えばアシル、そしてＥ、ＧおよびＴは前記に定義した通りである。
【００３４】
レボドパのカルボキシル基は、例えばアルキルエステルやメチルエステルとして、従来の方法により保護される。水酸基は、例えばアシル保護基を用いる従来の方法により保護される。レボドパとＣＯＭＴ阻害剤残基との間の所望のスペーサーは、適切な試薬を用いて、化学分野において公知の反応により得られ、その後、ＣＯＭＴ阻害剤残基は公知の方法により挿入され得る。これは、例えばイソシアネートまたは具体例において示したジカルボン酸モノアミドを介して達成され得る。保護水酸基は、所望の場合、従来の方法により取り除かれ得る。
【００３５】
前記の合成経路は本発明の化合物の製造を示すものであるが、それらに限定されるものではなく、すなわち当業者の一般知識の範囲内における他の合成方法も使用可能である。
【００３６】
本発明の化合物は、所望の場合、当該技術において周知の方法を用いてそれらの薬学的に許容可能な塩またはエステルに変換しても良い。
【００３７】
本発明の化合物は、腸内、局所または腸管外投与され得る。
【００３８】
本発明の化合物は、患者に対してそれ自体を、または１つ以上の他の活性成分および／もしくは適切な医薬賦形剤と組み合わせて投与される。後者の場合は、従来より使用されている賦形剤、ならびに充填剤、結合剤、分解剤、潤滑剤、溶媒、ゲル形成剤、乳化剤、安定剤、顔料および／または防腐剤などの処方補助剤からなる。
【００３９】
本発明で使用される化合物は、一般的に公知の調剤方法を用いて投与形態に処方される。投与形態は、例えば、錠剤、カプセル、顆粒、座剤、乳液、懸濁液または溶液などであり得る。投与経路および生薬形態によって、処方中の活性成分の量は代表的には０．０１〜１００％（ｗ／ｗ）の間で変化され得る。
【００４０】
本発明は、以下の実施例によってより詳細に説明される。実施例は、目的のみを示し、クレームに定義された本発明の範囲を限定しない。
【００４１】
実施例１：（Ｓ）−２−｛５−［（Ｅ）−２−シアノ−２−（ジエチルカルバモイル）ビニル］−２−ヒドロキシ−３−ニトロフェノキシカルボニルアミノ｝−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）プロピオン酸メチルエステル
レボドパ（２ｇ、１０ｍｍｏｌ）を乾燥メタノール（１０ｍｌ）中塩化チオニル（５ｍｌ）で処理した。得られた白色固体を、室温にてトリフルオロ酢酸（４ｍｌ）および塩化アセチル（１．５ｍｌ）とともに攪拌し、定量的収率および高純度の（Ｓ）−２−アミノ−３−（３，４−ジアセトキシフェニル）プロピオン酸メチルエステルを得た。（Ｓ）−２−アミノ−３−（３，４−ジアセトキシフェニル）プロピオン酸メチルエステルのＨＣｌ塩（１．５ｇ、４．５ｍｍｏｌ）を乾燥酢酸エチルに溶解し、ジホスゲン（１．１ｍｌ、９．０ｍｍｏｌ）を加え、窒素雰囲気下に−１０℃で攪拌した（加熱した場合、ホスゲンが放出するため、ジホスゲンの取り扱いにおいては注意を要する）。該混合物を室温まで暖め、次いで５時間還流し、高真空下に蒸発乾燥させ、（Ｓ）−３−（３，４−ジアセトキシフェニル）−２−イソシアネートプロピオン酸メチルエステルを得た。イソシアネート生成物を、さらに精製することなく直ちに次の反応に使用した。前記生成物を、窒素雰囲気下、光の不存在下にエンタカポーネ（５５３ｍｇ、１．８１ｍｍｏｌ）とともに乾燥アセトニトリル（１０ｍｌ）に溶解した。該混合物を２０時間還流し、蒸発乾燥させた。生成物を溶離剤としてジクロロメタン／メタノール（１００：１）を用いてシリカゲルに対するフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。アセチル基を５０℃で２時間、アセトン／３Ｎ  ＨＣｌ（２０：１）溶液を用いて処理することにより取り除いた。得られた明るい黄色の混合物を蒸発乾燥し、溶離剤としてアセトニトリル／水（５０：５０）を用いて予備的なＨＰＬＣにより精製した。溶媒を蒸発することにより、（Ｓ）−２−｛５−［（Ｅ）−２−シアノ−２−（ジエチルカルバモイル）ビニル］−２−ヒドロキシ−３−ニトロフェノキシカルボニルアミノ｝−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）プロピオン酸メチルエステルが黄色固体として得られた（４３６ｍｇ、４６％）、ｍ．ｐ．（分解された）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3、ＴＭＳ）δ：１．２６（６Ｈ、ｂｒ、ＣＨ2ＣＨ3）、２．９５（１Ｈ、ｑ、Ｊ＝６．１および１３．７Ｈｚ、ＣＨAＣＨ）、３．１１（１Ｈ、ｑ、Ｊ＝４．７および１３．７Ｈｚ、ＣＨBＣＨ）、３．５０（４Ｈ、ｂｒ、ＣＨ2ＣＨ3）、３．７７（３Ｈ、ｓ、ＯＣＨ3）、４．５９（１Ｈ、ｑ、Ｊ＝５．９および７．０Ｈｚ、ＣＨ2ＣＨ）、６．１４（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、ＮＨ）、６．１５（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、ＡｒＨ）、６．６６（１Ｈ、ｓ、ＡｒＨ）、６．７２（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、ＡｒＨ）、７．５２（１Ｈ、ｓ、ＣＨ＝Ｃ）、７．９２（１Ｈ、ｓ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、ＡｒＨ）、８．３２（１Ｈ、ｓ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、ＡｒＨ）。13Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ：１２．５、１３．６、３７．０、４１．１、４３．６、５２．７、５５．４、１０７．０、１１５．５、１１６．６、１２１．４、１２２．９、１２４．９、１２７．６、１３０．０、１３４．５、１４１．３、１４３．３，１４３．９、１４４．０、１４８．１、１５１．１、１５２．７、１６２．９、１７１．４。ＥＳＩ−ＭＳ：５４３．１（Ｍ＋１）。
【００４２】
実施例２：（Ｓ）−Ｎ−｛２−［３，４−ビス−（２，２−ジメチルプロピオニルオキシ）フェニル］−１−（メトキシカルボニル）エチル｝スクシンアミド酸５−［（Ｅ）−２−シアノ−２−（ジエチルカルバモイル）ビニル］−２−ヒドロキシ−３−ニトロフェニルエステル
レバドパ（３．０ｇ、１５．３ｍｍｏｌ）をメタノール（７５ｍｌ）と混合し、０℃まで冷却した。塩化チオニルを１５分間にわたって添加し、混合物を室温にて一晩攪拌した。溶媒を蒸発させ、油状残留物を乾燥ジエチルエステルで処理した。形成した固体物質を濾過し、吸引下に乾燥し、（Ｓ）−２−アミノ−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）プロピオン酸メチルエステルのＨＣｌ塩を得た。収率３．７ｇ（定量）。該（Ｓ）−２−アミノ−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）プロピオン酸メチルエステルのＨＣｌ塩（１．５ｇ、６．０７ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（１０ｍｌ）に溶解した。混合物を攪拌し、０℃まで冷却し、塩化ピバロイル（１．５ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）を１５分間にわたって滴下して加えた。混合物を室温にて２時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残留物を水に溶解した。該水溶液を５％ＮａＨＣＯ3水溶液で中和し、ジクロロメタンで４回抽出した。複合有機層を乾燥蒸発させ、（Ｓ）−２−アミノ−３−［３，４−ビス−（２，２−ジメチルプロピオニルオキシ）フェニル）プロピオン酸メチルエステルを得た。収量は２．０ｇ（８７％）であった。酢酸エチル（２０ｍｌ）中（Ｓ）−２−アミノ−３−［３，４−ビス−（２，２−ジメチルプロピオニルオキシ）フェニル）プロピオン酸メチルエステル（１．２ｇ、３．２ｍｍｏｌ）、コハク酸無水物（０．３８ｇ、３．８ｍｍｏｌ）および４−（ジメチルアミノ）ピリジン（０．４７ｇ、３．９ｍｍｏｌ）の溶液を２４時間還流させた。冷却後、反応混合物を１Ｍクエン酸溶液（５０ｍｌ）で洗浄した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、吸引蒸発させた。残留物を溶離剤として酢酸エチルを用いてシリカに対してクロマトグラフを行ない、（Ｓ）−Ｎ−｛２−［３，４−ビス−（２，２−ジメチルプロピオニルオキシ）フェニル］−１−（メトキシカルボニル）エチル｝スクシンアミド酸を得た。収量は１．３ｇ（８６％）であった。（Ｓ）−Ｎ−｛２−［３，４−ビス−（２，２−ジメチルプロピオニルオキシ）フェニル］−１−（メトキシカルボニル）エチル｝スクシンアミド酸（１．００ｇ、２．０８ｍｍｏｌ）およびエンタカポーネ（０．６４ｇ、２．１０ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（１５ｍｌ）に溶解した。ジシクロヘキシルカルボジイミド（０．５１ｇ、２．４７ｍｍｏｌ）および４−（ジメチルアミノ）ピリジン（１５ｍｇ）を加え、攪拌を連続して２４時間行なった。不溶解性物質を濾過し、濾液を５％ＮａＨＣＯ3水溶液で抽出した。有機層を分離し、乾燥蒸発させた。暗赤色残留物を溶離剤として酢酸エチルを用いてシリカに対してクロマトグラフを行ない、（Ｓ）−Ｎ−｛２−［３，４−ビス−（２，２−ジメチルプロピオニルオキシ）フェニル］−１−（メトキシカルボニル）エチル｝スクシンアミド酸５−［（Ｅ）−２−シアノ−２−（ジエチルカルバモイル）ビニル］−２−ヒドロキシ−３−ニトロフェニルエステルを黄色固体として得た。収量は０．７ｇ（４４％）であった。1Ｈ  ＮＭＲ（（ＣＤ3）2ＣＯ、ＴＭＳ）δ：１．２２（６Ｈ、ｓ（ブロード）、ＣＨ3ＣＨ2）、１．３１（９Ｈ、ｓ、（ＣＨ3）3Ｃ）、１．３２（９Ｈ、ｓ、（ＣＨ3）3Ｃ）、２．７７（２Ｈ、ｔ、ＣＨ2ＣＨ2）、２．９０（２Ｈ、ｔ、ＣＨ2ＣＨ2）、３．０５（１Ｈ、ｄｄ、ＣＨ2ＣＨ）、３．１５（１Ｈ、ｄｄ、ＣＨ2ＣＨ）、３．５１（４Ｈ、ｓ（ブロード）、ＮＣＨ2ＣＨ3）、３．６６（３Ｈ、ｓ、ＣＨ3Ｏ）、４．８３（１Ｈ、ｑ、ＣＨ2ＣＨ）、６．５０（１Ｈ、ｑ、ＮＨ）、７．０５（１Ｈ、ｄ、Ｊ4＝１．８Ｈｚ、ＡｒＨ）、７．０８（１Ｈ、ｄ、Ｊ3＝８．２Ｈｚ、ＡｒＨ）、７．１２（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ4＝１．８Ｈｚ、Ｊ3＝８．２Ｈｚ、ＡｒＨ）、７．６１（１Ｈ、ｓ、ＣＨ＝Ｃ）、７．９９（１Ｈ、ｄ、ＡｒＨ）、８．４８（１Ｈ、ｄ、ＡｒＨ）。13Ｃ  ＮＭＲ（（ＣＤ3）2ＣＯ）δ：１３．３９、２７．４４、２９．７２、３０．８６、３７．２７、３９．５８、４２．７７、５２．４５、５４．３８、１０６．１９、１１６．９７、１１９．７２、１２４．０７、１２５．０２、１２５．２５、１２６．６９、１２７．９１、１３６．１３、１３６．３５、１３７．７９、１４２．４４、１４３．３２、１４３．８８、１４７．７２、１６３．９７、１７１．２３、１７２．０８、１７２．７８、１７６．０１、１７６．０４。
【００４３】
ＨＰＬＣ
用いられたＨＰＬＣシステムは、Beckman System Gold Programmable Solvent Module 126、可変波長ＵＶ検出器（２５４ｎｍに設定）を有するBeckman System Gold Detector Module 166およびBeckman System Gold Autosampler 507eから構成された。分離は、Purospher RP-18逆相カラム（１２．５ｃｍ×４．０ｍｍ  ｉ．ｄ．、５μｍ（Merck、Darmstadt、Germany）を用いて行なった。クロマトグラフ条件は、次のとおりであった：注入体積、５０μｌ；カラム温度、４０℃；流速、１．０ｍｌ／分で勾配／一定組成。移動相はメタノール／水混合物（９０：１０）およびクエン酸塩／リン酸塩緩衝溶液（ｐＨ２．２）の種々の割合から構成された。
【００４４】
水溶液中の加水分解
化学的加水分解の速度は、３７℃、ｐＨ７．４、５．０および１．２での水溶性リン酸塩緩衝溶液（０．１６Ｍ）において測定される。適切な量を１０ｍｌの予熱された緩衝溶液に溶解し、該溶液を３７℃に温度制御された水浴に入れた。適切な時間をおいた後、試料を採取し、ＨＰＬＣによって残留共薬物の分析を行なった。加水分解の見かけ一次半減期（ｔ1/2）（pseudo-first order half-time）を、残留共薬物に対する時間の対数プロットの直線部分の傾きから計算した。
【００４５】
（Ｓ）−２−｛５−［（Ｅ）−２−シアノ−２−（ジエチルカルバモイル）ビニル］−２−ヒドロキシ−３−ニトロフェノキシカルボニルアミノ｝−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）プロピオン酸メチルエステル：
ｔ1/2＝１２．１時間（ｐＨ１．２）；１．４時間（ｐＨ５．０）；１．１時間（ｐＨ７．４）
【００４６】
１０％のウサギの肝臓のホモジネートにおける加水分解
ウサギの肝臓を、Ｘ−１０２０ホモジナイザー（Ystral、Germany）を使用して、ｐＨ７．４のリン酸塩等張緩衝溶液約４体積当量でホモジナイズした。ホモジネートをBiofuge 28 RS遠心分離機（Heraeus Instruments、Germany）を用いて９０００ｇ、４℃で９０分間遠心分離した。上澄み液を分析するまで−８０℃で保存した。適量を、予熱した２０％肝臓ホモジネート１容積分に溶解した。次いで、溶液を３７℃でインキュベートした。適切な時間をおいて、試料（３００μｌ）を取り出した。試料を３００μｌのメタノールで前処理し、酵素活性を終結させた。混合および遠心分離をした後、４００μｌの上澄み液を気流下に蒸発乾燥させた。残留物を４００μｌの移動相緩衝溶液に溶解し、ＨＰＬＣにより分析した。
【００４７】
（Ｓ）−２−｛５−［（Ｅ）−２−シアノ−２−（ジエチルカルバモイル）ビニル］−２−ヒドロキシ−３−ニトロフェノキシカルボニルアミノ｝−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）プロピオン酸メチルエステル：
ｔ1/2＝７分（ｐＨ７．４、３７℃）
【国際調査報告】
2005509673.tif 000019
2005509673.tif 000020
2005509673.tif 000021
2005509673.tif 000022
2005509673.tif 000023
2005509673.tif 000024
2005509673.tif 000025