(57)【要約】タンパク質含有生物学的流体のような流体、特に血漿は、超音波エネルギーのみまたはオゾンもしくはＵＶ照射のいずれかとともに処理することにより有効に除染され得る。そのような方法によりタンパク質含有生物学的流体を除染するための適切な装置が開示される。
2005524683.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血漿を除染するための方法であって、
（ａ）超音波エネルギーにより血漿を処理すること
を含む方法。
【請求項２】
血漿を除染するための方法であって、
（ａ’）超音波エネルギーにより血漿を処理するための工程
を含む方法。
【請求項３】
流体を除染するための方法であって、
（ａ）流体を、真空と接触させながら超音波エネルギーにより処理すること
を含む方法。
【請求項４】
前記流体がタンパク質含有生物学的流体である請求項３記載の方法。
【請求項５】
（ａ）少なくとも２つの異なる周波数の超音波エネルギーにより流体を同時に処理すること
を含む請求項３記載の方法。
【請求項６】
（ａ）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理すること、および
（ｂ）前記脱酸素された流体を照射すること
を含む請求項３記載の方法。
【請求項７】
（ａ）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理すること、および
（ｂ）前記脱酸素された流体をオゾンと接触させること
を含む請求項３記載の方法。
【請求項８】
（ａ）オゾン含有流体を獲得するために流体をオゾンと混合すること、および
（ｂ）超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理すること
を含む請求項３記載の方法。
【請求項９】
（ａ）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理すること、
（ｂ）オゾン含有流体を獲得するために、前記脱酸素された流体をオゾンと接触させること、および
（ｃ）超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理すること
を含む請求項３記載の方法。
【請求項１０】
（ａ）脱酸素された流体を獲得するために超音波により流体を処理すること、
（ｂ）照射された流体を獲得するために前記脱酸素された流体を照射すること、および
（ｃ）オゾン含有流体を獲得するために前記照射された流体をオゾンと接触させること
を含む請求項３記載の方法。
【請求項１１】
（ａ）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理すること、
（ｂ）照射された流体を獲得するために前記脱酸素された流体を照射すること、
（ｃ）オゾン含有流体を獲得するために前記照射された流体をオゾンと接触させること、および
（ｄ）超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理すること
を含む請求項３記載の方法。
【請求項１２】
流体を除染する方法であって、
（ａ’）前記流体を、真空と接触させながら、超音波エネルギーにより処理するための工程
を含む方法。
【請求項１３】
前記流体が、タンパク質含有生物学的流体である請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
（ａ’）少なくとも２つの異なる周波数の超音波エネルギーにより流体を同時に処理するための工程
を含む請求項１２記載の方法。
【請求項１５】
（ａ’）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するための工程、
（ｂ’）前記脱酸素された流体を照射するための工程
を含む請求項１２記載の方法。
【請求項１６】
（ａ’）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するための工程、および
（ｂ’）オゾンにより前記脱酸素された流体を処理するための工程
を含む請求項１２記載の方法。
【請求項１７】
（ａ’）オゾン含有流体を獲得するために流体をオゾンと混合するための工程、および
（ｂ’）超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理するための工程
を含む請求項１２記載の方法。
【請求項１８】
（ａ’）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するための工程、
（ｂ’）オゾン含有流体を獲得するために前記脱酸素された流体を処理するための工程、および
（ｃ’）超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理するための工程
を含む請求項１２記載の方法。
【請求項１９】
（ａ’）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するための工程、
（ｂ’）照射された流体を獲得するために前記脱酸素された流体を照射するための工程、
（ｃ’）オゾン含有流体を獲得するために前記照射された流体を処理するための工程
を含む請求項１２記載の方法。
【請求項２０】
（ａ’）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するための工程、
（ｂ’）照射された流体を獲得するために前記脱酸素された流体を照射するための工程、
（ｃ’）オゾン含有流体を獲得するために前記照射された流体を処理するための工程、および
（ｄ’）超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理するための工程
を含む請求項１２記載の方法。
【請求項２１】
（１）流体を収容するためのチャンバ、
（２）チャンバに結合する真空源、および
（３）チャンバに結合する超音波エネルギー源
を備える流体を除染するための装置であって、
前記チャンバは（ｉ）フラットパネル、（ｉｉ）入口、および（ｉｉｉ）出口を備え、前記チャンバの前記フラットパネルと前記入口は、前記入口を通り、前記出口に向かって前記フラットパネル上を流れる流体が薄膜を形成し、少なくとも前記フラットパネル上の流れの一部の間プラグ流れとして流れるように構成されている装置。
【請求項２２】
（１’）流体を収容するための手段、
（２’）流体を真空と接触させるための手段、および
（３’）前記流体を収容するための手段に超音波エネルギーを導入するための手段、
を備える流体を除染するための装置であって、
前記流体を収容するための手段は（ｉ）前記収容するための手段に流体を導入するための手段、（ｉｉ）流体を前記収容のための手段を通って流す手段、および（ｉｉｉ）前記収容するための手段から流体を除去するための手段を備え、前記収容のための手段は、前記収容のための手段を通って流れる流体が、薄膜を形成し、前記収容のための手段を通る流れの少なくとも一部の間にプラグ流れとして流れるように構成される装置。
【請求項２３】
流体を除染するための装置であって、
（１）流体を収容するためのチャンバ、
（２）チャンバに結合する真空源、
（３）そのようなチャンバに結合する超音波エネルギー源、および
（４）ＵＶ、ガンマ線、またはｘ線照射源
を備える装置。
【請求項２４】
流体を除染するための装置であって、
（１’）流体を収容するための手段、
（２’）流体を真空と接触させるための手段、
（３’）前記流体を収容するための手段に超音波エネルギーを導入するための手段、および
（４’）ＵＶ、ガンマ線、またはｘ線照射により流体を処理するための手段
を備える流体を除染するための装置。
【請求項２５】
（１）流体を収容するためのチャンバ、
（２）チャンバに結合する真空源、
（３）そのようなチャンバに結合する超音波エネルギー源、および
（４）オゾン源
を備える流体を除染するための装置であって、
前記チャンバが、（ｉ）オゾン源からオゾンを導入するための入口、（ｉｉ）流体を導入するための入口、および（ｉｉｉ）オゾン源からのオゾンを流体と混合するためのデバイスを備える装置。
【請求項２６】
（１’）流体を収容するための手段、
（２’）流体を真空と接触させるための手段、
（３’）前記流体を収容するための手段に超音波エネルギーを導入するための手段、および
（４’）オゾンを発生させるための手段
を備える流体を除染するための装置であって、
前記流体を収容するための手段が（ｉ）前記収容するための手段に前記オゾンを発生させるための手段からのオゾンを導入するための手段、（ｉｉ）前記収容するための手段に流体を導入するための手段、および（ｉｉｉ）前記オゾンを発生させるための手段からのオゾンを前記収容するために手段内の流体と混合するための手段を備える装置。
【請求項２７】
（１）流体を収容するためのチャンバ、
（２）チャンバに結合する真空源、
（３）ＵＶ、ガンマ線、またはｘ線照射源
（４）そのようなチャンバに結合する超音波エネルギー源、および
（５）オゾン源
を備える流体を除染するための装置であって、
前記チャンバは、（ｉ）前記オゾン源からオゾンを導入するための入口、（ｉｉ）流体を導入するための入口、および（ｉｉｉ）前記オゾン源からのオゾンを流体と混合するためのデバイスを備える装置。
【請求項２８】
（１’）流体を収容するための手段、
（２’）流体を真空と接触させるための手段、
（３’）ＵＶ、ガンマ線またはｘ線照射により流体を処理するための手段、
（４’）前記流体を収容するための手段に超音波エネルギーを導入するための手段、および
（５’）オゾンを発生させるための手段
を備える流体を除染するための装置であって、
前記流体を収容するための手段は、（ｉ）前記収容するための手段に前記オゾンを発生させるための手段からのオゾンを導入するための手段、（ｉｉ）前記収容するための手段に流体を導入するための手段、および（ｉｉｉ）前記オゾンを発生させるための手段からのオゾンを前記収容手段内の流体と混合するための手段を備える装置。
【請求項２９】
オゾンを液体と接触させるための装置であって、
（１）下方表面と上方表面を有し、前記下方表面を前記上方表面接続する複数の通路を有する基板、
（２）超音波エネルギーが前記基板の振動により導入されるように前記基板に結合する超音波エネルギー源、
（３）前記基板の前記下方表面に接続するオゾン源
を備える装置。
【請求項３０】
（１）回動自在のチャンバ、
（２）前記チャンバに接続するガスの供給源、および
（３）前記チャンバに結合する超音波エネルギー源
を備えるガス、例えばオゾンを流体と接触させるための装置であって、
前記チャンバは流体入口を備え、
前記チャンバは第１の側壁と第２の側壁を備え、前記第１と第２の側壁は、互いに対向して位置し、
前記チャンバはさらに複数の隔壁を備え、前記複数の隔壁が複数の棚を形成するように、前記隔壁は、交互配列で前記第１と第２の側壁に付着し、それぞれの隔壁は前記第２の側壁に向かって突出する前記第１の側壁に付着し、それぞれの隔壁は、前記第１の側壁に向かって突出する前記第２の側壁に付着し、
前記入口は、前記入口を通って前記チャンバに入る流体が第１の棚を占めるように前記チャンバ内に位置し、
前記チャンバは、前記チャンバの９０から９０°の回転の際に前記第１の棚を占める流体が第２の棚に流れるように回転することが可能であり、
前記ガスの供給源は、ガスを前記チャンバ内の流体と混合することを可能とするために前記チャンバに接続され、かつ、
前記少なくとも１つの隔壁により形成される棚を占める流体に超音波エネルギーの適用を可能とするために前記超音波エネルギーの供給源は、前記隔壁の少なくとも１つに結合する装置。
【発明の詳細な説明】
【発明の開示】
【０００１】
発明の分野
本発明は、タンパク質含有生物学的流体、特に血液製剤、他の天然生物製剤、および合成バイオテクノロジー製品を含む流体を除染するための方法に関する。本発明はまた、タンパク質含有生物学的流体、特に血液製剤、他の天然生物製剤、および合成バイオテクノロジー製品を含む流体を除染するために有用な装置にも関する。本発明はさらに、オゾンを液体と接触させるための装置に関する。
【０００２】
背景の説明
タンパク質含有生物学的流体は、多数の理由のために重要である。特に、全血および赤血球、血小板、および血漿のような血液製剤のようなタンパク質含有流体は、ヘルスケアシステムの重要な構成部分である。同様に、現代のヘルスケアはまた、組換え凝血因子のような合成バイオテクノロジー製品ならびに解毒剤およびワクチンのような天然生物製剤を含む他の重要なタンパク質含有生物学的流体にも依存している。不運にも、それらの流体の供給源およびそれらの流体がタンパク質を含むという事実は、寄生虫、細菌、真菌、およびウイルスのような様々の感染因子（ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  ａｇｅｎｔ）による汚染を受けやすくする。
【０００３】
それらの汚染物質の全てに共通する要因は、それらがＤＮＡおよび／またはＲＮＡを含むということである。したがって、タンパク質含有流体の除染は、汚染物質の除去を必ずしも必要としないが、しかし、それらの汚染物質が増殖しえず、したがって、疾病を広げないように汚染物質のＤＮＡおよび／またはＲＮＡの破裂を防ぐ必要はある。
【０００４】
ＤＮＡおよび／またはＲＮＡを攻撃するアプローチは、血液産業において特に有用である。というのは、輸血および薬品製造のための血液の有用な成分である赤血球、血小板および血漿は、ＤＮＡまたはＲＮＡを含まないからである。さらに、白血球は、ＤＮＡおよびＲＮＡを含むが、しかし、一般的な輸血の実施について近年推奨されているように、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）をなくすためにこの物質を破壊することが望ましい。
【０００５】
これらの潜在的な利益のために、血中および血液製剤中のＤＮＡおよび／またはＲＮＡを攻撃するためのいくつかの技術が開発されてきた。この作業の主たる標的は血漿であり、血漿は、細胞性血中成分が除去された後に残る麦わら色の物質である。タンパク質および栄養分に豊富であるために、血漿は、多くの汚染物質を含み得るが、しかし、上記汚染物質の中で最も小さく、したがって処理するのが最も困難であるのがウイルスである。具体的には、ＨＩＶおよびＢ型肝炎のような潜在的に致死性のウイルスが重大問題である。それらの汚染物質は、汚染されたユニットが、不注意のために薬品の製造のために用いられる血漿の大きなプールに含まれるとき大きな危険をもたらし、このようにしておそらく、処理された母集団の中に大きな規模の感染をもたらす。
【０００６】
血漿からそのような病原を除去するための現存する技術は、最近、１９９８ＡＡＢＢ年次会合（輸血伝染病（プリオン；細菌および寄生虫）；輸血伝染感染における選択された中心問題：アメリカ血液銀行協会年次会合、摘要、１９９８年）および１９９９ＣＨＩ血液の安全性とスクリーニングの年次シンポジウム（安全性の問題：新たな不活性化技術：血漿；ケンブリッジ健康技術研究所の第５回血液の安全性およびスクリーニングの年次シンポジウム、２月２３〜２４日、１９９９年）で要約された。それらの技術は、大まかに２つの群に分割され得る：（１）外膜を有するウイルスのみを処理し得るもの、および（２）外膜を有するウイルスと有さないウイルスの両方を処理し得るもの。
【０００７】
外膜を有するウイルスのみを処理し得る技術に言及すると、最も顕著な例は、具体的にはウイルスの外膜それ自体に関与する溶媒／洗剤の組み合わせである。特に、赤十字およびＶ．Ｉ．テクノロジーズは現在、Ｐｌａｓ＋ＳＤのような１製品を積極的に推進している。直接輸血を意図するために、Ｐｌａｓ＋ＳＤは、ある程度の安全性および均一な製品精度を提供する。しかしながら、（１）コスト、（２）製品に残る残留溶媒／洗剤、（３）約２，０００ユニットの比較的小さなものではあるが、ドナープールの使用、（４）外膜のないウイルスを処理することができないこと、（５）新規な、すなわち新たに現れるウイルスの影響（Ａ．ペレイラ；「標準血漿の代わりにウイルスの不活性化された血漿を輸血することのコスト上の有効性」、トランスフュージョン、第３９巻、４７９〜４８７ページ（１９９９年））、および（６）最近の回収事件（Ｖ．Ｉ．Ｔｅｃｈは、Ｐｄｔリコールから３百万ドル、Ｏｒ  ２４ｃ／Ｓｈｒ  ２Ｑ  Ｃｈｇを見積もる：ウォールストリートジャーナル／ダウジョーンズニューズワイア、７月１４日、１９９９年）についての問題が存在する。
外膜を有するウイルスを処理するためのもう１つの技術は、４５，０００から６０，０００ｐｓｉ台の極めて高い静圧である。しかしながら、要求される圧力容器は、極めて高価であり、どこでも用いられるけれども、この技術は、血漿の産業においては現在開発中のものである（Ｓ．デニーズら、「食品のバッチ高圧加工処理の間の伝導性熱移動およびプロセスの均一性のモデル化」、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．、第１６巻（１）、９２〜１０１（２０００年））。外膜を有するウイルスに対する限定を超えると、ポンプオイルの汚染および／または漏れならびに血漿バッグの破裂の実際的問題も存在する。１つの変形は、血漿を凍結してしまうことである（Ｄ．Ｗ．ブラッドレーら、「圧力サイクル技術：血漿中のウイルスの不活性化に対する新規なアプローチ」、トランスフュージョン、第４０巻（２）、１９３〜２００ページ、（２０００年））が、しかしこのプロセスは比較的緩慢であり、血漿タンパク質に対する凍結による損傷の問題が生じる。
【０００８】
外膜を有するウイルスと外膜を有さないウイルスの両方を処理することが可能な多くの技術の中で、最も一般的な例は、強烈な光への暴露である。ＵＶＣからガンマ線範囲の十分に高い周波数では、光のエネルギーは、汚染物質の基本構造を破壊する。しかしながら、それらのエネルギーでは、酸素ラジカル生成の問題も存在する。それらのラジカルによるタンパク質の損傷を防止するために、典型的にはクエンチング剤が血漿に加えられる。不運にも、クエンチング剤は高価であり、少なくとも部分的には有毒であり、血漿が用いられ得る前に除去されねばならない。そのような問題を回避するために、限定された暴露技術が近年報告されているが、しかし、現在までの結果は、部分的な成功とある程度のタンパク質損傷を示すのみである（Ｋ．Ｍ．レミントン、「添加剤の欠如の下でのＵＶＣウイルス不活性化への臨界パラメーターと適用の同定」、ケンブリッジ健康技術研究所の第６回血液製剤安全性の年次シンポジウム、２月１３日〜１５日、２０００年）。
【０００９】
それらの直接光暴露技術の延長上にあるのが血漿へのメチレンブルーのような光感受性化合物の添加である。適切な波長の光により活性化されるとき、この化合物は汚染物質を攻撃する。しかしながら、上記溶媒／洗剤プロセスのように、コストとそのように処理された血漿内の残留物質の影響についての問題が存在する。
【００１０】
外膜を有するウイルスと外膜を有さないウイルスの両方について共通に用いられるさらに別のアプローチは、典型的には水蒸気による熱処理である。しかしながら明らかに、このアプローチは、熱感受性タンパク質については適切でなく、単一の血漿ユニットのためには用いられない。
【００１１】
最終的には、様々のオゾンプロセスのような開発中の他の技術もまた存在するが、しかし、それらのプロセスは典型的には高価であり、血漿加工処理のために必要とされる閉じた環境において実施するのは困難である。加えて、オゾンに基づく方法は、長い処理時間を必要とする不利益を被る。他方、オゾンそれ自体は廉価であり、十分な処理時間があれば非常に有効であり、毒性残留物を残さない（Ｍ．Ｍ．ケケッツ、Ｓ．Ａ．サッター；「ウイルス不活性化のための新規なオゾンに基づく方法：予備研究」、Ｐｈｙｓ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．、第４２巻、２０２７〜２０３９ページ（１９９７年）；米国特許第４，６３２，９８０号；米国特許第５，８８２，５９１号）。
【００１２】
よりよい結果を達成するために、上記除染技術のいくつかは組み合わせられる。例えば、熱と溶媒／洗剤プロセスの組み合わせは、ＨＩＶのような病原に対して非常に有効である（Ｂ．ホロビッツ；「溶媒／洗剤処理によるウイルスの不活性化およびＳＤ−血漿の製造」、Ｖｏｘ  Ｓａｎｇ、第７４巻、補遺１、２０３〜２０６ページ（１９９８年））。
【００１３】
不運にも、上記除染技術ならびに他の技術の全てが重大な問題を抱えている。顕在しない困難は、汚染物質のウイルスＤＮＡおよび／またはＲＮＡは、ともにタンパク質であるということであり、したがって、それらの汚染物質を破壊するいずれの技術も処理される流体中の所望されるタンパク質に対して顕著な損傷を引き起こし得るということである。これは大きな問題である。というのは、損傷したタンパク質は、臨床上より有効性に欠けるからである。例えば、このタンパク質の過剰な除染による損傷は、手術の間に用いられるフィブリングルーの濃度を減少させ、したがって、得られるグルーは、外傷を相接させる（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅ）かまたは止血を誘発するかのいずれかをなし得ない。さらに、損傷したタンパク質はまた抗体形成も誘発し、それにより将来的な治療を非常に困難にする（バーバラＡ．コンクル；「血友病すなわちフォン・ビルブラント病を有する患者のための新規な製品」、アメリカ血液銀行協会年次会合、摘要、メリーランド州ボルチモア、１１１〜１１５ページ、１９９８年）。
【００１４】
加えて、汚染物質と所望のタンパク質は非常に似ているので、全ての汚染物質を完全に破壊するいずれの技術も全ての所望のタンパク質をも破壊するであろう。この理由のために、実際的な除染技術は、完全には有効であり得ず、したがって、ある程度の少ない汚染は処理された流体に常に残り得る。これは、ＨＩＶおよびＢ型肝炎のような致死的な汚染物質については、特別な問題である。そのような場合には、したがって、目標は、可能な限り多くの汚染物質を減少させることである。実際には、許容可能なレベルは、一般的に、６の対数減少率（ＬＲＦ）であるとみなされ、それは、百万で一部の生存処理を意味する。
もちろん、赤血球および血小板もまた汚染物質中に見出されるものと同様のタンパク質を有するので、ＤＮＡおよびＲＮＡ、タンパク質損傷と不完全な除染の問題もまたそれらの血液の成分に持ち込まれる。
【００１５】
さらに、同様の問題は、血液製剤以外の生物製剤の処理でも生じる。具体的には、合成または天然起源のいずれかの他の生物製剤は、それ自体の処理されていない遺伝物質を含むべきではなく、また、外来のＤＮＡおよび／またはＲＮＡで汚染されているべきでもない。他方、それらの生物製剤中のタンパク質は、汚染物質であるＤＮＡおよび／またはＲＮＡ中のタンパク質と同様である。したがって、いずれの処理の正味の結果もやはり、限定された除染とともに少なくともある程度のタンパク質損傷がある。
【００１６】
最終的には、血液製剤および他の生物製剤もまたいくつかの他の問題に影響を受ける。例えば、現代のヘルスケア環境においては、資本設備についてもいずれの使い捨て製品についてもコストは注意深く制御されねばならない。同様に、専門家養成期間（ｔｅｃｈｎｉｃｉａｎ  ｔｉｍｅ）とトレーニングは最低レベルに保たねばならない。しかしながら、それらのコスト要因の先には、いくつかのプロセス上の問題もまた存在する。具体的には、さまざまの静脈血内イムノグロブリン（ＩＶＩＧ）の最近の、そして進行中の不足により表されるように、全ての処理時間は、可能な限り短く保たれねばならない。加えて、出発材料の供給は単に限定されているものであり、それゆえ、出発材料は、可能な限り効率的に処理されねばならない。もちろん、上記問題の全てに答えねばならず、一方また、完全な証拠書類による裏づけとともに安全性と効率について厳しい管理された要求を満足させねばならない。
【００１７】
しかしながら、除染作業の最も困難な問題は、通常のＤＮＡまたはＲＮＡ感染経路に従わない感染因子による汚染の可能性である。具体的には、最近の仕事は、感染は、また、タンパク質形態のゆがみによっても進行し得ることを示す。この場合には、見えない媒体は、「プリオン」と称され、結果としての疾病は、ウシでは通常「狂牛病」と呼ばれ、羊では通常「スクレーピー」と呼ばれ、ヒトでは通常クロイツフェルト−ヤコブ病と呼ばれる。実際、通常の除染技術に対する抵抗がプリオンの特徴であるけれども、最近の仕事は、それらの感染因子は、ガンマ線照射に対して少なくとも部分的に影響を受け得るし、おそらく、同様に、音波またはオゾン効果の影響を受けることを示している。それゆえ、通常の媒体についての除染の間のタンパク質の防御を企図する以下の技術は、プリオンの除染の間にタンパク質を防御するためにもまた適用され得ることが理解される。
【００１８】
血液または血液製剤をオゾンと接触させることにより生存している外膜を有するウイルスを血液および血液成分からなくすための方法が、米国特許第４，６３２，９８０号において開示されている。米国特許第５，８８２，５９１号は、オゾンのようなガスとの相互作用を通して血漿／血清のような生物学的流体を感染防止するための方法および装置を開示する。
【００１９】
発明の概要
したがって、血漿のようなタンパク質含有生物学的流体を含む流体を除染するための有効なプロセスについての必要が存在する。特に、個人のユニットならびにプールされたユニットに適用され得、ウイルスを含む感染因子に対して優れた保護を与える血漿のようなタンパク質含有生物学的流体を除染するためのプロセスについての必要が存在する。加えて、それらのプロセスは、高速で、効率的で、廉価でなければならず、所望のタンパク質に対する損傷を最小限にしなければならない。また、そのようなプロセスを実施するために有用である装置についての必要も存在する。
【００２０】
したがって、本発明の１つの目的は、流体を除染するための新規な方法を提供することである。
【００２１】
本発明のもう１つの目的は、タンパク質含有生物学的流体を除染するための新規な方法を提供することである。
【００２２】
本発明のもう１つの目的は、血漿を除染するための新規な方法を提供することである。
【００２３】
本発明のもう１つの目的は、ヒト血漿を除染するための新規な方法を提供することである。
【００２４】
本発明のもう１つの目的は、感染因子からの高いレベルの防御を提供するタンパク質含有生物学的流体を除染するための新規な方法を提供することである。
【００２５】
本発明のもう１つの目的は、感染因子からの高いレベルの防御を提供する血漿を除染するための新規の方法を提供することである。
【００２６】
本発明のもう１つの目的は、感染因子からの高いレベルの防御を提供するヒト血漿を除染するための新規の方法を提供することである。
【００２７】
本発明のもう１つの目的は、ウイルスからの高いレベルの防御を提供するタンパク質含有生物学的流体を除染するための新規な方法を提供することである。
【００２８】
本発明のもう１つの目的は、ウイルスからの高いレベルの防御を提供する血漿を除染するための新規の方法を提供することである。
【００２９】
本発明のもう１つの目的は、ウイルスからの高いレベルの防御を提供するヒト血漿を除染するための新規の方法を提供することである。
【００３０】
本発明のもう１つの目的は、個人の血漿ユニットに容易に適用され得る血漿を除染するための新規の方法を提供することである。
【００３１】
本発明のもう１つの目的は、個人の血漿ユニットに容易に適用され得るヒト血漿を除染するための新規な方法を提供することである。
【００３２】
本発明のもう１つの目的は、プールされた血漿ユニットのバッチ処理に容易に適用され得る血漿を除染するための新規の方法を提供することである。
【００３３】
本発明のもう１つの目的は、プールされた血漿ユニットのバッチ処理に容易に適用されうるヒト血漿を除染するための新規の方法を提供することである。
【００３４】
本発明のもう１つの目的は、流体を除染するために有用な新規な装置を提供することである。
【００３５】
本発明のもう１つの目的は、タンパク質含有生物学的流体を除染するために有用な新規な装置を提供することである。
【００３６】
本発明のもう１つの目的は、血漿を除染するために有用な新規な装置を提供することである。
【００３７】
本発明のもう１つの目的は、ヒト血漿を除染するために有用な新規な装置を提供することである。
【００３８】
本発明のもう１つの目的は、感染因子からの高いレベルの防御を提供するタンパク質含有生物学的流体を除染するために有用な新規な装置を提供することである。
【００３９】
本発明のもう１つの目的は、感染因子からの高いレベルの防御を提供する血漿を除染するために有用な新規な装置を提供することである。
【００４０】
本発明のもう１つの目的は、感染因子からの高いレベルの防御を提供するヒト血漿を除染するために有用な新規な装置を提供することである。
【００４１】
本発明のもう１つの目的は、ウイルスからの高いレベルの防御を提供するタンパク質含有生物学的流体を除染するために有用な新規な装置を提供することである。
【００４２】
本発明のもう１つの目的は、ウイルスからの高いレベルの防御を提供する血漿を除染するために有用な新規な装置を提供することである。
【００４３】
本発明のもう１つの目的は、ウイルスからの高いレベルの防御を提供するヒト血漿を除染するために有用な新規な装置を提供することである。
【００４４】
本発明のもう１つの目的は、個人の血漿ユニットに容易に適用されうる血漿を除染ために有用な新規な装置を提供することである。
【００４５】
本発明のもう１つの目的は、個人の血漿ユニットに容易に適用されうるヒト血漿を除染するために有用な新規な装置を提供することである。
【００４６】
本発明のもう１つの目的は、プールされた血漿ユニットのバッチ処理に容易に適用され得る血漿を除染するために有用な新規な装置を提供することである。
【００４７】
本発明のもう１つの目的は、プールされた血漿ユニットのバッチ処理に容易に適用され得るヒト血漿を除染するために有用な新規な装置を提供することである。
【００４８】
本発明のもう１つの目的は、オゾンを液体と接触させるための新規の装置を提供することである。
【００４９】
以下の詳細な説明の間に明らかとなるそれらのおよび他の目的は、本発明者らの知見により、
（ａ）血漿を超音波エネルギーで処理すること
により血漿を除染するための方法の第１の主たる態様において達成された。
【００５０】
本発明者は、第２の主たる態様において、血漿を、
（ａ’）超音波エネルギーにより血漿を処理するための工程
を含む方法により有効に除染し得ることもまた発見した。
【００５１】
本発明者はさらに、第３の主たる態様において、タンパク質含有生物学的流体（biological fluid）のような流体を、
（ａ）流体を、脱ガスしながら、超音波エネルギーにより処理すること
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００５２】
本発明者はまた、第４の主たる態様において、そのような流体を
（ａ’）流体を脱ガスしながら、超音波エネルギーにより流体を処理するための工程
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００５３】
本発明者はさらに、第５の主たる態様において、タンパク質含有生物学的流体のような流体を
（ａ）少なくとも２つの異なる周波数の超音波エネルギーにより流体を同時に処理すること
を含む方法により有効に除染し得ることを発見した。
【００５４】
本発明者はまた、第６の主たる態様において、そのような流体を
（ａ’）少なくとも２つの異なる周波数の超音波エネルギーにより流体を同時に処理するための工程
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００５５】
本発明者はまた、第７の主たる態様において、そのような流体を
（ａ）脱酸素された流体を得るために超音波エネルギーにより流体を処理すること、および
（ｂ）前記脱酸素された流体を照射すること
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００５６】
本発明者はまた、第８の主たる態様において、そのような流体を
（ａ’）脱酸素された流体を得るために超音波エネルギーにより流体を処理する工程、および
（ｂ’）前記脱酸素された流体を照射する工程
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００５７】
本発明者はさらに、第９の主たる態様において、そのような流体を
（ａ）脱酸素された流体を得るために超音波エネルギーにより流体を処理すること、および
（ｂ）前記脱酸素された流体をパルス電界と接触させること
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００５８】
本発明者はまた、第１０の主たる態様において、そのような流体を
（ａ’）脱酸素された流体を得るために超音波エネルギーにより流体を処理する工程、
（ｂ’）前記脱酸素された流体をパルス電界と接触させる工程
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００５９】
本発明者はさらに、第１１の主たる態様において、タンパク質含有生物学的流体のような流体を
（ａ）脱酸素された流体を得るために超音波エネルギーにより流体を処理すること、および
（ｂ）前記脱酸素された流体をオゾンと接触させること
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００６０】
本発明者はまた、第１２の主たる態様において、そのような流体を
（ａ’）脱酸素流体を得るために超音波エネルギーにより流体を処理する工程、および
（ｂ’）前記脱酸素された流体をオゾンで処理する工程
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００６１】
本発明者はさらに、第１３の主たる態様において、タンパク質含有生物学的流体のような流体を
（ａ）オゾン含有流体を得るために流体をオゾンと混合すること、および
（ｂ）前記オゾン含有流体を超音波エネルギーにより処理すること
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００６２】
本発明者はまた、第１４の主たる態様において、そのような流体を
（ａ’）オゾン含有流体を得るために流体をオゾンと混合する工程、および
（ｂ’）前記オゾン含有流体を超音波エネルギーにより処理する工程
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００６３】
本発明者はさらに、第１５の主たる態様において、タンパク質含有生物学的流体のような流体を
（ａ）脱酸素流体を得るために流体を超音波エネルギーにより処理すること、
（ｂ）オゾン含有流体を得るために前記脱酸素流体をオゾンと接触させること、および
（ｃ）前記オゾン含有流体を超音波エネルギーにより処理すること
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００６４】
本発明者はまた、第１６の主たる態様において、そのような流体を
（ａ’）脱酸素流体を得るために流体を超音波エネルギーにより処理する工程
（ｂ’）オゾン含有流体を得るために前記脱酸素流体を処理する工程、および
（ｃ’）前記オゾン含有流体を超音波エネルギーにより処理する工程
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００６５】
本発明者はさらに、第１７の主たる態様において、タンパク質含有生物学的流体を含む流体を
（ａ）脱酸素流体を得るために超音波エネルギーにより流体を処理すること、
（ｂ）照射された流体を得るために前記脱酸素流体を照射すること、および
（ｃ）オゾン含有流体を得るために前記照射された流体をオゾンと接触させること
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００６６】
本発明者はまた、第１８の主たる態様において、そのような流体を
（ａ’）脱酸素流体を得るために流体を超音波エネルギーにより処理する工程、
（ｂ’）照射された流体を得るために前記脱酸素された流体を照射する工程、および
（ｃ’）オゾン含有流体を得るために前記照射された流体を処理する工程
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００６７】
本発明者はさらに、第１９の主たる態様において、タンパク質含有生物学的流体を含む流体を
（ａ）脱酸素流体を得るために超音波エネルギーにより流体を処理すること、
（ｂ）照射された流体を得るために前記脱酸素流体を照射すること、
（ｃ）オゾン含有流体を得るために前記照射された流体をオゾンと接触させること、および
（ｄ）前記オゾン含有流体を超音波エネルギーにより処理すること
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００６８】
本発明者はまた、第２０の主たる態様において、そのような流体を
（ａ’）脱酸素流体を得るために流体を超音波エネルギーにより処理する工程、
（ｂ’）照射された流体を得るために前記脱酸素流体を照射する工程、
（ｃ’）オゾン含有流体を得るために前記照射された流体を処理する工程、
（ｄ’）前記オゾン含有流体を超音波エネルギーにより処理する工程
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【００６９】
本発明者はまた、第２１の主たる態様において、タンパク質含有生物学的流体を含む流体を、
（１）流体を収容するためのチャンバ、
（２）チャンバに結合する真空源、および
（３）チャンバに結合する超音波エネルギー源
を備える装置であって、前記チャンバは、（ｉ）フラットパネル、（ｉｉ）入口、および（ｉｉｉ）出口を備え、前記チャンバの前記フラットパネルおよび前記入口は、前記入口を通り前記フラットパネル上を前記出口まで流れる流体が薄膜を形成し、少なくとも前記フラットパネル上の流れの一部の間プラグ流れとして流れるように構成される装置により有効に除染し得ることも発見した。
【００７０】
本発明者はさらに、第２２の主たる態様において、そのような流体を、
（１’）前記流体を収容するための手段、
（２’）前記流体を真空と接触させるための手段、および
（３’）前記流体を収容するための前記手段に超音波エネルギーを導入するための手段
を備える装置であって、前記流体を収容するための前記手段は、（ｉ）前記収容手段に前記流体を導入するための手段、（ｉｉ）前記流体を前記収容手段を通って流すための手段、および（ｉｉｉ）前記収容手段から前記流体を除去するための手段を備え、前記収容手段は、前記収容手段を通って流れるタンパク質含有流体が、薄膜を形成し、前記収容手段を通る流れの少なくとも一部の間にプラグ流れとして流れるように構成される装置により有効に除染し得ることを発見した。
【００７１】
本発明者はまた、第２３の主たる態様において、タンパク質含有生物学的流体を含む流体を
（１）流体を収容するためのチャンバ、
（２）チャンバに結合する真空源、
（３）そのようなチャンバに結合する超音波エネルギー源、および
（４）ＵＶ、ガンマ線またはｘ−線照射源
を備える装置により有効に除染し得ることも発見した。
【００７２】
本発明者はまた、第２４の主たる態様において、タンパク質含有生物学的流体を含む流体を
（１’）前記流体を収容するための手段、
（２’）前記流体を真空と接触させるための手段、
（３’）前記流体を収容するための前記手段に超音波エネルギーを導入するための手段、
（４’）ＵＶ、ガンマ線、またはｘ線照射により前記流体を処理するための手段
を備える装置により有効に除染し得ることを発見した。
【００７３】
本発明者はまた、第２５の主たる態様において、タンパク質含有生物学的流体を含む流体を、
（１）流体を収容するためのチャンバ、
（２）チャンバに結合する真空源、
（３）そのようなチャンバに結合する超音波エネルギー源、
（４）オゾン源
を備える装置であって、
前記チャンバは（ｉ）オゾン源からのオゾンを導入するための入口、（ｉｉ）血漿を導入するための入口、および（ｉｉｉ）オゾン源からのオゾンを流体と混合するためのデバイスを備える装置により有効に除染し得ることも発見した。
【００７４】
本発明者はさらに、第２６の主たる態様において、タンパク質含有生物学的流体を含む流体を、
（１’）前記流体を収容するための手段、
（２’）前記流体を真空と接触させるための手段、
（３’）前記流体を収容するための前記手段に超音波エネルギーを導入するための手段、
（４’）オゾンを発生させるための手段
を備える装置であって、
前記流体を収容するための前記手段は（ｉ）前記収容手段にオゾンを発生させるための前記手段からのオゾンを導入するための手段、（ｉｉ）前記収容手段に前記流体を導入するための手段、および（ｉｉｉ）オゾンを発生させるための前記手段からの前記オゾンを前記収容手段中の前記流体と混合するための手段を備える装置により有効に除染し得ることも発見した。
【００７５】
本発明者はまた、第２７の主たる態様において、タンパク質含有生物学的流体を含む流体を、
（１）流体を収容するためのチャンバ、
（２）チャンバに結合する真空源、
（３）ＵＶ、ガンマ線、またはｘ線照射源、
（４）そのようなチャンバに結合する超音波エネルギー源、
（５）オゾン源
を備える装置であって、前記チャンバは、（ｉ）オゾン源からのオゾンを導入するための入口、（ｉｉ）血漿を導入するための入口、および（ｉｉｉ）オゾン源からのオゾンを流体と混合するためのデバイスを備える装置により有効に除染し得ることも発見した。
【００７６】
本発明者はさらに、第２８の主たる態様において、タンパク質含有生物学的流体を含む流体を、
（１’）前記流体を収容するための手段、
（２’）前記流体を真空と接触させるための手段、
（３’）前記流体をＵＶ、ガンマ線またはｘ線照射で処理するための手段、
（４’）前記流体を収容するための前記手段に超音波エネルギーを導入するための手段、および
（５’）オゾンを発生させるための手段
を備える装置であって、前記流体を収容するための前記手段は、（ｉ）前記収容手段にオゾンを発生させるための前記手段からオゾンを導入するための手段、（ｉｉ）前記収容手段に前記流体を導入するための手段、（ｉｉｉ）オゾンを発生させるための前記手段からの前記オゾンを前記収容手段中の前記流体と混合するための手段を備える装置により有効に除染し得ることも発見した。
【００７７】
本発明者はさらに、第２９の主たる態様において、オゾンを、
（１）下方表面および上方表面を有し、前記下方表面を前記上方表面と接続する複数の通路を有する基板、
（２）前記超音波エネルギーが前記基板の振動により液体に導入されるように前記基板に結合された超音波エネルギー源、
（３）前記基板の前記下方表面に接続されたオゾン源
を備える装置により液体と有効に接触させ得ることも発見した。
【００７８】
本発明のより完全な評価およびその付随する利点の多くは、添付の図面と結びつけて考えるとき以下の詳細な説明を参照してよりよく理解されるようになるので、容易に獲得され得る。
【００７９】
好ましい態様の詳細な説明
すなわち、本発明は、流体を除染するための新規の方法および装置を提供する。ある種の好ましい態様において、流体は、タンパク質含有生物学的流体のような液体である。適切なタンパク質含有生物学的流体には、全血、唾液、精液、脊髄液などのような体液が含まれる。全血に加えて、タンパク質含有生物学的流体は、全血の血漿、血清、および赤血球または血小板画分のような血液製剤であり得る。タンパク質含有生物学的流体はまた、発酵培地のようなさまざまのインビトロまたはインビボのプロセスに由来するいずれかの天然または合成タンパク質含有流体でもあり得る。
【００８０】
本発明の特に好ましい態様において、タンパク質含有生物学的流体は血漿である。本発明の方法および装置は、血漿の除染のコンテキストにおいて主に以下に詳細に検討される。しかしながら、本発明の方法および装置はまた、組換えＤＮＡ技術により得られるもののような発酵生成物を含む食品（卵を含む）および反応混合物を含む上記検討されたタンパク質含有生物学的流体を除染するためにも用いられ得ることが理解されるべきである。本発明は、タンパク質含有生物学的流体のみならず、他の熱感受性材料にも同様に適用可能である。特に、以下に検討されるパルス電界（ＰＥＦ）法は、リンゴジュースを除染するのに有効である。したがって、本発明の方法のコンテキストにおいて、流体は、除染された形態で所望されるいずれの液体でもあり得るし、リンゴジュース、オレンジジュース、トマトジュースなどのようなジュースが含まれる。本発明のコンテキストにおいて、流体と言う用語はまた、通常は液体とは考えられない液体様物質も含む。したがって、本発明の方法および装置はまた、インビトロでの受精（ＩＶＦ）のための卵などの除染にも適用され得る。本発明の方法はまた、食品にも適用され得るし、その食品は、必ずしもタンパク質を含まなくともよい。同様に、本発明の方法は、特にＰＥＦに関連する汚染の問題が存在するどんな場合でも用いられ得る。
【００８１】
処理される血漿は、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ブタ、チンパンジー、およびヒトのようないずれの哺乳類のものであってもよい。好ましい態様において、除染される血漿は、ヒトの血漿である。
【００８２】
除染される血漿は、全血供与または細胞がドナーに戻されるアフェレーシス由来のようないずれか通常の技術により収集され得る。全血供与はドナーから少ない体積（約２００ｍｌ）を採取することに関与するが、しかし、供与間に相当長い時間（数ヶ月台）を必要とする。アフェレーシスは、ドナーから大きな体積（約６００ｍｌ）を採取することを含むが、しかし、細胞がドナーに戻されるので、供与間は短い時間（数週間台）を必要とする。血漿の収集は、参照により本明細書に組み込まれるＡＡＢＢ（アメリカ血液銀行協会）新聞技術マニュアル、第１３版、バルティモア、メリーランド州、１９９９年に記載されている。
【００８３】
除染される血漿は、単一のドナーから得られる個人ユニットであり得る。代わりに、除染される血漿は、多数のドナーから採取される対応する多数の個人ユニットをプールすることにより獲得され得る。
【００８４】
上記のように、血漿を除染する方法は、有用であると考えられる全ての感染因子を除去するかまたは不活性化する必要はない。実際、血漿を除染する多くの方法は、具体的には、例えば外膜を有するウイルスのようなある種のタイプの感染因子のみに対処するように設計されており、いずれも、想定される感染因子でさえ１００％の除去または不活性化を保証しない。したがって、本発明のコンテキストにおいて、「血漿を除染する方法」と言う用語は、血漿中に見出される少なくとも１種の感染因子の相当量を除去および／または不活性化することが可能である方法を称する。典型的には、血漿を除染するための本発明の方法は、血漿中に見出される少なくとも１種の感染因子について、少なくとも４、好ましくは少なくとも５、より好ましくは少なくとも６の対数減少率すなわちログ・キル（ｌｏｇ  ｋｉｌｌ）を達成することが可能である。
【００８５】
本発明の方法はまた、血漿タンパク質へのダメージを最小化しながら、血漿の除染に作用することも可能である。タンパク質損傷の量は、当該特定タンパク質、用いられる除染方法の特定態様、およびある程度まで供給源および血漿のそれまでの取り扱いに依存する。しかしながら、本発明の方法は、所定のタンパク質を定量するために用いられる許容された実験室的な臨床的方法により定量して、２０％未満、１０％未満、およびさらに数パーセント台のタンパク質損傷しか引き起こさずに、少なくとも１種の感染因子の上記ログ・キルを達成することが可能である。例えば、フィブリノーゲン濃度を定量するために、既知の量のトロンビンを既知の量の血漿に加え、次いで、凝血形成についての経過時間を測定し、較正された標準に比較する。現代の血液学の実験室においては、この試験および他のタンパク質についての同様の試験は、自動化された装置で日常的に実施され、したがって、タンパク質損傷の程度を定量する正確で文書化された手段を提供する。
【００８６】
本発明の方法により除去および／または不活性化され得る感染因子のタイプの例には、寄生虫、細菌、真菌、およびウイルスおよびおそらくプリオンが含まれる。
【００８７】
それらの感染因子の中で、寄生虫は、熱帯気候で主に顕著な脅威を提起する。そのような危険の最も大きなものはマラリアであり、マラリアは、プラスモディウムのすべての４つの異なる種により広がり、しかし主としてプラスモディウム・マラリアエにより広がる。もう１つの寄生虫による危険は、トリパノソーマ・クルージであり、それは、中南米で深刻な問題であるチャガ病（Ｃｈａｇａ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ）を引き起こす。米国では、バベシオーシス（Ｂａｂｅｓｉｏｓｉｓ）を引き起こす２種のバベシ原生動物が輸血により感染し得るが、しかしながら、より一般的な経路は、ダニの刺し傷である。ライシュマニア・インファンタムもまた血液製剤中に見出され得る寄生虫である。
【００８８】
細菌もまた輸血における今に至る脅威を提示する。この理由のために、ＣＤＣおよび血液関係者の主導メンバーは最近、輸血に関連する感染の危険を定量するためのＢａＣｏｎ（細菌汚染）研究に着手した。特に関心の持たれているものは、エリシニア・エンテロコリティカ、エスシェリキア・コリ（大腸菌）、シトロバクター・フロウンディイ、ならびにバルトネラおよびブルーセラの種である。
【００８９】
真菌の感染は、特に、がん治療、ＨＩＶなどにより弱体化した免疫系を有する患者のための医療処置において現在も続き、重要性を増している問題である。真菌とかびと言う用語は、しばしば互換性を持つけれども、慣例では、かびとは典型的には成長する真菌のウール状の外観を称するものである。この慣例に従えば、酵母は、この場合、特にサッカロマイセタシー科の特に微細な真菌である。多くのそのような日和見感染が存在するが、臨床的問題のより一般的な媒体の一部は、カンディーダ・アルビカンスおよびカンディーダ・ステラトイデアならびにクリプトコッカス・ネオフォルマンズである。
【００９０】
最後に、問題の中心のウイルスは、肝炎（ＡからＥ、およびＧ）、ＨＩＶ（ヒト免疫欠損ウイルス）、ＨＴＬＶ（ヒトｔ−細胞リンパ親和性ウイルス）タイプＩおよびＩＩ、ＣＭＶ（サイトメガロウイルス）、ＥＢＶ（エプシュタイン−バーウイルス）およびパーボウイルスＢ１９の様々の菌株である。
【００９１】
ほとんどの場合に、上記汚染は、主に、一人の患者から別の患者への輸血における問題である。しかしながら、そのような汚染物についてあらゆる個人の血液を処理し、次いで、この血液を患者に輸血し戻すこともまた可能である。例えば、そのようなアプローチは、エイズ患者の血液中を循環するＨＩＶの負担を軽減する。そのようなアプローチは、非ホジキンスリンパ腫のような血液中の非感染性媒体（「治療技術は、セララックス（Ｔｈｅｒａｌｕｘ）試行における第１の患者を記録する」、ウォールストリートジャーナル、１／２９／０１）の治療にも適用され得るであろう。
【００９２】
血液産業を超えて、他の生物学的分野においてもまたいくつかの用途が存在する。特に、バイオテクノロジーおよび関連する技術において、大きな関心が持ち上がる。背景の問題は、近く発表されるジョイントの保護者薬品協会（ＰＤＡ）とＦＤＡウイルス除去フォーラムＰＤＡ会議ファイル、２００１年秋で検討されるであろう。例えば、この産業が直面する１つの問題は、ネズミハイブリドーマは、存在することがどこで見出されようと、ネズミレトロウイルスで汚染されやすいであろうと言うことである。発生する種間交差汚染の可能性は、過去にブタカゼが破滅的な世界的流行病を引き起こしたことを思えば、大問題である。それゆえ、きわめて有効な除染手段は、バイオテクノロジーを発展させるために不可欠である。
【００９３】
生物学的分野に加えて、除染技術のための他の用途もまた存在する。１つの主たる領域は食品科学であり、食品科学は、さまざまの汚染物、特にサルモネラのような細菌の有効な除染を必要とする。したがって、食品製品の有効な除染は、安全性を向上させ、保存寿命を延長させる。
【００９４】
処理される対象が通常汚染物であるとみなされない優れた除染技術を用いることの他の可能性もまた存在する。具体的には、インビトロ受精（ＩＶＦ）の最近の進歩は、雌ドナーから卵細胞を採取し、遺伝物質のほとんどとともに核を除去する可能性を向上させた。次いで、第２の雌からの遺伝物質を卵細胞に挿入し、次いで、実現可能な妊娠を引き起こす意図でそれを受精させる。このアプローチの問題は、ドナーの全ての遺伝物質が除去され得るのではなく、主に一部のミトコンドリアＤＮＡを残すことである。結果として、現れる子供は、実際上も倫理上も大きな問題を引き起こす３者の「親」からの遺伝的寄与を有する。他のタンパク質を本質的に無傷に残しながらドナー遺伝物質の全てを破壊する除染技術を用いることは、そのような問題をなくすであろう。
【００９５】
最後に、以下に記載する独特の装置は、除染以外の目的のためにもまた用いられ得る。特に、オゾン処理ユニットはまた、一般的に、液体にガスを加えるためにも有用である。例えば、医療上の用途の場合には、デバイスは、心肺バイパスの間に血液を酸素化するために用いられ得る。食品および／または工業的用途については、オゾン処理ユニットは、水溶液に二酸化炭素を加えるために用いられ得る。他の同様の適用もまた可能である。
【００９６】
Ｉ．すなわち、第１の主たる態様において、本発明は、
（ａ）超音波エネルギーにより血漿を処理すること
を含む血漿を除染するための方法を提供する。
【００９７】
「超音波エネルギー」および「超音波」と言う用語は、ヒトの聴音の上限の２０ｋＨｚから数百ＭＨｚまでの範囲の周波数を有する音波を称する。
【００９８】
いくつかの異なる技術が超音波を発生させるために用いられ得るが、しかし、最も一般的なアプローチは、圧電結晶に電気衝撃を与えることである。次いで、活性化された結晶は、その主軸に沿って膨張収縮し、圧力律動または音波（超音波）を発する。加えて、超音波振動はまた、特に電磁デバイス、電気圧縮デバイス、または磁気圧縮デバイスによる他の通常の手段によっても発生し得る。そのようなデバイスは、参照により本明細書に組み込まれる、公開されたＰＣＴ特許出願ＷＯ９２／２０４２０において記載されている。
【００９９】
その比較的高い周波数範囲のために、超音波は、工業および医療において多くの用途を有する。特に、超音波は、液体の処理において多くの独特で有益な用途を有する。
【０１００】
それらの用途の中で、最も一般的で、最も顕著であるものにキャビテーションが含まれる。キャビテーションは、超音波の低圧部分が液体の蒸気圧未満となる時に起こる局所化された気化である。それらの条件の下では、キャビテーションの泡が成長し、次いで崩壊するとき局所温度および局所圧力は極端に高くなる。
【０１０１】
それらの極端な条件は、生物の細胞壁の破裂を含む多くの実際の用途のために用いられる。すなわち、この能力は、特に寄生虫について除染において即座の有用性を有する。波長の制限のために、より少ない程度ではあるが、細菌、真菌およびウイルスのようなより小さな汚染物もまた処理され得る。したがって、処理される液体は、液体を含む全ての非細胞性タンパク質を含む。特に、血液産業においては、処理される液体は、血漿または血清であり、赤血球または血小板ではない。
【０１０２】
それゆえ、この第１の態様のための全ての構成は、非常に細胞破壊のために用いられるものに非常に似ている。具体的には、超音波源、標的、および超音波源を標的に結合するいくつかの手段の３つの別々の部材が必要とされる。ここでの制限要因は、高周波数波の超音波は空気のようなガス中で良好に伝わらず、それゆえ硬質金属または液体のような伝達媒体を必要とすると言うことである。金属の場合には、導波路は通常アルミニウムで作られている。ホーンと呼ばれる形態に注意深く形成することにより、それらの導波路は、大きな振幅とエネルギーの波を作り出し得るものであり、標的への超音波エネルギーの効率的な移動をもたらす。
【０１０３】
この第１の態様における除染技術と現存する細胞破壊技術との間のもう１つの類似点は、両方のユニットが低範囲の超音波周波数で稼動すると言うことである。ここでの基礎となる物理的原理は、水および希釈水性系について、キャビテーションを作り出すために必要とされる力は、１００ｋＨｚを超えたところで劇的に増加すると言うことである。もちろん、ある程度のキャビテーションはさらに高い周波数でも起こり、本発明の方法は、そのようなより高い周波数の超音波エネルギーを利用し得る。特に、高周波数は、数百ｋＨｚからＭＨｚ周波数、すなわち「メガソニック」範囲でより多く装置として用いられ、容易に入手可能となることが予想される。
【０１０４】
それゆえ、本発明の方法の第１の態様において、血漿は、血漿のキャビテーションをもたらすのに十分な周波数を有する超音波エネルギーで処理される。したがって、血漿は、２０ｋＨｚから１０ＭＨｚ、好ましくは２０ｋＨｚから１ＭＨｚ、より好ましくは２０ｋＨｚから５００ｋＨｚ、さらにより好ましくは２０ｋＨｚから１００ｋＨｚの周波数を有する超音波エネルギーで適切に処理される。
【０１０５】
したがって、この第１の態様において記載される除染技術と通常の細胞壁破壊装置との間にある程度の類似が存在するけれども、しかしながら、ある程度の顕著な差異も存在する。具体的には、超音波周波数がしっかりと維持され、キャビテーションが装置のそれぞれの、そして全ての使用の際に実際に起こることは、有効性のため、そして規則的なコンプライアンスのために重要である。それらの条件が合致することを保証するために、プロセスは、好ましくは、ハイドロフォンおよび支持エレクトロニクス（モデルｂｘ−２０８／３０８，ｐｐｂ，Ｉｎｃ．，カリフォルニア州サンディエゴ）の使用によりモニターされねばならない。
【０１０６】
新たな除染装置と通常の細胞破壊装置との間のもう１つの顕著な差異は、除染ユニットは、細胞破壊デバイスについて必要とされる保護の程度をはるかに超えるレベルまで所望のタンパク質成分を注意深く保存しなければならないと言うことである。
【０１０７】
それらのタンパク質の保護における第１の問題は、超音波キャビテーションにより誘発される強力な化学反応を制限することである。１つのそのような反応は、キャビテーションの間の泡の成長および崩壊による強い攪拌による長鎖有機化合物の破壊である。この破壊は、エルピナーにより記載されているように、（Ｉ．Ｅ．エルピナー、「超音波の物理的、化学的、および生物学的効果」、コンサルタンツ・ビュロー、ニューヨーク、２１７ページ、１９６４年）凝血プロセスに関係する大きくて比較的デリケートなタンパク質について顕著な問題であり得る。
【０１０８】
本発明の方法において、血漿タンパク質のそのような損傷は、２つの技術により処理され得る。第１に、処理時間が短く、すなわち５分未満、好ましくは２分未満、より好ましくは３０秒未満に維持される。第２に、強度レベルが低く、すなわち、０．１から５０Ｗ／ｃｍ2 、好ましくは０．５から１０Ｗ／ｃｍ2 およびより好ましくは１から６Ｗ／ｃｍ2 に維持される。もちろん、実際には、それらの技術は、特定のタンパク質溶液および汚染物質に対して調節されねばならない。
【０１０９】
音波処理を受けるタンパク質溶液に対して完全に破壊的であるもう１つの反応は、キャビテーションの極端な温度と圧力の変化による液体中のフリーラジカルの生成である（Ｖ．ミシックおよびＰ．リース、「ＥＰＲ分光分析による水系音波化学における１級フリーラジカル種の検出」、「音波化学および音波発光」における、Ｌ．Ａ．クラム、Ｔ．Ｊ．メーソン、Ｊ．Ｌ．リースおよびＫ．Ｓ．サスリックによる編集、ＮＡＴＯ  ＡＳＩシリーズＣ、クラウワーアカデミックパブリッシャーズ、ドードレヒト、２２５〜２３６ページ、１９９９年）。それらのラジカルを制限するための好ましい方法は、鎖の破壊を防止するために上記のように超音波処理強度と暴露時間を減少させることである。
【０１１０】
しかしながら、液体に加えて、フリーラジカルは、処理された液体の表面でも生成し得る。それらのラジカルの中で、最も破壊的なものは、酸素から生成するものである。
【０１１１】
したがって、この第１の主たる態様の好ましい下位の態様において、超音波エネルギーは、血漿上のガスが不活性雰囲気と置き換えられた後に適用される。この場合には、「不活性」は貴ガスを含まない。というのは、そのような単原子種は、超音波エネルギーを分散させるためにはあまりに小さな程度しか自由度を有さないからである（Ｓ．Ｙ．ワン，「超音波源の生物学的影響および特性についてのシンポジウム」において、Ｄ．Ｇ．ハザードらにより編集される、ＵＳ  Ｄｅｐｔ．ＨＥＷ（ＦＤＡ）７８−８９４８、ＵＳ政府印刷局、１９６ページ、１９７７年）。代わりに、適切な不活性ガスは多原子性でなければならず、特に二酸化炭素である。実際、二酸化炭素ガス層を形成させることは、単に処理される溶液にドライアイスのペレットを投げ込むだけのことである（高強度超音波処理装置使用者案内、ソニックス＆マテリアルズ社、ニュートン、コネティカット州、１９９９年）。放出されるガスは、この場合、酸素に置き換わり、酸素がないため、酸素ラジカルは生成し得ない。
【０１１２】
このプロセスの間に、溶解したガスの一部もまた二酸化炭素により置き換わる。この置換の一部は、ペレットのすぐ近辺の濃度勾配により起こるが、しかし、この置換のほとんどは、液体表面上の富化された二酸化炭素ガス層からの輸送による。いずれの場合でも、正味の結果は、酸素の優先的な除去であり、そのことはやはり有益である。というのは、酸素ラジカルは、タンパク質に対して非常に破壊的であるからである。したがって、全てのプロセスはｈｐｌｃで通常用いられるヘリウム散布技術に類似することに注意されたい。しかし、ヘリウムは、上記貴ガスラジカルの生成のためにここでは用いられ得ない。
【０１１３】
フリーラジカルの生成の制御に加えて、タンパク質損傷を制限する上でのもう１つの重要な問題は、主に超音波源からの過剰な熱の制御である。この制御を達成するために、いくつかの冷却手段を備えねばならない。超音波源の熱を制限する好ましい手段は、超音波源および／またはホーンに水の流れを与えることである。標的を冷却するための好ましい手段は水浴に浸すことであり、このことはまた、超音波ホーンおよび超音波源への強力な音響学的結合も生み出す。
【０１１４】
したがって、それらの技術によれば、いずれかの選択された温度に標的を維持することが可能である。しかしながら、この温度は、しばしば対立する問題に依存する。具体的には、タンパク質、特に第ＶＩＩＩ因子のような凝血因子は典型的には熱感受性である。それゆえ、最大限の保護のために、温度は、２から１０℃のＦＤＡ特定範囲内に比較的低く保たれるべきである。他方、水中、または希釈水系中のキャビテーションは、約５０℃で最も有効である（Ｊ．ブリッツ、「超音波学：方法と用途」、ザ・バターワース・グループ、ロンドン、１３３〜４ページ、１９７１年）。この温度では、泡形成を誘発するためには最少量のエネルギーしか要求されず、より少ないエネルギーでは、たんぱく質鎖破壊はより少なく、ラジカル形成はより少ない。加えて、高温では溶解するガスはより少なく、それにより、上記のように最も破壊的である酸素ラジカルの形成をさらに減少させる。
【０１１５】
それらの理由のために、もし標的がそのような高温に耐え得るならば、ユニットは、約５０℃で操作されるべきである。特に、さらに高い温度に耐え得るタンパク質については、最も高い可能な範囲の使用は、付加的な安全性の尺度である病原の熱による不活性化を提供する。この場合には、５０℃をわずかに超える温度は、キャビテーション効率のある程度の減少をもたらし得るが、しかし、これは、熱による不活性化で得られる改善により、相殺を超えるものが得られる。代わりに、さらに高い除染温度は分離工程として用いられ得るものであり、キャビテーションは、より低い５０℃程度でなされる。
【０１１６】
あまり強固でない物質については、液体は、処理の直前まで冷却されたままにすべきであり、その時点で、急速な加熱技術が、５０℃以下まで操作温度を上昇させるように小さな試料に適用されるべきである。この時点で、超音波は、可能な限り短い持続時間と強度で適用されるべきであり、次いで、試料は、貯蔵温度まで急速に冷却される。
【０１１７】
最後に、上昇した温度に最小限の時間でさえ耐え得ない試料については、音波処理は、最も高い許容し得る温度で実施されるべきであり、続いて、超音波源またはキャビテーションプロセスに由来する残留熱を除去するために急速に冷却する。
【０１１８】
したがって、それら３つの全てのプロセスは、有効な熱移動のためのある種の手段を必要とする。上昇温度に耐え得る物質については、実際にそのような温度を達成するためのいくつかの加熱の選択肢が存在する。長時間の加熱に耐え得る強固な物質については、供給源バッグまたは容器全体が暖められ得るし、所望の上昇温度に維持され得る。水浴浸漬、マイクロ波、空気送風、またはいずれか他の簡便な技術がこの加温のために用いられ得る。
【０１１９】
より温度感受性の物質の急速な加熱のためには、処理される体積は、まず、より小さなユニットかまたは単位時間流れあたり連続的な少ない体積に小分けされる。次いで、それらのより小さなユニットまたは流れは、それらが水浴、マイクロ波、空気送風など由来のようないずれか簡便な熱源からの熱移動に供される大表面積を有する分離したバッグを通過する。
【０１２０】
同様なアプローチは、急速な冷却のために用いられる。しかしながら、この場合には、適切な冷却機構は、水浴浸漬またはガス膨張もしくはペルティエ効果により冷却されるプレートとの接触である。
【０１２１】
第１の主たる態様の方法は、バッチ式、半連続式または連続式のいずれかで実施され得ることもまた理解されるべきである。バッチ式除染については、単一バッグユニットは、超音波エネルギーにより個別に処理され得る。代わりに、半連続操作においては、血漿の単一ユニットまたは個々の小さな体積は、それらが超音波エネルギーで処理される１以上のステーションまたはステージを通過して流れ得る。この操作モードでは、それぞれの個々のユニットまたは体積は、処理のためのそれぞれのステーションまたはステージで保持され、次いで、次のステーションまたはステージにバルクで通過する。さらにもう１つの代替法は、血漿がステーションまたはステージを中断無しに流動し得る連続操作である。半連続モードおよび連続モードの両方は、処理される物質の極めて大きなプールを含む分別または他のプロセスに適用し得る。
【０１２２】
実際には全てのそれらの異なるモードの操作を達成するために、特別な処理チャンバが必要とされる。
【０１２３】
このチャンバについての第１の条件は、入口管はあらゆる病原を含んではならないと言うことである。背後の問題は、入口管が容器の頂部接合中のポートを通過する通常の血液バッグで見られ得る。それ自体、この管にとどまる処理されていない流体は、続いて、処理された流体を汚染し得る。これは、超音波および以下に記載される他の処理技術にとって特別な問題である。というのは、そのような処理プロセスが終わった後、病原の循環を防止するために残留物質は流体中にとどまらないからである。
【０１２４】
この問題を防止するために、入口管はバッグに近接して熱シールされ得るものであるが、しかしこのアプローチはいまだポートを残し、このポートは、シールすることが比較的困難である。そのようなポートも狭いので、したがって超音波は管のオリフィスの狭い管直径の中で効果的に減衰し、それにより、管の長さ全体でいずれかの病原についてほとんどまたはまったく処理されていない部分を残す。
【０１２５】
バッチ処理のための単純な代替案は、管のオリフィスの下でバッグそれ自体を熱シールすることである。有効なシーリングのために、この手順は、液体が、バッグの外的圧縮によりシーリングゾーンからすでに吐き出されたときに実施されねばならない。
【０１２６】
半連続プロセスについては、修正圧縮アプローチが好ましい。この場合には、上記のように、処理チャンバは管のオリフィスの直下できつくクランプ固定されるが、しかし、この場合には、熱シールは用いられない。代わりに、チャンバ中の流体は処理され、ついで、流体の次のバッチがクランプを緩めることにより流入を許容される前に排出される。流体体積、具体的には、クランプ近くの流体の完全な処理を保証するために、クランプジョーの面は、アルミニウムまたはステンレス鋼で作られ、それによりクランプでの音波の消音を防止する。他方、中実な金属クランプジョーは、音波をクランプを通して入力容器に伝播させ、したがっておそらく、過剰な音響処理を引き起こす。この潜在的問題を防止するために、クランプジョーの背面は、ゴムまたは他の防音材で被覆される。
【０１２７】
連続ユニットはそのような変更を必要としないことに注意されたい。というのは、流れは、漸進的に処理されるからである。
【０１２８】
処理チャンバについての第２の条件は、液体層は、比較的薄くなければならないと言うことである。そのような薄い液体層にはいくつかの利点が存在する。第１に、薄層は、均一温度と均一冷却を保証するために必要である。加えて、薄層はまた、液体中で発生する気泡が表面に急速に上昇することも可能とする。このことは重要である。というのは、急速な泡の上昇は、超音波が強力な泡の表面振動または強力な泡の周りのスリップ流れを誘発し得る時間を減少させ、それによりタンパク質損傷を減少させるからである。さらに、急速な泡の上昇はまた、過剰なサイズへの泡の集中も防止する。そのような大きな泡と比較して、小さな泡は好ましい。というのは、それは、より均一な処理を提供し、より少ない表面振動およびスリップ流れを有するからである。
【０１２９】
それゆえ、実際には、血漿は、好ましくは、超音波エネルギーの適用の少なくともある程度の時間の間、２から２０ｍｍ、好ましくは２から１０ｍｍ、およびより好ましくは２から４ｍｍの厚さを有する薄膜に形成される。好ましくは、血漿は、超音波エネルギーの適用の開始の前にそのような薄膜に形成され、超音波エネルギーの全的適用の間そのような薄膜に維持される。
【０１３０】
他方、適切な処理体積を獲得するためには、それらの薄層は、相対的に広くなければならない。バッチモードまたは半連続モードの場合には、広い表面は、得られる体積全体が超音波により均一に処理され得る限り円、正方形などのようないずれかの所望の形態のものであり得る。ここでの制限要因は、超音波は、典型的には、水の容器の中で均一暴露を生み出さないと言うことである。この理由のために、超音波洗浄産業は、主に、狭い帯域幅にわたって混合された周波数を用いることにより、および共鳴定在波を回避する寸法に処理タンクを建設することにより、「ホット」スポットおよび「コールド」スポットを回避するための多数の方法を開発した。それらのアプローチは、バッチおよび半連続除染ユニットのために直接用いられ得る。しかしながら、除染デバイス中の液体層は、超音波クリーナーのために通常用いられるものよりはるかに浅い。
【０１３１】
しかしながら、それらのアプローチは、連続流システムで要求される独特の形態に適合するように修正されねばならない。ここでの目標は、流れる流体の均一処理を保証することである。問題は、動く流体は、いくつかの異なる流動パターンに従い得ると言うことである。川、ゆっくりと動く管の流れなどのような共通の経験において、層流は、流体の中心で急速に動き、一方、境界近くの流体は本質的に静止状態にあるように展開する。展開するのは非常に単純であるけれども、そのような流れは除染作業では回避されねばならない。というのは、チャンバ壁近くの流体はそのように過剰な処理を受け、一方、中心の流体は、本質的に処理されないであろうからである。
【０１３２】
この問題を回避する１つの手段は、渦の流れが流体の徹底的なバルク混合をもたらすように荒い流れを用いることである。不運にも、このアプローチは、いくつかの理由のためにタンパク質除染にとって適切ではない。第１に、レイノルズ数Ｒｅ＝（ρＶｄ／μ）（式中、ρは密度であり、Ｖは速度であり、ｄは直径であり、μは粘度である）は、開放された頂部流動チャンネルについて約１０００でなければならない。それ自体、極端に高い流動速度は、乱流を達成するために用いられねばならないが、しかし、実際にそのような速度を獲得することは非常に困難である。さらに、たとえそのような速度が達成され得ても、許容し得る処理時間を生み出すためには、極めて長い処理装置が必要とされるであろう。最後に、たとえ高速で長い滞留時間のチャンバを作り得ても、得られる長時間の乱流はデリケートなタンパク質を損傷し、したがって、そのようなデバイスの利用範囲を限定してしまうであろう。それらの理由のために、乱流混合は、ほとんどのタンパク質除染作業にとって適切ではない。
【０１３３】
代替策は、全ての流体が処理装置を通してバルクとして動く、プラグ流れを用いることである。そのような流れを発生させるために、入口管を通って流入する流体はまず拡散装置と呼ばれる膨張セクションを通して広げられる。この拡散装置の出口で、プラグ流れ領域を提供するために長方形の形態が用いられる。例えば、この領域は、３０ｃｍ幅、６０ｃｍ長であり、０．４ｃｍの流体深さを有する。ついで、この長方形部材の末端で、本質的に逆転攪拌装置である集中セクションが出口管への流れを誘導するために用いられる。この単純な形態は、紫外線流動セルおよび同様の一般的な実験室設備において用いられる。
【０１３４】
除染用途のために、超音波源は、長方形セクションの下に直接配置される。このアプローチによれば、超音波は、除染をもたらすのみならず、流体の有効粘度も減少させ得る。この粘度の減少は重要である。と言うのは、低粘度は、プラグ流れが層状になる傾向を減少させ、このことは、いくつかのチャンバの流れの直径について起こり得るからである。それゆえ、この形態の正味の結果は、流体のまったく均一な超音波処理である。
【０１３５】
ＩＩ．  第２の主たる態様において、本発明は、
（ａ’）超音波エネルギーにより血漿を処理するための工程
を含む血漿を除染するための方法を提供する。この第２の主たる態様において、工程（ａ’）「超音波エネルギーによる血漿の処理のための」とは、工程「（ａ）超音波エネルギーにより血漿を処理すること」が第１の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。
【０１３６】
ＩＩＩ．  第３の主たる態様において、本発明は、
（ａ）流体を脱ガスしながら超音波エネルギーにより流体を処理すること
を含む流体を除染するための方法を提供する。
【０１３７】
したがって、この第３の主たる態様において、超音波エネルギーの適用の間流体に真空が適用される。
【０１３８】
この第３の主たる態様において、超音波エネルギーは、フリーラジカルを防除する手段を除いて、第１と第２の態様のコンテキストにおいて上記の同じ設備を用いて流体に適用され得る。具体的には、第１と第２の主たる態様の１つの好ましい態様において、超音波エネルギーは、血漿上のガスが不活性雰囲気により置換された後に適用される。非常に有効であるけれども、このアプローチは、不運にも、無菌の消耗品のための材料コストと系の汚染を許容しないでそれらの材料を導入する問題が絡んでくる。
【０１３９】
別のアプローチは、超音波で処理される液体上のガスを除去するために真空を適用することである（「高強度超音波処理装置使用者案内」、ソニックス＆マテリアルズ社、コネチカット州ニュートン、１９９９年参照）。この第３の主たる態様において、除染される液体は、上記流体のいずれかであり得る。好ましい態様において、流体は、血漿のようなタンパク質含有生物学的流体である。以下の検討は、血漿のコンテキストにおいて方法を説明するが、しかし、方法は、上記流体のいずれに対しても適用され得ることが理解されるべきである。
【０１４０】
流体上のガスは、流体上のガスに約２から１００ｍｂａｒ、好ましくは約１０から８０ｍｂａｒ、より好ましくは２０から６０ｍｂａｒの真空を適用することにより有効に除去される。ここでの制限要因は、溶媒の蒸発である。十分に低い圧力で、液体は制御不可能に沸騰し得る。異なる液体は異なるレベルの真空を要求し得るので、真空のレベルが変化し得るように装置が成形されることが好ましい。
【０１４１】
真空は、真空ポンプにより適用され得る。油の汚染を回避するために、真空ポンプは、スクロールかまたは他の乾燥した排気方法を使用するべきである。
【０１４２】
真空は、少なくとも血漿への超音波エネルギーの適用の開始の時間に、流体、例えば血漿上のガスに適用されることが好ましい。より好ましくは、真空は、血漿への超音波エネルギーの適用の開始の前に血漿上のガスに適用される。さらにより好ましくは、真空は、（１）血漿への超音波エネルギーの適用の開始の前に、そして（２）血漿への超音波エネルギーの少なくとも一部の適用の間に血漿上のガスに適用される。もちろん、超音波エネルギーは、真空への暴露の中断の後の適用され続け得る。
【０１４３】
液体−ガス界面での酸素ラジカルの形成の消去を超えて、この真空技術はまた、タンパク質溶液の除染において付加的な利点も有する。
【０１４４】
そのような主たる利点は、適用される真空は、液体上の蒸気圧を減少させ、それによりキャビテーションを誘導するのに必要とされるエネルギーを減少させることである。適用されるエネルギーがより少ないと、第１の態様および第２の態様において上述されたように起こり得るように望ましからぬタンパク質損傷は少なくなる。
【０１４５】
除染系への真空の適用のもう１つの利点は、超音波処理の際の液体の急速で有効な脱ガスである。超音波の最も単純な適用であると一般的にみなされるように（Ｔ．Ｊ．メーソン、「音響化学および出力超音波学の工業的適用」、「音響化学および音響発光」、Ｌ．Ａ．クラム、Ｔ．Ｊ．メーソン、Ｊ．Ｌ．ライスおよびＫ．Ｓ．サスリック編集、ＮＡＴＯ  ＡＳＩシリーズＣ、クラウワー・アカデミック・パブリッシャーズ、ドードレヒト、３８５ページ、１９９９年）、脱ガスは、ソーダおよびビール製造（「マークスの機械技術者のための標準ハンドブック」、第１０版、マグローヒル、ニューヨーク、１２＿１２１−１２＿１２３、１９９６年）からｈｐｌｃオイル洗浄までの範囲の産業で用いられる。それらのおよび同様の用途において、目標は、液体製品に溶解するガスの少なくとも一部を除去することである。
【０１４６】
液体の音波処理に関わるガスの実質的に２つの源泉が存在することに注意することは重要である。一般的な検討は、米国特許第４，５９７，８７６号において提供されている。放出される第１のガスは、「精留拡散」または「ガス性キャビテーション」と称されるプロセスで溶解しているガスである。この場合において、溶解するガスは、単純に、大きくなる泡に捉えられる。と言うのは、ガスは、液体に戻って拡散し得るよりも急速に溶液から吐き出されるからである。逆に、音響化学文献において、「キャビテーション」または「蒸気キャビテーション」とよりしばしば呼ばれるプロセスは、音波を掛けられた液相それ自体からの泡の形成に言及する。エネルギーの観点では、精留拡散は、ソーダカンを振ることにより容易に例証されるように、単に強力な振動のみを必要とする。しかしながら、通常キャビテーションと呼ばれるものを産み出すために液体を気化させるためには、はるかに大きなエネルギーが要求される。その結果、音響化学系および様々の超音波洗浄装置はまず拡張された操作および／または実際の処理の前の様々の添加剤（石鹸）の使用により「脱ガスされ」、さもなければ、溶解したガスは、音波を「軟化し」、したがって、超音波デバイスの性能を低下させる。
【０１４７】
もちろん、長い操作時間も石鹸も除染作業のためには許容され得ない。結果として、血漿に十分なエネルギーの音波を適用することは、精留拡散と水のキャビテーションの組み合わせをもたらす。さらに、精留拡散は、溶解しているガスをキャビテーションにより形成される泡にし得る。しかしながら、第１と第２の態様に記載されているように、タンパク質損傷を制限するために、超音波への暴露を可能な限り少なく維持することが望ましい。それらの条件の下で、比較的少ないガスの発生が、いずれかの源泉から起こる。
【０１４８】
逆に、真空を適用することは、蒸気圧を減少させ、したがって、両方の源泉からの気泡の成長を非常に加速する。加えて、真空はまた、表面に達するいずれの気泡も除去する。正味の結果は、ほとんど溶存ガスのない液体であり、特に、このように、液体はほとんど溶存酸素を有さない。この酸素濃度の減少は、キャビテーションによる酸素ラジカルを少なくする。それゆえ、キャビテーションの間に起こるタンパク質損傷は少ない。
【０１４９】
このプロセスを強化することは、高強度のキャビテーションを誘発する超音波が適用される前に液体を脱ガスするために低強度の超音波および真空を用いることである。このアプローチの利点は、溶存酸素がこのようにキャビテーションが起こる前に非常に除去され、そうしてタンパク質損傷を最小化することである。
【０１５０】
溶存気泡は、収容容器の壁に沿っておよび減少する音波作用の内部点の周りに集まる傾向があるので、一部の現存する超音波脱ガスデバイス（ポラリス・デガッサー、ポラリス・インストルメンツ社、ケンブリッジ、ＵＫ）は、発生するガスが出て行く時間を許容するためにパルス超音波ドライバーを用いる。このアプローチのさらなる強化は、漸進的により長くより強い律動を用いることである。このアプローチの利点は、脱ガスプロセスは連続するので、残留するガスは除去するのがより困難であることである。加えて、酸素の漸進的除去は、タンパク質に対するラジカルによる損傷無しにより多くの出力が適用されることを可能とする。
【０１５１】
正味の結果は、真空の適用は、大気圧でのキャビテーションのために必要とされる強度の４分の１以下の脱ガス強度の初期使用を可能とすると言うことである。脱ガスは継続するので、漸進的に高くなる強度が用いられ得る。脱ガスプロセスの完了時に、大気圧でのキャビテーションのために用いられる強度の２倍を超える強度が用いられ得るものであり、その際、酸素ラジカル由来の顕著なタンパク質損傷はない。
【０１５２】
実際、ハイドロフォンによるモニタリングがこの順序で異なる工程を分離するために用いられる。具体的には、ハイドロフォンは、液体は音波処理の下で脱ガスし、蒸気形成および崩壊が起こるとき鋭い「ポッピング」音が続くのでわずかにヒッシングする（ｈｉｓｓｉｎｇ）すなわち「揚げている」音を記録する（Ａ．Ａ．アッチリーおよびＬ．Ａ．クラム、「音響学的キャビテーションおよび気泡の動力学」、「超音波：その化学的、物理的、および生物学的効果」、Ｋ．Ｓ．サスリック編集、ＶＣＨパブリッシャーズ社、ＮＹ、１９〜２０ページ、１９８８年）。それら２つの信号の差異は、非常に異なっているので、それは、自動化された装置により認識され得るものであり、したがって、上記異なるレベルの超音波を活性化させるための基礎を提供する。
【０１５３】
真空操作の最終的な付加的な利点は、系への液体の供給の改善である。特に、血液製剤のようなタンパク質溶液は、ピストン式か蠕動式かのいずれでもポンプ輸送により容易に損傷する。真空系は、身体の力の下にある流体の取り出しによりこの問題を回避する。この点で、「身体の力」とは、重力に非常によく似た、流体の流れ全体のそれぞれの成分に対する作用を称する。しかしながら、重力による供給は、適切な流れを提供するために十分な高さを必要とし、この高さは、ときに実験室での設定で構築することを困難にし得る。
【０１５４】
そのような場合には、真空供給は、有用な代替策を提供する。そのような系を実現するために、弁を源泉バッグまたは容器と真空チャンバとの間に配置する。したがって、活性化の際に、それらの弁は流体が最小の移動損傷で処理装置に流入することを可能とする。流体が過剰速度になることを防止するために、流動限定装置が、流体経路に配置される。
【０１５５】
加えて、それらの弁は、態様１および２で記載された熱移動デバイスを通る流れを適合させるかまたは制御するように配列され得る。実際にこの効果を達成するために、先に記述された熱移動ユニットは、源泉バッグまたは容器の下に直接配置される。この配置は、補足的な重力供給ならびに最大収量のための入力バッグの完全な排出を提供する。同様に、加温ユニットの出力が、超音波処理チャンバの入口上に直接配置される。それゆえ、２つの弁が、加温バッグのそれぞれの側に１弁ずつ操作のために用いられる。源泉バッグと加温バッグとの間の弁を開放することで、加温バッグの容量を充填することが可能となる。次いでこの弁は閉じられ、流体が暖められる。次いで、加温バッグと超音波チャンバとの間の弁が開かれ、流体を重力および／または適用される真空の両方の影響の下でこのチャンバに入らせる。
【０１５６】
したがって、真空操作にはいくつかの利点が存在する。しかしながら、真空操作はまた、いくつかの特別な要求事項も課する。特に、有効な除染は、真空操作が無菌条件下で実施されねばならないことを要求する。この問題に対する１つの可能な解決策は、通常の真空用機器の包括的な清浄化と除染である。不運にも、このアプローチは、高価であり、時間も消費し、したがって極めて大きな処理装置でのみ使用される。
【０１５７】
好ましいアプローチは、適用の間に容易に取り替えられうる特別の使い捨て用品を使用することである。１つの可能なアプローチは、１気圧真空（ａｔｍｏｓｐｈｅｒｅ  ｖａｃｕｕｍ）に耐え得る使い捨てチャンバを用いることである。しかしながら、そのようなデバイスは、多量の物質を必要とし得るし、それゆえ、非常に高価であり得る。好ましい代替策は、金属、好ましくは、ステンレス鋼で作られた通常の真空チャンバの内側に薄い使い捨てのプラスチックライナーを用いることである。
【０１５８】
実際には、この使い捨て用品は、基板の反対側の入口と出口で、テント状配置となる。テントの頂点では、接続管は真空へのアクセスを提供し、したがってこのことは、内部と外部の圧力を等しくする。無菌性については、ＦＤＡに承認されたフィルターは、この管を通っての病原の出入りを防止する。液体の汚染を防止するために、プラスチックカバーがこのフィルターに取り付けられ、このカバーはユニットの使用の前に開かれ、その後閉じられる。代わりに、無菌結合デバイス（ＳＣＤ）を有する接続ホースもまた直接真空接続のために用いられ得る。ＳＣＤもまた入口および出口のために用いられる。したがって、使い捨て製品全体は、ガンマ線照射、オートクレーブ、ガス処理、またはいずれか他の通常の滅菌技術により滅菌され得る。
【０１５９】
材料については、テントは、硬質または可撓性プラスチックのいずれかで作られ得る。硬質プラスチックテントは、極めて有効な音響移動および大きな構造上の一体性のために、超音波ドライバーにクランプ固定されるであろう。不運にも、そのような配置は、比較的高価であり、顕著な量の貯蔵空間を要求するであろう。代替物は、適切な形態を維持するために四隅に設置用フックを有する可撓性テントである。このより廉価な設置は好ましい。所望であれば、テントは、音響接合および熱移動を改善するために液浴中に浸漬され得る。
【０１６０】
しかしながら、この液浴があってもなくても、全ての真空系は、液体を処理するとき吸引の潜在的危険を有するものである。この問題を回避する標準的手段は、ポンプに引かれる前に、吸引された液体を捕獲するために真空トラップを使用することである。このアプローチは除染作業のために用いられ得るけれども、好ましい技術は、血漿容器および真空チャンバのために分離トラップを用いることである。
【０１６１】
したがって、この配置の下で、血漿容器から吸引された汚染された液体は、使い捨てのための分離チャンバ内に捕獲される。最小の出費のために、このトラップは、トラップが何回ものサイクルのために用いられるように、無菌フィルターの向こう側に配置される。真空チャンバの空間を節約するために、トラップは外部に配置される。このアプローチの下では、血漿チャンバへの接続は、真空チャンバドアシールのくぼみに配置されている成形された挿入部を通してなされる。したがって、この挿入物を通して真空ホースおよびいずれかの供給ラインの経路決定をすることは、使い捨て製品を急速かつ容易に設置および取り外しすることを可能とする。
【０１６２】
したがって、このアプローチにおける真空チャンバトラップは、いずれの浸漬液体も捕獲し、また、血漿容器が破損し得る場合に付加的な安全手段も提供する。
【０１６３】
真空チャンバトラップはまた、プロセスをモニターすることが必要とされる真空ゲージのための簡便な設置位置も提供する。具体的には、このゲージは、いずれの吸引された物体からも保護するために、トラップおよび滅菌フィルターのポンプ側に設置されねばならない。
【０１６４】
この配置では、系は、前述の態様で記載されたように、バッチ式、半連続式、または連続式で操作され得る。
【０１６５】
バッチ式では、系は、真空チャンバを閉じ、真空ポンプを作動させることにより単純に真空にされる。系が予め充填されていないならば、その場合、真空は、処理される流体を処理チャンバに引き込む。次いで、真空センサーおよびリレーは、選択された真空レベルで超音波を発信させる。そのとき、脱ガスおよびキャビテーションは、予め決められた時間連続するプロセスとともに上記のように実施される。このプロセスの終わりに、真空は開放され、処理された物質が取り出される。新たな使い捨てユニットを取り付けた後、そのとき系は、次の操作のための準備ができている。
【０１６６】
半連続操作は、充填が大きな容器から段階的になされ、使い捨て製品がそれぞれのサイクルで交換されないことを除いて同様の形式で実施される。この場合には、処理された物質は、それぞれのサイクルの終わりに第２の容器に集められる。最後に、入力容器の排出の後に、処理装置には一部の残留物体が残されるであろう。バイオハザード廃棄物をもたらす残留物質を最小にし、最大収量を達成するために、その場合処理ユニットは、残留生成物を排出するためにわずかに傾けられる。この作用は、空気式ピストン、電気モーター、ソレノイド、などにより駆動され得る。
【０１６７】
連続操作はそれらの特徴を併せ持つが、しかしまた、付加的な改良も必要とする。第１の問題は、連続流は、上記のように、可変的な強度の使用および単一バッチについての超音波の時間律動を妨げることである。代わりに、超音波処理は、血漿を順次的なプールを通過させることにより達成され得、それぞれのプールは、連続的により強力でより長い時間作用するそれ自体の超音波源を有する。態様Ｉで上述されたようなプラグ流れがそれぞれのプールで用いられる。
【０１６８】
しかしながら、水は、超音波の非常に優れた伝導体であるために、プールは、音響学的に隔離されていなければならない。このことは、流体がシート状に薄くなるように十分な空間を有して１つのプールから次のプールへと流れのカスケードを有させることにより達成される。次いで、それらのシートは、出口プレートから切断されたのこぎりの歯のパターンの流れ補助材（ｓｔｒｅａｍｅｒ）上を流れ、そのようにして一連のひだを形成する。重力と超音波の作用の下で、このときそれらのひだは多数の液滴に変化する。それらの液滴間の空間は、超音波を伝播し得ないものであり、したがって、処理されるプール間に必要な音響学的隔離を提供する。
【０１６９】
一旦そのように処理されると、その場合、真空をなくすことなく流体を除去することが必要である。この除去を達成する１つの手段は、ポンプの作用に耐え得る流体のために非常に有用である蠕動ポンプを使用することである。ここでの制限要因は、通常の蠕動ポンプは、熱発生と潤滑剤の脱ガスのために真空中で良好に機能しないと言うことである。それゆえ、真空チャンバ壁を通すアクセスポートを有する外部のドライバーかまたは密封された蠕動ポンプかのいずれかを使用することが必要である。
【０１７０】
除去のもう１つの手段は、弁と真空ポンプの配列により真空および周囲環境に別の形で暴露される容器中に処理された流体を集めることである。このアプローチの下では、処理チャンバの出口の弁を開くと、真空になったチャンバにもまた存在する収集バッグに処理された流体が流れ込むことが可能になる。このバッグがいっぱいになっているとき、処理チャンバ弁は閉じられ、収集チャンバ中の真空は解き放たれる。収集チャンバが大気圧に達して後、出口弁はそのとき開かれる。収集バッグが完全に排出されるとき、出口弁は閉じられ、収集チャンバは、ポンプにより真空状態に戻される。その後、そのプロセスは、必要なだけ繰り返される。したがって、このアプローチは、流体移動の間最小限のタンパク質損傷を提供する。
【０１７１】
ＩＶ．  第４の主たる態様において、本発明は、
（ａ’）流体を脱ガスしながら超音波エネルギーにより流体を処理するための工程
を含む流体を除染するための方法を提供する。
【０１７２】
この第４の態様において、工程（ａ’）「流体を脱ガスしながら超音波エネルギーにより流体を処理するための」は、工程「（ａ）流体を脱ガスしながら超音波エネルギーにより流体を処理すること」が第３の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。
【０１７３】
Ｖ．  第５の主たる態様において、本発明は、
（ａ）少なくとも２種の異なる周波数の超音波エネルギーにより流体を同時に処理すること
を含む、流体を除染するための方法を提供する。
【０１７４】
上記のように、超音波は液体の除染の上で非常に有益であるが、しかし、そのような処理は４つの主たる問題を有する。すなわち、過剰なキャビテーションによるタンパク質の損傷、過剰な熱によるタンパク質の損傷、長い処理時間、および低い有効性である。
【０１７５】
これらの問題を克服するために、処理される液体への超音波の発信を改善する必要がある。ここでの制限要因は、上記のように、溶解しているガスまたは液体それ自体の蒸気性キャビテーションのいずれかから生じる液体中の泡と超音波の相互作用である。波動力学から、それらの泡と音波との間の相互作用の効果は、主に、強度と超音波の周波数に依存する。上述のように、より大きな強度は、液体のキャビテーションを促進し、一方、より小さな強度は、脱ガスを促進する。しかしながら、泡の大きさに応じて、音波は、気泡が液体に完全に吸収し戻されるようにすることもまた可能である。この場合において、成長する泡は、不安定であると言われる。
【０１７６】
この大きさへの依存関係は、音波が泡壁の形態の動きならびに液体を通しての泡の動きを誘発するので生じる。米国特許第４，５９７，８７６号において検討されているように、適用される音の周波数が泡の共鳴周波数に適合するときそれらの動きは特に強力である。この特許では、成長する泡が常に共鳴状態に供されるように、多数の周波数にわたっての掃引が提案されている。しかしながら、実際には、どの周波数もいつも理想的ではないように多数のサイズの泡が連続的に発生する。それ自体、高価な電子機器と、超音波源の共鳴適合における困難と、広い範囲の周波数にわたっての処理容器は、このアプローチを受け入れがたくしている。
【０１７７】
もう１つのアプローチは、２つの異なる周波数を同時に用いることである（ＣＰ  ツー、Ｒ  フェン、ＹＹ  ツァオ、「２周波数照射の音響化学的効果」、Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ、第２５巻、第２号（１月号）、１４２〜１４５号（２０００年））。このアプローチの利点は、大きく異なる周波数の２つの別の音源の組み合わせられた暴露は、２つの別の音源が単独で作用することの合計より有意に有効である。本発明のコンテキストにおけるこの結果の重要性は、多数の周波数の使用が同じレベルのキャビテーションを達成する手段を提供するが、しかしより少ない出力が系に適用されると言うことである。より少ない入力では、より低い試料加熱と泡の周りのより少ない強度の剪断と振動が起こる。結果として、物質は音波照射の間にあまり損傷を受けず、一方また、除染を改善し、および／または処理時間を短縮するための増加する全出力の任意選択も提供する。
そのような多数の音源の適用の重要な条件は、音波は、単純な重なりを防止するために、直交方向で適用されねばならないと言うことである。この理由のために、ツーらは、２つの音源を直角に配置して用いた。除染のためには、音波は、通常のｘ、ｙおよびｚ軸にそって伝播するように、上記のことは優先的に３次元に拡張される。それゆえ、暴露チャンバを適切に設計することが必要であるように、そのような配置の結果は、多数の反響により減衰され得ることにももちろん注意しなくてはならない。このことは、誘発された泡での音波散乱の付加とともに、音響学の標準的な慣例事項を用いてなされ得る。
【０１７８】
多数の音源配置での第２の考慮事項は、周波数は、打撃（ｂｅａｔｉｎｇ）または極値の長い重なりを防止するために十分に高くなければならないということである。この理由のために、ツーらは、数十ｋＨｚ範囲からＭＨｚ範囲の周波数を用いた。一般的な関係は、音波は、周波数にして少なくとも一桁の強度により分離されねばならないし、好ましくは加えて、小さな一定の規模要因によってもまた分離されねばならないと言うことである。それ自体、適切な分離とは、１５または２０程度であり得る。３次元系についてのこの配列を用いると、最低の周波数バンドは、２０から１００ｋＨｚ台であり、次のバンドは、５００ｋＨｚから１．５ＭＨｚ台であり、最高のバンドは、１０ＭＨｚ台である。周波数分離が少なくとも１桁の強度で存在する限り、それらの範囲は、極端に重要なものではない。この手順の主たる制限要因は、単純に、市販の発生装置の能力である。
【０１７９】
上記の仕事は、キャビテーションのために展開されたが、このアプローチは、また、脱ガスのためにも顕著な利益を有する。例えば、調整された拡散の下にある泡の成長は、微小な流れおよび非対称の泡の形態を誘発する条件の下で大きく加速することが知られている。ビヤークネス力は、その共鳴サイズに対して泡を強力に分離することもまた知られている。さらに、進行波条件の下で、泡は、音波を掛けられた体積を通して急速に変形し得る。調整された拡散の異なる殻制限と比べて、溶解するガスは、このように、多数の音源への暴露の下で非常に急速に放出される。
【０１８０】
実際には、このことは、多数の周波数のキャビテーションについて要求される同一の形態および周波数を用いて達成され得る。強度のみが低下させられる必要がある。
【０１８１】
しかしながら、有用な強化策は、脈動を有するか有さないで最も高い周波数のためのキャビテーション出力を用いることである。発生するガスポケットは非常に小さく、したがって、低い周波数源の影響の下で調整された拡散に続く成長のための核形成ポイントを提供する。
【０１８２】
最後に、液体にガスを加える逆のプロセスに上記技術を拡張することもまた可能である。この側面は、オゾン処理態様において以下で説明される。
【０１８３】
流体への超音波エネルギーの適用のための他の条件およびパラメーターは、第１、第２、第３、および第４の主たる態様のコンテキストにおいて上述されたように実施され得る。
【０１８４】
ＶＩ．  第６の主たる態様において、本発明は、
（ａ’）少なくとも２種の異なる周波数の超音波エネルギーにより流体を同時処理するための工程
を含む、流体を除染するための方法を提供する。
【０１８５】
この第６の態様において、工程（ａ’）「少なくとも２種の異なる周波数の超音波エネルギーにより流体を同時処理するための」は、工程「（ａ）少なくとも２種の異なる周波数の超音波エネルギーにより流体を同時処理すること」が第５の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。
【０１８６】
ＶＩＩ．  第７の主たる態様において、本発明は、
（ａ）脱酸素化された流体を得るために超音波エネルギーにより流体を処理すること、および
（ｂ）前記脱酸素された流体を照射すること
を含む、流体を除染するための方法を提供する。
【０１８７】
この第７の主たる態様において、超音波エネルギーは、第１、第２、第３、第４、第５および第６の主たる態様のコンテキストにおいて上述されたのと同じ方式でおよび同じ装置を用いることにより流体に適用され得る。この第７の主たる態様において、超音波エネルギーの主たる役割は、照射に対する暴露の前の流体の脱ガスに影響を与えることである。
この照射の目的は、過剰な損傷から処理された液体を保護しながら前述された超音波技術のみを用いることにより達成され得るよりもより有効な除染を達成することである。先行技術の観点では、米国特許第３，３６２，８２３号は、超音波処理後の除染を改善するために紫外線光を用いることを記述する。後の、米国特許第４，５９７，８７６号は、脱ガス目的のために超音波および真空で処理された液体に対して紫外線光を用いることを記述する。しかしながら、それらの特許は、本発明で記載されるように、タンパク質防御の独特の問題には対処しない。
【０１８８】
上記のように、除染のためにＵＶ、ガンマ線、またはｘ線のような照射を適用する上での主たる制限は、酸素のフリーラジカルの生成である。また、上記のように、この問題に対する１つの可能な解決策は、いくつかのタイプのスカベンジャーを使用することであるが、しかし、それらの薬剤は高価でしばしな有毒であり、それゆえ、それらは、製剤が用いられ得る前に除去されなければならない。
【０１８９】
この問題を回避するために、本発明は、液体を照射する前に脱ガス技術を用いる。特に、この技術は酸素の除去に向けられる。溶存酸素がないと、酸素ラジカルが続く照射の下で生成し得ず、それにより除染されるタンパク質を残留させる。
【０１９０】
一般的な工業的な実施においては、液体を脱ガスするいくつかの代替手段が存在する。例えば、凍結と煮沸は脱ガスのために通常用いられるが、しかし、それらのプロセスの両方が相当なタンパク質損傷を引き起こす。真空の補助があってもなくても分離媒体として管または膜を使用することもまた可能である。しかしながらそれらの媒体は現在高価であり、容易に詰まるので、それらの使用は、ほとんどのタンパク質溶液についていくらか制限される。固定混合ノズル（アップチャーチ・サイエンティフィック、オークハーバー、ワシントン州）またはローター系システム（ウォルターＰ．ノールドカンパニー、ナティック、マサチューセッツ州）のようないくつかの機械的デバイスもまた存在する。しかしながら、そのようなデバイスの機械的作用は、タンパク質のようなデリケートな物質に対しては極めて破壊的である。代わりに、酸素のみが他のガスにより置換され得るが、しかし、これは、高価であり、時間もかかる。これらの理由のために、特に、少量の高価な試薬を処理する観点で、真空超音波脱ガス技術が開発された（ポラリスデガッサー、ポラリス・インストルメンツ社、ケンブリッジ、ＵＫ）。
【０１９１】
しかしながら、上記態様Ｉ〜ＶＩＩに記載されているように、タンパク質系に超音波を適用することは、処理される物質に望ましからぬ損傷を引き起こす。特に、態様ＩＩＩは、超音波による除染の前の脱ガスの間に予測されるタンパク質損傷を記述する。
【０１９２】
このことは、照射の前にちょうどどのくらいの酸素除去が必要であるかと言う問題を生じさせる。この点において、化学的クエンチング剤は、ラジカル損傷を減少させ得るが、しかし除去し得ない。基礎となる物理的原理は、到来する光子は溶存する酸素分子を２つのラジカルに分割するが、しかしそれらのラジカルは、クエンチング剤と即座の接触に至り得ないと言うことである。それゆえラジカルは、最終的に不活性化される前に、一部のタンパク質分子に接触し、損傷させ得る。ラジカルに加えて、より反応性でないが、照射された酸素の他の生成物も存在し、それも損傷作用があることにもまた注意すべきである。「反応性酸素種」と呼ばれるが、それらの高いエネルギーの酸素形態は、他の分子、特に水素と結合する。クエンチング剤のタイプおよび酸素種のタイプに応じて、クエンチング剤は、そのような種に対してほとんどまたはまったく不活性化効果を有し得ない。正味の結果は、クエンチング剤は全ての酸素の効果を除去しないし、一部のラジカル損傷および他の反応性酸素種による一部の損傷を残す。クエンチング剤はそれらの制限を有してさえ、有効であることが公知であるので、それゆえ、新規の脱ガス技術は、照射の間にタンパク質を防御する上で有効であるように溶存酸素の全てを除去することが必要である。
【０１９３】
実際、残留溶存酸素の実際の量は、個人基準で定量されねばならない。この定量で考慮されるべき１つの要因は、脱ガスプロセスそれ自体がタンパク質に対してもたらす損傷である。しかしながら、上記手順の下で実施されるとき、ほとんどの物質は、少なくとも穏やかな酸素除去のために脱ガスの間ほとんどまたはまったく損傷を被らない。しかしながら、漸進的に低くなる酸素濃度では、特に不安定な凝血因子についてある程度のタンパク質損傷の可能性が存在する。逆に、そのような低い酸素濃度では、ラジカル形成によるタンパク質損傷が少なくなる。最後に、漸進的により低い濃度を達成するためには、漸進的により多くの時間と出費が要求される。正味の結果は、いずれの実際の適用においても考慮されるべきいくつかの競合因子が存在すると言うことである。
【０１９４】
血液製剤にそれらの考察を適用すると、１０％未満の、好ましくは測定装置の精度を超えるかまたは未満である５％未満のプロセス損失を維持することが一般的に有用である。処理の前に、血液製剤は、数ｐｐｍ台の標準酸素レベルを有する。実際の濃度は、個々の製品、温度、貯蔵バッグのタイプ、貯蔵の長さなどに依存する。すでに記載された脱ガス技術により、溶存酸素濃度は、出発温度および酸素濃度に依存して、５分以下で、約１から２ｐｐｍまで容易に減少し得る。しかしながら、数百ｐｐｂ範囲の濃度を達成するためには、処理時間は、約３０分まで増加する。以下でより完全に記載されるように、いくつかの異なる照射により脱ガスされた物質を処理することが可能である。そのような照射の結果は、処理されていない血漿に対して約５０％のタンパク質損傷である。タンパク質損傷は、１から２ｐｐｍ試料について１０％未満であり、ｐｐｂ溶存酸素レベルで機械の精度の限界まで低下して、漸進的により少なくなる損傷分が存在する。
【０１９５】
もちろん、ｐｐｂ範囲の溶存酸素濃度では、照射の下でほんのわずかの酸素ラジカルしか生成しない。そのような条件の下では、それらのわずかの酸素ラジカルは、典型的には病原それ自体である最も感受性の高い成分に対して最も損傷を与えることが可能である。もしそうであれば、残留酸素は、そのようにして、除染の観点でわずかな利益を実際に有し得る。
【０１９６】
そのような効果があってもなくても、血液製剤についての目標の溶存酸素範囲は、好ましくは１０から３０００ｐｐｂ、より好ましくは１００から２５００ｐｐｂ、および最も好ましくは５００から２０００ｐｐｂである。
【０１９７】
ついでながら、それらの限界の決定においては、通常の電気抵抗系溶存酸素メーターは正確ではないことに注意すべきである。というのは、試料があまりに小さく、電極での典型的な反応を保証するには不適切な流れが存在するからである。この流れの限界は、有意な量の液体が正確な結果のために十分な酸素を獲得するために試験されねばならないｐｐｂ範囲では特に重要である。さもなければ、局所的な環境は、存在するわずかな酸素分子の枯渇のために誤った低い読み取りが起こり得る。それゆえ、それらの限界のために、適切な希釈因子とともに光学吸収メーター（モデル  ＶＶＲ、ＣＨＥＭｅｔｒｉｃｓ  Ｃａｌｖｅｒｔｏｎ、バージニア州）が実際の溶存酸素濃度を定量するために用いられるべきである。
【０１９８】
このように脱ガスの手段と適切なレベルが決定されると、残る問題は、続く除染のために用いられるべき照射である。具体的には、照射のタイプ、この照射の要求される投与量、および処理される物質にこの照射を適用する手段を選択することが必要である。
【０１９９】
この点で、典型的にはコバルト６０またはセシウム１３７供給源由来のガンマ線照射が除染産業においては共通して用いられる。いずれの場合でも、要求される投与量は、ほとんどの病原について公知であるが、しかし、一般的な除染作業のためには、過剰なタンパク質損傷を引き起こすことなくほとんどの病原を処理し得る投与量が選択されねばならない。それゆえ、適切な試験ウイルスが選択されねばならない。この場合、このウイルスを不活性化する条件が、他の病原についても同様に適切であるとみなされる。
【０２００】
特に有用な試験対象はパーボウイルスである。この小さな外膜のないウイルスは、不活性化するのに非常に困難であり、したがって、ＨＩＶのようなあまり強力でないウイルスの破壊を保証する。そのブタ感染形態において、パーボウイルスは、ヒトに無害であり、それゆえ、実験室で取り扱うのが容易である。さらに、ヒト胎児の発生に対するその潜在的な損傷力のために、および輸血による感染の容易さのために、このウイルスのヒト感染形態は臨床上重要である。それゆえ、これらの理由のために、パーボウイルスは、通常不活性化技術のための基準として用いられる（ＳＩ  ミーカら、「油脂外膜を有するウイルスおよび外膜を有さないウイルスの不活性化のための新規の方法」、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｉａ１９９８年７月；４（４）：４０２〜８ページ）。
【０２０１】
この基準に基づいて、血液製剤のガンマ線照射のための適切な投与量範囲は、１ないし１００ｋＧｙ（キログレイ）、より好ましくは２から６０ｋＧｙ、およびさらにより好ましくは４から４０ｋＧｙである。
【０２０２】
実際には、ガンマ線照射によりそのような投与量を獲得することは非常に容易である。というのは、高エネルギー光子は非常に貫通性があり、したがって、シャドウイングまたは不完全な局所暴露についての問題無しに容易に用いられ得るからである。本発明において、この能力は、暴露チャンバの設計において大きな柔軟性を許容する。真空チャンバに存在させながら液体を照射することは１つの任意事項である。この場合には、照射源は、上記無菌テント配列の外側に配置される。それ自体、照射源は、真空チャンバの内側か、または薄くて低吸収性のウインドウを通してのアクセスを有して真空チャンバの外側に配置され得る。
【０２０３】
チャンバの真空が解き放たれた後液体を照射することがもう１つの任意選択事項である。この場合には、弁は、処理テントに導く管上に配置される。テントおよび真空チャンバが真空にされ、音波を掛けられた後にこの弁を閉じると、チャンバが大気圧条件に戻ることが可能となり、一方、処理された物質に対しては真空は維持されたままである。この場合、可撓性バッグそれ自体が処理される本質的に圧縮不能な流体について単純に潰れてしまう。このアプローチの利点には、極めて単純な遮蔽と制御配列が含まれる。１つだけの拘束事項は、溶存酸素濃度が周囲空気からの拡散により許容不可能なレベルまで上昇するまえに照射が完了するように、処理バッグは酸素に対して比較的不透過性でなければならないと言うことである。代わりに、照射は、有意な量の酸素がより透過性のバッグを通過する前に完了しなければならない。
【０２０４】
上記任意事項のいずれにおいても、バッチ操作および半連続操作は、通常の検出装置および記録装置による適用された照射の連続監視により特定時間目標を単純に照射することにより容易に達成され得る。しかしながら、連続操作については、前述のプラグ流れは、流体が高さについて連続的に上昇するように配置された閉じたチャンネル中に拘束されねばならない。この拘束は、全ての流体が完全な処理を受けるように暴露チャンバ内で十分な滞留時間を有することを保証する。さもなければ、流体は、重力の下であまりに急速にチャンネルから流れ出てしまうであろう。上方への流れのための駆動力はポンプによることができるし、高い位置の真空チャンバ由来の重力頭（ｇｒａｖｉｔｙ  ｈｅａｄ）によることができる。
【０２０５】
力のタイプは、上述のように、ほとんどの機械式ポンプにより容易に損傷する血液の細胞性成分にとって特に重要である。このようにこの点で、重力による供給は、ほとんどまたはまったくそのような損傷を起こさない。この理由のために、本発明は、細胞性血液成分の白血球減少にとって非常に適している。加えて、ガンマ線照射による白血球減少は、フィルターの詰まり、長い処理時間、大きな出費、および現存するフィルター系技術を複雑にしている関連する困難の問題を回避する。さらに、本発明の付加的な利点は、白血球減少の前の脱ガスは、白血球の壁に対する酸素ラジカルによる攻撃を防止し、したがって、赤血球に対して非常に有害である細胞内容物の漏れを防止する。この適用においては、細胞性血液成分は酸素を要求するけれども、それらの細胞は、除染のために十分に長く（数分）酸素が枯渇した環境で生存し得ることに注意されたい。その後酸素は、照射が完了して後流体に供給され得る。ガンマ線暴露の上記利点は、全体的な白血球減少についての最近の推奨の観点から特に顕著である（ウォール・ストリート・ジャーナル、「連邦のパネルは全ての供与された血液のろ過についてのディベートを聴取する」、１／２５／２００１）。
【０２０６】
不運にも、上記除染プロセスにおける１つの潜在的な問題は、ガンマ線照射の下での特にアルブミン由来の凝集物の形成である。それらの凝集物は望ましからぬものである。と言うのは、それらは使用可能なタンパク質の量を減少させるのみならず、除去のために別の、時間のかかる工程を要求するからである。それゆえ、本発明において、そのような凝集物は、超音波により破壊される。ここでの基礎となる原理は、超音波は、どのように音波が適用されるかに応じて、液体中の固体を凝集または分散させるために用いられ得るということである。それゆえ、本発明において、照射チャンバは、照射の間チャンバ長に添って均一に音波を掛けられ、それにより形成するが早いかいずれの小さな凝集物も破裂させる。
ガンマ線照射についてのもう１つの潜在的な問題は、酸素以外の分子由来の反応性種の生成である。特に、ガンマ線照射は、水分子を解離させ、および／または励起させるのに十分なエネルギーを有する。この効果を減少させるために、タンパク質濃縮物が用いられ得る。ＰＣＴ出願番号ＷＯ００１６８７２は、そのような濃縮物を発生させるための手順を記述する。濃縮物は、定義により比較的わずかの水を含むので、反応する水の種の数は、元のタンパク質溶液に比較して比例して減少する。
【０２０７】
ガンマ線照射と同じエネルギーの電磁線照射であるので、ｘ線もまた、全ての上記利益を達成させ得る。ガンマ線照射のために用いられる核崩壊源と違って、代わりに、ｘ線は、高電圧の電子加速源により発生する。しかしながら、エネルギー要求とそのような加速器の維持コストのために、ガンマ線照射は、現在、除染作業のためのそれら２つの照射の好ましい側である。
【０２０８】
不運にも、ガンマ線源およびｘ線源の両方は、比較的高価であるのみならず、厳格な遮蔽、免許および他の拘束要件を要求する。
【０２０９】
それらの理由のために、ＵＶ光源が除染のためにより一般的に用いられる。ＵＶ照射には４つのタイプが存在し、エネルギー増加の観点からＵＶＡ、ＵＶＢ、ＵＶＣ、およびＶＵＶが存在する。ＵＶＡおよびＵＶＢは、日光への暴露に関連する比較的弱い照射である。ラジカル生成を誘発するにはあまりに弱いので、不運であるが、それらの照射は、除染を誘発するある種のタイプの光活性化化学物質を必要とする。しかしながら、上記のように、本発明の目的は、そのような化学物質の経費を回避することであるので、それで、それらの照射は、自然とここでは有用ではない。逆に、ＶＵＶ、すなわち、真空紫外線ははるかによりエネルギーが強く、エネルギーの点では、軟ｘ線の境界域に及ぶ。しかしながら、ＶＵＶは発生させるのが困難であり、極めて容易に吸収されるので除染作業のためには実際的ではない。
【０２１０】
それゆえ、ＵＶＣ、特に水銀光源により作り出されるＵＶＣは、本発明における紫外線照射の好ましい形態である。それらの光源は有用である。というのは、それらはほとんど約２５４ｎｍで発光するからである。したがって、それらの光源は、オゾン発生のために必要とされる１８５ｎｍしきい値未満の波長で比較的少なく発光するので、それらは、この望ましからぬガスをほとんど作り出さない。しかしながら、より重要なことに、この波長は、ほとんどのタンパク質について２５０から２６０ｎｍの範囲で存在する吸光の極小値の中央にあるが、しかし、ＤＮＡとＲＮＡの両方がこの範囲に吸光の極大値を有する。したがって、この理由のために、水銀ランプ発光は、ほとんどの汚染物質中に見出されるＤＮＡおよびＲＮＡを選択的に攻撃するが、一方、処理される物質中の他のタンパク質を損傷しない。特に、この選択性は、血液成分を処理するために極めて有用である。と言うのは、先に論述したように、ほとんどの血液成分は遺伝物質のＤＮＡおよびＲＮＡを欠いているからである。
【０２１１】
例外は、白血球がそれらの物質を含むということであるが、しかし、この場合には、ＵＶＣ照射はやはり白血球減少の観点で有用である。具体的には、この適用において、ＵＶＣは、ガンマ線について上述された臨床上の利点ならびに取り囲んでいるタンパク質の選択的防御の利点のすべてを有する。
【０２１２】
したがって、紫外線照射の選択の上でＵＶＣを選択するときには、そのときは、適切な投与量が決定されなければならない。水の精製および食品の処理の点では、ＵＶＣ投与については大量のデータが存在するが、しかし、タンパク質溶液は、特に汚染物質のタイプに関して独特の要求事項を有する。
【０２１３】
血液製剤の観点では、上記のように、パーボウイルスが特に関心のもたれるところである。具体的には、Ｈ．スガワラが、最近、血漿製剤に関するこのウイルスのＵＶＣ不活性化の技術の現状を要約した（Ｈ．スガワラら、「ＵＶＣ照射による凝血因子濃縮物中のパーボウイルスＢ１９の不活性化：周辺ＣＤ３４＋細胞由来のＣＦＵ−Ｅを用いてのインビトロ伝染性アッセイによる評価」、トランスフュージョン２００１、４月号；４１（４）：４５６〜６１ページ）。
【０２１４】
この研究および同様の研究の正味の結果は、ＵＶＣ照射は、好ましくは、１から１０，０００Ｊ／ｍ2 、より好ましくは、１０から５，０００Ｊ／ｍ2 、およびさらにより好ましくは１００から３，０００Ｊ／ｍ2 台でなされるべきであると言うことである。
【０２１５】
したがって、適切な投与量を決定するときには、次の問題は、どのようにして最小限のタンパク質損傷でこの照射を獲得するかと言うことである。対処されるべき問題は、暴露の均一性、過剰な熱、凝集物の生成、および病原の復活である。
【０２１６】
暴露の均一性から始めると、いくつかの側面が考慮されねばならない。第１に、超音波系について上述されたように、処理チャンバは均一な厚さのものでなければならない。また、超音波系について検討されたように、動く系は、第１の主たる態様で記載されたようにプラグ流れを有さねばならない。
【０２１７】
しかしながら、超音波系とは違って、処理チャンバの深さは、ＵＶＣ系にとって重要ではない。基本的な問題は、処理される液体の吸光は、ビアーの法則にしたがって、指数曲線に従うと言うことである。そのようなものとして、処理チャンバの一方の側に対する暴露は、比較的薄いユニットについてさえ、そのチャンバの他方の側に対する暴露よりはるかに小さくなり得る。それゆえ、本発明においては、ＵＶＣ照射は、好ましくは、処理チャンバの両側から適用される。したがって、この配列の下では、２つの対向する光源からの暴露の合計は、通常の目的物の幅についてほとんど一定である。
【０２１８】
液体に加えて、処理チャンバの壁もまたＵＶＣを吸収し得る。この理由のために、それらの壁は均一な厚さのものでなければならず、ＵＶＣについて透明な材料、好ましくは溶融した石英でなければならない。
【０２１９】
もちろん、均一な暴露はまた、ＵＶＣ光源それ自体における少なくともある程度の均一性も要求する。この点において、スポットランプおよびチューブは、均一暴露のための単に比較的小さな区域を生み出す。逆に、長くて薄く、きつく巻かれた管からなるグリッドランプは、はるかにより均一な暴露を生み出す。それゆえ、そのようなランプ（モデルＬＦ１８０Ｓ、ＵＶＩｔｅｃ、ケンブリッジ、ＵＫ）が本発明において用いられる。
【０２２０】
上記形態の均一性に加えて、ランプはまた、時間についても合理的な均一性を有さねばならない。ここでの基本的な問題は、全てのＵＶ装置は、発生する光子の強いエネルギーのために本質的に劣化が起こる「ソラライゼーション」に供されるということである。結果として、適用される光投与は、もし単純な時間計測手順が使ってから時間のたったランプを制御するために用いられるならば除染のためには不適切であり得る。それゆえ、特定された暴露がランプの寿命に渡って実際に維持されることを保証する積分モニター（ｉｎｔｅｇｒａｔｉｎｇ  ｍｏｎｉｔｏｒ）（モデルＲＸ００３、ＵＶＩｔｅｃ、ケンブリッジ、ＵＫ）を使用することが好ましい。したがって、さらに、それぞれのランプ近くのそのようなモニターの配置が、１列のランプが意図される通りに機能することを保証する。この場合には、少なくとも１つのモニターはまた、適切な吸光レベルが維持されることを保証するために、処理される液体の向こう側に、少なくとも１つのランプと対向して配置されるべきである。このことは、光学特性が試料間でしばしば大きく異なる血液製剤については特に重要な配慮である。
【０２２１】
不運にも、すべてのＵＶＣランプは顕著な量の熱を生み出し、グリッドランプはその非常に強いＵＶＣ強度と比較して相対的に少ない熱を産み出すが、その熱はやはり問題である。この熱の一部は、ランプ上のファンに補助された対流により制御され得る。しかしながら、このアプローチは、目的物内で直接吸収されるランプ由来の赤外線成分を制限しない。それゆえ、この理由のために、水の流れまたはスプレーが目的物を冷却するために用いられる。と言うのは、水は、ＵＶＣ光をほんのわずかしか吸光しないからである。この冷却水またはスプレー、または汚染された流体の漏れがランプに落下し、電気的問題または破損を引き起こすことを防止するために、処理モジュールおよびランプは、垂直に配向されるべきである。この形態はまた、先にも論述したように、連続系のための制御された流れの維持にも役立つ。
【０２２２】
にもかかわらず、均一なＵＶＣ暴露と２つの冷却機構があってさえ、処理される液体の孤立点でのタンパク質凝集物の形成の可能性が存在する。しかしながら、ガンマ線照射について上述されたように、それらの凝集物は、超音波への暴露により除去され得る。
【０２２３】
ＵＶＣ処理についての最後の問題は、光源が停止させられた後、どうやら固有の修復機構により病原の回復があり得ることである。しかしながら、放電ランプについての最近の仕事（ＷＨカバー、「血小板機能についての広スペクトル律動光（ＢＳＰＬ）の効果」、血液製剤の安全性についてのケンブリッジ・ヘルステック第８回年次シンポジウム、２月４〜７日、２００２年）は、他の波長の光がそのような回復を阻害し得ることを示す。不運にも、放電ランプもまた多量の熱を発生させる。ＵＶＢおよびＵＶＡの混合光は、いずれか単独で作用させるよりもより有効であることが知られているため、そして、ＵＶ波長は、放電ランプの発光の中で最もエネルギーが強いので、好ましいアプローチは、病原の修復を抑制するために、処理プロトコール中にＵＶＡおよび／またはＵＶＢ光源を含ませることである。それらの波長はラジカル形成を誘発しないので、したがって、それを含ませることは固有のタンパク質損傷を引き起こさず、その赤外線の関与は、存在する冷却系により容易に制御され得る。加えて、ＵＶＣに対して透明であるいずれのポリマーもＵＶＡおよびＵＶＢに対しても透明であり、それゆえ、設計上の配慮は、ＵＶＣ処理の可能な系を構築することのみに減少する。
【０２２４】
上記の配慮とともに、ＵＶＣ系は、様々の操作条件および汚染された液体のために構築され得る。全てのアプローチがガンマ線照射系について上述されていることと同様であり、したがって、バッチ、半連続、および連続操作のために用いられ得る。主たる差異は、ガンマ線照射に対するＵＶＣの限定された貫通能力であり、このことは、バッグの設計についていくつかの問題をもたらす。
【０２２５】
この制限されたＵＶＣ貫通範囲の第１の結論は、使い捨て処理バッグはＵＶＣについて透明の材料で作られていなければならないと言うことである。特に、テフロン（登録商標）および同様のフルオロポリマーは、ＵＶＣに対してまったく透明であり、したがって、好ましい材料である。しかしながら、それらは幾分か高価であり、酸素に対して透過性である。それらの理由のために、エチルビニルアセテートのような他のポリマーの薄いフィルムが、合理的に低価格で、強力で、酸素不透過性で、ＵＶＣに透明な容器を提供するためにテフロン（登録商標）と積層され得る。また、暴露を速やかに実施することは、有意な量の酸素が系に拡散し得る前に除染が完了することを保証する。
【０２２６】
処理バッグについてのもう１つの問題は、テフロン（登録商標）および他のフルオロポリマーは、無菌血液製剤ポートおよび真空へのアクセスのために必要とされる包含物とともに密封することが困難であるということである。脱ガスプロセスおよびＵＶＣ暴露プロセスが同じバッグでなされるときには、この問題は重要ではない。他方、それらのプロセスが別のバッグで実施されるときは、脱ガス工程は、ＰＶＣのようないずれかの廉価で容易に密封されるバッグ材料でなされるべきであり、一方、ＵＶＣ暴露は、より経費のかかる、密封するのが困難であるが、しかしＵＶＣに対して透明なバッグでなされるべきである。
【０２２７】
さらにもう１つのバッグの問題は、アクセスポートおよび接続チューブは、典型的にはＵＶＣに対して透明ではなく、したがって、ＵＶＣ暴露から病原を遮蔽し得るということである。この問題に対する解決策は、この場合には造影効果（ｓｈａｄｉｎｇ  ｅｆｆｅｃｔ）を防止するためにクランプ固定がＵＶＣに対して透明な物質によりなされなければならないと言うことを除いて、超音波供給ポートについて態様Ｉにおいて記載されていることと同様である。例えば、クランプは、溶融した石英で作られ得るが、しかし、より大きな機械的強度のためには、テフロン（登録商標）のようなポリマーが好ましい。さらにもう１つの代替策は、末端の影を減らすために先端を切られたステンレス鋼かまたは他の金属のペンチを使用することである。この場合には、クランプ固定は、バッグの完全に照明が当てられている部分でなされるべきであり、また、クランプ固定位置から遠くに流体を排出するために上昇させられるべきである。この配置の下で、利用可能な光は最小限に減衰し、それにより、クランプ位置で最大限の処理を提供する。
【０２２８】
最後のバッグの問題は、比較的大きな処理体積については、厚さは薄いままでなければならず、したがって、表面積は大きくなければならないということである。コストの問題に加えて、この制限はまた、特に先に記述された垂直に配向した系について実質的な静水圧も引き起こす。１つの代替策は、処理バッグを含む極めて重い石英板を用いることであるが、しかし、このアプローチは、高価であり、ＵＶＣ光の望ましからぬ減衰を引き起こす。それゆえ、バッグの中心部が前から後ろに結合し、そのようにして、溶融した石英板上の負荷を減少させることが好ましい。加えて、処理バッグの境界部の密封が調節ピンに適合するように孔を含むこともまた好ましい。それらのピンは、処理チャンバの周囲に恒久的に設置されているか、またはバッグアセンブリの急速な挿入と除去を可能とするプラスチックの枠の中に設置されているかのいずれかである。
【０２２９】
それらの配慮は、赤血球処理にとっては特に重要である。この適用において、赤血球中のヘム基によるＵＶＣの強度の減衰は、約３０から６０ミクロンの厚さまで処理チャンバ中の流体経路を制限する。たとえそのようにこの層が極めて薄くても、関連する静水圧は、それにもかかわらず、いまだ非常に高い。それゆえ、中心のジョイントは、この適用において有用であるのみならず、流れる液体を混合する手段も提供する。この混合は、いくつかの連続するジョイントを交差させることにより達成され、したがって、それにより流体の流れを分割する。
【０２３０】
不運にも、先に記述したように、そのような流れの混合は、血液タンパク質に対して非常に有害である強烈な条件の下にある場合を除いて、比較的貧弱である。そのような訳で、流れの制限の付加により利用可能であるどんな混合も、多数の赤血球の間の陰影効果を防止するためには不適切である。この理由のために、米国特許第６，２１９，５８４号は、処理チャンバを振動させることを記述する。
【０２３１】
本発明においては、超音波は、極度に効果的な振動を提供するために用いられる。基礎となる原理は、凝集物処理の検討において先に記述したように、超音波は、液体中の固体を凝集または分散させ得ると言うことである。本発明の最大限の有効性のために、振動させる超音波は、処理バッグとの直接接触においてホーンにより提供される。具体的には、このホーンは、処理バッグの底部と接触すべきであり、そのようにして、部分的に充填されたバッグについてさえ、適切な振動を保証する。それにより、このアプローチは、インピーダンス整合ならびに高価な溶融石英板の起こり得る切削における問題により困難となるであろう処理チャンバ全体の振動を回避する。
【０２３２】
米国特許第５，９９７，８１２号に記載されているように、ＵＶにより照射される液体への超音波の付加は、混合を向上させるのみならず、「ＵＶ照射の殺傷効果」も向上させる。
【０２３３】
ＶＩＩＩ．第８の主たる態様において、本発明は、
（ａ’）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するための工程、および
（ｂ’）前記脱酸素された流体を照射するための工程
を含む流体を除染するための方法を提供する。
【０２３４】
この第８の主たる態様において、工程（ａ’）「脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するための」とは、工程「（ａ）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理すること」が第７の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。加えて、工程（ｂ’）「前記脱酸素された流体の照射のための」とは、工程「（ｂ）前記脱酸素された流体を照射すること」が第７の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。
【０２３５】
ＩＸ．  本発明者はさらに、第９の主たる態様において、そのような流体を、
（ａ）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理すること、および
（ｂ）前記脱酸素された流体をパルス電界と接触させること
を含む方法により有効に除染し得ることを発見した。
【０２３６】
この第９の主たる態様において、流体の脱酸素は、上記のように実施され得る。流体が脱酸素された後、それはパルス電界（ＰＥＦ）と接触する。
【０２３７】
ＰＥＦの基礎となるコンセプトは、温度に感受性のある物質を除染するために極めて高電圧の（数十ｋＶ）電界の短い律動（数十マイクロ秒）を用いることである。このアプローチは、通常、特に細菌、寄生虫などのために食品産業で用いられる。制限要因は、目標物の病原は電圧勾配を確立するために十分に大きくなければならないと言うことである。この制限は、ウイルスまたはもっと小さな多くの病原をはっきりと排除するけれども、多くの病原は、それにもかかわらず、ＰＥＦにより処理され得る。
【０２３８】
ＰＥＦの主たる制限は、試料が処理の間に壊れてしまうかもしれないと言うことである。特に、溶存するガスは、容易に破壊を引き起こす。この理由のために、Ｑ．Ｈ．ザンは、ＰＥＦ処理の前にアップルサイダーを脱ガスすることの利益を記述した（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｆｓｔ．ｏｈｉｏｓｔａｔｅ．ｅｄｕ／ＦＳ／ｐｅｆ／ｓｌｄ０２７．ｈｔｍ．  スライド２７／９１（１９９８年））。このアプローチの下で、多くのより強力なパルスが電気的な破壊の前に試料に適用され得るものであり、したがって、生成物の劣化無しに除染を改善する。
【０２３９】
この態様は、超音波エネルギーとＰＥＦの適用の間の相乗効果に依存している。ＰＥＦの基礎となる原理は、様々の電界は、荷電された種または極性分子に対して作用し得ると言うことである。
【０２４０】
定常電界および磁界は、分析し、実施する上で最も単純である。電界については、ある種の洗浄処理に影響を与えるために汚染された液体を通して電流を適用することについての長い経緯が存在する。全てのアプローチは、単純に、液体のプールの対向する側に２つの電極を置き、次いで電気を通すと言うことである。
【０２４１】
このアプローチの本質的な問題は、主に電極での電気化学的反応が製品を汚染し得ると言うことである。これは、医療のために用いられ得る血漿のような生物学的物質については重大な問題である。
【０２４２】
この問題を回避する新たな手段は、処理される流体に電極を連結するために無菌フィルターをまたぐ塩橋を使用することである。さらなる強化においては、薄いチューブがフィルターと塩橋から導かれ、処理バッグの側にまで延びる。さらなる防御のために、流れを制限する場所が、管とバッグの接続位置に配置される。処理後、この管は次いで流れを制限する場所で熱密封され、次いで、フィルターおよび塩橋が廃棄される。
【０２４３】
この配列の下で、望ましからぬ化合物が、塩橋の前縁でまず捕捉される。ついで、そのトラップで補足されないいずれの残留化合物も、それらがたまった流体に達する前に接続チューブに捉えられる。
【０２４４】
定常電界の直後の拡張がパルス電界、すなわちＰＥＦである。ＰＥＦは、典型的には、２０ｋＶ台の極めて強い電圧を有するが、しかし、持続時間は極めて短い。特に、ＰＥＦとオゾンは、相乗効果を有することが知られている（Ｒ  ウナル、ＪＧ  キム、およびＡＥ  ユーセフ、「オゾンとパルス電界の組み合わせによる大腸菌Ｏ１５７：Ｈ７、リステリア・モノサイトゲネス、およびラトバチルス・ライヒマニイの不活性化」、Ｊ．Ｆｏｏｄ  Ｐｒｏｔ．、６月号；６４（６）７７７〜７８２ページ（２００１年））。それゆえ、この態様において、ＰＥＦは、上記塩橋と管の配列と組み合わせられる。
【０２４５】
定常電界と同様、強力な磁界もまた除染作業において数十年間用いられてきた。最近、強力な磁界が、ＵＶ照射と組み合わせられた（米国特許第５，９９７，８１２号）。しかしながら、この技術は、磁気の影響を受ける物質を有さない生物学的な系のためには良好に適用されない。
【０２４６】
電気処理および磁気処理の最も進んだ形態は、もちろん、ＵＶ、ガンマ線およびｘ線について上述されたように電磁場である。オゾンとの相乗効果もまた注目されている（ＭＷ  ブリュンら、「培養培地内の大腸菌Ｏ１５７：Ｈ７の不活性化のためのガンマ線照射およびオゾン処理」、Ｊ．Ｆｏｏｄ．Ｐｒｏｔ．、６月号、７２８〜７３０ページ（１９９８年））。正味の結果は、新たな技術は、相乗効果について多くの機会を有するということである。特に、超音波およびＰＥＦは、下記のＵＶおよびオゾン工程の一方または両方の間に一緒にまたは別々に適用され得る。
【０２４７】
したがって、新たな技術における血漿処理の点で、ＰＥＦに適用する好ましいあり方は、脱ガス工程の直後である。そのようなものとして、ＰＥＦは、（下記のように）ＵＶＣまたはガンマ線照射の前、間、または後になされ得る。特に、超音波真空脱ガスの向上した速度は、食品のＰＥＦ処理において非常に有用であることにもまた注意すべきである。
【０２４８】
Ｘ．  本発明者はまた、第１０の主たる態様において、そのような流体を、
（ａ’）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するための工程、および
（ｂ’）前記脱酸素された流体をパルス電界と接触させるための工程
を含む方法により有効に除染し得ることも発見した。
【０２４９】
この第１０の主たる態様において、工程（ａ’）「脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するための」とは、工程「（ａ）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理すること」が第９の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。加えて、工程（ｂ’）「前記脱酸素された流体をパルス電界と接触させるための」とは、工程「（ｂ）前記脱酸素された流体をパルス電界と接触させること」が第９の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。
【０２５０】
ＸＩ．  第１１の主たる態様において、本発明は、
（ａ）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理すること、および
（ｂ）前記脱酸素された流体をオゾンと接触させること
を含む流体を除染するための方法を提供する。
【０２５１】
先に記載されたように、除染は、多数の独立のプロセスを適用することにより最も優れた成果が達成される。このアプローチの下では、１つの除染技術で捕捉されない病原は、第２または第３などの技術で逃れ得ない。加えて、いずれか所定の技術は、有意な量のタンパク質損傷も引き起こす前に限定された数の病原しか破壊し得ないので、それで、限界いっぱいまで実施される１つの技術の代わりに部分的な出力で多数の技術を使用することが好ましい。それゆえ、上記技術をさらにもう１つの独立の技術と一体化させることが望ましい。特に有用なそのような技術は、オゾン暴露である。
【０２５２】
オゾンは、酸素の３原子分子であるが、酸素の一般的形態は２原子である。結果として、オゾンは不安定な分子であり、したがって極端に反応性である。特に、この大きな反応性は、オゾンを極度に強力な除染剤とする。基礎となるメカニズムは、オゾンは、病原が伝播するために必要である複雑なタンパク質構造に高速に攻撃し、そのようにして急速な不活性化を引き起こすと言うことである。加えての利点は、反応した後、オゾンは、天然に存在する無毒の分子に戻ると言うことである。それ自体、オゾンおよびその生成物は、処理された物質から除去される必要はなく、したがって、他の除染剤について典型的に必要とされる分離された、高価な、時間を消費する工程を節約することになる。
【０２５３】
それらの理由のために、オゾンは、様々の除染デバイスで長い間用いられてきた。それらの適用の一部には、１室または閉鎖空間内のデバイスのようなガス暴露による所定面積または体積の処理が含まれる。それらの用途は非常に多数であるのだが、本発明の主たる問題点は、オゾンが水溶液に吸収される液体処理にある。次にそのような水溶液は、多くの特別な用途を有する。この点で、オゾンによる除染の最も一般的な用途は、水道水処理および汚染防除の両方を含む水の処理目的である。本発明の一部の側面はそのようなプロセスに対して適用可能であるけれども、しかしながら、ここでの主たる用途は、生物製剤、特に血液製剤の除染である。しかし、このいくらか限定された分野においてさえ、いくつかのそのようなデバイスがすでに開示されている。
【０２５４】
例えば、米国特許第４，６３２，９８０号は、オゾンによる血液処理デバイス、特に外膜を有するウイルスを優先的に攻撃しながら血液製剤への損傷を制御するための技術を開示する。しかしながら、外膜を有するウイルスに対する限定を初めとして、この特許にはいくつかの問題が存在する。具体的には、この特許発明が開発下にあったとき、１９８０年代初期にはＨＩＶのような外膜を有するウイルスが重要な問題であったけれども、その後の進歩したウイルス試験の開発およびより多くの外膜を有さないウイルス出現は、血液産業のニーズを大きく変化させた。もう１つの問題は、この特許はｐＨに言及するけれども、血液および血液製剤のｐＨは、抗凝血剤の選択に強く依存し、後に論述するように、ｐＨは溶存オゾンの挙動に強く影響すると言うことである。もう１つの顕著な問題は、開示されたデバイスはガラスローラーチャンバを使用するが、しかし、凝血シーケンスは、ガラス容器の中で開始し得るので、それゆえ、そのような材料は、血液製剤のためには用いられるべきではないと言うことである。さらに、いずれの材料のローラーもそれ自体低速である。最後に、ガラス容器およびそれに用いるシールは、高価であり、貯蔵するのが困難であり、一旦用いられると破壊するのが困難であろう。
【０２５５】
血液処理のためのもう１つのオゾンデバイスは、米国特許第５，７０９，９９２号において開示されている。この特許の主たる特徴は、還元酵素を加えることによる赤血球のオゾン損傷からの防御のための方法である。しかしながら、下記のように、赤血球は、すでに、ある種のそれ自体の防御機構を有する。さらに、何度も上述されたように、血液の仕事では、添加された物質は、通常、長い時間と相当の出費を伴って処理される物質の使用の前に除去される。最後に、４８時間の処理時間は、端的に、通常の血液銀行での操作で許容されるにはあまりに長すぎる。
【０２５６】
代わりのアプローチが米国特許第５，８８２，５９１号において記載されており、それは、スプレー系を開示する。この系の利点は、微細に分割されたスプレーは、急速な不活性化を促進すると言うことである。しかしながら、このアプローチには、いくつかの起こり得る問題が存在する。特に、小さな液滴中の汚染物質の不活性化は実際に非常に高速であるけれども、多量の流体をスプレーに変換するプロセス全体は高速ではない。そうであるから、プロセス全体は、血液銀行の環境で用いられるにはあまりに緩慢である。もう１つの問題は、スプレー化プロセスによる機械的損傷であり、これは、液滴サイズが減少するほど増加する。最後に、スプレーそれ自体の制限の問題もまた存在する。潜在的に汚染されている血液製剤のエアロゾルは通常、感染の危険のために避けられる。多数のトラップが開発され得るけれども、それらは、高価で、完全には有効ではないであろう。大きな血液処理設備では、累積的な空気の負荷は、このように非常に危険であろう。
【０２５７】
上記技術の全ては、処理される物質が後の使用のために集められる、本質的にインビトロでの適用である。しかしながら、オゾンはまた、米国特許第６，０２７，６８８号において開示されているように、ＸＣＴまたは体外処理のためにも用いられ得る。このデバイスにおいて、血液は、ＨＩＶ混入を減少させる意図をもって患者から採取され、処理され、次いで再注入される。１つの問題は、このデバイスは、非常に複雑であり、したがって、購入し、操作する上で経費がかかるであろうと言うことである。加えて、このデバイスはまた、ガラス処理管も有し、それは、上述のように、強烈な凝血を引き起こし得るものであり、したがって、肺塞栓と死をもたらす。最後に、長い処理時間についてさえ、開示された９９％（またはｌｏｇ２）ウイルス減少は、所望されるｌｏｇ６または７に比較して非常に小さい。
【０２５８】
上述の仕事および同様の仕事の正味の結果は、オゾンは、タンパク質溶液にとって非常に有効な除染剤であるが、しかし、大きな制限要因は、このプロセスの全速度であると言うことである。それゆえ、より高速のオゾン処理技術を開発する必要がある。この開発は、基本的な理想気体法則を用いて実現し得る。
【０２５９】
第１のそのような考察は、入力オゾンガスの濃度である。より高い濃度が好ましい。と言うのは、それは反応種の間により多くの衝突を生み出し、従って、短時間により多くの生成物を生み出すからである。ここでの制限要因は、２０％を超える気体性オゾン濃度は爆発性があると言うことである。より低濃度では、多数の実際に起こる問題が、達成され得る有効濃度を制限する。主たるそのような問題は、オゾンは極めて反応性であるので、長時間貯蔵し得ないと言うことである。代わりに、オゾンは、典型的には、使用されるべきである場所で発生する。
【０２６０】
オゾン発生には３つの重要な手段が存在する。紫外線光暴露、コロナ放電、および化学反応である（オゾン技術と応用のハンドブック、第１巻、Ｒ．Ｇ．ライスおよびＡ．ネッツァー編集、アン・アーバー・サイエンス、ザ・バターワース・グループ、英国ケント市、１９８２年）。
【０２６１】
紫外線光源は、まず、二原子酸素分子を一重項酸素に分割することにより機能し、その一重項酸素は、ついで、三原子オゾンを形成するように他の二原子分子と反応する。このプロセスは地球のオゾン層の源泉であるけれども、紫外線暴露は非効率である。隠れた問題は、ある種の周波数の光は、オゾンの発生において非常に有効であるけれども、他の周波数は、生成したオゾンの解離について極めて有効であると言うことである。それらの競合プロセスの結果として、ＵＶ単位は、１％未満の集中度に制限される。ＵＶ光源は非常に清浄で制御するのが容易であるけれども、この低いオゾン濃度は、除染作業におけるその使用を制限する。
【０２６２】
別のオゾン発生技術は、コロナ放電である。このプロセスにおいて、酸素は、高電圧電極により結合されたチャンネルを通過する。得られる放電は、二原子分子を破壊し、得られる高エネルギー単一酸素分子の一部はオゾンを生成するように隣接する酸素分子の一部と反応する。典型的な収率は、１から１５体積％の範囲のオゾンである。
【０２６３】
不運にも、コロナ放電システムについてもいくつかの問題が存在する。１つのそのような問題は、供給ガスが窒素、水蒸気または他のガスもまた含み得るということである。もしそうであれば、酸素およびオゾン以外の分子は生成物を汚染し得る可能性が存在する。それゆえ、放電系の医療への適用は、典型的には供給源としてハイグレードの酸素を使用するが、しかし、このことは、必然的に付加的なコストを伴う。このガス性の汚染に加えて、電極の劣化が製品への固体による汚染を誘導し得る可能性もまた存在する。それゆえ、高価なフィルターが要求される。さらに、腐食する電極はまた、電磁的ノイズも作り出し、これは、医療環境においては望ましくない。放電系についてのさらにもう１つの問題は、得られるガスが極めて高温で乾燥しているので、そのガスが処理されるタンパク質を損傷し得るということである。最後に、放電は、特に、部分的負荷操作において、制御することが困難である。それらの理由のために、コロナ放電ユニットは、除染作業のために用いられ得るが、しかし、相当程度の状態調整が必要である。
【０２６４】
別のアプローチは、様々の化学反応によりオゾンを発生させることである。例えば、米国特許第５，７０９，９９２号は、処理されるプールに直接活性化されたセラミック粒子を加えることについての１つのそのような技術を開示する。しかしながら、はるかにより確約されたアプローチは、電気化学的技術を用いることである。例えば、リンテック社による米国特許第５，９８９，４０７号（参照により本明細書に組み込まれる）は、１０から１５％の濃度でオゾンを作り出すデバイスを開示する。このデバイスは、水の電気分解の原理の下に作動し、それにより、電磁的なノイズの問題を回避しながら、原料としての高価な医療用グレードの酸素のコストを回避する。加えて、このデバイスにより作り出されたオゾンは、自己加圧し、相対的に低温であり、完全に加湿されている。
【０２６５】
それらの利点のために、電気化学的ユニットは、現在、本発明のための好ましいオゾン供給源である。以下において、電気化学的オゾン発生装置のいくつかの独特の特徴が、実際にそれらの特徴を実施するために必要である修正と拡張とともに詳細に記載される。
【０２６６】
自己加圧については、ここでの基礎となる理想気体法則は、オゾンを含む全てのガスは、高圧ではるかにより可溶性となると言うことである。それゆえ、圧力の増加それ自体が溶液中により多くのオゾンをもたらし、したがって、より高速でより有効な処理をもたらす。
【０２６７】
それらの利点を達成するために、オゾンは、高圧で発生させるか、または低圧で発生させ、次いで、圧縮するか、いずれかでなければならない。オゾンを圧縮するのは困難で費用がかかるので、圧力下でオゾンを発生させる上記能力は、電気化学的オゾンユニットの重要な利点である。
【０２６８】
不運にも、利用可能な電気化学的ユニットは、約５０ｐｓｉを超える圧力でオゾンを発生させることがいまだ不可能である。それゆえ、より高い圧力に達するためにはガスを圧縮することが必要である。オゾンを圧縮する好ましい手段は、隔壁ポンプである（ＢＡシリーズ、フルイトロン、ペンシルバニア州、アイビーランド）。隔壁ポンプは有用である。というのは、それはオゾン接触により破壊され得るシールを有さないし、流路全体が、洗浄するのに容易で、化学的に不活性な材料で構築され得るからである。そのようなコンプレッサーの設計における制限要因は、オゾンは高温で分解すると言うことである。それゆえ、可能な限り低温のオゾンで出発し、次いで、他段階でオゾンを圧縮することが必要である。それぞれの段階で、温度は、約４０℃を超えるべきではない。この限界に達するように、それぞれの段階の最大圧縮比は、標準断熱理想気体法則により計算され得る。したがって、圧縮頭の水冷は、ピーク温度が理論的上限未満に良好に維持されることを保証する。有効ではあるけれども、そのようなコンプレッサーは非常に高価であり、電気化学的発生において進歩があるので、そのようなコンプレッサーは放棄されるであろう。ところで、現存する発生装置からの出力は、低温で、部分的に圧縮された原料を提供する。例えば、電気化学的オゾン発生装置からの５０ｐｓｉの出力は、２段階隔壁ポンプに直接供給され得るものであり、それぞれの段階は、１．７：１の圧力比で操作される。それゆえ、得られるガスは、３５℃未満のピーク温度で約１５０ｐｓｉの圧力にある。
【０２６９】
もちろん、一旦発生したら、オゾンは、処理される物質に適用されねばならない。血液関係では、単に滅菌血液バッグ系に加圧されたオゾンを加えることは１つの任意事項である。ここでの困難は、通常のバッグは、そのような圧力に対処するようには設計されていないと言うことである。新たなバッグが構築され得るけれども、それは、通常のユニットよりはるかに高価なものであろう。その場合でさえ、処理の間にバッグの破裂は起こり得るけれども、そのときは、実験室全体に潜在的に汚染された血漿をスプレーすることになるであろう。最後に、実践的な立場からは、バッグを加圧するのに十分なオゾンを発生させることは、経費もかかり、時間も消費し、汚染物質を攻撃するために用いられ得る貴重なオゾンの多くを浪費することになるであろう。
【０２７０】
それらの理由のために、新規の暴露系が必要である。この系は、標準的な空気コンプレッサーにより駆動される圧力セルからなる。オゾンと同じ圧力まで空気でこのセルを加圧することにより、処理バッグの両側の圧力は等しくなる。このようにして廉価なバッグが用いられ得、破裂のリスクが存在せず、オゾンの必要量は大幅に減少する。通常の１１０ＶＡＣ圧縮装置によれば、約１０気圧（約１５０ｐｓｉｇ）までの圧力が容易に達成され得、所望であれば、２２０ＶＡＣ装置によりより高い圧力が発生し得る。
【０２７１】
バッグの交換または超音波真空脱ガスの間のような、オゾンが必要とされない時間は、処理が必要なときに続けられ得るように、オゾン源を加圧状態に維持することが望ましい。通常のガスでは、圧力は、典型的には、単純な貯蔵タンク中で維持される。しかしながら、オゾンは分解するのが速いので、このことは任意事項ではない。さらに、リンテックデバイスのような電解ユニットは、最大出力のために連続的に操作されねばならない。
【０２７２】
それらの理由のために、バイパス回路の使用が好ましい。この回路の第１の部分は、オゾン発生装置の出口に配置されるソレノイド弁である。活性化されたとき、この弁は、処理容器の周りに、所望の圧力を維持するチェック弁を通してオゾンを方向転換させる。この場合この弁の出力は、処理チャンバ出力とのＹ字接続を通して結合している。次いで、得られる組み合わせられた流れは、通気の前にオゾンを酸素に戻す分解ユニットに進行する。除染ユニットそれ自体の操作のためには必要ではないけれども、そのような分解ユニットは、除染プロセスが低レベルオゾンの汚染に関与しないことを保証する。
【０２７３】
最後に、電解ユニットについては、発生装置セル上の圧力負荷を均衡させることが必要である。具体的には、電解ユニットは、このセルの一方の側にオゾンと酸素を作り出し、他方の側に水素を作り出す。実際には、水素背圧は、単にチェック弁により維持され得る。次いで、下流での処理は、水のための単純な排水トラップおよび任意の水素分解ユニットを用いてほぼ大気圧でなされ得る。したがって、この装置は、簡便に、オゾンバイパス回路に並行に配置され得る。
【０２７４】
上記系は、個別の、すなわちバッチのユニットのために記載されてきたけれども、真空操作態様のためのすでに記載された供給と排出の手順は、連続流に適合させるために容易に変更され得る。唯一の有意な変化は、記載された圧力差は逆転されねばならないと言うことである。
【０２７５】
圧力の次の問題は、温度と湿度であり、それらは相互依存する。ここでの潜在的な温度の問題は、ガスが極めて高温か低温であると、ガスはタンパク質を損傷するということである。加えて、湿度が非常に低いとタンパク質は過剰に乾燥されうるし、非常に高いとタンパク質は過剰な湿度により希釈され得る。
【０２７６】
オゾン温度の正確な制御のために、ペルティエ系が望ましい（モデルＴＬＣ−１４００、ＴＥＣＡ社、イリノイ州シカゴ）。代わりに、適切な制御が提供されるならば、通常の冷凍および加熱デバイスもまた用いられ得る（モデルＲＴＥ、ネスラブ、ニューハンプシャー州ポーツマス）。両方の系は、加熱されたか冷却されたかいずれかの水源を提供する。それゆえ、それらのデバイスに熱交換器を接続することは、オゾン温度を調節する単純な手段を提供する。
【０２７７】
特に単純な配置は、処理ユニットにオゾン源を接続するためにテフロン（登録商標）または同様のプラスチックチューブを使用することである。オゾンによる攻撃に対して非常に耐性があるので、それらの適用においてはテフロン（登録商標）が望ましい。テフロン（登録商標）は、ガスに対していくらか透過性であるけれども、それらの損失は、過剰ではない。しかしながら、所望であれば、テフロン（登録商標）の低透過性形態、特にテフロン（登録商標）ＰＦＡもまた用いられ得る。もう１つの代替案は、低透過性プラスチックとのテフロン（登録商標）ラミネートを用いることである。
【０２７８】
したがって、制御された温度浴中の選択されたチューブのループの配置は、所望のオゾン加熱または冷却を提供する。代わりに、金属製熱交換器もまた用いられ得るが、しかし、この場合には、極めて反応性のオゾンによる攻撃から金属表面を保護することが必要である。有効な保護層は、テフロン（登録商標）である。さらに高速の熱移動のためには、ステンレス鋼管が用いられ得る。特に、硝酸により処理された管は、熱流を大きく減少させること無しにさらなる腐食に抵抗する内層を急速に形成する（ステンレス鋼管：硝酸処理されたもの、アップチャーチ・サイエンティフィック、ワシントン州オークハーバー）。
【０２７９】
熱交換器のすぐ下流に、水のトラップが高湿度系でいずれの凝集物も採集し、除去するために用いられる。ここでの問題は、系の圧力を損なうこと無しに凝縮した水が除去されねばならないと言うことである。水のトラップの第１の部分それ自体は、小さな圧力容器である。この容器は、トラップ内の水の水準を測定するために目盛り、浮き、光学的または電気的センサーに接続されている。容器が満たされたときには、そのときは、ソレノイド弁は、ドレンに加圧された液体を放出するように作動する。完全な排水のために、排水プロセス全体の間弁を作動したままにするために「フリップ−フロップ」回路が用いられ、回路の状態は、閉じている位置で配置されるスイッチにより反転される。この弁は、オゾンによる攻撃に抵抗するためにテフロン（登録商標）流動表面を有するべきである。また、最小のエネルギー消費のために、この弁は、「通常閉じている」べきである。この弁の下流には、高圧での過剰なスプレー作用を防止するために、流れの制限物が出口チューブ中に配置されねばならない。もしオゾン圧力が保たれ得るより高いレベルまで液体を移動させることが必要であるならば、もう１つのアプローチは、蠕動ポンプを用いることである。いずれの場合でも排水はトラップが完全に空になる前に閉鎖されねばならず、さもなければ、オゾンガスの漏れがいくらか起こる。
【０２８０】
低湿度発生装置の場合には、要求されるレベルまで湿度を増加させるためのデバイスは、水のトラップに置き換わる。この場合には、高純度水源ならびに低温でこの水を気化させるための何らかの手段が必要とされる。音波加湿器は、この用途のために特に適している。最後に、もし入って来るオゾンが十分に低温であるか、または水の添加の後に冷却され得るならば、加熱された気化系を用いることもまた可能である。
【０２８１】
したがって、それらの組み合わせられた特徴によれば、オゾンは、適切な濃度、圧力、温度および湿度で処理チャンバに配送される。しかしながら、それらの条件は除染において非常に有効であるけれども、前記の脱ガス技術を含ませることによりさらによりプロセスを加速させることが可能である。
【０２８２】
ここでの基礎となる原理は、やはり、基本的な理想気体挙動の問題である。具体的には、それぞれのガスは所定に液体についてそれ自体の特徴的な可溶性を有する。さらに、フィックの第１法則は、液体中のこのガスの拡散を記述し、一方ヘンリーの法則は、液体上のこのガスの分圧に対する液体中のこのガスの濃度を記述する。
【０２８３】
したがって、通常の条件の下で、水または希釈水溶液は、約３５％の酸素濃度および約６３％の窒素濃度を有する。それらの値は、空気中のそれぞれの２１％および７８％の値とは異なる。というのは、酸素は、窒素より可溶性であるからである。続いて、１５％オゾンと８５％酸素の飽和混合物に暴露されたとき、液体は、オゾンおよび酸素を取り込むので、そのときは窒素濃度は減少する。しかしながら、オゾンは、酸素の約１３倍可溶性であり、それで、酸素の取り込みはより急速となる。他方、オゾンは、それが溶解する液体と反応する。したがって、オゾン中の酸素の一部は、溶液中の他の成分の一部と結びつき、残りの酸素の一部は、通常の二原子形態に戻る。いずれの場合でも、流入するオゾンは、最終的には、より低いエネルギー形態となるように完全に反応し、酸素富化され、他のガスの少ない除染された液体を残す。
【０２８４】
したがって、上記順序は、通常のオゾンによる除染ユニットで起こることを記述するけれども、本発明においては、付加的な要因が考察されねばならない。具体的には、通常の液体はすでに、新たなガスが導入されるとき置換されなければならないある種の溶存ガスを含んでいる。逆に、脱ガスされた液体はそのようなガスの存在を有さず、したがって、ガス分子により占められるであろう分子間空間は代わりに空である。結果として、加圧されたオゾンが導入されるとき、それは、本質的に、部分真空下の液体に対して作用するのであり、それゆえ、結果としての取り込みは、通常の液体を通しての単純な拡散の下で起こるであろう取り込みよりもはるかに急速である。さらに、この急速な吸収は、オゾンが反応するかまたは置換される前に液体内により深く入り込むことを許容し、それにより、処理される液体内のオゾンのより均一な分布をもたらす。したがって、通常の液体と比較して、オゾン暴露前の脱ガスの直接の利益には、高速の処理速度とより徹底した除染が含まれる。
【０２８５】
さらにより大きな改善を獲得するために、上記順序は、本発明において巡回させられる。背後の現象は、水中の酸素の濃度を増加させるためにすでに提案されている（サミュエル  グラスストーン、テキストブック・オブ・フィジカル・ケミストリー、バン・ノストランド、ニューヨーク、６９９ページ、１９４６年を参照されたい）。ここでの基本的なコンセプトは、ガスを区別するために窒素に対する酸素のより高い水への可溶性を用いることである。窒素を駆逐するために部分加熱を用いると、いくつかのそのようなサイクルは、最終的には、９０％に達する残留酸素濃度をもたらし得るであろう。もちろん実際には、酸素は、低温ポンピングによりより急速かつより廉価に製造され得る。
【０２８６】
したがって、酸素発生のためには実際的ではないけれども、しかしながら、このサイクル形成アプローチは、本発明においては非常に有用である。主たる変更は、上記真空および超音波脱ガス系を用いることであり、このようにして、加熱による経費とタンパク質損傷をなくす。酸素に対するオゾンの相対的可溶性は約１３：１であるので、これは窒素に対して酸素について上述された値よりはるかに大きく、濃縮は極端に速く進行する。特に、濃縮は、通常の環境下で得られるものをはるかに超えるレベルに急速に達する。
【０２８７】
目下の問題は、それらの濃度はどのくらい高くまで達し得るかと言うことである。不運にも、ここでは２つの大きな理由のために決定的な解答は存在しない。第１に、それらの濃度は、定常状態で維持され得る濃度をはるかに超えているので、それらの濃度は正確な測定のためには十分に長くは持続しない。
【０２８８】
濃度限界を測定するための試行における第２の問題は、オゾンは、それが溶解されている液体と反応すると言うことである。例えば、オゾンは、一回蒸留された水における約２０分の半減期を有し、しかし、多数回蒸留された水については、８０分以上の半減期を有する。さらに、少量の酸または中性塩はオゾンの可溶性を増加させ、溶液の半減期を延長させる。逆に、アルカリは、オゾンの可溶性を減少させる（アサートン・セイデル、「ソリュビリティーズ・オブ・イノーガニック・アンド・オーガニック・コンパウンズ」、バン・ノストランド、ニューヨーク、４７３ページ、１９１９年）。
【０２８９】
直接の結果は、少量の汚染物質でさえ、溶存するオゾンの挙動に大きな影響を与えると言うことである。これは、本発明における特に大きな問題である。というのは、生物学的な系の特徴である塩で緩衝された酸−塩基系は、そのように、除染の速度と程度に強烈に影響を与え得るからである。さらに、血液の場合には、抗凝血剤の効果もまた考慮されねばならない。というのは、様々のクエン酸塩、ＥＤＴＡ、ヘパリンなどを含む、現在通常使用されている多くの異なるタイプの薬剤が存在し、それらの薬剤のそれぞれがそれ自体独特の化学的性質を有しているからである。
【０２９０】
正味の結果は、上方濃度限界は、個別の場合に特異的であるきわめて可変的な反応速度と併せて、そのような濃度の遷移的性質のために厳密には確定され得ていない。それにもかかわらず、いくつかの実際的なガイドラインは確立し得る。例えば、ヒトのガス暴露については、８時間は０．１ｐｐｍに耐え得る。
【０２９１】
除染作業については、ガス濃度は、百万当り１００または１０００部台とさえなり得る。通常の液体濃度は、０．３から１０ｍｇ／Ｌ台にある。この範囲もまた本発明のための基本であるが、しかし、ピークの遷移濃度は、１００から２００ｍｇ／Ｌ台にある。
【０２９２】
他方、オゾンは、それらの高濃度で非常に有毒であり、デリケートなタンパク質を急速に損傷し得る。この理由のために、本発明は、除染が完了するや否や過剰のオゾンを除去するために前記脱ガス装置を利用する。
【０２９３】
最後に、上記主張は、オゾン処理システム一般について当てはまる。例えば、増加した圧力は、常に、より多くのオゾンを溶液に溶け込ませる。しかしながら実際には、いずれのオゾン除染系の挙動も、オゾンが液体にどのように導入されるかに強く依存する。
【０２９４】
オゾン産業において、液体にオゾンを導入するプロセスは「コンタクティング」と呼ばれ、このプロセスのために用いられるデバイスは「コンタクター」と呼ばれる。有効であるために、コンタクターは、処理される流体の特性に適合するように設計されねばならない。例えば、飲料水の調製において、または有毒廃棄物の処理において、高いレベルの乱流および剪断は、処理される液体の損傷についての問題無しに許容され得る。さらに、コンタクターは、いずれの合理的に強度を有する構築材料からも製造され得る。しかしながら、上記のように、タンパク質系、特に血液製剤を含むものは、はるかに注意深く取り扱われねばならないものであり、凝血機構を誘発しないプラスチックがガラスのような材料の代わりに用いられねばならない。
【０２９５】
例えば、それらの問題は、血小板の処理において特に重要であり、血小板は、機械的または熱的ストレスにより容易に損傷される。コンタクターの設計の点では、独特の要因は、血小板は、装置およびドナーに依存して、５０ミリリットル位の小さな体積で処理されると言うことである。
【０２９６】
この比較的小さな体積のために、供与全体が一度に処理チャンバ上に広げられ得る。血小板の接触のために特に好ましいチャンバが図１１に示されている。処理チャンバは、鋭い楔の形態の互い違いに配置された対向する棚１１０２を有する長方形または同様に成形されたブロック１１０１からなる。水平位置のチャンバトともに、液体は、一方の側に沿って、トラフすなわち入口ポート１１０３に入る。このトラフを満たして後、次いで、チャンバは、約８０度まで回転し、その場所で、流体は、反対側の壁に向かって第１の棚１１０２ａを越えて流れる。しかしながら、棚は、反対側の壁に実際には接触しないので、流体は、次の棚１１０２ｂに落下し、次いで、流れは、逆転する。そうしている間に、オゾンは、ポート１１０４を通して導入される。この配置は上記引用された特許とは違うことに注意されたい。と言うのは、流れの逆転は、それぞれの段階で物質を徹底的に混合し、頂部層がほとんど底部層となり、その逆も起きるためである。
【０２９７】
回転は、流体の全てが入口トラフから空になるまで続き、このことは、約９０度で起こる。次いで、配列全体は、その元の位置に回転して戻され、次いで、反対方向からのプロセスを反復するために-９０度に続く。これらの動きの間、オゾンは、処理チャンバの一方の側に連続的に供給され、消費されたガスは、反対側から除去される。このように、チャンバの動きは、本質的に２つの相反する半回転であるので、ガス接続は、通常の柔軟性ホースであり得る。それによりこの配列は、コストと先に記述された連続回転ユニットのために必要とされる封じられたベアリングなどの設置問題を節約する。
【０２９８】
このデバイスの追加の強化には、流体流の速度を向上させ、オゾンの混合の助けとなる超音波ドライバー、加圧された処理セル、および真空補助を有する超音波脱ガスオプションが含まれる。それらの部材のそれぞれの利点が先に論述されてきたが、しかし、それらの強化をしてさえ、このデバイスは大きな体積の流体を有効には取り扱い得ない。それゆえ、血漿および他のより大きな体積の熱感受性の溶液を処理するためにこのデバイスを改良することが必要である。
【０２９９】
１つのそのようなアプローチは、図５に示されている。このデバイスは、閉じたチャンバの頂部に超音波スプレーノズルを用いる。すでに記載されたスプレーシステム（米国特許第５，８８２，５９１号）と違って、このデバイスは、静電界を有さないが、しかし、それは、高圧、スプレーされた流体の直接超音波処理、および以下により完全に記載される他の強化を含む。
【０３００】
不運にも、超音波は、スプレーされる液体について剪断を大きく減少させるけれども、このプロセスは、デリケートなタンパク質および細胞懸濁物をいまだ損傷し得る。また、他のスプレー適用のために先に記述されたように（米国特許第５，８８２，５９１号）、汚染された生物学的物質の微細なスプレーは、可能な限りいつでも回避されるべきである。それゆえ、一般的な血液の仕事、および同様の適用のためにさらに別のコンタクターを開発する必要がある。
【０３０１】
このコンタクターの重要な特徴は、閉じたチャンネルを通して処理される流体が流れると言うことである。次いで、オゾンは、チャンネル壁中の一連の小さな穴を通して液体に供給される。
【０３０２】
したがって、この配置は、通常のガス／液体発泡デバイスに対して一部類似性を有するけれども、しかしながら、顕著な差が存在する。具体的には、チャンバを回転させる能力は、流体のバルク混合の助けとなり、それにより、より均一な処理を提供する。この混合は、超音波によりさらに補助されるが、しかし、超音波はまた、本発明の適用において他の重要な効果も有する。
【０３０３】
歴史的には、オゾン接触を助けるための超音波の使用は、Ｗ．Ｓ．マシェラインにより検討されている（「ハンドブック・オブ・オゾン・テクノロジー・アンド・アプリケーション、第１巻」Ｒ．Ｇ．ライスおよびＡ．ネッツァー編集、アン・アーバー・サイエンス、ザ・バターワース・グループ、ケント、イギリス、１８０ページ１９８２年を参照されたい；また、Ｃ．ネーベル、Ｐ．Ｃ．ウナングストおよびＲ．Ｄ．ゴッチュリング、「水中にオゾンを分散させるための様々の混合デバイスの評価」、Ｗａｔｅｒ  Ｓｅｗ．  Ｗｏｒｋｓ  Ｒｅｆ．  Ｎｏ．Ｒ−６（１９７３年）も参照されたい）。特に、通常の超音波ノズルのガスおよび液体チャンネルを逆転させることは、細かく分割された泡の分布を作り出すことに注意される。最後に、前述のように、米国特許第４，５９７，８７６号は、オゾンの泡に対する超音波共鳴効果を記述する。特に、超音波は、小さな泡を液体にむけて駆動し、しかし、より大きな泡は、それが除去され得るポイントまで成長することが知られている。
【０３０４】
本発明において、超音波は、可能な限り溶液に多くのオゾンを入れるために独特のコンタクターと組み合わせられる。具体的には、本発明におけるコンタクターは、超音波により直接駆動される。さらに、この超音波は、高振幅ホーンにより送られ、それゆえ、振動は、変異が大きい。加えて、この変異は、オゾンが流れる孔の直径より大きい。正味の結果は、超音波は、取り囲む液体にむけて極端に小さな泡を剪断変形させる。共鳴よりはるかに小さいかまたは、さらに安定なサイズであるために、それらの小さな泡は、この場合、超音波の作用の下で急速に液体に溶け込まされる。
【０３０５】
上記脱ガス、加圧、および接触手順の下で、このように、処理された液体に非常に多量のオゾンを組み込むことが可能である。しかしながら、有効な除染のためには、溶解したオゾンの量を測定することが必要である。オゾンは極めて反応性であるので、この測定は、過剰な処理を回避するために正確でなければならない。フィードバック目的のために、この測定は、リアルタイムでなされねばならない。最後に、タンパク質溶液については、この測定は、無菌条件の下でなされねばならない。
【０３０６】
光学測定技術は、それらの条件全てを満足させる。特に、ＵＶ光の吸収は、特に有用な測定技術である（オーシャン・オプティックス・モデル２０００、フロリダ州デューンディン）。実際にこの測定を達成するために、ＵＶ透明ウインドウがオゾン処理経路に備えられる。ＵＶ暴露バッグのように、テフロン（登録商標）が理想的であるが、しかし高価である。もし極めて強力なＵＶ光源が利用可能であれば、より低品質のプラスチックが用いられ得る。
【０３０７】
この技術における主たる制限は、気泡の存在である。除染の結果として存在するのであるけれども、それらの泡は、測定プロセスにおいて顕著な問題である。というのは、それらは、濃縮されたオゾン溶液とは光学的にまったく異なるからである。この問題を最小化するために、測定セルは、広い頂部と狭い底部を有して作られ得る。この形態の下で、気泡は表面に上昇し、ＵＶ光線を測定する経路内にのみ液体を残す。
【０３０８】
実際に上記プロセスを達成するための詳細は、以下の態様においてより完全に記載されている。
【０３０９】
ＸＩＩ．  第１２の主たる態様において、本発明は、
（ａ’）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するための工程、および
（ｂ’）オゾンにより前記脱酸素された流体を処理するための工程
により血漿を除染するための方法を提供する。
【０３１０】
この第１２の主たる態様において、工程（ａ’）「脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するための」とは、工程「（ａ）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理すること」が第１１の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。加えて、工程（ｂ’）「オゾンにより前記脱酸素された流体を処理するための」とは、工程「（ｂ）前記脱酸素された流体をオゾンと接触させること」が第１１の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。
【０３１１】
ＸＩＩＩ．  第１３の主たる態様において、本発明は、
（ａ）オゾン含有流体を獲得するために、流体をオゾンと混合すること、および
（ｂ）超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理すること
により流体を除染するための方法を提供する。
【０３１２】
この第１３の態様において、超音波エネルギーによる流体の処理は、第１、第２、第３、第４、第５、第６、第７、第８、第９、第１０、第１１、および第１２の主たる態様のコンテキストにおいて上述されたのと同じ方式で、上記と同じ装置を用いることにより、実施され得る。
【０３１３】
この第１３の主たる態様において、超音波エネルギーは、オゾンの除染効果を高めるために用いられる。上記のように、オゾン処理は、標準的な除染技術である。非常に有効であるけれども、しかしながら、オゾン化は、不運にも、比較的長い処理時間を要する欠点がある。また上記のように、単独で作用する１つの技術を用いることにより達成され得るよりも、より完全な除染をもたらすために技術を組み合わせることが有用である。それゆえ、この本発明の第１３の主たる態様は、オゾン除染プロセスを加速するために、および組み合わせられた系の有効性全体を改善するために、超音波エネルギーを用いる。
【０３１４】
超音波は、細菌の除染の速度を高めることにおいて有効であることはすでに知られている（Ｗ．Ｓ．マスケライン、「ハンドブック・オブ・オゾン・テクノロジー・アンド・アプリケーション，第１巻」、Ｒ．Ｇ．ライスおよびＡ．ネッツァー編集、アン・アーバー・サイエンス、ザ・バターワース・グループ、ケント、イギリス、１８０ページ、１９８２年を参照されたい）。加えて、オゾンと超音波との間の相乗効果が存在することもまた知られている（バールソンＧＲ、マレーＴＭ、ポラードＭ「音波照射の有無とオゾンによるウイルスとバクテリアの不活性化」、Ａｐｐｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  １９７５年３月号；２９（３）：３４０〜４ページ）。
【０３１５】
それらの効果の背後の明らかなメカニズムは、超音波は、化学反応性、特にフリーラジカルを含むものを改善することが知られていると言うことである（Ｖ．ミシックおよびＰ．リース、「ＥＰＲ分光分析による水系音響化学における第１フリーラジカル種の検出」、「ソノケミストリー・アンド・ソノルミネッセンス」における、Ｌ．Ａ．クラム、Ｔ，Ｊ，メーソン、Ｊ．Ｌ．ライスおよびＫ．Ｓ．サスリック、ＮＡＴＯ  ＡＳＩシリーズ  Ｃ、クラウワー・アカデミック・パブリッシャーズ、ドルトレヒト、２２５〜２３６ページ、１９９９年）。加えて、観察された強化の一部もまた改善された混合によるものであろうことも可能である。
【０３１６】
本発明において、溶存オゾンを含む液体に超音波を適用することの独特の側面は、上記条件および技術が除染プロセスの間溶液中のタンパク質を保護するために適用されると言うことである。以下において、この態様は血漿のコンテキストにおいて記載され、オゾンを血漿とまず混合することになる。次いで、オゾン含有プラズマは、超音波エネルギーにより処理される。この態様において、血漿は、上記のように超音波エネルギーにより処理される。
【０３１７】
もちろん、「超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理すること」と言う用語は、流体へのオゾンの導入がやんだ後オゾン含有流体への超音波エネルギーの適用が始まることを要求しないことは理解されるべきである。反対に、この用語は、オゾン含有流体への超音波エネルギーの適用が、（１）流体へのオゾンの導入の開始の前に、（２）流体へのオゾンの導入が始まる時間に、（３）流体へのオゾンの導入が始まった後に、または（４）流体へのオゾンの導入が終わった後に、始まり得るということを意味する。実際、特に好ましい下位の態様において、超音波エネルギーは、オゾンが流体に導入される時間全体の間流体に適用される。
【０３１８】
ＸＩＶ．  第１４の主たる態様において、本発明は、
（ａ’）オゾン含有流体を獲得するために、流体をオゾンと混合するための工程、および
（ｂ’）超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理するための工程
により流体を除染するための方法を提供する。
【０３１９】
この第１４の主たる態様において、工程（ａ’）「オゾン含有流体を獲得するために流体をオゾンと混合するための」とは、工程「（ａ）オゾン含有流体を獲得するために流体をオゾンと混合すること」が第１３の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。加えて、工程（ｂ’）「超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理するための」とは、工程「（ｂ）超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理すること」が第１３の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。
【０３２０】
ＸＶ．  第１５の主たる態様において、本発明は、
（ａ）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理すること、
（ｂ）オゾン含有流体を獲得するために前記脱酸素された流体をオゾンと接触させること、および
（ｃ）超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理すること
により流体を除染するための方法を提供する。
【０３２１】
第１５の主たる態様は、本質的に、第１１および第１３の主たる態様の組み合わせである。したがって、この第１５の主たる態様において、流体はまず、上記のように超音波エネルギーを用いて脱ガスされる。次いで、脱ガスされた流体は、オゾンと接触し、オゾン含有流体は第９の主たる態様において記載されたようにオゾンの反応性を高めるために超音波エネルギーにより処理される。
【０３２２】
ＸＶＩ．  第１６の主たる態様において、本発明は、
（ａ’）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するための工程、
（ｂ’）オゾン含有流体を獲得するために、前記脱酸素された流体を処理するための工程、
（ｃ’）超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理するための工程
により流体を除染するための方法を提供する。
【０３２３】
この第１６の主たる態様において、工程（ａ’）「脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するために」とは、工程「（ａ）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理すること」が第１５の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。加えて、工程（ｂ’）「オゾン含有流体を獲得するために前記脱酸素された流体を処理するための」とは、工程「（ｂ）オゾン含有流体を獲得するために前記脱酸素された流体をオゾンと接触させること」が第１５の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。最後に、工程（ｃ’）「超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理するための」とは、工程「（ｃ）超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理すること」が第１５の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。
【０３２４】
ＸＶＩＩ．  第１７の主たる態様において、本発明は、
（ａ）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理すること、
（ｂ）照射された流体を獲得するために前記脱酸素された流体を照射すること、および
（ｃ）オゾン含有流体を獲得するために前記照射された流体をオゾンと接触させること
により流体を除染するための方法を提供する。
【０３２５】
この第１７の主たる態様は、上記照射とオゾン処理態様の組み合わせを表す。したがって、この主たる態様は、第５と第７の主たる態様の組み合わせを表し、工程（ａ）、（ｂ）、および（ｃ）は上記と同じ方式で同じ装置により実施され得る。先に注意したように、組み合わせられた除染プロセスは、非常に効果的である。と言うのは、それは、極めて大きな対数減少率を生み出すからである。
【０３２６】
この態様において、オゾン処理による除染は、照射による除染に先行するかまたは後に続くかのいずれかであり得る。しかしながら、たとえ、超音波脱ガスが極めて有効であっても、照射プロセスで過剰酸素を除去する前にオゾンプロセスで過剰な溶存酸素種を加えることは一般的には望ましくない。さらに、照射除染後にオゾン処理除染を実施することは、病原と反応するための残留オゾン付加時間を許容し、このようにしてこのことは殺傷効果全体を改善するであろう。それら２つの理由のために、照射除染は、オゾン処理除染に先行することが好ましい。したがって、流体として血漿を利用する好ましい態様において、この方法は、
（ａ”）脱酸素された血漿を獲得するために超音波エネルギーにより血漿を処理すること、
（ｂ”）照射された血漿を獲得するために前記脱酸素された血漿を照射すること、
（ｃ”）オゾン含有血漿を獲得するために前記血漿をオゾンと混合すること
を含む。
【０３２７】
ＸＶＩＩＩ．  第１８の主たる態様において、本発明は、
（ａ’）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するための工程、
（ｂ’）照射された流体を獲得するために前記脱酸素された流体を照射するための工程、および
（ｃ’）オゾン含有流体を獲得するために前記照射された流体を処理するための工程
により流体を除染するための方法を提供する。
【０３２８】
この第１８の主たる態様において、工程（ａ’）「脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するための」とは、工程「（ａ）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理すること」が第１７の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。加えて、工程（ｂ’）「照射された流体を獲得するために前記脱酸素された流体を照射するための」とは、工程「（ｂ）照射された流体を獲得するために前記脱酸素された流体を照射すること」が第１７の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。最後に、工程（ｃ’）「オゾン含有流体を獲得するために前記照射された流体を処理するために」とは、工程「（ｃ）オゾン含有流体を獲得するために前記照射された流体をオゾンと接触させること」が第１７の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。
【０３２９】
ＸＩＸ．  第１９の主たる態様において、本発明は、
（ａ）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理すること、
（ｂ）照射された流体を獲得するために前記脱酸素された流体を照射すること、
（ｃ）オゾン含有流体を獲得するために前記照射された流体をオゾンと接触させること、
（ｄ）超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理すること
により流体を除染するための方法を提供する。
【０３３０】
この態様は、上記照射とオゾン処理態様の別の組み合わせを表す。したがって、この第１９の主たる態様は、第５と第１３の主たる態様の組み合わせを表し、工程（ａ）、（ｂ）、（ｃ）および（ｄ）は、上記と同じ方式で同じ装置により実施され得る。
【０３３１】
先に注意したように、組み合わせられた除染プロセスは非常に効果的である。と言うのは、それは、極めて高い対数殺傷率を生み出すからである。この態様において、オゾン処理による除染は、照射による除染に先行するかまたは後に続くかいずれかであり得る。しかしながら、たとえ超音波脱ガスが極めて有効であっても、一般的には、照射プロセス中で過剰酸素を除去する前にオゾンプロセスで過剰な溶存酸素種を加えることは望ましくない。さらに、照射による除染後にオゾン処理による除染を実施することは、病原と反応する残留オゾン付加時間を許容するであろうし、そのようにしてこのことは、殺傷効果全体を改善するであろう。それら２つの理由のために、照射による除染は、オゾン処理による除染に先行することが好ましい。したがって、流体として血漿を利用する好ましい態様において、この方法は、
（ａ”）脱酸素された血漿を獲得するために超音波エネルギーにより血漿を処理すること、
（ｂ”）照射された血漿を獲得するために前記脱酸素された血漿を照射すること、
（ｃ”）オゾン含有血漿を獲得するために前記血漿をオゾンと混合すること、
（ｄ”）超音波エネルギーによりオゾン含有血漿を処理すること
を含む。
【０３３２】
ＸＸ．  第２０の主たる態様において、本発明は、
（ａ’）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するための工程、
（ｂ’）照射された流体を獲得するために前記脱酸素された流体を照射するための工程、
（ｃ’）オゾン含有流体を獲得するために前記照射された流体を処理するための工程、
（ｄ’）超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理するための工程
により流体を除染するための方法を提供する。
【０３３３】
この第２０の主たる態様において、工程（ａ’）「脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理するための」とは、工程「（ａ）脱酸素された流体を獲得するために超音波エネルギーにより流体を処理すること」が第１９の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。加えて、工程（ｂ’）「照射された流体を獲得するために前記脱酸素された流体を照射するための」とは、工程「（ｂ）照射された流体を獲得するために前記脱酸素された流体を照射すること」が第１９の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。工程（ｃ’）「オゾン含有流体を獲得するために前記照射された流体を処理するための」とは、工程「（ｃ）オゾン含有流体を獲得するために前記照射された流体をオゾンと接触させること」が第１９の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。最後に、工程（ｄ’）「超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理するための」とは、工程「（ｄ）超音波エネルギーにより前記オゾン含有流体を処理すること」が第１９の主たる態様のコンテキストにおいて実施されるのと同じ方式で実施され得る。
【０３３４】
ＸＸＩ．  第２１の主たる態様において、本発明は、
（１）流体を収容するためのチャンバ、
（２）チャンバに結合する真空源、および
（３）チャンバに結合する超音波エネルギー源
を備え、前記チャンバは（ｉ）フラットパネル、（ｉｉ）入口、および（ｉｉｉ）出口を備え、前記チャンバの前記フラットパネルおよび前記入口は、前記入口を通り、前記フラットパネル上を前記出口に流れる流体が、薄膜を形成し、前記フラットパネル上の流れの少なくとも一部の間プラグ流れとして流れるように構成される、流体を除染するための装置を提供する。
【０３３５】
血漿との接触に至るチャンバのいずれの表面も、特に流体が血漿であるとき流体に対して有害な影響を有さない材料で構築されるべきである。血漿との接触に至るチャンバの部分のために適切な材料は、血液との接触のためにＦＤＡにより特定されているものである。絶対の必要ではないけれども、チャンバの少なくとも一部が除染プロセスの視覚検査を可能とするために透明な材料で作られていることは好ましい。
【０３３６】
いずれの場合でも、ＰＶＣは、現在広く用いられ、開発中の様々のポリオレフィンバッグが存在する。それらの新規材料の大きな問題は、可塑化剤が時間がたつと滲出し得ると言うことである。しかしながら、本発明の方法については、接触時間は極めて短い。他方、音波処理は滲出プロセスを加速し得る。しかしながら、現在まで、試験は測定可能な劣化を示さないので、本発明の方法および装置にとって特有の限定事項はないようである。
【０３３７】
チャンバは、底部にフラットパネルまたは平板を含むように構成される。フラットパネルのサイズについては特別の限定は存在しないけれども、２つの一般的なサイズのタイプが存在する。第１に、約６００ｍｌのアフェレーシス供与（apheresis donation）由来の個別ユニットのために、フラットパネルは、ほぼ縦２５ｃｍ、横２５ｃｍであろう。他方、プール処理のための連続大規模ユニットは、数メートル台の平坦なセクションを有するであろう。
【０３３８】
チャンバはまた、入口と出口も含む。入口は、好ましくは、チャンバの底部近くに位置し、フラットパネルの一方の末端の幅に沿って伸びる。入口は、好ましくは、血漿がチャンバの底部でフラットパネル上を流れるとき血漿を薄膜に形成することを助けるための発散スプレッダである。入口の高さは、好ましくは、血漿が薄膜を形成するように構成される。膜の正確な厚さは、それ自体重要ではない。要求されている全てのことは、気泡が表面に比較的急速に到達することである。極めて耐久力のあるタンパク質の場合には、このことは考慮さえされない。より耐久性のないタンパク質およびセルについては、２から２０ｍｍ、好ましくは２から１０ｍｍ、およびより好ましくはその場合２から４ｍｍの厚さが用いられ得る。これはいかなる意味でも正確でなく、厚さは、真空設定、出力など次いで、異なる範囲への調整を単純に変化させることにより変化しうることが可能である。
【０３３９】
プラグ流れの創出は、周知である（ジョンＡ．ロバーソン、クレイトンＴ．クロウェ、エンジニアリング・フルード・メカニックス、第３版、フートン・ミフリン・カンパニー、ニューヨーク、１９８５年）。
【０３４０】
入口とフラットパネルの寸法は、好ましくは、血漿がプラグ流れとしてフラットパネル上を流れるように調節される。したがって、フラットパネルの長さ対入口の幅の比は、２０未満、好ましくは１５未満、より好ましくは約１０未満である。
【０３４１】
好ましい態様において、入口は、フラットパネル上の血漿の流量を制御するためのデバイスに接続されている。流体の流れは、以下のように制御され得る。血液の場合には、処理範囲には血漿ならびに血小板と赤血球が含まれる。
【０３４２】
第１に、全ての血液の用途は、白血球を除去するための手段を含むべきである。白血球は、ドナーの中で明らかに有用であるけれども、それらの細胞の輸血は、多数の不都合な免疫反応をもたらし得る。さらに悪いことに、それらの細胞は、疾患、特にｎｖＣＪＤ（新種クロイツフェルト−ヤコブ病）を感染させる機会も提供する。この理由のために、それらの細胞は、破壊されるか、または好ましくは除去されるかいずれかすべきである。単純なアプローチは、多くのＦＤＡが認可するフィルターの１つを用いることであり、１つの例は、ポール・コーポレーション（ニューヨーク）由来のものである。
【０３４３】
次いで、血漿は、１時間約５３℃に加熱されるべきである。この手順のみが多くのウイルスを殺傷する。この加熱のもう１つの利点は、溶存酸素は、そのような高温で急速に消失するということである。もう１つの利点は、キャビテーションは、高温でははるかにより容易であるということである。加熱が合理的に高速である限り実際の加熱方法は重要ではない。必要な加熱を提供することが可能であるいくつかの血液用、血漿用、および第ＩＶ因子溶液用加温器が市場に存在する。
【０３４４】
もちろん、血漿のいくつかの成分（特に第Ｖ因子）は、不安定であり、そのような処理に耐え得ない。同様に、血小板および赤血球は、この方式では加熱され得ない。それらの場合については、材料のバルクは、低温で維持され、熱は、液体が脱ガスユニットに入るときのみ適用されるであろう。
【０３４５】
次いで、流体は、脱ガス後即座に冷却され、それにより熱暴露全体を最小化する。もちろん、加熱をまったくしないことも任意事項として存在する。
【０３４６】
正味の効果はこの点にあり、処理される流体はバッグ内にあり、それは、加熱され得るかされ得ない。次の課題は、この流体を脱ガスユニットに入れることである。先に記載したように、蠕動ポンプは、１つの任意選択事項である。血漿のような強力な材料については非常に有効であるけれども、しかしながら、赤血球および血小板は、重大な損傷を被るであろう。というのは、極めて薄い管上の狭く離間したローラーのみが要求される低速の定常的な流量を達成し得るからである。この配置は、不運にも、流入した細胞にポンプ操作による過剰な損傷を引き起こすであろう。さらに、排出側の真空は、ポンプによる損傷を悪化させるであろう。
【０３４７】
それらの理由のために、細胞系は、流体流のための体力系（ｂｏｄｙ  ｆｏｒｃｅ  ｓｙｓｔｅｍ）を用いるであろう。具体的には、真空系からの吸引は、駆動力全体を提供するであろう。流体があまりに急速に吸引されることを防止するために、流れは、いくつかの技術により遅延されるであろう。極めて細い管を用いて、そうして摩擦損失を引き起こすことは１つの任意事項である。もう１つの任意事項は、遮断膜中のピンホールのような流れの制限である。第３の任意事項は、吸引が重力を克服しなければならないように脱ガスユニットの下に入口バッグを配置することである。第４の任意事項は、脱ガス側と供給側との間の圧力差が制御され得るように、部分真空系の内側にバッグを包含することである。第５の任意事項は、接続管を通して流れを制御する必要があるような、閉めることも緩めることもできる可変的なスクリュー配列である。それらのアプローチの全てならびに他の標準的な計測技術が適用され得る。
【０３４８】
唯一残る問題は、どのようにして実際にプロセスを制御するかと言うことである。ここでの問題は、液体が系に引き込まれる前に、真空が確立していなければならず、超音波がすでに発信されていなければならず、ＵＶランプが稼動状態になっていなければならないと言ったことなどである。必要な制御は、供給管上に閉鎖弁を配置することにより達成され得る。完全なオートメーション化のために、この弁は、電子的に制御され得る。
【０３４９】
もう１つの好ましい態様において、入口は、個別のアフェレーシス供与ユニットの出口に接続されるように形成される。この態様において、血漿の流量を制御するためのデバイスは、それ自体個別のアフェレーシス供与ユニットの中に収容され得るか、または入口と個別のアフェレーシス供与ユニットとの間に配置され得る。代わりに、入口は、血漿バッグのようないずれかの血漿容器に容易に接続され、脱着されるように構成され得る。
【０３５０】
出口はまた、入口の末端の反対側のフラットパネルの末端でチャンバの底部近くにも配置される。いずれにせよ、出口は、フラットパネル上を流れる血漿がフラットパネルを通過した後出口を通ってチャンバを出て行くように配置される。
【０３５１】
１つの好ましい態様において、出口は、除染された血漿を受容するための容器に容易に接続および脱着されるように成形される。そのような容器は、血漿ユニットの大きなプールの連続除染のために用いられる装置のために数百または数千リットルから、個別のユニットを除染するために用いられる装置のために数百または数十ｍｌほどの小ささまでのサイズの範囲をとり得る。
【０３５２】
もう１つの好ましい態様において、チャンバは、真空ポンプのような真空源と連通する第２の出口を含む。第２の出口は、好ましくは、真空が第２の出口を通してチャンバに適用されるとき血漿が第２の出口に吸引されないように、チャンバの頂部近くまたは少なくとも血漿層の頂部上に配置される。好ましくは、真空源は、２から１００ｍｂａｒ、好ましくは約１０から８０ｍｂａｒ、より好ましくは２０から６０ｍｂａｒの、チャンバ内の血漿の薄膜上の空間に真空を提供する。
【０３５３】
もう１つの好ましい態様において、装置は、第２の入り口と真空源との間に位置する無菌フィルターを有する液体トラップを含む。
【０３５４】
超音波エネルギー源は、所望の周波数と強度を有する、超音波エネルギーを発生させることが可能であるいずれのものでもあり得る。そのような超音波発生装置には、上記のものが含まれる。
【０３５５】
超音波エネルギーの源泉は、所望の強度および周波数の超音波エネルギーがフラットパネル上を流れる血漿の薄膜に適用され得るようにチャンバに結合される。好ましい態様において、装置は、フラットパネルの下に位置する超音波ドライバーを備える。特に好ましい態様において、装置は、超音波ドライバーとフラットパネルとの間に位置するウォータージャケットを備える。もう１つの特に好ましい態様において、装置は、超音波ドライバーとウォータージャケットとの間に位置する共鳴板を備える。ウォータージャケットは、好ましくは、超音波エネルギーが血漿に適用されるとき冷却水がウォータージャケットを循環するように冷却循環系に接続される。
【０３５６】
本発明の装置は、さらに、調節コンプライアンスを保証するために付加的なセンサーとデータ記録計を備え得る。そのような付加的なセンサーには、適切なキャビテーションまたは脱ガスを保証するためのハイドロフォン、適切な温度維持を保証するための熱電対、時間の関数としての適切な流量を保証するための入力および出力バッグ上のデジタル採寸計、および追跡可能な経路を維持するためのバーコードリーダーおよびデータプリンターを含み得る。直接のラジカル検出および記録もまた可能である。ハイドロフォンおよび熱電対は、それらが、血漿がフラットパネル上を流れるとき血漿の薄膜と連通するか接触するようにチャンバ内に配置されるべきである。
【０３５７】
装置は、部材の全てが恒久的または半恒久的であるように、すなわち、部材の全てまたはほとんどが多量の血漿の処理のために反復して用いられることが意図されるように構築され得る。代わりに、装置は、恒久的または半恒久的サブユニットおよび使い捨てサブユニットに分割され得る。この態様において、恒久的または半恒久的サブユニットは、部材の全てまたはほとんどが多量の血漿の処理のために反復して用いられることが意図されるように構築される。
【０３５８】
恒久的または半恒久的サブユニットは、
（１）超音波エネルギー源、および
（２）チャンバを受け入れるために設計された領域
を含み得るものであって、前記超音波エネルギー源は、前記チャンバが前記領域内に配置されるとき超音波エネルギーがチャンバ内の液体に適用され得るように前記チャンバを受け入れるように設計された前記領域に結合するものである。
【０３５９】
恒久的または半恒久的サブユニットは、さらに、蠕動ポンプ、ウォータージャケット、および真空ポンプを含む他の固定されたハードウエアも含み得る。蠕動ポンプは、それが、使い捨てユニットを通る血漿の流量を制御するために用いられ得るように配置される。ウォータージャケットは、それが、チャンバがチャンバを許容するように設計される領域内に配置されるとき、超音波ドライバーとチャンバとの間に存在するように配置される。真空ポンプは、それが、チャンバがチャンバを許容するように設計された領域内に配置されるとき、チャンバをとおって流れる血漿の薄膜上のガスに真空を供給し得るように配置される。恒久的または半恒久的サブユニットは、さらに任意に、ウォータージャケットと超音波ドライバーとの間に配置されるように位置する共鳴板を含み得る。
【０３６０】
使い捨てユニットは、
（１）チャンバ
を含み得るものであって、前記チャンバは、フラットパネル、入口、および出口を有し、前記チャンバの前記フラットパネルおよび前記入口は、前記入口を通り、前記出口まで前記フラットパネル上を流れる血漿が、薄膜を形成し、プラグ流れとして流れるように構成されているものである。
【０３６１】
使い捨てユニットは、さらに、血漿上のガスに真空を供給するための恒久的または半恒久的サブユニットの真空ポンプに接続され得る第２の出口を含み得る。
【０３６２】
本発明の装置の好ましい態様の使用がこれから図３を参照することにより、より詳細に記載される。図３は、血漿がＵＶＣ照射または続くオゾン処理の適用なしに超音波エネルギーの適用により除染される方法における使用のために設計されている除染系３０を示す。血漿は、左の血漿バッグ３１または他の供給源から系に入り、血漿の流量は、蠕動ポンプ３２により制御される。次いで、血漿流は、発散スプレッダ（divergent spreader）３３を通り過ぎ、そうして採集バッグ３１１に向かうチャンバ３４の底部のフラットパネルを通る血漿の薄膜の均一なプラグ流れを生み出す。（血漿のプラグ流れを達成するための手段はまた図４においても示されている。血漿は左からユニットに入り、流れは蠕動ポンプ４２により制御される。次いでこの流れは発散スプレッダ４３を通り過ぎ、このようにしてプラグ流れとしてメインチャンバ４４の底部でフラットパネルを通って流れる血漿の薄膜を生み出す。）プラグ流れは、入口幅の約２０倍の流れセクションが、乱流のない少ないレイノルズ数の下で層流を展開するのに必要とされる一般的な流体力学の準則を用いてこの設計の下で連続プラグ流れを保証する入口帯域に対して平坦区分（セクション）を相対的に短く維持することにより達成される。フラットパネル上の血漿の流量は上記の通りである。
【０３６３】
超音波エネルギーは、共鳴板３６を介してチャンバ３４の底部のフラットパネルに結合された超音波ドライバー３５により血漿に適用される。したがって、血漿がフラットパネル上を流れるときは、下から超音波を掛けられる。超音波照射は、効率的なエネルギー移動のために共鳴結合している金属板３６上に作用する超音波ドライバー３５により駆動される。
【０３６４】
フラットパネル上を流れる血漿の温度は、ウォータージャケット３７により制御される。共鳴板３６とフラットパネルとの間のウォータージャケット３７は、超音波ドライバー３５からの過剰の熱が血漿に達することを防止する。水は極めて良好な音の伝達媒体であり、したがって、超音波エネルギーの損失は有意ではない。フラットパネル上を流れて後、それから、除染された血漿は、出口３１０を介してチャンバを出て行き、採集バッグ３１１に入る。
【０３６５】
チャンバ３４の中の血漿上のガスおよび血漿への超音波エネルギーの適用の間に血漿から放出されるガスは、真空ポンプ３８によりチャンバから取り除かれる。感染因子のような生物学的物体は、真空ポンプ３８の汚染を防止するためにフィルタートラップ３９により捕捉される。
【０３６６】
プロセス全体が冷蔵状態の下で実施され得るし、装置３０全体または出発血漿バッグ３１、チャンバ３４、および採集バッグ３１１の少なくとも１以上が１以上の冷蔵ユニット中に含まれ得る。
【０３６７】
図３の装置３０は、完全な恒久的または半恒久的ユニットとして構築され得るものであり、出発プラズマおよび採集プラズマバッグのみが使い捨てまたは消耗可能なサブユニットである。代わりに、および好ましくは、図３の装置３０は、恒久的または半恒久的サブユニットおよび使い捨てまたは消耗性サブユニットとして構築される。図３の装置３０のコンテキストにおいて、ポンプ３２、超音波ドライバー３５、共鳴板３６、ウォータージャケット３７、および真空ポンプ３８は、恒久的または半恒久的サブユニットの部分であり得るし、一方、出発プラズマバッグ３１、入口３３、チャンバ３４、出口３１０および採集バッグ３１１は、１以上の使い捨てまたは消耗性ユニットの部分であり得る。フィルタートラップ３９を含む真空ラインは、恒久的もしくは半恒久的サブユニットまたは使い捨てもしくは消耗性サブユニットのいずれかの部分であり得る。
【０３６８】
コストを低く抑えるために、採集バッグを除く使い捨てまたは消耗性ユニットは、好ましくは、廉価なプラスチックからブロー成形され得る。この点で、血漿バッグのプラスチックに適用される苛烈な条件は、それ以外の使い捨てユニットで遭遇する必要はないことに注意すべきである。と言うのは、それは、凍結、輸送、または長期の貯蔵には決して供されることはないからである。しかしながら、採集バッグは、好ましくは、それらの標準に合致すべきである。したがって、通常の血漿バッグを用いることが好ましい。好ましくは、現在の実施状態との相容性のために、本発明の装置のいずれの使い捨て部分も金属部分を有するべきではない。そうすることで、使い捨て部分または消耗性部分は、焼却され得る。
【０３６９】
チャンバが使い捨てまたは消耗性ユニットの一部であるとき、チャンバの壁は、非常に薄く、および／または柔軟性のある材料で作られ得る。言い換えれば、使い捨てチャンバは、それが許容されるように設計されている領域のためのバッグまたはライナーであり得る。チャンバがバッグまたは柔軟なライナーであるとき、それは、所望の形態に保持されるように、または差圧の下で要求される寸法にライナーを引き出すようにわずかな真空を掛けることによりそれを許容するように設計された領域の形態に一致するように作られ得るものであり、そうして、チャンバとしての極めて廉価な処理バッグの使用を可能とする。
【０３７０】
もう１つの好ましい態様において、チャンバとして用いられる使い捨てバッグはさらに、真空処理の間バッグの内側と外側の圧力を平衡させるためにバッグの一方の末端でウイルスを通さないフィルターを含む。このＦＤＡに認可された部材はまた、チャンバを受け入れるように設計された領域の内側でのバッグの容易な設置も可能とする。もう１つの好ましい態様において、チャンバとして用いられる使い捨てバッグは、さらに、真空の適用の間の崩壊を防止するために入口管と出口管にグロメットを含む。
【０３７１】
もう１つの好ましい態様において、チャンバは、粗面化された内表面を有する。粗面化された内表面は、発生した気泡がバッグライナー上の局所的スパイクに上昇することを許容する。これらの点から、超音波振動は、泡を比較的容易に駆逐し得る。比較として、平滑なバッグ表面の一方の側に沿って平坦化された泡は、攪拌してさえ、除去することがより困難である。
【０３７２】
装置は、さらに、電気遮蔽、飛沫防護、および特に商業的な超音波遮蔽包囲法を含むある種の安全性への配慮も含み得る。
【０３７３】
もう１つの好ましい変形において、本発明の装置はさらに、特定量の流体が処理されたとき、検出のためのデバイスまたは手段も含み得る。例えば、個別のユニットが貯蔵容器に向けて処理されるとき、貯蔵容器が満杯であれば、検出するための目盛りを含むことが好ましいであろう。代わりに、容器中の流体のレベルを測定する光学デバイスもまた用いられ得る。
【０３７４】
入力容器またはバッグ内の流体の量を測定するために目盛りを含むこともまた好ましいであろう。具体的には、デジタル制御装置から時間が知らされれば、（コンピューター出力による）目盛りの上に入力バッグを設置することは、流量を測定するための手段を提供する。この流量が、今度は、弁系の開放と閉鎖を制御するために用いられ得る情報を提供する。
ＸＸＩＩ．  第２２の主たる態様において、本発明は、
（１’）前記流体を収容するための手段、
（２’）前記流体を真空と接触させるための手段、および
（３’）前記流体を収容するための前記手段に超音波エネルギーを導入するための手段、
を含み、
前記流体を収容するための前記手段は、（ｉ）前記収容手段に前記流体を導入するための手段、（ｉｉ）前記流体を前記収容手段を通って流すための手段、（ｉｉｉ）前記収容手段から前記流体を除去するための手段を含み、前記収容手段は、前記収容手段を通って流れる流体が薄膜を形成し、前記収容手段を通る流れの少なくとも一部の時間の間プラグ流れとして流れるように構成される、
流体を除染するための装置を提供する。
【０３７５】
この第２２の主たる態様において、「前記流体を収容するための手段」とは、第２１の主たる態様のコンテキストにおいて上述された「流体を収容するためのチャンバ」として記載されているのと同じであり得る。「前記流体を真空と接触させるための手段」とは、第２１の主たる態様のコンテキストにおいて上述された「チャンバと結合した真空源」と同じであり得る。および、「前記流体を収容するために前記手段に超音波エネルギーを導入するための手段」とは、第２１の主たる態様のコンテキストにおいて上述された「チャンバに結合する超音波エネルギー源」と同じであり得る。加えて、第２１の主たる態様のコンテキストにおいて上述されたすべての任意のおよび好ましい部材は、この第２２の主たる態様においてもまた存在し得る。
【０３７６】
ＸＸＩＩＩ．  第２３の主たる態様において、本発明は、
（１）流体を収容するためのチャンバ、
（２）チャンバに結合する真空源、
（３）そのようなチャンバに結合する超音波エネルギー源、および
（４）ＵＶ、ガンマ線、またはｘ線照射源
を含む流体を除染するための装置を提供する。
【０３７７】
この第２３の主たる態様において、「流体を収容するためのチャンバ」とは、第２１の主たる態様のコンテキストにおいて上述された「流体を収容するためのチャンバ」と同じであり得る。「チャンバに結合する真空源」とは、第２１の主たる態様のコンテキストにおいて上述された「チャンバに結合する真空源」と同じであり得る。「そのようなチャンバに結合する超音波エネルギー源」とは、第２１の主たる態様のコンテキストにおいて上述された「チャンバに結合する超音波エネルギー源」と同じであり得る。
【０３７８】
上記のように、この態様におけるチャンバと超音波エネルギー源は、第２１の主たる態様のコンテキストにおいて上述されたのと同じであり得る。しかしながら、ＵＶ、ガンマ線、またはｘ線照射が血漿に達するためにチャンバ壁の一部を通過しなければならないように、ＵＶ、ガンマ線またはｘ線照射源が配置されるならば、そのときは、所望の程度の除染が達成されるように、チャンバの少なくともその部分は照射に対して十分に透明でなければならない。
【０３７９】
この態様の装置と上記態様の装置との間の根本的な差異は、ＵＶ、ガンマ線、またはｘ線照射源の存在である。ＵＶ、ガンマ線またはｘ線照射源は、所望の周波数および強度の照射を発生させることが可能であるいずれのものでもあり得る。ＵＶの適切な照射源には上記のものが含まれる。ガンマ線照射については、コバルト−６０およびセシウム−１３７が最も一般的な医療用照射源である。Ｘ線は、標準的な高電圧電子加速照射源により発生し得る。
【０３８０】
もう１つの好ましい態様において、装置は、チャンバの内側に溶存酸素計を備える。溶存酸素計は、それがフラットパネル上を流れる血漿の薄膜内の酸素含有量を検出し得るように配置される。
【０３８１】
この装置はまた、部材の全てが恒久的または半恒久的であるように、すなわち、部材のすべてまたはほとんどが多量の血漿を処理するために反復して用いられることが意図されるようにも構築され得る。代わりに、装置は、恒久的または半恒久的サブユニットおよび使い捨てサブユニットに分割され得る。この態様においては、恒久的または半恒久的サブユニットは、部材の全てまたはほとんどが血漿のような多量の流体の処理のために反復して用いられることが意図されるように構築される。
【０３８２】
恒久的または半恒久的サブユニットは、
（１）超音波エネルギー源、
（２）ＵＶ、ガンマ線またはｘ線照射源、および
（３）チャンバを受け入れるように設計されている領域
を含むものであって、前記超音波エネルギー源は、前記チャンバが前記領域内に配置されるとき超音波エネルギーがチャンバ内の液体に適用され得るように前記チャンバを受け入れるように設計されている前記領域に結合し、前記ＵＶ、ガンマ線またはｘ線照射源が、前記チャンバが前記領域内に配置されるとき、ＵＶ、ガンマ線、またはｘ線照射がチャンバ内の液体に適用され得るように位置するものである。
【０３８３】
恒久的または半恒久的サブユニットは、さらに、蠕動ポンプ、ウォータージャケット、および真空ポンプを含む他の固定されたハードウエアも含む。蠕動ポンプは、それが使い捨てユニットを通しての血漿の流量を制御するために用いられ得るように配置される。ウォータージャケットは、チャンバがそれを受け入れるように設計されている領域に配置されているとき、超音波ドライバーとチャンバとの間に存在するように配置される。真空ポンプは、チャンバがそれを受け入れるように設計されている領域に配置されているとき、チャンバを通して流れる血漿の薄膜上のガスに真空を供給し得るように配置される。恒久的または半恒久的サブユニットは、さらに任意に、ウォータージャケットと超音波ドライバーとの間に位置するように配置される共鳴板を含み得る。
【０３８４】
この態様の使い捨てサブユニットは、血漿がＵＶ、ガンマ線および／またはｘ線照射により有効に除染されるように、チャンバ壁の少なくとも一部は十分にＵＶ、ガンマ線、および／またはｘ線に透明である材料で構築されねばならないと言う条件で、本質的に上記と同じである。
【０３８５】
ＸＸＩＶ．  第２４の主たる態様において、本発明は、
（１’）前記流体を収容するための手段、
（２’）前記流体を真空と接触させるための手段、
（３’）前記流体を収容するための前記手段に超音波エネルギーを導入するための手段、および
（４’）ＵＶ、ガンマ線、またはｘ線照射により前記流体を処理するための手段
を含む流体を除染するための装置を提供する。
【０３８６】
この第２４の主たる態様において、「前記流体を収容するための手段」とは、第２１および第２３の主たる態様のコンテキストにおいて上述された「流体を収容するためのチャンバ」と同じであり得る。「前記流体を真空と接触させるための手段」とは、第２１および第２３の主たる態様のコンテキストにおいて上述された「チャンバに結合した真空源」と同じであり得る。「前記流体を収容するための前記手段に超音波エネルギーを導入するための手段」とは、第２１および第２３の主たる態様のコンテキストにおいて記載されている「そのようなチャンバに結合されている超音波エネルギー源」と同じであり得る。「ＵＶ、ガンマ線、またはｘ線照射により前記流体を処理するための手段」とは、第２３の主たる態様のコンテキストにおいて上述された「ＵＶ、ガンマ線、またはｘ線照射源」と同じであり得る。加えて、第２１の主たる態様のコンテキストにおいて上述された全ての任意で好ましい部材は、この第２４の主たる態様においてもまた存在し得る。
【０３８７】
ＸＸＶ．  第２５の主たる態様において、本発明は、
（１）流体を収容するためのチャンバ、
（２）チャンバに結合する真空源、
（３）そのようなチャンバに結合する超音波エネルギー源、および
（４）オゾン源
を含み、
前記チャンバは、（ｉ）オゾン源からオゾンを導入するための入口、（ｉｉ）血漿を導入するための入口、および（ｉｉｉ）オゾン源からのオゾンを流体と混合するためのデバイスを含む
流体を除染するための装置を提供する。
【０３８８】
オゾンは、第１３から第２０の主たる態様のコンテキストにおいて上述されたように発生し得る。このようにオゾンを発生させた後、次の問題は、どのようにそれを流体に適用するかである。
【０３８９】
本発明の好ましい態様において、２つの別の方法またはコンタクターが用いられ得る。
【０３９０】
したがって、好ましい態様において、オゾンは、
（１）下方表面と上方表面を有し、前記下方表面を前記上方表面と接続する複数の通路を有する基板、
（２）超音波エネルギーが、前記基板の振動により流体に導入されるように前記基板に結合される超音波エネルギー源、
（３）前記基板の前記下方表面に接続されたオゾン源
を含むコンタクターにより流体と混合される。
【０３９１】
この好ましいコンタクターにおいて、オゾンは、流体に超音波エネルギー源を結合させる同一の基板を通して通過することにより流体に導入される。オゾンは、基板内の通路を通過し、気泡の形態で流体に導入される。泡のサイズは、流体に対する通路の開口のサイズを制御することにより少なくとも部分的に制御され得る。適切には、開口は、超音波の周波数範囲に応じて、２５から１０００ミクロン、好ましくは５０から５００ミクロンのサイズを有する通路の開口の直径を有して形態として円形である。流体に導入されるオゾン気泡のサイズもまた、部分的には、基板の振動の周波数および振幅により影響される。典型的には、基板は、開口の直径より大きな振幅で、２０から２５０ｋＨｚ、好ましくは２０から１００ｋＨｚの周波数で振動する。
【０３９２】
オゾン処理系の第１の部分は、血漿入力容器であり、それは、冷却のための熱移動板と直接接触する。前述の部分で注意したように、冷却された液体は、ガスをはるかにより多く受容しやすい。容器の形態全体は円筒形であり、底部に向かうほどサイズが小さくなる。この円筒の底部では、容器は、断面が方形になる。この方形の断面は、オゾンノズルの入口に適合している。このノズルは、それぞれの平面断面の両側で、小さな（数ミクロン）孔を有して「Ｖ」字状の形態となっている。それらの孔はオゾン源に接続している。超音波は、底部チャンネルの方向に沿って「Ｖ」字の平面に対して垂直に適用される。
【０３９３】
ノズルの反対側には、処理された流体を集めるために同様な容器が配置されている。しかしながら、この第２の容器の高さは、液体が重力の下で流れるように第１の容器の高さより低い。また、流体はポンプでくみ上げられ得る。
【０３９４】
この配置では、オゾンは、「リガメント」にすでに分割された液体に入る。それらのガス性リガメントに対する超音波の直接作用は、気泡への直接破裂である。特に、超音波ホーンの動きは、ｍｍ台であり、これは、オゾンオリフィス直径よりはるかに大きいことに注意すべきである。そのようなものとして、微細な気泡は、典型的には、広い面積にわたって広がる。また、この動きは、非常に均一な分布をもたらすように、続く互い違いの列とともに、多くのオリフィスを互いに近接して離間することを可能とする。実際には、入口側にはより少ないオリフィスが配置される。というのは、到来する下向きの流れは、上昇する気泡を互いに結合させる傾向があり、望ましくない大きなサイズをもたらすからである。逆に、出口側の浮力は、反対の効果を有し、それで、より多くのガスがこの場所に導入される。
【０３９５】
そのような配列にはいくつかの利点が存在する。第１に、容器中の流体は、一部のガスにすぐに暴露され、このようにして処理時間全体を改善する。第２に、液体の全てがノズルを通過しなければならないと言う要求は、均一な処理を保証する。第３に、出口側での連続オゾン処理はまた、良好な混合条件の下で処理時間全体を伸ばす。第４に、小さなミクロンサイズの泡は、典型的な２０ｋＨｚ音源についての共鳴のための最適値よりはるかに小さく、それゆえ、先に論述した適用される超音波により溶液に急速にもたらされる。最後に、低振幅源は、キャビテーションによる過剰な気泡成長またはタンパク質損傷なしに混合と拡散を改善する。
【０３９６】
超音波の働きの下で「Ｖ」字の狭い側をわずかに屈曲させることは、さらに、この混合を良好にし得る。この場合には、屈曲は、本質的に圧縮不可能な流体がノズルのオリフィスに対してより容易に動くことを可能とする。加えて、「Ｖ」字の基部の単独のドライバーは、それぞれの側のドライバーの対より、よりコスト上有効である。
【０３９７】
オゾン処理後、そのとき、液体は、上記のように第２の容器に集められる。ここから、このとき液体は、上記のようにヒーターを通して真空／超音波脱ガス装置に蠕動ユニットによりポンプ輸送される。先に記載したように、このとき流体は、部分的に脱ガスされ、優先的には、酸素を除去しながらオゾンを残す。このわずかな昇温で、脱ガスした後、流体は、ついで、出発容器にリサイクルされる。
【０３９８】
プロセス全体は、所望される回数反復され得る。このプロセスにおいて、目的全体は、高濃度のオゾンを急速に達成することである。最適時間利用のために、流体の一部は、流体の残部がオゾンノズル部材中に存在しながら、脱ガス部材中に存在し得る。物質の一部はこのように連続的に処理され、それによりシステム全体の時間要求を減少させる。
【０３９９】
流体へのオゾン流量は、基板の下方表面に適用される圧力および通路の大きさと密度に依存する。上記のように、通路の大きさは、部分的には、流体に導入される泡の大きさを決定する。また上記のように、泡の大きさは重要である。臨界サイズより大きな泡は安定であり、極めて大きく成長するので、液体を逃れ出るが、一方、この臨界サイズより小さな泡は、不安定であり、超音波により溶液に取り戻されるからである。臨界サイズ限界は超音波の周波数に依存するので、臨界サイズ未満の全ての泡は、適切である。
【０４００】
したがって、流体に導入されるオゾンの量は、典型的には、基板の下方表面に適用されるオゾンの圧力を変化させることにより、および基板中の通路の大きさと密度の注意深い選択により制御され得る。典型的には、オゾンは、１から１０ｍｍ／ｓｅｃ、好ましくは１から５ｍｍ／ｓｅｃの流動速度で基板の下方表面に適用される。オゾン上の流動速度を限定する臨界要因は、オゾンが通路を出て行く後の出口圧力である。具体的には、デリケートなタンパク質および／または細胞への損傷を防止するために、無視し得る残留圧力とともに１ｃｍ／ｓｅｃ未満台のガスがゆっくり動くことが望ましい。たとえば、それぞれ７５ミクロン直径の４００ホールを通す上記オゾン発生装置の出力を通過させることは、約０．６ｃｍ／ｓｅｃの最大速度をもたらす。実際には、流動速度は、所望のように、圧力損失によりはるかに遅くなる。上記のように分布した平方ｃｍ当り１００ホールを用いると、４ｃｍ2 の全表面積を生み出す。
【０４０１】
１つの特に好ましい下位の態様において、基板は、ｖ字形トラフの一部であり、一方の「ｖ」の「脚部」は他方より高い。高い「脚部」の内表面は上記基板の上方表面に対応し、高い「脚部」の外表面は、上記基板の下方表面に対応する。流体は、高い「脚部」の内表面（基板の上方表面）を流下し、そこでは流体は、底部に、次いで短い「脚部」上のオゾンと有効に接触する。
【０４０２】
もう１つの特に好ましい下位の態様において、基板は、ほぼＵ字形を有する中空の装置の一部を形成する。この好ましい下位の態様において、流体は、入口から流れる（好ましくは脱ガス後、そしてさらにより好ましくはＵＶ、ガンマ線および／またはｘ線照射後）。１つの態様において、中空「Ｕ」字の外側部材は、基板に対応し、その内側表面は基板の上方表面に対応し、一方、その外側表面は基板の下方表面に対応する。もう１つの態様において、中空「Ｕ」字の内部と外部の両方の部材は基板の対応し、内表面両方は基板の上方表面に対応し、外表面両方は基板の下方表面に対応する。
【０４０３】
ＸＸＶＩ．第２６の主たる態様において、本発明は、
（１’）前記流体を収容するための手段、
（２’）前記流体を真空と接触させるための手段、
（３’）前記流体を収容するための前記手段に超音波エネルギーを導入するための手段、および
（４’）オゾンを発生させるための手段
を備え、
前記流体を収容するための前記手段は、（ｉ）前記オゾンを発生させるための手段から前記収容手段にオゾンを導入するための手段、（ｉｉ）前記収容手段に前記流体を導入するための手段、および（ｉｉｉ）前記オゾンを発生させるための手段からの前記オゾンを前記収容手段中の前記流体と混合するための手段を含む
流体を除染するための装置を提供する。
【０４０４】
この第２６の主たる態様において、「前記流体を収容するための手段」とは、第２５の主たる態様のコンテキストにおいて上記される「流体を収容するためのチャンバ」と同じであり得る。「前記流体を真空と接触させるための手段」とは、第２５の主たる態様のコンテキストにおいて、上記される「チャンバに結合する真空源」と同じであり得る。「前記流体を収容するための前記手段に超音波エネルギーを導入するための手段」とは、第２５の主たる態様のコンテキストにおいて上記される「そのようなチャンバに結合する超音波エネルギー源」と同じであり得る。および「オゾンを発生させるための手段」とは、第２５の主たる態様のコンテキストにおいて上記される「オゾン源」と同じであり得る。さらに、「（ｉ）前記収容手段にオゾンを発生させるための前記手段由来のオゾンを導入するための手段」および「（ｉｉｉ）オゾンを発生させるための前記手段由来の前記オゾンを前記収容手段中の前記流体と混合するための手段」はともに、第２５の主たる態様のコンテキストで上述されるオゾンコンタクターのいずれかを形成し得る。
【０４０５】
ＸＸＶＩＩ．第２７の主たる態様において、本発明は、
（１）流体を収容するためのチャンバ、
（２）チャンバに結合する真空源、
（３）そのようなチャンバに結合する超音波エネルギー源、
（４）ＵＶ、ガンマ線、またはｘ線照射源、および
（５）オゾン源
を備え、
前記チャンバは、（ｉ）オゾン源からのオゾンを導入するための入口、（ｉｉ）流体を導入するための入口、（ｉｉｉ）オゾン源からのオゾンを流体と混合するためのデバイスを備える
流体を除染するための装置を提供する。
【０４０６】
この第２７の主たる態様において、（１）「流体を収容するためのチャンバ」、（２）「チャンバに結合する真空源」、（３）「ＵＶ、ガンマ線、またはｘ線照射源」、（４）「そのようなチャンバに結合する超音波エネルギー源」、および（５）「オゾン源」は、第２１、第２３、および第２５の主たる態様において上述される対応する要素のいずれかであり得る。さらに、「オゾン源からのオゾンを流体と混合するためのデバイス」は、第２５の主たる態様のコンテキストにおいて上述されるオゾンコンタクターのいずれかであり得る。
【０４０７】
したがって、第２７の主たる態様の装置は、流体がまず脱ガスされ、ついでＵＶ、ガンマ線またはｘ線照射に暴露され、ついでオゾンで処理される、すなわち、第１７から第２０の主たる態様の方法のプロセスを実施するために設計されている。
【０４０８】
ＸＸＶＩＩＩ．  第２８の主たる態様において、本発明は、
（１’）前記流体を収容するための手段、
（２’）前記流体を真空と接触させるための手段、
（３’）前記流体を収容するための前記手段に超音波エネルギーを導入するための手段、
（４’）ＵＶ、ガンマ線、ｘ線照射により前記流体を処理するための手段、および
（５’）オゾンを発生させるための手段
を備え、
前記流体を収容するための前記手段は、（ｉ）オゾンを発生させるための前記手段から前記収容するための手段にオゾンを導入するための手段、（ｉｉ）前記収容するための手段に前記流体を導入するための手段、（ｉｉｉ）オゾンを発生させるための前記手段からの前記オゾンを収容するための前記手段中の前記流体と混合するための手段を備える、
流体を除染するための装置を提供する。
【０４０９】
この第２８の主たる態様において、「前記流体を収容するための手段」とは、第２１、第２３、第２５、および第２７の主たる態様のコンテキストにおいて上記された「流体を収容するためのチャンバ」と同じであり得る。「前記流体を真空と接触させるための手段」とは、第２１、第２３、第２５、および第２７の主たる態様のコンテキストにおいて上記される「チャンバに結合した真空源」と同じであり得る。「前記流体を収容するための前記手段に超音波エネルギーを導入するための手段」とは、第２１、第２３、第２５、および第２７の主たる態様のコンテキストにおいて上記される「そのようなチャンバに結合する超音波エネルギー源」と同じであり得る。「ＵＶ、ガンマ線、またはｘ線照射により前記流体を処理するための手段」とは、第７の主たる態様のコンテキストにおいて上記される「ＵＶ、ガンマ線、またはｘ線照射源」と同じであり得る。「オゾンを発生させるための手段」とは、第２５および第２７の主たる態様のコンテキストにおいて上記される「オゾン源」と同じであり得る。さらに、「（ｉ）収容するための前記手段にオゾンを発生させるための前記手段からのオゾンを導入するための手段」および「（ｉｉｉ）オゾンを発生させるための前記手段からの前記オゾンを前記収容するための手段内の前記流体と混合するための手段」は、ともに、上記コンタクターのいずれかを形成し得る。
【０４１０】
ＸＸＩＸ．  第２９の主たる態様において、本発明は、
（１）下方表面と上方表面を有し、前記下方表面を前記上方表面と接続する複数の通路を有する基板、
（２）超音波エネルギーが前記基板の振動により液体に導入されるように前記基板に結合する超音波エネルギー源、
（３）前記基板の前記下方表面に接続されるオゾン源
を備えるオゾンを液体と接触させるための装置を提供する。
この第２９の主たる態様は、以下に詳細に記載される図８に示されるコンタクターに実質的に対応する。
【０４１１】
オゾンコンタクターの背後の基本原理もまた、液体に他のガスを加えるために適用され得るであろう。具体的には、背後の原理は、液体をまず脱ガスし、次いで、音波補助コンタクターを用いて直後に所望のガスを加えることである。最後に、反応生成物および／または所望でない種を除去するための部分的脱ガスが、そのときなされるべきである。
【０４１２】
もちろん、最も一般的な適用する液体は水であるが、しかし、これは、水溶液または他の液体を含むことも意図し得るであろう。ガスは、オゾンから、一酸化炭素または二酸化炭素、様々の窒素化合物などまで全てを含み得るであろう。そのようにして、最終生成物は、滅菌用のなにものかである必要はないであろうけれども、しかしかわりに、化学産業のための様々の供給原料を含み得るであろう。
【０４１３】
ＸＸＸ．第３０の主たる態様において、本発明は、
（１）回動自在のチャンバ、
（２）前記チャンバに接続される超音波エネルギー源、および
（３）前記チャンバに結合する超音波エネルギー源
を備え、
前記チャンバは流体入口を備え、
前記チャンバは、第１の側壁と第２の側壁を備え、前記第１と第２の側壁は互いに対向するように位置し、
前記チャンバはさらに、複数の隔壁を備え、前記隔壁は交互配置で前記第１と第２の側壁に付着し、前記複数の隔壁が複数の棚を形成するように、前記第１の側壁に付着するそれぞれの隔壁は、前記第２の側壁に向かって突き出し、前記第２の側壁に付着するそれぞれの隔壁は、前記第１の側壁に向かって突き出し、
前記入口を通って前記チャンバに入る流体は第１の棚を占めるように前記入口が前記チャンバ内に位置し、
前記チャンバの９０から９０°の回転について、前記第１の棚を占める流体が第２の棚に流れるように前記チャンバが回転することが可能であり、
前記ガス源が、ガスと前記チャンバ内の流体との混合を許容するように前記チャンバに接続され、そして、
前記超音波エネルギー源が、前記少なくとも１つの隔壁により形成される棚を占める流体に超音波エネルギーの適用を可能とするように、前記隔壁の少なくとも１つに結合する、
ガス、例えばオゾンと流体を接触させるための装置を提供する。
【０４１４】
この第３０主たる態様の装置は、図１１に描写され、以下に記載されるものに対応する。この第３０の主たる態様のコンタクターおよびその使用および操作は、オゾンを血小板を含む流体と接触させるために特に有用であり、図１１の記載と合せて詳細に記載される。しかしながら、チャンバのために用いられる材料、オゾン源、超音波エネルギー源に関連する論述は、この第３０の主たる態様に適用されることに注意すべきである。
【０４１５】
もちろん、上記開示された方法および装置で記載された全ての工程および／または部材は、コンピューター制御により実施、または操作され得ることが理解されるべきである。そのようなコンピューター制御は、問題の可能性およびリスクおよび／またはヒトの誤認に由来する操作不良を実質的に減少させる。
【０４１６】
ＸＸＸＩ．  図面：
本発明の様々の他の目的、特徴、および付随する利点は、それが同様の参照文字が同様のものを示し、またはいくつかの図に渡って部分を対応させる添付の図面と結びついて考慮されるとき以下のより詳細な記載からよりよく理解されるようになることがより完全に理解されるであろう。
【０４１７】
図１は、特に好ましい第１５から第１８の主たる態様の方法の模式的フローチャートである。図１に示される第１の工程において、流体は、温度調節工程に供される。第２の工程において、流体は、超音波エネルギーの適用により脱ガスされる。図１に示される第３の工程において、脱ガスされた流体は、照射される。図１に示される第４の工程において、照射された流体は、オゾンで処理される。
【０４１８】
それらの工程は、漸進的に示されているけれども、このことは、その技術が１度に１つの機能のみを実施しなければならないと言うことは意味しない。この点で、プロセスの第１工程（血漿バッグ全体の加熱）は、１時間以上を必要とし得ることに注意すべきである。同様に、脱ガスおよびＵＶ暴露は半時間ほどかかりうるし、一方、オゾン暴露は、同様の時間がかかり得るものであり、多数回のサイクルが用いられるならば、もっと時間がかかる。それらの別々のサイクルの間機械全体を従事させることを回避するために、臨床ユニットは、同時に暖められる２以上のバッグを有するであろう。それらのバッグの１つが熱処理の完了に達したとき、脱ガスなどされ、一方、他のバッグは、熱処理を続けられる。同様に、プロセスの終わりに、いくつかの異なるバッグがオゾン暴露に供され得るが、一方、他のユニットは、加熱され、脱ガスなどされる。結果として、ユニットは、投資に対する最大の回収のために常に処理を続けている。
【０４１９】
図２は、第３および第４の主たる態様で実施されるとき、超音波脱ガスのために有用である好ましい装置を示す。図２に示される装置を用いるとき、流体は、入口２２を通して柔軟な使い捨てバッグ２１であるチャンバに入り、最終的には、排出ポート２３を通って出て行く。使い捨てバッグは真空チャンバ２４の内部に受容されており、それは、超音波エネルギーが流体に導入されるように水冷の超音波ドライバー２５を備えている。柔軟性の使い捨てバッグ２１は、チャンバ真空ポート２６を介してバッグの外側に適用される真空により、固定された真空チャンバ壁に係合したファスナーにより膨張した形態で維持される。真空は、バッグ真空ポート２７を介してバッグの内側の流体に適用される。真空チャンバ２４はまた、流量および超音波エネルギーの導入による加熱が監視され、制御されるように、温度センサー２８および質量センサー２９も備える。
【０４２０】
図３は、第２１と第２２の主たる態様に対応する本発明の好ましい装置を示す。図３に示される態様において、流体は、出発血漿バッグ３１から入口３３を通ってメインチャンバ３４に導入される。流体の供給速度は、ポンプ３２により制御され得る。流体は下から音波を当てられる。と言うのは、それはメインチャンバ３４の平面セクションを超えて流れるからである。超音波エネルギーは超音波ドライバー３５により提供され、超音波ドライバーは共鳴板３６を介して流体に結合している。流体の温度は、ウォータージャケット３７により制御され得る。音波照射の間、酸素を含む溶存ガスは流体から放出され得るものであり、次いで、プラスチックのハウジングの中に捕捉される。このハウジングおよび平面セクションは密封されているユニットであり、したがって、外部の空気が系に流入することを防止する。発生するガスは、次いで、真空ポンプ３８により捕獲される。安全性のために、真空ラインは、病原が真空ポンプを汚染することを防止するために、滅菌カップリングおよびフィルタートラップ３９を含み得る。次いで、除染された流体は、採集バッグ３１１の中に集められる。
【０４２１】
図４は、第２１と第２２の主たる態様に対応する本発明のもう１つの好ましい装置を示す。図４は、流体、特に血漿が、ＵＶＣ照射または続くオゾン処理の適用なしに超音波エネルギーの適用により除染される方法における使用のために設計された除染系４０を示す。血漿は、左の血漿バッグ４１または他の供給源から系に入り、血漿の流量は、蠕動ポンプ４２により制御される。次いで血漿流は発散スプレッダ４３を交差し、このようにしてチャンバ４４の底部のフラットパネル上の血漿の薄膜の均一なプラグ流れを生み出す。
【０４２２】
超音波エネルギーは、超音波ドライバー４５により血漿に適用され、超音波ドライバーは、共鳴板４６を介してチャンバ４４の底部でフラットパネルに結合する。したがって、血漿がフラットパネル上を流れるとき、それは下から音波を当てられる。音波照射は、効率的なエネルギー移動のために共鳴結合する金属板４６上で作用する超音波ドライバー４５によりなされる。
【０４２３】
フラットパネル上を流れる血漿の温度は、ウォータージャケット４７により制御される。共鳴板４６とフラットパネルとの間のウォータージャケット４７は、超音波ドライバー４５由来の熱が血漿に達することを防止する。水は、極めて良好な音響伝達媒体であり、超音波の損失は、したがって有意ではない。
【０４２４】
チャンバ４４内の血漿上のガスおよび血漿への音波エネルギーの適用の間の血漿から発生するガス（特に酸素）は、真空ポンプ４８によりチャンバ４４から除去される。チャンバ４４は密封されたユニットであり、したがって、外部の空気が系に引き込まれることを防止する。安全性のために、真空ラインは、病原が真空ポンプに入り、真空ポンプを汚染することを防止するように無菌結合とフィルタートラップ４９を含む。
【０４２５】
血漿が脱酸素された後、それから血漿は、除染のために照射源４１０（この場合にはＵＶ光）の下を通過する。ウォータージャケット４７は、ＵＶ光４１０による血漿の過熱を防止するためにこの部分の下に延びていることに注意されたい。図４において、超音波ドライバー４５は、また、血漿がＵＶ光４１０の下を通過するセクションの下にも延びる。このセクションの下の超音波ドライバー４５の延長は、ＵＶ暴露の間の血漿の改善された混合ならびに凝集物の分散により高められた除染を提供する。別の配列において、超音波発生装置は、血漿がＵＶ光４１０の下を通過する領域の下には延びない。しかしながら、超音波発生装置が、血漿がＵＶ光４１０の下を通過する領域の下に延びないときでさえ、ウォータージャケット４７は、血漿がＵＶ光４１０の下を通過する領域の下に延びることが好ましい。
【０４２６】
このセクションにおけるＵＶ（またはガンマ線またはｘ線）暴露の後、この場合流れは、除染された製品のための採集容器すなわちバッグ４１２に接続されたチューブに導く収束ゾーン（出口）４１１に入る。任意に、流れは、任意の蠕動ポンプとそれに継ぐ採集バッグ４１２に通過するチューブに導く収束ゾーンを通過し得る。
【０４２７】
プロセス全体は冷蔵の下で実施され得るし、装置４０全体または出発血漿バッグ４１、チャンバ４４、および採集バッグ４１２の少なくとも１以上は、１以上の冷蔵ユニット内に収容され得る。
【０４２８】
図４において装置４０は、完全に恒久的または半恒久的ユニットとして構築され得るし、出発血漿バッグおよび採集血漿バッグのみが使い捨てまたは消耗性サブユニットであり得る。代わりに、および好ましくは、図４の装置４０は、恒久的または半恒久的サブユニットおよび使い捨てまたは消耗性サブユニットとして構築され得る。図４の装置４０のコンテキストにおいて、ポンプ４２、超音波ドライバー４５、共鳴板４６、ウォータージャケット４７および真空ポンプ４８は、恒久的または半恒久的サブユニットの部分であり得、一方、出発プラズマバッグ４１、入口４３、チャンバ４４、出口４１１および採集バッグ４１２は、１以上の使い捨てまたは消耗性ユニットの部分であり得る。フィルタートラップ４９を含む真空ラインは、恒久的もしくは半恒久的サブユニットまたは使い捨てもしくは消耗性サブユニットのいずれかの部分であり得る。
【０４２９】
上記のように、採集バッグを除く使い捨てまたは消耗性ユニットは、好ましくは廉価なプラスチックからブロー成形されうるが、一方、通常の血漿バッグを使用することが好ましく、本発明の装置の使い捨て部分は、焼却し得るように金属部分を有するべきではない。
【０４３０】
チャンバが使い捨てまたは消耗性ユニットの部分であるとき、チャンバ壁は、ランプの下で直接のＵＶ伝達のための小さなウインドウのみを有して非常に薄く、および／または柔軟性のある材料で作られ得る。言い換えれば、使い捨てチャンバは、チャンバを受け入れるように設計されている領域のためのバッグまたはライナーであり得る。チャンバがバッグまたは柔軟なライナーであるとき、それは、差圧のもとで要求される寸法にライナーを引き出すためにわずかな真空を適用することにより所望の形態を保持するかまたはチャンバを受け入れるように設計されている領域の形態に合致するように作られ得るものであり、したがって、チャンバとして極めて廉価な処理バッグの使用を可能とする。加えて強調しておくことは、ＵＶ、ガンマ線またはｘ線照射の第２の照射源により流体層の両側からの暴露を可能とするバッグの底部におけるもう１つのウインドウの存在である。
【０４３１】
もう１つの好ましい態様において、チャンバとして用いられる使い捨てバッグは、さらに、真空処理の間バッグの内側と外側の圧力を平衡させるためにバッグの一方の末端にウイルス侵入防止フィルターを備える。このＦＤＡが認可した部材はまた、チャンバを受け入れるように設計された領域の内側でバッグの容易な設置も可能とする。もう１つの好ましい態様において、チャンバとして用いられる使い捨てバッグは、さらに、真空の適用の間チューブが崩壊することを防止するために入口チューブおよび出口チューブにグロメットを備える。
【０４３２】
もう１つの好ましい態様において、チャンバは、粗面化された内表面を有する。粗面化された内表面は、発生した気泡がバッグライナー上の局所スパイクまで上昇することを許容する。それらの点から、超音波振動は、泡を比較的容易に駆逐し得る。比較のために、平滑なバッグ表面の一方の側に沿って平坦化された泡は、攪拌してさえ、除去するのがより困難である。
【０４３３】
この装置は、さらに、電気遮蔽装置、飛散防止ガード、および特に市販の超音波遮蔽包囲装置を含むある種の安全性に関する特徴も含む。
【０４３４】
図４に示される態様において、血漿は、下から音波を当てられる。と言うのは、それは、メインチャンバ４４の底部の平坦セクション上を流れるからである。したがって、音波照射の間、酸素を含む溶存ガスが、血漿から放出され、次いで、プラスチックのハウジングに捉えられる。このハウジングおよび平坦セクションは、密封されたユニットであり、したがって、外部の空気が系に引き込まれることを防止する。次いで発生したガスは真空ポンプにより捕捉される。安全性のために、真空ラインは、病原が真空ポンプを汚染することを防止するために無菌カップリングおよびフィルタートラップを含む。
【０４３５】
図４に示される装置のある種の部材ならびに図４に示されないある種の任意部材が、これからより詳細に論述される。
【０４３６】
１．入力容器４１。それらの部材の第１は、単に、脱ガスユニットからの出力を受け入れるためのバッグである。厳格な温度制御を要求するそれらの材料のために、この容器は、熱交換器を組み込んでいる。血小板のような極端な場合には、この容器には、脱ガスユニットへの入口のために記載されている加熱／冷却パックが先行している。しかしながら、熱伝達能力があってもなくても、容器の主要機能は、単純に、系の残り全体に重力による流れのための均一な圧力頭を提供することである。それ自体、容器は広く浅いので、それゆえ、充満した容器とほとんど空の容器との間には比較的わずかな圧力差しか存在しない。
【０４３７】
２．ＵＶＣランプ、４１０。高速で徹底的な処理を達成するために、高強度ＵＶランプが必要である。いくつかのそのようなＵＶＣ源が、近年販売されている（スペクトロニクス・コーポレーション、ウエストバリー、ニューヨーク州、およびＵＶＩテック、ケンブリッジ、イギリス）。不運にも、それらのランプもまた多量の熱を生み出し、そのような加熱は、タンパク質損傷を回避するために消去されねばならない。この消去を得る１つの手段は、単純に、ＵＶ源を横切るように空気を吹き込むことであり、このことは、実際、真空条件の代わりに大気圧条件でＵＶ暴露を実施することについての理由の１つである。第２の考慮事項は、セルは、常にランプに暴露されている必要はないということである。例えば、もし脱ガスユニットからの流体のバッチに遅延が存在するならば、ランプにセルの内容物を暴露することは過剰なＵＶ暴露をもたらすであろう。そのような時間の間のタンパク質損傷を回避するために、光線経路は遮断されねばならない。実際にこの遮断を達成するいくつかの可能な方法が存在する。１つのオプションは、単純にＵＶランプを消灯することである。このアプローチは非常に単純であり、ランプがすぐに再点灯され得る場合には好ましい。しかしながら、比較的長いウォーミング時間を必要とするランプについては、出力周期は任意事項ではない。この場合には、セルは、光線経路から引き離され得るが、しかし、セルが多数の設置物、チューブなどに付着している用途のためにはこのことは困難である。しかしながら、必要なときに光を遮断するために、光源と流れのセルとの間にシャッター配置をすることは好ましいアプローチである。
【０４３８】
加えて、また、試料の直接照射加熱の問題も存在する。この場合には、流入照射は、流れのセルの壁を通して容易に散逸しない液体中の熱を発生させる。正味の結果は、本質的には温室効果であり、これは、赤血球が光学的に濃密で赤色であるために赤血球にとっては特別の問題である。この熱が顕著な問題である場合については、流れのセルは、処理される材料の周りの冷却水または他の熱交換液体の薄層を含むように変更されるが、別々のチャンネルに拘束される。最後に、ランプの損傷または故意でない漏れからの防御のために、ランプは、薄いＵＶ透明シールドにより流れのセルから分離されていなければならない。
【０４３９】
３．出力ポンプ。ＵＶ処理チャンバの末端で、接続ホースは、採集バッグ４１２よりもむしろオゾン暴露ユニットに導き得る。この場合には、本質的な問題は、オゾンユニットは、典型的には、ＵＶユニット内に存在する大気圧よりはるかに大きな圧力で作動するということである。したがって、この圧力差を取り扱うために、いくつかの手段が作られなければならない。真空脱ガスユニットからＵＶユニットへの移行について先に記載されたように、２つの代替的アプローチは、圧力ロックチャンバまたは蠕動ポンプである。やはり、それぞれが前述した利点と欠点を有する。
【０４４０】
４．監視装置。監視については、本質的な問題は、ＵＶ系は、「ソラリゼーション」と呼ばれるプロセスにおいて時間経過とともに劣化する傾向があると言うことである。実施におけるこの損失を補うために、いくつかのＵＶ製造者（例えば、ニューヨーク州ウエストバリーのスペクトロニクス・コーポレーションのスペクトロライン部門）は、自動監視および補正システムを開発した。それらのユニットは、実際のＵＶ発光をモニターし、ついで、それにより暴露時間を調節する。基板上への架橋ＵＶ感受性試薬についてはもとから開発されてきたけれども、この技術は、ここで、直接転用可能である。
【０４４１】
５．流動の調節。残りの問題は、系を通しての流れを制御することである。ここでの最も重要な配慮は、液体は、有効な処理のために十分に長く光に暴露されねばならないが、しかし、過剰なタンパク質損傷に導くほど長くてはならないと言うことである。ここでのアプローチは、流動制限、脈動流、質量測定などを用いて脱ガスユニットへの入口について記載されたように流れを制御することである。ここでの本質的な考慮事項は、脱ガスユニットからの出力の全てを連続的に処理するのに十分に高速なＵＶ暴露ユニットの作動を維持することである。この点で、容器は、たとえ１つのユニットから次のユニットまで粘度の実質的変化が存在し得るとしても、全ての液体を急速に通過させるのに十分な水頭を維持しなければならない。このことはほとんどの場合に保たれるけれども、必要であれば、制御ループは、脱ガスユニットへの流れを終止させるためにもまた組み込まれる。
【０４４２】
系の操作：系全体の操作は、上記部材の記述に多かれ少なかれ従う。基本的には、脱ガスユニットからの流体は、供給容器に入る。次いで、重力の下で、流体は、流量を制御するために弁システムを通って流れる。次に、流体は、水と空気流により冷却されるＵＶチャンバに入る。流れが止まるとき、ランプとフローチャンバとの間のシャッターが光をさえぎる。次いで、処理後、流体は、オゾン暴露ユニットにポンプでくみ出され、もしオゾンが用いられないならば、採集バッグにくみ出される。
【０４４３】
オゾン暴露モジュールを含むユニットの残りのように、出発プロセスの第１工程は、真空ポンプにより流体の経路を真空にすることである。このことは、流体により吸収され得る系の中の酸素が存在しないし、したがって、ＵＶ暴露の間に酸素ラジカルを生成しないことを保証するために必要である。
【０４４４】
閉ざしてしまうことについては、最少量の流体のみが後に残されるように脱ガスユニットについて記載されたように、暴露チャンバは傾けられるべきである。この努力のための理由は、流体は極めて高価であり、したがって可能な限り集められねばならないと言うことである。さらに、残留物体は単純にバイオハザードであり、したがって、廃棄の問題を提起する。
【０４４５】
上記のように、ＵＶＣ照明は、両側からなされることが好ましい。これは、はるかにより均一な暴露を提供する。特に、この均一性は、赤血球処理を可能とする。さもなければ、ヘモグロビンによる強力な吸収は適切な処理を妨げる。この場合には、両側暴露を用いると、１０から４０ミクロン台、より好ましくは３０〜４０ミクロンの範囲の流動層の使用が可能となる。この厚さでは、強度の変動は、高いヘマトクリット試料についてさえ、１０％未満である。それらの寸法は、長さにして約１０ミクロンである赤血球の大きさに基づいていることに注意されたい。非常に正確であるけれども、要求されるレベルの機械使用は、カリフォルニア州ランチョ・クカモンガのミンドラム・プレシジョンＩｎｃ．のような特殊な会社からしか入手可能でない。この会社は、そのＵＶ流動セルについて約０．５ミクロンの平坦さのトレランスを特定する。
【０４４６】
赤血球を有効に処理するために、照明機器は、均一な混合を促進し、プラグ流れを確保するために低強度で音波照射されねばならない。照明機器の音波照射は、血漿タンパク質の凝集を防止するためにすでに言及されたことに注意すべきである。
【０４４７】
容易な操作のために、柔軟なバッグが処理装置に適合する硬質の枠上に設置されることが好ましい。この枠は、再使用されるかまたは廃棄されるかいずれかであり得る。そのような枠を使用してもしなくても、バッグは、その境界部に位置決め用の孔を有して製造されるべきである。もちろん、枠および／または処理装置は、それらの孔のための付着ピンを有さなければならない。この配置は、処理装置内にバッグを調整するための容易な方法を提供し、また、オペレーターによる過失の調節失敗を防ぐ役割もする。
【０４４８】
特に赤血球処理について必要な確度を達成するために、枠および／またはバッグアセンブリは、石英製の流動セルの内側の環状部内に設置されねばならない。したがって、石英それ自体が、流体が処理ゾーンに入って後、硬質の支持体を提供する。したがってまた、石英表面は、境界部で直接接触し、それにより厳格なトレランスを確保する。接触プロセスの間の過剰な圧力を回避するために、接触の際に圧縮するゴム支持体上に対向するパネルが設置される。それゆえ、音波照射は、音波を過剰に減衰させるこの配置の下でパネルに直接適用されねばならないことに注意されたい。
【０４４９】
最後の問題は、系の流れを制御することである。好ましい形態では、供与試料のすべてが１工程で照射される（例えば、血漿または血小板）。この場合には、脱ガスされる液体の全てが、１回の操作で暴露チャンバの頂部上に注がれる。次いでランプが点灯する。処理が終わった後、全ての液体が排出される。ここでの唯一の問題は、チューブの出口のクランプは、処理体積を遮光してはならないということである。これは、クランプ本体を越えて鋭く延びる、クランプに対する突起を設計することにより回避され得る。テフロン（登録商標）ＡＦまたは石英のようなＵＶＣ透明材料でこの突起を構築すると、いずれの残留陰影効果もなくなる。
【０４５０】
図５は、もう１つの好ましい装置を示し、それは、第２５と第２６の主たる態様の装置に対応し、第１３から第１６の主たる態様の方法を実施するのに有用である。図５において、流体、例示されている場合には血漿は、血漿バッグ５１からポンプ５２を介して血漿が混合チップ／スプレーノズル５５内でオゾンと混合されるオゾン化ユニットに入る。オゾンは、フィルタートラップ５６を通過して、オゾン発生装置５３から混合チップ／スプレーノズル５５に入る。流体およびオゾンは、混合チップ／スプレーノズル５５の中で混合され、スプレーまたはミストとして反応容器５７に入る。流体は、反応容器５７の底部で、充填ライン５１１に集まる。超音波エネルギーは、超音波ドライバー５８を介して反応容器５７の底部で流体に適用され、ウォータージャケット５１０は、加熱の程度を制御するために反応容器５７の底部と超音波ドライバー５８との間に配置される。処理が完了するとき、流体は、反応容器５７からラインを介して採集バッグ５１２に排出される。
【０４５１】
血漿を除染するための本発明の装置のこの好ましい態様の使用は、これから、図５を参照してより詳細に記載される。図５は、血漿が右側の血漿バッグ５１または他の供給源から系に入り、流れが蠕動ポンプ５２により制御される除染系５０を示す。次いで、通常の発生装置５３由来のオゾンは、接続管５４を通って、混合チップ／スプレーノズルアセンブリ５５に通過する。光暴露ラインにおける真空ラインのように、オゾン供給管は、フィルター５６を通過し、オゾン発生装置５３の不注意による汚染を防止するために滅菌カップリングを横切って捕捉される。オゾンと血漿を混合した後、それから生成物は、反応容器５７の中に集められる。光暴露ユニットの中の処理装置のトレーのように、この容器は、共鳴板５９に結合する超音波ドライバー５８上に存在し、流水式水冷ジャケット５１０により反応容器５７から分離されている。音波照射の後、それから、生成物は、採集容器に排出される。
【０４５２】
図５の装置５０は、完全な恒久的または半恒久的ユニットとして構築され得るものであり、出発血漿バッグおよび採集血漿バッグのみが使い捨てまたは消耗性サブユニットである。代わりに、そして好ましくは、図５の装置５０は、恒久的または半恒久的サブユニットおよび使い捨てまたは消耗性サブユニットとして構築される。図５の装置５０のコンテキストにおいて、ポンプ５２、オゾン発生装置５３、超音波ドライバー５８、共鳴板５９、およびウォータージャケット５１０は、恒久的または半恒久的サブユニットの部分であり得、一方、出発血漿バッグ５１、反応容器５７、および採集バッグ５１２は、１以上の使い捨てまたは消耗性ユニットの部分であり得る。フィルタートラップ５６および混合チップ／スプレーノズル５５を含むオゾンライン５４は、それぞれ、恒久的もしくは半恒久的サブユニットまたは使い捨てもしくは消耗性サブユニットのいずれかの部分であり得る。
【０４５３】
もう１つの好ましい態様において、チャンバとして用いられる使い捨てバッグは、さらに、真空処理の間にバッグの内側と外側の圧力を平衡させるためにバッグの一方の末端にウイルスの侵入しないフィルターを備える。このＦＤＡに認可された部材はまた、チャンバを受け入れるように設計された領域の内側のバッグの容易な設置も可能とする。もう１つの好ましい態様において、チャンバとして用いられる使い捨てバッグはさらに、真空の適用の間、チューブが崩壊することを免れるように入口チューブおよび出口チューブにグロメットを備える。
【０４５４】
もう１つの好ましい態様において、チャンバは、粗面化された内表面を有する。粗面化された内表面は、発生した気泡がバッグライナー上の局所的スパイクまで上昇することを許容する。それらの点から、超音波振動は、比較的容易に泡を駆逐し得る。比較として、平滑なバッグ表面の一方の側に沿って平坦化された泡は、攪拌してさえ、除去するのがより困難である。
【０４５５】
現在の使い捨て製品の大きな出費項目は、オゾンが汚染物質と緊密に接触し得る薄層またはスプレーを作り出すために必要とされる装備である。超音波は、この問題にいくつかの代替案を提供し、主たる利益は、混合プロセスそれ自体にある。それらの効果の基準は、超音波が液体の特性を変える能力である。もしアプリケーターホーンが液体に深く浸漬されていないならば、１つのそのような効果は、超音波がガスを液体の表面に混合する傾向である。もたらされる貧弱なカップリングは、キャビテーションの減少を引き起こすので、通常の超音波装置のそのような操作は回避されるべきである（高強度超音波処理装置の使用者案内、ソニックス＆マテリアルズ社、コネチカット州、１９９９年）。
【０４５６】
しかしながら、キャビテーションの減少とガスの捕捉は、まさにこのプロジェクトについて必要とされることである。それゆえ、それらのプロセスを促進するために、オゾンと血漿は、プラスチック製伸長装置が血漿表面のすぐ上に配置される混合チャンバ内にともにもたらされる。音波照射されるとき、そのとき、この伸長装置は、血漿の内外で振動し、したがって、秒当り２０，０００回小さなオゾンポケットを捕捉する。
【０４５７】
この微細に分割された混合物を形成した後、次の工程は、スプレーシステム、すなわち現存するオゾン技術の「ネビュライザー」に概念上類似している。しかしながら、それらの通常のシステムが有する問題は、それらは、血漿タンパク質についてあまりに大きな剪断を引き起こすと言うことである。代替案は、すでに部分的に混合された血漿とオゾンの混合物をスプレーするために超音波を使用することであり、このようにしてさらにより優れた混合をもたらす。基本的には、このプロセスは、この用途に特有ではない。様々の超音波ノズルが微細で柔軟なスプレーを生み出すために商業的に入手可能である。このプロセスのための唯一の変更は、ノズルとして延長された長さのプラスチックチューブを使用することであり、その末端は、音波照射の下で泡立たせるために波腹で自由端である。この単純な配置は市販のノズルほど有効ではないけれども、非常に廉価である。
【０４５８】
このように分散スプレーを開発したが、次の問題は、それを収容し、処理することである。その目標は、小さなプラスチック反応容器にスプレーを向けることにより合致し得る。次いで、スプレーはプールに蓄積し、そのプールは液体に体積に融合する。低強度で音波照射されるとき、超音波の高められた拡散効果と小さくなる粘性効果に助けられて、オゾン気泡は分散する。
【０４５９】
次いで、より強力な超音波の短時間の激発が反応容器に適用される。このときある程度のラジカル生成が存在するが、しかし、これは、砂時計状の形態の反応容器を用いることにより最小化されうるものであり、このようにして、中間点での充填ラインまで漸進的により少なくなる表面積をもたらす。しかしながら、ラジカル形成よりはるかにより重要であるのは、オゾン反応速度の減少である。この速度は、処理速度全体について決定的であるのみならず、超音波が水溶液からのオゾンの除去についてきわめて有効であるためでもある。この急速なパージの背後の明白な機構は、部分的には増加した化学反応性により、部分的には単純な脱ガスによる。したがって、有効な除染は、オゾンが失われる前の急速なオゾンと病原の反応を要求する。
【０４６０】
そのようなユニットについての全配列は図５に示されている。光暴露ユニットについてなされたように、このプロセスの第１の工程は、血漿の流量を制御するために蠕動ポンプを用いることである。次いで、通常の発生装置由来のオゾンは、接続チューブを通って混合チップ／スプレーノズルアセンブリに通過する。光暴露ラインの真空ラインと同様、オゾン供給チューブは、オゾン発生装置の故意でない汚染を防止するために無菌カップリングを横切ってろ過され、捕捉される。次いで、オゾンと血漿を混合した後、生成物は、反応容器内に集められる。光暴露ユニットの処理装置トレーのように、この容器は、水冷パックにより分離されている超音波ドライバー上に設置されている。次いで、音波照射の後、生成物は採集容器に排出される。
【０４６１】
図６は、本発明のもう１つの好ましい装置の一部を描写し、それは、第２５から第２６の主たる態様に対応し、バッチ方式に対して連続式で第１３から第１６の主たる態様の方法を実施するために有用である。図６において、流体は、図示されていない先にある超音波脱ガスユニットから入り、任意のクーラー６１を通過し得る。次いで、流体は、処理アセンブリ６２の中で薄膜に形成され、そこで、薄膜は、１、好ましくは２の光源６３の間を通過する。次いで、流体は、オゾン処理またはパッケージ６４に向けて流れつづける。
【０４６２】
図７は、第１３から第１６の主たる態様の方法を実施するために有用である第２５から第２６の主たる態様の装置の好ましい態様を示す。図７の一部はまた、第２８の主たる態様のコンタクターの好ましい態様にも対応する。図７において、流体は、バッグ１、７１からオゾンコンタクター７２を通ってバッグ２，７３に通過する。バッグ１、７１は、流体が導入される充填およびドレンポート７４、およびバッグ１、７１から流体が出て行くことにより作り出されるボイドを充填するためにガスが導入され得るイコライザーポート７５を備える。バッグ１、７１は、酸素となる消費されたオゾンが新鮮なオゾンにより置換されるように部分的脱ガスを可能とするために真空チャンバ７６の中に維持される。真空チャンバに対する別のアプローチは、１５０ｐｓｉを超える極めて高い処理圧力を用いることである。この場合には、単純に圧力を周囲に解放することが過剰なガスが急速に発生することを引き起こす。高圧操作についてのさらなる強化は、圧力チャンバの内側の中実ブロックにより処理される流体バッグを取り囲むことである。このアプローチの下では、エアコンプレッサーは必要ではない。と言うのは、ブロックは、チャンバ内の利用可能な残留空間を満たし、それにより使い捨てバッグの過剰な膨張および続く破裂を防止するからである。流体がコンタクター７２を通過するとき、同時に、オゾンおよび超音波エネルギーに暴露される。オゾンは、オゾン入口７７を介してコンタクター７２に導入され、コンタクター７２の内表面（図示せず）の複数の通路を介して流体に導入され、一方、超音波エネルギーは、超音波ドライバー７８により駆動されるコンタクター７２の内表面の振動を介して流体に導入される。コンタクター７２を通過した後、流体は、入ってくる流体および流体を排出するためのドレンポート７１０により置換されるガスを通気するために通気ポート７９を備えるバッグ２、７３に入る。バッグ１とバッグ２の両方が設置リング７１１を備え得る。
【０４６３】
脱ガスについて上述されたような反復処理について、２つのオプションが存在する。１つのそのようなオプションは、１つの使い捨てバッグからもう１つに進行させることである。これは可能である限り好ましい。
【０４６４】
代わりに、バッグは再使用され得る。もちろん、そのような再使用は、残留汚染の問題を生じさせる。しかしながら、系の全ての部分が直接オゾンガス暴露に供され、したがって、連続的に清浄化されていることに注意されたい。具体的には、表面は、バルクで系を通過する液体より清浄である。と言うのは、バルクの流体が存在するとき、表面は多くとも薄い流体層により被覆され、それは、オゾン暴露により容易に処理されるからである。
【０４６５】
さらに、この再使用オプションを拡張することもまた可能である。具体的には、上述はまずＵＶ系を用い、続いて別のオゾン処理装置を用いる。これは、個々の構成要素を最も高速に解放するオプションである、すなわち、１つの供与されたユニットは、ＵＶに暴露され得るものであり、一方、第２のユニットは、オゾンで処理される。もう１つのアプローチは、やはり、サイクルの間にバッグを除染するために十分なオゾン流によりオゾンユニット内のＵＶユニットからの真空脱ガスバッグを再使用することである。
【０４６６】
同様に、単一のバッグが両方のプロセスについて十分であるように、ＵＶＣ透明材料からＵＶ脱ガスバッグを作ることもまた可能である。ここでの決定要因は、個々の部位が処理量または使い捨ての経費により関連するかどうかである。例えば、大きな大都市の血液採集センターは、最大処理量を採用するであろうし、一方、隔離された野戦病院または発展途上国の病院は、使い捨てのための必要を最小化するであろう。そのような考慮は、場所ごとでの分析でのみなされ得る。
【０４６７】
図８は、図７で示される装置のコンタクター部分の詳細な断面図である。図８のコンタクターは、３つの異なる流動野を形成する４つの異なる層で作られている。まず、上方および下方外層８１および８２のそれぞれが存在する。第２に、複数のチャンネル８５により穿孔されている上方および下方内層８３および８４のそれぞれが存在する。上方および下方内層は、第２７と２８の主たる態様のコンテキストにおいて上述されている基板に対応し、チャンネルは、第２７と２８の主たる態様のコンテキストにおいて上述されている通路に対応することに注意すべきである。上方外層および内層８１および８３により、ならびに下方外層および内層８２および８４により形成されるルーメン（ｌｕｍｅｎ）は、図７に描写されるオゾン入口７７に接続され、コンタクターを通してのオゾンの流れを可能にし、オゾン流動野８６と称される。上方内層および下方内層８３および８４により形成されるルーメンは、図７に描写されるバッグ１、７１のような流体の供給源に接続され、液体流動野８７と称される。流体が液体流動野８７を通って流れるとき、オゾンは、チャンネル８５を通る流体に導入される。同時に、超音波エネルギーは、上方および下方内表面８３および８４に結合する超音波発生装置（図示せず）により上方および下方内表面８３および８４の振動により流体に導入される。
【０４６８】
図９は、第１３から第１６の主たる態様の方法を実施するために有用である第２５および第２６の主たる態様の装置のもう１つの好ましい態様を示す。図９の一部はまた、第２９の主たる態様のコンタクターの好ましい態様にも対応する。図９において、流体は、バッグ１、９１からオゾンコンタクター９２を通って、バッグ２、９３に通過する。バッグ１、９１は、流体が導入され得る充填およびドレンポート９４およびバッグ１，９１から流体が出て行くことにより作り出されるボイドを充填するためにガスが導入されるイコライザーポート９５を備える。バッグ１、９１は、酸素になる消費されたオゾンが新鮮なオゾンにより置換されるように部分的な脱ガスを可能とするように真空チャンバ９６の中に維持される。流体がコンタクター９２を通過するとき、同時に、オゾンおよび超音波エネルギーに暴露される。オゾンは、オゾン入口（図示せず）を介してコンタクター９２に、そしてコンタクター９２の内表面（図示せず）内の複数の通路を介して流体に導入され、一方、超音波エネルギーは、超音波ドライバー（図示せず）により駆動されるコンタクター９２の内表面の振動を介して流体に導入される。コンタクター９２を通過した後、流体は、入ってくる流体により置換されるガスを通気するための通気ポート９９および流体を排出するためのドレンポート９１０を備えるバッグ２、９３に入る。バッグ１およびバッグ２の両方は、設置リング９１１を備え得る。バッグ１、９１からコンタクター９２を通って、バッグ２、９３までの流体の流れは、ポンプ９１２により補助される。
【０４６９】
図１０は、本発明の第２９の主たる態様によるオゾンコンタクターの好ましい態様の断面図を示す。図１０において、流体は、入口１００１から流体流動野１００２を通って出口１００３に流れる。オゾンは、オゾン入口１００４に入り、オゾン流動野１００５を通って流れ、流体流動野１００７を形成する壁の中の複数のチャンネル１００６を通って流体流動野１００２に導入される。過剰のオゾンは、出口１００８を通ってオゾン流動野１００５を出て行く。流体流動野１００７を形成する壁は、１以上の超音波ドライバー１００９に結合されることにより振動させられる。
【０４７０】
図１１は、特に血小板について有用であるもう１つのオゾンコンタクターの断面図を示す。図１１に示されるコンタクターにおいて、処理チャンバは、鋭い楔の形態の互い違いの対向する棚１１０２を有する長方形または同様の形態のブロック１１０１からなる。水平位置のチャンバについては、液体は、一方の側に沿ってトラフまたは入口ポート１１０３に入る。次いで、このトラフを満たして後、チャンバは、約８０度まで上方に回転し、その点で、流体は、対向する壁に向かって第１の棚１１０２ａ上を流れる。しかしながら、棚は対向する壁に実際には接触していないので、流体は、次の棚１１０２ｂに流下し、次いで、逆に流れる。その間に、オゾンはポート１１０４を通って導入される。この配列は上記引用された特許とは異なることに注意されたい。と言うのは、逆流はそれぞれの工程で物質を徹底的に混合し、頂部層がほとんど底部層となり、その逆も起こるからである。
【０４７１】
回転は、流体の全てが入口トラフから空になるまで続き、それは、約９０度で起こる。次いで、全配列はその元の位置に逆回転し、次いで、９０度まで反対方向からプロセスを反復させる。それらの動きの間、オゾンは処理チャンバの一方の側に連続的に供給され、消費されたガスは、反対側から除去される。したがって、チャンバの動きは、本質的に２つの反対側の半回転であるので、ガスの接続は、通常の柔軟なホースであり得る。それによりこの配置は、前述された連続回転ユニットについて要求されるコストを節約し、密封されたベアリングの設置問題などを解決する。
【０４７２】
前述の態様のすべてについて、最後の工程は、系を閉ざすことであり、製品を貯蔵することである。前述のように、小さなソレノイドが、可能な限り完全に非常に高価な製品を排出するように部材を傾けるために用いられ得る。このコンセプトはまた、スプレーノズルの「ｖ」字形の出口側を降下させるためにも拡張され得る。
【０４７３】
１つのアプローチは、最後のオゾン注入が通過して後製品を集めることである。これは、液体中に実質量のオゾンを残すことになるであろう。それは反応し、酸素に分解するので、この残留オゾンは、除染効果のわずかな増加を提供するであろう。また、得られる酸素は、赤血球および血小板に対して非常に有益であろう。
【０４７４】
逆に、もし製品が凍結される予定であるならば、採集は、製品が可能な限り徹底的に脱ガスされて後なされるべきである。この工程は、凍結製品中の気泡（一般的に立方体の氷の中の小さなポケットおよび筋として観察される）の形成を減少させ、このようにして凍結プロセスの間のより少ない製品損傷に導く。
【０４７５】
本発明の方法の正確な条件および／またはパラメーターのある程度の変動は、ある種のタイプの病原および感染因子および流体について最適な結果を達成させるのに必要とされうることが認識されている。特に、本発明の方法の条件および／またはパラメーターの一部は、血漿タンパク質の損傷を最小にしながらある種のタイプの病原および感染因子について最適の結果を達成するために変動する必要があるかもしれないことが認識されている。そのような変動する必要があるかもしれない条件および／またはパラメーターには、超音波エネルギーの正確な強度および／または周波数、ＵＶ、ガンマ線および／またはｘ線照射の正確な強度および／または周波数、血漿と混合されるオゾンの正確な量、オゾンの圧力、およびあらゆる工程の正確な温度および／または時間が含まれる。
【０４７６】
本発明の方法の正確な条件および／またはパラメーターは、血漿タンパク質への損傷を最小化しながら、ある種のタイプの病原および感染因子について最適の結果を達成するために変化する必要があり得ると言う事実の認識において、どのようにして本発明の方法において用いられる正確な条件およびパラメーターを評価し、最適化するかの以下の検討が提供される。いずれか所定の病原または感染因子についての本発明の除染方法のいずれかの効率は、
（１）流体の試料の中の選択された病原濃度または活性を測定すること、
（２）除染された流体の試料を獲得するために流体の前記試料について本発明の除染方法の１つを実施すること、および
（３）除染された流体の前記試料中の前記選択された病原の濃度または活性を測定すること
により定量され得る。
【０４７７】
本発明の除染方法のいずれのパラメーターも、第１の試験で病原に対する方法の効率を評価し、次いで、やはり方法の１以上のパラメーターおよび／または条件を変化させた後方法の効率を評価し、次いで、２つの試験の結果を比較することにより最適化され得る。もちろん、いずれか１つの条件またはパラメーターを完全に最適化するために３以上の試験の結果を比較することが必要であるかもしれない。したがって、試験結果の超次元マトリックスを構築するために、一連の試験を実施することが好ましいかもしれない。
【０４７８】
血漿タンパク質損傷の最小化についての本発明の方法のいずれかの特定流体（例えば血漿）タンパク質に対する損傷の量および最適化は、病原濃度または活性よりもむしろタンパク質濃度または活性を定量することを例外として同じ方式で実施され得る。
【０４７９】
血漿それ自体についてのいずれのそのような試験も、もちろん、血漿を必要とする。しかしながら不運にも、血漿タンパク質の濃度は、ドナー間で広く変化している。これは顕著な問題である。と言うのは、それらの変動は通常、除染方法それ自体により引き起こされる部分的なタンパク質損傷より大きく、したがって、直接比較を困難にするからである。例えば、フィブリノーゲンについての標準参照範囲は、２００から４００ｍｇ／ｄｌであり、しかし、比較的貧弱な（血漿タンパク質に対する激しさの観点で）除染技術でさえこのタンパク質の２５％未満を破壊するであろう。結果として、個人ユニット間の血漿タンパク質の変化は、そのようにしてタンパク質損傷の範囲全体を覆い隠してしまうであろう。
【０４８０】
したがって、効率を評価し、特定の病原または感染因子について本発明の除染方法を最適化するとき、いくつかの供与物をプールし、次いで、同じ体積の多数のユニットを抽出することにより獲得される対照血漿を用いることが好ましい。そのような対照血漿の使用は、比較のための共通の基準を確立する。プール作成はまた、多額の試験のための出費をなくす。プールについては、タンパク質レベルは、出発条件を確立するために一回試験し得るが、しかし、個人のユニットについては、それぞれの出発条件は、別々に試験されねばならない。このプール作成技術は、血液試験装置における固有の大きな誤差は、単一のユニットの反復試験に対して単一プールの多数回試験により、よりよく補われ得る事がわかっている、本発明者によりなされた以前の仕事において大きな成功をおさめていることがわかっている。このプール作成は、評価と最適化目的のみのためのものであることに注意せねばならない。すなわち、個人の血漿ユニットを処理するための本発明の方法の能力をいずれの意味でも制限しない。
【０４８１】
特定の病原についての初期評価と最適化の目的のために、ヒト以外の動物の血漿を用いることによりコストを下げることは好ましいであろう。この点で、ウシの血漿は、ヒトの製品に関連するコストまたは取り扱いの問題なしに有用な出発点を提供する。したがって、流量、超音波強度などのようなある種のパラメーターが一旦ウシ血漿について最適化されると、ヒト血漿がそれから用いられ得る。
【０４８２】
もちろん、ドナーから得られた血漿は、問題の病原または感染因子について検出可能な量を含有し得ないかもしれない。そのような場合には、既知の量の病原または感染因子が血漿に加えられ得る。
【０４８３】
次の問題は、どの血漿タンパク質を試験するかである。血漿中に多数の成分が存在すれば、特に第ＶＩＩＩ因子、フィブリノーゲン、フォン・ビルブラント因子およびさまざまの免疫グロブリンのような多数の選択肢が存在する。それらのタンパク質の中で、フィブリノーゲンが最も適切である。それは臨床上重要であり、商業的に高価であり、試験するのが容易であり、現存の除染技術により容易に損傷し、他の研究者による幅広い使用は直接比較のための手段を提供する。
【０４８４】
明らかに、生存している人間の病原を取り扱うことは高価で困難である。この理由のために、実際のヒトのウイルスを模試するモデルウイルスが実験的除染試験のために用いられ得る。具体的には、実際の病原に対して低コストで、リスクが少なく、直接適用できることは、完全な産業上および法規上の容認に導いてきた。それらの利点のために、多くの試験ウイルスが単離されたし、現在も広く使用されている。そのようなモデルウイルスの典型的な例には、シンドビスおよびヒトＨＣＶについてのＢＶＤＶ（ウシウイルス性下痢ウイルス）およびヒトＨＢＶについてのアヒルＨＢＶが含まれる（Ｂ．ホロビッツ、「溶媒／洗剤処理によるウイルスの不活性化およびＳＤ−血漿の製造」、Ｖｏｘ  Ｓａｎｇ、第７４巻補遺１２０３〜２０６ページ（１９９８年））。
【０４８５】
それらは、ある程度強力なウイルスであるけれども、しかしながら、血液産業における最近の関心の多くは、ヒトパーボウイルスＢ１９に焦点が当てられている。臨床的な観点からは、伝染性紅斑またはパーボウイルスによる「第５疾患」は、主に、妊娠中の問題であり、したがって、肝炎またはＡＩＤＳより一般的な人々へのリスクははるかに小さい。血液産業の観点では、パーボウイルス感染は、実際に非常に広範であるので、Ｐｌａｓ＋ＳＤは、プールされたドナーは有効に抗体に寄与すると言う主張とともに販売されている。他方、パーボウイルスは、通常の技術により根絶するのが極端に困難である。正味の結果は、この特別のウイルスを攻撃することのコスト上の有効性については、血液産業の中でいくつかの問題が存在すると言うところである。しかしながら、除染の研究分野の中で、パーボウイルスは試験標準として大きな関心がもたれている。というのは、そのような強力なウイルスに対して有効であるあらゆる技術は、より少ない病原に対しても非常に有効であろうからである。したがって、本発明の方法のいずれか１つの条件および／またはパラメーターの最適化のための標準試験ウイルスとしてはパーボウイルス、特にブタパーボウイルス（ＰＰＶ）を用いることが好ましいであろう。
【０４８６】
このように血漿と試験ウイルスを選択すると、次の問題は、どのように提案された技術の有効性を測定するかである。幸運にも、そのような測定は、実際に、標準的な手順を用いて非常に単純である。具体的には、血漿は、まず、試験ウイルスを加えられ得るものであり、次いで、２つの画分に分割される。次いで、１つの画分は、対照として維持され、一方、他の画分は、評価または最適化される除染方法に供される。統計的解析のために、６つの試料がそれぞれの試験ポイントで採取され得る。所定の病原についての試験結果は、対数的減少率の観点で報告され得る。
【０４８７】
対数的減少率は、定量的測定であることに注意すべきである。それ自体、対数的減少率は、標準試験マトリックスに直接挿入され得る。超音波効果は、非線形的であるので、今度は、このマトリックスも非線形的となる。しかしながら、このマトリックスは、標準急勾配降下技術（ｓｔａｎｄａｒｄ  ｓｔｅｅｐｅｓｔ  ｄｅｓｃｅｎｔ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）により減少し得る。結果は、試験ポイントの分析の限界の範囲内で最適化されたシステムである。例えば、吸光に関するビヤーの指数法則によれば、臨界的な流体深さを越えると対数的減少率は実質的に低下することが予想される。したがって、この臨界値を確立すると、次いで、滞留時間は、処理チャンバのポンプ速度および／または寸法を変化させることにより最適化され得る。
【０４８８】
文献は、超音波に耐える様々のタンパク質の能力についていくつかの限定された情報しか有さないけれども、不運にも、適用技術、熱制御、処理装置設計、出力測定などには多くのバリエーションが存在する。例えば、出力は、変換器または超音波発生装置に与えられるワット数として測定され得るが、しかし、もし系が共鳴について調整されていないならば、試料に実際に与えられる出力は、はるかに小さくなり得る。したがって正味の結果は、１つの場合から別の場合にそのような結果を移し取ることは非常に信頼性のないことであると言うことである。したがって、特定の装置設計について起源でのすなわち工場での設定を決定するために上記最適化方法を使用することは好ましいであろう。装置の日常的な較正を実施するために上記最適化方法を用いることもまた好ましいであろう。この点で、所定の装置により血漿に適用される音波エネルギーの量の測定として音波照射の前後に血漿中に溶存する酸素の量を用いることが好ましいであろう。
【０４８９】
本発明の方法は、全ての汚染物質の完全な除去のためにはそれ自体有効ではあり得ないことを認識すべきである。したがって、照射を含む態様とともに少量のクエンチャーを利用することは、ある種の環境において所望され得る。本発明のコンテキストにおける利点は、より低いクエンチ濃度、化学物質コストの減少、除去コストの減少、およびより少ない生物学上の負担である。ＵＶ暴露の前に超音波と真空の本発明の組み合わせを用いることに加えて、本発明の方法は、バイオテクノロジーへの適用のために嫌気的合成系を調製するためにもまた用いられ得ることも認識されるべきである。ここでの利点は、処理された系は、次いで、直後のＵＶおよび／またはオゾン処理のための準備ができていると言うことである。
【０４９０】
本発明の他の特徴は、本発明の例示のために与えられ、その限定を意図しない典型的な態様の以下の記載の中で明らかになるであろう。
【０４９１】
例
以下の例は、上記装置および技術の代表としてのみ提示される。それらの例は、技術または処理される物体の範囲を限定することを意図しない。以下の例は、基本的な系で始まり、ついで、より特別化したデバイスに向けて進歩するますますより洗練されていく実験を記述する。それぞれの場合に、血液製剤が用いられるが、しかしながら、異なる実験のためには異なる血液製剤が用いられる。
【０４９２】
しかしながら、それぞれの場合に、同じ試験ウイルス、ブタパーボウイルスが用いられる。態様ＶＩＩで上述されたように、パーボウイルスは特に関心がもたれている。と言うのは、この小さな、強固な、外膜のないウイルスの破壊は、同様により少ないウイルスの破壊を含意するからである。また、態様ＶＩＩで注意したように、パーボウイルスのブタ形態は、取り扱いが簡便である。と言うのは、それはヒトに感染し得ないからである。
【０４９３】
起源については、ブタパーボウイルスは、農業全体に非常に広く広がっており、したがって、普通に入手可能である。しかしながら、詳細な実験作業のためには、バージニア州マナサスのアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション、アイテム番号ＶＲ−７４２のような良好に定義された起源が所望される。
【０４９４】
同様に、パーボウイルスは、きわめて広く分布しているので、多くの獣医科の施設および学校はそれを分析できる。しかしながら、特によく知られたグループは、テネシー州セビエビルにあるアメリカン・バイオリサーチ・ラボラトリーズである。
【０４９５】
試験溶液としては、血漿は、特に有用である。と言うのは、それは、特にフィブリノーゲンのような耐熱性成分と特に第ＶＩＩＩ因子のような熱感受性成分の両方を有するからである。簡便さのためにウシ血漿がヒト血漿の代わりに用いられ得る。いずれの場合でも、ブタ血漿は、現存する抗体の高い類似性のために用いられるべきではない。ウシ血漿は、屠殺場から容易に入手できるけれども、より高品質の材料は、モンタナ州ライゲートのクワッド・ファイブのような健康なドナー動物のメンテナンスに専念している施設から入手し得る。血漿に加えて、赤血球もまたウシ起源で入手され得る。代わりに、旧式だが、乏しい輸血可能な物質を基礎研究の実験目的に用いるべきではないと言う慣例の下で、ヒトの細胞もまた用いられ得る。同様に、５日間しか保存寿命がないヒト血小板もまた旧式の基準で入手可能である。すべての血液銀行がそのような材料を有するが、しかし、最大の供給者は、世界中にオフィスを有するアメリカ赤十字社である。
【０４９６】
このように材料とその起源が確認されると、次いで、試験方法が構成されねばならない。上記血液製剤のすべてが有意な臨床上の関心を有するので、試験は、いずれの現代の血液学の研究所でも容易に実施され得る。例えば、ウシ血液製剤は、ジョージア州アテンのジョージア大学獣医学部で日常的に分析されており、一方、ヒトの血液は、ジョージア州アトランタのエモリー大学病院血液学研究所で試験されている。
【０４９７】
そのような供給者と支持サービス機関のおかげで、広い範囲の実験が実施され得る。第１のそのような試験が耐熱性血漿タンパク質フィブリノーゲンである。このタンパク質は、特に関心が持たれる。と言うのは、それは、イリノイ州ディアフィールドのバクスター・ヘルスケアによるティジール（Ｔｉｓｓｅｅｌ）のような手術用糊料の決定的な部分であるからである。
【０４９８】
例１：耐熱性血漿タンパク質
この試験は、耐熱性タンパク質、フィブリノーゲンのために設計されている。この試験はまた、数ｍｌ台の少量のために設計されている。というのは、これが、供与された血漿の単一ユニットから抽出されうる物質の体積であるからである。試験手順は以下に記載される。
第１に、少量の耐熱性物質を取り扱うために装置を構成する。要求されるシステム装置には、加温部材、小さな真空モジュール、ＵＶＣ暴露モジュール、およびオゾン処理モジュールが含まれる。使い捨て製品は、ヒーターのためのライナー、真空チャンバおよびＵＶＣ照射装置の両方に役に立つテフロン（登録商標）バッグ、オゾン暴露ユニットのための１対のバッグ、超音波オゾンコンタクター、２つのウイルスの侵入しないフィルター、および滅菌接続チューブからなる小さな単一のユニットデバイスである。使い捨て用品を設置し、５０ｍｂａｒまで系を真空にするために真空を適用する。
【０４９９】
次いで、１ｍｌのブタパーボウイルスをウシ血漿中に１０：１まで希釈する。統計的目的のために、それぞれ６試料を６組調製する。対照として１組を残す。脱ガスに役立つように残りの試料を５２℃まで加熱する。熱の効果について確認するためにこの時点で１組を取り出す。次いで、残りの組を即座に脱ガスし、タンパク質損傷について確認するために１組を取り出す。ハイドロフォンにより脱ガスプロセスを監視し、経過した処理時間を記録する。次いで、ランプから１０ｃｍの距離で５分間ＵＶＣ照射に１つを除いてすべての残りの組を暴露し、全投与量を記録し、１組を取り出す。残りの２つの組（１つはＵＶＣ処理され、１つはされていない）を１５分間３気圧でオゾンに暴露する。
【０５００】
それらの実験が完了した後、すべての試料を氷上に配置し、血液とウイルスの試験機関に輸送する。試験後、信頼できるレベルと統計的に有意な差を決定するために試料を分析する。
【０５０１】
結果：対照と比較して、加熱と脱ガスのみは、ウイルスの負荷またはタンパク質損傷において有意な差を示さない。逆に、ＵＶＣ照射のみは、活性パーボウイルス負荷についてＬｏｇ６減少を示す。同様に、オゾン処理のみは、パーボウイルスについてＬｏｇ６減少を示す。ＵＶＣとオゾンの組み合わせは、明らかなＬｏｇ１２減少を示す。しかしながら、そのようなレベルでは、検出ははるかにより困難である。すべての事例において、フィブリノーゲン損失は５％未満であり、これは、本質的に、測定装置の誤差の限界の範囲内にある。
【０５０２】
例２：熱感受性血漿タンパク質
この試験は耐熱性タンパク質第ＶＩＩＩ因子のために設計されているものであり、第ＶＩＩＩ因子は、極めて不安定であることが知られている。すべての試験条件は、脱ガス前に試料に対して加熱がなされないことを除いて上記のとおりである。この差を補うために、真空を４０ｍｂａｒまで高め、ハイドロフォンモニターにより示されるように脱ガス時間を延長させる。
【０５０３】
結果：フィブリノーゲンについて観察されたように、脱ガス試験は測定可能な除染またはタンパク質損傷を示さない。また、フィブリノーゲンについて観察されたように、ＵＶＣとオゾンの両方は、パーボウイルスについてＬｏｇ６減少を示し、組み合わせられたプロセスは、やはり低レベル検出の問題を有するＬｏｇ１２を示す。最後に、タンパク質レベルは、５％未満まで減少し、これは、測定装置の限界の範囲内にある。
【０５０４】
例３：バッチ血漿
この試験は、物質のバッチを順次的に処理するときに系を評価するために設計される。具体的な材料は、単一のドナーユニットの血漿である。そのようなわけで、それは上記試験された体積より大きく、しかし、例４で以下に論述される連続流により処理されるであろう体積より小さい。この体積を収容するために、前記例で記載された装置は、以下のように変更されねばならない。
【０５０５】
処理される体積は、前述の小さな使い捨て製品の中で取り扱われ得ないので、モジュールからモジュールへの流れを移動させるための手段を有するより大きなユニットが用いられねばならない。第１に、１回使用の真空チャンバライナーを処理された流体のための入口と出口を有するライナーを用いることに相当する多数回使用のユニットと置換する。次に、照射バッグをより大きなユニットと置換し、適切な滞留時間を確保するために、前述のようにこのユニットを上方に傾ける。次に、オゾン処理バッグをより大きなユニットと置換する。最後に、付加的な試験として、脱ガスし、それから３回オゾンで流体が飽和する。
【０５０６】
結果：個別のＵＶＣおよびオゾンの場合は、それぞれ、Ｌｏｇ６ウイルス減少をもたらし、組み合わせられたプロセスはＬｏｇ１２をもたらす。オゾン暴露の反復については、ウイルスの減少は、Ｌｏｇ９である。すべての場合において、第ＶＩＩＩ因子損傷は、５％未満である。
【０５０７】
例４：連続流
この試験は、物質の連続流を処理するときに系を評価するために設計されている。具体的な材料はやはり血漿であるが、しかし、この場合には、大きな流れは続く画分生成のための材料のプールの処理に対応する。この体積を収容するために、前述の例で記載された装置は、以下のように変更されねばならない。
【０５０８】
大きな変更は、バッチ流装置を連続流装置に変えることである。具体的には、大きな変更は、関連するモジュールとともに、脱ガスモジュールおよびオゾン処理モジュールに対してなされる。バッチ流ＵＶＣモジュールもまた、単にフィードポンプ上の流動制御装置の付加により連続流のために用いられ得る。
【０５０９】
脱ガスモジュールについて、４つの別の工程がこの実験のために用いられる。次いで、脱ガスされた液体は、脱ガストレーから重力供給される蠕動ポンプの排出を通り過ぎて大気圧に戻る。ＵＶＣ暴露がすぐに続き、ついで、流体がオゾンに暴露される。ＵＶＣおよびオゾンモジュールでの滞留時間はそれぞれ約１５分であり、実際の処理時間は、それぞれの投与量モニターに従ってこの値付近を連続的にわずかに変動する。
【０５１０】
結果：個別のＵＶＣおよびオゾンの場合はそれぞれＬｏｇ６ウイルス減少をもたらし、組み合わせられたプロセスでは、Ｌｏｇ１２である。第ＶＩＩＩ因子損傷は、５％未満である。
【０５１１】
例５：赤血球
この試験は、生きている細胞構造に対する除染の効果を測定するために設計されている。装置および条件は、３つの要因を除いて本質的に例１について記載されているとおりである。第１の問題は、はるかに大きな照明チャンバ（縦３０ｃｍ横１０ｃｍ）が例１で用いられる比較的透明な流体について必要とされるより大きな表面積を処理するために用いられると言うことである。にもかかわらず、体積は同様である。と言うのは、赤血球チャンバは、約４０ミクロンではるかに薄いからである。第２の差は、加熱は５２℃の代わりに４５℃までしかなされないことである。と言うのは、赤血球は、高体温治療の間この低温によく耐えることが知られているがしかし、より高温（５２℃）はその細胞膜を弱め得るからである。第３の問題は、赤血球は、生存するために酸素を必要とするので照射の直後酸素または酸素／オゾンに暴露されると言うことである。脳内の神経細胞は、酸素無しではたった６分後に回復不可能な損傷を被ることが知られているが、しかし、赤血球は、はるかにより持続性があることに注意されたい。さらに、脱ガス直後に温度を下げることもまた細胞の一体性を維持する上で役立つ。
【０５１２】
前述の手順を実施した後、ウイルス試験結果は、ＵＶＣとオゾンの両方についてＬｏｇ６減少であり、一方、組み合わせられたプロセスは、約Ｌｏｇ１２である。そのような試験での細胞の損傷は、通常溶血により測定される。プロセス直後の損傷した細胞の数の観察は、全くの機械的損傷を示し、一方、２４時間後の細胞の損傷の測定は、処理された細胞の生存能力を示す（Ｇ．Ｆ．ドーブラー、Ａ．Ｗ．ローウェ、およびＡ．Ｐ．リンフレット、「哺乳動物血液の凍結」、クリオバイオロジー、ハロルドＴ．メリーマン編集、アカデミック・プレス社、ロンドン、４０７ページ、１９６６年）。この実験において、処理された物体は、対照から区別され得なかったので、それで、有意な損傷を示さない。
【０５１３】
例６：血小板
この試験は、血小板オゾンコンタクターのために設計されている。装置と条件は、本質的に、３つの要因を除いて加熱された小さな体積について例１で記載されているようである。第１の差は、単に血小板のために設計された特別なオゾンコンタクターの使用であり、図１１において示されている。第２の差は、５２℃の代わりにたった２２℃までしか加熱がなされないと言うことである。と言うのは、ＦＤＡ規則は、血小板は、生存能力を保持するために２２±２℃で維持しなければならないことを主張するからである。第３の要因は、照明は、赤血球について上述されたように、脱ガス直後なされなければならないということである。というのは、血小板は、長時間維持のために酸素を必要とするからである。
【０５１４】
この試験の結果は、ＵＶＣとオゾンの間のパーボウイルスのＬｏｇ６減少であり、組み合わせられたプロセスについては、Ｌｏｇ１２減少である。血小板損傷を測定するための第１の試験は、血小板産業において広く用いられている単純な光学的手順である。この試験は、単純に、特別の酸素透過性バッグの中の血小板の流れを観察することに相当する。正常な血小板は、輝くはずであり、一方、損傷した血小板は、しばしば凝集し、したがって、光を当てても輝かない。この実験において、処理された血小板は、対照により示されるのと同じ輝きを示す。第２の試験は凝血効果を測定することであり、これは、ゲルから凝血を形成し、次いでそれを破裂させることによりなされ、それにより血小板が、必要とされるように機能するかどうかを示す。この実験において、対照から形成される凝血は、処理された材料から形成される凝血から区別不能であり、それにより除染の間の血小板への識別し得る損傷を示さない。
【０５１５】
要約：上記例は、新規の技術が処理される物体に対して最小の損傷で許容可能なレベルまで強靭なウイルスを不活性化することを示す。
【０５１６】
明らかに、本発明の多数の修正および変更が、上記教示に鑑みて可能である。それゆえ、本発明は、特許請求の範囲の記載の範囲内で、本明細書に具体的に記載されている以外にも実施され得ることが理解されるべきである。
【０５１７】
上記のすべての特許および他の参照文献は、その参照文献があたかも十分に記載されているかのように参照により本明細書に完全に含まれる。
【図面の簡単な説明】
【０５１８】
【図１】本発明による方法の１態様を描写するフローチャートである。
【図２】本発明による超音波脱ガスチャンバの模式図である。
【図３】本発明による超音波処理装置の模式図である。
【図４】本発明による超音波処理とＵＶ処理を組み合わせた装置の別態様の模式図である。
【図５】本発明によるオゾン処理と超音波処理を組み合わせた装置の模式図である。
【図６】本発明によるＵＶ処理チャンバと部品の断面図である。
【図７】本発明によるオゾンコンタクターの模式図である。
【図８】本発明によるオゾンコンタクターの模式図である。
【図９】オゾンコンタクターの好ましい態様の模式図である。
【図１０】もう１つのオゾンコンタクターの好ましい態様の模式図である。
【図１１】血小板にとって有用であるもう１つのオゾンコンタクターの模式図である。
【符号の説明】
【０５１９】
３０，４０…除染系、２１，３１，４１，５１,７１，７３，９１，９３…血漿バッグ、３２，４２，５２…蠕動ポンプ、２３…ポート、３３，４３…発散スプレッダ、５３…オゾン発生装置、２４，３４，４４…チャンバ、２５，３５，４５，５８，７８，１００９…超音波ドライバー、５５…スプレーノズル、２６，２７…真空ポート、３６，４６…共鳴板、３７，４７，５１０…ウォータージャケット、３８，４８…真空ポンプ、３９，４９，５６…フィルタートラップ、３１１，４１２，５１２…採集バッグ、４１０…照射源、５７…反応容器、６１…クーラー、６２…処理アセンブリ、６３…光源、７２，９２…オゾンコンタクター、７４，７１０，９４，９１０…ドレンポート、７５，９５…イコライザーポート、７６，９６…真空チャンバ、７９，９９…通気ポート、７１１，９１１…設置リング、８５…チャンネル、８６，１００５…オゾン流動野、８７，１００２，１００７…液体流動野、
１１０１…ブロック、１１０２…棚、１１０３，１１０４…ポート
【図１】
2005524683.tif 000003
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【国際調査報告】
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2005524683.tif 000015
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