(57)【要約】  液体試料における対象の少なくとも１つの分析物の存在を判定する分析デバイスが開示され、このデバイスは、試料における対象の分析物の存在と量との何れか一方又は双方を表す第１の信号（試験信号）を生成する手段と、第２の信号を生成する手段とを備え、その第２の信号は、（ａ）試験が首尾よく処理されたこと、及び（ｂ）読み取るべき試験のために、分析デバイスと液体試料との接触に続いて充分な時間が経過して、第１の信号が適切に生成されたことを示す。
2005514621.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体試料における対象の少なくとも１つの分析物の存在を判定する分析デバイスであって、このデバイスは、試料における対象の分析物の存在と量との何れか一方又は双方を表す第１の信号即ち試験信号を生成する第１の信号生成手段と、第２の信号を生成する第２信号生成手段とを備え、その第２の信号は、
（ａ）試験が首尾よく処理されたこと、及び
（ｂ）読み取るべき試験のために、分析デバイスと液体試料との接触に続いて充分な時間が経過して、第１の信号が適切に生成されたことを示す分析デバイス。
【請求項２】
請求項１のデバイスにおいて、分析物はｈＣＧであるデバイス。
【請求項３】
側流免疫グラフィック分析デバイスである請求項１または２のデバイス。
【請求項４】
請求項１乃至３の何れか一項に記載のデバイスにおいて、第１信号生成手段及び第２信号生成手段は、ラテックス標識付け特定結合再結合剤を含むデバイス。
【請求項５】
請求項１乃至４の何れか一項に記載のデバイスにおいて、第２信号は、前記デバイスが前記試料と接触した約１分後に形成されるデバイス。
【請求項６】
請求項１乃至５の何れか一項に記載のデバイスにおいて、第２信号は、透明材料の層により被覆された試験デバイスの一部分に出現する可視信号であるデバイス。
【請求項７】
請求項１乃至６の何れか一項に記載のデバイスにおいて、第２信号は、１０秒未満の信号形成時間を有するデバイス。
【請求項８】
請求項７に記載のデバイスにおいて、第２信号は、８秒未満の信号形成時間を有するデバイス。
【請求項９】
請求項１乃至８の何れか一項に記載のデバイスにおいて、前記デバイスが標識付け分析物特定結合剤の貯蔵所と、その下流側の標識付け調整特定結合剤の貯蔵所とを含むデバイス。
【請求項１０】
液体試料における対象の分析物の存在を判定する分析を実行する方法であって、この方法は、請求項１乃至９の何れか一項に記載の分析デバイスを試料に接触させる段階と、第２信号の出現を観察する段階と、第２信号が出現したときに第１の信号を観察する段階とを含む方法。
【請求項１１】
請求項１０に記載の方法において、前記試料は体液の試料である方法。
【請求項１２】
請求項１１に記載の方法において、前記試料は尿である方法。
【請求項１３】
請求項１０乃至１２に記載の何れか一項において、前記分析物はｈＣＧであるデバイス。
【発明の詳細な説明】
【発明の分野】
【０００１】
本発明は分析デバイス、分析を実行する方法、及び分析デバイスを製作する方法に関する。
【発明の背景】
【０００２】
免疫クロマトグラフィック原理を採用する分析デバイスは公知である。特に一般的なのは「側流(lateral flow)」分析デバイスである。側流型のデバイスにおいては、指標付けされた結合試薬が多孔材料のストリップ上に解放可能に固定される。液体試料が多孔ストリップの一端に塗布されて、ストリップの毛管特性が液体試料をストリップに添って移送して、指標付けされた結合試薬を解放し、試料内に対象の分析物が存在するならば、この結合試薬は（その第１の結合側で）対象の分析物を特に結合する。指標付け結合試薬は、対象の分析物の第２の結合側について仕様の結合を有する第２の試薬により試験領域で捕捉されるのが通例である。過剰な指標付け結合試薬は次いで調整領域で典型的に捕捉され、その調整領域は指標付け試薬を特に結合する調整試薬により試験領域の下流側にある。この形式の分析デバイスは例えば欧州特許第０２９１１９４号に更に詳細に説明されている。
【０００３】
（欧州特許第０２９１１９４号及び第０５６０４１１号に開示された説明による）公知の側流分析デバイス、例えば試験デバイスへ塗布された尿試料におけるｈＣＧの存在を検出するClearblue（登録商標）妊娠テストキット（英国ベッドフォードのUnipath Ltdから入手可能である）においては、２つの可視的な信号を生成し得る。１つの信号は「調整」信号であり、誘導された青ラテックスビードの局地化により形成され、そのラテックスビードは免疫グロブリン分子で被覆されて、捕捉抗体により捕捉されて、試料の流れの方向に概ね直交する試験棒上のラインに沈積され、捕捉抗体はビード上に支持された免疫グロブリンについての仕様の結合活性を有する。この信号の生成はユーザーへ以下を伝える。
【０００４】
（i）ラテックスビード上の免疫グロブリンも試験棒上の捕捉抗体も充分に変性されておらず、さもなければ、２つの分子の間の仕様の結合体と相当に干渉するテストキットの製作又は保管の間に低下している。
【０００５】
（ii）充分な液体試料が解放可能な固定ラテックスビードを移動可能にするように加えられており、これらを捕捉抗体が位置している「調整」領域から少なくともできる限り遠ざけるように試験棒に沿って移送させる。
【０００６】
（i）の重要性は、試験棒上の免疫グロブリンが対象の分析物を特に結合する１つであることである。この調整信号は、捕捉抗体及びラテックス束縛抗体が依然として結合の能力があり、これは、試験キットにおける他の免疫グロブリン基試薬（例えば分析仕様免疫グロブリン試薬）がそれらの仕様の結合能力を等しく保持していることを意味する。（ii）の重要性は「調整」領域が「試験領域」の下流に位置し、その試験領域においては分析物が、試料の流れの方向に概ね直交して試験棒上のラインに沈積された更なる分析物仕様免疫グロブリンにより（任意の特定結合ラテックス指標付け免疫グロブリンと共に）束縛される。試験領域に固定された分析物特定免疫グロブリンのラインは、調整領域に固定された抗体のラインに上流側で実質的に平行である。
【０００７】
この方式においては、正しく機能した分析において試験棒に接触したｈＣＧを包含する尿試料は、調整領域及び試験領域の両方におけるラテックスビードの沈積をもたらし、即ちユーザーに可視的な２つの青ラインが形成される結果として、調整領域に１つのライン及び試験領域に１つのラインがもたらされる。
【０００８】
キットに与えられた使用説明はユーザーに対して、分析結果は試験棒を試料との接触状態から離した１分後に読み取るように指示している。従ってユーザーは正確な時間間隔が経過した後に分析結果を読み取るように外部タイマーを利用する必要がある。
【０００９】
指標は一般に直接指標であり、これは裸眼で容易に視認できるので、指標付けされた試薬が充分な量に蓄積されている場合は可視的な信号が形成される。
【００１０】
この種の分析デバイスに伴う問題は、分析デバイスを液体試料との接触状態から話した後、試験信号を明らかにするのに僅かな時間を要することである。明らかにユーザーは分析の結果をできるだけ早く読み取ろうとするものの、同様に、ユーザーは過度に長時間を待つことなく、適切な分析結果を得るための充分な時間が経過して、その試験は読み取りに早すぎないということを信じるに足る必要がある。
【００１１】
この問題を取り扱うために、欧州特許第０８２６７７７号に開示されたように、「タイマー」を分析デバイスに取り入れることが公知である。特に、欧州特許第０８２６７７７号の開示する分析デバイスは、通常の分析試薬に加えて、試料の試験デバイスへの塗布の後、所定の時間間隔で相互作用して検出可能な色変化を形成する様々な成分を含む。
【００１２】
更に「タイマー」試薬は量調整機能を果たすともいわれている。分析デバイスが湿気に晒されることは一般に望ましくない。しかしながら、タイマー試薬は水和したときに色付けされた生成物を生成するので、デバイスが湿気に晒されるとタイマーが露呈する。しかし「量調整」機能は非常に限定されているので、デバイスが計量不能な量の湿気に晒されたことを信号するのみである。欧州特許第０８２６７７７号に開示された装置は例えば試験試薬がそれらの仕様の結合特性（これは時間と共に劣化する）を保持しているか否かを信号することができず、このことは分析デバイスが温度条件下で保管されているときに顕著であり、例えば最適状態には及ばない。
【００１３】
発明の概要
本発明の第１の局面においては、液体試料における対象の少なくとも１つの分析物の存在を決定する分析デバイスが与えられ、このデバイスは、試料内の対象の分析物の存在と量との何れか一方又は双方を表す第１の信号（「試験」信号）を生成する手段と、第２の信号を生成する手段とを備え、その第２の信号は、
（ａ）試験が首尾よく処理されたこと、及び
（ｂ）読み取るべき試験のために、分析デバイスと液体試料との接触に続いて充分な時間が経過して、第１の信号が適切に生成されたことを示す。
【００１４】
好ましくは分析デバイスは免疫クロマトグラフ型であり、更に詳しくは側流免疫クロマトグラフィック分析デバイスである。
【００１５】
対象の分析物は適切な分子であり、例えばポリペチド又はペプチド、核酸、ステロイドその他である。適切には、分析物はホルモンである。特定の実施形態においては、分析物は、性ホルモン例えばルテインシングホルモン（ＬＨ）、或いは妊娠関連ホルモン例えばヒト絨毛膜性線刺激ホルモン（ｈＣＧ）である。他の実施形態においては、対象の分析物は薬物濫用、例えばアヘン、アンフェタミン、コカインとしてもよい。
【００１６】
液体試料は環境液体（例えば河川、湖、海などの水源の水、或いは水溶液）としてもよいが、更に好ましくは体液の試料であり、例えば血液、血漿、血清、唾液、尿、汗、涙、膣液その他である。上述のように尿は好ましい試料である。というのは、尿は浸入性採取技術を用いることなく容易に入手でき、しかも好適な分析物ｈＣＧのための関連試料となるためである。
【００１７】
第１信号と第２信号との何れか一方又は双方は例えば可視信号としてもよい。一般には第１信号と第２信号とが共に可視信号であることが好ましい。第１と第２とのそれぞれの信号を生成する手段は一般的には通常の形式である。例えば第１信号即ち「試験」信号及び第２信号は、欧州特許第０２９１１９４号及び欧州特許第０５６０４１１号に概ね開示されたように、色付けラテックスビード又は他の直接指標付け結合医薬の捕捉又は局地化により形成し得る。当業者には試験デバイスは試料内の対象の１つよりも多くの分析物の存在のための試験に使用し得ることが明らかである。例えば対象の各分析物を特定するために２つの異なる分析物特定結合試薬をデバイス上に設けてもよい。従って第１の「試験」信号は幾つかの実施形態においては、複数の別々の信号を含んでもよく、各信号は各分析物の有無に対応する。従って用語「第１の信号」は単独の試験信号を生成するように構成されているものではないことに留意されたい。
【００１８】
更に、第２の信号それ自体が複数の信号を含むことが少なくとも可能である。例えば、単独の位置にて生成される第２信号についても好ましいが、分析デバイス上の２つの異なる位置、例えば調整信号を表す「調整」領域と、「タイマー」信号を表す「タイマー領域」において生成される第２信号も可能である。このような第２の信号の２つの成分が別々の場所で生成される実施形態においては、調整信号とタイマー信号とが（ａ）実質的に同時に（即ち互いに１乃至５秒間以内）と（ｂ）同一の信号生成試薬によってとの何れか一方又は双方により生成されることが好ましい。１つの手段、例として２つの成分調整／タイマー信号の実質的同時生成を得る手段は、分析デバイス上の点における調整領域及びタイマー領域を与え、これらは調整及びタイマー信号生成試薬により実質的に同時に達成される。調整信号生成試薬とタイマー信号生成試薬とは試験棒に沿う実質的に同一の伝播速度を有するので、調整領域とタイマー領域とは並列関係で設けてもよい。
【００１９】
従来技術の分析デバイス、例えばClearblue（登録商標）テストキットは第１即ち「試験」信号及び第２即ち「調整」信号を生成する手段を含み、その第２信号は試験が首尾よく処理されたことを示す。しかしながら、このClearblue（登録商標）テストキットに設けられた分析デバイスにおいては、分析デバイスと試料との接触に続く所定の予め定められた間隔の後（分析結果を読み取るように意図された所望の時間点と一致する）に調整信号が現れることを補償する手段は無い。対照的に、本発明の基本的要求は、信号が調整信号として働いて（即ちこの調整信号は試験試薬が、獲得すべき意味ある試験結果について充分な機能及び特定の結合特性を包含していることを示す）、試験が首尾よく処理されたことを示し、この信号はデバイスが試料と接触した後の所定の予め定められた時間にのみ生成され、この時間は分析結果を読み取るように意図された所望の時間点とも一致する。
【００２０】
この方式において、第２信号は調整信号として働くのみならず、一体的分析「タイマー」としても働く。従って使用において分析デバイスは、少なくとも２つの個別の目的を有する信号を発生させるようになる。
【００２１】
特に本発明の分析デバイスは第１の信号（試験信号）、即ち対照の分析物が試料内に存在するならば陽性試験信号、分析物が存在しないか或いはこの分析デバイスについて要求された最小検知性を下回る濃度で存在するときは陰性信号（信頼性に依存する）が適切に形成される時間においてのみ第２の信号（２つの目的の調整／タイマー信号）が形成されるように配置されていることが必要である。実際的には陰性結果は通常は試験領域に可視信号が存在していないことにより示される。
【００２２】
代表的な分析デバイス、例えばClearblue（登録商標）妊娠テストキットは、デバイスを試料との接触状態から離して約１分後に読み取るようにされており、デバイスは通常は約５秒間に亘って尿流内に保持される。従って本発明の好ましい実施形態による分析デバイスは、デバイスを試料との接触状態から離して約１分後に第２の信号を発生させる。しかしながら、他の分析デバイスは通常は他の時間間隔（例えば３０秒乃至５分）読み取るようにしてもよく、従って他の実施形態においては、試料との接触の後に１分よりも長いか短い時間において第２の信号が形成されるようにしてもよい。
【００２３】
分析デバイスと試料との接触と第２信号の形成との間の経過時間を調整するためには非常に広範な方法を採用し得る。これらの方法は、試料を調整領域へ移送するのに要する時間を調節する方法と、ラテックスビード又は他の信号生成試薬が調整領域に到達するのに要する時間を調整する方法との何れか一方又は双方を含むが、これらに限定されるものではない。
【００２４】
Clearblue（登録商標）分析デバイスにおいては、一般に第２信号（即ち「調整」信号）は分析デバイスを試料との接触から離した約２０秒後に現れる。従って通常のClearblue（登録商標）分析デバイスを本発明の陽性に適合するように変更する目的では、１分が経過して試験結果を読み取る準備ができたことをユーザーに示すために第２信号の出現を約４０秒遅延させる必要がある。
【００２５】
このような第２信号の出現における遅延は、試料の流れ速度とデバイス内の信号生成試薬との何れか一方又は双方を低減させる少なくとも１つの方法を含む。例えば、以下の通りである。
【００２６】
（i）ラテックスビードの寸法又は信号生成試薬へ付加された他の部分を増大させる。
【００２７】
（ii）試料の流動特性を例えば分析デバイスへの流量率抑制剤を採用して交番させる。この交番をなすには、例えば有効量の多水酸基混合剤（例えば砂糖（例：ショ糖）又は他の粘性体をデバイスの芯又は他の部分へ取り入れるようにすることができ、混合剤は試料との接触に応じて再懸架して、その流動特性、特に試料の粘性を交番させる。
【００２８】
（iii）分析デバイスの流動特性を交番させる。これは例えば、異なる流量特性を有する膜（例えば、異なる多孔性と異なる材料との何れか一方又は双方）の選択か、或いは膜の一面又は両面を薄層化する（代表的には薄層化は上面、即ち分析結果を読み取るときに観察者から遠い面のみである）ことによる。使用が好ましい分析デバイスは試験ストリップを備え、このストリップは２つの部分、即ち流量率が比較的に高い膜を有する上流部分と、流量率が比較的に低い膜を有し、試験領域と調整領域との間の下流側部分とからなる。
【００２９】
これに代えて、第２信号の出現における遅延は距離を延長することにより得ることができ、試料は（再懸架された信号生成試薬と共に）調整領域に到達する以前に分析デバイス内で拡散させる必要がある。これは、調整領域を芯から遠ざけて更に下流側へ移動させることにより単純に有効にできる。他の試みは通常のClearblue（登録商標）デバイスにおけるほぼ同一の時間に第２信号が表れるようにするが、試験領域に第１信号を生成する試験反応に要する時間は短縮させる。これは試験領域を更に上流側に芯へ向かって移動させることにより有効とし得る。何れの試みにおいても、正味の試みは試験領域と調整領域との間の空間的（ひいては時間的にも）分離を増大させて、試験信号と調整信号とが読み取りのために同時に準備されるようにする。
【００３０】
他の種の試みは信号の生成に影響しないが、ユーザーによるその検出又は知覚に際して遅延させるように意図されている。従って例えば第２信号が色付けライン、スポット又は他のマーク或いは可視信号の出現であり、所望の効果は、生成された可視信号がユーザーにより観察される前に遅延を増大させることにより得られる。例えば半透明な被覆を調整領域に塗布して、調整領域をユーザーに対して不完全に暗くする。これは例えばプラスチック薄層又は他の材料の半透明層を調整領域の下面（即ち分析結果を読み取るようにユーザーにより試験される試験棒の側）に施すことにより達成される。適切な材料はARcare（登録商標）７８２３（英国Adhesives Research Europe Ltd, ［Great Dunmow, Essex］から入手可能）、及びＳ／Ｓ"frosted Silver"薄層（英国Davies Industrial Supplies（英国［Letchworth,Herts］）から入手可能）を含む。
【００３１】
上述の方法には互いに両立しないものはないので、任意の方法を単独で或いは少なくとも１つの他の任意の方法と組み合わせて用いてもよいことは当業者には明らかであろう。更に、ここに列挙したものは、網羅を意図したものではないので、所望の目的を達成する他の方法も本発明の開示事項の利点を与えることが当業者には自明であろう。
【００３２】
これらの実施形態においては、第２信号が生成されるのに要する時間を低減することは望ましいので、上記に概説した方法と概ね逆をなしても所望の効果を達成することも当業者には自明であろう。
【００３３】
本発明の更に相当に好ましい特徴は、「信号形成」時間と称されるものを低減することである。この「信号形成時間」とは、一部の観察者（即ち２０％未満）に知覚可能な第２信号の初期出現から、（人口集団から無作為に選出された）観察者の９５％以上に知覚可能な明白な信号に第２信号を形成させるのに要する時間である。例えば従来のClearblue（登録商標）分析デバイスの調整信号は比較的に長い信号形成時間を有し、調整領域における最初の仄かな青い色合いから非常に明確な容易に知覚できる青いマークを形成するまでに約１５秒を要する。これは信号が調整指示計として働く単なる信号機能を果たすのみの場合には容認できるが、信号がタイマーとしても働くように意図されている場合には、長い信号形成時間は、いつ分析試験結果を読み取るべきか（例えば第２信号の初期知覚に際してか、又はその完全な形成の知覚に際してか、或いは介在する１５秒の形成時間の間の或る中間点においてか）についてユーザーの心象に疑義をもたらすので好ましくない。
【００３４】
従って本発明の好ましい特徴は、第２信号の信号形成時間が１５秒未満であり、好ましくは１２秒未満であり、更に好ましくは１０秒未満であり、最も好ましくは８秒未満である。分析結果を読み取るときにユーザーに即時信号を与えるように、一般に短い信号形成時間が好ましい。
【００３５】
信号形成時間を短縮する幾つかの方法が発明者により工夫されてきた。１つの手法は、調整ラテックス標識付け抗体（又は、他の実施形態においては他の標識付け調整信号形成試薬）の個別の補給所を調整領域へ近接させるか、又は、この個別の補給所をより近接して規定された領域に置くかの何れか一方或いは両方である。これは調整ラテックスが、試料の採取により再懸架したときに、分析デバイスに沿って移動する間にむしろ分散する傾向があるので、調整ラテックスが長時間に亘って調整領域に到達する。この分散は、調整ラテックスが調整領域に到達する前に移動するように距離を短縮することにより低減される。従って例えば１つの実施形態において、第２信号の形成に要する時間は調整領域を下流側へ移動させることにより短縮でき、同時に、「信号形成」時間は調整ラテックスを調整領域へ近接して配置することにより短縮できる。
【００３６】
信号形成時間を短縮する更に好ましい他の方法は、分析デバイスへ塗布された調整ラテックスの量を増加することである。これは分析デバイスへ塗布する調整ラテックスの再懸架の濃度を増大することにより都合よく達成できる。
【００３７】
約２％ｗ／ｖラテックスは代表的な実施形態に特に適しており、分析デバイス当たり約２２μｇの調整ラテックスの沈積がもたらされる。
【００３８】
第２の局面において、本発明は分析を実行する方法を与え、この方法は上述に規定した本発明の第１の局面による分析デバイスの使用を含む。
【００３９】
本発明の様々な特徴について、添付図面を参照して図示的な例示により更に詳細に説明する。
【例】
【００４０】
例１−第２信号（「タイマー」調整）形成についての時間調整
分析デバイスの試料との接触と調整領域における第２信号の形成との間の遅延を交番させることの実現可能性の検証を実行するために多数の実験をなした。１つのモデルとして、発明者はUnipath Ltd（英国ベッドフォード）から市販されているClearblue（登録商標）妊娠テストキットを用いた。
【００４１】
Clearblue（登録商標）デバイスの説明においては、分析デバイスを尿試料に接触させた６０秒後に調整信号を形成する必要があり、その目的は、この信号が所望の時間が経過して分析結果を読み取る準備ができていることをユーザーに対して付加的に示すことである。既存のClearblue（登録商標）デバイスによる予備的な試験は、一般に調整信号は尿試料との初期（２０秒）定温放置から２０乃至２５秒後に現れることを示している。従って既存のデバイスを改造するためには第２信号の出現を３５乃至４０秒遅延させる必要がある。
【００４２】
様々な試みが第２の信号の出現における所望の遅延を得る観察により調査された。
【００４３】
１．１  第１の試みは調整領域を芯から更に離す下流側への移動である。
【００４４】
試験は、試料前方が１分において達したデバイス上の位置を決定するように実行した。ニトロセルローズの下部から測定して２５．０ｍｍの値が得られた。
【００４５】
ニトロセルローズストリップの下部下流端から測定した１６．５ｍｍにおける調整ライン（現在のClearblue（登録商標）デバイスにおける調整ラインの位置）は０．７５％ｗ／ｖ固体ラテックスと、尿試料との接触から２０秒の定温放置時間とを用いたところ、１０秒後に調整ライン信号が５クェーサー(Quasar)（任意）単位の強度で既に可視となり、６０秒後には強度は１２乃至１３クェーサー単位となった。（説明の例としてQuasar（商標）装置が、側流試験棒により生成された可視信号の強度を定量化するために発明者が用いたデバイスである。試験棒を通じて光を輝かせ、この光の強度を試験棒の他の側における検出器により測定した。吸収された光（ひいては試験信号の強度）の割合は棒上の信号の有無においてデバイスを透過した光量を比較することにより評価した）。２５ｍｍにおける調整ラインを用いると、１０秒における強度が概ね１クェーサー単位であり、また６０秒においては６クェーサー単位と８クェーサー単位との間であり、３乃至５単位の強度（即ち非熟練者が調整ラインを知覚する最低強度）に達するのに４０秒を要する。従って調整ライン位置を１６．５ｍｍ乃至２５．０ｍｍに移動させることは調整ライン形成を相当に遅延させる。
【００４６】
１．２  低速流出ニトロセルローズ
Clearblue（登録商標）デバイスに現在用いられているもの以外に低速流ニトロセルローズ膜を用いて遅延調整信号形成をなすことが提案された。ニトロセルローズの流速は細孔の大きさにより制御され、これはニトロセルローズ混合体における水の量（小さな範囲内で流速を制御）か、又はニトロセルローズの混合全体の変更（例えば洗剤、界面活性剤、水及びニトロセルローズの量の変更を採用）して流速の大きな交番を引き起こすかの何れかにより制御される。Schleicher and Schuell GmbH ("S&S" Dassel,ドイツ)とMillipore との両社からの多くの膜を試験した。即ちS&S 170/100  及びMillipore HiFlow（高速流）膜範囲HF75, HF90, HF120, HF135, HF180, HF240である。
【００４７】
S&S 170/100 膜を１００ｎｍ径ラテックス粒子による実験に用いた。１００ｎｍラテックスは170/100 ニトロセルローズ膜の調整ライン位置（１６．５ｍｍ）へ１分以内に流れるが、３８０ｎｍ粒子（従来のClearblue（登録商標）デバイスに用いられた大きさ）は調整領域に到達するまでに５分以上を要することが判明している。従ってS&S 170/100 膜の使用は小さな大きさのラテックス粒子と関連させるのに適している。
【００４８】
実験はMillipore 社（ベッドフォード、マサチューセッツ、米国）から入手可能なニトロセルローズ膜のHiFlow膜範囲（HF75, HF90, HF120, HF135, HF180及びHF240）のニトロセルローズの各速度を用いて調整ライン形成においても処理した。液体をストリップ上で４ｃｍ流すのに要する秒単位の時間に関する値はMillipore 社において試験されたときのものである。
【００４９】
ニトロセルローズ膜のために望ましい特性は、調整ラインは、試料との定温放置後の４０秒では見ることができない（即ち＜５クェーサー単位）が、６０秒では見ることができる（即ち＞５クェーサー単位）ということである。５クェーサー単位の強度は、非熟練者による判別可能な最小信号強度として採用した。様々な膜について、ｈＣＧを伴わない尿試料と、濃度４００ｍＩＵ／ｍｌのｈＣＧを包含する尿試料とを用いて試験した。これらの結果はそれぞれ図１及び図２に示してある。
【００５０】
図１及び図２は、ｈＣＧを含まない尿試料（図１）または濃度４００ｍＩＵ／ｍｌのｈＣＧを包含する尿試料（図２）との定温放置に続く４０または６０秒後の（任意の「クェーサー」単位で測定された）調整領域信号の強度を示す棒チャートであり、  従来のClearblue（登録商標）デバイスと、様々な流速による異なるMilliporeニトロセルローズ膜を用いて準備された同等なデバイスの各々とについてのものである。
【００５１】
図は、所望の基準に最もよく整合するのはＨＦ１８０であることを示し、これは試験下の試料がｈＣＧを包含しているか否かに拘わらず、４０秒後に５単位以下の強度の調整領域信号を与えるが、６０秒後には約１０単位の信号を与える。
【００５２】
１．３  調整領域の部分的遮蔽
調整ラインが標準的に形成されることが可能であるが、その消費者による知覚が充分に遅延するならば、調整信号の効果的出現を遅延させることが可能である。ユーザーによる調整ラインの知覚は調整領域の区画上を透明材料で被覆することにより遅延させることができる。これは、充分な強度の調整ラインのみがユーザーにより調整領域に見ることができることを意味している。
【００５３】
裏当ラミネート（ＡＲｃａｒｅ（登録商標）７８２３、 Adhesives Research Europe Ltd製）を（粘着テープを用いて）所定位置に固定して、試験領域を覆うことのないようにした（従って試験ラインの出現自体は交番しない）が、調整領域は覆った。使用したラミネートは透過性で、不透明な外観であり、調整窓を通じて見る側に配置された。このラミネートは、約５クェーサー単位に値する信号強度により描き出された調整ライン形成の知覚 を緩慢に低下させるので、既存のClearblue（登録商標）についての調整ラインの視認性を２０秒から３０秒遅延させる。他のラミネート材料の試料は現在試験中である。 
例２：信号形成時間の低減
上述したように、本発明における如く調整信号がタイマー機能も果たす際には、信号形成時間を最小化することが望ましい。発明者は従来のClearblue（登録商標）分析デバイスについて信号形成時間を低減することを試験する幾つかの実験をなした。従来のClearblue（登録商標）製品は、０．５％ｗ／ｖラテックス懸架からデバイスへ塗布された約７．６μｇの調整ラテックスを包含する。試験ラテックスは調整ラインにも接合される。発明者は、デバイス上に付着された調整ラテックスの量を増大するならば調整信号形成時間が低減されることを確かめようとした。実験は、調整ラテックスを分析デバイス上へ０．７５、１．５０及び２．０％（ｗ／ｖ）ラテックスの懸架から付着させて、信号形成時間を比較した。この結果は、信号強度（「クェーサー」単位）対時間のグラフである図３に示す。
【００５４】
図３は、０．７５％懸架からの調整ラテックスにより、調整ラインを非熟練者が見ることのできる強度（即ち５単位）へ形成するのに１５秒を要することを示している。ラテックスが２．０％（ｗ／ｗ）固体で付着した場合に、調整ラインを同様な強度へ形成するためには１０秒未満である。この結果は６０秒における調整ラインの強度が０．７５％固体のラテックスを用いて得られる１１クェーサー単位の強度から２．０％固体のラテックスを用いて得られる４２クェーサー単位へ大きく増大する。
【図面の簡単な説明】
【００５５】
【図１】図1は様々なニトロセルローズ膜を含む分析デバイスを用いて４０又は６０秒後に生成された調整信号の強度を比較する棒チャートである。
【図２】図２は様々なニトロセルローズ膜を含む分析デバイスを用いて４０又は６０秒後に生成された調整信号の強度を比較する棒チャートである。
【図３】図３は時間（秒）に対する調整信号の強度（任意の「クェーサー(Quasar)」ユニット）のグラフである。
【図１】
2005514621.tif 000003
【図２】
2005514621.tif 000004
【図３】
2005514621.tif 000005
【国際調査報告】
2005514621.tif 000006
2005514621.tif 000007
2005514621.tif 000008
2005514621.tif 000009