(57)【要約】本発明は、医薬製剤の有効成分として有用なカルボキサミド類に関する。本発明のカルボキサミド類は、ＩＰ受容体アンタゴニスト活性を有し、ＩＰ受容体アンタゴニスト活性に関連する疾患の予防および処置に使用できる。そのような疾患には、以下のような泌尿器疾患または障害が含まれる：膀胱下閉塞、過活動膀胱、尿失禁、排尿筋反射亢進、排尿筋不安定、膀胱容量の減少、頻繁な尿意、切迫性尿失禁、ストレス性尿失禁、膀胱の反応亢進、前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺炎、頻尿、夜尿症、尿意切迫、骨盤過敏症、尿道炎、骨盤疼痛症候群、前立腺痛、膀胱炎または特発性膀胱過敏症。本発明の化合物はまた、炎症性疼痛、神経因性疼痛、急性疼痛、慢性疼痛、歯痛、月経前疼痛、内臓の疼痛、頭痛などを含むがこれらに限定されるわけではない、疼痛；低血圧；血友病および出血；および炎症の処置にも有用である。なぜなら、これらの疾患も、ＩＰ受容体アンタゴニストによる処置で緩和されるからである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2005529181.tif 000022
式中、
ｍおよびｎは、独立して０ないし２の整数を表し；
−Ｘ−は、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−を表し；
Ｒ１は、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−ＳＯＲ１１、−ＳＯ２Ｒ１１、−ＮＲ１２Ｒ１３または−ＣＨＲ１４Ｒ１５を表し
［ここで、Ｒ１１は、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルキニル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルキルを表し、
Ｒ１２およびＲ１３は、独立して、水素を表すか、または、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルキニル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルキルを表すか、または、
Ｒ１２およびＲ１３は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、ＯまたはＮＨにより中断されていることもある５ないし７員の飽和ヘテロ環を形成し；
Ｒ１４およびＲ１５は、独立して、水素を表すか、または、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルキニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルキル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルコキシを表すか、または、
Ｒ１４およびＲ１５は、それらが結合しているＣＨと一緒になって、ＮＨもしくはＯにより中断されていることもある（Ｃ３−８）シクロアルキル、またはヒドロキシ、ハロゲンもしくは（Ｃ１−６）アルキルにより置換されていることもあるフェニルを形成する］；そして、
Ｒ２は、水素、シアノ、（Ｃ１−６）アルコキシ、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ２−６）アルキニル、（Ｃ３−７）シクロアルキル、または、アミノ、（Ｃ１−６）アルキルアミノもしくはフェニルにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルキルを表す、
のカルボキサミド誘導体、その互変体もしくは立体異性体、またはそれらの塩。
【請求項２】
式（Ｉ'）：
【化２】
2005529181.tif 000023
式中、
−Ｘ−は、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−を表し；
Ｒ１は、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−ＳＯＲ１１、−ＳＯ２Ｒ１１、−ＮＲ１２Ｒ１３または−ＣＨＲ１４Ｒ１５を表し
［ここで、Ｒ１１は、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルキニル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルキルを表し、
Ｒ１２およびＲ１３は、独立して、水素を表すか、または、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルキニル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルキルを表すか、または、
Ｒ１２およびＲ１３は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、ＯまたはＮＨにより中断されていることもある５ないし７員の飽和ヘテロ環を形成し；
Ｒ１４およびＲ１５は、独立して、水素を表すか、または、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルキニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルキル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルコキシを表すか、または、
Ｒ１４およびＲ１５は、それらが結合しているＣＨと一緒になって、ＮＨもしくはＯにより中断されていることもある（Ｃ３−８）シクロアルキル、またはヒドロキシ、ハロゲンもしくは（Ｃ１−６）アルキルにより置換されていることもあるフェニルを形成する］；そして、
Ｒ２は、水素、シアノ、（Ｃ１−６）アルコキシ、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ２−６）アルキニル、（Ｃ３−７）シクロアルキル、または、アミノ、（Ｃ１−６）アルキルアミノもしくはフェニルにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルキルを表す、
のカルボキサミド誘導体、その互変体もしくは立体異性体、またはそれらの塩。
【請求項３】
式中、
Ｒ１が、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−ＳＯＲ１１、−ＳＯ２Ｒ１１、−ＮＲ１２Ｒ１３または−ＣＨＲ１４Ｒ１５を表す
［ここで、Ｒ１１は、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ２−６）アルキニル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ１−６）アルキルを表し；
Ｒ１２およびＲ１３は、独立して、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ２−６）アルキニル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ１−６）アルキルを表し；
Ｒ１４およびＲ１５は、独立して、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ２−６）アルキニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ１−６）アルキル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ１−６）アルコキシを表す］、
請求項１または請求項２に記載のカルボキサミド誘導体、その互変体もしくは立体異性体、またはそれらの塩。
【請求項４】
式中、
Ｒ１が、フェノキシ（Ｃ１−６）アルキル、フェノキシ（Ｃ１−６）アルケニル、フェノキシ（Ｃ１−６）アルキニルまたはフェニル（Ｃ１−６）アルコキシである、
請求項１または請求項２に記載のカルボキサミド誘導体、その互変体もしくは立体異性体、またはそれらの塩。
【請求項５】
式中、
Ｒ２がフェニル（Ｃ１−６）アルキルである、
請求項１または請求項２に記載のカルボキサミド誘導体、その互変体もしくは立体異性体、またはそれらの塩。
【請求項６】
式中、
Ｒ２がベンジルである、
請求項１または請求項２に記載のカルボキサミド誘導体、その互変体もしくは立体異性体、またはそれらの塩。
【請求項７】
該誘導体が、以下の化合物：
Ｎ−（４−フェノキシメチルシンナモイル）フェニルアラニン；
Ｎ−［３−（４−フェノキシメチルフェニル）プロピオニル］フェニルアラニン；
Ｎ−（４−フェノキシメチルフェニルプロピオロイル）フェニルアラニン；および
Ｎ−（４−ベンジルオキシシンナモイル）フェニルアラニン
からなる群から選択される、請求項１に記載のカルボキサミド誘導体、その互変体もしくは立体異性体、またはそれらの塩。
【請求項８】
請求項１または請求項２に記載のカルボキサミド誘導体、その互変体もしくは立体異性体、またはそれらの生理的に許容し得る塩を有効成分として含む、医薬。
【請求項９】
１またはそれ以上の医薬的に許容し得る賦形剤をさらに含む、請求項８に記載の医薬。
【請求項１０】
カルボキサミド誘導体、その互変体もしくは立体異性体、またはそれらの生理的に許容し得る塩が、ＩＰ受容体アンタゴニストである、請求項８に記載の医薬。
【請求項１１】
泌尿器系障害または疾患の予防および／または処置のための、請求項８に記載の医薬。
【請求項１２】
疼痛の予防および／または処置のための、請求項８に記載の医薬。
【請求項１３】
低血圧の予防および／または処置のための、請求項８に記載の医薬。
【請求項１４】
血友病および出血の予防および／または処置のための、請求項８に記載の医薬。
【請求項１５】
炎症の予防および／または処置のための、請求項８に記載の医薬。
【請求項１６】
泌尿器系障害の処置および／または予防のための医薬を製造するための、請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項１７】
ＩＰ受容体アンタゴニスト的に有効な量の少なくとも１つの請求項１に記載の化合物を投与することによる、ヒトおよび動物における泌尿器系障害の制御方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の詳細な説明
技術分野
本発明は、医薬製剤の有効成分として有用なカルボキサミド誘導体に関する。本発明のカルボキサミド類は、ＩＰ受容体アンタゴニスト活性を有し、ＩＰ受容体アンタゴニスト活性に関連する疾患の予防および処置に使用できる。
【０００２】
より具体的には、本発明のカルボキサミド誘導体は、泌尿器科の疾患または障害の処置および予防に有用である。
【０００３】
本発明の化合物はまた、疼痛；低血圧；血友病および出血；炎症；アレルギーまたは喘息に起因する呼吸状態の処置にも有用である。なぜなら、これらの疾患も、ＩＰ受容体アンタゴニストによる処置で緩和されるからである。
【０００４】
背景技術
プロスタグランジン類（またはプロスタノイド類、ＰＧ類）は、膜のリン脂質から生成される生体活性脂質介在物質の一群である。それらは、３、４または５個の二重結合を含む炭素２０個の必須脂肪酸から形成され、シクロペンタン環を有する。それらはシクロペンタン環構造によって６個の主要なクラス（Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、ＨまたはＩ）に分類される。それらの主要なクラスは、それらの脂肪酸前駆体を反映して、添え字１、２または３によりさらに細分される。ＰＧＩ２は、プロスタノイド類のメンバーであり、二重環構造を有し、アラキドン酸から誘導される。ＰＧＩ２の受容体は、ＩＰ受容体と呼ばれる７回膜貫通Ｇタンパク質共役型受容体である。ＩＰ受容体は、少なくともＧｓ型Ｇタンパク質と共役し、アデニル酸シクラーゼおよびホスホリパーゼＣを活性化する。ＩＰの発現は、大動脈、冠／肺／大脳動脈、血小板、肺および後根神経節並びにいくつかの他の組織で明らかにされている。
【０００５】
血管に対するＰＧＩ２のよく知られている作用の１つは、血管拡張および低血圧を引き起こすことである。特に虚血性ショックにおいて、ＰＧＩ２が産生され、全身的低血圧の誘導に関与する（G.D. Bottoms et al, Am J Vet Res 1982, 43(6), 999-1002）。従って、ＩＰ受容体アンタゴニストは、虚血性ショックに関連する低血圧を防止し得る。
【０００６】
ＰＧＩ２の血小板に対する他のよく知られた作用は、凝集の抑制である。ＩＰ受容体ノックアウトマウスでは、ＦｅＣｌ３に誘導される血栓形成が、野生型マウスのものと比較して高まり（T. Murata et al, Nature 1997, 388, 678- 682.）、ＩＰ受容体の血小板阻害への関与が確認されている。従って、ＩＰ受容体アンタゴニストは、血小板活性化を高め、限定されるわけではないが、血友病や出血などの過剰失血を抑制し得る。
【０００７】
ＰＧＩ２はまた、炎症に関与する。炎症組織では、プロスタグランジン類を含む様々な炎症介在物質が産生される。ＰＧＩ２はまた、血流を増加するために、生成され血管拡張を誘導する。これは、炎症領域における血管透過性、浮腫形成および白血球炎症を高める (T. Murata et al, Nature 1997, 388, 678- 682.）。従って、ＩＰ受容体アンタゴニストは、炎症の処置に効能があり得る。
【０００８】
ＰＧＩ２は、呼吸器のアレルギーまたは喘息の病因に関与し得る。それは自然に生成され、ヒトの肺における主要なプロスタグランジンであり、適切な抗原攻撃はＰＧＩ２産生を増加させる（E.S. Schulman et al, J Appl Physiol 1982, 53(3), 589-595.）。従って、ＩＰ受容体アンタゴニストは、これらの呼吸器疾患の処置に有用であり得る。
【０００９】
加えて、痛覚過敏の誘導におけるＩＰ受容体のある重要な役割が、ＩＰ受容体ノックアウトマウスにより明確に示された（T. Murata et al., Nature 1997, 388, 678 682.）。腹腔への酢酸の注射は、ＰＧＩ２の産生を誘導した。このＰＧＩ２は、感覚神経のＩＰ受容体に結合すると考えられる。ＩＰ受容体は、アデニル酸シクラーゼとホスホリパーゼＣの両方の活性化と共役するので、ｃＡＭＰ依存性タンパク質キナーゼ（ＰＫＡ）およびタンパク質キナーゼＣ（ＰＫＣ）が活性化される。ＰＫＡおよびＰＫＣは、ＶＲ１、Ｐ２Ｘ３およびＴＴＸ−Ｒなどの感覚神経上のイオンチャネルを調節することが知られている。結果として、ＰＧＩ２は、感覚神経を鋭敏化し、神経伝達物質の放出を高める。故に、酢酸注射は、マウスに侵害受容反応（もがき）を誘導する。この酢酸に誘導されるもがきは、ＩＰ受容体無発現マウスにおいて、インドメタシン処置野生型マウスと同レベルに、大幅に減少する。いくつかの他の齧歯類におけるインビボの痛覚過敏研究およびインビトロの研究は、ＰＧＩ２が痛覚過敏の誘導に主要な役割を果たすこと、およびＰＧＩ２が感覚神経の重要な調節物質として作用することを、さらに支持する（K. Bley et al, Trends in Pharmacological Sciences 1998, 19(4), 141-147.）。従って、ＩＰ受容体アンタゴニストは、疼痛の処置に有用であり得る。
【００１０】
感覚神経は、疼痛の知覚のみならず、膀胱膨満の知覚においても非常に重要な役割を果たす。正常な対象では、Ａデルタ感覚線維が膀胱膨満の知覚に主要な役割を果たすと考えられている。しかしながら、限定されるわけではないが、脊椎損傷、膀胱炎、パーキンソン病、多発性硬化症、過去の脳血管の事故および前立腺肥大症（ＢＰＨ）に起因する膀胱下閉塞（bladder outlet obstruction；ＢＯＯ）による過活動膀胱の病状では、Ｃ線維感覚神経の感度が上方調節され、下部尿路症状の誘導に寄与する。カプサイシンまたはその強力な類似体であるレシニフェラトキシンは、両方とも膀胱を神経支配しているＶＲ１陽性Ｃ線維求心性神経を脱感作させるが、それらの膀胱内注射による過活動膀胱患者の処置は、いくつかの治験で有効であると示された（C. Silva et al, Eur Urol. 2000, 38(4), 444-452.）。従って、Ｃ線維感覚神経は、過活動膀胱の病理に重要な役割を果たす。ＰＧＩ２は、膀胱で局所的に生成され、ヒト膀胱から放出される主要なプロスタグランジンである。ウサギのＢＯＯモデルでは、安定なＰＧＩ２代謝物がＢＯＯ膀胱で増加すると報告された（JM. Masick et al, Prostaglandins Other Lipid Mediat. 2001, 66(3), 211-219.）。故に、疾患膀胱由来のＰＧＩ２は、Ｃ線維感覚神経を鋭敏化し、結果として、過活動膀胱の症状を誘導し得る。従って、ＩＰ受容体アンタゴニストは、過活動膀胱および関連泌尿器障害の処置に有用であると期待される。
【００１１】
ＥＰ−Ａ−４０７２００は、一般式：
【化１】
2005529181.tif 000002
式中、Ｒ１'およびＲ２'は、その出願中で定義された通りである、
で表される抗高脂血症剤を開示している。
【００１２】
ＤＥ−Ａ−２３２８３９１は、一般式：
【化２】
2005529181.tif 000003
で表される、心臓疾患の処置に有用な化合物を開示している。
【００１３】
しかしながら、これらの参照文献および他の参照文献のいずれも、ＩＰ受容体アンタゴニスト活性を有するカルボキサミド誘導体を開示していない。
【００１４】
効果的なＩＰ受容体アンタゴニスト活性を有し、ＩＰ受容体アンタゴニスト活性に関連する疾患の予防および処置に使用できる化合物の開発が望まれてきた。
【００１５】
発明の要旨
カルボキサミド誘導体の化学修飾に関する大規模な研究の結果、本発明者らは、本発明に関する構造の化合物が、予想外に優れたＩＰ受容体アンタゴニスト活性を有することを見出した。本発明は、これらの知見に基づいて成し遂げられた。
【００１６】
本発明は、式（Ｉ）の新規カルボキサミド誘導体、その互変体もしくは立体異性体、またはそれらの塩を提供するものである：
【化３】
2005529181.tif 000004
式中、
ｍおよびｎは、独立して０ないし２の整数を表し；
−Ｘ−は、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−を表し；
Ｒ１は、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−ＳＯＲ１１、−ＳＯ２Ｒ１１、−ＮＲ１２Ｒ１３または−ＣＨＲ１４Ｒ１５を表し
［ここで、Ｒ１１は、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルキニル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルキルを表し、
Ｒ１２およびＲ１３は、独立して、水素を表すか、または、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルキニル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルキルを表すか、または、
Ｒ１２およびＲ１３は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、ＯまたはＮＨにより中断されていることもある５ないし７員の飽和ヘテロ環を形成し；
Ｒ１４およびＲ１５は、独立して、水素を表すか、または、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルキニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルキル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルコキシを表すか、または、
Ｒ１４およびＲ１５は、それらが結合しているＣＨと一緒になって、ＮＨもしくはＯにより中断されていることもある（Ｃ３−８）シクロアルキル、またはヒドロキシ、ハロゲンもしくは（Ｃ１−６）アルキルにより置換されていることもあるフェニルを形成する］；そして、
Ｒ２は、水素、シアノ、（Ｃ１−６）アルコキシ、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ２−６）アルキニル、（Ｃ３−７）シクロアルキル、または、アミノ、（Ｃ１−６）アルキルアミノもしくはフェニルにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルキルを表す。
【００１７】
本発明の化合物は、驚くべきことに、優れたＩＰ受容体アンタゴニスト活性を示す。従って、それらは、医薬または医学用組成物を産生するのに適し、ＩＰ受容体アンタゴニストでの処置により緩和される疾患に有用であり得る。
【００１８】
より具体的には、本発明のカルボキサミド誘導体は、ＩＰ受容体に拮抗するので、泌尿器疾患または障害の処置および予防に有用である。
【００１９】
本発明の化合物は、また、泌尿器疾患または障害の処置に有用である。そのような疾患または障害には、膀胱下閉塞、過活動膀胱、尿失禁、排尿筋反射亢進、排尿筋不安定、膀胱容量の減少、頻繁な尿意（frequency of micturition）、切迫性尿失禁、ストレス性尿失禁、膀胱の反応亢進、前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺炎、頻尿（urinary frequency）、夜尿症、尿意切迫（urinary urgency）、骨盤過敏症（pelvic hypersensitivity）、尿道炎、骨盤疼痛症候群、前立腺痛、膀胱炎または特発性膀胱過敏症（idiophatic bladder hypersensitivity）が含まれる。
【００２０】
本発明の化合物はまた、炎症性疼痛、神経因性疼痛、急性疼痛、慢性疼痛、歯痛、月経前疼痛、内臓の疼痛、頭痛などを含むがこれらに限定されるわけではない、疼痛；低血圧；血友病および出血；炎症；アレルギーまたは喘息に起因する呼吸状態の処置に有用である。なぜなら、これらの疾患は、ＩＰ受容体アンタゴニストによる処置で緩和されるからである。
【００２１】
他の実施態様では、本発明は、式（Ｉ'）のカルボキサミド誘導体、その互変体もしくは立体異性体、またはそれらの塩を提供する:
【化４】
2005529181.tif 000005
式中、
−Ｘ−は、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−を表し；
Ｒ１は、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−ＳＯＲ１１、−ＳＯ２Ｒ１１、−ＮＲ１２Ｒ１３または−ＣＨＲ１４Ｒ１５を表し
［ここで、Ｒ１１は、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルキニル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルキルを表し、
Ｒ１２およびＲ１３は、独立して、水素を表すか、または、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルキニル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルキルを表すか、または、
Ｒ１２およびＲ１３は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、ＯまたはＮＨにより中断されていることもある５ないし７員の飽和ヘテロ環を形成し；
Ｒ１４およびＲ１５は、独立して、水素を表すか、または、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ２−６）アルキニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルキル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルコキシを表すか、または、
Ｒ１４およびＲ１５は、それらが結合しているＣＨと一緒になって、ＮＨもしくはＯにより中断されていることもある（Ｃ３−８）シクロアルキル、またはヒドロキシ、ハロゲンもしくは（Ｃ１−６）アルキルにより置換されていることもあるフェニルを形成する］；
Ｒ２は、水素、シアノ、（Ｃ１−６）アルコキシ、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ２−６）アルキニル、（Ｃ３−７）シクロアルキル、または、アミノ、（Ｃ１−６）アルキルアミノもしくはフェニルにより置換されていることもある（Ｃ１−６）アルキルを表す。
【００２２】
式（Ｉ）または（Ｉ'）の化合物のさらに別の実施態様は、式中、
Ｒ１が、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−ＳＯＲ１１、−ＳＯ２Ｒ１１、−ＮＲ１２Ｒ１３または−ＣＨＲ１４Ｒ１５を表す
［ここで、Ｒ１１は、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ２−６）アルキニル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ１−６）アルキルを表し、
Ｒ１２およびＲ１３は、独立して、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ２−６）アルキニル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ１−６）アルキルを表し；
Ｒ１４およびＲ１５は、独立して、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ２−６）アルケニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ２−６）アルキニル、アリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ１−６）アルキル、またはアリールもしくはヘテロアリールにより置換されている（Ｃ１−６）アルコキシを表す］、
ものである。
【００２３】
式（Ｉ）または（Ｉ'）の化合物の他の実施態様は、式中、
Ｒ１が、フェノキシ（Ｃ１−６）アルキル、フェノキシ（Ｃ１−６）アルケニル、フェノキシ（Ｃ１−６）アルキニルまたはフェニル（Ｃ１−６）アルコキシを表す、
ものである。
【００２４】
式（Ｉ）または（Ｉ'）の化合物のさらなる実施態様は、式中、
Ｒ２がフェニル（Ｃ１−６）アルキルを表す、
ものである。
【００２５】
式（Ｉ）または（Ｉ'）の化合物のなおさらなる実施態様は、式中、
Ｒ２がベンジルを表す、
ものである。
【００２６】
さらに、本発明は、上記の化合物の１つおよび場合により医薬的に許容し得る賦形剤を含む医薬を提供する。
【００２７】
アルキル自体、並びにアルコキシ、アルカノイル、アルキルアミノ、アルキルアミノカルボニル、アルキルアミノスルホニル、アルキルスルホニルアミノ、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルアミノおよびアルカノイルアミノ中の「アルコ（アルカ）」および「アルキル」は、一般的に炭素数１ないし６、好ましくは１ないし４、そして特に好ましくは１ないし３の線状または分枝アルキル基を表し、例示的に、そして好ましくは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチルおよびｎ−ヘキシルを表す。
【００２８】
アルコキシは、例示的に、そして好ましくは、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシおよびｎ−ヘキソキシを表す。
【００２９】
アルキルアミノは、１個または２個の（独立して選択される）アルキル置換基を有するアルキルアミノ基を表し、例示的に、そして好ましくは、メチルアミノ、エチルアミノ、ｎ−プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ、ｎ−ペンチルアミノ、ｎ−ヘキシル−アミノ、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジエチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−メチル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ−ｔ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−ｎ−ペンチルアミノおよびＮ−ｎ−ヘキシル−Ｎ−メチルアミノを表す。
【００３０】
アリール自体は、炭素数６ないし１４の単環式ないし三環式の芳香族性炭素環式基を表し、例示的に、そして好ましくは、フェニル、ナフチルおよびフェナントレニルを表す。
【００３１】
ヘテロアリール自体は、一般に５個ないし１０個、好ましくは５個または６個の環原子、および、Ｓ、ＯおよびＮからなる群から選択される、５個まで、好ましくは４個までのヘテロ原子を有する、芳香族性、単環式または二環式の基を表し、例示的に、そして好ましくは、チエニル、フリル、ピロリル、チアゾリル、オキサゾリル、イミダゾリル、ピリジル、ピリミジル、ピリダジニル、インドリル、インダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、キノリニル、イソキノリニルを表す。
【００３２】
ヘテロ環（複素環）自体は、一般に４個ないし１０個、好ましくは５個ないし８個の環原子、および、Ｎ、Ｏ、Ｓ、ＳＯおよびＳＯ２からなる群から選択される、３個まで、好ましくは２個までのヘテロ原子および／またはヘテロ基を有する、単環式または多環式、好ましくは単環式または二環式の、非芳香族性のヘテロ環の基を表す。複素環の基は、飽和または部分不飽和であり得る。例示的に、そして好ましくは、テトラヒドロフラン−２−イル、ピロリジン−２−イル、ピロリジン−３−イル、ピロリニル、ピペリジニル、モルホリニル、ペルヒドロアゼピニルなどの、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選択される２個までのヘテロ原子を有する、５員ないし８員の単環式飽和複素環基が好ましい。
【００３３】
発明の実施態様
本発明の式（Ｉ）の化合物は、限定されるわけではないが、様々な既知方法を組み合わせることにより製造できる。いくつかの実施態様では、出発物質または中間体として使用される化合物のアミノ基、カルボキシル基およびヒドロキシル基などの１またはそれ以上の置換基は、当業者に知られる保護基により保護されるのが有利である。保護基の例は、"Protective Groups in Organic Synthesis (3rd Edition)" by Greene and Wuts, John Wiley and Sons, New York 1999 に記載されている。
【００３４】
本発明の式（Ｉ）の化合物は、限定されるわけではないが、下記の方法［Ａ］により製造できる。
方法［Ａ］
【化５】
2005529181.tif 000006
【００３５】
式（Ｉ）の化合物（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｘ、ｍおよびｎは、上記定義と同じであり、Ｚは、Ｃ１−６アルキルを表す）またはその塩は、式（ＩＩ）の出発物質の加水分解により得ることができる。
【００３６】
反応は、例えば、ジクロロメタン、クロロホルムおよび１,２−ジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水素類；ジエチルエーテル、イソプロピルエーテル、ジオキサンおよびテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）および１,２−ジメトキシエタンなどのエーテル類；ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族性炭化水素類；Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミドおよびＮ−メチルピロリドンなどのアミド類；ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などのスルホキシド類；メタノール、エタノール、１−プロパノール、イソプロパノールおよびｔｅｒｔ−ブタノールなどのアルコール類；水などを含む溶媒中で実行し得る。場合により、上記列挙したものから選択される２またはそれ以上の溶媒を、混合し、使用できる。
【００３７】
反応温度は、反応させようとする化合物に応じて、場合により設定できる。反応温度は、通常、限定されるわけではないが、約２０℃ないし１００℃である。反応は、通常、３０分間ないし４８時間、好ましくは１ないし２４時間実行し得る。
【００３８】
反応は、例えば、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドおよびカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなどのアルカリ金属アルコキシド；水酸化ナトリウム、水酸化リチウムおよび水酸化カリウムなどのアルカリ金属水酸化物などを含む塩基の存在下で有利に実行できる。
【００３９】
【化６】
2005529181.tif 000007
式（ＩＩ）の化合物（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｘ、Ｚ、ｍおよびｎは、上記定義と同じである）は、化合物（ＩＩＩ）とアミン（ＩＶ）との反応により製造できる。
【００４０】
反応は、例えば、ジクロロメタン、クロロホルムおよび１,２−ジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水素類；ジエチルエーテル、イソプロピルエーテル、ジオキサンおよびテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）および１,２−ジメトキシエタンなどのエーテル類；ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族性炭化水素類；Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミドおよびＮ−メチルピロリドンなどのアミド類；ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などのスルホキシド類などを含む溶媒中で実行し得る。場合により、上記列挙したものから選択される２またはそれ以上の溶媒を、混合し、使用できる。
【００４１】
反応温度は、反応させようとする化合物に応じて、場合により設定できる。反応温度は、通常、限定されるわけではないが、約０℃ないし１００℃である。反応は、通常、３０分間ないし４８時間、好ましくは１ないし２４時間実行し得る。
【００４２】
反応は、例えば、Ｎ,Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミドおよび１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドなどのカルボジイミド類を含むカップリング剤を使用して実行し得る。
【００４３】
化合物（ＩＩＩ）およびアミン（ＩＶ）は、市販されているか、または、既知技法の使用により製造できる。
【００４４】
【化７】
2005529181.tif 000008
【００４５】
あるいは、式（ＩＩａ）または（ＩＩａ）'の化合物（式中、Ｒ２、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｘ、Ｚ、ｍおよびｎは、上記定義と同じであり、ＡはＯまたはＳを表す）は、化合物（Ｖ）または（Ｖ）'を、各々試薬（ＶＩ）または（ＶＩ）'（式中、Ｒ１１およびＲ１２は、上記定義と同じであり、Ｙは、例えば塩素、臭素またはヨウ素などのハロゲンのような脱離基を表す）と反応させることにより製造できる。
【００４６】
反応は、例えば、ジクロロメタン、クロロホルムおよび１,２−ジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水素類；ジエチルエーテル、イソプロピルエーテル、ジオキサンおよびテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）および１,２−ジメトキシエタンなどのエーテル類；ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族性炭化水素類；Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミドおよびＮ−メチルピロリドンなどのアミド類；ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などのスルホキシド類；アセトンなどのケトン類；メタノール、エタノール、１−プロパノール、イソプロパノールおよびｔｅｒｔ−ブタノールなどのアルコール類などを含む溶媒中で実行し得る。場合により、上記列挙したものから選択される２またはそれ以上の溶媒を、混合し、使用できる。
【００４７】
反応温度は、反応させようとする化合物に応じて、場合により設定できる。反応温度は、通常、限定されるわけではないが、約０℃ないし１００℃である。反応は、通常、３０分間ないし４８時間、好ましくは１ないし２４時間実行し得る。
【００４８】
反応は、例えば、水素化ナトリウムまたは水素化カリウムなどのアルカリ金属水素化物；ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドおよびカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなどのアルカリ金属アルコキシド；水酸化ナトリウムおよび水酸化カリウムなどのアルカリ金属水酸化物；炭酸ナトリウムおよび炭酸カリウムなどのアルカリ金属炭酸塩；炭酸水素ナトリウムおよび炭酸水素カリウムなどのアルカリ金属炭酸水素塩；マグネシウムエトキシドなどのアルカリ土類金属アルコキシド；ピリジン、トリエチルアミンおよびＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ジメチルアニリン、ジエチルアニリンなどの有機アミン類などを含む塩基の存在下で有利に実行できる。
【００４９】
化合物（Ｖ）または（Ｖ）'は、市販されているか、または、式（ＩＩ）の化合物の製造と類似の方法もしくは既知技法を使用して製造できる。化合物（ＶＩ）または（ＶＩ）'は、市販されているか、または、既知技法の使用により製造できる。
【００５０】
式（Ｉ）で示される化合物またはその塩が構造中に不斉炭素を有するとき、それらの光学活性化合物およびラセミ混合物も、本発明の範囲に包含される。
【００５１】
式（Ｉ）で示される化合物の典型的な塩には、本発明の化合物と、無機もしくは有機酸、または有機もしくは無機塩基との反応により製造される塩が含まれる。かかる塩は、順に、酸付加塩および塩基付加塩として知られている。
【００５２】
塩を形成する酸には、限定ではないが、硫酸、リン酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸などの無機酸、および、限定ではないが、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、蓚酸、ｐ−ブロモフェニルスルホン酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸、酢酸などの有機酸が含まれる。
【００５３】
塩基付加塩には、限定ではないが、水酸化アンモニウム、アルカリ金属水酸化物、アルカリ土類金属水酸化物、炭酸塩、重炭酸塩などの無機塩基、および、限定ではないが、エタノールアミン、トリエチルアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンなどの有機塩基から誘導されるものが含まれる。無機塩基の例には、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、水酸化カルシウム、炭酸カルシウムなどが含まれる。
【００５４】
本発明の化合物またはそれらの塩は、その置換基に応じて、修飾されて低級アルキルエステル類または既知の他のエステル類；および／または水和物または他の溶媒和物を形成し得る。これらのエステル類、水和物および溶媒和物は、本発明の範囲に包含される。
【００５５】
本発明の化合物は、限定ではないが、通常および腸溶性被覆錠剤、カプセル剤、丸剤、粉末剤、顆粒剤、エリキシル剤、チンキ剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤、固体および液体エアゾル剤、並びに乳剤などの経口形態で、投与し得る。それらは、医薬分野の当業者に周知の形態である、限定ではないが、静脈内、腹腔内、皮下、筋肉内などの非経腸形態でも投与し得る。本発明の化合物は、適する鼻腔内媒体の局所使用により鼻腔内形態で、または、当業者に周知の経皮送達系を使用して経皮経路で、投与できる。
【００５６】
本発明の化合物を使用する投薬法は、限定ではないが、年齢、体重、性別および受容者の健康状態、処置すべき症状の重篤度、投与経路、受容者の代謝および排出機能のレベル、採用する投薬形、採用する特定の化合物およびその塩を含む様々な要因を考慮して、当業者により選択される。
【００５７】
本発明の化合物は、好ましくは、投与に先立ち、１またはそれ以上の医薬的に許容し得る賦形剤と一緒に製剤される。賦形剤は、限定ではないが、担体、希釈剤、着香剤、甘味料、潤滑剤、可溶化剤、懸濁化剤、結合剤、錠剤崩壊剤およびカプセル化材料などの不活性物質である。
【００５８】
本発明のさらに他の実施態様は、本発明の化合物および１またはそれ以上の医薬的に許容し得る賦形剤を含む医薬製剤である。賦形剤は、製剤の他の成分に適合し、その受容者に有害ではないものである。本発明の医薬製剤は、治療的有効量の本発明の化合物を、１またはそれ以上の医薬的に許容し得る賦形剤と一緒に合わせることにより製造する。本発明の組成物の作成では、有効成分を希釈剤と混合するか、または、カプセル、小袋（sachet）、紙または他の容器の形態であり得る担体中に封入し得る。担体は、希釈剤として働き得、固体、半固体または媒体として作用する液体物質であってよく、または、錠剤、丸剤、粉末剤、トローチ剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、液剤、シロップ剤、エアゾル剤、例えば１０重量％までの活性化合物を含有する軟膏、ソフトおよびハードゼラチンカプセル剤、坐剤、滅菌注射可能液剤および滅菌包装粉末剤の形態であり得る。
【００５９】
経口投与のために、有効成分を、限定ではないが、ラクトース、デンプン、スクロース、グルコース、炭酸ナトリウム、マンニトール、ソルビトール、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、メチルセルロースなどの経口用、非毒性、医薬的に許容し得る担体；場合により、限定ではないが、トウモロコシ、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガム、アルギン酸などの崩壊剤；および、場合により、例えば、限定ではないが、ゼラチン、天然糖、ベータ−ラクトース、トウモロコシ甘味料、天然および合成ガム、アカシア、トラガカント、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、蝋などの結合剤；および、場合により、例えば、限定ではないが、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸、オレイン酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、タルクなどの潤滑剤と合わせ得る。
【００６０】
粉末形態では、担体は、細かく分割された固体であり得、細かく分割された有効成分と混合されている。有効成分を、結合特性を有する担体と適する割合で混合し、錠剤を製造するのに望ましい形と大きさに成形し得る。粉末剤および錠剤は、好ましくは、約１ないし約９９重量パーセントの、本発明の新規組成物である有効成分を含有する。適する固体担体は、マグネシウムカルボキシメチルセルロース、低融点蝋およびココアバターである。
【００６１】
滅菌液体製剤には、懸濁剤、乳剤、シロップ剤およびエリキシル剤が含まれる。有効成分は、滅菌水、滅菌有機溶媒または滅菌水と滅菌有機溶媒の両方の混合物などの医薬的に許容し得る担体中に、溶解または懸濁させることができる。
【００６２】
有効成分は、例えば、水性プロピレングリコールなどの適する有機溶媒に溶解させることもできる。他の組成物は、細かく分割された有効成分を水性デンプンまたはナトリウムカルボキシメチルセルロース溶液または適する油に分散させることにより作成できる。
【００６３】
製剤は、単位剤形であり得る。それは、ヒトまたは他の哺乳動物への投与に適する単位用量を含有する、物理的に分離した単位である。単位剤形は、１個のカプセル剤もしくは錠剤、または数個のカプセル剤もしくは錠剤であり得る。「単位用量」は、本発明の活性化合物の予め定められた量であり、１またはそれ以上の賦形剤と共同して、所望の治療効果を奏するように算出されたものである。単位用量中の有効成分の量は、必要とされる特定の処置に従って、約０.１ないし約１０００ミリグラムまたはそれ以上で変動し得るか、またはそれに合わせ得る。
【００６４】
指定の効果のために使用されるとき、本発明の典型的な経口用量は、約０.０１ｍｇ／ｋｇ／日ないし約１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは、０.１ｍｇ／ｋｇ／日ないし３０ｍｇ／ｋｇ／日、最も好ましくは、約０.５ｍｇ／ｋｇ／日ないし約１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲にある。非経腸投与の場合、約０.００１ないし１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは、０.０１ｍｇ／ｋｇ／日ないし１ｍｇ／ｋｇ／日の量を投与するのが一般に有利であると明らかにされた。本発明の化合物は、一日量を一回で投与してもよく、または、総一日量を、一日に２回、３回、またはそれ以上の回数に分割した用量で投与してもよい。送達が経皮形態である場合、当然、投与は継続的である。
【００６５】
実施例
本発明を実施例の形態で詳細に説明するが、それらは決して本発明の境界および限界を定義するものと解釈されるべきではない。
下記実施例では、断りのない限り、全ての量的データは重量パーセントに関する。
【００６６】
融点は無補正である。液体クロマトグラフィー−質量分析（ＬＣ−ＭＳ）のデータは、Shimadzu Phenomenex ODS カラム（４.６ｍｍ Ｘ ３０ｍｍ）を備えた Micromass Platform LC で記録し、アセトニトリル−水（９：１ないし１：９）の混合物を、流速１ｍｌ／分で流した。質量分析は、エレクトロスプレー（ＥＳ）イオン化法（micromass Platform LC）を使用して得た。ＴＬＣは、予め被覆したシリカゲルプレート（Merck silica gel 60 F-254) 上で実施した。シリカゲル（ＷＡＫＯ−ゲルＣ−２００（７５−１５０μｍ））を、全てのカラムクロマトグラフィー分離に使用した。全化学物質は試薬等級であり、Sigma-Aldrich、和光純薬株式会社、東京化成工業株式会社、ナカライテスク株式会社、渡辺化学工業株式会社、Maybridge plc、Lancaster Synthesis Ltd.、Merck KgaA、Kanto Chemical Co., Ltd.から購入した。
【００６７】
本化合物の効果を、以下のアッセイおよび薬理試験により調べた。
［ＨＥＬ細胞への［３Ｈ］−イロプロスト結合の測定］（アッセイ１）
ヒト赤白血病細胞株ＨＥＬ９２.１.７は、American Type Culture Correction から購入し、１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）、２ｍＭグルタミン、４.５ｇ／Ｌグルコース、１０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、１ｍＭピルビン酸ナトリウム、１００Ｕ／ｍｌペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを添加したＲＰＭＩ−１６４０培地（Gibco BRL）で、加湿５％ＣＯ２雰囲気中、３７℃で維持した。細胞を遠心分離により回収し、結合アッセイ緩衝液（ＢＡＢ：５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、５ｍＭ ＭｇＣｌ２（ｐＨ７.５））で洗浄した。細胞を６.２５ｘ１０６細胞／ｍｌの密度でＢＡＢに懸濁し、１００万個の細胞を含む細胞懸濁液のアリコート１６０μｌを、９６ウェルプレート（Falcon）のウェルに入れた。次いで、１％ＤＭＳＯを含むＢＡＢで希釈した、化合物溶液２０μｌ、１００μＭイロプロスト（非特異的結合用）、または緩衝液単独（総結合）を添加した。最後に、別量の［３Ｈ］−イロプロスト（０.０２μＣｉ、０.５−１ｐｍｏｌ）含有ＢＡＢ２０μｌを添加し、室温で３０分間、穏やかに震盪しながらインキュベートした。次いで、ＧＦ／Ｃガラスフィルター（Millipore）を有するマルチスクリーンプレートのウェルに細胞懸濁液を移し、細胞を回収した。細胞を氷冷ＢＡＢ２００μｌで２回洗浄し、プレートを５５℃で３０分間維持し、フィルターを乾燥させた。ウェル中のフィルターを、計測チューブに打ち出し、Ultima Gold XR (Packard) ２ｍｌを添加した。フィルターの［３Ｈ］−放射活性を、液体シンチレーションカウンター（Beckman）で測定した。
【００６８】
［ＨＥＬ細胞におけるイロプロスト誘導ｃＡＭＰ産生アッセイ］（アッセイ２）
ＨＥＬ細胞を遠心分離により回収し、ｃＡＭＰアッセイ緩衝液（ＣＡＢ：ハンクス平衡塩溶液、１７ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、０.１％ウシ血清アルブミン、１ｍＭ ＩＢＭＸ、０.４％ＤＭＳＯおよび１ｍＭ Ｌ−アスコルビン酸ナトリウム塩（ｐＨ７.４））で洗浄した。細胞を２.５ｘ１０５細胞／ｍｌの密度でＣＡＢに懸濁し、２千個の細胞を含む細胞懸濁液アリコート８０μｌを、９６ウェルプレート（Falcon）のウェルに入れた。次いで、１％ＤＭＳＯを含むＣＡＢで希釈した化合物溶液または緩衝液単独１０μｌを添加した。プレートを３７℃で３０分間インキュベートした。次いで、別量の１００ｎＭイロプロスト含有ＣＡＢまたは緩衝液単独１０μｌを添加し、さらに３７℃で３０分間インキュベートした。ウェル中のｃＡＭＰ含量をｃＡＭＰ ＥＬＩＳＡキット（Applied Biosystems）で測定した。
【００６９】
［麻酔ラットにおける周期的膀胱収縮の測定］
（１）動物
雌の Sprague-Dawley ラット（２００〜２５０ｇ／日本チャールズ・リバー）を使用した。
【００７０】
（２）麻酔ラットにおける周期的膀胱収縮
１.２５ｇ／ｋｇのウレタン（Sigma）の腹腔内投与により、ラットを麻酔した。気管をポリエチレンチューブ（ＨＩＢＩＫＩ、８番）でカニューレ挿管し、呼吸を容易にした；試験化合物の静脈内投与のために、カニューレ（BECTON DICKINSON, PE-50）を左大腿静脈に設置した。正中切開により腹部を切開し、両尿管を切断した後、水を満たしたバルーン（容量約１ｍｌ）を、膀胱円蓋部の頂上を通して挿入した。バルーンを、ポリグラフの圧力変換器に接続した。約１５ｃｍＨ２Ｏに膀胱内圧を高めることにより、周期的膀胱収縮を誘起した。周期的膀胱収縮が安定した後、試験化合物を静脈内投与した。周期的膀胱収縮の消失時間および振幅を測定することにより、活性を評価した。膀胱収縮の振幅に対する効果を、消失が回復した後のその振幅のパーセント抑制として表現した。実験値を平均±Ｓ.Ｅ.Ｍ.で表現した。試験化合物が介在する周期的膀胱収縮の阻害を、スチューデントのｔ検定を使用して評価した。５％より小さい確率水準を、有意差と認めた。
【００７１】
ＩＰ受容体アンタゴニストアッセイの結果を、下記の実施例に示す。データは、固相合成により得られたままの化合物に対応し、従って、約４０ないし９０％の純度レベルに対応する。実用的な理由から、化合物を以下の通りに３つの活性等級にグループ分けする：
ＩＣ５０＝Ａ０.１μＭ＜Ｂ１μＭ＜Ｃ
本発明の化合物はまた、インビボアッセイにおいて、優れた選択性と強い活性を示す。
【００７２】
実施例１：
（１）４−クロロメチルベンジルアルコール
【化８】
2005529181.tif 000009
テトラヒドロフラン（ＴＨＦ、６０ｍｌ）中の４−クロロ−４−トルイル酸の溶液に、１ＭボランＴＨＦ溶液（９０ｍｌ）を添加した。混合物を室温で終夜撹拌し、メタノール（５０ｍｌ）の添加によりクエンチした。溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４／１から３／１へ）により精製し、４−クロロメチルベンジルアルコール（８.８４ｇ、９６％）を無色固体として得た。
【００７３】
（２）４−フェノキシメチルベンジルアルコール
【化９】
2005529181.tif 000010
４−クロロメチルベンジルアルコール（０.８０ｇ）、フェノール（０.４８ｇ）、８５％水酸化カリウム（０.７６ｇ）およびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ、１５ｍｌ）の混合物を、室温で終夜撹拌し、水（５０ｍｌ）と酢酸エチル（５０ｍｌ）の混合物に注いだ。有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝３／１）により精製し、４−フェノキシメチルベンジルアルコール（０.８３ｇ、７６％）を無色粒状物として得た。
【００７４】
（３）４−フェノキシメチルベンズアルデヒド
【化１０】
2005529181.tif 000011
ジクロロメタン（１０ｍｌ）中のデス−マーティン（Dess-Martin）試薬（１.７９ｇ）の溶液に、４−フェノキシメチルベンジルアルコール（０.８２ｇ）溶液を室温で滴下して添加した。混合物を室温で３０分間撹拌し、１Ｎ ＮａＯＨ水溶液（３０ｍｌ）に注いだ。有機層を水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）により精製し、４−フェノキシメチルベンズアルデヒド（０.６７ｇ、８１％）を無色固体として得た。
【００７５】
（４）ｔｅｒｔ−ブチル４−フェノキシメチルシンナメート
【化１１】
2005529181.tif 000012
ＴＨＦ（１０ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチルジエトキシホスホリルアセテート（０.６６ｇ）の溶液に、６０％水素化ナトリウム（０.１０ｇ）を０℃で添加した。混合物を１時間、氷水浴上で撹拌し、ＴＨＦ（１ｍｌ）中の４−フェノキシメチルベンズアルデヒドの溶液を滴下して添加した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、飽和塩化アンモニウム水溶液（５０ｍｌ）に注いだ。生じた懸濁液を酢酸エチルで抽出し、有機層を洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）により精製し、ｔｅｒｔ−ブチル４−フェノキシメチルシンナメート（０.７３ｇ、１００％）を、無色固体として得た。
【００７６】
（５）Ｎ−（４−フェノキシメチルシンナモイル）フェニルアラニンメチルエステル
【化１２】
2005529181.tif 000013
ｔｅｒｔ−ブチル４−フェノキシメチルシンナメート（０.２０ｇ）、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、１ｍｌ）およびジクロロメタン（１ｍｌ）の混合物を、２.５時間室温で静置した。溶媒を真空で除去し、残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ、５ｍｌ）に溶解した。その溶液に、フェニルアラニンメチルエステル（０.１５ｇ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣＩ、０.１８ｇ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ、０.１２ｇ）およびトリエチルアミン（０.１２ｍｌ）を添加した。混合物を室温で終夜撹拌し、水（３０ｍｌ）と酢酸エチル（２０ｍｌ）の混合物に注いだ。有機層を水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）により精製し、Ｎ−（４−フェノキシメチルシンナモイル）フェニルアラニンメチルエステル（０.２２ｇ、８８％）を無色固体として得た。
【００７７】
（６）Ｎ−（４−フェノキシメチルシンナモイル）フェニルアラニン
【化１３】
2005529181.tif 000014
メタノール（２ｍｌ）中のＮ−（４−フェノキシメチルシンナモイル）フェニルアラニンメチルエステル（７０ｍｇ）の溶液に、１Ｎ水酸化リチウム水溶液（０.２ｍｌ）を添加した。混合物を５０℃で終夜撹拌し、真空で濃縮した。残渣を水に溶解し、１Ｎ塩酸で酸性化した。生じた懸濁液を酢酸エチルで抽出した。有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を除去し、残渣をジイソプロピルエーテルで磨砕し、Ｎ−（４−フェノキシメチルシンナモイル）フェニルアラニン（５９ｍｇ、８６％）を無色固体として得た。
ｍｐ２０５℃；計算値［Ｍ＋１］：４０２、実測値：ｍ／ｚ４０２
分子量：４０１.４７
活性等級アッセイ２：Ａ
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 2.94 (1H, dd, J = 14.2, 9.4 Hz), 3.12 (1H, dd, J = 13.9, 4.8 Hz), 4.55-4.59 (1H, m), 5.12 (2H, s), 6.70 (1H, d, J = 17.0 Hz), 6.94 (1H, t, J =7.3 Hz), 7.01 (2H, dd, J = 8.5, 0.9 Hz), 7.18-7.31 (6H, m), 7.38 (1H, d, J = 15.8 Hz), 7.48 (2H, d, J = 8.2 Hz), 7.56 (2H, d, J = 8.2 Hz), 8.40 (1H, d, J = 8.2 Hz), 12.76 (1H, s).
【００７８】
実施例２：
（１）ｔｅｒｔ−ブチル３−（４−フェノキシメチルフェニル）プロピオネート
【化１４】
2005529181.tif 000015
メタノール（４ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−フェノキシメチルシンナメート（参照：実施例１−（４）、０.２０ｇ）および塩化ニッケル六水和物（０.０２ｇ）の混合物に、四水素化ホウ素ナトリウム（sodium borontetrahydride）（０.０５ｇ）を、氷水浴上で添加した。混合物を室温で１時間撹拌し、飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチした。生じた懸濁液を酢酸エチルで抽出し、有機層を水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）により精製し、ｔｅｒｔ−ブチル３−（４−フェノキシメチルフェニル）プロピオネート（０.１６８ｇ、８４％）を無色固体として得た。
【００７９】
（２）Ｎ−［３−（４−フェノキシメチルフェニル）プロピオニル］フェニルアラニン
【化１５】
2005529181.tif 000016
エタノール（２ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル３−（４−フェノキシメチルフェニル）プロピオネート（０.１０ｇ）の溶液に、１Ｎ水酸化リチウム水溶液（０.７ｍｌ）を添加した。混合物を６０℃で３時間撹拌し、真空で濃縮した。残渣を、１Ｎ塩酸（０.７ｍｌ）、水（５ｍｌ）および酢酸エチル（１０ｍｌ）の混合物に懸濁し、有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を除去し、Ｎ−（４−フェノキシメチルシンナモイル）フェニルアラニンの合成方法（参照：実施例１−（５）および（６））に従い、残渣をＮ−［３−（４−フェノキシメチルフェニル）プロピオニル］フェニルアラニンに向かう次の工程に使用した。
ｍｐ１７３−１７４℃；計算値［Ｍ＋１］：４０４、実測値：ｍ／ｚ４０４
分子量：４０３.４８
活性等級アッセイ２：Ａ
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 2.37 (2H, t, J = 8.1 Hz), 2.72 (2H, t, J = 7.9 Hz), 2.84 (1H, dd, J = 13.9, 9.5 Hz), 3.03 (1H, dd, J = 13.9, 5.0 Hz), 4.41-4.45 (1H, m), 5.04 (2H, s), 6.93 (1H, t, J = 7.3 Hz), 6.99 (2H, dd, J = 8.9, 1.0 Hz), 7.15 (2H, d, J = 8.2 Hz), 7.18-7.20 (3H, m), 7.24-7.31 (5H, m), 8.17 (1H, d, J = 8.2 Hz), 12.66 (1H, bs).
【００８０】
実施例３：
（１）１−ヨード−４−（フェノキシメチル）ベンゼン
【化１６】
2005529181.tif 000017
４−ヨードベンジルブロミド（１ｇ）、フェノール（０.２８６ｇ）、炭酸カリウム（０.５３０ｇ）およびＤＭＦ（２０ｍｌ）の混合物を室温で終夜撹拌した。揮発性物質を真空で除去し、残渣を酢酸エチルと水の混合物に懸濁した。有機層を分離し、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１−ヨード−４−（フェノキシメチル）ベンゼン（０.９１８ｇ、９３％）を淡黄色薄片として得た。
【００８１】
（２）メチル４−フェノキシメチルフェニルプロピオレート
【化１７】
2005529181.tif 000018
ＴＨＦ（８ｍｌ）中の１−ヨード−４−（フェノキシメチル）ベンゼン（０.４０ｇ）およびメチルプロピオレート（０.４３ｇ）の溶液に、ビスキス（トリフェニルホスフィン）パラジウムジクロリド（１８ｍｇ）、ヨウ化銅（１０ｍｇ）および炭酸カリウム（０.３６ｇ）を添加した。混合物を８０℃で撹拌し、真空で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１）により精製し、メチル４−フェノキシメチルフェニルプロピオレート（０.１５５ｇ、４５％）を無色薄片として得た。
【００８２】
（３）Ｎ−（４−フェノキシメチルフェニルプロピオロイル）フェニルアラニン
【化１８】
2005529181.tif 000019
ｔｅｒｔ−ブチル４−フェノキシメチルシンナメートからのＮ−（４−フェノキシメチルシンナモイル）フェニルアラニンの合成方法（参照：実施例１−（５）および（６））に従い、Ｎ−（４−フェノキシメチルフェニルプロピオロイル）フェニルアラニンを、４−フェノキシメチルフェニルプロピオル酸から製造した。これは、対応するメチルエステルから、エタノール中での１Ｎ水酸化リチウムによる加水分解により得られたものである。
ｍｐ１４６℃；計算値［Ｍ＋１］：４００、実測値：ｍ／ｚ４００
分子量：３９９.４４
活性等級アッセイ２：Ａ
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 2.92 (1H, dd, J = 13.8, 10.1 Hz), 3.13 (1H, d, J = 13.9, 4.7 Hz), 4.46-4.51 (1H, m), 5.16 (2H, s), 6.95 (1H, t, J = 7.3 Hz), 7.01 (2H, d, J = 7.9 Hz), 7.20-7.31 (6H, m), 7.52 (2H, d, J = 8.2 Hz), 7.59 (2H, d, J = 8.2 Hz), 9.14 (1H, d, J = 8.2 Hz), 12.88 (1H, bs).
【００８３】
実施例４：
（１）４−ベンジルオキシベンズアルデヒド
【化１９】
2005529181.tif 000020
ＤＭＦ（３０ｍｌ）中の４−ヒドロキシベンズアルデヒド（１.００ｇ）の溶液に、塩化ベンジル（１.２４ｇ）および炭酸カリウム（１.３６ｇ）を添加した。混合物を室温で終夜、そして６０℃で２時間撹拌した。反応混合物を真空で濃縮し、残渣を酢酸エチルと水の混合物に懸濁した。有機層を分離し、塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を真空で除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）により精製し、４−ベンジルオキシベンズアルデヒド（１.８２ｇ、１００％）を無色固体として得た。
【００８４】
（２）Ｎ−（４−ベンジルオキシシンナモイル）フェニルアラニン
【化２０】
2005529181.tif 000021
ｔｅｒｔ−ブチル４−フェノキシメチルシンナメートの合成方法（参照：実施例１−（４））に従い、４−ベンジルオキシベンズアルデヒドを、記載されたホルナー−エモンズ（Horner-Emmons）反応に付し、ｔｅｒｔ−ブチル４−ベンジルオキシシンナメートを得、続いて実施例２−（２）に記載の方法を使用して、エタノール中で水酸化リチウムにより加水分解した。生じた４−ベンジルオキシ桂皮酸を、フェニルアラニンメチルエステルとカップリングさせ、Ｎ−（４−フェノキシメチルシンナモイル）フェニルアラニンの合成方法（参照：実施例１−（６））に従い、エタノール中で水酸化リチウムにより加水分解し、Ｎ−（４−ベンジルオキシシンナモイル）フェニルアラニンを得た。
ｍｐ２２０℃；計算値［Ｍ＋１］：４０２、実測値：ｍ／ｚ４０２
分子量：４０１.４６
活性等級アッセイ２：Ａ
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 2.92 (1H, dd, J = 9.5, 13.9 Hz), 3.11 (1H, dd, J = 5.1, 14.2 Hz), 4.55 (1H, m), 5.14 (2H, s), 6.55 (1H, d, J = 15.8 Hz), 7.05 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.18-7.21 (1H, m), 7.23-7.35 (6H, m), 7.38-7.41 (1H, m), 7.44-7.46 (1H, m), 7.49 (2H, d, J = 8.9 Hz), 12.77 (1H, br s).
【国際調査報告】
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2005529181.tif 000025
2005529181.tif 000026
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