(57)【要約】ＣＩ−１０３３のような非可逆性チロシンキナーゼ阻害剤の、一以上の他の抗腫瘍剤または電離放射線との組合せでの投与は、癌の処置において相乗的に作用する。
2005538129.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも一つのｅｒｂＢチロシンキナーゼについての阻害剤と、ジェムシタビン、パクリタキセル、ドセタキセル、シスプラチン、カルボプラチン、エトポシド、アドリアマイシン、トポテカン、ＣＰＴ−１１、カペシタビン若しくはそれらの薬学的に許容しうる塩、または電離放射線から成る群より選択される少なくとも一つの抗腫瘍因子との治療方式での投与を含む、細胞増殖性疾患を処置する方法。
【請求項２】
前記ｅｒｂＢチロシンキナーゼの阻害剤が非可逆性阻害剤である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記阻害剤が、二つ以上のｅｒｂＢチロシンキナーゼを阻害する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記阻害剤が、Ｎ−［４−（３−クロロ−４−フルオロフェニルアミノ）−７−（３−モルホリン−４−イルプロポキシ）−キナゾリン−６−イル］−アクリルアミドである、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記細胞増殖性疾患が、癌、乾癬、再狭窄および良性増殖性疾患を含む群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
少なくとも一つの前記抗腫瘍因子が、ジェムシタビンまたはその薬学的に許容しうる塩である、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
少なくとも一つの前記抗腫瘍因子が、タキサンまたはその薬学的に許容しうる塩である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
少なくとも一つの前記抗腫瘍因子が、パクリタキセルまたはドセタキセルである、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
処置を必要としている哺乳動物に、一定量の少なくとも一つのｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤と、細胞高増殖を阻害するのに充分な量の請求項１に記載の少なくとも一つの抗腫瘍因子を投与することを含む、高増殖性細胞障害を処置する方法。
【請求項１０】
前記癌が、充実性腫瘍、非小細胞性肺癌、扁平上皮細胞癌、神経膠腫、小細胞性肺癌、子宮内膜癌、甲状腺癌、黒色腫、結腸直腸癌、膀胱癌、腎細胞癌、膵臓癌、食道癌または頸部癌などの頭頚部癌、卵巣癌、骨髄腫、前立腺癌、肉腫、慢性骨髄性白血病および乳癌を含む群より選択される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
電離放射線との組合せ治療でＣＩ−１０３３を投与することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
ＣＩ−１０３３を、ジェムシタビン、パクリタキセル、タキソテール、シスプラチン、カルボプラチン、エトポシド、アドリアマイシン、トポテカン、ＣＰＴ−１１、カペシタビンまたは電離放射線を含む群より選択される少なくとも一つの抗腫瘍因子を用いる治療方式で投与することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記抗腫瘍因子を、ｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤の前に投与する、請求項２に記載の方法。
【請求項１４】
抗腫瘍因子を、チロシンキナーゼ阻害剤とほぼ同時に投与する、請求項２に記載の方法。
【請求項１５】
抗腫瘍因子を、チロシンキナーゼ阻害剤の後に投与する、請求項２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ｅｒｂＢ受容体チロシンキナーゼ阻害剤を慣用的な抗腫瘍剤および物理療法（modalities）と共に利用して細胞増殖性障害を処置する方法に関する。治療的プロトコルにおける因子のこの組合せの使用は、それら単一の因子を単独で用いるよりも予想外に大きい効力を与える。
【背景技術】
【０００２】
不適切な細胞増殖を引き起こす病理学的状態は、ヒト疾患に共通の原因である。良性哺乳動物疾患は、主に、身体の一部分から別の部分へと広がることができないことおよびそれらの一般により遅い増殖速度により、悪性疾患（癌）とは異なる。双方とも、その罹病者を死亡させるまたはさもなければ無力にすることがありうる。腹部外科手術後の内部癒着および瘢痕形成は、腸絞扼および死をもたらすことがありうる。真性糖尿病による失明は、眼内の新しい血管の不適切な増殖に起因する。良性神経線維腫は、損なわれた外観（disfigurement）を生じる。皮膚病である乾癬は、他の正常な細胞の不適切な過剰増殖に起因する。癌は、主な死因の一つである。とはいえ、癌化学療法は、近年劇的に進歩している。多くの腫瘍は、天然に存在する産物であるかまたは合成物質である化合物を利用して有効に処置することができる。更に、電離放射線などの他の癌療法は、一定の癌の処置に有効に用いられている。癌療法は、概して、より大きい治療的作用を与え且つ単独で用いられた場合の個々の因子でしばしば遭遇する毒性作用を減少させる手段としての因子の組合せの使用を、しばしば必要とする。
【０００３】
化学療法も、癌処置の要であり、多くのタイプの癌および他の過剰増殖性細胞障害に対して常套的に首尾良く用いられている。それにもかかわらず、一定のタイプの癌は、現在用いられている化学療法プロトコルにあまり影響を受けやすくない。若干のタイプの腫瘍は、化学療法の標準法に簡単に反応しない、または一時は反応するが後で無感応になり、癌の再発を引き起こす。現行の化学療法プロトコルを増強する新しい方法が、大いに望まれる。
【０００４】
多くの抗腫瘍因子が、癌を処置するのに治療的に用いられてきた。最も広く用いられているものの中には、ジェムシタビン（gemcitabine）、パクリタキセル、ドセタキセル（docetaxel）、カルボプラチン、シスプラチン、トポテカン（topotecan）、ＣＰＴ−１１、エトポシド、ドキソルビシンおよびカペシタビン（capecitabine）がある。これら薬剤の多くは、限られた治療的作用しか有さない。これら薬剤の殆どは、重度の副作用が一般的であるような高用量で用いられなければならない。上記の化学薬剤に加えて、放射線療法が、疾患の進行を止めるのにまたは腫瘍後退を引き起こすのに首尾良く用いられてきた。
【０００５】
ジェムシタビンは、２’−デオキシ−２’，２’−ジフルオロシチジンにあてられた一般名である。それは、一塩酸塩として、そしてβ異性体として、商業的に入手可能である。それは、化学的には、１−（４−アミノ−２−オキソ−１Ｈ−ピリミジン−１−イル）−２−デスオキシ−２，２−ジフルオロリボースとしても知られている。ジェムシタビンは、感受性の腫瘍を処置するためにジェムシタビンを合成、製剤化および使用する方法の教示について参照により本明細書中に援用される米国特許第４，８０８，６１４号および第５，４６４，８２６号に開示されている。単一薬剤としてのジェムシタビン塩酸塩の商業的製剤化が、膵臓または肺細胞癌（ＮＳＣＬＣ）の局所的に進行した（切除不可能な第２期または第３期）または転移性（第４期）腺癌を有する患者のための第一線の処置として必要とされており、５−フルオロウラシルで予め処置された患者に一般的に用いられる。それはまた、常套的には、他の既知の抗腫瘍因子との、特に、電離放射線との組合せで用いられる。しかしながら、相乗作用的組合せは、これまで報告されていない。
【０００６】
パクリタキセルは、天然物有糸分裂阻害剤である。それは、脱重合を妨げることによって、チューブリン二量体からの微小管の集合を促し、しかも微小管を安定化させる、抗微小管剤である。この安定性は、生命維持に必要な間期および有糸分裂細胞機能に不可欠である微小管ネットワークの正常な動的再形成（dynamic reorganization）の阻害を引き起こす。更に、パクリタキセルは、細胞周期を通じて微小管の異常な配列（arrays）または束を、そして有糸分裂中に微小管の多数の星状体を誘発する。パクリタキセルは、主に、卵巣癌および乳癌に必要とされるが、それは、他の癌を処置する場合にも有用である。パクリタキセルは、感受性新生物を処置するためにパクリタキセルを合成、製剤化および使用する方法の教示について参照により本明細書中に援用される米国特許第５，４９６，８０４号、第５，６４１，８０３号、第５，６７０，５３７号および第６，５１０，３９８号に開示されている。パクリタキセルの使用は、概して、過敏性反応、低血圧、除脈、高血圧、悪心および嘔吐、および注射部位反応を含めた望ましくない副作用を伴う。パクリタキセルは、タキソール（登録商標）（Bristol-Myers Squibb）として商業的に入手可能である。
【０００７】
ドセタキセルは、タキソイド（taxoid）ファミリーに属する半合成化合物である。それは、脱重合を妨げることによってチューブリン二量体からの微小管の集合を促し、しかも微小管を安定化させる、抗微小管剤である。この安定性は、生命維持に必要な間期および有糸分裂細胞機能に不可欠である微小管ネットワークの正常な動的再形成の阻害を引き起こす。更に、ドセタキセルは、細胞周期を通じて微小管の異常な配列または束を、そして有糸分裂中に微小管の多数の星状体を誘発する。ドセタキセルは、主に、乳癌および細胞肺癌に必要とされるが、それは、他の癌を処置する場合にも有用である。ドセタキセルは、感受性新生物を処置するためにドセタキセルを合成、製剤化および使用する方法の教示について参照により本明細書中に援用される米国特許第４，８１４，４７０号、第５，４３８，０７２号、第５，６９８，５８２号および第５，７１４，５１２号に開示されている。ドセタキセルの使用は、概して、過敏性反応、低血圧、除脈、高血圧、悪心および嘔吐、および注射部位反応を含めた望ましくない副作用を伴う。ドセタキセル三水和物は、タキソテール（Taxotere、登録商標）（Aventis Phamaceutical Products, Inc）として商業的に入手可能である。
【０００８】
カルボプラチンおよびシスプラチンは、それぞれ、ジアンミン［１，１−シクロブタンジカルボキシラート（２−）−０，０’］−，（ＳＰ−４−２）白金およびシスジアミノジクロロ白金（II）にあてられた一般名である。両方とも、ＩＶ（静脈内）注射用製剤として商業的に入手可能である。カルボプラチナムは、感受性新生物を処置するためにカルボプラチンを合成、製剤化および使用する方法の教示について参照により本明細書中に援用される米国特許第４，６５７，９２７号に開示されている。同様に、シスプラチンは、感受性新生物を処置するためにシスプラチンを合成、製剤化および使用する方法の教示について参照により本明細書中に援用されるドイツ特許ＤＥ２，３１８，０２０号に開示されている。カルボプラチンおよびシスプラチンは、ＤＮＡをアルキル化し、それによって、ＤＮＡの複製および転写を妨害する。カルボプラチンおよびシスプラチンは、精巣、卵巣、子宮内膜、子宮頸管、膀胱、頭頚部、胃腸管、肺の癌、軟組織および骨の肉腫、および非ホジキンリンパ腫の処置に用いられる。白金化合物の使用は、概して、骨髄抑制、悪心および嘔吐、腎尿細管異常、耳毒性、および過敏性反応を含めたいくつかの副作用を伴う。
【０００９】
トポテカンおよびＣＰＴ−１１は、ヒカンプチン（Hycamptin、登録商標）およびカンプトサール（Camptosar、登録商標）にあてられた一般名である。これら化合物は、カンプトテシンの誘導体である。トポテカン塩酸塩の化学名は、（Ｓ）−１０−［（ジメチルアミノ）メチル］−４−エチル−４，９−ジヒドロキシ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４−（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン・一塩酸塩である。ＣＰＴ−１１の化学名は、（４Ｓ）−４，１１−ジエチル−４−ヒドロキシ−９−［（４−ピペリジノピペリジノ）カルボニルオキシ］−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４（４Ｈ，１２Ｈ）ジオン塩酸塩である。両方とも、ＩＶ注射用製剤として商業的に入手可能である。トポテカンは、感受性新生物を処置するためにトポテカンを合成、製剤化および使用する方法の教示について参照により本明細書中に援用される米国特許第５，００４，７５８号に開示されている。同様に、ＣＰＴ−１１は、感受性新生物を処置するためにＣＰＴ−１１を合成、製剤化および使用する方法の教示について参照により本明細書中に援用される米国特許第４，６０４，４６３号に開示されている。トポテカンおよびＣＰＴ−１１は、ＤＮＡトポイソメラーゼＩと相互作用して、ＤＮＡにおける一本鎖切断、および最終的には二本鎖の切断を引き起こす。トポテカンおよびＣＰＴ−１１は、細胞肺癌、および卵巣、結腸直腸および食道の癌の処置に用いられる。カンプトテシン類似体の使用は、概して、骨髄抑制、悪心および嘔吐、および過敏性反応を含めたいくつかの副作用を伴う。
【００１０】
エトポシドまたはＶＰ−１６は、エピポドフィロトキシン（epipodophyllotoxin）の一般名である。エトポシドの化学名は、４’−デメチルエピポドフィロトキシン  ９−［４，６−Ｏ−（Ｒ）−エチリデン−（β）−Ｄ−グルコピラノシド］である。エトポシドは、経口投与用カプセル剤としてまたはＩＶ注射用溶液剤として商業的に入手可能である。エトポシドは、感受性新生物を処置するためにエトポシドを合成、製剤化および使用する方法の教示について参照により本明細書中に援用される米国特許第３，５２４，８４４号に開示されている。エトポシドは、ＤＮＡトポイソメラーゼIIと相互作用して、ＤＮＡにおける一本鎖切断、および最終的には二本鎖の切断を引き起こす。エトポシドは、小細胞および細胞肺癌、胚細胞癌およびリンパ腫の処置に用いられる。エトポシドの使用は、概して、骨髄抑制、悪心および嘔吐、過敏性反応および皮膚粘膜作用を含めたいくつかの副作用を伴う。
【００１１】
ドキソルビシンは、アドリアマイシン（Adriamycin、登録商標）の一般名である。ドキソルビシンの化学名は、５，１２−ナフタセンジオン，１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−（α）−Ｌ−lyxo−ヘキソピラノシル）オキシ］−７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−８−（ヒドロキシルアセチル）−１−メトキシ−，塩酸塩（８Ｓ−シス）である。ドキソルビシンは、ＩＶ注射用に商業的に入手可能である。ドキソルビシンは、感受性新生物を処置するためにドキソルビシンを合成、製剤化および使用する方法の教示について参照により本明細書中に援用される米国特許第３，５９０，０２８号に開示されている。ドキソルビシンは、おそらくは、ＤＮＡ二重らせんとの平面状アントラサイクリン核の特異的インターカレーションにより、核酸に結合して、異常な細胞性複製を引き起こす。ドキソルビシンは、乳房、膀胱、肝、肺、前立腺、胃および甲状腺の癌；骨および軟組織の肉腫；リンパ腫および白血病；および幼児期の腫瘍の処置に用いられる。ドキソルビシンの使用は、概して、骨髄抑制、悪心および嘔吐、皮膚粘膜および心臓作用を含めたいくつかの副作用を伴う。
【００１２】
カペシタビンは、ゼローダ（Xeloda、登録商標）の一般名である。カペシタビンの化学名は、５’−デオキシ−５−フルオロ−Ｎ−［（ペンチルオキシ）カルボニル］−シチジンである。カペシタビンは、経口投与用錠剤として商業的に入手可能である。カペシタビンは、感受性新生物を処置するためにカペシタビンを合成、製剤化および使用する方法の教示について参照により本明細書中に援用される米国特許第４，９６６，８９１号および第５，４７２，９４９号に開示されている。この薬物は、in vivo において５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）へと酵素的に変換される。正常細胞も腫瘍細胞も、５−ＦＵを、５−フルオロ−２’−デオキシウリジン一リン酸（ＦｄＵＭＰ）および５−フルオロウリジン三リン酸（ＦＵＴＰ）へと代謝する。これら代謝産物は、二つの異なった機構によって細胞損傷を引き起こす。第一に、ＦｄＵＭＰおよび葉酸補因子Ｎ５，１０−メチレンテトラヒドロ葉酸は、チミジル酸シンターゼ（ＴＳ）に結合して、共有結合した三重複合体を形成する。この結合は、２’−デオキシウリジル酸からのチミジル酸の形成を阻害する。チミジル酸は、ＤＮＡの合成に不可欠であるチミジン三リン酸の必須前駆体であるので、この化合物の欠乏は、細胞分裂を阻害しうる。第二に、核転写酵素は、ＲＮＡ合成の際に、ウリジン三リン酸（ＵＴＰ）の代わりにＦＵＴＰを誤って取り込みうる。この代謝エラーは、ＲＮＡプロセシングおよびタンパク質合成を妨害しうる。カペシタビンは、乳癌および結腸直腸癌の処置に用いられる。カペシタビンの使用は、概して、下痢、悪心、嘔吐、骨髄抑制、口内炎および手足症候群を含めたいくつかの副作用を伴う。
【００１３】
放射線療法は、多くの場合、食道、乳房、頭頚部、脳、前立腺および一定の白血病を含めた癌の処置に選択される療法である。しかしながら、腫瘍性細胞の不完全な死滅は、厳密な放射線処置方式を終えた後でも、癌の再発を引き起こしうるということが周知である。実際に、若干の細胞集団は、放射線への暴露の結果として、刺激されて増殖するので、処置の目的を全く無にするということが示唆される。明らかに、腫瘍性細胞を死滅させるより有効な方法への要求は存続しており、放射線療法に応答した細胞増殖の発生を排除する方法は、きわめて有益であると考えられる。
【００１４】
更に、線維症、粘膜炎（mucocitis）、白血球減少症および悪心を含めた重度の副作用は、しばしば、放射線療法に関連している。より少ない放射線への暴露またはより少ない暴露毎の線量、または双方を利用し、そしてなお、同レベルまたは高められたレベルの抗腫瘍活性をも達成する放射線療法の開発は、きわめて有利であると考えられる。
【００１５】
電離放射線への暴露後に腫瘍細胞が死滅する、生存するまたは刺激されて増殖する、一つまたは複数の分子機構は、充分に理解されていない。いくつかの報告は、放射線が、in vitro で細胞内の多数のシグナリング経路を活性化して、その線量および培養条件に依存して、増加した細胞死かまたは増加した増殖をもたらしうるということを示している［Verheij et al. (1996) Nature, 380,75-79; Rosette and Karin (1996) Science 274,1194-1197; Chmura et al. (1997) Cancer Res. 57,1270-1275; Santana et al. (1996) Cell 86,189-199; Kyriakis and Avruch (1996) Bioessays 18,567-577; Xia et al. (1995) Science 270,1326-1331; Kasid et al. (1996) Nature 382,813-816］。放射線に媒介される酸性スフィンゴミエリナーゼ活性化は、セラミドを生じ、その後、ストレス活性化プロテイン（Stress Activated Protein）（ＳＡＰ）キナーゼ経路（ｃ−Ｊｕｎ  ＮＨ．ｓｕｂ．２末端キナーゼ（ＪＮＫ）経路として時々文献に挙げられる）を活性化するということが示されている。この経路は、放射線によるアポトーシス（細胞死）の開始に主要な役割を果たすと考えられている（Verheij et al.; Rosette et al.; Chmura et al.; Santana et al.; Kyriakis and Avruch; Xia et al.）。
【００１６】
電離放射線への細胞応答に関して、別の細胞性標的が関与すると考えられている。上皮増殖因子（ＥＧＦ）受容体は、放射線に応答して用量依存方式で活性化されることが示されている［Schmidt-Ullrich et al. (1996) Radiation Research, 145,81-85; Schmidt-Ullrich et al. (1997) Oncogene 15,1191-1197］。
【００１７】
開発されているより新しい化学療法薬剤の中には、標的特異的化学物質がある。ＥＧＦは、一定の腫瘍タイプに、および細胞増殖に関連しているので、ＥＧＦ受容体チロシンキナーゼを阻害する多数の薬剤が開発されている。ＥＧＦ受容体チロシンキナーゼファミリーには、ｅｒｂＢ受容体キナーゼｅｒｂＢ１、ｅｒｂＢ２、ｅｒｂＢ３およびｅｒｂＢ４が含まれる。これらｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤の殆どは、可逆性阻害剤である。それらは、受容体に結合し、放出される。更に、これらチロシンキナーゼ阻害剤の殆どは、ｅｒｂＢ受容体チロシンキナーゼファミリー中のキナーゼの一つだけに特異的である。しかしながら、米国特許第６，３４４，４５５号および第６，３４４，４５９号は、ｅｒｂＢ受容体チロシンキナーゼｅｒｂＢ１、ｅｒｂＢ２、ｅｒｂＢ３およびｅｒｂＢ４の非可逆性阻害剤、すなわち、ＰＡＮ  ｅｒｂＢ受容体チロシンキナーゼ阻害剤を記載している。好ましいＰＡＮ  ｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤は、Ｎ−［４−（３−クロロ−４−フルオロフェニルアミノ）−７−（３−モルホリン−４−イルプロポキシ）−キナゾリン−６−イル］−アクリルアミドである。それは、ＣＩ−１０３３としても知られている。それは、Ｎ−［４−（３−クロロ−４−フルオロフェニルアミノ）−７−（３−モルホリン−４−イルプロポキシ）−キナゾリン−６−イル］−アクリルアミドを製造する方法、それを剤形に製剤化する方法、および癌および他の細胞増殖性障害を処置するのにそれを使用する方法の教示について参照により本明細書中に援用されるＷＯ００／３１０４８号に記載されている。
【００１８】
【特許文献１】米国特許第４，８０８，６１４号
【特許文献２】米国特許第５，４６４，８２６号
【特許文献３】米国特許第５，４９６，８０４号
【特許文献４】米国特許第５，６４１，８０３号
【特許文献５】米国特許第５，６７０，５３７号
【特許文献６】米国特許第６，５１０，３９８号
【特許文献７】米国特許第４，８１４，４７０号
【特許文献８】米国特許第５，４３８，０７２号
【特許文献９】米国特許第５，６９８，５８２号
【特許文献１０】米国特許第５，７１４，５１２号
【特許文献１１】米国特許第４，６５７，９２７号
【特許文献１２】ドイツ特許２，３１８，０２０号
【特許文献１３】米国特許第５，００４，７５８号
【特許文献１４】米国特許第４，６０４，４６３号
【特許文献１５】米国特許第３，５２４，８４４号
【特許文献１６】米国特許第３，５９０，０２８号
【特許文献１７】米国特許第４，９６６，８９１号
【特許文献１８】米国特許第５，４７２，９４９号
【特許文献１９】米国特許第６，３４４，４５５号
【特許文献２０】米国特許第６，３４４，４５９号
【特許文献２１】ＷＯ００／３１０４８号
【非特許文献１】Verheij et al. (1996) Nature, 380,75-79
【非特許文献２】Rosette and Karin (1996) Science 274,1194-1197
【非特許文献３】Chmura et al. (1997) Cancer Res. 57,1270-1275
【非特許文献４】Santana et al. (1996) Cell 86,189-199
【非特許文献５】Kyriakis and Avruch (1996) Bioessays 18,567-577
【非特許文献６】Xia et al. (1995) Science 270,1326-1331
【非特許文献７】Kasid et al. (1996) Nature 382,813-816
【非特許文献８】Schmidt-Ullrich et al. (1996) Radiation Research, 145,81-85
【非特許文献９】Schmidt-Ullrich et al. (1997) Oncogene 15,1191-1197
【発明の開示】
【００１９】
発明の要旨
本発明は、抗腫瘍因子の相乗作用的組合せに、及び、ｅｒｂＢ阻害剤を、少なくとも一つの他の化学療法薬剤または放射線療法を用いる治療方式で患者に投与することを含む、腫瘍を処置する方法に関する。好ましくは、そのｅｒｂＢ阻害剤は、ｅｒｂＢファミリーのチロシンキナーゼの少なくとも一つの受容体の非可逆性阻害剤である。より好ましくは、ｅｒｂＢ阻害剤は、ＰＡＮ  ｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤である。最も好ましくは、ｅｒｂＢ阻害剤は、非可逆性ＰＡＮ  ｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤である。好ましい非可逆性ＰＡＮ  ｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤は、Ｎ−［４−（３−クロロ−４−フルオロフェニルアミノ）−７−（３−モルホリン−４−イルプロポキシ）−キナゾリン−６−イル］−アクリルアミド（ＣＩ−１０３３）である。本発明は、より具体的には、一つの成分としてのＣＩ−１０３３と、ジェムシタビン、パクリタキセル、ドセタキセル、シスプラチン、カルボプラチン、エトポシド、アドリアマイシン、トポテカン、ＣＰＴ−１１、カペシタビンおよび電離放射線から成る群より選択される第二成分とを含む治療方式を提供する。本発明は、少なくとも一つのｅｒｂＢキナーゼ阻害剤と少なくとも一つの他の化学療法薬剤とを含む治療方式も提供する。
【００２０】
発明の詳しい説明
本発明の目的は、高増殖性細胞を、少なくとも一つのｅｒｂＢキナーゼについての阻害剤に、別の慣用的な抗腫瘍因子との組合せ治療で暴露することを含む、増殖を遅らせるかまたは高増殖性細胞を死滅させる方法を提供することである。好ましくは、そのｅｒｂＢキナーゼ阻害剤は、非可逆性ｅｒｂＢ阻害剤である。より好ましくは、ｅｒｂＢキナーゼ阻害剤は、二つ以上のｅｒｂＢキナーゼを阻害する。本発明のさらなる目的は、哺乳動物の癌などであるがこれに制限されるわけではない高増殖性細胞障害を処置する方法を提供することである。その方法は、致死的因子（例えば、電離放射線、化学療法薬剤、熱、紫外線、光力学的療法に用いられる強力赤色光等）を、ｅｒｂＢチロシンキナーゼの阻害剤、好ましくは、非可逆性阻害剤との組合せ治療で投与することを包含するであろう。このようなｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤の投与は、癌細胞のアポトーシスを引き起こす放射線若しくは化学療法、若しくは双方の、または他の致死的因子の能力を強化し、したがって、疾患進行を安定化させ、癌再発を減少させる。
【００２１】
本発明は、いずれのＰＡＮ  ｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤、そして好ましくは、非可逆性ＰＡＮ  ｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤の使用をも企図する。好ましい非可逆性ＰＡＮ  ｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤は、非可逆性ｅｒｂＢ阻害剤であるＮ−［４−（３−クロロ−４−フルオロフェニルアミノ）−７−（３−モルホリン−４−イルプロポキシ）−キナゾリン−６−イル］−アクリルアミドである。それは、ＣＩ−１０３３としても知られている。ＣＩ−１０３３は、Ｎ−［４−（３−クロロ−４−フルオロフェニルアミノ）−７−（３−モルホリン−４−イルプロポキシ）−キナゾリン−６−イル］−アクリルアミドを製造する方法、それを剤形に製剤化する方法、および結腸癌、乳癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肺癌、（腺癌および肉腫などの）他の癌のような癌を処置するのにそれを使用する方法の教示について参照により本明細書中に援用されるＷＯ００／３１０４８号に記載されている。
【００２２】
ＰＡＮ  ｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤の投与は、例えば、放射線処置または化学療法の処置の前、後またはそれと同時であってよい。当業者は、投与されるＰＡＮ  ｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤の量が、放射線および／または化学療法の抗腫瘍作用を増強するのに充分な量であるということを理解するであろう。このような量は、特に、患者の性別、年齢、体重および状態に依存して変動しうるので、ケースバイケースの原則に基づいて決定されるべきである。その量は、新形成のサイズおよびタイプ、並びに、従うための具体的な放射線または化学療法プロトコルにより変動しうる。概して、適当な用量は、腫瘍部位において０．５ｎＭ〜２００μＭ、より通常は、２０ｎＭ〜８０ｎＭの範囲内の阻害剤濃度を生じる用量である。ほとんどの場合、４０ｎＭ〜１５０ｎＭの血清濃度が充分なはずであると考えられる。投与は、経口、非経口または局所的であってよいが、経口または静脈内である確率が高い。阻害剤は、錠剤、丸剤、散剤、ロゼンジ剤、サシェ剤、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、溶液剤、シロップ剤、エアゾル剤（固体としてまたは液体媒体中）、軟または硬ゼラチンカプセル剤、坐剤、滅菌注射可能溶液剤、および経口または局所用途の滅菌容器入り散剤を含めたいくつかの形態のいずれかで投与されてよい。
【００２３】
本発明を実施するのに有用な組成物は、上記の活性成分またはそれらの適当な塩を、一般的な賦形剤、希釈剤および担体と一緒に含む。
好ましい処置は、ジェムシタビン、パクリタキセル、ドセタキセル、シスプラチン、カルボプラチン、エトポシド、アドリアマイシン、トポテカン、ＣＰＴ−１１またはカペシタビンの内の一つ以上と共に用いられるＣＩ−１０３３を含む。別の好ましい組合せは、電離放射線を用いる癌の処置用プロトコルにおけるＣＩ−１０３３の使用である。別の好ましい態様には、ＣＩ−１０３３を、電離放射線と、ジェムシタビン、パクリタキセル、ドセタキセル、シスプラチン、カルボプラチン、エトポシド、アドリアマイシン、トポテカン、ＣＰＴ−１１またはカペシタビンから成る群より選択される別の抗腫瘍因子とを用いるプロトコルにおいて投与することを含む、癌を処置する方法がある。
【００２４】
本発明は、劇的な相乗作用を示す、抗腫瘍因子の独特の組合せを提供する。その組合せは、非可逆性ＰＡＮ  ｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤を、ジェムシタビン、パクリタキセル、ドセタキセルなどの細胞毒性剤の投与と共に、または電離放射線療法と共に用いるためのプロトコルで利用する。これら組合せは、充実性腫瘍、特に、細胞肺癌および他の進行した充実性腫瘍を有する患者を処置する場合に特に有効である。
【００２５】
本発明の目的は、ＣＩ−１０３３を、ジェムシタビン、パクリタキセル、タキソテール、シスプラチン、カルボプラチン、エトポシド、アドリアマイシン、トポテカン、ＣＰＴ−１１、カペシタビンまたは電離放射線の少なくとも一つと共に含む組合せで、高増殖性細胞障害を処置する方法を提供することである。高増殖性細胞障害という用語には、乾癬、癌および再狭窄のような障害が含まれる。さらなる目的は、相乗作用量のＣＩ−１０３３およびジェムシタビン；相乗作用量のＣＩ−１０３３およびパクリタキセル；相乗作用量のＣＩ−１０３３およびタキソテール；相乗作用量のＣＩ−１０３３およびシスプラチン；相乗作用量のＣＩ−１０３３およびカルボプラチン；相乗作用量のＣＩ−１０３３およびエトポシド；相乗作用量のＣＩ−１０３３およびアドリアマイシン；相乗作用量のＣＩ−１０３３およびトポテカン；相乗作用量のＣＩ−１０３３およびＣＰＴ−１１；相乗作用量のＣＩ−１０３３およびカペシタビン；および電離放射線と一緒に用いられる相乗作用量のＣＩ−１０３３を含む組成物を提供することである。
【００２６】
本発明のさらなる態様において、本発明者は、処置を必要としている動物に、ＣＩ−１０３３と、電離放射線、ジェムシタビン、パクリタキセル、ドセタキセル、シスプラチン、カルボプラチン、エトポシド、アドリアマイシン、トポテカン、ＣＰＴ−１１およびカペシタビンから成る群より選択される少なくとも一つの療法との有効量の組合せを投与することを含む、癌を処置する方法を提供する。
【００２７】
好ましい方法は、ＣＩ−１０３３および慣用的な抗腫瘍性治療物理療法を含む組合せでの充実性腫瘍の処置を含む。
更に好ましい方法は、抗腫瘍量のＣＩ−１０３３と、有効量のジェムシタビン、パクリタキセル、ドセタキセル、シスプラチン、シスプラチン、カルボプラチン、エトポシド、アドリアマイシン、トポテカン、ＣＰＴ−１１若しくはカペシタビン、または電離放射線の少なくとも一つとを用いて、細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、乳癌、卵巣癌、頭頚部癌、骨髄腫、前立腺癌、結腸癌、膵臓癌および他の充実性腫瘍を含めた感受性癌を処置する。別の態様においては、ＣＩ−１０３３は、本発明において、二つ以上の他の抗腫瘍性治療物理療法と組み合わせて用いることができる。
【００２８】
本発明の別の態様は、一つの区画に投与量のＣＩ−１０３３を、そして別の区画に、投与量のジェムシタビン、パクリタキセル、ドセタキセル、シスプラチン、カルボプラチン、エトポシド、ドキソルビシン、トポテカン、ＣＰＴ−１１、カペシタビンまたはそれらの薬学的に許容しうる塩から成る群より選択される薬剤を含むキットである。別の態様においては、そのキットは、投与量のＣＩ−１０３３と、投与量のジェムシタビン、パクリタキセル、ドセタキセル、シスプラチン、カルボプラチン、エトポシド、アドリアマイシン、トポテカン、ＣＰＴ−１１またはカペシタビンから成る群より選択される少なくとも二つの化合物とを含む。やはり、キット中に更に含まれるのは、本発明の組合せの使用のための使用説明書であり、それには、その組合せで用いられる薬剤の投薬、投薬スケジュール、および製造、および投与のための使用説明書が含まれる。
【００２９】
本発明の方法で利用される化合物は、臨床で一般的に用いられる用量で投与してよい。このような処置を必要としている哺乳動物の疾患の状態、腫瘍タイプおよび全身状態に依存して、慣用的に投与されるよりも低い用量の各々の抗腫瘍物理療法を用いて、腫瘍に対する同様の効力を達成し得、単一因子として慣用的に用いられるよりも、副作用も減少させうる。このような用量は、普通の様式で、例えば、体表面積に基づいて計算することができる。ＣＩ−１０３３は、例えば、連続投薬用に約１０．０ｍｇ〜約２００ｍｇ、好ましくは、約５０．０ｍｇ〜約２００．０ｍｇの用量で投与される。理想的には、ＣＩ−１０３３は、約５〜約１００μｇ／ｍＬの血漿レベルを生じる用量で投与されるであろう。ＣＩ−１０３３は、典型的には、経口で、例えば、５、２５、５０、７５、１００および２００ｍｇ／カプセルの量の活性成分を有するカプセル剤として投与される。ＣＩ−１０３３は、ほぼ同じ用量レベルで処置期間中、典型的には、１５〜３０日間毎日投与される。或いは、ＣＩ−１０３３の１日用量は、２４時間中に分割量で投与してよい。複数処置期間は、担当医師、および処置されている特定の患者および状態によって指示される通りに実施することができる。患者の医学的状態によって正当化される場合には、または他の同時に行なう医学的処置と適合するように、ＣＩ−１０３３の静脈内投与も企図される。
【００３０】
ジェムシタビンは、臨床で常套的に利用されている用量に匹敵する用量で投与される。例えば、典型的には塩酸塩としてのジェムシタビンの初期用量は、約１０００ｍｇ／ｍ２体表面積である。ジェムシタビンは、滅菌溶液剤として常套的に製剤化され、そして静脈内注入により、概して約３０分間にわたって投与され、約２〜４回の週１回投与を、約２８〜３０日毎に反復されるコースで行なう。１０００ｍｇ／ｍ２の用量が、この処置方式にしたがって約７週間まで、または望ましくない副作用が認められまで、与えることができる。他の塩形態も、所望ならば用いることができ、例えば、臭化水素酸塩、一リン酸塩、硫酸塩、マロン酸塩、クエン酸塩およびコハク酸塩が容易に製造される。
【００３１】
カペシタビンは、単独療法のためには、概して、１日約２５００ｍｇ／ｍ２の用量で２週間経口投与後、１週間休止期間とする。その製品は、１５０ｍｇおよび５００ｍｇの錠剤で商業的に供給される。それら錠剤は、１日約１〜約４回の割合で処置期間中投与される。
【００３２】
パクリタキセルまたはドセタキセルは、概して、注射用の滅菌溶液剤として製剤化され、常套的には、約６０〜１７５ｍｇ／ｍ２の用量で投与され、毎日または断続的に静脈内に与えられる。パクリタキセルも、１３５〜１７５ｍｇ／ｍ２の用量で静脈内に３時間にわたる注入で、またはドセタキセルについても、ＩＶで６０〜１００ｍｇ／ｍ２の用量で１時間投与してもよい。或いは、電離放射線を、約２．５〜５６Ｇｙの単回投与として与えてもよい。電離放射線は、長時間間隔で反復される単回投与として、またはより頻繁で小さい線量に分割して与えることができる。このサイクルは、約４〜８週間毎に反復することができる。
【００３３】
シスプラチンは、注射用の滅菌溶液剤として製剤化され、常套的には、１日約２０ｍｇ／ｍ２の用量で５日間、または４週毎に７５〜１００ｍｇ／ｍ２で静脈内投与される。
カルボプラチンは、ＩＶ注射の前に再構成される滅菌粉末剤として製剤化され、常套的には、４週毎に約３６０ｍｇ／ｍ２の用量で静脈内投与される。
【００３４】
トポテカンは、ＩＶ注射の前に再構成される滅菌粉末剤として製剤化され、常套的には、３週毎に約１．５ｍｇ／ｍ２の用量で静脈内投与される。
ＣＰＴ−１１は、ＩＶ注射の前に希釈される滅菌液剤として製剤化され、常套的には、週に５０〜１５０ｍｇ／ｍ２の用量で４週間静脈内投与後、２週間休止期間とする。
【００３５】
エトポシドは、ＩＶ注射の前に希釈される滅菌溶液剤として製剤化され、常套的には、いくつか異なった処置スケジュールで静脈内投与され、それらには、１〜３日目の１２０ｍｇ／ｍ２ＩＶを２１日毎に反復する；１〜５日目の５０〜１００ｍｇ／ｍ２ＩＶを２〜４週毎にする；１日目、３日目、５日目の１２５〜１４０ｍｇ／ｍ２を３〜５週毎にするスケジュールが含まれる。投薬は、５０ｍｇ／ｍ２で２１日間、４〜５週毎のエトポシド錠剤／カプセル剤から成ってもよい。
【００３６】
ドキソルビシンは、ＩＶ投与前に再構成され希釈されるべき滅菌粉末剤として製剤化される。ドキソルビシンは、６０〜７５ｍｇ／ｍ２で３週毎に、１５〜２０ｍｇ／ｍ２で毎週、または１日目と８日目に３０ｍｇ／ｍ２で４週毎に静脈内投与される。
【００３７】
これら薬剤の用量および投与スケジュールは、組合せ化学療法プロトコルにおいて変動し得る。更に、具体的に挙げられたもの以外の塩を、組合せ治療プロトコルにおいて用いてよい。当業者は、これら組合せが、単に代表的なものであるということ、そしてこれら抗腫瘍剤の関連化合物または誘導体を、可逆性または非可逆性ｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせて用いることができるということを理解するであろう。
【００３８】
本発明によって提供された組合せを、いくつか異なった in vivo 腫瘍モデルに対して in vivo で評価した。ＣＩ−１０３３と放射線との組合せ実験を、二つの異なった in vivo 腫瘍モデルで行った。組合せ化学療法実験は、５種類の異なった in vivo 腫瘍モデルおよび７種類の異なった化学療法薬剤を用いて行った。
【００３９】
それら結果は、非可逆性ＰＡＮ  ｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤であるＣＩ−１０３３の使用を例証しているが、同様の結果が、これらキナーゼを阻害する他の薬剤でも得ることができる。
【００４０】
ＣＩ−１０３３を、処置期間が連続して１４日である場合、５０ｍｇ〜７５０ｍｇ／日の用量で臨床的に投与した。その処置は、オフドラッグ（off drug）休止期間を含んでまたは含むことなく延長してよい。より低い用量のＣＩ−１０３３を、毎日連続して８週間の治療に用いた後、２週間「休薬日（drug holiday）」とした。ＣＩ−１０３３単独では、反復コースおよびＣＩ−１０３３への長期暴露後に累積毒性は証明されなかった。ＣＩ−１０３３単独での予備研究においては、応答には、予め重度に処置されたＮＳＣＬＣ患者における一つの部分的応答と、腎細胞癌およびＮＳＣＬＣを各々有する一人の患者における微小の応答が含まれた。
【００４１】
次の詳細な実施例は、ＣＩ−１０３３と、ジェムシタビン、パクリタキセル、ドセタキセル、シスプラチン、カルボプラチン、エトポシド、ドキソルビシン、トポテカン、ＣＰＴ−１１、カペシタビンまたは電離放射線との間の相乗作用を更に立証する。これら実施例は、単に代表的なものに過ぎず、発明の範囲を制限するためのものではない。
【実施例１】
【００４２】
ヌードマウスの正常位に植え込まれたＬ３．６ｐ１ヒト膵臓癌に対するＣＩ−１０３３およびジェムシタビンでの組合せ化学療法の抗癌有効性。
本発明によって提供された相乗作用組合せを、雌免疫欠損ヌードマウスを用いた標準化学療法研究で評価した。ＣＩ−１０３３とジェムシタビンとの組合せを、正常位に植え込まれたヒト膵臓異種移植片に対して評価した。
【００４３】
Ｌ３．６ｐ１ヒト膵臓癌細胞を、ＣＯＬＯ３５７急速成長性細胞から、ヌードマウスの膵臓中にそれらを注入し、その後、肝転移の採取および膵臓中への再植込みを３サイクル行うことによって樹立した。得られたＬ３．６ｐ１細胞は、親細胞より有意に高い発生率の肝およびリンパ節転移を生じる。細胞は、５％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、ピルビン酸ナトリウム、非必須アミノ酸、Ｌ−グルタミンおよび２倍ビタミン溶液（GIBCO, Grand Island, NY）を補足されたダルベッコ修飾イーグル（Dulbecco's Modified Eagle's）培地（ＤＭＥＭ）中のプラスチック上において維持し、５％ＣＯ２−９５％空気中において３７℃でインキュベートした。培養物を、凍結原液から回収後８週間以下の間維持した。
【００４４】
動物および腫瘍細胞の正常位植込み。
雄無胸腺ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスは、the National Cancer Institute-Frederick Cancer Research and Development Center（Frederick, MD）由来であった。マウスを、the American Association for the Accreditation of Laboratory Animal Care によって承認された病原体不含条件下において層流キャビネット中で収容して維持し、これら実験でのそれらの使用は、the Institutional Animal Care and Use Committee により承認済みであった。
【００４５】
腫瘍を生じるために、細胞を、ほぼコンフルエントの培養物から、０．２５％トリプシンおよび０．２％ＥＤＴＡでの処理によって採取した。トリプシン処理を、１０％ＦＢＳ含有培地で停止し、それら細胞を、血清不含培地で１回洗浄し、ハンクの平衡塩溶液（Hank's Balanced Salt Solution）（ＨＢＳＳ）中に２×１０７個／ｍＬの細胞濃度で再懸濁させた。９０％を超える生存能力を有する単細胞懸濁液だけを、注射に用いた。マウス（８〜１０週令）に、メチオキシフルラン（methyoxyflurane）で麻酔し、膵臓を露出し、そして膵体中に、０．０５ｍＬ中の１×１０６個の細胞を注射した。切り口は、創傷クリップで閉じた。５〜６週間の腫瘍増殖後、マウスを屠殺した。一次腫瘍のサイズおよび重量、およびリンパ節および肝転移の発生率を、屠殺時に決定した。
【００４６】
樹立されたヒト膵臓癌異種移植片のＣＩ−１０３３およびジェムシタビンでの処置。
マウスの膵臓内に、１×１０６個のＬ３．６ｐ１ヒト膵臓癌細胞を０日目に植え込んだ。腫瘍細胞植込み後７日目に、治療を開始した。治療期間は４週間であった。膵臓重量、腫瘍重量および転移の発性率を、最終的な屠殺時に記録した。ジェムシタビン（１２５ｍｇ／ｋｇ）を、０．５ｍＬの生理食塩水中で、週２回、４週間腹腔内投与した。ＣＩ−１０３３を、３０ｍｇ／ｋｇ（高用量）および１０ｍｇ／ｋｇ（低用量）で１日１回、５日／週で４週間経口投与した。この研究は、最低１０匹／処置群のマウスを有する６処置群から成った。群は、対照；ジェムシタビン単独；３０ｍｇ／ｋｇのＣＩ−１０３３単独；１０ｍｇ／ｋｇのＣＩ−１０３３単独；ジェムシタビン＋３０ｍｇ／ｋｇのＣＩ−１０３３；およびジェムシタビン＋１０ｍｇ／ｋｇのＣＩ−１０３３であった。
【００４７】
対照動物は、４週間の治療期間の最後までに初期体重の１７％を失った。最終的な屠殺時には、それら対照動物は、初期体重の２４％を失っていた。この群の体重減少は、膵臓癌進行に起因している。１２５ｍｇ／ｋｇのジェムシタビン単独で週２回処置された腫瘍を有する動物は、治療期間にわたって僅かな体重増加があったが、最終的な屠殺時には、初期体重から通しで４％の減少があった。１０ｍｇ／ｋｇおよび３０ｍｇ／ｋｇのＣＩ−１０３３を投与されたマウスは、それぞれ、治療中に初期体重の６％および９％を失ったが、治療の最後と最終的な屠殺との間の期間に体重が増加した。ＣＩ−１０３３（１０ｍｇ／ｋｇ）＋ジェムシタビンで処置された群は、治療中に初期体重の１０％を失ったが、最後の治療後、失った体重を回復した。投薬の第二週の最後に、ＣＩ−１０３３（３０ｍｇ／ｋｇ）＋ジェムシタビン処置群は、１６％の体重減少があった。その大きい体重減少ゆえに、この組合せ投薬群には、治療３週目中に無薬休日を与え、研究の４週目に投薬を再開した。
【００４８】
抗腫瘍有効性の傾向は、総膵臓質量を調べても腫瘍体積を調べても同じであった。組合せ群は、ジェムシタビンのみまたはＣＩ−１０３３のみで処置された群と比較して改善された効力を示し、その組合せが、単一薬剤治療で得られるよりも抗腫瘍有効性を改善したということを示唆した。治療的有効性の階級順位は、ＣＩ−１０３３（３０ｍｇ／ｋｇ）＋ジェムシタビン＞ＣＩ−１０３３（１０ｍｇ／ｋｇ）＋ジェムシタビン＞ＣＩ−１０３３（３０ｍｇ／ｋｇ）＝ジェムシタビン＞ＣＩ−１０３３（１０ｍｇ／ｋｇ）であった。その階級順位は、腫瘍体積に基づくパーセントＴ／Ｃ値を計算した場合、同じであった。これら処置方式で、リンパ節転移の減少を生じたものはなかった。しかしながら、ＣＩ−１０３３は、肝転移の数を、ジェムシタビンで得られるよりも減少させると考えられた。ＣＩ−１０３３およびジェムシタビンの組合せは、それら単一薬剤のどちらか単独によって生じるよりも優れた抗腫瘍作用を生じた。
【実施例２】
【００４９】
ヌードマウスの正常位に植え込まれた２５３ＪＢ−Ｖヒト膀胱癌に対するＣＩ−１０３３およびパクリタキセルでの組合せ化学療法の抗癌有効性。
本発明によって提供された相乗作用組合せを、雌免疫欠損ヌードマウスを用いた標準化学療法研究で評価した。ＣＩ−１０３３およびパクリタキセルの組合せを、正常位に植え込まれたヒト移行上皮細胞（膀胱）異種移植片に対して評価した。きわめて転移性のヒト移行上皮細胞癌２５３ＪＢ−Ｖを、前に記載された通りの、１０％ウシ胎児血清、ビタミン類、ピルビン酸ナトリウム、Ｌ−グルタミンおよび非必須アミノ酸を補足された修飾イーグル最少必須培地中で単層培養物として維持した。
【００５０】
動物および腫瘍細胞の正常位植込み。
雄無胸腺ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスは、the National Cancer Institute-Frederick Cancer Research and Development Center（Frederick, MD）由来であった。マウスを、the American Association for the Accreditation of Laboratory Animal Care によって承認された病原体不含条件下において層流キャビネット中で収容して維持し、これら実験でのそれらの使用は、the Institutional Animal Care and Use Committee により承認済みであった。
【００５１】
腫瘍を生じるために、細胞を、ほぼコンフルエントの培養物から、０．２５％トリプシンおよび０．２％ＥＤＴＡでの処理によって採取した。トリプシン処理を、１０％ＦＢＳ含有培地で停止し、それら細胞を、血清不含培地で１回洗浄し、ハンクの平衡塩溶液（ＨＢＳＳ）中に２×１０７個／ｍＬの細胞濃度で再懸濁させた。９０％を超える生存能力を有する単細胞懸濁液だけを、注射に用いた。マウス（８〜１０週令）に、メチオキシフルランで麻酔して効果を生じさせ、下部正中切開を行い、膀胱を露出した。生存可能な腫瘍細胞（０．０５ｍＬ中に１×１０６個の細胞）を、膀胱の壁中に注射した。切り口は、創傷クリップで閉じた。６週間の腫瘍増殖後、マウスを屠殺した。一次膀胱腫瘍のサイズおよび重量を、屠殺時に記録した。
【００５２】
樹立されたヒト膀胱癌異種移植片のＣＩ−１０３３およびパクリタキセルでの処置。
マウスの膀胱壁中に、１×１０６個の２５３ＪＢ−Ｖヒト膀胱癌細胞を０日目に植え込んだ。細胞植込み後１４日目に、治療を開始した。治療期間は４週間であった。膀胱腫瘍重量を、最終的な屠殺時に記録した。パクリタキセル（８ｍｇ／ｋｇ）を、０．５ｍＬ中で、腫瘍細胞植込み後１４日目、２０日目および２７日目に腹腔内投与した。ＣＩ−１０３３を、３０ｍｇ／ｋｇ（高用量）および１０ｍｇ／ｋｇ（低用量）で１日１回、５日／週で４週間かまたは、３０ｍｇ／ｋｇで週２回４週間経口投与した。第一の研究は、最低６匹／処置群のマウスを有する６処置群から成った。群は、対照；パクリタキセル単独；３０ｍｇ／ｋｇのＣＩ−１０３３単独；１０ｍｇ／ｋｇのＣＩ−１０３３単独；パクリタキセル＋３０ｍｇ／ｋｇのＣＩ−１０３３；およびパクリタキセル＋１０ｍｇ／ｋｇのＣＩ−１０３３であった。第一の研究においては、ＣＩ−１０３３を、５日／週で４週間経口投与した。第二の研究もまた、最低８匹／群を有するマウスの６群から構成された。第二の研究での群は、対照；パクリタキセル単独；５日／週で投与されるＣＩ−１０３３（３０ｍｇ／ｋｇ）単独；週２回投与されるＣＩ−１０３３（３０ｍｇ／ｋｇ）；パクリタキセル＋ＣＩ−１０３３（３０ｍｇ／ｋｇ）５日／週；およびパクリタキセル＋ＣＩ−１０３３（３０ｍｇ／ｋｇ）週２回であった。
【００５３】
これら研究の双方の対照群の動物は、それらの初期体重の１％〜７％を失った。ＣＩ−１０３３かまたはパクリタキセルでの単一薬剤治療は、５％以下の体重減少を引き起こし、単一薬剤治療には、体重減少に基づく有意の毒性がなかったということを示唆した。組合せ治療群の体重減少は、治療の最初の２週間の間に初期体重の１０％を失った毎日ＣＩ−１０３３（３０ｍｇ／ｋｇ）＋パクリタキセル処置群を除いて、２％〜６％の範囲内であった。この処置群は、初期投薬から屠殺までの３％の体重減少について、治療の最後の２週間にかなりの体重減少を回復した。組合せ群の体重減少は、ＣＩ−１０３３＋パクリタキセルでの組合せ治療が、これら研究で用いられた用量およびスケジュールについて、それら単一薬剤の単独で認められるよりも毒性を強化しなかったということを示唆している。
【００５４】
対照群と、８ｍｇ／ｋｇのパクリタキセル単独を１４日目、２０日目および２７日目にＩＰ（腹腔内）投与された群は、膀胱腫瘍質量を有意に減少しなかった。ＣＩ−１０３３を、１４〜１８日目、２１〜２５日目、２８〜３２日目および３５〜３９日目に、または１４日目、１７日目、２１日目、２４日目、２８日目、３１日目、３５日目および３８日目に、１０ｍｇ／ｋｇまたは３０ｍｇ／ｋｇの用量で経口投与した。１０ｍｇ／ｋｇまたは３０ｍｇ／ｋｇのＣＩ−１０３３単独で処置された群の場合、腫瘍質量（最終的な屠殺時に測定される）は、それぞれ、対照群のものの４２％および２５％に減少した。ＣＩ−１０３３（１０ｍｇ／ｋｇまたは３０ｍｇ／ｋｇで）をパクリタキセル（８ｍｇ／ｋｇ、ＩＰ）と組み合わせて経口投与した場合、それら腫瘍質量は、対照群腫瘍質量の２２％および１４％に更に減少した。
【００５５】
毎日かまたは断続処置スケジュールでの単一薬剤としてのＣＩ−１０３３は、双方の研究においてパクリタキセルと少なくとも同程度に有効であった。ＣＩ−１０３３の３０ｍｇ／ｋｇでの断続投与は、同じ用量レベルでの毎日投与と同程度に有効であった。
【００５６】
パクリタキセルと毎日１０ｍｇ／ｋｇまたは３０ｍｇ／ｋｇのＣＩ−１０３３の組合せは、腫瘍質量を、いずれの単一薬剤の単独よりも大きく減少させ、それぞれ、２５％および１４％のパーセントＴ／Ｃ値を生じた。第二研究の結果は、双方の処置スケジュールについて、ＣＩ−１０３３＋パクリタキセルが、単一薬剤治療よりも改善された抗腫瘍有効性を生じたということも示唆した。
【００５７】
総体的に、これらデータは、パクリタキセルとＣＩ−１０３３の組合せが、腫瘍質量を減少させることにおいて、２５３ＪＢ−Ｖヒト膀胱癌に対してこれら研究で単一薬剤として投与されたいずれの薬剤よりも優れていたということを示している。
【００５８】
逐次的投与でのＣＩ−１０３３／ドセタキセル組合せ
多数の前臨床研究が、ｅｒｂＢファミリー受容体チロシンキナーゼの阻害剤をパクリタキセルと組み合わせることにより、どちらかの薬剤を単独で用いるよりも大きい治療的作用を得ることができるということを示している。この結果は、以前に、Ａ４３１ヒト類表皮腫、ＬＸ−１肺、Ａ５４９肺およびＧＥＯ結腸癌を含めたいくつかのヒト腫瘍異種移植片における Iressa（登録商標）について報告されている［Sirotnak, et al. Clin.Cancer Res. 6:4885-92,2000; Ciardiello, et al. Clin.Cancer Res. 7:1459-65,2001;  Ciardiello, et al. Clin.Cancer Res. 6:2053-63,2000］。ｅｒｂＢファミリーの個々の受容体に対して向けられた単クローン性抗体も、この薬物との組合せで有効であることが示されている。ｅｒｂＢ−２を特異的に中和する Herceptin（登録商法）は、ＢＴ−４７４ヒト乳癌に対して in vivo で［Baselga J, et al., Cancer Res. 58:2825-31,1998］、並びに、種々のヒト腫瘍細胞系において in vitro で［Pegram, et al., Oncogene 18:2241-51,1999］、パクリタキセルの活性を増強したが、ＥＧＦ受容体に対して向けられるＣ−２２５は、無胸腺ヌードマウス中の正常位で増殖した２５３ＪＢ−Ｖヒト膀胱においてパクリタキセルの抗腫瘍作用を増強することが示されている［Inoue, Clin.Cancer Res. 6:4874-84,2000］。
【００５９】
しかしながら、上記のｅｒｂＢファミリーチロシンキナーゼの阻害剤には、非可逆性であり且つｐａｎ  ｅｒｂＢチロシンキナーゼ阻害剤であるものはない。ＣＩ−１０３３は、パクリタキセルと組み合わせて用いられた場合、治療的作用を高く増強することが示されている。下記の実験は、特定の投薬順序（dose sequence）が、二つの薬物の組合せでの活性を増強するということを示す。ＭＤＡ−ＭＢ−４５３ヒト乳癌細胞を、単独かまたは組合せでのパクリタキセルおよびＣＩ−１０３３に暴露する in vitro 実験は、パクリタキセルに誘発されるアポトーシスの増強を示しており、最大作用がパクリタキセルへの最初の暴露に依存していた。これら実験において、パクリタキセル単独への３日暴露は、それら細胞の２３％にアポトーシスを起こさせたが、ＣＩ−１０３３単独は、アポトーシス部分に影響を与えなかった。パクリタキセルおよびＣＩ−１０３３への組合せ同時暴露は、細胞死を２７％へ僅かに増加させるだけであった。しかしながら、パクリタキセルを最初に加えた後、２４時間後にＣＩ−１０３３を加えた場合、アポトーシス部分は４７％に倍増した。対照的に、細胞を、パクリタキセルの２４時間前にＣＩ−１０３３に暴露した場合、アポトーシスは、僅か６％まで顕著に抑制された。Ａ４３１ヒト腫瘍異種移植片におけるパクリタキセルとの組合せのＣＩ−１０３３での in vivo 効力試験は、最初にパクリタキセルで、その１日後にＣＩ−１０３３で行う初期処置は、その組合せが、どちらかの薬物単独よりも大きい治療的作用を生じるきわめて有効なスケジュールであったということを示している。更に、その組合せは、充分に許容され、重複する毒性は存在しないと考えられた。これら結果は、ＥＧＦ受容体抗体Ｃ−２２５との組合せにより生じたパクリタキセルの増強された活性と一致している。その際、その抗体は、化学療法から２日後に与えられた［Inoue, Clin.Cancer Res. 6:4874-84,2000］。
【００６０】
ＥＧＦ受容体抗体Ｃ−２２５とトポテカンの組合せで認められた抗腫瘍活性は、トポテカンを最初に与え、その１日後にその抗体を与えた時に最大作用が得られたという、明らかな順序依性を示した。活性は、二つの薬物を同時に与えた時にはより小さくなり、Ｃ−２２５を最初に与えた時には顕著に抑制された［Ciardiello, et al. Clin.Cancer Res. 5:909-16,1999］。
【００６１】
ＣＩ−１０３３での研究も、二つの追加の薬物について、顕著な順序依存作用を示している。増強された細胞死は、上記のパクリタキセル研究と同様に、細胞を最初にジェムシタビンに、次にＣＩ−１０３３に暴露することによって in vitro で認められた［Nelson, et al., J.Biol.Chem. 276:14842-14847,2001］。Ａ４３１ヒト類表皮癌におけるＣＩ−１０３３での in vivo 試験は、シスプラチンとの顕著な順序依存性も示している。この場合、シスプラチンの後にＣＩ−１０３３を投与することは、より大きい治療的作用を与えたが、ＣＩ−１０３３を前投与することは、活性を阻害した。
【００６２】
集合的に、これらデータは、ＣＩ−１０３３を、ドセタキセルの前に与えるべきでなく同時投与は恩恵を与えることがありうるが、最大の抗腫瘍作用は、ドセタキセルの前処置後にＣＩ−１０３３を逐次的に投与することによって得られ得るということを示している。
【実施例３】
【００６３】
増殖遅延（Ｔ−Ｃ）試験の設計
本発明によって提供された相乗作用組合せを、１８〜２０グラムの体重の雌の慣用的な免疫欠損ヌードマウスを用いた標準化学療法研究で評価した。試験の０日目に、各々のマウスに、約３０ｍｇの重量の腫瘍断片を外科的に（皮下に）植え込んだ。それらマウスを週１回秤量し、腫瘍サイズ（ｍｍでの幅および長さ）を、標準的なキャリパーで各週に３回測定した。各被験動物の腫瘍質量は、式：
質量＝（ａ×ｂ２）／２
（式中、「ａ」は、ｍｍでの腫瘍の幅、「ｂ」はｍｍでの長さである）
にしたがって計算した。抗癌活性の評価は、式Ｔ−Ｃに基づいて行なわれた。式中、「Ｔ」および「Ｃ」は、（それぞれ）被処置腫瘍および対照腫瘍が７５０ｍｇの既定のサイズ（「評価サイズ」）に達するのに必要な（日数での）メジアン時間である。ＣＩ−１０３３を、５０ｍＭ乳酸ナトリウム緩衝液、ｐＨ４．０中に溶解させ、０．５ｍＬ容量中のいろいろな用量で経口投与した。標準薬剤を、包装インサートに記載した通りに希釈し、０．５ｍＬ注射剤中のいろいろな用量レベルで投与した。
【００６４】
各実験において、樹立された腫瘍を有するマウスを、無作為に４つの処置群の一つに入れた。１の群を対照処置群とした。群２を更に分けて、４つのサブグループとし、その各々に、経口用量のＣＩ−１０３３を規定の活性薬剤レベルで与えた。そのＣＩ−１０３３は、下記のスケジュールにしたがって投与した。第３群を更に分けて、４つのサブグループとし、その各々に、指定された標準薬剤を下記の経路およびスケジュールによって与えた。
【００６５】
群４を更に細分して、組合せ治療を受ける群とした。ＣＩ−１０３３の各用量を、標準化学療法薬剤の各用量レベルで評価した。
実施例１および２の正常位腫瘍モデル研究より示されたデータは、ＣＩ−１０３３とジェムシタビンまたはパクリタキセルとの組合せが、被験動物の腫瘍増殖速度を減少させるのに意外にも活性であるということを立証する。一緒に用いられた場合のこれら薬剤の能力は、この組合せが、用いられたいずれの薬剤単独よりも抗腫瘍剤として優れていることを立証する。
【実施例４】
【００６６】
ドセタキセルとの組合せのＣＩ−１０３３での腫瘍増殖遅延
ＣＩ−１０３３およびパクリタキセルの組合せで認められた相乗作用が意外にも劇的であったので、ドセタキセルおよびＣＩ−１０３３での腫瘍増殖遅延研究を、皮下に植え込まれたヒト非小細胞性肺癌異種移植片Ｈ１２５に対して行った。ＣＩ−１０３３を、４０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇおよび０．２ｍｇ／ｋｇで、１９〜２３日目および２６〜３０日目に、樹立されたＨ１２５ヒト細胞肺癌異種移植片を有するマウスにＰＯ（経口）投与した。ドセタキセルを、１２ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇおよび５ｍｇ／ｋｇの用量で、１９日目、２３日目および２７日目にＩＶ投与した。単一薬剤としてのＣＩ−１０３３およびドセタキセルについて最適の腫瘍増殖遅延は、それぞれ、１１．７日および３５．７日であった。組合せ化学療法を与えられた群のいくつかは、３５日を超える腫瘍増殖遅延を示し、ドセタキセルおよびＣＩ−１０３３を含む組合せ治療の増強された治療的利点を示した。図１は、ＣＩ−１０３３およびドセタキセルでの処置に伴う増強された腫瘍増殖遅延を示している。完全応答は、研究中に質量が１００％減少した腫瘍として定義した。部分応答は、研究中に質量が少なくとも５０％減少した腫瘍として定義した。この研究において双方の治療薬を与えられた被験動物で認められる部分応答および完全応答の数は、組合せ治療を受けた被験動物について、単一薬剤治療を受けた場合より多かった。しかしながら、この研究において双方の治療薬を与えられた被験動物で認められる完全応答の数は、単一薬剤を与えられた場合よりも顕著に上昇した（１３．３％対４％および０）。これら二つの薬剤の組合せは、毒性、致死性または体重減少をもたらさなかった。
【実施例５】
【００６７】
エトポシドとの組合せのＣＩ−１０３３での腫瘍増殖遅延
本発明によって提供された相乗作用組合せを、雌免疫欠損ヌードマウスを用いた標準化学療法研究で評価した。ＣＩ−１０３３およびエトポシドの組合せを、皮下に植え込まれたヒト非小細胞性肺癌異種移植片Ｈ１２５に対して評価した。
【００６８】
ＣＩ−１０３３およびエトポシドでの一つの組合せ試験において、ＣＩ−１０３３を、２００ｍｇ／ｋｇ、１２４ｍｇ／ｋｇおよび７７ｍｇ／ｋｇの用量で、３回エトポシド投与の各々の２４時間後に投与した。エトポシドは、８０ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇおよび３１ｍｇ／ｋｇの用量で、１２日目、１６日目および２０日目にＩＰ投与した。この試験において、エトポシドは、単一薬剤として、最大許容用量の５０ｍｇ／ｋｇではＨ１２５の成長を遅延させるのに比較的有効でなかったが、ＣＩ−１０３３は非常に有効であった。５０ｍｇ／ｋｇのエトポシドおよび７７ｍｇ／ｋｇのＣＩ−１０３３の組合せは、腫瘍増殖の遅延において、単独で投与されるいずれの薬剤で認められるよりも優れた作用を生じた。他の組合せ投薬方式は全て、ＣＩ−１０３３治療単独よりも良くなかった。しかしながら、エトポシドは、試験された最低用量でのみ充分に許容された。
【実施例６】
【００６９】
カペシタビンとの組合せのＣＩ−１０３３
本発明によって提供された相乗作用組合せを、ＢＡＬＢ／Ｃ雌マウスを用いた標準化学療法研究で評価した。ＣＩ−１０３３およびカペシタビンの組合せを、皮下に植え込まれたネズミ結腸癌Ｃ２６に対して評価した。
【００７０】
ＣＩ−１０３３およびカペシタビンでの一つの組合せ試験において、ＣＩ−１０３３を、４０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇおよび１０ｍｇ／ｋｇの用量で、各々のカペシタビン投与と同時に経口投与した。カペシタビンは、７５０ｍｇ／ｋｇおよび５００ｍｇ／ｋｇの用量で、１４〜１６日目、２１〜２３日目および２８〜３０日目にＰＯ投与した。単一薬剤としてのＣＩ−１０３３およびカペシタビンについての最適の腫瘍増殖遅延は、それぞれ、３．６日および２２．５日であった。組合せ化学療法を与えられた群のいくつかは、２２日を超える腫瘍増殖遅延を示し、カペシタビンおよびＣＩ−１０３３を含む組合せ治療の増強された治療的利点を示した。
【００７１】
カペシタビンは、単一薬剤として、Ｃ２６結腸癌に対して３／６の完全応答および２／６の部分応答を引き起こしたが、単一薬剤としてのＣＩ−１０３３は、この試験において有効ではなかった。７５０ｍｇ／ｋｇまたは５００ｍｇ／ｋｇのカペシタビンとＣＩ−１０３３との組合せは、相加的作用より大きい完全応答（１４／３６（３９％））および部分応答（５／３６（１４％））を生じた。単一薬剤としてのＣＩ−１０３３およびカペシタビンは、それぞれ、０および８％の無腫瘍生存動物を生じた。ＣＩ−１０３３およびカペシタビンの組合せは、１６％の無腫瘍生存動物を生じた。
【００７２】
したがって、この実験は、進行したネズミ結腸２６／クローン１０を有するマウスに投与されたカペシタビンとＣＩ−１０３３の組合せが、いずれの単一薬剤単独と比較しても優れた抗癌有効性を生じたということを示している。
【実施例７】
【００７３】
シスプラチンとの組合せのＣＩ−１０３３
ＣＩ−１０３３とシスプラチンの組合せを、免疫欠損雌ヌードマウスにおいて皮下に植え込まれたヒト非小細胞性肺癌異種移植片Ｈ１２５に対して評価した。
【００７４】
ＣＩ−１０３３を、４０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇおよび２．５ｍｇ／ｋｇで、進行したＯＶＣＡＲ−５ヒト卵巣癌異種移植片を有するマウスに、２８〜３７日目にＰＯ投与した。シスプラチンを、１２ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇおよび１．５ｍｇ／ｋｇの用量で、２８日目、３２日目および３４日目にＩＶ投与した。単独で投与された場合、シスプラチンもＣＩ−１０３３も、進行したＯＶＣＡＲ−５ヒト卵巣癌異種移植片に対して意味のある抗癌作用を生じなかった。この試験において、ＣＩ−１０３３をシスプラチンの後に投与する治療は、進行したＯＶＣＡＲ−５に対して、いずれの単一薬剤よりも優れた抗癌作用を与えた。すなわち、例えば、５ｍｇ／ｋｇおよび１０ｍｇ／ｋｇのＣＩ−１０３３と、１２ｍｇ／ｋｇのシスプラチンとの組合せについて（それぞれ、１８日および２１日を超える）、この用量で単独で投与されるシスプラチン（１０日）と比較して、１８日を超える腫瘍増殖遅延（Ｔ−Ｃ）を与えた。
【００７５】
Ａ４３１類表皮癌に対する試験を、単回投与のＣＩ−１０３３の前および後のシスプラチンへの腫瘍感受性を決定するように設計した。ＣＩ−１０３３およびシスプラチンを利用した治療プロトコルにおける投薬スケジュールの作用を評価するために、６ｍｇ／ｋｇの単回投与のシスプラチンを、腫瘍植込み後１６日目の進行したＡ−４３１異種移植片を有するマウスに、１００ｍｇ／ｋｇまたは２００ｍｇ／ｋｇの単回投与のＣＩ−１０３３の２４時間前かまたは後に、ＩＰにより行なった。腫瘍増殖を評価したが、シスプラチンの後にＣＩ−１０３３を用いる組合せは、シスプラチン単独で生じるものと比較して、１１〜１３．５日の成長遅延によって示されるように、相加的作用より大きい作用を生じた。図４。
【００７６】
異なった投薬スケジュールを用いたＣＩ−１０３３およびカルボプラチンを用いて、同様の結果が得られる。
【実施例８】
【００７７】
トポテカンとの組合せのＣＩ−１０３３
ＣＩ−１０３３およびトポテカンを、樹立されたＨ１２５ヒト細胞肺癌異種移植片を有する免疫欠損雌ヌードマウスに投与した。ＣＩ−１０３３を、４０ｍｇ／ｋｇか、２０ｍｇ／ｋｇかまたは１０ｍｇ／ｋｇで３２〜３５日目に経口投与し、そしてトポテカンを、１．６ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇおよび０．６２ｍｇ／ｋｇの用量で２６〜３０日目にＩＰ投与した。このＣＩ−１０３３およびトポテカンの組合せを、Ｈ１２５ヒト細胞肺癌異種移植片に対して評価した。
【００７８】
ＣＩ−１０３３およびトポテカンは双方とも、進行したＨ１２５ＮＳＣ肺異種移植片に対して腫瘍増殖遅延によって測定される意味のある抗癌有効性を生じた。それら組合せの抗癌有効性は、個々に投与されるいずれの薬剤の場合より優れていた。強化された毒性の徴候はなかった。
【００７９】
処置スケジュールは変動し得るが、ＣＰＴ−１１で同様の結果が得られる。
【実施例９】
【００８０】
放射線処置との組合せのＣＩ−１０３３
本発明によって提供された相乗作用組合せを、Ｃ３Ｈ雌マウスの皮下に植え込まれたネズミ扁平上皮細胞癌ＳＣＣ７において、ＣＩ−１０３３および電離放射線の組合せを用いた標準化学療法研究で評価した。
【００８１】
二つの研究を行った。双方の研究において、複数回投与のＣＩ−１０３３（４０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇおよび５ｍｇ／ｋｇ）を、７〜１８日目に経口で行なった。放射線は、単回投与としてかまたは複数画分として５日間にわたって与えた。これら試験において、ＣＩ−１０３３は、単回投与および複数投与双方の放射線プロトコルにおいて照射の１時間前に投与した。ＳＣＣ−７に対する単回投与放射線プロトコルの場合、腫瘍には、７日目におけるＣＩ−１０３３の１２回ＰＯ投与の最初のものの１時間後に５Ｇｙまたは１０Ｇｙの放射線を与えた。この試験において、ＳＣＣ−７癌は、ＣＩ−１０３３治療単独に感受性でなかった。１０Ｇｙおよび５Ｇｙの単回投与の放射線は、それぞれ、１３．６日および０．８日の腫瘍増殖遅延を生じた。放射線＋ＣＩ−１０３３での組合せ治療は、放射線またはＣＩ−１０３３治療の単独で得られるよりも優れた抗癌作用を生じた（９１％増強）。その作用は、１０Ｇｙの放射線量においてより明白であり、完全後退および部分後退の数の明らかな増加を伴った改善された抗腫瘍作用を示した。
【００８２】
複数回投与の放射線を複数回投与のＣＩ−１０３３と組み合わせる研究を、ＳＣＣ−７に対する単回投与放射線治療プロトコルの有効性に基づいて、Ｒｉｆ−１肉腫に対して行った。この研究は、５回行なうＣＩ−１０３３の１日１回投与の各々の１時間後に与えられる５回行なう放射線の１日１回投与の有効性を評価した。ＳＣＣ−７に対して認められるように、ＣＩ−１０３３は、この研究で用いられる用量での５日処置スケジュールによって生じた３．７日という腫瘍増殖遅延に基づくと、Ｒｉｆ−１肉腫に対して最小限に有効であった。５Ｇｙで５日間の放射線は、２８．５日の腫瘍増殖遅延を生じた。５Ｇｙ放射線＋ＣＩ−１０３３での組合せ治療は、放射線単独で認められるのと比較して意外にも優れた作用を生じ（４２％増強）、この臨床的に関係のある分割照射スケジュールでの優れた抗癌作用を示した。この作用を代表するデータを、表１および図２に与える。
【００８３】
放射線との組合せのＣＩ−１０３３の同様の増強が、結腸癌モデルであるＬｏＶｏ腫瘍において認められた。
【００８４】
【表１】
2005538129.tif 000003
【００８５】
これら実施例は、広範な抗腫瘍化学療法薬剤との組合せ治療におけるＣＩ−１０３３で、および電離放射線との組合せ治療におけるＣＩ−１０３３で腫瘍を処置することにおける予想外に好ましい結果を立証する。したがって、本発明は、ＣＩ−１０３３を、一以上の他の化学療法薬剤、それらの薬学的に許容しうる塩、または電離放射線を用いる治療方式で投与することを含む、感受性新生物を処置する方法を提供する。
【００８６】
治療剤の組合せは、一緒に包装することができる。その包装には、概して、別々に包装されることによって投与前のそれら薬剤間のなんらかの相互作用を免れる各々の活性成分、並びに、各々の薬剤のために個々に包装された緩衝剤または希釈剤が含まれるであろう。所望ならば、個々に包装される薬物は、キットとしての単一カートン中に入れることができ、それによって、担当医師または医療担当者に便宜を与えることができる。このようなキットは、ＣＩ−１０３３を一つの区画に、そして第二区画に抗腫瘍剤を含む、二つの区画を含有してよい。ＣＩ−１０３３を一つの区画に、そして二つの異なった抗腫瘍剤を（別々に包装された希釈剤または緩衝剤と一緒に）第二および第三の区画それぞれに含む少なくとも三つの区画を有するキットも、本発明によって企図される。
【００８７】
本発明によって処置される感受性新生物には、一以上のｅｒｂＢ受容体の突然変異または過剰発現を有する腫瘍が含まれる。この判定基準を満たす腫瘍の中には、充実性腫瘍、特に、進行した充実性腫瘍および非小細胞性肺癌、扁平上皮細胞癌、神経膠腫、小細胞性肺癌、子宮内膜癌、甲状腺癌、黒色腫、結腸直腸癌、腎細胞癌、膵臓癌、食道癌または頸部癌などの頭頚部癌、卵巣癌、骨髄腫、前立腺癌、肉腫、慢性骨髄性白血病および乳癌がある。
【図面の簡単な説明】
【００８８】
【図１】図１は、ヒトＨ１２５非小細胞性肺癌異種移植片におけるＣＩ−１０３３およびタキソテール（登録商標）の相乗作用を示す。
【図２】図２は、ネズミＲｉｆ−１肉腫におけるＣＩ−１０３３および放射線の相乗作用を示す。
【図３】図３は、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８乳癌細胞についての、ＣＩ−１０３３と組み合わされた場合の、タキソールのスケジュール依存性を示す。
【図４】図４は、ＣＩ−１０３３をシスプラチンと組み合わせた場合に認められる in vivo スケジュール依存性を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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