(57)【要約】本発明は、セラミドの放出の阻害、または早期皮膚老化に対するヒトの皮膚の予防および保護および皺形成に対するヒトの皮膚の予防および保護のための相溶性溶質の使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
セラミドの放出を阻害するための相溶性溶質から選択される一または二以上の化合物の使用。
【請求項２】
早期皮膚老化に対するヒトの皮膚の予防および保護のための、相溶性溶質から選択される一または二以上の化合物の使用。
【請求項３】
皺形成に対するヒトの皮膚の予防および保護のための、請求項１または２に記載の相溶性溶質から選択される一または二以上の化合物の使用。
【請求項４】
セラミドの放出が遊離基またはＵＶ光により誘発される、請求項１〜３のいずれかに記載の使用。
【請求項５】
セラミドの放出の阻害がマトリクス金属蛋白分解酵素の発現を防止する、請求項１〜４のいずれかに記載の使用。
【請求項６】
皮膚のコラーゲン線維の劣化の増加を避ける、請求項１〜５のいずれかに記載の使用。
【請求項７】
セラミドの放出の阻害が前炎症蛋白の発現を防止する、請求項１〜６のいずれかに記載の使用。
【請求項８】
前炎症蛋白がＩＣＡＭ−１遺伝子である、請求項７に記載の使用。
【請求項９】
セラミドの放出の阻害が反応性酸素種の形成を防止する、請求項１、４、７または８に記載の使用。
【請求項１０】
セラミドの放出が光線皮膚炎を有するヒトにおいて阻害される、請求項１〜９のいずれかに記載の使用。
【請求項１１】
光線皮膚炎が多形性光線皮膚炎、紅斑性狼瘡および光蕁麻疹から選択される、請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
相溶性溶質が化粧用、皮膚科学的または製薬組成物の形状である、請求項１〜１１のいずれかに記載の使用。
【請求項１３】
相溶性溶質が式ＩａおよびＩｂで示される化合物、式ＩａおよびＩｂで示される化合物の生理学的に許容される塩、および式ＩａおよびＩｂで示される化合物の立体異性体形から選択される、請求項１〜１２のいずれかに記載の使用：
【化１】
2005521709.tif 000018
式中、Ｒ1はＨまたはアルキル、Ｒ2はＨ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯ−アルキルまたはＣＯ−ＮＨ−Ｒ5、Ｒ3およびＲ4は各々、互いに独立してＨまたはＯＨ、ｎは１、２または３、アルキルは１〜４個の炭素原子を有するアルキル基、およびＲ5はＨ、アルキル、アミノ酸基、ジペプチド基またはトリペプチド基である。
【請求項１４】
化合物が（Ｓ）−１，４，５，６−テトラヒドロ−２−メチル−４−ピリミジンカルボン酸および（Ｓ，Ｓ）−１，４，５，６−テトラヒドロ−５−ヒドロキシ−２−メチル−４−ピリミジンカルボン酸から選択される式ＩａおよびＩｂで示される化合物から選択される、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
組成物中の相溶性溶質の割合が組成物全体を基準として０．００１〜５０重量％である、請求項１〜１４のいずれかに記載の使用。
【請求項１６】
皺形成に対してヒトの皮膚を予防または保護するのに適した組成物の調製のための、相溶性溶質の使用。
【請求項１７】
早期皮膚老化に対してヒトの皮膚を予防または保護するのに適した組成物の調製のための、相溶性溶質の使用。
【請求項１８】
光皮膚炎の予防または治療に適した組成物の調製のための、相溶性溶質の使用。
【請求項１９】
多形性光線皮膚炎、紅斑性狼瘡および／または光蕁麻疹の予防または治療に適した組成物の調製のための、相溶性溶質の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、セラミドの放出の阻害または早期皮膚老化に対するヒトの皮膚の予防および保護および皺形成に対するヒトの皮膚の予防および保護のための、相溶性溶質の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒトケラチノサイトの細胞代謝は、ＵＶ光に曝すことにより影響される。すなわち、例えば、ＵＶＡ照射および一重項酸素の形成は、細胞膜からのいわゆる「セカンド・メッセンジャー」の放出を引き起こす。このセカンド・メッセンジャーは、転写因子ＡＰ−２を活性化する。転写因子ＡＰ−２は、前炎症遺伝子の発現を誘発する。
【０００３】
例えば、特異的セカンド・メッセンジャーであるセラミドのＵＶ誘発放出により行われる代謝カスケードは、前炎症蛋白および反応性酸素種の合成を増加させ、これは、皮膚細胞を損ない得る。この細胞損傷は、皮膚老化、特に早期皮膚老化およびヒトの皮膚の皺形成に対する本質的影響因子である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
すなわち、本発明はセラミドの放出増加による皮膚細胞の損傷に対抗することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
驚くべきことに、相溶性溶質が、セラミドの放出を阻害するのに有利に適していることを発見した。
【０００６】
一般的定義によれば、相溶性溶質は、生合成または効果的輸送機構により大量に蓄積する極めて好塩性または耐塩性の真性細菌からのストレス保護物質である。これらの浸透活性物質は、媒体中への液体流出（乾燥）を防止し、その名前は、高い細胞質濃度（約２重量モルまで）でも細胞代謝を損なわないという事実に起因する、すなわち、代謝と相溶性（ｃｏｍｐａｔｉｂｌｅ）である（Ｅ．Ａ．Ｇａｌｉｎｓｋｉ、Ｍ．Ｓｔｅｉｎ、Ｂ．Ａｍｅｎｄｔ、Ｍ．Ｋｉｎｄｅｒ，Ｃｏｍｐ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，第１１７（３）巻、（１９９７年）、３５７〜３６５頁による）。
【０００７】
すなわち、本発明は、セラミドの放出を阻害するための相溶性溶質から選択される一または二以上の化合物の使用、早期皮膚老化に対するヒトの皮膚の予防および保護のための、相溶性溶質から選択される一または二以上の化合物の使用、および皺形成に対するヒトの皮膚の予防および保護のための、相溶性溶質から選択される一または二以上の化合物の使用に関する。
【０００８】
本発明は、さらに、セラミドの放出の阻害に適した、または早期皮膚老化に対するヒトの皮膚の予防および保護もしくは皺形成に対するヒトの皮膚の予防および保護に適した組成物の調製のための、相溶性溶質から選択される一または二以上の化合物の使用に関する。
【０００９】
本発明の過程において、相溶性溶質が、例えば遊離基およびＵＶ光、特にＵＶ−Ａ光により誘発される膜結合スフィンゴミエリンからのセラミドの放出を阻害することが発見された。
【００１０】
セラミドの放出の阻害は、マトリクス金属蛋白分解酵素の発現を妨げる。これは、皮膚のコラーゲン線維の増加した劣化を避けることができるようにする。
【００１１】
さらに、セラミドの放出の阻害は、前炎症蛋白の増加した発現、特に、例えばＩＣＡＭ−１のような遺伝子の増加した発現を防止する。
【００１２】
相溶性溶質は、最初の反応ステップと同様に早期に例えばＵＶ光により阻害される前記代謝カスケードを阻害し、このように皮膚細胞への損傷を防止する。
【００１３】
相溶性溶質は、スフィンゴミエリンからのセラミドのＵＶ誘発放出を阻害し、すなわち、セラミドの放出に基づく代謝カスケードのその後の反応ステップも阻害する。
【００１４】
本発明によれば、相溶性溶質は、皮膚のコラーゲン線維の保護に有利に適している。相溶性溶質は、さらに、皺形成に対するヒトの皮膚の保護に適している。
【００１５】
本発明によれば、相溶性溶質は、さらに、前炎症物質の形成およびそれから生じる反応性酸素種に対する保護に有利に適している。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
長波紫外照射線（ＵＶＡ  ３２０〜４００ｎｍ）は、生理学的条件下に治療的または化粧的理由でヒトの皮膚が曝される最も重要な傷害の一つである。ＵＶＡ照射線は、光線皮膚炎（例えば、多形性光線皮膚炎、紅斑性狼瘡、光蕁麻疹、光アレルギー性および光毒性反応）、早期および促進皮膚老化（光老化）および光発癌の病因に決定的に含まれる。これらの健康を損なう効果のために、ヒトの皮膚細胞中における遺伝子の発現の制御が基本的重要事項である。さらに、極く最近の論文は、これらの細胞中のミトコンドリアＤＮＡ中における突然変異の発生が、ＵＶＡ照射により開始されるヒトの皮膚の早期老化過程に同じように決定的に重要であることを示している。ミトコンドリアは、酸化的燐酸化に含まれる蛋白をコードするそれら自身のゲノム材料を含む。これは、環状ＤＮＡ分子の状態の内側ミトコンドリア膜の領域に位置し、すなわち、酸化的ストレスにかなりの程度に曝される。結果として起こるミトコンドリアＤＮＡ突然変異は、退化性疾患の病因に重要であるのみならず細胞および組織の老化にも重要である。このように、普通の健常組織は、その年齢に依りミトコンドリアＤＮＡ変異の含量が増えている。これは、酸化的燐酸化するその性能の低下に関連する。ＵＶＡ照射は酸化的ストレスの有力な誘発剤であり、したがって、皮膚においてミトコンドリアＤＮＡ変異を引き起こすことができる。すなわち、光老化皮膚は、それに対応して、光保護皮膚と比較してミトコンドリアＤＮＡ変異の含量が著しく増加している。さらに、ヒト線維芽細胞を繰り返しＵＶＡ照射すると、ミトコンドリアＤＮＡ変異が時間および投与量に依存して生じることが最近示されてきている。
【００１７】
相溶性溶質の本発明による使用は、光線皮膚炎を有するヒト、特に、多形性光線皮膚炎、紅斑性狼瘡および光蕁麻疹から選択される光線皮膚炎を有するヒトに好ましく適している。
【００１８】
本発明で好ましい相溶性溶質は、糖質およびポリオール、例えば、トレハロース、グリセロール、グリコシルグリセロール、β−マンノシルグリセレート（フィロイン（ｆｉｒｏｉｎ））、β−マンノシルグリセルアミド（フィロインＡ）、ジ−ミオ−イノシトールリン酸（ＤＩＰ）、環式２，３−ジホスホグリセレート（ｃＤＰＧ）、１，１−ジグリセロールリン酸（ＤＧＰ）およびジマンノシルジイノシトールリン酸（ＤＭＩＰ）、およびアミノ酸およびアミノ酸誘導体、例えば、ベタイン、好ましくはグリシンベタイン、プロリンベタインまたはグルタメートベタイン、アラニン、プロリン、グルタミン、Ｎ−アセチルリシン、グルタミン１−アミド、タウリン、コリン、コリンＯ−硫酸、カルニチン、アルセノベタイン、クロトノベタイン、ジメチルスルホニオ酢酸、ジメチルスルホプロピオン酸、ホモベタイン、トリメチルアミンＮ−オキシドおよびｅｃｔｏｉｎから選択される。
【００１９】
特に好ましい相溶性溶質は、式ＩａおよびＩｂで示される化合物、式ＩａおよびＩｂで示される化合物の生理学的に許容される塩、および式ＩａおよびＩｂで示される化合物の立体異性体形から選択される：
【００２０】
【化１】
2005521709.tif 000002
【００２１】
式中、Ｒ1はＨまたはアルキル、Ｒ2はＨ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯ−アルキルまたはＣＯ−ＮＨ−Ｒ5、Ｒ3およびＲ4は各々、互いに独立してＨまたはＯＨ、ｎは１、２または３、アルキルは１〜４個の炭素原子を有するアルキル基、およびＲ5はＨ、アルキル、アミノ酸基、ジペプチド基またはトリペプチド基である。
【００２２】
本発明の目的において、式ＩａおよびＩｂで示される化合物、式ＩａおよびＩｂで示される化合物の生理学的に許容される塩、および式ＩａおよびＩｂで示される化合物の立体異性体形から選択される全ての前記および以下の化合物は、「ｅｃｔｏｉｎまたはｅｃｔｏｉｎ誘導体」と呼ばれる。
【００２３】
ｅｃｔｏｉｎまたはｅｃｔｏｉｎ誘導体は、種々の好塩性微生物から単離または合成により調製することができる低分子量環式アミノ酸誘導体である。ｅｃｔｏｉｎおよびヒドロキシｅｃｔｏｉｎの両方が、細胞代謝と反応しないという利点を有する。
【００２４】
式ＩａおよびＩｂで示される化合物、式ＩａおよびＩｂで示される化合物の生理学的に許容される塩、および式ＩａおよびＩｂで示される化合物の立体異性体形から選択される化合物は、組成物中において、光学的異性体、ジアステレオマー、ラセミ化合物、両性イオン、カチオンまたはそれらの混合物として存在し得る。式ＩａおよびＩｂで示される化合物、式ＩａおよびＩｂで示される化合物の生理学的に許容される塩、および式ＩａおよびＩｂで示される化合物の立体異性体形のうち、Ｒ1がＨまたはＣＨ3、Ｒ2がＨまたはＣＯＯＨ、Ｒ3およびＲ4が各々、互いに独立してＨまたはＯＨ、およびｎが２である化合物が好ましい。式ＩａおよびＩｂで示される化合物、式ＩａおよびＩｂで示される化合物の生理学的に許容される塩、および式ＩａおよびＩｂで示される化合物の立体異性体形のうち、（Ｓ）−１，４，５，６−テトラヒドロ−２−メチル−４−ピリミジンカルボン酸（ｅｃｔｏｉｎ）および（Ｓ，Ｓ）−１，４，５，６−テトラヒドロ−５−ヒドロキシ−２−メチル−４−ピリミジンカルボン酸（ヒドロキシｅｃｔｏｉｎ）が特に好ましい。
【００２５】
式ＩａおよびＩｂで示される化合物の基Ｒ5として述べられたアミノ酸残基は、対応するアミノ酸から誘導される。「アミノ酸」という用語は、以下の化合物：すなわちアラニン、β−アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、γ−アミノ酪酸、Ｎε−アセチルリシン、Ｎδ−アセチルオルニチン、Ｎγ−アセチルジアミノ酪酸およびＮα−アセチルジアミノ酪酸の立体異性型、例えば、ＤおよびＬ型を意味すると解される。Ｌ−アミノ酸が好ましい。以下のアミノ酸の残基が好ましい：アラニン、β−アラニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、セリン、スレオニン、バリン、γ−アミノ酪酸、Ｎε−アセチルリシン、Ｎδ−アセチルオルニチン、Ｎγ−アセチルジアミノ酪酸およびＮα−アセチルジアミノ酪酸。
【００２６】
式ＩａおよびＩｂで示される化合物の基Ｒ5として述べられたジおよびトリペプチド基は、化学的性質において酸アミドであり、加水分解で分解されて２または３個のアミノ酸を与える。ジおよびトリペプチド基中のアミノ酸は、アミド結合により互いに結合する。好ましいジおよびトリペプチド基は、好ましいアミノ酸から組み立てられる。
【００２７】
式ＩａおよびＩｂで示される化合物の基Ｒ1、Ｒ2およびＲ5として述べられたアルキル基は、メチル基ＣＨ3、エチル基Ｃ2Ｈ5、プロピル基ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ3およびＣＨ（ＣＨ3）2、およびブチル基ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ3、Ｈ3ＣＣＨＣＨ2ＣＨ3、ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2およびＣ（ＣＨ3）3を含む。好ましいアルキル基はメチル基である。
【００２８】
式ＩａおよびＩｂで示される化合物の好ましい生理学的に許容される塩は、例えば、アルカリ金属、アルカリ土類金属またはアンモニウム塩、例えば、Ｎａ、Ｋ、ＭｇまたはＣａ塩、および有機塩基であるトリエチルアミンまたはトリス（２−ヒドロキシエチル）アミンから誘導された塩である。式ＩａおよびＩｂで示される化合物のさらに好ましい生理学的に許容される塩は、塩酸、硫酸および燐酸のような無機酸または、酢酸、クエン酸、安息香酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸およびｐ−トルエンスルホン酸のような有機カルボン酸またはスルホン酸との反応により生じる。
【００２９】
カルボキシル基またはアミノ基のような塩基性および酸性基がその中に同数で存在する式ＩａおよびＩｂで示される化合物は、内部塩を形成する。
【００３０】
式ＩａおよびＩｂで示される化合物の調製は、文献（ＤＥ  ４３  ４２  ５６０）に記載されている。（Ｓ）−１，４，５，６−テトラヒドロ−２−メチル−４−ピリミジンカルボン酸または（Ｓ，Ｓ）−１，４，５，６−テトラヒドロ−５−ヒドロキシ−２−メチル−４−ピリミジンカルボン酸は、微生物学的方法（Ｓｅｖｅｒｉｎら、Ｊ．Ｇｅｎ．Ｍｉｃｒｏｂ．第１３８巻（１９９２年）１６２９〜１６３８頁）により得ることもできる。
【００３１】
化粧的および製薬的目的で式ＩａおよびＩｂで示される化合物から選択される化合物を使用することは、既に知られている。
【００３２】
例えば、ＷＯ９４／１５９２３は、（Ｓ）−１，４，５，６−テトラヒドロ−２−メチル−４−ピリミジンカルボン酸または（Ｓ，Ｓ）−１，４，５，６−テトラヒドロ−５−ヒドロキシ−２−メチル−４−ピリミジンカルボン酸を、化粧組成物または医薬品の調製、例えば、皮膚疾患の治療に用い得ることを記載している。
【００３３】
さらに、ＤＥ  ４３  ４２  ５６０は、化粧品中の保湿剤としてのｅｃｔｏｉｎおよびｅｃｔｏｉｎ誘導体の使用を記載している。これらの生成物は、例えば、老化、乾燥または刺激された皮膚のケアのために適している。
【００３４】
さらに、ＤＥ  １９９  ３３  ４６６は、ｅｃｔｏｉｎおよびヒドロキシｅｃｔｏｉｎのような誘導体を、化粧組成物および皮膚科学的組成物中の酸化防止剤および遊離基捕捉剤として用い得ることを記載している。これらの組成物は、酸化的ストレスにより引き起こされる皮膚老化、および炎症反応を治療および／または予防するために用いることができる。
【００３５】
化粧製剤中におけるｅｃｔｏｉｎおよびｅｃｔｏｉｎ誘導体のさらなる用途、例えば、乾燥および／または剥げ落ち易い皮膚のケアおよび予防、ヒトの皮膚の乾燥および／または高塩濃度に対する保護、ヒトの皮膚の細胞、蛋白および／または生体膜の保護、ヒトの皮膚のミクロフローラの保護、皮膚バリアの安定化、およびヒトの皮膚細胞の核酸の保護および安定化が、例えば、ＷＯ  ００／０７５５８、ＷＯ  ００／０７５５９およびＷＯ  ００／０７５６０に記載されている。
【００３６】
しかしながら、例えば、式ＩａおよびＩｂで示される化合物、式ＩａおよびＩｂで示される化合物の生理学的に許容される塩、および式ＩａおよびＩｂで示される化合物の立体異性体形のような相溶性溶質から選択される化合物は、セラミドの放出の阻害に有利に適していることは、今まで知られていなかった。
【００３７】
相溶性溶質から選択される化合物の本発明による使用は、好ましくは、前記化合物が化粧用組成物、皮膚科学的組成物または医薬品組成物の状態、特に対応する製剤中に行われる。
【００３８】
化粧組成物、皮膚科学的組成物または医薬組成物中における、相溶性溶質の化合物から選択される化合物、特に、式ＩａおよびＩｂで示される化合物、式ＩａおよびＩｂで示される化合物の生理学的に許容される塩および式ＩａおよびＩｂで示される化合物の立体異性型の割合は、組成物全体を基準にして、好ましくは０．００１〜５０重量％、好ましくは０．０１〜１０重量％、特に好ましくは０．１〜１０重量％である。組成物中における前記化合物の割合は、特に好ましくは、組成物全体を基準として０．１〜５重量％である。
【００３９】
相溶性溶質以外に、組成物は、さらなる化粧的、皮膚科学的または製薬的活性成分も含んでよい。
【００４０】
組成物は、一または二以上の酸化防止剤を含んでよい。組成物は、全ての一般的酸化防止剤を含んでよい。この点において、酸化防止剤として用いることができる専門家文献から知られている多くの証明済みの物質、例えば、フラボノイド、クマラノン、アミノ酸（例えば、グリシン、ヒスチジン、チロシン、トリプトファン）およびそられの誘導体、イミダゾール（例えば、ウロカニン酸）およびそられの誘導体、ペプチド、例えば、Ｄ，Ｌ−カルノシン、Ｄ−カルノシン、Ｌ−カルノシンおよびそられの誘導体（例えば、アンセリン）、カロチノイド、カロテン（例えば、α−カロテン、β−カロテン、リコペン）およびそられの誘導体、クロロゲン酸およびそられの誘導体、リポ酸およびそられの誘導体（例えば、ジハイドロ酸）、アウロチオグルコース、プロピルチオウラシルおよび他のチオール（例えば、チオレドキシン、グルタチオン、システイン、シスチン、シスタミン並びにそれらのグリコシル、Ｎ−アセチル、メチル、エチル、プロピル、アミル、ブチルおよびラウリル、パルミトイル、オレイル、γ−リノレイル、コレステリルおよびグリセリルエステル）およびそれらの塩、チオジプロピオン酸ジラウリル、チオジプロピオン酸ジステアリル、チオジプロピオン酸およびそれらの誘導体（エステル、エーテル、ペプチド、脂質、ヌクレオチド、ヌクレオシドおよび塩）、およびスルホキシミン化合物（例えば、ブチオニンスルホキシミン、ホモシステインスルホキシミン、ブチオニンスルホン、ペンタ−、ヘキサ−およびヘプタチオニンスルホキシミン）の非常に低い許容量（例えば、ｐｍｏｌおよびμｍｏｌ／ｋｇ）、および（金属）キレート化剤（例えば、α−ヒドロキシ脂肪酸、パルミチン酸、フィチン酸、ラクトフェリン）、α−ヒドロキシ酸（例えば、クエン酸、乳酸、リンゴ酸）、フミン酸、胆汁酸、胆汁抽出物、ビリルビン、ビリベルジン、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡおよびそれらの誘導体、不飽和脂肪酸およびそれらの誘導体、ビタミンＣおよび誘導体（例えば、パルミチン酸アスコルビル、燐酸アスコルビルマグネシウム、酢酸アスコルビル）、トコフェロールおよび誘導体（例えば、酢酸ビタミンＥ）、ビタミンＡおよび誘導体（例えば、パルミチン酸ビタミンＡ）、およびベンゾイン樹脂の安息香酸コニフェリル、ルチン酸およびその誘導体、α−グリコシルルチン、フェルール酸、フルフリリデングルシトール、カルノシン、ブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、ノルジヒドログアヤレト酸、トリヒドロキシブチロフェノン、ケルセチン、尿酸およびその誘導体、マンノースおよびその誘導体、亜鉛およびその誘導体（例えば、ＺｎＯ、ＺｎＳＯ4）、セレンおよびその誘導体（例えば、セレノメチオニン）、スチルベンおよびその誘導体（例えば、酸化スチルベン、酸化トランススチルベン）、メタ重亜硫酸塩、亜硫酸塩または亜硫酸水素塩がある。
【００４１】
酸化防止剤の混合物が、同様に、組成物中での使用に適している。既知の市販の混合物は、例えば、活性成分として、レシチン、パルミチン酸Ｌ−（＋）−アスコルビルおよびクエン酸を含む混合物（例えば、Ｏｘｙｎｅｘ（登録商標）ＡＰ）；天然トコフェロール、パルミチン酸Ｌ−（＋）−アスコルビル、Ｌ−（＋）−アスコルビン酸およびクエン酸を含む混合物（例えば、Ｏｘｙｎｅｘ（登録商標）Ｋ  ＬＩＱＵＩＤ）；天然供給源からのトコフェロール抽出物、パルミチン酸Ｌ−（＋）−アスコルビル、Ｌ−（＋）−アスコルビン酸およびクエン酸を含む混合物（例えば、Ｏｘｙｎｅｘ（登録商標）Ｋ  ＬＩＱＵＩＤ）；ＤＬ−α−コロフェロール、パルミチン酸Ｌ−（＋）−アスコルビル、クエン酸およびレシチンを含む混合物（例えば、Ｏｘｙｎｅｘ（登録商標）ＬＭ）、または、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、パルミチン酸Ｌ−（＋）−アスコルビルおよびクエン酸を含む混合物（例えば、Ｏｘｙｎｅｘ（登録商標）２００４）である。
【００４２】
さらに適した酸化防止剤混合物は、例えばＷＯ  ００／４８５５１においてＣＡＰＲＯＳTMの名で記載（例えば、ＥｍｂｌｉｃａTM）されているように、例えば、特に、エンブリカニンＡ、エンブリカニンＢ、プニグルコニンおよびペンドゥンクラギンからなり得る。
【００４３】
本発明の好ましい態様において、組成物は、フラボノイドおよび／またはクマラノンから選択される一または二以上の化合物を含む。
【００４４】
フラボノイドは、フラボノン、フラボン、３−ヒドロキシフラボン（＝フラボノール）、オーロン、イソフラボンおよびロテノイドのグリコシドを意味すると解される（Ｒｏｅｍｐｐ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｌｅｘｉｋｏｎ［Ｒｏｅｍｐｐ’ｓ  Ｌｅｘｉｃｏｎ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ］、第９巻、１９９３年）。しかしながら、本発明の目的において、この用語は、アグリコン、すなわち糖非含有構成成分、およびフラボノイドとアグリコンとの誘導体を意味するとも解される。本発明の目的において、フラボノイドという用語は、さらに、アントシアニジン（シアニジン）を意味するとも解される。本発明の目的において、クマラノンという用語はその誘導体も意味すると解される。
【００４５】
好ましいフラボノイドは、フラボノン、フラボン、３−ヒドロキシフラボン、オーロンおよびイソフラボンから、特に、フラボノン、フラボン、３−ヒドロキシフラボンおよびオーロンから誘導される。
【００４６】
フラボノイドは好ましくは以下の化合物から選択される：４，６，３’，４’−テトラヒドロキシオーロン、ケルセチン、ルチン、イソケルセチン、エリオジクチオール、タキシフォリン、ルテオリン、トリスヒドロキシエチルケルセチン（トロキセケルセチン）、トリスヒドロキシエチルルチン（トロキセルチン）、トリスヒドロキシエチルイソケルセチン（トロキセイソケルセチン）、トリスヒドロキシエチルルテオリン（トロキセルテオリン）、α−グリコシルルチン、チリロシドおよびそれらの硫酸塩および燐酸塩。フラボノイドのうち、特に好ましいのはルチンおよびトロキセルチンである。
【００４７】
クマラノンのうち、好ましいのは４，６，３’，４’−テトラヒドロキシベンジル−３−クマラノンである。
【００４８】
本発明のさらに好ましい態様において、特に、フラボノイドおよび／またはクマラノンの水溶性を増すべき場合、極性基、例えば、各々の場合互いに独立して、硫酸または燐酸基を、これらの化合物の一または二以上のヒドロキシル基に結合させる。適当な対イオンは、例えば、アルカリまたはアルカリ土類金属のイオンであり、これらは、例えば、ナトリウムおよびカリウムから選択される。
【００４９】
多くのフラボノイドおよびクマラノンは、例えば、天然産である。組成物がそのような化合物を含む場合、これらは、対応する植物を抽出し、単一物質として精製するか、あるいは組成物中に抽出物の状態で導入することにより得ることもでき、抽出物は要すればさらに精製されていてもよい。
【００５０】
組成物中のフラボノイドおよびクマラノンから選択される一または二以上の化合物の割合は、組成物全体を基準として、好ましくは０．００１〜５重量％、特に好ましくは０．０１〜２重量％である。
【００５１】
本発明のさらに好ましい態様において、組成物は、クエン酸、乳酸、リンゴ酸、ＥＤＴＡ、ブチルヒドロキシトルエン、アスコルビン酸、パルミチン酸アルコルビル、燐酸アスコルビルマグネシウム、酢酸アスコルビル、トコフェロール、酢酸トコフェロール並びに、ナトリウムおよびカリウム塩のようなアルカリ金属塩から選択されるメタ重亜硫酸塩、亜硫酸塩または亜硫酸水素塩、および塩基性金属塩およびアンモニウム塩から選択される一または二以上の酸化防止剤を含む。
【００５２】
本発明のさらに好ましい態様において、組成物は、例えばＥｍｂｌｉｃａTMのような酸化防止剤混合物を含む。
【００５３】
組成物中の一または二以上の酸化防止剤の割合は、組成物全体を基準に、好ましくは０．００１〜５重量％、特に好ましくは０．０１〜２重量％である。
【００５４】
組成物は一または二以上のＵＶフィルターを含んでよい。適当な有機ＵＶフィルターは、当業者に知られている全てのＵＶＡおよびＵＶＢフィルターである。両方のＵＶ領域について、専門家文献から知られている例えば以下に列挙する多くの証明済みの物質がある。
【００５５】
ベンジリデン樟脳、例えば、
３−（４’−メチルベンジリデン）−ｄｌ−樟脳（例えば、Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）６３００）
３−ベンジリデン樟脳（例えば、Ｍｅｘｏｒｙｌ（登録商標）ＳＤ）
Ｎ−｛（２および４）−［（２−オキソボルン−３−イリデン）メチル］ベンジル｝アクリルアミド）（ＣＡＳ番号１１３７８３−６１−２、例えば、Ｍｅｘｏｒｙｌ（登録商標）ＳＷ）
Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル−４−（２−オキソボルン−３−イリデンメチル）アニリニウムメチル硫酸（ＣＡＳ番号５２７９３−９７−２、例えば、Ｍｅｘｏｒｙｌ（登録商標）ＳＫ）または
α−（２−オキソボルン−３−イリデン）トルエン−４−スルホン酸（ＣＡＳ番号５６０３９−５８−８、例えば、Ｍｅｘｏｒｙｌ（登録商標）ＳＬ）
ベンゾイルまたはジベンゾイルメタン、例えば、
１−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロパン−１，３−ジオン（例えば、Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）９０２０）または
４−イソプロピルジベンゾイルメタン（例えば、Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）８０２０）
ベンゾフェノン、例えば、
２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン（例えば、Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）４３６０）または
２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン−５−スルホン酸およびそのナトリウム塩（例えば、Ｕｖｉｎｕｌ（登録商標）ＭＳ−４０）
メトキシケイ皮酸エステル、例えば、
メトキシケイ皮酸オクチル（例えば、Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）２２９２）または
４−メトキシケイ皮酸イソペンチル、例えば、異性体の混合物として（例えば、Ｎｅｏ  Ｈｅｌｉｏｐａｎ（登録商標）Ｅ１０００）
サリチル酸塩誘導体、例えば、
サリチル酸２−エチルヘキシル（例えば、Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）ＯＳ）
サリチル酸４−イソプロピルベンジル（例えば、Ｍｅｇａｓｏｌ（登録商標））または
サリチル酸３，３，５−トリメチルシクロヘキシル（例えば、Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）ＨＭＳ）
４−アミノ安息香酸および誘導体、例えば、
４−アミノ安息香酸
４−（ジメチルアミノ）安息香酸２−エチルヘキシル（例えば、Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）６００７）または
エトキシル化４−アミノ安息香酸エチル（例えば、Ｕｖｉｎｕｌ（登録商標）Ｐ２５）
およびさらなる物質、例えば、
２−シアノ−３，３−ジフェニルアクリル酸２−エチルヘキシル（例えば、Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）ＯＣＲ）
２−フェニルベンズイミダゾール−５−スルホン酸およびそのカリウム、ナトリウムおよびトリエタノールアミン塩（例えば、Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）２３２）
３，３’−（１，４−フェニレンジメチレン）ビス（７，７−ジメチル−２−オキソビシクロ［２．２．１］−ヘプト−１−イルメタンスルホン酸およびその塩（例えば、Ｍｅｘｏｒｙｌ（登録商標）ＳＸ）
２，４，６−トリアニリノ−（ｐ−カルボ−２’−エチルヘキシル−１’−オキシ）−１，３，５−トリアジン（例えば、Ｕｖｉｎｕｌ（登録商標）Ｔ−１５０）または
２−（４−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸ヘキシル（例えば、Ｕｖｉｎｕｌ（登録商標）ＵＶＡ  Ｐｌｕｓ、ＢＡＳＦ社製）。
【００５６】
列挙した化合物は、単に例とみなすべきである。もちろん、他のＵＶフィルターを用いることもできる。
【００５７】
これらの有機ＵＶフィルターは、通常、組成物中に、０．５〜１０重量％、好ましくは１〜８重量％の量で混入される。
【００５８】
さらなる適した有機ＵＶフィルターは、例えば、
２−（２Ｈ−ベンゾトリアゾール−２−イル）−４−メチル−６−（２−メチル−３−（１，３，３，３−テトラメチル−１−（トリメチルシリロキシ）ジシロキサニル）プロピル）フェノール（例えば、Ｓｉｌａｔｒｉａｚｏｌｅ（登録商標））
４，４’−［（６−［４−（（１，１−ジメチルエチル）アミノカルボニル）フェニルアミノ］−１，３，５−トリアジン−２，４−ジイル）ジイミノ］ビス（安息香酸）２−エチルヘキシル（ＣＡＳ番号１５４７０２−１５−５、例えば、Ｕｖａｓｏｒｂ（登録商標）ＨＥＢ）
α−（トリメチルシリル）−ω−［トリメチルシリル］オキシ］ポリ［オキシ（ジメチル［および約６％のメチル［２−［ｐ−［２，２−ビス（エトキシカルボニル）ビニル］フェノキシ］−１−メチレンエチル］および約１．５％のメチル［３−［ｐ−［２，２−ビス（エトキシカルボニル）ビニル］フェノキシ］プロペニル］および０．１〜０．４％の（メチル水素）シリレン］
【００５９】
【数１】
2005521709.tif 000003
【００６０】
（ＣＡＳ番号２０７  ５７４−７４−１、例えば、Ｐａｒｓｏｌ  ＳＬＸ）
２，２’−メチレンビス（６−（２Ｈ−ベンゾトリアゾール−２−イル）−４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）フェノール）（ＣＡＳ番号１０３  ５９７−４５−１、例えば、Ｔｉｎｏｓｏｒｂ  Ｍ）
２，２’−（１，４−フェニレン）ビス（１Ｈ−ベンズイミダゾール−４，６−ジスルホン酸、一ナトリウム塩）（ＣＡＳ番号１８０  ８９８−３７−７、例えば、Ｎｅｏ  Ｈｅｌｉｏｐａｎ  ＡＰ）
２，４−ビス｛［４−（２−エチルヘキシルオキシ）２−ヒドロキシ］フェニル｝−６−（４−メトキシフェニル）−１，３，５−トリアジン（ＣＡＳ番号１８７  ３９３−００−６、例えば、Ｔｉｎｏｓｏｒｂ  Ｓ）または
２，２’−（１，４−フェニレン）ビス（１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−スルホン酸）およびそのカリウム、ナトリウムおよびトリエタノールアミン塩。
【００６１】
これらの有機ＵＶフィルターは、通常、組成物中に、個々の物質当たり０．５〜２０重量％、好ましくは１〜１５重量％、特に好ましくは２〜８重量％の量で混入される。
【００６２】
考えられる無機ＵＶフィルターは、例えば、被覆二酸化チタン（例えば、Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）Ｔ−２０００、Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）Ｔ−ＡＱＵＡ）のような二酸化チタン、酸化亜鉛（例えば、Ｓａｃｈｔｏｔｅｃ（登録商標））、酸化鉄および酸化セリウムからなる群から選択されるフィルターである。これらの無機ＵＶフィルターは、通常、組成物中に、０．５〜２０重量％、好ましくは２〜１０重量％の量で混入される。
【００６３】
異なる無機または有機ＵＶフィルターを用いる場合、これらは、互いに実質的に任意の所望の比で用いることができる。個々の物質の互いの比は、通常、１：１０〜１０：１、好ましくは１：５〜５：１、特に好ましくは１：２〜２：１である。ＵＶ−ＡフィルターをＵＶ−Ｂと共に用いる場合、ＵＶ−Ｂフィルターの割合が優勢で、ＵＶ−Ｂフィルターに対するＵＢ−Ａフィルターの比が１：１〜１：１０である場合、大部分の用途に有益である。
【００６４】
組成物中で用いられるＵＶ−フィルター特性を有する好ましい化合物は、３−（４’−メチルベンジリデン）−ｄｌ−樟脳、１−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロパン−１，３−ジオン、４−イソプロピルジベンゾイルメタン、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン、メトキシケイ皮酸オクチル、サリチル酸３，３，５−トリメチルシクロヘキシル、４−（ジメチルアミノ）安息香酸２−エチルヘキシル、２−シアノ−３，３−ジフェニルアクリル酸２−エチルヘキシル、２−フェニルベンズイミダゾール−５−スルホン酸および、それらのカリウム、ナトリウムおよびトリエタノールアミン塩、並びに、被覆された二酸化チタンである。
【００６５】
全ての前記ＵＶフィルターは、カプセル化状態で用いることもできる。特に、有機ＵＶフィルターをカプセル化状態で用いることが有利である。詳しくは、以下の利益が得られる。
【００６６】
カプセル壁の疎水性を、ＵＶフィルターの溶解性から独立して設定することができる。すなわち、例えば、疎水性ＵＶフィルターを純粋に水性の組成物中に混入することもできる。さらに、不快であると思われることが多い疎水性ＵＶフィルターを含む組成物の適用時の油性印象が抑制される。
【００６７】
特定のＵＶフィルター、特にジベンゾイルメタン誘導体は、例えば化粧製剤のような組成物中の低下した光安定性しか示さない。これらのフィルターまたは例えば前記ケイ皮酸誘導体のようなこれらのフィルターの光安定性を損なう化合物のカプセル化が、全組成物の光安定性を増すことを可能にする。
【００６８】
有機ＵＶフィルターによる皮膚滲透および、ヒトの皮膚に直接使用する際に刺激する性能が、文献に繰り返されて記載されている。ここで提案される対応する物質のカプセル化が、この効果を抑制する。
【００６９】
一般に、個々のＵＶフィルターまたは他の成分のカプセル化が、相互作用が抑制されるから、結晶化プロセス、沈殿および凝集形成のような個々の製剤構成成分の互いの相互作用により引き起こされる製剤の問題を避けることを可能にする。
【００７０】
したがって、前記ＵＶフィルターの一または二以上がカプセル化状態であることが好ましい。ここで、カプセルが、裸眼で見えないように小さいことが有利である。前記効果を達成するために、カプセルが充分に安定でありカプセル化された活性成分（ＵＶフィルター）が小さな程度にしか環境に放出されないことがさらに必要である。
【００７１】
適当なカプセルは、無機または有機ポリマーの壁を有することができる。例えば、ＵＳ  ６，２４２，０９９  Ｂ１は、キチン、キチン誘導体または多水酸化ポリアミンの壁を有する適当なカプセルの製造を記載している。特に好ましく用いることができるカプセルは、出願ＷＯ  ００／０９６５２、ＷＯ  ００／７２８０６およびＷＯ  ００／７１０８４に記載のようなゾル−ゲルプロセスにより得ることができる壁を有する。ここでも、その壁がシリカゲル（シリカ；不定酸化水酸化珪素）からなるカプセルが好ましい。対応するカプセルの製造は、例えば、その内容が本出願の対象にも属する引用された特許出願から当業者に知られている。
【００７２】
カプセルは、カプセル化されたＵＶフィルターが前記量で組成物中に存在することを確保する量で組成物中に存在することが好ましい。
【００７３】
組成物は、一または二以上のアミノ酸または製薬的に許容されるその塩も含む。好ましいアミノ酸は、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、リシン、アルギニンおよびヒスチジンからなる化合物群から選択される。
【００７４】
組成物がアミノ酸を含む場合、組成物中のアミノ酸または製薬的に許容されるその塩の割合は、組成物全体を基準に好ましくは０．１〜１０重量％、特に好ましくは０．１〜８重量％、特別に好ましくは０．２〜５重量％である。組成物中のアミノ酸または製薬的に許容されるその塩の割合は、組成物全体を基準に０．２〜２重量％であることが著しく好ましい。
【００７５】
構成成分は、定法にて組成物中に混入することができる。好適な製剤は、外用の製剤、例えば、クリーム、ローション、ゲルまたは皮膚に噴霧することができる溶液である。ここで、製剤が、少なくとも一つの油相および少なくとも一つの水相を含むことが好ましい。
【００７６】
挙げられる製剤の適用状態は、例えば、溶液、乳濁液、ＰＩＴ乳濁液、懸濁液、軟膏、ゲル、クリーム、ローション、スプレーおよびエアロゾルである。さらなる適用状態は、例えば、スティックである。いかなる所望の従来のキャリア、アジュバントおよび任意のさらなる活性成分も、組成物に添加してよい。
【００７７】
好ましいアジュバントは、保存剤、酸化防止剤、安定化剤、可溶化剤、ビタミン、着色剤、香り向上剤、フィルム形成剤、増粘剤および湿潤薬からなる群より得られる。
【００７８】
溶液および乳濁液は、溶媒、可溶剤および乳化剤のような従来のキャリア、例えば、水、エタノール、イソプロパノール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチルグリコール、油、特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油、グリセロール脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール、およびソルビタンの脂肪酸エステル、またはこれらの物質の混合物を含むことができる。
【００７９】
乳濁液は、種々の状態で存在することができる。すなわち、これらは、例えば、油中水（Ｗ／Ｏ）型または水中油（Ｏ／Ｗ）型の乳濁液またはミクロ乳濁液、または、多元乳濁液、例えば、水中油中水（Ｗ／Ｏ／Ｗ）型の乳濁液であり得る。
【００８０】
製剤は、乳化剤を含まない分散組成物の状態であってもよい。これらは、例えば、ハイドロ分散液（ｈｙｄｒｏｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ）またはピカリング乳濁液であり得る。
【００８１】
懸濁液は、液体希釈剤のような従来のキャリア、例えば、水、エタノールまたはプロピレングリコール、懸濁媒体、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールエステルおよびポリオキシエチレンスルビタンエステル、微結晶性セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天およびトラガカント、またはこれらの物質の混合物を含み得る。
【００８２】
ペースト、軟膏、ゲルおよびクリームは、従来のキャリア、例えば、動物および植物性脂肪、ワックス、パラフィン、澱粉、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、珪酸、タルクおよび酸化亜鉛、またはこれらの物質の混合物を含むことができる。
【００８３】
フェイスおよびボディーオイルは、従来のキャリア、例えば合成油、例えば脂肪酸エステル、脂肪アルコール、シリコーン油、天然油、例えば、植物油および油性植物抽出物、パラフィン油、ラノリン油、またはこれらの物質の混合物を含み得る。
【００８４】
スプレーは、従来の噴射剤、例えば、クロロフルオロカーボン、プロパン／ブタンまたはジメチルエーテルを含むことができる。
【００８５】
さらなる典型的化粧適用形態は、例えば、メークアップ、例えば、乳濁液メークアップ、およびサンスクリーン、日光照射前（ｐｒｅ−ｓｕｎ）および日光照射後（ａｆｔｅｒ−ｓｕｎ）製剤である。
【００８６】
剤形は、この用途で通常用いられる種々の投与状態のものである。すなわち、これは、特に、ローションまたは乳濁液の状態、例えば、クリームまたはミルク（Ｏ／Ｗ、Ｗ／Ｏ、Ｏ／Ｗ／Ｏ、Ｗ／Ｏ／Ｗ）；油性アルコール性、油性水性または水性アルコール性ゲルまたは溶液の状態；固体スティックの状態であってよい、またはエアロゾルとして調製してよい。
【００８７】
調製物には、このタイプの組成物中で通常用いられるアジュバント、例えば、増粘剤、可塑剤、湿潤剤、インターフェース活性剤、乳化剤、保存剤、起泡抑制剤、香料、ワックス、ラノリン、推進剤、薬剤そのものまたは皮膚を着色する染料および／または顔料、および化粧品、皮膚科薬および製薬において通常用いられる他の成分を含むことができる。
【００８８】
用いられる分散剤または可溶化剤は、油、ワックスまたは他の脂肪体、低級モノアルコールまたは低級ポリオール、またはそれらの混合物であり得る。特に好ましいモノアルコールまたはポリオールには、エタノール、イソプロパノール、プロピレングリコール、グリセロールおよびソルビトールが含まれる。
【００８９】
本発明の好ましい態様は、クリームまたはミルクの状態の乳濁液であり、脂肪アルコール、脂肪酸、脂肪酸エステル、特に脂肪酸のトリグリセリド、ラノリン、天然または合成油またはワックス、および乳化剤を水の存在下に含む。
【００９０】
さらに好ましい態様は、天然または合成油およびワックス、ラノリン、脂肪酸エステル、特に脂肪酸のトリグリセリドに基づく油性ローション、あるいは、エタノールのような低級アルコール、プロピレングリコールのようなグリコール、および／またはグリセロールのようなポリオール、および油、ワックスおよび、脂肪酸のトリグリセリドのような脂肪酸エステルに基づく油性／アルコール性ローションである。
【００９１】
調製物は、エタノール、プロピレングリコールまたはグリセロールのような一または二以上の低級アルコールまたはポリオール、および、ケイ質土のような増粘剤を含むアルコール性ゲルの状態であってもよい。
【００９２】
固体スティックは、天然または合成ワックスおよび油、脂肪アルコール、脂肪酸、脂肪酸エステル、ラノリンおよび他の脂肪体からなる。
【００９３】
組成物をエアロゾルとして調製する場合、アルカン、フルオロアルカンおよびクロロフルオロアルカンのような従来の推進剤が、通常、用いられる。
【００９４】
前述のような組成物が、皮膚に適用される。
【００９５】
さらなる説明がなくとも、当業者が、前記記載を最も広い範囲で利用し得ることが予想される。したがって、好ましい態様は、絶対に限定的ではない単なる説明的開示であると見なすべきである。
【００９６】
前述および後述の全ての出願および刊行物の全ての開示内容が、参考として本出願に取り込まれる。
【００９７】
組成物は、当業者によく知られている技術を利用して調製することができる。
【００９８】
組成物中で用いることができる全ての化合物または成分は、既知であり市販されている、または当業者によく知られていると共に文献に記載の方法（例えば、Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ著、Ｍｅｔｈｏｄｅｎ  ｄｅｒ  ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ  Ｃｈｅｍｉｅ［Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ］、Ｇｅｏｒｇ−Ｔｈｉｅｍｅ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ、のような標準的著作））により単離または調製することができる。
【００９９】
以下の実施例により、本発明を説明する。しかしながら、これらは決して限定的とみなすべきでない。
【実施例】
【０１００】
実施例Ａ：ＲｏｎａＣａｒｅ（登録商標）ｅｃｔｏｉｎの保護作用
処理しないで放置したまたは、ＲｏｎａＣａｒｅ（登録商標）ｅｃｔｏｉｎの２ｍＭ溶液で２４時間処理した正常ヒトケラチノサイトを、３０Ｊ／ｃｍ2のＵＶ−Ａ照射線量（ＵＶ−Ａ照射線の波長：３４０〜４００ｎｍ）に付する。この線量が、生きている細胞数に影響することなく前記カスケードを誘発することが既に発見されている。細胞を、照射後１時間でする（最大ＵＶ−Ａがセカンドメッセンジャー形成を誘発）。セカンドメッセンジャーの放出が測定された。
【０１０１】
結果を以下の表１に示す。
【０１０２】
【表１】
2005521709.tif 000004
【０１０３】
実験は、ＲｏｎａＣａｒｅ（登録商標）ｅｃｔｏｉｎが、セカンドメッセンジャーのＵＶ−Ａ誘発放出を阻害することを示している。前記カスケードは、セカンドメッセンジャーの濃度の低下により阻害される。これにより、マトリクス金属蛋白分解酵素および炎症前遺伝子の発現による皮膚細胞およびコラーゲン線維への有害な影響および損傷を避けることが可能になる。
【０１０４】
実施例Ｂ：ＲｏｎａＣａｒｅ（登録商標）ｅｃｔｏｉｎの保護作用
実施例Ｂ１：ＵＶ−Ａ誘発セラミド形成の阻害
１ｍＭのＲｏｎａＣａｒｅ（登録商標）ｅｃｔｏｉｎで処理したまたは、処理していないＵＶＡ−照射正常ヒトケラチノサイト中のセカンドメッセンジャー（セラミド）の濃度を未照射ケラチノサイトと比べて、定量的ＨＰＴＬＣ法を用いて測定する。（Ａ）未予備処理対照、（Ｂ）細胞媒体のみで２４時間予備インキュベート、（Ｃ）１ｍＭのＲｏｎａＣａｒｅTMｅｃｔｏｉｎで２４時間予備インキュベート。このように予備処理した細胞に、３０Ｊ／ｃｍ2のＵＶＡ（照射源：Ｓｅｌｌａｍｅｄ  ２４０００）を１回照射する。細胞を照射１時間後に「収穫」し、脂質抽出を行い、セカンドメッセンジャーの濃度を、定量的ＨＰＴＬＣにより測定する。方法詳細が、Ｇｒｅｔｈｅｒ−Ｂｅｃｋ  Ｓら、ＥＭＢＯ  Ｊ  １９巻：５７９３〜５８００頁、２０００年に記載されている。図１は、３つの独立した実験の各々についてのデータを示す。データは、セラミド（ｎｇ）に対するｅｃｔｏｉｎ（ｍＭ）のヒストグラムとして示す。１ｍＭ  ｅｃｔｏｉｎでの細胞の処理が、ＵＶＡ照射により誘発されるセラミド形成を完全に抑制することがわかる。
【０１０５】
実施例Ｂ２：ＵＶ−Ａ誘発ＡＰ−２活性化の阻害
転写因子ＡＰ−２の活性化を、ゲル電気泳動可動性シフトアッセイ（ＧＥＭＳＡ）を利用して決定する。この目的のために、ＵＶ−Ａ光３０Ｊ／ｃｍ2をあらかじめ１時間照射したヒトケラチノサイトの核抽出物（Ｊ．Ｄ．Ｄｉｇｎａｍ、Ｐ．Ｌ．Ｍａｒｔｉｎ、Ｂ．Ｓ．Ｓｋａｓｔｒｙ、Ｒ．Ｇ．Ｇ．Ｒｏｅｄｅｒ、Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ  １０１（１９８３年）５８２〜５９８頁）を、ＩＣＡＭ−１プロモーターのコンセンサスオリゴヌクレオチド配列（Ｇ．Ｇ．Ｓｔａｄｅ、Ｇ．Ｍｅｓｓｅｒ、Ｇ．Ｒｉｅｔｈｍｕｅｌｌｅｒ、Ｊ．Ｐ．Ｊｏｈａｎｎｓｏｎ、Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ、第１８２巻（１９９０年）、７９〜８７頁）を有する未照射対照と比較して、インキュベートする。続いて、結合したＡＰ−２の量をＧＥＭＳＡにより決める。（Ａ）予備処理していない未照射対照、（Ｂ）１ｍＭのＲｏｎａＣａｒｅTMｅｃｔｏｉｎで２４時間予備インキュベートし、３０Ｊ／ｃｍ2で１回照射、または（Ｃ）細胞媒体のみで２４時間予備インキュベートし、３０Ｊ／ｃｍ2を照射。２つの実験のデータを図２に示す。ＵＶＡ照射により、ＵＶＡ露光後に転写因子ＡＰ−２が活性化する。この活性化は、１ｍＭ  ｅｃｔｏｉｎで細胞を予備処理することにより実質的に完全に抑制され得ることがわかった。
【０１０６】
実施例Ｂ３：ＵＶ−Ａ誘発ＩＣＡＭ−１発現の阻害
ＩＣＡＭ−１の発現を、示差逆転写酵素ＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ）およびＡｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍからのキットを用いて測定する。皮膚細胞の遺伝子発現における正規変異を考慮するために、ＩＣＡＭ−１発現を、構成的に形成されたハウスキーピング遺伝子β−アクチンと比べる。ＲＴ−ＰＣＲの半定量的分析を、ＵＶ分光光度計（Ａ２６０）を用いるイオン交換クロマトグラフィーにより行う。（Ａ）予備処理していない照射対照、（Ｂ）１ｍＭのＲｏｎａＣａｒｅTMｅｃｔｏｉｎで２４時間予備インキュベートし、３０Ｊ／ｃｍ2で１回照射、または（Ｃ）１ｍＭ  ｅｃｔｏｉｎで２４時間予備インキュベートし、未照射。２つの独立した実験で得たデータを図３に示す。ＵＶＡ照射は、ＩＣＡＭ−１発現の増加を誘発する。１ｍＭ  ｅｃｔｏｉｎでのケラチノサイトの予備処理は、全ての時点においてＵＶＡ照射により誘発されるＩＣＡＭ−１誘発を実質的に完全に除くことができる。
【０１０７】
実施例Ｂ４：ミトコンドリアＤＮＡ突然変異のＵＶＡ照射誘発形成へのｅｃｔｏｉｎの効果
ヒト皮膚線維芽細胞を、イーグル最小培地において培養する。細胞に、ＵＶＡ  ８Ｊ／ｃｍ2を毎日３回、４連続日、合計３週間にわたって照射する。次に、ｍｔ−ＤＮＡを抽出し、ＰＣＲを用いて増幅する。この方法のより詳細が、Ｍ．Ｂｅｒｎｅｂｕｒｇ、Ｓ．Ｇｒｅｔｈｅｒ−Ｂｅｃｋ、Ｖ．Ｋｕｅｒｔｅｎ、Ｔｈ．Ｒｕｚｉｃｋａ、Ｋ．Ｂｒｉｖｉｂａ、Ｈ．Ｓｉｅｓ、Ｊ．Ｋｒｕｔｍａｎｎ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．第２７４巻（１９９９年）１５３４５〜１５３４９頁およびＭ．Ｂｅｒｎｅｂｕｒｇ、Ｎ．Ｇａｔｔｅｒｍａｎｎ、Ｈ．Ｓｔｅｇｅ、Ｍ．Ｇｒｅｗｅ、Ｋ．Ｖｏｇｅｌｓａｎｇ、Ｔｈ．Ｒｕｚｉｃｋａ、Ｈ．Ｋｒｕｔｍａｎｎ、Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌ．第６６巻（１９９７年）２７１〜２７５頁に記載されている。図４は、原発ヒト皮膚線維芽細胞中の強度のＵＶ−Ａ誘発ＤＮＡ突然変異の指示としての共通の欠失を示すためにＰＣＲにより複製された参考フラグメントのアガロースゲルを示す。１ｍＭのＲｏｎａｃａｒｅTMｅｃｔｏｉｎでの線維芽細胞の予備処理により、直接の比較から分かるように、ｍｔ−ＤＮＡ突然変異の形成が妨げられた。
【０１０８】
（調製例）
実施例１
サンスクリーンゲル
【０１０９】
【表２】
2005521709.tif 000005
【０１１０】
（調製）
Ａ相の調製のため、Ｓｅｐｉｇｅｌ３０５を水および保存剤と入念に混合する。Ｂ相を、Ａ相に溶解および混入する。Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）ＵＶ−ＰｅａｒｌｓTMＯＭＣを攪拌下に添加し、クエン酸を用いてｐＨを５に調節する。
【０１１１】
（注）
２５℃で粘度１４０００ｍＰａｓ（Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＬＶ、スピンドル４、１２ｒｐｍ）
（供給源）
（１）Ｓｅｐｐｉｃ
（２）Ｎｉｐａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｎ  ＧｍｂＨ
（３）Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ／Ｒｏｎａ（登録商標）
実施例２
敏感皮膚用サンスクリーンローション
【０１１２】
【表３】
2005521709.tif 000006
【０１１３】
（調製）
Ａ相を、Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）Ｔ−Ｓとは別に組み合わせ、８０℃に加熱する。続いて、Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）Ｔ−Ｓをゆっくりまぜ合わせる。続いて、Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）ＵＶ−Ｐｅａｒｌｓ（登録商標）ＯＭＣを４０℃で添加し、続いてＤ相を混入する。最後に、混合物を均質化し、攪拌下に冷却する。
【０１１４】
（注）
２５℃で粘度６０００ｍＰａｓ（Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＬＶ、スピンドル４、６０ｒｐｍ）
（供給源）
（１）Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ／Ｒｏｎａ（登録商標）
（２）Ｕｎｉｑｅｍａ
（３）Ｃｏｇｎｉｓ  ＧｍｂＨ
（４）Ｐｈｏｅｎｉｘ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ
（５）Ｎｉｐａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｎ  ＧｍｂＨ
実施例３
サンスクリーンローション（Ｗ／Ｏ）；ＳＰＦ１６．７／ＵＶＡ  ＰＦ８．０
【０１１５】
【表４】
2005521709.tif 000007
【０１１６】
（調製）
Ａ相を、ＥＵＳＯＬＥＸ（登録商標）Ｔ−ＥＣＯとは別に組み合わせ、８０℃に加熱する。ＥＵＳＯＬＥＸ（登録商標）Ｔ−ＥＣＯをゆっくり熱い油相に攪拌混入する。次に、Ｂ相を８０℃に加熱し、攪拌下にＡ相にゆっくり添加する。混合物を、Ｅｕｓｏｌｅｘ（登録商標）Ｔ−ＥＣＯの粒子の最適分散を可能にするために５０〜４０℃で注意深く均質化する。次に、Ｃ相を４０℃で添加し、混合物を攪拌下に冷却する。
【０１１７】
（注）
２６℃で粘度１１８００ｍＰａｓ（Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＲＶＴ、スピンドルＣ、１０ｒｐｍ）
（供給源）
（１）Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ／Ｒｏｎａ（登録商標）
（２）Ｕｎｉｑｅｍａ
（３）Ｄｅｇｕｓｓａ−Ｇｏｌｄｓｃｈｍｉｄｔ  ＡＧ
（４）Ｃｒｏｄａ  ＧｍｂＨ
（５）Ｈ．Ｅｒｈａｒｄ  Ｗａｇｎｅｒ  ＧｍｂＨ
（６）Ｃｏｇｎｉｓ  ＧｍｂＨ
（７）Ｓａｓｏｌ  Ｇｅｒｍａｎｙ  ＧｍｂＨ
（８）Ｄｏｗ  Ｃｏｒｎｉｎｇ
（９）Ｐａｒａｍｅｔ
（１０）Ｈａａｒｍａｎｎ  ＆  Ｒｅｉｍｅｒ  ＧｍｂＨ
実施例４
サンスクリーンローション（Ｏ／Ｗ）；ＳＰＦ１４．９／ＵＶＡ  ＰＦ３．９
【０１１８】
【表５】
2005521709.tif 000008
【０１１９】
（調製）
Ａ相を、ＥＵＳＯＬＥＸ（登録商標）Ｔ−２０００とは別に組み合わせ、６０℃に加熱する。ＥＵＳＯＬＥＸ（登録商標）Ｔ−２０００をゆっくり溶融油相に混入する。Ｂ相を６０℃に加熱し、次に、Ｃ相を攪拌下に分散し、続いて、Ａ相を激しい攪拌下にＢ／Ｃ相に攪拌混入する。混合物を、攪拌下に冷却し、Ｄ相を４０℃で添加する。続いて、混合物を均質化（設定ＩＩで棒を用いて１分間）し、攪拌下に２５℃で冷却する。
【０１２０】
（注）
２３℃でｐＨ＝４．３
２３℃で粘度７７００ｍＰａｓ（Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＲＶＴ、スピンドルＣ、１０ｒｐｍ）
（供給源）
（１）Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ／Ｒｏｎａ（登録商標）
（２）Ｇａｔｔｅｆｏｓｓe  ＧｍｂＨ
（３）Ｃｏｇｎｉｓ  ＧｍｂＨ
（４）ＧＥ  Ｓｉｌｉｃｏｎｅｓ  Ｈｏｌｌａｎｄ
（５）Ｃｒｏｄａ  ＧｍｂＨ
（６）Ｄｏｗ  Ｃｏｒｎｉｎｇ
（７）Ｐｈｏｅｎｉｘ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ
（８）Ａｌｌｉｅｄ  Ｃｏｌｌｏｉｄｓ  ＧｍｂＨ
（９）Ｍｃｉｎｔｙｒｅ  Ｇｒｏｕｐ，ＬＴＤ
（１０）Ｈａａｒｍａｎｎ  ＆  Ｒｅｉｍｅｒ  ＧｍｂＨ
実施例５
豪華ナイトクリーム（Ｗ／Ｏ）
【０１２１】
【表６】
2005521709.tif 000009
【０１２２】
（調製）
Ａ相およびＢ相を別々に８０℃に暖める。Ｂ相を、攪拌下にＡ相に添加する。続いて、混合物を冷却し、攪拌下に均質化する。
【０１２３】
（注）
粘度（２３℃）：３２０００ｍＰａｓ（Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＲＶＴ、スピンドルＣ、５ｒｐｍ、Ｈｅｌｉｐａｔｈ製）
（供給源）
（１）Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ／Ｒｏｎａ（登録商標）
（２）Ｄｅｇｕｓｓａ−Ｇｏｌｄｓｃｈｍｉｄｔ  ＡＧ
（３）Ｃｏｇｎｉｓ  ＧｍｂＨ
（４）Ｐａｒａｍｅｌｔ
実施例６
ウインターフェースクリーム（Ｗ／Ｏ）
【０１２４】
【表７】
2005521709.tif 000010
【０１２５】
（調製）
Ａ相を８０℃に暖める。次に、Ｂ相を攪拌下に溶解し、攪拌下にゆっくりとＡ相に添加する。続いて、混合物を均質化し、攪拌下に冷却する。
【０１２６】
（注）
粘度（２７℃）：１６０００ｍＰａｓ（Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＲＶＴ、スピンドルＣ、２０ｒｐｍ、Ｈｅｌｉｐａｔｈ製）
（供給源）
（１）Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ／Ｒｏｎａ（登録商標）
（２）Ｄｅｇｕｓｓａ−Ｇｏｌｄｓｃｈｍｉｄｔ  ＡＧ
（３）Ｃｏｇｎｉｓ  ＧｍｂＨ
実施例７
シャンプー
【０１２７】
【表８】
2005521709.tif 000011
【０１２８】
（調製）
Ａ相を秤量し、均質に溶解するまで攪拌する。
【０１２９】
（注）
ｐＨ（２５℃）：６．３０
粘度（２８℃）：１７００ｍＰａｓ（Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＲＶＴ、スピンドルＢ、１０ｒｐｍ、Ｈｅｌｉｐａｔｈ製）
（供給源）
（１）Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ／Ｒｏｎａ（登録商標）
（２）Ｃｏｇｎｉｓ  ＧｍｂＨ
（３）Ｄｅｇｕｓｓａ−Ｇｏｌｄｓｃｈｍｉｄｔ  ＡＧ
実施例８
豪華ボディーケア（Ｏ／Ｗ）
【０１３０】
【表９】
2005521709.tif 000012
【０１３１】
（調製）
Ａ相およびＢ相を別々に８０℃に暖める。次に、Ｂ相を攪拌下にＡ相に添加し、均質化する。続いて、混合物を中和し、攪拌下に冷却する。
【０１３２】
（注）
ｐＨ（２５℃）：５．８０
粘度（２５℃）：２８０００ｍＰａｓ（Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＲＶＴ、スピンドルＣ、５ｒｐｍ、Ｈｅｌｉｐａｔｈ製）
（供給源）
（１）Ｄｅｇｕｓｓａ−Ｇｏｌｄｓｃｈｍｉｄｔ  ＡＧ
（２）Ｇｕｓｔａｖ  Ｈｅｅｓｓ  ＧｍｂＨ
（３）Ｓａｓｏｌ  Ｇｅｒｍａｎｙ  ＧｍｂＨ
（４）Ｃｏｇｎｉｓ  ＧｍｂＨ
（５）ＢＦ  Ｇｏｏｄｒｉｃｈ
（６）Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ／Ｒｏｎａ（登録商標）
実施例９
保護的ベビーケア（Ｏ／Ｗ）
【０１３３】
【表１０】
2005521709.tif 000013
【０１３４】
（調製）
Ａ相およびＢ相を各々充分に攪拌する。次に、Ｂ相を攪拌下にＡ相に添加し、均質化する。続いて、混合物をＣ相を用いて中和し、整うまで攪拌する。
【０１３５】
（注）
ｐＨ（２５℃）：６．００
粘度（２５℃）：２７０００ｍＰａｓ（Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＲＶＴ、スピンドルＣ、５ｒｐｍ、Ｈｅｌｉｐａｔｈ製）
（供給源）
（１）Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ／Ｒｏｎａ（登録商標）
（２）Ｃｌａｒｉａｎｔ  ＧｍｂＨ
（３）Ｃｏｇｎｉｓ  ＧｍｂＨ
（４）Ｇｕｓｔａｖ  Ｈｅｅｓｓ  ＧｍｂＨ
（５）Ｓａｓｏｌ  Ｇｅｒｍａｎｙ  ＧｍｂＨ
（６）ＢＦ  Ｇｏｏｄｒｉｃｈ
実施例１０
サンコンプリート（Ｏ／Ｗ）
【０１３６】
【表１１】
2005521709.tif 000014
【０１３７】
（調製）
Ａ相およびＢ相を別々に８０℃に暖める。次に、Ｂ相を攪拌下にＡ相に添加し、均質化する。続いて、混合物を水酸化ナトリウム溶液を用いて中和し、攪拌下に冷却する。
【０１３８】
（注）
ｐＨ（２０℃）：５．９０
粘度（２６℃）：２４０００ｍＰａｓ（Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＲＶＴ、スピンドルＣ、５ｒｐｍ、Ｈｅｌｉｐａｔｈ製）
ＳＰＦ（Ｄｉｆｆｅｙ法）：８
（供給源）
（１）Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ／Ｒｏｎａ（登録商標）
（２）Ｄｅｇｕｓｓａ−Ｇｏｌｄｓｃｈｍｉｄｔ  ＡＧ
（３）Ｃｏｇｎｉｓ  ＧｍｂＨ
（４）ＢＦ  Ｇｏｏｄｒｉｃｈ
実施例１１
リップグロス（Ｗ／Ｏ）
【０１３９】
【表１２】
2005521709.tif 000015
【０１４０】
（調製）
染料をヒマシ油に攪拌混入する。続いて残りの成分を混入し、混合物を７５〜８０℃に加熱する。Ｂ相を混合し、７５〜８０℃に加熱する。次に、Ｂ相を、攪拌下にＡ相に添加し、均質化し、攪拌下に室温まで冷却する。
【０１４１】
（注）
粘度（２４℃）：３５００００ｍＰａｓ（Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＲＶＴ、スピンドルＤ、５ｒｐｍ、Ｈｅｌｉｐａｔｈ製）
（供給源）
（１）Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ／Ｒｏｎａ（登録商標）
（２）Ｓｉｓｔｅｒｎａ  Ｃ．Ｖ．
（３）Ｈｅｎｒｙ  Ｌａｍｏｔｔｅ  ＧｍｂＨ
（４）Ｄｅｇｕｓｓａ  ＡＧ
（５）Ｌｅｓ  Ｃｏｌｏｒａｎｔｓ  Ｗａｃｋｈｅｒｒ
（６）Ｈａａｒｍａｎｎ  ＆  Ｒｅｉｍｅｒ  ＧｍｂＨ
実施例１２
ボディミルク（Ｗ／Ｏ）
【０１４２】
【表１３】
2005521709.tif 000016
【０１４３】
（調製）
Ａ相およびＢ相を別々に８０℃に暖める。次に、Ｂ相を均質化しつつＡ相に混入する。混合物を攪拌下に６５℃に冷却し、再び均質化する。混合物を、３５℃でＣ相の香りをつける。
【０１４４】
（注）
粘度：１４９００ｍＰａｓ（Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＲＶＴ、スピンドルＣ、１０ｒｐｍ、Ｈｅｌｉｐａｔｈ製），２５℃
（供給源）
（１）Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ／Ｒｏｎａ（登録商標）
（２）Ｄｒａｇｏｃｏ  Ｇｅｒｂｅｒｄｉｎｇ  ＆  Ｃｏ．ＡＧ
（３）Ｇｕｓｔａｖ  Ｈｅｅｓｓ  ＧｍｂＨ
（４）Ｃｏｇｎｉｓ  ＧｍｂＨ
（５）Ｄｏｗ  Ｃｏｒｎｉｎｇ
（６）Ｓｃｈuｍａｎｎ  Ｓａｂｏｌ
実施例１３
リップフィックス
【０１４５】
【表１４】
2005521709.tif 000017
【０１４６】
（調製）
エタノール、水およびＲｏｎａＣａｒｅTMＣＰＣを最初に導入し、増粘剤を攪拌下に拡散させる。混合物を、透明溶液が形成されるまで攪拌し、ＲｏｎａＣａｒｅTMｅｃｔｏｉｎを加え、攪拌下に溶解する。
【０１４７】
（注）
ｐＨ：６．２０（２３℃）
（供給源）
（１）Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ／Ｒｏｎａ（登録商標）
（２）Ｄｏｗ  Ｃｏｒｎｉｎｇ
【図面の簡単な説明】
【０１４８】
【図１】ＵＶＡ−誘発セカンドメッセンジャーが、ｅｃｔｏｉｎで２４時間予備処理後にケラチノサイト中に放出されることを示すグラフである。
【図２】ＥｃｔｏｉｎおよびＵＶＡ−誘発ＡＰ−２活性化を示すグラフである。
【図３】ＥｃｔｏｉｎによるＵＶＡ−誘発ＩＣＡＭ−１遺伝子発現の阻害を示すグラフである。
【図４】ｍｔ−ＤＮＡ突然変異のＵＶＡ−誘発形成へのｅｃｔｏｉｎの効果を示すグラフである。
【図１】
2005521709.tif 000019
【図２】
2005521709.tif 000020
【図３】
2005521709.tif 000021
【図４】
2005521709.tif 000022
【国際調査報告】
2005521709.tif 000023
2005521709.tif 000024
2005521709.tif 000025
2005521709.tif 000026
2005521709.tif 000027
2005521709.tif 000028
2005521709.tif 000029
2005521709.tif 000030
2005521709.tif 000031
2005521709.tif 000032