(57)【要約】本発明は、新規の生分解性のポリアミノ酸物質であって、特に活性成分(類)を特定部位に向けるために有用な物質に関する。当該発明はまた、前記ポリアミノ酸を基礎とする新規薬学的、化粧品学的、栄養学的または植物衛生学的組成物に関する。本発明の目的は、新規ポリマー原料であって、活性成分を特定部位に向けるために使用すること、および全ての特定された要求：生体適合性、生分解性、活性成分を特定部位に向ける粒子への変換が容易且つ安価であること：を最適条件で実行できるようにする原料を提供することであり、前記粒子は、それ自身コロイド懸濁液を形成すること、非常に沢山の活性物質と容易に会合すること、および前記活性物質をインビボで放出することが可能である。そのため本発明は、就中、アスパラギン酸ユニットおよび/またはグルタミン酸ユニットを含む全ての両親媒性ポリアミノ酸であって、少なくとも前記ユニットの一部分が、少なくとも1のアルファ・トコフェロール・モチーフ、例えば(合成若しくは天然由来のアルファ・トコフェロールでグラフトされたポリグルタメートまたはポリアスパルテート)など、を含むグラフトを有することを特徴とする両親媒性ポリアミノ酸に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アスパラギン酸ユニットおよび/またはグルタミン酸ユニットを含んでなり、少なくともこれらのユニットの幾つかが少なくとも1のα-トコフェノール・ユニットを含むグラフトを有することを特徴とするポリアミノ酸。
【請求項２】
請求項１に記載のポリアミノ酸であって、以下の一般式(I)により特徴付けられるポリアミノ酸：
【化１】
2005531652.tif 000010
ここで：
・R1は、H、C2〜C10の直鎖またはC3〜C10の分岐鎖のアルキル、ベンジルまたは末端アミノ酸ユニットを表し：
・R2は、H、C2〜C10の直鎖またはC3〜C10の分岐鎖のアシル基、またはピログルタメートを表し；
・R3は、Hまたは、好ましくは以下を含む群から選択されたカチオン種であり：
−ナトリウム、カリウム、カルシウムおよびマグネシウムを含む下位集団から有利に
選択された金属カチオン、
−以下を含む下位集団から有利に選択された有機カチオン：
・アミンを基礎とするカチオン、
・オリゴアミンを基礎とするカチオン、
・ポリアミンを基礎とするカチオン(ポリエチレンイミンが特に好ましい)、
・リジンまたはアルギニンを基礎とするカチオンを含むクラスから有利に選択さ
れたアミノ酸(類)を基礎とするカチオン、
−または、ポリリジン若しくはオリゴリジンを含む下位集団から有利に選択されたカ
チオン・ポリアミノ酸;
・R4は、直接の結合または1〜4のアミノ酸ユニットを基礎とする「スペーサー」を表し;
・Aは、独立して、-CH2-(アスパラギン酸ユニット)または-CH2-CH2-(グルタミン酸ユニット)基を表し;
・n/(n+m)は、1モル当たりのグラフトの割合として定義され、且つ0.5〜100mol%の範囲に及び;
・n+mは、3〜1000、好ましくは30〜300の範囲に及び;
・Tは、α-トコフェロール・ユニットを表す。
【請求項３】
前記α-トコフェロールが天然由来であることを特徴とする請求項１または２に記載のポリアミノ酸。
【請求項４】
前記α-トコフェロールが合成由来であることを特徴とする請求項１または２に記載のポリアミノ酸。
【請求項５】
それがα-L-グルタメートまたはα-L-グルタミン酸のホモポリマーからなることを特徴とする請求項２に記載のポリアミノ酸。
【請求項６】
それがα-L-アスパルテートまたはα-L-アスパラギン酸のホモポリマーからなることを特徴とする請求項２に記載のポリアミノ酸。
【請求項７】
それがα-L-アスパルテート/α-L-グルタメートまたはα-L-アスパラギン酸/α-L-グルタミン酸のコポリマーからなることを特徴とする請求項２に記載のポリアミノ酸。
【請求項８】
前記少なくとも１のα-トコフェノール・ユニットを含むグラフトを有するアスパラギン酸ユニットおよび/またはグルタミン酸ユニットの分布は、それにより構成される当該ポリマーが、ランダム・タイプまたはブロック・タイプまたはマルチブロック・タイプの何れかとなるような分布であることを特徴とする請求項１〜７の何れか１項に記載のポリアミノ酸。
【請求項９】
それらのモル質量が2000〜100 000g/mol、好ましくは5000〜40 000g/molであることを特徴とする請求項１〜８の何れか１項に記載のポリアミノ酸。
【請求項１０】
1モル当たりのグラフトの割合が3%〜70%、好ましくは5%〜50%であることを特徴とする請求項１〜９の何れか１項に記載のポリアミノ酸。
【請求項１１】
それがグルタメートおよび/またはアスパルテート・ユニットに対して結合されたポリアルキレングリコール・タイプの少なくとも一つのグラフトを有することを特徴とする請求項１〜１０の何れか１項に記載のポリアミノ酸。
【請求項１２】
以下の式(II)の請求項１１に記載のポリアミノ酸：
【化２】
2005531652.tif 000011
ここで、
−R'4は、直接結合または1〜4のアミノ酸ユニットを基礎とする「スペーサー」を表し；
−Xは、酸素、窒素および硫黄を含む群から選択された炭素以外の原子であり；
−R5およびR6は、独立して、Hまたは直鎖のC1〜C4のアルキルを表し；
−n、は3〜1000の範囲に及ぶ。
【請求項１３】
前記ポリアルキレングリコールが、ポリエチレングリコールであることを特徴とする請求項１１〜１２の何れか１項に記載のポリアミノ酸。
【請求項１４】
前記ポリアルキレングリコールのグラフトの1モル当たりの割合が、1%〜30%の範囲に及ぶことを特徴とする請求項１１〜１３の何れか１項に記載のポリアミノ酸。
【請求項１５】
請求項１〜１４の何れか１項に記載のポリアミノ酸の少なくとも一つを含む薬学的、化粧品学的、栄養学的または植物保護学的組成物。
【請求項１６】
それが少なくとも1の活性成分を含むことを特徴とする請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
前記活性成分が蛋白質、糖蛋白質、ポリサッカライド、リポサッカライド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチドまたはペプチドであることを特徴とする請求項１５または１６の何れか１項に記載される組成物。
【請求項１８】
前記活性成分が、疎水性、親水性または両親媒性の有機「小」分子であることを特徴とする請求項１６または１７の何れか１項に記載の組成物。
【請求項１９】
それが経口、腸管外、鼻腔、経膣、眼科的、皮下、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内、脳内またはバッカル経路を経て投与され得ることを特徴とする、請求項１５〜１８の何れか１項に記載の組成物。
【請求項２０】
それがゲル、エマルジョン、溶液、懸濁液、ミセル、ナノ粒子、ミクロ粒子、粉末またはフィルムの形態にあることを特徴とする、請求項１５〜１９の何れか１項に記載の組成物。
【請求項２１】
それが水相におけるポリアミノ酸のナノ粒子および/またはミクロ粒子および/またはミセルのコロイド懸濁液であることを特徴とする、請求項１５〜２０の何れか１項に記載の組成物。
【請求項２２】
それが生体適合性溶媒中の溶液の形態にあること、およびそれが皮下、筋肉内または腫瘍に対して注射されることが可能であることを特徴とする、請求項１５〜１９の何れか１項に記載の組成物。
【請求項２３】
それが注射可能であること、およびそれが当該注射部位でデポジットを形成することが可能であることを特徴とする、請求項１５〜２２の何れか１項に記載の組成物。
【請求項２４】
それが以下を製造するためのものであることを特徴とする請求項１５〜２３の何れか１項に記載の組成物：
・特に、経口、鼻腔、経膣、眼科的、皮下、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内または脳内に投与するための医薬品であって、これらの医薬品の活性成分が、特に、蛋白質、糖蛋白質、1以上のポリアルキレングリコール鎖（例えば、ポリエチレングリコール(PEG)）と結合した蛋白質（この場合、それらは「PEG化」蛋白質と称される）、ペプチド、ポリサッカライド、リポサッカライド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチドおよび疎水性、親水性または両親媒性の有機小分子であり得る医薬品；
・および/または栄養剤；
・および/または化粧品学的または植物保護学的製品。
【請求項２５】
以下を製造する方法であって：
・特に、経口、鼻腔、経膣、眼科的、皮下、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内また
は脳内に投与するための医薬品であって、これらの医薬品の活性成分が、特
に、蛋白質、糖蛋白質、1以上のポリアルキレングリコール鎖（例えば、ポリ
エチレングリコール(PEG)）と結合した蛋白質（この場合、それらは「PEG化」蛋
白質と称される）、ペプチド、ポリサッカライド、リポサッカライド、オリゴ
ヌクレオチド、ポリヌクレオチドおよび疎水性、親水性または両親媒性の有機
小分子であり得る医薬品；
・および/または栄養剤；
・および/または化粧品学的または植物保護学的製品；
請求項１〜１４の何れか１項に記載のポリアミノ酸および/または請求項１５〜２３の何れか１項に記載の組成物の少なくとも一つを使用することが本質的に含まれることを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の背景】
【０００１】
本発明は、生分解性のポリアミノ酸を基礎とする新規物質であって、特に、活性物質(類)(以下APと記す)を特定部位へ送達するために使用される物質に関する。
【０００２】
本発明はまた、これらのポリアミノ酸を基礎とする新規な薬学的、化粧品学的、栄養学的または植物保護学的組成物に向けられる。これらの組成物は、APの特定部位への指向化(vectorization)を可能にするタイプのものであってよく、好ましくはエマルジョン、ミセル、粒子、ゲル、インプラントまたはフィルムの形態にあってよい。
【０００３】
考慮されべきる当該APは、動物または人体に対して、経口、腸管外、鼻腔内、経膣、眼内、皮下、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内、脳内、バッカルなどの経路を経て投与され得る有利な生物学的に活性な化合物である。
【０００４】
本発明に特に関連する当該APは、本発明をこれらに限定するものではないが、蛋白質、糖蛋白質、ペプチド、ポリサッカライド、リポサッカライド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチドおよび有機分子(organic molecules)である。しかしながら、それらはまた、化粧品学的製品または植物保護学的製品、例えば、除草剤、殺虫剤、除菌剤などであってもよい。
【０００５】
活性成分、特に医薬活性成分を特定部位へ指向化させる分野において、多くの場合、以下のことが必要である:
・それらが作用部位に到達するまで、分解(例えば、加水分解、その場での析出、酵素消化など)から保護されること、
・および/またはそれらの放出速度が所定期間に亘って一定に維持されるように制御されること、
・および/またはそれらが(それが保護されながら)当該作用部位までに送達されること。
【０００６】
これらの目的のために、種々のタイプのポリマーが研究されてきており、幾つかは商業的に入手することも可能である。例えば、当該ポリ乳酸、ポリ乳酸-グリコール酸、ポリオキシエチレン−オキシプロピレン、ポリアミノ酸または多糖のタイプのポリマーに言及することが可能である。これらのポリマーは、例えば、バルクインプラント(bulk implants)、ミクロ粒子(microparticles)、ナノ粒子(nanoparticles)、小胞体(vesicles)、ミセルまたはゲルなどの製造のための出発物質を構成する。これらのポリマーが前記システムの製造に適切でなければならないという事実に加えて、それらはまた、生体適合性で、無毒性で、非免疫性で、且つ費用効率的でなければならず、更にそれらは、生体から容易に排出され、および/または生分解性であるべきである。この最後の側面を考慮すると、更に、当該生体における生分解は無毒性の産物を生ずるものであるべきことも必須である。
【０００７】
APの指向化システムを形成するための出発物質として使用されるポリマーに関する従来技術を説明するために、種々の特許、特許出願または科学論文について以下で言及する。
【０００８】
特許US 4 652 441は、ホルモンLH-RHを封入するポリラクチド・ミクロカプセルを記載している。これらのマクロカプセルは、水中油中水型(w/o/w、water-in-oil-in-water)エマルジョンを製造することによって作り出され、このエマルジョンは、ホルモン、前記ホルモンを固定するための物質(ゼラチン)を含む水性内層、ポリラクチド油性層、および更なる水性外層(ポリビニルアルコール)を含む。当該APは皮下注射後の2週間以上の期間亘って放出される。
【０００９】
特許US 6 153 193は、例えば、アドリアマイシンなどの抗癌剤を特定部位に指向化させるための、両親媒性ポリ(オキシエチレン)-ポリ(オキシプロピレン)・ミセルを基礎とする組成物を記載している。
【００１０】
アキヨシら（Akiyoshi et al. J. Controlled Release 1998, 54, 313-320）は、コレステロールをグラフトすることにより疎水性化された、水中においてナノ粒子を形成するプルラン(pullulan)を記載している。可逆的にインスリンと複合することが可能であるこれらのナノ粒子は、安定したコロイド懸濁液を形成する。
【００１１】
特許US 4 351 337は、ロイシンおよびグルタメートを基礎とする両親媒性のコポリアミノ酸を記載するものであり、該両親媒性のコポリアミノ酸は、インプラントまたはミクロ粒子の形態で使用されることによって、活性成分を制御放出することを可能にする。前記活性成分は、非常に長期間に亘って放出され、この放出は当該ポリマーの分解速度に依存する。
【００１２】
特許US 4 888 398は、ポリグルタメートまたはポリアスパルテート、および任意のポリロイシンを基礎とするポリマーを記載しており、該ポリマーは、ポリアミノ酸の鎖上にランダムに配置されたアルキルオキシカルボニルメチル・タイプのペンダント基(pendent group)を有する。例えば、メトキシカルボニルメチルなどの側鎖基をグラフトされたこれらのポリアミノ酸は、持続放出されるAPを含んだ生分解性のインプラントの形態において使用され得る。
【００１３】
特許US 5 904 936は、ポリロイシン−ポリグルタメート・ブロック・ポリマーから得られたナノ粒子を記載しており、該ナノ粒子は、それらを変性することなく生物学的に活性な蛋白質と自然発生的に会合することの可能な安定したコロイド懸濁液を形成する。前記蛋白質は、更に、制御された方法で長期間に亘ってインビボで放出され得る。
【００１４】
特許出願WO 00/30618は、ポリ(グルタミン酸ナトリウム)(ポリメチル、エチル、ヘキサデシルまたはドデシルグルタメート)ブロック・ポリマーから得られたナノ粒子を記載しており、該ナノ粒子は、それらを変性することなく生物学的に活性な蛋白質と自然発生的に会合することの可能な安定したコロイド懸濁液を形成する。前記蛋白質は、更に、制御された方法で長期間に亘ってインビボで放出され得る。
【００１５】
これらの両親媒性コポリアミノ酸は、疎水性のアルキル側鎖により修飾される。
【００１６】
特許US 5 449 513は、両親媒性ブロック・コポリマーを記載しており、該両親媒性ブロックコポリマーは、ポリオキシエチレン・ブロックおよびポリアミノ酸・ブロックを有する、例えば、ポリ(β-ベンジル-L-アスパルテート)などである。これらのポリオキシエチレン−ポリベンジルアスパルテート・ポリマーは、アドリアマイシンまたはインドメタシンなどの疎水性活性分子を封入することが可能なミセルを形成する。
【００１７】
特許出願WO 99/61512は、疎水性基(ポリリジンまたはオルニチンに対して結合したパルミチン酸)および親水性基(ポリオキシエチレン)で機能性化されたポリリジンおよびポリオルニチンを記載している。これらのポリマー、例えば、ポリオキシエチレンおよびパルミトイル鎖をグラフトされたポリリジンなどは、コレステロールの存在下で、ドキソルビシン(doxorubicin)またはDNAを封入することが可能な小胞体を形成する。
【００１８】
更に、ビタミンE誘導体、より詳しくはα-トコフェロールが、APを特定部位へ指向化するシステムの構築に使用されることが知られている。
【００１９】
天然のビタミンEは、トコフェロール類として公知の化合物の混合からなり［バートンおよびインゴールド(Burton and Ingold, ACC. Chem. Res. 1986, 19, 194-201)を参照されたい］、この混合物では、その大部分をα-トコフェロール誘導体が占める。ビタミンEおよび幾つかのその誘導体は、今日では、ビタミン源として、または食品および化粧品的製品における抗酸化剤として使用される。これらの一般的な使用については、ビタミンEは、そのD-α-トコフェロール体(その天然体)、またはそのD,L-α-トコフェロール体(ラセミ体および合成体)で得られている。これら二つの産物は、治療学的用量よりも著しく高い用量でも、本質的に無毒性であるとみなされている。α-トコフェロールの構造は以下の通りである。
【化３】
2005531652.tif 000002
【００２０】
キラル部位には星印が付されている。その天然に存在する形態は、R、R、Rのコンフィギュレーションを有しており、合成体は当該キラル炭素が独立にRまたはSとなる混合物である。
【００２１】
活性成分を特定部位へ指向化する分野において使用されるビタミンE誘導体を考える場合、現時点で発明者の知る限り、α-トコフェロールを基礎としたポリマー製品は存在しておらず、ただその例外として、その一方の末端がα-トコフェロール-サクシネート基でグラフトされたポリオキシエチレン・タイプのポリマーがあるのみである。更に、当該鎖の末端においてα-トコフェロールサクシネートをグラフトされたポリエチレングリコール（PEG化ビタミンE(PEGylated vitamin E)）が市場で入手可能であり、TPGS1000の商品名で、ザ・カンパニー・イーストマン・ケミカル Ltd(the company Eastman Chemical Ltd)から販売されている。この製品は、1954年に特許化されており(US 2 680 749)、今日では経口経路用のビタミンE供給源として使用されている。このポリマー並びに類似のα-トコフェロール-サクシネートおよび未修飾のα-トコフェロールは、活性成分を特定部位へ指向化するために提案されてきている。
【００２２】
特許 US 5 869 703は、そのポリオキシエチレン鎖が、一方の末端にα-トコフェロールを含み、且つもう一方の末端に(メト)アクリル残基(meth)acrylic residueを含む類似の化合物を記載している。これらのα-トコフェロール誘導体は、安定した両親媒性小胞体(リポソーム)を製造するために使用され、直接に化粧品学的適用において使用される。
【００２３】
特許出願WO 00/71163は、その鎖の末端にα-トコフェロール-サクシネートをグラフトされたポリエチレングリコール(TPGS 1000)およびα-トコフェロールを基礎とした、パクリタキセル(抗癌剤)を可溶化するための製剤を記載している。現時点では、ポリオキシエチレン部に関連する毒性は知られていないが、ポリオキシエチレンはインビボでは分解されないことが知られている。更に、この化合物は、ポリマー鎖当たり一つのα-トコフェロール・ユニットのみを含むものであり、それは、界面活性剤の場合に類似した溶液中での特性を有する。何れの場合においても、特定部位へ指向化するためにこの生成物を使用しても、安定性に乏しいポリマーおよび活性成分の組み合わせしか得られないであろう。
【００２４】
特許 EP 0 243 446は、α-トコフェロール(ヘミ)サクシネート(α-トコフェロールの有機酸誘導体)を、アミン塩との組み合わせにおいて使用して、小胞体を製造することを記載している。これらの小胞体は、小分子、ペプチドおよび蛋白質を含む種々の活性成分を封入するために使用してもよい。一般に前記特許においては、有機酸はアミノ酸またはポリアミノ酸の何れであってもよいと示されている。しかしながら、この報告には詳細なことは全く示されていない。ただα-トコフェロール(ヘミ)サクシネートが示されているだけである。
【００２５】
従って、たとえ従来技術において、医薬活性成分を特定部位へ指向化するために開発され、且つ提案された非常に多くの技術的解決法があるとしても、全ての要件に合致することは達成が困難であり、満足な解決法は未だ存在しない。
【発明の開示】
【００２６】
このような状況において、本発明の一つの本質的な目的は、APを特定部位へ指向化させるために使用することが可能で、且つ以下の全ての詳細な項目を最も望ましく満たすことが可能な新規ポリマー出発物質を提供することである:
○生体適合性、
○生分解性、
○容易に且つ経済効率よく、活性成分を特定部位へ指向化させる粒子に変換される能力、
○これらの粒子がそれ自身で以下のことが可能であること：
・安定した水性コロイド懸濁液を形成すること：
・多くの活性成分と容易に会合すること：
・およびインビボでこれらの活性成分を放出すること。
【００２７】
この目的は、特に、アスパラギン酸ユニットおよび/またはグルタミン酸ユニットを有し、これらのユニットの少なくとも幾つかは少なくとも1のα-トコフェノール・ユニットを含むグラフトを有することを特徴とする、両親媒性ポリアミノ酸に関する本発明によって達成される。
【００２８】
これらの新規ポリマーは、α-トコフェロールを含んだ側鎖を有するポリアミノ酸を基礎とした、生分解性の骨格構造を有する。これらのポリマーは、類似の産物に比較して驚くべき会合および/または封入特性を有し、その上重要なことに、それらは酵素の存在下で容易に分解される。
【００２９】
当該出願人は、その努力により、全体的に賢明で且つ有利な方法で、特に、生分解性のポリAspおよび/またはポリGlu・ポリアミノ酸を、APの特定部位への指向化のために、α-トコフェロール(ビタミンE)を基礎とするグラフトと組み合わせるとの着想を得た。
【００３０】
本発明の目的に関して、「ポリアミノ酸」の用語は、2〜20のアミノ酸ユニットを含むオリゴアミノ酸のみを含むものではなく、更に20アミノ酸ユニット以上を含むポリアミノ酸も含むものである。
【００３１】
好ましくは、本発明に従う当該ポリアミノ酸は、グルタミン酸もしくはアスパラギン酸のアミノ酸繰り返しユニットを含むオリゴマー若しくはホモポリマー、またはこれら２種類のアミノ酸ユニットの混合物を含むコポリマーであり、前記ユニットは、部分的にα-トコフェロールを含むグラフトで置換されている。これらのポリマーにおいて考慮されているユニットは、D-もしくはL-コンフィギュレーション、またはD,L-コンフィギュレーションを有するアミノ酸であり、それらのグルタメートもしくはグルタミン酸ユニットについてはα-若しくはγ-位を介して、またアスパラギン酸もしくはアスパルテート・ユニットについてはα-またはβ-位を介して結合される。
【００３２】
好ましいアミノ酸ユニットは、L-コンフィギュレーションおよびα-タイプの結合を有するものである。
【００３３】
更に好ましくは、本発明に従う当該ポリアミノ酸は、以下の一般式(I)に相当する：
【化４】
2005531652.tif 000003
【００３４】
ここで：
・R1は、H、C2〜C10の直鎖またはC3〜C10の分岐鎖のアルキル、ベンジルまたは末端アミノ酸ユニットを表し：
・R2は、H、C2〜C10の直鎖またはC3〜C10の分岐鎖のアシル基、またはピログルタメートを表し；
・R3は、Hまたは、好ましくは以下を含む群から選択されたカチオン種であり：
−ナトリウム、カリウム、カルシウムおよびマグネシウムを含む下位集団から有利に
選択された金属カチオン、
−以下を含む下位集団から有利に選択された有機カチオン：
・アミンを基礎とするカチオン、
・オリゴアミンを基礎とするカチオン、
・ポリアミンを基礎とするカチオン(ポリエチレンイミンが特に好ましい)、
・リジンまたはアルギニンを基礎とするカチオンを含むクラスから有利に選択さ
れたアミノ酸(類)を基礎とするカチオン、
−または、ポリリジン若しくはオリゴリジンを含む下位集団から有利に選択されたカ
チオン・ポリアミノ酸;
・R4は、直接の結合または1〜4のアミノ酸ユニットを基礎とする「スペーサー」を表し;
・Aは、独立して、-CH2-(アスパラギン酸ユニット)または-CH2-CH2-(グルタミン酸ユニット)基を表し;
・n/(n+m)は、1モル当たりのグラフトの割合として定義され、且つ0.5〜100mol%の範囲に及び;
・n+mは、3〜1000、好ましくは30〜300の範囲に及び;
・Tは、α-トコフェロール・ユニットを表す。
【００３５】
これらの共通の使用のためのビタミンEは、そのD-α-トコフェロール体(その天然体)またはそのD,L-α-トコフェロール体(ラセミ体および合成体)で得られる。これらの2つの産物は、治療学的用量よりも著しく高い用量で本質的に無毒性であると考えられる。本発明において、α-トコフェロールのこれら二つの形態が好ましい。
【００３６】
当該α-トコフェロールは天然由来および合成由来であってよい。
【００３７】
本発明の第1の態様によれば、当該ポリアミノ酸は、α-L-グルタメートまたはα-L-グルタミン酸ホモポリマーである。
【００３８】
本発明の第2の態様によれば、当該ポリアミノ酸は、α-L-アスパルテートまたはα-L-アスパラギン酸・ホモポリマーである。
【００３９】
本発明の第3の態様によれば、当該ポリアミノ酸は、α-L-アスパルテート/α-L-グルタメートまたはα-L-アスパラギン酸/α-L-グルタミン酸・コポリマーである。
【００４０】
有利には、少なくとも1のα-トコフェロール・ユニットを含むグラフトを有する当該アスパラギン酸および/またはグルタミン酸ユニットの分布は、こうして構成される当該ポリマーがランダムタイプ、ブロックタイプまたはマルチブロックタイプの何れかになるようなものである。
【００４１】
もう1つの定義に従えば、本発明による当該ポリアミノ酸は、2000〜100 000g/molのモル質量、好ましくは5000〜40 000g/molのモル質量を有する。
【００４２】
更に好ましくは、本発明のポリアミノ酸におけるα-トコフェロールグラフト基のモルでの度合は、3%〜70%、好ましくは5%〜50%であるべきである。
【００４３】
本発明のポリアミノ酸は、グラフトの度合に依存して種々の方法で使用できる。本発明の目標とされる種々の形態における活性成分の封入のためのポリマーの形成方法は、当該技術分野における当業者に公知である。更に詳しくは、参照文献として、例えば、以下の幾つかの詳細な関連する参照文献を挙げることができる：
「Microspheres, Microcapsules and Liposomes ;vol.1. Preparation and chemical applications」、Ed. R. Arshady, Citus Books 1999. ISBN:0-9532187-1-6。
【００４４】
「Sustained-Release Injectable Products」、Ed. J. Senior and M. Radomsky、Interpharm Press 2000. ISBN:1-57491-101-5。
【００４５】
「Colloidal Drug Delivery Systems」、Ed. J. Kreuter、Marcel Dekker, Inc. 1994. ISBN: 0-8247-9214-9。
【００４６】
「Handbook of Pharmaceutical Controlled Release Technology」、Ed. D.L. Wise、Marcel Dekker, Inc. 2000. ISBN: 0-8247-0369-3。
【００４７】
当該ポリアミノ酸はまた、約3%〜10%の比較的に低いグラフト度合で、それらが(例えば、リン酸緩衝液による)pH7.4の水中において、当該ポリマー濃度に依存してコロイド懸濁液またはゲルを形成するという事実の結果として、非常に有利である。更に、当該コロイド懸濁液の分散相を形成するポリアミノ酸粒子は、活性成分、例えば、蛋白質、ペプチドまたは小分子と容易に会合することが可能である。好ましい形成操作は、当該出願人による特許出願 WO 00/30618に記載された通りであり、その操作は、当該ポリマーを水中で分散すること、およびAPの存在下で当該溶液をインキュベートすることを含む。次いで、この溶液は、0.2μmのフィルターで濾過した後に患者に直接注射できる。
【００４８】
グラフト度合が10%以上では、当該ポリマーは、APとの会合または封入が可能なミクロ粒子を形成できる。この状況において、当該ミクロ粒子の形成は、APおよび当該ポリマーを適切な有機溶媒中に共溶解し、次いで、当該混合物を水から沈殿させることにより行えばよい。次に、当該粒子は濾過によって回収され、その後、経口投与のために(ゲルカプセルの形態で、コンパクト化および/またはコーティングされた形態で、或いは油に分散された形態で)使用でき、または水に再分散した後に腸管外投与に使用できる。
【００４９】
グラフト度合が30%よりも大きい場合、当該ポリマーの水相での再分散は、イオン化可能なカルボキシレート基の量がより少ないため、また当該ポリマーが沈殿するために、より難しくなる。この場合、当該ポリマーは、生体適合性溶媒、例えば、N-メチルピロリドンまたは適切な油、例えば、ミグリオール（Miglyol(登録商標)）などに溶解して、その後、筋肉内若しくは皮下または腫瘍に注射することが可能である。当該溶媒または当該油の拡散は、注射部位での当該ポリマーの析出を生じ、それによりデポジットが形成される。これらのデポジットは、その後に、当該ポリマーの拡散および/または侵食および/または加水分解または酵素分解によって制御放出を提供する。
【００５０】
一般的に、中性またはイオン化された形態における本発明のポリマーは、単独で、または液体、固体またはゲル組成物中で、および水性または有機媒体中で使用されてもよい。
【００５１】
ポリアミノ酸を基礎とした当該ポリマーは、そのpHおよび組成に依存して、中性(COOHの形態)またはイオン化形態の何れかのカルボキシル基を含むことが理解されるべきである。このような理由のため、水相における溶解度は、(ビタミンEでグラフト化されていない)遊離COOHの含有量およびpHに直接依存する。水性溶液において、そのカウンター・カチオン(counter-cation)は、金属カチオン、例えば、ナトリウム、カルシウム若しくはマグネシウムなど、または有機カチオン、例えば、トリエタノールアミン、トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタンまたはポリアミン、例えば、ポリエチレンイミンなどであってもよい。
【００５２】
本発明の当該ポリマーは、当該技術分野の当業者に公知の方法を経ることにより得られる。当該ポリアミノ酸は、少なくとも二つの方法で得ることが可能である:
・ポリアミノ酸にα-トコフェロールをグラフトすること、または
・α-トコフェロールのNCA誘導体を重合し、続いて選択的に加水分解すること。
【００５３】
第1の場合、ポリアミノ酸、ホモポリグルタメート、ホモポリアスパルテート、またはグルタメート/アスパルテート・コポリマーは、ブロック、マルチ・ブロックまたはランダムの形態で、例えば、標準的な方法に従って製造される。
【００５４】
αタイプのポリアミノ酸を得るために、最も一般的に使用される技術は、N-カルボキシアミノ酸の無水物(NCA)を重合することが基礎的であり、例えば、文献「Biopolymers, 1976, 15, 1869」、H.R. Kricheldorfによる書籍「alpha-Aminoacid-N-carboxy Anhydride and related Heterocycles」、Springer Verlag (1987)などに記載されている。当該NCA誘導体は、好ましくは、NCA-O-Me、NCA-O-EtまたはNCA-O-Bz誘導体(Me=メチル、Et=エチルおよびBz=ベンジル)である。当該ポリマーは、その後、適切な条件下で加水分解され、その酸の形態でのポリマーが得られる。これらの方法は、当該出願人による特許FR 2 801 226 に挙げられた記述から着想を得ている。本発明に従って使用され得る或る数のポリマー、例えば、種々の質量のポリ-(α-L-アスパラギン酸)、ポリ(α-L-グルタミン酸)、ポリ(α-D-グルタミン酸)およびポリ(γ-L-グルタミン酸)タイプのものは、商業的に入手することが可能である。α-βタイプのポリアスパラギン酸は、(ポリサクシンイミドを得るための)アスパラギン酸の濃縮と、それに続く塩基性加水分解によって得られる(Tomida et al., Polymer 1997, 38, 4733-36を参照されたい)。
【００５５】
α-トコフェロールの酸性基とのカップリングは、カップリング剤としてのカルボジイミドの存在下で、当該ポリアミノ酸とビタミンEを反応させること、好ましくは、4-ジメチル-アミノピリジンなどの触媒の存在下で、適切な溶媒、例えば、ジメチルホルムアミド(DMF)、N-メチルピロリドン(NMP)またはジメチルスルホキシド(DMSO)中で反応させることによって、容易に実施される。当該カルボジイミドは、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミドまたはジイソプロピルカルボジイミドなどである。そのグラフト度合は、構成成分および試薬の化学量論、または反応時間によって化学的に制御される。
【００５６】
第2の場合は、以下の構造を有するα-トコフェロールのNCA誘導体が合成される。当該合成は、ステアリルグルタメート N-カルボキシ無水物についてポーシェらが「マクロモレキュールズ」に記載したものに類似する(Poche, et al. Macromolecules 1995, 28, 6745-53)。
【化５】
2005531652.tif 000004
【００５７】
このα-トコフェロール-グルタメートのNCA誘導体は、その後、例えば、ベンジルグルタメートNCAなどとコポリマー化され、更に、グルタメートまたはグルタミン酸基を得るために、ベンジル基の選択的加水分解反応を、トリフルオロ酢酸と臭化水素酸の混合物中で室温にて実施する。この第2の合成経路は、単に当該モノマーの付加の順序を変更するだけで、ランダム、ブロックまたはマルチ・ブロックのコポリマーが容易に製造できる点に留意するべきである。
【００５８】
1〜4のアミノ酸からなるスペーサーを介したビタミンEのカップリングは、ビタミンEと適切に保護されたアミノ酸との継続的な反応と、その後に脱保護して当該ポリマーにおいてグラフト可能なアミノ基を得ることを経て実施されてよく、またはオリゴペプチドとの反応によって実施されてもよい。例えば、ロイシン・ユニットを有するα-トコフェロールの合成は、当該分野の当業者らに周知の一般的な方法に従って、および以下のスキームに従って実施される。
【化６】
2005531652.tif 000005
【００５９】
α-トコフェロールの当該ポリマー上での直接的なグラフトは、エステル基を介して行われ、それに対してアミノ酸を基礎にするスペーサーの存在する場合では、それはアミド基を介して実施されることが留意されるべきである。エステル結合を製造する際と同様に、当該アミド結合は同様な方法で標準的なカップリング剤、例えば、ジアルキルカルボジイミドなどを使用して行われてもよい。
【００６０】
本発明の1つの変形に従えば、当該ポリアミノ酸は、α-トコフェロール・グラフトを有するのみならず、グルタメートおよび/またはアスパルテート・ユニットに結合された1分子当たり少なくとも一つの、好ましくは次式(II)のポリアルキレングリコール・タイプのグラフトを有する:
【化７】
2005531652.tif 000006
【００６１】
ここで、
・R'4は、直接の結合、または1〜4アミノ酸ユニットが基礎となる「スペーサー」を表し;
・Xは、酸素、窒素および硫黄を含む群から選択された炭素以外の原子であり;
・R5およびR6は、独立してHまたは直鎖のC1〜C4アルキルを表し;
・nは、3〜1000までの範囲に及ぶ。
【００６２】
好ましくは、当該ポリアルキレングリコールはポリエチレングリコールである。
【００６３】
本発明のもう1つの好ましい特徴に従えば、当該ポリアルキレングリコールグラフトのモルパーセントは、1%〜3%の範囲である。
【００６４】
これらのペンダント側鎖(pendent side group)(II)のグラフトは、それ自身公知であり、且つ当該技術分野の当業者の能力内の技術に従う方法、例えば、当該グルタメートおよび/またはアスパルテートモノマーのカルボキシル基との間で、アミド、エステルまたはチオエステル結合を形成する方法によって行われる。これらの技術は、特に、α-トコフェロールをポリアミノ酸骨格構造にグラフトするために使用されるものであり、前記技術は、本特許出願において記載されている。
【００６５】
更なる側面に従えば、本発明は、少なくとも1の上述した当該ポリアミノ酸を含む薬学的、化粧品学的、栄養学的または植物保護学的組成物に向けられている。
【００６６】
本発明の一つの有利な構成によれば、この組成物は、α-トコフェロールに加えて少なくとも1の活性成分を含み、この活性成分は治療学的、化粧品学的、栄養学的または植物保護学的に活性な成分であってよい。
【００６７】
好ましくは、当該活性成分は蛋白質、糖蛋白質、多糖、リポ多糖、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチドまたはペプチドである。
【００６８】
より更に好ましくは、当該活性成分は、疎水性、親水性または両親媒性有機「小分子(small molecule)」である。
【００６９】
本記載に従うと、「小分子」は特に非蛋白質分子を意味する。
【００７０】
この組成物は、ナノ粒子、ミクロ粒子、溶液、エマルジョン、懸濁液、ゲル、ミセル、インプラント、粉末またはフィルムの形態にあってよい。
【００７１】
その特に好ましい一つの形態に従えば、当該組成物は、活性成分を含有してもまたは含有していなくても、水相において、ポリアミノ酸のナノ粒子および/またはミクロ粒子および/またはミセルの安定したコロイド懸濁液である。
【００７２】
本発明に従う当該組成物は、それが医薬品(pharmaceutical)である場合、経口、腸管外、鼻腔内、経膣的、眼内、皮下、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内、脳内またはバッカル経路を経て投与されてよい。
【００７３】
また、当該組成物が、皮下、筋肉内または腫瘍に対して注射することが可能な生体適合性溶媒中の溶液の形態であることも想定される。
【００７４】
更なる変形に従うと、本発明に従う当該組成物は、それが注射可能であるように製剤化され、さらにその注射部位でデポジットを形成可能であるように製剤化されてもよい。
【００７５】
本発明は、また、本発明に従うポリアミノ酸と活性成分を含み、以下の製造のために使用することが可能な組成物に向けられる:
・特に、経口、鼻腔、経膣、眼科的、皮下、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内または脳内に投与するための医薬品であって、これらの医薬品の活性成分が、特に、蛋白質、糖蛋白質、1以上のポリアルキレングリコール鎖（例えば、ポリエチレングリコール(PEG)）と結合した蛋白質（この場合、それらは「PEG化」蛋白質と称される）、ペプチド、ポリサッカライド、リポサッカライド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチドおよび疎水性、親水性または両親媒性有機小分子であり得る医薬品；
・および/または栄養剤；
・および/または化粧品学的または植物保護学的製品。
【００７６】
更なるもう1つの側面に従うと、本発明は、以下を製造する方法であって：
・特に、経口、鼻腔、経膣、眼科的、皮下、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内また
は脳内に投与するための医薬品であって、これらの医薬品の活性成分が、特
に、蛋白質、糖蛋白質、1以上のポリアルキレングリコール鎖（例えば、ポリ
エチレングリコール(PEG)）と結合した蛋白質（この場合、それらは「PEG化」蛋
白質と称される）、ペプチド、ポリサッカライド、リポサッカライド、オリゴ
ヌクレオチド、ポリヌクレオチドおよび疎水性、親水性または両親媒性有機小
分子であり得る医薬品；
・および/または栄養剤；
・および/または化粧品学的または植物保護学的製品；
請求項１〜１４の何れか１項に記載のポリアミノ酸および/または請求項１５〜２３の何れか１項に記載の組成物の少なくとも一つを使用することが本質的に含まれることを特徴とする方法である。
【００７７】
上述に記載される通り、本発明に従って1以上のAPおよびα-トコフェロール・グラフト化・ポリアミノ酸を会合するための技術は、特に特許出願 WO 00/30618に記載される。
【００７８】
本発明は、また、本明細書に記載される通りの組成物を、経口、腸管外、鼻腔、経膣、眼科的、皮下、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内、脳内またはバッカル経路を経て投与することを本質的に含む治療学的処置方法に関する。
【００７９】
1つの詳細な態様に従うと、当該治療学的処置方法は、上述に記載の通りの組成物を生体適合性溶媒中での溶液の形態で使用すること、およびその後、それを皮下、筋肉内または腫瘍へ、好ましくはそれがその注射部位でデポジットを形成するように、注射することを本質的に含む。
【００８０】
本発明に従う当該ポリアミノ酸と会合し得るAPの例としては、それらが(ナノまたはミクロ)粒子の形態にあるか否かに関わらず、以下のものが挙げられる:
○蛋白質、例えば、インスリン、インターフェロン類、成長ホルモン類、インターロイキン類、エリスロポエチンまたはサイトカイン類など;
○ペプチド、例えば、ロイプロリド(leuprolide)またはシクロスポリンなど;
○小分子、例えば、アントラサイクリン、タキソイドまたはカンプトセシン・ファミリーに属するものなど;
○およびその混合物。
【００８１】
以下の例から、本発明が更に明確に理解され、その利点および手段の変形についてより分かり易く明らかになるだろう。以下の例は、α-トコフェロールがグラフト化されたポリアミノ酸の合成、APを特定部位へ指向化させるシステム(ナノ粒子の安定した水性懸濁液)へのその変換、およびAP類(例えば、小有機分子、蛋白質など)と会合して薬学的組成物を形成する能力を有する前記システムに関する例証を記載する。
【実施例】
【００８２】
例1：  ポリマーP1
合成由来のα-トコフェロールでグラフト化したポリグルタメートの合成
当該α-L-ポリグルタメートポリマーは、ポリオキシエイレン標準品に比例して約10 000に等しい質量で、NCAGluOMEを重合し、次に加水分解することによって、特許出願FR 2 801 226に記載の通りに得られる。5.5gのこのα-L-ポリグルタメートポリマーを、92mLのジメチルホルムアミド(DMF)に、40℃で2時間加熱することによって溶解される。当該ポリマーが一度溶解したら、その温度は25℃まで戻るに任せ、予め6mLのDMFに溶解された1.49gのD,L,-α-トコフェロール(>98%、Fluka(登録商標)から入手)、予め6mLのDMFに溶解された0.09gの4-ジメチルアミノピリジンおよび予め6mLのDMFに溶解された0.57gのジイソプロピルカルボジイミドを連続して添加する。25℃で8時間の攪拌の後に、当該反応媒体を15%の塩化ナトリウムと塩酸(pH 2)とを含む800mLの水に注ぎ入れる。その沈殿したポリマーを次に濾過し、0.1Nの塩酸で洗浄し、その後水で洗浄することによって回収する。当該ポリマーを次に75mLのDMFに再溶解し、その後、塩および酸を含み予めpH 2とした水から再沈殿させる。水で2回洗浄した後に、当該ポリマーを数回ジイソプロピルエーテルで洗浄する。当該ポリマーはその後、40℃の真空下でオーブン乾燥される。約85%の収率が得られる。
【００８３】
プロトンNMRで評価されたグラフト度合は約7.8%であり、HPLC分析によって残留トコフェロール含有量は0.3%未満であることが明らかになる。
【００８４】
Mw(GPCにより測定、NMPで溶出)＝17 500g/mol［ポリメチルメタクリレート当量(polymethyl methacrylate equivalent)として］。
【００８５】
例2、3、4および5：  ポリマーP2、P3、P4およびP5の合成
多様な量のトコフェロールを含むポリマーを同様に製造する。
【表１】
2005531652.tif 000007
【００８６】
全ての場合において、当該有効にグラフトされたトコフェロールの量をNMRにより確認した。
【００８７】
例6：  ポリマーP6
天然由来のα-トコフェロールでグラフトされたポリグルタメートの合成
同様に、ポリマーP6は、7.3%の天然由来のD-アルファ-トコフェロール(純度98.5%、カンパニー・ADM、フランスより入手)を用いて合成される。
【００８８】
当該モル質量は17 400(GPC NMP、PMMA eq)である。
【００８９】
例7：  水性溶液における当該ポリマーの分析
当該ポリマーは、pH7.4にリン酸で緩衝された生理的食塩水において、10〜40mg/mLまでの範囲の濃度で溶解される。当該pHは、0.1Nの水酸化ナトリウムを添加することによって調整される。当該溶解は視覚的に観察される。
【表２】
2005531652.tif 000008
【００９０】
リン酸緩衝液:0.01Mのホスフェート、0.0027MのKCLおよび0.137MのNaCL。
【００９１】
支持体上に置かれた当該ポリマーP1の透明な溶液のエレクトロン・トランスミッション(electron transmission)による観察は、15〜25nmのナノ粒子の存在を示す。pH7.4の水(リン酸緩衝液)中で15mg/mLのポリマーP1、P6およびα-トコフェロールサクシネートの溶液を比較分析すると、α-トコフェロールサクシネートだけが、小胞体の特徴を示す白濁した溶液を生じることが明らかになり、これは特許EP 0 243 446に記載される通りである。
【００９２】
例8：  当該ポリマーP1への染料の吸着
本発明の課題の1つに従うと、当該ポリマーは水中におけるコロイド懸濁液の形態で使用してよく、および活性成分と会合してもよい。本出願のために、以下のような実験において、あるポリマー、特に、約5%〜10%のトコフェロールのグラフトの度合を有するポリマーを用いて、その吸着能力が、従来の類似化合物の能力に比較して優れていることを証明する。
【００９３】
この試験のために、当該ポリマーP1をポリグルタメートにグラフトされたドデカノール鎖を含む類似のポリマーと比較した。このポリマーは、特許WO 00/30618に記載される。
【００９４】
当該試験は、以下の方法で行われる:当該ポリマーをpH7の水性溶液(リン酸緩衝液)に溶解し、オレンジOT(Rn CAS: 2646-17-5)として公知の染料の5mgを添加する。当該溶液を超音波浴中に1時間放置して当該会合を達成する。当該溶液をその後、遠心し、未会合の染料を取り除き、その光学的濃度(optical density)を、当該染料のλmax、即ち、495nmで測定する。
【表３】
2005531652.tif 000009
【００９５】
1モル当たりのグラフトの度合が半分未満の場合、およびポリマーの質量濃度が僅かにより小さい場合、当該ポリマーP1は、当該染料オレンジOTを会合する能力がより高くなる。
【００９６】
例９：  ポリマーP7の合成
α-トコフェロール・ロイシン・グラフトを含むポリグルタメートの合成
α-トコフェロール・ロイシン誘導体は、以下の方法で最初に合成される。
【００９７】
D,L-α-トコフェロール(4.3g)を、4-ジメチルアミノピリジン(244mg)およびジイソプロピルカルボジイミド(1.5g)の存在する15mLのジクロロメタン中でBOC-ロイシン(2.3g)と反応する。30℃での2時間後、その産物をシリカのカラム上で濾過することにより精製する。5gの当該産物であるα-トコフェロール・ロイシン・BOCが得られる(77%の収率)。その構造は、NMR分光法により確認される。当該産物の脱保護は、トリフルオロ酢酸中で、5〜10℃の間の温度で1時間で行われる。シリカを経る濾過により精製した後、3.3gの所望の産物が単離される(78%の収率)。その構造はNMR分光法により確認される。
【００９８】
ポリグルタミン酸における当該グラフト反応は、その後、例1と同様の条件下で、7%のグラフトの度合で行われる。当該ポリマーの構造およびグラフトの度合は、NMR分光法により確認した。
【００９９】
例10：  ポリマーP8の合成
α-トコフェロール・グラフトおよびポリオキシエチレングリコール・グラフトを含むポリグルタメートの合成。
【０１００】
グラフト反応は例1の通りに、11mol%のα-トコフェロールと、式MeO(CH2CH2O)aCH2CH2NH2、モル質量3000のアミノメトキシポリエチレングリコールザ・カンパニー・シアウォーターズ(the company Shearwaters)より入手される製品の2mol%を用いて行われる。その酸形態にある当該ポリマーが、72%の収率で得られる。プロトンNMRにより、10.9%のα-トコフェロールと、および1.9%のポリエチレングリコールのグラフトの度合を確認する。
【０１０１】
例11：  インスリンの吸着
pH7.0の1mLの水の中に1mgのポリマーP1および7mgのインスリンを含有する溶液を製造し、2時間放置してインキュベートする。当該懸濁液を次に限外濾過する(10 000xG、100kDaの閾値で20分)。濾液中の遊離インスリンをHPLCで分析し、更に、会合されたインスリンの量を差によって推定する。使用されたインスリンに対して95%以上の会合の度合が測定される。同様の条件下で、例8の当該比較用のポリマーでは40%の会合が可能となる。ポリマーP1の当該吸着能力は、従ってより強力である。
【０１０２】
例12：  酵素存在下におけるポリマーP1のインビトロでの分解
ポリマーP1は、pH7.5(リン酸緩衝液および10mMのカルシウムカチオン)で、20mg/mLの濃度で溶解される。0.1mLのプロテアーゼ(10mg/mLの溶液)が添加され、その分解は水性GPCによってモニターされる。
【０１０３】
比較的に迅速な分解が観察され、当該初期ポリマーの半減期は約100分である。
【手続補正書】
【提出日】平成16年7月20日(2004.7.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１８】
前記活性成分が、疎水性、親水性または両親媒性の有機非蛋白質分子であることを特徴とする請求項１６または１７の何れか１項に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２４】
それが以下を製造するためのものであることを特徴とする請求項１５〜２３の何れか１項に記載の組成物：
・特に、経口、鼻腔、経膣、眼科的、皮下、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内または脳内に投与するための医薬品であって、これらの医薬品の活性成分が、特に、蛋白質、糖蛋白質、1以上のポリアルキレングリコール鎖（例えば、ポリエチレングリコール(PEG)）と結合した蛋白質（この場合、それらは「PEG化」蛋白質と称される）、ペプチド、ポリサッカライド、リポサッカライド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチドおよび疎水性、親水性または両親媒性の有機非蛋白質であり得る医薬品；
・および/または栄養剤；
・および/または化粧品学的または植物保護学的製品。
【手続補正３】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２５】
以下を製造する方法であって：
・特に、経口、鼻腔、経膣、眼科的、皮下、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内また
は脳内に投与するための医薬品であって、これらの医薬品の活性成分が、特
に、蛋白質、糖蛋白質、1以上のポリアルキレングリコール鎖（例えば、ポリ
エチレングリコール(PEG)）と結合した蛋白質（この場合、それらは「PEG化」蛋
白質と称される）、ペプチド、ポリサッカライド、リポサッカライド、オリゴ
ヌクレオチド、ポリヌクレオチドおよび疎水性、親水性または両親媒性の有機
非蛋白質分子であり得る医薬品；
・および/または栄養剤；
・および/または化粧品学的または植物保護学的製品；
請求項１〜１４の何れか１項に記載のポリアミノ酸および/または請求項１５〜２３の何れか１項に記載の組成物の少なくとも一つを使用することが本質的に含まれることを特徴とする方法。
【国際調査報告】
2005531652.tif 000012
2005531652.tif 000013
2005531652.tif 000014
2005531652.tif 000015