(57)【要約】本発明は、プリオンにより生じる神経変性障害の進行を遅延し、及び／又は臨床症状の発症を遅延し、及び／又は臨床症状を治療するための医薬組成物に関する。本発明の前記組成物は、活性成分としてＤＭＳＯを含み、更に場合により、薬剤学的に許容することのできる添加剤及び／又は希釈剤を含む。本発明の前記組成物は、アミロイド斑へのＰｒＰＳｃの増加した蓄積に関連する神経変性障害の治療に特に適用可能である。更に、本発明は、プリオンにより生じる神経変性障害の治療方法、並びにプリオンにより生じる神経変性障害の進行を遅延し、及び／又は臨床症状の発症を遅延し、及び／又は臨床症状を治療するための医薬組成物の調製におけるＤＭＳＯの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性成分としてＤＭＳＯを含み、更に場合により、薬剤学的に許容することのできる添加剤及び／又は希釈剤を含む、プリオンにより生じる神経変性障害の進行を遅延し、及び／又は臨床症状の発症を遅延し、及び／又は臨床症状を治療するための医薬組成物。
【請求項２】
前記神経変性障害が、アミロイド斑へのＰｒＰＳｃの増加した蓄積に関連する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記神経変性障害が、脳内における過剰ＰｒＰＳｃに関連する、請求項１又は２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記神経変性障害が、進行性神経変性障害である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記神経変性障害が、クロイツフェルト−ヤーコプ病（ＣＪＤ）、変異型ＣＪＤ（ｖＣＪＤ）、クールー、ゲルストマン−シュトロイスラー−シャインカー症候群（ＧＳＳ）、及び致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）のいずれか１つ、特にクロイツフェルト−ヤーコプ病である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
経口投与用である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
ＤＭＳＯの水溶液の形態である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
ＤＭＳＯの濃度が、約１％（ｗ／ｖ）〜約１００％（ｗ／ｖ）である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
ＤＭＳＯの濃度が、約５％（ｗ／ｖ）〜約５０％（ｗ／ｖ）である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ＤＭＳＯの濃度が、２０％（ｗ／ｖ）である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
１日当たり１〜６回投与用である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
１日当たり２〜４回投与用である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
１日当たり３回投与用である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
患者１人当たりの１日のＤＭＳＯ投与量が約０．２ｇ／ｋｇである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
患者１人当たりの１日のＤＭＳＯ投与量が約０．１ｇ〜約３０ｇである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
患者１人当たりの１日のＤＭＳＯ投与量が約１ｇ〜１５ｇである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
患者１人当たりの１日のＤＭＳＯ投与量が５ｇである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
治療有効量のＤＭＳＯ又は治療有効量の請求項１〜１７のいずれか一項に記載の医薬組成物をＣＪＤ患者に投与すること含む、ＣＪＤの進行を遅延し、及び／又は臨床症状の発症を遅延し、及び／又は臨床症状を治療する方法。
【請求項１９】
前記投与が経口経路による、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記患者に、ＤＭＳＯを１日当たり約３ｇ〜約３０ｇ、好ましくは１５ｇ投与することを含む、請求項１８又は１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
プリオンにより生じる神経変性障害の進行の遅延、及び／又は臨床症状の発症の遅延、及び／又は臨床症状の治療におけるＤＭＳＯの使用であって、前記障害が、ＣＪＤ、ｖＣＪＤ、クールー、ＧＳＳ症候群、及びＦＦＩのいずれか１つ、特にクロイツフェルト−ヤーコプ病である、前記使用。
【請求項２２】
プリオンにより生じる神経変性障害の進行の遅延、及び／又は臨床症状の発症の遅延、及び／又は臨床症状の治療のための医薬組成物の調製におけるＤＭＳＯの使用。
【請求項２３】
プリオンにより生じる神経変性障害の進行の遅延、及び／又は臨床症状の発症の遅延、及び／又は臨床症状の治療のための医薬組成物の調製におけるＤＭＳＯの使用であって、前記神経変性障害が、アミロイド斑へのＰｒＰＳｃの増加した蓄積に関連する、前記使用。
【請求項２４】
プリオンにより生じる神経変性障害の臨床症状の発症の遅延及び／又は臨床症状の治療のための医薬組成物の調製におけるＤＭＳＯの使用であって、前記神経変性障害が、脳内における過剰ＰｒＰＳｃに関連する、前記使用。
【請求項２５】
神経変性障害の臨床症状の発症の遅延及び／又は臨床症状の治療のための医薬組成物の調製におけるＤＭＳＯの使用であって、前記神経変性障害が、ＣＪＤ、ｖＣＪＤ、クールー、ＧＳＳ症候群、及びＦＦＩ、特にクロイツフェルト−ヤーコプ病である、前記使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の分野】
【０００１】
本発明は、プリオンにより生じる神経変性障害、例えば、クロイツフェルト−ヤーコプ病（ＣＪＤ）の、有機溶媒ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）による治療に関する。
【０００２】
《発明の背景》
本明細書に記載されている全ての刊行物は、それらの中に引用されている参考文献を含めて、参照することにより本明細書に完全に包含される。
プリオン病は、ＴＳＥ（伝染性海綿状脳症：ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｂｌｅ  ｓｐｏｎｇｉｆｏｒｍ  ｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｉｅｓ）としても知られており、海綿状変性（大脳灰白質の任意の部分に作用している）、神経欠損［ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｌｏｓｓ］、及び神経膠星状細胞の増殖及び肥大の伝統的な３徴候によって神経病理学的に認識される、動物及びヒトの致死性神経変性疾患の群である［Ｂｅｃｋ，Ｅ．＆Ｄａｎｉｅｌ，Ｐ．Ｍ．Ｐｏｓｔｇｒａｄ  Ｍｅｄ  Ｊ４５（５２４），３６１−７０（１９６９）］。この疾病は、ＰｒＰＳｃがテンプレートとしての役割を果たす未だ解明されていないメカニズムによって、ＰｒＰＣ分子が、プロテアーゼ耐性があって且つ不溶性のＰｒＰＳｃ分子に変換されることから始まる。これらの疾病の特徴は、脳内において、プリオンタンパク質の異常アイソフォーム（ＰｒＰＳｃ）が蓄積し、アミロイド斑を形成することである［Ｐｒｕｓｉｎｅｒ，Ｓ．Ｂ．＆ＤｅＡｒｍｏｎｄ，Ｓ．Ｊ．Ｌａｂ  Ｉｎｖｅｓｔ５６（４），３４９−６３（１９８７）］。前記動物疾病の中で、最も流行しているのは、狂牛病として一般に知られているウシ海綿状脳症（ＢＳＥ：ｂｏｖｉｎｅ  ｓｐｏｎｇｉｆｏｒｍ  ｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ）である。
【０００３】
ヒトにおけるプリオン病全ケースの内、約８５％が散発性形態のクロイツフェルト−ヤーコプ病（ＣＪＤ：Ｃｒｅｕｔｚｆｅｌｄｔ−Ｊａｋｏｂ  ｄｉｓｅａｓｅ）であるのに対して、その残りは、感染プリオン病及び遺伝性プリオン病である。ＣＪＤの一般的な症状は、痴呆症、続いて共調の欠如であるが、この順番は逆転することがある。遺伝性形態のＣＪＤは、患者の１０〜１５％に影響し、そして３種の変異型が特徴付けられている。ごく稀に、前記疾病は、医学的手法の偶発的な成り行きとして、感染を介して後天的に獲得されることがある。散発性ケースの場合、平均発症年齢は６０歳であり、そしてその疾病は、余命を約８ヶ月とする。前記遺伝性疾病に対して、これらのパラメーターは、アレル変異体によって変化し、そして平均発症年齢は４５〜５５歳であり、余命を約８〜５０ヶ月とすることがある。
【０００４】
欧州において、変異型ＣＪＤ（ｖＣＪＤ）と称するＣＪＤの新しい変異型を罹病する患者の数が増加しつつあることは、プリオン汚染された牛製品の消費に関連付けられている［Ｗｉｌｌ，Ｒ．Ｇ．ら，Ｌａｎｃｅｔ３４７，９２１−５（１９９６）］。現在は、それぞれＢＳＥ又はスクラピーで汚染されている動物由来の牛製品又はラム製品を介する水平伝播によってｖＣＪＤに罹病するものと考えられている。
【０００５】
現在、ＣＪＤは、ヒトプリオン病の全ケースの約８５％を占める主要な健康上の危険を構成している。クロイツフェルト−ヤーコプ病の罹患率は、おおよそ１００万人に１人であるが、６０〜７４歳の人の間では、罹患率は、ほぼ１００万人に５人である［Ｐｒｕｓｉｎｅｒ，Ｓ．Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ３４４（２０），１５１６−１５２６（２００１）］。
【０００６】
ヒトにおける他のプリオン病としては、クールー、ゲルストマン−シュトロイスラー−シャインカー症候群（ＧＳＳ症候群）、及び致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）を挙げることができる。更に、ＰｒＰ遺伝子における病原性突然変異が２０以上も既に文書に記録されている［Ｐｒｕｓｉｎｅｒ，Ｓ．Ｂ．Ｐｈｉｌｏｓ  Ｔｒａｎｓ  Ｒ  Ｓｏｃ  Ｌｏｎｄ  Ｂ  Ｂｉｏｌ  Ｓｃｉ３４３，４４７−６３（１９９４）］。
【０００７】
ＰｒＰＳｃは、前記プリオンの唯一の同定された成分であり、このタンパク質様の物質がプリオン病を起こす[Ｐｒｕｓｉｎｅｒ，Ｓ．Ｂ．ら，Ｃｅｌｌ９３（３），３３７−４８（１９９８）]。ＰｒＰＳｃは、機能が知られておらず広範に分布している細胞表面糖タンパク質であるＰｒＰＣの配座的に異なるアイソフォームである。この２つのＰｒＰアイソフォーム間の違いは、化学的な違いよりもむしろ配座的な違いにあるように思われる。ＰｒＰＣの配座は殆どがαヘリックスであり、一方、ＰｒＰＳｃは、βシートをかなりな量で含有する（図１）。しかしながら、どちらのタンパク質も同じアミノ酸配列を共有し、そして３３〜３５Ｋｄの同じ見かけ分子量を有する。ＰｒＰＣはＰｒＰＳｃ生成のソースなので、ＰｒＰＣの発現レベルは、ＰｒＰＳｃの蓄積において中心的役割を果たすものと考えられる。このことは、組織培養及びトランスジェニックマウスのどちらにおいても見られる。αヘリックス状ＰｒＰＣ分子からβシートに富むＰｒＰＳｃへの変換は、プリオン病の伝播の原因と見なされてきた。ＰｒＰＳｃ合成の経路は、ＰｒＰＣ−ＰｒＰＳｃヘテロダイマーの形成のみを特徴とする可能性、あるいは更に、メディエータ分子からなる凝集の種（シード）の形成をも含む可能性がある。現在、この工程に関連するメカニズムは、依然として不明瞭なままである。
【０００８】
有機溶媒ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）は、アミロイド系疾患（プリオン病におけるように、アミロイド斑が形成される疾病）において、イン・ビトロ及びイン・ビボの両方に効果を示した。アミロイドタンパク質の変性に関連する実験から、イン・ビトロデータは、ＤＭＳＯが、アミロイドフィブリルの組立をブロックするが、既存のフィブリルの分解を妨害しないことを示唆している［Ｋｉｔｏ，Ｓ．ら，Ａｎｎ  Ｎ  Ｙ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ４１１，５２−６６（１９８３）］。更に、ＤＭＳＯは、高いβシート量を有するＡβペプチド中間体の形成をブロックする（これは、アルツハイマー病の間にアミロイド斑へと自己組立する過程における制御工程である）ことが示されている［Ｓｈｅｎ，Ｃ．Ｌ．＆Ｍｕｒｐｈｙ，Ｒ．Ｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｊ６９，６４０−６５１（１９９５）］。
【０００９】
スクラピーに感染した神経芽腫細胞（ＳｃＮ２ａ）のＤＭＳＯ治療は、新たに合成されたＰｒＰＣからのＰｒＰＳｃの形成を妨害した。この結果は、ＤＭＳＯが、「化学的シャペロン」として作用し、ＰｒＰＣのαヘリックス状配座を安定させ、そしてＰｒＰＳｃを生成することになる配座的変化をこうむることから前記配座を予防することができることを示唆している［Ｔａｔｚｅｌｔ，Ｊ．，Ｐｒｕｓｉｎｅｒ，Ｓ．Ｂ．＆Ｗｅｌｃｈ，Ｗ．Ｊ  ＥＭＢＯ  Ｊｏｕｒｎａｌ１５，６３６３−６３７３（１９９６）］。対照的に、本発明者らは、ＤＭＳＯが、Ｔａｔｚｅｌｔによって実証されたように変換工程に影響を与えず、むしろＰｒＰＳｃからアミロイド斑（これは、疾病の或る状態で脳内に堆積する）への集積工程に影響することを示した。興味深いことに、グリセロールによる脳ホモジェネートの処理（これも、Ｔａｔｚｅｌｔらによって「化学的シャペロン」として示唆されている）は、検出可能な効果を示さなかった（本発明者らの公開していない結果）。
【００１０】
カゼイック・アミロイドーシスに対するマウスモデルは、ＤＭＳＯの経口投与が、前記疾病の進展を予防しただけでなく、いくつかのケースにおいて、その後退をもたらすように見えたことを示した［Ｍｕｒａｖ'ｅｖ，Ｉ．Ｏ．ｒｅｖｍａｔｏｌｏｇｉａ１，４４−４６（１９９０）］。
ＤＭＳＯは、１９６３年から、医学的研究に利用可能であった。食品医薬品庁（ＦＤＡ）の認可は、間質性膀胱炎の全身的治療に対してのみであるが、白血病及びガン、脳虚血、頭部外傷、及び感染症に対して有益であることが示されている［Ｒｅｇｅｌｓｏｎ，Ｗ．＆Ｈａｒｋｉｎｓ，Ｓ．Ｗ．Ａｎｎ  Ｎ  Ｙ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ８２６，３４８−７４．（１９９７）］。ヒトに対する継続的治療として与えられる場合であっても、ＤＭＳＯには、重篤な副作用がない［Ｒａｖｉｄ．Ｍ，Ｓ．Ｊ．，Ｌａｎｇ．Ｒ．Ａｎｎ  Ｒｈｅｕｍ  Ｄｉｓ４１，５８７−５９２（１９８２）；Ｂｒｏｂｙｎ，Ｒ．Ｄ．Ａｎｎ  ＮＹ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ２４３，４９７−５０５（１９７５）］。
【００１１】
アミロイド性疾患におけるＤＭＳＯの臨床的使用の報告が、若干存在する。ＤＭＳＯの単独投与の後は、アミロイド性疾患に罹病している患者の尿が、コンゴーレッドで染色可能なフィブリルを形成することができる材料を含む。この結果は、体組織から運搬され、そして腎臓を介して排出される配座へのアミロイドフィブリルの分解を、ＤＭＳＯが起こすことができることを示唆している［Ｒａｖｉｄ，Ｍ．，Ｋｅｄａｒ，Ｉ．＆Ｓｏｈａｒ，Ｅ．．Ｌａｎｃｅｔ１，７３０−７３１（１９７７）］。更に、原発性及び家族性アミロイドーシス（Ｐｒｉｍａｒｙ  ａｎｄ  Ｆａｍｉｌｉａｌ  Ａｍｙｌｏｉｄｏｓｉｓ：ＦＡＰ）に罹病しているヒトに対するＤＭＳＯの慢性的な投与の後に、約５０％の患者が臨床的な改善を示した。しかしながら、ＤＭＳＯの作用のメカニズムは、未だに明確に理解されていない。
【００１２】
ＣＪＤ及び他のプリオン病の治療的処理に対する調査において、本発明者らは、ＤＭＳＯによる治療が、患者の状態を向上させることを発見した。従って、本発明の目的は、（特にヒトにおける）プリオン病、特にＣＪＤの治療において、ＤＭＳＯ及びＤＭＳＯ含有医薬組成物を使用することにある。本発明のこの目的及び別の目的は、以下の説明において詳しく説明する。
【００１３】
《発明の要約》
本発明の目的は、１つの観点において、医薬組成物に関し、第２の観点において、活性成分としてＤＭＳＯを含有し、そして場合により薬剤学的に許容することのできる添加剤及び／又は希釈剤を更に含有する、プリオンにより生じる神経変性障害の進行を遅延し、及び／又は臨床症状の発症を遅延し、及び／又は臨床症状を治療する方法に関する。
【００１４】
特定の神経変性障害は、アミロイド斑へのＰｒＰＳｃの増大した蓄積に関連する神経変性障害であり、特に、脳内での過剰なＰｒＰＳｃに関連する障害である。これらの神経変性障害は、進行性神経変性障害であり、例えば、クロイツフェルト−ヤーコプ病（ＣＪＤ）、変異型ＣＪＤ（ｖＣＪＤ）、クールー、ゲルストマン−シュトロイスラー−シャインカー症候群（ＧＳＳ症候群）、及び致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）、特にクロイツフェルト−ヤーコプ病を挙げることができる。
【００１５】
前記医薬組成物は、１日当たり１〜６回、好ましくは１日当たり２〜４回、最も好ましくは１日当たり３回の、好ましくは経口投与用であり、そしてＤＭＳＯの水溶液〔ここで、ＤＭＳＯの濃度は、約１％（ｗ／ｖ）〜約１００％（ｗ／ｖ）、好ましくは２０％（ｗ／ｖ）である〕の形態であり、１日当たり約０．２ｇ／ｋｇ又は１日当たり約０．１ｇ〜約３０ｇ、好ましくは１日当たり５ｇの投与量のＤＭＳＯを含む。
【００１６】
本発明は、ＤＭＳＯの治療有効量を、又は活性成分としてＤＭＳＯを含有し、そして場合により更に薬剤学的に許容することのできる添加剤及び／又は希釈剤を含有する医薬組成物の治療有効量を、ＣＪＤ患者に投与することを含む、プリオン病の進行を遅延し、及び／又は臨床症状の発症を遅延し、及び／又は臨床症状を治療する方法に関する。
【００１７】
本発明の方法は、アミロイド斑へのＰｒＰＳｃの増加した蓄積、及び脳内での過剰なＰｒＰＳｃに関連し、プリオンによって生じる神経変性障害、例えば、クロイツフェルト−ヤーコプ病、ｖＣＪＤ、クールー、ＧＳＳ症候群、及びＦＦＩ、特にクロイツフェルト−ヤーコプ病の治療を、特に意図する。
【００１８】
別の観点では、本発明の方法は、プリオンによって生じる神経変性障害、例えば、ＣＪＤ、ｖＣＪＤ、クールー、ＧＳＳ症候群、及びＦＦＩ、特にクロイツフェルト−ヤーコプ病の進行の遅延、及び／又は臨床症状の発症の遅延、及び／又は臨床症状の治療におけるＤＭＳＯの使用を含む。
【００１９】
本発明の更に別の観点は、アミロイド斑へのＰｒＰＳｃの増加した蓄積に関連し、及び脳内での過剰なＰｒＰＳｃに関連し、そして進行性神経変性障害、例えば、クロイツフェルト−ヤーコプ病、ｖＣＪＤ、クールー、ＧＳＳ症候群、及びＦＦＩ、特にクロイツフェルト−ヤーコプ病のいずれか１つの症状が発現している、プリオンにより生じる神経変性障害の進行を遅延し、及び／又は臨床症状の発症を遅延し、及び／又は臨床症状の治療のための医薬組成物の調製におけるＤＭＳＯの使用である。
以下の図面において、本発明を、より詳細に説明する。
【００２０】
《図面の簡単な説明》
図１ａ〜ｂ：ＰｒＰＣ及びＰｒＰＳｃの模式図。
図１（ａ）：組換えシリアンハムスターＰｒＰ（残基９０から２３１）のＮＭＲのリボン図。
図１（ｂ）：βシート構造の劇的な増加を示すＰｒＰＳｃの推定構造のモデル。
【００２１】
図２：経口ＤＭＳＯ治療は、スクラピー（ＩＣ）感染ハムスターの寿命を長期化することができる。
感染率を対数目盛上に示す。より高い値は、急性感染率を示す。略号：Ｉｎｏｃｕ．＝接種，ｃｏｎｔ．＝対照。
【００２２】
図３：経口ＤＭＳＯ治療は、スクラピー（ＩＰ）感染ハムスターの寿命を長期化することができる。
感染率を均等目盛（ｄｐｉ）上に示す。より高い値は、長期化した動物寿命、従ってより低い感染率を示す。略号：Ｉｎｆｅｃ．＝感染価，ｃｏｎｔ．＝対照，ｔｒｅａｔ．＝治療。
【００２３】
図４ａ〜ｂ：ＤＭＳＯ治療されたスクラピー感染ハムスターにおける、より低いＰｒＰＳｃレベル。
異なるＤＭＳＯ治療群からのスクラピーハムスターからの脳ホモジェネートを、プロテイナーゼＫで処理した後に、ウエスタンブロッティングした。そのバンドの強さに従って、ＰｒＰＳｃ濃度を概算した。
図４（ａ）：レーン１＝９０ｄｐｉにおいて収集した非治療動物からのサンプル；レーン２及び３＝それぞれ、レーン１からのサンプルの１０倍及び１００倍希釈を表す。
図４（ｂ）：レーン１＝１１０ｄｐｉにおいて収集したＤＭＳＯ治療動物からのサンプル；レーン２＝９０ｄｐｉにおいて収集したＤＭＳＯ治療動物からのサンプル；レーン３及び４＝それぞれ１０倍及び１００倍に希釈したレーン２からのサンプル。
９０ｄｐｉにおける非治療動物からのサンプル（ａ，第１レーン）は、１１０ｄｐｉにおけるＤＭＳＯ治療動物からのサンプル（ｂ，第１レーン）と同じ程度の強度を示す。９０ｄｐｉにおいては、非治療動物からのサンプルは、ＤＭＳＯ治療動物からのサンプルよりも約１０倍のＰｒＰＳｃを示した（図４ａと４ｂのレーン２を比較）。
図５ａ〜ｂ：６０ｄｐｉでの非治療動物におけるＰｒＰレベルは、１１０ｄｐｉでのＤＭＳＯ治療動物におけるＰｒＰレベルに、より近い。
図５（ａ）と図５（ｂ）との比較による、ハムスター脳ホモジェネートから調製したウエスタンブロット：
図５（ａ）：６０ｄｐｉでの非治療動物からのサンプル：無希釈、１０倍希釈、及び１００倍希釈（それぞれ、レーン１、２、及び３）。
図５（ｂ）：３時点のＤＭＳＯ治療動物（６０、９０、及び１１０ｄｐｉ：それぞれ、レーン１、レーン２、及びレーン３）。
６０ｄｐｉからのサンプルの間では、約１００倍の差が明らかである（図５ａ及び図５ｂのレーン１を比較）。６０ｄｐｉでの非治療動物からのサンプル及び１１０ｄｐｉでのＤＭＳＯ治療動物からのサンプルにおいては、同様のＰｒＰ濃度である（図５ａのレーン１と図５ｂのレーン３とを比較）。
【００２４】
《発明の詳細な説明》
明確性の目的で、本明細書において以下の用語を規定する：
「ＣＪＤ」：クロイツフェルト−ヤーコプ病。プリオンタンパク質（ＰｒＰ）の異常蓄積によって生じ、ヒトにおいて発生する進行性神経変性障害であり、一般的症状は、痴呆及び共調の欠如である。
「ｖＣＪＤ」：変異型ＣＪＤ。ＣＪＤの最近記載された形態であり、ＢＳＥ又はスクラピー汚染された牛肉又はラム肉由来の製品の消費を介して発病することがほぼ確実である。
「ＤＭＳＯ」：ジメチルスルホキシド。
「神経変性障害」：神経細胞タンパク質のプロセシングにおける異常状態による、中枢神経系の変性に起因する障害又は状態。欠陥のあるプロセシングは、種々の疾病を引き起こす特定のタンパク質１種又は複数種の蓄積をもたらす。最も一般的な神経変性障害は、アルツハイマー病である。また、プリオン病、パーキンソン病、筋萎縮側索硬化症、前頭側頭点痴呆症、ハンチントン病、及び脊髄小脳性運動失調も知られている。
「プリオン病」：異常形態のプリオンタンパク質の有害な蓄積によって生じる致死性神経変性障害。プリオン病は、広範な臨床的症状、例えば、痴呆、運動失調、不眠症、対麻痺、感覚異常、及び逸脱行動がある。神経病理学的所見の範囲は、萎縮不在から広範に広がった萎縮まで、最小の神経欠損から広範に広がった神経欠損まで、低密度な空胞形成又は海綿状変化から広範に広がった空胞形成又は海綿状変化まで、軽度の神経膠星状細胞性グリオーシスから重度な反応性の神経膠星状細胞性グリオーシスまで、及びＰｒＰアミロイド斑不在から大量の斑までに及ぶ。これらの所見は、ＰｒＰアミロイド斑の存在を除いて、プリオン病に関して診断上は、一義的ではない。
【００２５】
「プリオンタンパク質（ＰｒＰ）」：病原体のようにふるまう感染性タンパク質。プリオンは、正常な細胞プリオンタンパク質（ＰｒＰＣ）を補充することにより複製することができ、及び、それから疾患発生アイソフォーム（ＰｒＰＳｃ）への変換を刺激することができる。
「ＰｒＰＣ」：機能が不明なＧＰＩアンカー型糖タンパク質であり、正常な、非感染形態のプリオンタンパク質を構成する。ＰｒＰＳｃに変換することによって、病原性になる。ＮＭＲ研究により、ＰｒＰＣの三次構造が、α−ヘリックスに富んでいることが示されている。
「ＰｒＰＳｃ」：プリオンの、プロテアーゼ耐性で不溶性の形態であり、ＰｒＰＣをＰｒＰＳｃに変換することにより生じる。脳内におけるＰｒＰＳｃの蓄積は、プリオン病の特徴であるアミロイド斑を形成する。ＰｒＰＳｃの三次構造モデルは、βシートに富む構造を想定する。
【００２６】
プリオンは、世界中で哺乳動物に神経変性障害を引き起こしている。最もよく知られている障害は、ヒトにおけるクロイツフェルト−ヤーコプ病、ウシ海綿状脳症（ＢＳＥ）、及びヒツジにおけるスクラピーである。プリオン病の分子ベース及び細胞ベースの理解においては有意な進歩がなされてきたが、これらの努力は、未だに有望な治療的処理をもたらしていない。畜牛からのＢＳＥプリオンによって発生したと考えられるヒトにおける新たな変異型ＣＪＤ（ｖＣＪＤ）が、５０件以上も発生していることは、有効な治療法の開発の緊急性を高めている。
【００２７】
第１の観点として、本発明は、プリオンによって生じる神経変性障害の治療に対する治療特性を有する有機溶媒ＤＭＳＯを活性成分として含み、且つ薬剤学的に許容することのできる希釈剤を含む、医薬組成物に関する。
本観点の特に好ましい態様においては、本発明の前記医薬組成物が、アミロイド斑への
ＰｒＰＳｃの増加した蓄積に関連する神経変性障害の治療に対する治療特性を有する有機溶媒ＤＭＳＯを活性成分として含み、且つ薬剤学的に許容することのできる希釈剤を含む。
別の態様では、本発明の前記医薬組成物が、脳内における過剰ＰｒＰＳｃに関連する神経変性障害の治療に対する治療特性を有する有機溶媒ＤＭＳＯを活性成分として含み、且つ薬剤学的に許容することのできる希釈剤を含む。
【００２８】
更に別の態様においては、本発明の前記医薬組成物が、神経変性障害、例えば、クロイツフェルト−ヤーコプ病に関連する障害の治療に対する治療特性を有する有機溶媒ＤＭＳＯを活性成分として含み、且つ薬剤学的に許容することのできる希釈剤を含む。また、本発明の前記医薬組成物は、ヒトにおける他のプリオン病、例えば、クールー、ゲルストマン−シュトロイスラー−シャインカー症候群（ＧＳＳ症候群）、及び／又は致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）の治療にも有効である。
【００２９】
前記医薬組成物は、それが必要な患者による１日当たり１回から６回の使用、好ましくは１日当たり２回から４回の使用、最も好ましくは１日当たり３回の使用のためのものである。Ｈｕｃｋｅｒらは、経口投与後４時間でＤＭＳＯがピーク濃度に達することを示し、そして最大血液レベルの維持に関して１日６回投与を示唆した［Ｈｕｃｋｅｒ，Ｈ．Ｂ．ら，Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ１５５，３０９−３１７（１９６７）］。
【００３０】
本発明の更に別の態様においては、本発明の前記医薬組成物が、投与量当たり約０．１ｇ〜約３０ｇ、好ましくは約１ｇ〜１５ｇ、最も好ましくは約２．５ｇ〜約７．５ｇ、及び特には５．０ｇの活性成分の投与量を含む。前記医薬組成物中のＤＭＳＯの濃度は、約１％（ｗ／ｖ）〜約１００％（ｗ／ｖ）、好ましくは約５％〜約５０％（ｗ／ｖ）、そして最も好ましくは２０％（ｗ／ｖ）である。
【００３１】
好ましい希釈剤は水であるが、例えばフルーツジュースなどの別の水性希釈剤も、本発明において意図されている。
前記医薬組成物に対する同様の添加剤としては、受容者に対して無害な濃度の尿素及びエタノールを挙げることができる。尿素及びエタノールは、ＤＭＳＯ摂取の結果生じる望ましくない悪い口臭及び悪い味を軽減する有利な特性を有する。
【００３２】
許容することのできる担体、賦形剤、又は安定化剤は、使用される投与量及び濃度においては受容者に対して無毒であり、そして緩衝液、例えば、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、又は他の有機酸緩衝液；抗酸化剤、例えばアスコルビン酸；低分子量（約１０残基よりも少ない）ポリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、又はリシン；単糖類、二糖類、及び他の炭化水素、例えば、グルコース、マンノース、又はデキストリン；キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ；糖アルコール、例えば、マンニトール及びソルビトール；スラット形成［ｓｌａｔ−ｆｏｒｍｉｎｇ］対イオン、例えばナトリウム；及び／又はノニオン系界面活性剤、例えば、ツウィーン［Ｔｗｅｅｎ］、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ（商標）、又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）が含まれる。
【００３３】
本発明の医薬組成物は、投与量単位形態で調製することができる。投与量単位形態は、ＤＭＳＯを含むカプセルであることができる。この場合、カプセルが、ＤＭＳＯによって影響されない材料からなることが好ましい。また、前記投与量形態としては、徐放性装置を挙げることもできる。この組成物は、製薬技術において周知の任意の方法によって調製することができる。前記投与形態は、本質的に無毒で治療効果のない薬理学的に許容することのできる担体を含む。前記担体の例としては、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質、例えば、ヒト血清アルブミン、緩衝物質、例えば、ホスフェート、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和の植物性脂肪酸の部分的グリセリド混合物、水、塩、又は電解質、例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイダルシリカ、三珪酸マグネシウム、ポロビニルピロリドン、セルロース系物質、及びＰＥＧを挙げることができる。ＤＭＳＯの局所的形態又はゲルベース形態用の担体としては、多糖類、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース若しくはメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリアクリレート、ポリオキシエチレンブロックポリマー、及びＰＥＧを挙げることができる。全ての投与に対して、従来のデリバリー形態を適切に使用することができる。前記形態としては、例えば、マイクロカプセル、ナノカプセル、リポソーム、硬膏剤、吸入用泡状体、鼻用スプレー、舌下錠、及び徐放性調製物を挙げることができる。
【００３４】
医薬組成物の調製は、当業界で周知であり、多くの文献及び教科書に記載されている。例えば、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｇｅｎｎａｒｏ  Ａ．Ｒ．編，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ペンシルベニア州，１９９０」の中の特に第１５２１〜１７１２頁（参照により本明細書に完全に含まれる）を参照されたい。
【００３５】
第２の観点としては、本発明は、ＤＭＳＯ又は前記医薬組成物で治療する治療方法に関する。
ＤＭＳＯの治療的投与量の規模は、当然のことながら、患者の群（年齢、性別など）、病期、及び投与経路によって変化するであろう。どの場合でも、主治医
が治療的投与量を決定するであろう。
【００３６】
有効投与量のＤＭＳＯ又は前記医薬組成物を、哺乳動物、特にヒトに提供するには、適切な任意の投与経路を使用することができる。経口投与が好ましいであろうが、他の投与経路、例えば、局所的塗布又は侵襲性投与法に、治療を適応させることができる。本明細書において、用語「侵襲性」は、脳内投与、脊椎内投与、筋肉内投与、静脈内投与、腹腔内投与、皮下投与、関節内投与、滑液包内投与、又はクモ膜下腔内投与を意味するものと考えられたい。
【００３７】
治療に使用される前記ＤＭＳＯ又は本発明の医薬組成物の「有効量」は、例えば、治療目標、投与経路、及び患者の状態によって変化するであろう。従って、治療実施者は、要求されるとおりに投与量及び投与経路を変更して、最適な治療効果を得る必要があろう。典型的には、臨床医は、所望の効果を達成する投与量に達するまでＤＭＳＯを投与するであろう。全身治療用の典型的な１日の投与量は、前記要因に従って、約３ｇ〜３０ｇ以上の範囲〔ここで、ＤＭＳＯの濃度は、約１％（ｗ／ｖ）〜約１００％（ｗ／ｖ）である〕となるであろう。
【００３８】
「治療」は、治療的処理を意味する。治療が必要な対象には、臨床段階であるか前臨床段階であるかに係わらず、前記疾病又は障害に既に罹病している対象が含まれる。
治療の対象となる「哺乳動物」には、哺乳動物に分類される任意の動物、例えば、ヒト、家畜（ｄｏｍｅｓｔｉｃ  ａｎｄ  ｆａｒｍ  ａｎｉｍａｌ）、動物園の動物、スポーツの動物、又はペットの動物、例えば、イヌ、ウマ、ネコ、雌ウシなどが含まれる。前記哺乳動物は、好ましくはヒトである。
或る特定の態様では、本発明方法によって治療される哺乳動物が、プリオンによって生じる神経変性疾患の結果の痴呆又は共調欠如に罹病している。
【００３９】
本発明の別の観点は、プリオンによって生じる神経変性障害、特にクロイツフェルト−ヤーコプ病の治療におけるＤＭＳＯの使用である。
別の態様においては、本発明は、アミロイド斑へのＰｒＰＳｃの増加した蓄積に関連する神経変性障害、特に、脳内における過剰ＰｒＰＳｃに関連する神経変性障害の治療用医薬組成物の調製におけるＤＭＳＯの使用である。
【００４０】
前記で開示及び説明した本発明は、本明細書に記載の特定の態様、処理工程、及び材料に限定されるものではなく、これらの処理工程及び材料を若干変化させることができるものと理解されたい。また、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲及びその均等物によってのみ制限されるものであり、本明細書で使用されている専門用語は、特定の態様の説明の目的で使用されるものであり、制限されることを意図するものでないことも理解されたい。
【００４１】
本明細書及び添付の特許請求の範囲において、単数形の「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」には、特に明記しない限り複数の意味も含まれることに注意する必要がある。
本明細書及び続いての特許請求の範囲を通して、特に文脈が必要としない限り、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、及びその変形である「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」及び「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、規定された単独の整数若しくは工程、あるいは一群の整数若しくは工程を包含することを意味し、任意の他の単独の整数若しくは工程、あるいは一群の整数若しくは工程の排除を意味するものではないことが理解されよう。
【００４２】
以下の実施例は、本発明の各観点の実施において、本発明者が使用した技術の典型例である。これらの技術が本発明の実施に対する好ましい態様の説明であるのに対し、当業者は、本開示に照らして、本発明の精神及び意図される範囲から逸脱することなく多くの変形を実施することができることに留意されたい。
【００４３】
《実施例》
実験手順
〈脳ホモジェネート〉
ホモジェナイジング緩衝液（１０ｍＭトリスＨＣｌ，ｐＨ７．５，３００ｍＭスクロース）１０容量中で、脳をホモジェナイズした。遠心分離（２０００ｒｐｍ，１５分，４℃）した後に、上清を回収し、そして冷凍（−８０℃）した。これらの脳ホモジェネートから細胞膜を生成するために、その上清をホモジェナイジング緩衝液で１：４０に希釈し、次いで遠心分離（２００００ｒｐｍ，３０分間，４℃）した。そのペレットを低張溶液（１０ｍＭトリスＨＣｌ，ｐＨ７．５）４０ｍＬ中に再懸濁し、そして再び遠心分離（２００００ｒｐｍ，３０分間，４℃）した。最後の遠心分離からのペレット（細胞膜のみからなる）を、低張緩衝液中に再懸濁し、そして冷凍（−８０℃）した。
【００４４】
〈接種及びスクラピー診断〉
ハムスターに、サンプル５０μＬ（１％ＢＳＡ／ＰＢＳ溶液中に１：１０希釈した脳細胞膜５μＬ）を、脳内的に又は腹腔内的に接種した。接種後、スクラピー関連症状に関して毎日動物を調べた。Ｐｒｕｓｉｎｅｒら［Ｐｒｕｓｉｎｅｒ，Ｓら．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ１９（２１），４８８３−４８９１（１９８０）］に従って、インキュベーション時間（日数）から、感染価を計算した。或るアッセイでは、前記のとおり、飲み水を介して化合物を投与した。この溶媒は、急速にゴム様に溶解するので、ＤＭＳＯ治療された動物用の水瓶は、光保護され且つコルクで栓されたガラス瓶であった［Ｏ'Ｄｗｙｅｒ，Ｐ．Ｊ．ら，Ｃａｎｃｅｒ６２（５），９４４−９４８（１９８８）］。毎日水を交換した。前記疾病の臨床的徴候に対して、毎日、動物を監視した。
【００４５】
〈ウエスタンブロッティング〉
「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｇ−Ａ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｍａｎｕａｌ  ｂｙ  Ｓａｍｂｒｏｃｋら，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，第２版，１９８９」に記載の従来法で、ウエスタンブロッティングを実施した。
【００４６】
〈患者治療のためのプロトコル〉
二回蒸留水（２０ｇ／１００ｍＬ）中にＤＭＳＯを溶解した。この溶液２５ｍＬを、１日３回患者に摂取させた。前記ＤＭＳＯ溶液は、光保護された気密の容器中で保存した。前記溶液がプラスチックに露出しないように注意を払った。前記溶液は、使用前に充分撹拌した。
前記患者の肝機能、腎機能、及び眼の機能を６月ごとに監視することが好ましい。
【００４７】
《実施例１：スクラピー感染用モデルとしてのシリアンハムスター》
齧歯類におけるプリオン病用実験モデルは、ヒト及び動物の数種の致死性海綿状神経変性疾患のプロトタイプである[Ｐｒｕｓｉｎｅｒ，Ｓ．Ｂ．ら，Ａｎｎ  Ｎｅｕｒｏｌ１１（４），３５３−８（１９８２）]。従って、スクラピー感染ハムスターモデルを用いて、前記疾病の感染率及び脳内ＰｒＰＳｃレベルにおけるＤＭＳＯの効果を試験した。
脳内（ＩＣ）又は腹腔内（ＩＰ）スクラピー感染シリアンハムスターに、ＤＭＳＯを投与した。飲み水中に溶解した７．５％（ｗ／ｖ）ＤＭＳＯによる治療を、種々の時間にわたって実施した。水は自由に摂取させた。
【００４８】
〈ＤＭＳＯで治療されたＩＣ接種動物におけるスクラピー感染性〉
ＩＣ感染動物を５つの群に分けた。各群は、以下の治療プランの１つに従ってＤＭＳＯを受けた：対照（ＤＭＳＯ無し），０ｄｐｉ（days post-infection：感染後日数）から疾病（０〜終末）；０から１４ｄｐｉ（０〜１４）；１４ｄｐｉから疾病（１４〜終末）；又は５５ｄｐｉから疾病（５５〜終末）。結果を、表１及び図２に記載する。
【００４９】
《表１：経口ＤＭＳＯ治療は、ＩＣスクラピー感染ハムスターの寿命を延ばすことができる》
種々の治療プランでＤＭＳＯ治療した動物における感染率を、対照非治療動物と比較した結果の概要。対数目盛に従って感染率を表示する［Ｐｒｕｓｉｎｅｒ，Ｓ．Ｂ．ら，（１９８２），前出］。より高い値が、急性感染率を表す。
【表１】
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【００５０】
接種から神経系機能不全の臨床的徴候の発症までの時間として規定される疾病までのインキュベーション時間の測定値を、確立された数式［Ｐｒｕｓｉｎｅｒ，Ｓ．Ｂ．ら，Ａｄｖ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ１３４，３８５−９９（１９８１）］を介して力価に変換した。更なる統計学的分析を、一元配置分散分析（Ａｎｏｖａ）及びノンパラメトリック・クラスカル・ワリス検定によって実施し、続いて対照群に対して全ての群を比較した（Ｄｕｎｎの方法）。
【００５１】
治療プラン０〜終末又は１４〜終末の群と対照群とを比較した場合に、疾病までのインキュベーション時間に、統計学的に有意な増加が認められた。対照的に、０〜１４群は、有意な有害効果を示した。５５ｄｐｉ〜終末の間ＤＭＳＯ治療した動物については、対照群との統計学的有意差が観測されなかった。
【００５２】
〈ＤＭＳＯで治療されたＩＰ接種動物におけるスクラピー感染率〉
前記疾病の活性部位が位置する脳に病原物質が直接接種されることはないので、腹腔内接種法は、末梢感染をより良好にシミュレートする。腹腔内に代えて、接種が腹膜中になされると、感染物質は、そこから脳への経路を探さねばならない。
【００５３】
この方法を用いると、対数様式で感染価を計算するために開発された「インキュベーション時間アッセイ」法を、ＩＣ接種された動物の結果［Ｐｒｕｓｉｎｅｒ，Ｓ．Ｂ．ら（１９８１）前出］に対して使用できるようには、使用することができない。従って、この方法における感染価は、疾病インキュベーションの日数によって表される。
【００５４】
ＩＰ感染した動物を４つの群に分けた。各群は、以下の治療プランの１つに従ってＤＭＳＯを受けた：対照（ＤＭＳＯ無し），０ｄｐｉから疾病（０〜終末）；２８ｄｐｉから疾病（２８〜終末）；又は５５ｄｐｉから疾病（５５〜終末）。これらの結果を、表２及び図３にまとめる。
【００５５】
《表２：ＩＰスクラピー感染ハムスターに対する経口ＤＭＳＯ治療は、感染率を減少させる》
種々の治療プランでＤＭＳＯ治療した動物における感染率を、対照非治療動物と比較した結果の概要。より高い値が、動物の増加した生存期間を表し、従ってより低い感染率を表す。
【表２】
2005501098.tif 000003
【００５６】
表２に記載の結果は、ＤＭＳＯで治療された動物に対する全体的な有利な効果を表す。このモデル系において、５５ｄｐｉから先しか治療していない動物が、最も顕著な長寿を示したことは、興味深い発見である。「０〜終末」群及び「２８〜終末」群に対しては、この効果が限界であった。これらの結果は、抗疾病作用とＤＭＳＯの不利な作用、例えば、体重減少との競合によって説明することができる。前記ＩＣモデルが、疾病の比較的遅い病期で治療された動物に対して有意な効果を示さなかったので、５５ｄｐｉより遅く治療を開始させなかった。前記ＩＣモデルに記載のとおりに統計学的分析を実施した。全ての群が、対照からの有意な分散度［Ｐ＜０．０５］を示した。
【００５７】
《実施例２：ＤＭＳＯは脳内におけるＰｒＰＳｃ蓄積を遅らせる》
疾病インキュベーションの間にＤＭＳＯ治療したハムスター及び治療していないハムスターの脳におけるＰｒＰＳｃの蓄積を比較するために、ＩＣ接種した動物から収集した脳由来のサンプルをイムノブロッティングした。脳全体のホモジェネートを使用したので、脳の異なる領域間におけるＰｒＰＳｃの分布の差違を扱うことができなかった。治療していない動物からのサンプルを、ＤＭＳＯ治療した「１４〜終末」群と比較した。前記サンプルは、６０、９０、及び１１０ｄｐｉの時点で動物を安楽死させてから収集した。非治療動物の最大寿命が９０ｄｐｉであったので、遅い方の時点は、ＤＭＳＯ治療ハムスターに対してのみ実施可能であった。
【００５８】
興味深いことに、疾病の最終病期における非治療動物由来のサンプルは、１１０ｄｐｉにおけるＤＭＳＯ治療動物由来のサンプルに等しいＰｒＰＳｃ量を示した。更に、９０ｄｐｉにおける非治療動物由来のサンプルは、９０ｄｐｉにおける（すなわち、同時に殺された）ＤＭＳＯ治療動物からのバンドよりも強度が約１０倍高いバンドを示した（図４ａのバンドと図４ｂのバンドとを比較されたい）。
【００５９】
脳内における両方のＰｒＰアイソフォームの量の差は、６０ｄｐｉの時点で殺された動物由来のサンプルにおいて、既に明白である。この段階では、治療サンプルと非治療サンプルとの比率は、１００倍である。この発見は、より速い時点における非治療スクラピー罹病動物中のＰｒＰアイソフォーム量は、９０〜１１０ｄｐｉにおけるＤＭＳＯ治療動物のＰｒＰアイソフォーム量と同じであることを示している（図５）。
【００６０】
《実施例３：ＤＭＳＯによる末期的疾患患者の治療》
この節に記載の全ケースは、エルサレムにあるハダッサ病院の神経内科に来た患者である。これらの患者は、ＣＪＤと診断され、ＤＭＳＯによる治療を受けた。前記治療は、ＤＭＳＯの２０％（ｗ／ｖ）水溶液２５ｍＬを１日３回摂取することを含んでいた。ＤＭＳＯで治療されている患者の毎日の尿検査は、尿中に分泌されるＰｒＰＳｃの量の継続的な増加を示した。このことは、脳内におけるＰｒＰＳｃの凝集を予防することによって、その排泄を促進するＤＭＳＯの成果であるかもしれない。
【００６１】
〈患者Ａ〉
＊４６歳、女性、ユダヤ系リビヤ人起源。
＊家族歴：母親が、ＣＪＤと診断されてから死亡。
＊最初の症状：目眩及び歩行不安定性を、突然開始。
＊診断：この患者は、最初の前記症状から４月後に入院し、錐体路徴候を伴う小脳症候群が発見された。この患者は、最初、炎症性脱髄疾患と診断され、コルチコステロイドで治療されていた。
【００６２】
最初の前記症状から６月後に、認識衰退が進行してから２度目の入院が許可された。この際に、以下の発見、すなわち、脳脊髄液中における１４−３−３タンパク質の存在、脳生検によりＰｒＰＳｃに対する陽性組織化学反応が現れたこと、及びＰｒＰコード遺伝子のコドン２００における突然変異に対するヘテロ接合に基づいてＣＪＤと診断された。
【００６３】
最初の前記症状から７月後に、ＤＭＳＯによる治療が開始された。この病期において、患者は、小脳症候群のために車いすに制限されており、また、彼女の認識は、重篤に悪化していた。
治療から５月後において、患者は依然として生存しており、脳電図（ＥＥＧ）は、ゆっくりとした活動を示すものの実際の周期現象は示されなかった。医学的評価により、患者の揺動及び振せんが改善していること、並びにＣＪＤ患者に対して予測されるよりも悪化が遅延していること（未だに数語を話すこと、並びに彼女自身で嚥下可能であること及び腕を動かすことができることに基づく）が決定した。
【００６４】
〈患者Ｂ〉
＊４０歳、男性、ユダヤ系リビア人起源。
＊家族歴：おじ及びおばが急速進行性神経系疾患で死亡。
＊最初の症状：頭痛及び不眠症、続いて１月以内に、視覚障害、振せん、歩行不安定性。
＊診断：ＣＪＤ、脳脊髄液中における１４−３−３タンパク質の存在、及びＰｒＰコード遺伝子のコドン２００における突然変異に対する同型接合性の検出に基づく。
【００６５】
最初の前記症状から２月後にＤＭＳＯ治療を開始した。この病期においては、患者は、極わずかな認識障害、中程度の皮質視力障害、及び重篤な小脳症候群があったが、依然として歩行器の助けを借りて歩くことができた。
前記治療開始から６週間後に、吸飲性肺炎により死亡した。
医学的評価により、前記の治療の間に、前記小脳症候群は進行したが、更なる認識衰退は起こらなかったことが決定した。
【００６６】
〈患者Ｃ〉
＊５５歳、男性、ユダヤ系リビア人起源。
＊家族歴：報告されていない。
＊最初の症状：歩行不安定性、目眩、及び耳鳴り。
＊診断：この患者は、最初の症状から６月後にＣＪＤと診断された。
【００６７】
この患者は、最初の前記症状から１年後に入院した。この病期においては、患者は、寝たきりであり、話す能力が無く、重篤なミオクローヌス痙動があった。吸飲性肺炎により、急速に昏睡状態になった。
胃管を介してＤＭＳＯ治療を開始したが、治療開始後３日目に敗血症により死亡した。従って、この疾病におけるＤＭＳＯの効果は、評価することができなかった。
【図面の簡単な説明】
【００６８】
【図１】図１は、ＰｒＰＣ及びＰｒＰＳｃの模式図である。  図１（ａ）：組換えシリアンハムスターＰｒＰ（残基９０から２３１）のＮＭＲのリボン図。  図１（ｂ）：βシート構造の劇的な増加を示すＰｒＰＳｃの推定構造のモデル。
【図２】図２は、経口ＤＭＳＯ治療による、スクラピー（ＩＣ）感染ハムスターの寿命の長期化を示すグラフである。経口ＤＭＳＯ治療は、スクラピー（ＩＣ）感染ハムスターの寿命を長期化することができる。  感染率を対数目盛上に示す。より高い値は、急性感染率を示す。略号：Ｉｎｏｃｕ．＝接種，ｃｏｎｔ．＝対照。
【図３】図３は、経口ＤＭＳＯ治療による、スクラピー（ＩＰ）感染ハムスターの寿命の長期化を示すグラフである。経口ＤＭＳＯ治療は、スクラピー（ＩＰ）感染ハムスターの寿命を長期化することができる。  感染率を均等目盛（ｄｐｉ）上に示す。より高い値は、長期化した動物寿命、従ってより低い感染率を示す。略号：Ｉｎｆｅｃ．＝感染価，ｃｏｎｔ．＝対照，ｔｒｅａｔ．＝治療。
【図４】図４は、実施例２に記載のウエスタンブロッティングの結果を示す写真である。ＤＭＳＯ治療されたスクラピー感染ハムスターにおける、より低いＰｒＰＳｃレベル。  異なるＤＭＳＯ治療群からのスクラピーハムスターからの脳ホモジェネートを、プロテイナーゼＫで処理した後に、ウエスタンブロッティングした。そのバンドの強さに従って、ＰｒＰＳｃ濃度を概算した。  図４（ａ）：：レーン１＝９０ｄｐｉにおいて収集した非治療動物からのサンプル；レーン２及び３＝それぞれ、レーン１からのサンプルの１０倍及び１００倍希釈を表す。  図４（ｂ）：レーン１＝１１０ｄｐｉにおいて収集したＤＭＳＯ治療動物からのサンプル；レーン２＝９０ｄｐｉにおいて収集したＤＭＳＯ治療動物からのサンプル；レーン３及び４＝それぞれ１０倍及び１００倍に希釈したレーン２からのサンプル。  ９０ｄｐｉにおける非治療動物からのサンプル（ａ，第１レーン）は、１１０ｄｐｉにおけるＤＭＳＯ治療動物からのサンプル（ｂ，第１レーン）と同じ程度の強度を示す。９０ｄｐｉにおいては、非治療動物からのサンプルは、ＤＭＳＯ治療動物からのサンプルよりも約１０倍のＰｒＰＳｃを示した（図４ａと４ｂのレーン２を比較）。
【図５】図５は、図５（ａ）と図５（ｂ）との比較による、ハムスター脳ホモジェネートから調製したウエスタンブロットである。  図５（ａ）：６０ｄｐｉでの非治療動物からのサンプル：無希釈、１０倍希釈、及び１００倍希釈（それぞれ、レーン１、２、及び３）。  図５（ｂ）：３時点のＤＭＳＯ治療動物（６０、９０、及び１１０ｄｐｉ：それぞれ、レーン１、レーン２、及びレーン３）。  ６０ｄｐｉからのサンプルの間では、約１００倍の差が明らかである（図５ａ及び図５ｂのレーン１を比較）。６０ｄｐｉでの非治療動物からのサンプル及び１１０ｄｐｉでのＤＭＳＯ治療動物からのサンプルにおいては、同様のＰｒＰ濃度である（図５ａのレーン１と図５ｂのレーン３とを比較）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【手続補正書】
【提出日】平成15年8月11日(2003.8.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
プリオンにより生じる神経変性障害の進行の遅延、及び／又は臨床症状の発症の遅延、及び／又は臨床症状の治療におけるＤＭＳＯの使用であって、前記障害が、ＣＪＤ、ｖＣＪＤ、クールー、ＧＳＳ症候群、及びＦＦＩのいずれか１つ、特にクロイツフェルト−ヤーコプ病であり、ここで、前記ＤＭＳＯが経口的に投与される、前記使用。
【請求項２】
プリオンにより生じる進行性神経変性障害に罹病している患者での尿によるＰｒＰＳｃの排泄の促進及び／又は脳内でのＰｒＰＳｃの蓄積の予防における、ＤＭＳＯの使用。
【請求項３】
プリオンにより生じる進行性神経変性障害に罹病している患者での尿によるＰｒＰＳｃの排泄を促進し、及び／又は脳内でのＰｒＰＳｃの蓄積を予防することによる、前記障害の発症の遅延又は緩和における、ＤＭＳＯの使用。
【請求項４】
前記神経変性障害が、クロイツフェルト−ヤーコプ病（ＣＪＤ）、変異型ＣＪＤ（ｖＣＪＤ）、クールー、ゲルストマン−シュトロイスラー−シャインカー症候群（ＧＳＳ）、及び致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）のいずれか１つ、特にクロイツフェルト−ヤーコプ病である、請求項２及び３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項５】
活性成分としてＤＭＳＯを含み、更に場合により、薬剤学的に許容することのできる添加剤及び／又は希釈剤を含み、プリオンにより生じる神経変性障害の進行の遅延、及び／又は臨床症状の発症の遅延、及び／又は臨床症状の治療のための医薬組成物（ここで、前記ＤＭＳＯは、経口的に投与される）の調製におけるＤＭＳＯの使用。
【請求項６】
前記神経変性障害が、クロイツフェルト−ヤーコプ病（ＣＪＤ）、変異型ＣＪＤ（ｖＣＪＤ）、クールー、ゲルストマン−シュトロイスラー−シャインカー症候群（ＧＳＳ）、及び致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）のいずれか１つ、特にクロイツフェルト−ヤーコプ病である、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
前記医薬組成物が、ＤＭＳＯの水溶液の形態である、請求項５及び６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８】
前記医薬組成物中のＤＭＳＯの濃度が、約１％（ｗ／ｖ）〜約１００％（ｗ／ｖ）である、請求項７に記載の使用。
【請求項９】
ＤＭＳＯの前記濃度が、約５％（ｗ／ｖ）〜約５０％（ｗ／ｖ）である、請求項８に記載の使用。
【請求項１０】
ＤＭＳＯの前記濃度が、２０％（ｗ／ｖ）である、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
前記医薬組成物が、１日当たり１〜６回投与用である、請求項５〜１０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１２】
前記医薬組成物が、１日当たり２〜４回投与用である、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
前記医薬組成物が、１日当たり３回投与用である、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
患者１人当たりの１日のＤＭＳＯ投与量が約０．２ｇ／ｋｇである、請求項６に記載の使用。
【請求項１５】
患者１人当たりの１日のＤＭＳＯ投与量が約０．１ｇ〜約３０ｇである、請求項６に記載の使用。
【請求項１６】
患者１人当たりの１日のＤＭＳＯ投与量が約１ｇ〜１５ｇである、請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
治療有効量のＤＭＳＯ又は治療有効量の請求項５〜１６のいずれか一項に記載の医薬組成物をＣＪＤ患者に経口的に投与すること含む、ＣＪＤの進行を遅延し、及び／又は臨床症状の発症を遅延し、及び／又は臨床症状を治療する方法。
【請求項１８】
前記患者に、ＤＭＳＯを１日当たり約３ｇ〜約３０ｇ、好ましくは１５ｇ投与することを含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
プリオンにより生じる進行性神経変性障害に罹病している患者での尿によるＰｒＰＳｃの排泄の促進、及び脳内でのＰｒＰＳｃの蓄積の予防の方法であって、治療有効量のＤＭＳＯ又は治療有効量の請求項５〜１６のいずれか一項に記載の医薬組成物を前記患者に経口的に投与すること含む、前記方法。
【請求項２０】
プリオンにより生じる進行性神経変性障害に罹病している患者での尿によるＰｒＰＳｃの排泄の促進、及び脳内でのＰｒＰＳｃの蓄積の予防の方法であって、治療有効量のＤＭＳＯ又は治療有効量の請求項５〜１６のいずれか一項に記載の医薬組成物を前記患者に経口的に投与することによって、前記障害の発症を遅延又は緩和する、前記方法。
【請求項２１】
前記神経変性障害が、クロイツフェルト−ヤーコプ病（ＣＪＤ）、変異型ＣＪＤ（ｖＣＪＤ）、クールー、ゲルストマン−シュトロイスラー−シャインカー症候群（ＧＳＳ）、及び致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）のいずれか１つ、特にクロイツフェルト−ヤーコプ病である、請求項１８及び１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記投与が経口経路を介する、請求項１８〜２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記患者にＤＭＳＯを１日当たり約３ｇ〜約３０ｇ、好ましくは１５ｇ投与することを含む、請求項１８〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【国際調査報告】
2005501098.tif 000044
2005501098.tif 000045