(57)【要約】Ｎ−[１−オキソ−(所望により２−アザ)−２−アルキル−３−(カルボキシルまたはチオールまたはヒドロキシアミノカルボニルまたはＮ−ヒドロキシホルムアミド)−プロピル]−(アリールまたはヘテロアリール)−アザシクロ４〜７アルカンまたはチアザシクロ４〜７アルカン、その塩またはプロドラッグは、例えば細菌感染の処置のようなペプチジルデホルミラーゼインヒビターによる処置に反応性の障害の処置または予防において、興味深い特性を有する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｎ−[１−オキソ−(所望により２−アザ)−２−アルキル−３−(カルボキシルまたはチオールまたはヒドロキシアミノカルボニルまたはＮ−ヒドロキシホルムアミド)−プロピル]−(アリールまたはヘテロアリール)−アザシクロ４〜７アルカンまたはチアザシクロ４〜７アルカン、その塩またはそのプロドラッグ。
【請求項２】
式(Ｉ)：
【化１】
2005501020.tif 000020
〔式中、
Ｒ１は、環の窒素のα−またはβ−位のいずれかに結合した、アリールまたはヘテロアリールであり；
Ｒ２は、水素、ハロゲンまたはヒドロキシであり；
Ｒ３は、水素、ハロゲン、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０ヘテロアルキルであるか、または(Ｒ２およびＲ３)は一体となって、Ｃ４〜７シクロアルキルを形成し(ただしＲ３がハロゲンである場合には、Ｒ２はヒドロキシでなくいものとする。)；
Ｘは、−ＣＨ２−またはＳであり；
Ｗは、ＮＲ５またはＣＲ４Ｒ５であり、ここでＲ４は水素、ハロゲン、Ｃ１〜１０アルキル、またはＣ１〜１０ヘテロアルキルであり、そしてＲ５はＣ１〜１０アルキルであるか、あるいは(Ｒ４およびＲ５)は一体となってＣ４〜７シクロアルキルを形成し(ただしＷがＮＲ５である場合には、Ｒ２およびＲ３は水素、Ｃ１〜１０アルキルまたはヘテロアルキルであるものとする。)；
Ｙは、−ＣＯＯＨ、−ＳＨ、−Ｎ(ＯＨ)−ＣＨＯまたは−ＣＯ−ＮＨ(ＯＨ)であり(ただしＹが−Ｎ(ＯＨ)ＣＨＯまたは−ＳＨである場合には、Ｒ２は水素であり、そしてＲ３は水素、Ｃ１〜１０アルキルまたはＣ１〜１０ヘテロアルキルであるものとする。)、
ｎは、０〜３である(ただしｎが０である場合には、Ｘは−ＣＨ２−である。)。〕
で示される請求項１に記載の化合物；あるいは
その塩またはそのプロドラッグ。
【請求項３】
Ｙが−ＣＯ−ＮＨ(ＯＨ)または−Ｎ(ＯＨ)ＣＨＯである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
ＷがＣＲ４Ｒ５であり、Ｒ４は水素であり、そしてＲ５はＣ１〜１０アルキルである、請求項２または３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｘが−ＣＨ２−であり、そしてｎは１である、請求項２〜４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２がヒドロキシ、フッ素または水素であり、そしてＲ３は水素である、請求項２〜５のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１がヘテロアリール、好ましくはオキサゾリル、メチルオキサゾリルまたはピリジニルである、請求項２〜６のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのプロドラッグを含んでなる、医薬組成物。
【請求項９】
医薬としての使用のための、請求項１〜７のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのプロドラッグ。
【請求項１０】
対象における感染性障害の処置および／または予防方法であって、該対象に有効量の請求項１または２に記載の化合物、薬学的に許容されるその塩またはそのプロドラッグを投与することを含んでなる方法。
【請求項１１】
細胞培養培地の細菌汚染を阻止する方法であって、有効量の請求項１〜７のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩を細胞培養培地中に組込むことを含む方法。
【請求項１２】
細菌阻害量の請求項１〜７のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容されるその塩を含んでなる細胞培養培地。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、新規ピロリジン二環性化合物、医薬としてのそれらの使用およびそれらを含む医薬組成物の使用を目的とする。
【０００２】
宿主生物体における微生物感染の処置は、可能な限り宿主へ与える危害は少なく微生物を殺すのには有効な手段を必要とする。したがって、病原性微生物に特有な特性をターゲッティングする薬剤が、処置にとっては望ましい。ペニシリンは、かかる薬剤の非常に有名な例である。ペニシリンは、細菌細胞壁の生合成を阻害することにより作用する。哺乳類細胞は生存するうえで細胞壁を必要とはしないため、細菌感染したヒトへペニシリンを投与しても、ヒト細胞を殺すこと無く細菌を殺すことができる。
【０００３】
しかしながら、抗生物質および抗菌物質を使用すると、これらの薬剤に対する耐性を高めることにもなる。細菌が、より古く、より広範に使用されている抗菌物質に対して耐性をつけると、微生物感染に苦しむヒトおよび非ヒト動物に有効な処置を施すために、新規抗菌物質を開発しなければならない。
【０００４】
ペプチジルデホルミラーゼ(ＰＤＦ)は、原核生物体、例えば細菌から見出されるメタロペプチダーゼである。原核生物体におけるタンパク質合成は、Ｎ−ホルミルメチオニン(ｆＭｅｔ)から始まる。タンパク質合成開始後、ホルミル基は、酵素ＰＤＦにより除去される；この活性は、タンパク質の成熟には不可欠である。ＰＤＦが細菌の成長に必要とされることは立証されている(Chang et al., J. Bacteriol., Vol. 171, pp. 4071-4072 (1989); Meinnel et al., J. Bacteriol., Vol. 176, No. 23, pp. 7387-7390 (1994); Mazel et al., EMBO J., Vol. 13, No. 4, pp. 914-923 (1994)参照)。真核生物体におけるタンパク質合成は開始に関してｆＭｅｔに依存していないので、ＰＤＦを阻害する薬剤は、新規抗微生物および抗菌薬剤の開発についての魅力的な候補である。病原性原核生物を含む原核生物体は、Balows, A., H.G. Truper, M. Dworkin, W. Harder, and K.-H. Schleifer (eds.), The Prokaryotes, 2nd ed., New York: Springer-Verlag, 1992; および Holt, J.G. (editor-in-chief). Bergey's Manual of Systematic Bacteriology, Vols. 1-4, Baltimore: Williams & Wilkins (1982, 1986, 1989)に報告されている。
【０００５】
ＰＤＦは、メタロプロテイナーゼスーパーファミリーの一部である。ＰＤＦはメタロプロテイナーゼを特徴づける特性の多くを明白に共有しているが、幾つかの重要な点が該スーパーファミリーの他の構成員とは異なる。第一に、活性酵素における金属イオンは、より一般的に見られる亜鉛イオンの代わりに、Ｆｅ(ＩＩ)、またはおそらくは別の二価カチオン金属であると思われる(Rajagopalan et al., J. Am. Chem. Soc., Vol. 119, pp. 12418-12419 (1997)参照)。第二に、二価イオンは、触媒作用だけでなく、タンパク質の構造完全性においても重要な役割を果たすと思われる。第三に、二価イオンの第３配位子は、他のメタロプロテイナーゼ類のように、ヒスチジンまたはグルタメートではなく、システインであり、ＨＥＸＸＨモチーフのＣ−末端側に位置するのではなく、遠くアミノ酸配列に沿ってモチーフに対しＮ−末端に位置する。最後に、溶解構造は、他の始原型メタロプロテイナーゼ類と比べるとＰＤＦの二次および三次構造において顕著な差異を示す(Meinnel et al., J. Mol. Biol., Vol. 262, pp. 375-386 (1996)参照)。エシェリキア・コリ(E.coli)、バシラス・ステアロテルモフィルス(Bacillus stearothermophilus)、およびテルムス・テルモフィルス(Thermus thermophilus)からのＰＤＦは、既に特性確認されている(Meinnel et al., J. Mol. Biol., Vol. 267, pp. 749-761 (1997)参照)。Meinnel et al.が試験した酵素は、二価イオンとして亜鉛イオンを含んでおり、上記で概説した構造的特性は亜鉛含有タンパク質から得られた。タンパク質の構造は、また、ＮＭＲによっても測定された(O'Connell et al., J. Biomol., NMR Vol. 13, No. 4, pp. 311-324 (1999)参照)。
【０００６】
メタロプロテイナーゼ類は、正常な代謝の多くの局面にとって重大な存在である。マトリックスメタロプロテイナーゼ(ＭＭＰ)として知られている種類は、組織リモデリング、例えば細胞外マトリックスの分解に関与する。これらの酵素は、正常または有益な生物学的事象、例えば妊娠中における黄体形成(Liu et al., Endocrinology, Vol. 140, No. 11, pp. 5330-5338 (1999)参照)、創傷治癒(Yamagiwa et al., Bone, Vol. 25, No. 2, pp. 197-203 (1999)参照)、および健康な子どもにおける骨の成長(Bord et al., Bone, Vol. 23, No. 1, pp. 7-12 (1998)参照)において、ある一定の役割を果たすと考えられている。メタロプロテイナーゼに関わる疾患は、幾つかの病気、例えば癌、関節炎および自己免疫疾患に関与している。
【０００７】
正常な生理学的プロセスにおけるＭＭＰの重要さ故に、ＭＭＰをあまり阻害せずに、原核生物にのみ存在するメタロプロテイナーゼ、ＰＤＦを阻害する薬剤の開発は好ましいことである。別法として、ＰＤＦ阻害の治療上の利益がＭＭＰ阻害による副作用の危険より重要である場合、ＭＭＰをも阻害するＰＤＦインヒビターは有用であり得る。
【０００８】
広く多様な化合物がＭＭＰおよび他のメタロプロテイナーゼの候補インヒビターとして開発され、また多大な努力がこれらの化合物および関連化合物についての合成方法に向けられている(Izquierdo-Martin et al., J. Am. Chem. Soc., Vol. 114, pp. 325-331 (1992); Cushman et al., Chapter 5 "Specific Inhibitors of Zinc Metallopeptidases", Topics in Molecular Pharmacology, Burgen & Roberts, eds. (1981); Mohler et al., Nature, Vol. 370, pp. 218-220 (1994); Gearing et al., Nature, Vol. 370, pp. 555-557 (1994); McGeehan et al., Nature, Vol. 370, pp. 558-561 (1994); 米国特許第４０５２５１１、４３０３６６２、４３１１７０５、４３２１３８３、４５９９３６１、４８０４６７６、５１２８３４６、５２５６６５７、５２６８３８４、５４４７９２９、５４５３４２３、５５５２４１９、５６１４６２５、５６４３９０８、５７１２３００および５８６９５１８号、欧州特許公開ＥＰ２３６８７２、ＥＰ２７４４５３、ＥＰ３３４２４４、ＥＰ４２３９４３、ＥＰ４８９５７７、ＥＰ４８９５７９、ＥＰ４９７１９２、ＥＰ５７４７５８、および国際ＰＣＴ特許出願公開第ＷＯ９０／０５７１６、ＷＯ９０／０５７１９、ＷＯ９１／０２７１６、ＷＯ９２／１３８３１、ＷＯ９２／２２５２３、ＷＯ９３／０９０９０、ＷＯ９３／０９０９７、ＷＯ９３／２００４７、ＷＯ９３／２４４４９、ＷＯ９３／２４４７５、ＷＯ９４／０２４４６、ＷＯ９４／０２４４７、ＷＯ９４／２１６１２、ＷＯ９４／２５４３４、ＷＯ９４／２５４３５、ＷＯ９５／３３７３１、ＷＯ９６／２５１５６、ＷＯ９６／２６９１８、ＷＯ９７／３０７０７、ＷＯ９７／４９６７４、ＷＯ９８／５５４４９およびＷＯ９９／０２５１０号参照)。
【０００９】
ＰＤＦインヒビターに関する研究は、ＭＭＰインヒビターに関する場合ほど十分なものではない。Ｎ−ホルミルヒドロキシルアミン誘導体は、国際特許出願ＷＯ９９／３９７０４に記載されている。ＰＤＦのペプチドアルデヒドインヒビターは、Durand et al., Arch. Biochem. Biophys., Vol. 367, No. 2, pp. 297-302 (1999)に報告されている。ＰＤＦインヒビター(Ｓ)−２−Ｏ−(Ｈ−ホスホノキシ)−Ｌ−カプロイル−Ｌ−ロイシル−ｐ−ニトロアニリドは、Hao et al., Biochem., Vol. 38, pp. 4712-4719 (1999)に記載されており、ＰＤＦのペプチジルＨ−ホスホネートインヒビターは、Hu et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., Vol. 8, pp. 2479-2482 (1998)で検討されている。ホルミル化ペプチドおよびプソイドペプチドは、Meinnel et al., Biochem., Vol. 38, No. 1, pp. 4288-4295 (1999)にＰＤＦのインヒビターとして記載されている。
【００１０】
既存の抗生物質に耐性を示す細菌を処理するための新たな抗生物質の同定が重要であり、そしてＰＤＦインヒビターについて行われてきた研究が比較的少ないので、抗菌および抗微生物剤として評価および使用されるＰＤＦの新規インヒビターの開発は望ましいことである。本発明はこの要望を満たしている。
【００１１】
特に、本発明は、Ｎ−[１−オキソ−(所望により２−アザ)−２−アルキル−３−(カルボキシルまたはチオールまたはヒドロキシアミノカルボニルまたはＮ−ヒドロキシホルムアミド)−プロピル]−(アリールまたはヘテロアリール)−アザシクロ４〜７アルカンまたはチアザシクロ４〜７アルカン(本明細書において、集合的に「本発明の化合物」と称する)、その塩またはそのプロドラッグ、例えば式(Ｉ)
【化１】
2005501020.tif 000002
〔式中、
Ｒ１は、環の窒素のα−またはβ−位のいずれかに結合した、アリールまたはヘテロアリールであり；
Ｒ２は、水素、ハロゲンまたはヒドロキシであり；
Ｒ３は、水素、ハロゲン、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０ヘテロアルキルであるか、または(Ｒ２およびＲ３)は一体となって、Ｃ４〜７シクロアルキルを形成し(ただしＲ３がハロゲンである場合には、Ｒ２はヒドロキシでないものとする。)；
Ｘは、−ＣＨ２−またはＳであり；
Ｗは、ＮＲ５またはＣＲ４Ｒ５であり、ここでＲ４は水素、ハロゲン、Ｃ１〜１０アルキル、またはＣ１〜１０ヘテロアルキルであり、そしてＲ５はＣ１〜１０アルキルであるか、あるいは(Ｒ４およびＲ５)は一体となってＣ４〜７シクロアルキルを形成し(ただしＷがＮＲ５である場合には、Ｒ２およびＲ３は水素、Ｃ１〜１０アルキルまたはヘテロアルキルであるものとする。)；
Ｙは、−ＣＯＯＨ、−ＳＨ、−Ｎ(ＯＨ)−ＣＨＯまたは−ＣＯ−ＮＨ(ＯＨ)であり(ただしＹが−Ｎ(ＯＨ)ＣＨＯまたは−ＳＨである場合には、Ｒ２は水素であり、そしてＲ３は水素、Ｃ１〜１０アルキルまたはＣ１〜１０ヘテロアルキルであるものとする。)、
ｎは、０〜３である(ただしｎが０である場合には、Ｘは−ＣＨ２−である。)。〕
の化合物、その塩またはそのプロドラッグを提供する。
【００１２】
特記しない限り、本明細書において使用される下記の用語は、下記の意味を有する。
「シクロアルカン」または「シクロアルキル」なる用語は、３〜６個の環炭素原子を含む環状飽和アルキル基であり、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルである。
【００１３】
「アザシクロ４〜７アルカン」なる用語は、窒素である１つの環へテロ原子を含む。これは、ヘテロ原子を含めて、４〜７個、好ましくは５個の環原子を含む。
「チアザシクロ４〜７アルカン」なる用語は、２個のヘテロ原子、窒素および硫黄を含む。これは、ヘテロ原子を含めて、４〜７個、とりわけ５個の環原子を含む。
【００１４】
アザシクロ４〜７アルカンおよびチアザシクロ４〜７アルカンは、以下に定義するようにヘテロアリールまたはアリールにより環の窒素のα−またはβ−位のいずれかが置換されている。
【００１５】
「アルキル」なる語は、１〜１０個の炭素原子を有する直鎖、分枝状鎖および環状基を含む飽和および不飽和脂肪族基、シクロアルキル、または置換アルキルを意味し、そして好ましくは１〜７個の炭素原子、とりわけ１〜４個の炭素原子を有する低級アルキルである。アルキルの例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシルまたはｎ−ヘプチル、シクロプロピルおよびとりわけｎ−ブチルが含まれるが、これらに限定はされない。
【００１６】
「置換アルキル」なる語は、例えば、限定されるわけではないが、ハロゲン、低級アルコキシ、ヒドロキシ、メルカプト、カルボキシ、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールなどの置換基を含む１個またはそれ以上の置換基、好ましくは１〜３個の置換基により置換されたアルキル基をいう。置換アルキル基の例には、−ＣＦ３、−ＣＦ２−ＣＦ３、ヒドロキシメチル、１−または２−ヒドロキシエチル、メトキシメチル、１−または２−エトキシエチル、カルボキシメチル、１−または２−カルボキシエチル、シクロペンチルエチルなどがあるが、これらに限定はされない。
【００１７】
「アリール」または「Ａｒ」なる語は、単環(限定されるわけではないが、例えばフェニル基を含む)または多縮合環(限定されるわけではないが、例えばナフチルまたはアントリル基を含む)を有する６〜１４個の炭素原子の芳香族炭素環状基をいい、とりわけフェニルである。アリール基は、非置換であるか、または１もしくはそれ以上の置換基、好ましくは低級アルキル、ハロゲンおよび低級アルコキシを含む(これらに限定されるわけではない)１〜３の置換基で置換されていてもよい。
【００１８】
「ヘテロアリール」または「ＨｅｔＡｒ」なる用語は、４〜７員の単環式芳香族複素環または４〜７員単環式芳香族複素環およびそこに縮合したベンゼン環からなる二環をいう。ヘテロアリールは、環内に例えば、限定されるわけではないが、Ｎ、ＯおよびＳといったヘテロ原子を含む少なくとも１個のヘテロ原子、好ましくは１個または２個のヘテロ原子を有する。代表的な例は、オキサゾリル、チアゾリル、ピリジニルおよびイミダゾリル、ベンゾイミダゾリル、イソキサゾリル、ベンゾチアゾリルなどを含むが、これらに限定されるわけではない。ヘテロアリールは、非置換であるか、または限定されるわけではないが、低級アルキル、ハロ低級アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級アルコキシ、アリールを含む１もしくはそれ以上の置換基(好ましくはアリール)により置換され得る。
【００１９】
「ヘテロアルキル」なる用語は、１〜１０個の炭素原子を有する上記飽和または不飽和アルキル、およびとりわけ、基における主、分枝状または環状鎖の一部として１個またはそれ以上のヘテロ原子を含む１〜４個の炭素原子の飽和低級ヘテロアルキルをいう。ヘテロ原子は、独立して、−ＮＲ−(式中、Ｒは水素またはアルキルである)、−Ｓ−、−Ｏ−および−Ｐ−、好ましくは−ＮＲ−(式中、Ｒは水素またはアルキルである)および／または−Ｏ−からなる群から選択される。ヘテロアルキル基は、ヘテロ原子(原子価が利用可能な場合)または炭素原子が分子の残りの部分に結合され得る。ヘテロアルキル基の例には、例えば、限定されるわけではないが、−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ(ＣＨ３)−Ｓ−ＣＨ３、および−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−が含まれる。
【００２０】
ヘテロアルキル基は、非置換であるか、または限定されるわけではないが、アルキル、ハロゲン、アルコキシ、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシおよびフェニルを含む１個またはそれ以上の置換基、好ましくは１〜３個の置換基により置換され得る。基のヘテロ原子(複数も可)および炭素原子は置換され得る。また、ヘテロ原子(複数も可)は酸化形態であり得る。
【００２１】
本明細書で使用されている「アルコキシ」の語は、酸素原子に結合したＣ１〜１０アルキル、または好ましくは１〜７個の炭素原子を有する飽和低級アルコキシをいう。アルコキシ基の例には、例えばメトキシ、エトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシおよびアリルオキシのような基が含まれるが、これらに限定されない。
【００２２】
本明細書で使用されている「ハロゲン」または「ハロ」の語は、塩素、臭素、フッ素、ヨウ素をいい、とりわけフッ素である。
【００２３】
「保護基」は、以下の特性を呈する化学基をいう：１)所望の官能基と良好な収率で選択的に反応することにより、保護が望まれる計画された反応に対して安定した保護基質を与える；２)保護基質から選択的に除去可能であり、所望の官能性を生じさせ得る；および３)存在するかまたは上記の計画された反応で生成した他の官能基(複数も可)と適合し得る試薬により良好な収率で除去され得る。適切な保護基の例は、Greene et al.,“Protective Groups in Organic Synthesis”, 2nd Ed., John Wiley & Sons, Inc., NY (1991)に記載されている。好ましいアミノ保護基には、ベンジルオキシカルボニル(ＣＢｚ)、ｔ−ブチル−オキシカルボニル(Ｂｏｃ)、ｔ−ブチルジメチルシリル(ＴＢＤＭＳ)、９−フルオレニルメチル−オキシカルボニル(Ｆｍｏｃ)、または適切な光不安定性(photolabile)保護基、例えば６−ニトロベラトリルオキシカルボニル(Ｎｖｏｃ)、ニトロピペロニル、ピレニルメトキシカルボニル、ニトロベンジル、ジメチルジメトキシベンジル、５−ブロモ−７−ニトロインドリニルなどが含まれるが、これらに限定されない。好ましいヒドロキシル保護基には、Ｆｍｏｃ、ＴＢＤＭＳ、光不安定性保護基(例えばニトロベラトリルオキシメチルエーテル(Ｎｖｏｍ))、Ｍｏｍ(メトキシメチルエーテル)、およびＭｅｍ(メトキシエトキシメチルエーテル)が含まれる。特に好ましい保護基には、ＮＰＥＯＣ(４−ニトロフェネチルオキシカルボニル)およびＮＰＥＯＭ(４−ニトロフェネチルオキシ−メチルオキシカルボニル)が含まれる。
【００２４】
本発明の化合物、例えば式(Ｉ)の化合物は、光学異性体、ラセミ体またはジアステレオマー形態で存在し得るものとする。例えば、式(Ｉ)(式中、Ｒ２およびＲ３は異なる残基である。)の化合物は、不斉であり、Ｒ−またはＳ−立体配置を有し得る。本発明はすべてのエナンチオマーおよびそれらの混合物を包含するものとする。上述の不斉炭素原子を呈する出発物質に関しても類似した考察が適用される。
【００２５】
本発明の化合物、例えば式(Ｉ)の化合物は、遊離の形態または塩の形態、例えば薬学的に許容される塩の形態で存在し得る。化合物の「薬学的に許容される塩」は、親化合物(parent compound)の望ましい薬理学的活性を有し、かつ望ましくない毒素作用を分与することはない生理学的におよび薬学的に許容される塩を包含する。上記塩類には以下のものが含まれる：
【００２６】
(１)  塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などのような無機酸により形成されたか、または酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、３−(４−ヒドロキシベンゾイル)安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１,２−エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、４−トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、３−フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、第三級ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフタレンカルボン酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸などのような有機酸により形成された酸付加塩類、または
【００２７】
(２)  親化合物に存在する酸性プロトンが金属イオン、例えばアルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオンまたはアルミニウムイオンにより置換されているか、または有機塩基、例えばエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、Ｎ−メチルグルカミンなどと配位結合しているときに形成される塩類。
【００２８】
本発明の化合物、例えば式(Ｉ)の化合物は、プロドラッグとして作用し得る。「プロドラッグ」は、上記プロドラッグを哺乳動物の対象に投与したときにインビボで式(Ｉ)の活性親薬剤を放出する任意の化合物を意味する。式(Ｉ)の化合物のプロドラッグは、修飾を加えることによりインビボで開裂し、親化合物を放出させ得る形で式(Ｉ)の化合物に存在する官能基を修飾することにより製造される。プロドラッグは、式(Ｉ)[ただし、式(Ｉ)の化合物におけるヒドロキシ、アミノまたはスルフヒドリル基は、インビボで開裂されることにより、それぞれ、遊離のヒドロキシル、アミノまたはスルフヒドリル基を再生し得る基に結合している。]の化合物を含む。プロドラッグの例には、式(Ｉ)の化合物におけるヒドロキシ官能基のエステル類(例えば、酢酸、ギ酸および安息香酸誘導体)、カルバメート(例えば、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ−カルボニル)などが含まれるが、これらに限定されない。
【００２９】
本発明の化合物、例えば式(Ｉ)の化合物において、以下の意味を個々にまたは部分的に組み合わせたものが好ましい：
１.  Ｙは、ＣＯＯＨ、ＳＨ、−ＣＯ−ＮＨ(ＯＨ)または−Ｎ(ＯＨ)ＣＨＯ、好ましくは−ＣＯ−ＮＨ(ＯＨ)である。
２.  Ｘは、−ＣＨ２−である。
３.  Ｒ２は、ヒドロキシ、フッ素、または水素である。
４.  Ｒ３は、水素である。
５.  Ｗは、ＣＲ４Ｒ５であり、ここでＲ４は水素であり、そしてＲ５は水素またはＣ１〜１０アルキル、好ましくはｎ−ブチルであり；
６.  ｎは１である。
７.  Ｒ１は、フェニルまたはヘテロアリールである。
８.  Ｒ１としてのヘテロアリールは、オキサゾリル、チアゾリル、ピリジニルおよびベンズイミダゾリルである。ヘテロアリールがオキサゾリルである場合、オキサゾリルは、低級アルキル、とりわけメチルで置換されていてもよい。ヘテロアリールがチアゾリルである場合、チアゾリルは、低級アルキルおよびフェニルからなる群から選択される１もしくは２個の置換基により置換されていてもよい。好ましくは、Ｒ１は、オキサゾリルまたはメチルオキサゾリルである。
９.  Ｒ１は、好ましくは、式(Ｉ)において示されたアザシクロアルカンのα位に結合している。
【００３０】
本発明の化合物、例えば式(Ｉ)の化合物は、有機化学の分野において周知の方法にしたがって製造され得る。式Ｉの化合物は、式ＩＩ
【化２】
2005501020.tif 000003
〔式中、
Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｗおよびｎは、上で定義したとおりであり、そしてＹａはＣＯＯＨまたはその機能性誘導体である。〕
の化合物を、ヒドロキシルアミノ化剤(hydroxyl aminating agent)、例えばＮＨ２ＯＨと反応させ、そして必要な場合には、遊離の形態で得られた化合物を塩の形態に変換すること、またはその逆に変換することにより製造され得る。
【００３１】
ＹａとしてのＣＯＯＨの機能性誘導体は、例えばハロゲン化物、例えば酸クロライド、エステルまたは酸無水物である。
【００３２】
上記の反応は、当分野において既知の方法にしたがって、またはスキームＡ〜Ｋおよび以下の実施例において開示されたように、行われ得る。
【００３３】
出発物質の製造を特に記載しない限り、化合物は、既知であるか、当分野において既知の方法と同様に、または後記の実施例において開示されたように製造され得る。
【００３４】
次の略語が使用される：
ＡｃＯＨ＝酢酸
ＢｕＬｉ＝ｎ−ブチルリチウム
ＤＡＳＴ＝ジエチルアミノ硫黄トリフルオリド
ＤＣＣ＝ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＣＥ＝ジクロロエタン
ＤＣＭ＝ジクロロメタン
ＤＩＣ＝ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＡＤ＝ジイソプロピルアゾジカルボキシレート
ＤＩＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＥ＝１,２−ジメトキシエタン
ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド
ＥＤＣ＝Ｎ−(３−ジメチルアミノプロピル)−Ｎ'−エチルカルボジイミド
ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル
ＨＡＴＵ＝Ｏ−(７−アザ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロミウム ヘキサフルオロホスフェート
ＬＤＡ＝リチウムジイソプロピルアミン
ＭｅＯＨ＝メタノール
ＮａＨＭＤＳ＝ナトリウムヘキサメチルジシラジド
ＰｙＢＯＰ＝ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノホスホニウム ヘキサフルオロホスフェート
ｒｔ＝室温
ＴＥＡ＝トリエチルアミン
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
ｐ−ＴＳＡ＝ｐ−トルエンスルホン酸
ＴＭＳＣｌ＝トリメチルシリル クロライド
【００３５】
一般手順Ａ：ｎ−ヒドロキシ−３−アミノカルボニルプロピオンアミドの合成
【化３】
2005501020.tif 000004
【００３６】
工程１：ＴＨＦ中の４−(Ｓ)−ベンジルオキサゾリジン−２−オン(５６ｍｍｏｌ)(Aldrich, Milwaukee, WI)の溶液に、−７８℃にて、ヘキサン中２.５Ｍ ｎ−ＢｕＬｉ溶液(２２.４ｍｌ、５６ｍｍｏｌ)を加え、そして反応液を−７８℃で２時間撹拌する。これに、カニューレで、ＴＨＦ中の酸クロライド Ａ−１(Ｒ＝ヘキサノイル、６５ｍｍｏｌ)の−７８℃の溶液を加え、そして混合液を−７８℃で２時間撹拌し、次いで室温まで加温し、そして一夜撹拌する。次いで、反応液を水性飽和ＮＨ４Ｃｌでクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出し、乾燥し、そしてシリカゲルクロマトグラフィー(ヘキサン／ＥｔＯＡｃ)により精製すると、Ｎ−ヘキサノイル−４−(Ｓ)−ベンジルオキサゾリジン−２−オン(Ａ−２)を得る。
【００３７】
工程２：ＴＨＦ中のＮ−ヘキサノイル−４−(Ｓ)−ベンジルオキサゾリジン−２−オン Ａ−２(７.３ｍｍｏｌ)溶液に、−７８℃にて、１.０Ｍ ＮａＨＭＤＳ(８.８ｍｍｏｌ)を加え、そして反応液を−７８℃で１時間撹拌する。次いで、ＴＨＦ中のブロモ酢酸メチル(８.８ｍｍｏｌ)溶液を滴下し、そして得られた混合物を−７８℃で１時間、次いで室温で一夜撹拌する。反応液をＮＨ４Ｃｌでクエンチし、濃縮し、次いでＥｔＯＡｃ中に懸濁させ、そして０.５Ｎ ＨＣｌおよび食塩水で洗浄し、シリカゲルクロマトグラフィー(ＥｔＯＡｃ／ヘキサン)により精製すると、メチル ３−(Ｒ)−(ｎ−ブチル)−３−[４−(Ｓ)−ベンジルオキサゾリジン−２−オン−３−イルカルボニル)プロピオネート(Ａ−３)を得る。
【００３８】
工程３：ＴＨＦ／水中のメチル ３−(Ｒ)−(ｎ−ブチル)−３−[４−(Ｓ)−ベンジルオキサゾリジン−２−オン−３−イルカルボニル)−プロピオネート Ａ−３(１.４４ｍｍｏｌ)に、０℃にて、３０％Ｈ２Ｏ２(５.７６ｍｍｏｌ)および固体の水酸化リチウム(１.４４ｍｍｏｌ)を加え、そして反応液を０℃で３時間撹拌する。次いで、反応液を２.０Ｍ Ｎａ２ＳＯ３でクエンチし、濃縮し、ＥｔＯＡｃ中に懸濁させ、そして標準的な水性後処理を施す。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー(ＭｅＯＨ／ＤＣＭ)により精製すると、メチル ３−(Ｒ)−(ｎ−ブチル)−プロピオネート(Ａ−４)を得る。
【００３９】
工程４：ＤＭＦ中の一方が保護されたコハク酸、例えば、モノ−４−メチル ２−(Ｒ)−ブチルコハク酸 Ａ−４(１ｍｍｏｌ)溶液に、アミン Ａ−５(１ｍｍｏｌ)、ＤＩＥＡ(０.４ｍｌ、２.３ｍｍｏｌ)、および活性化剤(例えば、ＥＤＣ、ＰｙＢＯＰ、ＤＩＣ、ＤＣＣなど；１ｍｍｏｌ)を加える。混合物を一夜撹拌し、次いでＥｔＯＡｃで希釈し、そして水性ＨＣｌ(１Ｎ)、水、飽和ＮａＨＣＯ３、食塩水で洗浄し、次いで(Ｎａ２ＳＯ４)乾燥する。濾液を濃縮し、そしてシリカゲル(Ｍｅｒｃｋ ６０；ＥｔＯＡｃ／ヘキサン)で精製すると、３−アミノカルボニルプロピオネート Ａ−６を得る。
【００４０】
工程５：３−アミノカルボニルプロピオネート Ａ−６(０.１ｍｍｏｌ)をジオキサン(１ｍｌ)およびヒドロキシルアミン(５０％、水中、２ｍｌ)で１〜３日間処理し、次いで、分取的逆相(Ｃ１８)ＨＰＬＣにより精製すると、所望のＮ−ヒドロキシ−３−アミノカルボニルプロピオンアミド(Ａ−７)を得る。
【００４１】
一般手順Ｂ：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２(Ｓ)−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミドの合成
【００４２】
工程１：ＴＨＦ中のジイソプロピルアミン(１４ｍｌ、１００ｍｍｏｌ)の溶液に、０℃にて、ＢｕＬｉ(ヘキサン中２.５Ｍ、４０ｍｌ、１００ｍｍｏｌ)を１０分かけて加える。混合液を室温で３０分間撹拌し、そしてカニューレで、ＴＨＦ(１３０ｍｌ)中の−７８℃のリンゴ酸ジメチル Ｂ−１(７.７１ｇ、４７.６ｍｍｏｌ)の溶液に加える。混合液を２時間かけて−２０℃に加温し、次いで−７８℃に冷却する。臭化クロチル(８.１ｇ、６０ｍｍｏｌ)を加え、次いで混合液を室温まで加温し、次いで一夜撹拌する。次いで、溶液を−１０℃に冷却し、そしてＮＨ４Ｃｌ(１０％、１００ｍｌ)でクエンチする。ＴＨＦを除去し、そして残渣をＥｔＯＡｃ(２×２００ｍｌ)で抽出する。合わせた有機層をＨＣｌ(１Ｎ、３×５０ｍｌ)、飽和水性ＮａＨＣＯ３(３×５０ｍｌ)、および食塩水で洗浄し、次いでＮａ２ＳＯ４で乾燥する。溶液を濾過し、そして濃縮すると、残渣を得、これをシリカゲル(ＥｔＯＡｃ／ヘキサン １:４)で精製すると、(２Ｓ,３Ｒ)−３−(２−ブテニル)−２−ヒドロキシコハク酸 ジメチルエステル Ｂ−２を得る。
【化４】
2005501020.tif 000005
【００４３】
工程２：ＥｔＯＡｃ(５０ｍｌ)中の(２Ｓ,３Ｒ)−３−(２−ブテニル)−２−ヒドロキシコハク酸 ジメチルエステル Ｂ−２(２.５ｇ)に、１０％Ｐｄ／Ｃ(０.２５ｇ)を加え、そして反応液を水素雰囲気下で２０時間撹拌する。懸濁液をセライト濾過し、ＥｔＯＡｃ(３×)で洗浄し、次いで、真空中で濃縮すると、(２Ｓ,３Ｒ)−３−(ｎ−ブチル)−２−ヒドロキシコハク酸 ジメチルエステル Ｂ−３を得る。
【００４４】
工程３：ＭｅＯＨ(２８ｍｌ)中の(２Ｓ,３Ｒ)−３−(ｎ−ブチル)−２−ヒドロキシコハク酸 ジメチルエステル Ｂ−３に、水(２８ｍｌ)中のＮａＯＨ(２.２ｇ、５５ｍｍｏｌ)の溶液を加える。２４時間後、ＭｅＯＨを除去し、粗反応物をＨＣｌ(６Ｎ、１２ｍｌ)でｐＨ＝１まで酸性化し、次いでＥｔＯＡｃ(３×５０ｍｌ)で抽出する。合わせた有機層を(Ｎａ２ＳＯ４)乾燥し、そして濃縮すると、(２Ｓ,３Ｒ)−３−(ｎ−ブチル)−２−ヒドロキシコハク酸 Ｂ−４を得る。
【００４５】
工程４：２,２−ジメトキシプロパン(１０ｍｌ)中の(２Ｓ,３Ｒ)−３−(ｎ−ブチル)−２−ヒドロキシコハク酸 Ｂ−４(３００ｍｇ、１.５８ｍｍｏｌ)の溶液に、ｐ−ＴＳＡ(２０ｍｇ)を加え、そして反応液を室温で１６時間撹拌する。溶液をＤＣＭで希釈し、食塩水で洗浄し、(Ｎａ２ＳＯ４)乾燥し、次いでシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、１.２ｍｍｏｌの２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸 Ｂ−５を得る。
【００４６】
工程５：ＤＭＦ(１０ｍｌ)中の２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸 Ｂ−５(１.２ｍｍｏｌ)の溶液に、二環性ピロリジン Ａ−５(１.２ｍｍｏｌ)、ＨＡＴＵ(１.２ｍｍｏｌ)、およびＤＩＥＡ(２.５ｍｍｏｌ)を加える。混合液を一夜撹拌し、次いで濃縮し、シリカゲル(ＥｔＯＡｃ／ヘキサン １：４)で精製すると、２７５ｍｇの所望のアミド Ｂ−６を得る。
【００４７】
工程６：ジオキサン(５ｍｌ)中のＢ−６の冷溶液に、５０％水性ヒドロキシルアミンを加え(４００μl)、そして溶液を４℃にて８時間撹拌する。次いで、粗反応混合物を分取的逆相(Ｃ１８)ＨＰＬＣにより精製すると、２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２(Ｓ)−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド Ｂ−７を得る。
【００４８】
一般手順Ｃ：２−フルオロ−３−(Ｒ)−(２−Ｓ−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミドの合成
【化５】
2005501020.tif 000006
【００４９】
工程１：ＭｅＯＨ(２０ｍｌ)中の２,２−ジメチル−５−[２(Ｓ)−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ペンチル]−[１,３]ジオキソラン−４−オン Ｂ−６(５ｍｍｏｌ、５０％)(５ｍｍｏｌ)に、ナトリウムメトキシド(触媒的；ｐＨを１０に調節する)を加え、そして溶液を１時間撹拌する。Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２０樹脂(Ｈ＋形態)を加え、次いで溶液を濾過し、そして濃縮すると、２(Ｓ)−ヒドロキシ−３−(２(Ｓ)−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 メチルエステル Ｃ−１を得る。
【００５０】
工程２：ＤＣＭ(５ｍｌ)中の２(Ｓ)−ヒドロキシ−３−(２(Ｓ)−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 メチルエステル Ｃ−１(５ｍｍｏｌ)に、ＤＡＳＴ(１５ｍｍｏｌ)を−２０℃にて加える。溶液を室温で１６時間撹拌する。反応混合物を水性ＮａＨＣＯ３および食塩水で洗浄し、(Ｎａ２ＳＯ４)乾燥し、そして濃縮し、シリカゲル(ＥｔＯＡｃ／ヘキサン)で精製すると、２−(Ｒ／Ｓ)−フルオロ−３−(２(Ｓ)−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 メチルエステル Ｃ−２を得る。この生成物の１Ｈ ＮＭＲ分析により、約１：２のＳ／Ｒジアステレオマーが示された。これら２つの異性体は、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離される。
【００５１】
工程３：ジオキサン(１ｍｌ)中の中間体 Ｃ−２(０.１５ｍｍｏｌ、それぞれの異性体を別々に処理する)に、水性５０％ヒドロキシルアミンを加え(０.５ｍｌ)、そして反応液を５℃にて１６時間撹拌する。次いで、粗反応混合物を分取的逆相(Ｃ１８)ＨＰＬＣにより精製すると、２−フルオロ−３−(Ｒ)−(２−Ｓ−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド Ｃ−３を得る。
【００５２】
一般手順Ｄ：Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−{２−Ｒ−[２−Ｓ−(オキサゾール−２−イル)−ピロリジン−１−カルボニル]−ヘキシル}−ホルムアミド
【化６】
2005501020.tif 000007
【００５３】
工程１：２−ｎ−ブチル アクリル酸(Ｄ−２)(Ｒ＝ｎ−ブチル)は、上に示したように製造される。
【００５４】
工程２：４−ベンジル−３−(２−ブチル−アクリロイル)−オキサゾリジン−２−オン(Ｄ−３)
２−ｎ−ブチル アクリル酸(９.９０ｇ、７７.２ｍｍｏｌ、１当量)を、乾燥ＴＨＦ(２６０ｍｌ)中に溶解させ、そして窒素下で−７８℃に冷却する。ヒューニッヒ塩基(Hunig's base)(１７.５ｍｌ、１００.４ｍｍｏｌ、１.３当量)および塩化ピバロイル(９.５ｍｌ、７７.２ｍｍｏｌ、１当量)を、温度が−６０℃以下に維持されるように加える。混合物を−７８℃で３０分間維持し、室温まで２時間加温し、そして最後に−７８℃に冷却する。
【００５５】
別のフラスコにおいて、(Ｓ)−(−)−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン(１３.４９ｇ、７７.２４ｍｍｏｌ)を、乾燥ＴＨＦ(１５０ｍｌ)中に溶解させ、そして窒素下で−７８℃に冷却する。ＢｕＬｉ(ヘキサン中２.５Ｍ溶液、３０.９ｍｌ、７７.２ｍｍｏｌ、１当量)を−７８℃にてゆっくりと加え、そして混合物を室温で３０分間撹拌する。得られるアニオンを、カニューレでもとの反応容器へとゆっくりと移す。混合液を室温まで加温し、そして室温で一夜撹拌する。反応を１Ｍ ＫＨＣＯ３でクエンチし、そして溶媒を減圧下で除去する。残渣を、ＥｔＯＡｃおよび水の間で分配する。有機層を食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮すると、黄色の油状物質を得、これをフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝４:１)により精製すると、白色の固体として標題の化合物 Ｄ−３を得る。
1H NMR (CDCl3): δ7.39-7.20 (m, 5H), 5.42-5.40 (d, J = 7.14 Hz, 2H), 4.76-4.68 (m, 1H), 4.29-4.156 (m, 2H), 3.40-3.35 (dd, J = 3.57, 13.46 Hz, 1H), 2.86-2.79 (dd, J = 9.34, 13.46 Hz, 1H), 2.42-2.37 (t, J = 7.69 Hz, 2H), 1.55-1.30 (m, 4H), 0.951-0.904 (t, J = 7.14 Hz, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１７Ｈ２１ＮＯ３の計算値(２８７.３５)； 検出値：２８８.５ [Ｍ＋Ｈ]。
【００５６】
工程３：４−ベンジル−３−[２−(ベンジルオキシアミノ−メチル)−ヘキサノイル]−オキサゾリジン−２−オン(ｐ−トルエンスルホン酸塩)
化合物 Ｄ−３(８.２５ｇ、２８.７ｍｍｏｌ)をＯ−ベンジルヒドロキシルアミン(７.０７ｇ、５７.４ｍｍｏｌ、２当量)と混合し、そして窒素下で室温にて４０時間撹拌する。混合物をＥｔＯＡｃに溶解させ、そしてｐ−ＴＳＡ(２１.８４ｇ、１１４.８ｍｍｏｌ、４当量)を加えると、白色の固体として過剰のＯ−ベンジルヒドロキシルアミンが沈澱する。白色の固体を濾取し、そして濾液を濃縮すると、粗黄色油状物質を得る。粗黄色油状物質に過剰量のジエチルエーテルを加え、そして０℃まで３０分間冷却すると固体を得、これを濾過により回収し、真空中で乾燥すると、白色の結晶性固体として標題の化合物(単一のジアステレオマー)を得る。
1H NMR (CDCl3): δ 8.07-8.04 (d, J = 8.24 Hz, 2H), 7.59-7.39 (m, 10H), 7.18-7.15 (d, J = 7.69 Hz, 2H), 5.49-5.40 (q, J = 8.61 Hz, 2H), 4.65-4.56 (m, 1H), 4.25-4.08 (m, 3H), 3.83-3.79 (d, J = 13.46 Hz, 1H), 3.15-3.11 (d, J = 13.46 Hz, 1H), 2.56 (s, 3H), 1.83-1.67 (m, 4H), 1.40 (bs, 4H), 1.00-0.951 (t, J = 6.87, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ２４Ｈ３０Ｎ２Ｏ４＊Ｃ７Ｈ８Ｏ３Ｓの計算値(５８２.７１)；検出値：４１１.７ [Ｍ＋Ｈ]遊離塩基。
【００５７】
工程４：４−ベンジル−３−[２−(ベンジルオキシアミノ−メチル)−ヘキサノイル]−オキサゾリジン−２−オン(Ｄ−５)
ＥｔＯＡｃ(４００ｍｌ)中に溶解しているｐ−ＴＳＡ塩(２２.９ｇ、３９.３ｍｍｏｌ)の溶液に、１Ｍ Ｎａ２ＣＯ３(２００ｍｌ、５当量)を加え、そして室温で３０分間撹拌する。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮すると、淡黄色不透明油状物質として標題の化合物を得る。
1H NMR (CDCl3): δ 7.57-7.38 (m, 10H), 4.98-4.90 (m, 2H), 4.87-4.79 (m, 1H), 4.38-4.28 (m, 3H), 3.64-3.57 (dd, J = 9.21, 12.64 Hz, 1H), 3.46-3.36 (td, J = 3.76, 13.05 Hz, 2H), 2.68-2.60 (dd, J = 10.03, 13.46 Hz, 1H), 1.90-1.88 (m, 1H), 1.78-1.71 (m, 1H), 1.51-1.44 (m, 4H), 1.10-1.06 (t, J = 6.73 Hz, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ２４Ｈ３０Ｎ２Ｏ４の計算値(４１０.５１)；検出値：４１１.７ [Ｍ＋Ｈ]。
【００５８】
工程５：Ｎ−[２−(４−ベンジル−２−オキソ−オキサゾリジン−３−カルボニル)−ヘキシル]−Ｎ−ベンジルオキシ−ホルムアミド(Ｄ−６)
ギ酸(７.４ｍｌ、１９６.６ｍｍｏｌ、１５当量)中の化合物 Ｄ−５ (５.３８ｇ、１３.１ｍｍｏｌ、１当量)を窒素下で０℃に冷却する。別のフラスコにおいて、ギ酸(７.４ｍｌ、１９６.６ｍｍｏｌ、１５当量)を窒素下で０℃に冷却し、そして無水酢酸(２.４７ｍｌ、２６.２ｍｍｏｌ、２当量)を滴下する。溶液を０℃に１５分間撹拌する。得られた混合無水物を、シリンジでもとの反応容器へとゆっくりと移す。混合物を０℃にて１時間、次いで室温で３時間撹拌する。混合液を濃縮し、ＤＣＭ中に溶かし、飽和ＮａＨＣＯ３および食塩水で連続的に洗浄する。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮すると、不透明の油状物質を得、これをフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝２：１、次いでＤＣＭ：アセトン＝９：１)により精製すると、無色の油状物質として標題の化合物を得る。
1H NMR (CDCl3, 回転体): δ 8.38 (s, 0.7H), 8.21 (s, 0.3H), 7.54-7.35 (m, 10H), 5.0-5.00 (m, 2H), 4.88-4.81 (m, 1H), 4.39-4.29 (m, 4H), 4.07-4.03 (m, 1H), 3.43-3.39 (m, 1H), 2.66-2.58 (m, 1H), 1.89 (bs, 1H), 1.73 (bs, 1H), 1.49-1.44 (m, 3H), 1.10-1.06 (t, J = 6.73 Hz, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ２５Ｈ３０Ｎ２Ｏ５の計算値(４３８.５２)；検出値：４３９.７ [Ｍ＋Ｈ]。
【００５９】
工程６：２−[(ベンジルオキシ−ホルミル−アミノ)−メチル]−ヘキサン酸(Ｄ−７)
化合物 Ｄ−６(０.１６３ｇ、０.３７２ｍｍｏｌ、１当量)をＴＨＦ(４.５ｍｌ)および水(１.５ｍｌ)中に溶解させ、そして０℃に冷却する。過酸化水素(水中３０％、２２８μl、２.２３ｍｍｏｌ、６当量)を滴下し、続いて水(３５０μl)中の水酸化リチウム(０.０１９ｇ、０.４４６ｍｍｏｌ、１.２当量)の溶液をゆっくりと添加する。得られる混合物を０℃にて１.５時間撹拌する。塩基性の反応混合液を、０℃にてＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２０樹脂(Ｈ＋)を用いてクエンチし、ｐＨ４〜５にする。樹脂を濾取し、そしてＥｔＯＡｃですすぐ。混合液を濃縮してＴＨＦを除去し、次いでＥｔＯＡｃ中に溶かす。水層を分離し、そして有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮すると、不透明の油状物質を得、これをフラッシュクロマトグラフィー(ＤＣＭ：アセトン＝４：１、次いでアセトン：ＭｅＯＨ＝９９：１)により精製すると、無色の油状物質として標題の化合物 Ｄ−７を得る。
1H NMR (DMSO-d6, 回転体): δ 11.2 (s, 1H), 8.20 (s, 0.2H), 7.95 (s, 0.8H), 7.33-7.41 (m, 5H), 4.87 (s, 2H), 3.71 (bs, 2H), 2.50 (bs, 1H), 1.35-1.45 (m, 2H), 1.14-1.28 (m, 4H), 0.857-0.813 (t, J = 13.1 Hz, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１５Ｈ２１ＮＯ４についての計算値(２７９.３３)；検出値：２７８.５ [Ｍ−Ｈ]、３０２.５ [Ｍ＋Ｎａ]。
【００６０】
工程７：１−{２−[(ベンジルオキシ−ホルミル−アミノ)−メチル]−ヘキサノイル}−ピロリジン−２−カルボン酸アミド
乾燥ジオキサン(４ｍｌ)中の化合物 Ｄ−７(０.１９０ｇ、０.６８０ｍｍｏｌ、１当量)の溶液に、窒素下、室温にて、ヒューニッヒ塩基(３９１μl、２.２４ｍｍｏｌ、３.３当量)、化合物 Ａ−５(０.７４８ｍｍｏｌ、１.１当量)およびＨＡＴＵ(０.２８４ｇ、０.７４８ｍｍｏｌ、１.１当量)を連続的に加える。得られる混合液を室温で２２時間撹拌する。混合液をＥｔＯＡｃと１０％クエン酸との間で分離する。有機層を食塩水および飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４無水物で乾燥し、濾過し、そして濃縮する。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(ＤＣＭ：アセトン＝３：１)により精製すると、無色の油状物質として標題の化合物を得る。
【００６１】
工程８：{２−[(ホルミル−ヒドロキシ−アミノ)−メチル]−ヘキサノイル}−ピロリジン−２−カルボン酸アミド(Ｄ−８)
Ｐｄ−Ｃ(０.０５９ｇ、０.１当量)を、窒素下で、１：１ ＥｔＯＡｃ／エタノール溶液(１２ｍｌ)中の上記の化合物(０.５５０ｍｍｏｌ、１当量)の溶液に加える。混合液を、水素雰囲気下で３６時間撹拌する。触媒をセライト濾過により除去する。濾液を濃縮し、そして残渣を分取的ＴＬＣ(ＤＣＭ：アセトン＝２：１)により精製すると、アモルファス性の固体として標題の化合物を得る。
【００６２】
一般手順Ｅ：２−ピロリジン−２−イル−オキサゾール(臭化水素酸塩)
【化７】
2005501020.tif 000008
【００６３】
２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−オキサゾール Ｅ−５(Ｘ＝ＣＨ２、ｎ＝１)は、下記のように製造される。
工程１：２−クロロカルボニル−ピロリジン−１−カルボン酸 ベンジルエステル(Ｅ−２)
ＤＣＭ(２００ｍｌ)中のＺ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ Ｅ−１(１０.０ｇ、４０.１ｍｍｏｌ、１当量)および塩化チオニル(３０ｍｌ、４０１.２ｍｍｏｌ、１０当量)の混合液を、窒素下で、２０分間加熱還流し、そして真空中で濃縮する。残渣性の油状物質を、トルエンで３回共沸し、そして濃縮すると、不透明の油状物質としてＺ−Ｌ−Ｐｒｏ−Ｃｌを得る。
【００６４】
工程２：２−(トリメチル−シラニル)−２Ｈ−[１,２,３]トリアゾール(Ｅ−３)
乾燥ベンゼン(１４５ｍｌ)中の１Ｈ−１,２,３−トリアゾール(４.９８ｇ、７２.１０ｍｍｏｌ、１当量)の溶液に、室温にて、窒素下で、ＴＥＡ(１１.０５ｍｌ、７９.３１ｍｍｏｌ、１.１当量)を加え、続いてＴＭＳＣｌ(９.１５ｍｌ、７２.１０ｍｍｏｌ、１当量)を滴下する。白色の沈澱が現れる。反応混合物を室温にて窒素下で１時間撹拌する。得られる沈澱を濾過により除去し、そして乾燥ベンゼンで徹底的に洗浄する。濾液を、揮発性の高い生成物が蒸発することを避けるために穏やかに濃縮すると、痕跡量のベンゼンと共に、定量的収量のＴＭＳ−トリアゾールを得る。
【００６５】
工程３：２−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボン酸 ベンジルエステル(Ｅ−４)
スルホラン(２９０ｍｌ)中のＴＭＳ−トリアゾール(１４.１７ｇ、１００.３ｍｍｏｌ、１当量)の溶液に、室温にて、窒素下で、スルホラン(７０ｍｌ)中のＺ−Ｌ−Ｐｒｏ−Ｃｌ(２６.８５ｇ、１００.３ｍｍｏｌ、１当量)を滴下する。得られる混合物を、室温で３０分間撹拌し、次いで、温度を３時間で１４０℃まで上昇させる。反応混合液を室温まで冷却した後、過剰の食塩水に注ぎ、そしてジエチルエーテルで抽出する。ジエチルエーテル抽出物を食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発させる。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(ＤＣＭ：アセトン＝９：１)により精製すると、明黄色の油状物質として標題の化合物を得る。
1H NMR (CDCl3): δ 7.79-7.70 (s, 1H), 7.67-7.47 (m, 5H), 7.37-7.23 (m, 1H), 5.42-5.19 (m, 2H), 3.92-3.69 (m, 2H), 2.49-2.14 (m, 5H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１５Ｈ１６Ｎ２Ｏ３の計算値(２７２.３０)；検出値：２７３.５ [Ｍ＋Ｈ]。
【００６６】
工程４：２−ピロリジン−２−イル−オキサゾール(臭化水素酸塩)(Ｅ−５)
ＡｃＯＨ(１１６ｍｌ)中の化合物 Ｅ−４(６.３３ｇ、２３.２５ｍｍｏｌ、１当量)の溶液を、室温にて、ＨＢｒ(５.７Ｍ、ＡｃＯＨ中３３％、２０４ｍｌ、１１６２ｍｍｏｌ、５０当量)で処理し、そして混合液を室温にて１時間撹拌する。反応混合物に過剰のジエチルエーテルを加え、０℃まで３０分間冷却すると、固体を、これを濾過により回収し、そして真空中で乾燥すると、褐色がかった粉末として標題の化合物を得る。
1H NMR (DMSO-d6): δ 9.98 (bs, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 5.14-5.05 (m, 1H), 3.54-3.46 (m, 2H), 2.62-2.53 (m, 1H), 2.43-2.33 (m, 1H), 2.28-2.15 (m, 2H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ７Ｈ１０Ｎ２Ｏ＊ＨＢｒの計算値(２１９.０８)；検出値：１３９.４ [Ｍ＋Ｈ]遊離塩基。
【００６７】
一般手順Ｆ：５−アルキル−２(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−オキサゾールの合成
【化８】
2005501020.tif 000009
【００６８】
５−メチル−２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−オキサゾール(Ｆ−５)
ＤＣＭ中の(Ｓ)−Ｎ−(トリフルオロアセチル)ピロリルクロライド(Aldrich、１当量)の溶液を、ピリジン中の１−アミノ−プロパン−２−オン(１.５当量)で、室温にて５時間処理する。通常の後処理の後、１−トリフルオロアセチル−ピロリジン−２−カルボン酸(２−オキソ−プロピル)−アミドを得る。
1H NMR (CDCl3): δ 4.55-4.50 (m, 1H), 4.15 (s, 2H), 3.78-3.69 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.15-1.85 (m, 4H)。この中間体を、ＰＯＣｌ３で、７０℃にて２時間処置すると、２,２,２−トリフルオロ−１−{２(Ｓ)−(５−メチル−オキサゾール−２−イル)−ピロリジン−１−イル}−エタノンを得る。
【００６９】
この物質を、２Ｍメタノール性アンモニアで５時間処理すると、標題の化合物を得る。
ＭＳ：ｍ／ｚ＝１５３.４ (Ｍ＋１)。
【００７０】
一般手順Ｇ：２−(アルキル化−チアアゾール)−２−ピロリジンの合成
【化９】
2005501020.tif 000010
【００７１】
２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−(４,５−ジメチル−チアアゾール) Ｇ−４(Ｘ＝ＣＨ２、ｎ＝１、Ｒ２＝Ｒ３＝ＣＨ３)は、次のように製造される：
ＤＭＥ(５ｍｌ)中のチオアミド Ｇ−２(０.１１ｇ、１当量)の溶液に、３−ブロモ−２−ブタノン(０.１６ｍｌ、３当量)およびＫＨＣＯ３(０.４０ｇ、８当量)を加え、そして２時間撹拌する。反応混合液を０℃に冷却し、次いでピリジン(０.４ｍｌ、８.５当量)およびトリフルオロ無水酢酸(０.３２ｍｌ、４当量)を加え、そして混合液を室温にて１６時間撹拌する。それをＥｔＯＡｃで希釈し、そして水、食塩水で洗浄し、(Ｎａ２ＳＯ４)乾燥し、そして減圧下で濃縮する。残渣を、グラジエント溶媒としてヘキサン−ＥｔＯＡｃ(１:１)を用いるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、所望の中間体を得る。
1H NMR (CDCl3): δ 5.18-4.86 (m, 1H), 3.68-3.43 (m, 2H), 2.35 & 2.30 (それぞれ s, 2x3H), 2.15-1.81 (m, 2H), 2.54-1.45 (m, 2H), 1.35 (s, 9H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１４Ｈ２２Ｎ２Ｏ２Ｓの計算値(２８２.１４)；検出値：２８３.３ [Ｍ＋１]。
【００７２】
ジオキサン中４Ｍ ＨＣｌでの上記の化合物の処理により、標題の化合物を得る。
２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−(５−フェニル−チアアゾール) Ｇ−４(Ｘ＝ＣＨ２、ｎ＝１、Ｒ２＝Ｃ６Ｈ５、Ｒ３＝Ｈ)は、ＤＭＥ(５ｍｌ)中のチオアミド Ｇ−２(０.１３ｇ、１当量)の溶液を、２−ブロモ−アセトフェノン(０.３４ｇ、３当量)およびＫＨＣＯ３(０.４５ｇ、８当量)と反応させ、そしてさらに、上で開示されたように後処理することにより製造される。
1H NMR (CDCl3): δ  8.25-8.15 (m, 3H), 7.71-7.45 (m, 3H), 5.39-5.22 (dd, J = 2.8 Hz, 1H), 3.79-3.65 (m, 2H), 2.59-2.41 (m, 1H), 2.38-2.22 (m, 1H), 2.19-2.12 (m, 2H), 1.551 (bs, 9H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１８Ｈ２２Ｎ２Ｏ２Ｓの計算値(３３０.４５)；検出値：３３１.５ [Ｍ＋１]。ジオキサン中４Ｍ ＨＣｌで上記化合物を処理することにより、標題の化合物を得る。
【００７３】
一般手順Ｈ：２−ピロリジン−２−イル−ベンズイミダゾールの合成
【化１０】
2005501020.tif 000011
【００７４】
Ｎ−Ｃｂｚ−Ｌ−プロリンアミド[Ｘ＝ＣＨ２、ｎ＝１](４ｇ、１６.１ｍｍｏｌ)およびｏ−フェニレンジアミン(１.７ｇ、１５.５ｍｍｏｌ)を、窒素雰囲気中にて１６５℃で２.５時間加熱し、次いで温度を２２０℃に上昇させてさらに４０分間加熱する。反応混合液を室温まで冷却し、そしてＤＣＭ中に溶解させ、そして飽和ＮａＨＣＯ３、水および食塩水で洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で乾燥し、蒸発乾固させる。残渣を２：１のｉＰｒＯＨ／水、次いでジエチルエーテル／ヘキサンで結晶させると、Ｃｂｚ保護されたベンズイミダゾール ６３０ｍｇを得る。次いで、保護された物質を、ＡｃＯＨ(３ｍｌ)中に溶かし、そしてＡｃＯＨ(６ｍｌ)中３３％ＨＢｒを加える。４０分後、ジエチルエーテルを加え、そして溶液を０℃に冷却し、沈澱をグラスフィルターで回収する。ＭｅＯＨ／ジエチルエーテルから再結晶すると、ＨＢｒ塩として標題の化合物を得る。
1H NMR (CDCl3): δ 7.63 (dd, J = 3.3, 6.3, 2H), 7.43 (dd, J = 3.0, 6.3, 2H), 5.13 (dd, J = 8.0, 8.0, 1H), 4.57-3.37 (m, 2H), 2.64-2.58 (m, 1H), 2.43-2.04 (m, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１１Ｈ１３Ｎ３の計算値(１８７.１)；検出値：１８８.１ [Ｍ＋Ｈ]。
【００７５】
一般手順Ｉ：
【化１１】
2005501020.tif 000012
【００７６】
工程１
飽和水性ＮａＨＣＯ３(２５ｍｌ)中のアミノ酸メチルエステル塩酸塩 Ｉ−１(Ｐ＝メチル、Ｒ１＝Ｈ、８８ｍｍｏｌ)に、ＴＨＦ(５０ｍｌ)中の２−ニトロベンゼン−スルホニルクロライド(７７ｍｍｏｌ)の溶液を、激しく撹拌しながら加える。追加のＮａＨＣＯ３を、塩基性ｐＨを維持するために、２時間かけて加える。次いで、反応混合液をＤＣＭ(５００ｍｌ)で抽出し、そして有機層を水で洗浄し、(Ｎａ２ＳＯ４)乾燥し、濃縮し、そして粗生成物を２：１の水／イソプロパノールから再結晶し、次いで真空中でＰ２Ｏ５で乾燥すると、無色の結晶としてＮ−２−ニトロフェニルスルホニルアミノ酸メチルエステル Ｉ−２を得る。ＴＨＦ(１０ｍｌ)中の０℃のＮ−２−ニトロフェニルスルホニルアミノ酸メチルエステル Ｉ−２(２８ｍｍｏｌ)、アルコール Ｒ１ＯＨ(２５ｍｍｏｌ)およびトリフェニルホスフィン(２８ｍｍｏｌ)の溶液に、５分かけてＤＩＡＤ(２８ｍｍｏｌ)をゆっくりと加える。反応液を室温まで加温し、次いでさらに２４時間撹拌する。溶媒を除去し、そして粗生成物をシリカゲル(Ｍｅｒｃｋ ６０；ヘキサン／ＤＣＭ／ＴＨＦ １２：６：１)で精製すると、Ｎ−２−ニトロフェニルスルホニル−Ｎ−アルキル− アミノ酸メチルエステル Ｉ−３を得る。
【００７７】
工程３
ＤＭＦ(４０ｍｌ)中のＮ−２−ニトロフェニルスルホニル−Ｎ−アルキル−アミノ酸メチルエステル Ｉ−３(Ｒ２＝２−シクロペンチルエチル、１１ｍｍｏｌ)およびポリマー結合性１,３,４,６,７,８−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリミジノ[１,２−ａ]ピリミジン(１２ｍｍｏｌ)の撹拌懸濁液に、チオフェノール(２２ｍｍｏｌ)を加える。１時間後、反応混合液をエーテル(３００ｍｌ)で希釈し、濾過し、そして濾液を食塩水(５×５０ｍｌ)および飽和ＮａＨＣＯ３(５０ｍｌ)で洗浄する。合わせた塩基性水層を、ＤＣＭ(２×５０ｍｌ)で逆抽出し、そしてＤＣＭ層を合わせる。次いで、エーテル相を０.５Ｍ ＨＣｌ(５×２５ｍｌ)で抽出し、水性抽出物を固体のＮａＨＣＯ３で塩基性にし、次いでＮａＣｌで飽和させ、そしてＤＣＭ(５×５０ｍｌ)で抽出する。すべてのＤＣＭ層を合わせ、(Ｎａ２ＳＯ４)乾燥し、ジオキサン中４Ｎ ＨＣｌで酸性化し、そして蒸発させると、第二級アミン塩酸塩 Ｉ−４を得る。別のフラスコにおいて、ホスゲン(トルエン中２０％；０.１１ｍｏｌ)を、激しく撹拌した０℃の水(１２５ｍｌ)およびエーテル(２００ｍｌ)中のＮａＨＣＯ３(１ｍｏｌ)に加える。これに、水(１２５ｍｌ)中の第二級アミンＨＣｌ塩およびさらなるアリコートのホスゲン(０.１１ｍｏｌ)を、３０分かけて加える。反応混合物を、室温まで加温し、次いでさらに１５分間撹拌する。相を分離し、そして有機相を１Ｍ ＨＣｌ(２×７５ｍｌ)、食塩水(７５ｍｌ)で洗浄し、(ＭｇＳＯ４)乾燥し、そして蒸発させると、Ｎ−アルキル−アミノ酸メチルエステルカルバモイルクロライド Ｉ−５(２工程)を得る。
【００７８】
工程４
ＤＣＭ(４ｍｌ)中に溶解したＮ−アルキル−アミノ酸メチルエステルカルバモイルクロライド Ｉ−５(４ｍｍｏｌ)のアリコートを、ピリジン(４ｍｌ)中の０℃のアミン Ａ−５(５.３ｍｍｏｌ)溶液に加える。３０分後、反応混合物をエーテル(１００ｍｌ)で希釈し、１０％ＫＨＳＯ４(２×２５ｍｌ)、食塩水(２５ｍｌ)で洗浄し、(ＮａＳＯ４)乾燥し、そして蒸発させると、所望のウレア Ｉ−６を得る。
【００７９】
ジオキサン(２ｍｌ)中のＮ−[(２−カルボキシピロリジン−１−カルボニル)アミノ]アミノ酸メチルエステル Ｉ−６(２００μｍｏｌ)に。溶液を、５０％水性ヒドロキシルアミン(１ｍｌ)で希釈し、そして反応液を２４〜３６時間撹拌する。次いで、粗反応混合液を分取的逆相(Ｃ１８)ＨＰＬＣにより精製すると、Ｎ−ヒドロキシ−２−[(２−アミドピロリジン)アミノ]アセトアミド Ｉ−７を得る。
【００８０】
一般手順Ｊ：１−[２−Ｓ−(オキサゾール−２−イル)−ピロリジン−１−イル]−２−Ｒ／Ｓ−メルカプトメチル−アルカン−１−オンの合成
【化１２】
2005501020.tif 000013
【００８１】
工程１：２−ブチル−１−(２−Ｓ−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−イル)−プロペノン
ＤＭＦ(１０ｍｌ)中の２−ブチル アクリル酸 Ｄ−２(１.２ｍｍｏｌ)の溶液に、二環性ピロリジン Ｆ−５(１.２ｍｍｏｌ)、ＨＡＴＵ(１.２ｍｍｏｌ)、およびＤＩＥＡ(２.５ｍｍｏｌ)を加える。混合液を一夜撹拌し、次いで濃縮し、シリカゲル(ＥｔＯＡｃ／ヘキサン １：４)で精製すると、所望のアミド Ｊ−１を得る。
【００８２】
工程２：チオール酢酸 Ｓ−{２−Ｒ／Ｓ−[２−Ｓ−(オキサゾール−２−イル)−ピロリジン−１−カルボニル]−ヘキシル}エステル
チオール酢酸(１５ｍｌ)中のＪ−１(３ｍｍｏｌ)の溶液を、９０℃にて３時間加熱し、次いで室温まで冷却する。それをＥｔＯＡｃで希釈し、そして生理食塩水、水性冷ＮａＨＣＯ３で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧条件下で濃縮する。残渣を、ＤＣＭ中の５％〜２０％アセトンからなる溶媒勾配を用いてシリカゲルカラムで精製すると、Ｊ−２を得る。
【００８３】
工程３：１−[２−Ｓ−(５−ｔｅｒｔ−ブチル−オキサゾール−２−イル)−ピロリジン−１−イル]−２−Ｒ／Ｓ−メルカプトメチル−ヘキサン−１−オン
Ｊ−２(１ｍｍｏｌ)を、撹拌しながらアルゴン下でＭｅＯＨ(５ｍｌ)中に溶解させる。脱気した２Ｍ ＮａＯＨ溶液(６ｍｍｏｌ)を加え、そして混合液を３時間撹拌する。反応混合液を、ｐＨ２まで、ＩＲ−１２０(Ｈ＋)樹脂で酸性化する。樹脂を濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮すると、透明の油状物質としてＪ−３を得る。
【００８４】
一般手順Ｋ：２−Ｓ−ヒドロキシ−３−Ｒ−(２−Ｓ−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−アルカン酸の合成
【化１３】
2005501020.tif 000014
【００８５】
工程１：５−Ｒ−{１−[２−Ｓ−(５−ｔｅｒｔ−ブチル−オキサゾール−２−イル)−ピロリジン−１−カルボニル]−ペンチル}−２,２−ジメチル−[１,３]ジオキソラン−４−オン
二環性アミンの塩(０.８５２ｇ、２.４ｍｍｏｌ、１.１当量)のＤＭＦ溶液(７ｍｌ)に、ヒューニッヒ塩基(２.１ｍｌ、１２ｍｍｏｌ、５.５当量)を加え、そして混合物を０℃に冷却する。続いて、アセトナイド(５００ｍｇ、２.１７ｍｍｏｌ、１.０当量)、およびＨＡＴＵ(０.９１３ｇ、２.４ｍｍｏｌ、１.１当量)が０℃にて添加される。得られる混合物を、室温にて１６時間撹拌する。混合液を、過剰のＥｔＯＡｃおよび１０％クエン酸の間で分配する。有機層を食塩水および飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮するとＫ−１を得る。残渣をそのまま最終工程に持ち越す。
ＥＳ−ＭＳ：Ｃ２２Ｈ３４Ｎ２Ｏ５の計算値(４０６.２５)；検出値：４０７.５ [Ｍ＋Ｈ]
【００８６】
工程２：３−Ｒ−[２−Ｓ−(５−ｔｅｒｔ−ブチル−オキサゾール−２−イル)−ピロリジン−１−カルボニル]−２−Ｓ−ヒドロキシ−ヘプタン酸
アセトナイド Ｋ−１を、１０％(９５：５ ＴＦＡ：Ｈ２Ｏ)／ＤＣＥ(１０ｍｌ)中に溶解させ、そして反応液を室温にて７時間撹拌する。最終生成物を、分取的ＨＰＬＣにより精製し、これを凍結乾燥すると、無色の粉末として最終生成物Ｋ−２を得る。
【００８７】
実施例１：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２(Ｒ／Ｓ)−ピリジン−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸 Ｂ−５および商品として入手可能な２−ピロリジン−２−イル−ピリジン Ａ−５から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (DMSO): δ 8.6-8.5 (m, 1H), 7.97-7.92 (t, J = 7.4 & 7.1 Hz, 1H), 7.5-7.3 (m, 2H), 5.14-4.94 (m, 1H), 3.96-3.44 (m, 3H), 3.1-2.9 (m, 1H), 2.3-1.9 (m, 6H), 1.3-1.1 (m, 4H), 0.87-0.9 (m, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１７Ｈ２５Ｎ３Ｏ４の計算値(３３５.４０)；検出値：３３６.５ [Ｍ＋１]。
【００８８】
実施例２：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[３(Ｒ／Ｓ)−ピリジン−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸 Ｂ−５および商品として入手可能な２−ピロリジン−３−イル−ピリジン Ａ−５から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (DMSO): δ 8.85-8.8 (m, 1H), 8.21-8.14 (m, 2H), 7.8-7.6 (m, 4H), 4.4-3.9 (m, 4H), 3.8-3.6 (m, 2H), 3.09-3.06 (d, J = 9.34 Hz, 1H), 2.5-2.2 (m, 2H), 1.63 (bs, 2H), 1.38 (bs, 4H), 1.06-0.96 (m, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１７Ｈ２５Ｎ３Ｏ４の計算値(３３５.４０)；検出値：３３６.５ [Ｍ＋１]。
【００８９】
実施例３：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２−ピリジン−３−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド (異性体１)
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸 Ｂ−５および商品として入手可能な３−ピロリジン−２−イル−ピリジン Ａ−５から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (DMSO): δ 8.61 (s, 2H), 7.99-7.97 (d, J = 7.97 Hz, 1H), 7.67-7.63 (m, 1H), 5.11-5.07 (m, 1H), 4.02-3.57 (m, 3H), 2.99-2.93 (m, 1H), 2.49-2.24 (m, 2H), 1.96-1.76 (m, 4H), 1.37-1.0 (m, 4H), - 0.98-0.78 (m, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１７Ｈ２５Ｎ３Ｏ４の計算値(３３５.４０)；検出値：３３６.５ [Ｍ＋１]。
【００９０】
実施例４：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２−ピリジン−３−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド (異性体２)
標題の化合物は、実施例３において記載されたような、反応から単離された他方の異性体である。
1H NMR (DMSO): δ 8.86-8.76 (m, 2H), 8.32-8.3 (d, J = 7.97 Hz, 1H), 7.9-7.88 (m, 1H), 5.4-5.32 (m, 1H), 4.3-3.74 (m, 3H), 3.22-3.16 (t, J = 9.34 Hz, 1H), 2.52-2.46 (m, 2H), 2.26-1.98 (m, 3H), 1.63-1.38 (m, 5H), 1.07-1.01 (m, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１７Ｈ２５Ｎ３Ｏ４の計算値(３３５.４０)；検出値：３３６.５ [Ｍ＋１]。
【００９１】
実施例５：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２−ピリジン−４−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド (異性体１)
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸 Ｂ−５および商品として入手可能な４−ピロリジン−２−イル−ピリジン Ａ−５から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (DMSO): δ 8.89-8.87 (d, J = 4.7 Hz, 2H), 7.77-7.75 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 5.3-5.25 (m, 1H), 4.23-3.8 (m, 3H), 3.33-3.15 (m, 1H), 2.52-2.43 (m, 2H), 2.13-1.86 (m, 3H), 1.56-1.26 (m, 5H), 1.07-1.05 (m, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１７Ｈ２５Ｎ３Ｏ４の計算値(３３５.４０)；検出値：３３６.５ [Ｍ＋１]。
【００９２】
実施例６：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２−ピリジン−４−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド(異性体２)
標題の化合物は、実施例５において記載された反応から単離された、他方の異性体である。
1H NMR (DMSO): δ 8.89-8.85 (t, J = 6.32 & 6.6 Hz, 2H), 7.92-7.68 (m, 2H), 5.39-5.36 (dd, 1H), 4.25-3.8 (m, 3H), 3.25-3.2 (t, J = 7.96 & 8.8 Hz, 1H), 2.56-2.47 (m, 2H), 2.12-1.62 (m, 3H), 1.46-1.38 (m, 5H), 1.07-1.01 (m, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１７Ｈ２５Ｎ３Ｏ４の計算値(３３５.４０)；検出値：３３６.５ [Ｍ＋１]。
【００９３】
実施例７：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[３(Ｒ／Ｓ)−ピリジン−４−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸 Ｂ−５および商品として入手可能な４−ピロリジン−３−イル−ピリジン Ａ−５から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (DMSO): δ 8.94 (dd, 2H), 8.06-8.02 (t, J = 4.12 & 6.32 Hz, 2H), 4.2-3.53 (m, 6H), 3.1-3.02 (dd, 1H), 2.7-2.1 (m, 2H), 1.66-1.28 (m, 6H), 1.05-0.96 (m, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１７Ｈ２５Ｎ３Ｏ４の計算値(３３５.４０)；検出値：３３６.５ [Ｍ＋１]。
【００９４】
実施例８：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２(Ｒ／Ｓ)−フェニル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸 Ａ−５および商品として入手可能な２−フェニル−ピロリジン Ｂ−５から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (DMSO): δ 7.6-7.3 (m, 5H), 5.6-5.57 (d, J = 7.14 Hz, 1H), 5.3-5.24 (m, 1H), 4.21-3.72 (m, 4H), 3.2-3.14 (t, J = 7.96 & 10.44 Hz, 1H), 2.4-2.33 (m, 1H), 2.3-1.85 (m, 4H), 1.6-1.36 (m, 5H), 1.04-0.97 (m, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１８Ｈ２６Ｎ２Ｏ４の計算値(３３４.４２)；検出値：３３５.５ [Ｍ＋１]。
【００９５】
実施例９：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[３(Ｒ／Ｓ)−フェニル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸 Ｂ−５および商品として入手可能な３−フェニル−ピロリジン Ａ−５から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (DMSO): δ 7.56-7.4 (m, 5H), 4.4-3.4 (m, = 6H), 3.09-3.08 (d, J = 3.85 Hz, 1H), 2.49-1.97 (m, 3H), 1.64-1.34 (m, 5H), 1.05-1.02 (m, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１８Ｈ２６Ｎ２Ｏ４の計算値(３３４.４２)；検出値：３３５.５ [Ｍ＋１]。
【００９６】
実施例１０：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[３(Ｒ／Ｓ)−ピリジン−３−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸 Ｂ−５および商品として入手可能な３−ピロリジン−３−イル−ピリジン Ａ−５から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (DMSO): δ 8.89-8.76 (m, 2H), 8.26-8.2 (m, 1H), 7.79-7.74 (t, J = 4.7 & 7.7 Hz, 1H), 4.1-3.5 (m, 6H), 3.09-3.07 (d, J = 7.42 Hz, 1H), 2.54-1.37 (m, 8H), 1.05-0.97 (m, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１７Ｈ２５Ｎ３Ｏ４の計算値(３３５.４０)；検出値：３３６.５ [Ｍ＋１]。
【００９７】
実施例１１：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２(Ｓ)−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸 Ｂ−５および２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−オキサゾール Ａ−５(合成は、手順Ｅにおいて記載されている。)から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (CDCl3): δ 7.8 (s, 1H), 7.3 (s, 1H), 5.45 - 5.43 (t, J = 3.9 &3.8 Hz, 1H), 4.45 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 4.1-3.96 (m, 2H), 3.54 - 3.51 (t, J = 5.5 & 2.2 Hz, 1H), 2.5-2.3 (m, 4H), 1.95-1.91 (m, 2H), 1.57-1.53 (m, 4H), 1.12-1.08 (t, J = 6.04 & 7.14 Hz, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１５Ｈ２３Ｎ３Ｏ５の計算値(３２５.３６)；検出値：３２６.４ [Ｍ＋１]。
【００９８】
実施例１２：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２(Ｓ)−(５−メチル−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸および５−メチル−２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−オキサゾール Ｆ−５(Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝ＣＨ３；製造は、手順Ｆにおいて記載されている。)から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (CDCl3): δ 7.46 (s, 1H), 5.36-5.33 (m, 1H), 4.45-4.42 (m, 1H), 4.15-3.91 (m, 2H), 3.58-3.40 (m, 1H), 2.46(s, 3H), 2.40-2.21 (m, 4H), 1.93-1.83 (m, 2H), 1.51-1.49 (m, 4H), 1.08 (t, J = 6.9 Hz, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１６Ｈ２５Ｎ３Ｏ５の計算値(３３９.３９)；検出値：３４０.６ [Ｍ＋１]。
【００９９】
実施例１３：２(Ｒ)−フルオロ−３−(Ｒ)−(２−Ｓ−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、一般手順Ｃにしたがって製造され、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸 Ｂ−５を５−メチル−２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−オキサゾール Ａ−５(手順Ｅにおいて記載されたように製造される)と縮合すると、Ｂ−６を得、次いでこれを、さらに、手順Ｃにおいて記載されたように処理すると、異性体の１つとして標題の化合物を得る。
1H NMR (DMSO): δ 8.16 (s, 1H), 7.3 (s, 1H), 5.22-5.18 (dd, 1H), 5.07-4.9 (dd, J = 7.97 & 8.24 Hz, 1H), 3.9-3.65 (m, 2H), 3.4-3.35 (m, 1H), 2.37-2.07 (m, 4H), 1.78-1.76 (d, J = 6.04 Hz, 2H), 1.42 (bs, 4H), 1.03 (bs, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１５Ｈ２２ＦＮ３Ｏ４の計算値(３２７.５６)；検出値：３５０.５ [Ｍ＋２３]。
【０１００】
実施例１４：２(Ｓ)−フルオロ−３−(Ｒ)−(２−Ｓ−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、実施例１３において記載された反応から単離された、他方の異性体である。
1H NMR (DMSO): δ 8.16 (s, 1H), 7.3 (s, 1H), 5.33-5.29 (dd, 1H), 4.97-4.78 (dd, J = 9.89 & 10.44 Hz, 1H), 3.94-3.7 (m, 2H), 3.38-3.32 (m, 1H), 2.42-2.08 (m, 6H), 1.54-1.38 (m, 4H), 1.02-0.99 (m, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１５Ｈ２２ＦＮ３Ｏ４の計算値(３２７.５６)；検出値：３２８.５ [Ｍ＋１]。
【０１０１】
実施例１５：Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−[２−(２−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘキシル]−ホルムアミド
標題の化合物は、２−[(ベンジルオキシ−ホルミル−アミノ)−メチル]−ヘキサン酸 Ｄ−７(Ｒ＝ｎ−ブチル)および２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−オキサゾール Ｅ−５(手順Ｅにおいて記載されたように製造される)から、一般手順Ｄにしたがって製造される。
1H NMR (DMSO-d6): δ 9.89 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 5.28-5.21 (m, 1H), 3.88-3.45 (m, 4H), 3.31-3.02 (m, 1H), 2.41-2.27 (m, 1H), 2.20-2.03 (m, 4H), 1.57-1.41 (m, 5H), 1.02 (bs, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１５Ｈ２３Ｎ３Ｏ４の計算値(３０９.３６)；検出値：３１０.６ [Ｍ＋Ｈ]、３３２.５ Ｍ＋Ｎａ]。
【０１０２】
実施例１６：Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−[３(Ｒ)−(２−Ｒ／Ｓ−ピリジン−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘキシル]−ホルムアミド(異性体１)
標題の化合物は、２−[(ベンジルオキシ−ホルミル−アミノ)−メチル]−ヘキサン酸 Ｄ−７(Ｒ＝ｎ−ブチル)および商品として入手可能な２−ピロリジン−２−イル−ピリジン Ａ−５から、一般手順Ｄにしたがって製造される。
1H NMR (D2O): δ 8.55 (d, J = 4.9, 1H), 7.99-7.96 (m, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.37-7.28 (m, 2H), 5.02 (dd, J = 3.6, 3.6, 1H), 3.80-3.63 (m, 1H), 3.61-3.52 (m, 1H), 3.32-3.25 (m, 1H), 2.37-2.09 (m, 1H), 1.98-1.85 (m, 2H), 1.48-1.35 (m, 1H), 1.36-1.19 (m, 4H), 0.85-0.81 (t, J = 11.8, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１８Ｈ２７Ｎ５Ｏ４の計算値(３１９.２)；検出値：３２０.５ [Ｍ＋Ｈ]。
【０１０３】
実施例１７：Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−[３(Ｒ)−(２−Ｒ／Ｓ−ピリジン−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘキシル]−ホルムアミド(異性体２)
標題の化合物は、実施例１６において記載された反応から単離された、他方の異性体である。
1H NMR (D2O): δ 8.59 (d, J = 5.8, 1H), 8.41 (dd, J = 7.7, 7.7 1H), 7.82-7.75 (m, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.56-7.49 (m, 1H), 5.22 (dd, J = 4.7, 8.8, 1H), 4.05-3.89 (m, 1H), 3.87-3.80 (m, 1H), 3.72-3.62 (m, 1H), 3.54 (dd, J = 3.9, 14.8, 1H), 3.41-3.28 (m, 1H), 2.53-2.44 (m, 2H), 2.12-1.94 (m, 4H), 1.80-1.45 (m, 2H), 1.40-1.23 (m, 4H), 0.89 (dd, J = 5.5, 6.9, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１８Ｈ２７Ｎ５Ｏ４の計算値(３１９.２)；検出値：３２０.５ [Ｍ＋Ｈ]。
【０１０４】
実施例１８：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２−Ｓ−(４,５−ジメチル−チアアゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル]−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸 Ｂ−５および２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−(４,５−ジメチル−チアアゾール) Ｇ−４(Ｒ２＝Ｒ３＝ＣＨ３、合成は手順Ｇにおいて記載されている。)から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (CDCl3): δ 5.41-5.37 (dd, J = 2.5 Hz, 1H), 4.04-4.01 (m, 1H), 3.97 (d, J=9Hz, 1H), 3.85-3.78 (m, 1H), 3.14-3.08 (m, 1H), 2.44 & 2.39 (それぞれ s, 2x3H), 2.32-2.11 (m, 4H), 1.61-1.39 (m, 6H), 1.03 (t, J = 6.0Hz, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１７Ｈ２７Ｎ３Ｏ４Ｓの計算値(３６９.１７)；検出値：３７０.３ [Ｍ＋１]。
【０１０５】
実施例１９：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２−Ｓ−(４−フェニル−チアアゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル]−ヘプタン酸 ヒドロキサミドの合成
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸 Ｂ−５および２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−(４−フェニル−チアアゾール) Ｇ−４(Ｒ２＝Ｃ６Ｈ５、Ｒ３＝Ｈ、合成は手順Ｇにおいて記載されている。)から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (CDCl3): δ 8.18-8.10 (m, 3H), 7.64-7.49 (m, 3H), 5.59-5.58 (dd, J = 2.8 Hz, 1H), 4.10-4.01 (m, 1H), 3.95 (d, J = 7 Hz, 1H), 3.91-3.89 (m, 1H), 3.18-3.14 (m, 1H), 2.41-2.19 (m, 4H), 1.64-1.37 (m, 6H), 1.01(t, J = 6.0Hz, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ２１Ｈ２７Ｎ３Ｏ４Ｓの計算値(４１７.５２)；検出値：４１８.５ [Ｍ＋１]。
【０１０６】
実施例２０：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２−Ｓ−(４−メチル−チアアゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル]−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸 Ｂ−５および２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−(４−メチル−チアアゾール) Ｇ−４(Ｒ２＝ＣＨ３、Ｒ３＝Ｈ、製造は手順Ｇにおいて記載されている。)から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (CDCl3): δ 7.49-7.6 (dd, 1H), 7.05 (bs, 1H), 5.71-5.69 (d, J = 6.04 Hz, 1H), 4.45 (bs, 1H), 4.08-3.94 (d, 2H), 3.51 (bs, 1H), 2.67-2.63 (t, 3H), 2.3 9bs, 4H), 1.96 (bs, 2H), 1.57 (bs, 4H), 1.12-1.10 (d, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１６Ｈ２５Ｎ３Ｏ４Ｓの計算値(３５５.４７)；検出値：３５６.３ [Ｍ＋１]。
【０１０７】
実施例２１：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２−Ｓ−(ベンズイミダゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル]−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸 Ｂ−５および２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−(ベンズイミダゾール) Ｇ−４(合成は手順Ｇにおいて記載されている。)から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (DMSO): δ 7.78-7.66 (m, 2H), 7.51-7.37 (m, 2H), 5.41-5.37 (m, 1H), 5.25-5.21 (t, J = 6.32 Hz, 1H), 3.8-3.52 (m, 2H), 3.02-2.9 (m, 1H), 2.38-2.06 (m, 4H), 1.47-1.03 (m, 6H), 0.87-0.70 (m, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１９Ｈ２６Ｎ４Ｏ４の計算値(３７４.４４)；検出値：３７５.３ [Ｍ＋１]。
【０１０８】
実施例２２：Ｎ−ヒドロキシ−２−[Ｎ−(２−シクロペンチルエチル)−Ｎ)−[２−Ｓ−(４−フェニル)−チアアゾール−２−イル−ピロリジン]−アセトアミド
標題の化合物は、Ｉ−５および２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−(５−フェニル−チアアゾール) Ｇ−４(Ｒ２＝Ｃ６Ｈ５、Ｒ３＝Ｈ)から、一般手順Ｉ−４にしたがって製造される。
1H NMR (D6 DMSO): δ 7.93-7.91 (m, 3H), 8.41 (dd, J = 7.1, 7.1 2H), 7.35-7.30 (m, 1H), 5.31 (dd, J = 6.9, 6.9 1H), 3.89 (d, J = 16.2 1H), 3.62 (d, J = 16.2 1H), 3.58-3.40 (m, 2H), 3.30-3.15 (m, 2H), 2.42-2.39 (m, 1H), 1.96-1.83 (m, 3H), 1.69-1.60 (m, 3H), 1.54-1.43 (m, 6H), 1.07-0.96 (m, 2H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ２３Ｈ３０Ｎ４Ｏ３Ｓの計算値(４４２.２)；検出値：４６５.３ [Ｍ＋Ｎａ]。
【０１０９】
実施例２３：Ｎ−ヒドロキシ−２−[Ｎ−(２−シクロペンチルエチル)−Ｎ−[２−(２−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘキシル]−アセトアミド
標題の化合物は、Ｉ−５および５−メチル−２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−オキサゾール Ｅ−５(手順Ｅにおいて記載されたように製造される)から、一般手順Ｉ−４にしたがって製造される。
1H NMR (D6 DMSO): δ 7.97 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.07 (dd, J = 7.1, 7.1 1H), 3.81 (d, J = 16.2 1H), 3.47-3.39 (m, 2H), 3.25-2.99 (m, 2H), 2.26-2.22 (m, 1H), 1.98-1.81 (m, 3H), 1.69-1.60 (m, 3H), 1.78-1.42 (m, 7H), 1.04-1.02 (m, 2H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１７Ｈ２６Ｎ４Ｏ４の計算値(３５０.２)；検出値：３７３.４ [Ｍ＋Ｎａ]。
【０１１０】
実施例２４：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２(Ｓ)−(５−ｔｅｒｔ−ブチル−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸および５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−オキサゾール Ｆ−５(Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝ｔｅｒｔ−ブチル)から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (DMSO): δ 6.87 - 6.85 (d, J = 5.22 Hz, 1H), 5.25 - 5.21 (dd, J = 3.02 & 2.74 Hz, 1H), 4.04 - 3.96 (m, 2H), 3.86 - 3.79 (m, 1H), 3.13- 3.07 (t, J = 9.06 & 9.9 1Hz), 2.35 - 2.28 (m, 2H), 2.26 - 2.05 (m, 2H), 1.59 - 1.37 (m, 6H), 1.013 - 0.997 (t, J = 4.8 & 6.32 Hz, 3H)；ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１９Ｈ３１Ｎ３Ｏ５の計算値(３８１.４７)；検出値：３８２.４ [Ｍ＋Ｈ]。
【０１１１】
５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−オキサゾールは、次のように製造される：
１−アミノ−ピナコロン
ＤＭＦ(３０ｍｌ)中の１−ブロモ−ピナコロン(５.４ｇ、１当量)の溶液に、０℃にてアジ化ナトリウム(４ｇ、５当量)を加え、０℃にて１時間撹拌し、次いで室温にて１時間撹拌する。反応混合液をＥｔＯＡｃ(１５０ｍｌ)で希釈し、そして冷水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥する。このアジド化合物を、エタノール−濃ＨＣｌ中の１０％Ｐｄ−Ｃで処理すると、対応する標題の化合物を得る。
【０１１２】
５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−Ｓ−ピロリジン−２−イル−オキサゾール
ＤＣＭ中のＺ−Ｌ−Ｐｒｏ クロライド(１当量)の溶液を、ピリジン中の１−アミノ−ピナコロン(１.２当量)で、室温にて５時間処理する。通常の後処理の後、得られるアミド中間体をＰＯＣｌ３で、７０℃にて２時間処理すると、Ｚ−Ｎ−保護二環性化合物を得る。ＨＢｒ−ＡｃＯＨで処理すると、標題の化合物を得る。
1H NMR (DMSO): δ 9.51 (bs, 1H), 5.04 (bs, 1H), 3.49 (bs, 2H), 2.54-2.21 (m, 4H), 1.45 (bs, 9H). ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１１Ｈ１８Ｎ２Ｏの計算値(１９４.１４)；検出値：１９５.３ [Ｍ＋Ｈ]。
【０１１３】
実施例２５：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２(Ｓ)−(５−フェニル−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸および５−フェニル−２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−オキサゾール Ｆ−５(Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝フェニル)から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (DMSO): δ 7.86 - 7.83 (m, 1H), 7.77 (bs, 1H), 7.76 - 7.62 (m, 3H), 7.56 - 7.52 (m, 1H), 5.6 - 5.58 (d, J = 6.32 Hz, 1H), 5.32 - 5.29 (d, J = 6.59 Hz, 1H), 4.07 - 3.92 (m, 2H), 3.14 - 3.11 (m, 1H), 2.42 - 2.18 (m, 4H), 1.56 - 1.37 (m, 6H), 0.882 (bs, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ２１Ｈ２７Ｎ３Ｏ５の計算値(４０１.４６)；検出値：４０２.２ [Ｍ＋Ｈ]。
当該アミンは、実施例２４において記載されたのと同一の手順にしたがって、２−ブロモアセトフェノンから製造される。
【０１１４】
実施例２６：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２(Ｓ)−(５−イソ−ブチル−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸および５−イソ−ブチル−２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−オキサゾール Ｆ−５(Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝イソ−ブチル)から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (DMSO): δ 6.93 (bs, 1H), 5.23 - 5.19 (dd, J = 3.57 & 3.02 Hz, 1H), 4.05 - 3.95 (m, 2H), 3.83 - 3.78 (dd, J = 6.87 & 7.14 Hz, 1H), 3.13- 3.07 (t, J = 9.34 & 8.42 Hz, 1H), 2.7 - 2.57 (m, 2H), 2.47 - 1.97 (m, 5H), 1.58 - 1.35 (m, 6H), 1.13 - 0.99 (m, 9H)；ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１９Ｈ３１Ｎ３Ｏ５の計算値(３８１.４７)；検出値：３８２.３ [Ｍ＋Ｈ]。
４−メチル−２−ブタノンのブロモ化により、低い収率の他の位置異性体と共に、所望のブロモ化合物(主生成物)が提供される。アミンは、このブロモ化合物から、実施例２４において記載されたのと同一の手順にしたがって製造される。
【０１１５】
実施例２７：２(Ｓ)−ヒドロキシ−３(Ｒ)−[２(Ｓ)−(４,５−ジ−メチル−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸 ヒドロキサミド
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸および４,５−ジ−メチル−２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−オキサゾール Ｆ−５(Ｒ１＝Ｍｅ、Ｒ２＝Ｍｅ)から、一般手順Ｂにしたがって製造される。
1H NMR (DMSO): δ 5.17 - 5.13 (dd, J = 3.57 & 3.02 Hz, 1H), 4.06 - 3.92 (m, 2H), 3.86 - 3.82 (dd, J = 7.42 & 4.12 Hz, 1H), 3.12- 3.06 (t, J = 8.79 & 8.06 Hz, 1H), 2.56 - 2.26 (m, 2H), 2.35 (bs, 3H), 2.18 - 2.05 (m, 2H), 2.14 (bs, 3H), 1.57 - 1.35 (m, 6H), 1.04 - 1.02 (d, J = 6.043 Hz, 3H)。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１７Ｈ２７Ｎ３Ｏ５の計算値(３５３.４１)；検出値：３５４.６３ [Ｍ＋Ｈ]。
【０１１６】
４,５−ジ−メチル−２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−オキサゾールは、次のように製造される：
２−アミノ−ブタン−３−オン
ＤＭＦ中のジ−ｔｅｒｔ−ブチルイミノカルボキシレート(２８ｇ、１当量)の溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３(１３４ｇ、３当量)およびヨウ化テトラブチルアンモニウム(１５４ｇ、３当量)を、アルゴン雰囲気下で加える。１時間後、２−クロロ−ブタン−３−オン(４０ｍｌ、３当量)を反応混合液に加え、そして混合液を室温にて７２時間撹拌し、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライト濾過して無機物質を除去する。濾液を水性ＮａＨＣＯ３、水、１０％水性クエン酸で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、そして減圧下で濃縮する。残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーで精製すると、Ｂｏｃ保護された化合物を得る。この中間体を４Ｍ ＨＣｌで１６時間処理し、そして溶媒を蒸発させると、２−アミノ−ブタン−３−オンを得る。
【０１１７】
４,５−ジ−メチル−２−Ｓ−ピロリジン−２−イル−オキサゾール
ＤＣＭ中のＺ−Ｌ−Ｐｒｏ クロライド(１当量)溶液を、ピリジン中の２−アミノ−ブタン−３−オン(１.５当量)で、室温にて５時間処理する。通常の後処理の後、得られるアミド中間体をＰＯＣｌ３で７０℃にて２時間処理すると、Ｚ−Ｎ−保護二環性中間体を得る。この物質をＨＢｒ−ＡｃＯＨで処理すると、標題の化合物を得る。
1H NMR (DMSO): δ 4.99 - 4.94 (t, J = 7.32 & 6.7 Hz, 1H), 3.49-3.42 (m, 2H), 2.56 - 2.1 (m, 10H)；ＥＳ−ＭＳ：Ｃ９Ｈ１４Ｎ２Ｏの計算値(１６６.１１)；検出値：１６７.３ [Ｍ＋Ｈ]。
【０１１８】
実施例２８：２−Ｓ−ヒドロキシ−３−Ｒ−(２−Ｓ−オキサゾール−２−イル−ピロリジン−１−カルボニル)−ヘプタン酸
標題の化合物は、２−(２,２−ジメチル−４−オキソ−１,３−ジオキソラン−５−イル)ヘキサン酸および５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−オキサゾール Ｆ−５(Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝ｔｅｒｔ−ブチル)から、一般手順Ｋにしたがって、続いて９０％水性ＴＦＡ−ＤＣＥでの処理により、製造される。
1H NMR (DMSO): δ 6.48 (s, 1H), 5.21 - 5.18 (dd, J = 3.65 & 3.3 Hz, 1H), 4.15 - 3.92 (m, 3H), 3.80 - 3.74 (m, 1H), 2.92 - 2.86 (m, 2H), 2.32 - 2.28 (m, 1H), 2.14 - 2.03 (m, 3H), 2.02 - 1.36 (m, 15H), 1.012 - 0.973 (t, J = 6.6 & 5.22 Hz, 3H)；ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１９Ｈ３０Ｎ２Ｏ５の計算値(３６６.４６)；検出値：３６７.５ [Ｍ＋Ｈ]。
【０１１９】
実施例２９：１−[２−Ｓ−(５−ｔｅｒｔ−ブチル−オキサゾール−２−イル)−ピロリジン−１−イル]−２−Ｒ／Ｓ−メルカプトメチル−ヘキサン−１−オン
標題の化合物は、２−ブチル アクリル酸(Ｄ−２)および５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−(Ｓ)−ピロリジン−２−イル−オキサゾール Ｆ−５(Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝ｔｅｒｔ−ブチル)から、一般手順Ｊにしたがって、続いて９０℃にてチオール酢酸で３時間の処理により製造して、Ｓ−アセチル化合物を得る。ＭｅＯＨ中の２Ｎ−水酸化ナトリウムでアセチル基を除去すると、標題のチオ化合物の異性体混合物を得る；
1H NMR (CDCl3): δ 6.62 (s, 0.6H), 6.55 (s, 0.4H), 4.09-4.04 (m, 0.6H), 3.72-3.74 (m, 2H), 3.62-3.53 (m, 0.4H), 2.95-2.73 (m, 2H), 2.61-2.40 (m, 0.6H), 2.38-2.30 (m, 0.4H) 2.27-2.00 (m, 6H), 1.71-1.64 (m, 4H), 1.56-1.44 (m, 1H, SH), 1.26 (bs, 9H), 0.89 (t, J=7Hz, 3H), 0.74 (t, J=7Hz, 3H)；ＥＳ−ＭＳ：Ｃ１８Ｈ３０Ｎ２Ｏ２Ｓの計算値(３３８.５１)；検出値：３３９.５ [Ｍ＋Ｈ]。
【０１２０】
本発明による好ましい化合物は、例えば実施例１１〜１５の化合物である。
【０１２１】
本発明の化合物、例えば式(Ｉ)の化合物の遊離形態または薬学的に許容される塩形態またはそのプロドラッグは、例えばインビトロおよびインビボ試験で示されているように、例えば抗感染剤として、貴重な薬理学的特性を呈するため、治療に適応される。
【０１２２】
Ａ．ペプチドデホルミラーゼ活性の阻害
ＰＤＦ／ＦＤＨ共活性測定(Lazennec, C. & Meinnel, T., Anal. Biochem., Vol.224, pp. 180-182 (1997))を使用する。この共活性測定では、ＰＤＦによりその基質ｆＭＡＳから放出されるホルメートをカップリング酵素ＦＤＨにより酸化し、一分子のＮＡＤ＋からＮＡＤＨへの還元により、３４０ｎＭでの吸収増加が誘発される。測定は全て、半領域９６ウェルマイクロタイタープレート(Corning)において、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７.２、１０ｍＭのＮａＣｌ、０.２ｍｇ／ｍＬのＢＳＡの緩衝液中室温で実施される。０.５Ｕ／ｍｌのＦＤＨ、１ｍＭのＮＡＤ＋および所望の濃度のｆＭＡＳの混合物を加えることにより反応を開始させる。ＩＣ５０(酵素活性の５０％阻害に必要とされる濃度)値を測定するため、ＰＤＦを１０分間様々な濃度のアクチノニンとプレインキュベーションし、４ｍＭのｆＭＡＳを含む反応混合物を加えることにより脱ホルミル化反応を開始させる。ＳｐｅｃｔｒａＭａｘプレート読取装置(Molecular Devices, Sunnyvale, CA)を用いて、初反応速度ｙを、３４０ｎＭでの吸収増加の初速度として測定する。酵素活性の５０％が阻害されるインヒビターの濃度[Ｉｎ]、ＩＣ５０値を、以下の式を用いて計算する：
ｙ＝ｙ０／(１＋[Ｉｎ]／ＩＣ５０)
(式中、ｙ０は、インヒビターの非存在下における反応速度である)。ｙ＝ｙ０／２のときの[Ｉｎ]におけるＩＣ５０についてこの方程式を解くことによりＩＣ５０を得る。市販のソフトウェアパッケージ(Deltapoint, Inc., Chicago, IL)を用いて、非線形最小二乗回帰当てはめに基きＩＣ５０を計算する。
【０１２３】
この測定法を用いて、様々な化合物のＩＣ５０を測定する。様々な化合物についてのＩＣ５０を、金属イオンとしてニッケルおよび亜鉛を含むデホルミラーゼ酵素に対して測定する。亜鉛含有デホルミラーゼについて測定した式(Ｉ)の好ましい化合物のＩＣ５０値は、約０.５８５μＭ〜約０.００４μＭの範囲である。ニッケル含有デホルミラーゼについて測定した式(Ｉ)の好ましい化合物のＩＣ５０値は、約０.０６μＭ〜約０.０００１μＭの範囲であった。
【０１２４】
Ｂ．抗菌活性試験についてのアッセイ
９６ウェルフォーマットプレートにおける微量希釈方法を用いて最小阻害濃度(ＭＩＣ)を測定する。化合物を５または１０ｍｇ／ｍＬでＤＭＳＯに懸濁し、使用時まで４℃で貯蔵する。それらをミュラー−ヒントンブロス(ＭＨＢ)またはトリプチカーゼダイズブロス(ＴＳＢ)中で希釈し、ＭＩＣ測定に使用する。２倍希釈系を用いて試験した濃度範囲は、６４〜０.０６２５μｇ／ｍＬ最終濃度である。
【０１２５】
トリプチカーゼ大豆寒天(ＴＳＡ)で成長させた細胞から接種材料を調製し、３５℃で一夜インキュベーションし、５〜１０コロニーを用いてＭＨＢまたはＴＳＢブロスに接種し、培養物を３５℃で一夜インキュベーションする。一晩培養物を１：１０に希釈し、１時間３５℃でインキュベーションし、適切な接種材料サイズに希釈し、ブロスおよび試験化合物を含有するウェルに適用する。接種材料サイズは、２×１０４ＣＦＵ／ｍＬである。
【０１２６】
プレートを３５℃で４８時間インキュベーションし、細菌についてインキュベーションの１８時間後に記録する。ＭＩＣは、インキュベーション後に目に見える成長を生じることのない化合物の最低濃度として定義される。
【０１２７】
式(Ｉ)の様々な好ましい化合物についての最小阻害濃度は、ヘモフィルス・インフルエンザ(H.influenza)(４株)に対して約０.１２５μｇ／ｍＬ〜約２.０μｇ／ｍＬ、スタフィロコッカス・アウレウス(S.aureus)(４株)に対して約０.２５μｇ／ｍＬ〜６４μｇ／ｍＬより大、ストレプトコッカス・ニューモニア(S.pneumonia)(３株)に対して約２μｇ／ｍＬ〜約１６μｇ／ｍＬ、およびモラクセラ・カタラーリス(M.catarrhalis)に対して約０.１２５μｇ／ｍＬ〜約２μｇ／ｍＬの範囲である。デホルミラーゼ酵素は、エシェリキア・コリ(E.coli)から入手される。
【０１２８】
Ｃ．ＭＭＰ−７(マトリリシン)と比較したＰＤＦの選択的阻害の立証
先に記したように、ＭＭＰよりもＰＤＦについて選択的であるインヒビターは、副作用を回避するために望ましい。
【０１２９】
マトリックスメタロプロテイナーゼに対する可能な阻害作用について本発明の化合物を試験するため、ＭＭＰ−７(マトリリシン)についての以下のアッセイを使用する。
【０１３０】
ＭＭＰ−７(マトリリシン)アッセイ：
基質としてチオ−ペプチド(Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ)を用いて、マトリリシン活性を検定する。酵素加水分解時、チオラートが生成物として解離される。こうして生成されたチオラートがＤＴＮＢ(ジチオニトロベンゼン)と反応することにより生じた黄色を４０５ｎＭでモニターする。この検定は室温で実施する。検定緩衝液は、半領域９６ウェルマイクロタイタープレートに５０ｍＭのトリシン、ｐＨ７.５、０.２ＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのＣａＣｌ２、および０.０５％のブリージ(Brij)を含有する。緩衝液中の２００ＴＭ ＤＴＮＢおよび１００ＴＭチオペプチドの混合物を加えることにより、反応を開始させる。ＩＣ５０(酵素活性の５０％阻害に必要とされる濃度)値を測定するため、ＭＭＰ−７を１０分間様々な濃度の化合物とプレインキュベーションし、チオペプチドおよびＤＴＮＢを含む反応混合物を加えることにより、加水分解を開始させる。ＳｐｅｃｔｒａＭａｘプレート読取装置(Molecular Devices, Sunnyvale, CA)を用いて、３０分間にわたってＯＤ４０５での吸光度増加として反応速度を記録する。酵素活性の５０％が阻害されるインヒビターの濃度[Ｉｎ]、ＩＣ５０値を、以下の式を用いて計算する：
ｙ＝ｙ０／(１＋[Ｉｎ]／ＩＣ５０)
(式中、ｙ０は、インヒビターの非存在下における反応速度である)。ｙ＝ｙ０／２のときの[Ｉｎ]におけるＩＣ５０についてこの方程式を解くことによりＩＣ５０を得る。
【０１３１】
このアッセイを用いて、様々な化合物のＩＣ５０を測定する。ＭＭＰ−７に対する式(Ｉ)の様々な好ましい化合物のＩＣ５０は、約１００μＭであり、亜鉛含有ＰＤＦに対するこれらの同化合物のＩＣ５０は、約０.００４μＭ〜約０.５８５μＭの範囲であり、ニッケル含有ＰＤＦに対するＩＣ５０は、約０.００１μＭ〜約０.００６μＭの範囲である。したがって、本発明により提供される化合物は、ＭＭＰ−７に対するそれらの活性と比べてＰＤＦについての優れた選択性を有することが分かる。ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−９、ＭＭＰ−１３、ＭＴ−ＭＭＰ−１、および組織壊死因子変換酵素に対してもＰＤＦについての化合物の類似した選択性が観察される。類似した選択性はまた、他のメタロプロテイナーゼ類、例えばアンギオテンシン変換酵素に対しても観察される。
【０１３２】
Ｄ．インビボ効力測定用マウス敗血症モデル
各々体重１８〜２２ｇのＣＤ１雌異系交配マウス(Charles River Laboratories)に、７％ブタ胃粘膜(ムチン)中に５×１０７ｃｆｕのスタフィロコッカス・アウレウス(S.aureus)(スミス株)を含む懸濁液０.５ｍＬを腹腔内注射する。注射の１時間および５時間後にマウスを皮下(ｓ.ｃ.)、静脈内(ｉ.ｖ.)または経口(ｐ.ｏ.)的に処理する。６匹のマウスからなる６群の各々に、各化合物の２倍希釈を表す異なる用量レベル(１００ｍｇ／ｋｇ〜０.１ｍｇ／ｋｇの範囲)を与える。バンコマイシンを対照抗生物質として使用し、そして皮下投与する。化合物をＰＢＳ中で処方し、未処理対照にはビヒクルのみを投与する。
【０１３３】
各群における死亡を６日間毎日モニターして、累積死亡数を用いることにより、ReedおよびMuenchの方法を用いて計算される５０％防御用量(ＰＤ５０)を決定する。式(Ｉ)で示される幾つかの好ましい化合物についてのスタフィロコッカス・アウレウス(S.aureus)に対するマウスでのＥＤ５０(皮下)は、約３.４５ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇより大の範囲である。式(Ｉ)のこれら同化合物についてのスタフィロコッカス・アウレウス(S.aureus)に対するマウスにおけるＰＤ５０(経口)は、７.０６ｍｇ／ｋｇ〜約１０.８３ｍｇ／ｋｇより大の範囲である。
【０１３４】
Ｅ．マウスにおけるＰＤＦインヒビターの薬物動態試験
ＰＤＦ化合物の薬物動態を、体重２０〜２５ｇのＣＤ１雌異系交配マウス(Charles River Laboratories)で測定する。ＰＤＦ化合物を２０％シクロデキストリン(Aldrich)で処方し、０.２２μＭのフィルターを通して滅菌濾過する。単一化合物またはカセットとして４〜６化合物の混合物を、１０ｍＬ／ｋｇで静脈内および経口投与する。用量は、各化合物について３〜１５ｍｇ／ｋｇの範囲であった。服用後０.０８３、０.２５、０.５、１、２、４および７時間目に、麻酔下で心臓穿刺により血清試料を集める。４マウスからなる群を各時点について使用する。血清試料を分析時まで−８０℃で貯蔵する。
【０１３５】
アセトニトリルを加えることにより、血清タンパク質を沈澱させる。タンパク質沈澱後の試料を、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ方法により分析する。各化合物について標準曲線を得、血清中の化合物濃度の測定に使用する。最大濃度の時間(Ｔｍａｘ)、最大濃度(Ｃｍａｘ)、終末半減期(ｔ１／２)および曲線下領域(ＡＵＣ)を含む薬物動態パラメーターを、標準的方法にしたがって計算する。経口生物学的利用能を、経口投与のＡＵＣ対静脈内投与のＡＵＣの比率として計算する。式(Ｉ)の好ましい化合物は、３５％より大きい経口生物学的利用能を呈する。
【０１３６】
したがって、本発明の化合物は、細菌を阻害するのに、あるいは様々な細菌または原核生物体により誘発される感染性疾患の処置および／または予防に、有用である。例としては、グラム陽性およびグラム陰性好気性および嫌気性菌、例えば、スタフィロコッカス(Staphylococci、ブドウ球菌)、例えばスタフィロコッカス・アウレウス(S. aureus)およびスタフィロコッカス・エピデルミディス(S. epidermidis); エンテロコッカス(Enterococci、腸球菌)、例えばエンテロコッカス・フェカリス(E.faecalis)およびエンテロコッカス・フェシウム(E. faecium); ストレプトコッカス(Streptococci、連鎖球菌)、例えばストレプトコッカス・ニューモニエ(S.pneumoniae); ヘモフィルス(Haemophilus)、例えばヘモフィルス・インフルエンザ(H.influenza); モラクセラ(Moraxella)、例えばモラクセラ・カタラーリス(M. catarrhalis); バクテロイデス(Bacteroides)、例えば、バクテロイデス・フラギリス(Bacteroides fragilis)、クロストリジウム(Clostridium)、例えばクロストリジウム・ディフィシレ(Clostridium difficile)、ナイセリア(Niesseria)、例えばナイセリア・メニンギチジス(N. meningitidis)およびナイセリア・ゴノロエエ(N. gonorrhoae)、レジオネラ(Legionella)、およびエシェリキア(Escherichia)、例えばエシェリキア・コリ(E. coli)があるが、これらに限定はされない。他の例には、マイコバクテリウム(Mycobacteria)、例えばマイコバクテリウム・ツベルクローシス(M. tuberculosis); 細胞内微生物、例えばクラミジア(Chlamydia)およびリケッチア(Rickettsiae); およびマイコプラズマ(Mycoplasma)、例えばマイコプラズマ・ニューモニエ(M. pneumoniae); シュードモナス(Pseudomonas)、例えばシュードモナス・エルギノサ(P. aeruginosa); ヘリコバクター・ピロリ(Helicobacter pylori);および寄生体、例えばプラスモジウム・ファルシパルム(Plasmodium falciparum)がある。
【０１３７】
本明細書で使用されている「感染性疾患」は、微生物感染の存在、例えば細菌の存在を特徴とする疾患である。上記感染性疾患には、例えば、中枢神経系感染症、外耳感染症、中耳感染症、例えば急性中耳炎、硬膜静脈洞の感染症、目の感染症、口腔の感染、例えば歯、歯肉および粘膜の感染症、上気道感染症、下気道感染症、尿生殖器感染症、胃腸感染症、婦人科感染症、敗血症、骨および関節感染症、皮膚および皮膚構造感染症、細菌性心内膜炎、火傷、外科手術の抗菌的予防、免疫抑制患者、例えば癌化学療法を受けている患者、または臓器移植患者における抗菌的予防、および感染性生物により誘発される慢性疾患、例えば動脈硬化症がある。
【０１３８】
本発明の化合物を用いることにより、対象を処置し、感染症を処置、予防および／または重症度を低減化し得る。対象には、動物、植物、血液製品、培養物および表面、例えば医学または研究設備の表面、例えばガラス、針、外科設備および管、および生物体への一時的または永久的移植を意図した物体がある。好ましい動物には、哺乳動物、例えばマウス、ラット、ネコ、イヌ、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ、イノシシ、霊長類、例えばアカゲザル、チンパンジー、ゴリラ、および最も好ましくはヒトがある。対象の処置には、微生物による対象の感染により誘発される臨床徴候の予防、低減化、および／または排除、微生物による対象の感染症の予防、低減化および／または排除、または微生物による対象の汚染の予防、低減化、および／または排除が含まれるが、これらに限定はされない。関与する微生物は、好ましくは原核生物、さらに好ましくは細菌である。
【０１３９】
上記使用の場合、必要量は、もちろん、投与方式、処置される特定条件および所望の効果により変動する。組成物は、例えば、投与方法によって、約０.１重量％〜約９９重量％、例えば約１０〜６０重量％の割合で活性物質を含み得る。組成物が単位用量を含む場合、各単位は、例えば約１〜１０００ｍｇ、例えば１〜５００ｍｇの有効成分を含む。成人処置について使用される用量は、投与経路および頻度により、例えば約１〜３０００ｍｇ／日、例えば１５００ｍｇ／日の範囲である。かかる用量は、約０.０１５〜５０ｍｇ／ｋｇ／日に相当する。適切には、用量は、例えば約５〜２０ｍｇ／ｋｇ／日である。経口投与に適切な単位用量形態は、約０.２５〜１５００ｍｇの有効成分を含む。
【０１４０】
「薬学的に許容される担体」は、一般的に安全かつ非毒性であり、生物学的または他の面で望ましくない点が無い医薬組成物の製造に有用な賦形剤を意味し、獣医学用途およびヒト医薬用途に許容される賦形剤を包含する。本明細書および請求の範囲で使用されている「薬学的に許容される担体」は、１種および複数の両方の上記担体を包含する。
【０１４１】
化合物は、慣用的経路、例えば局所的または全身的、例えば経口、局所、非経口、皮下経路、または吸入により投与され得、そして対象、例えば動物、好ましくは哺乳動物、さらに好ましくはヒトにおける細菌感染症の処置に使用され得る。
【０１４２】
組成物は、当分野における任意の慣用的経路、例えば皮下、吸入、経口、局所または非経腸的に投与され得、そして対象、例えば動物、好ましくは哺乳動物、さらに好ましくはヒトにおける細菌感染症の処置に使用され得る。
【０１４３】
本発明の化合物は、他の抗生物質と同様に、ヒトまたは獣医学に用いられる好都合な方法での投与用に処方され得る。上記方法は当業界では公知であり(例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, Easton, PA: Mack Publishing Co.参照)、本明細書では詳述していない。
【０１４４】
組成物は、当業界で公知の形態を取り得、限定されるわけではないが、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、トローチ剤、クリームまたは液体調製物、例えば経口または滅菌非経口溶液または懸濁液が含まれ得る。化合物は、また、リポソーム製剤で投与され得る。化合物は、また、プロドラッグとして投与され得、その場合投与されるプロドラッグは、処置哺乳動物において、生物学的活性を示す形態への生体内変換を受ける。
【０１４５】
本発明の局所製剤は、例えば軟膏、クリームまたはローション、溶液、塗剤(salve)、エマルジョン、硬膏、眼用軟膏および点眼または点耳液、含浸ドレッシングおよびエーロゾルとしての形態を取り得、そして適当な慣用的添加物、例えば保存剤、薬剤浸透を助ける溶媒および皮膚軟化薬を軟膏およびクリーム中に含み得る。
【０１４６】
該製剤は、また、適合し得る慣用的担体、例えばクリームまたは軟膏基剤およびローション用にエタノールまたはオレイルアルコールを含み得る。上記担体は、例えば、製剤の約１％〜約９９％以下の割合で存在し得る。例えば、それらは製剤の約８０％以下を構成し得る。
【０１４７】
経口投与用の錠剤およびカプセル剤は、単位用量提示形態であり得、慣用的賦形剤、例えば結合剤、例えばシロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソルビトール、トラガカントまたはポリビニルピロリドン、増量剤、例えば乳糖、砂糖、トウモロコシ澱粉、リン酸カルシウム、ソルビトールまたはグリシン、錠剤用滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコールまたはシリカ、崩壊剤、例えばジャガイモ澱粉、または許容される湿潤剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムを含み得る。錠剤は、標準的医薬実践現場でよく知られている方法にしたがってコーティングされ得る。
【０１４８】
経口液体調製物は、例えば、水性または油状懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップまたはエリキシルの形態であり得るか、または使用前の水または別の適当な賦形剤による再構成用乾燥製品として提供され得る。上記液体調製物は、慣用的添加物、例えば懸濁剤、例えばソルビトール、メチルセルロース、グルコースシロップ、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲルまたは硬化食用脂、乳化剤、例えばレシチン、ソルビタンモノオレエート、またはアラビアゴム、非水性賦形剤(食用脂を含み得る)、例えば落花生油、油状エステル、例えばグリセリン、プロピレングリコール、またはエチルアルコール、保存剤、例えばメチルまたはプロピルｐ−ヒドロキシベンゾエートまたはソルビン酸および所望ならば慣用的調味または着色剤を含み得る。
【０１４９】
非経口投与の場合、流体単位用量形態は、化合物および滅菌賦形剤、好ましくは水を用いて製造される。使用される賦形剤および濃度により、化合物は、賦形剤または他の適当な溶媒に懸濁または溶解され得る。溶液を製造する場合、化合物を注射用水に溶かし、フィルター滅菌(濾過)した後、適当なバイアルまたはアンプルに充填し、密閉し得る。有利には、薬剤、例えば局所麻酔保存および緩衝剤を賦形剤に溶解させ得る。安定性を高めるため、組成物を、バイアルへの充填前に冷凍し、真空下で水を除去し得る。次いで、乾燥状凍結乾燥粉末をバイアルに密閉し、注射用水の添付バイアルを供給することにより、使用前に液体を再構成し得る。非経腸懸濁液も実質的に同じ方法で製造するが、ただし、化合物を溶解させる代わりに賦形剤に懸濁し、滅菌には濾過を付随させ得る。化合物を滅菌賦形剤に懸濁する前に、エチレンオキシドに暴露することにより滅菌し得る。有利には、界面活性剤または湿潤剤を組成物に含ませることにより、化合物の均一分布を容易にする。
【０１５０】
本発明の化合物、例えば式(Ｉ)の化合物は、例えば上記で示した通り、遊離形態または薬学的に許容される塩形態で投与され得る。上記塩類は、慣用的方法で製造され得、遊離化合物と同程度の活性を呈し得る。
【０１５１】
上述したことによると、本発明は、さらに以下のものを提供する。
１.１．対象、例えばヒトまたは他の動物対象における感染性疾患の処置および／または予防方法であって、対象に例えば式(Ｉ)の本発明の化合物、その薬学的に許容される塩またはそのプロドラッグの有効量を投与することを含む方法。
【０１５２】
１.２．対象におけるペプチジルデホルミラーゼの阻害方法であって、対象に例えば式(Ｉ)の本発明の化合物、その薬学的に許容される塩またはそのプロドラッグの有効ペプチジルデホルミラーゼ阻害量を投与することを含む方法。
【０１５３】
２．例えば上記１.１または１.２で示されたいずれかの方法において、医薬として使用される、例えば式(Ｉ)の本発明化合物の遊離形態または医薬上許容される塩形態。
【０１５４】
３．例えば式(Ｉ)の本発明化合物の遊離形態または薬学的に許容される塩形態を例えばその医薬上許容される希釈剤または担体と共に含む、例えば上記１.１または１.２記載の方法のいずれかにおいて使用される医薬組成物。
【０１５５】
４．上記１.１または１.２に示されたいずれかの方法で使用される医薬としてまたは医薬組成物の製造で使用される例えば式(Ｉ)の本発明の化合物、薬学的に許容されるその塩またはプロドラッグ。
【０１５６】
疾患を「処置する」または疾患の「処置」は、
(ａ)疾患を予防する、すなわち発病の危険にさらされているかまたは発病しやすい状態であり得るがまだ疾患の徴候を経験していないかまたは発現していない対象、例えば哺乳動物において疾患の臨床的徴候が発現しないようにする、
(ｂ)疾患を阻害する、すなわち疾患またはその臨床的徴候の発現を阻止または低減化する、または
(３)疾患を軽減する、すなわち疾患またはその臨床的徴候の後退を誘発する
ことを含む。
【０１５７】
「有効ペプチジルデホルミラーゼ阻害量」は、ペプチジルデホルミラーゼの阻害に応答性を示す感染性疾患を処置するため、またはペプチジルデホルミラーゼを阻害するために対象に投与されたとき、ペプチジルデホルミラーゼを阻害するのに十分である、化合物、薬学的に許容されるその塩またはそのプロドラッグの量をいう。「有効ペプチジルデホルミラーゼ阻害量」は、使用されている化合物、その塩またはそのプロドラッグ、対象で阻害される微生物、処置すべき対象の年齢、体重、性別、病状、種、疾患およびその重症度、および投与経路により変動するが、それにもかかわらず、当業者により容易に決定され得る。
【０１５８】
例えば式(Ｉ)の本発明の化合物、薬学的に許容されるその塩またはそのプロドラッグは、単独または別の治療剤と組み合わせて投与され得る。上記治療剤の例には、他の抗菌剤、例えばβ−ラクタム類、例えばペニシリン類、セファロスポリン類、カルバペネム類、ケトリド類、キノロン類、例えばフルオロキノロン、マクロライド類、例えばクラリスロマイシン、アジトロマイシンまたはバンコマイシン、リファマイシン類、モノバクタム類、イソニアジド、リコサミド類、ムピロシン、スルホンアミド類、フェニコール類、ホスホマイシン、グリコペプチド類、テトラサイクリン類、ストレプトグラミン類、クロラムフェニコール、およびオキサゾリジノン、抗炎症剤、例えばコルチコステロイド類またはＮＳＡＩＤ、鎮痛剤、例えば麻酔薬または非オピエート(non-opioic)鎮痛薬があるが、限定されるわけではない。
【０１５９】
上述したことによると、本発明はさらに別の態様において以下のものを提供する。
５．例えば治療上有効量の式(Ｉ)の本発明化合物、薬学的に許容されるその塩またはそのプロドラッグ、および第二の医薬物質の例えば同時または連続的併用投与を含む上記方法。
【０１６０】
６．ａ)例えば式(Ｉ)の本発明の化合物、薬学的に許容されるその塩またはそのプロドラッグ、およびｂ)少なくとも１種の第二の活性剤を含む治療用の組み合わせ、例えばキット。成分ａ)および成分ｂ)は同時または連続して使用され得る。キットは、その投与についての使用説明書を含み得る。
【０１６１】
以下のものは、本発明の化合物を含む代表的医薬製剤である。
実施例Ａ：錠剤製剤
以下の成分を緊密混合し、単一割線錠剤に圧縮成型する。
【表１】
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【０１６２】
実施例Ｂ：カプセル製剤
以下の成分を緊密混合し、ゼラチン硬カプセルに充填する。
【表２】
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【０１６３】
実施例Ｃ：懸濁液製剤
以下の成分を混合し、経口投与用懸濁液を形成する。
【表３】
2005501020.tif 000017
【０１６４】
実施例Ｄ：注射可能製剤
以下の成分を混合して、注射可能製剤を形成する。
【表４】
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【０１６５】
実施例Ｅ：坐剤製剤
本発明化合物とウィテップゾール(Witepsol、登録商標)Ｈ−１５(植物性飽和脂肪酸のトリグリセリド、Riches-Nelson, Inc., New York)を混合することにより、以下の組成を有する総重量２.５ｇの坐剤を製造する。
【表５】
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【０１６６】
本発明は、本発明の化合物の臨床的使用、すなわち対象における感染症の処置に限定されるわけではない。細菌と１種またはそれ以上の本発明化合物を接触させることにより細菌を阻害するのが望ましいときであれば常に、本発明の化合物は細菌を阻害するのに有用である。その細菌阻害能力ゆえに、本発明の化合物は、細胞培養物の汚染を阻止するのに特に有用である。この明細書で使用されている「阻害する」の語は、細菌の抑制、制御または殺菌を意味する。真核生物細胞、特に動物細胞は、様々な理由で、例えば物質、例えばタンパク質の生産能力ゆえに培養されることが多い。上記細胞の例には、チャイニーズハムスター卵巣細胞(ＣＨＯ細胞)、アフリカミドリザル腎細胞、親細胞(骨髄腫等)を有用物質生産性正常細胞(リンパ球等)と融合することにより構築されたハイブリドーマなどがある。典型的には、本発明化合物を、細菌阻害量、例えば約０.０００１〜約１０マイクログラム／ｍｌ、好ましくは約０.０００１〜約１マイクログラム／ｍｌ、さらに好ましくは約０.００１〜約０.１マイクログラム／ｍｌの濃度で細胞培養培地に組込む。当業界で公知の慣用的細胞培養培地が使用され得る。
【０１６７】
上述したところによると、本発明はさらに別の態様において以下のものを提供する。
７．例えば細菌阻害量の式(Ｉ)の本発明の化合物または薬学的に許容されるその塩を細胞培養培地中に組込むことを含む、細胞培養培地の細菌汚染を阻止する方法。
【０１６８】
８．例えば細菌阻害量の式(Ｉ)の本発明化合物または薬学的に許容されるその塩を含む細胞培養培地。
【０１６９】
以上、明確化および理解を目的として、実例および実施例により本発明をある程度詳細に説明した。添付の特許請求の範囲内で変更および修正が実施され得ることは、当業者であれば容易に理解できるはずである。したがって、上の記載は例示を意図するものであって制限を意図するものではないと理解されるべきである。したがって、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲を参照し、かつ特許請求の範囲と均等な全範囲を加えて決定されるべきであって、上記の説明によって決定されるべきではない。
【０１７０】
本願において引用されているすべての特許、特許出願および出版物は、それぞれの特許、特許出願または出版物が個別的に示されているのと同程度に、すべての目的のために引用により、それらの全体を本明細書の一部とする。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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