(57)【要約】本発明は初乳、プロバイオティック、及びプレバイオティックを含む食品に関する。初乳、プロバイオティック、及びプレバイオティックの３つの組合わせは、動物の消化管及び健康状態にとって特に有益である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
初乳、プロバイオティック、及びプレバイオティックを含む食品。
【請求項２】
糖を更に含むことを特徴とする請求項１に記載の食品。
【請求項３】
ココアバターの代用品を更に含むことを特徴とする請求項１または２に記載の食品。
【請求項４】
ヨーグルト成分を更に含むことを特徴とする請求項１乃至３のいずれか１項に記載の食品。
【請求項５】
前記初乳はウシ、ヒツジまたはヤギのものであることを特徴とする請求項１乃至４のいずれか１項に記載の食品。
【請求項６】
前記初乳は、初乳由来の生長因子及び免疫成分を含んだ画分であることを特徴とする請求項１乃至５のいずれか１項に記載の食品。
【請求項７】
前記プロバイオティックは、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、ビフィドバクテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、バクテリオイデス（Ｂａｃｔｅｒｉｏｉｄｅｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、フゾバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、メリッソコッカス（Ｍｅｌｉｓｓｏｃｏｃｃｕｓ）、プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、エンテロコッカス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ユーバクテリウム（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ラクトコッカス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）、スタフィロコッカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、ペプトストレプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、バシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、ペディオコッカス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ）、ミクロコッカス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ）、リューコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）、ウェイセラ（Ｗｅｉｓｅｌｌａ）、エアロコッカス（Ａｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、及びオエノコッカス（Ｏｅｎｏｃｏｃｃｕｓ）の内の１以上のものであることを特徴とする請求項１乃至６のいずれか１項に記載の食品。
【請求項８】
前記プロバイオティックは、ビフィドバクテリウム属の各菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｐｅｃｉｅｓ）、及びバシラスサブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）の内の１以上のものであることを特徴とする請求項７に記載の食品。
【請求項９】
前記プロバイオティックは、ＮＣＩＭＢ４１１１７として寄託されるラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）などの１以上のラクトバシラス・アシドフィリス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）であることを特徴とする請求項８に記載の食品。
【請求項１０】
前記プレバイオティックは、グルコース、フルクトース、キシロース、ガラクトース、ラクトース、マンノース、アラビノース、Ｄ−フコース、Ｌ−フコース、ラムノース、アクチライト、バイオトース、パラチノース、ＩＭＯ、セロビオース、ゲンチビオース、レバン、マルトデキストリン、マルトース、メリビオース、ラクトース、パノリッチ、メレジトース、ラフチリン、ラフチロース、スタキオース、スクロース、タガトース、キシラン、フルクトオリゴ糖、イヌリン、大豆オリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、ラクトスクロース、マルトオリゴ糖、キシロオリゴ糖、画分化イヌリン、及びラフィノースの１以上のものであることを特徴とする請求項１乃至９のいずれか１項に記載の食品。
【請求項１１】
乾燥状態または半湿潤状態のすぐ食べられるキブルの形状であることを特徴とする請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の食品。
【請求項１２】
前記キブルは初乳のコーティングを有することを特徴とする請求項１１に記載の食品。
【請求項１３】
前記プロバイオティックは前記キブルの外側に存在することを特徴とする請求項１１または１２に記載の食品。
【請求項１４】
初乳を含んだ乾燥状態または湿潤状態のすぐ食べられるキブルと、
プロバイオティックを含んだ乾燥状態または湿潤状態のすぐ食べられるキブルとを含むことを特徴とする請求項１乃至１３のいずれか１項に記載の食品。
【請求項１５】
プレバイオティックを含んだ乾燥状態または湿潤状態のすぐ食べられるキブルと、
液体もしく半液体状のフォーマットの初乳及び／またはプロバイオティックとを含むことを特徴とする請求項１乃至１３のいずれか１項に記載の食品。
【請求項１６】
脂肪ベースの乳製品基質の形状であることを特徴とする請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の食品。
【請求項１７】
粉末混合物の形状であることを特徴とする請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の食品。
【請求項１８】
動物の消化管の健康状態を維持もしくは改善するために使用されることを特徴とする請求項１乃至１７のいずれか１項に記載の食品。
【請求項１９】
動物の消化管の健康状態を維持もしくは改善する方法であって、請求項１乃至１７のいずれか１項に記載の食品を動物に投与する工程を含む方法。
【請求項２０】
前記動物は仔犬または仔猫であることを特徴とする請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
食品の製造に初乳、プロバイオティック及びプレバイオティックを使用して動物の消化管の健康状態を維持もしくは改善する方法。
【請求項２２】
請求項１乃至１８のいずれか１項に記載の食品を製造する方法であって、未加工の材料を混合し、必要に応じて材料片に成形し、必要に応じて加熱し、食品として提供する各工程を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は健康的な消化管の発育に有用な食品に関する。
【従来技術】
【０００２】
健康な消化管の初期の発育は、動物の乳児が生体防御力の高い健康な成体に成熟するうえで重要である。仔犬や他の動物の乳児では出生時の免疫応答が比較的弱く、このためこうした乳児動物では感染症のリスクが高い。乳児動物は母体から天然の「受動」免疫を獲得し、これにより乳児は出生前に子宮内で受動的に受け継がれる抗体によって防御される。母体のＩｇＧ抗体は胎盤を通過して母親が免疫を獲得している微生物と同じ微生物に対する免疫を乳児の循環系に与える。出生後、乳児の消化管を防御する生体活性物質やＩｇＡなどの抗体が母乳によって与えられる。こうした局所的受動免疫は、乳児の体腔内に入ることなく乳児を防御するものである。
【０００３】
離乳期における、母乳による流動栄養から固形食への切り換えは乳児にとって無防備となる時期である。消化管が固形食を消化しなければならないことに加え、乳児は母乳による生体防御を受けることができなくなる。離乳期では消化管及び免疫系は依然未成熟であり、このため乳児では下痢の原因となる（細菌やウイルス）感染のリスクが高い。健康リスクである下痢は乳児の成長速度を低下させるだけでなく、看過された場合には死亡に結びつくこともある。
【０００４】
更に、飼育及び販売期間においても仔犬の下痢の発生率は高い。下痢はペットショップのオーナー（仔犬の１０〜３０％）やブリーダー（商業的ブリーダーの１０〜５０％）にとって日常的な問題であり、仔犬の陳列ひいては販売に影響する問題である。また下痢は獣医の来院理由として一般的である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
したがって、仔犬、仔猫や他の動物の新生児の離乳期を通じた生存、生育を助ける栄養学的な食品であって、特にこうした動物が生後、ストレスを与える様々な状況に曝される際（母親と引き離される、新しい環境におかれる、食餌内容の急な変化）に下痢の発生率、期間、重篤度を低減し、仔犬／仔猫や他の動物の新生児を防御する局所的受動免疫を与える食品が必要とされている。こうした栄養学的食品は天然の食品であることが好ましい。こうした食品は単にこれを提供するだけではなく、仔犬、仔猫や他の新生児動物による摂取を促すために食べやすい形態で与えられることが必要である。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
そこで本発明は第１の態様において、初乳、プロバイオティック、及びプレバイオティックを含む食品を提供するものである。
【０００７】
プロバイオティックとは、ホスト動物の腸内の微生物バランスを改善することによってホスト動物に有益な効果をもたらす微生物のことである。プレバイオティックとは、消化管内の１以上の健康増進の助けとなる細菌の増殖及び／または活性を選択的に促進することによってホスト動物の健康増進に役立つ消化されない食物成分のことである。
【０００８】
初乳とは、出産後の最初の２４時間から７２時間にかけて母親の乳腺から分泌される前乳液のことである。初乳には、栄養素、生長因子、免疫因子、及び乳児に受動免疫を与える有効成分が豊富に含まれている。初乳の成分には、ＩｇＡ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＭ、ＩＧＦ−１、ＩＧＦ−１１、ＴＧＦ、ＥＧＦ、ラクトフェリン、リゾチーム、ラクトペルオキシダーゼ、成長ホルモン、及びインスリンが含まれる。
【０００９】
ウシ集団において、ウシ初乳とは、仔ウシの誕生後最初の１〜４日間に牝ウシが産生する母乳のことである。ウシ初乳には、栄養素、生長因子、及び仔ウシに受動免疫を与える有効成分が豊富に含まれている。仔ウシは生後最初の２４時間に血流中にこれらの生理活性物質を取り込むことが可能であるが、これは母ウシの生体防御機構が仔ウシに伝達される唯一の経路である。初乳中の母由来の抗体、抗細菌因子及び／またはオリゴ糖によって、仔ウシに炎症を引き起こす病原性微生物やウイルスに対する防御が与えられる。初乳が与えられない場合、ウシ新生児の死亡率は大幅に高くなる。
【００１０】
ウシ初乳中のこれらの因子は、免疫系が発達段階にある仔犬、仔猫、及び他の新生児動物の生体防御を促進するものである。抗体は消化管内の病原体に結合することによってこうした微生物が消化管の上皮壁に付着することを防止し、内部循環系への微生物の侵入を阻止することができる。したがって有害な微生物が生体内に定着し、増殖し、害をもたらす以前にこれを阻止することができる。更に栄養素及び生長因子によって、適正な消化管の発達、栄養の取込み、及び成長が促される。
【００１１】
離乳期には仔犬、仔猫及び他の新生児動物のエネルギー所要量は、同種の成体と比較して体重ベースで２倍である。消化管が健康で生体防御力を有することによって新生児動物は食餌から最大のエネルギー及び栄養を摂取することが可能であり、最適な発育が可能となるのである。発育期の栄養状態を最適とすることによって後の生活において長期的なプラスの健康が促進される。更に本発明の食品によればより高齢の動物においても同様の健康利益が得られるものである。
【００１２】
本発明の食品の形態やタイプは特に限定されず、食品が対象とする動物に応じて異なりうる。その点で本発明の食品はすべての哺乳動物、特にペット用の犬（Ｃａｎｉｓ  ｆａｍｉｌｉａｒｉｓ）やペット用の猫（Ｆｅｌｉｓ  ｓｉｌｖｅｓｔｒｕｓ  ｃａｔｕｓ）などの愛玩動物に適用することができる。本発明の食品は、ヒト、特に若年齢者や消化管の健康状態を改善する必要のある者にも適用可能である。
【００１３】
プロバイオティック、プレバイオティック及び初乳の組合せは、消化管全体に対して特に有益である。初乳は主として胃及び小腸に対して有益であり、プロバイオティック及びプレバイオティックは主として大腸の末端部に対して有益である。この組合せは消化管全体に対して特有の利益をもたらすものである。
【００１４】
本発明の食品は適宜包装することが可能である。そうすることで消費者が包装から食品の成分を知り、その食品が対象となる特定の動物に適したものであることを確認することができる。
【００１５】
特にペット用の犬やペット用の猫に対しては包装に金属を使用することが可能である（通常はスズ箔やフレキシフォイル）が、プラスチック、紙やボール紙が好ましい。特定のペット用の食品では製品は、乾燥状態、半湿潤状態、または湿潤（ウェット）状態の製品とすることができる。湿潤食品としては、金属缶に入れて販売される、含水量が約７０〜９０％の食品が挙げられる。乾燥食品としては、同様の組成を有するが、含水率が５〜１５％でありビスケット状のキブルとして提供される食品が挙げられる。半湿潤食品としては、含水量が約１５％〜７０％の食品が挙げられる。
【００１６】
製品中の水分量は使用もしくは必要とされる包装のタイプに影響する。本発明の食品には対象動物の食餌内容中に含まれるあらゆる材料が含まれる。ペット用動物では、本発明は通常の食品の他にペットフード用スナック（例、スナックバー、ペット用チュー、クランチ風おやつ、シリアルバー、スナック、ビスケット及び菓子製品）も含むものである。これらの食品は調理済製品であってもよい。本発明の食品はゲル化させたデンプン基質の形態であってもよい。本発明の食品はグレービー、ゼリー、パンや水に食材片を加えた形態でもよい。本発明の食品には、タンパク源を与えるための肉や動物由来の材料を加えてもよく（ビーフ、チキン、ターキー、ラム、ポーク、魚肉、血漿、骨髄やこれらの１以上の組合せ）、または肉を加えないものとしてもよい（大豆、トウモロコシグルテンや大豆製品などの肉の代用品を必要に応じて加える）。本食品には濃縮大豆タンパク質、乳タンパク質、グルテンなどの更なるタンパク源を添加してもよい。
【００１７】
本食品には１以上の穀類などのデンプン源を加えてもよく（例、小麦、トウモロコシ、米、オート麦、大麦など）、またはデンプンを加えないものとしてもよい。典型的な乾燥または半湿潤ドッグフードまたはキャットフードは、約２０〜３０％の粗製タンパク質及び約１０〜２０％の脂肪分を含み、残りは食物繊維や灰分などの炭水化物である。典型的な湿潤または半湿潤食品は、（乾燥分基準で）約４０％の脂肪分、約５０％のタンパク質を含み、残りは繊維や灰分である。
【００１８】
製造後の食品中でプロバイオティックが有効であるためには、プロバイオティックが食品の製造プロセスで生存できなければならない。ペットフードの製造プロセスでは一般に加熱処理が行われる。したがってプロバイオティック微生物はすべての加熱処理に耐えて生存するものであるか、すべての加熱処理が行われた後に適切に使用できるものでなければならない。
【００１９】
本発明の食品は更なる成分を含んでいてもよい。例えば食品は更に糖を含むことが可能である。こうした糖としては、すべてのタイプや形態のものを用いることが可能であるが、粉砂糖のように高品質のものが好ましい。高品質の糖を使用する利点は３つある。第１にこうした糖は各成分の担体として適している点である。次にこうした糖によって適切かつ好ましい食感が与えられる点、更に、高品質の糖によって食品中の水の活性が低下する点である。水の活性の低下は、プロバイオティック及び初乳の有効成分が製品の貯蔵期間にわたって保護されるという点で有益である。したがって本発明の食品は水分活性の低い基質として形成されることが有利である。その際の水分活性は好ましくは０．６〜０．１、より好ましくはａＷが０．４〜０．１５である。
【００２０】
本発明の食品の更なる成分としてソルビトールを使用することが可能である。食品中の糖及び／またはソルビトールの含量は任意の量でよく、好ましくは５〜５０％、より好ましくは３５〜４５％である（乾燥分基準でｗ／ｗ％）。
【００２１】
本発明の食品には更にココアバターやココアバターの代用品（または同等物、置換物、または改良物）を加えてもよい。ココアバターを食べやすいと感じる動物にはこれを食品に加えてやるとよい。こうした動物にはヒトが含まれる。ところがペット用の猫や犬などの動物はテオブロミン成分のためにココアバターを好まない。したがってペット動物用に製造される食品ではココアバターの代用品を使用することが好ましい。ココアバター代用品はラウリル脂肪をベースとしたものである。ラウリル脂肪とは、その脂肪酸組成中にラウリル酸を高率で含有する脂肪である。こうしたココアバター代用品としては、水素添加油、特に、水素添加パーム油やココナッツ油などの水素添加植物油が挙げられる。こうしたココアバターやココアバター代用品は好ましい食感を与えるものであり、食品を乳製品状の食材に加工する場合に特に有用である。ココアバター／ココアバター代用品の目的の１つは、成形型の冷却後に成形品を成形することにある。
【００２２】
ココアバターまたはココアバター代用品の量は２０〜５０％の範囲であることが好ましい（乾燥分基準でｗ／ｗ）。
【００２３】
本発明の食品には更にヨーグルト成分を加えてもよい。こうしたヨーグルト成分には、新鮮なヨーグルト、低温殺菌したヨーグルト、及び粉末ヨーグルトが含まれる。こうしたヨーグルト成分を添加して本食品の風味を向上させることが好ましい。ヨーグルト成分の量は、好ましくは１〜１５％の範囲である（乾燥分基準でｗ／ｗ）。
【００２４】
更に本発明の食品には１以上の更なる成分を加えることが可能である。こうした更なる成分の例としては、レシチンなどの乳化剤（乾燥分基準で０．１〜２．０ｗ／ｗ％）、食塩（乾燥分基準で０．１〜２ｗ／ｗ％）、ミルク香料などの香料（乾燥分基準で０．０１〜０．５ｗ／ｗ％）、及び／またはカゼインや乾燥ミルク粉末などの乳成分が挙げられる。
【００２５】
本発明に基づく初乳は特に限定されないが、高度に特定された初乳であることが好ましく、ウシ亜科の動物のものであることが好ましい。しかしながら動物や由来は特に限定されず、初乳の他の供給源としてヒツジやヤギを供給源とすることが考えられる。ラクトース成分など初乳の成分の一部を除去または低減させることが好ましい場合もある。また、生長因子及び／または免疫成分を含む画分などの初乳の特定の画分を使用することも可能である。初乳の適当な供給元として、ニュージーランド・ミルクプロダクツ、ニューライブフーズ社（販売名イミュラック、１５％ＩｇＧを含有するウシ初乳粉末）やノースフィールド社（インタクト（商標名）など。少なくとも１５％のＩｇＧを含有）から販売されている初乳が挙げられる。安全面からは牛乳のタンパク質製品がＧＲＡＳ基準（Ｇｅｎｅｒａｌｌｙ  Ｒｅｇａｒｄｅｄ  Ａｓ  Ｓａｆｅ）を満たしている。
【００２６】
本発明には更に、初乳由来の生長因子を含む初乳の画分や、免疫グロブリン濃度の異なる人為的に操作した初乳も含まれる。こうした初乳は、液体、粉末、及び／または凍結乾燥物など任意の形態とすることが可能である。初乳（または画分）の量は、全組成物の一部として、または初乳を含む組成物の部分として、１〜４０％（乾燥分基準でｗ／ｗ％）の範囲とすることが可能である。
【００２７】
推奨される初乳（または画分）の用量は約０．０３〜０．５ｇ／ｋｇ（体重）／日（乾燥分基準）である。
【００２８】
本発明に基づくプロバイオティック微生物は、ホストの腸内微生物バランスを改善することによってホストに有益な効果をもたらすいかなる微生物であってもよい。本発明の食品中には１以上のプロバイオティック微生物が存在していてよい。好ましいプロバイオティック微生物には、特にラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）（ムリヌス（ｍｕｒｉｎｕｓ）、ルミヌス（ｒｕｍｉｎｕｓ）、ラムノーサス（ｒｈａｍｎｏｓｉｓ）、アシドフィラス（ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ルテリ（ｒｅｕｔｅｒｉ）又はムコサエ（ｍｕｃｏｓａｅ）など）、ビフィドバクテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、バクテリオイデス（Ｂａｃｔｅｒｉｏｉｄｅｓ）、アオストリジウム（Ａｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、フゾバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、メリッソコッカス（Ｍｅｌｉｓｓｏｃｏｃｃｕｓ）、プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、エンテロコッカス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ラクトコッカス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）、スタフィロコッカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、ペプトストレプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｏｃｏｃｃｕｓ）、バシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、ペディオコッカス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ）、ミクロコッカス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ）、リューコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）、ウェイセラ（Ｗｅｉｓｅｌｌａ）、エアロコッカス（Ａｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、オエノコッカス（Ｏｅｎｏｃｏｃｃｕｓ）及びユーバクテリウム（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ）など多くの属が含まれる。
【００２９】
特に好ましいプロバイオティック微生物としては、ラクトバシラスアシドフィラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバシラスムコサエ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｕｃｏｓａｅ）、ラクトバシラスルミヌス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｕｍｉｎｕｓ）、ラクトバシラスルテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｅｕｔｅｒｉ）、ビフィドバクテリウム属の各菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｐｅｃｉｅｓ）、及びバシラスサブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）が挙げられる。詳細には、本発明のプロバイオティックは、特許手続上の微生物の寄託の国際的承認に関するブダペスト条約に基づき、２００１年１０月１０日に寄託されたアクセッション番号ＮＣＩＭＢ４１１１７のラクトバシラスである。
【００３０】
本発明のプロバイオティックは、全組成物の一部またはプロバイオティックを含む組成物の部分１ｇ当たり、１０２または１０３〜１０１５ｃｆｕ／ｇ（コロニー形成単位）の濃度で存在することが好ましい。こうした細胞濃度は消化管の細菌叢を形成するうえで適当であり、ホスト動物に望ましい健康利益をもたらすものである。更なる（１以上の）プロバイオティックが好ましくは同様の濃度（全組成物に対し、１０２、１０３〜１０１５ｃｆｕ／ｇ）で存在していてもよい。
【００３１】
推奨されるプロバイオティックの用量は、約１ｘ１０８〜１ｘ１０１１ｃｆｕ／日である。
【００３２】
本発明のプロバイオティック微生物は、例えば乾燥粉末や胞子（胞子を形成する微生物の場合）など、いかなる形態でもよい。更にプロバイオティック微生物は、すべての処理工程での生存率を高めるために適宜処理を行ったものでもよい。すなわちこうした微生物を、多糖類、脂肪、デンプン、タンパク質や糖基質でコーティングしたり、これらに封入することが可能である。小麦粉にはプロバイオティックの生存率に悪影響を及ぼす酵素が含まれていることからプロバイオティックと小麦粉の接触は防止されることが好ましい。米国特許第６，１９０，５９１号明細書に述べられるような当該技術分野では周知の標準的な封入技術を使用することが可能である（当該特許を参照によりここに開示に含まれる）。
【００３３】
本発明の食品のプレバイオティック成分としては特に限定されるものではないが、グルコース、フルクトース、キシロース、ガラクトース、ラクトース、マンノース、アラビノース、Ｄ−フコース、Ｌ−フコース、ラムノース、アクチライト、バイオトース、パラチノース、ＩＭＯ、セロビオース、ゲンチオビオース、ｌａｅｖａｎ、マルトデキストリン、マルトース、メリビオース、ラフィノース、ラクトース、パノリッチ、メレジトース、ラフチリン、ラフチロース、スタキオース、スクロース、タガトース、キシラン、フルクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）、大豆オリゴ糖、ラクトスクロース、マルトオリゴ糖、キシロオリゴ糖、イヌリン、及び画分化イヌリン等のオリゴ糖、並びに、ココナッツ（ココナッツ内胚乳繊維を含む）、ビートパルプ（砂糖大根パルプを含む）、チコリ（チコリパルプを含む）、オート麦ふすま濃縮物、米糠、イナゴマメ、タルハーガム、及びグアーガムなどの１以上の食物繊維成分などが含まれる。
【００３４】
オリゴ糖は、バナナ、トマト、チョウセンアザミ、タマネギ、ニンニク、及び穀類（小麦や大麦など）などの各種の果物や野菜に見られる天然化合物である。ＦＯＳには、１−ケトース、ニストース、及びβ−フルクトフラノシルニストースの３種類が存在する。ＦＯＳは上述したもののような植物から抽出することが可能であるが、スクロースのフルクトース単位にフルクトース単位をβ−（２，１）−グリコシド結合させてスクロース分子に１、２または３個のフルクトース単位を付加することによって人工的に生成することも可能である。同様の人為的結合を利用してＧＯＳや他のオリゴ糖を合成することが可能である。ＦＯＳ及びＧＯＳは化学合成されたものが販売されている。オリゴ糖は単一または複数のものを使用することができる。１以上の天然由来または化学合成されたものを使用することが可能である。
【００３５】
単一または複数の食物繊維成分を使用することも可能である。単一または複数の食物繊維成分を単一または複数のオリゴ糖と組み合わせて使用することも可能である。
【００３６】
本発明に基づくプレバイオティックの形態は特に限定されるものではないが、新鮮なもの、または加工、加熱、あるいは酵素処理したものなど任意の形態とすることが可能である。
【００３７】
食品に加えるプレバイオティックの濃度は特に限定されない。好ましくは食品中の繊維成分は、エングリスト法（ここに参照により開示に含まれるＥｎｇｌｉｓｈ  Ｈ  Ｎ  ａｎｄ  Ｃｕｍｍｉｎｇ  Ｊ  Ｈ  （１９８４），  Ｓｉｍｐｌｉｆｉｅｄ  Ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｔｏｔａｌ  Ｎｏｎ−Ｓｔａｒｃｈ  Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｂｙ  Ｇａｓ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  ｏｆ  Ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔ  Ｓｕｇａｒｓ  ａｓ  Ａｌｄｉｔｏｌ  Ａｃｅｔａｔｅｓ．，  Ａｎａｌｙｓｔ．  １０９，  ９３７−９４２に記載）によって測定した場合に乾燥分基準にして約０．１５〜８％、好ましくは乾燥分基準にして０．１５〜５％の濃度である。この方法で計算した濃度は０．１５％〜最大で５％、６％、７％、または８％と変動し得る。下限値は、１．５％、２％または３％である。エングリスト法については補遺１で説明した。なおプレバイオティックの濃度は全組成物またはプレバイオティックを含む組成物の部分に対するものである。
【００３８】
本発明に基づく食品は異なるフォーマットを有しうることから、初乳、プロバイオティック、及びプレバイオティックの濃度は特定のフォーマットにしたがって異なり得る。
【００３９】
例えば、本発明の食品の形態の１つとして非常に食べやすい乳製品おやつがある。この製品には初乳、プレバイオティック、及びプロバイオティックが食べやすい供給形態で入っている。脂肪をベースとしたこうした乳製品基質は、低温処理を行い、水分活性は低く、必要に応じて封入を行う基質である。これらの要素は有効成分であるプロバイオティックと初乳の有効性の最大化に関連するものである。こうした乳製品基質は、個別の補助食品片とするか、あるいは直線で区画された部分からなるチョコレートバーのような大きめのフォーマットとして製造することができる。これにより個々の部分または食品片を折り取って各動物に与えることが可能である。製品が個別の補助食品片として製造される場合、これらをフローラップ包装することが可能である（ただし必ずしも必要ではない）。多数のフローラップ包装した食品片（例、１５〜２５個）を瓶に入れたり、封入することができる。この瓶には酸素除去剤を入れ、熱シールにより密封して製品の貯蔵寿命を長くすることが可能である。初乳、プレバイオティック、及びプロバイオティックは、任意の製品に混合したり、製品に注入したり、外側に塗布することが可能である。初乳、プレバイオティック、及びプロバイオティックのいずれか１以上を製品の一部として任意の１以上の位置に配することも可能である。
【００４０】
本発明に基づけば、脂肪をベースとした乳製品基質は、少なくとも２０％、好ましくは少なくとも３０％の脂肪を含んでいる。脂肪は乳製品から得たものでもあるいは乳製品以外の供給源（植物油脂など）から得たものでもよい。
【００４１】
こうした脂肪ベースの乳製品基質は、チーズを含むか、チーズ風味を有していてもよい。
【００４２】
脂肪ベースの乳製品基質を用いた乳製品おやつにおいて適当な成分（非限定的な例である）及びその含量の範囲を下記に示す。
【００４３】
成分 ％（ｗｔ／ｗｔ）（乾燥分基準）
ココアバターまたはココアバター代用品    ２０〜４０
砂糖                                    ３０〜５０
初乳（またはその画分）                  ５〜３０
プレバイオティック                      １〜５
プロバイオティック                      ０．１〜１５
乳化剤                                  ０．１〜２
食塩                                    ０．１〜２
香料（例、ミルク香料）                  ０．０１〜５
ヨーグルト粉末                          １〜１５
食品のフォーマットが異なりうることから、個々の成分量も大幅に異なりうる。例えば脂肪ベースの乳製品基質を使用した乳製品おやつでは、その１００％（または１００％近く）が上記の成分から構成されていてもよい。また、こうした成分からなる脂肪ベースの乳製品基質を、乾燥キブルの内容充填物のように別のフォーマットの一部分として使用することも可能である。こうした食品のフォーマットでは、上記各成分の食品全体（この場合キブル）に対する割合は明らかに小さくなる。
【００４４】
本発明の第１の態様に基づいた別の食品の一例は、乾燥したビスケット状のキブルまたはシリアル製品の形態である。初乳、プロバイオティック、及びプレバイオティックをそれぞれ製品に加えることができる。製品はコーティング及び／または充填物を有していてもよい。こうしたコーティング及び／または充填物は初乳及び／またはプロバイオティック成分の１以上を含有していてもよい。乾燥キブルまたはシリアル製品またはコーティングまたは充填物の基質はプレバイオティック成分を含んでいてよい。中心が充填された食品は、米国特許第３，９２２，３５３号明細書、米国特許第３，９１６，０２９号明細書、欧州特許第００８８５７４号明細書、米国特許第３，７６４，７１５号明細書、米国特許第４，９９７，６７１号明細書及び米国特許第６，１１７，４７７号明細書に記載されるような標準的な方法にしたがって製造が可能である（これらをすべて参照により開示に含まれる）。本発明に基づく中心充填製品の一例として、ゲル化したデンプン基質と、初乳を含む軟らかい中心成分とを共押出成形した製品がある。これにより得られる製品は、初乳を含んだ軟らかい中心部分を有する小型のスナック菓子状の食品である。プロバイオティック微生物を初乳とともに軟らかい中心部分に添加するか、あるいはキブルに添加するか、あるいはキブルの外側に塗布することが可能である。
【００４５】
別法として、軟らかい中心部分をプレバイオティックとし、初乳及び／またはプロバイオティックをキブル基質に添加するか、キブルの外側に塗布することが可能である。この構成は、プロバイオティックまたは初乳が、軟らかい中心部分またはキブル基質の製造工程に耐えられないような場合に好適である。
【００４６】
基質や他のフォーマットの外側へのプロバイオティック及び／または初乳の塗布は、一般的なコーティング及び／または噴霧などの多くの方法によって行うことが可能である。基質の外側にコーティングまたは噴霧塗布する際にプロバイオティック微生物及び／または初乳を１以上の他の成分と混合することが可能である。例えばプロバイオティック微生物及び／または初乳を脂質やタンパク質のコーティング中に封入したり、添加することができる。
【００４７】
乾燥、半湿潤、及び湿潤製品の例が米国特許第６，１１７，４７７号明細書（ここに参照により開示に含まれる）及び米国特許第５，６９５，７９７号明細書（ここに参照により開示に含まれる）に述べられている。本発明は更に、複数の食品が組み合わされて一緒に食べられる場合に、初乳、プロバイオティック、及びプレバイオティックが摂取される、本発明の第１の態様にしたがった食品を提供するものである。例えば、食品は２以上の組成の異なるキブル状成分から構成することができる。その場合、このキブル状ビスケットの少なくとも１つは初乳を含み、別の少なくとも１つのキブル状ビスケットはプロバイオティックを含む。これらのキブルはそれぞれプレバイオティック成分を含んでいてよい。この食品では、３つの成分のそれぞれが２以上の別個の供給源から動物に与えられることになる。更に、初乳またはプロバイオティック成分を食品に代替成分として添加することが可能である。例えば、プロバイオティックを含むキブル状ビスケットを提供することができる。こうしたキブルは動物への投与に先立って、初乳と混合するか、液状、半液状、または粉末フォーマットのプレバイオティックをこれに添加しても差支えない。
【００４８】
また、プレバイオティックを含有するキブルなどの食品に、初乳及び／またはプロバイオティックを、オイル、水溶液、または粉末状のトッピングとして添加することも可能である。食品がプレバイオティックを含有していない場合には、プレバイオティックを別に添加することも可能である。粉末として添加する場合には、保存が可能であるように適宜包装された（砂糖またはインスタントコーヒーのような）ペーパー「スティック」として添加することができる。必要に応じてこうした成分を、別々または一緒にカプセル化したりコーティングすることが可能である。各成分をカプセル化することによって各成分は消化管内の酵素の作用を受ける前に消化管を通過するため、より効果的かつ／または持続的な結果が得られる。好適なコーティングとしては腸溶コーティングがある。また、キブル状ビスケットの中心に初乳をベースとした製品を充填し、プロバイオティックを動物への投与時に乾燥凍結した成分として添加しても差支えない。
【００４９】
更なる食品のフォーマットでは粉末混合物中に各成分を加える。こうした粉末混合物は、動物の更なる餌または液体摂取物に加えることができる。更なる餌は、ドライキブルのような、湿潤または半湿潤食品、ヨーグルト、粘りけのあるスナックやおやつなどのいずれのものでもよい。粉末を加えることが可能な液体としては、水、スープ、ミルク、ヨーグルトベースの飲料、チョコレートや麦芽を含んだミルクベースの飲料、フルーツジュース、コーディアルなどが挙げられる。
【００５０】
こうした食品（食品や液体）に添加することによって上記の粉末は動物によって容易に摂取が可能となる。こうした粉末混合物は、ペーパー「スティック」包装や他の任意の方法によって提供することができる。例えば、粉末をヨーグルトの瓶や液体容器の蓋に入れておけばよい。限定的なものではないが、こうした粉末混合物に適した成分及びそれらの量の範囲を下記に示す。
【００５１】
成分 ｗｔ／ｗｔ％（乾燥分基準）
初乳                                          １０−４０
プロバイオティック（例、カプセル化したもの）  １−１０
担体                                          ５−３５
粉ミルク（例、スキムミルク）                  ２０−６０
プレバイオティック                            ２−２０
こうした粉末は、プロバイオティック、プレバイオティック、初乳成分の１以上を含んだものであればよいが、これら３つをすべて含んだものであることが好ましい。こうした混合物には例えばマルトデキストリンなどの１以上の担体物質（担体）が含まれていてもよい。担体は水性または脂性媒体に溶解するものが好ましい。こうした混合物には更に、または代わりに、二酸化チタンなどの１以上の「流動剤」が含まれていてもよい。粉末には他の成分が含まれていてもよい。こうした粉末は白色などの明色であることが好ましい。
【００５２】
また、当該粉末は所定の食品フォーマットで使用することができる。例えば、粉末を例えば食用コーティングを施したキブルの内容物、スナックやおやつの内容物とすることができる。こうしたコーティングは砂糖ベース及び／またはチョコレートベースのものを使用することが可能である。
【００５３】
各フォーマットにおける典型的な割合として、約０．１〜１０ｗ／ｗ％（乾燥分基準）のプロバイオティックが含まれる。
【００５４】
更なる食品のフォーマットとして、初乳、プロバイオティック、及びプレバイオティックを、水、ミルクベースの飲料、ヨーグルトベースの飲料、スープ、ジュースなどの液体の一部として含んだものがある。その場合、プロバイオティックは、分離して存在するオイルベースの層中で前記液体の一部として含まれることが好ましい。投与に先立って震盪することでこの液体の成分全体が混合される。
【００５５】
本発明の第２の態様は、動物の消化管の健康の維持、改善に使用される、前記第１の態様に基づく食品を提供するものである。上述した３つの成分はすべて食品の機能に寄与するものであり、これら３つの成分の組み合わせによって、動物の消化管の健康に特に有益な効果がもたらされるものである。詳細には、これらの成分は以下の利益を与えるものである：
・初乳は、生まれたての仔犬／仔猫／赤ちゃんの免疫系の健康な出発を助け、こうした繊細な時期に仔犬／仔猫／赤ちゃんを保護する穏和な成分である。  
・栄養摂取を最適化する健康な消化器系の発達を助ける。  
・下痢を防止し、更なる病気に動物が罹りにくくする。  
・感染症から防御する。  
・腸／消化器の健康を維持する。  
・消化を助ける。
【００５６】
本発明の第１の態様の特徴はすべて第２の態様にもあてはまるものである。
【００５７】
本発明の第３の態様は、動物の消化管の健康を維持、改善するための方法であって、前記動物に本発明の第１の態様に基づく食品を投与することを含む方法を提供するものである。
【００５８】
第１及び第２の態様の特徴はすべて第３の態様にもあてはまるものである。本発明の第１の態様に基づく方法は、特に仔犬及び仔猫に関連するものである。
【００５９】
本発明の第４の態様は、動物の消化管の健康を維持、改善するための食品の製造における、初乳、プロバイオティック、及びプレバイオティックの用途を提供するものである。
【００６０】
本発明の第１乃至第３の態様の特徴はすべて第４の態様にもあてはまるものである。
【００６１】
本発明の第５の態様は、本発明の第１及び第２の態様にもとづく食品を製造するための方法であって、未加工の材料を混合することと、必要に応じて材料片に成形することと（加熱処理の前または後で）、必要に応じて加熱することと、食品として提供することとを含む方法を提供するものである。
【００６２】
食品の詳細な加工方法は、食品の形態によって異なる。
【００６３】
成分の加熱や調理を必要としない場合、上記の方法では製品の未加工材料を例えば適当なミキサーで単に混合すればよい。次いでこの混合物を型にすくい入れ／かき入れ、冷却して固化させる。この材料片を型から外すと、後は包装するだけでよい。初乳の生体活性成分がこの処理及び貯蔵期間試験で活性を失うことはない。完成した製品は貯蔵期間を延ばすために３０℃よりも低い温度で保存することが好ましい。
【００６４】
ある種の穀類を含んだ食品では一般に加熱／調理工程が必要である。一般に、混合、破砕、調理、加熱、押出しや外皮形成などの食品の製造に使用される具体的なプロセスは当該産業では周知のものである。任意の周知の方法を用いることによって、液体または半湿潤中心コアを形成し、外皮材料を形成し、押出し機にこれらの材料を装填し、外側材料と内側材料を共押出しすることが可能である。乾燥したキブル状材料は通常押出しによってペレットやキブルに成形する。押出しは好ましくは２０〜１０００ｐｓｉｇ（ゲージ圧で約０．１４〜６．９ＭＰａ）の圧力及び９０〜１６５℃の温度で行われる。
【００６５】
フォーマットの異なる本発明の食品によって、活性を有する、安定して保存可能な形態でプロバイオティックを提供できることが実証された。
【００６６】
（実施例１で述べるもののような）脂肪ベースの乳製品基質のフォーマットでプロバイオティックの生存率について試験を行った。製品は室温（１９〜２４℃の範囲）で保存し、プロバイオティックの生存率について１０ヶ月間にわたって試料の試験を行った。その結果、プロバイオティックの生存率は極めて高く、１０ヶ月で一桁の損失が見られただけであった。この程度の損失は生存率の各測定値の誤差の範囲内である。
【００６７】
乾燥ペットフードキブルに添加した場合のプロバイオティックの生存率についても試験を行った。プロバイオティックは植物油及び獣脂のコーティングベースに加えてキブルにコーティングした。製品は室温（１９〜２４℃の範囲）で保存し、試料は１１ヶ月にわたってプロバイオティックの生存率について試験した。ここでもやはりプロバイオティックの生存率は非常に高く、１１ヶ月で損失は見られなかった。
【発明を実施するための最良の形態】
【００６８】
本発明を付属の図面を参照しながら更に説明する。
【００６９】
２層構造のキブルを図２及び３に参照符合１にて示した。図３では、キブルは外皮２を有している。外皮（約７０ｗ／ｗ％）は、穀類、トウモロコシ、ソヤミール、米、及びミートミールから構成されている。キブルは、プレバイオティックを含む軟らかい中心部分３と、プロバイオティック及び初乳を含むコーティング４とを有している。軟らかい中心部分（３０ｗ／ｗ％）は、脂肪及び穀類、小麦、獣脂、及び血漿から構成されている。
【実施例】
【００７０】
本発明を更に以下の実施例で説明する。
【００７１】
実施例１
乳製品おやつ
非常に食べやすい乳製品おやつを製造した。その組成を下記に示す。
【表１】
2005508647.tif 000002
【００７２】
プロバイオティックの濃度は約３×１０１０ｃｆｕ／ｇであった。
【００７３】
製品は未加工材料を混合することによって得た。次いでこの混合物を型にすくい入れ／かき入れ、冷蔵庫に入れて固化させた。得られた材料片を型から外した。
【００７４】
製造工程及び貯蔵期間を通じて初乳の有効成分が保護されるように低温熱処理を行って、水分活性の低い基質を得た。この有効成分の製品中での活性保持力を確認した。
【００７５】
得られた乳製品おやつを図１に示した。
【００７６】
この製品は、生後２ヶ月の仔犬及び仔猫から成体に到るまでの使用に適したものである。
【００７７】
実施例２
乳製品おやつの食餌試験
６０頭の仔犬で試験を行った。これらの仔犬のうち３０頭には標準的な完全食餌内容を与えた。残りの３０頭には同じ食餌内容に加えて実施例１で述べた乳製品おやつを約０．５ｇ／ｋｇ（体重）／日の用量で与えた（残りの犬についての給餌ガイドを補遺２に示した）。
【００７８】
すべての仔犬に基本完全給餌内容を２日間与えた。仔犬の排便を集計、記録した。２日間のウォッシュアウト期間の後、３０頭の試験仔犬群に１０日間にわたって乳製品おやつを与えた。コントロール仔犬群（３０頭）には完全バランス食餌内容を１０日間継続して与えた。
【００７９】
結果は、乳製品おやつを与えた仔犬群では排便スコアに著しい改善が認められた。
【００８０】
実施例３
２層食品
表１に示した成分からなる外皮を有し、表２に示した成分で充填した、本発明に基づく２層キブルペット食品を製造した。外皮には表３に組成を示す外側コーティングを噴霧塗布した。
【００８１】
表１
成分 重量％
Ｃｈｉｘ＋ＢＨＡ／ＢＨＴ                    ２９．００
全粒トウモロコシ、イエロー＃２              ３９．１８
米糠                                        １７．００
大豆ミール４４％                            １３．００
食塩、ヨウ素添加                              ０．４０
ビタミン及びミネラル類                        ０．８０
抗酸化剤                                      ０．０２
酸化鉄着色剤                                  ０．６０
表２
成分 重量％
水素添加植物性脂肪                          ３６．２
スクロース                                  ４５．５
初乳                                        １５
イヌリン                                      ３
乳化剤                                        ０．３
表３
成分 重量％
ラクトバシラス・アシドフィラス（凍結乾燥）  ０．５
ヒマワリ油                                ９５．５
使用したＬ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓの濃度は約１０１０ｃｆｕ／ｇであった。各材料片のおおよそのサイズは１５ｍｍ×１０ｍｍ×５ｍｍであった。外皮：中心部：コーティングの比（ｗ／ｗ）は３：１：０．２であった。
【００８２】
補遺１
エングリスト法（エングリスト及びカミングスによる（前出））
実験方法
装置
前述したように５０〜６０ｍｌのネジ蓋式ガラス製遠心チューブで分画化を行った。水素炎イオン化検出器を備えたＰｙｅＵｎｉｃａｍ２０４シリーズのクロマトグラフを使用して気液クロマトグラフィを行った。３％のＳＰ２３３０でコーティングしたスペルコポート（Ｓｕｐｅｌｃｏｐｏｒｔ）（１００〜２００メッシュ）を充填した２．１ｍ×内径２ｍｍのガラス製カラムを使用した。カラム温度は２１５℃（等温）とし、インジェクタ及び検出器の温度は２５０℃とした。担体ガス（窒素）の流速は２０ｍｌ／分であった。
【００８３】
試薬
すべての分析で高純度保証試薬を使用した。酵素プレパレーションは次のとおり。ブタ膵臓α−アミラーゼ、Ｅ．Ｃ．３．２．１．１．（シグマ、カタログ番号Ａ４２６８）；プルラナーゼ、Ｅ．Ｃ．３．２．１．４１．（ベーリンガー、カタログ番号１０８９４４）。
【００８４】
方法
本方法の一連の工程を下記にまとめた。
【００８５】
試料の予備処理
食品はできるだけ予備処理を行わずに分析するべきである。代表的な試料の採取が困難である場合には、低含水量の食品は２〜３分間ボールミルで粉砕し、高含水量のものは均質化するか凍結乾燥してからボールミル粉砕する。
【００８６】
試料の質量
デンプンの含量が１５０ｍｇ、ＮＳＰが５０ｍｇ以下である試料を５０〜１０００ｍｇの範囲で秤量し、５０−６０ｍｌのネジ蓋式遠心チューブに入れてスターラーを入れる。
【００８７】
脂肪抽出及び乾燥
乾燥分が９０〜１００％であり、脂肪が２０３％未満である試料は直接分析可能である。これ以外の試料では、４０ｍｌのアセトンを加え、マグネティックスターラーで３０分混合し、遠心してから、残渣を揺動しないように吸引によって上清をできるだけ取り除く。６５℃の温水浴に入れたチューブをマグネティックスターラー付ホットプレート上に置き、残渣が乾燥するまで数分間混合する。このビーカーにフタをして水ポンプでアセトン蒸気を除去することが可能である。
【００８８】
デンプンの拡散
２ｍｌのＤＭＳＯを加え、チューブにキャップをし、継続的に撹拌しながら沸騰水浴中で再沸騰しはじめてから１時間加熱する。この後、冷却せずに８ｍｌの０．１Ｍ酢酸ナトリウム緩衝溶液（ｐＨ５．２）を５０℃で加え、直ちに振とうして混合する。
【表２】
2005508647.tif 000003
【００８９】
非デンプン性多糖類（ＮＳＰ）の分析法
デンプンの酵素による加水分解
チューブを４５℃にまで冷却し、ｐＨ５．２の酢酸緩衝溶液１ｍｌ当たり５０００単位のα−アミラーゼと５単位のプルラナーゼを含む酵素溶液を０．１ｍｌを直ちに加える。好ましくは上記に述べたように継続的に撹拌しながら試料を、４５℃で１６〜１８時間インキュベートする。
【００９０】
酵素処理の後、４０ｍｌの無水エタノールを加えてよく混合し、室温で１時間静置する。この後、１０分間もしくは透明な上清液が得られるまで遠心する。残渣を揺動しないように吸引によって上清液をできるだけ取り除いてこれを捨てる。混合により５０ｍｌの８５％エタノールで残渣を２回洗って懸濁液とし、透明になるまで遠心してから上述のように上清液を取り除く。洗った残渣に４０ｍｌのアセトンを加え、５分撹拌した後に遠心する。吸引により上清液を除去し、脂肪抽出及び乾燥の項で述べたように残渣を乾燥する。
【００９１】
酵素消化で得られた残渣の酸による加水分解
乾燥した残渣をボルテックスミキサーを使用して１ｍｌの１２Ｍ硫酸に分散させる。３５℃で１時間放置してセルロースを溶解し、１１ｍｌの水を急速に加えて混合する。
【００９２】
この溶液を継続的に撹拌しながら沸騰水浴中で、再沸騰から２時間加熱する。チューブを水に入れて室温にまで冷却し、２ｍｌの内部標準（飽和安息香酸１ｍｌ当たり２ｍｇのアロース）を加え、チューブの内容物を混合する。得られた加水分解物の１ｍｌを酢酸アルジトールの調製に用い、残りをウロン酸の検出用に保存する。
【００９３】
ウロン酸
スコットの方法を改変した方法を用いた。０．３ｍｌの加水分解物（必要に応じて１ｍｌ当たりのウロン酸の含量が２５〜１００μｇとなるように希釈する）を、塩化ナトリウム／ホウ酸溶液の混合物０．３ｍｌ（塩化ナトリウム２ｇとホウ酸３ｇを１００ｍｌの水に加えたもの）と混合する。５ｍｌの濃硫酸を加え、振とうして混合した後、チューブを７０℃のヒーティングブロックに入れる。チューブ及び内容物を４０分放置した後、水に入れて室温にまで冷却する。冷却後、０．２ｍｌの３．５−ジメチルフェノール溶液（０．１ｇの（ＣＨ３）２−Ｃ６Ｈ３ＯＨを１００ｍｌの氷酢酸に加えたもの）を加えて直ちに混合する。１０〜１５分後に分光光度計で水を基準として４００及び４５０ｎｍでの吸光度を測定する。各試料について４５０ｎｍでの指示値から４００ｎｍでの指示値を差し引き、得られた差をグルクロン酸スタンダードに対してプロットする（２５〜１２５μｆ／ｍｌの範囲で）。このグラフから試料濃度を読取る。
【００９４】
酢酸アルジトールの調製
加水分解物１ｍｌに０．２ｍｌの１２Ｍアンモニア溶液と５μｌのオクタン−２−オールを加える。この溶液がアルカリ性であることを確認し、３Ｍアンモニア溶液１ｍｌ当たり１００ｍｇのテトラヒドロホウ酸ナトリウム（ＩＩＩ）（水素化ホウ素ナトリウム）を加えた新鮮な溶液０．１ｍｌを加える。これを混合し、混合物を４０℃で１時間放置して、０．１ｍｌの氷酢酸を加える。次いでこの酸性溶液０．２ｍｌに０．３ｍｌのＮ−メチルイミダゾールと２ｍｌの無水酢酸を加えて混合する。これを２０℃（室温）で１０分間放置し、水５ｍｌを加えて混合し、冷却後にジクロロメタン１ｍｌを加え、内容物をボルテックスミキサーで激しく震盪してから数分間遠心して混合物を２相に分離する。上相の大部分を吸引により取り除いて捨ててから、下相を小さな容器に移し、密封して−２０℃で保存する。１〜２μｌをクロマトグラフで注入して使用する。
【００９５】
酢酸アルジトール調製の別法
酢酸アルジトールの溶媒としてジクロロメタンを使用する場合、自動ＧＬＣ注入装置のない多くの研究所において、再現可能な結果を得るには注入技術が極めて重要であることが観察されている。酢酸アルジトールの溶媒としてジクロロメタンの代わりに酢酸エチルを使用することによってより安定した方法となる。この方法を下記に述べる。
【００９６】
加水分解物１ｍｌに０．２ｍｌの１２Ｍアンモニア溶液と５μｌのオクタン−２−オールを加える。この溶液がアルカリ性であることを確認し、３Ｍアンモニア溶液１ｍｌ当たり１００ｍｇのテトラヒドロホウ酸ナトリウム（ＩＩＩ）を加えた新鮮な溶液０．１ｍｌを加える。これを混合し、混合物を４０℃で１時間放置して、０．１ｍｌの氷酢酸を加える。この酸性溶液０．５ｍｌに０．５ｍｌのＮ−メチルイミダゾールと５ｍｌの無水酢酸を加えて混合する。これを２０℃（室温）で１０分間放置した後、エタノール０．６ｍｌを加えて混合する。５分後に水５ｍｌを加え、室温で水浴中に入れ、５ｍｌの７．５Ｍ  ＫＯＨを加えて数分後に更に５ｍｌの７．５Ｍ  ＫＯＨを加える。チューブを逆さにして混合してから放置して２相に分離する。上相を小さな容器に移して５℃で保存する。１〜２μｌをクロマトグラフで注入して使用する。
【００９７】
補遺２
給餌ガイド
【表３】
2005508647.tif 000004
【００９８】
他の実施形態
以上本発明をその詳細な説明によって説明してきたが、上記の記載は発明の説明を目的としたものであってその範囲を限定するものではない点は理解されるべきである。本発明の他の態様、利点、ならびに改変例は特許請求の範囲の範囲に包含されるものである。
【表４】
2005508647.tif 000005
【表５】
2005508647.tif 000006
【図面の簡単な説明】
【００９９】
【図１ａ】仔犬用の初乳補助食品片の一フォーマットを示す図。
【図１ｂ】仔犬用の初乳補助食品片の別のフォーマットを示す図。
【図２】本発明のキブル食品を示す概略図。
【図３】切断線Ｘ−Ｘに沿った図２の本発明の食品の概略断面図。
【図１ａ】
2005508647.tif 000007
【図１ｂ】
2005508647.tif 000008
【図２】
2005508647.tif 000009
【図３】
2005508647.tif 000010
【国際調査報告】
2005508647.tif 000011
2005508647.tif 000012
2005508647.tif 000013