(57)【要約】本発明は、式（Ｉ）の新規ピラゾロピリジン誘導体に関する。式中、Ｒ１は（ａ）または（ｂ）を表し、ｎは１または２を表し、そしてＲ２はＨ、ＮＨ２を表す。本発明はまた、可溶性グアニル酸シクラーゼの刺激剤としてのその塩、異性体および水和物に関し、そして心臓血管疾患、高血圧、血栓栓塞疾患および虚血、性的機能不全または炎症の処置における剤としての、および中枢神経系疾患の処置のためのそれらの使用に関する。
2005501034.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2005501034.tif 000041
（式中、Ｒ１は
【化２】
2005501034.tif 000042
であり；
ｎは１または２であり；
Ｒ２はＨまたはＮＨ２である。）
の化合物並びに、その塩、異性体および水和物。
【請求項２】
Ｒ１が
【化３】
2005501034.tif 000043
であり;
Ｒ２がＨまたはＮＨ２である、請求項１記載の化合物並びに、その塩、異性体および水和物。
【請求項３】
Ｒ１が
【化４】
2005501034.tif 000044
であり;
Ｒ２がＨである、請求項１記載の化合物並びに、その塩、異性体および水和物。
【請求項４】
式（ＩＩ）
【化５】
2005501034.tif 000045
の化合物に
Ａ）式（ＩＩＩ）
【化６】
2005501034.tif 000046
（式中、Ｒ１は、前述と同意義を有し；
Alkは線状または分枝状Ｃ１-４−アルキルである。）
の化合物を、必要に応じて、有機溶媒中加熱反応させて、式（Ｉ）の化合物を生成させ；
あるいは
Ｂ）式（ＩＶ）
【化７】
2005501034.tif 000047
（式中、Ｒ１は、前述と同意義を有する。）
の化合物を有機溶媒中加熱反応させて、
式（Ｖ）
【化８】
2005501034.tif 000048
（式中、Ｒ１は、前述と同意義を有する。）
の化合物を与え、次いでハロゲン化剤を反応させて、
式（ＶＩ）
【化９】
2005501034.tif 000049
（式中、Ｒ１は、前述と同意義を有し；
Ｒ２は、ハロゲンである。）
の化合物を生成させ、そして、最後に、加圧下に水性アンモニア溶液を加熱反応させることを特徴とする、式（Ｉ）化合物の製造法。
【請求項５】
病気を処置するための式（Ｉ）の化合物。
【請求項６】
請求項１記載の式（Ｉ）の化合物を少なくとも含んでなる医薬。
【請求項７】
請求項１記載の式（Ｉ）の化合物を、必要に応じて、従来の賦形剤および添加剤を用いて、適切な投与型に変換することに特徴付けられる、医薬の製造方法。
【請求項８】
有機硝酸塩またはＮＯ供与体と組合せて、請求項１記載の式（Ｉ）の化合物を含んでなる医薬。
【請求項９】
環状グアノシンモノリン酸（ｃＧＭＰ）の破壊を阻害する化合物と組合せて、請求項１記載の式（Ｉ）の化合物を含んでなる医薬。
【請求項１０】
心血管疾患の処置用医薬を製造するための請求項１記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項１１】
高血圧症処置用医薬を製造するための請求項１記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項１２】
血栓塞栓症および貧血の処置用医薬を製造するための請求項１記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項１３】
性的機能不全の処置用医薬を製造するための請求項１記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項１４】
抗炎症特性を有する医薬を製造するための請求項１記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項１５】
中枢神経系疾患の処置用医薬を製造するための請求項１記載の一般式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項１６】
請求項１記載の式（Ｉ）の化合物が、有機硝酸塩またはＮＯ供与体と組合せて、あるいは環状グアノシンモノリン酸（ｃＧＭＰ）の破壊を阻害する化合物と組合せて、採用される、請求項９〜１４のいずれかに記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、可溶性グアニル酸シクラーゼを刺激する新規化合物、その製剤および医薬としての使用に関し、特に心血管疾患の処置薬としての使用に関する。
【０００２】
哺乳類の細胞において最も重要な細胞伝達システムの１つに、環状グアニル酸モノリン酸（ｃＧＭＰ）がある。内皮細胞から放出され、ホルモン的および機械的信号を伝達する、一酸化窒素（ＮＯ）とともに、ＮＯ／ｃＧＭＰシステムを形成する。グアニル酸シクラーゼは、グアノシン三リン酸（ＧＴＰ）からｃＧＭＰの生合成を触媒する。現在まで開示されるこの系統群の代表的なものは、構造的特徴およびリガンドの種類の両方によって２つのグループ：ナトリウム排泄増加性ペプチドによって刺激され得る粒子状グアニル酸シクラーゼ、およびＮＯによって刺激され得る可溶性グアニル酸シクラーゼ、に分けることができる。可溶性グアニル酸シクラーゼは、２つのサブユニットからなっており、たいていは、調節部位の一部であるヘテロダイマーにつき１つのヘムを含む。後者は、活性化の機構にとって極めて重要である。ＮＯは、ヘムの鉄原子と結合することができ、そして、このように著明に酵素活性を増大することができる。対照的に、ヘムを含まない製剤をＮＯによって刺激することはできない。ＣＯもまたヘムの中央の鉄原子に付着することができるが、しかしＣＯによる刺激はＮＯによるそれより明確に少ない。
【０００３】
ｃＧＭＰの産生およびそれから得られる、ホスホジエステラーゼ、イオンチャネルおよびタンパク質キナーゼの調節を通して、グアニル酸シクラーゼは、さまざまな生理学的なプロセスにおいて、特に平滑筋細胞の弛緩および増殖、血小板凝集および粘着、そしてニューロンの信号伝送、並びに上述したプロセスの障害によって生じる疾患において重要な役割を果たす。病態生理学的状況の下で、ＮＯ／ｃＧＭＰシステムが抑制され得、そして、それは、例えば高血圧、血小板活性化、増加する細胞増殖、内皮の機能不全、アテローム性動脈硬化、狭心症、心不全、血栓症、卒中および心筋梗塞に至り得る。
【０００４】
ＮＯから独立して、生物体におけるｃＧＭＰ信号系路に影響させることを目的とする、この種の疾患を処置する可能な方法は、高性能であることおよび副作用が少ないことから、有望な方法である。
【０００５】
その効果がＮＯに基づく化合物、例えば有機硝酸塩は、可溶なグアニル酸シクラーゼの治療上の刺激のために現在まで排他的に使用されてきた。ＮＯは、生化学変換によって生成し、そしてヘムの中央の鉄原子に付着することによって可溶なグアニル酸シクラーゼを活性化する。副作用の他に、耐性の発達は、この様式の処置の重大な不都合の１つである。
【０００６】
可溶性グアニル酸シクラーゼを直接（即ち、ＮＯの事前の放出なしに）刺激する若干の物質、例えば、３‐（５‘‐ヒドロキシメチル‐２’‐フリル）‐１‐ベンジルインダゾール（YC-1, Wu et al., Blood 84 (1994), 4226; Muelsch et al., Br. J. Pharmacol. 120 (1997), 681)、脂肪酸(Goldberg et al, J.Biol. Chem. 252 (1977), 1279)、ジフェニルヨードニウムヘキサフルオロリン酸塩(Pettibone et al., Eur. J. Pharmacol. 116 (1985), 307)、イソリキリチゲニン(Yu et al., Brit. J.Pharmacol. 114 (1995), 1587)、およびさまざまな置換ピラゾール誘導体（WO 98/16223）が近年記載されている。
【０００７】
加えて、WO 98/16507、WO 98/23619、WO 00/06567、WO 00/06568、WO 00/06569およびWO 00/21954は、ピラゾロピリジン誘導体が、可溶性グアニル酸シクラーゼの刺激剤であると記述している。また、３位にピリミジン基を有するピラゾロピリジン類が、これらの特許出願に記載されている。この種の化合物は、可溶性グアニル酸シクラーゼを刺激することに関して、非常に高いインビトロ活性を有する。しかしながら、これらの化合物がそれらのインビボ諸性質、例えば肝臓でのそれらの挙動、それらの薬物動態学的挙動、それらの用量反応関係またはそれらの代謝経路に関して、若干の不都合を有することが明らかになった。
【０００８】
従って、本発明の目的は、可溶性グアニル酸シクラーゼの刺激剤として作用するが、従来技術の化合物の上記で詳述した不都合を有しない、さらなるピラゾロピリジン誘導体を提供することである。
【０００９】
この目的は、請求項１記載の化合物を通して本発明によって達成される。これらの新しいピラゾロピリジン誘導体は、特別の置換パターン、即ち、ピリミジン環の５位に架橋モルホリン基を有し、そしてピリミジン環の４位に１アミノ基または４,６位に２アミノ基を有するピリミジン基を３位に有することに特徴付けられる。
【００１０】
具体的に、本発明は式(I)
【化１】
2005501034.tif 000003
（式中、Ｒ１は
【化２】
2005501034.tif 000004
であり；
ｎは１または２であり；
Ｒ２はＨまたはＮＨ２である。）
の化合物並びに、その塩、異性体および水和物に関する。
【００１１】
別の態様として、本発明は、
Ｒ１が
【化３】
2005501034.tif 000005
であり;
Ｒ２はＨまたはＮＨ２である、
式（Ｉ）の化合物、並びに、その塩、異性体および水和物に関する。
【００１２】
さらに別の態様として、本発明は、式（Ｉ）
そこでは、Ｒ１が
【化４】
2005501034.tif 000006
であり;
Ｒ２はＨである、
の化合物並びに、その塩、異性体および水和物に関する。
【００１３】
本発明の式（Ｉ）の化合物はまたそれらの塩の形式であってもよい。一般に有機であるか無機の塩基または酸との塩がここで言及できる。
【００１４】
生理的に許容される塩が本発明の目的のために好ましい。本発明の化合物の生理的に許容される塩は、本発明の物質と鉱酸、カルボン酸またはスルホン酸との塩であってもよい。特に好適な例示は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ‐トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸または安息香酸との塩である。
【００１５】
生理的に許容される塩は、同様に遊離カルボキシル基を有する本発明の化合物の金属またはアンモニウム塩であってもよい。特に好適な例示は、ナトリウム、カリウム、マグネシウムまたはカルシウム塩および、アンモニアまたは有機アミン、例えばエチルアミン、ジ‐またはトリエチルアミン、ジ‐またはトリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエタノール、アルギニン、リジンまたはエチレンジアミンから誘導したアンモニウム塩である。
【００１６】
本発明の化合物は、互変異性の形式で存在することができる。これは熟練労働者にとって既知であり、そして、この種の形式は同様に本発明に含まれる。
その上、本発明の化合物は、それらの可能な水和物の形式で存在することができる。
【００１７】
本発明の式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩ）
【化５】
2005501034.tif 000007
の化合物に
Ａ）式（ＩＩＩ）
【化６】
2005501034.tif 000008
（式中、Ｒ１は、前述と同意義を有し；
Alkは線状または分枝状Ｃ１-４−アルキルである。）
の化合物を、必要に応じて、有機溶媒中加熱反応させて、式（Ｉ）の化合物を生成させるか；
あるいは、
Ｂ）式（ＩＶ）
【化７】
2005501034.tif 000009
（式中、Ｒ１は、前述と同意義を有する。）
の化合物を有機溶媒中加熱反応させて、式（Ｖ）
【化８】
2005501034.tif 000010
（式中、Ｒ１は、前述と同意義を有する。）
の化合物を与え、次いでハロゲン化剤を反応させて、
式（ＶＩ）
【化９】
2005501034.tif 000011
（式中、Ｒ１は、前述と同意義を有し；
Ｒ２は、ハロゲンを表す。）
の化合物を与え、
そして、最後に、加圧下に水性アンモニア溶液を加熱反応させることによって、製造できる。
【００１８】
式（ＩＩ）の化合物は、以下の反応図式に示されるように製造できる：
【化１０】
2005501034.tif 000012
【００１９】
式（ＩＩ）の化合物は、文献(Borsche and Manteuffel, Liebigs. Ann. Chem. 1934, 512, 97）から既知である、シアノピルビン酸エチルエステル・ナトリウム塩から多段式合成により得ることができる。保護ガス雰囲気下に、不活性溶媒、例えば、ジオキサン中で、それと２‐フルオロベンジルヒドラジンとの加熱反応によって、５‐アミノ‐１‐（２‐フルオロベンジル）ピラゾール‐３‐カルボン酸エチルエステルを与え、そして、それは保護ガス雰囲気下に酸性溶媒中でジメチルアミノアクロレインと加熱反応させて、環化させ対応するピリジン誘導体を生成させる。このピリジン誘導体、１‐（２‐フルオロベンジル）‐１Ｈ‐ピラゾロ[３,４‐ｂ]ピリジン‐３‐カルボン酸エチルエステルは、アンモニアにより対応するアミドにエステル転換させ、脱水剤、例えば、トリフルオロ無水酢酸を用いて脱水させて、対応するニトリル誘導体を与え、ニトリル誘導体にナトリウムエトキシドを反応させ、そして塩化アンモニアとの最終反応に付して、式（ＩＩ）の化合物を導くことからなる多段式シーケンスによって、転換される。
【００２０】
式（ＩＩＩ）の化合物は、例えば、以下のスキームに示すように、製造できる：
スキームＡ
【化１１】
2005501034.tif 000013
【００２１】
スキームＢ
【化１２】
2005501034.tif 000014
【００２２】
対応する出発化合物２,５‐ビス（ヒドロキシメチル)テトラヒドロフランおよびピリジン‐２,６‐ジカルボン酸ジメチルエステルは購入可能である（例えば、Aldrichから）か、または熟練労働者にとって既知のルートによる従来の方法よって得られる。
【００２３】
ビシクロ[３.２.１]オクタンの場合、例えば、２環式システムの組立は、この種の反応に従来使用される条件の下で、ビスヒドロキシメチルテトラヒドロフラン誘導体（ビストシレートとして活性化される）に求核置換反応にて、ベンジルアミンを作用させることによって達成される。本発明によれば、２〜５倍の過剰量のアミンを使用して、好ましくは大気圧下に、そして複数時間、例えば、２時間、高い温度、例えば、６０〜１３０℃、好ましくは８０〜１２０℃、特に１００℃で、反応溶液を撹拌して、有機溶剤、例えば、炭化水素、好ましくは、芳香族炭化水素、特にトルエン中で反応を実施することが好ましい。
【００２４】
ビシクロ[３.３.１]ノナンの場合、例えば、２環式システムの組立ては、ピペリジン‐２,６‐ジヒドロキシメチル誘導体の２つのヒドロキシ基の分子内求核置換反応によって、従来この種の反応に使用される条件下で、行われる。本発明によれば、好ましくは、酸性条件下に、例えば、濃硫酸の存在下に、好ましくは大気圧下に、そして複数時間、例えば、２４時間、高い温度、例えば、６０〜２００℃、好ましくは８０〜１９０℃、特に１７５℃で、反応溶液を撹拌して、反応を実施するのが好ましい。このために必要なピペリジン‐２,６‐ジヒドロキシメチル誘導体は、ピリジン‐２,６‐ジカルボン酸メチルエステルを、従来この種の反応に使用される条件下で、例えば、パラジウム／活性炭触媒上で水素を用いて水素化し、対応するピぺリジン‐２,６‐ジカルボン酸メチルエステルを与え、例えば、臭化ベンジルを用いる環窒素のベンジル化(cf. Goldspink, Nicholas J.,: Simpkins, Nigel S.; Beckmann, Marion; Syn. Lett.; 8; 1999; 1292-1294)、そして、続いて、従来この種の反応に使用される条件下にカルボン酸エステル基の対応するヒドロキシメチル基への還元によって製造でき、そこでは、好ましくは、大気圧下に、２〜５倍の過剰量の還元剤を用いて、そして、高い温度、例えば、３０〜１００℃、好ましくは、３０〜７０℃、特に使用される溶媒の還流下に複数の時間、例えば、３時間、反応液を撹拌下に、有機溶剤、例えばエーテル類、好ましくはジエチルエーテル中水素化アルミニウムリチウムを用いて、実施される。
【００２５】
かくして得られる２環式システムは、いずれの場合においても、従来この種の反応に使用される条件下で、ベンジル保護基を除去することによって、例えば、好ましくは、５０〜２００バール、さらに好ましくは、１００バールの高い圧力下に、有機溶剤、例えばアルコール類、好ましくはエタノール中で、パラジウム／活性炭触媒上で水素を用い、そして高い温度、例えば、６０〜１３０℃、好ましくは、８０〜１２０℃、特に１００℃にて、複数の時間、例えば５時間、反応液を撹拌して、対応する２環式アミンに変換させることができる。後者は、適切なアセトニトリル誘導体、例えば、ハロアセトニトリル、好ましくは、ブロモアセトニトリルとの反応により、従来この種の反応に使用される条件下で、例えば、有機溶媒、具体的には、Ｎ,Ｎ‐ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中で、好ましくは大気圧下に、塩基、例えば、Ｎ,Ｎ‐ジイソプロピルエチルアミンおよびハライド、例えば、ヨウ化ナトリウムの存在下に、わずかに過剰量のアセトニトリル誘導体を用いて、そして、反応液を、高い温度、例えば４０〜１３０℃、好ましくは４０〜１００℃、特に６０℃で、複数の時間、例えば、２４時間撹拌して、対応するＮ‐メチルニトリル誘導体に、変換できる。最後に、式（ＩＩＩ）の化合物は、後者にギ酸エステル、例えば蟻酸エチルを反応させることによって、従来はこの種の反応に使用される条件下で、例えば、有機溶剤、具体的には、エーテル類、好ましくは環状エーテル類、具体的には、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中で、好ましくは大気圧下に、２〜５倍過剰量のギ酸エステルを用い、そして、反応液を、室温で、複数分間、例えば、２０〜６０分間撹拌し、続いて、無水酢酸によるアセチル化により、従来はこの種の反応に使用される条件下で、例えば、好ましくは大気圧下に、わずかに過剰量の無水酢酸を用いて、酢酸の存在下に行い、そして複数分間、例えば、２０〜６０分間反応液を撹拌して、製造できる。
【００２６】
式（ＩＩ）および（ＩＩＩ）の化合物を反応させて式（Ｉ）の化合物を与える反応は、等モル量の反応物質を用いて、または、好ましくは大気圧下に、有機溶剤、例えば、炭化水素、好ましくは芳香族炭化水素、特にトルエン中で、わずかな過剰量の式（ＩＩＩ）の化合物を用いて、高い温度、例えば８０〜１６０℃、好ましくは１００〜１５０℃、特に１２０℃で、複数時間、例えば、１２時間反応液の撹拌下に実施される。
【００２７】
式（ＩＶ）の化合物は、市販されている（例えば、Mercachemから）か、または熟練労働者にとって既知の方法により製造できる。
【００２８】
式（Ｖ）の化合物を導く（ＩＩ）および（ＩＶ）の化合物の反応は、等モル量の反応物質を用いて、またはわずかな過剰量の式（ＩＶ）の化合物を用いて、好ましくは大気圧下に、有機溶剤、例えば、炭化水素、好ましくは芳香族炭化水素、特にトルエン中で、そして高い温度、例えば８０〜１６０℃、好ましくは１００〜１５０℃で、特に１４０℃で、複数時間、例えば、１２時間、反応液の撹拌下に実施される。
【００２９】
式（ＶＩ）の化合物を導く式（Ｖ）の化合物の反応は、好ましくは、大気圧下に、必要に応じて、この種の反応に従来使用される有機溶剤、例えばジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中で、そして高い温度、例えば、８０〜１６０℃、好ましくは１００〜１２０℃で、複数時間、好ましくは３時間反応液の撹拌下に、式（Ｖ）の化合物にハロゲン化剤を反応させて、実施できる。本発明により、好ましくは、ＰＯＣｌ３がハロゲン化剤として使用できる。
【００３０】
本発明の式（Ｉ）の化合物に導く式（ＶＩ）の化合物の反応は、好ましくは、高い圧力下に、例えば、反応が反応混合物の自然発生の圧力下に進行するように、オートクレーブ中で行うことによって、そして高い温度、例えば、８０〜１６０℃、好ましくは１００〜１５０℃、特に１４０℃で、複数時間、例えば１２時間、反応液の撹拌下に、式（ＶＩ）の化合物にアンモニア水溶液を反応させることによって実施できる。
【００３１】
本発明の式（Ｉ）の化合物は、予測できなかった有益な範囲の薬理効果を示す。
本発明の式（Ｉ）の化合物は、血管緊張低下、血小板凝集阻害、血圧低下、そして冠状動脈血流増加を導く。これらの効果は、可溶なグアニル酸シクラーゼの直接の刺激およびｃＧＭＰの細胞内増加によって媒介される。加えて、本発明の式（Ｉ）の化合物は、ｃＧＭＰレベル、例えば、ＥＤＲＦ（内皮誘導弛緩因子）、ＮＯドナー、プロトポルフィリンＩＸ、アラキドン酸またはフェニルヒドラジン誘導体を増加させる物質の効果を高める。
【００３２】
従って、心血管疾患の処置、例えば、高血圧および心不全、安定および不安定狭心症、不整性末梢および心臓血管疾患の処置、血栓塞栓性疾患および貧血、例えば心筋梗塞、卒中、一過性および虚血性発作、末梢血流の撹乱の処置、血栓溶解治療、経皮的経管形成術（ＰＴＡｓ）、経皮的経管性冠状動脈形成術（ＰＴＡｓ）、バイパス形成術後など再狭窄の予防、そして、動脈硬化、喘息性疾患および泌尿生殖器システムの疾患、例えば前立腺肥大、勃起機能不全、女性の性的機能不全、骨粗鬆症、胃不全麻痺および失禁の処置のための医薬に使用できる。
【００３３】
本発明に記載されている式（Ｉ）の化合物はまた、ＮＯ／ｃＧＭＰシステムの撹乱によって特徴付けられる、中枢神経系疾患を制御する活性成分としても適切である。それらは、特に状況／疾患／症候群において生起するものなど、例えば、軽度の認識損傷、年齢関連の学習および記憶の損傷、年齢関連の記憶喪失、血管痴呆、頭蓋脳外傷、卒中、卒中後に起こる痴呆症（「卒中後痴呆症」）、外傷後の頭蓋脳外傷、全身性集中損傷、学習および記憶に問題がある児童の集中損傷、アルツハイマー型痴呆、血管痴呆、レービー(Lewy)小体痴呆、ピック症候群を含む前頭葉の退化による痴呆、パーキンソン病、進行性核麻痺、皮質基底の退化による痴呆、筋萎縮性側索（amyolateral）硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、多発性硬化症、視床退化、クロイツフェルト‐ヤコブ痴呆、ＨＩＶ痴呆、痴呆を伴う分裂病またはコルサコフ精神病のように、認識障害後の知覚、集中、学習または記憶を改善するために特に適切である。それらはまた、中枢神経系障害、例えば、不安、緊張および抑うつの状態、中枢神経系関連の性的機能不全および睡眠妨害の処置のために、そして、食料、刺激剤および習慣性物質の摂取についての病理学的撹乱を制御するためにも適している。
【００３４】
活性成分は、さらにまた脳血流を制御することに適し、そしてかくして偏頭痛を制御するための有効な医薬をも示す。
それらはまた、脳梗塞の後遺症、例えば、卒中、脳貧血および頭蓋脳の外傷の予防および制御にも適している。本発明の式（Ｉ）の化合物は、疼痛状態を制御するためにも同様に使用できる。
加えて、本発明の化合物は、抗炎症効果を有し、従って、抗炎症剤として使用できる。
【００３５】
さらに、本発明は、本発明の式（Ｉ）の化合物と有機硝酸塩およびＮＯドナーとの組合せを包含する。
本発明の目的のための有機硝酸塩およびＮＯドナーは、一般にＮＯまたはＮＯ類の放出を通してその治療効果を示す物質である。好ましいものは、ニトロプルシドナトリウム、ニトログリセリン、硝酸イソソルビド、イソソルビドモノ硝酸塩、モルシドミンおよびＳＩＮ−１である。
【００３６】
加えて、本発明は、環状グアノシンモノリン酸（ｃＧＭＰ）の破壊を阻害する化合物との組合せを包含する。これらは、特にホスホジエステラーゼ１、２および５の阻害剤である; Beavo and Reifsnyder (1990), TiPS 11 pp. 150 to 155の命名法。これらの阻害剤は、本発明の化合物の効果を増強し、そして所望の薬理効果を増加させる。
【００３７】
生物学的検査
インビトロにおける血管緊張低下効果
ウサギの首の後ろから殴打して気絶させ、次いで放血する。大動脈を取り外し、付着した組織を除き、幅１.５ｍｍのリング状に分割し、次の組成（ｍＭ）：ＮａＣｌ：１１９；ＫＣｌ：４.８；ＣａＣｌ２ｘ２Ｈ２Ｏ：１；ＭｇＳＯ４ｘ７Ｈ２Ｏ：１.４；ＫＨ２ＰＯ４：１.２；ＮａＨＣＯ３：２５；グルコース：１０、を有する、カルボゲン（carbogen）ガスを満たしたクレブス‐ヘンゼライト（Krebs-Henseleit）溶液を含む器官浴５ｍｌに３７℃で別々に緊張させて入れる。収縮力を、Statham UC2細胞によって検査し、Ａ／Ｄ変換機（DAS-1802 HC、Keithley Instruments Munich）を通して増幅させ、デジタル化させ、そして平行してチャート記録計に記録させる。フェニレフリンを浴に加え、濃度が増加するに伴い累積的に、収縮が発生する。いくつかの制御サイクルの後、検査される物質（被検物質）は、いずれの場合にも、各々さらなるランでの用量を増加させて検査され、そして収縮の高さは直前のランで達した収縮の高さと比較される。コントロール値の高さの５０％（ＩＣ５０）に減少させるに必要な濃度はこれから計算される。標準適用容量は５μｌであり、そして浴溶液のＤＭＳＯ含有量は０.１％に相当する。その結果を以下の表１に記載する。
【００３８】
表１．インビトロにおける血管緊張低下効果
【表１】
2005501034.tif 000015
【００３９】
インビトロにおける肝クリアランスの定量
ラットに麻酔をかけ、ヘパリンで凝血防止を行い、そして肝臓をそのまま門脈を通して潅流する。それから、主要なラット肝細胞は、コラーゲナーゼ溶液を用いて肝臓から生体外で得られる。２・１０６肝細胞／ｍｌを、いずれの場合も、同じ濃度の被検化合物とともに３７℃で培養した。培養開始後０〜１５分の周期に各々５時点で、時間とともに検査すべき基質の減少を、生物学的分析（ＨＰＬＣ／ＵＶ、ＨＰＬＣ／蛍光またはＬＣ／ＭＳＭＳ）により定量した。クリアランスは、細胞個数および肝臓の重量を通してそこから計算された。
【００４０】
インビボにおける血漿クリアランスの定量
被検物質は、尾静脈を通してラットに溶液として静注で投与される。血液は所定の回数ラットから採血され、次いでヘパリンで凝血防止され、そして血漿は従来の方法によりそこから得られる。物質は、生物学的分析により血漿中で定量化される。薬動力学的パラメータは、この目的で使用される従来の非区分法によって、この方法で見出された血漿中の濃度／時間経過から計算される。
【００４１】
本発明は、非毒性で、不活性な、薬学的に適した担体の他に、本発明の式（Ｉ）の化合物を含有してなる製剤およびこれらの製剤の製造方法を包含する。
活性成分はまた上述した１以上の担体のマイクロカプセルの形状中に存在してもよい。
【００４２】
治療上有効な式（Ｉ）の化合物は、上述した製剤中に、完全な混合物に対して約０.１〜９９.５、好ましくは約０.５〜９５重量％の濃度で存在しなければならない。
【００４３】
上述した医薬製剤は、本発明の式（Ｉ）の化合物以外にもまた、他の活性な医薬成分を含んでなることができる。
【００４４】
必要に応じて、所望の結果を得るために、本発明の活性成分を２４時間当たり体重ｋｇ当たり、総量として約０.０１〜約７００、好ましくは約０.０１〜１００ｍｇを、複数の単一用量の形状で投与することが、医薬および獣医薬の両者において概して有益である、と判明した。単一用量は、本発明の活性成分を、好ましくは体重のｋｇ当たり、約０.１〜約８０、特に０.１〜３０ｍｇの量で含んでなる。
【００４５】
本発明は、非限定的な好適な実施例によって以下に詳細に記載される。特に他に示さない限り、全ての量的データは重量パーセントに関する。
【００４６】
実施例
略号：
ＲＴ      ：室温
ＥＡ      ：酢酸エチル
ＭＣＰＢＡ：ｍ‐クロロ過酸化安息香酸
ＢＡＢＡ  ：酢酸ｎ‐ブチル／ｎ‐ブタノール／氷酢酸／リン酸緩衝液ｐＨ６（５０：９：２５.１５；有機相）
ＤＭＦ    ：Ｎ,Ｎ‐ジメチルホルムアミド
【００４７】
薄層クロマトグラフィーの移動相：
Ｔ１  Ｅ１：        トルエン‐酢酸エチル（１：１）
Ｔ１  ＥｔＯＨ１：  トルエン‐メタノール（１：１）
Ｃ１  Ｅ１：        シクロヘキサン：酢酸エチル（１：１）
Ｃ１  Ｅ２：        シクロヘキサン：酢酸エチル（１：２）
【００４８】
ＨＰＬＣ保持時間の定量方法および分取方法
方法Ａ（ＨＰＬＣ−ＭＳ）：
溶出液：        Ａ＝ＣＨ３ＣＮ、  Ｂ＝０.６ｇ  ３０％ＨＣｌ／ｌ  Ｈ２Ｏ
流速：          ０.６ｍｌ／分
カラムオーブン：５０℃
カラム：        SymmetryC18  2.1*150  mm
濃度勾配：
【表２】
2005501034.tif 000016
【００４９】
方法Ｂ（ＨＰＬＣ）：
溶出液：          Ａ＝５ｍｌＨＣｌＯ４／ｌ  Ｈ２Ｏ、  Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ
流速：            ０.７５ｍｌ／分
Ｌ−Ｒ温度：      ３０.００℃  ２９.００℃
カラム：          KromasilC18  60*2 mm
濃度勾配：
【表３】
2005501034.tif 000017
【００５０】
方法Ｃ（ＨＰＬＣ）：
溶出液：          Ａ＝Ｈ３ＰＯ４  ０.０１ｍｏｌ／ｌ、Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ
流速：            ０.７５ｍｌ／分
Ｌ−Ｒ温度：      ３０.０１℃  ２９.９８℃
カラム：          KromasilC18  60*2 mm
濃度勾配：
【表４】
2005501034.tif 000018
【００５１】
方法Ｄ（キラルＨＰＬＣ）：
溶出液：          ５０％イソヘキサン、５０％エタノール
流速：            １.００ｍｌ／分
温度：            ４０℃
カラム：          ２５０＊４.６ｍｍ,充填物：Chiralcel OD、１０μｍ
【００５２】
方法Ｅ（ＨＰＬＣ−ＭＳ）：
溶出液：          Ａ＝ＣＨ３ＣＮ、Ｂ＝０.３ｇ  ３０％ＨＣｌ／ｌ  Ｈ２Ｏ
流速：            ０.９ｍｌ／分
カラムオーブン：  ５０℃
カラム：          SymmertryC18  2.1*150mm
濃度勾配：
【表５】
2005501034.tif 000019
【００５３】
方法Ｆ（分取ＨＰＬＣ）：
溶出液：      Ａ＝Milli‐Q‐水,Ｂ＝アセトニトリル,Ｃ＝１％トリフルオロ酢酸
流速：        ２５ｍｌ／分
温度：        ５０℃
充填剤：      Kromosil 100 C18  ５μｍ  ２５０ｘ２０ｍｍ  Ｎｏ.１０１１３１４Ｒ
濃度勾配：
【表６】
2005501034.tif 000020
【００５４】
方法Ｇ＝（ＬＣ−ＭＳ）：
溶出液：          Ａ＝アセトニトリル＋０.１％蟻酸
Ｂ＝水＋０.１％蟻酸
流速：            ２５ｍｌ／分
温度：            ４０℃
充填剤：          Symmertry C18,５０ｘ２.１ｍｍ、３.５μｍ
濃度勾配：
【表７】
2005501034.tif 000021
【００５５】
方法Ｉ＝（分取ＨＰＬＣ）：
溶出液：    Ａ＝Milli‐Q‐水＋０.６％濃硫酸／１  Ｈ２Ｏ
Ｂ＝アセトニトリル
流速：      ５０ｍｌ／分
温度：      室温
充填剤：    YMC‐Gel ODS-AQS １１μｍ  ２５０ｘ３０ｍｍ
濃度勾配：
【表８】
2005501034.tif 000022
【００５６】
ＧＣ保持時間を測定する方法：
方法Ｈ＝（ＧＣ−ＭＳ）：
キャリアガス：          ヘリウム
流速：                  １.５ｍｌ／分
開始温度：              ６０℃
温度勾配：              １４℃／分から３００℃、次いで１分３００℃恒常状態
カラム：                HP-5  ３０ｍ×３２０μｍ×０.２５μｍ（フィルム厚み）
初期時間：              ２分
前部注入器温度：        ２５０℃
【００５７】
出発化合物：
Ｉ.（Ｅ／Ｚ）‐２‐シアノ‐２‐（８‐オキサ‐３‐アザビシクロ［３.２.１］オクト‐３‐イル）エテニルアセテートの合成
Ｉａ）２,５‐アンヒドロ‐３,４‐ジデオキシ‐１,６‐ビス‐Ｏ‐［（４‐メチルフェニル）スルホニル］ヘキシトール
【化１３】
2005501034.tif 000023
２,５‐ビス（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン３４.０ｇ（２６１ｍｍｏｌ）を塩化メチレン２６０ｍｌに溶解した。塩化ｐ‐トルエンスルホニル９９.０ｇ（５２１ｍｍｏｌ）をピリジン５２ｍｌおよび塩化メチレン１３０ｍｌに溶かした溶液をそこに滴下して加えた。室温で２４時間攪拌後、沈殿物を吸引濾過し、次いで塩化メチレンで洗浄した。濾液および洗浄相を併せ、希塩酸、続いて飽和重炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、そして蒸発乾固した。粗生成物をエタノールで再結晶した。
収量：          １１２ｇ（９８％）
融点：          １２５℃
ＭＳ：          （ＣＩpos.）,ｍ／ｚ＝４４１（［Ｍ＋Ｈ］＋）。
【００５８】
Ｉｂ）  ３‐ベンジル‐８‐オキサ‐３‐アザビシクロ［３.２.１］オクタン
【化１４】
2005501034.tif 000024
実施例Ｉａ由来の２,５‐アンヒドロ‐３,４‐ジデオキシ‐１,６‐ビス‐Ｏ‐［（４‐メチルフェニル）スルホニル］ヘキシトール１１２ｇ（２５０ｍｍｏｌ）およびベンジルアミン９０.７ｇ（８４０ｍｍｏｌ）をトルエン５００ｍｌ中で２０時間加熱還流した。次いで、沈殿物を吸引濾過し、そしてトルエンで洗浄した。併せたトルエン相を回転エバポレーターで濃縮し、次いで真空蒸留した。初溜分のベンジルアミンに続いて、生成物を得た。
収量：          ２８.２ｇ（５４％）
沸点：          ９６〜９９℃（８ｍバール）
ＭＳ：          （ＣＩpos.）,ｍ／ｚ＝２０４（［Ｍ＋Ｈ］＋）。
【００５９】
Ｉｃ）８‐オキサ‐３‐アザビシクロ［３.２.１］オクタン塩酸塩
【化１５】
2005501034.tif 000025
実施例Ｉｂ由来の３‐ベンジル‐８‐オキサ‐３‐アザビシクロ［３.２.１］オクタン２８.２ｇ（１３６ｍｍｏｌ）をエタノール２００ｍｌに溶解し、そして、パラジウム／活性炭（１０％）５.００ｇを添加した後、オートクレーブ中１００℃にて１００バールの水素で水素添加した。触媒を吸引濾去し、母液を濃硫酸１１.９ｍｌに混合し、次いで回転エバポレーターで濃縮した。アセトンを残渣に加え、次いで生じた沈殿物を吸引濾過した後、五酸化リンで乾燥した。
収量：          １７.０ｇ（８４％）
融点：          ２０９−２２１℃
ＭＳ：          （ＣＩpos.）,ｍ／ｚ＝１１４（［Ｍ＋Ｈ］＋）。
【００６０】
Ｉｄ  ８‐オキサ‐３‐アザビシクロ［３.２.１］オクト‐３‐イルアセトニトリル
【化１６】
2005501034.tif 000026
実施例１ｃ由来の８‐オキサ‐３‐アザビシクロ［３.２.１］オクタン塩酸塩１.５４ｇ（１０.３ｍｍｏｌ）をＮ,Ｎ‐ジメチルホルムアミド２０ｍｌに導入し、氷で冷却しながら、Ｎ,Ｎ‐ジイソプロピルエチルエミン２.９４ｇ（２２.７ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３０分間攪拌した後、ブロモアセトニトリル１.３６ｇ（１１.４ｍｍｏｌ）を滴下して加え、ヨウ化ナトリウム８９.９ｍｇ（０.６０ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を６０℃で一夜攪拌した。次いで、反応混合物を回転エバポレーターで蒸発乾固し、そして残渣を少量の塩化メチレンに溶解した。溶液を塩化メチレン／メタノール５０：１を溶出液としてシリカゲルを通して濾過し、次いで得られる生成物の画分をＨＶ下で乾燥した。
収量：            １.２４ｇ（６９％）
Ｒｆ：            ０.８０（塩化メチレン／メタノール２０：１）
ＧＣ‐ＭＳ：      保持時間＝１１.２３分（方法Ｈ）
ＭＳ：（ＣＩpos.）,ｍ／ｚ＝１５３（［Ｍ＋Ｈ］＋）。
【００６１】
Ｉ）（Ｅ／Ｚ）‐２‐シアノ‐２‐（８‐オキサ‐３‐アザビシクロ［３.２.１］オクタ‐３‐イル）エテニルアセテート
【化１７】
2005501034.tif 000027
カリウムtert‐ブトキシド２.００ｇ（１７.８ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン１０ｍｌに導入した。氷で冷却しながら、実施例Ｉｄ由来の８‐オキサ‐３‐アザビシクロ［３.２.１］オクト‐３‐イルアセトニトリル１.２３ｇ（８.０８ｍｍｏｌ）およびギ酸エチル１.３７ｇ（１７.８ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン５mlに溶かした溶液を滴下して加えた。室温で１時間攪拌した後、氷で冷却しながら、無水酢酸１.１６ｇ（１１.３ｍｍｏｌ）および酢酸１.０７ｇ（１７.８ｍｍｏｌ）からなる溶液を滴下して加え、そして混合物を室温で１時間攪拌した。続いて、塩化メチレンを溶出液として用い、混合物をシリカゲルにて濾過した。生成物の画分を４０℃で蒸発乾固した。生成物をさらなる精製をせずに次の反応に用いた。
収量：          ２.０３ｇ（５４％）
Ｒｆ：            ０.６４（塩化メチレン／メタノール  ２０：１）
【００６２】
ＩＩ.（Ｅ／Ｚ）‐２‐シアノ‐２‐（３‐オキサ‐９‐アザビシクロ［３.２.１］ノン‐９‐イル）エテニルアセテートの合成
【００６３】
ＩＩａ）  ［１‐ベンジル‐６‐（ヒドロキシメチル）‐２‐ピペリジニル］メタノール
【化１８】
2005501034.tif 000028
水素化リチウムアルミニウム１９.０ｇ（５００ｍｍｏｌ）を無水ジエチルエーテル３００ｍｌに導入し、そして無水ジエチルエーテル３００ｍｌ中に１‐ベンジル‐２,６‐ピペリジンジカルボン酸ジメチルエステル７５.０ｇ（２５０ｍｍｏｌ）（ピリジン‐２,６‐ジカルボン酸ジメチルエステルにパラジウム／活性炭を用い、水素にて水素化し、続いて得られる２,６‐ピペリジンジカルボン酸ジメチルエステルに臭化ベンジルを反応させて得られる；Goldspink,Nicholas J.; Simpkins, Nigel S.; Beckmann, Marion; Syn. Lett.; 8; 1999; 1292-1294の方法による）を溶かした溶液をそこへ滴下して加える。次いで、混合物を３時間加熱還流し、水４０ｍｌで慎重に加水分解し、そして１５％濃度の水酸化カリウム水溶液２０ｍｌを混合した。沈殿物を吸引濾過し、そしてジオキサンで煮沸する。併せた濾液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、回転エバポレーターで蒸発乾固させた。粗生成物を真空蒸留に付した。
収量：          ５３.３ｇ（９１％）
沸点：          １７０℃／０.２ミリバール
【００６４】
ＩＩｂ）  ９‐ベンジル‐３‐オキサ‐９‐アザビシクロ［３.３.１］ノナン
【化１９】
2005501034.tif 000029
実施例ＩＩａ由来の［１‐ベンジル‐６‐（ヒドロキシメチル）‐２‐ピペリジニル］メタノール４０ｇ（１７０ｍｍｏｌ）を６６％濃度硫酸１２９ｍｌ中で１７５℃にて一夜攪拌した。室温まで冷却した後、混合物を炭酸ナトリウムで中和し、水酸化ナトリウムでアルカリ性にし、次いで塩化メチレンで数回抽出した。併せた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、回転エバポレーターで蒸発乾固した。残渣を真空蒸留した。
収量：          ２６.５ｇ（７２％）
沸点：          １０１〜１０３℃／８ミリバール
ＭＳ：          （ＣI  pos.）、ｍ／ｚ＝２１８（［Ｍ＋Ｈ］＋）
【００６５】
ＩＩｃ）３‐オキサ‐９‐アザビシクロ［３.３.１］ノナン塩酸塩
【化２０】
2005501034.tif 000030
実施例ＩＩｂ由来の９‐ベンジル‐３‐オキサ‐９‐アザビシクロ［３.３.１］ノナン２６.０ｇ（１２０ｍｍｏｌ）をエタノール２００ｍｌに溶解し、次いでパラジウム／活性炭（１０％）５.００ｇを加えた後、オートクレーブ中１００℃にて１００バールの水素で水素添加した。触媒を吸引濾去し、次いで母液に濃塩酸１０.９ｍｌを混合し、そして回転エバポレーターで濃縮した。アセトンを残渣に添加し、そして得られる沈殿を吸引濾過した後、五酸化リンで乾燥した。
収量：          １２.０ｇ（８１％）
１Ｈ‐ＮＭＲ：  （４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）,δ＝１.６８‐１.７６（ｍ,１Ｈ,ＣＨ）,２.０８‐２.１５（ｍ,４Ｈ,２ＣＨ２）,２.３２‐２.４５（ｍ,１Ｈ,ＣＨ）,３.５６（ｍｃ,２Ｈ,２ＣＨ）,４.０７‐４.１７（ｍ,４Ｈ,２ＣＨ２）。
【００６６】
ＩＩｄ）  ３‐オキサ‐９‐アザビシクロ［３.３.１］ノン‐９‐イルアセトニトリル
【化２１】
2005501034.tif 000031
実施例ＩＩｃ由来の３‐オキサ‐９‐アザビシクロ［３.３.１］ノナン塩酸塩２.００ｇ（１２.２ｍｍｏｌ）をＮ,Ｎ‐ジメチルホルムアミド２０ｍｌに導入し、そして氷で冷却しながら、Ｎ,Ｎ‐ジイソプロピルエチルアミン３.１０ｇ（２６.９ｍｍｏｌ）を加える。室温で３０分間攪拌した後、ブロモアセトニトリル１.６１ｇ（１３.４ｍｍｏｌ）を滴下して加え、ヨウ化ナトリウム６０.０ｍｇ（０.４０ｍｍｏｌ）を加え、次いで混合物を６０℃で一夜攪拌した。それから、反応混合物を回転エバポレーターで蒸発乾固させ、次いで残渣を少量の塩化メチレンに溶解した。溶液を、溶出液として塩化メチレン／メタノール５０：１を用いて、シリカゲルで濾過し、次いで得られた生成物の画分をＨＶ下で乾燥させた。
収量：          １.５９ｇ（７６％）
Ｒｆ：          ０.７９（塩化メチレン／メタノール  ２０：１）
ＧＣ‐ＭＳ：    保持時間＝１２.５５分（方法Ｈ）
ＭＳ（ＣI pos.）、ｍ／ｚ＝１６７（［Ｍ＋Ｈ］＋）。
【００６７】
ＩＩ）（Ｅ／Ｚ）‐２‐シアノ‐２‐（３‐オキサ‐９‐アザビシクロ［３.３.１］ノン‐９‐イル）エテニル・アセテート
【化２２】
2005501034.tif 000032
カリウムｔｅｒｔ−ブトキサイド２.３５ｇ（２０.９ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン１０ｍｌ中に導入した。氷で冷却しながら、５ｍｌのテトラヒドロフラン中に実施例ＩＩｄ由来の３‐オキサ‐９‐アザビシクロ［３.３.１］ノン‐９‐イルアセトニトリル１.５５ｇ（９.５０ｍｍｏｌ）およびギ酸エチル１.５５ｇ（２０.９ｍｍｏｌ）を溶かした溶液を、滴下して加えた。室温で１時間攪拌後、無水酢酸１.３６ｇ（１３.３ｍｍｏｌ）および酢酸１.２６ｇ（２０.９ｍｍｏｌ）の溶液を、氷で冷却しながら、滴下し、そして混合物を室温で１時間攪拌した。次いで、混合物を、溶出液として塩化メチレンを用いて、シリカゲルで濾過した。生成物の画分を４０℃で蒸発乾固した。生成物をさらなる精製をせずに次の反応に供した。
収率：          １.５９ｇ（３９％）
Ｒｆ：          ０.６６（塩化メチレン／メタノール２０：１）
【００６８】
ＩＩＩ.  １‐（２‐フルオロベンジル）１Ｈ‐ピラゾロ［３,４‐ｂ］ピリジン‐３‐カルボキサミド
ＩＩＩａ）５‐アミノ‐１‐（２‐フルオロベンジル）ピラゾ-ル‐３‐カルボン酸エチルエステル
【化２３】
2005501034.tif 000033
ジオキサン２.５Ｌ中のシアノピルビン酸エチルエステルナトリウム塩１００ｇ（０.６１３ｍｏｌ）（Borsche and Manteuffel, Liebigs Ann. 1934, 512, 97  と同様に製造）に、アルゴン気流下で室温にて効率よく攪拌しながら、トリフルオロ酢酸１１１.７５ｇ（７５ｍｌ,０.９８ｍｏｌ）を加え、次いで混合物を１０分間攪拌し、そしてその間に、大部分の前駆体は溶解する。それから、２‐フルオロベンジルヒドラジン８５.９３ｇ（０.６１３ｍｏｌ）を加え、そして混合物を一夜煮沸する。冷却後、析出したトリフルオロ酢酸ナトリウム結晶を吸引濾過し、ジオキサンで洗浄し、次いで粗溶液をさらなる反応に用いる。
【００６９】
ＩＩＩｂ）  １‐（２‐フルオロベンジル）‐１Ｈ‐ピラゾロ［３,４‐ｂ］ピリジン‐３‐カルボン酸エチルエステル
【化２４】
2005501034.tif 000034
ＩＩＩａから得られた溶液をジメチルアミノアクロレイン６１.２５ｍｌ（６０.７７ｇ,０.６１３ｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸５６.２８ｍｌ（８３.８８ｇ,０.７３６ｍｏｌ）に混合し、そしてアルゴン気流下に３日間煮沸する。次いで、溶媒を減圧溜去し、そして残渣を水２Ｌに加えた後、毎回酢酸エチル１Ｌで３回抽出する。併せた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、そして回転エバポレーターで濃縮する。シリカゲル２.５ｋｇ上でクロマトグラフィーを行い、トルエン／トルエン‐酢酸エチル＝４：１濃度勾配で溶出する。収量９１.６ｇ（２段階にわたり、理論値の４９.９％）。
融点：８５℃
Ｒｆ（ＳｉＯ２,Ｔ１Ｅ１）：０.８３
【００７０】
ＩＩＩｃ）  １‐（２‐フルオロベンジル）‐１Ｈ‐ピラゾロ［３,４‐ｂ］ピリジン‐３‐カルボキサミド
【化２５】
2005501034.tif 000035
実施例ＩＩＩｂ）で得られたエステル１０.１８ｇ（３４ｍｍｏｌ）をアンモニアで飽和したメタノール１５０ｍｌに０〜１０℃で導入する。２日間室温で攪拌した後、減圧濃縮する。
Ｒｆ（ＳｉＯ２,Ｔ１Ｅ１）：０.３３
【００７１】
ＩＩＩｄ）  ３‐シアノ‐１‐（２‐フルオロベンジル）‐１Ｈ‐ピラゾロ［３,４‐ｂ］ピリジン
【化２６】
2005501034.tif 000036
実施例ＩＩＩｃ由来の１‐（２‐フルオロベンジル）‐１Ｈ‐ピラゾロ［３,４‐ｂ］ピリジン‐３‐カルボキサミド３６.１ｇ（１３３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ３３０ｍｌに溶解し、そしてピリジン２７ｇ（３４１ｍｍｏｌ）を加える。次いで、１０分間にわたって、トリフルオロ無水酢酸４７.７６ｍｌ（７１.６６ｇ、３４１ｍｍｏｌ）を加える。その間、温度が４０℃に上昇する。混合物を室温で一夜攪拌する。次いで、混合物を水１Ｌに注ぎ込み、そして毎回酢酸エチル０.５Ｌで３回抽出する。有機相を飽和重炭酸水素ナトリウム溶液および１ＮＨＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、そして回転エバポレーターで濃縮する。
収量：          ３３.７ｇ（理論値の１００％）
融点：          ８１℃
Ｒｆ（ＳｉＯ２,Ｔ１Ｅ１）：０.７４
【００７２】
ＩＩＩｅ）メチル（２‐フルオロベンジル）‐１Ｈ‐ピラゾロ［３,４‐ｂ］ピリジン‐３‐カルボキシイミデート
【化２７】
2005501034.tif 000037
ナトリウムメトキシド３０.３７ｇ（５６２ｍｍｏｌ）をメタノール１.５Ｌに溶解し、そして３‐シアノ‐１‐（２‐フルオロベンジル）‐１Ｈ‐ピラゾロ［３,４‐ｂ］ピリジン（実施例ＩＩＩｄ由来）３６.４５ｇ（１４４.５ｍｍｏｌ）を加える。室温で２時間攪拌した後、得られる溶液を直接次の段階に使用する。
【００７３】
ＩＩＩｆ）１‐（２‐フルオロベンジル）‐１Ｈ‐ピラゾロ［３,４‐ｂ］ピリジン‐３‐カルボキサミジン
【化２８】
2005501034.tif 000038
実施例ＩＩＩｅから得られたメタノール中のメチル（２‐フルオロベンジル）‐１Ｈ‐ピラゾロ［３,４‐ｂ］ピリジン‐３‐カルボキシイミデートの溶液を、氷酢酸３３.７６ｇ（３２.１９ｍｌ,５６２ｍｍｏｌ）および塩化アンモニウム９.２８ｇ（１７３ｍｍｏｌ）に混合し、一夜還流下で攪拌する。溶媒を減圧溜去し、残渣をアセトンで完全に粉砕し、そして沈殿した固体を吸引濾過する。
１Ｈ‐ＮＭＲ（ｄ６‐ＤＭＳＯ,２００ＭＨｚ）：δ＝５.９３（ｓ,２Ｈ）；７.１‐７.５（ｍ,４Ｈ）；７.５５（ｄｄ,１Ｈ）；８.１２（ｄｄ,１Ｈ）；８.３０(ｄｄ、１Ｈ)；９.５（ｂｓ,４Ｈ‐交換可能）ｐｐｍ.
ＭＳ（ＥＩ）：ｍ／ｚ＝２７０.２（Ｍ‐ＨＣｌ）
【００７４】
実施例
１.  ２‐［１‐（２‐フルオロベンジル）‐１Ｈ‐ピラゾロ［３,４‐ｂ］ピリジン‐３‐イル］‐５‐（８‐オキサ‐３‐アザビシクロ［３.２.１］オクト‐３‐イル）‐４‐ピリミジニルアミン
【化２９】
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【００７５】
あらかじめ新たに製造しておいた、実施例ＩＩＩ由来の１‐（２‐フルオロベンジル）‐１Ｈ‐ピラゾロ［３,４‐ｂ］ピリジン‐３‐カルボキシイミダミド９３０ｍｇ（３.３３ｍｍｏｌ）および実施例Ｉ由来の（Ｅ／Ｚ）‐２‐シアノ‐２‐（８‐オキサ‐３‐アザビシクロ［３.２.１］オクト‐３‐イル）エテニルアセテート１.００ｇ（４.５０ｍｍｏｌ）をトルエン１０ｍｌに懸濁した。混合物を１２０℃で一夜攪拌し、次いで回転エバポレーターで蒸発乾固した。残渣を分取ＨＰＬＣ（方法Ｉ）でクロマトグラフィーを行った。生成物を含有する画分を分取ＨＰＬＣ（方法Ｉ）でさらなる精製に供した。
収量：          ２３０ｍｇ（１６％）
Ｒｆ ：          ０.２３（塩化メチレン／メタノール  ２０：１）
１Ｈ‐ＮＭＲ：  （３００ＭＨｚ,Ｄ６‐ＤＭＳＯ）,δ＝１.７４‐１.９０（ｍ,２Ｈ,ＣＨ２）,２.０７‐２.２０（ｍ,２Ｈ,ＣＨ２）,２.８２‐２.９５（ｍ,４Ｈ,２ＣＨ２）,４.２９‐４.４２（ｍ,２Ｈ,２ＣＨ）,５.８０（ｓ,２Ｈ,ＣＨ２）,６.４０‐６.７０（ｂｒ,ｓ,２Ｈ,ＮＨ２）,７.１０‐７.２８（ｍ,３Ｈ,Ａｒ‐Ｈ）,７.３０‐７.４０（ｍ,２Ｈ,Ａｒ‐Ｈ）,８.１０（ｓ,１Ｈ,ピリミジンＨ）,８.６２（ｄｄ,１Ｈ,ピリジンＨ）,８.９７（ｄｄ,１Ｈ,ピリジンＨ）。
ＬＣ‐ＭＳ：    保持時間＝１.８４２分（方法Ｅ）。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ.）,ｍ／ｚ＝４３２（［Ｍ＋Ｈ］＋）,８６３（［２Ｍ＋Ｈ］＋）。
【００７６】
２.  ２‐［１‐（２‐フルオロベンジル）‐１Ｈ‐ピラゾロ［３,４‐ｂ］ピリジン‐３‐イル］‐５‐（３‐オキサ‐９‐アザビシクロ［３.３.１］ノン‐９‐イル）‐４‐ピリミジニルアミン
【化３０】
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【００７７】
あらかじめ新たに製造しておいた、実施例ＩＩＩ由来の１‐（２‐フルオロベンジル）‐１Ｈ‐ピラゾロ［３,４‐ｂ］ピリジン‐３‐カルボキシイミダミド８７９ｍｇ（３.１４ｍｍｏｌ）および実施例ＩＩ由来の（Ｅ／Ｚ）‐２‐シアノ‐２‐（８‐オキサ‐３‐アザビシクロ［３.２.１］オクト‐３‐イル）エテニルアセテート１.００ｇ（４.２３ｍｍｏｌ）をトルエン１０ｍｌに懸濁した。混合物を１２０℃で一夜攪拌し、次いで回転エバポレーターで蒸発乾固した。残渣を分取ＨＰＬＣ（方法Ｉ）でクロマトグラフィーに付した。生成物を含有する画分を分取ＨＰＬＣ（方法Ｉ）でさらなる精製に供した。
収量：          １４１ｍｇ（１０％）
Ｒｆ ：          ０.２４（塩化メチレン／メタノール  ２０：１）
１Ｈ‐ＮＭＲ（２００ＭＨｚ,Ｄ６‐ＤＭＳＯ）,δ＝１.５５‐１.８３（ｍ,４Ｈ,２ＣＨ２）,１.９７‐２.２０（ｍ,２Ｈ,ＣＨ２）,２.３８‐２.６５（ｍ,２Ｈ,ＣＨ２）,３.８０（ｄ,２Ｈ,２ＣＨ２）,４.０５（ｄ,２Ｈ,２ＣＨ２）,５.８７（ｓ,２Ｈ,ＣＨ２）,７.１０‐７.５１（ｍ,５Ｈ,Ａｒ‐Ｈ）,７.５３‐７.９３（ｂｒ,ｓ,２Ｈ,ＮＨ２）,７.８８（ｓ,１Ｈ,ピリジンＨ）,８.７２（ｄｄ,１Ｈ,ピリジンＨ）,９.０４（ｄｄ,１Ｈ,ピリジンＨ）。
ＬＣ−ＭＳ：    保持時間＝１.９８６分（方法Ｅ）。
ＭＳ（ＥＳＩ  ｐｏｓ.）,ｍ／ｚ＝４４６（［Ｍ＋Ｈ］＋）,８９１（［２Ｍ＋Ｈ］＋）。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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