(57)【要約】血管新生に依存する、又はそれによって調節される疾患状態が、細胞表面ガレクチンと相互作用する治療材料を用いて制御される。特定の治療材料は、糖において終結している側鎖がぶら下がっているポリマー骨格を含む。ポリマー骨格がポリガラクツロン酸に基づき、側鎖がアラビノースもしくはガラクトースで終結している特異的な治療的材料が開示されている。【特許請求の範囲】
【請求項１】
生物において、血管新生を制御する方法であって、ガレクチンと結合する化合物の治療的有効量を前記生物に投与することを含む方法。
【請求項２】
前記ガレクチンは、前記生物の組織の細胞表面に存在する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記化合物は、ガレクチン−１又はガレクチン−３に結合する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記化合物は、ラムノース残基によって分断された、実質的に脱メトキシ化されたポリガラクツロン酸を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記化合物は、側鎖がぶら下がっているポリマー骨格を含み、前記側鎖は、ガラクトース又はアラビノースユニットで終結している、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記化合物は、改変されたペクチンを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記改変されたペクチンは、ｐＨが改変されたペクチンを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記改変されたペクチンは、酵素的に改変されたペクチンを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記改変されたペクチンは、熱的に改変されたペクチンを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
前記改変されたペクチンは、改変されたシトラスペクチンを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
前記化合物は、少なくとも３００ダルトンの分子量を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記改変されたペクチンは、１〜５０キロダルトンの分子量を有する、請求項６に記載の方法。
【請求項１３】
前記改変されたペクチンは、２５〜４０キロダルトンの分子量を有する、請求項６に記載の方法。
【請求項１４】
前記改変されたペクチンは、約２５キロダルトンの分子量を持つ、請求項６に記載の方法。
【請求項１５】
前記改変されたペクチンは、約１０キロダルトンの分子量を有する、請求項６に記載の方法。
【請求項１６】
前記化合物を前記生物に投与するステップは、前記化合物を前記生物に注射することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記化合物を前記生物に投与するステップは、前記化合物を前記生物に局所投与することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記化合物を前記生物に投与するステップは、前記化合物を経皮的に投与することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記化合物を前記生物に投与するステップは、前記化合物を経口投与することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
動物における疾患の治療的処置を行う方法であって、その疾患の進行が前記動物の組織における新血管形成に依存し、前記方法は、
前記動物に、ガレクチンと結合する化合物の治療的有効量を投与し、それによって前記化合物が前記組織における血管新生及び新血管形成の速度を低下させることを含む方法。
【請求項２１】
前記化合物は、ガレクチン−１又はガレクチン−３に結合する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記化合物は、ラムノース残基によって分断された、実質的に脱メトキシ化されたポリガラクツロン酸を含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記化合物は、側鎖がぶら下がっているポリマー骨格を含み、前記側鎖は、ガラクトース又はアラビノースユニットで終結している、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
前記化合物は、改変されたペクチンを含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２５】
動物において血管新生を制御するための化合物であって、
ガレクチンの炭水化物結合部位に結合性を有する第１の機能部分を含み、前記第１の機能部分は、末端ガラクトースもしくはアラビノースを含み、及び、
蛋白質変性作用を有する第２の機能部分を含み、前記第２の機能部分は、カルコゲン元素、チオール、スルフヒドリル、シアノ基、チオシアネート、アルキル化剤及びこれらの組み合わせからなる群から選択されるメンバーを含む、化合物。
【請求項２６】
前記第１の機能部分及び第２の機能部分は、ポリマー骨格又はオリゴマー骨格に付着している、請求項２５に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、動物における血管新生を制御するための方法及び組成物に関する。より詳細には、本発明は、血管新生が要因となる疾患の治療のための材料及び方法に関する。最も具体的には、本発明は、ガレクチンと相互作用する化合物を用いて血管新生を制御する方法及び材料に関する。
【背景技術】
【０００２】
医学では、血管新生は、多種の疾患状態の開始及び/又は増殖の重要な要因であると認識されている。本明細書において用いられている「血管新生」という用語は、組織又は臓器における新血管の発生及び成長を意味する。正常な生理学的条件下で、ヒト及び他の動物は、非常に特異的かつ限定された状況でのみ血管新生を行う。例えば、血管新生は通常、創傷治癒、胎児及び胚の発育、ならびに黄体、子宮内膜及び胎盤の形成において観察される。血管新生のプロセスは、多くの疾患状態において変わることがわかっており、多くの例において、該疾患に関連する病理学的損傷は、制御されていない血管新生に関係する。
【０００３】
制御及び非制御の両方の血管新生は、同様に進行すると考えられる。基底膜により囲まれる内皮細胞及び周皮細胞は毛細血管を形成する。血管新生は、内皮細胞及び白血球により放出される酵素による基底膜の侵食により開始する。血管の管腔に並ぶ内皮細胞は、次いで基底膜を通して押し出される。血管新生性刺激剤は、内皮細胞が侵食基底膜を通って移動することを誘導する。移動細胞は、親血管から離れて“新芽”を形成し、そこで内皮細胞は有糸分裂を行い、増殖する。内皮の新芽は互いに融合し、毛細血管ループを形成し、新血管を創生する。微小血管系の創生は、疾患状態を開始又は悪化させ得る。
【０００４】
持続性の非制御血管新生は、多くの疾患状態、腫瘍の転移、内皮細胞による異常成長において発生し、これらの状態で見られる病理学的損傷をサポートする。非制御血管新生による多様な病理学的状態が、血管新生依存性又は血管新生関連として一緒にグループ化されている。血管新生のプロセスの制御を指向した治療は、これらの疾患の排除又は軽減を導き得るであろう。
【０００５】
血管新生によって媒介される疾患の一例は、眼の新生血管性の疾患である。この疾患は、新血管の、網膜や角膜といった眼の構造への侵入を特徴とする。それは失明の最も一般的な原因であり、約２０種の眼疾患に関与している。年齢関連性の黄斑変性症において、関連する視力の問題は、網膜色素上皮の下の繊維性血管組織の増殖を伴うブルッフ膜の欠損を介する脈絡叢毛細血管の内部成長によって引き起こされる。血管新生性の損傷はまた、糖尿病性の網膜症、未熟児網膜症、角膜移植片拒絶反応、新生血管性緑内障、及び水晶体後線維増殖症にも関連している。角膜の新血管形成に関連する他の疾患及び状態としては、限定されないが、流行性乾性角結膜炎、ビタミンＡ欠乏症、コンタクトレンズの長時間装用、アトピー性角膜炎、上位辺縁系角膜炎、乾燥翼状片角膜炎（pterygium keratitis sicca）、シェーグレン症候群、酒さ性ざ瘡、フリクテン症（phylectenulosis）、梅毒、マイコバクテリア感染、脂肪変性、化学的熱傷、細菌性潰瘍、真菌性潰瘍、単純ヘルペス感染、帯状疱疹感染、原虫感染、カポジ肉腫、モーレン潰瘍、テリエン周辺角膜変性症、辺縁表皮剥離、関節リウマチ、全身性狼瘡、多発性動脈炎、外傷、ウェジナーサルコイド症、強膜炎、スティーブンス・ジョンソン症候群、類天疱瘡、放射状角膜切開、及び角膜移植片拒絶反応を含む。
【０００６】
網膜／繊毛膜様新血管形成に関連する疾患は、限定されないが、糖尿病性網膜症、黄斑変性症、鎌状赤血球貧血、サルコイド、梅毒、弾力線維性仮黄色腫、ページェット病、静脈閉塞症、動脈閉塞症、頚動脈閉塞症、慢性ブドウ膜炎/硝子体炎（vitritis）、マイコバクテリア感染, ライム病, 全身性エリテマトーデス、未熟児網膜症、イールズ病、ベーチェット病、網膜炎又は脈絡膜炎を引き起こす感染症、推定眼ヒストプラスマ症、ベスト病、近視、眼陥凹、シュタルガルト病、扁平部炎、慢性網膜剥離、過粘度症候群、トキソプラズマ症、外傷及びポストレーザー合併症を含む。他の疾患は、限定されないが、ルベオーシス（足関節の新血管形成）に関連する疾患及び、あらゆる形態の硝子体網膜症を含む、線維性血管もしくは線維組織の異常増殖によって引き起こされる疾患を含む。
【０００７】
血管新生が関与すると考えられている別の疾患は、関節リウマチである。関節の滑液の裏打ち（lining）の血管に血管新生が起こる。新たな血管網の形成に加えて、内皮細胞が、パンヌス成長と軟骨破壊を導く要因と反応性酸素種を放出する。血管新生に関与する要因は、関節リウマチの慢性的な炎症状態に積極的に寄与し、その維持を助長するかもしれない。
【０００８】
血管新生に関連する要因はまた、変形性関節炎においてもその役割を果たす。血管新生関連性の要因による軟骨細胞の活性化は、関節の破壊に寄与する。末期において、血管新生因子は、新たな骨の形成を促進するであろう。骨の破壊を阻止する治療的介入によって、その疾患の進行を止め、関節炎で苦しむ人を救済することができるであろう。
【０００９】
慢性の炎症もまた、病理的血管新生に関与するかもしれない。潰瘍性大腸炎やクローン病などの疾患状態は、新血管が炎症組織に内部成長することによる組織的変化を示す。南アフリカで見つかった細菌感染であるバルトネラ症は、血管内皮細胞の増殖を特徴とする、慢性段階を引き起こしうる。血管新生に関連する別の病理的役割がアテローム性動脈硬化症において見い出されている。血管内腔内に形成された斑が血管新生刺激性の活性を有することが明らかにされている。
【００１０】
小児の最も頻度の高い血管新生性の疾患の１つは、血管種である。たいていの場合、腫瘍は良性であり、治療的介入なしで退行する。より重篤な症例では、腫瘍は、大きな空洞性かつ浸潤性の形態に進行し、臨床的合併症を引き起こす。血管種の全身的な形態である、血管種症は死亡率が高い。治療耐性血管種は、現在使われている治療薬によって治療することが不可能である。
【００１１】
血管新生はまた、オスラー-ウェーバー-ランジュ症候群又は遺伝性出血性毛細血管拡張などの遺伝性疾患にみとめられる損傷にも関与している。これは、多数の小血管種、血管もしくはリンパ管の腫瘍を特徴とする遺伝性疾患である。血管種は、皮膚及び粘膜でみとめられ、しばしば、鼻出血（鼻血）もしくは消化管出血を伴い、ときに肺や肝臓の動静脈瘻を伴う。
【００１２】
血管新生は、固形腫瘍形成及び転移において著明である。血管新生因子は、横紋筋肉腫、網膜芽腫、ユーイング肉腫、神経芽細胞腫、骨肉腫などの複数の固形腫瘍と関連して見出されている。腫瘍は、血液が供給され、栄養を付与し、細胞の廃物を除去することがなければ大きくならない。血管新生が重要である腫瘍としては、固形腫瘍、ならびに聴覚神経腫、神経線維腫、トラコーマ及び化膿性肉芽腫などの良性腫瘍が含まれる。血管新生を予防することによって、これらの腫瘍及び、腫瘍の存在が動物にもたらす損傷の成長を止めることができるであろう。
【００１３】
血管新生は、通常、貧血、障害性血液凝固、及びリンパ節、肝臓及び脾臓の肥大を伴って起こる血管由来の腫瘍、例えば、白血病、白血球の抑制されない増殖が起こる骨髄の種々の急性もしくは慢性の腫瘍性疾患などと関連していることに留意すべきである。血管新生は、白血病様腫瘍を引き起こす骨髄の異常において役割を果たしていると考えられている。
【００１４】
血管新生は、腫瘍の転移の２つのステージにおいて重要である。血管新生性の刺激が重要である第１ステージは、腫瘍細胞が血流に入り、体内を循環することを可能とする腫瘍の血管新生におけるものである。腫瘍細胞が原発部位を去り、第２の転移部位に至った後、新たな腫瘍が成長し、拡大する前に血管新生が生じる必要がある。したがって、血管新生の予防又は制御によって、腫瘍の転移を予防することができ、また、腫瘍性成長を原発部位に封じ込めることが可能となるであろう。
【００１５】
腫瘍の維持及び転移における血管新生の役割に関する知識は、乳癌の予後の指標を導く。原発腫瘍で検出された新血管形成の量は、侵襲性の乳癌における最も強度の高い新血管形成の領域における微小血管密度を計数することによって決定された。高レベルの微小血管密度を見つけ出して腫瘍の再発と相関させた。治療的手段による血管新生の制御によって、腫瘍の再発を止めることができる。
【００１６】
血管新生はまた、生殖及び創傷治癒などの正常な生理学的プロセスにも関与する。血管新生は、排卵、卵胞破裂における、及び受精後の胞胚の卵子着床における重要なステップである。血管新生の予防は、無月経を誘導し、排卵をブロックし、又は、胞胚の着床を阻害し、それによって受胎を阻害することができるであろう。
【００１７】
創傷治癒においては、過度の修復又は線維増殖は、外科手術手順における好ましくない副作用であり、それは血管新生によって引き起こされ、悪化するかもしれない。癒着は、外科手術の頻度の高い合併症であり、それによって小腸の閉塞などの問題を引き起こす。
【００１８】
明らかに、多くの疾患状態の発達及び進行は、血管新生のプロセスを制御することによって制御することができる。それに関して、当該技術においては、血管新生を制御し得る材料及び治療を開発すべく多くの試みがなされてきた。しかしながら、インビトロで有望であると思われる多くの材料が、インビボで適用されたとき、比較的無効であることが証明されてきた。さらに、そのような種々の材料は不安定であったり、毒性を有していたり、又は、そうでなければ利用が困難であることがわかった。そのため、血管新生を信頼できる方法で制御することができる方法及び材料が必要である。
【００１９】
本発明は、ガレクチンが血管新生を調節するのに重要な役割を果たすことを認識している。本発明はさらに、ガレクチンと相互作用する化合物が、血管新生が役割を果たす疾患の状態を制御することができることを認識している。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００２０】
本明細書においては、生物において、血管新生を制御する方法が開示されている。該方法は、ガレクチンと結合した化合物の治療的有効量を該生物に投与するステップを含む。具体的な態様において、治療的に有効な化合物は、ラムノース残基によって分断された、実質的に脱メトキシ化されたポリガラクツロン酸を含む。別の例において、該化合物は、側鎖がぶら下がっているポリマー骨格を含み、該側鎖は、ガラクトース又はアラビノースユニットで終結している。具体的な例において、該化合物は、改変されたペクチンを含み、特に、改変されたペクチンは、ｐＨが改変されたペクチン、酵素的に改変されたペクチン、又は熱的に改変されたペクチンを含む。
【００２１】
該治療的に有効な化合物は、経口、経皮、局所投与又は注射による投与を行うことができる。
【００２２】
特別な態様において、本発明の治療的処置は、新血管形成に依存する疾患を指向している。本発明はまた、動物において血管新生を制御するための化合物を含む。これらの化合物は、ガレクチンの炭水化物結合部位に結合性を有する第１の機能部分と、蛋白質変性作用を有する第２の機能部分とを含む。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
本発明は、血管新生におけるガレクチンの役割を認識しており、好都合にガレクチンと相互作用し、血管新生依存性の疾患の発現を調節又は予防するであろう治療的材料を提供する。具体的に、本発明は、特定の炭水化物材料が、ガレクチンと結合するか、そうでなければ相互作用し、それによって、それらと細胞構造との相互作用を改変し、そしてそれによって血管新生を制御することを認識している。
【００２４】
ガレクチンは、植物及び動物細胞によって発現され、βガラクトシド糖に結合する蛋白質のファミリーを含む。これらの蛋白質は、細胞表面、細胞質内及び細胞外液中において見つけることができる。それらは、通常２９〜３４ｋｄの分子量を有し、それらは、βガラクトシド含有材料との親和性を有し、多くの生物学的プロセスにおいて重要な役割を果たすことが認められている。ガレクチン−１及びガレクチン−３は、種々の細胞構造と相互作用することがわかっているこのファミリーの特異的なメンバーであり、ガレクチン−３は、インビトロでの血管新生を促進することが証明されている。
【００２５】
ガレクチンは、インビトロでは、ガラクトース又はその他の単糖類と結合することが知られているが、それらの単糖類はインビボで血管新生を調節するのに治療的有効性はない。推測に拘束されることを望むわけではないが、本発明者らは、そのような比較的小さな糖分子は、ガレクチン蛋白質の他の部分をブロック、活性化、抑制すること、又はそうでなければ、相互作用することができないと、推定している。したがって、本発明の実施における好ましい材料は、通常、活性的なガレクチンが結合する糖の部位を含有する分子を含むが、それは単糖類よりもやや高い分子量を有する。そのような分子は、好ましくは、少なくとも３００ダルトンの最低分子量のを有することが好ましく、最も典型的には、３００〜２０００ダルトンの範囲の最低分子量を含む。特異的に好ましい材料のいくつかはさらに高い分子量範囲を有している。
【００２６】
好ましいクラスの治療的材料は、ガラクトース又はアラビノースなどの１以上の糖類がぶら下がっているオリゴマー又はポリマー種を含む。オリゴマー又はポリマー骨格は、合成されたものでも天然のものでもよい。この種の材料は、米国特許第6,423,314号に開示されている。その開示を引用によって本明細書中に援用する。そのような材料は、３００〜５００００ダルトンの範囲の分子量を有することが好ましいであろう。高分子量炭水化物の分子量測定には、いくつかの固有の不確定性があること、そして測定された分子量は、幾分分子量の測定方法によって左右されることを認識しておく必要がある。本明細書で示されている分子量は、粘度測定に基づいており、そのような技法は当該技術において公知である。
【００２７】
この大別クラスに属する材料の１つの群は、それにぶら下がるラムノース残基を有する、実質的に脱メトキシ化されたポリガラクツロン酸を含む。この種の材料において、骨格からぶら下がる末端ガラクトース又はアラビノースユニットはガレクチン蛋白質に結合すると考えられる。残りの大部分の分子は、免疫系反応を調節する際に化合物の活性を促進する。上記したように、本発明者らは、推測に拘束されることを望むわけではないが、この残りの大部分の分子は、ガレクチン蛋白質の残りの部分と相互作用するか、及び/又はその糖部分との結合を持続させるものであると考えている。この一般的なタイプの材料は、下記式Ｉ〜Ｖによって表される。本発明の原理の範囲内で、この一般的な化合物のさらに他の変形例も調製し利用できることを理解すべきである。
【００２８】
【化１】
2005521644.tif 000002
【００２９】
ペクチンは、それにぶら下がる無数の枝分かれ側鎖を持つポリガラクツロン骨格からなる高度に枝分かれした構造を有する複合体炭水化物である。枝分かれは、「平滑（smooth）」及び「毛様(hairy)」として特徴付けられる領域を形成する。ペクチンは、種々の化学的、酵素的もしくは物理的処理によって改変し、分子を、より直線化された、ラムノース残基の側鎖がぶら下がっている実質的に脱メトキシ化されたポリガラクツロン骨格を持つ、より小さな部分に分解することができる。この材料は、当該技術において改変されたペクチンとして知られており、癌に対する治療効果が確立されている。その開示を本明細書において引用として援用している米国特許第5,895,784号は、改変されたペクチン材料、それらの調製方法、及び種々の癌の治療における、その材料の使用を記載している。上記特許第’784号に記載の材料は、ｐＨベースの改変処置によって調製されており、そこで、ペクチンは溶液化され、一連のプログラムされたｐＨの変化にさらされる。その結果分子の分割が生じ、治療的に有効な改変ペクチンが産出される。上記特許第’784号に記載の材料は、シトラスペクチンで調製されることが最も好ましいが、改変ペクチンは、リンゴなどの他のソースから得られたペクチン開始材料で調製されてもよい。また、改変プロセスは、ペクチンの酵素的処理、又は、加熱などによる物理的処理によっても達成することができる。改変ペクチン及びそれらを調製するため技法は、米国特許第5,834,442号及び米国特許出願08/024,487に開示されている。その開示を本明細書に引用として援用する。この種の改変ペクチンは、一般的に１〜５０キロダルトンの範囲の分子量を有しており、そのような材料の好ましい群は、約１〜１５キロダルトンの平均分子量を有する。１つの具体的な群の材料は、約１０キロダルトンの分子量を有する。そのような材料の別の好ましい群は、１５〜６０ｋｄの分子量を有する。これらの材料の特定の群は、約２０〜４０キロダルトンの範囲の分子量を有し、ある特定の材料は約２５ｋｄの分子量を有する。
【００３０】
従来技術において開示されているように、そのような改変されたペクチン材料は、種々の癌に対する治療効果を有している。これらの材料は、ガレクチン−１及びガレクチン−３などのガレクチンと相互作用する。それに関しては、血管新生が要因となる疾患や状態を制御する効果も有している。本発明において、血管新生は、ガレクチンと相互作用する改変されたペクチン材料及び他の材料を用いて制御又は調節することができる。これらの材料は、経口、又は、静脈内注射によって、又は罹患組織に直接的に注射することによって、例えば、関節炎の関節に直接注射することによって投与することができる。いくつかの例において、該材料は、点眼薬、点鼻スプレー、軟膏などの剤型で局所投与してもよい。また、経皮送達システム、吸入といった他の技法を用いてもよい。
【００３１】
前述の記載は、改変されたペクチンに基づく治療材料を主に指向しているものであるが、本発明はそれに限定されるものでないことは理解されるであろう。本発明の一般的な原理において、ガレクチンと相互作用する及びブロックする、広範なクラスの化合物のあらゆるメンバーを用いて、免疫調節疾患を治療することができる。好ましい態様において、これらの材料は炭水化物材料を含む。そのような材料は、毒性が低く、ガレクチンとの強い相互作用性を示すからである。改変されたペクチン材料は、ある特に好ましいグループの炭水化物材料を含む。同様に、ポリガラクツロン酸材料のような合成及びその半合成類似物も同様に用いることができる。
【００３２】
本発明のさらに別のクラスの材料は、典型的に炭水化物であり、そしてガレクチンに結合することができるとともに、蛋白質の活性に対して不活性であるか、又はそうでなければ蛋白質の活性を調節する第２の部分に結合した第１の部分を有する分子を含む。この第２の部分は、炭水化物である必要はなく、ガレクチン蛋白質の活性部分を含む蛋白質のセグメントと架橋又はそうでなければ、それを変性させる材料又は、ガレクチンと相互作用する他の蛋白質の活性部分を含む。そのような材料は、イオウ又は他のカルコゲン元素のような活性種を単独、もしくはそれらとチオール、スルフヒドリルなどとの組み合わせで含む。その他の活性種としては、シアノ基、チオシアネート、アルキル化剤、アルデヒドなどがある。
【００３３】
上記化合物は、薬学的に許容される製剤として、当該技術の当業者に公知の方法で提供され得る。これらの製剤は、標準的な経路で投与することができる。一般的には、該化合物は、局所、経皮、経口、直腸又は非経口（例えば、静脈内、皮下もしくは筋肉内）経路で投与することができる。さらに、その組み合わせを用いて、組成物を該化合物の徐放を可能とする生物分解性ポリマーに組み込み、該ポリマーを薬物送達が望まれる場所、例えば、腫瘍の部位に近接して移植することができる。生物分解性ポリマー及びそれらの使用については、例えば、Bremら、J. Neurosurg. 74:441-446 (1991)に詳細に記載されている。
【００３４】
化合物の用量は、治療すべき状態、使用される化合物及び、患者の体重や状態などのその他の臨床的要因、ならびに該化合物の投与経路に依存する。本発明は、ヒトでの使用及び獣医学の使用の双方に適用されることが理解されるであろう。ヒトへの経口投与においては、約０．１〜４５０ｍｇ/ｋｇ/日、好ましくは約０．５〜５０ｍｇ/ｋｇ/日、最も好ましくは、約１〜２０ｍｇ/ｋｇ/日の用量で通常十分である。
【００３５】
製剤は、経口、直腸、眼（硝子体内もしくは眼房内（intracameral）投与を含む）、鼻、局所（頬側及び舌下投与を含む）、膣又は非経口（皮下、筋肉内、静脈内、皮内、気管内及び硬膜外投与を含む）投与に好適なものを含む。製剤は、単位用量剤型で好都合に存在することもでき、また、通常の製剤技法で調製することができる。そのような技法は、活性成分及び薬学的担体もしくは添加剤と結合させる工程を含む。通常、製剤は、均一かつ密接に、活性成分を液体担体もしくは細かく分割された固体担体もしくはその双方と結合させて、必要であれば、その後、製品の形状にすることによって調製される。
【００３６】
経口投与に好適な本発明の製剤は、それぞれが所定量の活性成分を含有する、例えば、カプセル、カシェ剤もしくは錠剤などの離散したユニットとして、粉末もしくは顆粒として、水溶性の液体もしくは非水溶性の液体中の溶液もしくは懸濁液として、又は水中油液体エマルジョンもしくは油中水エマルジョンとして、及びボーラスとしてなどで提供することができる。
【００３７】
錠剤は、任意に１以上の副成分を用いて、圧縮又は成形によって作製してもよい。圧縮によって成る錠剤は、好適な機械で、粉末もしくは顆粒のような自由に流れる形状であり、任意に結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、防腐剤、表面活性剤又は分散剤などと混合した活性成分を圧縮することによって調製することができる。成形によって成る錠剤は、不活性の液体希釈剤で湿潤させた粉末状の化合物の混合物を好適な機械で成形することによって作製することができる。錠剤は、任意にコーティングを施したり、また切れ込みを入れて、そこに含まれる活性成分を徐放させることや、放出がコントロールされるよう調剤することもできる。
【００３８】
経口投与に好適な本発明の化合物の液体剤型には、風味付け基剤、通常は、スクロース、アカシア、トラガカント中に該成分を含むロゼンジ、ゼラチン及びグリセリンなどの不活性基剤又はスクロース及びアカシアに不活性成分を含んだ香錠、ならびに好適な液体担体中に投与される成分を含むマウスウォッシュが含まれる。
【００３９】
皮膚に投与される好適な局所投与の剤型としては、投与すべき活性成分を薬学的に許容される担体中に含んだ、軟膏、クリーム、ゲル剤及びペースト剤がある。好ましい局所送達システムは、投与されるべき成分を含有する経皮パッチである。
【００４０】
直腸投与用の剤型としては、例えば、ココアバター又はサリチル酸を含む坐剤として存在することができる。
【００４１】
担体が固体である経鼻投与の好適な製剤としては、粒径が、例えば、２０〜５００ミクロンの範囲の、吸入剤が投与される方法で投与される粗粉末を含む。すなわち、鼻の近くに置いた粉末の容器から、鼻経路を通って急速吸引によって投与される。担体が液体である、例えば、鼻スプレーもしくは点鼻薬としての投与するための好適な製剤としては、活性成分の水溶性もしくは油性溶液が含まれる。
【００４２】
膣内投与に好適な製剤としては、当該技術において適切であることが既知の担体を、活性成分に加えて含有した、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル剤、ペースト剤、フォーム又はスプレーの剤型がある。
【００４３】
非経口投与に好適な製剤は、抗酸化剤、緩衝剤、静菌薬、及び調剤を目的のレシピエントの血液と等張にする溶質を含んでもよい水溶性及び非水溶性の無菌の注射可能な溶液；ならびに懸濁剤及び硬化剤を含む水溶性及び非水溶性の無菌の懸濁液を含む。該製剤は、単位用量もしくはマルチ用量容器内、例えば、密閉アンプル及びバイアル内に存在するようにしてもよく、また、使用直前に無菌液体担体に溶かして再構成することができるような注射用の液体担体を添加すればよいだけの、フリーズドライ（凍結乾燥した）状態で保存することもできる。必要に応じて処方される注射用溶液及び懸濁液を、上で既に述べた無菌の粉末、顆粒及び錠剤から調製することもできる。
【００４４】
好ましい単位用量製剤は、上記したように、投与すべき成分の、一日用量もしくは単位、一日サブ用量、又はその適切な一部を含有するものである。
【００４５】
特に上記に示した成分に加えて、本発明の製剤は、問題となる製剤の種類に関する技術において一般的な他の材料を含むことができる。例えば経口投与に好適なものでは香料を含むことができる。
【００４６】
本発明において治療することができる、角膜の新血管形成と関連する疾患としては、限定されないが、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、角膜の移植片に対する拒絶反応、新生血管の緑内障及び水晶体後線維増殖症、流行性乾性角結膜炎、ビタミンＡ欠乏症、コンタクトレンズの長時間装用、アトピー性角膜炎、上位辺縁系角膜炎、乾燥翼状片角膜炎（pterygium keratitis sicca）、シェーグレン症候群、酒さ性ざ瘡、フリクテン症（phylectenulosis）、梅毒、マイコバクテリア感染、脂肪変性、化学的熱傷、細菌性潰瘍、真菌性潰瘍、単純ヘルペス感染、帯状疱疹感染、原虫感染、カポジ肉腫、モーレン潰瘍、テリエン周辺角膜変性症、辺縁表皮剥離、外傷、関節リウマチ、全身性狼瘡、多発性動脈炎、ウェジナーサルコイド症、強膜炎、スティーブンス・ジョンソン症候群、類天疱瘡、放射状角膜切開、及び角膜移植片拒絶反応を含む。
【００４７】
本発明によって治療することができる網膜／繊毛膜様新生血管化に関連する疾患は、限定されないが、糖尿病性網膜症、黄斑変性症、鎌状赤血球貧血、サルコイド、梅毒、弾力線維性仮黄色腫、ページェット病、静脈閉塞症、動脈閉塞症、頚動脈閉塞症、慢性ブドウ膜炎/硝子体炎（vitritis）、マイコバクテリア感染, ライム病, 全身性エリテマトーデス, 未熟児網膜症、イールズ病、ベーチェット病、網膜炎又は脈絡膜炎を引き起こす感染症、推定眼ヒストプラスマ症、ベスト病、近視、眼陥凹、シュタルガルト病、扁平部炎、慢性網膜剥離、過粘度症候群、トキソプラズマ症、外傷及びポストレーザー合併症を含む。他の疾患は、限定されないが、ルベオーシス（足関節の新血管形成）に関連する疾患、及び糖尿病に関連するかどうかにかかわらず、あらゆる形態の増殖性硝子体網膜症を含む、線維性血管もしくは線維組織の異常増殖によって引き起こされる疾患を含む。
【００４８】
慢性の炎症は、本発明の組成物及び方法によって治療することができる。慢性の炎症の症状を伴う疾患としては、クローン病や潰瘍性大腸炎のような炎症性腸疾患、乾癬、サルコイドーシス及び関節リウマチがある。血管新生は、これらの慢性の炎症性疾患に共通する重要な要素である。慢性の炎症は、毛細管出芽の連続的な形成に依存し、炎症性の細胞の流入を維持する。炎症性の細胞の流入及び存在は、肉芽腫を発症させ、それによって慢性の炎症状態を維持する。本発明の組成物と方法による血管新生の阻害は、肉芽腫の形成を阻止し、疾患を和らげる。
【００４９】
本発明の組成物及び方法は、クローン病や潰瘍性大腸炎のような炎症性腸疾患に罹患した患者を治療するために使用することができる。クローン病も潰瘍性大腸炎も、消化管の様々な部位における慢性の炎症及び血管新生を特徴とする。クローン病は、円筒状の炎症性細胞によって囲まれた新たな毛細管の出芽を含む、消化管全体における慢性の肉芽腫炎症を特徴とする。本発明の組成物及び方法によって血管新生を阻害することによって、出芽の形成を阻止し、肉芽腫の形成を阻害する。
【００５０】
クローン病は、回腸の遠位端及び結腸が好発部位であるが、口腔から肛門までの消化管のあらゆるところ及び辺縁部でも発症し得る、慢性の経壁の炎症性の疾患として発症する。クローン病患者には、通常腹痛を伴う慢性の下痢、発熱、食欲不振、体重減少及び腹部膨隆がみられる。潰瘍性大腸炎もまた、結腸粘膜において発症する慢性の、非特異的な炎症性及び潰瘍性の疾患であり、血便の存在を特徴とする。
【００５１】
炎症性の腸疾患はまた、皮膚病変のような腸管外の症状をも示す。そのような病変は、炎症及び血管新生を特徴とし、消化管以外の多くの部位において発症し得る。本発明の組成物及び方法はまた、血管新生を阻害し、それによって炎症細胞の流入及び病変形成を減少させることによって、これらの病変を治療することができる。
【００５２】
サルコイドーシスは、多システム肉芽腫障害として特徴付けられる、別の慢性の炎症性疾患である。この疾患の肉芽腫は、体中のいたるところに形成される。したがって、症状は、肉芽腫の部位及びこの疾患が活性的であるかどうかに依存する。肉芽腫は、炎症性細胞の一定の供給をする、血管新生性の毛細管出芽によって創生される。
【００５３】
本発明の組成物及び方法はまた、乾癬に関連する慢性の炎症性の状態を治療することもできる。乾癬、すなわち、皮膚の疾患は、別の慢性の、再発性の疾患であり、それは、様々な大きさの丘疹やプラークを特徴とする。特徴的病変を維持するのに必要な新たな血管新生を阻害することによって、症状を緩和させることができる。
【００５４】
本発明の組成物及び方法によって治療することができる別の疾患は、関節リウマチである。関節リウマチは、周縁部関節の非特異的な炎症を特徴とする慢性の炎症性疾患である。関節の滑液の裏打ち（lining）の血管に血管新生が起こると考えられている。新たな血管網の形成に加えて、内皮細胞が、パンヌス成長と軟骨破壊を導く要因と反応性酸素種を放出する。血管新生に関与する要因は、関節リウマチの慢性的な炎症状態に積極的に寄与し、その維持を助長するかもしれない。本発明によって治療することが可能な別の疾患は、血管種、オスラー-ウェーバー-ランジュ症候群又は出血性毛細血管拡張のような遺伝性疾患、固形又は血管由来の腫瘍及び後天性免疫不全症候群にみとめられる損傷にも関与している。
【００５５】
本発明の原理を一連の実験において説明し、血管新生のプロセスを阻害する際の治療的炭水化物材料の効果を評価する。
【００５６】
化学走性は、血管新生の統合的な部分であり、この一連の実験は、血管の阻害に関する、本発明の改変されたペクチン材料の効果を証明するものである。一連の実験の第１の部分において、化学走性誘引材料血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）のヒト臍静脈内皮細胞(ＨＵＶＥＣ)に及ぼす効果を定量化した。トランスウェルプレート内で実験を行い、その調製において、ＨＵＶＥＣ細胞を約８０％までコンフルエントに成長させた。該細胞を基剤媒体中に懸濁させ、トランスウェルプレートの、フィブロネクチンコート膜インサート上に、５００００細胞／インサートで入れた。ＶＥＧＦの濃度を変化させて、トランスウェルプレートの底面部に追加した。そしてプレートを３７℃で４時間、５％CO2雰囲気でインキュベートした。インキュベーション後、膜を固定し、染色した。動かない細胞を機械的剥離によって除去し、膜上を動く細胞数を数えた。この第１の実験からのデータを図１（表１）に示す。示されているとおり、ＶＥＧＦは、化学走性物質であり、それは、血管新生にとって重要な細胞の移動を誘導するものである。第１の一連の実験に基づいて、１０〜３０ｎｇ／ｍｌの濃度のＶＥＧＦは、強い化学走性をもたらした。三回実験を行った。実験からのデータを下記の表１に示す。
【００５７】
【表１】
2005521644.tif 000003
【００５８】
実験の第２の部分において、化学走性を調節する際、本発明の治療的炭水化物材料の効果、したがって、血管新生を評価した。該材料には、ＧＣＳ-１００（登録商標）としてGlycoGenesys, Inc. of Boston Massachusettsから入手可能な改変されたペクチンが含まれていた。この一連の実験において、ＨＵＶＥＣ細胞を、ＶＥＧＦを有するトランスウェルプレート中でインキュベートした。上記の条件下で、治療材料の濃度を変化させた。ＶＥＧＦの濃度は、３０ｎｇ／ｍｌとした。１つの実験群においては、細胞を、ＶＥＧＦを用いて、炭水化物材料の不存在下でインキュベートした。これを陽性コントロールとした。別の実験群においては、細胞を成長培地で、ＶＥＧＦもしくは治療的炭水化物材料を用いずに、インキュベートした。これを陰性コントロールとした。残りの実験においては、濃度を０．００１％〜０．１％の範囲のＧＣＳ−１００を採用した。この一連の実験から得られたデータを下の表２に示す。
【００５９】
【表２】
2005521644.tif 000004
【００６０】
示されているように、ＧＣＳ-１００材料は、細胞の移動を強く阻害し、その阻害は濃度依存的である。この一連の実験によって確立されているように、ＧＣＳ-１００材料は、血管新生プロセスの強力な阻害剤であり、それゆえに血管新生が要因となる疾患の治療において利用されるであろう。ＧＣＳ-１００材料は、ＨＵＶＥＣ細胞のような細胞の表面にみとめられるガレクチンに結合することが知られている。したがって、その他のガレクチンに結合する、このような炭水化物材料も、細胞の移動及び血管新生を阻害に関する類似の効果を示すことが期待されるであろう。
【００６１】
これまで述べたのは、本発明の特定の態様及び特徴である。本明細書に示されている教示に鑑み、当該技術の当業者は、血管新生及び疾患状態を制御するために用いられる他の材料を容易に調製し、選択することができるであろう。既述した図面、開示、実施例及び明細書は、本発明を限定するものではなく、その原理を説明するものである。下記の請求の範囲は、全ての等価物を含み、本発明の範囲を定義するものである。
【国際調査報告】
2005521644.tif 000005