(57)【要約】本発明は、生理活性成分、特別にはタンパク質、を含む天然の有機材料の脱水方法であって、活性成分の本来の構造を変化させずに、抗菌剤及び好ましくはイオン化可能な塩の存在下、変性がおこる温度以下で上記材料の水分含量が１５％未満に減少するまで微粒子の形態の該材料を乾燥する、上記方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
生理活性成分を含む天然の有機材料の脱水方法であって、以下のステップ：
該材料を抗菌剤及びイオン化塩と併合するステップ；
得られた微粒子形態の混合物を、変性が起こるよりも低い温度において、実質的な微生物又は病原菌の活動が起こる水分含量よりも少なくなるまで加熱するステップ；及び
生成物を、その本来の自然の構造において回収するステップ
を含む、前記方法。
【請求項２】
上記イオン化塩が固体の形態で使用される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
天然の消費可能な材料の脱水方法であって、以下のステップ：
該材料をイオン化塩及び抗菌剤と併合するステップ；及び
得られた微粒子形態の混合物を、水分含量が１５％未満に減少するまで、約１１０0F未満の温度で加熱するステップ
を含む、前記方法。
【請求項４】
請求項１に記載の方法であって、酸素を含有する抗菌剤及びイオン化可能で消費可能な塩の存在下で実施される、前記方法。
【請求項５】
上記抗菌剤が塩素を含有する化合物である、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
上記材料がタンパク質である、請求項３に記載の方法。
【請求項７】
上記タンパク質がタイプIIコラーゲンを含有するタンパク質である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
上記塩が塩化ナトリウム又は塩化カリウムである、請求項２に記載の方法。
【請求項９】
上記脱水が１００〜１１０0Fの温度において行われる、請求項４に記載の方法。
【請求項１０】
上記天然の材料が植物種である、請求項４に記載の方法。
【請求項１１】
上記天然の材料がアロエ又はキツネノテブクロである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
上記天然の材料が動物に由来する、請求項４に記載の方法。
【請求項１３】
上記天然の材料が骨の軟骨である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
上記骨の軟骨がタイプIIコラーゲンを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
ニワトリ軟骨の脱水方法であって、以下のステップ：
上記軟骨を粉砕するステップ；
得られた生成物を抗菌剤の水溶液に浸漬するステップ；
上記浸漬された生成物を塩化カリウム又は塩化ナトリウムと混合するステップ；及び
上記得られた微粒子の形態の混合物を、水分含量が１０％未満に減少するまで１１０0F未満の温度で脱水するステップ
を含む、前記方法。
【請求項１６】
上記抗菌剤が次亜塩素酸である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
上記脱水がヒドロキシプロピルメチルセルロース又はレシチンの存在下で行われる、請求項１５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、他の生物形態による消費並びにヒトによる消費に関して安全な、生理活性を有する生成物の製造方法に関する。より特別には、本発明は天然の材料の有効性を破壊しない脱水を通じて、そのような天然の材料を安定化する方法に関する。加工は、上記材料を保護する一方、微生物に原形質分離を起こす、高浸透圧性の条件を用いて行われる。最終産物における減少した水分活性は、健康によい生成物を保護する。
【０００２】
本出願は、部分的に２０００年９月２９日に出願された出願番号第60/237,005号の継続出願である。
【背景技術】
【０００３】
多様な分野における適用が見出された多くの天然の材料は、商業的な製品として好適であるように加工されなくてはならない。潜在的に有用なある物質を、予期される受容者に安全な方法で、特別には病原菌に対する安全性及び有毒酵素の活性の制御に関して安全な方法で提供しつつ、上記材料の生理活性を維持することは、歴史的には、費用がかかり且つ生理活性物質の変性の結果としてしばしばその有効性を減少させる。医薬品及び栄養補助食品の分野、食品分野、医療分野、大衆薬の分野並びに化粧品の分野のように、天然の生理活性を有する生成物に基づく製品を市場で売買する、いくつかの商業的分野がある。本発明の方法は、これらの分野すべてに適応させられることができる。
【０００４】
本発明の方法の適用の１の例は、関節炎患者のためのタイプIIコラーゲンの調製にある。この化合物は、効果的な方法で関節炎患者の免疫システムに働きかけることが報告されている。Eugene Moore博士の特許（米国特許第5,570,144号、同第5,529,786号、同第5,637,321号及び同第5,645,851号）に開示されたように、タイプIIコラーゲンが効果的であるためにはその自然の状態に最も近い方法で調製されなくてはならないことは明らかである。しかしながら、Mooreが示唆したこの物質の消費者へのデリバリーは、かなりの量の水の保持を含み、したがって製品を病原菌と相互汚染し易くする。
【０００５】
大衆薬の分野においては、ヒポクラテスにより示唆されたとおり、紀元前４００年という早期に熱を下げるためには、まず柳の樹皮が噛まれ、痛みを減らした。製品の貯蔵、取り扱い、そして配給をも含む、製品を広く入手可能なものとすることにおける多くの問題のために、１８９８年にドイツで働いていた化学者、Felix Hoffmanは、今日アスピリンとして知られている柳の樹皮中の活性成分、アセチルサリチル酸を合成、安定化した。柳の樹皮の脱水に適用される場合、本発明は合成アスピリンよりも効果的であることのできる安定な物質を生成する。
【０００６】
食品の分野において、マーガリン様のスプレッドは今やスーパーマーケットの乳製品ケースで入手でき、植物スタノールエステルを含む。脂肪種子の生産に由来するこれらのエステルはコレステロールを低下させることが示された。本発明の方法は、安全、有効且つより消費が容易な方法で脂肪種子を安定化するために使用されることができる。酵素的分解を減少させるための確立された方法で処理された場合、脂肪種子は有効性が減少することがあり得る。
【０００７】
医薬品の分野では、ジギタリスは、より有効な心拍を生み出すために使用される薬品であり、ジギタリス・プルプレア（Digitalis purpurea）として分類される、普通のキツネノテブクロの葉から得られるグリコシドである。本方法は消費者にとってより安全、より有効且つより好都合な方法でキツネノテブクロの葉を安定化するために使用されることができる。
【０００８】
医療の分野では、タイプ１、３及び５のコラーゲンが皮膚の健康に有益であることが知られ、傷の治療を助けるために使用される。本方法は、製品を消費者にとってより好都合にする一方、これらのコラーゲンを、生理活性を有し且つ傷の治療における使用に安全な形態で安定化するために使用されることができる。
【０００９】
化粧品の分野では、多くの顔用スキンクリームがコラーゲンを含む。本方法は、これらのコラーゲンをさらなる生理活性を有するより安全な形態で安定化するために使用されることができる。
【００１０】
したがって、照射法、熱処理、保存剤の使用、フリーズドライ及び他の知られた滅菌方法は、天然の材料の本来の生物学的構造を保持する、ヒトによる消費のための製品を安定化するために使用するには有効でないか、又は困難である。したがって、ヒトによる消費及び他の生物形態による使用のために安全かつ対費用効果の高い方法でデリバリーされることのできる、自然の材料中の生理活性成分を本来の形態で保持するための新規な方法に対する緊急の必要性がある。
【発明の開示】
【００１１】
発明の一般的な説明
本発明の方法は、既知の有益な効果を有する天然の材料の質及び有効性に影響する微生物因子を除去する一方、そのような材料本来の自然の構造を保持する、そのような材料の改良された効用に関する。この処理は、脱水を含み、したがって、病原菌の負荷を減少させる抗菌成分の存在下で従来の処理温度よりも低い温度で天然の材料を安定化することを含む。脱水は、好ましくは採用された濃度においては消費者に有害でない、イオン化可能な塩の存在下においても実施される。ある適用においては、糖又はアルコールのような他の高浸透圧性の作用物質も単独又は塩と併用で使用されることができる。加工の間及び後において、該塩は、問題の生物のインキュベーション温度にしばしば設定される上記過程中における、病原菌及び腐敗生物の成長及び潜在的な相互汚染に対するさらなる抗菌安定化剤としても作用する。
【００１２】
本発明の主要な特徴の一つは、本発明が有毒な微生物因子そして特に病原菌を除去するための熱処理において従来の高温よりも顕著に低い温度の使用を可能とし、及びしたがって本来の生成物の生物学的状態を維持する方法を提供することである。
【００１３】
本発明の他の主要な特徴は、得られる生成物が室温における貯蔵条件下で３年よりも長く、その微生物に対する安全性を保持することである。さらに、いかなる有毒酵素活性も制御され、結果としてより望ましい商業的に魅力的な製品が生じる。それはなぜなら、酵素活性が悪臭のような負の感覚受容性の性質を生じ得るからである。さらに、酵素活性は天然の産物の有効性に負の影響を及ぼすことができる。
【００１４】
本発明の方法は、これまで化学保存剤、熱処理、照射法、不活性大気、フリーズドライ、及び他の抗菌安定化法のようなもので処理されてきた天然の材料を、他の製品とともに使用されることもできる、安定で消費可能な製品に変える、改良された経済的な方法を提供する。
【００１５】
以前は、消費可能な製品は本発明において使用される温度で加工されることは無かった。なぜなら、得られる生成物が感覚受容的に許容できないものであったからである。少量の材料が消費される、最近の栄養補助食品ビジネスの導入は、本発明に意味を与える。本発明の方法により得られる生成物は安定で長期間消費可能であるのみならず、加えて、天然の材料がその自然の本来の構造を保持し、したがって、そのような材料に含まれる完全な有効性を保持する。結果として、栄養補助食品として、医薬品として、大衆薬として、生理活性を有する絆創膏のような医療用品の中の（生物学的に活性のあるクリームのような）クリーム又はローション中の局所用製品として及び機能性食品中の特別な成分として有用な、改良された生成物が得られる。
【００１６】
本発明の方法は好ましくは、タンパク質の本来の構造を変性させずに、自然のタンパク質中に見出される多様なタンパク種の相互作用から得られる望ましい相乗作用を保護する、栄養補助食品又は医薬品としての将来性及び有用性を示すタンパク質とともに使用される。
【００１７】
発明の詳細な説明
本発明の方法は、有機材料の一体性及び構造を保持するが、存在する病原菌の大半を除去し、所望により、実質的に上記材料の本来の構造に影響を及ぼすことなく、腐敗を起こす他の微生物を除去する条件下で有機材料を脱水することを含む。より特別には、本発明の方法は、変性が起こるよりも低い温度で自然の有機材料を加熱し、所望により、減圧下で、イオン化可能な塩であることのできる抗菌剤、しかし望ましくはより有効な抗菌剤及びイオン化可能で消費可能な塩との併用、の存在下で加熱することを含む。上記塩は、加工温度の間、上記材料を病原菌及び腐敗性生物の成長から保護し（原形質分離条件）、乾燥生成物の変質を防止するために、加工の間及び後に安定化剤として働く。
【００１８】
本方法において使用される材料は、光、酵素及び病原菌並びに腐敗性生物の作用の結果として、該材料を変質させるのに充分な水を含む、いかなる有機物質であることもできる。本方法において使用される材料は、有害な影響が起きないように、加工、貯蔵、取り扱い、及び配給並びに消費及び／又は使用の間に安定化を必要とする。上記材料は、一般的に室温で貯蔵されることを意図されるが、普通は冷蔵、及び／又は一般的には必要でないが凍結されることもできる。
【００１９】
本発明の方法によって脱水される自然の材料は、病原菌又は他の微生物の存在及び成長を可能とするのに充分な水又は適切な条件を含むいずれかの有機物質であることができ、及び有害酵素による攻撃を受ける材料であることもできる。したがって、水を含む生理活性を有する他のいずれかの材料と同様に、タンパク質、脂質、例えば脂肪、及び炭水化物が含まれる。採用される有機物質を精製する必要はない。なぜなら、上記方法は有機物質の混合物とともに採用されることができるからである。着色剤、潤滑剤及び抗酸化剤のような天然又は合成の他の添加剤の添加は、生成物を本発明の範囲外へ導くものではない。
【００２０】
しかしながら、本発明の方法は、タンパク質本来の未変性の構造を保持することが望ましい場合のタンパク質の脱水、及び消費された時に相乗効果を有するタンパク質の組み合わせを含む食品の脱水と組み合わせることにより、特別な効用を見出す。例えば、ニワトリ軟骨はタイプIIコラーゲンのみならず、加えてグルコサミン及びコンドロイチンのようなタンパク質を含む。Eugene Mooreの特許、米国特許第5,645,581号、同第5,637,321号、同第,529,786号、同第5,750,144号中に開示されたように、未変性のタイプIIコラーゲンの使用は、未変性のタイプIIコラーゲン又はそれとトリ軟骨中に存在する他のタンパク質との組み合わせの性質に部分的に依存するかも知れない関節リューマチの症状を軽減させる。対照的に、変性された精製タイプIIコラーゲンは、未変性タイプIIコラーゲンに比べて同じタイプの軽減又は利益を提供するものではない。
【００２１】
安定化のための塩は、消費に安全なイオン化可能な塩であり、特別には塩化ナトリウム又は塩化カリウムのいずれかである。塩濃度は、含まれる食品の性質及び所望の安定化の程度によって大きく変動する。したがって、腐敗を起こす微生物とは異なる病原菌の除去を意図する場合には、一般的に、より低濃度の塩を使用することが可能である。食品を古くさせ、病原菌である好ましくない微生物の負荷の生じることを観察することによって、最適の又は望ましい濃度が実験的に確立されることができる。過剰量の塩は脱水を妨害しないが、脱水された材料の有効性に影響することができる。タンパク質の脱水とともに、出発材料の重量に基づいて約１５％の濃度、これは脱水された生成物中では約４５％の濃度となる、を採用することが一般的には望ましい。
【００２２】
塩の効果は、塩酸又は酢酸のような酸の添加によって亢進されることができる。
【００２３】
一般的に、出発材料の水分含量が重量で１５％未満、好ましくは１〜８％の範囲、に減少するまで上記方法が実施される。水分濃度がさらに減少してもさらなる利益は得られない。１５％より高い濃度においては、安定化並びに病原菌及び他の微生物の除去は部分的でしかなく、上記材料を安定化するのには適当でない。
【００２４】
溶液中の次亜塩素酸ナトリウムのような塩素を含有する抗菌剤単独又はこれと塩酸のような好適な酸との組み合わせが、最初の微生物負荷を減少させることをさらに助けるために出発材料に添加される。これは特別には、腐敗を起こすことのできるような微生物に対しても上記材料が安定化される場合である。塩素剤の有用な濃度範囲は、１ppm〜10,000ppmである。酸の使用ｐH範囲は、ｐH１〜ｐH１０である。塩素剤を使用する場合、材料を乾燥過程に供する前に、まず塩素剤中に浸漬することが望ましいかも知れない。
【００２５】
一般的に、脱水される材料は、均一の水分除去を可能とし粒子内部の湿った点のないように粉砕される。粒子サイズが小さくなると、脱水性能が一様に増加する。しかしながら、粒子は、脱水される材料の構造に影響を及ぼすか又は過剰のアグロメレーションを起こすようなサイズまで小さくなるべきではない。好ましくは、粒子は１〜１０００メッシュサイズの範囲である。
【００２６】
広く多様な商業的に入手可能な乾燥装置が本発明の方法中で採用されることができる。好ましいのは、物理的に粒子を摩損させることなく均一に材料を乾燥できるような装置である。温度及び湿度を連続的にモニターする、流動層乾燥機又は回転式ドラム乾燥機は特別に好ましい。自然の材料の乾燥を助ける、剥離剤及び他の物質が乾燥ステップに加えられることができる。アグロメレーション及び乾燥機の壁のコーティングを減少させることを助ける、レシチン及びヒドロキシプロピルメチルセルロースのような補助は、本発明の方法において有用である。
【００２７】
本発明は、その本来の構造を保持し、それによってその本来の治療的価値を保持する安定な形態でタンパク質材料を調製するのに特別に有用である。ニワトリ軟骨に由来するタイプIIコラーゲンは、好適な方法で加工された場合、生理活性のあるタンパク質分子である。安定化し安全にする加工が行われる場合、従来の熱処理のような多くの伝統的な安定化技術によって、この成分の力価が容易に失われることから、この成分の力価を保持することは重要である。熱処理された場合、この成分が失活することはよく知られている。照射法及びフリーズドライ加工のような技術プロセスは最初はこの成分の活性を保持することができるが、プロセス後の生物学的安定性及び安全性に関しては、既存のプロセスはこの新しい方法に比べてかなり劣っており、この新しい方法は経済的に顕著に好ましい。重要な問題は、生成物を取り扱い、消費することのできる個人の行動による、加工後の相互汚染である。この新しい方法は、これに関するほどほどに不適当な行動が安全でない生成物をもたらさないということを保証する。所望の材料もまた、それがその自然の環境において機能したのとほぼ同じ温度で加工され、その本来の機能状態を保持していることを保証する。これは伝統的な加工を用いることによっては不可能であり、それはなぜなら、これらの温度は、病原菌が指数関数的に成長し、それによって健康に害のある生成物を作る結果となる、病原菌のインキュベーション温度であるからである。
【００２８】
生命を救う多くの薬物中の生理活性化合物は、本来は速度の遅い高価な化学的プロセスによって植物から単離されており、それらによる治療のために広い調節プロセスに服するようになった。この新しい方法は、これらの植物性化学物質の生理活性を非常に少ない加工費用で維持するために使用されることができる。天然の産物であるこれらの生成物はまた、より制御の必要性が少ないことから、より短時間及びより低価格で市販されることもできる。本来の自然の環境が保持されるため、本発明の方法により得られた生成物は、長期の貯蔵の後、そして低濃度で顕著な有効性を提供する。
【００２９】
天然の生理活性成分は、本発明の方法によって加工された場合には生理活性を有する、ニワトリ軟骨などの成分である、コンドロイチン及びグルコサミンを含む。Rocky Mountain Juniperの液果（berry）は、本方法を用いて脱水した場合、生理活性を有する。天然のジギタリスを含むキツネノテブクロは、本方法を使用した場合、生理活性を有する。Sitka Mountain Ashは本方法によって加工された場合、同様に生理活性を有する。
【００３０】
本発明は以下の実施例によってさらに例解される。
【実施例】
【００３１】
実施例１
本実施例は、ニワトリ胸骨軟骨、骨を抜いたニワトリ胸殻（breast shell）及び機械的に分離されたニワトリの微生物状態及び水分活性状態を滅菌された実験室環境において示すものである。
【００３２】
ニワトリ胸骨軟骨は、健康な若い（６０日齢未満）ニワトリから、チキンプロセッサーによって得た。この材料を分析して、湿度８２．０％、脂肪０．２％、タンパク質１２．７％、灰分２．２％、及び炭水化物２．９％を得た。また、骨を抜いたニワトリ胸殻及び機械的に分離されたニワトリ（MSC）を同じプロセッサーから得たが、近似分析にはかけなかった。
【００３３】
これら３の材料を、抗菌活性及び抗菌剤（次亜塩素酸ナトリウム）の効果について試験した。生成物を一連の３のステップ（最初は塩素化前、第二に塩素化後、そして第三に約１００0Fで衛生的なやり方で乾燥後）にかけ、ここで微生物プロフィールを各ステップについて作成し、そして水分活性インデックスを乾燥後に測定した。材料は約１／１６インチから１／８インチの小片に細分化した（ステップ１）。得られた粒子を２００ppmの次亜塩素酸ナトリウム溶液に浸漬し（ステップ２）、内部の熱源をはずし、温度の制御のために外部熱源を用い、標準的な食品脱水機を使用して、乾燥時間は約３日間であった。以下の結果が得られた：
【００３４】
【表１】
2005528326.tif 000002
【００３５】
【表２】
2005528326.tif 000003
【００３６】
【表３】
2005528326.tif 000004
【００３７】
この実施例は、タンパク質の本来の構造を保存するために低温での乾燥を行っても、ヒトによる消費のために安全な製品は、製造環境において遭遇する相互汚染の可能性及び加工後に取扱者又は消費者によって相互汚染される可能性について検討しないということは考慮に入れない、衛生的な環境で生産され得るということを示している。
【００３８】
実施例２
別の一組の新鮮な胸骨を得て、微生物状態について試験した。結果は78,000CFU/ｇ及び57,500CFU/ｇのAPC、１７CFU/ｇ及び５CFU/ｇの大腸菌型の微生物、並びに３CFU/ｇおよび３５CFU/ｇの大腸菌そしてサルモネラ、この病原菌に対しては両方とも陽性であることを示した。これらの条件下で抗菌剤単独の使用は、製造後の消費の前の貯蔵の間に病原菌及び酵素の攻撃からタンパク質を保護するためには適切でない。したがって、イオン性の塩を粉砕した胸骨に、約７６％のニワトリ胸骨に対して２４％の塩化カリウム（KCl）のレベルで取り込ませ、これを抗菌ステップを含む実施例１と類似したやり方で加工した。最終産物を再びAPC、大腸菌型の微生物、大腸菌、サルモネラ、及び酵母／カビについて試験した。
【００３９】
この塩の使用は、最終産物の感覚受容性の性質に悪影響を与えず、最終産物の微生物プロフィールは健全であった。最終産物は０．５未満のAwで１０％未満の湿度を含み、製造、取り扱い、貯蔵、配給、及び最終使用者の活動中の潜在的な相互汚染に関して安定な製品を供給した。塩の存在はまた、塩のない場合における材料の乾燥に比べて水分除去速度を増加させた。
【００４０】
実施例３
タイプIIコラーゲンの生理活性を有する材料を（FDAの日用値に適合する）栄養補助食品としての使用に好適であるように、KCl量を増加させることによって実施例２を拡張した。試験は、約５６％のニワトリ胸骨軟骨及び４４％のKClを使用して行った。温度モニターに自動制御を用いた回転式ドラム装置を使用した。先に記載した抗菌剤を加工の前に使用し、材料を上記のように粉末化した。加工中の温度は１１０0Fを超えなかった。２０以上のバッチを調製した。含水量は高くて３．９％、低くて０．９％の範囲であり、Awは高くて０．４３７であり、低くて０．１５８であった。すべてのバッチを微生物についてテストし、APCは高くて２７０CFU/ｇ、低くて検出不能の範囲であった。大腸菌型の微生物は検出されなかった。大腸菌（E.coli）は検出されなかった。すべてのサルモネラ（Salmonella）試験は陰性であった。これらの結果はこの発明が健康に良い消費者に好都合なそして安全な製品を製造することを示す。
【００４１】
実施例４
材料を乾燥する間の微生物プロフィールを確立した。胸骨のみの代わりに胸骨をKClに対して85／15で使用した以外は実施例１に記載した通りに生成物を調製した。以下の結果を得た：
【００４２】
【表４】
2005528326.tif 000005
【００４３】
上記の結果は、適切な条件下で実施された場合、本発明が生成物が加工される時間経過の間の適切な微生物プロフィールを提供することを示す。多くの他の生物学的材料と同様にニワトリが公衆の健康に関する病原菌を含むことはよく知られている。本発明はまた、相互汚染の問題にも取り組み、そして意図した通りの生理活性を有する、消費者による使用に安全な製品を製造する。１１０0Fの温度が顕著な微生物の成長を可能とするということが周知であるが、本発明の方法の使用はこれを防止する。
【００４４】
実施例５
タイプIIコラーゲンを含むニワトリ軟骨が安定化を目的とする高温の状態などに置かれた場合、タイプIIコラーゲン分子が変性し、意図された目的のための生理活性に関して不活性化されるということは周知である。
【００４５】
本実施例は、微生物産物に関する安全性及び感覚受容性の性質の時間経過とともに、ニワトリ胸骨軟骨に含まれる、未変性の天然の生理活性を有するタイプIIコラーゲンを保持する本発明の能力を実証する。生成物は、６０％ニワトリ胸骨軟骨及び４０％KClの混合物を用いて実施例４の通りに調製した。得られた生成物を以下の；（１）電子顕微鏡（EM)による定性測定、（２）定性測定及び定量測定のための酵素免疫測定法（ELISA)、（３）コラゲナーゼ特異的な酵素の逐次可溶化／沈降分析（S/PCSE）、（４）近似分析の４通りの測定法を用いて調査した。
【００４６】
EM試験は、本発明の方法の生成物が、自然のニワトリ胸骨軟骨内のタイプIIコラーゲン線維に関して完全な、天然の、未変性の形態を保持することを確認した。ELISA試験は、本発明の方法の生成物が意図された使用のための生理活性を有するタイプIIコラーゲンを保持するために作用し、定量のために使用され得ることを確認し、実証した。S/PCSEはさらに、本発明の方法が意図された使用のための生理活性を有するタイプIIコラーゲンを保持するために作用し、定量のために使用され得ることを確認し、実証した。本発明により製造された最終産物の近似分析は、報告された文献値と比較した予想されるタンパク質の割合に関してすべての試験について確認した。
【００４７】
本発明によって製造された生成物をゼロ時間で試験し、１年以上室温で貯蔵した生成物と比較した。試験は生成物が１年を超えて安定であることを実証している。
【００４８】
【表５】
2005528326.tif 000006
【００４９】
比較の目的で、新鮮なニワトリ胸骨軟骨を加工中の生成物の安全性を保持するために使用され得る可能性のある（しかし、相互汚染の可能性のために加工後ではない）熱処理にかけた。S/PCSE分析を用いて、新鮮な胸骨が1時間の２５０0Fにおける熱処理後のこの保存性の不安定な形態において約８％の活性タイプIIコラーゲンを示すにもかかわらず、S/PCSE結果は、あるとしても１％未満の残存（ほとんど測定不可能）を示した。
【００５０】
以下のデータは本発明によって製造された生成物の微生物学的安定性に関する。
【００５１】
【表６】
2005528326.tif 000007
【００５２】
感覚受容的には、生成物は貯蔵第１日にはわずかに褐色であり、弱い鳥肉臭があり、異臭はしなかった。１年を超えた後、これらの状態は同じである。
【００５３】
本発明は、意図した通りの生理活性を有する形態のタイプIIコラーゲンを保持するとともに、適切なやり方で加工する場合、微生物の面で安全な生成物を製造すると結論される。
【００５４】
実施例６
実施例５の手順に従って、軟骨を８５、KClを１５及び１モル塩酸を１の割合で使用して生成物を調製し、可変の乾燥時間にさらした。
【００５５】
【表７】
2005528326.tif 000008
【００５６】
本実施例は、酸の使用が微生物の制御を亢進し、より短い乾燥時間を可能とすることを示す。
【００５７】
実施例７
実施例１に記載されたように調製された粉砕されたニワトリ軟骨及び１５％KClの混合物へ、乾燥剤としてヒドロキシプロピルメチルセルロースを５、流動剤としてレシチンを２の割合で添加した。回転式ドラム乾燥機中で乾燥した場合の混合物は、これらの添加剤を含まない混合物に比べて、ドラムに付着することなく、より均一に短時間で乾燥される。
【００５８】
実施例８
実施例２の粉砕されたニワトリ軟骨とKClの混合物を水中に分散させ、その後木綿の布を浸した。そして得られた湿った布を実施例１に記載した通りに水分含量１０％未満まで乾燥した。そして、木綿の布を傷の治療を促進するための絆創膏として使用した。
【００５９】
実施例９
粉砕したパイナップルを１５％KClと混合し、実施例２の方法に従って水分含量１０％未満となるまで乾燥した。得られた乾燥パイナップルは病原菌を含まず、酵素による分解に対して安定である。
【００６０】
実施例１０
柳の樹皮を粉砕し、実施例２の手順に従って脱水した。得られた生成物は、天然のアセチルサリチル酸の活性を保持し、それと柳の樹皮に含まれる他の有益な成分を併有しており、大衆治療薬として入手可能である。
【００６１】
実施例１１
キツネノテブクロの葉を粉砕し、抗菌剤及び１５％のKClと併合し、その後、水分含量が約７％未満となるまで１００0Fの温度で脱水する。得られた生成物は医薬品として入手可能なジギタリス治療薬として有用である。
【００６２】
実施例１２
アブラナの種子を粉砕し、そして水分含量が１０％未満となるまで実施例２の手順に従って脱水する。得られた生成物は、コレステロールを制御するための食品添加物として有用である。
【００６３】
実施例１３
アロエの葉を粉砕し、抗菌剤及び２０％KClと併合し、その後、実施例２の手順を使用して脱水する。得られた生成物は免疫抵抗を増加させるための内服適用及び傷の治療を助けるための局所適用のいずれかに使用することができる。
【００６４】
実施例１４
骨から分離したブタ軟骨を粉砕し、そして、実施例２の手順に従って脱水する。得られた生成物はコラーゲン１，３及び５を本来の状態で含み、局所的適用において有用である。
【００６５】
実施例１５
高い割合でタイプIIコラーゲンを含むニワトリ胸骨を８５の割合で１５の割合の塩化カリウムと混合する。１００の割合のこの混合物を、３００の割合の２００ppmの塩素を含む溶液に４０0Fで２時間浸漬する。この浸漬ステップを全部で最低６時間となるよう、２回繰り返し、水を濾過して除く。
【００６６】
そして、タイプIIコラーゲンを含む混合物を、粒子サイズが約１／１６インチとなるまで繰り返し粉砕機にかける。得られた微粒子をさらなる１５の割合の塩化カリウムと混合し、再粉砕する。そして、混合物を回転式ドラム乾燥機中に入れ、水分含量が約５％まで減少するまで１０４0Fで乾燥する。得られた安定化された材料をさらにメッシュサイズ７０〜１００に粉砕し、約３８％のタンパク質と６０％の塩化カリウムを含む、自由流動粒子を得る。
【００６７】
先の記載に見られるように、生理活性成分を含む多様な有機材料を、そのような成分の本来の構造を破壊せずに脱水することができ、それによって、活性成分の有効性を保持する。先の実施例は、医薬品及び医療の分野において、栄養補助剤の分野において、大衆薬として販売されるハーブから作られる治療薬において、化粧品産業において、及び一般的な食品中において、その本来の自然の状態において保持されるべき生理活性成分を含む生成物の有用性を見出す、本発明の範囲を制限するものとして解釈されるべきではない。
【手続補正書】
【提出日】平成16年7月9日(2004.7.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
タイプIIコラーゲン含有軟骨材料をその天然の形態において脱水する方法であって、以下のステップ：
上記軟骨を、抗菌剤及び上記軟骨の少なくとも１５重量％のイオン化塩と混合するステップ；
得られた微粒子形態の混合物を、変性が起こるよりも低い温度において、水分含量が乾燥された軟骨の１５重量％未満に減少するまで加熱するステップ；及び
タイプIIコラーゲンをその本来の形態で含有し、塩含量が上記乾燥された軟骨の重量に基づいて４５％以上である生成物を回収するステップ
を含む、前記方法。
【請求項２】
上記イオン化塩が固体の形態で使用される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
上記加熱が４３．３℃未満の温度において行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
酸素を含有する抗菌剤及びイオン化可能で消費可能な塩の存在下で実施される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
上記抗菌剤が次亜塩素酸である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
上記塩が塩化ナトリウム又は塩化カリウムである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
上記軟骨がニワトリから得られる、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
４５〜６５重量％のイオン化塩を含有し、水分含量が１５重量％未満である、タイプIIコラーゲンを含有する微粒子形態の動物軟骨加工物。
【請求項９】
上記塩が塩化カリウム又は塩化ナトリウムである、請求項８に記載の動物軟骨加工物。
【請求項１０】
上記軟骨がニワトリ軟骨である、請求項８に記載の動物軟骨加工物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、他の生物形態による消費並びにヒトによる消費に関して安全な、生理活性を有する生成物の製造方法に関する。より特別には、本発明は天然の材料の有効性を破壊しない脱水を通じて、そのような天然の材料を安定化する方法に関する。加工は、上記材料を保護する一方、微生物に原形質分離を起こす、高浸透圧性の条件を用いて行われる。最終産物における減少した水分活性は、健康によい生成物を保護する。
【背景技術】
【０００２】
多様な分野における適用が見出された多くの天然の材料は、商業的な製品として好適であるように加工されなくてはならない。潜在的に有用なある物質を、予期される受容者に安全な方法で、特別には病原菌に対する安全性及び有毒酵素の活性の制御に関して安全な方法で提供しつつ、上記材料の生理活性を維持することは、歴史的には、費用がかかり且つ生理活性物質の変性の結果としてしばしばその有効性を減少させる。医薬品及び栄養補助食品の分野、食品分野、医療分野、大衆薬の分野並びに化粧品の分野のように、天然の生理活性を有する生成物に基づく製品を市場で売買する、いくつかの商業的分野がある。本発明の方法は、これらの分野すべてに適応させられることができる。
【０００３】
本発明の方法の適用の１の例は、関節炎患者のためのタイプIIコラーゲンの調製にある。この化合物は、効果的な方法で関節炎患者の免疫システムに働きかけることが報告されている。Eugene Moore博士の特許（米国特許第5,570,144号、同第5,529,786号、同第5,637,321号及び同第5,645,851号）に開示されたように、タイプIIコラーゲンが効果的であるためにはその自然の状態に最も近い方法で調製されなくてはならないことは明らかである。しかしながら、Mooreが示唆したこの物質の消費者へのデリバリーは、かなりの量の水の保持を含み、したがって製品を病原菌と相互汚染し易くする。
【発明の開示】
【０００４】
発明の一般的な説明
本発明の方法は、既知の有益な効果を有する天然の材料の質及び有効性に影響する微生物因子を除去する一方、そのような材料本来の自然の構造を保持する、そのような材料の改良された効用に関する。この処理は、脱水を含み、したがって、病原菌の負荷を減少させる抗菌成分の存在下で従来の処理温度よりも低い温度で天然の材料を安定化することを含む。脱水は、好ましくは採用された濃度においては消費者に有害でない、イオン化可能な塩の存在下においても実施される。ある適用においては、糖又はアルコールのような他の高浸透圧性の作用物質も単独又は塩と併用で使用されることができる。加工の間及び後において、該塩は、問題の生物のインキュベーション温度にしばしば設定される上記過程中における、病原菌及び腐敗生物の成長及び潜在的な相互汚染に対するさらなる抗菌安定化剤としても作用する。
【０００５】
本発明の主要な特徴の一つは、本発明が有毒な微生物因子そして特に病原菌を除去するための熱処理において従来の高温よりも顕著に低い温度の使用を可能とし、及びしたがって本来の生成物の生物学的状態を維持する方法を提供することである。
【０００６】
本発明の他の主要な特徴は、得られる生成物が室温における貯蔵条件下で３年よりも長く、その微生物に対する安全性を保持することである。さらに、いかなる有毒酵素活性も制御され、結果としてより望ましい商業的に魅力的な製品が生じる。それはなぜなら、酵素活性が悪臭のような負の感覚受容性の性質を生じ得るからである。さらに、酵素活性は天然の産物の有効性に負の影響を及ぼすことができる。
【０００７】
本発明の方法は、これまで化学保存剤、熱処理、照射法、不活性大気、フリーズドライ、及び他の抗菌安定化法のようなもので処理されてきた天然の材料を、他の製品とともに使用されることもできる、安定で消費可能な製品に変える、改良された経済的な方法を提供する。
【０００８】
以前は、消費可能な製品は本発明において使用される温度で加工されることは無かった。なぜなら、得られる生成物が感覚受容的に許容できないものであったからである。少量の材料が消費される、最近の栄養補助食品ビジネスの導入は、本発明に意味を与える。本発明の方法により得られる生成物は安定で長期間消費可能であるのみならず、加えて、天然の材料がその自然の本来の構造を保持し、したがって、そのような材料に含まれる完全な有効性を保持する。結果として、栄養補助食品として、医薬品として、大衆薬として、生理活性を有する絆創膏のような医療用品の中の（生物学的に活性のあるクリームのような）クリーム又はローション中の局所用製品として及び機能性食品中の特別な成分として有用な、改良された生成物が得られる。
【０００９】
本発明の方法は好ましくは、タンパク質の本来の構造を変性させずに、自然のタンパク質中に見出される多様なタンパク種の相互作用から得られる望ましい相乗作用を保護する、栄養補助食品又は医薬品としての将来性及び有用性を示すタンパク質とともに使用される。
【００１０】
発明の詳細な説明
本発明の方法は、有機材料の一体性及び構造を保持するが、存在する病原菌の大半を除去し、所望により、実質的に上記材料の本来の構造に影響を及ぼすことなく、腐敗を起こす他の微生物を除去する条件下で有機材料を脱水することを含む。より特別には、本発明の方法は、変性が起こるよりも低い温度で自然の有機材料を加熱し、所望により、減圧下で、イオン化可能な塩であることのできる抗菌剤、しかし望ましくはより有効な抗菌剤及びイオン化可能で消費可能な塩との併用、の存在下で加熱することを含む。上記塩は、加工温度の間、上記材料を病原菌及び腐敗性生物の成長から保護し（原形質分離条件）、乾燥生成物の変質を防止するために、加工の間及び後に安定化剤として働く。
【００１１】
本発明の方法は、タンパク質本来の未変性の構造を保持することが望ましい場合のタンパク質の脱水、及び消費された時に相乗効果を有するタンパク質の組み合わせを含む食品の脱水と組み合わせることにより、特別な効用を見出す。例えば、ニワトリ軟骨はタイプIIコラーゲンのみならず、加えてグルコサミン及びコンドロイチンのようなタンパク質を含む。Eugene Mooreの特許、米国特許第5,645,581号、同第5,637,321号、同第,529,786号、同第5,750,144号中に開示されたように、未変性のタイプIIコラーゲンの使用は、未変性のタイプIIコラーゲン又はそれとトリ軟骨中に存在する他のタンパク質との組み合わせの性質に部分的に依存するかも知れない関節リューマチの症状を軽減させる。対照的に、変性された精製タイプIIコラーゲンは、未変性タイプIIコラーゲンに比べて同じタイプの軽減又は利益を提供するものではない。
【００１２】
安定化のための塩は、消費に安全なイオン化可能な塩であり、特別には塩化ナトリウム又は塩化カリウムのいずれかである。塩濃度は、含まれる食品の性質及び所望の安定化の程度によって大きく変動する。したがって、腐敗を起こす微生物とは異なる病原菌の除去を意図する場合には、一般的に、より低濃度の塩を使用することが可能である。食品を古くさせ、病原菌である好ましくない微生物の負荷の生じることを観察することによって、最適の又は望ましい濃度が実験的に確立されることができる。過剰量の塩は脱水を妨害しないが、脱水された材料の有効性に影響することができる。タンパク質の脱水とともに、出発材料の重量に基づいて約１５％の濃度、これは脱水された生成物中では約４５％の濃度となる、を採用することが一般的には望ましい。
【００１３】
塩の効果は、塩酸又は酢酸のような酸の添加によって亢進されることができる。
【００１４】
一般的に、出発材料の水分含量が重量で１５％未満、好ましくは１〜８％の範囲、に減少するまで上記方法が実施される。水分濃度がさらに減少してもさらなる利益は得られない。１５％より高い濃度においては、安定化並びに病原菌及び他の微生物の除去は部分的でしかなく、上記材料を安定化するのには適当でない。
【００１５】
溶液中の次亜塩素酸ナトリウムのような塩素を含有する抗菌剤単独又はこれと塩酸のような好適な酸との組み合わせが、最初の微生物負荷を減少させることをさらに助けるために出発材料に添加される。これは特別には、腐敗を起こすことのできるような微生物に対しても上記材料が安定化される場合である。塩素剤の有用な濃度範囲は、１ppm〜10,000ppmである。酸の使用ｐH範囲は、ｐH１〜ｐH１０である。塩素剤を使用する場合、材料を乾燥過程に供する前に、まず塩素剤中に浸漬することが望ましいかも知れない。
【００１６】
一般的に、脱水される材料は、均一の水分除去を可能とし粒子内部の湿った点のないように粉砕される。粒子サイズが小さくなると、脱水性能が一様に増加する。しかしながら、粒子は、脱水される材料の構造に影響を及ぼすか又は過剰のアグロメレーションを起こすようなサイズまで小さくなるべきではない。好ましくは、粒子は１〜１０００メッシュサイズの範囲である。
【００１７】
広く多様な商業的に入手可能な乾燥装置が本発明の方法中で採用されることができる。好ましいのは、物理的に粒子を摩損させることなく均一に材料を乾燥できるような装置である。温度及び湿度を連続的にモニターする、流動層乾燥機又は回転式ドラム乾燥機は特別に好ましい。自然の材料の乾燥を助ける、剥離剤及び他の物質が乾燥ステップに加えられることができる。アグロメレーション及び乾燥機の壁のコーティングを減少させることを助ける、レシチン及びヒドロキシプロピルメチルセルロースのような補助は、本発明の方法において有用である。
【００１８】
本発明は、その本来の構造を保持し、それによってその本来の治療的価値を保持する安定な形態でタンパク質材料を調製するのに特別に有用である。ニワトリ軟骨に由来するタイプIIコラーゲンは、好適な方法で加工された場合、生理活性のあるタンパク質分子である。安定化し安全にする加工が行われる場合、従来の熱処理のような多くの伝統的な安定化技術によって、この成分の力価が容易に失われることから、この成分の力価を保持することは重要である。熱処理された場合、この成分が失活することはよく知られている。照射法及びフリーズドライ加工のような技術プロセスは最初はこの成分の活性を保持することができるが、プロセス後の生物学的安定性及び安全性に関しては、既存のプロセスはこの新しい方法に比べてかなり劣っており、この新しい方法は経済的に顕著に好ましい。重要な問題は、生成物を取り扱い、消費することのできる個人の行動による、加工後の相互汚染である。この新しい方法は、これに関するほどほどに不適当な行動が安全でない生成物をもたらさないということを保証する。所望の材料もまた、それがその自然の環境において機能したのとほぼ同じ温度で加工され、その本来の機能状態を保持していることを保証する。これは伝統的な加工を用いることによっては不可能であり、それはなぜなら、これらの温度は、病原菌が指数関数的に成長し、それによって健康に害のある生成物を作る結果となる、病原菌のインキュベーション温度であるからである。
【００１９】
本発明は以下の実施例によってさらに例解される。
【実施例】
【００２０】
実施例１
ニワトリ胸骨軟骨は、健康な若い（６０日齢未満）ニワトリから、チキンプロセッサーによって得た。この材料を分析して、湿度８２．０％、脂肪０．２％、タンパク質１２．７％、灰分２．２％、及び炭水化物２．９％を得た。新鮮な胸骨を微生物状態について試験した。結果は、７８，０００ＣＦＵ／ｇ及び５７，５００ＣＦＵ／ｇのＡＰＣ、１７ＣＦＵ／ｇ及び５ＣＦＵ／ｇの大腸菌型の微生物、３ＣＦＵ／ｇ及び３５ＣＦＵ／ｇの大腸菌、並びにサルモネラ、この病原菌に対しては両方とも陽性であることを示した。上記材料を１／１６インチ〜１／８インチの直径を有する小片となるように粉砕した。これらの条件下で抗菌剤単独の使用は、製造後の消費の前の貯蔵の間に病原菌及び酵素の攻撃からタンパク質を保護するためには適切でない。したがって、イオン性の塩を粉砕した胸骨に、約７６％のニワトリ胸骨に対して２４％の塩化カリウム（KCl）のレベルで取り込ませ、得られた産物を次亜塩素酸ナトリウムの２００ｐｐｍ溶液に浸漬し、その後、標準的な食品脱水機中で３日間乾燥した。最終産物を再びAPC、大腸菌型の微生物、大腸菌、サルモネラ、及び酵母／カビについて試験した。すべての試験が陰性であった。
【００２１】
この塩の使用は、最終産物の感覚受容性の性質に悪影響を与えず、最終産物の微生物プロフィールは健全であった。最終産物は０．５未満のAwで１０％未満の湿度を含み、製造、取り扱い、貯蔵、配給、及び最終使用者の活動中の潜在的な相互汚染に関して安定な製品を供給した。塩の存在はまた、塩のない場合における材料の乾燥に比べて水分除去速度を増加させた。
【００２２】
実施例２
タイプIIコラーゲンの生理活性を有する材料を、（FDAの日用値に適合する）栄養補助食品としての使用に好適な量であるように、KCl量を増加させることによって実施例１を拡張した。試験は、約５６％のニワトリ胸骨軟骨及び４４％のKClを使用して行った。温度モニターに自動制御を用いた回転式ドラム装置を使用した。先に記載した抗菌剤を加工の前に使用し、材料を上記のように粉末化した。加工中の温度は１１０0Fを超えなかった。２０以上のバッチを調製した。含水量は高くて３．９％、低くて０．９％の範囲であり、Awは高くて０．４３７であり、低くて０．１５８であった。すべてのバッチを微生物についてテストし、APCは高くて２７０CFU/ｇ、低くて検出不能の範囲であった。大腸菌型の微生物は検出されなかった。大腸菌（E.coli）は検出されなかった。すべてのサルモネラ（Salmonella）試験は陰性であった。これらの結果はこの発明が健康に良い消費者に好都合なそして安全な製品を製造することを示す。
【００２３】
実施例３
タイプIIコラーゲンを含むニワトリ軟骨が安定化を目的とする高温の状態などに置かれた場合、タイプIIコラーゲン分子が変性し、意図された目的のための生理活性に関して不活性化されるということは周知である。
【００２４】
本実施例は、微生物産物に関する安全性及び感覚受容性の性質の時間経過とともに、ニワトリ胸骨軟骨に含まれる、未変性の天然の生理活性を有するタイプIIコラーゲンを保持する本発明の能力を実証する。生成物は、６０％ニワトリ胸骨軟骨及び４０％KClの混合物を用いて実施例１の通りに調製した。得られた生成物を以下の；（１）電子顕微鏡（EM)による定性測定、（２）定性測定及び定量測定のための酵素免疫測定法（ELISA)、（３）コラゲナーゼ特異的な酵素の逐次可溶化／沈降分析（S/PCSE）、（４）近似分析の４通りの測定法を用いて調査した。
【００２５】
EM試験は、本発明の方法の生成物が、自然のニワトリ胸骨軟骨内のタイプIIコラーゲン線維に関して完全な、天然の、未変性の形態を保持することを確認した。ELISA試験は、本発明の方法の生成物が意図された使用のための生理活性を有するタイプIIコラーゲンを保持するために作用し、定量のために使用され得ることを確認し、実証した。S/PCSEはさらに、本発明の方法が意図された使用のための生理活性を有するタイプIIコラーゲンを保持するために作用し、定量のために使用され得ることを確認し、実証した。本発明により製造された最終産物の近似分析は、報告された文献値と比較した予想されるタンパク質の割合に関してすべての試験について確認した。
【００２６】
本発明によって製造された生成物をゼロ時間で試験し、１年以上室温で貯蔵した生成物と比較した。試験は生成物が１年を超えて安定であることを実証している。
【００２７】
【表１】
2005528326.tif 000009
【００２８】
比較の目的で、新鮮なニワトリ胸骨軟骨を加工中の生成物の安全性を保持するために使用され得る可能性のある（しかし、相互汚染の可能性のために加工後ではない）熱処理にかけた。S/PCSE分析を用いて、新鮮な胸骨が1時間の２５０0Fにおける熱処理後のこの保存性の不安定な形態において約８％の活性タイプIIコラーゲンを示すにもかかわらず、S/PCSE結果は、あるとしても１％未満の残存（ほとんど測定不可能）を示した。
【００２９】
以下のデータは本発明によって製造された生成物の微生物学的安定性に関する。
【００３０】
【表２】
2005528326.tif 000010
【００３１】
感覚受容的には、生成物は貯蔵第１日にはわずかに褐色であり、弱い鳥肉臭があり、異臭はしなかった。１年を超えた後、これらの状態は同じである。
【００３２】
本発明は、意図した通りの生理活性を有する形態のタイプIIコラーゲンを保持するとともに、適切なやり方で加工する場合、微生物の面で安全な生成物を製造すると結論される。
【００３３】
実施例４
実施例３の手順に従って、軟骨を８５、KClを１５及び１モル塩酸を１の割合で使用して生成物を調製し、可変の乾燥時間にさらした。
【００３４】
【表３】
2005528326.tif 000011
【００３５】
本実施例は、酸の使用が微生物の制御を亢進し、より短い乾燥時間を可能とすることを示す。
【００３６】
実施例５
実施例１に記載されたように調製された粉砕されたニワトリ軟骨及び１５％KClの混合物へ、乾燥剤としてヒドロキシプロピルメチルセルロースを５、流動剤としてレシチンを２の割合で添加した。回転式ドラム乾燥機中で乾燥した場合の混合物は、これらの添加剤を含まない混合物に比べて、ドラムに付着することなく、より均一に短時間で乾燥される。
【００３７】
実施例６
実施例１の粉砕されたニワトリ軟骨とKClの混合物を水中に分散させ、その後木綿の布を浸した。そして得られた湿った布を実施例１に記載した通りに水分含量１０％未満まで乾燥した。そして、木綿の布を傷の治療を促進するための絆創膏として使用した。
【００３８】
実施例７
高い割合でタイプIIコラーゲンを含むニワトリ胸骨を８５の割合で１５の割合の塩化カリウムと混合する。１００の割合のこの混合物を、３００の割合の２００ppmの塩素を含む溶液に４０0Fで２時間浸漬する。この浸漬ステップを全部で最低６時間となるよう、２回繰り返し、水を濾過して除く。
【００３９】
そして、タイプIIコラーゲンを含む混合物を、粒子サイズが約１／１６インチとなるまで繰り返し粉砕機にかける。得られた微粒子をさらなる１５の割合の塩化カリウムと混合し、再粉砕する。そして、混合物を回転式ドラム乾燥機中に入れ、水分含量が約５％まで減少するまで１０４0Fで乾燥する。得られた安定化された材料をさらにメッシュサイズ７０〜１００に粉砕し、約３８％のタンパク質と６０％の塩化カリウムを含む、自由流動粒子を得る。
【国際調査報告】
2005528326.tif 000012
2005528326.tif 000013