(57)【要約】本発明は、哺乳動物におけるチロシンキナーゼシグナルトランスダクションを阻害、制御および／または調整する３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の固体形態、これらの化合物を含有する組成物、および血管新生、癌、腫瘍増殖、アテローム性動脈硬化症、加齢関連黄斑変性、糖尿病性網膜症、炎症性疾患などのチロシンキナーゼ依存性疾患および病態を治療するために、これらを使用する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
６．７６、８．１２、１０．２１、１２．１１、１２．８８、１３．７７、１４．６５、１５．０１、１５．２３、１６．０９、１６．３６、１６．９５、１７．２８、１７．６５、１８．３１、１９．０６、１９．６６、２０．８４、２１．４７、２２．２１、２３．０７、２４．０５、２４．３２、２５．１９、２５．５８、２６．００、２６．９６、２８．２２および２８．８４の回折角を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする多型形態における３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの塩酸塩。
【請求項２】
６．７６、８．１２、１０．２１、１２．１１、１２．８８、１３．７７、１４．６５、１５．０１、１５．２３、１６．０９、１６．３６、１６．９５、１７．２８、１７．６５、１８．３１、１９．０６、１９．６６、２０．８４、２１．４７、２２．２１、２３．０７、２４．０５、２４．３２、２５．１９、２５．５８、２６．００、２６．９６、２８．２２および２８．８４の回折角、ならびに１分間当たり１０℃の速度で２８４．９０℃の融解吸熱を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする請求項１に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の多型形態。
【請求項３】
５．１９、９．５４、１０．３２、１２．９９、１４．７９、１５．１４、１６．５０、１７．１０、１７．４７、１８．２８、１９．１２、１９．５０、２０．７０、２１．００、２１．５６、２２．２７、２３．２４、２４．４２、２５．３５、２６．０６、２６．９９、２８．２８および３１．８７の回折角を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする結晶形態における３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの塩酸塩。
【請求項４】
５．１９、９．５４、１０．３２、１２．９９、１４．７９、１５．１４、１６．５０、１７．１０、１７．４７、１８．２８、１９．１２、１９．５０、２０．７０、２１．００、２１．５６、２２．２７、２３．２４、２４．４２、２５．３５、２６．０６、２６．９９、２８．２８および３１．８７の回折角、ならびに１分間当たり１０℃の速度で２７３．８℃の融解吸熱を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態。
【請求項５】
７．６０、９．３５０、１１．２２、１５．１２、１６．０１、１６．８６、１８．８５、１９．４６、２０．１０、２１．７３、２３．０７、２３．７０、２４．３５および２５．９９の回折角を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする多型形態における３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの塩酸塩。
【請求項６】
７．６０、９．３５０、１１．２２、１５．１２、１６．０１、１６．８６、１８．８５、１９．４６、２０．１０、２１．７３、２３．０７、２３．７０、２４．３５および２５．９９の回折角、ならびに１分間当たり１０℃の速度で２９２．６℃の融解吸熱を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする請求項５に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の多型形態。
【請求項７】
ＤＭＳＯ中の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの遊離塩基を水性塩酸で処理するステップを含む、６．７６、８．０９、９．９５、１２．０７、１２．８５、１３．７３、１４．３６、１４．８５、１５．２１、１６．０６、１６．３４、１６．７８、１７．２５、１８．２９、１８．８８、１９．１３、１９．７２、２０．３４、２０．７４、２１．５５、２２．３５、２４．０１、２４．２４、２５．１９、２５．５４、２６．８６、２８．７７および３０．２３の回折角を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする結晶形態における３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩を調製する方法。
【請求項８】
ＤＭＳＯ中の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの遊離塩基を水性塩酸で処理するステップおよび生じた固体を濾過により採取するステップを含む、６．７６、８．０９、９．９５、１２．０７、１２．８５、１３．７３、１４．３６，１４．８５、１５．２１、１６．０６、１６．３４、１６．７８、１７．２５、１８．２９、１８．８８、１９．１３、１９．７２、２０．３４、２０．７４、２１．５５、２２．３５、２４．０１、２４．２４、２５．１９、２５．５４、２６．８６、２８．７７および３０．２３の回折角を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする結晶形態における３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩を単離する方法。
【請求項９】
採取した固体を無水条件下で乾燥するステップをさらに含む請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
採取した固体を窒素掃流下で乾燥するステップをさらに含む請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
ＴＨＦ中の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの遊離塩基を水性塩酸で処理するステップを含む、６．７６、８．１２、１０．２１、１２．１１、１２．８８、１３．７７、１４．６５、１５．０１、１５．２３、１６．０９、１６．３６、１６．９５、１７．２８、１７．６５、１８．３１、１９．０６、１９．６６、２０．８４、２１．４７、２２．２１、２３．０７、２４．０５、２４．３２、２５．１９、２５．５８、２６．００、２６．９６、２８．２２および２８．８４の回折角を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする結晶形態における３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩を調製する方法。
【請求項１２】
採取した固体を無水条件下で乾燥するステップをさらに含む請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
採取した固体を窒素掃流下で乾燥するステップをさらに含む請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
６．７６、８．０９、９．９５、１２．０７、１２．８５、１３．７３、１４．３６、１４．８５、１５．２１、１６．０６、１６．３４、１６．７８、１７．２５、１８．２９、１８．８８、１９．１３、１９．７２、２０．３４、２０．７４、２１．５５、２２．３５、２４．０１、２４．２４、２５．１９、２５．５４、２６．８６、２８．７７および３０．２３の回折角を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態を１：１アセトニトリル／水の混液から再結晶するステップを含む、５．１９、９．５４、１０．３２、１２．９９、１４．７９、１５．１４、１６．５０、１７．１０、１７．４７、１８．２８、１９．１２、１９．５０、２０．７０、２１．００、２１．５６、２２．２７、２３．２４、２４．４２、２５．３５、２６．０６、２６．９９、２８．２８および３１．８７の回折角を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする結晶形態における３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩を調製する方法。
【請求項１５】
６．７６、８．０９、９．９５、１２．０７、１２．８５、１３．７３、１４．３６、１４．８５、１５．２１、１６．０６、１６．３４、１６．７８、１７．２５、１８．２９、１８．８８、１９．１３、１９．７２、２０．３４、２０．７４、２１．５５、２２．３５、２４．０１、２４．２４、２５．１９、２５．５４、２６．８６、２８．７７および３０．２３の回折角を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの結晶形態を１：１アセトン／水の混液から再結晶するステップを含む、５．１９、９．５４、１０．３２、１２．９９、１４．７９、１５．１４、１６．５０、１７．１０、１７．４７、１８．２８、１９．１２、１９．５０、２０．７０、２１．００、２１．５６、２２．２７、２３．２４、２４．４２、２５．３５、２６．０６、２６．９９、２８．２８および３１．８７の回折角を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする結晶形態における３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩を調製する方法。
【請求項１６】
６．７６、８．０９、９．９５、１２．０７、１２．８５、１３．７３、１４．３６、１４．８５、１５．２１、１６．０６、１６．３４、１６．７８、１７．２５、１８．２９、１８．８８、１９．１３、１９．７２、２０．３４、２０．７４、２１．５５、２２．３５、２４．０１、２４．２４、２５．１９、２５．５４、２６．８６、２８．７７および３０．２３の回折角を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態を酢酸から再結晶するステップを含む、７．６０、９．３５０、１１．２２、１５．１２、１６．０１、１６．８６、１８．８５、１９．４６、２０．１０、２１．７３、２３．０７、２３．７０、２４．３５および２５．９９の回折角を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする結晶形態における３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩を調製する方法。
【請求項１７】
請求項１に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の多型形態および製薬上許容できる担体を含んでなる製薬組成物。
【請求項１８】
請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態および製薬上許容できる担体を含んでなる製薬組成物。
【請求項１９】
請求項５に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態および製薬上許容できる担体を含んでなる製薬組成物。
【請求項２０】
請求項１に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の多型形態の治療有効量を癌の処置を必要とする哺乳動物に投与することを含んでなる前記哺乳動物において癌を治療または予防する方法。
【請求項２１】
請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態の治療有効量を癌の処置を必要とする哺乳動物に投与することを含んでなる前記哺乳動物において癌を治療または予防する方法。
【請求項２２】
請求項５に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態の治療有効量を癌の処置を必要とする哺乳動物に投与することを含んでなる前記哺乳動物において癌を治療または予防する方法。
【請求項２３】
前記癌が、脳、泌尿生殖管器、リンパ系、胃、喉頭および肺の癌から選択される請求項２１に記載の癌を治療または予防する方法。
【請求項２４】
前記癌が、組織球性リンパ腫、肺腺癌、小細胞肺癌、膵癌、グリア芽細胞腫および乳癌から選択される請求項２３に記載の癌を治療または予防する方法。
【請求項２５】
請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態の治療有効量を、血管新生が関係する疾患の処置を必要とする哺乳動物に投与することを含んでなる、血管新生が関係する疾患を治療または予防する方法。
【請求項２６】
前記疾患が眼疾患である請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態の治療有効量を、網膜血管新生の処置を必要とする哺乳動物に投与することを含んでなる、網膜血管新生を治療または予防する方法。
【請求項２８】
請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態の治療有効量を、糖尿病性網膜症の処置を必要とする哺乳動物に投与することを含んでなる、糖尿病性網膜症を治療または予防する方法。
【請求項２９】
請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態の治療有効量を、加齢関連黄斑変性の処置を必要とする哺乳動物に投与することを含んでなる、加齢関連黄斑変性を治療または予防する方法。
【請求項３０】
請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態の治療有効量を、炎症性疾患の処置を必要とする哺乳動物に投与することを含んでなる、炎症性疾患を治療または予防する方法。
【請求項３１】
前記炎症性疾患が、リウマチ様関節炎、乾癬、接触性皮膚炎、遅延型過敏性反応から選択される請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態の治療有効量を投与することを含む、チロシンキナーゼ依存性疾患または病態を治療または予防する方法。
【請求項３３】
請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態と製薬上許容できる担体とを組み合わせることにより製造された製薬組成物。
【請求項３４】
請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態と製薬上許容できる担体とを組み合わせることを含む製薬組成物を製造する方法。
【請求項３５】
請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態の治療有効量を投与することを含む、骨肉腫、変形性関節炎、およびくる病から選択される骨関連病態を治療または予防する方法。
【請求項３６】
１）エストロゲン受容体モジュレーター、
２）アンドロゲン受容体モジュレーター、
３）レチノイド受容体モジュレーター、
４）細胞毒性剤、
５）抗増殖剤、
６）プレニル−蛋白トランスフェラーゼ阻害剤、
７）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、
８）ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、
９）逆転写酵素阻害剤、および
１０）その他の血管新生阻害剤、から選択される第２の化合物をさらに含む請求項１８に記載の組成物。
【請求項３７】
前記第２の化合物が、チロシンキナーゼ阻害剤、上皮細胞誘導成長因子阻害剤、線維芽細胞誘導成長因子阻害剤、血小板誘導成長因子阻害剤、ＭＭＰ阻害剤、インテグリンブロッカー、インターフェロン−α、インターロイキン−１２、ポリ硫酸ペントサン、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、カルボキシアミドトリアゾール、コンブレタスタチンＡ−４、スクワラミン、６−Ｏ−クロロアセチル−カルボニル）−フマギロール、サリドマイド、アンジオスタチン、トロポニン−１、およびＶＥＧＦに対する抗体からなる群から選択される他の血管新生阻害剤である請求項３６に記載の組成物。
【請求項３８】
前記第２の化合物が、タモキシフェンおよびラロキシフェンから選択されるエストロゲン受容体モジュレーターである請求項３６に記載の組成物。
【請求項３９】
放射線療法と組み合わせて、請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態の治療有効量を投与することを含んでなる癌を治療する方法。
【請求項４０】
１）エストロゲン受容体モジュレーター、
２）アンドロゲン受容体モジュレーター、
３）レチノイド受容体モジュレーター、
４）細胞毒性剤、
５）抗増殖剤、
６）プレニル−蛋白トランスフェラーゼ阻害剤、
７）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、
８）ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、
９）逆転写酵素阻害剤、および
１０）その他の血管新生阻害剤、から選択される化合物と組み合わせて、請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態の治療有効量を投与することを含む、癌を治療または予防する方法。
【請求項４１】
１）エストロゲン受容体モジュレーター、
２）アンドロゲン受容体モジュレーター、
３）レチノイド受容体モジュレーター、
４）細胞毒性剤、
５）抗増殖剤、
６）プレニル−蛋白トランスフェラーゼ阻害剤、
７）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、
８）ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、
９）逆転写酵素阻害剤、および
１０）その他の血管新生阻害剤、から選択される化合物および放射線療法と組み合わせて、請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態の治療有効量を投与することを含む、癌を治療する方法。
【請求項４２】
請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態およびパクリタキセルまたはトラスツズマブの治療有効量を投与することを含む、癌を治療または予防する方法。
【請求項４３】
請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態およびＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａアンタゴニストの治療有効量を投与することを含む、癌を治療または予防する方法。
【請求項４４】
前記ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａアンタゴニストがチロフィバンである請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
請求項３に記載の３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態の治療有効量を投与することを含む、脳虚血事象後の組織損傷を軽減または予防する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、哺乳動物におけるチロシンキナーゼシグナルトランスダクションを阻害する３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の固体形態、これらの多型形態を含有する組成物、および血管新生、癌、腫瘍増殖、アテローム性動脈硬化症、加齢関連黄斑変性、糖尿病性網膜症、炎症性疾患などのチロシンキナーゼ依存性疾患および病態を治療するために、これらを使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
チロシンキナーゼ類は、蛋白質基質においてアデノシン三リン酸の末端リン酸エステルのチロシン残基への転移を触媒する酵素の一クラスである。チロシンキナーゼ類は、基質リン酸化による多数の細胞機能に関するシグナルトランスダクションにおいて重要な役割を演じ、細胞増殖、発癌現象および細胞分化において重要な寄与因子であることが示されている。
【０００３】
チロシンキナーゼ類は、受容体タイプまたは非受容体タイプとして分類できる。受容体タイプのチロシンキナーゼ類は、細胞外部分、膜貫通部分および細胞内部分を有するが、一方、非受容体タイプのチロシンキナーゼ類は、全体が細胞内に存在する。
【０００４】
受容体タイプおよび非受容体タイプ双方のチロシンキナーゼ類は、細胞シグナル伝達経路に関係し、癌、乾癬および超免疫応答などの多数の病原性状態に導く。
【０００５】
いくつかの受容体タイプのチロシンキナーゼ類およびそれに結合している成長因子は血管新生において役割を演じているが、あるものは間接的に血管新生を促進し得る（ＭｕｓｔｏｎｅｎおよびＡｌｉｔａｌｏ、Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１２９巻：８９５〜８９８頁、１９９５年）。このような受容体タイプのチロシンキナーゼの１つは、胎児肝キナーゼ１またはＦＬＫ−１である。ＦＬＫ−１のヒト類縁体は、高親和性でＶＥＧＦと結合することから、血管内皮細胞成長因子受容体２またはＶＥＧＦＲ−２としても知られているキナーゼ挿入ドメイン含有受容体ＫＤＲである。最後に、この受容体のマウス変種はまた、ＮＹＫとも呼ばれている（Ｏｅｌｒｉｃｈｓら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ８巻（１）：１１〜１５頁、１９９３年）。ＶＥＧＦおよびＫＤＲは、血管内皮細胞の増殖、および血管形成および血管新生とそれぞれ名付けられる血管の形成および血管の出芽において重要な役割を演じるリガンド受容体ペアである。
【０００６】
血管新生は、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）の過度の活性を特徴とする。ＶＥＧＦは実際、リガンドの科を含んでなる（ＫｌａｇｓｂｕｒｎおよびＤ’Ａｍｏｒｅ、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ＆  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ７巻：２５９〜２７０頁、１９９６年）。ＶＥＧＦは、高親和性膜貫通チロシンキナーゼ受容体ＫＤＲおよびそれに関連するｆｍｓ様チロシンキナーゼ−１（Ｆｌｔ−１または血管内皮細胞成長因子受容体１（ＶＥＧＦＲ−１）としても知られている）に結合する。細胞培養および遺伝子ノックアウト実験により、各受容体が血管新生の種々の態様に寄与していることが示されている。ＫＤＲは、ＶＥＧＦのマイトジェン機能を媒介するが、一方、Ｆｌｔ−１は、細胞内接着を伴うものなど非マイトジェン機能を調整するものと思われる。したがってＫＤＲ阻害は、マイトジェンＶＥＧＦ活性レベルを調整する。実際、腫瘍増殖は、ＶＥＧＦ受容体アンタゴニストの抗血管新生作用に感受性があることが示されている（Ｋｉｍら、Ｎａｔｕｒｅ  ３６２巻、８４１〜８４４頁、１９９３年）。
【０００７】
したがって固形腫瘍は、これらの腫瘍が増殖を支えるの必要な血管形成のための血管新生に依存することからチロシンキナーゼ阻害剤により治療できる。これらの固形腫瘍としては、組織球性リンパ腫、脳癌、泌尿生殖器癌、リンパ系癌、胃癌、喉頭癌、肺腺癌および小細胞肺癌などの肺癌が挙げられる。さらなる例としては、Ｒａｆ活性発癌遺伝子（例えば、Ｋ−ｒａｓ、ｅｒｂ−Ｂ）の過剰発現または活性化が見られる癌が挙げられる。このような癌としては、膵癌および乳癌が挙げられる。したがって、これらのチロシンキナーゼ阻害剤は、これらの酵素に依存する増殖性疾患の予防および治療に有用である。
【０００８】
ＶＥＧＦの血管新生活性は、腫瘍に限定されていない。ＶＥＧＦは、糖尿病性網膜症の網膜またはその近傍に生じた大部分の血管新生の原因となっている。網膜中のこの血管増殖は、最後に失明に至るような視覚退化に導く。眼ＶＥＧＦ  ｍＲＮＡおよび蛋白質は、霊長類における網膜静脈閉塞などの病態、および新血管新生に導くマウスにおける減少ｐＯ２レベルにより上昇する。抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体またはＶＥＧＦ受容体免疫融合体の眼内注入は、霊長類およびげっ歯類双方のモデルにおいて眼新血管新生を阻害する。ヒトの糖尿病性網膜症におけるＶＥＧＦ誘導の原因にかかわらず、眼ＶＥＧＦの阻害は、前記疾患を治療する上で有用である。
【０００９】
ＶＥＧＦの発現はまた、壊死領域に隣接した動物およびヒトの腫瘍の低酸素領域において有意に増加する。ＶＥＧＦはまた、発癌遺伝子ｒａｓ、ｒａｆ、ｓｒｃおよび突然変異体ｐ５３（それらすべては、標的癌に関連している）の発現によりアップレギュレートされる。モノクローナル抗ＶＥＧＦ抗体は、ヌードマウスにおけるヒト腫瘍の増殖を阻害する。これら同じ腫瘍細胞は、培養液中でＶＥＧＦを発現し続けるが、この抗体は有糸分裂速度を減少させない。このように、腫瘍誘導ＶＥＧＦは、自己分泌マイトジェン因子として機能しない。したがって、ＶＥＧＦは、そのパラクリン血管内皮細胞走化性およびマイトジェン活性を経て血管新生を促進することによりインビボ腫瘍増殖に寄与する。これらのモノクローナル抗体はまた、胸腺欠損マウスにおいて典型的に血管新生の不十分なヒト大腸癌の増殖を阻害し、接種細胞から生じる腫瘍数を減少させる。
【００１０】
細胞質チロシンキナーゼドメインを除去するために切断されたが、膜アンカーを保持しているＦｌｋ−１、Ｆｌｔ−１、マウスＫＤＲ受容体相同体のＶＥＧＦ結合構成物のウィルス発現は、恐らく膜貫通内皮細胞ＶＥＧＦ受容体によるヘテロ二量体形成の優勢な負の機構によりマウスにおける移植可能なグリア芽細胞腫の増殖を実質的に無効にする。ヌードマウスにおける固形腫瘍として通常は増殖する胎児幹細胞は、両ＶＥＧＦ対立遺伝子がノックアウトされると検出性の腫瘍を生じない。これらのデータをあわせると、固形腫瘍の増殖においてＶＥＧＦの役割が示されている。ＫＤＲまたはＦｌｔ−１の阻害は、病的血管新生に関係しており、腫瘍増殖が血管新生に依存していることが知られていることから、これらの受容体は、血管新生が、病態全体、例えば炎症、糖尿病性網膜症血管新生の一部である疾患、ならびに種々の形態の癌の治療に有用である（Ｗｅｉｄｎｅｒら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．、３２４巻、１〜８頁、１９９１年）。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オンは、チロシンキナーゼ阻害剤として有用であることが以前に報告されていたが（２００１年４月２６日公表のＷＯ第０１／２９０２５号を参照）、保存時に熱的安定性を有する本化合物の特に経口で有効な溶解形態を、患者に容易に投与できる化合物形態の必要性が依然として存在している。したがって、チロシンキナーゼ類のシグナルトランスダクションを特異的に阻害、制御および／または調整する化合物塩の固体形態の同定が望ましく、また本発明の目的でもある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、受容体タイプおよび非受容体タイプ双方のチロシンキナーゼ類のシグナルトランスダクションを阻害、調整および／または制御できる３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン（化合物１）塩酸塩の固体形態に関する。
【００１３】
【化１】
2005528400.tif 000002
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン（化合物１−１１）は、チロシンキナーゼシグナルトランスダクションの阻害剤であり、特にキナーゼＫＤＲを阻害する。化合物１−１１の塩基性ピペラジン窒素は、種々の酸で処理すると容易に塩を形成する。このような塩としては、限定はしないが、メシル酸塩、酒石酸塩、塩酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、臭化水素酸塩、マレイン酸塩、硫酸塩およびベシル酸塩が挙げられる。化合物１−１１の塩酸塩についての研究により、明らかに異なる５種の固体形態、形態Ａ、Ｂ、Ｃ、ＤおよびＥが明らかとなった。
【００１５】
化合物１の塩酸塩の形態Ａ、ＢおよびＥは無水体であるが、形態ＣおよびＤは水和物であることが決定された。化合物１の塩酸塩の形態Ａ、ＣおよびＤは結晶形態であるが、形態ＢおよびＥは、内容物が部分的に非晶形であることがさらに決定された。固体のこのような部分的結晶形態、部分的非晶形態は、多型形態と呼ぶことができる。用語の「多型形態」は、化合物の種々の結晶形態、多型形態および非晶形態を記載するために使用することもできる。
【００１６】
本発明の一実施形態は、３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の形態Ａにより例示される。形態Ａは、６．７６、８．０９、９．９５、１２．０７、１２．８５、１３．７３、１４．３６、１４．８５、１５．２１、１６．０６、１６．３４、１６．７８、１７．２５、１８．２９、１８．８８、１９．１３、１９．７２、２０．３４、２０．７４、２１．５５、２２．３５、２４．０１、２４．２４、２５．１９、２５．５４、２６．８６、２８．７７および３０．２３の回折角を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする結晶形態であり、さらに１分間当たり１０℃の速度で２９５．２９℃の融解吸熱を特徴とする。
【００１７】
本発明の他の実施形態は、３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の形態Ｂにより例示される。形態Ｂは、６．７６、８．１２、１０．２１、１２．１１、１２．８８、１３．７７、１４．６５、１５．０１、１５．２３、１６．０９、１６．３６、１６．９５、１７．２８、１７．６５、１８．３１、１９．０６、１９．６６、２０．８４、２１．４７、２２．２１、２３．０７、２４．０５、２４．３２、２５．１９、２５．５８、２６．００、２６．９６、２８．２２および２８．８４の回折角を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする多型形態であり、さらに１分間当たり１０℃の速度で２８４．９０℃の融解吸熱を特徴とする。
【００１８】
さらなる実施形態は、３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の形態Ｄである。形態Ｄは、５．１９、９．５４、１０．３２、１２．９９、１４．７９、１５．１４、１６．５０、１７．１０、１７．４７、１８．２８、１９．１２、１９．５０、２０．７０、２１．００、２１．５６、２２．２７、２３．２４、２４．４２、２５．３５、２６．０６、２６．９９、２８．２８および３１．８７の回折角を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする結晶形態であり、さらに１分間当たり１０℃の速度で２７３．８℃の融解吸熱を特徴とする。
【００１９】
他の実施形態は、３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の形態Ｅである。形態Ｅは、７．６０、９．３５０、１１．２２、１５．１２、１６．０１、１６．８６、１８．８５、１９．４６、２０．１０、２１．７３、２３．０７、２３．７０、２４．３５および２５．９９の回折角を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする多型形態であり、さらに１分間当たり１０℃の速度で２９２．６℃の融解吸熱を特徴とする。
【００２０】
３−｛５−［４−（２−ヒドロキシ−エタノイル）−ピペラジン−１−イルメチル］−１Ｈ−インドール−２−イル｝−１Ｈ−キノリン−２−オンの遊離塩基または３−｛５−［４−（２−ヒドロキシ−エタノイル）−ピペラジン−１−イルメチル］−１Ｈ−インドール−２−イル｝−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩のいずれかで出発して、種々の形態の３−｛５−［４−（２−ヒドロキシ−エタノイル）−ピペラジン−１−イルメチル］−１Ｈ−インドール−２−イル｝−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩を調製する方法は本発明の範囲内に含まれる。
【００２１】
形態Ａは、ＤＭＳＯ中、３−｛５−［４−（２−ヒドロキシ−エタノイル）−ピペラジン−１−イルメチル］−１Ｈ−インドール−２−イル｝−１Ｈ−キノリン−２−オンの遊離塩基を濃ＨＣｌ水で処理することにより調製される。この方法で調製された形態Ａは、濾過により単離でき、特に窒素掃流下、無水条件下で乾燥する。
【００２２】
形態Ｂは、ＴＨＦ中、３−｛５−［４−（２−ヒドロキシ−エタノイル）−ピペラジン−１−イルメチル］−１Ｈ−インドール−２−イル｝−１Ｈ−キノリン−２−オンの遊離塩基を濃ＨＣｌ水で処理することにより調製される。この方法で調製された形態Ｂは、濾過により単離でき、特に窒素掃流下、無水条件下で乾燥する。
【００２３】
形態Ｄは、１：１アセトニトリル／水または１：１アセトン／水から形態Ａの再結晶により調製される。この方法で調製された形態Ｄは、濾過により単離できる。
【００２４】
形態Ｅは、酢酸から形態Ａの再結晶により調製される。この方法で調製された形態Ｅは、濾過により単離できる。
【００２５】
また、本発明の多型形態または結晶形態および製薬上許容できる担体を含んでなる製薬組成物は、本請求項の範囲内に含まれる。本発明はまた、開示された当該多型形態または結晶形態の治療有効量を癌の処置を必要とする哺乳動物に投与することを含んでなる前記哺乳動物において癌を治療または予防する方法を包含する。治療する癌は、脳、泌尿生殖器、リンパ系、胃、喉頭および肺の癌から選択されることが好ましい。好ましい癌形態の他の組は、組織球性リンパ腫、肺腺癌、小細胞肺癌、膵癌、グリア芽細胞腫および乳癌である。
【００２６】
化合物１−１１塩酸塩の多型形態または結晶形態の治療有効量を、血管新生が関係する疾患の処置を必要とする哺乳動物に投与することを含んでなる、血管新生が関係する疾患を治療または予防する方法も含まれる。血管新生が関係するような疾患は、網膜血管新生、糖尿病性網膜症、加齢関連黄斑変性などの眼疾患である。
【００２７】
化合物１−１１塩酸塩の多型形態または結晶形態の治療有効量を、炎症性疾患の処置を必要とする哺乳動物に投与することを含む、炎症性疾患を治療または予防する方法も本発明の範囲内に含まれる。このような炎症性疾患の例は、リウマチ様関節炎、乾癬、接触性皮膚炎、遅延型過敏性反応などである。
【００２８】
化合物１−１１塩酸塩の多型形態の治療有効量を、チロシンキナーゼ依存性疾患または病態の処置を必要とする哺乳動物患者に投与することを含む、哺乳動物におけるチロシンキナーゼ依存性疾患または病態を治療または予防する方法も含まれる。治療量は、特定の疾患によって変わり、過度の実験なしで当業技術者に認識できる。
【００２９】
化合物１塩酸塩の多型形態または結晶形態の治療有効量を、網膜血管新生の処置を必要とする哺乳動物に投与することを含んでなる、網膜血管新生を治療または予防する方法もまた、本発明により包含される。糖尿病性網膜症および加齢関連黄斑変性などの眼疾患を治療または予防する方法もまた、本発明の一部である。リウマチ様関節炎、乾癬、接触性皮膚炎、遅延型過敏性反応などの炎症性疾患を治療または予防する方法、ならびに骨肉腫、変形性関節炎、およびくる病から選択される骨関連病態の治療法または予防法もまた本発明の範囲内に含まれる。本発明はまた、
１）エストロゲン受容体モジュレーター、
２）アンドロゲン受容体モジュレーター、
３）レチノイド受容体モジュレーター、
４）細胞毒性剤、
５）抗増殖剤、
６）プレニル−蛋白トランスフェラーゼ阻害剤、
７）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、
８）ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、
９）逆転写酵素阻害剤、および
１０）その他の血管新生阻害剤、から選択される第２の化合物と組み合わせて当該請求の範囲に記載されている多型形態または結晶形態の使用を考慮している。
【００３０】
好ましい血管新生阻害剤は、チロシンキナーゼ阻害剤、上皮細胞誘導成長因子阻害剤、線維芽細胞誘導成長因子阻害剤、血小板誘導成長因子阻害剤、ＭＭＰ（マトリックスメタロプロテアーゼ）阻害剤、インテグリンブロッカー、インターフェロン−α、インターロイキン−１２、ポリ硫酸ペントサン、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、カルボキシアミドトリアゾール、コンブレタ−スタチンＡ−４、スクワラミン、６−Ｏ−クロロアセチル−カルボニル）−フマギロール、サリドマイド、アンジオスタチン、トロポニン−１、およびＶＥＧＦに対する抗体からなる群から選択される。好ましいエストロゲン受容体モジュレーターは、タモキシフェンおよびラロキシフェンである。
【００３１】
放射線療法と組み合わせておよび／または
１）エストロゲン受容体モジュレーター、
２）アンドロゲン受容体モジュレーター、
３）レチノイド受容体モジュレーター、
４）細胞毒性剤、
５）抗増殖剤、
６）プレニル−蛋白トランスフェラーゼ阻害剤、
７）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、
８）ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、
９）逆転写酵素阻害剤、および
１０）その他の血管新生阻害剤、から選択される化合物と組み合わせて、化合物１−１１塩酸塩の
多型形態または結晶形態の治療有効量を投与することを含む、癌を治療する方法もまた、請求項の範囲内に含まれる。
【００３２】
また、本発明のさらに他の実施形態は、パクリタキセルまたはトラスツズマブと組み合わせて化合物１−１１塩酸塩の多型形態または結晶形態の治療有効量を投与することを含む、癌を治療する方法である。
【００３３】
化合物１−１１塩酸塩の多型形態または結晶形態の治療有効量を投与することを含む、脳虚血事象後の組織損傷を軽減または予防する方法も本発明の範囲内である。
【００３４】
本発明のこれらおよび他の態様は、本明細書に含まれた教示から明らかとなろう。
【００３５】
「チロシンキナーゼ依存性疾患または病態」は、１種または複数のチロシンキナーゼ類の活性に依存する病態を言う。チロシンキナーゼは、増殖、接着や遊走、および分化などの種々の細胞活動のシグナルトランスダクション経路に直接的または間接的に関与している。チロシンキナーゼ活性を伴う疾患としては、腫瘍細胞の増殖、固形腫瘍増殖を支える病的新血管新生、眼新血管新生（糖尿病性網膜症および加齢関連黄斑変性など）、および炎症（乾癬、リウマチ様関節炎など）が挙げられる。
【００３６】
化合物１−１１は、互変異性体として存在でき、たとえ１つの互変異性構造だけが描かれていても、双方の互変異性体が本発明の範囲に包含されることが意図されている。例えば、下記の化合物Ｉに対するいずれの請求項も互変異性構造ＩＩを含むこと、またその逆、ならびにそれらの混合物を含むことが解される。
【００３７】
【化２】
2005528400.tif 000003
【００３８】
有用性
当該の多型形態または結晶形態は、チロシンキナーゼ依存性疾患の治療において哺乳動物、特にヒトに対する薬剤として有用である。このような疾患としては、腫瘍細胞の増殖、固形腫瘍増殖を支える病的新血管新生（または血管新生）、眼新血管新生（糖尿病性網膜症および加齢関連黄斑変性など）、および炎症（乾癬、リウマチ様関節炎など）が挙げられる。動物における薬物動態研究に基づいて、請求された当該塩類は、対応する遊離塩基と比較して予想外に優れた経口活性プロフィルを有しており、したがって、特に経口投与に適している。しかしながら、これらは、本明細書中に記載したような他の経路により投与することができる。
【００３９】
本発明の多型形態または結晶形態は、癌治療における使用のために患者に投与できる。当該多型形態は、腫瘍血管新生を阻害し、それによって腫瘍増殖に影響を与える（Ｊ．Ｒａｋら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、５５巻：４５７５〜４５８０頁、１９９５年）。当該塩の抗血管新生の性質はまた、網膜血管新生に関連したある一定形態の失明の治療に有用である。
【００４０】
開示された多型形態または結晶形態は、発癌性骨軟化症としても知られている骨肉腫、変形関節炎、およびくる病などのある一定の骨関連病態の治療にも有用である。（Ｈａｓｅｇａｗａら、Ｓｋｅｌｅｔａｌ  Ｒａｄｉｏｌ．、２８巻、４１〜４５頁、１９９９年；Ｇｅｒｂｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、５巻、第６号、６２３〜６２８頁、１９９９年６月）。また、ＶＥＧＦは、成熟破骨細胞に発現されたＫＤＲ／Ｆｌｋ−１を介して破骨細胞性骨吸収を直接促進することから（ＦＥＢＳ  Ｌｅｔ．４７３巻：１６１〜１６４頁（２０００）；Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、１４１巻：１６６７頁（２０００））、当該塩は、骨粗鬆症およびページェット病などの骨吸収に関連した病態の治療および予防にも有用である。
【００４１】
当該請求の範囲に記載されている多型形態または結晶形態は、脳浮腫、組織損傷、および虚血後の再灌流傷害を軽減することにより、脳卒中などの脳虚血事象後に発生する組織損傷を軽減または予防するために使用することもできる。（Ｄｒｕｇ  Ｎｅｗｓ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔ  １１巻：２６５〜２７０頁（１９９８）；Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１０４巻：１６１３〜１６２０頁（１９９９））。
【００４２】
本発明の多型形態または結晶形態は、標準的な製薬実践に従って単独で、または好ましくは、製薬組成物中に製薬上許容できる担体または希釈剤と組み合わせて、場合によってはミョウバンなどの知られたアジュバントと組み合わせて哺乳動物、好ましくはヒトに投与できる。
【００４３】
本発明による多型形態または結晶形態の経口使用に関して、化合物は、例えば、錠剤またはカプセルの形態で、または水性溶液または懸濁液として投与できる。経口使用の錠剤の場合、通常使用される担体としては、乳糖およびコーンスターチが挙げられ、ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤が通常添加される。カプセル形態における経口投与に関して、有用な希釈剤としては、乳糖および乾燥コーンスターチが挙げられる。水性懸濁液が経口使用に必要な場合、有効成分を、乳剤および懸濁剤と組み合わせる。所望の場合、ある一定の甘味剤および／または風味剤を添加してもよい。
【００４４】
また、本発明の多型形態または結晶形態は、治療されている病態に対する特定の有用性のために選択される他のよく知られた治療薬と共投与できる。例えば骨関連障害の場合、有用であると考えられる組合せとしては、アレンドロネートおよびリセドロネートなどの抗吸収性ビホスホネート類；αｖβ３アンタゴニストなどのインテグリンブロッカー類（さらに下記で定義されている）；ＰＲＥＭＰＲＯ（登録商標）、ＰＲＥＭＡＲＩＮ（登録商標）、およびＥＮＤＯＭＥＴＲＩＯＮ（登録商標）などのホルモン置換療法に用いられる共役エストロゲン類；ラロキシフェン、ドロロキシフェン、ＣＰ−３３６，１５６（Ｐｆｉｚｅｒ）およびラソフォキシフェンなどの選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）類；カテスピンＫ阻害剤；およびＡＴＰプロトンポンプ阻害剤との組合せが挙げられる。
【００４５】
また、当該多型形態または結晶形態は、知られた抗癌剤との併用においても有用である。このような知られた抗癌剤としては、以下のものが挙げられる：エストロゲン受容体モジュレーター類、アンドロゲン受容体モジュレーター類、レチノイド受容体モジュレーター類、細胞毒性剤、抗増殖剤、プレニル−蛋白トランスフェラーゼ阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、逆転写酵素阻害剤、および他の血管新生阻害剤。
【００４６】
「エストロゲン受容体モジュレーター」は、機構にかかわらず、受容体に対するエストロゲンの結合を妨害、または阻害する化合物を言う。エストロゲン受容体モジュレーターの例としては、限定はしないが、タモキシフェン、ラロキシフェン、イドキシフェン、ＬＹ３５３３８１、ＬＹ１１７０８１、トレミフェン、フルベストラント、４−［７−（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ−４−メチル−２−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３−イル）−フェニル−２，２−ジメチルプロパノエート、４，４’−ジヒドロキシベンゾフェノン−２，４−ジニトロフェニル−ヒドラゾン、およびＳＨ６４６が挙げられる。
【００４７】
「アンドロゲン受容体モジュレーター」は、機構にかかわらず、受容体に対するアンドロゲンの結合を妨害、または阻害する化合物を言う。アンドロゲン受容体モジュレーターの例としては、フィナステリドおよび他の５α−レダクターゼ阻害剤、ニルタミド、フルタミド、ビカルタミド、リアロゾール、および酢酸アビラテロンが挙げられる。
【００４８】
「レチノイド受容体モジュレーター」は、機構にかかわらず、受容体に対するレチノイドの結合を妨害、または阻害する化合物を言う。このようなレチノイド受容体モジュレーターの例としては、ベキサロテン、トレチノイン、１３−シス−レチノイン酸、９−シス−レチノイン酸、α−ジフルオロメチルオルニチン、ＩＬＸ２３−７５５３、トランス−Ｎ−（４’−ヒドロキシフェニル）レチナミド、およびＮ−４−カルボキシフェニルレチナミドが挙げられる。
【００４９】
「細胞毒性剤」は、主に細胞の機能を直接妨害することにより細胞死をもたらすか、または細胞ミオシスを阻害または妨害する化合物を言い、アルキル化剤、腫瘍壊死因子、インターカレーター、微小管阻害剤およびトポイソメラーゼ阻害剤が挙げられる。
【００５０】
細胞毒性剤の例としては、限定はしないが、チラパジミン、セルテネフ、カケクチン、イフォスファミド、タソネルミン、ロニダミン、カルボプラチン、アルトレタミン、プレドニムスチン、ジブロモダルシトール、ラニムスチン、フォテムスチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、テモゾロミド、ヘプタプラチン、エストラムスチン、トシル酸インプロスルファン、トロホスフアミド、ニムスチン、塩化ジブロスピジウム、プミテパ、ロバプラチン、サトラプラチン、プロフィロマイシン、シスプラチン、イロフルベン、デキシホスファミド、シス−アミンジクロロ（２−メチルピリジン）白金、ベンジルグアニン、グルホスファミド、ＧＰＸ１００、（トランス、トランス、トランス）−ビス−ム−（ヘキサン−１，６−ジアミン）−ム−［ジアミン−白金（ＩＩ）］ビス［ジアミン（クロロ）白金（ＩＩ）］テトラクロリド、ジアリジニルスペルミン、砒素トリオキシド、１−（１１−ドデシルアミノ−１０−ヒドロキシウンデシル）−３，７−ジメチルキサンチン、ゾルビシン、イダルビシン、ビサントレン、ミトキサントロン、ピラルビシン、ピナフィド、バルルビシン、アムルビシン、アンチネオプラストン、３’−デアミノ−３’−モルホリノ−１３−デオキソ−１０−ヒドロキシカルミノマイシン、アンナマイシン、ガラルビシン、エリナフィド、ＭＥＮ１０７５５、および４−デメトキシ−３−デアミノ−３−アジリジニル−４−メチルスルホニル−ダウノルビシンが挙げられる。
【００５１】
微小管阻害剤の例としては、パクリタキセル、硫酸ビンデシン、３’，４’−ジデヒドロ−４’−デオキシ−８’−ノルビンカロイコブラスチン、ドセタキソール、リゾキシン、ドラスタチン、イセチオン酸ミボブリン、オーリスタチン、セマドチン、ＲＰＲ１０９８８１、ＢＭＳ１８４４７６、ビンフルニン、クリプトフィシン、２，３，４，５，６−ペンタフルオロ−Ｎ−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）エンゼンスルホンアミド、アンヒドロビンブラスチン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｌ−バリル−Ｌ−バリル−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリル−Ｌ−プロリン−ｔ−ブチルアミド、ＴＤＸ２５８、およびＢＭＳ１８８７９７が挙げられる。
【００５２】
トポイソメラーゼ阻害剤のいくつかの例として、トポテカン、ヒカプタミン、イリノテカン、ルビテカン、６−エトキシプロピオニル−３’，４’−Ｏ−エキソ−ベンジリデン−チャルトロイシン、９−メトキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−５−ニトロピラゾロ［３，４，５−ｋｌ］アクリジン−２−（６Ｈ）プロパナミン、１−アミノ−９−エチル−５−フルオロ−２，３−ジヒドロ−９−ヒドロキシ−４−メチル−１Ｈ，１２Ｈ−ベンゾ［ｄｅ］ピラノ［３’，４’：ｂ，７］インドリジノ［１，２ｂ］キノリン−１０，１３（９Ｈ，１５Ｈ）ジオン、ルルトテカン、７−［２−（Ｎ−イソプロピルアミノ）エチル］−（２０Ｓ）カンプトテシン、ＢＮＰ１３５０、ＢＮＰＩ１１００、ＢＮ８０９１５、ＢＮ８０９４２、リン酸エトポシド、テニポシド、ソブゾキサン、２’−ジメチルアミノ−２’−デオキシ−エトポシド、ＧＬ３３１、Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−９−ヒドロキシ−５，６−ジメチル−６Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］カルバゾール−１−カルボキサミド、アスラクリン、（５ａ，５ａＢ，８ａａ，９ｂ）−９−［２−［Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−Ｎ−メチルアミノ］エチル］−５−［４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル］−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキソヒドロフロ（３’，４’：６，７）ナフト（２，３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６−オン、２，３−（メチレンジオキシ）−５−メチル−７−ヒドロキシ−８−メトキシベンゾ［ｃ］−フェナントリジニウム、６，９−ビス［（２−アミノエチル）アミノ］ベンゾ［ｇ］イソキノリン−５，１０−ジオン、５−（３−アミノプロピルアミノ）−７，１０−ジヒドロキシ−２−（２−ヒドロキシエチルアミノメチル）−６Ｈ−ピラゾロ［４，５，１−ｄｅ］アクリジン−６−オン、Ｎ−［１−［２（ジエチルアミノ）エチルアミノ］−７−メトキシ−９−オキソ−９Ｈ−チオキサンテン−４−イルメチル］ホルムアミド、Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）アクリジン−４−カルボキサミド、６−［［２−（ジメチルアミノ）エチル］アミノ］−３−ヒドロキシ−７Ｈ−インデノ［２，１−ｃ］キノリン−７−オン、およびジメスナがある。
【００５３】
「抗増殖剤」としては、Ｇ３１３９、ＯＤＮ６９８、ＲＶＡＳＫＲＡＳ、ＧＥＭ２３１およびＩＮＸ３００１などのアンチセンスＲＮＡおよびＤＮＡオリゴヌクレオチド、およびエノシタビン、カルモフル、テガフル、ペントスタチン、ドキシフルリジン、トリメトレキサート、フルダラビン、カペシタビン、ガロシタビン、シタラビンオクホスファート、フォステアビンナトリウム水和物、ラルチトレキシド、パルチトレキシド、エミテフル、チアゾフリン、デシタビン、ノラトレキシド、ペメトレキシド、ネルザラビン、２’−デオキシ−２’−メチリデンシチジン、２’−フルオロメチレン−２’−デオキシシチジン、Ｎ−［５−（２，３−ジヒドロ−ベンゾフリル）スルホニル］−Ｎ’−（３，４−ジクロロフェニル）尿素、Ｎ６−［４−デオキシ−４−［Ｎ２−［２（Ｅ），４（Ｅ）−テトラデカジエノイル］グリシルアミノ］−Ｌ−グリセロ−Ｂ−Ｌ−マンノ−ヘプトピラノシル］アデニン、アプリジン、エクテイナシジン、トロキサシタビン、４−［２−アミノ−４−オキソ−４，６，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピリミジノ［５，４−ｂ］［１，４］チアジン−６−イル−（Ｓ）−エチル］−２，５−チエノイル−Ｌ−グルタミン酸、アミノプテリン、５−フルオロウラシル、アラノシン、１１−アセチル−８−（カルバモイルオキシメチル）−４−ホルミル−６−メトキシ−１４−オキサ−１，１１−ジアザテトラシクロ（７．４．１．０．０）−テトラデカ−２，４，６−トリエン−９−イル酢酸エステル、スウェインソニン、ロメトレキソール、デキスラゾキサン、メチオニナーゼ、２’−シアノ−２’−デオキシ−Ｎ４−パルミトイル−１−Ｂ−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン、および３−アミノピリジン−２−カルボキサルデヒドチオセミカルバゾンなどの抗代謝剤が挙げられる。「抗増殖剤」としてはまた、トラスツズマブなどの「血管新生阻害剤」に掲げられたもの以外の成長因子、および組み換えウィルス媒介遺伝子転移を経て送達できるｐ５３などの腫瘍抑制遺伝子に対するモノクローナル抗体が挙げられる（例えば、米国特許第６，０６９，１３４号を参照）。
【００５４】
「ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤」とは、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼの阻害剤を言う。ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼに対する阻害活性を有する化合物は、当業界によく知られているアッセイを用いることにより容易に同定できる。例えば、米国特許第４，２３１，９３８号の６欄、およびＷＯ第８４／０２１３１号の３０〜３３頁に記載または引用されているアッセイを参照されたい。用語の「ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤」および「ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの阻害剤」は、本明細書に用いられる場合、同じ意味を有する。
【００５５】
使用し得るＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の例としては、限定はしないが、ロバスタチン（ＭＥＶＡＣＯＲ（登録商標）、米国特許第４，２３１，９３８号、米国特許第４，２９４，９２６および米国特許第４，３１９，０３９号を参照）；シンバスタチン（ＺＯＣＯＲ（登録商標）、米国特許第４，４４４，７８４号、米国特許第４，８２０，８５０号および米国特許第４，９１６，２３９号を参照）；プラバスタチン（ＰＲＡＶＡＣＨＯＬ（登録商標）、米国特許第４，３４６，２２７号、米国特許第４，５３７，８５９号、米国特許第４，４１０，６２９号、米国特許第５，０３０，４４７号および米国特許第５，１８０，５８９号を参照）；フルバスタチン（ＬＥＳＣＯＬ（登録商標）、米国特許第５，３５４，７７２号、米国特許第４，９１１，１６５号、米国特許第４，９２９，４３７号、米国特許第５，１８９，１６４号、米国特許第５，１１８，８５３号、米国特許第５，２９０，９４６号および米国特許第５，３５６，８９６号を参照）；アトルバスタチン（ＬＩＰＩＴＯＲ（登録商標）、米国特許第５，２７３，９９５号、米国特許第４，６８１，８９３号、米国特許第５，４８９，６９１号および米国特許第５，３４２，９５２号を参照）；およびセリバスタチン（リバスタチンおよびＢＡＹＣＨＯＬ（登録商標）としても知られている；米国特許第５，１７７，０８０号を参照）が挙げられる。これらおよび本法に使用できる追加のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の構造式は、Ｍ．Ｙａｌｐａｎｉ、「Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  Ｌｏｗｅｒｉｎｇ  Ｄｒｕｇｓ」、Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＆  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ、８５〜８９頁（１９９６年２月５日）の８７頁および米国特許第４，７８２，０８４号および米国特許第４，８８５，３１４号に記載されている。本明細書に用いられる用語のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤はすべて、製薬上許容できるラクトン体および開環酸体（すなわち、ラクトン環が開いて遊離酸を形成している）ならびにＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害活性を有する化合物の塩およびエステル体を含み、したがって、このような塩類、エステル類、開環酸体およびラクトン体の使用は、本発明の範囲内に含まれる。ラクトン部分およびその対応する開環酸体の図は、構造ＩおよびＩＩとして下記に示す。
【００５６】
【化３】
2005528400.tif 000004
開環酸体が存在できるＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤において、塩およびエステル体は、好ましくは開環酸から形成でき、このような形態はすべて、本明細書に使用される用語「ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤」の意味の内に含まれる。ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤は、ロバスタチンおよびシンバスタチンから選択されることが好ましく、最も好ましくはシンバスタチンである。ここで、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤に関して用語の「製薬上許容できる塩類」は、本発明に使用される化合物の非毒性塩を意味し、これらは一般に、遊離酸と、好適な有機塩基または無機塩基とを反応させることにより調製され、特にナトリウム、カリウム、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、亜鉛およびテトラメチルアンモニウムなどのカチオン類から形成されるもの、ならびにアンモニア、エチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、リジン、アルギニン、オルニチン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、ジエタノールアミン、プロカイン、Ｎ−ベンジルフェネチルアミン、１−ｐ−クロロベンジル−２−ピロリジン−１’−イル−メチルベンズイミダゾール、ジエチルアミン、ピペラジン、およびトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンなどのアミン類から形成される塩がある。さらに、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の塩形態のさらなる例として、限定はしないが、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、エデト酸カルシウム塩、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシレート（ｅｄｉｓｙｌａｔｅ）、エストレート、エシレート、フマール酸塩、グルセプテート、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イソチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオネート（ｌａｃｔｏｂｉｏｎａｔｅ）、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチルスルホン酸塩、ムチン酸塩、ナプシレート（ｎａｐｓｙｌａｔｅ）、硝酸塩、オレイン酸塩、蓚酸塩、パモエート、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクレート（ｔｅｏｃｌａｔｅ）、トシル酸塩、トリエチオダイド（ｔｒｉｅｔｈｉｏｄｉｄｅ）、および吉草酸塩が挙げられる。
【００５７】
記載されたＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤化合物のエステル誘導体は、プロドラッグとして作動でき、温血動物の血流に吸収されると、薬物形態を放出するような様式で開裂でき、薬物の治療有効性を改善させる。
【００５８】
「プレニル−蛋白トランスフェラーゼ阻害剤」とは、ファルネシル−蛋白トランスフェラーゼ（ＦＰＴ酵素）、ゲラニルゲラニル−蛋白トランスフェラーゼタイプＩ（ＧＧＰＴ酵素−Ｉ）、およびゲラニルゲラニル−蛋白トランスフェラーゼタイプ−ＩＩ（ＧＧＰＴ酵素−ＩＩ、Ｒａｂ  ＧＧＰＴ酵素とも呼ばれる）など、プレニル−蛋白トランスフェラーゼ酵素のいずれか１種または任意の組合せを阻害する化合物を指す。プレニル−蛋白トランスフェラーゼ阻害化合物の例としては、（±）−６−［アミノ（４−クロロフェニル）（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）メチル］−４−（３−クロロフェニル）−１−メチル−２（１Ｈ）−キノリノン、（−）−６−［アミノ（４−クロロフェニル）（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）メチル］−４−（３−クロロフェニル）−１−メチル−２（１Ｈ）−キノリノン、（＋）−６−［アミノ（４−クロロフェニル）（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）メチル］−４−（３−クロロフェニル）−１−メチル−２（１Ｈ）−キノリノン、５（Ｓ）−ｎ−ブチル−１−（２，３−ジメチルフェニル）−４−［１−（４−シアノベンジル）−５−イミダゾリルメチル］−２−ピペラジノン、（Ｓ）−１−（３−クロロフェニル）−４−［１−（４−シアノベンジル）−５−イミダゾリルメチル］−５−［２−（エタンスルホニル）メチル）−２−ピペラジノン、５（Ｓ）−ｎ−ブチル−１−（２−メチルフェニル）−４−［１−（４−シアノベンジル）−５−イミダゾリルメチル］−２−ピペラジノン、１−（３−クロロフェニル）−４−［１−（４−シアノベンジル）−２−メチル−５−イミダゾリルメチル］−２−ピペラジノン、１−（２，２−ジフェニルエチル）−３−［Ｎ−（１−（４−シアノベンジル）−１Ｈ−イミダゾール−５−イルエチル）カルバモイル］ピペリジン、４−｛５−［４−ヒドロキシメチル−４−（４−クロロピリジン−２−イルメチル）−ピペリジン−１−イルメチル］−２−メチルイミダゾール−１−イルメチル｝ベンゾニトリル、４−｛５−［４−ヒドロキシメチル−４−（３−クロロベンジル）−ピペリジン−１−イルメチル］−２−メチルイミダゾール−１−イルメチル｝ベンゾニトリル、４−｛３−［４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）ベンジル］−３Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル｝ベンゾニトリル、４−｛３−［４−（５−クロロ−２−オキソ−２Ｈ−［１，２’］ビピリジン−５’−イルメチル］−３Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル｝ベンゾニトリル、４−｛３−［４−（２−オキソ−２Ｈ−［１，２’］ビピリジン−５’−イルメチル］−３Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル｝ベンゾニトリル、４−［３−（２−オキソ−１−フェニル−１，２−ジヒドロピリジン−４−イルメチル）−３Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル｝ベンゾニトリル、１８，１９−ジヒドロ−１９−オキソ−５Ｈ，１７Ｈ−６，１０：１２，１６−ジメテノ−１Ｈ−イミダゾ［４，３−ｃ］［１，１１，４］ジオキサアザシクロ−ノナデシン−９−カルボニトリル、（±）−１９，２０−ジヒドロ−１９−オキソ−５Ｈ−１８，２１−エタノ−１２，１４−エテノ−６，１０−メテノ−２２Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾ［４，３−ｋ］［１，６，９，１２］オキサトリアザ−シクロオクタデシン−９−カルボニトリル、１９，２０−ジヒドロ−１９−オキソ−５Ｈ，１７Ｈ−１８，２１−エタノ−６，１０：１２，１６−ジメテノ−２２Ｈ−イミダゾ［３，４−ｈ］［１，８，１１，１４］オキサトリアザシクロエイコシン−９−カルボニトリル、および（±）−１９，２０−ジヒドロ−３−メチル−１９−オキソ−５Ｈ−１８，２１−エタノ−１２，１４−エテノ−６，１０−メテノ−２２Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾ［４，３−ｋ］［１，６，９，１２］オキサ−トリアザシクロオクタデシン−９−カルボニトリルが挙げられる。
【００５９】
プレニル−蛋白トランスフェラーゼ阻害剤の他の例は、以下の刊行物および特許に見ることができる：ＷＯ第９６／３０３４３号、ＷＯ第９７／１８８１３号、ＷＯ第９７／２１７０１号、ＷＯ第９７／２３４７８号、ＷＯ第９７／３８６６５号、ＷＯ第９８／２８９８０号、ＷＯ第９８／２９１１９号、ＷＯ第９５／３２９８７号、米国特許第５，４２０，２４５号、米国特許第５，５２３，４３０号、米国特許第５，５３２，３５９号、米国特許第５，５１０，５１０号、米国特許第５，５８９，４８５号、米国特許第５，６０２，０９８号、欧州特許公報第０  ６１８  ２２１号、欧州特許公報第０  ６７５  １１２号、欧州特許公報第０  ６０４  １８１号、欧州特許公報第０  ６９６  ５９３号、ＷＯ第９４／１９３５７号、ＷＯ第９５／０８５４２号、ＷＯ第９５／１１９１７号、ＷＯ第９５／１２６１２号、ＷＯ第９５／１２５７２号、ＷＯ第９５／１０５１４号、米国特許第５，６６１，１５２号、ＷＯ第９５／１０５１５号、ＷＯ第９５／１０５１６号、ＷＯ第９５／２４６１２号、ＷＯ第９５／３４５３５号、ＷＯ第９５／２５０８６号、ＷＯ第９６／０５５２９号、ＷＯ第９６／０６１３８号、ＷＯ第９６／０６１９３号、ＷＯ第９６／１６４４３号、ＷＯ第９６／２１７０１号、ＷＯ第９６／２１４５６号、ＷＯ第９６／２２２７８号、ＷＯ第９６／２４６１１号、ＷＯ第９６／２４６１２号、ＷＯ第９６／０５１６８号、ＷＯ第９６／０５１６９号、ＷＯ第９６／００７３６号、米国特許第５，５７１，７９２号、ＷＯ第９６／１７８６１号、ＷＯ第９６／３３１５９号、ＷＯ第９６／３４８５０号、ＷＯ第９６／３４８５１号、ＷＯ第９６／３００１７号、ＷＯ第９６／３００１８号、ＷＯ第９６／３０３６２号、ＷＯ第９６／３０３６３号、ＷＯ第９６／３１１１１号、ＷＯ第９６／３１４７７号、ＷＯ第９６／３１４７８号、ＷＯ第９６／３１５０１号、ＷＯ第９７／００２５２号、ＷＯ第９７／０３０４７号、ＷＯ第９７／０３０５０号、ＷＯ第９７／０４７８５号、ＷＯ第９７／０２９２０号、ＷＯ第９７／１７０７０号、ＷＯ第９７／２３４７８号、ＷＯ第９７／２６２４６号、ＷＯ第９７／３００５３号、ＷＯ第９７／４４３５０号、ＷＯ第９８／０２４３６号、および米国特許第５，５３２，３５９号。血管新生に対するプレニル−蛋白トランスフェラーゼ阻害剤の役割の例に関しては、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊ．ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ、３５巻、第９号、１３９４〜１４０１頁（１９９９）を参照されたい。
【００６０】
ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤の例としては、アンプレナビル、アバカビル、ＣＧＰ−７３５４７、ＣＧＰ−６１７５５、ＤＭＰ−４５０、インジナビル、ネルフィナビル、チプラナビル、リトナビル、サキナビル、ＡＢＴ−３７８、ＡＧ１７７６およびＢＭＳ−２３２，６３２が挙げられる。逆転写酵素阻害剤の例としては、デラビリジン、エファビレンズ、ＧＳ−８４０、ＨＢ  Ｙ０９７、ラミブジン、ネビラピン、ＡＺＴ、３ＴＣ、ｄｄＣおよびｄｄＩが挙げられる。
【００６１】
「血管新生阻害剤」とは、機構のいかんにかかわらず、新たな血管形成を阻害する化合物を称す。血管新生阻害剤の例としては、限定はしないが、チロシンキナーゼ受容体Ｆｌｔ−１（ＶＥＧＦＲ１）およびＦｌｋ−１／ＫＤＲ（ＶＥＧＦＲ２０）の阻害剤などのチロシンキナーゼ阻害剤、上皮細胞誘導、線維芽細胞誘導、または血小板誘導成長因子の阻害剤、アスピリンおよびイブプロフェンのような非ステロイド系抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）類を含むＭＭＰ（マトリックスメタロプロテアーゼ）阻害剤、インテグリンブロッカー類、インターフェロン−α、インターロイキン−１２、ポリ硫酸ペントサン、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、ならびにセレコキシブおよびロフェコキシブのような選択的シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤（ＰＮＡＳ、８９巻、７３８４頁（１９９２）；ＪＮＣＩ、６９巻、４７５頁（１９８２）；Ａｒｃｈ．Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ．、１０８巻、５７３頁（１９９０）；Ａｎａｔ．Ｒｅｃ．、２３８巻、６８頁（１９９４）；ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、３７２巻、８３頁（１９９５）；Ｃｌｉｎ．Ｏｒｔｈｏｐ．３１３巻、７６頁（１９９５）；Ｊ．Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．、１６巻、１０７頁（１９９６）；Ｊｐｎ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、７５巻、１０５頁（１９９７）；Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、５７巻、１６２５頁（１９９７）；Ｃｅｌｌ、９３巻、７０５頁（１９９８）；Ｉｎｔｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．、２巻、７１５頁（１９９８）；Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７４巻、９１１６頁（１９９９））、カルボキシアミドトリアゾール、コンブレタスタチンＡ−４、スクワラミン、６−Ｏ−クロロアセチル−カルボニル）−フマギロール、サリドマイド、アンジオスタチン、トロポニン−１、アンジオテンシンＩＩアンタゴニスト（Ｆｅｒｎａｎｄｅｚら、Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．、１０５巻：１４１〜１４５頁（１９８５）を参照）、およびＶＥＧＦに対する抗体（Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１７巻、９６３〜９６８頁（１９９９年１０月）；Ｋｉｍら、Ｎａｔｕｒｅ、３６２巻、８４１〜８４４頁（１９９３）を参照）が挙げられる。
【００６２】
血管新生阻害剤の他の例としては、限定はしないが、エンドステーション、ウクレイン、ランプリナーゼ、ＩＭ８６２、５−メトキシ−４−［２−メチル−３−（３−メチル−２−ブテニル）オキシラニル］−１−オキサスピロ［２，５］オクチ−６−イル（クロロアセチル）カルバメート、アセチルジナナリン、５−アミノ−１−［［３，５−ジクロロ−４−（４−クロロベンゾイル）フェニル］メチル］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−カルボキサミド、ＣＭ１０１、スクワラミン、コンブレタスタチン、ＲＰＩ４６１０、ＮＸ３１８３８、硫酸化マンノペンタオースホスフェート、７，７−（カルボニル−ビス［イミノ−Ｎ−メチル−４，２−ピロロカルボニルイミノ［Ｎ−メチル−４，２−ピロール］−カルボニルイミノ］−ビス−（１，３−ナフタレンジスルホナート）、および３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチレン］−２−インドリノン（ＳＵ５４１６）が挙げられる。
【００６３】
上記に用いられる「インテグリンブロッカー類」とは、αｖβ３インテグリンに対する生理学的リガンド結合を選択的に拮抗、阻害、または中和する化合物、αｖβ５インテグリンに対する生理学的リガンド結合を選択的に拮抗、阻害、または中和する化合物、αｖβ３インテグリンおよびαｖβ５インテグリンの双方に対する生理学的リガンド結合を拮抗、阻害、または中和する化合物、毛細管内皮細胞上に発現する特定のインテグリン（類）の活性を拮抗、阻害、または中和する化合物を称す。この用語はまた、αｖβ６、αｖβ８、α１β１、α２β１、α５β１、α６β１およびα６β４インテグリン類のアンタゴニスト類を言う。この用語はまた、αｖβ３、αｖβ５、αｖβ６、αｖβ８、α１β１、α２β１、α５β１、α６β１およびα６β４インテグリン類の任意の組合せのアンタゴニスト類を言う。
【００６４】
チロシンキナーゼ阻害剤の具体的ないくつかの例としては、Ｎ−（トリフルオロメチルフェニル）−５−メチルイソキサゾール−４−カルボキサミド、３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル）インドリン−２−オン、１７−（アリルアミノ）−１７−デメトキシゲルダナマイシン、４−（３−クロロ−４−フルオロフェニルアミノ）−７−メトキシ−６−［３−（４−モルホリニル）プロポキシル］キナゾリン、Ｎ−（３−エチニルフェニル）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−４−キナゾリナミン、ＢＩＢＸ１３８２、２，３，９，１０，１１，１２−ヘキサヒドロ−１０−（ヒドロキシメチル）−１０−ヒドロキシ−９−メチル−９，１２−エポキシ−１Ｈ−ジインドロ［１，２，３−ｆｇ：３’，２’，１’−ｋｌ］ピロロ［３，４−ｉ］［１，６］ベンゾジアゾシン−１−オン、ＳＨ２６８、ゲニステイン、ＳＴＩ５７１、ＣＥＰ２５６３、スルホン酸４−（３−クロロフェニルアミノ）−５，６−ジメチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンメタン、４−（３−ブロモ−４−ヒドロキシフェニル）アミノ−６，７−ジメトキシキナゾリン、４−（４’−ヒドロキシフェニル）アミノ−６，７−ジメトキシキナゾリン、ＳＵ６６６８、ＳＴＩ５７１Ａ、Ｎ−４−クロロフェニル−４−（４−ピリジルメチル）−１−フタラジナミン、およびＥＭＤ１２１９７４が挙げられる。
【００６５】
癌性細胞の転移を阻止するために、当該請求の範囲に記載された多型形態または結晶形態は単独で、またはチロフィバンなどの血小板フィブリノーゲン受容体（ＧＰ  ＩＩｂ／ＩＩＩａ）アンタゴニスト類と組み合わせて有用である。腫瘍細胞は、主としてトロンビン生成を介して血小板を活性化し得る。この活性化はＶＥＧＦの放出を伴う。ＶＥＧＦの放出は、血管内皮に対する接着点における血管外遊出を増加させることによって転移を増大させる（Ａｍｉｒｋｈｏｓｒａｖｉ、Ｐｌａｔｅｌｅｔｓ  １０巻、２８５〜２９２頁、１９９９年）。したがって、本化合物は、単独で、またはＧＰ  ＩＩｂ／ＩＩＩａ）アンタゴニスト類と組み合わせて転移を阻止するために寄与できる。他のフィブリノーゲン受容体アンタゴニスト類の例としては、アブシキシマブ、エプチフィバチド、シブラフィバン、ラミフィバン、ロトラフィバン、クロモフィバン、およびＣＴ５０３５２が挙げられる。
【００６６】
一定用量に製剤される場合、このような組合せ製品は、下記用量範囲内の本発明の多型形態および認可された用量範囲内の他の製薬的に有効な単数または複数の薬剤を使用する。あるいは、組合せ製剤が不適切である場合、本発明の多型形態または結晶形態化合物は、製薬上許容できる知られた単数または複数の薬剤と連続的に使用できる。
【００６７】
本発明の化合物に関して用語の「投与」およびその変形（例えば、化合物の「投与」）とは、処置を必要とする動物の系内に多型形態化合物を導入することを意味する。本発明の多型形態が１種または複数の他の有効剤（例えば、細胞毒性剤）と組み合わせて供される場合、「投与」とその変形は、それぞれ多型形態化合物と他の薬剤の同時導入および連続導入を含んでいることが解される。
【００６８】
本明細書に使用される用語の「組成物」は、特定量に特定成分を含む製品、ならびに特定量に特定成分の組合せから直接的または間接的に生じる任意の製品を包含することが意図されている。
【００６９】
本明細書に使用される用語の「治療有効量」とは、研究者、獣医、医師または他の臨床医師により求められる、組織、系、動物またはヒトにおいて生物学的または医薬的応答を引き出す多型形態または結晶形態化合物量または製剤量を意味する。
【００７０】
用語の「癌を治療する」または「癌の治療」とは、癌病態を患っている哺乳動物への投与を言い、癌細胞を死滅させることにより癌病態を緩和する効果を言うが、癌の増殖阻害および／または転移阻害をもたらす効果も言う。
【００７１】
本発明はまた、製薬上許容できる担体または希釈剤と共に、またはそれなしで、本発明の塩の治療有効量の投与を含む、癌治療に有用な製薬組成物を包含する。本発明の好適な組成物は、本発明の化合物、および製薬上許容できる担体、例えばｐＨ７．４のレベルの生理食塩水を含んでなる水溶液を含む。
【００７２】
本発明による化合物をヒト被験者に投与する場合、毎日の投与量は、年齢、体重、および個々の患者の応答、ならびに患者症状の重症度によって一般に投与量を変えて処方医師により通常決定される。
【００７３】
１つの代表的適用において、３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の多型形態または結晶形態の好適な量が、癌治療を受けている哺乳動物に投与される。投与は、１日当たり約０．１ｍｇ／体重１ｋｇから約６０ｍｇ／体重１ｋｇの間の量、好ましくは、１日当たり０．５ｍｇ／体重１ｋｇから約４０ｍｇ／体重１ｋｇの間の量でなされる。
【００７４】
アッセイ
実施例に記載された本発明の化合物は、下記のアッセイにより試験され、キナーゼ阻害活性を有していることが判明した。他のアッセイは、文献に知られており、当業者により容易に実施できた（例えば、Ｄｈａｎａｂａｌら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５９巻：１８９〜１９７頁；Ｘｉｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４巻：９１１６〜９１２１頁；Ｓｈｅｕら、Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１８巻：４４３５〜４４４１頁；Ａｕｓｐｒｕｎｋら、Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．３８巻：２３７〜２４８頁；Ｇｉｍｂｒｏｎｅら、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．５２巻：４１３〜４２７頁；Ｎｉｃｏｓｉａら、Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  １８巻：５３８〜５４９頁を参照）。
【００７５】
Ｉ．ＶＥＧＦ受容体キナーゼアッセイ
ＶＥＧＦ受容体キナーゼ活性は、ポリグルタミン酸、チロシン、４：１（ｐＥＹ）基質への放射標識ホスフェート取り込みにより測定される。リン酸化ｐＥＹ生成物は、フィルタ膜上で捕捉し、放射標識ホスフェートの取り込みはシンチレーションカウントにより定量される。
【００７６】
材料
ＶＥＧＦ受容体キナーゼ
ヒトＫＤＲの細胞内チロシンキナーゼドメイン（Ｔｅｒｍａｎ，Ｂ．Ｉ．ら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ（１９９１）６巻、１６７７〜１６８３頁）およびＦｌｔ−１（Ｓｈｉｂｕｙａ，Ｍ．ら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ（１９９０）５巻、５１９〜５２４頁）を、グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）遺伝子融合蛋白質としてクローンした。これは、ＧＳＴ遺伝子のカルボキシ末端におけるフレーム内融合体としてＫＤＲキナーゼの細胞質ドメインをクローン化することにより達成された。溶解性組み換えＧＳＴ−キナーゼドメイン融合蛋白質は、バキュロウィルス発現ベクター（ｐＡｃＧ２Ｔ、Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）を用いてＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（Ｓｆ２１）昆虫細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）において発現させた。
【００７７】
使用された他の材料およびそれらの組成物は、以下のとおりであった：
細胞溶解用緩衝液：５０ｍＭトリスｐＨ７．４、０．５Ｍ  ＮａＣｌ、５ｍＭ  ＤＴＴ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．５％トリトンＸ−１００、１０％グリセロール、ロイペプチン、ペプスタチンおよびアプロチニンのそれぞれ１０ｍｇ／ｍＬ、および１ｍＭ  フッ化フェニルメチルスルホニル（すべてＳｉｇｍａ）。
【００７８】
洗浄用緩衝液：５０ｍＭトリスｐＨ７．４、０．５Ｍ  ＮａＣｌ、５ｍＭ  ＤＴＴ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．０５％トリトンＸ−１００、１０％グリセロール、ロイペプチン、ペプスタチンおよびアプロチニンのそれぞれ１０ｍｇ／ｍＬ、および１ｍＭ  フッ化フェニルメチルスルホニル。
【００７９】
透析用緩衝液：５０ｍＭトリスｐＨ７．４、０．５Ｍ  ＮａＣｌ、５ｍＭ  ＤＴＴ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．０５％トリトンＸ−１００、５０％グリセロール、ロイペプチン、ペプスタチンおよびアプロチニンのそれぞれ１０ｍｇ／ｍＬ、および１ｍＭ  フッ化フェニルメチルスルホニル。
【００８０】
１０×反応用緩衝液：２００ｍＭトリス、ｐＨ７．４、１．０Ｍ  ＮａＣｌ、５０ｍＭ  ＭｎＣｌ２、１０ｍＭ  ＤＴＴ、および５ｍｇ／ｍＬウシ血清アルブミン（Ｓｉｇｍａ）。
【００８１】
酵素希釈用緩衝液：５０ｍＭトリス、ｐＨ７．４、０．１Ｍ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＤＴＴ、１０％グリセロール、および１００ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡ。
【００８２】
１０×基質：７５０μｇ／ｍＬポリ（グルタミン酸、チロシン；４：１）（Ｓｉｇｍａ）。
【００８３】
停止溶液：３０％トリクロロ酢酸、０．２Ｍピロリン酸ナトリウム（両方ともＦｉｓｈｅｒ）。
【００８４】
洗浄用溶液：１５％トリクロロ酢酸、０．２Ｍピロリン酸ナトリウム。
【００８５】
フィルタプレート：ミリポア＃ＭＡＦＣ  ＮＯＢ、ＧＦ／Ｃグラスファイバー９６ウェルプレート。
【００８６】
方法
Ａ．蛋白質の精製
１．Ｓｆ２１細胞は、５個のウィルス粒子／細胞の多重感染において組み替えウィルスにより感染させ、２７℃で４８時間増殖させた。
【００８７】
２．すべてのステップを４℃で実施した。感染細胞を１０００×ｇの遠心分離により収穫し、細胞溶解用緩衝液の１／１０容量により４℃で３０分間溶解し、次いで１００，０００×ｇで１時間遠心分離を行った。次にこの上澄み液は、細胞溶解用緩衝液中で平衡にさせたグルタチオンセファロースカラム（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）を通し、５倍容量の同じ緩衝液で洗浄し、次いで５倍容量の洗浄用緩衝液で洗浄した。組み換えＧＳＴ−ＫＤＲ蛋白質を、洗浄用緩衝液／１０ｍＭ減少グルタチオン（Ｓｉｇｍａ）で溶出し、透析用緩衝液に対し透析した。
【００８８】
Ｂ．ＶＥＧＦ受容体キナーゼアッセイ
１．５μｌの阻害剤またはコントロールを５０％ＤＭＳＯ中のアッセイに加える。
【００８９】
２．５μｌの１０×反応用緩衝液、５μｌの２５ｍＭ  ＡＴＰ／１０μＣｉ［３３Ｐ］ＡＴＰ（Ａｍｅｒｓｈａｍ）および５μｌの１０×基質を含有する３５μｌの反応混合物を加える。
【００９０】
３．酵素希釈用緩衝液中、１０μｌのＫＤＲ（２５ｎＭ）の添加により反応を開始する。
【００９１】
４．室温で１５分間混合し、温置する。
【００９２】
５．５０μｌの停止溶液の添加により停止させる。
【００９３】
６．４℃で１５分間温置する。
【００９４】
７．９０μｌの分割量をフィルタプレートに移す。
【００９５】
８．洗浄用溶液により３回吸引洗浄する。
【００９６】
９．３０μｌのシンチレーションカクテルを加え、プレートをシールし、Ｗａｌｌａｃ  Ｍｉｃｒｏｂｅｔａシンチレーションカウンターでカウントする。
【００９７】
ＩＩ．ヒト臍静脈内皮細胞有糸分裂誘発アッセイ
培養液中のヒト臍静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）は、ＶＥＧＦ処理に応答して増殖するため、ＶＥＧＦ刺激に対するＫＤＲキナーゼ阻害剤の効果を定量するアッセイシステムとして使用できる。記載されたアッセイにおいて、ＶＥＧＦまたは塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）の添加２時間前に、休止ＨＵＶＥＣ単層を媒体または試験化合物により処理する。ＶＥＧＦまたはｂＦＧＦに対する有糸分裂応答は、細胞内ＤＮＡへの［３Ｈ］チミジン取り込みを測定することにより決定する。
【００９８】
材料
ＨＵＶＥＣ：一次培養単離体として凍結されたＨＵＶＥＣは、Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ社から入手する。細胞を、内皮細胞増殖培地（ＥＧＭ；Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ）中に維持し、下記の１〜５節に記載されているマイトジェンアッセイに用いる。
【００９９】
培養プレート：ＮＵＮＣＬＯＮ９６ウェルポリスチレン組織培養プレート（ＮＵＮＣ＃１６７００８）。
【０１００】
アッセイ培地：１ｍｇ／ｍＬグルコース（低グルコースＤＭＥＭ；Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ）を含有するダルベッコー修飾イーグル培地プラス１０％（ｖ／ｖ）ウシ胎仔血清（Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ）。
【０１０１】
試験化合物：試験化合物の作業用ストックを、１００％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中、所望の最終濃度の４００倍に連続希釈する。１×濃度に対する最終希釈は、細胞への添加直前にアッセイ培地中に直接製造する。
【０１０２】
１０×成長因子：ヒトＶＥＧＦ１６５（５００ｎｇ／ｍＬ；Ｒ＆Ｄシステム）およびｂＦＧＦ（１０ｎｇ／ｍＬ；Ｒ＆Ｄシステム）の溶液は、アッセイ培地中に調製する。
【０１０３】
１０×［３Ｈ］チミジン：［メチル−３Ｈ］チミジン（２０Ｃｉ／ｍｍｏｌ；Ｄｕｐｏｎｔ−ＮＥＮ）は、低グルコースＤＭＥＭ中、８０μＣｉ／ｍＬに希釈する。
【０１０４】
細胞洗浄用培地：１ｍｇ／ｍＬのウシ血清アルブミン（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ−Ｍａｎｎｈｅｉｍ）を含有するハンクス平衡塩溶液（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ）。
【０１０５】
細胞溶解液：１Ｎ  ＮａＯＨ、２％（ｗ／ｖ）Ｎａ２ＣＯ３。
【０１０６】
方法
１．ＥＧＭ中に維持されたＨＵＶＥＣ単層を、トリプシン化により収穫し、９６ウェルプレートにおいて１ウェル当たり１００μＬアッセイ培地につき４０００個の細胞密度で平板培養する。５％ＣＯ２を含有する加湿雰囲気下、細胞を３７℃で２４時間増殖制止させる。
【０１０７】
２．増殖制止培地を、媒体（０．２５％［ｖ／ｖ］ＤＭＳＯ）または試験化合物の所望の最終濃度を含有する１００μＬアッセイ培地により置き換える。判定はすべて、三重実施する。次に、試験化合物を細胞に入れるように、細胞を５％ＣＯ２、３７℃で２時間温置する。
【０１０８】
３．２時間の前処理時間後、細胞を、１０μＬ／ウェルのアッセイ培地、１０×ＶＥＧＦ溶液または１０×ｂＦＧＦ溶液のいずれかを添加することにより刺激する。次いで細胞を３７℃、５％ＣＯ２で温置する。
【０１０９】
４．増殖因子の存在下で２４時間後、１０×［３Ｈ］チミジン（１０μＬ／ウェル）を添加する。
【０１１０】
５．［３Ｈ］チミジンの添加３日後、培地を吸引により除き、細胞を、細胞洗浄用培地（４００μＬ／ウェルに次いで２００μＬ／ウェル）で２回洗浄する。次に洗浄された接着細胞を、細胞溶解液（１００μＬ／ウェル）の添加により溶解し、３７℃で３０分間温める。細胞溶解液を、１５０μＬの水を含有する７ｍＬガラス製シンチレーションバイアルに移す。シンチレーションカクテル（５ｍＬ／バイアル）を加え、細胞関連放射活性を液体シンチレーション分光法により判定する。
【０１１１】
前述のアッセイに基づくと、本発明の化合物はＶＥＧＦの阻害剤であり、したがって、眼疾患、例えば糖尿病性網膜症の治療、および癌、例えば固形腫瘍の治療などの血管新生阻害に有用である。当該化合物は、０．０１〜５．０μＭの間のＩＣ５０値で培養液中ヒト血管内皮細胞のＶＥＧＦ刺激有糸分裂を阻害する。これらの化合物はまた、関連チロシンキナーゼ類（例えば、ＦＧＦＲ１およびＳｒｃ群；Ｓｒｃキナーゼ類とＶＥＧＦＲキナーゼ類との間の関連に関しては、Ｅｌｉｃｅｉｒｉら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｅｌｌ、４巻、９１５〜９２４頁、１９９９年１２月を参照）に対して選択性を示すことができる。
【０１１２】
ＩＩＩ．ＦＬＴ−１キナーゼアッセイ
Ｆｌｔ−１は、Ｆｌｔ−１キナーゼドメインに対するＧＳＴ融合体として発現し、バキュロウィルス／昆虫細胞に発現した。Ｆｌｔ−１キナーゼ阻害活性に関して化合物をアッセイするために以下のプロトコルを使用した：
１．阻害剤を、アッセイにおいて最終希釈１：２０にするために希釈した。
【０１１３】
２．反応混合物の適量を室温で調製した：
１０×緩衝液（最終２０ｍＭトリスｐＨ７．４／０．１Ｍ  ＮａＣｌ／１ｍＭ  ＤＴＴ）
０．１Ｍ  ＭｎＣｌ２（最終５ｍＭ）
ｐＥＹ基質（７５μｇ／ｍＬ）
ＡＴＰ／［３３Ｐ］ＡＴＰ（最終２．５μＭ／ｌ  μＣｉ）
ＢＳＡ（最終５００μｇ／ｍＬ）。
【０１１４】
３．５μＬの希釈阻害剤を反応混合物に加えた。（５０％ＤＭＳＯ中５μＬの最終容量）。陽性コントロールウェルに、ブランクＤＭＳＯ（５０％）を加えた。
【０１１５】
４．３５μＬの反応混合物を、９６ウェルプレートの各ウェルに加えた。
【０１１６】
５．酵素を酵素希釈用緩衝液（４℃に保持）に希釈した。
【０１１７】
６．１０μＬの希釈酵素を、各ウェルに加え、混合した（最終５ｎＭ）。陰性コントロールウェルに、代わりに１ウェル当たり１０μＬの０．５Ｍ  ＥＤＴＡを加えた（最終１００ｍＭ）。
【０１１８】
７．次に、室温で３０分間温置を実施した。
【０１１９】
８．等容量（５０μＬ）の３０％ＴＣＡ／０．１Ｍ  ピロリン酸Ｎａの添加により停止させた。
【０１２０】
９．次いで温置を１５分間行って沈殿させた。
【０１２１】
１０．ミリポアフィルタプレートに移した。
【０１２２】
１１．１５％ＴＣＡ／０．１Ｍ  ピロリン酸Ｎａ（１回洗浄につき１２５μＬ）で３回洗浄した。
【０１２３】
１２．真空下で２〜３分間乾燥させた。
【０１２４】
１３．約２０分間フード内で乾燥させた。
【０１２５】
１４．Ｗａｌｌａｃミリポアアダプタを取り付け、５０μＬのシンチラントを各ウェルに加えてカウントした。
【０１２６】
ＩＶ．ＦＬＴ−３キナーゼアッセイ
Ｆｌｔ−３は、Ｆｌｔ−３キナーゼドメインに対するＧＳＴ融合体として発現し、バキュロウィルス／昆虫細胞に発現した。Ｆｌｔ−３キナーゼ阻害活性に化合物をアッセイするために以下のプロトコルを使用した：
１．阻害剤（アッセイにおいて最終希釈１：２０にするために）を希釈する。
【０１２７】
２．反応混合物の適量は、室温で調製する：
１０×緩衝液（最終２０ｍＭトリスｐＨ７．４／０．１Ｍ  ＮａＣｌ／１ｍＭ  ＤＴＴ）
０．１Ｍ  ＭｎＣｌ２（最終５ｍＭ）
ｐＥＹ基質（７５μｇ／ｍＬ）
ＡＴＰ／［３３Ｐ］ＡＴＰ（最終０．５μＭ／Ｌ  μＣｉ）
ＢＳＡ（最終５００μｇ／ｍＬ）。
【０１２８】
３．５μＬの希釈阻害剤を反応混合物に加える。（５０％ＤＭＳＯ中５μＬの最終容量）。陽性コントロールウェルに、ブランクＤＭＳＯ（５０％）を加える。
【０１２９】
４．３５μＬの反応混合物を、９６ウェルプレートの各ウェルに加える。
【０１３０】
５．酵素を酵素希釈用緩衝液（４℃に保持）に希釈する。
【０１３１】
６．１０μＬの希釈酵素を、各ウェルに加え、混合する（最終５〜１０ｎＭ）。陰性コントロールウェルに、代わりに１ウェル当たり１０μＬの０．５Ｍ  ＥＤＴＡを加える（最終１００ｍＭ）。
【０１３２】
７．室温で６０分間温置を実施する。
【０１３３】
８．等容量（５０μＬ）の３０％ＴＣＡ／０．１Ｍ  ピロリン酸Ｎａの添加により停止させる。
【０１３４】
９．温置を１５分間行って沈殿させる。
【０１３５】
１０．ミリポアフィルタプレートに移す。
【０１３６】
１１．１５％ＴＣＡ／０．１Ｍ  ピロリン酸Ｎａ（１回洗浄につき１２５μＬ）で３回洗浄する。
【０１３７】
１２．真空下で２〜３分間乾燥させる。
【０１３８】
１３．約２０分間フード内で乾燥させる。
【０１３９】
１４．Ｗａｌｌａｃミリポアアダプタを取り付け、５０μＬのシンチラントを各ウェルに加えてカウントする。
【０１４０】
提供された実施例は、本発明のさらなる理解を助けるために意図されている。使用される具体的な物質、種および条件は、本発明を例示するために意図され、その妥当な範囲を限定するものではない。
【０１４１】
本発明の塩を調製するために用いられた遊離塩基は、下記の手法ならびに参照として本明細書に組み込まれている、２００１年４月２６日に公表のＷＯ  ０１／２９０２５に開示されているものを使用することにより得ることができる。さらに、文献上知られている標準的な反応操作により他の手法を用いることができる。
【０１４２】
使用されるＨＰＬＣ法：
定組成法（溶解度試験のため）
カラム：        ＢＤＳ  ＨＹＰＥＳＩＬ、Ｃ１８（２５０ｍｍ×４６ｍｍ）、粒径５μｍ
カラム温度：    周囲温度
検出器：        ２３０ｎｍ（ＵＶ波長）
カラム温度：    周囲温度
流速：          １．０ｍＬ／分
注入量：        ２０μＬ
移動相：        Ａ）０．１％リン酸
Ｂ）１００％アセトニトリル
希釈剤：        ５０％アセトニトリル−ＤＩ水
勾配プロフィル：（Ａ／Ｂ）は（６０／４０）から開始し、（６０／４０）で２０分間保持。
実行時間：      ２０分
【実施例１】
【０１４３】
３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの塩酸塩（１−１１）
【０１４４】
【化４】
2005528400.tif 000005
2005528400.tif 000006
【０１４５】
（１Ｈ−インドール−５−イル）−メタノール（１−２）
１Ｈ−インドール−５−カルボン酸（１−１、２０．０１ｇ、１２４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５００ｍＬ）機械攪拌溶液に、１Ｍ−ＬＡＨのトルエン溶液（１８６ｍＬ、１８６ｍｍｏｌ、１．５当量）を周囲温度で徐々に加えた。反応混合物を１時間加熱還流し、氷でクエンチし、酢酸エチルと飽和ＮａＨＣＯ３水とに分配した。有機層をブラインで洗浄、分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）して真空濃縮した。この粗製物は、減圧下で放置すると固化した。前記粗製固体をヘキサン類（２００ｍＬ）と酢酸エチル（１０ｍＬ）に懸濁させ、一晩攪拌、濾過により採取、風乾して所望の生成物を淡褐色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．２４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、７．６２（ｓ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．２３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．２０（ｓ，１Ｈ）、６．５４（ｓ，１Ｈ）、４．７５（ｓ，２Ｈ）、１．６８（ｓ，１Ｈ）。
【０１４６】
５−（ｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−インドール−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１−３）
（１Ｈ−インドール−５−イル）−メタノール（１−２、１６．５ｇ、１１２．１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３００ｍＬ）攪拌溶液を、ジイソプロピルエチルアミン（３９ｍＬ、２２４．２ｍｍｏｌ、２当量）、塩化ｔ−ブチルジメチルシリル（１８．６ｇ、１２３．３ｍｍｏｌ、１．１当量）、および４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン（１．３７ｇ、１１．２ｍｍｏｌ、０．１当量）により引き続き周囲温度で処理した。反応混合物を、室温で３０分間攪拌、真空濃縮し、酢酸エチルと０．５Ｎ−ＨＣｌとに分配した。有機層をブラインで洗浄、分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）して真空濃縮して粗製シリルエーテルを淡褐色固体として得た。この粗製物と二炭酸ジ−ｔ−ブチル（２６．９、１２３．３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３００ｍＬ）に溶解し、４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン（１．３７ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）の存在下で２時間周囲温度で攪拌した。有機層を真空濃縮し、酢酸エチルと０．５Ｎ−ＨＣｌとに分配した。有機層をブラインで洗浄、分離、乾燥（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮して粗製オイルを得た。クロマトグラフィ（ＳｉＯ２、ヘキサン類中１０％酢酸エチル）により、５−（ｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−インドール−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１−３）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．４７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．２Ｈｚ）、７．４１（ｓ，１Ｈ）、７．１５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ）、６．４４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）、４．７２（ｓ，２Ｈ）、１．５６（ｓ，９Ｈ）、０．８４（ｓ，９Ｈ）、０．００（ｓ，６Ｈ）。
【０１４７】
５−（ｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−インドール−１−ｔ−ブチルオキシカルボニルインドール−２−ボロン酸（１−４）
５−（ｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−インドール−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１−３、３８．６ｇ、１０６．７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（４００ｍＬ）攪拌溶液に、リチウムジイソプロピルアミドのテトラヒドロフラン溶液（２Ｍ、８０．１ｍＬ、１６０．１ｍｍｏｌ、１．５当量）を−７８℃で徐々に加えた。反応混合物を同じ温度で１時間攪拌し、ホウ酸トリメチルで処理、周囲温度に温めて、酢酸エチルと０．５Ｎ−ＨＣｌとに分配した。有機層をブラインで洗浄、分離、乾燥（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮して粗製固体を得た。この粗製物をヘキサン類で粉砕、次いで濾過、風乾して所望のボロン酸体（１−４）を白色粉末として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）、７．５４（ｓ，１Ｈ）、７．４７（ｓ，１Ｈ）、７．３２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）、７．１０（ｓ，１Ｈ）、４．８２（ｓ，２Ｈ）、１．７４（ｓ，９Ｈ）、０．９５（ｓ，９Ｈ）、０．１１（ｓ，６Ｈ）。
【０１４８】
３−ヨード−１Ｈ−キノリン−２−オン（１−６）
２−クロロ−３−ヨードキノリン（１−５、３０．０ｇ）を、２５０ｍＬフラスコに秤量し、５０％酢酸水（１２５ｍＬ）中に懸濁させた。この混合物を１００℃に加熱し、粗製反応混合物のＴＬＣ分析による完了まで１６時間還流した。混合物を周囲温度に冷却してから、２００ｍＬの水で希釈した。生じた所望の生成物の懸濁液を真空濾過により単離し、次いで水（５０ｍＬ）で洗浄した。水と微量の酢酸を５時間真空除去し、所望のキノリノン体を黄褐色粉末（１−６）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１２．１３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、８．７１（ｓ，１Ｈ）、７．６５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．５４（ｍ，１Ｈ）、７．３１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．２０（ｍ，１Ｈ）。
【０１４９】
５−ヒドロキシメチル−２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−キノリン−３−イル）−インドール−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１−８）
ヨードキノリノン（１−６、１０ｇ、３６．９ｍｍｏｌ、１当量）、ボロン酸体（１−４、７．５ｇ、１８．４５ｍｍｏｌ、０．５当量）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１．７１ｇ、１．４８ｍｍｏｌ、０．０４当量）、および塩化リチウム（４．６９ｇ、１１０．７ｍｍｏｌ、３当量）のジオキサン／２Ｍ−Ｎａ２ＣＯ３水中の攪拌混合物を脱気し、ボロン酸体が薄層クロマトグラフィにより検出されなくなるまで８０℃で加熱した。ヨードキノリノン（１−６）のすべてが、完全に消費されるまで（ボロン酸体、１−４は全部で１．５当量を必要とした）、追加のボロン酸（一度に０．２当量）を反応混合物に加えた。反応混合物を酢酸エチルと飽和ＮａＨＣＯ３水とに分配した。有機層をブラインで洗浄、分離、乾燥（ＭｇＳＯ４）して真空濃縮した。粗製オイル（１−７）をテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）に溶解し、ＰＥＧボトルに移し、ＨＦ−ピリジン（１５ｍＬ）により０℃で処理し、周囲温度で１時間攪拌した。反応混合物を酢酸エチルと飽和ＮａＨＣＯ３水とに分配した。有機層をブラインで洗浄、分離、乾燥（ＭｇＳＯ４）して真空濃縮した。粗製固体を酢酸エチルとヘキサン類と共に粉砕、濾過により採取、風乾して所望の生成物（１−８）を淡黄色固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．１（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．０３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）、７．７４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．５５（ｓ，１Ｈ）、７．５２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）、７．３０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．２２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）、６．７７（ｓ，１Ｈ）、５．２１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．５Ｈｚ）、４．６０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．５Ｈｚ）、１．３５（ｓ，９Ｈ）。
【０１５０】
５−ホルミル−２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−キノリン−３−イル）−インドール−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１−９）
前活性化ＭｎＯ２（３４．５ｇ、１５当量）とアルコール体（１−８、１０．３２ｇ、１．０当量）を、１リットルフラスコに秤量し、乾燥ジクロロメタン（５００ｍＬ）に懸濁させた。反応混合物を４５℃に加熱し、薄層クロマトグラフィにより１時間後完了した。この混合物を周囲温度に冷却し、酸化マンガン（類）を真空濾過により除いた。フィルタ上の生成した酸化物のパッドを熱ＴＨＦと共に粉砕し、真空下で溶媒を濾過して酸化物からいずれの生成物をも取り出した。生じたろ液を真空濃縮して粗製アルデヒド体を黄色固体として得た。固体をメタノール（１０ｍＬ）および酢酸エチル（１５ｍＬ）と共に粉砕してから真空濾過し、純粋生成物を単離した。淡黄色アルデヒド体を真空乾燥した（１−９）。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．１５（ｓ，１Ｈ）、１０．０８（ｓ，１Ｈ）、８．２６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．５Ｈｚ）、８．２４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）、８．１５（ｓ，１Ｈ）、７．９０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５，１．５Ｈｚ）、７．７７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．５５（ｍ，１Ｈ）、７．３７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）、７．２４（ｍ，１Ｈ）、７．０１（ｓ，１Ｈ）。
【０１５１】
５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−キノリン−３−イル）−インドール−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１−１０）
アルデヒド体（１−９、２．０１ｇ、５．１５ｍｍｏｌ、１当量）およびＮ−メタンスルホニルピペラジン酢酸塩（４．６２ｇ、２０．６０ｍｍｏｌ、４当量）のジクロロエタン（４００ｍＬ）攪拌溶液に、酢酸（１．２ｍＬ）を周囲温度で加えた。反応混合物を水素化トリアセトキシホウ素ナトリウムで処理し、３時間攪拌した。反応は７６％の変換で停止し、ＭｇＳＯ４とさらに１ｇの前記水素化体とで処理した。さらに１時間攪拌後、反応は完了した。反応混合物を酢酸エチルと飽和ＮａＨＣＯ３水とに分配した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３水で再度一度だけ洗浄し、次いでブラインで洗浄、分離、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）して真空濃縮した。粗製固体をジメチルホルムアミドに溶解し、活性炭で処理した。ろ液（セライト）をシロップに濃縮して、メタノール（１００ｍＬ）で素早く粉砕した。生じた固体を濾過により採取、ジメチルホルムアミドに再度溶解、シロップに濃縮し、メタノール（１００ｍＬ）で粉砕、濾過により採取、真空乾燥して５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−キノリン−３−イル）−インドール−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１−１０）を白色粉末として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．０６（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、８．０４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）、７．７４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．５５（ｓ，１Ｈ）、７．５３（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．０，１．５Ｈｚ）、７．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）、７．３０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５，１．５Ｈｚ）、７．２２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）、６．７６（ｓ，１Ｈ）、３．６２（ｓ，２Ｈ）、３．１６（ｍ，４Ｈ）、２．８７（ｓ，３Ｈ）、２．４８（ｍ，４Ｈ）、１．３５（ｓ，９Ｈ）。
【０１５２】
３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン（１−１１）
ジクロロメタン（４０ｍＬ）中の５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−キノリン−３−イル）−インドール−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１−１０、１．０２ｇ、１．８６３ｍｍｏｌ）、ジメチルスルフィド（１．２ｍＬ）、水（０．６ｍＬ）およびＴＦＡ（４０ｍＬ）の混合物を１．５時間攪拌した。反応混合物を真空濃縮し、酢酸エチルと飽和ＮａＨＣＯ３水とに分配した。有機層をブラインで洗浄、分離、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）して真空濃縮した。生じた粗製固体を、逆相液体クロマトグラフィ（０．１％ＴＦＡ存在下でＨ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ勾配）で精製して１−１１のトリフルオロ酢酸塩を得た。所望の生成物を含有するフラクションのすべてを酢酸エチルと飽和ＮａＨＣＯ３水とに分配した。有機層をブラインで洗浄、分離、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、真空濃縮して３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン（１−１１）を明黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．０７（ｓ，１Ｈ）、１１．５４（ｓ，１Ｈ）、８．５３（ｓ，１Ｈ）、７．７３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．５２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．４７〜７．４６（ｍ，２Ｈ）、７．３８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）、７．２９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、７．２５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．０８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ）、３．５７（ｓ，２Ｈ）、３．１１（ｍ，４Ｈ）、２．８７（ｓ，３Ｈ）、２．４８（ｍ，４Ｈ）。
【０１５３】
ＨＣｌ塩の固体形態：
形態Ａ：
上記の粗製遊離塩基１−１１（２．４Ｋｇ、５．４８ｍｏｌｅ）を１００Ｌフラスコ内に充填し、ＤＭＳＯ（１９Ｌ）を加えた。濃ＨＣＬ水（５００ｍＬ）を加えてから、バッチに種（２４ｇ）をまいた。種まき物を１時間熟成させてから、ＥｔＯＨ（４８Ｌ）を４時間かけて加えた（添加容量：１時間目、４Ｌ；２時間目、８Ｌ；３時間目、１６Ｌ；４時間目、２０Ｌ）。混合物をさらに１時間熟成させてから濾過した。固体を５Ｌ  ３：１ＥｔＯＨ／ＤＭＳＯ、次いで５Ｌ  ＥｔＯＨで洗浄した。次いで固体をＮ２掃流下、５５℃で乾燥した。このように得られた結晶性固体を形態Ａと名付けた。
【０１５４】
１：４酢酸／ジエチルエーテルから形態Ａの再結晶は、形態Ａの結晶性固体を提供する。
【０１５５】
顕微鏡特性
形態Ａの偏光光学顕微鏡は、偏光下で複屈折の高い凡そ２５〜１００μｍの針状用黄色粒子を示す。
【０１５６】
粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）
形態Ａの粉末Ｘ線回折パターンは、５°と３０°間の２−シータの複数回折ピークを有する結晶性物質を示している。この形態を水性エタノール中、室温で７日間懸濁する場合、結晶構造における変化は観察されない（ＸＲＰＤにより判定、図１を参照）。
【０１５７】
熱的性質
ＤＳＣ
１０℃／分の加熱速度での２０℃から３５０℃の形態Ａの示差走査熱分析（ＤＳＣ）は、２９５．３℃で急激な吸熱量を示す。これは融解による。ＴＧＡおよびＤＳＣ図形は、形態Ａが無水多型形態であり、融解温度のＴＧＡにおける急激な重量減少で判定されるように融解時に分解することを示唆している。
【０１５８】
ＴＧＡ
１０℃／分の加熱速度での２０℃から４００℃の形態Ａの熱重量分析（ＴＧＡ）は、２０℃と１５０℃との間に０．５４％の重量減少を示す。この重量減少は、吸着された残りの湿気による。
【０１５９】
吸湿性
形態Ａの吸湿性は、窒素流下で０％から９５％ＲＨの相対湿度について吸熱プログラムステップを用いて２５℃で判定された。形態ＡのＨＣｌ塩は、２５℃では吸湿性ではなく、７５％ＲＨ（相対湿度）で約１％の湿気を可逆的に吸着する。
【０１６０】
溶解度
室温で形態ＡのＨＣｌ塩の溶解度を、製薬加工に使用できる水およびいくつかの有機溶媒中で判定した。この結果は表Ｉに作表している。
【０１６１】
【表１】
2005528400.tif 000007
種々の水性溶媒系における形態Ａの溶解度を、２０時間測定した。この結果を下記の表ＩＩに示している。
【０１６２】
【表２】
2005528400.tif 000008
【０１６３】
分配係数
１−オクタノールと水との間の形態Ａの分配係数は、ＨＣｌ塩の固有のｐＨで判定した（表ＩＩＩ）。
【０１６４】
【表３】
2005528400.tif 000009
【０１６５】
形態Ｂ：
上記の粗製遊離塩基１−１１を室温でＴＨＦ中にスラリ化し、濃ＨＣＬ水を徐々に加えた。この混合物を１時間熟成させてから濾過した。固体をＴＨＦで洗浄した。次いで固体を、Ｎ２掃流下、５５℃で乾燥した。このようにして得られた結晶性固体を形態Ｂと名付けた。形態Ｂの顕微鏡特性は、不規則な形状の結晶および部分的に非晶質であった。
【０１６６】
１０℃／分の加熱速度での２０℃から３５０℃の形態Ｂの示差走査熱分析（ＤＳＣ）は、２８４．９℃で急な吸熱量を示す。これは融解による。１０℃／分の加熱速度での２０℃から４００℃の形態Ｂの熱重量分析（ＴＧＡ）は、２０℃と１５０℃との間で０．２３％の重量減少を示す。ＴＧＡおよびＤＳＣ図形は、形態Ｂが無水多型形態であり、融解温度でＴＧＡにおける急激な重量減少により判定されるように融解時に分解することを示唆している。
【０１６７】
形態Ｃ：
上記の粗製遊離塩基１−１１（１．０２ｇ）のメタノール（５００ｍＬ）攪拌スラリを、ＨＣｌ水溶液（１Ｎ、２．３０ｍＬ）により周囲温度で処理した。生じた黄色溶液を真空濃縮した。残渣の固体を酢酸エチル（３０ｍＬ）に懸濁、濾過、酢酸エチルで洗浄して減圧乾燥した。このように得られた結晶性固体を形態Ｃと名付けた。形態Ｃの顕微鏡特性は、棒状形および板状形の結晶であった。
【０１６８】
１０℃／分の加熱速度で２０℃から３５０℃の形態Ｃの示差走査熱分析（ＤＳＣ）は、２８５．３℃で融解吸熱量を示す。これは融解による。１０℃／分の加熱速度で２０℃から４００℃の形態Ｃの熱重量分析（ＴＧＡ）は、２０℃と１５０℃との間で５％の重量減少を示す。ＴＧＡおよびＤＳＣ図形は、形態Ｃが水和物であり、融解温度でＴＧＡにおける急激な重量減少により判定されるように融解時に分解することを示唆している。
【０１６９】
形態Ｄ：
上記の形態ＡのＨＣｌ塩を熱１：１アセトニトリル／水の混液に溶解し、この混合物を熱時濾過した。ろ液を室温に冷却してから、５℃までゆっくりと冷却した。生じた結晶性固体を濾過により採取し、減圧乾燥した。このように得られた結晶性固体を形態Ｄと名付けた。形態Ｄの顕微鏡特性は、板状形の結晶であった。
【０１７０】
１０℃／分の加熱速度で２０℃から３５０℃の形態Ｄの示差走査熱分析（ＤＳＣ）は、２７３．８℃で融解吸熱量を示す。これは融解による。１０℃／分の加熱速度で２０℃から４００℃の形態Ｃの熱重量分析（ＴＧＡ）は、２０℃と１５０℃との間で０．８９〜２．４５％の重量減少を示している。ＴＧＡおよびＤＳＣ図形は、形態Ｄが水和物であり、融解温度でＴＧＡにおける急激な重量減少により判定されるように融解時に分解することを示唆している。
【０１７１】
形態ＡのＨＣｌ塩の熱１：１アセトン／水からの再結晶によっても形態Ｄが提供された。
【０１７２】
形態Ｅ：
上記の形態ＡのＨＣｌ塩を熱酢酸に溶解し、この混合物を熱時濾過した。ろ液を室温に冷却してから、−２０℃までゆっくりと冷却した。生じた混合物を室温まで徐々に温めて、結晶性固体を濾過により採取し、一晩減圧乾燥した。このように得られた結晶性固体を形態Ｅと名付けた。形態Ｅの顕微鏡特性は、棒状形および板状形の結晶であった。
【０１７３】
１０℃／分の加熱速度で２０℃から３５０℃の形態Ｅの示差走査熱分析（ＤＳＣ）は、２９２．６℃で融解吸熱量を示す。これは融解による。１０℃／分の加熱速度での２０℃から４００℃の形態Ｅの熱重量分析（ＴＧＡ）は、２０℃と１５０℃との間で２．５５％の重量減少を示す。ＴＧＡおよびＤＳＣ図形は、形態Ｅが無水であり、融解温度でＴＧＡにおける急激な重量減少により判定されるように融解時に分解することを示唆している。
【０１７４】
水中における形態ＥのＨＣｌ塩の室温で７日間のスラリにより、形態Ｄの結晶性固体が提供された。
【０１７５】
形態Ａ〜Ｅに関する粉末Ｘ線回折パターンは、図１から図５に示してある。形態Ａ〜Ｅに関する粉末Ｘ線回折データは、以下の下表に要約してある：
【０１７６】
【表４】
2005528400.tif 000010
【０１７７】
【表５】
2005528400.tif 000011
【０１７８】
【表６】
2005528400.tif 000012
【０１７９】
【表７】
2005528400.tif 000013
2005528400.tif 000014
【０１８０】
【表８】
2005528400.tif 000015
【図面の簡単な説明】
【０１８１】
【図１】３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態Ａの粉末Ｘ線回折パターンを示す図である。
【図２】３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の多型形態Ｂの粉末Ｘ線回折パターンを示す図である。
【図３】３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態Ｃの粉末Ｘ線回折パターンを示す図である。
【図４】３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の結晶形態Ｄの粉末Ｘ線回折パターンを示す図である。
【図５】３−［５−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−キノリン−２−オン塩酸塩の多型形態Ｅの粉末Ｘ線回折パターンを示す図である。
【図１】
2005528400.tif 000016
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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