(57)【要約】  本発明は、Ｂ型肝炎ウイルスに対して予想外に高い阻害活性を有する、７−デアザＬ−ヌクレオシドを含む。本発明はさらに、このような化合物を含む薬学的組成物ならびにＨＢＶおよび他のウイルス感染に感染した哺乳動物（特にヒト）を処置する方法を含む。別の局面では、本発明は、Ｂ型肝炎を阻害する方法を包含し、この方法は、Ｂ型肝炎に感染した哺乳動物に、有効量の本発明の化合物を投与して、Ｂ型肝炎の複製を遅延または予防する工程を包含する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物：
【化１】
2005514401.tif 000009
およびその薬学的に受容可能な塩であって、ここで、
ａ）Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃｌ、−ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、−ＮＨ２、または−ＮＨＺＲ５であり；
ｂ）Ｒ２およびＲ３は独立して、−Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、メチル、Ｃ２〜Ｃ６−アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、−Ｃｌ、−Ｉ、−Ｂｒ、−Ｆ、もしくはヘテロシクリルであるか；またはＲ２およびＲ３は、これらが結合している炭素と一緒になって５員環を形成し；
ｃ）Ｒ４は、−ＮＨＺＲ５もしくは−Ｎ（Ｒ５）２であり、ここで、Ｚは、−ＣＯ−もしくは−ＳＯ２−であり、そしてＲ５は、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、Ｃ５〜Ｃ６−シクロアルキル、もしくはアリールであるか；またはＲ４は、Ｈ、−ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、Ｃ１〜Ｃ６−アルケニル、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、もしくは−ＮＨ２であり；
ｄ）ＸおよびＹは、独立して、−Ｎ−または−ＣＨ−であり；そして
ｅ）Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨＺＲ５、−Ｆ、−Ｃｌ、または−Ｂｒである、化合物およびその薬学的に受容可能な塩。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物であって、ここで：
ａ）Ｒ１が、−ＮＨ２であり、Ｒ２およびＲ３が、独立して、−Ｈ、メチル、−Ｆ、もしくはＣ１〜Ｃ４−アルキルであり、そしてＲ４が、−Ｈであるか；
ｂ）Ｒ１が、−ＮＨ２であり、Ｒ２が、−Ｈであり、Ｒ３が、−Ｈであり、そしてＲ４が、−Ｃ１〜Ｃ４−アルキルであるか；
ｃ）Ｒ１が、−ＮＨＺＲ５であるか；
ｄ）Ｒ１が、−ＮＨ２であり、Ｒ２およびＲ３は、これらが結合している炭素と一緒になって５員環を形成し、そしてＲ４が−Ｈであるか；
ｅ）Ｒ１が、−ＨもしくはＣ１〜Ｃ４−アルキルであり、Ｒ２が、−Ｈであり、Ｒ３が、−Ｈであり、そしてＲ４がＨであるか；または
ｆ）Ｒ１が、−ＮＨ２であり、Ｒ２およびＲ３が−Ｈであり、独立して−ＨまたはＣ１〜Ｃ４−アルキルであり、そしてＲ４が−ＮＨＺＲ５である、化合物。
【請求項３】
請求項１に記載の化合物であって、ここで：
ａ）Ｒ６が、−Ｈであり、Ｒ７が、−Ｈであり、そしてＲ８が、−ＯＨであり、そしてＲ９が−Ｈであるか；
ｂ）Ｒ６が、−Ｈであり、Ｒ７が、−ＯＨであり、そしてＲ８が、−ＯＨであり、そしてＲ９が、−Ｈであるか；
ｃ）Ｒ６が、−Ｈであり、Ｒ７が、Ｃ１〜Ｃ４−アルキルオキシであり、Ｒ８が、−ＯＨであり、そしてＲ９が、−Ｈであるか；
ｄ）Ｒ６が、−Ｈであり、Ｒ７が、−ＮＨＺＲ５であり、Ｒ８が、−ＯＨであり、そしてＲ９が、−Ｈであるか；
ｅ）Ｒ６が、−Ｈであり、Ｒ７が、−Ｆであり、そしてＲ８が、−ＯＨであるか；
ｆ）Ｒ６が、−ＯＨもしくはＦであり、Ｒ７が、−Ｈであり、そしてＲ８が、−Ｈもしくは−ＯＨであるか；または
ｇ）Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８が、−Ｈであり、そしてＲ９が、−ＯＨもしくは−Ｆである、化合物。
【請求項４】
以下の構造（ＩＩ）：
【化２】
2005514401.tif 000010
を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物、および薬学的に受容可能なキャリアを含む、薬学的組成物。
【請求項６】
ＨＢＶに感染した哺乳動物を処置する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、有効量の請求項５に記載の組成物を投与する工程を包含する、方法。
【請求項７】
前記哺乳動物が、ヒトである、請求項６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の背景）
（発明の分野）
本発明は、抗ウイルス剤、特に、抗ウイルス性Ｌ−ヌクレオシド、そしてより具体的には抗ウイルス性７−デアザＬ−ヌクレオシドの分野にある。
【背景技術】
【０００２】
（関連技術の説明）
ヌクレオシドおよびヌクレオチドアナログは、潜在的抗ウイルス性化合物として長い間研究されている。多数のＤ−ヌクレオシドアナログが現在抗ウイルス剤として用いられており、このようなＤ−ヌクレオシドアナログとしては、ＨＩＶ逆転写酵素インヒビター（例えば、ＡＺＴ、ｄｄＩ、ｄｄＣ、およびｄ４Ｔ）が挙げられる。同様に、プリンＤ−ヌクレオシドアナログもまた、免疫調節因子の探索において探されている。
【０００３】
例えば、７位および／または８位に置換基を有するグアノシンアナログは、免疫系を刺激することが示されている（概説について、Ｗｅｉｇｌｅ，Ｗ．Ｏ．，ＣＲＣ  Ｃｒｉｔ  Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：２８５，１９８７；Ｌｉｎら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２８：１１９４，１９８５；Ｒｅｉｔｚら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３７：３５６１，１９９４；Ｍｉｃｈａｅｌら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３６：３４３１，１９９３を参照のこと）。７−デアザグアノシンおよびアナログは、これらの化合物は細胞培養物で抗ウイルス特性を欠くとはいえ、マウスにおいて、種々のＲＮＡウイルスに対して抗ウイルス活性を示すことが示されている。３−デアザグアニンヌクレオシドおよびヌクレオチドはまた、特定のＤＮＡウイルスおよびＲＮＡウイルスに対して、顕著な広いスペクトルの抗ウイルス活性を実証した（Ｒｅｖａｎｋｅｒら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２７：１３８９，１９８４）。特定の７−デアザグアニンＬ−ヌクレオシドおよび９−デアザグアニンＬ−ヌクレオシドは、マウスを、セムリキ森林ウイルスの致死的チャレンジから防御する能力を示す（Ｇｉｒｇｉｓら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３３：２７５０，１９９０）（プリンＬ−ヌクレオシドアナログを抗ウイルス剤として開示する、ＷＯ  ９８／１６１８４もまた参照のこと）。
【０００４】
特定の６−スルフェンアミドプリンヌクレオシドおよび６−スルフィナミドプリンヌクレオシドは、抗腫瘍活性を実証した（Ｒｏｂｉｎｓら，米国特許第４，３２８，３３６号）。特定のピリミド［５，４−Ｄ］ピリミジンヌクレオシドは、ＢＤＦ１マウスにおいてＬ１２１０に対する処置において有効であり（Ｒｏｂｉｎｓら，米国特許第５，０４１，５４２号）、そしてここでは、上記のヌクレオシドの抗ウイルス活性および抗腫瘍活性は、免疫調節因子としてのこれらの役割の結果であると示唆された（Ｂｏｎｎｅｔら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３６：６３５，１９９３）。
【０００５】
あらゆる調査にもかかわらず、現時点では、良性の急性ウイルス肝炎についての何の特定の処置もない。何人かによって推奨されているアドレノコルチコステロイドの使用は、根底にある疾患を処置する際には何の影響も有さないようである。さらに、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染の早期処置におけるステロイドの使用は、持続性感染の発達をもたらし得るようである。急性ＨＢＶ感染の予後および経過に対するインターフェロンの使用の治療有効性は未知のままである。
【０００６】
多数のストラテジーが慢性ＨＢＶの処置において用いられており、ここで、処置目標は、以下の３つのものからなる：（１）他者へのＨＢＶの感染性および伝染を除去すること、（２）肝臓疾患の進行を停止させて臨床的予後を改善させること、ならびに（３）肝細胞癌（ＨＣＣ）の発症を予防すること。現在、用いられているいくつかの処置が存在する。インターフェロン−αの使用は最も一般的であるが、いまや、ラミブジン（ｌａｍｉｖｕｄｉｎｅ）（３ＴＣ）および他のものは、潜在的治療剤とみられている。これらの処置はいずれも、治療とは呼ばれ得ず、それゆえ、ＨＢＶおよび関連疾患についての真の治療はいまだない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
それゆえ、毒性でなく、そして／または他の望ましくない副作用のない、改善された抗ウイルス活性を有する化合物を同定する必要性が存在する。本発明は、このような必要性を満たし、そして他の関連する利点をさらに提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
（発明の簡単な説明）
本発明は、Ｂ型肝炎ウイルスに対する予想外に高い阻害活性を有する７−デアザＬ−ヌクレオシドを包含する。１つの局面では、本発明は、以下の構造（Ｉ）の化合物およびその薬学的に受容可能な塩を包含する：
【０００９】
【化３】
2005514401.tif 000002
ここで、
ａ）Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃｌ、−ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、−ＮＨ２、または−ＮＨＺＲ５であり；
ｂ）Ｒ２およびＲ３は独立して、−Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、メチル、Ｃ２〜Ｃ６−アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、−Ｃｌ、−Ｉ、−Ｂｒ、−Ｆ、もしくはヘテロシクリルであるか；またはＲ２およびＲ３は、これらが結合している炭素と一緒になって５員環を形成し；
ｃ）Ｒ４は、−ＮＨＺＲ５もしくは−Ｎ（Ｒ５）２であり、ここで、Ｚは、−ＣＯ−もしくは−ＳＯ２−であり、そしてＲ５は、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、Ｃ５〜Ｃ６−シクロアルキル、もしくはアリールであるか；またはＲ４は、Ｈ、−ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、Ｃ１〜Ｃ６−アルケニル、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、もしくは−ＮＨ２であり；
ｄ）ＸおよびＹは、独立して、−Ｎ−または−ＣＨ−であり；そして
ｅ）Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨＺＲ５、−Ｆ、−Ｃｌ、または−Ｂｒである。
【００１０】
本発明の化合物は、Ｂ型肝炎ウイルスの複製を阻害する、予想外に高い活性を示す。したがって、別の局面では、本発明は、Ｂ型肝炎を阻害する方法を包含し、この方法は、Ｂ型肝炎に感染した哺乳動物に、有効量の本発明の化合物を投与して、Ｂ型肝炎の複製を遅延または予防する工程を包含する。
【００１１】
（発明の詳細な説明）
本発明は、一般に、抗ウイルス性化合物（例えば、抗Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）化合物）に関する。１つの好ましい実施形態では、本発明は、以下の構造（Ｉ）の抗ウイルス性化合物およびその薬学的に受容可能な塩を提供する：
【００１２】
【化４】
2005514401.tif 000003
ここで、
ａ）Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃｌ、−ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、−ＮＨ２、または−ＮＨＺＲ５であり；
ｂ）Ｒ２およびＲ３は独立して、−Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、メチル、Ｃ２〜Ｃ６−アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、−Ｃｌ、−Ｉ、−Ｂｒ、−Ｆ、もしくはヘテロシクリルであるか；またはＲ２およびＲ３は、これらが結合している炭素と一緒になって５員環を形成し；
ｃ）Ｒ４は、−ＮＨＺＲ５もしくは−Ｎ（Ｒ５）２であり、ここで、Ｚは、−ＣＯ−もしくは−ＳＯ２−であり、そしてＲ５は、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、Ｃ５〜Ｃ６−シクロアルキル、もしくはアリールであるか；またはＲ４は、Ｈ、−ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、Ｃ１〜Ｃ６−アルケニル、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、もしくは−ＮＨ２であり；
ｄ）ＸおよびＹは、独立して、−Ｎ−または−ＣＨ−であり；そして
ｅ）Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨＺＲ５、−Ｆ、−Ｃｌ、または−Ｂｒである。
【００１３】
特定の好ましい実施形態では、本発明は、構造（Ｉ）を有する化合物を包含し、ここで
ａ）Ｒ１は、−ＮＨ２であり、Ｒ２およびＲ３は、独立して、−Ｈ、−Ｆ、メチル、もしくはＣ１〜Ｃ４−アルキルであり、そしてＲ４は、−Ｈであるか；
ｂ）Ｒ１は、−ＮＨ２であり、Ｒ２は、−Ｈであり、Ｒ３は、−Ｈであり、そしてＲ４は、−Ｃ１〜Ｃ４−アルキルであるか；
ｃ）Ｒ１は、−ＮＨＺＲ５であるか；
ｄ）Ｒ１は、−ＮＨ２であり、Ｒ２およびＲ３は、これらが結合している炭素と一緒になって５員環を形成し、そしてＲ４は−Ｈであるか；
ｅ）Ｒ１は、−ＨもしくはＣ１〜Ｃ４−アルキルであり、Ｒ２は、−Ｈであり、Ｒ３は、−Ｈであり、そしてＲ４はＨであるか；または
ｆ）Ｒ１は、−ＮＨ２であり、Ｒ２およびＲ３は−Ｈであるか、または独立して−ＨもしくはＣ１〜Ｃ４−アルキルであり、そしてＲ４は−ＮＨＺＲ５である。
【００１４】
別の好ましい実施形態では、本発明は、構造（Ｉ）を有する化合物を包含し、ここで：
ａ）Ｒ６は、−Ｈであり、Ｒ７は、−Ｈであり、そしてＲ８は、−ＯＨであり、そしてＲ９は−Ｈであるか；
ｂ）Ｒ６は、−Ｈであり、Ｒ７は、−ＯＨであり、そしてＲ８は、−ＯＨであり、そしてＲ９は、−Ｈであるか；
ｃ）Ｒ６は、−Ｈであり、Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ４−アルキルオキシであり、Ｒ８は、−ＯＨであり、そしてＲ９は、−Ｈであるか；
ｄ）Ｒ６は、−Ｈであり、Ｒ７は、−ＮＨＺＲ５であり、Ｒ８は、−ＯＨであり、そしてＲ９は、−Ｈであるか；
ｅ）Ｒ６は、−Ｈであり、Ｒ７は、−Ｆであり、そしてＲ８は、−ＯＨであるか；
ｆ）Ｒ６は、−ＯＨもしくはＦであり、Ｒ７は、−Ｈであり、そしてＲ８は、−Ｈもしくは−ＯＨであるか；または
ｇ）Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、−Ｈであり、そしてＲ９は、−ＯＨもしくは−Ｆである。
【００１５】
なお別の好ましい実施形態では、本発明は、以下の構造（ＩＩ）の化合物を包含する：
【００１６】
【化５】
2005514401.tif 000004
別の実施形態では、本発明の化合物は、リボース部分が（閉鎖環ではなく）開いた鎖である上記で開示された化合物を包含し、ここで、酸素と１’炭素との間の結合は省略され、そして１’炭素はメチレンであり、そして４’炭素はヒドロキシル基を保有する。
【００１７】
本明細書中で用いられる場合、用語「ヘテロシクリル」とは、上記で定義したような１つの遊離原子価を有する、Ｃ５〜Ｃ１０の単環式または二環式の、アルキル部分、アルケニル部分またはアルキニル部分であって、１以上の環炭素原子が、ヘテロ原子（Ｏ、Ｎ、またはＳ）で置換されている、アルキル部分、アルケニル部分またはアルキニル部分をいう。
【００１８】
本発明の化合物は、驚くべきでかつ例外的に強いＨＢＶ複製阻害を示す。本発明の特定の化合物（Ｌ−７−デアザアデノシンが挙げられる）は、ＨＢＶに対して抗ウイルス活性を示し、ＩＣ５０は、ＨＢＶ細胞に基づくアッセイにおいて、５ｎＭ〜１５ｎＭの範囲にあった。したがって、本発明の化合物は、ＨＢＶの感染、増殖および生殖の生物学的機構を研究するための、インビトロアッセイおよび細胞に基づくアッセイについての有用な研究ツールである。本発明の化合物はまた、ＨＢＶ感染または他のウイルス感染に感染した哺乳動物（好ましくはヒト）を処置するために有用である。
【００１９】
別の局面では、本発明は、上記の化合物（またはその薬学的に活性な塩もしくは誘導体）のうちのいずれかと、薬学的に受容可能な、キャリア、希釈剤または賦形剤とを含む、薬学的組成物を包含する。１つの好ましい実施形態では、上記の組成物のいずれかは滅菌される。
【００２０】
別の局面では、本発明は、哺乳動物（好ましくはヒト）を、有効量の本明細書中に記載される組成物で処置する方法を包含する。
【００２１】
本明細書中で使用される場合、用語「薬学的に受容可能な塩または複合体」とは、上記で特定した化合物の所望の生物学的活性を保持し、かつ最小の毒物学的影響を示すかまたは所望でない毒物学的影響を示さない、塩または複合体をいう。このような塩の例としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸など）を用いて形成された酸付加塩、および有機酸（例えば、酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パモン酸（ｐａｍｏｉｃ  ａｃｉｄ）、アルギン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンスルホン酸（ｎａｐｈｔｈａｌｅｎｅｓｕｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、ナフタレンジスルホン酸、およびポリガラクツロン酸）を用いて形成された塩。これらの化合物はまた、当業者によって公知の薬学的に受容可能な４級塩として投与され得、これらとしては特に、式−ＮＲ＋Ｚ−（ここで、Ｒは水素、アルキル、またはベンジルであり、そしてＺは対イオン（クロリド、ブロミド、ヨージド、−Ｏ−アルキル、トルエンスルホネート、メチルスルホネート、スルホネート、ホスフェート、またはカルボキシレート（例えば、ベンゾエート、スクシネート、アセテート、グリコレート、マレエート、マレート、シトレート、タートレート、アスコルベート、ベンゾエート、シンナモネート、マンデロエート、ベンジロエート、およびジフェニルアセテート）が挙げられる）である）の４級アンモニウム塩が挙げられる。
【００２２】
本明細書中で用いられる場合、用語「薬学的に活性な誘導体」とは、その必要性がある被験体に投与された場合に、本明細書中に開示されるような抗ウイルス活性を有する化合物を直接的または間接的に提供し得る、本発明の任意の化合物をいう。
【００２３】
活性な化合物は、処置された患者に深刻な毒性影響を引き起こすことなく患者に治療有効量を送達するに充分な量で、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤中に含まれる。上記の状態の全てについての活性な化合物の好ましい用量は、１日あたり約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜３００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、そしてより好ましくは１日あたりレシピエント１キログラム体重あたり０．５ｍｇ〜約２５ｍｇの範囲に及ぶ。代表的な局所投薬量は、適切なキャリア中で０．０１ｗｔ／ｗｔ〜３％  ｗｔ／ｗｔの範囲に及ぶ。薬学的に受容可能な誘導体の有効投薬量範囲は、送達されるべき親化合物の重量に基づいて計算され得る。誘導体が親化合物と類似の活性を示す場合、有効投薬量は、誘導体の重量を用いて、または当業者に公知の他の手段によって、上記のように評価され得る。
【００２４】
本発明の方法は、ウイルス感染（例えば、ＨＢＶ）に罹患している哺乳動物（好ましくはヒト）に、その状態を緩和するに充分な量の、本発明による薬学的組成物を投与する工程を包含する。この化合物は、任意の適切な単位投薬量形態で便利に投与され、この単位投薬量形態としては、１単位投薬量形態あたり１ｍｇ〜３０００ｍｇ（好ましくは５ｍｇ〜５００ｍｇ）の活性成分を含む単位投薬量形態が挙げられるがこれに限定されない。１ｍｇ〜５００ｍｇ、好ましくは１０ｍｇ〜２５０ｍｇ、より好ましくは２５ｍｇ〜２５０ｍｇの経口投薬量が通常便利である。
【００２５】
活性成分は、約０．００１μＭ〜３０μＭ、好ましくは約０．０１μＭ〜約１０μＭの活性化合物ピーク血漿濃度を達成するように投与されるべきである。これは、例えば、必要に応じて生理食塩水中もしくは水性媒体中の、活性成分の溶液もしくは処方物の経口投与もしくは静脈内注射によって達成され得るか、または活性成分のボーラスとして投与され得る。
【００２６】
薬物組成物中での活性化合物の濃度は、薬物の吸収、分布、不活化および排出速度、ならびに当業者に公知の他の要因に依存する。投薬量の値はまた、緩和されるべき状態の重篤度にともなって変動することに留意すべきである。任意の特定の被験体について、特定の投薬量レジメンは、個体の必要性および組成物を投与するかまたは組成物の投与を監督する専門家の判断に従って経時的に調整されるべきであること、そして本明細書中で示される濃度範囲が単なる例示であって、本願組成物の範囲も実施も限定することを意図しないことがさらに理解されるべきである。活性成分は、１回で投与されても、種々の時間間隔で投与されるべき多数のより少ない用量へと分割されてもよい。
【００２７】
経口組成物は、一般に、不活性希釈剤または食用キャリアを含む。これらは、ゼラチンカプセル剤中に封入されても、または圧縮されて錠剤とされてもよい。経口治療投与の目的のために、活性な化合物は、賦形剤とともに組み込まれ得、そして錠剤、トローチ剤またはカプセル剤の形態で用いられ得る。薬学的に適合性の結合剤、および／またはアジュバント材料は、この組成物の一部として含まれ得る。
【００２８】
錠剤、丸剤、カプセル剤、トローチ剤などは、以下の成分または類似の性質の化合物のうちのいずれかを含み得る：結合剤（例えば、微結晶性セルロース、トラガカントガムまたはゼラチン）；賦形剤（例えば、澱粉またはラクトース）；分散剤（例えば、アルギン酸、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ、またはコーンスターチ）；滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウムまたはＳｔｅｒｏｒｅｓ）；グリダント（ｇｌｉｄａｎｔ）（例えば、コロイド状二酸化ケイ素）；甘味剤（例えば、スクロースまたはサッカリン）；または香料（例えば、ペパーミント、サリチル酸メチル、またはオレンジ香料）。投薬量の単位形態がカプセル剤である場合、これは、上記種類の材料に加えて、液体キャリア（例えば、脂肪油）を含み得る。さらに、投薬量の単位形態は、投薬量単位の物理的形態を改変させる種々の他の物質（例えば、糖、シェラックまたは腸溶剤のコーティング）を含み得る。一般に、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡを参照のこと。
【００２９】
活性な化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくは誘導体は、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、オブラート、チューインガムなどの成分として投与され得る。シロップ剤は、活性な化合物に加えて、甘味剤としてのスクロース、ならびに特定の保存剤、色素、着色剤および香料を含み得る。
【００３０】
活性な化合物またはその薬学的に受容可能な誘導体もしくは塩にはまた、所望の作用を付与しない他の活性な物質、または所望の作用を補助する物質（例えば、抗生物質、抗真菌剤、他の抗炎症剤、または他の抗ウイルス性化合物）が提供され得る。
【００３１】
非経口適用、皮内適用、皮下適用または局所適用に用いられる溶液または懸濁液は、以下の成分を含み得る：無菌希釈剤（例えば、注射用水、生理食塩水溶液、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒）；抗細菌剤（例えば、ベンジルアルコールまたはメチルパラベン）；抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウム）；キレート剤（例えば、エチレンジアミン四酢酸）；緩衝剤（例えば、酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩）ならびに張度の調整のための薬剤（例えば、塩化ナトリウムまたはデキストロース）。親調製物は、ガラスまたはプラスチック製の、アンプル、使い捨てシリンジまたは複数用量バイアル中に封入され得る。
【００３２】
静脈内投与される場合、好ましいキャリアは、生理学的食塩水またはリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）であり、好ましくはこの組成物は無菌である。
【００３３】
１つの実施形態では、この活性化合物は、身体からの迅速な除去からこの化合物を保護するキャリアを用いて調製される（例えば、移植片およびマイクロカプセル化送達系を含め、制御放出処方物）。生分解性の生体適合性ポリマー（例えば、エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステルおよびポリ乳酸）が用いられ得る。このような処方物の調製のための方法は、当業者に明らかである。この物質はまた、Ａｌｚａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（ＣＡ）およびＧｉｌｆｏｒｄ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ（Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍｄ．）から商業的に入手され得る。リポソーム懸濁物はまた、薬学的に受容可能なキャリアであり得る。これらは、（例えば、米国特許第４，５２２，８１１号に記載されるような）当該分野で公知の方法に従って調製され得る。例えば、リポソーム処方物は、適切な脂質（例えば、ステアロイルホスファチジルエタノールアミン、ステアロイルホスファチジルコリン、アラキドイルホスファチジルコリン（ａｒａｃｈａｄｏｙｌ  ｐｈｏｓｐｈａｆｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）；およびコレステロール）を無機溶媒に溶解し、次いでこれをエバポレートして、乾燥した脂質の薄いフィルムを容器表面上に残すことによって調製され得る。次いで、活性な化合物またはそのモノホスフェート誘導体、ジホスフェート誘導体および／もしくはトリホスフェート誘導体の水溶液は、容器内に導入される。次いで、この容器は、手で旋回され、脂質物質を容器の側面から遊離させ、そして脂質凝集物を分散させ、それにより、リポソーム懸濁物を形成させる。
【００３４】
以下に提供される実施例は、単なる例示であり、そして限定であることを意図しない。全ての特許、特許出願、および他の刊行物は、それらの全体が、本明細書中に参考として援用される。
【実施例】
【００３５】
（実施例１：４−アミノ−７−（２’−デオキシ−β−Ｌ−エリトロ−ペントフラノシル）ピロロ［２，３−Ｄ］ピリミジン（７−デアザ−２’−デオキシ−Ｌ−アデノシン））
【００３６】
【化６】
2005514401.tif 000005
（４−クロロ−７−（２’−デオキシ−３’，５’−ジ−Ｏ−ｐ−トルオイル−β−Ｌ−エリトロ−ペントフラノシル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（３））
無水ＣＨ３ＣＮ（３１ｍｌ）中の４−クロロピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン２（０．７９１ｇ、５．１５ｍｍｏｌ）のナトリウム塩の懸濁物に水素化ナトリウム９５％（０．１４ｇ；５．３ｍｍｏｌ）を添加し、そして混合物を、アルゴン雰囲気下で室温で３０分間攪拌した。１−クロロ−２’−デオキシ−３’，５’−ジ−Ｏ−ｐ−トルオイル−α−Ｌ−エリトロ−ペントフラノース１（２ｇ；５．１５ｍｍｏｌ）を３０分間にわたって少しずつ添加した。
【００３７】
反応混合物を５０℃で２時間攪拌し、次いで室温で攪拌し、そして濾過して不溶性物質を除去した。濾液のエバポレーション後、残渣を、酢酸エチル−ヘキサンの勾配（２０％；次いで２５％酢酸エチル、シリカゲル／酢酸エチルを乾燥充填）を用いてシリカゲルカラムで精製して、１．２５ｇ（６８％）の４−クロロ−７−（２’−デオキシ−３’，５’ジ−Ｏ−ｐ−トルオイル−β−Ｌ−エリトロ−ペントフラノシル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン３を得た。
【００３８】
【数１】
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（４−アミノ−７−（２’−デオキシル−β−Ｌ−エリトロ−ペントフラノシル）ピロロ［２，３ｄ］ピリミジン（４））
メタノール性アンモニア（０℃で飽和、３０ｍｌ）中の３（１．２５ｇ；２．４７ｍｍｏｌ）の溶液を、シールしたチューブ中で１２６℃にて１５時間加熱し、次いでこの混合物を乾燥するまでエバポレートした。残渣を水（６０ｍｌ）中に溶解し、そしてジクロロメタン（４×３０ｍｌ）で洗浄した。減圧下での水のエバポレーション、続いて溶媒として水−アセトニトリル（勾配：１００％；９５％）を用いた逆相精製（Ｃ−１８）によって、０．４ｇ（６５％）の４−アミノ−７−（２−デオキシ−β−Ｌ−エリトロ−ペントフラノシル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン４を得た。
【００３９】
【数２】
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【００４０】
【表１】
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（実施例２：細胞に基づくアッセイ）
（細胞株）
ＨＢＶ産生細胞２．２．１５を、ＲＰＭＩ  ４％  ＦＢＳ、５ｍＭ  Ｌ−グルタミン（Ｂｉｏ  Ｍｅｄｉａ）、０．７５％ピルビン酸ナトリウム（Ｂｉｏ  Ｍｅｄｉａ）中で増殖させる。６回継代した後、細胞を、１０日間の間、３３０μｇ／ｍｌのＧ４１８を用いて選択する。２．２．１５細胞について用いられる全ての培養ディッシュを、２ｍｌの無菌０．２°酢酸（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ）中に希釈した０．２５ｍｇ／ｍｌのラット尾コラーゲンの薄層でコーティングする。
【００４１】
（抗ウイルスアッセイ）
２．２．１５細胞を、１．６×１０４細胞／ウェルで９６ウェル平底プレート中にプレーティングする。細胞を、ＲＰＭＩ  ４％  ＦＢＳ中で２日間インキュベートする。細胞を１×１０５／ウェルで２４ウェル平底プレートにプレーティングすること以外は同じ手順を、細胞ＤＮＡ分析について用いられる細胞の処理のために行う。細胞を連続９回の一日用量の化合物で処理した。乾燥化合物を無菌ｄｄＨ２Ｏ中に１ｍＭで溶解して、作業ストックを構成する。３ＴＣコントロールの場合、元のストックを１００％  ＤＭＳＯ中に１０ｍＭで希釈する。１００μＭの作業ストック溶液を、元のストックの希釈により、ｄｄＨ２Ｏ中に調製する。抗ウイルス性スクリーニングについて、この化合物の連続希釈物をＲＰＭＩ  ２％  ＦＢＳ中に調製する。新鮮に希釈された化合物は、９日間の間毎日添加される。１０日目に、細胞および上清を分析のために収集する。
【００４２】
（細胞外ＨＢＶ  ＤＮＡのドットブロット分析）
細胞上清を２０００ｒｐｍで１０分間、４℃にて遠心分離して、あらゆる残存細胞を除去する。次いで、上清を、新たな９６ウェルプレートに移し、そして０．２ｍｇ／ｍｌのプロテアーゼで５６℃にて１時間処理する。上清を、等容積の２Ｍ  ＮａＯＨ／２０×ＳＳＣ緩衝液で希釈し、そして少なくとも３０分間、室温でインキュベートする。サンプルを、ドットブロット装置（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）を用いてナイロンメンブレンにローディングする。膜を、０．５ｍｌの１．０Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．４）／２Ｍ  ＮａＣｌ、続いて０．５ｍｌの２０×ＳＳＣで洗浄する。このメンブレンを乾燥し、そしてＵＶトランスイルミネーターで６分間照射する。次いで、このメンブレンを、４８時間の間４２℃で、１．２−ｋｂ  ＨＢＶ特異的３２Ｐ標識プローブ（Ｒｅａｄｙ−Ｔｏ−Ｇｏ標識ｄＣＴＰビーズ，Ａｍｅｒｓｈａｍ）とハイブリダイズする。メンブレンを、１５０ｍｌの２×ＳＳＣ、０．１％（ｗ／ｖ）ＳＤＳで室温にて１５分間、１５０ｍｌの１×ＳＳＣ、０．１％（ｗ／ｖ）で室温にて１０分間、１５０ｍｌの１×ＳＳＣ、０．１％（ｗ／ｖ）ＳＤＳで６５℃にて１０分間、そして１５０ｍｌの０．１×ＳＳＣ、０．１％（ｗ／ｖ）ＳＤＳで６５℃にて最終的に１０分間洗浄する。
【００４３】
（細胞毒性評価）
４つの細胞株（ＨｅｐＧ２、ＮＩＨ  ３Ｔ３、Ｖｅｒｏ、ＨＦＦ）およびヒト血液単核細胞のパネルを、非放射性テトラゾリウムに基づくアッセイ（ＭＴＴ）を用いたこの化合物の細胞の細胞傷害性プロファイルの評価に用いる。細胞増殖の評価を、９６ウェルプレート中で化合物を用いた細胞の４日間の処理の後に評価する。これらの化合物を、細胞株については完全ＤＭＥＭ  ２％  ＦＢＳ中に希釈し、そしてＰＢＭＣについては完全ＲＰＭＩ  １０％  ＦＢＳ中に希釈する。５日目に、テトラゾリウム塩を含む１５μｌの色素溶液（Ｐｒｏｍｅｇａ）を各ウェルに添加し、そして３７℃で４時間インキュベートする。１００μｌのストップ溶液を添加して、反応生成物（ホルマザン）を可溶化する。プレートを室温で４時間インキュベートし、そして分光光度計で５７０ｎｍで読み取る。
【００４４】
本明細書中で言及し、そして／または出願データシートに列挙した、上記の米国特許、米国特許出願公報、米国特許出願、外国特許、外国特許出願および非特許刊行物の全ては、それらの全体が、本明細書中に参考として援用される。
【００４５】
上記から、本発明の特定の実施形態が例示を目的として本明細書中に記載されているが、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、種々の改変が行われ得ることが明らかである。従って、本発明は、添付の特許請求の範囲以外によっては限定されない。
【国際調査報告】
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