(57)【要約】式(I)の化合物：【化１】2005501921.tif 000021(上記式中、Rはカルボン酸保護基を表し、P1およびP2は同一でもまたは異なっていてもよく、アミン保護基から選択されるものであり、P3は1,2-ジオールの保護基を表し、LGは脱離基を表す)、それらの製造方法、およびノイラミニダーゼ阻害剤結合体の製造におけるそれらの使用。
2005501921.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)の化合物：
【化１】
2005501921.tif 000016
(上記式中、
Rは、カルボン酸保護基を表し、
P1およびP2は、同一でもまたは異なっていてもよく、かつ、アミン保護基から選択されるものであり、
P3は、1,2-ジオールの保護基を表し、
LGは、脱離基を表す)。
【請求項２】
Rが、C1-6アルキルまたはジフェニルメタンであるものである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
P1および/またはP2が、第三ブトキシカルボニル(Boc)基であるものである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
P3が、COまたはCHMeであるものである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
LGが、パラ‐ニトロフェノールもしくはその誘導体、ハロゲン化物、イミダゾールまたはN-ヒドロキシスクシンイミドであるものである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Rがメチルまたはジフェニルメタンであり、P1およびP2がBocであり、P3がCOであり、かつ、LGがパラ‐ニトロフェノールである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の式(I)の化合物の製造方法であって、
式(III)の化合物：
【化２】
2005501921.tif 000017
(上記式中、P1、P2、P3およびRは請求項１〜６のいずれか一項に記載の通りである)
と、式(II)の化合物：
【化３】
2005501921.tif 000018
(上記式中、それぞれのLGは請求項１〜６のいずれか一項に記載の通りである)
とを、溶媒および塩基中にて反応させることを含んでなる、方法。
【請求項８】
前記反応を水の非存在下にて行うものである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記溶媒が、ピリジンまたはピリジン型溶媒である、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
前記塩基が、第三アミンである、請求項７〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記第三アミンが、ジメチルアミノピリジン(DMAP)、４−ピロリジノピリジン、または１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エンである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
式(V)：
【化４】
2005501921.tif 000019
のノイラミニダーゼ阻害剤結合体の製造における、請求項１〜６のいずれか一項に記載の式(I)の化合物の使用。
【請求項１３】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の式(I)と、
式(VI)の化合物：
【化５】
2005501921.tif 000020
とを、溶媒中で塩基の存在下にて反応させた後、所望により、脱保護を行うことを含んでなる、請求項１２で記載の式(V)の化合物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規化合物、それらの製造方法、およびノイラミニダーゼ阻害剤結合体の製造におけるそれらの使用に関する。
【０００２】
二量体性の化合物(dimeric compound)およびそれらをノイラミニダーゼ(neuraminidase)阻害剤として使用することが、WO00/55149号明細書に開示されている。ポリマー性化合物およびそれらをノイラミニダーゼ阻害剤として使用することは、WO98/21243号明細書に開示されている。WO00/55149号明細書においては、2個のノイラミニダーゼ結合化合物が、活性部位のバインディングに関与しない分子の領域にて互いに適当に結合するときには、この生成する二量体は抗ウイルス活性を増すことが示されている。Eur. J. Med. Chem 34 (1999)563-574には、グリセロール側鎖が修飾された4-guanidino-Neu5Ac2en (ザナミビール:zanamivir)の類縁体シリーズの合成およびそのインフルエンザウイルスシアリダーゼ阻害作用が開示されている。
【０００３】
WO00/55149号明細書には、化合物7：
【化１】
2005501921.tif 000003
は、ある種の二量体性ノイラミニダーゼ阻害剤の有用な前駆体として記載されている。
【０００４】
本発明者らは、第一の態様において、本発明によれば、
式(I)の化合物：
【化２】
2005501921.tif 000004
(上記式中、
Rは、カルボン酸保護基を表し、
P1およびP2は、同一でもまたは異なっていてもよく、かつ、アミン保護基から選択されるものであり、
P3は、1,2-ジオールの保護基を表し、および
LGは、脱離基、例えば、パラ-ニトロフェノールもしくはその誘導体、ハロゲン化物、イミダゾール、またはN-ヒドロキシスクシンイミドを表す)
が提供されることを見出した。
【０００５】
好ましくは、Rは、C1-6アルキル、ジフェニルメタン、または「有機合成における保護基(Protective Groups in Organic Synthesis)」, TW Greene and PGM Wuts 1999 (第３版), Wileyに記載されているような一般のカルボン酸保護基から当業者によって選択される適当な保護基である。
【０００６】
本明細書において、アルキル基は、直線状、分岐状、または環状であり、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、第三ブチル、ペンチル、ヘキシル、またはシクロヘキシルであり、好ましくは、メチルまたは第三ブチルであることができる。
【０００７】
一般のアミン保護基は、「有機合成における保護基(Protective Groups in Organic Synthesis)」, TW Greene and PGM Wuts 1999 (第３版), Wileyに記載されている通りであり、好ましくは、第三ブトキシカルボニル(Boc)基である。
【０００８】
1,2-ジオールの保護基は、CO(環状カーボネート)またはCHMe(メチルアセタール)であるか、または「有機合成における保護基(Protective Groups in Organic Synthesis)」, TW Greene and PGM Wuts 1999 (第３版), Wileyに記載されているような一般の1,2-ジオール保護基から当業者によって選択される適当な保護基である。好ましくは、P3は、COまたはCHMeである。
【０００９】
他の脱離基については、カルバメートの合成において、当業者には知られているであろう。
【００１０】
さらにより好ましくは、Rはメチルまたはジフェニルメタンであり、P1およびP2はBocであり、P3はCOであり、LGはパラ-ニトロフェノールである。
【００１１】
本発明の化合物は、多くのノイラミニダーゼ阻害剤結合体(neuraminidase inhibitor conjugate)、とりわけ、WO00/55149号明細書に開示されているものの迅速合成において極めて有利である。本発明の化合物は、共通中間体を提供するものであり、この共通中間体をもとにして、その多くが市販されているものである種々の「結合基(linking groups)」を用いることにより、極めて多数のノイラミニダーゼ阻害剤結合体を合成することが可能となる。共通中間体を使用することにより、柔軟性が与えられ、極めて多数の化合物を速やかに合成することができるようになる。
【００１２】
式(I)の化合物は、少なくとも2個、例えば、5-1000個の化合物、好ましくは、10-100個の化合物を含んでなる化合物ライブラリーの合成に用いることができる。化合物ライブラリーは、当該技術分野で知られている方法によって、「スプリット・アンド・ミックス(split and mix)」法、または液相化学もしくは固相化学を用いる多重パラレル合成によって製造することができる。
【００１３】
本発明の第二の態様は、ノイラミニダーゼ阻害剤結合体、とりわけ、WO00/55149号明細書に開示されているものの製造における式(I)の化合物の使用である。
【００１４】
本発明の第三の態様は、式(I)の化合物の使用を含んでなる、ノイラミニダーゼ阻害剤結合体、とりわけ、WO00/55149号明細書に開示されているものの製造方法である。
【００１５】
本発明のもう一つの態様は、式(I)の化合物を用いて合成したものであるノイラミニダーゼ阻害剤結合体、とりわけ、WO00/55149号明細書に開示されているものである。
【００１６】
WO00/55149号明細書およびWO98/21243号明細書の内容は、その開示の一部として本明細書に引用されている。とりわけ、ノイラミニダーゼ阻害剤結合体の一般式が、本明細書に引用される。
【００１７】
式(I)の化合物は、式(III)の化合物：
【化３】
2005501921.tif 000005
(上記式中、P1、P2、P3およびRは、式(I)の化合物について記載した通りのものである)
と、式(II)の化合物：
【化４】
2005501921.tif 000006
(上記式中、それぞれのLGは、独立して、式(I)の化合物について記載した通りのものである)
とを、溶媒および塩基中にて反応させることによって合成することができる。
【００１８】
好ましくは、用いられる塩基は第三アミンであり、例えば、ジメチルアミノピリジン(DMAP)、４−ピロリジノピリジン、または１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン(1,8-diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene)であり、さらに好ましくはDMAPである。
【００１９】
好ましくは、式(III)の化合物に対して、少なくとも２当量の塩基を用いる。
【００２０】
好ましくは、溶媒は、ピリジンまたはピリジン型溶媒である。
【００２１】
好ましくは、反応は、例えば、反応を行う前に出発材料を共沸しまたはオーブンにて乾燥することによって、水の非存在下にて行うべきである。
【００２２】
例えば、式(II)の化合物は、対称または非対称であってもよく、例えば、p-ニトロフェニルクロロホルメートであってもよい。
【００２３】
式(III)の化合物は、式(IV)の化合物：
【化５】
2005501921.tif 000007
(上記式中、P1、P2およびRは、式(I)の化合物について記載した通りのものである)
と、カルボニルジイミダゾール(CDI)またはホスゲンまたは他のホスゲン同等物
とを反応させることによって合成することができる。
【００２４】
式(IV)の化合物(式中、Rはジフェニルメタンである)は、文献(J Med Chem 1998,41, 787-797)にて知られている。
【００２５】
式(V)のノイラミニダーゼ阻害剤結合体：
【化６】
2005501921.tif 000008
は、式(I)の化合物と、式(VI)の化合物：
【化７】
2005501921.tif 000009
とを、溶媒、例えば、ピリジン中、塩基、例えば、DMAPの存在下にて反応させた後、必要ならば、脱保護を行うことによって合成することができる。
【００２６】
アミンおよびエステル基を脱保護する方法は、当業者には周知であろう。
【００２７】
本明細書において、ハロゲン化物とは、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨード基を表す。
【００２８】
式(V)の化合物は、プラーク分析法(Hayden et al., Antimicrobial. Agents Chemother., 1980, 17, 865)などの当該技術分野にて知られている方法によって、ノイラミニダーゼ活性について試験することができる。
【００２９】
本発明を、以下の例によって詳細に説明するが、以下の例は、本発明を制限するものではない。
【００３０】
例１および２では、式(I)の化合物の合成を開示する。例３では、式(V)のノイラミニダーゼ阻害剤結合体の合成を記載する。
【００３１】
本明細書で用いる略号は、
DPM  ジフェニルメタン
SPE  固相抽出
DMAP  ４−ジメチルアミノピリジン
BOC  第三ブトキシカルボニル
EtOAc  酢酸エチル
DCM  ジクロロメタン
THF  テトラヒドロフラン
CDI  １，１’−カルボニルジイミダゾール
LC/MS  液体クロマトグラフィー質量分析法
である。
【００３２】
例1
中間体1 ベンズヒドリル=(2R,3R,4S)-3-(アセチルアミノ)-4-({[(第三ブトキシカルボニル)アミノ][(第三ブトキシカルボニル)イミノ]メチル}アミノ)-2-{(S)-ヒドロキシ[(4R)-2-オキソ-1,3-ジオキソラン-4-イル]メチル}-3,4-ジヒドロ-2H-ピラン-6-カルボキシレート
【化８】
2005501921.tif 000010
ベンズヒドリル=(2R,3R,4S)-3-(アセチルアミノ)-4-({(E)-[(第三ブトキシカルボニル)アミノ][(第三ブトキシカルボニル)イミノ]メチル}アミノ)-2-[(1R,2R)-1,2,3-トリヒドロキシプロピル]-3,4-ジヒドロ-2H-ピラン-6-カルボキシレート(J. Med. Chem., 1998, 41, 787-797を参照)(12.38g; 17.7ミリモル)を、窒素下、室温にて乾燥アセトニトリル(130mL)に溶解した。この溶液を攪拌し、1,1'-カルボニルジイミダゾール(2.87g; 17.7ミリモル)を加えた。16時間後、LC/MSは出発物質のトリオールの存在を示したので、追加の1,1'-カルボニルジイミダゾール(総量0.493g; 3ミリモル)を加えた。数時間後、LC/MSはトリオールが存在しないことを示した。溶媒を留去し、残渣をシリカ上でフラッシュクロマトグラフィー処理を行い、１：１の酢酸エチル/40-60石油エーテルにて溶出した。所望な生成物を含む画分を留去した後、ジクロロメタンに溶解し、硫酸ナトリウムにて乾燥し、濾過して、溶媒を留去し、中間体1を灰白色固形物(11.05g; 86%)として得た。
LC/MS (Blue法)MH+=725, Tret=4.09分。
【００３３】
例1 ベンズヒドリル=(2R,3R,4S)-3-(アセチルアミノ)-4-({(E)-[(第三ブトキシカルボニル)アミノ][(第三ブトキシカルボニル)イミノ]メチル}アミノ)-2-{(S)-{[(4-ニトロフェノキシ)カルボニル]オキシ}[(4R)-2-オキソ-1,3-ジオキソラン-4-イル]メチル}-3,4-ジヒドロ-2H-ピラン-6- カルボキシレート
【化９】
2005501921.tif 000011
ベンズヒドリル=(2R,3R,4S)-3-(アセチルアミノ)-4-({[(第三ブトキシカルボニル)アミノ][(第三ブトキシカルボニル)イミノ]メチル}アミノ)-2-{(S)-ヒドロキシ[(4R)-2-オキソ-1,3-ジオキソラン-4-イル]メチル}-3,4-ジヒドロ-2H-ピラン-6-カルボキシレート(中間体1)(143mg, 0.197ミリモル)を4-ジメチルアミノピリジン(120mg, 0.982ミリモル)を含む乾燥ピリジン(3mL)に溶解したものを、4-ニトロフェニルクロロホルメート(199mg, 0.987ミリモル)にて22℃で処理した。この混合物を22℃にて17時間攪拌した後、ピリジンを真空留去した。残渣をSPEクロマトグラフィー(5gカートリッジ)によって、シクロヘキサン-酢酸エチル(4:1-2:1)を溶出液として精製した。例1を淡黄色ゴム状生成物(99mg, 56%)として得た。
NMRδ(CDCl3) 11.30 (1H brd, NH), 8.62 (1H brd, NH), 8.23 (2H, AA'BB', 芳香族CH), 7.52 (2H, AA'BB', 芳香族CH), 7.43-7.30 (10H m, 芳香族CH), 6.95 (1Hs, CH), 6.76 (1H brd, NH), 6.05 (1H d, =CH), 5.56 (1H dd, CH), 5.22 (1H dt, CH), 5.00 (1H dt, CH), 4.72 (1H dd, CH), 4.59 (1H dd, CH), 4.48 (1H q, CH), 4.25 (1H dd, CH), 1.92 (3H s, CH3), 1.48 (9H s,第三ブチル),および1.43 (9H s,第三ブチル).
LC/MS Rt=4.19分。(MH+=890, MH-= 888)。
【００３４】
例2
【化１０】
2005501921.tif 000012
中間体2 メチル=(2R,3R,4S)-3-(アセチルアミノ)-4-アミノ-2-[(1R,2R)-1,2,3-トリヒドロキシプロピル]-3,4-ジヒドロ-2H-ピラン-6-カルボキシレート塩酸塩
塩化アセチル(75mL; 1.05モル)を、窒素下にて0-5℃にて攪拌しながらメタノール(7500mL)に滴加した。この混合物を、上記温度にて、さらに15分間攪拌した後、約10℃に保持して、(2R,3R,4S)-3- (アセチルアミノ)-4-アミノ-2-[(1R, 2R)-1,2,3-トリヒドロキシプロピル]-3,4-ジヒドロ-2H-ピラン-6-カルボン酸三水和物(J. Med. Chem. 1998, 41, 787-797を参照)(250g; 726ミリモル)を少しづつ投入した。この混合物を約60℃にて5時間攪拌した後、約20℃まで冷却し、この温度にて一晩攪拌した。溶媒を留去し、残渣を再度メタノール(2x500mL)を用いて、2回溶媒留去し、フォーム(foam)状生成物とゴム(gummy)状生成物の混合物を得た。これをメタノール(〜1000mL)に再溶解し、溶媒を留去した後、残渣をDCMを用いて粉状とし、再度溶媒を留去した。このDCM粉状化工程を繰り返し行った。残渣を約30℃で真空オーブンにて一晩乾燥し、粉砕した後、再度一晩乾燥し、中間体2を白色粉末(264.2g)として得た。
LC/MS (Orange法)MH+= 305, Tret=0.54分。
【００３５】
中間体3 メチル=(2R,3R,4S)-3-(アセチルアミノ)-4-({[(第三ブトキシカルボニル)アミノ][(第三ブトキシカルボニル)イミノ]メチル}アミノ)-2-[(1R,2R)-1,2,3-トリヒドロキシプロピル]-3,4-ジヒドロ-2H-ピラン-6-カルボキシレート
アミノエステル塩酸塩の中間体2(211.6g; 0.62モル)を、窒素雰囲気下、10リットル反応装置中にてメタノール(2100mL)に攪拌しながら少しずつ加え、淡褐色溶液を得た。THF(2100mL)を加えた。トリエチルアミン(86.5ml;0.62モル)を攪拌しながら少しずつ加えた後、N,N'-ビス-第三ブチルオキシカルボニル-l-グアニルピラゾール(201.3g; 0.649ミリモル)をTHF(2100mL)に溶解したものを、反応温度を約22℃に保持しながら、少しずつ短時間にて加えた。この混合物を窒素雰囲気下、約22℃にて45時間攪拌した後、濾過して、少量の固形物を除去し、濾液を蒸発乾固した。一晩放置した後、ゴム状黄色残渣を、酢酸エチル(2500mL)と共にロータリーエバポレーター上で回転させることによって粉状とし、微細な白色固形物を得て、これを濾別した。濾液を蒸発させ、高真空下で乾燥し、フォーム状生成物(〜333g)を得た。フォーム状生成物を、3%メタノール/DCM(〜700mL)に溶解し、3%メタノール/DCMを溶出液とし、予備コンディショニング(pre-conditon)し、2.5kg Biotageカラムにて精製した。最も純粋な画分を合わせて、溶媒を留去した後、約30℃にて乾燥して、中間体3を白色固形物(192.8g; ピラゾールの存在について補正した収率49.4%)として得た。NMRは、〜54モル%のピラゾール(〜13重量%)の存在を示した。
LC/MS (Orange法)MH+= 547、 Tret= 5.07分。
【００３６】
中間体4 メチル=(2R,3R,4S)-3-(アセチルアミノ)-4-({[(第三ブトキシカルボニル)アミノ][(第三ブトキシカルボニル)イミノ]メチル}アミノ)-2-{(S)-ヒドロキシ[(4R)-2-オキソ-1,3-ジオキソラン-4-イル]メチル}-3,4-ジヒドロ-2H-ピラン-6-カルボキシレート
中間体3 (423.2g; 約0.77モル)(〜13%のピラゾールが混入)を、乾燥アセトニトリル(4750mL)に溶解し、10リットル反応装置中、窒素雰囲気下にて攪拌した。CDI(135.6g; 0.84モル)を、サーキュレーター(circulator)を用いて少しずつ加え、若干の発熱を制御し、反応温度を約22℃に保持した。この混合物を、窒素雰囲気下、前記温度にて一晩攪拌した。22時間後、溶媒を留去し、残渣の黄色ゴム状生成物を酢酸エチル(3500ml)に溶解して、反応装置に戻した。この溶液を、反応装置において希塩酸にて2回洗浄し(2x1250ml; 1M)、水(1000mL)にて1回洗浄した後、塩水(800mL)にて1回洗浄した。この溶液を硫酸マグネシウムにて乾燥し、濾過し、溶媒を留去し、高真空にて乾燥して、白色フォーム状生成物(378g)を得た。このフォーム状生成物を、DCM(〜1000ml)に溶解し、この溶液を2バッチに分けて、1:1ヘキサン/酢酸エチルを溶出液として予備コンディショニングして2.5kg Biotageカラムにて処理し、溶媒を留去して、乾燥した後、中間体4を白色固形物(総量292.1g; 補正した出発材料の量に対して〜76%)として得た。
LC/MS (Orange法)MH+= 573、 Tret=5.85分。
【００３７】
例2 メチル=(2R,3R,4S)-3-(アセチルアミノ)-4-({(E)-[(第三ブトキシカルボニル)アミノ][(第三ブトキシカルボニル)イミノ]メチル}アミノ)-2-{(S)-{[(4-ニトロフェノキシ)カルボニル]オキシ}[(4R)-2-オキソ-1,3-ジオキソラン-4-イル]メチル}-3,4-ジヒドロ-2H- ピラン-6-カルボキシレート
【化１１】
2005501921.tif 000013
メチル=(2R,3R,4S)-3-(アセチルアミノ)-4-({[(第三ブトキシカルボニル)アミノ][(第三ブトキシカルボニル)イミノ]メチル}アミノ)-2-{(S)-ヒドロキシ[(4R)-2-オキソ-1,3-ジオキソラン-4-イル]メチル}-3,4-ジヒドロ-2H-ピラン-6-カルボキシレート(113mg, 0.197ミリモル)を4-ジメチルアミノピリジン(120mg, 0.982ミリモル)を含む乾燥ピリジン(3mL)に溶解したものを、4-ニトロフェニルクロロホルメート(199mg, 0.987ミリモル)と共に、22℃にて処理した。この混合物を、22℃にて17時間攪拌した後、ピリジンを真空留去した。残渣を、シクロヘキサン−酢酸エチル(4:1−2:1)を溶出液として、SPEクロマトグラフィー(5gカートリッジ)にて精製し、例2を淡黄色ゴム状生成物(96mg, 66%)として得た。
NMRδ(CDCl3) 11.3 (1H s, NH), 8.58 (1H brd, NH), 8.26 (2H, AA'BB', 芳香族CH), 7.56 (2H, AA'BB', 芳香族CH), 6.82 (1H brd, NH), 5.93 (1H d, =CH), 5.54 (1H dd, CH), 5.20 (1H dt, CH), 5.10 (1H dt, CH), 4.78 (2H m, 2xCH), 4.44 (1H brq, CH), 4.28 (1H dd, CH), 3.82 (3H s CH3), 1.91 (3H s, CH3),および1.48 (18H s, 2x第三ブチル)。
LCMS Rt=3.87分。(MH+=738, MH-= 736)。
【００３８】
例3 
【化１２】
2005501921.tif 000014
ベンズヒドリル=(2R,3R,4S)-3-(アセチルアミノ)-4-({[(第三ブトキシカルボニル)アミノ][(第三ブトキシカルボニル)イミノ]メチル}アミノ)-2-{(S)-ヒドロキシ[(4R)-2-オキソ-1,3-ジオキソラン-4-イル]メチル}-3,4-ジヒドロ-2H-ピラン-6-カルボキシレート(0.4g;0.55ミリモル)を乾燥トルエンから4回共沸蒸留し、この乾燥固形物をモレキュラーシーブで乾燥したピリジン(1.6mL)に溶解した。この溶液を4-ジメチルアミノピリジン(0.17g;1.4ミリモル)で処理した。これに、4-ニトロフェニルクロロホルメート (0.12g;0.6ミリモル)を窒素雰囲気下にて加えた。若干の発熱が起こり、温度は24℃から27℃に上昇した。この混合物を室温にて3時間攪拌したところ、LC/MSは、出発材料が存在せず且つニトロフェニルカーボネートが存在することを示していた(例1)。
MH+=890。
【００３９】
この混合物に、4,7,10-トリオキサ-1,13-トリデカンジアミン(60.7mg; 0.276ミリモル)を乾燥ピリジン(1mL)に溶解したものを加えた。生成する混合物を室温にて3時間攪拌したところ、LC/MSは、ニトロ化合物2が存在せず且つ(M+2H+)/2=861にて生成物3が存在することを示していた。揮発分を40℃で真空留去し、生成する橙色油状物を10gのSi SPEカートリッジに装填して、DCM (5x)、エーテル(5x)、およびEtOAc (5x)にて溶出した。生成物は、EtOAc画分にて白色固形物(0.2g; 22%)として溶出した。
【００４０】
生成物は、標準的手法を用いて脱保護を行うことができる。
注:4-ニトロフェニルクロロホルメートは、黄色の痕跡のない白色であるべきである。
【００４１】
LC/MSの詳細  Blue法
Micromass P1atform II質量分析計、陽イオン電子スプレー方式で操作、質量範囲100-1000 amu。
カラム: 3.3cm x 4.6mm ID, 3μm ABZ+PLUS
流速: 3mL/分
注入容積: 5μL
溶媒A:  95%アセトニトリル+ 0.05%ギ酸
溶媒B: 0.1%ギ酸+10ミリモル酢酸アンモニウム
グラディエント: 0% A/0.7分、0-100% A/3.5分、100% A/1.1分、100-0% A/0.2分。
LC/MSの詳細  Orange法
2005501921.tif 000015
【００４２】
本発明は、上記した特定且つ好ましいサブグループの総ての組合せを包含することを理解すべきである。
【００４３】
本明細書および特許請求の範囲おいて、特に断らない限り、「含んでなる(comprise)」という単語およびその語尾変化（comprisesおよびcomprisingなど）は、記載した整数、または工程、または整数の群を包含するが、任意の他の整数、または工程、または整数もしくは工程の群を除外するものではないことが理解されるであろう。
【００４４】
この記載および特許請求の範囲が一部を形成するものである本出願は、任意の後の出願について優先権の基礎として用いることができる。このような後の出願の特許請求の範囲は、本明細書に記載された任意の特徴または特徴の組合せから導くことができる。それらは、組成物、方法または使用クレームの態様を採ることができ、例えば、制限なしに本出願の特許請求の範囲を包含することができる。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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