(57)【要約】超低イソフラボン含有量および高サポニン含有量を有する大豆タンパク質物質は、大豆粉またはフレークから繊維を除去することにより得られる大豆タンパク質物質から吸着によりイソフラボンを除去することを包含するプロセスにより生産される。大豆タンパク質物質はまた、高窒素溶解性指数（「ＮＳＩ」）を有する。低イソフラボン、高大豆サポニン大豆タンパク質物質は、少なくとも約５５．０重量％のタンパク質、約２００μｇ／ｇ（総乾燥物）未満のイソフラボン、および少なくとも約１０００μｇ／ｇ（総乾燥物）のソヤサポゲノールを有する。低イソフラボン、高サポニン大豆タンパク質物質を生産するプロセスは、脱脂大豆物質から繊維を除去すること、および液体（これは、次に低温殺菌される）を得ることを包含する。次に、糖および他の低分子量成分が、膜分離を用いて液体から任意に除去されて、最終物質のタンパク質含有量を増加させる。得られた液体または濃縮液は、イソフラボンの吸着除去に付され、任意に低温殺菌され、噴霧乾燥される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
総乾燥物の少なくとも約５５．０重量％のタンパク質含有量、
約２００μｇ／ｇ（総乾燥物）未満のイソフラボン含有量、および
少なくとも約１０００μｇ／ｇ（総乾燥物）のソヤサポゲノール含有量を特徴とする大豆タンパク質物質。
【請求項２】
少なくとも約７０％の窒素溶解性指数（「ＮＳＩ））を特徴とする、請求項１に記載の大豆タンパク質物質。
【請求項３】
前記イソフラボン含有量は、約１５０μｇ／ｇ（総乾燥物）未満であることを特徴とする、請求項１または２に記載の大豆タンパク質物質。
【請求項４】
前記タンパク質含有量は、総乾燥物の少なくとも約６５．０重量％であることを特徴とする、請求項１ないし３のいずれか１項に記載の大豆タンパク質物質。
【請求項５】
前記タンパク質含有量は、総乾燥物の少なくとも約９０．０重量％であることを特徴とする、請求項１ないし３のいずれか１項に記載の大豆タンパク質物質。
【請求項６】
総乾燥物の約３．０重量％未満の粗繊維含有量、
少なくとも約１００ｍｇ／ｇのキモトリブシン阻害剤（「ＣＩ」)含有量、
約１０．０ｍｌ未満の沈降物の溶解性指数、および
前記大豆タンパク質物質の約１２．０重量％の溶液が約２２℃の温度で水中に再構成される場合の約５００センチポアズ（ｃｐ）未満の粘度
の少なくとも１つを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項に記載の大豆タンパク質物質。
【請求項７】
（ａ）実質的に脱脂された大豆物質を供給する工程、
（ｂ）前記物質を水と混合する工程、および前記物質からタンパク質を抽出する工程、
（ｃ）不溶分を除去し、液体を生産する工程、
（ｄ）前記液体を加熱処理する工程、および
（ｅ）前記液体を吸着プロセスに付し、イソフラボンが吸着により除去される工程
を特徴とする、大豆タンパク質製品を生産する方法。
【請求項８】
前記吸着工程（ｅ）の後に、（ｆ）前記液体を乾燥させ、固体形態の大豆タンパク質物質を供給する、さらなる工程を特徴とする、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記加熱処理工程（ｄ）の後に、前記液体を限外濾過に付して、濃縮液を得る、さらなる工程を特徴とする、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記限外濾過工程は、
前記限外濾過工程が、約２５℃〜約６５℃の温度で実施されること、および、
約５，０００〜約６０，０００の分子量カットオフを有する限外濾過膜を用いて実施されること
の少なくとも１つを特徴とする、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記混合する工程（ｂ）は、
スラリーのｐＨを約６．８〜約１０．０に調製すること、および
約５．０重量％〜約１５．０重量％（固形分）のレベルで前記物質を水と混合すること
の少なくとも１つを特徴とする、請求項７ないし１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記大豆タンパク質物質が、
総乾燥物の少なくとも約５５．０重量％のタンパク質含有量、
約２００μｇ／ｇ（総乾燥物）未満のイソフラボン含有量、および
少なくとも約１０００μｇ／ｇ（総乾燥物）のソヤサポゲノール含有量であることを特徴とする、請求項８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［発明の分野］
本発明は、低イソフラボン高サポニン植物質、およびそれを生産する方法に関する。
【０００２】
［関連出願の相互参照］
本出願は、米国特許法３５ＵＳＣ１１９（ｅ）の下、２００２年５月７日に出願された高溶解性イソフラボン除去大豆タンパク質物質を生産する方法およびその製品(PROCESS FOR PRODUCING HIGH SOLUBILITY, ISOFLAVONES-DEPLETED SOY PROTEIN MATERIAL AND THE PRODUCT THEREOF)という表題の米国仮特許出願第６０／３７８，６１８号の有益性を主張する。
【背景技術】
【０００３】
［発明の背景］
関連技術の説明
大豆タンパク質の有益性は十分文書で立証されている。コレステロールは、工業世界全体にわたって消費者に関する主要な関心である。植物製品はコレステロールを含有しないことがよく知られている。数十年の間に、栄養研究により、食物中に大豆タンパク質が含まれることにより、危険性のある人々において実際に血清コレステロールレベルを低減させることが示されてきた。コレステロールが高いほど、大豆タンパク質はそのレベルを低減させるのにより効果的である。
【０００４】
大豆は、穀類および豆類すべてのうちで最も高いタンパク質含有量を有する。特に、大豆は、約４０．０重量％のタンパク質を有するのに対して、他の豆類は２０．０〜３０．０重量％のタンパク質を有し、穀類は約８．０〜１５．０重量％のタンパク質を有する。大豆はまた、主として炭水化物の残存乾燥物（３５．０重量％）とともに約２０重量％の油を含有する。湿量基準（そのままの状態）で、大豆は、約３５重量％のタンパク質、約１７．０重量％の油、約３１．０重量％の炭水化物、および約４．４重量％の灰分を含有する。
【０００５】
大豆において、タンパク質および脂質の両方が、大豆の使用可能な果肉（いわゆる子葉）中に含有される。複雑な炭水化物（または食物繊維）もまた、子葉の細胞壁に含有される。細胞の外層（いわゆる種皮）は、大豆総重量の約８．０重量％を構成する。生のさやをむいた大豆は、種類によるが、およそ１８．０重量％の油、１５．０重量％の可溶性炭水化物、１５．０重量％の不溶性炭水化物、１４．０重量％の水分および灰分、ならびに３８．０重量％のタンパク質である。
【０００６】
加工処理では、大豆は、色および大きさに関して慎重に選択される。次に、大豆を清浄化して、調整して（外皮の除去をより容易にするため）、砕いて、皮をむいて、ロールでつぶしてフレークにする。油を除去する溶媒浴にフレークをさらす。溶媒を除去して、フレークを乾燥させ、大豆タンパク質製品すべての基盤となる脱脂大豆フレークを創出する。市場で製品が多数あるにも関わらず、たった３つのタイプの脱脂大豆タンパク質製品（粉、濃縮物および単離物）が存在するに過ぎない。
【０００７】
大豆粉は、およそ５０．０重量％のタンパク質含有量を有する最も単純な形態の大豆タンパク質である。脱脂フレークを単にすり砕いて、ふるいにかけることにより、大豆粉が生産される。この単純な加工処理により大豆の特徴の多くが大豆粉に残ったままである。加工処理の不足がまた、大豆粉を品質に関して非常に様々なものにしている。
【０００８】
大豆粉およびグリットは、依然として広範に生産され、焼き菓子、スナック食品およびペットフードの用途では最も頻繁に使用されており、この用途では高風味特性は問題を課さない。型押し(textured)大豆粉は、肉製品の外見を模倣または増強する際の初期の試みである。型押しすることにより大豆粉の組成は変化せず、ほんのわずかに風味特性を減少させる。その主要な用途は、安価な肉製品またはペットフードである。
【０００９】
大豆濃縮物は、乾燥した重量に基づいて少なくとも６５．０重量％のタンパク質を有する。大豆タンパク質濃縮物は、脱脂大豆果肉から可溶性炭水化物物質を除去することにより作製される。アルコール水溶液抽出（６０〜８０％エタノール）または酸浸出（等電点沈殿）が炭水化物除去に関して最も一般的な手段である。しかしながら、アルコール水溶液抽出および酸浸出の両方において、本質的にすべてのタンパク質が不溶性となる。タンパク質の溶解性は、中和により酸浸出生成物において部分的に回復される場合もある。また、アルコール水溶液抽出では、イソフラボンおよびサポニンがアルコール相に抽出され、続いて廃棄されてしまう。したがって、アルコール水溶液抽出を用いて生産される大豆タンパク質濃縮物は、せいぜいほんの少量のイソフラボンおよびサポニンを有するに過ぎない。加工食品、肉、家禽、魚、穀類および乳製品系において大豆濃縮物および型押し濃縮物に関して無数の用途が開発されている。
【００１０】
単離物は、標準的な化学的単離により生産され、可溶化（ｐＨ７〜１０でのアルカリ抽出）および単離、続く等電点沈殿により脱脂フレークからタンパク質を抜き出す。結果として、単離物は、乾燥した重量に基づいて少なくとも９０．０重量％のタンパク質である。単離物は、ときどきナトリウムおよびミネラル（灰分含有量）が高く、これはそれらの用途を制限し得る特性である。その主要な用途は、乳幼児用製品および代用乳などに見られるような乳製品代用品である。
【００１１】
イソフラボンは、大豆のような植物性タンパク質物質を含む各種マメ植物および脂肪種子に見られる。これらの化合物として概して、ダイジン、６”−Ｏ−アセチルダイジン、６”−Ｏ−マロニルダイジン、ダイゼイン、ゲニスチン、６”−Ｏ−アセチルゲニスチン、６”−Ｏ−マロニルゲニスチン、ゲニステイン、グリシチン、６”−Ｏ−マロニルグリシリン、グリシテイン、ビオカニンＡ、およびフォルモノネチンが挙げられる。
【００１２】
近年、大豆のような植物性タンパク質に含有されるイソフラボンが、乳癌細胞、前立腺癌細胞および結腸癌細胞のようなヒト癌細胞の成長を阻害し得ると提唱されている。さらに、イソフラボンはまた、例えばリポタンパク質および低密度コレステロールを含むアテローム性動脈硬化症のレベルを低減させることにより、および内皮依存性血管拡張応答を増加させることにより、心血管の危険因子を減少させるとも提唱されている。イソフラボンはまた、骨粗しょう症を防止する際および更年期症候群を治療する際にかなりの展望を示している。
【００１３】
イソフラボン化合物は、大豆のような植物性タンパク質物質における固有の苦味のある風味と関連している。タンパク質単離物およびタンパク質濃縮物のようなかかるタンパク質物質の商業生産では、イソフラボン化合物を除去することに焦点が当てられている。例えば、大豆タンパク質単離物の生産に関する慣例のプロセスでは、タンパク質を可溶化させるためにタンパク質の等電点以上のｐＨを有する水性媒質で大豆フレークを抽出する。タンパク質を含有する抽出物は、不溶性繊維物質から分離されて、タンパク質抽出物を供給する。たいていのイソフラボンは、抽出物ならびにタンパク質に可溶化される。酸浸出、すなわち酸を用いて抽出物のｐＨをタンパク質のほぼ等電点に、大豆に関しては通常４．２〜４．６に調節することにより、タンパク質を沈殿させる。続いて、沈殿したタンパク質を抽出物から分離する。ほとんどのイソフラボンは、抽出物からの沈殿したタンパク質（カード）の分離後に抽出物に可溶化されたままであるが、イソフラボンの幾らかは通常沈殿したカードに存在する。抽出物から沈殿したタンパク質カードを分離した後、抽出物およびそこに可溶化されたイソフラボンは通常廃棄される。分離されたタンパク質中に残された任意の残存イソフラボンは、タンパク質の徹底した洗浄により除去されて、確実にイソフラボンに関連した風味がタンパク質に存在しないようにする。また、先述の洗浄プロセスは、サポニンならびにイソフラボンを除去する傾向にある。
【００１４】
問題としては、等電点沈殿がタンパク質の溶解性を減少させる。したがって、先述のプロセスを用いて作製される大豆濃縮物および単離物は通常、典型的に約７０％未満であるそれらの低窒素溶解性指数（「ＮＳＩ」）により示されるように低溶解性を有する。
【００１５】
大豆は、約０．５重量％のサポニンを含有する。大豆サポニンは、２０世紀初期以来研究の対象になっている。これらの化合物は、様々な糖およびアセチル部分を有するトリテルペノイド骨格から構成される。現在のコンセンサスは、ソヤサポゲノールＡ、ＢおよびＥが真のアグリコンである一方で、ソヤサポゲノールＣおよびＤは、それらの単離のプロセス中に見られる加水分解の加工品であることである。相当するグリコシドは、それぞれいわゆる「Ａ群サポニン」、「Ｂ群サポニン」、および「Ｅ群サポニン」である。
【００１６】
大豆サポニンは、癌予防用の有望な作用因子となる抗変異原性特性を示すことが提唱されている。さらに、Ｂ群大豆サポニンは、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）のｉｎ  ｖｉｔｒｏでの複製に対して顕著な抑制効果を示すと提唱されている。大豆サポニンの化学構造は、既知の抗ウイルス剤である化合物グリチルリジンの構造と非常に類似しており、したがって大豆サポニンは、抗ウイルス医薬化合物の合成用の構成単位として展望を示している。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
非常に大量の大豆の栽培および加工処理にも関わらず、目下大豆サポニンは、それらの単離および精製の困難性に起因して重要な商品ではない。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
［発明の概要］
本発明は、低イソフラボン高サポニン大豆タンパク質製品、および低イソフラボン高サポニン大豆タンパク質製品を生産する方法を提供する。大豆タンパク質製品は、高窒素溶解性指数（「ＮＳＩ」）、および従来利用可能な大豆タンパク質物質よりも低いイソフラボン含有量を有する。また、本発明の大豆タンパク質物質は、高サポニン含有量を有する。
【００１９】
少なくとも約５５．０重量％のタンパク質、約２００μｇ／ｇ未満のイソフラボン、および少なくとも約１０００μｇ／ｇのソヤサポゲノール（サポニン）を含有する低イソフラボン高サポニン大豆タンパク質物質が提供される。あるいは、大豆タンパク質物質のタンパク質含有量は、大豆タンパク質濃縮物を供給するには少なくとも約６５．０重量％であってもよく、大豆タンパク質単離物を供給するには少なくとも約９０．０重量％であってもよい。
【００２０】
少なくとも４５．０重量％のタンパク質（Ｎ×６．２５）、約３０．０〜４０．０重量％の炭水化物、約５．０〜１０．０重量％の水分、約１．０重量％未満の脂肪、および少なくとも７０％の窒素溶解性指数（ＮＳＩ）を有する脱脂大豆物質を供給する工程を含む、低イソフラボン高サポニン大豆タンパク質物質を生産する方法が提供される。大豆物質を、約５．０〜１５．０重量％の固形分レベルで水を用いてスラリーとし、スラリーのｐＨを約７．０〜約７．５に調整する。ｐＨ調整したスラリーを遠心分離プロセスに付して、液体を形成し、続いて低温殺菌する。膜限外濾過または別の分離法を用いて、糖および他の小分子量成分を任意に液体から除去して、大豆タンパク質製品のタンパク質含有量を増加させてもよい。膜限外濾過プロセスから得られた濃縮液を吸着プロセスに付して、吸着プロセスでイソフラボンが吸着により除去される。得られたイソフラボン除去大豆タンパク質物質を低温殺菌し、続いて任意に噴霧乾燥させる。
【００２１】
あるいは、液体を限外濾過に付す介在工程なしで、遠心分離プロセスから回収される液体を吸着プロセスに付して、イソフラボンを除去する。得られたイソフラボン除去大豆タンパク質物質を低温殺菌し、続いて任意に噴霧乾燥させる。
【００２２】
本発明の方法は、農家により慣例に育てられ、大豆プロセッサで使用される大豆から減少イソフラボン特性を有する大豆タンパク質物質を生産する新規で経済的に効率のよい方法を提供する。低イソフラボン大豆タンパク質物質は、高サポニン含有量を有し、高窒素溶解性指数を特徴とするように高い溶解性タンパク質を含有する。
【００２３】
本発明の一形態において、本発明は、総乾燥物の少なくとも約５５．０重量％のタンパク質含有量、約２００μｇ／ｇ（総乾燥物）未満のイソフラボン含有量、および少なくとも約１０００μｇ／ｇ（総乾燥物）のソヤサポゲノール含有量を含む大豆タンパク質物質を提供する。
【００２４】
本発明の別の形態において、本発明は、（ａ）実質的に脱脂された大豆物質を供給する工程、（ｂ）物質を水と混合する工程、および物質からタンパク質を抽出する工程、（ｃ）不溶分を除去し、液体を生産する工程、（ｄ）液体を加熱処理する工程、および（ｅ）液体を吸着プロセスに付し、イソフラボンが吸着により除去される工程
を含む、大豆タンパク質製品を生産する方法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２５】
［詳細な説明］
総乾燥物の少なくとも５５．０重量％のタンパク質、２００μｇ／ｇ未満のイソフラボン、少なくとも約１０００μｇ／ｇソヤサポゲノール（サポニン）、約３．０重量％未満の粗繊維を有する低イソフラボン高サポニン大豆タンパク質物質が提供される。当該製品はまた、少なくとも７０％、好ましくは約７５％以上の窒素溶解性指数（「ＮＳＩ」）を有する。
【００２６】
実質的に脱脂された大豆物質を供給する工程、上記物質からタンパク質を抽出する工程、上記物質から繊維を除去する工程、イソフラボンおよびサポニンを保持しながら限外濾過により炭水化物およびミネラルの量を任意に低減させる工程、濃縮液または繊維除去した懸濁液を吸着プロセスに付し、イソフラボンを除去する工程、およびイソフラボン除去懸濁液を低温殺菌する工程を含む、低イソフラボン高サポニン大豆タンパク質物質を製造する方法が提供される。
【００２７】
概して、本発明の方法は、１）完全大豆の皮をむくこと、２）皮をむいた大豆をフレーク状にすること、３）ヘキサンのような溶媒を用いてフレーク状にした大豆から大豆油を抽出すること、４）高加熱またはあぶり(toasting)なしで脱脂大豆フレークを脱溶媒することであって、それにより「白色」フレークを生産すること、５）大豆フレークから繊維を除去すること、６）任意に液体（繊維除去スラリー）を限外濾過し、イソフラボンおよびサポニンを保持しながら炭水化物およびミネラルを除去すること、７）懸濁液を、吸着によりイソフラボンを除去する吸着剤と接触させること、８）イソフラボン除去懸濁液を低温殺菌すること、および９）任意に低温殺菌したイソフラボン除去懸濁液を乾燥させることを包含する。
【００２８】
上述の工程１〜工程４は、一般的に大豆に関する抽出プロセスと呼ばれる。上述の工程１〜工程４に関する一般的な手順は、本発明の譲受人に譲渡された米国特許第５，０９７，０１７号(Konwinski)（この開示は、参照して本明細書に明白に援用される）に記載されるように十分認識されている。
【００２９】
上述の第１項は、皮をむくことである。皮をむくことは、大豆の外皮を完全大豆から除去するプロセスである。皮をむく前に大豆を慎重に清浄化して、異物を除去し、その結果生成物は、着色体により汚染されない。大豆はまた一般に、皮をむく前に約６片〜８片に砕かれる。
【００３０】
外皮は通常、完全大豆重量の約８．０重量％を占める。皮をむいた大豆は、約１０．０重量％の水、４０．０重量％のタンパク質、２０．０重量％の脂肪であり、残部は主として炭水化物、繊維およびミネラルである。
【００３１】
上述の第２の工程は、フレーク状にするプロセスである。フレーク状にする前に、大豆片を十分柔軟にさせるように水分および温度を調節することにより大豆を調整する。調整した大豆片をフレーキングロールに通して、約０．０１〜０．０１２インチ（ｉｎ．）厚のフレークを形成させる。
【００３２】
上述の第３の工程は、フレークからの大豆油除去である。大豆フレークは、それらをヘキサンのような溶媒と接触させることにより脱脂させて、大豆油を除去する。大豆油は、マーガリン、ショートニングおよび他の食製品のような多くの用途で使用され、レシチンの優れた供給であり、レシチンは乳化剤として多くの有用な用途を有する。
【００３３】
上述の第４の工程では、あぶりなしでヘキサン脱脂した大豆フレークを脱溶媒して、溶媒を除去し、白色フレークを生産する。白色フレークを粉にして、大豆粉を作製してもよい。本発明の出発物質として使用することができる大豆粉は容易に商業的に入手可能である。市販の大豆粉は通常、少なくとも５０．０重量％（５２．５重量％）のタンパク質（ＮＸ６．２５）、約３０．０〜４０．０重量％（３４．６重量％）の炭水化物、約５．０〜１０．０重量％（６．０重量％）の水分、約５．０〜１０．０重量％（６．０重量％）の灰分、約２．０〜３．０重量％（２．５重量％）の粗繊維、および約１．０重量％未満（０．９重量％）の脂肪を有する（エーテル抽出で決定される場合）。
【００３４】
大豆粉は、９０％のタンパク質分散性指数（「ＰＤＩ」）を有する。ＰＤＩは、American Oil Chemist's Society（ＡＯＣＳ）法Ｂａ  １０−６５により決定される。９０％ＰＤＩは、加熱処理なしの大豆粉であり、酵素活性を有する。大豆粉は８０メッシュであり、これは大豆粉の９５重量％以上が８０番メッシュＵＳＡ標準ふるいを通過することを意味する。本発明の一実施形態によれば、大豆粉または大豆フレークであり得る出発物質は、上記工程１〜４に記載するような分離プロセスに従って生産される。次に、大豆タンパク質物質は、以下に記載する工程に従って生産される。９０％を上回るタンパク質分散性指数（「ＰＤＩ」）を有する大豆粉または大豆フレークは、数社で市販されている。
【００３５】
次の工程は、物質からタンパク質を抽出すること、および繊維を除去することを包含する。これは、水を用いて出発物質をスラリーとし、スラリーを遠心分離のような分離または清澄化プロセスに付して、それにより物質から水溶性タンパク質を抽出することにより達成される。物質をスラリーとするのに使用される水は、約２７℃〜約７０℃の温度に予熱してもよく、スラリーは、約５．０重量％〜約１５．０重量％の固形分含有量を有し得る。攪拌または混合が、出発物質をスラリーとするのに通常使用される。混合を実施する一主手段は、プロペラ型攪拌装置である。
【００３６】
繊維を除去する一手段は、水酸化ナトリウムのようなアルカリを用いてスラリーのｐＨを約６．８〜約１０．０に調整し、続いてスラリーを分離させて、ケーキおよび液体を形成することである。分離は、多数の物理的な分離手段により実施することができるが、遠心分離が最も効率的かつ有効な手段である。スクロール型遠心分離機を用いて分離を実施してもよく、あるいは円板型または管状遠心分離機を用いて分離を行ってもよい。水酸化ナトリウムが本明細書中の実施例で使用されるが、水酸化カリウムおよび水酸化カルシウムのような他のアルカリ性試薬を用いてもよい。
【００３７】
次に、繊維除去した物質を、例えば約８０℃以上、好ましくは約９３℃以上の温度での低温殺菌により加熱処理してもよい。低温殺菌は、例えば、ジェットクッキング(jet cooking)により、あるいは蒸気ジャケット付ケトル中で保持することにより実施することができる。あるいは、この加熱処理工程は、先述の繊維除去工程の前に行ってもよい。加熱処理後に、物質のｐＨは任意に適切な酸を用いて調整して、物質のｐＨを約６．５〜約７．５に低減させてもよい。通常、このｐＨの低減は、初期の水抽出が上記範囲の約６．８〜約１０．０の上端付近のｐＨで実施される場合に行われる。加熱処理後に物質のｐＨを約６．５〜約７．５に調節することにより、１０．０重量％の懸濁液で水中に再構成されると、約６．５〜約８．０のｐＨを有する大豆タンパク質物質が供給されることを見出した。
【００３８】
次に、物質を以下に記載するように吸着プロセスに付して、物質からイソフラボンを除去してもよい。あるいは、吸着プロセスに付す前に、まず物質を以下に記載する限外濾過プロセスに付して、小分子量成分を除去して、物質中のタンパク質を濃縮してもよい。
【００３９】
特に、繊維除去した物質（液体）は任意に、５，０００〜６０，０００分子量カットオフ（「ＭＷＣＯ」）膜、好ましくは５，０００〜３０，０００ＭＷＣＯ膜を用いて限外濾過して、タンパク質を濃縮してもよい。限外濾過膜は、濃縮液中にイソフラボンおよびサポニンを保持しながら透過液中に炭水化物およびミネラルを透過させることにより、濃縮液中の液体のタンパク質含有量を濃縮する。イソフラボンおよびサポニンは、通常１５００未満の分子量を有する低分子量成分である。しかしながら、驚くべきことに、イソフラボンおよびサポニンの大部分、限外濾過膜により濃縮液中に保持されることが見出された。イソフラボンおよびサポニンは、タンパク質と複合体形成している可能性があり、その結果イソフラボンおよびサポニンは濃縮液中に保持され、炭水化物およびミネラルと一緒に透過しないと現時点で考えられる。
【００４０】
通常、限外濾過は、約２５℃〜約６０℃、好ましくは約２５℃〜約５０℃の温度で行われる。イソフラボンおよびサポニンは低温では水により溶解性が下がり、より高い程度でタンパク質と複合体形成し、逆に高温では水により溶解性が上がり、より低い程度でタンパク質と複合体形成すると考えられる。したがって、上記温度範囲の約２５℃〜約６０度の下端付近で限外濾過を実施する場合、より大量のイソフラボンおよびサポニンが濃縮液中に保持され、上記温度範囲の約２５℃〜約６０度の上端付近で限外濾過を実施する場合、より小量のイソフラボンおよびサポニンが濃縮液中に保持される。
【００４１】
種々の分子量カットオフを有する適切な膜は、Wilmington, MAにあるKoch Membrane Systems、Minnetonka, MNにあるOsmonics、Oxnard, CAにあるPTI Advanced Filtration、およびVacaville, CAにあるSynder Filtrationのような幾つかの供給メーカーから容易に商業的に入手可能である。
【００４２】
また、濃縮液のタンパク質含有量は、限外濾過により製品から除去される透過液の量に基づいて制御され得る。すなわち、除去される透過液が多いほど、タンパク質含有量は高く、除去される透過液が少ないほど、タンパク質含有量は低い。例えば、少なくとも９０重量％のタンパク質含有量を有する濃縮液を達成するために、本発明の方法ではダイアフィルトレーション(diafiltlation)が実施される。ダイアフィルトレーションは、濃縮液に水を添加して、透過液中の膜透過種の除去を継続させるプロセスを指す。ダイアフィルトレーションは、本発明の２つの形態（不連続または連続ダイアフィルトレーション）のいずれかで行うことができる。不連続ダイアフィルトレーションは、透過可能な溶質が容積減少により濃縮液から透過液中に除去され、続いて繰り返しの工程で再希釈および再限外濾過を行う操作である。連続ダイアフィルトレーションは、透過液が膜により除去されるのと同じ速度で水を供給タンクに添加することを包含する。
【００４３】
次の工程では、遠心分離した液体または膜濃縮液を、吸着によりイソフラボンを除去する吸着性物質と接触させる。適切な吸着剤としては、イオン性または非イオン性合成吸着性樹脂が挙げられる。本明細書中の実施例で使用される例示的な吸着剤は、ＳＰ８２５、ＳＰ８５０およびＳＰ２０７であり、これらは、商品名Ｄｉａｎｉｏｎ（登録商標）およびＳｅｐａｂｅａｄｓ（登録商標）の名でWhite Plains, NYにあるMitsubishi Chemical Americaから入手可能な合成吸着性樹脂である。本明細書中の実施例で使用される別の吸着剤は、Ｄｏｗｅｘ  Ｏｐｔｉｐｏｒｅ  ＳＤ−２吸着剤であり、これは、Midland, MIにあるThe Dow Chemical Companyから入手可能な高分子吸着剤である。これらの合成吸着性樹脂および類似の合成吸着性樹脂を用いて、イソフラボンを物理的に吸着および保持することができ、それにより低温殺菌した遠心分離液体または膜濃縮液からイソフラボンを除去する。一実施形態によれば、合成吸着性樹脂は、水酸化ナトリウムで前洗浄した後、使用前に塩酸で処理する。
【００４４】
このプロセスでは、イソフラボンは、吸着プロセスにより物質から除去される一方で、サポニンは除去されない。これに関する正確な理由が目下明らかではないが、サポニンがイソフラボンよりも高い程度で物質中のタンパク質と複合体形成している可能性があり、その結果サポニンは吸着されないと考えられる。
【００４５】
以下の実施例の幾つかでは、合成吸着性樹脂が濃縮液中に混合された後、ふるいを通して濾過することによりそこから分離された。以下の他の実施例では、適切な吸着性物質を含有する慣例の吸着カラムを使用し、ここでは必要に応じて吸着剤を再生させた。商業的実践では、適切な吸着性物質を含有する慣例の吸着カラムを使用し、必要に応じて再生／清浄化する。
【００４６】
続いて、イソフラボン除去液体または濃縮液を再び約８０℃以上の温度で低温殺菌してもよい。低温殺菌は、ジェットクッキングにより、あるいは蒸気ジャケット付ケトル中で保持することにより実施され得る。
【００４７】
任意の最終工程では、イソフラボン除去大豆タンパク質物質を乾燥させる。乾燥は、高圧ノズルを用いた垂直噴霧乾燥機により実施され得る。
【００４８】
乾燥させたイソフラボン除去大豆タンパク質物質は、市販のレシチンまたはモノ〜ジグリセリドのような他の食品用界面活性剤でコーティングして、水分散性を改善させ、物質の凝集を低減させてもよい。かかるコーティングの添加は、例えば、約０．５重量％〜約２．０重量％の範囲である。
【００４９】
イソフラボン除去大豆タンパク質物質は多くの用途を有する。例えば、イソフラボン除去大豆タンパク質は、代用乳として、またドリンクミックスおよび飲料（例えば、チョコレート、バニラおよびパイナップル飲料）、乳製品（例えば、フルーツヨーグルト）、栄養および健康製品（例えば、プロテインバー）、全筋肉注射、スリミ(surimi)製品、乳化肉、穀類製品（例えば、朝食用シリアル）、パン製品（例えば、ブルーベリーマフィン）および他の液体またはドライ飲料、食物あるいは栄養製品中に使用することができる。
【００５０】
以下の実施例では、窒素溶解性指数（「ＮＳＩ」）は、American Oil Chemists' Method Ba 11-65に従って測定された。ＮＳＩは、製品中の水溶性のタンパク質の量を特徴付ける。例えば、ＮＳＩ７５％を有するタンパク質製品は、その製品中のタンパク質の７５重量％が水溶性であることを意味する。
【００５１】
溶解性指数を測定する方法は、Standards for Grades of Dry Milks including Methods of Analysis, Bulletin 916, American Diary Products Institute, Chicago, IL 60606に記載されている。
【００５２】
また、以下の実施例では、イソフラボンは、Thiagarajan, D.G.,  Bennink, M.R., Bourquin, L.D., and Kavas, F.A., Prevention of precancerous colonic lesions in rats by soy flakes, soy flour, genistein and calcium, Am. J. Clin. Nutr. 1998; 68(suppl.); 1394S-9Sに記載される手順により特徴付けられた。
【００５３】
製品中のボーマン−バーク阻害剤（「ＢＢＩ」）の量は、キモトリプシン阻害剤（「ＣＩ」）の存在により特徴付けられ、これはＢＢＩに関する間接的なアッセイである。ＣＩ分析に使用される方法は、大豆製品用のトリプシン阻害剤活性に関するAmerican Oil Chemists' Society (AOCS) official method Ba 12-75に基づき、使用する酵素および基質が異なっている。ＣＩ分析に使用する基質は、製品番号４９７３８としてSigma-Aldrichから入手可能なＮ−グルタリル−Ｌ−フェニルアラニン−ｐ−ニトロアニリド（ＧＰＮＡ）である。使用する酵素は、製品番号Ｃ４１２９としてSigma-Aldrichから入手可能なウシ膵臓由来のα−キモトリプシン（酵素委員会（ＥＣ）番号：３．４．２１．１）である。ＡＯＣＳ法は、Kakade等(Cereal Chemistry, 51.376(1974))に基づいている。キモトリプシンは、過剰に存在する基質Ｎ−グルタリル−Ｌ−フェニルアラニン−ｐ−ニトロアニリドを加水分解する。黄色い色素であるｐ−ニトロアニリドの放出が分光光度的に測定される。大豆タンパク質製品の存在下では、ｐ−ニトロアニリドの放出は、活性なキモトリプシン阻害剤のレベルと逆に変化する。
【００５４】
サポニンは、高速液体クロマトグラフィ（「ＨＰＬＣ」）を用いて分析した。ＨＰＬＣベースの分析方法が開発され、大豆中に存在するサポニン前駆体の評価を有効にした。その方法は、エタノール抽出、続く結合糖鎖（複数可）を切断してそのアグリコン（ソヤサポゲノール）を形成するための酸加水分解を用いて微細大豆または大豆製品からの総サポニンの単離に基づく。得られたソヤサポゲノールを単離して、固相抽出法により濃縮した。定組成溶離による逆相カラムを用いてソヤサポゲノールを分離して、蒸発光散乱検出器（「ＥＬＳＤ」）を用いて検出した。ソヤサポゲノールの定量化は、基準化合物に対して得られた較正曲線を用いて実施した。総大豆サポニン含有量は、総ソヤサポゲノール含有量のおよそ２倍である(Duhan et al. (2001) Int. J. Food. Sci. Nutr. 52.53-59)。
【００５５】
製品の粘度は、粘度計を用いて測定した。およそ２２．２℃（７２±２°Ｆ）の高純度の水２２０グラムを、Ｗａｒｉｎｇ７−スピードの１リットル実験室ブレンダー（モデル：７０１２Ｇ、Waring Products, Torrington, CT 06790）の１．２Ｌのガラスジャーに添加した。消泡剤（ＫＦＯ１２０４Ａ、Lubrizol Corporation, Wickliffe, OH 44092)１５滴を水に添加した。ブレンダーをスピード１（低）で回転させた。低速設定により、３５００±３００ｒｐｍでブレンダーを操作した。タンパク質製品３０グラムを水の渦に定常流として添加して、それにより１２．０重量％溶液を供給した。完全タンパク質製品を添加した後、ブレンダーを１５秒間作動させた。１５秒混合した後（ブレンダーオフ）、ブレンダーの脇とブレードをスパチュラでこすり落として、ブレンドされていない物質を再懸濁させた。ブレンダーをスピード１（低）で１分間作動させることより懸濁液を再び混合した。混合したタンパク質懸濁液を最上部から約１／２インチになるように１５０ｍｌのビーカーに充填した。適切なスピンドルを用いたＢｒｏｏｋｆｉｅｌｄ粘度計（モデル：ＲＶＤＶＥＡ１１５、Brookfield Engineering Laboratories, Inc., Middleboro, MA 02346）を使用して粘度を決定した。粘度計のモータを１００ｒｐｍの速度設定を用いて作動させ、読取りを１５秒で記録した。２つの読取りがこの様式で取られ、２つの読取りの平均を用いて、換算チャートからセンチポアズ（ｃｐ）で粘度を算出した。粘度が５０〜２００ｃｐの範囲である場合、スピンドル番号２を使用し、粘度が２００〜６００ｃｐの範囲である場合、スピンドル番号３を使用した。
【００５６】
本発明のこれらの態様および他の態様は、以下の１つまたはそれ以上の実施例を参照して、より容易に理解され得る。
【実施例】
【００５７】
（実施例１）
水２２７．１Ｌ（６０ガロン）を混合タンクに添加して、６０℃に加熱した。大豆白色フレーク４５．４ｋｇ（１００ｌｂｓ．）を混合タンクに添加した。４．５％水酸化ナトリウム溶液１４００ｍｌを添加して、生じたスラリーのｐＨを約７．０に上げた。５５〜５８℃で１０分間バッチを混合した後、遠心分離機供給タンクへ移送し、この遠心分離機供給タンクは、６０℃に加熱した水３０３．０Ｌ（８０ガロン）を含有していた。混合したスラリーのｐＨは７．０１であった。５５〜５８℃で２０分間スラリーを混合し、その後１分当たり２ガロン（ｇｐｍ）の割合でＳｈａｒｐｌｅｓスクロール型遠心分離機へ供給した。遠心分離機からの液体を、１２７℃でのジェットクッキングにより低温殺菌した。低温殺菌した液体を、１００メッシュストレーナに通して膜供給タンクへ移送した。１０，０００ＭＷＣＯ渦巻型膜を有する限外濾過膜系に液体を供給した。液体の温度は、膜処理中２６．５〜２６．８℃に維持した。膜供給タンクへ添加した本来の供給容量の約７５％が透過液として除去された。膜系からの濃縮液を７７℃で低温殺菌した。
【００５８】
低温殺菌した濃縮液約１．０Ｌを凍結乾燥させた。乾燥させた製品を分析して、その含有量を決定した。分析結果を表１に示す。結果はすべて、別記しない限り、乾燥した重量に基づく。
【００５９】
【表１】
2005524406.tif 000002
【００６０】
（実施例２）
合成吸着性樹脂（White Plains, New YorkにあるMitsubishi Chemical AmericaからのＳＰ８２５）２５０．０ｍｌを順次水ですすぎ、４％水酸化ナトリウム溶液ですすぎ、水ですすぎ、４％塩酸溶液ですすぎ、水ですすいだ。実施例１からの濃縮液７５０．０ｍｌを、ビーカー中ですすいだ樹脂と混合した。混合物を３０分間攪拌した。攪拌した後、ＵＳ標準Ｎｏ．４００ふるいを用いて混合物を濾過した。樹脂はふるいによって保持され、濾液を収集した。樹脂処理した濾液を凍結乾燥して、大豆タンパク質物質を得た。乾燥させた製品を分析して、その含有量を決定した。分析結果を表２に示す。結果はすべて、別記しない限り、乾燥した重量に基づく。
【００６１】
【表２】
2005524406.tif 000003
【００６２】
（実施例３）
水約２２７．１Ｌ（６０ガロン）を混合タンクに添加して、６０℃（１４０°Ｆ）に加熱した。次に、大豆フレーク約４５．４ｋｇ（１００ポンド）を混合タンクに添加して、スラリーを形成した。４．５％水酸化ナトリウム溶液約１４００ｍｌを混合タンクに添加した。スラリーを１０分間混合した後、遠心分離機供給タンクへ移送した。水約３０２．８Ｌ（８０ガロン）を遠心分離機供給タンク中でスラリーに添加して、２０分間スラリーを混合した。スラリーのｐＨは７．４３だった。スラリーを１分当たり約７．６Ｌ（１分当たり２ガロン）の割合でＳｈａｒｐｌｅｓスクロール型遠心分離機へ供給した。上清（懸濁液）を、約１２６．７℃（２６０°Ｆ）の温度でジェットクッキングした。ジェットクッキングした懸濁液をフラッシュ冷却し、１００メッシュストレーナに通して膜供給タンクへ移送した。２つの渦巻型膜（ともに１０，０００ＭＷＣＯ）を含有する限外濾過膜系に懸濁液を供給した。懸濁液の温度は、膜処理中約２６．７℃（８０°Ｆ）に維持した。膜供給タンクへ添加した本来の供給容量の約７５％が透過液として除去された。膜系からの濃縮液約１．０Ｌを凍結乾燥させた。乾燥させた製品を分析して、その含有量を決定した。分析結果を表３に示す。結果はすべて、別記しない限り、乾燥した重量に基づく。
【００６３】
【表３】
2005524406.tif 000004
【００６４】
（実施例４）
合成吸着性樹脂（White Plains, New YorkにあるMitsubishi Chemical AmericaからのＳＰ２０７）２５０．０ｍｌを順次水ですすぎ、４％水酸化ナトリウム溶液ですすぎ、水ですすぎ、４％塩酸溶液ですすぎ、水ですすいだ。実施例３からの濃縮液７５０．０ｍｌを、ビーカー中ですすいで前処理した樹脂と混合し、３０分間攪拌した。ＵＳ標準Ｎｏ．４００ふるいを用いてその攪拌した混合物を濾過した。樹脂はふるいによって保持され、濾液を収集した。樹脂処理した濾液を凍結乾燥して、大豆タンパク質物質を得た。乾燥させた製品を分析して、その含有量を決定した。分析結果を表４に示す。結果はすべて、別記しない限り、乾燥した重量に基づく。
【００６５】
【表４】
2005524406.tif 000005
【００６６】
（実施例５)
合成吸着性樹脂（Midland, MichiganにあるDow Chemical CompanyからのＤｏｗｅｘ  Ｏｐｔｉｐｏｒｅ  ＳＤ−２吸着剤）２５０．０ｍｌを順次水ですすぎ、４％水酸化ナトリウム溶液ですすぎ、水ですすぎ、４％塩酸溶液ですすぎ、水ですすいだ。実施例３からの濃縮液７５０．０ｍｌを、ビーカー中ですすいで前処理した樹脂と混合し、３０分間攪拌した。ＵＳ標準Ｎｏ．４００ふるいを用いてその攪拌した混合物を濾過した。樹脂はふるいによって保持され、濾液を収集した。樹脂処理した濾液を凍結乾燥して、大豆タンパク質物質を得た。乾燥させた製品を分析して、その含有量を決定した。分析結果を表５に示す。結果はすべて、別記しない限り、乾燥した重量に基づく。
【００６７】
【表５】
2005524406.tif 000006
【００６８】
（実施例６）
水約２２７．１Ｌ（６０ガロン）を混合タンクに添加して、６０℃（１４０°Ｆ）に加熱した。次に、大豆フレーク約４５．４ｋｇ（１００ポンド）を混合タンクに添加して、スラリーを形成した。４．５％水酸化ナトリウム溶液約１４００ｍｌを混合タンクに添加した。スラリーを１０分間混合した後、遠心分離機供給タンクへ移送した。水約３０２．８Ｌ（８０ガロン）を遠心分離機供給タンク中でスラリーに添加して、２０分間スラリーを混合した。スラリーのｐＨは７．４３だった。スラリーを１分当たり約７．６Ｌ（１分当たり２ガロン）の割合でＳｈａｒｐｌｅｓスクロール型遠心分離機へ供給した。上清（懸濁液）を、約１２６．７℃（２６０°Ｆ）の温度でジェットクッキングした。ジェットクッキングした懸濁液をフラッシュ冷却し、１００メッシュストレーナに通して膜供給タンクへ移送した。２つの渦巻型膜（ともに１０，０００ＭＷＣＯ）を含有する限外濾過膜系に懸濁液を供給した。懸濁液の温度は、膜処理中約２６．７℃（８０°Ｆ）に維持した。膜供給タンクへ添加した本来の供給容量の約７５％が透過液として除去された。膜系からの濃縮液約１．０Ｌを凍結乾燥させた。乾燥させた製品を分析して、その含有量を決定した。分析結果を表６に示す。結果はすべて、別記しない限り、乾燥した重量に基づく。
【００６９】
【表６】
2005524406.tif 000007
【００７０】
（実施例７）
合成吸着性樹脂（White Plains, New YorkにあるMitsubishi Chemical AmericaからのＳＰ８５０）２５０．０ｍｌを順次水ですすぎ、４％水酸化ナトリウム溶液ですすぎ、水ですすぎ、４％塩酸溶液ですすぎ、水ですすいだ。実施例６からの濃縮液７５０．０ｍｌを、ビーカー中ですすいで前処理した樹脂と混合し、３０分間攪拌した。ＵＳ標準Ｎｏ．４００ふるいを用いてその攪拌した混合物を濾過した。樹脂はふるいによって保持され、濾液を収集した。樹脂処理した濾液を凍結乾燥して、大豆タンパク質物質を得た。乾燥させた製品を分析して、その含有量を決定した。分析結果を表７に示す。結果はすべて、別記しない限り、乾燥した重量に基づく。
【００７１】
【表７】
2005524406.tif 000008
【００７２】
（実施例８）
水約２２７．１Ｌ（６０ガロン）を混合タンクに添加して、６０℃（１４０°Ｆ）に加熱した。次に、大豆フレーク約４５．４ｋｇ（１００ポンド）を混合タンクに添加して、スラリーを形成した。４．５％水酸化ナトリウム溶液約１４００ｍｌを混合タンクに添加した。スラリーを１０分間混合した後、遠心分離機供給タンクへ移送した。６０℃（１４０°Ｆ）に予熱した水約３０２．８Ｌ（８０ガロン）を遠心分離機供給タンク中でスラリーに添加して、２０分間スラリーを混合した。スラリーのｐＨは７．５２だった。スラリーを１分当たり約７．６Ｌ（１分当たり２ガロン）の割合でＳｈａｒｐｌｅｓスクロール型遠心分離機へ供給した。上清（懸濁液）を、約１２６．７℃（２６０°Ｆ）の温度でジェットクッキングした。ジェットクッキングした懸濁液をフラッシュ冷却し、１００メッシュストレーナに通して膜供給タンクへ移送した。２つの渦巻型膜（ともに１０，０００ＭＷＣＯ）を含有する限外濾過膜系に懸濁液を供給した。懸濁液の温度は、膜処理中約２６．７℃（８０°Ｆ）に維持した。膜供給タンクへ添加した本来の供給容量の約７５％が透過液として除去された。
【００７３】
膜系から収集した濃縮液を、１分当たり９４６ｍｌ（１分当たり０．２５ガロン）の流速でクロマトグラフィ系へ供給した。クロマトグラフィ系は、連続してつなげた５本のカラムから構成されており、カラムはそれぞれ、White Plains, New YorkにあるMitsubishi Chemical AmericaからのＳＰ８２５である合成吸着性樹脂５．０Ｌを含有していた。したがって、クロマトグラフィ系は、２５．０Ｌの樹脂を有し、カラムすべてを通過させた後の膜濃縮液を収集した。クロマトグラフィ処理流を約８２．２℃（１８０°Ｆ）で低温殺菌して、垂直スプレー乾燥機中で高圧ポンプ供給スプレーノズルを用いて噴霧乾燥した。乾燥させた製品を分析して、その含有量を決定した。分析結果を表８に示す。結果はすべて、別記しない限り、乾燥した重量に基づく。
【００７４】
【表８】
2005524406.tif 000009
【００７５】
（実施例９）
水約２２７．１Ｌ（６０ガロン）を混合タンクに添加して、６０℃（１４０°Ｆ）に加熱した。次に、大豆フレーク約４５．４ｋｇ（１００ポンド）を混合タンクに添加して、スラリーを形成した。４．５％水酸化ナトリウム溶液約１４００ｍｌを混合タンクに添加した。スラリーを１０分間混合した後、遠心分離機供給タンクへ移送した。６０℃（１４０°Ｆ）に予熱した水約３０２．８Ｌ（８０ガロン）を遠心分離機供給タンク中でスラリーに添加して、２０分間スラリーを混合した。スラリーのｐＨは７．５０だった。スラリーを１分当たり約７．６Ｌ（１分当たり２ガロン）の割合でＳｈａｒｐｌｅｓスクロール型遠心分離機へ供給した。上清（懸濁液）を、約１２６．７℃（２６０°Ｆ）の温度でジェットクッキングした。ジェットクッキングした懸濁液をフラッシュ冷却し、１００メッシュストレーナに通して膜供給タンクへ移送した。２つの渦巻型膜（ともに１０，０００ＭＷＣＯ）を含有する限外濾過膜系に懸濁液を供給した。懸濁液の温度は、膜処理中約２６．７℃（８０°Ｆ）に維持した。膜供給タンクへ添加した本来の供給容量の約７５％が透過液として除去された。
【００７６】
膜系から収集した濃縮液を、１分当たり９４６ｍｌ（１分当たり０．２５ガロン）の流速でクロマトグラフィ系へ供給した。クロマトグラフィ系は、連続してつなげた５本のカラムから構成されており、カラムはそれぞれ、White Plains, New YorkにあるMitsubishi Chemical AmericaからのＳＰ８２５である合成吸着性樹脂５．０Ｌを含有していた。したがって、クロマトグラフィ系は、２５．０Ｌの樹脂を有し、カラムすべてを通過させた後の膜濃縮液を収集した。クロマトグラフィ処理流を約８２．２℃（１８０°Ｆ）で低温殺菌して、垂直スプレー乾燥機中で高圧ポンプ供給スプレーノズルを用いて噴霧乾燥した。乾燥させた製品を分析して、その含有量を決定した。分析結果を表９に示す。結果はすべて、別記しない限り、乾燥した重量に基づく。
【００７７】
【表９】
2005524406.tif 000010
【００７８】
（実施例１０）
水約２２７．１Ｌ（６０ガロン）を混合タンクに添加して、６０℃（１４０°Ｆ）に加熱した。次に、大豆フレーク約４５．４ｋｇ（１００ポンド）を混合タンクに添加して、スラリーを形成した。４．５％水酸化ナトリウム溶液約１４００ｍｌを混合タンクに添加した。スラリーを１０分間混合した後、遠心分離機供給タンクへ移送した。６０℃（１４０°Ｆ）に予熱した水約３０２．８Ｌ（８０ガロン）を遠心分離機供給タンク中でスラリーに添加して、２０分間スラリーを混合した。スラリーのｐＨは７．６９だった。スラリーを１分当たり約７．６Ｌ（１分当たり２ガロン）の割合でＳｈａｒｐｌｅｓスクロール型遠心分離機へ供給した。上清（懸濁液）を、約１２６．７℃（２６０°Ｆ）の温度でジェットクッキングした。ジェットクッキングした懸濁液をフラッシュ冷却し、１００メッシュストレーナに通して膜供給タンクへ移送した。２つの渦巻型膜（ともに１０，０００ＭＷＣＯ）を含有する限外濾過膜系に懸濁液を供給した。懸濁液の温度は、膜処理中約２６．７℃（８０°Ｆ）に維持した。膜供給タンクへ添加した本来の供給容量の約７５％が透過液として除去された。
【００７９】
膜系から収集した濃縮液を、１分当たり９４６ｍｌ（１分当たり０．２５ガロン）の流速でクロマトグラフィ系へ供給した。クロマトグラフィ系は、連続してつなげた５本のカラムから構成されており、カラムはそれぞれ、White Plains, New YorkにあるMitsubishi Chemical AmericaからのＳＰ８２５である合成吸着性樹脂５．０Ｌを含有していた。したがって、クロマトグラフィ系は、２５．０Ｌの樹脂を有し、カラムすべてを通過させた後の膜濃縮液を収集した。クロマトグラフィ処理流を約８２．２℃（１８０°Ｆ）で低温殺菌して、垂直スプレー乾燥機中で高圧ポンプ供給スプレーノズルを用いて噴霧乾燥した。乾燥させた製品を分析して、その含有量を決定した。分析結果を表１０に示す。結果はすべて、別記しない限り、乾燥した重量に基づく。
【００８０】
【表１０】
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【００８１】
（実施例１１）
水約２２７．１Ｌ（６０ガロン）を混合タンクに添加して、６０℃（１４０°Ｆ）に加熱した。次に、大豆フレーク約４５．４ｋｇ（１００ポンド）を混合タンクに添加して、スラリーを形成した。４．５％水酸化ナトリウム溶液約１４００ｍｌを混合タンクに添加した。スラリーを１０分間混合した後、遠心分離機供給タンクへ移送した。６０℃（１４０°Ｆ）に予熱した水約３０２．８Ｌ（８０ガロン）を遠心分離機供給タンク中でスラリーに添加して、２０分間スラリーを混合した。スラリーのｐＨは７．４８だった。スラリーを１分当たり約７．６Ｌ（１分当たり２ガロン）の割合でＳｈａｒｐｌｅｓスクロール型遠心分離機へ供給した。上清（懸濁液）を、約１２６．７℃（２６０°Ｆ）の温度でジェットクッキングした。ジェットクッキングした懸濁液をフラッシュ冷却し、さらに５１．７℃（１２５°Ｆ）に冷却した。
【００８２】
冷却した懸濁液約１１３．６Ｌ（３０ガロン）を１００メッシュトレーナに通してクロマトグラフィ系供給タンクへ移送した。懸濁液を、１分当たり９４６ｍｌ（１分当たり０．２５ガロン）の流速でクロマトグラフィ系へ供給した。クロマトグラフィ系は、連続してつなげた５本のカラムから構成されており、カラムはそれぞれ、White Plains, New YorkにあるMitsubishi Chemical AmericaからのＳＰ８２５である合成吸着性樹脂５．０Ｌを含有していた。したがって、クロマトグラフィ系は、２５．０Ｌの樹脂を有し、カラムすべてを通過させた後の懸濁液を収集した。クロマトグラフィ処理懸濁液を約８２．２℃（１８０°Ｆ）で低温殺菌して、垂直スプレー乾燥機中で高圧ポンプ供給スプレーノズルを用いて噴霧乾燥した。乾燥させた製品を分析して、その含有量を決定した。分析結果を表１１に示す。結果はすべて、別記しない限り、乾燥した重量に基づく。
【００８３】
【表１１】
2005524406.tif 000012
【００８４】
（実施例１２）
水約２２７．１Ｌ（６０ガロン）を混合タンクに添加して、６０℃（１４０°Ｆ）に加熱した。次に、大豆フレーク約４５．４ｋｇ（１００ポンド）を混合タンクに添加して、スラリーを形成した。４．５％水酸化ナトリウム溶液約１４００ｍｌを混合タンクに添加した。スラリーを１０分間混合した後、遠心分離機供給タンクへ移送した。６０℃（１４０°Ｆ）に予熱した水約３０２．８Ｌ（８０ガロン）を遠心分離機供給タンク中でスラリーに添加して、２０分間スラリーを混合した。スラリーのｐＨは７．０３だった。スラリーを１分当たり約７．６Ｌ（１分当たり２ガロン）の割合でＳｈａｒｐｌｅｓスクロール型遠心分離機へ供給した。上清（懸濁液）を、約１２６．７℃（２６０°Ｆ）の温度でジェットクッキングした。ジェットクッキングした懸濁液をフラッシュ冷却し、約３７８．５Ｌ（１００ガロン）を１００メッシュストレーナに通して膜供給タンクへ移送した。２つの渦巻型膜（ともに１０，０００ＭＷＣＯ）を含有する限外濾過膜系に懸濁液を供給した。懸濁液の温度は、膜処理中約４８．９℃（１２０°Ｆ）に維持した。透過液約１８９．３Ｌ（５０ガロン）を除去した後、水１８９．３Ｌ（５０ガロン）を膜供給タンクに添加した。透過液除去および水添加のこの工程（ダイアフィルトレーション）を再度２回繰り返し、その結果膜供給タンクに添加した水の総容量は５６７．８Ｌ（１５０ガロン）であった。膜供給タンクに添加した水すべておよび膜供給タンクに添加した本来の供給容量の約８０％が透過液として除去され、その結果除去された透過液の総容量は８７０．６Ｌ（２３０ガロン）であった。
【００８５】
膜系から収集した濃縮液を、１分当たり９４６ｍｌ（１分当たり０．２５ガロン）の流速でクロマトグラフィ系へ供給した。クロマトグラフィ系は、連続してつなげた５本のカラムから構成されており、カラムはそれぞれ、White Plains, New YorkにあるMitsubishi Chemical AmericaからのＳＰ８２５である合成吸着性樹脂５．０Ｌを含有していた。したがって、クロマトグラフィ系は、２５．０Ｌの樹脂を有し、カラムすべてを通過させた後の膜濃縮液を収集した。クロマトグラフィ処理懸濁液を約８２．２℃（１８０°Ｆ）で低温殺菌して、垂直スプレー乾燥機中で高圧ポンプ供給スプレーノズルを用いて噴霧乾燥した。乾燥させた製品を分析して、その含有量を決定した。分析結果を表１２に示す。結果はすべて、別記しない限り、乾燥した重量に基づく。
【００８６】
【表１２】
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【００８７】
本発明は好ましい意向(design)を有するものとして記載してきたが、本発明は、この開示の精神および範囲内でさらに変更させることができる。したがって、本出願は、その一般的原理を用いた本発明の任意の変更、使用または適合を網羅するものとされる。さらに、本出願は、本発明が属する技術分野において既知または慣例の実施内に当たる場合で、かつ添付の特許請求の範囲の限定の範疇にあるこの開示からのかかる逸脱を網羅するものとされる。
【国際調査報告】
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