(57)【要約】（ａ）多孔性内部を有するポリマー粒子を提供し；そして、（ｂ）磁性粒子の均質な分散物を含む磁性流体とポリマー粒子とを接触させることにより、磁性粒子を多孔性内部に取り込み、ポリマー磁性粒子を生成することを含む、ポリマー磁性粒子の調製方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）多孔性内部を有するポリマー粒子を提供し；そして、
（ｂ）磁性粒子の均質な分散物を含む磁性流体とポリマー粒子とを接触させることにより、磁性粒子を多孔性内部に取り込み、ポリマー磁性粒子を生成すること
を含む、ポリマー磁性粒子の調製方法。
【請求項２】
磁性流体との接触時に、ポリマー粒子は乾燥している、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
磁性流体は、毛管現象によって多孔性内部に導入される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
ポリマー粒子を、減圧下で磁性流体と接触させる、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
ポリマー粒子は、水性媒体中に分散し得る、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
ポリマー粒子の多孔性内部は、親水基を有する、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
親水基は、エステル、アミン、アルコール、カルボン酸、アミド、ハロゲン化物、アルデヒド、ケトン化合物、イミン、ニトロ化合物、チオール、チオエーテル、ニトリル、酸無水物、およびスルホン酸化合物の１つ以上から選択される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
ポリマー粒子の多孔性内部は、電荷を有する基を有し、かつ、磁性粒子は、多孔性内部の電荷を有する基と反対の電荷を有する、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
磁性粒子は、プラスの電荷を有する、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
多孔性内部の電荷を有する基は、スルホネート基、ホスホネート基、カルボキシレート基、ニトレート基、または、カーボネートもしくはクロレートの無機結合種を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
磁性粒子は、マイナスの電荷を有する、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
多孔性内部の電荷を有する基は、イミン基、アンモニア基、アンモニウム基、ホスホニウム基、またはスルホニウム基を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
磁性流体は、フェロ流体を含む、請求項１〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
磁性粒子は、１〜５０ｎｍの範囲の最大寸法を有する、請求項１〜１３のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
最大寸法は、１０ｎｍ未満である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ポリマー粒子は、３０〜９０％の範囲の細孔容量を有する、請求項１〜１５のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】
細孔容量は、７５％以下である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
ポリマー粒子の多孔性内部は、１〜１０ｎｍの範囲の半径を有する小さな細孔を含む、請求項１〜１７のいずれかに記載の方法。
【請求項１９】
ポリマー粒子の多孔性内部は、１００〜５００ｎｍの範囲の半径を有する大きな細孔を含む、請求項１〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】
請求項１〜１９のいずれかに記載の方法によって得られ得る、磁性粒子が実質的に均一に分布しているポリマー磁性粒子。
【請求項２１】
試料からターゲット物質を分離するための、請求項２０に記載のポリマー磁性粒子の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特に、とりわけ生物学的試料のような試料からターゲット物質を分離するための、分離媒体として使用するための、ポリマー磁性粒子の調製方法、および、それから得られ得る粒子に関する。
【０００２】
発明の背景
様々なタイプの分離媒体を、化学的または生物学的試料中のターゲット物質の単離に使用するために利用することができる。分子生物学では、電気泳動分画、およびゲル透過におけるアガロースおよびポリアクリルアミド、クロマトグラフィーのためのイオン交換およびアフィニティ材料を含む、様々な材料が、分画段階において使用される。そのような材料の中で、有機ポリマーおよびシリコン系粒子の両方は、核酸のようなターゲットの分離における用途が見出されている。各タイプの分離において、ある時点で、固相中の粒子から液相を物理的に除去する要求がある。これは、例えば、カラムの状態で、もしくはゲルプレート上に、粒子を固定化し、そして液相を溶出することによって、または、遠心分離下で、もしくは磁気を使用して力を加えることによって粒子を集めることによって、達成され得る。他の試料成分から粒子を分離するための磁気の使用には、粒子が磁場に反応することが必要である。有機またはシリコン系材料は、それ自体に磁気的反応性はないので、磁性成分とポリマー成分の両方を含む磁性粒子の製造方法を考え出す必要がある。
【０００３】
ＷＯ８３／０３９２０には、溶液中で多孔性ポリマー粒子に鉄を導入する、ポリマー磁性粒子の調製が記載されている。非磁性鉄塩を多孔性粒子と混合し、次いで、鉄を、マグネタイト沈殿として細孔中に沈殿させる。これを達成するためには、非磁性鉄をマグネタイトに転換するために、酸化反応を含む更なる段階を、インサイチュ(in situ)で行わなければならない。
【０００４】
より最近には、ＵＳ５６４８１２４に、磁気反応性ミクロ粒子の調製方法が記載されている。それら粒子は、セラディン社(Seradyn Inc.)から、現在市販品を入手可能である。この方法によれば、ヘテロ凝集剤(heterocoagulant)の存在下、フェロ流体(ferrofluid)から析出したマグネタイトがその上に析出した非多孔性コア粒子が提供される。マグネタイトのコーティングが、コアの表面上へ析出する。十分高濃度のマグネタイトを得るためには、この方法において、被覆されたコア上へマグネタイトを更に析出させ得る結合剤として働く、ヘテロ凝集剤を使用する必要がある。この方法によって得られる粒子は、その中の磁性成分が、均一に分布していないという欠点を更に有する。
【０００５】
本発明は、有用なポリマー磁性粒子を製造するための簡略化された方法を提供することにより、従来技術の欠点を克服することを目的とする。
【０００６】
発明の要約
従って、第一の態様において、本発明は、
（ａ）多孔性内部(porous interior)を有するポリマー粒子を提供し；そして、
（ｂ）磁性粒子の均質な分散物を含む磁性流体とポリマー粒子とを接触させることにより、磁性粒子を多孔性内部に取り込み、ポリマー磁性粒子を生成すること
を含む、ポリマー磁性粒子の調製方法を提供する。
【０００７】
驚くべきことに、更なる化学反応を必要とせずに、ポリマー粒子の多孔性内部に、磁性粒子を安定な状態で取り込むことができ、そして、試料からターゲット物質を分離する際に使用するための、十分高濃度の磁性粒子を含むポリマー磁性粒子を製造することができることが見出された。
【０００８】
有利には、減圧(sub-atmospheric pressure)下で、ポリマー粒子を磁性流体と接触させる。減圧を使用することにより、ポリマー粒子の多孔性内部への、磁性流体の導入が促進されることがわかる。
【０００９】
特に、磁性流体が毛管現象によって多孔性内部へ導入され、かつ、比較的短時間でそうなり得るように、磁性流体と接触させるときに、ポリマー粒子が乾燥していることが好ましい。毛管現象による多孔性内部への磁性流体の導入は、粒子が懸濁している液相によって、ポリマー粒子の多孔性内部を湿らせることができる場合に促進される。ポリマー粒子をこのように湿らせることができれば、それらを、水性媒体中に分散させることができる。これは、ポリマー粒子の多孔性内部が親水基を有する場合に達成され得る。炭化水素およびヘテロ原子構造の両方を含むポリマー粒子は、親水基を有し得る。本発明により有用なそれら親水基には、エステル、アミン、アルコール、カルボン酸、アミド、ハロゲン化物、アルデヒド、ケトン化合物、イミン、ニトロ化合物、チオール、チオエーテル、ニトリル、酸無水物、およびスルホン酸化合物が含まれ得る。ポリマー粒子は、多孔性内部（その中の６０％超が、電荷を有し得るか、または電荷を有し得ない親水基を有する）を有することが好ましい。
【００１０】
１つの態様では、ポリマー粒子の多孔性内部が電荷を有する基を有し、かつ、磁性粒子が、多孔性内部中の電荷を有する基と反対の電荷を有することが好ましい。電荷を有する親水基は、特に有用である。
【００１１】
２つの電荷間のイオン性相互作用により、磁性粒子が安定な状態で取り込まれ得るように、磁性粒子は、多孔性内部が有する電荷と反対の電荷を有する。１つの態様では、磁性粒子は、プラスの電荷を有し、これは、酸性ｐＨ、一般には１〜６の範囲、好ましくは１〜３の範囲のｐＨを有するように磁性流体を調製することによって、都合よく得られ得る。この態様によれば、多孔性内部の電荷を有する基は、マイナスの電荷を有する。マイナスの電荷を有する官能基としては、スルホネート、ホスホネート、カルボキシレート、ニトレート、ならびに、カーボネートおよびクロレートの無機結合種(inorganic bound species)を挙げることができる。更なる態様では、磁性粒子は、マイナスの電荷を有し、これは、塩基性ｐＨ、一般には８〜１４の範囲のｐＨを有するように磁性流体を調製することによって、都合よく得られ得る。この態様によれば、多孔性内部の電荷を有する基は、プラスの電荷を有する。プラスの電荷を有する基またはそうなる可能性(potential)を有する化学基としては、イミン、アンモニア、アンモニウム、ホスホニウム、およびスルホニウムを挙げることができる。
【００１２】
多孔性内部の基は、何らかの適当な官能基を含み得る。それら官能基は、誘導体化によって、または、モノマーもしくはコモノマーとして、または、あらかじめ調製された(pre-formulated)多孔性内部への、これらおよび他の化学基からなるモノマー、コモノマー、もしくはポリマーの吸着によって、容易に取り込まれ得る。
【００１３】
本発明の磁性流体は、磁性粒子（それらは、溶液中にはないため、それらを磁性を有するものにするか、または、それらをポリマー粒子の多孔性内部に保持するために、更なる化学反応に付す必要がない）の均質な分散物を含む。磁性粒子は、磁性を有する。但し、これは、それらが、磁場の存在下で磁化され得るが、ポリマー磁性粒子の操作温度で、そのような磁場がないと、それ自体は磁性を有さないという意味である。そのような磁性材料は、常磁性材料および超常磁性材料を含む。それらは、強磁性材料およびフェリ磁性材料も含む。但し、それらは、十分低いキュリー温度を有し、ポリマー磁性粒子が印加磁場がない操作において、磁性を有さないものである。典型的な材料は、磁性金属酸化物、特に、酸化鉄、を含む。有用な磁性金属酸化物は、その第一鉄(ferrous iron)の全部または一部が、カドミウム、クロム、コバルト、銅、マグネシウム、マンガン、ニッケル、バナジウム、および／または亜鉛のような二価遷移金属によって任意に置換されている酸化鉄を含む。
【００１４】
磁性流体は、フェロ流体として提供されることが好ましい。本発明において有用な磁性流体は、典型的には約５０ｎｍまでの、有利には約２５ｎｍまでの、好ましくは１から１０ｎｍ未満の範囲の最大寸法の磁性粒子を有するものを特に含む。このサイズの粒子は、ポリマー粒子の小さな細孔のいずれにも分散し得る。これにより、非常に高い鉄担持能力(iron loading capacity)が粒子にもたらされ、かつ、ポリマー粒子全体にわたり、磁性粒子が均一に分布するようになる。
【００１５】
ポリマー磁性粒子は、有機ポリマー粒子または無機ポリマー粒子であり得る。典型的には、ポリマー粒子は、３０〜９０％の範囲、好ましくは３０〜７５％の範囲の細孔容量(pore volume)を有する。ポリマー粒子は、ＷＯ８３／０３９２０に記載の方法を含む、既知の方法によって調製され得る。これは、ビニルモノマーおよびポリビニルモノマーおよびそれらの混合物の使用を含む。ビニルモノマーは、スチレン、スチレン誘導体、無水マレイン酸、アクリレート、メタクリレート、および、ビニルエステルを含む。
【００１６】
ポリマー粒子への高リガンド結合が必要とされる場合、高比表面積を有する粒子を製造しなければならない。このことは、比較的小さなサイズの粒子を使用する場合にだけ、従来技術の方法を使用して達成され得る。そのような小さな粒子の使用における欠点は、それらが、印加磁場において非常にゆっくりとしか分離しないことである。より大きな粒子を代わりに使用すると、はるかに大きな細孔サイズが必要とされる。大きな細孔におけるマグネタイト結晶の析出は、使用時に残留磁化または残留磁気(remanence)をもたらすので、これは、従来技術の方法によっては容易に達成できない。それに対し、本発明は、大小両方のポリマー粒子へ適用することができる、制御可能な方法を提供する。制御された細孔サイズ分布を有する粒子を作ることができる。半径１００〜５００ｎｍの比較的大きな細孔に加え、またはそのような細孔の代わりに、主に１〜２０ｎｍの範囲、好ましくは１〜１５ｎｍの範囲、特に１〜１０ｎｍの範囲の比較的小さな細孔を作ることができる。本発明による磁性流体の使用により、磁性粒子は、毛管現象によって、大きな細孔よりもむしろ小さな細孔へ導入されやすくなる。この方法では、残留磁気による問題はなく、かつ、比較的大きなポリマー粒子は、リガンド結合のための大きな細孔は残したままで、全体にわたって均一に分布した高濃度の磁性粒子を含み得る。
【００１７】
磁性成分が実質的に均一に分布している、本方法によって得られ得るポリマー磁性粒子は、現在利用可能なポリマー磁性粒子よりも優れていると考えられる。光学顕微鏡を使用することによって、現在利用可能な磁性ポリマー粒子が、マグネタイトまたは他の金属酸化物を、シリカの層で被覆された、目で見える金属コアとして、凝集した不均質な状態でのみ取り込んでいることがわかる。それに対し、本発明は、粒子マトリックス全体にわたって均一かつ均質に分布している磁性成分を提供する。使用時に、均一かつ潜在的に迅速な磁場への反応をもたらす点で、これは、従来技術に対する重要な利点を有する。これは、磁場を印加することによって、粒子が均一な速度で表面上へ凝集することを可能にする；これは、そのような粒子を、例えば自動分離システムにおいて使用する場合に重要な性質である。
【００１８】
発明の詳細な説明
ここで、一例としてのみ、以下の実施例を参照して、本発明を更に詳細に説明する。
【００１９】
実施例１
２μｍのスルホン化ポリスチレン粒子（４．５ｇ、多孔率７４％）を、ロータリーエバポレーター(rotavapor)に置いた。それら粒子を、注意深く回転させ、そして、ポンプを使用して系を脱気した。１０ｍｍＨｇの圧力で１０分後、水性フェロ流体（３０ｇ、５７ｍｇマグネタイト／ｇ、ｐＨ１．２）を添加した。懸濁液を、１５分間回転させ、蒸留水（２０ｍｌ）を添加し、大気圧下で１０分間、回転を続けた。磁気装置上で粒子を分離することによって、ポリマー磁性粒子を水（５×５０ｍｌ）で洗浄した。その後、懸濁液中で、または乾燥状態で、ポリマー磁性粒子を後処理することもできる。
【００２０】
実施例２
２μｍのスルホン化ポリスチレン粒子（４．５ｇ、多孔率７４％）を、５ｍｌの１０％ポリエチレンイミン（ＭＷ＝１０００）を含む０．０５Ｍのリン酸ナトリウム、ｐＨ８．５、によって、周辺温度(ambient temperature)で一日処理した。それら粒子を遠心分離（ｒｐｍ＝１０００）によって回収し、０．１Ｍのリン酸ナトリウム、ｐＨ７．３、によって３回（２０ｍｌ）、そして、２０ｍｌのメタノールによって３回洗浄した。ゼータ電位測定によって、４〜９のｐＨ範囲で、プラスの表面電荷（＞＋３０ｍｖ）を確認した。それら粒子を、水性アルカリフェロ流体（ｐＨ  約(ca)  １１、３ｇ、２９マグネタイト／ｇ）へ添加した。周辺温度で一日（１ｄ）、懸濁液を回転させた。ポリマー磁性粒子を、磁気装置によって回収し、水（３×５０ｍｌ）および０．１Ｍのリン酸ナトリウム、ｐＨ７．３（３×５０ｍｌ）で洗浄した。
【００２１】
実施例３〜９および１６〜１８は、フェロ流体の添加前に、乾燥した多孔性ポリマー粒子を含む。
【００２２】
実施例３（減圧）
直径約３μｍのスルホン化多孔性ポリスチレン粒子（１．０ｇ）を、丸底フラスコ（５０ｍｌ）中に置いた。次いで、そのフラスコを、ブーチ・ロータベーパー(Buechi Rotavapor)に設置した。フラスコを穏やかに回転させながら、圧力を１０ｍｂａｒに下げた。３０分後、減圧下、８．４ｍｌのフェロ流体を、注意深く導入した。すべての液体が蒸発するまで、室温でこの工程を続け（１時間）、次いで、６５℃で１時間加熱した。次いで、乾燥した粒子を、超音波処理（３分）によってメタノール（２０ｍｌ）中に再分散させ、最後に遠心分離によって単離した。次いで、それら粒子を、アセトン（２０ｍｌ）中に分散させ、遠心分離によって分離した。この洗浄工程を、３回繰り返し、そして、５０℃で一晩、粒子を乾燥させた。その後、１３．７７×１０-3ｃｇｓｅの比磁化率(relative magnetic susceptibility)を有するポリマー粒子が得られた。
【００２３】
実施例４（大気圧）
直径約３μｍのスルホン化多孔性ポリスチレン粒子（０．２６ｇ）を、丸底フラスコ（５０ｍｌ）中に置いた。次いで、２ｍｌのフェロ流体を添加した。次いで、そのフラスコを、ブーチ・ロータベーパー(Buechi Rotavapor)に設置し、メタノール（２０ｍｌ）を添加する前に、大気圧下で３０分間、穏やかに回転させた。３分間超音波処理した後、遠心分離によって粒子を単離した。次いで、それら粒子を、アセトン（２０ｍｌ）中に分散させ、遠心分離によって分離した。この洗浄工程を４回繰り返した後、５０℃で一晩、粒子を乾燥させた。その後、９．７５×１０-3ｃｇｓｅの比磁化率を有するポリマー粒子が得られた。
【００２４】
実施例５（非スルホン化粒子、減圧）
直径約３μｍの多孔性ポリスチレン粒子（１．０ｇ）を、丸底フラスコ（５０ｍｌ）中に置いた。次いで、そのフラスコを、ブーチ・ロータベーパー(Buechi Rotavapor)に設置した。フラスコを穏やかに回転させながら、圧力を１０ｍｂａｒに下げた。３０分後、減圧下、１０ｍｌのフェロ流体を注意深く導入し、次いで、温度を６５℃に上げ、この温度で１時間保ち、乾燥した粒子を得た。次いで、乾燥した粒子を、超音波処理（３分）によってメタノール（２０ｍｌ）中に再分散させ、最後に遠心分離によって単離した。次いで、それら粒子を、アセトン（２０ｍｌ）中に分散させ、遠心分離によって分離した。この洗浄工程を３回繰り返し、そして、５０℃で５時間、粒子を乾燥させた。その後、１３．９８×１０-3ｃｇｓｅの比磁化率を有するポリマー粒子が得られた。
【００２５】
実施例６（非スルホン化粒子、ＰＤＡＫ、減圧）
直径約３μｍの多孔性ポリスチレン粒子（１．０ｇ）を、ポリ（ジアリルジメチルアンモニウムクロライド）の５％水溶液（１０ｍｌ）とメタノール（１０ｍｌ）との混合物中に分散させ、一晩置いた。次いで、それら粒子を、遠心分離によって単離し、水（２０ｍｌ）中に再分散させた。この水による洗浄を、３回繰り返した。次いで、試料の半分を、先の水による洗浄と同様に、メタノール（２０ｍｌ）によって３回洗浄し、そして、メタノールから乾燥させた。乾燥した粒子（約０．５ｇ）を、丸底フラスコ（５０ｍｌ）中に置いた。次いで、そのフラスコを、ブーチ・ロータベーパー(Buechi Rotavapor)に設置した。フラスコを穏やかに回転させながら、圧力を１０ｍｂａｒに下げた。３０分後、減圧下、４．２ｍｌのフェロ流体を、注意深く導入した後、温度を６５℃に上げ、この温度で１時間保ち、乾燥した粒子を得た。次いで、乾燥した粒子を、超音波処理（３分）によってメタノール（２０ｍｌ）中に再分散させ、最後に永久磁石を用いて単離した。次いで、粒子をメタノール（２０ｍｌ）中に再度分散させ、磁石によって分離した。この洗浄工程を３回繰り返した。次いで、それら粒子を、メタノールによる洗浄と同様に、アセトン（２０ｍｌ）中で３回洗浄し、５０℃で一晩乾燥させた。その後、２４．４０×１０-3ｃｇｓｅの比磁化率を有するポリマー粒子を得た。
【００２６】
実施例７（非スルホン化粒子、ＰＤＡＫ、大気圧）
実施例６においてポリ（ジアリルジメチルアンモニウムクロライド）によって処理した粒子の水性分散物のもう半分を、遠心分離によって処理し、粒子を単離した。単離した湿った粒子（約０．５ｇ）を、丸底フラスコ（５０ｍｌ）へ移し、４．２ｍｌのフェロ流体を添加した。大気圧下、ブーチ・ロータベーパー(Buechi Rotavapor)において、フラスコを２時間、穏やかに回転させた後、試料を一晩置いた。次いで、それら粒子を、永久磁石を用いて単離し、超音波処理（３分）によってメタノール（２０ｍｌ）中に再分散させた。次いで、実施例６に記載のものと同様の工程を用いて、それら粒子を、アセトン（２０ｍｌ）によって３回洗浄した。乾燥（５０℃で一晩）後、８．４１×１０-3ｃｇｓｅの比磁化率を有するポリマー粒子が得られた。
【００２７】
実施例８（スルホン化粒子、ＰＤＡＫ、減圧）
実施例６に記載の磁性ポリマー粒子の調製工程において、多孔性ポリスチレン粒子を、対応するスルホン化粒子に置き換えることによって、１５．３６×１０-3の比磁化率を有するポリマー粒子を得た。
【００２８】
実施例９（スルホン化粒子、ＰＤＡＫ、大気圧）
実施例７に記載の磁性ポリマー粒子の調製工程において、多孔性ポリスチレン粒子を、対応するスルホン化粒子に置き換えることによって、９．５８×１０-3の比磁化率を有するポリマー粒子を得た。
【００２９】
実施例１０〜１５は、フェロ流体の添加前に、乾燥していない多孔性ポリマー粒子を含む。
【００３０】
実施例１０（非スルホン化粒子、大気圧）
直径約３μｍの乾燥した多孔性ポリスチレン粒子（１．０ｇ）を、メタノール（２０ｍｌ）中に分散させた。それら粒子を、遠心分離によって分離し、乾燥せずに丸底フラスコ（５０ｍｌ）へ移し、１０ｍｌのフェロ流体を添加した。大気圧下、ブーチ・ロータベーパー(Buechi Rotavapor)において、フラスコを１時間、穏やかに回転させた後、遠心分離によって粒子を単離した。次いで、それら粒子を、水（２０ｍｌ）中に分散させ、遠心分離によって分離した。この水による洗浄工程を、３回繰り返した。その後、メタノール（２０ｍｌ）によって粒子を２回洗浄し、５０℃で一晩乾燥させた。その後、４．０２×１０-3ｃｇｓｅの比磁化率を有するポリマー粒子が得られた。
【００３１】
実施例１１（非スルホン化粒子、減圧）
直径約３μｍの乾燥した多孔性ポリスチレン粒子（１．０ｇ）を、メタノール（２０ｍｌ）中に分散させた。それら粒子を、遠心分離によって分離し、乾燥せずに丸底フラスコ（５０ｍｌ）へ移し、１０ｍｌのフェロ流体を添加した。そのフラスコを、ブーチ・ロータベーパー(Buechi Rotavapor)に設置し、圧力を、注意深く２０ｍｂａｒに下げた。減圧下で２０分後、遠心分離によって粒子を単離した。次いで、それら粒子を、水（２０ｍｌ）中に分散させ、遠心分離によって分離した。この水による洗浄工程を、３回繰り返した。その後、メタノール（２０ｍｌ）によって粒子を２回洗浄し、５０℃で一晩乾燥させた。その後、２．４２×１０-3ｃｇｓｅの比磁化率を有するポリマー粒子が得られた。
【００３２】
実施例１２（乾燥したスルホン化粒子、減圧）
直径約３μｍの乾燥したスルホン化多孔性ポリスチレン粒子（１．０ｇ）を、丸底フラスコ（５０ｍｌ）へ移し、１０ｍｌのフェロ流体を添加した。超音波浴中で１分間、試料を処理した後、フラスコを、ブーチ・ロータベーパー(Buechi Rotavapor)に設置し、圧力を注意深く７５ｍｂａｒに下げた。減圧下で２０分後、遠心分離によって粒子を単離した。次いで、粒子を水（２０ｍｌ）中に分散させ、遠心分離によって分離した。この水による洗浄工程を、４回繰り返した。その後、メタノール（２０ｍｌ）によって粒子を２回洗浄し、５０℃で一晩乾燥させた。その後、１．０９×１０-3ｃｇｓｅの比磁化率を有するポリマー粒子が得られた。
【００３３】
実施例１３（乾燥したスルホン化粒子、大気圧）
直径約３μｍの乾燥したスルホン化多孔性ポリスチレン粒子（１．０ｇ）を、丸底フラスコ（５０ｍｌ）へ移し、１０ｍｌのフェロ流体を添加した。超音波浴中で１分間、試料を処理した後、フラスコを、ブーチ・ロータベーパー(Buechi Rotavapor)に設置した。大気圧下で２０分間、フラスコを穏やかに回転させた後、遠心分離によって粒子を単離した。次いで、粒子を水（２０ｍｌ）中に分散させ、遠心分離によって分離した。この水による洗浄工程を、２回繰り返した。次いで、メタノール（２０ｍｌ）によって粒子を２回洗浄し、５０℃で一晩乾燥させた。その後、１．１０×１０-3ｃｇｓｅの比磁化率を有するポリマー粒子が得られた。
【００３４】
実施例１４（水に分散させたスルホン化粒子、減圧）
直径約３μｍのスルホン化多孔性ポリスチレン粒子（１．０ｇ）を、水（２０ｍｌ）中に分散させた。それら粒子を、遠心分離によって分離し、乾燥せずに丸底フラスコ（５０ｍｌ）へ移し、１０ｍｌのフェロ流体を添加した。ブーチ・ロータベーパー(Buechi Rotavapor)にフラスコを設置する前に、超音波浴中で１分間、試料を処理し、そして、圧力を注意深く２０ｍｂａｒに下げた。減圧下で２０分後、遠心分離によって粒子を単離した。次いで、それら粒子を、水（２０ｍｌ）中に分散させ、遠心分離によって分離した。この水による洗浄工程を、２回繰り返した。次いで、メタノール（２０ｍｌ）によって粒子を２回洗浄し、５０℃で一晩乾燥させた。その後、３．１１×１０-3ｃｇｓｅの比磁化率を有するポリマー粒子が得られた。
【００３５】
実施例１５（水に分散させたスルホン化粒子、大気圧）
直径約３μｍのスルホン化多孔性ポリスチレン粒子（１．０ｇ）を、水（２０ｍｌ）中に分散させた。それら粒子を、遠心分離によって分離し、乾燥せずに丸底フラスコ（５０ｍｌ）へ移し、１０ｍｌのフェロ流体を添加した。超音波浴中で１分間、試料を処理した、大気圧下で１時間、ブーチ・ロータベーパー(Buechi Rotavapor)においてフラスコを穏やかに回転させた後、遠心分離によって粒子を単離した。次いで、粒子を水（２０ｍｌ）中に分散させ、遠心分離によって分離した。この水による洗浄工程を、２回繰り返した。次いで、メタノール（２０ｍｌ）によって粒子を２回洗浄し、５０℃で一晩乾燥させた。その後、３．１３×１０-3ｃｇｓｅの比磁化率を有するポリマー粒子が得られた。
【００３６】
実施例１６（スルホン化粒子）
直径約３μｍの乾燥したスルホン化多孔性ポリスチレン粒子（１０．０ｇ）を、丸底フラスコ（２５０ｍｌ）中に置いた。次いで、そのフラスコをブーチ・ロータベーパー(Buechi Rotavapor)に設置した。フラスコを穏やかに回転させながら、圧力を１０ｍｂａｒに下げた。１５分後、圧力を２００ｍｂａｒに上げ、１０ｍｌのフェロ流体を注意深く導入した。次いで、圧力を注意深く２０ｍｂａｒに下げ、３０分間このレベルに保った。次いで、遠心分離によって粒子を分離し、メタノール（１００ｍｌ）と水（１００ｍｌ）との混合物中に再分散させ、遠心分離によって分離した。次いで、単離した粒子を、メタノール（２００ｍｌ）中に分散させ、遠心分離によって分離し、最後に５０℃で一晩乾燥させた。その後、７．０３×１０-3ｃｇｓｅの比磁化率を有するポリマー粒子が得られた。
【００３７】
実施例１７（スルホン化粒子、ＰＥＩ）
直径約３μｍのスルホン化多孔性ポリスチレン粒子（１．０ｇ）を、超音波処理（２分）によって、ポリエチレンイミンの５％水溶液（１０ｍｌ）中に分散させた。室温で４０分後、遠心分離によって粒子を単離し、水（２０ｍｌ）中に再分散させた。次いで、遠心分離によって粒子を分離し、メタノール（２０ｍｌ）中に再分散させた。最後に、粒子を単離し（遠心分離）、５０℃で一晩乾燥させた。乾燥させた粒子を、丸底フラスコ（５０ｍｌ）中に置いた。次いで、そのフラスコを、ブーチ・ロータベーパー(Buechi Rotavapor)に設置した。フラスコを穏やかに回転させながら、圧力を１０ｍｂａｒに下げた。２０分後、圧力を２００ｍｂａｒに調整し、１０ｍｌのフェロ流体を注意深く導入した。圧力を徐々に２０ｍｂａｒに下げ、２０分間、このレベルに維持した。次いで、遠心分離によって粒子を分離し、水とメタノールとの１：１（体積）混合物（２５ｍｌ）中に再分散させた。この洗浄工程を２回繰り返し、粒子を単離し（遠心分離）、５０℃で一晩乾燥させた。その後、９．６９×１０-3ｃｇｓｅの比磁化率を有するポリマー粒子が得られた。
【００３８】
実施例１８（スルホン化粒子、ＰＤＡＫ）
直径約３μｍのスルホン化多孔性ポリスチレン粒子（１．０ｇ）を、超音波処理（２分）によって、ポリ（ジアリルジメチルアンモニウムクロライド）の５％水溶液（１０ｍｌ）中に分散させた。室温で４０分後、遠心分離によって粒子を単離し、水（２０ｍｌ）中に再分散させた。次いで、遠心分離によって粒子を分離し、メタノール（２０ｍｌ）中に再分散させた。最後に、粒子を単離し（遠心分離）、５０℃で一晩乾燥させた。乾燥させた粒子を、丸底フラスコ（５０ｍｌ）中に置いた。次いで、そのフラスコを、ブーチ・ロータベーパー(Buechi Rotavapor)に設置した。フラスコを穏やかに回転させながら、圧力を１０ｍｂａｒに下げた。２０分後、圧力を２００ｍｂａｒに調整し、１０ｍｌのフェロを、注意深く導入した。圧力を徐々に２０ｍｂａｒに下げ、２０分間、このレベルに維持した。次いで、遠心分離によって粒子を分離し、水とメタノールとの１：１（体積）混合物（２５ｍｌ）中に再分散させた。この洗浄工程を２回繰り返し、粒子を単離し（遠心分離）、５０℃で一晩乾燥させた。その後、８．２９×１０-3ｃｇｓｅの比磁化率を有するポリマー粒子が得られた。
【手続補正書】
【提出日】平成16年2月23日(2004.2.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１１】
磁性粒子は、マイナスの電荷を有する、請求項８に記載の方法。
【国際調査報告】
2005516077.tif 000002
2005516077.tif 000003
2005516077.tif 000004