(57)【要約】  性機能障害を治療および／または予防するための医薬品の調剤における、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む組成物の使用であって、前記ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１５倍より機能的に選択的である。
2005516014.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
性機能障害を治療および／または予防するための医薬品の調剤における、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む組成物の使用であって、該ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１５倍より機能的に選択的である、上記の使用。
【請求項２】
男性勃起機能障害（ＭＥＤ）を治療および／または予防するための、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
女性性機能障害（ＦＳＤ）を治療および／または予防するための、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）および／または性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ）を治療および／または予防するための、請求項３に記載の使用。
【請求項５】
医薬品は、経口投与または鼻腔内投与される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項６】
選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、性的興奮の前および／またはその間に投与される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項７】
選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む医薬組成物であって、該ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１５倍より機能的に選択的であり；そして、該アゴニストは、場合により、製薬上許容できるキャリアー、希釈剤または添加剤と混合されている、上記の医薬組成物。
【請求項８】
選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む組成物の有効量を個体に投与することを含む、ヒトまたは動物における性機能障害の治療または予防方法であって、該ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１５倍より機能的に選択的であり；そして、該アゴニストは、場合により、製薬上許容できるキャリアー、希釈剤または添加剤と混合されている、上記の方法。
【請求項９】
性機能障害は、男性勃起機能障害（ＭＥＤ）である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
性機能障害は、女性性機能障害（ＦＳＤ）である、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
女性性機能障害（ＦＳＤ）は、女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）および／または性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ）である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
性機能障害を治療および／または予防するのに用いることが出来る物質（以下、選択的ドーパミンＤ３アゴニストと称する）を同定するための分析方法であって、該分析は、試験物質が、内因性の生殖器の充血プロセスまたは勃起プロセスを直接的に増強できるかどうかを決定することを含み；該増強は、本発明で定義された試験物質の存在下での、生殖器の血流または陰茎海綿体圧および／または海綿体の血流の相乗作用と定義され；このような試験物質による相乗作用は、試験物質が、性機能障害の治療および／または予防において有用な可能性があることを示し、そして、該試験物質は選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである、上記の方法。
【請求項１３】
請求項１２に記載の分析方法で定義された物質。
【請求項１４】
請求項１３に記載の物質を含む、性機能障害を治療するための経口投与または鼻腔内投与のための医薬品。
【請求項１５】
女性または男性からサンプルを単離すること；該サンプルが女性性機能障害または男性性機能障害を引き起こすような量で物体を含むかどうかを決定することを含む診断方法であって、該物体は、女性における内因性の生殖器の興奮プロセスまたは男性の海綿体における勃起プロセスに直接的な作用を有し；該物体は、作用物質の使用により有益な作用が得られるように調節されることが可能であり；そして、該作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである、上記の方法。
【請求項１６】
単離された女性または男性サンプルで物体を検出する手段を含む診断用組成物またはキットであって；該手段は、サンプルが女性性機能障害または男性性機能障害を引き起こすような量で、または、性機能障害を引き起こすような量で該物体を含むかどうかを決定するのに用いることができ；該物体は、内因性の生殖器の興奮プロセスまたは勃起プロセスに直接的な作用を有し、該物体は、作用物質の使用により有益な作用が得られるように調節されることが可能であり；そして、該作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである、上記の組成物またはキット。
【請求項１７】
女性性機能障害または男性性機能障害を治療または予防することができる作用物質を同定するのに用いられる動物モデルであって、該モデルは、該動物の骨盤神経を刺激した後の、動物の膣／陰核の血流、陰茎海綿体圧および／または海綿体の血流における変化を測定する手段を含む麻酔された雌または雄の動物を含み；そして、該作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである、上記のモデル。
【請求項１８】
ＦＳＡＤまたはＭＥＤを治療するために内因性の生殖器の興奮プロセスまたは勃起プロセスを直接的に増強することができる作用物質を同定するための分析方法であって、作用物質を請求項１７に記載の動物モデルに投与すること；および、内因性の生殖器の興奮プロセスまたは勃起プロセスの変化を測定することを含み；該変化は、定義された試験物質の存在下での、動物モデルにおける膣／陰核の血流、陰茎海綿体圧（ＩＣＰ）（および／または海綿体の血流）の相乗作用と定義され；そして、該作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである、上記の方法。
【請求項１９】
性機能障害の治療または予防のための医薬品の製造／調剤における、１またはそれ以上の選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストと、１またはそれ以上の補助剤とからなる組み合わせの使用であって、ここで、該ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１５倍より機能的に選択的であり、該補助剤としては：
(ａ)  ＰＤＥ阻害剤（ＰＤＥｉ）；
(ｂ)  中性エンドペプチダーゼ（ＮＥＰ）を阻害する化合物；
(ｃ)  α−アドレナリン受容体アンタゴニスト化合物；
(ｄ)  ＮＰＹ−Ｙ１アンタゴニスト；
(ｅ)  コレステロール降下剤；
(ｆ)  エストロゲン受容体調節因子および／またはエストロゲンアゴニストおよび／またはエストロゲンアンタゴニスト；
(ｇ)  アンドロゲン受容体調節因子および／またはアンドロゲンアゴニストおよび／またはアンドロゲンアンタゴニスト；
(ｈ)  テストステロン補充剤またはテストステロンインプラント；または、
(ｉ)  エストロゲン、エストロゲン、および、メドロキシプロゲステロンまたは酢酸メドロキシプロゲステロン（ＭＰＡ）（単独で、または、組み合わせて）、またはエストロゲンおよびメチルテストステロンホルモン補充療法剤
が挙げられる、上記の使用。
【請求項２０】
男性勃起機能障害（ＭＥＤ）を治療するための、請求項１９に記載の使用。
【請求項２１】
女性性機能障害（ＦＳＤ）を治療するための、請求項１９に記載の使用。
【請求項２２】
女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）および／または性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ）を治療するための、請求項２１に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、性機能障害の治療および／または予防、例えば女性性機能障害（ＦＳＤ）、特に女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）、無オルガスム症（オルガスムに達しないこと）または欲求低下障害、例えば性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ；性に対する関心の欠如）の治療および／または予防に有用な化合物および薬剤に関する。好ましくは、ＨＳＤＤを併発したＦＳＡＤを治療または予防することである。
【０００２】
本発明はさらに、ＦＳＤ、特にＦＳＡＤ、無オルガスム症またはＨＳＤＤを治療および／または予防する方法に関する。好ましくは、ＨＳＤＤを併発したＦＳＡＤを治療または予防することである。
【０００３】
その上、本発明はさらに、ＦＳＤ、特にＦＳＡＤ、無オルガスム症またはＨＳＤＤの治療および／または予防に有用な化合物をスクリーニングするための分析に関する。好ましくは、ＨＳＤＤを併発したＦＳＡＤを治療または予防することである。
【０００４】
本発明は、男性性機能障害、特に男性勃起機能障害（ＭＥＤ）の治療および／または予防に用いるための化合物および医薬組成物に関する。本発明で述べられる男性性機能障害とは、射精の障害、例えば無オルガスム症（オルガスムに達しないこと）、または、欲求低下障害、例えば性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ；性に対する関心の欠如）を含むものとする。
【０００５】
本発明はさらに、男性性機能障害、特にＭＥＤの治療および／または予防方法に関する。
本発明はまた、男性性機能障害、特にＭＥＤの治療および／または予防に有用な化合物をスクリーニングするための分析に関する。
【０００６】
一つの広範な観点において、本発明は、性機能障害を治療および／または予防するための医薬品の調剤における選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む組成物の使用を提供し、前記ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１５倍より機能的に選択的である。
【背景技術】
【０００７】
ドーパミンアゴニスト
脳内でのドーパミン受容体の非選択的な活性化は、男性勃起機能障害（ＭＥＤ）を治療することが臨床的に証明されたメカニズムである。アポモルフィンは、このような非選択的ドーパミンアゴニストの一つであるが、中枢神経系でドーパミン受容体に作用し、ＭＥＤ治療に有効である。
【０００８】
本発明の以前は、一般的に、アポモルフィンおよびその他の非選択的ドーパミン受容体アゴニストにより引き起こされる勃起作用および女性の性的なモチベーションは、Ｄ２（またはＤ2ともいう）ドーパミン作動性受容体の活性化を介すると理解されていた（Andersson（2001年）Am. Soc. Of Pharmacology and Exp. Therapeutics，第53巻，第3号，417〜450頁、および、GiulianoおよびAllard（2001年）Int. J. Impotence Research，13，Suppl. 3，S18〜S28を参照）。
【０００９】
特に、Ｃｈｅｎ等（J. of Urology，1999年7月，第162巻，237〜242頁）は、「アポモ
ルフィンに対するＩＣＰ［陰茎海綿体圧］の増加は、主に、ＰＶＮ［室傍核］におけるＤ２受容体サブタイプの活性化による」と述べている（アブストラクトを参照）。
【００１０】
その上、本発明の以前の、性的行動の刺激はＤ２受容体を介すると考えられていたことのさらなる証拠は、Meglasson M.D. 等（2001年）Abstr. Soc. Neurosci.で見出すことができ、それには以下のように述べられている。
「・・・脳のドーパミン受容体は、性的行動に関与する。初期の発見によれば、Ｄ１受容体は、Ｄ２受容体の刺激の前性交作用に拮抗することが示唆されている（Life Sci ５
１：１７０５）。これは、選択的Ｄ２アゴニストが、混合型Ｄ１／Ｄ２アゴニスト、例えばアポモルフィンより効果的である可能性がある（ＡＰＯ；Ｋi：Ｄ１，５６ｎＭ、これ
に対し、Ｄ２，２６ｎＭ）ということを示す。我々は、ＰＮＵ−１４２７７４Ｅ、選択的Ｄ２受容体アゴニスト（Ｋi：Ｄ２，７ｎＭ、これに対し、Ｄ１＞７μＭ）を用いてこの
仮説を検証した。性的な感受性は、卵巣摘出されたホルモン不十分な雌ラットに、５０μｇ／ｋｇのＰＮＵ−１４２７７４Ｅを経口投与した後、５０または２５０ｇ／ｋｇのＡＰＯを腹腔内投与した後、または、プラセボを投与した後の、１５〜３０分間のロードシス／マウント率（Ｌ／Ｍ）により測定された（時間間隔は薬剤＋／−血漿Ｃｍａｘにあわせる）。ＰＮＵ−１４２７７４Ｅでは、Ｌ／Ｍが２２＋／−８％から６５＋／−１０％に増加した（Ｐ＜０.０１）。ＡＰＯでは、試験された用量でＬ／Ｍは増加しなかった（０、
５０、および２５０μｇ／ｋｇで、それぞれ１０＋／−５％、１１＋／−５％、０＋／−０％）。これらのデータから、選択的Ｄ２アゴニストが、混合型Ｄ１／Ｄ２受容体の拮抗作用を有する薬剤であるＡＰＯより有効であることが示される。選択的Ｄ２受容体の拮抗作用と性的行動との関係を確認するために、ＰＮＵ−１４２７７４Ｅを、雄アカゲザルで、性的感受性のある雌サルの存在下または非存在下で試験した。ＰＮＵ−１４２７７４Ｅを用量０、２０、５０、または１２５μｇ／ｋｇで経口投与した後４時間、非接触型の性的行動を評価したところ、２０および５０μｇ／ｋｇで性的行動（勃起、マスターベーション）の増加が起こり、雌サルとの視覚的な接触が許容された場合、それらは増強された。１２５μｇ／ｋｇでの性的行動は、プラセボと類似しており、すなわちこれは、二相性の用量応答関係を示す。これらの発見は、ドーパミン作動薬による性的行動の刺激が、Ｄ２受容体の活性化を示すことを証明している。・・・」。
【００１１】
非選択的ドーパミンアゴニスト、例えばアポモルフィン、７−ヒドロキシ−ＤＰＡＴ（７−ＯＨ−ＤＰＡＴ）およびプラミペキソールはいずれも、吐き気、嘔吐、失神、低血圧および徐脈などの副作用を引き起こし、これらの副作用のいくつかは重篤な懸念の原因である。特に、米国における医薬品局（ＦＤＡ）は、目下、失神、低血圧および徐脈などの重篤な有害反応による安全性への関心に従って、ユープリマ（Ｒ）（すなわちアポモルフィン）を調査している。
【００１２】
５種のドーパミン受容体がクローニングされている。それは、Ｄ１様受容体（Ｄ１およびＤ５；またはＤ1およびＤ5ともいう）およびＤ２様受容体（Ｄ２、Ｄ３およびＤ４；またはＤ2、Ｄ3およびＤ4ともいう）である。我々は、「非選択的」により、Ｄ２様受容体
ファミリーの異なるメンバー間の、特にＤ２とＤ３受容体との間の機能的な選択性を示さないか、または、ほんのわずかしか示さないドーパミンアゴニストを意味する。ＷＯ ０
０／２３０５６において、プラミペキソールが選択的Ｄ３受容体アゴニストであると示唆されている。しかしながら、それに続く調査によれば、機能的に、プラミペキソールのＤ３受容体に対する選択性は、Ｄ２受容体に対する選択性の約９倍程度であることが証明された。これは、Perachon等（1999年），European Journal of Pharmacology，366，293〜300で示されたデータに一致する。しかしながら、さらに調査したところ、機能的に、プ
ラミペキソールのＤ３受容体に対する選択性は、Ｄ２受容体に対する選択性の約５倍程度しかないことが証明された。これは、その他の（以前の）論文に一致する（Mierau等（1995年），European Journal of Pharmacology，290，29〜36を参照）。従って、明らかなことは、このような化合物が、Ｄ２受容体に対して効力のある活性を保持し続ける一方で、Ｄ３受容体に対してわずかにより活性であることである。このようなわずかに選択的なＤ３受容体アゴニストは、本発明で述べられる場合、本発明で用いられる用語「選択的Ｄ３受容体アゴニスト」には該当しない；なぜなら、本発明に係る選択的Ｄ３受容体アゴニストは、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して選択的であり、その選択性は、同じ機能分析（すなわち機能的な拮抗作用分析）で測定した場合、コントロール（わずかにＤ３優先的な（非選択的）化合物プラミペキソール）により得られる選択性の少なくとも３倍であるためである。
【００１３】
その上、ドーパミンＤ３およびＤ２受容体に関する結合データまたは結合選択性データが、機能的なデータまたは機能的な選択性データと常に相互関係があるというわけではないし、これらデータを反映するとも限らないことが示されている。例えば、化合物ＰＮＵ−９５６６６（(Ｒ)−５,６−ジヒドロ−Ｎ,Ｎ−ジメチル−４Ｈ−イミダゾ４,５,１−ｉｊ）キノリン−５−アミン）は、結合分析を行う際、Ｄ２選択的化合物であるが（Ｕ９５６６６Ａは、Ｄ２ドーパミン受容体に対する選択性を有する高い固有の活性を有するアゴニストである。Lajiness M.E.等，Abstr Soc Neurosci，1996年，22：1（217）；Synthesis and biological activities of（R）−5,6−dihydro−N,N−dimethyl−4H−imidazo4,5,1−ij）quinoliｎ−5−amine and its metabolites，Heier，R.F.等（1997年），J. Med. Chem. 40 (5) 639〜646）、しかし、機能的に、この化合物は、Ｄ２およびＤ３受容体に対して同じ効力を有する。従って、従来技術において選択的Ｄ３アゴニストと称される開示された化合物は、しばしば、結合という観点でのみ選択的Ｄ３アゴニストであるが、機能的には、選択的Ｄ３受容体アゴニストではない。本発明で用いられる用語「選択的」とは、本発明に関しては、「機能的に選択的」であることを意味する。
【００１４】
性機能障害
性機能障害（ＳＤ）は、男性と女性の両方に影響を与え得る重大な臨床上の問題である。ＳＤの原因は、器官的および心理的なもの両方と考えられる。ＳＤの器官的な観点は、典型的には、血管疾患、例えば高血圧または糖尿病に関連する血管疾患があること、処方薬、および／または、うつのような精神疾患が原因である。生理学的な要素としては、恐れ、遂行不安および対人葛藤がある。ＳＤは、性機能を損ない、自尊心を低下させ、個人的な関係を崩壊させるため、個人的な苦痛をもたらす。病院では、ＳＤ障害は、女性性機能障害（ＦＳＤ）障害および男性性機能障害（ＭＳＤ）障害に分類されていた（Melman等，1999年）。ＦＳＤは、女性における性的表現において満足することの困難さまたは無能と最もよく定義されている。男性性機能障害（ＭＳＤ）は、一般的に、勃起機能障害（または男性勃起機能障害（ＭＥＤ）としても知られている）に関連している（Benet等，1994年-Male Erectile dysfunction assessment and treatment options. Comp. Ther. 20：669〜673）。
【００１５】
薬剤により誘発される性機能障害は、例えば、選択的セロトニン再摂取阻害剤（ＳＳＲｉｓ）およびその他の抗うつ薬治療（三環系および主要なトランキライザー）、抗高血圧薬治療、ならびに交感神経遮断薬を用いた治療により引き起こされる可能性がある。このような薬剤により誘発される性機能障害の例は、無オルガスム症（オルガスムに達しないこと）であり、これは男性と女性の両方に起こり得るタイプのオルガスム障害である。
【００１６】
本発明の化合物は、男性の性機能障害（例えば男性勃起機能障害−ＭＥＤ）および女性の女性性機能障害（ＦＳＤ）、例えば女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）、無オルガスム症または欲求低下障害、例えば性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ；性に対する関心の欠如）の予防および／または治療に特に有益である。好ましくは、女性において、ＨＳＤＤを併発したＦＳＡＤを治療または予防することである。
【００１７】
女性性機能障害（ＦＳＤ）
本発明によれば、ＦＳＤは、女性における性的表現において満足することの困難さまたは無能と定義することができる。ＦＳＤは、数々の様々な女性性障害の総称である（Leiblum，S.R.（1998年）-Definition anｄ classification of female sexual disorder.Int. J. Impotence Res.，10，S104〜S106；Berman，J.R.，Berman，L.およびGoldstein，I.(1999年)-Female sexual dysfunction：Incidence，pathophysiology，evaluations and treatment options. Urology，54，385〜391）。女性は、欲求の欠如、興奮またはオルガスムに関する困難さ、性交の際の痛み、または、これらの問題の組み合わせを有することがある。いろいろなタイプの病気、薬物療法、外傷または心理的な問題が、ＦＳＤの原因となり得る。開発中の治療法は、ＦＳＤの特定のサブタイプ、主に欲求低下障害および性的興奮の障害を治療することを目標としている。
【００１８】
ＦＳＤのカテゴリーは、正常な女性の性反応の段階：欲求、興奮およびオルガスムに対比させることにより最もよく定義される（Leiblum，S.R. (1998年)-Definition and classification of female sexual disorder. Int. J. Impotence  Res.，10，S104〜S106）。欲求またはリビドーとは、性的表現に関する衝動である。その兆候としては、しばしば、興味のあるパートナーと一緒にいる場合、または、その他の色情的な刺激に晒された場合のいずれかにおける性的想像がある。興奮とは、性的な刺激に対する血管の反応であり、その重要な構成要素は生殖器の充血であり、膣の潤滑の上昇、膣の伸長、および、生殖器の感覚／感受性の上昇が挙げられる。オルガスムとは、興奮の際に最高潮に達する性的緊張の解放である。
【００１９】
従って、ＦＳＤは、女性がこれらの段階（通常は欲求、興奮またはオルガスム）のいずれかにおいて不十分または不満足な反応を示す場合に起こる。ＦＳＤカテゴリーとしては、性的欲求低下障害、性的興奮の障害、オルガスム障害および性交疼痛障害がある。本発明の化合物は、性的な刺激に対する生殖器の反応を改善するが（例えば女性の性的興奮の障害において）、それによって、関連する痛み、性交に伴う苦痛および不快感も改善することも可能であり、そのようにしてその他の女性性障害を治療することも可能である。
【００２０】
従って、本発明の好ましい観点によれば、性的欲求低下障害、性的興奮の障害、オルガスム障害、および、性交疼痛障害を治療または予防するための医薬品の調剤、より好ましくは、性的興奮の障害、オルガスム障害、および性交疼痛障害を治療または予防するための医薬品の調剤、最も好ましくは、性的興奮の障害の治療または予防における医薬品の調剤における本発明の化合物の使用を提供する。
【００２１】
女性が性に対して欲求がないか、またはわずかしかない場合や、性的想像または空想を持たないか、またはわずかしか持たない場合に、性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ）が存在する。このタイプのＦＳＤは、自然な閉経または外科手術による閉経のいずれかによるテストステロンレベルの低下が原因で引き起こされ得る。その他の原因としては、病気、薬物療法、疲労、うつ、および不安が挙げられる。性的欲求の欠乏または欠如の判断は、年齢やその人の人生環境のような機能化に影響を及ぼす要素を考慮して臨床医によりなされる。
【００２２】
女性オルガスム障害（ＦＯＤ）は、正常な性的興奮段階の後の、持続的または再発性の
オルガスムの遅延または欠如であると考えられている。女性は、オルガスムを引き起こす刺激のタイプまたは強度において、多様な変動を示す。ＦＯＤの診断は、女性のオルガスム量が、その人の年齢、性体験、およびその人が受けた性的な刺激の妥当性にみあったものより低いという臨床医の判断に基づくべきである。ＦＯＤ、特にオルガスム欠如はまた、「無オルガスム症」とも称される。
【００２３】
性交疼痛障害（例えば性交疼痛症および膣痙）は、挿入により生じる痛みを特徴とし、潤滑を減少させる薬物療法、子宮内膜症、骨盤の炎症性疾患、炎症性腸疾患または尿路の問題により生じる可能性がある。性交疼痛症とは、性交に伴う再発性または持続的な生殖器の痛みである。膣痙とは、性交に支障をきたす膣の外側の第三の筋系の再発性または持続的な不随意の痙攣である。
【００２４】
女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）は、性的な刺激に対する不十分な生殖器の反応を特徴とする。生殖器は、正常な性的興奮の特徴である充血を起こさない。膣壁の潤滑が不十分となるため、性交は痛みを伴う。オルガスムが妨げられる可能性がある。興奮障害は、閉経時または出産後や授乳中のエストロゲン減少、同様に、糖尿病およびアテローム性動脈硬化症のような血管構成要素に関する病気が原因で引き起こされ得る。その他の原因は、利尿薬、抗ヒスタミン剤、抗うつ薬、例えば選択的セロトニン再取り込み阻害剤（ＳＳＲＩｓ）、または抗高血圧剤を用いた治療に起因する。
【００２５】
ＦＳＤ罹患率は、この用語が数々のタイプの問題を含み、そのうちのいくつかは測定困難であることと、ＦＳＤ治療への関心は比較的最近であることから、評価し難い。多くの女性の性的問題は、女性の加齢問題または糖尿病や高血圧のような慢性疾患のいずれかと直接的な関連がある。
【００２６】
ＦＳＤは、性反応サイクルの異なる段階で症状を発現する数々のサブタイプからなるため、一つの治療は存在しない。現在のＦＳＤ治療は、主として心理的問題または人間関係問題に焦点をあわせている。ＦＳＤ治療は、臨床研究および基礎科学研究がこの医学的問題の調査に費やされるにつれて、次第に発展しつつある。女性の性的な不平は、特にその全ての女性の性的な不平をもたらす血管性機能障害（例えばＦＳＡＤ）の構成要素を有し得る個体にとって、必ずしも心理的または病態生理学的なものだけではない。今のところ、ＦＳＤを治療するために認可を受けた薬剤はない。実験的な薬物療法は、エストロゲン投与（局所的に、または、ホルモン補充療法として）、アンドロゲンまたは精神安定剤（例えばブスピロンまたはトラゾドン）が挙げられる。このような治療の選択は、場合によっては、低い有効性または許容できない副作用のために、不満足である。
【００２７】
ＦＳＤの薬理学的治療に対する関心は比較的最近であるため、治療は、心理的なカウンセリング、店頭販売の性的な潤滑剤、および他の症状に関して認可された薬剤などの治験薬、で構成される。このような薬物療法は、テストステロンまたはエストロゲンとテストステロンとの組み合わせのいずれかのホルモン剤、より近年には、男性勃起機能障害（ＭＥＤ）に有効であることが証明された血管系の薬剤で構成されている。
上述したように、本発明の化合物は、ＦＳＤ、特にＦＳＡＤ、無オルガスム症またはＨＳＤＤの予防および／または治療に特に有用である。
【００２８】
性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ）
女性が性に対して欲求がないか、またはわずかしかない場合、および、性的想像または空想を持たないか、またはわずかである場合、ＨＳＤＤが存在する。このタイプのＦＳＤは、自然な閉経または外科手術による閉経のいずれかによるテストステロンレベルの低下が原因で引き起こされ得る。その他の原因としては、閉経前の女性（すなわち閉経前で子宮摘出されていない女性）、および、閉経後の女性のいずれにおいても、病気、薬物療法、疲労、うつおよび／または不安などである。可能性のある（意識下または潜在意識下の）心理的な影響力を有する要素（例えば人間関係の困難または宗教的な要素）が、女性のＨＳＤＤの存在または発症に関係する可能性がある。
【００２９】
女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）
米国精神医学会の「診断と統計マニュアル（ＤＳＭ）」第IV巻では、女性の性的興奮の
障害（ＦＳＡＤ）を以下のように定義している：
「・・・性行為が完了するまで、十分な性的興奮の潤滑−腫張反応を達成または維持することの、持続的または再発性の無能である。この障害は、著しい苦痛または対人関係の困難さを必ず引き起こす。・・・」。
【００３０】
興奮反応は、骨盤における血流の増加（vasocongestion）、膣の潤滑、ならびに、外生殖器の膨張および腫張で構成される。上記障害は、著しい苦痛および／または対人関係の困難さを引き起こす。
【００３１】
ＦＳＡＤは、広く蔓延している性障害であり、閉経前、閉経中および閉経後の（±ホルモン補充療法（ＨＲＴ））女性に影響を及ぼす。これは、併発する障害、例えばうつ、心臓血管疾患、糖尿病および尿生殖器（ＵＧ）障害に関連する。
【００３２】
ＦＳＡＤの第１の予後は、充血／膨張の欠如、潤滑の欠如、快い生殖器の感覚の欠如である。ＦＳＡＤの第２の予後は、性的欲求の低下、性交中の痛み、および、オルガスムに達することの困難である。
【００３３】
近年、少なくとも一部のＦＳＡＤの症状を示す患者に関しては、血管性の原因があると仮定されており（Goldstein等，Int. J. Impot. Res.，10，S84〜S90，1998年）、この見解は動物データで裏付けられている（Park等，Int. J. Impot. Res.，9，27〜37，1997年）。
【００３４】
有効性を調査中のＦＳＡＤ治療のための治験薬は、主として、男性生殖器への血行を促進する勃起機能障害治療である。これらは、２タイプの製剤、すなわち経口または舌下の薬物療法（アポモルフィン、フェントラミン、ホスホジエステラーゼ５型（ＰＤＥ５）阻害剤、例えばシルデナフィル）、および、プロスタグランジン（ＰＧＥ1）からなり、こ
れらは、注射することもできるし、男性に経尿道投与したり、女性の生殖器に局所投与することもできる。
【００３５】
本発明の化合物は、正常な性的興奮反応を回復するための手段、すなわち生殖器の血流を増加させて膣、陰核および陰唇の充血を起こすための手段を提供することにより、有用である。それにより、血漿の漏出による膣の潤滑の増加、膣の伸展性の増加、および生殖器の感受性の増加が生じ得る。従って、本発明は、正常な性的興奮反応を回復または増強する手段を提供する。
【００３６】
本発明の化合物はまた、（ｉ）正常化した欲求および／または（ii）性への興味を回復させる手段を提供し、それにより、性的欲求低下障害、例えばＨＳＤＤを予防または治療することにより、有利である。
【００３７】
本発明において、女性生殖器とは、以下の意味を有するものとする：「生殖器官は、内生殖器と外生殖器で構成される。内部器官は、骨盤内に位置し、卵巣、卵管、子宮および膣からなる。外部器官は、尿生殖隔膜の表面にあり、骨盤弓の下である。これらは、恥丘、大陰唇および小陰唇、陰核、前庭、前庭球、ならびに、大前庭腺を含む」（Gray's Anatomy，C.D. Clemente，第13版，米国版）。
【００３８】
R.J. Levinは、以下のように教示している「・・・男性および女性生殖器は、共通の組織原基から発生学的に発達するため、男性および女性生殖器の構造は互いに相同であると論じられている。従って、陰核は、陰茎と相同であり、陰唇は陰嚢と相同である。・・・」（Levin，R.J. (1991年)，Exp. Clin. Endocrinol.，98，61〜69）。
【００３９】
男性性機能障害（ＭＳＤ）
本発明で述べられる男性性機能障害（ＭＳＤ）は、射精の障害、例えば無オルガスム症（オルガスムに達しないこと）、または、欲求低下障害、例えば性的欲求低下障害（性に対する関心の欠如）などを意味する。ＭＳＤはまた、男性勃起機能障害（ＭＥＤ）も含む。
【００４０】
男性勃起機能障害（ＭＥＤ）
男性勃起機能障害（ＭＥＤ）は、男性勃起障害とも呼ばれており、以下のように定義される：
「満足の行く性機能のために、陰茎の勃起に達する、および／または、それを維持することができないこと（NIH Consensus Development Panel on Impotence，1993年）」。
【００４１】
４０〜７０歳の男性の５２％が、いずれかの度合いの（極微な、中程度の、および完全なインポテンス）の勃起機能障害（ＥＤ）に罹患しており、７０歳超の男性がより高い割合であると推測されている（Melman等，1999年，J. Urology，161，5〜11頁）。この状態は、個人およびそのパートナーの生活の質に重大なネガティブな影響力を持っており、場合によっては、うつや自尊心の低下をもたらす不安や緊張の増加に陥る。２０年前、ＭＥＤは主として心理的な障害であると考えられていたが（Benet等，1994年，Comp. Ther.，20：669〜673）、現在は、個体の大部分が内在する器官的な原因を有することがわかっている。結果として、正常な陰茎の勃起のメカニズムおよびＭＥＤの病態生理を同定することにおいて大きく進歩した。
【００４２】
陰茎の勃起は海綿体の平滑筋および陰茎の血管系の収縮と弛緩との平衡に依存する血行動態現象である（Lerner等，1993年，J. Urology，149，1256〜1255）。海綿体の平滑筋
はまた、本発明において、海綿体平滑筋（corporal smooth muscle）または複数形で海綿体（corpus cavernosa）とも称される。海綿体の平滑筋を弛緩させることにより、海綿体の柱状部分への血流を増加させ、外被層に対して膨張させ、排出する静脈を圧縮する。それにより、血圧が高く上昇し、勃起が起こる（Naylor，1998年，J. Urology，81，424〜431）。
【００４３】
勃起プロセス中に起こる変化は複雑であり、末梢神経系および中枢神経系ならびに内分泌系に関する高度に協調した制御を必要とする（Naylor，1998年，J. Urology，81，424
〜431）。海綿体平滑筋の収縮は、シナプス後のα1−アドレナリン受容体の活性化を介した交感神経のノルアドレナリン作用性の神経支配により調節される。ＭＥＤは、内在性の海綿体平滑筋の緊張の増加に関連すると考えられている。しかしながら、海綿体平滑筋の弛緩プロセスは、部分的に非アドレナリン非コリン性（ＮＡＮＣ）神経伝達が介在する。ＮＯ以外に、陰茎で見出された多数のその他のＮＡＮＣ神経伝達物質があり、例えばカルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）および血管作用性小腸ペプチド（ＶＩＰ）がある。この弛緩の媒介に関与する主要な弛緩因子は酸化窒素（ＮＯ）であり、ＮＯは酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）によりＬ−アルギニンより合成される（Taub等，1993年，Urology，42，698〜704）。海綿体平滑筋の緊張の減少により、ＮＯが海綿体の弛緩を誘導するのを助けると考えられている。男性の性的興奮の際、ニューロンと内皮からＮＯが放出され、ＮＯは平滑筋細胞および内皮に存在する可溶性グアニル酸シクラーゼ（ｓＧＣ）に結合してこれを活性化し、細胞内の環状グアノシン３′,５′−一リン酸（ｃＧＭＰ）レベルを上昇させる。このｃＧＭＰの上昇は、プロテインキナーゼＧの活性化が関与すると思われる未知のメカニズム（恐らくＣａ2+ポンプおよびＣａ2+活性化Ｋ+チャンネルの活性化によると考えられる）を介した、細胞内のカルシウム濃度（［Ｃａ2+］i）の減少により海綿体の弛緩をもたらす。
【００４４】
近年、ファイザーが、ＭＥＤの初の経口治療薬としてクエン酸シルデナフィル（または
ViagraTMとして知られる）を開発した。シルデナフィルは、ホスホジエステラーゼ５（ＰＤＥ５）を選択的に阻害し、それによりｃＧＭＰの５′ＧＭＰへの加水分解を制限し、さらにｃＧＭＰの細胞内濃度を増加させ、海綿体の平滑筋の弛緩を容易にすることにより、海綿体中でのｃＧＭＰ破壊を阻害することで作用する（Boolel等，1996年，J. Urology. 78，257〜261；Jeremy等，1997年，Br. J. Urology，79，958〜963）。
【００４５】
現在は、その他全ての販売されている利用可能なＭＥＤ治療、例えば尿管内投与が可能な（MuseTMとしてヴィーバス社から入手可能）、または、小さい針の注入を介して投与可能な（CaverjectTMとしてファルマシア＆アップジョンから入手可能）、プロスタグラン
ジン関連化合物（すなわちアルプロスタジル）を用いた治療は、不適切であるか、および／または、侵襲性であるかのいずれかである。その他の治療法としては、陰圧式勃起補助具，血管作用薬の注入、または、陰茎プロテーゼの埋め込みが挙げられる（Montague等，1996年，J. Urology，156，2007〜2011）。注射可能な血管作用薬は高い有効性を示すが
、陰茎の痛み、線維症および陰茎強直症のような副作用を一般的に示し、注射による治療は、経口治療として好ましくない。従って、シルデナフィルは現在、最も好ましい市販の治療法の代表である。
従って、男性性機能障害、特にＭＥＤの新しい治療方法を見出すことが望ましい。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００４６】
本発明の将来性のある発見は、例えばアポモルフィン、プラミペキソールおよび７−ヒドロキシ−ＤＰＡＴのような非選択的ドーパミン受容体アゴニストを投与した後に観察される有害な副作用に、ドーパミンＤ２受容体が関与することである。驚くべきことに、ドーパミンＤ３受容体の選択的な活性化により、性機能障害、特に男性勃起機能障害（ＭＥＤ）、および、女性性機能障害、特に女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）および／または性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ）の治療を達成することができ、その一方で、有害な副作用（例えば非選択的アゴニストの投与後に観察される吐き気、嘔吐、失神、低血圧または徐脈の１またはそれ以上）が緩和および／または実質的に除去されることも示された。我々は、性機能障害の満足の行く治療を達成し、その一方で効果的に有害な副作用を軽減および／または除去するために、ドーパミンＤ３アゴニストは、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して選択的でなければならず、この選択性は、同じ機能分析で測定した場合、コントロールのわずかにＤ３優先的な（非選択的）化合物プラミペキソールにより得られる選択性の少なくとも３倍であることを発見した。驚くべきことに、本出願人等は、本発明に係る選択的ドーパミンＤ３アゴニストを用いることによって、非選択的ドーパミンアゴニストの投与の後に観察される１またはそれ以上の副作用、例えば吐き気、嘔吐および有害な心臓血管事象が、除去または実質的に緩和されることを発見した。
従って、本発明に係る化合物は、既知のドーパミンアゴニストと比較して、副作用が減少するという予想外の利点を有する。
【００４７】
詳細な観点
一つの観点において、本発明は、性機能障害を治療および／または予防するための医薬品の製造または調剤における、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む組成物または医薬組成物の使用に関し、前記ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して機能的に選択的であり、その選択性は、同じ機能分析で測定した場合、コントロールのわずかにＤ３優先的な（非選択的）化合物プラミペキソールで得られた機能的な選択性の少なくとも３倍である。
【００４８】
言い換えれば、本発明に係る化合物とコントロール化合物プラミペキソールとを、同じ機能分析を用いて、すなわち同一または実質的に同一のパラメーターを用いて試験した場
合、本発明に係る化合物が、プラミペキソールに関して観察されたＤ３受容体に関する機能的な選択性と比較して、少なくとも３倍より選択的であるような程度で、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストが、Ｄ２受容体と比較して、Ｄ３受容体に対して機能的に選択的である。
【００４９】
さらなる観点において、本発明は、性機能障害を治療および／または予防するための医薬品の製造または調剤における、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む組成物または医薬組成物の使用（ただし、ＮＥＰ阻害剤、神経ペプチドＹ（ＮＰＹ）阻害剤、ボンベシン受容体アンタゴニスト、または、個体の生殖器における中コンダクタンスカルシウム活性化カリウム（ＩＫCa）チャンネルの活性を調節することができる作用物質の１またはそれ以上とは組み合わされない）に関する。
【００５０】
その他の観点において、本発明は、性機能障害を治療および／または予防するための医薬品の調剤における、実質的に選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストからなる組成物の使用に関する。
さらなる観点において、本発明は、性機能障害を治療および／または予防するための医薬品の調剤における、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストからなる組成物の使用に関する。
【００５１】
よりさらなる観点において、本発明は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む組成物または医薬組成物に関し、ここで、前記ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して機能的に選択的であり、その機能的な選択性は、同じ機能分析で測定した場合、コントロールのわずかにＤ３優先的な（非選択的）化合物プラミペキソールで得られた機能的な選択性の少なくとも３倍である；前記アゴニストは、場合により、製薬上許容できるキャリアー、希釈剤または添加剤と混合されている。
【００５２】
さらなる観点において、本発明は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む組成物または医薬組成物（ただし、ＮＥＰ阻害剤、ＮＰＹ阻害剤、ボンベシン受容体アンタゴニスト、または、個体の生殖器における中コンダクタンスカルシウム活性化カリウム（ＩＫCa）チャンネルの活性を調節することができる作用物質の１またはそれ以上とは組み合わされない）に関し、ここで、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、場合により、製薬上許容できるキャリアー、希釈剤または添加剤と混合されている。
【００５３】
さらなる観点において、本発明は、実質的に選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストからなる組成物または医薬組成物に関し、ここで、前記組成物は、場合により、製薬上許容できるキャリアー、希釈剤または添加剤と混合されている。
【００５４】
さらなる観点において、本発明は、選択的ドーパミンＤ３受容体−アゴニストからなる組成物または医薬組成物に関し、ここで、前記組成物は、場合により、製薬上許容できるキャリアー、希釈剤または添加剤と混合されている。
【００５５】
その他の観点において、本発明は、ヒトまたは動物における性機能障害を治療および／または予防する方法に関し、該方法は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む組成物の有効量を個体に投与することを含み、前記ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して機能的に選択的であり、その機能的な選択性は、同じ機能分析で測定した場合、コントロールのわずかにＤ３優先的な（非選択的）化合物プラミペキソールで得られた機能的な選択性の少なくとも３倍であり、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、場合により、製薬上許容できるキャリアー、希釈剤または添加剤と混合されている。
【００５６】
さらなる観点において、本発明は、ヒトまたは動物における性機能障害を治療および／または予防する方法に関し、該方法は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む組成物（ただし、ＮＥＰ阻害剤、ＮＰＹ阻害剤、ボンベシン受容体アンタゴニスト、または、個体の生殖器における中コンダクタンスカルシウム活性化カリウム（ＩＫCa）チャンネルの活性を調節することができる作用物質の１またはそれ以上とは組み合わされない）の有効量を個体に投与することを含み、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、場合により、製薬上許容できるキャリアー、希釈剤または添加剤と混合されている。
【００５７】
その他の観点において、本発明は、ヒトまたは動物における性機能障害の治療または予防方法を提供し、該方法は、実質的に選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストからなる組成物の有効量を個体に投与することを含み、前記組成物は、場合により、製薬上許容できるキャリアー、希釈剤または添加剤と混合されている。
【００５８】
さらなる観点において、本発明は、ヒトまたは動物における性機能障害の治療または予防方法を提供し、該方法は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストからなる組成物の有効量を個体に投与することを含み、前記組成物は、場合により、製薬上許容できるキャリアー、希釈剤または添加剤と混合されている。
【００５９】
さらに、１またはそれ以上のコンパートメントを含む薬剤パックを提供し、該薬剤パックにおいて、少なくとも１つのコンパートメントは、１またはそれ以上の選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む。
【００６０】
さらなる観点において、本発明は、１またはそれ以上のコンパートメントを含む薬剤パックに関し、該薬剤パックにおいて、少なくとも１つのコンパートメントは、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む、１またはそれ以上の組成物（ただし、ＮＥＰ阻害剤、ＮＰＹ阻害剤、ボンベシン受容体アンタゴニスト、または、個体の生殖器における中コンダクタンスカルシウム活性化カリウム（ＩＫCa）チャンネルの活性を調節することができる作用物質の１またはそれ以上とは組み合わされない）を含む。
【００６１】
よりさらなる観点において、本発明は、１またはそれ以上のコンパートメントを含む薬剤パックを提供し、該薬剤パックにおいて、少なくとも１つのコンパートメントは、実質的に選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストからなる１またはそれ以上の組成物を含む。
【００６２】
よりさらなる観点において、本発明は、１またはそれ以上のコンパートメントを含む薬剤パックを提供し、該薬剤パックにおいて、少なくとも１つのコンパートメントは、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストからなる１またはそれ以上の組成物を含む。
【００６３】
本発明はさらに、１またはそれ以上の選択的ドーパミンＤ３−アゴニストと、製薬上許容できる希釈剤、添加剤またはキャリアーとを混合することを含む、本発明に係る医薬組成物の調剤プロセスを提供する。
【００６４】
さらなる観点において、本発明は、１またはそれ以上の選択的ドーパミンＤ３アゴニストと、製薬上許容できる希釈剤、添加剤またはキャリアーとを混合することを含む、本発明に係る医薬組成物の調剤プロセスを提供し、該調剤プロセスにおいて、前記ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して機能的に選択的であり、その機能的な選択性は、同じ機能分析で測定した場合、コントロールのわずかにＤ３優先的な（非選択的）化合物プラミペキソールで得られた機能的な選択性の少なくとも３倍である。
【００６５】
本発明はさらに、実質的に選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストからなる１またはそれ以上の組成物と、製薬上許容できる希釈剤、添加剤またはキャリアーとを混合することを含む、本発明に係る医薬組成物の調剤プロセスを提供する。
【００６６】
本発明はさらに、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストからなる１またはそれ以上の組成物と、製薬上許容できる希釈剤、添加剤またはキャリアーとを混合することを含む、本発明に係る医薬組成物の調剤プロセスを提供する。
【００６７】
さらなる観点において、本発明は、女性性機能障害、特にＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤ、または男性性機能障害、特にＭＥＤを治療および／または予防するのに用いることができる作用物質（以下、選択的ドーパミンＤ３アゴニストと称する）を同定するための分析方法に関し、該分析は、試験物質が、内因性の生殖器の充血プロセスまたは勃起プロセスを直接的に増強できるかどうかを決定することを含み；前記増強は、本発明で定義された試験物質の存在下での生殖器の血流または陰茎海綿体（ｉ.ｃ.）圧（および／または海綿体の血流）の相乗作用と定義され；このような試験物質による相乗作用は、試験物質が、女性性機能障害、特にＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤ、または男性性機能障害、特にＭＥＤの治療および／または予防において有用な可能性があるということを示し、前記試験物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである。好ましくは、このような物質は、前記物質を投与された個体において、吐き気、嘔吐、失神、低血圧または徐脈のいずれも引き起こさないか、または、最低限しか引き起こさない。
【００６８】
さらなる観点において、本発明は、女性性機能障害、特にＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤ、または男性性機能障害、特にＭＥＤを治療または予防することができる作用物質を同定するのに用いられる動物モデルに関し、前記モデルは、前記動物の骨盤神経を刺激した後の、前記動物の膣／陰核の血流、陰茎海綿体圧および／または海綿体の血流における変化を測定する手段を含む麻酔された雌または雄の動物を含み；前記作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである。
【００６９】
該動物モデルは、以下の前記動物におけるパラメーターまたは前記動物のパラメーター：吐き気、嘔吐、失神、低血圧または徐脈を測定する手段をさらに含んでもよい。
さらなる観点において、本発明は、ＦＳＡＤまたはＭＥＤを治療するために内因性の生殖器の興奮プロセスまたは勃起プロセスを直接的に増強することができる作用物質を同定するための分析方法に関し、該分析方法は、本発明の動物モデルに作用物質を投与すること；および、内因性の生殖器の興奮プロセスまたは勃起プロセスの変化を測定することを含み；前記変化は、定義された試験物質の存在下での、動物モデルにおける膣／陰核の血流、陰茎海綿体圧（ＩＣＰ）（および／または海綿体の血流）の相乗作用と定義され；前記物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである。
【００７０】
さらなる観点において、本発明は、女性または男性からサンプルを単離すること；該サンプルが女性性機能障害、好ましくはＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤ、または男性性機能障害、好ましくはＭＥＤを引き起こすような量の物体を含むかどうかを決定することを含む診断方法に関し、該物体は、女性における内因性の生殖器の興奮プロセスまたは男性の海綿体における勃起プロセスに直接的な作用を有し；前記物体は、作用物質の使用により有益な作用が得られるように調節されることが可能であり；前記作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである。
【００７１】
さらなる観点において、本発明は、単離された女性または男性サンプル中で物体を検出する手段を含む診断用組成物またはキットに関し；該手段は、該サンプルが、女性性機能障害、好ましくはＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤ、または男性性機能障害、好ましくはＭＥＤを引き起こすような量で、または、性機能障害、好ましくはＦＳＡＤおよび／また
はＨＳＤＤ、またはＭＥＤを引き起こすような量で物体を含むかどうかを決定するのに用いることができ；該物体は、内因性の生殖器の興奮プロセスまたは勃起プロセスに直接的な作用を有し、前記物体は、作用物質の使用により有益な作用が得られるように調節されることが可能であり；前記作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである。
【００７２】
さらなる観点において、本発明は、男性または女性からサンプルを単離すること；該サンプルが、性機能障害を引き起こすような量で物体を含むかどうかを決定することを含む診断方法に関し、該診断方法において、該物体は、作用物質の使用により有益な作用が得られるように調節されることが可能であり；前記作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである。
【００７３】
よりさらなる観点において、本発明は、単離された男性または女性サンプル中で物体を検出するための手段を含む診断用組成物またはキットに関し、該診断用組成物またはキットにおいて、該手段は、該サンプルが、性機能障害を引き起こすような量で該物体を含むかどうかを決定するのに用いることができ；前記物体は、作用物質の使用により有益な作用が得られるように調節されることが可能であり；前記作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである。
【００７４】
参照を容易にするために、本発明の上記観点およびさらなる観点を、以下の適切な項の表題の下考察する。しかしながら、各項の教示は、必ずしもそれぞれ特定の項に限定されることはない。
【００７５】
本発明で用いられる用語「を含む」は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストが、組成物中で単一の活性成分でなくてもよく、その他の活性成分または非活性成分が存在してもよいことを意味する。
【００７６】
本発明で用いられる用語「活性成分」は、性機能障害（すなわち男性性機能障害、好ましくはＭＥＤ、または女性性機能障害、好ましくはＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤ）の治療において活性な成分または要素を意味する。
【００７７】
本発明で用いられる用語「実質的に〜からなる」は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストが、組成物中で単一の活性成分であることを意味する。しかしながら、その他の非活性成分が存在してもよい。
【００７８】
本発明で用いられる用語「〜からなる」は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストが、組成物中で単一の成分であることを意味するが、ただし、あらゆる製薬上許容できるキャリアー、希釈剤または添加剤（必要に応じて）は例外とし、これらに限定される。
【００７９】
本発明で用いられる用語「選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニスト」または「選択的ドーパミンＤ３アゴニスト」または「選択的Ｄ３アゴニスト」または「選択的Ｄ３ドーパミン受容体アゴニスト」または「選択的Ｄ３ドーパミンアゴニスト」または「Ｄ３選択的アゴニスト」はそれぞれ置き換え可能であり、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して機能的に選択的であり、その機能的な選択性は、同じ機能分析で測定した場合、コントロールのわずかにＤ３優先的な（非選択的）化合物プラミペキソールで得られた機能的な選択性の少なくとも３倍であるドーパミンＤ３受容体アゴニストを意味する。
【００８０】
ドーパミンＤ３受容体アゴニストに関して本発明で用いられる用語「機能的に選択的」は、Ｄ２受容体と比較して、選択的にＤ３受容体の作用を増強すること、またはＤ３受容体を活性化することが可能であることを意味する。同様に、ドーパミンＤ３受容体アゴニ
ストに関して本発明で用いられる用語「機能的に選択的」は、Ｄ１、Ｄ４またはＤ５受容体と比較して、選択的にＤ３受容体の作用を増強すること、またはＤ３受容体を活性化することが可能であることを意味する。
【００８１】
本発明に係る化合物に関して本発明で用いられる用語「選択的」または「選択性」は、「機能的に選択的」または「機能的な選択性」であることを意味する。
用語「調剤（preparation）」および「製造（manufacture）」は、本発明に関して（すなわち医薬品などの「調剤（preparation）」または「製造（manufacture）」に関して）、同義と解釈され得る。
【００８２】
好ましい観点
本発明に係る性機能障害の治療または予防で用いられる作用物質は、好ましくは機能的に選択的ドーパミンＤ３アゴニストである。
一実施形態において、好ましくは、本発明に係る使用のための作用物質は、経口投与される。
他の実施形態において、本発明に係る使用のための作用物質は、局所投与または鼻腔内投与され得る。
【００８３】
好ましくは、本発明に係る作用物質は、男性勃起機能障害（ＭＥＤ）の治療または予防に用いられる。
好ましくは、本発明に係る作用物質は、女性性機能障害（ＦＳＤ）の治療または予防に用いられる。
好ましくは、本発明に係る作用物質は、女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）の治療または予防に用いられる。
【００８４】
好ましくは、本発明に係る作用物質は、性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ）の治療または予防に用いられる。
好ましくは、本発明に係る作用物質は、女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）および性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ）（すなわちＨＳＤＤを併発したＦＳＡＤを治療または予防することである）の治療または予防に用いられる。
【００８５】
好ましくは、前記選択的Ｄ３受容体アゴニストは、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して機能的に選択的であり、その機能的な選択性は、同じ機能分析で測定した場合、コントロールのわずかにＤ３優先的な（非選択的）化合物プラミペキソールで得られた機能的な選択性の少なくとも５倍である。
【００８６】
好ましくは、前記選択的Ｄ３受容体アゴニストは、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して機能的に選択的であり、その機能的な選択性は、同じ機能分析で測定した場合、コントロールのわずかにＤ３優先的な（非選択的）化合物プラミペキソールで得られた機能的な選択性の少なくとも１０倍である。
【００８７】
好ましくは、前記選択的Ｄ３受容体アゴニストは、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して機能的に選択的であり、その機能的な選択性は、同じ機能分析で測定した場合、コントロールのわずかにＤ３優先的な（非選択的）化合物プラミペキソールで得られた機能的な選択性の少なくとも２０倍である。
【００８８】
好ましくは、前記選択的Ｄ３受容体アゴニストは、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して機能的に選択的であり、その機能的な選択性は、同じ機能分析で測定した場合、コントロールのわずかにＤ３優先的な（非選択的）化合物プラミペキソールで得られた機能的な選択性の少なくとも２５倍である。
【００８９】
好ましくは、前記選択的Ｄ３受容体アゴニストは、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して機能的に選択的であり、その機能的な選択性は、同じ機能分析で測定した場合、コントロールのわずかにＤ３優先的な（非選択的）化合物プラミペキソールで得られた機能的な選択性の少なくとも３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、または少なくとも１２０倍である。
【００９０】
好ましくは、前記選択的Ｄ３受容体アゴニストは、ＥＣ50が１０００ｎｍ未満、より好ましくは１００ｎｍ未満、さらにより好ましくは５０ｎｍ未満、最も好ましくは１０ｎｍ未満で、発現されたＤ３受容体に対して機能的な効力を示す。
【００９１】
本発明はまた、性的な興奮／刺激の前、および／または、その最中に本発明の作用物質を投与することも含む。
従って、本発明のいくつかの観点において、性的な興奮／刺激段階があることが極めて望ましい。
【００９２】
ここで、「性的な興奮／刺激」は、視覚的な興奮／刺激、物理的な興奮／刺激、聴覚的な興奮／刺激または思考による興奮／刺激の１またはそれ以上でもよい。
従って、好ましくは、本発明の作用物質は、性的な興奮／刺激の前または最中に投与され、特にその際、これらの作用物質は経口投与用である。
【００９３】
さらに好ましい観点
上述したように、プラミペキソールは、機能的に、Ｄ２受容体と比較して、Ｄ３受容体に対してわずか約５倍〜約９倍の選択性を示すことがわかっている。従って、本発明の選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストが、「・・・ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して機能的に選択的であり、その選択性は、同じ機能分析で測定した場合、プラミペキソールで得られる機能的な選択性の少なくとも３倍である・・・」と表現される場合、これは、その代わりに、本発明の選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストが、「・・・同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１５倍〜約２７倍より機能的に選択的である・・・」（すなわち、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも３×約５倍（＝少なくとも約１５倍）〜３×約９倍（＝約２７倍）機能的な選択性である）、と表現することもできる。
【００９４】
同様に、本発明のＤ３受容体アゴニストの機能的な選択性が、プラミペキソールで得られる機能的な選択性の少なくとも５倍であると表現される場合、これは、Ｄ３受容体アゴニストが、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約２５倍〜約４５倍より機能的に選択的であることと等しい。
【００９５】
同様に、本発明のＤ３受容体アゴニストの機能的な選択性が、プラミペキソールで得られる機能的な選択性の少なくとも１０倍であると表現される場合、これは、Ｄ３受容体アゴニストが、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約５０倍〜約９０倍より機能的に選択的であることと等しい。
【００９６】
同様に、本発明のＤ３受容体アゴニストの機能的な選択性が、プラミペキソールで得られる機能的な選択性の少なくとも２０倍であると表現される場合、これは、Ｄ３受容体アゴニストが、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１００倍〜約１８０倍より機能的に選択的であること
と等しい。
【００９７】
同様に、本発明のＤ３受容体アゴニストの機能的な選択性が、プラミペキソールで得られる機能的な選択性の少なくとも２５倍であると表現される場合、これは、Ｄ３受容体アゴニストが、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１２５倍〜約２２５倍より機能的に選択的であることと等しい。
【００９８】
上記を考慮して、本発明は、以下のさらなる（番号付けされた）観点を提供する：
１.  性機能障害を治療および／または予防するための医薬品の調剤における、選択的
ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む組成物の使用であって、該使用において、前記ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１５倍、好ましくは少なくとも約２７倍、より好ましくは少なくとも約３０倍、最も好ましくは少なくとも約１００倍より機能的に選択的である。好ましくは、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを投与された個体において、吐き気、嘔吐、失神、低血圧または徐脈のいずれか一つを引き起こさないか、または、最低限しか引き起こさない。
【００９９】
２.  性機能障害を治療および／または予防するための医薬品の調剤における、実質的
に選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストからなる観点１に記載の組成物の使用。
３.  性機能障害を治療および／または予防するための医薬品の調剤における、選択的
ドーパミンＤ３受容体アゴニストからなる観点１または観点２に記載の組成物の使用。
４.  男性勃起機能障害（ＭＥＤ）を治療および／または予防するための、観点１〜３
のいずれか一項に記載の使用。
５.  女性性機能障害（ＦＳＤ）を治療および／または予防するための、観点１〜３の
いずれか一項に記載の使用。
【０１００】
６.  女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）および／または性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ
）を治療および／または予防するための、観点５に記載の使用。
７.  前記医薬品は、経口投与または鼻腔内投与される、観点１〜６のいずれか一項に
記載の使用。
８.  前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、性的興奮の前および／またはそ
の最中に投与される、観点１〜７のいずれか一項に記載の使用。
９.  選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む医薬組成物であって、該医薬組成
物において、前記ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１５倍、好ましくは少なくとも約２７倍、より好ましくは少なくとも約３０倍、最も好ましくは少なくとも約１００倍より機能的に選択的であり；前記アゴニストは、場合により、製薬上許容できるキャリアー、希釈剤または添加剤と混合される。好ましくは、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを投与された個体において、吐き気、嘔吐、失神、低血圧または徐脈のいずれか一つを引き起こさないか、または、最低限しか引き起こさない。
【０１０１】
１０.  選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む組成物の有効量を個体に投与す
ることを含む、ヒトまたは動物における性機能障害の治療または予防方法であって、該方法において、前記ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１５倍、好ましくは少なくとも約２７倍、より好ましくは少なくとも約３０倍、最も好ましくは少なくとも約１００倍より機能的に選択的であり；前記アゴニストは、場合により、製薬上許容できるキャリアー、希釈剤または添加剤と混合されている。好ましくは、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを投与された個体において、吐き気、嘔吐、失神、低血圧または徐脈のいずれか一つを引き起こさないか、または、最低限しか引き起こさない。
【０１０２】
１１.  実質的に選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストからなる組成物の有効量を個
体に投与することを含む、観点１０に記載のヒトまたは動物における性機能障害の治療または予防方法。
１２.  選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストからなる組成物の有効量を個体に投与
することを含む、観点１０または観点１１に記載のヒトまたは動物における性機能障害の治療または予防方法。
１３.  前記性機能障害は、男性勃起機能障害（ＭＥＤ）である、観点１０〜１２のい
ずれか一項に記載の方法。
１４.  前記性機能障害は、女性性機能障害（ＦＳＤ）である、観点１０〜１２のいず
れか一項に記載の方法。
１５.  前記女性性機能障害（ＦＳＤ）は、女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）および
／または性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ）である、観点１４に記載の方法。
【０１０３】
１６.  性機能障害を治療および／または予防するのに用いることができる作用物質（
以下、選択的ドーパミンＤ３アゴニストと称する）を同定するための分析方法であって、該分析は、試験物質が、内因性の生殖器の充血プロセスまたは勃起プロセスを直接的に増強できるかどうかを決定することを含み；前記増強は、本発明で定義された試験物質の存在下での生殖器の血流または陰茎海綿体圧および／または海綿体の血流の相乗作用と定義され；このような試験物質による相乗作用は、試験物質が、性機能障害の治療および／または予防において有用な可能性があるということを示し、前記試験物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである。好ましくは、このような物質は、前記物質を投与された個体において、吐き気、嘔吐、失神、低血圧または徐脈のいずれか一つを引き起こさないか、または、最低限しか引き起こさない。
１７.  観点１６に記載の分析方法により同定された作用物質。
１８.  観点１７に記載の作用物質を含む、性機能障害を治療するための経口投与また
は鼻腔内投与のための医薬品。
【０１０４】
１９.  女性または男性からサンプルを単離すること；該サンプルが、女性性機能障害
または男性性機能障害を引き起こすような量で物体を含むかどうかを決定することを含む診断方法であって、該診断方法において、該物体は、女性における内因性の生殖器の興奮プロセスまたは男性の海綿体における勃起プロセスに直接的な作用を有し；前記物体は、作用物質の使用により有益な作用が得られるように調節されることが可能であり；前記作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである。好ましくは、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを投与された個体において、吐き気、嘔吐、失神、低血圧または徐脈のいずれか一つを引き起こさないか、または、最低限しか引き起こさない。
【０１０５】
２０.  単離された女性または男性サンプル中で物体を検出する手段を含む診断用組成
物またはキットであって、該診断用組成物またはキットにおいて、該手段は、該サンプルが、女性性機能障害または男性性機能障害を引き起こすような量で、または、性機能障害を引き起こすような量で該物体を含むかどうかを決定するのに用いることができ；該物体は、内因性の生殖器の興奮プロセスまたは勃起プロセスに直接的な作用を有し、前記物体は、作用物質の使用により有益な作用が得られるように調節されることが可能であり；前記作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである。好ましくは、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを投与
された個体において、吐き気、嘔吐、失神、低血圧または徐脈のいずれか一つを引き起こさないか、または、最低限しか引き起こさない。
【０１０６】
２１.  女性性機能障害または男性性機能障害を治療または予防することができる作用
物質を同定するのに用いられる動物モデルであって、前記モデルは、前記動物の骨盤神経を刺激した後の、前記動物の膣／陰核の血流、陰茎海綿体圧および／または海綿体の血流における変化を測定する手段を含む麻酔された雌または雄の動物を含み；前記作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである。好ましくは、該動物モデルは、以下の前記動物におけるパラメーターまたは前記動物のパラメーター：吐き気、嘔吐、失神、低血圧または徐脈を測定する手段をさらに含んでもよい。
【０１０７】
２２.  ＦＳＡＤまたはＭＥＤを治療するために内因性の生殖器の興奮プロセスまたは
勃起プロセスを直接的に増強することができる作用物質を同定するための分析方法であって、該分析方法は、作用物質を観点２１に記載の動物モデルに投与すること；および、内因性の生殖器の興奮プロセスまたは勃起プロセスの変化を測定することを含み；前記変化は、定義された試験物質の存在下での、動物モデルにおける膣／陰核の血流、陰茎海綿体圧（ＩＣＰ）（および／または海綿体の血流）の相乗作用と定義され；前記作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである。好ましくは、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを投与された個体において、吐き気、嘔吐、失神、低血圧または徐脈のいずれか一つを引き起こさないか、または、最低限しか引き起こさない。
【０１０８】
２３.  性機能障害の治療または予防のための医薬品の調剤における、１またはそれ以
上の選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニスト（前記ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１５倍、好ましくは少なくとも約２７倍、より好ましくは少なくとも約３０倍、最も好ましくは少なくとも約１００倍より機能的に選択的である）、および、１またはそれ以上の補助剤からなる組み合わせの使用であって、この補助剤としては、下記の物が挙げられる。
（ｉ） 天然に存在する、または合成のプロスタグランジンまたはそれらのエステル；
（ii） α−アドレナリン受容体アンタゴニスト化合物（α−アドレノ受容体またはα
−受容体またはα−ブロッカーとしても知られている）；
（iii） ＮＯ−ドナー（ＮＯ−アゴニスト）化合物；
（iv） カリウムチャンネル開口薬または調節因子；
（ｖ） 血管拡張薬；
（vi） トロンボキサンＡ２アゴニスト；
（vii） ＣＮＳ活性物質；
（viii） 麦角アルカロイド；
（ix） ナトリウム利尿因子（naturetic factor）、特に心房性ナトリウム利尿因子（atrial naturetic factor）（または、心房性ナトリウム利尿ペプチドとしても知られている）、Ｂ型およびＣ型ナトリウム利尿因子の作用を調節する化合物、例えば中性エンドペプチダーゼの阻害剤；
（ｘ） 中性エンドペプチダーゼ（ＮＥＰ）を阻害する化合物；
【０１０９】
（xi） アンギオテンシン受容体アンタゴニスト；
（xii） ＮＯ−シンターゼの基質；
（xiii） カルシウムチャンネルブロッカー；
（xiv） エンドセリン受容体のアンタゴニスト、および、エンドセリン変換酵素の阻害剤；
（xv） コレステロール降下剤；
（xvi） 抗血小板物質および抗血栓剤；
（xvii） インスリン抵抗性改善剤；
（xviii） Ｌ−ＤＯＰＡまたはカルビドパ；
（xix） アセチルコリンエステラーゼ阻害剤；
（xx） ステロイド系または非ステロイド系抗炎症薬；
【０１１０】
（xxi） エストロゲン受容体調節因子および／またはエストロゲンアゴニストおよび／またはエストロゲンアンタゴニスト；
（xxii） ＰＤＥ阻害剤；
（xxiii） 血管作用性小腸タンパク質（ＶＩＰ）、ＶＩＰミメティック、ＶＩＰ類似体、より特定には、１またはそれ以上のＶＩＰ受容体サブタイプＶＰＡＣ１、ＶＰＡＣまたはＰＡＣＡＰ（脳下垂体アデニレートシクラーゼ活性化ペプチド）、１またはそれ以上のＶＩＰ受容体アゴニストまたはＶＩＰ類似体（例えばＲｏ−１２５−１５５３）、または、ＶＩＰ断片、ＶＩＰと組み合わせた１またはそれ以上のα−アドレナリン受容体アンタゴニスト（例えばInvicorp、Aviptadil）が介在する；
（xxiv） メラノコルチン受容体アゴニストもしくは調節因子、または、メラノコルチ
ンエンハンサー；
（xxv） セロトニン受容体アゴニスト、アンタゴニストまたは調節因子、より特定には５ＨＴ１Ａに対するアゴニスト、アンタゴニストまたは調節因子；
（xxvi） テストステロン補充剤またはテストステロンインプラント；
（xxvii） エストロゲン、エストロゲン、および、メドロキシプロゲステロンまたは酢酸メドロキシプロゲステロン（ＭＰＡ）(単独で、または、組み合わせて）、またはエス
トロゲンおよびメチルテストステロンホルモン補充療法剤；
（xxviii） ノルアドレナリン、ドーパミンおよび／またはセロトニンのトランスポー
ターの調節因子；
（xxix） プリン受容体アゴニストおよび／または調節因子；
（xxx） ニューロキニン（ＮＫ）受容体アンタゴニスト；
【０１１１】
（xxxi） オピオイド受容体アゴニスト、アンタゴニストまたは調節因子、好ましくは
ＯＲＬ−１受容体に対するアゴニスト；
（xxxii） オキシトシン／バソプレシン受容体に対するアゴニストまたは調節因子、好ましくは選択的オキシトシンアゴニストまたは調節因子；
（xxxiii） カンナビノイド受容体の調節因子；
（xxxiv） ＳＥＰ阻害剤（ＳＥＰｉ）、例えば１００ｎＭ未満、より好ましくは５０ｎＭ未満のＩＣ50を有するＳＥＰｉ；
（xxxv） ＮＰＹ阻害剤；
（xxxvi） ボンベシン受容体アンタゴニスト；または、
（xxxvii） 個体の生殖器における中コンダクタンスカルシウム活性化カリウム（ＩＫCa）チャンネルの活性を調節することができる物質。
【０１１２】
好ましくは、前記作用物質または補助剤は、以下から選択される。
（ａ） ＰＤＥ阻害剤（ＰＤＥｉ）、例えばＰＤＥ５ｉ、ＰＤＥ２ｉ、ＰＤＥ３ｉ、Ｐ
ＤＥ７ｉ、ＰＤＥ８ｉ（ＰＤＥ２ｉおよびＰＤＥ５ｉが最も好ましい）；
（ｂ） 中性エンドペプチダーゼ（ＮＥＰ）を阻害する化合物；
（ｃ） α−アドレナリン受容体アンタゴニスト化合物（α−アドレノ受容体またはα
−受容体またはα−ブロッカーとしても知られている）、特にα１−アドレノ受容体アンタゴニスト（例えば米国特許第２００２／０１６１００９号（Ａ１）で開示されたα１Ｂ−アドレノ受容体アンタゴニスト）、および、α２−アドレノ受容体アンタゴニスト、例えばヨヒンビン；
（ｄ） ＮＰＹ−Ｙ１アンタゴニスト；
（ｅ） コレステロール降下剤、例えばスタチン（例えばアトルバスタチン（リピトー
ルTM））；
（ｆ） エストロゲン受容体調節因子および／またはエストロゲンアゴニストおよび／
またはエストロゲンアンタゴニスト、例えばラソフォキシフェンまたはラロキシフェン；
（ｇ） アンドロゲン受容体調節因子および／またはアンドロゲンアゴニストおよび／
またはアンドロゲンアンタゴニスト、例えばチボロン；
（ｈ） テストステロン補充剤またはテストステロンインプラント；および、
（ｉ）エストロゲン、エストロゲン、および、メドロキシプロゲステロンまたは酢酸メドロキシプロゲステロン（ＭＰＡ）(単独で、または、組み合わせて）、またはエストロ
ゲンおよびメチルテストステロンホルモン補充療法剤。
【０１１３】
より好ましくは、前記作用物質または補助剤は、以下から選択される。
ｉ） １またはそれ以上のテストステロン、テストステロン補充剤（ｉｎｃ デヒドロアンドロステンジオン）、テストステロン（Tostrelle）、ジヒドロテストステロンまたは
テストステロンインプラント；
ii） １またはそれ以上のエストラジオール、エストロゲン、エストロゲン、および、
メドロキシプロゲステロンまたは酢酸メドロキシプロゲステロン（ＭＰＡ）（すなわち、組み合わせて）、またはエストロゲンおよびメチルテストステロンホルモン補充療法剤（例えばＨＲＴ、特にプレマリン、セネスチン、エストロフェミナール（Oestrofeminal）、エクイン（Equin）、エストレース、エストロフェム、エレステソロ（Elleste Solo），エストリング、エストラデルム（Eastraderm）ＴＴＳ，エストラデルムマトリックス、デルメストリル（Dermestril）、プレムフェーズ（Premphase）、プレムプロ（Preempro）、プレムパック（Prempak）、プレミクエ、エストラテスト、エストラテストＨＳ、チボロン）；
iii） １またはそれ以上のさらなるＰＤＥ阻害剤、より特定にはＰＤＥ２、４、５、７または８阻害剤、好ましくはＰＤＥ２阻害剤、前記阻害剤は、好ましくはそれぞれの酵素に対して１００ｎＭ未満のＩＣ50を有する；
iv） １またはそれ以上のＮＥＰ阻害剤、好ましくは、前記ＮＥＰは、ＥＣ３.４.２
４.１１であり、より好ましくは、前記ＮＥＰ阻害剤は、ＥＣ３.４.２４.１１に対する選択的阻害剤であり、より好ましくは、選択的ＮＥＰ阻害剤は、ＥＣ３.４.２４.１１に対
する選択的阻害剤であり、これらは１００ｎＭ未満のＩＣ50を有し（例えばompatrilat、sampatrilat）、適切なＮＥＰ阻害剤化合物は、欧州特許第１０９７７１９号（Ａ）で開
示されている；
ｖ） １またはそれ以上のＮＰＹ（神経ペプチドＹ）阻害剤、より特定にはＮＰＹ１ま
たはＮＰＹ５阻害剤、好ましくはＮＰＹ１阻害剤、前記ＮＰＹ阻害剤（例えばＮＰＹＹ１およびＮＰＹＹ５）は、好ましくは１００ｎＭ未満、より好ましくは５０ｎＭ未満のＩＣ50を有する；および、
vi） １またはそれ以上のエストロゲン受容体調節因子および／またはエストロゲンア
ゴニストおよび／またはエストロゲンアンタゴニスト、好ましくはラロキシフェンまたはラソフォキシフェン、（−）−ｃｉｓ−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５,６,７,８−テトラヒドロナフタレン−２−オール
、および、それらの製薬上許容できる塩、これらの調剤は、ＷＯ ９６／２１６５６で詳
細に述べられている。
【０１１４】
最も好ましくは、前記作用物質又は補助剤は、以下から選択される：
・テストステロン；
・エストラジオール；
・テストステロンおよびエストラジオールの組み合わせ；
・ラソフォキシフェン；
・ラソフォキシフェンおよびテストステロンの組み合わせ；
・ラソフォキシフェンおよびエストラジオールの組み合わせ；
ラソフォキシフェン、テストステロンおよびエストラジオールの組み合わせ。
【０１１５】
女性において、一般的に好ましい組み合わせは、本発明に係る選択的Ｄ３受容体アゴニストと、生殖器の血管に作用する物質および／またはホルモン補充療法（ＨＲＴ）、エストロゲン、アンドロゲン、ＳＥＲＭ（選択的エストロゲン受容体調節因子）またはＳＡＲＭ（選択的アンドロゲン受容体調節因子）との組み合わせである。ＳＥＲＭの例としては、ラソフォキシフェンまたはラロキシフェンが挙げられる。ＳＡＲＭの例はチボロンである。
【０１１６】
好ましくは、ＮＥＰを阻害する前記化合物（ＮＥＰ阻害剤；ＮＥＰｉ）としては、例えば、欧州特許第１０９７７１９号（Ａ１）またはＷＯ ０２／０３９９５（Ａ２）で説明
されたものが挙げられる。好ましくは、前記ＮＰＹ阻害剤としては、例えば、欧州特許第１０９７７１８号（Ａ１）またはＷＯ ０２／４７６７０（Ａ１）で説明されたものが挙
げられる。好ましくは、前記ボンベシン受容体アンタゴニストとしては、例えば、ＷＯ 
０２／４０００８（Ａ２）または米国特許第２００２／００５８６０６号（Ａ１）で説明されたものが挙げられる。
【０１１７】
好ましくは、個体の生殖器における中コンダクタンスカルシウム活性化カリウム（ＩＫCa）チャンネルの活性を調節することができる物質としては、例えば、ＷＯ ０２／１７
９６３（Ａ２）で説明されたものが挙げられる。
好ましくは、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを投与された個体において、吐き気、嘔吐、失神、低血圧または徐脈のいずれか一つを引き起こさないか、または、最低限しか引き起こさない。
【０１１８】
２４.  前記ＰＤＥ阻害剤は、ＰＤＥ２、３、４、５、７または８阻害剤である、観点
２３に記載の使用。
２５.  前記ＰＤＥ５阻害剤は、シルデナフィルである、観点２４に記載の使用。
２６.  男性勃起機能障害（ＭＥＤ）を治療するための、観点２３〜２５のいずれか一
項に記載の使用。
２７.  女性性機能障害（ＦＳＤ）を治療するための、観点２３〜２５のいずれか一項
に記載の使用。
２８.  女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）および／または性的欲求低下障害（ＨＳＤ
Ｄ）を治療するための、観点２７に記載の使用。
【０１１９】
好ましくは、本発明の前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約２０、２５、２７、３０、４５、５０、９０、１００、１２５、１３５、１８０、２００、２２５、２５０、２７０、３００、４００、５００、または少なくとも約６００倍より機能的に選択的である。
【０１２０】
好ましくは、本発明の前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、非ドーパミンＤ３受容体、例えばドーパミンＤ１、Ｄ４またはＤ５受容体に、わずかな機能的な作用しか持たないか、または、それらを持たない。
好ましくは、本発明の前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、１×１０-5Ｍ濃度（結合親和性分析で測定された）では、ドーパミンＤ１、Ｄ４またはＤ５受容体に対して作用を有さない。
【０１２１】
研究によれば、プラミペキソールは、ドーパミンＤ３受容体に関しては０.６２ｎＭの
ＥＣ50（「有効濃度５０％」は、ＥＣ50とも記載され、ここでは「最大アゴニスト反応の
５０％を引き起こすのに必要なアゴニスト濃度」と定義される）、およびドーパミンＤ４受容体に関しては３７.７ｎＭのＥＣ50を有する（ｃＡＭＰレベルの５０％減少に相当す
る有効濃度（ｎＭ）を用いて測定したところ）ことが示されている。従って、プラミペキソールは、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ４受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して約６０倍（約３７.７／０.６２）より機能的に選択的である。上述したように、本発明の選択的ドーパミンＤ３アゴニストは、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも３倍、好ましくは少なくとも５、１０、２０、または２５倍より機能的に選択的である。従ってこれは、本発明の選択的ドーパミンＤ３アゴニストは、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ４受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも３×６０倍、好ましくは少なくとも約５×６０、少なくとも約１０×６０、少なくとも約２０×６０、または少なくとも約２５×６０倍（すなわち少なくとも約１８０倍、好ましくは少なくとも約３００、少なくとも約６００、少なくとも約１２００、または少なくとも約１５００倍）より機能的に選択的である、ということになる。
【０１２２】
好ましくは、本発明の前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、用量制限副作用を予防または改善する。より好ましくは、予防または完全される前記副作用は、嘔吐（すなわち、嘔吐／吐き気）および／または低血圧作用（例えば低血圧（好ましくは起立性低血圧）、血圧の減少、心拍出量の増加、または心拍数の増加（頻脈））および／または心拍数の減少（徐脈）である。
【０１２３】
最も好ましくは、本発明には含まれない化合物、例えば非選択的ドーパミン受容体アゴニストまたは非ドーパミンＤ３受容体アゴニスト（例えば選択的Ｄ２受容体アゴニストまたはＤ３／Ｄ２受容体アゴニスト）、例えばアポモルフィン（非選択的ドーパミンアゴニスト）、プラミペキソール（わずかにＤ３優先的なＤ３／Ｄ２受容体アゴニスト）またはトランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミン（選択的Ｄ２受容体アゴニスト）（図１を参照）が用いられた場合、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、前記用量制限副作用を、１０倍以上、好ましくは１００倍以上で予防または改善し、その用量で、副作用は有益な（予防／治療）作用を下回る。
【０１２４】
好ましくは、本発明の前記ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、前性的作用（例えば勃起）と、上述した用量制限副作用との治療域を、本発明には含まれない化合物、例えば非選択的ドーパミン受容体アゴニストまたは非ドーパミンＤ３受容体アゴニスト（例えば選択的Ｄ２受容体アゴニストまたはＤ３／Ｄ２受容体アゴニスト）、例えばアポモルフィン（非選択的ドーパミンアゴニスト）、プラミペキソール（わずかにＤ３優先的なＤ３／Ｄ２受容体アゴニスト）またはトランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミン（選択的Ｄ２受容体アゴニスト）（図１を参照）の治療域の＞１０倍、好ましくは＞１００倍で増加させる。
【０１２５】
選択的Ｄ２受容体アゴニストであるトランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミンの化学構造を以下に示す：
【化１】
2005516014.tif 000003
【０１２６】
好ましくは、前記機能分析では、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストで処理したＤ３受容体発現細胞とＤ２受容体発現細胞における細胞内ｃＡＭＰレベルを測定し、それにより、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストに関するｃＡＭＰレベルの比率（Ｄ３受容体発現細胞：Ｄ２受容体発現細胞）が得られ、Ｄ２受容体発現細胞と比較して、Ｄ３受容体発現細胞において、少なくとも約１５倍、好ましくは少なくとも約２７倍、より好ましくは少なくとも約３０倍、最も好ましくは少なくとも約１００倍高いｃＡＭＰレベルを示す。また、好ましくは、前記選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストが、Ｄ２受容体発現細胞と比較して、Ｄ３受容体発現細胞において、少なくとも約２０倍、少なくとも約２５倍、または、少なくとも約４５、５０、９０、１００、１２５、１３５、１８０、２００、２２５、２５０、２７０、３００、４００、５００、または少なくとも約６００倍高いｃＡＭＰレベルを示すことである。好ましくは、前記機能分析は、ｃＡＭＰ酵素結合免疫検査法（酵素免疫検査法（ＥＩＡ）または酵素結合免疫吸着検査法（ＥＬＩＳＡ））であるが、その他の機能分析もすでに当業者既知である。このようなｃＡＭＰ酵素結合免疫検査法は、「Ｄ３／Ｄ２受容体アゴニスト機能分析」とも称され、このような分析の例は下記に示される。基本的に、この分析では、ドーパミン受容体を発現する細胞からの細胞内ｃＡＭＰレベルが測定される。受容体サブタイプのヒトＤ２ファミリー（すなわちＤ２、Ｄ３およびＤ４）は、Ｇタンパク質のＧｉサブタイプを介して作用し、アデニレートシクラーゼを阻害する。この機能分析は、細胞中でのｃＡＭＰ形成レベルを増加させるアデニレートシクラーゼを刺激するフォルスコリンに依存する。試験化合物を細胞とインキュベートし、この試験化合物がアゴニストとして作用する場合、Ｇｉタンパク質が刺激されることによりアデニレートシクラーゼ、続いてｃＡＭＰ形成が阻害されるため、ｃＡＭＰレベルは減少する。細胞中の細胞内ｃＡＭＰレベルは、市販のｃＡＭＰ ＥＩＡキット（アマシャムファルマシアバイオテク）を用いて測定される。本発明の好ましい機能分析に関する以下の参考文献を参照により本発明に加入する：
1.  O'SULLIVAN, M.J., CAPPER, S., WHATELEY, J. HORTON, J.K., BAXENDALE, P.M., Immunoassay Applications in Life Science Research. In : Wild, D., (Ed) The Immunoassay Handbook, Nature Publishing Group, pp. 817-845,2001。
2.  HORTON, J.K., SEDDON, L.J., WILLIAMS A. S. BAXENDALE P.M. A method for measuring intracellular cyclic AMP levels with immunoassay technology and novel, cellular lysis reagents. Br. J.Pharmacol. (Suppl), 123, p.31,1998。
3.  Conversion of the cAMP direct screening assay to a 384 well format. Amersham
Biosciences,Proximity Headlines 4, 1998。
4.  ICHIKAWA ET AL., Identification and role of adenylyl cyclase in auxin signaling in higher plants. Nature, 390, pp.698-701,1997。
5.  Direct quantitation of intracellular levels of cAMP-eliminating lengthy extraction processes. Nycomed Amersham, Life Science News 23,1997。
6.  Direct and in situ measurement of cAMP in cell culture with scintillation proximity radioimmunoassay. Amersham International, Proximity News 34, 1997。
7.  High throughput screening for c AMP formation by scintillation proximity radioimmunoassay. Amersham International, Proximity News 23, 1996。
8.  HORTON, J.K., BAXENDALE, P.M., Mass measurements of cyclic AMP formation by radioimmunoassay, enzyme immunoassay and scintillation proximity assay. In :Kendall, D.A., and Hill, S.J., (Eds) Meth. in Mol. Biol, 41, pp.95-105,1995。
9.  HORTON, J.K., SMITH,L., ALI, A., BAXENDALE, P.M., NEUMANN, K., KOLB, A., High throughput screening for cAMP formation by scintillation proximity radioimmunoassay. Packard Instrument Company TopCount Topics 21, pp.1-4,1995。
10   HORTON, J.K., MARTIN, R.C., KALINKA, S., CUSHING, A. KITCHER, J.P., O'SULLIVAN, M.J., BAXENDALE, P.M. Enzymeimmunoassays for the estimation of adenosine 3',5'cyclic monophosphate and guanosine 3',5'cyclic monophosphate in biological fluids. J. Immunological Methods, 155, pp.31-40, 1992。
【０１２７】
その他の適切な機能分析は、Perachon等（1999年），European Journal of Pharmacology，366，293〜300で見出すことができる。
その他の適切な機能分析は、本出願人により２００２年１１月６日付で出願された同時係属中の特許出願の欧州特許第０２２５７７０７.６号に見出すことができ、参照により
本発明に加入する。欧州特許第０２２５７７０７.６号で開示された分析は、Ｇタンパク
質結合受容体のアゴニスト化合物（例えば神経受容体）による活性化を決定するための分析方法であり、前記方法は、蛍光イメージングプレートリーダー（ＦＬＩＰＲ）の使用に基づいており、以下を含む：
【０１２８】
（ａ） 薬剤耐性マーカーから選択される少なくとも１つの適切な選択因子を有する細
胞系（ＨＥＫ２９３−Ｇα１５から選択される）を得ること、前記細胞系は、Ｇα１５から選択される様々なＧタンパク質を安定して発現し、選択されたＧ結合受容体をコードするｃＤＮＡを前記細胞系にトランスフェクトすることにより、前記細胞系において前記Ｇ結合受容体を共発現させること；
（ｂ） 共発現する細胞を適切な培地で培養すること；
（ｃ） 前記細胞を約１日間プレーティングすること；
（ｄ）所定量の目的に適した蛍光色素をプレーティングされた細胞にローディングすること；
（ｅ） 色素をローディングした細胞を約室温〜約３７℃で約１時間インキュベートす
ること；
（ｆ） 適切な緩衝液でプレートを洗浄し、過量の色素を除去し、除去した緩衝液を、
その量とほぼ同量の新しい緩衝液で置き換えること；
（ｇ） 約３０℃〜約３７℃でインキュベートすること；
（ｈ） 約３０℃〜約３７℃の一定温度条件下でアゴニスト化合物を加えること；およ
び、
（ｉ） 蛍光イメージングプレートリーダーで約３０℃〜約３７℃の一定温度条件下で
蛍光発光を測定し、それにより、アゴニスト化合物による選択された受容体の活性化レベルを決定すること。
【０１２９】
分析の一実施形態において、Ｇ結合受容体は、ドーパミンまたはヒスタミン受容体である。その他の実施形態において、Ｇ結合受容体は、Ｄ２、Ｄ３、α１Ａ、α２Ａ、Ｍ１、Ｈ１、５ＨＴ１Ａ、および５ＨＴ２Ａ受容体からなる群より選択される。他の特定の実施形態において、前記Ｇ結合受容体は、ドーパミンＤ３受容体である。分析のさらなる実施形態において、薬剤耐性マーカーから選択される選択因子は、ピューロマイシン耐性マーカーである。分析のさらに他の実施形態において、薬剤耐性マーカーから選択される選択
因子は、ブラスチシジン（blastocidin）耐性マーカーである。欧州特許第０２２５７７
０７.６号の分析方法を実施するのに用いられる好ましい蛍光色素は、Ｆｌｕｏ−３TMま
たはＦｌｕｏ−４TMである。好ましくは、プレーティングされた細胞の密度は、約１２,
０００〜約３０,０００細胞／ｃｍ2である。分析の他の実施形態において、インキュベート工程（ｇ）は、約１５分間〜約６０分間で行われる。好ましくは、前記インキュベート工程（ｇ）は、約３０分間行われる。
【０１３０】
驚くべき、かつ予想外の発見
本発明は、以下の驚くべき、かつ予想外の発見を実証する：
（ａ） ドーパミンＤ２受容体の活性化または刺激が、吐き気、嘔吐、失神、低血圧ま
たは徐脈のような副作用の発生に関与すること；
（ｂ） 選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを用いたドーパミンＤ３受容体の選択
的な活性化または刺激により、非選択的ドーパミンアゴニストの投与の後に観察される副作用を起こすことなく、男性および女性両方の性機能障害、特にＭＥＤおよびＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤが効果的に治療または予防されること。実質的に、Ｄ３受容体の拮抗作用は、性的行動の阻害剤となる。
【０１３１】
利点
本発明は、以下の理由により有利である：
（ａ） 選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストの使用によるドーパミンＤ３受容体の
選択的な標的化によって、性機能障害（男性および女性の両方）の治療または予防、特にＭＥＤならびにＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤが治療または予防され、それと同時に、非選択的ドーパミンアゴニストの投与の後に観察される吐き気、嘔吐、失神、低血圧または徐脈のような１またはそれ以上の副作用が効果的に軽減または除去される。
【０１３２】
患者群
女性
本発明の化合物は、以下のＦＳＤ患者のサブ集団：ホルモン補充療法を受けている、または受けていない、若い、年配の、閉経前、月経中、または閉経後の女性において用途を有する。
【０１３３】
本発明の化合物は、以下の原因により引き起こされるＦＳＤ患者において用途を有する：
ｉ） 血管性の病因、例えば心臓血管疾患またはアテローム性動脈硬化症、高コレステ
ロール血症、喫煙、糖尿病、高血圧、放射線損傷および会陰損傷、または、腸骨下腹の外陰部の血管系への外傷；
ii） 神経性の病因、例えば脊髄外傷または中枢神経系疾患、例えば多発性硬化症、糖
尿病、パーキンソン病（Parkinsonism）、脳血管発作、末梢神経疾患、外傷または根治的な骨盤の外科手術；
iii） ホルモン／内分泌の病因、例えば視床下部／下垂体／性腺軸の機能障害、または卵巣の機能障害、膵臓の機能障害、外科手術または薬物による去勢、アンドロゲン欠乏、プロラクチンの高い循環レベル、例えば高プロラクチン血症、自然な閉経、早発卵巣不全、または甲状腺機能亢進症および甲状腺機能低下症；
iv） 心因性の病因、例えばうつ、強迫性障害、不安障害、産後のうつ／「ベビーブル
ー」、情緒的および人間関係の問題、遂行不安、夫婦間の不和、非機能的態度、性交恐怖症、宗教的な禁止または過去の外傷的経験；または、
ｖ） 選択的セロトニン再摂取阻害剤（ＳＳＲｉｓ）を用いた治療およびその他の抗う
つ薬治療（三環系および主要なトランキライザー）、抗高血圧薬治療、交感神経遮断薬、または慢性的な経口避妊薬のピルを用いた療法により生じる、薬剤により誘発される性機能障害。
【０１３４】
男性
軽度から中程度のＭＥＤの患者は、本発明に係る化合物を用いた治療によって利益を受けるはずであり、重度のＭＥＤの患者もまた好反応を示す可能性がある。しかしながら、初期の調査では、軽度、中程度および重度のＭＥＤの患者の応答率は、選択的Ｄ３アゴニスト／ＰＤＥ５阻害剤（ＰＤＥ５ｉ）の組み合わせを用いればより大きくなる可能性があることが示されている。軽度、中程度および重度のＭＥＤは、当業者既知であるが、Journal of Urology，第151巻，54〜61（1994年1月）でガイダンスを見出すことができる。
【０１３５】
初期の調査では、後述するＭＥＤ患者群は、選択的Ｄ３アゴニストおよびＰＤＥ５ｉ（または下記に示すその他の組み合わせ）を用いた治療によって利益を受けるはずである、ということが示されている。これら患者群は、Clinical Andrology，第23巻，第4号，p773〜782、および、I. Eardley および K. Sethiaの「Erectile Dysfunction-Current Investigation and Management」（Mosby-Wolfe刊）の著書の第３章でより詳細に開示されており、以下の通りである：心因性の、器官の、血管性の、内分泌性の、神経性の、動脈性の、薬剤により誘発される性機能障害（乳腺刺激性）、および、海綿体の要因、特に静脈性の原因に関連する性機能障害。
【０１３６】
ドーパミンＤ３受容体
上述したように、上記作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストとして作用し得るあらゆる適切な物質が可能である。
ドーパミンＤ３受容体に関するバックグラウンドの教示は、http：／／www 3. Ncbi. Nlm. nih. gov／Omim／searchomim. htm.でVictor A. McKusick等により説明されている。その源より、Ｄ３受容体に関する以下のテキストを抜粋する：
「Sokoloff等（1990年）［ネイチャー３４７：１４６〜１５１］により、ドーパミン受容体は、Ｄ１およびＤ２受容体とは薬理学およびシグナル伝達システムにおいて異なり、自己受容体とシナプス後受容体との両方を示すことが特徴付けられた。特にドーパミン受容体Ｄ３は、認知、情緒、および内分泌機能に関連する大脳辺縁系に局在する。ドーパミン受容体Ｄ３は、これまでＤ２受容体のみと相互作用すると考えられていた抗精神病薬やパーキンソン病治療に用いられる薬剤の作用のいくつかを調節すると考えられる。上記のSokoloff等（1990年）は、逆転写およびＰＣＲを組み合わせて用いてｃＤＮＡおよびゲノムライブラリーをスクリーニングすることによりＤＲＤ３遺伝子をクローニングした。ＤＲＤ２遺伝子と同様に、ただしこのスーパーファミリーのその他ほとんどのメンバーとは異なり、ＤＲＤ３遺伝子は、全部で５個のイントロンを含む。このイントロンのうち２つの位置は、ＤＲＤ２におけるイントロンの位置に一致する。Le Coniat等（1991年）［Hum. Genet. Sep；87（5）：618〜20］は、ゲノムプローブをフローソーティングした染色体へハイブリダイゼーションすることによりＤＲＤ３遺伝子を第３染色体に割り当て、インサイチュハイブリダイゼーションによりバンド３ｑ１３.３に位置決定した」。
【０１３７】
最初は、Ｄ３受容体は、上記のSokoloff等（1990年）により、Ｄ２ドーパミン受容体配列から得られたプローブを用いてラットｃＤＮＡライブラリーからクローニングされた。その後まもなく、ヒトＤ３受容体のクローニングが報告され（Giros等（1990年）CR Acad. Sci. III，311：501〜508）、続いて、マウスのＤ３受容体のクローニングが報告された（Fishburn等（1993年）J. Bioi. Chem. 268：5872〜5878）。
【０１３８】
ドーパミンＤ３受容体配列データ
ドーパミンＤ３受容体に関するヌクレオチド配列およびアミノ酸配列は、文献から得ることができる（上記のSokoloff等（1990年）；Giros等（1990年）；および、Fishburn等
（1993年）を参照）。
ヒトドーパミンＤ３受容体に関するヌクレオチド配列（配列番号１）およびアミノ酸配
列（配列番号２）は、下記の配列リストに示す。
【０１３９】
選択的Ｄ３アゴニスト
選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、ドーパミンＤ３受容体と結合する際に生理的反応を引き起こす化合物であり、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して選択的であり、その選択性は、同じ機能分析で測定した場合、化合物プラミペキソールで得られた選択性の少なくとも３倍である。すなわち、本発明に係る選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、Ｄ３受容体に対して、化合物プラミペキソールよりも少なくとも3倍より選択的な反応を惹起するものである。
【０１４０】
ドーパミンＤ３受容体アゴニストを同定および／または研究するのに適切な分析システムの詳細を、以下の表題「Ｄ３アゴニスト分析」の項に示す。
適切な選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストおよびそれに関する中間体の例を、下記の実施例の項「化学合成の実施例」に示す。
【０１４１】
Ｄ３アゴニスト分析
上述したように、ドーパミンＤ３受容体およびドーパミンＤ２受容体に関して、結合データまたは結合選択性データは、機能的なデータまたは機能的な選択性データと必ずしも相互関係を有するとも限らないし、または、このようなデータを示すとも限らないことがわかっている。本発明において、「選択的」は「機能的に選択的」を意味するものとする。
【０１４２】
Ｄ３／Ｄ２アゴニスト結合分析
Gonazalez等（Eur. J. Pharmacology 272（1995年）R1〜R3）は、Ｄ３および／または
Ｄ２ドーパミン受容体への化合物の結合能力、続いてこのような化合物の結合選択性を決定するための分析を開示している。従って、この分析は、本発明において結合分析と称される。
【０１４３】
Ｄ３／Ｄ２アゴニスト機能分析
Ｄ３および／またはＤ２ドーパミン受容体に対する化合物の活性を機能的に決定するのに適切な分析を以下に詳述する。
ヒトＤ２およびＤ３受容体をそれぞれ発現するＧＨ４Ｃ１およびＣＨＯ細胞系におけるｃＡＭＰレベルを観察することによって、化合物をドーパミンＤ２およびＤ３受容体に対するアゴニストまたはアンタゴニストとして評価する。
【０１４４】
実験方法
材料
【表１】
2005516014.tif 000004
【０１４５】
クローニングされたヒトドーパミン受容体を発現する２種の付着細胞系を以下に示す：
ｈＤ2ＬＧＨ４Ｃ１−ヒトドーパミンＤ２ロング受容体を発現するラット下垂体細胞；
および、
ｈＤ3ＣＨＯ−ヒトドーパミンＤ３受容体を発現するジヒドロ葉酸レダクターゼ遺伝子
欠失チャイニーズハムスター卵巣細胞。
上記細胞の成長に必要な培地は、以下のように毎週新しく製造し、使用前に０.２２μ
Ｍフィルターでろ過する。培地は４℃で保存し、細胞に加える際には３７℃で温める。
【０１４６】
・細胞解離溶液：
（シグマＣ−５９１４）１０〜１５ｍｌは、２２５ｃｍ2のフラスコから細胞を回収す
るのに用いられる（ｈＤ2ＬＧＨ４Ｃ１細胞は３７℃で５分間、ｈＤ3ＣＨＯ細胞は１０分間）。
【０１４７】
・ＫＲＨ緩衝液：
ＫＲＨは、以下のように製造される；
【表２】
2005516014.tif 000005
蒸留水で１リットルにし、ｐＨを室温でｐＨ７.４に調製する。４℃で、最長１週間保
存する。
【０１４８】
・３−イソブチル−メチルキサンチン（ＩＢＭＸ）：
（シグマＩ７０１８）ＤＭＳＯに濃度１００ｍＭで溶解させる。１０×分析ストック１ｍＭは、ＫＲＨ緩衝液で１：１００に希釈することにより作製される。２０μｌを最終分析体積２００μｌに加え、最終分析濃度を１００μＭ／ウェルにする。
【０１４９】
・フォルスコリン：
（Calbiochem 344273）水に濃度１０ｍＭで溶解させる。（このストックは＋４℃で保
存する）。１０×分析ストック１００μＭおよび２００μＭを、ＫＲＨ緩衝液で１００倍および５０倍希釈することにより作製する。２０μｌを最終分析体積２００μｌに加え、最終分析濃度をＤ２細胞は１０μＭ、Ｄ３細胞は２０μＭにする。
【０１５０】
・試験化合物：
１００％ＤＭＳＯに濃度１０ｍＭで溶解し、ＫＲＨ緩衝液で希釈し、１００μＭ／ウェルの最高濃度を１％ＤＭＳＯ／ＫＲＨにおいてする（分析において、０.１％ＤＭＳＯ／
ＫＲＨ中で、１０μＭ／ウェル）。１％ＤＭＳＯ／ＫＲＨでさらに希釈する（１０×分析濃度）：１０μＭ、１μＭ、１００ｎＭ、１０ｎＭ、１ｎＭ、０.１ｎＭ.０.０１ｎＭお
よび０.００１ｎＭ。
２０μｌを最終分析体積２００μｌに加え、以下の最終分析濃度：１μＭ、１００ｎＭ、１０ｎＭ、１ｎＭ、０.１ｎＭ、０.０１ｎＭおよび０.００１ｎＭにする。
化合物は通常、１ｅ−５〜１ｅ−１２で分析する。
分析中、以下の化合物を常にインキュベートする：
アポモルフィン
１ｅ−５〜１ｅ−１２で分析
完全アゴニスト
【０１５１】
・ｃＡＭＰ酵素免疫検査法分析：
特に指定のない限り、全材料はアマシャムファルマシアバイオテクのｃＡＭＰ ＥＩＡ
キット（ＲＰＮ２２５）から得る。
・マイクロタイタープレート：
９６ウェルプレートをロバ抗ウサギＩｇＧで被覆する。
【０１５２】
・分析緩衝液：
希釈により、０.０２％ウシ血清アルブミンおよび０.０１％保存剤を含む０.０５Ｍ酢
酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５.８）とする。このボトルの内容物を、３×１５ｍｌの蒸留
水洗浄によりメスシリンダーに移す。次に、最終容量を５００ｍｌに調節する。
・ｃＡＭＰ標準（アセチル化分析以外のため）：
再溶解させることにより、３２００ｆｍｏｌ／ｍｌのｃＡＭＰとする。標準をリシス試薬１Ｂ（以下を参照）２ｍｌに溶解させて用いる。
【０１５３】
・抗体：
ウサギ抗ｃＡＭＰである。抗体をリシス試薬２Ｂ（以下を参照）１１ｍｌに溶解させて用いる。
・ペルオキシダーゼ複合体：
ｃＡＭＰ−ホースラディッシュペルオキシダーゼである。ペルオキシダーゼ複合体を分析緩衝液１１ｍｌに溶解させて用いる。
【０１５４】
・洗浄緩衝液：
希釈することにより、０.０５％Tween２０を含む０.０１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７.５）とする。このボトルの内容物を、３×１５ｍｌの蒸留水洗浄によりメスシリンダーに移す。次に、最終容量を５００ｍｌに調節する。
・ＴＭＢ基質：
２０％（ｖ／ｖ）ジメチルホルムアミド中の、３,３′,５,５′−テトラメチルベンジ
ジン（ＴＭＢ）／過酸化水素である。
【０１５５】
・リシス試薬１：
ドデシルトリメチルアンモニウムブロミドである（再溶解させて２５ｍｇ／ｍｌとする）。粉末を、３×１５ｍｌの分析緩衝液を用いて１００ｍｌメスシリンダーに移す。体積を、６０ｍｌに調節し、溶解するまで撹拌する。次に、最終体積を分析緩衝液で８０ｍｌにする。
・リシス試薬１Ｂ：
リシス試薬１（５ｍｌ）を、分析緩衝液で５０ｍｌに希釈する。
・リシス試薬２：
固体５ｇである。有害と分類される化学物質は含まない。粉末を、３×１５ｍｌの分析緩衝液を用いて１００ｍｌメスシリンダーに移す。体積を、８０ｍｌに調節し、溶解するまで撹拌する。次に、最終容量を分析緩衝液で１００ｍｌにする。
・リシス試薬２Ｂ：
リシス試薬２（１０ｍｌ）を、分析緩衝液で４０ｍｌに希釈する。
・硫酸（１Ｍ）：
１８Ｍストック（ＢＤＨ）から１Ｍ硫酸を作製する。酸１１ｍｌを蒸留水１８９ｍｌに加える。
【０１５６】
特定の器具
分光光度（Spectroscophometric）プレートリーダー（Spectra max１９０）。
マイクロタイタープレート振盪機／インキュベーター（Wesbart）。
【０１５７】
方法
凍結アンプルの再生：
液体窒素からアンプルを取り出し、２分間平衡化し、それにより、閉じ込められた気体や液体をアンプルから迅速に膨張させ、追い出すことができる。それらはまた、解凍前にマイナス２０℃に置いてもよい。
アンプルを水浴中で３７℃で迅速かつ完全に解凍する。
内容物を１５ｍｌチューブに慎重に移す。培地２ｍｌ、続いて８ｍｌをゆっくり加える。
細胞懸濁液をＴ２５フラスコに移し、２４時間、３７℃で、５％ＣＯ2でインキュベー
トする。細胞が速く増殖するように、Ｎ.Ｂ.ｈＤ3ＣＨＯ細胞をＴ２２５フラスコに直接
置いてもよい；必要な培地量は５０ｍｌである。
【０１５８】
細胞の回収および分割：
一般的に、火曜日と木曜日に分析を行うために、細胞は、月曜日と水曜日に分割した。あまりにも多くの細胞群が週末を過ぎて持ち越される場合、細胞はまた、金曜日にも分割した。ｈＤ3ＣＨＯ細胞は、密度８０％を超えて増殖させないことが極めて重要であり、
これは、それらはこの時点を過ぎた後は１回しか回収できないためである。
細胞をＴ２２５フラスコ（Jumbos）で培養する。細胞に加えられる各成分は、使用前に３７℃に温めなければならない。
【０１５９】
細胞の回収：
増殖培地をフラスコから除去し、細胞を温かいＰＢＳ（Ｇｉｂｃｏ. １４０４０−０９１） で２回洗浄し、除去する。
１. 細胞解離緩衝液（シグマＣ５９１４）約１０ｍｌを細胞に加え、約５分間インキュベーターに置く。（Ｄ３細胞は、Ｄ２細胞より強くフラスコに付着するので、Ｄ３細胞を除去するのにより長時間が必要な場合がある）。
２. インキュベーターから取り出す際に、フラスコを鋭くたたいて、全ての残存する細胞を底から動かす。
３. 完全培地約１０ｍｌを細胞に加え、フラスコの壁面を洗浄するのに用いる。細胞を、５分間、１０００ｒｐｍで遠心分離し、細胞を沈殿させる。
４. 培地を捨て、新しい培地１０ｍｌを用いて細胞を再懸濁する。計数のために、１００μｌを取り出し、トリパンブルー（シグマＴ８１５４）１００μｌとあわせる。
【０１６０】
分割比：
ｈＤ2ＬＧＨ４Ｃ１を、１：３〜１：６に分割した。
ｈＤ3ＣＨＯは、１：５〜１：１０に分割した（２つの細胞系はより速く増殖する）。
【０１６１】
分析のための播種：
５０，０００細胞／２００μｌ／ウェル（２.５×１０5細胞／ｍｌに等しい）が必要である。細胞を２.５×１０5細胞／ｍｌに希釈し、組織培養９６ウェルプレートのウェルに２００μｌを加える。全細胞を３７℃で、５％ＣＯ2で放置する。
【０１６２】
細胞系の凍結保存：
自作の細胞の細胞バンクを作製して、将来的な使用のために再生することは良い考えである。
１. 上記と同じ方法で細胞を回収する。
２. 細胞を計数する。
３. 凍結培地は、１０％ＤＭＳＯ含有完全培地を含ませ、細胞を再懸濁して２〜４×１
０6細胞／ｍｌにする。細胞懸濁液を１ｍｌのアリコートに分配する。
４. マイナス８０℃のフリーザーで「Mr Frosty」を用いて細胞を１℃〜３℃で一晩凍
結させ、その後、気相窒素保存容器に移す。
凍結後１つのアンプルを解凍し、細胞の生存率を試験することが賢明である。７０％未満の生存率は、少ない細胞数と死細胞片の存在により再生の際に問題となる恐れがある。
【０１６３】
細胞中の細胞内ｃＡＭＰレベルの測定：
前日に、細胞を５０,０００細胞／ウェルで、細胞培養培地（上記を参照）中の滅菌９
６−ウェルプレートにプレーティングし（最終容量は２００μｌ／ウェル）、３７℃で、５％ＣＯ2で一晩インキュベートする（Ｏ／Ｎ）。
ＫＲＨ緩衝液を上述の通り作製し、３７℃に温める。
ＩＢＭＸ、フォルスコリンおよび試験化合物を上述の通り作製し、希釈する。
細胞をＫＲＨ緩衝液２００μｌで１回洗浄する。
【０１６４】
以下のものを各ウェルに加える：
【表３】
2005516014.tif 000006
【０１６５】
【表４】
2005516014.tif 000007
【０１６６】
プレートを３７℃で４５分間撹拌する。
４５分間後、分析混合物を吸引し、リシス試薬１Ｂ（２００μｌ）を、細胞に加える。
さらに溶解させる前に、繰り返しピペッティングすることにより（〜２０回／ウェル）細胞を２０分間振盪する。
【０１６７】
ｃＡＭＰ酵素免疫検査法分析：
ストック試薬を室温に平衡化し、使用溶液を作製する（上述した通り）。
エッペンドルフチューブでｃＡＭＰ標準を作製し、１２.５、２５、５０、１００、２
００、４００、８００、１６００および３２００ｆｍｏｌと表記する。リシス試薬１Ｂ（０.５ｍｌ）を、各チューブに加える。希釈した標準０.５ｍｌを、３２００ｆｍｏｌチューブに加える。そのチューブをボルテックス混合し、０.５ｍｌを１６００ｆｍｏｌチューブに加える。これを続けて、さらに希釈液を作製する。
【０１６８】
各細胞溶解産物の２０μｌ（ｈＤ2）および１００μｌ（ｈＤ3）を、ＥＩＡプレートに移し、ｈＤ2サンプルに関しては、リシス試薬１Ｂで１００μｌにする。ｈＤ3サンプルには何も加えない。各標準と元の標準１００μｌを、二連でプレートに置く。以下のコントロールを用意する：
ゼロ標準：リシス試薬１Ｂ１００μｌ、
ＮＳＢ：リシス試薬１Ｂおよび２Ｂ１００μｌ、
ブランク：何も加えない。
抗体１００μｌを、ブランクとＮＳＢウェル以外の全てのウェルに加えた後、４℃で２時間インキュベートする。
インキュベート後、ペルオキシダーゼ複合体５０μｌを、ブランクウェル以外の全てのウェルに加え、４℃でさらに１時間インキュベートする。
プレートを吸収紙上へのブロッティングにより移し、洗浄緩衝液４００μｌで４回洗浄する。次に、ＴＭＢ基質１５０μｌを各ウェルに加える。
プレートを室温で３０分間振盪し、その後、１Ｍ硫酸１００μｌを全てのウェルに加える。
光学密度を、Spectramax１９０で、４５０ｎＭ、３０分間で読み取る。
【０１６９】
計算
エクセルとオリジンのテンプレートの組み合わせを用いて計算する。
エクセルで、ｌｏｇ ｃＡＭＰ（ｘ軸）ｍｏｌ／ウェルに対するコントロールＯＤデー
タの％（ｙ軸）をプロットすることにより標準曲線を作製する。標準曲線は、０〜１００の範囲である。
標準曲線からの変数を用いて、標準曲線から各サンプルウェルのｃＡＭＰ量を予測する。
反応を生じさせる用量をＳ字形曲線から予測するための式
【数１】
2005516014.tif 000008
（式中、ａ＝下部の漸近線、ｂ＝曲線の傾斜、ｃ＝ＩＣ50、ｄ＝上部の漸近線である。）
・各ＯＤの読み取りからｃＡＭＰ量を予測し、ＤＭＳＯコントロールの％として示す。
・コントロール反応％（ｙ軸）に対して化合物のＬｏｇ濃度（ｘ軸）をプロットし、Ｓ字状用量反応曲線を作製し、これからＥＣ50濃度を得ることができる。
【０１７０】
組み合わせ
より詳細に、本発明はさらに、本発明において概説された性機能障害（より特定には男性性機能障害、特にＭＥＤ、または女性性機能障害、特にＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤ）を治療するための、本発明の化合物と、１またはそれ以上の助剤活性物質（以下の適切な例についての考察を参照）との組み合わせを含む。この組み合わせは、男性および女性性機能障害、ならびに、特に、器官の、血管性の、神経性の、薬剤により誘発される、
および／または心因性の原因の勃起機能障害の治療を提供する。
【０１７１】
本発明はさらに、本発明において概説された男性性機能障害（より特定には男性勃起機能障害（ＭＥＤ）または女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）および／または性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ））を治療または予防するための医薬品の製造または調剤における、実質的に、本発明に係る選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストと、２種の助剤活性物質（以下の適切な例についての考察を参照）とからなる組み合わせの使用を含む。この組み合わせは、器官の、血管性の、神経性の、薬剤により誘発される、および／または心因性の原因の性機能障害の治療を提供する。
【０１７２】
本発明はさらに、本発明において概説された性機能障害（より特定には男性勃起機能障害（ＭＥＤ）または女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）および／または性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ））を治療または予防するための医薬品の製造または調剤における、本発明に係る選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストと、２種の助剤活性物質（以下の適切な例についての考察を参照）とからなる組み合わせの使用を含む。この組み合わせは、器官の、血管性の、神経性の、薬剤により誘発される、および／または心因性の原因の勃起機能障害の治療を提供する。
【０１７３】
本発明はさらに、本発明において概説された男性性機能障害（より特定には男性勃起機能障害（ＭＥＤ）または女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）および／または性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ））を治療または予防するための医薬品の製造または調剤における、実質的に、本発明に係る選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストと、１種の助剤活性物質（以下の適切な例についての考察を参照）とからなる組み合わせの使用を含む。この組み合わせは、器官の、血管性の、神経性の、薬剤により誘発される、および／または心因性の原因の性機能障害の治療を提供する。
【０１７４】
本発明はさらに、本発明において概説された男性性機能障害（より特定には男性勃起機能障害（ＭＥＤ）または女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）および／または性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ））を治療または予防するための医薬品の製造または調剤における、本発明に係る選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストと、１種の助剤活性物質（以下の適切な例についての考察を参照）とからなる組み合わせの使用を含む。この組み合わせは、器官の、血管性の、神経性の、薬剤により誘発される、および／または心因性の原因の性機能障害の治療を提供する。
【０１７５】
男性において、場合によっては女性において、好ましくは、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストと１またはそれ以上の補助剤との組み合わせは、ＮＥＰ阻害剤およびＮＰＹ阻害剤、ボンベシン受容体アンタゴニストまたは個体の生殖器における中コンダクタンスカルシウム活性化カリウム（ＩＫCa）チャンネルの活性を調節できる物質の１またはそれ以上を含まない。
【０１７６】
女性においてのみ、場合によっては、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、ＮＥＰ阻害剤またはＮＰＹ阻害剤のいずれか、またはその両方と組み合わせて用いることも考えられる。従って、本発明は、女性のみに関して、女性性機能障害（例えばＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤ）を治療するための上記組み合わせの使用を含む。本発明はさらに、女性性機能障害（例えばＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤ）の治療に用いるための、ＮＥＰ阻害剤および／またはＮＰＹ阻害剤のいずれか、またはその両方を一緒に含む、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む、または、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストからなる医薬組成物の使用を提供する。適切には、このような医薬組成物は、１またはそれ以上の補助剤（以下の適切な例についての考察を参照）をさらに含んでもよい。
【０１７７】
従って、本発明のさらなる組み合わせた観点は、本発明の化合物と、１またはそれ以上の助剤活性物質（以下の適切な例についての考察を参照）とを含む薬剤の組み合わせ（同時投与、別々の投与または連続投与のため）を提供する。
【０１７８】
本発明のよりさらなる組み合わせた観点は、実質的に、選択的ドーパミンＤ３アゴニストと、２種の助剤活性物質（以下の適切な例についての考察を参照）とからなる医薬組成物（同時投与、別々の投与または連続投与のため）を提供する。
本発明のよりさらなる組み合わせた観点は、選択的ドーパミンＤ３アゴニストと、２種の助剤活性物質（以下の適切な例についての考察を参照）とからなる医薬組成物（同時投与、別々の投与または連続投与のため）を提供する。
【０１７９】
本発明のよりさらなる組み合わせた観点は、実質的に、選択的ドーパミンＤ３アゴニストと、１種の助剤活性物質（以下の適切な例についての考察を参照）とからなる医薬組成物（同時投与、別々の投与または連続投与のため）を提供する。
本発明のよりさらなる組み合わせた観点は、選択的ドーパミンＤ３アゴニストと、１種の助剤活性物質（以下の適切な例についての考察を参照）とからなる医薬組成物（同時投与、別々の投与または連続投与のため）を提供する。
【０１８０】
助剤活性物質
本発明と組み合わせて用いるのに適切な助剤活性物質としては、以下のものが挙げられる：
１） 天然に存在する、または合成のプロスタグランジンまたはそれらのエステル。本
発明で用いるのに適切なプロスタグランジンとしては、以下のような化合物が挙げられる：アルプロスタジル、プロスタグランジンＥ1、プロスタグランジンＥ0、１３,１４−ジヒドロプロスタグランジンＥ1、プロスタグランジンＥ2、エプロスチノール（eprostinol）、天然、合成および半合成のプロスタグランジンおよびそれらの誘導体、例えば２０００年３月１４日に発行されたＷＯ ０００３３８２５および／または米国特許第６,０３７,３４６号（全て参照により本発明に加入する）に記載のもの、ＰＧＥ0、ＰＧＥ1、ＰＧＡ1、ＰＧＢ1、ＰＧＦ1α、１９−ヒドロキシＰＧＡ1、１９−ヒドロキシ−ＰＧＢ1、ＰＧＥ2、ＰＧＢ2、１９−ヒドロキシ−ＰＧＡ2、１９−ヒドロキシ−ＰＧＢ2、ＰＧＥ3α、カルボプロスト、トロメタミンジノプロスト、トロメタミン、ジノプロストン、リポプロスト（lipo prost）、ゲメプロスト、メテノプロスト（metenoprost）、スルプロストン（sulprostune）、チアプロスト（tiaprost）、および、モキシシレート（moxisylate）；
【０１８１】
２） α−アドレナリン受容体アンタゴニスト化合物（α−アドレノ受容体またはα−
受容体またはα−ブロッカーとしても知られている）。本発明で用いるのに適切な化合物としては、以下が挙げられる：１９９８年６月１４日に発行されたＰＣＴ出願ＷＯ ９９
／３０６９７に記載のα−アドレナリン受容体ブロッカー（そのα−アドレナリン受容体に関する開示を参照により本発明に加入する）、例えば、選択的α1−アドレノ受容体ま
たはα2−アドレノ受容体ブロッカー、および、非選択的アドレノ受容体ブロッカーであ
り、適切なα1−アドレノ受容体ブロッカーとしては、以下が挙げられる：フェントラミ
ン、フェントラミンメシレート、トラゾドン、アルフゾシン、インドラミン、ナフトピジル、タムスロシン、ダピプラゾール（dapiprazole）、フェノキシベンザミン、インダゾ
キサン（idazoxan）、エファラキサン（efaraxan）、ヨヒンビン、ラウオルフィアアルカロイド、レコルダティ１５／２７３９、ＳＮＡＰ１０６９、ＳＮＡＰ５０８９、ＲＳ１７０５３、ＳＬ８９.０５９１、ドキサゾシン、テラゾシン、アバノクイル（abanoquil）、および、プラゾシン；α2−ブロッカーとしては、以下が挙げられる：米国特許第６,０３７,３４６号［２０００年３月１４日］に記載のブロッカー、ジベナルニン（dibenarnine）、トラゾリン、トリマゾシン（trimazosin）、および、ジベナルニン（dibenarnine）；以下に記載のα−アドレナリン受容体：米国特許第４,１８８,３９０号；第４,０２６,８９４号；第３,５１１,８３６号；第４,３１５,００７号；第３,５２７,７６１号；第３,９９７,６６６号；第２,５０３,０５９号；第４,７０３,０６３号；第３,３８１,００９号；第４,２５２,７２１号および第２,５９９,０００号（いずれも参照により本発明に加入する）；α2−アドレノ受容体ブロッカーとしては、以下が挙げられる：クロニジン、パパベリン、塩酸パパベリン、場合により、カリオトニック剤（cariotonic agent）（例えばピルキサミン(pirxamine)）の存在下；
【０１８２】
３） ＮＯ−ドナー（ＮＯ−アゴニスト）化合物。本発明で用いるのに適切なＮＯ−ド
ナー化合物としては、以下が挙げられる：有機硝酸、例えば一、二もしくは三硝酸、または、有機硝酸エステル、例えば三硝酸グリセリン（または、ニトログリセリンとしても知られている）、イソソルビド５−一硝酸、二硝酸イソソルビド、四硝酸ペンタエリスリトール、四硝酸エリトリチル、ニトロフェリシアン化ナトリウム（ＳＮＰ）、３−モルホリノシドノニミン（３−morpholinosydnonimine）モルシドミン、Ｓ−ニトロソ−Ｎ−アセチルペニシラミン（ＳＮＡＰ）Ｓ−ニトロソ−Ｎ−グルタチオン（ＳＮＯ−ＧＬＵ）、Ｎ−ヒドロキシ−Ｌ−アルギニン、硝酸アミル、リンシドミン、リンシドミンクロロハイドレート、（ＳＩＮ−１）Ｓ−ニトロソ−Ｎ−システイン、ジアゼニウム（diazenium）ジオレート、（ＮＯＮＯａｔｅ）、１,５−ペンタンジニトレート、Ｌ−アルギニン、ニンジン、タイソウ、モルシドミン、Ｒｅ−２０４７、ニトロシル化マキシシライト（maxisylyte）誘導体、例えば公開されたＰＣＴ出願ＷＯ ００１２０７５に記載のＮＭＩ−６７８−１１およびＮＭＩ−９３７；
【０１８３】
４） カリウムチャンネル開口薬または調節因子。本発明で用いるのに適切なカリウム
チャンネル開口薬／調節因子としては、以下が挙げられる：ニコランジル、クロモカリム（cromokalim）、レブクロマカリム、レマカリム（lemakalim）、ピナシジル、ジアゾキ
シド、ミノキシジル、カリブドトキシン、グリブリド、４−アミノピリジン、ＢａＣｌ2
；
５） 血管拡張薬。本発明で用いるのに適切な血管拡張薬としては、以下が挙げられる：ニモデピン（nimodepine）、ピナシジル、シクランデラート、イソクスプリン、クロロプルマジン（chloroprumazine）、ハロペリドール、Ｒｅｃ１５／２７３９、トラゾドン；
６） トロンボキサンＡ２アゴニスト；
７） ＣＮＳ活性物質；
【０１８４】
８） 麦角アルカロイド；適切な麦角アルカロイドは、２０００年３月１４日に発行さ
れた米国特許第６,０３７,３４６号で開示されており、例えば以下が挙げられる：アセテルガミン（acetergamine）、ブラゼルゴリン（brazergoline）、ブロメルグリド（bromerguride）、シアネルゴリン（cianergoline）、デロルゴトリル（delorgotrile）、ジスレルジン（disulergine）、マレイン酸エルゴノビン、酒石酸エルゴタミン、エチスレルジン（etisulergine）、レルゴトライル（lergotrile）、リゼルギド、メスレルジン（mesulergine）、メテルゴリン（metergoline）、メテルゴタミン（metergotamine）、ニセルゴリン、ペルゴリド、プロピセルジド（propisergide）、プロテルグリドおよびテルグリド；
【０１８５】
９） ナトリウム利尿因子（natruretic factor）、特に心房性ナトリウム利尿因子（atrial naturetic factor）（または、心房性ナトリウムペプチド（atrial naturetic peptide）としても知られている）、Ｂ型およびＣ型ナトリウム利尿因子の作用を調節する化合物、例えば中性エンドペプチダーゼの阻害剤；
１０） 中性エンドペプチダーゼ（ＮＥＰ）を阻害する化合物；
１１） アンギオテンシン受容体アンタゴニスト、例えばロサルタン；
１２） ＮＯ−シンターゼの基質、例えばＬ−アルギニン；
１３） カルシウムチャンネルブロッカー、例えばアムロジピン；
１４） エンドセリン受容体のアンタゴニスト、および、エンドセリン変換酵素の阻害
剤；
【０１８６】
１５ ）コレステロール降下剤、例えばスタチン（例えばアトルバスタチン／リピトー
ルTM）およびフィブラート；
１６） 抗血小板物質および抗血栓剤、例えばｔＰＡ、ｕＰＡ、ワルファリン、ヒルジ
ンおよびその他のトロンビン阻害剤、ヘパリン、トロンボプラスチン活性化因子阻害剤；
１７） インスリン抵抗性改善剤、例えばリズリン（rezulin）、および、血糖降下薬、例えばグリピジド；
１８） Ｌ−ＤＯＰＡまたはカルビドパ；
１９） アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、例えばドネジピル（donezipil）；
２０） ステロイド系または非ステロイド系抗炎症薬；
【０１８７】
２１） エストロゲン受容体調節因子および／またはエストロゲンアゴニストおよび／
またはエストロゲンアンタゴニスト、好ましくはラロキシフェンまたはラソフォキシフェン、（−）−ｃｉｓ−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５,６,７,８−テトラヒドロナフタレン−２−オール、および、製薬上許容できるそれらの塩であり、これらの調剤は、ＷＯ ９６／２１６５６で詳細に述べられている；
２３） ＰＤＥ阻害剤、より特定にはＰＤＥ２、３、４、５、７または８阻害剤、好ま
しくはＰＤＥ２またはＰＤＥ５阻害剤、最も好ましくはＰＤＥ５阻害剤（下記を参照）であり、前記阻害剤は、好ましくはそれぞれの酵素に対するＩＣ50が１００ｎＭ未満である（ただし、ＰＤＥ３および４阻害剤は、局所投与または陰茎への注射による投与のみである）；
【０１８８】
２２） 血管作用性小腸タンパク質（ＶＩＰ）、ＶＩＰミメティック、ＶＩＰ類似体、
より特定には１またはそれ以上のＶＩＰ受容体サブタイプＶＰＡＣ１、ＶＰＡＣまたはＰＡＣＡＰ（下垂体アデニレートシクラーゼ活性化ペプチド）、１またはそれ以上のＶＩＰ受容体アゴニストまたはＶＩＰ類似体（例えば、Ｒｏ−１２５−１５５３）またはＶＩＰ断片、１またはそれ以上のＶＩＰと組み合わせたα−アドレノ受容体アンタゴニスト（例えばInvicorp、Aviptadil）が介在する；
２３） メラノコルチン受容体アゴニストもしくは調節因子、または、メラノコルチン
エンハンサー、例えばメラノタンＩＩ、ＰＴ−１４、ＰＴ−１４１、または、ＷＯ ０９
９６４００２、ＷＯ ０００７４６７９、ＷＯ ０９９５５６７９、ＷＯ ００１０５４０
１、ＷＯ ０００５８３６１、ＷＯ ００１１４８７９、ＷＯ ００１１３１１２、ＷＯ ０９９５４３５８で特許請求されている化合物；
【０１８９】
２４） セロトニン受容体アゴニスト、アンタゴニストまたは調節因子、より特定には
５ＨＴ１Ａ（例えばＶＭＬ６７０）、５ＨＴ２Ａ、５ＨＴ２Ｃ、５ＨＴ３および／または５ＨＴ６受容体に対するアゴニスト、アンタゴニストまたは調節因子、例えばＷＯ ０９
９０２１５９、ＷＯ ００００２５５０および／またはＷＯ ０００２８９９３に記載のもの；
２５） テストステロン補充剤（例えばデヒドロアンドロステンジオン）、テストステ
ロン（Tostrelle）、ジヒドロテストステロンまたはテストステロンインプラント；
【０１９０】
２６） エストロゲン、エストロゲン、および、メドロキシプロゲステロンまたは酢酸
メドロキシプロゲステロン（ＭＰＡ）（すなわち組み合わせて）、またはエストロゲンおよびメチルテストステロンホルモン補充療法剤（例えばＨＲＴ、特にプレマリン、セネス
チン、エストロフェミナール、エクイン、エストレース、エストロフェム、エレステソロ、エストリング、エストラデルムＴＴＳ、エストラデルムマトリックス、デルメストリル、プレムフェーズ、プレムプロ、プレムパック、プレミクエ（Premique）、エストラテスト、エストラテストＨＳ、チボロン）；
２７） ノルアドレナリン、ドーパミンおよび／またはセロトニンのトランスポーター
の調節因子、例えばブプロピオン、ＧＷ−３２０６５９；
【０１９１】
２８） プリン受容体アゴニストおよび／または調節因子；
２９） ニューロキニン（ＮＫ）受容体アンタゴニスト、例えばＷＯ ０９９６４００８に記載のもの；
３０） オピオイド受容体アゴニスト、アンタゴニストまたは調節因子、好ましくはＯ
ＲＬ−１受容体に対するアゴニスト；
３１） オキシトシン／バソプレシン受容体に対するアゴニストまたは調節因子、好ま
しくは選択的オキシトシンアゴニストまたは調節因子；
３２） カンナビノイド受容体の調節因子；
３３） ＳＥＰ阻害剤（ＳＥＰｉ）、例えば１００ｎＭ未満、より好ましくは５０ｎＭ
未満のＩＣ50を有するＳＥＰｉ。
【０１９２】
好ましくは、本発明に係るＳＥＰ阻害剤は、中性エンドペプチダーゼＮＥＰ ＥＣ３.４.２４.１１およびアンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）と比較して、ＳＥＰに対して３０倍より大きい、より好ましくは５０倍より大きい選択性を有する。好ましくは、ＳＥＰｉはまた、エンドセリン変換酵素（ＥＣＥ）と比較して、１００倍より大きい選択性を有する。
【０１９３】
発明に従って使用可能な特許および特許出願に含まれる化合物を本発明においてクロスリファレンスすることにより、我々は、それらの請求項および特定の実施例で定義された治療上の活性化合物を意図する（その全てを参照により本発明に加入する）。
活性物質の組み合わせを投与する場合、それらを同時に、別々に、または連続的に投与することができる。
【０１９４】
補助剤−ＰＤＥ５阻害剤
いずれの特定のｃＧＭＰ−ＰＤＥ５阻害剤が適切かどうかは、文献の方法でその効力と選択性を評価し、続いて標準的な薬務に従ってその毒性、吸収、代謝、薬物動態学等を評価することによって容易に決定することができる。
ｃＧＭＰ−ＰＤＥ５阻害剤に関するＩＣ50値は、ＰＤＥ５分析（上記を参照）により決定してもよい。
【０１９５】
好ましくは、本発明に係る薬剤の組み合わせにおいて用いられるｃＧＭＰ−ＰＤＥ５阻害剤は、ＰＤＥ５酵素に選択的である。好ましくは（経口的に用いられる場合）、上記ｃＧＭＰ−ＰＤＥ５阻害剤は、ＰＤＥ３と比較して、より好ましくはＰＤＥ３およびＰＤＥ４と比較して、より選択的である。好ましくは（経口的に用いられる場合）、本発明のｃＧＭＰ−ＰＤＥ５阻害剤は、ＰＤＥ３と比較して、より好ましくはＰＤＥ３およびＰＤＥ４と比較して、１００より大きい選択率、より好ましくは３００より大きい選択率を有する。
【０１９６】
選択率は、当業者により容易に決定することができる。ＰＤＥ３およびＰＤＥ４酵素に関するＩＣ50値は、確立された文献記載の方法論を用いて決定することができ（S A Ballard等，Journal of Urology，1998年，第159巻，2164〜2171頁を参照）、以下でも詳細に説明する。
【０１９７】
本発明に係る使用に適切なｃＧＭＰ−ＰＤＥ５阻害剤としては、以下が挙げられる：
欧州特許第０４６３７５６号（Ａ）で開示されたピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−
７−オン；欧州特許第０５２６００４号（Ａ）で開示されたピラゾロ［４,３−ｄ］ピリ
ミジン−７−オン；公開された国際特許出願ＷＯ ９３／０６１０４で開示されたピラゾ
ロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン；公開された国際特許出願ＷＯ ９３／０７１４９で開示された異性体のピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン−４−オン；公開された国際特
許出願ＷＯ ９３／１２０９５で開示されたキナゾリン−４−オン；公開された国際特許
出願ＷＯ ９４／０５６６１で開示されたピリド［３,２−ｄ］ピリミジン−４−オン；公開された国際特許出願ＷＯ ９４／００４５３で開示されたプリン−６−オン；公開され
た国際特許出願ＷＯ ９８／４９１６６で開示されたピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン；公開された国際特許出願ＷＯ ９９／５４３３３で開示されたピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン；欧州特許第０９９５７５１号（Ａ）で開示されたピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−４−オン；公開された国際特許出願ＷＯ ００／２４７４５で開示されたピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン；欧州特許第０９９５７５０号
（Ａ）で開示されたピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−４−オン；公開された国際特許
出願ＷＯ ９５／１９９７８で開示された化合物；公開された国際特許出願ＷＯ ９９／２４４３３で開示された化合物、および、公開された国際特許出願ＷＯ ９３／０７１２４で開示された化合物。公開された国際特許出願ＷＯ ０１／２７１１２で開示されたピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン；公開された国際特許出願ＷＯ ０１／２７１１３で開示されたピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン；欧州特許第１０９２７１８号（Ａ）で開示された化合物、および、欧州特許第１０９２７１９号（Ａ）で開示された化合物。
【０１９８】
本発明に係る使用のためのさらに適切なＰＤＥ５阻害剤としては、以下が挙げられる：
５−［２−エトキシ−５−（４−メチル−１−ピペラジニルスルホニル）フェニル］−１−メチル−３−ｎ−プロピル−１,６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン（シルデナフィル）、または、１−［［３−（６,７−ジヒドロ−１−メ
チル−７−オキソ−３−プロピル−１Ｈ−ピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−５−イル
）−４−エトキシフェニル］スルホニル］−４−メチルピペラジンとしても知られている（欧州特許第０４６３７５６号（Ａ）を参照）；５−（２−エトキシ−５−モルホリノアセチルフェニル）−１−メチル−３−ｎ−プロピル−１,６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ
［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン（欧州特許第０５２６００４号（Ａ）を参照）；３
−エチル−５−［５−（４−エチルピペラジン−１−イルスルホニル）−２−ｎ−プロポキシフェニル］−２−（ピリジン−２−イル）メチル−２,６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾ
ロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン（ＷＯ ９８／４９１６６を参照）；３−エチル−５−［５−（４−エチルピペラジン−１−イルスルホニル）−２−（２−メトキシエトキシ）ピリジン−３−イル］−２−（ピリジン−２−イル）メチル−２,６−ジヒドロ−７
Ｈ−ピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン（ＷＯ ９９／５４３３３を参照）；（＋）−３−エチル−５−［５−（４−エチルピペラジン−１−イルスルホニル）−２−（２−メトキシ−１（Ｒ）−メチルエトキシ）ピリジン−３−イル］−２−メチル−２,６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン、または、３−エチル−５−｛５−［４−エチルピペラジン−１−イルスルホニル］−２−（［（１Ｒ）−２−メトキシ−１−メチルエチル］オキシ）ピリジン−３−イル｝−２−メチル−２,６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オンとしても知られている（ＷＯ ９９／５４３３３を参照）；５−［２−エトキシ−５−（４−エチルピペラジン−１−イルスルホニル）ピリジン−３−イル］−３−エチル−２−［２−メトキシエチル］−２,６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン、または、１−｛６−エトキシ−５−［３−エチル−６,７−ジヒドロ−２−（２−メトキシエチル）−７−オキソ−２Ｈ−ピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−５−イル］−３−ピリジルスルホニル｝−４−エチルピペラジンとしても知られている（ＷＯ ０１／２７１１３，実施例８を参照）；５−［２−イソ−ブトキシ−５−（４−エチルピペラジン−１−イルスルホニル）ピリジン−３−イル］−３−エチル−２−（１−メチルピペリジン−４−イル）−２,６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン（ＷＯ ０１／２７１１３、実施例１５を参照）；５−［２−エトキシ−５−（４−エチルピペラジン−１−イルスルホニル）ピリジン−３−イル］−３−エチル−２−フェニル−２,６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン（ＷＯ ０１／２７１１３、実施例６６を参照）；５−（５−アセチル−２−プロポキシ−３−ピリジニル）−３−エチル−２−（１−イソプロピル−３−アゼチジニル）−２,６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン（ＷＯ ０１／２７１１２、実施例１２４を参照）；５−（５−アセチル−２−ブトキシ−３−ピリジニル）−３−エチル−２−（１−エチル−３−アゼチジニル）−２,６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン（ＷＯ ０１／２７１１２、実施例１３２を参照）；（６Ｒ，１２ａＲ）−２,３,６,７,１２,１２ａ−ヘキサヒドロ−２−メチル−６−（３,４−メチレンジオキシフェニル）−ピラジノ［２′,１′：６,１］ピリド［３,４−ｂ］インドール−１,４−ジオン（ＩＣ−３５１）、すなわち公開された国際特許出願ＷＯ ９５／１９９７８の実施例７８および９５の化合物、ならびに、実施例１、３、７および８の化合物；２−［２−エトキシ−５−（４−エチル−ピペラジン−１−イル−１−スルホニル）−フェニル］−５−メチル−７−プロピル−３Ｈ−イミダゾ［５,１−ｆ］［１,２,４］トリアジン−４−オン（バルデナフィル）、または、１−［［３−（３,４−ジヒドロ−５−メチル−４−オキソ−７−プロピルイミダゾ［５,１−ｆ］−ａｓ−トリアジン−２−イル）−４−エトキシフェニル］スルホニル］−４−エチルピペラジンとしても知られており、すなわち公開された国際特許出願ＷＯ ９９／２４４３３の���施例２０、１９、３３７および３３６の化合物；および、公開された国際特許出願ＷＯ ９３／０７１２４（エーザイ）の実施例１１の化合物；および、Rotella D P，J. Med. Chem.，2000年，43，1257の化合物３および１４。
【０１９９】
さらにその他の適切なＰＤＥ５阻害剤としては、以下が挙げられる：
４−ブロモ−５−（ピリジルメチルアミノ）−６−［３−（４−クロロフェニル）−プロポキシ］−３（２Ｈ）ピリダジノン；１−［４−［（１,３−ベンゾジオキソール−５
−イルメチル）アミノ］−６−クロロ−２−キノゾリニル］−４−ピペリジン−カルボン酸、モノナトリウム塩；（＋）−シス−５,６ａ,７,９,９,９ａ−ヘキサヒドロ−２−［
４−（トリフルオロメチル）−フェニルメチル−５−メチル−シクロペンタ−４,５］イ
ミダゾ［２,１−ｂ］プリン−４（３Ｈ）オン；フラゾロシリン（furazlocillin）；シス−２−ヘキシル−５−メチル−３,４,５,６ａ,７,８,９,９ａ−オクタヒドロシクロペン
タ［４,５］−イミダゾ［２,１−ｂ］プリン−４−オン；３−アセチル−１−（２−クロロベンジル）−２−プロピルインドール−６−カルボキシレート；３−アセチル−１−（２−クロロベンジル）−２−プロピルインドール−６−カルボキシレート；４−ブロモ−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−６−（３−（４−クロロフェニル）プロポキシ）−３−（２Ｈ）ピリダジノン；ｌ−メチル−５（５−モルホリノアセチル−２−ｎ−プロポキシフェニル）−３−ｎ−プロピル−１,６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ（４,３−ｄ）ピリミジン−７−オン；１−［４−［（１,３−ベンゾジオキソール−５−イルメチル）アミノ］−６−クロロ−２−キナゾリニル］−４−ピペリジンカルボン酸、モノナトリウム塩；ファーマプロジェクト（Pharmaprojects）番号４５１６（グラクソ・ウェルカム）；ファーマプロジェクト番号５０５１（バイエル）；ファーマプロジェクト番号５０６４（協和発酵；ＷＯ ９６／２６９４０を参照）；ファーマプロジェクト番号５０６９（シェリング・プラウ）；ＧＦ−１９６９６０（グラクソ・ウェルカム）；Ｅ−８０１０およびＥ−４０１０（エーザイ）；Ｂａｙ−３８−３０４５および３８−９４５６（バイエル）およびＳｃｈ−５１８６６。
【０２００】
インビトロでのサイクリックグアノシン３′,５′−一リン酸（ｃＧＭＰ）およびサイ
クリックアデノシン３′,５′−一リン酸（ｃＡＭＰ）ホスホジエステラーゼに対するＰ
ＤＥ阻害活性をそれらのＩＣ50値（酵素活性の５０％阻害に必要な化合物濃度）を測定することにより決定した。
【０２０１】
必要なＰＤＥ酵素を、本質的にW.J. ThompsonおよびM.M. Applemanの方法（Biochem.，1971年，10，311）に従って、ヒト海綿体、ヒトおよびウサギ血小板、ヒト心室、ヒト骨
格筋、ならびに、ヒトおよびイヌ網膜などの多種多様な源から単離した。特に、ｃＧＭＰ特異的ＰＤＥ（ＰＤＥ５）およびｃＧＭＰにより阻害されるｃＡＭＰ−ＰＤＥ（ＰＤＥ３）を、ヒト海綿体またはヒト血小板から得た；ｃＧＭＰにより刺激されるＰＤＥ（ＰＤＥ２）を、ヒト海綿体およびヒト血小板から得た；カルシウム／カルモジュリン（Ｃａ／ＣＡＭ）依存性ＰＤＥ（ＰＤＥ１）を、ヒト心室から得た；ｃＡＭＰ特異的ＰＤＥ（ＰＤＥ４）を、ヒト骨格筋から得て、ＳＦ９細胞でヒト組換え体を発現させた；および、光受容体ＰＤＥ（ＰＤＥ６）を、ヒトまたはイヌ網膜から得た。ホスホジエステラーゼ７〜１１をＳＦ９細胞にトランスフェクトした全長ヒト組換えクローンから生産した。
【０２０２】
分析は、W.J. Thompson等の「バッチ」法（Biochem.，1979，18.5228）の改変法を用いて行うことができ、または、アマシャム社により製品コードＴＲＫＱ７０９０／７１００において説明されたプロトコールの改変法を用いて直接的にＡＭＰ／ＧＭＰを検出するためのシンチレーション近接アッセイを用いて行うことができる。要約すると、ＰＤＥ阻害剤の作用の調査は、ＩＣ50がＫiに近くなるように、様々な阻害剤濃度と低い基質濃度で
固定量の酵素を分析することによりなされた（ｃＧＭＰまたはｃＡＭＰにおいて、濃度〜１／３Ｋmで非標識と［3Ｈ］標識との比が３：１である）。最終分析体積を分析緩衝液［２０ｍＭのトリス−ＨＣｌ（ｐＨ７.４），５ｍＭのＭｇＣｌ2，１ｍｇ／ｍｌのウシ血清アルブミン］で１００μｌにした。酵素で反応を開始させ、３０℃で３０〜６０分間インキュベートし、＜３０％の基質が変換され、ケイ酸イットリウムＳＰＡビーズ５０μｌ（ＰＤＥ９および１１に対してそれぞれ３ｍＭの非標識サイクリックヌクレオチドを含む）で反応を止めた。プレートを再度密封し、２０分間振盪し、その後、ビーズを暗所で３０分間静置し、次に、TopCountプレートリーダー（パッカード、メリデン、コネチカット州）で計数し、放射能単位を阻害されていないコントロールの活性％（１００％）に変換し、「Fit Curve」マイクロソフトエクセル拡張子（またはインハウスで同等のもの）を用いて得られた阻害剤濃度および阻害剤ＩＣ50値に対してプロットした。これらの試験結果により、本発明の化合物がｃＧＭＰ特異的ＰＤＥ５の阻害剤であることがわかる。
【０２０３】
機能的な活性は、S.A. Ballard等（Brit. J. Pharmacol.，1996年，118（増刊号），アブストラクト１５３Ｐ）またはS.A. Ballard等（J. Urology，1998年，159，2164〜2171
）に記載の方法に基づいた方法を用いて、本発明の化合物が、予め収縮させたウサギ海綿体組織片のニトロプルシドナトリウムまたは電場刺激で誘導される弛緩を増強する能力を決定することによりインビトロで評価することができる。
【０２０４】
化合物を試験動物（例えば麻酔されたウサギ）におけるインビボでスクリーニングし、化合物を静脈内投与した後、陰茎海綿体へのニトロフェリシアン化ナトリウム注入により誘導された陰茎海綿体における血圧上昇を強化する能力を、Trigo-Rocha等（Neurourol. And Urodyn.，1994年，13，71）に記載の方法に基づく方法を用いて決定することができ
る。
【０２０５】
本発明において、効力があり選択的なＰＤＥ５阻害剤が、医薬組成物における選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストとの組み合わせで用いるのにより好ましい。
本発明において、１またはそれ以上の効力があり選択的なｃＧＭＰ−ＰＤＥ５阻害剤と、１またはそれ以上の選択的Ｄ３ドーパミン受容体アゴニストとの組み合わせが特に好ましい。
【０２０６】
補助剤−ＳＥＰ阻害剤（ＳＥＰｉ）
ＳＥＰｉは、ＳＥＰ活性を有するポリペプチドを阻害する、または選択的に阻害する化合物である。
ＳＥＰは、可溶性の、分泌されたエンドペプチダーゼである。エンドペプチダーゼ（例えばセリンプロテアーゼ、システインプロテアーゼおよびメタロエンドペプチダーゼ）は、ペプチド中の配列を切断する。
【０２０７】
亜鉛メタロプロテアーゼとして知られるエンドペプチダーゼの重要な群は、触媒部位で亜鉛イオンと結合する必要があることを特徴とする。亜鉛メタロプロテアーゼは、いくつかのクラスに細分することができ（総論に関しては、FEBS Letters 354（1994年）1〜6頁を参照）、そのうちの１つのクラスは、ネプリライシン（ＮＥＰ）様亜鉛メタロプロテアーゼである（FASEB Journal，第11巻，1997年，355〜384頁）。ＮＥＰクラスは、互いに構造的に関連した少なくとも７種の酵素がある（下記を参照）。これらは、典型的には、膜結合型であり、大きいカルボキシ末端細胞外ドメイン、短い膜貫通領域、および、アミノ末端における短い細胞内ドメインを有する。このファミリーの既知のメンバーとしては、ネプリライシン（または、ＮＥＰ、ＣＤ１０、ＣＡＬＬＡ、エンケファリナーゼまたはＥＣ ３.４.２４.１１とも称される）、エンドセリン変換酵素（ＥＣＥ−１およびＥＣＥ−２）、ＰＥＸ、ＫＥＬＬ、Ｘ変換酵素／ダメージにより誘導される中性エンドペプチダーゼ（ＸＣＥ／ＤＩＮＥ）、および、齧歯類で同定された、可溶性の分泌されたエンドペプチダーゼ／ネプリライシンIIと呼ばれる酵素（SEP／NEPII；Ghaddar，G等，Biochem Journal，第347巻，2000年，419〜429頁；Ikeda. K等，Journal Biological Chemistry，第274巻，1999年，32469〜32477頁；Tanja，O等，Biochem Biophys Research Communication，第271巻，2000年，565〜570頁；国際特許出願WO 99／53077）が挙げられる。このクラスのメンバーの機能は、ペプチド作動性のシグナル伝達に関連すると考えられている。これは、ヒトなどのほとんどの生物で起こるプロセスであり、それにおいてペプチド分子は、生理的反応を惹起する「メッセンジャー」として用いられる。これは、典型的には、特定の細胞によるペプチドメッセンジャーの生産と放出に関与する（場合によってはプロテアーゼにより切断されて活性化する不活性前駆体として）。次に、ペプチドの活性型は、他の細胞表面上で特異的な受容体に結合し、反応を惹起する。次に、このペプチドは、他のプロテアーゼにより分解されて不活性化される。
【０２０８】
ＮＥＰIIは、ラットにおいて、９１％のアミノ酸同一性を有することから、マウスの酵素であるＳＥＰの同等物である可能性がある。これらは、アミノ酸配列においてＮＥＰと最も近いこのクラスのメンバーであり、いずれもヒトのＮＥＰと５４％同一である。双方のｍＲＮＡは、精巣において大量に存在し、その他の様々な組織でも低いレベルで検出することができる。ラットのＮＥＰＩＩの場合、脳と下垂体でもまたこのｍＲＮＡが比較的高いレベルで検出されている。哺乳動物細胞で組換えにより生産される場合、マウスＳＥＰとラットＮＥＰＩＩはいずれも増殖培地で検出することができる。これより、それらは循環可能であり、それにより体の他の部位でペプチドを切断し得る、分泌されたプロテアーゼである可能性が示される。マウスＳＥＰとラットＮＥＰIIは、その他いくつかのこのクラスのメンバー（例えばＥＣＥ−１）のように、スプラス変異を示す。マウスＳＥＰとラットＮＥＰＩＩの場合、このスプライス変異により、膜局在化および分泌に関与する配列において変化したアイソフォームが生じる。この生理学的な重要性は不明確であるが、これら酵素の膜結合、循環および細胞内形態が存する可能性がある。マウスＳＥＰは、各種の重要な生物学的ペプチド、例えばエンケファリン、エンドセリン、大きいエンドセリン、ブラジキニン、および、サブスタンスＰを切断できることがわかっている。それゆえに、ＮＥＰのように、マウスＳＥＰは極めて広範な基質特異性を有し、様々な組織において数々の生理学的な機能を有する可能性がある。
【０２０９】
このＮＥＰクラスの酵素は、その他のメタロプロテアーゼ酵素のように、低分子の薬物様分子（例えば、チオルファンおよびホスホラミドン）による阻害を受けやすいことがわかっている。この理由と、いくつかのＮＥＰ様酵素メンバーのペプチド作動性のシグナル伝達の調節における生理学的な機能の新たな性質により、上記酵素は薬剤介入の魅力的な標的である。
【０２１０】
ＳＥＰに関する配列は、ＷＯ ９９／５３０７７、欧州特許第１０６９１８８号、ＷＯ
０２／０６４９２およびＷＯ ００／４７７５０に記載されており、また本願の配列番３
〜５に記載されている。
例えば分析に関して本発明で述べられるＳＥＰ配列としては、ＷＯ ９９／５３０７７
、欧州特許第１０６９１８８号、ＷＯ ０２／０６４９２またはＷＯ ００／４７７５０に記載の配列または配列番号３、配列番号４もしくは配列番号５に記載の配列、または、それらの変異体、断片、相同体、類似体もしくは誘導体のいずれか１つ、またはそれ以上の引用が挙げられる。
【０２１１】
配列番号３および配列番号４はそれぞれ、ヒトＳＥＰをコードするヌクレオチド配列（ｃＤＮＡ）を開示する。配列番号４は、５′および３′に部分的なベクター配列を含む。配列番号５は、ヒトＳＥＰタンパク質を示す。
【０２１２】
あらゆる特定のＳＥＰｉの適合性は、例えば以下の分析を用い、続いて、標準的な製薬上の実施に従った毒性、吸収、代謝、薬物動態学などの評価によって、それらの効力および選択性を評価することにより決定することができる。
【０２１３】
ＳＥＰの候補阻害剤を検出するのに用いることができる一つのＳＥＰ分析は、蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）分析である。最も好ましくは、前記標識した基質ペプチドは、ローダミングリーン−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ｄＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（ＱＳＹTM−７）−βＡｌａ−ＮＨ2である。
【０２１４】
ＳＥＰのＦＲＥＴ分析
ＳＥＰのＦＲＥＴ分析は、Carvalho等によりＮＥＰと共に用いるために開発された分析（Carvalho等，Annal. Biochem. 237，167〜173頁（1996年））に基づく。ＳＥＰのＦＲ
ＥＴ分析は、同様に分子内で消光される蛍光ペプチド基質を、蛍光ドナー／アクセプター色素、特にローダミングリーン（モレキュラープローブス社，ユージン、オレゴン州，米国）およびＱＳＹTM−７（以下、「ＱＳＹ−７」または「ＱＳＹ７」と略称する；モレキュラープローブス社）との新しい組み合わせで利用する。
【０２１５】
ＳＥＰのエンドペプチダーゼ活性は、合成ペプチド基質ローダミングリーン−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ｄＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（ＱＳＹ７）−βＡｌａ−ＮＨ2をタンパク質分解する能力をモニターすることにより測定される。
【０２１６】
この分析のために選択された２種のフルオロフォア（蛍光色素）は、発光および吸収スペクトルがオーバーラップしているため、エネルギー移動に適切である。ローダミングリーンは、ドナーとして作用し、４８５ｎｍで励起させた場合、５３５ｎｍで発光（蛍光）し、順にＱＳＹ７を励起する（ＦＲＥＴが起こる）。ＱＳＹ７は、蛍光的にはサイレントであり、５３５ｎｍ超では発光しないため、シグナルは観察されない（ローダミングリーン発光は消光される）。
【０２１７】
ＳＥＰによるペプチド基質のＡｒｇ−Ｖａｌペプチド結合における切断（選択的な加水分解）の際、ローダミングリーンとＱＳＹ７成分が離散するため、４８５ｎｍでの励起ではエネルギー移動が起こらなくなる。その結果、ローダミングリーンに関して蛍光の増加
が５３５ｎｍで観察される。
【０２１８】
合成ペプチド基質ローダミングリーン−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ｄＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（ＱＳＹ７）−βＡｌａ−ＮＨ2の作製
ペプチド構築物は、製造元（アプライドバイオシステムズ，フォスターシティ，カリフォルニア州，米国）が供給する９−フルオレニルメトキシカルボニル（ＦＭＯＣ）に基づく合成サイクルの改変法を用いた固相ペプチド合成法により、ＦＭＯＣ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ樹脂（０.２５ｍｍｏｌ）上で完了した。我々の改変サイクルで、２０％ピペリジン／Ｎ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）を用いた２×５分の処理によりアミノ末端を脱保護する；その効率は、少量の脱保護溶液のアリコートをＵＶ吸光度検出器に通して、３０１ｎｍでのＵＶ吸光度をモニターする。別々のカートリッジで入ってくるアミノ酸をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＬ）に溶解させたそれぞれ０.９当量の２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１,１,３,３テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）／１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）で活性化する。２当量のジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）を加える。それと同時に、樹脂をＮＭＰで洗浄し、脱保護の副産物を除去する。洗浄溶液を樹脂から取り除き、活性化したアミノ酸エステルを樹脂に移し、２０分間撹拌してアミノ末端にカップリングさせた。残留したカップリング溶液を捨て、樹脂を再度ＮＭＰで洗浄した。ペプチドが均質性かを確かめるために、０.４Ｍ無水酢酸／０.０４ＭのＨＯＢｔのＮＭＰ溶液と、ＤＩＥＡ１２ミリモルを、樹脂に加えて、可能性がある未反応の部位全てをアセチル化する。最終的に、樹脂をＮＭＰで洗浄し、排液し、ジクロロメタン／２,２,２−トリフルオロエタノール１：１の混合物で洗浄し、排液した。これは、１つのペプチド合成サイクルの典型である。完成した合成樹脂を切断し、試薬Ｋを用いて脱保護し（King，D.S.等（1990年），Int. J. Pep. Prof. Res.，36，255〜66頁）、粗ペプチドＣＰ１の２５１ｍｇ（１００％）を得た：エレクトロスプレーマススペクトロメトリー（ＥＳＭＳ）(ｍ／ｚ計算（計算値）＝９７７.２１（ＭＨ＋平均），ｏｂｓ.＝９７７.４７）。
【０２１９】
ＱＳＹ−７のシステインへの結合：
粗ＣＰ１、５０ｍｇ（５１μｍｏｌ）を、ＱＳＹ−７マレイミド４５ｍｇ（５２.４μ
ｍｏｌ）を含む１０％ＤＩＥＡ／ＤＭＦ溶液に溶解させた。１０分後、ＨＰＬＣ−ＭＳ分析で反応が不完全であると判断され、追加の３０ｍｇ（３０.７μｍｏｌ）粗ペプチドを
加えた。さらに３０分後、反応が完了し、全ての開始試薬が消費されたとＨＰＬＣ−ＭＳで判断された。生成物をＣ１８分離用ＨＰＬＣクロマトグラフィーで単離し、マトリックス支援レーザー脱離イオン化マススペクトロメトリー（ＭＡＬＤＩ−ＭＳ）で所望の生成物の分子量を示す分画を貯め、凍結乾燥し、紫色の粉末ＣＰ２の７３.７ｍｇ（５０％）
を得た：ＥＳＭＳ（ｍ／ｚ計算値＝１７９７.８６（ＭＨ＋モノアイソトピック），測定
値＝１７９７.８６）。
【０２２０】
ビス（トリフルオロアセチル）ローダミングリーンのアミノ末端への結合：
ＣＰ２の７３.７ｍｇ（４１μｍｏｌ）を、ローダミングリーンカルボン酸３５ｍｇ（
５２.８μｍｏｌ）、トリフルオロアセトアミド、スクシニミジルエステル（５（６）−
ＣＲ１１０ＴＦＡ，ＳＥ）＊混合異性体＊を含む２％ＤＩＥＡ／ＤＭＦ溶液に溶解させた。２時間後、ＨＰＬＣ−ＭＳ分析で反応が完了したと判断された。生成物をＣ４分離用ＨＰＬＣクロマトグラフィーで単離し、所望の生成物の分子量（ＭＡＬＤＩ−ＭＳ）を示す分画を貯め、凍結乾燥し、紫色の粉末ＣＰ３の７１.４ｍｇ（７４％）を得た：ＥＳＭＳ（ｍ／ｚ計算値＝２３４５.９２（ＭＨ＋モノアイソトピック），測定値＝２３４５.４７）。
【０２２１】
ローダミングリーンからのトリフルオロアセチル保護基の除去：
ＣＰ３の７１.４ｍｇ（３０.４μｍｏｌ）を４：１ ＣＨ3ＣＮ／Ｈ2Ｏ（１０ｍｌ）に
溶解させた。これにＮａ2ＣＯ3の２００ｍｇ（１８８６μｍｏｌ）を加えた。１６時間後、ボルテックス混合し、上清を不溶性物質からデカントした。反応容器をＤＭＳＯ １ｍｌでリンスし、これを上清と合わせ、生成物をＣ４分離用ＨＰＬＣクロマトグラフィーで単離した。生成物の分子量（ＭＡＬＤＩ−ＭＳ）を示す分画を合わせ、凍結乾燥し、紫色の粉末、ＣＰ４を６４ｍｇ（９８％）得た：ＥＳＭＳ（ｍ／ｚ計算値＝２１５５.５４（ＭＨ＋平均），測定値＝２１５５.２７）。ＣＰ４が、所望の合成ペプチド基質ローダミングリーン−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ｄＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（ＱＳＹ７）−βＡｌａ−ＮＨ2である。
【０２２２】
材料：
全ての試薬は、最も純度の高いものを購入しさらに精製することなく用いた。ペプチド合成のための全ての試薬は、アプライドバイオシステムズ（フォスターシティ，カリフォルニア州，米国）から購入したが、以下は例外である：ＱＳＹTM−７マレイミド（カタログ番号Ｑ−１０２５７）、および、ローダミングリーンカルボン酸、トリフルオロアセトアミド、スクシニミジルエステル（５（６）−ＣＲ１１０ＴＦＡ，ＳＥ）＊混合異性体＊（カタログ番号Ｒ−６１１２）は、モレキュラープローブス社（オレゴン州、米国）から購入した；ＦＭＯＣ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳは、パースペクティブバイオシステムズ（マサチューセッツ州，米国）から購入した（カタログ番号ＧＥＮ９１３３８４）；ＦＭＯＣ−Ｂ−アラニン、および、ＦＭＯＣ−ｄ−フェニルアラニンは、ノヴァバイオケム（カリフォルニア州，米国）から購入した；ＦＭＯＣ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨは、アナスペック社（カリフォルニア州，米国）から購入した；２,２,２−トリフルオロエタノールは、アルドリッチ（ウィスコンシン州，米国）から購入した；炭酸ナトリウムは、フィッシャー（ペンシルベニア州，米国）から購入した。
【０２２３】
分離用ＨＰＬＣクロマトグラフィーは、バイダック（カリフォルニア州，米国）のＣ１８（カタログ番号２１８ＴＰ１０２２）で、または、Ｃ４（カタログ番号２１４ＴＰ１０２２）カラムで行い、流速１０ｍｌ／分で、０％〜８０％の直線的な濃度勾配（Ａ＝５％ＣＨ3ＣＮ／０.１％ＴＦＡ／９４.９％Ｈ2Ｏ，Ｂ＝１００％ＣＨ3ＣＮ）で３０分間かけて溶出し、３０秒ごとの分画を回収した。分析ＨＰＬＣ−ＭＳは、マイクロマス社（マンチェスター、イギリス国）のＬＣＴマススペクトロメーター（分子量は、外部補正された標準に基づく）を、ウォーターズ（マサチューセッツ州，米国）の２６９０ＨＰＬＣインレットとウォーターズの９９６フォトダイオードアレイ検出器とを組み合わせて用いて、クロマトグラフィーをバイダックのＣ４（カタログ番号２１４ＴＰ５４１５）カラムを０％〜８０％（Ａ＝５％ＣＨ3ＣＮ／０.１％ＴＦＡ／９４.９％Ｈ2Ｏ，Ｂ＝１００％ＣＨ3ＣＮ）の直線的な濃度勾配で、３０分間かけて、流速１ｍｌ／分で行われた。デコンボリューションした分子量を、多価の観察されたイオンからマイクロマスのトランスフォームソフトウェアを用いて計算した。ＭＡＬＤＩ−ＭＳを、パースペクティブバイオシステムズのVoyager−ＤＥリニア−マススペクトロメーターで、α−シアノ４−ヒドロキシケイ皮酸マトリックス（ヒューレット・パッカード，カリフォルニア州，米国）と外部補正に基づく報告された分子量を用いて得た。
【０２２４】
プロセス（化学構造を含む）：
ＣＰ４（＝合成ペプチド基質ローダミングリーン−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ｄＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（ＱＳＹTM−７）−βＡｌａ−ＮＨ2）を、固相ペプ
チド合成スキームで、重要な中間体ＣＰ３を結合させることによって合成する。
【０２２５】
スキーム１：
【化２】
2005516014.tif 000009
【０２２６】
まとめると、ＦＭＯＣ−ＰＡＬ−ＰＥＧ樹脂は、収率と時間の効率に関して最適化された固相ペプチド合成法を用いて合成される。これらサイクル（完全な詳細は上述した）は、２つのＦＭＯＣ脱保護、洗浄、ＨＢＴＵ活性化アミノ酸の１回のカップリング、洗浄、キャッピング、最後に、初めはＮＭＰで、次に１：１のトリフルオロエタノール／ジクロロメタンでの洗浄を含む。これら洗浄は、樹脂の２次構造を緩め、次のサイクルで入ってくるアミノ酸を徹底的に脱保護し、効率的にカップリングするのを促進する。
【０２２７】
スキーム２に従ってＣＰ２を合成する（完全な詳細は上述した）：
【化３】
2005516014.tif 000010
【０２２８】
このＱＳＹ−７タグの結合の後、スキーム３に従って第二のフルオロフォア、ローダミングリーンをビス−トリフルオロアセチル保護色素として加える：
【０２２９】
【化４】
2005516014.tif 000011
【０２３０】
最後に、Ｎａ2ＣＯ3で処理してトリフルオロアセチル基を除去し、所望の基質であるＣＰ４を得る：
【化５】
2005516014.tif 000012
【０２３１】
分析
分析のための試薬を初めに以下のように作製する：
基質溶液は、基質ローダミングリーン−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ｄＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−
Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（ＱＳＹ７）−βＡｌａ−ＮＨ2を５０ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液
（ｐＨ７.４）（シグマ，イギリス）中で濃度２μＭで再懸濁し、続いて２５ｍＬあたり
、１つのＥＤＴＡ非含有プロテアーゼ阻害剤カクテルタブレット（ロシュ・ダイアグノスティックス，イギリス）を加えることにより作製する。
【０２３２】
上述のＳＥＰ酵素のアリコートを解凍させ、次に、５０μｌ中に分析の間基質約３０％を生成物に変換するのに十分な量の酵素が含まれるよう、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７.４）中で、各酵素バッチに特異的な予め決められた因子により希釈する。
ＤＭＳＯ ４ｍｌと５０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７.４）９６ｍｌを含む４％ＤＭＳＯ溶液を作製する。
生成物溶液を、基質溶液５００μｌを酵素溶液２５０μｌ（４％ＤＭＳＯ溶液２５０μｌを含む）に加え、３７℃で１６時間インキュベートすることにより作製する。
【０２３３】
分析を以下のように設定する：
黒い９６ウェルマイクロタイタープレート中に、基質溶液１００μｌを、４％ＤＭＳＯ溶液５０μｌに加える。類似の非特異的バックグラウンドブランクも設定し、この場合、４％ＤＭＳＯ溶液５０μｌは、４０μＭホスホラミドンをさらに含む。酵素溶液５０μｌを分析とブランクに加え、９６ウェルプレートをＢＭＧギャラクシー蛍光リーダーに置いてBioliseソフトウェアパッケージ（ＢＭＧラボテクノロジーズ，オッフェンバーグ，ド
イツ）を用いて操作する。
【０２３４】
蛍光リーダーで、３７℃で１時間、プレートをインキュベートし、３分間ごとに蛍光を測定した（励起（Ｅｘ）４８５ｎｍ／放出（Ｅｍ）５３５ｎｍ）。ＳＥＰのタンパク分解活性は、サンプルの蛍光が増加する速度−非特異的バックグラウンドブランクの蛍光単位が増加する速度に相当する。４回の連続した読み取りを用いて上記ソフトウェアで計算された最大速度測定（ＭａｘＶ）をこの計算に用いる。
【０２３５】
同一のマイクロタイタープレートの１つのウェル中の生成物２００μｌを用いて蛍光を測定する。必要に応じて、この値をＳＥＰ分析の６０分の時点で測定された蛍光単位と共に用いて、１時間のインキュベートでタンパク質分解された基質のパーセンテージ（％）を計算することができ、または、測定された蛍光増加速度を、他の有用な単位（例えばタンパク質分解された基質ｎｇ／分／酵素ｍｌ）に変換することもできる。
【０２３６】
この分析を用いて、Athel Cornish Bowdenの「Fundamentals of Enzyme Kinetics」（1979年，Butterworths刊）に説明された標準的な原理に従って酵素の動態パラメーター（例えばＶmaxおよびＫm）を計算する。
【０２３７】
ＳＥＰ阻害剤の阻害パラメーターを決定するためのＳＥＰ分析の使用
ＳＥＰ阻害剤（例えばホスホラミドン）のＩＣ50を決定するために、様々な試験濃度の阻害剤を、ＤＭＳＯ溶液５０μｌ（１０ｍＭ阻害剤の１００％ＤＭＳＯストックを４％ＤＭＳＯ／５０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７.４）で適切に希釈して作製された）中でインキ
ュベートして、上述したように複数のＳＥＰ分析を行う。適切な標準的なグラフフィッティングコンピュータープログラムを用いて、Ｓ字状の用量反応曲線をログ阻害剤濃度対ＭａｘＶ（または％阻害もしくは％活性）のプロットをフィッティングさせる。ＩＣ50を５０％最大阻害を起こす阻害剤濃度として計算する。所定のＩＣ50決定に関して典型的には、ログ単位の増加の半分が異なる少なくとも１０種の阻害剤濃度の用量範囲が用いられる。
【０２３８】
ＳＥＰ分析を用いて、Ｋiと阻害の様式（すなわち阻害が競合型か、混合型か、非競合
型などか）を例えば、Athel Cornish Bowdenの「Fundamentals of Enzyme Kinetics」（1
979年，Butterworths刊）に説明された標準的な酵素学の原理に従って決定する。
【０２３９】
ＮＰＹ阻害剤および／またはＮＰＹ Ｙ１阻害剤
ＮＰＹｉ（またはＮＰＹ Ｙ１ｉ）を同定および／または研究するのに適切な分析シス
テムの詳細を、以下の「ＮＰＹ分析」という表題の項目で示し、ＷＯ Ａ−９８／５２８
９０（９６頁，２〜２８行を参照）に記載の分析に基づく。
【０２４０】
ＮＰＹ阻害剤またはＮＰＹ Ｙ１阻害剤のさらなる例は、以下の総論で開示、考察され
ている：
・Dunlop J,Rosenzweig-Lipson S: Therapeutic approaches to obesity Exp Opin Ther Pat 1999 8 12 1683-1694
・Wang S, Ferguson KC, Burris TP, Dhurandhar NV: 8th annual international conference on obesity and non-insulin dependent diabetes mellitus : novel drug developments. Exp Opin Invest Drugs 1999 8 7 1117-1125
・Ling AL: Neuropeptide Y receptor antagonists Exp Opin Ther Pat 1999 9 4 375-384 
・Adham N, Tamm J, Du P, Hou C, et al : Identification of residues involved in
the binding of the antagonist SNAP 6608 to the Y5 receptor Soc Neurosci Abstr 1998 24 part 2 626.9 
・Shu YZ, Cutrone JQ, Klohr SE, Huang S: BMS-192548, a tetracyclic binding inhibitor of neuropeptide Y receptors, from Aspergillus nigerWB2346. II. Physico-chemical properties and structural characterization J Antibiot 1995 48 10 1060-1065
・Rigollier P, Rueger H, Whitebread S, Yamaguchi Y, Chiesi M, Schilling W, Criscione L: Synthesis and SAR of CGP 71683A, a potent and selective antagonist of the neuropeptide Y Y5 receptor. Int Symp Med Chem 1998 15th Edinburgh 239 
・Criscione L, Rigollier P, Batzl-Hartmann C, Rueger H, Stricker-Krongrad A, et al : Food intake in free-feeding and energy-deprived lean rats is mediated by the neuropeptide Y5 receptor. J Clin Invest 1998 102 12 2136 - 2145 
・Neurogen Corp: NGD 95-1 Clin Trials Monitor 1996 5 10 Ab 19244
・Buttle LA: Anti-obesity drugs: on target for huge market sales. Exp Opin Invest Drugs 1996 5 12 1583-1587
・Gehlert DR, Hipskind PA: Neuropeptide Y receptor antagonists in obesity. Exp
Opin Invest Drugs 1996 7 9 1827-1838
・Goldstein DJ, Trautmann ME: Treatments for obesity. Emerging Drugs 19972-1-27
・Hipskind P A, Lobb K L, Nixon J A, Britton T C, Bruns R F, Catlow J, Dieckman McGinty D K, Gackenheimer S L, Gitter B D,lyengar S, Schober D A, et al. : Potent and selective 1,2, 3-trisubstituted indole NPY Y-1 antagonists. J Med Chem 1997 40 3712-3714
・Zimmerman DM, Cantrall BE, Smith ECR, Nixon JA, Bruns RF, Gitter B, Hipskind
PA, Ornstein PL, Zarrinmayeh H, Britton TC, Schober DA, GehlertDR : Structure-activity relationships of a series of 1-substituted-4- methylbenzimidazole neuropeptide Y-1 receptor antagonists Bioorganic Med Chem Lett 1998 8 5 473-476 
・Zarrinmayeh H, Nunes A, Ornstein P, Zimmerman D, Arnold MB, et al : Synthesis and evaluation of a series of novel 2-[(4- chlorophenoxy) methy] benzimidazoles as selectiveneuropeptide Y Y1 receptor antagonists J Med Chem 1998 41 15 2709-2719
・Britton TC, Spinazze PG, Hipskind PA, Zimmerman DM, Zarrinmayeh H, Schober DA, Gehlert DR, Bruns RF: Structure-activity relationships of a series of benzoth
iophene-dervied NPY-Y1 antagonists: optimization of the C2 side chain Bioorganic
Med Chem Lett 1999 9 3 475-480 
・Zarrinmayeh H, Zimmerman DM, Cantrell BE, Schober DA, Bruns RF, Gackenheimer
SL, Ornstein PL, Hipskind PA, Britton TC, Gehlert DR: Structure-activity relationship of a series of diaminoalkyl substituted benzimidazole as neuropeptide Y Y1 receptor antagonists Bioorganic Med Chem Lett 1999 9 5 647-652
・Murakami Y, Hara H, Okada T, Hashizume H, Kii M,Ishihara Y,Ishikawa M, Mihara S-I, Kato G, Hanasaki K, Hagishita S, Fujimoto M: 1,3-disubstituted benzazepines as novel, potent, selective neuropeptide Y Y1 receptor antagonists J Med Chem 1999 42 14 2621-2632
・Rudolf K, Eberlein W, Engel W,Wieland HA, Willim KD, Entzeroth M, Wienen W, Beck Sickinger AG, Doods HN: The first highly potent and selective non-peptide neuropeptide YY1 receptor antagonist: BIBP 3226 Eur J Pharmacol 1994 271 2-3R11-R13.
・Wieland HA, Willim KD, Entzeroth M, Wienen W, RudolfK,Eberlein W, Engel W, Doods HN: Subtype selectivity and antagonist profile of the nonpeptide neuropeptide Y1 receptor antagonist BIBP 3226 J Pharmacol Exp Ther 1995 275 1 143-149
・Wright J, Bolton G, Creswell M, Downing D, Georgic L, Heffner T, Hodges J, MacKenzie R, Wise L: 8-amino-6-(arylsulphonyl)-5-nitroquinolones : novel nonpeptide neuropeptide Y1 receptor antagonists Bioorganic Med Chem Lett 1996 6 15 1809-1814
・Capurro D, Huidobro-Toro JP: The involvement of neuropeptide Y Y1 receptors in the blood pressure baroreflex:studies with BIBP 3226 and BIB 3304. Eur J Pharmacol 1999 376 3 251-255
・Dumont Y, Cadieux A, Doods H, Quirion R: New tools to investigate neuropeptide Y receptors in the central and peripheral nervous systems:BIBO-3304(Y1),BIIE-246 (Y2) and [1251]-GR-231118(Y1／Y4). Soc Neurosci Abstr 1999 25 Part 1 Abs 74.11.
・Hegde SS, Bonhaus DW,Stanley W, Eglen RM, Moy TM, Loeb M, et al: Pharmacological evaluation of 1229U91, a high affinity and selective neuropeptide Y(NPY)-Y1
receptor antagonist Pharmacol Res 1995 31 190
・Matthews JE, Chance WT, Grizzle MK, Heyer D, Daniels AJ: Food intake inhibition and body weight loss in rats treated with GI 264879A, an NPY-Y1 receptor. Soc Neurosci Abstr 1997 23 Pt 2 1346
・Doods HN, Willim K-D, Smith SJ: BIBP 3226: a selective and highly potent NPY-Y1 antagonist Proc Br Pharmacol Soc 1994 13-16 Dec. C47
・Rudolf K,Eberlein W, Engel W,Wieland HA, Willim KD, Entzeroth M, Wienen W, Beck Sickinger AG, Doods HN: The first highly potent and selective non-peptide neuropeptide YY1 receptor antagonist:BIBP3226 Eur J Pharmacol 1994 271 2-3 R11-R13
・Serradelil-Le-Gal C, Valette G, Rouby PE, Pellet A,Villanova G, Foulon L, Lespy L, Neliat G, Chambon JP, Maffrand JP, Le-Fur G: SR 120107A and SR 120819A: Two potent and selective, orally-effective antagonists for NPY Y1 receptors Soc Neurosci Abstr 1994 20 Pt 1 907-Abs 376.14 
・Hong Y, Gregor V, Ling AL, Tompkins EV, Porter J, Chou TS, Paderes G, Peng Z, Hagaman C, Anderes K, Luthin D, May J: Synthesis and biological evaluation of novel guanylurea compounds as potent NPY Y1 receptor antagonist Acs 1999 217 Anaheim MEDI 108 
【０２４１】
ＮＰＹｉおよび／またはＮＰＹ Ｙ１ｉのさらなる例は、以下の文書で開示されている
：
ＷＯ ９８／０７４２０
ＷＯ ９４／００４８６
ＷＯ ９６／２２３０５
ＷＯ ９７／２０８２１
ＷＯ ９７／２０８２２
ＷＯ ９６／１４３０７
日本国特許第０７２６７９８８号
ＷＯ ９６／１２４８９
米国特許第５５５２４２２号
ＷＯ ９８／３５９５７
ＷＯ ９６／１４３０７
ＷＯ ９４／１７０３５
欧州特許第０６１４９１１号
ＷＯ ９８／４０３５６
欧州特許第０４４８７６５号
欧州特許第０７４７３５６号
ＷＯ ９８／３５９４１
ＷＯ ９７／４６２５０
欧州特許第０７４７３５７号
欧州特許第０８９６８２２号
欧州特許第１０３３３６６号
ＷＯ ００／６６５７８
【０２４２】
ＮＰＹ阻害剤および／またはＮＰＹ Ｙ１阻害剤のさらなる例は、以下の構造から選択
される：
【表５】
2005516014.tif 000013
【０２４３】
【表６】
2005516014.tif 000014
【０２４４】
【表７】
2005516014.tif 000015
【０２４５】
【表８】
2005516014.tif 000016
【０２４６】
ＮＰＹ分析
ＷＯ ９８／５２８９０（９６頁，２〜２８行）で教示されるように、化合物がＮＰＹ
に結合する能力は、本質的にM.W. Walker等，Journal of Neurosciences 8：2438〜2446
（1988年）に記載のプロトコールで評価することができる。
【０２４７】
この分析において、細胞系ＳＫ−Ｎ−ＭＣが用いられた。この細胞系は、スローン・ケッターリング記念病院（ニューヨーク）から入手可能であった。
これら細胞をＴ−１５０フラスコで５％ウシ胎仔血清を添加したダルベッコ最小必須培地（ＤＭＥＭ）を用いて培養した。細胞を手動で掻きとってフラスコから取り出し、ペレット状にし、−７０℃で保存した。
【０２４８】
このペレットを、ガラス製ホモジナイザーを用いて、２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７.
４）緩衝液（２.５ｍＭ塩化カルシウム、１ｍＭ塩化マグネシウムおよび２ｇ／Ｌバシト
ラシンを含む）中で懸濁した。最終容量２００μｌ（０.１ｎＭの125Ｉ−ペプチドＹＹ（２２００Ｃｉ／ｍｍｏｌ）、および、タンパク質０.２〜０.４ｍｇを含む）中で、室温で約２時間インキュベートした。
【０２４９】
非特異的な結合は、１μＭ神経ペプチドＹの存在下でインキュベートした後で組織に結合したままの放射能の量として定義された。いくつかの実験において、様々な化合物濃度をインキュベート混合物中でインキュベートした。
【０２５０】
９６−ウェルハーベスターを用いて、０.３％ポリエチレンイミンで予め浸したガラス
繊維フィルターで迅速にろ過することによりインキュベートを止めた。フィルターを４℃で５０ｍＭトリス（ｐＨ７.４）５ｍｌで洗浄し、すぐに６０℃で乾燥させた。次に、フ
ィルターをメルト−オンシンチレーションシートで処理して、フィルターに残った放射能を計数した。様々なソフトウェアパッケージを用いて結果を分析した。標準としてウシ血清アルブミンを用いた標準的なクーマシータンパク質分析試薬でタンパク質濃度を測定した。
【０２５１】
ＮＥＰ阻害剤（Ｉ：ＮＥＰ＝ＮＥＰｉ）
ＮＥＰ ＥＣ３.４.２４.１１（FEBS Lett. 229（1），206〜210（1988年））は、エン
ケファリナーゼまたはネプリライシンとしても知られており、亜鉛依存性中性エンドペプチダーゼである。この酵素は、数々の生物活性を有するオリゴペプチドの破壊、疎水性アミノ酸残基のアミノ側におけるペプチド結合の切断に関与する。重要なニューロンで放出された生理活性因子、または、ＮＥＰにより代謝された神経ペプチドとしては、ナトリウム利尿ペプチド、例えば心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）、および、脳ナトリウム利尿ペプチド、および、Ｃ型ナトリウム利尿ペプチド、ボンベシン、ブラジキニン、カルシトニン遺伝子関連ペプチド、エンドセリン、エンケファリン、ニューロテンシン、サブスタンスＰ、および、血管作用性小腸ペプチドが挙げられる。これらペプチドのいくつかは、効力のある血管拡張作用および神経ホルモン機能、利尿およびナトリウム利尿活性を有するか、または、動作の作用を仲介する。ＮＥＰに関する背景技術は、Victor A. McKusick等によりhttp：／／www3. Ncbi. nlm. nih. gov／Omim／searchomim. htm.で示されている。
【０２５２】
あらゆる特定のＩ：ＮＥＰの適性は、文献の方法を用いてその効力と選択性を評価し、続いて、その毒性、吸収、代謝、薬物動態学などを標準的な薬務に従って評価することにより容易に決定することができる。
好ましくは、Ｉ：ＮＥＰは、ＡＣＥと比較して３００を超過する選択性を有する。
ＡＣＥのＩＣ50値と選択率は、欧州特許第１０９７７１９Ａ１号で説明された方法により決定することができる。
【０２５３】
ＮＥＰ阻害剤の例が以下の総論で開示、考察されている：Pathol. Biol.，46（3），1998年，191；Current Pharm. Design，2（5），1996年，443；Biochem. Soc. Trans.，21（3），1993年，678；Handbook Exp. Pharmacol.，104／1，1993年，547；TiPS，11，1990年，245；Pharmacol. Rev.，45（1），1993年，87；Curr. Opin. Inves. Drugs，2（11），1993年，1175；Antihypertens. Drugs，(1997年），113；Chemtracts，(1997年)，10（11），804；Zinc Metalloproteases Health Dis. (1996年)，105；Cardiovasc. Drug Rev.，(1996年)，14（2），166；Gen. Pharmacol.，(1996年)，27（4），581；Cardiovasc. Drug Rev.，(1994年)，12（4），271；Ciin. Exp. Pharmacol. Physiol.，(1995年)，22（1），63；Cardiovasc. Drug Rev.，(1991年)，9（3），285；Exp. Opin. Ther. Patent（1996年），6（11），1147。
【０２５４】
ＮＥＰ阻害剤のさらなる例は、以下の文書で開示されている：欧州特許第５０９４４２号（Ａ)；米国特許第１９２４３５号；米国特許第４９２９６４１号；欧州特許第５９９
４４４号（Ｂ)；米国特許第８８４６６４号；欧州特許第５４４６２０号（Ａ)；米国特許第７９８６８４号；J. Med. Chem. 1993年，3821；Circulation，1993年，88（4)，1；欧州特許第１３６８８３号；日本国特許第８５１３６５５４号；米国特許第４７２２８１０号；Curr. Pharm. Design. 1996年，2，443；欧州特許第６４０５９４号；J. Med. Chem.
1993，36（1), 87；欧州特許第７３８７１１号（Ａ)；日本国特許第２７０９５７号；ＣＡＳ＃１１５４０６−２３−０；ドイツ国特許第１９５１０５６６号；ドイツ国特許第１９６３８０２０号；欧州特許第８３０８６３号；日本国特許第９８１０１５６５号；欧州特許第７３３６４２号；ＷＯ ９６１４２９３；日本国特許第０８２４５６０９号；日本国特許第９６２４５６０９号；ＷＯ ９４１５９０８；日本国特許第０５０９２９４８号；ＷＯ ９３０９１０１；ＷＯ ９１０９８４０；欧州特許第５１９７３８号；欧州特許第６９００７０号；J. Med. Chem.（1993年）, 36，2420；日本国特許第９５１５７４５９号；Bioorg. Med. Chem. Letts.，1996年，6（1)，65；欧州特許第０２７４２３４号（Ａ)；日本国特許第８８１６５３５３号；Biochem. Biophys. Res. Comm.，1989年，164，58；欧州特許第６２９６２７号（Ａ)；米国特許第７７９７８号；Perspect. Med. Chem. (1993年)，45；欧州特許第３５８３９８（Ｂ）号。
【０２５５】
ＮＥＰ阻害剤のさらなる例は、欧州特許第１０９７７１９号（Ａ１）で開示されており、特にそこに記載されている化合物ＦＸII〜ＦＸIIIである。
好ましいＮＥＰ阻害剤は、欧州特許第１０９７７１９号（Ａ１）の化合物ＦＶ〜ＦＸＩおよびＦ５７〜Ｆ６５である。
【０２５６】
ボンベシン受容体アンタゴニスト
ボンベシン受容体アンタゴニストである化合物は、特に女性に関して予測する能力を有する、信頼でき、かつ予測的と考えられる動物モデルを用いて試験された。齧歯類において、能動的性行動（proceptive behaviour）はホルモン制御下であり、プロゲステロンは、エストロゲンと組み合わせて、能動的性行動の誘導に必須である（Johnson M and Everitt B.，Essential Reproduction（第三版），Blackwell，Oxford，1988年）。霊長類における能動的性行動のホルモンの制御に関する証拠は対立しているが、概してエストロゲンおよび／またはアンドロゲンは、能動的性行動を増強するようである（Baum M.J.，J. Biosci.，1983年；33：578〜582）。ラットにおける能動的性行動の兆候は、耳の速い振動を伴う「跳躍（hopping）およびきょろきょろする（darting）」運動を含む。性的な接触を捜し求めること（性的なモチベーション）を評価する試験が能動的性行動を測定する最も適切な方法として報告されている（Meyerson B.J，Lindstrom L.H.，Acta Physiol. Scand.，1973年；389（増刊号）：1〜80）。ラットにおいて、雌が前屈位であると仮定すると、感受性が実証される。これは、雄がマウントして前足で感受性のある雌のわき腹に圧力を与える時に起こる。この行動に関するニューロンによる制御の主要部位は、腹内側核（ＶＭＮ）と中脳中心灰白質（ＭＣＧ）である（総論に関して、Wilson C.A.，In：Sexual薬理学，Riley A.J.等（Eds），Clarendon Press，Oxford，1993年：1〜58を参照）。
【０２５７】
ボンベシンは、１４−アミノ酸ペプチドであり、European frog Bombina bombinaの皮
膚から初めて単離された（Anastasi a.等，Experientia，1971年；27：166）。これは、
Ｃ末端デカペプチド領域において構造的相同性を共有するペプチドクラスに属する（DuttaA.  S.，Small Peptides；Chemistry，Biology，およびClinical Studies，第２章，６６〜８２頁）。今のところ、２種の哺乳動物のボンベシン様ペプチドが同定されており、デカペプチドニューロメジンＢ（ＮＭＢ）、および、２３残基のアミノ酸からなるガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）である。
【０２５８】
ボンベシンは、不均質な受容体集団での作用を介して多数の中枢性の作用を惹起する。ＢＢ1受容体は、ガストリン関連ペプチド（ＧＲＰ）とニューロメジンＣ（ＮＭＣ）より
高い親和性でニューロメジンＢ（ＮＭＢ）に結合し、ＢＢ2受容体は、ＮＭＢより高い親
和性でＧＲＰとＮＭＣに結合する。より近年、２種のさらなる受容体サブタイプ（ＢＢ3
およびＢＢ4）の証拠が示されているが、薬理学が限定されているため、今のところそれ
らの機能はほとんどわかっていない。ＢＢ1およびＢＢ2受容体の中枢神経系での分布は不均質であり、これは、これら受容体に関する内因性リガンドが、神経伝達を異なって調節する可能性を示す。その他の領域において、ＢＢ1受容体は視床下部腹内側部に存在する
（Ladenheim E.E等，Brain Res.，1990年；537：233〜240）。
【０２５９】
ボンベシン様免疫反応性およびｍＲＮＡが哺乳動物の脳で検出されている（Braun M.等，Life. Sci.，1978年；23：2721）（Battey J.等，TINS，1991年：14：524）。ＮＭＢおよびＧＲＰは、多種多様な生物学的な作用を仲介すると考えられている（総論として、ＷＯ ９８／０７７１８を参照）。
【０２６０】
以下の特許出願では、ボンベシン受容体におけるＮＭＢおよび／またはＧＲＰ作用を拮抗阻害することができる化合物が開示されている：ＣＡ２０３０２１２、欧州特許第０３０９２９７号、欧州特許第０３１５３６７号、欧州特許第０３３９１９３号、欧州特許第０３４５９９０号、欧州特許第０４０２８５２号、欧州特許第０４２８７００号、欧州特許第０４３８５１９号、欧州特許第０４６８４９７号、欧州特許第０５５９７５６号、欧州特許第０７３７６９１号、欧州特許第０８３５６６２号、日本国特許第０７２５８０８１号、イギリス国特許第２２３１０５１号、米国特許第４９４３５６１号、米国特許第５０１９６４７号、米国特許第５０２８６９２号、米国特許第５０４７５０２号、米国特許第５０６８２２２号、米国特許第５０８４５５５号、米国特許第５１６２４９７号、米国特許第５２４４８８３号、米国特許第５４３９８８４号、米国特許第５６２０９５５号、米国特許第５６２０９５９号、米国特許第５６５０３９５号、米国特許第５７２３５７８号、米国特許第５７５０６４６号、米国特許第５７６７２３６号、米国特許第５８７７２７７号、米国特許第５９８５８３４号、ＷＯ ８８／０７５５１、ＷＯ ８９／０２８９７、ＷＯ ８９／０９２３２、ＷＯ ９０／０１０３７、ＷＯ ９０／０３９８０、ＷＯ ９１／０２７４６、ＷＯ ９１／０４０４０、ＷＯ ９１／０６５６３、ＷＯ ９２／０２５４５、ＷＯ ９２／０７８３０、ＷＯ ９２／０９６２６、ＷＯ ９２／２０３６３、ＷＯ ９２／２０７０７、ＷＯ ９３／１６１０５、ＷＯ ９４／０２０１８、ＷＯ ９４／０２１
６３、ＷＯ ９４／２１６７４、ＷＯ ９５／００５４２、ＷＯ ９６／１７６１７、ＷＯ ９６／２８２１４、ＷＯ ９７／０９３４７、ＷＯ ９８／０７７１８、ＷＯ ００／０９
１１５、ＷＯ ００／０９１１６。我々は、上記出願で開示された化合物が性機能障害の
予防または治療で用いることができると考えており、このような性機能障害の予防または治療は、上記出願または実際にボンベシン受容体に関する従来のあらゆる科学的な出版物では、開示も示唆もされていない。
【０２６１】
ＷＯ ９８／０７７１８で開示されたボンベシン受容体アンタゴニストの一つの好まし
い属は、式（Ｉ）：
【化６】
2005516014.tif 000017
で示される化合物、およびそれらの製薬上許容できる塩を含み、
上記式中、
・ｊは、０または１であり；
・ｋは、０または１であり；
・ｌは、０、１、２、または３であり；
・ｍは、０または１であり；
・ｎは、０、１、または２であり；
・Ａｒは、フェニル、ピリジルまたはピリミジルであり、それぞれ未置換でもよいし、
アルキル、ハロゲン、アルコキシ、アセチル、ニトロ、アミノ、−ＣＨ2ＮＲ10Ｒ11 
、シアノ、−ＣＦ3、−ＮＨＣＯＮＨ2、および−ＣＯ2Ｒ12から選択される１〜３個  の
置換基で置換されてもよく；
【０２６２】
・Ｒ1は、水素、または、１〜７個の炭素原子の直鎖、分岐鎖もしくは環状アルキルで
あり；
・Ｒ8は、水素であるか、または、Ｒ1と３〜７個の炭素原子の環を形成してもよく；
・Ｒ2は、水素、または、１〜８個の炭素原子の直鎖、分岐鎖もしくは環状アルキル（
１〜２個の酸素または窒素原子を含んでもよい）であり；
・Ｒ9は、水素であるか、または、Ｒ2と３〜７個の炭素原子の環をを形成してもよく、該環は、酸素または窒素原子を含んでもよい；または、Ｒ2とＲ9が一緒になってカルボニルであってもよく；
・Ａｒ1は、独立してＡｒから選択することができ、または、ピリジル−Ｎ−オキシド
、インドリル、イミダゾリル、およびピリジルであってもよい；
・Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、およびＲ7はそれぞれ独立して、水素、および、低級アルキルから選択され；Ｒ4はまた、Ｒ5と２〜３個の原子（酸素または窒素原子を含み得る）の共有結合を形成してもよい；
【０２６３】
・Ｒ3は、独立してＡｒから選択してもよく、または、水素、ヒドロキシ、−Ｎｍｅ2、Ｎ−メチル−ピロリル、イミダゾリル、Ｎ−メチル−イミダゾリル、テトラゾリル、Ｎ−メチル−テトラゾリル、チアゾリル、−ＣＯＮＲ13Ｒ14アルコキシ、
【化７】
2005516014.tif 000018
［式中、ｐは、０、１、または２であり、Ａｒ2は、フェニルまたはピリジルである］で
もよく；
・Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、および、Ｒ14は、独立して、水素、または、１〜７個の炭素原子の直鎖、分岐鎖もしくは環状アルキルから選択される。
【０２６４】
上記の属の範囲で特に好ましい化合物は、（Ｓ）３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ−［１−（５−メトキシ−ピリジン−２−イル）−シクロヘキシルメチル］−２−メチル−２−［３−（４−ニトロ−フェニル）−ウレイド］−プロピオンアミド、および、それらの製薬上許容できる塩である。
【０２６５】
ＢＢ1およびＢＢ2結合分析
以下の実験において、ＢＢ1およびＢＢ2の結合の測定は、以下の通りであった。安定してクローン化ヒトＮＭＢを発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞（ＢＢ1分析用）、および、ＧＲＰ
受容体（ＢＢ2分析用）を、手順通りに１０％ウシ胎児血清と２ｍＭグルタミンを添加し
たハムＦ１２培地で培養した。結合実験のために、細胞をトリプシン処理して回収し、５％ＤＭＳＯを含むハムＦ１２培地中で−７０℃で凍結して必要になるまで保存した。使用日に、細胞を迅速に解凍させ、過量の培地で希釈し、２０００ｇで５分間遠心分離した。細胞を５０ｍＭトリス−ＨＣｌ分析緩衝液（ｐＨ７.４、２１℃で、０.０２％ＢＳＡ、４０μｇ／ｍＬバシトラシン、２μｇ／ｍＬキモスタチン、４μｇ／ｍＬロイペプチン、および２μＭホスホラミドンを含む）に再懸濁し、計数し、ポリトロンで粉砕し（設定５、１０秒）、その後、２８,０００ｇで１０分間遠心分離した。最終的なペレットを分析緩衝液に再懸濁し、最終細胞濃度を１.５×１０5／ｍＬにした。結合分析のために、試験化合物の存在下および非存在下で、膜の２００μＬのアリコートを［125Ｉ］［Ｔｙｒ4］ボンベシン（＜０.１ｎＭ）と、ＮＭＢ受容体は６０分間、ＧＲＰ受容体は９０分間インキュベートした（最終分析体積は２５０μＬ）。非特異的結合は、１μＭボンベシンで定義された。予め０.２％ＰＥＩ中に２時間超浸漬させたワットマンのＧＦ／Ｃフィルターで吸引しながら迅速にろ過することにより分析を止め、５０ｍＭトリス−ＨＣｌ（ｐＨ６.９，２１℃；６×１ｍＬ）で洗浄した。γカウンターを用いて結合した放射能を測定した。
【０２６６】
全ての競合データを、Prism（Ｒ）（グラフパッドソフトウェア社，サンディエゴ，米
国）で反復の曲線プロット法を利用した非線形回帰を用いて分析した。Cheng−Prusoffの方程式（Cheng Y.，Prusoff W.H.，Biochem. Pharmacol，22：3099〜3108，1973年）を用いてＩＣ50値をＫi値に修正した。
【０２６７】
中コンダクタンスカルシウム活性化カリウム（ＩＫCa）チャンネルの調節因子
用語「カルシウム活性化カリウムチャンネル」は、大コンダクタンスカルシウム活性化（ＢＫCa）チャンネル（またた、最大Ｋ＋チャンネルとも称される）、小コンダクタンスカルシウム活性化（ＳＫCa）チャンネル、および、中コンダクタンスカルシウム活性化（ＩＫCa）チャンネルを含み、これらは場合によってはｈＳＫ4チャンネルまたはＩＫチャンネルまたはｈＩＫ1チャンネルとも称される。
【０２６８】
現在は、３種のカルシウム活性化カリウムチャンネルサブタイプがある。そのサブタイプとは、大コンダクタンスカルシウム活性化（ＢＫCa）チャンネル、中コンダクタンスカルシウム活性化（ＩＫCa）チャンネル、および、小コンダクタンスカルシウム活性化（ＳＫCa）チャンネルである。これらチャンネルは、１回の開口でチャンネル孔を通過するイオンのコンダクタンスの程度によって特徴付けられている（Fan等，1995年）。区別する
と、大コンダクタンス（ＢＫ）チャンネルは、内部のカルシウムイオンと膜ポテンシャルとが協調作用することによってゲート開閉し、１００〜２２０ピコジーメンス（ｐＳ）の単位コンダクタンスを有する；ところが、中コンダクタンス（ＩＫ）および小コンダクタンス（ＳＫ）チャンネルは、内部のカルシウムイオンのみでゲート開閉する。さらに区別すると、ＩＫCaおよびＳＫCaチャンネルは、それぞれ２０〜８５ｐＳ、および、２〜２０ｐＳの単位コンダクタンスを有し、ＢＫチャンネルより高いカルシウム感受性を有する。それぞれのタイプのチャンネルは、別個の薬理学を示す（Ishii等，1997年）。
【０２６９】
本発明で用いられる用語「中コンダクタンスカルシウム活性化（ＩＫCa）チャンネル」は、１回の開口でチャンネル孔を通過するイオンのコンダクタンスの程度によって特徴付けられたカルシウム活性化カリウムチャンネルのサブタイプを意味する（Fan等，1995年
）。内部のカルシウムイオンと膜ポテンシャルとの協調作用によりゲート開閉し、１００〜２２０ピコジーメンス（ｐＳ）の単位コンダクタンスを有する大コンダクタンス（ＢＫ）チャンネルに対して、中コンダクタンス（ＩＫ）チャンネルは、内部のカルシウムイオンのみでゲート開閉し、２０〜８５ｐＳの単位コンダクタンスを有し、ＢＫチャンネルより高いカルシウム感受性を有する。
【０２７０】
本発明で用いられる用語「ＫCaチャンネル活性を調節すること」は、以下の１またはそれ以上を意味する：ＩＫCaチャンネル活性を改善すること、増加させること、増強すること、アゴナイズすること、脱分極すること、または、アップレギュレートすること、または、ＩＫCaチャンネルのＣａ2+感受性を増加させること、すなわち、ＩＫCaチャンネル活性／開口を惹起するのに必要なカルシウム濃度を低めること、を意味する。ＩＫCaチャンネルのＣａ2+感受性の増加は、ＩＫCaチャンネルの直接的または間接的な開口により増加／増強することができる。このようにＩＫCaチャンネルのＣａ2+感受性を増加させることにより、ＩＫCaチャンネルがより速く開口する、および／または、より低い細胞内カルシウム濃度で開口する、および／または、より長い時間開口する、および／または、開口時間の確率を高めて開口するようにＩＫCaチャンネルの開口が作用を受けるようにＩＫCaチャンネル特徴を改変させることができる。
【０２７１】
用語「ＩＫCaチャンネル活性を調節すること」はまた、例えば、ＩＫCaチャンネル発現を増加させる物質により、および／または、別の方法でＩＫCaチャンネル活性および／またはＩＫCaチャンネル発現の調節を損なう、および／または拮抗阻害する物質への作用物
質の作用による、海綿体平滑筋組織におけるＩＫCaチャンネル発現のアップレギュレートを含む。
【０２７２】
一例として、調節因子は、式（Ｉ）の構造であり得る：
【化８】
2005516014.tif 000019
式中、Ｒ１は、Ｈまたは適切な置換基、例えばアルキル基であり、場合により置換されてもよい；
Ｒ２は、Ｈまたは適切な置換基、好ましくはＨであり、
Ｒ３は、１またはそれ以上の適切な任意の置換基を示す。
【０２７３】
あるいは、調節因子は、式（１）の構造を有してもよい：
【化９】
2005516014.tif 000020
式中、Ｘは、ＮＲ、ＯまたはＳから選択され、Ｒは、Ｈまたはアルキル（好ましくは低級アルキル、より好ましくはＣ１〜６アルキル）であり、
Ｒ１は、アルキル（好ましくは低級アルキル、より好ましくはＣ１〜６アルキル）であり、
Ｒ２は、Ｈ、ハロゲン化物、アルキル（好ましくは低級アルキル、より好ましくはＣ１〜６アルキル）、アルコキシ（好ましくは低級アルコキシ、より好ましくはＣ１〜６アルコキシ）から選択され、
Ｒ３は、Ｈ、ハロゲン化物、アルキル（好ましくは低級アルキル、より好ましくはＣ１〜６アルキル）、アルコキシ（好ましくは低級アルコキシ、より好ましくはＣ１〜６アルコキシ）から選択され、
Ｒ４は、Ｈ、ハロゲン化物、アルキル（好ましくは低級アルキル、より好ましくはＣ１〜６アルキル）、アルコキシ（好ましくは低級アルコキシ、より好ましくはＣ１〜６アルコキシ）から選択され、
Ｒ５は、Ｈ、ハロゲン化物、アルキル（好ましくは低級アルキル、より好ましくはＣ１〜６アルキル）、アルコキシ（好ましくは低級アルコキシ、より好ましくはＣ１〜６アルコキシ）から選択される。
【０２７４】
式（１）の化合物（式中、式（１ａ）はＸ＝Ｏ、または、式（１ｂ）はＸ＝Ｓ）は、それぞれに対応する親ヘテロ環式（２ａ）または（２ｂ）の塩基性条件下でＮ−アルキル化することにより、作製することができ、これらは順に、それぞれ対応するアミノフェノール（３ａ）またはアミノチオフェノール（３ｂ）をホスゲンまたはその他の適切なカルボニル化剤を用いて処理することにより作製することができる。アミノフェノールとアミノチオフェノールは、通常、それぞれ対応するニトロフェノール（４ａ）またはニトロチオフェノール（４ｂ）を還元することにより作製される。多くの置換ニトロフェノール（４ａ）とニトロチオフェノール（４ｂ）が、市販されている。
【０２７５】
【化１０】
2005516014.tif 000021
【０２７６】
上記スキームを改変して式１の化合物（式中、Ｘ＝ＮＨ（式（１ｃ）））を作製することができる。これに関して、それぞれ対応するニトロアニリン（５ｃ）のアルキル化をニトロ基の還元の前に行い、フェニルジアミンが得られ（３ｃ，Ｘ＝ＮＨ）、これを上述のカルボニル化によって１ｃに環化する。
【０２７７】
【化１１】
2005516014.tif 000022
【０２７８】
好ましくは、調節因子は、ＥＢＩＯ（１−エチル−２−ベンズイミダゾリノン）またはそれらのミメティックまたはそれらいずれかの製薬上許容できる塩である。ＥＢＩＯの構造は、以下の通りである：
【化１２】
2005516014.tif 000023
【０２７９】
いくつかの用途に関しては、好ましくは、作用物質のＩＣ50値は、３００ｎＭ未満、２５０ｎＭ未満、２００ｎＭ未満、１５０ｎＭ未満、好ましくは約１００ｎＭ未満、好ましくは約７５ｎＭ未満、好ましくは約５０ｎＭ未満、好ましくは約２５ｎＭ未満、好ましくは約２０ｎＭ未満、好ましくは約１５ｎＭ未満、好ましくは約１０ｎＭ未満、好ましくは約５ｎＭ未満である。
【０２８０】
いくつかの用途に関しては、好ましくは、作用物質は、所望の標的に対して少なくとも約２５倍、５０倍、７５倍、１００倍の選択性を有し、好ましくは所望の標的に対して少なくとも約１５０倍の選択性を有し、好ましくは所望の標的に対して少なくとも約２００倍の選択性を有し、好ましくは所望の標的に対して少なくとも約２５０倍の選択性を有し、好ましくは所望の標的に対して少なくとも約３００倍の選択性を有し、好ましくは所望の標的に対して少なくとも約３５０倍の選択性を有する。
【０２８１】
女性生殖器
用語「女性生殖器」は、Gray's Anatomy（C.D. Clemente，第１３版，米国版）に記載
の定義、すなわち、
「生殖器官は、内部と外部の群からなる。内部器官は、骨盤内に位置し、卵巣、卵管、子宮および膣からなる。外部器官は、尿生殖隔膜の表面、骨盤弓の下に位置する。これらは、恥丘、大陰唇および小陰唇、陰核、前庭、前庭球、ならびに、大前庭腺からなる」
に従って用いられる。
【０２８２】
海綿体
本発明で用いられる用語「海綿体」は、特に陰茎にある組織体を意味する。これに関して、陰茎の本体は、組織の３つの円柱体から成り、それぞれ白膜という線維組織で取り囲まれている。１対の後外側部分は、海綿体陰茎（corpora cavernosa penis）（corpora＝本体；cavernosa＝中空）と呼ばれ；小さいほうの中腹側部分（midventral mass）である尿道海綿体は、海綿状の尿道からなり、射精中に海綿状の尿道を開いたままにする機能を有する。これら全ての組織体は、筋膜と皮膚で囲まれており、血液洞により浸透される勃起性の組織からなる。海綿体は、平滑筋肉細胞を含む。本発明で用いられる用語「海綿体」はまた、陰核における同等の平滑筋細胞および／または組織も含む。
【０２８３】
勃起機能障害（ＥＤ）
本発明で用いられる用語「勃起機能障害（ＥＤ）」は、陰茎と陰核との勃起性の組織が実質的に同等である限りにおいて、陰茎の勃起機能障害（射精、または、勃起の達成、または、性交に十分な長い時間の勃起の維持に関する成人男性の一貫した無能を特徴とする）と、女性における陰核の機能障害の両方を含む。
【０２８４】
陰茎の勃起
本発明で用いられる用語「陰茎の勃起」は、視覚的、接触、聴覚的、嗅覚的な刺激、または想像による刺激を受けると、陰茎にある動脈が膨らみ、大量の血液が血液洞に流入する状態を意味する。これらの空間が膨張することにより陰茎を排出する静脈が圧迫され、そのため、血液の流出が遅くなる。これら血管の変化は副交感神経の反射によるものであり、勃起を起こさせる。動脈が収縮し、静脈への圧力が軽減されると、陰茎は弛緩した状態に戻る。
本発明で用いられる用語「陰茎の」および「陰茎の勃起」は、陰茎と陰核との勃起性の組織が実質的に同等であるために、陰核と同等に適用されると解釈することができる。
【０２８５】
陰核
本発明で用いられる用語「陰核」は、男性の陰茎と同質の勃起性の組織の女性の組織体を意味する。男性の構造と同様に、陰核は、接触による刺激で膨張することができ、女性の性的興奮において役割を有する。特定のタイプの女性性機能障害（ＦＳＤ）、例えば女性の性的興奮機能障害（ＦＳＡＤ）において、興奮機能障害は、生殖器の血流における機能不全、および、陰核海綿体の弛緩に関連する可能性がある。
生殖器
本発明で用いられる用語「生殖器」は、男性および女性の生殖器を意味し、例えば陰茎および陰核である。
【０２８６】
平滑筋
本発明で用いられる用語「平滑筋」は、収縮に特化した組織を意味し、平滑筋は、中空の内部器官の壁面に存在する平滑筋繊維（細胞）から成り、自律神経運動ニューロンにより刺激される。用語「平滑筋」は、横紋を持たないため、滑らかな外観を有する筋肉を意味する。または、平滑筋は、不随意筋とも称される。平滑筋サイトゾルでＣａ2+濃度が増加することにより、横紋筋と同じように収縮が起こる。しかしながら、筋小胞体（横紋筋におけるＣａ2+の貯蔵所）は、平滑筋では貧弱である。カルシウムイオンは、細胞外の体液と筋小胞体との両方から平滑筋サイトゾルに流れるが、平滑筋繊維には横細管がないの
で、Ｃａ2+が線維の中心におけるフィラメントに達し、収縮性のプロセスを引き起こすまでより長い時間がかかる。これは、部分的に平滑筋の遅い徴候と持続性の収縮の原因となる。
【０２８７】
収縮および弛緩
数々のメカニズムにより、平滑筋細胞の収縮と弛緩が調節される。その一つにおいて、カルモジュリンという調節タンパク質は、サイトゾル中でＣａ2+に結合する。これは、平滑筋繊維にカルシウムイオンをゆっくり入らせることに加え、励起が衰えたらそれらを筋線維からゆっくり移動させるため、弛緩を遅延させる。サイトゾルにおけるＣａ2+の継続的な存在により、平滑筋の調子、継続的な部分的収縮状態が提供される。平滑筋組織は、中空の内部器官、例えば血管、肺への気道、胃、腸の胆嚢、膀胱、陰茎および陰核の海綿体の壁面に存在する。
【０２８８】
治療
当然ながら、本発明における治療への全ての参照は、治療、対処的治療および予防的治療の１またはそれ以上を含むものとする。
【０２８９】
性的な刺激
本発明はまた、性的な刺激の前、および／または最中に、選択的Ｄ３ドーパミン受容体アゴニスト（およびＰＤＥｉ、好ましくはＰＤＥ５ｉ、または必要に応じてその他の補助剤）を投与することによる上記で定義された使用も含む。ここで用語「性的な刺激」は、用語「性的興奮」と同義語であり得る。この本発明の観点は、全身性の（生理学的な）選択性を提供するために有利である。自然なカスケードは、生殖器でのみ生じるが、その他の場所、例えば心臓などにおいては生じない。従って、本発明に係る性機能障害（特にＭＥＤ、または、ＦＳＡＤおよび／もしくはＨＳＤＤ）の治療により、生殖器において選択的な作用を達成することができる。
【０２９０】
従って、本発明によれば、いくつかのステージで性的な刺激段階があることが極めて望ましい。我々は、この段階が全身性の選択性を提供するを発見した。ここで「性的な刺激」は、１またはそれ以上の視覚的な刺激、物理的な刺激、聴覚的な刺激、または思考による刺激であり得る。
【０２９１】
作用物質
男性性機能障害、特にＭＥＤ、または女性性機能障害、特にＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤの治療において用いる本発明に係る作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストとして作用し得るあらゆる適切な作用物質、必要に応じて、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストと補助剤（例えばＰＤＥｉ、好ましくはＰＤＥ５ｉ）との組み合わせであり得る。本発明で用いられる用語「作用物質」は、ドーパミンＤ３受容体を選択的に活性化または阻害することができるあらゆる物体を含む。
【０２９２】
このような作用物質（すなわち上記で定義された作用物質）は、アミノ酸配列またはそれらの化学誘導体であり得る。このような作用物質は、有機化合物でもよいし、またはその他の化学物質でもよい。このような作用物質は、ヌクレオチド配列でもよく、それらはセンス配列でもアンチセンス配列でもよい。このような作用物質は、抗体であってもよい。
【０２９３】
従って、用語「作用物質」としては、これらに限定されないが、あらゆる適切な源（天然でも非天然でもよい）から得ることができる、またはそれらから生産することができる化合物が挙げられる。
このような作用物質は、ペプチド、およびその他の化合物、例えば低分子の有機分子、
例えばリード化合物を含み得る化合物ライブラリーから設計することもできるし、それらから得ることもできる。
【０２９４】
一例として、作用物質は、天然物質、生体高分子、または、生物学的な材料、例えば細菌、菌類、または動物（特に哺乳動物）細胞または組織から得られた抽出物、有機または無機分子、合成物質、半合成物質、構造的もしくは機能的なミメティック、ペプチド、ペプチドミメティック、誘導体化物質、完全タンパク質から切断されたペプチド、もしくは合成されたペプチド（例えば、一例として、ペプチド合成器を用いて、もしくは組換え技術によってのいずれか、またはそれらの組み合わせによる）、組換え物質、抗体、天然もしくは非天然物質、融合タンパク質、または、それらの同等物、および、突然変異体、誘導体、または、それらの組み合わせであり得る。
【０２９５】
本発明で用いられる用語「作用物質」は、単一の物体であってもよいし、作用物質の組み合わせであってもよい。
いくつかの用途に関して作用物質が有機化合物である場合、例えば作用物質が特異的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである場合、その有機化合物は、典型的には、２またはそれ以上の連結したヒドロカルビル基を含み得る。いくつかの用途に関しては、好ましくは、このような作用物質は、少なくとも２つの環式基を含み、場合により、その環式基の一方は縮合環式環構造であってもよい。いくつかの用途に関しては、少なくとも１つの環式基は、ヘテロ環式基である。いくつかの用途に関しては、ヘテロ環式基は、環中に少なくとも１つのＮを含み得る。このような化合物の例をここで示す。
【０２９６】
いくつかの用途に関して作用物質が有機化合物である場合、例えば作用物質がＰＤＥ５ｉである場合、その有機化合物は、典型的には、２またはそれ以上の連結したヒドロカルビル基を含み得る。いくつかの用途に関しては、好ましくは、このような作用物質は、少なくとも２つの環式基を含み、その環式基の一方は、縮合環式環構造であってもよい。いくつかの用途に関しては、好ましくは少なくとも１つの環式基は、ヘテロ環式基である。いくつかの用途に関しては、好ましくは、ヘテロ環式基は、環中に少なくとも１つのＮを含む。このような化合物の例をＰＤＥ５の項目で本発明において示す。
【０２９７】
このような作用物質は、ハロ基を含み得る。ここで「ハロ」は、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードを意味する。
このような作用物質は、１またはそれ以上のアルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキレン、および、アルケニレン基を含んでもよく、これらの基は、非分枝鎖でもよいし、分岐鎖でもよい。
【０２９８】
置換
疑義を避けるために言えば、特に指示がない限り、用語「置換」は、１またはそれ以上の定義された基での置換を意味する。基を多数の代替の基から選択することができる場合、選択された基は、同じでも異なっていてもよい。疑義を避けるために言えば、該用語は、独立して、２以上の置換基が多数の可能な置換基から選択される場合、これら置換基は、同じでも異なっていてもよいを意味する。
【０２９９】
製薬上許容できる塩
作用物質は、製薬上許容できる塩（例えば酸付加塩または塩基性塩）、または、それらの溶媒化合物（例えばそれらの水和物）の形態でもよいし、および／または、それとして投与することもできる。適切な塩に関する総論として、Berge等，J. Pharm. Sci.，1977
年，66，1〜19を参照。
【０３００】
典型的には、製薬上許容できる塩を、必要に応じて望ましい酸または塩基を用いて簡単
に作製することができる。このような塩を溶液から沈殿させ、ろ過により回収してもよいし、または、溶媒を蒸発させることにより回収してもよい。
【０３０１】
適切な酸付加塩は、非毒性の塩を形成する酸から形成され、例としては、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、リン酸水素塩、酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、グルコン酸塩、コハク酸塩、サッカリン酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、および、パモ酸塩が挙げられる。
【０３０２】
適切な塩基性塩は、非毒性の塩を形成する塩基から形成され、例としては、ナトリウム、カリウム、アルミニウム、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、ジオラミン、オラミン、エチレンジアミン、トロメタミン、クロイン（chloine）、メグラミン（megulamine）、および、ジエタノールアミンの塩である。適切な医薬用の塩に関する総論に関しては、Berge等，J. Pharm. Sci.，66，1〜19（1977年）；Gould P.L.，International J. of Pharmaceutics，33（1986年），201〜217；および、Bighley等，Encyclopedia of Pharmaceutical Technology，Marcel Dekker Inc.，New York（1996年），第13巻，453〜497頁を参照。好ましい塩は、ナトリウム塩である。
【０３０３】
本発明の化合物の製薬上許容できる溶媒化合物は、それらの水和物を含む。
以下、本発明のいずれかの観点で定義された化合物、それらの製薬上許容できる塩、それらの溶媒化合物および多形（化学プロセスの中間体化合物を除く）は、「本発明の化合物」と称する。
【０３０４】
多形体／不斉炭素
作用物質は、多形体で存在してもよい。
作用物質は、１またはそれ以上の不斉炭素原子を含んでもよく、従って、２またはそれ以上の立体異性体の形態で存在する。作用物質がアルケニルまたはアルケニレン基を含む場合、シス（Ｅ）およびトランス（Ｚ）異性が生じる可能性もある。本発明は、作用物質の個々の立体異性体、および、必要に応じて、それらの個々の互変異性型、加えて、それらの混合物を含む。
【０３０５】
ジアステレオ異性体またはシスおよびトランス異性体の分離は、通常の技術によって達成することができ、例えば、作用物質またはそれらの適切な塩もしくは誘導体の立体異性体の混合物の分画の結晶化、クロマトグラフィーまたはＨ.Ｐ.Ｌ.Ｃ.により達成することができる。作用物質の個々の光学異性体はまた、対応する光学的に純粋な中間体から作製してもよいし、または、例えば、適切なキラル支持体を用いた対応するラセミ化合物のＨ.Ｐ.Ｌ.Ｃ.により分離することにより、または、必要に応じて、対応するラセミ化合物と適切な光学的に活性な酸または塩基との反応により形成されたジアステレオ異性体の塩の分画の結晶化により作製してもよい。
【０３０６】
同位体のバリエーション
本発明はまた、作用物質またはそれらの製薬上許容できる塩の全ての適切な同位体のバリエーションを含む。本発明の作用物質またはそれらの製薬上許容できる塩の同位体のバリエーションは、少なくとも１つの原子が、同じ原子番号だが原子質量が天然で通常観察される原子質量とは異なる原子で置換されたものと定義される。作用物質およびそれらの製薬上許容できる塩に含ませることができる同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素および塩素の同位体が挙げられ、例えばそれぞれ、2Ｈ、3Ｈ、13Ｃ、14Ｃ、15Ｎ、17Ｏ、18Ｏ、31Ｐ、32Ｐ、35Ｓ、18Ｆ、および、36Ｃｌである。作用物質およびそれらの製薬上許容できる塩の特定の同位体のバリエーション、例えば、放射性の同位体（例えば3Ｈまたは14Ｃ）を含ませたバリエーションは、薬剤および／または基
質の組織分布研究に有用である。トリチウム化した、すなわち3Ｈおよび炭素１４（すな
わち14Ｃ）同位体が、それらの作製と検出が簡単であるため特に好ましい。さらに、同位体、例えば重水素（すなわち2Ｈ）での置換により特定の治療上の利点を得ることができ
、このことは、より大きい代謝の安定性、例えば、インビボでの半減期を増加させ、または、必要な投与量を減少させることができるため、いくつかの状況においては好ましい可能性があることに起因する。作用物質およびそれらの製薬上許容できる塩の同位体のバリエーションは、一般的に、適切な試薬の適切な同位体のバリエーションを用いた通常の方法により作製することができる。
【０３０７】
プロドラッグ
当業者であれば理解できることであるが、作用物質は、プロドラッグから誘導されてもよい。プロドラッグの例としては、特定の保護基を有し、それ自体は薬理学的な活性を有さないが、例えば経口的または非経口的に投与された場合、その後体内で代謝されて薬理学的に活性な物質が形成されるような物体が挙げられる。
本発明の化合物の全ての保護された誘導体およびプロドラッグは、本発明の範囲内に含まれる。
【０３０８】
前駆成分
さらに、「前駆成分」として知られる特定の成分、例えばH. Bundgaardによる「Design
of Prodrugs」（エルゼビア，１９８５年）に説明されている成分（この開示を参照により本発明に加入する）を、作用物質の適切な機能性において使用可能であることが理解される。このようなプロドラッグもまた、本発明の範囲内に含まれる。
【０３０９】
阻害剤／アンタゴニスト
本発明で用いられる用語「阻害剤」は、例えばＰＤＥｉまたはＰＤＥ５ｉ化合物およびその他の助剤活性物質に関して、用語「アンタゴニスト」と置き換え可能であるとみなす。
本発明で用いられる用語「アンタゴニスト」は、他の作用物質または標的の作用を減少させるあらゆる作用物質を意味する。拮抗作用は、拮抗阻害される物質の組み合わせ（化学的な拮抗作用）、または、異なる標的を介した逆の作用の発生により（機能的な拮抗作用または生理学的な拮抗作用）、または、標的の活性化と観察される作用を関連づける中間体の結合部位に対する競合の結果として（間接的な拮抗作用）生じる可能性がある。
さらに、成句「内因性の勃起プロセスを増強すること」は、成句「内因性の勃起プロセスをアップレギュレートすること」と置き換え可能であるとみなす。
【０３１０】
アゴニスト
本発明で用いられる用語「アゴニスト」は、他の作用物質または標的の作用を増強する、または、他の物質または標的を活性化するあらゆる物質を意味する。用語「アゴニスト」は、受容体に結合することにより、変化をもたらし（典型的にはそれらの活性型の比率を増加させる）、生物学的な反応を生じさせるリガンドを含む。
【０３１１】
医薬組成物
本発明はまた、本発明の作用物質の治療上の有効量、および、製薬上許容できるキャリアー、希釈剤または添加剤（それらの組み合わせを含む）を含む医薬組成物を提供する。
医薬組成物は、ヒトの医学および獣医学においてヒトまたは動物へ用いることが可能であり、典型的には、あらゆる１またはそれ以上の製薬上許容できる希釈剤、キャリアー、または添加剤を含み得る。治療用途のための許容できるキャリアーまたは希釈剤は、製薬技術においてよく知られており、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing Co.（A.R. Gennaro編，1985年）で説明されている。製薬用キャリアー、添加剤または希釈剤の選択は、目的の投与経路と標準的な薬務に応じて選択することができる
。医薬組成物は、キャリアー、添加剤または希釈剤、あらゆる適切な結合剤、潤滑剤、懸濁化剤、コーティング剤、可溶化剤を含み得るか、または添加され得る。
【０３１２】
保存剤、安定化剤、色素、および矯味矯臭薬剤も、医薬組成物に含まれていてもよい。保存剤の例としては、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、および、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステルが挙げられる。抗酸化剤、および、懸濁化剤も用いることができる。
【０３１３】
様々な送達システムに応じて様々な組成物／製剤が必要である。一例として、本発明の医薬組成物は、ミニポンプを用いて、または、例えば吸入法のための鼻内噴霧もしくはエアロゾルとして粘膜経路で、または、経口摂取可能栄養溶液（ingestable solution）で
送達するために製剤化してもよいし、または、非経口的に送達するために製剤化することができ、その場合、該組成物は、例えば静脈内、筋肉内または皮下経路で送達するために注射可能な形態で製剤化される。あるいは、該製剤は、両方の経路で送達できるように設計することもできる。
【０３１４】
作用物質を胃腸の粘膜を介して粘膜経路で送達しようとする場合、消化管の移動中に安定な状態のままでいるべきである；例えば、タンパク分解に対して耐性であり、酸性ｐＨでも安定であり、胆汁の界面活性作用に対して耐性であるべきである。
【０３１５】
必要に応じて、医薬組成物は、吸入法により、坐剤または膣坐剤の形態で、ローション、溶液、クリーム、軟膏または散粉剤の形態で局所的に、皮膚パッチの使用により、スターチまたはラクトースのような添加剤を含む錠剤の形態で経口的に、または、カプセルまたは腔坐剤で（単独または添加剤と混合して）、または、矯味矯臭薬剤または着色剤を含むエリキシル、溶液または懸濁液の形態で投与することもでき、または、医薬組成物は、非経口的に、例えば静脈内、筋肉内または皮下に注射することもできる。非経口投与に関して、該組成物は、滅菌水溶液の形態で最適に用いることができ、このような滅菌水溶液は、他の物質、例えば血液と等張な溶液を作製するのに十分な量の塩または単糖を含んでもよい。バッカルまたは舌下投与に関しては、該組成物は、錠剤またはロゼンジの形態で投与することができ、このような錠剤またはロゼンジは、通常の方法で製剤化することができる。
【０３１６】
いくつかの実施形態において、本発明の作用物質はまた、シクロデキストリンと組み合わせて用いてもよい。シクロデキストリンは、薬剤分子との包接複合体、および、非包接複合体を形成することが知られている。薬剤−シクロデキストリン複合体を形成することにより、薬剤分子の溶解性、溶解速度、生物学的利用率および／または安定性特性を改変させることができる。薬剤−シクロデキストリン複合体は、一般的に、ほとんどの投薬形態および投与経路に関して有用である。薬剤での直接的な錯化の他に、シクロデキストリンは、助剤として、例えばキャリアー、希釈剤または可溶化剤として用いることもできる。α−、β−およびγ−シクロデキストリンが最も一般的に用いられており、適切な例は、ＷＯ ９１／１１１７２（Ａ）、ＷＯ ９４／０２５１８（Ａ）およびＷＯ ９８／５５１４８（Ａ）で開示されている。
【０３１７】
好ましい実施形態において、本発明の作用物質は、全身的に（例えば経口、頬側、舌下で）、より好ましくは、経口的に送達される。
従って、好ましくは、このような物質は、経口投与に適切な形態である。
【０３１８】
投与
用語「投与された」は、ウイルスを用いた、またはウイルスを用いない技術での送達を含む。ウイルスでの送達メカニズムとしては、これらに限定されないが、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター、ヘルペスウイルスベクター、レトロ
ウイルスベクター、レンチウイルスベクター、およびバキュロウイルスベクターが挙げられる。ウイルスを用いない送達メカニズムとしては、脂質介在トランスフェクション、リポソーム、イムノリポソーム、リポフェクチン、カチオンフェーシャル両親媒性物質（cationic facial amphiphiles）（ＣＦＡ）、および、それらの組み合わせが挙げられる。
【０３１９】
本発明の作用物質は、単独で投与することができるが、一般的に、例えば作用物質が、目的の投与経路および標準的な薬務に関して選択された適切な医薬添加剤、希釈剤またはキャリアーと混合されている場合、医薬組成物として投与される。
例えば、作用物質は、錠剤、カプセル、腔坐剤、エリキシル、溶液または懸濁液の形態で投与することができ（例えば経口的または局所に）、これらは、即時性、遅延型、改変型、持続性、パルスされた、または、コントロールされた放出の用途に応じて、矯味矯臭薬剤または着色剤を含んでもよい。
【０３２０】
錠剤は、添加剤、例えば微結晶性セルロース、ラクトース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、第二リン酸カルシウムおよびグリシン、崩壊剤、例えばスターチ（好ましくはコーンスターチ、ポテトスターチまたはタピオカスターチ）、ナトリウムスターチグリコレート、クロスカルメロースナトリウム、および、特定の錯体シリケート、および顆粒化結合剤、例えばポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、スクロース、ゼラチンおよびアラビアゴムを含み得る。加えて、潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ベヘン酸グリセリルおよびタルクを含んでもよい。
【０３２１】
類似のタイプの固形組成物はまた、ゼラチンカプセルにおいて充填剤としても用いることができる。これに関する好ましい添加剤としては、ラクトース、スターチ、セルロース、乳糖または高分子量ポリエチレングリコールが挙げられる。水性懸濁液および／またはエリキシルに関しては、作用物質は、様々な甘味剤または矯味矯臭薬剤，着色物質または色素、乳化剤および／または懸濁化剤、ならびに、希釈剤、例えば水、エタノール、プロピレングリコールおよびグリセリン、およびそれらの組み合わせと組み合わせてもよい。
【０３２２】
投与（送達）経路としては、これらに限定されないが、以下の１またはそれ以上が挙げられる：経口（例えば、錠剤、カプセルとして、または、経口摂取可能溶液として）、局所的、粘膜（例えば吸入法のための鼻内噴霧またはエアロゾルとして）、鼻、非経口（例えば注射可能な形態により）、胃腸、脊髄内、腹膜内の，筋肉内、静脈内、子宮内、眼内、皮内、頭蓋内、気管内、膣内、脳室内、脳内、皮下、眼（例えば硝子体内または眼房内）、経皮、直腸、頬側、陰茎、膣、硬膜外、舌下。
【０３２３】
当然ながら、全ての作用物質は、必ずしも同じ経路で投与されなくてもよい。同様に、組成物が２以上の活性成分を含む場合、それらの成分は、別々の経路で投与することができる。
【０３２４】
本発明の作用物質が非経口投与される場合、このような投与の例は、以下の１またはそれ以上が挙げられる：静脈内、動脈内、腹腔内、髄腔内、心室内、尿道内、肋骨内、頭蓋内、筋肉内、または、皮下に、作用物質を投与すること；および／または注入技術を用いて投与すること。
【０３２５】
非経口投与に関しては、作用物質は、滅菌水溶液の形態で最もよく用いられ、このような滅菌水溶液は、他の物質、例えば、血液と等張な溶液を作製するのに十分な量の塩またはグルコースを含んでもよい。このような水溶液は、必要に応じて、安定して緩衝化されるべきである（好ましくはｐＨ３〜９に）。滅菌条件下での適切な非経口製剤の調剤は、当業者周知の標準的な薬剤技術で簡単に達成される。
【０３２６】
上述したように、本発明の作用物質は、鼻腔内に、または、吸入法により投与することができ、乾燥粉末吸入器、または、適切な噴射剤の使用とともに加圧した容器、ポンプ、スプレーまたはネブライザーからのエアロゾルスプレープレゼンテーションの形態で都合よく送達され、この適切な噴射剤としては、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、ヒドロフルオロアルカン、例えば１,１,１,２−テトラフルオロエタン（ＨＦＡ １３４ＡTM）または１,１,１,２,３,３,３−ヘプタフルオロプロパン（ＨＦＡ ２２７ＥＡTM）、二酸化炭素、またはその他の適切
な気体が挙げられる。加圧したエアロゾルの場合、投与量単位は、定量を送達するためのバルブを提供することによって決定することができる。加圧した容器、ポンプ、スプレーまたはネブライザーは、活性化合物の溶液または懸濁液を含んでもよく、例えばエタノールと噴射剤（溶媒として）との混合物（これはさらにトリオレイン酸ソルビタンのような潤滑剤を含んでもよい）を用いてもよい。吸入器または注入器で用いられるカプセルおよびカートリッジ（例えばゼラチン製の）は、作用物質と適切な粉末ベース（例えばラクトースまたはスターチ）との粉末混合物を含むように製剤化することができる。
【０３２７】
あるいは、本発明の作用物質は、坐剤または膣坐剤の形態で投与することができ、または、ゲル、ヒドロゲル、ローション、溶液、クリーム、軟膏または散粉剤の形態で局所適用することもできる。本発明の作用物質はまた、例えば皮膚パッチの使用により、皮膚に、または経皮で投与することもできる。本発明の作用物質はまた、肺または直腸経路で投与することもできる。本発明の作用物質はまた、眼の経路で投与することもできる。眼への使用に関しては、本発明の化合物は、等張のｐＨ調節した滅菌生理食塩水中の微紛化した懸濁液として製剤化することができ、または、好ましくは、等張のｐＨ調節した滅菌生理食塩水の溶液として、場合により保存剤（例えば塩化ベンジルアルコニウム）と組み合わせて製剤化することができる。あるいは、本発明の化合物は、ワセリンのような軟膏に製剤化することができる。
【０３２８】
皮膚への局所適用のために、本発明の作用物質は、活性化合物を、例えば鉱油、液体ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン化合物、乳化ろう、および、水の１またはそれ以上との混合物中に懸濁または溶解させて含む適切な軟膏として製剤化することができる。あるいは、本発明の作用物質は、例えば鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリエチレングリコール、液体パラフィン、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコール、および、水の１またはそれ以上の混合物に懸濁または溶解させた適切なローションまたはクリームとして製剤化することができる。
【０３２９】
本発明の組成物は、直接注射により投与することができる。
いくつかの用途に関しては、好ましくは、このような作用物質は、経口投与される。
いくつかの用途に関しては、好ましくは、このような作用物質は、局所投与される。
【０３３０】
用量レベル
典型的には、医師が個々の被験体に最も適切となり得る実際の投与量を決定する。いずれかの特定の個体に関する投与量の特定の用量レベルと頻度は様々に変えることができ、多種多様な要素、例えば用いられる特定の化合物の活性、代謝安定性、および、その化合物が作用する長さ、年齢、体重、全般的な健康、性別、食事、投与様式と時間、排出速度、薬剤の組み合わせ、特定の状態の重症度、および個体が受ける治療に依存する。本発明の作用物質および／または医薬組成物は、１日１〜１０回の計画に従って投与することができ、例えば１日１回または２回である。
【０３３１】
ヒトへの経口および非経口投与に関しては、作用物質の１日用量は、１回でもよいし、
分割して投与してもよい。
必要に応じて、作用物質は、０.０１〜３０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば０.１〜１０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは０.１〜１ｍｇ／ｋｇ体重の用量で投与することができる。当然な
がら、本発明で述べられる投与量は、平均的なケースの典型例である。もちろん、より高いまたは低い投与量範囲が有益であるような個々の例がある。
【０３３２】
好ましくは、必要に応じて、作用物質は、０.０１〜１０ｍｇ／用量、例えば０.１〜５ｍｇ／用量、より好ましくは１〜３ｍｇ／用量で投与することができる。当然ながら、本発明で述べられる投与量は、平均的なケースの典型例である。もちろん、より高いまたは低い投与量範囲が有益であるような個々の例がある。指針として、プラミペキソールは、約０.１２５〜０.２５ｍｇ／用量で投与され、アポモルフィンは、約２〜３ｍｇ／用量で投与される。
【０３３３】
１日の経口用量は、例えば２０〜１０００ｍｇ、好ましくは５０〜３００ｍｇが可能であり、例えば、適切な用量は、男性性機能障害、特にＭＥＤ、または女性性機能障害、特にＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤの治療と、嘔吐またはその他の副作用の誘導との間の満足の行く治療上の比率を可能にするような量であり得る。
【０３３４】
製剤
本発明の作用物質は、例えば、１またはそれ以上の適切なキャリアー、希釈剤または添加剤と混合することによって、当業界既知の技術を用いて医薬組成物に製剤化することができる。
以下に限定されない製剤の例をいくつか示す。
製剤例１：以下の材料を用いて錠剤を作製する：
質量／ｍｇ
物質                          ２５０
セルロース、微結晶性          ４００
二酸化ケイ素、ヒュームド        １０
ステアリン酸                      ５  
合計                          ６６５
上記成分を混合し、圧縮して質量６６５ｍｇの錠剤を形成する。
【０３３５】
製剤例２：静脈内製剤を以下のように作製することができる：
物質                   １００ｍｇ
等張生理食塩水      １,０００ｍｌ
【０３３６】
個体
本発明で用いられる用語「個体」は、脊椎動物を意味し、特に哺乳動物種のメンバーである。この用語は、これらに限定されないが、家畜、突然変種の動物（sports animal）
、霊長類、および、ヒトを含む。
【０３３７】
生物学的利用
好ましくは、本発明の化合物（および組み合わせ）は、経口的に生物学的に利用可能である。経口の生物学的利用率とは、経口投与された薬剤が全身の血流に届いた比率を意味する。薬剤の経口の生物学的利用率を決定する要素は、溶解、膜透過性および代謝安定性である。典型的には、初めのインビトロ技術、続くインビボ技術のスクリーニングカスケードが、経口の生物学的利用率を決定するのに用いられる。
【０３３８】
胃腸管（ＧＩＴ）の水性成分による薬剤の溶解、可溶化は、インビトロでの溶解性実験をＧＩＴを模擬した適切なｐＨで行うことにより予測することができる。好ましくは本発
明の化合物は、最小限の溶解性（５０ｍｃｇ／ｍｌ）を有する。溶解性は、当業界既知の標準的な方法、例えばAdv. Drug Deliv. Rev. 23，3〜25，1997年に記載の方法により決
定することができる。
【０３３９】
膜透過性は、ＧＩＴの細胞を介した化合物の通過を意味する。親油性は、膜透過性を予測する重要な特性であり、有機溶媒と緩衝液を用いたインビトロでのＬｏｇＤ7.4測定に
より定義される。好ましくは、本発明の化合物のＬｏｇＤ7.4は、−２〜＋４であり、よ
り好ましくは−１〜＋２である。ｌｏｇＤは、当業界既知の標準的な方法、例えばJ. Pharm. Pharmacol. 1990年，42：144に記載の方法により決定することができる。
【０３４０】
細胞の単分子層分析、例えばＣａＣＯ2を、実質的に、流出トランスポーター（例えば
ｐ−糖タンパク質）の存在下での好ましい膜透過性の予測、いわゆるｃａｃｏ−２フラックスに加える。好ましくは、本発明の化合物のｃａｃｏ−２フラックスは、２×１０-6ｃｍｓ-1より大きく、より好ましくは５×１０-6ｃｍｓ-1より大きい。ｃａｃｏフラックス値は、当業界既知の標準的な方法、例えばJ. Pharm. Sci，1990年，79，595〜600に記載
の方法により決定することができる。
【０３４１】
代謝安定性は、吸収プロセスの際に化合物を代謝するＧＩＴまたは肝臓の能力：初回通過効果のことである。分析システム、例えばマイクロソーム、肝細胞等から、代謝の傾向を予測することができる。好ましくは、実施例の化合物は、分析システムにおいて代謝安定性を示し、これは、肝臓での除去率（０.５未満）と釣り合う。分析システムとデータ
操作の例は、Curr. Opin. Drug Disc. Devel.，201，4，36〜44，Drug Met. Disp.，2000年，28，1518〜1523で開示されている。
【０３４２】
上記プロセスの相互作用のために、薬剤が、ヒトにおける経口的に生物学的に利用可能であり得るというさらなる証拠を、動物におけるインビボでの実験により得ることができる。絶対的な生物学的利用率は、化合物を別々に、または、混合物として経口経路で投与することにより、３つの研究で決定される。絶対的な測定（％吸収）に関して、静脈内経路も用いられる。動物における経口の生物学的利用率の評価の例は、Drug Met. Disp.，2001年，29，82〜87；J. Med Chem，1997年，40，827〜829，Drug Met. Disp.，1999年，27，221〜226に見出すことができる。
【０３４３】
化学合成方法
典型的には、本発明に係る使用に適した選択的Ｄ３ドーパミン受容体アゴニスト（および／または、必要に応じて、補助剤、例えばＰＤＥｉ／ＰＤＥ５ｉ）は、化学合成技術により作製することができる。
【０３４４】
作用物質または標的、または、それらの変異体、相同体、誘導体、断片もしくはミメティックは、化学的方法を用いて製造し、作用物質を全部または部分的に合成することができる。例えば、ペプチドは、固相技術で、樹脂から切断し、分離用高速液体クロマトグラフィー（例えば、Creighton（1983年) Proteins Structures And Molecular Principles，ＷＨフリーマン・アンド・カンパニー，ニューヨーク，ニューヨーク州）により精製して合成することができる。合成ペプチドの組成は、アミノ酸分析または配列解析（例えば、Edman分解法；上記のCreighton）により確認することができる。
【０３４５】
作用物質、または、それらの変異体、相同体、誘導体、断片もしくはミメティックの直接合成は、様々な固相技術（Roberge JY等（1995年）サイエンス269：202〜204）を用い
て行うことができ、自動化合成は、製造元による説明書に従って、例えばＡＢＩ４３１Ａペプチドシンセサイザー（パーキンエルマー）を用いて達成することができる。加えて、作用物質またはそれらのいずれかの部分を含むアミノ酸配列は、直接合成により改変して
もよいし、および／または、化学的方法を用いてその他のサブユニットまたはそれらのいずれかの部分からの配列と結合させてもよく、それにより、変異物質または標的、例えば選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを製造することができる。
【０３４６】
本発明のその代わりの実施形態において、作用物質、標的、または、それらの変異体、相同体、誘導体、断片もしくはミメティックのコーディング配列は、当業界周知の化学的方法を用いて全部または部分的に合成することができる（Caruthers MH等（1980年）Nuc Acid Res Symp Ser 215〜23，Horn T等（1980年）Nuc Acid Res Symp Ser 225〜232を参
照）。
【０３４７】
ミメティック
本発明で用いられる用語「ミメティック」は、あらゆる化学物質を意味し、例えば、これらに限定されないが、標的に対して参照物質と同質の活性または作用を有するペプチド、ポリペプチド、抗体、またはその他の有機化学物質である。すなわち、ミメティックは、既知の作用物質と機能的に同等であり得る。
【０３４８】
化学誘導体
本発明で用いられる用語「誘導体」または「誘導体化された（derivatised）」は、作
用物質の化学修飾を含む。このような化学修飾の一例は、ハロ基、アルキル基、アシル基またはアミノ基で水素を置換することである。
【０３４９】
化学修飾
本発明の一実施形態において、作用物質は、化学修飾された物質でもよい。
作用物質の化学修飾は、作用物質と標的との間の水素結合相互作用、電荷相互作用、疎水性相互作用、ファン・デル・ワールス相互作用または双極子相互作用を増強または減少させることができる。
一つの観点において、同定された作用物質は、その他の化合物を開発するためのモデル（例えばテンプレート）として作用し得る。
【０３５０】
標的
本発明の一つの観点において、Ｄ３ドーパミン受容体は、Ｄ３ドーパミン受容体を活性化することができる作用物質を同定するためのスクリーニングにおける標的として用いることができる。これに関して、標的は、配列番号１で示されるヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列、または、それらの変異体、相同体、誘導体もしくは断片を含んでもよいし、または、配列番号２で示されるアミノ酸配列、または、それらの変異体、相同体、誘導体もしくは断片を含んでもよく、これらは、組換えおよび／または合成手段、または、上記と同じものを含む発現産物より作製される。
【０３５１】
あるいは、Ｄ３ドーパミン受容体を標的として用いて、ドーパミンＤ３受容体の活性化を介した、陰茎海綿体圧の増加、および／または、膣、陰核および陰唇の充血を起こす女性生殖器の血流の増加に介在する作用物質を同定することができる。また、Ｄ３ドーパミン受容体を標的として用いて、ドーパミンＤ３受容体の活性化を介して性的欲求を回復させることができる作用物質を同定することができる。これらいずれの場合においても、標的は、適切な組織抽出物であり得る。
標的は、このような組織および／または組換え標的の組み合わせでもよい。
【０３５２】
組換え方法
典型的には、本発明の作用物質は、組換えＤＮＡ技術により作製することができる。
一実施形態において、好ましくは、このような作用物質は、ドーパミンＤ３受容体アゴニストである。ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、組換えＤＮＡ技術により作製するこ
とができる。
【０３５３】
アミノ酸配列
本発明で用いられる用語「アミノ酸配列」は、用語「ポリペプチド」および／または用語「タンパク質」の同義語である。場合によっては、用語「アミノ酸配列」は、用語「ペプチド」の同義語である。場合によっては、用語「アミノ酸配列」は、用語「タンパク質」の同義語である。
アミノ酸配列は、適切な源から単離して作製してもよいし、または、合成により作製してもよいし、組換えＤＮＡ技術の使用により作製してもよい。
【０３５４】
一つの観点において、本発明は、１またはそれ以上の作用物質および／またはそれらの誘導体を同定するための分析において、標的として作用し得るアミノ酸配列を提供する。
好ましくは、標的はドーパミンＤ３受容体である。
好ましくは、ドーパミンＤ３受容体は、単離されたドーパミンＤ３受容体であり、および／または、精製されたものであり、および／または、非天然のものである。
【０３５５】
本発明のドーパミンＤ３受容体は、実質的に単離された形態であり得る。当然ながら、ドーパミンＤ３受容体は、意図された受容体の目的に干渉しないと思われ、そしてさらに実質的に単離されたとみなされるキャリアーまたは希釈剤と混合されてもよい。本発明のドーパミンＤ３受容体はまた、実質的に純粋な形態でもよく、この場合、一般的に、製剤中にドーパミンＤ３受容体が含まれ、製剤中、９０％、例えば９５％、９８％または９９％を超過するドーパミンＤ３受容体は、配列番号１の発現により得られたペプチド、または、それらの変異体、相同体、誘導体または断片、または、配列番号２で示されるアミノ酸配列を含むペプチド、または、それらの変異体、相同体、誘導体もしくは断片である。
【０３５６】
ヌクレオチド配列
本発明で用いられる用語「ヌクレオチド配列」は、用語「ポリヌクレオチド」の同義語である。
ヌクレオチド配列は、ゲノムの、または合成の、または、組換え由来のＤＮＡまたはＲＮＡであり得る。ヌクレオチド配列は、二本鎖、センスもしくはアンチセンス鎖を示す一本鎖、またはそれらの組み合わせであり得る。
【０３５７】
いくつかの用途に関しては、好ましくは、ヌクレオチド配列は、ＤＮＡである。
いくつかの用途に関しては、好ましくは、ヌクレオチド配列は、組換えＤＮＡ技術（例えば組換えＤＮＡ）の使用により作製される。
いくつかの用途に関しては、好ましくは、ヌクレオチド配列は、ｃＤＮＡである。
いくつかの用途に関しては、好ましくは、ヌクレオチド配列は、この観点に関して、天然に存在する形態と同じであり得る。
【０３５８】
一つの観点において、本発明は、１またはそれ以上の作用物質および／またはそれらの誘導体を同定するための分析において、標的として作用し得る物質をコードするヌクレオチド配列を提供する。
本発明の一つの観点において、ヌクレオチド配列は、ドーパミンＤ３受容体をコードする。
【０３５９】
当業者であれば理解できると思われるが、多数の様々なヌクレオチド配列が、遺伝子コードの縮重の結果として同じ標的をコードする可能性がある。加えて、当然ながら、当業者は、慣例的な技術を用いて、本発明のヌクレオチド配列によりコードされる実質的に活性に影響を与えないヌクレオチド置換を行い、標的が発現され得るいずれかの特定の宿主生物のコドンの利用を反映することができる。従って、添付の配列リストに記載のヌクレオチド配列に関して、用語「変異体」、「相同体」または「誘導体」は、得られたヌクレオチド配列が、本発明に係る機能的な標的をコードする場合（または、前記作用物質がヌクレオチド配列またはアミノ酸配列を含む場合、本発明に係る作用物質をコードする場合）、配列からの、または、配列への１つ（またはそれ以上）の核酸の置換、変異、改変、交換、欠失または付加のいずれかを含む。
【０３６０】
上述したように、配列相同性に関して、好ましくは、本発明においてクロスリファレンスされたＤ３受容体配列と、少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％の相同性を有する。より好ましくは、少なくとも９５％、より好ましくは少なくとも９８％の相同性を有する。ヌクレオチド相同性の比較は、上述した通りに行うことができる。好ましい配列の比較プログラムは、上述のＧＣＧウィスコンシンベストフィットプログラムである。
【０３６１】
デフォルトスコアリングマトリックスにおいて、それぞれの同一なヌクレオチドに対するマッチ値は１０、および、それぞれのミスマッチに対しては−９である。デフォルトギャップクリエーションペナルティーは−５０であり、デフォルトギャップ伸長ペナルティーはそれぞれのヌクレオチドに対して−３である。
【０３６２】
本発明はまた、本発明で提供される配列またはそれらの変異体、断片もしくは誘導体のいずれか、または、上記いずれかの相補体に選択的にハイブリダイズすることができるヌクレオチド配列を含む。ヌクレオチド配列は、好ましくは長さが少なくとも１５個のヌクレオチド、より好ましくは長さが少なくとも２０、３０、４０または５０個のヌクレオチドである。これら配列は、例えば診断キットでプローブとして用いることができる。
【０３６３】
変異体／相同体／誘導体
ここで述べられた特定のヌクレオチド配列およびそれから誘導できるアミノ酸配列に加えて、本発明はまた、それらの変異体、相同体、および誘導体の使用を含む。この場合、用語「相同性」は、「同一性」に等しいものとする。
【０３６４】
本発明の状況において、相同配列は、少なくとも７５、８５または９０％の同一性、好ましくは少なくとも９５または９８％の同一性を有する可能性があるアミノ酸配列を含むものとする。特に、典型的には、相同性は、活性に必須であることがわかっている配列の領域に関するものとみなすべきである。本発明に関して、類似性（すなわち類似の化学特性／機能を有するアミノ酸残基）を相同性とみなすことができるが、配列同一性に関して相同性を表すことが好ましい。
【０３６５】
相同性は、目で、またより一般的には、簡単に利用できる配列比較プログラムを用いて、比較することができる。これら市販のコンピュータープログラムにより、２またはそれ以上の配列間の相同性（％）を計算することができる。
【０３６６】
相同性（％）は、連続した配列について計算することができ、すなわち１つの配列を他の配列と並べ、１つの配列中のそれぞれのアミノ酸と、対応する他の配列中のアミノ酸、１つの残基とを同時に直接的に比較する。これは、「ギャップ無し（ungapped）」アラインメントという。典型的には、このようなギャップ無しアラインメントは、比較的長さが短い残基のみに行われる。
【０３６７】
これは極めて簡単で矛盾のない方法であるが、例えば、その他の点では同一な対の配列において、１つの挿入または欠失がなされることにより、それに続くアミノ酸残基がアラインメントからずれることを考慮し損ない、そのために、全体的なアラインメントが行われる際に相同性（％）が大きく減少する恐れがある。その結果として、ほとんどの配列比
較方法は、全部の相同性スコアに過剰なペナルティーを必要とすることなく、起こり得る挿入および欠失を考慮した最適アラインメントが作製されるように設計されている。これは、局部的な相同性を最大化するように「ギャップ」を配列アラインメントに挿入することにより達成される。
【０３６８】
しかしながら、このようなより複雑な方法は、同数の同一なアミノ酸に関して、可能な限り少ないギャップを含む配列アラインメント（２つの比較配列間でより高い関連を示す）が、多くのギャップを含む配列アラインメントより高いスコアを達成するように、アラインメント中に生じる各ギャップに「ギャップペナルティー」を割り当てる。典型的には、ギャップの存在に対しては比較的高いコストをチャージし、ギャップ中のそれぞれ後に続く残基に対してはより小さいペナルティーをチャージする「アフィンギャップコスト」が用いられる。これは、最も一般的に用いられるギャップスコアリングシステムである。もちろん、高いギャップペナルティーにより、より少ないギャップを含む最適化されたアラインメントが得られる可能性がある。多くのアラインメントプログラムでは、ギャップペナルティーを改変することができる。しかしながら、配列比較用のソフトウェアを用いる場合、デフォルト値を用いることが好ましい。例えばＧＣＧウィスコンシンベストフィットパッケージ（以下を参照）を用いる場合、アミノ酸配列に関するデフォルトギャップペナルティーは、ギャップに対して−１２であり、各伸長に対しては−４である。
【０３６９】
それゆえに、最大相同性（％）の計算は、ギャップペナルティーを考慮した最適なアラインメントの作製を必要とする。このようなアラインメントを実施するのに適切なコンピュータープログラムは、ＧＣＧウィスコンシンベストフィットパッケージである（ウィスコンシン大学，米国；Devereux等，1984年，Nucleic Acids Research 12：387）。配列比較を行うことができるその他のソフトウェアの例としては、これらに限定されないが、ＢＬＡＳＴパッケージ（Ausubel等，1999年（上記の通り）第１８章を参照）、ＦＡＳＴＡ（Atschul等，1990年, J. Mol. Biol.，403〜410）、および、ＧＥＮＥＷＯＲＫＳの一式の比較ツールが挙げられる。ＢＬＡＳＴとＦＡＳＴＡはいずれも、オフラインおよびオンライン検索として利用可能である（Ausubel等，1999年（上述の通り），7-58〜7-60頁を参照）。しかしながら、ＧＣＧベストフィットプログラムを用いることが好ましい。新しいツールの、いわゆるＢＬＡＳＴ２シークエンスもタンパク質とヌクレオチド配列とを比較するのに利用可能である（FEMS Microbiol Lett，1999年，174（2）：247〜50；FEMS Microbjol Lett，1999年，177（1）；187〜8、および、tatiana＠ncbi. Nlm. nih. govを
参照）。
【０３７０】
最終的な相同性（％）を同一性に関して測定することができるが、典型的には、アラインメントプロセスそれ自体は、全か無か（all-or-nothing）の対の比較に基づくものではない。その代わりに、スコアを化学類似性または進化距離に基づく各ペアワイズ比較に割り当てるスケールド類似性スコアマトリックスが一般的に用いられる。一般的に用いられるこのようなマトリックスの例は、ＢＬＯＳＵＭ６２マトリックスであり、これは、ＢＬＡＳＴの一式のプログラムに関するデフォルトマトリックスである。一般的に、ＧＣＧウィスコンシンプログラムは、一般のデフォルト値、または、特注のシンボル比較テーブル（供給される場合）（さらなる詳細に関してはユーザーマニュアルを参照）のいずれかを用いる。ＧＣＧパッケージに関しては、一般のデフォルト値を用いることが好ましく、または、その他のソフトウェアの場合は、デフォルトマトリックス、例えばＢＬＯＳＵＭ６２を用いることが好ましい。
【０３７１】
ソフトウェアにより最適なアラインメントが作製されたら、相同性（％）、好ましくは配列同一性（％）を計算することができる。典型的には、ソフトウェアは、配列比較の一環としてこの計算を行い、数値結果を出す。
【０３７２】
配列はまた、サイレント変化をもたらし、機能的に同等な物質が得られるアミノ酸残基の欠失、挿入または置換を有してもよい。二次的な物質の結合活性が保持される限り、残基の極性、電荷、溶解性、疎水性、親水性および／または両親媒性特性における類似性に基づき計画的なアミノ酸置換を行ってもよい。例えば、負電荷を有するアミノ酸としては、アスパラギン酸およびグルタミン酸が挙げられる；正電荷を有するアミノ酸としては、リシンおよびアルギニンが挙げられる；および、類似の親水性値を有する、主要な基が極性非電荷であるアミノ酸としては、ロイシン、イソロイシン、バリン、グリシン、アラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、およびチロシンが挙げられる。
【０３７３】
例えば以下の表に従って、保存的置換を行ってもよい。第二列で同じブロックであり、好ましくは第三列で同じ行に記載のアミノ酸は、互いに置換することができる：
【表９】
2005516014.tif 000024
【０３７４】
本発明はまた、相同置換を含み（ここで置換と交換はいずれも、現存するアミノ酸残基をその代わりの残基で交換することを意味する）、相同置換、すなわち塩基性と塩基性、酸性と酸性、極性と極性などのような同種同士の置換が起こり得る。非相同置換、すなわちある残基クラスから他の残基クラスへの置換、あるいは、非天然のアミノ酸の含有を伴う置換が起こることもあり、非天然のアミノ酸としては、例えば、オルニチン（以下、Ｚと称する）、ジアミノ酪酸オルニチン（以下、Ｂと称する）、ノルロイシンオルニチン（以下、Ｏと称する）、ピリル（pyriyl）アラニン、チエニルアラニン、ナフチルアラニン、および、フェニルグリシンが挙げられる。
【０３７５】
非天然のアミノ酸による置換を起こしてもよく、非天然のアミノ酸としては、例えば、α*およびα−二置換*アミノ酸、Ｎ−アルキルアミノ酸*、乳酸*、天然アミノ酸のハロゲン化物誘導体、例えばトリフルオロチロシン*、ｐ−Ｃｌ−フェニルアラニン*、ｐ−Ｂｒ−フェニルアラニン*、ｐ−ｌ−フェニルアラニン*、Ｌ−アリル−グリシン*、β−アラ
ニン*、Ｌ−α−アミノ酪酸*、Ｌ−γ−アミノ酪酸*、Ｌ−α−アミノイソ酪酸*、Ｌ−ε−アミノカプロン酸#、７−アミノヘプタン酸*、Ｌ−メチオニンスルホン#*、Ｌ−ノルロイシン*、Ｌ−ノルバリン*、ｐ−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニン*、Ｌ−ヒドロキシプロ
リン*、Ｌ−チオプロリン*、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）のメチル誘導体、例えば４−メチル−Ｐｈｅ*、ペンタメチル−Ｐｈｅ*、Ｌ−Ｐｈｅ（４−アミノ)*、Ｌ−Ｔｙｒ（メチル)*、Ｌ−Ｐｈｅ（４−イソプロピル)*、Ｌ−Ｔｉｃ（１,２,３,４−テトラヒドロイソ
キノリン−３−カルボン酸)*、Ｌ−ジアミノプロピオン酸#、および、Ｌ−Ｐｈｅ（４−
ベンジル)*が挙げられる。記号＊は、上記考察（相同または非相同置換に関する）の目的で、誘導体の疎水性特性を示すものとして用いられており、一方で、＃は、誘導体の親水性特性を示すものとして用いられており、＃＊は、両親媒性特性を示す。
【０３７６】
変異アミノ酸配列は、適切なスペーサー基を含んでもよく、このようなスペーサー基は、配列のいずれかの２つのアミノ酸残基間に挿入することができ、スペーサー基としては、例えば、アルキル基、例えばメチル、エチルまたはプロピル基、加えて、アミノ酸スペーサー、例えばグリシンまたはβ−アラニン残基が挙げられる。さらなる形態のバリエーションとしては、１またはそれ以上のアミノ酸残基が存在するペプトイド型があり、これは当業者にはよく知られている。疑義を避けるため、「ペプトイド型」は、α−炭素置換基がα−炭素ではなく残基の窒素原子にある変異アミノ酸残基を意味するものとして用いられる。ペプトイド形態でペプチドを製造する方法は、当業界既知であり、例えばSimon RJ等，PNAS（1992年）89（20），9367〜9371 and Horwell DC，Trends Biotechnol.(1995年）13（4），132〜134がある。
【０３７７】
ハイブリダイゼーション
本発明で用いられる用語「ハイブリダイゼーション」は、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）テクノロジーで行われるような「核酸の鎖を塩基対により相補鎖と結合させるプロセス」、および、増幅プロセスを含むべきである。
【０３７８】
本発明で示されるヌクレオチド配列またはそれらの相補体に選択的にハイブリダイズ可能な本発明のヌクレオチド配列は、一般的に、本発明で提供される対応する相補ヌクレオチド配列に対して少なくとも２０、好ましくは少なくとも２５または３０、例えば少なくとも４０、６０もしくは１００またはそれ以上の連続したヌクレオチドの領域において、少なくとも７５％、好ましくは少なくとも８５％または９０％、より好ましくは少なくとも９５％または９８％相同であり得る。
【０３７９】
用語「選択的にハイブリダイズ可能な」とは、ヌクレオチド配列が、プローブとして用いられる場合、標的ヌクレオチド配列が、バックグラウンドを顕著に超えるレベルでプローブにハイブリダイズすることがわかっている条件下で用いられることを意味する。バックグラウンドのハイブリダイゼーションは、例えばスクリーニングされるｃＤＮＡまたはゲノムＤＮＡライブラリー中に存在する他のヌクレオチド配列のために起こり得る。この現象において、バックグラウンドは、標的ＤＮＡを用いて観察された特異的な相互作用の１０倍未満、好ましくは１００倍未満の強度の、プローブとライブラリーの非特異的ＤＮＡメンバーとの相互作用により生じるシグナルレベルを示す。例えば、相互作用の強度は、例えば32Ｐでプローブを放射標識することにより測定することができる。
【０３８０】
ハイブリダイゼーション条件は、BergerおよびKimmel（1987年，Guide to Molecular Cloning Techniques，Methods in Enzymology，第152巻，アカデミックプレス，サンディ
エゴ，カリフォルニア州）が教示するように、核酸結合複合体の融解温度（Ｔｍ）に基づいており、定義された「ストリンジェンシー」が得られる（以下で説明する）。
【０３８１】
典型的には、最大ストリンジェンシーは、約Ｔｍ−５℃で生じ（プローブのＴｍより５℃低い）；高ストリンジェンシーは、Ｔｍより約５℃〜１０℃低く；中ストリンジェンシーは、Ｔｍより約１０℃〜２０℃低く；および、低ストリンジェンシーは、Ｔｍより約２０℃〜２５℃低い。当業者にはよく理解できることであるが、最大ストリンジェンシーでのハイブリダイゼーションは、同一なヌクレオチド配列を同定または検出するのに用いることができ、一方で、中（または低）ストリンジェンシーでのハイブリダイゼーションは、類似した、または関連したポリヌクレオチド配列を同定または検出するのに用いることができる。
【０３８２】
好ましい観点において、本発明は、ストリンジェントな条件下で（例えば６５℃、０.
１×ＳＳＣ｛１×ＳＳＣ＝０.１５ＭのＮａＣｌ，０.０１５Ｍクエン酸三ナトリウム，ｐＨ７.０｝）、本発明のヌクレオチド配列にハイブリダイズ可能なヌクレオチド配列を含
む。本発明のヌクレオチド配列が二本鎖の場合、二本鎖の両方の鎖は、個々に、または、組み合わせて、本発明に含まれる。ヌクレオチド配列が一本鎖である場合、当然ながら、そのヌクレオチド配列の相補配列も本発明の範囲内である。
【０３８３】
本発明の配列と１００％相同ではないが本発明の範囲内であるヌクレオチド配列を多数の方法により得ることができる。本発明で説明される配列のその他の変異体は、例えば各種の源より作製されたＤＮＡライブラリーをプロービングすることによって得ることができる。加えて、その他のウイルスの、細菌の、または細胞の相同体、特に哺乳動物細胞（例えばラット、マウス、ウシおよび霊長類の細胞）で見出される細胞の相同体を得ることができ、このような相同体およびそれらの断片は、一般的に、本発明の配列リストで示される配列に選択的にハイブリダイズ可能である。このような配列は、他の動物種からのゲノムＤＮＡライブラリーから作製されたｃＤＮＡライブラリーをプロービングすることにより、および、このようなライブラリーを、中〜高ストリンジェンシーの条件下で本発明に記載のヌクレオチド配列の全部または一部を含むプローブでプロービングすることにより得ることができる。同様の原理を用いて、本発明のアミノ酸および／またはヌクレオチド配列の相同体種および対立遺伝子変異体を得ることができる。
【０３８４】
変異体および相同体株／種はディジェネレートＰＣＲにより得てもよく、このようなディジェネレートＰＣＲは、標的配列に対して設計されたプライマーを本発明の配列内の保存されたアミノ酸配列をコードする変異体および相同体に用いる。保存された配列は、例えば数々の変異体／相同体からのアミノ酸配列を並べることによって予測することができる。配列アラインメントは、当業界既知のコンピューターソフトウェアを用いて行うことができる。例えば、ＧＣＧウィスコンシンＰｉｌｅＵｐプログラムが広く用いられている。ディジェネレートＰＣＲで用いられるプライマーは、１またはそれ以上のディジェネレート位を含み、既知の配列に対する１つの配列プライマーを用いて、配列をクローニングするのに用いられる条件より低いストリンジェンシー条件で用いることができる。
【０３８５】
あるいは、このようなヌクレオチド配列は、特徴付けられた配列、例えば本発明の配列リストの配列番号１に記載のヌクレオチド配列の部位特異的な変異誘発により得ることもできる。これは、例えばヌクレオチド配列が発現される特定の宿主細胞にとってコドンの選択が最適化されるように配列に対してサイレントコドンの変更が必要な場合、有用である。その他の配列の変更は、制限酵素の認識部位を導入するために、または、ヌクレオチド配列によりコードされるタンパク質の活性を変えるために、望ましい場合がある。
【０３８６】
本発明のヌクレオチド配列は、プライマー、例えばＰＣＲプライマー、オルタナティブ増幅反応のためのプライマー、例えば放射性または非放射性の標識を用いて通常の手段により、露出した標識で標識したプローブを作製するのに用いることができ、または、ヌクレオチド配列をベクターにクローニングしてもよい。このようなプライマー、プローブおよびその他の断片の長さは、少なくとも１５、好ましくは少なくとも２０、例えば少なくとも２５、３０または４０個のヌクレオチド長が可能であり、また、本発明で用いられる用語「本発明のヌクレオチド配列」に含まれる。
【０３８７】
本発明に係るＤＮＡポリヌクレオチドやプローブのようなヌクレオチド配列は、組換えにより、合成により、または、当業者が利用可能なあらゆる手段により作製することができる。これらはまた、標準的な技術によりクローニングすることもできる。
【０３８８】
一般的に、プライマーは、所望の核酸配列の段階的な製造（１回に１つのヌクレオチド）を含む合成手段により製造することができる。自動化技術を用いてこれを達成するための技術は、当業界において簡単に利用できる。
【０３８９】
より長いヌクレオチド配列は、一般的に、組換え手段を用いて、例えばＰＣＲ（ポリメラーゼ連鎖反応）クローニング技術を用いて製造することができる。この技術は、プライマー対を作製すること（例えば約１５〜３０個のヌクレオチドからなる）、クローニングが望まれる標的配列の領域をフランキングすること、プライマーと動物またはヒト細胞か
ら得られたｍＲＮＡまたはｃＤＮＡとを接触させること、所望の領域を増幅させるような条件下でポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行うこと、増幅された断片を単離すること（例えばアガロースゲルで反応混合物を精製することにより）、および、増幅されたＤＮＡを回収することを含み得る。増幅されたＤＮＡが適切なクローニングベクターにクローニングされるように、適切な制限酵素の認識部位を含むようにプライマーを設計することができる。
【０３９０】
遺伝子コードの固有の縮重のために、実質的に同じまたは機能的に同等なアミノ酸配列をコードするその他のＤＮＡ配列を、標的配列をクローニングし発現させるのに用いることができる。当業者には理解できることであるが、特定の発現系に関しては、天然には生じないコドンで標的配列を作製することが有利である場合がある。特定の原核性または真核性宿主にとって好ましいコドン（Murray E等（1989年）Nuc Acid Res 17：477〜508）
を選択して、例えば、標的の発現速度を高めたり、望ましい特性（例えば天然に存在する配列から生産された転写物より長い半減期）を有する組換えＲＮＡ転写物を生産したりすることができる。
【０３９１】
ベクター
本発明の一実施形態において、作用物質（すなわちドーパミンＤ３受容体アゴニスト）は、個体に直接投与することができる。
本発明の他の実施形態において、本発明の作用物質をコードするヌクレオチド配列を含むベクターが個体に投与される。
好ましくは、遺伝子ベクターを用いて、組換え作用物質が作製される、および／または、標的部位に送達される。
【０３９２】
当業界で周知の通り、ベクターは、ある環境から他の環境への物体の移動を可能にするため、または、容易にするためのツールである。本発明によれば、一例として、本発明のヌクレオチド配列を含むベクター、および／または、本発明のヌクレオチド配列によりコードされた本発明のタンパク質を発現するベクターを複製するために、組換えＤＮＡ技術で用いられる数々のベクターは、物体、例えばＤＮＡのセグメント（例えば異種ＤＮＡセグメント、例えば異種ｃＤＮＡセグメント）を、宿主および／または標的細胞に移動させる。組換えＤＮＡ技術で用いられるベクターの例としては、これらに限定されないが、プラスミド、染色体、人工染色体またはウイルスが挙げられる。
【０３９３】
用語「ベクター」は、発現ベクターおよび／または形質転換ベクターを含む。
用語「発現ベクター」は、インビボまたはインビトロ／エクスビボで発現可能な構築物を意味する。
用語「形質転換ベクター」は、１つの種から他の種へ移動可能な構築物を意味する。
【０３９４】
裸のＤＮＡ
男性性機能障害、例えばＭＥＤまたは女性性機能障害、例えばＦＳＡＤを治療するのに用いられる本発明の作用物質をコードするヌクレオチド配列を含むベクターは、「裸の核酸構築物」として直接投与することができ、好ましくは宿主細胞ゲノムに相同なフランキング配列をさらに含む。
【０３９５】
本発明で用いられる用語「裸のＤＮＡ」は、本発明の作用物質をコードするヌクレオチド配列を、その生産を制御するための短いプロモーター領域を共に含むプラスミドを意味する。これは、プラスミドがいずれの送達ビヒクルにも維持されていないため「裸の」ＤＮＡといわれる。このようなＤＮＡプラスミドが宿主細胞（例えば真核細胞）に入ると、それがコードするタンパク質（例えば本発明の作用物質）は細胞内で転写され、翻訳される。
【０３９６】
非ウイルス性の送達
あるいは、本発明のヌクレオチド配列を含むベクター、または、本発明の作用物質（すなわち選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニスト）、または、本発明の標的（すなわち選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニスト）は、当業界既知の多種多様な非ウイルス性の技術、例えばトランスフェクション、形質転換、エレクトロポレーション、および、パーティクルガン（biolistic）による形質転換を用いて、適切な宿主細胞に導入することができる
。
【０３９７】
本発明で用いられる用語「トランスフェクション」は、遺伝子を標的の哺乳動物細胞に送達するための非ウイルス性ベクターを用いるプロセスを意味する。
典型的なトランスフェクション方法としては、エレクトロポレーション、ＤＮＡパーティクルガン（biolistic）、脂質が介在するトランスフェクション、圧縮した（compacted）ＤＮＡが介在するトランスフェクション、リポソーム、イムノリポソーム、リポフェクチン、カチオン性物質介在、カチオンフェイシャル両親媒性物質（cationic facial amphiphiles）（ＣＦＡ）（ネイチャーBiotechnology，1996年，14；556），多価カチオン、例えばスペルミン、カチオン脂質、または、ポリリジン、１,２,−ビス（オレオイルオキシ）−３−（トリメチルアンモニオ）プロパン（ＤＯＴＡＰ）−コレステロール複合体（WolffおよびTrubetskoy，1998年，ネイチャーBiotechnology, 16：421）、及び、それら
の組み合わせが挙げられる。
【０３９８】
哺乳動物細胞による裸の核酸構築物の摂取は、数々の既知のトランスフェクション技術、例えばトランスフェクション剤の使用を含む技術により増強することができる。トランスフェクション剤の例としては、カチオン性物質（例えばリン酸カルシウム、および、ＤＥＡＥ−デキストラン）、および、リポフェクタント（lipofectant）（例えばlipofectamTM、および、transfectamTM）が挙げられる。典型的には、核酸構築物を、トランスフェクション剤と混合して組成物を作製する。
【０３９９】
ウイルスベクター
あるいは、本発明の作用物質もしくは標的または本発明のヌクレオチド配列を含むベクターは、当業界既知の多種多様なウイルス技術、例えば、レトロウイルス、単純疱疹ウイルスおよびアデノウイルスのような組換えウイルスベクターを用いた感染を用いて、適切な宿主細胞に導入することができる。
【０４００】
好ましくは、ベクターは組換えウイルスベクターである。適切な組換えウイルスベクターとしては、これらに限定されないが、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター、ヘルペスウイルスベクター、レトロウイルスベクター、レンチウイルスベクター、バキュロウイルスベクター、ポックスウイルスベクター、または、パルボウイルスベクター（Kestler等，1999年，Human Gene Ther 10（10）：1619〜32を参照）が挙げられる。ウイルスベクターの場合、本発明の作用物質をコードするヌクレオチド配列の送達は、標的細胞のウイルス感染を介する。
【０４０１】
標的化されたベクター
用語「標的化された（targeted）ベクター」は、細胞に感染／トランスフェクト／導入させる能力、または、宿主および／または標的細胞で発現させる能力が、宿主生物（通常、共通または類似の表現型を有する細胞）の特定の細胞型に限定されるベクターを意味する。
【０４０２】
複製ベクター
本発明の作用物質（すなわち選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストおよび／または補
助剤、例えばＰＤＥｉまたはＰＤＥ５ｉ）または標的（例えばドーパミンＤ３受容体）をコードするヌクレオチド配列を、組換え複製可能なベクターに組み込んでもよい。このようなベクターは、適合する宿主細胞でヌクレオチド配列を複製するのに用いることができる。従って、本発明の一実施形態において、本発明は、本発明のヌクレオチド配列を複製可能なベクターに導入すること、このベクターを適合する宿主細胞に導入すること、および、ベクターの複製が起こるような条件下で宿主細胞を培養することにより本発明の標的を製造する方法を提供する。ベクターは、宿主細胞から回収することができる。
【０４０３】
発現ベクター
好ましくは、ベクターに挿入された本発明の作用物質、または、本発明のヌクレオチド配列、または、本発明の標的は、コーディング配列（例えば本発明のＤ３ドーパミン受容体のコーディング配列）の宿主細胞による発現を可能にするコントロール配列に操作可能に結合しており、すなわち該ベクターは、発現ベクターである。本発明の作用物質、または、宿主組換え細胞によって生産された標的は、用いられた配列および／またはベクターに応じて、分泌されてもよいし、または、細胞内に含まれていてもよい。いずれも当業者に理解されるように、本発明の作用物質または標的をコードする配列を含む発現ベクターは、本発明の作用物質または標的をコードする配列を特定の原核または真核細胞の膜を介して直接的に分泌させるシグナル配列と共に設計することができる。
【０４０４】
インビトロでの発現
本発明のベクターを適切な宿主細胞および／または標的細胞（以下で説明する）に形質転換またはトランスフェクトして、本発明の作用物質または標的を発現させることができる。このプロセスは、本発明の作用物質または標的をコードするコーディング配列をベクターにより発現させるような条件下で、発現ベクターで形質転換した宿主細胞および／または標的細胞を培養すること、および、場合により、発現された本発明の作用物質または標的を回収すること、を含み得る。このようなベクターとしては、例えば、複製起点、場合により、前記ポリヌクレオチド発現のためのプロモーター、および、場合によりプロモーターのレギュレーターを備えたプラスミドまたはウイルスベクターが可能である。このようなベクターは、１またはそれ以上の選択マーカー遺伝子、例えば、細菌プラスミドの場合はアンピシリン耐性遺伝子、または、哺乳動物ベクターにはネオマイシン耐性遺伝子、を含み得る。本発明の作用物質または本発明の標的の発現は、断続的に生産されるような構成的発現であってもよいし、または、発現を開始させる刺激を必要とする誘導性発現であってもよい。誘導性発現の場合、本発明の作用物質または標的の生産は、必要なときに、例えば、誘導物質（例えばデキサメタゾンまたはＩＰＴＧ）を培地に加えることにより開始させることができる。
【０４０５】
融合タンパク質
ドーパミンＤ３受容体または本発明の作用物質（すなわち選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニスト）は、融合タンパク質として発現させ、抽出および精製、および／または、本発明の作用物質またはドーパミンＤ３受容体標的の個体への送達を補助することができ、および／または、作用物質のスクリーンへの展開を容易にすることができる。融合タンパク質パートナーの例としては、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、６×Ｈｉｓ、ＧＡＬ４（ＤＮＡ結合および／または転写活性化ドメイン）、および、β−ガラクトシダーゼが挙げられる。また、融合タンパク質パートナーと対象のタンパク質配列との間にタンパク分解の切断部位を含ませることも便利であり、それにより融合タンパク質配列を除去することができる。好ましくは、融合タンパク質は、標的の活性を妨害しない。
【０４０６】
融合タンパク質は、本発明の物質に融合した抗原または抗原性の決定因子を含んでもよく、この実施形態において、融合タンパク質は、免疫系の全身性の刺激をもたらす意味で
アジュバントとして作用する物質を含む天然に存在しない融合タンパク質であり得る。抗原または抗原性の決定因子は、上記物質のアミノ末端またはカルボキシ末端のいずれかに結合し得る。
【０４０７】
本発明の他の実施形態において、アミノ酸配列を異種配列にライゲートして、融合タンパク質をコードさせることができる。例えば、物質の活性に作用し得る作用物質に関してペプチドライブラリーをスクリーニングするために、市販の抗体により認識される異種エピトープを発現するキメラ物質をコードすることが、有用であり得る。
【０４０８】
宿主細胞
多種多様の宿主細胞は、作用物質（例えば本発明の作用物質）または本発明のドーパミンＤ３受容体標的をコードするヌクレオチド配列を発現させるために用いることができる。これら細胞は、原核性または真核性の宿主細胞のいずれでもよい。適切な宿主細胞としては、細菌、例えばＥ.ｃｏｌｉ、酵母、糸状菌、昆虫細胞、哺乳動物細胞、典型的には、不死化した、例えばマウス、ＣＨＯ、ヒトおよびサル細胞系およびそれらの誘導体が挙げられる。
【０４０９】
本発明の範囲内の適切な発現宿主の例は、菌類、例えばアスぺルギルス種（例えば、欧州特許第０１８４４３８号（Ａ）および欧州特許第０２８４６０３号（Ａ）で説明されたもの）、および、トリコデルマ種；細菌、例えばバチルス種（例えば、欧州特許第０１３４０４８号（Ａ）および欧州特許第０２５３４５５号（Ａ）で説明されたもの）、ストレプトマイセス種、および、シュードモナス種；ならびに、酵母、例えばKluyveromyces種（例えば、欧州特許第００９６４３０号（Ａ）および欧州特許第０３０１６７０号（Ａ）で説明されたもの）、および、サッカロミセス種である。一例として、典型的な発現宿主は、アスぺルギルス−ニガー、Aspergillus niger var. tubigenis、Aspergillus niger var. awamori、Aspergillus aculeatis、アスペルギルス−ニデュランス、アスペルギルス−オリゼ、Trichoderma reesei、バチルス−ズブチリス、バチルス−リケニフォルミス、バチルス−アミロリケファシエンス、Kluyveromyces lactis、および、サッカロミセス−セレビジエから選択することができる。
【０４１０】
適切な宿主細胞、例えば酵母、真菌、および植物宿主細胞を使用することにより、翻訳後修飾（例えばミリストイル化、グリコシル化、トランケーション、ラピデーション（lapidation）、および、チロシン、セリンまたはスレオニンリン酸化）を行うことができ、これは、本発明の組換え発現産物に、最適な生物活性を付加する必要がある可能性もあるためである。
【０４１１】
好ましい宿主細胞は、発現産物をプロセシングして、適切な成熟ポリペプチドを生産することができる。プロセシングの例としては、これらに限定されないが、グリコシル化、ユビキチン化、ジスルフィド結合形成、および、一般的な翻訳後修飾が挙げられる。
【０４１２】
抗体
本発明の一実施形態において、作用物質は抗体であってもよく、それに加えて、または、その代わりに、標的も抗体であってもよい。
抗体は、標準的な技術、例えば本発明の物質を用いた免疫化、または、ファージディスプレイライブラリーの使用により、生産することができる。
【０４１３】
本発明の目的において、用語「抗体」は、そうではないことが特に明記されていない限り、これらに限定されないが、ポリクローナル、モノクローナル、キメラ、単鎖、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ発現ライブラリーから製造された断片、および、それらのミメティックを含む。このような断片としては、標的物質への結合活性を保持する完全抗体の断片、Ｆｖ、
Ｆ（ａｂ′）およびＦ（ａｂ′）2断片、ならびに、単鎖抗体（ｓｃＦｖ）、融合タンパ
ク質、およびその他の抗体の抗原結合部位を含む合成タンパク質が挙げられる。その上、抗体およびそれらの断片は、ヒト化抗体が可能である。中和抗体、すなわち、物質ポリペプチドの生物活性を阻害する抗体が診断および治療に特に好ましい。
【０４１４】
ポリクローナル抗体が望ましい場合、選択された哺乳動物（例えば、マウス、ウサギ、ヤギ、ウマなど）は、同定された本発明の作用物質および／または物質から得ることができるエピトープを有する免疫原性ポリペプチドで免疫化される。宿主の種類に応じて、様々なアジュバントが、免疫反応を高めるのに用いることができる。このようなアジュバントとしては、これらに限定されないが、フロイント、ミネラルゲル、例えば水酸化アルミニウム、および界面活性物質、例えばリゾレシチン、プルロニックポリオール、ポリアニオン、ペプチド、油乳濁液、キーホールリンペットヘモシニアン、およびジニトロフェノールが挙げられる。ＢＣＧ（カルメット−ゲラン杆菌）、および、コリネバクテリウム−パルヴムが、有用なヒトアジュバントである可能性があり、これらは、精製した物質ポリペプチドを、全身性の防御を刺激する目的で免疫学的に易感染性の個体に投与する場合に用いることができる。
【０４１５】
免疫化した動物からの血清を回収し、既知の方法に従って処理する。本発明の同定された作用物質および／または物質から得ることができるエピトープに対するポリクローナル抗体を含む血清が、他の抗原に対する抗体を含む場合、ポリクローナル抗体は、イムノアフィニティークロマトグラフィーで精製することができる。ポリクローナル抗血清を生産および加工する技術は当業界既知である。このような抗体を製造するために、本発明はまた、動物またはヒトにおいて免疫原として用いるために、他のポリペプチドに対してハプテン化した本発明のポリペプチドまたはそれらの断片を提供する。
【０４１６】
本発明の同定された作用物質および／または物質から得ることができるエピトープに対して向けられたモノクローナル抗体はまた、当業者により簡単に製造することができる。ハイブリドーマによるモノクローナル抗体作製のための一般的な方法論はよく知られている。不死化した抗体生産細胞系は、細胞融合、また、その他の技術、例えば腫瘍性ＤＮＡでのＢリンパ球の直接的な形質転換、またはエプスタイン−バーウイルスでのトランスフェクションにより、作製することができる。眼窩のエピトープに対して作製されたモノクローナル抗体のパネルは、様々な特性に関して、すなわち、アイソタイプやエピトープ親和性に関してスクリーニングすることができる。
【０４１７】
物質および／または同定された作用物質に対するモノクローナル抗体は、培養中における継続的な細胞系で抗体分子を生産させるあらゆる技術を用いて作製することができる。例としては、これらに限定されないが、KoehlerおよびMilstein（1975年，ネイチャー256：495〜497）で初めに説明されたハイブリドーマ技術、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術（Kosbor等（1983年）Immunol Today 4：72；Cote等（1983）Proc Natl Acad Sci 80：2026〜2030）、および、ＥＢＶ−ハイブリドーマ技術（Cole等（1985年）Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy，Alan R Liss Inc，77〜96頁）が挙げられる。加えて、適切な抗原特異性と生物活性を有する分子を得るために、「キメラ抗体」生産のために開発された技術、マウス抗体遺伝子のヒト抗体遺伝子へのスプライシングを用いることができる（Morrison等（1984年）Proc Natl Acad Sci 81：6851〜6855；Neuberger等（1984年）ネイチャー312：604〜608；Takeda等（1985年）ネイチャー314：452〜454）。あるいは、単鎖抗体の作製を説明した技術（米国特許第４,９４６,７７９号）を適用して、物質特異的な単鎖抗体を作製することができる。
【０４１８】
同定された作用物質および／または物質から得ることができるエピトープに対して向けられた抗体は、モノクローナルおよびポリクローナルのいずれでも、診断において特に有
用であり、中和した上記抗体は、受動免疫療法において有用である。モノクローナル抗体は、特に、抗イディオタイプ抗体を生じさせるのに用いられ得る。抗イディオタイプ抗体は、物質および／または作用物質の「内部イメージ」（それに対して防御が望まれる）を有する免疫グロブリンである。抗イディオタイプ抗体を生じさせる技術は当業界既知である。これら抗イディオタイプ抗体はまた、治療に有用であり得る。
【０４１９】
抗体はまた、Orlandi等（1989年，Proc Natl Acad Sci 86：3833〜3837）、およびWinter GおよびMilstein C（1991年；ネイチャー349：293〜299）で開示された、インビボでのリンパ球集団での生産を誘導すること、または、組換え免疫グロブリンライブラリーもしくは極めて特異的な結合試薬のパネルのスクリーニングなどにより作製することができる。
【０４２０】
また、物質に特異的な結合部位を含む抗体断片も作製することができる。例えば、このような断片としては、これらに限定されないが、Ｆ（ａｂ′)2断片（抗体分子のペプシン消化により作製することができる）、および、Ｆａｂ断片（Ｆ（ａｂ′)2断片のジスルフィド架橋を還元することにより作製することができる）が挙げられる。あるいは、Ｆａｂ発現ライブラリーを構築することにより、望ましい特異性を有するモノクローナルＦａｂ断片を迅速かつ簡単に同定することができる（Huse WD等（1989年）サイエンス256：1275〜1281）。
【０４２１】
レポーター
都合よく検出可能（例えば分光学により）なシグナルを提供する好ましいレポーターを用いる本発明の分析方法（およびスクリーニング）において、多種多様のレポーターを用いることができる。一例として、レポーター遺伝子は、光吸収特性を変える反応を触媒する酵素をコードすることができる。
【０４２２】
レポーター分子の例としては、これらに限定されないが、β−ガラクトシダーゼ、インベルターゼ、緑色蛍光タンパク質、ルシフェラーゼ、クロラムフェニコール、アセチルトランスフェラーゼ、β−グルクロニダーゼ、エキソグルカナーゼ、および、グルコアミラーゼが挙げられる。あるいは、放射標識タグまたは蛍光性タグで標識したヌクレオチドを最初の転写物に組み込み、次にこれをオリゴヌクレオチドプローブと結合させて同定することができる。
一つの好ましい実施形態において、レポーター分子の生産は、レポーター遺伝子産物（例えばβ−ガラクトシダーゼ）の酵素活性により測定される。
【０４２３】
標的の発現を検出および測定するための多種多様なプロトコール、例えばタンパク質に特異的なポリクローナルまたはモノクローナル抗体のいずれかを用いるプロトコールが当業界既知である。例としては、酵素結合免疫吸着検査法（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、および、蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）が挙げられる。好ましくは、２サイトの、ポリペプチドで干渉しない２つのエピトープに反応性のモノクローナル抗体を用いたモノクローナルに基づくイムノアッセイであるが、競合結合分析を用いてもよい。
【０４２４】
これら、およびその他の分析は、本発明以外では、Hampton R等（1990年，Serological
Methods，A Laboratory Manual，APS Press，セントポール、ミネソタ州）およびMaddox
DE等（1983年，J Exp Med 158：1211）で説明されている。
【０４２５】
多種多様の標識および結合技術は、当業者既知であり、様々な核酸およびアミノ酸分析で用いることができる。標的ポリヌクレオチド配列を検出するために標識したハイブリダイゼーションプローブまたはＰＣＲプローブを製造する手段としては、オリゴ標識、ニッ
クトランスレーション、エンドラベリング、または、標識したヌクレオチドを用いたＰＣＲ増幅が挙げられる。あるいは、コーディング配列、またはそれらのいずれかの部分は、ｍＲＮＡプローブ生産のためにベクターにクローニングすることもできる。このようなベクターは当業界既知であり、市販されており、これを用いて、適切なＲＮＡポリメラーゼ（例えばＴ７、Ｔ３またはＳＰ６）と標識したヌクレオチドを加えることにより、ＲＮＡプローブをインビトロで合成することができる。
【０４２６】
多数の会社、例えばファルマシアバイオテク（ピスカタウェイ，ニュージャージー州）、プロメガ（マジソン，ウィスコンシン州）、およびＵＳバイオケミカル社（クリーブランド，オハイオ州）が、このような方法のための市販のキットおよびプロトコールを供給している。適切なレポーター分子または標識としては、放射性核種、酵素、蛍光性物質，化学発光物質、またはクロモジェニック物質、および、基質、補因子、阻害剤、磁気粒子などが挙げられる。このような標識の使用を示す特許としては、米国特許第３８１７８３７号（Ａ）；米国特許第３８５０７５２号（Ａ）；米国特許第３９３９３５０号（Ａ）；米国特許第３９９６３４５号（Ａ）；米国特許第４２７７４３７号（Ａ）；米国特許第４２７５１４９号（Ａ）、および、米国特許第４３６６２４１号（Ａ）が挙げられる。また、組換え免疫グロブリンは、米国特許第４８１６５６７号（Ａ）で示されるように作製することができる。
【０４２７】
特定の分子の発現を定量するさらなる方法としては、放射標識（Melby PC等，1993年，J Immunol Methods 159：235〜44）またはビオチン化（Duplaa C等，1993年，Anal Biochem，229〜36）ヌクレオチド、コントロール核酸との共増幅、および、実験結果を内挿した標準曲線が挙げられる。複数のサンプルの定量化は、数種類の希釈液に対象のオリゴマーを含ませてＥＬＩＳＡフォーマットで分析を行うことにより高速化することができ、分光学的反応または熱量的反応で迅速に定量化する。
【０４２８】
マーカー遺伝子発現の存在／非存在により、対象の遺伝子の存在も示されるが，その存在および発現を確認すべきである。例えば、ヌクレオチド配列が、マーカー遺伝子配列に挿入されている場合、同配列を含む組換え細胞は、マーカー遺伝子機能の非存在により同定することができる。あるいは、マーカー遺伝子は、１つのプロモーターの制御下に、標的コーディング配列と共にタンデムに存在させることができる。同様に、誘導または選択に応じてマーカー遺伝子が発現されることは、通常は、標的が発現されていることを示す。
【０４２９】
あるいは、標的に関するコーディング配列を含み、標的コーディング領域を発現する宿主細胞は、当業者既知の多種多様な方法により同定することができる。このような方法としては、これらに限定されないが、ＤＮＡ−ＤＮＡまたはＤＮＡ−ＲＮＡハイブリダイゼーション、および、タンパク質生物学的試験、または、イムノアッセイ技術が挙げられ、イムノアッセイ技術としては、核酸またはタンパク質の検出および／または定量化に関して、メンブレンベース、溶液ベース、またはチップベースのテクノロジーのものがある。
【０４３０】
スクリーニング
１またはそれ以上の適切な標的のいずれか（例えばドーパミンＤ３受容体および／またはドーパミンＤ２受容体のアミノ酸配列、および／または、ドーパミンＤ３受容体および／またはドーパミンＤ２受容体をコードするヌクレオチド配列）は、多種多様な薬剤スクリーニング技術のいずれかにおいて、作用物質（例えば選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニスト）を同定するのに用いることができる。このような試験で用いられる標的は、溶液中で遊離していてもよいし、固体支持体に付着させてもよいし、細胞表面に保持させてもよいし、または、細胞内に含ませてもよい。標的は、動物モデルに含まれていてもよく、この場合、前記標的は外因性標的か、または導入された標的であり得る。動物モデルは、
非ヒト動物モデルが可能である。標的活性または標的と試験される物質との結合複合体の形成の阻害を測定することができる。
【０４３１】
薬剤スクリーニングに関する技術は、Geysenの欧州特許出願８４／０３５６４（１９８４年９月１３日に公開）に記載の方法に基づくものが可能である。まとめると、多数の様々な低分子ペプチド試験化合物が、固体基質、例えばプラスチックピンまたはその他様々な表面上で合成される。ペプチド試験化合物は、適切な標的またはそれらの断片と反応し、洗浄される。次に、例えば当業界周知の方法を適切に用いることにより結合した物体を検出する。精製した標的はまた、薬剤スクリーニング技術で用いるために、直接的にプレート上に塗布することもできる。あるいは、非中和抗体をペプチドを捕獲し、固体支持体にそれを固定するのに用いることができる。
【０４３２】
本発明はまた、競合的薬剤スクリーニング分析の使用も考えられ、この分析において、標的に特異的に結合できる中和抗体が、標的への結合に関して試験化合物と競合する。
その他のスクリーニング技術としては、物質に対して適切な結合親和性を有する作用物質のハイスループットスクリーニング（ＨＴＳ）があり、この技術は、ＷＯ ８４／０３
５６４で詳細に説明された方法に基づく。
本発明の分析方法は、試験化合物の小規模および大規模スクリーニングと、定量分析の両方に適切であると考えられる。
【０４３３】
好ましい観点において、本発明のスクリーニングは、少なくとも以下の工程を含む（必ずしもこれと同じ順番でなくてもよい）：（ａ）インビトロでのスクリーニングを行い、候補物質が適切な活性（例えばドーパミンＤ３受容体活性の調節）を有するかどうか決定する工程；（ｂ）１またはそれ以上の選択的スクリーニングを行い、前記候補物質の選択性を決定する工程（例えば本発明で提供される機能分析プロトコールを用いて、例えば前記物質がドーパミンＤ２受容体に関するアゴニストでもあるかどうかを調べることができる）；および、（ｃ）前記候補作用物質を用いてインビボでのスクリーニングを行う工程（例えば機能的な動物モデルを用いて）。典型的には、前記候補物質がスクリーニング（ａ）とスクリーニング（ｂ）をパスした場合、スクリーニング（ｃ）が行われる。
【０４３４】
診断
本発明はまた、性機能障害、特にＭＥＤ、または、ＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤの素因を検出するための診断用組成物またはキットを提供する。これに関して、該組成物またはキットは、試験サンプル中の酸化窒素（ＮＯ）および／または１またはそれ以上の血管作用性小腸タンパク質（ＶＩＰ）の存在または非存在を示すことができる物体を含み得る。好ましくは、試験サンプルは、陰茎または女性生殖器から得られる。好ましくは、試験サンプルは、性的興奮の最中に得られる。
【０４３５】
病気の診断の基礎を得るために、性機能障害、特にＭＥＤまたはＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤのいずれにも罹っていない被検体からの正常な、または標準的な値を確立すべきである。例えば、これは、正常な被検体（動物またはヒトのいずれか）から得られた体液または細胞抽出物と、VＩPに対する抗体とを、例えば当業界周知の複合体形成に適した条件下であわせることにより達成することができる。標準的な複合体形成量は、複合体形成量をポジティブコントロールの一連の希釈液と比較することによって定量することができ、この場合、既知の抗体量は、既知の精製ＶＩＰ濃度と合わされる。次いで、正常なサンプルから得られた標準値は、男性性機能障害（例えばＭＥＤ）または女性性機能障害（例えばＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤ）に罹っている可能性がある被検体からのサンプルから得られた値とを比較することができる。標準値と被検体値との間の偏差により、病気が存在することが証明される。
【０４３６】
診断を適合させて、特定の治療計画（すなわち選択的ドーパミンＤ３アゴニストの投与）の有効性を評価することができ、動物研究臨床試験または個体の治療のモニターに用いることができる。ＭＥＤまたはＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤが確認されれば、治療剤、例えば本発明に係る選択的ドーパミンＤ３アゴニストを投与することができ、治療プロファイルまたは値を得ることができる。最終的に、診断分析を定期的に繰り返して、値が進行するか、正常または標準的なパターンに戻るかを評価することができる。継続的な治療プロファイルは、数日間または数ヶ月間にわたる治療の有効性を示すのに用いることができる。
【０４３７】
診断キット
本発明はまた、診断用組成物または診断方法またはキットも含み、これらは、（ｉ）生体液および組織におけるドーパミンＤ３受容体活性の検出および測定；および／または（ii）男性性機能障害（例えばＭＥＤ）または女性性機能障害（例えばＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤ）の素因の検出のためである。これに関して、該組成物またはキットは、試験サンプル中のＮＯおよび／または１またはそれ以上のＶＩＰの存在または非存在を示すことができる物体を含み得る。好ましくは、試験サンプルは、男性もしくは女性生殖器、または、それらの（それらからの）分泌液から得られる。好ましくは、試験サンプルは、被検体の性的興奮の最中に得られる。
【０４３８】
診断試験
病気の診断に関する基礎を得るために、性機能障害、特にＭＥＤまたはＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤのいずれにも罹っていない１またはそれ以上の被検体に関するNOおよび／または１またはそれ以上のＶＩＰの正常値または標準値を確立すべきである。例えば、これは、正常な被検体（動物またはヒトのいずれか）から採取された体液または細胞抽出物を、例えば当業界周知の複合体形成に適した条件下で、ＶＩＰに対する抗体と合わせることにより達成することができる。標準的な複合体形成量は、複合体形成量をポジティブコントロールの一連の希釈液と比較することにより定量することができ、この場合、既知の抗体量は、既知の精製ＶＩＰ濃度とあわせる。そこで、正常なサンプルから得られた標準値は、男性性機能障害（例えばＭＥＤ）または女性性機能障害（例えばＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤ）に罹っている可能性がある被検体からのサンプルから得られた値と比較することができる。標準値と被検体値との間の偏差により、病気が存在することが証明される。
【０４３９】
これら物体を含む診断用組成物および／またはキットは、勃起性の組織抽出物におけるＮＯおよび／または１またはそれ以上のＶＩＰの、迅速で、信頼性の高い、高感度の、特異的な測定および局在化のために用いることができる。特定の状況において、該キットにより、性機能障害、例えばＭＥＤまたはＦＳＡＤおよび／またはＨＳＤＤの存在を示すことができる。
【０４４０】
分析方法
診断用組成物および／または方法および／またはキットを以下の技術（ただしこれらに限定されない）に用いることができる；競合的および非競合的分析、ラジオイムノアッセイ、バイオルミネッセンスおよび化学発光分析、蛍光分析、サンドイッチ分析、イムノラジオメトリックアッセイ、ドットブロット、酵素結合検査法（例えばＥＬＩＳＡ）、マイクロタイタープレート、抗体被覆ストリップ、または、尿または血液の迅速なモニタリングのためのディップスティック、免疫組織化学染色および免疫細胞化学。
【０４４１】
プローブ
本発明の他の観点は、標的コーディング領域、例えばドーパミンＤ３受容体、または極めて関連のある分子（例えば対立遺伝子）をコードするゲノム配列を含むポリヌクレオチ
ド配列を検出することができる核酸ハイブリダイゼーションまたはＰＣＲプローブ（特に選択的に選択可能なもの）を提供することである。プローブの特異性（すなわち高度に保存された領域またはドメイン、保存された領域またはドメイン、または、保存されていない領域またはドメインから誘導されたかどうか）、および、ハイブリダイゼーションまたは増幅のストリンジェンシー（高、中または低）は、プローブが天然に存在する標的コーディング配列または関連配列のみを同定するかどうかを決定し得る。関連核酸配列の検出のためのプローブは、標的ファミリーメンバーの保存された、または、高度に保存されたヌクレオチド領域から選択され、このようなプローブを、ディジェネレートプローブのプールに用いることができる。同一な核酸配列の検出のため、または、最大の特異性が望まれる場合、核酸プローブは、標的ポリヌクレオチドの保存されていないヌクレオチド領域または固有の領域から選択される。本発明で用いられる用語「保存されていないヌクレオチド領域」は、本発明で開示された標的コーディング配列に固有であり、関連するファミリーメンバーには存在しないヌクレオチド領域を意味する。
【０４４２】
米国特許第４６８３１９５号（Ａ）、米国特許第４８００１９５号（Ａ）、および、米国特許第４９６５１８８号（Ａ）に記載のＰＣＲは、標的配列に基づくオリゴヌクレオチドのさらなる用途を提供する。このようなオリゴマーは、一般的には化学合成されるが、こあれらは、酵素により作製してもよいし、組換え源より作製してもよい。オリゴマーは、一般的に、２つのヌクレオチド配列を含み、１つは、センス方向（５′→３′）であり、もう一方はアンチセンス（３′←５′）であり、特異的な遺伝子の同定または状態にとって最適化された条件化で用いられる。同じ２つのオリゴマー、オリゴマーのネステッドセット、または、オリゴマーのディジェネレートプールも、極めて関連の高いＤＮＡまたはＲＮＡ配列の検出および／または定量化にとってより低いストリンジェントな条件下で用いることができる。
【０４４３】
作用物質または標的に関する核酸配列はまた、上述のハイブリダイゼーションプローブを、内因性ゲノム配列をマッピングするために作製するのに用いることができる。このような配列は、周知の技術を用いて特定の染色体または染色体の特定の領域に対してマッピングすることができる。このような技術としては、染色体分布へのインサイチュハイブリダイゼーション（Verma等（1988年），Human Chromosomes：A Manual of Basic Techniques，Pergamon Press，New York City）、フローソーティングした染色体の調製、または人工染色体構築、例えばＹＡＣ、細菌の人工染色体（ＢＡＣ）、細菌のＰＩ構築、または、単一の染色体ｃＤＮＡライブラリーが挙げられる。
【０４４４】
染色体の調製物のインサイチュハイブリダイゼーション、および、物理的マッピング技術、例えば確立された染色体マーカーを用いた連鎖分析は、遺伝子地図を拡張するのに極めて重要である。遺伝子地図の例は、サイエンス（１９９５；２７０：４１０ｆ、および、１９９４；２６５：１９８１ｆ）で見出すことができる。場合によっては、特定のヒト染色体の数やアームがわかっていない場合でも、他の哺乳動物種の染色体に遺伝子を配置させることによって関連するマーカーを明らかにすることができる。新しい配列を、物理的マッピングにより染色体アームまたはそれらの部分に割り当てることができる。これにより、研究者に、ポジショナルクローニング、またはその他の遺伝子を発見する技術を用いて疾患遺伝子を検索するための重要な情報が提供される。遺伝子連鎖により疾患または症候群が特定のゲノム領域へおおまかに位置決定されたら、そのエリアへの配列マッピングいずれかにより、さらなる調査のための関連遺伝子または調節遺伝子が示される可能性がある。本発明のヌクレオチド配列はまた、正常個体、キャリアー個体、または、罹患した個体間の相互転座、逆位などによる染色体位置の差を検出するのに用いることができる。
【０４４５】
生物
本発明に関して、用語「生物」は、標的および／またはそれから得られる産物を含み得るあらゆる生物を含む。生物の例としては、哺乳動物、真菌、酵母、または、植物が挙げられる。
本発明に関して、用語「トランスジェニック生物」は、標的および／またはそれから得られる産物を含むあらゆる生物を含む。
【０４４６】
宿主細胞／宿主生物の形質転換
上述したように、宿主生物は、原核または真核生物であり得る。適切な原核性の宿主の例としては、Ｅ.ｃｏｌｉ、および、バチルス−ズブチリスが挙げられる。原核性の宿主
の形質転換に関する教示は、当業界においてよく文書化されており、例えばSambrook等（Molecular Cloning：A Laboratory Manual，第二版，1989年，コールドスプリングハーバーラボラトリープレス）、および、Ausubet等，Current Protocols in Molecular Biology（1995年），ジョン・ワイリー＆サンズ社を参照。
原核性宿主が用いられる場合、ヌクレオチド配列は、形質転換のまえに適切に改変してもよい（例えばイントロンの除去により）。
【０４４７】
他の実施形態において、トランスジェニック生物は、酵母が可能である。これに関して、酵母はまた、異種遺伝子発現の担体として広く用いられている。サッカロミセス−セレビジエ種は、工業的使用の長い歴史を持ち、例えば、異種遺伝子発現に用いられる。サッカロミセス−セレビジエでの異種遺伝子の発現については、Goodey等（1987年，Yeast Biotechnology，D R Berry等編，401〜429頁，AlienおよびUnwin，ロンドン）、および、King等（1989年，Molecular and Cell Biology of Yeast, E F WaltonおよびG T Yarronton編，107〜133頁，Blackie，グラスゴー）に総論が記載されている。
【０４４８】
数々の理由で、サッカロミセス−セレビジエが、異種遺伝子発現に極めて適切である。第一に、サッカロミセス−セレビジエは、ヒトに対して非病原性であり、特定の内毒素を生産できない。第二に、サッカロミセス−セレビジエは、何百年にもわたる様々な目的のための商業的な開発を経て、安全に使用されてきた長い歴史がある。これが広い公共の容認を導いている。第三に、広範囲にわたる商業的な使用と、生物に徹したリサーチにより、遺伝学と生理学に関する知識の財産、同様に、サッカロミセス−セレビジエの大規模な発酵特徴をもたらした。
【０４４９】
サッカロミセス−セレビジエにおける異種遺伝子発現の原理、および、遺伝子産物の分泌の総論は、E Hinchcliffe E Kenny（1993年,「Yeast as a vehicle for the expression of heterologous genes」，Yeasts，第5巻，Anthony H RoseおよびJ Stuart Harrison編，第二版，アカデミックプレス社）に記載されている。
数々のタイプの酵母ベクターが利用可能であり、例えば、維持のために宿主ゲノムとの組換えを必要とする統合型ベクター、および自律複製型プラスミドベクターがある。
【０４５０】
トランスジェニックサッカロミセスを作製するために、本発明のヌクレオチド配列を酵母での発現に関して設計された構築物に挿入することにより、発現構築物を作製する。異種発現で用いられる数々のタイプの構築物が開発されている。このような構築物は、本発明のヌクレオチド配列に融合した酵母で活性なプロモーターを含み、通常、酵母由来のプロモーター、例えばＧＡＬ１プロモーターが用いられる。通常、酵母由来のシグナル配列、例えばＳＵＣ２シグナルペプチドをコードする配列が用いられる。酵母で活性なターミネーターが発現系を終結させている。
【０４５１】
酵母の形質転換に関して、数々の形質転換プロトコールが開発されている。例えば、本発明に係るトランスジェニックサッカロミセスを以下の技術に従って作製することができる：Hinnen等（1978年，Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA
75，1929年）；Beggs，JD（1978年，ネイチャー，ロンドン，275，104）；および、Ito
，H等（1983年，J Bacteriology 153，163〜168）。
【０４５２】
形質転換した酵母細胞は、様々な選択的マーカーを用いて選択される。形質転換に用いられるマーカーのなかでも、多数の栄養要求性マーカー、例えばＬＥＵ２、ＨＩＳ４およびＴＲＰ１、および、優性抗生物質耐性マーカー、例えばアミノグリコシド抗生物質マーカー、例えばＧ４１８が挙げられる。
【０４５３】
その他の宿主生物は植物である。遺伝子組換え植物構築の基本的な原理は、遺伝情報を植物ゲノムに挿入して、挿入された遺伝物質を安定して維持することである。遺伝情報を挿入する数々の技術があり、２つの主要な原理は、遺伝情報の直接的な導入、および、ベクター系を用いた遺伝情報の導入であり、一般的な技術の総論は、Potrykusの記事（Annu
Rev Plant Physiol Plant Mol Biol［1991年］42：205〜225）、および、Christou（Agro-Food-Industry Hi-Tech 1994年3月／4月，17〜27）で見出すことができる。植物の形質転換に関するさらなる技術は、欧州特許第０４４９３７５号（Ａ）で見出すことができる。
【０４５４】
従って、本発明はまた、標的となる、または標的を発現するヌクレオチド配列で宿主細胞を形質転換する方法を提供する。ヌクレオチド配列で形質転換した宿主細胞は、細胞培養物からのコードされたタンパク質の発現および回収に適した条件下で培養することができる。組換え細胞により生産されたタンパク質は、分泌させてもよく、用いられた配列および／またはベクターに応じて、細胞内に含有させてもよい。当業者には理解できることであるが、コーディング配列を含む発現ベクターは、特定の原核性または真核細胞の膜を通過してコーディング配列を分泌させるように指示するシグナル配列と共に設計することができる。その他の組換え構築において、可溶性タンパク質の精製を容易にし得るポリペプチドドメインをコードするヌクレオチド配列に、コーディング配列を連結させてもよい（Kroll DJ等（1993年）DNA Cell Biol 12：441〜53）。
【０４５５】
ＰＤＥ５阻害剤−試験方法
本発明で用いられるＰＤＥの作用効力値は、以下の分析によって決定される：
ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）阻害活性
本発明に係る使用に適した好ましいＰＤＥ化合物は、効力があり選択的なｃＧＭＰ−ＰＤＥ５阻害剤である。サイクリックグアノシン３′,５′−一リン酸（ｃＧＭＰ）、およ
び、サイクリックアデノシン３′,５′−一リン酸（ｃＡＭＰ）ホスホジエステラーゼに
対するインビトロでのＰＤＥ阻害活性は、それらのＩＣ50値（酵素活性の５０％阻害に必要な化合物濃度）を測定することにより決定することができる。
【０４５６】
必要なＰＤＥ酵素は、ヒト海綿体、ヒトおよびウサギ血小板、ヒト心室、ヒト骨格筋およびウシ網膜などの多種多様な源から単離することができ、本質的には、W.J. Thompson
およびM.M. Appleman（Biochem.，1971年，10，311）の方法に従う。特に、ｃＧＭＰ特異的ＰＤＥ（ＰＤＥ５）およびｃＧＭＰ阻害ｃＡＭＰ−ＰＤＥ（ＰＤＥ３）は、ヒト海綿体組織、ヒト血小板またはウサギ血小板から得ることができる；ｃＧＭＰ刺激ＰＤＥ（ＰＤＥ２）を、ヒト海綿体から得た；カルシウム／カルモジュリン（Ｃａ／ＣＡＭ）依存性ＰＤＥ（ＰＤＥ１）は、ヒト心室から得た；ｃＡＭＰ特異的ＰＤＥ（ＰＤＥ４）は、ヒト骨格筋から得た；および、光受容体ＰＤＥ（ＰＤＥ６）は、ウシ網膜から得た。ホスホジエステラーゼ７〜１１は、ＳＦ９細胞にトランスフェクトさせた全長ヒト組換えクローンから得ることができる。
【０４５７】
W.J. Thompson等の「バッチ」法（Biochem.，1979年，18. 5228）の改変法、または、
アマシャム社により説明されたプロトコール（製品コードＴＲＫＱ７０９０／７１００）の改変法を用いたＡＭＰ／ＧＭＰの直接的な検出のためのシンチレーション近接分析のいずれかを用いて分析を行うことができる。要約すると、ＰＤＥ阻害剤の作用は、ＩＣ50がＫiとほぼ同等となるように、様々な阻害剤濃度および低い基質濃度で（濃度〜１／３Ｋmで、ｃＧＭＰまたはｃＡＭＰが、非標識と［3Ｈ］標識との比率が３：１）固定量の酵素
を分析することにより調査された。最終分析体積を、分析緩衝液［２０ｍＭトリス−ＨＣｌ（ｐＨ７.４）、５ｍＭのＭｇＣｌ2、１ｍｇ／ｍｌウシ血清アルブミン］で１００μｌにした。反応を酵素で開始させ、３０℃で３０〜６０分間インキュベートして＜３０％の基質変換を起こし、ケイ酸イットリウムＳＰＡビーズ（ＰＤＥ９および１１に対してそれぞれ３ｍＭの非標識サイクリックヌクレオチドを含む）５０μｌで反応を止めた。プレートを再度密封し、２０分間振盪し、その後、ビーズを暗所で３０分間静置し、次に、TopCountプレートリーダー（パッカード，メリデン，コネチカット州）で計数した。放射能単位を阻害されていないコントロールの活性％（１００％）に変換し、「Fit Curve」マイクロソフトエクセル拡張子を用いて得られた阻害剤濃度および阻害剤ＩＣ50値に対して再度プロットした。
【０４５８】
機能的な活性
機能的な活性は、インビトロで、予め収縮させたウサギ海綿体組織片のニトロフェリシアン化ナトリウムにより誘導される弛緩を増強させる本発明の化合物の能力を決定することにより評価することができ、これは、S.A. Ballard等（Brit. J. Pharmacol.，1996年
，118（増刊号），アブストラクト１５３頁）で説明されている。
【０４５９】
実施例を用いて、本発明をさらに説明するが、ここで参照は、以下の図面および配列リストになされる：
図面
図１は、Ｄ２受容体と比べて、Ｄ３受容体に対して機能的に少なくとも３０倍の選択性を有する化合物の、１またはそれ以上の副作用（例えば吐き気、嘔吐、低血圧または失神）に対する勃起に関する作用の比較を示す。
図２は、麻酔されたイヌの血行動態パラメーターに関して、Ｄ３優先的なＤ２／Ｄ３アゴニストとは対照的に、選択的Ｄ３アゴニストは、大きい作用を有さないことを示す。
配列リスト
配列番号１は、ヒトドーパミンＤ３受容体に関するヌクレオチド配列を示す；
配列番号２は、ヒトドーパミンＤ３受容体に関するアミノ酸配列を示す；
配列番号３および４は、可溶性の分泌されたヒトエンドペプチダーゼ（ＳＥＰ）をコードするヌクレオチド配列（ｃＤＮＡ）を示す。
配列番号４は、５′および３′部分的ベクター配列（ハイライトした）を示す；および、
配列番号５は、ヒトＳＥＰタンパク質のアミノ酸配列を示す。
【実施例】
【０４６０】
化学合成の実施例
以下の略語および定義を用いて、以下の非限定的な実施例により本発明を説明する：
αD：５８７ｎｍでの光学回転、
アルバセル（Arbacel）（Ｒ）：フィルター物質、
Ｂ：ブロード、
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、
ＣＤＣｌ3：クロロホルム−ｄ１、
ＣＤ3ＯＤ：メタノール−ｄ４、
δ：化学シフト、
Ｄ：二重項、
Ｄｄ：二重の二重項、
ＤＣＭ：ジクロロメタン、
ＤＭＦ：Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド、
Ｈ：時間、
ＨＣｌ：塩化水素、
ＬＲＭＳ：低分解能質量分析計、
Ｍ：多重項、
ｍ／ｚ：マススペクトルピーク、
Ｍｉｎ：分、
Ｍｐｔ：融点、
ＮａＯＨ：水酸化ナトリウム、
ＮＭＲ：核磁気共鳴、
Ｑ：四重項、
Ｓ：一重項、
Ｔ：三重項、
Ｔｆ：トリフルオロメタンスルホニル、
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸、
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン、
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー。
パーキンエルマーＤＳＣ７を用いて、加熱速度２０℃／分で、融点を測定した。
【０４６１】
Ｘ線回折データを、室温で、ブルカー・エイエックスエスのＳＭＡＲＴ−ＡＰＥＸ ＣＣＤ二次元検出器回折計（モリブデン−Ｋα放射）を用いて記録した。数々の一連の露光より強度を統合した。それぞれの露光は、ωで０.３°の範囲であり、露光時間は６０秒、トータルデータセットは範囲（sphere）を超えた。
【０４６２】
実施例１
２−アミノ−１−（３−メトキシフェニル）エタノール
【化１３】
2005516014.tif 000025
室温で、３−メトキシベンズアルデヒド（２７.２ｇ，０.２ｍｏｌ）のＴＨＦ（１５０ｍｌ）溶液を、３ＮのＨＣｌ（ａｑ）（１５０ｍｌ，０.３ｍｏｌ）と亜硫酸ナトリウム
（３７.８ｇ，０.３ｍｏｌ）とを撹拌した溶液に加えた。１０分間後、シアン化カリウム（１９.５３ｇ，０.３ｍｏｌ）を数回に分けて加え、次に、反応混合物を３０分間撹拌した。ジエチルエーテル（８００ｍｌ）と水（３００ｍｌ）を加え、その後、層を分離した。水層を、ジエチルエーテル（５００ｍｌ）で再抽出し、有機層を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、次に、真空中で濃縮し、シアノヒドリン中間体を無色の油として得た（３５.５７ｇ，０.２２ｍｏｌ，＞１００％）。次に、ボラン−テトラヒドロフラン錯体（１ＭのＴＨＦ溶液）（４００ｍｌ，０.４ｍｏｌ）をシアノヒドリンのＴＨＦ（１００ｍｌ）溶液に慎重に加えた。発泡が止まったら、窒素雰囲気下で１.５時間で還流しながら撹拌し続けた。反応混合物を冷却し、続いて、メタノール（４０ｍｌ）でクエンチし、その後、真空中で濃縮し、無色の油を得た。６ＭのＨＣｌ（ａｑ）（２００ｍｌ）を加え、反応液を２時間還流しながら撹拌し、その後、真空中で濃縮して、白色の固体を得た。これをシリカに事前に吸収させ、カラムクロマトグラフィーで、ジクロロメタン：メタノール：アンモニア（９０：１０：１）で溶出させて精製し、表題の化合物を無色の油として得た（３１.３ｇ，０.１９ｍｏｌ，９４％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 1.60 (bs, 2H), 2.80 (dd, 1H), 3.02 (dd, 1H), 3.46 (s, 1H), 3.81 (s, 3H), 4.60 (dd, 1H), 6.81 (d, 1H), 6.91 (d, 1H), 6.93 (s, 1H), 7.22 (t, 1H)。LRMS: m／z 168 (M-H+)。分析値 C, 56.66; H, 8.28; N, 6.91％。C9H13NO2・1.33H2OはC, 56.33: H, 8.27; N, 7.30％を要する。
【０４６３】
実施例２
Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−メトキシフェニル）エチル］プロピオンアミド
【化１４】
2005516014.tif 000026
トリエチルアミン（５２ｍｌ，０.３７ｍｏｌ）を、実施例１のアミン（３１.３ｇ，０.１９ｍｏｌ）のジクロロメタン（４００ｍｌ）溶液に加え、反応混合物を、窒素ガス雰囲気下で、０℃で１０分間撹拌した。プロピオニルクロライド（１６.３ｍｌ，０.１９ｍｏｌ）を加え、３０分間撹拌した後、反応温度をさらに５時間室温に上げた。反応混合物を１ＮのＨＣｌ（ａｑ）(１００ｍｌ）でクエンチし、次に、ジクロロメタン（２×５０ｍｌ）で抽出した。有機分画を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物を無色の油として得て、これを静置して結晶化させて白色の結晶を得た（２８ｇ，０.１３ｍｏｌ，６７％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 1.18 (t, 3H), 2.22 (q, 2H), 2.51 (bs, 1H), 3.31 (m,
1H), 3.71 (dd, 1H), 3.80 (s, 3H), 4.81 (m, 1H), 5.95 (bs, 1H), 6.80 (d, 1H), 6.90 (d, 1H), 6.91 (s, 1H), 7.22 (t, 1H)。LRMS: m／z 224。Mpt: 77-78℃。分析値 C, 63.86; H, 7.82; N, 6.28％。C12H17NO3・0.1H2OはC, 64.04; H, 7.70; N, 6.22％を要する。
【０４６４】
実施例３
１−（３−メトキシフェニル）−２−プロピルアミノエタノール
【化１５】
2005516014.tif 000027
ボラン−テトラヒドロフラン錯体（１ＭのＴＨＦ溶液）（３７６ｍｌ，０.４ｍｏｌ）
を、実施例２のアミド（２８ｇ，０.１３ｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（１００ｍｌ）溶液に加え、続いて、反応混合物を窒素ガス雰囲気下で撹拌し、２.５時間還流した。反応混合物を冷却し、続いてメタノール（４０ｍｌ）でクエンチし、その後、真空中で濃縮し、不透明な白色の油を得た。６ＮのＨＣｌ（ａｑ）(２００ｍｌ）を加え、反応液を２時間還流しながら撹拌した。反応混合物を冷却し、続いてジクロロメタン（２００ｍｌ）を加え、層分離した。炭酸カリウムを加えて水層を塩基性にし、続いて、ジクロロメタン（２×２００ｍｌ）で再抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物を無色の油として得て、これを静置して結晶化させ、無色の結晶を得た（１５.３ｇ，０.０７ｍｏｌ，５９％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.93 (t, 3H), 1.62 (q, 2H), 2.71 (q, 2H), 2.81 (t, 2H), 3.00 (d, 1H), 3.80 (s, 3H), 4.30 (bs, 1H), 4.89 (d, 1H), 6.81 (d, 1H), 6.91
(d, 1H), 6.93 (s, 1H), 7.22 (t, 1H)。LRMS: m／z 210。Mpt: 50-51℃。分析値 C, 67.47 ; H, 9.02 ; N, 6.45％。C12H19NO2・0.2H2OはC, 67.70 ; H, 9.19 ; N, 6.58％を要する。
【０４６５】
実施例４
２−クロロ−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−メトキシフェニル）エチル］−Ｎ−プロピルアセトアミド
【化１６】
2005516014.tif 000028
水酸化ナトリウム（１５.１ｇ，０.３８ｍｏｌ）の水（１８０ｍｌ）の溶液を、実施例３のアミン（１５.８ｇ，０.０８ｍｏｌ）のジクロロメタン（５００ｍｌ）溶液に加え、溶液を強く室温で撹拌した。続いて、クロロアセチルクロリド（７.２２ｍｌ，０.０９ｍｏｌ）を加え、反応混合物をさらに３０分間撹拌した。層分離し、水層を、ジクロロメタン（２００ｍｌ）で再抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物を無色の油として得た（１７.８ｇ，０.０６ｍｏｌ，８３％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.96 (t, 3H), 1.62 (q, 2H), 3.21 (q, 2H), 3.57-3.71
(m, 2H), 3.82 (s, 3H), 4.01-4.21 (bq, 1H), 4.16 (s, 2H), 5.00 (m, 1H), 6.82 (m,
1H), 6.91-6.99 (m, 2H), 7.22 (m, 1H)。LRMS: m／z 286。分析値 C, 57.38 ; H, 6.95
; N, 4.67％。C14H20NO3Cl・0.33H2OはC, 57.64 ; H, 7.14 ; N, 4.80％を要する。
【０４６６】
実施例５
６−（３−メトキシフェニル）−４−プロピルモルホリン−３−オン
【化１７】
2005516014.tif 000029
水酸化カリウム（４.２ｇ，０.０７ｍｏｌ）、イソプロピルアルコール（５００ｍｌ）および実施例４のアミド（１７.８ｇ，０.０６ｍｏｌ）を、水（１５ｍｌ）と共に２時間撹拌し、不透明な溶液にした。反応混合物を真空中で濃縮し、黄色の残留物を酢酸エチル（２００ｍｌ）に溶解させた。これを水（２００ｍｌ）、続いてブライン（２００ｍｌ）で分離させた。有機分画を、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物を黄色の油として得た（１５.８ｇ，０.０６ｍｏｌ，１００％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.96 (t, 3H), 1.62 (m, 2H), 3.36 (m, 2H), 3.51 (q, 2H), 3.81 (s, 3H), 4.30-4.62 (bq, 2H), 4.79 (d, 1H), 6.85 (d, 1H), 6.91 (d, 1H),
6.95 (s, 1H), 7.29 (t, 1H)。LRMS: m／z 272。分析値 C, 66.80 ; H, 7.78 ; N, 5.52％。C14H19NO3・0.1H2OはC, 66.96 ; H, 7.71 ; N, 5.58％を要する。
【０４６７】
実施例６
２−（３−メトキシフェニル）−４−プロピルモルホリン
【化１８】
2005516014.tif 000030
ボラン−テトラヒドロフラン錯体（１ＭのＴＨＦ溶液）（２００ｍｌ，０.１９ｍｏｌ）を、実施例５のモルホリン−３−オン（１５.８ｇ，０.０６ｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（１００ｍｌ）溶液に、窒素雰囲気下で３０分間にわたり滴下して加えた。反応混合物を３時間還流し、続いて、冷却し、メタノール（３０ｍｌ）を加えてクエンチした。次に、反応混合物を真空中で濃縮し、無色の残留物を慎重に４ＮのＨＣｌ（ａｑ）（４００ｍｌ）に懸濁し、その後、２.５時間還流した。反応混合物を冷却し、ジクロロメタン（２００ｍｌ）を加えた。層分離し、水層を炭酸カリウムを加えて塩基性にし、その後、ジクロロメタン（３×１００ｍｌ）で再抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物を無色の油として得た（１２.５１ｇ，０.０５ｍｏｌ，８４％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.95 (t, 3H), 1.59 (q, 2H), 2.05 (t, 1H), 2.23 (t, 1H), 2.40 (t, 2H), 2.81 (d, 1H), 2.98 (d, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.85 (t, 1H), 4.05 (d, 1H), 4.60 (d, 1H), 6.81 (d, 1H), 6.91 (d, 1H), 7.21 (t, 1H), 7.23 (s, 1H)。LRMS:m／z 236。分析値 C, 68.94 ; H, 8.80; N, 5.79％。C14H21NO2・0.5H2OはC, 68.82 ; H, 9.08 ; N, 5.73％を要する。
【０４６８】
実施例７ａ
Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール
実施例７ｂ
Ｓ−（＋）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール
【化１９】
2005516014.tif 000031
臭化水素酸（２５０ｍｌ）と実施例６のアニソール（８.６２ｇ，０.０３ｍｏｌ）を加熱し、共に１時間還流した。冷却した後、反応混合物を、水（１００ｍｌ）で希釈し、続いてＮＨ4ＯＨ（２０ｍｌ）を加えて中和した。次に、黄色の不透明な溶液を、ジクロロメタン（２×１００ｍｌ）で抽出した。有機抽出物を合わせ、次に、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物のラセミ混合物を黄色の油として得た（７.７８ｇ，０.０３ｍｏｌ，９６％）。光学異性体を、キラルクロマトグラフィー（キラルパックＡＤ２５０*２０ｍｍカラム）で、ヘキサン：イソプロピルアルコール：ジエチルアミン（７０：３０：０.０５）で溶出させて分離し、光学異性体１（ｅｅ＞９９.５％）および光学異性体２（ｅｅ＞９９％）を得た。各光学異性体を、シリカを用いたカラムクロマトグラフィーで、ジクロロメタン：メタノール（９５：５）で溶出させて精製し、光学異性体１（７ａ）（３.０２ｇ，０.０１４ｍｏｌ，３９％）および光学異性体２（７ｂ）（３.１５ｇ，０.０１４ｍｏｌ，４０％）を無色の油としてを得た。
光学異性体１（７ａ）：
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.96 (t, 3H), 1.60 (q, 2H), 2.13 (t, 1H), 2.31 (t, 1H), 2.41 (t, 2H), 2.85 (d, 1H), 3.02 (d, 1H), 3.90 (t, 1H), 4.02 (dd, 1H), 4.60
(d, 1H), 6.78 (d, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.91 (d, 1H), 7.20 (t, 1H)。LRMS: m／z 222(M-H+)。
光学異性体２（７ｂ）：
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.96 (t, 3H), 1.60 (q, 2H), 2.13 (t, 1H), 2.31 (t, 1H), 2.41 (t,2H), 2.85 (d, 1H), 3.02 (d, 1H), 3.90 (t, 1H), 4.02 (dd, 1H), 4.60 (d, 1H), 6.78 (d, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.91 (d, 1H), 7.20 (t, 1H)。LRMS: m／z 222 (M-H+)。
【０４６９】
実施例８
Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩
【化２０】
2005516014.tif 000032
実施例７の光学異性体１（７ａ）（３.００ｇ，０.０１４ｍｏｌ）を、ジエチルエーテル（１８０ｍｌ）に溶解させ、塩化水素（２.０Ｍジエチルエーテル溶液）（１０ｍｌ）を加えた。反応混合物を室温で３０分間撹拌し、続いて、溶媒をデカントし、真空中で乾燥させ、表題の化合物を白色の固体として得た（３.１１５ｇ，０.０１２ｍｏｌ，９０％）。
1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ: 1.06 (t, 3H), 1.81 (m, 2H), 3.02 (t, 1H), 3.16 (t, 2H), 3.20 (t, 1H), 3.60 (t, 2H), 4.01 (t, 1H), 4.26 (d, 1H), 4.71 (d, 1H), 6.78 (d, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.83 (d, 1H), 7.21 (t, 1H)。LRMS:m／z 222 (M-H+)。分析値 C, 59.74 ; H, 7.98 ; N, 5.25％。C13H19NO2・0.18H2OはC, 59.82 ; H, 7.86 ; N, 5. 37％を要する。αD＝−5.66°(メタノール 10.6mg／10ml)。
メタノール：ジエチルエーテル混合物を用いた蒸気拡散により表題の化合物のサンプルを再結晶化し、Ｘ線結晶構造を得た。表題の化合物の絶対立体配置を、FIackの方法（H.D. Flack，Acta Cryst. 1983年，439，876〜881）により回折データから決定し、「Ｒ」立体配置を有することがわかった。
【０４７０】
実施例９
２−アミノ−１−（３,５−ジメトキシフェニル）エタノール
【化２１】
2005516014.tif 000033
実施例１と同じ方法に従って、３,５−ジメトキシベンズアルデヒド（５.００ｇ，０.０３ｍｏｌ）から開始して製造した。６ＭのＨＣｌ（ａｑ）で還流した後、反応混合物を冷却し、ジエチルエーテル（２×８０ｍｌ）で抽出した。有機層を捨て、水層を、炭酸カリウムを加えて塩基性にした。次に、水性の残留物を、酢酸エチル（３×７０ｍｌ）で抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物を薄黄色の油として得た（３.４７ｇ，０.０１８ｍｏｌ，５９％）。
1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ: 2.77-2.86 (m, 2H), 3.78 (s, 6H), 4.60 (m, 1H), 6.38
(s, 1H), 6.52 (s, 2H)。LRMS: m／z 198(M-H+)。
【０４７１】
実施例１０
Ｎ−［２−（３,５−ジメトキシフェニル）−２−ヒドロキシエチル］プロピオンアミド
【化２２】
2005516014.tif 000034
実施例２と同じ方法に従って、実施例９のアミン（３.４１ｇ，０.０１７ｍｏｌ）から開始して製造した。粗反応混合物を、シリカを用いたカラムクロマトグラフィーで、ジクロロメタン：メタノール（９５：５）で溶出させて精製し、表題の化合物を明るい黄色の油として得た（３.０８ｇ，０.０１２ｍｏｌ，７０％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 1.18 (m, 3H), 2.24 (m, 2H), 3.34 (m, 1H), 3.68 (m, 1H), 3.81 (s, 6H), 4.80 (dd, 1H), 5.95 (bs, 1H), 6.39 (s, 1H), 6.51 (s, 2H)。LRMS: m／z 252 (M-H-)。
【０４７２】
実施例１１
１−（３,５−ジメトキシフェニル）−２−プロピルアミノエタノール
【化２３】
2005516014.tif 000035
実施例３の方法に従って、実施例１０のアミド（３.０６ｇ，０.０１２ｍｏｌ）から開始して製造し、表題の化合物をオレンジ色の油として得た（２.７２ｇ，０.０１１ｍｏｌ，９４％）。
1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ: 0.95 (t, 3H), 1.56 (m, 2H), 2.61 (m, 2H), 2.77 (d, 2H), 3.78 (s, 6H), 4.70 (t, 1H), 6.38 (s, 1H), 6.51 (s, 2H)。LRMS: m／z 240 (M-H+)。
【０４７３】
実施例１２
２−クロロ−Ｎ−［２−（３,５−ジメトキシフェニル）−２−ヒドロキシエチル］−Ｎ−プロピルアセトアミド
【化２４】
2005516014.tif 000036
実施例４と同じ方法に従って、実施例１１のアミン（２.７０ｇ，０.０１１ｍｏｌ）から開始して製造し、表題の化合物を黄色の油として得た（３.５６ｇ，０.０１１ｍｏｌ，１００％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.92 (t, 3H), 1.61 (m, 2H), 3.20 (m, 2H), 3.51-3.64
(m, 2H), 3.80 (d, 6H), 4.13 (s, 2H), 4.95(m, 1H), 6.40 (m, 1H), 6.55 (s, 2H)。LRMS: m／z 316 (M-H+)。
【０４７４】
実施例１３
６−（３,５−ジメトキシフェニル）−４−プロピルモルホリン−３−オン
【化２５】
2005516014.tif 000037
実施例５と同じ方法に従って、実施例１２のアミド（３.５４ｇ，０.０１１ｍｏｌ）から開始して製造し、表題の化合物を黄色の油として得た（２.４４ｇ，０.００９ｍｏｌ，７８％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.94 (t, 3H), 1.61 (m, 2H), 3.30 (m, 2H), 3.49 (m, 
2H), 3.80 (s, 6H), 4.30 (d, 1H), 4.42 (d, 1H), 4.73 (dd, 1H), 6.42 (s, 1H), 6.53
(s, 2H)。LRMS: m／z 280 (M-H+)
【０４７５】
実施例１４
２−（３,５−ジメトキシフェニル）−４−プロピルモルホリン
【化２６】
2005516014.tif 000038
実施例６の方法に従って、実施例１３のアミド（２.４２ｇ，０.００９ｍｏｌ）から開始して製造した。６ＭのＨＣｌ（ａｑ）で還流した後、冷却した反応混合物を、ジエチルエーテル（２×８０ｍｌ）で抽出した。有機層を捨て、水層を炭酸カリウムを加えて塩基性にした。次に、水性の残留物を、酢酸エチル（３×８０ｍｌ）で抽出し、有機抽出物を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、次に、真空中で濃縮し、表題の化合物を薄いオレンジ色の油として得た（２.１４ｇ，０.００８ｍｏｌ，９３％）。
1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ: 0.95 (t, 3H), 1.58 (m, 2H), 2.01 (m, 1H), 2.22 (dt,
1H), 2.38 (t, 2H), 2.83 (d, 1H), 2.93 (d, 1H), 3.78 (m, 7H), 4.01 (dd, 1H), 4.45 (dd, 1H), 6.39 (s, 1H), 6.49 (s, 2H)。LRMS: m／z 266 (M-H+)。
【０４７６】
実施例１５ａ
Ｒ−５−（４−プロピルモルホリン−２−イル）ベンゼン−１,３−ジオール
実施例１５ｂ
Ｓ−５−（４−プロピルモルホリン−２−イル）ベンゼン−１,３−ジオール
【化２７】
2005516014.tif 000039
実施例７と同じ経路に従って、実施例１４の３,５−ジメトキシフェニル化合物（１.００ｇ，０.００４ｍｏｌ）から開始して製造し、表題のラセミ化合物を茶色の油として得た（１４５ｍｇ，０.６１ｍｍｏｌ，１６％）。光学異性体を、キラルクロマトグラフィー（キラルパックＡＤ２５０*２０ｍｍカラム）で、ヘキサン：イソプロピルアルコール：（８０：２０）で溶出させて分離し、光学異性体１（１５ａ）(５.２ｍｇ）(ｅｅ＞９８.９４％）および光学異性体２（１５ｂ）(５.１ｍｇ）(ｅｅ＞９６.４６％）を茶色の油としてを得た。
光学異性体１（１５ａ）：
1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ: 0.96 (t, 3H), 1.58 (m, 2H), 2.01 (t, 1H), 2.20 (dt,
1H), 2.37 (t, 2H), 2.81-2.92 (m, 2H), 3.89 (dt, 1H), 3.99 (dd, 1H), 4.38 (dd, 1H), 6.18 (t, 1H), 6.26 (s, 2H)。LRMS: m／z 238(M-H+)。
光学異性体２（１５ｂ）：
1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ: 0.95 (t, 3H), 1.58 (m, 2H), 2.01 (t, 1H), 2.20 (dt,
1H), 2.38 (t, 2H), 2.80-2.92 (q, 2H), 3.78 (dt, 1H), 3.98 (dd, 1H), 4.38 (dd, 1H), 6.18 (s, 1H), 6.25 (s, 2H)。LRMS: m／z 238 (M-H+)。
【０４７７】
実施例１６
４−フルオロ−３−メトキシベンズアルデヒド
【化２８】
2005516014.tif 000040
（４−フルオロ−３−メトキシフェニル）メタノール（５.００ｇ，０.０３ｍｏｌ）および二酸化マンガン（３３.４ｇ，０.３８ｍｏｌ）を、ジクロロメタン（１００ｍｌ）中で、窒素雰囲気下でおだやかに１６時間還流しながら撹拌した。次に、冷却した反応混合物を、アルバセルでろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物を白色の固体として得た（４.１８ｇ，０.０２７ｍｏｌ，８５％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 3.96 (s, 3H), 7.23 (d, 1H), 7.43 (m, 1H), 7.50 (d, 1H) 9.91 (s, 1H)。Mpt:61-63℃。分析値 C, 62.18 ; H, 4.54％。C8H7FO2はC, 62.34 ; H, 4.58％を要する。
【０４７８】
実施例１７
２−アミノ−１−（４−フルオロ−３−メトキシフェニル）エタノール
【化２９】
2005516014.tif 000041
実施例１と同じ方法に従って、４−フルオロ−３−メトキシベンズアルデヒド（４.１７ｇ，０.０３ｍｏｌ）から開始して製造した。６ＭのＨＣｌ（ａｑ）で還流した後、反応混合物を冷却し、ジエチルエーテル（２×６０ｍｌ）で抽出した。有機層を捨て、水層を、炭酸カリウムを加えて塩基性にした。次に、水性の残留物を酢酸エチル（３×８０ｍｌ）で抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物をオレンジ色の油として得た（２.３６ｇ，０.０１３ｍｏｌ，４７％）。
1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ: 2.80-2.91 (m, 2H), 3.86 (s, 3H), 4.64 (m, 1H), 6.89
(m, 1H), 7.03 (t, 1H), 7.11 (dd, 1H)。LRMS: m／z 186(M-H+)。
【０４７９】
実施例１８
Ｎ−［２−（４−フルオロ−３−メトキシフェニル）−２−ヒドロキシエチル］プロピオンアミド
【化３０】
2005516014.tif 000042
実施例２と同じ方法に従って、実施例１７のアミン（１.３２ｇ，０.００７ｍｏｌ）から開始して製造した。粗反応混合物を、シリカを用いたカラムクロマトグラフィーで、酢
酸エチル：ペンタン（２：１）で溶出させて精製し、表題の化合物を黄色の油として得て、これを静置して結晶化した（０.５９ｇ，０.００２ｍｏｌ，３５％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 1.18 (t, 3H), 2.24 (q, 2H), 2.58 (bs, 1H), 3.34 (m,
1H), 3.63 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 4.82 (dd, 1H), 5.98 (bs, 1H), 6.82 (m, 1H), 7.01 (m, 2H)。LRMS: m／z 242 (M-H+)。
【０４８０】
実施例１９
１−（４−フルオロ−３−メトキシフェニル）−２−プロピルアミノエタノール
【化３１】
2005516014.tif 000043
実施例３と同じ方法に従って、実施例１８のアミド（５８５ｍｇ，２.４２ｍｍｏｌ）から開始して製造した。６ＭのＨＣｌ（ａｑ）で還流した後、反応混合物を冷却し、ジエチルエーテル（２×５０ｍｌ）で抽出した。有機層を捨て、水層を炭酸カリウムを加えて塩基性にした。次に、水性の残留物を酢酸エチル（３×５０ｍｌ）で抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物を薄黄色の油として得た（４４８ｍｇ，１.９７ｍｍｏｌ，８１％）。
1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ: 0.96 (t, 3H), 1.58 (m, 2H), 2.63 (m, 2H), 2.79 (d, 2H), 3.96 (s, 3H), 4.77 (t, 1H), 6.90 (m, 1H), 7.03 (t, 1H), 7.11 (d, 1H)。LRMS:m／z 228 (M-H+)。
【０４８１】
実施例２０
２−クロロ−Ｎ−［２−（４−フルオロ−３−メトキシフェニル）−２−ヒドロキシエチル］−Ｎ−プロピルアセトアミド
【化３２】
2005516014.tif 000044
実施例４と同じ方法に従って、実施例１９のアミン（０.８４ｇ，４.００ｍｍｏｌ）から開始して製造し、表題の化合物を黄色の油として得た（０.９７ｇ，３.００ｍｍｏｌ，８７％）。ＬＲＭＳ：ｍ／ｚ ３０４（Ｍ−Ｈ+）。これを粗生成物から分離した。
【０４８２】
実施例２１
６−（４−フルオロ−３−メトキシフェニル）−４−プロピルモルホリン−３−オン
【化３３】
2005516014.tif 000045
実施例５と同じ方法に従って、実施例２０のアミド（０.９６ｇ，３.００ｍｍｏｌ）から開始して製造し、表題の化合物を黄色の油として得た（０.６４ｇ，２.４０ｍｍｏｌ，７５％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.94 (t, 3H), 1.62 (m, 2H), 3.33 (m, 2H), 3.48 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 4.34 (d, 1H), 4.43 (d, 1H), 4.76 (dd, 1H), 6.85 (m, 1H), 7.01-7.08 (m, 2H)。LRMS: m／z 268 (M-H+)。
【０４８３】
実施例２２
２−（４−フルオロ−３−メトキシフェニル）−４−プロピルモルホリン
【化３４】
2005516014.tif 000046
実施例６と同じ方法に従って、実施例２１のモルホリン−３−オン（６３３ｍｇ，２.３７ｍｍｏｌ）から開始して製造した。６ＭのＨＣｌ（ａｑ）で還流した後、反応混合物を冷却し、ジエチルエーテル（２×２０ｍｌ）で抽出した。有機層を捨て、水層を、炭酸カリウムを加えて塩基性にした。次に、水性の残留物を酢酸エチル（３×２０ｍｌ）で抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物を黄色の油として得た（５５２ｍｇ，２.１８ｍｍｏｌ，９２％）。
1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ: 0.95 (t, 3H), 1.58 (m, 2H), 2.02 (t, 1H), 2.22 (dt,
1H), 2.38 (t, 2H), 2.85 (d, 1H), 2.93 (d, 1H), 3.80 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 4.01
(dd, 1H), 4.50 (dd, 1H), 6.88 (m, 1H), 7.02 (t, 1H), 7.09 (d, 1H)。LRMS:m／z 254 (M-H+)。
【０４８４】
実施例２３ａ
Ｒ−（＋）−２−フルオロ−５−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール
実施例２３ｂ
Ｓ−（−）−２−フルオロ−５−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール
【化３５】
2005516014.tif 000047
実施例７と同じ方法に従って、実施例２２のアニソール（２００ｍｇ，０.７８９ｍｍｏｌ）から開始して製造した。粗反応混合物を、シリカを用いたカラムクロマトグラフィーで、ジクロロメタン：メタノール（９０：１０）で溶出させて精製し、表題のラセミ化合物を暗い黄色の粘性の油として得た（１４９ｍｇ，０.６２ｍｍｏｌ，７９％）。光学異性体を、キラルクロマトグラフィー（キラルパックＡＤ２５０*２０ｍｍカラム）で、ヘキサン：イソプロピルアルコール：（９０：１０）で溶出させて分離し、不透明な油として光学異性体１（２３ａ）(１５ｍｇ）(ｅｅ＞９９.５％）、および、結晶質固体として光学異性体２（２３ｂ）(１６ｍｇ）(ｅｅ＞９９％）を得た。
光学異性体１（２３ａ）：
1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ: 0.95 (t, 3H), 1.58 (m, 2H), 2.01 (t, 1H), 2.21 (dt,
1H), 2.37 (t, 2H), 2.82-2.97 (bq, 2H), 3.78 (dt, 1H), 3.99 (dd, 1H), 4.43 (d, 1
H), 6.78 (m, 1H), 6.89-7.01 (m, 2H)。LRMS: m／z 240 (M-H+)。αD＝＋0.91 (エタノール 1.10mg／ml)。
光学異性体２（２３ｂ）：
1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ: 0.96 (t, 3H), 1.58 (m, 2H), 2.01 (t, 1H), 2.22 (dt, 1H), 2.38 (t, 2H), 2.78 (dd, 2H), 3.78 (dt, 1H), 4.00 (dd, 1H), 4.43 (dd, 1H), 6.78 (m, 1H), 6.91 (d, 1H), 6.98 (t, 1H)。LRMS: m／z 240 (M-H+)。αD＝−0.40 (エタノール 1.00mg／ml)。
【０４８５】
実施例２４
２−アミノ−１−（４−ベンジルオキシフェニル）エタノール
【化３６】
2005516014.tif 000048
シアン化カリウム（２０.１５ｇ，０.３１mol）および塩化アンモニウム（１６.４ｇ，０.３１mol）を、水（６０ｍｌ）に溶解させ、そこに、４−ベンジルオキシベンズアルデヒド（３２.９ｇ，０.１５５ｍｏｌ）、続いてジエチルエーテル（１００ｍｌ）を加えた。反応混合物を、室温で４８時間、強く撹拌し、その後、酢酸エチル（２×２００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、シアノヒドリン中間体を、黄色の固体として得た（３４.２ｇ，０.１４ｍｏｌ，９０％）。次に、シアノヒドリンを、乾燥ＴＨＦ（３００ｍｌ）に溶解させ、ボラン−硫化メチル錯体（２６.６ｍｌ，０.２８ｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２時間還流し、その後、メタノール（５０ｍｌ）でクエンチした。水（５０ｍｌ）、続いてｃ.ＨＣｌ（４０ｍｌ）を加え、反応混合物を、発熱量が低下するまで２時間撹拌した。次に、反応混合物を真空中で濃縮し、残留物を水（１００ｍｌ）で希釈した。次に、その水溶液を、ＮＨ4ＯＨ（３０ｍｌ）を加えて塩基性にし、酢酸エチル（３×１５０ｍｌ）で抽出した。有機抽出物を、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物を白色の固体として得た（２４.８ｇ，０.１０ｍｏｌ，７３％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 1.62 (bs, 3H), 2.81 (dd, 1H), 2.99 (d, 1H), 4.61 (q, 1H), 5.07 (s, 2H), 6.95 (d, 2H), 7.22-7.45 (m, 7H)。LRMS: m／z 244 (M-H+)。
【０４８６】
実施例２５
Ｎ−［２−（４−ベンジルオキシルフェニル）−２−ヒドロキシエチル）プロピオンアミド
【化３７】
2005516014.tif 000049
実施例２４のアミン（２４.８ｇ，０.１０ｍｏｌ）をジクロロメタン（７００ｍｌ）に溶解させ、これにトリエチルアミン（２０.８６ｍｌ，０.１５ｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、撹拌し、０℃で冷却し、その後、プロピオニルクロライド（７.１２ｍｌ，０.０８２ｍｏｌ）を滴下して加えた。次に、反応混合物を１６時間にわたり室温に温め、その後、３ＭのＨＣｌ（ａｑ）(２０ｍｌ）と水（１００ｍｌ）でクエンチした。次に、反応混合物を、ジクロロメタン（３×２００ｍｌ）で抽出し、合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物を透明な粘性ゴムとして得た（２７.５ｇ，０.０９２ｍｏｌ，９０％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 1.10 (t, 3H), 2.19 (q, 2H), 3.32-3.43 (m, 4H), 4.81
(s, 2H), 5.11 (m, 1H), 6.99 (d, 2H), 7.25-7.42 (m, 7H)。LRMS: m／z 298 (M-H-)。
【０４８７】
実施例２６
１−（４−ベンジルオキシフェニル）−２−プロピルアミノエタノール
【化３８】
2005516014.tif 000050
実施例２５のアミド（２７.５ｇ，０.０９２ｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（１００ｍｌ）溶液に、ボラン−硫化メチル錯体（１７.５ｍｌ，０.１８ｍｏｌ）を加え、反応混合物を、２時間還流しながら撹拌した。反応混合物を冷却し、続いてメタノール（３０ｍｌ）でクエンチした。水（５０ｍｌ）と濃ＨＣｌ（３５ｍｌ）を加え、反応混合物を全ての泡がなくなるまで撹拌し、その後、真空中で濃縮した。残留物に水（２５０ｍｌ）を加え、その後、ＮＨ4ＯＨ（３０ｍｌ）を加えて塩基性にした。水層を、酢酸エチル（３×２００ｍｌ）で抽出し、合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物を白色の固体として得た（２６.１ｇ，０.０９ｍｏｌ，９９％）。
1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ: 0.95 (t, 3H), 1.58 (q, 2H), 2.62 (m, 2H), 2.81 (m, 2H), 4.72 (dd, 1H), 5.05 (s, 2H), 6.95 (d, 2H), 7.24 (m, 3H), 7.35 (t, 2H), 7.41
(d, 2H)。LRMS: m／z 286 (M-H+)。
【０４８８】
実施例２７
６−（４−ベンジルオキシフェニル）−４−プロピルモルホリン−３−オン
【化３９】
2005516014.tif 000051
水酸化ナトリウム（２２.５ｇ，０.５６ｍｏｌ）の水（１００ｍｌ）の溶液を、実施例２６のアミン（２６.０ｇ，０.０９ｍｏｌ）のジクロロメタン（４００ｍｌ）溶液に加え、溶液を強く室温で撹拌した。続いて、クロロアセチルクロリド（８.６ｍｌ，０.１１ｍｏｌ）を加え、反応混合物をさらに６０分間撹拌した。層分離し、水層を、ジクロロメタン（２００ｍｌ）で再抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、無色の油を得た。水酸化カリウム（１５.０ｇ，０.２７ｍｏｌ）、イソプロピルアルコール（４００ｍｌ）および無色の油の残留物を水（３０ｍｌ）と共に２時間撹拌し、不透明な溶液にした。反応混合物を真空中で濃縮し、黄色の残留物を酢酸エチル（２００ｍｌ）に溶解させた。これを水（２００ｍｌ）、続いてブライン（２００ｍｌ）で分離させた。有機分画を、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物を白色の固体として得た（１９.９ｇ，０.０６ｍｏｌ，６７％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.95 (t, 3H), 1.62 (m, 2H), 3.34 (m, 2H), 3.51 (m, 2H), 4.32 (d, 1H), 4.41 (d, 1H), 4.72 (dd, 1H), 5.04 (s, 2H), 6.98 (d, 2H), 7.31-7.43 (m, 7H)。LRMS: m／z 326 (M-H+)。
【０４８９】
実施例２８
２−（４−ベンジルオキシフェニル）−４−プロピルモルホリン
【化４０】
2005516014.tif 000052
実施例２６と同じ方法に従って、実施例２７のモルホリン−３−オン（１９.９ｇ，０.０６１ｍｏｌ）を用いて製造し、表題の化合物を無色の油として得た（１７ｇ，０.０５５ｍｏｌ，９０％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.95 (t, 3H), 1.55 (q, 2H), 2.06 (t, 1H), 2.21 (dt,
1H), 2.35 (dd, 2H), 2.80 (d, 1H), 2.91 (d, 1H), 3.82 (dt, 1H), 4.02 (dd, 1H), 4.52 (dd, 1H), 5.05 (s, 2H), 6.98 (t, 2H), 7.24-7.42 (m, 7H)。LRMS: m／z 312 (M-H+)。
【０４９０】
実施例２９
４−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール
【化４１】
2005516014.tif 000053
実施例２８のベンジルエーテル（３.０ｇ，９.６４ｍｍｏｌ）をメタノール（１５０ｍｌ）に溶解させ、１０％パラジウム担持活性炭（８００ｍｇ）を加えた。反応混合物を、２〜３分間撹拌し、その後、蟻酸アンモニウム（６.１７ｇ，９６.４ｍｍｏｌ）を数回に分けて加えた。反応混合物を、ガス発生がなくなるまで慎重に８０℃に加熱した。冷却した後、反応混合物をアルバセルでろ過し、メタノール（５０ｍｌ）で洗浄し、真空中で濃縮し、表題の化合物を白色の結晶質固体として得た（１.５１ｇ，６.８３ｍｍｏｌ，７１％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.91 (t, 3H), 1.58 (q, 2H), 2.10 (t, 1H), 2.22 (t, 1H), 2.40 (dd, 2H), 2.81 (d, 1H), 2.93 (d, 1H), 3.85 (t, 1H), 4.02 (dd, 1H), 4.57 (d, 1H), 6.79 (d, 2H), 7.21 (d, 2H)。LRMS: m／z 222 (M-H+)。
【０４９１】
実施例３０
２−ブロモ−４−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール
【化４２】
2005516014.tif 000054
実施例２９のフェノール（２００ｍｇ，０.９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５ｍｌ）
溶液に、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１６１ｍｇ，０.９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で５５時間撹拌し、その後、真空中で濃縮した。粗生成物を、シリカを用いたカラムクロマトグラフィーで、ジクロロメタン：メタノール（９５：５）で溶出させて精製し、表題の化合物を白色の発泡体として得た（１１７.５ｍｇ，０.３９ｍｍｏｌ，４４％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.96 (t, 3H), 1.59 (q, 2H), 2.03 (t, 1H), 2.23 (t, 1H), 2.40 (t, 2H), 2.81 (d, 1H), 2.98 (d, 1H), 3.82 (t, 1H), 4.01 (d, 1H), 4.56 (d, 1H), 6.96 (d, 1H), 7.20 (d, 1H), 7.49 (s, 1H)。LRMS: m／z 302(M-H+), Br 同位体)。
【０４９２】
実施例３１
２−（４−ベンジルオキシ−３−ブロモフェニル）−４−プロピルモルホリン
【化４３】
2005516014.tif 000055
実施例３０のフェノール（１１７.５ｍｇ，０.３９ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１０ｍｌ）溶液に、窒素雰囲気下で、炭酸カリウム（７５ｍｇ，０.５４ｍｍｏｌ）と臭化ベンジル（０.０７ｍｌ，０.５４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、１５０℃に４８時間加熱した。冷却した後、反応混合物を真空中で濃縮し、残留物を酢酸エチル（５０ｍｌ）と水（５０ｍｌ）で分離させた。次に、水層を、酢酸エチル（２×２０ｍｌ）で再抽出した。次に、合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、粗生成物を茶色の油として得た。これを、シリカを用いたカラムクロマトグラフィーで、ジクロロメタン：メタノール（９８：２）で溶出させて精製し、表題の化合物を無色の油として得た（１５３ｍｇ，０.３９ｍｍｏｌ，１００％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.93 (t, 3H), 1.56 (q, 2H), 2.05 (t, 1H), 2.25 (t, 1H), 2.37 (t, 2H), 2.82 (d, 1H), 2.92 (d, 1H), 3.85 (t, 1H), 4.02 (d, 1H), 4.52 (d, 1H), 5.15 (s,2H), 6.87 (d, 1H), 7.20 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.37 (t, 2H), 7.45 (d, 2H), 7.58 (s, 1H)。LRMS: m／z 392(M-H+)。
【０４９３】
実施例３２
２−ベンジルオキシ−５−（４−プロピルモルホリン−２−イル）安息香酸メチルエステル
【化４４】
2005516014.tif 000056
実施例３１の臭化物（１５３ｍｇ，０.３９ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（４ｍｌ）溶液に、トリエチルアミン（２.１ｍｌ，０.７８ｍｍｏｌ）とメタノール（２ｍｌ）を加え、反応混合物を５分間撹拌した。［１,１′−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（II）、ジクロロメタンとの錯体（１：１）（１６ｍｇ，０.０２ｍｍｏｌ）を加え、その後、反応混合物を一酸化炭素（ｇ）（３つの膨張したバルーン）で泡立てた。次に、反応混合物を、一酸化炭素雰囲気下で、１００℃で１６時間加熱した。冷却した後、反応混合物を真空中で濃縮し、残留物を酢酸エチル（２５ｍｌ）と水（２０ｍｌ）で分離させた。有機層を分離し、ブライン（２０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、黒色の固体を得た。シリカを用いたカラムクロマトグラフィーで、ジクロロメタン：メタノール：アンモニア（９０：１０：１）で溶出させて精製し、表題の化合物を無色の油として得た（１０５ｍｇ，０.２８ｍｍｏｌ，７３％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.94 (t, 3H), 1.60 (m, 2H), 2.18 (s, 4H), 2.43 (m, 2H), 3.00 (m, 2H), 3.90 (s, 3H), 4.04 d, 1H), 5.18 (s, 2H), 5.97 (d, 1H), 7.26-7.47 (m, 6H), 7.82 (s, 1H)。LRMS: m／z 370(M-H+)。
【０４９４】
実施例３３
２−ベンジルオキシ−５−（４−プロピルモルホリン−２−イル）安息香酸
【化４５】
2005516014.tif 000057
実施例３２のメチルエステル（１０５ｍｇ，０.２８ｍｍｏｌ）のメタノール（５ｍｌ）溶液に、１０％水酸化ナトリウム（ａｑ）（１５ｍｌ）を加え、乳白色の懸濁液を２時間還流した。無色になった反応混合物を冷却し、続いて２ＭのＨＣｌ（ａｑ）（数滴）を加えて中和した。次に、反応混合物を真空中で濃縮し、表題の化合物をオフホワイト色の固体として得た（９９ｍｇ，０.２８ｍｍｏｌ，１００％）。ＬＲＭＳ：ｍ／ｚ ３５５（Ｍ−Ｈ+）。この材料を粗生成物から分離し、実施例３４に用いた。
【０４９５】
実施例３４
２−ベンジルオキシ−５−（４−プロピルモルホリン−２−イル）ベンズアミド
【化４６】
2005516014.tif 000058
実施例３３の粗安息香酸（９９ｍｇ，０.２８ｍｍｏｌ）に、塩化チオニル（５ｍｌ）を加え、反応混合物を５０℃で２時間加熱した。反応混合物を冷却し、過量の塩化チオニルを真空中で除去した。次に、残留物を、ジクロロメタン（１０ｍｌ）に溶解させ、アンモニア（ｇ）で反応混合物を１０分間泡立たせた。得られた懸濁液を室温で１時間撹拌し、その後、真空中で濃縮した。粗材料を、シリカを用いたカラムクロマトグラフィーで、ジクロロメタン：メタノール：アンモニア（９５：５：０.５）で溶出させて精製し、表題の化合物をオフホワイト色の固体として得た（８８ｍｇ，０.２５ｍｍｏｌ，９０％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.94 (t, 3H), 1.59 (m, 2H), 2.15-2.42 (m, 4H), 2.87
(m, 1H), 3.03 (m, 1H), 3.96 (m, 1H), 4.02 (d, 1H), 4.67 (m, 1H), 5.19 (s, 2H), 5.72 (m, 1H), 7.04 (d, 1H), 7.41 (m, 5H), 7.50 (d, 1H), 7.70 (m, 1H), 8.21 (s, 1H)。LRMS: m／z 355 (M-H+)。
【０４９６】
実施例３５
２−ヒドロキシ−５−（４−プロピルモルホリン−２−イル）ベンズアミド
【化４７】
2005516014.tif 000059
実施例３４からのベンジルエステル（８０ｍｇ，０.２２ｍｍｏｌ）を用いて、実施例２９と同じ方法により製造し、表題の化合物をオフホワイト色の固体として得た（５６ｍｇ，０.２１ｍｍｏｌ，９６％）。
1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ: 0.95 (t, 3H), 1.55 (m, 2H), 2.13 (t, 1H), 2.29 (t, 1H), 2.42 (m, 2H), 2.88 (d, 1H), 2.97 (d, 1H), 3.81 (t, 1H), 4.00 (d, 1H), 4.49 (d, 1H), 6.87 (d, 1H), 7.42 (d, 1H), 7.78 (s, 1H)。LRMS: m／z 265(M-H+)。
【０４９７】
実施例３６
２−ニトロ−４−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール
【化４８】
2005516014.tif 000060
実施例２９のフェノール（１００ｍｇ，０.４５ｍｍｏｌ）を硝酸：水（１：３）（２ｍｌ）に溶解させ、室温で１０分間撹拌した。次に、反応混合物を水（５ｍｌ）で希釈し、ＮＨ4ＯＨ（１ｍｌ）で塩基性にし、その後、酢酸エチル（３×１０ｍｌ）に抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物を黄色の固体として得た（９５ｍｇ，０.３５ｍｍｏｌ，７９％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.97 (t, 3H), 1.33 (t, 2H), 1.43-1.79 (bm, 4H), 2.02 (d, 3H), 4.06 (m, 2H), 7.17 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 8.16 (s, 1H), 10.55 (bs, 1H)。LRMS: m／z 267 (M-H+)。
【０４９８】
実施例３７
２−アミノ−４−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール
【化４９】
2005516014.tif 000061
実施例３６のニトロ（９５ｍｇ，０.３５ｍｍｏｌ）のエタノール（１０ｍｌ）溶液に、１０％パラジウム担持活性炭（５０ｍｇ）と蟻酸アンモニウム（１００ｍｇ，ＸＳ）を加えた。反応混合物を、穏やかに７０℃に加熱し、その温度を１時間保持し、その後、室温に冷却した。次に、反応混合物を、アルバセルでろ過し、エタノール（２０ｍｌ）、続いてジクロロメタン（２０ｍｌ）で洗浄した。有機洗浄液を合わせ、真空中で濃縮し、表題の化合物を黄色の固体として得た（６５ｍｇ，０.２８ｍｍｏｌ，７８％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.91 (t, 3H), 1.55 (m, 2H), 2.12 (t, 1H), 2.25 (dt,
1H), 2.40 (t, 2H), 2.81-2.92 (dd, 2H), 3.82 (t, 1H), 4.00 (d, 1H), 4.42 (d, 1H), 6.60 (m, 2H), 6.71 (s, 1H)。LRMS: m／z 237(M-H+)。
【０４９９】
実施例３８
５−ブロモ−２−（２,５−ジメチルピロール−１−イル）ピリジン
【化５０】
2005516014.tif 000062
５−ブロモピリジン−２−イル−アミン（１３.８ｇ，０.０８ｍｏｌ）、アセトニルアセトン（１４.１ｍｌ，０.１２ｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸（１００ｍｇ）を、トルエン（１８０ｍｌ）に溶解させ、ディーン・スターク条件下で１４時間還流した。冷却した後、茶色の溶液を水（２００ｍｌ）に注いぎ、トルエン（２×２００ｍｌ）で抽出した。有機抽出物を合わせ、ブライン（５０ｍｌ）で洗浄し、続いて無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、粗生成物を得た。これを、シリカを用いたカラムクロマトグラフィーで、酢酸エチル：ペンタン（１：３）で溶出させて精製し、表題の化合物を茶色の油として得た（１８.４ｇ，０.０７３ｍｏｌ，９２％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 2.18 (s, 6H), 5.90 (s, 2H), 7.11 (d, 1H), 7.92 (d, 1H), 8.62 (s, 1H)。LRMS: m／z 253 (M-H+, Br 同位体)。
【０５００】
実施例３９
２−クロロ−１−［６−（２,５−ジメチルピロール−１−イル）ピリジン−３−イル］エタノン
【化５１】
2005516014.tif 000063
−７８℃の実施例３８のブロモピリジン（２ｇ，８.０ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（３０ｍｌ）溶液に、ブチルリチウム（２.５Ｍヘキサン溶液）（３.５ｍｌ ８.８ｍｍｏｌ）を滴下して２０分間にわたり加えた。反応混合物を３０分間撹拌し、続いて２−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルアセトアミド（１.２ｇ，８.８ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２０ｍｌ）溶液を−７８℃に保ちながら滴下して加えた。この温度で３０分間撹拌し続け、その後、１ＭのＨＣｌ（ａｑ）(５０ｍｌ）を加え、反応混合物を室温に温めた。有機層を分離し、水層を酢酸エチル（５０ｍｌ）で洗浄した。有機層を合わせ、次に、３ＭのＮａＯＨ（ａｑ）(１０ｍｌ）とブライン（１０ｍｌ）で洗浄し、その後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物の粗生成物を茶色の油として得た（１.３４ｇ，５.４ｍｍｏｌ，６７％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 2.20 (s, 6H), 4.68 (s, 2H), 5.92 (s, 2H), 7.32 (d, 1H), 8.38 (d, 1H), 9.16 (s, 1H)。LRMS: m／z 249 (M-H+)。
【０５０１】
実施例４０
２−（２,５−ジメチルピロール−１−イル）−５−オキシラニルピリジン
【化５２】
2005516014.tif 000064
乾燥ＴＨＦ（２０ｍｌ）に溶解させ０℃に冷却した実施例３９のケトン（１.３４ｇ，５.４ｍｍｏｌ）に、水素化硼素ナトリウム（３０８ｍｇ，８.１ｍｍｏｌ）を数回に分けて加えた。反応混合物を２時間撹拌し、続いて３ＭのＮａＯＨ（ａｑ）(１０ｍｌ）を加え、さらに１６時間撹拌し続けた。反応混合物を酢酸エチル（２×２０ｍｌ）で抽出し、合わせた有機抽出物をブライン（５ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮した。残留物を、シリカを用いたカラムクロマトグラフィーで、酢酸エチル：ペンタン（１：５）で溶出させて精製し、表題の化合物を無色の油として得た（９００ｍｇ，４.２ｍｍｏｌ，７８％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 2.13 (s, 6H), 2.91 (dd, 1H), 3.25 (t, 1H), 3.98 (t,
1H), 5.90 (s, 2H), 7.20 (d, 1H), 7.62 (dd, 1H), 8.58 (s, 1H)。LRMS: m／z 215 (M-H+)。
【０５０２】
実施例４１
１−［６−（２,５−ジメチルピロール−１−イル）ピリジン−３−イル］−２−プロピルアミノエタノール
【化５３】
2005516014.tif 000065
実施例４０のエポキシド（９００ｍｇ，４.２ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（５ｍｌ）溶液に、プロピルアミン（４ｍｌ，４.８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、４０℃で４日間加熱した。次に、反応混合物を冷却し、３ＭのＨＣｌ（ａｑ）(１０ｍｌ）と水（１０ｍｌ）を加え、その後、ジエチルエーテル（２×１０ｍｌ）で洗浄した。この有機層を捨てた。水層をＮＨ4ＯＨ（５ｍｌ）で塩基性にし、酢酸エチル（３×１０ｍｌ）で抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、表題の化合物を油として得た（１.１５ｇ，４.２ｍｍｏｌ，１００％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.93 (t, 3H), 1.62 (m, 2H), 2.11 (s, 6H), 2.69-2.82
(m, 3H), 3.06 (dd, 1H), 3.60 (bs, 2H), 4.92 (dd, 1H), 5.84 (s, 2H), 7.20 (d, 1H), 7.88 (d, 1H), 8.61 (s, 1H)。LRMS: m／z 274(M-H+)。
【０５０３】
実施例４２
６−［６−（２,５−ジメチルピロール−１−イル）ピリジン−３−イル］−４−プロピルモルホリン−３−オン
【化５４】
2005516014.tif 000066
実施例４１のアミン（１.１５ｇ，４.２ｍｍｏｌ）を用いて、実施例２７と同じ方法に従って製造した。シリカを用いたカラムクロマトグラフィーで、ジクロロメタン：メタノール（９８：２）で溶出させて精製し、表題の化合物を茶色のフィルムとして得た（１９１ｍｇ，０.６１ｍｍｏｌ，１４％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ:0.97 (t, 3H), 1.65 (m, 2H), 2.13 (s, 6H), 3.38 (m, 1H), 3.42-3.56 (m, 2H), 6.61 (t, 1H), 4.35 (d, 1H), 4.45 (d, 1H), 4.91 (dd, 1H), 6.91 (s, 2H), 7.22 (d, 1H), 7.89 (d, 1H), 8.61 (s, 1H)。LRMS: m／z 314 (M-H+)。
【０５０４】
実施例４３
６−［６−（２,５−ジメチルピロール−１−イル）ピリジン−３−イル］−４−プロピルモルホリン
【化５５】
2005516014.tif 000067
実施例４２のモルホリン−３−オン（１９１ｍｇ，０.６１ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（５ｍｌ）溶液に水素化アルミニウムリチウム（１Ｍジエチルエーテル溶液）（１.２５ｍｌ，０.６１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２.５時間還流しながら温めた。反応混合物を室温に冷却し、続いて１ＭのＮａＯＨ（１.２５ｍｌ）を加え、白色沈殿を得た。反応混合物をろ過し、真空中で濃縮した。白色の固体を捨てた。濃縮したろ液を、シリカを用いたカラムクロマトグラフィーで、ジクロロメタン：メタノール（９５：５）で溶出して精製し、表題の化合物を白色のフィルムとして得た（１０８ｍｇ，０.３６ｍｍｏｌ，５９％）。
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 0.92 (t, 3H), 1.61 (q, 2H), 2.10 (s, 6H), 2.15 (m, 1H), 2.29 (dt, 1H), 2.40 (t, 2H), 2.82 (d, 1H), 3.02 (d, 1H), 3.90 (t, 1H), 4.08
(d, 1H), 4.71 (d, 1H), 5.89 (s, 2H), 7.20 (d, 1H), 7.81 (d, 1H), 8.60 (s, 1H)。LRMS: m／z 300 (M-H+)。
【０５０５】
実施例４４
ＢＰ−８９７
【化５６】
2005516014.tif 000068
ＢＰ−８９７は、バイオプロジェット社が開発中の、薬剤の欲求と、薬剤が関連する環境の刺激により惹起される再発に対する脆弱性の可能性のある治療のためのドーパミンＤ３受容体アゴニストである。２０００年１１月に、ＢＰ−８９７を薬物依存性に関するフェーズII評価に進め、これらの試験は、２００１年１１月において進行中であった。
ＢＰ−８９７は、Ｄ３受容体を発現するＮＧ１０８−１５細胞において、フォルスコリンにより誘導されるｃＡＭＰの蓄積を阻害することがわかっている。この反応は、ハロペリドールにより完全に阻害された。これら細胞において、ＢＰ−８９７はまた、有糸分裂誘発、Ｄ３介在の受容体反応を増加させることも示し、この作用は、ナファドトライド（nafadotride）で拮抗された。
ＢＰ−８９７は、高い親和性を有する、効力のあるＤ３受容体アゴニスト（Ｋi＝０.９ｎＭ）であるが、弱いＤ２受容体アンタゴニスト（Ｋi＝６１ｎＭ）であることがわかっている。
【０５０６】
生物学的な実施例
１.０  方法
１.１.  動物試験方法
１.１.１  雄および雌の麻酔されたウサギを用いた方法
雄および雌のニュージーランドウサギ（〜２.５ｋｇ）を、フェイスマスクで酸素摂取を維持しながら、メデトミジン（Domitor（Ｒ））０.５ｍｌ／ｋｇ（筋肉内）、および、ケタミン（Vetalar（Ｒ））０.２５ｍｌ／ｋｇ（筋肉内）の組み合わせで前処理した。PortexTMカフなし気管内チューブ３ＩＤを用いてウサギの気管を切開し、人工呼吸器に連結させ、１分あたり呼吸３０〜４０回の呼吸速度で維持した（およその一回呼吸量体積は１８〜２０ｍｌ、最大気道圧は１０ｃｍ Ｈ2Ｏ）。次に、麻酔をイソフルランに切り替え、酸素呼吸を２ｌ／分で続けた。２３Ｇまたは２４Ｇカテーテルを用いて右耳の縁の静脈にカニューレを挿入し、０.５ｍｌ／分で乳酸リンゲル液で潅流した。侵襲的外科手術の最中、ウサギを３％イソフルランで維持し、麻酔状態を維持するために２％に低めた。左の頚静脈を露出させ、隔離し、薬剤と化合物を注入するためにＰＶＣカテーテル（１７Ｇ）を用いてカニューレを挿入した。
【０５０７】
ウサギの左鼠径部の毛を剃り、腿にそって長さ約５ｃｍに垂直に切開した。大腿静脈と動脈を露出させ、隔離し、薬剤と化合物を注入するためにＰＶＣカテーテルを用いてカニューレを挿入した（１７Ｇ）。大腿動脈へのカニューレ挿入を繰り返し、カテーテルが確実に腹部大動脈に達するようにカテーテルを深さ１０ｃｍに挿入した。この動脈カテーテルをグールドシステムに連結し、血圧を記録した。血液ガス分析用のサンプルも動脈カテーテルを経て採取した。収縮期圧と弛緩期圧を測定し、式（弛緩期×２＋収縮期）÷３を用いて平均動脈圧を計算した。パルスオキシメーターと、Ｐｏ−ｎｅ−ｍａｈデータ集録ソフトウェアシステム（Ponemah Physiology Platform，グールドインスツルメントシステムズ社）により心拍数を測定した。
【０５０８】
腹側正中線にそって腹腔まで切開した。恥骨のちょうど上まで長さ約５ｃｍ切開した。脂肪と筋肉を手際よく取り除き、体腔に沿って走る下腹神経を露出させた。恥骨の上にある大腿静脈と動脈を傷付けないように、恥骨の壁面の曲線に近づけて保持することが必須である。坐骨神経と骨盤神経はより深いところにあり、ウサギの背面をさらに切開した後に位置を確認した。坐骨神経が確認されたら、骨盤神経は容易に位置確認された。用語「骨盤神経」は、広く適用される；このテーマに関して、解剖学の教本では、あまり詳細に神経を同定していない。しかしながら、神経の刺激により、女性における膣および陰核の血流、ならびに、雄における陰茎海綿体圧および海綿体の血流を増加させ、骨盤領域の神経支配をもたらす。骨盤神経を周囲の組織から離し、神経の周囲にハーバードのバイポーラ刺激電極を設置した。神経をわずかに持ち上げ、いくらか張りを与え、電極を適所に固定した。パラフィン油約１ｍｌを神経と電極の回りに入れた。これは、神経の保護潤滑剤として作用し、電極の血液汚染を防ぐ。電極をグラス社のＳ８８スティミュレーターに連結した。以下のパラメーターを用いて骨盤神経を刺激した：−５Ｖ、パルス幅０.５ｍｓ、刺激時間２０秒、周波数１６Ｈｚ。１５〜２０分間ごとに神経を刺激した際に、再現性のある反応が得られた。上記パラメーターを用いて数回刺激し、平均コントロール反応を確立した。ハーバードの２２注入ポンプを用いて試験される化合物を頚静脈から注入し、連続した１５分の刺激サイクルを行った。
【０５０９】
雄では、陰茎周辺の皮膚と結合組織を除去し、陰茎を露出させた。カテーテル一式（インサイト−Ｗ，ベクトンディッキンソン２０ゲージ１.１×４８ｍｍ）を白膜（tunica albica）を通過させて左の海綿体の空間に挿入し、針を除去し、フレキシブルカテーテルを残した。このカテーテルを圧力トランスデューサー（Ohmeda 5299-04）を介してグールドシステムに連結させ、陰茎海綿体圧を記録した。陰茎海綿体圧が確立されたら、カテーテルをVetbond（組織接着剤，３Ｍ）を用いて適所に密封した。パルスオキシメーターとＰｏ−ｎｅ−ｍａｈデータ集録ソフトウェアシステム（Ponemah Physiology Platform，グールドインスツルメントシステムズ社）により心拍数を測定した。
【０５１０】
陰茎海綿体の血流の記録は、Ｐｏ−ｎｅ−ｍａｈデータ集録ソフトウェア（Ponemah Physiology Platform，グールドインスツルメントシステムズ社）を用いてフローメーターから直接的に数を記録するか、または、グールドチャートレコーダートレースから間接的に記録するかのいずれかによりなされた。実験開始時からキャリブレーションを行った（０〜１２５ｍｌ／分／１００ｇ組織）。
【０５１１】
雌においては、恥骨の尾の端で腹側正中線に沿って切開し、恥骨部分を露出させた。結合組織を除去し、壁が確実に小血管から離れるように陰核の膜を露出させた。全ての結合組織を除去して外側の膣壁も露出させた。１つのレーザードップラーフロープローブをプローブ軸の半分がなおも見えるように膣に３ｃｍ挿入した。第二のプローブを外部の陰核の壁の調度上に設置されるように配置した。次に、シグナルが得られるまでこれらプローブの位置を調節した。第二のプローブを外部の膣壁上の血管表面のちょうど上に設置した。双方のプローブを適所に固定した。
【０５１２】
膣および陰核の血流の記録は、Ｐｏ−ｎｅ−ｍａｈデータ集録ソフトウェア（Ponemah Physiology Platform，グールドインスツルメントシステムズ社）を用いてフローメーターから直接的に数を記録するか、または、グールドチャートレコーダートレースから間接的に記録するかのいずれかによりなされた。実験開始時からキャリブレーションを行った（０〜１２５ｍｌ／分／１００ｇ組織）。
【０５１３】
選択的ドーパミンＤ３アゴニストを生理食塩水と１０％の１ＭのＮａＯＨとで調製した。ホスホジエステラーゼタイプ５（ＰＤＥ５）阻害剤を生理食塩水と５％の１ＭのＨＣｌとで調製した。アゴニスト（必要に応じて阻害剤）と担体コントロールを速度０.１ｍｌ／秒で注入した。選択的ドーパミンＤ３アゴニスト（必要に応じてＰＤＥcAMP阻害剤）を、１５分間放置し、その後、骨盤神経を刺激した。
全データを平均±標準誤差として記録した。有意差をスチューデントのｔ検定を用いて同定した。
【０５１４】
２.０  結果および考察
以下の実施例により、Ｄ３ドーパミン受容体単独の活性化または活性の増強（すなわち、Ｄ２ドーパミン受容体活性の活性化または増強、または、Ｄ２ドーパミン受容体活性の顕著な活性化または増強を伴わない）により、陰茎の勃起および／または女性生殖器の血流の増強が引き起こされることが実証された。
加えて、以下の結果により、主としてＤ２ドーパミン受容体活性の活性化または増強が、非選択的ドーパミンアゴニストの投与後に観察される副作用の原因であることが実証された。この結果により、Ｄ３受容体は、前記副作用には関与していないか、または、主として関与していないことが実証された。
以下の結果により、アゴニストの、Ｄ３受容体とＤ２受容体との選択性の度合いが重要であることがさらに実証された。Ｄ２受容体に比べてＤ３受容体に対して機能的な選択性（プラミペキソールで達成されるのと少なくとも約３倍）を有する選択的Ｄ３受容体アゴニストのみが、所望の陰茎の勃起／女性生殖器の血流を引き起こし、一方で非選択的ドーパミンアゴニストで観察される副作用を克服するのに十分に選択的である。
【０５１５】
３.０  以下の実施例で用いられる化合物
３.１  ７−ＯＨ−ＤＰＡＴは市販のＤ３／Ｄ２非選択的アゴニストである。
３.２  プラミペキソール（ＳＮＤ９１９；２−アミノ−４,５,６,７−テトラヒドロ−６−プロピルアミノ−ベンズチアゾール−ジヒドロクロライド）は、市販のＤ３優先的Ｄ３／Ｄ２アゴニストであり、Ｄ２受容体と比べてＤ３に対して約５倍〜約９倍の選択性を有
する。
【０５１６】
３.３  ロピニロールは、市販の平均的なＤ３／Ｄ２アゴニストであり、Ｄ２受容体と比較してＤ３に対して約２倍の選択性を有する。
３.４  トランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミン（ＰＤ−１６３,４０４）は、選択的Ｄ２アゴニストである（Wustrow 等. J. Med. Chem. 41，760〜771（1998年）の実施例２３ｂを参照）。
【０５１７】
３.５  Ｌ−７４１,６２６は、市販のＤ２アンタゴニストである（１６倍選択的）（Kulagowski 等，J. Med. Chem. 1996年，5月10日，39（10）：1941〜2、および、Bowery 等，Br. J. Pharmacol. 1996年，12月号：119（7）：1491〜７を参照）。
３.６  ＳＢ−２７７,０１１は、Ｄ３アンタゴニスト（１２６倍選択的）である（Stemp等，J. Med. Chem.（2000年）45，1878〜1885を参照）。
３.７  Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩（「化学合成の実施例」の章の実施例８を参照）は、本発明に係る選択的Ｄ３受容体アゴニストである。
【０５１８】
３.８  Ｓ３２５０４は、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対する優先的または選択的アゴニストである。Ｓ３２５０４は、抗パーキンソンおよび抗うつ剤特性を有するといわれている。Ｓ３２５０４は、ＧＴＰγＳ分析を用いると、Ｄ２受容体と比較してＤ３受容体に対して２５１倍選択的である。Ｓ３２５０４の化学構造は以下の通り：
【化５７】
2005516014.tif 000069
化合物Ｓ３２５０４は、米国化学会の第２２２回ＡＣＳ全国会議（シカゴ，イリノイ州，２００１年８月２６〜３０日）で開示された。（Peglion等の［会議録のアブストラクト２０８］を参照）。この化合物の合成は、欧州特許第０８９９２６７号、加えて、Millan M.J. 等，Soc. Neurosci. Abst.（1999年）26. Pt. 2.アブストラクト588.2に記載されている。
３.９  ＰＮＵ−９５６６６（ａｋａ Ｕ−９５６６６，Ｕ−９５６６６Ａ，ＰＮＵ−９５６６６Ｅ，sumanirole）［（Ｒ）−５,６−ジヒドロ−Ｎ,Ｎ−ジメチル−４Ｈ−イミダゾ４,５,１−ｉｊ］キノリン−５−アミン（Ｒ）−３］が、選択的Ｄ２アゴニストとして（結合親和性により評価された）特許請求されているが、機能的には非選択的Ｄ２／Ｄ３ドーパミンアゴニストである。ＰＮＵ−９５６６６の化学構造を以下に示す：
【化５８】
2005516014.tif 000070
【０５１９】
実施例４５
陰茎の勃起と女性生殖器の血流の誘導／維持に関与するＤ３及びＤ２受容体
手術により埋め込まれた遠隔自動計測電送装置を用いて陰茎海綿体圧および／または陰核／膣の血流を測定することにより、勃起反応を記録した。外科手術、データ集録および分析の具体的な詳細は、Bernabe J，Rampin O. Sachs BD，Giuliano F. の Intracavernous pressure during erection in rats：an integrative approach based on telemetric
recording. Am. J. Physiol. 1999年2月；276（2 Pt 2）：R441-９で詳細に知ることができる。
【０５２０】
Ｄ２およびＤ３受容体はいずれも、陰茎の勃起の誘導と維持に関与する。
アポモルフィン、７−ＯＨ−ＤＰＡＴ、および、プラミペキソールはいずれも、雄の勃起モデルにおいて勃起前の作用（proerectile effect）を誘導／増強する。
作用機序研究によれば、７−ＯＨ−ＤＰＡＴ（Ｄ２／Ｄ３非選択的アゴニスト）と、プラミペキソール（Ｄ３優先的Ｄ２／Ｄ３アゴニスト）は、Ｄ３またはＤ２受容体の活性化により勃起メカニズムを増強させることができることが示された。
【０５２１】
プラミペキソール（０.１μｇ／ｋｇを皮下投与）は、遠隔測定されているラットにおいて勃起前の作用を誘導する。
プラミペキソールの勃起作用（０.１μｇ／ｋｇを皮下投与）は、選択的Ｄ２受容体アンタゴニストの存在下（Ｌ−７４１,６２６、２ｍｇ／ｋｇを皮下投与）で観察され、すなわちプラミペキソールによる勃起は、Ｄ３受容体活性化が介在する。
プラミペキソールの勃起作用（０.ｌμｇ／ｋｇを皮下投与）は、選択的Ｄ３受容体ア
ンタゴニストの存在下（ＳＢ−２７７,０１１、３ｍｇ／ｋｇを皮下投与）で観察され、すなわちプラミペキソールによる勃起は、Ｄ２受容体活性化が介在する。
【０５２２】
Ｌ−７４１,６２６およびＳＢ−２７７,０１１を同時に投与することによって（それぞれ２ｍｇ／ｋｇを皮下投与、３ｍｇ／ｋｇを皮下投与）、全てのプラミペキソールにより誘導される勃起性の活性が阻害され、すなわちプラミペキソールにより誘導される勃起は、Ｄ２またはＤ３受容体活性化が介在する。
【０５２３】
【表１０】
2005516014.tif 000071
【０５２４】
７−ＯＨ−ＤＰＡＴ（１０μｇ／ｋｇ皮下投与）は、遠隔測定されているラットにおいて、選択的Ｄ２受容体アンタゴニスト（Ｌ−７４１,６２６、２ｍｇ／ｋｇ皮下投与）又は選択的Ｄ３受容体アンタゴニスト（ＳＢ−２７７,０１１、３ｍｇ／ｋｇ皮下投与）の存在下で勃起前の作用を誘導する。
【０５２５】
Ｌ−７４１,６２６とＳＢ−２７７,０１１を同時に投与することによって（それぞれ２ｍｇ／ｋｇを皮下投与、３ｍｇ／ｋｇを皮下投与）、全ての７−ＯＨ−ＤＰＡＴにより誘導される勃起性の活性が阻害され、すなわち７−ＯＨ−ＤＰＡＴにより誘導される勃起は、Ｄ２またはＤ３受容体活性化が介在する。
【０５２６】
トランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミン（選択的Ｄ２アゴニスト）は、ラットにおいて勃起を起こさせる。選択的Ｄ２アンタゴニスト（Ｌ−７４１,６２６；２ｍｇ／ｋｇ皮下投与）により、トランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミンにより誘導される勃起が阻害される。プラミペキソールおよび７−ＯＨ−ＤＰＡＴにより誘導される勃起におけるＤ３の役割を調査した研究によれば、Ｄ２介在経路が阻害される。
【０５２７】
遠隔測定されているラットにおいて、Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩（１０μｇ／ｋｇ皮下投与）（選択的Ｄ３アゴニスト）により、２.２５±０.２５回の勃起／１０分間が起こる。
このデータによれば、Ｄ２およびＤ３受容体はいずれも、陰茎の勃起の誘導と維持に関与することが強く示唆される。Ｄ２受容体と比較して選択性を有する選択的Ｄ３アゴニストは、治療の有効性と副作用との治療可能比を増加させる機会を提供し得る（治療域；治療係数；治療プロファイル）。
【０５２８】
実施例４６
麻酔されたイヌにおいて、ドーパミンＤ２受容体の選択的活性化は、嘔吐を誘導する
雄ビーグル（１１〜１７ｋｇ）を用いた。一晩絶食させた後、動物をクロラロース（８０ｍｇ／ｋｇ静脈内）で麻酔し、まず麻酔剤用量の速攻型バルビツレート、チオペンタール（１５ｍｇ／ｋｇ静脈内）を注射した。気管挿管の後（催吐反応の嘔吐期の際でも開放気道を確保するため）、左大腿静脈と動脈に、それぞれ麻酔剤をさらに投与するためと、血行動態パラメーターを記録するためにカニューレを挿入した。外科手術を完了した際、外科手術の傷に持続型局所麻酔剤（ブピバカイン）を染み込ませ、動物を１２０分間安定化させ、その後、試験化合物を投与した。催吐反射のＣＮＳ遠心性成分は、本質的に呼吸性運動ニューロンにより運搬されるため、安定化期間の最中に呼吸数をモニターし、呼吸中枢が強く抑制されていないことを確かめた。動物が安定化し、呼吸数が規則正しくなったら、最初の試験化合物の用量を頚部の背面に皮下注射して投与した。投与後３０分間、動物を厳密に観察し、運動的（例えば、嚥下、目のまばたき、肢の動き、呼吸数と深さの変化、吐き気および嘔吐）および血行動態の変化を書き取り記録した。上述の投与の後、アポモルフィン、プラミペキソール、トランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミン、および、Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩の用量を段階的に増加させて（３、１０、３０，１００、３００、１０００、および、３０００μｇ／ｋｇ）、６０〜９０分間にわたり著しい催吐反応が観察されるまで投与した。各用量の試験化合物を投与した後、１５分間で血液サンプルを採取し（吐き気を催した動物において、試験薬剤の注射から最初に吐き気を催すまでの潜伏時間は、通常７〜１３分であった；表１を参照）、血漿サンプルは後の分析のために凍結した。実験が完了した後、動物を過量のペントバルビタールで殺した。
【０５２９】
個々の動物でなされた観察を用いて、特定の用量レベルの試験化合物を注射された際に吐き気を催した動物のパーセンテージを決定した。次に、吐き気を催した動物のパーセンテージを用いて、用量反応曲線を構築し、適切な曲線よりＥＤ50値を決定した。
【０５３０】
アポモルフィン
アポモルフィンは、クロラロースで麻酔されたイヌにおいて著しい催吐反応を誘導する。催吐反応は用量に関連しており、８.５、２６および８５μｇ／ｋｇ（皮下投与）を投与された動物（ｎ＝４）の、それぞれ０、２５および１００％が吐き気を催した。グルー
プ平均（±標準誤差）の吐き気を催した日数も用量に関連しており、８.５、２６および８５μｇ／ｋｇ（皮下投与）で、吐き気を催したのは、それぞれ０.０、２.５（±２.５）および２８.０（±７.５）であった。吐き気を催した動物のパーセンテージに基づき、アポモルフィンは、麻酔されたイヌにおいて、催吐反射の誘導に関して３３μｇ／ｋｇ（皮下投与）のＥＤ50を有する。
【０５３１】
トランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミン
研究の際、１００μｇ／ｋｇで嘔吐を観察し、対応するサンプルの平均遊離濃度は、３.６ｎＭであった。トランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−ｌ−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミンに関するＥＣ50は、３.８ｎＭ＝Ｄ２、および、Ｄ３＝＞１００ｎＭであった。サンプルによれば、遊離濃度はＤ２ＥＣ50を上回り、Ｄ３ＥＣ50より十分に低いことを示すことから、観察された嘔吐は、Ｄ２が介在する作用によるものと考えられる。
【０５３２】
プラミペキソール
研究の際、３０μｇ／ｋｇで嘔吐を観察し、対応するサンプルの平均遊離濃度は３.０ｎＭであった。プラミペキソールに関するＥＣ50は、２.７５ｎＭ＝Ｄ２および０.５６ｎＭ＝Ｄ３であった。適切なサンプルにおける遊離濃度がＤ２およびＤ３のＥＣ50に近いために、観察された嘔吐がＤ２またはＤ３の作用により引き起こされるかどうかの結論は、この化合物に関しては得られなかった。
【０５３３】
Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩
研究中、３０００μｇ／ｋｇまでの用量では嘔吐は観察されなかった。対応するサンプルの遊離血漿濃度は、２７００ｎＭであり、これはＲ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩に関するＤ３ＥＣ50より約２７０倍大きい。
【０５３４】
測定された濃度がＣmaxを示し、薬物動態学的プロファイルは嘔吐の薬力学的プロファイルに従うとすれば、上記データにより、観察された嘔吐は、トランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミンのデータに基づき、Ｄ２が介在する作用によるものであることが示される。アポモルフィンとプラミペキソールはいずれも、起こりうるＤ２が介在して観察される嘔吐を確認するのには決定的とはいえない。
【０５３５】
このデータにより、Ｄ２受容体が嘔吐の誘導に関与することが強く示される。Ｄ２受容体と比較して選択性を有する選択的Ｄ３アゴニストは、治療の有効性と副作用との治療可能比（治療域；治療係数；治療プロファイル）を増加させる機会を提供し得る。
【０５３６】
実施例４７
Ｄ２ドーパミン受容体は、７−ＯＨ−ＤＰＡＴの前嘔吐性の作用に介在する
クロアシイタチにおいてドーパミンＤ２／Ｄ３受容体アゴニストのＲ（＋）−７−ＯＨ−ＤＰＡＴにより誘導された嘔吐は、Ｄ２／Ｄ３受容体アンタゴニストの（Ｓ）−エチクロプリド（Yoshikawa等（1996年）Eur. J. Pharmacol. 301，143〜149）によりブロックすることができる。この作用のメカニズムをよりよく理解するために、我々は、（Ｓ）−エチクロプリドの活性と、報告されたＤ３−選択的アンタゴニストのＧＲ２１８２３１（Murray等（1996年）Bioorg. & Med. Chem. Letts. 6，403〜408）およびＤ２受容体優先的アンタゴニストのＬ−７４１,６２６（Bowery等，(1996年）Br. J. Pharmacol. 119，1491〜1497）の活性とを、クロアシイタチで７−ＯＨ−ＤＰＡＴにより誘導される嘔吐に関して比較した。
【０５３７】
アンタゴニスト親和性の概算（表１）を、標準的な技術を用いて、［3Ｈ］−スピペロンのヒト組換えＤ２ショート（ｈＤ２ｓ）受容体への結合阻害、および、［3Ｈ］−Ｒ（＋）−７−ＯＨ−ＤＰＡＴのヒト組換えＤ３（ｈＤ３）受容体への結合阻害から決定した。
【０５３８】
【表１１】
2005516014.tif 000072
【０５３９】
ＧＲ２１８２３１は、ｈＤ２ｓ受容体と比較してｈＤ３に対して〜８０倍選択的であり、一方で、Ｌ−７４１,６２６は、ｈＤ3と比較してｈＤ2ｓに対して〜３０倍選択的であった。エチクロプリドは非選択的であった。
【０５４０】
嘔吐実験において、雄または雌のクロアシイタチ（アルビノおよびヨーロッパケナガイタチ）（０.６〜１.５ｋｇ）に、７−ＯＨ−ＤＰＡＴ（０.１ｍｇ／ｋｇ皮下投与）での誘発の前の１５〜４５分に、アンタゴニストまたは担体を皮下投与した。イタチを６時間観察し、嘔吐をトータルの吐き気および嘔吐として定量した。７−ＯＨ−ＤＰＡＴを投与された全てのコントロール動物は、催吐反応（平均±標準誤差；７８.０±９.０）を示した。抗催吐効力は、試験された全動物において嘔吐を完全に阻害するのに必要な最小用量（ＥＤ100；表２）として示された。麻酔されたクロアシイタチ（ウレタン５０％ｗ／ｖ；３ｍｌ／ｋｇ，腹腔内）で、各アンタゴニストの未結合の血漿濃度と全脳内濃度をＥＤ100用量で皮下投与して測定した。
【０５４１】
【表１２】
2005516014.tif 000073
【０５４２】
ＧＲ２１８２３１の抗催吐作用は、最大用量１０ｍｇ／ｋｇでも最大下であり、遊離薬剤の血漿濃度は〜１００倍であったが、ｈＤ３受容体と脳内濃度に対するＫｉは、最高に達した。嘔吐は、動物の２／３においてしかブロックされなかった。エチクロプリドおよびＬ−７４１,６２６は、全動物において、遊離血漿濃度（低い倍数（〜４×）のｈＤ２ｓに対するＫｉである）で、嘔吐をブロックした。我々のデータによれば、７−ＯＨ−ＤＰＡＴの嘔吐をもたらす活性は、Ｄ３受容体活性化と無関係であり、Ｄ２受容体でのアゴニスト活性に、より関連する可能性があることが示される。
このデータにより、Ｄ２受容体が、嘔吐の誘導に関与することが強く示される。Ｄ２受容体と比較して選択性を有する選択的Ｄ３アゴニストは、治療の有効性と副作用との治療可能比（治療域；治療係数；治療プロファイル）を高める機会を提供し得る。
【０５４３】
実施例４８
麻酔されたイヌにおいて、ドーパミンＤ２受容体の選択的活性化が、低血圧およびその他の心臓血管作用を誘導する
雄ビーグルを、ピリトラミドの前投与後、クロラロースとウレタンの混合物で麻酔した。雄ビーグルに計器を導入し、動脈血圧、心拍出量、Ｅ.Ｃ.Ｇ.、外陰の動脈血流（ＰＡＦ）および陰茎海綿体圧（ＩＣＰ）を測定した。心拍数や血管抵抗のようなその他のパラメーターを、一次シグナルから得た。平衡時間の後、一連のコントロールを読み取り、４および８Ｈｚでの骨盤神経刺激のＩＣＰおよびＰＡＦに関する作用を測定した。化合物を、埋め込まれたカテーテルにより、用量範囲０.３〜３０００μｇ（基本）／ｋｇで頚部背面領域に皮下投与した。それぞれ投与した後、パラメーターを３０分の固定インターバルで測定した。それぞれ投与した後、骨盤神経の刺激を１５分間繰り返した。
結果をそれぞれのイヌの最終コントロール値からの変化（％）として分析し、３匹のイヌの平均値を用いた。
【０５４４】
３種の化合物（アポモルフィン、プラミペキソール、および、トランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミン）は、総血管抵抗（ＴＶＲ；または、総末梢抵抗（ＴＰＲ）としても知られている）を減少させたが、プラミペキソールとトランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミンだけが、平均血圧に何らかの明確な作用を有するようであった。ＴＰＲへの作用は、開始が迅速であり、そのピークは約１０〜１５分間であり、１〜１０μｇ／ｋｇ（皮下）の用量レベルを示した。ＥＤ30値を計算することによってＴＰＲへの作用を定量することを試みた。ピークの減少（ｆａｌｌ）に対するそれぞれのイヌの用量に関するＳ字形曲線をプロットし、１００〜４０の範囲にした（ＴＰＲの６０％減少は、最大に近い）。幾何平均値を表３に示す。
【０５４５】
【表１３】
2005516014.tif 000074
【０５４６】
Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩
研究の際、３０００μｇ／ｋｇまでの用量では、血圧またはＴＰＲへの顕著な作用は観察されなかった。対応するサンプルの遊離の血漿濃度は、２７００ｎＭであり、これは、Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩のＤ３ ＥＣ50より約２７０倍大きかった。
【０５４７】
アポモルフィン、プラミペキソール、および、トランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミン
これにより、広く類似した心拍出量と心拍数の増加が起こる。Ｄ３選択的アゴニストのＲ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩は、心拍出量と心拍数に関して顕著な作用を示さなかった。
【０５４８】
Ｄ２アゴニスト（トランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］
シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミン）、Ｄ３優先的アゴニスト（プラミペキソール）、および、非選択的ドーパミンアゴニスト（アポモルフィン）により、麻酔されたイヌにおいて著しい血行動態の変化が引き起こされ、最高用量レベルで心拍出量は約二倍であった。血圧と心拍数への作用に関していくらか質的な差があったが、その重要性はわかっていない。血行動態の変化、ＴＰＲを評価するのに最も重要なパラメーターは、全ケースにおいて減少した。化合物のＥＤ30値を計算した。このレベルは、ＴＰＲの顕著な減少を示し、起立性低血圧や失神を引き起こす可能性があり、Ｄ２受容体においてプラミペキソールが効力を減少させることから、プラミペキソールは、アポモルフィンと同等であると考えられる。Ｄ３選択的アゴニスト（Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩は、麻酔されたイヌでは顕著な血行動態作用を有さなかった。
【０５４９】
上記データによれば、観察された心臓血管の作用は、トランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミンのデータに基づき、Ｄ２が介在する作用によるものであることが示される。アポモルフィンとプラミペキソールは両方、Ｄ２受容体と比較してＤ３受容体に対する選択性を欠くことによる、可能なＤ２が介在する心臓血管の作用を確認するには、いずれも決定的とはいえない。
このデータは、Ｄ２受容体が、ドーパミンアゴニストに関連する心臓血管の作用に関与することを強く示す。Ｄ２受容体と比較して選択性を有する選択的Ｄ３アゴニストは、治療の有効性と副作用との治療可能比（治療域；治療係数；治療プロファイル）を増加させる機会を提供し得る。
【０５５０】
実施例４９
陰茎の勃起および女性生殖器の血流を増強するための選択的Ｄ３アゴニストの使用
Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩を作製し、前記麻酔された雄および雌ウサギ（方法は上述の通り）で試験し、それぞれ陰茎海綿体圧と海綿体の血流、および、膣と陰核の血流への作用を評価した。
調査によれば、機能的に選択的なＤ３アゴニスト、Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩は、麻酔された雄または雌ウサギ（方法は上述の通り）で試験したところ、雄ウサギにおける陰茎海綿体圧および海綿体の血流、ならびに、雌ウサギにおける膣および陰核の血流を、少なくとも非選択的ドーパミンアゴニスト（例えばアポモルフィン、および、プラミペキソール）と同程度に有益に増強したことがわかった。
【０５５１】
実施例５０
Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩の機能的な選択性
ドーパミンＤ２受容体と比較したドーパミンＤ３受容体に対するＲ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩の機能的な選択性を、上述の「機能的なＤ３／Ｄ２アゴニスト分析」を用いて分析した。
【０５５２】
以下の非選択的ドーパミンアゴニスト：プラミペキソール、ロピニロール、７−ＯＨ−ＤＰＡＴ、キネロラン（quinelorane）、トランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミン、および、アポモルフィンを用いて比較した。
【０５５３】
同じ機能分析を用いたところ、Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル
）フェノール塩酸塩は、Ｄ２受容体と比較してＤ３に対して機能的に選択的であり、選択性は、プラミペキソールが示す選択性の３倍を超過していた（Ｄ３受容体に対してわずか約５倍〜約９倍選択的であり、効果的に（機能的に）平均的アゴニストと同等である）。対照的に、アポモルフィン、７−ＯＨ−ＤＰＡＴ、および、キネロランは、Ｄ２およびＤ３受容体の両方に対してほぼ同等の活性を示す平均的アゴニストであり、トランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミンは、Ｄ２優先的アゴニストであった（表４を参照）。
【０５５４】
【表１４】
2005516014.tif 000075
【０５５５】
* ＥＣ50＝「有効濃度５０％」、または、ＥＣ50とも記載され、ここでは「そのアゴニストの可能な最大反応の５０％（または半分）を生じさせるアゴニストのモル濃度」と定義される。
** プラミペキソールに関して公開されたデータは、このデータに一致し、「Pramipexole binding and activation of cloned and expression dopamine D2，D3 and D4 receptors」(Mierau J. 等. Eur. J. Pharmacol. 1995年；290（1）；29〜36）を参照すれば、そのアブストラクトにおいて、以下のように述べられている「・・・これら結果は、Ｄ３受容体に対してプラミペキソールの５倍の選択性を示すが、その一方で、キンピロールおよびブロモクリプチンは、非選択的、または、むしろＤ２／Ｄ４受容体選択的である....」。
【０５５６】
ＷＯ ９３／２３０３５では、ロピニロールが開示されており、これは選択的Ｄ３アゴニストであり、Ｄ２：Ｄ３の結合が１３８０ｎＭ：６９ｎＭ（２０倍）であることに基づき選択性を示すことを示唆している。しかしながら、このような結合データは、ロピニロールが機能的にＤ３選択的ではないことを明確に示す上記表４のデータのような「機能的な選択性」の正確な所見ではない。
【０５５７】
実施例５１
Ｄ３アゴニストに対して機能的に少なくとも３０倍の選択性を有する化合物の、１またはそれ以上の副作用、例えば吐き気、嘔吐、低血圧または失神に関する作用の比較
機能的に選択的なＤ３アゴニスト、Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩は、非選択的ドーパミンアゴニスト、例えばアポモルフィンおよびプラミペキソールを投与した際に観察される副作用と比較して、１またはそれ以上の副作用、例えば吐き気、嘔吐、低血圧または失神を有益に減少させる。
選択的Ｄ３アゴニストであるＲ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩（１０μｇ／ｋｇ皮下投与）は、遠隔測定されているラットにおいて、２.２５±０.２５回の勃起／１０分間を引き起こす。
研究の際に、３０００μｇ／ｋｇまでの用量で、Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩の血圧またはＴＰＲに関する顕著な作用は観察されなかった。対応するサンプルの遊離の血漿濃度は、２７００ｎＭであり、これは、Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩に関するＤ３ ＥＣ50の約２７０倍大きかった。
【０５５８】
実施例５２
Ｄ２受容体と比較してＤ３受容体に対して機能的に少なくとも３０倍の選択性を有する化合物の、勃起と、１またはそれ以上の副作用、例えば吐き気、嘔吐、低血圧または失神とに対する作用の比較
アポモルフィン（非選択的ドーパミンアゴニスト）、プラミペキソール（Ｄ３優先的Ｄ２／Ｄ３アゴニスト）、選択的Ｄ３アゴニスト［Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩］、および、選択的Ｄ２アゴニスト［トランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミン］を、遠隔測定されたラットの勃起モデル、ならびに吐き気／嘔吐および低血圧のイヌモデルで特徴付けた（図１を参照）。
【０５５９】
選択的Ｄ３アゴニストのみが、有益な前性的作用と、低血圧や吐き気／嘔吐の起こり得る逆効果との間の顕著な治療係数（治療可能比；治療域；治療プロファイル）を示した。約１ｎＭの遊離血漿濃度で前性的作用を観察したところ、吐き気／嘔吐および低血圧は、試験された最大用量（約１０００ｎＭの遊離薬剤濃度）でさえ起こらなかった。それとは逆に、アポモルフィン、プラミペキソール、および、選択的Ｄ２アゴニストはいずれも、吐き気／嘔吐および低血圧を誘導した濃度と類似した濃度で前性的作用を誘導した。
これら研究で得られたデータは、Ｄ２およびＤ３受容体が、ドーパミンアゴニストの前性的作用に介在し、Ｄ２受容体が、非選択的ドーパミンアゴニストに関連する嘔吐および低血圧の逆効果に介在することを実証している。選択的に標的化した前性的Ｄ３ドーパミン受容体は、Ｄ２受容体と比較して選択性を達成しているが、その他のドーパミン受容体サブタイプ（例えばＤ２）が介在する用量制限副作用を軽減することにより、治療プロファイル（治療可能比；治療域；治療係数）を改善し得る。
【０５６０】
実施例５３
麻酔されたイヌにおいて、選択的Ｄ３アゴニストは、Ｄ３優先的Ｄ２／Ｄ３アゴニストとは対照的に、血行動態パラメーターに顕著な作用を有さない
麻酔されたイヌの血行動態モデルにおいて、プラミペキソール（Ｄ３優先的Ｄ２／Ｄ３アゴニスト）、および、選択的Ｄ３アゴニストの［Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩］を特徴付けた（図２を参照）。
プラミペキソールは、低血圧、総血管抵抗（ＴＰＲ）の減少、および、平均血圧への明らかな作用を引き起こした。ＴＰＲへの作用は、開始が迅速であり、そのピークは約１０〜１５分間であり、１０μｇ／ｋｇ（皮下投与）の用量レベルを示した。プラミペキソールはまた、心拍出量と心拍数の増加を引き起こした。
選択的Ｄ２アゴニストの（トランス−［４−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］シクロヘキシル］−ピリミジン−２−イルアミン）は、プラミペキソールと類似した血行動態作用を引き起こした（データは図２には示さないので、その代わりに実施例４８を参照）。プラミペキソールとＤ２選択的アゴニストとは対照的に、選択的Ｄ３アゴニストと生理食塩水コントロールは、ＴＰＲ、平均血圧、心拍出量または心拍数に対して顕著な作用を示さなかった。
この研究で得られたデータは、Ｄ２受容体が、非選択的ドーパミンアゴニストと関連する低血圧の血行動態の逆作用に介在することを実証する。選択的に標的化した前性的Ｄ３ドーパミン受容体は、Ｄ２受容体と比較して選択性を達成しているが、その他のドーパミン受容体サブタイプが介在する用量制限副作用、例えばＤ２が介在する低血圧を軽減することにより、治療プロファイル（治療可能比；治療域；治療係数）を改善し得る。
【０５６１】
実施例５４
無麻酔ラットの交尾行動モデル−雄および雌の性的欲求および興奮の測定
全ての性的行動の研究は、成人ラット（〜１２週齢／体重２００ｇ）で行われなければならない。性行動試験において、明／暗サイクルの暗期は赤い光のもとで、光を消してから２時間後に開始され、さらに分析するためにビデオ録画した（観察者の存在は、不都合に性的行動を変化させる恐れがある）。
【０５６２】
雄の性的行動
雄（Ｎ＝８〜１０）を、透明な水槽（またはホームケージ）に、少なくとも１５分間（順応時間）入れた。発情期の雌を交配用の場所に導入した。マウント行動が始まるまでの時間、最初の挿入までの時間、最初の射精までの時間（最初の挿入から計算した）、射精までの挿入回数、射精までのマウント回数、および、試験時間中の射精回数の情報は、４５分間の試験時間中記録された。１回の４５分間の試験で、発情期のＷＴ雌を用いて雄を観察した。
このラットは、少なくとも６日間の基準線決定が完了するまで、４日間のインターバルで、すなわち毎３日目に感受性のある雌と接触させる（接触の間に何も行わない日を２日置く）。それまでには、激しい行動が要求されるべきである。鈍い交尾行動を示すラットは、ＨＳＤＤモデルとして用いられる。
【０５６３】
全ての性的行動試験に関して、雄を、観察場所（ラット用として直径５０〜６０ｃｍ）に置く。雄をこの場所においてから３〜４分間後、感受性のある雌（卵巣摘出し、７ｍｍの安息香酸エストラジオールのシラスチックインプラントが埋め込まれていることにより、合併症を伴わない最良の結果が得られる）をこの場所に導入し、以下のパラメーターを記録した：
【０５６４】
マウントまでの時間：雌の導入と初めのマウントとの間の時間（秒）である。最大時間は１５分間（９００秒）であり、その時間内にマウントが記録されない場合、試験を停止する。マウントまでの時間は、性的衝動／欲求に関する。
【０５６５】
挿入までの時間：雌の導入と最初の挿入との間の時間（秒）である。最大時間は１５分間（９００秒）であり、その時間内に挿入が記録されない場合、試験を停止する。挿入まで
の時間は、性的衝動／欲求に関する。
【０５６６】
マウント回数：（射精に達するまでの）射精に達しない場合は、マウント回数を分析しない。
挿入回数：（射精に達するまでの）射精に達しない場合は、挿入回数を分析しない。
交尾の有効性：挿入なし／（マウント＋挿入なし）。これは、勃起機能の測定として役立つ。
【０５６７】
射精までの時間：最初の挿入から射精までの時間（秒）である。最大時間は３０分間（１８００秒）であり、射精がその時間で達成されない場合、試験を停止する。
不応期：射精から、次の一連の性行為の初めのマウントまでの時間（秒）である。射精に達した動物では、不応期の終わり（次の性的サイクルの初めのマウントにより示される）で試験を停止する。
これらパラメーターを１回の射精に調節する。数回の射精を試験しようとする場合、最大時間または射精回数が含まれるようにする必要がある。
【０５６８】
マウントは、雄が交尾の体位を示すが、挿入には達していないとみられる状態として定義される。挿入は、雄の陰茎が押し進める動きと協同して膣に入ることと定義される。挿入は、行動的に、ラットにおいて遅いリズミカルな押し進める動きと協同して雄が雌にマウントすることと定義される。ラットにおいて、マウントに関連する押し進める動き（挿入なし）は、挿入に関連する押し進める動きとは質的に異なるため、マウントを挿入と区別することがある。射精は、行動的に、激しく押し進める動きの最高潮、および、雄が脊柱を弓状にし、前足を雌から持ち上げ、その後引っ込めることにより定義される。射精は、精子の放出（sperm plug）が起こること、それに続く次のマウントまでの＞５分間の不応期により証明される。
【０５６９】
標準的なプロトコールを用いて発情期の雌を準備し、例えば試験１日前に、刺激雌は、エストラジオール−１７の皮下注射を受ける（０.０５ｍｇをゴマ油０.０５ｃｃに懸濁した）。試験前６時間に、この雌にプロゲステロン０.１ｍｇ（ゴマ油０.０５ｃｃに懸濁した）を皮下注射し、行動的な発情期を誘導する。
さらなる雄の性的行動の典型は、興奮を測定する非接触型の勃起の分析である。この場合、嗅覚刺激に対する雄の勃起反応が記録できるように、隔離された観察場所を用い、ここに発情期の雌が置かれる。この試験は、同じラットのグループで行うことができる。
【０５７０】
雌の性的行動
（１）能動的性行動（性的衝動／欲求）
このラットの試験は、高さ３０ｃｍの壁で囲まれた直径９０ｃｍの円形の場所（これらの寸法は、マウスにあわせる必要がある）で行われる。フロントが金網の小さいゲージ（１５×１５ｃｍ）２つを、ケージのフロントが壁と「同じ高さ」となり、２つのケージが互いに向かい合うように壁に固定する。これらのケージに、２匹の刺激動物、性的経験のある雄と感受性のある雌が含まれる。感受性のある雌は、試験の４８時間前に安息香酸エストラジオール（５ｍｇ）、試験の４時間前にプロゲステロン（０.５ｍｇ）で処理した卵巣摘出した雌か、または、発情期のインタクト雌かのいずれかが可能であり、安息香酸エストラジオールのシラスチックインプラント（ラット中で長さ７ｍｍ）を有する卵巣摘出した雌を用いることも可能である。試験前の連続２日間に、１０分間、動物を、器具に順応させる（刺激動物の非存在化で）。１０分間の試験の間に、それぞれの刺激動物を調査するのに費やされた時間を記録する。雄を調査するのに費やされた時間のパーセンテージから雌を調査するのに費やされた時間のパーセンテージを差引いて得られる差を、刺激動物を調査するのに費やされた総時間から計算する。動物間で、活動の領域を徹底的に掃除する。場所選択性を防ぐために、雄／雌の刺激ボックスの位置は、動物間でランダムにする。この試験には性的に未経験の動物を用いる。この試験を最初に行い、その後、感受性の動物の試験を行ってもよい。次に、雌ラット（インタクト）を用いて、発情前期後半で膣スメアにより測定して試験する。
【０５７１】
予想される結果：ラットにおいて、実験用の雌が発情間期であるか、または、卵巣摘出されている（ホルモン処理や低用量のエストロゲン処理がなされていない）場合、ほぼ同様の時間が雄または雌の調査に費やされる。これは、０〜１５％の差を生じることがある。
発情前期後半の雌、または、卵巣摘出した雌（エストロゲン＋プロゲステロン処理）においては、雄を調査するのに費やされた時間が約７０〜８０％であり、雌を調査するのに費やされた時間は約２０％であることから、５０〜６０％の差が生じる。エストロゲン処理した卵巣摘出したラットは、性的欲求低下障害の優れたモデルとして役立ち、ここで、逆の性別を調査するのに費やされた時間は、性的衝動／欲求と直接的に相互関係がある。
【０５７２】
（２）感受性
雌（Ｎ＝８〜１０）を１匹または一連の激しい雄ラットと共に置き、１０回のマウントを行わせた。結果が明確ではない場合、２０回のマウントを行わせることが推奨される。雄は、精管切除してもよいし、射精させなくてもよい（それぞれの雄によりなされるマウント回数を制限することにより）。動物の前屈反応を記録し、マウントのパーセンテージとして示す（すなわちロードシス係数，ＬＱ）。
卵巣摘出した雌、または、発情間期の雌は、典型的には、ロードシスを伴うマウントには反応しない（ＬＱ＝０〜２０％）。高ＬＱ＝８０〜１００％を示す動物は、感受性があるとみなされる。
【０５７３】
雄のマウントまたは挿入に対する雌の反応は、（ａ）総合的に感受性がない、蹴ること、立ち上がること、または、逃げることを伴う（スコア０）、(ｂ）能動的／動かない姿勢、脚の伸張は全くなし（スコア０.１）、(ｃ）能動的／動かない姿勢、脚の伸張あり（スコア０.５）、または（ｄ）感受性のある前屈姿勢、脊柱の背屈あり（スコア１〜３，背屈の度合いに応じて０.５のインターバルを有する）のいずれかとして採点される。スコア１またはそれ以上の雌の反応は、ロードシス係数の計算（ロードシス回数／マウントおよび挿入の回数）に関して、前屈反応とみなされる。マウントおよび挿入の総回数のうちの能動的／動かない姿勢のパーセント（スコア０.１、および、０.５）をそれぞれの雌ラットにおいて別々に計算する。
Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩を作製し、前記雄および雌無麻酔ラット（方法は上述の通り）で試験し、それぞれ雄および雌の交尾行動へのその作用を評価した。
【０５７４】
調査によれば、Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩は、雌ラットにおいて、感受性のある能動的性行動と、感受性のある行動を有益に増強させ、エストロゲン処理した卵巣摘出した動物（ＨＳＤＤのモデル）において性的欲求を回復させることがわかった。雄ラットにおいて、Ｒ−（−）−３−（４−プロピルモルホリン−２−イル）フェノール塩酸塩は、交尾行動と交尾有効性（挿入なし／（マウント＋挿入なし））を有益に増強させ、鈍い雄（ＨＳＤＤのモデル）において、マウントまでの時間と挿入までの時間を減少させる。
【０５７５】
実施例５５
機能的な選択性データ
上述のｃＡＭＰ酵素免疫検査法分析を用いて、実施例化合物（上記の「化学合成の実施例」の章を参照）をＤ２受容体と比較したＤ３受容体に対する機能的な選択性に関して試験した。全ての非中間体化合物は、同じ機能分析を用いて測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１５倍より機能的に選択的であった。機能的な選択性データの選択は、以下の表５に示す。
【０５７６】
【表１５】
2005516014.tif 000076
【０５７７】
ＥＣ50＝「有効濃度５０％」、または、ＥＣ50とも記載され、ここでは「そのアゴニストの可能な最大反応の５０％（または半分）を生じさせるアゴニストのモル濃度」と定義される。
【０５７８】
実施例５６
陰茎の勃起と雌の生殖器の血流を増強させるためのＳ３２５０４の使用
Ｓ３２５０４を作製し、前記麻酔された雄または雌ウサギ（方法は上述の通り）で試験し、それぞれ陰茎海綿体圧および海綿体の血流、および、膣と陰核の血流へのそれらの作用を評価した。
初期の調査によれば、Ｓ３２５０４は、雄ウサギにおける陰茎海綿体圧と海綿体の血流と、雌ウサギにおける膣および陰核の血流とを有益に増強させることが示された。
【０５７９】
本明細書で上述した全ての出版物を、参照により本発明に加入する。本発明の範囲および本質から逸脱することなく、当業者であれば、本発明の説明された方法およびシステムの様々な改変およびバリエーションを理解するものと考えられる。本発明を特定の好ましい実施形態に関して説明したが、特許請求された本発明は、このような特定の実施形態に過度に限定されるべきではない。実際に、本発明を実施するために説明された方法の様々な改変は、生化学およびバイオテクノロジーまたは関連分野に精通するものにとって明白であり、これらも請求項の範囲内であるとする。
【０５８０】
本発明において、本発明に従って使用可能な特許および特許出願に記載の化合物へクロスリファレンスすることにより、請求項および特定の実施例で定義される治療上活性な化合物を含むものとする（これらは全て、参照により本発明に加入する）。
【０５８１】
配列リスト（本明細書の一部を構成する）
【化５９】
2005516014.tif 000077
【０５８２】
【化６０】
2005516014.tif 000078
【０５８３】
【化６１】
2005516014.tif 000079
【０５８４】
【化６２】
2005516014.tif 000080
【図面の簡単な説明】
【０５８５】
【図１】Ｄ２受容体と比べて、Ｄ３受容体に対して機能的に少なくとも３０倍の選択性を有する化合物の、１またはそれ以上の副作用（例えば吐き気、嘔吐、低血圧または失神）に対する勃起に関する作用の比較を示す。
【図２】麻酔されたイヌの血行動態パラメーターに関して、Ｄ３優先的なＤ２／Ｄ３アゴニストとは対照的に、選択的Ｄ３アゴニストは、大きい作用を有さないことを示す。
【図１】
2005516014.tif 000081
【図２】
2005516014.tif 000082
【配列表】
2005516014000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成16年2月20日(2004.2.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
女性性機能障害（ＦＳＤ）、男性勃起機能障害（ＭＥＤ）、男性の無オルガスム症、または男性の性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ）を治療および／または予防するための医薬品の調剤における、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む組成物の使用であって、該ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１５倍より機能的に選択的である、上記の使用。
【請求項２】
ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析を用いて測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約２０倍より機能的に選択的である、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析を用いて測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約３０倍より機能的に選択的である、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析を用いて測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約５０倍より機能的に選択的である、請求項１に記載の使用。
【請求項５】
ＦＳＤは、（ａ）女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）および／または女性のＨＳＤＤ、または、（ｂ）女性の無オルガスム症である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項６】
医薬品は、経口投与または鼻腔内投与される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項７】
選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、性的興奮の前および／またはその間に投与される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８】
選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストを含む組成物の有効量を個体に投与することを含む、ヒトまたは動物における女性性機能障害（ＦＳＤ）、男性勃起機能障害（ＭＥＤ）、男性の無オルガスム症、または男性の性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ）の治療および／または予防方法であって、該ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析を用いて測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１５倍より機能的に選択的であり；そして、該アゴニストは、場合により、製薬上許容できるキャリアー、希釈剤または添加剤と混合されている、上記の方法。
【請求項９】
ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析を用いて測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約２０倍より機能的に選択的である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析を用いて測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約３０倍より機能的に選択的である、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析を用いて測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約５０倍より機能的に選択的である、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
ＦＳＤは、（ａ）女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）および／または女性のＨＳＤＤ、または、（ｂ）女性の無オルガスム症である、、請求項８〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
女性性機能障害（ＦＳＤ）、男性勃起機能障害（ＭＥＤ）、男性の無オルガスム症、または男性の性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ）を治療および／または予防するのに用いることが出来る物質（以下、選択的ドーパミンＤ３アゴニストと称する）を同定するための分析方法であって、該分析は、試験物質が、内因性の生殖器の充血プロセスまたは勃起プロセスを直接的に増強できるかどうかを決定することを含み；該増強は、本発明で定義された試験物質の存在下での、生殖器の血流または陰茎海綿体圧および／または海綿体の血流の相乗作用と定義され；このような試験物質による相乗作用は、試験物質が、女性性機能障害（ＦＳＤ）、男性勃起機能障害（ＭＥＤ）、男性の無オルガスム症、または男性の性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ）の治療および／または予防において有用な可能性があることを示し、そして、該試験物質は選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである、上記の分析方法。
【請求項１４】
女性または男性からサンプルを単離すること；該サンプルが女性性機能障害または男性性機能障害を引き起こすような量で物体を含むかどうかを決定することを含む診断方法であって、該物体は、女性における内因性の生殖器の興奮プロセスまたは男性の海綿体における勃起プロセスに直接的な作用を有し；該物体は、作用物質の使用により有益な作用が得られるように調節されることが可能であり；そして、該作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである、上記の方法。
【請求項１５】
単離された女性または男性サンプルで物体を検出する手段を含む診断用組成物またはキットであって；該手段は、サンプルが女性性機能障害（ＦＳＤ）、男性勃起機能障害（ＭＥＤ）、男性の無オルガスム症、または男性の性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ）を引き起こすような量で該物体を含むかどうかを決定するのに用いることができ；該物体は、内因性の生殖器の興奮プロセスまたは勃起プロセスに直接的な作用を有し、また該物体は、作用物質の使用により有益な作用が得られるように調節されることが可能であり；そして該作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである、上記の組成物またはキット。
【請求項１６】
女性性機能障害（ＦＳＤ）、男性勃起機能障害（ＭＥＤ）、男性の無オルガスム症、または男性の性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ）を治療および／または予防することができる作用物質を同定するのに用いられる動物モデルであって、該モデルは、動物の骨盤神経を刺激した後の、該動物の膣／陰核の血流、陰茎海綿体圧および／または海綿体の血流における変化を測定する手段を含む麻酔された雌または雄の動物を含み；そして、該作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである、上記のモデル。
【請求項１７】
ＦＳＡＤまたはＭＥＤを治療するために内因性の生殖器の興奮プロセスまたは勃起プロセスを直接的に増強することができる作用物質を同定するための分析方法であって、作用物質を請求項１６に記載の動物モデルに投与すること；および、内因性の生殖器の興奮プロセスまたは勃起プロセスの変化を測定することを含み；該変化は、定義された試験物質の存在下での、動物モデルにおける膣／陰核の血流、陰茎海綿体圧（ＩＣＰ）（および／または海綿体の血流）の相乗作用と定義され；そして、該作用物質は、選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストである、上記の方法。
【請求項１８】
女性性機能障害（ＦＳＤ）、男性勃起機能障害（ＭＥＤ）、男性の無オルガスム症、または男性の性的欲求低下障害（ＨＳＤＤ）の治療および／または予防のための医薬品の製造／調剤における、１またはそれ以上の選択的ドーパミンＤ３受容体アゴニストと、１またはそれ以上の補助剤とからなる組み合わせの使用であって、ここで、該ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析で測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約１５倍より機能的に選択的であり、該補助剤としては：
（ａ） ＰＤＥ阻害剤（ＰＤＥｉ）；
（ｂ） α−アドレナリン受容体アンタゴニスト化合物；
（ｃ） ＮＰＹ−Ｙ１アンタゴニスト；
（ｄ） コレステロール降下剤；
（ｅ） エストロゲン受容体調節因子および／またはエストロゲンアゴニストおよび／またはエストロゲンアンタゴニスト；
（ｆ） アンドロゲン受容体調節因子および／またはアンドロゲンアゴニストおよび／またはアンドロゲンアンタゴニスト；
（ｇ） テストステロン補充剤またはテストステロンインプラント；または、
（ｈ） エストロゲン、エストロゲン、および、メドロキシプロゲステロンまたは酢酸メドロキシプロゲステロン（ＭＰＡ）(単独で、または、組み合わせて）、またはエストロゲンおよびメチルテストステロンホルモン補充療法剤
が挙げられる、上記の使用。
【請求項１９】
ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析を用いて測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約２０倍より機能的に選択的である、請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析を用いて測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約３０倍より機能的に選択的である、請求項１８に記載の使用。
【請求項２１】
ドーパミンＤ３受容体アゴニストは、同じ機能分析を用いて測定した場合、ドーパミンＤ２受容体と比較して、ドーパミンＤ３受容体に対して少なくとも約５０倍より機能的に選択的である、請求項１８に記載の使用。
【請求項２２】
ＦＳＤは、（ａ）女性の性的興奮の障害（ＦＳＡＤ）および／または女性のＨＳＤＤ、または（ｂ）女性の無オルガスム症である、請求項１８〜２１のいずれか一項に記載の使用。
【国際調査報告】
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