(57)【要約】本明細書中には、カゼイン、カゼインの塩、乳漿および／またはカゼイン加水分解物を含有し、炭水化物を含まない新生児用補助物、そして、母乳育児中の乳児に関するその使用方法が開示される。本発明の補助物は、血清ビリルビンレベル、ならびに新生児黄疸の発生および重篤度を抑制するために設計されている。１つの形態において、そのような補助物の服用物はヒト母乳と混合され、新生児に与えられる。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト新生児に食物補助物を投与する方法であって、
ある日にヒト母乳をヒト新生児に投与すること；および
その同じ日に、カゼイン、カゼインの塩、乳漿、およびカゼインの加水分解物からなる群から選択される添加物を含む、炭水化物を本質的には含まない補助物をヒト新生児に投与すること
を含む方法。
【請求項２】
新生児が投与時において１月齢未満であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
新生児が投与前に黄疸の症状を示していたことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項４】
新生児が投与前に黄疸の症状を示していなかったことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項５】
血清ビリルビンレベルが低下させられることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項６】
添加物がカゼインナトリウムであることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項７】
添加物が乳漿であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項８】
添加物がカゼイン塩／乳漿の混合物であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項９】
添加物がカゼインの加水分解物であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
新生児に１０ｇｍ未満の添加物がその日に投与されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
ヒト新生児における血清ビリルビンレベルを低下させる方法であって、
ある日にヒト母乳をヒト新生児に投与すること；および
その同じ日に、炭水化物を本質的には含まず、かつ、カゼイン、カゼインの塩、乳漿、およびカゼインの加水分解物からなる群から選択される添加物を含む補助物をヒト新生児に投与すること
を含み、
それにより、新生児の血清ビリルビンレベルが低下させられる方法。
【請求項１２】
母乳育児中の乳児に関して１日だけ使用される補助服用物であって、炭水化物を本質的には含まず、かつ容量が５０ｍｌ未満であり、そして
カゼイン、カゼインの塩、乳漿、およびカゼイン加水分解物からなる群から選択される物質の０．１ｇｍ〜１０ｇｍ；および
液体キャリア
を含む補助服用物。
【請求項１３】
容量が多くても３０ｍｌであることを特徴とする請求項１２に記載の補助服用物。
【請求項１４】
母乳育児中のヒト乳児に関して１日だけ使用される補助服用物であって、乾燥され、かつ炭水化物を本質的には含まず、そして、カゼイン、カゼインの塩、乳漿、およびカゼイン加水分解物からなる群から選択される物質の０．１ｇｍ〜１０ｇｍを含み、そして、服用物の少なくとも一部分を母乳に混合するための説明書とともにパッケージされている補助服用物。
【発明の詳細な説明】
【連邦政府により援助を受けた研究／開発に関する記述】
【０００１】
決定予定。
【発明の背景】
【０００２】
本発明は、血清ビリルビンを低下させることにおいて、従って、新生児黄疸の発生および重篤度を低下させることにおいて有用な方法に関する。より詳細には、本発明は、母乳育児を補い、同時に母乳育児を妨げない、カゼイン（またはカゼインナトリウムなどのその塩）、乳漿、および／またはある種の加水分解カゼイン配合物の使用に関する。
【０００３】
小児科医は、ほとんどのヒト新生児を育てるための最も好ましい方法として母乳育児を勧めている。しかしながら、母乳育児には、新生児黄疸の増大したレベルが伴っている。新生児黄疸は、ほとんどが、出生後、最初の１ヶ月（特に、最初の１週間）の間に最も発生していると考えられる。
【０００４】
ビリルビンは、ヘモグロビンなどのある種の化合物が異化されているときに形成される赤色の胆汁色素である。ヒト新生児は、赤血球量がより多く、かつ赤血球の寿命がより短いため、単位体重あたり、成人よりも多くのビリルビンを産生する。ビリルビンは水溶性が悪く、身体から排出されるためには抱合(conjugation)されることを必要とする。
【０００５】
ビリルビンは肝細胞の小胞体内でグルクロン酸と抱合される。ビリルビン抱合体(conjugate)は、腸内では、細菌または内因性組織のいずれかのβ−グルクロニダーゼに対する基質として作用し得る。この酵素はグルクロン酸をビリルビングルクロニドから加水分解する。産生された生じる非抱合ビリルビンは腸からより迅速に吸収される。遊離ビリルビンのこの腸吸収は、増大した血清ビリルビンレベルを一部の新生児においてもたらし、このことが新生児黄疸と関連している。
【０００６】
アスパラギン酸および／またはリンゴ酸を食事に加えることが、β−グルクロニダーゼの阻害により、新生児黄疸に対する可能な治療法であるという提案がなされている。本発明者らの研究所のＰＣＴ国際公開ＷＯ０１／１３７４３号公報を参照のこと。この公開公報の開示および本明細書中で参照される他のすべての刊行物の開示は、本明細書中にすべてが示されているかのように参考として組み込まれる。母乳育児中の乳児の食事に外因性のアスパラギン酸および／またはリンゴ酸を含めることにより新生児黄疸の発生が減少するが、そのような黄疸の抑制および処置をさらに最適化することが望ましい。
【０００７】
炭水化物、脂肪、ビタミン類、カゼインナトリウム、および／またはカゼイン加水分解物を有するいくつかの複雑な乳児用調合乳が与えられている新生児は、新生児黄疸のレベルがより低いことが知られている。Ｇ．ゴーレイ(G. Gourley)ら，103，「Gastroenterology」，660-667，(1992)；Ｇ．ゴーレイら，25，「J. Ped. Gast. & Nutr.」，267-272，(1997)；およびＧ．ゴーレイら，44，「Advances in Pediatrics」，173-229，第６章，(1997)を参照のこと。しかしながら、多くの新生児用調合乳は、母乳育児に対する完全な代用物として設計されているので、母乳を飲もうとする乳児の意思を妨げ得る。従って、母親は、標準的な乳児用調合乳溶液が処方されている場合、黄疸の問題が生じるときには母乳育児の利点を失いやすい。
【０００８】
ウシ乳汁もまたカゼインおよび乳漿を含有しており、一部の新生児には与えられているが、新生児のためにウシ乳汁をヒト母乳の代用にしようとする試みはいずれも、母乳育児を再開することについて類似する有害な影響があると考えられる。さらに、非常に幼い新生児によるウシ乳汁の使用に関しては他の問題もまた存在する。
【０００９】
従って、新生児黄疸の重篤度を回避および低下することにおいて効果的であり、それにもかかわらず、母乳育児を著しく妨げない改善された新生児用補助物の開発が求められていることが理解され得る。
【発明の要約】
【００１０】
本発明は、ヒト新生児に食物補助物を投与する方法を提供する。ヒト新生児には、ある特定の日にヒト母乳が投与され、そしてその同じ日に、カゼイン、カゼインの塩、乳漿、およびカゼインの加水分解物からなる群から選択される添加物を含む、炭水化物を本質的には含まない（かつ好ましくは、脂肪もまた本質的には含まない）補助物がヒト新生児に投与される。
【００１１】
好ましい形態において、新生児は、投与時において１月齢未満である（さらにより好ましくは２週齢未満である）。補助物は、新生児が黄疸の症状を示す前に（予防剤として）与えることができ、またはビリルビンレベルを低下させるために治療的処置として与えることができる。最も好ましい添加物はカゼイン塩／乳漿の混合物である。
【００１２】
別の態様において、本発明は、ヒト新生児における血清ビリルビンレベルを低下させる方法を提供する。ヒト新生児には、ある特定の日にヒト母乳が投与され、そしてその同じ日に、カゼイン、カゼインの塩、乳漿、およびカゼインの加水分解物からなる群から選択される添加物を含む、炭水化物を本質的には含まない（かつ好ましくは、脂肪もまた本質的には含まない）補助物がヒト新生児に投与される。この方法を使用することにより、新生児の血清ビリルビンレベルが低下する。
【００１３】
本発明の別の形態により、母乳育児中の乳児に関して１日だけ使用される補助服用物が提供される。補助服用物は、炭水化物を本質的には含まず、かつ容量が５０ｍｌ未満（好ましくは３０ｍｌ以下）である。服用物は、カゼイン、カゼインの塩（カゼインナトリウムなど）、乳漿、およびカゼイン加水分解物からなる群から選択される物質の０．１ｇｍ〜１０ｇｍと、液体キャリアとを含有する。液体キャリアは水であり得るか、またはカリウムおよびナトリウムなどの適切なイオンを含有する水溶液であり得るか、または別の好適な液体であり得る。
【００１４】
本発明のさらに別の形態により、母乳育児中のヒト乳児に関して１日だけ使用される補助服用物が提供される。補助服用物は乾燥され、かつ炭水化物を本質的には含まず、そして、カゼイン、カゼインの塩、乳漿およびカゼイン加水分解物からなる群から選択される物質の０．１ｇｍ〜１０ｇｍを含有する。補助服用物は、服用物の少なくとも一部分を母乳に混合するための説明書とともにパッケージされる。
【００１５】
本発明は、新生児黄疸の発生および重篤度を減少させることにおいて効果的である（だが、母乳育児を妨げることを避けるために十分に少量である）上記種類の補助服用物、血清ビリルビンレベルを低下させることを助ける上記種類の補助服用物、そしてそのような服用物を使用するための方法を提供する。
【００１６】
本発明のこれらの利点およびさらに他の利点が下記の説明から明らかになる。下記の説明は、好ましい実施態様を単に記載するだけである。従って、本発明の完全な範囲を理解するためには、請求項を見なければならない。
【好適な実施態様の説明】
【００１７】
母乳育児中の４０名のヒト新生児が４つの試験群に分けられた。１つの試験群は、補助物が与えられず、従って、通常の母乳育児法に従っただけであった。第２の試験群には、補助物の１日６回の服用物が与えられ、この場合、それぞれの服用物は、０．３ｇｍの乳漿および０．２ｇｍのカゼインナトリウムを含有する５ｍｌの水であった。第３の試験群には、１日６回の服用物が与えられ、この場合、それぞれの服用物は、３．６ｇｍのアスパラギン酸、６９４ｍｇの水酸化カリウムおよび２２６ｍｇの水酸化ナトリウムを１００ｍｌの蒸留水に混合することによって作製された溶液（約６．１のｐＨ）の５ｍｌであった。
【００１８】
第４の試験群には、１日６回の服用物が与えられ、この場合、それぞれの服用物は、Ｎｕｔｒａｍｉｇｅｎ（登録商標）新生児用調合乳のカゼイン加水分解物画分の０．５ｇｍを含有する５ｍｌの水であった。Ｎｕｔｒａｍｉｇｅｎ（登録商標）は、ミード・ジョンソン・カンパニー(Mead Johnson Company)社から得ることができる市販の新生児用調合乳である。ミード・ジョンソン社から、本発明者らは、（炭水化物、脂肪またはビタミン類を含まない）その調合乳のカゼイン加水分解物部分だけを譲り受けた。カゼイン加水分解物は、広く知られている手順を使用して標準的なカゼインから得られていた。
【００１９】
それぞれのプロトコルのもと、新生児の黄疸レベルを、非侵襲的経皮デバイスである、ヒル−ロム・エア−シールズ(Hill-Rom Air-Shields)社（ペンシルベニア州ハトボロ）により販売されているヒル−ロム・エア・シールズ／ミノルタ黄疸メーター１０２を用いて毎日測定した。この計測器は、ストロボ光の同時放射を伴って光プローブを皮膚に押し付けることによる皮膚反射率の原理を利用している。この光は皮下組織を通り抜け、反射して分光光度計モジュールに戻る。
【００２０】
この光を二色ミラーで青色成分および緑色成分に分離した後、光の光学密度が光電池で測定される。青色光および緑色光の光学密度の差が、（ヘモグロビンについて補正された）黄色強度の尺度である。この黄色強度が、数字により計測器に表示され、「黄疸指数」と呼ばれる。数字読み取り値と、皮下ビリルビンにより皮膚にもたらされる黄色との間には直線関係が存在する。典型的には、指数が大きいほど、黄疸が大きい。
【００２１】
排出されたビリルビン誘導体はＨＰＬＣによって測定された。この点に関して、便抽出物を、下記の改変を用いて、Ｇ．ゴーレイら，99，「Gastroenterology」，1705-1709，(1990)に記載されるように調製した。胆汁色素を上部有機層に抽出した後、この上部層を取り出し、上部層の底部に存在するタンパク質境界部の３回の抽出物と一緒にプールした。タンパク質境界部のこの抽出は、境界部を取り出し、０．１ｍｌのジメチルホルムアミドを加え、１分間の超音波処理を行い、遠心分離（１２，４２７ｘｇで１分間）を行うことによって達成された。
【００２２】
このプール処理により、０．５ｍｌが得られ、これは、次に、すべての残留タンパク質を沈殿させるために冷凍（−２０℃ｘ１５分）され、再び遠心分離（１２，７４１ｘｇで５分間）され、清澄化された有機抽出液を０．２２ミクロンのナイロンマイクロフュージ遠心分離フィルター（エム・エス・アイ(MSI)社、マサチューセッツ州ウェストバラ）に移し、再び遠心分離（６，３７０ｘｇで２分間）し、そして２０μｌの抽出液を、逆相高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を使用して胆汁色素について分析した。
【００２３】
ＨＰＬＣシステムは、ヒューレット・パッカード社（ウィスコンシン州ブルックフィールド）のダイオードアレイ検出器（モデル１０９０）ケムステーションおよびポンプからなり、この方法の他の細部は、Ｇ．ゴーレイらの上記論文に以前に記載される通りであった。ビリルビンおよびビリルビン抱合体の検出は４３６ｎｍ（４ｎｍのバンド幅）で行われ、５５４ｎｍの参照（２２ｎｍのバンド幅）を引いた。ビリルビン、ビリルビンジグルクロニドおよびビリルビンモノグルクロニドのモル吸光係数はほぼ同一である（一般には、Ｗ．スピバク(W. Spivak)ら，234，「J. Biochem.」，101-109，(1986)を参照のこと）ので、ビリルビンについて得られた標準曲線を、クマリンの６つの内部標準を使用して３つの胆汁色素のすべてを定量するために使用することができる。
【００２４】
図１〜図４から理解され得るように、コントロール以外の３つの試験群は、黄疸指数の著しい低下、およびビリルビン変化体排出の有意な増大を示した。カゼイン塩／乳漿の群は、平均して、最も良い黄疸指数の改善をもたらしていると考えられ、カゼイン加水分解物の群は、２番目に最も良い改善を有すると考えられる。これらの試験によりまた、Ｌ−アスパラギン酸がヒトにおける黄疸レベルを低下させることも確認されたが、これらの試験は、Ｌ−アスパラギン酸の作用を助けるカゼイン加水分解物の他の態様が存在することを示している。さらに、カゼイン塩および乳漿は、これらの成分が有意な量のＬ−アスパラギン酸を含有しないとしても、黄疸の発生を低下させた。
【００２５】
特に驚くべきことは、これらの結果が、極めて低いレベルの添加物を使用して達成されたということである。このために、本発明者らは、これらの添加物の結果としての、継続された母乳育児に関する問題を今も発見していない。１日あたり合計で３０ｍｌの液体が典型的な乳児について提案され、この場合、典型的な母乳授乳頻度を真似るために、３０ｍｌを６つの別個の服用物に分けることが好ましい。しかし、補助物の一日投与量全体を１回で与えることができ、または２回〜５回で与えることができる（それにより、母乳育児がわずかに多く損なわれ得るとしても、それが影響し得ることはあまりないと考えられる）。
【００２６】
本発明は、上記に記載された具体的な例に限定されると見なされるべきではない。本発明の範囲内であることが意図される他の様々な改変が存在する。例えば、乾燥粉末（水性キャリアを含まない）を母乳に直接混合することができる。従って、請求項を、本発明の完全な範囲を判断するために見なければならない。
【産業上の利用可能性】
【００２７】
本発明は、新生児用補助物のために有用な化合物、およびそのような化合物を投与する方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】図１は、４つの異なる試験プロトコルを受けた新生児の黄疸指数レベルの統計学的平均化を示すグラフである。
【図２】図２は、４つの試験群についてビリルビンジグルクロニドの排出モデルを表すグラフである。
【図３】図３は、４つの試験群についてビリルビンモノグルクロニドの排出モデルを表すグラフである。
【図４】図４は、４つの試験群について非抱合ビリルビンの排出モデルを表すグラフである。
【００２９】
図１〜４において、本質的実線はＬ−アスパラギン酸群であり、短破線はカゼイン／乳漿の混合物群であり、長破線はカゼイン加水分解物群であると考えられる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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