(57)【要約】式（Ｉ）：【化１】2005508307.tif 000025[式中、R1、R2、R3、T、U、X、Ｙ、VおよびWは明細書に定義の通りである］で示される新規化合物およびその薬学上許容し得る塩およびそのエナンチオマーおよびラセミ体；ならびにそれらの製造方法、それらを含有する組成物ならびにそれらの治療における使用を提供する。この化合物は一酸化窒素シンターゼのインヒビターであり、故に炎症性疾患および疼痛の予防または治療に特に有用である。
2005508307.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（I）：
【化１】
2005508307.tif 000016
［式中、
XはH、C1-4アルキル、C1-4アルコキシ、ハロゲン、OH、CN、C≡CH、NO2、CHO、COCH3またはNHCHO（ここで、このアルキルまたはアルコキシ基は所望により1またはそれ以上のフッ素原子またはOH基でさらに置換されていてもよい）であり；
YはC1-4アルキル、C1-4アルコキシ、ハロゲン、OH、CN、C≡CH、NO2、CHO、COCH3またはNHCHO（ここで、このアルキルまたはアルコキシ基は所望により1またはそれ以上のフッ素原子でさらに置換されていてもよい）であり；
T、UおよびWのうち1個はNであり他の2個は個別にCR4であるか；または、T、UおよびWの各々はCR4であり；且つ各々のR4基は個別にH、FまたはCH3であり；
VはOまたはS(O)nであり；
nは整数0、1または2であり；
R1はC1-4アルキル、C2-4アルケニル、C2-4アルキニル、C3-6シクロアルキルまたはO、SおよびNから選ばれる1個のヘテロ原子が組み込まれた四ないし八員環飽和ヘテロ環であり（ここで、これらの基はいずれも所望によりC1-4アルキル、C1-4アルコキシ、C1-4アルキルチオ、C3-6シクロアルキル、1もしくはそれ以上のハロゲンまたはフェニルでさらに置換されていてもよく；このフェニル基は所望によりハロゲン、C1-4アルキル、C1-4アルコキシ、CF3、OCF3、CNまたはNO2から個別に選ばれる1またはそれ以上の置換基でさらに置換されていてもよい）；
またはR1は、フェニル、またはO、SおよびNから個別に選ばれる1ないし3個のヘテロ原子を含む五または六員環芳香族ヘテロ環であり（ここで、このフェニルまたは芳香族ヘテロ環は所望によりハロゲン、C1-4アルキル、C1-4アルコキシ、OH、CN、NO2またはNR5R6から個別に選ばれる 1またはそれ以上の置換基で置換されていてもよく；このアルキルまたはアルコキシ基は所望により1またはそれ以上のフッ素原子でさらに置換されていてもよい）；
R2およびR3は個別にH、C1-4アルキルまたはC3-6シクロアルキルであり（ここで、このアルキル基は所望によりC1-4アルコキシ、ハロゲン、OH、NR7R8、=NR7、フェニル、または、O、SおよびNから個別に選ばれる1ないし3個のヘテロ原子を含む五もしくは六員環芳香族または飽和ヘテロ環から個別に選ばれる1またはそれ以上の置換基で置換されていてもよく；このフェニルまたは芳香族ヘテロ環は所望によりハロゲン、C1-4アルキル、C1-4アルコキシ、CF3、OCF3、CNまたはNO2でさらに置換されていてもよい）；
R5、R6、R7およびR8は個別にHまたはC1-4アルキルを表す］
で示される化合物またはその薬学上許容し得る塩。
【請求項２】
VがOである、請求項1に記載の式（I）の化合物。
【請求項３】
VがS(O)nでありnが0である、請求項1に記載の式（I）の化合物。
【請求項４】
XおよびYが個別にBr、Cl、CH3、CH2F、CHF2、CF3またはCNである、請求項1ないし3のいずれか1項に記載の式（I）の化合物。
【請求項５】
YがCNである、請求項4に記載の化合物。
【請求項６】
2-{[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]オキシ}-4-クロロ-5-フルオロベンゾニトリル;
2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]チオ]-6-メチル-3-ピリジンカルボニトリル;
2-[(2,5-ジクロロフェニル)チオ]-2-フェニルエチルアミン;
2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]チオ]-4-クロロベンゾニトリル;
N-[2-(5-クロロ-2-シアノ-4-フルオロフェノキシ)-2-フェニルエチル]-エタンイミドアミド;
N-[2-(5-クロロ-2-シアノ-4-フルオロフェノキシ)-2-フェニルエチル]-2-ヒドロキシエタンイミドアミド;
2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]チオ]-6-(トリフルオロメチル)-3-ピリジンカルボニトリル;
2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]チオ]-4-メトキシベンゾニトリル;
4-クロロ-2-[[(1S)-2-(メチルアミノ)-1-フェニルエチル]チオ]ベンゾニトリル;
2-[[(1R)-2-アミノ-1-(3-イソキサゾリル)エチル]オキシ]-4-クロロ-5-フルオロベンゾニトリル;
2-[[2-アミノ-1-(3-ピリジニル)エチル]チオ]-4-クロロベンゾニトリル;
である、請求項1に記載の式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩。
【請求項７】
医薬として使用するための、請求項1ないし6のいずれか1項に記載の式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩。
【請求項８】
薬学上許容し得るアジュバント、希釈剤または担体と混合した、請求項1ないし6のいずれか1項に記載の式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩を含む薬用組成物。
【請求項９】
一酸化窒素シンターゼ活性の阻害が有益であるヒトの疾患または状態を予防または治療するための医薬の製造における、請求項1ないし6のいずれか1項に記載の式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩の使用。
【請求項１０】
炎症性疾患の予防または治療のための医薬の製造における、請求項1ないし6のいずれか1項に定義の式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩の使用。
【請求項１１】
CNS疾患の予防または治療のための医薬の製造における、請求項1ないし6のいずれか1項に定義の式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩の使用。
【請求項１２】
疾患が炎症性腸疾患である、請求項10に記載の使用。
【請求項１３】
疾患が関節リウマチである、請求項10に記載の使用。
【請求項１４】
疾患が変形性関節症である、請求項10に記載の使用。
【請求項１５】
疼痛の予防または治療のための医薬の製造における、請求項1ないし6のいずれか1項に定義の式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩の使用。
【請求項１６】
疾患が片頭痛である、請求項11に記載の使用。
【請求項１７】
炎症性疾患の予防または治療のための医薬の製造における、COX-2インヒビターと組み合わせた請求項1ないし6のいずれか1項に定義の式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩の使用。
【請求項１８】
一酸化窒素シンターゼ活性の阻害が有益であるヒトの疾患または状態を治療する、またはそのリスクを低下させる方法であって、係る疾患または状態に罹患しているまたはそのリスクが増大しているヒトに、請求項1ないし6のいずれか1項に定義の式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩の治療的有効量を投与することを含む方法。
【請求項１９】
炎症性疾患に罹患しているまたはそのリスクのあるヒトの炎症性疾患を治療するまたはそのリスクを低下させる方法であって、該方法が、請求項1ないし6のいずれか1項に定義の式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩の治療的有効量をそのヒトに投与することを含む方法。
【請求項２０】
CNS疾患に罹患しているまたはそのリスクのあるヒトのCNS疾患を治療するまたはそのリスクを低下させる方法であって、該方法が、請求項1ないし6のいずれか1項に定義の式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩の治療的有効量をそのヒトに投与することを含む方法。
【請求項２１】
請求項1ないし6のいずれか1項に定義の式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩、エナンチオマーまたはラセミ体の製造方法であって、その方法が、
(a) 式（II）：
【化２】
2005508307.tif 000017
［式中、T、U、X、YおよびWは請求項1と同意義であり、L1は脱離基である］
で示される化合物と式（III）：
【化３】
2005508307.tif 000018
［式中、R1、R2、R3およびVは請求項1と同意義である］
で示される化合物の反応；または、
(b) 式（IV）：
【化４】
2005508307.tif 000019
［式中、T、U、W、X、YおよびVは請求項1と同意義である］
で示される化合物と式（V）：
【化５】
2005508307.tif 000020
［式中、R1、R2およびR3は請求項1と同意義であり、L2は脱離基である］
で示される化合物の反応；または、
(c) 式（VI）：
【化６】
2005508307.tif 000021
［式中、R1、T、U、W、X、YおよびVは請求項1と同意義であり、L3は脱離基である］
で示される化合物と式（VII）：
【化７】
2005508307.tif 000022
［式中、R2およびR3は請求項1と同意義である］
で示される化合物の反応；または、
(d) 式（VIII）：
【化８】
2005508307.tif 000023
［式中、R1、T、U、W、X、YおよびVは請求項1と同意義であり、Qはアジド（N3）である］
で示される化合物の還元；または、
(e) 式（VIII）：
【化９】
2005508307.tif 000024
［式中、R1、T、U、W、X、YおよびVは請求項1と同意義であり、Qはイミド基である］
で示される化合物の加水分解；
を含み、所望によりまたは必要ならば、得られた式（I）の化合物またはその別の塩をその薬学上許容し得る塩に変換し；または、式（I）の或る化合物を式（I）の別の化合物に変換し；そして所望により得られた式（I）の化合物をその光学異性体に変換する事を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なアリールヘテロアルキルアミン誘導体、それらの製造方法、それらを含有する組成物および治療におけるそれらの使用に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
一酸化窒素は特異的一酸化窒素シンターゼ（NOS）の働きによって哺乳動物細胞中でL-アルギニンから生成される。これらの酵素は2つの明瞭なクラス、構成的NOS（cNOS）と誘導的NOS（iNOS）に分類される。現時点では2つの構成的NOSと1つの誘導的NOSが同定されている。構成的NOSでは内皮酵素（eNOS）が平滑筋弛緩および血圧と血流の調節に関わっており、一方神経細胞酵素（nNOS）は様々な生体機能の調節に関わっているようである。誘導的NOSは特に炎症性疾患の病理に関係している。故にこれらの酵素の調節は多岐にわたる疾病状態の治療に少なからぬ可能性を提供するに相違ない（J. E. Macdonald, Ann. Rep. Med. Chem., 1996, 31, 221 - 230)。
【０００３】
酵素一酸化窒素シンターゼの1またはそれ以上のイソ型の特異的インヒビターとして働く化合物を同定するために多大な努力が傾注されてきた。係る化合物の治療における使用もまた広範に主張されてきた。
【発明の開示】
【０００４】
本発明によれば、式（I）：
【化１】
2005508307.tif 000003
［式中、
XはH、C1-4アルキル、C1-4アルコキシ、ハロゲン、OH、CN、C≡CH、NO2、CHO、COCH3またはNHCHO（ここで、このアルキルまたはアルコキシ基は所望により1またはそれ以上のフッ素原子またはOH基でさらに置換されていてもよい）であり；
YはC1-4アルキル、C1-4アルコキシ、ハロゲン、OH、CN、C≡CH、NO2、CHO、COCH3またはNHCHO（ここで、このアルキルまたはアルコキシ基は所望により1またはそれ以上のフッ素原子でさらに置換されていてもよい）であり；
T、UおよびWのうち1個はNであり他の2個は個別にCR4であるか；または、T、UおよびWの各々はCR4であり；且つ各々のR4基は個別にH、FまたはCH3であり；
VはOまたはS(O)nであり；
nは整数0、1または2であり；
R1はC1-4アルキル、C2-4アルケニル、C2-4アルキニル、C3-6シクロアルキルまたはO、SおよびNから選ばれる1個のヘテロ原子が組み込まれた四ないし八員環飽和ヘテロ環であり（ここで、これらの基はいずれも所望によりC1-4アルキル、C1-4アルコキシ、C1-4アルキルチオ、C3-6シクロアルキル、1もしくはそれ以上のハロゲンまたはフェニルでさらに置換されていてもよく；このフェニル基は所望によりハロゲン、C1-4アルキル、C1-4アルコキシ、CF3、OCF3、CNまたはNO2から個別に選ばれる1またはそれ以上の置換基でさらに置換されていてもよい）；
またはR1は、フェニル、またはO、SおよびNから個別に選ばれる1ないし3個のヘテロ原子を含む五または六員環芳香族ヘテロ環であり（ここで、このフェニルまたは芳香族ヘテロ環は所望によりハロゲン、C1-4アルキル、C1-4アルコキシ、OH、CN、NO2またはNR5R6から個別に選ばれる1またはそれ以上の置換基で置換されていてもよく；このアルキルまたはアルコキシ基は所望により 1またはそれ以上のフッ素原子でさらに置換されていてもよい）；
R2およびR3は個別にH、C1-4アルキルまたはC3-6シクロアルキルであり（ここで、このアルキル基は所望によりC1-4アルコキシ、ハロゲン、OH、NR7R8、=NR7、フェニル、または、O、SおよびNから個別に選ばれる1ないし3個のヘテロ原子を含む五もしくは六員環芳香族または飽和ヘテロ環から個別に選ばれる1またはそれ以上の置換基で置換されていてもよく；このフェニルまたは芳香族ヘテロ環は所望によりハロゲン、C1-4アルキル、C1-4アルコキシ、CF3、OCF3、CNまたはNO2でさらに置換されていてもよい）；
R5、R6、R7およびR8は個別にHまたはC1-4アルキルを表す］
で示される化合物またはその薬学上許容し得る塩が提供される。
【０００５】
WがNでありXがOHである式（I）の化合物はこれに代わる互変異性体（Ia）：
【化２】
2005508307.tif 000004
で存在し得ることが理解できるであろう。
【０００６】
類似の互変異性構造は、TがNでありXがOHである；またはUがNでありYがOHである式（I）の化合物についても存在する。
【０００７】
R2がHであり、R3が、α炭素原子上で=NR7で置換されているC1-4アルキルである、式（I）の化合物もまた、式（Ib）：
【化３】
2005508307.tif 000005
で示されるような互変異性体で存在できる。
【０００８】
式（I）の化合物の可能な互変異性体の全ておよびその混合物は本発明の範囲内に包含される。
【０００９】
式Iの化合物はエナンチオマー型で存在し得る。全てのエナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ体およびその混合物は本発明の範囲内に包含される。
【００１０】
式（I）の化合物とその薬学上許容し得る塩は、酵素一酸化窒素シンターゼ（NOS）のインヒビターであるという利点を有する。一般に式（I）の化合物およびその薬学上許容し得る塩は、酵素一酸化窒素シンターゼの誘導的イソ型（iNOS）のインヒビターであるという利点を有する。或る式（I）の化合物およびその薬学上許容し得る塩は、さらに、または或いは、酵素一酸化窒素シンターゼの神経細胞イソ型（nNOS）のインヒビターであるという利点を有する。一般に式（I）の化合物およびその薬学上許容し得る塩は、内皮イソ型eNOSの阻害に比してiNOSおよび/またはnNOSの阻害に対して良好な選択性を示すという利点を有する。
【００１１】
本発明はさらに、式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩、エナンチオマーまたはラセミ体の製造方法を提供する。
【００１２】
本発明によれば、医薬として使用するための、式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩もまた提供される。
【００１３】
本発明の別の態様は、一酸化窒素シンターゼ活性の阻害が有益であるヒトの疾病または状態の予防または治療のための医薬の製造における、式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩の使用を提供する。
【００１４】
より具体的な本発明の態様は、炎症性疾患の予防または治療のための医薬の製造における、式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩の使用を提供する。
【００１５】
別のより具体的な本発明の態様は、CNS疾患の予防または治療のための医薬の製造における、式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩の使用を提供する。
【００１６】
本発明によれば、一酸化窒素シンターゼ活性の阻害が有益である疾病または状態の治療方法またはリスクを低下させる方法であって、該疾病または状態に罹患しているまたはそのリスクのあるヒトに、式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩の治療的有効量を投与することを含む方法が提供される。
【００１７】
より具体的には、炎症性疾患に罹患しているまたはそのリスクのあるヒトにおいて該疾患を治療またはそのリスクを低下させる方法（ここでこの方法は、式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩の治療的有効量をそのヒトに投与することを含む）もまた提供される。
【００１８】
より具体的には、CNS疾患に罹患しているまたはそのリスクのあるヒトにおいて該疾患を治療またはそのリスクを低下させる方法（ここでこの方法は、式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩の治療的有効量をそのヒトに投与することを含む）もまた提供される。
【００１９】
本発明化合物はさらに、第二の薬学上活性な物質と組み合わせて；具体的にはシクロオキシゲナーゼインヒビターと組み合わせて；より具体的にはシクロオキシゲナーゼの誘導的イソ型（COX-2）の選択的インヒビターと組み合わせて有利に使用できる。したがって本発明のさらなる態様では、炎症、炎症性疾患および炎症関連疾患の治療用医薬の製造における、COX-2インヒビターと組み合わせた式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩の使用が提供される。そしてさらに、炎症、炎症性疾患および炎症関連疾患に罹患しているまたはそのリスクのあるヒトにおいて、該疾患または状態を治療するまたはそのリスクを低下させる方法（ここで、この方法は、COX-2インヒビターと組み合わせた治療的有効量の式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩をそのヒトに投与することを含む）が提供される。
【００２０】
或る態様では、R2およびR3は個別にH、C1-4アルキルまたはC3-6シクロアルキルであり；このアルキル基は所望によりC1-4アルコキシ、ハロゲン、OH、NR7R8、フェニル、または、O、SおよびNから個別に選ばれる1ないし3個のヘテロ原子を含む五もしくは六員環芳香族または飽和ヘテロ環で置換されていてもよく；このフェニルまたは芳香族ヘテロ環は所望によりさらに、ハロゲン、C1-4アルキル、C1-4アルコキシ、CF3、OCF3、CNまたはNO2で置換されていてもよく；そしてX、Y、T、U、W、V、n、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7およびR8は前記と同意義である。
【００２１】
或る態様では、VはS(O)nであり、そしてnは0である。
【００２２】
別の態様では、VはOである。
【００２３】
別の態様では、XおよびYは個別にBr、Cl、CH3、CH2F、CHF2、CF3またはCNである。さらに別の態様では、YはCNである。
【００２４】
別の態様では、R1はフェニル、ピリジル、チエニル、イソキサゾリル、イソチアゾリルまたはチアゾリルである。さらなる態様では、R1はフェニルである。
【００２５】
或る態様では、R2はHまたはCH3である。
【００２６】
或る態様では、各々のR3はHまたはCH3である。
【００２７】
別の態様では、T、UおよびWは各々CHまたはCFである。
【００２８】
別の態様では、基T、UおよびWのうち1個はNであり、他の2個の基は個別にCHまたはCFである。具体的な態様では、WはNでありTおよびUはそれぞれCHである。
【００２９】
或る具体的な態様では、式（I）の化合物は式（Ic）：
【化４】
2005508307.tif 000006
で示されるような絶対的立体化学を有する。
【００３０】
或る具体的な態様では、本発明は、式（I）で示される化合物［式中、VはOまたはSであり；XおよびYは個別にBr、Cl、CH3、CH2F、CHF2、CF3またはCNであり； R1はフェニル、ピリジル、チエニル、イソキサゾリル、イソチアゾリルまたはチアゾリルであり；R2およびR3は各々HまたはCH3であり；TおよびUは各々CHまたはCFであり；WはCHまたはNであり；そして該化合物は式（Ic）に示す絶対配置を有する］およびその薬学上許容し得る塩に関するものである。
【００３１】
本発明に係る具体的化合物は、
2-{[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]オキシ}-4-クロロ-5-フルオロベンゾニトリル; 2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]チオ]-6-メチル-3-ピリジンカルボニトリル;
2-[(2,5-ジクロロフェニル)チオ]-2-フェニルエチルアミン;
2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]チオ]-4-クロロベンゾニトリル;
N-[2-(5-クロロ-2-シアノ-4-フルオロフェノキシ)-2-フェニルエチル]-エタンイミドアミド;
N-[2-(5-クロロ-2-シアノ-4-フルオロフェノキシ)-2-フェニルエチル]-2-ヒドロキシエタンイミドアミド;
2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]チオ]-6-(トリフルオロメチル)-3-ピリジンカルボニトリル;
2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]チオ]-4-メトキシベンゾニトリル;
4-クロロ-2-[[(1S)-2-(メチルアミノ)-1-フェニルエチル]チオ]ベンゾニトリル;
2-[[(1R)-2-アミノ-1-(3-イソキサゾリル)エチル]オキシ]-4-クロロ-5-フルオロベンゾニトリル;
2-[[2-アミノ-1-(3-ピリジニル)エチル]チオ]-4-クロロベンゾニトリル;
およびその薬学上許容し得る塩を包含する。
【００３２】
別途指摘の無い限り、「C1-4アルキル」という語は本明細書中、1ないし4個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル基を指す。このような基の例はメチル、エチル、n-プロピル、i-プロピル、n-ブチル、i-ブチルおよびt-ブチルを包含する。
【００３３】
別途指摘の無い限り、「C3-6シクロアルキル」という語は本明細書中、3ないし6個の炭素原子を有するシクロアルキル基を指す。このような基の例はシクロプロピル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルを包含する。
【００３４】
別途指摘の無い限り、「C2-4アルケニル」という語は本明細書中、2ないし4個の炭素原子を持ち少なくとも1個の炭素-炭素二重結合を含む直鎖または分枝鎖アルキル基を指す。このような基の例はエテニル、プロペニルおよびブテニルを包含する。
【００３５】
別途指摘の無い限り、「C2-4アルキニル」という語は本明細書中、2ないし4個の炭素原子を持ち少なくとも1個の炭素-炭素三重結合を含む直鎖または分枝鎖アルキル基を指す。このような基の例はエチニル、プロピニルおよびブチニルを包含する。
【００３６】
別途指摘の無い限り、「C1-4アルコキシ」という語は本明細書中、1ないし4個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルコキシ基を指す。このような基の例はメトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、I-プロポキシおよびt-ブトキシを包含する。
【００３７】
「C1-4アルキルチオ」という語は同様に解釈されたい。
【００３８】
別途指摘の無い限り、「ハロゲン」という語は本明細書中、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを指す。
【００３９】
O、SまたはNから選ばれる1個のヘテロ原子を含む四ないし八員環飽和ヘテロ環の例は、ピロリジン、ピペリジン、テトラヒドロフランおよびペルヒドロアゼピンを包含する。
【００４０】
O、SおよびNから個別に選ばれる1ないし3個のヘテロ原子を含む五または六員環芳香族ヘテロ環の例は、フラン、チオフェン、ピリジン、チアゾール、イミダゾール、オキサゾール、トリアゾール、オキサジアゾール、チアジアゾールおよびピリミジンを包含する。
【００４１】
O、SおよびNから個別に選ばれる1ないし3個のヘテロ原子を含む五または六員環飽和ヘテロ環の例は、モルホリン、ピロリジン、テトラヒドロフラン、ピペリジンおよびピペラジンを包含する。
【００４２】
「所望により1またはそれ以上のフッ素原子でさらに置換されていてもよいC1-4アルキルまたはC1-4アルコキシ」の例は、CH2F、CHF2、CF3、CF3CF2、CF3CH2、CH2FCH2、CH3CF2、CF3CH2CH2、OCF3およびOCH2CF3を包含する。
【００４３】
本発明によれば、本発明者等は、式（I）で示される化合物またはその薬学上許容し得る塩、エナンチオマーまたはラセミ化合物の製造方法であって、
(a) 式（II）：
【化５】
2005508307.tif 000007
［式中、T、U、X、YおよびWは式（I）と同意義であり、L1は脱離基である］
で示される化合物と式（III）：
【化６】
2005508307.tif 000008
［式中、R1、R2、R3およびVは式（I）と同意義である］
で示される化合物の反応；または、
(b) 式（IV）：
【化７】
2005508307.tif 000009
［式中、T、U、W、X、YおよびVは式（I）と同意義である］
で示される化合物と式（V）：
【化８】
2005508307.tif 000010
［式中、R1、R2およびR3は式（I）と同意義であり、L2は脱離基である］
で示される化合物の反応；または、
(c) 式（VI）：
【化９】
2005508307.tif 000011
［式中、R1、T、U、W、X、YおよびVは式（I）と同意義であり、L3は脱離基である］
で示される化合物と式（VII）：
【化１０】
2005508307.tif 000012
［式中、R2およびR3は式（I）と同意義である］
で示される化合物の反応；または、
(d) 式（VIII）：
【化１１】
2005508307.tif 000013
［式中、R1、T、U、W、X、YおよびVは式（I）と同意義であり、Qはアジド（N3）である］
で示される化合物の還元；または、
(e) 式（VIII）：
【化１２】
2005508307.tif 000014
［式中、R1、T、U、W、X、YおよびVは式（I）と同意義であり、Qはイミド基である］
で示される化合物の加水分解；
を含み、所望によりまたは必要ならば、得られた式（I）の化合物またはその別の塩をその薬学上許容し得る塩に変換し；または、式（I）の或る化合物を式（I）の別の化合物に変換し；そして所望により得られた式（I）の化合物をその光学異性体に変換する事を含む方法を提供する。
【００４４】
方法（a）では、不活性溶媒中で式（III）の求核試薬を式（II）の親電子試薬で処理することによって反応を行う。好適な脱離基L1はスルホナートおよびハロゲン化物、特にフルオリドまたはクロリドを包含する。反応は一般に水素化ナトリウムまたは炭酸セシウムといった非求核試薬塩基の存在下で実施する。好適な有機溶媒はN,N-ジメチルホルムアミド、N-メチル-2-ピロリジノン、テトラヒドロフランおよびジメチルスルホキシドといった溶媒である。反応は一般に0℃ないし溶媒の沸点までの温度で行う。
【００４５】
方法（b）では、反応体(IV）および（V）を例えばミツノブ条件を用いてテトラヒドロフランのような適当な不活性溶媒中で結合させる。したがって例えば、適当な温度、一般に0℃ないし溶媒の沸点までの温度で反応体をホスフィン誘導体およびアゾ誘導体で処理する。好適なホスフィン誘導体はトリフェニルホスフィンおよびトリブチルホスフィンを包含する。好適なアゾ誘導体はジエチルアゾジカルボキシレート、ジイソプロピルアゾジカルボキシレートおよび1,1'-(アゾジカルボニル)ジピペリジンを包含する。好適な脱離基L2はヒドロキシを包含する。
【００４６】
これに代わり方法（b）では、不活性溶媒中で式（IV）の求核試薬を式（V）の親電子試薬で処理することにより反応を実施する。好適な脱離基L2はスルホナートおよびハロゲン化物、特にクロリドまたはブロミドを包含する。反応は一般に水素化ナトリウムまたは炭酸セシウムといった非求核試薬塩基の存在下で実施する。好適な有機溶媒はN,N-ジメチルホルムアミド、N-メチル-2-ピロリジノン、テトラヒドロフランおよびジメチルスルホキシドといった溶媒である。反応は一般に0℃ないし溶媒の沸点までの温度で行う。
【００４７】
方法（c）では、式（VI）および（VII）の化合物をジメチルスルホキシドまたはテトラヒドロフランのような適当な不活性溶媒中で反応させる。反応は一般に塩基の存在下で実施する。この塩基は添加成分であっても、または過剰のアミン（VII）であってもよい。好適な脱離基L3は沃化物およびp-トルエンスルホナートを包含する。
【００４８】
方法（d）および（e）では、当業者に周知の標準条件を用いて反応を実施する。
【００４９】
上の方法において、アミンまたはヒドロキシまたはその他の可能性ある反応基を保護することが望ましいかまたは必要であるという事が、当業者には明らかであろう。好適な保護基ならびにそのような基を付加および除去するための方法の詳細は、GreeneおよびWutsの標準的教科書「Protective Groups in Organic Synthesis」、3rd Edition (1999)を参照して見出すことができる。
【００５０】
或る好ましい態様では、アミン基をカルバメート誘導体、例えばt-ブチルオキシカルバメートとして保護する。
【００５１】
保護基の使用の具体的例を実施例の項に示す。
【００５２】
本発明は、塩、特に酸付加塩の形の式（I）の化合物を包含する。好適な塩は有機および無機酸によって形成される塩の両方を包含する。係る酸付加塩は通常薬学上許容し得るものであるが、薬学上許容し得ない酸の塩も、当該化合物の製造および精製に有用であることがある。したがって好ましい塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、ピルビン酸、酢酸、琥珀酸、フマル酸、マレイン酸、メタンスルホン酸およびベンゼンスルホン酸から形成される塩を包含する。
【００５３】
式（I）の化合物の塩は、遊離塩基、またはその塩、エナンチオマーまたはラセミ化合物を適当な酸の1またはそれ以上の等価物と反応させることによって生成できる。反応は、その塩が溶解しない溶媒または媒質中で、またはその塩が可溶である溶媒、例えば水、ジオキサン、エタノール、テトラヒドロフランもしくはジエチルエーテル、または溶媒の混合物中で実施でき、それらは減圧または凍結乾燥により除去することができる。反応は複分解工程であってよく、またはイオン交換樹脂上で実施することもできる。
【００５４】
式（III）の化合物は式（IX）：
【化１３】
2005508307.tif 000015
［式中、R2およびR3は式（I）と同意義であり、GはH、ClまたはNCH3(OCH3)である］
で示される化合物を有機金属誘導体、R1-M［式中、R1は式（I）と同意義であり、Mはハロゲン化リチウムまたは同マグネシウムのような金属残基である］と反応させ、必要ならばその後還元することにより製造できる。次に、得られた式（III）［式中、Vは酸素である］の化合物を式（III）［式中、Vは硫黄である］の化合物に変換できる。
【００５５】
式（II)、(IV)、(V)、(VI)、(VIII)および(IX)の化合物は既知であるか、または当業者にとって自明の常法によって製造できる。
【００５６】
中間体化合物はそれ自体でまたは保護された形で使用できる。保護基とそれらの除去のための方法の詳細はGreeneおよびWutsの標準的教科書「Protective Groups in Organic Synthesis」、3rd Edition (1999)を参照して見出すことができる。
【００５７】
本発明化合物およびそれに至る中間体は標準技術を用いて反応混合物から単離でき、必要ならばさらに精製できる。
【００５８】
式Iの化合物はエナンチオマー型で存在できる。故に、全てのエナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ化合物およびそれらの混合物は本発明の範囲内に包含される。様々な光学異性体は、常套的技術、例えば分別結晶またはHPLCを用いて該化合物のラセミ混合物を分離することにより単離できる。
【００５９】
中間体化合物もまたエナンチオマー型で存在でき、精製されたエナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ化合物または混合物として使用できる。
【００６０】
式（I）の化合物およびその薬学上許容し得る塩は、それらが動物における薬理活性を有するが故に有用である。特にこの化合物は酵素一酸化窒素シンターゼのインヒビターとして活性である。より具体的には、これらは酵素一酸化窒素シンターゼの誘導的イソ型のインヒビターであり、そのため例えば抗炎症剤として治療上有用であると予想できる。或いはこれらは酵素一酸化窒素シンターゼの神経細胞イソ型のインヒビターとしての用途を持ち、そのためCNS疾患の治療における用途を有すると予想できる。
【００６１】
この化合物およびその薬学上許容し得る塩は、一酸化窒素の合成または過剰合成が寄与部分を形成している疾病もしくは状態の予防または治療における使用を適応とする。或る態様では、この化合物はヒトを包含する哺乳動物において炎症状態の治療における使用を適応とする。別の態様では、この化合物はヒトを包含する哺乳動物においてCNS疾患の治療における使用を適応とする。
【００６２】
具体的に述べることのできる状態は、
変形性関節症、慢性関節リウマチ、リウマチ様脊椎炎、痛風性関節炎およびその他の関節炎の病態、炎症性関節；
湿疹、乾癬、皮膚炎またはその他の炎症性皮膚病態、例えば日焼け；
ブドウ膜炎、緑内障および結膜炎を包含する炎症性眼病態；
炎症が関与している肺疾患、例えば喘息、気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、ハト愛好者病、農夫肺、急性呼吸窮迫症候群；
細菌血症、エンドトキシン血症（敗血症性ショック）、アフタ性潰瘍、歯肉炎、発熱、疼痛、髄膜炎および膵炎；
炎症性腸疾患、クローン病、萎縮性胃炎、変形性胃炎(gastritis varialoforme)、潰瘍性大腸炎、腹腔疾患、限局性腸炎、消化性潰瘍、過敏性腸症候群、逆流性食道炎、例えばHelicobacter pyloriによる感染または非ステロイド性抗炎症薬による治療に起因する胃腸管の損傷、を包含する胃腸管の状態；
ならびに、炎症に関連するその他の状態
である。
【００６３】
この化合物はさらに、急性疼痛または持続性炎症性疼痛または神経障害性疼痛または中枢起源の疼痛の治療および軽減に有用である。
【００６４】
この化合物はさらに癌の治療に有用である。
【００６５】
本発明者等は特に、炎症性腸疾患、慢性関節リウマチ、変形性関節症、慢性閉塞性肺疾患、癌および疼痛の状態に興味を持っている。
【００６６】
式（I）の化合物およびその薬学上許容し得る塩はさらに、上に述べたものの他の疾病もしくは状態の予防または治療にも有用である。例えば、この化合物は、アテローム性動脈硬化症、嚢胞性線維症、敗血症性および/または毒素性ショックに伴う低血圧の治療に、そして免疫系の機能低下の治療に、そして臓器移植治療の際の短期免疫抑制に対するアジュバントとして、そして糖尿病発症の制御に、そして糖尿病の際の膵臓機能の維持に、そして糖尿病に伴う血管合併症の治療に、そしてサイトカイン、例えばTNFまたはインターロイキンとの併用治療に有用である。
【００６７】
或いは式（I）の化合物は、低酸素症、例えば心停止および卒中の場合の低酸素症、虚血、低酸素症、低血糖症、癲癇といった疾患における神経変性および/または神経壊死を包含する神経変性疾患、ならびに外部創傷（例えば脊髄および頭部外傷）、高圧酸素痙攣および毒性、痴呆、例えば初老期痴呆、アルツハイマー病およびAIDS関連痴呆、シドナム舞踏病、パーキンソン病、トゥレット症候群、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、筋ジストロフィー、コルサコフ病、脳血管疾患に関連する精神遅滞、睡眠病、統合失調症、鬱病、疼痛、自閉症、季節性感情障害、時差ぼけ、月経前症候群（PMS）に伴う鬱またはその他の症状、不安および敗血症性ショックの治療に有用である。
【００６８】
式（I）の化合物はさらに、薬物嗜癖または耐性、例えばアヘン剤およびジアゼピン類に対する耐性の防止および逆転、薬物嗜癖の治療、偏頭痛およびその他の血管性頭痛、神経性炎症の治療、胃腸運動性疾患の治療ならびに分娩の誘導において活性を示すと予想できる。
【００６９】
本発明者等は特に卒中、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、統合失調症、偏頭痛、敗血症性ショックおよび疼痛、より具体的には片頭痛の状態に興味がある。
【００７０】
問題の疾患または状態のエピソードにかつて罹患したことのある、またはそれ以外の理由でそれらのリスクが高いと考えられるヒトの治療に対し、予防が特に適切であると予想される。特定の疾患または状態を発症するリスクのあるヒトは一般に、該疾患または状態の家族歴を持つ者、または遺伝的検査もしくはスクリーニングにより該疾患もしくは状態を特に発症しやすいと同定された者を包含する。
【００７１】
上記の治療適応のため、無論、投与される用量は、使用化合物、投与様式および所望の治療と共に変わる。しかしながら一般に、この化合物を固体の形で1日当たり1mgおよび2000mgの間の用量で投与する時に満足できる結果が得られる。
【００７２】
式（I）の化合物およびその薬学上許容し得る誘導体は単独で、または、該化合物または誘導体を薬学上許容し得るアジュバント、希釈剤または担体と混合した適当な薬用組成物の形で使用できる。本発明のさらなる態様は、薬学上許容し得るアジュバント、希釈剤または担体と混合した式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩を含む薬用組成物を提供する。投与は経腸（経口、舌下または直腸内を包含する）、鼻腔内、吸入、静脈内、局所またはその他の非経口投与経路によるものであってよいが、これらに限定される訳ではない。好適な薬用製剤の選択および製造のための常法は、例えば“Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Designs”, M. E. Aulton, Churchill Livingstone, 1988に記載されている。この薬用組成物は好ましくは式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩を80%未満、より好ましくは50%未満含む。
【００７３】
成分の混合を含むこのような薬用組成物の製造方法もまた提供する。
【００７４】
式（I）の化合物およびその薬学上許容し得る誘導体はさらに、COXインヒビターと組み合わせて、より具体的にはCOX-2インヒビターと組み合わせて有利に使用できる。特に好ましいCOX-2インヒビターはセレコキシブおよびMK-966である。NOSインヒビターとCOX-2インヒビターは一回投与単位の投与用に同じ薬用組成物内に調合するか、または、各成分を個別に製剤化して別々の投薬を同時または連続的に行うことができる。
【００７５】
本発明を以下の実施例によって説明するが、これらは限定的なものではない。
【実施例】
【００７６】
実施例１
2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]オキシ]-4-クロロ-5-フルオロベンゾニトリル (E)-ブテンジオエート
a) (S)-α-(アジドメチル)ベンゼンメタノール
乾燥DMSO（50ml）に入れた(S)-α-(クロロメチル)ベンゼンメタノール (2.38g）を攪拌しながらアジドナトリウム (1.48g) で処理し、次いで60℃で24時間加熱した。さらなるアジドナトリウム(74mg) を加え、80℃での加熱をさらに24時間継続した。反応混合物を冷却し、水に注ぎ、酢酸エチル中に抽出し、これを水（3x）、次いで食塩水で洗浄し、乾燥した(MgSO4）。溶媒を蒸発させて副題の化合物(2.40g)を黄色油状物として得た。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.34-7.24 (5H, m)、4.83 (1H, m)、3.40 (2H, m)。
【００７７】
b) 2-[[(1S)-2-アジド-1-フェニルエチル]オキシ]-4-クロロ-5-フルオロベンゾニトリル
乾燥DMF（40ml）に入れた工程(a)由来の生成物（1.75g) および4-クロロ-2,5-ジフルオロベンゾニトリル (1.86g) を窒素雰囲気下に攪拌しながら鉱油中60%水素化ナトリウム(470mg) で処理した。反応混合物を2.5時間攪拌し、水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出物を水（5x）、次いで食塩水で洗浄し、乾燥した(MgSO4)。溶媒を蒸発させ、残留物をクロマトグラフィー（シリカ、10%エーテル/イソヘキサン溶出液) で精製して副題の化合物(2.37g) を淡黄色油状物として得た。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.39-7.26 (6H, m)、6.8 (1H, d)、5.24 (1H, m)、3.79 (1H, m)、3.40 (1H, dd)。
【００７８】
c) 2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]オキシ]-4-クロロ-5-フルオロベンゾニトリル (E)-ブテンジオエート
乾燥THF（80ml）に入れた工程(b)由来の生成物 (2.79 g) をトリフェニルホスフィン(3.47g) および水 (12ml) で処理し、混合物を60℃で2時間加熱した。反応混合物を冷却し、水に注ぎ、酢酸エチルで抽出し、これを水洗し乾燥した(MgSO4)。溶媒を蒸発させ残留物をクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル、その後メタノール/ジクロロメタン中10% 7Mアンモニアを溶出液として）により精製して油状物を得た。これをエタノール(10ml）に溶解し、フマル酸 (70.3mg) で処理し、透明溶液が得られるまで加熱した。混合物を蒸発させ、残留物をエーテルで磨砕し濾過および減圧乾燥すると最終化合物(222mg）が得られた。
MS APCI +ve m/z 291 ([M+H]+)。
1H NMR 300MHz (DMSO-d6) 8.0 (1H, d)、7.54 (1H, d)、7.47-7.31 (5H, m)、6.52 (2H, s)、5.75 (1H, m)、3.21 (1H, m)、3.08 (1H, dd)。
【００７９】
実施例２
2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]チオ]-6-メチル-3-ピリジンカルボニトリル塩酸塩
a) 1,1-ジメチルエチル [(2R)-2-ヒドロキシ-2-フェニルエチル]カルバメート
(R)-α-(アミノメチル)ベンゼンメタノール (1.70g) およびビス(1,1-ジメチルエチル)カーボネート(2.98g) をメタノール (20ml) に溶解し、トリエチルアミン (4.3ml) を加えた。混合物を室温で4日間攪拌し、次いで濃縮すると、副題の化合物が油状物として得られた(2.60g、88%)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.27-7.38 (5H, m)、4.92 (1H, m)、4.83 (1H, m)、3.50 (1H, m)、3.25 (1H, m)、1.45 (9H, s)。
【００８０】
b) S-[(1S)-2-[[(1,1-ジメチルエトキシ)カルボニル]アミノ]-1-フェニルエチル] ベンゼンカルボチオエート
窒素雰囲気下、0℃のTHF (100ml) に入れたトリフェニルホスフィン (5.75g) の溶液に、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート (4.55ml) を滴下した。混合物を0℃で45分間攪拌し、次いでTHF（50ml）に入れたチオ安息香酸(3.05ml) および工程(a)の生成物(2.60g) の溶液を0℃で滴下した。添加が完了した後、混合物を室温で24時間攪拌した。混合物を濃縮し、残留物をクロマトグラフィー(シリカ、10%ジエチルエーテル/イソヘキサン溶出液) により精製して、副題の化合物 (3.30g、84%) を黄色固体として得た。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.95 (2H, m)、7.56 (1H, m)、7.28-7.44 (7H, m)、4.94 (1H, m)、4.75 (1H, bs)、3.70 (2H, m)、1.38 (9H, s)。
【００８１】
c) 1,1-ジメチルエチル [(2S)-2-[(3-シアノ-6-メチル-2-ピリジニル)チオ]-2-フェニルエチル]カルバメート
メタノール（10ml）および水（1ml）に入れた2-クロロ-6-メチル-3-ピリジンカルボニトリル (107mg) および工程(b)の生成物 (250mg) の混合物に炭酸カリウム(200mg）を加えた。混合物を窒素雰囲気下、室温で20時間攪拌した。次いでこの混合物を濃縮し、水を加え、酢酸エチルで3回抽出した。有機層を合し、洗浄し(食塩水)、乾燥し(MgSO4)、濃縮した。残留物をクロマトグラフィー(シリカ、20%酢酸エチル/イソヘキサン溶出液) により精製して、副題の化合物 (48mg、19%) を油状物として得た。
MS APCI +ve m/z 370 ([M+H]+)。
【００８２】
d) 2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]チオ]-6-メチル-3-ピリジンカルボニトリル塩酸塩
工程(c）の生成物 (45mg) をジオキサン中4M HCl (5ml）に溶解した。得られた溶液を室温で15分間攪拌し、次いで溶媒を蒸発させた。残留物をジエチルエーテル/エタノールから再結晶し、標題化合物（19mg）を白色固体として得た。
MS APCI +ve m/z 270 ([M+H]+)。
1H NMR 300MHz (DMSO-d6) 8.17 (2H, bs)、8.12 (1H, d)、7.55 (2H, m)、7.38 (3H,m)、7.24 (1H, d)、5.41 (1H, t)、3.51 (2H, m)、2.61 (3H, s)。
【００８３】
実施例３
2-[(2,5-ジクロロフェニル)チオ]-2-フェニルエチルアミン塩酸塩
a) 1,1-ジメチルエチル [2-ヒドロキシ-2-フェニルエチル]カルバメート
ラセミ体のα-(アミノメチル)ベンゼンメタノール (13.7g) およびビス(1,1-ジメチルエチル)カーボネート (21.8g) をメタノール (200ml) に溶解し、10%炭酸ナトリウム水溶液 (200ml) を加えた。混合物を室温で24時間攪拌し、2M塩酸中に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を蒸発させ酢酸エチル/ヘキサンで磨砕すると、副題化合物が淡黄色固体として得られた(27.6g)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.27-7.38 (5H, m)、4.92 (1H, m)、4.83 (1H, m)、3.50 (1H, m)、3.25 (1H, m)、1.45 (9H, s)。
【００８４】
b) 1,1-ジメチルエチル [2-[(2,5-ジクロロフェニル)チオ]-2-フェニルエチル]カルバメート
窒素雰囲気下0℃のTHF（30ml）に入れたトリフェニルホスフィン (1.97g)、2,5-ジクロロチオフェノール (0.90g) および工程(a)の生成物 (1.48g）の溶液に、ジエチルアゾジカルボキシレート(1.18ml) を滴下し、混合物を0℃で45分間、次いで室温で72時間攪拌した。混合物を濃縮し残留物をクロマトグラフィー（シリカ、10%酢酸エチル/イソヘキサン溶出液）により精製して副題化合物（500mg）を透明油状物として得た。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.28 (7H, m)、7.09 (1H, dd)、4.77 (1H, bs)、4.50 (1H, bt)、3.53 (2H, m)、1.43 (9H, s)。
【００８５】
c) 2-[(2,5-ジクロロフェニル)チオ]-2-フェニルエチルアミン塩酸塩
工程(b)の生成物 (0.4g) をジオキサン中4M HCl (5ml）に溶解した。得られた溶液を室温で6時間攪拌し、溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで磨砕して、標題化合物(0.24g)を白色固体として得た。
MS APCI +ve m/z 298/300 ([M+H]+)。
1H NMR 300MHz (DMSO-d6) 8.25 (3H, bs)、7.62 (1H, d)、7.55-7.26 (7H,m)、4.97 (1H, m)、3.45 (1H, m)、3.28 (1H,m)。
【００８６】
実施例４
2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]チオ]-4-クロロベンゾニトリル塩酸塩
a) 1,1-ジメチルエチル [(2S)-2-[(5-クロロ-2-シアノフェニル)チオ]-2-フェニルエチル]カルバメート
エタノール（20ml）に入れた実施例2工程(b)の生成物（360mg) の溶液に、水酸化ナトリウム(90mg) の水（5ml）溶液を加えた。5分間攪拌した後、4-クロロ-2-フルオロベンゾニトリル (156mg) を加えた。混合物を窒素雰囲気下、室温で24時間攪拌した。次に混合物を濃縮し、水を加え酢酸エチルで3回抽出した。有機層を合し、洗浄し、乾燥し(MgSO4)、濃縮した。残留物をクロマトグラフィー(シリカ、10%ジエチルエーテル/イソヘキサン溶出液)により精製し、副題化合物(60mg) を油状物として得た。
MS APCI +ve m/z 289 ([M-Boc+H]+)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.50 (1H, d)、7.43 (1H, s)、7.37-7.21 (6H, m)、4.82 (1H, bs)、4.60 (1H, t)、3.60 (2H, m)、1.42 (9H, s)。
【００８７】
b) 2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]チオ]-4-クロロベンゾニトリル塩酸塩
上記工程(a)の生成物を使用し実施例2工程(d)の方法によって標題化合物（34mg）を製造した。
MS APCI +ve m/z 289 ([M+H]+)。
1H NMR 300MHz (DMSO-d6) 8.18 (3H, bs)、7.88 (1H, d)、7.84 (1H, m)、7.57 (1H, dd)、7.46-7.32 (5H, m)、4.98 (1H, t)、3.51 (1H, dd)、3.33 (1H, m)。
【００８８】
実施例５
N-[2-(5-クロロ-2-シアノ-4-フルオロフェノキシ)-2-フェニルエチル]-エタンイミドアミド塩酸塩
乾燥THF（10ml）に入れた実施例1工程(c)の生成物（0.2g）をメチル アセトイミデート塩酸塩（75mg）で、続いてトリエチルアミン(0.1ml) で処理し一夜攪拌することにより、標題化合物を製造した。反応混合物を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を蒸発させ、残留物をクロマトグラフィー（シリカ、メタノール中2-20%の7Mアンモニア/ジクロロメタン溶出液）により精製して硝子状固体を得た。この固体をメタノール(10ml）に溶解し、エーテル中1M HCl (1ml) で処理し次いで蒸発させた。残留物をエーテルで磨砕すると標題化合物（90mg）がクリーム色固体として得られた。
M.p.133-135℃。
MS APCI +ve m/z 332/334 ([M+H]+)。
1H NMR 400MHz (DMSO-d6) 9.79 (1H, bt)、9.53(1H, bs)、8.8 (1H,bs)、8.04 (1H, d)、7.45 (6H, m)、5.84 (1H, m)、3.87 (1H, m)、3.68 (1H, m)、2.18 (3H, s)。
【００８９】
実施例６
N-[2-(5-クロロ-2-シアノ-4-フルオロフェノキシ)-2-フェニルエチル]-2-ヒドロキシエタンイミドアミド ヘミ エタンジオエート
メタノール中のエチル2-ヒドロキシエタンイミデート塩酸塩および実施例1工程(c)の生成物のエタン二酸塩を使用し、実施例5の方法によって標題化合物を製造した。
M.p.196℃。
MS APCI +ve m/z 348 ([M+H]+)。
1H NMR 400MHz (DMSO-d6) 8.0 (1H, dt)、7.62-7.33 (6H, m)、5.84 (1H, dd)、4.17 (2H, s)、3.8 (1H, dd)、3.56 (1H,dd)。
【００９０】
実施例７
2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]チオ]-6-(トリフルオロメチル)-3-ピリジンカルボニトリル
a) 1,1-ジメチルエチル [(2S)-2-[[3-シアノ-6-(トリフルオロメチル)-2-ピリジニル]チオ]-2-フェニルエチル]-カルバメート
実施例2工程(b)の生成物および2-クロロ-6-(トリフルオロメチル)-3-ピリジンカルボニトリルを使用し、実施例4(a)の方法により、副題化合物（115mg）を製造した。
MS APCI +ve m/z 324 ([M-Boc+H]+)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.94 (1H, d)、7.46-7.26 (6H, m)、5.23 (1H, t)、4.79 (1H, bs)、3.75 (2H, m)、1.39 (9H, s)。
【００９１】
b) 2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]チオ]-6-(トリフルオロメチル)-3-ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
工程(a)の生成物 (110mg) をジオキサン（8ml）中の4M HClの溶液に溶解した。混合物を室温で2時間攪拌し、次いで蒸発乾固した。残留物を重炭酸ナトリウム水溶液に溶解し、ジクロロメタンで抽出した（3回）。合した抽出物を食塩水で洗浄し、乾燥し(MgSO4) 蒸発させた。残留物をエタノールに溶解し、蓚酸のエタノール溶液を加え、得られた混合物を蒸発乾固し、次いでエタノールとジエチルエーテルの混合物から再結晶すると、標題化合物(85mg) が白色固体として得られた。
MS APCI +ve m/z 324 ([M+H]+)。
1H NMR 300MHz (DMSO-d6) 8.56 (1H, d)、7.87 (1H, d)、7.55 (2H, d)、7.41-7.30 (3H, m)、5.33 (1H, t)、3.65-3.48 (2H, m)。
【００９２】
実施例８
2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]チオ]-4-メトキシベンゾニトリル塩酸塩
a) 1,1-ジメチルエチル [(2S)-2-[2-シアノ-5-メトキシフェニル)チオ]-2-フェニルエチル]-カルバメート
実施例2工程(b)の生成物（360mg）を、メタノールに入れた7Mアンモニア（10ml）中で3時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残留物を窒素雰囲気下で乾燥DMF (10ml) に溶解し、2-フルオロ-4-メトキシベンゾニトリル (155mg) 、引き続き炭酸セシウム (655mg）を加えた。反応混合物を窒素雰囲気下に室温で3日間攪拌し、次いで水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。合した有機層を食塩水で洗浄し乾燥した（MgSO4)。溶媒を蒸発させ残留物をクロマトグラフィー（シリカ、10%酢酸エチル/イソヘキサン溶出液) により精製して副題化合物 (115mg) を油状物として得た。
MS APCI +ve m/z 285 ([M-Boc+H]+)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.50 (1H, d)、7.30 (5H, m)、6.92 (1H, s)、6.75 (1H, d)、5.30 (1H, bs)、4.59 (1H, t)、3.76 (3H, s)、3.61 (2H, m)、1.41 (9H, s)。
【００９３】
b) 2-[[(1S)-2-アミノ-1-フェニルエチル]チオ]-4-メトキシベンゾニトリル塩酸塩
上記工程(a)の生成物を使用し実施例2工程(d)の方法により、標題化合物(65mg) を製造した。
MS APCI +ve m/z 285 ([M+H]+)。
1H NMR 300MHz (DMSO-d6) 8.24 (3H, bs)、7.77 (1H, d)、7.46-7.32 (5H, m)、7.22 (1H, d)、7.01 (1H, dd)、5.01 (1H, t)、3.86 (3H, s)、3.47 (1H, m)、3.28 (1H, m)。
【００９４】
実施例９
4-クロロ-2-[[(1S)-2-(メチルアミノ)-1-フェニルエチル]チオ]ベンゾニトリル塩酸塩
a) 1,1-ジメチルエチル [(2S)-2-[(5-クロロ-2-シアノフェニル)チオ]-2-フェニルエチル]メチルカルバメート
実施例4工程(a)の生成物（92mg) のTHF（5ml）溶液に水素化ナトリウム（油中60%; 10mg) 、引き続きヨードメタン（60μl）を加えた。混合物を室温で2日間攪拌し、次いで水に注ぎジエチルエーテルで抽出した（3回）。合した有機層を食塩水で洗浄し乾燥した（MgSO4)。溶媒を蒸発除去して副題化合物（100mg) を油状物として得た。
MS APCI +ve m/z 303 ([M-Boc+H]+)。
【００９５】
b) 4-クロロ-2-[[(1S)-2-(メチルアミノ)-1-フェニルエチル]チオ]ベンゾニトリル塩酸塩
上記工程(a)の生成物を使用し実施例2工程(d)の方法により、標題化合物 (30mg) を製造した。
MS APCI +ve m/z 303/5([M+H]+)。
1H NMR 300MHz (DMSO-d6) 7.85 (2H, m)、7.56 (1H, dd)、7.47-7.33 (5H, m)、5.10 (1H, t)、3.65 (1H, m)、3.48 (1H, m)、2.56 (3H, s)。
【００９６】
実施例１０
2-[[(1R)-2-アミノ-1-(3-イソキサゾリル)エチル]オキシ]-4-クロロ-5-フルオロベンゾニトリル エタンジオエート
a) (R)-2-ヒドロキシ-2-(3-イソキサゾリル)エチルアミン
アセトニトリル (10ml) 中の塩化イッテルビウム(III）に2,6-ビス[(4S)-(-)-イソプロピル-2-オキサゾリン-2-イル]ピリジン (180mg) を加え、この溶液を1時間攪拌した。0℃に冷却した後、アセトニトリル（5ml）中の3-イソキサゾールカルボキシアルデヒド (580mg) 、引き続きTMSCN (0.96ml) を加えた。一夜室温に温めた後、塩化アンモニウム水溶液を加え、生成物をジエチルエーテル中に抽出した。抽出物を乾燥し(Na2SO4)、溶媒を蒸発除去し、残留物をジエチルエーテル(50ml）に溶解した。0℃に冷却した後、この溶液を0℃のジエチルエーテル（10ml）中の水素化アルミニウムリチウム(570mg) に加えた。室温で3時間後、水(0.54ml)、15%水酸化ナトリウム水溶液 (1.62ml) および水 (0.54ml) を順次加えた。混合物をセライトで濾過し、溶媒を蒸発除去して副題化合物を黄色油状物として得た（250mg、40% ee)。
1H NMR 400MHz (CDCl3) 8.38 (1H, d)、6.43 (1H, d)、4.82 (1H, t)、3.14 (1H, dd)、3.09 (1H, dd)。
【００９７】
b) 2-[[(1R)-2-アミノ-1-(3-イソキサゾリル)エチル]オキシ]-4-クロロ-5-フルオロベンゾニトリル エタンジオエート
DMF（2ml）に入れた工程(a)の生成物 (80mg) を、窒素雰囲気下に攪拌しながら鉱油中の60%水素化ナトリウム (75mg) で処理した。30分後、固体4-クロロ-2,5-ジフルオロベンゾニトリル (131mg) を加え、反応混合物を16時間攪拌し、水に注ぎ、ジエチルエーテルで抽出した。抽出物を食塩水と1N水酸化ナトリウム溶液の混合物（1:1）で洗浄し、次いで乾燥した（Na2SO4)。溶媒を蒸発除去し、残留物をSCX樹脂を通過させることにより精製した(メタノール中0-7Mアンモニア）。エタンジオエート塩がメタノール中に生成し、これにより標題化合物（6mg) が茶色固体として得られた。
1H NMR 300MHz (CD3OD) 8.79 (1H, s)、7.72 (1H, d)、7.52 (1H, d)、6.69 (1H, s)、6.01 (1H, dd)、3.77 (1H, dd)、3.60 (1H, dd)。
【００９８】
実施例１１
2-[[2-アミノ-1-(3-ピリジニル)エチル]チオ]-4-クロロベンゾニトリル
a) 1,1-ジメチルエチル N-[2-(メトキシメチルアミノ)-2-オキソエチル]カルバメート
N,O-ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩 (1.95g)、EDCI (3.83g)、N-メチルモルホリン (2.2ml) およびDMAP (2.44g) を、N-[(1,1-ジメチルエトキシ)カルボニル]グリシン (3.5g) のジクロロメタン（60ml）溶液に加え、室温で3日間攪拌した。ジクロロメタン(100ml) を加え、次いでこの溶液を2M塩酸（3回）、NaHCO3溶液 (3回) および水 (3回) で洗浄し、乾燥した (MgSO4)。有機層を分離し、水層をさらに2回抽出した。溶媒を蒸発させて副題化合物(3.42g）を得た。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 5.22 (1H, bs)、4.09 (2H, d)、3.72 (3H, s)、3.46 (9H, s)、3.21 (3H, s)。
【００９９】
b) 1,1-ジメチルエチル [2-オキソ-2-(3-ピリジニル)エチル]カルバメート
3-ブロモピリジン（4.92g）のTHF（30ml）溶液に臭化イソプロピルマグネシウム(15.5ml、THF中2M) を0℃で加え、1時間攪拌した。次いで工程(a)の生成物（2.18g）のTHF（20ml）溶液を加え、反応混合物を室温で40時間攪拌した。混合物を飽和塩化アンモニウム溶液(250ml) の添加により反応停止させ、酢酸エチルで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し乾燥した(MgSO4)。溶媒を蒸発除去し残留物をクロマトグラフィー(シリカ、20%酢酸エチル/ジクロロメタン溶出液) により精製して副題化合物(1.84g) を白色固体として得た。
MS APCI +ve m/z 237 ([M+H]+)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 9.18 (1H, d)、8.83 (1H, q)、8.24 (1H, dd)、7.46 (1H, dd)、5.47 (1H, bs)、4.67 (2H, d)、1.48 (9H, s)。
【０１００】
c) 1,1-ジメチルエチル [2-ヒドロキシ-2-(3-ピリジニル)エチル]カルバメート
工程(b)の生成物 (1.30g) のエタノール（50ml）溶液に水素化硼素ナトリウム (105mg）を加えた。混合物を1.5時間攪拌し、次いで蒸発させた。水を加え、混合物を酢酸エチルで2回抽出した。合した有機層を洗浄し（食塩水）乾燥した（MgSO4)。溶媒を蒸発除去して副題化合物(1.35g) を油状物として得た。
MS APCI +ve m/z 239 ([M+H]+)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 8.59 (1H, m)、8.53 (1H, m)、7.73 (1H, d)、7.30 (1H, m)、4.97 (1H, bs)、4.90 (1H, m)、3.75 (1H, bs)、3.50 (1H, m)、3.30 (1H, m)、1.45 (9H, s)。
【０１０１】
d) S-[2-[[(1,1-ジメチルエトキシ)カルボニル]アミノ]-1-(3-ピリジニル)エチル] ベンゼンカルボチオエート
上記工程(c)の生成物を使用し実施例2工程(b)の方法により、副題化合物 (740mg) を製造した。
MS APCI +ve m/z 359([M+H]+)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 8.67 (1H, d)、8.53 (1H, d)、7.94 (2H, d)、7.74 (1H, d)、7.57 (1H, t)、7.45 (2H, t)、7.27 (1H, m)、4.95 (1H, t)、4.79 (1H, bs)、3.71 (2H, t)、1.38 (9H, s)。
【０１０２】
e) 1,1-ジメチルエチル [2-[(5-クロロ-2-シアノフェニル)チオ]-2-(3-ピリジニル)エチル]カルバメート
上記工程(d)の生成物を使用し実施例8工程(a)の方法により、副題化合物 (300mg) を製造した。
MS APCI +ve m/z 390/2 ([M+H]+)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 8.52 (2H, m)、7.73 (1H, d)、7.53 (1H, d)、7.45 (1H, s)、7.30 (2H, m)、4.85 (1H, bs)、4.63 (1H, t)、3.62 (2H, m)、1.41 (9H, s)。
【０１０３】
f) 2-[[2-アミノ-1-(3-ピリジニル)エチル]チオ]-4-クロロベンゾニトリル 二塩酸塩
上記工程(e)の生成物を使用し実施例2工程(d)の方法により、標題化合物 (212mg) を製造した。
MS APCI +ve m/z 290/2 ([M+H]+)。
1H NMR 300MHz (DMSO-d6) 8.89 (1H, s)、8.76 (1H, d)、8.43 (3H, bs)、8.31 (1H, d)、8.04 (1H, s)、7.90 (1H, d)、7.80 (1H, t)、7.64 (1H, d)、5.18 (1H, t)、3.65 (1H, m)、3.46 (1H, m)。
【０１０４】
スクリーニング
本発明化合物の薬理活性を以下のスクリーニングで試験した。
スクリーニング1
式（I）の化合物またはその薬学上許容し得る塩の活性は、Foerstermann et al., Eur. J. Pharm., 1992, 225, 161-165に基づく方法により一酸化窒素シンターゼ阻害活性についてスクリーニングすることができる。一酸化窒素シンターゼは3H-lアルギニンを3H-l-シトルリンに変換し、これは陽イオン交換クロマトグラフィーにより分離し液体シンチレーション計数で定量することができる。
【０１０５】
培養したマウスマクロファージセルラインJ774A-1 (Imperial Cancer Research Fundの研究室より入手）から、誘導の後、酵素を調製する。J774A-1細胞を、10%牛胎児血清、4mM L-グルタミンおよび抗生物質(ペニシリンG 100単位/ml、ストレプトマイシン100mg/mlおよびアムホテリシンB 0.25mg/ml）を添加したダルベッコ改良イーグル培地 (DMEM) で培養する。細胞は培地35mlを入れ37℃に維持した225cm3フラスコ中、5% CO2を含む加湿雰囲気下で常套的に増殖させる。
【０１０６】
インターフェロン-g（IFNg）およびリポ多糖（LPS）に応答して、細胞が一酸化窒素シンターゼを産生する。密集培養フラスコから培地を取り除き、1mg/ml LPSおよび10単位/ml IFNgを含有する新鮮な培地25ml（フラスコ当たり）に交換する。17-20時間の培養の後、フラスコ表面から細胞のシートを削り取って培養基に入れることにより細胞の収穫を達成する。細胞を遠心分離(1000g10分間) で集め、50mM Tris-HCl (pH7.5、20℃)、10% (v/v) グリセロール、0.1% (v/v) トリトン-X-100、0.1mMジチオトレイトール、ならびにロイペプチン (2mg/ml)、大豆トリプシンインヒビター (10mg/ml)、アプロチニン (5mg/ml) およびフェニルメチルスルホニルフルオリド (50mg/ml)を含むプロテアーゼインヒビターのカクテルを含有する溶液を細胞ペレットに添加することにより、溶解液を調製する。
【０１０７】
検定のため、50mM Tris-HCl中の被験化合物の溶液25μlを入れた96ウェルフィルタープレート(孔径0.45μＭ)のウェルに、基質カクテル(50mM Tris-HCl (pH7.5、20℃)、400μＭ NADPH、20μＭフラビンアデニンジヌクレオチド、20μＭフラビンモノヌクレオチド、4μＭテトラヒドロビオプテリン、12μＭ L-アルギニンおよび0.025mCi L-[3H] アルギニン)25μlを加える。細胞溶解液（上記で調製）50μｌを添加して反応を開始し、室温で1時間インキュベートした後、3mMニトロアルギニンと21mM EDTAの水溶液50μlを添加して反応停止させる。
【０１０８】
標識したL-シトルリンを、Dowex AG-50Wを用いて、標識したL-アルギニンから分離する。Dowex 50W (Na+ 型) の25%水性スラリー150μlを検定に加え、その後全部を96ウェルプレート中に濾過する。濾液75μlをサンプリングし、固体シンチラントを入れた96ウェルプレートのウェルに加える。試料を乾燥させた後、L-シトルリンをシンチレーション計数によって定量する。
【０１０９】
典型的な実験では、基礎活性は試料75μl当たり300dpmであり、これが試薬対照では1900dpmに増大する。化合物活性はIC50（該検定で50%酵素阻害を与える薬物の濃度）で表し、10μMのIC50（50%阻害濃度）を与えるアミノグアニジンをこの方法を実証する標準として試験する。或る濃度範囲で化合物を試験し、得られる阻害からIC50値を算出する。100μMにおいて該酵素を少なくとも25%阻害する化合物を活性であると分類し、それらを少なくとも1回の再試験に付す。
【０１１０】
上記のスクリーニングにおいて、実施例1ないし11の化合物を試験したところ10μM未満のIC50値を与え、この事によりこれらが有用な治療活性を示すことが予想される。
【０１１１】
スクリーニング2
組換えヒトNOシンターゼ（iNOS、eNOSおよびnNOS）をE.coliで発現させ、補助因子（FAD、FMN、H4B）、プロテアーゼインヒビター、リゾチームおよび洗浄剤CHAPSを含有するHepes緩衝液（pH7.4）中に溶解液を調製した。これらの調製物を、種々のイソ型の阻害を評価するために適当な希釈で使用した。NOSの阻害は、Foerstermann et al.9 の方法の改良を用いて、L-[3H]アルギニンからのL-[3H]シトルリンの形成を測定することにより決定した。酵素検定は3μＭ [3H]アルギニン、1mM NADPHおよびNOS活性の支持に必要なその他の補助因子（FAD、FMN、H4B、カルモデュリン、Ca2+）の存在下で実施した。種々のNOSインヒビターが遅い結合速度を示す、または時間依存的に該酵素を不活性化すると報告されていることから、アルギニンを添加して反応を開始させる前にNADPHの存在下で酵素とインヒビターを60分間プレインキュベートした。さらに60分間インキュベートを継続した後検定を停止し、96ウェルフォーマットでDowex-50W樹脂上のクロマトグラフィーにより [3H]シトルリンを未反応基質から分離した。
【０１１２】
上記のスクリーニングにおいて、実施例1ないし11の化合物を試験したところiNOS酵素に対して10μM未満のIC50値を与え、この事によりこれらが有用な治療活性を示すことが予想される。
【０１１３】
スクリーニング3
以下の検定で立証できるように、化合物はヒト型の誘導一酸化窒素シンターゼに対しても活性を示す。
【０１１４】
ヒト結腸直腸癌腫セルライン、DLD-1（the European Collection of Animal Cell Cultureより入手。セルライン番号90102540) を、10%(v/v)牛胎児血清および2mM L-グルタミンを添加したRPMI1640で、5%CO2中37℃で常套的に増殖させた。
【０１１５】
ヒト組換えγ-IFN（1000単位/ml）、TNF-α (200U/ml)、IL-6 (200U/ml)およびIL-1-β (250U/ml)を含有する培地の添加により、細胞に一酸化窒素シンターゼを誘導した。37℃で18時間インキュベートした後、培地を取り除き、細胞を温リン酸緩衝化生理食塩水で洗浄した。100μＭ L-アルギニンと 100μＭヴェラパミル-HClを含有するRPMI1640中、被験化合物の存在下および不在下で、細胞を37℃/5%CO2の下に さらに5時間インキュベートした。
【０１１６】
等体積の培地とグリース試薬 (10mg/mlスルファニルアミド、2.5% (v/v) リン酸1mlに入れた1mg N-(1-ナフチル)エチレンジアミン）を混合して亜硝酸塩の蓄積を測定した。非処置細胞が産生した亜硝酸塩レベルに対する化合物存在下での阻害を算出した。%阻害の半対数プロット対化合物濃度からIC50値を推定した。
【０１１７】
このスクリーニングにおいて実施例1ないし11の化合物は100μM未満のIC50値を示し、この事によりこれらが有用な治療活性を示すことが予想される。
【国際公開パンフレット】
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