(57)【要約】本発明は、新規β−セクレターゼインヒビターに関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2005516967.tif 000025
［式中、Ｘはハロゲンまたはこれと生物学的に等価な部分を示し、特に、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、メチルまたはＣＦ３であり、好ましくはＣｌであり、
Ｒ１はそれぞれ独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、ニトロ、炭素原子１〜４個を含有する炭化水素基、特にＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニルまたはＣ２〜Ｃ４アルキニルであり、この場合、これらは置換されていてもよく、たとえばヒドロキシアルキル、ハロアルキル、シアノアルキル、カルボキシアルキル、アシルアルキル、オキシアルキル、スルホニルアルキル、スルホニルアミドアルキル、アミドアルキル、カルボニルアルキル、ウレイルアルキル等を示すか、あるいは、これらと生物学的に等価の部分を示し、かつｎは０〜４であり、好ましくは０〜２であり、
Ｒ２は、単結合またはＣ１〜Ｃ８炭化水素基、たとえば、Ｃ１〜Ｃ４−アルキレン基、Ｃ２〜Ｃ８−アルケニレン基、Ｃ２〜Ｃ８アルキニレン基、少なくとも１個のヘテロ原子を含有するＣ１〜Ｃ４アルキレン基、少なくとも１個のヘテロ原子を含有するＣ２〜Ｃ８アルケニレン基または少なくとも１個のヘテロ原子を含有するＣ２〜Ｃ８アルキニレン基から成る群からの結合部分であり、
Ｃｙｃは、炭素環、アリールまたはヘテロ環部分であり、
Ｒ３はそれぞれ独立して、Ｃｙｃ部分と結合する基であり、かつＲ１から選択されたか、あるいは、Ｒ１からの基０〜４個によって置換されたアリールまたはヘテロ環部分であるか、あるいは
【化２】
2005516967.tif 000026
であり、かつ、
ｍは０〜８、特に０〜４である］のβ−セクレターゼインヒビター。
【請求項２】
式
【化３】
2005516967.tif 000027
【化４】
2005516967.tif 000028
を有する請求項１に記載のβ−セクレターゼインヒビター。
【請求項３】
ＩＣ５０≦２００μＭを有する、請求項１または２に記載のβ−セクレターゼインヒビター。
【請求項４】
細胞中で活性である、請求項１から３までのいずれか１項に記載のβ−セクレターゼインヒビター。
【請求項５】
式１〜１１８に記載のいずれか１種の構造を有する、請求項１から４までのいずれか１項に記載のβ−セクレターゼインヒビター。
【請求項６】
場合により、１個またはそれ以上の製薬学的に認容性のキャリア、希釈剤および／または賦形剤との混合物の形で、請求項１から５までのいずれか１項に記載のβ−セクレターゼインヒビターを含有する、医薬組成物。
【請求項７】
請求項１から５までのいずれか１項に記載の、少なくとも５種のβ−セクレターゼインヒビターを含有する、物質ライブラリー。
【請求項８】
β−セクレターゼによって介在される症状を治療または予防するための、薬剤を製造するための、請求項１から５までのいずれか１項に記載のβ−セクレターゼインヒビターの使用。
【請求項９】
アミロイド前駆タンパク質（ＡＰＰ）からのβ−アミロイドペプチドの形成を抑制するための薬剤を製造するための、請求項１から５までのいずれか１項に記載のβ−セクレターゼインヒビターの使用。
【請求項１０】
アルツハイマー氏病またはβ−アミロイドペプチドの病理学的蓄積によって引き起こされる任意の疾病の治療または予防のための薬剤を製造するための、請求項８または９に記載の使用。
【請求項１１】
アルツハイマー氏病、ダウン症候群、脳性アミロイド血管症、Dutch型アミロイドーシスを伴う遺伝性脳性出血（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）およびβ−アミロイド蓄積によって特徴付けられる他の変性痴呆症を治療または予防するための薬剤の製造における、請求項１から５までのいずれか１項に記載のβ−セクレターゼインヒビターの使用。
【請求項１２】
β−アミロイド変換酵素の活性を調節することによる、β−アミロイド蓄積によって特徴付けられる疾病、たとえばアルツハイマー氏病を治療または予防するための方法において、このような治療を必要とする患者に、請求項１から５までのいずれか１項に記載の化合物、またはこれらの製薬学的に認容性の塩を投与することを特徴とする、β−アミロイド蓄積によって特徴付けられる疾病、たとえばアルツハイマー氏病を治療または予防するための方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アスパルチルプロテアーゼＢＡＣＥ（β−セクレターゼ）の新規インヒビター、その医薬組成物およびアミロイドβ−ペプチド沈着により引き起こされる疾病、たとえば、アルツハイマー病およびダウン症候群の治療のためのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
アルツハイマー氏病（ＡＤ）は、必然的に活動不能および死に導く、進行性痴呆によって臨床的に特徴付けられる神経変性障害である。病理解剖上では、激しいシナプスの損失およびニューロンの死が、認知機能をつかさどる脳の領域において観察され、この場合、これは、大脳皮質、嗅脳溝内皮質（entorhinal cortex）および海馬を含む（R.D. Terry, E. Masliah, L.A. Hansen, The neuropathology of Alzheimer disease and sreuctural basis of its congnitive alteration, in: R.D. Terry et al. (Ed.), Alzheimer Disease, Lippincott, Williams and Wilkins, Philadelphia, 1999, pp. 87-206）。ＡＤの過程を通してのニューロンおよびシナプスの容赦のない損失は、ＡＤ患者のその記憶、人格および最終的にはその生命をもゆっくりと奪うものである。
【０００３】
２つの特徴的な脳の病変が、顕微鏡レベルでのアルツハイマー氏病を定義する：これらは、神経原線維のもつれおよびβ−アミロイド（または神経炎性の）斑点である。神経の損傷によって包囲された神経炎性斑点は、すべてのＡＤ患者の脳中で見出されている。これらのプラークの主な成分は、アミロイド−β−ペプチドを形成する４２個のアミノ酸である（Ａ  ベータ）。このペプチドは神経毒性であり、かつ容易にプラークに凝集する不溶性フィブリルを形成する。Ａベータペプチドの蓄積は、ＡＤの指標となるばかりでなく、さらに、トリソミー２１（ダウン症候群）、Dutch型アミロイドーシスによる遺伝性脳出血（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）および他の神経変性障害における患者の脳において特徴的である。
【０００４】
３９〜４２個のアミノ酸から成るＡベータペプチドは、アミロイド前駆タンパク質（ＡＰＰ）のタンパク質分解によって生じる。セクレターゼと呼称されるいくつかのプロテアーゼが、ＡＰＰのプロセッシングに関与する。
【０００５】
ベータ−セクレターゼによるＡベータペプチドのＮ−末端でのＡＰＰの切断、およびγ−セクレターゼによるＣ−末端でのＡＰＰの切断は、ベータアミロイド経路、すなわち、Ａベータが形成される経路に寄与する。ＡＰＰフラグメントのタンパク分解プロセッシングは、たとえば、Ｃｉｔｒｏｎ  Ｍ．，Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ａｇｉｎｇ  ２３（２００２）、１０１７−１０２２に記載されている。
【０００６】
ベータセクレターゼ切断部位でＡＰＰプロセッシングに関与するアスパルチルプロテアーゼは、近年同定された（Ｖａｓｓｅｒ  Ｒ．ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９９９）２８６、７３５−７４１）。このβ−セクレターゼは、アミロイド変換酵素１（ＢＡＣＥ１）、Ａｓｐ２およびＭｅｍａｐｓｉｎ２を含む、種々の名称で開示されている。興味深いのは、ＢＡＣＥノックアウトマウスがＡベータの製造を減少させ、かつ通常の表現型を示すことである。ＡＰＰを過剰発現するトランスジェニックマウスと交雑した場合には、後代は、対照群と比較して、脳エキストラクト中のＡベータの減少を示した（Lue et al., 2001, Nature Neroscience 4: 231-232）。この結果は、β−セクレターゼ活性の抑制および脳中のＡベータの減少が、ＡＤおよび他のβ−アミロイド障害の治療方法を提供するといった提案を強力に支持するものである。
【０００７】
現在においては、アルツハイマー氏病の進行を中止させるか、回避するか、あるいは好転させるための効果的な治療法は存在しない。ＡＤに関する最近の治療薬は、すべてコリン作用薬であり、特に、アセチルコリンエステラーゼ（ＡＣＨＥ）インヒビターである。この試みの基礎となるのは、ＡＤが、コリン作動性ニューロンの本質的な損失を招くいった事実である。ＡＣＨＥインヒビターは、アセチルコリンのレベルを増加させ、残存するコリン性ニューロンを放出し続ける。
【０００８】
不運なことに、このような治療は、コリン作動性ニューロンの累進的な損失を停止させることはできず、最終的には効果が得られない。さらに、いくつかの神経伝達物質系が、ＡＤにおいて変化する。良好なアプローチとしては、神経変性の原因となる分子に作用する改善薬であろう。主な試みは、α−、β−またはγ−セクレターゼをターゲッティングすることによって、脳中のＡベータの製造および蓄積を遮断することである（Sabbagh, M. et al., Alz. Dis. Rev. (1997),3, 1-19）。しかしながら、ＢＡＣＥ−１を、最適な治療ターゲットとすべきであり、それというのも（Ｉ）これは、最初に、Ａベータ製造中の律速工程（rate-limiting step）を触媒するものであり、かつ、（ＩＩ）ＢＡＣＥ−１ノックアウトマウスは、任意の明らかな表現型を示すことはなかったためである。
【０００９】
いくつかの報告によれば、これまで、β−セクレターゼのインヒビターは、基質に基づく転移状態の類似体であった。ＰＣＲ出願ＷＯ０１／００６６５  Ｃ２“触媒的に活性のメマプシンおよびその使用方法”では、ＢＡＣＥ酵素の基質特異性、第一のペプチド様インヒビター（ＯＭ９９−１およびＯＭ９９−２）および酵素と結合したインヒビターの結晶構造を記載している。さらに、ＵＳ２００２０１１５６１６“β−アミロイド切断酵素の新規インヒビター”では、ペプチド様化合物を記載している。これらの有効性にもかかわらず、前記化合物は極めて大きく、かつ生体膜通過性に乏しいことが示された。ｉｎ  ｖｉｖｏで効果的に作用する薬剤に関しては、化合物は、血液脳関門を通過するのみならず、さらに細胞によって取り込まれなければならない。これらが細胞内で作用するために、これらの薬剤は高い選択性を有するべきであり、他の細胞内プロテアーゼとの干渉および重要なシグナル経路は、最少化されなければならない。
【００１０】
さらに、ＢＡＣＥインヒビターは、ＷＯ０２／０８８１０、ＷＯ０２／０２５２０、ＷＯ０２／０２５１８、ＷＯ０２／０２５１２、ＷＯ０２／０２５０６、ＷＯ０２／０２５０５、ＷＯ０２／７６４４０およびＷＯ０２／４７６７１中に記載されている。
【００１１】
しかしながら、アルツハイマー氏病は広く知られた疾病であり、ＵＳだけでも約４００万人が患っていることから、この疾病を治療するための有効な物質は極めて重要である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
したがって、本発明の目的は、さらに生体膜を通過可能な効果的なβ−セクレターゼインヒビターを提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明によれば、この目的は、式
【００１４】
【化１】
2005516967.tif 000002
［式中、Ｘはハロゲンまたはこれと生物学的に等価（bioisosteric）の成分を示し、特に、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、メチルまたはＣＦ３、好ましくはＣｌを示し、
Ｒ１は、それぞれ独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、ニトロ、炭素原子１〜４個を含有する炭化水素基、特に、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニルまたはＣ２〜Ｃ４アルキニルであり、この場合、これらは置換されていてもよく、たとえば、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル、シアノアルキル、カルボキシアルキル、アシルアルキル、オキシアルキル、スルホニルアルキル、スルホニルアミドアルキル、アミドアルキル、カルボノイルアルキル、ウレイルアルキル等であるか、あるいは、これと生物学的に等価の成分であり、かつ、
ｎは０〜４、好ましくは０〜２であり、
Ｒ２は、単結合またはＣ１〜Ｃ８−炭化水素基、特にＣ１〜Ｃ４−アルキレン基、Ｃ２〜Ｃ８−アルケニレン基、Ｃ２〜Ｃ８−アルキニレン基、少なくとも１個のヘテロ原子を含有するＣ１〜Ｃ４−アルキレン基、少なくとも１個のヘテロ原子を含有するＣ２〜Ｃ８−アルケニレン基または少なくとも１個のヘテロ原子を含有するＣ２〜Ｃ８−アルキニレン基から成る群からの結合部分であり、
Ｃｙｃは、炭素環、アリールまたはヘテロ環であり、
Ｒ３は、それぞれ独立して、Ｃｙｃと結合している基であり、かつ、Ｒ１から選択されたか、あるいは、Ｒ１から選択された基によって０〜４個置換されたアリールまたはヘテロ環であるか、あるいは、式
【００１５】
【化２】
2005516967.tif 000003
から選択された基であり、かつ、
ｍは０〜８、特に０〜４である］のβ−セクレターゼインヒビターによって達成された。
【００１６】
本発明によるβ−セクレターゼインヒビターは、ハロフェニル基、特にクロロフェニル基の存在によって特徴付けられ、その際、パラクロロフェニル基、ジオルトクロロフェニル基ならびにジメタクロロフェニル基が好ましい。フェニル基は、さらに、たとえばＯＨ基で置換されていてもよく、その際、ジメタクロロ−オルト−ヒドロキシ−フェニル基が好ましい。
【００１７】
基Ｘは、オルト、メタまたはパラ位であってもよい。
【００１８】
Ｒ１は、好ましくはＣ１〜Ｃ４−アルキル、Ｃ２〜Ｃ４−アルケニルまたはＣ２〜Ｃ４アルキニルであるか、あるいは、置換基を含有するアルキル基、たとえば、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル、シアノアルキル、カルボキシアルキル、アシルアルキル、オキシアルキル、スルホニルアルキル、スルホニルアミドアルキル、アミドアルキル、カルボノイルアルキル、ウレイルアルキル等である。
【００１９】
本発明によるβ−セクレターゼインヒビターにおいて、結合部分は、単結合から成るクロロフェニル基、Ｃ１〜Ｃ４−アルキレン基、Ｃ２〜Ｃ８−アルケニレン基、少なくとも１個のヘテロ原子を含有するＣ１〜Ｃ４−アルキレン基または少なくとも１個、好ましくは１〜３個、特に好ましくは１個または２個のヘテロ原子を含有するＣ２〜Ｃ８−アルケニレン基と結合している。好ましくは、１個またはそれ以上のヘテロ原子は、Ｎ、ＯおよびＳ、より好ましくはＮおよびＳから選択される。最も好ましくは、２個のＮ原子を含有する結合部分Ｒ２である。結合部分Ｒ２は、好ましくは単結合、
【００２０】
【化３】
2005516967.tif 000004
である。
【００２１】
Ｒ８は水素であるか、あるいはＲ４に関して示された任意の基であってもよい。
【００２２】
結合部分Ｒ２は、ハロフェニル残基、特に他の環部分を有するクロロフェニル基と結合する。前記の第２の環は、単環または多環、特に、２個、３個または４個の環が縮合した多環であってもよい。環部分は、好ましくは１個またはそれ以上のＯ、ＮおよびＳから選択されたヘテロ原子を含有する。Ｃｙｃ基の特に好ましい例は、
【００２３】
【化４】
2005516967.tif 000005
【００２４】
【化５】
2005516967.tif 000006
【００２５】
【化６】
2005516967.tif 000007
【００２６】
【化７】
2005516967.tif 000008
である。
【００２７】
本発明によれば、環部分Ｃｙｃは、さらに８個までの置換基、好ましくは５個までの置換基によって置換されていてもよい。環部分Ｃｙｃ上の特に好ましい置換基の例は、Ｃｌ、Ｎ、メチル、アリル、パラヨードフェニル、ＮＯ２、ＣＦ３ならびに
【００２８】
【化８】
2005516967.tif 000009
である。
【００２９】
最も好ましくは、本発明によるβ−セクレターゼは、以下の化合物から選択される：
【００３０】
【化９】
2005516967.tif 000010
【００３１】
【化１０】
2005516967.tif 000011
【００３２】
本明細書中で使用される用語は、別記しない限り以下の意味を有する。
【００３３】
用語「炭化水素」または「炭化水素基」は、少なくとも１個の炭素原子および少なくとも１個の水素原子を含有する任意の成分を含む。特に、用語「炭化水素」は、１〜３０個の炭素原子を含有する任意の成分を示し、かつ芳香族基および脂肪族基を包含する。
【００３４】
用語「脂肪族」または「脂肪族基」は：
−完全飽和であるかまたは１個またはそれ以上の不飽和単位を含有する直鎖、
−完全飽和であるかまたは１個またはそれ以上の不飽和単位を含有する単環のＣ３〜Ｃ８炭化水素または二環のＣ８〜Ｃ１２炭化水素であるが、しかしながら、これらは、芳香族ではなく（これらは、以下「炭素環」として呼称する）、かつ、残りの分子との単結合部位を有する。二環系中の任意のそれぞれの環は、３〜７個の環原子を含有する。
【００３５】
脂肪族基は、制限することはないが、直鎖または分枝鎖であるか、あるいはアルキル、アルケニル、アルキニル基、炭素環基（たとえば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ペンチル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、ベンゾイル等）およびこれらのヒドリド、たとえばシクロアルキル−アルキル、シクロアルケニル−アルキルまたはシクロアルキル−アルケニル（たとえば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル等）である。それぞれの脂肪族基において、４個までの炭素は、それぞれ、Ｏ、Ｎ、ＳまたはＮＨによって置換されていてもよい。
【００３６】
単独でかまたは用語の一部として使用された、用語「アルキル」、「アルケニル」または「アルキニル」は、直鎖および分枝鎖の双方を含み、その際、４個までの炭素は、それぞれＯ、Ｎ、ＳまたはＮＨによって置換されていてもよい。別記しない限りは、アルキル、アルケニルおよびアルキニルの鎖の長さは、１個〜１２個の炭素原子を含有するものであって、アルケニルの場合には、少なくとも２個の炭素原子および１個の二重結合、アルキニルの場合には、少なくとも２個の炭素原子および１個の三重結合を含有する。
【００３７】
用語「へテロ原子」は、酸素および、窒素および硫黄の任意の酸化された形を含み、かつ任意の塩基性窒素の４級化の形を含む。
【００３８】
「アリールアルキル」、「アリールアルコキシ」または「アリールオキシアルキル」として、単独でかまたは用語の一部として使用された用語「アリール」または「アリール環」は、全部で５個〜１４個の環員を有する単環、二環または三環に関し、その際、系中の少なくとも１個の環は芳香族であり、かつ、その際、それぞれの環は、３個〜７個の環員を含有する（たとえば、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル等）。
【００３９】
単独でかまたは用語の一部として使用される用語「ヘテロ環」、「ヘテロ環式」、「ヘテロアリール」、「ヘテロアリール環」および「ヘテロ芳香族」は、全部で５〜１４個の環員を有する、単環、二環または三環の、飽和または不飽和の環系に関し、系中の少なくとも１個の環はヘテロ原子を含有し、かつ、その際、それぞれの環は、３〜７個の環員を含有する（たとえば、ピリジル、トリアゾリル、ベンズチアゾリル、チエニル、モルホニリル、キノリル、フリル、イミダゾリル、ピラジニル、ピリミジニル、キノキサリニル等）。
【００４０】
本発明の化合物は、１個またはそれ以上の「非対称」の炭素原子を含有してもよく、これによって、ラセミ体およびラセミ混合物として、単一のエナンチオマー、ジアステレオマー混合物または別個のジアステレオマーとして存在していてもよい。本発明の化合物のこのような異性体の形は、本発明において特に含まれるものである。それぞれの立体性の炭素は、ＲまたはＳの配置であってもよい。本発明において例示された特定の化合物およびスキャフォールドは、特別な立体化学的配置で示されていてもよいが、任意のキラル中心で反対の立体化学を有する化合物およびスキャフォールド、またはこれらの混合物もまた認められる。
【００４１】
用語「照会（query）」は、化学化合物データベースをサーチするのに使用されるモデルまたはパターンに関し、これによって、この照会に類似する化学的、生物学的および製薬学的化合物を見出すことができる。
【００４２】
用語「フォーカスライブラリー（focused library）」は、化学化合物の大きいコレクションからの化合物のサブセットの選択に関する。これは、照会および適切なソフトウエアツールを用いてのコンピューター方法の使用により自動的にか、あるいは、化合物のマニュアル選択によっておこなわれてもよい。
【００４３】
用語「共通のファルマコホア（common pharmacophore）」は、１個または複数個の別個のタンパク質クラス、たとえば、アスパルチルプロテアーゼ、ホスホジエステラーゼまたはセリンプロテアーゼの結合部位の一般的なファルマコホリック表現（pharmacophoric representation）に関する。共通のファルマコホアは、１個または複数個のタンパク質クラスに属するタンパク質の異なるリガンドのファルマコホアを組合せ、かつ、１個または複数個の別個のタンパク質クラスの可能なリガンドまたはインヒビターのモデルまたはパターンを示す。
【００４４】
用語「Ｓｕｒｆ２Ｌｅａｄ」は、タンパク質の潜在的であるかまたは公知の結合部位（以下、「逆活性部位（inverse active site）」とする）（ＷＯ０２／９２２１８  Ａ２）からの、２次元または３次元のファルマコホリック情報を抽出するための、３次元タンパク質情報を使用する方法に関する。ファルマコホアは、特異的または他の類似のタンパク質のための、新規の潜在的なリガンドまたはインヒビターを見出すためのモデルまたはパターンを示す。
【００４５】
用語「ＰＨＡＣＩＲスクリーング」は、２項パターン（以下に「２項フィンガープリント」に関する）を、照会として使用し、フォーカスライブラリーを製造することに関する（ＷＯ０２／１２８８９  Ａ２）。２項フィンガープリントは、１個またはそれ以上の公知のリガンドまたはインヒビターの２次元または３次元のファルマコホアから製造されるか、あるいは、１個またはそれ以上の逆活性部位から製造することができる。化学的化合物データベースのサーチによって、この方法は、類似するが、新規である潜在的なリガンドまたはインヒビターを導く。
【００４６】
本発明の化合物は、当業者に公知の一般的な方法によって製造することができる（さらに、たとえば、Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，４ｔｈ  ｅｄ．）。その一つにより、以下の技術および記載による本発明の他の化合物を、簡単に合成されるかまたは商業的に入手可能な試薬を用いて合成することができる。
【００４７】
特に好ましい化合物は：
【００４８】
【化１１】
2005516967.tif 000012
【００４９】
【化１２】
2005516967.tif 000013
【００５０】
【化１３】
2005516967.tif 000014
【００５１】
【化１４】
2005516967.tif 000015
【００５２】
【化１５】
2005516967.tif 000016
【００５３】
【化１６】
2005516967.tif 000017
【００５４】
【化１７】
2005516967.tif 000018
【００５５】
【化１８】
2005516967.tif 000019
【００５６】
【化１９】
2005516967.tif 000020
【００５７】
【化２０】
2005516967.tif 000021
【００５８】
【化２１】
2005516967.tif 000022
【００５９】
【化２２】
2005516967.tif 000023
【００６０】
それぞれ、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニルまたはＣ２〜Ｃ４アルキニルであり、この場合、これらは置換されていてもよく、たとえば、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル、シアノアルキル、カルボキシアルキル、アシルアルキル、オキシアルキル、スルホニルアルキル、スルホニルアミドアルキル、アミドアルキル、カルボノイルアルキル、ウレイルアルキル等を示すか、あるいは、これらと生物学的に等価の部分であってもよい。
【００６１】
本発明のβ−セクレターゼインヒビターは、有効な化合物であり、これによって、β−セクレターゼを、選択的かつ効果的に抑制することができる。これらは、特に≦２００μＭのＩＣ５０値によって特徴付けることができる。さらに、本発明の化合物は、β−セクレターゼインヒビターに基づく新規薬剤の開発するための、新規足がかりを提供する。
【００６２】
さらに本発明の化合物は、細胞中で活性であることによって特徴付けられる。これに関して、化合物ＩＤ３およびＩＤ７は特に好ましく、それというのも、これらは特に、細胞−透過性活性の化合物であるためである。
【００６３】
本発明の化合物は、コンピューターによるスクリーニング、特にＰＨＡＣＩＲスクリーニングによって、組み合わされたファルマコホアに基づく化合物データベース以外のフォーカスライブラリーの製造のために同定された。この方法において、新規構造を有するベータセクレターゼインヒビターを発見することが可能であり、この場合、これらのインヒビターは、このような活性を有することが技術水準においていまだ仮想されていないものである。
【００６４】
組み合わされたファルマコホア、たとえば、アスパルチルプロテアーゼに関する共通のファルマコホアと、結晶化β−セクレターゼの表面をベースとするファルマコホア（Surf2lead（Ｒ））との組合せ物として：ＯＭ９２２複合体を使用することができる。アスパルチルプロテアーゼの共通のファルマコホアに関しては、活性中心が、ファルマコホアの製造に使用された。ｓｕｒｆ２ｌｅａｄアプローチに関しては、β−セクレターゼの活性中心表面：インヒビターと一緒に結晶化されたＯＭ９２２を、ファルマコホア製造のために使用した。ＰＨＡＣＩＲスクリーニングに関する照会は、２個のファルマコホアの組合せから生じた。その後に、視覚的スクリーニングによって同定されたフォーカスライブラリーの化合物は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイ、たとえば、フルオレセンスＢＡＣＥアッセイ、または細胞性アッセイをおこない、その抑制効果について測定することが可能である。
【００６５】
前記に示したように、β−セクレターゼ抑制作用を有する化合物は、アルツハイマー氏病および他のベータＡ蓄積によって特徴付けられる疾病、たとえばダウン症候群およびＨＣＨＷＡ−Ｄの治療に適した薬剤である。したがって、さらに本発明は、前記に示したようなβ−セクレターゼインヒビター、場合によっては１個またはそれ以上の製薬学的に認容性のキャリア、希釈剤および／または賦形剤との混合物の形での、医薬組成物に関する。
【００６６】
本発明の化合物は、特に、アミロイド前駆タンパク質（ＡＰＰ）からのβ−アミロイドペプチドの形成を抑制するのに適している。したがって、β−アミロイドの病理学的蓄積によって引き起こされる疾病の任意の症状、たとえば、アルツハイマー氏病、トリソミー２１（ダウン症症候群）またはDutch型のアミロイドーシスを伴う遺伝性脳性出血（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）を治療することができる。
【００６７】
製薬学的組成物は、それぞれの要求にしたがって、投薬のために処方することができる。特に、局所的、経口的、経皮的、非経口的、舌下、鼻腔内、鞘内（intrathecal）、直腸内、吸入または静脈内投与のために処方されていてもよい。
【００６８】
経口的送達に関して適した投薬形は、たとえば、錠剤、丸剤、トローチ、ゲルまたはカプセルを含む。非経口的送達に関しては、たとえば、デポー、シリンジ、アンプルまたはバイアルによる投薬がおこなわれてもよい。パッチ、メディパット、軟膏またはクリームの形での処方は、局所的送達のために適している。
【００６９】
疾病、たとえば、アルツハイマー氏病のような疾病の治療および／または予防における投与に要求される本発明によるインヒビターの量は、深刻な症状ならびに治療すべき患者に依存する。典型的には、日用量は、０．０１ｍｇ／ｋｇ（体重）〜５００ｍｇ／ｋｇ（体重）であり、好ましくは少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ（体重）〜５０ｍｇ／ｋｇ体重である。
【００７０】
β−セクレターゼインヒビターの他に、本発明による医薬組成物は、１個またはそれ以上の他の活性物質を含有していてもよい。
【００７１】
さらに本発明は、β−セクレターゼにより介在される疾病の治療のための薬剤を製造するための、前記に示したようなβ−セクレターゼインヒビターの使用に関する。β−セクレターゼインヒビターは、特に、アルツハイマー氏病の治療のための薬剤を製造するために適している。本明細書中で使用した用語「症状の治療」とは、確立された病状の治療と、予防的治療の双方に関し、これによって、疾病または特定の病状の発生を回避することができる。
【００７２】
さらに本発明は、少なくとも５種、少なくとも１０種、より好ましくは少なくとも５０種の前記に示したような化合物を含有する物質ライブラリーに関する。このようなライブラリーは、特に活性試験におけるスクリーニングのために有利であってもよい。
【００７３】
本発明は以下の実施例によってさらに説明される。
【実施例】
【００７４】
例１
フルオレセンスＢＡＣＥアッセイ
本発明の化合物の抑制活性は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイ、すなわち、フルオレセンスＢＡＣＥアッセイにおいて示された。
【００７５】
アッセイは、３対の９６穴ブロックプレートでおこなわれた。ｒｈＢＡＣＥを、１００ｌ（ＰＢＳ＋０．５％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ  １００、ｐＨ５０）で、１単位／穴に希釈した。ＢＡＣＥ酵素（Ｒ＆Ｄシステム（ca. No. 931-AS）による、参考文献：Vasserら、１９９９、Science 286,731-741）を、種々のインヒビター化合物の濃度（１０ｎＭ〜５００Ｍ）で、５分間に亘ってインキュベートした。
【００７６】
反応を、ＥＤＡＮＳ／Ｄａｂｃｙｌ  標識されたペプチド基質（BACHEM(cat. No. M-2470)からのもの、参考文献：Ermolieff et al., Biochemistry 39 (2000) 12450-56）を添加することによって開始した。３７℃で２時間に亘ってのインキュベーションの後に、結果を、フルオロプレートリーダーで、３５５ｎｍ／４８６ｎｍで読みとった。
【００７７】
以下のＩＣ５０値は、前記に示された特に好ましい化合物に関して測定された：
【００７８】
【化２３】
2005516967.tif 000024
【手続補正書】
【提出日】平成16年1月28日(2004.1.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2005516967.tif 000029
［式中、Ｘはハロゲンまたはこれと生物学的に等価な部分を示し、特に、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、メチルまたはＣＦ３であり、好ましくはＣｌであり、
Ｒ１はそれぞれ独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、ニトロ、炭素原子１〜４個を含有する炭化水素基、特にＣ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニルまたはＣ２〜Ｃ４アルキニルであり、この場合、これらは置換されていてもよく、たとえばヒドロキシアルキル、ハロアルキル、シアノアルキル、カルボキシアルキル、アシルアルキル、オキシアルキル、スルホニルアルキル、スルホニルアミドアルキル、アミドアルキル、カルボニルアルキル、ウレイルアルキル等を示すか、あるいは、これらと生物学的に等価の部分を示し、かつｎは０〜２であり、
Ｒ３はそれぞれ独立して、Ｒ１から選択されたか、あるいは、Ｒ１からの基０〜４個によって置換されたアリールまたはヘテロ環部分であるか、あるいは
【化２】
2005516967.tif 000030
であり、かつ、
Ｒ４はハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニルまたはＣ２〜Ｃ４アルキルであり、この場合、これらは置換されていてもよく、たとえば、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル、シアノアルキル、カルボキシアルキル、アシルアルキル、オキシアルキル、スルホニルアルキル、スルホニルアミドアルキル、アミドアルキル、カルボニルアルキル、ウレイルアルキル等であるか、あるいはこれと生物学的に等価な部分であり、かつ、
ｍは０〜４である］のβ−セクレターゼインヒビター。
【請求項２】
式
【化３】
2005516967.tif 000031
を有する請求項１に記載のβ−セクレターゼインヒビター。
【請求項３】
ＩＣ５０≦２００μＭを有する、請求項１または２に記載のβ−セクレターゼインヒビター。
【請求項４】
細胞中で活性である、請求項１から３までのいずれか１項に記載のβ−セクレターゼインヒビター。
【請求項５】
場合により、１個またはそれ以上の製薬学的に認容性のキャリア、希釈剤および／または賦形剤との混合物の形で、請求項１から４までのいずれか１項に記載のβ−セクレターゼインヒビターを含有する、医薬組成物。
【請求項６】
請求項１から４までのいずれか１項に記載の、少なくとも５種のβ−セクレターゼインヒビターを含有する、物質ライブラリー。
【請求項７】
β−セクレターゼによって介在される症状を治療または予防するための、薬剤を製造するための、請求項１から４までのいずれか１項に記載のβ−セクレターゼインヒビターの使用。
【請求項８】
アミロイド前駆タンパク質（ＡＰＰ）からのβ−アミロイドペプチドの形成を抑制するための薬剤を製造するための、請求項１から４までのいずれか１項に記載のβ−セクレターゼインヒビターの使用。
【請求項９】
アルツハイマー氏病またはβ−アミロイドペプチドの病理学的蓄積によって引き起こされる任意の疾病の治療または予防のための薬剤を製造するための、請求項７または８に記載の使用。
【請求項１０】
アルツハイマー氏病、ダウン症候群、脳性アミロイド血管症、Dutch型アミロイドーシスを伴う遺伝性脳性出血（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）およびβ−アミロイド蓄積によって特徴付けられる他の変性痴呆症を治療または予防するための薬剤の製造における、請求項１から４までのいずれか１項に記載のβ−セクレターゼインヒビターの使用。
【請求項１１】
β−アミロイド変換酵素の活性を調節することによる、β−アミロイド蓄積によって特徴付けられる疾病、たとえばアルツハイマー氏病を治療または予防するための方法において、このような治療を必要とする患者に、請求項１から４までのいずれか１項に記載の化合物、またはこれらの製薬学的に認容性の塩を投与することを特徴とする、β−アミロイド蓄積によって特徴付けられる疾病、たとえばアルツハイマー氏病を治療または予防するための方法。
【請求項１２】
式
【化４】
2005516967.tif 000032
【化５】
2005516967.tif 000033
を有する、β−セクレターゼインヒビター。
【国際調査報告】
2005516967.tif 000034
2005516967.tif 000035
2005516967.tif 000036
2005516967.tif 000037
2005516967.tif 000038
2005516967.tif 000039