(57)【要約】  ３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキドを生産するための産業上適用可能な方法である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシドを調製するための方法であって、ベンゾフロキサンとシアナミドを非水性媒体中、有機塩基の存在下、約２０〜２５℃の温度で反応せしめ、しかる後に有機酸で処理することを含んで成る方法。
【請求項２】
前記有機塩基がDBU及びDBNからなる群から選択されている、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記有機塩基がDBUである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記有機酸が酢酸である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
ベンゾフロキサンをシアナミドと、有機塩基がおよそ塩基２〜３mol/ベンゾフロキサンmolの割合で存在する中、およそシアナミド２〜３mol/ベンゾフロキサンmolの割合で反応せしめ、しかる後に、およそ酸１〜１．３mol/塩基molの割合における有機酸で処理する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記塩基がDBU及びDBNからなる群から選択されている、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記塩基がDBUである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記有機酸が酢酸である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
アセトニトリル、アセトン及びイソプロパノールから成る群から選択された溶媒の存在下で行われている、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記溶媒がアセトニトリルである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記ベンゾフロキサンをシアナミドと、およそシアナミド２mol/ベンゾフロキサンmolの割合で、アセトニトリル中、DBUがおよそDBU２mol/ベンゾフロキサンmolの割合で存在する中、およそ２０〜２５℃の温度で反応せしめ、しかる後に、およそ酢酸１mol/DBUmolの割合における酢酸で処理する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
a)ベンゾフロキサンをシアナミドと、およそシアナミド２mol/ベンゾフロキサンmolの割合で、およそDBU２mol/ベンゾフロキサンmolの割合におけるDBUの存在下、アセトニトリル/ベンゾフロキサンがおよそ０．３：１(w/w)の割合におけるアセトニトリル中、およそ２０〜２５℃の温度で、およそ４８時間に渡り反応せしめ；
b)前記反応混合物をアセトニトリルで、アセトニトリル/ベンゾフロキサンがおよそ５：１(w/w)の割合において、希釈し；
c)前記反応混合物を酢酸で、およそ酢酸１mol/DBUmolの割合において、温度をおよそ１５℃未満に維持しながら処理し；
d)およそ５〜１０℃で生成物を沈殿せしめ；そして
e)３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシドを前記反応混合物から単離する：
段階を含んで成る、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
請求項１に記載の方法によって調製された３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシド。
【請求項１４】
請求項４に記載の方法によって調製された３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシド。
【請求項１５】
請求項１０に記載の方法によって調製された３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシド。
【請求項１６】
請求項１２に記載の方法によって調製された３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシド。
【請求項１７】
単離した３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシドを水性メタンスルホン酸中に溶かし；
この溶液をろ過し；
ろ過したこの溶液を、およそ酢酸ナトリウム１〜１．３mol/メタンスルホン酸molを含む酢酸ナトリウムの水溶液に対して加え；そして
およそ１０〜２５℃で生成物を沈殿せしめる：
段階を更に含んで成る、請求項１２に記載の方法。
【請求項１８】
請求項１７に記載の方法によって調製された３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシド。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
本発明は、一般名チラパザミンの下で公知の３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキドを調製するための方法に関連する。
【０００２】
チラパザミンは、米国特許第５，１７５，２８７号において放射線感受性増強物質及び低酸素腫瘍細胞に対する選択的細胞傷害剤として開示されており、そして米国特許第５，４８４，６１２号は、チラパザミンが化学療法剤の細胞傷害性を増強することを開示している。
【０００３】
チラパザミンの調製は、Angew.Chem.Vol.８４、p１０６１（１９７２）及び米国特許第３，８６８，３７１号に開示されている。この方法は、ベンゾフロキサンと二ナトリウムシアナミドとの水性メタノール中での反応、しかる後の酢酸による酸性化をを伴い、３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキドを得る。米国特許第５，６７２，７０２号は、高純度のチラパザミンを調製するため改善された方法を開示しており、それは、ベンゾフロキサンと二ナトリウムシアナミドとの水性ジメチルスルフォキシド中での反応、しかる後のメタンスルホン酸による酸性化及び酢酸ナトリウム緩衝液からの結晶化を伴う。
【０００４】
上記方法は、発熱性であり、そして小さなスケールでは調節可能であるが、産業的スケールで行われる場合、危険な上昇発熱反応をもたらす危険がある。当然、この危険は、チラパザミンが細胞傷害性剤である事実によって寛容されている（magnified）。この問題を回避するために反応が行われるようにスケールを縮小することによって、当然産業的な生産方法の目的が損なわれる。さらには、前記発熱反応が調節できうるとしても、上記反応は強塩基水性媒体中で行われているが、この条件下ではチラパザミンが不安定である。従って、生成産物の収率と純度がどちらも低下する。従って、チラパザミンを生産するための安全な産業的方法及びチラパザミンがその方法中で安定である方法に対する要請がある。
【発明の開示】
【０００５】
発明の概要
従って、本発明は、高純度のチラパザミンを安全且つ比較的高い収率において産業スケールで生産し、そして更に、従来技術で使用されている水性塩基及び産業上不都合な物質のジメチルスルホキシド及びメタンスルホン酸の使用を回避するための方法を供する。
【０００６】
従って、本発明の方法は、ベンゾフロキサンとシアナミドの、非水性媒体中、有機塩基の存在下での反応、しかる後の有機酸による中和を含んで成る。
【０００７】
発明の詳細な説明
一層詳細には、ベンゾフロキサンは化学量論的過剰のシアナミドと非水性媒体中、およそ室温にて、有機塩基の存在下で反応せしめられている。反応が終結した場合、この反応混合物は有機酸で処理されチラパザミンが得られる。
【化１】
2005509033.tif 000002
【０００８】
前記有機塩基は、強い、非求核性塩基、好適には、ヒンダードアミンの例えば、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（DBU）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノン−５−エン（DBN）などである。DBUが好適である。
【０００９】
前記有機酸は、好適には弱有機酸の、例えば、酢酸であり、それはチラパザミンの有機塩基塩からチラパザミンを有効に遊離させるだろう。
【００１０】
ベンゾフロキサンはシアナミドと、およそシアナミド２〜３mol/ベンゾフロキサンmol、好適にはおよそシアナミド２mol/ベンゾフロキサンmolの割合で反応させられている。塩基、好適にDBUは同様におよそ塩基２〜３mol/ベンゾフロキサンmolの割合で使用されている。
【００１１】
前記反応は、溶媒存在又は不在の下、およそ室温、即ち２０〜２５℃において都合良く行われている。もし反応が、溶媒を伴わずに、又は濃縮溶液中で行われていれば、その発熱性の観点において、その温度は冷却を伴いながら好適におよそ２０〜２５℃に維持される。チラパザミンは水性塩基に対して不安定であるので、使用される全ての溶媒は、非水性であるべきだが少量の水は寛容され、溶媒、反応物及び試薬が本質的に水を含まない場合に至適収率が達成されている。
【００１２】
前記反応は、非水性の、極性溶媒、例えば、アセトン、イソプロパノール、アセトニトリルなどの中で行われていることが好適である。通常、前記溶媒は、溶媒/ベンゾフロキサンが、およそ０．２５：１（w/w）〜１．５：１（w/w）の割合で使用されている。アセトニトリルが好適な溶媒である。前記反応は、最大およそ１７０時間、好適には４８〜７２時間に渡り進められるかあるいは、当該反応は、TLC又はHPLCによって表示される場合迄に、本質的に完了する。生成する塩基性反応混合物は、有機酸、例えば酢酸を、およそ酸１〜１．３mol/塩基molの量において加えることによって中和されている。生成物の分解を防ぎ且つその単離を容易にするために、前記酸を加える前に前記反応混合物を希釈及び冷却することが有利である。この反応混合物は、任意の不活性溶媒、即ち、反応混合物の成分と反応はせず且つここでチラパザミンが比較的不溶性であるもの、例えば、アセトニトリル、アセトン、イソプロパノール、ベンゼン、トルエンなどで希釈されて良い。当然、前記反応がある溶媒の存在下で行われているならば、この反応混合物は同溶媒で更に都合良く希釈されても良い。前記チラパザミンは沈殿せしめられ、そして常用の方法により単離されている。例えば、中和された反応混合物は、およそ５〜２５℃でおよそ２〜７２時間に渡り撹拌され、そして生成する沈殿物がろ過によって回収され、新鮮溶媒及び水で洗浄されて、乾燥されている。好適に、前記水洗は、生成物を水中でスラリー状にし、およそ３０〜６０分に渡り撹拌し、そして当該スラリーをろ過することによって行われている。そのようにして生産されたチラパザミンは通常、更なる精製が不要である。しかし、もし所望されれば、それは常用の精製技術によって更に精製されても良い。例えば、更なる精製は、回収したチラパザミンを強酸、例えば、水性メタンスルホン酸中に溶かし、この溶液をろ過し、そして弱塩基、例えば、酢酸ナトリウムで処理することによってチラパザミンを再沈殿させることにより行われて良い。都合良く、前記酸性溶液が水性酢酸ナトリウムに対して加えられ、そしておよそ１０〜２５℃でおよそ１〜２４時間に渡り撹拌されている。次いで、沈殿したチラパザミンはろ過によって回収され、水で洗浄されて乾燥されている。出発物質のベンゾフロキサンとシアナミドは公知であり且つ試薬塩基、酸及び溶媒として商業上入手可能である。
【００１３】
本発明は、以下の本発明を限定することがない例によって説明されている。
【実施例】
【００１４】
実施例１
４mlのアセトニトリル中４．０８g（３０mmol）のベンゾフロキサンの懸濁に対して、１１．４g（７５mmol）のDBUを加えた。生成する溶液に対して、６．２mlのアセトニトリル中、２．５２g（６０mmol）のシアナミドを含む溶液を1時間に渡り加えた。室温で６日に渡る撹拌の後、この反応混合物を３０mlのトルエンで希釈し、０℃に冷却し、そして５．４g（９０mmol）の酢酸で処理した。室温で一晩の撹拌後、生成する沈殿物を回収して６mlのアセトニトリル及び１５mlの水で２度洗浄して、真空中で一晩乾燥させた後、２．１１gのチラパザミンを得た。
【００１５】
実施例２
８．４４g（５５．４mmol）のDBU中、３．７７g（２７．７mmol）のベンゾフロキサンを含む溶液に対して、冷却しながら２．３３g（５５．５mmol）のシアナミドを滴下した。この反応混合物を、室温で５日に渡り撹拌した後、２６mlのアセトンで希釈し、そして４．１６g（６９．３mmol）の酢酸で処理した。室温で一晩の撹拌後、この混合物を更に３０．２mlのアセトンで希釈し、そして室温で更に２．５時間に渡り撹拌した。生成する沈殿物を回収して５０mlのアセトン及び１５mlの水で洗浄して、真空下で一晩乾燥させた後、２．０９gのチラパザミンを得た。
【００１６】
実施例３
１０mlのイソプロパノール中、３．３５g（８０mmol）のシアナミドを含む溶液を、１２．１５g（８０mmol）のDBU中、５．４３g（４０mmol）のベンゾフロキサンを含む溶液に加えて、生成する混合物を室温で４日に渡り撹拌した。HPLCによってこの反応は不完全であることが示された。従って、更なる１６．８g（４０mmol）のシアナミドをこの反応混合物に対して滴下し、そして更なる３日に渡り室温で撹拌し続けた。次いで、この混合物を２８mlのイソプロパノールで希釈し、そして４．８g（８０mmol）の酢酸で処理した。室温で一晩の撹拌後、生成する沈殿物を回収して１５mlのイソプロパノール及び２０mlの水で洗浄して、真空下で一晩乾燥させた後、３．３９gのチラパザミンを得た。
【００１７】
実施例４
２２３．６g（１．５mol）のDBU中、１００g（０．７３mol）のベンゾフロキサンを含む溶液に対して、３８mlのアセトニトリル中、６１．７g（１．５mol）のシアナミドを含む溶液を、温度を２０〜２５℃に維持しながら、加えた。この反応混合物を、その温度で５０時間に渡る撹拌の後、それを６６２mlのアセトニトリルで希釈し、そして１５℃に冷却して８８．２g（１．５mol）の酢酸で処理した。この混合物を５℃で１８時間に渡り撹拌した後、生成する沈殿をろ過によって回収して１００mlのアセトニトリルで２度洗浄した。回収した固体を２００mlの水中でスラリー状にし、回収し、５０mlの水で２度洗浄し、そして真空下３日に渡り乾燥させた後、４９．７gのチラパザミンを得た。
【００１８】
実施例５
１．０００kg（７．３４７mol）ベンゾフロキサン及び２．２３７kg（１４．６９４mol）のDBUを含む撹拌された混合物に対して、３８０mlのアセトニトリル中、温度を２５℃未満に維持しながら、６１８g（１４．６９４mol）のシアナミドを含む溶液を加えた。この反応混合物を、４８時間に渡り２０〜２５℃で撹拌した後、６．６２０lのアセトニトリルで希釈し、そして１５℃未満に冷却した。この冷却された混合物に対して、温度を１５℃未満に維持しながら、８８２g（１４．６９４mol）の酢酸を加えた。５〜１０℃で一晩に渡り撹拌した後、沈殿した生成物をろ過によって回収してアセトニトリルで洗浄（２×２l）した。生成する固体を２lの水中で懸濁させて、均一な懸濁が獲得される迄、およそ３０分に渡り撹拌し、次いでろ過した。回収した固体を２lの水中で再懸濁させ、２０〜３０分に渡り撹拌し、そしてろ過した。回収した固体を真空下５０〜５５℃で一定の重量へと乾燥させ、５０６．６gのチラパザミンを得た。
【００１９】
実施例６
９．５kg（６９．８mol）ベンゾフロキサン及び２１．３kg（１３９．９mol）のDBUを含む撹拌された混合物に対して、２．７kgのアセトニトリル中、温度を１５〜２５℃に維持しながら、５．８kg（１３８．０mol）のシアナミドを含む溶液を加えた。この反応混合物を、２０〜２５℃で６７時間に渡る撹拌の後、４８kgのアセトニトリルで希釈し、そして０〜１０℃に冷却した。この冷却された混合物に対して、温度を５〜１５℃に維持しながら、８．５kg（１４１．５mol）の酢酸を加えた。５〜１０℃で４６時間に渡る撹拌後、沈殿した生成物をろ過によって回収してアセトニトリル（２×１５kg）で洗浄した。生成した固体を２０kgの水中で再懸濁し、４０分に渡り撹拌し、ろ過してフィルターケーキを１０kgの水で洗浄した。回収した固体を２０kgの水中で懸濁させ、４５分に渡り撹拌し、ろ過してフィルターケーキを１０kgの水で洗浄した。回収した固体を２９kgの水中で懸濁させ、そしてこの懸濁に対して８．７kg（９０．５mol）のメタンスルホン酸を加えた。この混合物を４０〜４５℃で溶解が完了する迄撹拌した。生成する溶液を、４９kgの水中９．２kg（１１２．２mol）の酢酸ナトリウムを含む溶液に対して加え、そして１．５時間に渡り１０〜２５℃で撹拌した。沈殿した生成物をろ過によって回収し、そして１０kgの水で洗浄した。回収した生成物を２０kgの水中で懸濁させて、５５分に渡り撹拌し、ろ過し、そしてこのフィルターケーキを１０kgの水で洗浄した。回収した固体を２０kgの水中で再懸濁させ、５５分に渡り撹拌し、ろ過し、そしてフィルターケーキを１０kgの水で洗浄した。獲得した生成物を５０〜５５℃で一定の重量へと乾燥させ、４．６kgのチラパザミンを得た。
【国際調査報告】
2005509033.tif 000003
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