(57)【要約】  一般式：B・X1・NO2(I)（式中、Ｂはステロイドの残基、Ｘ1は芳香環または複素環を含む２価の連結基である）のステロイド性化合物のニトロオキシ誘導体またはそのエステルもしくは塩。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式：
B ・ X1 ・ NO2              (I)
のステロイド性化合物のニトロオキシ誘導体またはそのエステルまたはそれらの塩：
［式中、Ｂは次の構造：
【化１】
2005516070.tif 000056
（ここで、一般式に示されたＣＨ基の水素またはＣＨ2基の２つの水素の位置に次の置換基が存在することができる）
を有するステロイド残基である］
のステロイド化合物のニトロオキシ誘導体またはそのエステルもしくは塩：
1-2位において:一つの２重結合;
2-3 において次の置換基:
【化２】
2005516070.tif 000057
2 位において: Cl、 Br;
3 位において: オキソ、-O-CH2-CH2-Cl、 OH、 OCH3; 
4-5 位において: 一つの２重結合;
5-6位において: 一つの２重結合;
6位において: Cl、 F、 Br、 CH3、 -CHO;
Ｂがエストロゲンの残基であるとき、1、2、3、4、5、および10と番号がつけられた炭素原子により定義される環は芳香環である；
7位において: Cl、OH;
9位において: Cl、F、Br;
11位において: OH、オキソ、Cl;
16位において: CH3、OH、=CH2;
17位において: OH、CH3、OCO(O)ua(CH2)vaCH3 （ここで、uaは０または１に等しい整数であり、vaは０〜４の整数である）、エチニル(C(CH); または
【化３】
2005516070.tif 000058
16-17位において次の基:
【化４】
2005516070.tif 000059
（ここで、RA1 はH、CH3; RA2 はC1-C10、好ましくはC1-C3の、直鎖状または分枝鎖状のアルキル鎖、より好ましくはCH3、または５〜６の炭素原子を有する飽和されたシクロ脂肪族環またはパラ位が任意にN(R1c)2（ここで、R1cはC1-C10、好ましくはC1-C4の直鎖状または分枝鎖状のアルキルである）で置換されていてもよい芳香族環である）;
RおよびR'は、互いに同一であるかまたは異なって、水素、C1-C4の直鎖状または分枝鎖状のアルキルであり、好ましくはR = R' = CH3 または R = R' = H;
好ましくは、B はコルチコステロイド残基である;
17位のR" は、次の意味の１つを有する２価の基である：
IB)   -(CO-L)t -(XO )t1-、ここでt = 1、そしてt1 は0または1、好ましく      は0;
IC) -L-(X0)t1-、ここでt1は0または1、好ましくは1である; 
２価の結合基Ｌは次の意味を有する：
(CR4R5)na(O)nb(CR4'R5')n'a(CO)n'b(O)n''b(CO)n'''b(CR4"R5")n''a
（ここで、na、n'a、およびn''aは、互いに同じであるかまたは異なって、０〜６、好ましくは１〜３の整数である；nb、n'b、n''bおよびn'''bは、互いに同じであるかまたは異なって、０または１に等しい整数である； R4、R5、R4'、 R5'、 R4"、 R5"は、互いに同じであるかまたは異なって、Ｈ、C1-C5、好ましくはC1-C3の直鎖状または分枝鎖状のアルキルから選択される; 
Xo = -O-、 -NH-、 -NR1c - （ここで、R1cは上記で定義されたとおりである）;
ステロイドBと連結基X1との間の結合はエステルまたはアミド型であり、Ｘ1は次のものから選択される２価の連結基である。
−    YAR1:
【化５】
2005516070.tif 000060
（式中、n3は０〜５の整数であり、n3'は１〜３の整数である）
−    YAR2: 
【化６】
2005516070.tif 000061
（式中、n3およびn3' は上記の意味を有する）
−    Yp :
【化７】
2005516070.tif 000062
（式中、
nIXは０〜１０、好ましくは１〜３の整数である；
nIIXは１〜１０、好ましくは１〜５の整数である；
RTIX、 RTIX'、 RTIIX、 RTIIX'は、互いに同じであるかまたは異なって、Hまたは C1-C4  の直鎖状または分枝鎖状のアルキルであり、好ましくはRTIX、 RTIX'、 RTIIX、 RTIIX' はHである；
Y3は、１〜３の、好ましくは１〜２のヘテロ原子を含み、５または      ６の原子を有する飽和、不飽和または芳香複素環であり、該へテロ原子は同      一であっても異なっていてもよく、窒素、酸素、硫黄から選択され、好まし      くは窒素である；
t3は０または１である；
Zは次の意味を有する：
【化８】
2005516070.tif 000063
（式中、
* はONO2基の位置を示す；
Tは次の意味を有する：
−    -COX3-、 -X3CO-（ここで、X3 = SまたはXoは上記の                とおりである）；
−    -X3- は上記のとおりである
n3およびn'3は上記のとおりである］。
【請求項２】
Y3が次の２価の基から選択される：
【化９】
2005516070.tif 000064
請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Y3が次のものから選択される請求項２に記載の化合物：
窒素原子に対してオルト位に２価の遊離原子価を有する(Y12); ２つのヘテロ原子に結合した２つの原子価をもった(Y16)、 (ピラゾール) 3,5-ジ置換(Y1) ;(Y16) が特に好ましい。
【請求項４】
Ｂの前駆体が次のものから選択される請求項１〜３に記載の化合物：ブデソナイド、ハイドロコーチゾン、アルクロメタゾン、アルゲストン、ベクロメタゾン、ベタメタゾン、クロロプレドニゾン、シクレソナイド、クロベタゾール、クロベタゾン、クロコルトロン、クロプレドノール、コーチゾン、コルチコステロン、デフラザコート、デソナイド、デスオキシメタゾン、デキサメタゾン、デキサメタゾン17-フロエート、ディフロラゾン、ディフルコルトロン、ディフルプレドネート、フルアザコート、フルクロロナイド、フルメタゾン、フルニソライド、フルオシノロンアセトナイド、フルオシノナイド、フルオコルチンブチル、フルオコルトロン、フルオロメトロン、フルペロロンアセテート、フルプレドニデンアセテート、フルプレドニゾロン、フルランドレノライド、フォルモコルタール、ハルシノナイド、ハロベタゾールプロピオネート、ハロメタゾン、ハロプレドンアセテート、ハイドロコルタメート、イトロシノナイド、ロテプレドノールエタボネート、メクロニゾン、メドリゾン、メプレドニゾン、メチルプレドニゾロン、モメタゾンフロエート、パラメタゾン、プレドニカルベート、プレドニゾロン、プレドニゾロン25-ジエチルアミノアセテート、プレドニソロンナトリウムホスフェート、プレドニゾン、プレドニヴァール、プレドニリデン、ロフレポナイド  リメキセロン、、トリアムシノロン、21-アセトキシ-プレグネノロン、コルチヴァゾール、アムシノナイドムシノナイド、フルチカゾンプロピオネート、マジプレドン、タウコルテン、チキソコルトール、トリアムシノロンヘキサセトナイド、ウルソデスオキシコール酸、ケノデスオキシコール酸、ミタトリエンジオール、モキセストロール、エチニルエストラジール、エストラジオール、メストラノール、メチル(20R)-6-α, 9-α-ジフルオロ-11-β-ヒドロキシ-16-α, 17-α-プロピルメチレンジオキシアンドロスタ-1,4-ジエン-3-オン-17-β-カルボキシレート 。
【請求項５】
Ｂがコルチコステロイドの残基であるとき、R"= IB （t = 1そして t1 = 0で）；好ましくは連結基Ｌの式において、na = nb = n'b = 1; n'a = n''b = n'''b = n''a = 0; R4 = R5 = H; またはn'b = n"b = 1そしてその他すべてのna、 nb、 n'a、 n'''b、 n''aは０に等しい、請求項１〜４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｂが胆汁酸の残基であるとき、 R"= IC （t1 = 1；好ましくは連結基Ｌの式においてna = n'b =1、 n'a = 2、 n''b = n'''b = n''a = nb = 0、 R4 = CH3、 R5 = R4" = R5"  = Hである、請求項１〜４に記載の化合物。
【請求項７】
Ｂがエストロゲンの残基であるとき、
−  R" = IC （ここで、t1 = 0そして連結基Ｌの式においてnb = n'b = 1、 na = n'a = n''b = n'''b = n''a = 0、１７位における炭素原子のその他の置換基は好ましくはHまたはエチニルであり、３位では置換基の１つは任意に-R"-X1-NO2基であり得る(R"は上記のとおりである)、
あるいは
−  Ｂがエストロゲンの残基であるとき、３位に-R"-X1-NO2基があり、R"は上記のとおりであり、そしてＢの式（ＩＡ）における１７位の炭素原子の置換基は次
のものである：
−  R" = -O-、ここで酸素の遊離原子価はＨで飽和されている；
−  ＨはＯＨ以外の基で置換されている、
請求項１〜４に記載の化合物。
【請求項８】
次のものから選択される請求項１〜７に記載の化合物：
ヒドロコーチゾン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート
【化１０】
2005516070.tif 000065
ヒドロコーチゾン-21-[2-[6-(ニトロオキシメチル)-2-ピリジニル]アセテート]
【化１１】
2005516070.tif 000066
ヒドロコーチゾン-21-[2-[4-[2-[4-(ニトロオキシメチル)ベンゾイルオキシ]エチル] 1-ピペラジニル]アセテート] 
【化１２】
2005516070.tif 000067
ヒドロコーチゾン-21-[2-[4-[3-(ニトロオキシ)プロピル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化１３】
2005516070.tif 000068
デキサメタゾン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート
【化１４】
2005516070.tif 000069
デキサメタゾン-21-[2-[4-[3-(ニトロオキシ)プロピル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化１５】
2005516070.tif 000070
デキサメタゾン-21-[2-[4-[2-[4-(ニトロオキシメチル)ベンゾイルオキシ]エチル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化１６】
2005516070.tif 000071
デキサメタゾン-21-[2-[6-(ニトロオキシメチル)-2-ピリジニル]アセテート] 
【化１７】
2005516070.tif 000072
プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート
【化１８】
2005516070.tif 000073
ブデソナイド-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート
【化１９】
2005516070.tif 000074
ブデソナイド-21-[2-[6-(ニトロオキシメチル)-2-ピリジニル]アセテート]
【化２０】
2005516070.tif 000075
ブデソナイド-21-[2-[4-[3-(ニトロオキシ)プロピル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化２１】
2005516070.tif 000076
ブデソナイド-21-[2-[4-[2-[4-(ニトロオキシメチル)ベンゾイルオキシ]エチル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化２２】
2005516070.tif 000077
フルメタゾン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート:
【化２３】
2005516070.tif 000078
フルメタゾン-21-[2-[6-(ニトロオキシメチル)-2-ピリジニル]アセテート] 
【化２４】
2005516070.tif 000079
フルメタゾン-21-[2-[4-[2-[4-(ニトロオキシメチル)ベンゾイルオキシ]エチル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化２５】
2005516070.tif 000080
フルメタゾン-21-[2-[4-[3-(ニトロオキシ)プロピル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化２６】
2005516070.tif 000081
プレドニゾロン-21-[2-[6-(ニトロオキシメチル)-2-ピリジニル]アセテート]
【化２７】
2005516070.tif 000082
プレドニゾロン-21-[2-[4-(3-ニトロオキシ)プロピル]ピペラジン-1-イル]アセテート] および対応する２塩酸塩:
【化２８】
2005516070.tif 000083
プレドニゾロン-21-[2-[4-[2-[(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾイルオキシ]-エチル]ピペラジン-1-イル]アセテート]  および対応する２塩酸塩:
【化２９】
2005516070.tif 000084
フルニソライド-21-[2-[4-[3-(ニトロオキシ)プロピル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化３０】
2005516070.tif 000085
フルニソライド-21-[(4'-ニトロオキシメチル)]ベンゾエート
【化３１】
2005516070.tif 000086
フルニソライド-21-[2-[4-[2-[4-(ニトロオキシメチル)ベンゾイルオキシ]エチル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化３２】
2005516070.tif 000087
フルニソライド-21-[2-[6-(ニトロオキシメチル)-2-ピリジニル]アセテート]
【化３３】
2005516070.tif 000088
フルニソライド-21-[(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート)]
【化３４】
2005516070.tif 000089
【請求項９】
医薬を製造するための、請求項１〜８に記載の化合物の使用。
【請求項１０】
末梢レベルでの抗炎症作用を有する医薬としての、請求項１〜８に記載の化合物の使用。
【請求項１１】
神経系の炎症および外傷に基づく神経退行性変性疾患の治療用の、請求項１〜８に記載の化合物の使用。
【請求項１２】
抗関節炎作用を有する医薬としての、請求項１〜８に記載の化合物の使用。
【請求項１３】
免疫抑制作用を有する医薬としての、請求項１〜８に記載の化合物の使用。
【請求項１４】
脈管静止／脈管発生作用を有する医薬としての、請求項１〜８に記載の化合物の使用。
【請求項１５】
抗喘息作用を有する医薬としての、請求項１〜８に記載の化合物の使用。
【請求項１６】
ホルモン療法の置換における、好ましくは月経閉止期後の治療における、請求項１〜８に記載の化合物の使用。
【請求項１７】
リュウマチ疾患の治療における、請求項１〜８に記載の化合物の使用。
【請求項１８】
腎臓疾患の治療における、請求項１〜８に記載の化合物の使用。
【請求項１９】
気管支疾患の治療における、請求項１〜８に記載の化合物の使用。
【請求項２０】
眼の疾患の治療における、請求項１〜８に記載の化合物の使用。
【請求項２１】
皮膚疾患の治療における、請求項１〜８に記載の化合物の使用。
【請求項２２】
自己免疫疾患の治療における、請求項１〜８に記載の化合物の使用。
【請求項２３】
腫瘍のプロセス療法における、任意に化学療法および／または放射線療法と組み合わされた、請求項１〜８に記載の化合物の使用。
【請求項２４】
胃腸系に影響する炎症性症状における請求項１０に記載の使用。
【請求項２５】
気管支閉塞により特徴づけられる呼吸症状においてグルココルチコイドが用いられる請求項１〜８に記載の化合物の使用。
【請求項２６】
請求項１〜８に記載の化合物を含む医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、改善された薬理活性およびより低い副作用、ならびに内因性ステロイドの特定のレセプターに対して改善されたレセプター親和性を有するステロイド化合物に関する。
【０００２】
特に、本発明は、内因性ステロイドの特定のレセプターに対して改善されたレセプター親和性、ならびに改善された薬理活性およびより低い副作用を有するステロイド化合物、とりわけ：
−  例えば骨粗しょう症、骨壊死および筋肉疾患のような骨の組織に作用するものであり、それは喘息またはCOPD（慢性の閉塞性肺疾患）に罹っている患者において呼吸作用の顕著な低下を決定することができる；
−  胃腸器官に作用するもの
に関するものである。
【０００３】
本発明は、末梢レベルでの改善された抗炎症性活性だけでなく、改善された抗神経変性活性、改善された抗関節炎活性、改善された免疫抑制活性、改善された血管静止／血管形成および抗喘息活性を有する；または、例えば更年期療法のための代用ホルモン療法に使用可能な、特にステロイド構造を有する化合物に関する。
【０００４】
より詳細には、本発明は、気管支収縮の発生を特徴とする呼吸器系疾患における、気管支拡張剤として用いることのできる、グルココルチコイドクラスのステロイド化合物にも関する。
【０００５】
本発明による化合物は、上記の改善された耐性と改善された効力の点で利点が増大し、ステロイド製剤が一般に適用されている疾患の治療において有用である。
周知のステロイド化合物と比べて、これはまったく驚嘆すべき、思わぬ結果を呈している。実際、特定の前駆物質の上記種々の治療用途を鑑みるに、本発明の物質は、治療実績の改善とみなされる結果の兼備、すなわち先行技術の物質に比べて、改善された薬物療法学的効果と改善された耐性をもたらしている。
【０００６】
実際、予期もせず、本発明の製剤は、改善された治療特性：上記の低い副作用とともに上記用途における高い活性を示すということに特徴付けられる。
【０００７】
知られているように、ステロイド類は：
−  一般にブドウ糖産生ならびにたんぱく質、脂質、炭水化物およびカルシウムの代謝に作用するグルココルチコイド、および水と塩類のバランスに作用するミネラルコルチコイドに分類されるコルチコステロイド類、
−  エストロゲンおよびアンドロゲンを含む性ステロイド類
を包含する。
【背景技術】
【０００８】
グルココルチコイドが種々の症状の治療において最初に選択される薬理学的アプローチを代表することは、よく知られている。
このクラスの医薬としては、例えばハイドロコーチゾン、コーチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、フルドロコーチゾン、デスオキシコルチコステロン、メチルプレドニゾロン、トリアムシノロン、パラメタゾン、ベタメタゾン、デキサメタゾン、トリアムシノロンアセトナイド、フルオシノロンアセトナイド、ベクロメタゾン、アセトキシプレグネロンなどが挙げられ、種々の器官に対して顕著な薬物−毒物効果を表わす。
【０００９】
この理由により、長期間にわたる臨床使用および薬物治療の中断は、副作用を惹き起こし、そのうちのいくらかは極めて重篤である。例えば、Goodman および Gilman, "The Pharmacological Basis of Therapeutics" 9th ed., 1459-1465頁, 1996参照。
【００１０】
副作用としては、
−  例えば骨粗しょう症、骨壊死および筋肉疾患のような骨の組織に作用するものであり、それは喘息またはCOPD（慢性の閉塞性肺疾患）に罹っている患者において呼吸能力の顕著な低下を決定することができる；
−  高血圧の応答および／または心拍数に関する疾患をもたらす心臓血管系の器官に作用するもの；
−  易感染性の増大；
−  胃腸器官に作用するもの；
−  糖尿病患者にあっては病状を悪化させ、疾病に罹り易い患者にあっては過血糖性のアタックの増加を惹き起こす、血液中のグルコースレベルの増加
が挙げられる。
例えば、Martindale "The Extrapharmacopoeia", 30版、712-723頁, 1993参照。
【００１１】
従来技術によれば、ステロイドの治療活性をそれらの副作用から分離することはできそうになかった。Goodmanら、上記、1474頁参照。
従来技術では、冠不全または狭心症の治療用の心臓血管系の薬剤としても用いらる、ステロイドのニトロオキシ誘導体が記載されている。
【００１２】
例えば、ドイツ特許第2,222,491号は２１位に-CH2-O-NO2 基を有するプレグナン誘導体の製造を記載している。この特許では、該誘導体がカルジオトロピック作用を有すると述べられている。
【００１３】
この作用は、該化合物が心拍数を加減するので、その欠点を表わしている。さらに、この特許は内因性ステロイドの特定のレセプターに対するレセプター親和性については何も触れていない。
【００１４】
米国特許第3,494,941号は、冠不全および狭心症のような心臓疾患の治療に血管拡張剤として用いられる、３−ヒドロキシエクストランまたはエクストル−４−エン−3−オンからのステロイド誘導体を記載している。
【００１５】
該化合物の構造において、ONO2 基はエーテル結合によりステロイドに１７位で結合しているアルキレン鎖の遊離末端に位置している。この特許によれば、ステロイド構造の３および16位にもナイトレート基をもつことができる。心拍数に対する影響についての上記と同じ欠陥が、この特許の化合物についても繰り返され得る。その上、この特許では内因性ステロイドの特定のレセプターに対するレセプター親和性については何も触れられていない。
【００１６】
米国特許第3,183,252号は、アルキル基が炭素−炭素結合によりプレグナン構造に結合している１６−ナイトレート−アルキルプレグナンの誘導体が記載されている。この特許によれば、該化合物は血管拡張剤として用いられ得る。上記の先行技術について報告されたのと同じ欠陥が、ここでも繰り返される。
【００１７】
本出願人の名前による国際公開WO 98/15568号は、ステロイド化合物のナイトレートエステルを記載しており、この化合物ではステロイド構造とニトロオキシ基との間に２価の結合基が挿入されている。これらの化合物は、対応する前駆体に関して良好な効能および／または良好な忍容性を示す。
【００１８】
しかしながら、その実施例および説明において、レセプター活性に関するデータは報告されていない。したがって、より低い副作用と合わさった改善されたレセプター活性および改善された薬理活性を有するステロイド化合物を示唆することは何も報告されていない。
【００１９】
本出願人による特許出願WO 00/61604号は、一方の末端にニトロオキシ基を有し、他方の末端でステロイド化合物に共有結合した種々の結合基をもつステロイド化合物のニトロオキシ誘導体を記載している。この出願において、その用途は酸化的ストレスの患者の治療に有用な化合物に関連している。それらの化合物は、その分子中にフリーラジカルの生成を阻害できなければならず、そこに報告された試験に基づいて選択される２価の結合基をも含んでいる。したがって、より低い副作用とともに、改善されたレセプター活性および改善された薬理活性を有するステロイド化合物を示唆する記載はない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２０】
より低い副作用とともに、内因性ステロイドの特定のレセプターに対して改善されたレセプター親和性および改善された薬理活性を有するステロイド化合物の開発の必要性が感じられてきた。
【課題を解決するための手段】
【００２１】
本出願人は、驚くべきことに、また予期せずに、上記の症状において改善された効果だけでなく、従来技術におけるステロイドと比べて改善された認容性およびより低い副作用を予期せず驚異的に示す、特別なクラスのステロイド化合物を見出した。
【００２２】
本発明の目的は、一般式：
B ・ X1 ・ NO2              (I)
［式中、Ｂは次の構造：
【化１】
2005516070.tif 000002
（式中、一般式（ＩＡ）に示されるＣＨ基の水素またはＣＨ2基の２つの水素の位置に次の置換基が存在することができる）を有するステロイド残基である]
のステロイド化合物のニトロオキシ誘導体またはそのエステルもしくは塩にある。
【００２３】
1-2位において:一つの２重結合;
2-3 において次の置換基:
【化２】
2005516070.tif 000003
2 位において: Cl、 Br;
3 位において: オキソ、-O-CH2-CH2-Cl、 OH、 OCH3; 
4-5 位において: 一つの２重結合;
5-6位において: 一つの２重結合;
6位において: Cl、 F、 Br、 CH3、 -CHO;
Ｂがエストロゲンの残基であるとき、1、2、3、4、5、および10と番号がつけられた炭素原子により定義される環は芳香環である；
7位において: Cl、OH;
9位において: Cl、F、Br;
11位において: OH、オキソ、Cl;
16位において: CH3、OH、=CH2;
17位において: OH、CH3、OCO(O)ua(CH2)vaCH3 （ここで、uaは０または１に等しい整数であり、vaは０〜４の整数である）、エチニル(C(CH); または
【００２４】
【化３】
2005516070.tif 000004
16-17位において次の基:
【００２５】
【化４】
2005516070.tif 000005
（ここで、RA1 はH、CH3; RA2 はC1-C10、好ましくはC1-C3の、直鎖状または分枝鎖状のアルキル鎖、より好ましくはCH3、または５〜６の炭素原子を有する飽和されたシクロ脂肪族環またはパラ位が任意にN(R1c)2（ここで、R1cはC1-C10、好ましくはC1-C4の直鎖状または分枝鎖状のアルキルである）で置換されていてもよい芳香族環である）;
【００２６】
RおよびR'は、互いに同一であるかまたは異なって、水素、C1-C4の直鎖状または分枝鎖状のアルキルであり、好ましくはR = R' = CH3 または R = R' = H;
好ましくは、B はコルチコステロイド残基である;
17位のR" は、次の意味の１つを有する２価の基である：
IB)   -(CO-L)t -(XO )t1-、ここでt = 1 、そしてt1 は0または1、好ましくは0;
IC) -L-(X0)t1-、ここでt1は0または1、好ましくは1である; 
２価の結合基Ｌは次の意味を有する：
【００２７】
(CR4R5)na(O)nb(CR4'R5')n'a(CO)n'b(O)n''b(CO)n'''b(CR4"R5")n''a
（ここで、na、n'a、およびn''aは、互いに同じであるかまたは異なって、０〜６、好ましくは１〜３の整数である；nb、n'b、n''bおよびn'''bは、互いに同じであるかまたは異なって、０または１に等しい整数である； R4、R5、R4'、 R5'、 R4"、 R5"は、互いに同じであるかまたは異なって、Ｈ、C1-C5、好ましくはC1-C3の直鎖状または分枝鎖状のアルキルから選択される; 
【００２８】
Xo = -O-、 -NH-、 -NR1c - （ここで、R1cは上記で定義されたとおりである）;
ステロイドBと連結基X1との間の結合はエステルまたはアミド型であり、Ｘ1は次のものから選択される２価の連結基である。
【００２９】
−    YAR1:
【化５】
2005516070.tif 000006
（式中、n3は０〜５の整数であり、n3'は１〜３の整数である）
【００３０】
−    YAR2: 
【化６】
2005516070.tif 000007
（式中、n3およびn3' は上記の意味を有する）
【００３１】
−    Yp :
【化７】
2005516070.tif 000008
（式中、
nIXは０〜１０、好ましくは１〜３の整数である；
nIIXは１〜１０、好ましくは１〜５の整数である；
RTIX、 RTIX'、 RTIIX、 RTIIX'は、互いに同じであるかまたは異なって、Hまたは C1-C4  の直鎖状または分枝鎖状のアルキルであり、好ましくはRTIX、 RTIX'、 RTIIX、 RTIIX' はHである；
【００３２】
Y3は、１〜３の、好ましくは１〜２のヘテロ原子を含み、５または６の原子を有する飽和、不飽和または芳香複素環であり、該へテロ原子は同一であっても異なっていてもよく、窒素、酸素、硫黄から選択され、好ましくは窒素である；
t3は０または１である；
Zは次の意味を有する：
【００３３】
【化８】
2005516070.tif 000009
（式中、
* はONO2基の位置を示す；
Tは次の意味を有する：
−    -COX3-、 -X3CO-（ここで、X3 = SまたはXoは上記の                とおりである）；
−    -X3- は上記のとおりである
n3およびn'3は上記のとおりである
【００３４】
連結基X1は基 Bに酸素をもたない示された原子価で結合している。
好ましくは、Y3は次の２価の基から選択される：
【化９】
2005516070.tif 000010
【００３５】
次はY3の好ましいものである：(Y12)、窒素原子に対してオルト位に２つの遊離原始価を有する； (Y16) ２つのヘテロ原子に結合した２つの原子価を有する；(Y1) (ピラゾール) 3,5-ジ置換；(Y16) は特に好ましい。
【００３６】
本発明の好ましい化合物は、Ｂの前駆体が以下の意味を有するものである。
本発明のステロイドの前駆体としては、例えばここに参照として全体的に組み込まれるMerck Index, 12th Ed. 1996（個々の合成法も記載されている）および以下に示される特許に記載されているものが挙げられる。
【００３７】
前駆体（Merckの命名法による）は、以下のものから選択される次のコルチコステロイドである：ブデソナイド、ハイドロコーチゾン、アルクロメタゾン、アルゲストン、ベクロメタゾン、ベタメタゾン、クロロプレドニゾン、シクレソナイド (米国特許第 5,482,934号)、 クロベタゾール、クロベタゾン、クロコルトロン、クロプレドノール、コーチゾン、コルチコステロン、デフラザコート、デソナイド、デスオキシメタゾン、デキサメタゾン、デキサメタゾン17-フロエート、ディフロラゾン、ディフルコルトロン、ディフルプレドネート、フルアザコート、フルクロロナイド、フルメタゾン、フルニソライド、フルオシノロンアセトナイド、フルオシノナイド、フルオコルチンブチル、フルオコルトロン、フルオロメトロン、フルペロロンアセテート、フルプレドニデンアセテート、フルプレドニゾロン、フルランドレノライド、フォルモコルタール、ハルシノナイド、ハロベタゾールプロピオネート、ハロメタゾン、ハロプレドンアセテート、ハイドロコルタメート、イトロシノナイド(ヨーロッパ特許第197,018号)、ロテプレドノールエタボネート、メクロニゾン、(米国特許第4,472,393号)、メドリゾン、メプレドニゾン、メチルプレドニゾロン、モメタゾンフロエート、パラメタゾン、プレドニカルベート、プレドニゾロン、プレドニゾロン25-ジエチルアミノアセテート、プレドニソロンナトリウムホスフェート、プレドニゾン、プレドニヴァール、プレドニリデン、ロフレポナイド  リメキセロン、トリアムシノロン、21-アセトキシ-プレグネノロン、コルチヴァゾール、アムシノナイド、フルチカゾンプロピオネート、マジプレドン、タウコルテン、チキソコルトール、トリアムシノロンヘキサセトナイド、ウルソデスオキシコール酸から選択される胆汁酸類、ケノデスオキシコール酸、ミタトリエンジオールから選択されるエストロゲン類、モキセストロール、エチニルエストラジオール、エストラジオール、メストラノール、メチル(20R)-6α, 9α-ジフルオロ-11-β-ヒドロキシ-16α, 17α-プロピルメチレンジオキシアンドロスタ-1,4-ジエン-3-オン-17β-カルボキシレート (ヨーロッパ特許第143,764号)。
【００３８】
好ましいのは、Ｂがコルチコステロイドの残基であるとき、R"= IB （t = 1そして t1 = 0で）；好ましくは連結基Ｌの式において、na = nb = n'b = 1; n'a = n''b = n'''b = n''a = 0; R4 = R5 = H; またはn'b = n"b = 1そしてその他すべてのna、 nb、 n'a、n'''b、 n''aは０に等しい。
【００３９】
好ましいのは、Ｂが胆汁酸の残基であるとき、 R"= IC （t1 = 1；好ましくは連結基Ｌの式においてna = n'b =1、 n'a = 2、 n''b = n'''b = n''a = nb = 0、 R4 = CH3、 R5 = R4" = R5"  = H。
【００４０】
好ましいのは、Ｂがエストロゲンの残基であるとき、
−  R" = IC （ここで、t1 = 0そして連結基Ｌの式においてnb = n'b = 1、 na = n'a = n''b = n'''b = n''a = 0、１７位におけるその他の置換基は好ましくはHまたはエチニルであり、３位では置換基の１つは任意に-R"-X1-NO2基であることができる(R"は上記のとおりである)、
【００４１】
あるいは
−  Ｂがエストロゲンの残基であるとき、３位に-R"-X1-NO2基があり、R"は上記のとおりであり、この場合、Ｂの式（ＩＡ）における１７位の炭素原子の置換基
は次のものである：
−  R" = -O-、ここで酸素の遊離原子価はＨで飽和されている；
−  式（ＩＡ）のHはＯＨ以外の基で置換されている。
【００４２】
２価の基Ｘ1が上記のとおりである前駆体（ここで、酸素の遊離原子価はＨで飽和されており、末端の炭素原子の遊離原子価はカルボキシまたはヒドロキシまたはアミン基のいずれかで飽和されている）は、市販されている物質であるか、あるいは従来技術の公知方法によって合成することができる。
【００４３】
本発明による好ましい化合物は、次のものである：
ヒドロコーチゾン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート
【化１０】
2005516070.tif 000011
【００４４】
ヒドロコーチゾン-21-[2-[6-(ニトロオキシメチル)-2-ピリジニル]アセテート]
【化１１】
2005516070.tif 000012
【００４５】
ヒドロコーチゾン-21-[2-[4-[2-[4-(ニトロオキシメチル)ベンゾイルオキシ]エチル] 1-ピペラジニル]アセテート] 
【化１２】
2005516070.tif 000013
【００４６】
ヒドロコーチゾン-21-[2-[4-[3-(ニトロオキシ)プロピル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化１３】
2005516070.tif 000014
【００４７】
デキサメタゾン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート
【化１４】
2005516070.tif 000015
【００４８】
デキサメタゾン-21-[2-[4-[3-(ニトロオキシ)プロピル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化１５】
2005516070.tif 000016
【００４９】
デキサメタゾン-21-[2-[4-[2-[4-(ニトロオキシメチル)ベンゾイルオキシ]エチル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化１６】
2005516070.tif 000017
【００５０】
デキサメタゾン-21-[2-[6-(ニトロオキシメチル)-2-ピリジニル]アセテート] 
【化１７】
2005516070.tif 000018
【００５１】
プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート
【化１８】
2005516070.tif 000019
【００５２】
ブデソナイド-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート:
【化１９】
2005516070.tif 000020
【００５３】
ブデソナイド-21-[2-[6-(ニトロオキシメチル)-2-ピリジニル]アセテート]
【化２０】
2005516070.tif 000021
【００５４】
ブデソナイド-21-[2-[4-[3-(ニトロオキシ)プロピル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化２１】
2005516070.tif 000022
【００５５】
ブデソナイド-21-[2-[4-[2-[4-(ニトロオキシメチル)ベンゾイルオキシ]エチル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化２２】
2005516070.tif 000023
【００５６】
フルメタゾン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート:
【化２３】
2005516070.tif 000024
【００５７】
フルメタゾン-21-[2-[6-(ニトロオキシメチル)-2-ピリジニル]アセテート] 
【化２４】
2005516070.tif 000025
【００５８】
フルメタゾン-21-[2-[4-[2-[4-(ニトロオキシメチル)ベンゾイルオキシ]エチル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化２５】
2005516070.tif 000026
【００５９】
フルメタゾン-21-[2-[4-[3-(ニトロオキシ)プロピル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化２６】
2005516070.tif 000027
【００６０】
プレドニゾロン-21-[2-[6-(ニトロオキシメチル)-2-ピリジニル]アセテート]
【化２７】
2005516070.tif 000028
【００６１】
プレドニゾロン-21-[2-[4-(3-ニトロオキシ)プロピル)ピペラジン-1-イル]アセテート] および対応する２塩酸塩:
【化２８】
2005516070.tif 000029
【００６２】
プレドニゾロン-21-[2-[4-[2-[(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾイルオキシ]-エチル]ピペラジン-1-イル]アセテート]  および対応する２塩酸塩:
【化２９】
2005516070.tif 000030
【００６３】
フルニソライド-21-[2-[4-[3-(ニトロオキシ)プロピル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化３０】
2005516070.tif 000031
【００６４】
フルニソライド-21-[(4'-ニトロオキシメチル)]ベンゾエート
【化３１】
2005516070.tif 000032
【００６５】
フルニソライド-21-[2-[4-[2-[4-(ニトロオキシメチル)ベンゾイルオキシ]エチル]-1-ピペラジニル]アセテート]
【化３２】
2005516070.tif 000033
【００６６】
フルニソライド-21-[2-[6-(ニトロオキシメチル)-2-ピリジニル]アセテート]
【化３３】
2005516070.tif 000034
【００６７】
フルニソライド-21-[(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート)]
【化３４】
2005516070.tif 000035
【００６８】
一般に、Bと X1との結合は、上記のとおり、エステルまたはアミド型(NHまたはNR1C、X0で定義されたように)。該官能基の形成には、従来技術に記載の合成法を採用することができる。
【００６９】
本発明による化合物は、酸、例えばアミン酸で塩化し得る官能基が少なくとも存在するときは、対応する塩に変換することができる。例えば、塩を形成する１つの方法は、次のとおりである：分子内に塩基性の窒素原子が１つあるとき、それは例えばアセトニトリル、テトラヒドロフランのような有機溶媒中で、等モル量の対応する有機または無機の酸と反応する。
【００７０】
有機酸の例は、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、コハク酸、クエン酸、トリフルオロ酢酸である。無機酸の例は、塩酸、硫酸、リン酸である。
【００７１】
本発明で用いられる前駆化合物が１つ以上のキラル中心を有するとき、それらはラセミ型であるか、またはジアステレオマー混合物として、単一のエナンシオマーもしくは単一のジアステレオマーとして存在することができ、それらが幾何学的不斉を示すとき、当該化合物はシスまたはトランスの形態で用いられる。
【００７２】
X1 (例えば-COOH, -OH)と反応する、ステロイド構造の官能基が共有結合型、例えばエステル、アミド、エーテルで結合しているとき、該官能基は従来技術の周知方法で復元され得る。
【００７３】
一般に、反応化合物中により官能性の基があるとき、そのような基は従来技術の公知方法、例えば"Protective groups in organic synthesis", Th. W. Greene, Harward University Press, 1980に記載の方法に従って、反応の前に保護され得る。
【００７４】
本発明の化合物の合成で用いられるアシルハライド類は、従来技術の公知方法に従って、例えば、対応するカルボン酸をチオニルクロライドまたはオキサリルクロライド、PIIIもしくはPVハライドと、反応条件下で不活性な溶媒中で、反応させることにより製造することができる。
【００７５】
１．ステロイドの反応性の官能基がヒドロキシ基(B-OH)であり、ステロイドと連結基 X1との間の結合がエステル型であるとき、最もよく用いられる合成方法は次のとおりである：
【００７６】
１ａ．ステロイド分子と、式Hal-C(O)-X1A-Hal（ここで、Hal = Cl、 Br、 I、そしてX1AはYAR1 (式VおよびVI)またはYP (式III)から得られる基、t3 = 0であり、酸素原子−O-は省略）の化合物との反応は、トリエチルアミンまたはピリジンなどのような有機塩基の存在下に、ＤＭＦ、トルエン、テトラヒドロフランなどのような反応条件下で不活性な溶媒を用いて、０℃〜２５℃の範囲の温度で、次の反応式（ＩＡ）に従って行われる：
B-OH + Hal-C(O)-X1A-Hal ( B-OC(O)-X1A-Hal (IA.1)
【００７７】
対応するニトロオキシ誘導体は、上記の反応で得られる化合物(IA.1)をAgNO3と、アセトニトリル、テトラヒドロフランのような有機溶媒中、２５℃〜８０℃の範囲の温度で、次の反応式(IA.2)に従って反応させることにより得ることができる：
B-O(CO)-X1A-Hal + AgNO3 ( B-O(CO)-X1A-ONO2 (IA.2)
【００７８】
１ｂ．１ａに記載された反応の代わりに、化合物HO-C(O)-X1A-Hal（ここで、HalおよびX1Aは上記の意味を有する）を、N,N-ジカルボニルジイミダゾール(CDI)、 N-ヒドロキシベンゾトリアゾールまたはジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)から選択されるカルボキシ活性化剤と、例えばＤＭＦ、テトラヒドロフラン、クロロホルムなどのような有機溶媒中、−５〜５０℃の範囲の温度で処理することもできる。得られる化合物をそのままステロイド(B-OH)と反応させて、式(IA.1)の化合物が得られる。
対応するニトロオキシ誘導体は、上記のようにして得られる。
【００７９】
２．ステロイドの反応性の官能基がヒドロキシ基(B-OH)（ここで、X1 = YPであり、特にYP = Y16であり、さらにステロイドと連結基X1との間の結合はエステル型であり、式(III)においてt3 = 0である）であるとき、採用され得る合成方法は、例えば次のとおりである：
【００８０】
２ａ．ステロイド B-OHを式Hal-C(O)-M-Hal（ここで、Hal = Cl、Br、I、そしてMはC1-C10の直鎖状のまたは置換されたアルキレンである）の化合物と、トリエチルアミンまたはピリジンなどのような有機塩基の存在下に、ＤＭＦ、トルエン、テトラヒドロフランなどのような反応条件の下では不活性な溶媒を用いて、０℃〜２５℃の範囲の温度で、次の反応式(IIA)に従って反応させる。
B-OH + Hal-C(O)-M-Hal ( B-O(CO)-M-Hal  (IIA.1)
【００８１】
式(IIA.1)の化合物を、次いでN-((-ハロゲンアルキル)ピペラジンのビス塩酸塩またはN-((-ヒドロキシアルキル)ピペラジン（ここで、Ｍと同じであるかまたは異なったアルキレンはＭ’である）と、トリエチルアミンなどのような有機塩基の存在下に、ＤＭＦ、トルエン、テトラヒドロフランなどのような反応条件下で不活性な溶媒を用いて、−5°C〜 0°Cの範囲の温度で、反応式(IIB)に従って反応させて、化合物(IIB.1)を得る。
【００８２】
【化３５】
2005516070.tif 000036
（式中、MおよびM'は上記のとおりであり、 Q = OH、 Cl、 Br、 Iである）。
【００８３】
Q = Cl、Br、Iのとき、化合物(IIB.1)を上記のようにAgNO3と反応させて、対応するニトロオキシ誘導体を得る。
式(III)においてt3 = 1のとき、２価の基M'の遊離末端にある官能基を、例えばIaで報告された合成スキーム（ここで、X1Aは式(VI)の基であるが、Ｔ官能基が欠落している）に従って反応させる。基Halを有する化合物が得られ、これを上記のように AgNO3と反応させる。
【００８４】
３．ステロイドの反応性の官能基がカルボキシ基(R-COOH)であり、ステロイドと連結基X1との間の結合がエステル型であるとき、最もよく用いられる合成法は次のとおりである：
【００８５】
３ａ．ステロイド(R-COOH)をN,N-ジカルボニルジイミダゾール(CDI)、N-ヒドロキシベンゾトリアゾールまたはジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)から選択されるカルボキシ活性化剤で、例えばＤＭＦ、テトラヒドロフラン、クロロホルムなどのような有機溶媒中、−5°C〜５０℃の範囲の温度で処理する。
【００８６】
得られる化合物をそのまま式HO-X1A-Hal （ここで、X1AはYAR1またはYPから得られる基であり、酸素原子-O-はなく、Halは上記のとおりである）の前駆体X1と反応させる。
上記で得られる、一般式B-C(O)-O- X1A-Halを有する化合物を、上記のようにしてAgNO3と反応させて、対応するニトロオキシ誘導体を得る。
【００８７】
４．ステロイドの反応性の官能基がカルボキシ基(R-COOH)であり、ステロイドと連結基X1との間の結合がアミジック型であるとき、最もよく用いられる合成法は次のとおりである：
【００８８】
４ａ．ステロイド(R-COOH)をジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)から選択されるカルボキシ活性化剤で、例えばＤＭＦ、テトラヒドロフラン、クロロホルムなどのような有機溶媒中、−5°C〜50°Cの範囲の温度で処理し、得られる化合物をそのまま式H2N-X1A-Hal（ここで、X1AおよびHalは上記のとおりである）YAR1またはYPから得られる基であり、酸素原子-O-はなく、）の前駆体X1と反応させる。
【００８９】
上記で得られる、一般式B-C(O)-NH-X1A-Halを有する化合物を、上記のようにしてAgNO3と反応させて、対応するニトロオキシ誘導体を得る。
本出願人は、連結基X1が上記の２価の基から選択される本発明の化合物は、連結基X1がアルキレンであるニトロオキシ誘導体および／または対応する前駆体ステロイドに比べて、レセプター結合アッセイの試験例に見られるように、予期できず、しかも驚くべきほどに改善された結果をもたらすことを予期せずに見出した。
【００９０】
従来技術では、本発明に記載された連結基でレセプター結合が改善され得ることは何も触れられていないので、上記の結果は全く予期しなかったことである。
本発明の化合物は心臓循環パラメータに影響を与えず、したがって本発明の化合物は全身の血圧および心拍数に対して好ましくない作用を及ぼさないということが、見出された。その上、本発明の化合物は、より低い副作用、特に
−  例えば骨粗しょう症のような骨組織に対する作用、
−  胃腸器官に対する作用
と結びついた、改善された薬理活性を示す。
【００９１】
本発明の化合物は、末梢レベルでの改善された抗炎症性活性のみでなく、改善された抗神経変性活性を有し、例えば脊髄損傷や脳損傷、多発性硬化症等の神経系の炎症等、神経系の炎症性および外傷性ベースの神経変性疾患に活性である。本発明の化合物はさらに、改善された抗関節炎活性、改善された免疫抑制活性、改善された血管静止／血管形成性および抗喘息活性を示す。
【００９２】
本発明の化合物は、例えば更年期療法における代用ホルモン療法に用いることができる。本発明による化合物は、ステロイド前駆体物質が用いられているが、上に定義した改善された認容性と改善された効力という点で利点が増大しているので、病的状態の手当てに治療上有用である。事実、予想に反して、本発明の物質は改善された治療的特性：上記のとおり低い副作用とともに上記用途における高い活性を呈しているということに特徴付けられる。本発明の化合物は：
−例えば、喘息またはCOPD（慢性閉塞性肺疾患）に罹患した患者において呼吸能力の顕著な減衰を決定する、骨粗鬆症、骨壊死および筋疾患等の骨組織を冒すもの；
−高血圧性反応および／または心拍障害を発生させる心臓血管系を冒すもの；
−感染症に対する低い疾病素質
−消化器官を冒すもの
に関して特に低い副作用を示す。
【００９３】
本発明の目的化合物は、通常の補助剤（例えば、刊行物  "Remington's Pharmaceutical Sciences" 15th Ed.参照）とともに、従来技術における周知の技法に従って、例えば舌下錠、吸入剤、坐剤、経皮剤、浣腸剤のような、非経口、経口および局所用の、場合によっては徐放性の、対応する医薬組成物に製剤化される。
上記の組成物中の活性成分のモルベースでの量は、通常、対応する前駆体医薬のそれと同じであるか、あるいはそれより低い。
【００９４】
１日当たりの投与量は、前駆体医薬と同じであるか、あるいはそれより低くてもよい。
前駆体の１日当たりの投与量は、例えば"Physician's Desk reference"におけるように、当該技術分野の刊行物中に見出され得る。
【００９５】
本発明の化合物は、前駆体ステロイドが用いられる症状の治療に用いられる。
特に、この用途は、化学療法および／または放射線療法、神経変性疾患（例えば外傷性脊髄障害および移植後治療）と組み合わさって、リューマチ疾患、腎臓および気管支疾患、眼および皮膚の疾患、自己免疫疾患、腫瘍進行における医薬として挙げられる。さらに、消化器官に作用する炎症性疾患（クローン病、潰瘍性大腸炎およびIBD（炎症性腸疾患））が挙げられる。
【００９６】
さらに、本出願人は、驚くことにまた予期せずして、先行医薬とは異なり、気管支閉塞症状を特徴とする呼吸器系疾患に、本発明のグルココルチコイドクラスのステロイドを用いることができることを見出した。従来の医薬が前記の病状下では実質的に効果がなかったので、上記の事実はまったく予想外であった。実際、従来の医薬は、例えばサルブタモールのようなベータ作用物質として気管支拡張剤を使用しなくてはならなかった。
【００９７】
気管支拡張剤としての上記の使用について、本出願人は本発明によるステロイドのニトロオキシ誘導体が有効であるだけでなく、式（Ｉ）における連結基X1が次
のものから選択される、式（Ｉ）のグルココルチコイド  クラスの脂肪族連結基で
ある誘導体も使用できることを見出した：
【００９８】
Ｉ）アルキレンオキシ基R'O （ここで、R' はC1-C20の、直鎖状または可能なとき分枝鎖状の、好ましくは２〜６の炭素原子を有するか、または５〜７の炭素原子を有するシクロアルキレンであり、シクロアルキレン環で１つ以上の炭素原子はヘテロ原子で置きかえられることができ、その環はR'タイプ（R' は上記のとおりである）の側鎖を有することができる；
【００９９】
II)あるいは次の基の一つ：
【化３６】
2005516070.tif 000037
（式中、nf' は１〜６、好ましくは１〜４の整数である）；
【化３７】
2005516070.tif 000038
（式中、R1f = H、 CH3、そしてnf' は１〜６、好ましくは１〜４の整数である）。
【０１００】
上記の用途のために、上記の連結基を有する本発明の化合物および連結基がI) またはII)に示されたものから選択される化合物のどちらもが使用できる。
【０１０１】
本発明の化合物は、前駆体と異なって、骨システムに対する副作用を有しておらず、特にそれらは骨再吸収を引き起こさず、しかもそれらは高い胃認容性を示す。
以下の実施例は説明のためのものであり、本発明を限定するものではない。
【０１０２】
実施例１ (比較)
プレドニゾロン-21-(4-ニトロオキシ)ブチレートの合成
Ａ．プレドニゾロン-21-(4-クロロブチレート)
テトラヒドロフラン(150 ml) 中のプレドニゾロン (2.5 g、7 mmol)の溶液に、トリエチルアミン(3.9 ml)および4-クロロブチリルクロライド(5.2 g)をこの順序で加えた。この溶液を撹拌下に室温で４時間維持した。溶媒を真空下に蒸発させて除去した。粗残留物を酢酸エチルと水の混液で抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで減圧下に濃縮した。得られた残渣をヘキサン／酢酸エチルにより結晶化させた。生成物(2.9 g)を黄色固体として単離した。
【０１０３】
プレドニゾロン-21-[(4-ニトロオキシメチル)ブチレート]
アセトニトリル(130 ml)およびテトラヒドロフラン(30 ml)中のプレドニゾロン-21-(4-クロロブチレート) (2.8 g、5.5 mmol) および硝酸銀(1.87 g, 11 mmol)により形成される溶液を調製し、次いで還流し、１８時間遮光した。銀塩により形成された沈殿物を濾過し、溶媒を真空下に蒸発させた。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィに付し、ヘキサン／酢酸エチル(6/5 v/v)で溶出することにより精製した。 生成物をテトラヒドロフラン／ｎ−ヘキサンにより結晶化させて、白色固体1.1 gを得た。
M.p.: 80°-85°C
1H-NMR (200MHz, DMSO) ppm: 7.38 (1H,d); 6.22 (1H,dd); 5.95 (1H,s); 5.45 (1H,s); 5.16(1H,d); 4.84 (1H,d); 4.76 (1H,d); 4.65 (2H,t); 4.35 (1H,s); 3.35 (2H,m); 2.58 (5H, m); 2.35 (1H,m); 2.15-0.90 (12H,m); 1.42 (3H,s); 0.82 (3H,s)
【０１０４】
実施例２
ヒドロコーチゾン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエートの合成
【化３８】
2005516070.tif 000039
A.    ヒドロコーチゾン-21-[(4'-クロロメチル)ベンゾエート]
テトラヒドロフラン(20 ml)中のヒドロコーチゾン（0.5 g）の溶液に、トリエチルアミン(0.192 ml)および4-クロロベンゾイルクロライド(0.26 g)を加えた。この溶液を撹拌下に室温で２４時間維持した。次いで溶媒を真空下に蒸発させた。得られた粗残渣を水と酢酸エチルの混液で抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下に濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィに付し、メチレンクロライド／アセトン9/1 で溶出することにより精製した。固形の化合物0.6を室温で得る。
【０１０５】
B.    ヒドロコーチゾン-21-[(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート]
アセトニトリル(90 ml)およびテトラヒドロフラン(70 ml)中のヒドロコーチゾン21-[(4'-クロロメチル)ベンゾエート]（ 2.33 g 、4.57 mmol）および硝酸銀 (2.39 g) の溶液を４０°Cに加熱し、遮光した。0.77 gに等しい量の硝酸銀を１日に１回、５日間加えた。形成された沈殿物（銀塩）を濾過し、溶媒を真空下に蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィに付し、ｎ−ヘキサン／酢酸エチル６／４で溶出することにより精製した。最後に白色の固体2 gを単離した。
M.p.: 209°C、 DSCによる。
1H-NMR (200MHz, DMSO) ppm: 8.09(2H,d); 7.69(2H,d); 5.74(2H,s); 5.62(1H,s); 5.54(1H,s); 5.45-5.05(2H,dd); 4.42(1H,m); 4.35(1H,m); 2.60-0.9(23H,m)
【０１０６】
実施例３
デキサメタゾン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエートの合成
【化３９】
2005516070.tif 000040
A.    デキサメタゾン-21-[(4'-クロロメチル)ベンゾエート]
テトラヒドロフラン(100 ml)中のデキサメタゾン（5 g、12.74 mmol)の溶液に、トリエチルアミン(1.77 ml)および4-(クロロメチル)ベンゾイルクロライド(2.4 g) を加える。この溶液を撹拌下に室温で２４時間維持する。
２４時間後、上記と同じ量のトリエチルアミンおよびアシルクロライドを加えた。最後に真空下に溶媒を蒸発させる。粗残渣を酢酸エチルと水の混液で抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで減圧下に濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィに付し、メチレンクロライド／アセトン９／１で溶出して精製した。白色の固体(6.19 g)を得た。
【０１０７】
B.    デキサメタゾン-21-[(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート] 
アセトニトリル(100 ml)中の デキサメタゾン-21-[(4'-クロロメチル)ベンゾエート] （ 6.19 g 、11.35 mmol）および硝酸銀(2.89 g、17.03 mmol)を、４０℃に加熱し、１９０時間遮光した。それを濾過し、濾液を回収し、溶媒を真空下に蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィに付し、ｎ−ヘキサン／酢酸エチル６／４で溶出して精製した。固体をテトラヒドロフラン／エチルエーテルで結晶化させた。生成物(4.22 g)を白色の固体として得た。
M.p.: 176.8°C
1H-NMR (300MHz, DMSO) ppm: 8.10(2H,d); 7.69(2H,d); 7.27 (1H,d); 6.25(1H,d); 6.07(1H,s); 5.79(1H,d); 5.74(1H,s); 5.69(1H,d); 5.38(1H,d); 5.29(1H,s); 5.14(1H,d); 4.23(1H,m); 3.96(1H,m); 2.76-2.103(1H,m); 1.90-1.32(7H,m); 1.14-0.87 (7H,m)
【０１０８】
実施例４
プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエートの合成
【化４０】
2005516070.tif 000041
A.    プレドニゾロン-21-[(4'-クロロメチル)ベンゾエート]
テトラヒドロフラン(230 ml)中のプレドニゾロン（12 g、33.29 mmol)の溶液に、トリエチルアミン(4.64 ml)および4-(クロロメチル)ベンゾイルクロライド(6.29 g) を加えた。この溶液を撹拌下に室温で維持し、１日後に溶媒を真空下に蒸発させた。粗残渣を酢酸エチルと水の混液で抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで減圧下に濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィに付し、メチレンクロライド／アセトン８／２で溶出して精製した。生成物(16.53 g)を白色の固体として得た。
【０１０９】
B.    プレドニゾロン-21-[(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート]
アセトニトリル(100 ml)およびテトラヒドロフラン(200 ml)中のプレドニゾロン21-[(4'-クロロメチル)ベンゾエート]（16 g、31.19 mmol）および硝酸銀(7.42 g、 43.66 mmol)の溶液を、加熱還流し、３５時間遮光した。形成された沈殿物（硝酸塩)を濾過し、溶媒を真空下に蒸発させた。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィに付し、クロロホルム／アセトン／テトラヒドロフラン４／１／１で溶出して精製した。生成物(13.3 g)をテトラヒドロフラン(450 ml)／n-ヘキサン(250 ml).で結晶化させた。白色の固体（10.34 g）を得た。
M.p.: 232.5°C 、DSCによる。
1H-NMR (200MHz, DMSO) ppm: 8.15(2H,d); 7.75(2H,d); 7.45 (1H,d); 6.28(1H,dd); 6.04(1H,s); 5.80(2H,s); 5.46(1H,d); 5.16(1H,d); 4.43(1H,m); 2.63-1.06(13H,m); 1.47(3H,s); 0.95 (3H,s).
13C-NMR (200MHz, DMSO) ppm: 205.298; 185.594; 171.023; 164.962; 157.118; 138.099; 129.759; 129.126; 127.023; 121.580; 88.725; 74.096; 68.362; 55.449; 51.168; 47.265; 43.916; 33.992; 33.146; 31.453; 30.955; 23.554; 20.878; 16.560
【０１１０】
実施例５
ブデソナイド-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエートの合成
【化４１】
2005516070.tif 000042
A.    ブデソナイド-21-[(4'-クロロメチル)ベンゾエート]
テトラヒドロフラン(100 ml)中のブデソナイド(5 g)の溶液に、トリエチルアミン(1.62 ml) および4-(クロロメチル)ベンゾイルクロライド(2.19 g)を加えた。この溶液を撹拌下に室温で維持し、４時間後に上記と同じ量のトリエチルアミンおよびアシルクロライドを加えた。この溶液を撹拌下に室温でさらに２４時間維持した。最後に、溶媒を真空下に蒸発させて除去し、得られた残渣を酢酸エチルと水の混液で抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで減圧下に濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィに付し、メチレンクロライド／アセトン１０／１で溶出して精製した。生成物(6.53 g)を白色の固体として得た。
M.p.: 106°-110°C
【０１１１】
B.    ブデソナイド-21-[(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート]
アセトニトリル(100 ml)中のブデソナイド-21-[(4'-クロロメチル)ベンゾエート] (6.5 g)および硝酸銀(3.8 g)の溶液を加熱還流し、２５時間遮光した。形成された沈殿物（銀塩）を濾去し、溶媒を真空下に蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィに付し、ｎ−ヘキサン／酢酸エチル６／４（ｖ／ｖ）で溶出して精製した。生成物(4.65 g)を白色の固体として得た。
M.p.: 96°C (DSC)
1H-NMR (300MHz, DMSO) ppm: 8.05(2H,d); 7.63(2H,d); 7.32 (1H,m); 6.17(1H,d); 5.91(1H,s); 5.67(2H,d); 5.31-5.00(2H,m); 4.75-4.72(1H,m); 4.34(1H,m); 2.51(2H,m); 2.26(2H,m); 1.98-1.94(4H,m); 1.59-1.54(4H,m); 1.39-1.35(5H,m); 0.96-0.85(7H,m)
【０１１２】
実施例６（比較）
ブデソナイド-21-(4-ニトロオキシ)ブチレートの合成
ブデソナイド-21-(4'-クロロブチレート)]
テトラヒドロフラン(20 ml)中のブデソナイド(1 g、2.32 mmol)の溶液に、トリエチルアミン(0.32 ml)および 4-ブロモブチリルクロライド(0.27 ml)をこの順序で加えた。５時間後に、上記と同じ量のトリエチルアミンおよびアシルクロライドを加えた。この溶液を撹拌下に室温で１６時間維持した。実施例１Ａ（比較）に記載のプロセスを繰り返した。生成物を白色の固体（1.18 g）として単離した。
【０１１３】
ブデソナイド-21-[(4-ニトロオキシメチル)ブチレート]
アセトニトリル(50 ml)およびテトラヒドロフラン(30 ml)中の ブデソナイド-21-(4'-ブロモブチレート) (1.18 g、2.03 mmol)および硝酸銀(0.52 g、3.04 mmol)により形成された溶液を、調製し、次いで還流し、４８時間遮光した。銀塩により形成された沈殿物を濾過し、溶媒を真空下に蒸発させた。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィに付し、メチレンクロライド／酢酸エチル（６／５  ｖ／ｖ）で溶出して精製した。白色の固体（850 mg）を得た。
M.p.: 142.5°-144.5°C
1H-NMR (300MHz, DMSO) ppm: 7.32(1H,dd); 6.15(1H,d); 5.92(1H,s); 5.2-5.1(1H,m); 5.02(1H,m); 4.84(1H,m); 4.7(1H,m); 4.7(1H,m);  4.58(1H,m); 4.56(2H,t); 4.3(1H,m); 2.55(2H,t); 2.3(1H,m); 2.2-0.9(16H,m); 1.39(3H,s); 0.87 (6H,m)
【０１１４】
実施例７
フルメタゾン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエートの合成
【化４２】
2005516070.tif 000043
A.    フルメタゾン-21-[(4'-クロロメチル)ベンゾエート]
テトラヒドロフラン(40 ml)中のフルメタゾン(1 g、2.43 mol)の溶液に、トリエチルアミン(0.34 ml)および4-(クロロメチル)ベンゾイルクロライド(0.46 g)を加えた。この溶液を撹拌下に室温で維持し、２４時間後に上記と同じ量のトリエチルアミンおよびアシルクロライドを加えた。この溶液を撹拌下に室温でさらに２４時間維持した。実施例５に記載のプロセスを繰り返した。生成物(0.52 g)を白色の固体として得た
【０１１５】
B.    フルメタゾン-21-[(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート]
アセトニトリル(100 ml)中のフルメタゾン-21-[(4'-クロロメチル)ベンゾエート] (0.47 g)および硝酸銀(0.21 g)の溶液を、４０℃に加熱し、３０時間遮光した。形成された沈殿物（銀塩）を濾去し、溶媒を真空下に蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィに付し、ｎ−ヘキサン／酢酸エチル（１／１  ｖ／ｖ）で溶出して精製した。生成物(0.2 g)を白色の固体として得た。
M.p.: 115°-120°C
1H-NMR (300MHz, DMSO) ppm: 8.02(2H,d); 7.61(2H,d); 7.26(1H,m); 6.30(1H,d); 6.10(1H,s); 5.66(2H,s); 5.51(1H,m); 5.30(1H,d); 5.26(1H,s); 5.07(1H,d); 4.20(1H,m); 2.90(1H,m); 2.20(3H,m); 1.80-1.60(6H,m); 1.48(3H,s); 0.91(3H,s); 0.83(3H,d)
【０１１６】
実施例８
プレドニゾロン-21-[2-[4-(3-ニトロオキシプロピル)ピペラジン-1-イル]アセテート] 
【化４３】
2005516070.tif 000044
A.    クロロアセチル-プレドニゾロンの合成
無水ＴＨＦ（10 ml）中のプレドニゾロン(1 mmol、360 mg)の溶液に、TEA (1.1 mmol、153 (l)を加えた。系を氷水浴中で冷却し、クロロアセチルクロライド(1.1 mmol、87 (l) を加えた。反応混合物を室温(23°C)にし、撹拌下に３時間維持した。反応混合物をAcOEt (10 ml)および水(10 ml)で希釈した。２相を分離し、有機相を食塩水(5 ml)で処理し、無水化し、乾燥した。得られた残渣を石油エーテルで析出させ、濾過して、420 mgの生成物(収率95%)を淡褐色の固体として得た。この生成物をさらに精製することなく、そのまま次の反応に用いた。
【０１１７】
B.    N'-t-ブトキシカルボニル-N-(3-クロロプロピル)ピペラジンの合成
N-t-ブトキシカルボニルピペラジン(3 mmol、558 mg) (Boschi D. らにより記載された方法（Arch. Pharm. 1994, 327, 661-667)に従って製造された）を無水CH2Cl2（15 ml）に溶解し、この溶液にTEA (3.3 mmol、0.46 ml)を加え、０℃にする。1-ブロモ-3-クロロプロパン(3.3 mol、0.32 ml)を加え、還流(50°C)する。３時間後に、同じ量のTEAおよび1-ブロモ-3-クロロプロパンを加え、還流下に２４時間反応させた。溶媒を減圧下に除去し、粗生成物をCH2Cl2 (20 ml)に溶解し、水(10 ml)で洗浄する。有機相を食塩水(10 ml)で洗浄し、無水化し、溶媒を減圧下に除去し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィに付し、溶出溶媒としてAcOEt: 石油エーテル8:2 (v/v)を用いて精製した。470 mgの生成物(収率60%)を極めて濃い油として得た。
【０１１８】
C.    N-3-クロロプロピルピペラジン２塩酸塩の合成
7.5 mmolのN'-t-ブトキシカルボニル-N-(3-クロロプロピル)ピペラジン(1.96 g) を０℃でHCl/AcOEt (50 ml) 混合物に溶解する。系を氷水浴中に１時間放置し、次いで室温(23°C)でもう１時間放置する。白色の沈殿物の生成が認められた。この時間が経過した後、溶媒を減圧下に除去し、エチルエーテルで処理し、濾過した。 1.76 gの生成物(m.p. 237°-239°C) を得、これをさらに精製することなく次の反応に用いた。
【０１１９】
D.    プレドニゾロン-21-[2-[4-(3-クロロプロピル)ピペラジン-1-イル]アセテート]の合成
無水ＤＭＦ（5 ml）中のクロロアセチルプレドニゾロン(1 mmol, 437 mg)の溶液にN-3-クロロプロピルピペラジンの２塩酸塩 (1.2 mmol、282 mg) を加えた。この混合物を氷浴中で０℃に冷却し、TEA (4 mmol、0.56 ml)を加えた。混合物を撹拌下に室温で１８時間放置した後、混合物を水(5 ml)中に注ぎ、AcOEt (2x10 ml)で抽出した。有機抽出液を合わせ、食塩水で洗浄し、無水化し、乾燥した。このようにして得た黄色油状の残渣をシリカゲルクロマトグラフィに付し、まずAcOEtで、次いでAcOEt/MeOH 9.5:0.5 (v/v)の混液で溶出して精製した。クロマトグラフィで精製して得られた生成物をエチルエーテルで結晶化し、310 mg の生成物(55% 収率)を黄色固体として得た。
【０１２０】
E.    プレドニゾロン-21-[2-[4-(3-ニトロオキシプロピル)ピペラジン-1-イル]アセテート]の合成
プレドニゾロン-21-[2-[4-(3-クロロプロピル)ピペラジン-1-イル]アセテート] (0.55 mmol、310 mg) を無水CH3CN （8 ml）および無水THF（6 ml）に溶解し、この溶液にAgNO3 (1.65 mmol、280 mg)を加え、窒素雰囲気中、還流(100°C)下に、５時間遮光した。それを濾過し、溶媒を減圧下に蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィに付し、AcOEt/MeOH 9:1 (v/v)の混液で溶出して精製した。155 mg の生成物を褐色の固体として得た。(48% 収率)。
M.p.: 116°-118°C
1H-NMR (300MHz, DMSO) ppm: 7.33 (1H,d); 6.16(1H,d); 5.92(1H,s); 5.1(1H,d); 4.8(1H,d); 4.7(1H,s); 4.6(2H,t); 4.3(1H,s); 4.2(2H,t); 3.5(2H,t); 2.44(10H,s); 2.3-1.62(13H,m);  1.4(3H,s); 0.9 (3H,s)
【０１２１】
実施例９
プレドニゾロン-21-[2-[4-(3-ニトロオキシプロピル)ピペラジン-1-イル]アセテート]２塩酸塩の合成
実施例８の最後に単離された化合物 (50 mg) をMeOH/DCM (ジクロロメタン) (1:1)の混液（6 ml）に溶解した。この溶液を0°Cに冷却し、HCl/MeOH 溶液を数滴加えた。0°Cで５分間保った後、溶媒を減圧下に除去し、残渣をエチルエーテルで処理した。生成した白色の固体を濾取した。
M.p.: >240°C.
元素分析：
C%          H%          N%          Cl%
理論値            54.6        6.83        6.33        10.7
測定値            54.4        6.9         6.25        10.85
【０１２２】
実施例１０
プレドニゾロン-21-[2-[4-[2-[(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾイルオキシ]エチル]ピペラジン-1-イル]アセテート]の合成
【化４４】
2005516070.tif 000045
A.    プレドニゾロン-21-[2-[4-(2-ヒドロキシエチル)-ピペラジン-1-イル]-アセテート]の合成
無水THF 15 ml 中のクロロアセチルプレドニゾロン (1.5 mmoles, 660 mg) の溶液に、無水THF 15 ml 中に溶解したN-2-ヒドロキシエチルピペラジン (15 mmol、1.95 g)を(氷水浴)冷却下に加える。３０分後に混合物を室温にし、１８時間後にろ過し、溶媒を減圧下に除去する。残渣を、最初にDCM-MeOH 9:1 (v/v)混液 、次いで8:2 (v/v)の比のDCM-MeOH 混液を用いるシリカゲルクロマトグラフィにより精製する。
【０１２３】
B.    プレドニゾロン-21-[2-[4-[2-[(4'-クロロメチル)ベンゾイルオキシ]エチル]ピペラジン-1-イル]アセテート]の合成
前の工程の最後に単離された化合物(570 mg、1.1 mmol)をアセトニトリル/THF (4:1 v/v)混液10 ml に溶解し、この溶液に0°C に冷却下、TEA (0.3 ml、 2.15 mmol) およびp-クロロ-メチルベンゾイルクロライド(233 mg、 1.18 mmol) を加える。反応混合物を室温にし、３時間後に乾燥し、残渣を水(5 ml)およびDCM (3x10 ml)で処理する。有機抽出液を合わせ、食塩水(5 ml)で洗浄し、Na2SO4で無水にし、乾燥する。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィ(DCM/MeOH 9.5/0.5) により精製して、731 mg の生成物を白色固体として回収する(収率80% )。
M.p.: 215°-217°C
【０１２４】
C.    プレドニゾロン-21-[2-[4-[2-[(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾイルオキシ]エチル]ピペラジン-1-イル]アセテート] の合成
プレドニゾロン-21-[2-[4-(4'-クロロメチルベンゾイルオキシ)プロピルピペラジン-1-イル]アセテート] (0,82 mmol、560 mg) を無水CH3CN (16 ml)および無水THF (12 ml)の混液に溶解する。AgNO3 (24.6 mmol、418 mg)を加える。この混合物を遮光、還流下に３時間加熱する。これをろ過し、溶媒を減圧下に除去する。残渣を、AcOEt/MeOH 9/1 (v/v)混液を用いるシリカゲルクロマトグラフィにより精製する。560 mg の生成物(収率  96% )が得られた。
M.p.: 206°-208°C
1H-NMR (300MHz, DMSO) ppm: 8.0(2H,d); 7.61(2H,d); 6.16(1H,d); 5.67(2H,s); 5.41(1H,s); 5.1(1H,d); 4.82(1H,d); 4.2(1H,s); 4.4 (2H,t); 4.3(1H,s); 3.5(2H,t); 2.7-2.5(10H,m); 2.3-1.6(13H,m);  1.39(3H,s); 0.8(3H,s)
【０１２５】
実施例１１
プレドニゾロン-21-[2-[4-[2-[(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾイルオキシ]エチル]ピペラジン-1-イル]アセテート]  ２塩酸塩の合成
【化４５】
2005516070.tif 000046
プレドニゾロン-21-[2-[4-(4'-ニトロオキシメチルベンゾイルオキシ) プロピルピペラジン-1-イル]アセテート] 50 mg をMeOH/DCM (ジクロロメタン)(1:1) の混液6 mlに溶解し、この溶液に 0°Cに冷却下、HCl/MeOH 溶液を数滴加える。５分後に生成した沈殿物をろ取して白色の固体を得る。
元素分析:
C%          H%          N%          Cl%
理論値            56.7        6.30        5.36        9.05
実測値            56.6        6.40        5.25        9.15
【０１２６】
実施例１２
フルニソライド-21-[(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート]の合成
【化４６】
2005516070.tif 000047
A.    フルニソライド-21-[(4'-クロロメチル)ベンゾエート]
テトラヒドロフラン(50 ml)中のフルニソライド1.48 gの溶液に、トリエチルアミン(0.71 ml)および4-(クロロメチル)ベンゾイルクロライド(0.96 g)を加える。この溶液を室温で撹拌下に維持し、１日経過後に、トリエチルアミン(0.23 ml)および4-(クロロメチル)ベンゾイルクロライド(0.32 g)を加える。48時間後に、溶媒を真空下に蒸発させる。粗残渣を酢酸エチルと水の混液で抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで減圧下に濃縮した。得られた残渣を、溶出液としてメチレンクロライド/アセトン8/2を用いるシリカゲルクロマトグラフィにより精製した。生成物(1.08 g)を白色の固体として得た。
【０１２７】
B.    フルニソライド-21-[(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート]
アセトニトリル(50 ml)およびテトラヒドロフラン(20 ml)中のフルニソライド21-[(4'-クロロメチル)ベンゾエート] 1.07 gおよび硝酸銀(0.62 g)の溶液を  、遮光して還流下、60°Cに２０時間加熱した。反応混合物を同じ条件下に３日間維持し、その間に硝酸銀(0.31 g)を毎日加えた。生成した沈殿物（銀塩）をろ過し、溶媒を真空下に蒸発させた。得られた残渣を、メチレンクロライド/酢酸エチル9/1で溶出するシリカゲルクロマトグラフィにより精製する。生成物(0.5 g) をメチレンクロライド/n-ヘキサンで結晶化した。生成物0.4 gを白色の固体として得た。
M.p.: 223°-225°C
1H-NMR (300MHz, DMSO) ppm: 8.05(2H,d); 7.65(2H,d); 7.30 (1H,d); 6.25(1H,d); 6.03(1H,s); 5.72(1H,d); 5.69(2H,s);   5.40-5.60(2H,m); 4.91(2H,d); 4.88(1H,dd); 2.4(1H,m); 2.20(1H,m); 1.87(2H,s); 1.57-1.00(5H,m); 1.42(3H,s); 1.39(3H,s); 1.22 (3H,s); 0.88 (3H,s)
【０１２８】
実施例１３
プレドニゾロン-21-[2-[4-(3-ニトロオキシプロピル)ピペラジン-1-イル]アセテート] ビス-トリフルオロメタンアセテートの合成
実施例８の最後に単離された化合物(50 mg)をアセトニトリル5 mlに溶解する。この溶液に、0°Cに冷却下、アセトニトリル(4 ml)中のトリフルオロ酢酸(0.4 ml)の溶液を数滴加える。５分後、0°Cで、溶媒を減圧下に除去し、残渣をエチルエーテルで処理する。生成した白色の固体をろ過した。
元素分析:
C%          H%          N%          F%
理論値            49.94       5.54        5.14        13.94
実測値            49.89       5.50        5.18        13.92
【０１２９】
薬理学的実施例
レセプター結合実験
ステロイド分子と標的器官組織中に存在する特定のレセプタープロテインとの間の相互作用、レセプターの活性を測定し、ステロイドの薬理学的効果である一連の生化学的および生理学的変化を組織中に生じさせる。
【０１３０】
それ自体を特定のレセプターに結合させ（親和性）、レセプター自身を活性化させる（効果）物質の能力は、したがってその薬理学的活性の尺度である。
本発明によるニトロオキシ誘導体および脂肪族連結基を有する対応ニトロオキシ誘導体の効果をグルココルチコイドレセプターに対する結合モデルで測定した。
【０１３１】
これらの実験において、表面にグルココルチコイドに対するレセプターを有するヒトのモノサイトを用いた。
それ自体がレセプターに結合したコルチコステロイドは、Morganelli P.M. ら、 J. Immunol., 1988, 140, 2296-2304により単離され、特徴づけられたヒトのメンブランプロテインCD163を活性化させる。
該メンブランプロテインの活性化は、コルチコステロイドにより仲介される薬理学的応答に依存する。(Resnick D.ら、1994 Trends Biochem. Sci. 19, 5-8; Hogger P. ら、J. Immunol., 1998, 161, 1883-1890; Hogger P. ら、Pharm. Res., 15, 296-302, A. Droste ら、Biochem. Biophys. Res. Comm., 256, 110-113, 1999)。
【０１３２】
実施例F1
この実験において、ヒトのモノサイトに存在するグルココルチコイドに対する結合部位から3H-デキサメタゾンを置き換える、試験物質の能力が評価された。
モノサイトは、濃度勾配に基づく方法によりヒトの血液から単離された (Ficoll-Hypaque d=1.077)。単離された細胞は、培養基質RPMI 1640 およびグルタミン1%を含む試験管に移された（1x106 細胞、測定は２とおり行われた）。 各試験管に、順番に、3H-デキサメタゾン(DMSO 中50nM) および同じ溶媒中に下記の表中に示された濃度で溶解された試験化合物が加えられた。試験管の内容物はVortex 装置を用いて混合された。次いで、試験管は37°Cで1時間培養された。
【０１３３】
培養後、細胞をリン酸緩衝液中の食塩水で4回洗浄し、氷浴中で冷却し(PBS, 0.01 M)、細胞に結合した[3H]-デキサメタゾンの量を液体シンチグラフィにより測定した。各サンプルについて、細胞に結合した[3H]-デキサメタゾンの濃度 (フェムトモル(fモル)/ml = 10-15 mol/ml) を、測定した値、非特異的結合値からサブトラクティングし、次いでモル濃度／放射能比を乗じすることにより計算した。
【０１３４】
次の化合物を用いて実験を行った。
-ハイドロコーチゾン-21-(4-ニトロオキシブチレート) (Hydr-C4-ONO2) 、特許出願 WO 98/15568に記載のようにして調製；
-ハイドロコーチゾン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート(Hydr-Ar-ONO2)(実施例２);
-デキサメタゾン-21-(4-ニトロオキシブチレート) (Dex-C4-ONO2)、特許出願WO 98/15568に記載のようにして合成；
-デキサメタゾン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート(Dex-Ar-ONO2)(実施例３);
-プレドニゾロン-21-(4-ニトロオキシブチレート) (Predn-C4-ONO2)、特許出願WO 98/15568に記載のようにして合成；
-プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート(Predn-Ar-ONO2) (実施例４);
-プレドニゾロン-21-[2-[4-(3-ニトロオキシプロピル)ピペラジン-1-イル]アセテート] ２塩酸塩(Predn-pyper-ONO2) (実施例９);
-プレドニゾロン-21-[2-(3-ニトロオキシプロピル)-ピペラジン-1-イル]アセテート ビストリフルオロメタンアセテート(Predn-pyper-C3-ONO2) (実施例１３)。
【０１３５】
表中に報告されたデータは、fmole [3H]-デキサメタゾン/ml で表わされている。
Hydr-Ar-ONO2  で得られた結果、および比較のためにHydr-C4-ONO2 で得られた結果を表１中に報告する。
Dex-Ar-ONO2 で得られた結果、および比較のためにDex-C4-ONO2 で得られた結果を表２中に報告する。
Predn-Ar-ONO2、Predn-pyper-ONO2、Predn-pyper-Ar-ONO2で得られた結果、および比較のためにPredn-C4-ONO2  で得られた結果を表３中に報告する。
結果は、本発明のステロイド性ニトロオキシ誘導体が、ニトロオキシ基が脂肪族の２価のC4 連結基に結合している誘導体よりも活性であることを示している。
【０１３６】
実施例F2
発明化合物の心臓循環器系パラメータに対する影響
スプラーグ・ドーリー系の正常血圧の雄ラットをグループ分けし、プレドニゾロン21-[(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート] (実施例３) 5 mg/Kg/die i.p. で、また同じ投与量の対応前駆体でそれぞれ３週間処置した。対照は担体(ピーナッツオイル0.5 ml/ラット/die i.p. 3日間)で処置した。処置の終わりに、平均動脈圧(MABP)および心拍数をラットの間で調整した。対照の基礎MABPは110 ± 4 (n = 9)であり、プレドニゾロンで処置された群ではそれが154 ± 7 (n = 8 p < 0.01)  であり、ニトロオキシ誘導体で処置した群では128 ± 7 (n = 9 p < 0.05)であった。心拍数に関して、プレドニゾロンのニトロオキシ誘導体は、上記のパラメータに顕著な影響を与えないことが分かった(対照 330 ± 32 n = 9; 処置群 348 ± 18, n = 9).
【０１３７】
実施例F３
ギネアピッグにおいてヒスタミンにより惹き起こされる気管支狭縮に対するブデソナイド21-[(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート] (NO-ブデソナイド) (実施例５)対ブデソナイド前駆体の効果
体重が250〜300 gの雄ギネアピッグを、実験開始前の数日間、拘束状態および全身充盈計に慣らした。試験化合物投与の24時間前および投与の15分後に、ヒスタミン(3 mM 0.9% 食塩水に溶解)を鼻内ルートにより２０秒間投与した。DMSO 20%、 エタノール10%、生理食塩水70% (v/v)の混液中に溶解したNO-ブデソナイド(635 (g/ml) およびブデソナイド(448 (g/ml) または担体を、エアロゾルとして、密閉した部屋で、圧力21.38x103 Pa (20 p.s.i.)の圧縮空気により流量0.5 ml/分で作動するライトナブライザーを用いて、動物に投与した。投与を１５分間維持した。
【０１３８】
動物の気道の機能をモニターするために、「全身」充盈計を用いた。動物は用心深く、気道の特定のコンダクタンス(sGaw)として、曝露直後の基礎値の変化%で表わした機能性を測定した。この目的のために、動物に適当なマスクを施し、次いで密閉した部屋へ移した。呼吸の流れを呼吸空気速度描記器および圧力トランスジューサにより測定した。sGaw の減少は、気管支狭縮を示している。
表４に報告されたデータは、NO-ブデソナイドがヒスタミンによって惹き起こされた気管支狭縮を完全に阻止(100% 阻止)することを示している。同じモル投与量で投与されたブデソナイドは、反対にヒスタミンによって惹き起こされた気管支狭縮を悪化させる。
【０１３９】
実施例F4
プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート(実施例４)とプレドニゾロンの抗痛風作用の比較
このインビボでの薬理学的実験では、プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエートとプレドニゾロンの抗痛風作用を、ラットにおける痛風のモデルで測定した。
体重150-200 gの、標準ダイエットで給餌され、水を自由に摂取できるルウィス雌ラットを12 時間 明/暗のサイクルでスタビュレートした。
【０１４０】
実験を行うために、ラットをハロタンで麻酔した(ゼロ日)。次いで、尾の基部で皮内注射により、コラーゲン懸濁液II/Freundの不完全アジュバント(400 (g/ラット)を注射した。その製法を以下に記す：鼻のボビンコラーゲン  タイプII (Sigma-Aldrich, 4mg/ml) を酢酸(0.01 M)に溶解し、冷却した同じ量のFreund の不完全アジュバント(Sigma-Aldrich)で乳化した。
【０１４１】
痛風の症状が１１日目と１３日目の間に明らかになってきた。未処置のラットでは、１８日目に炎症が最高になった。
注射後、１２日目から１８日目まで、ラットを１０匹ずつ３つのグループに分け、次のプロトコルに従って、i.p. 処置した：
グループ １:プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート  (4 (mol/kg);
グループ ２:プレドニゾロン (4 (mol/kg); 
グループ ３:対照  担体 (落花生油 0.5 ml/kg, i.p.)。
4番目のグループの健康なラット(ナイーブ)は、さらなる参照とした。
【０１４２】
試験化合物で処置する間、次のパラメータにより、抗痛風作用を評価した：
-検脈器により測定された足の平均体積；
-0 (炎症なし)から3 (重篤な炎症、これは股関節および動物の足の両方に影響する) までの任意のスコアによる股の機能の臨床評価。
１８日目にラットを殺し、皮膚を除去した後、動物の後ろ足股関節の直径を測定した；そして関節の組織学的な分析を行った。
組織学的な組織の分析から、プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエートで処置したグループでは、滑液の炎症および 軟骨における炎症細胞の浸潤は最小限であり、軟骨の妥協を伴っていなかったが、プレドニゾロンで処置したグループでは、未処置の対照グループと比べれば低度ではあるが、軟骨の潰瘍形成および滑液の炎症が認められた。
【０１４３】
表５には次のことが報告されている:
-ｍｍで表わされた関節の大きさ、
-コラーゲン懸濁液だけで処置された対照ラットのグループと対比した関節の大き      さの縮小パーセント、
-mlで表わされた足の体積、毎日測定、
-股の機能の評価スコア。
結果は、プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエートが、ラットでコラーゲンにより惹き起こされる関節炎において強い抗炎症作用を有しており、その程度は考慮されたパラメータに関してプレドニゾロンよりも高いことを示している。
【０１４４】
実施例  F5
プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート(実施例４) とプレドニゾロンの骨折作用
プレドニゾロンの投与、および一般にグルココルチコイドの投与は、骨代謝の増進を惹き起こし、その結果、骨のもろさにつながる骨粗しょう症進展の高い危険性をもたらす骨重量の減少を惹き起こす。
Mancini L. ら、Biochem. Biophys. Res. Comm. 1998, 243, 785-790A に記載のようにして調製された一次ラット食骨細胞の懸濁液を、リン酸カルシウム（アパタイト）でコーティングされた２４ウェルを有する２つの培養プラーク上に置いた。37°Cで30分後、付着していない細胞を除去した。プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエートおよびプレドニゾロン(最終濃度 1 nM)を各プラークにそれぞれ加えた。プラークを37°Cで18 時間培養した。最後に、プラークを次亜塩素酸ナトリウム溶液(10% v/v)で処理して細胞を除去し、エリアを測定した。
【０１４５】
得られたサンプルを、イメージ取得システム(Argus-10, Hamamatsu Photonics, Enfield, 英国)に接続されたインバース顕微鏡(Diaphot TMD; Nikon、日本)で、分析した。各プラークについて、個々の再吸収エリアの合計を計算し、得られた値をウェルの平均エリアの値に対するパーセントで表わした。
結果を表６に報告する。この結果は、プレドニゾロンが食骨細胞の活性を増大させるのに対して、プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエートは骨再吸収を惹き起こさないことを示している。
【０１４６】
実施例  F６
プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエートとプレドニゾロンの、局所貧血−再灌注により惹き起こされる胃障害の測定
この実験では、プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエートとプレドニゾロンの、局所貧血−再灌注により惹き起こされる胃障害に対する効果を比較した。
麻酔されたラット(6 動物/グループ)の腹部動脈を外科の鉗子で一時的に閉塞し、HCl溶液(1 ml, 0.1 N)を胃の内腔に導入した。酸の溶液を導入してから30分後に、 循環を再発させ、血液循環を再発させてから60分後に、創傷強度インデックススコア(LI)により胃の障害を測定した。
【０１４７】
局所貧血の２時間前に、プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエートおよびプレドニゾロン(28 (mol/kg) を経口によりラットに投与した。
結果を表７に報告する。この結果は、局所貧血−再灌注により惹き起こされる胃障害をプレドニゾロンは増大させるが、プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエートは実験的に惹き起こされた胃潰瘍を悪化させないことを示している。
【０１４８】
実施例  Ｆ７
トラウマから脊椎損傷を惹起させた後の、プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエートとプレドニゾロンの、ラットにおける運動機能の回復に対する効果
ラット(各10動物の3グループ) を、重量落下(10 g)により胸部レベルで脊髄の損傷に付した。このようにして脊椎の損傷を起こした。この損傷は、運動機能を顕著に冒す。損傷後、ラットをプレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエート (食塩水/エタノール1:8に溶解、 20 mg/kg、 s.c.) およびプレドニゾロン(20 mg/kg、s.c.、同様に溶解)または担体だけで、１日１回、５日間処置する。
【０１４９】
損傷後、３日目、５日目および７日目にマルチプルスコア(BBB スコア)により、動物の挙動を評価する。採用されたスコアにおいて、ゼロ値は運動機能が著しく影響を受けている状態(動物が歩かない)に対して与えられ、値20は 正常な運動機能に相当する。
結果を表８に報告する。この結果は、プレドニゾロン-21-(4'-ニトロオキシメチル)ベンゾエートでの処置が、比較のコルチコステロイドとは異なって、損傷の回復を誘発することを示している。
【０１５０】
【表１】
2005516070.tif 000048
【０１５１】
【表２】
2005516070.tif 000049
【０１５２】
【表３】
2005516070.tif 000050
【０１５３】
【表４】
2005516070.tif 000051
【０１５４】
【表５】
2005516070.tif 000052
【０１５５】
【表６】
2005516070.tif 000053
【０１５６】
【表７】
2005516070.tif 000054
【０１５７】
【表８】
2005516070.tif 000055
【国際調査報告】
2005516070.tif 000090
2005516070.tif 000091
2005516070.tif 000092
2005516070.tif 000093
2005516070.tif 000094
2005516070.tif 000095
2005516070.tif 000096