(57)【要約】グルカン結合タンパク質-Bのペプチドサブユニット、およびグルコシルトランスフェラーゼのペプチドサブユニットと共にグルカン結合タンパク質-Bのペプチドサブユニットを含む、虫歯に関する免疫原性組成物およびサブユニットワクチンを記述する。ミュータンス連鎖球菌グルカン結合タンパク質-Bまたはグルコシルトランスフェラーゼに対する免疫応答を誘発する方法を記述する。グルカン結合タンパク質-Bまたはグルコシルトランスフェラーゼの特定のエピトープに結合する抗体と共に、虫歯に対して哺乳類を免疫する方法についても記述する。
2005531511.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
グルカン結合タンパク質B（GbpB）の断片を含む組成物であって、断片が主要組織適合抗原複合体（MHC）クラスIIタンパク質に結合する組成物。
【請求項２】
断片がHLAタンパク質に結合する、請求項1記載の組成物。
【請求項３】
HLAタンパク質が、DRA、DRB1、DRB2、DQA1、DQB1、DPA1、DPB1、DMA、DMB、DOA、およびDOBからなる群より選択される、請求項1記載の組成物。
【請求項４】
HLAタンパク質がDRB1である、請求項1記載の組成物。
【請求項５】
GbpBタンパク質が、配列番号：29、30、31、32、および33からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項1記載の組成物。
【請求項６】
GbpBタンパク質が配列番号：29のアミノ酸配列を含む、請求項1記載の組成物。
【請求項７】
断片の長さが6残基より大きく431残基未満である、請求項6記載の組成物。
【請求項８】
断片の長さが400残基未満である、請求項1記載の組成物。
【請求項９】
断片の長さが100残基未満である、請求項1記載の組成物。
【請求項１０】
断片の長さが10〜25残基である、請求項1記載の組成物。
【請求項１１】
断片が、配列番号：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、および41からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項1記載の組成物。
【請求項１２】
断片が配列番号：1および3からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項1記載の組成物。
【請求項１３】
GbpBポリペプチドおよびグルコシルトランスフェラーゼポリペプチドを含む組成物。
【請求項１４】
GbpBポリペプチドが配列番号：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、および41からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項13記載の組成物。
【請求項１５】
GbpBポリペプチドが配列番号：1または3のアミノ酸配列を含む、請求項13記載の組成物。
【請求項１６】
グルコシルトランスフェラーゼポリペプチドが配列番号：34、35、36、37、38、39、または40の触媒ドメインを含む、請求項13記載の組成物。
【請求項１７】
ドメインが配列番号：24または25のアミノ酸配列を含む、請求項16記載の組成物。
【請求項１８】
グルコシルトランスフェラーゼポリペプチドが配列番号：34、35、36、37、38、39、または40のグルカン結合ドメインを含む、請求項13記載の組成物。
【請求項１９】
ドメインが配列番号：23のアミノ酸配列を含む、請求項18記載の組成物。
【請求項２０】
グルコシルトランスフェラーゼポリペプチドが、配列番号：23、24、25、26、27、および28からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項13記載の方法。
【請求項２１】
GbpBポリペプチドが配列番号：1を含み、グルコシルトランスフェラーゼポリペプチドが配列番号：23を含む、請求項13記載の組成物。
【請求項２２】
GbpBポリペプチドが配列番号：1を含み、グルコシルトランスフェラーゼポリペプチドが配列番号：25を含む、請求項13記載の組成物。
【請求項２３】
ペプチジルコアマトリクスをさらに含む、請求項13記載の組成物。
【請求項２４】
コアマトリクスが少なくとも一つのリジンを含む、請求項23記載の組成物。
【請求項２５】
コアマトリクスが複数のリジン残基を含む、請求項23記載の組成物。
【請求項２６】
主要組織適合抗原複合体（MHC）クラスIIタンパク質に結合する、グルカン結合タンパク質-B（GbpB）の断片を含む組成物を哺乳類に投与する段階を含む、哺乳類における抗体産生を誘発する方法。
【請求項２７】
GbpBポリペプチドおよびグルコシルトランスフェラーゼポリペプチドを含む組成物を哺乳類に投与する段階を含む、哺乳類における抗体産生を誘発する方法。
【請求項２８】
哺乳類によって産生された抗GbpB抗体の量が、GTFペプチドの非存在下でGbpBペプチドを含む組成物で免疫した哺乳類によって産生された量より少なくとも10％多い、請求項27記載の方法。
【請求項２９】
抗体がIgAアイソタイプを含む、請求項26または27記載の方法。
【請求項３０】
抗体がIgGアイソタイプを含む、請求項26または27記載の方法。
【請求項３１】
請求項26または17記載の方法によって産生された実質的に純粋な抗体。
【請求項３２】
GbpBのMHCクラスII結合断片に特異的に結合する精製抗体を含む組成物を哺乳類に投与することを含む、口腔連鎖球菌に対する受動免疫を付与する方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
発明の背景
ミュータンス連鎖球菌（Mutans streptococci）は、ヒトにおける虫歯の開始に関係している。ミュータンス連鎖球菌は、細菌を歯の生物膜内に蓄積させて虫歯を引き起こす酸を産生してこれに耐えるいくつかのビルレンス因子を有する。齲食原性のミュータンス連鎖球菌が歯の生物膜において蓄積できることは、グルコシルトランスフェラーゼによってグルカンが合成された後に、細菌が細胞関連グルカン結合タンパク質（Gbps）を通してこれらのポリマーに結合した結果であると考えられている。生体膜の発達は異なる二つの相で起こる。第一の相において、細菌表面のタンパク質は、宿主または歯の表面に吸着された細菌産物と相互作用する。第二の相において、同じまたは他の種との凝集によって細菌が蓄積すると、生体膜が形成され、細胞外多糖類マトリクスを産生する。
【０００２】
これらの機能に関連したエピトープは、関連する配列が抗体上で近づくことができる分子領域に存在する限り、免疫原性攻撃に対する一次標的であると考えられている。グルカン結合活性を有するいくつかのミュータンス連鎖球菌タンパク質が記述されている（Rusell, R.R.、J. Gen. Microbiol. 112：197〜201（1979）；Smith, D.J.ら、Infect. Immun. 62：2545〜2552（1994）；Sato, Y.ら、Infect. Immun. 65：668〜675（1997））。これらの成分の一つであるグルカン結合タンパク質-B（Gbp-B）は、全身性または粘膜免疫後の実験的虫歯に対する保護的免疫応答を誘導することが示されている（Smith, D.J.ら、Infect. Immun. 64：3069〜3073（1996）およびSmith,D.J.ら、Oral Microbiol. Immunol. 13：278〜285（1998））。さらに、GbpBの発現が生体膜の形成に直接関連するという証拠がある（Mattos-Graner, R.O.ら、Infect. and Immun. 69（11）6931〜6941（2001））。しかし、ワクチンに無傷のGbpBタンパク質を用いると、無関係なまたは望ましくないエピトープに対する免疫を誘導する可能性がある。
【発明の開示】
【０００３】
発明の概要
本発明は、連鎖球菌抗原に対する抗体産生を誘導するための改善された免疫原およびワクチン組成物を提供する。したがって、本発明は、主要組織適合性抗原複合体（MHC）クラスIIタンパク質、例えば、DRA、DRB1、DRB2、DQA1、DQB1、DPA1、DPB1、DMA、DMB、DOA、およびDOBからなる群より選択されるHLAタンパク質に結合するグルカン結合タンパク質-B（GbpB）の断片を含む組成物を特徴とする。GbpBタンパク質は好ましくはミュータンス連鎖球菌株に由来する。例えば、連鎖球菌のGbpBは、配列番号：29、30、31、32、および33からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む。好ましくはGbpBタンパク質は、配列番号：29のアミノ酸配列（ミュータンス連鎖球菌SJ32株）を含む。
【０００４】
断片は長さが6残基より大きく、431残基より小さい。例えば、断片は長さが400残基未満であり、長さが100残基未満であり、または長さが50残基未満である。好ましくは、断片は長さが10〜25残基である。断片は、配列番号：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、および22からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む。好ましくは、断片は、配列番号：1および3からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む。
【０００５】
二つまたはそれ以上の連鎖球菌タンパク質の断片を含むキメラポリペプチドも本発明に含まれる。例えば、組成物は、GbpBポリペプチドとグルコシルトランスフェラーゼ（GTF）ポリペプチドとを含む。ポリペプチドは共有結合している。キメラポリペプチドは、二つより多いエピトープを含み（二エピトープポリペプチド）、3、4、5個またはそれより多いエピトープを含んでもよい（多エピトープポリペプチド）。選択的に、ポリペプチドは、単一のエピトープの二つまたはそれ以上のコピーを含む。BgpBポリペプチドは、好ましくは配列番号：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、および22からなる群より選択されるアミノ酸配列を含み、グルコシルトランスフェラーゼポリペプチドは、配列番号：34、35、36、37、38、39、または40の触媒ドメインを含む。好ましくは、触媒ドメインは、配列番号：24または25のアミノ酸配列を含む。または（もしくはさらに）、グルコシルトランスフェラーゼポリペプチドは、配列番号：34、35、36、37、38、39、または40のグルカン結合ドメインを含む。好ましくはグルカン結合ドメインは、配列番号：23のアミノ酸配列を含み、グルコシルトランスフェラーゼポリペプチドは、配列番号：23、24、25、26、27、および28からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む。例えば、二エピトープポリペプチド構築物には、配列番号：1を含むGbpBポリペプチドと配列番号：23を含むグルコシルトランスフェラーゼポリペプチド、または配列番号：1を含むGbpBポリペプチドと配列番号：25を含むグルコシルトランスフェラーゼポリペプチドが含まれる。二または多エピトープ構築物は、選択的にペプチジルコアマトリクスを含む。マトリクスは、一つまたは複数のリジン残基を含む。
【０００６】
組成物は、哺乳類における抗体の産生を誘発するために用いられる。方法は、GbpBのMHCクラスII結合断片を含む組成物、またはGbpBポリペプチドとグルコシルトランスフェラーゼポリペプチドの双方を含む組成物を哺乳類に投与することによって行われる。後者の場合、哺乳類によって産生される抗GbpB抗体の量は、GTFペプチドの非存在下でGbpBペプチドを含む組成物によって免疫した哺乳類によって産生される量より少なくとも10％多い。二または多エピトープペプチド構築物によって免疫した動物における抗GbpB力価は、好ましくは単エピトープペプチドによって免疫した動物において得られた力価より少なくとも20％、少なくとも50％、少なくとも75％、および少なくとも100％高い。同様に、二または多エピトープペプチド構築物によって免疫した動物における抗GTF力価は、好ましくは単エピトープペプチドによって免疫した動物において得られた力価より少なくとも20％、少なくとも50％、少なくとも75％、および少なくとも100％高い。免疫によって全身性免疫（例えば、IgGアイソタイプ）と共に粘膜免疫（IgAアイソタイプ）が産生される。同様に、本発明には、上記の任意の方法によって産生された実質的に純粋な抗体が含まれる。
【０００７】
本発明におけるポリペプチド（抗体分子を含む）は、実質的に純粋である。ポリペプチドは、その天然の状態でそれが伴うその混入物（タンパク質および他の天然に存在する有機分子）から分離されている場合に実質的に純粋である。抗体調製の場合、抗体は、細胞または他の血液タンパク質のような他の血液成分から精製される。典型的に、ポリペプチドは、調製物においてタンパク質の重量で少なくとも60％を占める場合に実質的に純粋である。好ましくは、調製物中のタンパク質は、所望のタンパク質の重量の少なくとも75％、より好ましくは少なくとも90％、および最も好ましくは少なくとも99％である。純度は、適当な方法、例えばカラムクロマトグラフィー、ポリアクリルアミドゲル電気泳動、またはHPLC分析によって測定される。したがって、実質的に純粋なポリペプチドには、合成ポリペプチド、真核細胞に由来するが大腸菌もしくは他の原核細胞、またはポリペプチドが本来由来する細胞以外の真核細胞において産生された組み換え型ポリペプチドが含まれる。
【０００８】
ペプチドは、合成によって、または組み換えDNA技術によって調製される。ペプチドという用語は、隣接するアミノ酸のα-アミノ基とα-カルボキシル基とのあいだのペプチド結合によって互いに連結した一連のアミノ酸を指すために、本明細書においてポリペプチドと互換的に用いられる。選択的に、一つまたはそれ以上のペプチド結合は、ペプチド結合と比較してペプチダーゼによる切断を受けにくい別のタイプの共有結合（「ペプチド模倣体」）によって置換される。被験者に注入後のペプチドのタンパク質溶解による分解が問題である場合、特に感受性の高いペプチド結合を非切断性のペプチド模倣体に置換すると、ペプチド模倣体が得られ、これはより安定で、このように治療物質としてより有用である。そのような模倣体、およびそれらをペプチドに組み入れる方法は当技術分野で周知である。同様に、L-アミノ酸残基の置換は、タンパク質溶解に対するペプチドの感受性をより低くする標準的な方法である。同様に、t-ブチルオキシカルボニル、アセチル、テイル（theyl）、スクシニル、メトキシスクシニル、スベリル、アジピル、アゼライル、ダンシル、ベンジルオキシカルボニル、フルオレニルメトキシカルボニル、メトキシアゼライル、メトキシアジピル、メトキシスベリル、および2,4-ジニトロフェニルのようなアミノ末端のブロッキング基も有用である。ポリペプチドまたはペプチドは、改変がポリペプチドの免疫刺激活性を破壊しない条件であれば、その天然型（未変化型）、もしくは塩である型、およびグリコシル化、側鎖の酸化、もしくは燐酸化のような改変を含まない、またはこれらの改変を含む型であってもよい。
【０００９】
誘導体ペプチドのエピトープは、天然に存在する受容体ペプチドのアミノ酸配列とは異なるアミノ酸配列を有する。そのような誘導体ペプチドは、参照アミノ酸配列、例えば天然に存在するグルタメート受容体ペプチドと比較して少なくとも50％の同一性を有する。好ましくは、誘導体は、天然に存在するタンパク質配列と90、95、98、または99％同一である。誘導体は、保存的アミノ酸置換を含む。保存的アミノ酸置換とは、アミノ酸残基を、生物学的および／または化学的に類似であるもう一つのアミノ酸に置換すること、例えば一つの疎水性残基をもう一つの残基に、または一つの極性残基をもう一つの残基に置換することを意味する。置換には、グリシン、アラニン；バリン、イソロイシン、ロイシン；アスパラギン酸、グルタミン酸；アスパラギン、グルタミン；セリン、トレオニン；リジン、アルギニン；およびフェニルアラニン、チロシンのような組み合わせが含まれる。本明細書に記述のヌクレオチドおよびアミノ酸比較は、Lasergeneソフトウェアパッケージ（DNAスターインク（DNASTAR）、マジソン、ウィスコンシン州）を用いて行う。用いたMegAlignモジュールは、Clustal V法（Higginsら、1989、CABIOS 5（2）：151〜153）である。用いたパラメータは、ギャップペナルティ10、ギャップ長ペナルティ10である。
【００１０】
連鎖球菌免疫原によって哺乳類を免疫することによって能動免疫を誘発することの他に、方法は、受動免疫を付与する方法を含む。例えば、インビトロまたはインビボで産生された抗体を精製して、哺乳類に投与する。抗体調製物は、GbpBおよび／またはGTFのような連鎖球菌抗原に対して特異的に結合する抗体を含む。例えば、受動免疫レジメにおいて用いられる抗体は、GbpBのMHCクラスII結合断片または上記の一つもしくはそれ以上の多エピトープ構築物に対して特異的に結合する精製抗体を含む組成物によって第一の哺乳類を免疫することによって作製された。第一の動物からの抗体の精製後、抗体を第二の動物に投与する。または、抗体は培養において産生し、精製して、受動免疫を付与するために哺乳類に投与する。免疫によって誘発されたまたは受動的に投与された抗体は、一つまたはそれ以上の活性、例えば口腔連鎖球菌のコロニー形成を阻害する。
【００１１】
本発明の他の特徴および長所は、以下の詳細な説明および請求の範囲から明らかとなるであろう。
【００１２】
発明の詳細な説明
ミュータンス連鎖球菌は、感染性の疾患である虫歯の主要な病原体である。この口腔病原体は、幼児期のあいだに口腔に感染し、通常一生のあいだ宿主の歯列に関連して留まる。歯の生体膜内での細菌の蓄積は、いくつかのビルレンス因子の影響による起こりうる。ミュータンス連鎖球菌の蓄積相に関連した細菌成分には、グルコシルトランスフェラーゼ、そのグルカン産物、およびグルカン結合タンパク質が含まれる。少なくとも三つのミュータンス連鎖球菌グルカン結合タンパク質、GbpA、GbpB、およびGbpCが同定されている。GbpAは、グルコシルトランスフェラーゼの推定のグルカン結合ドメインと相同性を有し、gbpA遺伝子は、構成的に発現された分泌タンパク質をコードすることが判明した。細胞表面に会合したGbpCは、連鎖球菌タンパク質のSpaファミリーに関連し、ストレス条件の場合に限って発現される。GbpBは、ミュータンス連鎖球菌およびスレプトコッカス・ソブリナス（Streptococcus sobrinus）によって発現された他のグルカン結合タンパク質とは免疫原性が異なり、同様に大きさおよび精製特性も異なる。
【００１３】
グルカン結合タンパク質-Bは、単一のポリペプチド鎖であり、これは長さが431〜432残基である。一次配列の分析から、ロイシンジッパードメインが判明した。しかし、GbpBは、グルコシルトランスフェラーゼまたはミュータンス連鎖球菌グルカン結合タンパク質Aのグルカン結合ドメインと配列相同性を有しなかった。これによって、その全文が参照として本明細書に組み入れられる、米国特許第5,686,075号および米国特許出願第09/290,049号に記述されるように、合成ペプチドまたはGTFグルカン結合ドメインに由来する組み換え型構築物について用いられ、成功を収めていたサブユニットワクチンアプローチを用いて、推定のグルカン結合機能を有するGbpBドメインの特異的ターゲティングが防止された。
【００１４】
GbpB配列は、他のグラム陽性微生物からのペプチドグリカンヒドロラーゼと有意な相同性を有し、gbpB領域の比較可能なゲノム分析によって、細胞形状および細胞壁の維持に関係する遺伝子において機能的関係が示唆された。gbpB遺伝子をノックアウトする試みから、GbpBの発現が生物にとって必須であることが示された。GbpB機能による免疫原性の妨害は、口腔における齲食原性のミュータンス連鎖球菌の増殖に関連した有害な作用を減少させる。
【００１５】
表5〜9には、様々な株のミュータンス連鎖球菌からのGbpBのアミノ酸配列が含まれる。
【００１６】
（表５）GenBankアクセッション番号AY046410のミュータンス連鎖球菌株SJ32 GbpBの推定アミノ酸配列
2005531511.tif 000003
【００１７】
（表６）GenBankアクセッション番号AY046411のミュータンス連鎖球菌株3VF4 GbpBの推定アミノ酸配列
2005531511.tif 000004
【００１８】
（表７）GenBankアクセッション番号AY046412のミュータンス連鎖球菌株15JP2 GbpBの推定アミノ酸配列
2005531511.tif 000005
【００１９】
（表８）GenBankアクセッション番号AY046413のミュータンス連鎖球菌株3SN1 GbpBの推定アミノ酸配列
2005531511.tif 000006
【００２０】
（表９）GenBankアクセッション番号AY046414のミュータンス連鎖球菌株5SM3 GbpBの推定アミノ酸配列
2005531511.tif 000007
【００２１】
本明細書に記述の組成物、例えばサブユニットワクチン組成物および免疫原性組成物は、投与される哺乳類において免疫応答を生じるために十分な長さであるGbpBのアミノ酸配列サブユニットを含む。本明細書において用いられるように、「サブユニット」または「断片」という用語は、天然に存在するタンパク質全体より小さいGbpBタンパク質の一部を指す。例えば、断片は、天然に存在する完全長のタンパク質の少なくとも5連続アミノ酸を含む。本明細書に記述のペプチド構築物を含むワクチンは、GbpBおよび／またはGTFの機能的ドメインに対して特異的に結合する抗体を誘発し、そのようなワクチンが無関係なまたは望ましくないエピトープに対して免疫を誘導しないというさらなる長所を有する。有用なペプチドは、投与される哺乳類において免疫応答を生じるために十分な長さであるが、無傷のGbpBの完全なアミノ酸配列より短いであろう。典型的に、ペプチドは、長さがアミノ酸少なくとも5〜7個である。好ましくはペプチドは長さがアミノ酸少なくとも12個である；より好ましくはペプチドは長さがアミノ酸少なくとも23個である。GbpBポリペプチドはミュータンス連鎖球菌に由来する。しかし、有意な相同性および／または機能を有するミュータンス連鎖球菌の他の株に由来するグルカン結合タンパク質も同様に利用することができる。例えば、本発明の免疫原性組成物およびサブユニットワクチン中のペプチドは、典型的に、MHCクラスII結合モチーフに対してマッチ少なくとも4個を有するアミノ酸少なくとも6個を含む。好ましくは、ペプチドは、MHCクラスII結合モチーフに対してアミノ酸のマッチが5個より多く、最も好ましくはペプチドはアミノ酸のマッチが6個より多い。マッチは、例えば当技術分野で既知のエピトープ予測に関する行列に基づくアルゴリズムを用いて決定される。
【００２２】
MHCクラスIIモチーフからのDBRI対立遺伝子の組に対するGbpB一次配列の比較に起因する有意なピークを有する、図1に示されるペプチドも企図される。例えば、図1に従って、長さが右側にアミノ酸少なくとも6残基から残基16個、62、90、121、322、および369個伸長したペプチドは、DBRI対立遺伝子に対して少なくとも4個のマッチ残基を有するペプチドであり、本出願の組成物において用いることが企図される。適したペプチドはまた、表記のピークの左側にアミノ酸残基を含んでもよい。
【００２３】
GbpBのHLA結合ペプチド
GbpBペプチドを合成して、免疫原性、親タンパク質との反応性、および虫歯保護免疫の誘導に関して評価した。例としてのペプチドには、グルカン結合タンパク質-Bの以下の断片が含まれる：
2005531511.tif 000008
アミノ酸残基の座標は、完全長のGbpB（配列番号：29）を指す。同等のペプチドには、他のミュータンス連鎖球菌グルカン結合タンパク質における同等の部位（例えば、位置または残基）が含まれると意図される。例えば、他のグルカン結合ペプチドは、S.ソブリナスまたは他のミュータンス連鎖球菌株において認めることができる。同等物は、当業者によって日常的に行われているように、例えば他のミュータンス連鎖球菌GbpBのアミノ酸配列を並列化することによって同定することができる。
【００２４】
本明細書において用いられるように、ワクチン組成物は、投与される哺乳類において免疫応答を誘発する組成物である。GbpB-特異的抗体が誘発されると、免疫物質または免疫原性交叉反応物質によるその後のチャレンジに対して、免疫した哺乳類を保護する。例えば、GbpBに対して特異的な粘膜の抗体が産生されると、免疫した哺乳類におけるミュータンス連鎖球菌の量が減少する。保護は、非ワクチン接種哺乳類と比較した症状または感染の減少または消失のような、完全または部分的となりうる。免疫原性交叉反応物質は、例えば免疫原として用いられるサブユニットペプチドが由来する全タンパク質（GbpB）となりうる。または、免疫原性交叉反応物質は、免疫物質によって誘発された抗体によって全体または部分的に認識される異なるタンパク質となりうる。
【００２５】
本明細書において用いられるように、免疫原性組成物は、投与される哺乳類において免疫応答を誘発し、免疫物質または免疫原性交叉反応物質によるその後のチャレンジに対して、免疫した哺乳類を保護してもしなくてもよい組成物を含む。
【００２６】
産生された免疫応答は、B細胞反応、T細胞反応、またはB細胞とT細胞反応の双方を特徴とする。B細胞反応は、主にIgAである粘膜抗体、および主にIgGである全身抗体の出現に関連している。免疫によって誘発された抗体は、好ましくは免疫物質と免疫原性交叉反応物質の双方を認識する（例えば、免疫ペプチドおよび無傷のGbpBタンパク質）。抗体反応は、免疫物質または免疫原性交叉反応物質によるその後のチャレンジまたは感染に対して、免疫した哺乳類を保護する。
【００２７】
表1に記載したペプチドの他に、GbpBの他の免疫原性ドメインと共に、アジュバント性を増強する、または他の感染物質に対する免疫原性反応を生じる非GbpB起源のドメインは、選択的に本発明の組成物に含まれる。例えば、ワクチンまたは免疫原性組成物は、ジフテリア、百日咳、破傷風、麻疹、インフルエンザ、ポリオウイルス、およびレトロウイルスを含むがこれらに限定されない病原体の免疫原性部分であるさらなる免疫原性成分を含み、これによって一つより大きい感染性疾患または物質に対して免疫応答を生じる多価組成物が得られる。多価ワクチンには、幼児期初期の感染症を標的とする免疫原性エピトープおよび適当なアジュバント配列が含まれる。
【００２８】
GbpB-GTFキメラペプチド
GTFの一つまたはそれ以上のドメインと組み合わせたGbpBの一つまたはそれ以上のドメインを含む免疫原性組成物を作製して、それらの抗体産生誘発能を評価した。この戦略によって、二つまたはそれ以上のエピトープを利用するミュータンス連鎖球菌の分子的病原性に対して複合的に取り組むことができる。ミュータンス連鎖球菌のグルコシルトランスフェラーゼの一つまたはそれ以上の機能的ドメインのアミノ酸配列を含む合成ペプチドは、免疫応答を誘導し、これは細菌のコロニー形成を減少させる。GTF配列とGbpB配列とを含むキメラペプチドは、免疫応答の酵素阻害能を増加させることによって、無関係なエピトープに対する反応を消失させることによって、およびグルカン結合能を減少させることによって、細菌のコロニー形成に対してより全体的な攻撃を提供する。
【００２９】
表10〜16には、様々な連鎖球菌のGTFアイソザイムのアミノ酸配列が含まれる。
【００３０】
（表１０）ミュータンス連鎖球菌GTF-Bの推定アミノ酸配列
2005531511.tif 000009
【００３１】
（表１１）ミュータンス連鎖球菌GTF-Cの推定アミノ酸配列
2005531511.tif 000010
【００３２】
（表１２）ミュータンス連鎖球菌GTF-Dの推定アミノ酸配列
2005531511.tif 000011
【００３３】
（表１３）S. ソブリナスGTF-Iの推定アミノ酸配列
2005531511.tif 000012
【００３４】
（表１４）S. ソブリナスGTF-Uの推定アミノ酸配列
2005531511.tif 000013
【００３５】
（表１５）S. ドウネイ（S. downei）GTF-Sの推定アミノ酸配列
2005531511.tif 000014
【００３６】
（表１６）S. サリバリウス（S. salivarius）GTF-Iの推定アミノ酸配列
2005531511.tif 000015
【００３７】
例としてのGTFペプチドを表17〜19に示す。
【００３８】
（表１７）GTFの触媒ドメインペプチド
2005531511.tif 000016
【００３９】
（表１８）GTFのグルカン結合ドメインペプチド
2005531511.tif 000017
【００４０】
（表１９）GTFの表面ドメインペプチド
2005531511.tif 000018
【００４１】
ミュータンスGbpBおよびミュータンス連鎖球菌のGTFの双方に対する保護抗体を誘導する二エピトープペプチド構築物は、既知の方法を用いて作製する。一つのペプチドをGbpB配列から得て、もう一つのペプチドをGTF配列から得る。有用なGTF配列は、米国特許第5,686,075号および米国特許出願第09/290,049号に記述される。多エピトープ配列は、多数の抗原性ペプチド（MAP）骨格上に存在し、組み換えによって、もしくは弱毒化発現ベクターにおいて、または当技術分野で既知の他の方法によって発現される。例えば、二エピトープ免疫原性およびワクチン組成物には、S.ソブリナスGTF-B残基1303〜1324位；
2005531511.tif 000019
またはミュータンス連鎖球菌GTF-B残基442〜462位；
2005531511.tif 000020
と組み合わせたミュータンスGbpBペプチド
2005531511.tif 000021
が含まれる。
【００４２】
ペプチドは、互いに直接結合しているか、または介在する残基（例えば、一つまたはそれ以上のリジン）によって分離されている。組成物は選択的に、細菌由来アジュバントのような免疫原性増強物質を含む。例えば、GbpBまたはGTFペプチドを、既知のタンパク質（破傷風トキソイドのような）または担体（合成ポリマー担体のような）に結合させると、組成物に高分子構造を与え、免疫原性を増強する。組成物は少なくとも二つの異なるペプチドを含み、ペプチドを合成して、ペプチジルコアマトリクスに共有結合させると、単一の構造において高密度のペプチドを有する高分子が得られる。そのような構造におけるそれぞれのペプチドは、GbpBペプチドを含み、これは投与される哺乳類において免疫応答を誘導するために十分な長さである。組成物は選択的に、複数のコピーのGbpBまたはGTFペプチドを含む。合成ペプチドワクチンデザインは、既知の方法、例えばTamら、PNAS USA 85：5409〜5413（1988）を用いてMAP構築物を用いて行った。
【００４３】
ペプチジルコアマトリクスは、リジン、アルギニンおよびヒスチジンのようなアミノ酸を含む。特に、少なくとも二つのペプチドを少なくとも一つのリジンのコアマトリクスにおいて合成すると、高分子ワクチン組成物が得られる。特に、少なくとも二つのペプチドは、リジン3個のコアマトリクスにおいて合成される。もう一つの例において、ワクチン組成物は、ペプチド4個をリジン3個のコアマトリクスに共有結合させて、4本の樹状の腕を有する放射状に分岐したペプチドを生じることによって作製される。存在する四つのペプチドは同じまたは異なりうる。そのような多エピトープペプチド構築物は免疫応答の増強を誘導した。その上、いくつかの株からの配列を合成または組み換え型多エピトープ構築物に組み合わせると、虫歯のサブユニットワクチンの保護能が増加する。
【００４４】
ワクチン製剤
適したペプチド（複数）を、輸送および免疫応答を改善するために、微粒子、例えばPGLA微粒子に組み入れる。そのような生体接着性の微粒子は、一次および二次粘膜抗体産生を促進することができる。さらに、粘膜に適用したペプチド（抗原）に対する免疫応答を増強する他の方法には、コレラ毒素または大腸菌熱不安定毒素の解毒版のような粘膜アジュバントを用いることが含まれる（Smithら、Infect. Immunity 69（8）：4767〜4773）。
【００４５】
ペプチドは、生理的に許容される培地によって調製される。生理的な培地には、水、緩衝生理食塩液、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコール）、およびデキストロース溶液が含まれるがこれらに限定されない。選択された培地における活性成分（複数）の至適濃度は、当業者に周知の技法に従って経験的に決定することができ、所望の最終的な薬学的製剤に依存するであろう。外因性ペプチドを治療部位に導入する方法には、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、皮下、口腔、舌下、眼内、直腸内、および鼻腔内が含まれるがこれらに限定されない。他の適した導入法にはまた、充填可能または生体分解性の装置および徐放性ポリマー材料が含まれうる。本発明の組成物はまた、他の物質との併用治療の一部として投与することができる。
【００４６】
ペプチドは、ポリペプチド約1〜100 μmol/kg体重/日の静脈内用量で投与される。投与は典型的に非経口である。例えば、ペプチドは、静脈内、皮下、筋肉内、腹腔内、口腔、または鼻腔内に投与される。
【００４７】
抗体産生
本発明のペプチドは、抗体を産生するため、または免疫応答を誘発するために用いられる。本明細書において用いられる「抗体」という用語は、免疫グロブリン分子および免疫グロブリン分子の免疫原性活性部分、すなわち抗原に特異的に結合する抗原結合部位を含む分子を指す。本発明のペプチドに特異的に結合する分子は、そのペプチドまたはその断片に結合するが、本来ペプチドを含む試料中、例えば生体試料中の他の分子には実質的に結合しない分子である。免疫グロブリン分子の免疫原性活性部分の例には、F(ab)およびF(ab')2断片が含まれ、これらはペプシンのような酵素によって抗体を処理することによって作製することができる。本発明は、本発明のペプチドに結合するポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、およびトランスジェニック抗体を提供する。本明細書において用いられる「モノクローナル抗体」または「モノクローナル抗体組成物」という用語は、本発明のペプチドの特定のエピトープと免疫反応することができる抗原結合部位の一つのみの種を含む抗体分子の集団を指す。このように、モノクローナル抗体組成物は、典型的にそれが免疫反応する本発明の特定のペプチドに対して単一の結合親和性を示す。
【００４８】
ポリクローナル抗体は、適した被験者を所望の免疫原、例えば全グルカン結合タンパク質-B、本発明のペプチドまたはその断片によって免疫することによって上記のように調製される。免疫した被験者における抗体力価は、固定したペプチドまたはタンパク質を用いる酵素結合イムノソルベントアッセイ（ELISA）のような標準的な技術によって経時的にモニターすることができる。望ましければ、ペプチドに対する抗体分子を哺乳類（例えば、血液から）から単離して、プロテインAクロマトグラフィーのような周知の技術によってさらに精製してIgG分画を得る。同様に、抗体は、免疫した鶏卵の 卵黄（IgY）（Svendsenら、Lab. Anim. Sci. 45：89〜93（1995））から単離することができる、またはトランスジェニック抗体を植物もしくは他の宿主において調製して、ヒトでの使用のために抽出することができる（Maら、Eur. J. Immol. 24：131〜138（1994））。免疫後の適当な磁気に、例えば抗体力価が最高である時期に、抗体産生細胞を被験者から得て、これを用いて、Kohler and Milstein、Nature 256：495〜497（1975）によって初めて記述されたハイブリドーマ技術、ヒトB細胞ハイブリドーマ技術（Kozborら、Immunol. Today 4：72（1983））、EBV-ハイブリドーマ技術（Coleら、「Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy」、アランR.リスインク（Alan R. Liss, Inc）、77〜96頁（1985））、またはトリオーマ技術のような標準的な技術によってモノクローナル抗体を調製することができる。ハイブリドーマを作製する技術は周知である（例えば、一般的にAusubelら（編）「Current Protocols in Immunology」、ジョンウィリー＆サンズインク、ニューヨーク、ニューヨーク州（2001）を参照されたい）。簡単に説明すると、不死化細胞株（典型的に骨髄腫）を、上記の免疫原によって免疫した哺乳類からのリンパ球（典型的に脾細胞）に融合させて、得られたハイブリドーマ細胞の培養上清をスクリーニングして、本発明のペプチドに結合するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマを同定する。
【００４９】
リンパ球と不死化細胞株を融合させるために用いられる多くの周知の任意のプロトコールを、本発明のペプチドに対するモノクローナル抗体を作製する目的で応用することができる（例えば、上記の「Current Protocols in Immunology」；Galfreら、Nature 266：55052（1977）；R.H. Kenneth、「Monoclonal Antibodies：A New Dimension In Biological Analyses」、プレナム出版、ニューヨーク、ニューヨーク州（1980）；およびLerner、Yale J. Biol. Med. 54：387〜402（1981））。その上、当業者は、同様に有用であるそのような方法の多くの変法が存在することを認識するであろう。
【００５０】
モノクローナル抗体分泌ハイブリドーマを調製する代わりに、組み換え型組み合わせ免疫グロブリンライブラリ（例えば、抗体ファージディスプレイライブラリ）をペプチドによってスクリーニングして、それによってペプチドに結合する免疫グロブリンライブラリメンバーを単離することによって、本発明のペプチドに対するモノクローナル抗体を同定して単離することができる。ファージディスプレイライブラリを作製およびスクリーニングするためのキットは市販されている（例えば、ファルマシア、Recombinant Phage Antibody System、カタログ番号27-9400-01；およびストラタジーン（Stratagene）、SurfZAP（商標）ファージディスプレイキット、カタログ番号240612）。さらに、抗体ディスプレイライブラリを作製およびスクリーニングするために用いられるために特に用いやすい方法および試薬の例は、例えば米国特許第5,223,409号；PCT出願国際公開公報第92/18619号；PCT出願国際公開公報第91/17271号；PCT出願国際公開公報第92/20791号；PCT出願国際公開公報第92/15679号；PCT出願国際公開公報第93/01288号；PCT出願国際公開公報第92/01047号；PCT出願国際公開公報第92/09690号；PCT出願国際公開公報第90/02809号；Fuchsら、BIo/Technology 9：1370〜1372（1991）；Hayら、Hum. Antibod. Hybridomas 3：81〜85（1992）；Huseら、Science 246：1275〜1281（1989）；Griffithsら、EMBO J. 12：725〜734（1993）に認められうる。
【００５１】
さらに、ヒトおよび非ヒト部分の双方を含み、標準的な組み換えDNA技術によって作製することができるキメラおよびヒト化モノクローナル抗体のような組み換え型抗体は、本発明の範囲内である。そのようなキメラおよびヒト化モノクローナル抗体は、当技術分野で既知の組み換えDNA技術によって産生することができる。本発明はまたヒト抗体も含むと意図される。産生、単離、精製および使用法は、標準的な方法論を用いる当業者に既知である。
【００５２】
ミュータンス連鎖球菌によって能動的免疫を行うと、実験的虫歯に対する保護を誘導することが示されている。同様に、Smithら、Infect. and Immun. 69（5）：3135〜3142（2001）によって記述される方法を用いて、本発明のペプチドに対する抗体を投与することによって、哺乳類に受動免疫を付与するために本明細書に記述のペプチドを用いることも、本出願によって企図される。受動免疫およびミュータンス連鎖球菌からの保護は、本明細書に記述のGbp-Bペプチド（例えば、配列番号：1〜22）に対して特異的な抗体の投与によって得ることができる。投与経路には、静脈内、鼻腔内、局所、およびマウスウォッシュ、歯磨き、またはチューインガムに抗体を含めることを含む食事となりうる。Gbp-Bペプチド抗体の投与は、生体膜におけるミュータンス連鎖球菌の蓄積および虫歯を引き起こすその後の事象を阻害することによって、虫歯に対して免疫治療的有効性を有しうる。
【００５３】
本発明はさらに、本発明の免疫原性またはワクチン組成物を投与することによって、哺乳類におけるグルカン結合タンパク質またはグルコシルトランスフェラーゼに対する免疫応答を誘発する方法に関する。好ましくは、免疫応答によって、ワクチン組成物の投与後の哺乳類において生体膜におけるグルカン結合の妨害が起こる。または、免疫応答によって哺乳類におけるグルコシルトランスフェラーゼの酵素活性の妨害が起こる。本発明の組成物および方法によって誘発された免疫応答は液性または全身性となりうる；例えば、免疫応答は、粘膜反応となりうる。本発明の方法によって誘発された免疫応答によって、ワクチンまたは免疫原性組成物を投与される哺乳類におけるミュータンス連鎖球菌株のコロニー形成または蓄積の減少が起こる。
【００５４】
本発明の組成物は、虫歯の予防および／または減少が望ましい任意の哺乳類に投与される。適した哺乳類には、虫歯の阻害が望ましい霊長類、ヒト、ネコ、イヌ、マウス、ラット、および他の哺乳類が含まれる。本発明は、ワクチンが投与される哺乳類において虫歯の進行を予防、停止、または減少するために有用であるワクチンを提供する。
【００５５】
GbpBに対する免疫応答を誘発する本発明の方法において、GbpBに対する免疫応答が望ましい哺乳類に、本明細書に記述のワクチンまたは免疫原性組成物を投与する。組成物を製剤に含めることができ、これを治療すべき個体に投与する；そのような製剤にはまた、生理的に適合される担体（例えば、生理的緩衝液）、安定化剤、着香料、アジュバントおよび他の成分が含まれうる。ワクチンは多様な経路（例えば、非経口、粘膜、鼻腔内、眼内、静脈内、直腸内、経口）によって投与することができ、製剤の成分はそれに従って選択されるであろう。投与量および投与回数は、経験的に、そして治療すべき哺乳類の年齢および体格、ならびに虫歯疾患の進行期（例えば、ミュータンス連鎖球菌のコロニー形成前、ミュータンス連鎖球菌のコロニー形成直後、またはコロニー形成の後期）を考慮に入れるであろう。
【００５６】
実施例1：免疫原性領域の同定
クラスII MHC分子と共に示されるペプチドは、抗原処理細胞のファゴソームにおいて処理されているGbpBに由来した。ペプチドはこれらの細胞の表面上で比例的にMHC分子に結合する。結合は、MHC分子における結合ポケットとペプチドのアミノ酸側鎖との相互作用によって決定した。所定のMHCに対して結合する可能性があるペプチドの特徴を、MHC対立遺伝子のプールしたシークエンシングデータから直接推定して、推定結合確率を得た。このように、サブユニットワクチンをデザインするために用いることができるGbpB配列における可能性があるB細胞エピトープを同定するために、エピトープ予測に関する行列に基づくアルゴリズム（EpiMatrix；エピバックス（EpiVax）インク、プロビデンス、ロードアイランド州）を用いて、既知のMHCクラスII結合モチーフに関してGbpBの一次アミノ酸配列を検索した。
【００５７】
モチーフマッチアルゴリズムは、それぞれのMHCクラスII対立遺伝子に対してGbpB配列を分析して、結合モチーフのクラスタを含む配列の領域を示した。十分に高い推定結合確率（EBP）を有するそれらの配列を用いて、MHCリガンドを予測した。図1は、所定の配列に関連したモチーフマッチ数として予想エピトープの領域を示す。発現されたタンパク質配列のN-末端領域内に少なくとも6個のマッチを有する、発現されたタンパク質配列内の領域4個が同定された。残基16位から始まるこれらの領域の一つは、27残基のシグナルペプチド内に存在した。分子のN末端3分の1に存在する他の三つの領域は、残基62位、残基90位、および残基121位で始まった。残基369位で始まるC末端領域における一つのペプチドは、マッチ5個を有した。既知の対立遺伝子の他の組の独立した分析によってもまた、これらはより高い推定結合確率を有する領域であると同定された。これらの後者の分析はまた、残基322位以降の10量体領域が図1に示す結果から予測された場合より大きい結合確率を有することを示した。表1は、この方法によって同定されたペプチド配列を示す。
【００５８】
（表１）
2005531511.tif 000022
【００５９】
ペプチド構築物
残基62位、121位、および322位以降に予測結合エピトープが含まれる三つの20量体ペプチド（SYI、QGQ、SAS）のMAP構築物を、以下のペプチドを用いて合成した：
2005531511.tif 000023
【００６０】
上記のマトリクスに基づくアプローチにおいて同定された推定の高いMHCクラスII結合確率に基づいて、構築物（SYI、QGQ、およびSAS；配列番号：1、3および9）を、合成およびさらなる分析のために選択した。Merrifield R.B.、J. Amer. Chem. Soc. 85：2149〜2154（1963）の段階的固相合成法を用いて、リジンのコアマトリクス上でペプチドを合成して（アプライドディアグノスティクス、フォスターシティ、カリフォルニア州）、Tamら、PNAS USA 85：5409〜5413（1988）の方法に従って1分子あたりペプチド4個を有する高分子を生成した。合成は、三つのペプチドの二つ（SYIおよびQGQ）について成功した。HPLC、アミノ酸分析、および質量分析による分子量測定を用いて純度（＞90％）を評価した。
【００６１】
グルカン結合タンパク質（GbpB）
GbpBは、尿素の存在下でMONO-Q HR 5/5（ファルマシア（Pharmacia））上でのイオン交換クロマトグラフィーによってミュータンス連鎖球菌株SJrから精製した。細菌を、Navarre and Schneewind、Mol. Microbiol.14：115〜121（1994）に既に記述されるように蔗糖不含合成培地において培養した。このようにして調製したGbpBは、SDSポリアクリルアミドゲル電気泳動において単一のタンパク質バンドとして移動する。
【００６２】
ELISA
血清IgGおよび唾液IgA抗体を、酵素結合イムノソルベントアッセイ（ELISA）によって調べた。ポリスチレンマイクロタイタープレート（フローラボラトリーズ（Flow Laboratories））を2.5 mg/mlのSYIもしくはQGQ、または0.5 mg/mlミュータンス連鎖球菌GbpBによってコーティングした。抗体活性を、400倍および4000倍希釈した血清、または4倍希釈した唾液と共にインキュベートすることによって測定した。次に、プレートを、ウサギ抗IgGによってIgG抗体に関して展開させた後、アルカリホスファターゼヤギ抗ウサギIgG（バイオソースインク（Biosource Inc.））およびp-ニトロフェニルホスフェート（シグマケミカル（Sigma Chemical Co.）、セントルイス、ミズーリ州）によって連続的に展開させた。ラットα鎖に対するマウスモノクローナル試薬（ザイムド（Zymed）、サウスサンフランシスコ、カリフォルニア州）を、ビオチン化ヤギ抗マウスIgG（ザイムド）と共に用いた後、アビジン-アルカリホスファターゼ（ICNバイオメディカルズインク（ICN Biomedicals, Inc）、オーロア、オハイオ州）の後にp-ニトロフェニルホスフェートを用いて、ペプチドに対する唾液IgA抗体レベルを測定した。反応性は、マイクロプレートリーダー（バイオテックインストルメンツ（Biotek Instruments）、ウィヌースキ、バーモント州）における吸光度（A405 nm）として記録した。データは、ELISA単位（EU）として報告し、これはそれぞれのペプチド構築物によって2回免疫したSprague Dawley系ラットからの適当な参照血清または唾液レベルと比較して計算した。A405 nmで約1.0を生じる血清の希釈液は、血清IgG抗体測定に関して100 EUであると見なした。A405 nmで約0.8を生じる唾液の希釈液は、唾液のIgA抗体に関して100 EUであると見なした。
【００６３】
ペプチドの免疫原性
Sprague Dawley CD系の45日齢雌性ラット（チャールスリバーラボラトリーズ（Charles River Laboratories）、ウィルミントン、マサチューセッツ州）を注射のために用いた。1群6匹のラット4群の唾液腺の近傍の皮下に各SYIまたはQGQペプチド構築物50 μg、もしくはGbpB 10 μgを注射するか、または緩衝液単独で偽免疫した。初回注射には、フロイントの完全アジュバント（CFA；ディフコラボラトリーズ（Difco Laboratories）、デトロイト、ミシガン州）が含まれ、21日後のその後の注射にはフロイントの不完全アジュバントが含まれた。動物を注射前に採血して、第二の注射の14日後に採取した。この実験において、ラットは50％二酸化炭素および50％酸素の混合ガスによって一時的に麻酔した後、ケタミン（ケタセット、100 mg/ml、フォートドッジラブ（Fort Dodge Lab）、フォートドッジ、アイオワ州）3に対してキシラジン（ロンプン、20 mg/ml、バイエル（Bayer）社、シャウニーマディソン、カンサス州）7の混合物（0.65 ml/kg）の腹腔内注射によって麻酔した。唾液分泌は、0.6 ml/kgラット体重のカルバコール（0.1 mg/mlを生理食塩液中に含む；シグマケミカル社、セントルイス、ミズーリ州）の皮下注射によって刺激した。唾液の収集後、ラットにまず0.1 ml/kg硫酸アトロピン（0.4 mg/ml；アメリカンファーマシューティカルパートナーズインク（American Phaemaceutical Partners Inc.）、ロサンゼルス、カリフォルニア州）を皮下注射した後、ヨヒンビン（ヨビン、2.0 mg/ml；ロイドラボラトリーズ（Lloyd Laboratories）、シェナンド、アイオワ州）を、麻酔に用いる1.4倍に等しい容量で皮下注射した。凝固して遠心した血液からの血清を-20℃で凍結保存した。最初の注射の35日後に採取した血清を、それぞれのペプチド構築物およびGbpBに対する血清IgG抗体レベルに関してELISAにおいて分析した（図2）。
【００６４】
QGQペプチドを注射したラットは全て、QGQペプチドに対する高い血清抗体レベルで反応したが、偽免疫ラットまたはSYIを注射したラットではQGQエピトープに対して有意な反応を認めなかった。興味深いことに、GbpBタンパク質を注射したラット4匹中2匹からの血清はQGQにも反応した。
【００６５】
SYIペプチドを注射したラットもまた全て、偽またはQGQ注射ラットとは対照的に、刺激性のSYI MAPペプチド構築物に対する血清IgG抗体レベルの上昇を示した。この場合も、親GbpBタンパク質を注射したラット4匹中1匹からの血清IgGが同様に、SYIペプチドに対して有意な反応を示した。
【００６６】
血清は全て、GbpBをコーティングしたプレートを用いてELISAにおいても評価した。SYI（6/6）またはQGQ（4/6）ペプチド注射群からのラットは、親GbpBタンパク質と反応した。GbpBと反応したペプチド注射ラットからの血清IgG抗体レベルは、タンパク質注射ラットのレベルに達しなかったが、SYI注射ラットにおける天然のGbpBエピトープに対する全体的な反応は、有意であった。併せて考慮すると、これらの結果は、情報科学アプローチを用いて予測されたこれらのペプチドの免疫原性を支持した。さらに、それらはまた、特にSYIペプチド構築物について認められた直線状のエピトープ（複数）が無傷の親GbpBタンパク質上で認められたエピトープと共有されたことも示唆した。
【００６７】
保護免疫
ペプチドおよび多エピトープペプチド構築物を、ヒトの虫歯に関する当技術分野で認識されたラットモデルにおいて調べた。SYIペプチドはQGQペプチドよりGbpBに反応性のより一貫した免疫応答を誘導したことから、この仮定を調べるためにこのペプチドを選択した。
【００６８】
二群（n＝13／群）の25日齢のSprague Dawley系雌性ラットを個別に収容した。ラットの唾液腺の近傍にSYI MAPペプチド構築物50 μgまたは燐酸緩衝生理食塩液（対照動物）を皮下（sc）注射した。抗原にはフロイントの完全アジュバント（CFA）を組み入れた。9日後、ラットにPBSまたはSYIをフロイントの不完全アジュバントにおいて同じ用量で注射した。第二の注射の6日後、血液および唾液を上記の麻酔下で採取した。第二の注射の約15日後、ラットをタブに入れて（ラット6匹／タブ）、飼料2000を与えて、ミュータンス連鎖球菌約108個に3日間連続して経口感染させた。感染プロトコールが終了した後、ラットを再度個別に収容して、実験期間中飼料2000を与えた。血液および唾液は初回感染の78日後、および屠殺後に採取した。虫歯の採点のための準備のために、ラット頭蓋を皮膚用槌で肉を落とし、70％エタノールによってすすいだ。
【００６９】
78日の感染期間終了時に採取した血清を、双方のペプチド構築物（図3）およびGbpB（図4）に対するIgGおよびIgA抗体に関して分析した。予想通り、ペプチドによる免疫は、刺激性のSYIペプチドに対する双方のアイソタイプの血清抗体を誘導した。同様に、これまでの実験と一致して、SYI免疫はまた、全てのラットにおいて無傷のGbpBに対するIgG抗体を誘導したが、ラットの中には、少なくとも調べた希釈倍数では、GbpBに対する血清IgA抗体レベルを示さなかったものもあった。唾液は感染前および実験終了時に採取して、SYIおよびGbpBに対するIgA抗体に関してELISAにおいて分析した（表2）。いくつかの（5/13）SYI免疫ラットが、いずれかの時点で双方のペプチドおよび無傷のタンパク質に対して唾液IgA抗体の誘導を示したが、グループレベルでは測定条件において有意差を示さなかった。
【００７０】
（表２）
2005531511.tif 000024
【００７１】
SYI免疫の保護反応を、ミュータンス連鎖球菌感染に関して大臼歯の系統的綿球標本（図5）および大臼歯表面の虫歯の測定（図6）によって評価した。
【００７２】
細菌の回収
ミュータンス連鎖球菌の菌叢を感染の70日後に評価した。歯の系統的綿球標本を採取して、超音波処理を行って、ミチス・サリバリウス寒天（MS；全連鎖球菌）、および0.2 mg/ml硫酸ストレプトマイシンを含むMS寒天（MSS；ミュータンス連鎖球菌株SJr）上に適当な希釈液を播種した後、プレートを90％N2、10％CO2において37℃で48時間インキュベートした。MSS寒天上でのミュータンス連鎖球菌のコロニー形成単位（CFU）を顕微鏡によって計数した。
【００７３】
虫歯の評価
全てのラット大臼歯における虫歯病変の程度および深さ（虫歯スコア）を、標準的な方法によって顕微鏡下で評価した。虫歯スコアは、なめらかな表面および咬合歯表面について個別に決定した。このように、免疫の保護的影響の測定は、このモデルにおいて虫歯保護反応を誘導することができる少なくとも一つのエピトープがSYI上で保存されていることを支持する。SYI免疫群から回収した感染性ミュータンス連鎖球菌SJr（ストレプトマイシン耐性菌）の平均レベルは、感染開始の8日および65日後のいずれにおいても偽免疫群より低かったが、これらの差は、細菌回収の変動のために、p＜0.05レベルでの統計学的有意水準に達しなかった。感染データの傾向は、虫歯の測定によって支持された。なめらかな表面（頬側）および咬合表面での虫歯スコアのみならず、SYIペプチド免疫ラットの全虫歯スコアは、偽免疫および感染ラットのスコアより有意に低かった（図6）。
【００７４】
実施例2：二エピトープ免疫実験
ミュータンス連鎖球菌からのGTFおよびグルカン結合タンパク質B（GbpB）はそれぞれ、これらの微生物によって引き起こされた虫歯の分子的発病に関係している。本来のGTFおよびGbpBと共にそれぞれのタンパク質に由来する合成ペプチドは、実験モデルにおいて齲食原性のミュータンス連鎖球菌による感染に対して保護的免疫応答を誘導することが示されている。
【００７５】
二つの二エピトープ合成ペプチド構築物をMAP形式で合成した。いずれのペプチドもSYIを含み、情報科学分析によって示されたGbpBからの20量体配列は、MHCクラスII結合ペプチドと配列が類似であった。一つの二エピトープペメインからのペプチド（SYI-CAT）も同様にGTFの触媒ドメインからの22量体配列を含んだ。他の二エピトープ構築物（SYI-GLU）は、GTFのグルカン結合ドメインからの22量体配列を含んだ。
【００７６】
二エピトープおよび単エピトープMAP構築物は、アナスペックインク（AnaSpec Inc.、サンノゼ、カリフォルニア州）が合成した。8群のSprague Dawley系ラット（n＝4〜8／群）に対し、最初に以下の一つをフロイントの完全アジュバントと共に注射した：（1）緩衝液単独、（2）MAP-CAT、（3）MAP-GLU、（4）MAP-SYI、（5）MAP-CATGTF-SYIGbpB、（6）MAP-GLUGTF-SYIGbpB、（7）ミュータンス連鎖球菌GbpB、または（8）S.ソブリナスGTF。21日目に、2回目の注射ではフロイントの不完全アジュバントに置換したことを除き、8群に再度同じ構築物を注射した。42日および63日目に動物から血液および唾液を採取した。血清を、アルカリホスファターゼ酵素結合イムノソルベントアッセイ（ELISA）を用いて、ペプチドおよびタンパク質に対して抗体活性に関して調べた。一元および二元配置ANOVAを用いた後、ダンの多重比較検定を用いて抗体レベルを比較した。
【００７７】
2回目の注射の42日後に採取した血液からの血清を、ペプチドまたは天然のタンパク質に対するIgG抗体活性に関して調べた。GLUに対する血清IgG反応は、注射にSYI-GLUまたはGLU単独を用いたか否かによらず類似であった。対照的に、SYI-CATは、CAT単独の場合に誘導された反応より有意に高いCATに対するIgG反応を誘導した。二エピトープペプチド構築物はいずれも、GTFおよびGbpBの本来のタンパク質と反応するIgG抗体を誘導した。SYI-CAT免疫動物から血清は、SYI-GLUより有意に大きい程度GTFに反応した。これらの結果は、二エピトープ合成ペプチド、特にSYI-CATがサブユニット虫歯ワクチンにおいてより広い範囲の保護抗体エピトープを提供する免疫応答を誘導することを示している。さらに、これらの結果は、SYIとCATとを組み合わせると、この重要なGTF触媒ドメインに対する免疫応答を増強したことを示している。
【００７８】
二エピトープ免疫研究において用いた配列：
1．GTF-由来触媒（CAT）ペプチド：
2005531511.tif 000025
2．GTF由来グルカン結合（GLU）ペプチド：
2005531511.tif 000026
3．GbpB由来MHCクラスII（SYI）ペプチド：
2005531511.tif 000027
4．二エピトープSYI-CATペプチド、多抗原性ペプチド（MAP）フォーマットにおいてそれぞれ2コピー：
2005531511.tif 000028
5．二エピトープSYI-GLUペプチド、多抗原性ペプチド（MAP）フォーマットにおいてそれぞれ2コピー：
2005531511.tif 000029
【００７９】
二エピトープ免疫試験の結果
血清は、ラット4〜7匹の群において200倍希釈で試験した。
【００８０】
双方の二エピトープ構築物はGbp-Bに対して有意な抗体を誘導する（表3）。
【００８１】
（表３）GBP-B（グルカン結合タンパク質B）に対する血清IgG反応
2005531511.tif 000030
【００８２】
SYI-GLU二エピトープ構築物は、抗ペプチド（SYI）および抗グルカン結合タンパク質反応（図7）を増強する。いずれかの二エピトープ構築物によって免疫したラットは、親GbpBタンパク質に対する抗体を産生する（図8）。
【００８３】
SYI-CAT二エピトープ構築物は、単エピトープMAPに対して抗ペプチド（CATI）反応を有意に増強する（図10）。SYI-CAT二エピトープ構築物のみが全てのラットにおいて親GTFタンパク質に対して有意なIgG抗体を誘導し（図11）、このように、双方のビルレンス抗原に対する抗体にとって最も効率的な刺激であった。さらに、SYI-CAT二エピトープ構築物は、単独で全ての動物においてGTFに対する有意な血清IgG免疫応答を誘導した（表4）。
【００８４】
（表４）GTFに対する血清IgG反応
2005531511.tif 000031
【００８５】
SYI-CAT構築物は、ミュータンス連鎖球菌のGbpBおよびGTFビルレンス抗原の双方に対して血清IgG抗体の有意なレベルを誘導する。さらに、二エピトープ構築物は、単エピトープCAT構築物を用いた場合に認められた反応と比較してCATエピトープに対する免疫応答を増強した。このように、SYI-CAT構築物は、酵素活性（グルカン形成）を阻害することによって、およびグルカン結合タンパク質Bの活性を阻害することによって、ミュータンス連鎖球菌の病原性を減少させる。
【００８６】
本明細書において引用した参考文献は全て、その全文が参照として本明細書に組み入れられる。本発明は、その好ましい態様を参照して特に示し、説明してきたが、その形状および詳細に様々な変更を行ってもよく、それらも添付の請求の範囲に含まれる本発明の範囲に含まれることは、当業者によって理解されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００８７】
【図１】マッチ対配列として表す、DBRI対立遺伝子の組に対するGbpB一次配列を比較するために用いられるMHCクラスモチーフマッチアルゴリズムの結果を示すチャートである。
【図２】GbpBペプチド構築物QGQおよびSYIに対する血清IgG抗体のボックスプロットを表す。血清IgG抗体活性をQGQ（左のパネル）およびSYI（中央のパネル）ペプチド構築物ならびにGbpBタンパク質（右のパネル）に対するELISAにおいて測定した。偽免疫およびSYI、QGQ、およびGbpB免疫群は、2回の皮下免疫の初回後35日目での1群あたりラット6匹の免疫経験を表す。吸光度は405 nmで測定した。
【図３】保護実験におけるSYIに対する血清IgGおよびIgA抗体のボックスプロットを表す。IgG（左のパネル）およびIgA（右のパネル）抗体活性は、保護実験の終了時に採取した血清中のSYIに対するELISAにおいて測定した。偽免疫およびSYI免疫群は、2回の皮下免疫の初回後3ヶ月目の1群あたりラット13匹の免疫経験を表す。吸光度は405 nmで測定した。
【図４】保護実験におけるGbpBに対する血清IgGおよびIgA抗体のボックスプロットを表す。IgG（左のパネル）およびIgA（右のパネル）抗体活性は、保護実験の終了時に採取した血清中のGbpBに対するELISAにおいて測定した。偽免疫およびSYI免疫群は、2回の皮下免疫の初回後3ヶ月目の1群あたりラット13匹の免疫経験を表す。吸光度は405 nmで測定した。
【図５】ミュータンス連鎖球菌をチャレンジ後の感染レベルを表す。それぞれのプロットは、ミュータンス連鎖球菌SJrによる最初の感染後8日および65日の大臼歯表面の系統的な綿球試料採取後に培養したミュータンス連鎖球菌の数を表す。バーは、偽またはSYI免疫群におけるミュータンス連鎖球菌SJrの平均コロニー形成単位を示す。白丸および黒丸は、個々のラットの感染レベルを示す。
【図６】ミュータンス連鎖球菌SJrによる感染の78日後の虫歯を示す。偽およびSYI-免疫群の頬側、舌側、咬合および全大臼歯の虫歯スコアをそれぞれのパネルに示す。
【図７】ELISAアッセイにおいて測定した405 nmでの吸光度として示されるSYIペプチドに対する血清IgG抗体結合を示すボックスプロットである。血清は63日目に採取した。
【図８】ELISAアッセイにおいて測定した405 nmでの吸光度として示されるミュータンス連鎖球菌GbpBに対する血清IgG抗体結合を示すボックスプロットである。血清は63日目に採取した。
【図９】ELISAアッセイにおいて測定した405 nmでの吸光度として示されるGLUペプチドに対する血清IgG抗体結合を示すボックスプロットである。血清は63日目に採取した。
【図１０】ELISAアッセイにおいて測定した405 nmでの吸光度として示されるCATペプチドに対する血清IgG抗体結合を示すボックスプロットである。血清は63日目に採取した。
【図１１】ELISAアッセイにおいて測定した405 nmでの吸光度として示されるS.ソブリナスGTFに対する血清IgG抗体結合を示すボックスプロットである。血清は63日目に採取した。
【図１２】ELISA結合アッセイにおけるラットの免疫のために用いられるペプチドおよびタンパク質抗原の図示である（その結果を図7〜11に示す）。
【図１】
2005531511.tif 000032
【図２】
2005531511.tif 000033
【図３】
2005531511.tif 000034
【図４】
2005531511.tif 000035
【図５】
2005531511.tif 000036
【図６】
2005531511.tif 000037
【図７】
2005531511.tif 000038
【図８】
2005531511.tif 000039
【図９】
2005531511.tif 000040
【図１０】
2005531511.tif 000041
【図１１】
2005531511.tif 000042
【図１２】
2005531511.tif 000043
【手続補正書】
【提出日】平成16年11月17日(2004.11.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８７】
【図１】マッチ対配列として表す、DBRI対立遺伝子の組に対するGbpB一次配列を比較するために用いられるMHCクラスモチーフマッチアルゴリズムの結果を示すチャートである。
【図２】GbpBペプチド構築物QGQおよびSYIに対する血清IgG抗体のボックスプロットを表す。血清IgG抗体活性をQGQ（左のパネル）およびSYI（中央のパネル）ペプチド構築物ならびにGbpBタンパク質（右のパネル）に対するELISAにおいて測定した。偽免疫およびSYI、QGQ、およびGbpB免疫群は、2回の皮下免疫の初回後35日目での1群あたりラット6匹の免疫経験を表す。吸光度は405 nmで測定した。
【図３】保護実験におけるSYIに対する血清IgGおよびIgA抗体のボックスプロットを表す。IgG（左のパネル）およびIgA（右のパネル）抗体活性は、保護実験の終了時に採取した血清中のSYIに対するELISAにおいて測定した。偽免疫およびSYI免疫群は、2回の皮下免疫の初回後3ヶ月目の1群あたりラット13匹の免疫経験を表す。吸光度は405 nmで測定した。
【図４】保護実験におけるGbpBに対する血清IgGおよびIgA抗体のボックスプロットを表す。IgG（左のパネル）およびIgA（右のパネル）抗体活性は、保護実験の終了時に採取した血清中のGbpBに対するELISAにおいて測定した。偽免疫およびSYI免疫群は、2回の皮下免疫の初回後3ヶ月目の1群あたりラット13匹の免疫経験を表す。吸光度は405 nmで測定した。
【図５】ミュータンス連鎖球菌をチャレンジ後の感染レベルを表す。それぞれのプロットは、ミュータンス連鎖球菌SJrによる最初の感染後8日および65日の大臼歯表面の系統的な綿球試料採取後に培養したミュータンス連鎖球菌の数を表す。バーは、偽またはSYI免疫群におけるミュータンス連鎖球菌SJrの平均コロニー形成単位を示す。白丸および黒丸は、個々のラットの感染レベルを示す。
【図６】ミュータンス連鎖球菌SJrによる感染の78日後の虫歯を示す。偽およびSYI-免疫群の頬側、舌側、咬合および全大臼歯の虫歯スコアをそれぞれのパネルに示す。
【図７】ELISAアッセイにおいて測定した405 nmでの吸光度として示されるSYIペプチドに対する血清IgG抗体結合を示すボックスプロットである。血清は63日目に採取した。
【図８】ELISAアッセイにおいて測定した405 nmでの吸光度として示されるミュータンス連鎖球菌GbpBに対する血清IgG抗体結合を示すボックスプロットである。血清は63日目に採取した。
【図９】ELISAアッセイにおいて測定した405 nmでの吸光度として示されるGLUペプチドに対する血清IgG抗体結合を示すボックスプロットである。血清は63日目に採取した。
【図１０】ELISAアッセイにおいて測定した405 nmでの吸光度として示されるCATペプチドに対する血清IgG抗体結合を示すボックスプロットである。血清は63日目に採取した。
【図１１】ELISAアッセイにおいて測定した405 nmでの吸光度として示されるS.ソブリナスGTFに対する血清IgG抗体結合を示すボックスプロットである。血清は63日目に採取した。
【図１２】ELISA結合アッセイにおけるラットの免疫のために用いられるペプチドおよびタンパク質抗原の図示である（その結果を図7〜11に示す）。
【配列表】
SEQUENCE LISTING
<110>  The Forsyth Institute
<120>  Immunogenicity of Glucan Binding Protein
<130>  MF-A0404
<140>  JP   2003-574121
<141>  2003-03-07
<150>  US   60/402,483
<151>  2002-08-08
<150>  US   60/363,209
<151>  2002-03-07
<160>  41    
<170>  PatentIn version 3.2
<210>  1
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  1
Lys Ser Asn Ala Ala Thr Ser Tyr Ile Asn Ala Ile Ile Asn Ser Lys 
1               5                   10                  15      
Ser Val Ser Asp 
20  
<210>  2
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  2
Lys His Lys Leu Ile Thr Ile Gln Gly Gln Val Ser Ala Leu Gln Thr 
1               5                   10                  15      
Gln Gln Ala Gly 
20  
<210>  3
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  3
Thr Ala Thr Glu Ala Gln Pro Ser Ala Ser Ser Ala Ser Thr Ala Ala 
1               5                   10                  15      
Val Ala Ala Asn 
20  
<210>  4
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  4
Leu Ser Ala Val Leu Val Ser Gly Val Thr Leu Ser Ser Ala Thr Thr 
1               5                   10                  15      
Leu Ser Ala Val 
20  
<210>  5
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  5
Leu Ser Ser Ala Thr Thr Leu Ser Ala Val Lys Ala Asp Asp Phe Asp 
1               5                   10                  15      
Ala Gln Ile Ala 
20  
<210>  6
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  6
Gln Ile Ala Ser Gln Asp Ser Lys Ile Asn Asn Leu Thr Ala Gln Gln 
1               5                   10                  15      
Gln Ala Ala Gln 
20  
<210>  7
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  7
Gln Asp Ser Lys Ile Asn Asn Leu Thr Ala Gln Gln Gln Ala Ala Gln 
1               5                   10                  15      
Ala Gln Val Asn 
20  
<210>  8
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  8
Gln Gln Ala Ala Gln Ala Gln Val Asn Thr Ile Gln Gly Gln Val Ser 
1               5                   10                  15      
Ala Leu Gln Thr 
20  
<210>  9
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  9
Gln Ala Gln Val Asn Thr Ile Gln Gly Gln Val Ser Ala Leu Gln Thr 
1               5                   10                  15      
Gln Gln Ala Glu 
20  
<210>  10
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  10
Gln Gln Ile Gln Thr Leu Ser Ser Lys Ile Val Ala Arg Asn Glu Ser 
1               5                   10                  15      
Leu Lys Gln Gln 
20  
<210>  11
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  11
Ala Thr Ser Tyr Ile Asn Ala Ile Ile Asn Ser Lys Ser Val Ser Asp 
1               5                   10                  15      
Ala Ile Asn Arg 
20  
<210>  12
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  12
Val Ser Ala Ile Arg Glu Val Val Ser Ala Asn Glu Lys Met Leu Gln 
1               5                   10                  15      
Gln Gln Glu Gln 
20  
<210>  13
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  13
Thr Val Ala Ala Asn Gln Glu Thr Ile Ala Gln Asn Thr Asn Ala Leu 
1               5                   10                  15      
Asn Thr Gln Gln 
20  
<210>  14
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  14
Ala Gln Leu Glu Ala Ala Gln Leu Asn Leu Gln Ala Glu Leu Thr Thr 
1               5                   10                  15      
Ala Gln Asp Gln 
20  
<210>  15
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  15
Lys Ala Thr Leu Val Ala Gln Lys Ala Ala Ala Glu Glu Ala Ala Arg 
1               5                   10                  15      
Gln Ala Ala Ala 
20  
<210>  16
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  16
Ala Leu Gln Glu Gln Ala Ala Gln Ala Gln Val Ala Ala Asn Asn Asn 
1               5                   10                  15      
Thr Gln Ala Thr 
20  
<210>  17
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  17
Thr Glu Gln Ser Ala Ala Gln Ala Val Asn Asn Ser Asp Gln Glu Ser 
1               5                   10                  15      
Thr Thr Ala Thr 
20  
<210>  18
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  18
Gln Pro Ser Ala Ser Ser Ala Ser Thr Ala Ala Val Ala Ala Asn Thr 
1               5                   10                  15      
Ser Ser Ala Asn 
20  
<210>  19
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  19
Gly Asn Tyr Trp Gly Asn Gly Gly Gln Trp Ala Ala Ser Ala Ala Ala 
1               5                   10                  15      
Ala Gly Tyr Arg 
20  
<210>  20
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  20
Ala Gly Tyr Arg Val Gly Ser Thr Pro Ser Ala Gly Ala Val Ala Val 
1               5                   10                  15      
Trp Asn Asp Gly 
20  
<210>  21
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  21
Asp Gly Gly Tyr Gly His Val Ala Tyr Val Thr Gly Val Gln Gly Gly 
1               5                   10                  15      
Gln Ile Gln Val 
20  
<210>  22
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  22
Gln Glu Ala Asn Tyr Ala Gly Asn Gln Ser Ile Gly Asn Tyr Arg Gly 
1               5                   10                  15      
Trp Phe Asn Pro 
20  
<210>  23
<211>  22
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  23
Thr Gly Ala Gln Thr Ile Lys Gly Gln Lys Leu Tyr Phe Lys Ala Asn 
1               5                   10                  15      
Gly Gln Gln Val Lys Gly 
20          
<210>  24
<211>  21
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  24
Asp Ala Asn Phe Asp Ser Ile Arg Val Asp Ala Val Asp Asn Val Asp 
1               5                   10                  15      
Ala Asp Leu Leu Gln 
20      
<210>  25
<211>  22
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  25
Asp Ala Asn Phe Asp Ser Ile Arg Val Asp Ala Val Asp Asn Val Asp 
1               5                   10                  15      
Ala Asp Leu Leu Gln Ile 
20          
<210>  26
<211>  25
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  26
Pro Leu Asp Lys Arg Ser Gly Leu Asn Pro Leu Ile His Asn Ser Leu 
1               5                   10                  15      
Val Asp Arg Glu Val Asp Asp Arg Glu 
20                  25  
<210>  27
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  27
Asp Gly Lys Leu Arg Tyr Tyr Asp Ala Asn Ser Gly Asp Gln Ala Phe 
1               5                   10                  15      
Asn Lys Ser Val 
20  
<210>  28
<211>  14
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  28
Gln Trp Asn Gly Glu Ser Glu Lys Pro Tyr Asp Asp His Leu 
1               5                   10                  
<210>  29
<211>  431
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  29
Met Lys Lys Arg Ile Leu Ser Ala Val Leu Val Ser Gly Val Thr Leu 
1               5                   10                  15      
Ser Ser Ala Thr Thr Leu Ser Ala Val Lys Ala Asp Asp Phe Asp Ala 
20                  25                  30          
Gln Ile Ala Ser Gln Asp Ser Lys Ile Asn Asn Leu Thr Ala Gln Gln 
35                  40                  45              
Gln Ala Ala Gln Ala Gln Val Asn Thr Ile Gln Gly Gln Val Ser Ala 
50                  55                  60                  
Leu Gln Thr Gln Gln Ala Glu Leu Gln Ala Glu Asn Gln Arg Leu Glu 
65                  70                  75                  80  
Ala Gln Ser Ala Thr Leu Gly Gln Gln Ile Gln Thr Leu Ser Ser Lys 
85                  90                  95      
Ile Val Ala Arg Asn Glu Ser Leu Lys Gln Gln Ala Arg Ser Ala Gln 
100                 105                 110         
Lys Ser Asn Ala Ala Thr Ser Tyr Ile Asn Ala Ile Ile Asn Ser Lys 
115                 120                 125             
Ser Val Ser Asp Ala Ile Asn Arg Val Ser Ala Ile Arg Glu Val Val 
130                 135                 140                 
Ser Ala Asn Glu Lys Met Leu Gln Gln Gln Glu Gln Asp Lys Ala Ala 
145                 150                 155                 160 
Val Glu Gln Lys Gln Gln Glu Asn Gln Ala Ala Ile Asn Thr Val Ala 
165                 170                 175     
Ala Asn Gln Glu Thr Ile Ala Gln Asn Thr Asn Ala Leu Asn Thr Gln 
180                 185                 190         
Gln Ala Gln Leu Glu Ala Ala Gln Leu Asn Leu Gln Ala Glu Leu Thr 
195                 200                 205             
Thr Ala Gln Asp Gln Lys Ala Thr Leu Val Ala Gln Lys Ala Ala Ala 
210                 215                 220                 
Glu Glu Ala Ala Arg Gln Ala Ala Ala Ala Gln Ala Ala Ala Glu Ala 
225                 230                 235                 240 
Lys Ala Ala Ala Glu Ala Lys Ala Leu Gln Glu Gln Ala Ala Gln Ala 
245                 250                 255     
Gln Val Ala Ala Asn Asn Asn Thr Gln Ala Thr Asp Ala Ser Asp Gln 
260                 265                 270         
Gln Ala Ala Ala Ala Asp Asn Thr Gln Ala Ala Gln Thr Gly Asp Ser 
275                 280                 285             
Thr Glu Gln Ser Ala Ala Gln Ala Val Asn Asn Ser Asp Gln Glu Ser 
290                 295                 300                 
Thr Thr Ala Thr Glu Ala Gln Pro Ser Ala Ser Ser Ala Ser Thr Ala 
305                 310                 315                 320 
Ala Val Ala Ala Asn Thr Ser Ser Ala Asn Thr Tyr Pro Ala Gly Gln 
325                 330                 335     
Cys Thr Trp Gly Val Lys Ser Leu Ala Pro Trp Val Gly Asn Tyr Trp 
340                 345                 350         
Gly Asn Gly Gly Gln Trp Ala Ala Ser Ala Ala Ala Ala Gly Tyr Arg 
355                 360                 365             
Val Gly Ser Thr Pro Ser Ala Gly Ala Val Ala Val Trp Asn Asp Gly 
370                 375                 380                 
Gly Tyr Gly His Val Ala Tyr Val Thr Gly Val Gln Gly Gly Gln Ile 
385                 390                 395                 400 
Gln Val Gln Glu Ala Asn Tyr Ala Gly Asn Gln Ser Ile Gly Asn Tyr 
405                 410                 415     
Arg Gly Trp Phe Asn Pro Gly Ser Val Ser Tyr Ile Tyr Pro Asn 
420                 425                 430     
<210>  30
<211>  431
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  30
Met Lys Lys Arg Ile Leu Ser Ala Val Leu Val Ser Gly Val Thr Leu 
1               5                   10                  15      
Ser Ser Ala Thr Thr Leu Ser Ala Val Lys Ala Asp Asp Phe Asp Ala 
20                  25                  30          
Gln Ile Ala Ser Gln Asp Ser Lys Ile Asn Asn Leu Thr Ala Gln Gln 
35                  40                  45              
Gln Ala Ala Gln Ala Gln Val Asn Thr Ile Gln Gly Gln Val Ser Ala 
50                  55                  60                  
Leu Gln Thr Gln Gln Ala Glu Leu Gln Ala Glu Asn Gln Arg Leu Glu 
65                  70                  75                  80  
Ala Gln Ser Ala Thr Leu Gly Gln Gln Ile Gln Thr Leu Ser Ser Lys 
85                  90                  95      
Ile Val Ala Arg Asn Glu Ser Leu Lys Gln Gln Ala Arg Ser Ala Gln 
100                 105                 110         
Lys Ser Asn Ala Ala Thr Ser Tyr Ile Asn Ala Ile Ile Asn Ser Lys 
115                 120                 125             
Ser Val Ser Asp Ala Ile Asn Arg Val Ser Ala Ile Arg Glu Val Val 
130                 135                 140                 
Ser Ala Asn Glu Lys Met Leu Gln Gln Gln Glu Gln Asp Lys Ala Ala 
145                 150                 155                 160 
Val Glu Gln Lys Gln Gln Glu Asn Gln Ala Ala Ile Asn Thr Val Ala 
165                 170                 175     
Ala Asn Gln Glu Thr Ile Ala Gln Asn Thr Asn Ala Leu Asn Thr Gln 
180                 185                 190         
Gln Ala Gln Leu Glu Ala Ala Gln Leu Asn Leu Gln Ala Glu Leu Thr 
195                 200                 205             
Thr Ala Gln Asp Gln Lys Ala Thr Leu Val Ala Gln Lys Ala Ala Ala 
210                 215                 220                 
Glu Glu Ala Ala Arg Gln Ala Ala Ala Ala Gln Ala Ala Ala Glu Ala 
225                 230                 235                 240 
Lys Ala Ala Ala Glu Ala Lys Ala Leu Gln Glu Gln Ala Ala Gln Ala 
245                 250                 255     
Gln Ala Ala Ala Asn Asn Asn Thr Gln Ala Thr Asp Ala Ser Asp Gln 
260                 265                 270         
Gln Ala Ala Ala Ala Asp Asn Thr Gln Ala Ala Gln Thr Gly Asp Ser 
275                 280                 285             
Thr Glu Gln Ser Ala Ala Gln Ala Val Asn Asn Ser Asp Gln Glu Ser 
290                 295                 300                 
Thr Thr Ala Thr Glu Ala Gln Pro Ser Ala Ser Ser Ala Ser Thr Ala 
305                 310                 315                 320 
Ala Val Ala Ala Asn Thr Ser Ser Ala Asn Thr Tyr Pro Ala Gly Gln 
325                 330                 335     
Cys Thr Trp Gly Val Lys Ser Leu Ala Pro Trp Val Gly Asn Tyr Trp 
340                 345                 350         
Gly Asn Gly Gly Gln Trp Ala Ala Ser Ala Ala Ala Ala Gly Tyr Arg 
355                 360                 365             
Val Gly Ser Thr Pro Ser Ala Gly Ala Val Ala Val Trp Asn Asp Gly 
370                 375                 380                 
Gly Tyr Gly His Val Ala Tyr Val Thr Gly Val Gln Gly Gly Gln Ile 
385                 390                 395                 400 
Gln Val Gln Glu Ala Asn Tyr Ala Gly Asn Gln Ser Ile Gly Asn Tyr 
405                 410                 415     
Arg Gly Trp Phe Asn Pro Gly Ser Val Ser Tyr Ile Tyr Pro Asn 
420                 425                 430     
<210>  31
<211>  432
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  31
Met Lys Lys Arg Ile Leu Ser Ala Val Leu Val Ser Gly Val Thr Leu 
1               5                   10                  15      
Ser Ser Ala Thr Thr Leu Ser Ala Ile Lys Ala Asp Asp Phe Asp Ala 
20                  25                  30          
Gln Ile Ala Ser Gln Asp Ser Lys Ile Asn Asn Leu Thr Ala Gln Gln 
35                  40                  45              
Gln Ala Ala Gln Ala Gln Val Asn Thr Ile Gln Gly Gln Val Ser Ala 
50                  55                  60                  
Leu Gln Thr Gln Gln Ala Glu Leu Gln Ala Glu Asn Gln Arg Leu Glu 
65                  70                  75                  80  
Ala Gln Ser Ala Thr Leu Gly Gln Gln Ile Gln Thr Leu Ser Ser Lys 
85                  90                  95      
Ile Val Ala Arg Asn Glu Ser Leu Lys Gln Gln Ala Arg Ser Ala Gln 
100                 105                 110         
Lys Ser Asn Ala Ala Thr Ser Tyr Ile Asn Ala Ile Ile Asn Ser Lys 
115                 120                 125             
Ser Val Ser Asp Ala Ile Asn Arg Val Ser Ala Ile Arg Glu Val Val 
130                 135                 140                 
Ser Ala Asn Glu Lys Met Leu Gln Gln Gln Glu Gln Asp Lys Ala Ala 
145                 150                 155                 160 
Val Glu Gln Lys Gln Gln Glu Asn Gln Ala Ala Ile Asn Thr Val Ala 
165                 170                 175     
Ala Asn Gln Glu Thr Ile Ala Gln Asn Thr Asn Ala Leu Asn Thr Gln 
180                 185                 190         
Gln Ala Gln Leu Glu Ala Ala Gln Leu Asn Leu Gln Ala Glu Leu Thr 
195                 200                 205             
Thr Ala Gln Asp Gln Lys Ala Thr Leu Val Ala Gln Lys Ala Ala Ala 
210                 215                 220                 
Glu Glu Ala Ala Arg Gln Ala Ala Ala Ala Gln Ala Ala Ala Glu Ala 
225                 230                 235                 240 
Lys Ala Ala Ala Glu Ala Lys Ala Leu Gln Glu Gln Ala Ala Gln Ala 
245                 250                 255     
Gln Ala Ala Ala Asn Asn Asn Asn Thr Gln Ala Thr Asp Ala Ser Asp 
260                 265                 270         
Gln Gln Ala Ala Ala Ala Asp Asn Thr Gln Ala Ala Gln Thr Gly Asp 
275                 280                 285             
Ser Thr Asp Gln Ser Ala Ala Gln Ala Val Asn Asn Ser Asp Gln Glu 
290                 295                 300                 
Ser Thr Thr Ala Thr Ala Ala Gln Pro Ser Ala Ser Ser Ala Ser Thr 
305                 310                 315                 320 
Ala Ala Val Ala Ala Asn Thr Ser Ser Ala Asn Thr Tyr Pro Ala Gly 
325                 330                 335     
Gln Cys Thr Trp Gly Val Lys Ser Leu Ala Pro Trp Val Gly Asn Tyr 
340                 345                 350         
Trp Gly Asn Gly Gly Gln Trp Ala Ala Ser Ala Ala Ala Ala Gly Tyr 
355                 360                 365             
Arg Val Gly Ser Thr Pro Ser Ala Gly Ala Val Ala Val Trp Asn Asp 
370                 375                 380                 
Gly Gly Tyr Gly His Val Ala Tyr Val Thr Gly Val Gln Gly Gly Gln 
385                 390                 395                 400 
Ile Gln Val Gln Glu Ala Asn Tyr Ala Gly Asn Gln Ser Ile Gly Asn 
405                 410                 415     
Tyr Arg Gly Trp Phe Asn Pro Gly Ser Val Ser Tyr Ile Tyr Pro Asn 
420                 425                 430         
<210>  32
<211>  432
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  32
Met Lys Lys Arg Ile Leu Ser Ala Val Leu Val Ser Gly Val Thr Leu 
1               5                   10                  15      
Ser Ser Ala Thr Thr Leu Ser Ala Val Lys Ala Asp Asp Phe Asp Ala 
20                  25                  30          
Gln Ile Ala Ser Gln Asp Ser Lys Ile Asn Asn Leu Thr Ala Gln Gln 
35                  40                  45              
Gln Ala Ala Gln Ala Gln Val Asn Thr Ile Gln Gly Gln Val Ser Ala 
50                  55                  60                  
Leu Gln Thr Gln Gln Ala Glu Leu Gln Ala Glu Asn Gln Arg Leu Glu 
65                  70                  75                  80  
Ala Gln Ser Ala Thr Leu Gly Gln Gln Ile Gln Thr Leu Ser Ser Lys 
85                  90                  95      
Ile Val Ala Arg Asn Glu Ser Leu Lys Gln Gln Ala Arg Ser Ala Gln 
100                 105                 110         
Lys Ser Asn Ala Ala Thr Ser Tyr Ile Asn Ala Ile Ile Asn Ser Lys 
115                 120                 125             
Ser Val Ser Asp Ala Ile Asn Arg Val Ser Ala Ile Arg Glu Val Val 
130                 135                 140                 
Ser Ala Asn Glu Lys Met Leu His Gln Gln Glu Gln Asp Lys Ala Ala 
145                 150                 155                 160 
Val Glu Gln Lys His Gln Glu Asn Gln Ala Ala Ile Asn Thr Val Ala 
165                 170                 175     
Ala Asn Gln Glu Thr Ile Ala Gln Asn Thr Asn Ala Leu Asn Thr Gln 
180                 185                 190         
Gln Ala Gln Leu Glu Ala Ala Gln Leu Asn Leu Gln Ala Glu Leu Thr 
195                 200                 205             
Thr Ala Gln Asp Gln Lys Ala Thr Leu Val Ala Gln Lys Ala Ala Ala 
210                 215                 220                 
Glu Glu Ala Ala Arg Gln Ala Ala Ala Ala Gln Ala Ala Ala Glu Ala 
225                 230                 235                 240 
Lys Ala Ala Ala Glu Ala Lys Ala Leu Gln Glu Gln Ala Ala Gln Ala 
245                 250                 255     
Gln Ala Ala Ala Asn Asn Asn Asn Thr Gln Ala Thr Asp Ala Ser Asp 
260                 265                 270         
Gln Gln Ala Ala Ala Ala Asp Asn Thr Gln Ala Ala Gln Thr Gly Asp 
275                 280                 285             
Ser Thr Asp Gln Ser Ala Ala Gln Ala Val Asn Asn Ser Asp Gln Glu 
290                 295                 300                 
Ser Thr Thr Ala Thr Ala Ala Gln Pro Ser Ala Ser Ser Ala Ser Thr 
305                 310                 315                 320 
Ala Ala Val Ala Ala Asn Thr Ser Ser Ala Asn Thr Tyr Pro Ala Gly 
325                 330                 335     
Gln Cys Thr Trp Gly Val Lys Ser Leu Ala Pro Trp Val Gly Asn Tyr 
340                 345                 350         
Trp Gly Asn Gly Gly Gln Trp Ala Ala Ser Ala Ala Ala Ala Gly Tyr 
355                 360                 365             
Arg Val Gly Ser Thr Pro Ser Ala Gly Ala Val Ala Val Trp Asn Asp 
370                 375                 380                 
Gly Gly Tyr Gly His Val Ala Tyr Val Thr Gly Val Gln Gly Gly Gln 
385                 390                 395                 400 
Ile Gln Val Gln Glu Ala Asn Tyr Ala Gly Asn Gln Ser Ile Gly Asn 
405                 410                 415     
Tyr Arg Gly Trp Phe Asn Pro Gly Ser Val Ser Tyr Ile Tyr Pro Asn 
420                 425                 430         
<210>  33
<211>  431
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  33
Met Lys Lys Arg Ile Leu Ser Ala Val Leu Val Ser Gly Val Thr Leu 
1               5                   10                  15      
Ser Ser Ala Thr Thr Leu Ser Ala Val Lys Ala Asp Asp Phe Asp Ala 
20                  25                  30          
Gln Ile Ala Ser Gln Asp Ser Lys Ile Asn Asn Leu Thr Ala Gln Gln 
35                  40                  45              
Gln Ala Ala Gln Ala Gln Val Asn Thr Ile Gln Gly Gln Val Ser Ala 
50                  55                  60                  
Leu Gln Thr Gln Gln Ala Glu Leu Gln Ala Glu Asn Gln Arg Leu Glu 
65                  70                  75                  80  
Ala Gln Ser Ala Thr Leu Gly Gln Gln Ile Gln Thr Leu Ser Ser Lys 
85                  90                  95      
Ile Val Ala Arg Asn Glu Ser Leu Lys Gln Gln Ala Arg Ser Ala Gln 
100                 105                 110         
Lys Ser Asn Ala Ala Thr Ser Tyr Ile Asn Ala Ile Ile Asn Ser Lys 
115                 120                 125             
Ser Val Ser Asp Ala Ile Asn Arg Val Ser Ala Ile Arg Glu Val Val 
130                 135                 140                 
Ser Ala Asn Glu Lys Met Leu Gln Gln Gln Glu Gln Asp Lys Ala Ala 
145                 150                 155                 160 
Val Glu Gln Lys Gln Gln Glu Asn Gln Ala Ala Ile Asn Thr Val Ala 
165                 170                 175     
Ala Asn Gln Glu Thr Ile Ala Gln Asn Thr Asn Ala Leu Asn Thr Gln 
180                 185                 190         
Gln Ala Gln Leu Glu Ala Ala Gln Leu Asn Leu Gln Ala Glu Leu Thr 
195                 200                 205             
Thr Ala Gln Asp Gln Lys Ala Thr Leu Val Ala Gln Lys Ala Ala Ala 
210                 215                 220                 
Glu Glu Ala Ala Arg Gln Ala Ala Ala Ala Gln Ala Ala Ala Glu Ala 
225                 230                 235                 240 
Lys Ala Ala Ala Glu Ala Lys Ala Leu Gln Glu Gln Ala Ala Gln Ala 
245                 250                 255     
Gln Ala Ala Ala Asn Asn Asn Thr Gln Ala Thr Asp Ala Ser Asp Gln 
260                 265                 270         
Gln Ala Ala Ala Ala Asp Asn Thr Gln Ala Ala Gln Thr Gly Asp Ser 
275                 280                 285             
Thr Glu Gln Ser Ala Ala Gln Ala Val Asn Asn Ser Asp Gln Glu Ser 
290                 295                 300                 
Thr Thr Ala Thr Glu Ala Gln Pro Ser Ala Ser Ser Ala Ser Thr Ala 
305                 310                 315                 320 
Val Val Thr Ala Asn Thr Ser Ser Ala Asn Thr Tyr Pro Ala Gly Gln 
325                 330                 335     
Cys Thr Trp Gly Val Lys Ser Leu Ala Pro Trp Val Gly Asn Tyr Trp 
340                 345                 350         
Gly Asn Gly Gly Gln Trp Ala Ala Ser Ala Ala Ala Ala Gly Tyr Arg 
355                 360                 365             
Val Gly Ser Thr Pro Ser Ala Gly Ala Val Ala Val Trp Asn Asp Gly 
370                 375                 380                 
Gly Tyr Gly His Val Ala Tyr Val Thr Gly Val Gln Gly Gly Gln Ile 
385                 390                 395                 400 
Gln Val Gln Glu Ala Asn Tyr Ala Gly Asn Gln Ser Ile Gly Asn Tyr 
405                 410                 415     
Arg Gly Trp Phe Asn Pro Gly Ser Val Ser Tyr Ile Tyr Pro Asn 
420                 425                 430     
<210>  34
<211>  1475
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  34
Met Asp Lys Lys Val Arg Tyr Lys Leu Arg Lys Val Lys Lys Arg Trp 
1               5                   10                  15      
Val Thr Val Ser Val Ala Ser Ala Val Met Thr Leu Thr Thr Leu Ser 
20                  25                  30          
Gly Gly Leu Val Lys Ala Asp Ser Asn Glu Ser Lys Ser Gln Ile Ser 
35                  40                  45              
Asn Asp Ser Asn Thr Ser Val Val Thr Ala Asn Glu Glu Ser Asn Val 
50                  55                  60                  
Ile Thr Glu Ala Thr Ser Lys Gln Glu Ala Ala Ser Ser Gln Thr Asn 
65                  70                  75                  80  
His Thr Val Thr Thr Ser Ser Ser Ser Thr Ser Val Val Asn Pro Lys 
85                  90                  95      
Glu Val Val Ser Asn Pro Tyr Thr Val Gly Glu Thr Ala Ser Asn Gly 
100                 105                 110         
Glu Lys Leu Gln Asn Gln Thr Thr Thr Val Asp Lys Thr Ser Glu Ala 
115                 120                 125             
Ala Ala Asn Asn Ile Ser Lys Gln Thr Thr Glu Ala Asp Thr Asp Val 
130                 135                 140                 
Ile Asp Asp Ser Asn Ala Ala Asn Leu Gln Ile Leu Glu Lys Leu Pro 
145                 150                 155                 160 
Asn Val Lys Glu Ile Asp Gly Lys Tyr Tyr Tyr Tyr Asp Asn Asn Gly 
165                 170                 175     
Lys Val Arg Thr Asn Phe Thr Leu Ile Ala Asp Gly Lys Ile Leu His 
180                 185                 190         
Phe Asp Glu Thr Gly Ala Tyr Thr Asp Thr Ser Ile Asp Thr Val Asn 
195                 200                 205             
Lys Asp Ile Val Thr Thr Arg Ser Asn Leu Tyr Lys Lys Tyr Asn Gln 
210                 215                 220                 
Val Tyr Asp Arg Ser Ala Gln Ser Phe Glu His Val Asp His Tyr Leu 
225                 230                 235                 240 
Thr Ala Glu Ser Trp Tyr Arg Pro Lys Tyr Ile Leu Lys Asp Gly Lys 
245                 250                 255     
Thr Trp Thr Gln Ser Thr Glu Lys Asp Phe Arg Pro Leu Leu Met Thr 
260                 265                 270         
Trp Trp Pro Asp Gln Glu Thr Gln Arg Gln Tyr Val Asn Tyr Met Asn 
275                 280                 285             
Ala Gln Leu Gly Ile Asn Lys Thr Tyr Asp Asp Thr Ser Asn Gln Leu 
290                 295                 300                 
Gln Leu Asn Ile Ala Ala Ala Thr Ile Gln Ala Lys Ile Glu Ala Lys 
305                 310                 315                 320 
Ile Thr Thr Leu Lys Asn Thr Asp Trp Leu Arg Gln Thr Ile Ser Ala 
325                 330                 335     
Phe Val Lys Thr Gln Ser Ala Trp Asn Ser Asp Ser Glu Lys Pro Phe 
340                 345                 350         
Asp Asp His Leu Gln Asn Gly Ala Val Leu Tyr Asp Asn Glu Gly Lys 
355                 360                 365             
Leu Thr Pro Tyr Ala Asn Ser Asn Tyr Arg Ile Leu Asn Arg Thr Pro 
370                 375                 380                 
Thr Asn Gln Thr Gly Lys Lys Asp Pro Arg Tyr Thr Ala Asp Asn Thr 
385                 390                 395                 400 
Ile Gly Gly Tyr Glu Phe Leu Leu Ala Asn Asp Val Asp Asn Ser Asn 
405                 410                 415     
Pro Val Val Gln Ala Glu Gln Leu Asn Trp Leu His Phe Leu Met Asn 
420                 425                 430         
Phe Gly Asn Ile Tyr Ala Asn Asp Pro Asp Ala Asn Phe Asp Ser Ile 
435                 440                 445             
Arg Val Asp Ala Val Asp Asn Val Asp Ala Asp Leu Leu Gln Ile Ala 
450                 455                 460                 
Gly Asp Tyr Leu Lys Ala Ala Lys Gly Ile His Lys Asn Asp Lys Ala 
465                 470                 475                 480 
Ala Asn Asp His Leu Ser Ile Leu Glu Ala Trp Ser Asp Asn Asp Thr 
485                 490                 495     
Pro Tyr Leu His Asp Asp Gly Asp Asn Met Ile Asn Met Asp Asn Lys 
500                 505                 510         
Leu Arg Leu Ser Leu Leu Phe Ser Leu Ala Lys Pro Leu Asn Gln Arg 
515                 520                 525             
Ser Gly Met Asn Pro Leu Ile Thr Asn Ser Leu Val Asn Arg Thr Asp 
530                 535                 540                 
Asp Asn Ala Glu Thr Ala Ala Val Pro Ser Tyr Ser Phe Ile Arg Ala 
545                 550                 555                 560 
His Asp Ser Glu Val Gln Asp Leu Ile Ala Asp Ile Ile Lys Ala Glu 
565                 570                 575     
Ile Asn Pro Asn Val Val Gly Tyr Ser Phe Thr Met Glu Glu Ile Lys 
580                 585                 590         
Lys Ala Phe Glu Ile Tyr Asn Lys Asp Leu Leu Ala Thr Glu Lys Lys 
595                 600                 605             
Tyr Thr His Tyr Asn Thr Ala Leu Ser Tyr Ala Leu Leu Leu Thr Asn 
610                 615                 620                 
Lys Ser Ser Val Pro Arg Val Tyr Tyr Gly Asp Met Phe Thr Asp Asp 
625                 630                 635                 640 
Gly Gln Tyr Met Ala His Lys Thr Ile Asn Tyr Glu Ala Ile Glu Thr 
645                 650                 655     
Leu Leu Lys Ala Arg Ile Lys Tyr Val Ser Gly Gly Gln Ala Met Arg 
660                 665                 670         
Asn Gln Gln Val Gly Asn Ser Glu Ile Ile Thr Ser Val Arg Tyr Gly 
675                 680                 685             
Lys Gly Ala Leu Lys Ala Thr Asp Thr Gly Asp Arg Thr Thr Arg Thr 
690                 695                 700                 
Ser Gly Val Ala Val Ile Glu Gly Asn Asn Pro Ser Leu Arg Leu Lys 
705                 710                 715                 720 
Ala Ser Asp Arg Val Val Val Asn Met Gly Ala Ala His Lys Asn Gln 
725                 730                 735     
Ala Tyr Arg Pro Leu Leu Leu Thr Thr Asp Asn Gly Ile Lys Ala Tyr 
740                 745                 750         
His Ser Asp Gln Glu Ala Ala Gly Leu Val Arg Tyr Thr Asn Asp Arg 
755                 760                 765             
Gly Glu Leu Ile Phe Thr Ala Ala Asp Ile Lys Gly Tyr Ala Asn Pro 
770                 775                 780                 
Gln Val Ser Gly Tyr Leu Gly Val Trp Val Pro Val Gly Ala Ala Leu 
785                 790                 795                 800 
Ile Lys Met Phe Ala Leu Arg Leu Ala Arg Pro His Gln Gln Met Ala 
805                 810                 815     
Ser Val His Gln Asn Ala Ala Leu Asp Ser Arg Val Met Phe Glu Gly 
820                 825                 830         
Phe Ser Asn Phe Gln Ala Phe Ala Thr Lys Lys Glu Glu Tyr Thr Asn 
835                 840                 845             
Val Val Ile Ala Lys Asn Val Asp Lys Phe Ala Glu Trp Gly Val Thr 
850                 855                 860                 
Asp Phe Glu Met Ala Pro Gln Tyr Val Ser Ser Thr Asp Gly Ser Phe 
865                 870                 875                 880 
Leu Asp Ser Val Ile Gln Asn Gly Tyr Ala Phe Thr Asp Arg Tyr Asp 
885                 890                 895     
Leu Gly Ile Ser Lys Pro Asn Lys Tyr Gly Thr Ala Asp Asp Leu Val 
900                 905                 910         
Lys Ala Ile Lys Ala Leu His Ser Lys Gly Ile Lys Val Met Ala Asp 
915                 920                 925             
Trp Val Pro Asp Gln Met Tyr Ala Phe Pro Glu Lys Glu Val Val Thr 
930                 935                 940                 
Ala Thr Arg Val Asp Lys Tyr Gly Thr Pro Val Ala Gly Ser Gln Ile 
945                 950                 955                 960 
Lys Asn Thr Leu Tyr Val Val Asp Gly Lys Ser Ser Gly Lys Asp Gln 
965                 970                 975     
Gln Ala Lys Tyr Gly Gly Ala Phe Leu Glu Glu Leu Gln Ala Lys Tyr 
980                 985                 990         
Pro Glu Leu Phe Ala Arg Lys Gln  Ile Ser Thr Gly Val  Pro Met Asp 
995                 1000                 1005             
Pro Ser  Val Lys Ile Lys Gln  Trp Ser Ala Lys Tyr  Phe Asn Gly 
1010                 1015                 1020             
Thr Asn  Ile Leu Gly Arg Gly  Ala Gly Tyr Val Leu  Lys Asp Gln 
1025                 1030                 1035             
Ala Thr  Asn Thr Tyr Phe Asn  Ile Ser Asp Asn Lys  Glu Ile Asn 
1040                 1045                 1050             
Phe Leu  Pro Lys Thr Leu Leu  Asn Gln Asp Ser Gln  Val Gly Phe 
1055                 1060                 1065             
Ser Tyr  Asp Gly Lys Gly Tyr  Val Tyr Tyr Ser Thr  Ser Gly Tyr 
1070                 1075                 1080             
Gln Ala  Lys Asn Thr Phe Ile  Ser Glu Gly Asp Lys  Trp Tyr Tyr 
1085                 1090                 1095             
Phe Asp  Asn Asn Gly Tyr Met  Val Thr Gly Ala Gln  Ser Ile Asn 
1100                 1105                 1110             
Gly Val  Asn Tyr Tyr Phe Leu  Ser Asn Gly Leu Gln  Leu Arg Asp 
1115                 1120                 1125             
Ala Ile  Leu Lys Asn Glu Asp  Gly Thr Tyr Ala Tyr  Tyr Gly Asn 
1130                 1135                 1140             
Asp Gly  Arg Arg Tyr Glu Asn  Gly Tyr Tyr Gln Phe  Met Ser Gly 
1145                 1150                 1155             
Val Trp  Arg His Phe Asn Asn  Gly Glu Met Ser Val  Gly Leu Thr 
1160                 1165                 1170             
Val Ile  Asp Gly Gln Val Gln  Tyr Phe Asp Glu Met  Gly Tyr Gln 
1175                 1180                 1185             
Ala Lys  Gly Lys Phe Val Thr  Thr Ala Asp Gly Lys  Ile Arg Tyr 
1190                 1195                 1200             
Phe Asp  Lys Gln Ser Gly Asn  Met Tyr Arg Asn Arg  Phe Ile Glu 
1205                 1210                 1215             
Asn Glu  Glu Gly Lys Trp Leu  Tyr Leu Gly Glu Asp  Gly Ala Ala 
1220                 1225                 1230             
Val Thr  Gly Ser Gln Thr Ile  Asn Gly Gln His Leu  Tyr Phe Arg 
1235                 1240                 1245             
Ala Asn  Gly Val Gln Val Lys  Gly Glu Phe Val Thr  Asp His His 
1250                 1255                 1260             
Gly Arg  Ile Ser Tyr Tyr Asp  Gly Asn Ser Gly Asp  Gln Ile Arg 
1265                 1270                 1275             
Asn Arg  Phe Val Arg Asn Ala  Gln Gly Gln Trp Phe  Tyr Phe Asp 
1280                 1285                 1290             
Asn Asn  Gly Tyr Ala Val Thr  Gly Ala Arg Thr Ile  Asn Gly Gln 
1295                 1300                 1305             
Leu Leu  Tyr Phe Arg Ala Asn  Gly Val Gln Val Lys  Gly Glu Phe 
1310                 1315                 1320             
Val Thr  Asp Arg Tyr Gly Arg  Ile Ser Tyr Tyr Asp  Gly Asn Ser 
1325                 1330                 1335             
Gly Asp  Gln Ile Arg Asn Arg  Phe Val Arg Asn Ala  Gln Gly Gln 
1340                 1345                 1350             
Trp Phe  Tyr Phe Asp Asn Asn  Gly Tyr Ala Val Thr  Gly Ala Arg 
1355                 1360                 1365             
Thr Ile  Asn Gly Gln His Leu  Tyr Phe Arg Ala Asn  Gly Val Gln 
1370                 1375                 1380             
Val Lys  Gly Glu Phe Val Thr  Asp Arg His Gly Arg  Ile Ser Tyr 
1385                 1390                 1395             
Tyr Asp  Gly Asn Ser Gly Asp  Gln Ile Arg Asn Arg  Phe Val Arg 
1400                 1405                 1410             
Asn Ala  Gln Gly Gln Trp Phe  Tyr Phe Asp Asn Asn  Gly Tyr Ala 
1415                 1420                 1425             
Val Thr  Gly Ala Arg Thr Ile  Asn Gly Gln His Leu  Tyr Phe Arg 
1430                 1435                 1440             
Ala Asn  Gly Val Gln Val Lys  Gly Glu Phe Val Thr  Asp Arg Tyr 
1445                 1450                 1455             
Gly Arg  Ile Ser Tyr Tyr Asp  Ala Asn Ser Gly Glu  Arg Val Arg 
1460                 1465                 1470             
Ile Asn  
1475 
<210>  35
<211>  1375
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  35
Met Glu Lys Lys Val Arg Phe Lys Leu Arg Lys Val Lys Lys Arg Trp 
1               5                   10                  15      
Val Thr Val Ser Ile Ala Ser Ala Val Val Thr Leu Thr Ser Leu Ser 
20                  25                  30          
Gly Ser Leu Val Lys Ala Asp Ser Thr Asp Asp Arg Gln Gln Ala Val 
35                  40                  45              
Thr Glu Ser Gln Ala Ser Leu Val Thr Thr Ser Glu Ala Ala Lys Glu 
50                  55                  60                  
Thr Leu Thr Ala Thr Asp Thr Ser Thr Ala Thr Ser Ala Thr Ser Gln 
65                  70                  75                  80  
Pro Thr Ala Thr Val Thr Asp Asn Val Ser Thr Thr Asn Gln Ser Thr 
85                  90                  95      
Asn Thr Thr Ala Asn Thr Ala Asn Phe Val Val Lys Pro Thr Thr Thr 
100                 105                 110         
Ser Glu Gln Ala Lys Thr Asp Asn Ser Asp Lys Ile Ile Thr Thr Ser 
115                 120                 125             
Lys Ala Val Asn Arg Leu Thr Ala Thr Gly Lys Phe Val Pro Ala Asn 
130                 135                 140                 
Asn Asn Thr Ala His Pro Lys Thr Val Thr Asp Lys Ile Val Pro Ile 
145                 150                 155                 160 
Lys Pro Lys Ile Gly Lys Leu Lys Gln Pro Ser Ser Leu Ser Gln Asp 
165                 170                 175     
Asp Ile Ala Ala Leu Gly Asn Val Lys Asn Ile Arg Lys Val Asn Gly 
180                 185                 190         
Lys Tyr Tyr Tyr Tyr Lys Glu Asp Gly Thr Leu Gln Lys Asn Tyr Ala 
195                 200                 205             
Leu Asn Ile Asn Gly Lys Thr Phe Phe Phe Asp Glu Thr Gly Ala Leu 
210                 215                 220                 
Ser Asn Asn Thr Leu Pro Ser Lys Lys Gly Asn Ile Thr Asn Asn Asp 
225                 230                 235                 240 
Asn Thr Asn Ser Phe Ala Gln Tyr Asn Gln Val Tyr Ser Thr Asp Val 
245                 250                 255     
Ala Asn Phe Glu His Val Asp His Tyr Leu Thr Ala Glu Ser Trp Tyr 
260                 265                 270         
Arg Pro Lys Tyr Ile Leu Lys Asp Gly Lys Thr Trp Thr Gln Ser Thr 
275                 280                 285             
Glu Lys Asp Phe Arg Pro Leu Leu Met Thr Trp Trp Pro Asp Gln Glu 
290                 295                 300                 
Thr Gln Arg Gln Tyr Val Asn Tyr Met Asn Ala Gln Leu Gly Ile His 
305                 310                 315                 320 
Gln Thr Tyr Asn Thr Ala Thr Ser Pro Leu Gln Leu Asn Leu Ala Ala 
325                 330                 335     
Gln Thr Ile Gln Thr Lys Ile Glu Glu Lys Ile Thr Ala Glu Lys Asn 
340                 345                 350         
Thr Asn Trp Leu Arg Gln Thr Ile Ser Ala Phe Val Lys Thr Gln Ser 
355                 360                 365             
Ala Trp Asn Ser Asp Ser Glu Lys Pro Phe Asp Asp His Leu Gln Lys 
370                 375                 380                 
Gly Ala Leu Leu Tyr Ser Asn Asn Ser Lys Leu Thr Ser Gln Ala Asn 
385                 390                 395                 400 
Ser Asn Tyr Arg Ile Leu Asn Arg Thr Pro Thr Asn Gln Thr Gly Lys 
405                 410                 415     
Lys Asp Pro Arg Tyr Thr Ala Asp Arg Thr Ile Gly Gly Tyr Glu Phe 
420                 425                 430         
Leu Leu Ala Asn Asp Val Asp Asn Ser Asn Pro Val Val Gln Ala Glu 
435                 440                 445             
Gln Leu Asn Trp Leu His Phe Leu Met Asn Phe Gly Asn Ile Tyr Ala 
450                 455                 460                 
Asn Asp Pro Asp Ala Asn Phe Asp Ser Ile Arg Val Asp Ala Val Asp 
465                 470                 475                 480 
Asn Val Asp Ala Asp Leu Leu Gln Ile Ala Gly Asp Tyr Leu Lys Ala 
485                 490                 495     
Ala Lys Gly Ile His Lys Asn Asp Lys Ala Ala Asn Asp His Leu Ser 
500                 505                 510         
Ile Leu Glu Ala Trp Ser Tyr Asn Asp Thr Pro Tyr Leu His Asp Asp 
515                 520                 525             
Gly Asp Asn Met Ile Asn Met Asp Asn Arg Leu Arg Leu Ser Leu Leu 
530                 535                 540                 
Tyr Ser Leu Ala Lys Pro Leu Asn Gln Arg Ser Gly Met Asn Pro Leu 
545                 550                 555                 560 
Ile Thr Asn Ser Leu Val Asn Arg Thr Asp Asp Asn Ala Glu Thr Ala 
565                 570                 575     
Ala Val Pro Ser Tyr Ser Phe Ile Arg Ala His Asp Ser Glu Val Gln 
580                 585                 590         
Asp Leu Ile Arg Asn Ile Ile Arg Thr Glu Ile Asn Pro Asn Val Val 
595                 600                 605             
Gly Tyr Ser Phe Thr Thr Glu Glu Ile Lys Lys Ala Phe Glu Ile Tyr 
610                 615                 620                 
Asn Lys Asp Leu Leu Ala Thr Glu Lys Lys Tyr Thr His Tyr Asn Thr 
625                 630                 635                 640 
Ala Leu Ser Tyr Ala Leu Leu Leu Thr Asn Lys Ser Ser Val Pro Arg 
645                 650                 655     
Val Tyr Tyr Gly Asp Met Phe Thr Asp Asp Gly Gln Tyr Met Ala His 
660                 665                 670         
Lys Thr Ile Asn Tyr Glu Ala Ile Glu Thr Leu Leu Lys Ala Arg Ile 
675                 680                 685             
Lys Tyr Val Ser Gly Gly Gln Ala Met Arg Asn Gln Gln Val Gly Asn 
690                 695                 700                 
Ser Glu Ile Ile Thr Ser Val Arg Tyr Gly Lys Gly Ala Leu Lys Ala 
705                 710                 715                 720 
Thr Asp Thr Gly Asp Arg Thr Thr Arg Thr Ser Gly Val Ala Val Ile 
725                 730                 735     
Glu Gly Asn Asn Pro Ser Leu Arg Leu Lys Ala Ser Asp Arg Val Val 
740                 745                 750         
Val Asn Met Gly Ala Ala His Lys Asn Gln Ala Tyr Arg Pro Leu Leu 
755                 760                 765             
Leu Thr Thr Asp Asn Gly Ile Lys Ala Tyr His Ser Asp Gln Glu Ala 
770                 775                 780                 
Ala Gly Leu Val Arg Tyr Thr Asn Asp Arg Gly Glu Leu Ile Phe Thr 
785                 790                 795                 800 
Ala Ala Asp Ile Lys Gly Tyr Ala Asn Pro Gln Val Ser Gly Tyr Leu 
805                 810                 815     
Gly Val Trp Val Pro Val Gly Ala Ala Ala Asp Gln Asp Val Arg Val 
820                 825                 830         
Ala Ala Ser Thr Ala Pro Ser Thr Asp Gly Lys Ser Val His Gln Asn 
835                 840                 845             
Ala Ala Leu Asp Ser Arg Val Met Phe Glu Gly Phe Ser Asn Phe Gln 
850                 855                 860                 
Ala Phe Ala Thr Lys Lys Glu Glu Tyr Thr Asn Val Val Ile Ala Lys 
865                 870                 875                 880 
Asn Val Asp Lys Phe Ala Glu Trp Gly Val Thr Asp Phe Glu Met Ala 
885                 890                 895     
Pro Gln Tyr Val Ser Ser Thr Asp Gly Ser Phe Leu Asp Ser Val Ile 
900                 905                 910         
Gln Asn Gly Tyr Ala Phe Thr Asp Arg Tyr Asp Leu Gly Ile Ser Lys 
915                 920                 925             
Pro Asn Lys Tyr Gly Thr Ala Asp Asp Leu Val Lys Ala Ile Lys Ala 
930                 935                 940                 
Leu His Ser Lys Gly Ile Lys Val Met Ala Asp Trp Val Pro Asp Gln 
945                 950                 955                 960 
Met Tyr Ala Leu Pro Glu Lys Glu Val Val Thr Ala Thr Arg Val Asp 
965                 970                 975     
Lys Tyr Gly Thr Pro Val Ala Gly Ser Gln Ile Lys Asn Thr Leu Tyr 
980                 985                 990         
Val Val Asp Gly Lys Ser Ser Gly  Lys Asp Gln Gln Ala  Lys Tyr Gly 
995                 1000                 1005             
Gly Ala  Phe Leu Glu Glu Leu  Gln Ala Lys Tyr Pro  Glu Leu Phe 
1010                 1015                 1020             
Ala Arg  Lys Gln Ile Ser Thr  Gly Val Pro Met Asp  Pro Ser Val 
1025                 1030                 1035             
Lys Ile  Lys Gln Trp Ser Ala  Lys Tyr Phe Asn Gly  Thr Asn Ile 
1040                 1045                 1050             
Leu Gly  Arg Gly Ala Gly Tyr  Val Leu Lys Asp Gln  Ala Thr Asn 
1055                 1060                 1065             
Thr Tyr  Phe Ser Leu Val Ser  Asp Asn Thr Phe Leu  Pro Lys Ser 
1070                 1075                 1080             
Leu Val  Asn Pro Asn His Gly  Thr Ser Ser Ser Val  Thr Gly Leu 
1085                 1090                 1095             
Val Phe  Asp Gly Lys Gly Tyr  Val Tyr Tyr Ser Thr  Ser Gly Asn 
1100                 1105                 1110             
Gln Ala  Lys Asn Ala Phe Ile  Ser Leu Gly Asn Asn  Trp Tyr Tyr 
1115                 1120                 1125             
Phe Asp  Asn Asn Gly Tyr Met  Val Thr Gly Ala Gln  Ser Ile Asn 
1130                 1135                 1140             
Gly Ala  Asn Tyr Tyr Phe Leu  Ser Asn Gly Ile Gln  Leu Arg Asn 
1145                 1150                 1155             
Ala Ile  Tyr Asp Asn Gly Asn  Lys Val Leu Ser Tyr  Tyr Gly Asn 
1160                 1165                 1170             
Asp Gly  Arg Arg Tyr Glu Asn  Gly Tyr Tyr Leu Phe  Gly Gln Gln 
1175                 1180                 1185             
Trp Arg  Tyr Phe Gln Asn Gly  Ile Met Ala Val Gly  Leu Thr Arg 
1190                 1195                 1200             
Val His  Gly Ala Val Gln Tyr  Phe Asp Ala Ser Gly  Phe Gln Ala 
1205                 1210                 1215             
Lys Gly  Gln Phe Ile Thr Thr  Ala Asp Gly Lys Leu  Arg Tyr Phe 
1220                 1225                 1230             
Asp Arg  Asp Ser Gly Asn Gln  Ile Ser Asn Arg Phe  Val Arg Asn 
1235                 1240                 1245             
Ser Lys  Gly Glu Trp Phe Leu  Phe Asp His Asn Gly  Val Ala Val 
1250                 1255                 1260             
Thr Gly  Thr Val Thr Phe Asn  Gly Gln Arg Leu Tyr  Phe Lys Pro 
1265                 1270                 1275             
Asn Gly  Val Gln Ala Lys Gly  Glu Phe Ile Arg Asp  Ala Asn Gly 
1280                 1285                 1290             
Tyr Leu  Arg Tyr Tyr Asp Pro  Asn Ser Gly Asn Glu  Val Arg Asn 
1295                 1300                 1305             
Arg Phe  Val Arg Asn Ser Lys  Gly Glu Trp Phe Leu  Phe Asp His 
1310                 1315                 1320             
Asn Gly  Ile Ala Val Thr Gly  Ala Arg Val Val Asn  Gly His Ala 
1325                 1330                 1335             
Ser Ile  Leu Ser Leu Met Val  Phe Arg Leu Arg Glu  Ser Ser Leu 
1340                 1345                 1350             
Gln Ser  Val Lys Val Val Ser  Asn Thr Met Ile Leu  Ile Pro Glu 
1355                 1360                 1365             
Met Lys  Phe Val Ile Val Met  
1370                 1375 
<210>  36
<211>  1430
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  36
Met Glu Thr Lys Arg Arg Tyr Lys Met His Lys Val Lys Lys His Trp 
1               5                   10                  15      
Val Thr Val Ala Val Ala Ser Gly Leu Ile Thr Leu Gly Thr Thr Thr 
20                  25                  30          
Leu Gly Ser Ser Val Ser Ala Glu Thr Glu Gln Gln Thr Ser Asp Lys 
35                  40                  45              
Val Val Thr Gln Lys Ser Glu Asp Asp Lys Ala Ala Ser Glu Ser Ser 
50                  55                  60                  
Gln Thr Asp Ala Pro Lys Thr Lys Gln Ala Gln Thr Glu Gln Thr Gln 
65                  70                  75                  80  
Ala Gln Ser Gln Ala Asn Val Ala Asp Thr Ser Thr Ser Ile Thr Lys 
85                  90                  95      
Glu Thr Pro Ser Gln Asn Ile Thr Thr Gln Ala Asn Ser Asp Asp Lys 
100                 105                 110         
Thr Val Thr Asn Thr Lys Ser Glu Glu Ala Gln Thr Ser Glu Glu Arg 
115                 120                 125             
Thr Lys Gln Ser Glu Glu Ala Gln Thr Thr Ala Ser Ser Gln Ala Leu 
130                 135                 140                 
Thr Gln Ala Lys Ala Glu Leu Thr Lys Gln Arg Gln Thr Ala Ala Gln 
145                 150                 155                 160 
Glu Asn Lys Asn Pro Val Asp Leu Ala Ala Ile Pro Asn Val Lys Gln 
165                 170                 175     
Ile Asp Gly Lys Tyr Tyr Tyr Ile Gly Ser Asp Gly Gln Pro Lys Lys 
180                 185                 190         
Asn Phe Ala Leu Thr Val Asn Asn Lys Val Leu Tyr Phe Asp Lys Asn 
195                 200                 205             
Thr Gly Ala Leu Thr Asp Thr Ser Gln Tyr Gln Phe Lys Gln Gly Leu 
210                 215                 220                 
Thr Lys Leu Asn Asn Asp Tyr Thr Pro His Asn Gln Ile Val Asn Phe 
225                 230                 235                 240 
Glu Asn Thr Ser Leu Glu Thr Ile Asp Asn Tyr Val Thr Ala Asp Ser 
245                 250                 255     
Trp Tyr Arg Pro Lys Asp Ile Leu Lys Asn Gly Lys Thr Trp Thr Ala 
260                 265                 270         
Ser Ser Glu Ser Asp Leu Arg Pro Leu Leu Met Ser Trp Trp Pro Asp 
275                 280                 285             
Lys Gln Thr Gln Ile Ala Tyr Leu Asn Tyr Met Asn Gln Gln Gly Leu 
290                 295                 300                 
Gly Thr Gly Glu Asn Tyr Thr Ala Asp Ser Ser Gln Glu Ser Leu Asn 
305                 310                 315                 320 
Leu Ala Ala Gln Thr Val Gln Val Lys Ile Glu Thr Lys Ile Ser Gln 
325                 330                 335     
Thr Gln Gln Thr Gln Trp Leu Arg Asp Ile Ile Asn Ser Phe Val Lys 
340                 345                 350         
Thr Gln Pro Asn Trp Asn Ser Gln Thr Glu Ser Asp Thr Ser Ala Gly 
355                 360                 365             
Glu Lys Asp His Leu Gln Gly Gly Ala Leu Leu Tyr Ser Asn Ser Asp 
370                 375                 380                 
Lys Thr Ala Tyr Ala Asn Ser Asp Tyr Arg Leu Leu Asn Arg Thr Pro 
385                 390                 395                 400 
Thr Ser Gln Thr Gly Lys Pro Lys Tyr Phe Glu Asp Asn Ser Ser Gly 
405                 410                 415     
Gly Tyr Asp Phe Leu Leu Ala Asn Asp Ile Asp Asn Ser Asn Pro Val 
420                 425                 430         
Val Gln Ala Glu Gln Leu Asn Trp Leu His Tyr Leu Met Asn Tyr Gly 
435                 440                 445             
Ser Ile Val Ala Asn Asp Pro Glu Ala Asn Phe Asp Gly Val Arg Val 
450                 455                 460                 
Asp Ala Val Asp Asn Val Asn Ala Asp Leu Leu Gln Ile Ala Ser Asp 
465                 470                 475                 480 
Tyr Leu Lys Ala His Tyr Gly Val Asp Lys Ser Glu Lys Asn Ala Ile 
485                 490                 495     
Asn His Leu Ser Ile Leu Glu Ala Trp Ser Asp Asn Asp Pro Gln Tyr 
500                 505                 510         
Asn Lys Asp Thr Lys Gly Ala Gln Leu Pro Ile Asp Asn Lys Leu Arg 
515                 520                 525             
Leu Ser Leu Leu Tyr Ala Leu Thr Arg Pro Leu Glu Lys Asp Ala Ser 
530                 535                 540                 
Asn Lys Asn Glu Ile Arg Ser Gly Leu Glu Pro Val Ile Thr Asn Ser 
545                 550                 555                 560 
Leu Asn Asn Arg Ser Ala Glu Gly Lys Asn Ser Glu Arg Met Ala Asn 
565                 570                 575     
Tyr Ile Phe Ile Arg Ala His Asp Ser Glu Val Gln Thr Val Ile Ala 
580                 585                 590         
Lys Ile Ile Lys Ala Gln Ile Asn Pro Lys Thr Asp Gly Leu Thr Phe 
595                 600                 605             
Thr Leu Asp Glu Leu Lys Gln Ala Phe Lys Ile Tyr Asn Glu Asp Met 
610                 615                 620                 
Arg Gln Ala Lys Lys Lys Tyr Thr Gln Ser Asn Ile Pro Thr Ala Tyr 
625                 630                 635                 640 
Ala Leu Met Leu Ser Asn Lys Asp Ser Ile Thr Arg Leu Tyr Tyr Gly 
645                 650                 655     
Asp Met Tyr Ser Asp Asp Gly Gln Tyr Met Ala Thr Lys Ser Pro Tyr 
660                 665                 670         
Tyr Asp Ala Ile Asp Thr Leu Leu Lys Ala Arg Ile Lys Tyr Ala Ala 
675                 680                 685             
Gly Gly Gln Asp Met Lys Ile Thr Tyr Val Glu Gly Asp Lys Ser His 
690                 695                 700                 
Met Asp Trp Asp Tyr Thr Gly Val Leu Thr Ser Val Arg Tyr Gly Thr 
705                 710                 715                 720 
Gly Ala Asn Glu Ala Thr Asp Gln Gly Ser Glu Ala Thr Lys Thr Gln 
725                 730                 735     
Gly Met Ala Val Ile Thr Ser Asn Asn Pro Ser Leu Lys Leu Asn Gln 
740                 745                 750         
Asn Asp Lys Val Ile Val Asn Met Gly Ala Ala His Lys Asn Gln Glu 
755                 760                 765             
Tyr Arg Pro Leu Leu Leu Thr Thr Lys Asp Gly Leu Thr Ser Tyr Thr 
770                 775                 780                 
Ser Asp Ala Ala Ala Lys Ser Leu Tyr Arg Lys Thr Asn Asp Lys Gly 
785                 790                 795                 800 
Glu Leu Val Phe Asp Ala Ser Asp Ile Gln Gly Tyr Leu Asn Pro Gln 
805                 810                 815     
Val Ser Gly Tyr Leu Ala Val Trp Val Pro Val Gly Ala Ser Asp Asn 
820                 825                 830         
Gln Asp Val Arg Val Ala Ala Ser Asn Lys Ala Asn Ala Thr Gly Gln 
835                 840                 845             
Val Tyr Glu Ser Ser Ser Ala Leu Asp Ser Gln Leu Ile Tyr Glu Gly 
850                 855                 860                 
Phe Ser Asn Phe Gln Asp Phe Val Thr Lys Asp Ser Asp Tyr Thr Asn 
865                 870                 875                 880 
Lys Lys Ile Ala Gln Asn Val Gln Leu Phe Lys Ser Trp Gly Val Thr 
885                 890                 895     
Ser Phe Glu Met Ala Pro Gln Tyr Val Ser Ser Glu Asp Gly Ser Phe 
900                 905                 910         
Leu Asp Ser Ile Ile Gln Asn Gly Tyr Ala Phe Glu Asp Arg Tyr Asp 
915                 920                 925             
Leu Ala Met Ser Lys Asn Asn Lys Tyr Gly Ser Gln Gln Asp Met Ile 
930                 935                 940                 
Asn Ala Val Lys Ala Leu His Lys Ser Gly Ile Gln Val Ile Ala Asp 
945                 950                 955                 960 
Trp Val Pro Asp Gln Ile Tyr Asn Leu Pro Gly Lys Glu Val Val Thr 
965                 970                 975     
Ala Thr Arg Val Asn Asp Tyr Gly Glu Tyr Arg Lys Asp Ser Glu Ile 
980                 985                 990         
Lys Asn Thr Leu Tyr Ala Ala Asn  Thr Lys Ser Asn Gly  Lys Asp Tyr 
995                 1000                 1005             
Gln Ala  Lys Tyr Gly Gly Ala  Phe Leu Ser Glu Leu  Ala Ala Lys 
1010                 1015                 1020             
Tyr Pro  Ser Ile Phe Asn Arg  Thr Gln Ile Ser Asn  Gly Lys Lys 
1025                 1030                 1035             
Ile Asp  Pro Ser Glu Lys Ile  Thr Ala Trp Lys Ala  Lys Tyr Phe 
1040                 1045                 1050             
Asn Gly  Thr Asn Ile Leu Gly  Arg Gly Val Gly Tyr  Val Leu Lys 
1055                 1060                 1065             
Asp Asn  Ala Ser Asp Lys Tyr  Phe Glu Leu Lys Gly  Asn Gln Thr 
1070                 1075                 1080             
Tyr Leu  Pro Lys Gln Met Thr  Asn Lys Glu Ala Ser  Thr Gly Phe 
1085                 1090                 1095             
Val Asn  Asp Gly Asn Gly Met  Thr Phe Tyr Ser Thr  Ser Gly Tyr 
1100                 1105                 1110             
Gln Ala  Lys Asn Ser Phe Val  Gln Asp Ala Lys Gly  Asn Trp Tyr 
1115                 1120                 1125             
Tyr Phe  Asp Asn Asn Gly His  Met Val Tyr Gly Leu  Gln Gln Leu 
1130                 1135                 1140             
Asn Gly  Glu Val Gln Tyr Phe  Leu Ser Asn Gly Val  Gln Leu Arg 
1145                 1150                 1155             
Glu Ser  Phe Leu Glu Asn Ala  Asp Gly Ser Lys Asn  Tyr Phe Gly 
1160                 1165                 1170             
His Leu  Gly Asn Arg Tyr Ser  Asn Gly Tyr Tyr Ser  Phe Asp Asn 
1175                 1180                 1185             
Asp Ser  Lys Trp Arg Tyr Phe  Asp Ala Ser Gly Val  Met Ala Val 
1190                 1195                 1200             
Gly Leu  Lys Thr Ile Asn Gly  Asn Thr Gln Tyr Phe  Asp Gln Asp 
1205                 1210                 1215             
Gly Tyr  Gln Val Lys Gly Ala  Trp Ile Thr Gly Ser  Asp Gly Lys 
1220                 1225                 1230             
Lys Arg  Tyr Phe Asp Asp Gly  Ser Gly Asn Met Ala  Val Asn Arg 
1235                 1240                 1245             
Phe Ala  Asn Asp Lys Asn Gly  Asp Trp Tyr Tyr Leu  Asn Ser Asp 
1250                 1255                 1260             
Gly Ile  Ala Leu Val Gly Val  Gln Thr Ile Asn Gly  Lys Thr Tyr 
1265                 1270                 1275             
Tyr Phe  Gly Gln Asp Gly Lys  Gln Ile Lys Gly Lys  Ile Ile Thr 
1280                 1285                 1290             
Asp Asn  Gly Lys Leu Lys Tyr  Phe Leu Ala Asn Ser  Gly Glu Leu 
1295                 1300                 1305             
Ala Arg  Asn Ile Phe Ala Thr  Asp Ser Gln Asn Asn  Trp Tyr Tyr 
1310                 1315                 1320             
Phe Gly  Ser Asp Gly Val Ala  Val Thr Gly Ser Gln  Thr Ile Ala 
1325                 1330                 1335             
Gly Lys  Lys Leu Tyr Phe Ala  Ser Asp Gly Lys Gln  Val Lys Gly 
1340                 1345                 1350             
Ser Phe  Val Thr Tyr Asn Gly  Lys Val His Tyr Tyr  His Ala Asp 
1355                 1360                 1365             
Ser Gly  Glu Leu Gln Val Asn  Arg Phe Glu Ala Asp  Lys Asp Gly 
1370                 1375                 1380             
Asn Trp  Tyr Tyr Leu Asp Ser  Asn Gly Glu Ala Leu  Thr Gly Ser 
1385                 1390                 1395             
Gln Arg  Ile Asn Asp Gln Arg  Val Phe Phe Thr Arg  Glu Gly Lys 
1400                 1405                 1410             
Gln Val  Lys Gly Asp Val Ala  Tyr Asp Glu Arg Arg  Leu Leu Val 
1415                 1420                 1425             
Tyr Arg  
1430 
<210>  37
<211>  1590
<212>  PRT
<213>  Streptococcus sobrinus
<400>  37
Met Glu Lys Asn Val Arg Phe Lys Met His Lys Val Lys Lys Arg Trp 
1               5                   10                  15      
Val Thr Leu Ser Val Ala Ser Ala Thr Met Leu Ala Ser Ala Leu Gly 
20                  25                  30          
Ala Ser Val Ala Ser Ala Asp Thr Asp Thr Ala Ser Asp Asp Ser Asn 
35                  40                  45              
Gln Ala Val Val Thr Gly Asp Gln Thr Thr Asn Asn Gln Ala Thr Asp 
50                  55                  60                  
Gln Thr Ser Ile Ala Ala Thr Ala Thr Ser Glu Gln Ser Ala Ser Thr 
65                  70                  75                  80  
Asp Ala Ala Thr Asp Gln Ala Ser Ala Ala Glu Gln Thr Gln Gly Thr 
85                  90                  95      
Thr Ala Ser Thr Asp Thr Ala Ala Gln Thr Thr Thr Asn Ala Asn Glu 
100                 105                 110         
Ala Lys Trp Val Pro Thr Glu Asn Glu Asn Gln Gly Phe Thr Asp Glu 
115                 120                 125             
Met Leu Ala Glu Ala Lys Asn Val Ala Thr Ala Glu Ser Asp Ser Ile 
130                 135                 140                 
Pro Ser Asp Leu Ala Lys Met Ser Asn Val Lys Gln Val Asp Gly Lys 
145                 150                 155                 160 
Tyr Tyr Tyr Tyr Asp Gln Asp Gly Asn Val Lys Lys Asn Phe Ala Val 
165                 170                 175     
Ser Val Gly Asp Lys Ile Tyr Tyr Phe Asp Glu Thr Gly Ala Tyr Lys 
180                 185                 190         
Asp Thr Ser Lys Val Asp Ala Asp Lys Ser Ser Ser Ala Val Ser Gln 
195                 200                 205             
Asn Ala Thr Ile Phe Ala Ala Asn Asn Arg Ala Tyr Ser Thr Ser Ala 
210                 215                 220                 
Lys Asn Phe Glu Ala Val Asp Asn Tyr Leu Thr Ala Asp Ser Trp Tyr 
225                 230                 235                 240 
Arg Pro Lys Ser Ile Leu Lys Asp Gly Lys Thr Trp Thr Glu Ser Gly 
245                 250                 255     
Lys Asp Asp Phe Arg Pro Leu Leu Met Ala Trp Trp Pro Asp Thr Glu 
260                 265                 270         
Thr Lys Arg Asn Tyr Val Asn Tyr Met Asn Lys Val Val Gly Ile Asp 
275                 280                 285             
Lys Thr Tyr Thr Ala Glu Thr Ser Gln Ala Asp Leu Thr Ala Ala Ala 
290                 295                 300                 
Glu Leu Val Gln Ala Arg Ile Glu Gln Lys Ile Thr Ser Glu Asn Asn 
305                 310                 315                 320 
Thr Lys Trp Leu Arg Glu Ala Ile Ser Ala Phe Val Lys Thr Gln Pro 
325                 330                 335     
Gln Trp Asn Gly Glu Ser Glu Lys Pro Tyr Asp Asp His Leu Gln Asn 
340                 345                 350         
Gly Ala Leu Leu Phe Asp Asn Gln Thr Asp Leu Thr Pro Asp Thr Gln 
355                 360                 365             
Ser Asn Tyr Arg Leu Leu Asn Arg Thr Pro Thr Asn Gln Thr Gly Ser 
370                 375                 380                 
Leu Asp Ser Arg Phe Thr Tyr Asn Pro Asn Asp Pro Leu Gly Gly Tyr 
385                 390                 395                 400 
Asp Phe Leu Leu Ala Asn Asp Val Asp Asn Ser Asn Pro Val Val Gln 
405                 410                 415     
Ala Glu Gln Leu Asn Trp Leu His Tyr Leu Leu Asn Phe Gly Ser Ile 
420                 425                 430         
Tyr Ala Asn Asp Ala Asp Ala Asn Phe Asp Ser Ile Arg Val Asp Ala 
435                 440                 445             
Val Asp Asn Val Asp Ala Asp Leu Leu Gln Ile Ser Ser Asp Tyr Leu 
450                 455                 460                 
Lys Ala Ala Tyr Gly Ile Asp Lys Asn Asn Lys Asn Ala Asn Asn His 
465                 470                 475                 480 
Val Ser Ile Val Glu Ala Trp Ser Asp Asn Asp Thr Pro Tyr Leu His 
485                 490                 495     
Asp Asp Gly Asp Asn Leu Met Asn Met Asp Asn Lys Phe Arg Leu Ser 
500                 505                 510         
Met Leu Trp Ser Leu Ala Lys Pro Leu Asp Lys Arg Ser Gly Leu Asn 
515                 520                 525             
Pro Leu Ile His Asn Ser Leu Val Asp Arg Glu Val Asp Asp Arg Glu 
530                 535                 540                 
Val Glu Thr Val Pro Ser Tyr Ser Phe Ala Arg Ala His Asp Ser Glu 
545                 550                 555                 560 
Val Gln Asp Ile Ile Arg Asp Ile Ile Lys Ala Glu Ile Asn Pro Asn 
565                 570                 575     
Ser Phe Gly Tyr Ser Phe Thr Gln Glu Glu Ile Glu Gln Ala Phe Lys 
580                 585                 590         
Ile Tyr Asn Glu Asp Leu Lys Lys Thr Asp Lys Lys Tyr Thr His Tyr 
595                 600                 605             
Asn Val Pro Leu Ser Tyr Thr Leu Leu Leu Thr Asn Lys Gly Ser Ile 
610                 615                 620                 
Pro Arg Val Tyr Tyr Gly Asp Met Phe Thr Asp Asp Gly Gln Tyr Met 
625                 630                 635                 640 
Ala Asn Lys Thr Val Asn Tyr Asp Ala Ile Glu Ser Leu Leu Lys Ala 
645                 650                 655     
Arg Met Lys Tyr Val Ser Gly Gly Gln Ala Met Gln Asn Tyr Gln Ile 
660                 665                 670         
Gly Asn Gly Glu Ile Leu Thr Ser Val Arg Tyr Gly Lys Gly Ala Leu 
675                 680                 685             
Lys Gln Ser Asp Lys Gly Asp Ala Thr Thr Arg Thr Ser Gly Val Gly 
690                 695                 700                 
Val Val Met Gly Asn Gln Pro Asn Phe Ser Leu Asp Gly Lys Val Val 
705                 710                 715                 720 
Ala Leu Asn Met Gly Ala Ala His Ala Asn Gln Glu Tyr Arg Ala Leu 
725                 730                 735     
Met Val Ser Thr Lys Asp Gly Val Ala Thr Tyr Ala Thr Asp Ala Asp 
740                 745                 750         
Ala Ser Lys Ala Gly Leu Val Lys Arg Thr Asp Glu Asn Gly Tyr Leu 
755                 760                 765             
Tyr Phe Leu Asn Asp Asp Leu Lys Gly Val Ala Asn Pro Gln Val Ser 
770                 775                 780                 
Gly Phe Leu Gln Val Trp Val Pro Val Gly Ala Ala Asp Asp Gln Asp 
785                 790                 795                 800 
Ile Arg Val Ala Ala Ser Asp Thr Ala Ser Thr Asp Gly Lys Ser Leu 
805                 810                 815     
His Gln Asp Ala Ala Met Asp Ser Arg Val Met Phe Glu Gly Phe Ser 
820                 825                 830         
Asn Phe Gln Ser Phe Ala Thr Lys Glu Glu Glu Tyr Thr Asn Val Val 
835                 840                 845             
Ile Ala Asn Asn Val Asp Lys Phe Val Ser Trp Gly Ile Thr Asp Phe 
850                 855                 860                 
Glu Met Ala Pro Gln Tyr Val Ser Ser Thr Asp Gly Gln Phe Leu Asp 
865                 870                 875                 880 
Ser Val Ile Gln Asn Gly Tyr Ala Phe Thr Asp Arg Tyr Asp Leu Gly 
885                 890                 895     
Met Ser Lys Ala Asn Lys Tyr Gly Thr Ala Asp Gln Leu Val Lys Ala 
900                 905                 910         
Ile Lys Ala Leu His Ala Lys Gly Leu Lys Val Met Ala Asp Trp Val 
915                 920                 925             
Pro Asp Gln Met Tyr Thr Phe Pro Lys Gln Glu Val Val Thr Val Thr 
930                 935                 940                 
Arg Thr Asp Lys Phe Gly Lys Pro Ile Ala Gly Ser Gln Ile Asn His 
945                 950                 955                 960 
Ser Leu Tyr Val Thr Asp Thr Lys Ser Ser Gly Asp Asp Tyr Gln Ala 
965                 970                 975     
Lys Tyr Gly Gly Ala Phe Leu Asp Glu Leu Lys Glu Lys Tyr Pro Glu 
980                 985                 990         
Leu Phe Thr Lys Lys Gln Ile Ser  Thr Gly Gln Ala Ile  Asp Pro Ser 
995                 1000                 1005             
Val Lys  Ile Lys Gln Trp Ser  Ala Lys Tyr Phe Asn  Gly Ser Asn 
1010                 1015                 1020             
Ile Leu  Gly Arg Gly Ala Asp  Tyr Val Leu Ser Asp  Gln Val Ser 
1025                 1030                 1035             
Asn Lys  Tyr Phe Asn Val Ala  Ser Asp Thr Leu Phe  Leu Pro Ser 
1040                 1045                 1050             
Ser Leu  Leu Gly Lys Val Val  Glu Ser Gly Ile Arg  Tyr Asp Gly 
1055                 1060                 1065             
Lys Gly  Tyr Ile Tyr Asn Ser  Ser Ala Thr Gly Asp  Gln Val Lys 
1070                 1075                 1080             
Ala Ser  Phe Ile Thr Glu Ala  Gly Asn Leu Tyr Tyr  Phe Gly Lys 
1085                 1090                 1095             
Asp Gly  Tyr Met Val Thr Gly  Ala Gln Thr Ile Asn  Gly Ala Asn 
1100                 1105                 1110             
Tyr Phe  Phe Leu Glu Asn Gly  Thr Ala Leu Arg Asn  Thr Ile Tyr 
1115                 1120                 1125             
Thr Asp  Ala Gln Gly Asn Ser  His Tyr Tyr Ala Asn  Asp Gly Lys 
1130                 1135                 1140             
Arg Tyr  Glu Asn Gly Tyr Gln  Gln Phe Gly Asn Asp  Trp Arg Tyr 
1145                 1150                 1155             
Phe Lys  Asp Gly Asn Met Ala  Val Gly Leu Thr Thr  Val Asp Gly 
1160                 1165                 1170             
Asn Val  Gln Tyr Phe Asp Lys  Asp Gly Val Gln Ala  Lys Asp Lys 
1175                 1180                 1185             
Ile Ile  Val Thr Arg Asp Gly  Lys Val Arg Tyr Phe  Asp Gln His 
1190                 1195                 1200             
Asn Gly  Asn Ala Ala Thr Asn  Thr Phe Ile Ala Asp  Lys Thr Gly 
1205                 1210                 1215             
His Trp  Tyr Tyr Leu Gly Lys  Asp Gly Val Ala Val  Thr Gly Ala 
1220                 1225                 1230             
Gln Thr  Val Gly Lys Gln Lys  Leu Tyr Phe Glu Ala  Asn Gly Gln 
1235                 1240                 1245             
Gln Val  Lys Gly Asp Phe Val  Thr Ser Asp Glu Gly  Lys Leu Tyr 
1250                 1255                 1260             
Phe Tyr  Asp Val Asp Ser Gly  Asp Met Trp Thr Asp  Thr Phe Ile 
1265                 1270                 1275             
Glu Asp  Lys Ala Gly Asn Trp  Phe Tyr Leu Gly Lys  Asp Gly Ala 
1280                 1285                 1290             
Ala Val  Thr Gly Ala Gln Thr  Ile Arg Gly Gln Lys  Leu Tyr Phe 
1295                 1300                 1305             
Lys Ala  Asn Gly Gln Gln Val  Lys Gly Asp Ile Val  Lys Gly Thr 
1310                 1315                 1320             
Asp Gly  Lys Ile Arg Tyr Tyr  Asp Ala Lys Ser Gly  Glu Gln Val 
1325                 1330                 1335             
Phe Asn  Lys Thr Val Lys Ala  Ala Asp Gly Lys Thr  Tyr Val Ile 
1340                 1345                 1350             
Gly Asn  Asp Gly Val Ala Val  Asp Pro Ser Val Val  Lys Gly Gln 
1355                 1360                 1365             
Thr Phe  Lys Asp Ala Ser Gly  Ala Leu Arg Phe Tyr  Asn Leu Lys 
1370                 1375                 1380             
Gly Gln  Leu Val Thr Gly Ser  Gly Trp Tyr Glu Thr  Ala Asn His 
1385                 1390                 1395             
Asp Trp  Val Tyr Ile Gln Ser  Gly Lys Ala Leu Thr  Gly Glu Gln 
1400                 1405                 1410             
Thr Ile  Asn Gly Gln His Leu  Tyr Phe Lys Glu Asp  Gly His Gln 
1415                 1420                 1425             
Val Lys  Gly Gln Leu Val Thr  Gly Thr Asp Gly Lys  Val Arg Tyr 
1430                 1435                 1440             
Tyr Asp  Ala Asn Ser Gly Asp  Gln Ala Phe Asn Lys  Ser Val Thr 
1445                 1450                 1455             
Val Asn  Gly Lys Thr Tyr Tyr  Phe Gly Asn Asp Gly  Thr Ala Gln 
1460                 1465                 1470             
Thr Ala  Gly Asn Pro Lys Gly  Gln Thr Phe Lys Asp  Gly Ser Asp 
1475                 1480                 1485             
Ile Arg  Phe Tyr Ser Met Glu  Gly Gln Leu Val Thr  Gly Ser Gly 
1490                 1495                 1500             
Trp Tyr  Glu Asn Ala Gln Gly  Gln Trp Leu Tyr Val  Lys Asn Gly 
1505                 1510                 1515             
Lys Val  Leu Thr Gly Leu Gln  Thr Val Gly Ser Gln  Arg Val Tyr 
1520                 1525                 1530             
Phe Asp  Glu Asn Gly Ile Gln  Ala Lys Gly Lys Ala  Val Arg Thr 
1535                 1540                 1545             
Ser Asp  Gly Lys Ile Arg Tyr  Phe Asp Glu Asn Ser  Gly Ser Met 
1550                 1555                 1560             
Ile Thr  Asn Gln Trp Lys Phe  Val Tyr Gly Gln Tyr  Tyr Tyr Phe 
1565                 1570                 1575             
Gly Asn  Asp Gly Ala Arg Ile  Tyr Arg Gly Trp Asn  
1580                 1585                 1590 
<210>  38
<211>  1554
<212>  PRT
<213>  Streptococcus sobrinus
<400>  38
Met Glu Lys Lys Leu His Tyr Lys Leu His Lys Val Lys Lys His Trp 
1               5                   10                  15      
Val Thr Ile Ala Val Ala Ser Ile Gly Leu Val Ser Leu Val Gly Ala 
20                  25                  30          
Gly Thr Val Ser Ala Glu Asp Lys Val Ala Asn Asp Thr Thr Ala Gln 
35                  40                  45              
Ala Thr Val Gly Val Asp Thr Gly Gln Asp Gln Ala Thr Thr Asn Asp 
50                  55                  60                  
Ala Asn Thr Asn Thr Thr Asp Thr Asp Thr Ala Asp Gln Ser Ala Asn 
65                  70                  75                  80  
Thr Asn Gln Asp Gln Ala Gly Ser Asp Gln Ser Asn Asn Gln Asp Gln 
85                  90                  95      
Ala Lys Gln Asp Thr Ala Asn Thr Asp Arg Asn Gln Ala Asp Asn Ser 
100                 105                 110         
Gln Thr Asp Asn Asn Gln Ala Thr Asp Gln Ala Thr Ser Pro Ala Thr 
115                 120                 125             
Asp Gly Thr Ser Val Gln Arg Arg Asp Ala Ala Asn Val Ala Thr Ala 
130                 135                 140                 
Ala Asp Gln Glu Gly Gln Thr Ala Pro Ser Glu Gln Glu Lys Ser Ala 
145                 150                 155                 160 
Ala Leu Ser Leu Asp Asn Val Lys Leu Ile Asp Gly Lys Tyr Tyr Tyr 
165                 170                 175     
Val Gln Ala Asp Gly Ser Tyr Lys Lys Asn Phe Ala Ile Thr Val Asn 
180                 185                 190         
Gly Gln Met Leu Tyr Phe Asp Ser Asp Thr Gly Ala Leu Ser Ser Thr 
195                 200                 205             
Ser Thr Tyr Ser Phe Ser Gln Gly Thr Thr Asn Leu Val Asp Asp Phe 
210                 215                 220                 
Ser Ser His Asn Lys Ala Tyr Asp Ser Thr Ala Lys Ser Phe Glu Leu 
225                 230                 235                 240 
Val Asn Gly Tyr Leu Thr Ala Asn Ser Trp Tyr Arg Pro Ala Gly Ile 
245                 250                 255     
Leu Arg Asn Gly Gln Thr Trp Glu Ala Ser Asn Glu Asn Asp Leu Arg 
260                 265                 270         
Pro Val Leu Met Ser Trp Trp Pro Asp Lys Asp Thr Gln Val Ala Tyr 
275                 280                 285             
Val Asn Tyr Met Asn Lys Tyr Leu Ser Ala Asn Glu Thr Glu Val Thr 
290                 295                 300                 
Asn Glu Thr Ser Gln Val Asp Leu Asn Lys Glu Ala Gln Ser Ile Gln 
305                 310                 315                 320 
Thr Lys Ile Glu Gln Lys Ile Thr Ser Asp Asn Ser Thr Gln Trp Leu 
325                 330                 335     
Arg Thr Ala Met Glu Ala Phe Val Ala Ala Gln Pro Lys Trp Asn Met 
340                 345                 350         
Ser Thr Glu Asn Phe Asn Lys Gly Asp His Leu Gln Gly Gly Ala Leu 
355                 360                 365             
Leu Tyr Thr Asn Ser Asp Leu Thr Pro Trp Ala Asn Ser Asp Tyr Arg 
370                 375                 380                 
Leu Leu Asn Arg Thr Pro Thr Gln Gln Asp Gly Thr Lys Lys Tyr Phe 
385                 390                 395                 400 
Thr Glu Gly Gly Glu Gly Gly Tyr Glu Phe Leu Leu Ser Asn Asp Val 
405                 410                 415     
Asp Asn Ser Asn Pro Val Val Gln Ala Glu Gln Leu Asn Gln Leu His 
420                 425                 430         
Tyr Leu Met Asn Trp Gly Asp Ile Val Met Gly Asp Lys Asp Ala Asn 
435                 440                 445             
Phe Asp Gly Val Arg Val Asp Ala Val Asp Asn Val Asn Ala Asp Leu 
450                 455                 460                 
Leu Gln Val Tyr Ser Asn Tyr Phe Lys Asp Asn Tyr Lys Val Thr Asp 
465                 470                 475                 480 
Ser Glu Ala Asn Ala Leu Ala His Ile Ser Ile Leu Glu Ala Trp Ser 
485                 490                 495     
Leu Asn Asp Asn Gln Tyr Asn Glu Asp Thr Asn Gly Thr Ala Leu Ser 
500                 505                 510         
Ile Asp Asn Ser Ser Arg Leu Thr Ser Leu Ala Val Leu Thr Lys Gln 
515                 520                 525             
Pro Gly Gln Arg Ile Asp Leu Ser Asn Leu Ile Ser Glu Ser Val Asn 
530                 535                 540                 
Lys Glu Arg Ala Asn Asp Thr Ala Tyr Gly Asp Thr Ile Pro Thr Tyr 
545                 550                 555                 560 
Ser Phe Val Arg Ala His Asp Ser Glu Val Gln Thr Val Ile Ala Lys 
565                 570                 575     
Ile Val Lys Glu Lys Ile Asp Thr Asn Ser Asp Gly Tyr Thr Phe Thr 
580                 585                 590         
Leu Asp Gln Leu Lys Asp Ala Phe Lys Ile Tyr Asn Glu Asp Met Ala 
595                 600                 605             
Lys Val Asn Lys Thr Tyr Thr His Tyr Asn Ile Pro Ala Ala Tyr Ala 
610                 615                 620                 
Leu Leu Leu Ser Asn Met Glu Ser Val Pro Arg Val Tyr Tyr Gly Asp 
625                 630                 635                 640 
Leu Tyr Thr Asp Asp Gly Gln Tyr Met Ala Lys Lys Ser Pro Tyr Tyr 
645                 650                 655     
Asp Ala Ile Ala Thr Met Leu Gln Gly Arg Ile Ala Tyr Val Ser Gly 
660                 665                 670         
Gly Gln Ser Glu Glu Val His Lys Val Asn Gly Asn Asn Gln Ile Leu 
675                 680                 685             
Ser Ser Val Arg Tyr Gly Gln Asp Leu Met Ser Ala Asp Asp Thr Gln 
690                 695                 700                 
Gly Thr Asp Leu Ser Arg Thr Ser Gly Leu Val Thr Leu Val Ser Asn 
705                 710                 715                 720 
Asp Pro Asn Leu Asp Leu Gly Gly Asp Ser Leu Thr Val Asn Met Gly 
725                 730                 735     
Arg Ala His Ala Asn Gln Ala Tyr Arg Pro Leu Ile Leu Gly Thr Lys 
740                 745                 750         
Asp Gly Val Gln Ser Tyr Leu Lys Asp Ser Asp Thr Asn Ile Val Lys 
755                 760                 765             
Tyr Thr Asp Ala Asn Gly Asn Leu Thr Phe Thr Ala Asp Asp Ile Lys 
770                 775                 780                 
Gly Tyr Ser Thr Val Asp Met Ser Gly Tyr Leu Ala Val Trp Val Pro 
785                 790                 795                 800 
Val Gly Ala Lys Asp Gly Gln Asp Val Arg Val Ala Ala Asp Thr Asn 
805                 810                 815     
Gln Lys Ala Asp Gly Lys Ser Leu Lys Thr Ser Ala Ala Leu Asp Ser 
820                 825                 830         
Gln Val Ile Tyr Glu Gly Phe Ser Asn Phe Gln Asp Phe Ala Asn Asn 
835                 840                 845             
Asp Ala Asp Tyr Thr Asn Lys Lys Ile Ala Glu Asn Ala Asp Phe Phe 
850                 855                 860                 
Lys Lys Leu Gly Ile Thr Ser Phe Glu Met Ala Pro Gln Tyr Val Ser 
865                 870                 875                 880 
Ala Thr Asp Gly Ser Phe Leu Asp Ser Ile Ile Gln Asn Gly Tyr Ala 
885                 890                 895     
Phe Ser Asp Arg Tyr Asp Leu Ala Met Ser Lys Asn Asn Lys Tyr Gly 
900                 905                 910         
Ser Lys Asp Asp Leu Ala Asn Ala Leu Lys Ala Leu His Ala Asn Gly 
915                 920                 925             
Ile Gln Ala Ile Ala Asp Trp Val Pro Asp Gln Ile Tyr Gln Leu Pro 
930                 935                 940                 
Gly Glu Glu Val Val Thr Ala Lys Arg Thr Asn Ser Tyr Gly Asn Pro 
945                 950                 955                 960 
Thr Phe Asp Ala Tyr Ile Asn Asn Ala Leu Tyr Ala Thr Asn Thr Lys 
965                 970                 975     
Ser Ser Gly Ser Asp Tyr Gln Ala Gln Tyr Gly Gly Ala Phe Leu Asp 
980                 985                 990         
Glu Leu Lys Ala Lys Tyr Pro Asp  Met Phe Thr Val Asn  Met Ile Ser 
995                 1000                 1005             
Thr Gly  Lys Pro Ile Asp Pro  Ser Thr Lys Ile Lys  Gln Trp Glu 
1010                 1015                 1020             
Ala Lys  Tyr Phe Asn Gly Thr  Asn Val Leu Gly Lys  Gly Ala Gly 
1025                 1030                 1035             
Tyr Val  Leu Ser Asp Asp Ala  Thr Gly Lys Tyr Phe  Thr Val Asn 
1040                 1045                 1050             
Glu Asn  Gly Asp Phe Leu Pro  Ala Ser Phe Thr Gly  Asp Gln Asn 
1055                 1060                 1065             
Ala Lys  Thr Gly Phe Tyr Tyr  Asp Gly Thr Gly Met  Ala Tyr Tyr 
1070                 1075                 1080             
Ser Thr  Ser Gly Asn Lys Ala  Val Asn Ser Phe Ile  Tyr Glu Gly 
1085                 1090                 1095             
Gly His  Tyr Tyr Tyr Phe Asp  Lys Asp Gly His Met  Val Thr Gly 
1100                 1105                 1110             
Ser Tyr  Lys Ala Glu Asp Gly  Asn Asp Tyr Tyr Phe  Leu Pro Asn 
1115                 1120                 1125             
Gly Ile  Gln Met Arg Asp Ala  Ile Tyr Gln Asp Ala  Gln Gly Asn 
1130                 1135                 1140             
Ser Tyr  Tyr Tyr Gly Arg Thr  Gly Ile Leu Tyr Lys  Gly Asp Asn 
1145                 1150                 1155             
Trp Tyr  Pro Phe Val Asp Pro  Asn Asn Ala Asn Lys  Thr Val Phe 
1160                 1165                 1170             
Arg Tyr  Phe Asp Ala Asn Asn  Val Met Ala Ile Gly  Tyr Arg Asn 
1175                 1180                 1185             
Met Tyr  Gly Gln Thr Tyr Tyr  Phe Asp Glu Asn Gly  Phe Gln Ala 
1190                 1195                 1200             
Lys Gly  Gln Leu Leu Thr Asp  Asp Lys Gly Thr His  Tyr Phe Asp 
1205                 1210                 1215             
Glu Asp  Asn Gly Ala Met Ala  Lys Asn Lys Phe Val  Asn Val Gly 
1220                 1225                 1230             
Asp Asp  Trp Tyr Tyr Met Asp  Gly Asn Gly Asn Ala  Val Lys Gly 
1235                 1240                 1245             
Gln Tyr  Pro Val Asn Asn Gln  Ile Leu Tyr Phe Asn  Pro Glu Thr 
1250                 1255                 1260             
Gly Val  Gln Val Lys Gly Gln  Phe Ile Thr Asp Ala  Gln Gly Arg 
1265                 1270                 1275             
Thr Ser  Tyr Tyr Asp Ala Asn  Ser Gly Ala Leu Lys  Ser Ser Gly 
1280                 1285                 1290             
Phe Phe  Thr Pro Asn Gly Ser  Asp Trp Tyr Tyr Ala  Glu Asn Gly 
1295                 1300                 1305             
Tyr Val  Tyr Lys Gly Phe Lys  Gln Val Ala Glu Asn  Gln Asp Gln 
1310                 1315                 1320             
Trp Tyr  Tyr Phe Asp Gln Thr  Thr Gly Lys Gln Ala  Lys Gly Ala 
1325                 1330                 1335             
Ala Lys  Val Asp Gly Arg Asp  Leu Tyr Phe Asn Pro  Asp Ser Gly 
1340                 1345                 1350             
Val Gln  Val Lys Gly Asp Phe  Ala Thr Asp Glu Ser  Gly Asn Thr 
1355                 1360                 1365             
Ser Phe  Tyr His Gly Asp Asn  Gly Asp Lys Val Val  Gly Gly Phe 
1370                 1375                 1380             
Phe Thr  Thr Gly Asn Asn Ala  Trp Tyr Tyr Ala Asp  Asn Asn Gly 
1385                 1390                 1395             
Asn Leu  Val Lys Gly Phe Gln  Glu Ile Asp Gly Lys  Trp Tyr His 
1400                 1405                 1410             
Phe Asp  Glu Val Thr Gly Gln  Gln Ala Lys Gly Ala  Ala Leu Val 
1415                 1420                 1425             
Asn Gly  Gln Gln Leu Tyr Phe  Asp Val Asp Ser Gly  Ile Gln Val 
1430                 1435                 1440             
Lys Gly  Asp Phe Val Thr Asp  Gly Gln Gly Asn Thr  Ser Tyr Tyr 
1445                 1450                 1455             
Asp Val  Asn Ser Gly Asp Lys  Lys Val Asn Gly Phe  Phe Thr Thr 
1460                 1465                 1470             
Gly Asp  Asn Ala Trp Tyr Tyr  Ala Asp Gly Gln Gly  Asn Leu Ala 
1475                 1480                 1485             
Lys Gly  Arg Lys Ser Ile Asp  Asn Gln Asp Leu Tyr  Phe Asp Pro 
1490                 1495                 1500             
Ala Thr  Gly Lys Gln Val Lys  Gly Gln Leu Val Ser  Ile Asp Gly 
1505                 1510                 1515             
Arg Asn  Tyr Tyr Phe Asp Ser  Gly Ser Gly Asn Met  Ala Lys Asn 
1520                 1525                 1530             
Arg Phe  Val Arg Ile Gly Asp  Gln Trp Ile Tyr Phe  Gly Asn Asp 
1535                 1540                 1545             
Gly Ala  Ala Thr Asn Leu 
1550                 
<210>  39
<211>  1365
<212>  PRT
<213>  Streptococcus downei
<400>  39
Met Glu Lys Asn Leu Arg Tyr Lys Leu His Lys Val Lys Lys Gln Trp 
1               5                   10                  15      
Val Ala Ile Gly Val Thr Thr Val Thr Leu Ser Phe Leu Ala Gly Gly 
20                  25                  30          
Gln Val Val Ala Ala Asp Thr Asn Asn Asn Asp Gly Thr Ser Val Gln 
35                  40                  45              
Val Asn Lys Met Val Pro Ser Asp Pro Lys Phe Asp Ala Gln Ala Gln 
50                  55                  60                  
Asn Gly Gln Leu Ala Gln Ala Met Phe Lys Ala Ala Asn Gln Ala Asp 
65                  70                  75                  80  
Gln Thr Ala Thr Ser Gln Val Ser Pro Ala Thr Asp Gly Arg Val Asp 
85                  90                  95      
Asn Gln Val Thr Pro Ala Ala Asn Gln Pro Ala Ala Asn Val Ala Asn 
100                 105                 110         
Gln Asp Val Ala Asn Pro Ala Thr Asp Ala Gly Ala Leu Asn Arg Gln 
115                 120                 125             
Ser Ala Ala Asp Thr Ser Thr Asp Gly Lys Ala Val Pro Gln Thr Ser 
130                 135                 140                 
Asp Gln Pro Gly His Leu Glu Thr Val Asp Gly Lys Thr Tyr Tyr Val 
145                 150                 155                 160 
Asp Ala Asn Gly Gln Arg Leu Lys Asn Tyr Ser Met Val Ile Asp Gly 
165                 170                 175     
Lys Thr Tyr Tyr Phe Asp Gly Gln Thr Gly Glu Ala Gln Thr Asp Leu 
180                 185                 190         
Pro Lys Thr Gly Gln Ala Asn Gln Asp Asn Val Pro Asp Ser Tyr Gln 
195                 200                 205             
Ala Asn Asn Gln Ala Tyr Ser Asn Glu Ala Ser Ser Phe Glu Thr Val 
210                 215                 220                 
Asp Asn Tyr Leu Thr Ala Asp Ser Trp Tyr Arg Pro Arg Lys Ile Leu 
225                 230                 235                 240 
Lys Asn Gly Gln Ser Trp Gln Ala Ser Ser Glu Gly Asp Leu Arg Pro 
245                 250                 255     
Ile Leu Met Thr Trp Trp Pro Asp Ala Ala Thr Lys Ala Ala Tyr Ala 
260                 265                 270         
Asn Phe Trp Ala Lys Glu Gly Leu Ile Ser Gly Ser Tyr Arg Gln Asn 
275                 280                 285             
Ser Ala Asn Leu Asp Ala Ala Thr Gln Asn Ile Gln Ser Ala Ile Glu 
290                 295                 300                 
Lys Lys Ile Ala Ser Glu Gly Asn Thr Asn Trp Leu Arg Asp Lys Met 
305                 310                 315                 320 
Ser Gln Phe Val Lys Ser Gln Asn Gln Trp Ser Ile Ala Ser Glu Asn 
325                 330                 335     
Glu Thr Val Tyr Pro Asn Gln Asp His Met Gln Gly Gly Ala Leu Leu 
340                 345                 350         
Phe Ser Asn Ser Lys Asp Thr Glu His Ala Asn Ser Asp Trp Arg Leu 
355                 360                 365             
Leu Asn Arg Asn Pro Thr Phe Gln Thr Gly Lys Gln Lys Tyr Phe Thr 
370                 375                 380                 
Thr Asn Tyr Ala Gly Tyr Glu Leu Leu Leu Ala Asn Asp Val Asp Asn 
385                 390                 395                 400 
Ser Asn Pro Val Val Gln Ala Glu Gln Leu Asn His Leu His Tyr Leu 
405                 410                 415     
Met Asn Trp Gly Asp Ile Val Met Gly Asp Lys Asp Ala Asn Phe Asp 
420                 425                 430         
Gly Val Arg Val Asp Ala Val Asp Asn Val Asn Ala Asp Leu Leu Gln 
435                 440                 445             
Ile Gln Arg Asp Tyr Tyr Lys Ala Lys Tyr Gly Thr Asp Gln Asn Glu 
450                 455                 460                 
Lys Asn Ala Ile Asp His Leu Ser Ile Leu Glu Ala Trp Ser Gly Asn 
465                 470                 475                 480 
Asp Asn Asp Tyr Val Lys Asp Gln Asn Asn Phe Ser Leu Ser Ile Asp 
485                 490                 495     
Asn Asp Gln Arg Ser Gly Met Leu Lys Ala Phe Gly Tyr Ala Ser Ala 
500                 505                 510         
Tyr Arg Gly Asn Leu Ser Asn Leu Ala Thr Ala Gly Leu Lys Asn Arg 
515                 520                 525             
Ser Ala Asn Pro Asp Ser Asp Pro Val Pro Asn Tyr Val Phe Ile Arg 
530                 535                 540                 
Ala His Asp Ser Glu Val Gln Thr Arg Ile Ala Lys Ile Ile Arg Glu 
545                 550                 555                 560 
Lys Leu Gly Lys Thr Asn Ala Asp Gly Leu Thr Asn Leu Thr Leu Asp 
565                 570                 575     
Asp Leu Asn Lys Ala Phe Asp Ile Tyr Asn Gln Asp Met Asn Ala Thr 
580                 585                 590         
Asp Lys Val Tyr Tyr Pro Asn Asn Leu Pro Met Ala Tyr Ala Trp Met 
595                 600                 605             
Leu Gln Asn Lys Asp Thr Val Thr Arg Val Tyr Tyr Gly Asp Met Tyr 
610                 615                 620                 
Thr Asp Asn Gly Gln Tyr Met Ala Thr Lys Thr Pro Phe Tyr Asn Ala 
625                 630                 635                 640 
Ile Glu Thr Leu Leu Lys Gly Arg Ile Lys Tyr Val Ala Gly Gly Gln 
645                 650                 655     
Ala Val Ser Tyr Lys Gln Asp Trp Ser Ser Gly Ile Leu Thr Ser Val 
660                 665                 670         
Arg Tyr Gly Lys Gly Ala Asn Ser Ala Ser Asp Ala Gly Asn Thr Glu 
675                 680                 685             
Thr Arg Asn Ser Gly Met Ala Leu Leu Ile Asn Asn Arg Pro Asn Phe 
690                 695                 700                 
Arg Ala Tyr Arg Asn Leu Thr Leu Asn Met Gly Ala Ala His Lys Ser 
705                 710                 715                 720 
Gln Ala Tyr Arg Pro Leu Leu Leu Ser Thr Lys Asp Gly Ile Ala Thr 
725                 730                 735     
Tyr Leu Asn Asp Ser Asp Val Asp Ser Arg Gln Tyr Lys Tyr Thr Asp 
740                 745                 750         
Ser Gln Gly Asn Leu Ser Phe Ser Ala Ser Glu Leu Gln Ser Val Ala 
755                 760                 765             
Asn Ala Gln Val Ser Gly Met Ile Gln Val Trp Val Pro Val Gly Ala 
770                 775                 780                 
Ala Asp Asn Gln Asp Val Arg Thr Ser Pro Ser Thr Gln Ala Thr Lys 
785                 790                 795                 800 
Asp Gly Asn Ile Tyr His Gln Ser Asp Ala Leu Asp Ser Gln Val Ile 
805                 810                 815     
Tyr Glu Gly Phe Ser Asn Phe Gln Ala Phe Ala Gln Ser Pro Asp Gln 
820                 825                 830         
Tyr Thr Asn Ala Val Ile Ala Lys Asn Gly Asp Leu Phe Lys Ser Trp 
835                 840                 845             
Gly Ile Thr Gln Phe Glu Met Ala Pro Gln Tyr Val Ser Ser Glu Asp 
850                 855                 860                 
Gly Thr Phe Leu Asp Ser Val Ile Leu Asn Gly Tyr Ala Phe Ser Asp 
865                 870                 875                 880 
Arg Tyr Asp Leu Ala Met Ser Lys Asn Asn Lys Tyr Gly Ser Lys Gln 
885                 890                 895     
Asp Leu Ala Asn Ala Ile Lys Gly Leu Gln Ser Ala Gly Ile Lys Val 
900                 905                 910         
Leu Ser Asp Leu Val Pro Asn Gln Leu Tyr Asn Leu Pro Gly Lys Glu 
915                 920                 925             
Val Val Thr Ala Thr Arg Val Asn Gln Tyr Gly Gln Ala Lys Ser Gly 
930                 935                 940                 
Ala Thr Ile Asn Lys Thr Pro Tyr Val Ala Asn Thr Arg Ser Tyr Gly 
945                 950                 955                 960 
Asp Tyr Gln Glu Gln Tyr Gly Gly Lys Phe Leu Asp Asp Leu Gln Lys 
965                 970                 975     
Leu Tyr Pro Arg Leu Phe Ser Thr Lys Gln Ile Ser Thr Gly Lys Pro 
980                 985                 990         
Ile Asp Pro Ser Val Lys Ile Thr  Asn Trp Ser Ala Lys  Tyr Phe Asn 
995                 1000                 1005             
Gly Ser  Asn Ile Leu Gly Arg  Gly Ala Lys Tyr Val  Leu Ser Glu 
1010                 1015                 1020             
Gly Asn  Lys Tyr Leu Asn Leu  Ala Asp Gly Lys Leu  Phe Leu Pro 
1025                 1030                 1035             
Thr Val  Leu Asn Asn Thr Tyr  Gly Gln Pro Gln Val  Ser Ala Asn 
1040                 1045                 1050             
Gly Phe  Ile Ser Lys Asn Gly  Gly Ile His Tyr Leu  Asp Lys Asn 
1055                 1060                 1065             
Gly Gln  Glu Val Lys Asn Arg  Phe Lys Glu Ile Ser  Gly Ser Trp 
1070                 1075                 1080             
Tyr Tyr  Phe Asp Ser Asp Gly  Lys Met Ala Thr Gly  Lys Thr Lys 
1085                 1090                 1095             
Ile Gly  Asn Asp Thr Tyr Leu  Phe Met Pro Asn Gly  Lys Gln Leu 
1100                 1105                 1110             
Lys Glu  Gly Val Trp Tyr Asp  Gly Lys Lys Ala Tyr  Tyr Tyr Asp 
1115                 1120                 1125             
Asp Asn  Gly Arg Thr Trp Thr  Asn Lys Gly Phe Val  Glu Phe Arg 
1130                 1135                 1140             
Val Asp  Gly Gln Asp Lys Trp  Arg Tyr Phe Asn Gly  Asp Gly Thr 
1145                 1150                 1155             
Ile Ala  Ile Gly Leu Val Ser  Leu Asp Asn Arg Thr  Leu Tyr Phe 
1160                 1165                 1170             
Asp Ala  Tyr Gly Tyr Gln Val  Lys Gly Gln Thr Val  Thr Ile Asn 
1175                 1180                 1185             
Gly Lys  Ser Tyr Thr Phe Asp  Ala Asp Gln Gly Asp  Leu Val Gln 
1190                 1195                 1200             
Thr Asp  Asn Ala Asn Pro Ala  Pro Gln Gly Gln Ala  Gly Trp Lys 
1205                 1210                 1215             
Leu Leu  Gly Asp Asn Gln Trp  Gly Tyr Arg Lys Asp  Gly Gln Leu 
1220                 1225                 1230             
Leu Thr  Gly Glu Gln Thr Ile  Asp Gly Gln Lys Val  Phe Phe Gln 
1235                 1240                 1245             
Asp Asn  Gly Val Gln Val Lys  Gly Gly Thr Ala Thr  Asp Ala Ser 
1250                 1255                 1260             
Gly Val  Leu Arg Phe Tyr Asp  Arg Asp Gln Gly His  Gln Val Gly 
1265                 1270                 1275             
Lys Gly  Trp Tyr Ser Thr Ser  Asp Asp Asn Trp Val  Tyr Val Asn 
1280                 1285                 1290             
Glu Ser  Gly Gln Val Leu Thr  Gly Leu Gln Thr Ile  Asp Gly Gln 
1295                 1300                 1305             
Thr Val  Tyr Phe Asp Asp Lys  Gly Ile Gln Ala Lys  Gly Lys Ala 
1310                 1315                 1320             
Val Trp  Asp Glu Asn Gly Asn  Leu Arg Tyr Phe Asp  Ala Asp Ser 
1325                 1330                 1335             
Gly Asn  Met Leu Arg Asp Arg  Trp Lys Asn Val Asp  Gly Asn Trp 
1340                 1345                 1350             
Tyr Tyr  Phe Asn Arg Asn Gly  Leu Ala Thr Arg Trp  
1355                 1360                 1365 
<210>  40
<211>  1518
<212>  PRT
<213>  Streptococcus salivarius
<400>  40
Met Glu Asn Lys Ile His Tyr Lys Leu His Lys Val Lys Lys Gln Trp 
1               5                   10                  15      
Val Thr Ile Ala Val Ala Ser Val Ala Leu Ala Thr Val Leu Gly Gly 
20                  25                  30          
Leu Ser Val Thr Thr Ser Ser Val Ser Ala Asp Glu Thr Gln Asp Lys 
35                  40                  45              
Thr Val Thr Gln Ser Asn Ser Gly Thr Thr Ala Ser Leu Val Thr Ser 
50                  55                  60                  
Pro Glu Ala Thr Lys Glu Ala Asp Lys Arg Thr Asn Thr Lys Glu Ala 
65                  70                  75                  80  
Asp Val Leu Thr Pro Ala Lys Glu Thr Asn Ala Val Glu Thr Ala Thr 
85                  90                  95      
Thr Thr Asn Thr Gln Ala Thr Ala Glu Ala Ala Thr Thr Ala Thr Thr 
100                 105                 110         
Ala Asp Val Ala Val Ala Ala Val Pro Asn Lys Glu Ala Val Val Thr 
115                 120                 125             
Thr Asp Ala Pro Ala Val Thr Thr Glu Lys Ala Glu Glu Gln Pro Ala 
130                 135                 140                 
Thr Val Lys Ala Glu Val Val Asn Thr Glu Val Lys Ala Pro Glu Ala 
145                 150                 155                 160 
Ala Leu Lys Asp Ser Glu Val Glu Ala Ala Leu Ser Leu Lys Asn Ile 
165                 170                 175     
Lys Asn Ile Asp Gly Lys Tyr Tyr Tyr Val Asn Glu Asp Gly Ser His 
180                 185                 190         
Lys Glu Asn Phe Ala Ile Thr Val Asn Gly Gln Leu Leu Tyr Phe Gly 
195                 200                 205             
Lys Asp Gly Ala Leu Thr Ser Ser Ser Thr Tyr Ser Phe Thr Pro Gly 
210                 215                 220                 
Thr Thr Asn Ile Val Asp Gly Phe Ser Ile Asn Asn Arg Ala Tyr Asp 
225                 230                 235                 240 
Ser Ser Glu Ala Ser Phe Glu Leu Ile Asp Gly Tyr Leu Thr Ala Asp 
245                 250                 255     
Ser Trp Tyr Arg Pro Ala Ser Ile Ile Lys Asp Gly Val Thr Trp Gln 
260                 265                 270         
Ala Ser Thr Ala Glu Asp Phe Arg Pro Leu Leu Met Ala Trp Trp Pro 
275                 280                 285             
Asn Val Asp Thr Gln Val Asn Tyr Leu Asn Tyr Met Ser Lys Val Phe 
290                 295                 300                 
Asn Leu Asp Ala Lys Tyr Ser Ser Thr Asp Lys Gln Glu Thr Leu Lys 
305                 310                 315                 320 
Val Ala Ala Lys Asp Ile Gln Ile Lys Ile Glu Gln Lys Ile Gln Ala 
325                 330                 335     
Glu Lys Ser Thr Gln Trp Leu Arg Glu Thr Ile Ser Ala Phe Val Lys 
340                 345                 350         
Thr Gln Pro Gln Trp Asn Lys Glu Thr Glu Asn Tyr Ser Lys Gly Gly 
355                 360                 365             
Gly Glu Asp His Leu Gln Gly Gly Ala Leu Leu Tyr Val Asn Asp Ser 
370                 375                 380                 
Arg Thr Pro Trp Ala Asn Ser Asp Tyr Arg Arg Leu Asn Arg Thr Ala 
385                 390                 395                 400 
Thr Asn Gln Thr Gly Thr Ile Asp Lys Ser Ile Leu Asp Glu Gln Ser 
405                 410                 415     
Asp Pro Asn His Met Gly Gly Phe Asp Phe Leu Leu Ala Asn Asp Val 
420                 425                 430         
Asp Leu Ser Asn Pro Val Val Gln Ala Glu Gln Leu Asn Gln Ile His 
435                 440                 445             
Tyr Leu Met Asn Trp Gly Ser Ile Val Met Gly Asp Lys Asp Ala Asn 
450                 455                 460                 
Phe Asp Gly Ile Arg Val Asp Ala Val Asp Asn Val Asp Ala Asp Met 
465                 470                 475                 480 
Leu Gln Leu Tyr Thr Asn Tyr Phe Arg Glu Tyr Tyr Gly Val Asn Lys 
485                 490                 495     
Ser Glu Ala Asn Ala Leu Ala His Ile Ser Val Leu Glu Ala Trp Ser 
500                 505                 510         
Leu Asn Asp Asn His Tyr Asn Asp Lys Thr Asp Gly Ala Ala Leu Ala 
515                 520                 525             
Met Glu Asn Lys Gln Arg Leu Ala Leu Leu Phe Ser Leu Ala Lys Pro 
530                 535                 540                 
Ile Lys Glu Arg Thr Pro Ala Val Ser Pro Leu Tyr Asn Asn Thr Phe 
545                 550                 555                 560 
Asn Thr Thr Gln Arg Asp Glu Lys Thr Asp Trp Ile Asn Lys Asp Gly 
565                 570                 575     
Ser Lys Ala Tyr Asn Glu Asp Gly Thr Val Lys Gln Ser Thr Ile Gly 
580                 585                 590         
Lys Tyr Asn Glu Lys Tyr Gly Asp Ala Ser Gly Asn Tyr Val Phe Ile 
595                 600                 605             
Arg Ala His Asp Asn Asn Val Gln Asp Ile Ile Ala Glu Ile Ile Lys 
610                 615                 620                 
Lys Glu Ile Asn Pro Lys Ser Asp Gly Phe Thr Ile Thr Asp Ala Glu 
625                 630                 635                 640 
Met Lys Gln Ala Phe Glu Ile Tyr Asn Lys Asp Met Leu Ser Ser Asp 
645                 650                 655     
Lys Lys Tyr Thr Leu Asn Asn Ile Pro Ala Ala Tyr Ala Val Met Leu 
660                 665                 670         
Gln Asn Met Glu Thr Ile Thr Arg Val Tyr Tyr Gly Asp Leu Tyr Thr 
675                 680                 685             
Asp Asp Gly His Tyr Met Glu Thr Lys Ser Pro Tyr Tyr Asp Thr Ile 
690                 695                 700                 
Val Asn Leu Met Lys Ser Arg Ile Lys Tyr Val Ser Gly Gly Gln Ala 
705                 710                 715                 720 
Gln Arg Ser Tyr Trp Leu Pro Thr Asp Gly Lys Met Asp Asn Ser Asp 
725                 730                 735     
Val Glu Leu Tyr Arg Thr Asn Glu Val Tyr Thr Ser Val Arg Tyr Gly 
740                 745                 750         
Lys Asp Ile Met Thr Ala Asn Asp Thr Glu Gly Ser Lys Tyr Ser Arg 
755                 760                 765             
Thr Ser Gly Gln Val Thr Leu Val Ala Asn Asn Pro Lys Leu Asn Leu 
770                 775                 780                 
Asp Gln Ser Ala Lys Leu Asn Val Glu Met Gly Lys Ile His Ala Asn 
785                 790                 795                 800 
Gln Lys Tyr Arg Ala Leu Ile Val Gly Thr Ala Asp Gly Ile Lys Asn 
805                 810                 815     
Phe Thr Ser Asp Ala Asp Ala Ile Ala Ala Gly Tyr Val Lys Glu Thr 
820                 825                 830         
Asp Ser Asn Gly Val Leu Thr Phe Gly Ala Asn Asp Ile Lys Gly Tyr 
835                 840                 845             
Glu Thr Phe Asp Met Ser Gly Phe Val Ala Val Trp Val Pro Val Gly 
850                 855                 860                 
Ala Ser Asp Asn Gln Asp Ile Arg Val Ala Pro Ser Thr Glu Ala Lys 
865                 870                 875                 880 
Lys Glu Gly Glu Leu Thr Leu Lys Ala Thr Glu Ala Tyr Asp Ser Gln 
885                 890                 895     
Leu Ile Tyr Glu Gly Phe Ser Asn Phe Gln Thr Ile Pro Asp Gly Ser 
900                 905                 910         
Asp Pro Ser Val Tyr Thr Asn Arg Lys Ile Ala Glu Asn Val Asp Leu 
915                 920                 925             
Phe Lys Ser Trp Gly Val Thr Ser Phe Glu Met Ala Pro Gln Phe Val 
930                 935                 940                 
Ser Ala Asp Asp Gly Thr Phe Leu Asp Ser Val Ile Gln Asn Gly Tyr 
945                 950                 955                 960 
Ala Phe Ala Asp Arg Tyr Asp Leu Ala Met Ser Lys Asn Asn Lys Tyr 
965                 970                 975     
Gly Ser Lys Glu Asp Leu Arg Asp Ala Leu Lys Ala Leu His Lys Ala 
980                 985                 990         
Gly Ile Gln Ala Ile Ala Asp Trp  Val Pro Asp Gln Ile  Tyr Gln Leu 
995                 1000                 1005             
Pro Gly  Lys Glu Val Val Thr  Ala Thr Arg Thr Asp  Gly Ala Gly 
1010                 1015                 1020             
Arg Lys  Ile Ala Asp Ala Ile  Ile Asp His Ser Leu  Tyr Val Ala 
1025                 1030                 1035             
Asn Ser  Lys Ser Ser Gly Lys  Asp Tyr Gln Ala Lys  Tyr Gly Gly 
1040                 1045                 1050             
Glu Phe  Leu Ala Glu Leu Lys  Ala Lys Tyr Pro Glu  Met Phe Lys 
1055                 1060                 1065             
Val Asn  Met Ile Ser Thr Gly  Lys Pro Ile Asp Asp  Ser Val Lys 
1070                 1075                 1080             
Leu Lys  Gln Trp Lys Ala Glu  Tyr Phe Asn Gly Thr  Asn Val Leu 
1085                 1090                 1095             
Glu Arg  Gly Val Gly Tyr Val  Leu Ser Asp Glu Ala  Thr Gly Lys 
1100                 1105                 1110             
Tyr Phe  Thr Val Thr Lys Glu  Gly Asn Phe Ile Pro  Leu Gln Leu 
1115                 1120                 1125             
Thr Gly  Lys Glu Lys Val Ile  Thr Gly Phe Ser Ser  Asp Gly Lys 
1130                 1135                 1140             
Gly Ile  Thr Tyr Phe Gly Thr  Ser Gly Thr Gln Ala  Lys Ser Ala 
1145                 1150                 1155             
Phe Val  Thr Phe Asn Gly Asn  Thr Tyr Tyr Phe Asp  Ala Arg Gly 
1160                 1165                 1170             
His Met  Val Thr Asn Ser Glu  Tyr Ser Pro Asn Gly  Lys Asp Val 
1175                 1180                 1185             
Tyr Arg  Phe Leu Pro Asn Gly  Ile Met Leu Ser Asn  Ala Phe Tyr 
1190                 1195                 1200             
Ile Asp  Ala Asn Gly Asn Thr  Tyr Leu Tyr Asn Ser  Lys Gly Gln 
1205                 1210                 1215             
Met Tyr  Lys Gly Gly Tyr Thr  Lys Phe Asp Val Ser  Glu Thr Asp 
1220                 1225                 1230             
Lys Asp  Gly Lys Glu Ser Lys  Val Val Lys Phe Arg  Tyr Phe Thr 
1235                 1240                 1245             
Asn Glu  Gly Val Met Ala Lys  Gly Val Thr Val Ile  Asp Gly Phe 
1250                 1255                 1260             
Thr Gln  Tyr Phe Gly Glu Asp  Gly Phe Gln Ala Lys  Asp Lys Leu 
1265                 1270                 1275             
Val Thr  Phe Lys Gly Lys Thr  Tyr Tyr Phe Asp Ala  His Thr Gly 
1280                 1285                 1290             
Asn Gly  Ile Lys Asp Thr Trp  Arg Asn Ile Asn Gly  Lys Trp Tyr 
1295                 1300                 1305             
Tyr Phe  Asp Ala Asn Gly Val  Ala Ala Thr Gly Ala  Gln Val Ile 
1310                 1315                 1320             
Asn Gly  Gln Lys Leu Tyr Phe  Asn Glu Asp Gly Ser  Gln Val Lys 
1325                 1330                 1335             
Gly Gly  Val Val Lys Asn Ala  Asp Gly Thr Tyr Ser  Lys Tyr Lys 
1340                 1345                 1350             
Glu Gly  Phe Gly Glu Leu Val  Thr Asn Glu Phe Phe  Thr Thr Asp 
1355                 1360                 1365             
Gly Asn  Val Trp Tyr Tyr Ala  Gly Ala Asn Gly Lys  Thr Val Thr 
1370                 1375                 1380             
Gly Ala  Gln Val Ile Asn Gly  Gln His Leu Tyr Phe  Asn Ala Asp 
1385                 1390                 1395             
Gly Ser  Gln Val Lys Gly Gly  Val Val Lys Asn Ala  Asp Gly Thr 
1400                 1405                 1410             
Tyr Ser  Lys Tyr Asn Ala Ser  Thr Gly Glu Arg Leu  Thr Asn Glu 
1415                 1420                 1425             
Phe Phe  Thr Thr Gly Asp Asn  Asn Trp Tyr Tyr Ile  Gly Ala Asn 
1430                 1435                 1440             
Gly Lys  Ser Val Thr Gly Glu  Val Lys Ile Gly Asp  Asp Thr Tyr 
1445                 1450                 1455             
Phe Phe  Ala Lys Asp Gly Lys  Gln Val Lys Gly Gln  Thr Val Ser 
1460                 1465                 1470             
Ala Gly  Asn Gly Arg Ile Ser  Tyr Tyr Tyr Gly Asp  Ser Gly Lys 
1475                 1480                 1485             
Arg Ala  Val Ser Thr Trp Ile  Glu Ile Gln Pro Gly  Val Tyr Val 
1490                 1495                 1500             
Tyr Phe  Asp Lys Asn Gly Leu  Ala Tyr Pro Pro Arg  Val Leu Asn 
1505                 1510                 1515             
<210>  41
<211>  20
<212>  PRT
<213>  Streptococcus mutans
<400>  41
Gly Asn Tyr Trp Gly Asn Gly Gly Gln Trp Ala Ala Ser Ala Ala Ala 
1               5                   10                  15      
Ala Gly Arg Tyr 
20